CN203203999U - 一种同时检测两种肺癌标志物的电化学免疫传感器 - Google Patents
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Abstract
本实用新型涉及一种同时检测两种肺癌标志物的电化学免疫传感器。在聚对苯二甲酸二乙酯(PET)基底上印刷导电碳油墨制成辅助电极和两个工作电极；印刷银/氯化银混合油墨制成参比电极，制得双通道丝网印刷电极。在工作电极表面设有巯基化石墨烯层、细胞角蛋白19片段抗体层和癌胚抗原抗体层，制得双通道电化学免疫传感器。本传感器成本低、检测结果稳定、操作方便，适用于细胞角蛋白19片段和癌胚抗原的快速同时测定。
Description
技术领域
本实用新型涉及一种同时检测两种肺癌标志物的电化学免疫传感器，属于纳米功能材料、免疫技术、生物传感、丝网印刷和疾病诊断领域。
背景技术
肺癌是我国恶性肿瘤中发病率高的肿瘤之一，据卫生部全国肿瘤防治办公室资料，自90年代以来肺癌死亡率居城市居民癌症死亡率之首位。20年中，肺癌发病率的增长速度为所有癌症之冠，严重威胁人们的健康。癌胚抗原(CEA)是最早用于肺癌诊断的肿瘤标志物之一，其诊断价值早已被肯定。近年来，新的肿瘤标志物细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)被认为是迄今为止所发现的用于诊断肺鳞癌和小细胞肺癌较灵敏的肿瘤标志物之一，但其单项检测仍有一定的局限性。
因此发展快速、简便、灵敏的细胞角蛋白19片段和癌胚抗原检测手段显得十分必要。
本实用新型涉及一种同时检测两种肺癌标志物的电化学免疫传感器，使用双通道丝网印刷电极制备的双通道电化学免疫传感器可同时检测细胞角蛋白19片段和癌胚抗原，与其它检测方法相比，具有灵敏度高，特异性好，成本低廉、快速方便和检测效率高等优势，可实现细胞角蛋白19片段和癌胚抗原的同时检测。
实用新型内容
本实用新型的技术方案是：
一种同时检测两种肺癌标志物的电化学免疫传感器，其特征在于，在聚对苯二甲酸二乙酯(PET)基底上依次印刷导电银浆制成电极条和电极触点；印刷导电碳油墨制成辅助电极和两个工作电极；印刷银/氯化银混合油墨制成参比电极；印刷绝缘油墨制成敏感池；印刷绝缘油墨覆盖中间导电部分制成绝缘层和在工作电极区域制成一个电解池凹槽，制得双通道丝网印刷电极。
在上述的双通道丝网印刷电极的一个工作电极表面上，设有巯基化石墨烯层和细胞角蛋白19片段抗体层，在另外一个工作电极表面上设有巯基化石墨烯层和癌胚抗原抗体层，制得双通道电化学免疫传感器，引出线端与电化学工作站连接。
所述电解池凹槽为一矩形凹槽，放置含有铁氰化钾的PBS缓冲溶液。
所述双通道电化学免疫传感器用于细胞角蛋白19片段和癌胚抗原同时检测。
本实用新型具备以下优势：
（1）本实用新型采用巯基化石墨烯，可增大工作电极的表面积，提高细胞角蛋白19片段和癌胚抗原抗体固载量，增强电子传递，提高传感器的灵敏度。
（2）本实用新型采用巯基化石墨烯具有良好的生物相容性，增强传感器的稳定性，使检测结果重现性好。
（3）本实用新型传感器利用抗原抗体的特异反应，特异性好。
（4）本实用新型传感器检测方法简单、快速，易于推广。
（5）本实用新型传感器与现有技术相比，具有制备简单、加工方便、成本低、易于商品化的优点。
（6）本实用新型制备的双通道电化学免疫传感器，可实现对细胞角蛋白19片段和癌胚抗原的快速同时测定，显著提高了检测效率。
附图说明
图1为双通道丝网印刷电极六层网版的设计图纸。
图2为双通道丝网印刷电极结构图。
图2标号说明：1、电极条，2、电极触点，3、辅助电极，4、工作电极，5、参比电极，6、敏感池，7、绝缘层，8、电解池凹槽。
具体实施方式
下面结合附图和实施例进一步说明本实用新型。
实施例1 双通道丝网印刷电极的制备
本实用新型结合图1和图2，进行双通道丝网印刷电极的制备，整个印刷电极在厚度为0.5mm、长度为40mm、宽度为20mm的PET板。
制备步骤如下：
（1）在PET基底上印刷导电银浆（ED-479SS，美国埃奇森公司）制成的电极条1和电极触点2，100℃热固化12h。
（2）印刷导电碳油墨（ED-423SS，美国埃奇森公司）制成辅助电极3，100℃热固化12h。
（3）印刷导电碳油墨制成工作电极4，100℃热固化12h。
（4）印刷银/氯化银混合油墨（美国埃奇森公司）制成参比电极5，100℃热固化12h。
（5）印刷绝缘油墨（ED-452SS，美国埃奇森公司）制成敏感池6，紫外光固化30s。
（6）印刷绝缘油墨（ED-452SS，美国埃奇森公司）覆盖中间导电部分，制成绝缘层7和电解池凹槽8，紫外光固化30s，制得双通道丝网印刷电极。
热固化温度和时间由商业油墨提供的油墨固化信息要求决定。
实施例2 本实用新型传感器的制备
（1）取一片实施例1制备的双通道丝网印刷电极，用超纯水冲洗，去掉电极表面的其他物质，在每个工作电极表面分别设置一层巯基化石墨烯，制成巯基化石墨烯层，常温干燥。
（2）在（1）制得的其中一个工作电极的巯基化石墨烯层上，设置一层细胞角蛋白19片段抗体，4℃条件下晾干，制成细胞角蛋白19片段抗体层。
（3）在（1）制得的另一个工作电极的巯基化石墨烯层上，设置一层癌胚抗原抗体，4℃条件下晾干，制成癌胚抗原抗体层。
（4）用BSA溶液封闭（2）和（3）中的工作电极上的非特异性活性位点，制得双通道电化学免疫传感器。
实施例3 本实用新型传感器的应用
（1）分别取6μL样品溶液滴涂于（4）制得双通道电化学免疫传感器的工作电极上，保持电极湿润2h。
（2）在电解池凹槽内，加入100μL pH为7.4的含有铁氰化钾的PBS缓冲溶液，利用方波伏安法，对样品中细胞角蛋白19片段和癌胚抗原进行同时检测。
Claims (1)
1.一种同时检测两种肺癌标志物的电化学免疫传感器，其特征在于，在聚对苯二甲酸二乙酯（PET）基底上依次印刷导电银浆制成电极条（1）和电极触点（2）；印刷导电碳油墨制成辅助电极（3）和两个工作电极（4）；印刷银/氯化银混合油墨制成参比电极（5）；印刷绝缘油墨制成敏感池（6）；印刷绝缘油墨覆盖中间导电部分制成绝缘层（7）和在工作电极区域制成一个电解池凹槽（8），制得双通道丝网印刷电极；在所述的双通道丝网印刷电极的一个工作电极表面上，设有巯基化石墨烯层和细胞角蛋白19片段抗体层，在另外一个工作电极表面上设有巯基化石墨烯层和癌胚抗原抗体层，制得双通道电化学免疫传感器，引出线端与电化学工作站连接。
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103528928A (zh) * | 2013-10-24 | 2014-01-22 | 南开大学 | 一种基于石墨烯的单细胞传感方法 |
| CN104407139A (zh) * | 2014-11-18 | 2015-03-11 | 济南大学 | 一种多重功能化石墨烯黑色素瘤传感器的制备方法及应用 |
| CN106124487A (zh) * | 2016-04-18 | 2016-11-16 | 山东大学 | 一种基于光谱分辨原理的电致化学发光多组分免疫检测方法 |
| CN115112735A (zh) * | 2022-06-27 | 2022-09-27 | 华中科技大学 | 一种鼻炎标志物传感器及其制备方法 |
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2013
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