CN1827632B - 齐多夫定棕榈酸酯原料精制方法及制剂 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种齐多夫定棕榈酸酯(或硬脂酸酯)原料精制方法及制剂。建立了一种齐多夫定棕榈酸酯的纯化方法，提高了用药安全性。主要技术方案是将齐多夫定棕榈酸酯或硬脂酸酯原料用适量的有机溶剂溶解，加入吸附剂或不加入吸附剂，室温至80℃保温搅拌5～500分钟，过滤除去吸附剂，低温5～-50℃放置1～100小时，收集沉淀，干燥即得。纯化后的齐多夫定棕榈酸酯原料为白色至类白色，经HPLC检查，纯度大于99％。所得精制齐多夫定棕榈酸酯或硬脂酸酯原料可以进一步制备各种制剂，包括乳剂、脂质体、硬、软胶囊、片剂、颗粒剂，混悬剂。本发明以高质量的齐多夫定棕榈酸酯原料制备的脂质体和乳剂研究了齐多夫定棕榈酸酯静脉注射后的体内药物动力学，为临床应用提供可靠的依据。

Description

齐多夫定棕榈酸酯原料精制方法及制剂

技术领域：

本发明涉及医药技术领域，确切地说是一种齐多夫定棕榈酸酯或硬脂酸酯原料精制方法、相对的质量指标及采用该精制原料所制备的制剂。

背景技术：

齐多夫定棕榈酸酯是由齐多夫定和棕榈酰氯二者经酯化而形成的化合物，是抗艾滋病药物齐多夫定的一种前药，目前国内外均未有厂家生产。国内生产齐多夫定的厂家有东北制药总厂、河南天方药业股份有限公司、北京博康健基因科技有限公司、上海现代浦东药厂有限公司、山东海山药业有限公司、上海迪赛诺化学制药有限公司、齐鲁制药有限公司、湖北盖瑞特药业有限公司、厦门迈克制药有限公司等9家。齐多夫定棕榈酸酯化学结构如下：

齐多夫定是美国FDA批准的第1个应用于临床的抗艾滋病药物，其疗效确切，美国药典、英国药典、欧洲药典均有收载，为抗艾滋病的首选药之一。齐多夫定为核苷类逆转录酶抑制剂，逆转录酶是HIV从mRNA逆转录为DNA过程中起主要作用的酶，齐多夫定可作为逆转录酶的底物或竞争性抑制剂而阻止病毒的复制。

发明内容：

本发明的目的是提供一种具有抗HIV病毒作用的齐多夫定棕榈酸酯或硬脂酸酯原料精制方法及制剂，即对自己合成的原料进行精制，建立符合工业化大生产的纯化(精制)方法，制订高质量原料的标准，并采用所纯化的高质量原料研究相对应的各种高质量制剂。

系将齐多夫定棕榈酸酯原料用适量的有机溶剂溶解，加入吸附剂或不加入吸附剂，室温至80℃保温搅拌5～500分钟，过滤除去吸附剂后，所得溶液于低温(5℃～零下50℃度)放置1～100小时，收集沉淀，干燥即得。所述的有机溶剂包括：C1～C5醇类或其与水的适当比例的混合溶剂；C3～C8有机酸酯类、C1～C4有机酸类、C2～C8醚类、C3～C8酮类以及乙腈；吸附剂为活性炭、硅胶、氧化铝、硅酸镁、聚酰胺、硅藻土中的一种或几种；纯化后的齐多夫定棕榈酸酯原料由原来的微黄色或淡黄色蜡状固体改变为白色至类白色的针状结晶或结晶性粉末；在色谱柱：Betasil ODS柱(ID4.6mm×200mm，5μm)；流动相：乙醇∶水＝95∶5；室温；检测波长：266nm条件下进行HPLC检查，纯度大于99％。

采用所精制齐多夫定棕榈酸酯原料可以制备成不同制剂，包括脂质体、乳剂(包括注射乳剂、口服乳剂)、硬胶囊、软胶囊(包括自乳化)、片剂、颗粒剂、混悬剂。

所述的乳剂(包括注射乳剂和口服乳剂)为一种齐多夫定棕榈酸酯乳剂，含有效剂量的齐多夫定棕榈酸酯作为药物，并含有药用辅料，其特征是：药用辅料包括油、乳化剂、助乳化剂、等渗调节剂、pH调节剂；药∶油＝1∶3～1∶300。所述的油为C₆～C₂₈的植物油或动物油(包括经过结构改造和水解后的植物油)、甘油三酸酯，如椰子油、橄榄油、大豆油、红花油、海豹油、辛葵酸甘油酯(Delios)(称为中链三甘油酯MCT)；也包括脂肪酸的衍生物，如油酸乙酯，用量为1～30％(w/v)。乳化剂包括磷脂(蛋黄磷脂或大豆磷脂)(0.5％～5％)(w/v)、HS15(聚乙二醇12-羟基硬脂酸酯、polyethylene glycol 660 hydroxystearate)(0.1％～5％)(w/v)、维生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)(0.1％～5％)(w/v)、DSPE-PEG、泊洛沙姆(0.05％～5％)(w/v)、吐温类(0.1％～5％)(w/v)、司盘类中的一种或几种的混合物；口服乳剂还可以采用明胶、阿拉伯胶作为乳化剂；可以根据需要加入助乳化剂，如油酸、辛酸、葵酸、月桂酸、棕榈酸、亚油酸、亚麻油酸、硬脂酸、二十二碳六烯酸(DHA)、胆酸(包括猪、鹅、熊去氧胆酸)中的一种或几种的混合物；等渗调节剂是甘油、葡萄糖、甘露醇、木糖醇中的一种或几种的混合物；pH调节剂是盐酸、氢氧化钠、醋酸、醋酸钠、磷酸、磷酸钠、柠檬酸、柠檬酸钠等中的一种或几种的混合物，最佳pH范围是4～9；所制乳剂的粒径范围是10nm～10μm。乳剂的制备工艺为：

1)在配制罐中制备油相：在配制罐中，将注射用油加热至40～90℃，加入乳化剂(或加在水相中)，强烈搅拌至溶解，加入药物，强烈搅拌混匀。

2)在配制罐中制备水相：将水和甘油在40～90℃下搅拌5min，使之完全混溶。

3)在40～80℃时，将油相加入水相(或水相加入油相)，强烈搅拌混匀，形成初乳。

4)调节pH值到4～9。

5)过均质仪，第一步调节匀化压力至520～600kg/cm²，第二步再调节至100～140kg/cm²，(或微射流仪，第一步调节匀化压力至4000～8000psi，第二步再调节至10000～16000psi)将溶液反复匀化，得到均匀的乳剂，过微孔滤膜，封装，灭菌，即得本品。

所述的的脂质体为一种齐多夫定棕榈酸酯的脂质体，含有效剂量的齐多夫定棕榈酸酯作为药物，并含有药用辅料，药用辅料包括膜材、pH调节剂、表面修饰辅料或不含表面修饰辅料。所述的膜材为天然磷脂，包括大豆磷脂、氢化大豆磷脂、卵磷脂、磷脂酰乙醇胺(PE)、胆固醇、脑磷脂、胆固醇乙酰脂、β-谷甾醇、磷脂酰肌醇(Phosphatidyl inostiols简称PI)、神经鞘磷脂(SPH)、鞘髓磷脂(SM)、牛胆酸钠；也包括合成磷脂，二棕榈酰-DL-α磷脂酰胆碱(Synthetic dialmitoylpDLα-Phosphatidyl choline简称DPPC)、二肉豆蔻酰卵磷脂(DMPC)、二硬脂酰磷脂酰胆碱、合成磷脂酰丝氨酸(Phosphatidyl Serine，PS)、二鲸蜡磷酸酯(DCP)、硬脂胺(SA)等中的一种或几种的混合物，用量为1～30％(w/v)；可以根据需要加入/或不加表面修饰辅料，如与体内某些抗原对应的抗体、单克隆抗体、转铁蛋白、半乳糖及其衍生物、PEG及其衍生物，如PEG₂₀₀₀-CH-S(聚乙二醇胆固醇硫酸酯)、PEG₂₀₀₀-CHS(聚乙二醇胆固醇琥珀酸酯)中的一种或几种的混合物；还可以加入pH调节剂，盐酸、氢氧化钠、醋酸、醋酸钠、柠檬酸、柠檬酸钠、碳酸钠、碳酸氢钠、磷酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸钾中的一种或几种，pH范围是3～9，所制脂质体的粒径范围为10nm～10μm。脂质体的制备工艺为：

1)在配制罐中制备药物溶液：在配制罐中，将膜材加入适量无水乙醇(或其它有机溶剂)中，加热至30～90℃，搅拌使其完全溶解，再加入药物搅拌使其溶解，形成药物溶液。

2)在配制罐中制备水相：将水和pH调节剂在30～90℃下搅拌5min，使之完全溶解。

3)在30～80℃时，将药物溶液加入水相(或水相加入药物溶液)中，搅拌孵化10～1000分钟。

4)过均质仪，第一步调节匀化压力至520～600kg/cm²，第二步再调节至100～140kg/cm²，(或微射流仪，第一步调节匀化压力至-4000-8000psi，第二步再调节至1000-1600psi)将溶液反复匀化，得到均匀的脂质体，过微孔滤膜，封装，灭菌，即得本品。

所述的软胶囊剂(包括自乳化)，其溶剂可以是C₆～C₁₈的植物油或动物油(包括经过结构改造和水解后的植物油)、甘油三酸酯，如椰子油、玉米油、橄榄油、大豆油、红花油、海豹油、辛葵酸甘油酯(Delios

)(称为中链三甘油酯MCT)；也包括脂肪酸的衍生物，如油酸乙酯。自乳化软胶囊剂中所采用的油为C₈～C₁₀的中链油，除此之外，尚有乳化剂、助乳化剂。所说的乳化剂包括磷脂、高HLB表面活性剂，如聚氧乙烯蓖麻油、HS15(聚乙二醇12-羟基硬脂酸酯、polyethylene glycol 660 hydroxystearate)、维生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)、泊洛沙姆、吐温类、蔗糖脂肪酸酯类中的一种或几种的混合物；助乳化剂(乙醇、丙二醇、聚乙二醇200-600、二甲基异山梨酯中的一种或几种的混合物)；除此之外，还可以加入抗氧化剂，包括丁基羟基茴香醚(BHA)、二丁基羟基甲苯(BHT)、α-生育酚、α-醋酸生育酚、α-硫辛酸、维生素C棕榈酸酯中的一种或几种的混合物。

所述的硬胶囊剂，可以直接填装精制原料粉颗粒，也可以加入适当的辅料混合后填装；片剂、颗粒剂、混悬剂按照常规方法、采用常规辅料制备。齐多夫定棕榈酸酯溶解度的测定

取研成细粉的齐多夫定棕榈酸酯0.3g若干份，分别置于10mL具塞磨口试管中，再分别加入水、甲醇、乙醇等溶媒，加塞置于37±0.5℃气浴恒温振荡器中(60次/分)振荡10h，饱和液静置，至室温后，过滤，吸取续滤液0.1～1.0mL，置于10mL量瓶中，以流动相稀释定容后，进行HPLC分析。外标法求出齐多夫定棕榈酸酯在不同溶剂中的饱和溶液的浓度，计算溶解度。结果见表1。

表1齐多夫定棕榈酸酯在不同溶剂中的溶解度数据表(20℃，室温)

齐多夫定棕榈酸酯正辛醇-缓冲液分配系数的测定

取pH3.6、pH5.8、pH7.4的缓冲液(参考中国药典(2000版)附录XV D配制，其实测值分别为3.74，5.66与7.37)饱和的正辛醇配制溶液(1mg·mL^-１)。分别移取上述溶液5.0mL，室温(20℃±1℃)下，加入正辛醇饱和过的相应缓冲液5.0mL，密塞，涡旋10min，静置分层后分液，得上层液态正辛醇层，分别吸取分配前及分配后的正辛醇溶液，稀释适当倍数，HPLC测定药物含量，根据公式 $P=\frac{C_{\left(O\right)}}{C_{\left(W\right)}}=\frac{C_{\mathrm{pro}}}{C_{\mathrm{pre}}-C_{\mathrm{pro}}}$ 来求算分配系数，结果见表2。

表2齐多夫定棕榈酸酯的正辛醇-缓冲液分配系数(20℃，室温)

血浆中母体药物齐多夫定的浓度测定：

制剂：乳剂、脂质体；给药途径：静脉注射

色谱柱：Betasil C18柱(200mm×4.6mm，5μm)；流动相：甲醇∶水＝35∶65；流速：1.0mL/min；柱温：40℃；检测波长：266nm。内标为苯乙醇。其典型色谱图见附图1。

乳剂及脂质体给药后，不同时间点下，母体药物齐多夫定的血药浓度见表1。药时曲线见附图2。

表1齐多夫定棕榈酸酯脂质体与乳剂大鼠尾静脉注射后的血药浓度(μg·mL^-1)数据(9.93mg·kg^-1)

大鼠体内的药物动力学研究表明，齐多夫定棕榈酸酯静脉内给药后，在体内广泛存在的羧酸酯酶的作用下，可以迅速酶解为有活性的母体化合物齐多夫定。粒度测定：本实验中应用PSS.NICOMP^TM380作为测定粒径的仪器。

本发明的优点是：建立了一种齐多夫定棕榈酸酯的纯化方法，所获得的产品由原来的淡黄色改善为白色或类白色；用所建立的HPLC方法控制药物的纯度大于99％，从而大大提高了用药安全性；以高质量的齐多夫定棕榈酸酯原料制备的脂质体和乳剂研究了齐多夫定棕榈酸酯静脉注射后的体内药物动力学，在国内外首次获得了这些参数，为临床应用提供可靠的依据。

附图说明：

图1齐多夫定在大鼠血浆中的HPLC色谱图。

图2大鼠静脉注射齐多夫定棕榈酸酯脂质体及亚微乳后齐多夫定的药-时曲线。

图3齐多夫定棕榈酸酯差示扫描量热图。

图4纯化后齐多夫定棕榈酸酯纯度检查HPLC图谱。

具体实施方式：

实施例1：

取合成的齐多夫定棕榈酸酯粗品10g，于50℃下溶于400mL95％乙醇中，加入活性炭0.5g，搅拌，充分混匀，抽滤除去活性炭，将滤液降温，搅拌10分钟，继续降温至-20℃，半小时后齐多夫定棕榈酸酯大量析出，为针状结晶，抽滤得纯品。外观为白色，HPLC测定有关物质0.73％，纯度为99.27％。

实施例2：

取合成的齐多夫定棕榈酸酯粗品10g，于40℃下溶于300mL甲醇中，加入硅胶1g，搅拌，充分混匀，抽滤除去硅胶，将滤液降温，搅拌10分钟，继续降温至-20℃，1小时后齐多夫定棕榈酸酯大量析出，为针状结晶，抽滤得纯品。外观为白色，HPLC测定有关物质0.78％，纯度为99.22％。

实施例3：

取合成的齐多夫定棕榈酸酯粗品10g，于40℃下溶于100mL甲醇-乙酸乙酯(100：1)中，加入硅胶1g，搅拌，充分混匀，抽滤除去硅胶，将滤液降温，搅拌10分钟，继续降温至-20℃，1小时后齐多夫定棕榈酸酯大量析出，为针状结晶，抽滤得纯品。外观为白色，HPLC测定有关物质0.88％，纯度为99.12％。

实施例4：

取合成的齐多夫定棕榈酸酯粗品10g，于50℃下溶于100mL甲醇-甲酸-乙醚-丙酮(100:0.1:1:1)中，加入活性炭0.5g，搅拌，充分混匀，抽滤除去活性炭，将滤液降温，搅拌10分钟，继续降温至-20℃，半小时后齐多夫定棕榈酸酯大量析出，为针状结晶，抽滤得纯品。外观为白色，HPLC测定有关物质0.67％，纯度为99.33％。

实施例5：

取合成的齐多夫定棕榈酸酯粗品10g，于50℃下溶于200mL乙腈中，加入活性炭0.5g，搅拌，充分混匀，抽滤除去活性炭，将滤液降温，搅拌10分钟，继续降温至-20℃，半小时后齐多夫定棕榈酸酯大量析出，为针状结晶，抽滤得纯品。外观为白色，HPLC测定有关物质0.65％，纯度为99.35％。

实施例6：

取合成的齐多夫定棕榈酸酯粗品10g，于40℃下溶于50mL丙酮中，加入硅胶1g，搅拌，充分混匀，抽滤除去硅胶，将滤液降温，搅拌10分钟，继续降温至-20℃，1小时后齐多夫定棕榈酸酯大量析出，为针状结晶，抽滤得纯品。外观为白色，HPLC测定有关物质0.73％，纯度为99.27％。

实施例7：齐多夫定棕榈酸酯DSC分析

初始温度为30℃，最终温度为300℃，升温速度为5℃·min^-1。所得DSC图谱见图附3。由图可知，齐多夫定棕榈酸酯在60.19℃开始熔化吸热到65.15℃全部熔化。

实施例8：齐多夫定棕榈酸酯HPLC纯度检查

仪器：P230高压恒流泵，DAD230二极管阵列检测器，DAD2000色谱数据处理工作站；色谱柱：Betasil ODS柱(ID4.6mm×200mm，5μm)；流动相：乙醇∶水＝95∶5；室温；检测波长：266nm。结果见附图4。

实施例9：齐多夫定棕榈酸酯乳剂的制备

成分为有效剂量的齐多夫定棕榈酸酯0.3g，磷脂1.2g，中链油10g，甘油2.5g，氢氧化钠适量，其余为注射用水，共100mL。

制造方法：

1)在配制罐中制备油相：在配制罐中，将中链油加热至70℃，加入磷脂，强烈搅拌至溶解，加入药物，搅拌5min使之溶解；

2)在配制罐中制备水相：将甘油加入注射用水中，在70℃下搅拌5min，使之完全混溶；

3)在50℃时，将油相加入水相，强烈搅拌12min，形成初乳；

4)用适量的氢氧化钠溶液调节pH值至9；

5)过均质仪，第一步调节匀化压力至600kg/cm²，第二步再调节至120kg/cm²，将溶液反复匀化，得到均匀的乳剂，过微孔滤膜，封装，灭菌，即得本品。平均粒径为232nm，不含大于5μm的粒子。所得乳剂可以注射也可以口服。

实施例10：

成分为有效剂量的齐多夫定棕榈酸酯0.3g，磷脂1.2g，油酸乙酯20g，甘油2.5g，盐酸适量，其余为注射用水，共100mL。

制造方法：

1)在配制罐中制备油相：在配制罐中，将油酸乙酯加热至80℃，加入磷脂，强烈搅拌至溶解，加入药物，搅拌5min使之溶解；

2)在配制罐中制备水相：将甘油加入注射用水中，在70℃下搅拌5min，使之完全混溶；

3)在40℃时，将油相加入水相，强烈搅拌15min，形成初乳；

4)用适量的盐酸溶液调节pH值至4；

5)过均质仪，第一步调节匀化压力至580kg/cm²，第二步再调节至140kg/cm²，将溶液反复匀化，得到均匀的乳剂，过微孔滤膜，封装，灭菌，即得本品。平均粒径为265nm，不含大于5μm的粒子。所得乳剂可以注射也可以口服。

实施例11：

成分为有效剂量的齐多夫定棕榈酸酯0.3g，磷脂1.5g，注射用大豆油30g，甘油2.5g，磷酸钠适量，其余为注射用水，共100mL。

制造方法：

1)在配制罐中制备油相：在配制罐中，将注射用大豆油加热至80℃，加入磷脂，强烈搅拌至溶解，加入药物，搅拌5min使之溶解；

2)在配制罐中制备水相：将甘油加入注射用水中，在70℃下搅拌5min，使之完全混溶；

3)在40℃时，将油相加入水相，强烈搅拌20min，形成初乳；

4)用适量的磷酸钠溶液，调节PH值至7；

5)过均质仪，第一步调节匀化压力至520kg/cm²，第二步再调节至100kg/cm²，将溶液反复匀化，得到均匀的乳剂，过微孔滤膜，封装，灭菌，即得本品。平均粒径为386nm，不含大于5μm的粒子。所得乳剂可以注射也可以口服。

实施例12：

成分为有效剂量的齐多夫定棕榈酸酯0.3g，磷脂1.2g，中链油10g，大豆油10g，PEG₂₀₀₀-CH-S(聚乙二醇胆固醇硫酸酯)0.3g、甘油2.5g，氢氧化钠适量，其余为注射用水，共100mL。

制造方法：

1)在配制罐中制备油相：在配制罐中，将中链油加热至70℃，加入磷脂，强烈搅拌至溶解，加入药物，搅拌5min使之溶解；

2)在配制罐中制备水相：将PEG₂₀₀₀-CH-S、甘油加入注射用水中，在70℃下搅拌5min，使之完全混溶；

3)在50℃时，将油相加入水相，强烈搅拌12min，形成初乳；

4)用适量的氢氧化钠溶液，调节pH值至9；

5)过均质仪，第一步调节匀化压力至600kg/cm²，第二步再调节至120kg/cm²，将溶液反复匀化，得到均匀的乳剂，过微孔滤膜，封装，灭菌，即得本品。平均粒径为232nm，不含大于5μm的粒子。所得乳剂可以注射也可以口服。

实施例13：

成分为有效剂量的齐多夫定棕榈酸酯0.3g，磷脂1.2g，中链油10g，红花油1g，PEG₂₀₀₀-CHS(聚乙二醇胆固醇琥珀酸酯)0.3g、甘油2.5g，氢氧化钠适量，其余为注射用水，共100mL。

制造方法：

1)在配制罐中制备油相：在配制罐中，将中链油加热至70℃，加入磷脂，强烈搅拌至溶解，加入药物，搅拌5min使之溶解；

2)在配制罐中制备水相：将PEG₂₀₀₀-CHS、甘油加入注射用水中，在70℃下搅拌5min，使之完全混溶；

3)在50℃时，将油相加入水相，强烈搅拌12min，形成初乳；

4)用适量的氢氧化钠溶液，调节pH值至9；

5)过均质仪，第一步调节匀化压力至600kg/cm²，第二步再调节至120kg/cm²，将溶液反复匀化，得到均匀的乳剂，过微孔滤膜，封装，灭菌，即得本品。平均粒径为232nm，不含大于5μm的粒子。所得乳剂可以注射也可以口服。

实例14：齐多夫定棕榈酸酯脂质体的制备

成分为有效剂量的齐多夫定棕榈酸酯0.3g，氢化大豆磷脂2g，胆固醇0.25g，无水乙醇适量，其余为5mM的磷酸钠缓冲液(pH7.4)，共100mL。

制造方法：

1)在配制罐中制备药物溶液：在配制罐中，将磷脂与胆固醇溶于适量无水乙醇中加热至50℃，强烈搅拌至溶解，加入药物，强烈搅拌5min使之溶解；

2)在配制罐中制备水相：将5mM的磷酸钠缓冲液加热至50℃，备用。

3)在40℃时，将药物溶液加入水相，强烈搅拌20min；

4)过均质仪，第一步调节匀化压力至500kg/cm²，第二步再调节至100kg/cm²，将溶液反复匀化，得到均匀半透明的脂质体，过微孔滤膜，封装，灭菌，即得本品。平均粒径为85nm，不含大于5μm的粒子。所得脂质体可用于注射或口服。

实施例15

成分为有效剂量的齐多夫定棕榈酸酯0.3g，大豆磷脂3g，胆固醇0.375g，无水乙醇适量，其余为5mM的磷酸钠缓冲液(pH5.5)，共100mL。

制造方法：

1)在配制罐中制备药物溶液：在配制罐中，将磷脂与胆固醇溶于适量无水乙醇中加热至60℃，强烈搅拌至溶解，加入药物，强烈搅拌5min使之溶解；

2)在配制罐中制备水相：将5mM的磷酸缓冲液加热至60℃，备用。

3)在60℃时，将药物溶液加入水相，强烈搅拌15min；

4)过均质仪，第一步调节匀化压力至600kg/cm²，第二步再调节至120kg/cm²，将溶液反复匀化，得到均匀半透明的脂质体，过微孔滤膜，封装，灭菌，即得本品。平均粒径为88nm，不含大于5μm的粒子。所得脂质体可用于注射或口服。

实施例16

成分为有效剂量的齐多夫定棕榈酸酯0.3g，Degussa 1704g，胆固醇0.5g，无水乙醇适量，其余为5mM的枸橼酸缓冲液(pH3.0)，共100mL。

制造方法：

1)在配制罐中制备药物溶液：在配制罐中，将磷脂与胆固醇溶于适量无水乙醇中加热至55℃，强烈搅拌至溶解，加入药物，强烈搅拌5min使之溶解；

2)在配制罐中制备水相：将5mM的枸橼酸缓冲液加热至55℃，备用。

3)在55℃时，将药物溶液加入水相，强烈搅拌25min；

4)过均质仪，第一步调节匀化压力至600kg/cm²，第二步再调节至150kg/cm²，将溶液反复匀化，得到均匀半透明的脂质体，过微孔滤膜，封装，灭菌，即得本品。平均粒径为125nm，不含大于5μm的粒子。所得脂质体可用于注射。

实施例17

成分为有效剂量的齐多夫定棕榈酸酯0.3g，Degussa 2005g，胆固醇0.625g，无水乙醇适量，其余为5mM的碳酸钠缓冲液，共100mL。

制造方法：

1)在配制罐中制备药物溶液：在配制罐中，将磷脂与胆固醇溶于适量无水乙醇中加热至45℃，强烈搅拌至溶解，加入药物，强烈搅拌5min使之溶解；

2)在配制罐中制备水相：将5mM的碳酸钠缓冲液加热至45℃，备用。

3)在45℃时，将药物溶液加入水相，强烈搅拌30min；

4)过均质仪，第一步调节匀化压力至580kg/cm²，第二步再调节至150kg/cm²，将溶液反复匀化，得到均匀半透明的脂质体，过微孔滤膜，封装，灭菌，即得本品。平均粒径为225nm，不含大于5μm的粒子。所得脂质体可用于注射。

实施例18：

成分为有效剂量的齐多夫定棕榈酸酯0.3g，Degussa 1704g，胆固醇0.375g，PEG₂₀₀₀-CH-S(聚乙二醇胆固醇硫酸酯)0.4g、无水乙醇适量，其余为5mM的磷酸钠缓冲液，共100mL。

制造方法：

1)在配制罐中制备药物溶液：在配制罐中，将磷脂、胆固醇与PEG₂₀₀₀-CH-S溶于适量无水乙醇中加热至50℃，强烈搅拌至溶解，加入药物，强烈搅拌5min使之溶解；

2)在配制罐中制备水相：将5mM的磷酸钠缓冲液加热至50℃，备用。

3)在40℃时，将药物溶液加入水相，强烈搅拌20min；

4)过均质仪，第一步调节匀化压力至500kg/cm²，第二步再调节至100kg/cm²，将溶液反复匀化，得到均匀半透明的脂质体，过微孔滤膜，封装，灭菌，即得本品。平均粒径为85nm，不含大于5μm的粒子。所得脂质体可用于注射。

实施例19：

成分为有效剂量的齐多夫定棕榈酸酯0.3g，Degussa1704g，胆固醇0.375g，PEG₂₀₀0-CHS(聚乙二醇胆固醇琥珀酸酯)0.4g、无水乙醇适量，其余为5mM的磷酸钠缓冲液，共100mL。

制造方法：

1)在配制罐中制备药物溶液：在配制罐中，将磷脂、胆固醇与PEG₂₀₀₀-CHS溶于适量无水乙醇中加热至50℃，强烈搅拌至溶解，加入药物，强烈搅拌5min使之溶解；

2)在配制罐中制备水相：将5mM的磷酸钠缓冲液加热至50℃，备用。

3)在40℃时，将药物溶液加入水相，强烈搅拌20min；

4)过均质仪，第一步调节匀化压力至500kg/cm²，第二步再调节至100kg/cm²，将溶液反复匀化，得到均匀半透明的脂质体，过微孔滤膜，封装，灭菌，即得本品。平均粒径为85nm，不含大于5μm的粒子。所得脂质体可用于注射。

实施例20：硬胶囊剂

将实例1或实例2或实例3或实例4或实例5或实例6所得精制品与10％微粉硅胶混合均匀后，直接装填于硬胶囊中即得。每个规格50mg或100mg。

实施例21：片剂

将实例1或实例2或实例3或实例4或实例5或实例6所得精制品与20％多孔淀粉、10％微晶纤维素、5％PVPP、10％微粉硅胶混合均匀后，直接压片即得。每个规格50mg或100mg。

实施例22：颗粒剂

将实例1或实例2或实例3或实例4或实例5或实例6所得精制品与20％蔗糖、5％糊精、5％羧甲基纤维素钠、2％HPMC混合均匀后，按照湿法制粒，干燥、整粒即得。每个规格50mg或100mg。

实施例23：混悬剂

将实例1或实例2或实例3或实例4或实例5或实例6所得精制品与50％蔗糖、5％HPMC混合均匀后，加入0.1％尼泊金乙酯，或0.1％苯甲酸，并加入蒸馏水，用胶体磨分散即得。每个规格50mg或100mg。

实施例24：软胶囊剂或自乳化软胶囊剂

将实例1或实例2或实例3或实例4或实例5或实例6所得精制品与C₆～C₁₈的植物油或动物油(包括经过结构改造和水解后的植物油)、甘油三酸酯，如椰子油、玉米油、橄榄油、大豆油、红花油、海豹油、辛葵酸甘油酯(Delios)(称为中链三甘油酯MCT)；也包括脂肪酸的衍生物，如油酸乙酯。自乳化软胶囊剂中所采用的油为C₈～C₁₀的中链油，除此之外，尚有乳化剂、助乳化剂。所说的乳化剂包括磷脂、高HLB表面活性剂，如聚氧乙烯蓖麻油、HS15(聚乙二醇12-羟基硬脂酸酯、polyethylene glycol660hydroxystearate)、维生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)、DSPE-PEG、泊洛沙姆、吐温类、蔗糖脂肪酸酯类、椰子油C8/C10聚乙二醇甘油酯、杏仁油酸聚乙二醇甘油酯、聚氧乙烯(25)甘油三油酸酯、聚氧乙烯(20)山梨醇油酸酯、聚乙二醇-8-甘油辛酸/癸酸酯中的一种或几种的混合物；助乳化剂(乙醇、丙二醇、聚乙二醇200-600、二甲基异山梨酯中的一种或几种混合物)；除此之外，还可以加入抗氧化剂，包括丁基羟基茴香醚(BHA)、二丁基羟基甲苯(BHT)、α-生育酚、α-醋酸生育酚、α-硫辛酸、维生素C棕榈酸酯中的一种或几种混合物。压丸即得。每个规格50mg或100mg。

Claims (2)

1.齐多夫定棕榈酸酯原料精制方法，其特征在于：将齐多夫定棕榈酸酯或硬脂酸酯原料用有机溶剂溶解，所述有机溶剂包括：C1～C5醇类或其与水适当比例的混合溶剂；C3～C8有机酸酯类、C1～C4有机酸类、C2～C8醚类、C3～C8酮类以及乙腈；加入吸附剂或不加入吸附剂，所述的吸附剂为活性炭、硅胶、氧化铝、硅酸镁、聚酰胺、硅藻土中的一种或几种；室温至80℃保温搅拌5～500分钟，过滤除去吸附剂后，所得溶液于低温5℃～零下50℃度放置1～100小时，收集沉淀，干燥即得，纯化后的齐多夫定棕榈酸酯原料为白色至类白色的针状结晶或结晶性粉末。

2.根据权利要求1所述的齐多夫定棕榈酸酯原料精制方法，其特征在于：纯化后的齐多夫定棕榈酸酯原料在色谱柱：Betasil ODS柱；流动相：乙醇∶水＝95∶5；室温；检测波长：266nm条件下进行HPLC检查，纯度大于99％。