CN1985867A - 改善衰老机体认知功能的组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种改善衰老机体认知功能的组合物，包括：蓝莓提取物500～1500份，银杏叶提取物60～180份，维生素B610～30份，维生素B120.01～0.03份，本发明的组合物经动物实验结果显示，与对照组比较，能使实验动物衰老大鼠在水迷宫中的运动成绩明显提高；血清和海马组织乙酰胆碱酯酶活力显著受到抑制；额叶皮层5－羟色胺、多巴胺、去甲肾上腺素等神经递质的含量明显增加；血清维生素E浓度增加；血清总抗氧化能力和谷胱甘肽过氧化物酶活力显著增强；海马CA1区的群峰电位幅值增加，提示本发明的组合物有助于长时程增强LTP形成，实验结果表明，给衰老大鼠补充适量的本发明的组合物可明显改善其认知功能。
Description
技术领域
本发明涉及一种药物组合物，特别是涉及一种改善衰老机体认知功能的组合物。
背景技术
随着社会经济的发展与科技进步，人类寿命不断延长，世界人口老龄化的趋势日益明显。统计资料显示，2010年全球老年人将达5.9亿，2025年将增至11亿。我国60岁以上的老人目前约为1亿，2025年将达2.8亿，占总人口的19.3％。与此同时，老年认知功能减退和老年性痴呆、帕金森病等神经退行性疾病的发生率亦逐年升高，不仅严重影响老年人的生活质量，而且给社会和家庭带来沉重负担。
脑老化的显著特点是认知功能的渐进性减退。马永兴等调查结果显示，70％的受调查老人出现记忆功能减退。对上海市区5055名55岁以上老年人的调查结果也显示，轻度智力减退者占14.4％，老年性痴呆患者达4.1％。可见老年人的认知功能减退已成为严重的社会问题。
目前改善老年认知功能的药物主要包括胆碱能激动剂、益智药、钙拮抗剂、神经生长因子等。补充乙酰胆碱前体的药物如卵磷脂、胆碱，临床疗效未能证实；胆碱能受体激动剂如占诺美林等，在临床试验中证实可改善痴呆患者症状。益智药包括吡拉西坦(脑复康)、茴拉西坦、奈非西坦等吡咯烷酮类药物以及氢化麦角碱(海特琴)、麦角溴烟酯(尼麦角林)等麦角生物碱类药物均有一定疗效。临床前药理和动物实验证明，神经生长因子(NGF)对中枢胆碱能神经元有营养作用，可改善老年动物的认知功能障碍。但由于其分子量大，不易通过血脑屏障。另外，用于治疗痴呆的钙通道阻滞剂主要有尼莫地平、氟桂利嗪等，可通过阻滞钙离子内流起到神经保护作用，并改善脑供血。以上药物均有不同程度的毒副作用，若作为老年认知减退的预防药物长期使用，还存在价格昂贵和安全毒理性问题。
老年认知功能与营养关系密切。研究表明，健康老人血清中维生素C、维生素E、Zn、Mn、Se的含量偏低；老年性痴呆血锌、发锌含量以及血中维生素E、维生素C浓度均低于正常对照；而且老年人膳食中微量营养素又易于缺乏。因而寻找一种能改善衰老机体认知功能的组合物配方，对于提高老人生活质量，预防认知功能障碍和神经退行性疾病，均具有重要的科学意义和实用价值。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术中的不足，提供一种改善衰老机体认知功能的组合物。
本发明的技术方案概述如下：
一种改善衰老机体认知功能的组合物，按重量份包括：蓝莓提取物500～1500份，银杏叶提取物60～180份，维生素B6 10～30份，维生素B12 0.01～0.03份。
优选的是：所述蓝莓提取物为1000份，所述银杏叶提取物为120份，所述维生素B6为20份，所述维生素B12为0.02份。
一种改善衰老机体认知功能的组合物，按重量份还可以包括：维生素E 30～90份，维生素C 50～150份，叶酸0.2～0.6份，二十二碳六烯酸100～300份，绿茶多酚提取物75～225份。
优选的是：所述维生素E为60份，所述维生素C为100份，所述叶酸为0.4份，所述二十二碳六烯酸为200份，所述绿茶多酚提取物为150份。
一种改善衰老机体认知功能的组合物，按重量份还可以包括：乳酸锌25～75份，硒酵母0.025～0.075份。
优选的是：所述乳酸锌为50份，所述硒酵母为0.050份。
本发明的一种改善衰老机体认知功能的组合物经动物实验结果显示，与对照组比较，能使实验动物衰老大鼠在水迷宫中的运动成绩明显提高；血清和海马组织乙酰胆碱酯酶(AchE)活力显著受到抑制；额叶皮层5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)等神经递质的含量明显增加；血清维生素E浓度增加；血清总抗氧化能力(TAOC)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力显著增强；海马CA1区的群峰电位(PS)幅值增加，提示营养干预有助于长时程增强(LTP)形成。上述实验结果表明，给衰老大鼠补充适量的一种改善衰老机体认知功能的组合物可明显改善其认知功能。
通过人体实验结果显示，与干预前比较，使用本发明的组合物后老人对数字和图形的记忆能力显著提高；老人血清甘油三酯含量显著下降，血清总胆固醇含量也有降低的趋势。
上述实验结果表明，给老年人群补充适量的本发明的组合物可明显延缓其认知衰退。
附图说明
图1为本发明的组合物对大鼠海马CA1区LTP形成的影响。
具体实施方式
组方的理论依据
(一)提高老年认知功能的营养素研究进展
1.长链多不饱和脂肪酸：膳食中脂肪酸的摄入可能与认知功能以及某些神经系统疾患有关。研究发现，饱和脂肪、胆固醇和痴呆或认知功能损害之间存在正相关，而鱼或n-3脂肪酸和痴呆与认知功能损害之间则存在负相关关系。研究还表明，长链多不饱和脂肪酸(LCPUFAs)为神经系统的功能和发育所必需，可以促进神经元的生长与分化，提高学习记忆能力。
2.锌：流行病学研究资料表明，老年性痴呆患者的血清锌和发锌含量均明显降低。动物实验及临床研究结果提示，成年缺锌大鼠学习记忆功能降低；缺锌还与阿尔茨海默病、帕金森氏病等神经退行性疾病的发生、发展有密切关系。
3.维生素：近年研究提示，老年人认知功能低下与维生素B1、维生素B6、维生素B12、维生素C、叶酸等一些维生素的缺乏有关；而补充维生素具有改善人体认知功能的作用。健康成年人每日补充50mg维生素B1，两个月后情绪和认知等心理行为均有改善。Meador等的研究结果表明补充维生素B1可在一定程度上改善东莨菪碱所致认知功能损害。Dei jen等给38名70～79岁老人每日补充20mg维生素B6，连续3个月，结果其长时记忆功能明显改善。Sram等给老人连续补充维生素E一年，结果观察对象的短时记忆、运动能力以及情绪反应等多项指标均得到改善。Masaki等在研究中发现，补充维生素E对老年血管性痴呆有明显的防治作用：同时对正常人群认知功能的改善有益。
(二)植物化学成分改善认知功能的研究进展
研究证实，植物多酚、皂苷、植物雌激素、硫化物、银杏叶提取物、蓝莓提取物等多种植物化学成分可改善认知功能。
1.绿茶提取物：表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是绿茶提取物的主要成分。EGCG可激活一系列细胞反应，具有保护神经元的作用。EGCG还可通过α-分泌酶途径促进淀粉样前体蛋白代谢，减少阿尔茨海默病β-淀粉样蛋白纤维缠结的形成。
2.银杏叶提取物：银杏叶提取物(EGB)主要活性物质有黄酮类、萜类、有机酸、原花色素。Morris水迷宫行为测试结果表明，主要含有银杏提取物和人参皂苷的复方银杏滴丸可明显缩短大鼠逃避潜伏期和首次穿越平台的时间，保护脑组织，提高大鼠学习记忆能力。EGB还能增强老年大鼠的记忆保留，同时增强老龄前期小鼠的学习记忆能力，对东莨菪碱、亚硝酸钠造成的记忆获得及巩固障碍有不同程度的改善作用。EGB可保护海马神经元免受β-淀粉样蛋白诱导的神经毒性及氧化应激损伤。
3.蓝莓提取物：Morris水迷宫实验发现，在19月龄F344大鼠饮食中分别添加蓝莓、菠菜、草莓提取物，可逆转其认知缺陷，蓝莓提取物组还可改善运动功能。4月龄APP/PS1转基因小鼠补充蓝莓提取物8个月后，与未补充蓝莓组比较，其Y迷宫测试进入错误端的错误次数显著减少，学习记忆成绩显著提高。Casadesus等用蓝莓补充膳食饲养19月龄F344老龄大鼠8周。行为功能测试结果表明，蓝莓补充组大鼠记忆错误次数减少，认知功能提高。
以上研究提示，B族维生素、VitE、微量元素锌、硒以及蓝莓、银杏叶和绿茶多酚提取物与老年脑认知功能密切相关，是改善老年认知减退功能食品中重要的功能因子。
下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明：
实施例1
一种改善衰老机体认知功能的组合物，按重量份包括：蓝莓提取物1000份，银杏叶提取物120份，维生素B6 20份，维生素B12 0.02份。将该组合物按常规方法制成片剂，也可以制成冲剂，或者制成胶囊剂，或者是其它的口服剂型如散剂等。
还可以加入药学可接受的辅料，按常规方法制成片剂或冲剂或胶囊剂。
实施例2
一种改善衰老机体认知功能的组合物，按重量份包括：蓝莓提取物500份，银杏叶提取物60份，维生素B6 10份，维生素B12 0.01份。将该组合物按常规方法制成片剂，也可以制成冲剂，或者制成胶囊剂，或者是其它的口服剂型如散剂等。
还可以加入药学可接受的辅料，按常规方法制成片剂或冲剂或胶囊剂。
实施例3
一种改善衰老机体认知功能的组合物，按重量份包括：蓝莓提取物1500份，银杏叶提取物180份，维生素B6 30份，维生素B12 0.03份。将该组合物按常规方法制成片剂，也可以制成冲剂，或者制成胶囊剂，或者是其它的口服剂型如散剂等。
还可以加入药学可接受的辅料，按常规方法制成片剂或冲剂或胶囊剂。
实施例4
一种改善衰老机体认知功能的组合物，按重量份包括：蓝莓提取物1500份，银杏叶提取物60份，维生素B6 30份，维生素B12 0.01份。将该组合物按常规方法制成片剂，也可以制成冲剂，或者制成胶囊剂，或者是其它的口服剂型如散剂等。
还可以加入药学可接受的辅料，按常规方法制成片剂或冲剂或胶囊剂。
实施例5
一种改善衰老机体认知功能的组合物，按重量份包括：蓝莓提取物500份，银杏叶提取物180份，维生素B6 10份，维生素B12 0.03份。将该组合物按常规方法制成片剂，也可以制成冲剂，或者制成胶囊剂，或者是其它的口服剂型如散剂等。
还可以加入药学可接受的辅料，按常规方法制成片剂或冲剂或胶囊剂。
实施例6
一种改善衰老机体认知功能的组合物，按重量份包括：蓝莓提取物1000份，银杏叶提取物120份，维生素B6 20份，维生素B12 0.02份，维生素E 60份，维生素C 100份，叶酸0.4份，二十二碳六烯酸200份，绿茶多酚提取物150份。将该组合物按常规方法制成片剂，也可以制成冲剂，或者制成胶囊剂，或者是其它的口服剂型如散剂等。
还可以加入药学可接受的辅料，按常规方法制成片剂或冲剂或胶囊剂。
实施例7
一种改善衰老机体认知功能的组合物，按重量份包括：蓝莓提取物500份，银杏叶提取物60份，维生素B6 10份，维生素B12 0.01份，维生素E 30份，维生素C 50份，叶酸0.2份，二十二碳六烯酸100份，绿茶多酚提取物75份。将该组合物按常规方法制成片剂，也可以制成冲剂，或者制成胶囊剂，或者是其它的口服剂型如散剂等。
还可以加入药学可接受的辅料，按常规方法制成片剂或冲剂或胶囊剂。
实施例8
一种改善衰老机体认知功能的组合物，按重量份包括：蓝莓提取物1500份，银杏叶提取物180份，维生素B6 30份，维生素B12 0.03份，维生素E 90份，维生素C 150份，叶酸0.6份，二十二碳六烯酸300份，绿茶多酚提取物225份。将该组合物按常规方法制成片剂，也可以制成冲剂，或者制成胶囊剂，或者是其它的口服剂型如散剂等。
还可以加入药学可接受的辅料，按常规方法制成片剂或冲剂或胶囊剂。
实施例9
一种改善衰老机体认知功能的组合物，按重量份包括：蓝莓提取物500份，银杏叶提取物180份，维生素B6 10份，维生素B12 0.03份，维生素E 30份，维生素C 150份，叶酸0.2份，二十二碳六烯酸300份，绿茶多酚提取物75份。将该组合物按常规方法制成片剂，也可以制成冲剂，或者制成胶囊剂，或者是其它的口服剂型如散剂等。
还可以加入药学可接受的辅料，按常规方法制成片剂或冲剂或胶囊剂。
实施例10
一种改善衰老机体认知功能的组合物，按重量份包括：蓝莓提取物1500份，银杏叶提取物60份，维生素B6 30份，维生素B12 0.01份，维生素E 90份，维生素C 50份，叶酸0.6份，二十二碳六烯酸100份，绿茶多酚提取物225份。将该组合物按常规方法制成片剂，也可以制成冲剂，或者制成胶囊剂，或者是其它的口服剂型如散剂等。
还可以加入药学可接受的辅料，按常规方法制成片剂或冲剂或胶囊剂。
实施例11
一种改善衰老机体认知功能的组合物，按重量份包括：蓝莓提取物1000份，银杏叶提取物120份，维生素B6 20份，维生素B12 0.02份，维生素E 60份，维生素C 100份，叶酸0.4份，二十二碳六烯酸200份，绿茶多酚提取物150份，乳酸锌50份，硒酵母0.05份。将该组合物按常规方法制成片剂，也可以制成冲剂，或者制成胶囊剂，或者是其它的口服剂型如散剂等。
还可以加入药学可接受的辅料，按常规方法制成片剂或冲剂或胶囊剂。
实施例12
一种改善衰老机体认知功能的组合物，按重量份包括：蓝莓提取物500份，银杏叶提取物60份，维生素B6 10份，维生素B12 0.01份，维生素E 30份，维生素C 50份，叶酸0.2份，二十二碳六烯酸100份，绿茶多酚提取物75份，乳酸锌25份，硒酵母0.025份。将该组合物按常规方法制成片剂，也可以制成冲剂，或者制成胶囊剂，或者是其它的口服剂型如散剂等。
还可以加入药学可接受的辅料，按常规方法制成片剂或冲剂或胶囊剂。
实施例13
一种改善衰老机体认知功能的组合物，按重量份包括：蓝莓提取物1500份，银杏叶提取物180份，维生素B6 30份，维生素B12 0.03份，维生素E 90份，维生素C 150份，叶酸0.6份，二十二碳六烯酸300份，绿茶多酚提取物225份，乳酸锌75份，硒酵母0.075份。将该组合物按常规方法制成片剂，也可以制成冲剂，或者制成胶囊剂，或者是其它的口服剂型如散剂等。
还可以加入药学可接受的辅料，按常规方法制成片剂或冲剂或胶囊剂。
实施例14
一种改善衰老机体认知功能的组合物，按重量份包括：蓝莓提取物500份，银杏叶提取物180份，维生素B6 10份，维生素B12 0.03份，维生素E 30份，维生素C150份，叶酸0.2份，二十二碳六烯酸300份，绿茶多酚提取物75份，乳酸锌75份，硒酵母0.025份。将该组合物按常规方法制成片剂，也可以制成冲剂，或者制成胶囊剂，或者是其它的口服剂型如散剂等。
还可以加入药学可接受的辅料，按常规方法制成片剂或冲剂或胶囊剂。
实施例15
一种改善衰老机体认知功能的组合物，按重量份包括：蓝莓提取物1500份，银杏叶提取物60份，维生素B6 30份，维生素B12 0.01份，维生素E 90份，维生素C 50份，叶酸0.6份，二十二碳六烯酸100份，绿茶多酚提取物225份，乳酸锌25份，硒酵母0.075份。将该组合物按常规方法制成片剂，也可以制成冲剂，或者制成胶囊剂，或者是其它的口服剂型如散剂等。
还可以加入药学可接受的辅料，按常规方法制成片剂或冲剂或胶囊剂。
在上述各实施例中维生素B6，维生素B12，维生素E，维生素C，叶酸，乳酸锌，硒酵母由天津四环营养保健品厂提供。也可以选用其它企业生产的产品。
二十二碳六烯酸(微藻DHA)由武汉市福星生物药业有限公司提供(DHA含量为10.53％)。各实施例中所使用的DHA是按纯品计算投料的。
植物提取物：蓝莓提取物、银杏提取物、绿茶多酚提取物均由辽宁大兴安岭林格贝有机食品有限责任公司提供。也可以选用其它企业生产的产品。
实施例16
1.分别将维生素E、维生素C、维生素B6、维生素B12、叶酸、乳酸锌、硒酵母准确称重，并按维生素B12、硒酵母、叶酸、维生素B6、乳酸锌、维生素E、维生素C的顺序由小量到大量逐级混合，过筛，并搅拌均匀；
2.准确称取DHA、蓝莓提取物、银杏提取物、绿茶多酚提取物，充分混合，并与步骤1的混合物混合，过筛，并搅拌均匀；
3.在步骤2得到的混合物中按1∶10(或1∶11或1∶12或1∶13或1∶14或1∶15)的比例加入山楂果粉或麦芽糊精或淀粉或微晶纤维素等辅料，充分混匀。按常规方法制成片剂或冲剂或胶囊剂或散剂。
实施例17
效果评价
军事医学科学院动物中心提供18月龄Wistar大鼠30只，雌雄各半，体重雌鼠350g，雄鼠520g左右。随机分为正常对照组(以下简称对照组)和本发明组合物(实施例11的组合物)补充组(以下简称补充组)。分别给予基础饲料和添加营养素的基础饲料。补充组大鼠同时灌胃给予植物提取物混合液，剂量为4ml/(kg bw·d)。实验期10周。实验结束后处死动物，取血、组织检测各项指标。
结果显示，与对照组比较，补充组大鼠(1)在水迷宫中的运动成绩明显提高；(2)血清和海马组织乙酰胆碱酯酶(AchE)活力显著受到抑制；(3)额叶皮层5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)等神经递质的含量明显增加；(4)血清维生素E浓度增加；(5)血清总抗氧化能力(TAOC)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力显著增强。(6)海马CA1区的群峰电位(PS)幅值增加，提示营养干预有助于长时程增强(LTP)形成。
上述实验结果表明，给衰老大鼠补充适量本发明的组合物可明显改善其认知功能。
表1营养干预对老龄大鼠水迷宫和运动平衡功能的影响
| 组别 | n | 水迷宫时间(秒) | 运动平衡时间(秒) |
| 对照组补充组 | 1211 | 8.82±2.636.93±1.13* | 100.15±68.68121.53±68.33 |
n：动物数(只)；与对照组比较，*P＜0.05
表2营养干预对老龄大鼠血清、海马乙酰胆碱酯酶活力的影响
| 组别 | n | 血清(U/ml) | 海马(U/mg·prot) |
| 对照组补充组 | 88 | 18.21±8.4310.57±4.78* | 0.09±0.010.04±0.01* |
与对照组比较，*P＜0.05
表3营养干预对老龄大鼠额叶皮层神经递质含量的影响
| 组别 | n | 5-HT | DA | NE |
| 对照组补充组 | 77 | 0.55±0.130.95±0.12** | 0.18±0.060.31±0.05** | 0.14±0.150.36±0.13** |
与对照组比较，料P＜0.01
表4营养干预对老龄大鼠抗氧化功能的影响
| 组别 | n | 血清TAOC(U/ml) | 全血GSH-Px(活力单位) |
| 对照组补充组 | 1010 | 6.51±1.3913.01±9.36* | 33.48±3.1947.27±8.60** |
与对照组比较，*P＜0.05；**P＜0.01
实施例18
效果评价
从200例60岁以上社区老年志愿者中筛选具有轻微认知减退的老人60名，随机分为营养素干预组和安慰剂组。营养素干预组补充本发明组合物(实施例11的组合物)制成的冲剂，安慰剂组给予山楂果粉、麦芽糊精等辅料制成的冲剂。干预期3个月。干预结束前后检测各项指标。
结果显示，(1)与干预前比较，补充营养素组合物后老人对数字和图形的记忆能力显著提高，而干预组老人认知能力改善的效果不明显；(2)与干预前和安慰剂组比较，补充营养素组合物后老人血清维生素C和维生素E含量明显增加；(3)与干预前比较，补充营养素组合物后老人血清甘油三酯含量显著下降，血清总胆固醇含量也有降低的趋势；而且营养素干预组降低血脂的效果好于安慰剂组。
上述实验结果表明，给老年人群补充适量的本发明的组合物可明显延缓其认知衰退。表5血清维生素C测定结果(
)
| 干预组(μg/ml) | 安慰剂组(μg/ml) | |
| 零点(n＝60) | 24.05±3.94 | 23.04±2.81 |
| 3个月(n＝42) | 26.67±2.56*△△ | 23.47±1.77 |
*与零点比较有差异，p＜0.05
△△与安慰剂组比较有显著性差异，p＜0.01
表6血清维生素E测定结果(
)
| 干预组(μg/ml) | 安慰剂组(μg/ml) | |
| 零点(n＝60) | 5.087±1.43 | 5.06±1.48 |
| 3个月(n＝42) | 6.57±0.70**△ | 5.73±1.15 |
**与零点比较有显著性差异，p＜0.01
△与安慰剂组比较有差异，p＜0.05
表7血脂测定结果(
)
| 总胆固醇(mmol/L) | 甘油二酯(mmol/L) | |||
| 0点(n＝60) | 3个月(n＝42) | 0点(n＝60) | 3个月(n＝42) | |
| 干预组安慰剂组 | 5.63±0.855.78±0.92 | 5.38±0.735.56±0.95 | 2.12±0.282.13±0.31 | 1.74±0.83*1.70±0.90* |
*与零点比较，p＜0.05
表8干预组服用营养素前后认知水平比较
| 项目 | 服用前(n＝30) | 服用后(n＝20) |
| 数字拷贝汉字比较心算汉字旋转数字工作记忆广度双词再认无意义图形再认 | 10.76±5.317.38±4.6411.37±4.216.32±2.7610.73±5.0410.70±4.4610.30±3.26 | 13.09±3.146.29±3.7311.50±4.535.87±2.1911.33±5.1611.38±3.7710.67±3.16 |
表9安慰剂组服用安慰剂前后认知水平比较
| 项目 | 服用前(n＝30) | 服用后(n＝20) |
| 数字拷贝汉字比较心算汉字旋转数字工作记忆广度双词再认无意义图形再认 | 14.38±3.898.53±4.1713.91±5.187.16±2.8511.30±5.169.89±3.8611.65±2.67 | 12.50±3.918.50±4.3811.69±6.165.85±2.8811.08±5.9810.77±3.7010.55±2.69 |
Claims (6)
1.一种改善衰老机体认知功能的组合物，按重量份包括：蓝莓提取物500～1500份，银杏叶提取物60～180份，维生素B610～30份，维生素B120.01～0.03份。
2.根据权利要求1所述的一种改善衰老机体认知功能的组合物，其特征是所述蓝莓提取物为1000份，所述银杏叶提取物为120份，所述维生素B6为20份，所述维生素B12为0.02份。
3.根据权利要求1或2所述的一种改善衰老机体认知功能的组合物，其特征是按重量份包括：维生素E 30～90份，维生素C 50～150份，叶酸0.2～0.6份，二十二碳六烯酸100～300份，绿茶多酚提取物75～225份。
4.根据权利要3所述的一种改善衰老机体认知功能的组合物，其特征是所述维生素E为60份，所述维生素C为100份，所述叶酸为0.4份，所述二十二碳六烯酸为200份，所述绿茶多酚提取物为150份。
5.根据权利要求3所述的一种改善衰老机体认知功能的组合物，其特征是按重量份包括：乳酸锌25～75份，硒酵母0.025～0.075份。
6.根据权利要求5所述的一种改善衰老机体认知功能的组合物，其特征是所述乳酸锌为50份，所述硒酵母为0.050份。
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