CN1321182C - 马传染性贫血病毒代表毒株的全基因克隆及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了马传染性贫血病毒动物传代致强毒株(辽系强毒株或称LN株)以及马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞减毒株的前病毒DNA全长核苷酸序列,各功能基因的核苷酸序列及其编码的蛋白质的氨基酸序列。这些序列在病毒诊断、疫苗和基因治疗领域具有广泛应用前景。

Description

马传染性贫血病毒代表毒株的全基因克隆及其应用
本发明涉及马传染性贫血病毒的一种强毒株(本文称为辽系野毒株或LN)和一种经过多次马属动物细胞传代得到的减毒疫苗株(本文称为驴胎皮肤细胞适应株或FD)的全长前病毒DNA序列、各功能基因的DNA序列及其编码的蛋白质序列及各功能基因及蛋白产物的应用。所述的两种毒株是我国自行分离得到的。
马传染性贫血病毒(Equine Infectious Anemia Virus,EIAV)是引起马传染性贫血的病原体,是最早被人类发现的病毒。马传染性贫血于1843年首先在法国发现,一个多世纪以来对畜牧业造成了巨大的危害,因而也是各国科学家一直在致力研究和控制的疾病之一。我国自六十年代起投入巨资对该病毒的生物学性状进行了研究,分离并培育出与国外毒株有明显差异的强毒株进行体外驴白细胞传代,逐步驯化该病毒使之成为无致病力,但可以使动物在接种之后产生较坚强免疫保护的疫苗株,该疫苗株自1976年开始生产,1978年在全国大规模应用,至今已接种7000万匹马骡驴,已经控制了该病在我国的流行(沈荣显等,马传染性贫血免疫的研究。中国农业科学,第4期P1-15,1979)。
EIAV属逆转录病毒科慢病毒属(lentivirus),与同属于慢病毒属的人类免疫缺陷病毒(Human Immunodificiency Virus,HIV)在基因组结构,基因编码蛋白及基因调控方式等方面有许多相似之处(J.M.Coffin,The structure And Classfication of Retroviruses,The Retroviridae,Vol.1,p19,edit by Jay A.Levy,Plenum Press),EIAV的逆转录酶、蛋白酶、dUTP酶、包膜糖蛋白和核心蛋白的结构和功能与HIV的相应组份亦有很高的相似性,而且马传染性贫血病毒感染马属动物后引起急性发病的马症状特点为周期性发热、红血球减少性贫血和持续性病毒血症,易于观察和研究,因此该病毒成为研究慢病毒感染和致病机制及病毒酶功能的重要模型(R.C.Montelaro et,al Equine Retroviruses,in:vol.2,p257)。
对EIAV病毒基因组的研究是在70年代分子生物学技术发展并得到广泛应用之后才兴起的。现在GenBank中已发表的马传染性贫血病毒的全长基因组序列均来源于美国标准强毒株(Wyoming株)和日本强毒株(Goshun株),及由它们衍生得到的细胞培养适应株的基因序列。我国的马传染性贫血病毒原始强毒株(辽系野毒株)是我国自行分离的有代表性的流行毒株,经过在驴白细胞和驴皮肤细胞中连续多次传代分别获得了驴白细胞适应株和皮肤细胞适应的疫苗株,这些毒株的获得为我国成功地研制马传染性贫血疫苗并最终控制该病在我国的流行起决定性作用。但是由于我国的马传染性贫血病毒辽系野毒株、驴白细胞适应株和皮肤细胞适应的疫苗株的均采用经典病毒学的路线进行培养和研究,它们的全长基因序列尚未被阐明,因而无法从基因水平上对我国EIAV疫苗的母体毒株进行有效的保护。另外,对病毒基因组的一级结构的研究又是进一步研究各功能基因的高级结构和功能的基础,因此辽系野毒株和皮肤细胞适应株全长基因序列的发明对研究该病毒的感染和致病的分子机制,揭示该病毒在细胞培养传代过程中毒力自然致弱的分子机理可提供直接有力的证据。另外,由于辽系野毒株为EIAV白细胞弱毒疫苗株的母体毒株,其基因序列的阐明将为寻找EIAV毒力基因及比较研究强弱毒株之间在基因水平的差异提供最重要的基础。
因此,本发明的第一个目的在于提供马传染性贫血病毒的一种强毒株(辽系野毒株LN)的全长前病毒DNA序列、各功能基因的序列及其编码蛋白的氨基酸序列,及其应用。
本发明的第二个目的在于提供经过多次马属动物细胞传代得到的减毒疫苗株(驴胎皮肤细胞适应株FD)的全长前病毒DNA序列、各功能基因的序列及其编码蛋白的氨基酸序列,及其应用。
根据本发明的一个方面,本发明涉及马传染性贫血病毒LN毒株的全长前病毒DNA序列及其主要结构基因(gag,pol,env)和调控基因(5’LTR,3’LTR,rev基因,S2基因,tat基因)的DNA序列。其中该毒株的全长基因组包含8236个核苷酸,具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。在该毒株的全长基因组中,核苷酸1-316位为5’LTR,核苷酸7928-8236位为3’LTR,核苷酸457-1917位为gag基因,核苷酸1680-5124位为pol基因,核苷酸5307-7904位为env基因,核苷酸356-454位为tat基因第一外显子,核苷酸5133-5270位为tat基因第二外显子,核苷酸5048-5542位为Rev基因第一外显子,核苷酸7249-7651位为Rev基因第二外显子,核苷酸5281-5487位为S2基因。gag基因、pol基因、env基因、rev基因、tat基因、s2基因的DNA序列和相应的推导的氨基酸序列分别如SEQ ID NOS:2、3、4、5、6、7以及SEQ ID NOS:8、9、10、11、12、13所示。
根据本发明的另一个方面,本发明涉及马传染性贫血病毒FD毒株的全长前病毒DNA序列及其主要结构基因(gag,pol,env)和调控基因(5’LTR,3’LTR,rev基因,S2基因,tat基因)的DNA序列。其中该毒株的全长基因组包含8255个核苷酸,具有如SEQ ID NO:14所示的核苷酸序列。在该毒株的全长基因组中,核苷酸1-328位为5’LTR,核苷酸7919-8255位为3’LTR,核苷酸469-1929位为gag基因,核苷酸1692-5126位为pol基因,核苷酸5319-7448位为env基因,核苷酸368-465位为tat基因第一外显子,核苷酸5142-5282位为tat基因第二外显子,核苷酸5460-5552位为Rev基因第一外显子,核苷酸7256-7657位为Rev基因第二外显子,核苷酸5293-5496位为S2基因。gag基因、pol基因、env基因、rev基因、tat基因、s2基因的DNA序列和相应的推导的氨基酸序列分别如SEQ ID NOS:15、16、17、18、19、20以及SEQ ID NOS:21、22、23、24、25、26所示。
本发明通过以下技术手段实现:首先用标准的PCR方法扩增各毒株的基因,分别克隆到质粒载体中再进行DNA序列的分析,最后得到各毒株的全长基因序列。EIAV毒株在体外可以感染马属动物细胞,病毒在复制过程中将自身的基因整合到细胞的染色体上,形成前病毒DNA,可作为PCR的模板。
本发明是以病毒感染的驴白细胞或驴胎皮肤细胞为研究材料,首先利用基因组DNA提取试剂盒从细胞中提取染色体DNA,以此为模板按标准的PCR方法分3段扩增病毒基因;然后分别将各段基因克隆到质粒载体上。对全部克隆基因进行序列测定,最后获得了两个毒株的全基因组序列(分别为SEQ ID NOS:1和14)。用含有LN和FD毒株的全基因克隆的质粒(分别命名为pCh-LN及pCh-FD)转化的大肠杆菌已与1999年12月28日在保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号分别为CGMCC NO.0434.2及CGMCC NO.0434.1。将得到的两个毒株的全基因组序列与GenBank所发表的国际标准株(Wyoming株,GenBank Accession Number:AF028232)序列进行核苷酸序列的比较,并利用计算机软件对全长基因序列的开放读码框架进行分析,得到各个的结构基因及调控基因的完整开放读码框架及其它们在各自基因组中的位置。
辽系野毒株(LN株)主要结构基因(gag,pol,env)的核苷酸序列及氨基酸序列与国际标准株(Wyoming株,GenBank AccessionNumber:AF028232)相应序列的同源性比较,核苷酸序列的同源性在74.54%-82.74%之间,氨基酸序列的同源性在75.76%-90.74%之间。
驴胎皮肤细胞适应株(FD株)主要结构基因(gag,pol,env)的核苷酸序列及氨基酸序列与国际标准株(Wyoming株,GenBankAccession Number:AF028232)相应序列的同源性比较,核苷酸序列的同源性在73.58%-82.44%之间,氨基酸序列的同源性在74.97%-90.13%之间。
本发明在国内外首次阐明我国自行分离的有代表性的马传染性贫血病毒原始强毒株(辽系野毒株)、经过在驴皮肤细胞中连续多次传代获得的驴皮肤细胞适应的疫苗株的全长基因序列,以及各个结构基因和调控基因及各自编码的蛋白质,将为其他慢病毒疫苗的研制提供重要的指导。由它们的各主要基因及其编码的蛋白质研制的核酸诊断和血清学诊断试剂可分别用于EIAV感染的诊断、EIAV野毒株感染与疫苗株接种的鉴别诊断以及基因工程疫苗的研制,拥有巨大的经济及社会效益。
因此,根据本发明的再一个方面,本发明的马传染性贫血病毒辽系野毒株和驴胎皮肤细胞适应株全长DNA克隆及序列可用于构建基于EIAV核心蛋白(p26)的基因重组诊断试剂。因EIAV自然感染马属动物后,动物常终身携带病毒,血清中抗p26抗体持续保持阳性终身,因此检测血清中的抗p26抗体可以用于确诊马传染性贫血病毒的感染。我们设计了一种在大肠杆菌中表达p26基因的方法,用标准的PCR方法扩增各个毒株的p26基因,在正反向引物中分别设计了NcoI和HindIII位点,然后将扩增的p26基因克隆到原核表达质粒pRSET系列载体的相应位点(NcoI和HindIII)中,转化大肠杆菌BL21菌株,在0.1-1.0mM的IPTG诱导的条件下可以高效表达p26蛋白,表达产物可利用金属离子亲和层析方法(HMAC)进行快速的提纯,得到的纯化蛋白可作为ELISA检测的包被抗原。利用标准的ELISA方法可以直接从血清中快速检测P26抗体,从而对病毒感染做出诊断。
根据本发明的另一方面,本发明涉及用于EIAV自然感染马中中国流行株存在的检测的特异性引物。根据已测定的马传染性贫血病毒LN株全基因序列和国际标准株Wyoming株全基因序列(WyomingGenebank Accession Number:AF028232)设计并合成多对引物,用PCR扩增不同毒株的DNA,选择对中国流行株特异性最佳的引物。结果是针对LN株全基因克隆的2325-2341位和3046-3028位的命名为RT和POL的一对引物的特异性最好,这两个引物的序列分别为
RT:GAgAAgTTATTAggTgC
POL:CCCTgATCTCATCCATgTT
根据本发明的再一方面,本发明的马传染性贫血病毒辽系野毒株和驴胎皮肤细胞适应株全长DNA克隆及序列可用于构建马传染性贫血病毒基因减毒疫苗株。具体地,将中国EIAV强毒株与弱毒株及部分致弱株的全基因组序列分别进行比较,并参考国际上已发表的各个EIAV毒株的基因序列,可以发现EIAV的LTR、env和pol等基因存在较多的点突变。利用人工诱变的方法(Altered Sites II in vittoMutagenesis System,Promega公司)对LTR、env和pol等基因进行人工改造,得到多个基因突变的毒株,分别接种马属动物(马或驴)进行免疫保护试验,在筛选有免疫保护作用的毒株的同时,对影响EIAV毒力的基因进行精确的定位,从而在基因水平上阐明病毒的生物学表型(如病毒的毒力,免疫原性和免疫保护性)产生差异的根本原因,为研究逆转录病毒的基因调控和基因功能提供重要的理论基础。并且运用对影响毒力的基因的研究的结果来指导EIAV及其它逆转录病毒,特别是灵长类逆转录病毒(HIV和SIV)的人工减毒疫苗的构建。
根据本发明的再一方面,本发明的马传染性贫血病毒辽系野毒株和驴胎皮肤细胞适应株全长DNA克隆及序列可用于构建EIAV感染性分子克隆。具体而言,将EIAV的各段基因依次连接,得到全长的EIAV基因组,并将全长基因克隆到低拷贝数质粒载体pLin338中,转化大肠杆菌STABL2菌株,从转化子中筛选阳性克隆。将阳性克隆转染驴胎皮肤细胞(Lipofectin作为转染试剂),当细胞发生明显病变时,用ELISA法检测培养上清中p26抗原,并用标准方法检测培养上清中的RT活性,从而对感染性分子克隆进行筛选。对阳性的感染性分子克隆进行基因改造,用删除或人工诱变方法使毒力基因失活,从而得到非致病的感染性分子克隆,转染驴胎皮肤细胞,可获得毒力减弱的毒株。还可以利用非致病的感染性分子克隆按文献记载的方法构建基因转移载体。
本发明还涉及本发明的马传染性贫血病毒辽系野毒株和驴胎皮肤细胞适应株全长DNA克隆及序列在研制马传染性贫血病毒疫苗株和野毒株感染的PCR及基因探针鉴别诊断试剂中的应用。根据序列比较分析结果,发现在LTR、env和pol等区域野毒株和疫苗株的基因序列存在差异。针对EIAV野毒株和疫苗株基因序列差异最大的区域分别设计PCR引物或合成用地高辛或生物素标记的特异性基因探针,进行PCR或分子杂交检测,根据PCR扩增产物的差异(如扩增片段的长度或有无)或分子杂交的结果来对强弱毒株的感染进行鉴别诊断。
本发明还可用来研制马传染性贫血病毒基因工程疫苗和血清学鉴别诊断试剂。根据马传染性贫血病毒各强弱毒株全基因克隆和序列研究的结果,可以分别构建表达gag基因和env基因的原核表达系统和真核表达系统。表达gag基因(如p26基因)的原核表达系统,以原核表达质粒pET9系列质粒为载体,将目的基因通过常规的PCR方法扩增后,克隆到pET9系列质粒的NdeI和BamHI位点之间,以大肠杆菌BL21为宿主细胞,0.1-1.0Mm IPTG作为诱导剂诱导表达重组蛋白,可得到分子量为26KD的目的蛋白。表达env基因(包膜糖蛋白)的真核表达系统可以选用哺乳动物细胞表达系统(以真核表达质粒pcDNA3为载体,CHO细胞为宿主细胞);或以杆状病毒为载体在昆虫细胞表达系统中进行表达。将gp90基因经标准的PCR方法扩增后克隆到中间转移载体pFastBacl中,转化宿主菌DH10BAC后经蓝白斑筛选法挑选外源gp90基因插入的克隆,提取Bacmid,用于转染昆虫细胞,转染试剂为Lipofectin。48-72小时后待细胞出现明显的CPE时收获培养的上清,作为毒种保留。分别对细胞培养上清和细胞内的表达进行分析,得到的产物为病毒的包膜糖蛋白(gp90)。表达产物经离子交换层析、亲和层析和分子筛等方法纯化后可用于制备血清学诊断试剂或基因工程亚单位疫苗。
本发明还涉及利用中国株马传染性贫血病毒疫苗株基因构建的用于基因治疗的基因转移载体。马传染性贫血病毒不能引起人类发病,构建源于该疫苗株的基因转移载体,不但可以克服以往所用的鼠白血病病毒来源的基因转移载体的基因转移效率较低和不能转染未分裂细胞等缺陷,而且能够提供安全保障。
以下参照附图和实施例进一步描述本发明,其中
图1为含有本发明的FD病毒株全长基因组克隆的质粒pCh-FD的示意图。
图2为含有本发明的LN病毒株全长基因组克隆的质粒pCh-LN的示意图。
图3示出用本发明的特异性引物对EIAV自然感染马中中国流行株存在的检测结果。泳道1-5为中国EIAV自然感染马的外周血样本,泳道6为健康马外周血样本,泳道7为核酸分子量标准,泳道8-12为Wyoming株病毒驴白细胞培养物样本。
实施例1LN及FD病毒株的全长基因组克隆及测序
本实施例分三段扩增出这两个毒株的全部基因,利用它们序列上156位的MluI和2700位的HindIII酶切位点进行连接,分别构建了我国马传贫野毒株(LN株)和弱毒疫苗株(FD株)的全基因克隆。
一.病毒培养和细胞基因组DNA的提取:
LN株:该毒株是将马传染性贫血病毒辽宁分离株通过马体继代17代的血浆毒(LN17)接种100%大牛血清37℃培养的健康驴白细胞(每107细胞接毒1ml),至出现细胞病变(CPE)但细胞未开始脱落时收毒,弃上清,用Qiagen Genomenic DNA Kit(M13433,midi)按说明书提供的方法提取细胞基因组DNA。
FD株:该毒株是将LN株在驴体内继代至117代后转移到驴白细胞培养物上继代至123代,又在驴胎皮肤细胞上继代至11代的弱毒疫苗株(D15V11),病毒滴度108TCID50/ml,接种含10%大牛血清的MEM、37℃培养的30代(D30)驴胎皮肤细胞(每107细胞接毒1ml),至出现细胞病变(CPE)但细胞未开始脱落时收毒,用QiagenGenomenic DNA Kit(M13433,midi)按说明书提供的方法提取细胞基因组DNA。
二.病毒全基因的分段扩增、回收和克隆(两毒株方法相同)
实验中所有内切酶均购自Programa公司。T4连接酶购自华美生物工程公司。
构建全基因克隆的引物如下:
片段名称 扩增区域 引物名称及位置  引物序列(5’-3’)
5’LTR  1-321 第一轮:正向:LTR-F5反向:GR11第二轮:正向:LTR-F5反向:LTR-R5  TgTgggATTAATATAAgATTCTAACCTTGCTGCTATGGGAATTgTgggATTAATATAAgATTCTTgTTAgATCTTgAAAACAAgAC
3.5K  115-3523 第一轮:正向:P26反向:PR40第二轮:正向:732反向:PR40  GCTGATGCTCTCATAACCTTGGATGTGAATATACCATGTCTGACCGCAATAACCGCATTGTGACGGATGTGAATATACCATGTCTG
7.7K  398-8150 正向:Ev-Fa:反向:Ev-Ra:  CTggAATTCgTCgACAgCAgAggAGAACTTACAgCAgACTCgAgCAgggACTCAgACCgCAgAATC
注:所有引物均根据本实验室已有马传贫病毒部分序列设计。
1、5’LTR(1-321)片段
(1)扩增:
第一轮扩增所用引物为正向引物LTR-F5和反向引物GR11,反应体系为10×缓冲液(Mg2+2.5mM)5ul,dNTP(10mM)1ul,LTR-F5(20uM)1ul,GR11(20uM)1ul,Taq(Promega)0.5ul(1.25U),模板1ul(200ng),H2O40.5ul。反应条件为:95℃5分钟,1个循环;94℃40秒,52℃30秒,72℃1.5分钟,30个循环;72℃10分钟,1个循环。第二轮扩增所用引物为正向引物LTR-F5和反向引物LTR-R5,反应体系为10×缓冲液(Mg2+2.5mM)5ul,dNTP(10mM)1ul,LTR-F5(20uM)1ul,LTR-R5(20uM)1ul,Taq(Promega)0.5ul(1.25U),模板5ul(第一轮产物),H2O35.5ul。反应条件为95℃5分钟,1个循环;94℃40秒,52℃30秒,72℃50秒,30个循环;72℃10分钟,1个循环。
(2)PCR产物的回收和克隆和测序
用QIAEX II Extraction Kit(QIAGEN)按说明书提供的方法回收PCR产物,使用pGEMR-T Easy Vector Systeml(Programa)按说明书提供方法克隆PCR产物,转化DH5α,EcoR I酶切鉴定,ABI377测序仪测序,选择正向引物从T7方向插入的克隆,命名为T-easyLTR。
2、3.5K片段(115-3523)
(1)扩增:
第一轮扩增所用引物为正向引物正向:P26和反向引物PR40,反应体系为10×缓冲液(Mg2+ 2.5mM)5ul,dNTP(10mM)1ul,P26(20uM)1ul,PR40(20uM)1ul,Taq(Promega)0.5ul(1.25U),模板1ul(200ng),H2O40.5ul。反应条件为:95℃5分钟,1个循环;94℃40秒,52℃ 30秒,72℃ 4分钟,30个循环;72℃ 10分钟,1个循环。第二轮扩增所用引物为正向引物732和反向引物PR40,反应体系为10×缓冲液(Mg2+2.5mM)5ul,dNTP(10mM)1ul,732(20uM)1ul,PR40(20uM)1ul,Taq(Promega)0.5ul(1.25U),模板5ul(第一轮产物),H2O35.5ul。反应条件为95℃5分钟,1个循环;94℃40秒,55℃30秒,72℃4分钟,30个循环;72℃10分钟,1个循环。
(2)PCR产物的回收和克隆和测序
方法同上述5′LTR扩增产物所用方法,产物命名为T-easy3.5K。
3、7.7K片段(398-8150)
(1)扩增:
所用引物为正向引物Ev-Fa和反向引物Ev-Ra,反应体系和条件使用ExpandTM Long Template PCR System(BOEHRINGERMANNHEIM)按说明书提供的反应体系和反应条件进行。(缓冲液使用Buffer3)
(2)PCR产物的回收、克隆和测序
方法同上述5′LTR扩增产物所用方法,产物命名为T-easy 7.7K。
三.T-easy 8.0K的构建
1.SacII和HindIII酶切T-easy 3.5K,用QIAEX II Extraction Kit(QIAGEN)按说明书提供方法回收2.5K的酶切片段。
2.Sac II和HindIII酶切T-easy7.7K,用QIAEX II Extraction Kit(QIAGEN)按说明书提供方法回收8.5K的酶切片段。
3.连接2.5K和8.5K的酶切片段,转化DH5α,EcoR I酶切和P26、GR11引物PCR鉴定(常规方法),命名为T-easy8.0K.
四.PTZ18LTR构建
1.EcoR I酶切T-easyLTR,用QIAEX II Extraction Kit(QIAGEN)按说明书提供方法回收320bp的酶切片段
2.EcoRI酶切PTZ18(PL-Pharmacia),CIAP处理。
3.将320bp的酶切片段和EcoR I酶切的PTZ18连接,转化大肠杆菌DH5α,EcoRI酶切鉴定,命名为PTZ18LTR。
五.pCh-LN和pCh-FD的构建
1.MluI酶切T-easy8.0K,用QIAEX II Extraction Kit(QIAGEN)按说明书提供方法回收7.9K的酶切片段。
2.Mlu I酶切PTZ18LTR,CIAP处理。
3.将7.9K的酶切片段和Mlu I酶切的PTZ18LTR连接,转化大肠杆菌DH5α,EcoRI酶切和P26、GR11引物PCR鉴定(常规方法),含有插入正确的LN全基因克隆的质粒命名为pCh-LN,含有插入正确的FD全基因克隆的质粒命名为pCh-FD,这两个质粒的示意图分别见图1和图2。
实施例2构建的全基因克隆的应用:体外感染试验
将实施例1中构建的LN株和FD株的全基因克隆在体外通过DOTAP Liposomal Transfection Reagent(Roche)按说明书提供方法分别转染驴白细胞(DLV)和驴胎皮肤细胞(FDD),每104细胞转染10ug质粒,同时设病毒阳性对照和阴性对照,待转染细胞出现细胞病变或病毒阳性对照出现明显CPE时收获,冻融2-3次后,差速离心去细胞沉淀,一部分上清用聚乙二醇浓缩10倍,电镜观察病毒粒子,同时用Nonradioactive Micro-Assay(Cook,1992)测定RT活性;另一部分上清50000rpm超速离心,沉淀用PBS重悬,采用SDS-PAGE和Western-Blotting检测病毒蛋白,来证实它们对细胞的感染性。
实施例3构建的全基因克隆的应用:体内感染试验
选择在实施例2的体外试验中证实对细胞有明显感染性的全基因克隆分别皮下接种马和驴,接种量为100ug质粒,每周采外周血,分离血清,用已建立的EIAV AGID和ELISA方法检测抗体的消长,同时定时测体温和各种血常规指标,观察LN株对动物体的致病力,三个月后,用104稀释的LN强毒株攻击接种FD全基因克隆的马、驴,同时设阳性和阴性对照,以此来证实疫苗株全基因克隆对马、驴的保护性。
实施例4构建嵌和克隆
使用实施例2和3筛选出的在体内外均有良好感染性的全基因克隆,结合序列比较的结果,通过有目的性的置换野毒株和疫苗株不同基因和区域来构建不同的嵌和克隆,采用上述实施例2和3中使用的方法测定这些克隆在体内和体外的感染性区别,以定位野毒株的致病基因和疫苗株的保护基因,从而弄清我国马传贫疫苗株的致弱和保护机制。
实施例5EIAV自然感染马中中国流行株存在的检测
根据已测定的马传染性贫血病毒LN株全基因序列和国际标准株Wyoming株全基因序列(Wyoming Genebank Accession Number:AF028232)设计并合成多对引物,用PR扩增不同毒株的DNA,选择对中国流行株特异性最佳的引物。
分别以中国民间自然感染马外周血白细胞、肝脏细胞和脾脏细胞中的DNA为模板,采用PROMEGA公司Taq聚合酶,进行PCR扩增。PCR混合体系如下:10x缓冲液5ul,2.5mM MgCl25ul,2.5mMdNTP1ul,20uM RTF21ul,20uM RTR201ul,Taq DNA聚合酶2U,H2O34.6ul,模板2ul。充分混匀后,放在PCR仪上,PCR反应条件为:95℃5分钟,之后为94℃50s,50℃40s,72℃50s的30个循环,最后72℃10分钟。
将反应物加到琼脂糖凝胶,通过电泳,可见到大小约700bp的DNA片段条带。而在上述相同条件下,以国际标准株Wyoming株病毒驴白细胞培养物DNA为模板的PCR扩增产物,则没有相应的条带(图3)。
通过多对引物扩增结果比较,下表引物为特异性最佳引物。
引物名称 区域 位置     序列(5’-3’) 引物方向
RTF2 RT 2325-2341  GAgAAgTTATTAggTgC 正向
RTR20 ROL 3046-3028  CCCTgATCTCATCCATgTT 反向
以此对引物对国内采集的40份EIAV自然感染马样品进行DNA扩增检测,40份样品全部能扩增出700bp的DNA片段,对国外的毒株则为阴性。检测结果见图3所示。该检测结果与现行EIAV血清学国家诊断标准检测结果完全一致,并显示有很高的敏感性。
实施例6EIAV基因转移系统的构建
EIAV基因转移系统主要由以下3个质粒组成,为保证有足够的表达,每一质粒都使用人巨细胞病毒(CMV)的立即早期启动子指导转录:
1、表达EIAV gag/pol的质粒:在EIAV感染性克隆的基础上,对其进行改造。在env基因中,缺失SU编码区内的736个核苷酸和TM编码区C末端的168个核苷酸;缺失基因组中对病毒逆转录和整合必需的3′区域(包括多嘌呤区和整个3′LTR)。这些突变保证这一质粒不产生具有复制能力的EIAV。在基因组5′末端的RNA包装信号应该完整地保留。
2、EIAV基因转移载体:该质粒包括对载体逆转录和整合必须的所有顺式作用序列和用于插入cDNA的多克隆位点。因为EIAV的启动子/增强子序列在人细胞株中活性很低,所以用CMV的启动子/增强子替换5′LTR中的U3区。为检测构建的CMV/R/U5的活性,可在其下游插入β-半乳糖苷酶报告基因。
3、病毒膜蛋白基因表达载体:该质粒用于表达病毒膜蛋白(在第1个质粒中env基因被突变)。
用表达EIAV gag/pol的质粒转染人293细胞,以neo基因为选择标记筛选,构建表达EIAV蛋白的辅助细胞系作为EIAV载体的包装细胞系。
序列表
SEQ ID NO:1的信息:
(a)序列特征:
长度:8236bp
类型:核酸
链性:双链
拓扑结构:线性
(b)分子类型:DNA(基因组)
(c)来源:马传染性贫血病毒辽系野毒株全长克隆
(d)序列描述:SEQ ID NO:1
TGTGGGATTA ATACAAGATT CTTATAAGTG ATTATAAAAG TTGCTGATGC TCTCATAACC    60
TTATGTAACC CAAAAGACTA GCTCATGTTG CCAGGCAACT AAACTGTGAT AACCTTTTGT   120
TCCTCATTAT AGTTCCGCTT TTGTGACGCG TTAAGTTCCT GTTTTTACAG TATATAAGTA   180
CTTGTATTCT GACATTTGGA CACTCAGATT CTGCGGTCTG AGTCCCTTCT CTGCTGGGCT   240
AACTCTAGCC TTGGTAATAA ATATAATTCT CTGCTCAGTC CCTGTTCTTA GTCTGTCTTG   300
TTTTCAAGGT CTAACAGTTG GCGCCCGAAC AGGGACCAGA GGGCGCAGAC CCTGCCTGCT   360
GAACCTGGCT GATCGTAGGA TCCCTAGGAC AGCAGAGGAG AACTTACAGA CGTCTTCTGG   420
AGGTGTTCCT GGCCACAACA CAGGAAGACA GGTAAGATGG GAGACTCTTT GACATGGAGC   480
AAAGCGCTCA AGAAGTTAGA GAAGGTGACG GTACAAGGGT CTCAAAAGCT AACTAATGGT   540
AACTGTAATT GGGCGCTGAA TTTGGTGGAC TTATTCCATG ACGCCAATTT TTGTAAAGAA   600
AAAGACTGGC AATTAAGGGA CGACATTCCA TTGTTGGAGG ACGTTTCTCA GACATTGTCA   660
GGACAAGAGA GAGAGGCATT TGAAAAAACT TGGTGGGCAA TAGCTGCCGT TAAGATGGGC   720
TTACAAATTA ATACTGTGAA TGATGCAAAA GCAACATTTA CTATATTAAA AGCTAAGTTT   780
GAAAGAAAGA CTGCAAATAC TACCAAAAAG CAGTCTGAGC CCATGGAAGA ATACCCAATA   840
ATGATTGATG GGGCTGGAAA CCGAAACTTT CGGCCATTAA CACCCAGAGG ATATACTACC   900
TGGGTAAATA CTATACAGCA AAACAATCTC TTAAATGAAG CTAGTGTGAA TCTATTTGGT   960
ATTTTATCAG TAGACTGTAC TTCTGAGGAA ATGAATGCAT TTTTGGATGT AGTACCAGGA  1020
CAAGCAGGAC AAAAACAAGT ACTATTGGAT AATCTTGATA AGATTGCAGA AGAATGGGAT  1080
CGTAGGCACC CGATGCCAAA TCCTCCATTG GTGGCACCAC CACAAGGGCC TATTCCCATG  1140
ACAGCAAGGT TCATTAGGGG ATTGGGAGTT CCTAGAGAAA GACAGATGGA ACCTGCTTTT  1200
GATCAGTTTA GACAAACTTA TAGACAGTGG ATAATAGAAG CAATGACAGA GGGGATAAAA  1260
ATAATGATTG GGAAACCCAA AGCGCAAAAT ATTAGGCAAG GACCCAAAGA ACCCTATCCA  1320
GAGTTTGTAG ACAGATTGCT GTCTCAGATA AAAAGTGAGG GACATCCGGC TGATGTAACT  1380
AAATTCCTGA CAGACACCTT AACTATTCAG AATGCTAATG ATGAATGCAA AAGTGCTATG  1440
AGACATTTGA GGCCAGAAGA TACATTAGAA GAAAAAATGT ATGCATGTAG AGATATTGGC  1500
ACTATGAAAC AAAAAATGGC ATTATTAGCC AAGGCACTTC AAACAGGATT AGCTGGTCCT  1560
ATGAAGGGAG GAATATTTAA AGGGGGACCC TTAGGGGCGA AGCAGACATG TTATAATTGT  1620
GGAAAACCAG GACATTTTTC TAGTCAATGT AAAGCACCTA AAGTATGTTT TAAGTGCAAA  1680
CAGCCAGGAC ATTTCTCAAA ACAATGTATA AATGCTCCAA AAAACGGGAA ACAAGGGGCT  1740
CAGGGGAGGC CCCAAAAACA AACTTTCCCT GTGCAGAAGG AATCAATGAA CAAAACACAA  1800
AAGGAGGAAA AACAGCAAGG GACCTTATAT CCAGATTTGA GTCAGATGAA ACAGGAGTAC  1860
AAGATCAAGG AAGAGGAAAA TCAAGAGGAT CTCAATCTGG ACAGTTTGTG GGAGTAACTT  1920
ATAATTTAGA AAAGAGACCA ACTACAATAG TTTTGATTAA TGACACACCC TTAAATGTAT  1980
TATTGGACAC AGGAGCAGAC ACGTCGGTAC TAACTATTGC ACATTATAAT AGGTTAAAGT  2040
ATAGAGGAAG GAAATATCAA GGTACAGGTA TTGTTGGGGT TGGAGGTAAT GTAGAAACAT  2100
TTTCCACTCC TGTTACGGTA AAAAAGAAAG GAAAACAAAT TAAAACTAGA ATGTTAGTAG  2160
CAGATATCCC AGTTACTATT TTGGGGCGAG ATATCCTTCA AGAATTAGGC GCACAATTAA  2220
TAATGGCTCA ACTTTCAAAA GAAATAACCC CAAGAGAAAT TAAATTAAAA ACAGGCACAG  2280
TAGGGCCTAA GGTTCCCCAA TGGCCACTTA CTAAAGAGAA GTTATTAGGT GCTAAAGAAA  2340
TAGTCAAAAA ATTGTTGGAT GAAGGTAAAA TATCAGAAGC CAGTGATGAT AATCCTTATA  2400
ATTCTCCTAT ATTTGTAATA AAAAAGAAAT CTGGGAAGTG GAGACTATTG CAAGATTTAA  2460
GAGAATTAAA TAAGGTGGTA CAAGTAGGAA CTGAAATATC CAGAGGGTTA CCTCATCCAG  2520
GGGGATTAAT TAAATGTAAT CATATGACAG TATTAGATAT TGGAGATGCC TATTTCACTA  2580
TACCATTAGA TCCAAAGTTT AGACAATATA CAGCATTTAC TGTGCCATCC ATTAATCATC  2640
AGGAACCAGA TAAAAGATAT GTATGGAATT GCTTGCCACA AGGTTTTGTG TTAAGTCCAT  2700
ACATATATCA AAAAACATTA CAGGACATAT TACAAGCTTT TAGAGAAAGG CATCCAGATG  2760
TACAATTATA TCAATATATG GATGATTTAT TCATTGGGAG TAATGGATCT AAAAGACAAC  2820
ATAAGGAACT AGTAGAAGAA TTAAGAGCTA TTCTTTTAGA AAAGGGCTTT GAGACGCCTG  2880
AGGATAAATT GCAGGAAGAG GCACCCTATA ATTGGCTGGG ATATCAACTT AGTCCAGGCA  2940
ATTGGAAAGT ACAAAAGATG CAATTAGAAT TGGTAAAAGA ACCAACATTA AATGATGTGC  3000
AAAAATTAAT GGGAAATATA ACATGGATGA GTTCAGGGGT TCCTGGATTA ACAGTGAAGC  3060
GAATAGCTGC TACCACTAAA GGATGCCTAG ATTTAAATCA AAAGGTAGTA TGGACGGAAG  3120
AAGCACAAAA AGAACTAGAG GAAAATAATA AAAAGATTCA GGAAGCTCAG GGATTGCAAT  3180
ATTATAACCC AGAAGAAGAA GTAATCTGTG AGATTGAAAT TACTAAAAAT TATGAGGCTA  3240
CTTATATAAT AAAACAGTCC CAAGGAATAT TGTGGGCAGG AAAGAAAATT ATGAGGGCTA  3300
ATAAAGGATG GTCCGCAGCA AAAAATCTAA TGTTATTGTT ACAACATGTA GCCACAGGAA  3360
GTATTGTTAG AATTGGAACA TGTCCAAAAT TTAAAGTACC TTTTACTAAA GAACAAGTCA  3420
AATGGGAAAT GGAAAAGGGA TGGTATTATT CATGGCTACC AGATATGGTA TATTCACATC  3480
AAGTTGTTCA TGATGATTGG AAACTGAAAT TAGTAGAGCA ACCAACATCT GGTATAACAA   3540
TTTACACTGA TGGGGGTAAA CAGAATGAAG AAGGAGTTGC GGCTTATGTG ACTAGTAATG   3600
GGAAAACTAA ACAAAAAAGG TTAGGACCTG TTACTCATCA AACTGCTGAG AGGATAGCAA   3660
TACAAATGGC ATTAGAAGAT ACTGAAGAGA CACTGGTAAA TATAGTAACT GATAGTTACT   3720
ACTGTTGGAA AAATATTACA GAAGGATTAG GGTTAGAAGG ACCAGACAGC CCCTGGTGGC   3780
CAATAATTCA AAATATTAGG GCTAAAGAAA TGGTTTATTT TGCTTGGGTA CCAGGTCACA   3840
AGGGAATATA TGGCAATCAA TTGGCAGATG AGGCTACTAA AATAACAGAG GACATTATGT   3900
TAGCATATCA AGGCACACAG ATTAAGGAAA AAAGAGATGA AGATGCAGGG TTTGACTTGT   3960
GTATTCCTTA TGACATAATA ATACCTGTCT CTGAGACAAA GGTTATACCC ACAGATGTAA   4020
AAATACAGGT ACCTCATAAA TGTTTTGGAT GGGTAACTGG TAAGTCATCG GTGGCTAAGC   4080
AAGGGTTATT AATCAATGGG GGAATAATTG ATGAAGGATA CACAGGTGAA ATACAGGTAA   4140
TTTGTATTAA CATTGGAAAG AGTAACATTA AACTCTGGGA AGGACAAAAG TTTGCACAAT   4200
TAATCATATT ACAGCATCGA TCAAATGATA AACAAATCTG GGATGAAAAT AAAGCATCTC   4260
AAAGGGGAGA TAAAGGGTTT GGAAGCACAG GTGTATTTTG GGTAGAGAAT ATCCAAGAGG   4320
CACAAGATGA ACATGAAAAC TGGCATACAT CTCCAAAGAT ATTGGCAAAA AGATATGGGT   4380
TACCATTGAC GGTAGCTAAA CAGATAACTC AAGAATGCCC TCATTGTACT AAGCAAGGAT   4440
CTGGACCAGC AGGTTGTGTA ATGAGATCCC CTAATCATTG GCAGGCTGAT TGTACACATT   4500
TAGAAAACAG GATAATAATG ACATTTGTAG AGTCTAATTC AGGATACATT CATGCTACTC   4560
TATTGTCCAA AGAAAATGCC TTGTGTACTT CATTGGCTAT TTTGGAATGG GTGAGGTTAT  4620
TTTCTCCTAA ATCTTTACAT ACAGACAATG GTACTAATTT TGTAGCAGAG TCAGTAGCAA  4680
ATCTGTTGAA ATTCCTGAAG GTGACACATA CTACAGGAAT ACCTTATCAC CCAGAGAGCC  4740
AAGGCATTGT GGAAAGAGCA AACAGGACAT TAAAAGAAAA AATTAAAAGT CATAGAGAAA  4800
ATACTCAGAC ACTTGAAGCA GCATTACAAC TTGCTCTCAT TACTTGTAAC AAAGGGAGGG  4860
AAAGTATGGG AGGA AAACT CCATGGGAAG TATTTATTAC TAATCAGGCT CAAACAATAC  4920
ATGAAGAACT TTTATTACAA CAAGCACAAT CTTCTAAAAA ATTTTGTTTT TATAAAATTC  4980
CTGGTGAGCA TAATTGGAAG GGGCCCACCA GAGTGTTGTG GAAAGGTGAT GGAGCAGTAG  5040
TGGTCAATGA TGAGGAAAAA GGAATAATTG CTGTGCCTTT AACCAGGACT AAATTATTAA  5100
TAAGACCAAA TTGAGTGTTG TTTCAGGAAT CACCACCAGT CAGCTATCAT TGTCAACTGT  5160
GTTTCCTGAG ATCATTGGGA ATTGACTACC TTGACAGCTC GCTGAAGAAG AAGAACAAAC  5220
AAAGACAGAA GGCCATCAAG GAGGGAAGAC CACCTCAGTA TCTGTTATAA GGTTTGGTGC  5280
ATGGGATTAT TTGGTAAAGG GGTAACATGG TCAGCATTGC ATTCTATGGG GGTATCCCAG  5340
GGGGAATATC AACCCCTATC ACCCAACAAA CAGAATCAAC AGACACACAA AAAGGGGATC  5400
ACATGGTATA TCAACCCTAT TGTTATAATG ACAGCCATAA AGCAGAAATG GCAGAGGCAA  5460
GAGACACAAG ATACCAAGAA GAAATGAACC GGAAAGAAGA GAAAGAAGAT AACAAAAGAA  5520
GAAATAACTG GTGGAAGATA GGTATGTTCC TATTGTGTCT GTTGGGGACC ACTGGAGGAT  5580
TCCTCTGGTG GTATGAGGGG CAAAAGCATT CACATTATAT AGGATTGGTT ACAATAGGAA  5640
GTAGACTAAA TGGTTCAGGA ATGACTAGTG CCATAGAATG TTGGGGTTCA TTTCCTGGGT  5700
GTAGGCCATT TACTAACTAT TTCAGTTATG AGACTAATAG GACTATTAGT AGAGATAATA  5760
ATACTGCCAC TCTGTTAGAT GCTTATCAAA GAGAAGTAAC AAACATATAC AGGACATCTT  5820
GTGTAGATAG TGATCACTGT CAAGAGTATA AATGTAAGCA AGTACAGTTG AAGGAGAACA  5880
GCAGTAACAT TATAATGAAT AATTGTAGTA ACAATAGTTG TGAAGAGTTT TGGGGGTTTA  5940
GCTGGTTAGA ATGTAATCAG ACAGAAAATG CAATAACTAT ATTGGTCCCA GAAGTAGAAA  6000
TGCAGCAAAG CGATAATAAC ACTTGGATTC CAAAAAGGTG TAATGAAACT TGGGCTAGGG  6060
TAAAACATTG TCCGATGGAT TTATTATATG GTATAAATCG AATAAGAATG TGTGTCCAAC  6120
CTCCATTCTT TTTGTTTAAA CAGAATGATA CTTCTAATAA TACTAGTATT CTCAGTAATT  6180
GTGGACCTTT AGTATTTCTT GGAATATTGG AGGACAACAA GGCAGCAATA CAGAATGGGA  6240
GTTGCACTCT TCACAGGACA AATATTAAAA GGCCAGATTA TAGTGGATTT TACCAAGTGC  6300
CTATATTTTA TATATGCAAC TTGACAGGAC TTCAGAGTTG TAATAATGGA TCAATAATTA  6360
GTATAATTAT GTCTGAATCT AATAATGTTC AATACTTGTT ATGCAATACT AGTAATACTA  6420
ATAGTACCAA TAATGCTACT GTCTCTTGTG TAGTACAAAG TTTTGGAGTG ATAGGACAGG  6480
CACATGTGGC GCTGCCCAGA AAAAATAAGA GGTTACAATC TCCAAAGTTT GCTCACTATA  6540
ATTGCACCAT AAATAATAAA ACAGAGTTAA GGCAATGGCA GTTGGTAAAA ACATCAGGCA  6600
TCACTCCTTT ACCCATTTCT TCTACAGCTA ATACTGGATT AGTCAGACAC AAGAGAGATT  6660
TTGGTATATC TGCTATAATA GCTGCCATTG TAGCTGCTAC TGCTATTGCT GCTAGCGTTA  6720
CTATGTCTTA TATCGCTTTG ACAGACGTCA ACAAATTAGA TAGTGTACAA AATCATACTT  6780
TTGAAGTAGA GAACAATACT ATCAATGGCT TGGAGTTGGT AGAAGAGCAA ATTCATATAT  6840
TATATGCTAT GGTTCTCCAA ACACATGCAG ATGTTCAATT GTTAAAAGAA CAACAAAAGA  6900
TTGAGGAAAC ATTTAATTTG ATTGGATGTA TAGAAAGATC ACATACATTT TGTCATACTG  6960
GGCATCCCTG GAATGAATCA TGGGGTCAGC TAAATGATTC TACACAGTGG GATGACTGGG  7020
TAGATAAGAT GGAAAATTTA AATCATGATA TATTAACAAC ACTTCATACT GCTAGAAATA  7080
ATCTAGAACA ATCTATGATA ACTTTTAATA CACCTGACAG TATAGCACAA TTTGGAAAAA  7140
ATATTTGGAG TCATATTGCG AATTGGATTC CTGGATTAGG AGCTTCCATA ATTAAATATA  7200
TAGTGTTATT ATTGCTTGTA TATGTGCTAC TAACCTCTGC ACCTAAGATC CTCAGAGGCC  7260
TCTTGACAAC GATGAGTGGT GCAGGATCCT CCGCCAGTCG CTACCTGAGG AAAAGATACC  7320
ATCACAGACA TGCATCGCGA GGAGACATCT GGGCCCAGGT CCAGTATCAT GCGTACCTGG  7380
CAGACGAGAC TCATGGCTCA GGGGACAAGT CCAACATGCG GAAGCTCTCC AGGAACAACT  7440
GGAATGGCGA ATCAGAGGAG TACAACAGAC GGCAAAAGAA TTGGAAAAAG TTAATAAAGA  7500
GATCTGGAGA GAATTACAAT ACACACGAAG ACAACATGGG GACTATGGGT CGTTTGGTGA  7560
CTACCGCCGC CGAGAAGAAG AACGTTGGGG TGAATCCTCA CCAAGGGTCC TTAAACCTGG  7620
AGATTCAAAG CGAAGGAGGA AACATCTATG ACTGTTGCAT TAAGGCTCAA GAAGGAACTC  7680
TTGCTATTCC TTGCTGTGGC TTCCCACTAT GGCTGCTTTG GGGGCTTATA ATCATATTAG  7740
GACGCTTGTT GGGATATGGG CTTCGGGGAA TTGCAAAAAT CATAATGATT CTGGGGAAAG  7800
GACTAAATGT AATAATTACA GGATTAAGAA AACTATGTGA TTATATTGGG AAAATGCTAA  7860
ATCCAGCTAC ATCTCATGTA ACAATGCCTC AATATGATGT TTAGAAAAAC AAGGGGGGAA  7920
CTGTGGGATT AATACAAGAT TCTTATAAGT GATTATAAAA GTTGCTGATG CTCTCATAAC  7980
CTTATGTAAC CCAAAAGACT AGCTCATGTT GCCAGGCAAC TAAACTGTGA TAACCTTTTG  8040
TTCCTCATTA TAGTTCCGCT TTTGTGACGC GTTAAGTTCC TGTTTTTACA GTATATAAGT  8100
ACTTGTATTC TGACATTTGG ACACTCAGAT TCTGCGGTCT GAGTCCCTTC TCTGCTGGGC  8160
TAACTCTAGC CTTGGTAATA AATATAATTC TCTGCTCAGT CCCTGTTCTT AGTCTGTCTT  8220
GTTTTCAAGA TCTAAC                                                  8236
SEQ ID NO:2的信息:
(a)序列特征:
长度:1461bp
类型:核酸
链性:双链
拓扑结构:线性
(b)分子类型:DNA(基因组)
(c)来源:马传染性贫血病毒辽系野毒株gag基因
(d)序列描述:SEQ ID NO:2
ATGGGAGACT CTTTGACATG GAGCAAAGCG CTCAAGAAGT TAGAGAAGGT GACGGTACAA    60
GGGTCTCAAA AGCTAACTAA TGGTAACTGT AATTGGGCGC TGAATTTGGT GGACTTATTC   120
CATGACGCCA ATTTTTGTAA AGAAAAAGAC TGGCAATTAA GGGACGACAT TCCATTGTTG   180
GAGGACGTTT CTCAGACATT GTCAGGACAA GAGAGAGAGG CATTTGAAAA AACTTGGTGG   240
GCAATAGCTG CCGTTAAGAT GGGCTTACAA ATTAATACTG TGAATGATGC AAAAGCAACA   300
TTTACTATAT TAAAAGCTAA GTTTGAAAGA AAGACTGCAA ATACTACCAA AAAGCAGTCT   360
GAGCCCATGG AAGAATACCC AATAATGATT GATGGGGCTG GAAACCGAAA CTTTCGGCCA   400
TTAACACCCA GAGGATATAC TACCTGGGTA AATACTATAC AGCAAAACAA TCTCTTAAAT   460
GAAGCTAGTG TGAATCTATT TGGTATTTTA TCAGTAGACT GTACTTCTGA GGAAATGAAT   520
GCATTTTTGG ATGTAGTACC AGGACAAGCA GGACAAAAAC AAGTACTATT GGATAATCTT   600
GATAAGATTG CAGAAGAATG GGATCGTAGG CACCCGATGC CAAATCCTCC ATTGGTGGCA   660
CCACCACAAG GGCCTATTCC CATGACAGCA AGGTTCATTA GGGGATTGGG AGTTCCTAGA   720
GAAAGACAGA TGGAACCTGC TTTTGATCAG TTTAGACAAA CTTATAGACA GTGGATAATA   780
GAAGCAATGA CAGAGGGGAT AAAAATAATG ATTGGGAAAC CCAAAGCGCA AAATATTAGG   840
CAAGGACCCA AAGAACCCTA TCCAGAGTTT GTAGACAGAT TGCTGTCTCA GATAAAAAGT   900
GAGGGACATC CGGCTGATGT AACTAAATTC CTGACAGACA CCTTAACTAT TCAGAATGCT   960
AATGATGAAT GCAAAAGTGC TATGAGACAT TTGAGGCCAG AAGATACATT AGAAGAAAAA  1020
ATGTATGCAT GTAGAGATAT TGGCACTATG AAACAAAAAA TGGCATTATT AGCCAAGGCA  1080
CTTCAAACAG GATTAGCTGG TCCTATGAAG GGAGGAATAT TTAAAGGGGG ACCCTTAGGG  1140
GCGAAGCAGA CATGTTATAA TTGTGGAAAA CCAGGACATT TTTCTAGTCA ATGTAAAGCA  1200
CCTAAAGTAT GTTTTAAGTG CAAACAGCCA GGACATTTCT CAAAACAATG TAGAA TGCT  1260
CCAAAAAACG GGAAACAAGG GGCTCAGGGG AGGCCCCAAA AACAAACTTT CCCTGTGCAG  1320
AAGGAATCAA TGAACAAAAC ACAAAAGGAG GAAAAACAGC AAGGGACCTT ATATCCAGAT  1380
TTGAGTCAGA TGAAACAGGA GTACAAGATC AAGGAAGAGG AAAATCAAGA GGATCTCAAT  1440
CTGGACAGTT TGTGGGAGTA A                                            1461
SEQ ID NO:3的信息:
(a)序列特征:
长度:3435bp
类型:核酸
链性:双链
拓扑结构:线性
(b)分子类型:DNA(基因组)
(c)来源:马传染性贫血病毒辽系野毒株pol基因
(d)序列描述:SEQ ID NO:3
ACAGCCAGGA CATTTCTCAA AACAATGTAT AAATGCTCCA AAAAACGGGA AACAAGGGGC    60
TCAGGGGAGG CCCCAAAAAC AAACTTTCCC TGTGCAGAAG GAATCAATGA ACAAAACACA   120
AAAGGAGGAA AAACAGCAAG GGACCTTATA TCCAGATTTG AGTCAGATGA AACAGGAGTA   180
CAAGATCAAG GAAGAGGAAA ATCAAGAGGA TCTCAATCTG GACAGTTTGT GGGAGTAACT   240
TATAATTTAG AAAAGAGACC AACTACAATA GTTTTGATTA ATGACACACC CTTAAATGTA   300
TTATTGGACA CAGGAGCAGA CACGTCGGTA CTAACTATTG CACATTATAA TAGGTTAAAG   360
TATAGAGGAA GGAAATATCA AGGTACAGGT ATTGTTGGGG TTGGAGGTAA TGTAGAAACA   420
TTTTCCACTC CTGTTACGGT AAAAAAGAAA GGAAAACAAA TTAAAACTAG AATGTTAGTA   480
GCAGATATCC CAGTTACTAT TTTGGGGCGA GATATCCTTC AAGAATTAGG CGCACAATTA   500
ATAATGGCTC AACTTTCAAA AGAAATAACC CCAAGAGAAA TTAAATTAAA AACAGGCACA   600
GTAGGGCCTA AGGTTCCCCA ATGGCCACTT ACTAAAGAGA AGTTATTAGG TGCTAAAGAA   660
ATAGTCAAAA AATTGTTGGA TGAAGGTAAA ATATCAGAAG CCAGTGATGA TAATCCTTAT   720
AATTCTCCTA TATTTGTAAT AAAAAAGAAA TCTGGGAAGT GGAGACTATT GCAAGATTTA   780
AGAGAATTAA ATAAGGTGGT ACAAGTAGGA ACTGAAATAT CCAGAGGGTT ACCTCATCCA   840
GGGGGATTAA TTAAATGTAA TCATATGACA GTATTAGATA TTGGAGATGC CTATTTCACT   900
ATACCATTAG ATCCAAAGTT TAGACAATAT ACAGCATTTA CTGTGCCATC CATTAATCAT   960
CAGGAACCAG ATAAAAGATA TGTATGGAAT TGCTTGCCAC AAGGTTTTGT GTTAAGTCCA  1020
TACATATATC AAAAAACATT ACAGGACATA TTACAAGCTT TTAGAGAAAG GCATCCAGAT  1080
GTACAATTAT ATCAATATAT GGATGATTTA TTCATTGGGA GTAATGGATC TAAAAGACAA  1140
CATAAGGAAC TAGTAGAAGA ATTAAGAGCT ATTCTTTTAG AAAAGGGCTT TGAGACGCCT  1200
GAGGATAAAT TGCAGGAAGA GGCACCCTAT AATTGGCTGG GATATCAACT TAGTCCAGGC  1260
AATTGGAAAG TACAAAAGAT GCAATTAGAA TTGGTAAAAG AACCAACATT AAATGATGTG  1320
CAAAAATTAA TGGGAAATAT AACATGGATG AGTTCAGGGG TTCCTGGATT AACAGTGAAG  1380
CGAATAGCTG CTACCACTAA AGGATGCCTA GATTTAAATC AAAAGGTAGT ATGGACGGAA  1440
GAAGCACAAA AAGAACTAGA GGAAAATAAT AAAAAGATTC AGGAAGCTCA GGGATTGCAA  1500
TATTATAACC CAGAAGAAGA AGTAATCTGT GAGATTGAAA TTACTAAAAA TTATGAGGCT  1560
ACTTATATAA TAAAACAGTC CCAAGGAATA TTGTGGGCAG GAAAGAAAAT TATGAGGGCT  1620
AATAAAGGAT GGTCCGCAGC AAAAAATCTA ATGTTATTGT TACAACATGT AGCCACAGGA  1680
AGTATTGTTA GAATTGGAAC ATGTCCAAAA TTTAAAGTAC CTTTTACTAA AGAACAAGTC  1740
AAATGGGAAA TGGAAAAGGG ATGGTATTAT TCATGGCTAC CAGATATGGT ATATTCACAT  1800
CAAGTTGTTC ATGATGATTG GAAACTGAAA TTAGTAGAGC AACCAACATC TGGTATAACA  1860
ATTTACACTG ATGGGGGTAA ACAGAATGAA GAAGGAGTTG CGGCTTATGT GACTAGTAAT  1920
GGGAAAACTA AACAAAAAAG GTTAGGACCT GTTACTCATC AAACTGCTGA GAGGATAGCA  1980
ATACAAATGG CATTAGAAGA TACTGAAGAG ACACTGGTAA ATATAGTAAC TGATAGTTAC  2040
TACTGTTGGA AAAATATTAC AGAAGGATTA GGGTTAGAAG GACCAGACAG CCCCTGGTGG  2100
CCAATAATTC AAAATATTAG GGCTAAAGAA ATGGTTTATT TTGCTTGGGT ACCAGGTCAC  2160
AAGGGAATAT ATGGCAATCA ATTGGCAGAT GAGGCTACTA AAATAACAGA GGACATTATG  2220
TTAGCATATC AAGGCACACA GATTAAGGAA AAAAGAGATG AAGATGCAGG GTTTGACTTG  2280
TGTATTCCTT ATGACATAAT AATACCTGTC TCTGAGACAA AGGTTATACC CACAGATGTA  2340
AAAATACAGG TACCTCATAA ATGTTTTGGA TGGGTAACTG GTAAGTCATC GGTGGCTAAG  2400
CAAGGGTTAT TAATCAATGG GGGAATAATT GATGAAGGAT ACACAGGTGA AATACAGGTA  2460
ATTTGTATTA ACATTGGAAA GAGTAACATT AAACTCTGGG AAGGACAAAA GTTTGCACAA  2520
TTAATCATAT TACAGCATCG ATCAAATGAT AAACAAATCT GGGATGAAAA TAAAGCATCT  2580
CAAAGGGGAG ATAAAGGGTT TGGAAGCACA GGTGTATTTT GGGTAGAGAA TATCCAAGAG  2640
GCACAAGATG AACATGAAAA CTGGCATACA TCTCCAAAGA TATTGGCAAA AAGATATGGG  2700
TTACCATTGA CGGTAGCTAA ACAGATAACT CAAGAATGCC CTCATTGTAC TAAGCAAGGA  2760
TCTGGACCAG CAGGTTGTGT AATGAGATCC CCTAATCATT GGCAGGCTGA TTGTACACAT  2820
TTAGAAAACA GGATAATAAT GACATTTGTA GAGTCTAATT CAGGATACAT TCATGCTACT  2880
CTATTGTCCA AAGAAAATGC CTTGTGTACT TCATTGGCTA TTTTGGAATG GGTGAGGTTA  2940
TTTTCTCCTA AATCTTTACA TACAGACAAT GGTACTAATT TTGTAGCAGA GTCAGTAGCA  3000
AATCTGTTGA AATTCCTGAA GGTGACACAT ACTACAGGAA TACCTTATCA CCCAGAGAGC  3060
CAAGGCATTG TGGAAAGAGC AAACAGGACA TTAAAAGAAA AAATTAAAAG TCATAGAGAA  3120
AATACTCAGA CACTTGAAGC AGCATTACAA CTTGCTCTCA TTACTTGTAA CAAAGGGAGG  3180
GAAAGTATGG GAGGACAAAC TCCATGGGAA GTATTTATTA CTAATCAGGC TCAAACAATA  3240
CATGAAGAAC TTTTATTACA ACAAGCACAA TCTTCTAAAA AATTTTGTTT TTATAAAATT  3300
CCTGGTGAGC ATAATTGGAA GGGGCCCACC AGAGTGTTGT GGAAAGGTGA TGGAGCAGTA  3360
GTGGTCAATG ATGAGGAAAA AGGAATAATT GCTGTGCCTT TAACCAGGAC TAAATTATTA  3420
ATAAGACCAA ATTGA                                                   3435
SEQ ID NO:4的信息:
(a)序列特征:
长度:2598bp
类型:核酸
链性:双链
拓扑结构:线性
(b)分子类型:DNA(基因组)
(c)来源:马传染性贫血病毒辽系野毒株env基因
(d)序列描述:SEQ ID NO:4
ATGGTCAGCA TTGCATTCTA TGGGGGTATC CCAGGGGGAA TATCAACCCC TATCACCCAA    60
CAAACAGAAT CAACAGACAC ACAAAAAGGG GATCACATGG TATATCAACC CTATTGTTAT   120
AATGACAGCC ATAAAGCAGA AATGGCAGAG GCAAGAGACA CAAGATACCA AGAAGAAATG   180
AACCGGAAAG AAGAGAAAGA AGATAACAAA AGAAGAAATA ACTGGTGGAA GATAGGTATG   240
TTCCTATTGT GTCTGTTGGG GACCACTGGA GGATTCCTCT GGTGGTATGA GGGGCAAAAG   300
CATTCACATT ATATAGGATT GGTTACAATA GGAAGTAGAC TAAATGGTTC AGGAATGACT   360
AGTGCCATAG AATGTTGGGG TTCATTTCCT GGGTGTAGGC CATTTACTAA CTATTTCAGT   420
TATGAGACTA ATAGGACTAT TAGTAGAGAT AATAATACTG CCACTCTGTT AGATGCTTAT   480
CAAAGAGAAG TAACAAACAT ATACAGGACA TCTTGTGTAG ATAGTGATCA CTGTCAAGAG   540
TATAAATGTA AGCAAGTACA GTTGAAGGAG AACAGCAGTA ACATTATAAT GAATAATTGT   600
AGTAACAATA GTTGTGAAGA GTTTTGGGGG TTTAGCTGGT TAGAATGTAA TCAGACAGAA   660
AATGCAATAA CTATATTGGT CCCAGAAGTA GAAATGCAGC AAAGCGATAA TAACACTTGG   720
ATTCCAAAAA GGTGTAATGA AACTTGGGCT AGGGTAAAAC ATTGTCCGAT GGATTTATTA   780
TATGGTATAA ATCGAATAAG AATGTGTGTC CAACCTCCAT TCTTTTTGTT TAAACAGAAT   840
GATACTTCTA ATAATACTAG TATTCTCAGT AATTGTGGAC CTTTAGTATT TCTTGGAATA   900
TTGGAGGACA ACAAGGCAGC AATACAGAAT GGGAGTTGCA CTCTTCACAG GACAAATATT   960
AAAAGGCCAG ATTATAGTGG ATTTTACCAA GTGCCTATAT TTTATATATG CAACTTGACA  1020
GGACTTCAGA GTTGTAATAA TGGATCAATA ATTAGTATAA TTATGTCTGA ATCTAATAAT  1080
GTTCAATACT TGTTATGCAA TACTAGTAAT ACTAATAGTA CCAATAATGC TACTGTCTCT  1140
TGTGTAGTAC AAAGTTTTGG AGTGATAGGA CAGGCACATG TGGCGCTGCC CAGAAAAAAT  1200
AAGAGGTTAC AATCTCCAAA GTTTGCTCAC TATAATTGCA CCATAAATAA TAAAACAGAG  1260
TTAAGGCAAT GGCAGTTGGT AAAAACATCA GGCATCACTC CTTTACCCAT TTCTTCTACA  1320
GCTAATACTG GATTAGTCAG ACACAAGAGA GATTTTGGTA TATCTGCTAT AATAGCTGCC  1380
ATTGTAGCTG CTACTGCTAT TGCTGCTAGC GTTACTATGT CTTATATCGC TTTGACAGAC  1440
GTCAACAAAT TAGATAGTGT ACAAAATCAT ACTTTTGAAG TAGAGAACAA TACTATCAAT  1500
GGCTTGGAGT TGGTAGAAGA GCAAATTCAT ATATTATATG CTATGGTTCT CCAA CACAT  1560
GCAGATGTTC AATTGTTAAA AGAACAACAA AAGATTGAGG AAACATTTAA TTTGATTGGA  1620
TGTATAGAAA GATCACATAC ATTTTGTCAT ACTGGGCATC CCTGGAATGA ATCATGGGGT  1680
CAGCTAAATG ATTCTACACA GTGGGATGAC TGGGTAGATA AGATGGAAAA TTTAAATCAT  1740
GATATATTAA CAACACTTCA TACTGCTAGA AATAATCTAG AACAATCTAT GATAACTTTT  1800
AATACACCTG ACAGTATAGC ACAATTTGGA AAAAATATTT GGAGTCATAT TGCGAATTGG  1860
ATTCCTGGAT TAGGAGCTTC CATAATTAAA TATATAGTGT TATTATTGCT TGTATATGTG  1920
CTACTAACCT CTGCACCTAA GATCCTCAGA GGCCTCTTGA CAACGATGAG TGGTGCAGGA  1980
TCCTCCGCCA GTCGCTACCT GAGGAAAAGA TACCATCACA GACATGCATC GCGAGGAGAC  2040
ATCTGGGCCC AGGTCCAGTA TCATGCGTAC CTGGCAGACG AGACTCATGG CTCAGGGGAC  2100
AAGTCCAACA TGCGGAAGCT CTCCAGGAAC AACTGGAATG GCGAATCAGA GGAGTACAAC  2160
AGACGGCAAA AGAATTGGAA AAAGTTAATA AAGAGATCTG GAGAGAATTA CAATACACAC  2220
GAAGACAACA TGGGGACTAT GGGTCGTTTG GTGACTACCG CCGCCGAGAA GAAGAACGTT  2280
GGGGTGAATC CTCACCAAGG GTCCTTAAAC CTGGAGATTC AAAGCGAAGG AGGAAACATC  2340
TATGACTGTT GCATTAAGGC TCAAGAAGGA ACTCTTGCTA TTCCTTGCTG TGGCTTCCCA   2400
CTATGGCTGC TTTGGGGGCT TATAATCATA TTAGGACGCT TGTTGGGATA TGGGCTTCGG   2460
GGAATTGCAA AAATCATAAT GATTCTGGGG AAAGGACTAA ATGTAATAAT TACAGGATTA   2520
AGAAAACTAT GTGATTATAT TGGGAAAATG CTAAATCCAG CTACATCTCA TGTAACAATG   2580
CCTCAATATG ATGTTTAG                                                 2598
SEQ ID NO:5的信息:
(a)序列特征:
长度:498bp
类型:核酸
链性:双链
拓扑结构:线性
(b)分子类型:DNA(基因组)
(c)来源:马传染性贫血病毒辽系野毒株rev基因
(d)序列描述:SEQ ID NO:5
ATGGCAGAGG CAAGAGACAC AAGATACCAA GAAGAAATGA ACCGGAAAGA AGAGAAAGAA    60
GATAACAAAA GAAGAAATAA CTGGTGGAAG ATAGGTCCTC AGAGGCCTCT TGACAACGAT   120
GAGTGGTGCA GGATCCTCCG CCAGTCGCTA CCTGAGGAAA AGATACCATC ACAGACATGC   180
ATCGCGAGGA GACATCTGGG CCCAGGTCCA GTATCATGCG TACCTGGCAG ACGAGACTCA   240
TGGCTCAGGG GACAAGTCCA ACATGCGGAA GCTCTCCAGG AACAACTGGA ATGGCGAATC   300
AGAGGAGTAC AACAGACGGC AAAAGAATTG GAAAAAGTTA ATAAAGAGAT CTGGAGAGAA   360
TTACAATACA CACGAAGACA ACATGGGGAC TATGGGTCGT TTGGTGACTA CCGCCGCCGA   420
GAAGAAGAAC GTTGGGGTGA ATCCTCACCA AGGGTCCTTA AACCTGGAGA TTCAAAGCGA   480
AGGAGGAAAC ATCTATGA                                                 498
SEQ ID NO:6的信息:
(a)序列特征:
长度:237bp
类型:核酸
链性:双链
拓扑结构:线性
(b)分子类型:DNA(基因组)
(c)来源:马传染性贫血病毒辽系野毒株tat基因
(d)序列描述:SEQ ID NO:6
CTGCTGAACC TGGCTGATCG TAGGATCCCT AGGACAGCAG AGGAGAACTT ACAGACGTCT    60
TCTGGAGGTG TTCCTGGCCA CAACACAGGA AGACAGGTAC CACCAGTCAG CTATCATTGT   120
CAACTGTGTT TCCTGAGATC ATTGGGAATT GACTACCTTG ACAGCTCGCT GAAGAAGAAG   180
AACAAACAAA GACAGAAGGC CATCAAGGAG GGAAGACCAC CTCAGTATCT GTTATAA      237
SEQ ID NO:7的信息:
(a)序列特征:
长度:207bp
类型:核酸
链性:双链
拓扑结构:线性
(b)分子类型:DNA(基因组)
(c)来源:马传染性贫血病毒辽系野毒株s2基因
(d)序列描述:SEQ ID NO:7
ATGGGATTAT TTGGTAAAGG GGTAACATGG TCAGCATTGC ATTCTATGGG GGTATCCCAG    60
GGGGAATATC AACCCCTATC ACCCAACAAA CAGAATCAAC AGACACACAA AAAGGGGATC   120
ACATGGTATA TCAACCCTAT TGTTATAATG ACAGCCATAA AGCAGAAATG GCAGAGGCAA   180
GAGACACAAG ATACCAAGAA GAAATGA                                       207
SEQ ID NO:8的信息:
(a)序列特征:
长度:487个氨基酸
类型:氨基酸
链性:
拓扑结构:线性
(b)分子类型:蛋白质
(c)来源:马传染性贫血病毒辽系野毒株gag蛋白
(d)序列描述:SEQ ID NO:8
MGDSLTWSKA LKKLEKVTVQ GSQKLTNGNC NWALNLVDLF HDANFCKEKD WQLRDDIPLL
EDVSQTLSGQ EREAFEKTWW AIAAVKMGLQ INTVNDAKAT FTILKAKFER KTANTTKKQS
EPMEEYPIMI DGAGNRNFRP LTPRGYTTWV NTIQQNNLLN EASVNLFGIL SVDCTSEEMN
AFLDVVPGQA GQKQVLLDNL DKIAEEWDRR HPMPNPPLVA PPQGPIPMTA RFIRGLGVPR
ERQMEPAFDQ FRQTYRQWII EAMTEGIKIM IGKPKAQNIR QGPKEPYPEF VDRLLSQIKS
EGHPADVTKF LTDTLTIQNA NDECKSAMRH LRPEDTLEEK MYACRDIGTM KQKMALLAKA
LQTGLAGPMK GGIFKGGPLG AKQTCYNCGK PGHFSSQCKA PKVCFKCKQP GHFSKQCRNA
PKNGKQGAQG RPQKQTFPVQ KESMNKTQKE EKQQGTLYPD LSQMKQEYKI KEEENQEDLN
LDSLWE*
SEQ ID NO:9的信息:
(a)序列特征:
长度:1145个氨基酸
类型:氨基酸
链性:
拓扑结构:线性
(b)分子类型:蛋白质
(c)来源:马传染性贫血病毒辽系野毒株pol蛋白
(d)序列描述:SEQ ID NO:9
TARTFLKTMY KCSKKRETRG SGEAPKTNFP CAEGINEQNT KGGKTARDLI SRFESDETGV
QDQGRGKSRG SQSGQFVGVT YNLEKRPTTI VLINDTPLNV LLDTGADTSV LTIAHYNRLK
YRGRKYQGTG IVGVGGNVET FSTPVTVKKK GKQIKTRMLV ADIPVTILGR DILQELGAQL
IMAQLSKEIT PREIKLKTGT VGPKVPQWPL TKEKLLGAKE IVKKLLDEGK ISEASDDNPY
NSPIFVIKKK SGKWRLLQDL RELNKVVQVG TEISRGLPHP GGLIKCNHMT VLDIGDAYFT
IPLDPKFRQY TAFTVPSINH QEPDKRYVWN CLPQGFVLSP YIYQKTLQDI LQAFRERHPD
VQLYQYMDDL FIGSNGSKRQ HKELVEELRA ILLEKGFETP EDKLQEEAPY NWLGYQLSPG
NWKVQKMQLE LVKEPTLNDV QKLMGNITWM SSGVPGLTVK RIAATTKGCL DLNQKVVWTE
EAQKELEENN KKIQEAQGLQ YYNPEEEVIC EIEITKNYEA TYIIKQSQGI LWAGKKIMRA
NKGWSAAKNL MLLLQHVATG SIVRIGTCPK FKVPFTKEQV KWEMEKGWYY SWLPDMVYSH
QVVHDDWKLK LVEQPTSGIT IYTDGGKQNE EGVAAYVTSN GKTKQKRLGP VTHQTAERIA
IQMALEDTEE TLVNIVTDSY YCWKNITEGL GLEGPDSPWW PIIQNIRAKE MVYFAWVPGH
KGIYGNQLAD EATKITEDIM LAYQGTQIKE KRDEDAGFDL CIPYDIIIPV SETKVIPTDV
KIQVPHKCFG WVTGKSSVAK QGLLINGGII DEGYTGEIQV ICINIGKSNI KLWEGQKFAQ
LIILQHRSND KQIWDENKAS QRGDKGFGST GVFWVENIQE AQDEHENWHT SPKILAKRYG
LPLTVAKQIT QECPHCTKQG SGPAGCVMRS PNHWQADCTH LENRIIMTFV ESNSGYIHAT
LLSKENALCT SLAILEWVRL FSPKSLHTDN GTNFVAESVA NLLKFLKVTH TTGIPYHPES
QGIVERANRT LKEKIKSHRE NTQTLEAALQ LALITCNKGR ESMGGQTPWE VFITNQAQTI
HEELLLQQAQ SSKKFCFYKI PGEHNWKGPT RVLWKGDGAV VVNDEEKGII AVPLTRTKLL
IRPN*
SEQ IDNO:10的信息:
(a)序列特征:
长度:865个氨基酸
类型:氨基酸
链性:
拓扑结构:线性
(b)分子类型:蛋白质
(c)来源:马传染性贫血病毒辽系野毒株env蛋白
(d)序列描述:SEQ ID NO:10
MVSIAFYGGI PGGISTPITQ QTESTDTQKG DHMVYQPYCY NDSHKAEMAE ARDTRYQEEM
NRKEEKEDNK RRNNWWKIGM FLLCLLGTTG GFLWWYEGQK HSHYIGLVTI GSRLNGSGMT
SAIECWGSFP GCRPFTNYFS YETNRTISRD NNTATLLDAY QREVTNIYRT SCVDSDHCQE
YKCKQVQLKE NSSNIIMNNC SNNSCEEFWG FSWLECNQTE NAITILVPEV EMQQSDNNTW
IPKRCNETWA RVKHCPMDLL YGINRIRMCV QPPFFLFKQN DTSNNTSILS NCGPLVFLGI
LEDNKAAIQN GSCTLHRTNI KRPDYSGFYQ VPIFYICNLT GLQSCNNGSI ISIIMSESNN
VQYLLCNTSN NSTNNATVSC VVQSFGVIGQ AHVALPRKNK RLQSPKFAHY NCTINNKTEL
RQWQLVKTSG ITPLPISSTA NTGLVRHKRD FGISAIIAAI VAATAIAASV TMSYIALTDV
NKLDSVQNHT FEVENNTING LELVEEQIHI LYAMVLQTHA DVQLLKEQQK IEETFNLIGC
IERSHTFCHT GHPWNESWGQ LNDSTQWDDW VDKMENLNHD ILTTLHTARN NLEQSMITFN
TPDSIAQFGK NIWSHIANWI PGLGASIIKY IVLLLLVYVL LTSAPKILRG LLTTMSGAGS
SASRYLRKRY HHRHASRGDI WAQVQYHAYL ADETHGSGDK SNMRKLSRNN WNGESEEYNR
RQKNWKKLIK RSGENYNTHE DNMGTMGRLV TTAAEKKNVG VNPHQGSLNL EIQSEGGNIY
DCCIKAQEGT LAIPCCGFPL WLLWGLIIIL GRLLGYGLRG IAKIIMILGK GLNVIITGLR
KLCDYIGKML NPATSHVTMP QYDV*
SEQ ID NO:11的信息:
(a)序列特征:
长度:165个氨基酸
类型:氨基酸
链性:
拓扑结构:线性
(b)分子类型:蛋白质
(c)来源:马传染性贫血病毒辽系野毒株rev蛋白
(d)序列描述:SEQ ID NO:11
MAEARDTRYQ EEMNRKEEKE DNKRRNNWWK IGPQRPLDND EWCRILRQSL PEEKIPSQTC
IARRHLGPGP VSCVPGRRDS WLRGQVQHAE ALQEQLEWRI RGVQQTAKEL EKVNKEIWRE
LQYTRRQHGD YGSFGDYRRR EEERWGESSP RVLKPGDSKR RRKHL
SEQ ID NO:12的信息:
(a)序列特征:
长度:79个氨基酸
类型:氨基酸
链性:
拓扑结构:线性
(b)分子类型:蛋白质
(c)来源:马传染性贫血病毒辽系野毒株tat蛋白
(d)序列描述:SEQ ID NO:12
LLNLADRRIP RTAEENLQTS SGGVPGHNTG RQVPPVSYHC QLCFLRSLGI DYLDSSLKKK
NKQRQKAIKE GRPPQYLL*
SEQ ID NO:13的信息:
(a)序列特征:
长度:69个氨基酸
类型:氨基酸
链性:
拓扑结构:线性
(b)分子类型:蛋白质
(c)来源:马传染性贫血病毒辽系野毒株s2蛋白
(d)序列描述:SEQ ID NO:13
MGLAGKGVTW SALHSMGVSQ GEYQPLSPNK QNQQTHKKGI TWYINPIVIM TAIKQKWQRQ
ETQDTKKK*
SEQ ID NO:14的信息:
(a)序列特征:
长度:8255bp
类型:核酸
链性:双链
拓扑结构:线性
(b)分子类型:DNA(基因组)
(c)来源:马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株全长克隆
(d)序列描述:SEQ ID NO:14
TGTGGGATTA ATATAAGATT CTTATAAGTG AATATGAAAG TTGCTGATGC TCTCATAACC    60
TCATGTAACC CAGATGACTA GCTGATGACT AGCTCATGTT GCTAGGCAAC TGAACTGTAA   120
TAACCTTTTG TTCCTCATTA TAGTTCCGCT TTTGTGACGC GTTAACTTCC TGTTTTTACA   180
GTATATAAGT GCTTGTATTC TGACATTTGG TCGCTCAGAT TCTGCGGTCT GAGTCCCTTC   240
TCTGCTGGGC TAGACCCTAG CCTTGGTAAT AAATATAATT CTCTGCTAAG TCCCTGTTCT   300
TAGTTTGTCT TGTTTTCAAG ACCTAACAGC TGGCGCCCGA ACAGGGACCT GAGGGCGCAG   360
ACCCTGCCTG CTGAACCTGG CTGATCATAG GATCCCTAGG ACAGCAGAGG AGAACTTACA   420
GAAGTCTTCT GGAGGTGTTA CTGGCCACAA CACAGGAAGA CAGGTAAGAT GGGAGACTCT   480
TTGACGTGGA GCAAAGCGCT CAAGAAGTTA GAGAAGGTGA CGGTACAAGG GTCTCAAAAG   540
CTAACTAGTG GTAACTGTAA TTGGGCGCTG AATTTGGTGG ACTTATTCCA TGACACCAAT   600
TTTTGTAAAG AAAAGGACTG GCAATTAAGG GACGTTATTC CATTGTTGGA GGACGTTTCC   660
CAGACGTTGT CAGGACAAGA GAGAGAGGCG TTTGAAAAAA CTTGGTGGGC AATAGCTGCC   720
GTTAAGATGG GCCTACAAAT TAATACTGTG AATGGTGCAA AATCAACATT TTCTATATTA   780
AAAGCCAAGT TTGAAAGAAA GACTGCAAAT ACTACCAAAA AGCAGTCTGA GCCCGAGGAA   840
GAATACCCAA TAATGATTGA TGGGGCTGGA AACAGAAACT TTCGGCCATT AACACCCAGA   900
GGATATACTA CCTGGGTAAA TACTATACAG CAAAACAATC TCCTAAATGA AGCTAGTGTA   960
AATCTATTTG GTATTTTATC AGTAGACTGT ACTTCTGAGG AAATGAATGC ATTTTTGGAT  1020
GTAGTACCAG GACAAGCAGG GCAAAAACAA GTACTATTGG ATAATCTTGA TAAGATTGCA  1080
GAAGAATGGG ATCGTAGGCA CCCGATGCCA AATCCTCCAT TAGTGGCACC ACCACAAGGG  1140
CCTATTCCCA TGACAGCAAG GTTCATTAGG GGATTGGGAG TTCCTAGAGA AAGACAGATG  1200
GAACCTGCTT TTGATCAGTT TAGACAAACT TATAGACAAT GGATAATAGA AGCAATGACA  1260
GAGGGGATAA AAATAATGAT TGGGAAACCT AAAGCGCAAA ATATTAGGCA AGGACCCAAA  1320
GAACCCTATC CAGAGTTTGT AGACAGATTG CTGTCTCAGA TAAAAAGTGA GGGACATCCG  1380
GCTGATATAA CTAAATTCCT GACAGACACT TTAACTATTC AGAATGCTAA TGATGAATGC  1440
AAAAATGCTA TGAGACATTT GAGGCCAGAA GATACATTAG AAGAAAAAAT GTATGCATGT  1500
AGAGATATTG GCACTATGAA ACAAAAAATG GCATTATTAG CCAAGGCACT TCAAACAGGA  1560
TTAGCTGGTC CGATGAAGGG AGGAATATTT AAAGGAGGAC CCTTAGGGGC GAAGCAGACA  1620
TGTTATAATT GTGGAAAACC AGGACATCTT TCTAGTCAAT GTAAAGCACC TAAAGTATGT  1680
TTTAAGTGCA AACAGCCAGG ACACTTCTCA AAACAATGTA TAAATGCTCC AAAAAACGGG  1740
AAACAAGGGG CTCAGGGGAG GCCCCAGAAA CAAACTTTCC CTGTGCAGAA GGGGTCAATG  1800
GACAAAACAC AAATGGAGGA GAAACAGCAA GGGACCTTAT ATCCAGATTT GAGTCAGATG  1860
AAACAGGAGT ACAAGATCAG GGAAGAGGAA AATCAGGAGG ATCTCAATCT GAACAGTTTG  1920
TGGGAGTAAC TTATAATTTA GAAAAGAGAC CAACTACAAT AGTCTTGATT AATGACACAC  1980
CCTTAAATGT ATTATTGGAC ACAGGAGCAG ACGCGTCAGT ACTAACTATT GCACATTATA  2040
ATAGGTTAAA GTATAGAGGA AGAAAATATC AGGGTACAGG TATTGTTGGG GTTGGAGGTA  2100
ATGTAGAGAC ATTTTCCACT CCTGTTACAG CGAAAAAGAA AGGAAAACAA ATTAAAACTA  2160
GAATGTTAGT AGCAGATATC CCAGTTACTA TTTTGGGGCG AGATATCCTT CAAGAATTAG  2220
GCGCACAGTT AATAATGGCT CAACTTTCAA AAGAGATAAC CCCAAGAGAA ATTAAATTAA  2280
AAACAGGCAC AGTAGGGCCT AAGGTTCCCC AATGGCCACT TACTAAAGAG AAGTTATTGG  2340
GTGCTAAAGA AATAGTCAAA AAATTGTTGG ATGAAGGTAA AATATCAGAA GCCAGTGATG  2400
ATAATCCTTA TAATTCTCCT ATATTTGTAA TAAAAAAGAA ATCTGGGAAG TGGAGATTAT  2460
TGCAAGATTT AAGAGAGTTA AATAAGGTGG TACAAGTAGG AACTGAAATA TCCAGAGGGT  2520
TACCTCATCC AGGAGGATTA ATTAAATGTA ATCATATGAC AGTATTAGAT ATTGGAGATG  2580
CATATTTCAC TATACCATTA GATCCAAAGT TTAGACAATA TACAGCATTT ACTGTGCCAT  2640
CCATTAATCA TCAGGAACCA GATAAAAGAT ATGTGTGGAA TTGCTTGCCA CAAGGTTTTG  2700
TGTTAAGTCC ATACATATAT CAAAAAACAT TGCAGGACAT ATTACAAGCT TTTAGAGAAA  2760
GGCATCCAGA TGTACAATTA TATCAATATA TGGATGATTT ATTCATTGGG AGTAATGAAT  2820
CTAAAAGACA ACATAAGGAA CTAGTAGAAG AATTAAGAGC TATTCTTTTA GAAAAGGGCT  2880
TTGAGACGCC TGAGGACAAA TTGCAGGAAG AGGCACCCTA TAATTGGCTG GGATATCAAC  2940
TTAGTCCAGG CAATTGGAAA GTACAAAAGA TGCAATTAGA ATTGGTAAAA GAACCAACAT  3000
TAAATGATGT GCAAAAATTA ATGGGAAATA TAACATGGAT GAGTTCAGGG GTTCCTGGAT  3060
TAACGGTAAA GCAAATAGCT GCTACCACTA AAGGATGCCT AGATTTAAAT CAAAAGGTAG  3120
TATGGACAGA AGAAGCACAA AAAGAACTAG AGGAAAATAA TAAAAAGATT CAGGAAGCTC  3180
AGGGATTGCA ATATTATAAC CCAGAAGAAG AAGTAATCTG TGAGATTGAA ATTACTAAAA  3240
ATTATGAGGC TACTTATATA ATAAAACAGT CTCAAGGAAT ATTGTGGGCA GGAAAGAAAA  3300
TTATGAGGGC CAATAAAGGA TGGTCCGCAG CAAAAAATTT AATGTTGTTG TTACAACATG  3360
TAGCCACAGA AAGTATTGTT AGAATTGGAA CATGTCCAAA ATTTAAAGTA CCTTTTACTA  3420
AAGAACAAGT CAAATGGGAA ATGGAAAAGG GGTGGTATTA TTCATGGCTA CCAGACATGA  3480
TATATTCACA TCAAGTTGTT CATGATGATT GGAGACTGAA ATTAGTAGAG CAACCAACAT  3540
CTGGTATAAC AATTTACACT GATGGAGGTA AACAGGATGA AGAAGGAGTT GCAGCTTATG  3600
TGACTAGTAA TGGGAAAACT AAACAAAAAA GGTTAGGACC TGTTACTCAT CAAACTGCTG  3660
AGAGGATAGC AATACAAATG GCATTAGAAG ATACTGAAGA GACATTGGTA AATATAGTAA  3720
CTGATAGTTA CTATTGTTGG AAAAATATTA CAGAAGGATT AGGGTTAGAA GGACCAGACA  3780
GCCCCTGGTG GCCAATAATT CAAAATATTA GGGCTAAAGA AATGGTTTAT TTTGCTTGGG  3840
TACCAGGTCA TAAAGGAATA TATGGCAATC AATTGGCAGA TGAGGCTACT AAAATAACTG  3900
AGGAAATTAT GTTAGCATAT CAAGGCACAC AGATTAAGGA AAAAAGAGAT GAAGATGCAG  3960
GGTTTGACTT GTGTATTCCT TATGACATGA TAATACCTGT CTCTGAGACA AAAGTTATAC  4020
CCACAGATGT AAAAATACAG GTACCTCACA AATGTTTTGG ATGGGTAACT GGTAAGTCAT  4080
CAATGGCTAA GCAAGGGTTA TTAATCAATG GGGGAATAAT TGATGAAGGA TATACAGGTG  4140
AAATACAGGT AATTTGTACT AACATTGGAA AGAGTAACAT GAAACTCAGG NAAGGACAAA  4200
AGTTTGCACA ATTAATCATA TTACAGCATC GATCAAATGA TAAACAAATC TGGGATGAAA  4260
ATAAAACATC TCAAAGGGGA GATAAAGGGT TTGGAAGCAC AGGTATATTT TGGGTAGAGA  4320
ATATCCAAGA GGCACAAGAT GAACATGAAA ACTGGCATAC ATCTCCAAAG ATATTGGCAA  4380
AAAGATATGG GTTACCATTG ACAGTAGCTA AACAGATAAC TCAAGAATGC CCTCATTGTA  4440
CTAAACAAGG ATCTGGACCA GCAGGTTGTG TAATGAGATC TCCTAATCAT TGGCAGGCTG  4500
ATTGTACACA TTTAGAAAAC AGGATAATAA TGACATTTGT AGAGTCTAAT TCAGGATACA  4560
TTCATGCTAC TCTATTGTCT AAAGAAAATG CCTTGTGTAC TTCATTGGCT ATTTTGGAAT  4620
GGGTGAGGTT ATTTTCTCCT AAATCTTTAC ATACAGACAA TGGTACTAAT TTTGTAGCAG  4680
AGTCAGTAGC AAATCTGTTG AAATTCCTGA AGGTGACACA TACTACAGGA ATACCTTATC  4740
ACCCAGAGAG CCAAGGCATT GTGGAAAGAG CAAACAGGAC ATTAAAAGAA AAAATTAAAA  4800
GTCATAGAGA AAATACTCAG ACACTTGAAG CAGCATTACA ACTTGCTCTC ATTACTTGTA  4860
ACAAAGGGAG GGAAAGTATG GGAGGACAAA CTCCATGGGA AGTATTTATT ACTAATCAGG  4920
CTCAAACAAT ACATGAAGAA CTTCTATTAC AACAAGCACA ATCTTCTAAA AAATTTTGTT  4980
TTTATAAAAT TCCTGGTGAG CATAATTGGA AGGGGCCCAC CAGAGTGTTG TGGAAAGGTG  5040
ATGGAGCAGT AGTGGTCAAT GATGAGAAAA AAGGAATAAT TGCTGTGCCT TTAACTAGGA  5100
CTAAATTATT AATAAGACCA AATTGAGTGT TGTTTCAGGA ATCACCACCA GTCAGCTATC  5160
ATTGTCAACT GTGTTTCCTG AGATCATTGG GAATTGACTA CCTTGACAGC TCTCTAAAGA  5220
AGAAGAACAA ACAAAGACAG AAGGCCATCA GGGAGGGAAG ACCACCTCAA TATCTGTTGT  5280
AAGGTTTGGT GTATGGGATT ATTTGGTAAA GGGGTAACAT GGTCAGCATT GCATTCTATG  5340
GGGGTATCCC AGGGGGAATA TCAACCCCTA TCACCCAACA AACAGAATCA ACAGACACAC  5400
AGAAAGGGGA TCATATGGTA TATCAACCCT ATTGTTATAA TGATAGCCAT AAAGAAGAAA  5460
TGGCAGAGGC AAGAGACACA AGATACCAAG AAGAAATGAA CCGGAAAGAA GATAAAGAAG  5520
ATAAAAGAAG AAATAACTGG TGGAAGATAG GTATGTTCCT ATTGTGTCTG TTAGGGACCA  5580
CTGGAGGATT CCTCTGGTGG TATGAGAGGC AACAACATTC ATATTATATA GGATTGGTTA  5640
CAATAGGAGG TAGACTAAAT GGTTCAGGAA TGACTAGTGC CATAGAATGT TGGGGTTCAT  5700
TTCCTGGGTG TAGGTCATTT ACTAACTATT TCAGTTATGA CACTAATAGG ACTGTTAGTA  5760
CAGATAATAA TACTGCCACT CTGTTAGATG CTTATCAAAG AGAAATAACA AACATATACA  5820
GGACATCTTG TGTGGATAGT GATCACTGTC AAAAATATAA ATGTAACCAA GTACAGTTGG  5880
AGAAGAACAG CAATAACATT ATAATGAATA ATTGTAGTAA CAATAGTTGT GAAGAGTTTT  5940
GGGGGTTTAG CTGGTTAGAA TGTAATCAGA CAGAAAATGC AATAACTATA TTGGTCCCAG  6000
AAGTAGAAAT GCAGCAAAGT AAAAACACTT GGATTCCAAA AGGGTGTAAT GAAACTTGGG  6060
CTAGGGTAAA ACATTGTCCA ATGGATTTAT TATATGGTAT AAATAGAATA AGAATGTGTG  6120
TCCAACCTCC ATTCTTTTTG TTTAAACAGG ATGATACTTC TAATAATACT GGTATTCTCA  6180
GTAATTGTGG ACCTTTAGTA TTTCTTGGAA TATTGGAGGA CAACAAGGCA GCAATACAGA  6240
ATGGGAGTTG CACTCTTCAC AGGACAAATA TTGAAAGGCC AGATTATAGT GGATTTTACC  6300
AAGTGCCTAT ATTTTATATA TGCAACTTGA CAGGACTTCA GAGTTGTAAT AATGGATCAA  6360
TAATTAGTAT AATTATGTCT GAGCCTAATA ATGTTCAATA CTTGTTATGC AACACTAGTA  6420
ATACTAATAG TACCAGTAAT GCTAATGTCT CTTGTGTGGT ACAAAGTTTT GGAGTGATAG  6480
GACAGGCACA TGTGGCGCTG CCCAGAAAAA ATAAGAGGTT ACAATCTCCA AAGTTTGCTC  6540
AATATAATTG CACCATAAAT AATAAAACAG AATTAAGGCA ATGGCAATTG GTGAAAACAT  6600
CAGGCATCAC TCCTTTACCC ATTTCCTCTA CAGCTAATAC TGGATTAGTC AGACACAAGA  6660
GAGACTTTGG TATATCTGCT ATAATAGCTG CCATTGTAGC TGCTACTGCT ATTGCTGCTA  6720
GTGCTACTAT GTCTTATATT GCTTTGACAG AAGTCAACAA ATTAGATAGT GTACAAAATC  6780
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ATATATTATA TGCTATGGTC CTCCAAACAC ATGCAGATGT TCAATTGTTA AAAGAACAAC  6900
AAAAGATTGA GGAAACATTT AATTTGATTG GATGTATAGA AAGATCACAT ACATTTTGTC  6960
ATACTGGGCA TCCCTGGAAT GAATCATGGG GTCAGCTAAA TGATTCTACA CAGTGGGATG  7020
ACTGGGTAGA TAAGATGGAA AATTTAAATC ATGATATATT AACAACACTT CATACTGCTA  7080
GAAATAATCT AGAACAATCT ATGATAACTT TTAATACACC TGACAGTATA GCACAATTTG  7140
GTAAAAATAT TTGGAGTCAT GTTGCAAATT GGATTCCTGG ATTAGGAGCT TCCATAATTA  7200
AATATATAGT GTTATTATTA CTTGTATATG TGCTACTAAC CTCTGCACCT AAGATCCTCA  7260
GAGGCCTCTT GACAACGATG AGTGGTGCAG GATCCTCCGC CAGTCGCTAC CTGAGGAAAA  7320
GGTACCATCA CAGACATGCA TCGCGAGGAG ACATCTGGGC CCAGGTCCAG TATCATGCGT  7380
ACCTGGCAGA CGAGACTCAT GGATCAGGGG ACAAGTCCAA CATGCGGAAG TTCTCCAGGA  7440
ACAACTGAAA TGGCGAATCA GAGGAGTACA ACAGACGGCA AAAGAATTGG AAAAGGTTAA  7500
TAAAGAGATC TGGAGAGAAT TACAATACAC ACGAAGACAA CATGGGGACT ATGGGTCGTT  7560
TGGTGACTAC CGCCGCCGAG AAGAAGAACG TTGGGGTGAA TCCTCACCAA GGGTCCTTAA  7620
ACCTGGAGAT TCCAAGCGAA GGAGGAAACA TCTATGACTG TTGCCTTAAG GCTCAAGAAG  7680
GAACTCTTGC TATTCCTTGC TGTGGCTTCC CACTATGGCT GCTTTGGGGA CTTATAATCA  7740
TATTAGGACG CTTGTTGGGA TATGGGCTTC GGGGAATTGC AAAAAGCATA ATGATTCTGG  7800
GGAAGGGACT AAATGTAATA ATTACAGGAT TAAGAAAATT ATGTAATTAT ATTGGGAAAA  7860
TGCTAAATCC AGCTACATCT CATGTAACAA TGCCTCAATA TGATGTTTAG AAAAACAAGG  7920
GGGGAACTGT GGGATTAATA TAAGATTCTT ATAAGTGAAT ATGAAAGTTG CTGATGCTCT  7980
CATAACCTCA TGTAACCCAG ATGACTAGCT GATGACTAGC TCATGTTGCT AGGCAACTGA  8040
ACTGTAATAA CCTTTTGTTC CTCATTATAG TTCCGCTTTT GTGACGCGTT AAGTTCCTGT  8100
TTTTACAGTA TATAAGTGCT TGTATTCTGA CATTTGGTTG CTCAGATTCT GCGGTCTGAG  8160
TCCCTTCTCT GCTGGGCTAG ACTCTAGCCT TGGTAATAAA TATAATTCTC TGCTAAGTCC  8220
CTGTTCTTAG TTTGTCTTGT TTTCAAGATC TAACA                             8255
SEQ ID NO:15的信息:
(a)序列特征:
长度:1461bp
类型:核酸
链性:双链
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(b)分子类型:DNA(基因组)
(c)来源:马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株gag基因
(d)序列描述:SEQ ID NO:15
ATGGGAGACT CTTTGACGTG GAGCAAAGCG CTCAAGAAGT TAGAGAAGGT GACGGTACAA    60
GGGTCTCAAA AGCTAACTAG TGGTAACTGT AATTGGGCGC TGAATTTGGT GGACTTATTC   120
CATGACACCA ATTTTTGTAA AGAAAAGGAC TGGCAATTAA GGGACGTTAT TCCATTGTTG   180
GAGGACGTTT CCCAGACGTT GTCAGGACAA GAGAGAGAGG CGTTTGAAAA AACTTGGTGG   240
GCAATAGCTG CCGTTAAGAT GGGCCTACAA ATTAATACTG TGAATGGTGC AAAATCAACA   300
TTTTCTATAT TAAAAGCCAA GTTTGAAAGA AAGACTGCAA ATACTACCAA AAAGCAGTCT   360
GAGCCCGAGG AAGAATACCC AATAATGATT GATGGGGCTG GAAACAGAAA CTTTCGGCCA   420
TTAACACCCA GAGGATATAC TACCTGGGTA AATACTATAC AGCAAAACAA TCTCCTAAAT   480
GAAGCTAGTG TAAATCTATT TGGTATTTTA TCAGTAGACT GTACTTCTGA GGAAATGAAT   540
GCATTTTTGG ATGTAGTACC AGGACAAGCA GGGCAAAAAC AAGTACTATT GGATAATCTT   600
GATAAGATTG CAGAAGAATG GGATCGTAGG CACCCGATGC CAAATCCTCC ATTAGTGGCA   660
CCACCACAAG GGCCTATTCC CATGACAGCA AGGTTCATTA GGGGATTGGG AGTTCCTAGA   720
GAAAGACAGA TGGAACCTGC TTTTGATCAG TTTAGACAAA CTTATAGACA ATGGATAATA   780
GAAGCAATGA CAGAGGGGAT AAAAATAATG ATTGGGAAAC CTAAAGCGCA AAATATTAGG   840
CAAGGACCCA AAGAACCCTA TCCAGAGTTT GTAGACAGAT TGCTGTCTCA GATAAAAAGT   900
GAGGGACATC CGGCTGATAT AACTAAATTC CTGACAGACA CTTTAACTAT TCAGAATGCT   960
AATGATGAAT GCAAAAATGC TATGAGACAT TTGAGGCCAG AAGATACATT AGAAGAAAAA  1020
ATGTATGCAT GTAGAGATAT TGGCACTATG AAACAAAAAA TGGCATTATT AGCCAAGGCA  1080
CTTCAAACAG GATTAGCTGG TCCGATGAAG GGAGGAATAT TTAAAGGAGG ACCCTTAGGG  1140
GCGAAGCAGA CATGTTATAA TTGTGGAAAA CCAGGACATC TTTCTAGTCA ATGTAAAGCA  1200
CCTAAAGTAT GTTTTAAGTG CAAACAGCCA GGACACTTCT CAAAACAATG TAGAAATGCT  1260
CCAAAAAACG GGAAACAAGG GGCTCAGGGG AGGCCCCAGA AACAAACTTT CCCTGTGCAG  1320
AAGGGGTCAA TGGACAAAAC ACAAATGGAG GAGAAACAGC AAGGGACCTT ATATCCAGAT  1380
TTGAGTCAGA TGAAACAGGA GTACAAGATC AGGGAAGAGG AAAATCAGGA GGATCTCAAT  1440
CTGAACAGTT TGTGGGAGTA A                                            1461
SEQ ID NO:16的信息:
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类型:核酸
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(b)分子类型:DNA(基因组)
(c)来源:马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株pol基因
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ACAGCCAGGA CACTTCTCAA AACAATGTAT AAATGCTCCA AAAAACGGGA AACAAGGGGC    60
TCAGGGGAGG CCCCAGAAAC AAACTTTCCC TGTGCAGAAG GGGTCAATGG ACAAAACACA   120
AATGGAGGAG AAACAGCAAG GGACCTTATA TCCAGATTTG AGTCAGATGA AACAGGAGTA   180
CAAGATCAGG GAAGAGGAAA ATCAGGAGGA TCTCAATCTG AACAGTTTGT GGGAGTAACT   240
TATAATTTAG AAAAGAGACC AACTACAATA GTCTTGATTA ATGACACACC CTTAAATGTA   300
TTATTGGACA CAGGAGCAGA CGCGTCAGTA CTAACTATTG CACATTATAA TAGGTTAAAG   360
TATAGAGGAA GAAAATATCA GGGTACAGGT ATTGTTGGGG TTGGAGGTAA TGTAGAGACA   420
TTTTCCACTC CTGTTACAGC GAAAAAGAAA GGAAAACAAA TTAAAACTAG AATGTTAGTA   480
GCAGATATCC CAGTTACTAT TTTGGGGCGA GATATCCTTC AAGAATTAGG CGCACAGTTA   540
ATAATGGCTC AACTTTCAAA AGAGATAACC CCAAGAGAAA TTAAATTAAA AACAGGCACA   600
GTAGGGCCTA AGGTTCCCCA ATGGCCACTT ACTAAAGAGA AGTTATTGGG TGCTAAAGAA   660
ATAGTCAAAA AATTGTTGGA TGAAGGTAAA ATATCAGAAG CCAGTGATGA TAATCCTTAT   720
AATTCTCCTA TATTTGTAAT AAAAAAGAAA TCTGGGAAGT GGAGATTATT GCAAGATTTA   780
AGAGAGTTAA ATAAGGTGGT ACAAGTAGGA ACTGAAATAT CCAGAGGGTT ACCTCATCCA   840
GGAGGATTAA TTAAATGTAA TCATATGACA GTATTAGATA TTGGAGATGC ATATTTCACT   900
ATACCATTAG ATCCAAAGTT TAGACAATAT ACAGCATTTA CTGTGCCATC CATTAATCAT   960
CAGGAACCAG ATAAAAGATA TGTGTGGAAT TGCTTGCCAC AAGGTTTTGT GTTAAGTCCA  1020
TACATATATC AAAAAACATT GCAGGACATA TTACAAGCTT TTAGAGAAAG GCATCCAGAT  1080
GTACAATTAT ATCAATATAT GGATGATTTA TTCATTGGGA GTAATGAATC TAAAAGACAA  1140
CATAAGGAAC TAGTAGAAGA ATTAAGAGCT ATTCTTTTAG AAAAGGGCTT TGAGACGCCT  1200
GAGGACAAAT TGCAGGAAGA GGCACCCTAT AATTGGCTGG GATATCAACT TAGTCCAGGC  1260
AATTGGAAAG TACAAAAGAT GCAATTAGAA TTGGTAAAAG AACCAACATT AAATGATGTG  1320
CAAAAATTAA TGGGAAATAT AACATGGATG AGTTCAGGGG TTCCTGGATT AACGGTAAAG  1380
CAAATAGCTG CTACCACTAA AGGATGCCTA GATTTAAATC AAAAGGTAGT ATGGACAGAA  1440
GAAGCACAAA AAGAACTAGA GGAAAATAAT AAAAAGATTC AGGAAGCTCA GGGATTGCAA  1500
TATTATAACC CAGAAGAAGA AGTAATCTGT GAGATTGAAA TTACTAAAAA TTATGAGGCT  1560
ACTTATATAA TAAAACAGTC TCAAGGAATA TTGTGGGCAG GAAAGAAAAT TATGAGGGCC  1620
AATAAAGGAT GGTCCGCAGC AAAAAATTTA ATGTTGTTGT TACAACATGT AGCCACAGAA  1680
AGTATTGTTA GAATTGGAAC ATGTCCAAAA TTTAAAGTAC CTTTTACTAA AGAACAAGTC  1740
AAATGGGAAA TGGAAAAGGG GTGGTATTAT TCATGGCTAC CAGACATGAT ATATTCACAT  1800
CAAGTTGTTC ATGATGATTG GAGACTGAAA TTAGTAGAGC AACCAACATC TGGTATAACA  1860
ATTTACACTG ATGGAGGTAA ACAGGATGAA GAAGGAGTTG CAGCTTATGT GACTAGTAAT  1920
GGGAAAACTA AACAAAAAAG GTTAGGACCT GTTACTCATC AAACTGCTGA GAGGATAGCA  1980
ATACAAATGG CATTAGAAGA TACTGAAGAG ACATTGGTAA ATATAGTAAC TGATAGTTAC  2040
TATTGTTGGA AAAATATTAC AGAAGGATTA GGGTTAGAAG GACCAGACAG CCCCTGGTGG  2100
CCAATAATTC AAAATATTAG GGCTAAAGAA ATGGTTTATT TTGCTTGGGT ACCAGGTCAT  2160
AAAGGAATAT ATGGCAATCA ATTGGCAGAT GAGGCTACTA AAATAACTGA GGAAATTATG  2220
TTAGCATATC AAGGCACACA GATTAAGGAA AAAAGAGATG AAGATGCAGG GTTTGACTTG  2280
TGTATTCCTT ATGACATGAT AATACCTGTC TCTGAGACAA AAGTTATACC CACAGATGTA  2340
AAAATACAGG TACCTCACAA ATGTTTTGGA TGGGTAACTG GTAAGTCATC AATGGCTAAG  2400
CAAGGGTTAT TAATCAATGG GGGAATAATT GATGAAGGAT ATACAGGTGA AATACAGGTA  2460
ATTTGTACTA ACATTGGAAA GAGTAACATG AAACTCAGGG AAGGACAAAA GTTTGCACAA  2520
TTAATCATAT TACAGCATCG ATCAAATGAT AAACAAATCT GGGATGAAAA TAAAACATCT  2580
CAAAGGGGAG ATAAAGGGTT TGGAAGCACA GGTATATTTT GGGTAGAGAA TATCCAAGAG  2640
GCACAAGATG AACATGAAAA CTGGCATACA TCTCCAAAGA TATTGGCAAA AAGATATGGG  2700
TTACCATTGA CAGTAGCTAA ACAGATAACT CAAGAATGCC CTCATTGTAC TAAACAAGGA  2760
TCTGGACCAG CAGGTTGTGT AATGAGATCT CCTAATCATT GGCAGGCTGA TTGTACACAT  2820
TTAGAAAACA GGATAATAAT GACATTTGTA GAGTCTAATT CAGGATACAT TCATGCTACT  2880
CTATTGTCTA AAGAAAATGC CTTGTGTACT TCATTGGCTA TTTTGGAATG GGTGAGGTTA  2940
TTTTCTCCTA AATCTTTACA TACAGACAAT GGTACTAATT TTGTAGCAGA GTCAGTAGCA  3000
AATCTGTTGA AATTCCTGAA GGTGACACAT ACTACAGGAA TACCTTATCA CCCAGAGAGC  3060
CAAGGCATTG TGGAAAGAGC AAACAGGACA TTAAAAGAAA AAATTAAAAG TCATAGAGAA  3120
AATACTCAGA CACTTGAAGC AGCATTACAA CTTGCTCTCA TTACTTGTAA CAAAGGGAGG  3180
GAAAGTATGG GAGGACAAAC TCCATGGGAA GTATTTATTA CTAATCAGGC TCAAACAATA  3240
CATGAAGAAC TTCTATTACA ACAAGCACAA TCTTCTAAAA AATTTTGTTT TTATAAAATT  3300
CCTGGTGAGC ATAATTGGAA GGGGCCCACC AGAGTGTTGT GGAAAGGTGA TGGAGCAGTA  3360
GTGGTCAATG ATGAGAAAAA AGGAATAATT GCTGTGCCTT TAACTAGGAC TAAATTATTA  3420
ATAAGACCAA ATTGA                                                   3435
SEQ ID NO:17的信息:
(a)序列特征:
长度:2130bp
类型:核酸
链性:双链
拓扑结构:线性
(b)分子类型:DNA(基因组)
(c)来源:马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株env基因
(d)序列描述:SEQ ID NO:17
ATGGTCAGCA TTGCATTCTA TGGGGGTATC CCAGGGGGAA TATCAACCCC TATCACCCAA    60
CAAACAGAAT CAACAGACAC ACAGAAAGGG GATCATATGG TATATCAACC CTATTGTTAT   120
AATGATAGCC ATAAAGAAGA AATGGCAGAG GCAAGAGACA CAAGATACCA AGAAGAAATG   180
AACCGGAAAG AAGATAAAGA AGATAAAAGA AGAAATAACT GGTGGAAGAT AGGTATGTTC   240
CTATTGTGTC TGTTAGGGAC CACTGGAGGA TTCCTCTGGT GGTATGAGAG GCAACAACAT   300
TCATATTATA TAGGATTGGT TACAATAGGA GGTAGACTAA ATGGTTCAGG AATGACTAGT   360
GCCATAGAAT GTTGGGGTTC ATTTCCTGGG TGTAGGTCAT TTACTAACTA TTTCAGTTAT   420
GACACTAATA GGACTGTTAG TACAGATAAT AATACTGCCA CTCTGTTAGA TGCTTATCAA   480
AGAGAAATAA CAAACATATA CAGGACATCT TGTGTGGATA GTGATCACTG TCAAAAATAT   540
AAATGTAACC AAGTACAGTT GGAGAAGAAC AGCAATAACA TTATAATGAA TAATTGTAGT   600
AACAATAGTT GTGAAGAGTT TTGGGGGTTT AGCTGGTTAG AATGTAATCA GACAGAAAAT   660
GCAATAACTA TATTGGTCCC AGAAGTAGAA ATGCAGCAAA GTAAAAACAC TTGGATTCCA   720
AAAGGGTGTA ATGAAACTTG GGCTAGGGTA AAACATTGTC CAATGGATTT ATTATATGGT   780
ATAAATAGAA TAAGAATGTG TGTCCAACCT CCATTCTTTT TGTTTAAACA GGATGATACT   840
TCTAATAATA CTGGTATTCT CAGTAATTGT GGACCTTTAG TATTTCTTGG AATATTGGAG   900
GACAACAAGG CAGCAATACA GAATGGGAGT TGCACTCTTC ACAGGACAAA TATTGAAAGG   960
CCAGATTATA GTGGATTTTA CCAAGTGCCT ATATTTTATA TATGCAACTT GACAGGACTT  1020
CAGAGTTGTA ATAATGGATC AATAATTAGT ATAATTATGT CTGAGCCTAA TAATGTTCAA  1080
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GTACAAAGTT TTGGAGTGAT AGGACAGGCA CATGTGGCGC TGCCCAGAAA AAATAAGAGG  1200
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GCTGCTACTG CTATTGCTGC TAGTGCTACT ATGTCTTATA TTGCTTTGAC AGAAGTCAAC  1440
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GAGTTAACAG AAGAGCAAAT TCATATATTA TATGCTATGG TCCTCCAAAC ACATGCAGAT  1560
GTTCAATTGT TAAAAGAACA ACAAAAGATT GAGGAAACAT TTAATTTGAT TGGATGTATA  1620
GAAAGATCAC ATACATTTTG TCATACTGGG CATCCCTGGA ATGAATCATG GGGTCAGCTA  1680
AATGATTCTA CACAGTGGGA TGACTGGGTA GATAAGATGG AAAATTTAAA TCATGATATA  1740
TTAACAACAC TTCATACTGC TAGAAATAAT CTAGAACAAT CTATGATAAC TTTTAATACA  1800
CCTGACAGTA TAGCACAATT TGGTAAAAAT ATTTGGAGTC ATGTTGCAAA TTGGATTCCT  1860
GGATTAGGAG CTTCCATAAT TAAATATATA GTGTTATTAT TACTTGTATA TGTGCTACTA  1920
ACCTCTGCAC CTAAGATCCT CAGAGGCCTC TTGACAACGA TGAGTGGTGC AGGATCCTCC  1980
GCCAGTCGCT ACCTGAGGAA AAGGTACCAT CACAGACATG CATCGCGAGG AGACATCTGG  2040
GCCCAGGTCC AGTATCATGC GTACCTGGCA GACGAGACTC ATGGATCAGG GGACAAGTCC  2100
AACATGCGGA AGTTCTCCAG GAACAACTGA                                   2130
SEQ ID NO:18的信息:
(a)序列特征:
长度:495bp
类型:核酸
链性:双链
拓扑结构:线性
(b)分子类型:DNA(基因组)
(c)来源:马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株rev基因
(d)序列描述:SEQ ID NO:18
ATGGCAGAGG CAAGAGACAC AAGATACCAA GAAGAAATGA ACCGGAAAGA AGATAAAGAA    60
GATAAAAGAA GAAATAACTG GTGGAAGATA GGTCCTCAGA GGCCTCTTGA CAACGATGAG   120
TGGTGCAGGA TCCTCCGCCA GTCGCTACCT GAGGAAAAGG TACCATCACA GACATGCATC   180
GCGAGGAGAC ATCTGGGCCC AGGTCCAGTA TCATGCGTAC CTGGCAGACG AGACTCATGG   240
ATCAGGGGAC AAGTCCAACA TGCGGAAGTT CTCCAGGAAC AACTGAAATG GCGAATCAGA   300
GGAGTACAAC AGACGGCAAA AGAATTGGAA AAGGTTAATA AAGAGATCTG GAGAGAATTA   360
CAATACACAC GAAGACAACA TGGGGACTAT GGGTCGTTTG GTGACTACCG CCGCCGAGAA   420
GAAGAACGTT GGGGTGAATC CTCACCAAGG GTCCTTAAAC CTGGAGATTC CAAGCGAAGG   480
AGGAAACATC TATGA                                                    495
SEQ ID NO:19的信息:
(a)序列特征:
长度:237bp
类型:核酸
链性:双链
拓扑结构:线性
(b)分子类型:DNA(基因组)
(c)来源:马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株tat基因
(d)序列描述:SEQ ID NO:19
CTGCTGAACC TGGCTGATCA TAGGATCCCT AGGACAGCAG AGGAGAACTT ACAGAAGTCT    60
TCTGGAGGTG TTACTGGCCA CAACACAGGA AGACAGGTAC CACCAGTCAG CTATCATTGT   120
CAACTGTGTT TCCTGAGATC ATTGGGAATT GACTACCTTG ACAGCTCTCT AAAGAAGAAG   180
AACAAACAAA GACAGAAGGC CATCAGGGAG GGAAGACCAC CTCAATATCT GTTGTAA      237
SEQ ID NO:20的信息:
(a)序列特征:
长度:207bp
类型:核酸
链性:双链
拓扑结构:线性
(b)分子类型:DNA(基因组)
(c)来源:马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株s2基因
(d)序列描述:SEQ ID NO:20
ATGGGATTAT TTGGTAAAGG GGTAACATGG TCAGCATTGC ATTCTATGGG GGTATCCCAG    60
GGGGAATATC AACCCCTATC ACCCAACAAA CAGAATCAAC AGACACACAG AAAGGGGATC   120
ATATGGTATA TCAACCCTAT TGTTATAATG ATAGCCATAA AGAAGAAATG GCAGAGGCAA   180
GAGACACAAG ATACCAAGAA GAAATGA                                       207
SEQ ID NO:21的信息:
(a)序列特征:
长度:487个氨基酸
类型:氨基酸
链性:
拓扑结构:线性
(b)分子类型:蛋白质
(c)来源:马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株gag蛋白
(d)序列描述:SEQ ID NO:21
MGDSLTWSKA LKKLEKVTVQ GSQKLTSGNC NWALNLVDLF HDTNFCKEKD WQLRDVIPLL
EDVSQTLSGQ EREAFEKTWW AIAAVKMGLQ INTVNGAKST FSILKAKFER KTANTTKKQS
EPEEEYPIMI DGAGNRNFRP LTPRGYTTWV NTIQQNNLLN EASVNLFGIL SVDCTSEEMN
AFLDVVPGQA GQKQVLLDNL DKIAEEWDRR HPMPNPPLVA PPQGPIPMTA RFIRGLGVPR
ERQMEPAFDQ FRQTYRQWII EAMTEGIKIM IGKPKAQNIR QGPKEPYPEF VDRLLSQIKS
EGHPADITKF LTDTLTIQNA NDECKNAMRH LRPEDTLEEK MYACRDIGTM KQKMALLAKA
LQTGLAGPMK GGIFKGGPLG AKQTCYNCGK PGHLSSQCKA PKVCFKCKQP GHFSKQCRNA
PKNGKQGAQG RPQKQTFPVQ KGSMDKTQME EKQQGTLYPD LSQMKQEYKI REEENQEDLN
LNSLWE*
SEQ ID NO:22的信息:
(a)序列特征:
长度:1145个氨基酸
类型:氨基酸
链性:
拓扑结构:线性
(b)分子类型:蛋白质
(c)来源:马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株pol蛋白
(d)序列描述:SEQ ID NO:22
TARTLLKTMY KCSKKRETRG SGEAPETNFP CAEGVNGQNT NGGETARDLI SRFESDETGV
QDQGRGKSGG SQSEQFVGVT YNLEKRPTTI VLINDTPLNV LLDTGADASV LTIAHYNRLK
YRGRKYQGTG IVGVGGNVET FSTPVTAKKK GKQIKTRMLV ADIPVTILGR DILQELGAQL
IMAQLSKEIT PREIKLKTGT VGPKVPQWPL TKEKLLGAKE IVKKLLDEGK ISEASDDNPY
NSPIFVIKKK SGKWRLLQDL RELNKVVQVG TEISRGLPHP GGLIKCNHMT VLDIGDAYFT
IPLDPKFRQY TAFTVPSINH QEPDKRYVWN CLPQGFVLSP YIYQKTLQDI LQAFRERHPD
VQLYQYMDDL FIGSNESKRQ HKELVEELRA ILLEKGFETP EDKLQEEAPY NWLGYQLSPG
NWKVQKMQLE LVKEPTLNDV QKLMGNITWM SSGVPGLTVK QIAATTKGCL DLNQKVVWTE
EAQKELEENN KKIQEAQGLQ YYNPEEEVIC EIEITKNYEA TYIIKQSQGI LWAGKKIMRA
NKGWSAAKNL MLLLQHVATE SIVRIGTCPK FKVPFTKEQV KWEMEKGWYY SWLPDMIYSH
QVVHDDWRLK LVEQPTSGIT IYTDGGKQDE EGVAAYVTSN GKTKQKRLGP VTHQTAERIA
IQMALEDTEE TLVNIVTDSY YCWKNITEGL GLEGPDSPWW PIIQNIRAKE MVYFAWVPGH
KGIYGNQLAD EATKITEEIM LAYQGTQIKE KRDEDAGFDL CIPYDMIIPV SETKVIPTDV
KIQVPHKCFG WVTGKSSMAK QGLLINGGII DEGYTGEIQV ICTNIGKSNM KLREGQKFAQ
LIILQHRSND KQIWDENKTS QRGDKGFGST GIFWVENIQE AQDEHENWHT SPKILAKRYG
LPLTVAKQIT QECPHCTKQG SGPAGCVMRS PNHWQADCTH LENRIIMTFV ESNSGYIHAT
LLSKENALCT SLAILEWVRL FSPKSLHTDN GTNFVAESVA NLLKFLKVTH TTGIPYHPES
QGIVERANRT LKEKIKSHRE NTQTLEAALQ LALITCNKGR ESMGGQTPWE VFITNQAQTI
HEELLLQQAQ SSKKFCFYKI PGEHNWKGPT RVLWKGDGAV VVNDEKKGII AVPLTRTKLL
IRPN*
SEQ ID NO:23的信息:
(a)序列特征:
长度:710个氨基酸
类型:氨基酸
链性:
拓扑结构:线性
(b)分子类型:蛋白质
(c)来源:马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株env蛋白
(d)序列描述:SEQ ID NO:23
MVSIAFYGGI PGGISTPITQ QTESTDTQKG DHMVYQPYCY NDSHKEEMAE ARDTRYQEEM
NRKEDKEDKR RNNWWKIGMF LLCLLGTTGG FLWWYERQQH SYYIGLVTIG GRLNGSGMTS
AIECWGSFPG CRSFTNYFSY DTNRTVSTDN NTATLLDAYQ REITNIYRTS CVDSDHCQKY
KCNQVQLEKN SNNIIMNNCS NNSCEEFWGF SWLECNQTEN AITILVPEVE MQQSKNTWIP
KGCNETWARV KHCPMDLLYG INRIRMCVQP PFFLFKQDDT SNNTGILSNC GPLVFLGILE
DNKAAIQNGS CTLHRTNIER PDYSGFYQVP IFYICNLTGL QSCNNGSIIS IIMSEPNNVQ
YLLCNTSNTN STSNANVSCV VQSFGVIGQA HVALPRKNKR LQSPKFAQYN CTINNKTELR
QWQLVKTSGI TPLPISSTAN TGLVRHKRDF GISAIIAAIV AATAIAASAT MSYIALTEVN
KLDSVQNHTF KVENNTINSM ELTEEQIHIL YAMVLQTHAD VQLLKEQQKI EETFNLIGCI
ERSHTFCHTG HPWNESWGQL NDSTQWDDWV DKMENLNHDI LTTLHTARNN LEQSMITFNT
PDSIAQFGKN IWSHVANWIP GLGASIIKYI VLLLLVYVLL TSAPKILRGL LTTMSGAGSS
ASRYLRKRYH HRHASRGDIW AQVQYHAYLA DETHGSGDKS NMRKFSRNN*
SEQ ID NO:24的信息:
(a)序列特征:
长度:165个氨基酸
类型:氨基酸
链性:
拓扑结构:线性
(b)分子类型:蛋白质
(c)来源:马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株rev蛋白
(d)序列描述:SEQ ID NO:24
MAEARDTRYQ EEMNRKEDKE DKRRNNWWKI GPQRPLDNDE WCRILRQSLP EEKVPSQTCI
ARRHLGPGPV SCVPGRRDSW IRGQVQHAEV LQEQLKWRIR GVQQTAKELE KVNKEIWREL
QYTRRQHGDY GSFGDYRRRE EERWGESSPR VLKPGDSKRR RRKHL*
SEQ ID NO:25的信息:
(a)序列特征:
长度:79个氨基酸
类型:氨基酸
链性:
拓扑结构:线性
(b)分子类型:蛋白质
(c)来源:马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株tat蛋白
(d)序列描述:SEQ ID NO:25
LLNLADHRIP RTAEENLQKS SGGVTGHNTG RQVPPVSYHC QLCFLRSLGI DYLDSSLKKK
NKQRQKAIRE GRPPQYLL*
SEQ IDNO:26的信息:
(a)序列特征:
长度:69个氨基酸
类型:氨基酸
链性:
拓扑结构:线性
(b)分子类型:蛋白质
(c)来源:马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株s2蛋白
(d)序列描述:SEQ ID NO:26
MGLFGKGVTW SALHSMGVSQ GEYQPLSPNK QNQQTHRKGI IWYINPIVIM IAIKKKWQRQ
ETODTKKK*

Claims (4)

1、马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株的全基因组序列,其特征在于所述序列如SEQ ID NO:14所示。
2、马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株env基因编码的氨基酸序列,其特征在于所述序列如SEQ ID NO:23所示。
3、含有权利要求1所述的马传染性贫血病毒驴胎皮肤细胞适应株的全基因组序列的质粒pCh-FD,所述质粒如图1所示。
4、用权利要求3所述的质粒转化的大肠杆菌,其特征在于所述大肠杆菌的保藏号为CGMCC NO.0434.1。
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