CN118103050A - 抗steap2嵌合抗原受体及其用途 - Google Patents
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Abstract
本披露提供了包含特异性结合人STEAP2的抗原结合结构域的嵌合抗原受体和抗体、编码其的核苷酸、包含其的细胞、以及在癌症(例如前列腺癌)的治疗中使用其的方法。
Description
相关申请的交叉引用
本申请要求于2021年10月15日提交的美国临时申请号63/262,602的优先权，其通过引用以其全文并入本文。
参考通过EFS WEB电子提交的序列表
本申请中提交的电子提交的序列表(CARTSTEAP2-100-WO-PCT.xml；大小：144,481字节；和创建日期：2022年10月13日)的内容通过引用以其全文并入本文。
背景技术
免疫疗法已成为对抗多种类型疾病(包括癌症)的有力手段。免疫疗法利用患者自身免疫系统的力量来对抗多种类型的肿瘤。
嵌合抗原受体(CAR)T细胞疗法是特定形式的基于细胞的免疫疗法，该免疫疗法使用工程化的T细胞对抗癌症。在CAR-T细胞疗法中，将T细胞从患者血液中收获，离体工程化以表达含有抗原结合结构域和T细胞激活结构域的CAR，扩增至更大的群体并且施用至患者。CAR-T细胞用作结合至癌细胞并引起这些癌细胞的破坏的活的药物。当成功时，CAR-T细胞治疗的作用往往会持续很长时间，如通过在临床缓解后很长时间在患者中检测CAR-T细胞的持久性和扩增所证明的。
尽管几种有前景的CAR疗法已获批准使用，但仍需要开发针对新靶标的CAR以扩展可使用此疗法进行治疗的适应症数量。本文描述了针对人STEAP2的新型CAR以及使用其治疗癌症(例如前列腺癌)的方法。
发明内容
本披露的一些方面涉及包含编码嵌合抗原受体(CAR)的核苷酸序列的多核苷酸，其中CAR包含：(i)结合人前列腺六跨膜表皮抗原2(STEAP2)上的表位的抗原结合结构域；(ii)跨膜结构域；和(iii)细胞内结构域。在一些方面，抗原结合结构域结合人STEAP2的细胞外环上的表位。
在一些方面，抗原结合结构域包含Fab、Fab'、F(ab')2、Fd、Fv、单链可变片段(scFv)、单链抗体、VHH、vNAR、纳米抗体(单结构域抗体)或其任何组合。在一些方面，抗原结合结构域包含scFv。
在一些方面，抗原结合结构域包含可变重链区(VH)和可变轻链区(VL)，其中VH包含VH互补决定区(CDR)1、VH-CDR2、VH-CDR3；且其中VL包含VL-CDR1、VL-CDR2和VL-CDR3。
在一些方面，抗原结合结构域包含VH-CDR3，其包含选自SEQ ID NO:6、16、26、36、46和96的氨基酸序列。在一些方面，抗原结合结构域包含VH-CDR2，其包含选自SEQ ID NO:5、15、25、35、45和95的氨基酸序列。在一些方面，抗原结合结构域包含VH-CDR1，其包含选自SEQ ID NO:4、14、24、34、44和94的氨基酸序列。在一些方面，抗原结合结构域包含VL-CDR3，其包含选自SEQ ID NO:3、13、23、33、43和93的氨基酸序列。在一些方面，抗原结合结构域包含VL-CDR2，其包含选自SEQ ID NO:2、12、22、32、42和92的氨基酸序列。在一些方面，抗原结合结构域包含VL-CDR1，其包含选自SEQ ID NO:1、11、21、31、41和91的氨基酸序列。
在一些方面，抗原结合结构域包含：(a)包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3；(b)包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3；(c)包含SEQ ID NO:21中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:22中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:23中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:24中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:25中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQID NO:26中所示氨基酸序列的VH-CDR3；(d)包含SEQ ID NO:31中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:32中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:33中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:34中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:35中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:36中所示氨基酸序列的VH-CDR3；(e)包含SEQ IDNO:41中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:42中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:43中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:44中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:45中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:46中所示氨基酸序列的VH-CDR3；或(f)包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ IDNO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:95中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3。
在一些方面，抗原结合结构域包含VH，VH包含与选自SEQ ID NO:7、17、27、37、47和97的氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，抗原结合结构域包含VH，VH包含选自SEQ ID NO:7、17、27、37、47和97的氨基酸序列。
在一些方面，抗原结合结构域包含VL，所述VL包含与选自SEQ ID NO:8、18、28、38、48和98的氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，抗原结合结构域包含VL，所述VL包含选自SEQ ID NO:8、18、28、38、48和98的氨基酸序列。
在一些方面，抗原结合结构域包含：(a)VH和VL，VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，所述VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(b)VH和VL，VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，所述VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(c)VH和VL，VH包含与SEQ ID NO:27中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，所述VL包含与SEQ ID NO:28中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(d)VH和VL，VH包含与SEQ ID NO:37中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，所述VL包含与SEQ ID NO:38中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(e)VH和VL，VH包含与SEQ ID NO:47中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，所述VL包含与SEQ ID NO:48中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；或(f)VH和VL，VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，所述VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
在一些方面，抗原结合结构域包含VH，VH包含与SEQ ID NO:57中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
在一些方面，抗原结合结构域包含VL，所述VL包含与SEQ ID NO:58中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
在一些方面，抗原结合结构域包含VH，VH包含与SEQ ID NO:67中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
在一些方面，抗原结合结构域包含VL，所述VL包含与SEQ ID NO:68中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
在一些方面，抗原结合结构域包含VH，VH包含与SEQ ID NO:77中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
在一些方面，抗原结合结构域包含VL，所述VL包含与SEQ ID NO:78中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
在一些方面，抗原结合结构域包含VH，VH包含与SEQ ID NO:87中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
在一些方面，抗原结合结构域包含VL，所述VL包含与SEQ ID NO:88中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
在一些方面，抗原结合结构域包含VH，VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
在一些方面，抗原结合结构域包含VL，所述VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
在一些方面，抗原结合结构域包含：(a)包含SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列的VH，和包含SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列的VL；(b)包含SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列的VH，和包含SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列的VL；(c)包含SEQ ID NO:27中所示氨基酸序列的VH，和包含SEQ ID NO:28中所示氨基酸序列的VL；(d)包含SEQ ID NO:37中所示氨基酸序列的VH，和包含SEQ ID NO:38中所示氨基酸序列的VL；(e)包含SEQ ID NO:47中所示氨基酸序列的VH，和包含SEQ ID NO:48中所示氨基酸序列的VL；(f)包含SEQ ID NO:57中所示氨基酸序列的VH，和包含SEQ ID NO:58中所示氨基酸序列的VL；(g)包含SEQ ID NO:67中所示氨基酸序列的VH，和包含SEQ ID NO:68中所示氨基酸序列的VL；(h)包含SEQ ID NO:77中所示氨基酸序列的VH，和包含SEQ ID NO:78中所示氨基酸序列的VL；或(i)包含SEQ ID NO:87中所示氨基酸序列的VH，和包含SEQ ID NO:88中所示氨基酸序列的VL；或(j)包含SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列的VH，和包含SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列的VL。
在一些方面，抗原结合结构域包含与SEQ ID NO:9中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，抗原结合结构域包含与SEQ ID NO:99中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
在一些方面，细胞内结构域包含共刺激结构域或其部分。在一些方面，细胞内结构域包含共刺激结构域，所述共刺激结构域选自由以下组成的组：CD3z的细胞内结构域、CD28共刺激结构域、CD27共刺激结构域、4-1BB共刺激结构域、ICOS共刺激结构域、OX-40共刺激结构域、GITR共刺激结构域、CD2共刺激结构域、IL-2Rβ共刺激结构域、MyD88/CD40a CD28共刺激结构域及其任何组合。在一些方面，细胞内结构域包含4-1BB共刺激结构域。在一些方面，细胞内结构域包含CD3z的细胞内结构域和CD28共刺激结构域。在一些方面，细胞内结构域包含CD3z的细胞内结构域和4-1BB共刺激结构域。在一些方面，CD3z的细胞内结构域包含SEQ ID NO:131，并且4-1BB共刺激结构域包含SEQ ID NO:130。在一些方面，包含CD3z的细胞内结构域和4-1BB共刺激结构域的细胞内结构域包含SEQ ID NO:130。在一些方面，细胞内结构域包含CD3z的细胞内结构域、CD28共刺激结构域和4-1BB共刺激结构域。
在一些方面，CAR包含与SEQ ID NO:10中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
在一些方面，跨膜结构域包含选自CD4、CD8α或CD28的跨膜结构域的跨膜结构域。在一些方面，跨膜结构域包含CD28的跨膜结构域。在一些方面，CD28的跨膜结构域包含SEQID NO:129。
在一些方面，CAR还包含铰链区/间隔区结构域。在一些方面，铰链区/间隔区结构域包含免疫球蛋白铰链区/间隔区。在一些方面，铰链区/间隔区结构域包含IgG铰链区结构域。在一些方面，铰链区/间隔区结构域包含IgG1铰链区结构域、IgG2铰链区结构域、IgG3铰链区结构域或IgG4铰链区结构域。在一些方面，铰链区/间隔区结构域包含IgG4铰链区结构域。在一些方面，IgG4铰链区结构域包含SEQ ID NO:128。
在一些方面，多核苷酸进一步编码装甲分子，其中当在细胞表面上表达时，装甲分子对抗肿瘤微环境中细胞的免疫抑制。在一些方面，装甲分子包含显性负性2型TGF-β受体(TGFβRIIDN)。在一些方面，装甲分子包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，装甲分子包含SEQID NO:105中所示的氨基酸序列。
在一些方面，编码CAR的核苷酸序列与SEQ ID NO:101或103中所示核苷酸序列具有至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性。在一些方面，编码CAR的核苷酸序列包含SEQ ID NO:101或103中所示核苷酸序列。
在一些方面，多核苷酸还包含编码装甲分子的第二核苷酸序列，其中所述第二核苷酸序列与SEQ ID NO:104中所示核苷酸序列具有至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性。在一些方面，第二核苷酸包含SEQ ID NO:104中所示核苷酸序列。在一些方面，编码CAR的核苷酸序列包含SEQ ID NO:101中所示核苷酸序列，以及第二核苷酸序列包含SEQ ID NO:104中所示核苷酸序列。在一些方面，编码CAR的核苷酸序列包含SEQ ID NO:103中所示核苷酸序列，以及第二核苷酸序列包含SEQ ID NO:104中所示核苷酸序列。
在一些方面，编码CAR的核苷酸序列和第二核苷酸序列通过第三核苷酸序列连接，其中该第三核苷酸序列编码可切割的肽接头。在一些方面，可切割的肽接头是自切割的肽接头。在一些方面，可切割的肽接头包含T2A肽。在一些方面，可切割的肽接头包含SEQ IDNO:126。
在一些方面，多核苷酸包含与SEQ ID NO:107中所示核苷酸序列具有至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含SEQ ID NO:107中所示核苷酸序列。
本披露的一些方面涉及包含本文披露的多核苷酸的载体或载体组。在一些方面，载体是病毒载体。
本披露的一些方面涉及包含本文披露的多核苷酸或本文披露的载体或载体组的细胞。在一些方面，细胞是免疫细胞。在一些方面，细胞选自由以下组成的组：T细胞、天然杀伤(NK)细胞、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)、调节性T细胞、肿瘤浸润淋巴细胞及其任何组合。
本披露的一些方面涉及细胞，其包含(i)编码结合人STEAP2的嵌合抗原受体(CAR)的多核苷酸和(ii)编码装甲分子的多核苷酸。在一些方面，细胞是免疫细胞。在一些方面，细胞选自由以下组成的组：T细胞、天然杀伤(NK)细胞、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)、调节性T细胞、肿瘤浸润淋巴细胞及其任何组合。在一些方面，细胞是人细胞。
在一些方面，CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含VH和VL，其中VH包含VH-CDR1、VH-CDR2、VH-CDR3，并且其中所述VL包含VL-CDR1、VL-CDR2和VL-CDR3；并且其中(a)VL-CDR1包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列，VL-CDR2包含SEQ ID NO:2中所示的氨基酸序列，VL-CDR3包含SEQ ID NO:3中所示的氨基酸序列，VH-CDR1包含SEQ ID NO:4中所示的氨基酸序列，VH-CDR2包含SEQ ID NO:5中所示的氨基酸序列，以及VH-CDR3包含SEQID NO:6中所示的氨基酸序列；(b)VL-CDR1包含SEQ ID NO:11中所示的氨基酸序列，VL-CDR2包含SEQ ID NO:12中所示的氨基酸序列，VL-CDR3包含SEQ ID NO:13中所示的氨基酸序列，VH-CDR1包含SEQ ID NO:14中所示的氨基酸序列，VH-CDR2包含SEQ ID NO:15中所示的氨基酸序列，以及VH-CDR3包含SEQ ID NO:16中所示的氨基酸序列；(c)VL-CDR1包含SEQID NO:21中所示的氨基酸序列，VL-CDR2包含SEQ ID NO:22中所示的氨基酸序列，VL-CDR3包含SEQ ID NO:23中所示的氨基酸序列，VH-CDR1包含SEQ ID NO:24中所示的氨基酸序列，VH-CDR2包含SEQ ID NO:25中所示的氨基酸序列，以及VH-CDR3包含SEQ ID NO:26中所示的氨基酸序列；(d)VL-CDR1包含SEQ ID NO:31中所示的氨基酸序列，VL-CDR2包含SEQ ID NO:32中所示的氨基酸序列，VL-CDR3包含SEQ ID NO:33中所示的氨基酸序列，VH-CDR1包含SEQID NO:34中所示的氨基酸序列，VH-CDR2包含SEQ ID NO:35中所示的氨基酸序列，以及VH-CDR3包含SEQ ID NO:36中所示的氨基酸序列；(e)VL-CDR1包含SEQ ID NO:41中所示的氨基酸序列，VL-CDR2包含SEQ ID NO:42中所示的氨基酸序列，VL-CDR3包含SEQ ID NO:43中所示的氨基酸序列，VH-CDR1包含SEQ ID NO:44中所示的氨基酸序列，VH-CDR2包含SEQ IDNO:45中所示的氨基酸序列，以及VH-CDR3包含SEQ ID NO:46中所示的氨基酸序列；或(f)VL-CDR1包含SEQ ID NO:91中所示的氨基酸序列，VL-CDR2包含SEQ ID NO:92中所示的氨基酸序列，VL-CDR3包含SEQ ID NO:93中所示的氨基酸序列，VH-CDR1包含SEQ ID NO:94中所示的氨基酸序列，VH-CDR2包含SEQ ID NO:95中所示的氨基酸序列，以及VH-CDR3包含SEQID NO:96中所示的氨基酸序列。
在一些方面，(a)VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(b)VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(c)VH包含与SEQ ID NO:27中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且VL包含与SEQ ID NO:28中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(d)VH包含与SEQ ID NO:37中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且VL包含与SEQ ID NO:38中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(e)VH包含与SEQID NO:47中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且VL包含与SEQ ID NO:48中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；或(f)VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且VL包含与SEQID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
在一些方面，VH包含与SEQ ID NO:57中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且VL包含与SEQ ID NO:58中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
在一些方面，VH包含与SEQ ID NO:67中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且VL包含与SEQ ID NO:68中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
在一些方面，VH包含与SEQ ID NO:77中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且VL包含与SEQ ID NO:78中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
在一些方面，VH包含与SEQ ID NO:87中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且VL包含与SEQ ID NO:88中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
在一些方面，VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
在一些方面，提供细胞，其包含：(a)VH包含SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列，并且VL包含SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列；(b)VH包含SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列，并且VL包含SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列；(c)VH包含SEQ ID NO:27中所示氨基酸序列，并且VL包含SEQ ID NO:28中所示氨基酸序列；(d)VH包含SEQ ID NO:37中所示氨基酸序列，并且VL包含SEQ ID NO:38中所示氨基酸序列；(e)VH包含SEQ ID NO:47中所示氨基酸序列，并且VL包含SEQ ID NO:48中所示氨基酸序列；(f)VH包含SEQ ID NO:57中所示氨基酸序列，并且VL包含SEQ ID NO:58中所示氨基酸序列；(g)VH包含SEQ ID NO:67中所示氨基酸序列，并且VL包含SEQ ID NO:68中所示氨基酸序列；(h)VH包含SEQ ID NO:77中所示氨基酸序列，并且VL包含SEQ ID NO:78中所示氨基酸序列；(i)VH包含SEQ ID NO:87中所示氨基酸序列，并且VL包含SEQ ID NO:88中所示氨基酸序列；或(j)VH包含SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列，并且VL包含SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列。
在一些方面，装甲分子包含显性负性2型TGF-β受体(TGFβRIIDN)。在一些方面，装甲分子包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，装甲分子包含SEQ ID NO:105中所示的氨基酸序列。
在一些方面，编码CAR的多核苷酸包含与SEQ ID NO:101或103中所示核苷酸序列具有至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的核苷酸序列。在一些方面，编码CAR的多核苷酸包含SEQ ID NO:101或103中所示核苷酸序列。
在一些方面，编码装甲分子的多核苷酸包含与SEQ ID NO:104中所示核苷酸序列具有至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的核苷酸序列。在一些方面，编码装甲分子的多核苷酸包含SEQ ID NO:104中所示核苷酸序列。
在一些方面，编码CAR的多核苷酸包含SEQ ID NO:101中所示的核苷酸序列，并且编码装甲分子的多核苷酸包含SEQ ID NO:104中所示的核苷酸序列。
在一些方面，编码CAR的多核苷酸包含SEQ ID NO:103中所示的核苷酸序列，并且编码装甲分子的多核苷酸包含SEQ ID NO:104中所示的核苷酸序列。
在一些方面，编码CAR的多核苷酸和编码装甲分子的多核苷酸在单个启动子的控制下可操作地连接。在一些方面，编码CAR的多核苷酸和编码装甲分子的多核苷酸通过IRES可操作地连接。在一些方面，编码CAR的多核苷酸和编码装甲分子的多核苷酸通过编码可切割的肽接头的核苷酸序列连接。在一些方面，可切割的肽接头是自切割的肽接头。在一些方面，可切割的肽接头包含T2A肽。在一些方面，可切割的肽接头包含SEQ ID NO:126。
本披露的一些方面涉及特异性结合人STEAP2的抗体或其抗原结合部分，其包含可变重链区(VH)和可变轻链区(VL)，其中VH包含VH互补决定区(CDR)1、VH-CDR2、VH-CDR3；并且其中VL包含VL-CDR1、VL-CDR2和VL-CDR3，其中(i)VL-CDR1包含选自SEQ ID NO:1、11、21、31、41和91的氨基酸序列；(ii)VL-CDR2包含选自SEQ ID NO:2、12、22、32、42和92的氨基酸序列；(iii)VL-CDR3包含选自SEQ ID NO:3、13、23、33、43和93的氨基酸序列；(iv)VH-CDR1包含选自SEQ ID NO:4、14、24、34、44和94的氨基酸序列；(v)VH-CDR2包含选自SEQ ID NO:5、15、25、35、45和95的氨基酸序列；和(vi)VH-CDR3包含选自SEQ ID NO:6、16、26、36、46和96的氨基酸序列。
在一些方面，(a)VL-CDR1包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列，VL-CDR2包含SEQID NO:2中所示的氨基酸序列，VL-CDR3包含SEQ ID NO:3中所示的氨基酸序列，VH-CDR1包含SEQ ID NO:4中所示的氨基酸序列，VH-CDR2包含SEQ ID NO:5中所示的氨基酸序列，以及VH-CDR3包含SEQ ID NO:6中所示的氨基酸序列；(b)VL-CDR1包含SEQ ID NO:11中所示的氨基酸序列，VL-CDR2包含SEQ ID NO:12中所示的氨基酸序列，VL-CDR3包含SEQ ID NO:13中所示的氨基酸序列，VH-CDR1包含SEQ ID NO:14中所示的氨基酸序列，VH-CDR2包含SEQ IDNO:15中所示的氨基酸序列，以及VH-CDR3包含SEQ ID NO:16中所示的氨基酸序列；(c)VL-CDR1包含SEQ ID NO:21中所示的氨基酸序列，VL-CDR2包含SEQ ID NO:22中所示的氨基酸序列，VL-CDR3包含SEQ ID NO:23中所示的氨基酸序列，VH-CDR1包含SEQ ID NO:24中所示的氨基酸序列，VH-CDR2包含SEQ ID NO:25中所示的氨基酸序列，以及VH-CDR3包含SEQ IDNO:26中所示的氨基酸序列；(d)VL-CDR1包含SEQ IDNO:31中所示的氨基酸序列，VL-CDR2包含SEQ ID NO:32中所示的氨基酸序列，VL-CDR3包含SEQ ID NO:33中所示的氨基酸序列，VH-CDR1包含SEQ ID NO:34中所示的氨基酸序列，VH-CDR2包含SEQ ID NO:35中所示的氨基酸序列，以及VH-CDR3包含SEQ ID NO:36中所示的氨基酸序列；(e)VL-CDR1包含SEQ ID NO:41中所示的氨基酸序列，VL-CDR2包含SEQ ID NO:42中所示的氨基酸序列，VL-CDR3包含SEQID NO:43中所示的氨基酸序列，VH-CDR1包含SEQ ID NO:44中所示的氨基酸序列，VH-CDR2包含SEQ ID NO:45中所示的氨基酸序列，以及VH-CDR3包含SEQ ID NO:46中所示的氨基酸序列；或(f)VL-CDR1包含SEQ ID NO:91中所示的氨基酸序列，VL-CDR2包含SEQ ID NO:92中所示的氨基酸序列，VL-CDR3包含SEQ ID NO:93中所示的氨基酸序列，VH-CDR1包含SEQ IDNO:94中所示的氨基酸序列，VH-CDR2包含SEQ ID NO:95中所示的氨基酸序列，以及VH-CDR3包含SEQ ID NO:96中所示的氨基酸序列。
在一些方面，VH包含与选自SEQ ID NO:7、17、27、37、47、57、67、77、87和97的氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，VH包含选自SEQ ID NO:7、17、27、37、47、57、67、77、87和97的氨基酸序列。
在一些方面，VL包含与选自SEQ ID NO:8、18、28、38、48、58、68、78、88和98的氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，VL包含选自SEQ ID NO:8、18、28、38、48、58、68、78、88和98的氨基酸序列。
在一些方面，(a)VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(b)VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(c)VH包含与SEQ ID NO:27中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且VL包含与SEQ ID NO:28中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(d)VH包含与SEQ ID NO:37中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且VL包含与SEQ ID NO:38中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(e)VH包含与SEQID NO:47中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且VL包含与SEQ ID NO:48中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(f)VH包含与SEQ ID NO:57中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且VL包含与SEQ IDNO:58中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(g)VH包含与SEQ ID NO:67中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且VL包含与SEQ ID NO:68中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(h)VH包含与SEQ ID NO:77中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且VL包含与SEQ ID NO:78中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(i)VH包含与SEQ ID NO:87中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且VL包含与SEQ ID NO:88中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；或(j)VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
在一些方面，(a)VH包含SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列，并且VL包含SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列；(b)VH包含SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列，并且VL包含SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列；(c)VH包含SEQ ID NO:27中所示氨基酸序列，并且VL包含SEQ ID NO:28中所示氨基酸序列；(d)VH包含SEQ ID NO:37中所示氨基酸序列，并且VL包含SEQ ID NO:38中所示氨基酸序列；(e)VH包含SEQ ID NO:47中所示氨基酸序列，并且VL包含SEQ ID NO:48中所示氨基酸序列；(f)VH包含SEQ ID NO:57中所示氨基酸序列，并且VL包含SEQ ID NO:58中所示氨基酸序列；(g)VH包含SEQ ID NO:67中所示氨基酸序列，并且VL包含SEQ ID NO:68中所示氨基酸序列；(h)VH包含SEQ ID NO:77中所示氨基酸序列，并且VL包含SEQ ID NO:78中所示氨基酸序列；(i)VH包含SEQ ID NO:87中所示氨基酸序列，并且VL包含SEQ ID NO:88中所示氨基酸序列；或(j)VH包含SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列，并且VL包含SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列。
本披露的一些方面涉及药物组合物，其包含本文披露的多核苷酸，本文披露的载体，本文披露的细胞，或本文披露的抗体或抗原结合部分，以及药学上可接受的赋形剂。
本披露的一些方面涉及在有需要的受试者中治疗疾病或病症的方法，其包括向受试者施用本文披露的多核苷酸，本文披露的载体，本文披露的细胞，本文披露的抗体或抗原结合部分，或本文披露的药物组合物。在一些方面，所述疾病或病症包括癌症。
本披露的一些方面涉及在有需要的受试者中治疗癌症的方法，其包括向受试者施用本文披露的多核苷酸，本文披露的载体，本文披露的细胞，本文披露的抗体或抗原结合部分，或本文披露的药物组合物。在一些方面，癌症包括前列腺癌。在一些方面，前列腺癌是转移性的、反复发作性的或复发性的。
本披露的一些方面涉及本文披露的多核苷酸，本文披露的载体，本文披露的细胞，本文披露的抗体或抗原结合部分，或本文披露的药物组合物在治疗有需要的受试者中的疾病或病症中的用途。在一些方面，所述疾病或病症包括癌症。
本披露的一些方面涉及本文披露的多核苷酸，本文披露的载体，本文披露的细胞，本文披露的抗体或抗原结合部分，或本文披露的药物组合物在治疗有需要的受试者中的癌症中的用途。在一些方面，癌症包括前列腺癌。在一些方面，前列腺癌是转移性的、反复发作性的或复发性的。
附图说明
图1A-1C显示了根据基因组人蛋白图谱数据库(图1A)、cDNA阵列基因表达图谱(图1B)和根据免疫组织化学(IHC)用定制多克隆抗体的细胞表面蛋白表达(图1C)，STEAP2在多种肿瘤类型中的表达和定位。对含有原发性前列腺癌、去势抗性前列腺癌(CRPC)和前列腺淋巴结转移以及前列腺癌骨转移的脱钙全断面切片的组织微阵列进行IHC用于STEAP2膜表达(图1D)，STEAP2在CRPC(图1E)和骨转移(图1F)中的代表性图像。正常人组织微阵列中STEAP2 IHC和原位杂交(ISH)的总结和评分标准(图1G)。正常前列腺组织中STEAP2 IHC染色的实例(图1H)。
图2A-2F。图2A显示测试40A3 scFv-Fc与人STEAP家族成员(STEAP 1、2、3和4)和鼠STEAP2的结合。由Graph Pad Prism中S形剂量反应的EC50值计算40A3 scFv-Fc亲和力，并转化为摩尔浓度。图2B-2F显示了针对结合抗原阳性细胞系：Ad293 STEAP3-2(图2F)、Ad293STEAP3-2鼠(图2E)和LNCAP(图2C)细胞和抗原阴性细胞系：Ad293(图2D)和LNCAP STEAP2CRISPR(图2B)而筛选的多种scFv-Fc和全长IgG1抗体的结果。LNCAP细胞系“LNCAP STEAP2CRISPR”中的STEAP2表达已经通过CRISPR敲除消除，并且STEAP3-2细胞是嵌合细胞系，其STEAP2细胞外环被移植到STEAP3蛋白的主链上，以利用STEAP3的细胞表面定位，但触发针对STEAP2的免疫应答。图2B-2F显示40A3 scFv-Fc、40A3 IgG1和14N scFv(STEAP2的已知结合剂)作为阳性对照以及非结合IgG1作为阴性对照的结合曲线。使用Alexa fluor 647缀合的抗人Fc二级抗体通过流式细胞术检测scFv-Fc或IgG1与细胞的结合。
图3A-3E。图3A显示了包括装甲策略的CAR设计。图3B-3D显示在第10天未转导的(图3B)、40A3Bz(图3C)和40A3Bz dnTGFβRII(图3D)转导的细胞群体。图3E显示了pSMAD 2/3和总SMAD 2/3的蛋白质印迹，作为40A3Bz和40A3Bz dnTGFβRIICAR-T细胞中天然TGFβRII下游的急性信号传导的指标。证实了与单独的40A3Bz CAR或未转导的细胞相比，dnTGFβRII(40A3Bz)CAR-T细胞中TGFβ介导的信号传导的显著消除(图3E)。
图4A-4N。图4A显示了转化后的稳健CAR-T扩展。图4B-4E显示CD8+CAR-T细胞维持初始/干细胞样表型。图4F-4K显示了来自相同供体细胞的40A3Bz STEAP2 CAR-T细胞和40A3Bz dnTGFβRII STEAP2 CAR-T细胞，对表型表面标记物包括CD45RO/CD62L/CD70/CD27进行染色，并使用流式细胞术和FlowJo进行分析。关键词＝初始(CD45RO-CD62L+)、中央记忆(CD45RO+CD62L+)、效应记忆(CD45RO+CD62L-)和效应(CD45RO-CD62L-)。CAR＝嵌合抗原受体；dnTGFβRII＝显性负性转化生长因子β受体II；FACS＝荧光激活细胞分选；STEAP2＝前列腺六跨膜表皮抗原2；TGFβ＝转化生长因子β。图4L-4N显示40A3Bz CAR-T和40A3Bz dnTGFβRIICAR-T细胞表现出混合CD4:CD8比率。图4O显示在TGFβ存在下，dnTGFβRII装甲实现CAR-T活性，如通过C4-2肿瘤细胞杀伤所证明的。图4P显示使用Bang’s beads quantum simplycellular试剂盒和STEAP2细胞表面IHC的评估用抗STEAP2抗体-alexa fluor 647缀合物通过FACS分析抗体结合能力的一系列肿瘤细胞系(图4P，左图)。将肿瘤细胞系与40A3BzdnTGFβRIICAR-T细胞以E:T比率1:1共培养，并在24小时分析培养基中从CAR T细胞释放的IFNγ水平。40A3Bz dnTGFβRIICAR-T在与C4-2、LNCAP、VCAP、22RV1肿瘤细胞系的共培养物中诱导显著的IFNγ释放(图4P，右图)。
图5A-5K。图5A-5B和5D-5E显示LNCAP STEAP2 CRISPR(图5D-5E)和LNCAP(图5A-5B)细胞群体中的STEAP2表达，如通过IHC(图5A和5D)和ISH(图5B和5E)测定的。将40A3BzSTEAP2CAR-T和40A3Bz dnTGFβRII STEAP2 CAR-T细胞与抗原阳性细胞系(“Ad293 STEAP3-2”和“LNCAP”)和抗原阴性细胞系(“Ad293”细胞和“LNCAP STEAP2 CRISPR”细胞)共培养。在人T细胞培养基(补充有5％人AB热灭活血清和300U/mL IL-2的AIM-V培养基)中扩增10天的显性负性40A3Bz TGFβRII STEAP2 CAR-T细胞显示出以与未装甲STEAP2 CAR-T细胞相似的方式杀死抗原阳性靶细胞，如LNCAP(图5C)和Ad293 STEAP3-2(图5G)所示，与LNCAPSTEAP2CRISPR(图5F)和Ad293细胞(图5H)相反。使用xCELLigence阻抗测定在100小时内测量靶细胞的杀伤。图5I-5K显示加入CAR-T细胞后24小时进行的相同共培养实验的上清液和使用MSD ECL测定测量的细胞因子(IFNγ、TNFα和IL-2)：TNFα(图5I)、IFNγ(图5J)、IL-2(图5K)。
图6显示，测试的STEAP2 CAR-T构建体在共培养24小时后通过IFNγ分泌评估显示最小的中靶、肿瘤外活性。
图7A-7R。图7A-7C显示了体内结果，其中通过尾静脉注射以3个剂量水平(3/7/21×106个细胞)向移植了前列腺癌细胞系的NSG小鼠施用未装甲的STEAP2 CAR-T细胞。以1:1Cultrex BME在侧腹植入肿瘤。在植入具有STEAP2高表达细胞系C4-2的小鼠后35天测量肿瘤体积(图7A)。当肿瘤达到175mm3时，将小鼠随机分组，并施用T细胞。测量小鼠的体重(图7B)，直到C4-2细胞系移植后第28天。图7C显示了在C4-2模型中通过IHC测定的STEAP2表达。图7D-7F显示植入后53天在携带具有中间STEAP2表达的细胞系22RV1的小鼠中测量的肿瘤体积(图7D)。当肿瘤达到175mm3时，将小鼠随机分组，并施用T细胞。测量小鼠的体重(图7E)，直到22RV1细胞系移植后第50天。图7F显示在22RV1异种移植模型中通过IHC测定的STEAP2表达。图7G显示22RV1荷瘤小鼠在CAR-T细胞给药后第4、7、14和21天放血的结果。使用电化学发光(ECL)测定运行血清样品以评估体内随时间的细胞因子产生。图7H显示40A3Bz鼠生物分布的Genevestigator分析。图7I-7K显示通过ISH评估的灌注后10天的STEAP2表达，具有剂量依赖性局灶性浸润并且没有损伤迹象。图7L-7M没有显示CD3+CAR-T浸润到心脏底部神经的证据(在输注收获后第10天21e6个细胞剂量)。图7N-7O没有显示CD3+CAR-T浸润到外周皮下神经的证据(在输注收获后第10天21e6个细胞剂量)。图7P-7R显示以8e6的浓度施用40A3 CAR-T细胞后并在输注收获后第14天评估后的皮下肿瘤样品分析。看到了两个小的完整的和未浸润的外周神经被截留在致密CAR-T浸润内(图7P，箭头)。还存在具有最小至轻度STEAP2染色的几个小血管(图7R，箭头)。尽管CD3+CAR-T浸润非常密集，但神经是完整的并且似乎不受影响(图7Q)。
图8A-8F显示，STEAP2装甲的CAR-T细胞表现出优异的持久性和分化特征，包括细胞溶解和IFN-γ产生。图8A显示五轮连续杀伤的示意图。图8B显示用40A3Bz dnTGFβRII装甲的、40A3Bz未装甲的CAR-T细胞和对照T细胞治疗后T细胞的表型。图8C显示40A3Bz dnTGFβRII装甲的、40A3Bz未装甲的CAR-T细胞和对照T细胞的细胞溶解活性。图8D显示40A3BzdnTGFβRII装甲的、40A3Bz未装甲的CAR-T细胞和对照T细胞的细胞因子释放。图8E显示肿瘤体积，图8F显示用40A3Bz dnTGFβRII装甲的、40A3Bz未装甲的CAR-T细胞和对照T细胞治疗的小鼠的体重。图8G显示每只小鼠用2.5e^6个40A3Bz dnTGFβRII装甲的、40A3B未装甲的CAR-T细胞和对照T细胞治疗的小鼠中的细胞因子释放。图8H显示了植入表达C4-2荧光素酶的肿瘤细胞并用未转导的T细胞、40A3Bz dnTGFβRII装甲的CAR-T细胞或40A3Bz未装甲的CAR-T细胞治疗的小鼠中的荧光信号。图8I显示测量的小鼠体重，直到表达荧光素酶的C4-2细胞移植后第22天。
图9A-9C显示增强的CAR-T制造加强抗肿瘤活性。图9A显示根据SMART方法制造的40A3Bz dnTGFβRIICAR-T细胞，与来自相同供体的未转导的T细胞(UT)相比，在扩增第4天进行表型分析。图9B显示将过表达TGFβ的22Rv1肿瘤细胞植入NSG MHC 1类2类敲除小鼠后50天测量的肿瘤体积(顶部)和体重(底部)，所述小鼠用4种浓度(0.3、1、3、6×e6个CAR阳性细胞)给药的40A3Bz dnTGFβRII SMART CAR-T细胞治疗。图9C显示植入来自CTG-3610前列腺癌细胞的冷冻原液的PDX片段的NSG 1类2类敲除小鼠的肿瘤体积(顶部)和体重(底部)，当肿瘤体积为125-250mm3时随机化，并如B中那样给药0.5e6或5e6个40A3Bz dnTGFβRIISMART CAR-T细胞，与5e6个UT SMART对照相比。显示了CTG-3610肿瘤细胞的膜STEAP2和TGFβ的IHC强度和比例得分。图9D显示植入来自CTG-2440前列腺癌细胞的冷冻原液的PDX片段的NSG 1类2类敲除小鼠的肿瘤体积(顶部)和体重(底部)，当肿瘤体积为125-250mm3时随机化，并如B中那样给药0.5e6或5e6个40A3Bz dnTGFβRII SMART CAR-T细胞，与5e6个UTSMART对照相比。显示了CTG-2440细胞的膜STEAP2和TGFβ的IHC强度和比例得分。图9E显示植入来自Lucap 147前列腺癌细胞的冷冻原液的PDX片段的NSG 1类2类敲除小鼠的肿瘤体积(顶部)和体重(底部)，当肿瘤体积为125-250mm3时随机化，并如B中那样给药0.5e6或5e6个40A3Bz dnTGFβRII SMART CAR-T细胞，与5e6个UT SMART对照相比。显示了Lucap 147细胞的膜STEAP2和TGFβ的IHC强度和比例得分。图9F显示植入来自Lucap 73前列腺癌细胞的冷冻原液的PDX片段的NSG 1类2类敲除小鼠的肿瘤体积(顶部)和体重(底部)，当肿瘤体积为125-250mm3时随机化，并如B中那样给药0.5e6或5e6个40A3Bz dnTGFβRII SMART CAR-T细胞，与5e6个UT SMART对照相比。显示了Lucap 73细胞的膜STEAP2和TGFβ的IHC强度和比例得分。
图10A显示了在阻断性抗STEAP2抗体(0.2、2、20或200μg/ml)存在下，LNCAP肿瘤细胞和E:T比率0.3:1的40A3Bz dnTGFβRII CAR-T细胞或未转导的T细胞的共培养物的肿瘤细胞系生长。图10B显示了在阻断性抗STEAP2抗体或同种型阻断性抗体(0.2、2、20或200μg/ml)存在下，LNCAP肿瘤细胞和E:T比率0.3:1或1:1的40A3Bz dnTGFβRIICAR-T细胞或未转导的T细胞的共培养物的上清液中通过MSD ECL测定法测定的IFNγ水平。图10C显示了在阻断性抗STEAP2抗体(0.2、2、20或200μg/ml)存在下，LNCAP STEAP2CRISPR肿瘤细胞和E:T比率0.3:1的40A3Bz dnTGFβRIICAR-T细胞或未转导的T细胞的共培养物的肿瘤细胞系生长。图10D显示了在阻断性抗STEAP2抗体或同种型阻断性抗体(0.2、2、20或200μg/ml)存在下，LNCAP STEAP2 CRISPR肿瘤细胞和E:T比率0.3:1或1:1的40A3Bz dnTGFβRIICAR-T细胞或未转导的T细胞的共培养物的上清液中通过MSD ECL测定法测定的IFNγ水平。
具体实施方式
本披露涉及特异性结合人前列腺六跨膜表皮抗原2(STEAP2)上的表位的抗原结合部分。本披露的一些方面涉及包含编码嵌合抗原受体(CAR)的核苷酸序列的多核苷酸，其中CAR包含结合人STEAP2上的表位的抗原结合结构域。本披露的一些方面涉及包含多核苷酸的宿主细胞。本披露的其他方面涉及特异性结合人STEAP2上的表位的抗体或其抗原结合部分。在一些方面，抗原结合结构域结合人STEAP2的细胞外环上的表位。本披露的其他方面涉及治疗有需要的受试者的方法，其包括向受试者施用多核苷酸、细胞和/或抗体或其抗原结合部分。在一些方面，受试者患有前列腺癌或源自前列腺癌的肿瘤。
I.术语
为了使本发明可以更容易理解，首先定义了某些术语。另外的定义贯穿详细说明列出。
应注意，术语“一个/种(a或an)”实体是指一个/种或多个/种所述实体；例如，“核苷酸序列”应理解为表示一种或多种核苷酸序列。因此，术语“一个/种(a或an)”、“一个/种或多个/种”和“至少一个/种”本文可互换地使用。
此外，“和/或”在本文使用时被认为是两个所指定的特征或组分中每一者与或不与另一者一起的具体披露。因此，如在本文中的短语如“A和/或B”中所用的术语“和/或”旨在包括“A和B”、“A或B”、“A”(单独)和“B”(单独)。同样，如在诸如“A、B和/或C”等短语中所用的术语“和/或”意图涵盖以下方面中的每一个：A、B和C；A、B或C；A或C；A或B；B或C；A和C；A和B；B和C；A(单独)；B(单独)；和C(单独)。
应当理解，无论在什么情况下本文用语言“包含”描述方面时，也提供了用“由……组成”和/或“主要由……组成”描述的其他类似方面。如本文所用的，术语“包含(comprise)”和“包括(include)”及其变体(例如，“包含(comprises/comprising)”、“包括(includes/including)”)应理解为表示包括陈述的组分、特征、元素或步骤，或一组组分、特征、元素或步骤，但不排除任何其他组分、特征、元素或步骤，或一组组分、特征、元素或步骤。术语“包含”、“基本上由……组成”和“由……组成”中的任何一个可以用其他两个术语中的任一个替换，同时保留其普通含义。
除非另外定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有如本披露所属领域的普通技术人员通常理解的相同含义。例如，Concise Dictionary ofBiomedicine andMolecular Biology[简明生物医学和分子生物学词典],Juo,Pei-Show，第2版，2002,CRC出版社(CRC Press)；Dictionary ofCell and Molecular Biology[细胞和分子生物学词典]，第3版，1999，学术出版社(Academic Press)；以及Oxford Dictionary OfBiochemistry And Molecular Biology[生物化学和分子生物学牛津词典]，修订版，2000，牛津大学出版社(OxfordUniversity Press)为技术人员提供了在本披露中使用的许多术语的通用词典注释。
单位、前缀和符号是以它们的国际单位系统(Système International deUnites)(SI)接受的形式表示。数值范围包括限定该范围的数字。除非另外指明，否则核苷酸序列以5'至3'取向从左向右书写。氨基酸序列以氨基至羧基的方向从左向右书写。本文提供的标题不是本披露的不同方面的限制，可以通过作为一个整体参考本说明书来获得这些方面。因此，通过以其全文参考说明书，更充分地定义了紧接着在下文中定义的术语。
本文所用的术语“约”是指近似、大致、大约或在其范围内。当术语“约”与一个数值范围结合使用时，它通过扩展列举的数值的上限和下限将该范围加以修饰。通常，术语“约”可以通过例如10％以上或以下(更高或更低)的变化来修饰高于和低于所述值的数值。
在一些方面，术语“抗体”是指包含通过二硫键相互连接的至少两条重(H)链和两条轻(L)链的蛋白质。每个重链由重链可变区(本文缩写为VH)和重链恒定区(本文缩写为CH)构成。在一些抗体中，例如天然存在的IgG抗体，重链恒定区由铰链区和三个结构域CH1、CH2和CH3组成。在一些抗体中，例如天然存在的IgG抗体，每条轻链由轻链可变区(本文缩写为VL)和轻链恒定区组成。轻链恒定区由一个结构域(本文缩写为CL)组成。VH和VL区可以进一步细分为被称为互补决定区(CDR)的高变区，其间插入被称为框架区(FR)的更保守的区域。每个VH和VL由三个CDR和四个FR构成，从氨基末端到羧基末端按照以下顺序排列：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3和FR4。重链和轻链的可变区含有与抗原相互作用的结合结构域。抗体的恒定区可以介导免疫球蛋白与宿主组织或因子(包括免疫系统的不同细胞(例如效应细胞)和经典补体系统的第一组分(C1q))的结合。重链可具有或不具有C末端赖氨酸。除非本文另有说明，否则可变区中的氨基酸使用Kabat编号系统编号，恒定区中的氨基酸使用EU系统编号。
免疫球蛋白可以来自任何通常已知的同种型，包括但不限于IgA、分泌性IgA、IgG和IgM。IgG同种型在某些物种中分为亚类：人类中的IgG1、IgG2、IgG3和IgG4，以及小鼠中的IgG1、IgG2a、IgG2b和IgG3。在一些方面，本文所述的抗体是IgG1亚型。免疫球蛋白如IgG1存在于几种同种异型中，它们彼此相差至多几个氨基酸。例如，“抗体”包括天然存在的和非天然存在的抗体；单克隆和多克隆抗体；嵌合和人源化抗体；人和非人抗体和全合成抗体。
本文所用的术语抗体的“抗原结合部分”是指保留特异性结合抗原(例如人STEAP2)的能力的抗体的一个或多个片段。抗体的抗原结合功能可以通过全长抗体的片段来实现。抗体(例如本文所述的抗STEAP2抗体)的术语“抗原结合部分”内涵盖的结合片段的实例包括(i)Fab片段(来自木瓜蛋白酶切割的片段)或由VL、VH、LC和CH1结构域组成的类似单价片段；(ii)F(ab')2片段(来自胃蛋白酶切割的片段)或包含通过铰链区的二硫键连接的两个Fab片段的类似二价片段；(iii)由VH和CH1结构域组成的Fd片段；(iv)由抗体单臂的VL和VH结构域组成的Fv片段，(v)由VH结构域组成的dAb片段(Ward等人，(1989)Nature[自然]341:544-546)；(vi)分离的互补决定区(CDR)和(vii)两个或更多个分离的CDR的组合，其可任选地通过合成接头连接。此外，尽管Fv片段的两个结构域VL和VH由独立基因编码，但它们可以使用重组方法，通过合成接头连接，该接头使其能够制备成单个蛋白质链形式，其中VL和VH区域配对形成单价分子(称为单链Fv(scFv))；参见例如，Bird等人(1988)Science[科学]242:423-426；以及Huston等人(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美国国家科学院院报]85:5879-5883)。这类单链抗体还旨在涵盖在术语抗体的“抗原结合部分”内。这些抗体片段是使用本领域的技术人员已知的常规技术获得的，并且以与完整抗体相同的方式针对效用来筛选这些片段。可以通过重组DNA技术或通过完整免疫球蛋白的酶裂解或化学裂解来产生抗原结合部分。
本文所用的术语“嵌合抗原受体”或“CAR”是指工程化抗原结合多肽，其包含抗原结合结构域、跨膜结构域和细胞内信号传导结构域。CAR在细胞(例如免疫细胞)表面上的表达允许细胞靶向并结合特定抗原。在一些方面，CAR由免疫细胞(例如T细胞)表达。在一些方面，抗原结合结构域包含Fab、Fab'、F(ab')2、Fd、Fv、单链可变片段(scFv)、单链抗体、VHH、vNAR、纳米抗体(单结构域抗体)或其任何组合。在一些方面，跨膜结构域包含选自CD4、CD8α或CD28的跨膜结构域的跨膜结构域。在一些方面，细胞内结构域包含共刺激结构域或其部分。在一些方面，细胞内结构域包含共刺激结构域，所述共刺激结构域选自由以下组成的组：CD3z的细胞内结构域、CD28共刺激结构域、CD27共刺激结构域、4-1BB共刺激结构域、ICOS共刺激结构域、OX-40共刺激结构域、GITR共刺激结构域、CD2共刺激结构域、IL-2Rβ共刺激结构域、MyD88/CD40a CD28共刺激结构域及其任何组合。CAR可以进一步包含“铰链区”或“间隔区”结构域。铰链区/间隔区结构域的非限制性实例包括免疫球蛋白铰链区/间隔区结构域，例如IgG1铰链区结构域、IgG2铰链区结构域、IgG3铰链区结构域或IgG4铰链区结构域。
如本文所用，术语“装甲”是指对表达CAR的细胞(例如，CAR-T细胞)进行分子操作以进一步表达一种或多种可对抗免疫抑制的“装甲分子”。例如，研究者最近报道了修饰CAR-T细胞以分泌阻断PD-1的单链可变片段(scFv)，这改善了PD-L1+血液肿瘤和实体瘤的小鼠模型中的CAR-T细胞抗肿瘤活性(Rafiq,S.,Yeku,O.,Jackson,H.等人Targeteddelivery of a PD-1-blocking scFv by CAR-T cells enhances anti-tumor efficacyin vivo.[CAR-T细胞对阻断PD-1的scFv的靶向递送增强了体内抗肿瘤功效]NatBiotechnol[自然生物技术]36,847-856(2018))。其他研究表明了用显性负性2型TGF-β受体(TGFβRIIDN)装甲分子来装甲T细胞以中和TGF-β对T细胞的抑制作用的有效性(Bollard等人，Tumor-Specific T-Cells Engineered to Overcome Tumor Immune EvasionInduce Clinical Responses in Patients With Relapsed Hodgkin Lymphoma[工程化以克服肿瘤免疫逃逸的肿瘤特异性T细胞诱导复发性霍奇金淋巴瘤患者的临床响应],J ClinOncol[临床肿瘤学杂志]36(11):1128-1139(2018))。当前，至少一项临床研究正在研究用TGFβRIIDN装甲分子装甲抗PSMA-CAR-T细胞对治疗去势抗性前列腺癌的有效性(NCT03089203)。
如本文所用的，术语“亲和力(affinity)”指抗原或靶标(如表位)与其同源结合结构域(如互补位)的结合强度的量度。如本文所用的，术语“亲合力(avidity)”指表位与互补位(即抗原与抗原结合结构域)的群体之间的复合物的总体稳定性。
术语“表位”是指抗原(例如，STEAP2)上嵌合抗原受体、免疫球蛋白或抗体特异性结合的位点，例如，如通过用于鉴定它的特定方法所定义的。表位可以由连续氨基酸(通常是线性表位)形成，也可以由通过蛋白质三级折叠而并置的非连续氨基酸(通常是构象表位)形成。由连续氨基酸形成的表位通常但不总是在暴露于变性溶剂时保留，而通过三级折叠形成的表位通常在用变性溶剂处理时丢失。表位通常包括处于独特空间构象中的至少3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或15个氨基酸。
关于两个或更多个抗原结合部分的术语“结合相同的表位”是指抗原结合部分结合相同的氨基酸残基片段。“与另一抗体竞争结合靶标”的抗原结合部分是指抑制(部分或完全)另一抗体与靶标结合的抗原结合部分。
如本文所用，术语“特异性结合”、“选择性结合”、“选择性地结合”和“特异性地结合”是指抗原结合部分(例如，CAR或抗体)结合预定抗原上的表位。通常，抗原结合部分(例如CAR或抗体)(i)以约小于10-7M，例如约小于10-8M、10-9M或10-10M或甚至更低的平衡解离常数(KD)结合，当通过例如表面等离子体共振(SPR)技术在2000仪器中使用预定抗原(例如人STEAP2)作为分析物和抗体作为配体，或抗体与抗原阳性细胞结合的Scatchard分析测定时，和(ii)结合预定抗原的亲和力比其结合预定抗原或密切相关抗原以外的非特异性抗原(例如BSA、酪蛋白)的亲和力大至少两倍。因此，“特异性结合人STEAP2”的抗原结合部分(例如CAR或抗体)是指以10-7M或更小，例如约小于10-8M、10-9M或10-10M或甚至更低的KD结合人STEAP2的抗原结合部分(例如CAR或抗体)。
“多肽”是指包含至少两个连续连接的氨基酸残基的链，对链的长度没有上限。蛋白质中的一个或多个氨基酸残基可以含有修饰，例如但不限于糖基化、磷酸化或二硫键形成。“蛋白质”可包含一种或多种多肽。
本文所用的术语“核酸分子”包括DNA分子和RNA分子。核酸分子可以是单链或双链的，并且可以是cDNA。
“保守氨基酸取代”是指用具有相似侧链的氨基酸残基取代氨基酸残基。具有相似侧链的氨基酸残基家族已在本领域中定义。这些家族包括具有以下各项的氨基酸：碱性侧链(例如，赖氨酸、精氨酸、组氨酸)、酸性侧链(例如，天门冬氨酸、谷氨酸)、不带电荷的极性侧链(例如，甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、色氨酸)、非极性的侧链(例如，丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸)、β-分支侧链(例如，苏氨酸、缬氨酸、异亮氨酸)、以及芳香族侧链(例如，酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、组氨酸)。在一些方面，STEAP2结合部分(例如抗STEAP2 CAR或抗体)中预测的非必需氨基酸残基被来自相同侧链家族的另一氨基酸残基替代。
两个序列之间的同一性百分比是序列共享的相同位置的数目的函数(即，％同源性＝相同位置的数量/位置的总数×100)，考虑了空位数目和每个空位的长度，需要引入这些空位以用于两个序列的最佳比对。序列比较以及两个序列之间的同一性百分比的确定可以使用数学算法完成，如以下非限制性实例中所述。
两个核苷酸序列间的百分比同一性可以使用GCG软件包(可在worldwideweb.gcg.com上获得)中的GAP程序，使用NWSgapdna.CMP矩阵和40、50、60、70或80的缺口权重以及1、2、3、4、5或6的长度权重来确定。两个核苷酸或氨基酸序列之间的百分比同一性也可以使用E.Meyers和W.Miller算法(CABIOS,4:11-17(1989))，其已经被结合到ALIGN程序(2.0版)中，使用PAM120权重残基表，空位长度罚分12以及空位罚分4来确定。另外，两个氨基酸序列之间的百分比同一性可以使用Needleman和Wunsch(J.Mol.Biol[分子生物学杂志].(48):444-453(1970))算法，其已经被结合到GCG软件包(可在http://www.gcg.com上获得)中的GAP程序里，使用Blossum62矩阵或PAM250矩阵和16、14、12、10、8、6或4的缺口权重以及1、2、3、4、5或6的长度权重来确定。
本文所述的核酸和蛋白质序列还可用作“查询序列”以对公共数据库进行搜索，例如鉴定相关序列。这种搜索可以使用Altschul等人(1990)J.Mol.Biol.[分子生物学杂志]215:403-10的NBLAST和XBLAST程序(版本2.0)来执行。BLAST核苷酸搜索可用NBLAST程序，得分＝100，字长＝12进行，以获得与本文所述核酸分子同源的核苷酸序列。BLAST蛋白搜索可用XBLAST程序，得分＝50，字长＝3进行，以获得与本文所述蛋白分子同源的氨基酸序列。为了获得用于比较目的的空位比对，可以利用如Altschul等人，(1997)Nucleic AcidsRes[核酸研究].25(17):3389-3402中描述的空位BLAST程序。当利用BLAST程序和空位BLAST程序时，可以使用相应程序(例如，XBLAST和NBLAST)的缺省参数。参见worldwideweb.ncbi.nlm.nih.gov。
本文所用的术语“载体”是指能够转运与其连接的另一种核酸的核酸分子。一种类型的载体是“质粒”，其是指可以向其中连接另外的DNA片段的环状双链DNA环。另一类型的载体是病毒载体，其中另外的DNA片段可以被连入病毒基因组。某些载体能够在引入它们的宿主细胞中自主复制(例如，具有细菌复制起点的细菌载体和附加型哺乳动物载体)。其他载体(例如，非附加型哺乳动物载体)可以在一旦被引入宿主细胞时整合进宿主细胞基因组中，并且由此与宿主基因组一起复制。此外，某些载体能够指导与其有效连接的基因表达。此类载体在本文中称为“重组表达载体”(或简单地，“表达载体”)。一般来说，重组DNA技术中应用的表达载体通常为质粒形式。在本说明书中，“质粒”和“载体”可以互换使用，因为质粒是最常用的载体形式。然而，还包括提供等效功能的其他形式的表达载体，例如病毒载体(例如，复制缺陷型逆转录病毒、腺病毒和腺相关病毒)。
本文所用的术语“重组宿主细胞”(或简称“宿主细胞”)是指包含细胞中天然不存在的核酸的细胞，并且可以是其中已引入重组表达载体的细胞。应当理解，这些术语不仅指特定的主题细胞，而且指这种细胞的后代。由于突变或环境影响，某些修饰可以在后代中发生，因此这样的后代实际上不能与亲本细胞相同，但仍包括在本文所用的术语“宿主细胞”的范围内。
“免疫应答”是本领域所理解的，并且通常是指脊椎动物体内对外来试剂或异常例如癌细胞的生物应答，该应答保护生物体免受这些试剂和由它们引起的疾病。免疫应答由免疫系统的一种或多种细胞(例如，T淋巴细胞、B淋巴细胞、天然杀伤(NK)细胞、巨噬细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞、树突状细胞或嗜中性粒细胞)和由这些细胞或肝脏中的任一种产生的可溶性大分子(包括抗体、细胞因子和补体)的作用介导，该作用导致选择性靶向、结合、损伤、破坏和/或从脊椎动物体内清除侵入的病原体、感染病原体的细胞或组织、癌或其他异常细胞，或在自身免疫或病理性炎症的情况下，正常人细胞或组织。免疫反应包括例如激活或抑制T细胞，例如效应T细胞、Th细胞、CD4+细胞、CD8+T细胞或Treg细胞，或激活或抑制免疫系统的任何其他细胞，例如NK细胞。
“免疫疗法”是指通过包括诱导、增强、抑制或以其他方式改变免疫系统或免疫应答的方法治疗患有疾病或处于感染疾病或疾病复发的风险中的受试者。
如本文所用，术语“连接”是指两个或更多个分子的缔合。连接可以是共价或非共价的。该连接也可以是遗传的(即重组融合)。这种连接可以使用多种本领域公认的技术来实现，例如化学缀合和重组蛋白产生。
如本文所用的，当在治疗癌症的上下文中使用时，术语“治疗(treat/treatment/treatment of)”指减轻疾病病理、减轻或消除疾病症状、促进存活率提高、和/或减轻不适。例如，治疗可以是指当向受试者施用疗法时该疗法减少疾病症状、体征或病因的能力。治疗还指缓和或减少至少一种临床症状和/或抑制或延迟病症的进展和/或预防或延迟疾病或疾患的发作。
如本文所用，“癌症”是指以体内异常细胞不受控制的生长为特征的一大类疾病。不受调节的细胞分裂可导致恶性肿瘤或细胞的形成，这些恶性肿瘤或细胞侵入邻近组织并可通过淋巴系统或血流转移到身体的远处部分。
如本文所用的，术语施用的治疗性物质(如CAR-T细胞)的“有效量”或“治疗有效量”是足以进行特别说明或预期目的，如治疗癌症的量。“有效量”可以根据所述目的凭经验以常规方式确定。
如本文所用的，术语“受试者”、“个体”或“患者”指希望诊断、预后或治疗的任何受试者，尤其是哺乳动物受试者。哺乳动物受试者包括例如人、非人灵长类动物、狗、猫、豚鼠、兔子、大鼠、小鼠、马、牛、熊等。
如本文所用，术语“ug”和“uM”分别与“μg”和“μM”互换使用。
本文所述的各个方面在以下小节中进一步详细描述。
I.本披露的多核苷酸
本披露的一些方面涉及包含编码特异性结合人STEAP2的CAR的核苷酸序列的多核苷酸。在一些方面，CAR包含(i)结合STEAP2上的表位的抗原结合结构域，(ii)跨膜结构域，和(iii)细胞内结构域。在一些方面，CAR还包含铰链区/间隔区结构域。在一些方面，铰链区/间隔区结构域位于抗原结合结构域和跨膜结构域之间。
在一些方面，多核苷酸还包含编码装甲分子的核苷酸序列。在一些方面，编码CAR的核苷酸序列和编码装甲部分的核苷酸序列在相同启动子的控制下表达。在一些方面，编码CAR的核苷酸序列和编码装甲部分的核苷酸序列在两个启动子的控制下表达。在一些方面，两个启动子是不同的启动子。在一些方面，编码CAR的核苷酸序列和编码装甲部分的核苷酸序列表达为单个连续多肽。在一些方面，编码CAR的核苷酸序列和编码装甲部分的核苷酸序列表达为两个单独的多肽。在一些方面，CAR和编码装甲部分的核苷酸序列通过编码接头的核苷酸序列连接。在一些方面，接头是肽接头。在一些方面，接头是可切割的接头。在一些方面，接头是自切割的肽接头，例如包含T2A肽。
I.A.抗原结合结构域
本文披露了包含编码CAR的核苷酸序列的多核苷酸，其中所述CAR包含(i)结合人STEAP2上的表位的抗原结合结构域，(ii)细胞内信号传导结构域，和(iii)跨膜结构域。任何抗原结合结构域可用于本文披露的组合物中。在一些方面，抗原结合结构域包含Fab、Fab'、F(ab')2、Fd、Fv、单链可变片段(scFv)、单链抗体、VHH、vNAR、纳米抗体(单结构域抗体)或其任何组合。在一些方面，抗原结合结构域包含scFv。
在一些方面，CAR的抗原结合结构域包含可变重链区(VH)和可变轻链区(VL)，其中VH包含VH互补决定区(CDR)1、VH-CDR2、VH-CDR3；且其中VL包含VL-CDR1、VL-CDR2和VL-CDR3。在一些方面，抗原结合结构域包含VH-CDR3，其包含选自SEQ ID NO:6、16、26、36、46和96的氨基酸序列。在一些方面，抗原结合结构域包含VH-CDR2，其包含选自SEQ ID NO:5、15、25、35、45和95的氨基酸序列。在一些方面，抗原结合结构域包含VH-CDR1，其包含选自SEQID NO:4、14、24、34、44和94的氨基酸序列。
在一些方面，抗原结合结构域包含VL-CDR3，其包含选自SEQ ID NO:3、13、23、33、43和93的氨基酸序列。在一些方面，其中抗原结合结构域包含VL-CDR2，其包含选自SEQ IDNO:2、12、22、32、42和92的氨基酸序列。在一些方面，抗原结合结构域包含VL-CDR1，其包含选自SEQ ID NO:1、11、21、31、41和91的氨基酸序列。
在一些方面，抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3。
在一些方面，抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3。
在一些方面，抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:21中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:22中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:23中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:24中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:25中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:26中所示氨基酸序列的VH-CDR3。
在一些方面，抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:31中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:32中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:33中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:34中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:35中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:36中所示氨基酸序列的VH-CDR3。
在一些方面，抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:41中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:42中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:43中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:44中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:45中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:46中所示氨基酸序列的VH-CDR3。
在一些方面，抗原结合结构域包含存在于具有SEQ ID NO:58中所示氨基酸序列的VL区中的VL-CDR1、VL-CDR2和VL-CDR3；以及存在于具有SEQ ID NO:57中所示氨基酸序列的VH区中的VH-CDR1、VH-CDR2和VH-CDR3。
在一些方面，抗原结合结构域包含存在于具有SEQ ID NO:68中所示氨基酸序列的VL区中的VL-CDR1、VL-CDR2和VL-CDR3；以及存在于具有SEQ ID NO:67中所示氨基酸序列的VH区中的VH-CDR1、VH-CDR2和VH-CDR3。
在一些方面，抗原结合结构域包含存在于具有SEQ ID NO:78中所示氨基酸序列的VL区中的VL-CDR1、VL-CDR2和VL-CDR3；以及存在于具有SEQ ID NO:77中所示氨基酸序列的VH区中的VH-CDR1、VH-CDR2和VH-CDR3。
在一些方面，抗原结合结构域包含存在于具有SEQ ID NO:88中所示氨基酸序列的VL区中的VL-CDR1、VL-CDR2和VL-CDR3；以及存在于具有SEQ ID NO:87中所示氨基酸序列的VH区中的VH-CDR1、VH-CDR2和VH-CDR3。
在一些方面，抗原结合结构域包含存在于具有SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列的VL区中的VL-CDR1、VL-CDR2和VL-CDR3；以及存在于具有SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列的VH区中的VH-CDR1、VH-CDR2和VH-CDR3。
在一些方面，CAR包含含有VH的抗原结合结构域，VH包含与选自SEQ ID NO:7、17、27、37、47、57、67、77、87和97的氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，抗原结合结构域包含VH，VH包含选自SEQ ID NO:7、17、27、37、47、57、67、77、87和97的氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含含有VL的抗原结合结构域，所述VL包含与选自SEQ ID NO:8、18、28、38、48、58、68、78、88和98的氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，抗原结合结构域包含VL，所述VL包含选自SEQ IDNO:8、18、28、38、48、58、68、78、88和98的氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ IDNO:7中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ IDNO:17中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:27中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:28中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ IDNO:27中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:28中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:37中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:38中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ IDNO:37中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:38中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:47中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:48中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ IDNO:47中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:48中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:57中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:58中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ IDNO:57中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:58中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:67中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:68中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ IDNO:67中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:68中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:77中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:78中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ IDNO:77中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:78中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:87中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:88中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ IDNO:87中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:88中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ IDNO:97中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含与SEQ ID NO:9中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含SEQ ID NO:9中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含与SEQ ID NO:99中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含SEQ ID NO:99中所示氨基酸序列。
I.B.细胞内结构域
本文披露了包含编码CAR的核苷酸序列的多核苷酸，其中所述CAR包含(i)结合人STEAP2上的表位的抗原结合结构域，(ii)细胞内信号传导结构域，和(iii)跨膜结构域。任何细胞内信号传导结构域可用于本文披露的组合物中。在一些方面，细胞内信号传导结构域包含共刺激结构域或其部分。
在一些方面，细胞内结构域包含共刺激结构域，所述共刺激结构域选自由以下组成的组：CD3z的细胞内结构域、CD28共刺激结构域、CD27共刺激结构域、4-1BB共刺激结构域、ICOS共刺激结构域、OX-40共刺激结构域、GITR共刺激结构域、CD2共刺激结构域、IL-2Rβ共刺激结构域、MyD88/CD40a CD28共刺激结构域及其任何组合。
在一些方面，细胞内结构域包含4-1BB共刺激结构域。在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ IDNO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(ii)4-1BB共刺激结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(ii)4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列；和(ii)4-1BB共刺激结构域，其包含SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含与SEQ ID NO:9中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(ii)4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含SEQ ID NO:9中所示氨基酸序列；和(ii)4-1BB共刺激结构域，其包含SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列。
在一些方面，细胞内结构域包含CD3z的细胞内结构域和CD28共刺激结构域。在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(ii)CD3z的细胞内结构域和CD28共刺激结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和CD28共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列；和(ii)包含SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列的CD3z的细胞内结构域，和包含SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列的CD28共刺激结构域。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含与SEQ ID NO:9中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和CD28共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含SEQ ID NO:9中所示氨基酸序列；和(ii)包含SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列的CD3z的细胞内结构域，和包含SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列的CD28共刺激结构域。
在一些方面，细胞内结构域包含CD3z的细胞内结构域和4-1BB共刺激结构域。在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(ii)CD3z的细胞内结构域和4-1BB共刺激结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列；和(ii)包含SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列的CD3z的细胞内结构域，和包含SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列的4-1BB共刺激结构域。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含与SEQ ID NO:9中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含SEQ ID NO:9中所示氨基酸序列；和(ii)包含SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列的CD3z的细胞内结构域，和包含SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列的4-1BB共刺激结构域。
在一些方面，细胞内结构域包含CD3z的细胞内结构域、CD28共刺激结构域和4-1BB共刺激结构域。在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ IDNO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(ii)CD3z的细胞内结构域、CD28共刺激结构域和4-1BB共刺激结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，CD28共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列；和(ii)包含SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列的CD3z的细胞内结构域，包含SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列的CD28共刺激结构域和包含SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列的4-1BB共刺激结构域。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含与SEQ ID NO:9中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，CD28共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含SEQ ID NO:9中所示氨基酸序列；和(ii)包含SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列的CD3z的细胞内结构域，包含SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列的CD28共刺激结构域和包含SEQID NO:130中所示氨基酸序列的4-1BB共刺激结构域。
在一些方面，细胞内结构域包含4-1BB共刺激结构域。在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(ii)4-1BB共刺激结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(ii)4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列；和(ii)4-1BB共刺激结构域，其包含SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列。
在一些方面，细胞内结构域包含CD3z的细胞内结构域和CD28共刺激结构域。在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(ii)CD3z的细胞内结构域和CD28共刺激结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和CD28共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列；和(ii)包含SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列的CD3z的细胞内结构域，和包含SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列的CD28共刺激结构域。
在一些方面，细胞内结构域包含CD3z的细胞内结构域和4-1BB共刺激结构域。在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(ii)CD3z的细胞内结构域和4-1BB共刺激结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列；和(ii)包含SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列的CD3z的细胞内结构域，和包含SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列的4-1BB共刺激结构域。
在一些方面，细胞内结构域包含CD3z的细胞内结构域、CD28共刺激结构域和4-1BB共刺激结构域。在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ IDNO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(ii)CD3z的细胞内结构域、CD28共刺激结构域和4-1BB共刺激结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，CD28共刺激结构域，其包含与SEQ IDNO:133中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列；和(ii)包含SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列的CD3z的细胞内结构域，包含SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列的CD28共刺激结构域和包含SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列的4-1BB共刺激结构域。
在一些方面，细胞内结构域包含4-1BB共刺激结构域。在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQID NO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:95中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(ii)4-1BB共刺激结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和(ii)4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列；和(ii)4-1BB共刺激结构域，其包含SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列。
在一些方面，细胞内结构域包含CD3z的细胞内结构域和CD28共刺激结构域。在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:95中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(ii)CD3z的细胞内结构域和CD28共刺激结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和CD28共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列；和(ii)包含SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列的CD3z的细胞内结构域，和包含SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列的CD28共刺激结构域。
在一些方面，细胞内结构域包含CD3z的细胞内结构域和4-1BB共刺激结构域。在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:95中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(ii)CD3z的细胞内结构域和4-1BB共刺激结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列；和(ii)包含SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列的CD3z的细胞内结构域，和包含SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列的4-1BB共刺激结构域。
在一些方面，细胞内结构域包含CD3z的细胞内结构域、CD28共刺激结构域和4-1BB共刺激结构域。在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ IDNO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:95中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，CD28共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，CD28共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列；和(ii)包含SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列的CD3z的细胞内结构域，包含SEQ IDNO:133中所示氨基酸序列的CD28共刺激结构域和包含SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列的4-1BB共刺激结构域。
在一些方面，CAR包含与SEQ ID NO:10中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含SEQ ID NO:10中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含与SEQ ID NO:108中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含SEQ ID NO:108中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含与SEQ ID NO:109中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含SEQ ID NO:109中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含与SEQ ID NO:110中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含SEQ ID NO:110中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含与SEQ ID NO:111中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含SEQ ID NO:111中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含与SEQ ID NO:112中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含SEQ ID NO:112中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含与SEQ ID NO:113中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含SEQ ID NO:113中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含与SEQ ID NO:114中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含SEQ ID NO:114中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含与SEQ ID NO:115中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含SEQ ID NO:115中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含与SEQ ID NO:116中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含SEQ ID NO:116中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含与SEQ ID NO:118中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含SEQ ID NO:118中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含与SEQ ID NO:119中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含SEQ ID NO:119中所示氨基酸序列。
I.C.跨膜结构域
本文披露了包含编码CAR的核苷酸序列的多核苷酸，其中所述CAR包含(i)结合人STEAP2上的表位的抗原结合结构域，(ii)细胞内信号传导结构域，和(iii)跨膜结构域。任何跨膜结构域均可用于本文披露的组合物中。在一些方面，跨膜结构域包含选自CD4、CD8α或CD28的跨膜结构域的跨膜结构域。在一些方面，跨膜结构域包含CD28跨膜结构域。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3；(ii)4-1BB共刺激结构域；和(iii)包含CD28的跨膜结构域的跨膜结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(iii)跨膜结构域，其包含与SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列；(ii)4-1BB共刺激结构域，其包含SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列；和(iii)跨膜结构域，其包含SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含与SEQ ID NO:9中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(iii)跨膜结构域，其包含与SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含SEQ ID NO:9中所示氨基酸序列；(ii)4-1BB共刺激结构域，其包含SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列；和(iii)跨膜结构域，其包含SEQ IDNO:129中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3；(ii)CD3z的细胞内结构域和CD28共刺激结构域；和(iii)包含CD28的跨膜结构域的跨膜结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ IDNO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和CD28共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(iii)跨膜结构域，其包含与SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列；(ii)包含SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列的CD3z的细胞内结构域，和包含SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列的CD28共刺激结构域；和(iii)跨膜结构域，其包含SEQID NO:129中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含与SEQ ID NO:9中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和CD28共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(iii)跨膜结构域，其包含含有与SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的跨膜结构域。在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含SEQ ID NO:9中所示氨基酸序列；(ii)包含SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列的CD3z的细胞内结构域，和包含SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列的CD28共刺激结构域；和(iii)跨膜结构域，其包含SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3；(ii)CD3z的细胞内结构域和4-1BB共刺激结构域；和(iii)包含CD28的跨膜结构域的跨膜结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(iii)跨膜结构域，其包含与SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列；(ii)包含SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列的CD3z的细胞内结构域，和包含SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列的4-1BB共刺激结构域；和(iii)跨膜结构域，其包含SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含与SEQ ID NO:9中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(iii)跨膜结构域，其包含与SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含SEQ ID NO:9中所示氨基酸序列；(ii)包含SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列的CD3z的细胞内结构域，和包含SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列的4-1BB共刺激结构域；和(iii)跨膜结构域，其包含SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3；(ii)CD3z的细胞内结构域、CD28共刺激结构域和4-1BB共刺激结构域；和(iii)包含CD28的跨膜结构域的跨膜结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ IDNO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，CD28共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(iii)跨膜结构域，其包含与SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列；(ii)包含SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列的CD3z的细胞内结构域，包含SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列的CD28共刺激结构域和包含SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列的4-1BB共刺激结构域；和(iii)跨膜结构域，其包含SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含与SEQ ID NO:9中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，CD28共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(iii)跨膜结构域，其包含与SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含SEQ ID NO:9中所示氨基酸序列；(ii)包含SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列的CD3z的细胞内结构域，包含SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列的CD28共刺激结构域和包含SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列的4-1BB共刺激结构域；和(iii)跨膜结构域，其包含SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ IDNO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3；(ii)4-1BB共刺激结构域；和(iii)包含CD28的跨膜结构域的跨膜结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(iii)跨膜结构域，其包含与SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列；(ii)4-1BB共刺激结构域，其包含SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列；和(iii)跨膜结构域，其包含SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ IDNO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3；(ii)CD3z的细胞内结构域和CD28共刺激结构域；和(iii)包含CD28的跨膜结构域的跨膜结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和CD28共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(iii)跨膜结构域，其包含与SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列；(ii)包含SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列的CD3z的细胞内结构域，和包含SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列的CD28共刺激结构域；和(iii)跨膜结构域，其包含SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ IDNO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3；(ii)CD3z的细胞内结构域和4-1BB共刺激结构域；和(iii)包含CD28的跨膜结构域的跨膜结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(iii)跨膜结构域，其包含与SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列；(ii)包含SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列的CD3z的细胞内结构域，和包含SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列的4-1BB共刺激结构域；和(iii)跨膜结构域，其包含SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ IDNO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3；(ii)CD3z的细胞内结构域、CD28共刺激结构域和4-1BB共刺激结构域；和(iii)包含CD28的跨膜结构域的跨膜结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，CD28共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(iii)跨膜结构域，其包含与SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列；(ii)包含SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列的CD3z的细胞内结构域，包含SEQID NO:133中所示氨基酸序列的CD28共刺激结构域和包含SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列的4-1BB共刺激结构域；和(iii)跨膜结构域，其包含SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ IDNO:95中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3；(ii)4-1BB共刺激结构域；和(iii)包含CD28的跨膜结构域的跨膜结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(iii)跨膜结构域，其包含与SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列；(ii)4-1BB共刺激结构域，其包含SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列；和(iii)跨膜结构域，其包含SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ IDNO:95中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3；(ii)CD3z的细胞内结构域和CD28共刺激结构域；和(iii)包含CD28的跨膜结构域的跨膜结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和CD28共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(iii)跨膜结构域，其包含与SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列；(ii)包含SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列的CD3z的细胞内结构域，和包含SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列的CD28共刺激结构域；和(iii)跨膜结构域，其包含SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ IDNO:95中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3；(ii)CD3z的细胞内结构域和4-1BB共刺激结构域；和(iii)包含CD28的跨膜结构域的跨膜结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(iii)跨膜结构域，其包含与SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列；(ii)包含SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列的CD3z的细胞内结构域，和包含SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列的4-1BB共刺激结构域；和(iii)跨膜结构域，其包含SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ IDNO:95中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3；(ii)CD3z的细胞内结构域、CD28共刺激结构域和4-1BB共刺激结构域；和(iii)包含CD28的跨膜结构域的跨膜结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，CD28共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(iii)跨膜结构域，其包含与SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列；(ii)包含SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列的CD3z的细胞内结构域，包含SEQID NO:133中所示氨基酸序列的CD28共刺激结构域和包含SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列的4-1BB共刺激结构域；和(iii)跨膜结构域，其包含SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含SEQ ID NO:10中所示氨基酸序列。在一些方面，CAR包含SEQID NO:108中所示氨基酸序列。在一些方面，CAR包含SEQ ID NO:109中所示氨基酸序列。在一些方面，CAR包含SEQ ID NO:110中所示氨基酸序列。在一些方面，CAR包含SEQ ID NO:111中所示氨基酸序列。在一些方面，CAR包含SEQ ID NO:112中所示氨基酸序列。在一些方面，CAR包含SEQ ID NO:113中所示氨基酸序列。在一些方面，CAR包含SEQ ID NO:114中所示氨基酸序列。在一些方面，CAR包含SEQ ID NO:115中所示氨基酸序列。在一些方面，CAR包含SEQ ID NO:116中所示氨基酸序列。在一些方面，CAR包含SEQ ID NO:118中所示氨基酸序列。在一些方面，CAR包含SEQ ID NO:119中所示氨基酸序列。
I.D.间隔区/铰链区结构域
本文披露了包含编码CAR的核苷酸序列的多核苷酸，其中所述CAR包含(i)结合人STEAP2上的表位的抗原结合结构域，(ii)细胞内信号传导结构域，(iii)跨膜结构域，和(iv)铰链区/间隔区结构域。任何铰链区/间隔区结构域可用于本文披露的组合物中。在一些方面，铰链区/间隔区结构域包含人免疫球蛋白铰链区/间隔区结构域。在一些方面，铰链区/间隔区结构域包含IgG铰链区结构域。在一些方面，铰链区/间隔区结构域包含IgG1铰链区结构域、IgG2铰链区结构域、IgG3铰链区结构域或IgG4铰链区结构域。在一些方面，铰链区/间隔区结构域包含IgG4铰链区结构域。在一些方面，IgG铰链区结构域是变体铰链区结构域。在一些方面，IgG4铰链区结构域是变体IgG4铰链区结构域。在一些方面，变体IgG4铰链区结构域包含S228P突变。在一些方面，IgG4铰链区结构域包含SEQ ID NO:128中所示的氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3；(ii)4-1BB共刺激结构域；(iii)包含CD28的跨膜结构域的跨膜结构域；和(iv)IgG铰链区结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ IDNO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(iii)跨膜结构域，其包含与SEQID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和(iv)IgG铰链区结构域，其包含与SEQ ID NO:128中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列；(ii)4-1BB共刺激结构域，其包含SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列；(iii)跨膜结构域，其包含SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列；和(iv)IgG铰链区结构域，其包含SEQ ID NO:128中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含与SEQ ID NO:9中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(iii)跨膜结构域，其包含与SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(iv)IgG铰链区结构域，其包含与SEQ ID NO:128中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含SEQ ID NO:9中所示氨基酸序列；(ii)4-1BB共刺激结构域，其包含SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列；(iii)跨膜结构域，其包含SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列；和(iv)IgG铰链区结构域，其包含SEQ ID NO:128中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3；(ii)CD3z的细胞内结构域和CD28共刺激结构域；(iii)包含CD28的跨膜结构域的跨膜结构域；和(iv)IgG铰链区结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和CD28共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(iii)跨膜结构域，其包含与SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(iv)IgG铰链区结构域，其包含与SEQ ID NO:128中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列；(ii)包含SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列的CD3z的细胞内结构域，和包含SEQ IDNO:133中所示氨基酸序列的CD28共刺激结构域；(iii)跨膜结构域，其包含SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列；和(iv)IgG铰链区结构域，其包含SEQ ID NO:128中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含与SEQ ID NO:9中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和CD28共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(iii)跨膜结构域，其包含与SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(iv)IgG铰链区结构域，其包含与SEQ ID NO:128中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含SEQ ID NO:9中所示氨基酸序列；(ii)CD3z的细胞内结构域和CD28共刺激结构域；(iii)包含CD28的跨膜结构域的跨膜结构域；和(iv)IgG铰链区结构域。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3；(ii)CD3z的细胞内结构域和4-1BB共刺激结构域；(iii)包含CD28的跨膜结构域的跨膜结构域；和(iv)IgG铰链区结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(iii)跨膜结构域，其包含与SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(iv)IgG铰链区结构域，其包含与SEQ ID NO:128中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列；(ii)CD3z的细胞内结构域和4-1BB共刺激结构域；(iii)包含CD28的跨膜结构域的跨膜结构域；和(iv)IgG铰链区结构域。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含与SEQ ID NO:9中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(iii)跨膜结构域，其包含与SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(iv)IgG铰链区结构域，其包含与SEQ ID NO:128中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含SEQ ID NO:9中所示氨基酸序列；(ii)CD3z的细胞内结构域和4-1BB共刺激结构域；(iii)包含CD28的跨膜结构域的跨膜结构域；和(iv)IgG铰链区结构域。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3；(ii)CD3z的细胞内结构域、CD28共刺激结构域和4-1BB共刺激结构域；(iii)包含CD28的跨膜结构域的跨膜结构域；和(iv)IgG铰链区结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，CD28共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(iii)跨膜结构域，其包含与SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(iv)IgG铰链区结构域，其包含与SEQ ID NO:128中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列；(ii)CD3z的细胞内结构域、CD28共刺激结构域和4-1BB共刺激结构域；(iii)包含CD28的跨膜结构域的跨膜结构域；和(iv)IgG铰链区结构域。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含与SEQ ID NO:9中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，CD28共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(iii)跨膜结构域，其包含与SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(iv)IgG铰链区结构域，其包含与SEQ ID NO:128中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含SEQ ID NO:9中所示氨基酸序列；(ii)CD3z的细胞内结构域、CD28共刺激结构域和4-1BB共刺激结构域；(iii)包含CD28的跨膜结构域的跨膜结构域；和(iv)IgG铰链区结构域。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ IDNO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3；(ii)4-1BB共刺激结构域；(iii)包含CD28的跨膜结构域的跨膜结构域；和(iv)IgG铰链区结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(iii)跨膜结构域，其包含与SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(iv)IgG铰链区结构域，其包含与SEQ ID NO:128中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列；(ii)4-1BB共刺激结构域，其包含SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列；(iii)跨膜结构域，其包含SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列；和(iv)IgG铰链区结构域，其包含SEQ ID NO:128中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ IDNO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3；(ii)CD3z的细胞内结构域和CD28共刺激结构域；(iii)包含CD28的跨膜结构域的跨膜结构域；和(iv)IgG铰链区结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和CD28共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(iii)跨膜结构域，其包含与SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(iv)IgG铰链区结构域，其包含与SEQ ID NO:128中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列；(ii)包含SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列的CD3z的细胞内结构域，和包含SEQID NO:133中所示氨基酸序列的CD28共刺激结构域；(iii)跨膜结构域，其包含SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列；和(iv)IgG铰链区结构域，其包含SEQ IDNO:128中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ IDNO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3；(ii)CD3z的细胞内结构域和4-1BB共刺激结构域；(iii)包含CD28的跨膜结构域的跨膜结构域；和(iv)IgG铰链区结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ IDNO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(iii)跨膜结构域，其包含与SEQID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(iv)IgG铰链区结构域，其包含与SEQ ID NO:128中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列；(ii)CD3z的细胞内结构域和4-1BB共刺激结构域；(iii)包含CD28的跨膜结构域的跨膜结构域；和(iv)IgG铰链区结构域。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ IDNO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3；(ii)CD3z的细胞内结构域、CD28共刺激结构域和4-1BB共刺激结构域；(iii)包含CD28的跨膜结构域的跨膜结构域；和(iv)IgG铰链区结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，CD28共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(iii)跨膜结构域，其包含与SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(iv)IgG铰链区结构域，其包含与SEQ ID NO:128中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列；(ii)包含SEQID NO:131中所示氨基酸序列的CD3z的细胞内结构域，包含SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列的CD28共刺激结构域和包含SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列的4-1BB共刺激结构域；(iii)跨膜结构域，其包含SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列；和(iv)IgG铰链区结构域，其包含SEQ ID NO:128中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ IDNO:95中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3；(ii)4-1BB共刺激结构域；(iii)包含CD28的跨膜结构域的跨膜结构域；和(iv)IgG铰链区结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(iii)跨膜结构域，其包含与SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(iv)IgG铰链区结构域，其包含与SEQ ID NO:128中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列；(ii)4-1BB共刺激结构域，其包含SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列；(iii)跨膜结构域，其包含SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列；和(iv)IgG铰链区结构域，其包含SEQ ID NO:128中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ IDNO:95中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3；(ii)CD3z的细胞内结构域和CD28共刺激结构域；(iii)包含CD28的跨膜结构域的跨膜结构域；和(iv)IgG铰链区结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和CD28共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(iii)跨膜结构域，其包含与SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(iv)IgG铰链区结构域，其包含与SEQ ID NO:128中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列；(ii)包含SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列的CD3z的细胞内结构域，和包含SEQID NO:133中所示氨基酸序列的CD28共刺激结构域；(iii)跨膜结构域，其包含含有SEQ IDNO:129中所示氨基酸序列的CD28的跨膜结构域；和(iv)IgG铰链区结构域，其包含SEQ IDNO:128中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ IDNO:95中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3；(ii)CD3z的细胞内结构域和4-1BB共刺激结构域；(iii)包含CD28的跨膜结构域的跨膜结构域；和(iv)IgG铰链区结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ IDNO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(iii)跨膜结构域，其包含与SEQID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(iv)IgG铰链区结构域，其包含与SEQ ID NO:128中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列；(ii)包含SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列的CD3z的细胞内结构域，和包含SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列的4-1BB共刺激结构域；(iii)跨膜结构域，其包含SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列；和(iv)IgG铰链区结构域，其包含SEQ ID NO:128中所示氨基酸序列。
在一些方面，CAR包含(i)抗原结合结构域，其包含：包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ IDNO:95中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3；(ii)CD3z的细胞内结构域、CD28共刺激结构域和4-1BB共刺激结构域；(iii)包含CD28的跨膜结构域的跨膜结构域；和(iv)IgG铰链区结构域。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(ii)CD3z的细胞内结构域，其包含与SEQ ID NO:131中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，CD28共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，和4-1BB共刺激结构域，其包含与SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；(iii)跨膜结构域，其包含与SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(iv)IgG铰链区结构域，其包含与SEQ ID NO:128中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列；(ii)包含SEQID NO:131中所示氨基酸序列的CD3z的细胞内结构域，包含SEQ ID NO:133中所示氨基酸序列的CD28共刺激结构域和包含SEQ ID NO:130中所示氨基酸序列的4-1BB共刺激结构域；(iii)跨膜结构域，其包含SEQ ID NO:129中所示氨基酸序列；和(iv)IgG铰链区结构域，其包含SEQ ID NO:128中所示氨基酸序列。在一些方面，CAR包含(i)含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列；(ii)CD3z的细胞内结构域、CD28共刺激结构域和4-1BB共刺激结构域；(iii)包含CD28的跨膜结构域的跨膜结构域；和(iv)IgG铰链区结构域。
在一些方面，编码CAR的核苷酸序列与SEQ ID NO:101中所示核苷酸序列具有至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性。在一些方面，编码CAR的核苷酸序列包含SEQ ID NO:101中所示核苷酸序列。
在一些方面，编码CAR的核苷酸序列与SEQ ID NO:102中所示核苷酸序列具有至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性。在一些方面，编码CAR的核苷酸序列包含SEQ ID NO:102中所示核苷酸序列。
在一些方面，编码CAR的核苷酸序列与SEQ ID NO:103中所示核苷酸序列具有至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性。在一些方面，编码CAR的核苷酸序列包含SEQ ID NO:103中所示核苷酸序列。
I.E.装甲分子
本文披露了多核苷酸，其包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含结合人STEAP2上的表位的抗原结合结构域，和(b)编码装甲分子的核苷酸序列。一种制备更加抵抗肿瘤相关的免疫抑制的CAR-T细胞的方法称为“装甲”。装甲是对CAR-T细胞进行分子操作，以表达一种或多种可以抵抗免疫抑制的“装甲分子”。例如，研究者报道了修饰CAR-T细胞以分泌阻断PD-1的单链可变片段(scFv)，这改善了PD-L1+血液肿瘤和实体瘤的小鼠模型中的CAR-T细胞抗肿瘤活性(Rafiq,S.,Yeku,O.,Jackson,H.等人Targeted delivery of a PD-1-blocking scFv by CAR-T cells enhances anti-tumor efficacy in vivo.[CAR-T细胞对阻断PD-1的scFv的靶向递送增强了体内抗肿瘤功效]Nat Biotechnol[自然生物技术]36,847-856(2018))。其他研究表明了用显性负性2型TGF-β受体(TGFβRIIDN)装甲分子来装甲T细胞以中和TGF-β对T细胞的抑制作用的有效性(Bollard等人，Tumor-Specific T-Cells Engineered to Overcome Tumor Immune Evasion Induce Clinical Responsesin Patients With Relapsed Hodgkin Lymphoma[工程化以克服肿瘤免疫逃逸的肿瘤特异性T细胞诱导复发性霍奇金淋巴瘤患者的临床响应],J Clin Oncol[临床肿瘤学杂志]36(11):1128-1139(2018))。当前，至少一项临床研究正在研究用TGFβRIIDN装甲分子装甲抗PSMA-CAR-T细胞对治疗去势抗性前列腺癌的有效性(NCT03089203)。
在一些方面，装甲分子包含显性负性2型TGF-β受体(TGFβRIIDN)。在一些方面，装甲分子包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，装甲分子包含SEQ ID NO:105中所示的氨基酸序列。
在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)装甲分子，其包含与SEQ IDNO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)装甲分子，其包含SEQ IDNO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)装甲分子，其包含SEQ IDNO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:95中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:95中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:95中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)装甲分子，其包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ IDNO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ IDNO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)装甲分子，其包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ IDNO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)装甲分子，其包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ IDNO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)装甲分子，其包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，装甲分子包含显性负性2型TGF-β受体(TGFβRIIDN)。在一些方面，装甲分子包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，装甲分子包含SEQ ID NO:105中所示的氨基酸序列。
在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)装甲分子，其包含与SEQ IDNO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)装甲分子，其包含SEQ IDNO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)装甲分子，其包含SEQ IDNO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ IDNO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)装甲分子，其包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ IDNO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)装甲分子，其包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含与SEQ ID NO:99中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含与SEQ ID NO:99中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含与SEQ ID NO:99中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)装甲分子，其包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:10中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:10中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:10中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)装甲分子，其包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:108中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:108中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:108中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)装甲分子，其包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:109中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:109中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:109中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)装甲分子，其包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:110中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:110中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:110中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)装甲分子，其包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:111中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:111中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:111中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)装甲分子，其包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:112中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:112中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:112中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)装甲分子，其包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:113中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:113中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:113中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)装甲分子，其包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:114中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:114中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:114中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)装甲分子，其包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:115中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:115中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:115中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)装甲分子，其包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:116中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:116中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:116中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)装甲分子，其包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:118中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:118中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:118中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)装甲分子，其包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:119中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:119中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码与SEQ ID NO:119中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列的核苷酸序列；和(b)装甲分子，其包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，多核苷酸包含(a)编码包含SEQ ID NO:101中所示核苷酸序列的CAR的核苷酸序列；和(b)编码包含SEQ ID NO:104中所示核苷酸序列的装甲分子的核苷酸序列。
在一些方面，多核苷酸包含(a)编码包含SEQ ID NO:102中所示核苷酸序列的CAR的核苷酸序列；和(b)编码包含SEQ ID NO:104中所示核苷酸序列的装甲分子的核苷酸序列。
在一些方面，多核苷酸包含(a)编码包含SEQ ID NO:103中所示核苷酸序列的CAR的核苷酸序列；和(b)编码包含SEQ ID NO:104中所示核苷酸序列的装甲分子的核苷酸序列。
在一些方面，多核苷酸包含(a)编码包含SEQ ID NO:101中所示核苷酸序列的CAR的核苷酸序列；和(b)编码包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列的装甲分子的核苷酸序列。
在一些方面，多核苷酸包含(a)编码包含SEQ ID NO:102中所示核苷酸序列的CAR的核苷酸序列；和(b)编码包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列的装甲分子的核苷酸序列。
在一些方面，多核苷酸包含(a)编码包含SEQ ID NO:103中所示核苷酸序列的CAR的核苷酸序列；和(b)编码包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列的装甲分子的核苷酸序列。
在一些方面，编码CAR的核苷酸和编码装甲分子的核苷酸通过第三核苷酸序列连接，其中该第三核苷酸序列编码可切割的肽接头。在一些方面，可切割的肽接头包含T2A肽。在一些方面，可切割的肽接头包含SEQ ID NO:126。
在一些方面，多核苷酸包含与SEQ ID NO:107中所示核苷酸序列具有至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含SEQ ID NO:107中所示核苷酸序列。
II.本披露的抗STEAP2抗体
本披露的一些方面涉及特异性结合人STEAP2的抗体或其抗原结合部分。在一些方面，该抗体或其抗原结合部分包含可变重链区(VH)和可变轻链区(VL)，其中VH包含VH互补决定区(CDR)1、VH-CDR2、VH-CDR3；且其中VL包含VL-CDR1、VL-CDR2和VL-CDR3。在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含VH-CDR3，其包含选自SEQ ID NO:6、16、26、36、46和96的氨基酸序列。在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含VH-CDR2，其包含选自SEQ ID NO:5、15、25、35、45和95的氨基酸序列。在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含VH-CDR1，其包含选自SEQ ID NO:4、14、24、34和44和94的氨基酸序列。
在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含VL-CDR3，其包含选自SEQ ID NO:3、13、23、33、43和93的氨基酸序列。在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含VL-CDR2，其包含选自SEQ ID NO:2、12、22、32、42和92的氨基酸序列。在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含VL-CDR1，其包含选自SEQ ID NO:1、11、21、31、41和91的氨基酸序列。
在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3。
在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3。
在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含：包含SEQ ID NO:21中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:22中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:23中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:24中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:25中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:26中所示氨基酸序列的VH-CDR3。
在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含：包含SEQ ID NO:31中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:32中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:33中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:34中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:35中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:36中所示氨基酸序列的VH-CDR3。
在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含：包含SEQ ID NO:41中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:42中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:43中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:44中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:45中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:46中所示氨基酸序列的VH-CDR3。
在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含存在于具有SEQ ID NO:58中所示氨基酸序列的VL区中的VL-CDR1、VL-CDR2和VL-CDR3；以及存在于具有SEQ ID NO:57中所示氨基酸序列的VH区中的VH-CDR1、VH-CDR2和VH-CDR3。
在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含存在于具有SEQ ID NO:68中所示氨基酸序列的VL区中的VL-CDR1、VL-CDR2和VL-CDR3；以及存在于具有SEQ ID NO:67中所示氨基酸序列的VH区中的VH-CDR1、VH-CDR2和VH-CDR3。
在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含存在于具有SEQ ID NO:78中所示氨基酸序列的VL区中的VL-CDR1、VL-CDR2和VL-CDR3；以及存在于具有SEQ ID NO:77中所示氨基酸序列的VH区中的VH-CDR1、VH-CDR2和VH-CDR3。
在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含存在于具有SEQ ID NO:88中所示氨基酸序列的VL区中的VL-CDR1、VL-CDR2和VL-CDR3；以及存在于具有SEQ ID NO:87中所示氨基酸序列的VH区中的VH-CDR1、VH-CDR2和VH-CDR3。
在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含存在于具有SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列的VL区中的VL-CDR1、VL-CDR2和VL-CDR3；以及存在于具有SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列的VH区中的VH-CDR1、VH-CDR2和VH-CDR3。
在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含VH，VH包含与选自SEQ ID NO:7、17、27、37、47、57、67、77、87和97的氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含VH，VH包含选自SEQ ID NO:7、17、27、37、47、57、67、77、87和97的氨基酸序列。
在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含VL，VL包含与选自SEQ ID NO:8、18、28、38、48、58、68、78、88和98的氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含VL，VL包含选自SEQ ID NO:8、18、28、38、48、58、68、78、88和98的氨基酸序列。
在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含VH和VL，VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含VH和VL，VH包含SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列。
在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含VH和VL，VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含VH和VL，VH包含SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列。
在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含VH和VL，VH包含与SEQ ID NO:27中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:28中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含VH和VL，VH包含SEQ ID NO:27中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:28中所示氨基酸序列。
在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含VH和VL，VH包含与SEQ ID NO:37中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:38中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含VH和VL，VH包含SEQ ID NO:37中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:38中所示氨基酸序列。
在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含VH和VL，VH包含与SEQ ID NO:47中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:48中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含VH和VL，VH包含SEQ ID NO:47中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:48中所示氨基酸序列。
在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含VH和VL，VH包含与SEQ ID NO:57中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:58中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含VH和VL，VH包含SEQ ID NO:57中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:58中所示氨基酸序列。
在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含VH和VL，VH包含与SEQ ID NO:67中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:68中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含VH和VL，VH包含SEQ ID NO:67中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:68中所示氨基酸序列。
在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含VH和VL，VH包含与SEQ ID NO:77中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:78中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含VH和VL，VH包含SEQ ID NO:77中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:78中所示氨基酸序列。
在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含VH和VL，VH包含与SEQ ID NO:87中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:88中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含VH和VL，VH包含SEQ ID NO:87中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:88中所示氨基酸序列。
在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含VH和VL，VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含VH和VL，VH包含SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列，VL包含SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列。
在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含与SEQ ID NO:9中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含SEQ ID NO:9中所示氨基酸序列。
在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含与SEQ ID NO:99中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，抗体或其抗原结合部分包含SEQ ID NO:99中所示氨基酸序列。
在一些方面，抗体或其抗原结合部分与本文披露的抗体或其抗原结合部分交叉竞争结合人STEAP2。在一些方面，抗体或其抗原结合部分与本文披露的抗体或其抗原结合部分结合人STEAP2上的相同表位。在一些方面，抗体或其抗原结合部分与本文披露的抗体或其抗原结合部分结合人STEAP2上的覆盖型表位。
III.本披露的细胞
本披露的一些方面涉及包含本文披露的多核苷酸或多肽的细胞。本披露的一些方面涉及包含(i)编码结合人STEAP2的嵌合抗原受体(CAR)的多核苷酸的细胞。在一些方面，细胞还包含(ii)编码装甲分子的多核苷酸。在一些方面，细胞是免疫细胞。在一些方面，细胞选自由以下组成的组：T细胞、天然杀伤(NK)细胞、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)、调节性T细胞、肿瘤浸润淋巴细胞及其任何组合。在一些方面，细胞是哺乳动物细胞。在一些方面，细胞是人细胞。
本披露的细胞可以通过任何来源获得。例如，T细胞可在体外从造血干细胞群体分化，或T细胞可从受试者获得。T细胞可获自例如外周血单核细胞、骨髓、淋巴结组织、脐带血、胸腺组织、来自感染部位的组织、腹水、胸腔积液、脾组织和肿瘤。此外，T细胞可来源于本领域可用的一种或多种T细胞系。T细胞也可以使用本领域技术人员已知的许多技术，例如FICOLLTM分离和/或单采血液成分术从收集自受试者的血液单位获得。在某些方面，洗涤通过单采血液成分术收集的细胞以除去血浆部分，并置于合适的缓冲液或介质中用于随后的处理。在一些方面，用PBS洗涤细胞。如将理解的，可以使用洗涤步骤，例如通过使用半自动流通式离心机，例如COBETM2991细胞处理器、Baxter CYTOMATETM等。在一些方面，将洗涤的细胞再悬浮于一种或多种生物相容性缓冲液，或其他含或不含缓冲液的盐水溶液中。在某些方面，除去单采血液成分术样品中不需要的成分。分离T细胞用于T细胞疗法的其他方法披露于美国专利公开号2013/0287748中，其通过引用以其全文并入本文。
在某些方面，通过裂解红细胞并耗竭单核细胞，例如通过PERCOLLTM梯度离心从PBMC中分离T细胞。在一些方面，通过本领域已知的阳性或阴性选择技术进一步分离T细胞的特定亚群，例如CD28+、CD4+、CD8+、CD45RA+和CD45RO+T细胞。例如，通过负选择富集T细胞群体可以用针对负选择细胞特有的表面标记物的抗体的组合来实现。在一些方面，可以使用通过负磁性免疫粘附或流式细胞术进行的细胞分选和/或选择，所述流式细胞术使用针对负选择的细胞上存在的细胞表面标记物的单克隆抗体的混合物。例如，为了通过负选择富集CD4+细胞，单克隆抗体混合物通常包括针对CD14、CD20、CD11b、CD16、HLA-DR和CD8的抗体。在某些方面，流式细胞术和细胞分选用于分离感兴趣的细胞群体以用于本披露。
在一些方面，使用本文所述的方法将PBMC直接用于免疫细胞(例如CAR)的基因修饰。在某些方面，在分离PBMC之后，进一步分离T淋巴细胞，并且在基因修饰和/或扩增之前或之后将细胞毒性T淋巴细胞和辅助T淋巴细胞分类为初始T细胞、记忆T细胞和效应T细胞亚群。
在一些方面，通过鉴定与这些类型的CD8+细胞中的每一种相关的细胞表面抗原，将CD8+细胞进一步分类为初始细胞、中央记忆细胞和效应细胞。在一些方面，中央记忆T细胞的表型标记物的表达包括CD45RO、CD62L、CCR7、CD28、CD3和CD127，并且是颗粒酶B阴性的。在一些方面，中央记忆T细胞是CD45RO+、CD62L+、CD8+T细胞。在一些方面，效应T细胞是CD62L、CCR7、CD28和CD127阴性的，并是颗粒酶B和穿孔素阳性的。在某些方面，将CD4+T细胞进一步分类成亚群。例如，通过鉴别具有细胞表面抗原的细胞群体，可将CD4+T辅助细胞分类为初始细胞、中央记忆细胞和效应细胞。
在一些方面，免疫细胞，例如T细胞，在使用已知方法分离后进行基因修饰，或免疫细胞在进行基因修饰之前体外激活和扩增(或在祖细胞的情况下分化)。在另一方面，免疫细胞如T细胞用本文所述的CAR基因修饰(例如，用包含编码CAR的一个或多个核苷酸序列的病毒载体转导)，然后在体外激活和/或扩增。激活和扩增T细胞的方法是本领域已知的，并且描述于例如美国专利号6,905,874；6,867,041；和6,797,514；和PCT公开号WO 2012/079000中，其内容通过引用整体并入本文。通常，这样的方法包括将PBMC或分离的T细胞与通常附着于珠子或其他表面上的刺激剂和共刺激剂(如抗CD3和抗CD28抗体)在具有适当细胞因子如IL-2的培养基中接触。附着于同一珠的抗CD3和抗CD28抗体用作“替代”抗原呈递细胞(APC)。一个例子是体系，一种用于人T细胞的生理激活的CD3/CD28激活剂/刺激物体系。在其他方面，使用如美国专利号6,040,177和5,827,642以及PCT公开号WO2012/129514中所描述的方法用饲养细胞和适当抗体和细胞因子激活和刺激T细胞以增殖，其内容通过引用整体并入文中。
在某些方面，T细胞获自供体受试者。在一些方面，供体受试者是患有癌症或肿瘤的人类患者。在其他方面，供体受试者是未患有癌症或肿瘤的人类患者。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3。在一些方面，多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3。在一些方面，多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ IDNO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3。在一些方面，多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ IDNO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3。在一些方面，多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ IDNO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ IDNO:95中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3。在一些方面，多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ IDNO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:95中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3。在一些方面，多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ IDNO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:95中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ IDNO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ IDNO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ IDNO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ IDNO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3。在一些方面，多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3。在一些方面，多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ IDNO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3。在一些方面，多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ IDNO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3。在一些方面，多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ IDNO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ IDNO:95中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3。在一些方面，多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ IDNO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:95中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3。在一些方面，多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ IDNO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:95中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ IDNO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ IDNO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ IDNO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ IDNO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)装甲分子，其包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ IDNO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ IDNO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ IDNO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)装甲分子，其包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ IDNO:95中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ IDNO:95中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ IDNO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:95中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)装甲分子，其包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ IDNO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)装甲分子，其包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ IDNO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)装甲分子，其包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ IDNO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)装甲分子，其包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:104中所示核酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的核酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)装甲分子，其包含SEQ ID NO:104中所示核酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ IDNO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ IDNO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:104中所示核酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的核酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ IDNO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)装甲分子，其包含SEQ ID NO:104中所示核酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ IDNO:95中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ IDNO:95中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:104中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的核酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQID NO:95中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3；和(b)装甲分子，其包含SEQ ID NO:104中所示核酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ IDNO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:104中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的核酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ IDNO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)装甲分子，其包含SEQ ID NO:104中所示核酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ IDNO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:104中所示核酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的核酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ IDNO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)装甲分子，其包含SEQ ID NO:104中所示核酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ IDNO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)编码TGFβRIIDN的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)装甲分子，其包含与SEQ ID NO:104中所示核酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的核酸序列。在一些方面，多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，其中所述CAR包含含有VH和VL的抗原结合结构域，VH包含与SEQ IDNO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；和(b)装甲分子，其包含SEQ ID NO:104中所示核酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，所述CAR包含SEQ ID NO:101中所示的核苷酸序列；和(b)编码包含SEQ ID NO:104中所示核苷酸序列的装甲分子的核苷酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，所述CAR包含SEQ ID NO:102中所示的核苷酸序列；和(b)编码包含SEQ ID NO:104中所示核苷酸序列的装甲分子的核苷酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，所述CAR包含SEQ ID NO:103中所示的核苷酸序列；和(b)编码包含SEQ ID NO:104中所示核苷酸序列的装甲分子的核苷酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，所述CAR包含SEQ ID NO:101中所示的核苷酸序列；和(b)编码包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列的装甲分子的核苷酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，所述CAR包含SEQ ID NO:102中所示的核苷酸序列；和(b)编码包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列的装甲分子的核苷酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含(a)编码CAR的核苷酸序列，所述CAR包含SEQ ID NO:103中所示的核苷酸序列；和(b)编码包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列的装甲分子的核苷酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含与SEQ ID NO:107中所示核苷酸序列具有至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的核苷酸序列。在一些方面，多核苷酸包含SEQ ID NO:107中所示核苷酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含编码多肽的核苷酸序列，所述多肽包含与SEQ ID NO:106中所示氨基酸序列具有至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，多肽包含SEQ ID NO:106中所示氨基酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含编码氨基酸序列的核苷酸序列，所述氨基酸序列与SEQ ID NO:117中所示氨基酸序列具有至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性。在一些方面，多肽包含SEQ ID NO:117中所示氨基酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含编码氨基酸序列的核苷酸序列，所述氨基酸序列与SEQ ID NO:120中所示氨基酸序列具有至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性。在一些方面，多肽包含SEQ ID NO:120中所示氨基酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含编码氨基酸序列的核苷酸序列，所述氨基酸序列与SEQ ID NO:121中所示氨基酸序列具有至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性。在一些方面，多肽包含SEQ ID NO:121中所示氨基酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含编码氨基酸序列的核苷酸序列，所述氨基酸序列与SEQ ID NO:122中所示氨基酸序列具有至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性。在一些方面，多肽包含SEQ ID NO:122中所示氨基酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含编码氨基酸序列的核苷酸序列，所述氨基酸序列与SEQ ID NO:123中所示氨基酸序列具有至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性。在一些方面，多肽包含SEQ ID NO:123中所示氨基酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含编码氨基酸序列的核苷酸序列，所述氨基酸序列与SEQ ID NO:124中所示氨基酸序列具有至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性。在一些方面，多肽包含SEQ ID NO:124中所示氨基酸序列。
在一些方面，细胞包含多核苷酸，所述多核苷酸包含编码氨基酸序列的核苷酸序列，所述氨基酸序列与SEQ ID NO:125中所示氨基酸序列具有至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性。在一些方面，多肽包含SEQ ID NO:125中所示氨基酸序列。
在一些方面，细胞包含CAR，所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3。
在一些方面，细胞包含CAR，所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3。
在一些方面，细胞包含CAR，所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:95中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3。
在一些方面，细胞包含多肽，所述多肽包含(i)CAR，所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ IDNO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3和(ii)SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，细胞包含多肽，所述多肽包含(i)CAR，所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ IDNO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3和(ii)SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，细胞包含多肽，所述多肽包含(i)CAR，所述CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ IDNO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:95中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3和(ii)SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列。
在一些方面，细胞包含含有SEQ ID NO:10中所示氨基酸的CAR和含有SEQ ID NO:105中所示氨基酸的装甲分子。在一些方面，细胞包含含有SEQ ID NO:108中所示氨基酸的CAR和含有SEQ ID NO:105中所示氨基酸的装甲分子。在一些方面，细胞包含含有SEQ IDNO:109中所示氨基酸的CAR和含有SEQ ID NO:105中所示氨基酸的装甲分子。在一些方面，细胞包含含有SEQ ID NO:110中所示氨基酸的CAR和含有SEQ ID NO:105中所示氨基酸的装甲分子。在一些方面，细胞包含含有SEQ ID NO:111中所示氨基酸的CAR和含有SEQ ID NO:105中所示氨基酸的装甲分子。在一些方面，细胞包含含有SEQ ID NO:112中所示氨基酸的CAR和含有SEQ ID NO:105中所示氨基酸的装甲分子。在一些方面，细胞包含含有SEQ IDNO:113中所示氨基酸的CAR和含有SEQ ID NO:105中所示氨基酸的装甲分子。在一些方面，细胞包含含有SEQ ID NO:114中所示氨基酸的CAR和含有SEQ ID NO:105中所示氨基酸的装甲分子。在一些方面，细胞包含含有SEQ ID NO:115中所示氨基酸的CAR和含有SEQ ID NO:105中所示氨基酸的装甲分子。在一些方面，细胞包含含有SEQ ID NO:116中所示氨基酸的CAR和含有SEQ ID NO:105中所示氨基酸的装甲分子。
IV.本披露的载体、宿主细胞和药物组合物
在一些方面，本披露的多核苷酸存在于载体中。因此，本文提供了包含本披露的多核苷酸的载体。在一些方面，本披露涉及包含编码如本文所述的CAR的多核苷酸的载体或载体组。在其他方面，本披露涉及包含编码如本文所披露的特异性结合STEAP2的抗体或其抗原结合分子的多核苷酸的载体或载体组。
在一些方面，载体组包含第一载体和第二载体，其中第一载体包含编码本文披露的CAR的核酸序列，第二载体包含编码本文披露的装甲分子的核酸序列。
本领域已知的任何载体可适用于本披露。在一些方面，载体是病毒载体。在一些方面，载体是逆转录病毒载体、DNA载体、鼠白血病病毒载体、SFG载体、质粒、RNA载体、腺病毒载体、杆状病毒载体、爱泼斯坦-巴尔病毒载体、乳头状病毒载体、痘苗病毒载体、单纯疱疹病毒载体、腺病毒相关载体(AAV)、慢病毒载体或其任何组合。
在其他方面，本文提供了包含本披露的多核苷酸或载体的宿主细胞。在一些方面，本披露涉及宿主细胞，例如体外细胞，其包含编码如本文所述的CAR或TCR的多核苷酸。在一些方面，本披露涉及宿主细胞，例如体外细胞，其包含编码如本文披露的特异性结合STEAP2的抗体或其抗原结合分子的多核苷酸。在其他方面，本披露涉及体外细胞，其包含由编码特异性结合STEAP2的CAR的多核苷酸编码的多肽。在其他方面，本披露涉及细胞，体外细胞，其包含由编码如本文所披露的特异性结合STEAP2的抗体或其抗原结合分子的多核苷酸编码的多肽。
任何细胞可用作本披露的多核苷酸、载体或多肽的宿主细胞。在一些方面，细胞可以是原核细胞、真菌细胞、酵母细胞或高等真核细胞如哺乳动物细胞。合适的原核细胞包括但不限于真细菌，例如革兰氏阴性或革兰氏阳性生物体，例如肠杆菌科，例如埃希氏菌属，例如大肠杆菌；肠杆菌属；欧文氏菌属；克雷伯氏菌属；变形杆菌；沙门氏菌属，例如鼠伤寒沙门氏菌；沙雷氏菌属，例如粘质沙雷菌和志贺氏菌；芽孢杆菌，例如枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌；假单胞菌属，例如铜绿假单胞菌；和链霉菌属。在一些方面，细胞是人细胞。
本披露的其他方面涉及包含本文所述的多核苷酸、本文所述的载体、本文所述的多肽或本文所述的细胞的组合物。在一些方面，组合物包含药学上可接受的载体、稀释剂、增溶剂、乳化剂、防腐剂和/或佐剂。在一些方面，组合物包含赋形剂。在一个方面，组合物包含编码CAR的多核苷酸，其中所述CAR包含特异性结合STEAP2的抗原结合分子。在另一方面，组合物包含由本披露的多核苷酸编码的CAR，其中CAR包含特异性结合STEAP2的抗原结合分子。在另一方面，组合物包含含有编码CAR的多核苷酸的T细胞，其中所述CAR包含特异性结合STEAP2的抗原结合分子。在另一个方面，组合物包含如本文所述的特异性结合STEAP2的抗体或其抗原结合分子。在另一方面，组合物包含细胞(例如T细胞，例如CAR-T细胞)，所述细胞包含编码CAR的多核苷酸，所述CAR包含特异性结合STEAP2的抗原结合结构域，如本文所披露的。
在其他方面，组合物被配制用于肠胃外递送、用于吸入、或用于通过消化道递送，如口服。此类药学上可接受的组合物的制备在本领域技术人员的能力范围内。在某些方面，缓冲剂用于将组合物维持在生理pH或稍低的pH，通常在约5至约8的pH范围内。在某些方面，当考虑胃肠外施用时，组合物是无热原的胃肠外可接受的水溶液形式，其包含在药学上可接受的媒介物中的所需的针对BCMA的抗原结合分子，含有或不含另外的治疗剂。在某些方面，用于肠胃外注射的媒介物是无菌蒸馏水，其中将针对BCMA的抗原结合分子与或不与至少一种另外的治疗剂一起配制成适当保存的无菌等渗溶液。在某些方面，该制剂包括所需分子与聚合化合物(例如聚乳酸或聚乙醇酸)、珠粒或脂质体的配制品，其提供产物的控制或持续释放，其随后经由储库注射递送。在某些方面，可植入药物递送装置用于引入所需分子。
VI.本披露的方法
本披露的某些方面涉及在有需要的受试者中治疗疾病或病症的方法，该方法包括向该受试者施用本文披露的组合物。在一些方面，疾病或病症包括癌症。在一些方面，癌症是前列腺癌。在一些方面，癌症包括源自前列腺癌的肿瘤(例如，源自前列腺癌转移的肿瘤)。在一些方面，癌症(例如，前列腺癌)局部进展。在一些方面，癌症(例如，前列腺癌)是转移性的。在一些方面，癌症(例如，前列腺癌)是反复发作性的。在一些方面，癌症(例如，前列腺癌)是复发的。
本文披露的组合物，例如包含编码本文披露的CAR的多核苷酸的T细胞，可以与其他抗癌疗法组合使用，包括一种或多种另外的免疫疗法。在一些方面，本文披露的组合物与另外的抗癌剂同时施用。在一些方面，本文披露的组合物和另外的抗癌剂顺序施用(例如，在同一天或在不同天)。
在一些方面，另外的抗癌剂包含抗代谢物(包括但不限于叶酸拮抗剂、嘧啶类似物、嘌呤类似物和腺苷脱氨酶抑制剂)。在一些方面，另外的抗癌剂包括甲氨蝶呤、5-氟尿嘧啶、氟尿苷、阿糖胞苷、6-巯基嘌呤、6-硫鸟嘌呤、磷酸氟达拉滨、喷司他丁、吉西他滨及其任何组合。
在一些方面，另外的抗癌剂包括紫杉烷、紫杉醇(例如TAXOLTM)、多西他赛、圆皮海绵内酯(DDM)、dictyostatin(DCT)、佩洛鲁西德A、埃博霉素、埃博霉素A、埃博霉素B、埃博霉素C、埃博霉素D、埃博霉素E、埃博霉素F、呋喃埃博霉素D、脱氧埃博霉素Bl、[17]-脱氢脱氧埃博霉素B、[18]脱氢脱氧埃博霉素B、C12,13-环丙基-埃博霉素A、C6-C8桥连埃博霉素A、反式-9,10-脱氢埃博霉素D，顺式-9,10-脱氢埃博霉素D、16-去甲基埃博霉素B、埃博霉素BIO、discoderomolide、帕土匹龙(EPO-906)、KOS-862、KOS-1584、ZK-EPO、ABJ-789、XAA296A(圆皮海绵内酯)、TZT-1027(soblidotin)、ILX-651(tasidotin盐酸盐)、软海绵素B、甲磺酸艾日布林(E-7389)、哈米特林(HTI-286)、E-7974、Cyrptophycins、LY-355703、美登素免疫缀合物(DM-1)、MKC-1、ABT-751、Tl-38067、T-900607、SB-715992(伊斯平斯)、SB-743921、MK-0731、STA-5312、软珊瑚醇、17β-乙酰氧基-2-乙氧基-6-氧基-B-均-雌甾-l,3,5(10)-三烯-3-醇、环链素、异莱利霉素、莱利霉素、4-表-7-去羟基-14,16-去二甲基-(+)-圆皮海绵内酯、和cryptothilone 1、微管稳定剂及其任何组合。
表1.序列
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除非另外指示，否则本披露的实践将使用细胞生物学、细胞培养、分子生物学、转基因生物学、微生物学、重组DNA以及免疫学的常规技术，这些技术在本领域的技能范围内。此类技术在文献中得到充分解释。参见，例如，Sambrook等人编辑(1989)MolecularCloning ALaboratoryManual[分子克隆：实验室手册](第2版；冷泉港实验室出版社)；Sambrook等人编辑(1992)Molecular Cloning:A Laboratory Manual[分子克隆：实验室手册],(冷泉港实验室，纽约)；D.N.Glover编辑(1985)DNA Cloning,Volumes I and II[DNA克隆，I和II卷]；Gait,编辑(1984)Oligonucleotide Synthesis[核苷酸合成]；Mullis等人美国专利号4,683,195；Hames和Higgins编辑(1984)Nucleic Acid Hybridization[核酸杂交]；Hames和Higgins编辑(1984)Transcription And Translation[转录和翻译]；Freshney(1987)Culture Of Animal Cells[动物细胞培养物](艾伦·艾·利斯公司(AlanR.Liss,Inc.))；Immobilized Cells And Enzymes[固定化细胞和酶](IRL出版社)(1986)；Perbal(1984)APractical Guide To Molecular Cloning[分子克隆实用指南]；thetreatise,Methods In Enzymology[论文，酶学方法](学术出版社有限公司，纽约)；Miller和Calos编辑(1987)Gene Transfer Vectors For Mammalian Cells[哺乳动物细胞的基因转移载体],(冷泉港实验室)；Wu等人编辑，Methods In Enzymology[酶学方法]，第154和155卷；Mayer和Walker编辑(1987)Immunochemical Methods In Cell And MolecularBiology[细胞和分子生物学中的免疫化学方法](学术出版社，伦敦)；Weir和Blackwell编辑，(1986)Handbook Of Experimental Immunology,Volumes I-IV[实验免疫学手册，第I-IV卷]；Manipulating the Mouse Embryo[操纵小鼠胚胎]，冷泉港实验室出版社，冷泉港实验室，纽约，(1986)；Crooks,Antisense drug Technology:Principles,strategies andapplications[反义药物技术：原理、策略和应用]，第2版CRC出版社(2007)以及Ausubel等人(1989)Current Protocols in Molecular Biology[分子生物学中的当前方案](约翰威利父子公司(John Wiley and Sons)，马里兰州巴尔的摩)。
以说明的方式而不是以限制的方式提供以下实例。
实例
实例1：抗STEAP2 CAR的产生和表征
STEAP2是减少铁和铜以促进细胞摄取、代谢和增殖的金属还原酶，其主要在前列腺癌中表达，在前列腺外的健康组织或其他癌症类型中几乎不表达或不表达(图1A-1C)。通过对正常组织和前列腺癌cDNA阵列进行定量实时PCR分析来分析STEAP2表达。还包括从CRPC FFPE患者样品产生的cDNA。GAPDH用作标准化对照(图1B)。STEAP2在包括转移瘤和CRPC的所有疾病阶段中具有高的均匀细胞表面表达(图1B)，由于正常人组织表达谱而具有有限的组织下沉和毒性风险：前列腺和肾皮质中的最低表达(图1A-1C)。我们对广泛的肿瘤类型以及整个疾病进程中的前列腺癌进行了cDNA阵列分析、ISH和IHC，以证实与正常前列腺相比，该蛋白质在前列腺癌中过表达并存在于细胞表面(图1C)。
对含有原发性前列腺癌、去势抗性前列腺癌(CRPC)和前列腺淋巴结转移以及前列腺癌骨转移的脱钙全断面切片的组织微阵列进行IHC用于STEAP2膜表达(图1D)。在CRPC(图1E)和骨转移(图1F)中发现STEAP2的高表达。在正常人组织微阵列中进行的STEAP2 IHC和ISH证实在大多数正常组织中不存在或存在低STEAP2(图1G)和在正常前列腺组织中存在高STEAP2蛋白水平(图1H)。
产生多个抗STEAP2抗原结合构建体并测定结合特异性。使用抗原阳性和阴性细胞系进行体外结合测定以评估候选scFv-Fc对STEAP2的特异性(图2A)和细胞上结合亲和力(图2B-2F)。克隆40A3显示与Ad293细胞异源表达的人、食蟹猴和鼠/大鼠STEAP2的强靶向结合(图2A、2E和2F)，与对照Ad293细胞(图2A和2D)或表达其他STEAP家族成员的Ad293细胞(图2A)结合很少或没有结合。克隆40A3进一步结合LNCaP细胞(雄激素敏感的人前列腺腺癌细胞)，作为scFv-Fc CAR构建体和作为IgG1抗体；结合在STEAP2敲除LNCaP细胞中丧失(图2B)。
通过将40A3抗原结合结构域与4-1BB共刺激结构域和CD3ζ信号传导结构域融合，克隆40A3的抗原结合结构域用于产生CAR构建体，本文称为40A3Bz(图3A，顶部)。为了进一步增强CAR-T体内功效，将CAR编码序列置于编码显性负性TGFβRII(dnTGFβRII)的序列上游，通过病毒T2A肽编码序列连接(图3A，底部)。T2A肽允许从同一启动子表达两种单独的蛋白质，确保两种蛋白质的等摩尔表达。然后用慢病毒转导高效表达CAR构建体(图3B-3D)。使用CD3/CD28珠活化的供体T细胞通过慢病毒转导产生CAR-T细胞。与未转导的供体T细胞相比，在细胞表面CAR表达的流式细胞术评估之前，将CAR-T细胞在CAR-T培养条件下扩增10天。将识别40A3Bz的互补位抗体与TGFβRII抗体结合使用，用于在第10天评估未转导的(图3B)、40A3Bz(图3C)和40A3Bz dnTGFβRII(图3D)转导的细胞群体中40A3Bz和40A3Bz dnTGFβRII的细胞表面定位。
为了提供dnTGFβRII装甲的功能验证，在转导后第4天通过FACS将CAR阳性细胞(40A3Bz STEAP2 CAR和403Bz dnTGFβRII STEAP2 CAR-T细胞)纯化至>97％纯度。将这些细胞扩增到第15天，在用1ng/mL重组人TGFβ刺激之前在X VIVOTM15培养基中饥饿17小时。在pSMAD 2/3、总SMAD 2/3和β-肌动蛋白的蛋白质印迹中，比较装甲和未装甲CAR-T细胞之间初始TGFβRII下游的急性信号传导的分析(图3E)。证实了与单独的40A3Bz CAR或未转导细胞相比，dnTGFβRII(40A3Bz)CAR-T细胞中TGFβ介导的信号传导的显著消除(图3E)。
对从2名健康供体扩增的(40A3Bz)STEAP2 CAR和dnTGFβRII(40A3Bz)STEAP2 CAR-T细胞进行表型表征。如通过用CD62L和CD45RO抗体染色所确定的，来自所有条件的T细胞在第10天扩增过程结束时显示出主要具有初始/中枢记忆表型(图4F-4K)。还评估扩增的CAR-T细胞的分化和耗竭标记物(例如CD45RA、CD69、KLRG1、CD127、PD 1和LAG-3；数据未显示)的表达。总之，数据显示CAR和dnTGFβRII装甲可在T细胞中表达。此外，显示将dnTGFβRII装甲引入CAR构建体似乎不显著影响培养结束时的细胞表型。
转导的40A3Bz STEAP2 CAR和40A3Bz dnTGFβRII STEAP2CAR-T细胞显示出稳健的扩增(图4A)。对从2名健康供体扩增的40A3Bz STEAP2 CAR和40A3Bz dnTGFβRII STEAP2CAR-T细胞进行表型表征。来自所有条件的T细胞显示主要具有初始/干细胞样表型(图4B-4K)。还评估扩增的CAR-T细胞的分化和耗竭标记物(例如CD45RA、CD69、KLRG1、CD127、PD 1和LAG-3；数据未显示)的表达。此外，40A3Bz STEAP2 CAR和40A3Bz dnTGFβRII STEAP2CAR-T细胞维持混合的CD4:CD8比率(图4L-4N)。在30ng/ml TGFβ存在下，40A3Bz dnTGFβRIISTEAP2 CAR-T细胞能够杀死C4-2靶细胞(图4O)。将40A3Bz STEAP2 CAR和40A3Bz dnTGFβRII STEAP2CAR-T用30ng/mL重组TGFβ预处理6天以抑制CAR-T功能，然后以1:4E:T比率用于与稳定表达mKate红色荧光蛋白的C4-2细胞的共培养测定。使用活细胞成像系统通过共培养120小时内RFP阳性细胞的存在随时间对细胞毒性成像。结果显示暴露于免疫抑制性TGFβ后，dnTGFβRII装甲的CAR在体外的效力提高。
使用Bang’s beads quantum simply cellular试剂盒，用抗STEAP2抗体-alexafluor 647缀合物通过FACS分析一系列肿瘤细胞系的抗体结合能力。对这些细胞系进行STEAP2细胞表面IHC并定量(图4P，左图)。此外，将这些细胞系以E:T比率1:1包括在40A3BzdnTGFβRIICAR-T共培养测定中，在24小时时对培养基取样以分析从CAR-T细胞释放的IFNγ水平。40A3Bz dnTGFβRIICAR-T显示出对C4-2、LNCaP、VCAP、22RV1细胞系的特异性细胞毒性(图4P，右图)。
还测定了STEAP2 CAR随时间的特异性细胞毒性。STEAP2CAR-T细胞对LNCaP细胞(图5A-5C)和外源表达人STEAP2的Ad293细胞(图5G)具有细胞毒性，但对STEAP2敲除的LNCaP细胞(图5D-5F)或对照Ad293细胞(图5H)没有细胞毒性。在人T细胞培养基(补充有5％人AB热灭活血清和300U/mL IL-2的AIM VTM培养基)中扩增10天的显性负性TGFβRII 40A3BzSTEAP2 CAR-T细胞显示出以与未装甲的STEAP2 CAR-T细胞相似的方式杀死抗原阳性靶细胞(图5C、5F和5G-5H)。另外，40A3Bz和40A3Bz dnTGFbRII STEAP2CAR-T细胞显示在共培养24小时后释放促炎细胞因子(图5I-5K)。在装甲的STEAP2 CAR-T细胞与抗原阴性靶标共培养后没有观察到细胞毒性活性和促炎细胞因子的释放。这表明T细胞活性是STEAP2抗原依赖性的，没有强直性CAR信号传导的证据。STEAP2 CAR-T具有最小的靶向非肿瘤活性(图6)。
实例2：抗STEAP2 CAR在小鼠模型中的体内功效
将STEAP2阳性肿瘤细胞植入小鼠，并施用未转导的(UT)T细胞或用GPC3-G08-Bz阴性对照、14N阳性对照、或3百万、7百万或2千1百万个40A3Bz CAR-T细胞转导的T细胞(图7A-7F)。使用显示表达STEAP2的2种前列腺癌细胞系C4-2和22RV1进行体内概念验证研究(图7C和7F)。数据显示以3种不同剂量输注40A3Bz STEAP2 CAR-T细胞后，NSG小鼠中C4-2肿瘤受到控制(图7A)。在研究期间，所有3种CAR-T细胞剂量均未观察到小鼠体重的不利变化(图7B)。考虑到40A3 scFv可以与鼠STEAP2交叉反应，这些数据从安全角度来看是相关的。在与C4-2相比含有较低STEAP2受体密度和表达比例的22RV1异种移植模型中，肿瘤的控制仅在40A3Bz STEAP2 CAR-T细胞的最高剂量(21×106)下是明显的(图7D)。在7×106剂量下观察到部分反应，在最低3×106个T细胞剂量下未观察到对肿瘤细胞生长的影响。类似于C4-2模型，用22RV1细胞系移植且随后施用3个浓度水平的STEAP2 CAR-T细胞的小鼠在研究期间未显示体重的不利变化(图7E)。
来自22RV1异种移植物研究的小鼠在CAR-T细胞输注后第4、7、14和21天放血以评估细胞因子产生的动力学。血清中人IFNγ、IL-2和TNFα水平升高，对于大多数CAR-T细胞剂量，在第4天或第7天达到峰值，然后在第14天和第21天降低(图7G)。这些数据证实了用体内表达不同水平STEAP2抗原的肿瘤细胞系攻击后STEAP2CAR-T细胞对肿瘤的识别。输注后10天，通过ISH评估STEAP2表达，具有剂量依赖性局灶浸润并且没有损伤迹象(图7I-7K)。
STEAP2 CAR-T施用没有显示CD3+CAR-T浸润到心脏基底神经的证据(图7L-7M)，也没有CD3+CAR-T浸润到外周皮下神经的证据(图7N-7O)。然而，观察到被捕获在致密CAR-T浸润内的两个小的完整和未浸润的外周神经(图7P；箭头)。在肿瘤内也观察到几个小血管，具有最小至轻度STEAP2染色(图7R；箭头)。尽管有非常致密的CD3+CAR-T浸润(图7Q)，但神经是完整的并且似乎不受影响。
STEAP2 CAR-T相对于未转导的T细胞显示增加的持久性。在5轮连续杀伤后(图8A)，40A3Bz dnTGFβRIICAR-T细胞在抗原阳性细胞存在下显示一致的细胞溶解和持续的IFN-γ产生(图8E-8G)，同时保持主要的TCM和TEM分化状态(图8B)。在植入过表达TGFβ的C4-2肿瘤细胞的NSG小鼠中通过尾静脉注射以3种浓度(0.5、2.5、5×e6个CAR阳性细胞)给药的40A3Bz和40A3Bz dnTGFβRIICAR-T细胞显示出肿瘤体积减少(图8E)并在肿瘤植入后60天保持体重(图8F)。dnTGFβRII装甲进一步增强了肿瘤体积的减少(图8E)和细胞因子释放(图8D和8G)。完全应答者(CR)定义为两次连续测量的肿瘤体积为0mm3的小鼠。
将NSG小鼠的胫骨内空间植入表达C4-2荧光素酶的细胞，并监测荧光素酶信号。当肿瘤通量达到4.04e8个光子/秒时，给动物每只小鼠注射1×106、1×105、5×105或1×106个40A3Bz CAR-T细胞或40A3Bz dnTGFβRIICAR-T细胞。在给药后22天监测肿瘤体积和体重，并且剂量依赖性肿瘤生长抑制是明显的，与40A3Bz相比，用40A3Bz dnTGFbRIICAR-T观察到更大的抑制(图8H)。在研究期间没有观察到体重的不利变化(图8I)。
在一些方面，根据SMART方法制备40A3Bz dnTGFβRIICAR-T细胞，并在扩增第4天评估细胞的CAR阳性、激活和表型，并与来自相同供体的未转导的T细胞进行比较(图9A)。将40A3Bz dnTGFβRII SMART CAR-T细胞以4种浓度(0.3、1、3、6×106个CAR阳性细胞)通过尾静脉注射给药植入过表达TGFβ的22Rv1细胞的NSG MHC 1类2类敲除小鼠。在肿瘤植入后50天测量肿瘤体积和体重(图9B)。在所有40A3Bz dnTGFβRII SMART CAR-T细胞治疗的小鼠中肿瘤体积有效减少(图9B，顶部)，对体重没有不利影响(图9B，底部)。
此外，将NSG 1类2类敲除小鼠植入来自CTG-3610前列腺癌细胞的冷冻原液的PDX片段，并在肿瘤体积为125-250mm3时随机化。CTB-3610细胞的膜STEAP2和TGFβ的IHC强度得分为2+，STEAP2的比例得分为5，TGFβ为2(图9C)。向小鼠给药0.5×106或5×106个40A3BzdnTGFβRII SMART CAR-T细胞，并与5×106UT SMART对照进行比较。在两种剂量下，40A3BzdnTGFβRII SMART CAR-T细胞有效抑制肿瘤生长(图9C，顶部)，而对体重没有不利影响(图9C，底部)。
将NSG 1类2类敲除小鼠植入来自CTG-2440前列腺癌细胞的冷冻原液的PDX片段，并在肿瘤体积为125-250mm3时随机化。膜STEAP2和TGFβ的IHC强度得分为2+，STEAP2的比例得分为5，TGFβ为2(图9D)。向小鼠给药0.5×106或5×106个40A3Bz dnTGFβRII SMART CAR-T细胞，并与5×106UT SMART对照进行比较。40A3Bz dnTGFβRII SMART CAR-T细胞剂量依赖性地抑制肿瘤生长(图9D，顶部)，而对体重没有不利影响(图9D，底部)。
将NSG 1类2类敲除小鼠植入来自Lucap 147前列腺癌细胞的冷冻原液的PDX片段，并在肿瘤体积为125-250mm3时随机化。膜STEAP2的IHC强度得分为1+，膜STEAP2的比例得分为5(图9E)。向小鼠给药0.5×106或5×106个40A3Bz dnTGFβRII SMART CAR-T细胞，并与5×106UT SMART对照进行比较。40A3Bz dnTGFβRII SMART CAR-T细胞剂量依赖性地抑制肿瘤生长(图9E，顶部)，而对体重没有不利影响(图9E，底部)。
将NSG 1类2类敲除小鼠植入来自Lucap 73前列腺癌细胞的冷冻原液的PDX片段，并在肿瘤体积为125-250mm3时随机化。膜STEAP2的IHC强度得分为1+，膜STEAP2的比例得分为3(图9F)。向小鼠给药0.5×106或5×106个40A3Bz dnTGFβRII SMART CAR-T细胞，并与5×106UT SMART对照进行比较。40A3Bz dnTGFβRII SMART CAR-T细胞剂量依赖性地抑制肿瘤生长(图9F，顶部)，而对体重没有不利影响(图9F，底部)。
用LNCaP肿瘤细胞系和40A3Bz dnTGFβRIICAR-T细胞以E:T比率0.3:1建立共培养物，并将阻断性抗STEAP2抗体施用于培养物(0.2、2、20或200μg/ml)(图10A)。也用LNCaP肿瘤细胞系和40A3Bz dnTGFβRIICAR-T细胞以E:T比率0.3:1和1:1在阻断性抗STEAP2抗体或同种型对照阻断抗体(0.2、2、20或200μg/ml)存在下建立共培养物，并在培养基中测定IFNγ水平(图10B)。40A3Bz dnTGFβRIICAR-T细胞在低浓度阻断性抗STEAP2抗体存在下有效抑制LNCaP细胞的细胞生长。然而，最高浓度的抗STEAP2阻止了40A3Bz dnTGFβRIICAR-T细胞对LNCaP细胞的生长抑制(图10A)。类似地，40A3Bz dnTGFβRIICAR-T细胞在存在低浓度但不高浓度的阻断STEAP2抗体的情况下剂量依赖性地诱导IFNγ水平，而同种型对照阻断抗体对IFNγ水平没有影响(图10B)。
LNCaP STEAP2 CRISPR细胞与40A3Bz dnTGFβRIICAR-T细胞以E:T比率0.3:1在阻断性抗STEAP2抗体(0.2、2、20或200μg/ml)存在下的共培养显示在40A3Bz dnTGFβRIICAR-T细胞存在下LNCaP STEAP2 CRISPR细胞的细胞生长类似于在未转导T细胞存在下的细胞生长(图10C)，并且没有IFNγ分泌到培养基中(图10D)。
具体方面的以上描述将充分地揭示本披露的总体性质，使得在不脱离本披露的一般概念的情况下，其他人可以无需过多的实验通过应用本领域的技术内的知识，容易地针对此类具体方面的各种应用修改和/或改编。因此，基于在此提出的传授和指导，此类改编和修改旨在处于所披露的含义和等效范围内。应理解，本文的措辞或术语是出于描述而非限制的目的，使得本说明书的术语或措辞应由技术人员根据传授内容和指导进行解释。
在考虑了在此披露的本发明的说明书和实践之后，本领域技术人员将了解本披露的其他方面。说明书和实例旨在被视为仅是示例性的，本披露的真实范围和精神由以下权利要求书指出。
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Claims (159)
1.一种多核苷酸，该多核苷酸包含编码嵌合抗原受体(CAR)的核苷酸序列，其中该CAR包含：
(i)结合人前列腺六跨膜表皮抗原2(STEAP2)上的表位的抗原结合结构域；
(ii)跨膜结构域；以及
(iii)细胞内结构域。
2.如权利要求1所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域结合人STEAP2的细胞外环上的表位。
3.如权利要求1或2所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含Fab、Fab'、F(ab')2、Fd、Fv、单链可变片段(scFv)、单链抗体、VHH、vNAR、纳米抗体(单结构域抗体)或其任何组合。
4.如权利要求1至3中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含scFv。
5.如权利要求1至4中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含可变重链区(VH)和可变轻链区(VL)，其中该VH包含VH互补决定区(CDR)1、VH-CDR2、VH-CDR3；且其中该VL包含VL-CDR1、VL-CDR2和VL-CDR3。
6.如权利要求1至5中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含VH-CDR3，其包含选自SEQ ID NO:6、16、26、36、46和96的氨基酸序列。
7.如权利要求1至6中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含VH-CDR2，其包含选自SEQ ID NO:5、15、25、35、45和95的氨基酸序列。
8.如权利要求1至7中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含VH-CDR1，其包含选自SEQ ID NO:4、14、24、34、44和94的氨基酸序列。
9.如权利要求1至8中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含VL-CDR3，其包含选自SEQ ID NO:3、13、23、33、43和93的氨基酸序列。
10.如权利要求1至9中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含VL-CDR2，其包含选自SEQ ID NO:2、12、22、32、42和92的氨基酸序列。
11.如权利要求1至10中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含VL-CDR1，其包含选自SEQ ID NO:1、11、21、31、41和91的氨基酸序列。
12.如权利要求1至11中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含：
(a)包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3；
(b)包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ IDNO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3；
(c)包含SEQ ID NO:21中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:22中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:23中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:24中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:25中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ IDNO:26中所示氨基酸序列的VH-CDR3；
(d)包含SEQ ID NO:31中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:32中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:33中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:34中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:35中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ IDNO:36中所示氨基酸序列的VH-CDR3；
(e)包含SEQ ID NO:41中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:42中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:43中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:44中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:45中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ IDNO:46中所示氨基酸序列的VH-CDR3；或
(f)包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:95中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ IDNO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3。
13.如权利要求1至12中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含VH，该VH包含与选自SEQ ID NO:7、17、27、37、47和97的氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
14.如权利要求1至13中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含VH，该VH包含选自SEQ ID NO:7、17、27、37、47和97的氨基酸序列。
15.如权利要求1至14中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含VL，该VL包含与选自SEQ ID NO:8、18、28、38、48和98的氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
16.如权利要求1至15中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含VL，该VL包含选自SEQ ID NO:8、18、28、38、48和98的氨基酸序列。
17.如权利要求1至12中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含：
(a)VH和VL，该VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，该VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；
(b)VH和VL，该VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，该VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；
(c)VH和VL，该VH包含与SEQ ID NO:27中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，该VL包含与SEQ ID NO:28中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；
(d)VH和VL，该VH包含与SEQ ID NO:37中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，该VL包含与SEQ ID NO:38中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；
(e)VH和VL，该VH包含与SEQ ID NO:47中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，该VL包含与SEQ ID NO:48中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；或
(f)VH和VL，该VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，该VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
18.如权利要求1至5中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含VH，该VH包含与SEQ ID NO:57中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
19.如权利要求1至5和18中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含VL，该VL包含与SEQ ID NO:58中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
20.如权利要求1至5中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含VH，该VH包含与SEQ ID NO:67中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
21.如权利要求1至5和20中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含VL，该VL包含与SEQ ID NO:68中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
22.如权利要求1至5中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含VH，该VH包含与SEQ ID NO:77中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
23.如权利要求1至5和22中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含VL，该VL包含与SEQ ID NO:78中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
24.如权利要求1至5中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含VH，该VH包含与SEQ ID NO:87中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
25.如权利要求1至5和24中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含VL，该VL包含与SEQ ID NO:88中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
26.如权利要求1至5中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含VH，该VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
27.如权利要求1至5和26中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含VL，该VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
28.如权利要求1至27中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含：
(a)包含SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列的VH，和包含SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列的VL；
(b)包含SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列的VH，和包含SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列的VL；
(c)包含SEQ ID NO:27中所示氨基酸序列的VH，和包含SEQ ID NO:28中所示氨基酸序列的VL；
(d)包含SEQ ID NO:37中所示氨基酸序列的VH，和包含SEQ ID NO:38中所示氨基酸序列的VL；
(e)包含SEQ ID NO:47中所示氨基酸序列的VH，和包含SEQ ID NO:48中所示氨基酸序列的VL；
(f)包含SEQ ID NO:57中所示氨基酸序列的VH，和包含SEQ ID NO:58中所示氨基酸序列的VL；
(g)包含SEQ ID NO:67中所示氨基酸序列的VH，和包含SEQ ID NO:68中所示氨基酸序列的VL；
(h)包含SEQ ID NO:77中所示氨基酸序列的VH，和包含SEQ ID NO:78中所示氨基酸序列的VL；
(i)包含SEQ ID NO:87中所示氨基酸序列的VH，和包含SEQ ID NO:88中所示氨基酸序列的VL；或
29.包含SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列的VH，和包含SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列的VL。如权利要求1至17和28中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含与SEQ ID NO:9中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
30.如权利要求1至17和28中任一项所述的多核苷酸，其中该抗原结合结构域包含与SEQ ID NO:99中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
31.如权利要求1至30中任一项所述的多核苷酸，其中该细胞内结构域包含共刺激结构域或其部分。
32.如权利要求1至31中任一项所述的多核苷酸，其中该细胞内结构域包含共刺激结构域，该共刺激结构域选自由以下组成的组：CD3z的细胞内结构域、CD28共刺激结构域、CD27共刺激结构域、4-1BB共刺激结构域、ICOS共刺激结构域、OX-40共刺激结构域、GITR共刺激结构域、CD2共刺激结构域、IL-2Rβ共刺激结构域、MyD88/CD40a CD28共刺激结构域及其任何组合。
33.如权利要求1至32中任一项所述的多核苷酸，其中该细胞内结构域包含4-1BB共刺激结构域。
34.如权利要求1至32中任一项所述的多核苷酸，其中该细胞内结构域包含CD3z的细胞内结构域和CD28共刺激结构域。
35.如权利要求1至32中任一项所述的多核苷酸，其中该细胞内结构域包含：包含SEQID NO:131的CD3z的细胞内结构域和包含SEQ ID NO:130的4-1BB共刺激结构域。
36.如权利要求1至35中任一项所述的多核苷酸，其中该细胞内结构域包含CD3z的细胞内结构域、CD28共刺激结构域和4-1BB共刺激结构域。
37.如权利要求1至36中任一项所述的多核苷酸，其中该跨膜结构域包含选自CD4、CD8α或CD28的跨膜结构域的跨膜结构域。
38.如权利要求1至37中任一项所述的多核苷酸，其中该跨膜结构域包含CD28的跨膜结构域并包含SEQ ID NO:129。
39.如权利要求1至38中任一项所述的多核苷酸，其中该CAR还包含铰链区/间隔区结构域。
40.如权利要求39所述的多核苷酸，其中该铰链区/间隔区结构域包含免疫球蛋白铰链区/间隔区。
41.如权利要求39或40所述的多核苷酸，其中该铰链区/间隔区结构域包含IgG铰链区结构域。
42.如权利要求39至41中任一项所述的多核苷酸，其中该铰链区/间隔区结构域包含IgG1铰链区结构域、IgG2铰链区结构域、IgG3铰链区结构域或IgG4铰链区结构域。
43.如权利要求39至42中任一项所述的多核苷酸，其中该铰链区/间隔区结构域包含IgG4铰链区结构域并包含SEQ ID NO:128。
44.如权利要求1至43中任一项所述的多核苷酸，其中该CAR包含与SEQ ID NO:10中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
45.如权利要求1至43中任一项所述的多核苷酸，其中该CAR包含与SEQ ID NO:108中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
46.如权利要求1至43中任一项所述的多核苷酸，其中该CAR包含与SEQ ID NO:109中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
47.如权利要求1至43中任一项所述的多核苷酸，其中该CAR包含与SEQ ID NO:110中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
48.如权利要求1至43中任一项所述的多核苷酸，其中该CAR包含与SEQ ID NO:111中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
49.如权利要求1至43中任一项所述的多核苷酸，其中该CAR包含与SEQ ID NO:112中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
50.如权利要求1至43中任一项所述的多核苷酸，其中该CAR包含与SEQ ID NO:113中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
51.如权利要求1至43中任一项所述的多核苷酸，其中该CAR包含与SEQ ID NO:114中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
52.如权利要求1至43中任一项所述的多核苷酸，其中该CAR包含与SEQ ID NO:115中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
53.如权利要求1至43中任一项所述的多核苷酸，其中该CAR包含与SEQ ID NO:116中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
54.如权利要求1至43中任一项所述的多核苷酸，其中该CAR包含与SEQ ID NO:118中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
55.如权利要求1至43中任一项所述的多核苷酸，其中该CAR包含与SEQ ID NO:119中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
56.如权利要求1至55中任一项所述的多核苷酸，该多核苷酸进一步编码装甲分子，其中当在细胞表面上表达时，该装甲分子对抗肿瘤微环境中细胞的免疫抑制。
57.如权利要求56所述的多核苷酸，其中该装甲分子包含显性负性2型TGF-β受体(TGFβRIIDN)。
58.如权利要求56或57所述的多核苷酸，其中该装甲分子包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
59.如权利要求56至58中任一项所述的多核苷酸，其中该装甲分子包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列。
60.如权利要求1至59中任一项所述的多核苷酸，其中编码该CAR的核苷酸序列与SEQID NO:101或103中所示核苷酸序列具有至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性。
61.如权利要求60所述的多核苷酸，其中编码该CAR的核苷酸序列包含SEQ ID NO:101或103中所示核苷酸序列。
62.如权利要求1至61中任一项所述的多核苷酸，该多核苷酸进一步包含编码装甲分子的第二核苷酸序列，其中该第二核苷酸序列与SEQ ID NO:104中所示核苷酸序列具有至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性。
63.如权利要求62所述的多核苷酸，其中该第二核苷酸包含SEQ ID NO:104中所示核苷酸序列。
64.如权利要求63所述的多核苷酸，其中编码该CAR的核苷酸序列包含SEQ ID NO:101中所示核苷酸序列，以及该第二核苷酸序列包含SEQ ID NO:104中所示核苷酸序列。
65.如权利要求63所述的多核苷酸，其中编码该CAR的核苷酸序列包含SEQ ID NO:103中所示核苷酸序列，以及该第二核苷酸序列包含SEQ ID NO:104中所示核苷酸序列。
66.如权利要求56至65中任一项所述的多核苷酸，其中编码该CAR的核苷酸序列和该第二核苷酸序列通过第三核苷酸序列连接，其中该第三核苷酸序列编码可切割的肽接头。
67.如权利要求66所述的多核苷酸，其中该可切割的肽接头是自切割的肽接头。
68.如权利要求66或67所述的多核苷酸，其中该可切割的肽接头包含T2A肽。
69.如权利要求66至68中任一项所述的多核苷酸，其中该可切割的肽接头包含SEQ IDNO:126。
70.如权利要求1-17、28、31-43、56-64或66-69中任一项所述的多核苷酸，该多核苷酸包含与SEQ ID NO:107中所示核苷酸序列具有至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的核苷酸序列。
71.如权利要求1-17、28、31-43、56-64或66-70中任一项所述的多核苷酸，该多核苷酸包含SEQ ID NO:107中所示核苷酸序列。
72.如权利要求1-17、28、31-43、56-63或65-69中任一项所述的多核苷酸，其中该CAR包含与SEQ ID NO:117中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
73.如权利要求1-17、28、31-43、56-63、65-69或72中任一项所述的多核苷酸，其中该CAR包含SEQ ID NO:117中所示氨基酸序列。
74.如权利要求1-17、28、31-43、56-59或66-69中任一项所述的多核苷酸，其中该CAR包含与SEQ ID NO:120中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
75.如权利要求1-17、28、31-43、56-59、66-69或74中任一项所述的多核苷酸，其中该CAR包含SEQ ID NO:120中所示氨基酸序列。
76.如权利要求1-17、28、31-43、56-59或66-69中任一项所述的多核苷酸，其中该CAR包含与SEQ ID NO:121中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
77.如权利要求1-17、28、31-43、56-59、66-69或76中任一项所述的多核苷酸，其中该CAR包含SEQ ID NO:121中所示氨基酸序列。
78.如权利要求1-17、28、31-43、56-59或66-69中任一项所述的多核苷酸，其中该CAR包含与SEQ ID NO:122中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
79.如权利要求1-17、28、31-43、56-59、66-69或78中任一项所述的多核苷酸，其中该CAR包含SEQ ID NO:122中所示氨基酸序列。
80.如权利要求1-17、28、31-43、56-59、66-69中任一项所述的多核苷酸，其中该CAR包含与SEQ ID NO:123中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
81.如权利要求1-17、28、31-43、56-59、66-69或80中任一项所述的多核苷酸，其中该CAR包含SEQ ID NO:123中所示氨基酸序列。
82.如权利要求1-17、28、31-43、56-59或66-69中任一项所述的多核苷酸，其中该CAR包含与SEQ ID NO:124中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
83.如权利要求1-17、28、31-43、56-59、66-69或82中任一项所述的多核苷酸，其中该CAR包含SEQ ID NO:124中所示氨基酸序列。
84.如权利要求1-17、28、31-43、56-59或66-69中任一项所述的多核苷酸，其中该CAR包含与SEQ ID NO:125中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
85.如权利要求1-17、28、31-43、56-59、66-69或84中任一项所述的多核苷酸，其中该CAR包含SEQ ID NO:125中所示氨基酸序列。
86.一种载体或载体组，其包含如权利要求1至85中任一项所述的多核苷酸。
87.如权利要求86所述的载体或载体组，其为病毒载体。
88.一种细胞，该细胞包含如权利要求1至85中任一项所述的多核苷酸或如权利要求86或87所述的载体或载体组。
89.如权利要求88所述的细胞，该细胞是免疫细胞。
90.如权利要求88或89所述的细胞，该细胞选自由以下组成的组：T细胞、天然杀伤(NK)细胞、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)、调节性T细胞、肿瘤浸润淋巴细胞及其任何组合。
91.一种细胞，该细胞包含(i)编码结合人STEAP2的嵌合抗原受体(CAR)的多核苷酸和(ii)编码装甲分子的多核苷酸。
92.如权利要求91所述的细胞，该细胞是免疫细胞。
93.如权利要求91或92所述的细胞，该细胞选自由以下组成的组：T细胞、天然杀伤(NK)细胞、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)、调节性T细胞、肿瘤浸润淋巴细胞及其任何组合。
94.如权利要求91至93中任一项所述的细胞，该细胞是人细胞。
95.如权利要求91至94中任一项所述的细胞，其中该CAR包含抗原结合结构域，该抗原结合结构域包含VH和VL，其中该VH包含VH-CDR1、VH-CDR2、VH-CDR3，并且其中该VL包含VL-CDR1、VL-CDR2和VL-CDR3；并且其中
(a)该VL-CDR1包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列，该VL-CDR2包含SEQ ID NO:2中所示的氨基酸序列，该VL-CDR3包含SEQ ID NO:3中所示的氨基酸序列，该VH-CDR1包含SEQID NO:4中所示的氨基酸序列，该VH-CDR2包含SEQ ID NO:5中所示的氨基酸序列，并且该VH-CDR3包含SEQ ID NO:6中所示的氨基酸序列；
(b)该VL-CDR1包含SEQ ID NO:11中所示的氨基酸序列，该VL-CDR2包含SEQ ID NO:12中所示的氨基酸序列，该VL-CDR3包含SEQ ID NO:13中所示的氨基酸序列，该VH-CDR1包含SEQ ID NO:14中所示的氨基酸序列，该VH-CDR2包含SEQ ID NO:15中所示的氨基酸序列，并且该VH-CDR3包含SEQ ID NO:16中所示的氨基酸序列；
(c)该VL-CDR1包含SEQ ID NO:21中所示的氨基酸序列，该VL-CDR2包含SEQ ID NO:22中所示的氨基酸序列，该VL-CDR3包含SEQ ID NO:23中所示的氨基酸序列，该VH-CDR1包含SEQ ID NO:24中所示的氨基酸序列，该VH-CDR2包含SEQ ID NO:25中所示的氨基酸序列，并且该VH-CDR3包含SEQ ID NO:26中所示的氨基酸序列；
(d)该VL-CDR1包含SEQ ID NO:31中所示的氨基酸序列，该VL-CDR2包含SEQ ID NO:32中所示的氨基酸序列，该VL-CDR3包含SEQ ID NO:33中所示的氨基酸序列，该VH-CDR1包含SEQ ID NO:34中所示的氨基酸序列，该VH-CDR2包含SEQ ID NO:35中所示的氨基酸序列，并且该VH-CDR3包含SEQ ID NO:36中所示的氨基酸序列；
(e)该VL-CDR1包含SEQ ID NO:41中所示的氨基酸序列，该VL-CDR2包含SEQ ID NO:42中所示的氨基酸序列，该VL-CDR3包含SEQ ID NO:43中所示的氨基酸序列，该VH-CDR1包含SEQ ID NO:44中所示的氨基酸序列，该VH-CDR2包含SEQ ID NO:45中所示的氨基酸序列，并且该VH-CDR3包含SEQ ID NO:46中所示的氨基酸序列；或
(f)该VL-CDR1包含SEQ ID NO:91中所示的氨基酸序列，该VL-CDR2包含SEQ ID NO:92中所示的氨基酸序列，该VL-CDR3包含SEQ ID NO:93中所示的氨基酸序列，该VH-CDR1包含SEQ ID NO:94中所示的氨基酸序列，该VH-CDR2包含SEQ ID NO:95中所示的氨基酸序列，并且该VH-CDR3包含SEQ ID NO:96中所示的氨基酸序列。
96.如权利要求91至95中任一项所述的细胞，其中
(a)该VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且该VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；
(b)该VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且该VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；
(c)该VH包含与SEQ ID NO:27中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且该VL包含与SEQ ID NO:28中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；
(d)该VH包含与SEQ ID NO:37中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且该VL包含与SEQ ID NO:38中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；
(e)该VH包含与SEQ ID NO:47中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且该VL包含与SEQ ID NO:48中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；
(f)该VH包含与SEQ ID NO:57中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且该VL包含与SEQ ID NO:58中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；
(g)该VH包含与SEQ ID NO:67中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且该VL包含与SEQ ID NO:68中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；
(h)该VH包含与SEQ ID NO:77中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且该VL包含与SEQ ID NO:78中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；
(i)该VH包含与SEQ ID NO:87中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且该VL包含与SEQ ID NO:88中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；或
(j)该VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且该VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
97.如权利要求91至96中任一项所述的细胞，其中：
(a)该VH包含SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列，并且该VL包含SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列；
(b)该VH包含SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列，并且该VL包含SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列；
(c)该VH包含SEQ ID NO:27中所示氨基酸序列，并且该VL包含SEQ ID NO:28中所示氨基酸序列；
(d)该VH包含SEQ ID NO:37中所示氨基酸序列，并且该VL包含SEQ ID NO:38中所示氨基酸序列；
(e)该VH包含SEQ ID NO:47中所示氨基酸序列，并且该VL包含SEQ ID NO:48中所示氨基酸序列；
(f)该VH包含SEQ ID NO:57中所示氨基酸序列，并且该VL包含SEQ ID NO:58中所示氨基酸序列；
(g)该VH包含SEQ ID NO:67中所示氨基酸序列，并且该VL包含SEQ ID NO:68中所示氨基酸序列；
(h)该VH包含SEQ ID NO:77中所示氨基酸序列，并且该VL包含SEQ ID NO:78中所示氨基酸序列；或
(i)该VH包含SEQ ID NO:87中所示氨基酸序列，并且该VL包含SEQ ID NO:88中所示氨基酸序列；或
(j)该VH包含SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列，并且该VL包含SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列。
98.如权利要求91至97中任一项所述的细胞，其中该装甲分子包含显性负性2型TGF-β受体(TGFβRIIDN)。
99.如权利要求91至98中任一项所述的细胞，其中该装甲分子包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
100.如权利要求91至99中任一项所述的细胞，其中该装甲分子包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列。
101.如权利要求91至100中任一项所述的细胞，其中编码该CAR的多核苷酸包含与SEQID NO:101或103中所示核苷酸序列具有至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的核苷酸序列。
102.如权利要求101所述的细胞，其中编码该CAR的多核苷酸包含SEQ ID NO:101或103中所示核苷酸序列。
103.如权利要求91至102中任一项所述的细胞，其中编码该装甲分子的多核苷酸包含与SEQ ID NO:104中所示核苷酸序列具有至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的核苷酸序列。
104.如权利要求91至103中任一项所述的细胞，其中编码该装甲分子的多核苷酸包含SEQ ID NO:104中所示核苷酸序列。
105.如权利要求91至104中任一项所述的细胞，其中编码该CAR的多核苷酸包含SEQ IDNO:101中所示的核苷酸序列，并且编码该装甲分子的多核苷酸包含SEQ ID NO:104中所示的核苷酸序列。
106.如权利要求91至105中任一项所述的细胞，其中编码该CAR的多核苷酸包含SEQ IDNO:103中所示的核苷酸序列，并且编码该装甲分子的多核苷酸包含SEQ ID NO:104中所示的核苷酸序列。
107.如权利要求91至106中任一项所述的细胞，其中编码该CAR的多核苷酸和编码该装甲分子的多核苷酸在单个启动子的控制下可操作地连接。
108.如权利要求91至107中任一项所述的细胞，其中编码该CAR的多核苷酸和编码该装甲分子的多核苷酸通过IRES可操作地连接。
109.如权利要求91至107中任一项所述的细胞，其中编码该CAR的多核苷酸和编码该装甲分子的多核苷酸通过编码可切割的肽接头的核苷酸序列连接。
110.如权利要求109所述的细胞，其中该可切割的肽接头是自切割的肽接头。
111.如权利要求109或110所述的细胞，其中该可切割的肽接头包含T2A肽。
112.如权利要求109至111中任一项所述的细胞，其中该可切割的肽接头包含SEQ IDNO:126。
113.一种细胞，该细胞包含结合人STEAP2的嵌合抗原受体(CAR)，其中该CAR包含抗原结合结构域，该抗原结合结构域包含：
a)包含SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:2中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:3中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:4中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:5中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ ID NO:6中所示氨基酸序列的VH-CDR3；
b)包含SEQ ID NO:11中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:12中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:13中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:14中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:15中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ IDNO:16中所示氨基酸序列的VH-CDR3；
c)包含SEQ ID NO:21中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:22中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:23中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:24中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:25中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ IDNO:26中所示氨基酸序列的VH-CDR3；
d)包含SEQ ID NO:31中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:32中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:33中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:34中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:35中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ IDNO:36中所示氨基酸序列的VH-CDR3；或
e)包含SEQ ID NO:41中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:42中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:43中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:44中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:45中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ IDNO:46中所示氨基酸序列的VH-CDR3；或
f)包含SEQ ID NO:91中所示氨基酸序列的VL-CDR1，包含SEQ ID NO:92中所示氨基酸序列的VL-CDR2，包含SEQ ID NO:93中所示氨基酸序列的VL-CDR3，包含SEQ ID NO:94中所示氨基酸序列的VH-CDR1，包含SEQ ID NO:45中所示氨基酸序列的VH-CDR2，包含SEQ IDNO:96中所示氨基酸序列的VH-CDR3。
114.如权利要求113所述的细胞，该细胞进一步包含装甲分子。
115.如权利要求113或114所述的细胞，其中该CAR包含抗原结合结构域，该抗原结合结构域包含：
a)VH和VL，该VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，该VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；
b)VH和VL，该VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，该VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；
c)VH和VL，该VH包含与SEQ ID NO:27中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，该VL包含与SEQ ID NO:28中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；
d)VH和VL，该VH包含与SEQ ID NO:37中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，该VL包含与SEQ ID NO:38中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；
e)VH和VL，该VH包含与SEQ ID NO:47中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，该VL包含与SEQ ID NO:48中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；或
f)VH和VL，该VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，该VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
116.如权利要求113至115中任一项所述的细胞，其中该CAR包含抗原结合结构域，该抗原结合结构域包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列。
117.如权利要求113至115中任一项所述的细胞，其中该CAR包含抗原结合结构域，该抗原结合结构域包含SEQ ID NO:99的氨基酸序列。
118.如权利要求113至115中任一项所述的细胞，其中该CAR包含氨基酸序列，该氨基酸序列包含SEQ ID NO:10的氨基酸序列。
119.如权利要求113至115中任一项所述的细胞，其中该CAR包含氨基酸序列，该氨基酸序列包含SEQ ID NO:108的氨基酸序列。
120.如权利要求113至115中任一项所述的细胞，其中该CAR包含氨基酸序列，该氨基酸序列包含SEQ ID NO:109的氨基酸序列。
121.如权利要求113至115中任一项所述的细胞，其中该CAR包含氨基酸序列，该氨基酸序列包含SEQ ID NO:110的氨基酸序列。
122.如权利要求113至115中任一项所述的细胞，其中该CAR包含氨基酸序列，该氨基酸序列包含SEQ ID NO:111的氨基酸序列。
123.如权利要求113至115中任一项所述的细胞，其中该CAR包含氨基酸序列，该氨基酸序列包含SEQ ID NO:112的氨基酸序列。
124.如权利要求113至115中任一项所述的细胞，其中该CAR包含氨基酸序列，该氨基酸序列包含SEQ ID NO:113的氨基酸序列。
125.如权利要求113至115中任一项所述的细胞，其中该CAR包含氨基酸序列，该氨基酸序列包含SEQ ID NO:114的氨基酸序列。
126.如权利要求113至115中任一项所述的细胞，其中该CAR包含氨基酸序列，该氨基酸序列包含SEQ ID NO:115的氨基酸序列。
127.如权利要求113至115中任一项所述的细胞，其中该CAR包含氨基酸序列，该氨基酸序列包含SEQ ID NO:116的氨基酸序列。
128.如权利要求113至115中任一项所述的细胞，其中该CAR包含氨基酸序列，该氨基酸序列包含SEQ ID NO:118的氨基酸序列。
129.如权利要求113至115中任一项所述的细胞，其中该CAR包含氨基酸序列，该氨基酸序列包含SEQ ID NO:119的氨基酸序列。
130.如权利要求113至129中任一项所述的细胞，其中该装甲分子包含显性负性2型TGF-β受体(TGFβRIIDN)。
131.如权利要求113至130中任一项所述的细胞，其中该装甲分子包含与SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
132.如权利要求113至131中任一项所述的细胞，其中该装甲分子包含SEQ ID NO:105中所示氨基酸序列。
133.如权利要求113至115或130至132中任一项所述的细胞，其中该细胞包含氨基酸序列，该氨基酸序列包含SEQ ID NO:106中所示氨基酸序列。
134.如权利要求113至115或130至132中任一项所述的细胞，其中该细胞包含氨基酸序列，该氨基酸序列包含SEQ ID NO:117中所示氨基酸序列。
135.如权利要求113至115或130至132中任一项所述的细胞，其中该细胞包含氨基酸序列，该氨基酸序列包含SEQ ID NO:120中所示氨基酸序列。
136.如权利要求113至115或130至132中任一项所述的细胞，其中该细胞包含氨基酸序列，该氨基酸序列包含SEQ ID NO:121中所示氨基酸序列。
137.如权利要求113至115或130至132中任一项所述的细胞，其中该细胞包含氨基酸序列，该氨基酸序列包含SEQ ID NO:122中所示氨基酸序列。
138.如权利要求113至115或130至132中任一项所述的细胞，其中该细胞包含氨基酸序列，该氨基酸序列包含SEQ ID NO:123中所示氨基酸序列。
139.如权利要求113至115或130至132中任一项所述的细胞，其中该细胞包含氨基酸序列，该氨基酸序列包含SEQ ID NO:124中所示氨基酸序列。
140.如权利要求113至115或130至132中任一项所述的细胞，其中该细胞包含氨基酸序列，该氨基酸序列包含SEQ ID NO:125中所示氨基酸序列。
141.一种特异性结合人STEAP2的抗体或其抗原结合部分，其包含可变重链区(VH)和可变轻链区(VL)，其中该VH包含VH互补决定区(CDR)1、VH-CDR2、VH-CDR3；且其中该VL包含VL-CDR1、VL-CDR2和VL-CDR3，其中
(a)该VL-CDR1包含选自SEQ ID NO:1、11、21、31、41和91的氨基酸序列；
(b)该VL-CDR2包含选自SEQ ID NO:2、12、22、32、42和92的氨基酸序列；
(c)该VL-CDR3包含选自SEQ ID NO:3、13、23、33、43和93的氨基酸序列；
(d)该VH-CDR1包含选自SEQ ID NO:4、14、24、34、44和94的氨基酸序列；
(e)该VH-CDR2包含选自SEQ ID NO:5、15、25、35、45和95的氨基酸序列；并且
(f)该VH-CDR3包含选自SEQ ID NO:6、16、26、36、46和96的氨基酸序列。
142.如权利要求141所述的抗体或其抗原结合部分，其中：
(a)该VL-CDR1包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列，该VL-CDR2包含SEQ ID NO:2中所示的氨基酸序列，该VL-CDR3包含SEQ ID NO:3中所示的氨基酸序列，该VH-CDR1包含SEQID NO:4中所示的氨基酸序列，该VH-CDR2包含SEQ ID NO:5中所示的氨基酸序列，并且该VH-CDR3包含SEQ ID NO:6中所示的氨基酸序列；
(b)该VL-CDR1包含SEQ ID NO:11中所示的氨基酸序列，该VL-CDR2包含SEQ ID NO:12中所示的氨基酸序列，该VL-CDR3包含SEQ ID NO:13中所示的氨基酸序列，该VH-CDR1包含SEQ ID NO:14中所示的氨基酸序列，该VH-CDR2包含SEQ ID NO:15中所示的氨基酸序列，并且该VH-CDR3包含SEQ ID NO:16中所示的氨基酸序列；
(c)该VL-CDR1包含SEQ ID NO:21中所示的氨基酸序列，该VL-CDR2包含SEQ ID NO:22中所示的氨基酸序列，该VL-CDR3包含SEQ ID NO:23中所示的氨基酸序列，该VH-CDR1包含SEQ ID NO:24中所示的氨基酸序列，该VH-CDR2包含SEQ ID NO:25中所示的氨基酸序列，并且该VH-CDR3包含SEQ ID NO:26中所示的氨基酸序列；
(d)该VL-CDR1包含SEQ ID NO:31中所示的氨基酸序列，该VL-CDR2包含SEQ ID NO:32中所示的氨基酸序列，该VL-CDR3包含SEQ ID NO:33中所示的氨基酸序列，该VH-CDR1包含SEQ ID NO:34中所示的氨基酸序列，该VH-CDR2包含SEQ ID NO:35中所示的氨基酸序列，并且该VH-CDR3包含SEQ ID NO:36中所示的氨基酸序列；
(e)该VL-CDR1包含SEQ ID NO:41中所示的氨基酸序列，该VL-CDR2包含SEQ ID NO:42中所示的氨基酸序列，该VL-CDR3包含SEQ ID NO:43中所示的氨基酸序列，该VH-CDR1包含SEQ ID NO:44中所示的氨基酸序列，该VH-CDR2包含SEQ ID NO:45中所示的氨基酸序列，并且该VH-CDR3包含SEQ ID NO:46中所示的氨基酸序列；或
(f)该VL-CDR1包含SEQ ID NO:91中所示的氨基酸序列，该VL-CDR2包含SEQ ID NO:92中所示的氨基酸序列，该VL-CDR3包含SEQ ID NO:93中所示的氨基酸序列，该VH-CDR1包含SEQ ID NO:94中所示的氨基酸序列，该VH-CDR2包含SEQ ID NO:95中所示的氨基酸序列，并且该VH-CDR3包含SEQ ID NO:96中所示的氨基酸序列。
143.如权利要求141或142所述的抗体或其抗原结合部分，其中该VH包含与选自SEQ IDNO:7、17、27、37、47、57、67、77、87和97的氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
144.如权利要求141至143中任一项所述的抗体或其抗原结合部分，其中该VH包含选自SEQ ID NO:7、17、27、37、47、57、67、77、87和97的氨基酸序列。
145.如权利要求141至144中任一项所述的抗体或其抗原结合部分，其中该VL包含与选自SEQ ID NO:8、18、28、38、48、58、68、78、88和98的氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
146.如权利要求141至145中任一项所述的抗体或其抗原结合部分，其中该VL包含选自SEQ ID NO:8、18、28、38、48、58、68、78、88和98的氨基酸序列。
147.如权利要求141至146中任一项所述的抗体或其抗原结合部分，其中：
(a)该VH包含与SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且该VL包含与SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；
(b)该VH包含与SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且该VL包含与SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；
(c)该VH包含与SEQ ID NO:27中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且该VL包含与SEQ ID NO:28中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；
(d)该VH包含与SEQ ID NO:37中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且该VL包含与SEQ ID NO:38中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；
(e)该VH包含与SEQ ID NO:47中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且该VL包含与SEQ ID NO:48中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；
(f)该VH包含与SEQ ID NO:57中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且该VL包含与SEQ ID NO:58中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；
(g)该VH包含与SEQ ID NO:67中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且该VL包含与SEQ ID NO:68中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；
(h)该VH包含与SEQ ID NO:77中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且该VL包含与SEQ ID NO:78中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；
(i)该VH包含与SEQ ID NO:87中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且该VL包含与SEQ ID NO:88中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列；或
(j)该VH包含与SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列，并且该VL包含与SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％序列同一性的氨基酸序列。
148.如权利要求141至147中任一项所述的抗体或其抗原结合部分，其中：
(a)该VH包含SEQ ID NO:7中所示氨基酸序列，并且该VL包含SEQ ID NO:8中所示氨基酸序列；
(b)该VH包含SEQ ID NO:17中所示氨基酸序列，并且该VL包含SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列；
(c)该VH包含SEQ ID NO:27中所示氨基酸序列，并且该VL包含SEQ ID NO:28中所示氨基酸序列；
(d)该VH包含SEQ ID NO:37中所示氨基酸序列，并且该VL包含SEQ ID NO:38中所示氨基酸序列；
(e)该VH包含SEQ ID NO:47中所示氨基酸序列，并且该VL包含SEQ ID NO:48中所示氨基酸序列；
(f)该VH包含SEQ ID NO:57中所示氨基酸序列，并且该VL包含SEQ ID NO:58中所示氨基酸序列；
(g)该VH包含SEQ ID NO:67中所示氨基酸序列，并且该VL包含SEQ ID NO:68中所示氨基酸序列；
(h)该VH包含SEQ ID NO:77中所示氨基酸序列，并且该VL包含SEQ ID NO:78中所示氨基酸序列；
(i)该VH包含SEQ ID NO:87中所示氨基酸序列，并且该VL包含SEQ ID NO:88中所示氨基酸序列；或
(j)该VH包含SEQ ID NO:97中所示氨基酸序列，并且该VL包含SEQ ID NO:98中所示氨基酸序列。
149.一种药物组合物，该药物组合物包含如权利要求1至85中任一项所述的多核苷酸、如权利要求86或87所述的载体、如权利要求88至140中任一项所述的细胞、或如权利要求141至148中任一项所述的抗体或其抗原结合部分、以及药学上可接受的赋形剂。
150.一种在有需要的受试者中治疗疾病或病症的方法，该方法包括向该受试者施用如权利要求1至85中任一项所述的多核苷酸、如权利要求86或87所述的载体、如权利要求88至140中任一项所述的细胞、如权利要求141至148中任一项所述的抗体或其抗原结合部分或如权利要求149所述的药物组合物。
151.如权利要求150所述的方法，其中该疾病或病症包括癌症。
152.一种在有需要的受试者中治疗癌症的方法，该方法包括向该受试者施用如权利要求1至85中任一项所述的多核苷酸、如权利要求86或87所述的载体、如权利要求88至140中任一项所述的细胞、如权利要求141至148中任一项所述的抗体或其抗原结合部分或如权利要求149所述的药物组合物。
153.如权利要求151或152所述的方法，其中该癌症包括前列腺癌。
154.如权利要求153所述的方法，其中该前列腺癌是转移性的、反复发作性的或复发性的。
155.如权利要求1至85中任一项所述的多核苷酸、如权利要求86或87所述的载体、如权利要求88至140中任一项所述的细胞、如权利要求141至148中任一项所述的抗体或其抗原结合部分或如权利要求149所述的药物组合物在有需要的受试者中治疗疾病或病症的用途。
156.如权利要求155所述的用途，其中该疾病或病症包括癌症。
157.如权利要求1至85中任一项所述的多核苷酸、如权利要求86或87所述的载体、如权利要求88至140中任一项所述的细胞、如权利要求141至148中任一项所述的抗体或其抗原结合部分或如权利要求149所述的药物组合物在有需要的受试者中治疗癌症的用途。
158.如权利要求156或157所述的用途，其中该癌症包括前列腺癌。
159.如权利要求158所述的用途，其中该前列腺癌是转移性的、反复发作性的或复发性的。
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| PB01 | Publication | ||
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