CN1196672C - 具有治疗和/或营养活性的活性成分的不吸湿的盐以及含有它们的可口服的组合物 - Google Patents

Abstract

本发明公开了具有增强的营养和/或治疗作用的含有肌酸和鸟氨酸的活性成分的衍生物，它们可有利地用于制备可口服的固体组合物。

Description

具有治疗和/或营养活性的活性成分的 不吸湿的盐以及含有它们的可口服的组合物

本发明涉及稳定的、不吸湿的具有相对于它们的内盐同族物增加的营养和/或治疗功效的L-肉碱和低级烷酰基L-肉碱的盐以及含有这种盐、特别适合于口服的固体组合物。

早就已知肉碱及其烷酰基衍生物有助于不同的治疗应用，例如在心血管领域用于治疗急性和慢性心肌缺血、心绞痛、心力衰竭和心脏的心律不齐。乙酰基L-肉碱用于神经病学领域，用于治疗中枢神经系统紊乱和外周的神经病、特别是糖尿病性的周围神经病。丙酰基L-肉碱用于治疗慢性闭塞性动脉硬化、特别是显示出严重致残间歇性跛行症状的病人。

另一方面，广泛推广的肉碱及其衍生物已经迅速地向除了那些纯粹治疗之外的应用发展，尽管与它们有联系。

事实上现已经被广泛地承认在专业运动员以及在任何从事运动的业余等级的对象中L-肉碱提供能量给骨骼的肌肉系统以及增加对长时间、紧张的压力的抵抗力，增加这种个体性能水平。

此外，L(-)-肉碱或其低级烷酰基衍生物对于其饮食具有低肉碱含量以及低含量的两个氨基酸、赖氨酸和蛋氨酸(生物合成肾和肝脏中L(-)-肉碱的前体)的素食者以及那些必须长时间靠缺乏蛋白的饮食生活的对象构成不可缺少的营养增补剂。

因此，含有肉碱或其衍生物作为单组分或与另外的活性成分结合的不同的组合物最近已经进入食物增补剂、健康食品、能源食品和类似产品的市场中。

早就已经知道L(-)-肉碱及其烷酰基衍生物当它们以下式表示的内盐(或″甜菜碱″)的形式存在时非常易吸湿并且不很稳定。

其中R＝H或C₁-C₅低级烷酰酰基。

这就导致原料和制成品加工、稳定性和储存的复杂问题。例如，L(-)-肉碱片剂必须包装在泡罩中以保持它们不与空气接触，因为否则甚至在正常的湿度条件下，它们也将发生变化、膨胀并且变成糊状和粘稠。

由于迄今已知的L(-)-肉碱及其烷酰基衍生物的盐、如所谓的内盐(或″甜菜碱″)分别具有相同的治疗、营养或饮食的活性，内盐吸湿性的问题已经通过使它们与不具有不需要的毒性或副作用的″药理学可接受的″酸成盐而尝试性地解决。

现在有大量的文献、特别是专利公开了这种稳定的、不吸湿的盐的生产。

在L-肉碱盐中，特别是L-肉碱酒石酸盐和L-肉碱酸富马酸盐迄今已经发现具有实际的应用。

尽管上述″药理学可接受的″盐或多或少令人满意地解决了L-肉碱内盐的吸湿性问题，但是在已知的盐中没有一种阴离子部分协同增加的营养、精力充沛的和/或治疗的功效可归于盐本身的″肉碱″部分。

此外，没有一种用于制备不吸湿的L-肉碱盐的酸能够形成不吸湿的烷酰基L-肉碱盐。因此，例如，尽管L(-)-肉碱酸富马酸盐和L(-)-肉碱酒石酸盐是不吸湿的化合物，但乙酰基L(-)-肉碱酸富马酸盐和酒石酸盐分别为强吸湿的化合物，其具有与相应的内盐相同的缺点。

本发明的目的在于提供稳定的、不吸湿的具有相对于相应的内盐增加的治疗和/或营养功效的L-肉碱和低级烷酰基L-肉碱的盐。

WO 98/47857中报道了L-肉碱和烷酰基L-肉碱胆碱酒石酸盐是稳定的和不吸湿的盐。

至于含有氨基酸的L-肉碱盐，EP-A1-0 354 848公开了包括L-肉碱赖氨酸盐作为活性成分的药物组合物，但是没有报道其制备和理化特性。尤其是该参考文献没有公开上述L-肉碱赖氨酸盐是吸湿的还是不吸湿的物质。

因此，显而易见的是本发明盐的功用被发现不仅在于相对它们相应的内盐来说它们缺乏吸湿性而具有更高的稳定性，而且它们的阴离子部分总体上导致盐的营养、精力充沛的和/或治疗功效。因此这些新盐的上述功效不仅仅归于盐的″肉碱″部分。

上述目的通过下式(I)所示的L-肉碱和烷酰基L-肉碱与肌酸和鸟氨酸的盐实现：

其中：

-R为氢或具有2-5个碳原子的直链或支链的烷酰基；以及

-Y^-选自：

和

其中A为具有使氨基成盐功能的药理学可接受的酸。优选的是，A为氢卤酸例如盐酸，或磷酸。

当R为烷酰基时，优选选自包括乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基和异戊酰基的组。

肌酸是一种以相当的量存在于脊椎动物骨骼肌组织中的有机含氮化合物，其中其大约2/3以磷酸肌酸的形式存在。

肌酸主要是在肝和肾中由三种氨基酸生物合成：提供碳骨架的甘氨酸、释放脒基的精氨酸和释放甲基的蛋氨酸。肌酸作为肌酸酐与尿一起排泄。由于其主要存在于肉中，肌酸可以与饮食一起被吸收。然而，为了吸收10克/天的肌酸，应该吃2.5千克肉。外源的的供给和内源的生物合成必须补偿每天肌酸至肌酸酐的转变，在70-千克雄性对象中估计大约为2克。

肌酸的生理作用是非常重要的：主要在骨骼肌中，但是在脑、肝脏和肾中也有，肌酸-通过可逆地吸收ATP的磷酸基一起到储藏高能磷酸盐基团的作用。由于ATP在超过非常有限的临界值时不能储存在组织中，因此该反应极其重要。正是其在组织中的含量为ATP的五倍的磷酸肌酸提供磷酸基供给。继适当地疲倦的身体劳力之后，存在于骨骼肌中的磷酸肌酸以比ATP更相当大的量减少，因此显示当ATP变成脱磷时磷酸肌酸复磷ADP。

当ATP代谢生产的速率超过ATP的利用时，将导致磷酸肌酸的形成。因此磷酸肌酸是一种立即可用的能量的储存器，适合于平衡在代谢的磷酸化过程中超过ATP合成速率的能量需要。

肌酸主要通过运动员和运动选手在增加骨骼肌肉系统的范围内吸收，如果其摄入伴随有持久的身体的劳力。肌酸的摄取导致脂肪的降低同时增强了骨骼肌。近来的研究显示肌酸和碳水化合物的联合摄取增强了由于胰岛素产生的肌酸作用，胰岛素的产生通过可能在肌酸至肌细胞的输出中起作用的单糖刺激。

鸟氨酸、一种非蛋白基因的氨基酸是赖氨酸的低级同系物以及在脲生物合成循环中重要的中间体，其中其通过精氨酸胍转移作用合成。鸟氨酸还可以转化为谷氨酸。

因此显然在任意处理新的肉碱盐时具有的优点，除了稳定和经得起高相对湿度(60-70％)的环境外，还结合了L-肉碱或其烷酰基衍生物和肌酸或鸟氨酸的治疗、营养和给予精力的特性。

此外，本发明还提供了包含式(I)所示的L-肉碱或烷酰基L-肉碱与肌酸或鸟氨酸的盐和其药理学可接受的赋形剂和/或稀释剂的组合物。在一种所述组合物中，它另外包含维生素、辅酶、矿物质和抗氧化剂。本发明的组合物可以呈可口服的食物增补剂或增能剂形式。所述食物增补剂或增能剂可以呈锭形、片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒、囊剂、糖浆或小瓶的形式。所述食物增补剂或增能剂可以呈单位剂量形式，包括大约100至大约1,000毫克的至少一种式(I)的盐。

下列非限制性的实施例阐明本发明一些化合物的制备和物理化学特性。

                            实施例1

                   L-肉碱肌酸磷酸盐(BS/210)

 

         C₁₁H₂₇N₄O₉P                          390.338

将16.1克(0.1摩尔)L-肉碱内盐溶于200毫升水。向得到的溶液中加入13.1克(0.1摩尔)和75毫升85％磷酸(0.1摩尔)。完全熔解之后，加入异丁醇，然后将得到的混合物在40℃真空下浓缩。由此获得的残余物用丙酮处理，然后在搅拌下放置几个小时。粉碎反应产物然后在真空下过滤。

由此获得的固体用丙酮洗涤，在30℃恒温炉中干燥过夜。获得33.2克标题化合物，为白色结晶的、不吸湿的固体。

收率95％

熔点150℃(分解)

K.F.＝0.6％

[α]²⁰ _D＝-15.1(C＝1％H₂O)

pH 3.2(C＝0.5％H₂O)

元素分析：    C％     H％    N％     Cl％

计算值：       42.10     7.34     15.10     9.56

实测值：       42.23     7.63     15.62     9.32

NMR：D₂Oδ＝5.5-5.4(1H，m-CH-)；3.9(2H，CH₂-N-CH₃)；3.8-3.5

(2H，m，N-CH₂)；3.1(9H，s，N-(CH₃)₃)；2.9(3H，s，N-CH₃)；2.7-2.5(2H，m，

-CH₂-COOH)；2(3H，s，COCH₃)

HPLC：

柱：Hypersil PS-2(5μm)200x4.6

温度：＝30℃

流动相：CH₃CN/H₂O+0.05M KH₂PO₄/CH₃CN(65-35 v/v)

pH：4.7含H₃PO₄

流速0.7毫升/分钟

乙酰基-L-肉碱R_t＝8.5

肌酸：R_t＝7.4

                        实施例2

              乙酰基L-肉碱肌酸盐酸盐(BS/211)

       C₁₃H₂₇N₄O₆Cl                         370.58

将23.9克(0.1摩尔)乙酰基L-肉碱氯化物溶于300毫升蒸馏水中，在搅拌下向得到的溶液中加入13.1克(0.1摩尔)肌酸。完全溶解之后，加入300毫升异丁醇，在40℃真空下浓缩得到的混合物。用丙酮处理由此获得的残余物，混合物保持搅拌。2小时之后，在真空下过滤混合物同时向其中加入丙酮，残余物在真空下在30℃恒温炉中干燥过夜。获得34克标题化合物，为白色结晶的、不吸湿的固体。

收率96％。

熔点161℃(分解)

K.F.＝1.6％

[α]²⁰ _D＝-12.8(C＝1％H₂O)

pH 3.4(C＝0.5％H₂O)

元素分析：C％  H％    N％  P％

计算值：   33.84  6.97     14.35  7.94

实测值：   33.58  7.07     14.25  7.81

NMR：D₂Oδ＝4.6-4.5(1H，m -CH-)；3.9(2H，CH₂-N-CH₃)；3.5-3.4

(2H，m，N-CH₂)；3.1(9H，s，N-(CH₃)₃)；2.9(3H，s，N-CH₃)；2.6-2.5(2H，d，

-CH₂-COOH)

HPLC：

柱：Hypersil APS-2(5μm)200x4.6

温度：＝30℃

流动相：CH₃CN/H₂O+0.05M KH₂PO₄/CH₃CN(65-35 v/v)

pH：4.7含H₃PO₄

流速：0.7毫升/分钟

L-肉碱：R_t＝10.1

肌酸：R_t＝7.4

                           实施例3

             乙酰基L-肉碱L-鸟氨酸二盐酸盐(BS/212)

        C₁₄H₃₁N₃N₆Cl₂                 408.329

将20.3克(0.1摩尔)乙酰基L-肉碱内盐溶于100毫升蒸馏水中，在搅拌下向得到的溶液中加入20.5克(0.1摩尔)L-鸟氨酸二盐酸盐。

完全溶解之后，将混合物在40℃真空下在装有水泵的旋转蒸发器中在25mm/Hg下浓缩。将异丁醇加入到该浓缩物中，共沸蒸馏得到的混合物。用丙酮处理由此获得的残余物，然后保持在机械搅拌下过夜。用古氏过滤器n4真空蒸馏混合物。

由此获得的固体在真空下在30℃恒温炉中干燥过夜。

获得38克标题化合物，为白色结晶的、不吸湿的固体。

收率：96％

K.F.＝0.5％

[α]20_D＝-5.7(C＝1％H₂O)

pH 3.2(C＝1％H₂O)

元素分析：  C％      H％     N％      Cl％

计算值：     41.18      7.68      10.29      17.3

实测值：     41.27      8.01      10.33      17.1

NMR：D₂Oδ＝5.5-5.4(1H.m-CH-)；3.8-3.5(2H，m，N-CH₂)；3.7-3.6

(1H，t，CH₂NH₂)；3.1(9H，s，N-(CH₃)₃)；3-2.9(3H，t，N-CH₂-NH₂)；2.7-

2.5(2H，m，-CH₂-COOH)；2(3H，s，CO-CH₃)；1.9-1.8(2H，q，CH₂-CH)；1.7-

1.5(2H，m，CH₂-CH₂-CH₂)

HPLC：

柱：Hypersil APS-2(5μm)200x4.6

温度：＝30℃

流动相：CH₃CN/H₂O+0.05M KH₂PO₄/CH₃CN(65-35 v/v)

pH：4.7含H₃PO₄

流速：0.7毫升/分钟

乙酰基-L-肉碱：R_t＝8.5

鸟氨酸：R_t＝12.58

在下面表1中，显示与L-肉碱和乙酰基L-肉碱的内盐和乙酰基L-肉碱的氯化物相比本发明的一些化合物在70±5％相对湿度中、在25℃下暴露24小时之后重量增加(％)和外观。

                       表1

化合物                        重量增加(％)             外观

L-肉碱内盐                    23                       潮解

乙酰基-L-肉碱氯化物           8                        凝块

乙酰基-L-肉碱内盐             19                       潮解

实施例1(BS/210)               0.25                     无变化

实施例2(BS/211)               0.19                     无变化

实施例3(BS/212)               0.21                     无变化

除了由于稳定性和缺乏吸湿性所具有的技术性能的优点之外，式(I)盐对于消费者存在另外的优点，即，使之容易摄取合适剂量的活性成分。其能够容易地调节以适合特殊个体的个人需要。因此在治疗和饮食领域例如训练饮食、虚弱和有压力的个体的滋养品和素食中大大地便利了消费者的需求。

Claims (11)

1.具有下式的L-肉碱或烷酰基L-肉碱与肌酸或鸟氨酸的盐：

其中：

-R为氢或具有2-5个碳原子的直链或支链的烷酰基；以及

-Y选自：

和

其中A为具有使肌酸或鸟氨酸的氨基各自成盐的功能的药理学可接受的酸。

2.权利要求1的盐，其中A是选自盐酸、氢溴酸和磷酸的无机酸。

3.权利要求1或2的盐，其中R是选自乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基和异戊酰基的烷酰基。

4.作为权利要求1的盐的L-肉碱肌酸磷酸盐。

5.作为权利要求1的盐的乙酰基L-肉碱肌酸盐酸盐。

6.作为权利要求1的盐的乙酰基L-肉碱L-鸟氨酸二盐酸盐。

7.包括至少一种权利要求1-6中的盐和其药理学可接受的赋形剂和/或稀释剂的组合物。

8.权利要求7的组合物，它另外包括维生素、辅酶、矿物质和抗氧化剂。

9.权利要求7或8的组合物，呈食物增补剂或增能剂形式、可口服。

10.权利要求9的食物增补剂或增能剂，呈锭剂、片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒、囊剂、糖浆或小瓶的形式。

11.权利要求9或10的食物增补剂或增能剂，呈单位剂量形式。包括大约100至大约1,000毫克的至少一种权利要求1-6的盐。