CN1830448A

CN1830448A - 具有肝脏靶向的阿德福韦酯注射剂及其制备方法

Info

Publication number: CN1830448A
Application number: CN 200510133751
Authority: CN
Inventors: 邓意辉; 吴红兵; 王绍宁
Original assignee: Shenyang Pharmaceutical University
Current assignee: Shenyang Pharmaceutical University
Priority date: 2004-12-16
Filing date: 2005-12-16
Publication date: 2006-09-13
Anticipated expiration: 2025-12-16
Also published as: CN1830448B

Abstract

本发明公开了具有肝脏靶向的阿德福韦酯注射剂及其制备方法，它可强化肝脏靶向效果，将阿德福韦酯用于制备具有肝脏靶向的阿德福韦酯注射剂。药物与磷脂、胆固醇组成的比例为：1∶5－100∶0－50(W/W/W)，其pH范围为：4－8，粒度范围为10nm－5000nm。所述的乳剂由药物与油相、乳化剂、助乳化剂组成，药物与油相、乳化剂、助乳化剂的组成比例为：1∶0.5－500∶1－50∶0－50(W/W/W)，其pH范围为：4－8，粒度范围为10nm－5000nm。本发明可制备成脂质体、乳剂、纳米粒、复合物及其冷冻干燥粉针剂。

Description

具有肝脏靶向的阿德福韦酯注射剂及其制备方法

技术领域：

本发明涉及医药技术领域，确切地说它是一种具有肝脏靶向的阿德福韦酯注射剂及其制备方法。

背景技术：

阿德福韦酯(Adefovir dipivoxil)的结构式如下：

阿德福韦酯为阿德福韦的前体药物，为嘌呤类衍生物，可以口服，口服后水解为阿地福韦，不需要磷酸化即有抗病毒作用。本品能抑制HBV DNA多聚酶的活性，并能渗入到乙肝病毒的DNA中，抑制病毒的复制，对拉米夫定和泛昔洛韦耐药的HBV病毒株，均有很强的抑制作用。临床可用于肝炎和AIDS疾病的治疗。

阿德福韦酯的CA登录号为[142340-994]。阿德福韦最早申请的化合物专利为捷克斯洛伐克专利CS263951，优先权日为1985.04.25，同等专利有EP 206459，US 4808716。其它专利包括US 4724233、WO 9904774，WO 0035460等。研制阿德福韦酯的Gilead Sciences公司在中国申请了该药的有关专利：专利公开号CN 1251592(核苷酸类似物组合物)，专利公开号CN 1330547(药用制剂)。相关的专利还有02159033.8，涉及阿德福韦酯的软胶囊及其制备方法，该软胶囊制剂是通过阿德福韦酯与聚乙二醇400、吐温80、甘油、丙二醇、异丙醇、去氢大豆油、植物油、芳香油等物质混溶，然后用明胶、甘油材料制成的；另外还有多个专利申请，如03101361.9阿德福韦酯肠溶制剂；03154126.7包含阿德福韦和硒化合物的联合用药物；02151017.2一种制备阿德福韦双特戊酯的方法；02149420.7含阿德福韦地匹福酯的药物组合物(强亲水溶性载体，PEGPVP)；02134009.9一种阿德福韦酯的新结晶形态及制备方法；02148744.8阿德福韦酯新结晶形态及其制备方法；03100167.X 阿德福韦酯新晶态、新晶态组合物及其制备方法；02137905.X 匹伏阿德福韦的晶型、02111037.9阿德福韦酯无定形固化物及制备方法03109894.0、阿德福韦酯的晶型；03150966.5、一种阿德福韦酯新的晶型及其制备方法、03114984.7阿德福韦和阿德福韦双特戊酰氧基甲酯非肠道给药制剂(申请的是钾盐、钠盐、氨、苦参盐等，为溶液型制剂)。

病毒性肝炎之所以引起肝硬化，其根本原因是肝炎病毒在肝脏中持续复制，肝细胞持续遭破坏，肝细胞不断新生并不断刺激肝纤维组织增生，以致肝组织结构紊乱，肝脏变硬。肝硬化再发展则出现黄疽、腹水、出血、昏迷、尿少，即我们常说的肝硬化后失去了代偿能力，会危及到患者的生命。由于肝炎病毒主要分布于肝脏中，体外试验还表明，阿德福韦可以促进肝细胞的再生和更新速度。另外，阿德福韦酯在人体试验中口服生物利用度约为59％，造成较大的浪费，且有研究文章报道阿德福韦酯大鼠灌胃后的肾脏中药物量是肝脏的十余倍(孟志云，窦桂芳，孙文种，朱晓霞，张亮，汤仲明.阿德福韦二吡呋酯在猕猴体内的药代动力学及在大鼠体内的组织分布《中国药理学与毒理学杂志》2003年12月；17(6)：447-450)，长期用药需注意肾脏毒性。另外，还需注意到急性发作期的病人往往有恶心、呕吐等症状，不能口服给药的情况。综合考虑，很有必要研发实现肝脏靶向的阿德福韦酯注射剂，提高治疗效果、降低肾脏的毒副作用。已经申请的专利中未见肝脏靶向的阿德福韦酯注射剂(如采用专利公开号为03114984.7(阿德福韦和阿德福韦双特戊酰氧基甲酯非肠道给药制剂)制备的溶液型注射剂不具备肝脏靶向性。)及其可工业化应用的制备方法。

发明内容：

本发明的目的是利用胶体给药系统(脂质体、乳剂、纳米粒、复合物)的天然靶向性和利用配体-受体作用来实现阿德福韦酯的肝脏靶向目的，提供一种具有肝脏靶向的阿德福韦酯注射剂及其制备方法。

所说的脂质体系由药物与磷脂、胆固醇组成，药物与磷脂、胆固醇组成的比例为：1∶5～100∶0～50(W/W/W)，其pH范围为：4～8(在此范围内药物难溶解)，粒度范围为20nm～5000nm。在脂质体制剂中，所说的磷脂为PC(磷脂酰胆碱)含量大于40％的天然磷脂、半合成磷脂或合成磷脂。天然磷脂包括大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂；半合成磷脂包括氢化大豆卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂。所说的乳剂由药物与油相、乳化剂、助乳化剂组成，药物与油相、乳化剂、助乳化剂的组成比例为：1∶0.5～500∶1～50∶0～50(W/W/W)，其pH范围为：4～8(在此范围内药物难溶解)，粒度范围为50nm～5000nm。在乳剂中，所说的油相为C₆～C₁₈的植物油或动物油(包括经过结构改造和水解后的植物油)、甘油三酸酯，如椰子油、橄榄油、大豆油、红花油、海豹油、辛葵酸甘油酯(Delios)(称为中链三甘油酯MCT)；也包括脂肪酸的衍生物，如油酸乙酯。乳化剂包括磷脂、HS15(聚乙二醇12-羟基硬脂酸酯、polyethylene glycol 660hydroxystearate)、维生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)、吐温类中的一种或几种混合物；助乳化剂包括乙醇、甘油、C₆～C₃₀的饱和或不饱和脂肪酸，如己酸、辛酸、葵酸、月桂酸、棕榈酸、(亚)油酸、亚麻油酸、硬脂酸、二十二碳六烯酸(DHA)、胆酸中的一种或几种混合物；所说的纳米粒由药物与磷脂类物质组成，组成比例为：1∶10～1000(W/W)，也可根据需要加入其他合适的成分，如维生素E、、HS15(聚乙二醇12-羟基硬脂酸酯、polyethylene glycol660 hydroxystearate)、维生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)；其pH范围为：4～8(在此范围内药物难溶解)，粒度范围为5nm～1000nm。在纳米粒制剂中，所说的磷脂类物质包括PC(磷脂酰胆碱)含量大于40％的天然磷脂、半合成磷脂或合成磷脂。天然磷脂包括大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂；半合成磷脂包括氢化大豆卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂；合成磷脂包括DSPC(二硬脂酰磷脂酰胆碱)、DPPC(二棕榈酰磷脂酰胆碱)、DMPC(二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱)、DLPC(二月桂酰磷脂酰胆碱)、DSPG(二硬脂酰磷脂酰甘油)、DPPG(二棕榈酰磷脂酰甘油)、DMPG(二肉豆蔻酰磷脂酰甘油)、DLPG(二月桂酰磷脂酰甘油)、PA(磷脂酸)、PI(磷脂酰肌醇)、PS(磷脂酰丝氨酸)。所说的肝脏靶向的阿德福韦酯注射剂中可加入抗氧化剂，包括丁基羟基茴香醚(BHA)、二丁基羟基甲苯(BHT)、α-生育酚、α-醋酸生育酚、α-硫辛酸、维生素C、维生素C棕榈酸酯、亚硫酸(氢)钠、惰性气体(氮气、氩气)、EDTA(2Na、或钠钙盐)中的一种或几种混合物。所说的冻干粉针剂涉及的冻干保护剂为：葡萄糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、蔗糖、海藻糖、右旋糖苷、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等中的一种或几种混合物，冻干保护剂的含量为2％～20％(W/V)。所述的注射剂制备方法，以乳剂为例说明如下：1)在配制罐中制备油相(药物相)：在配制罐中，将注射用油加热至20-90℃(单纯药物时不加油)，加入乳化剂，20～80℃时强烈搅拌至溶解；再降温至20～40℃，在搅拌中加入药物。2)在配制罐中制备水相：将水和甘油在20～90℃下搅拌5min，使之完全混溶。3)在20～50℃时，将水相加入油相中，强烈搅拌10～30min，形成初乳。4)将初乳过G₃漏斗抽滤，调节pH值到4～8。5)过均质仪，第一步调节匀化压力至520～600kg/cm²，第二步再调节至100～140kg/cm²(或微射流仪，第一步调节匀化压力至4000-8000psi，第二步再调节至10000-16000psi)，形成乳剂。过微孔滤膜，分装(加入冻干保护剂，进行冷冻干燥，即得冻干乳剂；或进行喷雾干燥)，灭菌，即得注射用乳剂。所述的配体-受体作用肝脏靶向辅料为半乳糖衍生物，加入该化合物，可进一步强化肝脏靶向效果。

附图说明：

图1为药物吸收试验结果(n＝3)表。

具体实施方式：

本发明的详细组分由下列实施例给出，但本发明的保护范围，不仅局限于此。

粒度测定仪：本实验中应用PSS.NICOMP^TM 380作为测定粒径的仪器。

微射流仪(Microfluidic公司，美国)，均质机等。

IIPLC分析：色谱柱：氰基柱；流动相：乙腈-磷酸盐缓冲液(25mmol/L，pH4)(35∶65，V/V)；检测波长：260nm；流速：1mL/min。阿德福韦(降解产物、有关物质)、阿德福韦单酯(降解产物、有关物质)、阿德福韦酯的保留时间分别为：3.8min、6.1min、11.2min。

实施例1 阿德福韦酯脂质体

组分重量(克)

阿德福韦酯 1

大豆卵磷脂 5

乙醇适量

柠檬酸缓冲液加至500

制备工艺：

称取处方量的阿德福韦酯、大豆卵磷脂，用适量乙醇溶解后，加入柠檬酸缓冲液(0.1mol/L，pH4.0)，40℃下搅拌水化，过均质机(或微射流)(第一步调节匀化压力至520～600kg/cm²，第二步再调节至100～140kg/cm²。微射流仪，第一步调节匀化压力至4000-8000psi，第二步再调节至10000-16000psi)得阿德福韦酯脂质体，其粒度为20nm～300nm。所得脂质体液体可加入2％(W/V)的海藻糖进行冷冻干燥，得冻干脂质体。复溶后，其粒度为10nm～380nm。

实施例2 阿德福韦酯脂质体

组分重量(克)

阿德福韦酯 1

大豆卵磷脂 20

乙醇适量

α-生育酚 0.1

磷酸盐缓冲液加至1000

制备工艺：

称取处方量的阿德福韦酯、大豆卵磷脂、α-生育酚，用适量乙醇溶解后，加入磷酸盐缓冲液(0.01mol/L，pH5.0)，40℃下搅拌水化，过均质机(或微射流)，第一步调节匀化压力至520kg/cm²，第二步再调节至100kg/cm²(或微射流仪，第一步调节匀化压力至4000psi，第二步再调节至10000psi)，得阿德福韦酯脂质体，其粒度为55nm～580nm。所得脂质体液体可加入6％(W/V)的甘露醇和1％(W/V)的葡萄糖进行冷冻干燥，得冻干脂质体，每支6mg阿德福韦酯(或真空压盖)。复溶后，其粒度为60nm～520nm。

实施例3 阿德福韦酯脂质体

组分重量(克)

阿德福韦酯 1

蛋黄卵磷脂 30

胆固醇 1

α-硫辛酸 0.5

乙醇适量

醋酸盐缓冲液加至1000

制备工艺：

称取处方量的阿德福韦酯、蛋黄卵磷脂、胆固醇、α-硫辛酸，用适量乙醇溶解后，采用乙醇注入法加入磷酸盐缓冲液(0.03mol/L，pH6.0)中，50℃下搅拌水化，过均质机(或微射流)，第一步调节匀化压力至600kg/cm²，第二步再调节100kg/cm²(或微射流仪，第一步调节匀化压力至5000psi，第二步再调节10000psi)，得阿德福韦酯脂质体，其粒度为58nm～510nm，包封率大于80％。所得脂质体液体可加10％(W/V)的蔗糖、5％(W/V)的乳糖进行冷冻干燥，即得冻干脂质体；或进行喷雾干燥，得前体脂质体。分装充氮气，得脂质体制剂，每支3mg阿德福韦酯(或真空压盖)。复溶后，其粒度为70nm～660nm。

实施例4 阿德福韦酯脂质体

组分重量(克)

阿德福韦酯 1

DMPG 100

胆固醇 50

维生素C棕榈酸酯 0.2

乙醇适量

磷酸盐缓冲液加至5000

制备工艺：

称取处方量的阿德福韦酯、DMPG、胆固醇、维生素C棕榈酸酯，用适量乙醇溶解后，采用乙醇注入法加入磷酸盐缓冲液(0.03mol/L，pH7.0)中，50℃下搅拌水化，过均质机(或微射流)，第一步调节匀化压力至600kg/cm²，第二步再调节至140kg/cm²(或微射流仪，第一步调节匀化压力至8000psi，第二步再调节16000psi)，得阿德福韦酯脂质体，其粒度为78nm～710nm，包封率大于80％。所得脂质体液体可加入20％(W/V)的蔗糖进行冷冻干燥，即得冻干脂质体；或进行喷雾干燥，得前体脂质体。分装充氮气，得脂质体制剂，每支3mg阿德福韦酯(或真空压盖)。复溶后，其粒度为60nm～520nm。

实施例5 阿德福韦酯脂质体

组分重量(克)

阿德福韦酯 1

HSPC 20

DSPG 10

乙醇适量

磷酸盐缓冲液加至1000

制备工艺：

称取处方量的阿德福韦酯、DMPG、HSPC，用适量乙醇溶解后，加入磷酸盐缓冲液(0.01mol/L，pH8.0，含有0.001mol/L EDTA-2Na)中，无菌环境中，50℃下搅拌水化，得阿德福韦酯脂质体，其粒度为536nm～5000nm，包封率大于90％。分装充氮气，得脂质体制剂，每支6mg含阿德福韦酯(或真空压盖)。

实施例6 阿德福韦酯乳剂

组分重量(千克)

阿德福韦酯 0.6

大豆油 0.3

磷脂 10

葵酸 0.6

甘油 2.4

注射用水加至200

制备工艺：

1)在配制罐中制备油相(药物相)：在配制罐中，加入注射用油(20℃)，加入乳化剂磷脂，50℃时强烈搅拌至溶解；再降温至40℃，在搅拌中加入药物。2)在配制罐中制备水相：将水和甘油在90℃下搅拌5min，使之完全混溶。3)在50℃时，将水相加入油相中，强烈搅拌30min，形成初乳。4)将初乳过G₃漏斗抽滤，调节pH值到4。5)过均质仪，第一步调节匀化压力至520kg/cm²，第二步再调节140kg/cm²(或微射流仪，第一步调节匀化压力4000psi，第二步再调节至10000psi)，形成乳剂。过微孔滤膜，分装、充氮气，每支1ml(含药物3mg)或每支2ml(含药物6mg)，灭菌，即得注射用乳剂。粒度为10nm～1000nm。

实施例7 阿德福韦酯乳剂

组分重量(千克)

阿德福韦酯 1

椰子油 10

HS15 2

油酸 6

甘油 12

注射用水加至1000

制备工艺：

1)在配制罐中制备油相(药物相)：在配制罐中，加入注射用椰子油(50℃)，加入乳化剂HS15，80℃时强烈搅拌至溶解；再降温至30℃，在搅拌中加入药物。2)在配制罐中制备水相：将水和甘油在90℃下搅拌5min，使之完全混溶。3)在40℃时，将水相加入油相中，强烈搅拌30min，形成初乳。4)将初乳过G₃漏斗抽滤，调节pH值到6。5)过均质仪，第一步调节匀化压力至450kg/cm²，第二步再调节120kg/cm²(或微射流仪，第一步调节匀化压力至6000psi，第二步再调节至12000psi)，形成乳剂。过微孔滤膜，分装、充氮气，每支3ml(含药物3mg)或每支6ml(含药物6mg)，灭菌，即得注射用乳剂。粒度为50nm～700nm。

实施例8 阿德福韦酯乳剂

组分重量(千克)

阿德福韦酯 1

椰子油 10

HS15 2

油酸 6

甘油 12

α-生育酚 1

注射用水加至1000

制备工艺：

操作同实施例7，粒度为70nm～2000nm。每支3ml(含药物3mg)或每支6ml(含药物6mg)，或每支5ml(含药物5mg)，或每支10ml(含药物10mg)(充氩气)。

实施例9 阿德福韦酯乳剂

组分重量(千克)

阿德福韦酯 0.1

辛葵酸甘油酯 50

TPGS 5

月桂酸 5

甘油 2.4

α-硫辛酸 1

注射用水加至200

制备工艺：

操作同实施例7，粒度为70nm～2000nm。每支6ml(含药物3mg)(氩气气)。

实施例10 阿德福韦酯乳剂

组分重量(千克)

阿德福韦酯 1

油酸乙酯 10

磷脂 2

TPGS 2

DHA 10

甘油 1.2

α-硫辛酸 0.2

注射用水加至200

制备工艺：

操作同实施例7，pH8，无菌操作，粒度为100nm～5000nm。每支1ml(含药物5mg)或每支2ml(含药物10mg)，(充氩气)。

实施例11 阿德福韦酯纳米粒

组分重量(克)

阿德福韦酯 1

大豆卵磷脂 10

HS15 5

乙醇适量

α-硫辛酸 1

甘油 2

水加至1000

制备工艺：

称取处方量的阿德福韦酯、磷脂、HS15、α-硫辛酸，置于配料罐中，加入乙醇，于50℃加热溶解后，加入水(含甘油)搅拌、分散，调pH至4，过均质机(或微射流)，第一步调节匀化压力至600kg/cm²，第二步再调节至140kg/cm²(或微射流仪，第一步调节匀化压力至8000psi，第二步再调节至16000psi)，得阿德福韦酯纳米液体，过0.22μm微孔滤膜除菌，分装，每支3ml(含药物3mg)或每支6ml(含药物6mg)，(充氩气)。测定粒度为5nm～500nm。所得液体中加入10％蔗糖，进行喷雾干燥或冷冻干燥，得无菌粉末。喷雾干燥或冷冻干燥所得固体再水化后的粒度为：50nm～1000nm。

实施例12 阿德福韦酯纳米粒

组分重量(克)

阿德福韦酯 0.1

蛋黄卵磷脂 100

氢化大豆卵磷脂 1

乙醇适量

维生素E 1

甘露醇 50

水加至1000

制备工艺：

称取处方量的阿德福韦酯、磷脂、维生素E、氢化大豆卵磷脂，置于配料罐中，加入乙醇，于60℃加热溶解后，备用。另外称取处方量的甘露醇，加入水溶解后，与上述阿德福韦酯磷脂溶液混合，搅拌水化，调pH至6，过均质机(或微射流)，第一步调节匀化压力500kg/cm²，第二步再调节至120kg/cm²(或微射流仪，第一步调节匀化压力至6000psi，第二步再调节至13000psi)，得阿德福韦酯纳米液体。其粒度为5nm～300nm。过0.22μm微孔滤膜除菌，分装，每支30ml(含药物3mg)(充氮气)。

实施例13 阿德福韦酯纳米粒

组分重量(克)

阿德福韦酯 1

蛋黄卵磷脂 30

乙醇适量

维生素E 1

甘露醇 50

葡萄糖 10

水加至1000

制备工艺：

称取处方量的阿德福韦酯、磷脂、维生素E，置于配料罐中，加入乙醇，于50℃加热溶解后，备用。另外称取处方量的甘露醇、葡萄糖，加入水溶解后，与上述阿德福韦酯磷脂溶液混合，搅拌水化，调pH至8，过均质机(或微射流)，第一步调节匀化压力至600kg/cm²，第二步再调节至140kg/cm²(或微射流仪，第一步调节匀化压力至6000psi，第二步再调节至16000psi)，得阿德福韦酯纳米液体。其粒度为5nm～550nm。过0.22μm微孔滤膜除菌，分装，每支3ml(含药物3mg)或每支6ml(含药物6mg)(充氮气)。所得液体进行喷雾干燥或冷冻干燥，得无菌粉末。再水化后的粒度为：50nm～500nm。

实施例14 阿德福韦酯纳米粒

组分重量(克)

阿德福韦酯 1

蛋黄卵磷脂 30

乙醇适量

维生素E 1

甘露醇 50

葡萄糖 10

水加至1000

制备工艺：

称取处方量的阿德福韦酯、磷脂、维生素E，置于配料罐中，加入乙醇，于50℃加热溶解后，备用。另外称取处方量的甘露醇、葡萄糖，加入水溶解后，与上述阿德福韦酯磷脂溶液混合，搅拌水化，调pH至8，过均质机(或微射流)，第一步调节匀化压力至600kg/cm²，第二步再调节140kg/cm²(或微射流仪，第一步调节匀化压力至6000psi，第二步再调节至16000psi)，得阿德福韦酯纳米液体。其粒度为5nm～550nm。过0.22μm微孔滤膜除菌，分装，每支3ml(含药物3mg)或每支6ml(含药物6mg)(充氮气)。所得液体进行喷雾干燥或冷冻干燥，得无菌粉末。再水化后的粒度为：50nm～500nm。

实施例15 阿德福韦酯复合物

组分重量(克)

阿德福韦酯 3

DSPG 90

乙醇适量

水加至1000

制备工艺：

称取处方量的阿德福韦酯、DSPG，置于配料罐中，加入乙醇，于50℃加热溶解后，加入水与上述阿德福韦酯溶液混合，搅拌水化，调pH至4，过均质机(或微射流)，第一步调节匀化压力至400kg/cm²，第二步再调节至140kg/cm²(或微射流仪，第一步调节匀化压力至4000psi，第二步再调节至12000psi)，得阿德福韦酯复合物液体。其粒度为5nm～230nm。过0.22μm微孔滤膜除菌，分装，每支1ml(含药物3mg)或每支2ml(含药物6mg)(充氮气)。

实施例15 阿德福韦酯复合物

组分重量(克)

阿德福韦酯 3

DPPG 30

维生素E半琥珀酸酯 60

乙醇适量

水加至1000

制备工艺：

称取处方量的阿德福韦酯、DPPG、维生素E半琥珀酸酯，置于配料罐中，加入乙醇，于50℃加热溶解后，加入水与上述阿德福韦酯溶液混合，搅拌水化，调pH至6，过均质机(或微射流)，第一步调节匀化压力至400kg/cm²，第二步再调节110kg/cm²(或微射流仪，第一步调节匀化压力至4000psi，第二步再调节至14000psi)，得阿德福韦酯复合物液体。其粒度为5nm～280nm。过0.22μm微孔滤膜除菌，分装，每支1ml(含药物3mg)或每支2ml(含药物6mg)(充氮气)。

实施例16 阿德福韦酯复合物

组分重量(克)

阿德福韦酯 1

DMPG 20

PS 30

乙醇适量

水加至1000

制备工艺：

称取处方量的阿德福韦酯、DMPG、PS，置于配料罐中，加入乙醇，于50℃加热溶解后，加入水与上述阿德福韦酯溶液混合，搅拌水化，调pH至8，过均质机(或微射流)，第一步调节匀化压力至400kg/cm²，第二步再调节至110kg/cm²(或微射流仪，第一步调节匀化压力至4000psi，第二步再调节至14000psi)，得阿德福韦酯复合物液体。其粒度为5nm～330nm。过0.22μm微孔滤膜除菌，分装，每支3ml(含药物3mg)或每支6ml(含药物6mg)(充氮气)。

实施例17 含有半乳糖衍生物(肝脏靶向辅料)阿德福韦酯纳米粒

组分重量(克)

阿德福韦酯 1

大豆卵磷脂 30

D-半乳糖甾醇衍生物 1

乙醇适量

甘油 5

α-硫辛酸 1

甘露醇 60

葡萄糖 10

水加至1000

制备工艺：

称取处方量的阿德福韦酯、磷脂、D-半乳糖甾醇衍生物、α-硫辛酸，置于配料罐中，加入乙醇，于50℃加热溶解后，备用。另外称取处方量的甘露醇、葡萄糖、甘油，加入水溶解后，与上述阿德福韦酯磷脂溶液混合，搅拌水化，调pH至6，过均质机(或微射流)，第一步调节匀化压力至600kg/cm²，第二步再调节至140kg/cm²(或微射流仪，第一步调节匀化压力至6000psi，第二步再调节16000psi)，得阿德福韦酯强化肝脏靶向纳米液体。其粒度为5nm～360nm。过0.22μm微孔滤膜除菌，分装，每支3ml(含药物3mg)或每支6ml(含药物6mg)(充氮气)。所得液体进行喷雾干燥或冷冻干燥，得无菌粉末。再水化后的粒度为：50nm～460nm。

同样可以在实施例3、实施例10、实施例15中加入D-半乳糖衍生物，可以得到强化肝脏靶向脂质体、乳剂和复合物。

实施例18 药物吸收试验

参照文献(孟志云等，阿德福韦二吡呋酯在猕猴体内的药代动力学及在大鼠体内的组织分布.中国药理学与毒理学杂志2003，17(6)：447-450)，测定小鼠静脉注射后的肝脏、肾脏中的浓度(注：(1)-代表按专利03114984.7配制的注射液；(2)-代表实施例3；(3)-代表实施例10；(4)-代表实施例15；(5)-代表实施例16)。结果见附图1。

由此可知，本发明的制剂在肝脏中的分布高，而在肾脏中的分布少，靶向效果明显优于专利03114984.7配制的普通注射液，利于疾病的治疗。

实施例18 药物稳定性试验

上述实施例3、实施例10、实施例15样品在4℃放置，至少稳定一年。

Claims

1、具有肝脏靶向的阿德福韦酯注射剂，其特征在于：将阿德福韦酯用于制备具有肝脏靶向的阿德福韦酯注射剂。

2、根据权利要求1所述的具有肝脏靶向的阿德福韦酯注射剂，其特征在于：所述的注射剂包括脂质体、乳剂、纳米粒、复合物及其冷冻干燥粉针剂。

3、根据权利要求2所述的具有肝脏靶向的阿德福韦酯注射剂，其特征在于：所述的脂质体由药物与磷脂、胆固醇组成，药物与磷脂、胆固醇组成的比例为：1∶5～100∶0～50(W/W/W)，其pH范围为：4～8，粒度范围为10nm～5000nm；所述的纳米粒由药物与磷脂类物质组成，组成比例为：1∶10～1000(W/W)，也可根据需要加入维生素E、聚乙二醇12-羟基硬脂酸酯、polyethylene glycol660hydroxystearate、维生素E聚乙二醇琥珀酸酯；其pH范围为：4～8，粒度范围为5nm～1000nm。

4、根据权利要求2所述的具有肝脏靶向的阿德福韦酯注射剂，其特征在于：所述的乳剂由药物与油相、乳化剂、助乳化剂组成，药物与油相、乳化剂、助乳化剂的组成比例为：1∶0.5～500∶1～50∶0～50(W/W/W)，其pH范围为：4～8，粒度范围为10nm～5000nm。

5、根据权利要求2所述的具有肝脏靶向的阿德福韦酯注射剂，其特征在于：所述的复合物由药物与负电脂质类物质组成，组成比例为：1∶10～1000(W/W)，所说的负电脂质类物质包括天然的、半合成的及全合成的，天然磷脂酰甘油、磷脂酸、磷脂酰肌醇、磷脂酰丝氨酸、心肌磷脂；半合成的指的是对天然的脂质进行氢化，全合成的包括二硬脂酰磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油、二月桂酰磷脂酰甘油、维生素E半琥珀酸

6、根据权利要求4所述的具有肝脏靶向的阿德福韦酯注射剂，其特征在于：所述的油相为C₆～C₁₈的植物油或动物油、甘油三酸酯，椰子油、橄榄油、大豆油、红花油、海豹油、辛葵酸甘油酯；也包括脂肪酸的衍生物；乳化剂包括磷脂、聚乙二醇12-羟基硬脂酸酯、polyethylene glycol 660hydroxystearate、维生素E聚乙二醇琥珀酸酯、吐温类中的一种或几种混合物；助乳化剂包括乙醇、甘油、C₆～C₃₀的饱和或不饱和脂肪酸，己酸、辛酸、葵酸、月桂酸、棕榈酸、(亚)油酸、亚麻油酸、硬脂酸、二十二碳六烯酸(DHA)、胆酸中的一种或几种混合物。

7、根据权利要求3或7所述的具有肝脏靶向的阿德福韦酯注射剂，其特征在于：所述的磷脂类物质包括磷脂酰胆碱含量大于40％的天然磷脂、半合成磷脂或合成磷脂；天然磷脂包括大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂；半合成磷脂包括氢化大豆卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂；合成磷脂包括二硬脂酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、二月桂酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油、二月桂酰磷脂酰甘油、磷脂酸、磷脂酰肌醇、磷脂酰丝氨酸。。

酯、胆固醇半琥珀酸酯；其pH范围为：4～8，粒度范围为5nm～10000nm。

8、根据权利要求1所述的具有肝脏靶向的阿德福韦酯注射剂，其特征在于：所述的肝脏靶向的阿德福韦酯注射剂中可加入抗氧化剂，包括丁基羟基茴香醚、二丁基羟基甲苯、α-生育酚、α-醋酸生育酚、α-硫辛酸、维生素C、维生素C棕榈酸酯、亚硫酸(氢)钠、惰性气体、2Na、或钠钙盐中的一种或几种混合物，还可以加入半乳糖衍生物。

9、根据权利要求2所述的具有肝脏靶向的阿德福韦酯注射剂，其特征在于：所述的冷冻干燥粉针剂涉及的冻干保护剂为：葡萄糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、蔗糖、海藻糖、右旋糖苷、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)中的一种或几种混合物，冻干保护剂的含量为2％～20％(W/V)。

10、具有肝脏靶向的阿德福韦酯注射剂的制备方法，其特征在于：1)制备阿德福韦酯脂质体：称取处方量的阿德福韦酯、大豆卵磷脂、α-生育酚，用适量乙醇溶解后，加入磷酸盐缓冲液，浓度为0.01-0.03mol/L，pH4.0-8.0，40-50℃下搅拌水化，过均质机或微射流，第一步调节匀化压力至520～600kg/cm²520kg/cm²，第二步再调节至100～140kg/cm²，过微射流仪，第一步调节匀化压力至4000-8000psi，第二步再调节至10000psi)，均得阿德福韦酯脂质体，其粒度为55nm～580nm，所得脂质体液体可加入6％(W/V)的甘露醇和1％(W/V)的葡萄糖进行冷冻干燥，得冻干脂质体，每支6mg阿德福韦酯，复溶后，其粒度为60nm～520nm；所得脂质体液体也可加入10％(W/V)的蔗糖、5％(W/V)的乳糖进行冷冻干燥，即得冻干脂质体；或进行喷雾干燥，得前体脂质体；分装充氮气，得脂质体制剂，复溶后，其粒度为70nm～660nm；

2)制备阿德福韦酯乳剂：a.在配制罐中制备油相既药物，在配制罐中，将注射用油加热至20-90℃(单纯药物时不加油)，加入乳化剂，20-80℃时强烈搅拌至溶解；再降温至20～40℃，在搅拌中加入药物，b.在配制罐中制备水相，将水和甘油在20～90℃下搅拌5min，使之完全混溶，c.在20～50℃时，将水相加入油相中，强烈搅拌10-30min，形成初乳，d.将初乳过G₃漏斗抽滤，调节pH值到4～8，e.过均质仪，第一步调节匀化压力至520～600kg/cm²，第二步再调节至100～140kg/cm²，或微射流仪，第一步调节匀化压力至4000-8000psi，第二步再调节至10000-16000psi，形成乳剂，过微孔滤膜，分装，加入冻干保护剂，进行冷冻干燥或进行喷雾干燥，即得冻干乳剂，灭菌，即得注射用乳剂，加入DPPG、维生素E半琥珀酸酯，过0.22μm微孔滤膜除菌，分装，可得阿德福韦酯复合物液体；加入维生素E，过0.22μm微孔滤膜除菌，过0.22μm微孔滤膜除菌，分装，所得液体进行喷雾干燥或冷冻干燥，得阿德福韦酯纳米粒。