CN1891230A - 血小板模拟物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
血小板模拟物及其制备方法,包括:A、抽取鹰隼鸟类的血置入抗凝剂中;B、将抽取的鹰隼鸟类血与洗涤液混合后离心洗涤去除血浆;C、将洗涤后的血液置入固定液中固定;D、将固定后的测试用血小板模拟物置于保存液中,并根据使用需要调节浓度,或者作为单项指标测试的质控物使用,或者将其加入到含有其它指标的质控物中使用;本发明用一些特定的鸟类的血液进行固定后模拟血小板,因其体积较小,所以更加接近于人类血小板的实际分布;而且由于进行了充分的固定,本发明的血小板模拟物更加适合于长期稳定的保存。
Description
技术领域 本发明涉及医用配制品及对血液的分析、测试,尤其涉及原材料来源于鸟类血液的医用配制品。
背景技术 现有技术中测定血小板参数,特别是进行筛选性检查时,基本上是用血液分析仪进行。血液分析仪当前的工作状况,需要通过一些手段来进行监测,以便于及时发现分析仪的异常。通常人们都是用测试质控物来实现目的,而质控物中血小板的参数是一项重要指标,在质控物的制备过程中血小板模拟物可以直接利用人血中的血小板进行稳定化处理,如US4198206美国专利,所述及的就是用人的血小板进行稳定化处理。但人的血小板来源困难。为了实现目的,也可以用其它动物的血小板来模拟。例如US4338564美国专利,其方案是用猪的血小板来进行稳定以后模拟人血小板,因为猪的血小板本身容易聚集,所以提取加工过程极为复杂。还如US4264470美国专利,其方案是用羊的红细胞进行稳定以后模拟人血小板,但是,羊红细胞具有正态分布,在固定以后因为不能被血液分析仪的溶血素溶掉,而产生假白细胞干扰,这种情况往往是不可控制的。而且羊红细胞的体积偏大,和血小板的分布有很大的差别。
发明内容 本发明的目的在于避免现有技术的不足之处而提出一种血小板模拟物及其制备方法,本发明用一些特定的鸟类的血液进行固定后模拟血小板,因其体积较小,接近于人类血小板的实际分布,更为可贵的是,进行充分固定后的细胞,更适合于长期稳定的保存。通过选择的结果得知,鸟类的红细胞差异很大,普通的家禽如鸡、鸭、鹅、火鸡、鸵鸟之类因不能飞翔,或者飞翔能力很差的鸟类的红细胞体积通常较大,这些鸟类的红细胞如果用于血小板模拟,需要通过一定的技术处理甚至只用其裸核才能落入血小板模拟的体积范围。而一些鸟类,例如隼形目鸟类,以及一些善于飞行的能生活在高海拔范围的鸟类,红细胞的体积就很小。典型的是鹰,其细胞体积在10fl以下,可以直接以醛类固定作为质控中的血小板模拟。可以使用的醛类很多,甲醛、多聚甲醛、戊二醛、苯甲醛等都可以使用。
本发明通过采用以下的技术方案来实现。
实施一种血小板模拟物的制备方法,包括步骤:
A.抽取鹰隼鸟类的血加入抗凝剂中;
B.将抽取的鹰隼鸟类血与氯化钠溶液混合后离心洗涤去除血浆,以及血液上层的白细胞;
C.将洗涤后的血液置入固定液中固定;
D.将固定后的血小板模拟物置于盐水或其他保存液中,并根据使用需要调节浓度,或者作为单项指标测试的质控物使用,或者将其加入到全指标测试的质控物中使用。
步骤A所述抽取鹰隼鸟类的血是从翅膀静脉中抽取,所述抗凝剂是在80~120毫升0.6%~1%(重量)的氯化钠溶液中,加入0.8~1.2克乙二胺四乙酸二钠制成。
步骤B所述洗涤用的氯化钠溶液是0.6%~1%氯化钠溶液;在洗涤时,按血∶氯化钠溶液=0.8~1.2∶4~6(体积)的比例混合后,置入离心洗涤机洗涤2~4次。
步骤C所述的固定,在室温25℃时,固定1小时,其固定时间随环境温度的不同而改变,温度每低1℃延长固定时间5~15分钟,温度每高1℃缩短固定时间2~6分钟。
步骤C所述的固定,是以1~3毫升40%~60%(重量)的戊二醛置入0.6%~1%(重量)的氯化钠溶液,配成0.8%~1.2%的戊二醛氯化钠溶液之后,加入4~6毫升洗涤后的血液进行固定。
固定后,视细胞浓度用生理盐水或细胞保存液洗涤5-7次。
所述生理盐水或细胞保存液是等渗透压的。
本发明还通过以下的技术方案进一步实现。
制备一种血小板模拟物,血小板模拟物由抽取鹰隼鸟类的血液固定后得到。
所述的抽取鹰隼鸟类的血液中红细胞体积在10fl以下,直径在1.5~2.5μm之间。所述抽取的鹰隼鸟类血被氯化钠溶液混合后离心洗涤去除血浆,以及血液上层的白细胞,而且固定后的血小板模拟物被置于盐水或其他保存液中,并被根据使用需要调节了浓度,或者作为单项指标测试的质控物使用,或者将其加入到全指标测试的质控物中使用。
与现有技术相比较,本发明用一些特定的鸟类的血液进行固定后模拟血小板,因其体积较小,所以更加接近于人类血小板的实际分布。而且由于进行了充分的固定,本发明的血小板模拟物更加适合于长期稳定的保存。
附图说明 图1是本发明血小板模拟物的制备方法的流程图
具体实施方式 下面结合图1及最佳实施例对本发明作进一步详尽的描述。
如图1所示:一种血小板模拟物的制备方法,包括步骤:
A.抽取鹰隼鸟类的血加入抗凝剂中;
B.将抽取的鹰隼鸟类血与氯化钠溶液混合后离心洗涤去除血浆,以及血液上层的白细胞;
C.将洗涤后的血液置入固定液中固定;
D.将固定后的血小板模拟物置于盐水或其他保存液中,并根据使用需要调节浓度,或者作为单项指标测试的质控物使用,或者将其加入到全指标测试的质控物中使用。
步骤A所述抽取鹰隼鸟类的血是从翅膀静脉中抽取,所述抗凝剂是在80~120毫升0.6%~1%(重量)的氯化钠溶液中,加入0.8~1.2克乙二胺四乙酸二钠制成。
最佳实施例中,所述抗凝剂是在100毫升0.8%的氯化钠溶液中,加入1克乙二胺四乙酸二钠制成
步骤B所述洗涤用的氯化钠溶液是0.6%~1%氯化钠溶液;在洗涤时,按血∶氯化钠溶液=0.8~1.2∶4~6(体积)的比例混合后,置入离心洗涤机洗涤2~4次。
最佳实施例中,所述洗涤用的氯化钠溶液是0.8%氯化钠溶液;在洗涤时,按血∶氯化钠溶液=1∶5的比例混合后,置入离心洗涤机洗涤2~4次
步骤C所述的固定,最佳实施例是在室温25℃时,固定1小时。其他实施例固定时间随环境温度的不同而改变,温度每低1℃延长固定时间5~15分钟,温度每高1℃缩短固定时间2~6分钟。
步骤C所述的固定,是以1~3毫升40%~60%(重量)的戊二醛置入0.6%~1%(重量)的氯化钠溶液,配成0.8%~1.2%的戊二醛氯化钠溶液之后,加入4~6毫升洗涤后的血液进行固定。
最佳实施例中,是以2毫升50%的戊二醛置入0.8%的氯化钠溶液,配成1%的戊二醛氯化钠溶液之后,加入5毫升洗涤后的血液进行固定。
固定后,视细胞浓度用生理盐水或细胞保存液洗涤5-7次。而且所述生理盐水或细胞保存液是等渗透压的。
本发明所述的一种血小板模拟物。
尤其是血小板模拟物是由抽取鹰隼鸟类的血液固定后而得到。
所述的抽取鹰隼鸟类的血液中红细胞体积在10fl以下,直径在1.5~2.5μm之间。
所述的抽取的鹰隼鸟类血是已经被氯化钠溶液混合后离心洗涤去除血浆以及血液上层的白细胞。而且固定后的血小板模拟物已经被置于盐水或其他保存液中,并被根据使用需要调节了浓度,或者作为单项指标测试的质控物使用,或者将其加入到全指标测试的质控物中使用。
为了消除采样鸟的个体差异,这样我们可以采用一些手段来使个别偏大的个体细胞体积分布范围稍稍缩小一些。例如,洗涤后,用浓度为2%的盐水来使之皱缩,然后再用加入甲醛使最终浓度达到3%固定。
本发明主要使用在血液学质控中,可以是三分群全血质控,也可以用于五分类全血质控血小板单项质控,以及血小板和任意其他参数组合的血液学质控。
实践证明,本发明用一些特定的鸟类的血液进行固定后模拟血小板,因其体积较小,所以更加接近于人类血小板的实际分布。而且由于进行了充分的固定,本发明的血小板模拟物更加适合于长期稳定的保存。
Claims (10)
1.一种血小板模拟物的制备方法,其特征在于,所述方法包括步骤:
A.抽取鹰隼鸟类的血置入抗凝剂中;
B.将抽取的鹰隼鸟类血与洗涤液混合后离心洗涤去除血浆;
C.将洗涤后的血液置入固定液中固定;
D.将固定后的血小板模拟物置于保存液中,并根据使用需要调节浓度,或者作为单项指标测试的质控物使用,或者将其加入到含有其它指标的质控物中使用。
2.根据权利要求1所述的血小板模拟物的制备方法,其特征在于:步骤A所述抽取鹰隼鸟类的血是从翅膀静脉中抽取或者用其他方法获取该类鸟类的血液,放入抗凝剂溶液中。
3.根据权利要求2所述的血小板模拟物的制备方法,其特征在于:所述抗凝剂是在80~120毫升0.6%~1%的氯化钠溶液中,加入0.8~1.2克乙二胺四乙酸二钠、0.5-10g柠檬酸的金属盐类、0.2-3g肝素的金属盐类配成的溶液。
4.根据权利要求1所述的血小板模拟物的制备方法,其特征在于:步骤B所述洗涤液为渗透压为100-1000mOsm/kg·H20的0.6%~1.2%氯化钠溶液或其他液体;在洗涤时,按血∶氯化钠溶液=1∶0.5~20的比例混合后,置入离心洗涤机洗涤1~4次。
5.根据权利要求1所述的血小板模拟物的制备方法,其特征在于:步骤C所述的固定,在室温25度时,加入固定液进行固定,其固定时间随环境温度的不同而改变。
6.根据权利要求1所述的测试用用血小板模拟物的制备方法,其特征在于:所述固定液是用含0.1-10%的醛类化合物的水溶液对其进行固定处理,所述醛类化合物包括甲醛、多聚甲醛、乙醛、乙二醛、丙稀醛、戊二醛、苯甲醛。
7.根据权利要求1、6所述的血小板模拟物的制备方法,其特征在于:步骤C所述的固定,是以1~3毫升40%~60%的戊二醛置入0.6%~1%的氯化钠溶液,配成0.8%~1.2%的戊二醛氯化钠溶液之后,加入4~6毫升洗涤后的血液进行固定。
8.根据权利要求1所述的血小板模拟物的制备方法,其特征在于:所述保存液是等渗透压的或者渗透压范围为200-400mOsm/kg的水性溶液。
9.一种血小板模拟物,其特征在于:血小板模拟物由抽取鹰隼鸟类的血液固定后得到,血液中红细胞体积在10fl以下,直径在1.5~2.5μm之间。
10.根据权利要求9所述的血小板模拟物,其特征在于:抽取的鹰隼鸟类血被氯化钠溶液混合后离心洗涤去除血浆,以及血液上层的白细胞,而且固定后的血小板模拟物被置于盐水或其他保存液中,并被根据使用需要调节了浓度,或者作为单项指标测试的质控物使用,或者将其加入到含有其他指标测试的质控物中使用。
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Cited By (3)
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WO2018126499A1 (zh) * | 2017-01-05 | 2018-07-12 | 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 | 网织红细胞模拟粒子、血小板模拟粒子制备方法及质控物 |
CN108489776A (zh) * | 2018-02-07 | 2018-09-04 | 桂林优利特医疗电子有限公司 | 一种光学质控物及其制备方法 |
WO2020132906A1 (zh) * | 2018-12-25 | 2020-07-02 | 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 | 血小板模拟粒子及其制备方法以及含该模拟粒子的质控物或校准物 |
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