CN118320024A - 一种改善微循环障碍的中药组合物及其制备方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及医药技术领域，尤其涉及一种改善微循环障碍的中药组合物及其制备方法与应用。本发明所述的改善微循环障碍的中药组合物，包括以下重量份的原料：天麻1‑10份、三七1‑5份、莲子心1‑10份、玉米须5‑30份。配方科学合理，工艺简单，口感好，成本低，安全有效，能够改善微循环障碍，减少血管内皮损伤，对心脑血管疾等疾病具有较好疗效。该中药组合物可应用于用于制备治疗微循环障碍的药物，其主要成分为药食同源，副作用相对较少，适合长期服用，对于慢性疾病的管理尤为重要。
Description
技术领域
本发明涉及医药技术领域，尤其涉及一种改善微循环障碍的中药组合物及其制备方法与应用。
背景技术
微循环是微动脉与微静脉之间毛细血管中的血液循环，是循环系统中最基层的结构和功能单位，在提供氧气、养料，传递能量，交流信息，排除二氧化碳及代谢废物等方面扮演重要角色。微循环障碍是血液理化性质的改变，使管腔狭窄，血液流速或减慢或血栓形成，使局部组织缺血缺氧甚至坏死，引起一系列临床症状。微循环障碍是许多疾病共同的病理基础，研究表明：衰老、肿瘤、高血压、糖尿病及许多心脑血管等疾病的发生发展与微循环障碍息息相关。健全的微循环功能是保证体内重要脏器执行正常功能的首要前提，改善微循环障碍也因此愈发受到关注。
目前常用的改善微循环的药物主要有：微循环是微动脉与微静脉之间毛细血管中的血液循环，是循环系统中最基层的结构和功能单位，血管保护药、抗凝血药、溶栓去纤药、抗血小板药、血管扩张药、降低血粘度药物等；虽可某种程度上改善微循环障碍，但往往存在较多毒副作用。中药可通过多靶点多途径整体调控，相比之下具有优势。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术存在的不足之处而提供一种改善微循环障碍的中药组合物，将天麻、三七、莲子心和玉米须组成中药组合物，具有改善微循环障碍、保护微血管的作用。
为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：
第一方面，本发明提供了一种改善微循环障碍的中药组合物，包括以下重量份的组分：天麻1-10份、三七1-5份、莲子心1-10份、玉米须5-30份。
莲薏，苦寒泻火，治心烦上热之证，因是胚芽，具有生气，泻火之中又有流通之性。心血管疾病气郁化火，莲子心引心火下行，清心除烦；天麻在《神经本草经》中是上品，味辛，温。主杀鬼精物，蛊毒，恶气，消痈肿，下肢满疝，下血。久服益气力，长肥健，轻身增年。天麻能够平抑肝阳、通经活络，木生火，平肝以抑心火亢盛，相火内燔，减轻心血管压力；心血管疾病大多因气滞血瘀，三七，和营止血，通脉行瘀，一切瘀血皆破，一切新血皆止，化瘀血的同时又能够保护心血；玉米须味甜，性微温。入阳明胃经，宽肠下气，治妇人乳结红肿，具有清热生津的功效，对于阴虚火热导致的血糖高，有较好的疗效。本发明将四种中药配伍，在上述范围内，中药的有效成分相互作用，具有泻中有补，清热除烦，活血化瘀的同时不忘生津补虚，保护心脑血管的效果。
优选地，所述的改善微循环障碍的中药组合物，包括以下重量份的组分：天麻9份、三七3份、莲子心9份、玉米须30份。
第二方面，本发明提供了上述的改善微循环障碍的中药组合物的制备方法，包括以下步骤：
(1)按重量份配比称取药材原料混合加入水浸泡，加热蒸煮，过滤，得到提取液A和滤渣；
(2)取滤渣加水蒸煮，过滤得到提取液B；
(3)将提取液A和提取液B混合，静置，过滤，浓缩，得到所述改善微循环障碍的中药组合物。
本发明通过二次水提使得药材原料含有的有效成分充分溶解浸出，最大程度地发挥药材原料的效果。
优选地，所述步骤(1)中，加水量为药材原料总重量的8-30倍；所述蒸煮时间为30-45min。
优选地，所述步骤(1)中，浸泡时间为0.5-3h。
优选地，所述步骤(2)中，蒸煮时间为20min-2h。
优选地，所述步骤(3)中，浓缩的方式为减压蒸馏法。
优选地，所述步骤(3)中，浓缩至清膏状，相对密度为1.0-1.2。
第三方面，本发明提供了上述的改善微循环障碍的中药组合物在制备治疗微循环障碍的药物中的应用。
第四方面，本发明提供了一种治疗微循环障碍的药物，包括上述的改善微循环障碍的中药组合物。
优选地，所述药物的剂型包括片剂、胶囊剂、糖浆剂、合剂、口服液。
优选地，所述剂型为片剂或胶囊剂时，药物中还包括稀释剂、润湿剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂中的至少一种。
优选地，所述剂型为糖浆剂或口服液时，药物中还包括矫味剂、防腐剂、助溶剂中的至少一种。
优选地，所述剂型为合剂时，药物中还包括矫味剂、防腐剂中的至少一种。
本发明的有益效果为：
本发明制备的改善微循环障碍的中药组合物，配方科学合理，工艺简单，口感好，成本低，安全有效，能够改善微循环障碍，减少血管内皮损伤，对心脑血管疾等疾病具有较好疗效。
慢性疾病患者通常需要持续地服用药物，本发明所述的改善微循环障碍的中药组合物用于制备治疗微循环障碍的药物，其主要成分为药食同源，副作用相对较少，适合长期服用，对于慢性疾病的管理尤为重要。
附图说明
图1为中药组合物对小鼠心脏微血管内皮损伤改善的结果；A、各组小鼠心脏血管ICAM-1的表达水平；B、各组小鼠心脏血管ZO-1的表达水平；其中，VWF为血管标记物；*代表各组与模型组相比的显著性差异，**为P<0.01，***为P<0.001。
图2为中药组合物对小鼠末梢血液循环的影响；A、各组小鼠双足血流成像代表图；B、各组小鼠右足血流灌注比统计图；*代表各组与模型组相比的显著性差异，**为P<0.01，***为P<0.001。
图3为中药组合物对同型半胱氨酸(Hcy)干预后造成的小鼠心脏微血管内皮损伤改善的结果；A、各组小鼠心脏血管VCAM-1的表达水平；B、各组小鼠心脏血管ZO-1的表达水平；*代表各组与模型组相比的显著性差异，*表示p<0.05，**为P<0.01，***为P<0.001，CD31为血管标记物。
具体实施方式
为更好的说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明。
6周龄SPF级C57BL/6小鼠、8周龄SPF级C57BL/6N小鼠，购自广东维通利华实验动物技术有限公司，动物生产合格证号：SCXK(粤)2022-0063。
本发明所用试剂、材料来源为：L-NAME(Sigma aldrich，N5751)；恩格列净(德国勃林格殷格翰，14202853284)；高脂饲料(华阜康，H10060)；叶酸(源叶，B21487)；同型半胱氨酸(Merck，H4628)。
实施例1：
本发明所述改善微循环障碍的中药组合物的一种实施例；本实施例所述中药组合物包括以下重量的组分：天麻9g、三七3g、莲子心9g、玉米须30g。
所述改善微循环障碍的中药组合物的制备方法包括以下步骤：
(1)按重量配比称取药材原料混合加入1L水浸泡0.5h，加热蒸煮0.5h，过滤，得到提取液A和滤渣；
(2)取滤渣加0.5L水蒸煮20min，过滤得到提取液B；
(3)将提取液A和提取液B混合，静置过夜，过滤，所得滤液通过减压蒸馏法浓缩至相对密度为1.2的清膏，即得到所述改善微循环障碍的中药组合物。
实施例2：
本发明所述改善微循环障碍的中药组合物的一种实施例；本实施例所述中药组合物包括以下重量的组分：天麻9g、三七1g、莲子心5g、玉米须20g。
所述改善微循环障碍的中药组合物的制备方法包括以下步骤：
(1)按重量配比称取药材原料混合加入1L水浸泡0.5h，加热蒸煮45min，过滤，得到提取液A和滤渣；
(2)取滤渣加0.75L水蒸煮25min，过滤得到提取液B；
(3)将提取液A和提取液B混合，静置过夜，过滤，所得滤液通过减压蒸馏法浓缩至相对密度为1.0的清膏，即得到所述改善微循环障碍的中药组合物。
实施例3：
本发明所述改善微循环障碍的中药组合物的一种实施例；本实施例所述中药组合物包括以下重量的组分：天麻10g、三七1g、莲子心1g、玉米须20g。
所述改善微循环障碍的中药组合物的制备方法包括以下步骤：
(1)按重量配比称取药材原料混合加入1L水浸泡0.5h，加热蒸煮30min，过滤，得到提取液A和滤渣；
(2)取滤渣加0.75L水蒸煮2h，过滤得到提取液B；
(3)将提取液A和提取液B混合，静置过夜，过滤，所得滤液通过减压蒸馏法浓缩至相对密度为1.0的清膏，即得到所述改善微循环障碍的中药组合物。
实施例4：
本发明所述改善微循环障碍的中药组合物的一种实施例；本实施例所述中药组合物包括以下重量的组分：天麻1g、三七5g、莲子心10g、玉米须5g。
所述改善微循环障碍的中药组合物的制备方法包括以下步骤：
(1)按重量配比称取药材原料混合加入1L水浸泡3h，加热蒸煮45min，过滤，得到提取液A和滤渣；
(2)取滤渣加0.75L水蒸煮25min，过滤得到提取液B；
(3)将提取液A和提取液B混合，静置过夜，过滤，所得滤液通过减压蒸馏法浓缩至相对密度为1.0的清膏，即得到所述改善微循环障碍的中药组合物。
对比例1
本发明所述改善微循环障碍的中药组合物的一种对比例；本对比例所述中药组合物包括以下重量的组分：天麻9g、三七3g、莲子心9g。
所述改善微循环障碍的中药组合物的制备方法同实施例1。
对比例2
本发明所述改善微循环障碍的中药组合物的一种对比例；本对比例所述中药组合物包括以下重量的组分：天麻11g、三七1g、莲子心11g、玉米须4g。
所述改善微循环障碍的中药组合物的制备方法同实施例1。
对比例3
本发明所述改善微循环障碍的中药组合物的一种对比例；本对比例所述中药组合物包括以下重量的组分：天麻5g、三七6g、莲子心11g、玉米须35g。
所述改善微循环障碍的中药组合物的制备方法同实施例1。
药效试验1：
实验样本：实施例1-4和对比例1-3制备的中药组合物。
实验动物分组：购买8周龄SPF级C57BL/6N小鼠为实验小鼠，随机分组，分为正常组、模型组、对比例1-3中药组合物组、实施例1中药组合物低剂量组、实施例1中药组合物中剂量组、实施例1中药组合物高剂量组、实施例2-4中药组合物组、阳性药物组(恩格列净)，每组6只。
正常组小鼠给予普通饲料和普通饮用水，模型组及药物组小鼠每日自由饮食高脂饲料并给予含有L-NAME的饮用水(0.5g/L)。实施例1中药组合物低剂量组从造模开始每日灌胃5.3g生药/kg，实施例1中药组合物中剂量组每日灌胃10.4g生药/kg，实施例1中药组合物高剂量组每日灌胃20.9g生药/kg，对比例1-3中药组合物组及实施例2-4中药组合物组从造模开始每日均按照20.9g生药/kg进行灌胃，阳性药物组每日灌胃恩格列净10mg/kg，连续灌胃10周。正常组和模型组给药同体积的生理盐水。
小鼠连续灌胃给药10周后，麻醉后处死，收集小鼠心脏组织进行冰冻切片，使用免疫荧光染色法对切片进行染色。首先取出片子，使用0.02％ PBST润洗3次，随后将片子置于丙酮中，于-20℃固定20min，随后取出片子，加0.02％ PBST静置3min，重复3次，用擦镜纸擦干组织周围多余液体，用免疫组化笔在组织周围画适当大小的圆圈，加入封闭液进行室温封闭1h。弃去封闭液，加入一抗(anti-VWF/anti-ICAM-1/anti-ZO-1)，4℃孵育过夜。弃一抗，加0.02％ PBST静置5min，重复三次。甩干PBST，加入荧光二抗，室温避光孵育2h。弃二抗，加0.02％PBST静置5min，重复三次，擦去组织周围多余水分及免疫组化笔痕迹，避光封片，置于免疫荧光显微镜下拍照。
紧密连接蛋白ZO-1是血管内皮功能的重要表征蛋白之一，当血管内皮发生损伤时，ZO-1的表达会下降。细胞间粘附分子-1(ICAM-1)是介导粘附反应的一个重要粘附分子，ICAM-1在静息的血管内皮细胞上呈低水平表达，当血管出现损伤时，ICAM-1的表达会显著上调。从图1的结果可知，当小鼠在接受高脂饲料和L-NAME的双重打击后，小鼠心脏血管会出现内皮损伤。与正常组相比，模型组小鼠心脏微血管内皮ICAM-1表达显著增加，ZO-1表达明显降低；实施例1-4的中药组合物以及阳性药物组处理后均能改善血管内皮损伤；而对比例1-3的中药组合物组对小鼠微血管损伤的改善作用较弱，表明中药组合物中各组分配比不在本发明的范围内会减弱中药组合物对微血管内皮损伤的改善作用。
药效试验2：
实验样本：实施例1-4和对比例1-3制备的中药组合物。
实验动物分组：购买6周龄SPF级C57BL/6小鼠为实验小鼠，随机分组，分为正常组、模型组、对比例1-3中药组合物组、实施例1中药组合物低剂量组、实施例1中药组合物中剂量组、实施例1中药组合物高剂量组、实施例2-4中药组合物组、阳性药物组(叶酸)，每组6只。正常组小鼠给予普通饮用水，模型组及药物组小鼠给予含有同型半胱氨酸的饮用水(1.8g/L)。实施例1中药组合物低剂量组从造模开始每日灌胃5.3g生药/kg，实施例1中药组合物中剂量组每日灌胃10.4g生药/kg，实施例1中药组合物高剂量组每日灌胃20.9g生药/kg，对比例1-3中药组合物组及实施例2-4中药组合物组从造模开始每日均按照20.9g生药/kg进行灌胃，阳性药物组每日灌胃叶酸71μg/kg，连续灌胃6周。正常组和模型组给药同体积的生理盐水。
给药6周后，对小鼠进行麻醉，使用激光散斑血流成像系统对小鼠双足进行血流量检测。小鼠麻醉后，将其置于合适体位，暴露待测部位。在可见光下调整摄像机焦距以获得清晰图像，然后根据不同部位调整各项参数。记录完毕后，用LSCI软件(深圳RWD)框选待测部位ROI区域，计算平均灌注量并生成实物图、灰度图、伪彩图及视频文件。
麻醉后处死小鼠，收集小鼠心脏组织进行冰冻切片，使用免疫荧光染色法对切片进行染色。首先取出片子，使用0.02％ PBST润洗3次，随后将片子置于丙酮中，于-20℃固定20min，随后取出片子，加0.02％ PBST静置3min，重复3次，用擦镜纸擦干组织周围多余液体，用免疫组化笔在组织周围画适当大小的圆圈，加入封闭液进行室温封闭1h。弃去封闭液，加入一抗(anti-CD31/anti-VCAM-1/anti-ZO-1)，4℃孵育过夜。弃一抗，加0.02％ PBST静置5min，重复三次。甩干PBST，加入荧光二抗，室温避光孵育2h。弃二抗，加0.02％ PBST静置5min，重复三次，擦去组织周围多余水分及免疫组化笔痕迹，避光封片，置于免疫荧光显微镜下拍照。
小鼠饮用含有同型半胱氨酸(Hcy)的饮用水，会造成高同型半胱氨酸血症。高同型半胱氨酸会促进微循环障碍。如图2所示，激光散斑血流成像的结果表明，正常组小鼠双足血流充沛(颜色偏橙红)；而模型组小鼠前肢血流量则明显减少(颜色偏绿蓝)。经过实施例1-4的中药组合物、阳性药物干预后，均能显著增加小鼠前肢的血流量，而对比例1-3组的中药组合物未有明显作用，表明中药组合物可改善高同型半胱氨酸血症引起的微循环障碍。
紧密连接蛋白ZO-1是血管内皮功能的重要表征蛋白之一，当血管内皮发生损伤时，ZO-1的表达会下降。血管细胞粘附分子1(VCAM-1)在静息的血管内皮细胞上呈低水平表达，当血管出现损伤时，ICAM-1的表达会显著上调。如图3所示，当小鼠在接受同型半胱氨酸(Hcy)干预后，小鼠心脏微血管会出现内皮损伤，与正常组相比，模型组小鼠心脏微血管内皮VCAM-1表达显著增加，ZO-1表达明显降低，经实施例1-4的中药组合物、阳性药物干预后，均能明显改善血管内皮损伤；而对比例1-3中药组合物组对小鼠微血管损伤的改善作用较弱，表明中药组合物中各组分配比不在本发明的范围内会减弱中药组合物对微血管内皮损伤的改善作用。
最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
Claims (10)
1.一种改善微循环障碍的中药组合物，其特征在于，包括以下重量份的组分：天麻1-10份、三七1-5份、莲子心1-10份、玉米须5-30份。
2.如权利要求1所述的改善微循环障碍的中药组合物，其特征在于，包括以下重量份的组分：天麻9份、三七3份、莲子心9份、玉米须30份。
3.一种如权利要求1-2任一项所述的改善微循环障碍的中药组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)按重量份配比称取药材原料混合加入水浸泡，加热蒸煮，过滤，得到提取液A和滤渣；
(2)取滤渣加水蒸煮，过滤得到提取液B；
(3)将提取液A和提取液B混合，静置，过滤，浓缩，得到所述改善微循环障碍的中药组合物。
4.如权利要求3所述的改善微循环障碍的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中，加水量为药材原料总重量的8-30倍；所述浸泡时间为0.5-3h；所述蒸煮时间为30-45min。
5.如权利要求3所述的改善微循环障碍的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中，蒸煮时间为20min-2h。
6.如权利要求3所述的改善微循环障碍的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中，浓缩的方式为减压蒸馏法。
7.如权利要求3所述的改善微循环障碍的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中，浓缩至清膏状，相对密度为1.0-1.2。
8.如权利要求1-2任一项所述的改善微循环障碍的中药组合物在制备治疗微循环障碍的药物中的应用。
9.一种治疗微循环障碍的药物，其特征在于，包括权利要求1-2任一项所述的改善微循环障碍的中药组合物。
10.如权利要求9所述的治疗微循环障碍的药物，其特征在于，所述药物的剂型包括片剂、胶囊剂、糖浆剂、合剂、口服液。
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