CN1321182C - 马传染性贫血病毒代表毒株的全基因克隆及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了马传染性贫血病毒动物传代致强毒株(辽系强毒株或称LN株)以及马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞减毒株的前病毒DNA全长核苷酸序列,各功能基因的核苷酸序列及其编码的蛋白质的氨基酸序列。这些序列在病毒诊断、疫苗和基因治疗领域具有广泛应用前景。
Description
本发明涉及马传染性贫血病毒的一种强毒株(本文称为辽系野毒株或LN)和一种经过多次马属动物细胞传代得到的减毒疫苗株(本文称为驴胎皮肤细胞适应株或FD)的全长前病毒DNA序列、各功能基因的DNA序列及其编码的蛋白质序列及各功能基因及蛋白产物的应用。所述的两种毒株是我国自行分离得到的。
马传染性贫血病毒(Equine Infectious Anemia Virus,EIAV)是引起马传染性贫血的病原体,是最早被人类发现的病毒。马传染性贫血于1843年首先在法国发现,一个多世纪以来对畜牧业造成了巨大的危害,因而也是各国科学家一直在致力研究和控制的疾病之一。我国自六十年代起投入巨资对该病毒的生物学性状进行了研究,分离并培育出与国外毒株有明显差异的强毒株进行体外驴白细胞传代,逐步驯化该病毒使之成为无致病力,但可以使动物在接种之后产生较坚强免疫保护的疫苗株,该疫苗株自1976年开始生产,1978年在全国大规模应用,至今已接种7000万匹马骡驴,已经控制了该病在我国的流行(沈荣显等,马传染性贫血免疫的研究。中国农业科学,第4期P1-15,1979)。
EIAV属逆转录病毒科慢病毒属(lentivirus),与同属于慢病毒属的人类免疫缺陷病毒(Human Immunodificiency Virus,HIV)在基因组结构,基因编码蛋白及基因调控方式等方面有许多相似之处(J.M.Coffin,The structure And Classfication of Retroviruses,The Retroviridae,Vol.1,p19,edit by Jay A.Levy,Plenum Press),EIAV的逆转录酶、蛋白酶、dUTP酶、包膜糖蛋白和核心蛋白的结构和功能与HIV的相应组份亦有很高的相似性,而且马传染性贫血病毒感染马属动物后引起急性发病的马症状特点为周期性发热、红血球减少性贫血和持续性病毒血症,易于观察和研究,因此该病毒成为研究慢病毒感染和致病机制及病毒酶功能的重要模型(R.C.Montelaro et,al Equine Retroviruses,in:vol.2,p257)。
对EIAV病毒基因组的研究是在70年代分子生物学技术发展并得到广泛应用之后才兴起的。现在GenBank中已发表的马传染性贫血病毒的全长基因组序列均来源于美国标准强毒株(Wyoming株)和日本强毒株(Goshun株),及由它们衍生得到的细胞培养适应株的基因序列。我国的马传染性贫血病毒原始强毒株(辽系野毒株)是我国自行分离的有代表性的流行毒株,经过在驴白细胞和驴皮肤细胞中连续多次传代分别获得了驴白细胞适应株和皮肤细胞适应的疫苗株,这些毒株的获得为我国成功地研制马传染性贫血疫苗并最终控制该病在我国的流行起决定性作用。但是由于我国的马传染性贫血病毒辽系野毒株、驴白细胞适应株和皮肤细胞适应的疫苗株的均采用经典病毒学的路线进行培养和研究,它们的全长基因序列尚未被阐明,因而无法从基因水平上对我国EIAV疫苗的母体毒株进行有效的保护。另外,对病毒基因组的一级结构的研究又是进一步研究各功能基因的高级结构和功能的基础,因此辽系野毒株和皮肤细胞适应株全长基因序列的发明对研究该病毒的感染和致病的分子机制,揭示该病毒在细胞培养传代过程中毒力自然致弱的分子机理可提供直接有力的证据。另外,由于辽系野毒株为EIAV白细胞弱毒疫苗株的母体毒株,其基因序列的阐明将为寻找EIAV毒力基因及比较研究强弱毒株之间在基因水平的差异提供最重要的基础。
因此,本发明的第一个目的在于提供马传染性贫血病毒的一种强毒株(辽系野毒株LN)的全长前病毒DNA序列、各功能基因的序列及其编码蛋白的氨基酸序列,及其应用。
本发明的第二个目的在于提供经过多次马属动物细胞传代得到的减毒疫苗株(驴胎皮肤细胞适应株FD)的全长前病毒DNA序列、各功能基因的序列及其编码蛋白的氨基酸序列,及其应用。
根据本发明的一个方面,本发明涉及马传染性贫血病毒LN毒株的全长前病毒DNA序列及其主要结构基因(gag,pol,env)和调控基因(5’LTR,3’LTR,rev基因,S2基因,tat基因)的DNA序列。其中该毒株的全长基因组包含8236个核苷酸,具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。在该毒株的全长基因组中,核苷酸1-316位为5’LTR,核苷酸7928-8236位为3’LTR,核苷酸457-1917位为gag基因,核苷酸1680-5124位为pol基因,核苷酸5307-7904位为env基因,核苷酸356-454位为tat基因第一外显子,核苷酸5133-5270位为tat基因第二外显子,核苷酸5048-5542位为Rev基因第一外显子,核苷酸7249-7651位为Rev基因第二外显子,核苷酸5281-5487位为S2基因。gag基因、pol基因、env基因、rev基因、tat基因、s2基因的DNA序列和相应的推导的氨基酸序列分别如SEQ ID NOS:2、3、4、5、6、7以及SEQ ID NOS:8、9、10、11、12、13所示。
根据本发明的另一个方面,本发明涉及马传染性贫血病毒FD毒株的全长前病毒DNA序列及其主要结构基因(gag,pol,env)和调控基因(5’LTR,3’LTR,rev基因,S2基因,tat基因)的DNA序列。其中该毒株的全长基因组包含8255个核苷酸,具有如SEQ ID NO:14所示的核苷酸序列。在该毒株的全长基因组中,核苷酸1-328位为5’LTR,核苷酸7919-8255位为3’LTR,核苷酸469-1929位为gag基因,核苷酸1692-5126位为pol基因,核苷酸5319-7448位为env基因,核苷酸368-465位为tat基因第一外显子,核苷酸5142-5282位为tat基因第二外显子,核苷酸5460-5552位为Rev基因第一外显子,核苷酸7256-7657位为Rev基因第二外显子,核苷酸5293-5496位为S2基因。gag基因、pol基因、env基因、rev基因、tat基因、s2基因的DNA序列和相应的推导的氨基酸序列分别如SEQ ID NOS:15、16、17、18、19、20以及SEQ ID NOS:21、22、23、24、25、26所示。
本发明通过以下技术手段实现:首先用标准的PCR方法扩增各毒株的基因,分别克隆到质粒载体中再进行DNA序列的分析,最后得到各毒株的全长基因序列。EIAV毒株在体外可以感染马属动物细胞,病毒在复制过程中将自身的基因整合到细胞的染色体上,形成前病毒DNA,可作为PCR的模板。
本发明是以病毒感染的驴白细胞或驴胎皮肤细胞为研究材料,首先利用基因组DNA提取试剂盒从细胞中提取染色体DNA,以此为模板按标准的PCR方法分3段扩增病毒基因;然后分别将各段基因克隆到质粒载体上。对全部克隆基因进行序列测定,最后获得了两个毒株的全基因组序列(分别为SEQ ID NOS:1和14)。用含有LN和FD毒株的全基因克隆的质粒(分别命名为pCh-LN及pCh-FD)转化的大肠杆菌已与1999年12月28日在保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号分别为CGMCC NO.0434.2及CGMCC NO.0434.1。将得到的两个毒株的全基因组序列与GenBank所发表的国际标准株(Wyoming株,GenBank Accession Number:AF028232)序列进行核苷酸序列的比较,并利用计算机软件对全长基因序列的开放读码框架进行分析,得到各个的结构基因及调控基因的完整开放读码框架及其它们在各自基因组中的位置。
辽系野毒株(LN株)主要结构基因(gag,pol,env)的核苷酸序列及氨基酸序列与国际标准株(Wyoming株,GenBank AccessionNumber:AF028232)相应序列的同源性比较,核苷酸序列的同源性在74.54%-82.74%之间,氨基酸序列的同源性在75.76%-90.74%之间。
驴胎皮肤细胞适应株(FD株)主要结构基因(gag,pol,env)的核苷酸序列及氨基酸序列与国际标准株(Wyoming株,GenBankAccession Number:AF028232)相应序列的同源性比较,核苷酸序列的同源性在73.58%-82.44%之间,氨基酸序列的同源性在74.97%-90.13%之间。
本发明在国内外首次阐明我国自行分离的有代表性的马传染性贫血病毒原始强毒株(辽系野毒株)、经过在驴皮肤细胞中连续多次传代获得的驴皮肤细胞适应的疫苗株的全长基因序列,以及各个结构基因和调控基因及各自编码的蛋白质,将为其他慢病毒疫苗的研制提供重要的指导。由它们的各主要基因及其编码的蛋白质研制的核酸诊断和血清学诊断试剂可分别用于EIAV感染的诊断、EIAV野毒株感染与疫苗株接种的鉴别诊断以及基因工程疫苗的研制,拥有巨大的经济及社会效益。
因此,根据本发明的再一个方面,本发明的马传染性贫血病毒辽系野毒株和驴胎皮肤细胞适应株全长DNA克隆及序列可用于构建基于EIAV核心蛋白(p26)的基因重组诊断试剂。因EIAV自然感染马属动物后,动物常终身携带病毒,血清中抗p26抗体持续保持阳性终身,因此检测血清中的抗p26抗体可以用于确诊马传染性贫血病毒的感染。我们设计了一种在大肠杆菌中表达p26基因的方法,用标准的PCR方法扩增各个毒株的p26基因,在正反向引物中分别设计了NcoI和HindIII位点,然后将扩增的p26基因克隆到原核表达质粒pRSET系列载体的相应位点(NcoI和HindIII)中,转化大肠杆菌BL21菌株,在0.1-1.0mM的IPTG诱导的条件下可以高效表达p26蛋白,表达产物可利用金属离子亲和层析方法(HMAC)进行快速的提纯,得到的纯化蛋白可作为ELISA检测的包被抗原。利用标准的ELISA方法可以直接从血清中快速检测P26抗体,从而对病毒感染做出诊断。
根据本发明的另一方面,本发明涉及用于EIAV自然感染马中中国流行株存在的检测的特异性引物。根据已测定的马传染性贫血病毒LN株全基因序列和国际标准株Wyoming株全基因序列(WyomingGenebank Accession Number:AF028232)设计并合成多对引物,用PCR扩增不同毒株的DNA,选择对中国流行株特异性最佳的引物。结果是针对LN株全基因克隆的2325-2341位和3046-3028位的命名为RT和POL的一对引物的特异性最好,这两个引物的序列分别为
RT:GAgAAgTTATTAggTgC
POL:CCCTgATCTCATCCATgTT
根据本发明的再一方面,本发明的马传染性贫血病毒辽系野毒株和驴胎皮肤细胞适应株全长DNA克隆及序列可用于构建马传染性贫血病毒基因减毒疫苗株。具体地,将中国EIAV强毒株与弱毒株及部分致弱株的全基因组序列分别进行比较,并参考国际上已发表的各个EIAV毒株的基因序列,可以发现EIAV的LTR、env和pol等基因存在较多的点突变。利用人工诱变的方法(Altered Sites II in vittoMutagenesis System,Promega公司)对LTR、env和pol等基因进行人工改造,得到多个基因突变的毒株,分别接种马属动物(马或驴)进行免疫保护试验,在筛选有免疫保护作用的毒株的同时,对影响EIAV毒力的基因进行精确的定位,从而在基因水平上阐明病毒的生物学表型(如病毒的毒力,免疫原性和免疫保护性)产生差异的根本原因,为研究逆转录病毒的基因调控和基因功能提供重要的理论基础。并且运用对影响毒力的基因的研究的结果来指导EIAV及其它逆转录病毒,特别是灵长类逆转录病毒(HIV和SIV)的人工减毒疫苗的构建。
根据本发明的再一方面,本发明的马传染性贫血病毒辽系野毒株和驴胎皮肤细胞适应株全长DNA克隆及序列可用于构建EIAV感染性分子克隆。具体而言,将EIAV的各段基因依次连接,得到全长的EIAV基因组,并将全长基因克隆到低拷贝数质粒载体pLin338中,转化大肠杆菌STABL2菌株,从转化子中筛选阳性克隆。将阳性克隆转染驴胎皮肤细胞(Lipofectin作为转染试剂),当细胞发生明显病变时,用ELISA法检测培养上清中p26抗原,并用标准方法检测培养上清中的RT活性,从而对感染性分子克隆进行筛选。对阳性的感染性分子克隆进行基因改造,用删除或人工诱变方法使毒力基因失活,从而得到非致病的感染性分子克隆,转染驴胎皮肤细胞,可获得毒力减弱的毒株。还可以利用非致病的感染性分子克隆按文献记载的方法构建基因转移载体。
本发明还涉及本发明的马传染性贫血病毒辽系野毒株和驴胎皮肤细胞适应株全长DNA克隆及序列在研制马传染性贫血病毒疫苗株和野毒株感染的PCR及基因探针鉴别诊断试剂中的应用。根据序列比较分析结果,发现在LTR、env和pol等区域野毒株和疫苗株的基因序列存在差异。针对EIAV野毒株和疫苗株基因序列差异最大的区域分别设计PCR引物或合成用地高辛或生物素标记的特异性基因探针,进行PCR或分子杂交检测,根据PCR扩增产物的差异(如扩增片段的长度或有无)或分子杂交的结果来对强弱毒株的感染进行鉴别诊断。
本发明还可用来研制马传染性贫血病毒基因工程疫苗和血清学鉴别诊断试剂。根据马传染性贫血病毒各强弱毒株全基因克隆和序列研究的结果,可以分别构建表达gag基因和env基因的原核表达系统和真核表达系统。表达gag基因(如p26基因)的原核表达系统,以原核表达质粒pET9系列质粒为载体,将目的基因通过常规的PCR方法扩增后,克隆到pET9系列质粒的NdeI和BamHI位点之间,以大肠杆菌BL21为宿主细胞,0.1-1.0Mm IPTG作为诱导剂诱导表达重组蛋白,可得到分子量为26KD的目的蛋白。表达env基因(包膜糖蛋白)的真核表达系统可以选用哺乳动物细胞表达系统(以真核表达质粒pcDNA3为载体,CHO细胞为宿主细胞);或以杆状病毒为载体在昆虫细胞表达系统中进行表达。将gp90基因经标准的PCR方法扩增后克隆到中间转移载体pFastBacl中,转化宿主菌DH10BAC后经蓝白斑筛选法挑选外源gp90基因插入的克隆,提取Bacmid,用于转染昆虫细胞,转染试剂为Lipofectin。48-72小时后待细胞出现明显的CPE时收获培养的上清,作为毒种保留。分别对细胞培养上清和细胞内的表达进行分析,得到的产物为病毒的包膜糖蛋白(gp90)。表达产物经离子交换层析、亲和层析和分子筛等方法纯化后可用于制备血清学诊断试剂或基因工程亚单位疫苗。
本发明还涉及利用中国株马传染性贫血病毒疫苗株基因构建的用于基因治疗的基因转移载体。马传染性贫血病毒不能引起人类发病,构建源于该疫苗株的基因转移载体,不但可以克服以往所用的鼠白血病病毒来源的基因转移载体的基因转移效率较低和不能转染未分裂细胞等缺陷,而且能够提供安全保障。
以下参照附图和实施例进一步描述本发明,其中
图1为含有本发明的FD病毒株全长基因组克隆的质粒pCh-FD的示意图。
图2为含有本发明的LN病毒株全长基因组克隆的质粒pCh-LN的示意图。
图3示出用本发明的特异性引物对EIAV自然感染马中中国流行株存在的检测结果。泳道1-5为中国EIAV自然感染马的外周血样本,泳道6为健康马外周血样本,泳道7为核酸分子量标准,泳道8-12为Wyoming株病毒驴白细胞培养物样本。
实施例1LN及FD病毒株的全长基因组克隆及测序
本实施例分三段扩增出这两个毒株的全部基因,利用它们序列上156位的MluI和2700位的HindIII酶切位点进行连接,分别构建了我国马传贫野毒株(LN株)和弱毒疫苗株(FD株)的全基因克隆。
一.病毒培养和细胞基因组DNA的提取:
LN株:该毒株是将马传染性贫血病毒辽宁分离株通过马体继代17代的血浆毒(LN17)接种100%大牛血清37℃培养的健康驴白细胞(每107细胞接毒1ml),至出现细胞病变(CPE)但细胞未开始脱落时收毒,弃上清,用Qiagen Genomenic DNA Kit(M13433,midi)按说明书提供的方法提取细胞基因组DNA。
FD株:该毒株是将LN株在驴体内继代至117代后转移到驴白细胞培养物上继代至123代,又在驴胎皮肤细胞上继代至11代的弱毒疫苗株(D15V11),病毒滴度108TCID50/ml,接种含10%大牛血清的MEM、37℃培养的30代(D30)驴胎皮肤细胞(每107细胞接毒1ml),至出现细胞病变(CPE)但细胞未开始脱落时收毒,用QiagenGenomenic DNA Kit(M13433,midi)按说明书提供的方法提取细胞基因组DNA。
二.病毒全基因的分段扩增、回收和克隆(两毒株方法相同)
实验中所有内切酶均购自Programa公司。T4连接酶购自华美生物工程公司。
构建全基因克隆的引物如下:
片段名称 | 扩增区域 | 引物名称及位置 | 引物序列(5’-3’) |
5’LTR | 1-321 | 第一轮:正向:LTR-F5反向:GR11第二轮:正向:LTR-F5反向:LTR-R5 | TgTgggATTAATATAAgATTCTAACCTTGCTGCTATGGGAATTgTgggATTAATATAAgATTCTTgTTAgATCTTgAAAACAAgAC |
3.5K | 115-3523 | 第一轮:正向:P26反向:PR40第二轮:正向:732反向:PR40 | GCTGATGCTCTCATAACCTTGGATGTGAATATACCATGTCTGACCGCAATAACCGCATTGTGACGGATGTGAATATACCATGTCTG |
7.7K | 398-8150 | 正向:Ev-Fa:反向:Ev-Ra: | CTggAATTCgTCgACAgCAgAggAGAACTTACAgCAgACTCgAgCAgggACTCAgACCgCAgAATC |
注:所有引物均根据本实验室已有马传贫病毒部分序列设计。
1、5’LTR(1-321)片段
(1)扩增:
第一轮扩增所用引物为正向引物LTR-F5和反向引物GR11,反应体系为10×缓冲液(Mg2+2.5mM)5ul,dNTP(10mM)1ul,LTR-F5(20uM)1ul,GR11(20uM)1ul,Taq(Promega)0.5ul(1.25U),模板1ul(200ng),H2O40.5ul。反应条件为:95℃5分钟,1个循环;94℃40秒,52℃30秒,72℃1.5分钟,30个循环;72℃10分钟,1个循环。第二轮扩增所用引物为正向引物LTR-F5和反向引物LTR-R5,反应体系为10×缓冲液(Mg2+2.5mM)5ul,dNTP(10mM)1ul,LTR-F5(20uM)1ul,LTR-R5(20uM)1ul,Taq(Promega)0.5ul(1.25U),模板5ul(第一轮产物),H2O35.5ul。反应条件为95℃5分钟,1个循环;94℃40秒,52℃30秒,72℃50秒,30个循环;72℃10分钟,1个循环。
(2)PCR产物的回收和克隆和测序
用QIAEX II Extraction Kit(QIAGEN)按说明书提供的方法回收PCR产物,使用pGEMR-T Easy Vector Systeml(Programa)按说明书提供方法克隆PCR产物,转化DH5α,EcoR I酶切鉴定,ABI377测序仪测序,选择正向引物从T7方向插入的克隆,命名为T-easyLTR。
2、3.5K片段(115-3523)
(1)扩增:
第一轮扩增所用引物为正向引物正向:P26和反向引物PR40,反应体系为10×缓冲液(Mg2+ 2.5mM)5ul,dNTP(10mM)1ul,P26(20uM)1ul,PR40(20uM)1ul,Taq(Promega)0.5ul(1.25U),模板1ul(200ng),H2O40.5ul。反应条件为:95℃5分钟,1个循环;94℃40秒,52℃ 30秒,72℃ 4分钟,30个循环;72℃ 10分钟,1个循环。第二轮扩增所用引物为正向引物732和反向引物PR40,反应体系为10×缓冲液(Mg2+2.5mM)5ul,dNTP(10mM)1ul,732(20uM)1ul,PR40(20uM)1ul,Taq(Promega)0.5ul(1.25U),模板5ul(第一轮产物),H2O35.5ul。反应条件为95℃5分钟,1个循环;94℃40秒,55℃30秒,72℃4分钟,30个循环;72℃10分钟,1个循环。
(2)PCR产物的回收和克隆和测序
方法同上述5′LTR扩增产物所用方法,产物命名为T-easy3.5K。
3、7.7K片段(398-8150)
(1)扩增:
所用引物为正向引物Ev-Fa和反向引物Ev-Ra,反应体系和条件使用ExpandTM Long Template PCR System(BOEHRINGERMANNHEIM)按说明书提供的反应体系和反应条件进行。(缓冲液使用Buffer3)
(2)PCR产物的回收、克隆和测序
方法同上述5′LTR扩增产物所用方法,产物命名为T-easy 7.7K。
三.T-easy 8.0K的构建
1.SacII和HindIII酶切T-easy 3.5K,用QIAEX II Extraction Kit(QIAGEN)按说明书提供方法回收2.5K的酶切片段。
2.Sac II和HindIII酶切T-easy7.7K,用QIAEX II Extraction Kit(QIAGEN)按说明书提供方法回收8.5K的酶切片段。
3.连接2.5K和8.5K的酶切片段,转化DH5α,EcoR I酶切和P26、GR11引物PCR鉴定(常规方法),命名为T-easy8.0K.
四.PTZ18LTR构建
1.EcoR I酶切T-easyLTR,用QIAEX II Extraction Kit(QIAGEN)按说明书提供方法回收320bp的酶切片段
2.EcoRI酶切PTZ18(PL-Pharmacia),CIAP处理。
3.将320bp的酶切片段和EcoR I酶切的PTZ18连接,转化大肠杆菌DH5α,EcoRI酶切鉴定,命名为PTZ18LTR。
五.pCh-LN和pCh-FD的构建
1.MluI酶切T-easy8.0K,用QIAEX II Extraction Kit(QIAGEN)按说明书提供方法回收7.9K的酶切片段。
2.Mlu I酶切PTZ18LTR,CIAP处理。
3.将7.9K的酶切片段和Mlu I酶切的PTZ18LTR连接,转化大肠杆菌DH5α,EcoRI酶切和P26、GR11引物PCR鉴定(常规方法),含有插入正确的LN全基因克隆的质粒命名为pCh-LN,含有插入正确的FD全基因克隆的质粒命名为pCh-FD,这两个质粒的示意图分别见图1和图2。
实施例2构建的全基因克隆的应用:体外感染试验
将实施例1中构建的LN株和FD株的全基因克隆在体外通过DOTAP Liposomal Transfection Reagent(Roche)按说明书提供方法分别转染驴白细胞(DLV)和驴胎皮肤细胞(FDD),每104细胞转染10ug质粒,同时设病毒阳性对照和阴性对照,待转染细胞出现细胞病变或病毒阳性对照出现明显CPE时收获,冻融2-3次后,差速离心去细胞沉淀,一部分上清用聚乙二醇浓缩10倍,电镜观察病毒粒子,同时用Nonradioactive Micro-Assay(Cook,1992)测定RT活性;另一部分上清50000rpm超速离心,沉淀用PBS重悬,采用SDS-PAGE和Western-Blotting检测病毒蛋白,来证实它们对细胞的感染性。
实施例3构建的全基因克隆的应用:体内感染试验
选择在实施例2的体外试验中证实对细胞有明显感染性的全基因克隆分别皮下接种马和驴,接种量为100ug质粒,每周采外周血,分离血清,用已建立的EIAV AGID和ELISA方法检测抗体的消长,同时定时测体温和各种血常规指标,观察LN株对动物体的致病力,三个月后,用104稀释的LN强毒株攻击接种FD全基因克隆的马、驴,同时设阳性和阴性对照,以此来证实疫苗株全基因克隆对马、驴的保护性。
实施例4构建嵌和克隆
使用实施例2和3筛选出的在体内外均有良好感染性的全基因克隆,结合序列比较的结果,通过有目的性的置换野毒株和疫苗株不同基因和区域来构建不同的嵌和克隆,采用上述实施例2和3中使用的方法测定这些克隆在体内和体外的感染性区别,以定位野毒株的致病基因和疫苗株的保护基因,从而弄清我国马传贫疫苗株的致弱和保护机制。
实施例5EIAV自然感染马中中国流行株存在的检测
根据已测定的马传染性贫血病毒LN株全基因序列和国际标准株Wyoming株全基因序列(Wyoming Genebank Accession Number:AF028232)设计并合成多对引物,用PR扩增不同毒株的DNA,选择对中国流行株特异性最佳的引物。
分别以中国民间自然感染马外周血白细胞、肝脏细胞和脾脏细胞中的DNA为模板,采用PROMEGA公司Taq聚合酶,进行PCR扩增。PCR混合体系如下:10x缓冲液5ul,2.5mM MgCl25ul,2.5mMdNTP1ul,20uM RTF21ul,20uM RTR201ul,Taq DNA聚合酶2U,H2O34.6ul,模板2ul。充分混匀后,放在PCR仪上,PCR反应条件为:95℃5分钟,之后为94℃50s,50℃40s,72℃50s的30个循环,最后72℃10分钟。
将反应物加到琼脂糖凝胶,通过电泳,可见到大小约700bp的DNA片段条带。而在上述相同条件下,以国际标准株Wyoming株病毒驴白细胞培养物DNA为模板的PCR扩增产物,则没有相应的条带(图3)。
通过多对引物扩增结果比较,下表引物为特异性最佳引物。
引物名称 | 区域 | 位置 | 序列(5’-3’) | 引物方向 |
RTF2 | RT | 2325-2341 | GAgAAgTTATTAggTgC | 正向 |
RTR20 | ROL | 3046-3028 | CCCTgATCTCATCCATgTT | 反向 |
以此对引物对国内采集的40份EIAV自然感染马样品进行DNA扩增检测,40份样品全部能扩增出700bp的DNA片段,对国外的毒株则为阴性。检测结果见图3所示。该检测结果与现行EIAV血清学国家诊断标准检测结果完全一致,并显示有很高的敏感性。
实施例6EIAV基因转移系统的构建
EIAV基因转移系统主要由以下3个质粒组成,为保证有足够的表达,每一质粒都使用人巨细胞病毒(CMV)的立即早期启动子指导转录:
1、表达EIAV gag/pol的质粒:在EIAV感染性克隆的基础上,对其进行改造。在env基因中,缺失SU编码区内的736个核苷酸和TM编码区C末端的168个核苷酸;缺失基因组中对病毒逆转录和整合必需的3′区域(包括多嘌呤区和整个3′LTR)。这些突变保证这一质粒不产生具有复制能力的EIAV。在基因组5′末端的RNA包装信号应该完整地保留。
2、EIAV基因转移载体:该质粒包括对载体逆转录和整合必须的所有顺式作用序列和用于插入cDNA的多克隆位点。因为EIAV的启动子/增强子序列在人细胞株中活性很低,所以用CMV的启动子/增强子替换5′LTR中的U3区。为检测构建的CMV/R/U5的活性,可在其下游插入β-半乳糖苷酶报告基因。
3、病毒膜蛋白基因表达载体:该质粒用于表达病毒膜蛋白(在第1个质粒中env基因被突变)。
用表达EIAV gag/pol的质粒转染人293细胞,以neo基因为选择标记筛选,构建表达EIAV蛋白的辅助细胞系作为EIAV载体的包装细胞系。
序列表
SEQ ID NO:1的信息:
(a)序列特征:
长度:8236bp
类型:核酸
链性:双链
拓扑结构:线性
(b)分子类型:DNA(基因组)
(c)来源:马传染性贫血病毒辽系野毒株全长克隆
(d)序列描述:SEQ ID NO:1
TGTGGGATTA ATACAAGATT CTTATAAGTG ATTATAAAAG TTGCTGATGC TCTCATAACC 60
TTATGTAACC CAAAAGACTA GCTCATGTTG CCAGGCAACT AAACTGTGAT AACCTTTTGT 120
TCCTCATTAT AGTTCCGCTT TTGTGACGCG TTAAGTTCCT GTTTTTACAG TATATAAGTA 180
CTTGTATTCT GACATTTGGA CACTCAGATT CTGCGGTCTG AGTCCCTTCT CTGCTGGGCT 240
AACTCTAGCC TTGGTAATAA ATATAATTCT CTGCTCAGTC CCTGTTCTTA GTCTGTCTTG 300
TTTTCAAGGT CTAACAGTTG GCGCCCGAAC AGGGACCAGA GGGCGCAGAC CCTGCCTGCT 360
GAACCTGGCT GATCGTAGGA TCCCTAGGAC AGCAGAGGAG AACTTACAGA CGTCTTCTGG 420
AGGTGTTCCT GGCCACAACA CAGGAAGACA GGTAAGATGG GAGACTCTTT GACATGGAGC 480
AAAGCGCTCA AGAAGTTAGA GAAGGTGACG GTACAAGGGT CTCAAAAGCT AACTAATGGT 540
AACTGTAATT GGGCGCTGAA TTTGGTGGAC TTATTCCATG ACGCCAATTT TTGTAAAGAA 600
AAAGACTGGC AATTAAGGGA CGACATTCCA TTGTTGGAGG ACGTTTCTCA GACATTGTCA 660
GGACAAGAGA GAGAGGCATT TGAAAAAACT TGGTGGGCAA TAGCTGCCGT TAAGATGGGC 720
TTACAAATTA ATACTGTGAA TGATGCAAAA GCAACATTTA CTATATTAAA AGCTAAGTTT 780
GAAAGAAAGA CTGCAAATAC TACCAAAAAG CAGTCTGAGC CCATGGAAGA ATACCCAATA 840
ATGATTGATG GGGCTGGAAA CCGAAACTTT CGGCCATTAA CACCCAGAGG ATATACTACC 900
TGGGTAAATA CTATACAGCA AAACAATCTC TTAAATGAAG CTAGTGTGAA TCTATTTGGT 960
ATTTTATCAG TAGACTGTAC TTCTGAGGAA ATGAATGCAT TTTTGGATGT AGTACCAGGA 1020
CAAGCAGGAC AAAAACAAGT ACTATTGGAT AATCTTGATA AGATTGCAGA AGAATGGGAT 1080
CGTAGGCACC CGATGCCAAA TCCTCCATTG GTGGCACCAC CACAAGGGCC TATTCCCATG 1140
ACAGCAAGGT TCATTAGGGG ATTGGGAGTT CCTAGAGAAA GACAGATGGA ACCTGCTTTT 1200
GATCAGTTTA GACAAACTTA TAGACAGTGG ATAATAGAAG CAATGACAGA GGGGATAAAA 1260
ATAATGATTG GGAAACCCAA AGCGCAAAAT ATTAGGCAAG GACCCAAAGA ACCCTATCCA 1320
GAGTTTGTAG ACAGATTGCT GTCTCAGATA AAAAGTGAGG GACATCCGGC TGATGTAACT 1380
AAATTCCTGA CAGACACCTT AACTATTCAG AATGCTAATG ATGAATGCAA AAGTGCTATG 1440
AGACATTTGA GGCCAGAAGA TACATTAGAA GAAAAAATGT ATGCATGTAG AGATATTGGC 1500
ACTATGAAAC AAAAAATGGC ATTATTAGCC AAGGCACTTC AAACAGGATT AGCTGGTCCT 1560
ATGAAGGGAG GAATATTTAA AGGGGGACCC TTAGGGGCGA AGCAGACATG TTATAATTGT 1620
GGAAAACCAG GACATTTTTC TAGTCAATGT AAAGCACCTA AAGTATGTTT TAAGTGCAAA 1680
CAGCCAGGAC ATTTCTCAAA ACAATGTATA AATGCTCCAA AAAACGGGAA ACAAGGGGCT 1740
CAGGGGAGGC CCCAAAAACA AACTTTCCCT GTGCAGAAGG AATCAATGAA CAAAACACAA 1800
AAGGAGGAAA AACAGCAAGG GACCTTATAT CCAGATTTGA GTCAGATGAA ACAGGAGTAC 1860
AAGATCAAGG AAGAGGAAAA TCAAGAGGAT CTCAATCTGG ACAGTTTGTG GGAGTAACTT 1920
ATAATTTAGA AAAGAGACCA ACTACAATAG TTTTGATTAA TGACACACCC TTAAATGTAT 1980
TATTGGACAC AGGAGCAGAC ACGTCGGTAC TAACTATTGC ACATTATAAT AGGTTAAAGT 2040
ATAGAGGAAG GAAATATCAA GGTACAGGTA TTGTTGGGGT TGGAGGTAAT GTAGAAACAT 2100
TTTCCACTCC TGTTACGGTA AAAAAGAAAG GAAAACAAAT TAAAACTAGA ATGTTAGTAG 2160
CAGATATCCC AGTTACTATT TTGGGGCGAG ATATCCTTCA AGAATTAGGC GCACAATTAA 2220
TAATGGCTCA ACTTTCAAAA GAAATAACCC CAAGAGAAAT TAAATTAAAA ACAGGCACAG 2280
TAGGGCCTAA GGTTCCCCAA TGGCCACTTA CTAAAGAGAA GTTATTAGGT GCTAAAGAAA 2340
TAGTCAAAAA ATTGTTGGAT GAAGGTAAAA TATCAGAAGC CAGTGATGAT AATCCTTATA 2400
ATTCTCCTAT ATTTGTAATA AAAAAGAAAT CTGGGAAGTG GAGACTATTG CAAGATTTAA 2460
GAGAATTAAA TAAGGTGGTA CAAGTAGGAA CTGAAATATC CAGAGGGTTA CCTCATCCAG 2520
GGGGATTAAT TAAATGTAAT CATATGACAG TATTAGATAT TGGAGATGCC TATTTCACTA 2580
TACCATTAGA TCCAAAGTTT AGACAATATA CAGCATTTAC TGTGCCATCC ATTAATCATC 2640
AGGAACCAGA TAAAAGATAT GTATGGAATT GCTTGCCACA AGGTTTTGTG TTAAGTCCAT 2700
ACATATATCA AAAAACATTA CAGGACATAT TACAAGCTTT TAGAGAAAGG CATCCAGATG 2760
TACAATTATA TCAATATATG GATGATTTAT TCATTGGGAG TAATGGATCT AAAAGACAAC 2820
ATAAGGAACT AGTAGAAGAA TTAAGAGCTA TTCTTTTAGA AAAGGGCTTT GAGACGCCTG 2880
AGGATAAATT GCAGGAAGAG GCACCCTATA ATTGGCTGGG ATATCAACTT AGTCCAGGCA 2940
ATTGGAAAGT ACAAAAGATG CAATTAGAAT TGGTAAAAGA ACCAACATTA AATGATGTGC 3000
AAAAATTAAT GGGAAATATA ACATGGATGA GTTCAGGGGT TCCTGGATTA ACAGTGAAGC 3060
GAATAGCTGC TACCACTAAA GGATGCCTAG ATTTAAATCA AAAGGTAGTA TGGACGGAAG 3120
AAGCACAAAA AGAACTAGAG GAAAATAATA AAAAGATTCA GGAAGCTCAG GGATTGCAAT 3180
ATTATAACCC AGAAGAAGAA GTAATCTGTG AGATTGAAAT TACTAAAAAT TATGAGGCTA 3240
CTTATATAAT AAAACAGTCC CAAGGAATAT TGTGGGCAGG AAAGAAAATT ATGAGGGCTA 3300
ATAAAGGATG GTCCGCAGCA AAAAATCTAA TGTTATTGTT ACAACATGTA GCCACAGGAA 3360
GTATTGTTAG AATTGGAACA TGTCCAAAAT TTAAAGTACC TTTTACTAAA GAACAAGTCA 3420
AATGGGAAAT GGAAAAGGGA TGGTATTATT CATGGCTACC AGATATGGTA TATTCACATC 3480
AAGTTGTTCA TGATGATTGG AAACTGAAAT TAGTAGAGCA ACCAACATCT GGTATAACAA 3540
TTTACACTGA TGGGGGTAAA CAGAATGAAG AAGGAGTTGC GGCTTATGTG ACTAGTAATG 3600
GGAAAACTAA ACAAAAAAGG TTAGGACCTG TTACTCATCA AACTGCTGAG AGGATAGCAA 3660
TACAAATGGC ATTAGAAGAT ACTGAAGAGA CACTGGTAAA TATAGTAACT GATAGTTACT 3720
ACTGTTGGAA AAATATTACA GAAGGATTAG GGTTAGAAGG ACCAGACAGC CCCTGGTGGC 3780
CAATAATTCA AAATATTAGG GCTAAAGAAA TGGTTTATTT TGCTTGGGTA CCAGGTCACA 3840
AGGGAATATA TGGCAATCAA TTGGCAGATG AGGCTACTAA AATAACAGAG GACATTATGT 3900
TAGCATATCA AGGCACACAG ATTAAGGAAA AAAGAGATGA AGATGCAGGG TTTGACTTGT 3960
GTATTCCTTA TGACATAATA ATACCTGTCT CTGAGACAAA GGTTATACCC ACAGATGTAA 4020
AAATACAGGT ACCTCATAAA TGTTTTGGAT GGGTAACTGG TAAGTCATCG GTGGCTAAGC 4080
AAGGGTTATT AATCAATGGG GGAATAATTG ATGAAGGATA CACAGGTGAA ATACAGGTAA 4140
TTTGTATTAA CATTGGAAAG AGTAACATTA AACTCTGGGA AGGACAAAAG TTTGCACAAT 4200
TAATCATATT ACAGCATCGA TCAAATGATA AACAAATCTG GGATGAAAAT AAAGCATCTC 4260
AAAGGGGAGA TAAAGGGTTT GGAAGCACAG GTGTATTTTG GGTAGAGAAT ATCCAAGAGG 4320
CACAAGATGA ACATGAAAAC TGGCATACAT CTCCAAAGAT ATTGGCAAAA AGATATGGGT 4380
TACCATTGAC GGTAGCTAAA CAGATAACTC AAGAATGCCC TCATTGTACT AAGCAAGGAT 4440
CTGGACCAGC AGGTTGTGTA ATGAGATCCC CTAATCATTG GCAGGCTGAT TGTACACATT 4500
TAGAAAACAG GATAATAATG ACATTTGTAG AGTCTAATTC AGGATACATT CATGCTACTC 4560
TATTGTCCAA AGAAAATGCC TTGTGTACTT CATTGGCTAT TTTGGAATGG GTGAGGTTAT 4620
TTTCTCCTAA ATCTTTACAT ACAGACAATG GTACTAATTT TGTAGCAGAG TCAGTAGCAA 4680
ATCTGTTGAA ATTCCTGAAG GTGACACATA CTACAGGAAT ACCTTATCAC CCAGAGAGCC 4740
AAGGCATTGT GGAAAGAGCA AACAGGACAT TAAAAGAAAA AATTAAAAGT CATAGAGAAA 4800
ATACTCAGAC ACTTGAAGCA GCATTACAAC TTGCTCTCAT TACTTGTAAC AAAGGGAGGG 4860
AAAGTATGGG AGGA AAACT CCATGGGAAG TATTTATTAC TAATCAGGCT CAAACAATAC 4920
ATGAAGAACT TTTATTACAA CAAGCACAAT CTTCTAAAAA ATTTTGTTTT TATAAAATTC 4980
CTGGTGAGCA TAATTGGAAG GGGCCCACCA GAGTGTTGTG GAAAGGTGAT GGAGCAGTAG 5040
TGGTCAATGA TGAGGAAAAA GGAATAATTG CTGTGCCTTT AACCAGGACT AAATTATTAA 5100
TAAGACCAAA TTGAGTGTTG TTTCAGGAAT CACCACCAGT CAGCTATCAT TGTCAACTGT 5160
GTTTCCTGAG ATCATTGGGA ATTGACTACC TTGACAGCTC GCTGAAGAAG AAGAACAAAC 5220
AAAGACAGAA GGCCATCAAG GAGGGAAGAC CACCTCAGTA TCTGTTATAA GGTTTGGTGC 5280
ATGGGATTAT TTGGTAAAGG GGTAACATGG TCAGCATTGC ATTCTATGGG GGTATCCCAG 5340
GGGGAATATC AACCCCTATC ACCCAACAAA CAGAATCAAC AGACACACAA AAAGGGGATC 5400
ACATGGTATA TCAACCCTAT TGTTATAATG ACAGCCATAA AGCAGAAATG GCAGAGGCAA 5460
GAGACACAAG ATACCAAGAA GAAATGAACC GGAAAGAAGA GAAAGAAGAT AACAAAAGAA 5520
GAAATAACTG GTGGAAGATA GGTATGTTCC TATTGTGTCT GTTGGGGACC ACTGGAGGAT 5580
TCCTCTGGTG GTATGAGGGG CAAAAGCATT CACATTATAT AGGATTGGTT ACAATAGGAA 5640
GTAGACTAAA TGGTTCAGGA ATGACTAGTG CCATAGAATG TTGGGGTTCA TTTCCTGGGT 5700
GTAGGCCATT TACTAACTAT TTCAGTTATG AGACTAATAG GACTATTAGT AGAGATAATA 5760
ATACTGCCAC TCTGTTAGAT GCTTATCAAA GAGAAGTAAC AAACATATAC AGGACATCTT 5820
GTGTAGATAG TGATCACTGT CAAGAGTATA AATGTAAGCA AGTACAGTTG AAGGAGAACA 5880
GCAGTAACAT TATAATGAAT AATTGTAGTA ACAATAGTTG TGAAGAGTTT TGGGGGTTTA 5940
GCTGGTTAGA ATGTAATCAG ACAGAAAATG CAATAACTAT ATTGGTCCCA GAAGTAGAAA 6000
TGCAGCAAAG CGATAATAAC ACTTGGATTC CAAAAAGGTG TAATGAAACT TGGGCTAGGG 6060
TAAAACATTG TCCGATGGAT TTATTATATG GTATAAATCG AATAAGAATG TGTGTCCAAC 6120
CTCCATTCTT TTTGTTTAAA CAGAATGATA CTTCTAATAA TACTAGTATT CTCAGTAATT 6180
GTGGACCTTT AGTATTTCTT GGAATATTGG AGGACAACAA GGCAGCAATA CAGAATGGGA 6240
GTTGCACTCT TCACAGGACA AATATTAAAA GGCCAGATTA TAGTGGATTT TACCAAGTGC 6300
CTATATTTTA TATATGCAAC TTGACAGGAC TTCAGAGTTG TAATAATGGA TCAATAATTA 6360
GTATAATTAT GTCTGAATCT AATAATGTTC AATACTTGTT ATGCAATACT AGTAATACTA 6420
ATAGTACCAA TAATGCTACT GTCTCTTGTG TAGTACAAAG TTTTGGAGTG ATAGGACAGG 6480
CACATGTGGC GCTGCCCAGA AAAAATAAGA GGTTACAATC TCCAAAGTTT GCTCACTATA 6540
ATTGCACCAT AAATAATAAA ACAGAGTTAA GGCAATGGCA GTTGGTAAAA ACATCAGGCA 6600
TCACTCCTTT ACCCATTTCT TCTACAGCTA ATACTGGATT AGTCAGACAC AAGAGAGATT 6660
TTGGTATATC TGCTATAATA GCTGCCATTG TAGCTGCTAC TGCTATTGCT GCTAGCGTTA 6720
CTATGTCTTA TATCGCTTTG ACAGACGTCA ACAAATTAGA TAGTGTACAA AATCATACTT 6780
TTGAAGTAGA GAACAATACT ATCAATGGCT TGGAGTTGGT AGAAGAGCAA ATTCATATAT 6840
TATATGCTAT GGTTCTCCAA ACACATGCAG ATGTTCAATT GTTAAAAGAA CAACAAAAGA 6900
TTGAGGAAAC ATTTAATTTG ATTGGATGTA TAGAAAGATC ACATACATTT TGTCATACTG 6960
GGCATCCCTG GAATGAATCA TGGGGTCAGC TAAATGATTC TACACAGTGG GATGACTGGG 7020
TAGATAAGAT GGAAAATTTA AATCATGATA TATTAACAAC ACTTCATACT GCTAGAAATA 7080
ATCTAGAACA ATCTATGATA ACTTTTAATA CACCTGACAG TATAGCACAA TTTGGAAAAA 7140
ATATTTGGAG TCATATTGCG AATTGGATTC CTGGATTAGG AGCTTCCATA ATTAAATATA 7200
TAGTGTTATT ATTGCTTGTA TATGTGCTAC TAACCTCTGC ACCTAAGATC CTCAGAGGCC 7260
TCTTGACAAC GATGAGTGGT GCAGGATCCT CCGCCAGTCG CTACCTGAGG AAAAGATACC 7320
ATCACAGACA TGCATCGCGA GGAGACATCT GGGCCCAGGT CCAGTATCAT GCGTACCTGG 7380
CAGACGAGAC TCATGGCTCA GGGGACAAGT CCAACATGCG GAAGCTCTCC AGGAACAACT 7440
GGAATGGCGA ATCAGAGGAG TACAACAGAC GGCAAAAGAA TTGGAAAAAG TTAATAAAGA 7500
GATCTGGAGA GAATTACAAT ACACACGAAG ACAACATGGG GACTATGGGT CGTTTGGTGA 7560
CTACCGCCGC CGAGAAGAAG AACGTTGGGG TGAATCCTCA CCAAGGGTCC TTAAACCTGG 7620
AGATTCAAAG CGAAGGAGGA AACATCTATG ACTGTTGCAT TAAGGCTCAA GAAGGAACTC 7680
TTGCTATTCC TTGCTGTGGC TTCCCACTAT GGCTGCTTTG GGGGCTTATA ATCATATTAG 7740
GACGCTTGTT GGGATATGGG CTTCGGGGAA TTGCAAAAAT CATAATGATT CTGGGGAAAG 7800
GACTAAATGT AATAATTACA GGATTAAGAA AACTATGTGA TTATATTGGG AAAATGCTAA 7860
ATCCAGCTAC ATCTCATGTA ACAATGCCTC AATATGATGT TTAGAAAAAC AAGGGGGGAA 7920
CTGTGGGATT AATACAAGAT TCTTATAAGT GATTATAAAA GTTGCTGATG CTCTCATAAC 7980
CTTATGTAAC CCAAAAGACT AGCTCATGTT GCCAGGCAAC TAAACTGTGA TAACCTTTTG 8040
TTCCTCATTA TAGTTCCGCT TTTGTGACGC GTTAAGTTCC TGTTTTTACA GTATATAAGT 8100
ACTTGTATTC TGACATTTGG ACACTCAGAT TCTGCGGTCT GAGTCCCTTC TCTGCTGGGC 8160
TAACTCTAGC CTTGGTAATA AATATAATTC TCTGCTCAGT CCCTGTTCTT AGTCTGTCTT 8220
GTTTTCAAGA TCTAAC 8236
SEQ ID NO:2的信息:
(a)序列特征:
长度:1461bp
类型:核酸
链性:双链
拓扑结构:线性
(b)分子类型:DNA(基因组)
(c)来源:马传染性贫血病毒辽系野毒株gag基因
(d)序列描述:SEQ ID NO:2
ATGGGAGACT CTTTGACATG GAGCAAAGCG CTCAAGAAGT TAGAGAAGGT GACGGTACAA 60
GGGTCTCAAA AGCTAACTAA TGGTAACTGT AATTGGGCGC TGAATTTGGT GGACTTATTC 120
CATGACGCCA ATTTTTGTAA AGAAAAAGAC TGGCAATTAA GGGACGACAT TCCATTGTTG 180
GAGGACGTTT CTCAGACATT GTCAGGACAA GAGAGAGAGG CATTTGAAAA AACTTGGTGG 240
GCAATAGCTG CCGTTAAGAT GGGCTTACAA ATTAATACTG TGAATGATGC AAAAGCAACA 300
TTTACTATAT TAAAAGCTAA GTTTGAAAGA AAGACTGCAA ATACTACCAA AAAGCAGTCT 360
GAGCCCATGG AAGAATACCC AATAATGATT GATGGGGCTG GAAACCGAAA CTTTCGGCCA 400
TTAACACCCA GAGGATATAC TACCTGGGTA AATACTATAC AGCAAAACAA TCTCTTAAAT 460
GAAGCTAGTG TGAATCTATT TGGTATTTTA TCAGTAGACT GTACTTCTGA GGAAATGAAT 520
GCATTTTTGG ATGTAGTACC AGGACAAGCA GGACAAAAAC AAGTACTATT GGATAATCTT 600
GATAAGATTG CAGAAGAATG GGATCGTAGG CACCCGATGC CAAATCCTCC ATTGGTGGCA 660
CCACCACAAG GGCCTATTCC CATGACAGCA AGGTTCATTA GGGGATTGGG AGTTCCTAGA 720
GAAAGACAGA TGGAACCTGC TTTTGATCAG TTTAGACAAA CTTATAGACA GTGGATAATA 780
GAAGCAATGA CAGAGGGGAT AAAAATAATG ATTGGGAAAC CCAAAGCGCA AAATATTAGG 840
CAAGGACCCA AAGAACCCTA TCCAGAGTTT GTAGACAGAT TGCTGTCTCA GATAAAAAGT 900
GAGGGACATC CGGCTGATGT AACTAAATTC CTGACAGACA CCTTAACTAT TCAGAATGCT 960
AATGATGAAT GCAAAAGTGC TATGAGACAT TTGAGGCCAG AAGATACATT AGAAGAAAAA 1020
ATGTATGCAT GTAGAGATAT TGGCACTATG AAACAAAAAA TGGCATTATT AGCCAAGGCA 1080
CTTCAAACAG GATTAGCTGG TCCTATGAAG GGAGGAATAT TTAAAGGGGG ACCCTTAGGG 1140
GCGAAGCAGA CATGTTATAA TTGTGGAAAA CCAGGACATT TTTCTAGTCA ATGTAAAGCA 1200
CCTAAAGTAT GTTTTAAGTG CAAACAGCCA GGACATTTCT CAAAACAATG TAGAA TGCT 1260
CCAAAAAACG GGAAACAAGG GGCTCAGGGG AGGCCCCAAA AACAAACTTT CCCTGTGCAG 1320
AAGGAATCAA TGAACAAAAC ACAAAAGGAG GAAAAACAGC AAGGGACCTT ATATCCAGAT 1380
TTGAGTCAGA TGAAACAGGA GTACAAGATC AAGGAAGAGG AAAATCAAGA GGATCTCAAT 1440
CTGGACAGTT TGTGGGAGTA A 1461
SEQ ID NO:3的信息:
(a)序列特征:
长度:3435bp
类型:核酸
链性:双链
拓扑结构:线性
(b)分子类型:DNA(基因组)
(c)来源:马传染性贫血病毒辽系野毒株pol基因
(d)序列描述:SEQ ID NO:3
ACAGCCAGGA CATTTCTCAA AACAATGTAT AAATGCTCCA AAAAACGGGA AACAAGGGGC 60
TCAGGGGAGG CCCCAAAAAC AAACTTTCCC TGTGCAGAAG GAATCAATGA ACAAAACACA 120
AAAGGAGGAA AAACAGCAAG GGACCTTATA TCCAGATTTG AGTCAGATGA AACAGGAGTA 180
CAAGATCAAG GAAGAGGAAA ATCAAGAGGA TCTCAATCTG GACAGTTTGT GGGAGTAACT 240
TATAATTTAG AAAAGAGACC AACTACAATA GTTTTGATTA ATGACACACC CTTAAATGTA 300
TTATTGGACA CAGGAGCAGA CACGTCGGTA CTAACTATTG CACATTATAA TAGGTTAAAG 360
TATAGAGGAA GGAAATATCA AGGTACAGGT ATTGTTGGGG TTGGAGGTAA TGTAGAAACA 420
TTTTCCACTC CTGTTACGGT AAAAAAGAAA GGAAAACAAA TTAAAACTAG AATGTTAGTA 480
GCAGATATCC CAGTTACTAT TTTGGGGCGA GATATCCTTC AAGAATTAGG CGCACAATTA 500
ATAATGGCTC AACTTTCAAA AGAAATAACC CCAAGAGAAA TTAAATTAAA AACAGGCACA 600
GTAGGGCCTA AGGTTCCCCA ATGGCCACTT ACTAAAGAGA AGTTATTAGG TGCTAAAGAA 660
ATAGTCAAAA AATTGTTGGA TGAAGGTAAA ATATCAGAAG CCAGTGATGA TAATCCTTAT 720
AATTCTCCTA TATTTGTAAT AAAAAAGAAA TCTGGGAAGT GGAGACTATT GCAAGATTTA 780
AGAGAATTAA ATAAGGTGGT ACAAGTAGGA ACTGAAATAT CCAGAGGGTT ACCTCATCCA 840
GGGGGATTAA TTAAATGTAA TCATATGACA GTATTAGATA TTGGAGATGC CTATTTCACT 900
ATACCATTAG ATCCAAAGTT TAGACAATAT ACAGCATTTA CTGTGCCATC CATTAATCAT 960
CAGGAACCAG ATAAAAGATA TGTATGGAAT TGCTTGCCAC AAGGTTTTGT GTTAAGTCCA 1020
TACATATATC AAAAAACATT ACAGGACATA TTACAAGCTT TTAGAGAAAG GCATCCAGAT 1080
GTACAATTAT ATCAATATAT GGATGATTTA TTCATTGGGA GTAATGGATC TAAAAGACAA 1140
CATAAGGAAC TAGTAGAAGA ATTAAGAGCT ATTCTTTTAG AAAAGGGCTT TGAGACGCCT 1200
GAGGATAAAT TGCAGGAAGA GGCACCCTAT AATTGGCTGG GATATCAACT TAGTCCAGGC 1260
AATTGGAAAG TACAAAAGAT GCAATTAGAA TTGGTAAAAG AACCAACATT AAATGATGTG 1320
CAAAAATTAA TGGGAAATAT AACATGGATG AGTTCAGGGG TTCCTGGATT AACAGTGAAG 1380
CGAATAGCTG CTACCACTAA AGGATGCCTA GATTTAAATC AAAAGGTAGT ATGGACGGAA 1440
GAAGCACAAA AAGAACTAGA GGAAAATAAT AAAAAGATTC AGGAAGCTCA GGGATTGCAA 1500
TATTATAACC CAGAAGAAGA AGTAATCTGT GAGATTGAAA TTACTAAAAA TTATGAGGCT 1560
ACTTATATAA TAAAACAGTC CCAAGGAATA TTGTGGGCAG GAAAGAAAAT TATGAGGGCT 1620
AATAAAGGAT GGTCCGCAGC AAAAAATCTA ATGTTATTGT TACAACATGT AGCCACAGGA 1680
AGTATTGTTA GAATTGGAAC ATGTCCAAAA TTTAAAGTAC CTTTTACTAA AGAACAAGTC 1740
AAATGGGAAA TGGAAAAGGG ATGGTATTAT TCATGGCTAC CAGATATGGT ATATTCACAT 1800
CAAGTTGTTC ATGATGATTG GAAACTGAAA TTAGTAGAGC AACCAACATC TGGTATAACA 1860
ATTTACACTG ATGGGGGTAA ACAGAATGAA GAAGGAGTTG CGGCTTATGT GACTAGTAAT 1920
GGGAAAACTA AACAAAAAAG GTTAGGACCT GTTACTCATC AAACTGCTGA GAGGATAGCA 1980
ATACAAATGG CATTAGAAGA TACTGAAGAG ACACTGGTAA ATATAGTAAC TGATAGTTAC 2040
TACTGTTGGA AAAATATTAC AGAAGGATTA GGGTTAGAAG GACCAGACAG CCCCTGGTGG 2100
CCAATAATTC AAAATATTAG GGCTAAAGAA ATGGTTTATT TTGCTTGGGT ACCAGGTCAC 2160
AAGGGAATAT ATGGCAATCA ATTGGCAGAT GAGGCTACTA AAATAACAGA GGACATTATG 2220
TTAGCATATC AAGGCACACA GATTAAGGAA AAAAGAGATG AAGATGCAGG GTTTGACTTG 2280
TGTATTCCTT ATGACATAAT AATACCTGTC TCTGAGACAA AGGTTATACC CACAGATGTA 2340
AAAATACAGG TACCTCATAA ATGTTTTGGA TGGGTAACTG GTAAGTCATC GGTGGCTAAG 2400
CAAGGGTTAT TAATCAATGG GGGAATAATT GATGAAGGAT ACACAGGTGA AATACAGGTA 2460
ATTTGTATTA ACATTGGAAA GAGTAACATT AAACTCTGGG AAGGACAAAA GTTTGCACAA 2520
TTAATCATAT TACAGCATCG ATCAAATGAT AAACAAATCT GGGATGAAAA TAAAGCATCT 2580
CAAAGGGGAG ATAAAGGGTT TGGAAGCACA GGTGTATTTT GGGTAGAGAA TATCCAAGAG 2640
GCACAAGATG AACATGAAAA CTGGCATACA TCTCCAAAGA TATTGGCAAA AAGATATGGG 2700
TTACCATTGA CGGTAGCTAA ACAGATAACT CAAGAATGCC CTCATTGTAC TAAGCAAGGA 2760
TCTGGACCAG CAGGTTGTGT AATGAGATCC CCTAATCATT GGCAGGCTGA TTGTACACAT 2820
TTAGAAAACA GGATAATAAT GACATTTGTA GAGTCTAATT CAGGATACAT TCATGCTACT 2880
CTATTGTCCA AAGAAAATGC CTTGTGTACT TCATTGGCTA TTTTGGAATG GGTGAGGTTA 2940
TTTTCTCCTA AATCTTTACA TACAGACAAT GGTACTAATT TTGTAGCAGA GTCAGTAGCA 3000
AATCTGTTGA AATTCCTGAA GGTGACACAT ACTACAGGAA TACCTTATCA CCCAGAGAGC 3060
CAAGGCATTG TGGAAAGAGC AAACAGGACA TTAAAAGAAA AAATTAAAAG TCATAGAGAA 3120
AATACTCAGA CACTTGAAGC AGCATTACAA CTTGCTCTCA TTACTTGTAA CAAAGGGAGG 3180
GAAAGTATGG GAGGACAAAC TCCATGGGAA GTATTTATTA CTAATCAGGC TCAAACAATA 3240
CATGAAGAAC TTTTATTACA ACAAGCACAA TCTTCTAAAA AATTTTGTTT TTATAAAATT 3300
CCTGGTGAGC ATAATTGGAA GGGGCCCACC AGAGTGTTGT GGAAAGGTGA TGGAGCAGTA 3360
GTGGTCAATG ATGAGGAAAA AGGAATAATT GCTGTGCCTT TAACCAGGAC TAAATTATTA 3420
ATAAGACCAA ATTGA 3435
SEQ ID NO:4的信息:
(a)序列特征:
长度:2598bp
类型:核酸
链性:双链
拓扑结构:线性
(b)分子类型:DNA(基因组)
(c)来源:马传染性贫血病毒辽系野毒株env基因
(d)序列描述:SEQ ID NO:4
ATGGTCAGCA TTGCATTCTA TGGGGGTATC CCAGGGGGAA TATCAACCCC TATCACCCAA 60
CAAACAGAAT CAACAGACAC ACAAAAAGGG GATCACATGG TATATCAACC CTATTGTTAT 120
AATGACAGCC ATAAAGCAGA AATGGCAGAG GCAAGAGACA CAAGATACCA AGAAGAAATG 180
AACCGGAAAG AAGAGAAAGA AGATAACAAA AGAAGAAATA ACTGGTGGAA GATAGGTATG 240
TTCCTATTGT GTCTGTTGGG GACCACTGGA GGATTCCTCT GGTGGTATGA GGGGCAAAAG 300
CATTCACATT ATATAGGATT GGTTACAATA GGAAGTAGAC TAAATGGTTC AGGAATGACT 360
AGTGCCATAG AATGTTGGGG TTCATTTCCT GGGTGTAGGC CATTTACTAA CTATTTCAGT 420
TATGAGACTA ATAGGACTAT TAGTAGAGAT AATAATACTG CCACTCTGTT AGATGCTTAT 480
CAAAGAGAAG TAACAAACAT ATACAGGACA TCTTGTGTAG ATAGTGATCA CTGTCAAGAG 540
TATAAATGTA AGCAAGTACA GTTGAAGGAG AACAGCAGTA ACATTATAAT GAATAATTGT 600
AGTAACAATA GTTGTGAAGA GTTTTGGGGG TTTAGCTGGT TAGAATGTAA TCAGACAGAA 660
AATGCAATAA CTATATTGGT CCCAGAAGTA GAAATGCAGC AAAGCGATAA TAACACTTGG 720
ATTCCAAAAA GGTGTAATGA AACTTGGGCT AGGGTAAAAC ATTGTCCGAT GGATTTATTA 780
TATGGTATAA ATCGAATAAG AATGTGTGTC CAACCTCCAT TCTTTTTGTT TAAACAGAAT 840
GATACTTCTA ATAATACTAG TATTCTCAGT AATTGTGGAC CTTTAGTATT TCTTGGAATA 900
TTGGAGGACA ACAAGGCAGC AATACAGAAT GGGAGTTGCA CTCTTCACAG GACAAATATT 960
AAAAGGCCAG ATTATAGTGG ATTTTACCAA GTGCCTATAT TTTATATATG CAACTTGACA 1020
GGACTTCAGA GTTGTAATAA TGGATCAATA ATTAGTATAA TTATGTCTGA ATCTAATAAT 1080
GTTCAATACT TGTTATGCAA TACTAGTAAT ACTAATAGTA CCAATAATGC TACTGTCTCT 1140
TGTGTAGTAC AAAGTTTTGG AGTGATAGGA CAGGCACATG TGGCGCTGCC CAGAAAAAAT 1200
AAGAGGTTAC AATCTCCAAA GTTTGCTCAC TATAATTGCA CCATAAATAA TAAAACAGAG 1260
TTAAGGCAAT GGCAGTTGGT AAAAACATCA GGCATCACTC CTTTACCCAT TTCTTCTACA 1320
GCTAATACTG GATTAGTCAG ACACAAGAGA GATTTTGGTA TATCTGCTAT AATAGCTGCC 1380
ATTGTAGCTG CTACTGCTAT TGCTGCTAGC GTTACTATGT CTTATATCGC TTTGACAGAC 1440
GTCAACAAAT TAGATAGTGT ACAAAATCAT ACTTTTGAAG TAGAGAACAA TACTATCAAT 1500
GGCTTGGAGT TGGTAGAAGA GCAAATTCAT ATATTATATG CTATGGTTCT CCAA CACAT 1560
GCAGATGTTC AATTGTTAAA AGAACAACAA AAGATTGAGG AAACATTTAA TTTGATTGGA 1620
TGTATAGAAA GATCACATAC ATTTTGTCAT ACTGGGCATC CCTGGAATGA ATCATGGGGT 1680
CAGCTAAATG ATTCTACACA GTGGGATGAC TGGGTAGATA AGATGGAAAA TTTAAATCAT 1740
GATATATTAA CAACACTTCA TACTGCTAGA AATAATCTAG AACAATCTAT GATAACTTTT 1800
AATACACCTG ACAGTATAGC ACAATTTGGA AAAAATATTT GGAGTCATAT TGCGAATTGG 1860
ATTCCTGGAT TAGGAGCTTC CATAATTAAA TATATAGTGT TATTATTGCT TGTATATGTG 1920
CTACTAACCT CTGCACCTAA GATCCTCAGA GGCCTCTTGA CAACGATGAG TGGTGCAGGA 1980
TCCTCCGCCA GTCGCTACCT GAGGAAAAGA TACCATCACA GACATGCATC GCGAGGAGAC 2040
ATCTGGGCCC AGGTCCAGTA TCATGCGTAC CTGGCAGACG AGACTCATGG CTCAGGGGAC 2100
AAGTCCAACA TGCGGAAGCT CTCCAGGAAC AACTGGAATG GCGAATCAGA GGAGTACAAC 2160
AGACGGCAAA AGAATTGGAA AAAGTTAATA AAGAGATCTG GAGAGAATTA CAATACACAC 2220
GAAGACAACA TGGGGACTAT GGGTCGTTTG GTGACTACCG CCGCCGAGAA GAAGAACGTT 2280
GGGGTGAATC CTCACCAAGG GTCCTTAAAC CTGGAGATTC AAAGCGAAGG AGGAAACATC 2340
TATGACTGTT GCATTAAGGC TCAAGAAGGA ACTCTTGCTA TTCCTTGCTG TGGCTTCCCA 2400
CTATGGCTGC TTTGGGGGCT TATAATCATA TTAGGACGCT TGTTGGGATA TGGGCTTCGG 2460
GGAATTGCAA AAATCATAAT GATTCTGGGG AAAGGACTAA ATGTAATAAT TACAGGATTA 2520
AGAAAACTAT GTGATTATAT TGGGAAAATG CTAAATCCAG CTACATCTCA TGTAACAATG 2580
CCTCAATATG ATGTTTAG 2598
SEQ ID NO:5的信息:
(a)序列特征:
长度:498bp
类型:核酸
链性:双链
拓扑结构:线性
(b)分子类型:DNA(基因组)
(c)来源:马传染性贫血病毒辽系野毒株rev基因
(d)序列描述:SEQ ID NO:5
ATGGCAGAGG CAAGAGACAC AAGATACCAA GAAGAAATGA ACCGGAAAGA AGAGAAAGAA 60
GATAACAAAA GAAGAAATAA CTGGTGGAAG ATAGGTCCTC AGAGGCCTCT TGACAACGAT 120
GAGTGGTGCA GGATCCTCCG CCAGTCGCTA CCTGAGGAAA AGATACCATC ACAGACATGC 180
ATCGCGAGGA GACATCTGGG CCCAGGTCCA GTATCATGCG TACCTGGCAG ACGAGACTCA 240
TGGCTCAGGG GACAAGTCCA ACATGCGGAA GCTCTCCAGG AACAACTGGA ATGGCGAATC 300
AGAGGAGTAC AACAGACGGC AAAAGAATTG GAAAAAGTTA ATAAAGAGAT CTGGAGAGAA 360
TTACAATACA CACGAAGACA ACATGGGGAC TATGGGTCGT TTGGTGACTA CCGCCGCCGA 420
GAAGAAGAAC GTTGGGGTGA ATCCTCACCA AGGGTCCTTA AACCTGGAGA TTCAAAGCGA 480
AGGAGGAAAC ATCTATGA 498
SEQ ID NO:6的信息:
(a)序列特征:
长度:237bp
类型:核酸
链性:双链
拓扑结构:线性
(b)分子类型:DNA(基因组)
(c)来源:马传染性贫血病毒辽系野毒株tat基因
(d)序列描述:SEQ ID NO:6
CTGCTGAACC TGGCTGATCG TAGGATCCCT AGGACAGCAG AGGAGAACTT ACAGACGTCT 60
TCTGGAGGTG TTCCTGGCCA CAACACAGGA AGACAGGTAC CACCAGTCAG CTATCATTGT 120
CAACTGTGTT TCCTGAGATC ATTGGGAATT GACTACCTTG ACAGCTCGCT GAAGAAGAAG 180
AACAAACAAA GACAGAAGGC CATCAAGGAG GGAAGACCAC CTCAGTATCT GTTATAA 237
SEQ ID NO:7的信息:
(a)序列特征:
长度:207bp
类型:核酸
链性:双链
拓扑结构:线性
(b)分子类型:DNA(基因组)
(c)来源:马传染性贫血病毒辽系野毒株s2基因
(d)序列描述:SEQ ID NO:7
ATGGGATTAT TTGGTAAAGG GGTAACATGG TCAGCATTGC ATTCTATGGG GGTATCCCAG 60
GGGGAATATC AACCCCTATC ACCCAACAAA CAGAATCAAC AGACACACAA AAAGGGGATC 120
ACATGGTATA TCAACCCTAT TGTTATAATG ACAGCCATAA AGCAGAAATG GCAGAGGCAA 180
GAGACACAAG ATACCAAGAA GAAATGA 207
SEQ ID NO:8的信息:
(a)序列特征:
长度:487个氨基酸
类型:氨基酸
链性:
拓扑结构:线性
(b)分子类型:蛋白质
(c)来源:马传染性贫血病毒辽系野毒株gag蛋白
(d)序列描述:SEQ ID NO:8
MGDSLTWSKA LKKLEKVTVQ GSQKLTNGNC NWALNLVDLF HDANFCKEKD WQLRDDIPLL
EDVSQTLSGQ EREAFEKTWW AIAAVKMGLQ INTVNDAKAT FTILKAKFER KTANTTKKQS
EPMEEYPIMI DGAGNRNFRP LTPRGYTTWV NTIQQNNLLN EASVNLFGIL SVDCTSEEMN
AFLDVVPGQA GQKQVLLDNL DKIAEEWDRR HPMPNPPLVA PPQGPIPMTA RFIRGLGVPR
ERQMEPAFDQ FRQTYRQWII EAMTEGIKIM IGKPKAQNIR QGPKEPYPEF VDRLLSQIKS
EGHPADVTKF LTDTLTIQNA NDECKSAMRH LRPEDTLEEK MYACRDIGTM KQKMALLAKA
LQTGLAGPMK GGIFKGGPLG AKQTCYNCGK PGHFSSQCKA PKVCFKCKQP GHFSKQCRNA
PKNGKQGAQG RPQKQTFPVQ KESMNKTQKE EKQQGTLYPD LSQMKQEYKI KEEENQEDLN
LDSLWE*
SEQ ID NO:9的信息:
(a)序列特征:
长度:1145个氨基酸
类型:氨基酸
链性:
拓扑结构:线性
(b)分子类型:蛋白质
(c)来源:马传染性贫血病毒辽系野毒株pol蛋白
(d)序列描述:SEQ ID NO:9
TARTFLKTMY KCSKKRETRG SGEAPKTNFP CAEGINEQNT KGGKTARDLI SRFESDETGV
QDQGRGKSRG SQSGQFVGVT YNLEKRPTTI VLINDTPLNV LLDTGADTSV LTIAHYNRLK
YRGRKYQGTG IVGVGGNVET FSTPVTVKKK GKQIKTRMLV ADIPVTILGR DILQELGAQL
IMAQLSKEIT PREIKLKTGT VGPKVPQWPL TKEKLLGAKE IVKKLLDEGK ISEASDDNPY
NSPIFVIKKK SGKWRLLQDL RELNKVVQVG TEISRGLPHP GGLIKCNHMT VLDIGDAYFT
IPLDPKFRQY TAFTVPSINH QEPDKRYVWN CLPQGFVLSP YIYQKTLQDI LQAFRERHPD
VQLYQYMDDL FIGSNGSKRQ HKELVEELRA ILLEKGFETP EDKLQEEAPY NWLGYQLSPG
NWKVQKMQLE LVKEPTLNDV QKLMGNITWM SSGVPGLTVK RIAATTKGCL DLNQKVVWTE
EAQKELEENN KKIQEAQGLQ YYNPEEEVIC EIEITKNYEA TYIIKQSQGI LWAGKKIMRA
NKGWSAAKNL MLLLQHVATG SIVRIGTCPK FKVPFTKEQV KWEMEKGWYY SWLPDMVYSH
QVVHDDWKLK LVEQPTSGIT IYTDGGKQNE EGVAAYVTSN GKTKQKRLGP VTHQTAERIA
IQMALEDTEE TLVNIVTDSY YCWKNITEGL GLEGPDSPWW PIIQNIRAKE MVYFAWVPGH
KGIYGNQLAD EATKITEDIM LAYQGTQIKE KRDEDAGFDL CIPYDIIIPV SETKVIPTDV
KIQVPHKCFG WVTGKSSVAK QGLLINGGII DEGYTGEIQV ICINIGKSNI KLWEGQKFAQ
LIILQHRSND KQIWDENKAS QRGDKGFGST GVFWVENIQE AQDEHENWHT SPKILAKRYG
LPLTVAKQIT QECPHCTKQG SGPAGCVMRS PNHWQADCTH LENRIIMTFV ESNSGYIHAT
LLSKENALCT SLAILEWVRL FSPKSLHTDN GTNFVAESVA NLLKFLKVTH TTGIPYHPES
QGIVERANRT LKEKIKSHRE NTQTLEAALQ LALITCNKGR ESMGGQTPWE VFITNQAQTI
HEELLLQQAQ SSKKFCFYKI PGEHNWKGPT RVLWKGDGAV VVNDEEKGII AVPLTRTKLL
IRPN*
SEQ IDNO:10的信息:
(a)序列特征:
长度:865个氨基酸
类型:氨基酸
链性:
拓扑结构:线性
(b)分子类型:蛋白质
(c)来源:马传染性贫血病毒辽系野毒株env蛋白
(d)序列描述:SEQ ID NO:10
MVSIAFYGGI PGGISTPITQ QTESTDTQKG DHMVYQPYCY NDSHKAEMAE ARDTRYQEEM
NRKEEKEDNK RRNNWWKIGM FLLCLLGTTG GFLWWYEGQK HSHYIGLVTI GSRLNGSGMT
SAIECWGSFP GCRPFTNYFS YETNRTISRD NNTATLLDAY QREVTNIYRT SCVDSDHCQE
YKCKQVQLKE NSSNIIMNNC SNNSCEEFWG FSWLECNQTE NAITILVPEV EMQQSDNNTW
IPKRCNETWA RVKHCPMDLL YGINRIRMCV QPPFFLFKQN DTSNNTSILS NCGPLVFLGI
LEDNKAAIQN GSCTLHRTNI KRPDYSGFYQ VPIFYICNLT GLQSCNNGSI ISIIMSESNN
VQYLLCNTSN NSTNNATVSC VVQSFGVIGQ AHVALPRKNK RLQSPKFAHY NCTINNKTEL
RQWQLVKTSG ITPLPISSTA NTGLVRHKRD FGISAIIAAI VAATAIAASV TMSYIALTDV
NKLDSVQNHT FEVENNTING LELVEEQIHI LYAMVLQTHA DVQLLKEQQK IEETFNLIGC
IERSHTFCHT GHPWNESWGQ LNDSTQWDDW VDKMENLNHD ILTTLHTARN NLEQSMITFN
TPDSIAQFGK NIWSHIANWI PGLGASIIKY IVLLLLVYVL LTSAPKILRG LLTTMSGAGS
SASRYLRKRY HHRHASRGDI WAQVQYHAYL ADETHGSGDK SNMRKLSRNN WNGESEEYNR
RQKNWKKLIK RSGENYNTHE DNMGTMGRLV TTAAEKKNVG VNPHQGSLNL EIQSEGGNIY
DCCIKAQEGT LAIPCCGFPL WLLWGLIIIL GRLLGYGLRG IAKIIMILGK GLNVIITGLR
KLCDYIGKML NPATSHVTMP QYDV*
SEQ ID NO:11的信息:
(a)序列特征:
长度:165个氨基酸
类型:氨基酸
链性:
拓扑结构:线性
(b)分子类型:蛋白质
(c)来源:马传染性贫血病毒辽系野毒株rev蛋白
(d)序列描述:SEQ ID NO:11
MAEARDTRYQ EEMNRKEEKE DNKRRNNWWK IGPQRPLDND EWCRILRQSL PEEKIPSQTC
IARRHLGPGP VSCVPGRRDS WLRGQVQHAE ALQEQLEWRI RGVQQTAKEL EKVNKEIWRE
LQYTRRQHGD YGSFGDYRRR EEERWGESSP RVLKPGDSKR RRKHL
SEQ ID NO:12的信息:
(a)序列特征:
长度:79个氨基酸
类型:氨基酸
链性:
拓扑结构:线性
(b)分子类型:蛋白质
(c)来源:马传染性贫血病毒辽系野毒株tat蛋白
(d)序列描述:SEQ ID NO:12
LLNLADRRIP RTAEENLQTS SGGVPGHNTG RQVPPVSYHC QLCFLRSLGI DYLDSSLKKK
NKQRQKAIKE GRPPQYLL*
SEQ ID NO:13的信息:
(a)序列特征:
长度:69个氨基酸
类型:氨基酸
链性:
拓扑结构:线性
(b)分子类型:蛋白质
(c)来源:马传染性贫血病毒辽系野毒株s2蛋白
(d)序列描述:SEQ ID NO:13
MGLAGKGVTW SALHSMGVSQ GEYQPLSPNK QNQQTHKKGI TWYINPIVIM TAIKQKWQRQ
ETQDTKKK*
SEQ ID NO:14的信息:
(a)序列特征:
长度:8255bp
类型:核酸
链性:双链
拓扑结构:线性
(b)分子类型:DNA(基因组)
(c)来源:马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株全长克隆
(d)序列描述:SEQ ID NO:14
TGTGGGATTA ATATAAGATT CTTATAAGTG AATATGAAAG TTGCTGATGC TCTCATAACC 60
TCATGTAACC CAGATGACTA GCTGATGACT AGCTCATGTT GCTAGGCAAC TGAACTGTAA 120
TAACCTTTTG TTCCTCATTA TAGTTCCGCT TTTGTGACGC GTTAACTTCC TGTTTTTACA 180
GTATATAAGT GCTTGTATTC TGACATTTGG TCGCTCAGAT TCTGCGGTCT GAGTCCCTTC 240
TCTGCTGGGC TAGACCCTAG CCTTGGTAAT AAATATAATT CTCTGCTAAG TCCCTGTTCT 300
TAGTTTGTCT TGTTTTCAAG ACCTAACAGC TGGCGCCCGA ACAGGGACCT GAGGGCGCAG 360
ACCCTGCCTG CTGAACCTGG CTGATCATAG GATCCCTAGG ACAGCAGAGG AGAACTTACA 420
GAAGTCTTCT GGAGGTGTTA CTGGCCACAA CACAGGAAGA CAGGTAAGAT GGGAGACTCT 480
TTGACGTGGA GCAAAGCGCT CAAGAAGTTA GAGAAGGTGA CGGTACAAGG GTCTCAAAAG 540
CTAACTAGTG GTAACTGTAA TTGGGCGCTG AATTTGGTGG ACTTATTCCA TGACACCAAT 600
TTTTGTAAAG AAAAGGACTG GCAATTAAGG GACGTTATTC CATTGTTGGA GGACGTTTCC 660
CAGACGTTGT CAGGACAAGA GAGAGAGGCG TTTGAAAAAA CTTGGTGGGC AATAGCTGCC 720
GTTAAGATGG GCCTACAAAT TAATACTGTG AATGGTGCAA AATCAACATT TTCTATATTA 780
AAAGCCAAGT TTGAAAGAAA GACTGCAAAT ACTACCAAAA AGCAGTCTGA GCCCGAGGAA 840
GAATACCCAA TAATGATTGA TGGGGCTGGA AACAGAAACT TTCGGCCATT AACACCCAGA 900
GGATATACTA CCTGGGTAAA TACTATACAG CAAAACAATC TCCTAAATGA AGCTAGTGTA 960
AATCTATTTG GTATTTTATC AGTAGACTGT ACTTCTGAGG AAATGAATGC ATTTTTGGAT 1020
GTAGTACCAG GACAAGCAGG GCAAAAACAA GTACTATTGG ATAATCTTGA TAAGATTGCA 1080
GAAGAATGGG ATCGTAGGCA CCCGATGCCA AATCCTCCAT TAGTGGCACC ACCACAAGGG 1140
CCTATTCCCA TGACAGCAAG GTTCATTAGG GGATTGGGAG TTCCTAGAGA AAGACAGATG 1200
GAACCTGCTT TTGATCAGTT TAGACAAACT TATAGACAAT GGATAATAGA AGCAATGACA 1260
GAGGGGATAA AAATAATGAT TGGGAAACCT AAAGCGCAAA ATATTAGGCA AGGACCCAAA 1320
GAACCCTATC CAGAGTTTGT AGACAGATTG CTGTCTCAGA TAAAAAGTGA GGGACATCCG 1380
GCTGATATAA CTAAATTCCT GACAGACACT TTAACTATTC AGAATGCTAA TGATGAATGC 1440
AAAAATGCTA TGAGACATTT GAGGCCAGAA GATACATTAG AAGAAAAAAT GTATGCATGT 1500
AGAGATATTG GCACTATGAA ACAAAAAATG GCATTATTAG CCAAGGCACT TCAAACAGGA 1560
TTAGCTGGTC CGATGAAGGG AGGAATATTT AAAGGAGGAC CCTTAGGGGC GAAGCAGACA 1620
TGTTATAATT GTGGAAAACC AGGACATCTT TCTAGTCAAT GTAAAGCACC TAAAGTATGT 1680
TTTAAGTGCA AACAGCCAGG ACACTTCTCA AAACAATGTA TAAATGCTCC AAAAAACGGG 1740
AAACAAGGGG CTCAGGGGAG GCCCCAGAAA CAAACTTTCC CTGTGCAGAA GGGGTCAATG 1800
GACAAAACAC AAATGGAGGA GAAACAGCAA GGGACCTTAT ATCCAGATTT GAGTCAGATG 1860
AAACAGGAGT ACAAGATCAG GGAAGAGGAA AATCAGGAGG ATCTCAATCT GAACAGTTTG 1920
TGGGAGTAAC TTATAATTTA GAAAAGAGAC CAACTACAAT AGTCTTGATT AATGACACAC 1980
CCTTAAATGT ATTATTGGAC ACAGGAGCAG ACGCGTCAGT ACTAACTATT GCACATTATA 2040
ATAGGTTAAA GTATAGAGGA AGAAAATATC AGGGTACAGG TATTGTTGGG GTTGGAGGTA 2100
ATGTAGAGAC ATTTTCCACT CCTGTTACAG CGAAAAAGAA AGGAAAACAA ATTAAAACTA 2160
GAATGTTAGT AGCAGATATC CCAGTTACTA TTTTGGGGCG AGATATCCTT CAAGAATTAG 2220
GCGCACAGTT AATAATGGCT CAACTTTCAA AAGAGATAAC CCCAAGAGAA ATTAAATTAA 2280
AAACAGGCAC AGTAGGGCCT AAGGTTCCCC AATGGCCACT TACTAAAGAG AAGTTATTGG 2340
GTGCTAAAGA AATAGTCAAA AAATTGTTGG ATGAAGGTAA AATATCAGAA GCCAGTGATG 2400
ATAATCCTTA TAATTCTCCT ATATTTGTAA TAAAAAAGAA ATCTGGGAAG TGGAGATTAT 2460
TGCAAGATTT AAGAGAGTTA AATAAGGTGG TACAAGTAGG AACTGAAATA TCCAGAGGGT 2520
TACCTCATCC AGGAGGATTA ATTAAATGTA ATCATATGAC AGTATTAGAT ATTGGAGATG 2580
CATATTTCAC TATACCATTA GATCCAAAGT TTAGACAATA TACAGCATTT ACTGTGCCAT 2640
CCATTAATCA TCAGGAACCA GATAAAAGAT ATGTGTGGAA TTGCTTGCCA CAAGGTTTTG 2700
TGTTAAGTCC ATACATATAT CAAAAAACAT TGCAGGACAT ATTACAAGCT TTTAGAGAAA 2760
GGCATCCAGA TGTACAATTA TATCAATATA TGGATGATTT ATTCATTGGG AGTAATGAAT 2820
CTAAAAGACA ACATAAGGAA CTAGTAGAAG AATTAAGAGC TATTCTTTTA GAAAAGGGCT 2880
TTGAGACGCC TGAGGACAAA TTGCAGGAAG AGGCACCCTA TAATTGGCTG GGATATCAAC 2940
TTAGTCCAGG CAATTGGAAA GTACAAAAGA TGCAATTAGA ATTGGTAAAA GAACCAACAT 3000
TAAATGATGT GCAAAAATTA ATGGGAAATA TAACATGGAT GAGTTCAGGG GTTCCTGGAT 3060
TAACGGTAAA GCAAATAGCT GCTACCACTA AAGGATGCCT AGATTTAAAT CAAAAGGTAG 3120
TATGGACAGA AGAAGCACAA AAAGAACTAG AGGAAAATAA TAAAAAGATT CAGGAAGCTC 3180
AGGGATTGCA ATATTATAAC CCAGAAGAAG AAGTAATCTG TGAGATTGAA ATTACTAAAA 3240
ATTATGAGGC TACTTATATA ATAAAACAGT CTCAAGGAAT ATTGTGGGCA GGAAAGAAAA 3300
TTATGAGGGC CAATAAAGGA TGGTCCGCAG CAAAAAATTT AATGTTGTTG TTACAACATG 3360
TAGCCACAGA AAGTATTGTT AGAATTGGAA CATGTCCAAA ATTTAAAGTA CCTTTTACTA 3420
AAGAACAAGT CAAATGGGAA ATGGAAAAGG GGTGGTATTA TTCATGGCTA CCAGACATGA 3480
TATATTCACA TCAAGTTGTT CATGATGATT GGAGACTGAA ATTAGTAGAG CAACCAACAT 3540
CTGGTATAAC AATTTACACT GATGGAGGTA AACAGGATGA AGAAGGAGTT GCAGCTTATG 3600
TGACTAGTAA TGGGAAAACT AAACAAAAAA GGTTAGGACC TGTTACTCAT CAAACTGCTG 3660
AGAGGATAGC AATACAAATG GCATTAGAAG ATACTGAAGA GACATTGGTA AATATAGTAA 3720
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GCCCCTGGTG GCCAATAATT CAAAATATTA GGGCTAAAGA AATGGTTTAT TTTGCTTGGG 3840
TACCAGGTCA TAAAGGAATA TATGGCAATC AATTGGCAGA TGAGGCTACT AAAATAACTG 3900
AGGAAATTAT GTTAGCATAT CAAGGCACAC AGATTAAGGA AAAAAGAGAT GAAGATGCAG 3960
GGTTTGACTT GTGTATTCCT TATGACATGA TAATACCTGT CTCTGAGACA AAAGTTATAC 4020
CCACAGATGT AAAAATACAG GTACCTCACA AATGTTTTGG ATGGGTAACT GGTAAGTCAT 4080
CAATGGCTAA GCAAGGGTTA TTAATCAATG GGGGAATAAT TGATGAAGGA TATACAGGTG 4140
AAATACAGGT AATTTGTACT AACATTGGAA AGAGTAACAT GAAACTCAGG NAAGGACAAA 4200
AGTTTGCACA ATTAATCATA TTACAGCATC GATCAAATGA TAAACAAATC TGGGATGAAA 4260
ATAAAACATC TCAAAGGGGA GATAAAGGGT TTGGAAGCAC AGGTATATTT TGGGTAGAGA 4320
ATATCCAAGA GGCACAAGAT GAACATGAAA ACTGGCATAC ATCTCCAAAG ATATTGGCAA 4380
AAAGATATGG GTTACCATTG ACAGTAGCTA AACAGATAAC TCAAGAATGC CCTCATTGTA 4440
CTAAACAAGG ATCTGGACCA GCAGGTTGTG TAATGAGATC TCCTAATCAT TGGCAGGCTG 4500
ATTGTACACA TTTAGAAAAC AGGATAATAA TGACATTTGT AGAGTCTAAT TCAGGATACA 4560
TTCATGCTAC TCTATTGTCT AAAGAAAATG CCTTGTGTAC TTCATTGGCT ATTTTGGAAT 4620
GGGTGAGGTT ATTTTCTCCT AAATCTTTAC ATACAGACAA TGGTACTAAT TTTGTAGCAG 4680
AGTCAGTAGC AAATCTGTTG AAATTCCTGA AGGTGACACA TACTACAGGA ATACCTTATC 4740
ACCCAGAGAG CCAAGGCATT GTGGAAAGAG CAAACAGGAC ATTAAAAGAA AAAATTAAAA 4800
GTCATAGAGA AAATACTCAG ACACTTGAAG CAGCATTACA ACTTGCTCTC ATTACTTGTA 4860
ACAAAGGGAG GGAAAGTATG GGAGGACAAA CTCCATGGGA AGTATTTATT ACTAATCAGG 4920
CTCAAACAAT ACATGAAGAA CTTCTATTAC AACAAGCACA ATCTTCTAAA AAATTTTGTT 4980
TTTATAAAAT TCCTGGTGAG CATAATTGGA AGGGGCCCAC CAGAGTGTTG TGGAAAGGTG 5040
ATGGAGCAGT AGTGGTCAAT GATGAGAAAA AAGGAATAAT TGCTGTGCCT TTAACTAGGA 5100
CTAAATTATT AATAAGACCA AATTGAGTGT TGTTTCAGGA ATCACCACCA GTCAGCTATC 5160
ATTGTCAACT GTGTTTCCTG AGATCATTGG GAATTGACTA CCTTGACAGC TCTCTAAAGA 5220
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AAGGTTTGGT GTATGGGATT ATTTGGTAAA GGGGTAACAT GGTCAGCATT GCATTCTATG 5340
GGGGTATCCC AGGGGGAATA TCAACCCCTA TCACCCAACA AACAGAATCA ACAGACACAC 5400
AGAAAGGGGA TCATATGGTA TATCAACCCT ATTGTTATAA TGATAGCCAT AAAGAAGAAA 5460
TGGCAGAGGC AAGAGACACA AGATACCAAG AAGAAATGAA CCGGAAAGAA GATAAAGAAG 5520
ATAAAAGAAG AAATAACTGG TGGAAGATAG GTATGTTCCT ATTGTGTCTG TTAGGGACCA 5580
CTGGAGGATT CCTCTGGTGG TATGAGAGGC AACAACATTC ATATTATATA GGATTGGTTA 5640
CAATAGGAGG TAGACTAAAT GGTTCAGGAA TGACTAGTGC CATAGAATGT TGGGGTTCAT 5700
TTCCTGGGTG TAGGTCATTT ACTAACTATT TCAGTTATGA CACTAATAGG ACTGTTAGTA 5760
CAGATAATAA TACTGCCACT CTGTTAGATG CTTATCAAAG AGAAATAACA AACATATACA 5820
GGACATCTTG TGTGGATAGT GATCACTGTC AAAAATATAA ATGTAACCAA GTACAGTTGG 5880
AGAAGAACAG CAATAACATT ATAATGAATA ATTGTAGTAA CAATAGTTGT GAAGAGTTTT 5940
GGGGGTTTAG CTGGTTAGAA TGTAATCAGA CAGAAAATGC AATAACTATA TTGGTCCCAG 6000
AAGTAGAAAT GCAGCAAAGT AAAAACACTT GGATTCCAAA AGGGTGTAAT GAAACTTGGG 6060
CTAGGGTAAA ACATTGTCCA ATGGATTTAT TATATGGTAT AAATAGAATA AGAATGTGTG 6120
TCCAACCTCC ATTCTTTTTG TTTAAACAGG ATGATACTTC TAATAATACT GGTATTCTCA 6180
GTAATTGTGG ACCTTTAGTA TTTCTTGGAA TATTGGAGGA CAACAAGGCA GCAATACAGA 6240
ATGGGAGTTG CACTCTTCAC AGGACAAATA TTGAAAGGCC AGATTATAGT GGATTTTACC 6300
AAGTGCCTAT ATTTTATATA TGCAACTTGA CAGGACTTCA GAGTTGTAAT AATGGATCAA 6360
TAATTAGTAT AATTATGTCT GAGCCTAATA ATGTTCAATA CTTGTTATGC AACACTAGTA 6420
ATACTAATAG TACCAGTAAT GCTAATGTCT CTTGTGTGGT ACAAAGTTTT GGAGTGATAG 6480
GACAGGCACA TGTGGCGCTG CCCAGAAAAA ATAAGAGGTT ACAATCTCCA AAGTTTGCTC 6540
AATATAATTG CACCATAAAT AATAAAACAG AATTAAGGCA ATGGCAATTG GTGAAAACAT 6600
CAGGCATCAC TCCTTTACCC ATTTCCTCTA CAGCTAATAC TGGATTAGTC AGACACAAGA 6660
GAGACTTTGG TATATCTGCT ATAATAGCTG CCATTGTAGC TGCTACTGCT ATTGCTGCTA 6720
GTGCTACTAT GTCTTATATT GCTTTGACAG AAGTCAACAA ATTAGATAGT GTACAAAATC 6780
ATACATTTAA AGTAGAGAAC AATACTATCA ATAGCATGGA GTTAACAGAA GAGCAAATTC 6840
ATATATTATA TGCTATGGTC CTCCAAACAC ATGCAGATGT TCAATTGTTA AAAGAACAAC 6900
AAAAGATTGA GGAAACATTT AATTTGATTG GATGTATAGA AAGATCACAT ACATTTTGTC 6960
ATACTGGGCA TCCCTGGAAT GAATCATGGG GTCAGCTAAA TGATTCTACA CAGTGGGATG 7020
ACTGGGTAGA TAAGATGGAA AATTTAAATC ATGATATATT AACAACACTT CATACTGCTA 7080
GAAATAATCT AGAACAATCT ATGATAACTT TTAATACACC TGACAGTATA GCACAATTTG 7140
GTAAAAATAT TTGGAGTCAT GTTGCAAATT GGATTCCTGG ATTAGGAGCT TCCATAATTA 7200
AATATATAGT GTTATTATTA CTTGTATATG TGCTACTAAC CTCTGCACCT AAGATCCTCA 7260
GAGGCCTCTT GACAACGATG AGTGGTGCAG GATCCTCCGC CAGTCGCTAC CTGAGGAAAA 7320
GGTACCATCA CAGACATGCA TCGCGAGGAG ACATCTGGGC CCAGGTCCAG TATCATGCGT 7380
ACCTGGCAGA CGAGACTCAT GGATCAGGGG ACAAGTCCAA CATGCGGAAG TTCTCCAGGA 7440
ACAACTGAAA TGGCGAATCA GAGGAGTACA ACAGACGGCA AAAGAATTGG AAAAGGTTAA 7500
TAAAGAGATC TGGAGAGAAT TACAATACAC ACGAAGACAA CATGGGGACT ATGGGTCGTT 7560
TGGTGACTAC CGCCGCCGAG AAGAAGAACG TTGGGGTGAA TCCTCACCAA GGGTCCTTAA 7620
ACCTGGAGAT TCCAAGCGAA GGAGGAAACA TCTATGACTG TTGCCTTAAG GCTCAAGAAG 7680
GAACTCTTGC TATTCCTTGC TGTGGCTTCC CACTATGGCT GCTTTGGGGA CTTATAATCA 7740
TATTAGGACG CTTGTTGGGA TATGGGCTTC GGGGAATTGC AAAAAGCATA ATGATTCTGG 7800
GGAAGGGACT AAATGTAATA ATTACAGGAT TAAGAAAATT ATGTAATTAT ATTGGGAAAA 7860
TGCTAAATCC AGCTACATCT CATGTAACAA TGCCTCAATA TGATGTTTAG AAAAACAAGG 7920
GGGGAACTGT GGGATTAATA TAAGATTCTT ATAAGTGAAT ATGAAAGTTG CTGATGCTCT 7980
CATAACCTCA TGTAACCCAG ATGACTAGCT GATGACTAGC TCATGTTGCT AGGCAACTGA 8040
ACTGTAATAA CCTTTTGTTC CTCATTATAG TTCCGCTTTT GTGACGCGTT AAGTTCCTGT 8100
TTTTACAGTA TATAAGTGCT TGTATTCTGA CATTTGGTTG CTCAGATTCT GCGGTCTGAG 8160
TCCCTTCTCT GCTGGGCTAG ACTCTAGCCT TGGTAATAAA TATAATTCTC TGCTAAGTCC 8220
CTGTTCTTAG TTTGTCTTGT TTTCAAGATC TAACA 8255
SEQ ID NO:15的信息:
(a)序列特征:
长度:1461bp
类型:核酸
链性:双链
拓扑结构:线性
(b)分子类型:DNA(基因组)
(c)来源:马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株gag基因
(d)序列描述:SEQ ID NO:15
ATGGGAGACT CTTTGACGTG GAGCAAAGCG CTCAAGAAGT TAGAGAAGGT GACGGTACAA 60
GGGTCTCAAA AGCTAACTAG TGGTAACTGT AATTGGGCGC TGAATTTGGT GGACTTATTC 120
CATGACACCA ATTTTTGTAA AGAAAAGGAC TGGCAATTAA GGGACGTTAT TCCATTGTTG 180
GAGGACGTTT CCCAGACGTT GTCAGGACAA GAGAGAGAGG CGTTTGAAAA AACTTGGTGG 240
GCAATAGCTG CCGTTAAGAT GGGCCTACAA ATTAATACTG TGAATGGTGC AAAATCAACA 300
TTTTCTATAT TAAAAGCCAA GTTTGAAAGA AAGACTGCAA ATACTACCAA AAAGCAGTCT 360
GAGCCCGAGG AAGAATACCC AATAATGATT GATGGGGCTG GAAACAGAAA CTTTCGGCCA 420
TTAACACCCA GAGGATATAC TACCTGGGTA AATACTATAC AGCAAAACAA TCTCCTAAAT 480
GAAGCTAGTG TAAATCTATT TGGTATTTTA TCAGTAGACT GTACTTCTGA GGAAATGAAT 540
GCATTTTTGG ATGTAGTACC AGGACAAGCA GGGCAAAAAC AAGTACTATT GGATAATCTT 600
GATAAGATTG CAGAAGAATG GGATCGTAGG CACCCGATGC CAAATCCTCC ATTAGTGGCA 660
CCACCACAAG GGCCTATTCC CATGACAGCA AGGTTCATTA GGGGATTGGG AGTTCCTAGA 720
GAAAGACAGA TGGAACCTGC TTTTGATCAG TTTAGACAAA CTTATAGACA ATGGATAATA 780
GAAGCAATGA CAGAGGGGAT AAAAATAATG ATTGGGAAAC CTAAAGCGCA AAATATTAGG 840
CAAGGACCCA AAGAACCCTA TCCAGAGTTT GTAGACAGAT TGCTGTCTCA GATAAAAAGT 900
GAGGGACATC CGGCTGATAT AACTAAATTC CTGACAGACA CTTTAACTAT TCAGAATGCT 960
AATGATGAAT GCAAAAATGC TATGAGACAT TTGAGGCCAG AAGATACATT AGAAGAAAAA 1020
ATGTATGCAT GTAGAGATAT TGGCACTATG AAACAAAAAA TGGCATTATT AGCCAAGGCA 1080
CTTCAAACAG GATTAGCTGG TCCGATGAAG GGAGGAATAT TTAAAGGAGG ACCCTTAGGG 1140
GCGAAGCAGA CATGTTATAA TTGTGGAAAA CCAGGACATC TTTCTAGTCA ATGTAAAGCA 1200
CCTAAAGTAT GTTTTAAGTG CAAACAGCCA GGACACTTCT CAAAACAATG TAGAAATGCT 1260
CCAAAAAACG GGAAACAAGG GGCTCAGGGG AGGCCCCAGA AACAAACTTT CCCTGTGCAG 1320
AAGGGGTCAA TGGACAAAAC ACAAATGGAG GAGAAACAGC AAGGGACCTT ATATCCAGAT 1380
TTGAGTCAGA TGAAACAGGA GTACAAGATC AGGGAAGAGG AAAATCAGGA GGATCTCAAT 1440
CTGAACAGTT TGTGGGAGTA A 1461
SEQ ID NO:16的信息:
(a)序列特征:
长度:3435bp
类型:核酸
链性:双链
拓扑结构:线性
(b)分子类型:DNA(基因组)
(c)来源:马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株pol基因
(d)序列描述:SEQ ID NO:16
ACAGCCAGGA CACTTCTCAA AACAATGTAT AAATGCTCCA AAAAACGGGA AACAAGGGGC 60
TCAGGGGAGG CCCCAGAAAC AAACTTTCCC TGTGCAGAAG GGGTCAATGG ACAAAACACA 120
AATGGAGGAG AAACAGCAAG GGACCTTATA TCCAGATTTG AGTCAGATGA AACAGGAGTA 180
CAAGATCAGG GAAGAGGAAA ATCAGGAGGA TCTCAATCTG AACAGTTTGT GGGAGTAACT 240
TATAATTTAG AAAAGAGACC AACTACAATA GTCTTGATTA ATGACACACC CTTAAATGTA 300
TTATTGGACA CAGGAGCAGA CGCGTCAGTA CTAACTATTG CACATTATAA TAGGTTAAAG 360
TATAGAGGAA GAAAATATCA GGGTACAGGT ATTGTTGGGG TTGGAGGTAA TGTAGAGACA 420
TTTTCCACTC CTGTTACAGC GAAAAAGAAA GGAAAACAAA TTAAAACTAG AATGTTAGTA 480
GCAGATATCC CAGTTACTAT TTTGGGGCGA GATATCCTTC AAGAATTAGG CGCACAGTTA 540
ATAATGGCTC AACTTTCAAA AGAGATAACC CCAAGAGAAA TTAAATTAAA AACAGGCACA 600
GTAGGGCCTA AGGTTCCCCA ATGGCCACTT ACTAAAGAGA AGTTATTGGG TGCTAAAGAA 660
ATAGTCAAAA AATTGTTGGA TGAAGGTAAA ATATCAGAAG CCAGTGATGA TAATCCTTAT 720
AATTCTCCTA TATTTGTAAT AAAAAAGAAA TCTGGGAAGT GGAGATTATT GCAAGATTTA 780
AGAGAGTTAA ATAAGGTGGT ACAAGTAGGA ACTGAAATAT CCAGAGGGTT ACCTCATCCA 840
GGAGGATTAA TTAAATGTAA TCATATGACA GTATTAGATA TTGGAGATGC ATATTTCACT 900
ATACCATTAG ATCCAAAGTT TAGACAATAT ACAGCATTTA CTGTGCCATC CATTAATCAT 960
CAGGAACCAG ATAAAAGATA TGTGTGGAAT TGCTTGCCAC AAGGTTTTGT GTTAAGTCCA 1020
TACATATATC AAAAAACATT GCAGGACATA TTACAAGCTT TTAGAGAAAG GCATCCAGAT 1080
GTACAATTAT ATCAATATAT GGATGATTTA TTCATTGGGA GTAATGAATC TAAAAGACAA 1140
CATAAGGAAC TAGTAGAAGA ATTAAGAGCT ATTCTTTTAG AAAAGGGCTT TGAGACGCCT 1200
GAGGACAAAT TGCAGGAAGA GGCACCCTAT AATTGGCTGG GATATCAACT TAGTCCAGGC 1260
AATTGGAAAG TACAAAAGAT GCAATTAGAA TTGGTAAAAG AACCAACATT AAATGATGTG 1320
CAAAAATTAA TGGGAAATAT AACATGGATG AGTTCAGGGG TTCCTGGATT AACGGTAAAG 1380
CAAATAGCTG CTACCACTAA AGGATGCCTA GATTTAAATC AAAAGGTAGT ATGGACAGAA 1440
GAAGCACAAA AAGAACTAGA GGAAAATAAT AAAAAGATTC AGGAAGCTCA GGGATTGCAA 1500
TATTATAACC CAGAAGAAGA AGTAATCTGT GAGATTGAAA TTACTAAAAA TTATGAGGCT 1560
ACTTATATAA TAAAACAGTC TCAAGGAATA TTGTGGGCAG GAAAGAAAAT TATGAGGGCC 1620
AATAAAGGAT GGTCCGCAGC AAAAAATTTA ATGTTGTTGT TACAACATGT AGCCACAGAA 1680
AGTATTGTTA GAATTGGAAC ATGTCCAAAA TTTAAAGTAC CTTTTACTAA AGAACAAGTC 1740
AAATGGGAAA TGGAAAAGGG GTGGTATTAT TCATGGCTAC CAGACATGAT ATATTCACAT 1800
CAAGTTGTTC ATGATGATTG GAGACTGAAA TTAGTAGAGC AACCAACATC TGGTATAACA 1860
ATTTACACTG ATGGAGGTAA ACAGGATGAA GAAGGAGTTG CAGCTTATGT GACTAGTAAT 1920
GGGAAAACTA AACAAAAAAG GTTAGGACCT GTTACTCATC AAACTGCTGA GAGGATAGCA 1980
ATACAAATGG CATTAGAAGA TACTGAAGAG ACATTGGTAA ATATAGTAAC TGATAGTTAC 2040
TATTGTTGGA AAAATATTAC AGAAGGATTA GGGTTAGAAG GACCAGACAG CCCCTGGTGG 2100
CCAATAATTC AAAATATTAG GGCTAAAGAA ATGGTTTATT TTGCTTGGGT ACCAGGTCAT 2160
AAAGGAATAT ATGGCAATCA ATTGGCAGAT GAGGCTACTA AAATAACTGA GGAAATTATG 2220
TTAGCATATC AAGGCACACA GATTAAGGAA AAAAGAGATG AAGATGCAGG GTTTGACTTG 2280
TGTATTCCTT ATGACATGAT AATACCTGTC TCTGAGACAA AAGTTATACC CACAGATGTA 2340
AAAATACAGG TACCTCACAA ATGTTTTGGA TGGGTAACTG GTAAGTCATC AATGGCTAAG 2400
CAAGGGTTAT TAATCAATGG GGGAATAATT GATGAAGGAT ATACAGGTGA AATACAGGTA 2460
ATTTGTACTA ACATTGGAAA GAGTAACATG AAACTCAGGG AAGGACAAAA GTTTGCACAA 2520
TTAATCATAT TACAGCATCG ATCAAATGAT AAACAAATCT GGGATGAAAA TAAAACATCT 2580
CAAAGGGGAG ATAAAGGGTT TGGAAGCACA GGTATATTTT GGGTAGAGAA TATCCAAGAG 2640
GCACAAGATG AACATGAAAA CTGGCATACA TCTCCAAAGA TATTGGCAAA AAGATATGGG 2700
TTACCATTGA CAGTAGCTAA ACAGATAACT CAAGAATGCC CTCATTGTAC TAAACAAGGA 2760
TCTGGACCAG CAGGTTGTGT AATGAGATCT CCTAATCATT GGCAGGCTGA TTGTACACAT 2820
TTAGAAAACA GGATAATAAT GACATTTGTA GAGTCTAATT CAGGATACAT TCATGCTACT 2880
CTATTGTCTA AAGAAAATGC CTTGTGTACT TCATTGGCTA TTTTGGAATG GGTGAGGTTA 2940
TTTTCTCCTA AATCTTTACA TACAGACAAT GGTACTAATT TTGTAGCAGA GTCAGTAGCA 3000
AATCTGTTGA AATTCCTGAA GGTGACACAT ACTACAGGAA TACCTTATCA CCCAGAGAGC 3060
CAAGGCATTG TGGAAAGAGC AAACAGGACA TTAAAAGAAA AAATTAAAAG TCATAGAGAA 3120
AATACTCAGA CACTTGAAGC AGCATTACAA CTTGCTCTCA TTACTTGTAA CAAAGGGAGG 3180
GAAAGTATGG GAGGACAAAC TCCATGGGAA GTATTTATTA CTAATCAGGC TCAAACAATA 3240
CATGAAGAAC TTCTATTACA ACAAGCACAA TCTTCTAAAA AATTTTGTTT TTATAAAATT 3300
CCTGGTGAGC ATAATTGGAA GGGGCCCACC AGAGTGTTGT GGAAAGGTGA TGGAGCAGTA 3360
GTGGTCAATG ATGAGAAAAA AGGAATAATT GCTGTGCCTT TAACTAGGAC TAAATTATTA 3420
ATAAGACCAA ATTGA 3435
SEQ ID NO:17的信息:
(a)序列特征:
长度:2130bp
类型:核酸
链性:双链
拓扑结构:线性
(b)分子类型:DNA(基因组)
(c)来源:马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株env基因
(d)序列描述:SEQ ID NO:17
ATGGTCAGCA TTGCATTCTA TGGGGGTATC CCAGGGGGAA TATCAACCCC TATCACCCAA 60
CAAACAGAAT CAACAGACAC ACAGAAAGGG GATCATATGG TATATCAACC CTATTGTTAT 120
AATGATAGCC ATAAAGAAGA AATGGCAGAG GCAAGAGACA CAAGATACCA AGAAGAAATG 180
AACCGGAAAG AAGATAAAGA AGATAAAAGA AGAAATAACT GGTGGAAGAT AGGTATGTTC 240
CTATTGTGTC TGTTAGGGAC CACTGGAGGA TTCCTCTGGT GGTATGAGAG GCAACAACAT 300
TCATATTATA TAGGATTGGT TACAATAGGA GGTAGACTAA ATGGTTCAGG AATGACTAGT 360
GCCATAGAAT GTTGGGGTTC ATTTCCTGGG TGTAGGTCAT TTACTAACTA TTTCAGTTAT 420
GACACTAATA GGACTGTTAG TACAGATAAT AATACTGCCA CTCTGTTAGA TGCTTATCAA 480
AGAGAAATAA CAAACATATA CAGGACATCT TGTGTGGATA GTGATCACTG TCAAAAATAT 540
AAATGTAACC AAGTACAGTT GGAGAAGAAC AGCAATAACA TTATAATGAA TAATTGTAGT 600
AACAATAGTT GTGAAGAGTT TTGGGGGTTT AGCTGGTTAG AATGTAATCA GACAGAAAAT 660
GCAATAACTA TATTGGTCCC AGAAGTAGAA ATGCAGCAAA GTAAAAACAC TTGGATTCCA 720
AAAGGGTGTA ATGAAACTTG GGCTAGGGTA AAACATTGTC CAATGGATTT ATTATATGGT 780
ATAAATAGAA TAAGAATGTG TGTCCAACCT CCATTCTTTT TGTTTAAACA GGATGATACT 840
TCTAATAATA CTGGTATTCT CAGTAATTGT GGACCTTTAG TATTTCTTGG AATATTGGAG 900
GACAACAAGG CAGCAATACA GAATGGGAGT TGCACTCTTC ACAGGACAAA TATTGAAAGG 960
CCAGATTATA GTGGATTTTA CCAAGTGCCT ATATTTTATA TATGCAACTT GACAGGACTT 1020
CAGAGTTGTA ATAATGGATC AATAATTAGT ATAATTATGT CTGAGCCTAA TAATGTTCAA 1080
TACTTGTTAT GCAACACTAG TAATACTAAT AGTACCAGTA ATGCTAATGT CTCTTGTGTG 1140
GTACAAAGTT TTGGAGTGAT AGGACAGGCA CATGTGGCGC TGCCCAGAAA AAATAAGAGG 1200
TTACAATCTC CAAAGTTTGC TCAATATAAT TGCACCATAA ATAATAAAAC AGAATTAAGG 1260
CAATGGCAAT TGGTGAAAAC ATCAGGCATC ACTCCTTTAC CCATTTCCTC TACAGCTAAT 1320
ACTGGATTAG TCAGACACAA GAGAGACTTT GGTATATCTG CTATAATAGC TGCCATTGTA 1380
GCTGCTACTG CTATTGCTGC TAGTGCTACT ATGTCTTATA TTGCTTTGAC AGAAGTCAAC 1440
AAATTAGATA GTGTACAAAA TCATACATTT AAAGTAGAGA ACAATACTAT CAATAGCATG 1500
GAGTTAACAG AAGAGCAAAT TCATATATTA TATGCTATGG TCCTCCAAAC ACATGCAGAT 1560
GTTCAATTGT TAAAAGAACA ACAAAAGATT GAGGAAACAT TTAATTTGAT TGGATGTATA 1620
GAAAGATCAC ATACATTTTG TCATACTGGG CATCCCTGGA ATGAATCATG GGGTCAGCTA 1680
AATGATTCTA CACAGTGGGA TGACTGGGTA GATAAGATGG AAAATTTAAA TCATGATATA 1740
TTAACAACAC TTCATACTGC TAGAAATAAT CTAGAACAAT CTATGATAAC TTTTAATACA 1800
CCTGACAGTA TAGCACAATT TGGTAAAAAT ATTTGGAGTC ATGTTGCAAA TTGGATTCCT 1860
GGATTAGGAG CTTCCATAAT TAAATATATA GTGTTATTAT TACTTGTATA TGTGCTACTA 1920
ACCTCTGCAC CTAAGATCCT CAGAGGCCTC TTGACAACGA TGAGTGGTGC AGGATCCTCC 1980
GCCAGTCGCT ACCTGAGGAA AAGGTACCAT CACAGACATG CATCGCGAGG AGACATCTGG 2040
GCCCAGGTCC AGTATCATGC GTACCTGGCA GACGAGACTC ATGGATCAGG GGACAAGTCC 2100
AACATGCGGA AGTTCTCCAG GAACAACTGA 2130
SEQ ID NO:18的信息:
(a)序列特征:
长度:495bp
类型:核酸
链性:双链
拓扑结构:线性
(b)分子类型:DNA(基因组)
(c)来源:马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株rev基因
(d)序列描述:SEQ ID NO:18
ATGGCAGAGG CAAGAGACAC AAGATACCAA GAAGAAATGA ACCGGAAAGA AGATAAAGAA 60
GATAAAAGAA GAAATAACTG GTGGAAGATA GGTCCTCAGA GGCCTCTTGA CAACGATGAG 120
TGGTGCAGGA TCCTCCGCCA GTCGCTACCT GAGGAAAAGG TACCATCACA GACATGCATC 180
GCGAGGAGAC ATCTGGGCCC AGGTCCAGTA TCATGCGTAC CTGGCAGACG AGACTCATGG 240
ATCAGGGGAC AAGTCCAACA TGCGGAAGTT CTCCAGGAAC AACTGAAATG GCGAATCAGA 300
GGAGTACAAC AGACGGCAAA AGAATTGGAA AAGGTTAATA AAGAGATCTG GAGAGAATTA 360
CAATACACAC GAAGACAACA TGGGGACTAT GGGTCGTTTG GTGACTACCG CCGCCGAGAA 420
GAAGAACGTT GGGGTGAATC CTCACCAAGG GTCCTTAAAC CTGGAGATTC CAAGCGAAGG 480
AGGAAACATC TATGA 495
SEQ ID NO:19的信息:
(a)序列特征:
长度:237bp
类型:核酸
链性:双链
拓扑结构:线性
(b)分子类型:DNA(基因组)
(c)来源:马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株tat基因
(d)序列描述:SEQ ID NO:19
CTGCTGAACC TGGCTGATCA TAGGATCCCT AGGACAGCAG AGGAGAACTT ACAGAAGTCT 60
TCTGGAGGTG TTACTGGCCA CAACACAGGA AGACAGGTAC CACCAGTCAG CTATCATTGT 120
CAACTGTGTT TCCTGAGATC ATTGGGAATT GACTACCTTG ACAGCTCTCT AAAGAAGAAG 180
AACAAACAAA GACAGAAGGC CATCAGGGAG GGAAGACCAC CTCAATATCT GTTGTAA 237
SEQ ID NO:20的信息:
(a)序列特征:
长度:207bp
类型:核酸
链性:双链
拓扑结构:线性
(b)分子类型:DNA(基因组)
(c)来源:马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株s2基因
(d)序列描述:SEQ ID NO:20
ATGGGATTAT TTGGTAAAGG GGTAACATGG TCAGCATTGC ATTCTATGGG GGTATCCCAG 60
GGGGAATATC AACCCCTATC ACCCAACAAA CAGAATCAAC AGACACACAG AAAGGGGATC 120
ATATGGTATA TCAACCCTAT TGTTATAATG ATAGCCATAA AGAAGAAATG GCAGAGGCAA 180
GAGACACAAG ATACCAAGAA GAAATGA 207
SEQ ID NO:21的信息:
(a)序列特征:
长度:487个氨基酸
类型:氨基酸
链性:
拓扑结构:线性
(b)分子类型:蛋白质
(c)来源:马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株gag蛋白
(d)序列描述:SEQ ID NO:21
MGDSLTWSKA LKKLEKVTVQ GSQKLTSGNC NWALNLVDLF HDTNFCKEKD WQLRDVIPLL
EDVSQTLSGQ EREAFEKTWW AIAAVKMGLQ INTVNGAKST FSILKAKFER KTANTTKKQS
EPEEEYPIMI DGAGNRNFRP LTPRGYTTWV NTIQQNNLLN EASVNLFGIL SVDCTSEEMN
AFLDVVPGQA GQKQVLLDNL DKIAEEWDRR HPMPNPPLVA PPQGPIPMTA RFIRGLGVPR
ERQMEPAFDQ FRQTYRQWII EAMTEGIKIM IGKPKAQNIR QGPKEPYPEF VDRLLSQIKS
EGHPADITKF LTDTLTIQNA NDECKNAMRH LRPEDTLEEK MYACRDIGTM KQKMALLAKA
LQTGLAGPMK GGIFKGGPLG AKQTCYNCGK PGHLSSQCKA PKVCFKCKQP GHFSKQCRNA
PKNGKQGAQG RPQKQTFPVQ KGSMDKTQME EKQQGTLYPD LSQMKQEYKI REEENQEDLN
LNSLWE*
SEQ ID NO:22的信息:
(a)序列特征:
长度:1145个氨基酸
类型:氨基酸
链性:
拓扑结构:线性
(b)分子类型:蛋白质
(c)来源:马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株pol蛋白
(d)序列描述:SEQ ID NO:22
TARTLLKTMY KCSKKRETRG SGEAPETNFP CAEGVNGQNT NGGETARDLI SRFESDETGV
QDQGRGKSGG SQSEQFVGVT YNLEKRPTTI VLINDTPLNV LLDTGADASV LTIAHYNRLK
YRGRKYQGTG IVGVGGNVET FSTPVTAKKK GKQIKTRMLV ADIPVTILGR DILQELGAQL
IMAQLSKEIT PREIKLKTGT VGPKVPQWPL TKEKLLGAKE IVKKLLDEGK ISEASDDNPY
NSPIFVIKKK SGKWRLLQDL RELNKVVQVG TEISRGLPHP GGLIKCNHMT VLDIGDAYFT
IPLDPKFRQY TAFTVPSINH QEPDKRYVWN CLPQGFVLSP YIYQKTLQDI LQAFRERHPD
VQLYQYMDDL FIGSNESKRQ HKELVEELRA ILLEKGFETP EDKLQEEAPY NWLGYQLSPG
NWKVQKMQLE LVKEPTLNDV QKLMGNITWM SSGVPGLTVK QIAATTKGCL DLNQKVVWTE
EAQKELEENN KKIQEAQGLQ YYNPEEEVIC EIEITKNYEA TYIIKQSQGI LWAGKKIMRA
NKGWSAAKNL MLLLQHVATE SIVRIGTCPK FKVPFTKEQV KWEMEKGWYY SWLPDMIYSH
QVVHDDWRLK LVEQPTSGIT IYTDGGKQDE EGVAAYVTSN GKTKQKRLGP VTHQTAERIA
IQMALEDTEE TLVNIVTDSY YCWKNITEGL GLEGPDSPWW PIIQNIRAKE MVYFAWVPGH
KGIYGNQLAD EATKITEEIM LAYQGTQIKE KRDEDAGFDL CIPYDMIIPV SETKVIPTDV
KIQVPHKCFG WVTGKSSMAK QGLLINGGII DEGYTGEIQV ICTNIGKSNM KLREGQKFAQ
LIILQHRSND KQIWDENKTS QRGDKGFGST GIFWVENIQE AQDEHENWHT SPKILAKRYG
LPLTVAKQIT QECPHCTKQG SGPAGCVMRS PNHWQADCTH LENRIIMTFV ESNSGYIHAT
LLSKENALCT SLAILEWVRL FSPKSLHTDN GTNFVAESVA NLLKFLKVTH TTGIPYHPES
QGIVERANRT LKEKIKSHRE NTQTLEAALQ LALITCNKGR ESMGGQTPWE VFITNQAQTI
HEELLLQQAQ SSKKFCFYKI PGEHNWKGPT RVLWKGDGAV VVNDEKKGII AVPLTRTKLL
IRPN*
SEQ ID NO:23的信息:
(a)序列特征:
长度:710个氨基酸
类型:氨基酸
链性:
拓扑结构:线性
(b)分子类型:蛋白质
(c)来源:马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株env蛋白
(d)序列描述:SEQ ID NO:23
MVSIAFYGGI PGGISTPITQ QTESTDTQKG DHMVYQPYCY NDSHKEEMAE ARDTRYQEEM
NRKEDKEDKR RNNWWKIGMF LLCLLGTTGG FLWWYERQQH SYYIGLVTIG GRLNGSGMTS
AIECWGSFPG CRSFTNYFSY DTNRTVSTDN NTATLLDAYQ REITNIYRTS CVDSDHCQKY
KCNQVQLEKN SNNIIMNNCS NNSCEEFWGF SWLECNQTEN AITILVPEVE MQQSKNTWIP
KGCNETWARV KHCPMDLLYG INRIRMCVQP PFFLFKQDDT SNNTGILSNC GPLVFLGILE
DNKAAIQNGS CTLHRTNIER PDYSGFYQVP IFYICNLTGL QSCNNGSIIS IIMSEPNNVQ
YLLCNTSNTN STSNANVSCV VQSFGVIGQA HVALPRKNKR LQSPKFAQYN CTINNKTELR
QWQLVKTSGI TPLPISSTAN TGLVRHKRDF GISAIIAAIV AATAIAASAT MSYIALTEVN
KLDSVQNHTF KVENNTINSM ELTEEQIHIL YAMVLQTHAD VQLLKEQQKI EETFNLIGCI
ERSHTFCHTG HPWNESWGQL NDSTQWDDWV DKMENLNHDI LTTLHTARNN LEQSMITFNT
PDSIAQFGKN IWSHVANWIP GLGASIIKYI VLLLLVYVLL TSAPKILRGL LTTMSGAGSS
ASRYLRKRYH HRHASRGDIW AQVQYHAYLA DETHGSGDKS NMRKFSRNN*
SEQ ID NO:24的信息:
(a)序列特征:
长度:165个氨基酸
类型:氨基酸
链性:
拓扑结构:线性
(b)分子类型:蛋白质
(c)来源:马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株rev蛋白
(d)序列描述:SEQ ID NO:24
MAEARDTRYQ EEMNRKEDKE DKRRNNWWKI GPQRPLDNDE WCRILRQSLP EEKVPSQTCI
ARRHLGPGPV SCVPGRRDSW IRGQVQHAEV LQEQLKWRIR GVQQTAKELE KVNKEIWREL
QYTRRQHGDY GSFGDYRRRE EERWGESSPR VLKPGDSKRR RRKHL*
SEQ ID NO:25的信息:
(a)序列特征:
长度:79个氨基酸
类型:氨基酸
链性:
拓扑结构:线性
(b)分子类型:蛋白质
(c)来源:马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株tat蛋白
(d)序列描述:SEQ ID NO:25
LLNLADHRIP RTAEENLQKS SGGVTGHNTG RQVPPVSYHC QLCFLRSLGI DYLDSSLKKK
NKQRQKAIRE GRPPQYLL*
SEQ IDNO:26的信息:
(a)序列特征:
长度:69个氨基酸
类型:氨基酸
链性:
拓扑结构:线性
(b)分子类型:蛋白质
(c)来源:马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株s2蛋白
(d)序列描述:SEQ ID NO:26
MGLFGKGVTW SALHSMGVSQ GEYQPLSPNK QNQQTHRKGI IWYINPIVIM IAIKKKWQRQ
ETODTKKK*
Claims (4)
1、马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株的全基因组序列,其特征在于所述序列如SEQ ID NO:14所示。
2、马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株env基因编码的氨基酸序列,其特征在于所述序列如SEQ ID NO:23所示。
3、含有权利要求1所述的马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株的全基因组序列的质粒pCh-FD,所述质粒如图1所示。
4、用权利要求3所述的质粒转化的大肠杆菌,其特征在于所述大肠杆菌的保藏号为CGMCC NO.0434.1。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CNB991275322A CN1321182C (zh) | 1999-12-30 | 1999-12-30 | 马传染性贫血病毒代表毒株的全基因克隆及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
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