CN1852665B - 婴儿配方乳品 - Google Patents

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Abstract

含有骨桥蛋白的婴儿配方乳品和骨桥蛋白作为婴儿配方乳品或婴儿食品补充剂的用途。

Description

婴儿配方乳品
发明领域
本发明涉及补充骨桥蛋白的婴儿配方乳品(infant formula)或婴儿食品以及骨桥蛋白在婴儿配方乳品或婴儿食品中的用途。
发明背景
婴儿配方乳品不具有与母乳相同的免疫刺激效果是公知的。因此母乳喂养的婴儿与人工喂养的婴儿相比较具有较低的感染和较少发生过敏和湿疹。为此，尝试使婴儿配方乳品尽可能多地与人乳相似。将这称为使婴儿配方乳品“人化”。
骨桥蛋白(OPN)是存在于产奶哺乳动物的乳汁(例如人乳和牛乳)中的蛋白质。
迄今为止，相信人乳和牛乳含有几乎相同浓度的OPN。因此没有提出过为了人化婴儿配方乳品而将额外的OPN加入婴儿配方乳品中。
过去估算人乳中的OPN含量为约3-10mg/升。现在令人惊讶地发现人乳平均含有约25-300mg/升OPN，即牛乳中OPN的约5-10倍。存在个体差异。
还已经显示了OPN在获得Th-1-应答中具有关键功能。由于从母体接收的抗体，婴儿从出生开始主要具有Th-2应答，且婴儿中免疫应答的成熟通过Th-1应答的诱导/获得来介导。因此相信OPN对于婴儿营养而言是人乳中的必需成分。
OPN是多功能蛋白，涉及多个器官和组织中的生理和病理过程，包括生物矿化作用、炎症、白细胞募集和细胞存活(综述于Mazzali M，Kipari T，Ophascharoensuk V，Wesson JA，Johnson R，Hughes J.2000.Osteopontin-a molecule for all reasons.Q.J.95：3-13；Denhart DT，Giachelli CM，Ritting SR.2001.Role of osteopontinin cellular signaling and toxicant injury.41：4723-49)。OPN由多种细胞类型和上皮细胞表达。因此，OPN存在于大多数已分析了其存在的组织和器官中。OPN以相对高的浓度存在于许多体液中，如血液、血浆、胆汁、尿液和乳汁中。OPN以组织特异性同种型存在，例如，蛋白水解截短的形式，磷酸化和糖基化变体等，其可以对应于特定的细胞功能。
牛乳OPN-该蛋白质最充分表征的形式，含有27个磷酸丝氨酸，一个磷酸苏氨酸和三个O-糖基化苏氨酸(S
Figure 200480026972210000210003_0
rensen ES，Hjrup P，Petersen T.1995.Posttranslational modifications of bovineosteopontin：Identificaiton of twenty-eight phosphorylationand three O-glycosylations sites.Protein Sci.4：2040-2049)。所有磷酸化位于乳腺酪蛋白激酶和酪蛋白激酶2的酸性识别序列中(S
Figure 200480026972210000210003_2
rensen ES，Petersen TE.1994.Identification of twophosphorylation motifs in bovine osteopontin.Biochem.Biophys.Res.Comm.198：200-205)。
牛和人OPN非常同源，所有功能元件在物种之中保留。这两种蛋白质的序列比对显示于图1中。Arg-Gly-Asp整联蛋白结合序列担负着与细胞受体的结合，富集多聚天冬氨酸的区域涉及与羟磷灰石、钙盐和离子的结合，且最令人感兴趣的是几乎所有位于显示出磷酸化牛OPN的乳腺酪蛋白激酶的识别序列中的丝氨酸残基也存在于人序列中。同样，牛蛋白中显示糖基化的苏氨酸残基也存在于人的对应部分。这种翻译后修饰位点和基序的保守性表明可通过消化人OPN形成的生物活性肽多半也可以通过消化牛OPN来形成。因此，相信该牛蛋白高度适于强化例如婴儿配方乳品和婴儿食品。
WO 02/28413公开了通过阴离子交换纯化乳蛋白的酸性蛋白级分和在骨健康组合物中使用该级分。所述的级分含有多种次要酸性乳清蛋白。这些包括
Figure 200480026972210000210003_3
蛋白胨组分3，
Figure 200480026972210000210003_4
蛋白胨组分5(PP5)，也称为β-酪蛋白-5P(f1-5P)或β-酪蛋白-5P(f1-107)；蛋白胨8-慢(PP8-慢)，也称为β-酪蛋白-1P(f29-105)或β-酪蛋白-1P(f29-107)；唾液酸化和磷酸化蛋白质α-s1-酪蛋白磷酸肽和骨桥蛋白，和源自这些蛋白质的肽的混合物以及少量的β-乳球蛋白、牛血清白蛋白和免疫球蛋白。该发明中所述的蛋白质级分可以用于生产治疗和/或预防骨质缺损的功能食品。该专利说明书没有鉴定骨桥蛋白是该蛋白质级分中的活性成分，且该专利说明书中没有提及使用骨桥蛋白或所述的蛋白质级分用于免疫刺激目的或用于婴儿配方乳品的人化。
Senger DR，Perruzzi CA，Papadopoulos A，Tenen DG.1989.Biochem.Biophys.Acta.996：43-48.Purification of a human milkprotein closely similar to tumor secreted phosphoproteins andosteopontin，描述了人母乳中骨桥蛋白的存在和纯化。作者估计人乳中的骨桥蛋白浓度为3-10mg/升。这估算低于我们在本发明中测量值10倍以上。
Dhanireddy R，Senger R，Mukher jee BB，Mukher jee AB.1993.Acta Paediatr. 82：821-2.Osteopontin in human milk from mothersof premature infant，描述了早产乳中骨桥蛋白的存在。通过蛋白质印迹来表征奶样品。没有测定样品中的OPN浓度。只是有关钙运输讨论了奶中OPN的存在。
Srensen S，Justesen SJ，Johnsen，AH.2003.ProteinExpression and Purification 30：238-245。Purification andcharacterization of osteopontin from human milk，描述了纯化人乳骨桥蛋白的新实验方案。该论文描述了源自骨桥蛋白的若干片段和肽以及完整的全长骨桥蛋白的纯化。人乳中骨桥蛋白浓度的估计是基于通过该方法纯化的量，且约略地与Senger等1989的发现一致。这低于本发明中我们通过夹心ELISA测量的骨桥蛋白值10倍还多。该论文还描述了生产对抗骨桥蛋白的多克隆抗体，但是这些没有用于测定奶中骨桥蛋白的实际量。该论文简单地描述了制备骨桥蛋白和骨桥蛋白变体的方法，用于标准化程序、抗体产生和功能研究。该论文没有讨论或提及骨桥蛋白对于奶、婴儿配方乳品或任何其他食品的功能或潜在用途。
现有技术中测定OPN浓度的测试估计其含量为3-10mg/升。然而，由于例如蛋白形成聚合体的干扰，难以进行测定奶中OPN浓度的测试。因此奶中OPN的含量尚未得到精确地测定。由于这一原因，还没有将OPN加入婴儿配方乳品中，以获得具有对抗发生过敏的有益保护效果的类似母乳的产品，。因此婴儿配方乳品目前没有提供免疫刺激因子，所述因子可以增加Th1应答的获得。
发明概述
本发明是基于令人惊讶的发现：与牛乳相比较，OPN以升高的水平存在于人母乳中。之前对奶中OPN含量的估计是基于蛋白质印迹分析和蛋白质纯化，即，3-10mg/升。针对乳OPN的定量ELISA的开发导致对奶中OPN浓度的新认识。
因此，本发明提供了补充哺乳动物来源(人和非人)的乳骨桥蛋白的婴儿配方乳品。在所有已知的婴儿配方乳品中，可以包括OPN作为补充剂或可以将OPN与配方乳品分开给予婴儿，其促进Th1应答的获得并因此减轻婴儿中受损的免疫功能。
在婴儿配方乳品中或与婴儿配方乳品分开给予婴儿的骨桥蛋白量，可以与人母乳中发现的相当。可以将骨桥蛋白掺入所有人婴儿配方乳品中，如基于牛乳的和基于大豆的婴儿配方乳品，和婴儿食品中，如来自Nestlé的NAN
Figure 10003_7
。
以初始(starter)配方乳品、后续(follow-on)配方乳品和LBW配方乳品制得的婴儿配方乳品都可以含有乳OPN。
婴儿配方乳品应优选含有占总蛋白含量至少1％量的乳OPN，相当于母人乳中的乳OPN的量。
附图简述
图1显示牛和人乳OPN的序列比对。
牛OPN中的磷酸化残基用粗体字母显示。
图2显示了用牛OPN刺激后人肠T细胞中的IL-12表达。
优选实施方案的详述
在大量不是由母亲哺育而是以婴儿配方乳品喂养的新生婴儿中，Th1免疫应答的获得可能延迟，因此增加了过敏反应的风险。通过将补充与人乳相当量的乳OPN的婴儿配方乳品给予非母乳喂养的新生儿，可能发生Th1免疫应答的诱导。
因此，本发明提出了补充骨桥蛋白的婴儿配方乳品或婴儿食品。
婴儿配方乳品优选含有从人或牛乳获得的骨桥蛋白。然而，婴儿配方乳品也可以补充来自其他动物奶的骨桥蛋白，如山羊、绵羊、骆驼、单峰骆驼或美洲驼。
优选婴儿配方乳品包括含量相当于总蛋白含量1％的骨桥蛋白。可以使用3％那么多，优选使用的量高于1.5％、2％或2.5％。这样的量使得准备喂养的配方乳(ready to feed formula)中乳骨桥蛋白为至少25-300mg/升。优选50-250mg/升，尤其是100-200mg/升。最优选130-150mg/升。许多情况中，相信130mg/升可产生最佳婴儿配方乳品。
本发明的另一方面是乳骨桥蛋白在婴儿配方乳品或婴儿食品中作为补充剂的用途。
还相信通过给予额外补充乳骨桥蛋白的配方乳品可治疗某些特定的免疫缺陷。
如所述的，可以从所有哺乳动物获得乳骨桥蛋白，如骆驼、山羊、绵羊、美洲驼和单峰骆驼。优选通过纯化人乳或牛乳来获得骨桥蛋白。
可以将骨桥蛋白运用至所有已知的婴儿配方乳品，即初始配方乳品、后续配方乳品和LBW-配方乳品和早产儿配方乳品。
乳骨桥蛋白的浓度可取决于地理位置、种族、生活方式、饮食等。
还可以将乳骨桥蛋白运用至给予除人以外的其他哺乳动物的婴儿配方乳品中，如家养动物、家畜(猪、牛、马，等)、宠物和动物园动物。
可以使用产后不同天取得的奶来测量产后不同时间的人母乳中的骨桥蛋白浓度。该测量可以用于在例如初始配方乳品；后续配方乳品和LBW-配方乳品中具有不同的OPN水平。
还可以测量母乳中的OPN含量，如果需要可以向其中补充额外的乳OPN并将其给予她自己的孩子或其他的孩子。
可以使用ELISA或其他免疫学方法如蛋白质印迹分析来进行人乳中OPN的测量。
可以多个不同的实施方案进行ELISA，其中许多可应用于本发明。特别适用于本发明的一个ELISA实施方案使用天然乳OPN特异性的抗体。
本发明的婴儿配方乳品补充从奶中分离的乳OPN，然而，将认识到可以在合适的产生如“乳-OPN”中发现的磷酸化模式的细胞中通过重组方式制得乳OPN。用于表达的优选细胞是乳腺的那些细胞，因为可以预期这些细胞产生相同或基本上相同的磷酸化模式。
婴儿配方乳品不具有与母乳相同的免疫刺激效应是公知的，且与人工喂养的婴儿相比较，母乳喂养的婴儿具有较少的感染以及过敏症和湿疹的发生。一个原因可能是母乳含有高含量的OPN。
定义
如在此所用的术语“骨桥蛋白”或“OPN”用于来自奶的骨桥蛋白，包括奶中天然存在的片段或通过蛋白水解切割源自OPN的肽，或可由WO 01/49741中提出的方法获得的剪接-、磷酸化-，或糖基化-变体。
乳OPN是从哺乳动物奶样中纯化和获得的OPN。
哺乳动物奶是来自人和任何产奶动物的奶，如牛、骆驼、山羊、绵羊、单峰骆驼和美洲驼。
母乳：从(健康)人母亲收集的奶。
婴儿配方乳品是足够涵盖婴儿营养需求的配方乳品。
初始配方乳品：足够涵盖头4-6个月内婴儿营养需求的配方乳品。
后续配方乳品：足够涵盖头4个月后婴儿营养需求的配方乳品。
LBW(低出生体重)配方乳品：足够涵盖低出生体重婴儿营养需求的配方乳品。
早产儿配方乳品：足够涵盖早产婴儿营养需求的配方乳品。
参照以下非限制性实施例来进一步说明本发明。
实施例
奶样的采集和处理
从10名产后10-58天的健康母亲采集人母乳样品。通过吸乳器收集奶且从每次吸奶取样2ml并合并来获得全天的奶。通过高速离心从全脂奶中提取奶油并与脱脂奶分离。将脱脂奶等分成0.2ml部分并立即分析或在-20℃冷冻直至需要。
在当地奶场获得新鲜收集合并的牛乳。在4个月期间获得4次奶并各自单独处理。通过离心除去奶油，并将奶样-20℃冷冻直至需要。
奶中总蛋白质浓度的测定
使用牛血清白蛋白作为标准通过Bradford分析来测定所有奶样中的蛋白质浓度。根据制造商提供的说明进行分析。
对奶中OPN的ELISA
通过夹心ELISA测量各奶和可购得婴儿配方乳品中的OPN浓度。为了该测试，在Dako(Glostrup，Denmark)在兔子中针对分别从牛乳和人乳纯化的天然OPN产生抗牛和人OPN的抗血清。基本上如所述的(S
Figure 10003_8
rensen ES，Petersen TE，1993，Purification andcharacterization of three protein isolated from the proteosepeptone fraction of bovine milk，J.Dairy Res 60：189-197)纯化牛OPN。基本上如所述的(Senger DR，Perruzzi CA，PapadopoulosA，Tenen DG，1989，Purification of milk protein closely similarto tumor-secreted phosphoproteins and osteopontin.Biochem.Biophys.Acta 996：43-48)纯化人乳OPN。为了额外高纯度，将两种蛋白质在免疫兔子之前进行反相色谱。通过Concavalin A亲和性来纯化抗血清的IgG部分并直接用于ELISA，或在OPN亲和柱上纯化来获得高度特异性的抗体。检查抗体的特异性并通过对奶样和纯化的OPN的蛋白质印迹分析来验证。所开发的ELISA非常敏感，检测限＜5ng/ml奶，并在10-300ng/ml的范围内是线性的，相应地在分析前将奶样稀释2000-23000倍。所有样品以每一测量6-12个稀释度一式三份进行分析。通过用已知量的OPN掺加入奶样来检查ELISA的可靠性，表明测试是定量的，在用于这些测量的范围内完全回收掺入示踪量的OPN。同样，人乳样品中OPN的纯化显示OPN产量与通过ELISA测量的浓度相当。
牛乳中OPN的浓度
在4个月内测定四次合并牛乳中的OPN水平(表1)。发现平均OPN浓度为18.28mg/升。根据文献将总蛋白设定为35,000mg/升。牛乳中的OPN含量为总蛋白的0.05％(w/w)。
表1.牛乳中的OPN浓度
牛乳“样品编号” OPN(mg/升) 总蛋白(mg/升) OPN/蛋白质(％)
301002 17.84
061102 19.37
141101 17.91
120203 18.01
平均 18.28 ～35,000 0.052
人乳中的OPN浓度
从十名年龄25-35岁(平均29岁)产后10-58天(平均产后21.6天)的母亲取奶样并分析OPN和总蛋白。数据总结于表2中。母乳中的OPN为22.44mg/升至257.35mg/升，平均值为138.5mg/升。奶中的总蛋白浓度为8327mg/升至13268mg/升，平均值为10821mg/升。OPN平均构成人乳中总蛋白的1.3％(w/w)且在单一一名母亲中超过3％的乳蛋白是OPN。
表2.人乳中的OPN浓度
    母亲    年龄     产后    天数     OPN浓度    (mg/升)     总蛋白浓度    (mg/升)   OPN/蛋白质  (％)
    28     59     65.97     8550    0.77
    35     13     257.35     8327    3.09
    28     12     200.52     13268    1.50
    30     10     238.69     12628    1.89
    25     12     22.44     11442    0.20
    30     33     101.54     10000    1.02
    31     39     113.96     10157    1.12
    30     17     67.04     10328    0.65
    23     12     212.00     10936    1.94
    30     10     105.00     12576    0.83
平均     29     21.6     138.4     10821    1.3
在个体母亲中相对于总蛋白的OPN浓度存在显著变异。所有母亲中，OPN/总蛋白比例显著高于牛乳的对应值。这些测量显示，与牛乳相比较(0.05％)，人乳中相对于总蛋白的平均OPN浓度(1.3％)约26倍更高。该平均值涵盖了牛(乳)值4至62倍的个体变异。
可购得婴儿配方乳品中的OPN浓度
以mg OPN/升准备喂养的配方乳计算数据，基于125g/升。
表3
Figure G04826972220060327D000101
牛骨桥蛋白诱导人肠道细胞中的IL-12表达
获得人肠细胞并在IL-2和IL-4存在下培养，基本上如所述的(Agnholt J，Kaltoft K，2001.Infliximab downregulatesinterferon production in activated gut T-lymfocytes frompatients with Crohn’s disease.Cytokine.15：212-222)。在IL-2和IL-4存在下的培养促进了T-细胞生长，具有保存的细胞特征如表达受体：TCRαβ+，CD4+CD45RO+。
分别用1ml(1mg/ml)骨桥蛋白PBS-溶液和PBS包被细胞培养孔，在4℃过夜。将孔倒空并在孔中培养T-细胞(106细胞/ml)24小时，随后取样等分的细胞上清液用于分析。
从R&D Systems获得用于测定IL-12的细胞因子相配的抗体对。检测抗体都是生物素化的。使用应用铕(Eu3+)标记的链霉抗生物素蛋白和Delphia 1234荧光计(Wallac，Turku，Finland)的时间分辨荧光测定用于测定IL-2含量。获得的值是一式三份实验中三次ELISA读数的平均值。
表4.用牛骨桥蛋白刺激后人肠道免疫中的IL-12表达
IL-12(pg/ml)
平均(标准偏差)
对照细胞 3.3(+/-3.2)
+骨桥蛋白 16.7(+/-2.1)
如表3和图2所示，可以观察到用天然牛骨桥蛋白刺激的人免疫细胞中IL-12表达的显著提高。
在此我们显示天然牛OPN能够诱导Th-1细胞因子IL-12在非激活的人肠免疫细胞中表达，强烈表明在调节肠免疫中的作用。
含有OPN的婴儿配方乳品的混合
以下实施例中认为100-130mg/升OPN的水平是用于婴儿配方乳品的合适量。然而，本发明的范围不限于该含量，因为由于食物、生活方式、地理区域、种族等，存在人乳组成的变异。
引入本发明实施例中的是基于EU地方法和关于婴儿配方乳品的推荐制得的婴儿配方乳品组合物。
关于此，我们只考虑蛋白质的量，因为预期产品的其他部分不发生改变，我们已经选择将100mg OPN/1000ml运用至所有产品，然而还可以(并在本发明范围内)根据蛋白质水平本身来应用OPN。
牛乳含有15-20mg/升OPN，比本发明实施例中测得的人乳中平均138.4mg/升的OPN含量低至少5倍。15-20mg/升的OPN相当于牛乳中总蛋白含量的0.05％。该数字比本发明实施例中测得的人乳中1.3％(OPN/总蛋白)约低26倍。
我们在我们的计算中假定OPN包含于奶的乳清部分且因此所述水平为约18mg/100g奶粉和约360mg/100g WPC80粉。由于这些数字，我们已经计算出所述水平，预期其是由所用配料引起的。
在以下实施例的一些中，我们以加入的OPN量减少乳清蛋白部分，因为认为在约pH6.2副酪蛋白和pH4.6酸性酪蛋白的沉淀下，糖蛋白在乳清之后。
可以如下计算婴儿配方乳品的蛋白水平：
初始配方乳品
初始配方乳品意思是用于婴儿的食品，其足够涵盖头4-6个月内婴儿的营养需求。
EU对于蛋白质含量的常规要求
来源：关于婴儿配方乳品和用于新生儿和婴儿的补充剂的公告no.202。
蛋白质：
对于牛乳蛋白，蛋白质含量＝氮含量×6.38
对于豆奶蛋白分离物(isolator)和部分水解的蛋白质，蛋白质含量＝氮含量×6.25
化学指数意思是本蛋白质中必需氨基酸的量和参照蛋白质中相应氨基酸的量之间的最低比值。
基于牛乳的产品：
最小 最大
初始配方乳品 0.45g/100kJ(1.8g/100kcal) 0.7g/100kJ(3g/100kcal)
在相同的能量含量下，产品应含有如同参照蛋白质(在附录6中限定的母乳)的可获得量的必需和半必需氨基酸；计算时可以加入蛋氨酸和半胱氨酸含量。
基于部分水解蛋白质的产品：
最小 最大
初始配方乳品 0.56g/100kJ(2.25g/100kcal) 0.7g/100kJ(3g/100kcal)
在相同的能量含量下，产品应含有如同参照蛋白质(在附录6中限定的母乳)的可获得量的必需和半必需氨基酸；计算时可以加入蛋氨酸和半胱氨酸含量。
蛋白质功效比(PER)和净蛋白质利用(NPU)应当至少与酪蛋白相关。牛磺酸含量必须为至少10μmol/100kJ(42μmol/100kcal)和L-肉碱(carnithin)含量至少为1.8μmol/100kJ(7.5μmol/100kcal)。
只基于大豆蛋白分离物的或与牛乳蛋白质一起组合的产品：
最小 最大
初始配方乳品 0.56g/100kJ(2.25g/100kcal) 0.7g/100kJ(3g/100kcal)
仅大豆蛋白分离物可以用于这些婴儿配方乳品。蛋白质的化学指数应是参照蛋白质(公告附录7中限定的母乳)的至少80％。
在相同的能量含量下，产品应至少含有与参照蛋白质(母乳)相当的可获得量的蛋氨酸。L-肉碱含量应为至少1.8μmol/100kJ(7.5μmol/100kcal) 。
氨基酸只可用于产品中以提高营养价值，并仅以实现目标所必需的比例。
实施例：初始配方乳品的混合
能量：2200kJ/100g(525kcal/100g)
复原：125g每升
传统婴儿初始配方乳品
   奶粉   克每100g   复原的  克每升  克每100kcal  克每100kJ
总蛋白质* 12  15  2.29  0.550
酪蛋白 4.8  6.1  0.91  0.220
乳清蛋白 7.2  9.1  1.38  0.330
该OPN的* 0.030  0.038  0.006  0.001
酪蛋白/乳清蛋白比例 40/60
含有OPN的婴儿初始配方乳品
奶粉克每100g  复原的 克每升  克每100kcal  克每100kJ
总蛋白质 12  15  2.29  0.550
酪蛋白 4.8  6.1  0.91  0.220
该OPN的* 0.030  0.038  0.006  0.001
乳清蛋白 7.12  9.0  1.36  0.326
加入的OPN 0.074  0.092  0.014  0.003
酪蛋白/乳清蛋白比例 40/60
后续配方乳品
EU对蛋白质含量的常规要求
来源：关于婴儿配方乳品和用于新生儿和婴儿的补充剂的公告no.202。
蛋白质：
对于牛乳蛋白，蛋白质含量＝氮含量×6.38
对于豆奶蛋白分离物，蛋白质含量＝氮含量×6.25
化学指数意思是本蛋白质中必需氨基酸的量和参照蛋白质中相应氨基酸的量之间的最低比值。
氨基酸的量之间的最低比值。
基于牛乳的产品
  最小   最大
  后续配方乳品   0.50g/100kJ(2.25g/100kcal)   1g/100kJ(4.5g/100kcal)
蛋白质的化学指数应是参照蛋白质(公告附录7中限定的母乳)的至少80％。
只有大豆蛋白分离物可以用于这些婴儿配方乳品。氨基酸只可为了提高营养价值而加入，并仅以实现目标所必需的比例。
在相同的能量含量下，产品应该含有如同参照蛋白(附录6中限定的母乳)的可获得量的必需和半必需氨基酸；计算时可以加入蛋氨酸和半胱氨酸含量。
实施例：
能量：2170kJ/100g(520kcal/100g)
复原：150g每升
传统后续配方乳品
  奶粉  克每100g   复原的  克每升  克每100kcal   克每100kJ
  总蛋白质*   15   22.5   2.89   0.690
  酪蛋白   12   18   2.31   0.554
  乳清蛋白   3   4.5   0.58   0.138
  该OPN的*   0.007   0.011   0.001   0.000
  酪蛋白/乳清  蛋白比例   80/20
含有OPN的婴儿后续配方乳品
奶粉克每100g  复原的 克每升  克每100kcal  克每100kJ
总蛋白质 15  22.5  2.89  0.690
酪蛋白 12  18  2.31  0.554
乳清蛋白 2.92  4.4  0.56  0.134
该OPN的* 0.007  0.011  0.001  0.000
OPN 0.078  0.117  0.015  0.004
酪蛋白/乳清蛋白比例 80/20
低出生体重(LBW)婴儿的婴儿配方乳品
目前在该领域不存在法规，然而在处理进程中。
对LBW婴儿的婴儿配方乳品的制造商目前正从儿科医师和“指导在欧盟销售的低出生体重配方乳品组成的IDACE提案”获得推荐。预期这些指导可提供EU即将出台的法规的基础。
蛋白质：
对于牛乳和水解牛乳蛋白质，蛋白质含量＝氮×6.38。
基于牛乳和水解牛乳蛋白质的产品
最小 最大
低出生体重 0.6g/100kJ(2.4g/100kcal) 0.8g/100kJ(3.3g/100kcal)
配方乳品必需含有可获得量的每种必需和半必需氨基酸，至少与参照蛋白质(母乳)中的含量相当。与标准婴儿配方乳品相反，为了计算的目的，不能加入蛋氨酸和半胱氨酸的量。
牛磺酸含量应为至少1.3mg/100kJ(5.3mg/100kcal)。
实施例
能量：315kJ/100ml(75kcal/100ml)
复原：150g每升
传统LBW配方乳品
奶粉克每100g  复原的 克每升  克每100kcal  克每100kJ
总蛋白* 15  22.5  3  0.718
水解乳清蛋白 14.96  22.44  2.992  0.716
该OPN的* 0.067  0.101  0.012  0.002
牛磺酸 0.04  0.06  0.008  0.002
含有OPN的LBW配方乳品
奶粉克每100g  复原的 克每升  克每100kcal  克每100kJ
总蛋白* 15  22.5  3  0.718
水解乳清蛋白 14.89  22.34  2.972  0.712
该OPN的* 0.067  0.101  0.012  0.002
牛磺酸 0.04  0.06  0.008  0.002
加入的OPN 0.023  0.034  0.005  0.002
附图
图1
人OPN和牛OPN的序列比对。通过两个点来表示同一性和通过单点来表示同源氨基酸。牛OPN中的磷酸化残基用粗体表示。牛序列中的RGD(Arg-Gly-Asp)整联蛋白结合三联体和含有糖基化的区域用下划线表示。
图2
用牛OPN刺激的T细胞的IL-12表达。

Claims (7)

1.乳骨桥蛋白作为婴儿食品中补充剂的用途。
2.乳骨桥蛋白作为婴儿配方乳品中补充剂的用途。
3.根据权利要求1或2的用途，其中从人乳或牛乳获得乳骨桥蛋白。
4.根据权利要求2的用途，其中乳骨桥蛋白占总蛋白含量的至少1％。
5.根据权利要求2的用途，其中乳骨桥蛋白量使得配方乳中的骨桥蛋白为至少25-300mg/升，其中该配方乳是准备喂养的。
6.根据权利要求2的用途，其中婴儿配方乳品是初始配方乳品。
7.根据权利要求2的用途，其中婴儿配方乳品是后续配方乳品。
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