CN118415938A - 一种植物提取物复合抑菌剂及应用 - Google Patents

一种植物提取物复合抑菌剂及应用 Download PDF

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CN118415938A CN202410552601.7A CN202410552601A CN118415938A CN 118415938 A CN118415938 A CN 118415938A CN 202410552601 A CN202410552601 A CN 202410552601A CN 118415938 A CN118415938 A CN 118415938A
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张军
吴建飞
陈诗娜
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Abstract

本发明公开了一种植物提取物复合抑菌剂及应用,所述植物提取物复合抑菌剂包括如下质量百分含量原料:抑菌剂20‑70%,所述抑菌剂包括尖叶秦皮提取物、侧柏叶提取物、银杏坚果提取物中的至少两种混合物;本发明通过充分发挥抑菌剂的各提取物之间的协同增效作用,能够抑制酪氨酸酶的活性,从而减少黑色素的合成,达到较好的美白功效。该植物提取物复合抑菌剂可用于化妆品中,具有用量低、安全有效、天然低刺激等优点。

Description

一种植物提取物复合抑菌剂及应用
技术领域
本发明属于植物提取物领域,尤其涉及一种植物提取物复合抑菌剂及应用。
背景技术
近年来,随着生活水平的提高,人们对自己肌肤的保养越来越重视,化妆护肤品的使用越加频繁。防腐剂是化妆品中不可或缺的一类成分,添加防腐剂可抑制化妆品中微生物滋生,选择高效、安全的防腐剂是化妆品配方开发的关键之一,但现有的防腐剂在保持良好的防腐效果的同时,难以实现良好的美白功效。因而,开发一种具有良好美白功效的天然提取物防腐剂的重要性日渐显著。
秦皮为木犀科植物苦枥白蜡树、白蜡树、尖叶白蜡树或宿柱白蜡树的干燥枝皮或干皮,具有清热燥湿、收涩止痢、止带和明目的功效。秦皮主产于陕西、河北、河南、山西、辽宁、吉林等地,于春、秋二季剥取,晒干。研究表明,秦皮主要含有香豆素类、木脂素类、环烯醚萜类等化学成分;而现代药理学实验表明其具有抗菌,抗炎镇痛,抗肿瘤,止咳祛痰及降低血尿酸等作用。
侧柏叶又名扁柏、黄心柏,为常绿乔木,其嫩枝、叶及果皆可入药,其味苦、涩,性微寒,入肺、肝、大肠经,有凉血止血、乌须发、止咳喘的功效。主要用于血热妄行引起的出血病症,并有镇咳、祛痰、降压、防脱发等作用。其果实中的果仁则有养心安神、润肠通便之功效。
银杏果俗称白果,是营养丰富的高级滋补品,银杏树的果实即银杏果,银杏果为中药的一种,银杏果的作用具有延缓衰老、美容养颜、预防心脑血管疾病和消毒杀菌。
发明内容
针对上述现有技术中的不足,本发明通过充分发挥抑菌剂的各提取物之间的协同增效作用,能够抑制酪氨酸酶的活性,从而减少还色素的合成,达到较好的美白功效。该植物提取物复合抑菌剂可用于化妆品中,具有用量低、安全有效、天然低刺激等优点。
本发明的目的在于提供一种植物提取物复合抑菌剂,包括如下质量百分含量原料:抑菌剂20-70%,所述抑菌剂包括尖叶秦皮提取物、侧柏叶提取物、银杏坚果提取物中的至少两种混合物。
在本发明一些实施例中,所述植物提取物复合抑菌剂包括如下质量百分含量原料:抑菌剂20-50%,所述抑菌剂包括尖叶秦皮提取物、侧柏叶提取物、银杏坚果提取物中的至少两种混合物。
在本发明一些实施例中,所述植物提取物复合抑菌剂包括如下质量百分含量原料:抑菌剂20-40%,所述抑菌剂包括尖叶秦皮提取物、侧柏叶提取物、银杏坚果提取物中的至少两种混合物。
在本发明一些实施例中,所述植物提取物复合抑菌剂包括如下质量百分含量原料:抑菌剂30%,所述抑菌剂包括尖叶秦皮提取物、侧柏叶提取物、银杏坚果提取物中的至少两种混合物。
在本发明一些实施例中,所述植物提取物复合抑菌剂还包括溶剂30-80%。
在本发明一些实施例中,所述植物提取物复合抑菌剂还包括溶剂50-80%。
在本发明一些实施例中,所述植物提取物复合抑菌剂还包括溶剂60-80%。
在本发明一些实施例中,所述植物提取物复合抑菌剂还包括溶剂70%。
在本发明一些实施例中,所述溶剂包括1,3-丁二醇、1,3-丙二醇、1,2-丙二醇、1,2-丁二醇、1,4-丁二醇、1,2-戊二醇、1,5-戊二醇、异戊二醇、异己二醇、1,2-己二醇、二丙二醇、水、甘油、甲基丙二醇中的至少一种。
在本发明一些实施例中,所述尖叶秦皮提取物与侧柏叶提取物的质量比为2-6:1-4。
在本发明一些实施例中,所述尖叶秦皮提取物与侧柏叶提取物的质量比为2:1。
在本发明一些实施例中,所述尖叶秦皮提取物与银杏坚果提取物的质量比为2-5:1-4。
在本发明一些实施例中,所述尖叶秦皮提取物与银杏坚果提取物的质量比为2:1。
在本发明一些实施例中,所述侧柏叶提取物与银杏坚果提取物的质量比为1-4:1-4。
在本发明一些实施例中,所述侧柏叶提取物与银杏坚果提取物的质量比为1:1。
在本发明一些实施例中,所述尖叶秦皮提取物、侧柏叶提取物与银杏坚果提取物的质量比为2-6:1-4:1-4。
在本发明一些实施例中,所述尖叶秦皮提取物、侧柏叶提取物与银杏坚果提取物的质量比为15:7:8。
在本发明一些实施例中,所述尖叶秦皮提取物的提取工艺包括如下步骤:
将尖叶秦皮粉碎,尖叶秦皮粉末经第一溶剂浸提、超声萃取,萃取液纯化,得尖叶秦皮提取物。
在本发明一些实施例中,所述第一溶剂包括质量浓度为40-80%乙醇水溶液。
在本发明一些实施例中,所述尖叶秦皮粉末与第一溶剂的质量比为1:6-10。
在本发明一些实施例中,将尖叶秦皮粉碎后,还过60-100目筛。
在本发明一些实施例中,所述浸提的温度为40-70℃,时间为1-2小时。
在本发明一些实施例中,所述超声萃取的时间为1-3小时。
在本发明一些实施例中,所述侧柏叶提取物的提取工艺包括如下步骤:
将侧柏叶粉碎,侧柏叶粉末经第二溶剂超声萃取,萃取液纯化,得侧柏叶提取物。
在本发明一些实施例中,所述第二溶剂包括质量浓度为60-80%乙醇水溶液。
在本发明一些实施例中,所述侧柏叶粉末与第二溶剂的质量比为1:6~10。
在本发明一些实施例中,将侧柏叶粉碎后,还过60-100目筛。
在本发明一些实施例中,所述超声萃取的温度为50-70℃,时间为2-6h。
在本发明一些实施例中,所述银杏坚果提取物的提取工艺包括如下步骤:
将银杏坚果粉碎,将银杏坚果粉末经第三溶剂提取,提取液浓缩、纯化,得银杏坚果提取物。
在本发明一些实施例中,所述第三溶剂包括质量浓度为50-80%乙醇水溶液。
在本发明一些实施例中,所述银杏坚果粉末与第三溶剂的质量比为1:8~10。
在本发明一些实施例中,将银杏坚果粉碎后,还过60-100目筛。
在本发明一些实施例中,所述提取的温度为40-60℃,时间为2-6h。
本发明另一目的在于提供一种所述的植物提取物复合抑菌剂在制备化妆品中的应用,所述化妆品中含有所述植物提取物复合抑菌剂,所述化妆品包括面膜液、乳液、膏霜、爽肤水、精华液、原液、洁面乳、化妆水、香水、卸妆水、粉底液、粉底霜、遮瑕霜、胭脂、口红、眼影、腮红中的至少一种。
在本发明一些实施例中,以质量百分含量计,所述植物提取物复合抑菌剂的用量为化妆品的0.5-5%。
与现有技术相比,本发明具有如下有益效果:
(1)本发明提供的植物提取物复合抑菌剂的各组分均为常见的植物提取物,替代传统防腐剂,具有安全、温和、无刺激的优点,不会引起皮肤过敏反应。
(2)本发明通过充分发挥抑菌剂的各提取物之间的协同增效作用,能够抑制酪氨酸酶的活性,从而减少还色素的合成,达到较好的美白功效。该植物提取物复合抑菌剂可用于化妆品中,具有用量低、安全有效、天然低刺激等优点。
具体实施方式
为了使本技术领域的人员更好地理解本发明中的技术方案,下面将结合本发明实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都应当属于本发明保护的范围。
实施例1
本实施例提供尖叶秦皮提取物的提取工艺,具体提取工艺如下:
取55kg尖叶秦皮,用中药粉碎机粉碎,过80目筛,得到尖叶秦皮粉末。取50kg过筛后的尖叶秦皮粉末,加入6-10倍量的40-80%乙醇水溶液,混合均匀后浸提,一般浸提1-2小时,温度保持55℃左右,浸提后,将提取混合物转入超声萃取设备,通过大功率双频超声装置,超声萃取2h,萃取完成后,将萃取液进行过滤除杂,并在不高于60℃环境下,脱去水和乙醇,剩余尖叶秦皮萃取液进一步超滤除杂精制后,得尖叶秦皮提取物。
实施例2
本实施例提供侧柏叶提取物的提取工艺,具体提取工艺如下:
取55kg侧柏叶,用中药粉碎机粉碎,后过80目筛备用。取过筛后的侧柏叶细粉50kg加入提取容器中,加入6-10倍量的60-80%乙醇水溶液,在温度50-70℃下常压下超声提取2-3次,每次1-2h,合并提取液,将萃取液进行过滤除杂,并在不高于60℃环境下,脱去水和乙醇,剩余侧柏叶萃取液进一步超滤除杂精制后,得侧柏叶提取物。
实施例3
本实施例提供银杏坚果提取物的提取工艺,具体提取工艺如下:
取55kg银杏坚果,用中药粉碎机粉碎,过80目筛,得到银杏坚果粉末。取50kg过筛后的银杏坚果粉末,加入8-10倍量的50-80%乙醇水溶液,混合均匀后加热回流提取2-3次,每次1-2小时,提取温度在50℃左右。合并提取液,在65℃减压真空浓缩,得到银杏坚果提取物浓缩液,用适量的纯净水分散后,用乙酸乙酯萃取,乙酸乙酯层浓缩后得萃取物;萃取物经大孔树脂吸附,用体积分数为95%的乙醇洗脱,洗脱液浓缩、干燥,得银杏坚果提取物。
植物提取物复合抑菌剂的制备:
表1.植物提取物复合抑菌剂的原料组成。
配方 原料及质量百分比
实施例4 20%尖叶秦皮提取物+10%侧柏叶提取物+70%1,3-丁二醇
实施例5 20%尖叶秦皮提取物+10%银杏坚果提取物+70%1,3-丁二醇
实施例6 15%侧柏叶提取物+15%银杏坚果提取物70%1,3-丁二醇
实施例7 15%尖叶秦皮提取物+7%侧柏叶提取物+8%银杏坚果提取物+70%1,3-丁二醇
对比例1 30%尖叶秦皮提取物+70%1,3-丁二醇
对比例2 30%侧柏叶提取物+70%1,3-丁二醇
对比例3 30%银杏坚果提取物+70%1,3-丁二醇
按表1的原料及质量百分比,在带有温度计和搅拌器的250mL烧瓶中,分别加入上述提取物和1,3-丁二醇,升温至40℃,搅拌30~50min至完全混合均匀,降至室温后,过滤除去不溶性杂质,即得植物提取物复合抑菌剂。
防腐功效测试:
测试菌种:本实验所使用的细菌为铜绿假单胞菌ATCC9027、大肠埃希氏菌ATCC8739和金黄色葡萄球菌ATCC6538混合菌;真菌为白色假丝酵母菌ATCC10231、黑曲霉ATCC16404,均来源于广东省微生物菌种保藏中心。
试验测试使用的混合细菌初始接种菌量为105~106CFU/g,白色假丝酵母菌和黑曲霉单一初始接种菌量为104~105CFU/g,在第7、14和28天测定含菌量,计算出对应时间节点的各种微生物数量减少对数值,表2~4中的防腐剂分别为表1中实施例4~7、对比例1~3的植物提取物复合抑菌剂;测试体系为面膜液、保湿乳液、修复霜,配方和生产工艺见表2~4。
表2.面膜液成分表及生产工艺。
表3.保湿乳液成分表及生产工艺。
表4.修复霜成分表及生产工艺。
试验结果判定:在第7天时细菌数量降低3个数量级,第14、28天时细菌降低3个数量级且不增加;白色假丝酵母菌第7天降低1个数量级,第14、28天降低一个数量级且不增加;黑曲霉在14天时不增加,在28天时下降一个数量级,即为通过,结果参见表5~7。
表5.面膜液防腐功效测试数据。
表6.保湿乳液防腐功效测试数据。
表7.修复霜防腐功效测试数据。
由表5-7可知,含实施例4~7制备的植物提取物复合抑菌剂在面膜液、保湿乳液、修复霜三种测试体系中均通过了防腐功效测试,具有很强的防腐效果。对比例1~3的单组分抑菌剂的制备的面膜液、保湿乳液、修复霜三种测试体系的抑菌谱和抑菌能力防腐存在缺陷,均未通过防腐功效测试。可见,植物提取物复合抑菌剂具有协同增效防腐作用。
酪氨酸酶活性抑制率的测试:
黑色素的合成受酪氨酸酶影响,酪氨酸酶能够催化L-酪氨酸羟化成多巴,并把多巴氧化成多巴醌,多巴醌形成最终的反应产物黑色素。具有酪氨酸酶活性抑制作用的受试物可以减慢酪氨酸酶催化L-酪氨酸转化成多巴醌,通过测定475nm处多巴醌的吸光度,具有酪氨酸酶活性抑制作用的原料可以减少多巴转化成多巴醌,从而降低吸光度值,根据吸光度的变化来评估受试物对酪氨酸酶活性的抑制效果。参考T/GDCA 006-2021化妆品原料对酪氨酸酶活性抑制试验方法(体外法)。
具体方法如下:
溶液配制:
1、酪氨酸酶溶液配制:用PBS缓冲液将酪氨酸酶配制成500U/ml,分装,-20℃保存,避免二次冻融。
2、L-酪氨酸溶液配制:取0.025g L-酪氨酸溶于适量PBS缓冲溶液中,超声助溶,使其充分溶解,再用PBS定容至50mL,配制成0.5g/L的L-酪氨酸溶液,该溶液应现配现用。
3、阳性对照溶液制备:阳性对照曲酸用超纯水稀释成0.040g/L、0.020g/L、0.010g/L、0.008g/L、0.005g/L、0.002g/L、0.001g/L系列质量浓度梯度溶液。
4、样品溶液制备:用PBS缓冲剂将样品配制成1%待测浓度。
6.2试验分组:
试验中分为溶剂本底组(Ta)、溶剂反应孔组(Tb)、样品本底组(Tc)、样品反应组(Td)。溶剂本底组(Ta)为溶剂、PBS缓冲液、酪氨酸酶溶液;溶剂反应孔组(Tb)为L-酪氨酸溶液、溶剂、PBS缓冲液、酪氨酸酶溶液;样品本底组(Tc)为样品溶液、PBS缓冲液、酪氨酸酶溶液;样品反应组(Td)为L-酪氨酸溶液、样品溶液、PBS缓冲液、酪氨酸酶溶液。每组三个复孔。
试验步骤:
按照表8试剂添加量,在各孔依次加入L-酪氨酸溶液、样品溶液/溶剂、PBS缓冲液,置于37℃的全波长酶标仪中恒温震荡3min后,继续孵育7min,即加样后,置于37℃恒温条件下共孵育10min。孵育结束时,依次在各孔中加入20μL的酪氨酸酶溶液,37℃混匀反应5min±5s后读数(可置于37℃的全波长酶标仪中恒温震荡3min,继续孵育2min后读数),在475nm波长处进行测定。
表8.酪氨酸酶活性的抑制能力加样表
名称 Ta(溶剂本底孔) Tb(溶剂反应孔) Tc(样品本底孔) Td(样品反应孔)
L-酪氨酸溶液(μL) 0 40 0 40
样品溶液(μL) 0 0 40 40
溶剂(μL) 40 40 0 0
PBS缓冲液(μL) 70 30 70 30
酪氨酸酶溶液(μL) 20 20 20 20
总计(μL) 130 130 130 130
数据处理:
酪氨酸酶活性抑制率的计算:
式(1)中:
Aa——溶剂本底孔吸光度平均值;
Ab——溶剂反应孔吸光度;
Ac——样品本底孔吸光度平均值;
Ad——样品反应孔吸光度。
阳性对照半数抑制浓度(IC50值):
以阳性对照浓度为横坐标,其对应的酪氨酸酶活性抑制率为纵坐标,绘制曲线图,拟合线性回归方程,(R2≥0.900)并根据方程计算酪氨酸酶活性抑制率为50%时对应的阳性对照浓度。阳性对照曲酸的IC50应在0.005g/L~0.01g/L,则认为本次试验有效。
表9.酪氨酸酶活性抑制率测试结果
由表9结果可知,尖叶秦皮提取物、侧柏叶提取物、银杏坚果提取物中任意两种或两种以上的组合能够协同抑制酪氨酸酶活性,尖叶秦皮提取物、侧柏叶提取物、银杏坚果提取物中任意两种或两种以上的组合对酪氨酸酶活性的抑制效果均优于单独使用上述任一种组分,其中三种提取物形成的组合物对酪氨酸酶活性的抑制效果最佳,说明尖叶秦皮提取物、侧柏叶提取物、银杏坚果提取物的两种或三种组分之间存在协同抑制酪氨酸酶活性的作用。
人体皮肤斑贴试验:
将含有实施例4~7制备的植物萃取多效组合物的实施例12~15的乳液的刺激性、安全性进行检测,乳液的配方及生产工艺见表3。
试验方法:参考《化妆品安全技术规范》2015版第七章第2节6.1皮肤封闭型斑贴试验。分别称取不同乳液产品0.02mL至斑试器中,同时设置空白对照组,对照即为该化妆品的稀释剂。选取健康志愿者200名,分成4组,每组50名,年龄18~24岁,无过敏史。清洁受试者前臂内侧后,取0.02mL样品加在斑试器所附滤纸片上。将斑试器用无刺激胶带贴敷于受试者的前臂内侧,粘贴好后用手指轻压使之均匀贴于皮肤上,持续24h。嘱咐受试者24h内保持斑贴部位干燥,避免激烈运动、挠抓斑试部位、长时间日光照射等。24h后去除试器并做好标记,分别于去除受试物斑试器后30min、24h和48h按照表10标准观察皮肤反应,并记录观察结果。
表10.皮肤封闭型斑贴实验皮肤反应分级标准
表11.皮肤斑贴试验结果
由表11可知,含有实施例4~7的植物提取物复合抑菌剂的实施例12~15乳液均无严重不良反应,受试者基本为阴性反应,结果判定该含有实施例4~7制备的植物提取物复合抑菌剂的实施例12~15乳液刺激性低、安全性高。
本发明植物提取物复合抑菌剂中抑菌剂的质量百分含量在20-70%、溶剂的质量百分含量在30-80%范围内(如抑菌剂的质量百分含量为20%、25%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%,溶剂的质量百分含量为30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、75%、80%等),和/或采用其他溶剂对尖叶秦皮、侧柏叶、银杏坚果进行提取(如采用乙醇、甲醇、石油醚、乙酸乙酯等溶剂对尖叶秦皮、侧柏叶、银杏坚果进行提取),和/或植物提取物复合抑菌剂选用其他溶剂(如1,3-丙二醇、1,2-丙二醇、1,2-丁二醇、1,4-丁二醇、1,2-戊二醇、1,5-戊二醇、异戊二醇、异己二醇、1,2-己二醇、二丙二醇、水、甘油、甲基丙二醇等),和/或尖叶秦皮提取物与侧柏叶提取物的质量比为2-6:1-4,和/或尖叶秦皮提取物与银杏坚果提取物的质量比为2-5:1-4,和/或侧柏叶提取物与银杏坚果提取物的质量比为1-4:1-4,和/或尖叶秦皮提取物、侧柏叶提取物与银杏坚果提取物的质量比为2-6:1-4:1-4,所得到的植物提取物复合抑菌剂均出现抑菌剂间具有协同防腐、协同抑制酪氨酸酶活性作用,且将植物提取物复合抑菌剂用于制备化妆品刺激性低、安全性高。
最后应当说明的是,以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对其限制,尽管对照上述实施例对本发明进行了详细的说明,所属领域的普通技术人员应当理解,技术人员阅读本申请说明书后依然可以对本发明的具体实施方式进行修改或者等同替换,但这些修改或变更均未脱离本发明申请待批权利要求保护范围之内。

Claims (10)

1.一种植物提取物复合抑菌剂,其特征在于,包括如下质量百分含量原料:抑菌剂20-70%,所述抑菌剂包括尖叶秦皮提取物、侧柏叶提取物、银杏坚果提取物中的至少两种混合物。
2.如权利要求1所述的植物提取物复合抑菌剂,其特征在于,还包括溶剂30-80%。
3.如权利要求2所述的植物提取物复合抑菌剂,其特征在于,所述溶剂包括1,3-丁二醇、1,3-丙二醇、1,2-丙二醇、1,2-丁二醇、1,4-丁二醇、1,2-戊二醇、1,5-戊二醇、异戊二醇、异己二醇、1,2-己二醇、二丙二醇、水、甘油、甲基丙二醇中的至少一种。
4.如权利要求1所述的植物提取物复合抑菌剂,其特征在于,所述尖叶秦皮提取物与侧柏叶提取物的质量比为2-6:1-4;
所述尖叶秦皮提取物与银杏坚果提取物的质量比为2-5:1-4;
所述侧柏叶提取物与银杏坚果提取物的质量比为1-4:1-4。
5.如权利要求1所述的植物提取物复合抑菌剂,其特征在于,所述尖叶秦皮提取物、侧柏叶提取物与银杏坚果提取物的质量比为2-6:1-4:1-4。
6.如权利要求1所述的植物提取物复合抑菌剂,其特征在于,所述尖叶秦皮提取物的提取工艺包括如下步骤:
将尖叶秦皮粉碎,尖叶秦皮粉末经第一溶剂浸提、超声萃取,萃取液纯化,得尖叶秦皮提取物;
所述侧柏叶提取物的提取工艺包括如下步骤:
将侧柏叶粉碎,侧柏叶粉末经第二溶剂超声萃取,萃取液纯化,得侧柏叶提取物;
所述银杏坚果提取物的提取工艺包括如下步骤:
将银杏坚果粉碎,将银杏坚果粉末经第三溶剂提取,提取液浓缩、纯化,得银杏坚果提取物。
7.如权利要求6所述的植物提取物复合抑菌剂,其特征在于,所述第一溶剂包括质量浓度为40-80%乙醇水溶液;
所述第二溶剂包括质量浓度为60-80%乙醇水溶液;
所述第三溶剂包括质量浓度为50-80%乙醇水溶液。
8.如权利要求6所述的植物提取物复合抑菌剂,其特征在于,所述尖叶秦皮粉末与第一溶剂的质量比为1:6-10;
所述侧柏叶粉末与第二溶剂的质量比为1:6-10;
所述银杏坚果粉末与第三溶剂的质量比为1:8-10。
9.如权利要求1~8任一项所述的植物提取物复合抑菌剂在制备化妆品中的应用,其特征在于,所述化妆品中含有所述植物提取物复合抑菌剂,所述化妆品包括面膜液、乳液、膏霜、爽肤水、精华液、原液、洁面乳、化妆水、香水、卸妆水、粉底液、粉底霜、遮瑕霜、胭脂、口红、眼影、腮红中的至少一种。
10.如权利要求9所述的应用,其特征在于,以质量百分含量计,所述植物提取物复合抑菌剂的用量为化妆品的0.5-5%。
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