CN1662549A - 治疗代谢紊乱的糖皮质激素受体配基 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及用作肝脏选择性糖皮质激素受体拮抗剂的新型化合物、这种化合物的制备方法和使用这种化合物调节代谢，尤其是降低血清中葡萄糖水平、胰岛素水平或脂质水平和/或减轻体重的方法。

Description

治疗代谢紊乱的糖皮质激素受体配基
发明领域
本发明涉及用作肝脏选择性糖皮质激素受体拮抗剂的新型化合物、制备这种化合物的方法和使用这种化合物调节代谢，尤其是降低血清葡萄糖水平和/或减轻体重的方法。
发明背景
2型和1型糖尿病的主要问题在于存在由肝脏产生的过量或非适量的葡萄糖。这种异常是禁食性高血糖症的主要诱因并且伴随发生胰岛素释放的调节缺陷和对胰岛素的外周敏感性缺陷。因此，降低肝脏葡萄糖生成的试剂将有助于治疗2型和1型糖尿病。
1型糖尿病的高血糖症的深入治疗表明能够降低眼睛、肾脏和神经综合征的发展，有证据表明这种治疗还有助于2型糖尿病。现有数据还表明多数2型或1型糖尿病患者都没有获得适当治疗。尽管已有多种不同类型的胰岛素制剂和许多其他治疗，但仍存在有这种不足，所述其他治疗包括刺激胰岛素释放的试剂(例如磺酰脲)；影响肝脏葡萄糖生成的试剂(例如二甲双胍)；影响对胰岛素敏感性的试剂(例如trglitazone)和葡萄糖吸收剂(α-葡萄糖苷酶抑制剂)。尽管已有降低血液中葡萄糖水平的多种不同的口服活性试剂，但许多2型糖尿病患者还是需要胰岛素来控制其血糖水平。总体上，胰岛素在2型糖尿病中的使用超过了在1型糖尿病中的使用，对治疗2型糖尿病和其他肥胖相关疾病的其他口服活性试剂的需求已经达成共识。
肾上腺的糖皮质激素分泌(人类中主要为氢化可的松)如此命名，是由于它们具有调节葡萄糖代谢的能力。这些类固醇在肝脏中通过促进糖质异生而刺激葡萄糖的生成，所述糖质异生是指新生葡萄糖的生物合成(即：非来自糖原的葡萄糖)。因此，糖皮质激素不足时，由于肝脏葡萄糖生成降低会有发生低血糖的趋势。糖尿病中Addison’s病的进一步发生通常会导致葡萄糖水平降低。相反，糖皮质激素过量会激发具有潜伏性糖尿病症的个体发生症状明显的糖尿病，并通常会恶化已有糖尿病的血糖控制。已经在各种动物模型中观察到了类似的影响。
糖皮质激素作用下葡萄糖生成的增加源于对多种蛋白质的影响。其中重要的是对将氨基酸转化为葡萄糖前体的各种转氨酶的影响，以及对关键的葡糖异生酶如葡萄糖-6-磷酸酶和磷酸烯醇丙酮酸酯羧激酶(PEPCK)的诱导。如在转基因小鼠中所观察到的，甚至PEPCK的中度增加也会导致血糖升高。2型糖尿病的遗传学小鼠模型已经增加了皮质酮(该物种的内源性糖皮质激素)水平，并伴随PEPCK表达的增加。这种PEPCK的超表达可以用GR拮抗剂RU-38486处理抑制，导致高血糖下降。其他肝脏蛋白质也受到糖皮质激素的类似调节。例如，通过GR激动剂强的松龙或地塞米松处理来诱导肝酶酪氨酸氨基转移酶(TAT)；通过用RU-38486处理使该酶升高的水平正常化。
上述事项表明：如果内源性糖皮质激素对肝脏葡萄糖生成的作用可以以一种特异的方式阻断，则可以改善血糖控制，从而对糖尿病患者有利。但是，迄今为止，所有阻断糖皮质激素作用的手段都是系统性的。这些方法由于抑制系统性糖皮质激素信号传导而产生不希望的副作用。因此，肾上腺切除术使患者患有症状明显的肾上腺机能不全和Addison’s病的问题。例如通过甲吡酮阻断肾上腺类固醇的生成，或例如用RU-38486阻断糖皮质激素的作用，通常只有有限的有效持续时间；当其有效时，还导致全身性的肾上腺机能不全。长期下来，补偿性ACTH分泌过多和增加的氢化可的松释放最终会使阻断无效，并克制这些治疗。升高的外周氢化可的松水平可以引发非必要的副作用如低血钾。相比之下，肝脏特异性GR拮抗剂将不会具有这些问题，可以对抗糖尿病中增加的肝脏葡萄糖生成，并可用于治疗2型糖尿病。
以前将阻断糖皮质激素作用作为治疗糖尿病和肥胖症的方法的努力遇到了阻碍，即所用的化合物通常会在所有组织中阻断糖皮质激素的作用，并导致潜在的糖皮质激素缺乏的问题，如低血压、休克以及如果生物有机体完全暴露于强压力条件下时会导致的最终死亡。相比之下，在肝脏外具有最小作用的肝脏选择性GR拮抗剂可以用作2型糖尿病的前沿治疗，或可以和其他现有的治疗联用。
肝脏选择性GR拮抗剂提供了许多优点。首先，它减少肝脏葡萄糖的生成。这种作用将对血糖控制具有明显的效果。事实上，过量的肝脏葡萄糖生成可能是2型糖尿病中的主要缺陷。其次，这种药会增加胰岛素敏感性，这是由于代谢微环境的全面改善和高血糖诱导的胰岛素功能和分泌缺陷的改善。作为降低血糖的结果，对β-细胞分泌的需求下降会妨碍2型糖尿病的进行性β-细胞功能紊乱性质。与磺酰脲或胰岛素治疗相比，肝脏GR拮抗剂的另一个优点是患者将具有更小的低血糖危险性。
发明内容
本发明涉及化学式(I)的化合物，其可用于治疗II型糖尿病、肥胖症、X综合征、高血糖、高血压、葡萄糖清除(clearance)不充分、高胰岛素血症、高脂血症和肝脏糖皮质激素水平升高。
或其药学上合适的盐或前药，其中
A是选自-O-或-NRA的单元，其中RA是选自氢和烷基的单元；
R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7各自独立地是选自氢、(C1-C6)-烷基、烯基、炔基、烷氧基、羟基、烷氧烷基、羟基烷基和卤素的单元；且
R8、R9和R10各自独立地是选自氢、烷基、烯基、炔基、烷氧基、羟基、氰基、卤素和-NRBRC的单元，其中RB和RC各自独立地是选自氢和烷基的单元。
在另一个实施方案中，本发明涉及选择性拮抗哺乳动物中糖皮质激素受体的效应的方法，该方法包括施用治疗有效量的化学式(I)的化合物。
在另一个实施方案中，本发明涉及选择性拮抗哺乳动物中肝脏糖皮质激素受体的效应的方法，该方法包括施用治疗有效量的化学式(I)的一种或多种化合物。
在另一个实施方案中，本发明涉及治疗糖尿病、高血糖、高胰岛素血症、不充分的葡萄糖清除、肥胖症、X综合征、高脂血症、糖尿病性高血压和肝脏糖皮质激素水平升高的方法，该方法包括施用化学式(I)的一种或多种化合物。
在另一个实施方案中，本发明涉及包含化学式(I)的化合物的药用组合物。
本发明的另一个实施方案涉及化学式(I)的化合物的药学上合适的前药。
具体实施方式
术语“烯基”指从具有至少一个碳-碳双键的烃衍生的2-12个碳原子的单价直链或支链基团。本发明的烯基基团可以任选地用1-5个取代基取代，所述取代基选自烷氧基、烷酰基氧基、烷氧基羰基、氨基、叠氮基、酰胺基、羧基、氰基、卤基、羟基、硝基、全氟烷基、全氟烷氧基、氧基、硫代烷氧基、未取代或取代的芳基、未取代或取代的杂芳基和未取代或取代的杂环。取代本发明的烷基的取代芳基、取代杂芳基和取代杂环基团用选自烷基、烷氧基、羧基、叠氮基、甲醛基、卤基、羟基、全氟烷基和全氟烷氧基的至少一种取代基取代。
术语“烷氧基”指通过氧原子和母体分子基团结合的烷基基团。
术语“烷氧烷基”指通过亚烷基和母体分子基团结合的烷氧基。
术语“烷基”指从具有1-12个碳原子的饱和烃衍生的单价直链或支链基团。本发明的烷基集团可以任选地用1-5个取代基取代，所述取代基选自烷氧基、烷酰基氧基、烷氧基羰基、氨基、叠氮基、酰胺基、羧基、氰基、卤基、羟基、硝基、全氟烷基、全氟烷氧基、氧基、硫代烷氧基、未取代或取代的芳基、未取代或取代的杂芳基和未取代或取代的杂环。取代本发明的烷基的取代芳基、取代杂芳基和取代杂环基团用选自烷基、烷氧基、羧基、叠氮基、甲醛基(carboxaldehyde)、卤基、羟基、全氟烷基和全氟烷氧基的至少一种取代基取代。
术语“炔基”指具有至少一个碳-碳三键的、2-12个碳原子的单价直链或支链烃。本发明的炔基基团可任选地用1-5个取代基取代，所述取代基选自烷氧基、烷酰基氧基、烷氧基羰基、氨基、叠氮基、酰胺基、羧基、氰基、卤基、羟基、硝基、全氟烷基、全氟烷氧基、氧基、硫代烷氧基、未取代或取代的芳基、未取代或取代的杂芳基和未取代或取代的杂环。取代本发明的烷基的取代芳基、取代杂芳基和取代杂环基团用选自烷基、烷氧基、羧基、叠氮基、甲醛基、卤基、羟基、全氟烷基和全氟烷氧基的至少一种取代基取代。
术语“芳基”指具有一个或两个芳香环的单-或双环的碳环型环系统。芳基还可以和环己烷、环己烯、环戊烷和环戊烯环稠合。本发明的芳基可以任选地用1-5个取代基取代，所述取代基各自选自烷基、烷氧基、烷氧烷基、烷氧烯基、烷酰基、烷酰基氧基、烷酰基氧基烷基、烷酰基氧基烯基、烷氧基羰基、烷氧基羰基烷基、烷氧基羰基烯基、烷基磺酰基、烷基磺酰基烷基、烷基磺酰基烯基、氨基、氨基烷基、氨基烯基、氨基磺酰基、氨基磺酰基烷基、氨基磺酰基烯基、叠氮基、甲醛基、(甲醛基)烷基、(甲醛基)烯基、酰胺基、酰胺基烷基、酰胺基烯基、羧基、羧基烷基、羧基烯基、氰基、氰基烷基、氰基烯基、卤基、卤烷基、卤烯基、羟基、羟基烷基、羟基烯基、硝基、氧基、全氟烷基、全氟烷氧基、全氟烷氧基烷基、全氟烷氧基烯基、硫代烷氧基、硫代烷氧基烷基、硫代烷氧基烯基、未取代或取代的芳基、未取代或取代的杂芳基、未取代或取代的杂环。取代本发明的芳基的取代芳基、杂芳基和杂环基团用选自烷基、烷氧基、羧基、叠氮基、甲醛基、卤基、羟基、全氟烷基和全氟烷氧基的至少一种取代基取代。
术语“氰基”指-CN。
术语“卤基”或“卤素”指F、Cl、Br或I。
此处所用的术语“杂环”指包含选自氧、氮和硫的至少一个原子的环状的、非芳族的四-、五-、六-或七-元环。四元环具有零个双键，五元环具有零个或一个双键，六元环和七元环具有零个、一个或两个双键。本发明的杂环基团例如二氢吡啶基、吗啉基、哌嗪基、吡咯烷基、四氢吡啶基、哌啶基、硫代吗啉基、1，3-二氧戊环基、1，4-二噁烷基、1，3-二噁烷基等。本发明的杂环基团可以和芳基或杂芳基稠合。本发明的杂环基团可以通过环中可取代的碳或氮原子与母体分子基团相连。
杂环还包括跨接的双环基团，其中单环的杂环基团通过亚烷基跨接，如
Figure A0381413700111
等。
本发明的杂环基团可以任选地用1-5个取代基取代，所述取代基各自选自烷基、烷氧基、烷氧烷基、烷氧烯基、烷酰基、烷酰基氧基、烷酰基氧基烷基、烷酰基氧基烯基、烷氧基羰基、烷氧基羰基烷基、烷氧基羰基烯基、烷基磺酰基、烷基磺酰基烷基、烷基磺酰基烯基、氨基、氨基烷基、氨基烯基、氨基磺酰基、氨基磺酰基烷基、氨基磺酰基烯基、叠氮基、甲醛基、(甲醛基)烷基、(甲醛基)烯基、酰胺基、酰胺基烷基、酰胺基烯基、羧基、羧基烷基、羧基烯基、氰基、氰基烷基、氰基烯基、卤基、卤烷基、卤烯基、羟基、羟基烷基、羟基烯基、硝基、氧基、全氟烷基、全氟烷氧基、全氟烷氧基烷基、全氟烷氧基烯基、硫代烷氧基、硫代烷氧基烷基、硫代烷氧基烯基、未取代或取代的芳基、未取代或取代的杂芳基、未取代或取代的杂环。取代本发明的杂环基团的取代芳基、杂芳基和杂环基团用选自烷基、烷氧基、羧基、叠氮基、甲醛基、卤基、羟基、全氟烷基和全氟烷氧基的至少一种取代基取代。
此处所用的“杂芳基”指环状的、芳香族的五元和六元基团，其中至少一个原子选自N、O和S，其他原子为碳原子。五元环具有两个双键，六元环具有三个双键。本发明的杂芳基通过环中的可取代碳或氮与母体分子基团相连。杂芳基的例子有呋喃基、噻吩基、吡咯基、唑基、噻唑基、咪唑基、异唑基、异噻唑基、二唑基、二唑基、三唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡唑基、三嗪基等。本发明的杂芳基可以和芳基、杂环或其他杂芳基稠合。本发明的杂芳基可以任选地用1-5个取代基取代，所述取代基各自选自烷基、烷氧基、烷氧烷基、烷氧烯基、烷酰基、烷酰基氧基、烷酰基氧基烷基、烷酰基氧基烯基、烷氧基羰基、烷氧基羰基烷基、烷氧基羰基烯基、烷基磺酰基、烷基磺酰基烷基、烷基磺酰基烯基、氨基、氨基烷基、氨基烯基、氨基磺酰基、氨基磺酰基烷基、氨基磺酰基烯基、叠氮基、甲醛基、(甲醛基)烷基、(甲醛基)烯基、酰胺基、酰胺基烷基、酰胺基烯基、羧基、羧基烷基、羧基烯基、氰基、氰基烷基、氰基烯基、卤基、卤烷基、卤烯基、羟基、羟基烷基、羟基烯基、硝基、氧基、全氟烷基、全氟烷氧基、全氟烷氧基烷基、全氟烷氧基烯基、硫代烷氧基、硫代烷氧基烷基、硫代烷氧基烯基、未取代或取代的芳基、未取代或取代的杂芳基、未取代或取代的杂环。取代本发明的杂芳基的取代芳基、杂芳基和杂环基团用选自烷基、烷氧基、羧基、叠氮基、甲醛基、卤基、羟基、全氟烷基和全氟烷氧基的至少一种取代基取代。
术语“羟基”指-OH。
术语“羟基烷基”指通过烷基和母体分子相连的羟基基团。
本发明涉及化学式(I)的化合物，
或其药学上合适的盐或前药，其中
A是选自-O-或-NRA的单元，其中RA是选自氢和烷基的单元；
R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7是独立选自氢、(C1-C6)-烷基、烯基、炔基、烷氧基、羟基、烷氧烷基、羟基烷基和卤素的单元；且
R8、R9和R10是独立选自氢、烷基、烯基、炔基、烷氧基、羟基、氰基、卤素和-NRBRC的单元，其中RB和RC是选自氢和烷基的单元。
根据本发明的一个实施方案，提供了化学式(I)的化合物，其中R1、R2、R3和R4是氢；R5是选自氢和烷基的单元；A、R6、R7、R8、R9、R10、RA、RB和RC在化学式1中限定。
在本发明的另一个实施方案中，提供了化学式(I)的化合物，其中R1、R2、R3、R4、R8、R9和R10是氢；R5是选自氢和烷基的单元；R6是OH；R7是炔基，A、R8、R9、R10、RA、RB和RC在化学式(I)中限定。
在本发明的另一个实施方案中，提供了化学式(I)的化合物，其中R1、R2、R3、R4、R8、R9和R10是氢；R5是选自氢和烷基的单元；R6是OH；R7是-C≡C-CH3，A、R8、R9、R10、RA、RB和RC在化学式(I)中限定。
在本发明的另一个实施方案中，提供了化学式(I)的化合物，其中R1、R2、R3、R4、R8、R9和R10是氢；R5是选自氢和烷基的单元；R6是OH；R7是-C≡C-CH3，A是-NCH3，R8、R9、R10、RA、RB和RC在化学式1中限定。
在本发明的另一个实施方案中，提供了化学式(I)的化合物，其中R6是OH；R7是-C≡C-CH3；A是-O-，R1、R2、R3、R4、R5、R8、R9、R10、RA、RB和RC在化学式1中限定。
本发明的另一个方案涉及化学式(I)的化合物的药学上合适的前药。
在一个实施方案中，本发明涉及在消化道中分解释放化学式(I)的化合物的前药。
在本发明的另一个实施方案中，提供了化学式(II)的化合物，
或其药学上合适的盐，其中A是选自-O-或-NRA的单元；R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7是独立选自氢、(C1-C6)-烷基、烯基、炔基、烷氧基、羟基、烷氧烷基、羟基烷基和卤素的单元；且R8、R9和R10是独立选自氢、烷基、烯基、炔基、烷氧基、羟基、氰基、卤素和-NRBRC的单元；RA是选自氢和烷基的单元；RB和RC是选自氢和烷基的单元；PD1和PD2中的一个或多个在体内被切割。在本发明的另一个实施方案中提供了化学式(II)的化合物，
或其药学上合适的盐，其中A是选自-O-或-NRA的单元；R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7是独立地选自氢、(C1-C6)-烷基、烯基、炔基、烷氧基、羟基、烷氧烷基、羟基烷基和卤素的单元；R8、R9和R10是选自氢、烷基、烯基、炔基、烷氧基、氰基、羟基、卤素和-NRBRC的单元；RA是选自氢和烷基的单元；RB和RC是独立地选自氢和烷基的单元；PD1和PD2中的一个或多个是在消化道中被体内切割的部分。
在本发明的另一个实施方案中，提供了化学式(II)的化合物，其中R1、R2、R3、R4、R8、R9和R10是氢；R5是选自氢和烷基的单元；R6是OH；R7是-C≡C-CH3。在本发明的一个实施方案中，提供了选择性拮抗哺乳动物中糖皮质激素受体的效应的方法，该方法包括施用治疗有效量的化学式(I)的化合物。
在本发明的一个实施方案中，提供了选择性拮抗哺乳动物中糖皮质激素受体的效应的方法，该方法包括施用治疗有效量的化学式(II)的化合物。
在本发明的一个实施方案中，提供了选择性拮抗哺乳动物中肝脏糖皮质激素受体的效应的方法，该方法包括施用治疗有效量的化学式(I)的化合物。
在本发明的一个实施方案中，提供了选择性拮抗哺乳动物中肝脏糖皮质激素受体的效应的方法，该方法包括施用治疗有效量的化学式(II)的化合物。
在本发明的一个实施方案中，提供了治疗哺乳动物中糖尿病、肥胖症或X综合征的方法，该方法包括施用治疗有效量的化学式(I)的化合物。
在本发明的一个实施方案中，提供了治疗哺乳动物中糖尿病、肥胖症或X综合征的方法，该方法包括施用治疗有效量的化学式(II)的化合物。
在本发明的一个实施方案中，提供了治疗哺乳动物中高血糖、葡萄糖清除不充分、高胰岛素血症、高脂血症、糖尿病性高血压和肝脏糖皮质激素水平升高的方法，该方法包括施用治疗有效量的化学式(I)的化合物。
在本发明的一个实施方案中，提供了治疗哺乳动物中高血糖、葡萄糖清除不充分、高胰岛素血症、高脂血症、糖尿病性高血压和肝脏糖皮质激素水平升高的方法，该方法包括施用治疗有效量的化学式(II)的化合物。
在本发明的一个实施方案中，提供了一种药用组合物，包含治疗有效量的化学式(I)的化合物和药学上合适的载体。
在本发明的一个实施方案中，提供了一种药用组合物，包含治疗有效量的化学式(II)的化合物和药学上合适的载体。
在本发明中，术语“前药”指例如通过血液或食道中的水解在体内转化成化学式(I)的化合物的化合物。在T.Higuchi and V.Stella，Pro-drugs as Novel DeliverySystems，Vol.14 of the A.C.S.Symposium Series和Edwar B.Roche，ed.，Bioreversiblecarriers in Drug Design，American Pharmaceutical Association and Pergamon Press，1987中进行了全面讨论，二者通过引用并入本文。
术语“药学上合适的前药”指本发明化合物的前药，其在合理的医疗判断范围内适用于与人类和低等动物的组织接触，而不具有过度的毒性、刺激性、过敏反应等，具有合理的效益/风险比，对预期应用有效，以及本发明化合物的各种离子形式。例如，可以根据J.Pharm.Sci.1981，70，181-186中所述的Anderson和Taphouse的方法制备酯前药。可以根据Kitagawa、Mohri和Kitagawa在Arneim.-Forschung 1972，22，402-410中描述的方法，或通过Thaisrivongs等在J.Med.Chem.1993，36，2575-2577所述的步骤制备磷酸盐(酯)前药。根据Safadi、Oliyai和Stella在Pharm.Res.1993，10(9)，1350-1355中所概述的方法制备磷酰氧基-甲基碳酸酯和氨基甲酸酯。还可以根据Hewawasam等在Bioorg.Med.Chem.Letts.2003，13，1695-1698中概述的策略制备这些前药和包括酰氧基甲基和磷酰氧基甲基醚的其他前药。Y.Hattori、S.Kawakami、F.Yamashita和M.Hashida在J.Controlled Release 69(2000)，369-377中、R.Saner、J.Maurinsh、U.Reith、F.Fulle、K-N.Klotz和C.Muller在J.Med.Chem.2000，43，440-448中还描述了水溶性前药的其他例子。二者通过举例并入本文。
术语“药学上合适的盐”指在合理的医疗判断范围内适用于与人类和低等动物的组织接触，不具有过分的毒性、刺激性、过敏反应等、具有合理的效益/风险比的盐。药学上合适的盐是本领域所熟知的。例如，S.M.Berge等在J.PharmaceuticalSciences，66：1-19(1997)中描述了药学上合适的盐。所述的盐可以在本发明的化合物最终分离和纯化的过程中原位制备，或通过使游离的碱官能团和适当的有机酸反应而单独制备。代表性的酸加成盐包括醋酸盐、己二酸盐、藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐(camphersulfonate)、柠檬酸盐、环戊丙酸盐、二葡萄糖酸盐(digluconate)、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、延胡索酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氢溴酸盐、盐酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐、乳糖酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲基磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟基萘酸盐(pamoate)、pectinate、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐、十一烷酸盐、戊酸盐等。代表性碱或碱土金属盐包括钠、锂、钾、钙、镁等，以及无毒的铵、季铵和胺阳离子，包括但不局限于铵、四甲基铵、四乙基铵、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、乙胺等。
本发明的化合物可以作为立体异构体存在，其中存在有不对称或手性中心。这些化合物用符号“R”或“S”表示，取决于手性碳原子周围取代基的构型。本发明考虑了各种立体异构体及其混合物。立体异构体包括对映异构体和非对映异构体，对映异构体的等量混合物表示为(±)。本发明化合物的各立体异构体可以从商业来源的起始材料合成制得，所述的起始材料包含不对称或手性中心，或通过制备外消旋的混合物、然后进行本领域的普通技术人员所熟知的拆分。这些拆分方法例如：(1)将对映异构体混合物和手性助剂结合，通过再结晶或色谱法分离所得的非对映异构体，并从助剂释放光学纯产物；或(2)在手性色谱柱上直接分离对映异构体混合物。
本发明的化合物中还可以存在几何异构体。本发明考虑了由碳-碳双键周围的取代基排列或环周围的取代基排列所产生的各种几何异构体和其混合物。碳-碳双键周围的取代基命名为Z或E构型，其中术语“Z”表示碳-碳双键同侧的取代基，术语“E”表示碳-碳双键对侧的取代基。环周围取代基的排列命名为顺式或反式，其中术语“顺式”表示环平面同侧的取代基，术语“反式”表示环平面对侧的取代基。取代基位于环平面同侧和对侧的化合物的混合物命名为顺/反式。
本发明还提供了药用组合物，其包含与一种或多种无毒的药学上合适的载体配制在一起的本发明化合物。配制药用组合物可以具体配制用于固体或液体形式的口服、用于肠道外施用或直肠施用。
本发明的药用组合物可以经口、经直肠、肠道外、脑池内、阴道内、腹腔内、局部(如粉末、软膏或滴剂)、经颊(bucally)、或作为口或鼻喷雾施用于人类或其他动物。术语“肠道外”施用指包括静脉内、肌肉内、腹腔内、胸骨内、皮下和关节内注射和输注的施用模式。
本发明用于肠道外注射的药用组合物包含药学上合适的无菌水溶液或非水溶液、分散体、悬浮液或乳液，以及使用前复原为无菌可注射溶液或分散体的无菌粉末。合适的水或非水载体、稀释剂、溶剂或溶媒的例子包括水、乙醇、多元醇(如甘油、丙二醇、聚乙二醇等)及其合适的混合物；植物油(如橄榄油)，和可注射的有机酯如油酸乙酯。例如，通过使用包衣材料如卵磷脂；通过维持分散体中所需颗粒尺寸；以及通过使用表面活性剂，可以保持适当的流动性。相反，减小颗粒尺寸可以保持生物活性。
这些组合物还可以包含助剂，如防腐剂、润湿剂、乳化剂和分散剂。可以通过引入各种抗细菌和抗真菌剂例如对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚山梨酸等来保证对微生物作用的抑制。也可能希望引入等渗透压剂如糖、氯化钠等。可以通过引入延迟吸收的试剂如单硬脂酸铝和明胶，实现可注射药用形式的长时间吸收。
在某些情况下，为了延长药物的效应，需要减缓皮下或肌肉注射后的药物吸收。可以通过使用具有低水溶性的晶体或无定形材料的悬浮液来实现这一点。因此，药物的吸收速度依赖于其溶解速度，而溶解速度依赖于晶体大小和晶体形式。作为可替换方案，通过将药物溶解或悬浮在油溶媒中实现肠道外施用的药物形式的延迟吸收。
通过在生物可降解的聚合物如聚丙交酯-聚乙交酯中形成药物的微囊基质来制备可注射贮存型。依赖于药物与聚合物的比例和所用具体聚合物的性质，药物释放速度可以得以控制。其他生物可降解聚合物的例子包括聚(原酸酯)和聚(酐)。还可以通过将药物圈闭在和身体组织相容的脂质体或微乳剂中来制备贮存可注射配方制剂。
可注射配方制剂可以加以消毒，例如使用前通过截留细菌的过滤器进行过滤，或引入能够溶解或分散于无菌水或其他可注射介质的无菌固体组合物形式的消毒剂。
用于口服的固体剂型包括胶囊、片、丸、粉末和颗粒。在这样的固体剂型中，活性化合物和至少一种惰性的药学上合适的赋形剂或载体混合，所述的赋形剂或载体如柠檬酸钠或磷酸二钙，和/或a)填充剂或增容剂，如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；b)粘合剂，例如羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；c)保湿剂，如甘油；d)崩解剂，如琼脂、碳酸钙、土豆或木薯淀粉、藻酸、特定的硅酸盐、和碳酸钠；e)溶液阻滞剂，如石蜡；f)吸收加速剂，如季铵化合物；g)润湿剂，如十六烷醇和单硬脂酸甘油酯；h)吸附剂，如高岭土和膨润土；和i)润滑剂，如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠，及其混合物。在胶囊、片和丸的情况下，剂型还可以包含缓冲剂。
利用诸如乳糖(lactose或milk sugar)以及高分子量聚乙二醇等的赋形剂，将类似类型的固体组合物用作软-和硬-填充的明胶胶囊中的填充剂。
可以制备带有包衣和鞘如肠溶衣和药学配制领域中熟知的其他包衣来制备片、糖锭、胶囊、丸和颗粒形式的固体剂型。它们可以任选地包含遮光剂，还可以具有仅在肠道的某部分或者优先在肠道的某部分任选地以延迟方式释放活性成分的组合物。可以使用的包埋组合物的例子包括多聚物质和蜡。
活性化合物还可以是微胶囊形式的，如果合适的话，具有一种或多种上述赋形剂。
用于口服的液体剂型包括药学上合适的乳液、溶液、悬浮液、糖浆和酏剂。除了活性化合物，液体剂型还包含本领域中通用的惰性稀释剂，例如水或其他溶剂、增溶剂和乳化剂，如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油(尤其是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢糠醇、聚乙二醇和山梨聚糖的脂肪酸酯，及其混合物。
除了惰性稀释剂，口服组合物还可以包括助剂，如润湿剂、乳化和悬浮剂、甜味剂、调味品和香味剂。
除了活性化合物之外，悬浮液还包括悬浮剂，例如乙氧基化的异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇和山梨聚糖酯、微晶纤维素、aluminum metahydroxide、膨润土、琼脂和黄芪胶，及其混合物。
用于直肠或阴道施用的组合物优选为栓剂，可以通过将本发明的化合物和合适的无刺激性的赋形剂或载体混合而制备，所述的赋形剂或载体如可可油、聚乙二醇或栓剂蜡，其在室温下为固体，体温下为液体，从而能够在直肠或阴道中融化并释放活性化合物。
本发明的化合物还可以以脂质体的形式施用。如本领域中所公知的，脂质体通常来源于磷脂或其他脂物质。脂质体由分散在水介质中的单或多薄层状的水合液态晶体(liquid crystals)形成。可以使用能够形成脂质体的任何无毒的、生理学上合适的、可代谢的脂质。除了本发明的化合物之外，脂质体形式的该组合物还可以包含稳定剂、防腐剂、赋形剂等。优选的脂质是天然的和合成的磷脂与磷脂酰胆碱(卵磷脂)。
形成脂质体的方法是本领域所公知的。例如参见Prescott，Ed.， Methods in Cell Biology，Volume XIV， Academic Press，New York，N.Y.(1976)，p.33及以下。
本发明化合物用于局部施用的剂型包括粉末、喷雾、软膏和吸入剂。在无菌条件下活性化合物和可能需要的药学上合适的载体和任何所需的防腐剂、缓冲剂或推进剂混合。眼用配方制剂、眼膏、粉末和溶液也在本发明的范围之内。
可以改变本发明的药用组合物中活性成分的实际剂量水平，以获得能够有效实现对特定患者、组合物和施用模式所需治疗应答的活性化合物的量。所选的剂量水平取决于特定化合物的活性、施用途径、待治疗病情的严重程度和待治疗患者的病情和病史。但是，从低于达到所需治疗效果所需要水平的化合物剂量出发，逐渐增大剂量直至达到所需效果，属于本领域的技术范围。
哺乳动物患者口服的通常剂量水平为每天每kg体重约0.1至约50mg活性化合物，较优选约1至约10mg活性化合物。如果需要，有效日剂量可以分成多剂进行服用，如每天2-4次独立剂量。
可以采用下面方案中所示的反应来制备本发明的化合物。通过替换这些合成法中的适当反应物可以合成所述的化合物，步骤自身可以以不同的顺序进行，这对于本领域的普通技术人员来说将是显而易见的。例如，在下面的方案中，R1、R2、R3、R4、R5、R8、R9和R10在方便的情况下都是氢，这仅仅是为了易于说明。当这些基团是氢以外的其他基团时，也可以进行所述方案中所采用的化学方法。同样显而易见的是，可以进行保护和去保护步骤，以成功地完成化合物的合成。 Protective Groups in Oganic Synthesis，3rd edition，John Wiley & Sons，New York(1999)中提供了保护基团的全面讨论。
在下面的方案和实施例的描述中所用的缩略词有：DMF是N，N-二甲基甲酰胺；DMSO是二甲基亚砜；HFA是三水合六氟丙酮；PPh3是三苯基膦；OsO4是四氧化锇；NaBH4是硼氢化钠；(iPr)EtN是二异丙基乙胺；NaIO4是高碘酸钠；LiOH是氢氧化锂；TBTU是2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，2，2-四甲基脲阳离子四氟硼酸盐；NBS是N-溴代丁二酰亚胺；THF是四氢呋喃。
方案1.活化胆汁酸中间体的制备
Figure A0381413700211
方案2.糖皮质激素拮抗剂中间体的制备
Figure A0381413700221
方案3.片段的组合
本发明的化合物可以根据方案1-3中所述的方法制备。在胆酸中间体上引入潜在的连接基团的一种方法如方案1所述。胆酸甲酯例如通过用磺酰卤化物等处理而选择性地在3-位活化。活化的3-醇用乙二醇置换，所得的醇例如通过向氯化物、磺酸酯等的转化而活化为离去基团，即得中间体Z。
在方案2中，中间体A和B在以下的几个步骤中从公知的酮-缩酮制备。有机金属反应试剂例如丙炔基-溴化镁等向C-17酮的加成产生相应的β醇作为主要的立体异构体。Δ(5，10)双键的选择性环氧化作用，例如使用由六氟丙酮催化的过氧化氢，产生未饱和的环氧化物，其以SN2’方式和有机金属试剂例如4-(N-Boc-N-甲基)-苯基溴化镁反应，即得相应C-11取代的烯丙醇A。例如使用对甲苯磺酸水合物或盐酸等进行酸催化的去保护，并同时去除C-5醇，即得烯酮样的B。
在方案3中，C-11处的连接取代基的任选的去保护之后，例如使用类碱的三乙胺等清除反应过程中产生的酸，该片段和方案1中所述的修饰的胆汁酸Z偶联。所得的连接产物C中酯基团的水解产生目标化合物。
方案4.片段的替换方式的组合
方案4描述了方案3中所述的偶联策略的替换方式。在C-11处的连接基团的任选的去保护之后，来自方案2的中间体A可以直接与方案1中修饰的胆汁酸Z偶联。偶联产物用酸处理，以除去C-3乙缩醛，去除C-3醇，所得的烯酮酯C如前所述水解，即得目标化合物。
方案5.糖皮质激素拮抗剂中间体的替换方式的组合
                     方案5A
                         方案5B
为了有利于结构-活性研究，可以根据方案5中所述的几个替换方式的策略制备关键中间体B。因此，例如，如方案5A中所述，Δ5，10石蜡的环氧化可以发生在C-17取代基的加成之前。所得环氧-醇的进一步转化如前面的方案2所述。作为可替换方案，C-17取代基的加成可以一直推迟到合成后期。在这种情况下，如方案5B所示，C-11和C-17加成步骤的顺序是颠倒的。所有的其他转化如方案2所述。
                        方案6
本发明化合物的前药形式可以根据方案6-10中概述的方法制备。在方案6中，胆酸的C-3羟基例如以酯、三烷基甲硅烷基醚等形式加以保护，使得C-7和/或C-12羟基可以用潜在形式的体内分解部分处理。这种反应基团(LPD-X)的例子可以包括二烷基磷酰氯(dialkylphosphochloridate)、活化的酸、氯甲酸酯等。如前面的方案1所述，选择性地去除C-3保护基，所得的C-3醇转化为潜在的连接基团，即得中间体D。
                    方案7
Figure A0381413700251
作为可替换方案，如方案7所示，根据方案1制备的化合物Z的C-7和/或C-12羟基用潜在形式的体内分解物质处理，直接提供中间体。
                    方案8
如方案8所示，根据方案6或方案7制备的化合物Y可以如方案3所述用二烯酮B(任选的去保护之后)处理，提供完全保护的偶联产物D。水解D中的酯，然后去除保护基，即得最终的前药酸。作为可替换方案，偶联产物D可以通过中间体A(任选的去保护之后)和化合物Y反应、然后在酸性条件下进行处理来制备。
                        方案9
方案9表明化合物D可以从倒数第二个中间体C通过和潜在形式的体内分解部分反应直接制备。这种反应性基团的例子可以包括二烷基磷酰氯、活化的酸、氯甲酸酯等。水解D中的酯，然后去除保护基，即得最终的前药酸。
                        方案10
方案10表明本发明的化合物可以直接用于制备前药形式。所述化合物用潜在形式的体内分解部分处理，然后去除保护基。这种反应性基团的例子可以包括二烷基磷酰氯、活化的酸、氯甲酸酯等。
现在将结合所述方案的优选实施方案来描述本发明，所述方案并不限制本发明的范围。相反，本发明涵盖了包括在权利要求书范围内的所有替换方式、改变和等同物。因此，下面的实施例说明本发明的特别优选的实践，应该理解，实施例的目的是说明某些优选的实施方案，并提供最有用的且易于理解的步骤和概念方面的描述。
合成方法
在以下的方案和实施例的描述中用到的缩略词为：EtOAc是乙酸乙酯；CH2Cl2是二氯甲烷；CHCl3是氯仿；CH3CN是乙腈；THF是四氢呋喃；MTBE是甲基叔丁基醚。
                        实验技术
                         实施例1
(3β，5β，7α，12α)-7，12-二羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-1-丙-1-炔基-4，9- 雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸
                         实施例1A
(3α，5β，7α，12α)-7，12-二羟基-3-(甲磺酰基氧基)-24-胆烷酸甲酯
在0℃搅拌下，在30分钟期间，向吡啶(75mL)中的胆酸甲酯(25g，59.2mmol)溶液中滴加甲基磺酰氯(5.04mL，65.1mmol)。反应物升温至室温，搅拌6小时。将反应混合物倒入EtOAc(200mL)、1N HCl(200mL)和冰的混合物中。分层，有机层用1N HCl(2×50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩，即得浅黄色的油。将该粗制材料通过用50％EtOAc/己烷洗脱的二氧化硅塞(plug)，即得24.5g(83％)浅黄色油状的标题化合物，其置于高真空泵下时形成白色粘稠的泡沫。
                     实施例1B
(3β，5β，7α，12α)-7，12-二羟基-3-(2-羟基乙氧基)-24-胆烷酸甲酯
在环境温度下，含有实施例1A化合物(10.0g，20mmol)的压力容器(250mL烧瓶)中装入乙二醇(20mL)和吡啶(4mL)，密封，然后于120℃加热4小时。将反应物冷却至室温，用EtOAc(50mL)稀释，并用1N HCl(30mL)终止反应。分层，有机层用1N HCl(2×50mL)洗涤、干燥(Na2SO4)并浓缩。通过硅胶色谱(10％->40％丙酮/己烷)进行纯化，即得标题化合物(3.5g，37％)。MS(ESI)m/e484(M+NH4)+
Figure A0381413700282
                     实施例1C
(3β，5β，7α，12α)-7，12-二羟基-3-[2-(对甲苯磺酰基氧基)乙氧基]-24-胆烷酸甲酯
将实施例1B的化合物(1.50g，3.2mmol)溶解于15mL氯仿和15mL吡啶中；加入对甲苯磺酰氯(920mg，4.83mmol)，并将混合物搅拌过夜。加入氯仿(250mL)，所得溶液用5％HCl溶液和饱和Na2SO4洗涤。在真空中除去溶剂之后，该粗制产物通过硅胶柱色谱(40％->60％丙酮/己烷)进行纯化。标题化合物的产率为1.40g(71％)。
Figure A0381413700291
                        实施例1D
                 N-叔丁氧羰基-N-甲基-4-溴苯胺
将50mmol 4-溴苯胺(0.86g)溶解于10mL的THF中；加入1.09g(5.0mmol)二碳酸二叔丁基酯，并将所得溶液升温至50℃ 5小时。反应物在水和乙酸乙酯之间分配；有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，并浓缩产生白色固体。该粗制材料溶解于20mL的干燥THF中，并在冰浴中冷却；按份加入250mg(1.25当量)的NaH(60％油分散体)。气体放出，15min后留下泡沫状的半固体。加入额外的THF(10mL)以驱散泡沫，然后加入0.50mL(1.6当量)的碘代甲烷。所得产物搅拌过夜，缓慢升温至室温。将反应混合物小心加入到1N H3PO4水溶液中(有气体放出！)，所得混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，并用Na2SO4干燥。粗制产物通过硅胶色谱、用0->10％乙酸乙酯/己烷梯度洗脱进行纯化，得到1.08g(共76％)标题化合物，其为稍带黄色的油。
                         实施例1E
(5’R，10’R，13’S)-13’-甲基-1’，2’，6’，7’，8’，12’，13’，14’，15’，16’-十氢-17’H-螺[1，3-二氧戊环 -2，3’-[5，10]环氧环戊[α]菲]-17’-酮
0℃下，向CH2Cl2(160mL)中的二烯(5.0g，15.9mmol)、三水合六氟丙酮(349mg，1.59mmol)和吡啶(75mg，0.95mmol)溶液中滴加30％H2O2溶液(2.7g，23.8mmol)。反应物于0℃搅拌2小时，并于常温下搅拌2天(通过TLC监测)。用10％Na2S2O3溶液终止反应，用CH2Cl2(250mL×3)萃取，并经Na2SO4干燥。在真空中除去溶剂，所得的黄色固体用35mL二乙醚在封闭的烧瓶中磁力搅拌过夜，粉碎。混合物通过粗-多孔烧结的玻璃漏斗进行吸滤，用5mL二乙醚洗涤三次，并吸干1小时。所得的滤饼碾成细粉，真空干燥，即得标题化合物(2.0g，38％产率)。残留物质(～2.6g)可以再次经历上述步骤，回收另外的0.5gα-环氧化物。
                        实施例1F
(5’R，10’R，13’S，17’S)-13’-甲基-17’-丙-1-炔基-1’，2’，7’，8’，12’，13’，14’，15’，16’，17’-十氢 -6’H-螺[1，3-二氧戊环-2，3’-[5，10]环氧环戊[α]菲]-17’-醇
0℃下，向THF(1.2mL，蒸馏)中的100mg(0.30mmol)实施例1E化合物的溶液中滴加丙-1-炔基溴化镁溶液(1.2mL，0.60mmol，0.5M，在THF中)。反应混合物搅拌2hr。在真空中除去溶剂；残余物用饱和的NH4Cl水溶液终止，用EtOAc(20mL×3)萃取。合并的有机萃取物用Na2SO4干燥。在真空中除去溶剂，即得110mg标题化合物(产率～100％)。
Figure A0381413700302
                         实施例1G
叔丁基4-((5R，11R，13S，17S)-5，17-二羟基-13-甲基-17-丙-1-炔基 -1，2，4，5，6，7，8，11，12，13，14，15，16，17-十四氢螺[环戊[α]菲-3，2’-[1，3]二氧戊环]-11-基)苯 基(甲基)氨基甲酸酯
将装有Mg粉(44mg，1.8mmol)的50mL烧瓶在N2下用加热枪(heat-gun)干燥。在装置冷却至室温后，加入THF(2mL)和小的碘晶体。往有效搅拌的混合物中加入0.6mL实施例1D化合物(500mg，1.75mmol)的THF(2mL)溶液。混合物加热回流约5分钟后，碘的颜色迅速褪为无色，然后将混合物冷却至室温。在20分钟期间滴加其余的溴化物溶液。混合物在冰水浴中冷却30分钟，然后一次性加入CuI(132mg，0.69mmol，粉末)。混合物搅拌2分钟后，加入THF(2mL)中的实施例1F化合物(256mg，0.69mmol)溶液，导致形成大量的浅黄色沉淀。30分钟后，缓慢加入NH4Cl溶液(5mL，饱和)，然后缓慢加入EtOAc(10mL)。将混合物搅拌10分钟，然后分离水层，用EtOAc萃取。合并的有机层用盐水(3×)洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩。该粗制产物通过HPLC(标准相)纯化，即得标题化合物(352mg，90％产率)。
Figure A0381413700311
                         实施例1H
(11β，17α)-17-羟基-11-(4-(甲基氨基)苯基)-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-3-酮
将实施例1G化合物(36mg)溶解于0.3mL TsOH.H2O/CH2Cl2/THF(1.9g/3mL/3.8mL)溶液中；所得混合物于室温下搅拌3小时。将反应混合物滴加到NaHCO3溶液(2mL，饱和)中，然后用EtOAc(3×)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩。粗制产物通过制备的(preparative)TLC纯化，即得标题化合物(20mg，74％产率)。
                         实施例1I
(3β，5β，7α，12α)-7，12-二羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌 二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸甲酯
在1升的压力瓶中，将实施例1C化合物(15g，24.2mmol)和实施例1H化合物(11g，26.5mmol)与NaI(2.7g)、溶于400mL乙腈中的二异丙基乙胺(3.12g)混合。溶液加热至100℃。采用TLC(EtOAc∶己烷，60∶40)或HPLC验证反应的完成；16小时后未观察到起始物质。将反应混合物冷却至环境温度，并通过Celite硅藻土过滤；在真空中除去溶剂。该粗制材料用EtOAc(500mL)稀释，并用饱和的氯化铵溶液(2×100mL)洗涤。在真空中除去溶剂，将该粗制材料加到硅胶柱上，并用己烷/EtOAc(3∶2-1∶1-2∶3)洗脱。收集纯的级分，浓缩，即得14.5g(63.3％)的标题化合物。
                         实施例1J
(3β，5β，7α，12α)-7，12-二羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌 二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸
将实施例1I化合物(1.40g，1.62mmol)溶解于15mL的THF中；加入15mL的1N的LiOH水溶液，所得混合物于环境温度下搅拌5小时。在真空中除去溶剂，并加入足够的水以形成一相。用醋酸将溶液酸化，以沉淀出浅黄色的固体，该固体可以通过过滤收集，并用水洗涤数次。产物在冻干机上干燥过夜。生成1.35g(98％)的标题化合物。1H NMR(500MHz，MeOH)δ7.07-7.71(m，4H)，5.76(s，1H)，4.57(d，1H)，3.95(s，1H)，3.78(d，1H)，3.74(t，1H)，3.44(m，1H)，3.23(m，3H)，2.86(m，1H)，2.66(m，1H)，2.50(m，2H)，2.16-2.41(m，7H)，2.15(m，2H)，2.08(m，1H)，1.95(m，3H)，1.85(m，5H)，1.75(m，5H)，1.57(m，7H)，1.40(m，8H)，1.31(m，6H)，1.01(d，3H)，0.92(m，5H)，0.71(s，3H)，0.48(s，3H)，MS(ESI)m/e 850(M+H)+，848(M-H)-；对于C54H75NO7的准确分子量计算值：850.5616；实测值：850.5620.
(3β，5β，7α，12α)-7，12-二羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸的替换方式的合成。
实施例1K，实施例1A的可替换方案
(3α，5β，7α，12α)-7，12-二羟基-3-(p-甲苯磺酰基氧基)-24-胆烷酸甲酯
在2.5小时期间，-10℃下、向溶于吡啶(2250mL)中的胆酸甲酯(1000.0g，2.366mol)溶液中滴加溶于吡啶(650mL)中的对甲苯磺酰氯(654.2g，2.431mol)，并同时将反应温度维持在-10至-6℃。将该溶液于-10℃再混合12.5小时，用水(61.8g)稀释，并继续冷却。在43分钟期间将-7.5℃的混合物加入到MTBE(5L)和6NHCl(6.2L)的混合物中。分层，将有机相用7％NaHCO3(2L)、然后用2％NaCl(2L)、最终用pH7的磷酸盐缓冲液(2L)洗涤。将有机相过滤，用MTBE(3×200mL)减压浓缩，即得1608.93g非常粘稠的淡黄色油(95.3％效能调整产率)，直接用于下一步骤。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.79(d，J＝8.5Hz，2H)，7.32(d，J＝8.6Hz，2H)，4.40-4.31(m，1H)，3.97(br s，1H)，3.83(br s，1H)，3.68(s，3H)，2.60-2.50(m，1H)，2.45(s，3H)，2.43-1.34(m，25H)，0.99(d，J＝6.3Hz，3H)，0.88(s，3H)，0.69(s，3H)，MS(ESI)预期值＝576；基准值(base)＝594.2(576+NH4 +).
Figure A0381413700332
                 实施例1L，实施例1B的替换方式
(3β，5β，7α，12α)-7，12-二羟基-3-(2-羟基乙氧基)-24-胆烷酸甲酯
往含有残留MTBE(311.5g)的实施例1K的粗制次级(secondary)甲苯磺酰酯(1297.3g，2.25mol)中装入乙二醇(2516g，40.5mol)和吡啶(445g，5.63mol)，将该混合物于60℃加热15小时，然后于80℃加热4小时。将混合物冷却至30℃以下，加入乙酸异丙酯(5.3L)，然后加入1.15M HCl(3387mL)。分层，水层用乙酸异丙酯(3L)萃取。合并的有机相用10％盐水(5L)洗涤，然后浓缩成残余物。将残余物溶解于甲醇(15L)和水(7.5L)中，将混合物用庚烷(30L)萃取。加入额外的水(7.5L)，将甲醇/水溶液加热至45℃，然后用庚烷(2×30L)萃取。将甲醇/水相冷却至室温，然后加入二氯甲烷溶液(15L)和20％盐水(15L)，并分层。减压除去二氯甲烷溶液，往残余物中加入甲苯，将产物过滤并加以干燥，即得白色固体状的实施例1B化合物(462.2g，44％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ3.97(m，1H)，3.85(m，1H)，3.70(m，2H)，3.65(s，3H)，3.58(m，1H)，3.47(m，2H)，1.10-2.40(m，27H)，0.98(d，J＝6.3Hz，3H)，0.91(s，3H)，0.69(s，3H).MS(M+NH4)+＝484.3.
Figure A0381413700341
               实施例1M，实施例1C的替换方式
(3β，5β，7α，12α)-7，12-二羟基-3-[2-(碘)乙氧基]-24-胆烷酸甲酯
35分钟期间，往-11℃的溶于吡啶(67.5mL)中的得自实施例1B的伯醇(30.0g，64.2mmol)溶液中滴加吡啶(22.5mL)中的对甲苯磺酰氯(15.57g，81.5mmol)，同时将反应温度维持在-11至-8℃。反应物于-12℃再混合6小时，然后通过加入水(1.5g)终止反应。在5分钟期间，将-12.5℃的、终止了的反应混合物加入到叔丁基甲醚(180mL)和3N HCl(369mL)的混合物中，分层。有机层用7％NaHCO3(90mL)洗涤，然后用2％NaCl(90mL)洗涤，最后用pH7的缓冲溶液(90mL)洗涤。将有机层减压浓缩，并用MTBE(90mL)、然后用丙酮(90mL)收集，即得51.26g粘稠的油。加入丙酮(386mL)，然后加入碘化钠(14.45g，96.4mmol)，反应混合物在氮气下加热回流，直到甲苯磺酸盐消耗完。往冷却的反应混合物中加入MTBE(200mL)和H2O(200mL)，分层。有机层用H2O(150mL)洗涤，浓缩并用CH3CN收集。通过过滤将产物和CH3CN分离，并干燥，即得29.51g(76.9％)的标题化合物。
Figure A0381413700351
               实施例1N，实施例1H的替换方式
(11β，17α)-17-羟基-11-(4-(甲基氨基)苯基)-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-3-酮
将实施例1G化合物(36mg)溶解于0.3mL TsOH.H2O/CH2Cl2/THF(1.9g/3mL/3.8mL)溶液中；所得混合物于室温下搅拌3小时。反应混合物滴加到NaHCO3溶液(2mL，饱和)中，并用EtOAc(3次)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥并加以浓缩。粗制产物通过制备性TLC纯化，即得标题化合物(20mg，74％产率)。
               实施例1O，实施例1H的另一替换方式
(11β，17α)-17-羟基-11-(4-(甲基氨基)苯基)-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-3-酮
往CH2Cl2(500mL)中的(11β，17α)-17-羟基-11-(4-(二甲基氨基)苯基)-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-3-酮(200g，0.446mol)中，加入已经用Na2SO4干燥的、溶于CH2Cl2(1250mL)中的NMO(260g，2.22mol)滤液，所得溶液在N2下冷却至-10℃。在25分钟内滴加溶于CH2Cl2(150mL)中的TPAP(16.1g，0.046mol)溶液，所得溶液于-10℃混合。在20min内通过加料漏斗加入10％亚硫酸氢钠(2100mL)终止反应。然后将溶液升温至室温，再搅拌10min。加入EtOAc(3.5L)和H2O(2L)并分层。水层用EtOAc(2L)反萃取，合并的有机相用pH7的磷酸盐缓冲液(2×4L)洗涤。有机层通过Celite硅藻土过滤，并用碳(Darco G-60，46.1g)脱色。浓缩产物溶液，使产物沉淀。产物过滤、干燥，即得130.17g的甲酰胺(63.0％)。1HNMR(CDCl3，400MHz)δ8.47(s，1H)，7.22(d，J＝8.1Hz，2H)，7.09(d，J＝8.7Hz，2H)，5.80(s，1H)，4.44(d，J＝7.2Hz，1H)，3.31(s，3H)，2.85-2.2(m，11H)，1.92(s，1H)，2.1-1.3(m，6H)，0.53(s，3H).样品还含有约20mole％EtOAc。MS(ESI)，M+1＝444，M-1＝442.
往15-20℃的溶于甲醇(2.6L)中的甲酰胺(130.17g，0.265mol)溶液中加入5℃的HCl水溶液(696mL浓HCl和1440mL H2O)。反应物升温至室温，混合40小时。反应混合物冷却至15℃，加入10％Na2CO3溶液调pH。产物于pH3(12℃下最终pH＝7.05)时开始沉淀。过滤分离产物，然后将湿滤饼溶解于CH2Cl2(700mL)中，分层，有机层在真空下浓缩成稠的残余物。将溶剂换为CH3CN，然后将产物过滤并干燥，即得实施例1H化合物(104.2g，85.4％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ6.98(d，J＝8.1Hz，2H)，6.56(d，J＝8.7Hz，2H)，5.77(s，1H)，4.35(d，J＝6.9Hz，1H)，2.83(s，3H)，2.85-2.1(m，10H)，1.91(s，3H)，2.1-1.3(m，6H)，0.53(s，3H).样品还含有约80mole％CH3CN。MS(ESI)，M+1＝416，M-1＝414.
                 实施例1P，实施例1I的替换方式
(3β，5β，7α，12α)-7，12-二羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基
           -4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}24-胆烷酸甲酯
将N，N-二甲基乙酰胺(20mL)中的实施例1H化合物(4.0g，9.63mmol)、实施例1M的一价碘化物(7.44g，12.9mmol)、二异丙基乙胺(1.66g，12.9mmol)在氮气下加热至80℃18h。冷却的反应混合物用乙酸异丙酯(50mL)稀释，并用10％NH4Cl(50mL)洗涤，然后用pH7的磷酸盐缓冲液(50mL)洗涤。将有机相真空浓缩，粗制产物在二氧化硅上层析(50％EtOAc/庚烷至100％EtOAc)，即得标题化合物(5.95g，76.8％)。
              实施例1Q，实施例1I的另一替换方式
(3β，5β，7α，12α)-7，12-二羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基
         -4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}24-胆烷酸甲酯
N，N-二甲基乙酰胺(20.7mL)中的(11β，17α)-17-羟基-11-(4-(二甲基氨基)苯基)-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-3-酮(4.14g，9.63mmol)、实施例1L的一价碘化物(7.44g，12.9mmol)、二异丙基乙胺(1.66g，12.9mmol)在氮气下加热至80℃ 19h。冷却的反应混合物用乙酸异丙酯(50mL)稀释，并用10％NH4Cl(50mL)洗涤，然后用pH7的磷酸盐缓冲液(50mL)洗涤。将有机相真空浓缩，该粗制产物经二氧化硅色谱(50％EtOAc/庚烷至100％EtOAc)纯化，即得标题化合物(4.96g，60.6％)。
             实施例1R，实施例1I的另一替换方式
(3β，5β，7α，12α)-7，12-二羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基
          -4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}24-胆烷酸甲酯
得自实施例1B的伯醇(8.69g，18.62mmol)溶解于CH2Cl2(87mL)，并加入N，N-二异丙基乙胺(6.14g，47.52mmol)，将溶液冷却至-45至-55℃。在2.5h期间、在-52℃至-47℃加入三氟甲磺酸酐(5.31g，18.82mmol)。溶液于约-48℃混合47min。然后加入(11β，17α)-17-羟基-11-(4-(二甲基氨基)苯基)-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-3-酮(5.00g，11.6mmol)，混合物升温至-6℃，混合88h。溶液用10％NH4Cl溶液洗涤，在真空中除去溶剂。将残余物溶解于乙腈(50mL)，在真空中除去溶剂；加入乙腈，即得约10mL乙腈终体积/g苯胺。往溶液中加入N，N-二异丙基乙胺(2.27g，17.56mmol)和NaI(5.24g，34.96mmol)，混合物加热回流并混合45h。冷却微混浊的溶液，并加入CH2Cl2(20mL)和EtOAc(50mL)，溶液用5％NH4Cl溶液洗涤，然后用20％NaCl溶液洗涤。通过硅胶色谱(EtOAc/庚烷梯度)纯化，即得标题化合物(82.7％)。
Figure A0381413700381
            实施例1S，实施例1J的替换方式
(3β，5β，7α，12α)-7，12-二羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌
       二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸
5℃的EtOH(173mL)中的实施例1I化合物(17.28g，20.0mmol，91％化学效能，因此是15.72g，18.2mmol)溶液以一定的速率添加3N KOH(33.3mL，100mmol)，以将内部温度维持在＜7℃。反应物于5℃搅拌17小时。反应混合物用3N HCl(33.3mL，100mmol)中和，并同时将内部温度维持在＜10℃(最终pH用0.2mL的3N KOH从4.63调整至4.87)。加入3N HCl后数分钟反应混合物结晶。将反应混合物升温至环境温度，加入种子(20mg的籽晶)，升温至40℃ 3小时，缓慢冷却至环境温度，再搅拌16小时。将浆料过滤，洗涤并干燥，即得14.30g(92.4％)的标题化合物。
                        实施例2
(3β，7α，12α)-7，12-二羟基-3-(2-(4-((11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯
           -11-基)-2-甲基苯氧基)乙氧基)-24-胆烷酸
                        实施例2A
                 1-烯丙氧基-4-溴-2-甲基-苯
往4-溴-2-甲基苯酚(2.0g，10.7mmol)的THF(100mL)溶液中加入固体Cs2CO3(3.8g，11.7mmol)和烯丙基溴化物(1.9mL，21.4mmol)。反应混合物于室温下搅拌20小时。搅拌结束时，溶液用NH4Cl水溶液稀释，并用乙酸乙酯萃取两次。合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，真空浓缩，并通过柱色谱(己烷中0至100％乙酸乙酯)纯化，即得1.1g(45％)的白色固体。
Figure A0381413700391
                        实施例2B
(3β，7α，12α)-7，12-二羟基-3-(2-((甲基磺酰基)氧基)乙氧基)-24-胆烷酸甲酯
实施例1B化合物(1.0g，2.1mmol)溶解于THF(21mL)中并冷却至0℃。往冷却的溶液中加入甲基磺酰氯(0.25mL，3.21mmol)，然后滴加三乙胺(0.45mL，3.21mmol)。反应溶液升温至室温，并搅拌过夜。加入NH4Cl饱和水溶液，并用乙酸乙酯萃取两次。有机相用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，并通过柱色谱(1∶1己烷∶乙酸乙酯)纯化。生成产物429mg(37％)。
Figure A0381413700392
                         实施例2C
(11β，17α)-11-(4-(烯丙氧基)-3-甲苯基)-17-羟基-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-3-酮
往圆底烧瓶中加入镁粉(916mg，38mmol)，火焰干燥。冷却至室温时，加入碘晶体。往合并的固体中加入30mL THF，并将悬浮液浸入水浴。然后滴加实施例2A中制备的化合物(8.6g，38mmol，为10-30mL THF中的溶液)。在加入溴化物15分钟内发生起始反应，由碘颜色消失来指示。反应溶液冷却至0℃，并一次性加入CuI(3.6g，19mmol)。2分钟后，迅速加入溶解于10mL THF的实施例1F的环氧化物溶液(2.8g，7.5mmol)。于0℃搅拌1小时后，用NH4Cl水溶液终止反应，并用乙酸乙酯萃取。有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO4)并浓缩。粗制残余物溶解于THF(150mL)，并加入2M HCl(75mL)。反应混合物于室温下搅拌1小时，加入NaHCO3水溶液中和反应物，所得溶液用乙酸乙酯萃取。有机相用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，并通过柱色谱(1∶1己烷∶乙酸乙酯)纯化。产物产率为429mg(37％)。并通过柱色谱(4∶1己烷∶乙酸乙酯)纯化。反应产率为737mg(21％)。
Figure A0381413700401
                     实施例2D
(11β，17α)-17-羟基-11-(4-羟基-3-甲苯基)--17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-3-酮
实施例2C中所述的化合物(737mg，1.6mmol)溶解于二氯甲烷(8mL)中。往溶液中加入苯基硅烷(0.4mL，3.2mmol)和Pd(Ph3)4(186mg，0.2mmol)，此时反应混合物变黑。室温下搅拌1小时后，将溶液用盐水稀释，并用乙酸乙酯萃取。合并的有机级分在MgSO4上干燥，浓缩，并通过柱色谱(70∶30己烷∶乙酸乙酯)纯化，即得369mg(55％)白色固体产物。
Figure A0381413700402
                         实施例2E
(3β，7α，12α)-7，12-二羟基-3-(2-(4-((11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯
             -11-基)-2-甲基苯氧基)乙氧基)-24-胆烷酸甲酯
合并实施例2D的苯酚(252mg，0.6mmol)和实施例2B的甲磺酸酯(390mg，0.7mmol)，溶解于THF(6mL)中。往溶液中加入Cs2CO3(600mg，1.8mmol)和nBu4NI(450mg，1.2mmol)，所得的混合物升温至55℃24小时。冷却至室温时，混合物用盐水稀释，并用乙酸乙酯萃取。有机级分经MgSO4干燥，真空浓缩，并通过柱色谱(70∶30己烷∶乙酸乙酯)纯化。偶联的产率是480mg(93％)。
                         实施例2F
(3β，7α，12α)-7，12-二羟基-3-(2-(4-((11β，17β)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯
             -11-基)-2-甲基苯氧基)乙氧基)-24-胆烷酸
实施例2E中所述的酯溶解于THF(2mL)和甲醇(2mL)的混合物中。往混合物中加入LiOH(1.4mL的1M水溶液)。所得混合物于室温下搅拌2小时。反应混合物用水稀释，并用二乙醚洗涤。水相级分用1M H3PO4酸化，并用乙酸乙酯萃取。合并的有机级分经MgSO4干燥，真空浓缩。粗制的白色物体不进行进一步纯化。1H NMR(300mHz，CDCl3)：δ6.95(d，J＝2.03Hz，1H)，6.84(m，1H)，6.71(d，J＝8.48Hz，1H)，5.76(s，1H)，4.34(d，J＝6.10Hz，1H)，4.06(m，2H)，3.99(s，1H)，3.85(d，J＝2.37，1H)，3.72(dd，J＝4.58，6.27Hz，2H)，3.65(d，J＝2.71Hz，1H)，2.75(m，2H)，2.59(m，4H)，2.36(m，12H)，2.19(s，3H)，1.97(m，4H)，1.90(m，3H)，1.54(m，19H)，1.01(m，3H)，0.90(s，3H)，0.71(s，3H)，0.53(s，3H)，MS(ESI)m/e 851.6(M+H)+，849.6(M-H).
Figure A0381413700411
                         实施例3
(3β，5β，7α，12α)-7，12-二羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌
         二烯-11-基]-2-氟苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸
                         实施例3A
         N-叔丁氧羰基-N-甲基-2-氟-4-溴苯胺
用4-溴-2-氟苯胺代替4-溴苯胺，根据实施例1D的方法制备该化合物。
Figure A0381413700422
                         实施例3B
2-氟-4-((11R，13S，17S)-7-羟基-13-甲基-17-丙-1-炔基-1，2，6，7，8，11，12，13，14，15，16，17-
     十二氢螺[环戊[α]菲-3，2’-[1，3]二氧戊环]-11-基)苯基(甲基)氨基甲酸叔丁酯
用实施例3A的化合物代替实施例1D的化合物，使用实施例1G的方法制备该化合物(95％产率)。1H NMR(300mHz，DMSO)δ7.23(t，J＝8.4Hz，1H)，7.06(m，1H)，7.02(m，1H)，5.07(s，1H)，4.26(d，J＝6.3Hz，1H)，4.17(m，1H)，3.91-3.70(m，4H)，3.08(s，3H)，2.33-0.98(m，16H)，1.83(s，3H)，1.29(s，9H)，0.32(s，3H)；MS(ESI)m/e 578(M+H)+.
                         实施例3C
(11β，17α)-(3-氟-4-(甲基氨基)苯基)-17-羟基-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-3-酮
往0℃ CH2Cl2(2mL)中的实施例3B化合物(490mg，0.85mmol)溶液中滴加CH2Cl2中的TFA溶液(6mL 50％溶液)。所得混合物于0℃搅拌35分钟。通过滴加NaHCO3溶液(饱和)中和反应混合物，然后用EtOAc萃取(3次)。合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，并浓缩。粗制产物通过硅胶色谱(33％乙酸乙酯/己烷)纯化，即得标题化合物(244mg，66％产率)。1H NMR(300mHz，CDCl3)δ6.84-6.76(m，2H)，6.64(t，J＝8.3Hz，1H)，5.77(s，1H)，4.33(d，J＝6.9Hz，1H)，2.87(s，3H)，2.81-1.30(m，18H)，1.89(s，3H)，0.55(s，3H)，MS(ESI)m/e 434(M+H)+，432(M-H)-.
                             实施例3D
(3β，5β，7α，12α)-7，12-二羟基-3-{ 2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌
         二烯-11-基]-2-氟苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸甲酯
在密封管中，将实施例1C化合物(79mg，0.13mmol)、实施例3C化合物(55mg，0.13mmol)、二异丙基乙胺(25mg，0.193mmol)和CH3CN(1.9mL)中的NaI(15mg，0.16mmol)的混合物于115℃加热40小时。反应混合物吸进EtOAc中，用NH4Cl溶液和盐水洗涤。有机层经Na2SO4干燥，浓缩。粗制产物通过硅胶色谱(40％乙酸乙酯/己烷)纯化，即得标题化合物(68mg，61％产率)。1H NMR(300mHz，CDCl3)δ6.84-6.74(m，3H)，5.77(s，1H)，4.34(d，J＝6.9Hz，1H)，3.98(m，1H)，3.83(m，1H)，3.67(s，3H)，3.53-3.32(m，5H)，2.91(s，3H)，2.80-1.10(m，44H)，1.89(s，3H)，0.98(d，J＝6.3Hz，3H)，0.89(s，3H)，0.69(s，3H)，0.55(s，3H)；MS(ESI)m/e 882(M+H)+，880(M-H)-.
                       实施例3E
(3β，5β，7α，12α)-7，12-二羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌
             二烯-11-基]-2-氟苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸
实施例3D的化合物(360mg，0.408mmol)溶解于6mL THF和CH3OH(1∶1)中。然后于0℃加入2.5mL LiOH溶液(1M，水溶液)。所得混合物于环境温度下搅拌5小时。在真空中除去有机溶剂，加入足够的水形成一相。溶液用醋酸进行酸化，以沉淀浅黄色的固体，所述固体用EtOAc萃取(3次)。合并的有机层用盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空浓缩，即得标题化合物(350mg，98％产率)。1H NMR(300mHz，CDCl3)δ 6.83-6.74(m，3H)，5.78(s，1H)，4.34(d，J＝7.2Hz，1H)，3.98(m，1H)，3.84(m，1H)，3.52-3.33(m，5H)，2.92(s，3H)，2.80-1.10(m，44H)，1.89(s，3H)，0.99(d，J＝6.0Hz，3H)，0.89(s，3H)，0.69(s，3H)，0.55(s，3H)；MS(ESI)m/e 868(M+H)+，866(M-H)-.
                         实施例4
(3β，5β，7α，12α)-7，12-二羟基-3-{2-[{4-[(11β，16α，17α)-17-羟基-16-甲基-3-氧-17-丙-1-
         炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸
                     实施例4A
(5’R，10’R，13’S，16’R)-13’，16’-二甲基-1’，2’，6’，7’，8’，12’，13’，14’，15’-九氢-17’H-螺[1，3-
         二氧戊环-2，3’-[5，10]环氧环戊[α]菲]-17’-酮
实施例1E的化合物(3.0g，9.1mmol)溶解于30mL THF，冷却至-78℃。往冷却的溶液中加入LiHMDS(1.0M THF溶液，9.5mL)，所得混合物于-78℃搅拌1小时。通过注射器迅速加入MeI(6.0mL，91mmol)，20分钟内将溶液升温至室温。加入NH4Cl水溶液终止反应，并用乙酸乙酯萃取两次。合并的有机层用盐水洗涤，干燥(MgSO4)并真空浓缩，即得3.03g(97％)标题化合物，不经进一步纯化即使用。
                            实施例4B
    (5’R，10’R，13’S，16’R，17’S)-13’，16’-二甲基-17’-丙-1-炔基
    -1’，2’，6’，7’，8’，12’，13’，14’，15’，17’-九氢-17’H-螺[1，3-二氧戊环-2，3’-[5，10]环氧环戊
                          [α]菲]-17’-醇
实施例4A的化合物(3.03g，8.80mmol)溶解于THF(35mL)，冷却至0℃。一次性加入丙炔基溴化镁(0.5M in THF，35mL)。反应混合物于0℃搅拌2.5小时。搅拌结束时，用NH4Cl水溶液终止反应，并用乙酸乙酯萃取。有机级分用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，并真空浓缩。粗制残余物通过柱色谱(70∶30己烷∶乙酸乙酯)纯化，即得1.0g(29％)标题化合物。
                             实施例4C
(11β，16α，17α)-17-羟基-16-甲基-11-(4-(甲基氨基)苯基)-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-3-
                                      酮
往火焰干燥的三颈圆底烧瓶(装有回流冷凝器、玻璃塞和橡胶隔板)中加入RiekeMg(1.0M in THF，13mL)和20mL THF。然后滴加实施例1D所述的化合物(1.86g，6.50mmol)。加入少部分的溴化物，然后用加热枪加热烧瓶直至反应开始。按比例加入其余的溴化物，使反应混合物回流，然后冷却。完成加入时，将反应溶液冷却至室温，并在冰浴中冷却。一次性加入CuI(1.23，6.50mmol)。2分钟后，迅速加入6mL THF中的实施例4β所述的化合物溶液(1.0g，2.6mmol)。0℃搅拌1小时，然后用NH4Cl水溶液终止反应，并用乙酸乙酯萃取。有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩。粗制残余物溶解于7.6mL THF和6mL CH2Cl2中。往溶液中加入TsOH(3.8g，19.9mmol)，所得溶液于室温搅拌3h。加入饱和NaHCO3水溶液中和反应，所得溶液用乙酸乙酯萃取。有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO4)浓缩并通过柱色谱(70∶30己烷∶乙酸乙酯)纯化。以34％的产率(250mg)分离得到标题化合物。
                         实施例4D
(3β，5β，7α，12α)-7，12-二羟基-3-{2-[{4-[(11β，16α，17α)-17-羟基-16-甲基-3-氧-17-丙-1-
         炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸甲酯
在压力管中，将实施例4C所述的苯胺(250mg，0.581mmol)和实施例1C的甲苯磺酸酯(361mg，0.581mmol)合并，并溶解于8mL乙腈中。往溶液中加入NaI(104mg，0.696mmol)和Hünig’s碱(0.2mL，0.873mmol)。反应混合物于60℃搅拌2天。冷却至室温，溶液用盐水稀释，并用乙酸乙酯萃取。有机级分用盐水洗涤，干燥(MgSO4)并真空浓缩。粗制残余物通过柱色谱(3∶2己烷∶乙酸乙酯)纯化，即得215mg(42％)的标题化合物。
                         实施例4E
(3β，5β，7α，12α)-7，12-二羟基-3-{2-[{4-[(11β，16α，17α)-17-羟基-16-甲基-3-氧-17-丙-1-
         炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸
实施例4D所述的化合物(215mg，0.244mmol)溶解于3mL THF和3mL MeOH。然后加入LiOH水溶液(1.0M，1.0mL)，所得溶液于室温搅拌3小时。碱溶液用Et2O萃取1次，用1N H3PO4酸化，并用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯级分用Na2SO4干燥并真空浓缩。白色固体不需要进一步纯化。1H NMR(500mHz，MeOH)δ7.07-7.71(m，4H)，5.76(s，1H)，4.4(d，1H)，3.95(s，1H)，3.78(bs，1H)，3.74(t，1H)，3.44(m，4H)，2.86(m，1H)，2.66(m，1H)，2.50(m，2H)，2.16-2.41(m，9H)，2.15(m，2H)，2.08(m，1H)，1.9(m，3H)，1.85(m，5H)，1.75(m，5H)，1.57(m，7H)，1.40(m，8H)，1.31(m，6H)，1.05(d，3H)，1.01(d，3H)，0.81(s，3H)，0.71(s，3H)，0.6(s，3H)；MS(ESI)m/e 864(M+H)+，863(M-H)-；对于C55H78NO7的准确分子量计算值：864.5769；实测值：864.5773.
                         实施例5
     (3β，5β，7α，12α)-7-[(2-氨根(ammonio)乙氧基)羰基氧基]-12-羟基-3-
{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]
                     乙氧基}-24-胆烷酸
                         实施例5A
(3β，5β，7α，12α)-7-(4-硝基苯氧基羰基氧基)-12-羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-
         氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸甲酯
往充分搅拌的0℃吡啶(4.1mL)中的实施例1I化合物(1.20g，1.39mmol)溶液中加入4-硝基苯基氯甲酸酯(698mg，3.47mmol)，并升温至室温过夜。反应混合物在H3PO4(1N)和EtOAc之间分离。有机层在Na2SO4上干燥并浓缩。粗制产物通过硅胶色谱(50％乙酸乙酯/己烷)纯化，即得标题化合物(0.70g，49％产率)。
                         实施例5B
(3β，5β，7α，12α)-7-[2-(叔丁氧基羰基氨基)乙氧基羰基氧基]-12-羟基-3- {2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]
                     乙氧基}-24-胆烷酸甲酯
实施例5A化合物(83mg，0.081mmol)、2-(叔丁氧基-羰基氨基)乙醇(26mg，0.161mmol)、DMAP(10mg)和乙腈(1mL)中的Hunig’s碱(0.1mL)的混合物于90℃搅拌过夜。反应混合物在H2O和EtOAc之间分离。有机相经Na2SO4干燥并真空浓缩。残余物通过硅胶层析(45％乙酸乙酯/己烷)纯化，即得标题化合物(73mg，86％产率)。
                     实施例5C
(3β，5β，7α，12α)-7-(2-氨基乙氧基)羧基-12-羟基-3-{2-[{4-[(11β，17β)-17-羟基-3-氧
     -17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸
往实施例5B的化合物(20mg，0.019mmol)中加入HCl的1，4-二氧六环(4M，0.3mL)溶液。所得溶液于室温搅拌6小时。反应混合物通过HPLC(反相)纯化，即得标题化合物(5mg，28％产率)。1H NMR(300mHz，CD3OD)δ7.33-7.21(m，2H)，7.18-7.07(m，2H)，5.75(s，1H)，4.75(m，1H)，4.51(d，J＝7.2Hz，1H)，4.42-4.31(m，1H)，4.30-4.23(m，1H)，3.98(m，1H)，3.71-1.07(m，52H)，3.14(s，3H)，1.86(s，3H)，1.02(d，J＝6.6Hz，3H)，0.93(s，3H)，0.72(s，3H)，0.51(s，3H)；MS(ESI)m/e 937(M+H)+，935(M-H)-.
                     实施例6
(3β，5β，7α，12α)-7-[(3-氨根丙氧基)羰基氧基]-12-羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基
     -3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸
Figure A0381413700501
                         实施例6A
(3β，5β，7α，12α)-7-[3-(叔丁氧基羰基)氨基丙氧基羰基氧基]-12-羟基-3- {2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]
                   乙氧基}-24-胆烷酸甲酯
用3-(叔丁氧基羰基氨基)丙醇代替2-(叔丁基羰基氨基)乙醇，按照实施例5B的方法制备标题化合物(65％)。
Figure A0381413700502
                         实施例6B
(3β，5β，7α，12α)-7-[3-(叔丁氧基羰基)氨基丙氧基羰基氧基]-12-羟基-3- {2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]
                      乙氧基}-24-胆烷酸
化合物5(46mg，0.043mmol)溶解于2.5mLTHF和CH3OH(1∶1.5)中。然后加入0℃的0.8mL LiOH溶液(1M，水溶液)。所得混合物于环境温度搅拌过夜。在真空中除去有机溶剂，加入足够的水形成一相。溶液用H3PO4(1M)酸化，以沉淀浅黄色的固体。所述固体用EtOAc萃取(2次)。合并的有机层用盐水洗涤，并经Na2SO4干燥。真空浓缩，即得标题化合物(46mg，100％产率)。
                         实施例6C
(3β，5β，7α，12α)-7-[(3-氨根丙氧基)羰基氧基]-12-羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基
     -3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸
0℃下，往实施例6B的化合物(24mg，0.023mmol)中加入HCl的1，4-二氧六环溶液。所得混合物于0℃搅拌0.5小时，然后于室温搅拌0.5小时。反应混合物通过HPLC(反相)纯化，即得标题化合物(5mg，23％产率)。1H NMR(300mHz，CD3OD)δ7.46-7.36(m，4H)，5.77(s，1H)，4.73(m，1H)，4.57(d，J＝6.8Hz，1H)，4.31-4.21(m，1H)，4.21-4.10(m，1H)，3.98(m，1H)，3.82-1.06(m，54H)，3.24(s，3H)，1.86(s，3H)，1.02(d，J＝6.4Hz，3H)，0.95(s，3H)，0.73(s，3H)，0.49(s，3H)；MS(ESI)m/e 951(M+H)+，949(M-H)-.
                         实施例7
(3β，5β，7α，12α)-7-磷酰氧基-12-羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基
         -4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸
Figure A0381413700521
                     实施例7A
(3β，5β，7α，12α)-7-二烯丙基磷酰氧基-12-羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17- 丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸甲酯
实施例1I的化合物溶解于THF并冷却至0℃。滴加正丁基锂(2.5M己烷溶液；1.5当量)；白色固体形成并分散，溶液变成浅黄色。加入二烯丙基磷酰氯(2当量)，使颜色迅速褪去；溶液缓慢升温至环境温度，搅拌过夜。反应物用碳酸氢盐水溶液稀释，并用乙酸乙酯萃取。有机层干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。粗制材料通过柱色谱纯化。
Figure A0381413700522
                         实施例7B
(3β，5β，7α，12α)-7-二烯丙基磷酰氧基-12-羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-
        丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸
实施例7A的化合物溶解于THF中；加入LiOH水溶液，所得混合物于环境温度下搅拌3小时。加入磷酸水溶液(1N)终止反应，并用乙酸乙酯萃取。合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤并减压浓缩。粗制材料不加进一步纯化而直接使用。
                     实施例7C
(3β，5β，7α，12α)-7-磷酰氧基-12-羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基
         -4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸
实施例7B的化合物溶解于THF；加入三苯基膦(0.5当量)、甲酸(2当量)、正丁基胺(2当量)和四(三苯基膦)钯(0)(0.3当量)，所得混合物于环境温度下搅拌3小时。真空下除去溶剂；残余物移入1N NaOH水溶液中，并用二氯甲烷萃取。水相用磷酸水溶液(1N)酸化；产物通过反相HPLC纯化。
                     实施例8
(3β，5β，7α，12α)-7-磷酰氧基甲氧基-12-羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙 -1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸
Figure A0381413700532
                         实施例8A
(3β，5β，7α，12α)-7-甲基硫甲氧基-12-羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-
     炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸甲酯
实施例1I的化合物溶解于吡啶，并在冰浴中冷却；加入甲基硫氯甲基(1.2当量)，混合物升温至环境温度，然后加热至90℃过夜。真空中除去溶剂；残余物在磷酸水溶液(1N)和乙酸乙酯之间分离。有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。粗制材料通过柱色谱纯化。
                         实施例8B
(3β，5β，7α，12α)-7-氯甲氧基-12-羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基
         -4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸甲酯
实施例8A的化合物溶解于二氯甲烷；加入磺酰氯(1.1当量)，混合物于室温下搅拌直至起始物质消耗完。加入碳酸氢钠水溶液终止反应；移除有机层，水相用二氯甲烷重新萃取。合并的有机相干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。该粗制材料不需要进一步纯化而使用。
Figure A0381413700542
                     实施例8C
(3β，5β，7α，12α)-7-二烯丙基磷酰氧基甲氧基-12-羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-
     氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸甲酯
实施例8B的化合物溶解于THF。加入二烯丙基磷酸银，混合物加热回流过夜。冷却至环境温度之后，使粗制反应混合物通过硅胶塞(plug)除去盐。
Figure A0381413700551
                     实施例8D
(3β，5β，7α，12α)-7-二烯丙基磷酰氧基甲氧基-12-羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-
     氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸
实施例8C的化合物溶解于THF；加入LiOH的水溶液，所得混合物于室温搅拌3小时。加入磷酸水溶液(1N)终止反应，并用乙酸乙酯萃取。粗制材料不需进一步纯化而使用。
                     实施例8E
(3β，5β，7α，12α)-7-磷酰氧基甲氧基-12-羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙
     -1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸
实施例8D的化合物溶解于THF；加入三苯基膦(0.5当量)、甲酸(2当量)、正丁基胺(2当量)和四(三苯基膦)钯(0)(0.3当量)，所得混合物于环境温度下搅拌3小时。真空下除去溶剂；残余物移入1N NaOH水溶液，并用二氯甲烷萃取。水相用磷酸水溶液(1N)酸化；产物通过反相HPLC纯化。
Figure A0381413700561
                     实施例9
(3β，5β，7α，12α)-7-(4-氨根丁酰氧基)-12-羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-
     丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸
                     实施例9A
(3β，5β，7α，12α)-7-(4-叔丁氧基羰基氨基丁酰氧基)-12-羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-
     羟基-3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸甲酯
实施例8B的化合物溶解于DMF；加入4-叔丁氧基羰基氨基丁酸(1.3当量)和1.2当量的Cs2CO3。所得混合物于环境温度下搅拌过夜。反应混合物在磷酸水溶液(1N)和乙酸乙酯之间分离。有机相干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。在硅胶上使用己烷中的梯度乙酸乙酯纯化该粗制材料，即得标题化合物。
Figure A0381413700571
                     实施例9B
(3β，5β，7α，12α)-7-(4-叔丁氧基羰基氨基丁酰氧基)-12-羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-
     羟基-3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸
实施例9A的化合物溶解于THF；加入LiOH水溶液，所得混合物于环境温度搅拌3小时。加入磷酸水溶液(1N)终止反应，并用乙酸乙酯萃取。粗制材料不需进一步纯化而使用。
                     实施例9C
(3β，5β，7α，12α)-7-(4-氨根丁酰氧基)-12-羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-
     丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸
实施例9B的化合物用HCl的二氧六环溶液(4N)处理。所得混合物于室温搅拌1小时。反应混合物通过HPLC(反相)纯化，即得标题化合物。
Figure A0381413700572
                     实施例10
(3β，5β，7α，12α)-7-(5-氨根戊酰氧基)-12-羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-
     丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸
Figure A0381413700581
                     实施例10A
(3β，5β，7α，12α)-7-(5-叔丁氧基羰基氨基戊酰氧基)-12-羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-
     羟基-3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸甲酯
实施例8B的化合物溶解于DMF；加入4-叔丁氧基羰基氨基丁酸(1.3当量)和1.2当量的Cs2CO3。所得混合物于环境温度下搅拌过夜。反应混合物在磷酸水溶液(1N)和乙酸乙酯之间分离。有机相干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。在硅胶上使用己烷中的梯度乙酸乙酯纯化该粗制材料，即得标题化合物。
Figure A0381413700582
                     实施例10B
(3β，5β，7α，12α)-7-(5-叔丁氧基羰基氨基戊酰氧基)-12-羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-
     羟基-3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸
实施例9A的化合物溶解于THF；加入LiOH水溶液，所得混合物于环境温度搅拌3小时。加入磷酸水溶液(1N)终止反应，并用乙酸乙酯萃取。粗制材料不需进一步纯化而使用。
                         实施例10C
(3β，5β，7α，12α)-7-(5-氨根戊酰氧基)-12-羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-
         丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸
实施例9B的化合物用HCl的二氧六环溶液(4N)处理。所得混合物于室温搅拌1小时。反应混合物通过HPLC(反相)纯化，即得标题化合物。
Figure A0381413700591
                         实施例11
(3β，5β，7α，12α)-7-(4-氨根丁酰氧基甲氧基)-12-羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-
         氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸
Figure A0381413700592
                         实施例11A
                 4-叔丁氧基羰基氨基丁酸氯甲酯
4-N-叔丁氧基羰基氨基丁酸(5mmol)溶解于20mL DMF；加入10mmol三乙基胺和20mmol氯碘甲烷，所得混合物于环境温度下搅拌24hr。反应混合物在乙酸乙酯和水之间分离；有机层用水和盐水洗涤。所得溶液干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。在硅胶上使用己烷中的梯度乙酸乙酯纯化该粗制材料，即得标题化合物。
Figure A0381413700601
                         实施例11B
(3β，5β，7α，12α)-7-(4-叔丁氧基羰基氨基丁酰氧基甲氧基)-12-羟基-3- {2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]
                     乙氧基}-24-胆烷酸甲酯
实施例1I的化合物(1mmol)和等摩尔量的1mL乙腈中的实施例11A的化合物合并。加入二异丙基乙胺(2当量)和NaI(20mg)，所得混合物于90℃加热20hr。反应混合物在乙酸乙酯和水之间分离；有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。在硅胶上使用己烷中的梯度乙酸乙酯纯化该粗制材料，即得标题化合物。
Figure A0381413700602
                        实施例11C
(3β，5β，7α，12α)-7-(4-叔丁氧基羰基氨基丁酰氧基甲氧基)-12-羟基-3- {2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]
                     乙氧基}-24-胆烷酸
实施例11B的化合物溶解于THF；加入LiOH水溶液，所得混合物于环境温度搅拌3小时。加入磷酸水溶液(1N)终止反应，并用乙酸乙酯萃取。粗制材料不需进一步纯化而使用。
                         实施例11D
(3β，5β，7α，12α)-7-(4-氨根丁酰氧基甲氧基)-12-羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-
     氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}-24-胆烷酸
实施例11C的化合物用二噁烷中的HCl溶液(4N)处理。所得混合物于室温搅拌20min。反应混合物通过HPLC(反相)纯化，即得标题化合物。
生物学数据
获得肝脏选择性化合物的一种策略是将它们和胆汁酸如胆酸偶联。Kramer和Wess(Kramer，W.：Wess，G.；“Bile acid transport systems as pharmaceutical targets”；Eur.J.Clin.Invest.1996，26，715-732)对这种策略作了评论。例如，已经制备了带有甲状腺激素T3和HMG-CoA还原酶抑制剂的胆汁酸偶联物。两种类型的偶联物都能够降低血清胆固醇水平，同时将非必要的外周效应降至最小。这些结果表明胆汁酸偶联物有时可以是肝脏选择性的，能够将治疗有效浓度的药物递送到肝脏中。胆汁酸偶联物一个有诱惑力的方面是它们从肠道吸收，排出到胆汁中，并且可以多次重吸收。因此，胆汁酸可以极为有效地维持释放递送机制。但是，胆汁酸偶联物必须小心设计。母药和胆汁酸上连接位点的选择必须使每一部分都赋予连接物质所需的特征。必须选择连接体，并和母药分子相结合，以便保留适当水平的所需生化活性(例如酶活性或受体结合亲和性)和选择性。同样，必须选择胆汁酸组分，保证连接体的结合能够使胆汁酸将偶联物选择性地导向肝脏。另外，为了生产可经口递送的试剂，所得偶联物的总体特征必须优化，以通过单独或联合的主动(转运蛋白介导的)和被动(扩散)机制来跨肠腔吸收。
EP0417725介绍了用于治疗各种疾病的胆汁酸衍生物。所提到的衍生物具有“修饰的胆汁酸基团”，该基团通过连接体和“活性化合物部分W”相连，所述“活性化合物部分W”是肽、抗生素、抗病毒物质、抗癌试剂、保肝试剂、抗血脂剂、利尿剂、降血压药、肾素抑制剂或脯氨酸羟基化酶抑制剂。US5780444描述了一系列作为转化细胞试剂的胆汁酸偶联的核酸，一般地要求保护“一种偶联物，包含胆汁酸或其类似物……与一种或多种第二化合物直接或间接共价连接”。WO9944616描述了作为抗生素试剂的修饰的胆汁酸。一个允许的改变是“与第二类固醇连接的连接基团”。这些例子和Kramer和Wess的综述中概述的研究都表明胆汁酸偶联物策略可以产生在肝脏中具有选择活性的试剂。但是，仍没有这种策略如何在活性药物试剂是糖皮质激素受体拮抗剂的具体情况下实施的教导。事实上，如表I中报道的例子中所概述的，有助于开发经口递送的和肝脏选择性的糖皮质受体拮抗剂的因素并不是显而易见的。
Figure A0381413700621
     
                        实施例1的化合物                 WO0058337的实施例1
化合物A                   化合物B                化合物C                化合物D
图1.代表性的GR拮抗剂-胆汁酸偶联物，包括实施例1的化合物
表I.胆汁酸-偶联物类固醇对肝脏和系统性糖皮质激素应答的影响
           对GR介导的应答的抑制作用
    化合物     TAT     糖原     淋巴细胞
    RU-38486     100％     74％     108％
    化合物1     85％     111％     35％
    化合物A     39％     9％     9％
    化合物B     11％     20％     4％
    化合物C     无抑制作用     无抑制作用     14％
    化合物D*     22％     无抑制作用     8％
所有化合物在大鼠中的口服剂量为100mpk，只有*化合物D为皮下剂量23mpk。
使用涉及对大鼠施用强的松龙激发的单一药理学研究可以实现体内活性和肝脏选择性的分析。强的松龙是一种普遍存在的糖皮质受体激动剂，其在肝脏和肝脏外区域都表现出GR-激动效应。给正常大鼠施用10mg/kg(10mpk)剂量的强的松龙，在7个小时的实验过程中3倍诱导受糖皮质激素调节的酶：酪氨酸氨基转移酶(TAT)。此时，激动剂导致肝脏糖原的积累增加～60％。人们认为这两种效应都是由肝脏GR的直接活化所介导的；这些实验结果如图1所示。
系统性糖皮质激素活性导致抗炎反应，这是GR相关的、抑制淋巴细胞活性的结果。实践中，上述强的松龙激发方案能够降低正常大鼠中的循环淋巴细胞水平(结果概括在图2中)。因此，强的松龙激发研究能够进行体内肝脏和系统GR活化的内部对照评价；它提供了一种分析方法，以测定任何GR拮抗剂化合物阻断肝脏应答(需要的特征)、而不影响系统糖皮质激素受体(不需要的副作用)的选择能力。
RU38486是一种原型GR拮抗剂，口服时其广泛分布在全身，并在各种组织类型中表现出功效。在大鼠强的松龙激发实验中，口服剂量为30mpk时RU-38486完全阻断对TAT诱导的激动效应。在同一实验中，强的松龙诱导的肝糖原积累也完全得以抑制。因此，RU-38486具有口服活性试剂阻断肝脏糖皮质激素受体的所需效果。但是，该试剂在肝脏外区域也具有效果，在同样的实验中，它能够阻断强的松龙诱导的淋巴细胞应答。这些肝脏外效果使RU-38486不可能是长期治疗的候选物。
酪氨酸转氨酶活性                      肝糖原                        血浆淋巴细胞
图2.10-mpk剂量的强的松龙对大鼠中肝脏-(TAT、糖原)和系统性-(淋巴细胞水平)
                糖皮质激素调节的应答的影响。
通过将GR拮抗剂和胆汁酸连接已经制备了各种偶联分子(参见说明代表性结构的图1)。使用上述的分析方法可以评价这些化合物的体内活性和肝脏选择性。在此所要求保护的化合物能够阻断大鼠激发模型中强的松龙的肝脏效应，而对系统活性没有显著影响。例如，口服剂量仅为100mpk时，实施例1的化合物对强的松龙诱导的TAT活性和糖原水平产生近乎完全的阻断(分别为85％和111％)，而循环淋巴细胞的数目只有很小变化(对强的松龙诱导的抑制作用只有35％的阻断)。肝脏选择性拮抗剂的这种效果有望用于长期治疗，例如将需要用来治疗如糖尿病的代谢紊乱。
获得用来拮抗糖皮质激素受体的、可经口递送的、肝脏选择性的试剂所需的化学结构的具体细节不是显而易见的。实施例1的化合物具有三个主要部分：赋予所需生化特征的糖皮质激素拮抗剂样的片段；有助于将偶联物靶向肝脏区域的胆汁样片段；和连接片段，其必须将两个部分连接起来以保留各自的活性，并提供偶联物的整体物理化学特征。任意这三个部分中的小的改变都将不可预知地导致所需药理效果的丧失。例如，实施例1化合物的胆汁酸部分可以将胆酸换为牛磺胆酸，产生化合物A(图1)。如所期望的，化合物A保留有与化合物1类似的GR亲和性(化合物1对人GR的IC50为3.6nM，化合物A为3.0nM)。但是，两个化合物的药理活性(表I)相当不同。和化合物1不同，该类似物只显示出抑制TAT活化的中等效应(同样口服剂量时有39％的抑制作用)，对糖原积累或淋巴细胞应答基本上没有作用。它对于肝脏GR和系统效应没有选择性；事实上，其具有最小的体内活性。连接片段中简单的变化，如化合物B和C所示的变化也可以产生不能阻断肝脏糖皮质激素应答的类似物。即使在连接体改变不导致GR拮抗剂片段或胆汁酸片段上结合位点变化的最保守情况(如化合物C)下，这一点也是真实的。这些不大的变化对于偶联物的GR亲和性几乎没有影响(化合物B对人GR的IC50为3.1nM，化合物C为4.3nM)。最后，使用该策略选择具体的靶向GR拮抗剂对偶联分子的特征有显著的影响。RU-43044是一种甾族的的GR拮抗剂，其具有和RU-38486(对人GR的IC50＝1.1nM)非常类似的效力(对人GR的IC50＝2.2nM)。RU-43044可以以类似于上述的方式和胆酸连接，产生化合物D。化合物D以与化合物1类似的方式和GR结合(IC50＝5.2nM，化合物1为3.6nM)；但是它在体内失活，在大鼠强的松龙激发模型中不具有选择性。如上面的实例所述，具有所需肝脏选择性药理学特征的化合物结构细节是不容易辨别或预测的。
例如，由RU-38486所致的、对GR的系统性阻断诱导了由下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴所介导的补偿性应答。由受抑制的系统性糖皮质激素引发的下丘脑刺激使垂体腺体分泌促肾上腺皮质激素(ACTH)。ACTH作用于肾上腺腺体，刺激内源性糖皮质激素如氢化可的松(人类)或皮质酮(啮齿类)的生成。实践中，口服剂量的RU-38486使正常小鼠中ACTH和皮质酮的循环水平增加(参见图3)。类似剂量的实施例1化合物不能刺激HPA轴，证据是缺少这些参数的变化。该结果验证了大鼠强的松龙激发实验的结果，证实化合物1表现出肝脏选择性药理学特征。其还提供了进一步证据，说明化合物1能够通过阻断肝脏GR减少葡萄糖，且不产生HPA活化所致的副作用。如化合物1的类似物可能对于治疗代谢疾病如糖尿病和肥胖症具有改进的功效和安全效果。
对糖皮质激素拮抗剂的ATCH应答                 对糖皮质激素拮抗剂的皮质酮应答
图3.糖皮质激素拮抗剂对下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴的影响。RU-38486和化合物1以100mpk
               的剂量给于正常小鼠；1hr后测定应答。
利用人糖皮质激素受体和强的松龙受体胞液进行放射配体结合研究的方法
3(H)-地塞米松(TRK 645)在下文中称作3(H)-dex，购自Pharmacia Amersham，Uppsala，Sweden。地塞米松在下文中称作dex，购自SIGMA。Costar 96-孔板(3794或3365)购自Life Technologies AB，Tby，Sweden。GF/B滤器(1450-521)、过滤盒(1450-104)、MeltiLex闪烁蜡(1450-441)、样品袋(1450-42)、MicrobetaTM 1450-PLUS和Microsealer 1495-021均购自Wallac Oy，Turkku，Finland。从感染有包含克隆hGR基因的重组杆状病毒转移载体的Sf9细胞提取人糖皮质激素受体。利用BAC-TO-BAC表达系统(Life Technologies)、根据供应商的指示产生重组杆状病毒。通过常规技术将hGR编码序列克隆到杆状病毒转移载体中。扩增表达hGR的重组杆状病毒，用于感染Sf9细胞。感染后48hr收获感染的细胞。用磷酸盐缓冲液(1mMEDTA，20mM K3PO4(pH8)，8.6％甘油，12mM MTG，20mM Na2MoO4)从细胞沉淀中提取受体。使用J.Steroid Biochem.Molec.Biol.50，No.5/6，313-318，1994中所述的G25分析方法，提取物中的hGR浓度测定为特异性3(H)-dex结合，估算约25nM。将提取物分装成小份，保存于-70℃。
过滤结合分析：所提到的受试化合物和地塞米松的稀释系列从DMSO中的10mM(1mM dex)贮液配制。10μl稀释液加入孔中，设两个复孔。细胞提取物在EPMo+MTG缓冲液(1mM EDTA，HPO4 20mM(pH8)，6mM MTG)中稀释10倍。稀释的提取物加入孔中(110μl)。将3(H)-dex贮液在EPMo+MTG缓冲液中稀释至10-10.8nM。往孔中加入110μl稀释的3(H)-dex。实验中hGR的终浓度估算为1nM。所有制剂都在环境温度(20-25℃)下于冰上、用+4℃温度的缓冲液制备。板于4℃孵育过夜(15-20hr)。
在Tomtec Cellharvester上用GF/B滤器进行过滤终止孵育。在TomtecCellharvester上的过滤程序如下：1)过滤之前制备EP缓冲液(1mM EDTA 20mMH3PO4(pH8))2×(Wash/Asp 0.6sec.，Asp 0.5sec.)；2)用EP+PEI缓冲液(EP缓冲液，0.3％聚乙烯亚胺)(Asp 0.8sec)预先将GF/B滤器湿润。3)过滤/收获96孔孵育板3×(Wash/Asp 0.6sec.，Asp 0.5sec.)。GF/B滤器于65℃干燥至少1hr。用Microsealer将MeltiLex闪烁蜡融化在滤器上。将滤器置于样品袋中，用剪刀剪成和过滤盒相匹配。将过滤盒置于Microbeta中，测定1min/位置，返回ccpm(每分钟的校正计数)。
对于能够从受体置换3(H)-地塞米松的化合物来说，通过非线性四参数对数模型计算IC50值(抑制50％的3(H)-dex结合所需的浓度)；
            b＝((bmax-bmin)/(1+(I/IC50)S))+bminI
b是结合抑制剂的加入浓度，IC50是半数最大结合处的抑制剂浓度，S是斜率因数1。对于溶液中3(H)-dex浓度的测定来说，使用scintillation cocktail SupermixTM(Wallac)在Wallac Rackbeta中进行常规闪烁计数。
Microbeta设备产生平均cpm(每分钟计数)值/分钟，并校正探测器之间的个体变异性，从而产生校正的cpm值。结果发现检测器之间的计数效率差异小于5％。
采用类似的方案测定本发明化合物对于皮质酮受体(PR)的亲和性。
如下所述，本发明的化合物对糖皮质激素受体表现出结合亲和性，表现出相对于PR的GR选择性：
    实施例#     GR结合(IC50，μM)     PR结合(IC50，μM)
    1     0.0036     0.0087
    2     0.0028     0.0023
    3     0.0020     0.0045
    4     0.0033     0.0016
Haggblad，J.，Carlsson，B.，Kivel，P.，Siitari H.，(1995)Biotechniques 18，146-151
可以使用下述方法评价本发明化合物的体内活性。这些相同的体内模型还可用于说明某些化合物在肝脏中选择性阻断糖皮质激素作用的能力。
评价肝脏靶向的糖皮质激素受体拮抗剂的大鼠强的松龙激发模型
禁食过夜的150g雄性Sprague Dawley大鼠口服溶媒、RU-486(30-100mg/kg)或选定的糖皮质激素受体拮抗剂(30-100mg/kg)，60分钟后用10mg/kg强的松龙口服激发。强的松龙激发6小时后，用CO2将大鼠处死，通过心脏穿刺取血，评价血液淋巴细胞和血浆药物水平。收获7mm肝脏活检打孔物(punches)用来评价酪氨酸氨基转移酶(TAT)、肝脏糖原和GR拮抗剂水平。还摘除其他的肝脏组织、腹膜后脂肪、骨骼肌、肾脏和来自耳活检的皮肤，分离并评价mRNA。在6小时的激发期间，强的松龙增加肝脏TAT和糖原水平，并诱发严重的淋巴细胞减少。100mpk剂量时，RU-486完全拮抗这些肝脏和外周应答。
如表I所示，本发明的化合物在上述的模型中表现出体内功效和肝脏选择性。
小鼠下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)活化模型
在糖皮质激素水平低的0800hr时，给未禁食的CD-1雄性小鼠，体重约25g，服用溶媒、RU-486(30-100mg/kg)或GR拮抗剂(30-100mg/kg)。两小时后，用CO2将小鼠处死，通过心脏穿刺取血，通过质谱分析血浆中的皮质酮，通过ELISA分析血浆中的促肾上腺皮质激素(ACTH)水平。取出大脑和血浆，分析GR拮抗剂水平。100mpk剂量下，和溶媒对照相比，RU-486显著增加ACTH和皮质酮水平。本发明表明刺激HPA轴的能力下降，如图3所示。
本发明的化合物可用于治疗与过量肝脏糖皮质激素应答相关的疾病。这些疾病包括但不局限于下述疾病：糖尿病、肥胖症、X综合征、高血糖症、葡萄糖清除不充分、高血压、高胰岛素血症、高脂血症和肝脏糖皮质激素水平升高。
对于治疗糖尿病、X综合征或高血糖症来说，本发明的化合物可以单独使用，或者和现有的任意抗糖尿病或抗高血糖症试剂联用。用作这种联合治疗的一部分的试剂包括但不限于胰岛素；胰岛素类似物，如美卡舍明等；胰岛素促分泌素，如那格列奈(nateglinide)、exendin等；胰岛素增敏剂，如吡咯列酮、罗格列酮等；磺酰脲类，如格列吡嗪、格列本脲等；双胍类，如二甲双胍、苯乙双胍等；metiglinide，如repaglinide等；和α-葡萄糖苷抑制剂，如阿拉伯糖、米格列醇等。其他类似的试剂是本领域的技术人员所公知的。本发明的化合物单独使用或与其他试剂联用治疗糖尿病、X综合征或高血糖症的能力可以使用本文描述的模型和方法验证，或者根据Friedman等在J.Biol.Chem.1997，272(50)，31475-31481中所述的方法进行验证。测试本发明化合物功效的其他这类方法是本领域的技术人员所公知的。
对于治疗肥胖症来说，本发明的化合物可以单独使用，或者和现有的任意抗肥胖试剂联用。可用作这种联合治疗一部分的试剂包括但不限于厌食剂，如溴隐定、右芬氟拉明等；单胺重吸收抑制剂，如西布曲明(sibutramine)等；类交感神经药，如酚妥拉明、苯甲曲秦等；脂肪酸吸收抑制剂，如奥利司他(orlistat)等；和拟甲状腺素药，如三碘甲腺原氨酸等。其他抗肥胖症试剂是本领域的技术人员所公知的。本发明的化合物单独使用或与其他试剂联用治疗肥胖症的能力可以根据Langley和York在Am.J.Physiol.1990，259(Reg.Int.Comp.Phys.28)R539-544中所述的模型和方法进行验证，或者根据Walker和Romsos在Am.J.Physiol.192，262(Endo.Metab.25)E-110-117中所述的模型和方法进行验证。测试本发明化合物功效的其他这类方法是本领域的技术人员所公知的。
对于治疗葡萄糖清除不充分或肝脏糖皮质激素水平升高来说，本发明的化合物可以单独使用，或者和影响葡萄糖吸收或肝脏葡萄糖生成的任意现有试剂联用。可以用作联合治疗的一部分的试剂包括但不限于胰岛素；胰岛素类似物，如美卡舍明等；胰岛素促分泌素，如那格列奈(nateglinide)、exendin等；胰岛素增敏剂，如吡咯列酮、罗格列酮等；磺酰脲类，如格列吡嗪、格列本脲等；双胍类，如二甲双胍、苯乙双胍等；和metiglinide，如repaglinide等。其他这种试剂是本领域技术人员所公知的。本发明的化合物单独使用或与其他试剂联用治疗葡萄糖清除不充分或肝脏糖皮质激素水平升高的能力可以使用本文描述的模型和方法验证，或者根据Terrettaz、Assimacopoulos-Jeannet和Jeanrenaud在Endocrinology.1986，118：674-678中所述的方法进行验证。测试本发明化合物功效的其他这类方法是本领域的技术人员所公知的。
对于治疗糖尿病性高血压来说，本发明的化合物可以单独使用，或者和现有的任意抗高血压试剂联用。可以用作这种联合治疗一部分的试剂包括但不局限于ACE抑制剂，如卡托普利、enanlipril等；利尿药，如利尿磺胺、双氢氯噻嗪等；β-阻断剂，如阿替洛尔、卡维地洛等；钙阻断剂，如氨氯地平、硝苯地平等。其他这种试剂是本领域的技术人员所公知的。本发明的化合物单独使用或与其他试剂联用治疗糖尿病性高血压的能力可以根据Velasquez等在Hypertension 1997(5)，1232-1237中所述的模型和方法进行验证。测试本发明化合物功效的其他这类方法是本领域的技术人员所公知的。
对于治疗高胰岛素血症来说，本发明的化合物可以单独使用，或者和影响胰岛素水平或胰岛素敏感性的任意现有试剂联用。可以用作这种联合治疗的一部分的试剂包括但不局限于胰岛素；胰岛素类似物，如美卡舍明等；胰岛素促分泌素，如那格列奈(nateglinide)、exendin等；和胰岛素增敏剂，如吡咯列酮、罗格列酮等。其他这种试剂是本领域的技术人员所公知的。本发明的化合物单独使用或与其他试剂联用治疗高胰岛素血症的能力可以使用本文描述的模型和方法验证，或者根据Shulman等在Metabolism 1991，40(10)：1025-1030中所述的方法进行验证，或者根据Hevener、Reichart和Olefsky在Diabetes 2000，49(12)：2154-2159中所述的方法进行验证。测试本发明化合物功效的其他这类方法是本领域的技术人员所公知的。
对于治疗高脂血症来说，本发明的化合物可以单独使用，或者和现有的任意抗高脂血症试剂联用。可以用作这种联合治疗的一部分的试剂包括但不局限于烟酸；他汀类(statins)，如洛伐他汀、辛伐他汀等；贝特类，如非诺贝特、吉非贝齐等；和胆汁酸螯合剂，如消胆胺、考来替泊等。其他这种试剂是本领域的技术人员所公知的。本发明的化合物单独使用或与其他试剂联用治疗高脂血症的能力可以根据Olivier等在Atherosclerosis 1988，74(1-2)，15-21中所述的模型方法进行验证。测试本发明化合物功效的其他这类方法是本领域的技术人员所公知的。

Claims (22)

1.化学式(I)的化合物；
或者其药学上合适的盐或前药，其中
A是选自-O-或-NRA的单元，其中RA是选自氢和烷基的单元；
R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7是独立选自氢、(C1-C6)-烷基、烯基、炔基、烷氧基、羟基、烷氧烷基、羟基烷基和卤素的单元；且
R8、R9和R10是独立选自氢、烷基、烯基、炔基、烷氧基、羟基、氰基、卤素和-NRBRC的单元，其中RB和RC是独立选自氢和烷基的单元。
2.根据权利要求1的化合物，其中
R1、R2、R3、R4是氢；且
R5是选自氢和烷基的单元。
3.根据权利要求1的化合物，其中
R1、R2、R3、R4、R8、R9和R10是氢；
R5是选自氢和烷基的单元；
R6是OH；且
R7是炔基。
4.根据权利要求1的化合物，其中
R1、R2、R3、R4、R8、R9和R10是氢；
R5是选自氢和烷基的单元；
R6是OH；且
R7是-C≡C-CH3。
5.根据权利要求1的化合物，其中
R1、R2、R3、R4、R8、R9和R10是氢；
R5是选自氢和烷基的单元；
R6是OH；
R7是-C≡C-CH3；且
A是-NCH3。
6.根据权利要求5的化合物，选自
(3β，5β，7α，12α)-7，12-二羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}24-胆烷酸；
(3β，5β，7α，12α)-7，12-二羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]-2-氟苯基}(甲基)氨基]乙氧基}24-胆烷酸；和
(3β，5β，7α，12α)-7，12-二羟基-3-{2-[{4-[(11β，16α，17α)-17-羟基-16-甲基-3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}24-胆烷酸。
7.根据权利要求1的化合物，其中
R6是OH；且
R7是-C≡C-CH3；且
A是-O-。
8.根据权利要求7的化合物，是
(3β，7α，12α)-7，12-二羟基-3-(2-(4-((11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基)-2-甲基苯氧基)乙氧基)24-胆烷酸。
9.化学式(II)的化合物，
或者其药学上合适的盐，其中
A是选自-O-和-NRA的单元；
R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7是独立选自氢、(C1-C6)-烷基、烯基、炔基、烷氧基、羟基、烷氧烷基、羟基烷基和卤素的单元；
R8、R9和R10是独立选自氢、烷基、烯基、炔基、烷氧基、羟基、氰基、卤素和-NRBRC的单元；
RA是选自氢和烷基的单元；
RB和RC是选自氢和烷基的单元；且
PD1和PD2中的一个或多个在体内被切割。
10.化学式(II)的化合物；
Figure A038141370004C2
或者其药学上合适的盐，其中
A是选自-O-或-NRA的单元；
R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7是独立选自氢、(C1-C6)-烷基、烯基、炔基、烷氧基、羟基、烷氧烷基、羟基烷基和卤素的单元；
R8、R9和R10是选自氢、烷基、烯基、炔基、烷氧基、氰基、羟基、卤素和-NRBRC的单元；
RA是选自氢和烷基的单元；
RB和RC是独立选自氢和烷基的单元；且
PD1和PD2中的一个或多个是在消化道中被体内切割的部分。
11.根据权利要求10的化合物，其中
R1、R2、R3、R4、R8、R9和R10是氢；
R5是选自氢和烷基的单元；
R6是OH；且
R7是-C≡C-CH3。
12.根据权利要求11的化合物，选自
(3β，5β，7α，12α)-7-[(2-氨根乙氧基)羰基氧基]-12-羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基}乙氧基}24-胆烷酸；
(3β，5β，7α，12α)-7-[(3-氨根丙氧基)羰基氧基]-12-羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}24-胆烷酸；
(3β，5β，7α，12α)-7-磷酰氧基-12-羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基]乙氧基}24-胆烷酸；
(3β，5β，7α，12α)-7-磷酰氧基甲氧基-12-羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基}乙氧基}24-胆烷酸；
(3β，5β，7α，12α)-7-(4-氨根丁酰氧基)-12-羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基}乙氧基}24-胆烷酸；
(3β，5β，7α，12α)-7-(5-氨根戊酰氧基)-12-羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基}乙氧基}24-胆烷酸；和
(3β，5β，7α，12α)-7-(4-氨根丁酰氧基甲氧基)-12-羟基-3-{2-[{4-[(11β，17α)-17-羟基-3-氧-17-丙-1-炔基-4，9-雌二烯-11-基]苯基}(甲基)氨基}乙氧基}24-胆烷酸。
13.一种选择性拮抗哺乳动物中糖皮质激素受体的效应的方法，包括施用治疗有效量的化学式(I)的化合物。
14.一种选择性拮抗哺乳动物中糖皮质激素受体的效应的方法，包括施用治疗有效量的化学式(II)的化合物。
15.一种选择性拮抗哺乳动物中肝脏糖皮质激素受体的效应的方法，包括施用治疗有效量的化学式(I)的化合物。
16.一种选择性拮抗哺乳动物中肝脏糖皮质激素受体的效应的方法，包括施用治疗有效量的化学式(II)的化合物。
17.一种治疗哺乳动物中糖尿病、肥胖症或X综合征的方法，包括施用治疗有效量的化学式(I)的化合物。
18.一种治疗哺乳动物中糖尿病、肥胖症或X综合征的方法，包括施用治疗有效量的化学式(II)的化合物。
19.一种治疗哺乳动物中高血糖、葡萄糖清除不充分、高胰岛素血症、高脂血症、糖尿病性高血压或肝脏糖皮质激素水平升高的方法，包括施用治疗有效量的化学式(I)的化合物。
20.一种治疗哺乳动物中高血糖、葡萄糖清除不充分、高胰岛素血症、高脂血症、糖尿病性高血压或肝脏糖皮质激素水平升高的方法，包括施用治疗有效量的化学式(II)的化合物。
21.一种药用组合物，包含治疗有效量的化学式(I)的化合物和药学上合适的载体。
22.一种药用组合物，包含治疗有效量的化学式(II)的化合物和药学上合适的载体。
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