CN204347034U - 血红蛋白、血红蛋白-结合珠蛋白复合物、转铁蛋白联检试剂盒 - Google Patents

Abstract

本实用新型提供一种血红蛋白、血红蛋白-结合珠蛋白复合物、转铁蛋白联检试剂盒，包括上下卡壳、免疫试纸条、检测试纸等，含有血红蛋白单抗、血红蛋白-结合珠蛋白复合物单抗和转铁蛋白单抗的金标复合物划在硝酸纤维素膜上，硝酸纤维素膜上平行设置有3条检测线、质控线(15)以及金标复合物划膜线。该联检试剂盒操作方便简单，性能稳定，结果准确，在临床上对直肠癌或结肠癌等下消化道出血症状的肿瘤早期诊断和鉴别有较好的参考价值，对消化道出血性疾病的阳性检出率有显著提高。适合临床医检和家庭自检，同时为此类疾病的大规模普查提供一种手段。

Description

血红蛋白、血红蛋白-结合珠蛋白复合物、转铁蛋白联检试剂盒

技术领域

本实用新型属于临床体外诊断试剂技术领域，具体为一种血红蛋白、血红蛋白-结合珠蛋白复合物、转铁蛋白联检试剂盒，应用免疫学原理、侧向层析技术以及化学邻甲苯胺显色法，通过检测人粪便中的血红蛋白、血红蛋白-结合珠蛋白复合物、转铁蛋白，发现下消化道出血症状，早期诊断直肠癌或结肠癌等下消化道肿瘤。

背景技术

便隐血在目前临床上主要检测方法有化学法和免疫学方法：化学法常用的有邻甲苯胺法、还原酚酞法、联苯胺法、匹拉米洞法、俞创木脂法等。其设计原理基本相同，都是基于血红蛋白中的含铁血黄素部分有催化过氧化物分解的作用，能催化试剂中的过氧化氢，分解释放新生态氧，氧化上述色原物质而呈色，显色的深浅反应了血红蛋白的多少。然而在实际应用中由于粪便成份差别很大，各实验室具体操作细节不同，用化学法检测结果存在很大差异，并且缺乏特异性和准确性。外源性食物中如果含有血红蛋白、肌红蛋白，其血红素的作用均可以使实验呈阳性，大量生食蔬菜中含有活性的植物过氧化物也可催化过氧化物分解，出现假阳性反应。血液在肠道中停留过久，血红蛋白变性，则会出现与病情不符的阴性结果。此外，如果患者服用大量的维生素C或其他具有还原性的药物，在实验中可将过氧化物还原，从而不能氧化色原物质，也可使实验出现假阴性。因此，化学法易受干扰因素多、假阳性率高、冰醋酸配成的试剂易形成晶体等条件限制，未能得到广泛使用，亟需一种特异性好、灵敏度高、检测快速、简单的隐血检测方法。

免疫学方法是目前检测隐血常用的方法，主要包括免疫单抗法、酶联免疫吸附法、免疫斑点法、胶乳免疫透射比浊法、放射免疫扩散法、反向间接血凝法、胶体金标记夹心免疫检验法等。免疫法检测的指标一般是人血红蛋白或人红细胞基质，所用抗体是抗人血红蛋白抗体或抗人红细胞基质抗体，检测人血红蛋白可检出消化道任何部位的出血，检测人红细胞基质只能检出下消化道出血，但是血红蛋白由于受到肠道内细菌的作用及大肠粘膜产生的粘液成分影响而变性，易出现假阴性反应。

临床上往往需要两种或以上的方法联合检测，目前市场上已有血红蛋白-转铁蛋白联检试剂盒、血红蛋白-Hb-Hp复合物联检试剂盒等。如中国发明专利申请公布号为CN101965515A（公布日为2011年2月2日）提供了一种用于检测潜血的方法和装置，包括检测在GI样品中的转铁蛋白和血红蛋白，以及将检测到的转铁蛋白和血红蛋白的量与转铁蛋白和血红蛋白的各自的预定值相比较，由此去顶来自GI的出血，并提供使用横向流动三明治免疫测定装置来实现对转铁蛋白和血红蛋白的检测，该技术方案缺少血红蛋白-结合珠蛋白复合物检测，对直肠癌或结肠癌的阳性符合率较低。

发明内容

本实用新型旨在提供一种血红蛋白、血红蛋白-结合珠蛋白复合物、转铁蛋白联检试剂盒，由一根同时检测血红蛋白、血红蛋白-结合珠蛋白复合物、转铁蛋白的试纸条，化学邻甲苯胺试纸，上卡壳和下卡壳组成的试剂盒，该试剂盒的结构简单，检测快速高效，具有很好灵敏度和特异性，在临床上对直肠癌或结肠癌等下消化道出血症状的肿瘤早期诊断和鉴别有较好的参考价值，对消化道出血性疾病的阳性检出率有显著提高。

针对以上根本技术问题，本实用新型相应的解决技术方案是：

   一种血红蛋白、血红蛋白-结合珠蛋白复合物、转铁蛋白联检试剂盒，包括上卡壳、下卡壳、置于上卡壳和下卡壳之间的免疫试纸条、检测试纸，上卡壳设有加样孔、观察窗口、ID记录处和化学试纸观察窗口，下卡壳开有与免疫试纸条位置对应的第一凹槽和与化学法试纸位置对应的第二凹槽，其特征在于免疫试纸条包括吸水纸、硝酸纤维素膜、样品垫和PVC底板，样品垫边缘处黏贴在硝酸纤维素膜上，吸水纸边缘处黏贴在硝酸纤维素膜上，硝酸纤维素膜固定在PVC底板上，含有血红蛋白单抗、血红蛋白-结合珠蛋白复合物单抗和转铁蛋白单抗的金标复合物划在硝酸纤维素膜上，硝酸纤维素膜上平行设置有 3条检测线、质控线以及靠近硝酸纤维素膜底端的金标复合物划膜线，质控线处包被有羊抗鼠IgG，3条检测线是由气动微定量喷头将标记完成的胶体金复合物喷线包被于硝酸纤维素膜上。

   第一凹槽和与化学法试纸位置对应的第二凹槽中间设有凸起的隔断，检测试纸上样段与样品垫的底部由隔断分隔开，加样孔位于隔断处正上方。

   加样孔下方为化学法试纸和样品垫，加样孔为圆形或椭圆形并同时外漏出化学法试纸和样品垫，所述的硝酸纤维素膜对应观察窗口放置。

   所述上卡壳上设有二维码。

所述PVC底板是具有粘性胶质层的PVC底板。

所述样品垫是厚度为355.6-508.0um 的奥斯龙8964型玻璃纤维。

   使用该联检试剂盒的检测时，在圆形或者椭圆形的加样孔中滴加3-4滴由样本采集器处理好的样品液，5到8分钟判读免疫试纸条；同时，在化学试纸观察窗口滴加10%的过氧化氢溶液，观察颜色变化，最后结合两种检测方法的结果判定最终检测结果：

全阳性：对于免疫学方法，在长条形观察窗口中，均在检测线和质控线位置出现紫色红色带。表示样品中存在血红蛋白、血红蛋白-结合珠蛋白复合物、转铁蛋白。对于化学方法，出现蓝色反应，表明结果呈阳性；

全阴性：对于免疫学方法，在长条形观察窗口中，在质控线位置出现紫红色带，而在检测线位置均未出现紫红色带，表示样品中不存在血红蛋白、血红蛋白-结合珠蛋白复合物、转铁蛋白。对于化学方法，不出现蓝色反应，表明结果呈阴性；

相比现有技术，本实用新型提供的联检试剂盒及其制备方法，有益效果在于：

（1）本实用新型是血红蛋白、血红蛋白-结合珠蛋白复合物、转铁蛋白联检试剂盒，采用免疫层析胶体金技术结合化学显色方法，快速、简便同时检测大便中的血红蛋白、血红蛋白-结合珠蛋白复合物、转铁蛋白，可以消除现有技术的弊端，准确发现消化道癌变引起的少量出血，提高早期直肠癌或结肠癌诊断准确率，也可以为早期诊断此病提供快速、简便的手段和药物治疗时的监测。

（2）本实用新型试剂盒上使用ID和二维码，一方面，ID处可以手工填写样本信息，避免检测结果的混淆。另一方面，二维码可以高密度编码，信息容量大，可以存入大量的零件信息。编码范围广，可以存入文字、图片、声音等信息。容错能力强，具有纠错能力，表面受到油污、损耗等照样可以得到识读。译码可靠性高，误码率不超过千万分之一。还有成本低，易制作，持久耐用等优点，二维码可以选择性的根据条件进行检测结果录入，对患者的治愈和康复过程有一个很好的监测，结果查询更加方便，医生统筹治疗方案也更加得心应手。甚至在病理方面也具有统计学上的意义。

本实用新型申请的联检试剂盒特异性强，灵敏度高，易储存，无须专门技术人员操作，不需任何仪器设备，而且结果易读。对直肠癌或结肠癌等下消化道出血症状的肿瘤早期诊断和鉴别有较好的参考价值，对消化道出血性疾病的阳性检出率效果更佳。

附图说明

附图1是本试剂盒的立体模型示意图。

附图2是本试剂盒的拆分结构示意图。

图中，1. 上卡壳，2. 下卡壳，3.加样孔，4. 观察窗口，5. 第一凹槽，6. 试纸条，17.化学试纸观察窗口，18.ID记录，19.二维码，20.化学试纸，21.第二凹槽，22.隔断。

附图3是免疫试纸条的结构示意图。

附图4是免疫试纸条的结构示意图。

图中：7.样品垫，8.金标复合物划膜线，9.硝酸纤维素膜，10.吸水纸，11.PVC底板。12.抗人转铁蛋白单抗检测线，13.抗人血红蛋白-结合珠蛋白复合物单抗检测线，14.抗人血红蛋白单抗检测线，15.质控线。

附图5是本试剂盒正面塑料外壳的外部形态示意图。

图中由上至下分别是二维码，ID记录处，“C”是控制线的位置，“Hb”是血红蛋白检测线的位置，“Hb-Hp”是血红蛋白-结合珠蛋白复合物检测线的位置，“TF”是转铁蛋白检测线的位置。椭圆形为样本滴加处，最下端正方形窗口为化学试纸显色窗口。

附图6是本试剂盒的全阳性结果示意图。

附图7是本试剂盒的全阳性结果示意图。

图中6血红蛋白、血红蛋白-结合珠蛋白复合物、转铁蛋白均是阳性。图中7血红蛋白（Hb）、血红蛋白-结合珠蛋白复合物（Hb-Hp）、转铁蛋白（TF）均是阴性。

具体实施方式

下面结合附图和实施例对本实用新型做进一步的说明，但需要指出的是，本实用新型的联检试剂盒并不限于这种特定的形状或结构。对于本领域技术人员显然可以理解的是，以下的说明内容即使不做任何调整或修正，也可以直接适用于在此未指明的其他类型或结构的试纸条。

如图1-图7所示，一种血红蛋白、血红蛋白-结合珠蛋白复合物、转铁蛋白联检试剂盒，包括免疫试纸条6、化学试纸20（邻甲苯胺试纸）、上卡壳1、下卡壳2组成。

联检试剂盒的上卡壳表面设计有一个圆形或椭圆形加样孔3、一个观察窗口4、化学试纸观察窗口17、ID记录18、二维码19，下卡壳2内部设有与试纸条6相对应的第一凹槽5、与化学法试纸对应的第二凹槽21、防止试剂混淆的塑料隔断22，免疫试纸条6和化学法试纸20置于上卡壳1和下卡壳2之间。免疫试纸条6由PVC底板11、吸水纸10、硝酸纤维素膜9和样品垫7组成。

硝酸纤维素膜9黏贴在PVC底板11上，金标复合物划膜线8划在硝酸纤维素膜9上，样品垫7少部分即边缘黏贴在硝酸纤维素膜9下端，吸水纸10的边缘黏贴在硝酸纤维素膜9上段，所述的样品垫7对应圆形或椭圆形加样孔3，所述的硝酸纤维素膜9对应长条形观察窗口4。

所述的免疫试纸条6为一条。化学试纸20上样段的顶部与样品垫7的底部由塑料卡壳上的隔断22分隔开，防止了化学物质可能的干扰。加样孔3的位置正好位于隔断22处上方。

检测时，在圆形或者椭圆形的加样孔中滴加3-4滴由样本采集器处理好的样品液，5到8分钟判读免疫试纸条。同时，在化学试纸观察窗口滴加10%的过氧化氢溶液，观察颜色变化。最后结合两种检测方法的结果判定最终检测结果。

全阳性：对于免疫学方法，在长条形观察窗口中，均在检测线和质控线位置出现紫色红色带。表示样品中存在血红蛋白、血红蛋白-结合珠蛋白复合物、转铁蛋白。对于化学方法，出现蓝色反应，表明结果呈阳性。

全阴性：对于免疫学方法，在长条形观察窗口中，在质控线位置出现紫红色带，而在检测线位置均未出现紫红色带，表示样品中不存在血红蛋白、血红蛋白-结合珠蛋白复合物、转铁蛋白。对于化学方法，不出现蓝色反应，表明结果呈阴性。

无效：在长条形观察窗口中，在质控线位置不出现紫红色带，无论检测线位置出现或者均未出现紫红色带，表明试验无效，应重新进行检测。

本实用新型试剂盒快速准确，操作方便，性能稳定，不需要任何专业仪器设备，适合医院的临检和家庭的自检。由于此试剂盒在临床上对直肠癌或结肠癌等下消化道肿瘤的早期诊断和鉴别有较大的参考意义，加上它快速、简便、准确性高的特点为此类疾病的普查和医疗条件相对落后的地方基本诊断提供一种手段。

试剂盒灵敏度可调在临床意义范围中。例血红蛋白（Hb）200ng/ml、血红蛋白-结合珠蛋白复合物（Hb-Hp）25ng/ml、转铁蛋白40ng/ml是有临床意义的值。

尽管上文对本实用新型的具体实施方式给予了详细描述和说明，但是应该指明的是，本领域的熟练技术人员无须过多实验即可对本实用新型所要求保护的进行实施，具有类似结构的替换，仍未超出说明书及附图所涵盖的精神时，均应该在本实用新型的保护范围之内。

Claims (6)

1.一种血红蛋白、血红蛋白-结合珠蛋白复合物、转铁蛋白联检试剂盒，包括上卡壳（1）、下卡壳（2）、置于上卡壳和下卡壳之间的免疫试纸条（6）、检测试纸（20），上卡壳设有加样孔（3）、观察窗口（4）、ID记录处（18）和化学试纸观察窗口（17），下卡壳（2）开有与免疫试纸条（6）位置对应的第一凹槽（5）和与化学法试纸位置对应的第二凹槽（21），其特征在于免疫试纸条（6）包括吸水纸（10）、硝酸纤维素膜（9）、样品垫（7）和PVC底板（11），样品垫边缘处黏贴在硝酸纤维素膜上，吸水纸边缘处黏贴在硝酸纤维素膜上，硝酸纤维素膜固定在PVC底板上，含有血红蛋白单抗、血红蛋白-结合珠蛋白复合物单抗和转铁蛋白单抗的金标复合物划在硝酸纤维素膜上，硝酸纤维素膜上平行设置有 3条检测线、质控线（15）以及靠近硝酸纤维素膜（9）底端的金标复合物划膜线（8)，质控线（15）处包被有羊抗鼠IgG，3条检测线是由气动微定量喷头将标记完成的胶体金复合物喷线包被于硝酸纤维素膜上。

2.如权利要求1所述的血红蛋白、血红蛋白-结合珠蛋白复合物、转铁蛋白联检试剂盒，其特征在于第一凹槽（5）和与化学法试纸位置对应的第二凹槽（21）中间设有凸起的隔断（22），检测试纸（20）上样段与样品垫（7）的底部由隔断（22）分隔开，加样孔（3）位于隔断（22）处正上方。

3.如权利要求2所述的血红蛋白、血红蛋白-结合珠蛋白复合物、转铁蛋白联检试剂盒，其特征在于加样孔下方为化学法试纸和样品垫（7），加样孔为圆形或椭圆形并同时外漏出化学法试纸和样品垫，所述的硝酸纤维素膜对应观察窗口（4）放置。

4.如权利要求3所述的血红蛋白、血红蛋白-结合珠蛋白复合物、转铁蛋白联检试剂盒，其特征在于上卡壳上设有二维码（19）。

5.如权利要求4所述的血红蛋白、血红蛋白-结合珠蛋白复合物、转铁蛋白联检试剂盒，其特征在于PVC底板（11）是具有粘性胶质层的PVC底板。

6.如权利要求5所述的血红蛋白、血红蛋白-结合珠蛋白复合物、转铁蛋白联检试剂盒，其特征在于样品垫（7）是厚度为355.6-508.0um 的奥斯龙8964型玻璃纤维。