CN201035012Y - 内分泌激素四合一联合检测板 - Google Patents

Abstract

本实用新型为一种内分泌激素四合一联合检测板，包含基础板和检测试纸；基础板包括板身和板盖，板身内部设有4个与检测试纸对应的凹槽，板身正面有相关信息记录表、结果判别说明、检测对象说明和结果显示栏，检测试纸4条固定于板身内部。本实用新型可实现对FSH、LH、孕酮、雌二醇的同时检测，具有快速、灵敏、操作简便、成本低、无需专业人员检测的特点。

Description

内分泌激素四合一联合检测板

技术领域

本实用新型涉及一种内分泌激素四合一联合检测板，属于胶体金免疫检测领域。

背景技术

由垂体前叶产生的FSH(卵泡刺激素素)及LH(黄体生成激素)两种糖蛋白激素，在性腺轴上共同作用一起调节生殖功能，在生育年龄的妇女随月经周期出现周期性变化。FSH作用于卵泡颗粒细胞上的受体，刺激卵泡生长、发育、成熟，并促进雌激素分泌。FSH在卵泡早期维持较低水平，随卵泡发育至晚期，雌激素水平升高，随后FSH略下降，至排卵期24小时出现低值，随即迅速升高，24小时后又下降，LH和FSH共同作用，引起排卵，黄体期维持低水平，并促进雌、孕激素合成。LH在卵泡早期处于低水平，以后逐渐上升，至排卵前24小时左右与FSH同时出现高峰，而且是较FSH更高的陡峰，24小时后最高值骤降，黄体后期逐渐下降。检测血中及尿液中FSH、LH水平，临床上用于协助判断闭经原因、诊断多囊卵巢综合症以及卵巢早衰、卵巢功能不足等。

孕酮为孕激素之一，是了解卵巢功能和胎盘功能的重要指标，正常妇女在月经周期以卵泡期最低，黄体期最高；正常妊娠妇女第7周开始升高，35周达高峰。异常的孕酮分泌与经前期紧张、了宫内膜不规律剥脱、痛经和黄体功能不全有关。

雌二醇是一种A环为苯环的18碳类固醇激素，分子量272.4，只有1～3％的雌二醇以游离形式存在于循不的血浆内，它主要与性激素结合球蛋白和血清白蛋白结合。雌二醇是存在于男性与女性体内的最主要的天然雌激素，在女性，雌激素刺激性器官生长和第二性特征的发育，也影响促性腺激素的分泌，在男性作用尚不清楚。未孕妇女雌二醇几乎全由卵巢产生，因此，在排卵周期连续(如每日)测定有助于判断卵泡生长等卵巢功能，也可用于监测在正常周期或在体外受精之前诱发的排卵周期中E2血清水平的指数增长。其它的临床用途有青春期延迟，原发或继发性闭经，绝经等，可与其它激素同时测定来更好地分析与鉴别诊断。

目前对内分泌生殖激素检测方法有气相层析法、蛋白结合分析法及放射免疫法及化学发光法。由于血中孕酮含量较低，目前应用较多的方法为蛋白结合分析、放射免疫分析法(RIA)及磁性微粒分离的免疫酶联测定法(IEMA)及发光法。这些方法需要特殊防护设备、严苛的条件、价格昂贵的仪器和训练有素的人员，而且操作费时、样本存储困难，不易于推广应用。

免疫分析为内分泌生殖激素的检测提供了一个新的分析检测途径，现已有中国专利00222540.9一种优生试纸；中国专利00112780.2一种优生试纸及其检测方法；中国专利00222539.5一种不孕症检测试纸，万华普曼生物工程有限公司于1995年获得排卵产品国药字批准文号(95)卫药准字(京万华)S-02号，并将产品投放市场，因此对上述专利不构成侵犯。200610014168.3检测雌二醇的胶体金免疫试纸及其制备方法，该专利为检测食品中雌二醇残留，本发明用于诊断妇科疾病及卵巢功能。中国专利200510109165.3用于奶牛早期妊娠诊断的试纸及其检测方法，用途不同也不构成侵犯。

本发明根据检测需要，在现有的胶体金免疫技术上加以改进，制备出可同时检测FSH、LH、孕酮、雌二醇的联合检测装置，简单小巧，操作容易，且特异性强，灵敏度高，易储存，无须专门技术人员操作，而且结果易读。

发明内容

本实用新型针对上述存在的一些问题，提供了内分泌激素四合一联合检测板，利用胶体金免疫层析方法来检测相关内分泌激素。

为解决上述技术问题，本实用新型是通过以下技术方案实现的：

内分泌激素四合一联合检测板，包含基础板和检测试纸。

基础板又包括板身和板盖两部分，两者连接方式为插接；板身内部设有4个与检测试纸对应的凹槽，板身正面有相关信息记录表、结果判别说明、检测对象说明和结果显示栏。

检测试纸4条固定于板身内部，均是由底板、吸水板、硝酸纤维素膜、单克隆抗体金标垫、样品吸液层、MAX线组成，底板中部为硝酸纤维素膜，底板一端端头为吸水板，另一端端头为样品吸液层，硝酸纤维素膜两端分别与吸水板和单克隆抗体金标垫相互交叠连接，在单克隆抗体金标垫上压有样品吸液层。样品吸液层暴露在板身外，当板身和板盖连接上时，样品吸液层进驻板盖内，起到封闭作用；检测试纸的硝酸纤维素膜与板身的结果显示栏对应。

通过免疫筛选出针对一种免疫原的两种配对单抗，一种称为单克隆抗体I用于包被试验线，另一种称为单克隆抗体II用于胶体金标记，共同与免疫原有亲合作用，利用双抗夹心法原理制成的试纸。

此检测装置中的检测试纸利用胶体金双抗夹心法原理制成，把检测试纸的样品吸液层端放入待测样品中(液面不得超过MAX线)，由于毛细管作用样品将沿着试纸向吸水板端移动，在上行过程中，尿液中的抗原与单克隆抗体金标探针发生特异结合，当移动至固定有单克隆抗体I的试验线时，尿液中的抗原另一位点又与试验线中的单克隆抗体I相结合，因此其胶体金滞留于试验线上，试验线处显示红色，为阳性；相反如果尿液中没有相应抗原，单克隆抗体金标探针就不会与试验线上的单克隆抗体I发生特异结合，没有胶体金滞留。即仅有一条红色控制线为阴性，这就是双抗夹心法原理。根据此原理，两条线为阳性，一条线为阴性得出诊断。

方案中，当移动至羊抗鼠多克隆抗体控制线时，无论样品中有无相应抗原，标记的金标探针都会与已设定好的羊抗鼠多克隆抗体结合滞留，使控制线显示红色。因此控制线无色带产生则代表操作有误，检测时样品液面超过MAX线或试纸已经过期。

上述抗原可为FSH、LH、孕酮、雌二醇，硝酸纤维素膜上的试验线可由FSH、LH、孕酮、雌二醇合成免疫原包被；多克隆抗体控制线由羊抗鼠多克隆抗体包被。通过更替试验线包被物的成分，可制成可FSH检测试纸、LH检测试纸、孕酮检测试纸、雌二醇检测试纸，实现对内分泌激素FSH、LH、孕酮、雌二醇的同时检测。

由于采用上述技术方案，本发明所提供的内分泌激素四合一联合检测板具有这样的有益效果，即简单小巧，操作容易，且特异性强，灵敏度高，易储存，无须专门技术人员操作，而且结果易读。

附图说明

图1为本实用新型的主视结构图。

图2为本实用新型的剖视图。

图3为检测试纸的主视结构图。

图4为检测试纸的剖视图。

1.基础板，2.板身，3.板盖，4.信息记录表，5.结果判别说明，6.检测对象说明，7.结果显示栏，8.检测试纸，9.底板，10.吸水板，11.硝酸纤维素膜，12.单克隆抗体金标垫，13.样品吸液层，14.试验线，15.控制线，16.MAX线，17.凹槽。

具体实施例

下面结合附图对本实用新型进行进一步说明。

图1详细表示了本实用新型的主视结构图，从图中可以看出本实用新型由基础板(1)和检测试纸(8)两部分组成。

(一)基础板

由图1可见，基础板(1)包括板身(2)和板盖(3)两部分，板身(2)和板盖(3)连接方式为插接；板身(2)内部设有与检测试纸(8)对应的凹槽(17)，板身正面有相关信息记录表(4)、结果判别说明(5)、检测对象说明(6)和结果显示栏(7)。

(二)检测试纸

图4详细表示检测试纸的剖视图，检测试纸(8)固定于板身(2)内部，是由底板(9)、吸水板(10)、硝酸纤维素膜(11)、单克隆抗体金标垫(12)、样品吸液层(13)、MAX线(16)组成，底板(9)中部为硝酸纤维素膜(11)，底板一端端头为吸水板(10)，另一端端头为样品吸液层(13)，硝酸纤维素膜(11)两端分别与吸水板(10)和单克隆抗体金标垫(12)相互交叠连接，在单克隆抗体金标垫(12)上压有样品吸液层(13)。

检测试纸具体制法：应用化学合成方法，分别合成针对FSH、LH、孕酮、雌二醇的两种不同结合位点的合成免疫原。用上述制备的合成免疫原免疫小鼠，提取小鼠腹水，分离纯化得到FSH单克隆抗体I、FSH单克隆抗体II；LH单克隆抗体I、LH单克隆抗体II；孕酮单克隆抗体I、孕酮单克隆抗体II；雌二醇单克隆抗体I、雌二醇单克隆抗体II。取双蒸水加适量的氯金酸磁力搅拌加温到80～100℃，加入适量柠檬酸三钠继续加热搅拌至沸腾，冷却后避光保存备用。把金标抗体吸附于纤维材料上备用。特种机制膜，利用电脑控制传动速度，保证每单位膜上包被的抗体量相等。其中4条试纸的试验线分别由FSH单克隆抗体I、LH单克隆抗体I、孕酮单克隆抗体I、雌二醇单克隆抗体I包被，控制线是由羊抗鼠多克隆抗体包被制成，可制成FSH检测试纸、LH检测试纸、孕酮检测试纸、雌二醇检测试纸，配搭基础板，可同时实现对FSH、LH、孕酮、雌二醇的检测。

结合图1和图2可看出，4条检测试纸(8)通过4个凹槽(17)固定在板身(2)内部，检测试纸的样品吸液层(13)暴露于板身(2)之外，当板身(2)和板盖(3)连接上时，样品吸液层(13)进驻板盖(3)内；检测试纸(8)的硝酸纤维素膜(11)与板身(2)的结果显示窗(7)对应。

使用时，拔去板盖，把露出的样品吸液层放入待检样品中(液面不得超过MAX线)，15秒后取出，5分钟时观察结果。观察结果显示窗，一个显示窗内，控制线、试验线均出现红色色带的，相应的检测为阳性；某条试验线没有出现色带对应的检测结果为阴性；控制区未出现红色线，表明试纸过期或操作不当。

Claims (6)

1.一种内分泌激素四合一联合检测板，其特征在于包含基础板(1)、检测试纸(8)；基础板(1)包括板身(2)和板盖(3)两部分，板身(2)和板盖(3)连接方式为插接；板身(2)内部设有与检测试纸(8)对应的凹槽(17)，板身正面有相关信息记录表(4)、结果判别说明(5)、检测对象说明(6)和结果显示栏(7)；检测试纸(8)固定于板身(2)内部，是由底板(9)、吸水板(10)、硝酸纤维素膜(11)、单克隆抗体金标垫(12)、样品吸液层(13)、MAX线(16)组成，底板(9)中部为硝酸纤维素膜(11)，底板一端端头为吸水板(10)，另一端端头为样品吸液层(13)，硝酸纤维素膜(11)两端分别与吸水板(10)和单克隆抗体金标垫(12)相互交叠连接，在单克隆抗体金标垫(12)上压有样品吸液层(13)。

2.根据权利要求1所述的一种内分泌激素四合一联合检测板，特征在于所述的样品吸液层(13)暴露于板身(2)之外，当板身(2)和板盖(3)连接上时，样品吸液层(13)进驻板盖(3)内；检测试纸(8)的硝酸纤维素膜(11)与板身(2)的结果显示窗(7)对应。

3.根据权利要求1所述的一种内分泌激素四合一联合检测板，其特征在于所述的凹槽(17)数量为4，对应的检测试纸(8)为4条。

4.根据权利要求1所述的一种内分泌激素四合一联合检测板，其特征在于硝酸纤维素膜(11)上有一条试验线(14)和一条多克隆抗体控制线(15)。

5.根据权利要求4所述的一种内分泌激素四合一联合检测板，特征在于控制线是由羊抗鼠多克隆抗体包被制成。

6.根据权利要求1所述的一种内分泌激素四合一联合检测板，其特征在于所述内分泌激素包括FSH、LH、孕酮、雌二醇。

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