CN1823083B - 具备抗微生物活性的林可霉素衍生物 - Google Patents
具备抗微生物活性的林可霉素衍生物 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1823083B CN1823083B CN2004800203015A CN200480020301A CN1823083B CN 1823083 B CN1823083 B CN 1823083B CN 2004800203015 A CN2004800203015 A CN 2004800203015A CN 200480020301 A CN200480020301 A CN 200480020301A CN 1823083 B CN1823083 B CN 1823083B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- group
- alkyl
- replacement
- tetrahydrochysene
- pyrans
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Cosmetics (AREA)
Abstract
公开了新颖的林可霉素衍生物。这些林可霉素衍生物表现抗菌活性。本发明化合物可以表现有力的对抗细菌的活性，包括革兰氏阳性生物，可以是有用的抗微生物剂。也公开了合成和使用这些化合物的方法。
Description
相关申请的交叉参考
本申请是2004年2月11日提交的美国专利申请No.10/777,455的部分继续申请，后者是2003年8月15日提交的美国专利申请No.10/642,807的部分继续申请，并且进一步根据35U.S.C.§119(e)要求2003年6月17日提交的美国临时申请No.60/479,296和2003年6月17日提交的美国临时申请No.60/749,502的优先权，这些公开内容全文引用在此作为参考。
发明背景
发明领域
本发明涉及表现抗菌活性的林可霉素衍生物以及使用这类衍生物的方法。
技术现状
林可霉素是一种生物合成产物，它不利地影响多种不同微生物的生长，特别是革兰氏阳性细菌。林可霉素的特征和制备公开在美国专利No.3,086,912中。已经制备了多种也具有抗微生物活性的林可霉素衍生物。这些衍生物例如包括克林霉素，如美国专利No.3,496,163所述。
林可霉素衍生物仍然是抗菌药物发现的诱人目标。因此，需要作为潜在抗菌剂的具备抗微生物活性的林可霉素衍生物。
发明概述
本发明提供具备抗菌活性的林可霉素衍生物。在一些实施方式中，所述新颖的林可霉素衍生物表现对抗革兰氏阳性与厌氧菌病原体的抗菌活性。惊人地，本文所述经过选择的新颖的林可霉素化合物与已知化合物例如克林霉素相比，表现出对抗肠球菌(Enterocci species)的非典型效力，例如屎肠球菌(Enterocci faecium)和粪肠球菌(Enterocci faecalis)，和/或对抗苛养的革兰氏阴性病原体的非典型效力，例如流感嗜血杆菌。
在其一个组成方面，本发明涉及式(I)化合物：
其中：
W是含氮环：
其中m是0、1、2或3；其中当m是2时，该含氮环可以可选地在4与5含氮环位之间含有双键；其中当m是3时，该含氮环可以可选地在4与5含氮环位或者在5与6含氮环位之间含有一条双键；其中含氮环位置是以氮为“1”开始按逆时针方向连续编号的；
R1选自由氢、烷基、取代的烷基、羟基烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基、环烷基烷基、卤代基、烷硫基和取代的烷硫基组成的组；
R2和R3独立地是氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基、氰基、烷硫基、取代的烷硫基、羟基、卤代基，或者R2和R3之一是＝NOR7，另一个不存在，或者R2和R3之一是＝CH2，另一个不存在；
R6选自由氢、烷基、羟基烷基、环烷基、取代的烷基、亚氨甲基、-C(O)O-烷基、-C(O)O-取代的烷基、-C(O)O-芳基、-C(O)O-取代的芳基、-C(O)O-杂芳基、-C(O)O-取代的杂芳基、-(酰胺基)烷基、(氨甲酰基)烷基、5-烷基-[1，3]二氧杂环戊烯-2-酮-4-基-甲基、5-烷基-[1，3]二氧杂环戊烯-2-酮-4-基-甲氧基-羰基组成的组，或者-N(R6)-片段是脒、N-氰基脒、N-羟基脒或N-烷氧基脒结构的一部分；
R7是H或烷基；
R9可以在环中相同或不同的碳上被单次或多次取代，独立地选自由氢、烷基、取代的烷基、环烷基、取代的环烷基、环烷基烷基、取代的烯基、取代的氧、取代的氮、卤素、苯基、取代的苯基、烷硫基、取代的烷硫基、取代的芳硫基、杂芳硫基烷基、杂环硫基烷基、杂芳硫基、杂环硫基、亚丙基(＝CHCH2CH3)、叠氮基、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-NR4R5及其支链异构体(其中n是整数1至8，含端值，R4和R5是H或烷基)、烷氧基烷氧基、芳基、取代的芳基、烯基、取代的烯基和-S(O)qR13(其中q是等于0、1或2的整数，R13选自由烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基组成的组)组成的组，其中在该含氮环上存在不超过一个-S(O)qR13基团；
或者其前体药物和/或药学上可接受的盐。
在其另一个组成方面，本发明涉及式(II)化合物：
其中：
W是含氮环：
其中m是0、1、2或3；其中当m是2时，该含氮环可以可选地在4与5含氮环位之间含有双键；其中当m是3时，该含氮环可以可选地在4与5含氮环位或者在5与6含氮环位之间含有一条双键；其中含氮环位置是以氮为“1”开始按逆时针方向连续编号的；
R1选自由氢、烷基、取代的烷基、羟基烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基、环烷基烷基、卤代基、烷硫基和取代的烷硫基组成的组；
R20和R21独立地是氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基、氰基、烷硫基、取代的烷硫基、羟基、卤代基，或者R20和R21之一是＝NOR7，另一个不存在，或者R20和R21之一是＝CH2，另一个不存在，或者R20和R21一起是环烷基、芳基、取代的芳基、杂环基或杂芳基；
R6选自由氢、烷基、羟基烷基、环烷基、取代的烷基、亚氨甲基、-C(O)O-烷基、-C(O)O-取代的烷基、-C(O)O-芳基、-C(O)O-取代的芳基、-C(O)O-杂芳基、-C(O)O-取代的杂芳基、-(酰胺基)烷基、(氨甲酰基)烷基、5-烷基-[1，3]二氧杂环戊烯-2-酮-4-基-甲基、5-烷基-[1，3]二氧杂环戊烯-2-酮-4-基-甲氧基-羰基组成的组，或者-N(R6)-片段是脒、N-氰基脒、N-羟基脒或N-烷氧基脒结构的一部分；
R7是H或烷基；
R9可以在环中相同或不同的碳上被单次或多次取代，独立地选自由氢、烷基、取代的烷基、环烷基、取代的环烷基、环烷基烷基、取代的烯基、取代的氧、取代的氮、卤素、苯基、取代的苯基、烷硫基、取代的烷硫基、取代的芳硫基、杂芳硫基烷基、杂环硫基烷基、杂芳硫基、杂环硫基、亚丙基(＝CHCH2CH3)、叠氮基、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-NR4R5及其支链异构体(其中n是整数1至8，含端值，R4和R5是H或烷基)、烷氧基烷氧基、芳基、取代的芳基、烯基、取代的烯基和-S(O)qR13(其中q是等于0、1或2的整数，R13选自由烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基组成的组)组成的组，其中在该含氮环上存在不超过一个-S(O)qR13基团；
或者其前体药物和/或药学上可接受的盐。
在其另一个组成方面，本发明涉及式(IA)化合物：
其中：
代表一条键，可以是双键或单键；
R1选自由-S-烷基、-S-取代的烷基、氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基和卤代基组成的组；
R2和R3独立地是氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基、氰基、烷硫基、取代的烷硫基、羟基、卤代基，或者R2和R3之一是＝NOR7，另一个不存在，或者R2和R3之一是＝CH2，另一个不存在；
R6选自由氢、烷基、取代的烷基、-C(O)O-烷基、-C(O)O-取代的烷基、-C(O)O-芳基、-C(O)O-取代的芳基、-C(O)O-杂芳基、-C(O)O-取代的杂芳基、-(酰胺基)烷基、(氨甲酰基)烷基、
组成的组，或者-N(R6)-片段是脒、N-氰基脒、N-羟基脒或N-烷氧基脒结构的一部分；
R7选自由氢和烷基组成的组；
R9可以在环中相同或不同的碳上被单次或多次取代，独立地选自由氢、烷基、取代的烷基、烷氧基烷氧基、环烷基、取代的环烷基、取代的氧、取代的氮、卤代基、芳基、取代的芳基、烯基、取代的烯基和-S(O)qR13组成的组，其中q是等于0、1或2的整数，R13选自由烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基组成的组；
其中m1＝0-2；
其中t＝0-3；
或者其药学上可接受的盐和/或前体药物；
具有下列条件：
A.在式(I)化合物中，若是单键，
m1是0或1，
R2和R3独立地是氢、烷基、羟基、氟代基、氰基烷基，或者R2和R3之一是＝NOR7，另一个不存在，或者R2和R3之一是＝CH2，另一个不存在，
R6是氢、烷基、羟基烷基、-C(O)O-亚烷基-环烷基、-C(O)O-亚烷基-取代的烷基、-C(O)O-烷基、-C(O)O-取代的烷基、-C(O)O-芳基、-C(O)O-取代的芳基、-C(O)O-杂芳基、-C(O)O-取代的杂芳基、-C(O)O-杂环基、-C(O)O-取代的杂环基、-[C(O)O]p-亚烷基-杂环、-[C(O)O]p-亚烷基-取代的杂环，其中p是0或1，
R7选自由氢和烷基组成的组，
R9是氢、烷基、取代的烷基、烷氧基烷氧基、环烷基、取代的环烷基、取代的氧、取代的氮、卤代基、苯基、取代的苯基、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-NR4R5、-亚烷基-Ra，其中Ra选自一氟苯基或一氯苯基，及其支链异构体，其中n是整数1至8，含端值，R4和R5是氢或烷基，
则R1不是-S-烷基；
B.在式(I)化合物中，若
是单键，
R2和R3独立地是氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基、氰基、烷硫基、取代的烷硫基、羟基、卤代基，或者R2和R3之一是＝NOR7，另一个不存在，或者R2和R3之一是＝CH2，另一个不存在，其条件是R2和R3不都是氢；当R2和R3之一是卤代基时，另一个不是氢或羟基；当R2和R3之一是羟基时，另一个不是氢或羟基，
R6选自由氢、烷基、取代的烷基、-C(O)O-烷基、-C(O)O-取代的烷基、-C(O)O-芳基、-C(O)O-取代的芳基、-C(O)O-杂芳基、-C(O)O-取代的杂芳基、-(酰胺基)烷基、(氨甲酰基)烷基组成的组，或者-N(R6)-片段是脒、N-氰基脒、N-羟基脒或N-烷氧基脒结构的一部分，
R7选自由氢和烷基组成的组，
R1选自由-S-烷基、-S-取代的烷基、氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基和卤代基组成的组，
则至少一个R9不是氢、烷基、取代的烷基、烷氧基烷氧基、环烷基、取代的环烷基、取代的氧、取代的氮、卤代基、苯基、取代的苯基、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-NR4R5、-亚烷基-Ra，其中Ra选自一氟苯基或一氯苯基，及其支链异构体，其中n是整数1至8，含端值，R4和R5是氢或烷基；
C.在式(I)化合物中，若
是单键，
R2和R3独立地是氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基、氰基、烷硫基、取代的烷硫基、羟基、卤代基，或者R2和R3之一是＝NOR7，另一个不存在，或者R2和R3之一是＝CH 2，另一个不存在，其条件是R2和R3不都是氢；当R2和R3之一是卤代基时，另一个不是氢或羟基；当R2和R3之一是羟基时，另一个不是氢或羟基，
R7选自由氢和烷基组成的组，
R1选自由-S-烷基、-S-取代的烷基、(杂芳基)烷基、氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基和卤代基组成的组，
R9独立地选自不是(other than)氢、烷基、取代的烷基、烷氧基烷氧基、环烷基、取代的环烷基、取代的氧、取代的氮、卤代基、苯基、取代的苯基、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-NR4R5、-亚烷基-Ra，其中Ra选自一氟苯基或一氯苯基，及其支链异构体，其中n是整数1至8，含端值，R4和R5是氢或烷基，
则R6选自由取代的烷基(除外单取代的杂环或取代的杂环)、
(酰胺基)烷基和-N(R6)-片段组成的组，所述-N(R6)-片段是脒、N-氰基脒、N-羟基脒或N-烷氧基脒结构的一部分；
其中正如仅在这些条件中所用的，下列特定术语具有下列特定含义：
取代的烷基表示这样的烷基，其中一个或多个氢原子已被卤素、氧、羟基、胺(伯)、胺(被上述烷基取代的仲-烷基)、胺(被如上所定义的烷基取代的叔-烷基)、硫、-SH或苯基所代替，
取代的环烷基表示被烷基取代的环烷基，其中烷基是如上所定义的，或者这样的基团，其中一个或多个氢原子已被卤素、氧、羟基、胺(伯)、胺(被上述烷基取代的仲-烷基)、胺(被如上所定义的烷基取代的叔-烷基)、硫、-SH或苯基所代替，
取代的氧表示基团-ORd，其中Rd是烷基、卤代烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、烯基、环烷基和取代的环烷基，
取代的氮或氨基表示基团-NRaRb，其中Ra和Rb独立地是氢、烷基、卤代烷基、烯基、环烷基、取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基和取代的杂芳基，
取代的芳基表示被一个或多个取代基取代的芳基环，所述取代基选自由烷基、烯基、炔基、卤代基、烷氧基、酰氧基、氨基、羟基、羧基、氰基、硝基、烷硫基和硫代烷基(thioalkyl)组成的组，其中烷硫基表示基团-S-烷基，硫代烷基表示具有一个或多个-SH基团的烷基，
取代的杂芳基表示被一个或多个取代基取代的杂芳基环，所述取代基选自由烷基、烯基、炔基、卤代基、烷氧基、酰氧基、氨基、羟基、羧基、氰基、硝基、烷硫基和硫代烷基组成的组，其中烷硫基表示基团-S-烷基，硫代烷基表示具有一个或多个-SH基团的烷基。
在其另一个组成方面，本发明涉及式(IB)化合物：
其中：
R1选自由氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基、环烷基烷基、卤代基和取代的烷硫基组成的组；
R2和R3独立地是氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基、氰基、烷硫基、取代的烷硫基、羟基、卤代基，或者R2和R3之一是＝NOR7，另一个不存在；
R6是H、烷基或羟基烷基；
R7是H或烷基；
R9可以在环中相同或不同的碳上被单次或多次取代，独立地选自由氢、烷基、取代的烷基、环烷基、取代的环烷基、取代的氧、取代的氮、卤素、苯基、取代的苯基、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-NR4R5及其支链异构体组成的组，其中n是整数1至8，含端值，R4和R5是H或烷基；
m是1或2；
或者其前体药物和/或药学上可接受的盐。
在一些实施方式中，若含氮环是饱和的，
R2和R3独立地是氢、羟基、卤代基、烷氧基、烷硫基、取代的烷硫基、烷基、取代的烷基、羟基烷基，
R6是氢、烷基、羟基烷基；
R9是氢、烷基、取代的烷基、环烷基、取代的环烷基、取代的氧、取代的氮、卤代基、苯基、取代的苯基、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-NR4R5及其支链异构体，其中n是整数1至8，含端值，R4和R5是氢或烷基，
则R1不是-S-烷基。
在一些实施方式中，若含氮环是饱和的，
m是0、1、2或3，
R2和R3独立地是氢、烷基、羟基、氟代基、氰基烷基，或者R2和R3之一是＝NOR7，另一个不存在，或者R2和R3之一是＝CH2，另一个不存在，
R6是氢、烷基、羟基烷基、-C(O)O-亚烷基-环烷基、-C(O)O-亚烷基-取代的烷基、-C(O)O-烷基、-C(O)O-取代的烷基、-C(O)O-芳基、-C(O)O-取代的芳基、-C(O)O-杂芳基、-C(O)O-取代的杂芳基、-C(O)O-杂环基、-C(O)O-取代的杂环基、-[C(O)O]p-亚烷基-杂环、-[C(O)O]p-亚烷基-取代的杂环，其中p是0或1，
R7选自由氢和烷基组成的组；
R9是氢、烷基、取代的烷基、烷氧基烷氧基、环烷基、取代的环烷基、取代的氧、取代的氮、卤代基、苯基、取代的苯基、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-NR4R5、-亚烷基-Ra，其中Ra选自一氟苯基或一氯苯基，及其支链异构体，其中n是整数1至8，含端值，R4和R5是氢或烷基，
则R1不是-S-烷基。
在一些实施方式中，若含氮环是饱和的，
m是1或2，
R2和R3独立地是氢、烷基、羟基、氟、氰基烷基，或者R2和R3之一是＝NOR7，另一个不存在，或者R2和R3之一是＝CH2，另一个不存在，
R6是氢、烷基、羟基烷基、-C(O)O-亚烷基-环烷基、-C(O)O-亚烷基-取代的烷基、-C(O)O-烷基、-C(O)O-取代的烷基、-C(O)O-芳基、-C(O)O-取代的芳基、-C(O)O-杂芳基、-C(O)O-取代的杂芳基、-C(O)O-杂环基、-C(O)O-取代的杂环基、-[C(O)O]p-亚烷基-杂环、-[C(O)O]p-亚烷基-取代的杂环，其中p是0或1，
R7选自由氢和烷基组成的组，
R9是氢、烷基、取代的烷基、烷氧基烷氧基、环烷基、取代的环烷基、取代的氧、取代的氮、卤代基、苯基、取代的苯基、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-NR4R5、-亚烷基-Ra，其中Ra选自一氟苯基或一氯苯基，及其支链异构体，其中n是整数1至8，含端值，R4和R5是氢或烷基，
则R1不是-S-烷基。
在一些实施方式中，若含氮环是饱和的，
R2和R3独立地是氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基、氰基、烷硫基、取代的烷硫基、羟基、卤代基，或者R2和R3之一是＝NOR7，另一个不存在，或者R2和R3之一是＝CH2，另一个不存在，其条件是R2和R3不都是氢；当R2和R3之一是卤代基时，另一个不是氢或羟基；当R2和R3之一是羟基时，另一个不是氢或羟基，
R6选自氢、烷基、取代的烷基、-C(O)O-烷基、-C(O)O-取代的烷基、-C(O)O-芳基、-C(O)O-取代的芳基、-C(O)O-杂芳基、-C(O)O-取代的杂芳基、-(酰胺基)烷基、(氨甲酰基)烷基，或者-N(R6)-片段是脒、N-氰基脒、N-羟基脒或N-烷氧基脒结构的一部分，
R7选自由氢和烷基组成的组；
R1选自由-S-烷基、-S-取代的烷基、氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基和卤代基组成的组，
则至少一个R9不是氢、烷基、取代的烷基、烷氧基烷氧基、环烷基、取代的环烷基、取代的氧、取代的氮、卤代基、苯基、取代的苯基、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-NR4R5、-亚烷基-Ra，其中Ra选自一氟苯基或一氯苯基，及其支链异构体，其中n是整数1至8，含端值，R4和R5是氢或烷基。
在一些实施方式中，若含氮环是饱和的，
R2和R3独立地是氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基、氰基、烷硫基、取代的烷硫基、羟基、卤代基，或者R2和R3之一是＝NOR7，另一个不存在，或者R2和R3之一是＝CH2，另一个不存在，其条件是R2和R3不都是氢；当R2和R3之一是卤代基时，另一个不是氢或羟基；当R2和R3之一是羟基时，另一个不是氢或羟基，
R7选自由氢和烷基组成的组，
R1选自由-S-烷基、-S-取代的烷基、(杂芳基)烷基、氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基和卤代基组成的组，
R9独立地选自不是氢、烷基、取代的烷基、烷氧基烷氧基、环烷基、取代的环烷基、取代的氧、取代的氮、卤代基、苯基、取代的苯基、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-NR4R5、-亚烷基-Ra，其中Ra选自一氟苯基或一氯苯基，及其支链异构体，其中n是整数1至8，含端值，R4和R5是氢或烷基，
则R6选自由取代的烷基(除外单取代的杂环或取代的杂环)、
(酰胺基)烷基和-N(R6)-片段组成的组，所述-N(R6)-片段是脒、N-氰基脒、N-羟基脒或N-烷氧基脒结构的一部分。
当仅在上述这些条件中使用时，下列特定术语具有下列特定含义：
取代的烷基表示这样的烷基，其中一个或多个氢原子已被卤素、氧、羟基、胺(伯)、胺(被上述烷基取代的仲-烷基)、胺(被如上所定义的烷基取代的叔-烷基)、硫、-SH或苯基所代替，
取代的环烷基表示被烷基取代的环烷基，其中烷基是如上所定义的，或者这样的基团，其中一个或多个氢原子已被卤素、氧、羟基、胺(伯)、胺(被上述烷基取代的仲-烷基)、胺(被如上所定义的烷基取代的叔-烷基)、硫、-SH或苯基所代替，
取代的氧表示基团-ORd，其中Rd是烷基、卤代烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、烯基、环烷基和取代的环烷基，
取代的氮或氨基表示基团-NRaRb，其中Ra和Rb独立地是氢、烷基、卤代烷基、烯基、环烷基、取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基和取代的杂芳基，
取代的芳基表示被一个或多个取代基取代的芳基环，所述取代基选自由烷基、烯基、炔基、卤代基、烷氧基、酰氧基、氨基、羟基、羧基、氰基、硝基、烷硫基和硫代烷基组成的组，其中烷硫基表示基团-S-烷基，硫代烷基表示具有一个或多个-SH基团的烷基，
取代的杂芳基表示被一个或多个取代基取代的杂芳基环，所述取代基选自由烷基、烯基、炔基、卤代基、烷氧基、酰氧基、氨基、羟基、羧基、氰基、硝基、烷硫基和硫代烷基组成的组，其中烷硫基表示基团-S-烷基，硫代烷基表示具有一个或多个-SH基团的烷基。
在一些实施方式中，R2和R3不都是氢。在一些实施方式中，当R2和R3之一是卤代基时，另一个不是氢或羟基。在一些实施方式中，当R2和R3之一是羟基时，另一个不是氢或羟基。
在一种实施方式中，m是0(W是
)。在另一种实施方式中，m是1(W
。在一种实施方式中，m是2。
在另一种实施方式中，m是2，含氮环是饱和的(W是)。
在另一种实施方式中，m是2，含氮环在4与5含氮环位之间含有双键(W是)。在一种实施方式中，m是3。在
另一种实施方式中，m是3，含氮环是饱和的(W
)。在
另一种实施方式中，m是3，含氮环在4与5含氮环位之间含有双键(W)。在另一种实施方式中，m是3，含氮环在5与6含氮环位之间含有双键(W是
)。在一种实施方式中，含氮环是饱和的。
在优选的实施方式中，本发明提供这样的化合物，其中上述式中的含氮环选自
在一种实施方式中，R1选自由氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基、卤代基、烷硫基和取代的烷硫基组成的组。在一种实施方式中，R1选自由氢、烷基、取代的烷基、羟基烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基、环烷基烷基、卤代基和取代的烷硫基组成的组。在一种实施方式中，R1选自由氢、烷基、取代的烷基、羟基烷基、烷氧基、环烷基烷基、烷硫基和取代的烷硫基组成的组。在一种实施方式中，R1选自由氢、烷基、取代的烷基、羟基烷基、烷氧基、环烷基烷基和取代的烷硫基组成的组。在优选的实施方式中，R1选自由氢、-S-甲基、-S-异丙基、-S-叔丁基、丙基、2，2，2-三氟-乙基-硫基、2-乙氧基-乙-1-基、丁氧基、2-羟基-乙基、3-羟基-丙基、羟基-甲基、2-(甲基-硫基)-乙基和环丙基-甲基组成的组。在另一种优选的实施方式中，R1选自由氢、-S-异丙基、-S-叔丁基、丙基、2，2，2-三氟-乙基-硫基、2-乙氧基-乙-1-基、丁氧基、2-羟基-乙基、3-羟基-丙基、羟基-甲基、2-(甲基-硫基)-乙基和环丙基-甲基组成的组。在另一种优选的实施方式中，R1是-S-甲基。优选的R1基团可以在表I、II和III中找到。在一些实施方式中，R1不是-S-烷基。在一些实施方式中，R1不是-S-甲基。在其他实施方式中，R1不是-S-取代的烷基。
在其他实施方式中，R1优选地是-SR0，其中R0优选地是C1-4烷基更优选甲基、2-羟基乙基或2-乙基水杨酸酯。在另一种实施方式中，R1优选地是氢、烷基、取代的烷基或2，2，2-三氟乙硫基。更优选地，R1是氢、丙基、2-乙氧基乙基或2，2，2-三氟乙硫基。
在一种实施方式中，R2和R3独立地选自由氢、烷基、羟基和卤代基组成的组。在优选的实施方式中，R2和R3独立地选自由氢、甲基、羟基和氯代基组成的组。在另一种优选的实施方式中，R2和R3是氢和羟基。在另一种优选的实施方式中，R2和R3是氢和氯代基。在另一种优选的实施方式中，R2和R3是氢和甲基。优选的R2和R3基团可以在表I、II和III中找到。
在一种实施方式中，R20和R21独立地是烷基或烯基，或者R20和R21一起是环烷基、芳基、取代的芳基、杂环基或杂芳基。在一种实施方式中，R20和R21之一是H，另一个是烷基或烯基。在优选的实施方式中，R20和R21之一是H，另一个是乙基或乙烯基。在另一种实施方式中，R20和R21一起是环烷基或芳基。在优选的实施方式中，R20和R21一起是环丙基、环戊基、苯基或4-氯-苯基。优选的R20和R21基团可以在表I、II和III中找到。在一种实施方式中，若R20和R21之一是氢，则另一个不是氢、烷基、羟基、氰基、烷硫基或取代的烷硫基。
在一种实施方式中，R6选自由氢、烷基、环烷基、羟基烷基、取代的烷基、亚氨甲基、-C(O)O-取代的烷基、5-烷基-[1，3]二氧杂环戊烯-2-酮-4-基-甲基和5-烷基-[1，3]二氧杂环戊烯-2-酮-4-基-甲氧基-羰基组成的组。在另一种实施方式中，R6选自氢和烷基。在一种实施方式中，R6选自由1H-咪唑-2-基-甲基、2-[HC(O)]-乙-1-基、2-氨基-乙-1-基、2-羟基乙基、2-甲氧基-乙-1-基、5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基-甲氧基-羰基、5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基-甲基、氨基羰基甲基、氨基羰基乙基、氰甲基、环丙基、氢、亚氨甲基、甲基和甲氧羰基甲基组成的组。在一种实施方式中，R6选自由1H-咪唑-2-基-甲基、2-羟基乙基、5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基-甲氧基-羰基、5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基-甲基、氨基羰基甲基、氰甲基、环丙基、氢、亚氨甲基和甲基组成的组。在优选的实施方式中，R6选自由1H-咪唑-2-基-甲基、2-[HC(O)]-乙-1-基、2-氨基-乙-1-基、2-羟基乙基、2-甲氧基-乙-1-基、氨基羰基甲基、氨基羰基乙基、氰甲基、环丙基、氢、亚氨甲基、甲基和甲氧羰基甲基组成的组。在优选的实施方式中，R6是氢或甲基。在另一种优选的实施方式中，R6选自由5-甲基-[1，3]二氧杂环戊烯-2-酮-4-基-甲基和5-甲基-[1，3]二氧杂环戊烯-2-酮-4-基-甲氧基-羰基组成的组。优选的R6基团可以在表I、II和III中找到。
在另一种实施方式中，R9选自由烷基、取代的烷基、环烷基、环烷基烷基、取代的烯基、烷硫基、取代的烷硫基、取代的芳硫基、杂芳硫基烷基、杂环硫基烷基、卤素、亚丙基(＝CHCH2CH3)、叠氮基、取代的氧、杂芳硫基和杂环硫基组成的组。在另一种实施方式中，R9选自由烷基、取代的烷基、环烷基、环烷基烷基、取代的烯基、烷硫基、取代的烷硫基、取代的芳硫基、杂芳硫基烷基、杂环硫基烷基、卤素、亚丙基(＝CHCH2CH3)和叠氮基组成的组。在优选的实施方式中，R9是烷基。在另一种优选的实施方式中，R9是卤素。
在另一种实施方式中，R9选自由(2-氟环丙基)甲氧基、(3-氟丙氧基)甲基、1H-吡咯基甲基、2-(4-乙基噻唑-2-基)-乙-1-基、2-(4-甲基噻唑-2-基)-乙-1-基、2-(5-乙基-异噁唑-3-基)-乙-1-基、2，2，2-三氟乙基-硫基、2，2-二氟乙氧基甲基、2-[1，3]二硫戊环-2-基-乙-1-基、2-氯苯基-甲硫基、2-环丁基乙基、2-亚环丁基-乙基、2-环丙基乙基、2-巯基乙氧基-乙基-硫基、2-氟乙氧基、2-丙氧基乙基、3-(1H-[1，2，3]三唑)-丙-1-基、3-(3-氟丙氧基)丙基、3-(环己氧基)丙基、3-(二氟甲硫基)丙基、3-(乙硫基)丙基、3-(呋喃-2-基甲硫基)-丙-1-基、3，3，3-三氟丙-1-基-硫基、3，3，3-三氟丙氧基、3，3-二氟烯丙基、3，3-二氟丁基、3，3-二氟丙基、3-[(环丙基)甲氧基]丙基、3-氰基丙-1-基、3-环己氧基丙基、3-环丙基-丙基、3-乙氧基亚氨基丙-1-基、3-乙硫基丙-1-基、3-氟丙氧基、3-氟丙氧基甲基、3-氟丙基、3-咪唑-1-基-丙-1-基、3-巯基丙硫基、3-甲氧基亚氨基-丙-1-基、3-甲基丁-1-基-硫基、3-甲基丁基、3-吡啶-4-基-烯丙基、3-吡啶-4-基-丙基、3-吡咯烷-2-酮基-丙-1-基、3-噻吩-2-基硫基丙-1-基、4-(甲氧基)丁基、4，4-二氟丁基、4，4-二氟戊基、4-氟丁氧基、5，5-二氟戊基、叠氮基、丁氧基、丁基、丁硫基、氯代基、环丁基甲基、环己基甲基、环丙基、环丙基甲基、乙基、乙硫基、氟代基、异丁基、甲基、间-甲基苄硫基、正丁硫基、邻，对-二氯苄硫基、戊氧基、戊基、对-氟苄硫基、对-氟苯硫基、对-甲基苄硫基；丙氧基、丙基、亚丙基(＝CHCH2CH3)、对-三氟甲氧基苄硫基、吡嗪-2-基-甲基-硫基、吡啶-2-基-甲基-硫基、吡啶-4-基-硫基和噻吩-2-基-甲硫基组成的组。
在另一种实施方式中，R9选自由2-(4-甲基噻唑-2-基)-乙-1-基、2-(5-乙基-异噁唑-3-基)-乙-1-基、2-[1，3]二硫戊环-2-基-乙-1-基、2-环丁基乙基、2-亚环丁基-乙基、2-环丙基-乙基、3-(二氟甲硫基)-丙-1-基、3-(呋喃-2-基甲硫基)-丙-1-基、3，3，3-三氟丙-1-基-硫基、3，3-二氟烯丙基、3，3-二氟-丙基、3-氰基丙-1-基、3-环丙基-丙基、3-乙氧基亚氨基丙-1-基、3-乙硫基丙-1-基、3-咪唑-1-基-丙-1-基、3-甲氧基亚氨基-丙-1-基、3-甲基丁-1-基-硫基、3-甲基丁基、3-吡啶-4-基-烯丙基、3-吡啶-4-基-丙基、3-噻吩-2-基硫基丙-1-基、4-丙基、叠氮基、丁基、丁硫基、环丁基甲基、环丙基、环丙基甲基、乙基、乙硫基、氟代基、甲基、正丁硫基、邻，对-二氯苄硫基、戊基、对-氟苯硫基、对-甲基苄硫基、丙基、亚丙基(＝CHCH2CH3)、吡嗪-2-基-甲基-硫基和噻吩-2-基-甲硫基组成的组。在一种实施方式中，至少一个R9基团不是氢。
在优选的实施方式中，R9是丙基。优选的R9基团可以在表I、II和III中找到。
在一种实施方式中，Z选自由氢、磷酸酯和棕榈酸酯组成的组。在一种实施方式中，Z是氢。在另一种实施方式中，Z是磷酸酯。在另一种实施方式中，Z是棕榈酸酯。
本发明化合物也包括式(I)、(II)、(IA)和(IB)的前体药物。这类前体药物包括这样的式(I)、(II)、(IA)和(IB)化合物，其中R6或者糖上羟基之一经过修饰，以包括选自磷酸酯、棕榈酸酯或
的取代基。
优选的前体药物包括这样的式(I)、(II)、(IA)和(IB)化合物，其中R6或者糖上羟基之一经过修饰，以包括选自
的取代基。
优选的式(I)、(II)、(IA)和(IB)化合物对至少一种选自以下的生物具有32μg/ml或以下的最小抑菌浓度：肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、粪肠球菌、屎肠球菌、流感嗜血杆菌、粘膜炎莫拉氏菌、大肠杆菌、脆弱拟杆菌、多形拟杆菌和艰难梭菌。
在一种实施方式中，式(I)、(II)、(IA)和(IB)化合物对至少一种选自以下的生物具有4μg/ml或以下的最小抑菌浓度：流感嗜血杆菌和粘膜炎莫拉氏菌。在一种实施方式中，式(I)、(II)、(IA)和(IB)化合物对至少一种选自以下的生物具有4μg/ml或以下的最小抑菌浓度：粪肠球菌和屎肠球菌。在一种实施方式中，式(I)、(II)、(IA)和(IB)化合物对至少一种选自以下的生物具有4μg/ml或以下的最小抑菌浓度：革兰氏阴性生物流感嗜血杆菌VHIN1003和流感嗜血杆菌VHIN1004。
本发明的另一方面是药物组合物，包含药学上可接受的载体和治疗有效量的本文所述化合物。
本发明的另一方面是治疗哺乳动物微生物感染的方法，包括对该哺乳动物给予治疗有效量的本文所述化合物。在一种实施方式中，所治疗的微生物感染是由一种或多种下列病原体所导致的：流感嗜血杆菌、粘膜炎莫拉氏菌、粪肠球菌和屎肠球菌。所给予的化合物可以被配制成本文所述药物组合物。化合物可以在药物组合物中以口服、肠胃外、透皮、局部、直肠或鼻内方式对哺乳动物给药。在一种实施方式中，化合物的给药量可以从约0.1至约100mg/kg体重/天。
本发明范围内的林可霉素包括如下表I所述式I那些，其中含氮环位置是以氮为“1”开始按逆时针方向连续编号的，即
表I
表I中，除非另有注解，当m是0或1时，R9取代基在4-位取代。
另外在本发明范围内的林可霉素衍生物包括如下表II所述式II那些，其中含氮环位置是如式(I)所编号的。
表II
另外在本发明范围内的林可霉素衍生物包括如下表III所述式III那些：
其中含氮环位置是如式(I)所编号的。
表III
| Ex.No. | R<sup>1</sup> | Z | R<sup>2</sup>/R<sup>3</sup> | R<sup>6</sup> | R<sup>9</sup> | m |
| 115 | 丙基 | -P(＝O)(OH)<sub>2</sub> | H/Me | H | 4-戊基 | 1 |
| 116 | 丙基 | -C(O)(CH<sub>2</sub>)<sub>14</sub>-CH<sub>3</sub> | H/Me | H | 4-戊基 | 1 |
| 117 | 丙基 | -P(＝O)(OH)<sub>2</sub> | H/Me | H | 4-丙基 | 1 |
| 118 | 丙基 | -C(O)(CH<sub>2</sub>)<sub>14</sub>-CH<sub>3</sub> | H/Me | H | 4-丙基 | 1 |
在上表I、II和III中，使用下列缩写：
S＝单键
D＝双键
D 4，5＝在4与5含氮环位之间的双键
Me＝甲基
Pr＝丙基
Bu＝丁基
i＝异-
t＝叔-
正如下文所用的，这些化合物是基于胺衍生物命名的，但是作为替代选择，这些化合物也可以基于1-硫代-L-苏-α-D-半乳-吡喃辛糖苷衍生物命名。
在本发明范围内优选的化合物包括下列化合物：
4-(3，3-二氟-烯丙基)-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3-吡啶-4-基-烯丙基)-吡咯烷-2羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3-吡啶-4-基-丙基)-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-丁硫基-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-乙硫基-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-乙硫基-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-1(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-乙硫基-吡咯烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-乙硫基-吡咯烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(4-甲基-苄硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(4-氟-苯硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3，3，3-三氟-丙硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3-甲基-丁硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(2，4-二氯-苄硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(噻吩-2-基甲硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(吡嗪-2-基甲硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(2，4-二氯-苄硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-丁硫基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-叠氮基-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-[3-(呋喃-2-基甲硫基)-丙-1-基]-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3-咪唑-1-基-丙-1-基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-[3-(噻吩-2-基硫基)-丙-1-基]-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3-乙硫基-丙-1-基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3-氰基-丙-1-基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3-二氟甲硫基-丙-1-基)-哌啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3-二氟甲硫基-丙基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(2-[1，3]二硫戊环-2-基-乙基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-[2-(4-甲基-噻唑-2-基)-乙基]-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3-甲氧基亚氨基-丙-1-基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3-乙氧基亚氨基-丙-1-基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-[2-(5-乙基-异噁唑-3-基)-乙基]-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-氟-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-氟-4-丙基-哌啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-氟-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-氟-4-丁基-吡咯烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-氟-4-乙基-哌啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-亚丙基-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-丙基-1，2，3，6-四氢-吡啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-丙基-1，2，3，6-四氢-吡啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
1-氨甲酰基甲基-4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
1-氰甲基-4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
1-(1H-咪唑-2-基甲基)-4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
1-亚氨甲基-4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
1-甲基-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-异丙硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-丙基-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-异丙硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
1-甲基-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[1-(6-叔丁硫基-3，4，5-三羟基-四氢-吡喃-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；
4-丙基-哌啶-2-羧酸[1-(6-叔丁硫基-3，4，5-三羟基-四氢-吡喃-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；
1-(5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲基)-5-丙基-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
2-[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基氨甲酰基]-5-丙基-氮杂环庚烷-1-羧酸5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲基酯；
5-甲基-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
5-乙基-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
5-环丙基甲基-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
5-环丙基-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
5-乙基-4-甲基-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-乙基-5-甲基-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
5-乙基-6-甲基-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-丙基-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
5-氟-5-丙基-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-丙基-1，2，3，6-四氢-吡啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-丁基-1，2，3，6-四氢-吡啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-氟-1-(2-羟基-乙基)-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-丁基-4-氟-哌啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(2-环丁基-乙基)-哌啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-环丙基甲基-吡咯烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-环丙基甲基-哌啶-2-羧酸(2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(2-亚环丁基-乙基)-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(2-亚环丁基-乙基)-吡咯烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(2-环丁基-乙基)-吡咯烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-环丁基甲基-哌啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
5-丙基-2，3，6，7-四氢-1H-氮杂
-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(2-环丙基-乙基)-吡咯烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-环丙基甲基-4-氟-哌啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
5-丙基-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
1-环丙基-5-丙基-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-丁基-1，2，3，6-四氢-吡啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
5-丙基-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-异丙硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
5-丙基-氮杂环庚烷-2-羧酸[1-(6-叔丁硫基-3，4，5-三羟基-四氢-吡喃-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；
3-环丙基甲基-氮杂环丁烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
3-(2-环丁基-乙基)-氮杂环丁烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
3-(2-环丙基-乙基)-氮杂环丁烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
3-(3-环丙基-丙基)-氮杂环丁烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
3-丙基-氮杂环丁烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
3-丁基-氮杂环丁烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
3-丁基-1-(2-羟基-乙基)-氮杂环丁烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
3-戊基-氮杂环丁烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
3-(3-甲基-丁基)-氮杂环丁烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
3-(3，3-二氟-丙基)-氮杂环丁烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
3-丁基-1-甲基-氮杂环丁烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
1-甲基-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[环丙基-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-甲基]-酰胺；
4-丙基-哌啶-2-羧酸[环丙基-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-甲基]-酰胺；
5-丙基-氮杂环庚烷-2-羧酸[环丙基-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-甲基]-酰胺；
4-丙基-哌啶-2-羧酸[苯基-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-甲基]-酰胺；
1-甲基-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[苯基-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-甲基]-酰胺；
4-丙基-哌啶-2-羧酸[环戊基-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-甲基]-酰胺；
1-甲基-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[环戊基-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-甲基]-酰胺；
5-丙基-氮杂环庚烷-2-羧酸[环戊基-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-甲基]-酰胺；
5-丙基-氮杂环庚烷-2-羧酸[1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丁基]-酰胺；
1-甲基-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丁-3-烯基]-酰胺；
4-丙基-哌啶-2-羧酸[1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丁-3-烯基]-酰胺；
4-丙基-哌啶-2-羧酸[1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丁基]-酰胺；
1-甲基-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[(4-氯-苯基)-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-甲基]-酰胺；
4-丙基-哌啶-2-羧酸[(4-氯-苯基)-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-甲基]-酰胺；
1-甲基-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丁基]-酰胺；
5-丙基-氮杂环庚烷-2-羧酸[(4-氯-苯基)-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-甲基]-酰胺；
4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-丙基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-丙基-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-丙基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-丙基-哌啶-2-羧酸{2-甲基-1-[3，4，5-三羟基-6-(2，2，2-三氟-乙硫基)-四氢-吡喃-2-基]-丙基}-酰胺；
4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[1-(6-乙氧基乙基-3，4，5-三羟基-四氢-吡喃-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；
1-(2-羟基-乙基)-4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-丙基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[1-(6-丁氧基-3，4，5-三羟基-四氢-吡喃-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；
4-丁基-1-甲基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-丙基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
磷酸一-(4，5-二羟基-6-{2-甲基-1-[(4-戊基-吡咯烷-2-羰基)-氨基]-丙基}-2-丙基-四氢-吡喃-3-基)酯；
十六烷酸4，5-二羟基-6-{2-甲基-1-[(4-戊基-吡咯烷-2-羰基)-氨基]-丙基}-2-丙基-四氢-吡喃-3-基酯；
磷酸一-(4，5-二羟基-6-{2-甲基-1-[(4-丙基-吡咯烷-2-羰基)-氨基]-丙基2-丙基-四氢-吡喃-3-基)酯；
十六烷酸4，5-二羟基-6-{2-甲基-1-[(4-丙基-吡咯烷-2-羰基)-氨基]-丙基}-2-丙基-四氢-吡喃-3-基酯；
1-(5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲基)-4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-丙基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
2-[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-丙基-四氢-吡喃-2-基)-丙基氨甲酰基]-4-戊基-吡咯烷-1-羧酸5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲基酯；
1-(5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲基)-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸(2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-丙基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
2-[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-丙基-四氢-吡喃-2-基)-丙基氨甲酰基]-4-丙基-吡咯烷-1-羧酸5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲基酯；
4-丙基-吡咯烷-2-羧酸{2-甲基-1-[3，4，5-三羟基-6-(2-羟基-乙基)-四氢-吡喃-2-基]-丙基}-酰胺；
4-丙基-吡咯烷-2-羧酸{2-甲基-1-[3，4，5-三羟基-6-(3-羟基-丙基)-四氢-吡喃-2-基]-丙基}-酰胺；
4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-羟甲基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-丙基-吡咯烷-2-羧酸{2-甲基-1-[3，4，5-三羟基-6-(2-甲硫基-乙基)-四氢-吡喃-2-基]-丙基}-酰胺；
4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[1-(6-环丙基甲基-3，4，5-三羟基-四氢-吡喃-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；
或者其前体药物和/或药学上可接受的盐。
另外在本发明范围内的化合物包括：
4-(噻吩-2-基甲硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(4-氟-苄硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(4-甲基-苄硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(吡啶-2-基甲硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(吡嗪-2-基甲硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-氟-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(2，4-二氯-苄硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-丁硫基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3，3-二氟-烯丙基)-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
1-氨甲酰基甲基-4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
1-氰甲基-4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3-吡啶-4-基-烯丙基)-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3-吡啶-4-基-丙基)-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
1-(2-甲氧基-乙基)-4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
1-(1H-咪唑-2-基甲基)-4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
1-(2-甲酰氨基-乙基)-4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
1-(2-氨基-乙基)-4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3-环己氧基-丙基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
{2-[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基氨甲酰基]-4-戊基-吡咯烷-1-基}-乙酸甲基酯；
1-甲基氨甲酰基甲基-4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(2-[1，3]二硫戊环-2-基-乙基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
1-亚氨甲基-4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-[3-(呋喃-2-基甲硫基)-丙基]-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3-咪唑-1-基-丙基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-[3-(噻吩-2-基硫基)-丙基]-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3-咪唑-1-基-丙基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-[3-(2-氧代-吡咯烷-1-基)-丙基]-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-[2-(4-甲基-噻唑-2-基)-乙基]-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3-甲氧基亚氨基-丙基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-[2-(4-乙基-噻唑-2-基)-乙基]-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3-乙硫基-丙基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3-乙氧基亚氨基-丙基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-吡咯-1-基甲基-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
2-[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基氨甲酰基]-4-丙基-哌啶-1-羧酸9H-芴-9-基甲基酯；
2-[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基氨甲酰基]-4-丙基-哌啶-1-羧酸乙基酯；
4-(3-氰基-丙基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
2-[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基氨甲酰基]-4-丙基-哌啶-1-羧酸苯基酯；
2-[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基氨甲酰基]-4-丙基-哌啶-1-羧酸苯基酯；
4-(2-[1，2，3]三唑-1-基-乙基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-亚丙基-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
1-(5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲基)-4-丙基-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-氟-4-丙基-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-氟-4-丙基-哌啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-氟-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-氟-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-氟-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-氟-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3-二氟甲硫基-丙基)-哌啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-丙基-1，2，3，6-四氢-吡啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-丙基-1，2，3，6-四氢-吡啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3-二氟甲硫基-丙基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[1-(6-乙氧基甲基-3，4，5-三羟基-四氢-吡喃-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺；
或者其前体药物和/或药学上可接受的盐。
另外的本发明化合物包括：
磷酸一-(6-{2-氯-1-[(5-丙基-氮杂环庚烷-2-羰基)-氨基]-丙基}-4，5-二羟基-2-甲硫基-四氢-吡喃-3-基)酯；
磷酸一-(6-{2-氯-1-[(5-氟-5-丙基-氮杂环庚烷-2-羰基)-氨基]-丙基}-4，5-二羟基-2-甲硫基-四氢-吡喃-3-基)酯；
磷酸一-(6-{2-氯-1-[(5-环丙基甲基-氮杂环庚烷-2-羰基)-氨基]-丙基}-4，5-二羟基-2-甲硫基-四氢-吡喃-3-基)酯；
磷酸一-(6-{2-氯-1-[(4-氟-4-丙基-哌啶-2-羰基)-氨基]-丙基}-4，5-二羟基-2-甲硫基-四氢-吡喃-3-基)酯；
十六烷酸6-{2-氯-1-[(5-丙基-氮杂环庚烷-2-羰基)-氨基]-丙基}-4，5-二羟基-2-甲硫基-四氢-吡喃-3-基酯；
十六烷酸6-{2-氯-1-[(5-氟-5-丙基-氮杂环庚烷-2-羰基)-氨基]-丙基}-4，5-二羟基-2-甲硫基-四氢-吡喃-3-基酯；
十六烷酸6-{2-氯-1-[(5-环丙基甲基-氮杂环庚烷-2-羰基)-氨基]-丙基}-4，5-二羟基-2-甲硫基-四氢-吡喃-3-基酯；和
十六烷酸6-{2-氯-1-[(4-氟-4-丙基-哌啶-2-羰基)-氨基]-丙基}-4，5-二羟基-2-甲硫基-四氢-吡喃-3-基酯。
另外的本发明化合物包括：
2-[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基氨甲酰基]-5-丙基-氮杂环庚烷-1-羧酸5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲基酯；
2-[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基氨甲酰基]-5-氟-5-丙基-氮杂环庚烷-1-羧酸5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲基酯；
5-氟-1-(5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲基)-5-丙基-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
5-环丙基甲基-1-(5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲基)-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
2-[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基氨甲酰基]-5-环丙基甲基-氮杂环庚烷-1-羧酸5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲基酯；
2-[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基氨甲酰基]-4-氟-4-丙基-哌啶-1-羧酸5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲基酯；和
4-氟-1-(5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲基)-4-丙基-哌啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺。
如本文所定义的化合物、其前体药物和药学上可接受的盐可以具有对抗细菌、原生动物、真菌和/或寄生虫的活性。
另一方面，本发明提供药物组合物，包含药学上可接受的载体和治疗有效量的如本文所定义的化合物。本发明的药物组合物可以进一步包含一种或多种另外的抗菌剂。在一种实施方式中，一种或多种另外的抗菌剂可以是对革兰氏阴性细菌有活性的。在一种实施方式中，一种或多种另外的抗菌剂可以是对革兰氏阳性细菌有活性的。在另一种实施方式中，至少一种抗菌剂可以是对革兰氏阴性和革兰氏阳性细菌都有活性的。
在其一个方法方面，本发明涉及治疗哺乳动物微生物感染的方法，包括对该哺乳动物给予治疗有效量的本发明化合物。本发明化合物可以在药物组合物中以口服、肠胃外、透皮、局部、直肠或鼻内方式对哺乳动物给药。
在其另一个方法方面，本发明涉及治疗哺乳动物微生物感染的方法，包括对该哺乳动物给予包含治疗有效量本发明化合物的药物组合物。本发明的药物组合物可以进一步包含一种或多种另外的抗菌剂。在一种实施方式中，一种或多种另外的抗菌剂可以是对革兰氏阴性细菌有活性的。在一种实施方式中，一种或多种另外的抗菌剂可以是对革兰氏阳性细菌有活性的。药物组合物可以以口服、肠胃外、透皮、局部、直肠或鼻内方式对哺乳动物给药。
在优选的实施方式中，所治疗的微生物感染是革兰氏阳性感染。在另一种实施方式中，感染可以是革兰氏阴性感染。在进一步的实施方式中，感染可以是分枝杆菌感染、支原体感染或衣原体感染。
在另一方面，本发明提供新颖的制备本文所述化合物的中间体和方法。
发明的详细说明
如上所述，本发明涉及林可霉素衍生物，它们表现抗菌活性，特别是革兰氏阳性抗菌活性。在一些实施方式中，所述新颖的林可霉素衍生物表现对抗革兰氏阳性与厌氧菌病原体的抗菌活性。惊人地，本文所述经过选择的新颖的林可霉素化合物与已知化合物例如克林霉素相比，表现出对抗肠球菌的非典型效力，例如屎肠球菌和粪肠球菌，和/或对抗苛养的革兰氏阴性病原体的非典型效力，例如流感嗜血杆菌。不过，在进一步详细描述本发明之前，将首先定义下列术语。
必须注意，正如本文和所附权利要求书所用的，单数形式“一个”、“一种”和“该”包括复数形式，上下文另有明显指示除外。因而例如，对“药学上可接受的载体”的称谓包括多种这类载体；对“另外的抗菌剂”的称谓是对一种或多种药物及其本领域技术人员已知的等价物的称谓，等等。
定义
除非另有规定，用在说明书和权利要求书中的下列术语具有下文给出的含义：
“酰基”表示基团-C(O)R14，其中R14是氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基或取代的杂环基。
“酰基氨基”表示-NRaC(O)R14，其中Ra和R14是如上所定义的。
“烯基”表示二至八个碳原子的直链不饱和一价烃基或者三至八个碳原子的支链一价烃基，含有至少一条双键(-C＝C-)，优选1-2条双键。烯基的实例包括但不限于烯丙基、乙烯基、2-丁烯基等。
“烷氧基”表示基团“烷基-O-”，例如包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基、正戊氧基、正己氧基、1，2-二甲基丁氧基等。
“烷基”表示一至八个碳原子的直链饱和一价烃基或者三至八个碳原子的支链饱和一价烃基。烷基的实例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基等。
“亚烷基”表示一至八个碳原子的直链二价烃基或者三至八个碳原子的支链二价烃基。亚烷基的实例包括但不限于亚甲基、亚乙基、2-甲基亚丙基等。
“烷硫基”表示基团“烷基-S-”，其中烷基是如本文所定义的，例如包括甲硫基、丁硫基等。
“炔基”表示二至八个碳原子的直链一价烃基或者三至八个碳原子的支链一价烃基，含有至少一条叁键(-C≡C-)，优选单一的叁键。炔基的实例包括但不限于乙炔基、丙炔基、2-丁炔基等。
“氨基”或“取代的氮”表示基团“-NRaRb”，其中Ra和Rb独立地是氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、环烷基、取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基、取代的杂环基，或者其中Ra和Rb与它们所键合的氮原子一起构成杂环。
“氨基酰基”表示-C(O)NRaRb。
“氨基羰基烷基”表示基团“-RcC(O)NRaRb”，其中Rc是亚烷基，Ra和Rb是如上所定义的。
“芳基”表示6至14个环原子的一价单环或二环芳族碳环基团。实例包括但不限于苯基、萘基和蒽基。芳基环可以可选地与5-、6-或7-元单环非芳族环稠合，后者可选地含有1或2个独立选自氧、氮或硫的杂原子，其余环原子是C，其中一个或两个C原子可选地被羰基代替。带有稠合环的代表性芳基包括但不限于2，5-二氢苯并[b]氧杂
、2，3-二氢苯并[1，4]二噁烷、苯并二氢吡喃、异苯并二氢吡喃、2，3-二氢苯并呋喃、1，3-二氢异苯并呋喃、苯并[1，3]二氧杂环戊烯、1，2，3，4-四氢异喹啉、1，2，3，4-四氢喹啉、2，3-二氢-1H-吲哚、2，3-二氢-1H-异吲哚、苯并咪唑-2-酮、2H-苯并噁唑-2-酮等。
“羧基”表示基团“C(O)OH”。
“氰基烷基”表示被一个或多个氰基(-CN)取代的烷基，其条件是在同一碳原子上只存在单一的氰基。氰基烷基的实例例如包括氰甲基、2-氰基乙基、2-氰基丙基等。
“环烷基”表示3至8个环原子的环状饱和烃基。环烷基的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基等。
“环烷基烷基”表示基团-RcRd，其中Rc是亚烷基，Rd是环烷基，都是如上所定义的。实例包括但不限于环丙基亚甲基、环己基亚乙基等。
“卤代”或“卤素”表示氟、氯、溴或碘。
“卤代烷基”表示被一个或多个、优选一至六个相同或不同的卤原子取代的烷基。卤代烷基的实例例如包括三氟甲基、3-氟丙基、2，2-二氯乙基等。
“杂芳基”表示5至10个环原子的一价单环或二环芳族基团，含有1、2或3个选自N、O或S的环杂原子，其余环原子是C。
“杂环”或“杂环基”表示这样一种饱和或不饱和的基团，具有单一的环或多个稠合的环，在环内具有1至10个碳原子和1至4个选自氮、氧或S(O)q(其中q是0、1或2)的杂原子，其中在稠合环系中，一个或多个环可以是芳基或杂芳基。
杂环和杂芳基的实例包括但不限于氮杂环丁烷、吡咯、咪唑、吡唑、吡啶、吡嗪、嘧啶、哒嗪、吲嗪、异吲哚、吲哚、二氢吲哚、吲唑、嘌呤、喹嗪、异喹啉、喹啉、酞嗪、萘啶、喹喔啉、喹唑啉、噌啉、蝶啶、咔唑、咔啉、菲啶、吖啶、菲咯啉、异噻唑、吩嗪、异噁唑、吩噁嗪、吩噻嗪；咪唑烷、咪唑啉、哌啶、哌嗪、吲哚啉、酞酰亚胺、1，2，3，4-四氢异喹啉、4，5，6，7-四氢苯并[b]噻吩、噻唑、噻唑烷、噻吩、苯并[b]噻吩、吗啉基、硫代吗啉基(也称为噻吗啉基)、哌啶基、吡咯烷、四氢呋喃基等。
“羟基”表示基团-OH。
“羟基烷基”表示被一个或多个-OH基团取代的烷基，其条件是在同一碳原子上只存在单一的羟基(-OH)。羟基烷基的实例例如包括羟甲基、2-羟基乙基、2-羟基丙基等。
“哺乳动物”表示所有哺乳动物，包括人类、家畜和宠物。
“可选的”或“可选地”意味着随后描述的事件或情形可以但是不必发生，并且该说明包括其中该事件或情形发生的情形和不发生的情形。例如，“可选被烷基单-或二-取代的芳基”意味着烷基可以但是不必存在，并且该说明包括其中芳基被烷基单-或二-取代的情形和其中芳基不被烷基取代的情形。
“药学上可接受的载体”表示这样一种载体，它可用于制备药物组合物，一般是安全、无毒的，在生物学上和其他方面都不是不可取的，包括可为兽医用途以及人类药用所接受的载体。用在说明书和权利要求书中的“药学上可接受的载体”包括一种和一种以上这样的载体。
化合物的“药学上可接受的盐”表示这样一种盐，它是药学上可接受的，并且具备母体化合物的所需药理活性。这样的盐包括：
(1)酸加成盐，与无机酸生成，例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等；或者与有机酸生成，例如乙酸、丙酸、己酸、环戊烷丙酸、乙醇酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、苹果酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1，2-乙二磺酸、2-羟基乙磺酸、苯磺酸、4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟脑磺酸、4-甲基二环[2.2.2]辛-2-烯-1-羧酸、葡庚酸、4，4’-亚甲基双(3-羟基-2-烯-1-羧酸)、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、月桂基硫酸、葡糖酸、谷氨酸、羟萘甲酸、水杨酸、硬脂酸、粘酸等；或者
(2)当存在于母体化合物中的酸性质子被金属离子、例如碱金属离子、碱土金属离子或铝离子代替，或者与有机碱、例如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、N-甲基葡糖胺等配位化合时所生成的盐。
“前体药物”表示任意这样的化合物，当这类前体药物对哺乳动物受治疗者给药时，在体内释放根据本发明化合物的活性母体药物。通过以这样一种方式修饰存在于本发明化合物中的官能团，制备本发明化合物的前体药物，以便这些修饰可以在体内裂解，释放母体化合物。前体药物包括这样的本发明化合物，其中化合物中的羟基、巯基或氨基与任意可以在体内裂解的基团键合，以分别再生游离的羟基、巯基或氨基。前体药物的实例包括但不限于本发明化合物中羟基官能团的酯(例如乙酸酯、甲酸酯、棕榈酸酯和苯甲酸酯衍生物)、氨基甲酸酯(例如N，N-二甲氨基羰基)等。优选的前体药物取代基包括下列与五或六元含氮杂环N-位连接的取代基：磷酸酯、棕榈酸酯或者
“取代的烷基”表示具有1-3个取代基的如上所定义的烷基，所述取代基独立地选自由氰基、卤素(即Cl、Br、F或I)、酰基、取代的氧、羟基、烷硫基、取代的烷硫基、环烷基、取代的环烷基、氨基羰基烷基、羧基、-C(O)H、-C(O)OR15(其中R15是烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基等)、-C(O)NRaRb、取代的氮、＝N-OR7(其中R7是氢或烷基)、-SH、-S(O)qR16(其中q是0、1或2，R16是烷基、卤代烷基、芳基、杂芳基、杂环基和被芳基、杂芳基、环烷基和杂环基取代的烷基)、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基组成的组。取代的烷基的实例包括但不限于1-氟乙基、1-氯乙基、2-氟乙基、2-氯乙基、1-溴丙基、2-碘丙基、1-氯丁基、4-氟丁基、4-氯丁基、2-乙氧基乙-1-基、-CH2-S(O)2-CH3等。
“取代的烯基”表示如上所定义的烯基，其中一个或多个氢原子、优选1至3个氢原子已被对取代的烷基所定义的取代基所代替。
“取代的炔基”表示如上所定义的炔基，其中一个或多个氢原子、优选1至3个氢原子已被对取代的烷基所定义的取代基所代替。
“取代的烷硫基”表示基团-S-取代的烷基，其中取代的烷基是如上所定义的，例如包括2-羟基乙硫基等。
“取代的烷氧基”表示基团-O-取代的烷基，其中取代的烷基是如上所定义的。
“取代的芳基”表示被一个或多个取代基取代的芳基环，优选一至三个取代基，选自由烷基、取代的烷基、烷硫基、取代的烷硫基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、卤代基、烷氧基、取代的烷氧基、酰基、氨基、酰基氨基、酰基氨基、环烷基、取代的环烷基、环烷基烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基、取代的杂环基、羟基、羧基、-C(O)OR15、-C(O)NRaRb、氰基、硝基和硫烷基烷基(sulfanylalkyl)组成的组。芳基环可以可选地与5-、6-或7-元单环非芳族环稠合，后者可选地含有1或2个独立选自氧、氮或硫的杂原子，其余环原子是C，其中一个或两个C原子可选地被羰基代替。
“取代的环烷基”表示被烷基或者如上关于取代的烷基所定义的基团取代的环烷基。代表性实例包括但不限于2-环丙基乙基、3-环丁基丙基、4-环戊基丁基、4-环己基丁基等。
“取代的杂芳基”表示被一个或多个取代基取代的杂芳基环，优选一至三个取代基，选自如上关于取代的芳基所定义的基团。
“取代的杂环基”表示独立被1至3个与对取代的环烷基所定义相同的取代基取代的杂环基团。
“取代的氧”表示基团“-O-Rd”，其中Rd是烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、环烷基、取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基或取代的杂环基。
“取代的苯基”表示具有1至3个选自关于取代的芳基所定义的基团的取代基的苯基。
“硫烷基烷基(sulfanylalkyl)”表示被一个或多个-SH基团取代的烷基，其条件是如果存在两个巯基，它们不都在同一碳原子上。硫烷基烷基的实例例如包括硫烷基甲基、2-硫烷基乙基、2-硫烷基丙基等。
“治疗有效量”表示化合物在对哺乳动物给药治疗疾病时足以实现这类疾病治疗的量。“治疗有效量”将因化合物、疾病及其严重性、所治疗哺乳动物的年龄、体重等而异。
“治疗”疾病或疾病的“治疗”包括：
(1)预防疾病，也就是在可能暴露于疾病或有患病倾向但是尚未经历或显示疾病症状的哺乳动物中导致疾病临床症状不发生，
(2)抑制疾病，也就是阻止或减轻疾病或其临床症状的发展，或者
(3)缓解疾病，也就是导致疾病或其临床症状的消退。
本发明化合物一般是按照IUPAC或CAS命名系统命名的。可以使用本领域普通技术人员熟知的缩写(例如“Ph”表示苯基，“Me”表示甲基，“Et”表示乙基，“h”表示小时，“rt”表示室温)。
除非另有定义，本文所用所有技术和科学术语具有与本发明所属领域普通技术人员所普遍理解的相同含义。
在描述本发明组合物和方法之前，需要理解本发明不限于所述特定的方法、方案、测定法和试剂，这些都可以改变。也需要理解本文所用术语打算描述本发明的特定实施方式，绝不打算限制如所附权利要求所述的本发明范围。
尽管任何与本文所述那些相似或等同的方法和材料都可以用于本发明的实施或测试，不过现在描述优选的方法、装置和材料。本文引用的所有出版物都全文引入在此作为参考，目的是描述和公开在这些出版物中报道的方法、试剂和工具，它们可能用于本发明。本文不被解释为承认本发明无权凭借在先发明而先于这类公开。
除非另有指示，本发明的实施将采用本领域技术能力之内的化学、生物化学、分子生物学、细胞生物学和药理学的常规方法。这类技术在文献中有充分解释。
通用合成流程
本发明化合物可以借助下示反应流程所述方法加以制备。
用于制备这些化合物的原料和试剂是可从供应商获得的，例如Toranto Research Chemicals(North York，ON Canada)、AldrichChemical Co.(Milwaukee，Wisconsin，USA)、Bachem(Torrance，California，USA)、Emka-Chemie或Sigma(St.Louis，Missouri，USA)，或者是按照参考文献所述工艺借助本领域技术人员已知的方法制备的，例如Fieser and Fieser′s Reagents for Organic Synthesis，Volumes 1-15(John Wiley and Sons，1991)、Rodd′s Chemistry ofCarbon Compounds，Volumes 1-5 and Supplementals(ElsevierScience Publishers，1989)、Organic Reactions，Volumes 1-40(John Wiley and Sons，1991)、March′s Advanced Organic Chemistry，(John Wiley and Sons，4th Edition)和Larock′s ComprehensiveOrganic Trans formations(VCH Publishers Inc.，1989)。这些流程仅仅是对一些能够合成本发明化合物的方法的说明，可以对这些流程进行多种不同的改进，参照本文内容将对本领域技术人员有所提示。
正如将为本领域技术人员所显而易见的，常规保护基团可能是必要的，以防止某些官能团经历不需要的反应。适合于不同官能团的保护基团以及适合于保护与去保护特定官能团的条件是本领域熟知的。例如，大量保护基团描述在T.W.Greene and G.M.Wuts，ProtectingGroups in Organic Synthesis，Second Edition，Wiley，New York，1991和其中引用的参考文献中。
如果需要的话，可以利用常规技术分离和纯化反应的原料和中间体，包括但不限于过滤、蒸馏、结晶、色谱等。可以利用常规手段表征这类材料，包括物理常数和光谱数据。
本发明化合物通常将含有一个或多个手性中心。因此，如果需要的话，这类化合物可以被制备或分离为纯的立体异构体。所有这类立体异构体(和所富集的混合物)都包括在本发明范围内，另有指示除外。例如，可以使用本领域熟知的旋光活性原料或立体选择性试剂制备纯的立体异构体(或所富集的混合物)。作为替代选择，例如，可以利用手性柱色谱、手性拆分剂等分离这类化合物的外消旋混合物。
本发明化合物的制备
一般而言，为了制备本发明的式(I)化合物，使适当7-取代的林可胺(lincosamine)中间体和适当取代的吡咯烷基、哌啶基、氮杂环丁烷基或氮杂环庚烷羧酸在反应条件下缩合，优选地在惰性有机溶剂中，在偶联剂和有机碱的存在下。这种反应可以利用任意数量的已知偶联试剂进行，例如O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HATU)、1-羟基苯并三唑水合物(HOBT)与碳二亚胺、氯甲酸异丁酯等。适合的有机碱包括二异丙基乙胺(DIEA)、三乙胺(TEA)、吡啶、N-甲基吗啉等。可以使用的适合的惰性有机溶剂例如包括N，N-二甲基甲酰胺、乙腈、二氯甲烷等。这种反应通常是使用过量于林可胺的羧酸进行的，温度在约0℃至约50℃的范围内。反应持续直至完成，这通常发生在约2至12小时内。
如本发明所定义的适当7-取代的林可胺中间体(即R2/R3)是借助本领域技术人员熟知的方法、从甲基6-氨基-6，8-二脱氧-1-硫代-赤-α-D-半乳-吡喃辛糖苷合成的，后者可以如Hoeksema，H.et.al.Journal of the American Chemical Society，1967，89 2448-2452所述制备。7-取代的林可胺中间体的说明性合成如下流程1-6所示。
另外如本发明所定义的适当7-取代的林可胺中间体(即R2/R3)是借助本领域技术人员熟知的方法、从甲基6-氨基-6，8-二脱氧-1-硫代-赤-α-D-半乳-吡喃辛糖苷合成的，正如下列文献所公开的：美国专利No.3,086,912(R2＝OH，R3＝H)、美国专利No.3,496,136、美国专利No.3,502,646或优选欧洲专利No.0161794(R2＝卤素，R3＝H)、美国专利No.3,179,565(R2＝SR，R3＝H)、美国专利No.3,544,551(R2＝SH，R3＝H)。
如本发明所定义的适当取代的吡咯烷基或哌啶基羧酸中间体(即R9)也是借助本领域技术人员熟知的方法、从脯氨酸和吡啶合成的。可以用在本发明羧酸中间体合成中的脯氨酸和吡啶例如包括4-氧代脯氨酸和4-取代的吡啶。用在合成中的脯氨酸和吡啶是可从供应商获得的，例如Aldrich和Sigma。作为替代选择，这些脯氨酸和吡啶可以借助本领域熟知的方法制备。适当取代的吡咯烷基或哌啶基羧酸中间体的说明性合成如下流程7-12所示。
下列流程1说明林可胺中间体1c的通用合成，其中P是N-保护基团，优选Cbz或Boc，R1是如式(I)所定义的。
流程1：林可胺中间体1c的通用合成
(a)N-保护(Boc，Cbz)；(b)O-甲硅烷基保护(TMS)；(c)Swern氧化
如流程1所示，如Hoeksema，H.et.al.Journal of the AmericanChemical Society，1967，89，2448-2452所述制备甲基6-氨基-6，8-二脱氧-1-硫代-赤-α-D-半乳-吡喃辛糖苷1a。然后将产物1a的氨基官能团和羟基官能团用适合的保护基团保护。加入二碳酸二叔丁酯、N-(苄氧羰基氧基)琥珀酰亚胺等，可以生成适合的N-保护基团(P)。羟基可以被保护为甲硅烷基醚。可以在适当的有机碱的存在下，例如三乙胺，与N，O-双(三甲代甲硅烷基)三氟乙酰胺反应，使羟基转化为三甲代甲硅烷基(TMS)醚，或者在有机碱的存在下，例如三乙胺，转化为三甲代甲硅烷基氯。N-保护通常是在O-保护之前完成的。蒸发溶剂后，粗产物经过二氧化硅色谱处理，得到被保护的产物1b。
将1b的7-O-三甲代甲硅烷基化学选择性地去保护和氧化，得到7-酮基-林可胺衍生物1c。这种选择性转化作用是这样进行的，在惰性有机溶剂中，例如二氯甲烷，向二甲基亚砜和草酰氯加入被保护的产物1b，继之以适当的有机碱，例如三乙胺。作为替代选择，转化作用可以这样进行，在惰性有机溶剂中，向二甲基亚砜和适当的活化剂、例如三氟乙酸酐加入1b。反应通常是在大约-70℃的温度下进行的。将所得反应混合物在低温下搅拌，然后升温至大约-50℃。在这种第二温度下维持反应达大约1h至3h。向反应混合物加入适合的有机碱，例如TEA、吡啶等。反应混合物经过适当处理，得到产物1c。用在1b向1c转化中的通用条件类别在本领域中被称为Swern氧化条件。
下列流程2说明林可胺中间体2b的通用合成，其中P是N-保护基团，优选Cbz或Boc，R3是氢，R2’与R2一致，是如式(I)所定义的，R1是如式(I)所定义的。
流程2：林可胺中间体2b的通用合成
(a)Wittig烯化(R2’CH2Ph3 +X-或R2’CH2PO(OEt)2，碱，溶剂)；(b)H2/Pd，(c)Global去保护
如流程2所示，利用Wittig或Horner-Wadsworth-Emmons反应使酮基-林可胺中间体1e反应，生成烯。在这种反应中，将适合的鏻盐或膦酸酯用强碱去保护，生成磷内鎓盐。可以使用的适合的鏻盐是烷基三苯基鏻卤化物，这可以借助三苯膦与烷基卤的反应制备。适合的磷化合物例如包括甲基三苯基鏻溴化物、二乙基(氰甲基)膦酸酯等。可以用于生成内鎓盐的适合的强碱包括有机锂试剂、叔丁醇钾等。磷内鎓盐的生成通常是这样进行的，在惰性气氛下，例如N2，在惰性有机溶剂中，例如甲苯、THF等，在低温下。
磷内鎓盐的生成之后，向反应加入产物1c。反应可以适宜地在-40℃与室温之间的温度下进行，搅拌直至完成，通常1至4小时。所得有机溶液经过处理，粗产物经过二氧化硅色谱处理，得到烯产物2a。
然后氢化产物2a，得到饱和产物2b。氢化作用通常是这样进行的，在极性有机溶剂中，例如甲醇、乙醇等，在Parr瓶中使用10％披钯碳。将瓶子用H2净化和充气至大约50至70psi，摇动直至完成，通常大约12至24h。将所得反应混合物过滤，例如通过C盐，用极性有机溶剂清洗，例如甲醇。有机溶液经过如下处理，转移至含有干燥的、经过洗涤的Dowex 50w-400x H+型的树脂漏斗，摇动。用甲醇和水洗涤树脂后，用含5％TEA的MeOH洗涤，从树脂上洗脱产物2b。产物也可以经过硅胶柱色谱纯化。
流程3说明林可胺中间体3b的通用合成，其中P是N-保护基团，优选Cbz或Boc，R2或R3之一是烷基，另一个是-OH，R1是如式(I)所定义的。
流程3：林可胺中间体3b的通用合成
(a)R2M(碳亲核试剂)；(b)(i)TMS去保护(H+或F-)和(ii)N-去保护
如流程3所示，在适合的惰性有机溶剂中，向7-酮基林可胺中间体1c加入适合的碳亲核试剂，得到7-羟基林可胺中间体3b。适合的碳亲核试剂包括氯化甲基镁、二乙基锌、乙炔钠等，可以使用的适合的惰性有机溶剂包括THF、二乙醚、甲苯等。反应通常在减压下、大约0℃下进行约3至5h。然后将反应用饱和酸性水溶液猝灭，例如饱和含水NH4Cl/H2O。经过猝灭的混合物然后经过处理，可以经过色谱纯化，得到产物3b。
下列流程4说明林可胺中间体4b的通用合成，其中P是N-保护基团，优选Boc，R1是如式(I)所定义的，R2/R3是肟(＝NOR7)，其中R7是如式(I)所定义的。
流程4：7-肟-林可胺4b的通用合成
(a)H2NOR7.HCl，吡啶，EtOH(b)TFA
如流程4所示，在适合的试剂的存在下搅拌，例如O-三甲代甲硅烷基羟胺、O-烷基羟胺盐酸盐(例如O-甲基羟胺盐酸盐)等，使林可胺中间体1c转化为肟。反应通常是在极性有机溶剂中进行的，例如甲醇。反应可以适宜地在室温下进行大约8至24h。除去溶剂，得到N-保护的产物4a。
保护基团的除去可以用酸进行，例如三氟乙酸(TFA)、盐酸、对-甲苯磺酸等，在惰性有机溶剂例如二氯甲烷、二氯乙烷、二噁烷、THF等中。除去作用通常是在低温下进行的，例如0℃，然后逐渐升温至室温，得到产物4b。
下列流程5说明林可胺中间体5b的通用合成，其中R2和R3都是氟，P是N-保护基团，优选Cbz或Boc，R1是如式(I)所定义的。
流程5：7-脱氧-7，7-二氟林可胺5b的通用合成
(a)F-；(b)Ac2O，吡啶，DMAP；(c)DAST；(d)TFA
如流程5所示，在惰性有机溶剂中使林可胺中间体1c与适合的氟化物接触。可以使用的适合的氟化物包括氟化四丁基铵、Amberlite树脂A-26F-型、HF·吡啶等。适合的惰性有机溶剂包括THF、乙腈、二氯甲烷、二噁烷等。反应可以适宜地在室温下进行约1至2h。产物(没有显示)可以经过硅胶柱纯化。
在惰性有机溶剂与有机碱的适合混合物中，例如二氯甲烷与吡啶，借助与乙酸酐和二甲氨基吡啶(DMAP)接触，转化从柱子上所得产物上的O-保护基团。反应可以适宜地在室温下进行约6至12小时。产物可以经过硅胶柱纯化，得到产物5a。
使产物5a与适合的氟化试剂接触，然后除去N-保护基团，得到产物5b。可以使用的适合的氟化试剂例如包括三氟化二甲氨基硫、三氟化[双(2-甲氧基乙基)氨基]硫等。反应通常是这样进行的，在惰性有机溶剂中，例如二氯甲烷、乙酸乙酯、THF等，在室温下，时间大约6至12h。
保护基团的除去可以用酸进行，例如三氟乙酸(TFA)、盐酸、对-甲苯磺酸等，在惰性有机溶剂例如二氯甲烷、二氯乙烷、二噁烷、THF等中。除去通常是在低温下进行的，例如0℃，然后逐渐升温至室温，得到产物5b。
下列流程6说明林可胺中间体6b的通用合成，其中P是N-保护基团，优选三氟酰基，R2和R3之一是氢，另一个是Cl、Br或I，R1是如式(I)所定义的。
流程6：7-脱氧-7-卤代林可胺6b的通用合成
(a)三氟乙酸甲酯，三乙胺；(b)卤化试剂(即PPh3X2，其中X＝Cl，Br，I或优选1-N-(卤代亚甲基)哌啶盐)；(c)含水碱(即KOH，氨水)
如流程6所示，在碱的存在下，在适合的有机溶剂中，将林可胺中间体1a用适合的三氟酰化试剂N-保护。适合的三氟酰化试剂包括三氟乙酸甲酯、三氟硫代乙酸乙酯、三氟乙酸酐等。适合的有机溶剂包括甲醇、THF、乙腈、二氯甲烷、二噁烷等。反应可以适宜地在环境温度下进行约2至4h。被保护的林可酰胺(lincosamide)中间体6a可以经过结晶纯化，或者直接用于随后的反应。
被保护的中间体6a的7-位卤化作用是这样完成的，与适合的Rydon试剂接触，如Magerlein，B.J.；Kagen，F.Journal ofMedicinal Chemistry，1969，12，780-784所述，或者与酰胺卤化物盐接触，如欧洲专利No.0161794所述。适合的Rydon试剂包括三苯基磷杂环戊二烯二氯化物、三苯基磷杂环戊二烯二溴化物等，在惰性有机溶剂例如乙腈、二氯甲烷、二氯乙烷或甲苯中。适合的卤代酰胺盐试剂包括1-N-(氯代亚甲基)哌啶氯化物、1-N-(氯代亚甲基)-N-甲基methaninium氯化物等，在惰性有机溶剂例如乙腈、二氯甲烷、二氯乙烷或甲苯中。反应通常是这样进行的，在大约24℃至70℃的温度下，时间16至24h，使用过量的卤化试剂。卤化产物加合物的水解(没有显示)和在含水碱中除去保护基团得到7-脱氧-7-卤代林可酰胺中间体6b。适合的碱是NaOH、KOH和浓氨在水或者水与混溶性有机溶剂混合物中的溶液，所述有机溶剂例如甲醇、乙腈、四氢呋喃、二噁烷等。反应通常是在使粗7-脱氧-7-卤代林可酰胺中间体6b沉淀的条件下进行的。7-脱氧-7-卤代林可酰胺中间体6b可以经过适当的溶剂或溶剂系统结晶纯化。
作为替代选择，1c可以被直接卤化，如美国专利No.3,496,136或美国专利No.3,502,646所述，与适合的Rydon试剂或酰胺卤化物盐接触，如欧洲专利No.0161794所述。卤化产物加合物(没有显示)在含水碱中的水解得到7-脱氧-7-卤代林可酰胺中间体6b。
下列流程7说明反式R9”-脯氨酸中间体7d的通用合成，其中R9”是烷基或取代的烷基。
流程7：反式-烷基脯氨酸7d的通用合成
(a)(i)LiHMDS，THF-78℃，(ii)溴代烯；(b)(i)LiBHEt3，THF-78℃，(ii)BF3·OEt2，Et3SiH；(c)H2 Pd/C.
如流程7所示，在惰性有机溶剂中将被保护的5-氧代脯氨酸7a用适合的碱烯醇化，然后用适合的烷基化剂烷基化，得到内酰胺7b(其中R9’是烯基)，如Zhang，R.；et.al.Journal of the AmericanChemical Society，1998，120，3894-3902的文献工艺所述。化合物7a是可从供应商获得的，例如Bachem。作为替代选择，7a可以借助本领域熟知的方法制备。适合的碱性烯醇化剂包括LiHMDS、LiN(iPr)2等，适合的烷基化剂包括烯丙型和苄型溴化物，例如4-溴-2-甲基-2-丁烯和顺式-1-溴-2-戊烯、烯丙基溴等。
将内酰胺7b用适合的还原剂还原，得到吡咯烷7c，其中R9’是烯基。还原作用是借助两步顺序进行的，牵涉内酰胺的还原，得到半缩醛胺，和随后半缩醛胺的还原。可以使用的适合的还原剂包括Et3SiH/BF3·OEt2、Et3SiH/TiCl4等。
然后氢化吡咯烷7c，同时除去R9’取代基中的不饱和度和除去羧酸中的苄基保护基团，得到产物7d。氢化作用通常是在极性有机溶剂中进行的，例如甲醇、乙醇等，在Parr瓶中使用10％披钯碳。将瓶子用H2净化和充气至大约50至70psi，摇动直至完成，通常大约5至24h。将反应混合物过滤，例如通过C盐垫，用极性有机溶剂洗涤，例如甲醇。合并洗液和滤液，蒸发，得到产物7d，其中R9”是烷基或取代的烷基。
下列流程8说明反式-R9-脯氨酸中间体8b和8c的通用合成，其中R9’是烯基或取代的烯基，R9”是烷基或取代的烷基。
流程8：反式-R9-取代的脯氨酸8b的通用合成，其中R9’是烯基，R9”是R9’的饱和形式，和8c的合成，其中R9’是烯基或取代的烯基
(a)i.O3，DCM，-78℃，ii.DMS；(b)R9’CH2P+Ph3盐，碱；(c)H2，Pd/C；(d)Aq.LiOH，THF.
如流程8所示，将产物7c臭氧化，得到醛，然后在Wittig条件下处理，得到8a。臭氧分解反应通常是这样进行的，在无水惰性有机溶剂中，例如二氯甲烷、二噁烷、THF等，在低温下，例如-78℃，继之以用还原剂猝灭反应，例如DMS、Ph3P。
在强碱的存在下，在惰性有机溶剂中，使醛与适合的鏻盐反应。可以使用的适合的鏻盐例如包括氯化氟苄基鏻、氯化4-氯苄基鏻、二溴氟代甲烷和三苯膦等。可以使用的适合的碱包括叔丁醇钾、有机锂试剂和活化锌。可以使用的适合的有机溶剂包括甲苯、THF、二甲基乙酰胺等。反应通常是在惰性气氛中进行的，例如在氮下，同时剧烈搅拌。反应通常在室温至大约110℃下进行1至2h。所得反应混合物经过适当处理，可以经过色谱纯化，得到8b。
然后氢化中间体8b，得到产物8c。氢化作用通常是在极性有机溶剂中进行的，例如甲醇、乙醇等，在Parr瓶中使用10％披钯碳。将瓶子用H2净化和充气至大约40至70psi，摇动直至完成，通常大约4至24h。将反应混合物过滤，例如通过C盐垫，用极性有机溶剂洗涤若干次，例如甲醇。合并洗液和滤液，蒸发，得到产物8c，其中R9”是烷基或取代的烷基，相当于产物8b的饱和形式。
作为替代选择，中间体8b可以借助本领域技术人员熟知的方法皂化，与含水碱和混溶性有机助溶剂接触，得到R9’不饱和的氨基酸中间体8c。
下列流程9说明脯氨酸中间体9d的通用合成，其中R9是如式(I)所定义的。
流程9：顺式-R9或反式-R9取代的环状氨基酸9d的通用合成
(a)活化试剂，即((Ts)2O，吡啶或PPh3Br2)(b)亲核试剂，碱(RSH，MTBU)，DMF(c)LiOH，THF，H2O
下列流程10说明取代的吡啶羧酸中间体10b的通用合成，其中R9是如式(I)所定义的，如Shuman，R.T.；Journal of OrganicChemistry.1990，55，741-750所述。
流程10：取代的吡啶-2-基羧酸10b的通用合成
如流程10所示，使适当取代的吡啶与适合的氧化剂在惰性有机溶剂中接触。适当取代的吡啶原料是可从供应商获得的，例如Aldrich和Sigma。作为替代选择，这些吡啶可以借助本领域熟知的方法制备。可以使用的适合的氧化剂包括过氧化氢、MCPBA等。反应通常在回流下进行6至12h。然后使反应混合物与适合的氰化物试剂接触，得到氰基-取代的吡啶10a。可以使用的适合的氰化物试剂包括三甲代甲硅烷基氰、HCN等。适合的惰性有机溶剂包括二氯甲烷、二噁烷、THF等。反应可以适宜地在室温下进行大约6至12h。反应混合物经过处理，得到氰基-取代的吡啶10a。
然后通过与适合的酸接触，水解氰基-取代的吡啶10a，得到吡啶-2-基羧酸10b。适合于水解氰基为羧酸的酸包括盐酸、含水硫酸等。反应通常在回流下进行6至12h。
下列流程11说明吡啶和哌啶中间体的通用合成，其中R9是如式(I)所定义的。
流程11：4-取代的中间体11c、11d和11e的通用合成
(a)SOCl2，MeOH(没有显示)；(b)HI，H2PO3，(c)MeOH，H2SO4(cat.)，(d)Pd(OAc)2，CuI，PPh3R9’炔；(e)PtO2，H2，H+；(f)N-保护试剂(即(Boc)2O，CbzCl ect.)，碱；(g)Aq.LiOH，二噁烷
下列流程12说明脯氨酸中间体12d的通用合成，其中R9是如式(I)所定义的。
流程12：从4-酮基吡咯烷(m＝1)和4-酮基哌啶(m＝2)12a开始的脯氨酸中间体12d的通用合成
(a)四烯丙基锡，BF3·Et2O或R9M(R9碳亲核试剂)；(b)DAST；(c)H2/Pd(d)aq.LiOH或适当的羧酸酯去保护条件
如流程12所示，将酮基脯氨酸12a烯丙基化，生成羟基烯丙基脯氨酸，它的羟基官能团随后用氟代替。烯丙基双键的氢化作用得到氟代烷基脯氨酸12c，去保护生成12d。
下列流程13说明如上流程1-6所述制备的林可胺中间体与如上流程7-12所述制备的吡咯烷基或哌啶基羧酸的偶联反应，其中R1、R2、R3、R6和R9是如式(I)所定义的，P1是适合的O-保护基团，P2是适合的N-保护基团。
流程13：通用偶联和去保护方法
如流程13所示，使适当7-取代的林可胺中间体(例如按照流程1-6中任一制备)与适当取代的吡咯烷基或哌啶基羧酸(例如按照流程7-9或11-12中任一制备)在反应条件下缩合，优选地在惰性有机溶剂中，在偶联试剂和有机碱的存在下。这种反应可以使用任意数量的已知偶联试剂进行，例如O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HATU)、1-羟基苯并三唑水合物(HOBT)与碳二亚胺、氯甲酸异丁酯等。适合的有机碱包括二异丙基乙胺(DIEA)、三乙胺(TEA)、吡啶、N-甲基吗啉等。可以使用的适合的惰性有机溶剂例如包括N，N-二甲基甲酰胺、乙腈、二氯甲烷等。这种反应通常是这样进行的，使用过量于林可胺的羧酸，在约0℃至约50℃的温度下。反应持续直至完成，这通常发生在约2至12小时内。
保护基团的除去可以用酸进行，例如三氟乙酸(TFA)、盐酸、对-甲苯磺酸等，在惰性有机溶剂例如二氯甲烷、二氯乙烷、二噁烷、THF等中。除去通常是在低温下进行的，例如0℃，然后逐渐升温至室温，得到产物。
也如流程13所示，使适当7-取代的林可胺中间体(例如按照流程1-6中任一制备)与适当取代的吡啶-2-基羧酸(例如按照流程10制备)在反应条件下缩合，优选地在惰性有机溶剂中，在偶联试剂和有机碱的存在下，如上所述。
氢化吡啶13b，得到哌啶基产物。氢化作用通常是这样进行的，在极性有机溶剂中，例如甲醇、乙醇等，使用氧化铂(IV)，在酸的存在下，例如HCl、乙酸等，在Parr瓶中。将瓶子用H2净化和充气至大约40至70psi，摇动直至完成，通常大约24h。将反应混合物过滤，例如通过C盐垫，用极性有机溶剂洗涤若干次，例如甲醇。合并洗液和滤液，蒸发，得到哌啶基产物。
吡啶羧酸与林可胺偶联得到吡啶13b、继之以向哌啶基产物的还原也可以如Birkenmeyer，R.D；et al；Journal of MedicinalChemistry 1984，27，216-223所述进行。
下列流程14说明如上流程1-6所述制备的林可胺中间体与如上流程7-12所述制备的吡咯烷基或哌啶基羧酸的偶联反应，其中R1、R2、R3和R9是如式(I)所定义的，P是适合的N-保护基团。本文所述偶联反应也可以用于偶联氮杂环丁烷基和氮杂环庚烷羧酸。
流程14：4-硫醚林可酰胺14c的通用合成
(a)(TEA，CF3COOEt)(b)MTL，BSTFA，TEA，HATU(c)Dowex H+树脂MeOH.(d)(Ac)2O，吡啶，DMAP(e)TFA，DMS，DCE，H2O(f)(Ts)2O，吡啶，DCM(g)R9H，MTBU(其中R9是这样选择的，以便引入烷硫基或取代的烷硫基取代基；亚砜或砜取代基也在本发明的范围内，可以借助本领域熟知的常规氧化方法得到)(h)MeONa，MeOH
流程15说明构建被保护的1-烯丙型中间体15b、15c、15e、15f的通用合成方法，其中R2、R3、R9是如式(I)所定义的，P1和P2分别表示适合的N-和O-保护基团。
流程15：构建被保护的1-烯丙型中间体15b、15c、15e、15f的通用合成
(a)DAST，NBS(b)BF3·Et2O，CH3CN，TMS，CH2CH＝CH2
流程15中，P1和P2是可优先有别除去的保护基团。甲硫基(甲基硫烷基)被氟代取代基置换是这样完成的，在N-溴琥珀酰亚胺(NBs)的存在下，在适合的溶剂中，例如二氯甲烷(DCM)，与DAST接触，得到化合物15b和15c。
进而，通过在三氟硼酸盐二乙醚配合物的存在下与三甲基烯丙基硅烷接触，氟代基团被置换生成烯丙基取代基。随后用三氟乙酸(TFA)除去Boc(叔丁氧羰基)保护基团，得到去保护的产物。作为替代选择，1-脱(甲硫基)-1-氟-2，3，4-三-O-苄基-7-脱氧-7-甲基林可胺的常规脱氟作用得到1-脱(甲硫基)-2，3，4-三-O-苄基-7-脱氧-7-甲基林可胺(也就是说R1是氢)。
在偶联促进剂的存在下，例如O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HATU)，在二甲基甲酰胺(DMF)和三乙胺(TEA)中，N-Boc-4-戊基-脯氨酸的羧基与1-脱(甲硫基)-1-烯丙基-2，3，4-三-O-苄基-7-脱氧-7-甲基林可胺的常规酰胺偶联得到化合物15c和15f。化合物15c和15f的烯丙基提供林可胺基团1-位的大量修饰来源。
流程16说明构建的通用合成方法，其中R1是烷硫基、取代的烷硫基，R2、R3、R9是如式(I)所定义的，P1和P2分别表示适合的N-和O-保护基团。
流程16：氟代基被硫烷基部分置换
流程16说明1-氟基团被适合的硫烷基部分所亲核置换既可以在林可胺部分上完成，生成化合物16a，也可以在偶联的林可胺衍生物上完成，生成化合物16b。亲核置换是利用本领域熟知的常规技术进行的。
流程17说明在1-位构建醇和醚取代基的通用合成方法，其中R2、R3、R9是如式(I)所定义的，P1和P2分别表示适合的N-和O-保护基团，R是氢、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基或取代的杂芳基。
流程17：醇和醚1-位林可胺衍生物的通用合成
(a)i.O3-78℃至0℃，ii.NaBH4(b)RX，碱，其中R可以选自由氢、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基和取代的杂芳基组成的组
流程17说明1-(脱硫烷基甲基)-1-烯丙基林可胺衍生物可以借助常规方法氧化为对应的醛，其再还原为伯醇，例如臭氧分解继之以硼氢化钠还原，优选地在质子溶剂中，例如甲醇。随后，使伯醇与适当的碱例如氢化钠和适合的烷基卤化物接触，生成醚衍生物，为林可胺实体或偶联的林可胺衍生物，分别得到化合物17c和17f。
流程18说明15f、16b和17f的去保护流程，其中R2、R3、R9是如式(I)所定义的，P是适合的N-保护基团，R1分别与流程15、16和17是-致的。
流程18
流程18说明常规去保护作用得到式(I)化合物。
下列流程19说明吡咯烷基或哌啶基环氮的烷基化作用，其中R6是烷基或羟基烷基，R1、R2、R3和R9是如式(I)所定义的。
流程19：1’-N-取代的林可酰胺的通用合成
(a)烷基化剂
如流程19所示，通过在适合的碱的存在下与烷基化剂接触，林可胺18a可以被N-取代，得到产物18b。可以使用的适合的烷基化剂包括环氧化物、烷基溴化物等。可以使用的适合的碱包括碳酸钾、碳酸铯、三乙胺等。烷基化反应通常是在极性有机溶剂中进行的，例如甲醇或DMF。烷基化反应通常在0℃至-10℃的低温下进行10至20h。
流程20中，R2、R3、R6和R9是如式(I)所定义的，P2是适合的O-保护基团。
流程2O：a.Rainey Ni，EtOH，回流
下列流程21说明允许合成不饱和的N-保护氨基酸21k环的多用合成顺序，其中m和R9是如式(I)所定义的。
(a)NaH，R9Br，DMF(b)KOH，H2O，EtOH(c)CH2O(aq)，哌啶，EtOH(d)DIBALH，CH2Cl2(e)PBr3，Et2O(f)溴乙酸乙酯(g)HCl/二噁烷(h)LiOt-Bu，THF(i)21d，LiHMDS，LiCl，THF，0℃(j)Boc2O，Et3N，CH2Cl2(k)烯烃复分解催化剂CH2Cl2(l)1M NaOH(aq)，MeOH
如流程21所示，适合的N-烯丙型氨基酯21f可以附加充当手性助剂的伪麻黄碱，允许碳被适合的烯丙型溴化物21d所立体特异性烷基化。仲胺的保护继之以烯烃复分解和手性助剂的裂解得到4，5-不饱和的N-保护环状氨基酸21k。
流程22：a.H+，MeOH b.2-硝基苯磺酰氯，2，4，6-三甲基吡啶，二氯乙烷c.Cs2CO3，TBABr，DMF，22c(Y＝Br或OTs)或者c.通过Mitsunobu烷基化PPh3，二异丙基叠氮基二羧酸酯，22c(Y＝OH)d.亚苄基[1，3-双(2，4，6-三甲基苯基)-2-亚咪唑烷基]二氯-(三环己基膦)钌e.有机碱(7-甲基-1，5，7-三氮杂二环[4.4.0]癸-5-烯)，苯硫酚f.(Boc)2O，TEA g.Aq.LiOH，二噁烷
流程23：C6林可胺衍生物的通用合成
(a)R20+R21金属，Et2AlCl，Et2O；(b)(i)MsCl，Et3N，CH2Cl2，(ii)吉拉德试剂T，MeOH，(iii)三氟乙酸酐，2，6-二甲基吡啶，CH2Cl2；(c)(i)TFA，H2O，(ii)Ac2O，Et3N，DMAP，CH2Cl2，(iii)HBr，AcOH，CH2Cl2；(d)(i)AcOAg，AcOH，(ii)PCl5，BF3.OEt2，CH2Cl2；(e)(i)MeSNa，HMPA，DMF，(ii)Ac2O，Et3N，DMAP，CH2Cl2；(f)NaOH，H2O，MeOH
流程24：2-取代的酯的通用合成
a.(Boc)2O，aq.KHCO3 THF b.对-茴香醛二甲基缩醛，PPTS，c.R11酰化剂，碱d.TFA，DCE，水
流程25：反式-烷基氮杂环丁烷羧酸的通用合成
(a)(i)LDA，THF，0℃，(ii)溴代烷或溴代烯；(b)TMSCHN2，MeOH，23℃；(c)(i)TMSCHN2，MeOH，23℃，(ii)H2，Pd/C，EtOAc，23℃；(d)Et3N.3HF，THF，23℃；(e)LiAlH4，THF，68℃；(f)Boc2O，CH2Cl2，23℃；(g)RuCl3.xH2O，NaIO4，丙酮，H2O，23℃
流程26：反式-烷基氮杂环丁烷羧酸经由醛的通用合成
(a)TBSCl，咪唑，DMF，23℃；(b)(i)臭氧，CH2Cl2，-78℃，(ii)PPh3；(c)烯化作用，R1R2CHP＝Ph3X-，碱，溶剂；(d)H2，Pd/C，EtOAc，23℃或KO2CN＝NCO2K，AcOH，二噁烷，23℃；(e)TBAF，THF，23℃；(f)RuCl3.xH2O，NaIO4，丙酮，H2O，23℃
流程27：外消旋顺式4-取代的中间体27a的通用合成和拆分，得到2S，4R R9中间体27b
(a)PtO2，H2，H+(b)(Boc)2O，-OH(c)i.手性胺，重结晶ii.H+
流程28：2-取代的酯的通用合成
a.(Boc)2O，aq.KHCO3THF b.对-茴香醛二甲基缩醛，PPTS，c.R11酰化剂，碱d.TFA，DCE，水(方法V)
药物制剂
在用作药物时，本发明化合物通常是以药物组合物的形式给药的。这些化合物可以借助各种途径给药，包括口服、肠胃外、透皮、静脉内、肌内、局部、直肠和鼻内。这些化合物可注射的和口服组合物都是有效的。这类组合物是以药学领域熟知的方式制备的，包含至少一种活性化合物。
本发明也包括药物组合物，它含有一种或多种上述本发明化合物作为活性成分，以及一种或多种药学上可接受的载体。在制备本发明组合物时，通常将活性成分与赋形剂混合，用赋形剂稀释，或者包封在这样一种载体内，载体可以是胶囊、药囊、纸或其他容器的形式。所采用的赋形剂通常是适合于对人类或其他哺乳动物给药的赋形剂。当赋形剂充当稀释剂时，它可以是固体、半固体或液体材料，充当活性成分的媒介物、载体或介质。因而，组合物可以是片剂、丸剂、粉剂、锭剂、药囊剂、扁囊剂、酏剂、混悬液、乳液、溶液、糖浆剂、气雾剂(为固体或者在液体介质中)、软膏剂(例如含有至多10重量％的活性化合物)、软与硬明胶胶囊剂、栓剂、无菌可注射溶液和无菌带包装粉剂的形式。
在制备制剂时，可能有必要在与其他成分合并之前研磨活性化合物，以提供适当的粒径。如果活性化合物是基本上不溶性的，一般研磨至粒径小于200目。如果活性化合物是基本上水溶性的，在正常情况下通过研磨调节粒径，以提供基本上均匀的在制剂中的分布，例如约40目。
一些适合的赋形剂实例包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、淀粉、阿拉伯胶、磷酸钙、藻酸盐、黄蓍胶、明胶、硅酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素、无菌水、糖浆和甲基纤维素。制剂可以另外包括：润滑剂，例如滑石、硬脂酸镁和矿物油；湿润剂；乳化与悬浮剂；防腐剂，例如羟基苯甲酸甲酯与丙酯；甜味剂；和矫味剂。采用本领域已知的工艺配制本发明组合物，可以在对患者给药后提供活性成分的快速、持续或延迟释放。
活性组分、即根据本发明的化合物在药物组合物中的量及其单位剂型可以根据特定应用、特定化合物的效力和所需浓度而各不相同或者加以调节。
组合物优选地被配制成单位剂型，每剂含有约5至约100mg、更通常约10至约30mg活性成分。术语“单位剂型”表示物理上离散的单元，适合作为人类和其他哺乳动物的单位剂量，每一单元含有预定量的活性材料，经过计算产生所需的治疗效果，以及适合的药物赋形剂。优选地，采用占药物组合物不超过约20重量％的上述本发明化合物，更优选不超过约15重量％，余量为药学惰性载体。
活性化合物在宽泛的剂量范围内是有效的，一般给以药学或治疗学上的有效量。不过将被理解的是，化合物的实际给药量将由医师鉴于相关情形，包括所治疗的病症、所治疗的细菌感染的严重性、所选择的给药途径、所给药的实际化合物、个体患者的年龄、体重与反应、患者症状的严重性等来确定。
在治疗或对抗温血动物细菌感染的治疗用途中，化合物或其药物组合物将按一定剂量被口服、局部、透皮和/或肠胃外给药，以达到和维持一定浓度，也就是活性组分在接受治疗的动物中将是抗菌有效的量或血液水平。一般而言，活性组分剂量的这类抗菌或治疗有效量(即有效剂量)将在约0.1至约100、更优选约1.0至约50mg/kg体重/天的范围内。
就制备固体组合物而言，例如片剂，将主要活性成分与药物赋形剂混合，形成固体制剂前组合物，含有本发明化合物的均匀混合物。在把这些制剂前组合物称为均匀时，这意味着活性成分被均匀分散在组合物中，以便组合物可以容易被细分为同等有效的单位剂型，例如片剂、丸剂和胶囊剂。然后将这种固体制剂前组合物细分为上述类型的单位剂型，例如含有0.1至约500mg本发明活性成分。
本发明的片剂或丸剂可以被包衣或者被复合，以提供长效剂型。例如，片剂或丸剂可以包含内部剂量和外部剂量组分，后者是前者的封套形式。两种组分可以被肠溶层隔开，所述肠溶层起到抵抗胃中崩解和允许内部组分完整进入十二指肠或延迟释放的作用。各种材料可以用于这类肠溶层或包衣，这样的材料包括多种聚合酸和聚合酸与虫胶、鲸蜡醇和乙酸纤维素等材料的混合物。
其中可以掺入新颖的本发明组合物供口服或注射给药的液体形式包括水溶液、适当矫味的糖浆、水或油混悬液和矫味的乳液，含有食用油，例如玉米油、棉子油、芝麻油、椰子油或花生油，以及酏剂和相似的药物媒介物。
吸入或吹入组合物包括在药学上可接受的水性或有机溶剂或者其混合物中的溶液和混悬液，和粉末。液体或固体组合物可以含有适合的药学上可接受的赋形剂，如上所述。优选地，组合物通过口或鼻呼吸途径给药，供局部或全身起效。在优选药学上可接受的溶剂中的组合物可以利用惰性气体雾化。雾化溶液可以从雾化装置中被直接吸入，或者雾化装置可以附着于面罩或间歇性正压呼吸机。溶液、混悬液或粉末组合物可以优选地从以适当方式递送制剂的装置中经口或经鼻给药。
下列制剂实施例说明本发明的代表性药物组合物。
制剂实施例1
制备含有下列成分的硬明胶胶囊剂：
成分 量(mg/胶囊)
活性成分 30.0
淀粉 305.0
硬脂酸镁 5.0
将上述成分混合，以340mg填充到硬明胶胶囊中。
制剂实施例2
使用下列成分制备片剂：
成分 量(mg/片)
活性成分 25.0
微晶纤维素 200.0
胶体二氧化硅 10.0
硬脂酸 5.0
将组分掺合，压制成片，每片重240mg。
制剂实施例3
制备含有下列组分的干粉吸入制剂：
成分 重量％
活性成分 5
乳糖 95
将活性成分与乳糖混合，将混合物加入到干粉吸入器具中。
制剂实施例4
如下制备片剂，每片含有30mg活性成分：
成分 量(mg/片)
活性成分 30.0mg
淀粉 45.0mg
微晶纤维素 35.0mg
聚乙烯吡咯烷酮(10％无菌水溶液) 4.0mg
羧甲基淀粉钠 4.5mg
硬脂酸镁 0.5mg
滑石 1.0mg
总计 120mg
将活性成分、淀粉和纤维素通过No.20目U.S.筛，充分混合。将聚乙烯吡咯烷酮溶液与所得粉末混合，然后通过16目U.S.筛。将所得颗粒在50℃至60℃下干燥，通过16目U.S.筛。然后向颗粒加入预先通过No.30目U.S.筛的羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁和滑石，混合后在压片机上压制得到片剂，每片重120mg。
制剂实施例5
如下制备胶囊剂，每粒含有40mg药物：
成分 量(mg/胶囊)
活性成分 40.0mg
淀粉 109.0mg
硬脂酸镁 1.0mg
总计 150.0mg
将活性成分、淀粉和硬脂酸镁掺合，通过No.20目U.S.筛，以150mg填充到硬明胶胶囊中。
制剂实施例6
如下制备栓剂，每粒含有25mg活性成分：
成分 量
活性成分 25mg
饱和脂肪酸甘油酯，至 2,000mg
将活性成分通过No.60目U.S.筛，悬浮在预先熔化的饱和脂肪酸甘油酯中，必要时略微加热。然后将混合物倒入标称2.0g容量的栓剂模具中，冷却。
制剂实施例7
如下制备混悬液，每5.0mL剂量含有50mg药物：
成分 量
活性成分 50.0mg
黄原胶 4.0mg
羧甲基纤维素钠(11％)
微晶纤维素(89％) 50.0mg
蔗糖 1.75g
苯甲酸钠 10.0mg
矫味剂和色素 q.v.
纯化水，至 5.0mL
将活性成分、蔗糖和黄原胶掺合，通过No.10目U.S.筛，然后与预先制备的微晶纤维素与羧甲基纤维素钠的水溶液混合。将苯甲酸钠、矫味剂和色素用一些水稀释，加入同时搅拌。然后加入足量水至所需体积。
制剂实施例8
成分 量(mg/胶囊)
活性成分 15.0mg
淀粉 407.0mg
硬脂酸镁 3.0mg
总计 425.0mg
将活性成分、淀粉和硬脂酸镁掺合，通过No.20目U.S.筛，以425.0mg填充到硬明胶胶囊中。
制剂实施例9
如下可以制备皮下制剂：
成分 量
活性成分 5.0mg
玉米油 1.0mL
制剂实施例10
如下可以制备局部制剂：
成分 量
活性成分 1-10g
乳化蜡 30g
液体石蜡 20g
白软石蜡，至 100g
将白软石蜡加热直至熔化。掺入液体石蜡和乳化蜡，搅拌直至溶解。加入活性成分，继续搅拌直至分散。然后冷却混合物直至固体。
制剂实施例11
如下可以制备静脉内制剂：
成分 量
活性成分 250mg
等渗盐水 1000mL
另一种用在本发明方法中的优选制剂采用透皮递送装置(“贴剂”)。这类透皮贴剂可以用于以控制量提供本发明化合物的连续或不连续输注。药物递送用透皮贴剂的构造和使用是本领域熟知的。例如参见1991年6月11日颁布的美国专利No.5,023,252，引用在此作为参考。可以将这类贴剂构造成药物的连续、脉冲式或因需递送。
经常需要或者有必要直接或间接向脑引入药物组合物。直接的技术通常牵涉在宿主脑室系统中放置药物递送导管，以绕过血-脑屏障。一种用于转运生物因子至机体特定解剖区域的这类可植入递送系统描述在美国专利5,011,472中，引用在此作为参考。
间接的技术一般是优选的，通常牵涉配制组合物，通过转化亲水性药物为脂溶性药物提供药物的潜伏化作用。潜伏化作用一般是这样实现的，封闭存在于药物上的羟基、羰基、硫酸酯和伯胺基团，以赋予药物更大的脂溶性和经得起跨越血-脑屏障的转运。作为替代选择，借助高渗溶液的动脉内输注可以提高亲水性药物的递送，这可以暂时打开血-脑屏障。
其他适用于本发明的制剂可以在Remington′s PharmaceuticalSciences，Mace Publishing Company，Philadelphia，PA，17th ed.(1985)中找到。
如上所述，本文所述化合物适用于上述各种药物递送系统。另外，为了提高所给药的化合物的体内血清半衰期，化合物可以被包封、引入到脂质体腔内、制成胶体，或者可以采用其他常规技术以延长化合物的血清半衰期。多种方法可用于制备脂质体，例如Szoka，et al.，美国专利No.4,235,871、4,501,728和4,837,028所述，各自引用在此作为参考。
如上所述，对患者给药的化合物是上述药物组合物的形式。这些组合物可以借助常规灭菌技术灭菌，或者可以无菌过滤。所得水溶液可以被包装供原样使用，或者冻干，在给药之前将冻干制备物与无菌含水载体合并。化合物制备物的pH通常将在3与11之间，更优选5至9，最优选7-8。将理解的是，某些前述赋形剂、载体或稳定剂的使用将导致药物盐的生成。
一般而言，本发明化合物将以治疗有效量借助任意公认的用于发挥相似效用的药物的给药方式给药。这类化合物的毒性和治疗功效可以借助标准药学工艺在细胞培养物或实验动物中加以测定，例如测定LD50(对50％种群致死的剂量)和ED50(对50％种群治疗有效的剂量)。毒性与治疗效果之间的剂量比是治疗指数，可以表示为LD50/ED50之比。表现大治疗指数的化合物是优选的。
在制定用于人类的剂量范围时可以利用从细胞培养物测定法和动物研究获得的数据。这类化合物的剂量优选地位于包括ED50的循环浓度范围内，带有轻微或者没有毒性。剂量可以在这种范围内因所采用的剂型和所利用的给药途径而异。就任意用在本发明方法中的化合物而言，可以首先从细胞培养物测定法中估计治疗有效剂量。可以在动物模型中制定一种剂量，以根据细胞培养物的测定达到包括IC50(供试化合物达到症状半数最大抑制的浓度)的循环血浆浓度范围。这类信息可以用于更精确地确定可用于人类的剂量。血浆水平例如可以借助高效液相色谱测量。
实用性
本文所定义的化合物、其前体药物及药学上可接受的盐具有对抗多种细菌、原生动物、真菌和寄生虫中至少一种的活性。举例而言，化合物、其前体药物及药学上可接受的盐可以对革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌是有活性的。化合物、其前体药物及药学上可接受的盐可以对多种真菌是有活性的，包括毛霉菌属和念珠菌属真菌，例如总头毛霉菌或白色念珠菌。化合物、其前体药物及药学上可接受的盐可以对多种寄生虫是有活性的，包括疟疾和隐孢子虫寄生虫。
本发明化合物可以表现对多种细菌感染中至少一种的活性，例如包括革兰氏阳性感染、革兰氏阴性感染、分枝杆菌感染、支原体感染和衣原体感染。
由于本发明化合物可以对多种细菌表现有力的活性，例如革兰氏阳性细菌，本发明化合物可以是有用的抗微生物剂，可以有效对抗多种人类与兽医病原体中的至少一种，包括革兰氏阳性细菌。本发明化合物可以对其有效的革兰氏阳性生物例如包括肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、粪肠球菌、屎肠球菌、流感嗜血杆菌、粘膜炎莫拉氏菌、大肠杆菌、脆弱拟杆菌、多形拟杆菌和艰难梭菌等。
本发明化合物可以与一种或多种另外抗菌剂联合。一种或多种另外抗菌剂可以对革兰氏阴性细菌是有活性的。一种或多种另外抗菌剂可以对革兰氏阳性细菌是有活性的。本发明化合物与一种或多种另外抗菌剂的组合可以用于治疗革兰氏阴性感染。本发明化合物与一种或多种另外抗菌剂的组合可以用于治疗革兰氏阳性感染。本发明化合物与一种或多种另外抗菌剂的组合也可以用于治疗分枝杆菌感染、支原体感染或衣原体感染。
本发明化合物的体外活性可以借助标准测试程序加以评估，例如借助琼脂稀释法测定最小抑菌浓度(MIC)，如″Approved Standard.Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests forBacteria that Grow Aerobically，″3rd ed.，published 1993 by theNational Committee for Clinical Laboratory standards，Villanova，Pennsylvania，USA所述。
对哺乳动物患者给药的量将因所给予的药物、给药的目的(例如预防或治疗)、患者的状态、给药的方式等而异。例如，将组合物对已经患有疾病的患者给药，给药量足以治愈或者至少部分阻止疾病的症状及其并发症。足以完成这一点的量被定义为“治疗有效量”。就这种用途而言有效的量将取决于所治疗的疾病状况以及主治医师根据炎症的严重性、患者的年龄、体重与一般状况等因素所作出的判断。
对患者给药的组合物是上述药物组合物的形式。这些组合物可以借助常规灭菌技术灭菌，或者可以无菌过滤。所得水溶液可以被包装供原样使用，或者冻干，在给药之前将冻干制备物与无菌含水载体合并。化合物制备物的pH通常将在约3与约11之间，更优选约5至约9，最优选约7至约8。将理解的是，某些前述赋形剂、载体或稳定剂的使用将导致药物盐的生成。
本发明化合物的治疗剂量将因例如进行治疗的特定用途、化合物给药的方式、患者的健康与状况和处方医师的判断而异。例如，就静脉内给药而言，剂量将通常在约20μg至约500μg每千克体重的范围内，优选约100μg至约300μg每千克体重。适合于鼻内给药的剂量范围一般是约0.1mg至1mg每千克体重。由从体外或动物模型试验系统得出的剂量-反应曲线，可以推出有效剂量。
下列合成和生物学实施例供说明本发明，不以任意方式被解释为限制本发明的范围。
实施例
在上文讨论和下文实施例中，下列缩写具有下列含义。如果没有定义缩写，它具有公认的含义。
7-甲基MTL ＝ 1-甲硫基-7-脱氧-7-甲基林可胺
Ac ＝ 乙酰基
apt ＝ 明显的三重峰
Aq ＝ 含水
atm ＝ 大气压
Bn ＝ 苄基
Boc ＝ 叔丁氧羰基保护基团
br s ＝ 宽的单峰
BSTFA ＝ N，O-双(三甲代甲硅烷基)三氟乙酰胺
13C NMR ＝ 13碳核磁共振
Cbz ＝ 碳酰氧基苄氧基保护基团
CDCl3 ＝ 氘代氯仿
CD3OD ＝ 氘代甲醇
CD3SOCD3 ＝ 氘代二甲基亚砜
cfu ＝ 菌落形成单位
D2O ＝ 氘代水
d ＝ 双峰
DAST ＝ 三氟化二甲氨基硫
dd ＝ 双重双峰
dddd ＝ 双重双峰的双重双峰
DIBALH ＝ 氢化二异丁基铝
dt ＝ 双重三峰
DCE ＝ 二氯乙烷
DCM ＝ 二氯甲烷
DIEA ＝ 二异丙基乙胺
DMAP ＝ 二甲氨基吡啶
DMF ＝ 二甲基甲酰胺
DMS ＝ 二甲硫
DMSO ＝ 二甲基亚砜
DPPA ＝ 二苯基磷酰叠氮化物
ED50 ＝ 对50％种群治疗有效的剂量
equiv ＝ 当量
ESMS ＝ 电喷雾质谱
Et ＝ 乙基
EtOAc ＝ 乙酸乙酯
Et2O ＝ 二乙醚
g ＝ 克
h ＝ 小时
HATU ＝ O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟磷
酸盐
HOBT ＝ 1-羟基苯并三唑水合物
1H NMR ＝ 氢核磁共振光谱
HPLC ＝ 高压液相色谱
Hz ＝ 赫兹
IC50 ＝ 供试化合物达到症状半数最大抑制的浓度
J ＝ 偶合常数，以赫兹计
L ＝ 升
LD50 ＝ 对50％种群致死的剂量
LiHMDS ＝ 六甲基二硅氮化锂
m ＝ 多重峰
M ＝ 摩尔浓度
MCPBA ＝ 3-氯过苯甲酸
Me ＝ 甲基
MeCN ＝ 乙腈
MeOH ＝ 甲醇
mg ＝ 毫克
MHB ＝ Mueller Hinton肉汤
MHz ＝ 兆赫
MIC ＝ 最小抑菌浓度
min ＝ 分钟
mL ＝ 毫升
mm ＝ 毫米
mmHg ＝ 毫米汞柱
mmol ＝ 毫摩尔
MS(ESPOS) ＝ 质谱(阳性模式电喷雾电离)
MS(ESNEG) ＝ 质谱(阴性模式电喷雾电离)
MTBU ＝ 7-甲基-1，5，7-三氮杂二环[4.4.0]癸-5-烯
MTL ＝ 1-甲硫基林可胺(甲基6-氨基-6，8-二脱氧-1-硫代-赤
-α-D-半乳-吡喃辛糖苷)
N ＝ 正
NBS ＝ N-溴琥珀酰亚胺
NMR ＝ 核磁共振
OBz ＝ 苄氧基保护基团
OtBu ＝ 叔丁氧基
Pd/C ＝ 钯/碳
pg ＝ 皮克
Ph ＝ 苯基
Pro ＝ L-脯氨酸
psi ＝ 磅每平方英寸
q ＝ 四重峰
q.v. ＝ 定量
Rf ＝ 保留因子
rt ＝ 室温
s ＝ 单峰
sat. ＝ 饱和
t ＝ 三重峰
TCI ＝ TCI America
TEA ＝ 三乙胺
TFA ＝ 三氟乙酸
THF ＝ 四氢呋喃
TLC ＝ 薄层色谱
TMS ＝ 三甲代甲硅烷基
Ts ＝ 甲苯磺酰基
μg ＝ 微克
μL ＝ 微升
μM ＝ 微摩尔浓度
v/v ＝ 体积/体积
另外，术语“Aldrich”表示用在后面工艺中的化合物或试剂在商业上可从Aldrich Chemical Company，Inc.，1001 West Saint PaulAvenue，Milwaukee，WI 53233 USA获得；术语“Fluka”表示化合物或试剂在商业上可从Fluka Chemical Corp.，980 South 2nd Street，Ronkonkoma NY 11779 USA获得；术语“Lancaster”表示化合物或试剂在商业上可从Lancaster Synthesis，Inc.，P.O.Box 100 Windham，NH 03087 USA获得；术语“Sigma”表示化合物或试剂在商业上可从Sigma，P.O.Box 14508，St.Louis MO 63178 USA获得；术语“Chemservice”表示化合物或试剂在商业上可从Chemservice Inc.，Westchester，PA，USA获得；术语“Bachem”表示化合物或试剂在商业上可从Bachem Bioscience Inc.，3700 Horizon Drive，Renaissance at Gulph Mills，King of Prussia，PA 19406 USA获得；术语“Maybridge”表示化合物或试剂在商业上可从MaybridgeChemical Co.Trevillett，Tintagel，Cornwall PL34 OHW UnitedKingdom获得；术语“RSP”表示化合物或试剂在商业上可从RSP AminoAcid Analogs，Inc.，106 South St.，Hopkinton，MA 01748，USA获得；术语“TCI”表示化合物或试剂在商业上可从TCI America，9211North Harborgate St.，Portland，Oregon，97203，OR，USA获得；术语“Toronto”表示化合物或试剂在商业上可从Toronto ReasearchChemicals，Inc.，2 Brisbane Rd.，New York，ON，Canada M3J2J8获得；术语“Alfa”表示化合物或试剂在商业上可从Johnson MattheyCatalog Company，Inc.30 Bond Street，Ward Hill，MA 01835-0747获得；术语“Nova Biochem”表示化合物或试剂在商业上可从NovaBiochem USA，10933 North Torrey Pines Road，P.O.Box 12087，La Jolla CA 92039-2087获得。
下列实施例中，所有温度均为摄氏度(另有指示除外)，利用下列通用工艺制备所示化合物。
通用工艺
方法A
甲基6-氨基-6，8-二脱氧-1-硫代-赤-α-D-半乳-吡喃辛糖苷1a(MTL)是如Hoeksema，H.et.al.Journal of the American ChemicalSociety，1967，89，2448-2452所述制备的。将N-(苄氧羰基氧基)琥珀酰亚胺(5.8g，23.1mmol)和1a(5.0g，19.7mmol)悬浮在吡啶(40mL)中，在N2气氛下搅拌36h。将反应混合物冷却至0℃，然后历经2min借助注射器加入双-N，O-三氟乙酰胺(15.7mL，59.0mmol)。使反应混合物升温至rt，搅拌42h。加入甲苯(100mL)，蒸发反应混合物至干。将残余物溶于乙酸乙酯(400mL)。将有机溶液快速用10％柠檬酸(200mL)、H2O(3×100mL)、饱和NaHCO3(100mL)和盐水(2×100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，蒸发至干。粗产物经过二氧化硅色谱处理，用含有0.2％TEA的10％EtOAc/己烷洗脱，从甲苯(100mL)和环己烷(2×100mL)中共蒸发后得到被保护的产物1b(P＝Cbz，R1＝SMe)(7.2g，54％)，为无色的油：
1HNMR(300MHz，CD3SOCD3)δ7.34-7.31(m，5)，7.05(d，J＝8.2，1)，5.19(d，J＝5.8，1)，5.01(d，J＝1.6，2)，3.99(apt dt，J＝5.5，9.3，9.3，2)，3.93-3.86(m，3)，3.49(dd，J＝2.5，9.6，1)，2.01(s，3)，1.03(d，J＝6.3，3)，0.10(s，9)，0.09(s，9)，0.04(m，18).
向冷却至-72℃的二甲基亚砜(413μL，5.82mmol)的DCM(1.5mL)溶液历经1min加入草酰氯2M的DCM溶液(1.49mL，2.98mmol)。25min后借助套管加入被保护的产物1b(1.92g，2.84mmol)。将所得反应混合物搅拌25min，然后升温至-50℃(干冰乙腈)，在该温度下维持2h。向反应混合物加入TEA(1.29mL，3.30mmol)。25min后，将反应混合物用EtOAc(300mL)稀释。将所得有机溶液快速用5％柠檬酸(300mL)、H2O(2×300mL)、饱和NaHCO3(100mL)和盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，借助甲苯(100mL)蒸发至干，得到产物1c。用正戊烷共蒸发和在高真空下除去残余溶剂后，得到产物1c(P＝Cbz，R1＝SMe)，为无色结晶性固体(1.60g，94％)：
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.37-7.33(m，5)，5.60(m，1)，5.21(d，J＝5.2，1)，5.17(d，J＝12.4，1)，5.08(d，J＝12.4，1)，4.74(m，1)，4.16-4.12(m，2)，3.87(d，J＝2.2，1)，3.69(dd，J＝2.5，9.3，1)，2.01(br s，3)，1.90(s，3)，0.19(s，9)，0.16(s，9)，0.15(s，9).
方法B
Boc-保护的产物1c(P＝Boc，R1＝SMe)一般可以如下所述制备。向在冰上冷却至0℃的1a(MTL)(在50℃高真空下干燥)(21.8g，86mmol)的甲醇(200mL)与TEA(26mL)悬液加入二碳酸二叔丁酯(57.0g，0.26mol)。然后将反应混合物在室温下搅拌过夜。向反应混合物加入甲苯(100mL)，除去溶剂至总体积为100mL，留下浓稠的悬液，向其中加入环己烷(300mL)。将所得固体沉淀研制，然后过滤，用环己烷、醚和戊烷洗涤，干燥至恒重。粗的Boc-保护的产物无需进一步纯化即使用(87％)：TLC Rf＝0.75(10％MeOH/DCM)；MS(ESPOS)：354[M+H]+；1H NMR(300MHz，CD3OD)δ0.14(d，J＝6.3，3)，1.43(s，9)，2.07(s，3)，3.55(dd，J＝3.3，10.43，1)，3.84-4.08(m，3)，4.10-4.15(m，2)，5.25(d，J＝5.5，1).
在0℃下，向N-Boc-1-甲硫基林可酰胺(240mg，0.68mmol)的DMF(5mL)溶液加入BSTFA(0.52mL，2.0mmol)和三乙胺(0.14mL，1.42mmol)，然后在室温下搅拌过夜。除去DMF，使粗产物快速通过硅胶柱(用2％三乙胺的乙酸乙酯溶液预处理)，用10％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱，得到1b(P＝Boc，R1＝SMe)(350mg，95％)。在-60℃下向草酰氯(0.16mL，0.78mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液缓慢加入二甲基亚砜(0.22mL，0.78mmol)，然后搅拌15min。然后缓慢加入1b(370mg，0.65mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液。将反应混合物搅拌45min，在此期间升高反应温度至-40℃。然后加入三乙胺(0.70mL，3.25mmol)，继续在-40℃下搅拌另外15min。然后用二氯甲烷(100mL)萃取，用10％柠檬酸(50mL)洗涤。除去溶剂所得残余物然后经过硅胶柱纯化，使用10％乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱剂，得到1c(P＝Boc，R1＝SMe)，为无色的油(289mg，78％)：TLC：Rf＝0.60(10％EtOAc/己烷)；MS(ESPOS)：590[M+Na]+；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ0.11(s，18)，0.17(s，18)，1.40(s，9)，1.84(s，3)，2.26(s，3)，3.63(dd，J＝2.7，9.34，1)，3.82(d，J＝1.9，1)，4.01-4.12(m，2)，5.15(d，J＝5.5，1).
方法C
在N2气氛下，将溴化三苯基鏻(3.29g，9.20mmol)和叔丁醇钾(715mg，6.4mmol)悬浮在甲苯(31mL)中，同时剧烈搅拌。4.0h后，借助套管加入被保护的产物1c(P＝Cbz，R1＝SMe)(1.40g，2.36mmol)的甲苯(20mL)溶液。将所得反应混合物搅拌2h，然后用EtOAc(250mL)稀释。将所得有机溶液快速用H2O(2×100mL)、盐水(1×100mL)洗涤，经Na 2SO4干燥，蒸发至干。粗产物经过二氧化硅色谱处理，用含有0.2％TEA的6％EtOAc/己烷洗脱，得到烯产物2a(P＝Cbz，R1SMe，R2’＝H)，为无色的油，从甲苯和环己烷中共蒸发后结晶(0.65g，46％)：
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.35-7.27(m，5)，6.36(d，J＝7.1，1)，5.24(d，J＝5.5，1)，5.08(m，4)，4.34(m，1)，4.16(m，2)，3.88(d，J＝2.2，1)，3.61(dd，J＝2.2，9.3，1)，2.20(s，3)，1.79(s，3)，0.17-0.13(m，27).
在Parr瓶中，向10％披钯碳(degusa湿型，50％w/w水)(700mg)加入产物2a(P＝Cbz，R1＝SMe，R2’＝H)(490mg，0.82mmol)的乙醇(50mL)溶液。将瓶子用H2净化和充气至65psi，摇动24h。将反应混合物通过C盐过滤，用甲醇清洗。将有机溶液转移至含有干燥的经过洗涤的
50w-400x H+型(0.8g)的树脂漏斗，摇动10min。将树脂用甲醇洗涤三次和用水洗涤两次后，用5％TEA的MeOH溶液洗涤(35mL × 10min × 5)，从树脂上洗脱饱和产物2b。合并滤液，蒸发至干，从EtOH中共蒸发两次，从1∶1MeCN/H2O中冻干，得到产物2b(R2’＝H)，为无色粉末(198mg，96％)：
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.17(d，J＝5.8，1)，3.97-3.84(m，3)，3.52(dd，J＝3.0，10.0，1)，2.82(dd，J＝4.4，8.5，1)，1.94(s，3)，1.89-1.81(m，1)，0.82(d，J＝6.9，3)，0.72(d，J＝6.9，3)；MS(ESPOS)：252.2[M+H]+，(ESNEG)：250.4[M-H]-.
方法D
在替代方式中，当在流程1中使用Boc保护基团时(P＝Boc)，在0℃下将溴化甲基三苯基鏻(12g，33.6mmol)和叔丁醇钾(3g，26.7mmol)溶于THF(70mL)，在rt下搅拌4h。然后加入Boc-保护的产物1c(P＝Boc，R1＝SMe)(4.7g，8.2mmol)的THF(30mL)溶液，在rt下搅拌2h。然后将其用EtOAc(300mL)萃取，用盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥。粗烯产物2a(P＝Boc，R1＝SMe，R2’＝H)经过硅胶柱色谱纯化，使用10％EtOAc的己烷溶液作为洗脱剂(4.1g，87.6％)：
TLC：Rf＝0.5(10％ of EtOAc在己烷中)：1H NMR(300MHz，CD3OD)δ7.24(m，2)，5.22(d，J＝5.7，1)，4.21(m，1)，4.09(m，2)，3.87(d，J＝2.4，1)，3.60(dd，J＝2.7，9.3，1)，1.99(s，3)，1.76(s，3)，1.43(s，9)；MS(ESPOS)：444[M-2TMS+Na]+.
向产物2a(P＝Boc，R1＝SMe，R2’＝H)的甲醇(30mL)溶液加入
H+树脂(1g)，在rt下搅拌1h。将树脂过滤，除去溶剂，将所得产物(2.4g，6.8mmol)溶于MeOH(30mL)，加入Pd/C(2.5g)，在55psi下氢化过夜。过滤和除去溶剂后所得粗产物经过硅胶柱色谱纯化，使用10％MeOH的DCM溶液洗脱，得到Boc-保护的7-甲基MTL，为白色固体(2.06g，86％)：TLC Rf＝0.5(10％ofMeOH in DCM)；1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.23(d，J＝5.4，1)，4.11(m，1)，3.97(d，J＝10.2，1)，3.84(m，1)，3.52(m，1)，2.08(s，3)，1.44(s，9)，1.14(m，1)，0.93(d，J＝6.9，3)，0.85(d，J＝6.9，3)；MS(ESPOS)：351[M+H]+.
向Boc-保护的7-甲基MTL(150mg，0.43mmol)的二氯乙烷(6mL)溶液加入二甲硫(0.16mL，2.5mmol)，继之以TFA(2mL)、水(0.16mL)，在rt下搅拌1h。除去溶剂，得到粗产物2b(R1＝SMe，P＝Boc，R2’＝H)。经过硅胶柱色谱纯化，使用30％MeOH的DCM溶液作为洗脱剂，得到产物2b(R2’＝H)，在所有方面都等同于方法C所得产物。
方法E
在N2气氛下，将氢化钠(80mg，3.3mmol)悬浮在THF(4mL)中，同时剧烈搅拌。将悬液冷却至-30℃，加入二乙基(氰甲基)膦酸酯(805μL，5.0mmol)。30min后，借助套管加入被保护的产物1c(P＝Cbz，R1＝SMe)(1.0g，1.7mmol)的THF(3mL)溶液。将所得反应混合物搅拌4h，然后用EtOAc(250mL)稀释。将所得有机溶液快速用饱和含水NaHCO3(1×100mL)、盐水(1×50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，蒸发至干。粗产物经过二氧化硅色谱处理，用6％EtOAc/己烷至含有0.2％TEA的10％EtOAc/己烷洗脱，得到被保护的烯产物2a(P＝Cbz，R1＝SMe，R2’＝CN)，为无色的油(0.38g，37％)：MS(ESPOS)：625.5[M+H]+，MS(ESNEG)：659.5[M+Cl]-.
在Parr瓶中，向10％披钯碳(degusa湿型，50％w/w水)(300mg)加入产物2a(P＝Cbz，R1＝SMe，R2’＝CN)(180mg，0.29mmol)的乙醇(15mL)溶液，加入浓HCl(29μL)。将瓶子用H2净化和充气至65psi，摇动24h。将反应混合物通过C盐过滤，用甲醇清洗。将有机溶液转移至含有干燥的经过洗涤的50w-400x H+型(1g)的树脂漏斗，摇动10min。将树脂用甲醇洗涤两次和用水洗涤后，用5％TEA的MeOH溶液洗涤(20mL×20min×3)和用MeCN洗涤(20mL×20min)，从树脂上洗脱饱和产物2b(R1＝SMe，R2’＝CN)。合并有机滤液，蒸发至干，从1∶1MeCN/H2O中冻干，得到产物2b(R1＝SMe，R2＝CH2CN)，为无色固体(70mg，91％)：MS(ESNEG)：275.3[M-H]-.
方法F
在0℃下，向被保护的产物1c(P＝Cbz，R1＝SMe)(0.75g，1.3mmol)的THF(7.3mL)溶液加入MeMgCl 3M(Aldrich)的THF溶液(7.0mL，2.1mmol)。历经3min将反应混合物升温至4℃，4h后用1∶3饱和含水NH4Cl/H2O(10mL)猝灭反应混合物。将经过猝灭的混合物用水稀释至100mL，用DCM萃取(4×50mL)。合并有机相，干燥，蒸发。将残余物溶于1∶2∶4H2O/HOAc/THF(100mL)，搅拌20h，然后借助甲苯蒸发(2×100mL)。色谱处理(10∶1至10∶2DCM/MeOH)得到产物3a(P＝Cbz，R1＝SMe，R2”＝Me)(153mg，31％)：MS(ESNEG)：399.5[M-H]-.
在Parr瓶中，向10％披钯碳(degusa湿型，50％w/w水)(400mg)加入产物3a(P＝Cbz，R1＝SMe，R2”＝Me)(79mg，0.2mmol)的乙醇(10mL)溶液。将瓶子用H2净化和充气至65psi，摇动6h。将反应混合物通过C盐过滤，用甲醇清洗。合并滤液，蒸发至干，从1∶1MeCN/H2O中冻干，得到产物3b(R1＝SMe，R2”＝Me)，为无色粉末(42mg，80％)：
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.33(d，J＝5.8，1)，4.83-4.06(m，3)，3.65-3.60(m，1)，3.06-3.03(m，1)，2.18(s，3)，1.30(s，3)，1.23(s，3)；MS(ESPOS)：268.4[M+H]，MS(ESNEG)：266.2[M-H]-.
方法G
向Boc-保护的产物1c(P＝Boc，R1＝SMe)(100mg，0.18mmol)的甲醇(3mL)溶液加入O-三甲代甲硅烷基羟胺(0.10mL，0.88mmol)，在rt下搅拌过夜。除去溶剂，得到粗的Boc-保护的产物4a(R1＝SMe，R7＝H)。向粗产物4a(95mg，0.15mmol)加入30％三氟乙酸的二氯乙烷(10mL)与二甲硫(0.5mL)溶液，搅拌1h。除去溶剂，产物4b(R1＝SMe，R7＝H)直接用于下一步。
TLC：Rf＝0.35(10％MeOH/DCM)；MS(ESPOS)：267(M+H)；1H NMR(300MHz，CD3OD)δ1.96(s，3)，2.09(s，3)，3.58(dd，J＝3.3，10.2，1)，3.90(s，1)，4.11(dd，J＝5.7，10.20，1)，4.19(d，J＝5.4，1)，4.50(d，J＝5.1，1)，5.36(d，J＝5.7，1).
方法H
向Boc-保护的产物1c(P＝Boc，R1＝SMe)(100mg，0.176mmol)的甲醇(4mL)与水(1mL)溶液加入O-烷基羟胺盐酸盐(例如O-甲基羟胺盐酸盐)(60mg，0.70mmol)和乙酸钠(57mg，0.70mmol)，在80℃下加热3h，然后在rt下搅拌过夜。在高真空下除去溶剂，得到粗的Boc-保护的产物4a(R1＝SMe，R7＝Me)。将粗产物4a溶于30％三氟乙酸的二氯乙烷(10mL)与二甲硫(0.5mL)溶液，在rt下搅拌1h。除去溶剂，使残余物在高真空下保持1h，产物4b(R1＝SMe，R7＝Me)直接用于下一步：TLC Rf＝0.63(10％MeOH/DCM)；MS(ESPOS)：281[M+H]+；1H NMR(300MHz，CD3OD)δ1.95(s，3)，2.08(s，3)，3.60(dd，J＝3.3，10.2，1)，3.92(s，3)，4.13(dd，J＝4.8，10.2，1)，4.49(d，J＝1.2，1)，5.38(d，J＝5.4，1).
方法I
向Boc-保护的产物1c(P＝Boc，R1＝SMe)(500mg，0.88mmol)的THF(10mL)溶液加入氟化四丁基铵(2.5mmol，1M THF溶液)，将反应混合物在rt下搅拌1h。除去溶剂，残余物经过硅胶柱纯化，使用5％甲醇的二氯甲烷溶液作为洗脱剂。然后将柱子所得产物(111mg，0.31mmol)溶于二氯甲烷(3mL)与吡啶(3mL)的混合物，向其中加入乙酸酐(0.5mL，10.6mmol)和二甲氨基吡啶(80mg，1.7mmol)，在rt下搅拌过夜。除去溶剂，粗产物经过硅胶柱纯化，使用30％乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱剂，得到5a(P＝Boc，R1＝SMe)(58mg，3％)：
TLC Rf＝0.73(50％EtOAc/己烷)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.38(s，9)，1.91(s，3)，1.98(s，3)，2.07(s，3)，2.18(s，3)，4.33(m，1)，4.72(m，1)，4.94(m，1)，5.21(m，2)，5.45(s，1)，5.57(m，1)；MS(ESPOS)：500[M+Na]+.
向产物5a(P＝Boc，R1＝SMe)(158mg，0.331mmol)的DCM(5mL)溶液加入三氟化二甲氨基硫(732μL，3.31mmol)，搅拌过夜。加入更多的DCM，将有机部分用碳酸氢钠洗涤。除去溶剂所得残余物经过硅胶柱色谱纯化，使用20％乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱剂(100mg，60％)，得到被保护的产物(P＝Boc，R1＝SMe)。将Boc-保护的产物溶于30％三氟乙酸的二氯乙烷与二甲硫溶液，在rt下搅拌1h。除去溶剂，得到产物5b(R1＝SMe)：
TLC Rf＝0.63(40％MeOH/己烷)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.40(s，9)，1.69(t，J＝18.9，3)，1.98(s，3)，2.08(s，6)，2.13(s，3)，4.22-4.30(m，1)，4.53(dd，J＝10.9，25.3，1)，5.16-5.28(m，2)，5.52(s，1)，5.63(d，J＝5.2，1)；MS(ESPOS)：522[M+Na]+.
方法J
化合物6a(P＝TFA)的制备
向1L圆底烧瓶加入干燥的1a MTL(R1＝SMe)(在50℃真空下干燥过夜)(20g，0.079mol)、无水甲醇(200mL)、三乙胺(8.77g，0.087mol)和三氟乙酸甲酯(127.3g，0.99mol)。将反应混合物在rt下搅拌4h，然后蒸发溶剂至干，得到被保护的MTL 6a(R1＝SMe，P＝TFA)(26.2g，95％)，直接用于下一步。
氯代亚甲基哌啶鎓HCl(流程6，试剂b)
在氮气氛下，向装有机械搅拌器、玻璃搅拌杆(大型特氟隆桨)的3L三颈圆底烧瓶加入二乙醚(无水，1.8L)和N-甲酰哌啶(35.6g，0.315mol)。将反应混合物冷却至0℃，历经2小时分至少5部分加入三光气(31.2g，0.105mol)，维持0℃和剧烈搅拌。然后使反应混合物升温至rt(1hr)，以确保三光气完全反应，然后再次冷却至0℃。然后将反应混合物在氮或氩气流下过滤(非常吸湿性的，恶臭)，用冷的二乙醚洗涤(2×100mL)。然后将所得白色晶体在真空中干燥，得到氯代亚甲基哌啶鎓HCl(46.4g，95％)。
TFA保护的7-Cl MTL
在氮气氛下，向装有机械搅拌器、玻璃搅拌杆、特氟隆桨和回流冷凝器的3L三颈圆底烧瓶加入氯代亚甲基哌啶鎓HCl(44.4g，0.286mol)和二氯乙烷(无水，1L)。将所得浆液剧烈搅拌，调节温度至0℃。历经1分钟向搅拌着的反应混合物加入粗的6a(R1SMe，P＝TFA)(20g，0.057mol)。将反应混合物搅拌1hr，然后升高温度至65℃，在此过程期间见到反应变为澄清的溶液。然后将反应混合物在65℃下搅拌18h。然后将反应混合物冷却至0℃，然后迅速倒入装有机械搅拌器的4L埃伦迈厄瓶中，其中已经加入水(1L)和NaOH(22.9g，0.57mol)并且冷却至0℃。然后将反应混合物搅拌30min，然后用浓HCl调节pH至10.5(pH试纸)(历经5min加入，同时在每次HCl加入后检查pH，如果pH降至低于10.5，简单地加入NaOH调节至10.5是可接受的)。然后将这种经过pH调节的混合物搅拌2小时，同时允许反应恢复至rt。然后用更多的浓HCl调节pH至7，然后搅拌过夜，或者直至见到产物不含由氯化剂和糖OH官能团所生成的加合物。然后借助附着于旋转蒸发器的高真空蒸发反应混合物至干(可以采用与溶剂共蒸发，例如甲苯，以促进这种过程)。然后向所得固体加入10％甲醇/DCM混合物，搅拌1小时，使产物不含盐。然后将混合物过滤，蒸发滤液至干，得到含有产物和N-甲酰哌啶的糖浆物。用己烷研制混合物，从产物油中滗析己烷若干次，可以除去大部分N-甲酰哌啶。粗反应产物然后经过色谱处理，用10％甲醇/DCM洗脱，得到纯化的TFA保护的7-ClMTL(21.1g，75％)。
6b(R1＝SMe，R2＝Cl，R3＝H).
在0℃下，向装有机械搅拌器的500mL三颈圆底烧瓶加入纯化的TFA保护的7-Cl MTL(20g，0.054mol)在少量甲醇(10mL)中的溶液，继之以1M NaOH(250mL)。然后将反应混合物在0℃下搅拌12hr(首先见到混合物生成极粘性固体，最终进入溶液，不久见到纯的产物晶体生成)，同时定期收获纯的产物晶体，以防止7-氯官能团的水解，用少量冷水、继之以冷甲醇洗涤，得到7-Cl MTL 6b(R1＝SMe，R2＝Cl，R3＝H)，为无色固体(10g，50％)。
方法K
按照Zhang，R.；et.al.，Journal of the American ChemicalSociety.1998，120，3894-3902的文献工艺，7a与4-溴-2-甲基-2-丁烯的烯醇化(LiHMDS)和烷基化得到内酰胺7b(R9’＝2-甲基-2-丁烯)的非对映体混合物(61％)。化合物7a是可从供应商获得的，例如Bachem。作为替代选择，7a可以借助本领域熟知的方法制备，例如参见Baldwin J.E.；et al.；Tetrahedron，1989，45，7449-7468。
借助两步顺序将内酰胺7b还原为吡咯烷7c(R9’＝2-甲基-2-丁烯)(70％)，这牵涉内酰胺向半缩醛胺的还原和随后半缩醛胺被Et3SiH/BF3·OEt2还原。使吡咯烷7c(778mg，2.08mmol)、10％披钯碳(230mg)在无水甲醇(25mL)中受到50psi Parr氢解作用达5h。将反应混合物通过C盐垫过滤，用甲醇洗涤若干次。合并洗液和滤液，蒸发至干，无需进一步纯化即可得到无色的油7d(R9”＝2-甲基-2-丁烷)：TLC Rf＝0.3[溶剂系统：DCM/己烷/MeOH(6∶5∶1)]；MS(ESNEG)：284.5[M-H]-.
方法L
在-78℃和N2下，向搅拌着的7a(9.47g，29.7mmol，1equiv)的无水THF溶液加入1M LiHMDS的THF溶液(33mmol，33mL，1.1equiv)，继之以顺式-1-溴-2-戊烯(4.21mL，35.6mmol，1.2equiv)，在硅胶纯化后得到内酰胺7b(R9’＝2-戊烯)的非对映体混合物(43.2％)。借助两步顺序将内酰胺7b(3.96g，10.22mmol)还原为吡咯烷7c(R9’＝戊烯)，这牵涉在-78℃下在无水THF中内酰胺向半缩醛胺的还原，和随后在无水DCM中在-78℃下半缩醛胺被Et3SiH/BF3·OEt2还原，在硅胶纯化后得到7c(R9’＝2-戊烯)(71％)。使吡咯烷7c(2.71g，7.26mmol)和10％披钯碳(560mg)在无水甲醇(30mL)中受到50psi Parr氢解作用达5h。将反应混合物通过C盐垫过滤，用甲醇洗涤若干次。合并洗液和滤液，蒸发至干，无需进一步纯化即可得到无色的油7d(R9＝戊基)(1.68g，80％)：TLC：Rf＝0.3[溶剂系统：DCM∶己烷∶MeOH(6∶5∶1)].MS(ESNEG)：284.5[M-H]-.
方法M
8a(R9’＝3，3-二氟丙-2-烯)
7c(R9’＝2-甲基-2-丁烯)在无水二氯甲烷中的臭氧分解处理、继之以在-78℃下用DMS处理、继之以缓慢升温至rt，得到末端醛8a(77％)，无需进一步纯化即用于下一步。
在0℃下，向从上述反应所得醛8a(407mg，1.17mmol，1equiv)的二甲基乙酰胺(0.25mL)溶液加入二溴二氟甲烷(0.21mL，2.34mmol，2equiv)。在氮下，历经20分钟向搅拌着的混合物加入三苯膦(0.61g，2.34mmol，2equiv)的二甲基乙酰胺(0.5mL)溶液。将反应混合物升温至rt，搅拌30分钟，然后借助二甲基乙酰胺(0.3mL)加入到活化锌(0.25g，3.82mmol，3.3equiv)中。将所得反应混合物在110℃下搅拌1h，冷却至rt，借助二甲基乙酰胺(7mL)过滤。将滤液倒入冰水(100mL)中，用醚(150mL)萃取。将醚层用盐水洗涤，干燥，浓缩。残余物经过色谱纯化，得到澄清的油8a(R9’＝3，3-二氟丙-2-烯)(182mg，41％)：MS(ESPOS)：282.4[M Boc+H]+.
8c(R9’＝3，3-二氟丙-2-烯).向8a(84.1mg，0.22mmol，1equiv)的THF(3mL)与水(1mL)溶液加入氢氧化锂一水合物(46.3mg，1.10mmol，5equiv)。将反应混合物在rt下搅拌过夜。在真空下除去THF。将残余物溶于乙酸乙酯(50mL)，用10％柠檬酸(20mL)分配。将有机层用水(1x)、盐水(1x)洗涤，干燥，浓缩，得到8c(R9’＝3，3-二氟丙-2-烯)，为澄清的玻璃状物(56mg，87％)：MS(ESPOS)：192.3[M-Boc+H]+；MS(ESNEG)：290.3[M-H]-.
8b(R9”＝3，3-二氟丙烷).借助氢化方法可以得到流程8的饱和产物，例如关于7d的方法K所述。
方法N
9b(P＝Boc，m＝1，LG＝Ts).
向N-Boc-(2S，4R)-4-羟基脯氨酸甲基酯(Bachem)9a(P＝Boc，m＝1)(5g，20.4mmol，1equiv)与DMAP(0.25g，2.04mmol，0.1equiv)的DCM(80mL)溶液加入甲苯磺酸酐(8.65g，26.5mmol，1.3equiv)。将反应混合物冷却至0℃，加入吡啶(6.59mL，81.5mmol，4equiv)。将混合物在0℃下搅拌30分钟，然后在rt下搅拌过夜。将溶液浓缩至干。将残余物溶于乙酸乙酯(400mL)，用10％aq.柠檬酸(2×400mL)、sat.aq.NaHCO3(400mL)和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，浓缩，得到黄色糖浆物9b(P＝Boc，m＝1，LG＝Ts)(8.44g，100％)：HPLC(方法RV-1)，C18 3.5μm，4.6×30mm柱；梯度洗脱剂2％-98％MeCN历经5min；1.5mL/min)：Rt＝3.096.
9c(P＝Boc，m＝1，R9＝2，4-二氯苄基硫).
在N2下，向甲苯磺酸酯9b(P＝Boc，m＝1，LG＝Ts)(1.02g，2.55mmol，1equiv)的无水DMF(7.6mL)溶液加入2，4-二氯苄硫醇(1.48g，7.66mmol，3equiv)，继之以加入MTBU(0.55mL，3.83mmol，1.5equiv)。将反应混合物在rt下搅拌过夜，浓缩至干。将残余物溶于乙酸乙酯(100mL)，用10％柠檬酸(50mL)和盐水洗涤，浓缩。残余物经过色谱纯化，得到澄清的糖浆物9c(P＝Boc，m＝1，R9＝4-(2，4-二氯苄基硫)(1.0g)：MS(ESPOS)：320.2[M-Boc+H]+，MS(ESNEG)：418.4[M-H]-.
向甲基酯9c(P＝Boc，m＝1，R9＝2，4-二氯苄基硫)(1.0g，2.38mmol，1equiv)的THF(9mL)与水(3mL)溶液加入氢氧化锂(0.5g，11.9mmol，5equiv)。将反应混合物在rt下搅拌过夜。在真空下除去THF。使残余物在乙酸乙酯(150mL)与10％柠檬酸(100mL)之间分配。将有机层用水(1x)、盐水(1x)洗涤，经Na2SO4干燥，蒸发，得到澄清的糖浆9d(P＝Boc，m＝1，R9＝2，4-二氯苄基硫)(1.0g)：MS(ESPOS)：306.3[M-Boc+H]+；MS(ESNEG)：404.2[M-H]-.
方法O
4-丙基吡啶-2-羧酸10b(R9＝正丙基).
向4-丙基吡啶(TCI)(2.5g，20mmol)加入30％过氧化氢(2.4g)，回流过夜。除去溶剂，将所得残余物溶于DCM(30mL)。向上述溶液加入三甲代甲硅烷基氰(2.6g，26mmol)，继之以二甲基氨甲酰氯(2.8g，26mmol)，在室温下搅拌过夜。加入碳酸钾(10％，100mL)。分离有机层，经硫酸钠干燥，然后浓缩，得到4-丙基-2-氰基吡啶(2.5g，93％)。然后在盐酸(6N，60mL)中回流过夜。从乙腈中结晶后得到4-丙基吡啶羧酸10b(R9＝nPr)(2.0g，71％)：MS(ESPOS)：166[M+H]；1HNMR(300MHz，CD3OD)δ8.75(dd，J＝9.0，3.0，1)，8.42(s，1)，8.08(dd，J＝9.0，3.0，1)，3.00(t，J＝7.5，2)，1.82(m，2)，1.05(t，J＝7.2，3).
4-丙基-(3-苯基)吡啶-2-羧酸10b(R9＝4-丙基-(3-苯基)).
向4-丙基-(3-苯基)吡啶-N-氧化物(1g，4.69mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液加入三甲代甲硅烷基氰(1.3mL，10mmol)和二甲基氨甲酰氯(1mL，10mmol)，在室温下搅拌24小时。加入含水碳酸钾(10％，10mL)，用二氯甲烷(100mL)萃取。将除去溶剂所得粗产物溶于盐酸(6N，30mL)，回流24小时。除去酸，继之以使粗产物从乙腈中结晶，得到酸10b(1g，86％)：MS(ESPOS)：240[M-1]；1H NMR(300MHz，CD3OD)δ2.03-2.17(m，2)，2.74(t，J＝7.2，2)，3.04(t，J＝7.8，2)，7.16-7.38(m，5)，8.07(d，J＝4.2，1)，8.40(s，1)，8.71(d，J＝5.7，1).
方法P
4-氯吡啶甲酸甲基酯
将吡啶甲酸(20g，162mmol，1equiv)与溴化钠(33.43g，325mmol，2equiv)在亚硫酰氯(81mL)中的混合物回流5h。在真空下除去溶剂。加入无水甲醇(160mL)，将混合物在rt下搅拌30分钟。蒸发溶剂，将残余物溶于5％碳酸氢钠，用乙酸乙酯萃取(3x)。合并有机层，经MgSO4干燥，蒸发。残余物经过色谱纯化，得到4-氯吡啶甲酸甲基酯(19.9g，72％)，为白色固体：1HNMR(300MHz，CDCl3)δ8.63(d，J＝5.4，1)，8.13(d，J＝2.1，1)，7.48(dd，J＝2.0，5.3，1)，4.00(s，3).
4-碘吡啶甲酸11a.
将4-氯吡啶甲酸甲基酯(2.4g，14.1mmol)、57％氢碘酸(13.3mL)与50％含水次磷酸(0.66mL)的混合物在85℃下搅拌2h，然后在107℃下搅拌过夜。将混合物冷却至95℃。在该温度下在30分钟内加入10M氢氧化钠水溶液(4.2mL)，继之以加入水(15.2mL)。将混合物冷却至rt，在rt下搅拌1h。将沉淀过滤，用冷水洗涤，在高真空下干燥过夜，得到黄色固体11a，即4-碘吡啶甲酸(3.5g，66％)：1H NMR(300MHz，DMSO d6)δ8.39(d，J＝5.1，1)，8.35(d，J＝1.8，1)，8.07(dd，J＝1.7，5.2，1)；MS(ESPOS)：250.2[M+H]+.
4-碘吡啶甲酸甲基酯11b.
在23℃下，向4-碘吡啶甲酸11a(7.0g，18.6mmol)的MeOH(70mL)溶液加入浓硫酸(350μL)，将反应混合物回流48h。将反应混合物冷却至室温，浓缩，得到所需产物4-碘吡啶甲酸甲基酯11b(4.4g，90％)，为黄色的油：1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.52(t，J＝0.6，1.5，1)，8.40(d，J＝5.1，1)，7.86-7.88(dd，J＝0.6，5.1，1)，4.02(s，3)；MS(ESPOS)：263.9[M+H]；285.9[M+Na].
4-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基(silanyloxy))-丙-1-炔基]-吡啶-2-羧酸甲基酯11c(R9’＝叔丁基-二甲基-硅烷氧基).
向干燥的烧瓶加入11b(5.41g，20.6mmol，1equiv)、三苯膦(431.5mg，1.65mmol，0.08equiv)、碘化亚铜(I)(313.4mg，1.65mmol，0.08equiv)、乙酸钯(5mg，0.82mmol，0.04equiv)和三乙胺(74mL)。将混合物用氮脱气，继之以加入叔丁基二甲基(2-丙炔氧基)硅烷(Aldrich)(8.34mL，41.14mmol，2equiv)。将混合物在rt下搅拌3h。在真空下除去溶剂，得到深色残余物。残余物经过色谱纯化，得到酯11c(R9’＝3-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丙-1-炔基)(6.07g，97％)，为褐色的油：1HNMR(300MHz，CDCl3)δ8.67(dd，J＝0.8，5.0，1)，8.09(m，1)，7.43(dd，J＝1.7，5.0，1)，4.54(s，2)，3.99(s，3)，0.92(s，9)，0.14(s，6).MS(ESPOS)：306.5[M+H]+.
4-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丙基]-哌啶-2-羧酸甲基酯11d(R9’＝3-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丙基).
向11c(R9’＝3-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丙-1-炔基)(6.05g，19.8mmol，1equiv)在MeOH(60mL)、水(60mL)与乙酸(1.14mL，19.8mmol，1equiv)中的混合物加入氧化铂(2.0g)。将混合物用氢净化和充气(50psi)，在rt下摇动过夜。过滤除去氧化铂，浓缩滤液，得到产物11d(R9’＝3-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丙基)(5.0g，80％)：MS(ESPOS)：316.6[M+H]+.
4-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丙基]-哌啶-1，2-二羧酸1-叔丁基酯2-甲基酯11e(R9’＝3-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丙基，P＝Boc).
向11d(R9’＝3-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丙基)(4.99g，15.8mmol，1equiv)的甲醇(60mL)溶液加入三乙胺(4.42mL，31.7mmol，2equiv)和二碳酸二叔丁酯(4.7mL，20.6mmol，1.3equiv)。将混合物在rt下搅拌过夜。在真空下除去溶剂。残余物经过色谱纯化，得到氨基甲酸酯11e(R9’＝3-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丙基，P＝Boc)(2.75g，42％)，为澄清的糖浆物：
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ4.28(t，J＝6.6，1)，3.70(s，3)，3.55(t，J＝6.3，2)，3.55-3.48(m，1)，3.40-3.30(m，1)，2.00-1.92(m，1)，1.82-1.69(m，2)，1.64-1.20(m，6)，1.41(s，9)，0.86(s，9)，0.01(s，6)；MS(ESPOS)：316.6[M+H-Boc]+.
4-[3-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丙基]-哌啶-1，2-二羧酸1-叔丁基酯11f(R9’＝3-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丙基，P＝Boc).
向11e(R9’＝3-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丙基，P＝Boc)(2.75g，6.63mmol，1equiv)在THF(12mL)与水(4mL)中的混合物加入氢氧化锂一水合物(306mg，7.29mmol，1.1equiv)。将混合物在rt下搅拌过夜。加入另外的氢氧化锂一水合物(834mg，19.89mmol，3equiv)，将混合物在rt下搅拌5hr。在真空下除去THF。将水层溶于乙酸乙酯，用10％柠檬酸分配。将有机层用水(1x)、盐水(1x)洗涤，干燥，浓缩，得到黄色糖浆物，经过色谱纯化，得到所需的酸11f(R9’＝3-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丙基，P＝Boc)(1.83g，69％)，为无色糖浆物：1HNMR(300MHz，CDCl3)δ4.26(t，J＝6.9，1)，3.57(t，J＝6.5，2)，3.53-3.44(m，1)，3.43-3.33(m，1)，2.05-1.96(m，1)，1.82-1.68(m，2)，1.64-1.45(m，3)，1.42(s，9)，1.37-1.27(m，3)，0.86(s，9)，0.02(s，6).MS(ESPOS)：424.7[M+Na]+.
方法Q
(2S，4R)-N-Boc-4-羟基脯氨酸甲基酯.
在0℃下，向搅拌着的(2S，4R)-4-羟基脯氨酸(Bachem)(25g，108mmol)的甲醇(50mL)溶液加入三甲代甲硅烷基重氮甲烷(24.6g，216mmol)。将混合物在0℃下搅拌1h。除去溶剂所得残余物经过柱色谱纯化，用50％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱，得到(2S，4R)-N-Boc-4-羟基脯氨酸甲基酯(27g，100％)，为无色的油：1H NMR(300MHz，CDCl3)δ4.47(m，1)，4.39(m，1)，3.70(s，3)，3.60(m，2)，2.27(m，1)，2.05(m，1)，1.38(s，9)；MS(ESPOS)：268(M+Na).
(2S，4R)-N-Boc-4-酮基脯氨酸甲基酯12a(P＝Boc，P2＝Me，m＝1).
在-78℃下，向草酰氯(15g，118mmol)的DCM(15mL)溶液历经15分钟缓慢加入DMSO(18.6mL，236mmol)。加入完成后，滴加(2S，4R)-N-Boc-4-羟基脯氨酸甲基酯(26.5g，108mmol)的DCM(100mL)溶液，在-78℃下搅拌20min，然后加入三乙胺(54.6g，540mmol)，搅拌2h。然后将反应混合物用10％aq.HCl(200mL)洗涤。分离有机层，经硫酸钠干燥。除去溶剂所得粗产物经过硅胶柱色谱纯化，用50％EtOAc的己烷溶液洗脱，得到12a(P＝Boc，P2＝Me，m＝1)(20g，78％)，为褐色固体：1H NMR(300MHz，CDCl3)δ4.80(m，1)，3.88(d，J＝8.7，2)，3.77(s，3)，2.98(m，1)，2.58(m，1)，1.45(s，9)；MS(ESPOS)：244(M+H).
N-Boc-4-羟基-4-烯丙基脯氨酸甲基酯12b(P＝Boc，P2＝Me，m＝1，R9’＝烯丙基).
向搅拌着的12a(P＝Boc，P2＝Me)(1g，4.11mmol)的THF(10mL)溶液加入四烯丙基锡(1.08mL，4.52mmol)的无水THF溶液，然后冷却至0℃，然后缓慢加入三氟化硼醚合物(0.520mL，4.11mmol)。将混合物在0℃下搅拌1h，然后在室温下搅拌另外2h。加入氟化钾(360mg，在5mL水中)和C盐(1g)，将反应混合物搅拌1小时。将反应混合物过滤，浓缩至干。将残余物溶于DCM(200mL)，用水(100mL)和盐水(100mL)洗涤，经MgSO4干燥，蒸发至干。所得残余物经过硅胶柱色谱纯化，用50％EtOAc的己烷溶液洗脱，得到12b(P＝Boc，P2＝Me，m＝1，R9＝烯丙基)(0.94g，80％)，为无色的油：
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ5.87(m，1)，5.19(m，2)，4.34(m，1)，3.75(d，J＝4.8，3)，3.50(m，3)，2.37(m，1)，2.21(m，1)，1.39(d，J＝12.9，9)；MS(ESPOS)：308[M+Na]+.
N-Boc-4-氟-4-烯丙基脯氨酸甲基酯12c(P＝Boc，P2＝Me，m＝1，R9’＝烯丙基).
在-78℃下，向搅拌着的DAST(1.06g，6.58mmol)的DCM(10mL)溶液缓慢加入12b(P＝Boc，P2＝Me，R9＝烯丙基)(940mg，3.3mmol)的无水DCM(10mL)溶液。然后将混合物在-78℃下搅拌1h，然后在-10℃下搅拌另外1h。加入DCM(50mL)，用NH4Cl(10％，150mL)猝灭，分离有机层，经硫酸钠干燥，蒸发至干。残余物经过硅胶柱色谱纯化，使用5％EtOAc的己烷溶液作为洗脱剂，得到所需产物12c(P＝Boc，P2＝Me，m＝1，R9＝烯丙基)(330mg，34％)，为无色的油：
1HNMR(300MHz，CDC13)δ5.82(m，1)，5.12(m，2)，4.43(m，1)，3.66(s，3)，3.47(m，1)，2.37(m，1)，2.43(m，4)，1.37(dd，J＝4.5，13.8，9)；MS(ESPOS)：310[M+Na]+.
N-Boc-4-氟-4-丙基脯氨酸甲基酯12c(P＝Boc，P2＝Me，m＝1，R9＝丙基).
向12c(P＝Boc，P2＝Me，m＝1，R9＝烯丙基)(0.33g，1.15mmol)的MeOH(15mL)溶液加入10％Pd/C(40mg)。将反应混合物在室温和氢(30atm)下搅拌3hr。通过C盐过滤催化剂，用甲醇洗涤。浓缩滤液，得到所需被保护的氨基酸酯12c(P＝Boc，P2＝Me，R9＝丙基)(0.33g，100％)，为澄清的油：1HNMR(300MHz，CDCl3)δ4.43(m，1)，3.71(m，4)，3.47(m，1)，2.51(m，1)，1.98(m，5)，1.40(dd，J＝5.1，13.8，9)，0.93(J＝7.8，3)；MS(ESPOS)：190[M-Boc]+.
N-Boc-4-氟-4-丙基脯氨酸12d(P＝Boc，R9＝丙基，m＝1).
向甲基酯12d(330mg，1.15mmol)的THF(12mL)与水(4mL)溶液加入氢氧化锂一水合物(60mg，1.38mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。除去THF，将残余物溶于乙酸乙酯(50mL)，用10％柠檬酸(100mL)和盐水(20mL)洗涤。浓缩有机部分，得到所需被保护的氨基酸12e(P＝Boc，R9＝丙基，m＝1)(310mg，100％)，为白色固体：
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ4.43(m，1)，3.71(m，6)，2.51(m，2)，1.98(m，3)，1.45(m，9)，0.96(m，3)；MS(ESNEG)：274[M-1]
方法R
(2S，4R)-N-三氟酰基-4-叔丁氧基脯氨酸.
向4-叔丁氧基脯氨酸(Bachem)(5.0g，27mmol，1equiv)与TEA(11.2mL，80mmol，3equiv)的无水MeOH(30mL)溶液加入三氟乙酸乙酯(4.8mL，40mmol，1.5equiv)。将混合物在24℃下搅拌过夜。将溶液浓缩至干，溶于DCM(200mL)，将有机相用aq.0.2M KHSO4(2×100mL)和盐水(1×100mL)洗涤，经MgSO4干燥，蒸发至干。所得残余物用环己烷和戊烷研制，得到产物(2S，4R)-N-三氟酰基-4-叔丁氧基脯氨酸，为浅黄色粉末(5.5g，72％)。
14a(P＝CF3CO，m＝1，R2＝H，R3＝OH).
在0℃下，向MTL 1a(1.32g，5.3mmol，1equiv)的无水DMF(16mL)溶液加入三乙胺(2.20mL，15.9mmol，3equiv)，继之以双-(三甲代甲硅烷基)三氟乙酰胺(2.81mL，10.6mmol，2.0equiv)。将反应混合物在0℃下搅拌10分钟，然后在rt下搅拌50分钟。向反应混合物加入(2S，4R)-N-三氟酰基-4-叔丁氧基脯氨酸(1.8g，6.3mmol，1.2equiv)、HATU(3.02g，8.0mmol，1.5equiv)。将反应混合物搅拌3h。将反应混合物蒸发至干，溶于乙酸乙酯(500mL)，用10％柠檬酸(100mL)、水(100mL)、半饱和含水NaHCO3(200mL)和盐水洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，蒸发，得到黄色糖浆物，溶于MeOH(100mL)。加入干燥的
H+型树脂(500mg)，将所得悬液搅拌50min，过滤，蒸发至干，得到黄色固体(2.89g)。产物经过二氧化硅色谱纯化，用DCM/己烷/MeOH 6∶5∶1至7∶2∶1洗脱，得到产物14a(P＝CF3CO，m＝1，R2＝H，R3＝OH)，为无色固体(1.7g，51％)。
14b(P＝CF3CO，m＝1，R2＝H，R3＝OAc).
在0℃下，向14a(P＝CF3CO，m＝1，R2＝H，R3＝OH)(1.63g，3.1mmol)、吡啶(3mL，30mmol)与DMAP(38mg，0.31mmol)的无水DCM(10mL)溶液加入乙酸酐(3mL，31mmol)。使反应温度历经1h升高至24℃，搅拌48h。将反应混合物用氯仿(200mL)稀释，有机相用Aq.10％乙酸(3×200mL)、10％柠檬酸(200mL)、半饱和aq.NaHCO3(200mL)和盐水(1×100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，蒸发，得到全酰化中间体14b(P＝CF3CO，m＝1，R2＝H，R3＝OAc)(2.14g，99％)，为无色晶体。
向上述全酰化中间体14b(P＝CF3CO，m＝1，R2＝H，R3＝OAc)(2.1g，3.1mmol)的DCE(64mL)与甲基硫(1.4mL)溶液加入三氟乙酸(21mL)和水(1.4mL)。将反应混合物在rt下搅拌1h。在真空下除去溶剂，用DCE共蒸发两次。残余物经过色谱纯化，用5％MeOH的DCM溶液洗脱，得到中间体醇(1.6g，83％)，为无色固体，无需表征即用于下一步。
14b(P＝CF3CO，m＝1，R2＝H，R3＝OAc).
向上述4-醇中间体(1.5g，2.38mmol，1equiv)与DMAP(29mg)的DCE(9.5mL)溶液加入对-甲苯磺酸酐(1.01g，3.09mmol，1.3equiv)。将反应混合物冷却至0℃，加入吡啶(0.77mL，9.52mmol，4equiv)。将反应混合物在0℃下搅拌30分钟，然后在rt下搅拌过夜。将反应混合物浓缩至干。将残余物溶于乙酸乙酯(200mL)，用10％柠檬酸(2×200mL)、sat.NaHCO3(200mL)和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，浓缩，得到黄色糖浆物，经过色谱纯化，用4∶1己烷/EtOAc洗脱，得到对-甲苯磺酸酯产物14b(P＝CF3CO，m＝1，R2＝H，R3＝OAc)(1.7g，92％)，为无色固体。
方法S
正丙基丙二酸二乙酯
在23℃下，历经10min经由套管向氢化钠(60％矿物油分散体，12.6g，315mmol，1.05equiv)的DMF(300mL)悬液加入丙二酸二乙酯(45.5mL，300mmol，1equiv)的DMF(100mL)溶液。加入导致轻微的放热，观察到H2气体的放出，没有必要冷却。加入后，将反应在23℃下搅拌45min，然后用1-溴丙烷(27.3mL，300mmol，1equiv)处理。将反应在23℃下搅拌25min，然后加热至65℃达3h，然后在23℃下搅拌过夜。将反应混合物加入到1.0N HCl(1N)中，然后用二乙醚(700mL)萃取。将醚萃取液用H2O(400mL)、盐水(200mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩，得到65.1g产物，为澄清的油。13C NMR揭示为大约4∶1的单∶双-烷基化产物。产物正丙基丙二酸二乙酯无需进一步纯化即可使用：
1H NMR(300MHz，CDCl3)4.18(q，J＝6.9Hz，4H)，3.32(t，J＝7.8Hz，1H)，1.91-1.79(m，2H)，1.41-1.25(m，2H)，1.25(t，J＝6.9Hz，6H)，0.92(t，J＝7.5Hz，3H)；13CNMR(300MHz，CDCl3)
(*表示由双烷基化次要产物引起的信号)
61.2，60.9*，51.8，34.4*，30.7，20.5，17.3*，14.4*，14.0，13.7.
正丙基丙二酸乙酯21b(R9＝正丙基).
在23℃下，向正丙基丙二酸二乙酯(被大约20％双(正丙基)丙二酸二乙酯污染，65.0g，273mmol，1equiv)的EtOH(500mL)溶液加入1.0MKOH溶液(273mL，273mmol，1equiv)。加入后，将反应加热至80℃(内部温度)达4h。冷却至23℃后，在真空中除去EtOH。使残余混合物在二乙醚(400mL)与H2O(200mL)之间分配。分离各层，醚层用饱和含水NaHCO3(100mL)萃取。合并含水NaHCO3层与原始水层，将该溶液用1.0N HCl酸化至pH 1，用EtOAc萃取(2×600mL)。将EtOAc萃取液干燥(MgSO4)，过滤，浓缩，得到21b(R9＝正丙基)41.3g(237mmol，79％，2步)纯产物，为澄清的油：
1HNMR(300MHz，CDCl3)4.43(q，J＝7.2Hz，2H)，3.60(t，J＝7.5Hz，1H)，2.18-2.02(m，2)，1.66-1.50(m，2H)，1.49(t，J＝7.2Hz，3H)，1.15(t，J＝7.5Hz，3H).
正丙基丙烯酸乙酯21c(R9＝正丙基).
在23℃下，向正丙基丙二酸乙酯(41.3g，237mmol，1equiv)的EtOH(500mL)溶液加入哌啶(28.1mL，284mmol，1.2equiv)，继之以含水甲醛(37％，88mL)。加入后，将反应回流29h。冷却至23℃后，使混合物在二乙醚(500mL)与1.0N HCl(800mL)之间分配。分离各层，水层用二乙醚(500mL)萃取。合并有机层，用H2O(500mL)、盐水(300mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩(仅旋转蒸发，产物是潜在挥发性的)。将产物真空蒸馏(bp 70℃，15mmHg)，得到16.4g 21c(R9＝正丙基)(115mmol，49％)所需产物：1H NMR显示被未鉴别的材料污染；产物无需进一步纯化即用于下一步：1H NMR(300MHz，CDCl3)6.12(s，1H)，5.50(s，1H)，4.19(q，J＝7.2Hz，2H)，2.23(t，J＝7.5Hz，2H)，1.55-1.42(m，2H)，1.24(t，J＝7.2Hz，3H)，0.92(t，J＝7.5Hz，3H).
2-丙基-丙-2-烯-1-醇.
在78℃下，历经20min经由套管向21c(R9＝正丙基)(16.4g，115mmol，1equiv)的CH2Cl2(500mL)溶液加入DIBALH(1.0M己烷溶液，403mL，403mmol，3.5equiv)。加入后，将反应在78℃下搅拌30min，然后历经60min升温至55℃。一旦反应浴温度已经达到55℃，加入EtOAc(15mL)以猝灭过量DIBALH。搅拌5min后，在23℃下将经过猝灭的反应混合物经由套管缓慢加入到搅拌着的1∶1饱和含水酒石酸钾钠∶饱和含水NaHCO3混合物(1L)中。将两相混合物搅拌1h，然后分离各层。水层用二乙醚(500mL)萃取。合并有机层，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩(仅旋转蒸发，产物是潜在挥发性的)。将产物真空蒸馏(bp100-120℃，15mmHg)，得到7.58g(75.8mmol，66％)所需产物2-丙基-丙-2-烯-1-醇，为澄清的油：1HNMR(300MHz，CDCl3)5.22(s，1H)，5.06(s，1H)，4.27(s，2H)，2.24(t，J＝7.5Hz，2H)，1.75-1.60(m，2H)，1.12(t，J＝6.9Hz，3H).
2-溴甲基-戊-1-烯21d(R9＝正丙基).
在0℃下，向正丙基烯丙醇(7.58g，75.8mmol，1equiv)的Et2O(65mL)溶液加入吡啶(0.58mL)。然后历经15min经由套管加入PBr3(4.28mL，45.5mmol，0.6equiv)的Et2O(20mL)溶液。加入后，将反应在0℃下搅拌75min，然后将冷反应混合物缓慢加入到搅拌着的冰冷的饱和含水NaHCO3(500mL)中。所得两相混合物用二乙醚(250mL)萃取。将有机萃取液用饱和含水NaHCO3(2×100mL)、盐水(100mL)、1.0N HCl(100mL)、盐水(100mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩(0℃旋转蒸发，产物是挥发性的)。产物经由硅胶快速柱色谱纯化，使用戊烷作为洗脱剂，得到5.97g(36.8mmol，49％)所需产物21d(R9＝正丙基)，为澄清的油：1HNMR(300MHz，CDCl3)5.16(s，1H)，4.95(s，1H)，3.97(s，2H)，2.19(t，J＝7.5Hz，2H)，1.56-1.43(m，2H)，0.93(t，J＝7.8Hz，3H).
N-烯丙基甘氨酸乙基酯.
在0℃下，向烯丙基胺21e(R9b＝H，m＝1)(50mL，666mmol，2equiv)的Et2O(167mL)溶液加入溴乙酸乙酯(36.9mL，333mmol，1equiv)。在加入后立即观察到白色沉淀和放热反应；放热导致溶剂沸腾大约2min。加入后，将反应搅拌2.5h，然后除去冰-水浴，将反应在23℃下搅拌过夜。在23℃下15h后，将反应混合物通过玻璃料过滤，以除去所沉淀的烯丙基胺氢溴酸盐副产物。收集固体，用Et2O(200mL)洗涤，然后合并滤液，浓缩。将产物真空蒸馏(bp 48-55℃，1.0mmHg)，得到35.5g(249mmol，75％)所需产物N-烯丙基甘氨酸乙基酯，为黄色的油：1HNMR(300MHz，CDCl3)5.93-5.79(m，1H)，5.22-5.08(m，2H)，4.18(q，J＝7.2Hz，2H)，3.39(s，2H)，3.29-3.23(m，2H)，1.27(t，J＝7.2Hz，3H)；MS(ESPOS)：144.1[M+H]+.
N-烯丙基甘氨酸乙基酯盐酸盐21f(R9b＝H，m＝1).
在23℃下，经由加液漏斗历经35min向N-烯丙基甘氨酸乙基酯(10.0g，70.0mmol，1equiv)的Et2O(260mL)与己烷(1.3L)溶液缓慢加入4.0M HCl的二噁烷溶液(16.6mL，66.5mmol，0.95equiv)。加入后，将悬液搅拌另外40min，然后通过玻璃料过滤分离产物，用己烷(200mL)洗涤。收集白色固体，转移至烧瓶，置于真空(0.5mmHg)下达1h，得到11.5g所需产物，为白色固体。在相等规模上重复反应，得到总计22.73g(127mmol，90％)所需胺盐酸盐21f(R9b＝H，m＝1)，为白色固体：
1HNMR(300MHz，DMSO-d6)9.50(s，2H)，5.95-5.81(m，1H)，5.49-5.37(m，2H)，4.21(q，J＝7.2Hz，2H)，3.92(s，2H)，3.59(d，J＝6.6Hz，2H)，1.24(t，J＝7.2Hz，3H)；MS(ESPOS)：144.1[M+H]+.
伪麻黄碱N-烯丙基甘氨酰胺21h(R9b＝H，m＝1).
向含有21f(R9b＝H)(20.3g，113mmol，1.3equiv)和(1R，2R)-伪麻黄碱21g(14.4g，86.9mmol，1equiv)的烧瓶加入THF(130mL)。将所得混合物在20℃下剧烈搅拌20分钟，得到均匀的浆液，然后用一次性加入的固体叔丁醇锂(9.74g，122mmol，1.4equiv)处理。将反应在20℃下搅拌2天，此后分析揭示两种原料仍然是存在的。将不完全的反应用H2O(200mL)处理，然后在真空中除去THF。将所得水溶液用CH2Cl2萃取(2×150mL)，然后用NaC l饱和，进一步用CH2Cl2萃取(2×100mL)。将有机萃取液干燥(K2CO3)，过滤，浓缩。粗产物经由硅胶快速柱色谱纯化，使用2∶2∶96MeOH/Et3N/CH2Cl2作为洗脱剂，得到18g产物。该产物仍然在实质上被N-烯丙基甘氨酸乙基酯污染，在真空(1.0mmHg)下轻微加热(60℃)达15h除去之，得到14.88g(56.8mmol，65％)所需甘氨酰胺产物21h(R9b＝H，m＝1)，为粘性的油：1H NMR(300MHz，CDCl3)(光谱显示旋转异构体)7.41-7.24(m，5H)，6.00-5.80(m，1H)，5.29-5.07(m，2H)，4.64-4.44(m，1H)，3.96-3.84(m，0.5H)，3.63(d，J＝13.8Hz，0.5H)，3.45-3.21(m，4H)，2.95(s，1.5H)，2.78(s，1.5H)，1.11(d，J＝6.9Hz，1.5H)，0.98(d，J＝6.9Hz，1.5H)；MS(ESPOS)：263.2[M+H]+.
HPLC(Symmetry C18，3.5μm粒径，孔径，4.6mm直径30mm长度，2％-98％MeCN于H2O中w/0.1％TFA历经10min，2mL/min流速)：Rt＝3.10min
伪麻黄碱N-烯丙基甘氨酰胺的烷基化
在0℃下，向含有LiCl(经过真空火焰干燥，3.14g，74.1mmol，4equiv)的烧瓶加入伪麻黄碱N-烯丙基甘氨酰胺21h(R9b＝H，m＝1)(4.85g，18.5mmol，1equiv)的THF(50mL)溶液。将所得混合物在0℃下搅拌25min，然后用历经40min经由套管缓慢加入的LiHMDS溶液(1.0M THF溶液，37.0mL，37mmol，2equiv)处理。加入LiHMDS后，将烯醇化物溶液在0℃下搅拌另外30min，然后历经30sec经由注射器滴加烯丙基溴(3.00g，18.5mmol，1equiv)。将反应在0℃下搅拌另外90min，然后用H2O(200mL)猝灭，用CH2Cl2萃取(3×150mL)。将有机萃取液干燥(K2CO3)，过滤，浓缩，得到8.0g黄色的油。一小部分粗产物经由硅胶快速柱色谱纯化，使用3∶2∶95MeOH/Et3N/CH2Cl2作为洗脱剂，得到分析纯的产物样品。其余产物无需任何纯化即用于下一步：1H NMR(300MHz，CDCl3)(光谱显示旋转异构体)7.40-7.24(m，5H)，5.90-5.76(m，1H)，5.20-5.02(m，2H)，4.92-4.75(m，2H)，4.66-4.45(m，2H)，4.20-4.00(m，1H)，3.62(t，J＝6.3Hz，1H)，3.34-3.16(m，1H)，3.05-2.94(m，2H)，2.84(s，3H)，2.55(q，J＝7.2Hz，1H)，2.22-1.80(m，5H)，1.58-1.36(m，3H)，1.11(d，J＝6.9Hz，2H)，1.04(t，J＝72Hz，1H)，0.96(d，J＝6.9Hz，1H)，0.89(t，J＝7.2Hz，2H)；MS(ESPOS)：345.0[M+H]+.
HPLC(Symmetry C18，3.5μm粒径，
孔径，4.6mm直径30mm长度，2％-98％MeCN于H2O中w/0.1％TFA历经10min，2mL/min流速)：Rt＝4.28min
二烯氨基酰胺21i的Boc-保护(R9＝正丙基，R9b＝H，m＝1)
在23℃下，向胺(前步粗产物，8.0g，大约18mmol，1equiv)的CH2Cl2(100mL)溶液加入三乙胺(2.83mL，20mmol，1.1equiv)，继之以(Boc)2O(8.07g，37mmol，2equiv)。将所得混合物在23℃下搅拌13.5h，然后浓缩。粗产物经由硅胶梯度快速柱色谱纯化(柱子填充时的直径为5.5cm，高17cm)，先用25％EtOAc/己烷(1L)洗脱，再用30％EtOAc/己烷(600mL)洗脱，再用40％EtOAc/己烷(400mL)洗脱。得到21i(R9＝正丙基，R9b＝H，m＝1)5.20g(11.7mmol，65％，2步)纯产物。弃去一些也含有微量产物的混合级分：
1H NMR(300MHz，CDCl3)(光谱显示旋转异构体)7.52-7.24(m，5H)，5.90-5.62(m，1H)，5.44(t，J＝6.9Hz，0.5H)，5.20-4.96(m，2.5H)，4.77(d，J＝13.2Hz，2H)，4.68-4.35(m，2H)，4.00-3.55(m，1H)，3.79(d，J＝5.7Hz，1H)，2.91(s，1H)，2.87(s，2H)，2.52-2.29(m，2H)，2.10-1.96(m，2H)，1.54-1.35(m，9H)，1.13-1.00(m，2H)，0.96-0.86(m，3H)；MS(ESPOS)：467.3[M+Na]+.
HPLC(Symmetry C18，3.5μm粒径，孔径，4.6mm直径30mm长度，2％-98％MeCN于H2O中w/0.1％TFA历经10min，2mL/min流速)：Rt＝6.85min
环封闭性二烯复分解21j(R9＝正丙基，R9b＝H，m＝1).
在23℃下，向二烯21i(R9＝正丙基，R9b＝H)(5.20g，11.7mmol，1equiv)的CH2Cl2(700mL)溶液加入亚苄基[1，3-双(2，4，6-三甲基苯基)-2-亚咪唑烷基]二氯-(三环己基膦)钌(Grubbs第2代催化剂，320mg，0.38mmol，0.03equiv)。将反应回流2h，然后冷却至23℃，浓缩。所得产物首先经由硅胶快速柱色谱纯化(以40％EtOAc的己烷溶液作为洗脱剂)，得到所需产物，仍然轻微被未鉴别的材料污染。然后将产物溶于热己烷(100mL)，历经2天结晶。通过玻璃料过滤分离所结晶的产物，用冰冷的己烷(100mL)洗涤，得到3.425g所需四氢吡啶(8.23mmol，70％)。浓缩母液，得到0.57g褐色的油，再次受到硅胶快速柱色谱处理(以40-50％EtOAc的己烷溶液作为洗脱剂)，得到另外392mg(0.94mmol，8％)所需产物21j(R9＝正丙基，R9b＝H，m＝1)：
1H NMR(300MHz，CDCl3)(光谱显示旋转异构体)7.50-7.25(m，5H)，5.52-5.26(m，1H)，5.05-4.96(m，1H)，4.634.35(m，2H)，4.30-358(m，3H)，2.91(s，3H)，2.50-2.34(m，1H)，2.20-1.94(m，3H)，1.46(s，7H)，1.41(s，2H)，1.19-1.01(m，2H)，0.94-0.85(m，3H)；MS(ESPOS)：439.3[M+Na]+.
HPLC(Symmetry C18，3.5μm粒径，孔径，4.6mm直径30mm长度，2％-98％MeCN于H2O中w/0.1％TFA历经10min，2mL/min流速)：Rt＝6.29min
伪麻黄碱助剂21k的裂解(R9＝正丙基，R9b＝H，m ＝1).
在23℃下，向酰胺21j(R9＝正丙基，R9b＝H，m＝1)(3.42g，8.22mmol，1equiv)的MeOH(170mL)溶液加入1.0M含水NaOH(41.1mL，41.1mmol，5equiv)。将反应回流24h(油浴温度100℃)，然后冷却至23℃，经由旋转蒸发浓缩，以除去大多数MeOH。将所得水溶液转移至分液漏斗，用H2O(100mL)稀释，用Et2O(100mL)萃取。将醚萃取液用0.5M含水NaOH(70mL)洗涤，然后弃去。合并碱性水层，用1.0NHCl酸化至pH 2，然后用EtOAc萃取(2×200mL)。将有机萃取液干燥(MgSO4)，过滤，浓缩，得到2.46g所需Boc-保护的氨基酸21k(R9＝正丙基，R9b＝H，m＝1)：1HNMR(300MHz，CDCl3)(光谱显示旋转异构体)5.36(d，J＝22.8Hz，1H)，5.09(d，J＝4.8Hz，0.5H)，4.90(br s，0.5H)，4.14-3.97(m，1H)，3.83-3.67(m，1H)，2.57-2.37(m，2H)，1.98(t，J＝7.2Hz，2H)，1.48(s，6H)，1.47-1.35(m，2H)，1.46(s，3H)，0.86(t，J＝72Hz，3H)；MS(ESPOS)：292.1[M+Na]+；MS(ESNEG)：268.2[M-H]-.
方法T
在0℃下，向无水MeOH(20mL)滴加SOCl2(1.58mL，21.6mmol)，将溶液在0℃下搅拌10分钟，然后加入固体L-2-氨基-4-戊烯酸22a(R9b＝H)(Aldrich)(1.0g，8.7mmol)。将反应混合物在环境温度下搅拌48h，在真空下除去溶剂。借助硅胶柱色谱进行纯化(10％MeOH/DCM)，得到L-2-氨基-4-戊烯酸甲基酯22b(R9b＝H)(0.95g，85％)。
在0℃下，向L-2-氨基-4-戊烯酸甲基酯的二氯乙烷溶液(32mL)加入2，4，6-三甲基吡啶(2.3mL，19.1mmol，2.2equiv)和固体2-硝基苯磺酰氯。将反应在r.t.下搅拌3h。在真空下除去溶剂，使残余物在乙酸乙酯(200mL)与饱和含水NH4Cl之间分配。将有机层用1.0M aq.KHSO4、饱和aq.NaHCO3、盐水洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，得到残余物，经过二氧化硅柱色谱纯化(梯度：10至20％EtOAc/己烷)，得到所需产物22b(R9b＝H)0.70g(26％)，为黄色的油。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ8.10-8.06(m，1)，7.95-7.92(m，1)，7.76-7.73(m，2)，6.08(d，J＝8.2，1)，5.74-5.60(m，1)，5.17-5.12(m，2)，4.33-4.26(m，1)，3.52(s，3)，2.58(dd，J＝6.0，6.0，1)，3.44-3.30(m，2)，2.25-2.10(m，2)，2.11(s，3)，2.00-1.88(m，1)，1.86-1.70(m，1)，1.44-1.25(m，6)，0.98-0.88(m，9H).
MS(ESNEG)：313.0[M-H]-.
向搅拌着的磺酰胺22b(R9b＝H)(685mg，2.18mmol)、Cs2CO3(710mg，2.18mmol)与溴化四丁基铵(702mg，2.18mmol)的DMF(5.0mL)悬液加入3-亚甲基己-1-基-甲苯磺酸酯22c(R9＝丙基)(702mg，2.61mmol；如Kelvin H.Yong et al.Journal of Organic Chemistry，2001，66，8248所述制备)的DMF(1.0mL)溶液，将反应混合物加热至60℃过夜。蒸发除去反应溶剂，将所得残余物溶于EtOAc，用10％含水柠檬酸和盐水洗涤，将有机相经MgSO4干燥，浓缩，得到残余物，经过二氧化硅柱色谱纯化(17％-20％EtOAc/己烷)，得到所需产物22d(R9＝丙基，R9b＝H)(0.38g，42％)，为油。
MS(ESPOS)：433[M+Na]+.
向22d(R9＝丙基，R9b＝H)(0.38g，0.92mmol)的无水DCM(40mL)溶液加入亚苄基[1，3-双(2，4，6-三甲基苯基)-2-亚咪唑烷基]二氯-(三环己基膦)钌(23.3mg，0.0276mmol)，将所得反应混合物在N2下回流2.5hr，冷却至室温，浓缩。产物经过硅胶快速柱色谱纯化(35％乙酸乙酯/己烷)，得到所需化合物22e(R9＝丙基，R9b＝H)(0.29g，81％)。
MS(ESPOS)：383[M+Na]+.
经由套管向搅拌着的苯硫酚(183μL，1.79mmol)与7-甲基-1，5，7-三氮杂二环[4.4.0]癸-5-烯(214μL，1.49mmol)的无水DMF(3mL)溶液加入烯22e(R9＝丙基，R9b＝H)(228mg，0.596mmol)的无水DMF(3.0mL)溶液，将所得反应混合物在N2下搅拌1小时，然后浓缩至残余物。将残余物溶于醚，与1N含水HCl(15.0mL)搅拌5min。将水相用醚洗涤，用固体碳酸钾调至碱性。所得碱性水相用醚萃取三次。合并有机层，用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，浓缩，冷却至0℃，加入2M HCl的醚溶液(0.8mL)处理，将所得混合物搅拌5min，然后蒸发至干，得到所需产物22f(R9＝丙基，R9b＝H)，为盐酸盐(144mg，103％)。
MS(ESPOS)：198[M+H]+.
向胺22f(R9＝丙基，R9b＝H)(143mg，0.61mmol)的无水二氯甲烷(2.0mL)溶液加入三乙胺(170μL，1.22mmol)和二碳酸二叔丁酯(350mg，1.6mmol)。将所得反应混合物在室温和N2下搅拌过夜，然后蒸发至干，经过硅胶快速柱色谱纯化，使用20％乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱剂，得到所需化合物22g(R9＝丙基，R9b＝H)(176mg，86％)。
MS(ESPOS)：320[M+Na]+.
向酯22g(R9＝丙基，R9b＝H)(175mg，0.59mmol)的二噁烷/水(6∶1)(4mL)溶液加入1M含水氢氧化锂(0.65mL，0.648mmol)。将所得反应混合物在室温和N2下搅拌过夜，在减压下除去溶剂。将残余物溶于水，用醚洗涤。将水层用10％柠檬酸酸化，用醚萃取。将有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发至干，得到所需被保护的环状氨基酸22h(R9＝丙基，R9b＝H)(175mg，105％)。
MS(ESNEG)：292[M-H]-.
通用方法U
在23℃下，向硝酮23a(如Dondoni et al，SyntheticCommunications，1994，24，2537-2550所述制备)(5.96g，16.4mmol，1equiv)的Et2O(200mL)溶液加入Et2AlCl溶液(1.0M庚烷溶液，16.4mL，16.4mmol，1equiv)。将反应在23℃下搅拌15min，然后冷却至-78℃，用历经25min经由套管加入的溴化环丙基镁溶液(0.5M THF溶液，99mL，49mmol，3equiv)处理。在-78℃下搅拌另外1.7h后，用1.0M含水NaOH(80mL)在低温下猝灭反应。将所得混合物在23℃下搅拌25min，然后转移至分液漏斗，分离各层。有机层用盐水洗涤(100mL，利用轻微的搅拌避免乳液的生成)。将原始水层用Et2O萃取(3×150mL)，每份萃取液用盐水(100mL)洗涤。合并有机层，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩，得到5.89g(14.5mmol，89％)所需产物23b(R20+R21＝环丙烷)，为白色固体。该产物无需进一步纯化即可使用。
MS(ESPOS)：406.0[M+H]
在0℃下，向羟胺23b(R20+R21＝环丙烷)(5.89g，14.5mmol，1equiv)与Et3N(12.2mL，87.3mmol，6equiv)的CH2Cl2(200mL)溶液加入甲磺酰氯(2.25mL，29.1mmol，2equiv)。将反应在0℃下搅拌20min，然后在23℃下搅拌另外25min，然后加入到1.0M含水NaOH∶盐水(1∶1，200mL)中。分离各层，水层用CH2Cl2萃取(2×50mL)，然后合并有机层，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩。将所得残余物溶于1∶1EtOAc∶己烷(200mL)，用H2O(150mL)、饱和含水NaHCO3(200mL)、盐水(150mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩，得到5.95g褐色的油，其主要组分是所需的亚胺。
MS(ESPOS)：388.2[M+H]
在23℃下，向粗的亚胺(5.95g)的MeOH(150mL)溶液加入吉拉德试剂T(2.84g，16.9mmol，1.1equiv)。搅拌70min后，浓缩溶液。使残余物在EtOAc(150mL)与1∶1∶1H2O∶盐水∶饱和含水NaHCO3(150mL)之间分配。分离各层，水层用EtOAc(150mL)萃取。合并有机层，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩，得到4.70g黄色的油，其主要组分是所需的胺。
MS(ESPOS)：300.0[M+H]+.
在0℃下，向粗的胺(4.70g)与2，6-二甲基吡啶(7.31mL，62.9mmol，4equiv)的CH2Cl2(200mL)溶液加入三氟乙酸酐(3.28mL，23.6mmol，1.5mmol)。将反应在0℃下搅拌1h，然后在23℃下搅拌3h；然后用H2O(100mL)猝灭。将经过猝灭的反应混合物搅拌10min，然后在1∶1EtOAc∶己烷(300mL)与盐水(200mL)之间分配。分离各层，将水层用1.0N HCl(300mL)、饱和含水NaHCO3(300mL)、盐水(200mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩。产物用硅胶快速柱色谱纯化，使用25％EtOAc的己烷溶液作为洗脱剂，得到4.50g所需三氟乙酰胺23c(R20+R21＝环丙烷)(11.3mmol，78％，从羟胺计)。
MS(ESPOS)：418.0[M+Na]+
在23℃下，向diacetonide 23c(R20+R21＝环丙烷)(4.50g，11.3mmol，1equiv)的溶液加入含水TFA(80％，100mL，预冷却至0℃)。将反应在23℃下搅拌35min，然后浓缩，得到3.87g白色固体，其主要组分是所需的去保护的半乳糖。
MS(ESPOS)：338.1[M+Na]+
在23℃下，向粗的半乳糖(3.65g，11.6mmol，1equiv)与Et3N(16.1mL，116mmol，10equiv)的CH2Cl2(130mL)溶液加入Ac2O(7.65mL，81.1mmol，7equiv)，继之以DMAP(141mg，1.2mmol，0.1equiv)。将反应在23℃下搅拌2h，然后用MeOH(5mL)猝灭。将经过猝灭的反应混合物搅拌5min，然后用Et2O(300mL)稀释。将所得溶液用H2O(2×300mL)、1.0N HCl(300mL)、饱和含水NaHCO3(300mL)、盐水(300mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩，得到5.07g乙酰化产物，为α/β和吡喃糖/呋喃糖异构体的混合物。
MS(ESPOS)：506.1[M+Na]+.
在0℃下，向过乙酸酯异构体(5.07g)的CH2Cl2(150mL)溶液加入HBr的乙酸溶液(33％，30mL)。将反应在0℃下搅拌30min，然后升温至23℃。搅拌另外3.5h后，将反应混合物用CH2Cl2(50mL)稀释，用冰水(2×300mL)、冰冷的50％饱和含水NaHCO3(2×300mL)、冰冷的50％饱和盐水(300mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩，得到4.33gα-溴化物23d(R20+R21＝环丙烷)(8.60mmol，76％，从diacetonide计)。该产物无需进一步纯化即可使用。
在23℃下，向溴化物23d(R20+R21＝环丙烷)(4.33g，8.60mmol，1equiv)的AcOH(100mL)溶液加入AgOAc(1.44g，8.60mmol，1equiv)。在23℃下搅拌45min后，将反应混合物用CH2Cl2(350mL)稀释，用H2O(2×400mL)、冰冷的50％饱和含水NaHCO3(3×300mL)、盐水(400mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩，得到3.76g(7.78mmol，91％)所需β-乙酸酯，为白色泡沫。该产物无需进一步纯化即可使用。
MS(ESPOS)：506.1[M+Na]
在23℃下，向β-乙酸酯(3.76g，7.78mmol，1equiv)的CH2Cl2(50mL)溶液加入PCl5(1.70g，8.17mmol，1.05equiv)，继之以BF3·OEt2(50μL)。搅拌1h后，将反应用CH2Cl2(300mL)稀释，用冰冷的盐水(500mL)、冰冷的50％饱和含水NaHCO3(2×500mL)、冰冷的盐水(500mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩，得到3.72g所需β-氯化物23e(R20+R21＝环丙烷)。产物无需进一步纯化即可使用。
MS(ESNEG)：458.2[M-H]
在23℃下，向半乳糖基氯23e(R20+R21＝环丙烷)(3.72g，8.10mmol，1equiv)的DMF(30mL)与HMPA(7.5mL)溶液加入MeSNa(1.70g，24.3mmol，3equiv)。在23℃下搅拌35min后，使反应混合物在Et2O(150mL)与1∶1H2O/盐水(70mL)之间分配。分离各层，水层用Et2O(150mL)反萃取。合并有机层，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩。将残余物溶于CH2Cl2(130mL)，用Et3N(11.3mL，81.0mmol，10equiv)、Ac2O(5.35mL，56.7mmol，7equiv)和DMAP(99mg，0.81mmol，0.1equiv)处理。在23℃下搅拌1h后，用MeOH(3.0mL)猝灭反应。将经过猝灭的反应混合物搅拌10min，然后在Et2O(200mL)与H2O(200mL)之间分配。分离各层，将有机层用1.0M含水HCl(200mL)、饱和含水NaHCO3(200mL)、盐水(100mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩。粗产物经由硅胶快速柱色谱纯化，使用30％EtOAc的己烷溶液作为洗脱剂，得到2.03g(4.30mmol，53％)所需产物23f(R20+R21＝环丙烷，R1＝SMe)，为白色固体。
1H NMR(300MHz，CDCl3)β6.52(br d，J＝9.3Hz，1H)，5.65(d，J＝5.4Hz，1H)，5.56(dd，J＝0.9，3.0Hz，1H)，5.27(dd，J＝5.4，11.1Hz，1H)，5.20(dd，J＝3.0，10.5Hz，1H)，4.43(dd，J＝0.9，7.5Hz，1H)，3.66(q，J＝9.0Hz，1H)，2.15(s，3H)，2.08(s，3H)，2.07(s，3H)，1.98(s，3H)，0.94-0.78(m，1H)，0.70-0.61(m，1H)，0.57-0.33(m，3H)；MS(ESPOS)：493.9[M+Na]；MS(ESNEG)：470.2[M-H]-.
在23℃下，向三乙酰基三氟乙酰胺23f(R20+R21＝环丙烷，R1＝SMe)(2.03g，4.30mmol，1equiv)的MeOH(35mL)溶液加入1.0M含水NaOH(43mL，43mmol，10equiv)。将反应搅拌100min，然后用1.0M含水HCl(48mL)酸化至pH 2。在真空中浓缩所得溶液至干，然后将残余物溶解/悬浮在EtOH(40mL)中，通过中等孔隙率玻璃料过滤，以除去NaCl。固体用EtOH洗涤(2×20mL)。合并滤液，用Amberlite IRA400(OH-型)树脂(60mL含树脂床的MeOH)处理，用MeOH转移树脂(2×20mL)。将所得混合物在23℃下搅拌1h，然后过滤。将树脂用MeOH(3×100mL)、CH3CN(100mL)洗涤。合并滤液，浓缩，得到1.04g所需半乳糖苷23g(R20+R21＝环丙烷，R1＝SMe)，为白色固体(4.19mmol，97％)。产物无需进一步纯化即可使用。
1HNMR(300MHz，CD3OD)β5.28(d，J＝5.7Hz，1H)，4.13-4.06(m，2H)，3.97(d，J＝6.6Hz，1H)，3.59(dd，J＝3.3，9.9Hz，1H)，2.33(dd，J＝6.9，9.0Hz，1H)，2.05(s，3H)，0.91-0.77(m，1H)，0.58-0.43(m，2H)，0.39-0.31(m，1H)，0.28-0.19(m，1H)；MS(ESPOS)：272.0[M+Na]；MS(ESNEG)：248.2[M-H].
通用方法V
遵照流程24中的通用方法，在23℃下向化合物1盐酸盐(9.90mmol，1equiv)的THF(70mL)溶液加入H2O(70mL)，继之以KHCO3(12.9mmol，1.3equiv)，继之以(Boc)2O(12.9mmol，1.3equiv)。搅拌5h后，使反应混合物在盐水(200mL)与EtOAc(300mL)之间分配。分离有机层，用盐水(150mL)洗涤，干燥(MgSO4)。在真空下除去溶剂，粗产物利用柱色谱系统纯化(40+M柱，40mm ID×150mm)，使用线性梯度(75％EtOAc/己烷-100％EtOAc)，总计1.2L洗脱剂，流速50mL/min，得到氨基甲酸酯24a(8.91mmol，90％)。
在23℃下，向氨基甲酸酯24a(15.9mmol，1equiv)的苯(300mL)溶液加入对-茴香醛二甲基缩醛(4.06mL，23.8mmol，1.5equiv)，继之以PPTS(199mg，0.79mmol，0.05equiv)。将反应混合物加热至回流。4h后，加入第二份对-茴香醛二甲基缩醛(2.0mL，11.7mmol，0.74equiv)。另外17h后，加入第三份对-茴香醛二甲基缩醛(2.0mL，11.7mmol，0.74equiv)。最后一次加入后，将反应回流另外3h，然后冷却至23℃，在EtOAc(300mL)与H2O(300mL)之间分配。将有机层用50％饱和含水NaHCO3(300mL)、盐水(150mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩。粗产物经由硅胶快速柱色谱纯化，使用40％EtOAc的己烷溶液洗脱，得到缩醛24b(11.3mmol，71％)。
在0℃下，向醇24b(4.82mmol，1equiv)的磷酸三甲酯(60mL)溶液加入吡啶(3.90mL，48.2mmol，10equiv)，继之以历经60sec加入POCl3(0.88mL，9.65mmol，2equiv)。在本步骤中可以使用其他酰化试剂，例如酸酐(R11CO)2O或酰氯R11COCl，并且在适当的碱的存在下，得到不同的R11酰基取代基。加入后，在0℃下维持反应2h，然后小心加入二碳酸三乙基铵缓冲液(1.0M，pH 8.5，40mL)，以猝灭反应。然后加入H2O(60mL)，将所得混合物在0℃下搅拌30min，然后升温至23℃。将经过猝灭的反应混合物在23℃下搅拌2h后，借助在水浴中轻微加热(40-45℃)，在真空中除去挥发物。通过与DMF(3×100mL)、再与甲苯(150mL，浴温40-45℃)共同蒸发，对所得粗产物共沸干燥，得到白色固体。粗产物24c(R11＝PO(OH)2)在实质上被三乙基铵盐污染，但是无需纯化即可继续使用。
在0℃下，向如上所述制备的被保护的磷酸酯24c(R11＝PO(OH)2)(前步粗产物，大约4.8mmol)的1，2-二氯乙烷(600mL)溶液加入H2O(25mL)，继之以TFA(200mL)。加入后，在0℃下维持反应5min，然后升温至23℃。在23℃下搅拌25min后，在真空中除去挥发物，得到16.2g油。将粗产物溶于1∶1H2O/MeOH(70mL)，过滤，所得溶液经过制备型HPLC纯化(WatersHR C18，6μm粒径，孔径，40mm ID×200mm，含5-60％乙腈的H2O w/0.1％AcOH，历经30min，流速75mL/min)，得到所需的2-磷酸酯5(R11＝PO(OH)2)(3.10mmol，64％，从游离醇计)，为白色固体。
方法W
在0℃下，历经20min经由注射泵向β-内酰胺25a(2.92g，12.8mmol，1equiv；从苄基(S)-(-)-4-氧代-2-氮杂环丁烷-羧酸酯(Aldrich)制备，如Baldwin et al，Tetrahedron 1990，46，4733所述)的THF(30mL)溶液加入LDA溶液(2.0M，14.0mL，28.1mmol，2.2equiv)。将反应在0℃下搅拌30min。历经约1.5min滴加巴豆基溴(85％，2.89mL，28.1mmol，2.2equiv)，将混合物在0℃下搅拌2h，然后在1.0M含水KHSO4(100mL)与EtOAc(100mL)之间分配。分离有机层，用1.0M含水KHSO4(100mL)、盐水(100mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩，得到25b(R9’＝2-丁烯基)3.65g(100％)绿黄色固体。该产物无需进一步纯化即可使用。
MS(ESNEG)：282.2[M-H]-.
在0℃下，将三甲代甲硅烷基重氮甲烷(2.0M Et2O溶液，25.0mL，50mmol，3.9equiv)缓慢加入到酸25b(R9’＝2-丁烯基)(3.65g，12.9mmol，1equiv)的甲醇(70mL)溶液中。在真空下除去溶剂，得到3.53g(11.9mmol，92％)所需的酯产物，为黄色的油。该产物无需进一步纯化即可用于随后的反应。
在23℃下，向烯25c(R9’＝2-丁烯基)(3.53g，11.9mmol，1equiv)的EtOAc(40mL)溶液加入Pd/C(10wt.％，482mg)。向反应容器充以氢(气囊)，将混合物剧烈搅拌。2.5h后，将反应混合物通过C盐垫过滤。将C盐用EtOAc(200mL)洗涤，浓缩滤液，得到3.51g(11.7mmol，99％)25c(R9＝丁基)，为黄色的油。该产物无需进一步纯化即可使用。
MS(ESPOS)：300.4[M+H]+.
在23℃下，向N-TBSβ-内酰胺25c(R9＝丁基)(3.51g，11.7mmol，1equiv)的THF(50mL)溶液加入Et3N·3HF(0.95mL，5.85mmol，0.5equiv)。在23℃下搅拌60min后，使反应混合物在90％饱和盐水(150mL)与EtOAc(200mL)之间分配。分离有机层，用盐水(150mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩。产物经由硅胶快速柱色谱纯化，使用50％EtOAc的己烷溶液作为洗脱剂，得到1.48g(8.0mmol，68％)25d(R9＝丁基)，为澄清的油。
MS(ESPOS)：578.3[3M+H]+.
在23℃下，历经2min经由注射器向β-内酰胺25d(R9＝丁基)(2.06g，11.1mmol，1equiv)的THF(150mL)溶液加入LiAlH4溶液(1.0MTHF溶液，22.9mL，22.9mmol，2.06equiv)。在0℃下搅拌10min后，将反应升温至23℃，搅拌15min，然后回流3h。然后将混合物冷却至0℃，如下猝灭，小心加入H2O(1.0mL)，继之以15％含水NaOH(1.0mL)，然后H2O(2.5mL)。将所得悬液在23℃下搅拌1.5h，用Et2O(250mL)稀释，通过C盐过滤，用Et2O(250mL)洗涤。浓缩滤液，得到1.42g所需产物25e(R9＝丁基)(9.93mmol，89％)，为澄清的油。产物无需进一步纯化即可使用。
MS(ESPOS)：287.4[2M+H]+.
在23℃下，向氨基醇25e(R9＝丁基)(1.41g，9.86mmol，1equiv)的二氯甲烷(50mL)溶液加入Boc2O(2.59g，11.9mmol，1.2equiv)。在23℃下搅拌2h后，浓缩反应混合物。产物经由硅胶快速柱色谱纯化，使用33％EtOAc的己烷溶液作为洗脱剂，得到1.53g(6.31mmol，64％)25f(R9＝丁基)，为澄清的油。
MS(ESPOS)：266.0[M+Na]+.
在23℃下，向NaIO4(8.81g，41.2mmol，10equiv)的H2O(60mL)溶液加入RuCl3·xH2O(350mg，催化量)，继之以醇25f(R9＝丁基)(1.00g，4.12mmol，1equiv)的丙酮(60mL)溶液。将两相混合物在23℃下搅拌30min，然后用EtOAc(250mL)萃取，滗析有机层。含水残余物用另外两份EtOAc萃取(2×150mL)。合并有机萃取液，用2-丙醇(75mL)处理，在23℃下搅拌。搅拌2h后，将混合物通过C盐过滤，用EtOAc(300mL)洗涤。浓缩滤液，得到0.78g所需产物25g(R9＝丁基)(3.04mmol，74％)，为深色的油。产物无需进一步纯化即可使用。
MS(ESPOS)：280.0[M+Na]+.
方法X
在23℃下，向醇25f(R9’＝2-甲基-2-丁烯基)(3.31g，13.0mmol，1equiv)的DMF(100mL)溶液加入咪唑(2.21g，32.5mmol，2.5equiv)，继之以TBSCl(2.93g，19.5mmol，1.5equiv)。将反应搅拌35min，然后用MeOH(2.0mL)猝灭。搅拌5min后，使所得混合物在Et2O(500mL)与H2O(400mL)之间分配。分离有机层，用H2O(400mL)、盐水(200mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩，得到26a(R9’＝2-甲基-2-丁烯基)4.13g(11.2mmol，86％)所需产物，为澄清的油。
MS(ESPOS)：392.4[M+Na]+.
在-78℃下，将中间体26a(R9’＝2-甲基-2-丁烯基)(2.03g，5.50mmol，1equiv)的二氯甲烷(80mL)溶液用经由气体分散管引入的臭氧(1.2L/min)处理，直至观察到蓝色(20min)。然后使氧气流(1.2L/min)穿过反应混合物，以排出过量臭氧。15min后，停止氧流，加入PPh3(2.16g，8.25mmol，1.5equiv)。将反应混合物在-78℃下搅拌30min，然后在0℃下搅拌15min，然后升温至23℃。在23℃下搅拌10min后，加入硅胶，在真空下浓缩所得混合物至干，得到自由流动的粉末，直接装上硅胶柱。经过快速柱色谱处理，使用30-33％EtOAc的己烷溶液作为洗脱剂，得到1.52g(4.42mmol，80％)醛26b，为澄清的油。
MS(ESPOS)：398.0[M+MeOH+Na]+.
在0℃下，历经1min经由注射器向溴化环丙基甲基三苯基鏻(1.22g，3.06mmol，1.5equiv)的THF(10mL)悬液滴加NaHMDS溶液(1.0M THF溶液，3.06mL，3.06mmol，1.5equiv)。将所得溶液在0℃下搅拌20min，然后用经由套管转移的醛26g(700mg，2.04mmol，1equiv)的THF(3.0mL；2×1.0mL冲洗)溶液处理。在0℃下15min后，将反应升温至23℃，搅拌另外10min，然后用饱和NH4Cl(30mL)猝灭。使所得混合物在Et2O(120mL)与H2O(50mL)之间分配。分离有机层，用盐水(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩。经过快速柱色谱处理，使用10％EtOAc的己烷溶液作为洗脱剂，得到588mg(1.54mmol，76％)26c(R9’＝3-环丙基-丙-3-烯基)，为澄清的油。
MS(ESPOS)：404.3[M+Na]+.
在23℃下，向烯26c(R9’＝3-环丙基-丙-3-烯基)(191mg，0.50mmol，1equiv)的二噁烷(5.0mL)溶液加入偶氮二羧酸二钾(973mg，5.01mmol，10equiv)，继之以经由注射泵历经16h缓慢加入AcOH(573μL，10.0mmol，20equiv)的二噁烷(5.0mL)溶液。加入完成后，将反应搅拌另外6h，然后借助Et2O(150mL)通过玻璃料过滤，以除去沉淀。将所得溶液用饱和含水NaHCO3(2×100mL)、盐水(80mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩。对所得粗产物重复三次上述工艺，以进行烯的完全转化，得到183mg(0.48mmol，96％)饱和产物26d(R9＝3-环丙基-丙基)，为澄清的油。
MS(ESPOS)：406.0[M+Na]+.
在23℃下，向TBS醚26d(R9’＝3-环丙基-丙基)(190mg，0.50mmol，1equiv)的THF(10mL)溶液加入TBAF溶液(1.0M THF溶液，0.55mL，0.55mmol，1.1equiv)。将所得溶液在23℃下搅拌40min，然后在Et2O(50mL)与H2O(50mL)之间分配。分离有机层，用盐水(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩，得到133mg(0.50mmol，100％)26e(R9＝3-环丙基-丙基)，为澄清的油。
MS(ESPOS)：290.2[M+Na]+.
26e向所需羧酸产物26f(R9＝3-环丙基-丙基)的催化性钌氧化作用是如前述实施例所述进行的。
MS(NEG)：282[M-H]-.
方法Y
外消旋27a(R9＝正丙基)的合成
向10b(R9＝正丙基)(22g，0.13mol)的甲醇(30mL)与浓HCl(10mL)溶液加入氧化铂(IV)(5g)。将反应混合物在50psi下氢化16h，通过C盐过滤除去催化剂，蒸发滤液至干。粗的哌啶甲酸无需进一步纯化即可使用。
将粗的哌啶甲酸残余物19g溶于乙腈(200mL)，加入氢氧化四甲基铵·5H2O(33g)，将反应混合物搅拌30分钟，加入焦碳酸二叔丁酯(39g，0.46mol)，将反应混合物在室温下搅拌72h。加入另外的氢氧化四甲基铵·5H2O(8g)和焦碳酸二叔丁酯(9g)，将反应混合物搅拌24h。在真空中除去反应溶剂，将所得油用水(200mL)稀释，用醚(200mL)洗涤。将含水部分用固体柠檬酸酸化至pH 3-4，然后用乙酸乙酯萃取(3×200mL)。合并有机层，经MgSO4干燥，过滤，除去溶剂，得到27a(R9＝正丙基)(19g，77％)，为黄色的油，静置后结晶。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ4.31(m，1)，3.60(m，1)，3.33(m，1)，2.01(m，4)，1.24(m，14)，0.89(t，J＝5.7，3)；MS(ESNEG)：270[M-1]-.
将外消旋混合物27a(R9＝正丙基)用乙腈(5体积)和S-α-甲基苄基胺(0.5eq)稀释，将混合物加热至回流，冷却，同时种晶。将混合物放置过夜。然后过滤第一批所生成的盐，备用，直至最后重结晶。
在真空中浓缩来自过滤的母液，然后溶于DCM(4体积)，DCM然后用1M柠檬酸(DCM的2/3体积)洗涤。然后分离DCM，经硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩。将2R，4S对映体富集的游离酸溶于5体积乙腈，加入0.85eq.R-α-甲基苄基胺，将混合物加热至回流，冷却，同时种晶。将混合物放置过夜。然后过滤所生成的盐，备用(盐的ee一般为85-90％)。
得到第二批2S，4R盐的过程等同于前面的段落，除了用S-α-甲基苄基胺代替R-α-甲基苄基胺以外。然后过滤所生成的第二批盐(一般具有80-90％左右的ee)，备用，直至最后重结晶。
在真空中浓缩来自过滤的母液(2S，4R盐生成母液，第2批)。借助前述方法分解(broken)盐。在此阶段，杂质已经浓缩至这样一种水平，以致盐的生成是不可能的。使游离酸受到柱色谱处理(30％EtOAc/己烷)，这除去不希望的杂质。柱子采用10∶1的二氧化硅与化合物重量比。化合物也被吸收到3当量(wt∶wt)二氧化硅上。
将来自柱子的游离酸(富含2R，4S对映体)用乙腈(5体积)稀释，加入R-α-甲基苄基胺，重复重结晶。
盐分解和2S，4R盐的生成等同于前文所述。第三批所生成的盐一般具有80-90％的ee。
合并三批2S，4R盐，用乙腈(7体积)稀释。将混合物加热至回流，此时所有的盐都溶解。然后使混合物冷却至rt，放置过夜，同时种晶。过滤已经从溶液中沉淀出来的盐。盐显示大约97％的ee。重复该过程，得到ee大于99％的盐。将盐溶于DCM(4体积)，用1M柠檬酸(DCM的大约2/3体积)洗涤两次，经硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩。这种过程得到理论收率77％的2S，4R对映体，为琥珀色油，98％ee。
方法Z
下列条件是方法Z所述通用偶联和去保护流程的代表，其中P1＝H，P2＝羧酸叔丁酯(Boc)。
在23℃下，向氮杂环丁烷酸25f(R9＝丁基)(52mg，0.20mmol，1equiv)、7-Cl MTL 6b(R2＝H，R3＝Cl)(58mg，0.20mmol，1equiv)与HBTU(84mg，0.22mmol，1.1equiv)的DMF(2.0mL)溶液加入DIPEA(88μL，0.51mmol，2.5equiv)。在23℃下搅拌12h后，在真空中除去DMF，然后使残余物在EtOAc(100mL)与1∶1盐水∶10％含水柠檬酸(100mL)之间分配。分离有机层，用1∶1盐水/饱和含水NaHCO3(100mL)、盐水(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩，得到82mg(0.17mmol，84％)13a(R2＝H，R3＝Cl，R9＝丁基，P1＝H，P2＝羧酸叔丁酯，m＝0)，为玻璃状固体，无需纯化即可用于下一步。
在23℃下，向氨基甲酸酯13a(R2＝H，R3＝Cl，R9＝丁基，P1＝H，P2＝羧酸叔丁酯，m＝0)(82mg，0.17mmol，1equiv)的1，2-二氯乙烷(10mL)溶液加入H2O(0.40mL)，继之以TFA(4.0mL)。在23℃下搅拌20min后，加入甲苯(50mL)，将所得溶液浓缩至干。残余物经过半制备型HPLC纯化(WatersHR C18，6μm粒径，
孔径，20mm ID×100mm，含5-60％乙腈的H2O w/0.1％HCl，历经30min，流速20mL/min)，得到41mg标题化合物3-丁基-氮杂环丁烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺，为白色固体。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.30(d，J＝6.0Hz，1H)，4.64(d，J＝7.8Hz，1H)，4.63-4.52(m，2H)，4.29(d，J＝10.2Hz，1H)，4.07(dd，J＝5.7，10.2Hz，1H)，4.00(t，J＝6.6Hz，1H)，3.82(d，J＝3.3Hz，1H)，3.75(dd，J＝8.4，9.9Hz，1H)，3.56(dd，J＝3.3，10.2Hz，1H)，2.92-2.76(m，1H)，2.14(s，3H)，1.90-1.67(m，2H)，1.45(d，J＝6.6Hz，3H)，1.44-1.24(m，4H)，0.93(t，J＝6.9Hz，3H)；MS(ESPOS)：411.0[M+H]+.
方法AA
向吡啶-2-羧酸10b(0.5mmol)的DMF(2mL)溶液加入如通用偶联流程13中所定义的林可胺(0.5mmol)，继之以HBTU(214mg，0.55mmol)和DIEA(132mg，1mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2hr。除去溶剂，粗产物经过硅胶柱色谱纯化，得到化合物13b。
向吡啶13b(0.46mmol)的水(10mL)、AcOH(3mL)与MeOH(2mL)溶液加入PtO2(200mg)，将所得反应混合物在55psi氢下摇动过夜，或者在更低的氢压下摇动更长的时间。通过C盐过滤除去残余催化剂，除去溶剂，得到粗产物。经过硅胶柱色谱纯化，使用MeOH的DCM溶液洗脱，得到如流程13所定义的1型林可酰胺类似物。
一般而言，二氧化硅色谱容易从不需要的异构体中分离顺式-2S非对映体。在有些情况下，异构体的分离要求半制备型HPLC。一组代表性条件如下：Waters
HR C18柱，6μm粒径，孔径，20mm ID×100mm，5-60％乙腈0.1％AcOH/H2O 0.1％AcOH，历经30min，流速20mL/min。
方法AB
[2-甲基-1-(3，4，5-三-苄氧基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-氨基甲酸叔丁基酯15b(P1＝Boc，P2＝Bn，R2＝Me，R3＝H)的合成，步骤a(中间体未显示)
向迅速搅拌着的2a(P＝Boc，R1＝Me，R2＝H)(2g，5.7mmol)的苯(40mL)溶液加入50％含水KOH(12.8mL)、四丁基铵硫酸氢盐(0.67g)和苄基溴(6.77mL，57.0mmol)，在N2气氛下悬浮同时剧烈搅拌。3.5h后，加入苄胺(6.0mL)，将反应混合物搅拌另外20’，然后加入甲苯(300mL)，将有机层用H2O(2×100mL)、2M KHSO4(3×100mL)、sat.aq.NaHCO3(1×100mL)、盐水(1×100mL)洗涤，经MgSO4干燥，蒸发至干。粗产物经过二氧化硅色谱处理，用10％EtOAc/己烷至15％EtOAc/己烷洗脱，得到步骤a产物15b[2-甲基-1-(3，4，5-三-苄氧基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-氨基甲酸叔丁基酯，为无色泡沫(2.6g，72％)；MS(ESPOS)：522.8[M+H-Boc]+.
[2-甲基-1-(3，4，5-三-苄氧基-6-氟-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-氨基甲酸叔丁基酯15b(P1＝Boc，P2＝Bn，R2＝Me，R3＝H)的合成，步骤b
向冷却至-16℃的搅拌着的上述中间体[2-甲基-1-(3，4，5-三-苄氧基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-氨基甲酸叔丁基酯(1.54g，2.5mmol)的DCM(25mL)溶液加入DAST(0.599mL，4.46mmol)，在N2气氛下悬浮同时剧烈搅拌。5分钟后，历经5分钟加入固体NBS(0.599mL，4.46mmol)，将反应混合物搅拌另外45’，然后加入DCM(300mL)，将有机层用sat.aq.NaHCO3(1×100mL)洗涤，经MgSO4干燥，蒸发至干。粗产物经过二氧化硅色谱处理，用15％至30％Et2O/己烷洗脱，分离产物，为1-α与β氟化的[2-甲基-1-(3，4，5-三-苄氧基-6-氟-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-氨基甲酸叔丁基酯15b的混合物(P1＝Boc，P2＝Bn，R2＝Me，R3＝H)，为无色的油(0.85g，58％)；TLC(20％Et2O/己烷)Rf异构体1＝0.2，Rf异构体2＝0.05.19F NMR(CDCl3)δ异构体1：-132.78，-132.96，异构体2：-145.05，-145.13，-145.23，-145.31.HPLC C18 3.5um，4.6×30mm柱，梯度洗脱剂2％-98％MeCN，历经10min；1.5mL/min：保留时间＝7.93min，7.98min.MS(ESPOS)：494.7[M+H-Boc]+；MS(ESNEG)：592.7[M-H]+.
2-甲基-1-(6-烯丙基-3，4，5-三-苄氧基-四氢-吡喃-2-基)-丙基胺15c(P1＝H，P2＝Bn，R1＝烯丙基，R2＝Me，R3＝H)的合成
在N2气氛下，向冷却至-32℃的搅拌着的上述中间体15b(831g，2.5mmol)的DCM(30mL)溶液加入烯丙基三甲基硅烷(1.12mL，7.0mmol)。10分钟后，历经2分钟加入BF3·Et2O(0.36mL，2.8mmol)，将反应混合物搅拌另外1.5h，然后升温至0℃达30分钟。向反应混合物加入水(1mL)和TFA(15mL)，使反应混合物升温至RT，搅拌1h，蒸发至干。将残余物溶于Et2O(200mL)，用1M aq.K2CO3(50mL)和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，蒸发至干，分离产物15c(P1＝H，P2＝Bn，R1＝烯丙基，R2＝Me，R3＝H)，为无色的油(0.69g，96％)；TLC(20％EtOAc/己烷)Rf＝0.05；MS(ESPOS)：516.4[M+H-Boc]+.
2-(1-氨基-2-甲基-丙基)-6-丙基-四氢-吡喃-3，4，5-三醇
在N2下，将160mg 2-甲基-1-(6-烯丙基-3，4，5-三-苄氧基-四氢-吡喃-2-基)-丙基胺15c和100mg degusa 50％w/w湿10％钯/碳悬浮在THF(5mL)和1M aq.HCl(1mL)中，将反应混合物在1atm H2压下搅拌24h。将反应混合物通过C盐过滤，蒸发至干，得到产物2-(1-氨基-2-甲基-丙基)-6-丙基-四氢-吡喃-3，4，5-三醇(60.8mg，89％)，为HCl盐。TLC(CHCl3：MeOH：32％aq.AcOH)Rf＝0.35.MS(ESPOS)：248[M+H]+.
方法AC
一般而言，下列实施例所述化合物的非对映异构体的最终纯化和分离可以借助半制备型HPLC实现。最终产物经过Waters Prep
系统纯化，它配有Waters双λ吸光度检测器，设置在214nm，和S.E.D.E.R.E蒸发光散射检测器系列。用于非对映异构体分离的通用条件如下：Waters
HR C18柱，6μm粒径，
孔径，20mm ID×100mm，5-60％乙腈0.1％AcOH/H2O 0.1％AcOH，历经30min，流速20mL/min。汇集所收集的级分，冷冻干燥。
实施例
按照上述方法制备下列实施例。
实施例1
4-(3，3-二氟-烯丙基)-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
4-(3，3-二氟-烯丙基)-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺.在0℃下，向2b(R2′＝H)(45mg，0.18mmol，1equiv)的无水DMF(0.5mL)溶液加入三乙胺(79.4μL，0.57mmol，3.2equiv)，继之以双-(三甲代甲硅烷基)三氟乙酰胺(71.2μL，0.27mmol，1.5equiv)。将反应混合物在0℃下搅拌10分钟，然后在rt下搅拌50分钟。在25mL圆底烧瓶中，将反应混合物加入到如通用方法M制备的被保护的氨基酸8c(R9＝3，3-二氟烯丙基)(56mg，0.19mmol，1.1equiv)中，继之以加入固体HATU(91.2mg，0.24mmol，1.3equiv)。将反应混合物在rt下搅拌3h。将反应混合物蒸发至干，溶于乙酸乙酯(60mL)，用10％柠檬酸(2×40mL)、水(40mL)、半饱和aq.NaHCO3(40mL)和盐水洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，蒸发，得到黄色糖浆物。
向上述粗偶联产物的DCM(9mL)与甲基硫(0.2mL)溶液加入三氟乙酸(3mL)和水(0.2mL)。将反应混合物在rt下搅拌1h。在真空下除去溶剂，与甲苯共蒸发两次。残余物经过色谱纯化，得到标题化合物4-(3，3-二氟烯丙基)-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺(55.6mg，73％)，为白色固体：
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.93(brs，1)，5.30(d，J＝4.8，1)，4.20-4.05(m，2)，3.96-3.77(m，3)，3.71-3.52(m，2)，3.19-3.07(m，1)，2.78-2.63(m，1)，2.38-2.21(m，1)，2.13(s，3)，2.20-1.97(m，4)，1.94-1.80(m，1)，0.92-0.84(m，6)；MS(ESPOS)：425.5[M+H]+；MS(ESNEG)：423.5[M-H]-.
实施例2
4-(3-吡啶-4-基-烯丙基)-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
实施例2标题化合物4-(3-吡啶-4-基-烯丙基)-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺是按照实施例1和通用方法M所述工艺制备的，使用在流程8所述Wittig烯化步骤中从氯化三苯基(4-吡啶基甲基)鏻衍生的内鎓盐。HPLC：C18 3.5μm，4.6×30mm柱；梯度洗脱剂2％-98％MeCN，历经10min；1.5mL/min：Rt＝2.99min；MS(ESPOS)：466.4[M+H]+；MS(ESNEG)：464.2[M-H]-，500.3[M+HCl]-.
实施例3
4-(3-吡啶-4-基-丙基)-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
实施例3标题化合物4-(3-吡啶-4-基-丙基)-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺是按照通用方法M制备的，使用在流程8所述Wittig烯化步骤中从氯化三苯基(4-吡啶基甲基)鏻衍生的内鎓盐，继之以被保护的氨基酸8b(R9＝3-吡啶-4-基-丙基，R2＝H)的还原性去保护。实施例1所述偶联和去保护工艺得到所需的最终产物。HPLC：C18 3.5μm，4.6×30mm柱；梯度洗脱剂2％-98％MeCN，历经10min；1.5mL/min：Rt＝2.99min；MS(ESPOS)：466.4[M+H]+；MS(ESNEG)：468.3[M-H]-，502.4[M+HCl]-.
实施例4
4-丁硫基-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
N-Cbz-(2S)，(4S)-(正丁硫基)脯氨酸9d(P＝Cbz，m＝1，R9＝正丁硫基).标题中间体是如通用方法N所述制备的。在N2下，向搅拌着的中间体9b(P＝Cbz，m＝1，LG＝Ts)(1.34g，3.08mmol)的DMF(10mL)溶液加入1-丁硫醇(0.7mL，6.16mmol，2equiv)，继之以7-甲基-1，5，7-三氮杂二环[4.4.0]癸-5-烯(0.7mL，4.87mmol，1.6equiv)。加入后，将所得混合物在室温下搅拌18h，然后在EtOAc与H2O之间分配。分离有机层，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，蒸发至干。所得粗残余物经过二氧化硅色谱处理，用3∶1己烷/EtOAc洗脱，得到甲基酯9c(P＝Cbz，m＝1，R9＝正丁硫基)(470mg，44％)。
将甲基酯9c用氢氧化锂(132.7mg，3.16mmol，2.4equiv)在4∶1THF/H2O中处理过夜。将反应溶液的pH用aq.1M HCl调至3，用EtOAc萃取(3×100mL)。合并有机相，经Na2SO4干燥，过滤，蒸发至干，得到产物9d N-Cbz-(2S)，(4S)-(正丁硫基)脯氨酸(463mg，quant.)。
在0℃和N2下，向MTL 1a(140mg，0.56mmol，1equiv)的无水DMF(2mL)溶液加入三乙胺(0.3mL，2.2mmol，3.9equiv)，继之以BSTFA(0.3mL，1.1mmol，2equiv)。将所得混合物在0℃下搅拌10min，然后在室温下搅拌30min，冷却至0℃。加入被保护的氨基酸N-Cbz-(2S)，(4S)-(正丁硫基)脯氨酸(215mg，0.64mmol，1.2equiv)的无水DMF(1mL)溶液，继之以固体HATU(320mg，0.84mmol，1.5equiv)，除去冷却浴，在室温下搅拌2h。在高真空下蒸发反应混合物后，将所得残余物用乙酸乙酯(150mL)稀释，顺序用10％柠檬酸(2×50mL)、0.5M sat.aq.NaHCO3(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，蒸发至干。将所得全甲硅烷基化中间体用含
50w-400x H+型树脂(Aldrich)(200mg)的MeOH(60mL)处理45min，过滤，蒸发至干，经过二氧化硅色谱处理(92∶8DCM/甲醇)，得到所需Cbz保护的林可酰胺(185mg，61％)。
在氮下，向搅拌着的10％披钯碳(200mg)的无水EtOH(6mL)悬液加入1，4-环己二烯(2mL)，10min后，加入上述Cbz保护的林可酰胺(178mg，0.33mmol)的EtOH(6mL)溶液。将所得混合物搅拌并且加热至回流过夜。冷却后，将反应混合物通过C盐垫过滤，用乙醇洗涤，合并滤液和洗液，蒸发至干。所得粗残余物经过二氧化硅色谱处理(90∶9∶1DCM/MeOH/浓氢氧化铵)，得到标题化合物，溶于1∶1乙腈/水(4mL)，用1M HCl酸化(pH 4)，冻干，得到HCl盐(35mg)，为无色粉末：MS(ESPOS)：439.3[M+H]+，461.2[M+Na]+.
实施例5
4-乙硫基-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
实施例5标题化合物是按照通用方法N制备的，在流程9所述置换步骤中使用乙硫醇钠。实施例4所述偶联和去保护工艺得到所需的最终产物。MS(ESPOS)：412.6[M+H]+.
实施例6
4-乙硫基-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
实施例6标题化合物是按照通用方法N制备的，使用二溴化三苯基鏻安装9b中的4-(S)溴化物离去基团(P＝Cbz，m＝1，LG＝Br)，然后在流程9所述置换步骤中使用乙硫醇钠。实施例4所述偶联和去保护工艺得到所需的最终产物。MS(ESPOS)：411.6[M]+.
实施例7
4-乙硫基-吡咯烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
实施例7标题化合物是按照通用方法N制备的，使用二溴化三苯基鏻安装9b中的4-(S)溴化物离去基团(P＝Cbz，m＝1，LG＝Br)，然后在流程9所述置换步骤中使用乙硫醇钠。实施例4所述偶联和去保护工艺得到所需的最终产物。MS(ESPOS)：429.1[M+H]+；MS(ESNEG)：427.6[M-H]-，463.6[M+HCl]-.
实施例8
4-乙硫基-吡咯烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
实施例8标题化合物是按照通用方法N制备的，然后在流程9所述置换步骤中使用乙硫醇钠。实施例4所述偶联和去保护工艺得到所需的最终产物。MS(ESPOS)：429.1[M+H]+.
实施例9
4-(4-甲基-苄硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
在N2下，向在通用方法R流程14中制备的甲苯磺酸酯中间体14b(P＝CF3CO，m＝1，R2＝H，R3＝OAc)(73.2mg，92μmol)的无水DMF(300μL)溶液加入4-甲基苄硫醇(Lancaster)(63.5μL，0.46mmol)，继之以MTBU(33.6μL，0.23mmol)。将反应混合物在rt下搅拌16h。将反应混合物溶于MeOH(1.5mL)，加入0.5M NaOMe的MeOH溶液(920μL，9.2mmol)，将反应混合物在室温下搅拌18h，然后加入到
树脂床(3.3mL在水中)中。将树脂用甲醇(5×10mL)、水(1×10mL)和乙腈(2×10mL)洗涤，然后如下洗脱产物，用5％浓NH4OH的MeOH溶液(5×10mL)和MeCN(1×10mL)洗涤。合并洗液，蒸发，经过制备型TLC处理(95∶5MeOH：0.25M NH3/DCM)，得到标题化合物(25.0mg，56％)，为无色固体：MS(ESPOS)：487.3[M+H]+；HPLC：C18 3.5μm，4.6×30mm柱；梯度洗脱剂2％-98％MeCN，历经5min：Rt＝1.91min.
实施例10
4-(4-氟-苯硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
实施例10标题化合物是借助实施例9所用工艺制备的，从在通用方法R流程14中制备的甲苯磺酸酯中间体14b(P＝CF3CO，m＝1，R2＝H，R3＝OAc)开始。4-氟苯硫酚(Aldrich)是用在置换步骤中的亲核试剂：MS(ESPOS)：477.3[M+H]+.
实施例11
4-(3，3，3-三氟-丙硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
实施例11标题化合物是借助实施例9所用工艺制备的，从在通用方法R流程14中制备的甲苯磺酸酯中间体14b(P＝CF3CO，m＝1，R2＝H，R3＝OAc)开始。1，1，1-三氟丙硫醇(Aldrich)是用在置换步骤中的亲核试剂。(300MHz，CDCl3)δ5.32(d，J＝5.8，1)，4.43(dd，J＝8.2，8.21)，4.36-4.31(m，1)，4.19-4.04(m，3)，3.90-3.g8(m，1)，3.78-3.55(m，3)，3.37-3.31(m，1)，2.96-2.82(m，3)，2.61-2.49(m，2)，2.12(s，3)，2.07-2.01(m，2)，1.14(d，J＝6.6，3)；(19F CDCl3)δ-68.8t；MS(ESPOS)：479.2[M+H]+，963.3[2M+H]+.
实施例12
4-(3-甲基-丁硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
实施例12标题化合物是借助实施例9所用工艺制备的，从在通用方法R流程14中制备的甲苯磺酸酯中间体14b(P＝CF3CO，m＝1，R2＝H，R3＝OAc)开始。3-甲基丁硫醇(Aldrich)是用在置换步骤中的亲核试剂：MS(ESPOS)：453.3[M+H]+；HPLC：C18 3.5μm，4.6×30mm柱；梯度洗脱剂2％-98％MeCN，历经10min：Rt＝3.90min.
实施例13
4-(2，4-二氯-苄硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
实施例13标题化合物是借助实施例9所用工艺制备的，从在通用方法R流程14中制备的甲苯磺酸酯中间体14b(P＝CF3CO，m＝1，R2＝H，R3＝OAc)开始。2，4-二氯苄硫醇(Maybridge)是用在置换步骤中的亲核试剂：MS(ESPOS)：541.2[M]+；HPLC：C18 3.5μm，4.6×30mm柱；梯度洗脱剂2％-98％MeCN，历经10min：Rt＝4.383min.
实施例14
4-(噻吩-2-基甲硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
实施例14标题化合物是借助实施例9所用工艺制备的，从在通用方法R流程14中制备的甲苯磺酸酯中间体14b(P＝CF3CO，m＝1，R2＝H，R3＝OAc)开始。噻吩-2-基甲硫醇(Aldrich)是用在置换步骤中的亲核试剂：MS(ESPOS)：479.2[M+H]+；HPLC：C18 3.5μm，4.6×30mm柱；梯度洗脱剂2％-98％MeCN，历经10min：Rt＝3.656min.
实施例15
4-(吡嗪-2-基甲硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
实施例15标题化合物是借助实施例9所用工艺制备的，从在通用方法R流程14中制备的甲苯磺酸酯中间体14b(P＝CF3CO，m＝1，R2＝H，R3＝OAc)开始。2-巯基甲基吡嗪(Pyrazine Specialties Inc.)是用在置换步骤中的亲核试剂。实施例15标题化合物的纯化是借助制备型TLC进行的(16％氨的甲醇溶液/二氯甲烷)，得到产物4-(吡嗪-2-基甲硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺(9mg，15％)。MS(ESPOS)：475.5[M+H]+；497.4[M+Na]+.
实施例16
4-(2，4-二氯-苄硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
在0℃下，向2b(R2’＝H)(100mg，0.40mmol，1equiv)的无水DMF(1mL)溶液加入三乙胺(0.18mL，1.27mmol，3.2equiv)，继之以加入双(三甲代甲硅烷基)三氟乙酰胺(0.16mL，0.60mmol，1.5equiv)。将反应混合物在0℃下搅拌10分钟，然后在rt下搅拌50分钟。向反应混合物加入在通用方法N中制备的Boc-保护的氨基酸9d(P＝Boc，m＝1，R9＝2，4-二氯苄基硫)(263mg，0.65mmol，1.63equiv)、HATU(302mg，0.80mmol，2equiv)。将反应混合物在rt下搅拌3h。将反应混合物蒸发至干，溶于乙酸乙酯(150mL)，用10％柠檬酸(2×80mL)、水(80mL)、半饱和NaHCO3(80mL)和盐水洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，蒸发，得到所需Boc-保护的林可酰胺，为黄色糖浆物。
向上述Boc-保护的林可酰胺的DCM(15mL)与甲基硫(0.33mL)溶液加入三氟乙酸(5mL)和水(0.33mL)。将反应混合物在rt下搅拌1h。在真空下除去溶剂，与甲苯共蒸发两次。残余物经过色谱纯化，得到白色固体(61mg)。白色固体经过制备型薄层色谱纯化，得到4-(2，4-二氯-苄硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺(47.5mg，22％)，为白色固体：1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.84(br s，1)，7.39-7.19(m，3)，5.31(d，J＝5.1，1)，4.09(dd，J＝5.4，9.9，1)，3.94-3.76(m，4)，3.81(s，2)，3.57-3.48(m，1)，3.40-3.32(m，1)，3.22-3.14(m，1)，2.88-2.79(m，1)，2.64-2.54(m，1)，2.33-2.22(m，1)，2.14(s，3)，1.93-1.85(m，1)，0.92-0.85(m，6).MS(ESPOS)：539.4[M+H]+.
实施例17
4-丁硫基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
9c(P＝Boc，m＝1，R9＝正丁基硫).在N2下，向在通用方法N中制备的9b(P＝Boc，m＝1)(1.61g，4.03mmol，1equiv)的无水DMF(12mL)溶液加入正丁硫醇(1.30mL，12.1mmol，3equiv)，继之以加入7-甲基-1，5，7-三氮杂二环[4.4.0]癸-5-烯(MTBU)(0.87mL，6.05mmol，1.5equiv)。将反应混合物在rt下搅拌过夜，浓缩至干。将残余物溶于乙酸乙酯(100mL)，用10％柠檬酸(50mL)和盐水洗涤，浓缩。残余物经过色谱纯化，得到澄清的油(1.24g，97％)：1H NMR(300MHz，CDCl3)δ4.30(t，J＝8.0，0.36)，4.23(t，J＝8.1，0.64)，4.00-3.94(m，0.64)，3.87-3.82(m，0.36)，3.72(s，1.1)，3.71(s，1.9)，3.29-3.15(m，2)，2.64-2.49(m，3)，1.97-1.84(m，1)，1.60-1.32(m，4)，1.44(s，3.2)，1.38(s，5.8)，0.93-0.86(m，3).
9c(P＝Boc，m＝1，R9＝正丁基硫).向甲基酯9c(1.24g，3.91mmol，1equiv)的THF(15mL)与水(5mL)溶液加入氢氧化锂一水合物(0.82g，19.55mmol，5equiv)。将反应混合物在rt下搅拌过夜。在真空下除去THF。使残余物在乙酸乙酯(200mL)与10％柠檬酸(100mL)之间分配。将有机层用水(1x)、盐水(1x)洗涤，经Na2SO4干燥，蒸发，得到澄清的油9c(P＝Boc，m＝1，R9＝正丁基)(1.21g，100％)：MS(ESPOS)：204.4[M-Boc+H]+，326.4[M+Na]+；MS(ESNEG)：302.3[M-H]-.
4-丁硫基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺.在0℃下，向2b(R2’＝H)(75mg，0.30mmol，1equiv)的无水DMF(0.8mL)溶液加入三乙胺(0.13mL，0.96mmol，3.2equiv)，继之以加入双-(三甲代甲硅烷基)三氟乙酰胺(0.12mL，0.45mmol，1.5equiv)。将反应混合物在0℃下搅拌10分钟，然后在rt下搅拌50分钟。向反应混合物加入Boc-保护的氨基酸9c(P＝Boc，m＝1，R9＝正丁基硫)(147mg，0.49mmol，1.63equiv)、HATU(227mg，0.60mmol，2equiv)。将反应混合物在rt下搅拌3h。将反应混合物蒸发至干，溶于乙酸乙酯(100mL)，用10％柠檬酸(2×60mL)、水(60mL)、半饱和NaHCO3(60mL)和盐水洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，蒸发，得到黄色糖浆物。
向上述糖浆物的DCM(15mL)与甲基硫(0.33mL)溶液加入三氟乙酸(5mL)和水(0.33mL)。将反应混合物在rt下搅拌1h。在真空下除去溶剂，与甲苯共蒸发两次。残余物经过色谱纯化，得到白色固体4-丁硫基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺(95mg，73％)：1HNMR(300MHz，CD3OD)δ5.24(d，J＝6.0，1)，4.14-4.02(m，3)，3.94(dd，J＝7.1，8.9，1)，3.82(d，J＝3.3，1)，3.51(dd，J＝3.3，10.2，1)，3.45-3.32(m，2)，2.93(dd，J＝6.4，10.6，1)，2.71-2.55(m，3)，2.23-2.13(m，1)，2.10(s，3)，1.83-1.72(m，1)，1.63-1.52(m，2)，1.48-1.38(m，2)，0.97-0.88(m，9).MS(ESPOS)：437.5[M+H]+.
实施例18
4-叠氮基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
N-Boc-(2S，4R)-4-甲磺酰基脯氨酸甲基酯9b(P＝Boc，m＝1，LG＝Ms).向在通用方法N中制备的N-Boc-(2S，4R)-4-羟基脯氨酸甲基酯(Bachem)9a(P＝Boc，m＝1)(1g，4.0mmol)的DCM(10mL)溶液加入吡啶(1.64mL，20.0mmol)、甲磺酰氯(0.631mL，5.52mmol)，在0℃下搅拌2小时，进一步在室温下搅拌过夜。加入更多的DCM(100mL)，用HCl(1N，50mL)洗涤，有机部分经硫酸镁干燥。除去溶剂后得到甲磺酸酯产物(1.30g，100％)，无需进一步纯化即可使用。N-Boc-(2S，4S)-4-叠氮基脯氨酸甲基酯9c(P＝Boc，m＝1，R9＝叠氮化物).将N-Boc-(2S，4R)-4-甲磺酰基脯氨酸甲基酯溶于DMF(10mL)，向其中加入叠氮化钠(1.30g，20.0mmol)，在75-80℃下加热过夜。除去DMF，将产物用乙酸乙酯(100mL)萃取，用水(50mL)洗涤。除去溶剂后得到叠氮化物产物9c(P＝Boc，m＝1，R9＝叠氮化物)(0.98g，90％)。
9d(P＝Boc，m＝1，R9＝叠氮化物).将搅拌着的9c(P＝Boc，m＝1，R9＝叠氮化物)的THF(10mL)溶液用氢氧化锂(300mg，7.14mmol)的水(0.5mL)溶液处理过夜。借助旋转蒸发除去过量溶剂，残余物用乙酸乙酯萃取，弃去。将含水部分酸化，用乙酸乙酯萃取，经硫酸镁干燥。除去溶剂，得到被保护的氨基酸N-Boc-(2S，4S)-4-叠氮基脯氨酸9d(P＝Boc，m＝1，R9＝叠氮化物)(0.8g，88％)：
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ4.34-4.24(m，2)，3.73-3.64(m，1)，3.39-3.34(m，1)，2.61-2.51(m，1)，2.16-2.09(m，1)，1.46(s，3)，1.42(s，6)；MS(ESNEG)：255(M-1).
1-(2-(S)-4-(S)-(叠氮基)-N-吡咯烷-2-基-{1-(R)-[2-(S)，3-(S)，4-(S)，5-(R)-三羟基-6-(R)-(甲硫基)四氢吡喃-2-基]-2-羟基-丙-1-基}乙酰胺.在0℃下，向2b(R9’＝H)(200mg，0.788mmol)的DMF(5mL)溶液加入三乙胺(0.164mL，1.18mmol)和双-(三甲代甲硅烷基)三氟乙酰胺(0.93mL，3.94mmol)，在室温下搅拌过夜。然后在0℃下加入N-Boc-(2S，4S)-4-叠氮基脯氨酸(300mg，1.18mmol)和HATU(444mg，1.18mmol)，然后搅拌4小时。在结束时除去DMF，将残余物溶于乙酸乙酯(100mL)，用柠檬酸(10％，30mL)、饱和碳酸氢钠(30mL)和盐水(30mL)洗涤。用硫酸钠干燥有机部分后，除去溶剂，得到粗产物，直接用于下面的去保护步骤。向粗产物的二氯乙烷溶液加入30％三氟乙酸(10mL)和二甲硫(0.5mL)，将反应混合物搅拌1小时。除去溶剂，所得粗产物经过硅胶柱色谱处理，用20％甲醇的DCM溶液洗脱，得到标题化合物，为白色固体(278mg，90％)：TLC：Rf＝0.38(40％甲醇的DCM溶液)；
TLC：Rf＝0.38(40％甲醇在DCM中)；1H NMR(300MHz，CD3OD)δ4.24(d，J＝5.4，1)，4.16(s，1)，4.03-4.13(m，3)，3.95(d，J＝3.6，1)，3.80(dd，J＝4.5，9.9，1)，3.51-3.56(dd，J＝3.3，10.2，1)，3.13-3.22(m，1)，2.95-3.00(m，1)，2.35-2.45(m，1)，2.08(s，3)，1.93-2.04(m，1)，1.29(t，J＝7.2，1)，0.97(m，3)；MS(ESPOS)：392[M+H]+.
实施例19
4-[3-(呋喃-2-基甲硫基)-丙-1-基]-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
4-(3-羟基-丙基)-2-[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基氨甲酰基]-哌啶-1-羧酸叔丁基酯.
在0℃下，向2b(R2’＝H)(532mg，1.85mmol，1equiv)在无水DMF(4.5mL)中的混合物加入三乙胺(1.28mL，9.25mmol，5equiv)，继之以加入双-(三甲代甲硅烷基)三氟乙酰胺(0.74mL，2.78mmol，1.5equiv)。将反应混合物在0℃下搅拌10分钟，然后在rt下搅拌50分钟。向反应混合物加入在通用方法P中制备的Boc-保护的氨基酸11f(R9’＝3-叔丁基二甲基甲硅烷氧基丙基，P＝Boc)(741mg，1.85mmol，1.0equiv)和HATU(886mg，2.33mmol，1.26equiv)。将反应混合物在rt下搅拌3h。将反应混合物蒸发至干，溶于乙酸乙酯，用10％柠檬酸(1x)、水(1x)、sat.NaHCO3(1x)和盐水洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，浓缩，得到黄色糖浆。将残余物溶于甲醇(20mL)，继之以加入树脂(340mg)。将混合物在rt下搅拌1hr，过滤除去树脂。浓缩滤液，残余物经过柱色谱纯化，得到产物4-(3-羟基-丙基)-2-[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基氨甲酰基]-哌啶-1-羧酸叔丁基酯(694mg，72％)，为白色固体：
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ5.33-5.28(m，1)，4.16-3.97(m，3)，3.89-3.69(m，3)，3.65-3.58(m，2)，3.56-3.47(m，1)，3.17-3.06(m，1)，2.33-2.23(m，1)，2.14(s，1.5)，2.13(s，1.5)，1.94-1.80(m，2)，1.67-1.50(m，5)，1.45(s，9)，1.42-1.23(m，2)，0.93-0.82(m，6).MS(ESPOS)：521.7[M+H]+.
2-[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)丙基氨甲酰基]-4-[3-(甲苯-4-磺酰氧基)-丙基]-哌啶-1-羧酸叔丁基酯.
在0℃下，向4-(3-羟基-丙基)-2-[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基氨甲酰基]-哌啶-1-羧酸叔丁基酯(196mg，0.38mmol，1equiv)与对-甲苯磺酸酐(123mg，0.38mmol，1equiv)的DCM(1.5mL)溶液滴加三乙胺(63μL，0.45mmol，1.2equiv)。将反应混合物在0℃下搅拌5hr，然后用乙酸乙酯稀释。将有机层用sat.碳酸氢钠、盐水洗涤，干燥，浓缩，得到白色固体，经过色谱纯化，得到11h(147.5mg，58％)，为白色固体：
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.78-7.74(m，2)，7.35-7.31(m，2)，5.30(d，J＝5.7，1)，4.13-4.06(m，1)，4.03-3.93(m，3)，3.91-3.60(m，4)，3.54-3.45(m，1)，3.12-3.02(m，1)，2.43(s，3)，2.32-2.21(m，1)，2.121(s，1.7)，2.117(s，1.3)，1.83-1.73(m，2)，1.65-1.59(m，4)，1.45(s，5)，1.44(s，4)，1.37-1.15(m，3)，0.93-0.81(m，6)；MS(ESPOS)：675.9[M+H]+.
4-[3-(呋喃-2-基甲硫基)-丙基]-2-[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基氨甲酰基]-哌啶-1-羧酸叔丁基酯.
在N2下，向Boc-保护的甲苯磺酸酯2-[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基氨甲酰基]-4-[3-(甲苯-4-磺酰氧基)-丙基]-哌啶-1-羧酸叔丁基酯(91mg，0.13mmol，1equiv)的无水DMF(0.42mL)溶液加入糠基硫醇(68μL，0.67mmol，5equiv)，继之以加入7-甲基-1，5，7-三氮杂二环[4.4.0]癸-5-烯(MTBU)(48μL，0.33mmol，2.5equiv)。将反应混合物在rt下搅拌过夜，用DCM稀释，用盐水洗涤(3x)，干燥，浓缩。残余物经过制备型TLC纯化(8％MeOH/DCM)，得到所需Boc-保护的硫醚4-[3-(呋喃-2-基甲硫基)-丙基]-2-[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基氨甲酰基]-哌啶-1-羧酸叔丁基酯(63.3mg，76％)，为澄清的糖浆物：MS(ESPOS)：617.9[M+H]+.
向Boc-保护的硫醚4-[3-(呋喃-2-基甲硫基)-丙基]-2-[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基氨甲酰基]-哌啶-1-羧酸叔丁基酯的DCM(9mL)与甲基硫(0.2mL)溶液加入三氟乙酸(3mL)和水(0.2mL)。将反应混合物在rt下搅拌1h。在真空下除去溶剂，与甲苯共蒸发两次。残余物经过制备型TLC纯化，得到实施例19标题林可酰胺产物(13mg，25％)，为白色固体：1HNMR(300MHz，CD3OD)δ7.39(dd，J＝0.8，2.0，1)，6.32(dd，J＝2.1，3.3，1)，6.18(dd，J＝0.8，3.2，1)，5.24(d，J＝5.7，1)，4.17(dd，J＝3.2，10.1，1)，4.10-4.02(m，2)，3.79(d，J＝3.3，1)，3.71(s，2)，3.50(dd，J＝3.3，10.2，1)，3.43(dd，J＝2.9，11.9，1)，3.24-3.17(m，1)，2.78-2.67(m，1)，2.49(t，J＝7.1，2)，2.20-2.11(m，1)，2.10(s，3)，2.06-1.93(m，1)，1.78-1.70(m，1)，1.62-1.52(m，3)，1.38-1.29(m，2)，1.20-1.06(m，2)，0.91(d，J＝7.2，6)；MS(ESPOS)：517.8[M+H]+.
实施例20
4-(3-咪唑-1-基-丙-1-基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
4-(3-咪唑-1-基-丙-1-基)-2-[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基氨甲酰基]-哌啶-1-羧酸叔丁基酯.
在0℃下，向NaH(60％，11.9mg，0.30mmol，2equiv)在无水DMF(0.2mL)中的混合物滴加咪唑(40.4mg，0.60mmol，4equiv)的DMF(0.25mL)溶液。将混合物在0℃下搅拌10min，然后冷却至-78℃。向该混合物滴加在实施例19中制备的Boc-保护的甲苯磺酸酯(100mg，0.15mmol，1equiv)的无水DMF(0.4mL)溶液。将混合物在0℃下搅拌2hr，然后在rt下搅拌过夜。将反应混合物用DCM稀释，用盐水(3x)洗涤，干燥，浓缩。残余物经过色谱纯化，得到标题Boc-保护的咪唑化合物(60mg，71％)，为白色固体。MS(ESPOS)：571.8[M+H]+.
向上述Boc-保护的咪唑的DCM(9mL)与甲基硫(0.2mL)溶液加入三氟乙酸(3mL)和水(0.2mL)。将反应混合物在rt下搅拌1h。在真空下除去溶剂，与甲苯共蒸发两次。残余物经过色谱纯化，得到实施例20标题林可酰胺化合物(10mg，20％)，为白色固体：1H NMR(300MHz，CD3OD)δ7.63(s，1)，7.11(s，1)，6.95(s，1)，5.23(d，J＝5.7，1)，4.14(dd，J＝3.2，10.1，1)，4.10-3.99(m，4)，3.79(d，J＝3.6，1)，3.50(dd，J＝3.3，10.2，1)，3.27-3.21(m，1)，3.14-3.07(m，1)，2.64-2.54(m，1)，2.19-2.10(m，1)，2.10(s，3)，1.94-1.76(m，3)，1.70-1.64(m，1)，1.55-1.43(m，1)，1.30-1.18(m，2)，1.11-0.94(m，2)，0.92-0.88(m，6)；MS(ESPOS)：471.7[M+H]+.
实施例21
4-[3-(噻吩-2-基硫基)-丙-1-基]-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
4-[3-(噻吩-2-基硫基)-丙-1-基]-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺.
在N2下，向在实施例19中制备的被保护的甲苯磺酸酯(97mg，0.14mmol，1equiv)的无水DMF(0.42mL)溶液加入2-噻吩硫醇(Acros)(68μL，0.72mmol，5equiv)，继之以加入7-甲基-1，5，7-三氮杂二环[4.4.0]癸-5-烯(MTBU)(51.3μL，0.36mmol，2.5equiv)。将反应混合物在rt下搅拌过夜，用DCM稀释，用盐水洗涤(3x)，干燥，浓缩。残余物经过制备型TLC纯化(8％MeOH/DCM)，得到澄清的糖浆物(65.5mg，74％)：MS(ESPOS)：619.8[M+H]+.
向上述糖浆物的DCM(9mL)与甲基硫(0.2mL)溶液加入三氟乙酸(3mL)和水(0.2mL)。将反应混合物在rt下搅拌1h。在真空下除去溶剂，与甲苯共蒸发两次。残余物经过制备型TLC纯化，得到实施例21标题林可酰胺化合物(16mg，29％)，为白色固体：
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ7.45-7.42(m，1)，7.12-7.09(m，1)，7.01-6.96(m，1)，5.23(d，J＝5.7，1)，4.16(dd，J＝3.3，10.2，1)，4.10-4.01(m，2)，3.79(d，J＝3.3，1)，3.50(dd，J＝3.3，10.5，1)，3.34-3.28(m，1)，3.18-3.10(m，1)，2.76(t，J＝7.1，2)，2.68-2.58(m，1)，2.20-2.06(m，1)，2.10(s，3)，1.98-1.88(m，1)，1.71-1.28(m，6)，1.13-1.00(m，2)，0.90(d，J＝6.9，6)；MS(ESPOS)：519.7[M+H]+.
实施例22
4-(3-乙硫基-丙-1-基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
实施例22标题化合物是这样制备的，从在实施例19中制备的被保护的甲苯磺酸酯中间体开始，按照实施例19-21所用工艺，在置换步骤中使用乙硫醇钠：MS(ESPOS)：465.3[M+H]+.
实施例23
4-(3-氰基-丙-1-基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
实施例23标题化合物是这样制备的，从在实施例19中制备的被保护的甲苯磺酸酯中间体11h开始，按照实施例19-21所用工艺，在置换步骤中使用氰化钠亲核试剂：MS(ESPOS)：430.3[M+H]+.
实施例24
4-(3-二氟甲硫基-丙-1-基)-哌啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
11c(R9’＝3-羟基-丙炔).
在23℃下，向4-碘吡啶甲酸甲基酯11b(4.36g，16.5mmol，1equiv)、三苯膦(346mg，1.32mmol，0.08equiv)、碘化亚铜(251mg，1.32mmol，0.08equiv)、乙酸钯(148mg，0.66mmol，0.04equiv)在三乙胺(60mL)中的混合物加入炔丙醇(1.92mL，33.0mmol，2equiv)，将反应混合物在23℃下搅拌过夜。在高真空下浓缩反应混合物，黑色残余物经过柱色谱纯化(2％MeOH的二氯甲烷溶液)，得到褐色的油。褐色的油再次经过柱色谱纯化(100％EtOAc)，得到所需产物11c(R9’＝3-羟基-1-丙炔)，为黄色的油(3.0g，95％)：
1H NMR(300MHz，CDCl3)8.70-8.74(dd，J＝0.9，5.1，1)，8.14(s，1)，7.46-7.50(dd，J＝1.8，5.1，1)，4.54(d，J＝6.3，2)，4.02(s，3)；MS(ESPOS)：192.1[M+H]；214.1[M+Na]；
HPLC：(Symmetry C18 3.5μm，4.6×30mm柱；梯度洗脱剂2％-98％MeCN历经5分钟；1.5mL/min)：Rt＝1.42min.
11c(R9’＝3-羟基-丙基).
在23℃下，向11c(R9’＝3-羟基-1-丙炔)(2.0g，10.5mmol，1.0equiv)的MeOH(120mL)溶液加入20wt.％披Pd(OH)2碳(1.0g)，将反应混合物在氢气氛下搅拌过夜。将反应混合物通过C盐过滤，浓缩滤液，得到所需产物4-(3-羟基-丙基)-吡啶-2-羧酸甲基酯11c(R9’＝3-羟基-丙基)(2.03g，99％)，为黄色的油：
1H NMR(300MHz，CDCl3)8.65(d，J＝5.1，1)，8.03(s，1)，7.34-7.36(dd，J＝1.8，5.1，1)，4.02(s，3)，3.71(t，J＝6.0，12.3，2)，2.83(t，J＝7.8，15.6，2)，1.92-1.97(m，2)；MS(ESPOS)：196.3[M+H]MS(ESNEG)：194.2[M-H]；
HPLC：(Symmetry C18 3.5μm，4.6×30mm柱；梯度洗脱剂2％-98％MeCN历经5分钟；1.5mL/min)：Rt＝1.46min.
11d(R9’＝3-羟基-丙基).
在23℃下，向4-(3-羟基-丙基)-吡啶-2-羧酸甲基酯11c(R9’＝1-羟基丙基)(1.81g，9.28mmol，1.0equiv)的MeOH(30mL)与H2O(20mL)溶液加入浓HCl(412μL，11.1mmol，1.2equiv)，继之以氧化铂(IV)(600mg，0.33wt％)，将反应混合物在1atm氢气氛下剧烈搅拌48h。将反应混合物通过C盐过滤，用甲醇(200mL)洗涤。合并滤液，在减压下浓缩，得到所需产物11d(R9’＝3-羟基-丙基)，为HCl盐(2.02g，8.52mmol，91％)：MS(ESPOS)：202.2[M+H]+.
11e(R9’＝3-羟基-丙基，P＝Cbz).
在5℃下，向11d(R9’＝3-羟基-丙基)(2.02g，8.52mmol，1equiv)的二氯甲烷(50mL)溶液加入三乙胺(1.54mL，11.07mmol，1.3equiv)，将反应混合物搅拌10min。向该溶液加入氯甲酸苄基酯(1.55mL，11.07mmol，1.3equiv)，将反应混合物在5℃下搅拌1h，然后升温至室温。浓缩反应混合物，使粗产物在二氯甲烷(250mL)与水(150mL)之间分配。收集有机层，经Na2SO4干燥，浓缩。残余物经过柱色谱纯化(梯度从50％至75％EtOAc/己烷)，得到所需产物11e(R9’＝3-羟基-丙基，P＝Cbz)(2.28g，6.80mmol，80％)，为黄色的油：
1HNMR(300MHz，CDCl3)7.34(s，5)，5.19(s，2)，4.48(t，J＝6.3，12.3，1)，3.68(bs，3)，3.60-3.64(m，2)，3.38-3.42(m，2)，1.94-1.98(m，3)，1.65-1.80(m，2)，1.33-1.37(m，2)，1.20-1.24(m，2)；MS(ESPOS)：358.0[M+Na]；
HPLC：(Symmetry C18 3.5μm，4.6×30mm柱；梯度洗脱剂2％-98％MeCN历经5分钟；1.5mL/min)：Rt＝2.50min.
11e(R9’＝3-甲磺酰基丙基，P＝Cbz).
在0℃下，向借助通用方法P制备的醇中间体11e(R9’＝3-羟基-丙基，P＝Cbz)(2.0g，5.97mmol，1equiv)的二氯甲烷(15mL)溶液加入三乙胺(1.0mL 7.2mmol，1.2equiv)，将反应混合物搅拌15min。向该溶液加入甲磺酸酐(1.04g，5.97mmol，1equiv)，将反应混合物在0℃下搅拌另外30min。使反应混合物在二氯甲烷(250mL)与饱和含水NaHCO3(100mL)之间分配。收集有机层，经Na2SO4干燥，浓缩，得到所需甲磺酸酯产物11e(R9’＝3-甲磺酰基丙基，P＝Cbz)(2.25g，5.45mmol；91％)，为澄清的油：
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.34(s，5)，5.19(s，2)，4.48(t，J＝6.3，12.3，1)，4.20(t，J＝6.3，14.1，2)，3.70(bs，3)，3.38-3.42(m，2)，3.02(s，3)，1.94-1.98(m，3)，1.65-1.80(m，2)，1.33-1.37(m，2)，1.20-1.24(m，2)；MS(ESPOS)：436.3[M+Na]；
HPLC：(
C18 3.5μm，4.6×30mm柱；梯度洗脱剂2％-98％MeCN历经5分钟；1.5mL/min)：Rt＝2.86min.
11e(R9’＝3-乙酰硫基-丙基，P＝Cbz).
在5℃下，向甲磺酸酯11e(R9’＝3-甲磺酰基丙基，P＝Cbz)(2.25g，5.45mmol，1equiv)的DMF(30mL)溶液加入硫代乙酸钾(3.11g，27.3mmol，5equiv)，将反应混合物在5℃下搅拌过夜。使反应混合物在EtOAc(250mL)与饱和aq.NaHCO3(100mL)之间分配。收集有机层，经Na2SO4干燥，浓缩。所得粗产物经过柱色谱纯化(25％EtOAc的己烷溶液)，得到所需硫代酸酯产物11e(R9’＝3-乙酰硫基-丙基，P＝Cbz)(1.90g，4.83mmol，89％)，为黄色的油：
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.34(s，5)，5.12(s，2)，4.46(t，J＝6.3，12.3，1)，3.69(bs，3)，3.38-3.42(m，2)，2.81-2.85(m，3)，2.32(s，3)，1.89-2.05(m，3)，1.65-1.80(m，2)，1.33-1.37(m，2)，1.20-1.24(m，2)；MS(ESPOS)：394.0[M+H]416.1[M+Na]；
HPLC：(
C18 3.5μm，4.6×30mm柱；梯度洗脱剂2％-98％MeCN历经5分钟；1.5mL/min)：保留时间＝3.28min.
11f(R9’＝3-二氟甲硫基-丙基，P＝Cbz).
向11e(R9’＝3-乙酰硫基-丙基，P＝Cbz)(1.90g，4.83mmol，1equiv)的乙醇(8mL)溶液加入3N NaOH(4.5mL)。将反应混合物在室温下搅拌45min，然后浓缩，得到澄清的油。将所得油溶于乙醇(20mL)，经由反应烧瓶的排空使反应混合物脱氧，然后将反应混合物用1atm压力的氯代二氟甲烷气体(Aldrich)饱和。将反应混合物在5℃下搅拌16h，然后在0℃下用1N HCl中和，在减压下浓缩。将残余物用0.5N含水NaOH调至碱性，用醚洗涤。将水层用1N HCl酸化至pH 2.0，用乙酸乙酯萃取(3×100mL)。将有机层用盐水洗涤(2×100mL)，干燥(MgSO4)，浓缩。所得粗残余物经过柱色谱纯化(50％EtOAc/49％己烷/1％AcOH)，得到所需的二氟甲基硫产物11f(R9’＝3-二氟甲硫基-丙基，P＝Cbz)(0.75g，1.94mmol，40％)，为澄清的油：1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.36(s，5)，6.97(s)，6.79(s)，6.60(s)，5.15(s，2)，4.51(t，J＝6.3，12.3，1)，3.38-3.42(m，2)，2.75(t，J＝7.2，14.4，1)，2.47-2.51(m，1)，1.89-2.05(m，3)，1.65-1.80(m，2)，1.33-1.37(m，2)，1.21-1.23(m，2)；MS(ESPOS)：388.1[M+H]+410.1[M+Na]+；
HPLC：(C18 3.5μm，4.6×30mm柱；梯度洗脱剂2％-98％MeCN历经5分钟；1.5mL/min)：Rt＝2.85min.
11f(R9’＝3-二氟甲硫基-丙基，P＝Boc).
在23℃下，向11f(R9’＝3-二氟甲硫基-丙基，P＝Cbz)(750mg，1.94mmol，1equiv)的乙腈(100mL)溶液加入碘代三甲基硅烷(0.8mL，5.81mmol，3equiv)，将反应混合物搅拌30min。浓缩反应混合物，得到去保护的粗产物(491mg，1.94mmol，100％)。向其中加入二氯甲烷(100mL)、三乙胺(0.54mL，3.88mmol，2equiv)和二碳酸二叔丁酯(0.67mL，2.91mmol，1.5equiv)。将反应混合物在5℃下搅拌过夜。浓缩反应混合物，使粗产物在二氯甲烷(250mL)与水(150mL)之间分配。收集有机层，干燥(Na2SO4)，浓缩。所得粗残余物经过柱色谱纯化(50∶49∶1EtOAc/己烷/AcOH)，得到所需产物11f(R9’＝3-二氟甲硫基-丙基，P＝Boc)(671mg，98％)，为澄清的油：
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ7.10(s)，6.90(s)，6.70(s)，4.19-4.23(m，1)，3.48-3.53(m，1)，2.68(t，J＝6.6，13.8，1)，2.56(t，J＝7.2，14.4，1)，1.80-1.95(m，4)，1.50-1.80(m，5)，1.33(s，9)，1.13-1.20(m，2)；MS(ESPOS)：254.1[M-Boc+H]MS(ESNEG)：352.2[M-H]-.
4-(3-二氟甲硫基-丙基)-哌啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺.
在23℃下，向搅拌着的7-Cl-MTL 6b(R2＝H，R3＝Cl)(195mg，0.68mmol，1.2equiv)的DMF(2.5mL)溶液加入二异丙基乙胺(0.3mL，1.71mmol，3equiv)，继之以boc-保护的氨基酸11f(R9’＝3-二氟甲硫基-丙基，P＝Boc)(200mg，0.57mmol，1equiv)的DMF(2.5mL)溶液和HBTU(324mg，0.85mmol，1.5equiv)。将所得溶液在室温下搅拌3h，然后浓缩至干。使固体残余物在乙酸乙酯(300mL)与饱和aq.NaHCO3(100mL)之间分配。收集有机层，干燥(Na2SO4)，浓缩。在23℃下向一部分该残余物(60mg，0.12mmol，1equiv)加入1，2-二氯乙烷(5mL)、水(0.2mL)，继之以净TFA(2.0mL)，将反应混合物在室温下搅拌15min，然后在真空中浓缩。粗产物经过制备型HPLC纯化，得到实施例24标题化合物，为白色粉末：
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ7.12(s)，6.93(s)，6.74(s)，5.21(d，J＝5.7，1)，4.48(d，J＝8.4，2)4.40(d，J＝10.2，1)，4.17(d，J＝9.6，1)，3.97-4.02(dd，J＝5.4，9.9，1)3.71(d，J＝3.3)，3.46-3.52(m，2)，2.71-2.76(t，J＝6.9，13.8，1)，2.05(s，3)，1.83(s，1)，1.61-1.77(m，5)，1.35(d，J＝6.9，4)，1.08-1.22(m，3)；MS(ESPOS)：507.1[M+H]+.
实施例25
4-(3-二氟甲硫基-丙基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
4-(3-二氟甲硫基-丙基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺.
在23℃下，向搅拌着的2b(R2’＝H)的DFM(2.5mL)溶液加入二异丙基乙胺(0.3mL，1.7mmol，3equiv)，继之以Boc-保护的氨基酸11f(R9’＝3-二氟甲硫基-丙基，P＝Boc)(200mg，0.57mmol，1equiv)的DMF(2.5mL)溶液和HBTU。将所得溶液在室温下搅拌3h，浓缩至干。使固体残余物在乙酸乙酯(300mL)与饱和aq.NaHCO3之间分配。收集有机层，干燥(Na2SO4)，浓缩。在23℃下向一部分该残余物(60mg，0.12mmol，1equiv)加入1，2-二氯乙烷(5mL)、水(0.2mL)，继之以净TFA(2.0mL)，将反应混合物在室温下搅拌15min，然后浓缩。粗产物经过制备型HPLC纯化，得到所需实施例25标题化合物，为白色粉末：
1HNMR(300MHz，CD3OD)δ7.13(s)，6.94(s)，6.75(s)，5.16(d，J＝5.7，1)，4.12(d，J＝9.9，1)，3.97-4.02(dd，J＝4.8，10.2，2)，3.71(d，J＝3.3，1)，3.42-3.46(m，2)，2.88-2.96(m，2)，2.75(t，J＝7.8，15.0，2)，2.59-2.63(m，2)，2.03(s，3)，1.81-1.87(m，1)，1.61-1.70(m，5)，1.20-1.38(m，4)，0.82-0.84(d，J＝6.9，6)；MS(ESPOS)：487.1[M+H]+.
实施例26
4-(2-[1，3]二硫戊环-2-基-乙基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
4-(3，3-二乙氧基-丙-1-炔基)-吡啶-2-羧酸甲基酯.
向干燥的烧瓶中加入在通用方法P中制备的中间体11b(2.98g，11.33mmol，1equiv)、三苯膦(238mg，0.91mmol，0.08equiv)、碘化亚铜(I)(172.6mg，0.91mmol，0.08equiv)、乙酸钯(101.6mg，0.45mmol，0.04equiv)和三乙胺(42mL)。将混合物用氮脱气，继之以加入3，3-二乙氧基-丙炔(Aldrich)(2.90g，22.7mmol，2equiv)。将混合物在rt下搅拌3h。在真空下除去溶剂，得到深色残余物。残余物经过色谱纯化，得到黄色的油11c(R9’＝3，3-二乙氧基-丙-1-炔基)(3g，100％)：
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.69(dd，J＝0.8，5.0，1)，8.15(d，J＝0.8，1.4，1)，7.49(dd，J＝1.7，5.0，1)，5.48(s，1)，3.99(s，3)，3.82-3.73(m，2)，3.71-3.62(m，2)，1.26(t，J＝7.2，6).MS(ESPOS)：264.5[M+H]+.
4-(3，3-二乙氧基-1-丙基)-哌啶-1，2-二羧酸2-甲基酯11d(R9’＝3，3-二乙氧基-1-丙基).
向11c(R9’＝3，3-二乙氧基-丙-1-炔基)(3g)在MeOH(15mL)、乙酸(15mL)与水(15mL)中的混合物加入氧化铂(1.0g)。将混合物用氢净化和充气(50psi)，在rt下摇动5hr。过滤除去氧化铂，浓缩滤液，得到所需产物11d(R9’＝3，3-二乙氧基-1-丙基)(2.45g，79％)，为油：MS(ESPOS)：296.5[M+Na]+.
4-(3，3-二乙氧基-1-丙基)-哌啶-1，2-二羧酸1-烯丙基酯2-甲基酯11e(R9’＝3，3-二乙氧基-1-丙基，P＝Alloc).
在0℃下，向11d(R9’＝3，3-二乙氧基-1-丙基)(2.4g，8.79mmol，1equiv)与吡啶(1.26mL，11.9mmol，1.35equiv)的THF(29mL)溶液滴加氯甲酸烯丙酯溶液(0.96mL，11.9mmol，1.4equiv)。将混合物缓慢升温至rt，在rt下搅拌3hr。过滤溶液，在真空下除去溶剂。残余物经过色谱纯化，得到11e(R9’＝3，3-二乙氧基-1-丙基，P＝Alloc)(2.1g，66％)，为澄清的油：MS(ESPOS)：380.6[M+Na]+.
4-(3-氧代-丙基)-哌啶-1，2-二羧酸1-烯丙基酯2-甲基酯.
将11e(R9’＝3，3-二乙氧基-1-丙基，P＝Alloc)(2.03g)的乙酸(32mL)与水(8mL)溶液在rt下搅拌过夜。在高真空下除去溶剂。将残余物用乙酸乙酯稀释，用sat碳酸氢钠(1x)和盐水(1x)洗涤。将有机层干燥，浓缩。残余物经过色谱纯化，得到甲基酯11e(R9’＝3-氧代-丙基，P＝Alloc)(1.2g，75％)，为澄清的油：
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.75(t，J＝1.5，1)，5.96-5.82(m，1)，5.30-5.16(m，2)，4.57(d，J＝5.4，2)，4.46(t，J＝6.0，1)，3.74-3.65(m，1)，3.71(s，3)，3.42-3.32(m，1)，2.48-2.41(m，2)，2.02-1.35(m，7)；MS(ESPOS)：306.5[M+Na]+.
4-(2-[1，3]二硫戊环-2-基-乙基)-哌啶-1，2-二羧酸1-烯丙基酯2-甲基酯.
在氮下，向11e(R9’＝3-氧代-丙基，P＝Alloc)(248mg，0.87mmol，1equiv)与1，2-乙二硫醇(0.147mL，1.75mmol，2equiv)的混合物加入三氟化硼-乙酸配合物(0.122mL，0.87mmol，1equiv)。将混合物剧烈搅拌1hr。将混合物用己烷稀释，用sat.碳酸氢钠(3x)和盐水(1x)洗涤。将有机层干燥，浓缩。残余物经过色谱纯化，得到11e(R9’＝2-[1，3]二硫戊环-2-基-乙基，P＝Alloc)(144mg，46％)，为油：MS(ESPOS)：382.5[M+Na]+.
4-(2-[1，3]二硫戊环-2-基-乙基)-哌啶-1，2-二羧酸1-烯丙基酯11f(R9’＝(2-[1，3]二硫戊环-2-基-乙基)，P＝Alloc).
向11e(R9’＝2-[1，3]二硫戊环-2-基-乙基，P＝Alloc)(144mg，0.40mmol，1equiv)在THF(3mL)与水(1mL)中的混合物加入氢氧化锂一水合物(67mg，1.6mmol，4equiv)。将混合物在rt下搅拌过夜。在真空下除去THF。将水层溶于乙酸乙酯，用10％柠檬酸分配。将有机层用水(1x)、盐水(1x)洗涤，干燥，浓缩，得到11f(R9’＝(2-[1，3]二硫戊环-2-基-乙基)，P＝Alloc)(127mg，92％)，为糖浆物：
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ5.96-5.83(m，1)，5.30-5.17(m，2)，4.59(d，J＝5.4，2)，4.48(t，J＝6.4，1)，4.41(t，J＝6.9，1)，3.75-3.64(m，1)，3.44-3.33(m，1)，3.25-3.12(m，4)，2.05-1.35(m，9).MS(ESPOS)：346.5[M+H]+.
4-(2-[1，3]二硫戊环-2-基-乙基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺.
在0℃下，向2b(R2’＝H)(95mg，0.33mmol，1equiv)在无水DMF(0.8mL)中的混合物加入三乙胺(0.23mL，1.65mmol，5equiv)，继之以加入双(三甲代甲硅烷基)三氟乙酰胺(0.13mL，0.49mmol，1.5equiv)。将反应混合物在0℃下搅拌10分钟，然后在rt下搅拌50分钟。向反应混合物加入酸11f(R9’＝(2-[1，3]二硫戊环-2-基-乙基)，P＝Alloc)(115mg，0.33mmol，1.0equiv)和HATU(158mg，0.42mmol，1.3equiv)。将反应混合物在rt下搅拌3h。将反应混合物蒸发至干，溶于乙酸乙酯，用10％柠檬酸(1x)、水(1x)、sat.NaHCO3(1x)和盐水洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，浓缩。残余物经过色谱纯化，得到Alloc-保护的林可酰胺类似物(133mg，70％)，为糖浆物：MS(ESPOS)：579.8[M+H]+.
向上述Alloc-保护的林可酰胺(103mg，0.18mmol，1equiv)的THF(2.3mL)溶液加入双甲酮(0.25g，1.78mmol，10equiv)和四-(三苯膦)钯(41.1mg，0.036mmol，0.2equiv)。将混合物在rt下搅拌过夜。在真空下除去溶剂，残余物经过色谱纯化，得到实施例27标题化合物(34mg，49％)，为微黄色固体：
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.23(d，J＝5.7，1)，4.45(t，J＝6.9，1)，4.18-4.01(m，3)，3.81-3.77(m，1)，3.56-3.47(m，2)，3.25-3.07(m，5)，2.66-2.56(m，1)，2.18-2.13(m，1)，2.10(s，3)，1.94-1.63(m，4)，1.55-1.35(m，3)，1.12-0.98(m，2)，0.95-0.88(m，6)；MS(ESPOS)：495.6[M+H]+.
实施例27
没有实施例27。
实施例28
4-[2-(4-甲基-噻唑-2-基)-乙基]-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
4-[2-(4-甲基-噻唑-2-基)-乙基]-哌啶-1，2-二羧酸1-烯丙基酯11f(R9’＝4-甲基-噻唑-2-基，P＝Alloc).
这种中间体是这样制备的，利用通用方法P流程11所述反应顺序，从中间体11b开始，使用4-叔丁氧羰基乙炔(Aldrich)作为炔。借助本领域技术人员熟知的方法加工被保护的二羧酸11e(R9’＝丙酸叔丁酯，P＝Alloc)，安装4-甲基噻唑部分。如通用方法P进行酯的去保护，得到所需羧酸酯中间体11f(R9’＝4-甲基-噻唑-2-基，P＝Alloc)。
4-[2-(4-甲基-噻唑-2-基)-乙基]-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺.
借助实施例26所述工艺进行2b(R2’＝H)与被保护的氨基酸11f(R9’＝4-甲基-噻唑-2-基，P＝Alloc)的偶联和去保护，得到实施例28标题林可酰胺：(300MHz，CD3OD)δ6.80(s，1)5.07(d，J＝5.5，1)，4.43(dd，J＝3.3，9.91)，3.91-3.86(m，2)，3.60(m，1)，3.50-3.45(m，1)，3.30(d，J＝3.3，10.4，1)，2.89-2.82(m，2)，2.76-2.67(m，1)，2.19(s，3)，1.96(s，3)，1.77-1.73(m，1)，1.61-1.57(m，3)，1.22-1.09(m，2)，0.72(d，J＝6.9，6)；MS(ESPOS)：488.4[M+H]+.
实施例29
4-(3-甲氧基亚氨基-丙-1-基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
11e(R9’ ＝3-甲氧基亚氨基-丙基，P＝Alloc).
向在实施例26中制备的11e(R9’＝3-氧代丙基，P＝Alloc)(129mg，0.45mmol)的乙醇(1.3mL)溶液加入盐酸甲氧基胺和吡啶。将反应混合物回流2hr。在真空下除去溶剂。将残余物溶于乙酸乙酯，用10％柠檬酸和盐水洗涤，干燥，浓缩，得到11e(R9’＝3-甲氧基亚氨基-丙基，P＝Alloc)(129mg，91％)，为澄清的油：MS(ESPOS)：334.5[M+Na]+.
4-(3-甲氧基亚氨基-丙基)-哌啶-1，2-二羧酸1-烯丙基酯11f(R9’＝(3-甲氧基亚氨基-丙基)，P＝Alloc).
向酯11e(R9’＝(3-甲氧基亚氨基-丙基)，P＝Alloc)(129mg，0.41mmol，1equiv)在THF(1.5mL)与水(0.5mL)中的混合物加入氢氧化锂一水合物(69mg，1.6mmol，4equiv)。将混合物在rt下搅拌过夜。在真空下除去THF。将水层溶于乙酸乙酯，用10％柠檬酸分配。将有机层用水(1x)、盐水(1x)洗涤，干燥，浓缩，得到11f(R9’＝3-甲氧基亚氨基-丙基，P＝Alloc)(114mg，93％)，为澄清的油：
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.31(t，J＝6.2，0.6H)，6.60(t，J＝5.4，0.4H)，5.96-5.82(m，1)，5.30-5.16(m，2)，4.58(d，J＝5.7，2)，4.83(t，J＝6.5，1)，3.83(d，J＝0.3，1.2H)，3.78(d，J＝0.6，1.8H)，3.77-3.62(m，1)，3.42-3.30(m，1)，2.38-2.26(m，1)，2.23-2.14(m，1)，2.08-1.85(m，2)，1.82-1.62(m，2)，1.53-1.35(m，3)；MS(ESPOS)：321.2[M+Na]+.
4-(3-甲氧基亚氨基-丙基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺.
在0℃下，向2b(R2’＝H)(109.8mg，0.38mmol，1equiv)在无水DMF(0.9mL)中的混合物加入三乙胺(0.26mL，1.91mmol，5equiv)，继之以加入双(三甲代甲硅烷基)三氟乙酰胺(0.15mL，0.57mmol，1.5equiv)。将反应混合物在0℃下搅拌10分钟，然后在rt下搅拌50分钟。向反应混合物加入被保护的氨基酸11f(R9’＝3-甲氧基亚氨基-丙基，P＝Alloc)(113.6mg，0.38mmol，1.0equiv)和HATU(182mg，0.48mmol，1.26equiv)。将反应混合物在rt下搅拌3h。将反应混合物蒸发至干，溶于乙酸乙酯，用10％柠檬酸(1x)、水(1x)、sat.NaHCO3(1x)和盐水洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，浓缩。残余物经过色谱纯化，得到Alloc-保护的林可酰胺产物(107mg，53％)：MS(ESPOS)：532.4[M+H]+.
向上述Alloc-保护的林可酰胺(107mg，0.20mmol，1equiv)在THF(2.6mL)中的混合物加入双甲酮(282mg，2.01mmol，10equiv)和四(三苯膦)钯(46.5mg，0.04mmol，0.2equiv)。将混合物在rt下搅拌过夜。在真空下除去溶剂，残余物经过色谱纯化，得到实施例29标题化合物(28mg，31％)，为白色固体：
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ7.36(t，J＝6.2，0.68H)，6.66(t，J＝5.4，0.32H)，5.23(d，J＝5.7，1)，4.16(dd，J＝3.2，10.1，1)，4.10-4.01(m，2)，3.81(s，1)，3.79(d，J＝3.3，1)，3.74(s，2)，3.50(dd，J＝3.3，9.9，1)，3.30-3.22(m，1)，3.18-3.10(m，1)，2.67-2.55(m，1)，2.40-2.31(m，1)，2.25--2.12(m，2)，2.10(s，3)，1.97-1.88(m，1)，1.76-1.65(m，1)，1.59-1.38(m，3)，1.14-1.01(m，2)，0.90(d，J＝6.9，6)；MS(ESPOS)：448.4[M+H]+.
实施例30
4-(3-乙氧基亚氨基-丙-1-基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
实施例30标题化合物的合成是如实施例29所述进行的，从中间体11e(R9’＝3-氧代丙基，P＝Alloc)开始，在亚胺生成步骤中替换盐酸乙氧基胺：MS(ESPOS)：462.4[M+H]+.
实施例31
4-[2-(5-乙基-异噁唑-3-基)-乙基]-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺.
实施例31标题化合物的合成是如实施例29所述进行的，从中间体11e(R9’＝3-氧代丙基，P＝Alloc)开始，在亚胺生成步骤中替换盐酸羟胺，得到11e(R9’＝3-羟基亚氨基-丙基，P＝Alloc)。在N-氯琥珀酰亚胺和TEA的存在下借助1-丁炔的环加成作用加工中间体11e(R9’＝3-羟基亚氨基-丙基，P＝Alloc)，安装异噁唑杂环。偶联和去保护是如实施例29所述进行的：MS(ESPOS)：486.3[M+H]+.
实施例32
4-氟-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
4-位立体异构体I和4-位立体异构体II
4-氟-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺(高Rf的4位立体异构体I和低Rf的4位立体异构体II)
在0℃下，向在通用方法Q流程12所述合成顺序中制备的Boc-保护的氨基酸12d(P＝Boc，R9＝丙基，m＝1)(310mg，，1.15mmol)的DMF(3mL)溶液加入7-Cl MTL 6b(R2＝H，R3＝Cl)(306mg，1.15mmol)、HBTU(469mg，1.3mmol)和DIEA(290μL，2.3mmol)，在室温下搅拌过夜。在高真空下借助旋转蒸发除去DMF。所得残余物经过硅胶柱色谱纯化(3％MeOH的DCM溶液)，得到所需Boc-保护的4-F林可酰胺(451mg，75％)，为浅褐色油：
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.29(d，J＝5.7，1)，4.50(m，3)，4.10(m，1)，3.60(m，3)，2.51(m，1)，2.11(m，4)，1.70(m，2)，1.50(m，9)，0.96(t，J＝7.2，3)；MS(ESPOS)：529[M+H]+.
向上述Boc-保护的4-氟林可酰胺(451mg，0.85mmol)的DCE(6mL)溶液加入三乙基硅烷(0.16mL)、TFA(2mL)和水(0.16mL)，在室温下搅拌1.5hr。在真空中除去反应溶剂。所得残余物经过硅胶柱色谱纯化，使用10％MeOH的DCM溶液作为洗脱剂，得到实施例32标题化合物4-立体异构体I(高TLC Rf)(165mg，45％)：
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.29(d，J＝5.7，1)，4.59(m，2)，4.32(d，J＝9.9，1)，4.07(dd，J＝5.7，10.2，1)，3.81(d，J＝3.3，1)，3.59(m，3)，3.01(d，J＝3.0，1)，2.83(m，1)，2.14(m，4)，1.86(m，2)，1.50(m，5)，0.99(t，J＝7.2，3)；MS(ESPOS)429[M+H]+；
和4-立体异构体II(低TLC Rf)(165mg，45％)：
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.29(d，J＝5.7，1)，4.59(m，3)，4.29(d，J＝10.2，1)，4.08(dd，J＝5.7，10.2，1)，3.85(d，J＝3.3，1)，3.59(m，4)，2.60(m，1)，2.11(m，3)，1.88(m，2)，1.50(m，5)，0.99(t，J＝7.2，3)；MS(ESPOS)；429[M+H]+.
实施例33
4-氟-4-丙基-哌啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
4-氟-4-丙基-哌啶-1，2-二羧酸1-叔丁基酯12d(P＝Boc，R9＝正丙基，m＝2).
从原料(2S)-4-氧代-哌啶-1，2-二羧酸1-叔丁基酯合成Boc-保护的4-氟氨基酸12d采用流程12所述通用方法Q。原料(2S)-4-氧代-哌啶-1，2-二羧酸1-叔丁基酯的制备是如Bousquet，Y.；Anderson，P.C.；Bogri，T.；Duceppe J.；Grenier，L.；Guse，I.；Tetrahedron，1997，53 15671-15680所述的。
将迅速搅拌着的4-氧代-哌啶-1，2-二羧酸1-叔丁基酯12a(m＝2，P＝H，P2＝Boc)(16.0g，0.066mol)(借助Bousquet et al.Tetrahedron，1997，53，15671所述方法制备)的DMF(200mL)溶液用固体碳酸铯(10.7g，0.033mol)和甲基碘(4.5mL，0.072mol)处理。将反应混合物搅拌5h，用EtOAc稀释，用饱和aq.碳酸氢钠、10％aq.柠檬酸和盐水萃取，分离有机层，经硫酸钠干燥，过滤，蒸发至干。从无水苯中蒸发，使除去溶剂所得产物共沸干燥，得到14.8g(98％)所需产物4-氧代-哌啶-1，2-二羧酸1-叔丁基酯2-甲基酯12a(m＝2，P＝Me，P2＝Boc)，为油：TLC Rf 0.53(己烷/Et OAc，1∶1)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ5.33(宽m，0.5)旋转异构体，5.06(宽m，0.5)旋转异构体，4.31-4.19(m，1)，3.95(s，3)，3.95-3.70(m，1)，3.16-2.97(m，2)，2.71(m，2)，1.68(宽s，9).
将0℃搅拌着的4-氧代-哌啶-1，2-二羧酸1-叔丁基酯2-甲基酯12a(m＝2，P＝Me，P2＝Boc)(5.17g，0.02mol)的DCM(60mL)溶液用四烯丙基锡(Aldrich)(5.3mL，0.022mol)处理，继之以滴加BF3·OEt2(2.5mL，0.02mol)。将反应混合物搅拌1h，然后加入aq.1M氟化钾(38.0mL)和C盐(5g)，将反应混合物搅拌3h。将反应混合物过滤，浓缩至干，将残余物溶于DCM，用水和盐水洗涤，经MgSO4干燥，蒸发至干。所得残余物经过硅胶柱色谱纯化(DCM 100％至DCM∶丙酮9∶1)，得到3.85g(64％)所需产物4-烯丙基-4-羟基-哌啶-1，2-二羧酸1-叔丁基酯2-甲基酯12b(m＝2，P＝Me，P2＝Boc，R9′＝烯丙基)，为油。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.11-5.97(m，1)，5.42-5.32(m，2)，5.06(宽d，J＝6.0，0.5)rotamer，4.87(宽d，J＝6.0，0.5)rotamer，4.18-4.03(m，1)，3.93(s，3)，2.48-2.37(m，2)，1.98-1.43(m，11)；MS(ESPOS)：322.0[M+Na]+.
rotamer：旋转异构体
将搅拌着的12b(m＝2，P＝Me，P2＝Boc，R9′＝烯丙基)(3.80mL，1.27mmol)与10％Pd/C(degusa湿型50％w/w)(1.35g，1.3mmol)的MeOH(80mL)悬液在1atm氢下搅拌6h。将反应混合物通过C盐过滤，蒸发至干，借助从甲苯中蒸发共沸干燥，所得残余物(3.15g)无需进一步纯化即可用于下一步。
向搅拌着的-78℃的DAST(1.7mL，1.3mmol)的DCM(50mL)溶液加入4-羟基-4-丙基-哌啶-1，2-二羧酸1-叔丁基酯2-甲基酯的DCM(30mL)溶液。然后将反应混合物在-78℃下搅拌1h，然后升温至-40℃达5h。加入另外的DAST(0.4mL)，将反应混合物搅拌另外2h，加入饱和aq.K2CO3(20mL)和水(60mL)，继之以二乙醚(500mL)，分离有机层，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，蒸发至干。所得粗的氟化产物经过硅胶柱色谱纯化(己烷-EtOAc 9∶1)。将色谱纯化所得残余物溶于二噁烷(65mL)和水(26mL)，冷却至0℃，用OsO4(0.65mL，4％水溶液)和30％H2O2(10mL)处理。将反应混合物搅拌过夜，浓缩至干，将残余物溶于DCM，将有机层用水(100mL)、25％aq.Na2SO3(2×100mL)和盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，蒸发至干。所得残余物经过硅胶柱色谱纯化(己烷-EtOAc 9∶1)，得到(1.08g，34％)所需产物4-氟-4-丙基-哌啶-1，2-二羧酸1-叔丁基酯2-甲基酯12c(m＝2，P＝Me，P2＝Boc，R9＝正丙基)，为油。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ4.59(dd，J＝6.0，6.0，1)，3.82-3.69(m，1)，3.74(s，3)，3.28(m，1)，3.29-2.04(m，2)，1.91-1.71(m，3)，1.60-1.31(m，6)，1.45(s，9)，0.92(t，J＝7.1，3)；MS(ESPOS)：204.1(M+H-Boc)，326.3[M+Na]+.
利用实施例32的偶联和去保护条件，容易完成从12d(P＝Boc，R9＝正丙基，m＝2)合成实施例33标题化合物。
MS(ESPOS)：443.1[M+H]+；HPLC：C18 3.5μm，4.6×30mm柱；梯度洗脱剂2％-98％MeCN，历经10min；1.5mL/min)：Rt＝3.738min.
实施例34
4-氟-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
4-氟-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺.
将借助流程12所述通用方法Q制备的12d(P＝Boc，R9＝C3H7，m＝1)(164mg，0.57mmol)的搅拌悬液悬浮在无水乙腈(4mL)中。加入三乙胺(332μL，3.02mmol)，将反应混合物冷却至0℃。加入氯甲酸异丁酯(78μL，0.57mmol)，10min后使反应升温至4℃。1.5h后，加入MTL 1a(151mg，0.57mmol)的1∶1丙酮∶水(4mL)溶液，将反应混合物在rt下搅拌10h。将反应混合物蒸发至干，经过二氧化硅色谱处理(95∶5二氯甲烷/MeOH至95∶8二氯甲烷/MeOH)，得到产物，为无色的油(137mg，45％)：TLC Rf＝0.32(9∶1二氯甲烷/MeOH)；MS(ESPOS)：411[M+H-Boc]+，511[M+H]+.
向上述Boc-保护的林可酰胺(125mg)的DCM(2.0mL)溶液加入DCE溶液(10.0mL)、三氟乙酸(5mL)、甲基硫(0.3mL)与水(0.3mL)。将反应混合物在rt下搅拌40min，然后用DCE(25.0mL)稀释。在真空下除去溶剂，与DCE共蒸发两次。残余物经过fluorosil色谱纯化(20％MeOH0.25M NH3/DCM)，得到标题化合物，为无色固体(30.0mg，30％)：MS(ESPOS)：411.6[M+H]+.
实施例35
4-氟-4-丁基-吡咯烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
4-位立体异构体I和4-位立体异构体II
4-羟基-4-丁基脯氨酸甲基酯12b(P＝Boc，m＝1，R9＝正丁基).
在-78℃下，向正丁基锂(165mg，2.6mmol)的THF(5mL)搅拌溶液加入12a(P＝Boc，P2＝Me，m＝1)(570mg，2.3mmol)的THF(5mL)溶液。将反应混合物在-78℃下搅拌2hr，然后在-40℃下搅拌另外1hr。加入EtOAc(20mL)，继之以NH4Cl(5mL，10％)和水(10mL)。分离有机层，经硫酸钠干燥，蒸发至干。所得残余物经过硅胶柱色谱纯化，使用50％EtOAc的己烷溶液作为洗脱剂，得到4-羟基-4-丁基脯氨酸甲基酯12b(P＝Boc，m＝1，R9＝正丁基)，为无色的油(0.52g，73％)：
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ4.33(m，1)，3.76(d，J＝4.8，3)，3.62(m，2)，3.28(m，1)，2.13(m，1)，2.02(m，1)，1.57(m，2)，1.29(m，12)，0.88(m，3)；MS(ESPOS)：324[M+Na]+.
4-氟-4-丁基脯氨酸甲基酯12c(P＝Boc，m＝1，R9＝正丁基).
在-78℃下，向搅拌着的DAST(0.55g，3.4mmol)的DCM(5mL)溶液缓慢加入4-羟基脯氨酸12b(P＝Boc，m＝1，R9＝正丁基)(520mg，1.7mmol)的无水DCM(5mL)溶液。将混合物在-78℃下搅拌1h，然后在-10℃下搅拌另外1h。加入DCM(50mL)，继之以aq.NH4Cl(10％，30mL)。分离有机层，经硫酸钠干燥，蒸发至干。所得残余物经过柱色谱纯化，用5％EtOAc的己烷溶液洗脱，得到4-氟-4-丁基脯氨酸甲基酯12c(P＝Boc，m＝1，R9＝正丁基)(270mg，52％)，为无色的油：
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ4.41(m，2)，3.83(m，1)，3.71(s，3)，3.45(dd，J＝12.3，32.7，2)，2.48(m，1)，1.73(m，2)，1.40(m，12)，0.89(m，3)；MS(ESPOS)：326[M+Na]+.
4-氟-4-丁基脯氨酸12d(P＝Boc，m＝1，R9＝正丁基).
向12c(0.27g，0.89mmol)的THF(10mL)与水(3mL)溶液加入氢氧化锂一水合物(45mg，1.06mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。除去THF，残余物经过柱色谱纯化，使用10％MeOH的DCM溶液作为洗脱剂，得到4-氟-4-丁基脯氨酸12d(P＝Boc，m＝1，R9＝正丁基)(0.26g，100％)，为无色的油：1H NMR(300MHz，CD3OD)δ4.30(m，1)，3.72(m，1)，3.49(m，1)，3.39(m，1)，2.58(m，1)，2.02(m，2)，1.72(m，13)，0.93(t，J＝6.6，3)；MS(ESNEG)：288[M-1]-.
4-氟-4-丁基-吡咯烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺：4-立体异构体I和4-立体异构体II
在0℃下，向12d(P＝Boc，m＝1，R9＝正丁基)(125mg，0.43mmol)的DMF(3mL)溶液加入7-Cl MTL 6b(R2＝H，R3＝Cl)(117mg，0.43mmol)、HBTU(180mg，0.47mmol)和DIEA(111mg，0.86mmol)，在室温下搅拌过夜。除去溶剂，残余物经过硅胶柱色谱纯化，用2％MeOH的DCM溶液洗脱，得到所需Boc-保护的林可酰胺中间体(170mg，72％)，为浅褐色液体：1HNMR(300MHz，CD3OD)δ5.29(d，J＝5.4，1)，4.57(m，3)，4.39(m，1)，4.03(m，2)，3.74(m，3)，3.25(m，1)，2.51(m，1)，2.12(m，3)，1.85(m，3)，1.46(s，9)，1.36(m，6)，0.93(t，J＝6.6，3)；MS(ESPOS)：543[M+H]+.
向上述Boc-保护的林可酰胺(170mg，0.31mmol)的DCE(6mL)溶液加入三乙基硅烷(0.16mL)、TFA(2mL)和水(0.16mL)。将反应混合物在室温下搅拌1hr。除去溶剂，残余物经过硅胶柱色谱纯化，用10％MeOH的DCM溶液洗脱，得到4-氟-4-丁基-吡咯烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺，4-立体异构体I(14mg，10％)：1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.30(d，J＝6.0，1)，4.54(m，3)，4.29(d，J＝10.2，1)，4.09(dd，J＝5.6，10.2，1)，3.80
4-氟-4-丁基-吡咯烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺，4-立体异构体II(3mg，2％)：
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.30(d，J＝6.0，1)，4.54(m，3)，4.29(d，J＝10.2，1)，4.09(dd，J＝5.6，10.2，1)，3.80(d，J＝3.0，1)，3.56(m，3)，2.70(m，1)，2.14(m，4)，1.87(m，2)，1.43(m，7)，0.94(t，J＝7.2，3)；(ESPOS)：443[M+H]+.
实施例36
4-氟-4-乙基-哌啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
4-氟-4-乙基-哌啶-1，2-二羧酸1-叔丁基酯12d(P＝Boc，m＝2，R9＝正乙基).
从原料(2S)-4-氧代-哌啶-1，2-二羧酸1-叔丁基酯合成Boc-保护的4-氟氨基酸12d采用流程12所述通用方法Q，在4-酮烷基化步骤中使用三甲代甲硅烷基乙炔阴离子作为二碳合成子。原料4-氧代-哌啶-1，2-二羧酸1-叔丁基酯的制备是如Bousquet，Y.；Anderson，P.C.；Bogri，T.；Duceppe J.；Grenier，L.；Guse，I.；Tetrahedron，1997，53 15671-15680所述的。利用实施例34的偶联和去保护条件，容易完成从12d(P＝Boc，m＝2，R9＝乙基)合成实施例36标题化合物。MS(ESPOS)：429.1[M+H]+.
实施例37
4-亚丙基-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
4-氧代-哌啶-1，2-二羧酸1-叔丁基酯2-甲基酯.
向(2S)-4-氧代-哌啶-1，2-二羧酸1-叔丁基酯(0.52g，2.15mmol)的甲醇(10mL)溶液加入2M TMS-重氮甲烷的己烷溶液(2mL，4mmol)，在室温下搅拌15min。除去反应溶剂，所得甲基酯产物(4-氧代-哌啶-1，2-二羧酸1-叔丁基酯2-甲基酯)直接用于下一反应(0.55g，100％)：
MS(ESPOS)：258[M+H]+；1HNMR(300MHz，CD3OD)δ5.13，4.86(bs，1)，4.02-4.11(m，1)，3.73(s，3)，3.67-3.72(m，1)，2.78(d，J＝4.2Hz，2)，2.51(bs，2)，1.46(bs，9).
4-亚丙基-哌啶-1，2-二羧酸1-叔丁基酯2-甲基酯.
将溴化丙基三苯基鏻(1.24g，3.22mmol)的THF(10mL)溶液加入到经过己烷洗涤的氢化钠(123mg，3.22mmol)的THF(10mL)溶液中，在室温下搅拌3h。向上述反应混合物缓慢加入甲基酯12a(P＝Boc，m＝2，P2＝Me)(0.55g，2.15mmol)的THF(5mL)溶液，然后搅拌另外2h。然后倒入水中，用乙酸乙酯(30mL)萃取。将有机相用硫酸镁干燥，过滤，蒸发至干，所得残余物经过色谱处理，用20％EtOAc的己烷溶液洗脱，得到产物4-亚丙基-哌啶-1，2-二羧酸1-叔丁基酯2-甲基酯(0.100g，16％)：
MS(ESPOS)：284[M+H]+；1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.18(m，m)，4.60-4.93(m，1)，3.91(m，1)，3.67(s，3)，2.94-3.04(m，2)，2.40-2.48(m，2)，1.99-2.06(m，1)，1.85-1.97(m，2)，1.38(bs，9)，0.85(t，J＝5Hz，3).
4-亚丙基-哌啶-1，2-二羧酸1-叔丁基酯.
向4-亚丙基-哌啶-1，2-二羧酸1-叔丁基酯2-甲基酯(0.100g，0.353mmol)的THF(10mL)溶液加入氢氧化锂(0.50g，11.6mmol)的水(2mL)溶液，将反应混合物在室温下搅拌16h。然后倒入水中，用醚(20mL)萃取。然后将水层用10％HCl(5mL)酸化，用乙酸乙酯(30mL)萃取。干燥和除去溶剂后所得产物羧酸4-亚丙基-哌啶-1，2-二羧酸1-叔丁基酯直接用于下一步。MS(ESNEG)：268[M-1]-；1HNMR(300MHz，CD3OD)δ5.18(m，m)，4.60-4.93(m，1)，3.91(m，1)，2.94-3.04(m，2)，2.40-2.48(m，2)，1.99-2.06(m，1)，1.85-1.97(m，2)，1.38(bs，9)，0.85(t，J＝5Hz，3).
4-亚丙基-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺.
向搅拌着的2b(R2’＝H)(32mg，0.12mmol)、DIEA(0.2mL，1.20mmol)、4-亚丙基-哌啶-1，2-二羧酸1-叔丁基酯(37mg，0.14mmol)的DMF(5mL)溶液加入HBTU(57mg，0.16mmol)，将混合物在室温下搅拌2h。在高真空下除去大多数DMF，将粗产物溶于乙酸乙酯(50mL)，用饱和碳酸氢钠(10mL)洗涤。在真空下除去溶剂，产物经过硅胶柱色谱纯化，使用乙酸乙酯作为洗脱剂，得到所需Boc-保护的林可酰胺(50mg，83％)：MS(ESPOS)：503(M-1)；1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.19-5.27(m，2)，4.10-4.26(m，2)，3.90-4.05(m，2)，3.83-3.90(m，2)，3.49-3.88(m，2)，3.06(m，2)，2.57(m，2)，1.90(s，3)，1.47(bs，9)，0.88-0.95(m，9).
向上述Boc-保护的林可酰胺(50mg，0.10mmol)的二氯乙烷(6mL)溶液加入三乙基硅烷(0.15mL)，继之以93％aq.三氟乙酸(2.15mL)。在r t下搅拌1hr后，在45℃减压下除去溶剂。所得粗产物经过硅胶柱色谱纯化，使用10％MeOH的DCM溶液作为洗脱剂，得到标题化合物(5mg，12％)：1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.40(m，1)，5.24(d，J＝3.8Hz，1)，4.16-4.20(m，1)，4.04-4.09(m，2)，3.81(t，J＝2.2Hz，1)，3.49-3.55(m，2)，2.50-2.92(m，3)，2.00-2.25(m，6)，2.10(s，3)，0.89-0.98(m，9).MS(ESPOS)：403[M+H]+.
实施例38
4-丙基-1，2，3，6-四氢-吡啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
Boc-保护的氨基酸与2b(R2’＝H)偶联
在23℃下，向借助流程21所述通用方法S制备的Boc-氨基酸21k(R9＝正丙基，R9b＝H，m＝1)(69mg，0.26mmol，1equiv)、2b(R2’＝H)(74mg，0.26mmol，1equiv)与HBTU(107mg，0.28，1.1equiv)的DMF(2.5mL)溶液加入N，N-二异丙基乙胺(89μL，0.51mmol，2equiv)。将反应在23℃下搅拌2.5h，然后在真空中浓缩，以除去DMF。
将所得残余物溶于乙酸乙酯(70mL)，然后用1∶1盐水∶10％含水柠檬酸(50mL)、饱和含水NaHCO3(50mL)、盐水(30mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩，得到107mg所需偶联产物。该产物无需进一步纯化即可用于最终的去保护步骤：1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.39(br d，J＝14.4Hz，1H)，5.19(d，J＝5.7Hz，1H)，4.10-3.82(m，4H)，3.55-3.48(m，1H)，2.45(br s，2H)，2.05(s，3H)，2.04-1.94(m，2H)，1.47(s，9H)，1.46-1.37(m，2H)，0.96-0.83(m，9H)；MS(ESPOS)：503.3[M+H]+.
Boc-去保护得到4-丙基-1，2，3，6-四氢-吡啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺.
在23℃下，向上述Boc-氨基甲酸酯林可酰胺(35mg，0.070mmol，1equiv)的DCE(5.0mL)溶液加入H2O(0.20mL)，继之以TFA(2.0mL)。将反应在23℃下搅拌30min，然后用甲苯(40mL)处理，然后浓缩至体积10mL，然后用第二份甲苯(40mL)处理，浓缩至干。粗产物经由半制备型HPLC纯化(Waters
HR C18，6μm粒径，
孔径，25mm直径×100mm长度，含5-60％乙腈的H2O/0.1％AcOH，历经30min，流速20mL/min)，得到16mg纯的4-丙基-1，2，3，6-四氢-吡啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺：
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.51(brs，1H)，5.33(br d，J＝5.4Hz，1H)，4.18(s，2H)，4.13-3.98(m，2H)，3.86(br s，1H)，3.55-3.58(m，3H)，2.58-2.39(m，2H)，2.12(s，3H)，2.12-2.00(m，3H)，1.50-1.37(m，2H)，0.94-0.78(m，9H)；13C NMR(300MHz，D2O)：δ170.9，136.5，114.5，88.4，70.9，69.3，68.8，68.2，55.1，53.0，42.3，38.3，29.9，27.7，20.0，19.9，14.7，13.3，13.1；MS(ESPOS)：403.3[M+H]+.
实施例39
4-丙基-1，2，3，6-四氢-吡啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
Boc-保护的氨基酸与6b(R2＝H，R3＝Cl)偶联
在23℃下，向借助流程21所述通用方法S制备的Boc-氨基酸21k(R9＝正丙基，m＝1)(131mg，0.49mmol，1equiv)、7-Cl MTL 6b(R2＝H，R3＝Cl)(132mg，0.49mmol，1equiv)与HBTU(203mg，0.54mmol，1.1equiv)的DMF(4.0mL)溶液加入N，N-二异丙基乙胺(170μL，0.97mmol，2equiv)。将反应在23℃下搅拌2.5h，然后在真空中浓缩，以除去DMF。将所得残余物溶于EtOAc(70mL)，然后用1∶1盐水∶10％含水柠檬酸(50mL)、饱和含水NaHC03(25mL)、盐水(30mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩，得到276mg所需偶联产物。该产物无需进一步纯化即可用于最终的去保护步骤：
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.41(br s，1H)，5.28(d，J＝6.0Hz，1H)，4.65-4.52(m，1H)，4.46-4.36(m，1H)，4.25-4.16(m，1H)，4.15-3.97(m，2H)，3.93-3.74(m，2H)，3.55(dd，J＝3.3，10.2Hz，1H)，2.62-2.40(m，2H)，2.13(s，3H)，2.10-1.95(m，2H)，1.49(s，9H)，1.46-1.32(m，5H)，0.90(brt，J＝7.2Hz，3H)；MS(ESPOS)：523.2[M+H]+.
4-丙基-1，2，3，6-四氢-吡啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺.
在23℃下，向上述Boc-氨基甲酸酯保护的林可酰胺(225mg，0.43mmol，1equiv)的DCE(25mL)溶液加入H2O(1.0mL)，继之以TFA(10mL)。将反应在23℃下搅拌30min，然后用甲苯(150mL)处理，然后浓缩至体积30mL，然后用第二份甲苯(150mL)处理，浓缩至干。粗产物经由半制备型HPLC纯化(WatersHR C18，6μm粒径，孔径，25mm直径×100mm长度，含5-60％乙腈的H2O/0.1％AcOH，历经30min，流速20mL/min)，得到90mg纯的4-丙基-1，2，3，6-四氢-吡啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺：1H NMR(300MHz，D2O)δ5.53(br s，1H)，5.39(br d，J＝6.0Hz，1H)，4.66-4.55(m，1H)，4.46(dd，J＝1.2，10.2Hz，1H)，4.33(d，J＝9.9Hz，1H)，4.19-4.07(m，2H)，3.88(d，J＝2.7Hz，1H)，3.74(br s，2H)，3.66(dd，J＝3.0，10.2Hz，1H)，2.70-2.44(m，2H)，2.18(s，3H)，2.08(br t，J＝7.2Hz，3H)，1.52-1.37(m，2H)，1.42(d，J＝6.9Hz，3H)，0.85(t，J＝6.9Hz，3H)；MS(ESPOS)：423.1[M+H]+.
实施例40
1-氨甲酰基甲基-4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
在室温和氮气氛下，向搅拌着的4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺(200mg，0.48mmol，1equiv)的无水乙腈(3mL)溶液加入三乙胺(0.2mL，1.44mmol，3equiv)，继之以溴乙酰胺(80mg，0.58mmol，1.2equiv)。将所得混合物在室温下搅拌18h，蒸发至干。所得残余物首先经过硅胶纯化，洗脱剂为7％氨的甲醇溶液/二氯甲烷。收集所需级分，蒸发至干，经过HPLC再纯化(除去碱与溴乙酰胺反应的副产物)。冻干后，得到所需实施例40标题化合物(2.0mg)，为白色绒毛状粉末：
HPLC：Rt＝4.11min(220.0nm)；1H NMR(300MHz，CD3OD)δ(rotamers)5.46(d，J＝5.5，1)，4.47(dd，J＝3.02，2.7，1.1)，4.31-4.25(m，3.3)，4.11(d，J＝3.02，1.6)，2.31(s，3)，1.65-1.52(m，9.5)，1.12-1.09(m，10.3).MS(ESPOS)：476.5[M+H]+，(ESNEG)：474.5[M-H]-.
实施例41
1-氰甲基-4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
在rt和氮下，将搅拌着的粗的4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺(210mg，0.50mmol，1equiv)与三乙胺(0.21mL，1.51mmol，3equiv)的无水乙腈(3mL)溶液用溴乙腈(42μL，0.60mmol，1.2equiv)处理。将所得反应混合物在rt下搅拌18h，蒸发至干，经过硅胶色谱纯化，洗脱剂为2.5％甲醇的二氯甲烷溶液。汇集所需级分，蒸发至干，冻干，得到标题化合物(11.2mg，10％)，为绒毛状白色粉末：
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.44(d，J＝5.49，1)，4.38-4.23(m，4)，2.29(s，3)，1.52(m，11)，1.16-1.09(m，12)；MS(ESPOS)：458.5[M+H]+，MS(ESNEG)：456.5[M-H]-.
实施例42
1-(1H-咪唑-2-基甲基)-4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
1-(1-苄基-1H-咪唑-2-基甲基)-4-戊-2-烯基-吡咯烷-2-羧酸苄基酯.
将Boc-保护的氨基酸7d(R9’＝4-戊-2-烯基)(433mg，1.16mmol，1eq.)在4M HCl的二噁烷溶液(5mL)中搅拌2h，然后蒸发至干。使所得残余物从DCM中共蒸发至干(3×20mL)。将粗的HCl盐溶于丙酮(8mL)，将所得溶液用二异丙基乙胺(0.61mL，3.50mmol，3equiv)处理，继之以1-苄基-2-(氯甲基)-1H-咪唑(Maybridge)(338mg，1.39mmol，1.2equiv)处理。将反应混合物在室温下搅拌48h，蒸发至干。将所得残余物用EtOAc(200mL)稀释，顺序用10％柠檬酸、盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，蒸发至干。所得粗产物经过硅胶色谱纯化，用CH2Cl2/己烷/MeOH(6∶5∶1)洗脱，得到所需的N-烷基化产物1-(1-苄基-1H-咪唑-2-基甲基)-4-戊-2-烯基-吡咯烷-2-羧酸苄基酯(257mg，50％)：Rf＝0.7(7∶2∶1，CH2Cl2/己烷/MeOH)；MS(ESPOS)：444.3[M+H]+.
1-(1-苄基-1H-咪唑-2-基甲基)-4-戊-2-烯基-吡咯烷-2-羧酸.
在室温下，向搅拌着的1-(1-苄基-1H-咪唑-2-基甲基)-4-戊-2-烯基-吡咯烷-2-羧酸苄基酯(257.2mg，0.6mmol，1equiv)的4∶1THF/H2O(8mL)溶液加入氢氧化锂一水合物(250mg，5.96mmol，10equiv)。将所得反应混合物在室温下搅拌过夜，蒸发至干。将所得残余物溶于水(10mL)，调节所得溶液的pH在3与4之间，用EtOAc萃取(3×100mL)。合并有机萃取液，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，蒸发至干，得到酸产物1-(1-苄基-1H-咪唑-2-基甲基)-4-戊-2-烯基-吡咯烷-2-羧酸(202mg，98％)：Rf＝0.4(7∶2∶1CH2Cl2/己烷/MeOH)，KMnO4可视化染剂；MS(ESPOS)：355[M+H]+；MS(ESNEG)：352[M-H]-.
1-(1-苄基-1H-咪唑-2-基甲基)-4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺.
在N2和0℃下，向搅拌着的2b(R2′＝H)(96.4mg，0.33mmol，1equiv)的无水DMF(1.5mL)溶液加入三乙胺(0.4mL，2.9mmol，8.7equiv)，继之以BSTFA(0.4mL，1.51mmol，4.6equiv)。将所得混合物在0℃下搅拌10min，然后在室温下搅拌30min，再冷却。向反应加入1-(1-苄基-1H-咪唑-2-基甲基)-4-戊-2-烯基-吡咯烷-2-羧酸(194mg，0.55mmol，1.7equiv)溶液，继之以固体HATU(261mg，0.69mmol，2.1equiv)。将所得混合物在室温下搅拌3h，蒸发至干。将所得残余物溶于EtOAc，然后用10％含水柠檬酸、饱和含水NaHCO3、盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩。将粗的全甲硅烷基化化合物溶于MeOH(60mL)，在室温下用Dowex H+型树脂(250mg)处理45min，将反应混合物过滤，蒸发至干，得到林可酰胺产物1-(1-苄基-1H-咪唑-2-基甲基)-4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺。
向经过烘箱干燥的密封试管中加入上述粗的1-(1-苄基-1H-咪唑-2-基甲基)-4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺(280mg，0.48mmol)的无水EtOH(5mL)溶液、10％披钯碳(560mg)和1，4-环己二烯(1.5mL)。将反应容器用N2净化，密封，在室温下搅拌18h。将反应混合物通过C盐过滤，用试剂醇洗涤若干次，合并洗液和滤液，蒸发至干。所得残余物经过硅胶色谱纯化(1∶9氨的甲醇溶液∶CH2Cl2)。将所需级分蒸发至干，冻干，得到实施例42标题化合物(29.3mg，18％)：TLC Rf＝0.7(14％氨的甲醇溶液/CH2Cl2)，KMnO4可视化染剂；MS(ESPOS)：499.4[M+H]+
实施例43
1-亚氨甲基-4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
将搅拌着的4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺(153mg，0.34mmol，1equiv)与亚氨代甲酸乙酯(ethyl formimidate)(Aldrich)(44mg，0.40mmol，1.2equiv)的二噁烷(1mL)悬液用1M含水NaOH(0.74mL，0.74mmol，2.2equiv)处理。1h后，向反应混合物加入另外的亚氨代甲酸乙酯(44mg，0.40mmol，1.2equiv)，继续搅拌30min。将反应混合物冷冻并冻干。冻干粉末经过柱色谱纯化，得到标题化合物(8mg)：TLC Rf＝0.48CHCl3/MeOH/32％含水AcOH(5∶3∶1)；MS(ESPOS)：447.7[M+H]+，469.7[M+Na]+，MS(ESNEG)：481.6[M-H+HCl]-.
实施例44
4-丁基-1，2，3，6-四氢-吡啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
使借助通用方法S制备的Boc-氨基酸21k(R9＝正丁基，R9b＝H，m＝1)与7-Cl MTL 6b(R2＝H，R3＝Cl)偶联。该产物无需进一步纯化即可用于最终的去保护步骤。如前文实施例38进行去保护和纯化，得到标题化合物。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.52(br s，1H)，5.29(br d，J＝5.7Hz，1H)，4.63-4.52(m，2H)，4.30(d，J＝9.6Hz，1H)，4.08(dd，J＝5.7Hz，1H)，4.00(dd，J＝4.8，11.4Hz，1H)，3.81(d，J＝2.1Hz，1H)，3.69(brs，2H)，3.56(dd，J＝3.3，10.2Hz，1H)，2.66-2.35(m，2H)，2.20-2.06(m，2H)，2.14(s，3H)，1.54-1.28(m，7H)，0.93(t，J＝7.2Hz，3H)；MS(ESPOS)：437.2[M+H]+.
实施例45
4-丁基-1，2，3，6-四氢-吡啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
使借助通用方法S制备的Boc-氨基酸21k(R9＝正丁基，R9b＝H，m＝1)与林可胺2b(R2′＝H)偶联。该产物无需进一步纯化即可用于最终的去保护步骤。如前文实施例38进行去保护和纯化，得到标题化合物。1H NMR(300MHz，D2O)δ5.52(br s，1H)，5.24(d，J＝5.7Hz，1H)，4.23(dd，J＝3.6，10.2Hz，1H)，4.13-4.04(m，2H)，3.95(dd，J＝5.1，11.1Hz，1H)，3.81(d，J＝2.7Hz，1H)，3.68(bs，2H)，3.51(dd，J＝3.3，10.2Hz，1H)，2.59-2.34(m，2H)，2.24-2.06(m，3H)，2.11(s，3H)，1.52-1.28(m，4H)，0.98-0.87(m，9H)MS(ESPOS)：417.3[M+H].
实施例46
5-丙基-2，3，6，7-四氢-1H-氮杂
-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
在0℃下，向被保护的环状氨基酸22h(R9b＝H，R9＝丙基)(340mg，0.88mmol)的DMF(3mL)溶液加入6b 7-Cl MTL(R2＝H，R3＝Cl)(367mg，0.88mmol)、TEA(332μL，1.76mmol)、HRTU(496mg，0.97mmol)，在室温下搅拌过夜。然后除去溶剂。经过硅胶柱色谱进行纯化，用50-100％EtOAc/己烷洗脱，得到所需被保护的林可酰胺13a(R9＝丙基，R9b＝H，m＝2，R2＝H，R3＝Cl，P1＝H，P2＝Boc)(575mg，90％)。MS(ESPOS)：537[M+1]+.
向Boc-保护的林可酰胺13a(R9＝丙基，R9b＝H，m＝2，R2＝H，R3＝Cl，P1＝H，P2＝Boc)(575mg，1.07mmol)的DCE(15mL)溶液加入三乙基硅烷(0.5mL)、TFA(5mL)、水(0.5mL)，在室温下搅拌1.5hr。除去反应溶剂，所得残余物经过二氧化硅色谱纯化，用5-10％MeOH/DCM洗脱，得到标题化合物(433mg，92％)，为无色固体。MS(ESPOS)：437[M+1]+.
实施例47
5-丙基-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
将实施例46的不饱和标题化合物5-丙基-2，3，6，7-四氢-1H-氮杂-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺(433mg，0.99mmol)和10％Pd/C(80mg)溶于MeOH(10mL)，在50psi下氢化过夜。除去溶剂，得到粗产物。借助硅胶柱色谱进行纯化(20％MeOH/DCM)，继之以制备型HPLC纯化(通用方法AC)，得到异构体1Rt＝18.3min(10mg，2.3％)和异构体2Rt＝18.6min(58mg，13.3％).
异构体1 1HNMR(300MHz，CD3OD)δ5.29(d，J＝5.4，1)，4.88(m，1)，4.42(dd，J＝1.8，10.2，1)，4.23(d，J＝9.9，1)，4.10(dd，J＝5.7，10.2，1)，3.78(d，J＝3.3，1)，3.71(t，J＝6.0，1)，3.58(dd，J＝3.3，10.2，1)，3.15(m，1)，2.83(m，1)，2.13(m，2)，2.03(m，2)，1.86(m，2)，1.73(m，1)，1.50(m，4)，1.42(m，6)，0.92(t，J＝6.6，3)；MS(ESPOS)：439[M+H]+.
异构体2 1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.30(d，J＝5.7，1)，5.30(d，J＝5.7，1)，4.61(m，2)，4.29(d，J＝9.9，1)，4.10(dd，J＝5.7，10.2，1)，4.00(m，1)，3.78(d，J＝3.0，1)，3.58(dd，J＝3.3，10.2，1)，3.39(m，1)，3.08(m，1)，2.14(m，4)，1.96(m，3)，1.59(m，3)，1.45(m，3)，1.35(m，4)，0.93(t，J＝6.9，3)；MS(ESPOS)：439[M+H]+.
实施例48
1-环丙基-5-丙基-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
向借助实施例47、48所述方法制备的5-丙基-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺(68mg，0.16mmol)的MeOH(2mL)溶液加入乙酸(0.1mL)，继之以1-[(乙氧基环丙基)氧基]三甲基硅烷(0.2mL，0.96mmol)、氰基硼氢化钠(41mg，0.64mmol)和分子筛，加热至回流达3hr。滤出分子筛，除去反应溶剂，得到粗产物。借助硅胶柱色谱(10％MeOH/DCM)和HPLC进行纯化，得到标题化合物(44mg，59％)。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.20(d，J＝5.4，1)，4.15(d，J＝6.6，1)，4.08(dd，J＝5.4，9.9，1)，3.96(d，J＝3.0，1)，3.88(t，J＝13.2，1)，3.62(m，1)，3.56(dd，J＝3.3，10.2，1)，3.14(m，1)，2.82(m，1)，2.13(m，2)，2.05(s，3)，1.99-1.30(m，10)，0.96(m，9)，0.51(m，4)；MS(ESPOS)：459[M+H]+.
实施例49
1-(5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲基)-5-丙基-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
标题化合物可以这样制备，在DMF中，在碳酸钠的存在下，将实施例46标题化合物1的异构体1或异构体2(其中R2＝H，R3＝Cl，R6＝H，R9＝5-正丙基，m＝3)用4-溴甲基-5-甲基-[1，3]二氧杂环戊烯-2-酮(如J.Alexander，et.al.J.Med.Chem，1996，39，480-486所述制备)处理。
实施例50
2-[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基氨甲酰基]5-丙基-氮杂环庚烷-1-羧酸5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲基酯
标题化合物可以这样制备，在DMF中，在碳酸氢钾的存在下，将实施例46标题化合物1的异构体1或异构体2(其中R2＝H，R3＝Cl，R6＝H，R9＝5-正丙基，m＝3)用碳酸5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲基酯4-硝基-苯基酯(如F.Sakamoto，et.al，Chem.Pharm.Bull.1984，32(6)，2241-2348所述制备)处理。
实施例51
5-甲基-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
如通用方法Z所述使林可胺6b 7-Cl MTL(R2＝H，R3＝Cl)与借助通用方法T制备的环状氨基酸22f(R9＝丙基，R9b＝H，m＝2)偶联，得到中间体氨基甲酸酯13a(R9＝甲基，R9b＝H，m＝2，R2＝H，R3＝Cl，P1＝H，P2＝Boc)，在酸性条件下去保护，得到粗的不饱和中间体。不饱和化合物在MeOH中、在50psi H2下被10％Pd/C氢化，得到5-位异构体的粗混合物。借助制备型HPLC分离两种5-位异构体。
异构体1(低Rt)1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.30(d，J＝5.7，1)，4.58(dd，J＝6.3，10.8，2)，4.30(d，J＝9.9，1)，4.10(m，1)，3.79(m，1)，3.58(m，1)，3.33(m，1)，3.13(m，1)，2.14(m，4)，1.92(m，3)，1.55(m，1)，1.44(d，J＝9.9，6)，1.00(d，J＝9.9，3)；Rt：14.2min；MS(ESPOS)：412[M+H]+.
异构体2(高Rt)1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.30(d，J＝5.7，1)，4.59(m，2)，4.30(d，J＝9.9，1)，4.10(m，1)，3.99(m，1)，3.81(m，1)，3.58(m，1)，3.14(m，1)，2.14(m，4)，1.90(m，3)，1.51(m，1)，1.44(d，J＝9.9，6)，1.00(d，J＝9.9，3)；Rt＝14.5min；MS(ESPOS)：412[M+H]+.
实施例52
5-乙基-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
如通用方法Z所述使林可胺6b 7-Cl MTL(R2＝H，R3＝Cl)与借助通用方法T制备的环状氨基酸22f(R9＝丙基，R9b＝H，m＝2)偶联，得到中间体氨基甲酸酯13a(R9＝甲基，R9b＝H，m＝2，R2＝H，R3＝Cl，P1＝H，P2＝Boc)，在酸性条件下去保护，得到粗的不饱和中间体。不饱和化合物在MeOH中、在50psi H2下被10％Pd/C氢化，得到5-位异构体的粗混合物。借助制备型HPLC分离两种5-位异构体。
异构体1(低Rt)1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.30(d，J＝6.0，1)，4.59(m，1)，4.49(m，1)，4.27(d，J＝9.9，1)，4.10(dd，J＝6.0，10.2，1)，3.92(m，1)，3.79(m，1)，3.55(m，1)，2.99(m，1)，2.14(m，4)，1.79(m，3)，1.45(d，J＝9.9，6)，1.38(m，3)，0.99(m，3)；Rt＝14.6min MS(ESPOS)：425.3[M+H]+.
异构体2(高Rt)1HNMR(300MHz，CD3OD)δ5.30(d，J＝6.0，1)，4.80(m，2)，4.29(d，J＝9.9，1)，4.10(dd，J＝6.0，10.2，1)，3.98(m，1)，3.80(d，J＝2.7，1)，3.59(dd，J＝3.0，10.2，1)，3.07(m，1)，2.14(m，4)，1.92(m，3)，1.52(m，1)，1.45(d，J＝9.9，6)，1.32(m，2)，0.93(m，3)Rt：16min；MS(ESPOS)：425.3[M+H]+.
实施例53
5-环丙基甲基-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
标题化合物可以这样制备，如通用方法Z所述偶联借助通用方法T制备的环状氨基酸22f(R9＝环丙基甲基，R9b＝H，m＝2)与林可胺6b 7-Cl MTL(R2＝H，R3＝Cl)。如实施例47用10％Pd/C氢化不饱和化合物，得到标题化合物，为5-位异构体混合物。
实施例54
5-环丙基-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
标题化合物可以这样制备，如通用方法Z所述偶联借助通用方法T制备的环状氨基酸22f(R9＝环丙基，R9b＝H，m＝2)与林可胺6b7-Cl MTL(R2＝H，R3＝Cl)。如实施例47用10％Pd/C氢化不饱和化合物，得到标题化合物，为5-位异构体混合物。
实施例55
5-乙基-4-甲基-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
标题化合物可以这样制备，如通用方法Z所述偶联借助通用方法T制备的环状氨基酸22f(R9＝乙基，R9b＝甲基，m＝2)与林可胺6b 7-Cl MTL(R2＝H，R3＝Cl)。如实施例47用10％Pd/C氢化不饱和化合物，得到标题化合物，为异构体混合物。
实施例56
4-乙基-5-甲基-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
标题化合物可以这样制备，如通用方法Z所述偶联借助通用方法T制备的环状氨基酸22f(R9＝甲基，R9b＝乙基，m＝2)与林可胺6b 7-Cl MTL(R2＝H，R3＝Cl)。如实施例47用10％Pd/C氢化不饱和化合物，得到标题化合物，为异构体混合物。
实施例57
5-乙基-6-甲基-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
标题化合物可以这样制备，如通用方法Z所述偶联借助通用方法T制备的环状氨基酸22f(R9＝甲基，R9b＝乙基，m＝1)与林可胺6b 7-Cl MTL(R2＝H，R3＝Cl)。如实施例47用10％Pd/C氢化不饱和化合物，得到标题化合物，为异构体混合物。
实施例58
4-丙基-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
标题化合物可以这样制备，如通用方法Z所述偶联借助通用方法T制备的环状氨基酸22f(R9＝H，R9b＝丙基，m＝2)与林可胺6b 7-ClMTL(R2＝H，R3＝Cl)。如实施例47用10％Pd/C氢化不饱和化合物，得到标题化合物，为4-位异构体混合物。
实施例59
5-氟-5-丙基-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
标题化合物可以这样制备，如通用方法Z所述偶联环状氨基酸12d(R9＝丙基，m＝2)与林可胺6b 7-Cl MTL(R2＝H，R3＝Cl)。
实施例60
1-甲基-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[环丙基-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-甲基]-酰胺
如通用方法Z所述使林可酰胺23g(R20+R21＝环丙基，R1＝SMe)与借助Hoeksema，H.et.al.Journal of the American ChemicalSociety，1967，892448-2452的方法制备的4-正丙基古液酸(4-n-propylhygric acid)偶联，得到标题化合物。
1H MR(300MHz，D2O)δ5.37(d，J＝5.7Hz，1H)，4.26-4.18(m，2H)，4.10(dd，J＝5.7，9.9Hz，1H)，3.98(d，J＝3.0Hz，1H)，3.82(dd，J＝6.6，11.1Hz，1H)，3.72(d，J＝8.7Hz，1H)，3.67(dd，J＝3.3，7.2Hz，1H)，2.96-2.83(m，1H)，2.90(s，3H)，2.45-2.16(m，3H)，2.10(s，3H)，1.50-1.22(m，4H)，1.10-0.98(m，1H)，0.86(t，J＝7.2Hz，3H)，0.67-0.56(m，1H)，0.50-0.40(m，1H)，0.32-0.14(m，2H).MS(ESPOS)：403.3[M+H]；MS(ESNEG)：437.2[M+Cl].
实施例61
4-丙基-哌啶-2-羧酸[环丙基-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-甲基]-酰胺
如通用方法Z所述使林可酰胺23g(R20+R21＝环丙基，R1＝SMe)与4-丙基-哌啶-1，2-二羧酸-1-叔丁基酯27b(R9＝丙基)偶联，得到标题化合物。使中间体13a(R1＝SMe，R20+R21＝环丙基，R9＝丙基，P1＝H，P2＝羧酸叔丁酯，m＝2)在酸性条件下去保护，得到标题化合物。
1HNMR(300MHz，D2O)δ5.37(d，J＝5.7Hz，1H)，4.20(d，J＝9.0Hz，1H)，4.09(dd，J＝5.7，10.2Hz，1H)，3.96(d，J＝3.3Hz，1H)，3.85(dd，J＝3.0，12.9Hz，1H)，3.75-3.65(m，2H)，3.51-3.42(m，1H)，3.07-2.96(m，1H)，2.21-2.10(m，1H)，2.10(s，3H)，1.99-1.90(m，1H)，1.80-1.65(m，1H)，1.46-1.23(m，6H)，1.11-0.98(m，1H)，0.85(t，J＝6.6Hz，3H)，0.66-0.55(m，1H)，0.50-0.36(m，1H)，0.30-0.12(m，2H)；MS(ESPOS)：403.3[M+H]；MS(ESNEG)：437.2[M+Cl].
实施例62
5-丙基-氮杂环庚烷-2-羧酸[环丙基-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-甲基]-酰胺
如通用偶联方法Z所述使林可酰胺23g(R20+R21＝环丙基，R1＝SMe)与5-丙基-氮杂-1，2-二羧酸-1-叔丁基酯偶联，得到标题化合物。使中间体13a(R20+R21＝环丙基，R9＝丙基，P1＝H，P2＝羧酸叔丁酯，m＝3)在酸性条件下去保护，得到标题化合物。
MS(ESPOS)：451.2[M+H]+.
实施例63
4-丙基-哌啶-2-羧酸[苯基-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-甲基]-酰胺
如流程23所述制备林可酰胺23f(R20+R21＝Ph，R1＝SMe)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.41-7.26(m，5H)，6.90(br d，J＝9.6Hz，1H)5.55(d，J＝5.4Hz，1H)，5.49(dd，J＝1.2，3.3Hz，1H)，5.30-5.23(m，2H)，5.17(dd，J＝3.3，10.8Hz，1H)，4.68(dd，J＝0.9，8.4Hz，1H)，2.08(s，3H)，2.06(s，3H)，1.97(s，3H)，1.62(s，3H)；MS(ESPOS)：530.0[M+Na]；MS(ESNEG)：506.0[M-H].
如流程23所述制备林可酰胺23g(R20+R21＝Ph，R1＝SMe)。
1HNMR(300MHz，CD3OD)δ7.40-7.20(m，5H)，5.09(d，J＝5.7Hz，1H)，4.16-4.05m，4H)，3.58(dd，J＝3.3，10.2Hz，1H)，1.38(s，3H)；MS(ESPOS)：286.0[M+H]；MS(ESNEG)：284.2[M-H].
如通用方法Z所述使林可酰胺23g(R20+R21＝Ph，R1＝SMe)与4-丙基-哌啶-1，2-二羧酸-1-叔丁基酯27b(R9＝丙基)偶联，得到标题化合物。使中间体13a(R20+R21＝Ph，R9＝丙基，P1＝H，P2＝羧酸叔丁酯，m＝2)在酸性条件下去保护，得到标题化合物。
1H NMR(300MHz，D2O)δ7.46-7.30(m，5H)，5.15(d，J＝5.7Hz，1H)，5.11(d，J＝9.9Hz，1H)，4.51(d，J＝10.2Hz，1H)，4.13-4.03(m，2H)，3.91(dd，J＝3.0，12.9Hz，1H)，3.68(dd，J＝3.3，10.2Hz，1H)，3.49-3.40(m，1H)，3.07-2.95(m，1H)，2.10-2.01(m，1H)，1.96-1.86(m，1H)，1.78-1.62(m，1H)，1.51(s，3H)，1.36-1.07(m，6H)，0.82(t，J＝6.6Hz，3H)；MS(ESPOS)：439.3[M+H]；MS(ESNEG)：473.2[M+Cl]
实施例64
1-甲基-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[苯基-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-甲基]-酰胺
如通用方法Z所述使林可酰胺23g(R20+R21＝苯基，R1＝SMe)与4-正丙基古液酸偶联，得到标题化合物。
1HNMR(300MHz，D2O)δ7.47-7.30(m，5H)，5.15(d，J＝5.7Hz，1H)，5.11(d，J＝10.2Hz，1H)，4.50(d，J＝9.9Hz，1H)，4.28(dd，J＝5.4，9.3Hz，1H)，4.11-4.04(m，2H)，3.75(dd，J＝6.0，11.1Hz，1H)，3.68(dd，J＝3.3，10.5Hz，1H)，2.91(s，3H)，2.90-2.80(m，1H)，2.45-1.90(m，3H)，1.48(s，3H)，1.44-1.10(m，4H)，0.78(t，J＝7.2Hz，3H)；MS(ESPOS)：439.3[M+H]；MS(ESNEG)：473.2[M+Cl].
实施例65
4-丙基-哌啶-2-羧酸[环戊基-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-甲基]-酰胺
如流程23所述制备林可酰胺23f(R20+R21＝环戊基，R1＝SMe)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.29(brd，J＝9.0Hz，1H)，5.63(d，J＝5.7Hz，1H)，5.43(d，J＝3.3Hz，1H)，5.25(dd，J＝5.4，11.1Hz，1H)，5.14(dd，J＝3.3，11.1Hz，1H)，4.40-4.38(m，2H)，2.30-2.08(m，1H)，2.14(s，3H)，2.09(s，3H)，2.08(s，3H)，1.97(s，3H)，1.86-1.48(m，6H)，1.27-1.12(m，2H)；MS(ESPOS)：522.2[M+Na]；MS(ESNEG)：498.2[M-H].
如流程23所述制备林可酰胺23g(R20+R21＝环戊基，R1＝SMe)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.28(d，J＝5.7Hz，1H)，4.16-4.08(m，2H)，3.93(dd，J＝0.9，6.6Hz，1H)，3.54(dd，J＝3.0，10.2Hz，1H)，2.99(t，J＝6.6Hz，1H)，2.17-2.04(m，1H)，2.07(s，3H)，1.88-1.51(m，6H)，1.42-1.26(m，2H)
MS(ESPOS)：278.3[M+H]；MS(ESNEG)：276.2[M-H].
如通用方法Z所述使林可酰胺23g(R20+R21＝环戊基，R1＝SMe)与4-丙基-哌啶-1，2-二羧酸-1-叔丁基酯27b(R9＝丙基)偶联，得到标题化合物。使中间体13a(R20+R21＝环戊基，R9＝丙基，P1＝H，P2＝羧酸叔丁酯，m＝2)在酸性条件下去保护，得到标题化合物。
1H MR(300MHz，D2O)δ5.37(d，J＝5.7Hz，1H)，4.23(dd，J＝5.4，9.3Hz，1H)，4.15(d，J＝9.3Hz，1H)，4.09(dd，J＝5.7，10.5Hz，1H)，3.90(dd，J＝3.3，13.2Hz，1H)，3.63(dd，J＝3.3，10.5Hz，1H)，3.49(br d，J＝12.6Hz，1H)，3.10-2.98(m，1H)，2.32-2.12(m，2H)，2.13(s，3H)，2.10-1.91(m，1H)，1.80-1.04(m，16H)，0.87(t，J＝6.6Hz，3H)；MS(ESPOS)：431.3[M+H]；MS(ESNEG)：465.2[M+Cl].
实施例66
1-甲基-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[环戊基-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-甲基]-酰胺
如通用方法Z所述使林可酰胺23g(R20+R21＝环戊基，R1＝SMe)与4-正丙基古液酸偶联，得到标题化合物。
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.35(d，J＝6.0Hz，1H)，4.31-4.22(m，2H)，4.16(d，J＝9.0Hz，1H)，4.09(dd，J＝5.7，10.5Hz，1H)，3.94(d，J＝3.0Hz，1H)，3.85(dd，J＝6.3，11.1Hz，1H)，3.63(dd，J＝3.0，10.5Hz，1H)，2.95-2.85(m，1H)，2.93(s，3H)，2.45-2.13(m，3H)，2.13(s，3H)，1.84-1.03(m，13H)，0.87(t，J＝7.2Hz，3H)；MS(ESPOS)：431.3[M+H]；MS(ESNEG)：465.2[M+Cl].
实施例67
5-丙基-氮杂环庚烷-2-羧酸[环戊基-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-甲基]-酰胺
如通用方法Z所述使林可酰胺23g(R20+R21＝环戊基，R1＝SMe)与5-丙基-氮杂
-1，2-二羧酸-1-叔丁基酯偶联，得到标题化合物。使中间体13a(R1＝SMe，R20+R21＝环戊基，R9＝丙基，P1＝H，P2＝羧酸叔丁酯，m＝3)在酸性条件下去保护，得到标题化合物。
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.33(d，J＝5.7Hz，1H)，4.24(dd，J＝4.8，9.0Hz，1H)，4.19-4.11(m，2H)，4.07(dd，J＝5.7，10.5Hz，1H)，3.90(d，J＝3.0Hz，1H)，3.62(dd，J＝3.3，10.5Hz，1H)，3.46(dd，J＝4.2，13.8Hz，1H)，3.19-3.08(m，1H)，2.36-2.09(m，3H)，2.12(s，3H)，2.08-1.81(m，2H)，1.80-1.40(m，8H)，1.36-1.01(m，7H)，0.83(t，J＝6.6Hz，3H)；MS(ESPOS)：445.2[M+H]；MS(ESNEG)：479.0[M+Cl].
实施例68
1-甲基-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丁-3-烯基]-酰胺
如流程23所述制备林可酰胺23f(R20＝乙烯基，R21＝H，R1＝SMe)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.31(br d，J＝9.3Hz，1H)，5.80-5.62(m，1H)，5.64(d，J＝5.4Hz，1H)，5.41(dd，J＝0.9，3.0Hz，1H)，5.26(dd，J＝5.4，10.8Hz，1H)，5.23-5.10(m，3H)，4.42-4.25(m，2H)，3.56-2.44(m，1H)，2.35-2.23(m，1H)，2.14(s，3H)，2.09(s，3H)，2.08(s，3H)，1.97(m，3H)；MS(ESNEG)：470.0[M-H].
如流程23所述制备林可酰胺23g(R20＝乙烯基，R21＝H，R1＝SMe)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.94-5.78(m，1H)，5.27(d，J＝5.7Hz，1H)，5.20-5.10(m，2H)，4.09(dd，J＝5.7，10.2Hz，1H)，4.04(dd，J＝1.5，3.3Hz，1H)，3.82(dd，J＝0.9，8.1Hz，1H)，3.57(dd，J＝3.3，9.9Hz，1H)，3.13(dt，J＝3.9，8.4Hz，1H)，2.57-2.47(m，1H)，2.14-2.02(m，1H)，2.07(s，3H)；MS(ESPOS)：272.0[M+Na]；MS(ESNEG)：248.2[M-H].
如通用方法Z所述使林可酰胺23g(R20＝乙烯基，R21＝H，R1＝SMe)与4-正丙基古液酸偶联，得到标题化合物。
1HNMR(300MHz，D2O)δ5.84-5.68(m，1H)，5.37(d，J＝5.7Hz，1H)，5.16-5.07(m，2H)，4.28-4.18(m，2H)，4.14-4.07(m，2H)，3.93(d，J＝3.3Hz，1H)，3.82(dd，J＝6.3，11.1Hz，1H)，3.66(dd，J＝3.3，10.5Hz，1H)，2.91-2.83(m，1H)，2.91(s，3H)，2.67-2.58(m，1H)，2.40-2.10(m，4H)，2.11(s，3H)，1.52-1.22(m，4H)，0.87(t，J＝72Hz，3H)；MS(ESPOS)：403.3[M+H]；MS(ESNEG)：437.0[M+Cl].
实施例69
4-丙基-哌啶-2-羧酸[1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丁-3-烯基]-酰胺
如通用方法Z所述使林可酰胺23g(R20＝乙烯基，R21＝H，R1＝SMe)与4-丙基-哌啶-1，2-二羧酸-1-叔丁基酯27b(R9＝丙基)偶联，得到标题化合物。使中间体13a(R20＝乙烯基，R21＝H，R1＝SMe，R9＝丙基，P1＝H，P2＝羧酸叔丁酯，m＝2)在酸性条件下去保护，得到标题化合物。
1HNMR(300MHz，D2O)δ5.82-5.66(m，1H)，5.37(d，J＝5.7Hz，1H)，5.16-5.07(m，2H)，4.24-4.05(m，3H)，3.92(d，J＝3.3Hz，1H)，3.85(dd，J＝3.3，12.9Hz，1H)，3.66(dd，J＝3.3，10.5Hz，1H)，3.47(brd，J＝12.3Hz，1H)，3.08-2.96(m，1H)，2.66-2.56(m，1H)，2.22-2.10(m，2H)，2.11(s，3H)，1.99-1.89(m，1H)，1.80-1.64(m，1H)，1.41-1.22(m，6H)，0.87(t，J＝6.6Hz，3H)；MS(ESPOS)：403.3[M+H]；MS(ESNEG)：437.2[M+Cl].
实施例70
5-丙基-氮杂环庚烷-2-羧酸[1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丁基]-酰胺
标题化合物是这样制备的，如通用方法Z所述偶联借助通用方法T制备的环状氨基酸22f(R9＝丙基，R9b＝H，m＝2)与林可胺23g(R20＝乙基，R21＝H，R1＝SMe)。不饱和中间体的氢化作用得到标题化合物。
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.34(d，J＝5.7Hz，1H)，4.16-4.04(m，3H)，4.01(d，J＝9.3Hz，1H)，3.89(d，J＝3.3Hz，1H)，3.64(dd，J＝3.3，10.5Hz，1H)，3.45(dd，J＝5.1，13.2Hz，1H)，3.13(t，J＝12.0Hz，1H)，2.20-1.16(m，15H)，2.08(s，3H)，0.86(t，J＝7.5Hz，3H)，0.83(t，J＝6.9Hz，3H)；MS(ESPOS)：419.0[M+H]；MS(ESNEG)：453.2[M +Cl].
实施例71
4-丙基-哌啶-2-羧酸[1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丁基]-酰胺
实施例69标题化合物的氢化作用得到标题化合物。
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.34(d，J＝6.0Hz，1H)，4.14-4.04(m，2H)，4.00(d，J＝9.3Hz，1H)，3.91-3.83(m，2H)，3.64(dd，J＝3.3，10.5Hz，1H)，3.51-3.43(m，1H)，3.08-2.96(m，1H)，2.22-2.13(m，1H)，2.07(s，3H)，1.99-1.89(m，1H)，1.83-1.65(m，2H)，1.48-1.13(m，9H)，0.85(t，J＝7.5Hz，6H)；MS(ESPOS)：405.4[M+H]；MS(ESNEG)：439.2[M+Cl].
实施例72
1-甲基-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[l-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丁基]-酰胺
实施例68标题化合物的氢化作用得到标题化合物。
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.36(d，J＝6.0Hz，1H)，4.28-4.03(m，4H)，3.93(d，J＝3.0Hz，1H)，3.85(dd，J＝6.9，11.1Hz，1H)，3.66(dd，J＝3.0，10.2Hz，1H)，2.95-2.85(m，1H)，2.93(s，3H)，2.47-2.19(m，3H)，2.10(s，3H)，1.86-1.70(m，1H)，1.54-1.16(m，7H)，0.87(t，J＝6.9Hz，6H)；MS(ESPOS)：405.4[M+H]；MS(ESNEG)：439.2[M+Cl].
实施例73
1-甲基-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[(4-氯-苯基)-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-甲基]-酰胺
如流程23所述制备林可酰胺23f(R20+R21＝4-氯苯基，R1＝SMe)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)□7.34(d，J＝8.4Hz，2H)，7.25(d，J＝8.4Hz，2H)，7.16(brd，J＝9.0Hz，1H)，5.55(d，J＝5.4Hz，1H)，5.50(d，J＝2.1Hz，1H)，5.30-5.13(m，3H)，4.66(d，J＝8.7Hz，1H)，2.09(s，3H)，2.07(s，3H)，1.98(s，3H)，1.65(s，3H)；MS(ESPOS)：563.9[M+Na]；MS(ESNEG)：539.8[M-H].
如流程23所述制备林可酰胺23g(R20+R21＝4-氯苯基，R1＝SMe)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)□7.37(d，J＝8.4Hz，2H)，7.31(d，J＝9.0Hz，2H)，5.09(d，J＝6.0Hz，1H)，4.13-4.03(m，4H)，3.58(dd，J＝3.3，10.2Hz，1H)，1.41(s，3H)；MS(ESPOS)：320.0[M+H]；MS(ESNEG)：354.0[M+Cl].
如通用方法Z所述使林可酰胺23g(R20+R21＝4-氯苯基，R1＝SMe)与4-正丙基古液酸偶联，得到标题化合物。
1H NMR(300MHz，D2O)□7.43(d，J＝8.1Hz，2H)，7.36(d，J＝8.4Hz，2H)，5.18(d，J＝6.0Hz，1H)，5.12(d，J＝10.2Hz，1H)，4.48(d，J＝9.9Hz，1H)，4.29(dd，J＝5.4，9.0Hz，1H)，4.14-4.05(m，2H)，3.78(dd，J＝5.7，10.8Hz，1H)，3.70(dd，J＝3.3，10.2Hz，1H)，2.92(s，3H)，2.87(t，J＝10.8Hz，1H)，2.26-2.11(m，2H)，2.07-1.94(m，1H)，1.52(s，3H)，1.46-1.12(m，4H)，0.81(t，J＝7.2Hz，3H)；MS(ESPOS)：473.2[M+H]；MS(ESNEG)：507.2[M+Cl].
实施例74
4-丙基-哌啶-2-羧酸[(4-氯-苯基)-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-甲基]-酰胺
如通用方法Z所述使林可酰胺23g(R20+R21＝4-氯苯基，R1＝SMe)与27b(R9＝丙基)偶联，得到标题化合物。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ7.35(s，4H)，5.20(d，J＝9.6Hz，1H)，5.14(d，J＝6.0Hz，1H)，4.36(d，J＝9.3Hz，1H)，4.10(dd，J＝5.7，10.2Hz，1H)，3.99(d，J＝3.0Hz，1H)，3.89(dd，J＝3.0，12.6Hz，1H)，3.59(dd，J＝3.3，10.2Hz，1H)，3.45-3.36(m，1H)，3.04(dt，J＝3.3，13.2Hz，1H)，2.24-2.14(m，1H)，1.98-1.88(m，1H)，1.81-1.66(m，1H)，1.52(s，3H)，1.46-1.13(m，6H)，0.94(t，J＝7.2Hz，3H)；MS(ESPOS)：473.2[M+H]；MS(ESNEG)：507.2[M+Cl].
实施例75
1-甲基-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-异丙硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
如流程23所述制备林可酰胺23f(R20＝甲基，R21＝甲基，R1＝异丙硫基)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.10(br d，J＝10.5Hz，1H)，5.79(d，J＝5.4Hz，1H)，5.36(dd，J＝1.2，3.3Hz，1H)，5.20(dd，J＝5.7，11.1Hz，1H)，5.09(dd，J＝3.3，10.8Hz，1H)，4.36(dd，J＝0.9，9.9Hz，1H)，4.26(dt，J＝3.0，10.2Hz，1H)，3.04-2.90(m，1H)，2.13(s，3H)，2.07(s，3H)，1.97(s，3H)，1.29(d，J＝4.8Hz，3H)，1.27(d，J＝5.1Hz，3H)，0.91(d，J＝6.9Hz，3H)，0.86(d，J＝6.9Hz，3H)
MS(ESPOS)：524.0[M+Na]
MS(ESNEG)：500.0[M-H]
如流程23所述制备林可酰胺23g(R20＝甲基，R21＝甲基，R1＝异丙硫基)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.36(d，J＝6.0Hz，1H)，4.05(dd，J＝5.7，10.2Hz，1H)，4.01(dd，J＝1.5，3.3Hz，1H)，3.95(dd，J＝1.2，8.7Hz，1H)，3.48(dd，J＝3.3，10.5Hz，1H)，3.04-2.93(m，1H)，2.89(dd，J＝3.6，8.4Hz，1H)，2.07-1.95(m，1H)，1.30(d，J＝6.9Hz，3H)，1.26(d，J＝6.9Hz，3H)，0.98(d，J＝6.9Hz，3H)，0.87(d，J＝6.6Hz，3H)；MS(ESPOS)：280.0[M+H]；MS(ESNEG)：278.2[M-H]
如通用方法Z所述使林可酰胺23g(R20＝甲基，R21＝甲基，R1＝异丙硫基)与4-正丙基古液酸偶联，得到标题化合物。
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.47(d，J＝6.0Hz，1H)，4.25(brt，J＝7.2Hz，1H)，4.16(br s，2H)，4.07(dd，J＝5.7，10.5Hz，1H)，3.83(dd，J＝8.1，11.4Hz，2H)，3.56(dd，J＝3.0，10.5Hz，1H)，3.11-2.99(m，1H)，2.91(s，3H)，2.88(brt，J＝11.1Hz，1H)，2.45-2.20(m，3H)，2.15-2.00(m，1H)，1.50-1.37(m，2H)，1.36-1.23(m，8H)，0.90-0.80(m，9H)；MS(ESPOS)：433.4[M+H]；MS(ESNEG)：467.2[M+Cl]
实施例76
4-丙基-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-异丙硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
如通用方法Z所述使林可酰胺23g(R20＝甲基，R21＝甲基，R1＝异丙硫基)与4-丙基-哌啶-1，2-二羧酸-1-叔丁基酯27b(R9＝丙基)偶联，得到标题化合物。使中间体13a(R1＝异丙硫基，R20＝甲基，R21＝甲基，R9＝丙基，P1＝H，P2＝羧酸叔丁酯，m＝2)在酸性条件下去保护，得到标题化合物。
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.47(d，J＝6.0Hz，1H)，4.14(brs，2H)，4.07(dd，J＝6.0，10.5Hz，1H)，3.89(dd，J＝3.0，12.6Hz，1H)，3.83(d，J＝3.3Hz，1H)，3.56(dd，J＝3.3，10.5Hz，1H)，3.47(br d，J＝13.5Hz，1H)，3.12-2.96(m，2H)，2.25-1.90(m，3H)，1.80-1.66(m，1H)，1.50-1.22(m，12H)，0.90-0.79(m，9H)；MS(ESPOS)：433.4[M+H]；MS(ESNEG)：467.2[M+Cl].
实施例77
1-甲基-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[1-(6-叔丁硫基-3，4，5-三羟基-四氢-吡喃-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺
如流程23所述制备林可酰胺23f(R20＝甲基，R21＝甲基，R1＝叔丁硫基)。
1H NMR(300MHz CDCl3)δ6.08(br d，J＝9.3Hz，1H)，5.81(d，J＝5.7Hz，1H)，5.34(d，J＝3.0Hz，1H)，5.19(dd，J＝5.7，11.1Hz，1H)，5.01(dd，J＝3.3，11.1Hz，1H)，4.34-4.18(m，2H)，2.20-2.05(m，1H)，2.13(s，3H)，2.07(s，3H)，1.97(s，3H)，1.32(m，9H)，0.89(t，J＝6.6Hz，6H)；MS(ESPOS)：538.0[M+Na]；MS(ESNEG)：514.2[M-H].
如流程23所述制备林可酰胺23g(R20＝甲基，R21＝甲基，R1＝叔丁硫基)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.39(d，J＝5.7Hz，1H)，4.05(dd，J＝6.0，10.8Hz)，1H)，4.01(dd，J＝1.2，3.3Hz，1H)，3.90(dd，J＝1.5，8.7Hz，1H)，3.39(dd，J＝3.3，10.5Hz，1H)，2.88(dd，J＝3.6，8.1Hz，1H)，2.08-1.95(m，1H)，1.36(s，9H)，0.98(d，J＝6.9Hz，3H)，0.89(d，J＝6.9Hz，3H)；MS(ESPOS)：294.0[M+H]；MS(ESNEG)：292.2[M-H]
如通用方法Z所述使林可酰胺23g(R2＝异丙基，R1＝叔丁硫基)与4-正丙基古液酸偶联，得到标题化合物。
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.50(d，J＝5.7Hz，1H)，4.26(br t，J＝7.5Hz，1H)，4.15(br s，2H)，4.08(dd，J＝5.7，10.5Hz，1H)，3.90-3.82(m，2H)，3.50(dd，J＝3.0，10.8Hz，1H)，2.93(s，3H)，2.91(brt，J＝11.1Hz，1H)，2.48-2.25(m，3H)，2.16-2.04(m，1H)，1.52-1.26(m，4H)，1.37(m，9H)，0.88(t，J＝6.9Hz，9H)；MS(ESPOS)：447.4[M+H]；MS(ESNEG)：481.2[M+Cl].
实施例78
4-丙基-哌啶-2-羧酸[1-(6-叔丁硫基-3，4，5-三羟基-四氢-吡喃-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺
如通用方法Z所述使林可酰胺23g(R20＝甲基，R21＝甲基，R1＝叔丁硫基)与4-丙基-哌啶-1，2-二羧酸-1-叔丁基酯27b(R9＝丙基)偶联，得到标题化合物。使中间体13a(R1＝叔丁硫基，R20＝甲基，R21＝甲基，R9＝丙基，P1＝H，P2＝羧酸叔丁酯，m＝2)在酸性条件下去保护，得到标题化合物。
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.50(d，J＝5.7Hz，1H)，4.13(brs，2H)，4.08(dd，J＝5.7，10.5Hz，1H)，3.92(dd，J＝3.0，12.6Hz，1H)，3.85(d，J＝3.3Hz，1H)，3.51(dd，J＝3.0，10.5Hz，2H)，3.06(brt，J＝10.8Hz，1H)，2.28-2.19(m，1H)，2.16-1.93(m，2H)，1.85-1.69(m，1H)，1.54-1.27(m，6H)，1.38(s，9H)，0.94-0.83(m，9H)；MS(ESPOS)：447.4[M+H]；MS(ESNEG)：481.0[M+Cl].
实施例79
4-(2-环丙基-乙基)-哌啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
在干燥氮下，向搅拌着的11b(0.5g，1.9mmol，1equiv)、三苯膦(39.9mg，0.15mmol，0.08equiv)、碘化亚铜(I)(28.9mg，0.15mmol，0.08equiv)、乙酸钯(17mg，0.076mmol，0.04equiv)的三乙胺(7mL)悬液加入环丙基乙炔(Aldrich)(0.25g，3.8mmol，2equiv)。将混合物在rt下搅拌过夜。在真空下除去溶剂，得到深色残余物。残余物经过柱色谱纯化，得到11c(R9′＝2-环丙基-乙-1-炔基)(0.39g，100％)，为黄色的油。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.65-8.56(m，1)，8.06-7.99(m，1)，7.40-7.32(m，1)，3.98(s，3)，1.50-1.40(m，1)，0.96-0.81(m，4)；MS(ESPOS)：202.0[M+H]+.
向11c(R9′＝2-环丙基-乙-1-炔基)(0.39g，1.9mmol)的甲醇(15mL)溶液加入10％披钯碳(0.2g)。将混合物用氢净化和充气(1atm)，在rt下搅拌过夜。过滤除去钯，浓缩滤液，得到4-(2-环丙基乙基)-吡啶-2-羧酸甲基酯(0.38g，97％)，为黄色的油(未显示中间体)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.60(d，J＝4.5，1)，8.00-7.96(m，1)，7.34-7.29(m，1)，3.99(s，3)，2.78(t，J＝7.6，2)，1.58-1.49(m，2)，0.71-0.59(m，1)，0.47-0.38(m，2)，0.06-0.02(m，2)；MS(ESPOS)：228.2[M+Na]+
向4-(2-环丙基乙基)-吡啶-2-羧酸甲基酯(0.38g)在MeOH(8mL)与水(8mL)中的混合物加入浓HCl(158μL)和氧化铂(0.2g)。将混合物用氢净化和充气(1atm)，搅拌过夜。过滤除去氧化铂，蒸发滤液，得到浅黄色固体11d(R9＝2-环丙基乙基)，无需进一步纯化即可使用。
向上述粗残余物11d(R9＝2-环丙基乙基)加入2N NaOH(3.8mL)和叔丁醇(2mL)。将反应混合物在rt下搅拌2h，然后加入二碳酸二叔丁酯(0.62g，2.85mmol)，将混合物搅拌过夜。在真空下除去溶剂，将所得残余物用水稀释，然后用醚洗涤。将水层用2N HCl酸化至pH＝2.0，用乙酸乙酯萃取两次。合并有机层，经MgSO4干燥，浓缩，得到4-(2-环丙基乙基)-哌啶-1，2-二羧酸1-叔丁基酯11f(P＝Boc，R9＝2-环丙基乙基)(0.42g，77％)，为澄清的糖浆物。
MS(ESPOS)：320.3[M+Na]+；MS(ESNEG)：296.2[M-H]-.
如通用方法Z所述使林可酰胺6b(R2＝H，R3＝Cl)与4-(2-环丙基乙基)-哌啶-1，2-二羧酸1-叔丁基酯11f(P＝Boc，R9＝2-环丙基乙基)偶联，得到标题化合物。使中间体13a(R20＝甲基，R21＝甲基，R9＝丙基，P1＝H，P2＝羧酸叔丁酯，m＝2)在酸性条件下去保护，得到标题化合物。
MS(ESPOS)：451.3[M+H]+.
实施例80
4-环丙基甲基-哌啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
采用通用方法O制备4-环丙基甲基吡啶-2-羧酸，即化合物10b(R9＝环丙基甲基)，所用原料4-环丙基甲基吡啶是这样制备的，借助Osuch et al，Journal of the American Chemical Society，1955，78，1723所述方法，将4-甲基吡啶用环丙基溴烷基化。改进的方法如下所示。
向-78℃的4-甲基吡啶(1.1g，11.8mmol)的THF(5mL)溶液加入LDA 2M的THF/庚烷/乙基苯(Aldrich)(5.9mL，11.8mmol)溶液，将所得反应混合物在-78℃下搅拌3h，然后在-40℃下搅拌1h。然后在-78℃下加入环丙基溴(1.43g，11.8mmol)，使其升温至室温，在室温下搅拌1h。向反应混合物加入饱和含水NH4Cl(10mL)，水相用EtOAc萃取(10×2mL)，合并有机萃取液，经Na2SO4干燥。除去溶剂，得到产物4-环丙基甲基吡啶(0.5g，31％)，无需进一步纯化即可使用。
如通用方法AA使林可酰胺6b(R2＝H，R3＝Cl)与4-环丙基甲基吡啶-2-羧酸10b(R9＝环丙基甲基)偶联，得到中间体13b(R1＝SMe，R2＝Me，R3＝H，R9＝环丁基-乙基，P1＝H)，借助催化氢化作用还原为标题化合物。
MS(ESPOS)：437.2[M]+.
实施例81
4-(2-环丁基-乙基)-哌啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
采用通用方法O制备4-(环丁基-乙基)-吡啶-2-羧酸，即化合物10b(R9＝环丁基-乙基)，所用原料4-(环丁基-乙基)-吡啶是这样制备的，如实施例80所述，将4-甲基吡啶用溴甲基环丁烷烷基化。
如通用方法AA使林可酰胺6b(R2＝H，R3＝Cl)与4-(环丁基-乙基)-吡啶-2-羧酸10b(R9＝环丁基-乙基)偶联，得到中间体13b(R1＝SMe，R2＝Me，R3＝H，R9＝环丁基-乙基，P1＝H)，借助催化氢化作用还原为标题化合物。
MS(ESPOS)：465.2[M]+.
实施例82
4-环丁基甲基-哌啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基1-酰胺
采用通用方法O制备4-环丁基甲基吡啶-2-羧酸，即化合物10b(R9＝环丁基甲基)，所用原料4-环丁基甲基吡啶是这样制备的，如实施例80所述，将4-甲基吡啶用环丁基溴烷基化。
如通用方法AA使林可酰胺6b(R2＝H，R3＝Cl)与4-环丁基甲基吡啶-2-羧酸、即化合物10b(R9＝4-环丁基甲基)偶联，得到中间体13b(R1＝SMe，R2＝Me，R3＝H，R9＝环丁基乙基，P1＝H)，借助催化氢化作用还原为标题化合物。
MS (ESPOS)：451.2[M+H]+.
实施例83
4-环丙基甲基-吡咯烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
被保护的氨基酸中间体(2S，4R)-4-环丙基甲基-吡咯烷-1，2-二羧酸-1-叔丁基酯是这样制备的，借助Goodman et al.Journal ofOrganic Chemistry，2003，68，3923所述合成顺序，在Wittig烯化步骤中使用溴化环丙基甲基三苯基鏻(Aldrich)作为原料。
如通用偶联流程11所述使林可胺6b(R2＝H，R3＝Cl)与(2S，4R)-4-环丙基甲基-吡咯烷-1，2-二羧酸-1-叔丁基酯偶联，得到中间体13a(R1＝SMe，R2＝Me，R9＝环丙基甲基，P1＝H，P2＝羧酸叔丁酯，m＝1)，在酸性条件下去保护，得到标题化合物。
MS(ESPOS)：423.2[M+H]+.
实施例84
4-(2-亚环丁基-乙基)-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
氨基酸中间体(2S，4R)-4-(2-亚环丁基-乙基)-吡咯烷-1，2-二羧酸-1-叔丁基酯是这样制备的，借助通用方法K，将焦谷氨酸酯7a用(2-溴-亚乙基)-环丁烷烷基化。烯丙型卤化物(2-溴-亚乙基)-环丁烷原料是分两步从环丁烷酮制备的，如美国专利No.3,711,555所述。
使林可胺2b(R1＝SMe，R2＝Me)与被保护的氨基酸8c(R9’＝2-亚环丁基-乙基)偶联，得到中间体氨基甲酸酯13a(R1＝SMe，R2＝Me，R9＝2-亚环丁基-乙基，P1＝H，P2＝Boc，m＝1)，在酸性条件下去保护，得到标题化合物。
MS(ESPOS)：429.1[M+H]+.
实施例85
4-(2-亚环丁基-乙基)-吡咯烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
氨基酸中间体(2S，4R)-4-(2-亚环丁基-乙基)-吡咯烷-1，2-二羧酸-1-叔丁基酯是这样制备的，借助通用方法K，将焦谷氨酸酯7a用(2-溴-亚乙基)-环丁烷烷基化。烯丙型卤化物(2-溴-亚乙基)-环丁烷原料是分两步从环丁烷酮制备的，如美国专利No.3,711,555所述。
使林可胺6b(R2＝H，R3＝Cl)与被保护的氨基酸8c(R9’＝2-亚环丁基-乙基)偶联，得到中间体氨基甲酸酯13a(R1＝SMe，R2＝Me，R9′＝2-亚环丁基-乙基，P1＝H，P2＝Boc，m＝1)，在酸性条件下去保护，得到标题化合物。
MS(ESPOS)：450.1[M+H]+.
实施例86
4-(2-环丁基-乙基)-吡咯烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
氨基酸中间体(2S，4R)-4-(2-环丁基-乙基)-吡咯烷-1，2-二羧酸-1-叔丁基酯是这样制备的，借助通用方法K，将焦谷氨酸酯7a用(2-溴-亚乙基)-环丁烷烷基化。烯丙型卤化物(2-溴-亚乙基)-环丁烷原料是分两步从环丁烷酮制备的，如美国专利No.3,711,555所述。
使林可胺6b(R2＝H，R3＝Cl)与被保护的氨基酸7d(R9＝2-环丁基-乙基)偶联，得到中间体氨基甲酸酯13a(R1＝SMe，R2＝Me，R9＝环丁基-乙基，P1＝H，P2＝Boc，m＝1)，在酸性条件下去保护，得到标题化合物。
MS(ESPOS)：451.2[M]+.
实施例87
4-(2-环丙基-乙基)-吡咯烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
使林可胺2b(R1＝SMe，R2＝Me)与借助通用方法M制备的被保护的氨基酸8c(R9＝2-环丙基-乙基)偶联，得到中间体氨基甲酸酯13a(R1＝SMe，R2＝Me，R9＝环丙基-乙基，P1＝H，P2＝羧酸叔丁酯，m＝1)，在酸性条件下去保护，得到标题化合物。
MS(ESPOS)：437.2[M+H]+.
实施例88
4-氟-1-(2-羟基-乙基)-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
如流程19所述，将4-氟-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺18a(实施例32)用环氧乙烷的甲醇溶液处理，得到标题化合物。
MS(ESPOS)：473.3[M+H]+.
实施例89
4-丁基-4-氟-哌啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
从原料(2S)-4-氧代-哌啶-1，2-二羧酸1-叔丁基酯合成Boc-保护的4-氟-4-丁基-哌啶-1，2-二羧酸1-叔丁基酯12d(P＝Boc，m＝2，R9＝正丁基)采用流程12所述通用方法Q，在4-酮烷基化步骤中使用1-丁炔阴离子作为四碳合成子。原料4-氧代-哌啶-1，2-二羧酸1-叔丁基酯的制备如Bousquet，Y.；Anderson，P.C.；Bogri，T.；DuceppeJ.；Grenier，L.；Guse，I.；Tetrahedron，1997，53，15671-15680所述。
如通用方法Z所述，使林可酰胺6b(R2＝H，R3＝Cl)与12d(P＝Boc，m＝2，R9＝丁基)偶联，得到中间体13a(R2＝H，R3＝Cl，R9＝丁基，P1＝H，P2＝Boc，m＝2)，在酸性条件下去保护，得到标题化合物。
MS(ESPOS)：457.0[M+H]+.
实施例90
4-环丙基甲基-4-氟-哌啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
如通用方法Z所述，使林可酰胺6b(R2＝H，R3＝C1)与12d(P＝Boc，m＝2，R9＝环丙基甲基)偶联，得到中间体13a(R2＝H，R3＝Cl，R9＝环丙基甲基，P1＝H，P2＝Boc，m＝2)，在酸性条件下去保护，得到标题化合物。
MS(ESPOS)：455.0[M+H]+.
实施例91
3-丁基-氮杂环丁烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
在23℃下，向氮杂环丁烷酸25f(R9＝丁基)(52mg，0.20mmol，1equiv)、7-Cl MTL 6b(R2＝H，R3＝Cl)(58mg，0.20mmol，1equiv)与HBTU(84mg，0.22mmol，1.1equiv)的DMF(2.0mL)溶液加入DIPEA(88μL，0.51mmol，2.5equiv)。在23℃下搅拌12h后，在真空中除去DMF，然后使残余物在EtOAc(100mL)与1∶1盐水∶10％含水柠檬酸(100mL)之间分配。分离有机层，用1∶1盐水/饱和含水NaHCO3(100mL)、盐水(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩，得到82mg(0.17mmol，84％)13a(R2＝H，R3＝Cl，R9＝丁基，P1＝H，P2＝羧酸叔丁酯，m＝0)，为玻璃状固体，无需纯化即可用于下一步。
在23℃下，向氨基甲酸酯13a(R2＝H，R3＝Cl，R9＝丁基，P1＝H，P2＝Boc，m＝0)(82mg，0.17mmol，1equiv)的1，2-二氯乙烷(10mL)溶液加入H2O(0.40mL)，继之以TFA(4.0mL)。在23℃下搅拌20min后，加入甲苯(50mL)，将所得溶液浓缩至干。残余物经过半制备型HPLC纯化(Waters Nova-
HR C18，6μm粒径，孔径，20mmID×100mm，含5-60％乙腈的H2O w/0.1％HCl，历经30min，流速20mL/min)，得到41mg标题化合物，为白色固体。
1HNMR(300MHz，CD3OD)δ5.30(d，J＝6.0Hz，1H)，4.64(d，J＝7.8Hz，1H)，4.63-4.52(m，2H)，4.29(d，J＝10.2Hz，1H)，4.07(dd，J＝5.7，10.2Hz，1H)，4.00(t，J＝6.6Hz，1H)，3.82(d，J＝3.3Hz，1H)，3.75(dd，J＝8.4，9.9Hz，1H)，3.56(dd，J＝3.3，10.2Hz，1H)，2.92-2.76(m，1H)，2.14(s，3H)，1.90-1.67(m，2H)，1.45(d，J＝6.6Hz，3H)，1.44-1.24(m，4H)，0.93(t，J＝6.9Hz，3H)；MS(ESPOS)：411.0[M+H]+.
实施例92
3-环丙基甲基-氮杂环丁烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
如通用方法Z使林可胺6b(R2＝H，R3＝Cl)与氮杂环丁烷酸25f(R9＝环丙基甲基)偶联，得到中间体13a(R2＝H，R3＝Cl，R9＝环丙基甲基，P1＝H，P2＝Boc，m＝0)，在酸性条件下去保护，得到标题化合物。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.30(d，J＝5.7Hz，1H)，4.70(d，J＝7.5Hz，1H)，4.63-4.54(m，2H)，4.29(d，J＝9.9Hz，1H)，4.08(dd，J＝5.7，10.2Hz，1H)，4.02(t，J＝9.3Hz，1H)，3.88-3.80(m，2H)，3.57(dd，J＝3.3，10.2Hz，1H)，3.05-2.91(m，1H)，2.14(s，3H)，1.90-1.65(m，1H)，1.57-1.46(m，1H)，1.47(d，J＝6.6Hz，3H)，0.80-0.64(m，1H)，0.58-0.47(m，2H)，0.16-0.10(m，2H)；MS(ESPOS)：409.2[M+H]+.
实施例93
3-丙基-氮杂环丁烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
如通用方法Z使林可胺6b(R2＝H，R3＝Cl)与氮杂环丁烷酸25f(R9＝丙基)偶联，得到中间体13a(R2＝H，R3＝Cl，R9＝丙基，P1＝H，P2＝Boc，m＝0)，在酸性条件下去保护，得到标题化合物。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.31(d，J＝5.7Hz，1H)，4.66(d，J＝7.5Hz，1H)，4.63-4.54(m，2H)，4.31(d，J＝9.9Hz，1H)，4.09(dd，J＝5.4，10.2Hz，1H)，4.03(t，J＝9.6Hz，1H)，3.83-3.74(m，2H)，3.57(dd，J＝3.3，10.2Hz，1H)，2.95-2.80(m，1H)，2.15(s，3H)，1.88-1.66(m，2H)，1.47(d，J＝6.9Hz，3H)，1.46-1.30(m，2H)，0.97(t，J＝7.2Hz，3H)；MS(ESPOS)：397.0[M+H]+.
实施例94
3-丁基-1-(2-羟基-乙基)-氮杂环丁烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
如流程19所述将在实施例91中制备的3-丁基-氮杂环丁烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺样品用环氧乙烷烷基化(R6＝2-羟基乙基)，得到标题化合物。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.30(d，J＝5.4Hz，1H)，4.67-4.57(m，1H)，4.46-4.37(m，1H)，4.29-4.24(m，1H)，4.13-4.06(m，1H)，3.83-3.78(m，1H)，3.67-3.55(m，3H)，3.44-3.32(m，1H)，2.75-2.57(m，2H)，2.44-2.34(m，1H)，2.14(s，3H)，1.80-1.40(m，6H)，1.39-1.20(m，5H)，0.95-0.86(m，3H)；MS(ESPOS)：455.0[M+H]+.
实施例95
3-丁基-1-甲基-氮杂环丁烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
在23℃下，向Boc-氨基甲酸酯25f(R9＝丁基)(236mg，0.92mmol，1equiv)的含水甲醛(37％，2.0mL)溶液加入甲酸(95％，1.0mL)。将所得混合物在回流下加热4h，然后冷却至23℃，用t-BuOH(5.0mL)处理，浓缩。将粗残余物溶解/悬浮在H2O(15mL)中，冷冻并冻干。将所得固体溶于1.0N HCl(15mL)，过滤，浓缩。将所得产物溶解/悬浮在H2O中，得到浑浊的悬液，通过尼龙膜(0.2μm)过滤，浓缩，得到186mg白色固体，其主要组分是所需的3-丁基-1-甲基-氮杂环丁烷-2-羧酸盐酸盐。该产物无需进一步纯化即可使用。
MS(ESPOS)：172.3[M+H].
如通用方法Z使林可胺6b(R2＝H，R3＝Cl)与3-丁基-1-甲基-氮杂环丁烷-2-羧酸盐酸盐偶联，得到标题化合物。
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.40(d，J＝5.7Hz，1H)，4.73(d，J＝7.8Hz，1H)，4.66-4.56(m，1H)，4.48dd，J＝1.2，9.9Hz，1H)，4.38-4.27(m，2H)，4.11(dd，J＝5.7，10.5Hz，1H)，3.88(d，J＝3.0Hz，1H)，3.81(t，J＝9.6Hz，1H)，3.67(dd，J＝3.3，10.5Hz，1H)，3.04-2.87(m，1H)，2.94(s，3H)，2.18(s，3H)，1.90-1.68(m，2H)，1.44(d，J＝6.9Hz，3H)，1.40-1.22(m，4H)，0.87(t，J＝6.9Hz，3H)；MS(ESPOS)：425.3[M+H]+.
实施例96
3-戊基-氮杂环丁烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
如通用方法Z使林可胺6b(R2＝H，R3＝Cl)与氮杂环丁烷酸25f(R9＝戊基)偶联，得到中间体13a(R2＝H，R3＝Cl，R9＝戊基，P1＝H，P2＝羧酸叔丁酯，m＝0)，在酸性条件下去保护，得到标题化合物。
H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.30(d，J＝5.4Hz，1H)，4.63-4.53(m，3H)，4.30(d，J＝9.6Hz，1H)，4.08(dd，J＝5.7，10.2Hz，1H)，4.00(t，J＝9.6Hz，1H)，3.81(d，J＝2.4Hz，1H)，3.74(dd，J＝7.8，9.9Hz，1H)，3.57(dd，J＝3.3，10.2Hz，1H)，2.92-2.78(m，1H)，2.15(s，3H)，1.9-1.67(m，2H)，1.46(d，J＝6.9Hz，3H)，1.44-1.26(m，6H)，0.92(t，J＝7.5Hz，3H)；MS(RSPOS)：425.0[M+H]+.
实施例97
3-(3-甲基-丁基)-氮杂环丁烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
如通用方法Z使林可胺6b(R2＝H，R3＝Cl)与氮杂环丁烷酸25f(R9＝3-甲基-丁基)偶联，得到中间体13a(R2＝H，R3＝Cl，R9＝3-甲基-丁基，P1＝H，P2＝羧酸叔丁酯，m＝0)，在酸性条件下去保护，得到标题化合物。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.31(d，J＝5.4Hz，1H)，4.63-4.53(m，2H)，4.30(d，J＝10.5Hz，1H)，4.08(dd，J＝5.7，10.5Hz，1H)，4.00(t，J＝9.6Hz，1H)，3.81(d，J＝2.4Hz，1H)，3.74(dd，J＝8.1，9.9Hz，1H)，3.57(dd，J＝3.3，10.2Hz，1H)，2.88-2.75(m，1H)，2.15(s，3H)，1.90-1.67(m，2H)，1.63-1.50(m，1H)，1.46(d，J＝6.9Hz，3H)，1.39-1.10(m，3H)，0.94(d，J＝1.5Hz，3H)，0.92(d，J＝1.5Hz，3H)；MS(ESPOS)：425.0[M+H]+.
实施例98
3-(3-环丙基-丙基)-氮杂环丁烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
如通用方法Z使林可胺6b(R2＝H，R3＝Cl)与氮杂环丁烷酸26f(R9＝3-环丙基-丙基)偶联，得到中间体13a(R2＝H，R3＝Cl，R9＝丁基，P1＝H，P2＝羧酸叔丁酯，m＝0)，在酸性条件下去保护，得到标题化合物。
1HNMR(300MHz，CD3OD)δ5.29(d，J＝5.7Hz，1H)，4.64-4.51(m，3H)，4.29(d，J＝10.2Hz，1H)，4.07(dd，J＝5.7，10.2Hz，1H)，3.99(t，J＝9.9Hz，1H)，3.79(d，J＝3.3Hz，1H)，3.74(dd，J＝8.4，9.9Hz，1H)，3.55(dd，J＝3.3，10.2Hz，1H)，2.91-2.77(m，1H)，2.13(s，3H)，1.93-1.68(m，2H)，1.60-1.32(m，2H)，1.44(d，J＝6.9Hz，3H)，1.24(q，J＝10.2Hz，2H)，0.74-0.62(m，1H)，0.44-0.36(m，2H)，0.04--0.02(m，2H)；MS(ESPOS)：437.2[M+H]+.
实施例99
3-(3-环丁基-丙基)-氮杂环丁烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
如通用方法Z使林可胺6b(R2＝H，R3＝Cl)与氮杂环丁烷酸26f(R9＝3-环丁基-丙基)偶联，得到中间体13a(R2＝H，R3＝Cl，R9＝3-环丁基-丙基，P1＝H，P2＝羧酸叔丁酯，m＝0)，在酸性条件下去保护，得到标题化合物。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.29(d，J＝5.7Hz，1H)，4.63-4.46(m，3H)，4.28(d，J＝10.2Hz，1H)，4.08(dd，J＝5.4，10.2Hz，1H)，3.89(t，J＝9.0Hz，1H)，3.79(d，J＝3.6Hz，1H)，3.65(dd，J＝8.1，9.6Hz，1H)，3.56dd，J＝3.0，10.2Hz，1H)，2.86-2.71(m，1H)，2.38-2.20(m，1H)，2.14(s，3H)，2.10-1.96(m，2H)，1.90-1.52(m，6H)，1.44(d，J＝6.9Hz，3H)，1.44-1.14(m，4H).
MS(ESPOS)：451.2[M+H]
实施例100
3-(2-环丁基-乙基)-氮杂环丁烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
如通用方法Z使林可胺6b(R2＝H，R3＝Cl)与氮杂环丁烷酸26f(R9＝2-环丁基-乙基)偶联，得到中间体13a(R2＝H，R3＝Cl，R9＝2-环丁基-乙基，P1＝H，P2＝羧酸叔丁酯，m＝0)，在酸性条件下去保护，得到标题化合物。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.29(d，J＝5.7Hz，1H)，4.63-4.50(m，3H)，4.29(d，J＝10.2Hz，1H)，4.08(dd，J＝5.4，10.2Hz，1H)，3.95(t，J＝9.3Hz，1H)，3.79(d，J＝3.0Hz，1H)，3.69(dd，J＝8.4，9.9Hz，1H)，3.56(dd，J＝3.3，10.2Hz，1H)，2.87-2.72(m，1H)，2.38-2.20(m，1H)，2.14(s，3H)，2.13-2.00(m，2H)，1.94-1.55(m，6H)，1.54-1.34(m，2H)，1.45(d，J＝6.6Hz，3H)；MS(ESPOS)：437.2[M+H]+.
实施例101
3-(2-环丙基-乙基)-氮杂环丁烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
如通用方法Z使林可胺6b(R2＝H，R3＝Cl)与氮杂环丁烷酸26f(R9＝2-环丙基-乙基)偶联，得到中间体13a(R2＝H，R3＝Cl，R9＝2-环丙基-乙基，P1＝H，P2＝羧酸叔丁酯，m＝0)，在酸性条件下去保护，得到标题化合物。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.29(d，J＝5.7Hz，1H)，4.62-4.50(m，3H)，4.29(d，J＝10.2Hz，1H)，4.07(dd，J＝5.4，10.2Hz，1H)，3.99(t，J＝9.6Hz，1H)，3.82-3.71(m，2H)，3.56(dd，J＝3.3，10.2Hz，1H)，2.95-2.80(m，1H)，2.13(s，3H)，2.00-1.77(m，2H)，1.44(d，J＝6.9Hz，3H)，1.35-1.20(m，2H)，0.74-0.62(m，1H)，0.48-0.40(m，2H)，0.09-0.02(m，2H)；MS(ESPOS)：423.2[M+H]+.
实施例102
3-(3，3-二氟丙基)-氮杂环丁烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
如通用方法Z使林可胺6b(R2＝H，R3＝Cl)与氮杂环丁烷酸26f(R9＝3，3-二氟丙基)偶联，得到中间体13a(R2＝H，R3＝Cl，R9＝2-环丙基-乙基，P1＝H，P2＝羧酸叔丁酯，m＝0)，在酸性条件下去保护，得到标题化合物。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.93(t，J＝57Hz，1H)，5.29(d，J＝5.7Hz，1H)，4.64(d，J＝7.5Hz，1H)，4.60-4.51(m，2H)，4.29(d，J＝10.2Hz，1H)，4.07(dd，J＝5.7，10.2Hz，1H)，4.02(t，J＝8.7Hz，1H)，3.82-3.74(m，2H)，3.55(dd，J＝3.3，10.5Hz，1H)，2.96-2.82(m，1H)，2.13(s，3H)，2.06-1.76(m，4H)，1.44(d，J＝6.9Hz，3H)；MS(ESPOS)：433.0[M+H]+.
实施例103
4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-丙基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-四氢-吡喃-2-基)-丙基氨甲酰基]-4-戊基-吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯.
在0℃下，向借助通用方法AB制备的2-(1-氨基-2-甲基-丙基)-6-丙基-四氢-吡喃-3，4，5-三醇(51.9mg，0.21mmol，1equiv)的无水DMF(4.5mL)溶液加入三乙胺(117μL，0.84mmol，4equiv)，继之以加入BSTFA(84μL，0.32mmol，1.5equiv)。将反应混合物在0℃下搅拌10分钟，然后在RT下搅拌45分钟。向反应混合物加入如通用方法L所制备的被保护的氨基酸7d(R9＝正戊基，P＝Boc)(72mg，0.25mmol，1.2equiv)和HATU(120mg，0.32mmol，1.5equiv)。将反应混合物在RT下搅拌2h，蒸发至干，溶于Et2O(150mL)，用10％柠檬酸(1x)、饱和NaHCO3(1x)和盐水洗涤。将有机层经MgSO4干燥，浓缩，得到粗产物(190mg)，为黄色的油。将残余物溶于DCE(6mL)，加入含有水(0.2mL)的三氟乙酸(4mL)，同时搅拌。将反应混合物在RT下搅拌1h，然后通过反复从DCE中共蒸发在真空下除去溶剂。残余物经过二氧化硅柱色谱纯化，用10％0.25M NH3的MeOH/DCM溶液洗脱，得到产物(38.4mg，43％)。1H NMR(300MHz，D2O)δ4.37(dd，J＝4.7，9.1，1)，4.14(dd，J＝3.0，9.6，1)，3.97-3.90(m，2)，3.70(d，J＝2.8，1)，3.62-3.51(m，3)，2.89(dd，J＝9.1，11.3，1)，2.33-2.03(m，1)，1.64-1.55(m，2)，1.52-1.45(m，3)，1.36-1.25(m，6)，1.0-0.86(m，12)；MS (ESPOS)：416.6[M+H].
实施例104
4-丙基-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-丙基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
使用在通用方法O中制备的中间体10b(R9＝正丙基)，按照实施例103所述方法制备实施例2标题化合物。
MS(ESPOS)：401.7[M+H]+.
实施例105
4-丙基-哌啶-2-羧酸{2-甲基-1-[3，4，5-三羟基-6-(2，2，2-三氟-乙硫基)-四氢-吡喃-2-基]-丙基}-酰胺
在通用方法*中制备的中间体27a 4-丙基-哌啶-1，2-二羧酸1-叔丁基酯。
MS(ESNEG)：270.2[M-H]-.
按照通用方法R所述和流程16所述方法制备标题化合物，使用1，1，1-三氟乙硫醇作为硫醇亲核试剂。如实施例103进行被保护的氨基酸中间体4-丙基-哌啶-1，2-二羧酸1-叔丁基酯的偶联和去保护。
MS(ESPOS)：473.7[M+H]+.
实施例106
4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[1-(6-乙氧基乙基-3，4，5-三羟基-四氢-吡喃-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺
2-[1-(6-烯丙基-3，4，5-三-苄氧基-四氢-吡喃-2-基)-2-甲基-丙基氨甲酰基]-4-戊基-吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯.
在0℃下，向搅拌着的构件15c(650mg，1.26mmol，1equiv)与被保护的氨基酸7d(R9＝戊基，P＝Boc)(395mg，1.39mmol，1.1equiv)的无水DMF(5.0mL)溶液加入DIEA(0.88mL，5.0mmol，4equiv)，继之以加入固体HATU(956mg，2.52mmol，2.0equiv)。将反应混合物在RT下搅拌3h，蒸发至干，溶于乙酸乙酯，用10％柠檬酸(1x)、水(1x)、饱和NaHCO3(1x)和盐水洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，浓缩，得到黄色糖浆物。浓缩滤液，残余物经过二氧化硅柱色谱纯化，用10％EtOAc/己烷至20％EtOAc/己烷洗脱，得到产物2-[1-(6-烯丙基-3，4，5-三-苄氧基-四氢-吡喃-2-基)-2-甲基-丙基氨甲酰基]-4-戊基-吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯，为无色的油(897mg，89％)。
2-{2-甲基-1-[3，4，5-三-苄氧基-6-(2-羟基-乙基)-四氢-吡喃-2-基]-丙基氨甲酰基}-4-戊基-吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯.
在-78℃下，将搅拌着的2-[1-(6-烯丙基-3，4，5-三-苄氧基-四氢-吡喃-2-基)-2-甲基-丙基氨甲酰基]-4-戊基-吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(634mg，0.81mmol，1equiv)的DCM(60mL)溶液用含臭氧的氧气流处理20min，观察到持久的淡蓝色。30min后，用N2气流除去过量臭氧，加入DMS(3mL)的DCM(10mL)溶液，使溶液升温至RT过夜。蒸发溶液至干，将残余物溶于EtOH(50mL)，冷却至0℃，用NaBH4(300mg，8.1mmol，10equiv)处理。1h后，通过酸化反应混合物破坏过量NaBH4，除去溶剂，粗产物经过二氧化硅柱色谱纯化，用20％EtOAc/己烷洗脱，得到醇产物(304mg，47％)。
2-{2-甲基-1-[3，4，5-三-苄氧基-6-(2-乙氧基-乙基)-四氢-吡喃-2-基]-丙基氨甲酰基}-4-戊基-吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯.
在0℃下，向搅拌着的经过洗涤的NaH(4.4mg，0.183mmol，1equiv)的THF(0.8mL)溶液加入醇中间体2-{2-甲基-1-[3，4，5-三-苄氧基-6-(2-羟基-乙基)-四氢-吡喃-2-基-]丙基氨甲酰基}-4-戊基-吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(144mg，0.183mmol，1equiv)，10min后加入EtI(73μL，0.92mmol，5.0equiv)，将反应混合物搅拌过夜。将反应混合物蒸发至干。浓缩滤液，残余物经过制备型色谱纯化，用30％EtOAc/己烷洗脱，得到产物2-{2-甲基-1-[3，4，5-三-苄氧基-6-(2-乙氧基-乙基)-四氢-吡喃-2-基]-丙基氨甲酰基}-4-戊基-吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(33.8mg，22％)，为无色的油。
4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[1-(6-乙氧基甲基-3，4，5-三羟基-四氢-吡喃-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺.
将2-{2-甲基-1-[3，4，5-三-苄氧基-6-(2-乙氧基-乙基)-四氢-吡喃-2-基]-丙基氨甲酰基}-4-戊基-吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(33.8mg)和degussa 50％w/w湿10％钯/碳(80mg)悬浮在MeOH(3mL)中，在1atm压力H2下搅拌20h。将反应混合物通过C盐过滤，蒸发至干，得到粗产物，经过二氧化硅柱色谱纯化，用3％至5％MeOH/DCM洗脱，得到Boc-保护的醚产物(19mg)，溶于DCE(1mL)，加入含有水(0.05mL)的三氟乙酸(1mL)，同时搅拌。将反应混合物在RT下搅拌1h，然后通过反复从DCE中共蒸发在真空下除去溶剂。从含有过量稀HCl的1∶1MeCN/水中冻干TFA盐，得到标题化合物(13.0mg，66％)。
1H NMR(300MHz，D2O)δ4.47-4.38(m，1)，4.21-4.16(m，1)，4.11-4.06(m，1)，3.96(dd，J＝6.3，9.6，1)，3.81(s，1)，3.61-3.50(m，7)，2.92(dd，J＝9.9，9.9，1)，2.33-1.98(m，7)，1.96-1.82(m，1)，1.47-1.33(m，11)，1.18(t，J＝6.9，3)，0.97-0.89(m，12)；MS(ESPOS)：446.4[M+H].
实施例107
1-(2-羟基-乙基)-4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-丙基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
标题化合物是按照流程19所述方法制备的。使用环氧乙烷作为烷基化剂。在0℃下，向搅拌着的4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-丙基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺(实施例103)(12.0mg 0.029mmol，1equiv)与TEA(100μL)的MeOH(2mL)溶液加入缩合的(condensed)环氧乙烷(200μL)，将反应混合物搅拌48h。将反应混合物蒸发至干，所得残余物经过二氧化硅柱色谱纯化，用20％0.25M NH3的MeOH/DCM溶液洗脱，得到粗的N-烷基化产物。将粗产物溶于Et2O，过滤，将滤液用2M HCl的Et2O溶液处理，收集所沉淀的HCl盐，用Et2O洗涤，冻干，得到标题化合物，为无色粉末(4.4mg，34％)。
MS(ESPOS)：473.6[M+H]+.
实施例108
4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
2-{2-甲基-1-[3，4，5-三-羟基-四氢-吡喃-2-基]-丙基氨甲酰基}-4-戊基-吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯.
在N2下，向搅拌着的潮湿阮内镍R1(300mg)悬浮在EtOH(5mL)中的溶液加入1-(2-(S)-4-(R)-正戊基吡咯烷-2-基)-N-{1-(R)-[2-(S)-3-(S)，4-(S)，5-(R)-三羟基-6-(R)-(甲硫基)四氢吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺(85.0mg，0.164mmol，1equiv)的EtOH(5mL)溶液。将反应混合物回流2h，冷却至RT，通过C盐过滤，蒸发至干，得到粗产物(66mg)，经过二氧化硅柱色谱纯化，用3％MeOH/DCM洗脱，得到N-Boc-保护的脱硫代甲基产物(42.7mg，55％)。
TLC Rf＝0.27(10％MeOH/DCM)；MS(ESPOS)：473.6[M+H]+(ESNEG)：507.5[M+HC l].
4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺.
将N-Boc-保护的产物脱硫代甲基产物溶于DCE(5mL)，加入含有水(0.1mL)的三氟乙酸(5mL)，同时搅拌。将反应混合物在RT下搅拌40min，然后通过从DCE中反复共蒸发在真空下除去溶剂。将残余物溶于冷却至0℃的1∶1MeCN/水，加入1M HCl(0.5mL)，将溶液过滤，冻干，得到标题化合物(26mg，43％)，为无色粉末。
TLC(CHCl3：MeOH：32％aq.AcOH)Rf＝0.58；MS(ESPOS)387.3[M+H]+.
按照本文所述方法可以制备实施例109-127、142和143。
实施例109
4-丙基-1，2，3，6-四氢-吡啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
实施例110
5-丙基-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
实施例111
5-丙基-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-异丙硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
实施例112
5-丙基-氮杂环庚烷-2-羧酸[1-(6-叔丁硫基-3，4，5-三羟基-四氢-吡喃-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺
实施例113
5-丙基-氮杂环庚烷-2-羧酸[(4-氯苯基)-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-甲基]-酰胺
实施例114
4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-丙基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
实施例115
4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[1-(6-丁氧基-3，4，5-三羟基-四氢-吡喃-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺
实施例116
4-丁基-1-甲基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-丙基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
实施例117
磷酸一-(4，5-二羟基-6-{2-甲基-1-[(4-戊基-吡咯烷-2-羰基)-氨基]-丙基}-2-丙基-四氢-吡喃-3-基)酯
实施例118
十六烷酸4，5-二羟基-6-{2-甲基-1-[(4-戊基-吡咯烷-2-羰基)-氨基]-丙基}-2-丙基-四氢-吡喃-3-基酯
实施例119
磷酸一-(4，5-二羟基-6-{2-甲基-1-[(4-丙基-吡咯烷-2-羰基)-氨基]-丙基}2-丙基-四氢-吡喃-3-基)酯
实施例120
十六烷酸4，5-二羟基-6-{2-甲基-1-[(4-丙基-吡咯烷-2-羰基)-氨基]-丙基}-2-丙基-四氢-吡喃-3-基酯
实施例121
1-(5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲基)-4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-丙基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
实施例122
2-[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-丙基-四氢-吡喃-2-基)-丙基氨甲酰基]-4-戊基-吡咯烷-1-羧酸5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲基酯
实施例123
1-(5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲基)-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-丙基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
实施例124
2-[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-丙基-四氢-吡喃-2-基)-丙基氨甲酰基]-4-丙基-吡咯烷-1-羧酸5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲基酯
实施例125
4-丙基-吡咯烷-2-羧酸{2-甲基-1-[3，4，5-三羟基-6-(2-羟基-乙基)-四氢-吡喃-2-基]-丙基}-酰胺
实施例126
4-丙基-吡咯烷-2-羧酸{2-甲基-1-[3，4，5-三羟基-6-(3-羟基-丙基)-四氢-吡喃-2-基]-丙基}-酰胺
实施例127
4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-羟甲基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
实施例142
4-丙基-吡咯烷-2-羧酸{2-甲基-1-[3，4，5-三羟基-6-(2-甲硫基-乙基)-四氢-吡喃-2-基]-丙基}-酰胺
实施例143
4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[1-(6-环丙基甲基-3，4，5-三羟基-四氢-吡喃-2-基)-2-甲基-丙基]-酰胺
利用上文所述方法，从各自的母体化合物(见上)制备下列特定前体药物实施例128-141。
实施例128
磷酸一-(6-{2-氯-1-[(5-丙基-氮杂环庚烷-2-羰基)-氨基]-丙基}-4，5-二羟基-2-甲硫基-四氢-吡喃-3-基)酯
实施例129
十六烷酸6-{2-氯-1-[(5-丙基-氮杂环庚烷-2-羰基)-氨基]-丙基}-4，5-二羟基-2-甲硫基-四氢-吡喃-3-基酯
实施例130
磷酸一-(6-{2-氯-1-[(5-氟-5-丙基-氮杂环庚烷-2-羰基)-氨基]-丙基}-4，5-二羟基-2-甲硫基-四氢-吡喃-3-基)酯
实施例131
十六烷酸6-{2-氯-1-[(5-氟-5-丙基-氮杂环庚烷-2-羰基)-氨基]-丙基}-4，5-二羟基-2-甲硫基-四氢-吡喃-3-基酯
实施例132
2-[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基氨甲酰基]-5-氟-5-丙基-氮杂环庚烷-1-羧酸5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲基酯
实施例133
5-氟-1-(5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲基)-5-丙基-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
实施例134
5-环丙基甲基-1-(5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲基)-氮杂环庚烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
实施例135
2-[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基氨甲酰基]-5-环丙基甲基-氮杂环庚烷-1-羧酸5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲基酯
实施例136
十六烷酸6-{2-氯-1-[(5-环丙基甲基-氮杂环庚烷-2-羰基)-氨基]-丙基}-4，5-二羟基-2-甲硫基-四氢-吡喃-3-基酯
实施例137
磷酸一-(6-{2-氯-1-[(5-环丙基甲基-氮杂环庚烷-2-羰基)-氨基]-丙基}-4，5-二羟基-2-甲硫基-四氢-吡喃-3-基)酯
实施例138
十六烷酸6-{2-氯-1-[(4-氟-4-丙基-哌啶-2-羰基)-氨基]-丙基}-4，5-二羟基-2-甲硫基-四氢-吡喃-3-基酯
实施例139
磷酸一-(6-{2-氯-1-[(4-氟-4-丙基-哌啶-2-羰基)-氨基]-丙基}-4，5-二羟基-2-甲硫基-四氢-吡喃-3-基)酯
实施例140
2-[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基氨甲酰基]-4-氟-4-丙基-哌啶-1-羧酸5-甲基-2-氧代[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲基酯
实施例141
4-氟-1-(5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲基)-4-丙基-哌啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺
实施例A
敏感性测试
遵照NCCLS的微量稀释法测试化合物(National Committee forClinical Laboratory Standards.Methods for dilutionantimicrobial susceptibility tests for bacteria that growaerobically；Approved standard-fifth edition.NCCLS documentM7-A5，NCCLS，Wayne，PA.2000；National Committee for ClinicalLaboratory Standards.Methods for antimicrobial susceptibilitytesting of anaerobic bacteria；Approved standards-fifthedition.NCCLS document M11-A4，NCCLS，Wayne，PA.2001)。在带有圆底小孔的无菌塑料96孔微量滴定盘(Greiner)中进行测定。
化合物准备
在DMSO中制备供试化合物和对照抗生素的储备溶液，浓度10mg/ml。在微量滴定板中跨越每行进行每种药物的系列2-倍稀释，使用DMSO作为溶剂，浓度是所需最终浓度的100倍。第1-11栏小孔含有药物，第12栏作为生物生长对照，没有药物。将母板中的每一小孔用无菌去离子水稀释，混合，向所得测定板的每一小孔分配10μL体积。
接种物的制备
利用MicrobankTM法(Pro-Lab Diagnostics)制备储备培养物，贮存在-80℃下。为了繁殖需氧菌株，从冷冻小瓶中取出一个珠粒，无菌划线到胰胨大豆琼脂(Difco)、巧克力琼脂(Remel)或血琼脂(Remel)上，在35℃下温育过夜。在补充有氯高铁血红素和维生素K的Brucella琼脂(Remel)中培养厌氧菌，在35℃下利用厌氧罐(Mitsubishi)厌氧温育24至48h。按照NCCLS指导，利用直接菌落悬浮法制备标准化接种物(National Committee for Clinical Laboratory Standards.Methods for dilution antimicrobial susceptibility tests forbacteria that grow aerobically；Approved standard-fifthedition.NCCLS document M7-A5，NCCLS，Wayne，PA.2000；NationalCommittee for Clinical Laboratory Standards.Methods forantimicrobial susceptibility testing of anaerobic bacteria；Approved standard-fifthedition.NCCLS document M11-A4，NCCLS，Wayne，PA.2001)。从18-24hr琼脂平板中选择分离的菌落，再悬浮在0.9％无菌盐水中，以匹配0.5McFarland浊度标准。在制备15分钟内使用悬液。
| 肺炎链球菌VSPN1001 | 肺炎链球菌ATCC 49619 |
| 肺炎链球菌VSPN3026 | 肺炎链球菌R6x |
| 肺炎链球菌VSPN1001 | 肺炎链球菌ATCC 49619 |
| 肺炎链球菌VSPN4054 | 肺炎链球菌488K |
| 肺炎链球菌VSPN4021 | 肺炎链球菌9 |
| 金黄色葡萄球菌VSAU1017 | 金黄色葡萄球菌Smith |
| 金黄色葡萄球菌VSAU1003 | 金黄色葡萄球菌ATCC 25923 |
| 金黄色葡萄球菌VSAU4020 | 金黄色葡萄球菌125 |
| 金黄色葡萄球菌VSAU4048 | 金黄色葡萄球菌85-EPI |
| 金黄色葡萄球菌VSAU4065 | 金黄色葡萄球菌VSAU4065 |
| 表皮葡萄球菌VSEP1001 | 表皮葡萄球菌ATCC 12228 |
| 粪肠球菌VEFL1003 | 粪肠球菌ATCC 51299 |
| 屎肠球菌VEFA1005 | 屎肠球菌BM4147.1 |
| 流感嗜血杆菌VHIN1003 | 流感嗜血杆菌ATCC 49766 |
| 流感嗜血杆菌VHIN1004 | 流感嗜血杆菌ATCC 31517 |
| 流感嗜血杆菌VHIN1005acr | 流感嗜血杆菌LS-2 |
| 粘膜炎莫拉氏菌VMCA1001 | 粘膜炎莫拉氏菌ATCC 25238 |
| 大肠杆菌VECO2096 | 大肠杆菌MG1655 |
| 大肠杆菌VECO2526 tolC | 大肠杆菌MG1655 tolC |
| 脆弱拟杆菌VBFR1001 | 脆弱拟杆菌ATCC 25285 |
| 多形拟杆菌VBTH1001 | 多形拟杆菌ATCC#29741 |
| 艰难梭菌VCDI1001 | 艰难梭菌ATCC 9689 |
MIC测定平板的准备
在1.1x浓度下制备培养基：被NCCLS推荐的Mueller-Hinton肉汤MHB(Difco)，补充有Ca++和Mg++；MHB，补充有5％马溶解血液；HTM肉汤(Remel)；或者Brucella肉汤(Remel)，补充有氯高铁血红素和维生素K。就每种生物而言，在无菌贮器中将标准化悬液稀释到适当的生长培养基中。混合后，向含药测定平板小孔接种90μL体积。因而，就每一MIC测定而言，每孔含有100μL的最终体积，接种物大小为大约5×105cfu/ml，DMSO不超过1％。
MIC的解释
如下温育所完成的微量滴定板，就需氧菌而言在环境空气中在35℃下温育16-20h，就厌氧菌而言在35℃下温育46-48小时或者在厌氧罐(Mitsubishi)中温育。利用VersaMax Microplate读数器(Molecular Devices，Sunnyvale，CA)在600nm下测定每一小孔的光密度。MI C被定义为导致可见细菌生长完全抑制的最低药物浓度。
实施例47异构体I和实施例47异构体II具备对抗革兰氏阴性生物流感嗜血杆菌的体外效力，MIC≤4μm/mL。实施例47异构体1和2进一步显示对抗流感嗜血杆菌菌株ATCC 31517的MIC为0.5μm/mL，与之相比，克林霉素显示对抗流感嗜血杆菌菌株ATCC 31517的MIC为8μm/mL。
实施例B
在鼠金黄色葡萄球菌败血症中的功效
按照另处公布的模型，在金黄色葡萄球菌鼠败血症模型中进行功效研究(Goldstein，B.P.，G.Candiani，T.M.Arain，G.Romano，I.Ciciliato，M.Berti，M.Abbondi，R.Scotti，M.Mainini，F.Ripamonti等人，1995.Antimicrobia lactivity of MDL 63,246，anew semisynthetic glycopeptide antibiotic.Antimicrob AgentsChemother.39：1580-1588.；Misiek，M.，T.A.Pursiano，F.Leitner和K.E.Price 1973.Microbiological properties of a newcephalosporin，BL-S 339：7-(phenylacetimidoyl-aminoacetamido)-3-(2-methyl-1，3，4-thiadiazol-5-ylthio methyl)ceph-3-em-4-carboxylic acid.Antimicrob Agents Chemother.3：40-48)。
化合物准备
将化合物溶于2％吐温80供口服给药或溶于0.9％NaCl溶液供静脉内给药。在细菌接种后1小时给予化合物。使用万古霉素或氨苄西林作为对照。
功效模型
使用来自MDS Pharma Services的体重22±2g的雄性或雌性ICR小鼠进行评价。自由给予食物和水。使用每组6只体重22±2g的小鼠进行实验。向小鼠腹膜内接种含有4×104CFU金黄色葡萄球菌Smith的0.5ml脑心浸液(Difco)，其中含有5％粘蛋白(Sigma)。在细菌接种后7天里每天记录一次死亡率。
尽管本文已经参照多种不同特定物质、工艺和实施例对发明进行了描述和说明，不过可以理解的是本发明不限于特定的物质、物质组合和为此所选择的工艺。本领域技术人员将领会到这类细节的大量变化。
Claims (22)
1.式(IA)化合物：
其中：
R1选自由-S-烷基、-S-取代的烷基、(杂芳基)烷基、氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基、环烷基烷基、卤代基和取代的烷硫基组成的组；
R2和R3独立地是氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基、氰基、烷硫基、取代的烷硫基、羟基、卤代基，或者R2和R3之一是＝NOR7，另一个不存在；
R6选自氢、烷基、取代的烷基、(酰胺基)烷基、(氨甲酰基)烷基、烷氧基羰基、(烷氧基羰基)烷基、(烷氧基羰基氨基)烷基，或者-N(R6)-片段是脒、N-氰基脒、N-羟基脒或N-烷氧基脒结构的一部分；
R7选自由氢和烷基组成的组；
R9可以在环中相同或不同的碳上被单次或多次取代，独立地选自由氢、取代的烷基、卤代基、取代的烯基、烯基、(杂芳基)烯基和-S(O)qR13组成的组，其中q是等于0、1或2的整数，R13选自由烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基组成的组；
其中m＝0-2；
其中t＝0-3；
或者其药学上可接受的盐；
其条件是排除下列化合物：
这样的化合物，其中是单键，每个R9是氢；
这样的化合物，其中
是单键，R9是具有单一取代基的取代的烷基，所述单一取代基不是卤代基、氧、羟基、伯胺、胺(被上述烷基取代的仲烷基)、胺(被上述烷基取代的叔烷基)、硫、-SH、苯基或-(CH2)nNR’R”，其中n是整数1至8，R’和R”是氢或烷基；和
这样的化合物，其中
是单键，R9是卤代基。
2.权利要求1的化合物，其中在R1定义中，-S-烷基为SMe，-S-取代的烷基为-S-(2-羟基乙基)。
3.权利要求1的化合物，其中式(IA)中的含氮环选自：
4.选自下组的化合物：
4-(4-甲基-苄硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-氟-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3，3-二氟-烯丙基)-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3-吡啶-4-基-烯丙基)-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3-吡啶-4-基-丙基)-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(2-[1，3]二硫戊环-2-基-乙基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-[3-(呋喃-2-基甲硫基)-丙基]-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3-咪唑-1-基-丙基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-[3-(噻吩-2-基硫基)-丙基]-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-[2-(4-甲基-噻唑-2-基)-乙基]-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3-甲氧基亚氨基-丙基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3-乙硫基-丙基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3-乙氧基亚氨基-丙基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3-氰基-丙基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-亚丙基-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3-二氟甲硫基-丙基)-哌啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-丙基-1，2，3，6-四氢-吡啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-丙基-1，2，3，6-四氢-吡啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3-二氟甲硫基-丙基)-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-乙硫基-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-乙硫基-吡咯烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(4-氟-苯硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-丁硫基-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3，3，3-三氟-丙硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3-甲基-丁硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(2，4-二氯-苄硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(噻吩-2-基甲硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(吡嗪-2-基甲硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-羟基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(2，4-二氯-苄硫基)-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-丁硫基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
1-氨甲酰基甲基-4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
1-氰甲基-4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
1-(1H-咪唑-2-基甲基)-4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
1-亚氨甲基-4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-氟-4-丙基-哌啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；和
4-氟-4-丙基-吡咯烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺。
5.式(IB)化合物：
其中：
R1选自由氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基、环烷基烷基、卤代基和取代的烷硫基组成的组；
R2和R3独立地是氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基、氰基、烷硫基、取代的烷硫基、羟基、卤代基，或者R2和R3之一是＝NOR7，另一个不存在；
R6是H、烷基或羟基烷基；
R7是H或烷基；
R9可以在环中相同或不同的碳上被单次或多次取代，选自由氢、烷基、取代的烷基、环烷基、取代的环烷基、取代的氧、取代的氮、卤素、苯基、取代的苯基、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-NR4R5及其支链异构体组成的组，其中n是整数1至8，含端值，R4和R5是H或烷基；
m是1或2；
或者其药学上可接受的盐。
6.选自下组的化合物：
4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-丙基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-丙基-哌啶-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-丙基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
1-(2-羟基-乙基)-4-戊基-吡咯烷-2-羧酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羟基-6-丙基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-丙基-哌啶-2-羧酸{2-甲基-1-[3，4，5-三羟基-6-(2，2，2-三氟-乙硫基)-四氢-吡喃-2-基]-丙基}-酰胺；
或者其药学上可接受的盐。
7.药物组合物，包含药学上可接受的载体和治疗有效量的权利要求1-6任意一项的化合物。
8.权利要求1-6任意一项的化合物或权利要求7的药物组合物用于制备治疗哺乳动物微生物感染的药物的用途。
9.根据权利要求8的用途，其中所述药物为口服、肠胃外、透皮、局部、直肠或鼻内给药形式。
10.根据权利要求8的用途，其中将所述药物制成使得该化合物的给药量是0.1至100mg/kg体重/天。
11.式(I)化合物：
其中：
W是含氮环：
其中m是0、1、2或3；其中当m是2时，该含氮环可以可选地在4与5含氮环位之间含有双键；其中当m是3时，该含氮环可以可选地在4与5含氮环位或者在5与6含氮环位之间含有一条双键；其中含氮环位置是以氮为“1”开始按逆时针方向连续编号的；
R1选自由氢、烷基、取代的烷基、羟基烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基、环烷基烷基、卤代基、烷硫基和取代的烷硫基组成的组；
R2和R3独立地是氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基、氰基、烷硫基、取代的烷硫基、羟基、卤代基，或者R2和R3之一是＝NOR7，另一个不存在，或者R2和R3之一是＝CH2，另一个不存在；
R6选自由氢、烷基、羟基烷基、环烷基、取代的烷基、亚氨甲基、-C(O)O-烷基、-C(O)O-取代的烷基、-C(O)O-芳基、-C(O)O-取代的芳基、-C(O)O-杂芳基、-C(O)O-取代的杂芳基、-(酰胺基)烷基、(氨甲酰基)烷基、5-烷基-[1，3]二氧杂环戊烯-2-酮-4-基-甲基、5-烷基-[1，3]二氧杂环戊烯-2-酮-4-基-甲氧基-羰基组成的组，或者-N(R6)-片段是脒、N-氰基脒、N-羟基脒或N-烷氧基脒结构的一部分；
R7是H或烷基；
R9可以在环中相同或不同的碳上被单次或多次取代，独立地选自由氢、烷基、取代的烷基、环烷基、取代的环烷基、环烷基烷基、取代的烯基、取代的氧、取代的氮、卤素、苯基、取代的苯基、烷硫基、取代的烷硫基、取代的芳硫基、杂芳硫基烷基、杂环硫基烷基、杂芳硫基、和杂环硫基、＝CHCH2CH3、叠氮基、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-NR4R5及其支链异构体，其中n是整数1至8，含端值，R4和R5是H或烷基；烷氧基烷氧基、芳基、取代的芳基、烯基、取代的烯基和-S(O)qR13组成的组，其中q是等于0、1或2的整数，R13选自由烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基组成的组，其中在该含氮环上存在不超过一个-S(O)qR13基团；
其中t＝0-3；
或者其药学上可接受的盐；
其条件是排除下列化合物：
这样的化合物，其中是单键，每个R9是氢；
这样的化合物，其中
是单键，R9是具有单一取代基的取代的烷基，所述单一取代基不是卤代基、氧、羟基、伯胺、胺(被上述烷基取代的仲烷基)、胺(被上述烷基取代的叔烷基)、硫、-SH、苯基或-(CH2)nNR’R”，其中n是整数1至8，R’和R”是氢或烷基；和
这样的化合物，其中是单键，R9是卤代基。
12.式(I A)化合物：
其中：
R1选自由-S-烷基、-S-取代的烷基、氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基和卤代基组成的组；
R2和R3独立地是氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基、氰基、烷硫基、取代的烷硫基、羟基、卤代基，或者R2和R3之一是＝NOR7，另一个不存在，或者R2和R3之一是＝CH2，另一个不存在；
R6选自由氢、烷基、取代的烷基、-C(O)O-烷基、-C(O)O-取代的烷基、-C(O)O-芳基、-C(O)O-取代的芳基、-C(O)O-杂芳基、-C(O)O-取代的杂芳基、-(酰胺基)烷基、(氨甲酰基)烷基、
组成的组，或者-N(R6)-片段是脒、N-氰基脒、N-羟基脒或N-烷氧基脒结构的一部分；
R7选自由氢和烷基组成的组；
R9可以在环中相同或不同的碳上被单次或多次取代，独立地选自由氢、烷基、取代的烷基、烷氧基烷氧基、环烷基、取代的环烷基、取代的氧、取代的氮、卤代基、芳基、取代的芳基、烯基、取代的烯基和-S(O)qR13组成的组，其中q是等于0、1或2的整数，R13选自由烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基组成的组；
其中m1＝0-2；
其中t＝0-3；
或者其药学上可接受的盐；
具有下列条件：
A.在式(I)化合物中，若
是单键，
m1是0或1，
R2和R3独立地是氢、烷基、羟基、氟代基、氰基烷基，或者R2和R3之一是＝NOR7，另一个不存在，或者R2和R3之一是＝CH2，另一个不存在，
R6是氢、烷基、羟基烷基、-C(O)O-亚烷基-环烷基、-C(O)O-亚烷基-取代的烷基、-C(O)O-烷基、-C(O)O-取代的烷基、-C(O)O-芳基、-C(O)O-取代的芳基、-C(O)O-杂芳基、-C(O)O-取代的杂芳基、-C(O)O-杂环基、-C(O)O-取代的杂环基、-[C(O)O]p-亚烷基-杂环、-[C(O)O]p-亚烷基-取代的杂环，其中p是0或1，
R7选自由氢和烷基组成的组，
R9是氢、烷基、取代的烷基、烷氧基烷氧基、环烷基、取代的环烷基、取代的氧、取代的氮、卤代基、苯基、取代的苯基、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-NR4R5、-亚烷基-Ra，其中Ra选自一氟苯基或一氯苯基，及其支链异构体，其中n是整数1至8，含端值，R4和R5是氢或烷基，
则R1不是-S-烷基；
B.在式(I)化合物中，若是单键，
R2和R3独立地是氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基、氰基、烷硫基、取代的烷硫基、羟基、卤代基，或者R2和R3之一是＝NOR7，另一个不存在，或者R2和R3之一是＝CH2，另一个不存在，其条件是R2和R3不都是氢；当R2和R3之一是卤代基时，另一个不是氢或羟基；当R2和R3之一是羟基时，另一个不是氢或羟基，
R6选自由氢、烷基、取代的烷基、-C(O)O-烷基、-C(O)O-取代的烷基、-C(O)O-芳基、-C(O)O-取代的芳基、-C(O)O-杂芳基、-C(O)O-取代的杂芳基、-(酰胺基)烷基、(氨甲酰基)烷基组成的组，或者-N(R6)-片段是脒、N-氰基脒、N-羟基脒或N-烷氧基脒结构的一部分，
R7选自由氢和烷基组成的组，
R1选自由-S-烷基、-S-取代的烷基、氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基和卤代基组成的组，
则至少一个R9不是氢、烷基、取代的烷基、烷氧基烷氧基、环烷基、取代的环烷基、取代的氧、取代的氮、卤代基、苯基、取代的苯基、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-NR4R5、-亚烷基-Ra，其中Ra选自一氟苯基或一氯苯基，及其支链异构体，其中n是整数1至8，含端值，R4和R5是氢或烷基；
C.在式(I)化合物中，若是单键，
R2和R3独立地是氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基、氰基、烷硫基、取代的烷硫基、羟基、卤代基，或者R2和R3之一是＝NOR7，另一个不存在，或者R2和R3之一是＝CH2，另一个不存在，其条件是R2和R3不都是氢；当R2和R3之一是卤代基时，另一个不是氢或羟基；当R2和R3之一是羟基时，另一个不是氢或羟基，
R7选自由氢和烷基组成的组，
R1选自由-S-烷基、-S-取代的烷基、(杂芳基)烷基、氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基和卤代基组成的组，
R9独立地选自不是氢、烷基、取代的烷基、烷氧基烷氧基、环烷基、取代的环烷基、取代的氧、取代的氮、卤代基、苯基、取代的苯基、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-NR4R5、-亚烷基-Ra，其中Ra选自一氟苯基或一氯苯基，及其支链异构体，其中n是整数1至8，含端值，R4和R5是氢或烷基，
则R6选自由取代的烷基(除外单取代的杂环或取代的杂环)、
(酰胺基)烷基和-N(R6)-片段组成的组，所述-N(R6)-片段是脒、N-氰基脒、N-羟基脒或N-烷氧基脒结构的一部分；
其中：
取代的烷基表示这样的烷基，其中一个或多个氢原子已被卤素、氧、羟基、胺(伯)、胺(被上述烷基取代的仲-烷基)、胺(被如上所定义的烷基取代的叔-烷基)、硫、-SH或苯基所代替，
取代的环烷基表示被烷基取代的环烷基，其中烷基是如上所定义的，或者这样的基团，其中一个或多个氢原子已被卤素、氧、羟基、胺(伯)、胺(被上述烷基取代的仲-烷基)、胺(被如上所定义的烷基取代的叔-烷基)、硫、-SH或苯基所代替，
取代的氧表示基团-ORd，其中Rd是烷基、卤代烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、烯基、环烷基和取代的环烷基，
取代的氮或氨基表示基团-NRaRb，其中Ra和Rb独立地是氢、烷基、卤代烷基、烯基、环烷基、取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基和取代的杂芳基，
取代的芳基表示被一个或多个取代基取代的芳基环，所述取代基选自由烷基、烯基、炔基、卤代基、烷氧基、酰氧基、氨基、羟基、羧基、氰基、硝基、烷硫基和硫代烷基组成的组，其中烷硫基表示基团-S-烷基，硫代烷基表示具有一个或多个-SH基团的烷基，
取代的杂芳基表示被一个或多个取代基取代的杂芳基环，所述取代基选自由烷基、烯基、炔基、卤代基、烷氧基、酰氧基、氨基、羟基、羧基、氰基、硝基、烷硫基和硫代烷基组成的组，其中烷硫基表示基团-S-烷基，硫代烷基表示具有一个或多个-SH基团的烷基。
13.权利要求11或12任意一项的化合物，其中式(I)和(IA)中的含氮环选自：
14.式(IB)化合物：
其中：
R1选自由氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基、环烷基烷基、卤代基和取代的烷硫基组成的组；
R2和R3独立地是氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基、氰基、烷硫基、取代的烷硫基、羟基、卤代基，或者R2和R3之一是＝NOR7，另一个不存在；
R6是H、烷基或羟基烷基；
R7是H或烷基；
R9可以在环中相同或不同的碳上被单次或多次取代，独立地选自由氢、烷基、取代的烷基、环烷基、取代的环烷基、取代的氧、取代的氮、卤素、苯基、取代的苯基、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-NR4R5及其支链异构体组成的组，其中n是整数1至8，含端值，R4和R5是H或烷基；
m是1或2；
或者其药学上可接受的盐。
15.式(II)化合物：
其中：
W是含氮环：
其中m是0、1、2或3；其中当m是2时，该含氮环可以可选地在4与5含氮环位之间含有双键；其中当m是3时，该含氮环可以可选地在4与5含氮环位或者在5与6含氮环位之间含有一条双键；其中含氮环位置是以氮为“1”开始按逆时针方向连续编号的；
R1选自由氢、烷基、取代的烷基、羟基烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基、环烷基烷基、卤代基、烷硫基和取代的烷硫基组成的组；
R20和R21独立地是氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、烷氧基、取代的烷氧基、氰基、烷硫基、取代的烷硫基、羟基、卤代基，或者R20和R21之一是＝NOR7，另一个不存在，或者R20和R21之一是＝CH2，另一个不存在；或者R20和R21一起是环烷基、芳基或杂环基；
R6选自由氢、烷基、羟基烷基、环烷基、取代的烷基、亚氨甲基、-C(O)O-烷基、-C(O)O-取代的烷基、-C(O)O-芳基、-C(O)O-取代的芳基、-C(O)O-杂芳基、-C(O)O-取代的杂芳基、-(酰胺基)烷基、(氨甲酰基)烷基、5-烷基-[1，3]二氧杂环戊烯-2-酮-4-基-甲基、5-烷基-[1，3]二氧杂环戊烯-2-酮-4-基-甲氧基-羰基组成的组，或者-N(R6)-片段是脒、N-氰基脒、N-羟基脒或N-烷氧基脒结构的一部分；
R7是H或烷基；
R9可以在环中相同或不同的碳上被单次或多次取代，独立地选自由氢、烷基、取代的烷基、环烷基、取代的环烷基、环烷基烷基、取代的烯基、取代的氧、取代的氮、卤素、苯基、取代的苯基、烷硫基、取代的烷硫基、取代的芳硫基、杂芳硫基烷基、杂环硫基烷基、杂芳硫基、杂环硫基、＝CHCH2CH3、叠氮基、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-NR4R5及其支链异构体，其中n是整数1至8，含端值，R4和R5是H或烷基；烷氧基烷氧基、芳基、取代的芳基、烯基、取代的烯基和-S(O)qR13组成的组，其中q是等于0、1或2的整数，R13选自由烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基组成的组，其中在该含氮环上存在不超过一个-S(O)qR13基团；
或者其药学上可接受的盐。
16.选自下组的化合物：
3-(3-环丁基-丙基)-氮杂环丁烷-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；和
4-(2-环丙基-乙基)-哌啶-2-羧酸[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺。
17.以下化合物：
2-[2-氯-1-(3，4，5-三羟基-6-甲硫基-四氢-吡喃-2-基)-丙基氨甲酰基]-5-丙基-氮杂环庚烷-1-羧酸5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲基酯。
18.药物组合物，包含药学上可接受的载体和治疗有效量的权利要求11-17任意一项的化合物。
19.权利要求11-17任意一项的化合物或权利要求18的药物组合物用于制备治疗哺乳动物微生物感染的药物的用途。
20.根据权利要求19的用途，其中所述药物用于治疗由任意下列细菌病原体所导致的微生物感染：流感嗜血杆菌、粪肠球菌和屎肠球菌。
21.根据权利要求19或20的用途，其中所述药物为口服、肠胃外、透皮、局部、直肠或鼻内给药形式。
22.根据权利要求19或20的用途，其中将所述药物制成使得该化合物的给药量是0.1至100mg/kg体重/天。
Applications Claiming Priority (9)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US47929603P | 2003-06-17 | 2003-06-17 | |
| US47950203P | 2003-06-17 | 2003-06-17 | |
| US60/479,296 | 2003-06-17 | ||
| US60/479,502 | 2003-06-17 | ||
| US10/642,807 | 2003-08-15 | ||
| US10/642,807 US7164011B2 (en) | 2002-08-15 | 2003-08-15 | Lincomycin derivatives possessing antibacterial activity |
| US10/777,455 | 2004-02-11 | ||
| US10/777,455 US7199105B2 (en) | 2002-08-15 | 2004-02-11 | Lincomycin derivatives possessing antibacterial activity |
| PCT/US2004/019689 WO2005012320A2 (en) | 2003-06-17 | 2004-06-17 | Novel lincomycin derivatives possessing antimicrobial activity |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN1823083A CN1823083A (zh) | 2006-08-23 |
| CN1823083B true CN1823083B (zh) | 2010-05-26 |
Family
ID=36923804
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN2004800203015A Expired - Fee Related CN1823083B (zh) | 2003-06-17 | 2004-06-17 | 具备抗微生物活性的林可霉素衍生物 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN1823083B (zh) |
| ZA (1) | ZA200510192B (zh) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101555223B (zh) * | 2009-04-17 | 2011-06-01 | 北京化工大学 | 一种吡利霉素中间体及其制备方法 |
| CN105566411B (zh) * | 2014-11-07 | 2020-11-13 | 中国科学院上海有机化学研究所 | 林可霉素生物合成中间产物及其制法和用途 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3268556A (en) * | 1964-04-13 | 1966-08-23 | Upjohn Co | Novel lincomycin derivatives |
| US3361739A (en) * | 1964-07-01 | 1968-01-02 | Upjohn Co | Lincomycin derivatives and processes for preparing the same |
| US3496163A (en) * | 1965-02-08 | 1970-02-17 | Upjohn Co | 7-halo-7-deoxylincomycins and process for preparing the same |
| US3539689A (en) * | 1965-02-08 | 1970-11-10 | Upjohn Co | 7-halo-lincomycin composition and process of treatment |
| US3549615A (en) * | 1968-10-17 | 1970-12-22 | Upjohn Co | Lincomycin derivatives and process for producing the same |
-
2004
- 2004-06-17 CN CN2004800203015A patent/CN1823083B/zh not_active Expired - Fee Related
-
2005
- 2005-12-14 ZA ZA200510192A patent/ZA200510192B/en unknown
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3268556A (en) * | 1964-04-13 | 1966-08-23 | Upjohn Co | Novel lincomycin derivatives |
| US3361739A (en) * | 1964-07-01 | 1968-01-02 | Upjohn Co | Lincomycin derivatives and processes for preparing the same |
| US3496163A (en) * | 1965-02-08 | 1970-02-17 | Upjohn Co | 7-halo-7-deoxylincomycins and process for preparing the same |
| US3539689A (en) * | 1965-02-08 | 1970-11-10 | Upjohn Co | 7-halo-lincomycin composition and process of treatment |
| US3549615A (en) * | 1968-10-17 | 1970-12-22 | Upjohn Co | Lincomycin derivatives and process for producing the same |
Non-Patent Citations (6)
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ZA200510192B (en) | 2006-12-27 |
| CN1823083A (zh) | 2006-08-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US7361743B2 (en) | Lincomycin derivatives possessing antibacterial activity | |
| AU2014278428B2 (en) | Processes of making and crystalline forms of a MDM2 inhibitor | |
| US6797820B2 (en) | Succinate compounds, compositions and methods of use and preparation | |
| WO2017133517A1 (zh) | 一种磷酰胺衍生物及制备方法和用途 | |
| CN103003233A (zh) | 新型异羟肟酸衍生物 | |
| WO1985004876A1 (en) | 2-azetidinone derivatives and process for their preparation | |
| EP1237862A1 (en) | Succinate compounds, compositions and methods of use and preparation | |
| KR20060091050A (ko) | 항균 활성을 갖는 신규 린코마이신 유도체 | |
| CN101535305A (zh) | 5-羟基甲基-噁唑烷-2-酮衍生物 | |
| CN1315859C (zh) | 具有抗菌活性的林可霉素衍生物 | |
| DE60203006T2 (de) | Pyrrolidin-derivate als faktor xa inhibitoren | |
| CN101072787A (zh) | 取代的腺嘌呤及其用途 | |
| WO2007142150A1 (ja) | 新規アミノグリコシド系抗生物質 | |
| CN1823083B (zh) | 具备抗微生物活性的林可霉素衍生物 | |
| US7199106B2 (en) | Lincomycin derivatives possessing antimicrobial activity | |
| US7199105B2 (en) | Lincomycin derivatives possessing antibacterial activity | |
| US7256177B2 (en) | Lincomycin derivatives possessing antibacterial activity | |
| JP2002338532A (ja) | カルバ糖アミン誘導体及びそれを用いるグリコシダーゼ阻害剤 | |
| EP1654268A2 (en) | Lincomycin derivatives possessing antibacterial activity | |
| KR20090099594A (ko) | 항균 활성을 갖는 신규 린코마이신 유도체 | |
| CN113710687A (zh) | 环肽抗生素 | |
| TW201335151A (zh) | 具有骨形成促進作用之色酮衍生物 | |
| JP2007528360A (ja) | 抗菌活性を有するリンコマイシン誘導体 | |
| SG172140A1 (en) | Cyclic amine compounds |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| REG | Reference to a national code |
Ref country code: HK Ref legal event code: DE Ref document number: 1090061 Country of ref document: HK |
|
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| REG | Reference to a national code |
Ref country code: HK Ref legal event code: GR Ref document number: 1090061 Country of ref document: HK |
|
| C17 | Cessation of patent right | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20100526 Termination date: 20110617 |