CN1225963C - 一种培育梨自花结实性新种质的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种培育梨自花结实性新种质的方法，专用于果树自花授粉能结实性品种的培育。包括：选用S基因型为S₂S₅的早熟梨品种“八里”或S基因型为S₂S₃的“长十郎”作母本(♀)，以具有自花结实性的品种“奥嗄二十世纪”为父本(♂)的杂交授粉，各个组合的自花授粉坐果率均在70%以上；选出兼有优质、早熟、抗病等优良特性“98-19-117”和“99-6-39”为两个自花结实性推广品系。可以不用配置授粉品种和人工辅助授粉就能获得应有的产量和品质，而且在封闭的保护地内也可不用人工辅助授粉，也能获得与露地栽培相同的结果，省工、高效。

Description

一种培育梨自花结实性新种质的方法

一、技术领域

本发明涉及一种培育梨自花结实性新种质的方法，属于一种梨自花结实性种质的创新方法，专用于果树自花授粉能结实性品种的培育。

二、技术背景

梨(Pyrus)是世界及我国的主栽果树，我国现有栽培面积约102.64万公顷，产量879.61万吨(据2002年中国农业年鉴)，仅次于苹果、柑桔，处于第三位。梨树是属于配子体型自花不结实性果树，绝大多数品种自花授粉坐果率很低，生产上必须合理配置授粉品种或人工异花授粉才能正常结实，尤其是保护地栽培的梨园对授粉的要求更高。人工授粉要采集或购买花粉，又需要花费很多劳力。尽管如此，也常因授粉品种搭配不当、花期不良气象条件影响昆虫传粉或人工授粉不及时而造成减产。因此，创新梨自花结实性种质，选育出梨自花结实性(自交亲和性)品种是个亟待解决的问题，也是今后梨、苹果等自花授粉不结实性果树新品种选育的目标之一。

为了有效地创新梨自花结实性种质，本项目组自1991年开始开展梨自花结实与不结实性机理及自花结实性遗传特点等的研究工作，在梨树自花结实与不结实性的细胞形态学、生理生化学、分子生物学等方面取得许多突破性进展。在梨品种自花不结实性基因型(S基因型)的鉴定方面，分别应用花柱半离体培养法和分子标记技术鉴定出了一些梨品种的S基因型。这些研究均为选育梨自花结实性品种(系)鉴定了良好的基础。

迄今，国际上应用有性杂交育种的方法育成的梨自花结实性品种除了本项目组的工作外尚未见其他报道。从现状分析认为，梨自花结实性品种少的原因是存在以下几个关键性问题：其一是有关梨自花结实与不结实性机理及自花结实性遗传特性研究的起步较晚，涉及到的一些理论问题如自花结实性的遗传特性等尚未弄清楚，因而在选配杂交亲本等的育种实践中具有一定的盲目性，有性杂交获得的后代中自花结实性与不结实性的植株混杂或是仅有自花不结实性的后代，因而无法筛选出具有自花结实性的新种质；其二，现有已知S基因型的自花结实性品种尚少，仅有‘噢嗄二十世纪’，其S基因型为S₂S₄ ^SM，是从二十世纪的芽变选种中选出的，不仅远不能满足生产上的需求，而且严重地限制了对作为杂交亲本使用的自花结实性品种所应有的选择；其三，用有性杂交创新自花结实性种质时，双亲中的一个虽然可以用自花不结实性品种，但是，最好是选择已知S基因型的具有优异性状的品种作为杂交亲本，如果选用未知S基因型的品种作为杂交亲本时，其后代中自花结实与不结实的比例就无法事先预测，甚至根本无法获得自花结实的后代。但是，目前已知S基因型的自花不结实性品种也较少，可供选择的具有特异性状的品种更少，这也是造成自花结实性品种选育的进展缓慢的原因。

三、发明内容

技术问题  本发明的目的是提供一种培育梨自花结实性新种质的方法，为创新梨树自花结实性种质和大面积推广自花结实性品种而实现一个果园栽培一个品种提供可能。该方法可用于创新其它具有自花不结实性的果树(如苹果、杏、梅、樱桃等)的自花结实性种质提供参考。

技术方案

本发明所提供一种培育梨自花结实性新种质的方法，包括：

1)杂交组合

选用S基因型为S₂S₅的早熟梨品种‘八里’(Yasato)或S基因型为S₂S₃的‘长十郎’(Chojuro)作母本(♀)，以具有自花结实的品种‘奥嗄二十世纪’(Osa-Nijisseiki)(S基因型为S₂S₄ ^sm)为父本(♂)的杂交授粉，分别称之为杂交组合1和组合2，获得后代的自花授粉坐果率分别为77.0％～93.9％和81.9％～100％；

2)杂交后代的选优

将杂交后代栽植于田间，按植株分别编号和挂上标签，跟踪观察各个植株的植物学特性、生长结果习性，依据后代的表现，选出如下2个品系(品种特性描述参照参照《果树种质资源描述符，记载项目及评价标准》，农业出版社，1990.11)：

从以‘八里’作母本(♀)、‘奥嗄二十世纪’为父本(♂)的杂交组合1的后代，选择培育出了一个优系，其特征为：树势开张，纺锤形树型的树高2.5～3.5米，树冠纵横径2.8～3.5米，枝条呈直立生长；主干呈灰褐色，一年生枝淡灰褐色，枝条皮孔扁园形、中大、分布稀；芽的萌芽率55％～70％，成枝力3～5条；以短果枝结果为主，每花序坐果1～3个，3月中旬萌芽，下旬开花，花白色，花期7～10天；5月下旬新梢停长，叶片狭椭圆形，叶缘锯齿状、密、突出，叶柄长1.3～2.1厘米，叶身长度10～13厘米，叶尖渐尖，叶色淡绿；果实发育天数105～110天，7月下旬成熟，果实长圆形，单果重240～340克，最大单果重可达420克，果实盖色为褐绿色，果点密，有斑锈；果梗长3～4厘米，梗洼浅狭；萼片脱落，萼洼深度中，呈漏斗形；果肉白色，肉质细，石细胞少，汁液多，有香气，果心大小中等，其直径占果实横切面直径的三分之一，果肉硬度6.1～8.5公斤/平方厘米，果实味甜，可溶性固形物含量11.5～12.6％；果实可滴定酸0.14～0.18％；果实品质综合评价按百分制评分为86～92分，果实货架期15～20天；自花授粉坐果率77.0％～93.9％的梨自花结实性新种质品系，定名为‘98-19-117’：

或从‘长十郎’(♀)和‘奥嗄二十世纪’(♂)的杂交组合2的后代中，选择培育出了优系，其特征为：纺锤形树型的树高2.5～3.3米，树冠纵横径2.8～3.5米；主干呈暗褐色，一年生枝灰褐色，枝条柔软，皮孔近椭园形、大而稀；芽的萌芽率41％～53％，成枝力4～5条；以短果枝及中果枝结果为主，每花序坐果1～2个，3月中旬萌芽，3月下旬开花，新梢5月下旬停长，叶片狭椭圆形，叶缘锯齿状，叶柄长1.4～2.2厘米，叶身长度11～14厘米，叶尖渐尖，叶色淡绿；果实发育天数100～105天，7月中下旬成熟，果实扁圆形，单果重210～310克，最大单果重可达400克，果实盖色为黄褐色，果点密，无斑锈；果梗长3～4厘米，梗洼浅，萼片脱落；果肉乳白色，肉质细，石细胞少，汁液多，果心直径占果实横切面直径的三分之一，果肉硬度6.7～8.2公斤/平方厘米，果实味酸甜，可溶性固形物含量10.8～12.3％；果实可滴定酸0.16～0.19％，果实品质综合评价按百分制评分为83～81分；果实货架期15～20天；自花授粉坐果率81.9％～100％的梨自花结实性新种质品系，定名为‘99-6-39’；

3)高接选择

进一步将以上2个品系在不同的生态区域高接于大树，选出了分别具有以上2个品系性状的植株，确定‘98-19-117’和‘99-6-39’为两个自花结实性推广品系。

有益效果  本发明一种梨自花结实性种质创新方法的优点与积极效果为：

1)本发明是在国际上采用有性杂交育成梨自花结实性品种的第一例，具有重要的理论意义及应用价值。提供了有效的田间杂交授粉亲本的选配原则与方法。主要是如何依据梨品种自花不结实性基因(S基因型)来确定父母本的方法，以使获得的杂种后代均为自花结实性的后代；只有在已知S基因型品种中选择杂交亲本，才有可能获得预期的结果；

2).应用本发明方法来培育自花结实性品种，具有快速、准确、可靠等优点，依据品种的S基因型选配杂交组合，能创新出大量的自花结实性后代，因而可望选育出具有自花授粉能结实的品种。

3).通过本发明方法获得的具有自花结实性的梨品种，有广泛的应用前景。首先是直接应用于梨树生产。梨树是属于配子体型自花授粉不结实性果树，现有的绝大多数品种自花授粉不结实，生产上必须配置授粉树才能获得应有的产量和品质，而选用具有自花授粉结实的品种是解决该问题最有利的方案，因为生产上栽培自花结实性品种时，可以不用配置授粉树和人工辅助授粉也能获得应有的产量和品质；同时，由于其具有上述省工、低投入等优点，在品种的其他综合性状相似的情况下，具有自花结实性的品种无疑是生产上首选的品种。其次，在理论研究方面，由于自花结实与不结实是花粉与雌蕊相互作用结果的综合表现，是研究植物细胞间的信息传递、基因时空表达等的理想模型。随着自花结实性品种的不断育成和应用，对于深入开展植物自花结实和不结实性机制、S基因功能的表达及失活调控机制、植物细胞间的信息传递机理等研究提供了良好的材料，对于阐明相关的学说理论有重要意义。

4).用本发明方法创新了一大批自花结实性种质，筛选出了兼有早熟、优质、抗病等优良特性的许多单株和几个已在生产上开始推广的自花结实性品系，如98-19-117、99-6-39等，该两个品系有望在长江流域大面积推广。其果实成熟期在7月中下旬，果个较大，果肉黄白色，石细胞少，果肉细腻、汁液极多，味甜，可溶性固形物含量较高，香气浓郁，风味品质上等。枝条生长势强旺，萌芽率高，成枝力强。以短果枝结果为主，每花序坐果1～3个。抗梨黑星病、梨黑斑病及梨轮纹病能力较强。

5).本发明方法理论和实践不仅能应用于同样具有自花不结实性果树(如苹果、甜樱桃等)的自花结实性品种的选育，而且能应用于其他植物(如甘蓝、矮牵牛等)自花结实性种质的创新，具有广泛的应用前景。

6)本方法的发明为实现一个果园栽培单一品种而不用人工辅助授粉的省工、高效的集约化栽培奠定了基础。

本发明的中心技术原理：

本发明的关键技术是阐明了梨品种自花结实与不结实性的遗传特性，自花结实性基因的遗传特点，科学地应用该特性来选配杂交亲本，从而获得自花结实的后代。

为了阐明梨自花结实性的遗传特性，以已知S基因型的自花结实性品种‘奥嗄二十世纪’(S基因型为S₂S₄ ^SM)为亲本，开展田间授粉试验和相关的研究工作。我们多年来的研究已表明了S₄ ^SM基因是控制该品种是否自花结实的基因，只要含有该S₄ ^SM基因，其自花授粉就能结实。关于含S₄ ^SM基因的梨品种能自花结实的原因，本发明人已于2001年以《梨自交不亲和性及其亲和突变品种花柱内S₄(S₄ ^SM)基因的表达与作用的比较》在《植物学报》第43卷11期上发表(但未涉及本发明方法的内容)。

自花结实性品种‘奥嗄二十世纪’的自花授粉及其与不同品种的异花授粉试验研究结果表明：

1)自花结实性品种(S₂S₄ ^SM)‘奥嗄二十世纪’自花授粉获得的后代，其后代均含有S₄ ^SM基因，自花授粉均能结实，而且有一半为纯合的自花结实性后代(附图2，A)；2)以‘奥嗄二十世纪’为母本的杂交授粉实验：其后代的表现因父本的S基因型不同而异，如果父本的S基因型为S₂S₄则后代中自花授粉结实与不结实的将各占一半。如‘奥嗄二十世纪’(S₂S₄ ^sm)与‘二十世纪’(S₂S₄)，其后代中S₂S₄和S₄S₄ ^sm的各占一半(附图2，B)；如果父本的S基因型与之有一个相同一个不同，则后代中有两种S基因型，但后代的自花结实与不结实的也将各占一半，如：‘奥嗄二十世纪’(S₂S₄ ^sm)与‘长十郎’(S₂S₃)，其后代中S₂S₃、S₃S₄ ^sm各占一半(附图2，C)。如果父本的一对S基因型的其中之一为S₄，另一个与母本完全不同，则后代出现4种基因型，且自花结实与不结实性品种将各占一半(附图1，D)。如果父本的S基因型与之完全不同，则后代中也有四种S基因型，但后代的自花结实与不结实的植株也将各占一半，如：‘奥嗄二十世纪’(S₂S₄ ^sm)与‘丰水’(S₃S₅)，其后代中S₂S₃、S₃S₄ ^sm、S₂S₅、S₄ ^smS₅、的各占四分之一(附图2，E)。因凡是带S₄ ^sm基因的后代自花授粉均能结实，因此，也表现为自花授粉结实与不结实者各占一半。

3)以‘奥嗄二十世纪’为父本时的杂交授粉试验中。其后代的S基因型及自花结实性的表现也因所选用的母本的S基因型不同而异，如说明书的附图3所示，当母本的S基因型为S₂S⁴时，表现出杂交授粉不结实；母本与其有一个S基因型不同时，后代出现2种S基因型，但后代均为自花结实，如‘长十郎’(S₂S₃)ב奥嗄二十世纪’(S₂S₄ ^sm)，其后代的S基因型为S₂S₄ ^sm和S₃S₄ ^sm，均为自花结实的后代；若母本中含S₄基因，即使另一个基因型与‘奥嗄二十世纪’不同，其杂交的后代出现2种基因型，但均是自花授粉不结实，如‘幸水’(S₄S₅)ב奥嗄二十世纪’(S₂S₄ ^sm)的后代为S₂S₄，S₂S₅，因为S₄ ^sm的花粉被雌蕊的S₄基因产物所抑制；当母本的S基因与‘奥嗄二十世纪’均不同时，后代有4种S基因型，其中一半为自花结实性品种，而另一半为自花不结实性品种。如‘今村秋’(S₁S₆)ב奥嗄二十世纪’(S₂S₄ ^sm)后代的S基因型为S₁S₂、S₂S₆、S₁S₄ ^sm、S₆ S₄ ^sm，后两种基因型的后代表现为自花结实。

以上分析表明，在利用自花结实性品种‘奥嗄二十世纪’含有S₄ ^sm基因作亲本来培育自花授粉结实性品种时，后代的自花结实性表现取决于另一方的S基因型，且正反交的结果不同。只有在母本品种中含S₂基因型的品种，与‘奥嗄二十世纪’为父本的杂交组合的后代，或者‘奥嗄二十世纪’自花授粉的后代不必进行自花结实性鉴定均是自花授粉能结实的后代，从中选出综合性状优良者，就能获得优良的自花结实性品种，其它杂交组合的后代还需要对后代是否为自花授粉结实作进一步的鉴定。此外，含S₄基因的品种为母本与‘奥嗄二十世纪’杂交的组合，其后代均是自花不结实的。

从附图2也可看出，‘奥嗄二十世纪’自花授粉后代的S基因型有一半与‘奥嗄二十世纪’相同，而另一半为S₄ ^sm S₄ ^sm的纯合个体(附图3)，应用该方法获得梨等果树的纯合个体，在育种、基因功能等科学研究方面均有重要的价值。

四、附图说明

图1梨自花结实性种质创新方法的流程图。

图2以‘奥嘎二十世纪’(S₂S₄ ^sm)为母本的杂交(含自交)授粉后代的S基因型(注：含S4sm基因型均能自花结实)

图3以‘奥嗄二十世纪’(S₂S₄ ^sm)为父本的杂交(含自交)授粉后代的S基因型

图4自交结实性品系(98-19-117)结果状

图5自花结实性品系(99-6-39)结果状

五、具体实施方式

1.材料与方法

1.1试验材料

选用已知S基因型的优质早熟梨品种‘八里’或‘长十郎’作母本(♀)，以具有自花结实性的品种‘奥嗄二十世纪’为父本(♂)的杂交授粉试验。因为‘八里’的S基因型为S₂S₅、‘长十郎’的S基因型为S₂S₃，它们均含有一个S₂基因，使‘奥嗄二十世纪’的含S₂基因的花粉无法受精，仅有S₄ ^sm花粉完成受精，后代中均含有S₄ ^sm基因，因此，这些杂交组合的后代均为自花结实。

1.2杂交组合

1)组合1：以‘八里’为母本(♀)，以自花结实性品种‘奥嗄二十世纪’为父本(♂)的杂交组合。该杂交组合合计获得杂交种子6547粒，对该杂种进行层积处理、播种后获得杂种实生苗5132株，按1米的株行距全部栽植于试验园内。

2)组合2：以‘长十郎’为母本(♀)、‘奥嗄二十世纪’(♂)为父本的杂交组合。该组合合计获得杂交种子7241粒，对该杂种进行层积处理、播种后获得杂种实生苗5862株，按1米的株行距全部栽植于试验园内。

3)组合3：‘奥嗄二十世纪’自花授粉试验。该组合合计获得杂交种子3837粒，对该杂种进行层积处理、播种后获得杂种实生苗3158株，按1米的株行距全部栽植于试验园内。

2.杂交后代自花授粉坐果率

依据自花结实性的遗传特性，理论上讲，上述杂交或自交组合的后代均为自花授粉结实性的后代，为了证实该结果的可靠性，我们从已开花的植株中随机选取30株左右，分别挂牌调查，对各个植株分别选取生长位置良好的花序，开花前套袋，进行自花授粉试验，每株自花授粉的花朵数为50～100朵，授粉后套袋，并于授粉后1个月调查各个植株的坐果数，计算出各个调查单株的坐果率；同时，以自花不结实性品种‘幸水’的自花授粉、以及以‘幸水’ב丰水’的异花结实性授粉分别为对照1和对照2，同样调查了各个组合的坐果率，结果如表1所示。

             表1各杂交组合自花授粉坐果率

杂交组合	调查总株数	每株自花授粉的总花数(朵)	单株坐果率(％)(每株坐果数/调查花朵数)
				组合1组合2组合3对照1	3030301	50～10050～10050～100100	77.0(47/61)～93.9(77/82)81.9(77/94)～100.0(50/50)73.5(50/68)～923(60/65)0.0(0/100)

对照2

1

100

83.0(83/100)

注：对照1为幸水的自花授粉；对照2为幸水(♀)与丰水(♂)的杂交授粉试验。

上述结果表明，各个组合随机选取的30株，虽然各植株间的自花授粉坐果率有一定的差异，但均在70％以上，与杂交结实性授粉的结果相似，而自花不结实性品种‘幸水’的自花授粉坐果率为0.0％，因此，认为上述3个组合的后代均是自花结实的。本试验充分证实了本发明方法的可靠性。致于杂交结实性或自花结实性后代的田间授粉坐果率大多达不到100％的原因可以认为是田间其他因素或人工授粉时对花朵带来的伤害等不利因素的影响所造成的。

3.杂交后代的选优

将杂交后代栽植于田间，按植株分别编号和挂上标签，跟踪观察各个植株的植物学特性、生长结果习性等。依据众多后代的表现，选出了一些优系，进一步在不同的生态区域高接于大树，观察其生长、结果习性、适应性和抗病性等。依据各个优系的综合表现，选出了具有优良性状的植株，初步确定了具有推广价值的品系(品种特性描述参照《果树种质资源描述符，记载项目及评价标准》，农业出版社，1990.11)。

1)98-19-117：该品系是以‘八里’作母本(♀)，以具有自花结实性的品种‘奥嗄二十世纪’为父本(♂)的杂交后代。按要求定期观察、调查其植物学特性、生长结果习性及果实经济性状等。

该品系的性状为：树势开张，纺锤形树型的树高2.5～3.5米，树冠纵横径2.8～3.5米，枝条呈直立生长；主干呈灰褐色，一年生枝淡灰褐色，枝条皮孔扁园形、中大、分布稀；芽的萌芽率55％～70％，成枝力3～5条；以短果枝结果为主，每花序坐果1～3个，3月中旬萌芽，下旬开花，花白色，花期7～10天；5月下旬新梢停长，叶片狭椭圆形，叶缘锯齿状、密、突出，叶柄长1.3～2.1厘米，叶身长度10～13厘米，叶尖渐尖，叶色淡绿；果实发育天数105～110天，7月下旬成熟，果实长圆形，单果重240～340克，最大单果重可达420克，果实盖色为褐绿色，果点密，有斑锈；果梗长3～4厘米，梗洼浅狭；萼片脱落，萼洼深度中，呈漏斗形；果肉白色，肉质细，石细胞少，汁液多，有香气，果心大小中等，其直径占果实横切面直径的三分之一，果肉硬度6.1～8.5公斤/平方厘米，果实味甜，可溶性固形物含量11.5～12.6％；果实可滴定酸0.14～0.18％；果实品质综合评价按百分制评分为86～92分，果实货架期15～20天；自花授粉坐果率77.0％～93.9％的梨自花结实性新种质品系，定名为‘98-19-117’(图4)。

2)99-6-39：该品系为‘长十郎’(♀)和‘奥嗄二十世纪’(♂)的杂交后代。因为‘长十郎’的S基因型为S₂S₃，因此，该组合的后代均为自花结实。按要求定期观察、调查其植物学特性、生长结果习性及果实经济性状等。纺锤形树型的树高2.5～3.3米，树冠纵横径2.8～3.5米；主干呈暗褐色，一年生枝灰褐色，枝条柔软，皮孔近椭园形、大而稀；芽的萌芽率41％～53％，成枝力4～5条；以短果枝及中果枝结果为主，每花序坐果1～2个，3月中旬萌芽，3月下旬开花，新梢5月下旬停长，叶片狭椭圆形，叶缘锯齿状，叶柄长1.4～2.2厘米，叶身长度11～14厘米，叶尖渐尖，叶色淡绿；果实发育天数100～105天，7月中下旬成熟，果实扁圆形，单果重210～310克，最大单果重可达400克，果实盖色为黄褐色，果点密，无斑锈；果梗长3～4厘米，梗洼浅，萼片脱落；果肉乳白色，肉质细，石细胞少，汁液多，果心直径占果实横切面直径的三分之一，果肉硬度6.7～8.2公斤/平方厘米，果实味酸甜，可溶性固形物含量10.8～12.3％；果实可滴定酸0.16～0.19％，果实品质综合评价按百分制评分为83～81分；果实货架期15～20天；自花授粉坐果率81.9％～100％的梨自花结实性新种质品系，定名为‘99-6-39’(图5)。

此外，近年我们还确定了许多优系，仍在进一步观察之中。

4.两优系的田间区试结果

对优选出的上述两个优系分别定植及高接在南京农业大学江浦园艺实验场和高邮市果树实验场，并以目前生产上的主栽品种为对照，参试的品种(品系)有‘幸水’、‘丰水’、‘砀山酥’、‘西子绿’、‘98-19-117’、‘99-6-39’，调查其生长物候期、开花结果习性(表2)、果实经济性状(表3)及抗逆性等。

        表2品种的开花结果习性的比较(南京，2002)

品种(品系)	开花期	自花结实率	果实成熟期
				幸水丰水砀山酥梨西子绿98-19-11799-6-39	4月2日3月31日3月29日3月29日3月29日3月30日	0001.2％78％92％	8月10日8月25日9月25日7月20日7月25日7月20日

    表3自花结实性品系和几个主栽梨品种果实外观和风味品质的比较

品种(品系)	平均单果重(克)	果实外观品质	可溶性固形物含量(％)	滴定酸含量(％)	果实综合风味
						幸水丰水	256324	果实扁圆形，果面较粗糙，绿褐色至黄褐色，果点中大，凸起，淡黄褐色，较密果实扁圆形，较端正，果面粗糙，黄褐色，果点较大，凸起，较多	12.212.0	0.1760.171	酸甜可口，汁多，果肉细脆，口感好，品质优甜酸味均较浓，肉质细脆，多汁，品质好

砀山酥梨西子绿98-19-11799-6-39

345238305263

果实形状不规则，果皮稍粗糙，果点密、较大，微凸，褐色果形端正近圆形，果面光洁，果点少而小果形端正，长圆形，果面较光洁，果点少而小，果皮淡绿色果实扁圆形，果皮黄褐色，果点少，果面较光洁

10.610.512.511.6

0.1740.1700.1700.175

微甜酸，汁多，肉质较粗，口感差，品质差味淡，微酸，肉质细脆，汁液较多，品质较好味甜，肉质细脆，石细胞少汁液多，微香，品质好风味较浓，肉质细，汁液多，口感好，品质优

本项目组应用本发明方法已成功地创造了近2万株的自花结实性种质，经过田间观察、调查，认为综合经济性状较优良、有继续观察价值的单株有300余株。这些单株不仅是进一步培育自花结实性品种(系)的良好材料，而且有望从中选出在生产上推广的梨自花结实性品种(系)。‘98-19-117’和‘99-6-39’就是从中优选出的两个自花结实性品系。

综合经济性状优良的梨自花结实性品种是有广阔的应用前景的。如，上述两个自花结实性品系兼有优质、早熟、抗病等优良特性，已在一些梨产区少量栽培的结果已呈现出其优势。由于此类品种(品系)自花结实，因而不仅可以不用配置授粉品种和人工辅助授粉就能获得应有的产量和品质，而且在封闭的保护地内也可不用人工辅助授粉，也能获得与露地栽培相同的结果，在其他综合经济性状相同(或相似)的情况下，是生产者首选的品种，更是保护地栽培的理想品种。总之，本发明方法是创新梨自花结实性种质、培育自花结实性品种的有效方法，育成的自花结实性品种比自花不结实性品种具有省工高效适合于集约化栽培等优点，应用前景广阔。

注：本发明中涉及到的三个梨品种的来源、S基因型等资料：

1)‘长十郎’(Chojuro)：寺见广雄等，《日本梨各个品种不捻性因子分析》，园艺学研究集录，1946，第三辑，267-271。

2)‘八里’(Yasato)：Ishimizu et al.，《PCR-based method for identifyingthe S-gnotypes of Japanese pear cultivars》，Theor.Appl.Genet，1999，98：961-967。

3)‘奥嗄二十世纪’(Osa-Nijisseiki)：Hiratsuka S et al.，《Crossability ofself-compatible mutant‘Osa-Nijisseiki’(Pyrus serotina Rehd.)》，J Japan.Soc.Hort.Sci.；1987，56(2)：166-172.

Claims (1)

1、一种培育梨自花结实性新种质的方法，包括：

1)杂交组合

选用S基因型为S₂S₅的早熟梨品种‘八里’或S基因型为S₂S₃的‘长十郎’作母本，以具有自花结实的品种‘奥嗄二十世纪’为父本的杂交授粉，分别称为杂交组合1和组合2，获得后代的自花授粉坐果率分别为77.0％～93.9％和81.9％～100％；

2)杂交后代的选优

将杂交后代栽植于田间，按植株分别编号和挂上标签，跟踪观察各个植株的植物学特性、生长结果习性，依据后代的表现，选出如下2个品系：

从以‘八里’作母本、‘奥嗄二十世纪’为父本的杂交组合1的后代，选择培育出了一个优系，其特征为：树势开张，纺锤形树型的树高2.5～3.5米，树冠纵横径2.8～3.5米，枝条呈直立生长；主干呈灰褐色，一年生枝淡灰褐色，枝条皮孔扁园形、中大、分布稀；芽的萌芽率55％～70％，成枝力3～5条；以短果枝结果为主，每花序坐果1～3个，3月中旬萌芽，下旬开花，花白色，花期7～10天；5月下旬新梢停长，叶片狭椭圆形，叶缘锯齿状、密、突出，叶柄长1.3～2.1厘米，叶身长度10～13厘米，叶尖渐尖，叶色淡绿；果实发育天数105～110天，7月下旬成熟，果实长圆形，单果重240～340克，最大单果重可达420克，果实盖色为褐绿色，果点密，有斑锈；果梗长3～4厘米，梗洼浅狭；萼片脱落，萼洼深度中，呈漏斗形；果肉白色，肉质细，石细胞少，汁液多，有香气，果心大小中等，其直径占果实横切面直径的三分之一，果肉硬度6.1～8.5公斤/平方厘米，果实味甜，可溶性固形物含量11.5～12.6％；果实可滴定酸0.14～0.18％；果实品质综合评价按百分制评分为86～92分，果实货架期15～20天；自花授粉坐果率77.0％～93.9％的梨自花结实性新种质品系，定名为‘98-19-117’；

或从母本‘长十郎’和父本‘奥嗄二十世纪’的杂交组合2的后代中，选择培育出了优系，其特征为：纺锤形树型的树高2.5～3.3米，树冠纵横径2.8～3.5米；主干呈暗褐色，一年生枝灰褐色，枝条柔软，皮孔近椭园形、大而稀；芽的萌芽率41％～53％，成枝力4～5条；以短果枝及中果枝结果为主，每花序坐果1～2个，3月中旬萌芽，3月下旬开花，新梢5月下旬停长，叶片狭椭圆形，叶缘锯齿状，叶柄长1.4～2.2厘米，叶身长度11～14厘米，叶尖渐尖，叶色淡绿；果实发育天数100～105天，7月中下旬成熟，果实扁圆形，单果重210～310克，最大单果重可达400克，果实盖色为黄褐色，果点密，无斑锈；果梗长3～4厘米，梗洼浅，萼片脱落；果肉乳白色，肉质细，石细胞少，汁液多，果心直径占果实横切面直径的三分之一，果肉硬度6.7～8.2公斤/平方厘米，果实味酸甜，可溶性固形物含量10.8～12.3％；果实可滴定酸0.16～0.19％，果实品质综合评价按百分制评分为83～81分；果实货架期15～20天；自花授粉坐果率81.9％～100％的梨自花结实性新种质品系，定名为‘99-6-39’；

3)高接选择

进一步将以上2个品系在不同的生态区域高接于大树，选出了分别具有以上2个品系性状的植株，确定‘98-19-117’和‘99-6-39’为两个自花结实性推广品系。

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