CN201402264Y - 柱状黄杆菌Dot-ELISA检测试剂盒 - Google Patents
柱状黄杆菌Dot-ELISA检测试剂盒 Download PDFInfo
- Publication number
- CN201402264Y CN201402264Y CN2009200848104U CN200920084810U CN201402264Y CN 201402264 Y CN201402264 Y CN 201402264Y CN 2009200848104 U CN2009200848104 U CN 2009200848104U CN 200920084810 U CN200920084810 U CN 200920084810U CN 201402264 Y CN201402264 Y CN 201402264Y
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- bottle position
- bottle
- protection cap
- flavobacterium
- valve protection
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Images
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本实用新型提供了一种柱状黄杆菌Dot－ELISA检测试剂盒，包括盒体和衬垫，其特征在于：在衬垫上设有放置硝酸纤维素膜的方格及存放不同溶液不同颜色瓶帽的试剂瓶瓶位，所述的试剂瓶瓶位分别为浓缩PBST液瓶位、PBS缓冲液瓶位、兔抗柱状黄杆菌抗血清标准液瓶位、辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG标准液瓶位、牛血清白蛋白瓶位、DAB显色液瓶位、柱状黄杆菌抗原标准菌液瓶位；在盒体盒盖的内侧设有放置培养皿的口袋。本实用新型可一次性进行多个样本的测定，减少样本检测时间，操作简便快速，可在非实验室条件进行，便于携带和运输，能快速、简便、灵敏地用于水产动物致病菌柱状黄杆菌的检测。
Description
技术领域
本实用新型涉及生物技术领域，具体地说是一种柱状黄杆菌Dot-ELISA检测试剂盒。
背景技术
柱状黄杆菌(Flavobacterium columnaris)又名柱状噬纤维菌(Cytophagacolumnaris)，为常见的鱼类致病种。目前，国内外对柱状黄杆菌的检测工作研究较少，人们通常采取细菌分离及生化鉴定的方法对其进行检测和诊断，也曾有研究者采用PCR和凝集免疫法对柱状黄杆菌进行确认。但此类方法均存在操作成本高、费时费力且依赖实验室环境程度高，无法进行现场检测等缺陷，难以有效应用于野外现场环境。
斑点酶联免疫吸附实验(Dot-ELISA)是上世纪80年代初发展起来的一项免疫学新技术。它与ELISA相似，只是将固相载体变为硝酸纤维素膜(NC膜)。Dot-ELISA方法的优点在于快速、简便，既保留了常规ELISA的优点，又克服了其繁琐的程序，且结果直观可用肉眼直接观察。这种方法不仅较其它方法快速准确，而且可大幅度降低检验成本，减少劳动强度，省时省料。但是现有Dot-ELISA所用的设备不易操作、成本高、劳动较复杂、无法在非实验室环境下进行、难以快速检测、难以有效应用于野外现场环境。
发明内容
本实用新型的目的是针对上述情况，提供了一种柱状黄杆菌Dot-ELISA检测试剂盒，用以解决该致病菌无法现场检测的难题。
本实用新型的目的是这样实现的：所述的柱状黄杆菌Dot-ELISA检测试剂盒，包括盒体和衬垫，在衬垫上设有放置硝酸纤维素膜的方格及存放不同溶液不同颜色瓶帽的试剂瓶瓶位，所述的试剂瓶瓶位分别为浓缩PBST液瓶位、PBS缓冲液瓶位、兔抗柱状黄杆菌抗血清标准液瓶位、辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG标准液瓶位、牛血清白蛋白瓶位、DAB显色液瓶位、柱状黄杆菌抗原标准菌液瓶位；在盒体盒盖的内侧设有放置培养皿的口袋。
浓缩PBST液瓶位内放置有50ml带白色标示层瓶帽的透明塑料试剂瓶，PBS缓冲液瓶位内放置有50ml蓝色标示层瓶帽的透明塑料试剂瓶，兔抗柱状黄杆菌抗血清标准液瓶位内放置有2ml红色标示层瓶帽的透明塑料试剂瓶，辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG标准液瓶位内放置有1ml绿色标示层瓶帽的透明塑料试剂瓶，牛血清白蛋白瓶位内放置有紫色标示层瓶帽的深色玻璃试剂瓶，DAB显色液瓶位内放置有黑色标示层瓶帽的深色玻璃试剂瓶，柱状黄杆菌抗原标准菌液瓶位内放置有黄色标示层瓶帽的透明塑料试剂瓶。
本实用新型的有益效果：由于采用以上技术方案，该试剂盒灵敏高，可检出的最低检测限为5×103cfu，可一次性进行多个样本的测定，减少检测样本所需要的时间，所需的试剂用不同大小、不同颜色的试剂瓶封装在盒内，易于快速区分，具有成本节约、操作简便快速、可在非实验室条件进行、便于携带和运输等优势，能快速、简便、灵敏地用于水产动物致病菌柱状黄杆菌的检测。
附图说明
图1是本实用新型的结构示意图。
图中：1-盒体，2-衬垫，3-方格，4-浓缩PBST液瓶位，5-PBS缓冲液瓶位，6-兔抗柱状黄杆菌抗血清标准液瓶位，7-辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG标准液瓶位，8-牛血清白蛋白瓶位，9-DAB显色液瓶位，10-柱状黄杆菌抗原标准菌液瓶位，11-培养皿，12-口袋。
具体实施方式
下面结合附图对本实用新型作进一步说明。图1中，所述的柱状黄杆菌Dot-ELISA检测试剂盒，包括盒体1和衬垫2，其特征在于：在衬垫2上设有放置硝酸纤维素膜的方格3及存放不同溶液不同颜色瓶帽的试剂瓶瓶位，所述的试剂瓶瓶位分别为浓缩PBST液瓶位4、PBS缓冲液瓶位5、兔抗柱状黄杆菌抗血清标准液瓶位6、辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG标准液瓶位7、牛血清白蛋白瓶位8、DAB显色液瓶位9、柱状黄杆菌抗原标准菌液瓶位10；在盒体1盒盖的内侧设有放置培养皿11的口袋12。
浓缩PBST液瓶位4内放置有50ml带白色标示层瓶帽的透明塑料试剂瓶，PBS缓冲液瓶位5内放置有50ml蓝色标示层瓶帽的透明塑料试剂瓶，兔抗柱状黄杆菌抗血清标准液瓶位6内放置有2ml红色标示层瓶帽的透明塑料试剂瓶，辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG标准液瓶位7内放置有1ml绿色标示层瓶帽的透明塑料试剂瓶，牛血清白蛋白瓶位8内放置有紫色标示层瓶帽的深色玻璃试剂瓶，DAB显色液瓶位9内放置有黑色标示层瓶帽的深色玻璃试剂瓶，柱状黄杆菌抗原标准菌液瓶位10内放置有黄色标示层瓶帽的透明塑料试剂瓶。
用试剂盒内的试剂配制如下溶液：
配制PBST缓冲液∶用去离子水将浓缩PBST液按1∶19体积比进行稀释；
配制封闭液：取0.1克牛血清白蛋白，加PBS缓冲液至100ml；
配制兔抗柱状黄杆菌抗血清作用液(一抗)∶用PBST缓冲液将兔抗柱状黄杆菌抗血清标准液按1∶500体积比进行稀释；
配辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG作用液(酶标二抗)∶用PBST缓冲液将辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG标准液按1∶1000体积比进行稀释；
试剂盒的操作步骤：
A.滴样：先将样品用匀浆器将所需检测的组织匀浆，经抗原包被缓冲液(PH9.6 0.05M碳酸盐缓冲液)稀释，取10μl所测样品或柱状黄杆菌抗原标准菌液的稀释液滴于硝酸纤维素膜上，在自然条件下干燥1～2小时；
B.洗涤：将已点样的硝酸纤维素膜放置于培养皿11中，加PBST缓冲液中漂洗3次，每次5分钟；
C.封闭：取出，再将硝酸纤维素膜浸入配好的封闭液中，于自然条件下孵育60min，期间摇动3～4次，取出后用PBST缓冲液漂洗3次，每次5min，每次洗涤中间摇动数次；
D.加抗体：取出，再将硝酸纤维素膜浸入稀释后的兔抗柱状黄杆菌抗血清标准液中，自然条件下孵育1h，取出，漂洗3次，每次5分钟；再将其浸入稀释后的辣根过氧化物酶标记标记的羊抗兔IgG标准液中，自然条件下孵育1.5h，取出，用PBST缓冲液漂洗3次，每次5分钟；
E.底物显色及终止反应：将硝酸纤维素膜浸入DAB显色液中，于自然条件下避光显色15min，取出，当硝酸纤维素膜出现明显斑点后，用蒸馏水漂洗2次以终止反应，然后取出硝酸纤维素膜置于干净的滤纸上自然干燥，记录试验结果，避光保存。
F.结果判定：观察硝酸纤维素膜上的颜色，与阳性和空白结果进行比较，或与标准反应图例进行对照从而得出结果。
Claims (2)
1.一种柱状黄杆菌Dot-ELISA检测试剂盒，，包括盒体(1)和衬垫(2)，其特征在于：在衬垫(2)上设有放置硝酸纤维素膜的方格(3)及存放不同溶液不同颜色瓶帽的试剂瓶瓶位，所述的试剂瓶瓶位分别为浓缩PBST液瓶位(4)、PBS缓冲液瓶位(5)、兔抗柱状黄杆菌抗血清标准液瓶位(6)、辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG标准液瓶位(7)、牛血清白蛋白瓶位(8)、DAB显色液瓶位(9)、柱状黄杆菌抗原标准菌液瓶位(10)；在盒体(1)盒盖的内侧设有放置培养皿(11)的口袋(12)。
2.根据权利要求1所述柱状黄杆菌Dot-ELISA检测试剂盒，其特征在于：浓缩PBST液瓶位(4)内放置有50ml带白色标示层瓶帽的透明塑料试剂瓶，PBS缓冲液瓶位(5)内放置有50ml蓝色标示层瓶帽的透明塑料试剂瓶，兔抗柱状黄杆菌抗血清标准液瓶位(6)内放置有2ml红色标示层瓶帽的透明塑料试剂瓶，辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG标准液瓶位(7)内放置有1ml绿色标示层瓶帽的透明塑料试剂瓶，牛血清白蛋白瓶位(8)内放置有紫色标示层瓶帽的深色玻璃试剂瓶，DAB显色液瓶位(9)内放置有黑色标示层瓶帽的深色玻璃试剂瓶，柱状黄杆菌抗原标准菌液瓶位(10)内放置有黄色标示层瓶帽的透明塑料试剂瓶。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2009200848104U CN201402264Y (zh) | 2009-04-09 | 2009-04-09 | 柱状黄杆菌Dot-ELISA检测试剂盒 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2009200848104U CN201402264Y (zh) | 2009-04-09 | 2009-04-09 | 柱状黄杆菌Dot-ELISA检测试剂盒 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN201402264Y true CN201402264Y (zh) | 2010-02-10 |
Family
ID=41662060
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN2009200848104U Expired - Fee Related CN201402264Y (zh) | 2009-04-09 | 2009-04-09 | 柱状黄杆菌Dot-ELISA检测试剂盒 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN201402264Y (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102010896A (zh) * | 2009-09-03 | 2011-04-13 | 通威股份有限公司 | 一种检测无鳞鱼致病菌柱状黄菌的方法和检测试剂盒 |
| CN103293310A (zh) * | 2013-05-08 | 2013-09-11 | 成都创宜生物科技有限公司 | 一种检测胎膜早破的试剂盒 |
-
2009
- 2009-04-09 CN CN2009200848104U patent/CN201402264Y/zh not_active Expired - Fee Related
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102010896A (zh) * | 2009-09-03 | 2011-04-13 | 通威股份有限公司 | 一种检测无鳞鱼致病菌柱状黄菌的方法和检测试剂盒 |
| CN102010896B (zh) * | 2009-09-03 | 2012-12-05 | 通威股份有限公司 | 一种检测无鳞鱼致病菌柱状黄菌的方法和检测试剂盒 |
| CN103293310A (zh) * | 2013-05-08 | 2013-09-11 | 成都创宜生物科技有限公司 | 一种检测胎膜早破的试剂盒 |
| CN103293310B (zh) * | 2013-05-08 | 2015-09-30 | 成都创宜生物科技有限公司 | 一种检测胎膜早破的试剂盒 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPH03105252A (ja) | コロニーブロッティング法および装置 | |
| CN201402264Y (zh) | 柱状黄杆菌Dot-ELISA检测试剂盒 | |
| CN104792991A (zh) | 一种基于单克隆抗体的检测食品中沙门氏菌属的特异性双抗体夹心法 | |
| CN106662529A (zh) | 检测目标分析物的测定装置和方法 | |
| CN102749443A (zh) | 双层微流控芯片器件及其在免疫检测中的用途 | |
| CN107688094B (zh) | 一种肠炎沙门氏菌的检测方法及其检测试纸条 | |
| CN106932575B (zh) | 纳米免疫磁珠技术联合酶联免疫吸附快速检测鼠伤寒沙门氏菌的方法 | |
| CN104483479B (zh) | 一种斑点金免疫渗滤测定古代丝织品的方法 | |
| CN108627650A (zh) | 用于宠物感染标志物检测的蛋白芯片的制备方法及应用 | |
| CN103134923A (zh) | 一种检测黄曲霉毒素m1的试剂盒 | |
| CN201382941Y (zh) | 嗜水气单胞菌的Dot-ELISA检测试剂盒 | |
| KR101811134B1 (ko) | 정지액체상 랩온어칩을 이용한 박테리아 검출 방법 | |
| CN108226492A (zh) | A群猪轮状病毒快速elisa检测试剂盒 | |
| Gares et al. | Detection and identification of Pectinatus cerevisiiphilus using surface-reactive monoclonal antibodies in a membrane filter-based fluoroimmunoassay | |
| CN103954750A (zh) | 一种免疫磁珠及其快速检测奥奈达希瓦氏菌的方法 | |
| US10809256B2 (en) | Simple measurement tool having reaction regions separated by gel boundary regions | |
| CN107478828B (zh) | 快速检测草甘膦残留的试剂盒及草甘膦残留的检测方法和应用 | |
| CN202599956U (zh) | 抗心磷脂抗体IgG定量检测用试剂盒 | |
| CN203164127U (zh) | 一种检测痰液游离血红素的检测装置 | |
| CN202548133U (zh) | 一种布鲁氏菌抗体快捷检测试剂盒 | |
| CN102539749A (zh) | 现场用高灵敏度免疫检测方法及试剂盒 | |
| CN103487590B (zh) | 一种血型抗体的间接Dot-ELISA检测方法与应用 | |
| CN202471707U (zh) | 现场用快速免疫检测试剂盒 | |
| CN102565387A (zh) | 现场用快速免疫检测试剂盒及其检测方法 | |
| RU77687U1 (ru) | Укладка иммунохроматографических индикаторных элементов |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20100210 Termination date: 20160409 |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |