CN1325312A - 粘膜粘附聚合物,其应用及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明描述了装配有不超过10种的不同单体并且含有至少一个非端基的硫羟基的粘膜粘附聚合物,以及含有这些聚合物的药物。

Description

粘膜粘附聚合物，其应用及其制备方法
本发明涉及粘膜粘附聚合物，含有该聚合物的药物以及该粘膜粘附聚合物的应用。
自从在药学文献中引入生物粘附这一概念以来，在大学和工业领域中已经尝试了多种方法以改善各种聚合物的生物粘附性质。这些尝试包括中和离子型聚合物(Tobyn等，Eur.J.Pharm.Biopharm.42(1996)56-61)、在有机溶剂中使聚合物沉淀以及用空气干燥代替冷冻干燥(Bernkop-Schnürch等，Int.J.Pharm.165(1998)217-225)、开发聚合物-植物凝集素共轭物(Naisbett等，Int.J.Pharm.107(1994)223-230)以及聚合物与细菌外源凝集素共轭物(Bernkop-Schnürch等，J.Pharm.Sci.3(1995)293-299)。
所描述的这些体系均以形成非共价键，例如氢键与离子键相互作用为基础，由此仅得到一个弱键，这在许多情况下不足以将活性物质释放体系令人满意地定位到某些靶向位置。
覆盖GI上皮的粘液层主要由粘液糖蛋白组成，其中含有具有众多O-连接低聚糖链的中心区以及在任一侧的两个侧面的富含半胱氨酸亚区域。这些富含半胱氨酸的亚区域在其涉及的主要结构上含有超过10％的Cys(半胱氨酸)，它们与粘蛋白单体通过二硫化物键连接形成低聚物。由此形成了粘液胶层的三维网络。
本发明的目的包括提供改进的粘膜粘附聚合物，该聚合物能够将活性物质定向引入粘液层并能够稳定地存在于靶向位置。通过本发明，可以得到有效的活性物质释放体系，这样可提高并因此延长药物在粘膜上的粘附。
根据本发明，采用粘膜粘附性聚合物达到该目的，所述聚合物的特征在于它装配有不超过10种的不同单体并且含有至少一个非端基的硫羟基。为了向已知具有粘膜粘附性质的聚合物中定向引入硫羟基或者产生含有硫羟基的全新聚合物，在具体的方式中利用粘液层特定的结构。已知硫醇例如N-乙酰基半胱氨酸的溶解粘液活性是基于粘液中糖蛋白与溶解粘液活性物质之间的二硫化物交换反应。基于该交换反应，粘液的糖蛋白结构中分子内与分子间的二硫化物键裂解，因而使粘液层溶解。根据这一发现，粘液溶解物质与粘液中的糖蛋白共价结合，根据本发明建立了这样的假设，即其它含硫羟基的化合物、特别是含硫羟基的聚合物也可以与粘液层共价结合。现已出人意料地发现，该假设不仅完全准确，而且特别提供了有效的药物释放体系。特别是，已经表明，与粘液溶解硫醇相比，本发明的聚合物不具有任何实质上的溶解粘液活性。
已经表明，本发明的聚合物能够与粘液糖蛋白的富含半胱氨酸的亚区域形成可逆的共价键(参见图1)，该键使得该聚合物能够稳定地定位于粘液中的某些粘膜上。
优选的是，本发明聚合物含有至少0.05μmol、特别是至少0.1μmol的共价结合的硫羟基/克聚合物。通常，本发明聚合物含有1-500μmol硫羟基/克聚合物，尤其是10-100μmol。这不仅使得其有效地与粘液糖蛋白结合，还因为其优越的水合作用和内聚性使得其粘膜粘附性质加强。
优选通过将已知具有粘膜粘附性质的聚合物硫羟基化制备本发明的聚合物。如此，该粘膜粘附性质实质上得到加强和改进。因此，本发明聚合物优选自硫羟基化的聚卡波非(丙烯酸与二乙烯基二醇的共聚物)、硫羟基化的脱乙酰壳多糖、硫羟基化的羧甲基纤维素钠、硫羟基化的藻酸钠、硫羟基化的羟丙基纤维素钠、硫羟基化的透明质酸和硫羟基化的果胶。对于非硫羟基化的聚合物，例如Smart等人已经描述了其粘膜粘附性质(J.Pharm.Pharmacol.36(1984)295-299)。
当然，上述聚合物的硫羟基化衍生物也是优选的。该衍生物的实例包括通过自交联、引入官能团、与配位剂(例如EDTA等)连接、与酶抑制剂偶合等得到的衍生物，尤其是当聚合物含有带负电荷的基团例如COO-基团时。
根据本发明，该硫羟基化作用可以通过所有类型的化学反应实现，通过该反应，硫羟基与聚合物、特别是水溶性聚合物结合。出于经济原因，使用半胱氨酸基可以借助其自身进行硫羟基化，因为后者可以容易廉价地获得。优选半胱氨酸基与聚合物通过酰胺键结合。
另一方面，还可以如下制备本发明的聚合物：在所述聚合物的制备过程中，将至少一个单体与硫羟基(共)聚合，该单体包括在聚合物中的游离硫羟基，即硫羟基在聚合反应中不直接反应。按照本发明，含有至少一个在聚合物中具有游离硫羟基的单体的该聚合物也是优选的。
本发明优选的聚合物的特征还在于对肠粘膜具有高粘合力，经测量其总附着功(TWA)高于120μJ，特别是高于150μJ(在pH7下)。在实施例中将描述一个适用于测量该TWA的体系。
根据本发明，优选使用的聚合物与非硫羟基化聚合物的TWA相比，具有增加的TWA。优选TWA增加50％或更多，特别是增加100％或更多，该值是在最适宜硫羟基化聚合物的TWA的pH条件下测量的。
本发明另一方面涉及一种药物，该药物含有本发明的聚合物和至少一种经粘膜吸收的活性物质。由于借助本发明聚合物可以将活性物质定向施用在粘液层上，因此本发明的药物优于所有先前已知的对粘液层释放活性物质的给药体系，无论是其专一性还是其通用适用性。
优选的是，活性物质与聚合物非共价结合，这样就可以通过扩散在靶位置处施用活性物质。活性物质与聚合物混合或互相连接的方式不是关键的，共冻干与空气干燥、胶凝等同样适用。将药物最终制成糖膏剂也不是重要的，优选制成片剂、栓剂、丸剂、滴眼剂、滴鼻剂、滴耳剂或凝胶，给药方式为吸入或制成微粒。
作为活性物质，优选的物质是已知对粘液层具有活性的物质，特别是那些在血液中具有相对短的排除半衰期、例如小于3小时的物质。此外，由于活性物质在基于本发明硫羟基化聚合物的活性物质给药体系中具有改善的和延长的粘附作用，因此该体系可以在几小时内控制活性物质的释放，该活性物质的吸收频率可以急剧下降。
根据一个优选的实施方案，本发明药物含有被硫羟基加强的活性物质，优选硫羟基依赖性酶，特别是木瓜蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶。
本发明另一方面涉及作为药物的本发明聚合物以及本发明聚合物在制备药物、特别是粘膜粘附药物中的应用。优选的是，该药物可以经口服给药。
本发明的给药形式还可以延缓活性物质的释放，例如制成活性物质包在聚合物中的片剂，由于活性物质须经聚合物包衣渗透，因而实现了延缓释放的效果。在这一方面，由于硫羟基所致的本发明聚合物改善的膨胀特性尤其起到了重要的作用。
根据本发明，以有效剂量给患者施用药物，其中所述剂量符合现有技术中对各个活性物质所述的剂量。然而，在这一点上，需要考虑两方面的问题：一方面是，本发明的给药形式比起已知的给药形式(通过同样的途径给药)更具有定向作用和更为有效，另一方面，本发明聚合物可以使活性物质通过粘膜的渗透加强。
因此，本发明一个优选的实施方案涉及本发明聚合物在制备用于加强活性物质、特别是高分子亲水物质例如活性(多)肽物质通过粘膜、优选通过肠粘膜的渗透性的药物中的应用。
已经表明，本发明聚合物还能够与某些离子、特别是锌离子结合。通过施用本发明的聚合物，聚合物的锌离子将结合在粘附部位，因此酶、特别是依赖于锌离子的酶受到抑制。通过将酶直接与本发明的聚合物结合也可以抑制酶的作用。因此本发明还涉及本发明聚合物在制备用于抑制酶、特别是依赖于锌离子的酶的药物中的应用。其实例尤其是胃肠道中的依赖于锌离子的酶，例如羧基肽酶A和B。
另一方面，本发明还涉及本发明聚合物在非粘液接触层上的应用，其中还利用了对生物(蛋白质的)材料的改善的粘附性质。尤其是考虑在粘性-手术(visco-surgery)(眼内外科手术，白内障治疗)应用、真皮内的应用(美容以及治疗；例如除皱或组织增强)、以及关节内应用，特别是滑液应用。
如上所述，本发明聚合物的制备不是关键的；本发明聚合物优选制备方法的特征在于：基础聚合物装配有不超过10种的不同单体，其中至少一个非端基的单体含有一个在聚合物内游离的端基官能团Ⅰ，该单体与含有至少一个其他官能团Ⅱ的含硫羟基的化合物反应，官能团Ⅰ与官能团Ⅱ在反应中形成共价键，该反应任选地使用偶合剂。
优选的是，该方法中的官能团Ⅰ为羧基，官能团Ⅱ为氨基，优选伯氨基，其中形成酰胺键。在该反应中优选使用偶合剂、特别是碳酰二亚胺。
根据一个优选的实施方案，使用具有伯氨基的巯基化合物、优选半胱氨酸或半胱氨酸衍生物作为含硫羟基的化合物。
该反应优选在pH4-8、特别是5.5-6.5的条件下进行。
可以将本发明聚合物调节至一定的pH，优选pH5-9，尤其是6.5-8.5。
另一方面，本发明还涉及改善聚合物的粘膜粘附的方法，该方法的特征在于将侧向排列的硫醇结构引入这些聚合物中，结果在聚合物与粘液层之间形成二硫化物键。
下面参照下列实施例和附图对本发明做更详细的描述，其中
图1表示本发明聚合物与粘液层共价结合的原理；
图2表示硫羟基化的聚合物与非改性聚合物崩解的比较；
图3表示利福平从硫羟基化和非硫羟基化的CMC中(图3A)以及从硫羟基化和非硫羟基化的PCP中(图3B)释放的特性；
图4表示通过肠粘膜的渗透作用；
图5表示测量粘膜粘附性质的装置；
图6表示L-半胱氨酸与硫羟基化PCP的结合。
实施例1：本发明聚合物的制备
在持续搅拌下，将10g聚卡波非(NoveonAA1，购自BF Goodrich)分批悬浮于100ml4％(m/m)氢氧化钠的甲醇溶液中。将所得聚合物的钠盐进行过滤并用甲醇洗涤，直至滤液成中性pH。随后，在室温下在干燥器中干燥该聚合物。在250ml去离子水中水合一克的中性聚卡波非，并在室温下与加至50mM终浓度的1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)-碳酰二亚胺盐酸盐一起搅拌以使该聚合物的羧基预活化45分钟。为避免随后加入的L-半胱氨酸的氧化，用5NHCl将该溶液的pH调至4并通入15分钟的氮气。加入0.5gL-半胱氨酸后，可选择性地分别用盐酸或氢氧化钠将该溶液的pH调至4-5，然后在通入氮气的条件下，将该反应混合物在室温搅拌3小时。在排除空气下，于10℃将聚卡波非-半胱氨酸共轭物在1mM HCl和2μM EDTA的水溶液中进行透析，在另外还含有1％NaCl的相同透析液中透析两次，随后在0.5mM HCl中进行充分透析。之后，用1N氢氧化钠将共轭物的pH调至5。将分离的共轭物于-30℃冻干。在4℃下贮藏。
制备具有下列硫羟基浓度(μmol/g聚合物)的各种聚卡波非(PCP)-半胱氨酸共轭物：PCP-Cyst 1∶4∶142.2±38.0μmol/g聚合物；PCP-Cyst 1∶2∶12.4±2.3；PCP-Cyst 2∶1∶5.3±2.4；PCP-Cyst 4∶1∶3.2±2.0；PCP-Cyst 8∶1∶2.9±1.4；PCP-Cyst 16∶1∶0.6±0.7；PCP-Cyst 32∶1∶0.3±0.5；对照：(未反应的PCP+Cyst):0.00±0.00(这表明了纯化的效力)。
与未改性的聚合物相比，1∶2和1∶4的PCP-Cyst共轭物尤其表现出显著(＞100％)更高的摄水力。
粘蛋白结合研究(猪的粘蛋白与聚合物的结合)表明，粘蛋白有效地结合于被测试的聚合物-半胱氨酸共轭物(与未改性的聚合物形成对照)。
按照Bernkop-Schnürch等的描述(Pharm.Res.16(6)(1999),876-881),Ch’ng等测试了本发明的聚合物与肠粘膜粘蛋白的结合强度(TWA)(J.Pharm.Sci.74(1985)399-405)。
在含0.9％氯化钠的50mM Tris-HCl缓冲液(pH6.8)组成的人工肠液中的粘附实验和用切自猪小肠的粘膜进行离体研究中，本文所述的聚合物(聚卡波非)-半胱氨酸共轭物表现出的粘附力明显高于以相同方式预处理的、但半胱氨酸未与其共价结合的聚卡波非。
可以证明，相对于未改性的聚合物(PCP)，本发明的聚合物的粘附作用可提高至少100％。即，例如用16∶1聚合物-半胱氨酸共轭物可获得191±47μJ的TWA；用2∶1共轭物可获得280±67μJ的TWA；但使用未改性的聚合物仅可获得104±21μJ的TWA。已经表明在pH6.8时，TWA增强最高，但即使在pH3下，与起始聚合物相比，巯基化化合物也具有正性作用。
实施例2：本发明聚合物的崩解性分析
将按照本发明制备的羧甲基纤维素-半胱氨酸共轭物(CMC-半胱氨酸共轭物)和PCP-半胱氨酸共轭物冻干并制成基质片剂形式。同样地，制备包含相应的未改性的聚合物的片剂。按照欧洲药典，于37℃在5ml50mM Tris-HCl缓冲生理盐水溶液(TBS,pH6.8)中，以0.5次/秒的振动频率用崩解分析仪分析聚合物片剂(30mg)的稳定性。
已经表明巯基化聚合物片剂的稳定性显著高于未改性聚合物片剂。在分析中，含CPC-半胱氨酸共轭物的基质片剂甚至可稳定数天。附图2说明了该结果，y轴给出了以小时为单位的崩解时间。
本发明聚合物片剂的高稳定性可通过聚合物二硫键的形成来解释，由此可间接提高基质体系的粘附作用，因为通过药物内部键的断裂而脱离粘膜的药物大大减少了。这种稳定性的提高还有着很大的实际意义，与已知的聚合物载体体系相比具有多种优点，主要是减少了活性多肽物质在肠中的体系前代谢。
实施例3：释放试验
使本发明制备的共轭物(CMC-半胱氨酸共轭物和PCP-半胱氨酸共轭物)在软化水中水合并分别放入丙酮或1NNaOH中，以使粘度大大增强。分别用丙酮或甲醇洗涤后，进行空气干燥并粉碎。
分别制备由1mg利福平活性物质和29mg CMC-半胱氨酸共轭物或PCP-半胱氨酸共轭物，以及相应的未改性聚合物组成的片剂。然后，将片剂放入盛有10ml释放液(50mM TBS,pH6.8)的25ml容器中分析该活性物质释放体系的体外释放速率。使容器密闭并于37±0.5℃的振动水浴中保温。每隔1小时取600μl等分样品并用等体积的释放液置换。在470nm通过校准曲线以光度分析法定量分析释放的利福平。
结果示于附图3A(CMC)和附图3B(PCP),x轴是以小时表示的时间，y轴表示释放的利福平的百分数。
分析还表明使用本发明的体系可获得更有效的释放，崩解结果证实了本发明聚合物的高效性。以有效的方式控制活性物质在长时间内释放。
实施例4：本发明聚合物作为渗透促进剂的活性
将2mg异硫氰酸荧光素(FITC)溶于1ml DMSO并以25μl的等分试样体积加到40mg杆菌肽(溶于20ml 0.1M碳酸钠)中。在4℃保持8小时后，为中止偶联反应，以50mM的终浓度加入氯化铵。通过Sephadex G15凝胶过滤分离形成的FITC共轭物并将其冻干。
用豚鼠小肠段的Ussing室，在37℃用该改性的肽进行渗透试验。在供应室和接受室中各填充1ml含250mM氯化钠、2.6mM硫酸镁、10.0mM氯化钙、40.0mM葡萄糖和50mM碳酸氢钠的溶液(pH7.2)的溶液。将杆菌肽-FITC共轭物以0.1％(m/v)的终浓度加到供应室中。在特定的时间点从接受室取200μl体积并用相同的渗透液替代。通过加入0.5％(m/v)PCP和0.5％(m/v)PCP-Cyst，试验按照本发明制备的PCP和硫羟基化PCP(PCP-Cyst)对改性肽的渗透特性的影响。用荧光计测定渗透的杆菌肽-FiTC共轭物的量。同样，监测经上皮的电阻的变化。
可以证明，分子量为1422Da的杆菌肽在一定程度上能透过肠粘膜。由于其酶抑制活性，可排除因消化酶的降解。0.5％PCP的加入导致样品肽透过膜的运送增强1.2倍，但使用本发明制备的聚合物可使这种渗透更明显地增强(约1.5倍)。对照实验表明半胱氨酸本身对渗透作用没有影响，但已证明本发明的聚合物对渗透具有明显作用。
该实验的结果示于附图4,x轴以分钟表示的时间，y轴给出了渗透占整个剂量的百分数：(○:PCP■:PCP-Cyst◆：对照)
实施例5：体外粘膜粘附试验
用氢氧化钠中和PCP(分子量大于700kDa)。通过加入终浓度为50mM的1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳酰二亚胺盐酸盐(EDAC；Sigma)将水合、中和的PCP和水合的CMC(分子量约1000kDa)的羧酸基活化45分钟。加入L-半胱氨酸盐酸盐，并将反应混合物的pH调节至4-5。对于与PCP和CMC的偶合反应来说，EDAC与L-半胱氨酸的摩尔比分别为50∶3.2和50∶1。通过加入1N盐酸，使与CMC偶合反应的pH值保持恒定。反应混合物在室温保温3小时。在10℃和蔽光条件下，通过用1mN盐酸进行透析，将所得的聚合物-半胱氨酸共轭物分离。之后，用1N氢氧化钠调节这些聚合物的pH为3、5或7，并冻干。所得硫羟基化的聚合物在每克聚合物中含有12.3μmol(PCP共轭物)和22.3μmol(CMC共轭物)硫羟基。
用美国药典的装置(参见图5)进行粘膜粘附试验：将新切除的猪肠粘膜在钢质圆筒(直径4.5cm，高5.1cm,4圆筒装置，USPⅩⅫ)上绷紧。将该圆筒置于含有100mM TBS(pH8.6,37℃)的溶解装置中，并以250rpm旋转。将聚合物压成直径5.0mm的30mg片剂，置于粘膜上并观察10小时。所得结果示于下表：
  聚合物     pH3     pH5     pH7
PCP对照 7.5±1.35dis. 4.8±1.35det. 4.6±1.39dis.
PCP-Cys 7.55±1.15dis.      ＞10 2.25±0.87det.
CMC对照 2.0±0.35dis. 2.5±0.5dis. 1.5±0.91det.
CMC-Cys 3.9±1.02dis. 3.0±0.35det. 1.7±0.57det.
dis.表示崩解det.表示脱离
已经表明，相对于非硫羟基化的起始聚合物，本发明聚合物具有明显改善的性质。已表明在本发明体系中的协同性质：与粘膜粘附的能力、本发明聚合物与粘膜的结合机理、增加的内聚力以及膨胀特性使得粘附过程最佳化，因而使得通过与粘液层的最适当粘附提供优异的药物。
实施例6：酶抑制作用
检测PCP-半胱氨酸共轭物和未改性的中和PCP对于羧基肽酶A和羧基肽酶B的抑制作用。为此，对这些酶进行如下所述的酶活性试验：
分别将0.5mg聚合物或L-半胱氨酸与0.5单位得自牛胰腺的羧基肽酶A在含有2.9％NaCl的400μl25mM Tris-HCl(pH6.8)中室温培养30分钟。离心后，将300μl上清液倒入300μl2mM马尿酰-L-苯基-丙氨酸中，在254nm处以1分钟的间隔测量吸收的增加。将聚合物(1mg)与得自牛胰腺的羧基肽酶B(0.62单位)在37℃、于总量600μl体积中培养30分钟。离心后，将400μl上清液倒入400μl2mM马尿酰-L-精氨酸中，在258nm处以1分钟的间隔测量吸收的增加。
已经表明，通过将半胱氨酸固定在聚合物上，可以使PCP对羧基肽酶A和B的已经存在的抑制作用显著增加。由于PCP对锌的结合亲和力可以通过将半胱氨酸固定在聚合物上增加1.13倍(68.7±1.9％的锌与PCP结合，而97.8±0.5与PCP-半胱氨酸结合)，并且这些外肽酶不与聚合物结合，因此抑制作用的增加显然归因于本发明聚合物的较高锌亲和力。
实施例7：半胱氨酸与本发明聚合物的结合
在半胱氨酸-结合研究中，将所制备的0.5％(m/v)PCP-半胱氨酸共轭物与0.1％(m/v)L-半胱氨酸在37℃和各种pH值下进行培养。所得结果在图6中作出说明：在x-轴上以小时为单位给出时间，在y-轴上以可以与聚合物结合的理论上最大值的％给出结合的半胱氨酸值。
由这些结合试验清楚地表明，本发明聚合物可以与生物体系中的半胱氨酸部分结构共价粘附，因此还适于改善与非粘液接触层粘附的应用，例如真皮内的应用、关节内应用和眼内应用。

Claims (27)

1．一种粘膜粘附聚合物，其特征在于
·它装配有不超过10种的不同单体并且
·含有至少一个非端基的硫羟基。
2．权利要求1的聚合物，其特征在于它含有至少0.05μmol、特别是至少0.1μmol的共价结合的硫羟基/克聚合物。
3．权利要求1或2的聚合物，其特征在于聚合物选自丙烯酸与二乙烯基二醇的硫羟基化共聚物、硫羟基化的脱乙酰壳多糖、硫羟基化的羧甲基纤维素钠、硫羟基化的藻酸钠、硫羟基化的羟丙基纤维素钠、硫羟基化的透明质酸和硫羟基化的果胶或这些硫羟基化聚合物的衍生物。
4．权利要求1-3中任何一项的聚合物，其特征在于硫羟基是优选通过酰胺键与聚合物结合的半胱氨酸基。
5．权利要求1-4中任何一项的聚合物，其特征在于它含有至少一种在聚合物中具有游离硫羟基的单体。
6．权利要求1-5中任何一项的聚合物，其特征在于其对pH7下的肠粘膜的总附着功(TWA)高于120μJ，特别是高于150μJ。
7．权利要求1-6中任何一项的聚合物，其特征在于与非硫羟基化聚合物的TWA相比，该聚合物的TWA增加至少30％，优选TWA增加50％或更多，特别是增加100％或更多，该值是在最适宜硫羟基化聚合物的TWA的pH条件下测量的。
8．一种药物，含有权利要求1-7中任何一项的聚合物和至少一种经粘膜吸收的活性物质。
9．权利要求8的药物，其特征在于活性物质与聚合物非共价结合。
10．权利要求8或9的药物，其特征在于为片剂、栓剂、丸剂、滴眼剂、滴鼻剂、滴耳剂或凝胶的形式，给药方式为吸入或制成微粒。
11．权利要求8-10中任何一项的药物，其特征在于它含有被硫羟基加强的活性物质，优选硫羟基依赖性酶，特别是木瓜蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶。
12．权利要求1-7中任何一项的聚合物在制备药物中的应用。
13．权利要求1-7中任何一项的聚合物在制备粘膜粘附药物中的应用。
14．权利要求1-7中任何一项的聚合物在制备经口服给药的药物中的应用。
15．权利要求12-14中任何一项的聚合物应用，其特征在于将药物制备成延缓释放活性物质的形式。
16．权利要求1-7中任何一项的聚合物在制备用于加强活性物质、特别是活性(多)肽物质通过粘膜、尤其是通过肠粘膜渗透的试剂中的应用。
17．权利要求1-7中任何一项的聚合物在制备真皮内、眼内或关节内使用的试剂中的应用。
18．权利要求1-6中任何一项的聚合物在制备抑制酶、特别是依赖于锌离子的酶的药物中的应用。
19．权利要求1-6中任何一项的聚合物的制备方法，其特征在于基础聚合物装配有不超过10种的不同单体，其中至少一个非端基的单体含有一个在聚合物内游离的端基官能团Ⅰ，该单体与含有至少一个其他官能团Ⅱ的含硫羟基的化合物反应，官能团Ⅰ与官能团Ⅱ在该反应中共同形成共价键，该反应任选地使用偶合剂。
20．权利要求19的方法，其特征在于官能团Ⅰ为羧基，官能团Ⅱ为氨基、优选伯氨基，在该反应中优选使用偶合剂、特别是碳酰二亚胺，其中形成酰胺键。
21．权利要求19或20的方法，其特征在于使用具有伯氨基的巯基化合物、优选半胱氨酸或半胱氨酸衍生物作为含硫羟基的化合物。
22．权利要求19-21中任何一项的方法，其特征在于该反应在pH4-8、特别是5.5-6.5的条件下进行。
23．权利要求19-22中任何一项的方法，其特征在于将所制备的聚合物调节至pH5-9，尤其是6.5-8.5。
24．权利要求8-11中任何一项的药物的制备方法，其特征在于将权利要求1-7中任何一项的聚合物与活性物质结合。
25．权利要求24的方法，其特征在于在结合时，活性物质不与聚合物共价结合。
26．权利要求24或25的方法，其特征在于将聚合物与活性物质共冻干。
27．一种改善聚合物的粘膜粘附性的方法，其特征在于将侧向排列的硫醇基引入这些聚合物中，结果在聚合物与粘液层之间形成二硫化物键。
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