CN202246700U - 一种用于pcr反应的试剂盒 - Google Patents
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Abstract
本实用新型公开了一种用于PCR反应的试剂盒，包括基板、表面覆膜，主要用于PCR检测。该试剂盒能增加溶液体系的温度敏感性和光透率，实现溶液体系的温度随PCR仪器的温度变化同步迅速变化。本装置结构简单，使用方便，对于小样本量的实验，本装置更易于分辨加样孔和无加样孔，并且成本低廉，制备快速。
Description
技术领域
本实用新型涉及生物实验技术领域，特别是涉及PCR实验领域一种用于PCR反应的试剂盒。
背景技术
PCR（polymerase chain reaction，聚合酶链式反应）因其灵敏度高，特异性强，已作为一种成熟技术成为分子生物学研究的关键技术，广泛应用于生物科学的各领域实验中。其基本原理是依据体内细胞分裂中的DNA半保留机制，通过制造一个体外合成系统的温度，促使双链DNA解开为单链，再由单链DNA与人工设计的引物复性，由DNA聚合酶根据引物的位置沿单链模板复制为双链DNA。整个PCR过程由高温变性、低温复性和一定温度下延伸三个步骤循环构成。所以在PCR实验中，对温度的控制非常重要。
在常规的PCR实验中，通常是将DNA样本、引物等试剂根据要求放置于普通384孔或96孔塑料基板内，在基板的表层附上一层透明的塑料膜，以封闭溶液体系。在PCR实验平台的往复温度变化后，通过普通光源或激光透过塑料膜进行分析。
在PCR实验中一般要求DNA样本温度随着PCR的温度同时变化，PCR反应中，从高温到低温或从低温到高温的温度变化灵敏性越高越好。在普通塑料基板上，由于塑料本身在温度传递上有一定的延迟，而且也会吸收一定的热能，导致溶液体系的温度与理想温度有一定误差。另外在通过光源分析时，由于基板的变形及塑料膜本身透光率的问题，导致反应结果出现一定的系统误差。并且当实验的样本量不是很大的情况下，在普通的384孔或96孔板的基板上，一旦附上塑料膜，对区别已加样的孔和没加样的孔需要仔细辨认，加大了实验者的工作量和工作强度。
实用新型内容
本实用新型的目的是提供一种应用于PCR实验的试剂盒，具有结构简单，温度适应性强，透光率好，成本低廉等特点。
为达到上述目的，本实用新型的技术方案是：一种用于PCR反应的试剂盒，包括基板和设于所述基板上面的表面覆膜，所述表面覆膜上设有穴坑。
优选的，所述穴坑设有凸沿。
优选的，所述凸沿与所述表面覆膜是一体成型的。
优选的，所述穴坑内设有反应体系和用于封闭所述反应体系的封闭层。
优选的，所述基板采用亲水性、耐腐蚀、高温下不易变形的透明材料。
优选的，所述基板采用硼硅酸盐超薄玻璃材料。
优选的，所述表面覆膜采用耐高温、变形率小的材料。
优选的，所述表面覆膜采用有机硅塑料为材料。
优选的，所述表面覆膜与所述基板接触的一面设有热熔粘合剂。
优选的，所述穴坑的数量及形状与采用的PCR仪器的反应孔匹配。
优选的，所述封闭层为石蜡。
基板采用亲水性、耐腐蚀、高温下不易变形的透明材料，优选为硼硅酸盐玻璃所制，该基板由于其材质及超薄的特性不会随着温度的变化而出现变形，并且耐腐蚀，亲水性好。
表面覆膜的材质为采用耐高温、变形率小的材料，优选有机硅塑料，表面覆膜的反面涂有热熔粘合剂，将覆膜放置与基板上，在加热模块加热片刻，轻微压制便可粘贴在一起。
表面覆膜的穴坑有凸沿，凸沿与表面覆膜是一体成型的。
由于本试剂盒的结构简单，可以在PCR仪器中保持溶液体系温度和仪器温度一致性。试剂盒本身不易变形，不会吸收能量导致溶液温度不够。
对于单个细胞的PCR实验，在本试剂盒中，能够将单个细胞很好地束缚在一个封闭的体系内，避免单个细胞的布朗运动，且细胞溶解物的浓度有所提高，便于数据的探查。
还可用封闭层来封住反应体系，封闭层采用低熔点的多脂石蜡溶液，在加样完毕后，将石蜡溶液加热至57℃-60℃，呈溶液状后，加到每个加样孔上，以封闭反应体系。过去的试剂盒是使用塑料膜，厚度大约为10-20μm，且塑料膜与反应体系之间有间隙存在，增加了光透率。本试剂盒的封闭层采用液体石蜡，每个加样孔加入1-5ul石蜡，厚度约为5-10μm。且石蜡溶液表面张力较强，会在反应体系上面形成隔离层，完全贴合地封闭反应体系，不会像传统384孔板等试剂盒那样在光学膜和反应液体间形成空腔，加之厚度也比塑料膜薄，因此光透性较固态的塑料膜好。
本技术方案的有益效果是：本装置结构简单，使用方便，对于小样本量的实验，本装置更易于分辨加样孔和无加样孔，并且成本低廉，制备快速。
附图说明
图1是试剂盒单个穴坑工作时示意图；
图2是试剂盒384孔布置图。
图中：
1.基板 2.表面覆膜 3.凸沿 4.反应体系 5.封闭层 6.穴坑。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施方式对本实用新型作进一步详细的说明。
实施例1，如图1和图2所示，试剂盒单个穴坑及384孔布置：
基板1为一个厚度为0.03mm的硼硅酸盐玻璃，该基板1由于其材质及超薄的特性不会随着温度的变化而出现变形，并且耐腐蚀，亲水性好。
表面覆膜2的材质为有机硅塑料，为384孔（384个穴坑4），厚度为0.8mm。表面覆膜2的反面涂有热熔粘合剂，将表面覆膜2放置于基板1上，在加热模块加热片刻，轻微压制便可粘贴在一起。每个穴坑6口沿上设有凸沿3，该凸沿3与表面覆膜一体成型，穴坑6内放置所述反应体系4，在反应体系4上再加设封闭层5，对反应体系4进行封闭。
实验时，往穴坑6内加装反应体系4完毕后，将石蜡加热至57℃，呈溶液状后，加到每个加样孔（穴坑6）内，在反应体系4表面形成一层封闭层5，以封闭反应体系。
实施例2
其余与实施例1相同，不同之处在于，基板1为一个厚度为0.5mm的硼硅酸盐玻璃，该基板1由于其材质及超薄的特性不会随着温度的变化而出现变形，并且耐腐蚀，亲水性好。
表面覆膜2的材质为有机硅塑料，穴坑6数量为96孔，厚度为1.4mm。表面覆膜2的反面涂有热熔粘合剂，将表面覆膜2放置于基板1上，在加热模块加热片刻，轻微压制便可粘贴在一起。
实验时，往穴坑6内加装反应体系4完毕后，将石蜡加热至60℃，呈溶液状后，加到每个加样孔（穴坑6）内，在反应体系4表面形成一层封闭层5，以封闭反应体系。
实施例3
基板1为一个厚度为0.03mm的硼硅酸盐玻璃，该基板1由于其材质及超薄的特性不会随着温度的变化而出现变形，并且耐腐蚀，亲水性好。
表面覆膜2的材质为有机硅塑料，穴坑6的数量为96孔，厚度为0.8mm。表面覆膜2的反面涂有热熔粘合剂，将表面覆膜2放置于基板1上，在加热模块加热片刻，轻微压制便可粘贴在一起。
实验时，往穴坑6内加装反应体系4完毕后，将石蜡加热至57℃，呈溶液状后，加到每个加样孔（穴坑6）内，在反应体系4表面形成一层封闭层5，以封闭反应体系。
实施例4
其余与实施例1相同，不同之处在于，基板1为一个厚度为0.5mm的硼硅酸盐玻璃，该基板1由于其材质及超薄的特性不会随着温度的变化而出现变形，并且耐腐蚀，亲水性好。
表面覆膜2的材质为有机硅塑料，穴坑6的数量为384孔，厚度为1.4mm。表面覆膜2的反面涂有热熔粘合剂，将表面覆膜2放置于基板1上，在加热模块加热片刻，轻微压制便可粘贴在一起。
实验时，往穴坑6内加装反应体系4完毕后，将石蜡加热至60℃，呈溶液状后，加到每个加样孔（穴坑6）内，在反应体系4表面形成一层封闭层5，以封闭反应体系。
上述实施例中，基板1的材质还可以是CR39(双烯丙基二甘醇碳酸酯聚合物)热固塑料或聚丙烯塑料。所述表面覆膜2的材质还可以是含有聚丙烯酰胺的聚丙烯塑料、含聚乙烯醇的聚乙烯或聚己内酯。所述封闭层5的材料还可以使用甲基硅油等。
上述实施例中，如果表面覆膜2足够厚，即上面的穴坑6可以足够深，则不需要设置凸沿3，但是这使得表面覆膜2的生产成本增加，因此，凸沿3的设置减少了原料的用量，降低了成本，也减轻了产品重量。
本技术方案的有益效果是：
本试剂盒在实验过程中，很好地增加了溶液体系的温度敏感性和光透率，实现溶液体系的温度随PCR仪器的温度变化同步迅速变化。
由于本试剂盒的结构简单，可以在PCR仪器中保持溶液体系温度和仪器温度一致性。试剂盒本身不易变形，不会吸收能量导致溶液温度不够。
对于单个细胞的PCR实验，在本试剂盒中，能够将单个细胞很好地束缚在一个封闭的体系内，避免单个细胞的布朗运动，且细胞溶解物的浓度有所提高，便于数据的探查。
还可用封闭层来封住反应体系，封闭层采用低熔点的多脂石蜡溶液，在加样完毕后，将石蜡溶液加热至57℃-60℃，呈溶液状后，加到每个加样孔上，以封闭反应体系。过去的试剂盒是使用塑料膜，厚度大约为10-20μm，且塑料膜与反应体系之间有间隙存在，增加了光透率。本试剂盒的封闭层采用液体石蜡，每个加样孔加入1-5ul石蜡，厚度约为5-10μm。且石蜡溶液表面张力较强，会在反应体系上面形成隔离层，完全贴合地封闭反应体系，不会像传统384孔板等试剂盒那样在光学膜和反应液体间形成空腔，加之厚度也比塑料膜薄，因此光透性较固态的塑料膜好。
本装置结构简单，使用方便，对于小样本量的实验，本装置更易于分辨加样孔和无加样孔，并且成本低廉，制备快速。
以上所述的仅是本实用新型的优选实施方式，应当指出，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本实用新型创造构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本实用新型的保护范围。
Claims (11)
1.一种用于PCR反应的试剂盒，其特征在于，包括基板和设于所述基板上面的表面覆膜，所述表面覆膜上设有穴坑。
2.根据权利要求1所述的用于PCR反应的试剂盒，其特征在于，所述穴坑设有凸沿。
3.根据权利要求2所述的用于PCR反应的试剂盒，其特征在于，所述凸沿与所述表面覆膜一体成型。
4.根据权利要求1到3任一所述的用于PCR反应的试剂盒，其特征在于，所述穴坑内设有反应体系和用于封闭所述反应体系的封闭层。
5.根据权利要求1到3任一所述的用于PCR反应的试剂盒，其特征在于，所述基板采用亲水性、耐腐蚀、高温下不易变形的透明材料。
6.根据权利要求5所述的用于PCR反应的试剂盒，其特征在于，所述基板采用硼硅酸盐超薄玻璃材料。
7.根据权利要求1到3任一所述的用于PCR反应的试剂盒，其特征在于，所述表面覆膜采用耐高温、变形率小的材料。
8.根据权利要求7所述的用于PCR反应的试剂盒，其特征在于，所述表面覆膜采用有机硅塑料为材料。
9.根据权利要求1到3任一所述的用于PCR反应的试剂盒，其特征在于，所述表面覆膜与所述基板接触的一面设有热熔粘合剂。
10.根据权利要求1到3任一所述的用于PCR反应的试剂盒，其特征在于，所述穴坑的数量及形状与采用的PCR仪器的反应孔匹配。
11.根据权利要求4所述的用于PCR反应的试剂盒，其特征在于，所述封闭层为石蜡。
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|---|---|---|---|---|
| CN104854451A (zh) * | 2012-10-09 | 2015-08-19 | 犹他大学研究基金会 | 用荧光监测温度 |
| CN107180163A (zh) * | 2017-05-15 | 2017-09-19 | 北京旌准医疗科技有限公司 | 一种基于芯片数字pcr的反应通孔数优化分析算法 |
| CN116042379A (zh) * | 2023-04-03 | 2023-05-02 | 至美时代生物智能科技(北京)有限公司 | 一种防止核酸气溶胶污染的装置及方法 |
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