CN1316030C - 乳酸杆菌菌株在治疗过敏中之新用途 - Google Patents

乳酸杆菌菌株在治疗过敏中之新用途 Download PDF

Info

Publication number
CN1316030C
CN1316030C CNB021498253A CN02149825A CN1316030C CN 1316030 C CN1316030 C CN 1316030C CN B021498253 A CNB021498253 A CN B021498253A CN 02149825 A CN02149825 A CN 02149825A CN 1316030 C CN1316030 C CN 1316030C
Authority
CN
China
Prior art keywords
lactobacillus
ccrc
subspecies
strain
inf
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CNB021498253A
Other languages
English (en)
Other versions
CN1498627A (zh
Inventor
许清祥
苏伟志
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
JINGYUE BIOLOGICAL SCIENCE AND TECHNOLOGY Co Ltd
Genmont Biotech Inc
Original Assignee
JINGYUE BIOLOGICAL SCIENCE AND TECHNOLOGY Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by JINGYUE BIOLOGICAL SCIENCE AND TECHNOLOGY Co Ltd filed Critical JINGYUE BIOLOGICAL SCIENCE AND TECHNOLOGY Co Ltd
Priority to CNB021498253A priority Critical patent/CN1316030C/zh
Publication of CN1498627A publication Critical patent/CN1498627A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN1316030C publication Critical patent/CN1316030C/zh
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Images

Abstract

本发明提供一种可刺激INF-γ分泌之乳酸菌株在治疗个体过敏中的新用途，该菌株系选自由以下所组成的组：植物乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)CCRC 12944、嗜酸性乳酸杆菌(Lactobacillus acidophilus)CCRC 14079、鼠李糖乳酸杆菌(Lactobacillus rhamnosus)CCRC 10940、副干酪乳酸杆菌副干酪亚种(Lactobacillus paracasei subsp.paracasei)CCRC 14023、德氏乳酸杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus)CCRC 12297、德氏乳酸杆菌保加利亚亚种CCRC 14007、及德氏乳酸杆菌保加利亚亚种CCRC 14069。

Description

乳酸杆菌菌株在治疗过敏中之新用途
技术领域
本发明主要涉及某些乳酸杆菌菌株在治疗过敏中之新用途。
背景技本
过敏系指一种对正常无害之物质发展出免疫媒介不良反应之后天潜在能力。过敏反应会诱发产生如搔痒、咳嗽、哮喘、打喷嚏、流眼泪、发炎及疲劳等症状。一般相信，过敏反应包括早期的专一性免疫反应及晚期的发炎反应。有报告指出，过敏原(例如花粉及尘螨)会刺激高亲合力免疫球蛋白(IgE)受体以引起过敏之早期阶段。例如，肥大细胞及嗜碱白血球经过敏原刺激后，会释放出组织胺及细胞激素，而后，肥大细胞及嗜碱白血球所释放的细胞激素会藉由增加发炎细胞而引发过敏的后期阶段。亦有报告指出，嗜伊红血球、巨噬细胞、淋巴细胞、嗜中性白血球及血小板的汇集会激活剧烈的发炎循环。过敏的晚期阶段会扩大初期的免疫反应，并依序诱发释放出更多的发炎细胞(Blease等人，Chemokines and their role in airwayhyper-reactivity，Respir Res 2000；1：54-61)。
为了治疗过敏症状，业已研究各式的治疗法，其中已有使用抗过敏药剂及组织胺H受体拮抗剂(抗组织胺)的治疗。组织胺拮抗剂的使用可拮抗对过敏原反应而由肥大细胞释放出之组织胺。组织胺拮抗剂可减少组织胺在标的组织所造成之泛红、搔痒及肿胀现象，并可预防或减缓肥大细胞因去颗粒化后所产生的许多症状。然而，抗组织胺亦会造成某些不良反应，诸如注意力降低、反应迟钝及嗜睡(美国专利第6,225,332号)。
亦有某些报告指出，可藉由调节细胞激素来治疗过敏。在这些报告中发现干扰素γ(INF-γ)会抑制Th2淋巴细胞中细胞激素的过度表现(特别是IL-4的分泌)，进而降低B细胞增生。除此之外，INF-γ可刺激Th1的免疫反应，及抑制IgE的合成(Sareneva T等人，Influenza A virus-induced INF-α/β and IL-18 synergistically enhanceIFN-γgene expression in human T cells，J Immunol 1998；160：6032-6038；Shida K等人，Lactobacillus casei inhibits antigen-induced IgEsecretion through regulation of cytokine production in murine splenocyteculture，Int Arch Allergy Immunol 1998；115：278-287)。因为INF-γ可抑制B细胞的增生及IgE分泌，因此，发明人相信INF-γ可有效治疗过敏。
乳酸菌是革兰氏阳性细菌，常作为食品工业发酵之用。近来的研究证明，乳酸菌可刺激细胞的INF-γ分泌(Contractor NV等人，Lymphoid hyperplasia，autoimmunity and compromised intestinalintraepithelial lymphocyte development in colitis-free gnotobiotic IL-2-deficient mice，J Immunol 1998；160：385-394)。某些特定的乳酸菌(诸如双叉杆菌乳酸菌(Bifidobacterium lactis)及短乳酸杆菌(Lactobacillus brevis)亚种可以刺激源自小鼠及人类血液之淋巴细胞中INF-γ的分泌(美国专利公开案第2002/0031503 A1号；美国专利第5,556,785号)。另外亦有报告指出，乳酸菌可刺激源自人类或鼠之淋巴细胞分泌介白素12(IL-12)，IL-12为一种T细胞刺激细胞激素，其可活化T细胞及NK细胞分泌INF-γ(Hessle等人，Lactobacilli from human gastrointestinal mucosa are strong stimulators ofIL-12 production，Clin Exp Immunol 1999；116：276-282)。
发明内容
本发明提供某些乳酸杆菌菌株在治疗过敏中之新用途。
一方面，本发明提供用以治疗过敏之组合物，该组合物包含可刺激含量达到可有效治疗过敏之INF-γ分泌之乳酸菌株，该菌株系选自由以下所组成之组：植物乳酸杆菌CCRC 12944、嗜酸性乳酸杆菌CCRC 14079、鼠李糖乳酸杆菌CCRC 10940、副干酪乳酸杆菌副干酪亚种CCRC 14023、德氏乳酸杆菌保加利亚亚种CCRC 12297、德氏乳酸杆菌保加利亚亚种CCRC 14007、及德氏乳酸杆菌保加利亚亚种CCRC 14069。所述菌株购自台湾新竹食品工业发展研究所。
另一方面，本发明提供一种可刺激INF-γ分泌之乳酸菌株之用途，其系用于制造治疗过敏之医药配方，该菌株系选自由以下所组成之组：植物乳酸杆菌CCRC 12944、嗜酸性乳酸杆菌CCRC14079、鼠李糖乳酸杆菌CCRC 10940、副干酪乳酸杆菌副干酪亚种CCRC 14023、德氏乳酸杆菌保加利亚亚种CCRC 12297、德氏乳酸杆菌保加利亚亚种CCRC 14007、及德氏乳酸杆菌保加利亚亚种CCRC 14069。
附图说明
图1所示为乳酸杆菌菌株与淋巴细胞共同培养后，INF-γ之分泌量。乳酸菌与淋巴细胞分别共同培养12及36小时后，以ELISA侦测INF-γ之分泌量。INF-γ含量以吸收值(O.D.数值)表示。图中，「PC」代表作为阳性控制组之干酪乳酸杆菌CCRC 10697；「NC」代表作为阴性控制组之德氏乳酸杆菌保加利亚亚种CCRC 14071；1代表植物乳酸杆菌CCRC 12944；2代表嗜酸性乳酸杆菌CCRC14079；3代表鼠李糖乳酸杆菌CCRC 10940；4代表副干酪乳酸杆菌副干酪亚种CCRC 14023；5代表德氏乳酸杆菌保加利亚亚种CCRC12297；6代表德氏乳酸杆菌保加利亚亚种CCRC 14007，及7代表德氏乳酸杆菌保加利亚亚种CCRC 14069。
图2所示为乳酸杆菌菌株与外周血单核细胞(PBMC)共同培养后，INF-γ之分泌量。乳酸菌与PBMC分别共同培养12、48及72小时后，以ELISA侦测INF-γ的分泌量。INF-γ含量以吸收值(O.D.数值)表示。试验中，干酪乳酸杆菌CCRC 10697为阳性控制组；德氏乳酸杆菌保加利亚亚种CCRC 14071为阴性控制组；副干酪乳酸杆菌副干酪亚种CCRC 14023为试验菌株。
具体实施方式
根据本发明，意外地发现某些刺激INF-γ分泌之乳酸杆菌菌株可用以治疗过敏。
一方面，本发明提供一种治疗一个体过敏之组合物，其包含可刺激INF-γ分泌之乳酸菌株，该菌株系选自由以下所组成之群：植物乳酸杆菌CCRC 12944、嗜酸性乳酸杆菌CCRC 14079、鼠李糖乳酸杆菌CCRC 10940、副干酪乳酸杆菌副干酪亚种CCRC 14023、德氏乳酸杆菌保加利亚亚种CCRC 12297、德氏乳酸杆菌保加利亚亚种CCRC 14007、及德氏乳酸杆菌保加利亚亚种CCRC 14069。这些菌株均寄存于台湾新竹食品工业发展研究所(FIRDI)内，因此，公众可自FIRDI取得前述的菌株。这些菌株是安全、天然、无毒性，且符合G.R.A.S(Generally Regarded as Safe，普遍认为安全)标准，这些菌株常用于食品中，且对人体无害。
根据本发明，已证明当这些菌株与淋巴细胞共同培养时，具有刺激INF-γ分泌的能力。其中之一株已证明可刺激外周血单核细胞(PBMC)分泌INF-γ。在本发明最佳的具体实例中，发现副干酪乳酸杆菌副干酪亚种CCRC14023刺激INF-γ分泌的能力优于(四倍)阳性控制组之干酪乳酸杆菌CCRC 10697。
根据本发明，治疗过敏时所用的乳酸菌可为活的菌株或灭活(inactive)菌株，例如，活的菌株经加热步骤或此技术中其它常用以杀死乳酸菌的处理方式处理后，可得灭活菌株。
本专利说明书中，「过敏」系指由INF-γ调节的过敏。过敏疾病包括鼻炎、鼻窦炎、气喘、过敏性肺炎、外部过敏齿槽炎、结膜炎、荨麻疹、湿疹、皮肤炎、过敏反应、血管水肿、过敏性头痛及偏头痛、及某些肠胃疾病。现已证明，能刺激INF-γ分泌之益生菌可治疗异位性湿疹(Isolauri E等人，Probiotics in the management ofatopic eczema，Clinical and experimental Allergy 2000；30：1604-1610；Sutas Y等人，Suppression of lymphocyte proliferation in vitroby bovine caseins hydrolyzed with Lactobacillus casei GG-derivedenzyme，J Allergy Clin Immunol 1996；98：216-224；Kalliomaki M等人，Probiotics in primary prevention of atopic disease：a randomizedplacebo-controlled trial，Lancet 2001；357：1076-79)。
根据本发明，乳酸菌株可包含于人类正常摄取之医药组合物、膳食补充剂、食品、或其组分中。在本发明之一较佳具体实施例中，乳酸菌株系以食品的方式给予，诸如牛乳发酵后所产制之凝结乳制品。根据本发明所制备之食品可以很方便地投与婴儿或小孩。
另一方面，本发明提供一种可刺激INF-γ分泌之乳酸菌株之用途，其系用于制造治疗过敏之医药配方，该菌株系选自由以下所组成的群：植物乳酸杆菌CCRC 12944、嗜酸性乳酸杆菌CCRC14079、鼠李糖乳酸杆菌CCRC 10940、副干酪乳酸杆菌副干酪亚种CCRC 14023、德氏乳酸杆菌保加利亚亚种CCRC 12297、德氏乳酸杆菌保加利亚亚种CCRC 14007、及德氏乳酸杆菌保加利亚亚种CCRC 14069。
兹以下列实施例予以详细说明本发明，惟并不意味本发明仅局限于此等实施例所揭示之内容。
实施例1：筛选可刺激淋巴细胞分泌INF-γ之乳酸菌株
细菌培养：事先选定表1中所列的六十七株乳酸菌株，同时，亦注明作为阳性控制组(PC)及阴性控制组(NC)之菌株。所有的菌株均购自FIRDI。
表1：
  编号                         乳酸菌株   CCRC编号
    PC 干酪乳酸杆菌(Lactobacillus casei)     10697
    NC 德氏乳酸杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckii subsp.Bulgaricus)     14071
    1 植物乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)     10069
    2 植物乳酸杆菌     10357
    3 植物乳酸杆菌     11697
    4 植物乳酸杆菌     12250
    5 植物乳酸杆菌     12251
    6 植物乳酸杆菌     12327
    7 植物乳酸杆菌     12944
    8 植物乳酸杆菌     14059
    9 植物乳酸杆菌     15478
    10 约氏乳酸杆菌(Lactobacillus johnsonii)     14004
    11 嗜酸性乳酸杆菌(Lactobacillus acidophilus)     14026
    12 鼠李糖乳酸杆菌(Lactobacillus rhamnosus)     14029
    13 嗜酸性乳酸杆菌     14064
    14 嗜酸性乳酸杆菌     14065
    15 嗜酸性乳酸杆菌     14079
    16 乳酸杆菌种     16000
    17 嗜酸性乳酸杆菌     16092
    18 嗜酸性乳酸杆菌     16099
    19 嗜酸性乳酸杆菌     17009
    20 嗜酸性乳酸杆菌     17064
    21 嗜酸性乳酸杆菌     10695
    22 干酪乳酸杆菌干酪亚种(Lactobacillus casei subsp.Casei)     10358
    23 鼠李糖乳酸杆菌     10940
    24 干酪乳酸杆菌干酪亚种     11197
    25 鼠李糖乳酸杆菌     11673
    26 副干酪乳酸杆菌副干酪亚种(Lactobacillus paracasei subsp.Paracasei)     12193
    27 副干酪乳酸杆菌副干酪亚种     12248
    28 干酪乳酸杆菌干酪亚种     12249
    29 干酪乳酸杆菌干酪亚种     12272
    30 副干酪乳酸杆菌副干酪亚种     14001
    31 副干酪乳酸杆菌副干酪亚种     14023
    32 干酪乳酸杆菌干酪亚种     14025
    33 干酪乳酸杆菌干酪亚种     14073
    34 干酪乳酸杆菌干酪亚种     14074
    35 干酪乳酸杆菌干酪亚种     14080
    36 干酪乳酸杆菌干酪亚种     14082
    37 干酪乳酸杆菌干酪亚种     14083
    38 干酪乳酸杆菌干酪亚种     14084
    39 干酪乳酸杆菌干酪亚种     14705
    40 干酪乳酸杆菌干酪亚种     16093
    41 干酪乳酸杆菌干酪亚种     16094
    42 副干酪乳酸杆菌副干酪亚种     16100
    43 干酪乳酸杆菌干酪亚种     17001
    44 干酪乳酸杆菌干酪亚种     17002
    45 干酪乳酸杆菌干酪亚种     17004
    46 干酪乳酸杆菌干酪亚种     17005
    47 德氏乳酸杆菌保加利亚亚种     10696
    48 瑞士乳酸杆菌(Lactobacillus helveticus)     11052
    49 德氏乳酸杆菌保加利亚亚种     12255
    50 德氏乳酸杆菌保加利亚亚种     12297
    51 德氏乳酸杆菌保加利亚亚种     14007
    52 德氏乳酸杆菌保加利亚亚种     14008
    53 德氏乳酸杆菌保加利亚亚种     14009
    54 德氏乳酸杆菌保加利亚亚种     14010
    55 德氏乳酸杆菌保加利亚亚种     14069
    56 德氏乳酸杆菌保加利亚亚种     14075
    57 德氏乳酸杆菌保加利亚亚种     14077
    58 德氏乳酸杆菌保加利亚亚种     14090
    59 德氏乳酸杆菌保加利亚亚种     14091
    60 德氏乳酸杆菌保加利亚亚种     14098
    61 德氏乳酸杆菌保加利亚亚种     16050
    62 德氏乳酸杆菌保加利亚亚种     16051
    63 德氏乳酸杆菌保加利亚亚种     16052
    64 德氏乳酸杆菌保加利亚亚种     16053
    65 副干酪乳酸杆菌副干酪亚种     12188
    66 短乳酸杆菌(Lactobacillus brevis)     12247
    67 短乳酸杆菌     14060
在这些菌株中，有三十八株是安全、天然、无毒性，且符合G.R.A.S(普遍视为安全)的标准。所有的菌株均以乳酸菌MRS培养液(DIFCO 0881)在37℃下培养至停滞期，以3000g离心15分钟收集菌株，并以2毫升及1毫升PBS(磷酸缓冲盐水，pH7.2)清洗。将所培养的菌株再悬浮于1毫升PBS中，而后在95℃加热30分钟，经高温高压灭菌处理后，将之置于PBS中，于-20℃下保存。
淋巴细胞培养：根据Fischloff(Fischkoff S.A.Graded increase inprobability of eosinophilic differentiation of HL-60 promyelocyticleukemia cells induced by culture under alkaline condition，LeukemiaResearch 1988；12(8)：679-686)所述之方法处理HL-60 CCRC60273(选殖体15 HL-60)细胞(购自FIRDI)。将HL-60细胞置于RPME 1640(pH7.2)中进行继代培养(subcultured)，将之诱导分化成嗜伊红细胞，而后再以RPMI 1640(pH7.7)进行数代的继代培养，以获得淋巴细胞样品。在每个淋巴细胞样品中，将细胞密度调整成每个样品含5×106个细胞。将淋巴细胞样品以2毫升RPMI 1640(pH7.7)培养6小时。
刺激INF-γ分泌：将淋巴细胞样品与一定量的前述菌株共同培养，并以干酪乳酸杆菌CCRC 10697作为阳性控制组，而德氏乳酸杆菌保加利亚亚种CCRC 14071作为阴性控制组。共同培养12、36及60小时后，分别收集每个样品细胞。再悬浮所收集的细胞，并以2000rpm离心5分钟，测定每个样品中上清液中INF-γ含量。
测定INF-γ含量：根据Shida等人(Shida K.等人，Lactobacillus caseiinhibits antigen induced IgE secretion through regulation of cytokineproduction in murine splenocyte cultures，Int Arch Allergy Immunol1998；115：278-287)所述之ELISA方法测定INF-γ含量，该方法步骤包括：
-  在ELISA培养板的每个孔内加入150微升溶于包被缓冲液(每升含有8.00克NaCl、0.20克KCl、1.44克Na2HPO4、0.24克KH2PO4、30.0克牛血清白蛋白、及0.50克NaN3，pH7.4)中之2.5微克/毫升纯化小鼠抗人类INF-γ抗体；
-  于室温下以40rpm转速震荡培养板；
-  将培养板在4℃下静置一夜；
-  倒去孔中的包被缓冲液；
-  以洗涤缓冲液(每升含有8.00克NaCl、0.20克KCl、1.44克Na2HPO4、0.24克KH2PO4、0.5毫升Tween 20、及0.50克NaN3，pH7.4)清洗培养板的每个孔3分钟，共清洗二次；
-  以蒸馏水清洗培养板每个孔；
-  在培养板的每个孔中加入200微升封闭缓冲液；
-  将培养板置于室温下至少静置2小时；
-  倒去孔中的封闭缓冲液；
-  以洗涤缓冲液清洗培养板的每个孔3分钟，共清洗三次；
-  以蒸馏水清洗培养板每个孔；
-  将淋巴细胞样品上清液加至培养板的每个孔中；
-  于4℃下以40rpm转速隔夜震荡培养板；
-  倒去孔中的样品；
-  以洗涤缓冲液清洗培养板的每个孔3分钟，共清洗三次，接着再以蒸馏水清洗；
-  将经稀释缓冲液稀释之150微升生物素小鼠抗人类INF-γ抗体加至培养板的每个孔中；
-  将培养板在室温下静置2小时；
-  以洗涤缓冲液清洗培养板的每个孔3分钟，共清洗三次，接着再以蒸馏水清洗；
-  在培养板的每个孔中加入经稀释缓冲液稀释之150微升抗生物素蛋白链菌素-碱性磷酸酶(抗生蛋白链菌素-AKP)；
-  将培养板在室温下静置1小时；
-  以洗涤缓冲液清洗培养板的每个孔3分钟，共清洗四次，接着再以蒸馏水清洗；
-  在培养板的每个孔中加入150微升对-硝基苯基磷酸(pNpp)底物；
-  将培养板在室温下静置，直至完成底物反应；
-  测定培养板每个孔在405毫微米(换言之OD405)之吸收值。
结果：67株乳酸菌刺激INF-γ含量的结果列于表2中。
表2：
    CCRC编号   12小时(OD)   36小时(OD)   60小时(OD)
    阳性控制组     0.156     0.295     0.106
    阴性控制组     0.117     0.241     0.103
    10069     0.117     0.304     0.107
    10357     0.129     0.267     0.104
    11697     0.112     0.397     0.104
    12250     0.122     0.335     0.156
    12251     0.177     0.293     0.110
    12327     0.131     0.289     0.111
    12944     0.152     0.427     0.092
    14059     0.111     0.363     0.102
    15478     0.157     0.385     0.109
    14004     0.162     0.399     0.106
    14026     0.115     0.405     0.103
    14029     0.131     0.272     0.110
    14064     0.114     0.337     0.164
    14065     0.159     0.244     0.110
    14079     0.142     0.342     0.099
    16000     0.123     0.255     0.105
    16092     0.127     0.254     0.114
    16099     0.114     0.262     0.114
    17009     0.111     0.276     0.117
    17064     0.147     0.272     0.114
    10695     0.131     0.274     0.118
    10358     0.148     0.271     0.119
    10697     0.160     0.340     0.098
    10940     0.336     0.335     0.109
    11197     0.150     0.293     0.104
    11673     0.109     0.298     0.106
    12193     0.116     0.305     0.111
    12248     0.160     0.284     0.112
    12249     0.142     0.267     0.112
    12272     0.120     0.276     0.112
    14001     0.173     0.410     0.108
    14023     0.120     0.538     0.125
    14025     0.142     0.339     0.110
    14073     0.157     0.398     0.104
    14074     0.125     0.455     0.117
    14080     0.124     0.308     0.116
    14082     0.148     0.248     0.113
    14083     0.129     0.203     0.116
    14084     0.153     0.335     0.121
    14705     0.159     0.277     0.122
    16093     0.131     0.328     0.127
    16094     0.160     0.309     0.114
    16100     0.158     0.316     0.121
    17001     0.219     0.252     0.123
    17002     0.155     0.207     0.120
    17004     0.236     0.112     0.119
    17005     0.125     0.320     0.104
    10696     0.122     0.373     0.122
    11052     0.142     0.316     0.107
    12255     0.118     0.325     0.116
    12297     0.121     0.418     0.105
    14007     0.122     0.502     0.110
    14008     -     0.359     0.100
    14009     0.224     0.293     0.103
    14010     0.150     0.312     0.100
    14069     0.146     0.440     0.161
    14071     0.144     0.270     0.099
    14075     0.152     0.319     0.100
    14077     0.163     0.342     0.102
    14090     0.203     0.302     0.106
    14091     0.184     0.288     0.097
    14098     0.147     0.242     0.101
    16050     0.136     0.264     0.098
    16051     0.135     0.250     0.103
    16052     0.132     0.386     0.104
    16053     0.132     0.314     0.113
    12188     0.150     0.263     0.101
    12247     0.137     0.246     0.103
    14060     0.167     0.328     0.103
在此67株菌株中，发现下列七株可以刺激淋巴细胞中INF-γ的分泌：植物乳酸杆菌CCRC 12944、嗜酸性乳酸杆菌CCRC 14079、鼠李糖乳酸杆菌CCRC 10940、副干酪乳酸杆菌副干酪亚种CCRC14023、德氏乳酸杆菌保加利亚亚种CCRC 12297、14007及14069，这些结果示于图1中。副干酪乳酸杆菌副干酪亚种CCRC 14023及德氏乳酸杆菌保加利亚亚种CCRC 12297、14007及14069所得之OD405数值高于阳性控制组，甚至比阴性控制组高4倍，除此之外，除了鼠李糖乳酸杆菌CCRC 10940外，其它菌株在36小时后所收集的共同培养液之OD405数值是12小时后共同培养液数值的3倍。
实施例2：经乳酸菌刺激之外周血单核细胞后之INF-γ分泌分离外
周血单核细胞：将5毫升Ficoll-Hypaque(17-1400-02，法玛西亚(Pharmacia))加至5毫升源自自愿者之血液样品中，而后以500g速度离心30分钟。从界面中取出外周血单核细胞(PBMC)，并以PBS清洗两次。将PBMC(105个细胞/毫升)转种至6孔培养板的孔内，其中每个孔含有2毫升pH 7.7的RPMI 1640培养液。
刺激INF-γ分泌：利用实例1所述的类似方法，将PBMC与植物乳酸杆菌CCRC 12944、嗜酸性乳酸杆菌CCRC 14079、鼠李糖乳酸杆菌CCRC 10940、副干酪乳酸杆菌副干酪亚种CCRC 14023、德氏乳酸杆菌保加利亚亚种CCRC 12297、14007及14069(107个细胞/毫升)共同培养，并以干酪乳酸杆菌CCRC 10697作为阳性控制组，而德氏乳酸杆菌保加利亚亚种CCRC 14071作为阴性控制组。在共同培养24、48及72小时后，收集细胞，再悬浮，并以2000 rpm速度离心5分钟，以实施例1所述的相同方法测定上清液中INF-γ含量。
结果：七株菌株刺激PBMC后所得INF-γ的结果列于表3中，而副干酪乳酸杆菌副干酪亚种CCRC 14023的结果特别列于图2中。
表3：
    时间     CCRC编号     OD   INF-γ浓度(毫微克/毫升)
    24小时     阳性控制组     0.1945     861.5
    12944     0.1685     731.5
    14079     0.1892     836.5
    10940     0.223     1004
    14023     0.23     1039
    12297     0.195     864
    14007     0.165     714
    14069     0.2015     896.5
    48小时     阳性控制组     0.2095     936.5
    12944     0.1605     691.5
    14079     0.244     1109
    10940     0.305     1414
    14023     0.267     1224
    12297     0.1555     666.5
    14007     0.141     594
    14069     0.165     714
    72小时     阳性控制组     0.2575     1176.5
    12944     0.159     684
    14079     0.17     739
    10940     0.193     854
    14023     0.1895     836.5
    12297     0.147     624
    14007     0.133     554
    14069     0.17     739
在共同培养24小时后，所收集样品之OD405数值是阴性控制组的1.2倍；在共同培养48小时后，所收集样品之数值是阴性控制组的1.8倍，且是阳性控制组的1.3倍；而共同培养72小时后的数值是阴性控制组的1.3倍。
上述实施例仅为说明本发明之原理及其功效，而非限制本发明。因此，习于此技术之人士对上述实施例所做之修改及变化仍不违背本发明之精神。本发明之权利范围应如权利要求书所列。

Claims (3)

1.一种可刺激INF-γ分泌之乳酸菌株之用途，其系用于制造治疗过敏之医药配方，其中该菌株系选自由以下所组成之组：植物乳酸杆菌CCRC 12944、嗜酸性乳酸杆菌CCRC 14079、鼠李糖乳酸杆菌CCRC 10940、副干酪乳酸杆菌副干酪亚种CCRC 14023、德氏乳酸杆菌保加利亚亚种CCRC 12297、德氏乳酸杆菌保加利亚亚种CCRC 14007、及德氏乳酸杆菌保加利亚亚种CCRC 14069，此等菌株均购自台湾新竹食品工业发展研究所。
2.根据权利要求1之用途，其中该乳酸菌株为活的菌株或灭活菌株。
3.根据权利要求2之用途，其中该乳酸菌株为灭活菌株。
CNB021498253A 2002-11-06 2002-11-06 乳酸杆菌菌株在治疗过敏中之新用途 Expired - Fee Related CN1316030C (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB021498253A CN1316030C (zh) 2002-11-06 2002-11-06 乳酸杆菌菌株在治疗过敏中之新用途

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB021498253A CN1316030C (zh) 2002-11-06 2002-11-06 乳酸杆菌菌株在治疗过敏中之新用途

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN1498627A CN1498627A (zh) 2004-05-26
CN1316030C true CN1316030C (zh) 2007-05-16

Family

ID=34233800

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNB021498253A Expired - Fee Related CN1316030C (zh) 2002-11-06 2002-11-06 乳酸杆菌菌株在治疗过敏中之新用途

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN1316030C (zh)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7351572B2 (en) * 2004-10-15 2008-04-01 Genmont Biotech Inc. Microorganism strain GM-090 of Lactobacillus fermentum and its use for stimulating IFN-γ secretion and/or treating allergy
US8372392B2 (en) * 2009-12-23 2013-02-12 Lytone Enterprise, Inc. Lactobacillus paracasei strain LT12 as immunity regulatory agent
CN102399718B (zh) * 2011-10-14 2017-07-07 景岳生物科技股份有限公司 副干酪乳酸杆菌株gmnl‑133、用于改善异位性皮肤炎或其它过敏疾病的组合物及其用途
TWI731209B (zh) * 2018-01-09 2021-06-21 柯順議 益生菌組合物及其用途

Also Published As

Publication number Publication date
CN1498627A (zh) 2004-05-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Sashihara et al. An analysis of the effectiveness of heat-killed lactic acid bacteria in alleviating allergic diseases
RU2603285C2 (ru) Пробиотический препарат на основе штамма bifidobacterium bifidum для применения для облегчения симптомов синдрома раздраженного кишечника
CN101160134B (zh) 用于减轻哺乳动物炎症的乳酸菌的选择和应用
Pozo-Rubio et al. Immunostimulatory effect of faecal Bifidobacterium species of breast-fed and formula-fed infants in a peripheral blood mononuclear cell/Caco-2 co-culture system
CN102115721B (zh) 具有抗炎活性的乳杆菌分离株及其用途
CN108367031A (zh) 嗜黏蛋白阿克曼氏菌用于治疗炎症病况的用途
KR101487210B1 (ko) 항알레르기용 조성물
JP2021522867A (ja) ラクトバチルス・パラカゼイ株及びその使用
KR20190133640A (ko) 락토바실러스 가세리 kbl697 균주 및 그 용도
WO2007040444A1 (en) Method, device and computer program product for diagnosing of at least one exhaust emission control unit
US11667977B2 (en) Method of using a medication or a food supplement with lactobacillus strains isolated from kimere for strengthining the immune system
Cukrowska et al. Impact of heat-inactivated Lactobacillus casei and Lactobacillus paracasei strains on cytokine responses in whole blood cell cultures of children with atopic dermatitis
US20040047849A1 (en) Use of some lactobacillus strains in treating allergy
CN1329505C (zh) 发酵乳酸杆菌GM－090及其在生产刺激INF－γ分泌及/或治疗过敏的药物中的用途
CN113925158A (zh) 后生元提取物的制法以及该方法得到的产物及其抑制生物膜形成与促进肠道健康的用途
Sashihara et al. Effect of growth conditions of Lactobacillus gasseri OLL2809 on the immunostimulatory activity for production of interleukin-12 (p70) by murine splenocytes
US9644210B2 (en) Probiotic gram-positive bacteria for the prophylaxis, suppression, or elimination of allergic reactions in human
JP7358001B2 (ja) 乳酸菌、インターロイキン－２２産生誘導剤、皮膚バリア機能増強剤
Jun et al. Safety assessment of potential lactic acid bacteria Bifidobacterium longum SPM1205 isolated from healthy Koreans
CN112042766A (zh) 一种壳寡糖益生菌牦牛乳多肽配方奶粉及其制备方法
Cong et al. Probiotics and immune regulation of inflammatory bowel diseases
TWI277651B (en) New use of some lactobacillus strains in treating allergy
CN1316030C (zh) 乳酸杆菌菌株在治疗过敏中之新用途
TWI509069B (zh) 具有免疫調節及抗過敏作用的乳酸菌
KR100742900B1 (ko) 면역조절기능이 있는 락토바실루스 람노서스 아이디씨씨3201의 이용

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20070516

Termination date: 20171106