CN117980303A

CN117980303A - 新化合物以及它们在治疗细菌感染中的用途

Info

Publication number: CN117980303A
Application number: CN202280062697.8A
Authority: CN
Inventors: D·安德雷奥蒂; J·G·卡明; G·佛萨提; S·萨姆帕莱西; E·塞拉
Original assignee: F Hoffmann La Roche AG
Current assignee: F Hoffmann La Roche AG
Priority date: 2021-09-20
Filing date: 2022-09-19
Publication date: 2024-05-03
Also published as: WO2023041756A1

Abstract

本发明提供了具有通式(I)的新颖化合物，其中R¹、R²、R3^a、R^3b、R⁴、A¹、A²、A³、A⁴、A⁵、A⁶、B¹、B²、B³、B⁴和L如本文所述，包含所述化合物的组合物，以及使用所述化合物的方法。

Description

新化合物以及它们在治疗细菌感染中的用途

本发明提供了表现出广谱抗菌活性的化合物、它们的制造、包含它们的药物组合物以及它们作为药物用于治疗微生物感染、特别是用于治疗由铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯氏菌、大肠杆菌、鲍氏不动杆菌和金黄色葡萄球菌引起、更特别地由革兰氏阴性菌引起、此外更特别地由大肠杆菌引起的疾病和感染的用途。

本发明提供了新颖式(I)化合物，

其中

A¹为-N-；

A²选自

i)-N-，和

ii)-CH-；

A³为-CH-；

A⁴选自

i)-O-，和

ii)-S-；

A⁵为-CH-；

A⁶为-O-；

B¹选自

i)-N-，和

ii)–CR⁵-；

B²选自

i)-N-，和

ii)–CR⁶-；

B³为–CNH-C(＝O)R⁷-；

B⁴选自

i)-N-，和

ii)–CR⁸-；

R²为H；

R^3a选自

i)H，

ii)卤素，和

iii)OH；

R^3b选自

i)H，

ii)卤素，和

iii)OH；

其中R^3a和R^3b中的至少一者为H；

R⁴选自

i)H，

ii)卤素，

iii)C_1-6-烷氧基，和

iii)OH；

R⁵选自

i)H，

ii)卤素，

iii)氰基，和

iv)C_1-6-烷基；

R⁶选自

i)H，和

ii)C_1-6-烷基；

R⁷选自

i)CR^aR^bNR^cR^d，

ii)CR^aR^bOH，

iii)CHR^eR^f，

iv)杂环烷基，

v)杂环烷基烷基，

vi)经取代的杂环烷基，

vii)经取代的杂环烷基烷基，和

vii)经取代的杂芳基，

其中经取代的杂环烷基、经取代的杂环烷基烷基或经取代的杂芳基经1至2个独立地选自C_1-6-烷基、C_1-6-烷氧基、OH、羟基烷基、氨基和二烷基氨基的取代基取代，或者两个取代基一起形成3元至6元环烷基环；

R⁸选自

i)H，

ii)卤素，和

iii)氰基；

L为-L₁-NR⁹-L₂-；

L₁为(CH₂)_x，其中x表示1至6的整数；

L₂为(CH₂)_y，其中y表示1至6的整数，

R¹为H，且R⁹选自

i)H，和

ii)C_1-6-烷基；

或者R¹、R⁹和L₂以及它们所键合的原子形成包含单个N杂原子的4元至6元杂环；

或者R¹和L₂以及它们所键合的原子形成3元至6元烷基环；

R^a和R^b独立地选自

i)H，

ii)C_1-6-烷基，和

iii)卤素，

或者R^a和R^b形成3元环烷基环；

R^c和R^d独立地选自

i)H，

ii)C_1-6-烷基，

iii)C₃-C₆-环烷基，和

iv)包含单个氧杂原子的4元至6元杂环烷基，

或者R^c和R^d形成包含单个N杂原子的4元环；

R^e和R^f独立地选自

i)H，

ii)NH₂，

iii)羟基烷基，和

iv)烷基-COOH；

或其药用盐。

细菌感染引起持续的医疗问题，因为在使用抗菌药物的细菌中最终产生耐药性。细菌对几乎所有目前的抗生素药物的耐药性都在增加。许多形式的抗生素耐药性甚至可以跨越国界并且以惊人的速度蔓延。因此，迫切需要新颖抗菌化合物。

本发明的目的为新颖式(I)化合物、其制造、基于根据本发明所述的化合物的药物和其生产以及式(I)的化合物用于治疗或预防细菌感染、特别是用于治疗由大肠杆菌引起的疾病和感染的用途。

术语“C_1-6-烷基”表示具有1至6个碳原子的单价直链或支链饱和烃基。C_1-6-烷基的实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、正-丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基和戊基。特定的C_1-6-烷基基团为甲基、乙基和正丁基。更特别的实例为甲基。

术语“氰基”表示-C≡N基团。

术语“C_1-6-烷氧基”表示式-O-R'的基团，其中R'为C_1-6-烷基基团。C_1-6-烷氧基基团的实例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正-丁氧基、异丁氧基和叔丁氧基。特定的实例为甲氧基。

术语“C_3-8-环烷基”表示3至8个环碳原子的单价饱和单环或双环烃基。双环意指由两个具有一个或两个共同碳原子的饱和碳环组成的环体系。单环C_3-8-环烷基的实例为环丙基、环丁基、环戊基、环己基或环庚基。特定的单环环烷基基团为C_3-6环烷基，诸如环丙基、环丁基、环戊基和环己基。更特别的单环环烷基基团为环丙基。

术语“卤素”表示氟、氯、溴或碘。特定的卤素为氯和氟。

术语“杂环烷基”表示具有4至9个环原子的单价饱和或部分不饱和的单环或双环体系，其包含1、2或3个选自N、O和S的杂原子，剩余的环原子是任选地被氧代取代的碳。双环意指由两个具有一个或两个共同环原子的环组成。杂环烷基优选地为具有4至6个环原子的单价饱和或部分不饱和单环体系，其包含1个或2个选自N、O和S的环杂原子(4元至6元杂环烷基)。单环饱和杂环烷基的实例为4,5-二氢-噁唑基、氧杂环丁烷基、氮杂环丁烷基、吡咯烷基、2-氧代-吡咯烷-4-基、3-氧代-吗啉-6-基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、吡唑烷基、咪唑烷基、噁唑烷基、异噁唑烷基、噻唑烷基、哌啶基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、1,1-二氧代-硫代吗啉-4-基、氮杂环庚烷基、二氮杂环庚烷基、高哌嗪基或氧氮杂环庚烷基。双环饱和杂环烷基的示例为氧杂双环[2.2.1]庚烷基、氧杂螺[3.3]庚烷基、8-氮杂-双环[3.2.1]辛烷基、奎宁环基、8-氧杂-3-氮杂-双环[3.2.1]辛烷基、9-氮杂-双环[3.3.1]壬烷基、3-氧杂-9-氮杂-双环[3.3.1]壬烷基或3-噻-9-氮杂-双环[3.3.1]壬烷基。部分不饱和杂环烷基的实例是二氢呋喃基、咪唑啉基、二氢噁唑基、四氢吡啶基或二氢吡喃基。杂环基优选地为氮杂环丁烷基、哌啶基、吡咯烷基、四氢呋喃基或氧杂环丁烷基。

术语“杂环烷基烷基”表示一种烷基基团，其中该烷基基团的氢原子中的至少一者已替换为杂环烷基基团。实例为四氢呋喃基烷基、吡咯烷基烷基、哌啶基烷基和氮杂环丁烷基烷基。更特别地，吡咯烷基甲基、哌啶基甲基和氮杂环丁烷基甲基

术语“杂芳基”表示具有4至9个环原子的单价芳族单环或双环体系，其包含1、2、3或4个选自N、O和S的杂原子，剩余的环原子是任选地被氧代取代的碳。双环意指由两个具有一个或两个共同环原子的环组成。杂芳基优选地为具有5至6个环原子的单价芳环体系(5元至6元杂芳基)，其包含1个或2个选自N、O和S的环杂原子。杂芳基的实例为咪唑、吡唑、噁唑、异噁唑、三唑、噻唑、四唑、吡啶、嘧啶、吡嗪或哒嗪。特定杂芳基为噁唑。

术语“羟基”表示-OH基团。

术语“羟基烷基”表示其中烷基基团的至少一个氢原子已被羟基基团代替的烷基基团。羟基烷基的实例包括羟基甲基、羟基乙基、羟基-1-甲基-乙基、羟基丙基、羟基甲基丙基和二羟基丙基。特定实例为羟基甲基。

术语“氨基”表示-NH₂基团。

术语“烷基氨基”表示一种氨基基团，其中该氨基基团的氢原子中的一者已被烷基基团替换。实例为甲基氨基。

术语“二烷基氨基”表示一种氨基基团，其中该氨基基团的氢原子中的两者已被两个烷基基团替换。实例为二甲基氨基。

术语“4元至6元环”表示具有4至6个环原子的单环饱和或不饱和环体系。“4元至6元环”可包含1个、2个或3个选自N、O和S的环杂原子，剩余的环原子是任选地被氧代取代的碳。4元至6元环的实例为环己烷、环戊烷、环丁烷、氮杂环丁烷、吡咯烷和哌啶。特定的4元至6元环为环己烷。

术语“药用盐”是指那些保留游离碱或游离酸的生物效果和特性的盐，这些盐在生物学或其他方面不是不合需要的。这些盐用无机酸诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等(特别是盐酸)和有机酸诸如乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸、N-乙酰基半胱氨酸、乳酸等形成。此外，这些盐可通过将无机碱或有机碱加入游离酸中来制备。衍生自无机碱的盐包括但不限于钠、钾、锂、铵、钙、镁盐等。衍生自有机碱的盐包括但不限于以下各项的盐：伯胺、仲胺和叔胺、经取代胺(包括天然存在的经取代胺)、环胺和碱性离子交换树脂(诸如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、赖氨酸、精氨酸、N-乙基哌啶、哌啶、聚亚胺树脂等)。特定的式(I)的化合物的药用盐为盐酸盐、甲磺酸盐、乳酸盐和柠檬酸盐。

本发明的化合物当置于空气中时可吸收水分、已吸收水或形成水合物。此类水合物也包括在本发明的盐中。

进一步，本发明的化合物可吸收某些其他溶剂以形成溶剂化物。此类溶剂化物也作为式(I)的化合物的盐涵盖于本发明中。

术语“保护基团”(PG)表示选择性封闭多功能化合物中的反应位点以便在合成化学中通常与之相关的另一未保护的反应位点选择性发生化学反应的基团。保护基团可以在适当的时间点被去除。示例性的保护基是氨基保护基、羧基保护基或羟基保护基。特别的保护基团为叔丁氧基羰基(Boc)、苄氧基羰基(Cbz)、芴基甲氧基羰基(Fmoc)和苄基(Bn)基团。进一步特别的保护基团为叔丁氧基羰基(Boc)和芴基甲氧基羰基(Fmoc)基团。更特别的保护基团为叔丁氧基羰基(Boc)基团。

缩写uM意指微摩尔，与符号μM等同。

缩写uL意指微升，相当于符号μL。

缩写ug意指微克，并且与符号μg等同。

式(I)的化合物可含有若干不对称中心，并且能以光学纯对映异构体、对映异构体的混合物(例如外消旋体)、光学纯非对映异构体、非对映异构体的混合物、非对映异构外消旋体或非对映异构外消旋体的混合物的形式存在。

根据Cahn-Ingold-Prelog规范，不对称碳原子可以是"R"或"S"构型。

本发明的另一实施例为如本文所述的根据式(I)的化合物及其药用盐，特别是如本文所述的根据式(I)的化合物及其药用盐，更特别地是如本文所述的根据式(I)的化合物。

本发明的一实施例为如本文所述的根据式(I)的化合物，其中

A¹为-N-；

A²选自

i)-N-，和

ii)-CH-；

A³为-CH-；

A⁴选自

i)-O-，和

ii)-S-；

A⁵为-CH-；

A⁶为-O-；

B¹选自

i)-N-，和

ii)–CR⁵-；

B²选自

i)-N-，和

ii)–CR⁶-；

B³为–CNH-C(＝O)R⁷-；

B⁴选自

i)-N-，和

ii)–CR⁸-；

R²为H；

R^3a选自

i)H，

ii)卤素，和

iii)OH；

R^3b选自

i)H，

ii)卤素，和

iii)OH；

其中R^3a和R^3b中的至少一者为H；

R⁴选自

i)H，

ii)卤素，

iii)C_1-6-烷氧基，和

iii)OH；

R⁵选自

i)H，

ii)卤素，

iii)氰基，和

iv)C_1-6-烷基；

R⁶选自

i)H，和

ii)C_1-6-烷基；

R⁷选自

i)CR^aR^bNR^cR^d，

ii)CR^aR^bOH，

iii)CHR^eR^f，

iv)杂环烷基，

v)杂环烷基烷基，

vi)经取代的杂环烷基，

vii)经取代的杂环烷基烷基，和

vii)经取代的杂芳基，

其中经取代的杂环烷基、经取代的杂环烷基烷基或经取代的杂芳基经1至2个独立地选自C_1-6-烷基、C_1-6-烷氧基、OH、羟基烷基、氨基和二烷基氨基的取代基取代，或者两个取代基一起形成3元至6元环烷基环。

R⁸选自

i)H，

ii)卤素，和

iii)氰基；

L为-L₁-NR⁹-L₂-；

L₁为(CH₂)_x，其中x表示1至6的整数；

L₂为(CH₂)_y，其中y表示1至6的整数，

R¹为H，且R⁹选自

i)H，和

ii)C_1-6-烷基；

或者R¹和L₂以及它们所键合的原子形成3元至6元烷基环；

R^a和R^b独立地选自

i)H，

ii)C_1-6-烷基，和

iii)卤素，

或者R^a和R^b形成3元环烷基环；

R^c和R^d独立地选自

i)H，

ii)C_1-6-烷基，

iii)C₃-C₆-环烷基，和

iv)包含单个氧杂原子的4元至6元杂环烷基，

或者R^c和R^d形成包含单个N杂原子的4元环；

R^e和R^f独立地选自

i)H，

ii)NH₂，

iii)羟基烷基，和

iv)烷基-COOH；

或其药用盐。

本发明的另一个实施例为如本文所述的根据式(I)的化合物，其中

A¹为-N-；

A²为–N-；

A³为-CH-；

A⁴为-O-；

A⁵为-CH-；

A⁶为-O-；

B¹为–CR⁵-；

B²为–CR⁶-；

B³为–CNH-C(＝O)R⁷-；

B⁴为–CR⁸-；

R²为H；

R^3a为H；

R^3b为H；

R⁴为H；

R⁵选自

i)卤素，和

ii)氰基；

R⁶为H；

R⁷选自

i)CR^aR^bNR^cR^d，

ii)CR^aR^bOH，

iii)包含单个N杂原子的4元杂环烷基烷基，

iv)包含单个N杂原子的5元经取代的杂环烷基，其中经取代的杂环烷基经1至2个独立地选自C_1-6-烷基、OH和羟基烷基的取代基取代，

R⁸选自

i)H，和

ii)卤素；

L为-L₁-NR⁹-L₂-；

L₁为(CH₂)_x，其中x为1；

L₂为(CH₂)_y，其中y为2；

R¹和R⁹为H，

或者R¹、R⁹和L₂以及它们所键合的原子形成如下哌啶环，

R^a和R^b独立地选自

i)H，

ii)C_1-6-烷基，和

iii)卤素，

R^c和R^d为C_1-6-烷基，或者R^c和R^d形成包含单个N杂原子的4元环；

或其药用盐。

另外，本发明的一个特定实施例提供如本文所述的根据式(I)的化合物，其中

A¹为-N-；

A²为–N-；

A³为-CH-；

A⁴为-O-；

A⁵为-CH-；

A⁶为-O-；

B¹为–CR⁵-；

B²为–CR⁶-；

B³为–CNH-C(＝O)R⁷-；

B⁴为–CR⁸-；

R²为H；

R^3a为H；

R^3b为H；

R⁴为H；

R⁵为卤素；

R⁶为H；

R⁷为CR^aR^bNR^cR^d；

R⁸为H；

L为-L₁-NR⁹-L₂-；

L₁为(CH₂)_x，其中x为1；

R¹和R⁹为H；

L₂为(CH₂)_y，其中y为2；

R^a和R^b独立地选自

i)H，和

ii)C_1-6-烷基；

R^c和R^d为C_1-6-烷基；

或其药用盐。

本发明的一实施例提供如本文所述的根据式(I)的化合物，其中A⁴为–O-。

本发明的一实施例提供如本文所述的根据式(I)的化合物，其中R⁶为H。

本发明的一实施例提供如本文所述的根据式(I)的化合物，其中R⁸为H或卤素。

本发明的一个特定实施例提供如本文所述的根据式(I)的化合物，其中R⁸为H。

本发明的一实施例提供如本文所述的根据式(I)的化合物，其中A²为-N-。

本发明的一实施例提供如本文所述的根据式(I)的化合物，其中B¹为–CR⁵-。

本发明的一实施例提供如本文所述的根据式(I)的化合物，其中B²为–CR⁶-。

本发明的一实施例提供如本文所述的根据式(I)的化合物，其中B⁴为–CR⁸-。

本发明的一实施例提供如本文所述的根据式(I)的化合物，其中R⁴为H。

本发明的一实施例提供如本文所述的根据式(I)的化合物，其中R⁵为氰基或卤素。

本发明的一特定实施例提供如本文所述的根据式(I)的化合物，其中R⁵为卤素。

本发明的一实施例提供如本文所述的根据式(I)的化合物，其中R⁷选自

i)CR^aR^bNR^cR^d，

ii)CR^aR^bOH，

iii)CHR^eR^f，

iv)包含单个N杂原子的5元杂环烷基，

v)包含单个N杂原子的3元至6元杂环烷基烷基，

vi)包含单个N或O杂原子的5元经取代的杂环烷基，

vii)包含单个N杂原子的5元经取代的杂环烷基烷基，和

viii)经取代的噁唑，

其中经取代的杂环烷基、经取代的杂环烷基烷基或经取代的噁唑经1至2个独立地选自C_1-6-烷基、C_1-6-烷氧基、OH、羟基烷基、氨基和二烷基氨基的取代基取代，或者两个取代基一起形成3元至6元环烷基环。

i)CR^aR^bNR^cR^d，

ii)CR^aR^bOH，

iii)包含单个N杂原子的4元杂环烷基烷基，

iv)包含单个N杂原子的5元经取代的杂环烷基，

其中经取代的杂环烷基经1至2个独立地选自C_1-6-烷基、OH或羟基烷基的取代基取代。

本发明的一特定实施例提供如本文所述的根据式(I)的化合物，其中R⁷为CR^aR^bNR^cR^d。

本发明的一实施例提供如本文所述的根据式(I)的化合物，其中R⁹为H。

本发明的一实施例提供如本文中所述的根据式(I)的化合物，其中R^a和R^b独立地选自H、C_1-6-烷基和卤素。

本发明的一特定实施例提供如本文所述的根据式(I)的化合物，其中R^a为H且R^b为C_1-6-烷基。

本发明的一实施例提供如本文所述的根据式(I)的化合物，其中R^c和R^d独立地选自C_1-6-烷基或者一起形成包含单个N杂原子的4元环。

本发明的一特定实施例提供如本文所述的根据式(I)的化合物，其中R^c和R^d两者均为C_1-6-烷基。

本发明的一实施例提供如本文所述的根据式(I)的化合物，其中x为2。

本发明的一实施例提供如本文所述的根据式(I)的化合物，其中y为1。

本发明的一实施例提供如本文所述的根据式(I)的化合物，其中R¹、R⁹和L₂以及它们所键合的原子形成如下哌啶环，

制造如本文所述的式(I)的化合物的方法也是本发明的目的。

本发明的式(I)化合物的制备可按照顺序或并发合成路线进行。本发明的合成如以下总体方案所示。进行所得产物的反应和纯化所需的技能是本领域技术人员已知的。除非有相反说明，否则在以下对过程的描述中使用的取代基和标记具有本文之前给出的意义。

更详细地，式(I)化合物可以通过以下给出的方法、通过实例中给出的方法或通过类似方法来制造。各个反应步骤的适当反应条件是本领域技术人员已知的。反应顺序不限于方案1至11中显示的顺序，但是，取决于起始材料及其各自的反应性，可自由改变反应步骤的顺序。起始物质可商购获得，或者可以通过类似于下面给出的方法的方法、通过在说明书中或在实施例中引用的参考文献中描述的方法或通过本领域已知的方法制备。

本发明的式(I)的化合物及其药用盐可通过下文所述的方法(方案1)进行制备，其中L₁为(CH₂)x并且x为1至6。

式(II)的醛与式(III)的胺进行还原胺化得到式(I)化合物。典型条件包括三乙酰氧基硼氢化钠或氰基硼氢化钠，任选地在诸如室温的温度下在溶剂诸如甲醇、THF或1,2-二氯乙烷中，在添加剂诸如N,N-二异丙基乙胺或三乙胺或乙酸或粉状分子筛的存在下。

替代性地，式(I)的化合物可以如方案2中所示进行制备。

式(IV)的中间体(其中LG为离去基团，诸如碘、溴、甲磺酰氧基或甲苯磺酰氧基)与式(III)的胺进行反应得到式(I)化合物。典型条件包括在溶剂诸如MeCN、DMF、DMA或NMP中、在诸如80℃的高温，使用碱诸如碳酸钾或碳酸铯。

替代性地，式(I)的化合物可以如方案3中所示进行制备。

式(V)的醛(其中X为受保护的胺官能团)与式(III)的胺进行还原胺化得到式(VI)的中间体。典型条件包括三乙酰氧基硼氢化钠或氰基硼氢化钠，任选地在诸如室温的温度下在溶剂诸如甲醇、THF或1,2-二氯乙烷中，在添加剂诸如N,N-二异丙基乙胺或三乙胺或乙酸或粉状分子筛的存在下。

式(VI)的受保护的胺进行脱保护得到式(VII)的胺。典型的保护基团包括Boc，其典型的脱保护条件包括在溶剂诸如DCM或EtOAc中、在诸如室温的温度，使用酸诸如三氟乙酸或盐酸。替代性地，受保护的胺官能团可以是硝基基团，其可以被还原以得到式(VII)的胺。典型条件包括在氢气气氛下、在催化剂诸如碳载钯的存在下、在溶剂诸如乙醇中、在诸如室温的温度进行氢化。

式(VII)的胺与羧酸进行反应得到式(I)化合物。典型条件包括在碱诸如DIPEA或1-甲基咪唑的存在下、在溶剂诸如DCM、DMF或MeCN中、在诸如室温的温度，使用偶联剂诸如TCFH或HATU。

式(II)的中间体可以如方案4中所示进行制备。

式(VIII)的酯还原得到式(IX)的醇。典型条件包括在诸如介于-78℃与室温之间的温度下在溶剂诸如THF中的还原剂诸如氢化铝锂。式(IX)的醇氧化得到式(II)的醛。典型条件包括在溶剂诸如DCM中、在诸如0℃至25℃的温度，使用戴斯-马丁氧化剂(Dess-Martinperiodiane)；或在三乙胺和干燥二甲亚砜的存在下、在溶剂诸如DCM中、在诸如0℃至25℃的温度，使用三氧化硫吡啶复合物。

替代性地，式(VIII)的酯还原得到式(II)的醛。典型条件包括在诸如介于-78℃与-20℃之间的降低的温度下在溶剂诸如THF中的还原剂诸如氢化铝锂，。

式(IV)的中间体(其中LG为离去基团，诸如碘、溴、甲磺酰氧基或甲苯磺酰氧基)可以如方案4中所示进行制备。式(IX)的醇进行活化得到式(IV)的中间体。典型条件包括在溶剂诸如DCM中、在诸如0℃与室温之间的温度，使用对甲苯磺酰氯或甲磺酰氯、N,N-二异丙基乙胺或三乙胺和DMAP，任选地随后使所得甲磺酰氧基或甲苯磺酰氧基衍生物与卤化物盐诸如碘化钠或溴化钾在溶剂诸如MeCN中、在诸如60℃的温度进行反应。

式(VIII)和(IX)的中间体可以如方案5中所示进行制备。

式(X)或式(XI)的胺与羧酸进行反应分别提供式(VIII)和式(IX)的中间体。典型条件包括在碱诸如DIPEA、DMAP或1-甲基咪唑的存在下，在溶剂诸如DCM、DMF或MeCN中，在诸如室温的温度，使用偶联剂诸如TCFH、T3P或HATU。替代性地，式(X)的胺与酰氯进行反应提供式(VIII)的中间体。典型条件包括在碱诸如三甲基胺或DIPEA的存在下，在溶剂诸如DCM、DMA或THF中，在诸如-10℃与25℃之间的温度。

式(XI)的中间体可以如方案5中所示进行制备。式(X)的酯进行还原得到式(XI)的醇。典型条件包括在诸如介于-78℃与室温之间的温度下在溶剂诸如THF中的还原剂诸如氢化铝锂。

式(X)的中间体可以如方案6中所示进行制备。

式(XIII)的中间体(其中X为H)进行硝化得到式(XII)的受保护的胺，其中胺保护基团为硝基。典型条件包括在较低温度(诸如-10℃与0℃之间)，使用硝酸和硫酸的混合物。式(XII)的受保护的胺(其中胺保护基团为硝基)进行还原得到式(X)的胺。典型条件包括在氢气气氛下、在催化剂诸如碳载钯的存在下、在溶剂诸如乙醇中、在诸如室温的温度进行氢化。

式(XIII)的中间体(其中X为Br或三氟甲磺酸酯)进行胺化得到式(XII)的受保护的胺，其中胺保护基团为Boc或二苯基甲胺。典型条件包括在钯催化剂诸如叁(二亚苄基丙酮)二钯(0)和膦配体诸如xantphos或XPhos以及碱诸如碳酸铯的存在下、在溶剂诸如1,4-二噁烷中、在诸如90℃与100℃之间的温度，与氨基甲酸叔丁酯或二苯基甲胺反应。式(XII)的受保护的胺(其中胺保护基团为Boc或二苯基甲胺)进行脱保护得到式(X)的胺。典型条件包括在溶剂诸如DCM、THF或EtOAc中、在诸如室温的温度，使用酸诸如三氟乙酸或盐酸。

使用三步程序，可以将式(XIII)中间体(其中X为H)转化为式(XIII)的中间体(其中X为三氟甲磺酸酯)。第一步的典型条件包括在催化剂诸如(1,5-环辛二烯)(甲氧基)铱(I)二聚体的存在下、在诸如65℃的温度，使用4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷和3,4,7,8-四甲基-1,10-二氮杂菲。第二步的典型条件包括在0℃与25℃之间的温度，使用在水中的一水合过硼酸钠。第三步的典型条件包括在诸如0℃的温度、在溶剂诸如DCM中、在碱诸如2,6-二甲基吡啶的存在下，使用三氟甲磺酸酐。

式(V)的中间体可以如方案6中所示进行制备。式(XII)的酯还原得到式(XIV)的醇。典型条件包括在诸如介于-78℃与室温之间的温度下在溶剂诸如THF中的还原剂诸如氢化铝锂。式(XIV)的醇进行氧化得到式(V)的醛。典型条件包括在溶剂诸如DCM中、在诸如0℃与25℃之间的温度，使用戴斯-马丁氧化剂；或在三乙胺和干燥二甲亚砜的存在下、在溶剂诸如DCM中、在诸如0℃与25℃之间的温度，使用三氧化硫吡啶复合物。

式(XII)和(XIII)的中间体可以如方案7中所示进行制备。

式(XV)或式(XVI)的酮与碳酸二乙酯或碳酸二甲酯进行反应分别得到式(XVII)和式(XVIII)的β-酮酯(其中X为H或Br，且R⁴为H)。典型条件包括在溶剂诸如甲苯中、在诸如120℃的温度，使用碱诸如氢化钠。

式(XVII)或式(XVIII)的β-酮酯(其中X为Br)进行胺化分别得到式(XVII)和式(XVIII)的β-酮酯(其中X为受保护的氨基)。典型条件包括在钯催化剂诸如叁(二亚苄基丙酮)二钯(0)和膦配体诸如xantphos或XPhos以及碱诸如碳酸铯的存在下、在溶剂诸如1,4-二噁烷中、在诸如90℃与100℃之间的温度，使用氨基甲酸叔丁酯。

可以将式(XVII)或式(XVIII)的β-酮-酯(其中R⁴为H)还原为式(XIII)或式(XII)的酯(其中R^3a、R^3b和R⁴为H)。典型条件包括在诸如0℃与25℃之间的温度，使用三乙基硅烷和三氟乙酸。

式(XVII)或式(XVIII)的β-酮酯进行还原得到式(XIII)或式(XII)的醇(其中R^3a或R^3b分别为OH)。典型条件包括在溶剂诸如乙醇中、在诸如0℃的温度，使用硼氢化钠；或在催化剂诸如碳载钯的存在下、在溶剂诸如EtOAc中、在诸如室温的温度进行氢化。

式(XIII)或式(XII)的醇(其中R^3a或R^3b或R⁴为OH)与试剂诸如二乙基氨基三氟化硫在溶剂诸如DCM中、在诸如-78℃的温度反应，得到式(XIII)或式(XII)的中间体(其中R^3a或R^3b或R⁴分别为F)。

使用两步程序，可以将式(XIII)或式(XII)的醇(其中R^3a或R^3b为OH)转化为式(XIII)或式(XII)的中间体(其中R^3a和R^3b为H)。第一步的典型条件包括在溶剂诸如DCM中、在诸如0℃的温度，使用磺酰氯和碱诸如三乙胺。第二步的典型条件包括在催化剂诸如碳载钯的存在下、在溶剂诸如EtOAc中、在诸如室温的温度进行氢化。

式(XVII)或式(XVIII)的β-酮酯(其中R⁴为H)与试剂诸如3-氯过苯甲酸在溶剂诸如DCM中、在诸如0℃的温度反应得到式(XVII)或式(XVIII)的中间体(其中R⁴为OH)。

替代性地，式(XIII)的中间体(其中R^3a、R^3b和R⁴为H)可以如方案8中所示进行制备。

式(XIX)的炔烃或异氰酸酯与式(XX)的二炔或炔烃-腈进行环加成得到式(XXIII)的中间体。典型条件包括在高温下在溶剂诸如苯中使用催化剂混合物诸如氯(1,5-环辛二烯)铱(I)二聚体与1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁，或在诸如90℃的高温下在溶剂诸如1,2-二氯乙烷中使用催化剂诸如氯(1,5-环辛二烯(五甲基环戊二烯基)钌(II)。

替代性地，式(XXI)的二卤代甲基化合物与式(XXII)的丙二酸二酯进行反应得到式(XXIII)的二酯。典型条件包括在诸如0℃的温度下在溶剂诸如THF中使用碱诸如氢化钠。

式(XXIII)的二酯可以转化为式(XIII)的酯，其中R^3a、R^3b和R⁴为H。典型条件包括在诸如160℃的高温下使用盐，诸如在DMSO和水中的氯化锂。

替代性地，式(XXIII)的二酯可以在诸如100℃的温度、在水中用酸诸如HCl进行处理，然后在诸如80℃的温度、在溶剂诸如甲醇或乙醇中与酸诸如硫酸反应以得到式(XIII)的酯(其中R^3a、R^3b和R⁴为H)。

式(III)的中间体可以如方案9中所示进行制备。

式(XXIV)的化合物与任选地受保护的式(XXV)的杂芳基溴化物偶联得到任选地受保护的式(XXVI)的中间体。典型条件包括在诸如100℃的温度下，在碱诸如在溶剂诸如1,4-二噁烷中的碳酸钾的存在下，使用催化量的碘化亚铜(I)和反式-N,N’-二甲基环己烷-1,2-二胺或三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)和9,9-二甲基-4,5-双(二苯基膦基)氧杂蒽。式(XXV)的杂芳基溴化物中典型的任选保护基团基包括2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基。式(XXVI)中间体进行脱保护得到式(III)的中间体。典型条件包括在诸如25℃的温度，在溶剂诸如甲醇或乙酸乙酯中使用酸诸如盐酸，或在溶剂诸如DCM中使用三氟乙酸。

如本文所述的式(I)化合物的特定示例选自

2-(二甲基氨基)-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]乙酰胺；

1-(二甲基氨基)-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]环丙烷甲酰胺；

2-(二甲基氨基)-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-2-甲基-丙酰胺；

(2R)-2-(二甲基氨基)-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]丙酰胺；

N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-2-吗啉代-乙酰胺；

2-(二甲基氨基)-N-[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]-2-甲基-丙酰胺；

(2R)-2-(二甲基氨基)-N-[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]丙酰胺；

2-(氮杂环丁烷-1-基)-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]乙酰胺；

(2S)-2-(二甲基氨基)-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]丙酰胺；

(2S)-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-1-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺；

N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-2-[甲基(氧杂环丁烷-3-基)氨基]乙酰胺；

2-(3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]乙酰胺；

2-[环丙基(甲基)氨基]-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]乙酰胺；

(2R)-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-1-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺；

N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-2-甲基-噁唑-5-甲酰胺；

2-(氮杂环丁烷-1-基)-N-[7-氟-2-[[2-[(5R)-2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]丙酰胺；

(2S,4R)-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-4-甲氧基-1-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺；

N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-2-羟基-2-甲基-丙酰胺；

(3R)-3-(二甲基氨基)-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]四氢呋喃-3-甲酰胺；

N-[7-氰基-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-2-羟基-2-甲基-丙酰胺；

N-[7-氰基-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-2-羟基-2-甲基-丙酰胺；

(2R)-N-[7-氰基-2-[[2-[(5R)-2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-2-(二甲基氨基)丙酰胺；

(2R)-2-(二甲基氨基)-N-[4-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]丙酰胺；

2-(二甲基氨基)-N-[4-甲基-6-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-2-基]乙酰胺；

(2R)-2-(二甲基氨基)-N-[4-甲基-6-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-2-基]丙酰胺；

2-(氮杂环丁烷-1-基)-N-[4-甲基-6-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-2-基]乙酰胺；

(2S)-1-甲基-N-[4-甲基-6-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-2-基]吡咯烷-2-甲酰胺；

(2R)-2-(二甲基氨基)-N-[1-甲基-6-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[c]吡啶-3-基]丙酰胺；

(2R)-2-(二甲基氨基)-N-[1-甲基-6-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[c]吡啶-3-基]丙酰胺；

(2R)-N-[4,7-二氟-2-羟基-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-2-(二甲基氨基)丙酰胺；

(2R)-N-[4,7-二氟-2-甲氧基-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-2-(二甲基氨基)丙酰胺；

(2R)-2-(二甲基氨基)-N-[2,4,7-三氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]丙酰胺；

(2R)-N-[2,7-二氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-2-(二甲基氨基)丙酰胺；

(2R)-N-[7-氰基-2-羟基-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-2-(二甲基氨基)丙酰胺；

(2R)-N-[7-氰基-2-羟基-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]-2-(二甲基氨基)丙酰胺；

(2S)-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]吡咯烷-2-甲酰胺；

(2S,4R)-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-吡咯烷-2-甲酰胺；

(2R)-2-氨基-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-3-羟基-丙酰胺；

(2R)-2-氨基-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-3-甲氧基-丙酰胺；

(3R)-3-氨基-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]四氢呋喃-3-甲酰胺；

(3R)-3-氨基-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]四氢呋喃-3-甲酰胺；2,2,2-三氟乙酸；

(3S)-3-氨基-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]四氢呋喃-3-甲酰胺；

(3S)-3-氨基-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]四氢呋喃-3-甲酰胺；盐酸盐；

(2S,4R)-N-[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-吡咯烷-2-甲酰胺；

2-氨基-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-2-甲基-丙酰胺；

(2S,4R)-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-4-甲氧基-吡咯烷-2-甲酰胺；

(2R,4R)-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-吡咯烷-2-甲酰胺；

(2S,4S)-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-吡咯烷-2-甲酰胺；

(2R,4S)-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-吡咯烷-2-甲酰胺；

(3S)-3-氨基-4-[[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]氨基]-4-氧代-丁酸；

(3S)-3-氨基-4-[[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]氨基]-4-氧代-丁酸；2,2,2-三氟乙酸；

(2S,4R)-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-1-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺；

N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-2-[(3R)-3-羟基吡咯烷-1-基]乙酰胺；

(2S)-2-(二甲基氨基)-N-[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]丙酰胺；

(2S,4R)-N-[4,7-二氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-吡咯烷-2-甲酰胺；

(2R)-N-[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]-2-(羟基甲基)吡咯烷-2-甲酰胺；

(2R)-N-[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]-2-(羟基甲基)吡咯烷-2-甲酰胺；2,2,2-三氟乙酸；

(2S,3S)-N-[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]-3-羟基-吡咯烷-2-甲酰胺；

(2S,3S)-N-[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]-3-羟基-吡咯烷-2-甲酰胺；2,2,2-三氟乙酸；

(2R,4R)-N-[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-吡咯烷-2-甲酰胺；

(2R,4S)-N-[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-吡咯烷-2-甲酰胺；

(2S,4S)-N-[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-吡咯烷-2-甲酰胺；

(2R)-2-(二甲基氨基)-N-[7-氟-2-[[甲基-[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基]氨基]甲基]茚满-5-基]丙酰胺；

(2S,4R)-N-[7-氰基-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-吡咯烷-2-甲酰胺；

(2S,4R)-4-羟基-N-[6-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-3-基]吡咯烷-2-甲酰胺；

(2S,4R)-N-[7-氰基-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-吡咯烷-2-甲酰胺；

(2R)-N-[7-氰基-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-1-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺；

(2S,4R)-N-[7-氟-2-[[甲基-[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基]氨基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-吡咯烷-2-甲酰胺；

(2S,4R)-N-[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-1-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺；

(2R)-2-(二甲基氨基)-N-[7-氟-3-羟基-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]丙酰胺；

(2R)-2-(二甲基氨基)-N-[7-氟-3-羟基-2-[[2-[(5R)-2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]丙酰胺；

(2R)-N-[3,7-二氟-2-[[2-[(5R)-2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-2-(二甲基氨基)丙酰胺；

(2R)-2-(二甲基氨基)-N-[7-氟-2-[[2-[(5S)-2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]丙酰胺；

(2R)-2-(二甲基氨基)-N-[7-氟-2-[[2-[(5R)-2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]丙酰胺；

或其药用盐。

如本文所述的式(I)化合物的另一特定实例为(2S,4R)-N-[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-2-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺；

如本文所述的式(I)的进一步特定实例选自

或其药用盐。

如本文所述的式(I)的最特定实例选自

或其药用盐。

本发明的另一个目的是如本文所述的根据式(I)的化合物，该化合物用作治疗活性物质。

同样，本发明的一个目的是一种药物组合物，该药物组合物包含如本文所述的根据式(I)的化合物以及治疗惰性载体。

如上所述，式(I)的化合物及其药用盐具有用于治疗或预防由病原体引起、特别是由细菌引起、更特别地由铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯氏菌、大肠杆菌、鲍氏不动杆菌或金黄色葡萄球菌、更特别地由革兰氏阴性菌引起、此外更特别地由大肠杆菌引起的感染和由此所致的疾病(特别是菌血症、肺炎、脑膜炎、尿路感染和伤口感染)的有价值的药理特性。

式(I)的化合物及其药用盐表现出作为抗生素、特别是作为抗铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯氏菌、大肠杆菌、鲍氏不动杆菌或金黄色葡萄球菌、更特别地抗革兰氏阴性菌、此外更特别地抗大肠杆菌的抗生素的活性。

式(I)的化合物及其药用盐可用作抗生素，即用作适用于治疗和预防细菌感染的抗菌药物成分，其特别适用于治疗和预防由病原体引起、特别是由细菌引起、更特别地由铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯氏菌、大肠杆菌、鲍氏不动杆菌或金黄色葡萄球菌、更特别地由革兰氏阴性菌引起、此外更特别地由大肠杆菌引起的细菌感染。

本发明的化合物可单独使用或与其他药物联合使用，用于治疗或预防由病原体引起、特别是由细菌引起、更特别地由铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯氏菌、大肠杆菌、鲍氏不动杆菌或金黄色葡萄球菌、更特别地由革兰氏阴性菌引起、此外更特别地由大肠杆菌引起的感染和由此所致的疾病，特别是菌血症、肺炎、脑膜炎、尿路感染和伤口感染。

本发明的一个特定实施例涉及包含如上文所定义的式(I)的化合物或其如上文定义的药用盐与一种或多种药用赋形剂的药物组合物。

本发明的一个特定实施例涉及包含如上文所定义的式(I)的化合物或其如上文定义的药用盐与一种或多种药用赋形剂的药物组合物，其用于治疗或预防由病原体引起、特别是由细菌引起、更特别地由铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯氏菌、大肠杆菌、鲍氏不动杆菌或金黄色葡萄球菌、更特别地由革兰氏阴性菌引起、此外更特别地由大肠杆菌引起的感染和由此所致的疾病，特别是菌血症、肺炎、脑膜炎、尿路感染和伤口感染。

本发明的一个特定实施例涉及如上文所定义的式(I)的化合物或其药用盐，其用作治疗活性物质，尤其是用作治疗或预防由病原体引起、特别是由细菌引起、更特别地由铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯氏菌、大肠杆菌、鲍氏不动杆菌或金黄色葡萄球菌、更特别地由革兰氏阴性菌引起、此外更特别地由大肠杆菌引起的感染和由此所致的疾病(特别是菌血症、肺炎、脑膜炎、尿路感染和伤口感染)的治疗活性物质。

本发明的一个特定实施例涉及如上文所定义的式(I)的化合物或其药用盐，其用于治疗或预防由病原体引起、特别是由细菌引起、更特别地由铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯氏菌、大肠杆菌、鲍氏不动杆菌或金黄色葡萄球菌、更特别地由革兰氏阴性菌引起、此外更特别地由大肠杆菌引起的感染和由此所致的疾病，特别是菌血症、肺炎、脑膜炎、尿路感染和伤口感染。

本发明的一个特定实施例涉及一种治疗或预防由病原体引起、特别是由细菌引起、更特别地由铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯氏菌、大肠杆菌、鲍氏不动杆菌或金黄色葡萄球菌、更特别地由革兰氏阴性菌引起、此外更特别地由大肠杆菌引起的感染和由此所致的疾病(特别是菌血症、肺炎、脑膜炎、尿路感染和伤口感染)的方法，该方法包括向受试者施用如上文所定义的式(I)的化合物或其药用盐。

本发明的一个特定实施例涉及如上文所定义的式(I)的化合物或其药用盐的用途，其用于治疗或预防由病原体引起、特别是由细菌引起、更特别地由铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯氏菌、大肠杆菌、鲍氏不动杆菌或金黄色葡萄球菌、更特别地由革兰氏阴性菌引起、此外更特别地由大肠杆菌引起的感染和由此所致的疾病，特别是菌血症、肺炎、脑膜炎、尿路感染和伤口感染。

本发明的一个特定实施例涉及如上文所定义的式(I)的化合物或其药用盐用于制备药物的用途，所述药物用于治疗或预防由病原体引起、特别是由细菌引起、更特别地由铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯氏菌、大肠杆菌、鲍氏不动杆菌或金黄色葡萄球菌、更特别地由革兰氏阴性菌引起、此外更特别地由大肠杆菌引起的感染和由此所致的疾病，特别是菌血症、肺炎、脑膜炎、尿路感染和伤口感染。此类药物包含如上所定义的式(I)化合物或其药用盐。

本发明的又一实施例为如本文所述的式(I)化合物，其根据本文所述方法中的任一者进行制造。

测定程序

最低抑制浓度(MIC)确定:

根据M07-A10临床和实验室标准研究所(Clinical and Laboratory StandardsInstitute)(CLSI)指南[1]，使用适当的肉汤培养基，使用肉汤微量稀释法确定抗菌化合物对多种物种和菌株的MIC。简而言之，通过在96孔微量滴定板(MTP)的第一个孔中分配100μL各储备液来制备化合物板，各储备液的浓度比肉汤中所需的最终浓度高100倍。对于新化合物，在DMSO中对最高浓度的储备液进行十一次连续2倍稀释；且对于参考化合物，在水(或适当的溶液)中进行稀释[2]。从各孔中取1μL转移至新MTP中，作为后续接种的测试板。该细菌悬液由首先在琼脂板上继代培养并且酌情孵育18至24小时的菌株来制备。孵育后，由分离的菌落制备接种物，并且在0.9％盐水中调整至0.5McFarland浊度标准(1x108至2x108菌落形成单位(CFU)/mL)。然后将细菌悬液在适当的无菌培养基中按1:200稀释，并且在15分钟内以100μL/孔分配。所有板中均包括阴性对照(缺乏细菌细胞)和生长对照孔(缺乏化合物)。MTP在环境空气中于35±2℃孵育18至24小时。将各化合物的MIC值(以μg/mL表示)确定为完全抑制生长(无可见生长)所需的最低浓度。

[1]CLSI(2015)Methods for dilution antimicrobial susceptibility testsfor bacteria that grow aerobically；批准的标准，第十版。CLSI文件M7-A10(ISBN 1-56238-987-4).Wayne,PA:Clinical and Laboratory Standards Institute,19087,USA。

[2]CLSI(2017)Performance Standards for Antimicrobial SusceptibilityTesting；第二十五次资料补编。CLSIDocument M100-S27,CLSI,Wayne,Pennsylvania19087,USA。

表1提供每升所获得的本发明化合物对大肠杆菌(Escherichia coli)ATCC 25922菌株的最低抑制浓度(MIC)，单位为微克每毫升。

本发明的特定化合物表现出≤4μg/mL的MIC(大肠杆菌ATCC 25922)。

本发明的更特定化合物表现出≤1μg/mL的MIC(大肠杆菌ATCC 25922)。

本发明的最特定化合物表现出≤0.25μg/mL的MIC(大肠杆菌ATCC 25922)。

表1

式(I)化合物及其药用盐可以用作药物(例如，以药物制剂的形式)。药物制剂可内部给药，诸如经口(例如，以片剂、包衣片剂、糖衣丸、硬和软明胶胶囊、溶液、乳剂或混悬剂的形式)、经鼻(例如，以鼻喷雾剂的形式)、经直肠(例如，以栓剂的形式)或经眼部局部(例如，以溶液、软膏、凝胶剂或水溶性聚合物插入物的形式)给药。但是，也可通过肠胃外诸如肌内、静脉内或眼内(例如，以无菌注射液的形式)给药。

式(I)化合物及其药用盐可与药学上惰性的无机或有机助剂一起加工，以用于生产片剂、包衣片剂、糖衣丸、硬明胶胶囊、注射液或局部制剂。例如，可使用乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石粉、硬脂酸或其盐等作为片剂、糖衣丸和硬明胶胶囊的此类助剂。

用于软明胶胶囊的合适的助剂为例如植物油、蜡、脂肪、半固体物质和液体多元醇等。

用于制备溶液和糖浆的合适的助剂为例如水、多元醇、蔗糖、转化糖、葡萄糖等。

用于注射液的合适的助剂为例如水、醇、多元醇、甘油、植物油等。

用于栓剂的合适的助剂为例如天然或硬化油、蜡、脂肪、半固体或液体多元醇等。

用于局部眼用制剂的合适的助剂为例如环糊精、甘露醇或本领域已知的许多其他载体和赋形剂。

此外，药物制剂可以含有防腐剂、增溶剂、增粘物质、稳定剂、润湿剂、乳化剂、甜味剂、着色剂、香料、用于改变渗透压的盐、缓冲剂掩模剂或抗氧化剂。它们还可以含有其他有治疗价值的物质。

剂量可以在宽范围内变化，当然将适合每种特定情况下的各种要求。一般而言，口服给药的日剂量为每kg体重约0.1mg至20mg、优选为每kg体重约0.5mg至4mg(例如每人约300mg)应当是合适的，其优选地分为1-3个单独的剂量(可由例如相同的量组成)。在局部给药的情况下，该制剂可包含按重量计0.001％至15％的药物，并且所需剂量可以为0.1mg至25mg，每天或每周单次给药、或每天多次给药(2至4次)，或每周多次给药。但是，显而易见的是，当显示为适用时，可超过本文中给出的上限或下限。

包含本发明的化合物的药物组合物的制备：

以下组合物的片剂按常规方式进行生产：

生产程序

1.将成分1、2、3和4混合并与纯化水一起造粒。

2.在50℃干燥颗粒。

3.令颗粒通过合适的研磨设备。

4.加入成分5，混合三分钟；在合适的压机上压制。

生产以下组合物的胶囊：

生产程序

1.将成分1、2和3在合适的混合器中混合30分钟。

2.加入成分4和5，并混合3分钟。

3.填充到合适的胶囊中。

首先在混合器中将式I化合物与乳糖和玉米淀粉混合，然后在粉碎机中粉碎。使混合物返回混合器；向其中加入滑石粉，并且混合均匀。利用机器将混合物装填到合适的胶囊中，例如硬明胶胶囊。

生产以下组合物的注射液：

本发明通过以下实例示出，这些实例不具有限制性。

如果制备例以对映异构体的混合物的形式获得，则纯对映异构体可通过本文所述的方法或本领域的技术人员所知的方法诸如例如手性色谱或结晶来获得。

实例

缩写

MeOH：甲醇，AcOH：乙酸，制备型HPLC：制备型反相高效液相色谱，MS：质谱，M：分子量，ESP：电喷雾电离(正电荷检测)，ESN：电喷雾电离(负电荷检测)，DCM：二氯甲烷，EtOAc：乙酸乙酯，DMF：N,N-二甲基甲酰胺，RT、r.t.或rt：室温，DIPEA：N,N-二异丙基乙胺，i-PrOH：2-丙醇，h：小时，min.：分钟，THF：四氢呋喃，xantphos：4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基氧杂蒽，TFA：三氟乙酸，二噁烷：1,4-二噁烷，sat.：饱和，quant.：定量，EI：电子电离，dppf：1,1′-二茂铁二基-双(二苯基膦)，HATU：1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化六氟磷酸盐，RM：反应混合物，t-BuOH：2-甲基丙烷-2-醇，制备型TLC：制备型薄层色谱，SFC：超临界流体色谱，乙醚：乙醚，BOC：叔丁氧基羰基，HV：高真空，Pd/C：碳载钯，TMSCl：三甲基氯硅烷，MeCN：乙腈，NMR：核磁共振波谱法，s：单峰，d(NMR)：双峰，t：三重峰，q：四重峰，m：多重峰，dd：双峰的双峰，dt：三重峰的双峰，br：宽，J：耦合常数，δ：化学位移(以ppm计)，PE：石油醚，NMP：N-甲基-2-吡咯烷酮，DMA：N,N-二甲基乙酰胺，MTBE：甲基叔丁基醚，戴斯-马丁氧化剂或DMP：1,1,1-三乙酰氧基-1,1-二氢-1,2-苯碘酰-3(1H)-酮，LDA：二异丙基氨基锂，MOMCl：甲基氯甲基醚，DMAP：4-二甲基氨基吡啶，tBu：叔丁基，LiHMDS：双(三甲基甲硅烷基)酰胺锂，TsCl：对甲苯磺酰氯，HPLC：制备型反相高效液相色谱，TBSOTf：三氟甲磺酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯，Grubbs二代催化剂：1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷亚基)二氯(苯基亚甲基)(三环己基膦)钌，DMSO：二甲基亚砜，AcOEt：乙酸乙酯，d(时间)：天，TEMPO：(2,2,6,6-四甲基-哌啶-1-基)氧基，TBSCl：叔丁基二甲基氯硅烷，dba：二亚苄基丙酮，XPhos：二环己基[2',4',6'-叁(丙-2-基)[1,1'-联苯]-2-基]膦，t-BuXPhos：2-二-叔丁基膦基-2',4',6'-三异丙基联苯基，t-BuXPhos-Pd-G3：[(2-二叔丁基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)-2-(2'-氨基-1,1'-联苯)]甲磺酸钯(II)，XPhos-G3-Pd：(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)[2-(2'-氨基-1,1'-联苯)]甲磺酸钯(II)，T3P：2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧在三磷杂环己烷-2,4,6-三氧化物，TBAF：四正丁基氟化铵，TCFH：氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸盐，SCX：强阳离子交换。

实例1

2-(二甲基氨基)-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]乙酰胺

将6-[5-(2-氨基乙基)-2-氧代-噁唑烷-3-基]-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮；2,2,2-三氟乙酸(中间体1，51.13mg，0.130mmol，1当量)、2-(二甲基氨基)-N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)乙酰胺(中间体7，85.9mg，0.130mmol，1当量)、DIPEA(33.96uL，0.190mmol，1.5当量)在THF(3mL)和DMA(2mL)中的混合物在RT搅拌15分钟。添加乙酸(18.61uL，0.330mmol，2.5当量)和三乙酰氧基硼氢化钠(41.33mg，0.190mmol，1.5当量)并将混合物在RT搅拌1h。添加EtOAc和NaHCO₃(饱和水溶液)，然后分离各相。有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩。粗产物通过快速色谱(0至10％MeOH/DCM)纯化，以得到标题化合物(12mg，0.020mmol，17.3％收率)。MS(ESP)m/z＝528.2[M+H]⁺。

以下实例的制备类似于实例1。

/>

实例36

(2S)-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]吡咯烷-2-甲酰胺

将6-[5-(2-氨基乙基)-2-氧代-噁唑烷-3-基]-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮；2,2,2-三氟乙酸(中间体1，62.69mg，0.160mmol，1当量)、(2S)-2-[(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(中间体37，60.0mg，0.160mmol，1当量)和DIPEA(41.64uL，0.240mmol，1.5当量)在THF(1.5mL)和DMA(0.5mL)中的混合物在室温搅拌15分钟。添加乙酸(22.81uL，0.400mmol，2.5当量)和三乙酰氧基硼氢化钠(50.67mg，0.240mmol，1.5当量)并将混合物在r.t.搅拌1h。添加EtOAc和NaHCO₃(饱和水溶液)并分离各相。有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩。获得的粗品通过快速柱色谱(在DCM中的0％-5％MeOH，然后是在DCM中的0％-10％MeOH)纯化，以得到白色固体状(2S)-2-[[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(47.0mg，0.070mmol，55.32％收率)。向该产物在DCM(2mL)中的溶液中添加三氟乙酸(0.11mL，1.47mmol，20当量)。将混合物在r.t.下搅拌过夜。添加EtOAc和NaHCO₃溶液(饱和水溶液)。分离各相，水相用EtOAc(x2)萃取。合并的有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。获得的粗品通过快速柱色谱(在DCM中的0％-10％MeOH，然后是在DCM中的10％-30％MeOH)纯化，以得到白色固体状标题化合物(13mg，0.020mmol，31.15％收率)。MS(ESP)m/z＝540.3[M+H]⁺。

以下实例的制备类似于实例36。

/>

实例49

(2S,4R)-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-1-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺

将6-[5-(2-氨基乙基)-2-氧代-噁唑烷-3-基]-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮；2,2,2-三氟乙酸(中间体1，35.35mg，0.090mmol，1当量)、(2S,4R)-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)-1-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺(中间体49，37.8mg，0.090mmol，1当量)和N,N-二异丙基乙胺(0.02mL，0.130mmol，1.5当量)在THF(1.5mL)和DMA(0.500mL)中的混合物在RT搅拌15分钟，然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(28.57mg，0.130mmol，1.5当量)和乙酸(0.01mL，0.220mmol，2.5当量)。将混合物在20℃搅拌48h。添加NaHCO₃(饱和水溶液)和EtOAc。将混合物搅拌15分钟，然后分离各相。有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩。将获得的粗品通过快速柱色谱(在DCM中的0％-10％MeOH)纯化，以得到黄色固体状(2S,4R)-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-1-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺(28.5mg，0.040mmol，46.37％收率)。在RT向该物质在四氢呋喃(2mL)中的溶液中添加四丁基氟化铵(83.35uL，0.080mmol，2当量)。将混合物在RT搅拌24h，然后将其浓缩。残余物通过快速柱色谱(在DCM中的1％-20％MeOH)纯化，以得到浅黄色固体状标题化合物(17mg，0.030mmol，70.18％收率)。MS(ESP)m/z＝570.4[M+H]⁺。

实例50

N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-2-[(3R)-3-羟基吡咯烷-1-基]乙酰胺

类似于实例49，使用2-[(3R)-3-[叔丁基(二苯基)硅烷基]氧基吡咯烷-1-基]-N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)乙酰胺(中间体50)代替(2S,4R)-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)-1-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺，制备并获得白色固体状标题化合物。MS(ESP)m/z＝570.3[M+H]⁺。

实例51

(2S)-2-(二甲基氨基)-N-[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]丙酰胺

将6-[8-[(6-氨基-4-氟-茚满-2-基)甲基]-2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-基]-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮(中间体51，30.0mg，0.060mmol，1当量)、(2S)-2-(二甲基氨基)丙酸(8.25mg，0.070mmol，1.1当量)、TCFH(21.56mg，0.080mmol，1.2当量)和1-甲基咪唑(17.87uL，0.220mmol，3.5当量)在MeCN(0.637mL)中的悬浮液在r.t.搅拌16h。在减压下去除挥发物以得到残余物，该残余物通过反相色谱(从水+0.1％氢氧化铵/乙腈95:5至水+0.1％氢氧化铵/乙腈65:35)纯化，然后通过二氧化硅小柱(cartridge)色谱(5g二氧化硅-NH，从DCM 100％至DCM:[EtOAc/MeOH 9:1]7:3)纯化，以得到白色固体状标题化合物(15mg，0.030mmol，41.27％收率)。MS(ESP)m/z＝568.3[M+H]⁺。

实例52

(2S,4R)-N-[4,7-二氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-吡咯烷-2-甲酰胺

将6-[8-[(5-氨基-4,7-二氟-茚满-2-基)甲基]-2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-基]-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮(中间体52，17.5mg，0.040mmol，1当量)、(2S,4R)-1-叔丁氧基羰基-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-吡咯烷-2-甲酸(中间体38，步骤1，16.16mg，0.050mmol，1.3当量)、TCFH(16.15mg，0.060mmol，1.6当量)和1-甲基咪唑(11.47uL，0.140mmol，4当量)在MeCN(2mL)中的悬浮液在RT搅拌6h。然后添加TCFH(7.07mg，0.030mmol，0.700当量)、(2S,4R)-1-叔丁氧基羰基-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-吡咯烷-2-甲酸(16.16mg，0.050mmol，1.3当量)和DMF(0.800mL)并将混合物搅拌过夜。将反应混合物用EtOAc和NaHCO₃(饱和水溶液)稀释。分离各相，并且水层用EtOAc(x2)萃取。合并的有机相通过分相器过滤，并在减压下去除挥发物以得到残余物，该残余物通过二氧化硅小柱色谱(5g，从DCM 100％至DCM/MeOH 95:5)纯化，以得到白色固体状(2S,4R)-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-2-[[4,7-二氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(22.5mg，0.030mmol，76.84％收率)。向该物质在DCM(2mL)中的溶液中添加三氟乙酸(0.8mL，10.38mmol，393.12当量)，并将混合物在RT搅拌过夜。然后蒸发DCM，添加三氟乙酸(0.8mL，10.38mmol，393.12当量)并将混合物再搅拌18h。将混合物在真空下浓缩，然后添加NaHCO₃(饱和水溶液)并将混合物搅拌15分钟。混合物用EtOAc(x2)和EtOAc/MeOH(9:1)萃取。合并的有机相通过分相器干燥并在真空下浓缩。所得粗品通过快速柱色谱(10g，从100％DCM至90:10DCM/MeOH)纯化，以得到标题化合物(11mg，0.020mmol，67.37％收率)。MS(ESP)m/z＝600.5[M+H]⁺。

实例53

(2R)-N-[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]-2-(羟基甲基)吡咯烷-2-甲酰胺；2,2,2-三氟乙酸

在25℃向(2R)-2-[[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基甲基]-2-[[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(中间体53，125.0mg，0.150mmol，1当量)在THF(1.54mL)中的溶液中添加1M四丁基氟化铵在THF中的溶液(0.43mL，0.430mmol，2.77当量)。将反应混合物在25℃搅拌5分钟。然后在RT搅拌4小时。反应混合物用EtOAc和NH₄Cl(饱和水溶液)稀释。分离各相，并且有机相用NH₄Cl(饱和水溶液)(x2)洗涤。有机相通过分相器过滤，并在减压下去除挥发物以得到残余物，该残余物通过二氧化硅小柱色谱(10g，从DCM 100％至DCM/MeOH 9:1+0.1％NH₄OH)纯化，以得到灰白色固体状(2R)-2-[[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]氨基甲酰基]-2-(羟基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(63mg，0.090mmol，58.68％收率)。将该物质在DCM(0.906mL)和三氟乙酸(0.3mL，3.91mmol，43.18当量)中的溶液在r.t.搅拌0.75h。在减压下去除挥发物，并且将残余物与MeCN一起蒸发数次直至去除所有TFA。将残余物悬浮于DCM和戊烷中并搅拌，去除上清液并将该操作重复3次。将剩余固体在减压下干燥，以得到灰白色固体装标题化合物(39.1mg，0.050mmol，65.25％收率)。MS(ESP)m/z＝596.3[M+H]⁺。

实例54

(2R,3S)-N-[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]-3-羟基-吡咯烷-2-甲酰胺；2,2,2-三氟乙酸

类似于实例53，由(2S,3S)-3-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-2-[[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(中间体54)制备并获得灰白色固体状标题化合物。MS(ESP)m/z＝582.3[M+H]⁺。

实例55

(2R,4R)-N-[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-吡咯烷-2-甲酰胺

类似于实例52，使用6-[8-[(6-氨基-4-氟-茚满-2-基)甲基]-2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-基]-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮(中间体51)代替6-[8-[(5-氨基-4,7-二氟-茚满-2-基)甲基]-2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-基]-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮，并且使用(2R,4R)-1-叔丁氧基羰基-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-吡咯烷-2-甲酸(中间体45，步骤1)代替(2S,4R)-1-叔丁氧基羰基-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-吡咯烷-2-甲酸，制备并获得白色固体状标题化合物。MS(ESP)m/z＝582.4[M+H]⁺。

实例56

(2R,4S)-N-[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-吡咯烷-2-甲酰胺

类似于实例55，使用(2R,4S)-1-叔丁氧基羰基-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-吡咯烷-2-甲酸(中间体47，步骤1)代替(2R,4R)-1-叔丁氧基羰基-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-吡咯烷-2-甲酸，制备并获得白色固体状标题化合物。MS(ESP)m/z＝582.4[M+H]⁺。

实例57

(2S,4S)-N-[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-吡咯烷-2-甲酰胺

类似于实例55，使用(2S,4S)-1-叔丁氧基羰基-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-吡咯烷-2-甲酸(中间体46，步骤1)代替(2R,4R)-1-叔丁氧基羰基-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-吡咯烷-2-甲酸，制备并获得白色固体状标题化合物。MS(ESP)m/z＝582.4[M+H]⁺。

实例58

(2R)-2-(二甲基氨基)-N-[7-氟-2-[[甲基-[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基]氨基]甲基]茚满-5-基]丙酰胺

向(2R)-2-(二甲基氨基)-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]丙酰胺(实例4，74.0mg，0.140mmol，1当量)在THF(2.28mL)中的搅拌溶液中添加甲醛37wt％水溶液(10.17uL，0.140mmol，1当量)和三乙酰氧基硼氢化钠(57.92mg，0.270mmol，2当量)，并将混合物搅拌过夜。添加另外的甲醛37wt％水溶液(10.17uL，0.140mmol，1当量)和三乙酰氧基硼氢化钠(28.96mg，0.140mmol，1当量)，并继续搅拌2h。然后用NaHCO₃(水溶液)的稀释溶液淬灭反应，并用DCM(3x5mL)萃取。合并的有机层通过分相器干燥并在减压下浓缩。残余物通过二氧化硅小柱色谱(10g，甲醇/DCM 0至100％)纯化，然后通过反相二氧化硅小柱(5g，乙腈/(水+0.1％NH₃)1％至53％)纯化，之后冻干以得到白色固体状标题化合物(35mg，0.060mmol，45.64％收率)。MS(ESP)m/z＝556.5[M+H]⁺。

实例59

(2S,4R)-N-[7-氰基-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-吡咯烷-2-甲酰胺

类似于实例52，使用6-氨基-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-4-甲腈(中间体55)代替6-[8-[(5-氨基-4,7-二氟-茚满-2-基)甲基]-2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-基]-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮，制备并获得白色固体状标题化合物。MS(ESP)m/z＝589.4[M+H]⁺。

实例60

(2S,4R)-4-羟基-N-[6-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-3-基]吡咯烷-2-甲酰胺

将(2S,4R)-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-2-[[6-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-3-基]氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(中间体56，30.0mg，0.040mmol，1当量)在三氟乙酸(1.0mL，12.98mmol，337.03当量)中的溶液在r.t.搅拌19h。在减压下去挥发物以得到残余物，该残余物通过二氧化硅小柱色谱(5g二氧化硅-NH，从DCM100％至DCM/[DCM/MeOH 9:1]45:55)纯化，以得到白色固体状标题化合物(12mg，0.020mmol，52.43％收率)。MS(ESP)m/z＝565.4[M+H]⁺。

实例61

(2S,4R)-N-[7-氰基-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-吡咯烷-2-甲酰胺

类似于实例53，由(2S,4R)-2-[[2-[[叔丁氧基羰基-[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基]氨基]甲基]-7-氰基-茚满-5-基]氨基甲酰基]-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(中间体57)，制备并获得白色固体状标题化合物。MS(ESP)m/z＝563.3[M+H]⁺。

实例62

(2R)-N-[7-氰基-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-1-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺

类似于实例52，由N-[(6-氨基-4-氰基-茚满-2-基)甲基]-N-[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体57，步骤5)和(2R)-1-甲基吡咯烷-2-甲酸[CAS#58123-62-9]，制备并获得白色固体状标题化合物。MS(ESP)m/z＝561.4[M+H]⁺。

实例63

(2S,4R)-N-[7-氟-2-[[甲基-[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基]氨基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-吡咯烷-2-甲酰胺

类似于实例60，由(2S,4R)-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-2-[[7-氟-2-[[甲基-[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基]氨基]甲基]茚满-5-基]氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(中间体58)制备标题化合物。MS(ESP)m/z＝570.4[M+H]⁺。

实例64

(2S,4R)-N-[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-1-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺

类似于实例58，使用(2S,4R)-N-[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-吡咯烷-2-甲酰胺(实例42)代替(2R)-2-(二甲基氨基)-N-[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]丙酰胺，制备并获得白色固体状标题化合物。MS(ESP)m/z＝596.4[M+H]⁺。

实例65

(2R)-2-(二甲基氨基)-N-[7-氟-3-羟基-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]丙酰胺

类似于实例49，使用(2R)-N-[3-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基]-2-(二甲基氨基)丙酰胺(中间体59)代替(2S,4R)-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)-1-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺并且使用6-(2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-基)-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮；2,2,2-三氟乙酸(中间体4)代替6-[5-(2-氨基乙基)-2-氧代-噁唑烷-3-基]-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮；2,2,2-三氟乙酸，制备并获得浅黄色固体状标题化合物。MS(ESP)m/z＝584.3[M+H]⁺。

实例66

(2R)-2-(二甲基氨基)-N-[7-氟-3-羟基-2-[[2-[(5R)-2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]丙酰胺

类似于实例65，使用6-[(5R)-5-(2-氨基乙基)-2-氧代-噁唑烷-3-基]-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮；2,2,2-三氟乙酸(中间体62)代替6-(2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-基)-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮；2,2,2-三氟乙酸，制备并获得棕色固体状标题化合物。MS(ESP)m/z＝558.2[M+H]⁺。

实例67

(2R)-N-[3,7-二氟-2-[[2-[(5R)-2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-2-(二甲基氨基)丙酰胺

将(2R)-N-[3,7-二氟-2-[[2-[(5R)-2-氧代-3-[3-氧代-4-(2-三甲基硅烷基乙氧基甲基)吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基]噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-2-(二甲基氨基)丙酰胺(中间体60，18.9mg，0.030mmol，1当量)在DCM(0.274mL)和三氟乙酸(0.15mL，1.95mmol，71.06当量)中的溶液在25℃搅拌1h。在减压下去除挥发物，并且残余物通过二氧化硅小柱色谱(5g，DCM/MeOH从99:1至8:2)纯化，以得到灰白色固体状标题化合物(4.4mg，0.010mmol，24.39％收率)。MS(ESP)m/z＝560.3[M+H]⁺。

实例68

(2R)-2-(二甲基氨基)-N-[7-氟-2-[[2-[(5S)-2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]丙酰胺，差向异构体A

和

实例69

(2R)-2-(二甲基氨基)-N-[7-氟-2-[[2-[(5S)-2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]丙酰胺，差向异构体B

/>

将(2R)-2-(二甲基氨基)-N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)丙酰胺(中间体10，516.0mg，1.85mmol，1当量)、6-[(5S)-5-(2-氨基乙基)-2-氧代-噁唑烷-3-基]-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮；2,2,2-三氟乙酸(中间体63，780.17mg，1.98mmol，1.07当量)和N,N-二异丙基乙胺(0.65mL，3.71mmol，2当量)在DMA(9.26mL)和THF(27.81mL)中的混合物在r.t.搅拌45分钟。添加乙酸(0.32mL，5.56mmol，3当量)，之后添加三乙酰氧基硼氢化钠(589.4mg，2.78mmol，1.5当量)，然后将混合物在r.t.搅拌1.5h。添加EtOAc和NaHCO₃(饱和水溶液)，将混合物搅拌20分钟，然后分离各相。水相用EtOAc(x3)萃取。合并的有机相通过分相器干燥并在减压下浓缩。获得的粗品通过二氧化硅小柱色谱(25g，在DCM中的0％-20％MeOH)纯化，以得到浅棕色泡沫状(2R)-2-(二甲基氨基)-N-[7-氟-2-[[2-[(5S)-2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]丙酰胺(579mg，1.07mmol，57.67％收率)。

(2R)-2-(二甲基氨基)-N-[7-氟-2-[[2-[(5R)-2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]丙酰胺(547.0mg，1.01mmol，1当量)的差向异构体通过制备型手性SFC分离以得到：峰1，其为灰白色固体状(2R)-2-(二甲基氨基)-N-[7-氟-2-[[2-[(5R)-2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]丙酰胺差向异构体A(207mg，0.380mmol，37.84％收率)；和峰2，其为白色固体状(2R)-2-(二甲基氨基)-N-[7-氟-2-[[2-[(5R)-2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]丙酰胺差向异构体B(207mg，0.380mmol，37.84％收率)。MS(ESP)m/z＝542.3[M+H]⁺。

实例70

(2R)-2-(二甲基氨基)-N-[7-氟-2-[[2-[(5R)-2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]丙酰胺，差向异构体A

和

实例71

(2R)-2-(二甲基氨基)-N-[7-氟-2-[[2-[(5R)-2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]丙酰胺，差向异构体B

类似于实例68和69，使用6-[(5R)-5-(2-氨基乙基)-2-氧代-噁唑烷-3-基]-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮；2,2,2-三氟乙酸(中间体62)代替6-[(5S)-5-(2-氨基乙基)-2-氧代-噁唑烷-3-基]-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮；2,2,2-三氟乙酸，制备并获得白色固体状标题化合物。MS(ESP)m/z＝542.2[M+H]⁺。

实例72

(2S,4R)-N-[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-2-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺，差向异构体A

和

实例73

(2S,4R)-N-[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-2-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺，差向异构体B

向6-[8-[(6-氨基-4-氟-茚满-2-基)甲基]-2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-基]溶液-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮；盐酸盐(中间体51，120.0mg，0.24mmol，1.0当量和(2S,4R)-1-叔丁氧基羰基-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-2-甲基-吡咯烷-2-甲酸(中间体63，111.08mg，0.31mmol，1.3当量)在MeCN(3mL)中的溶液中添加TCFH(106.69mg，0.38mmol，1.6当量)和1-甲基咪唑(58.54mg，0.71mmol，3.0当量)，以得到白色悬浮液。将所得悬浮液在25℃搅拌2h。将混合物在减压下浓缩，以得到残余物。残余物通过制备型TLC纯化，以得到浅黄色固体状(2S,4R)-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-2-[[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]氨基甲酰基]-2-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(130.0mg，0.16mmol，62.13％收率)。

向冷却至0℃的(2S,4R)-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-2-[[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]氨基甲酰基]-2-甲基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(125.0mg，0.15mmol，1.0当量)在甲醇(6mL)中的溶液中添加MeOH/HCl(6.0mL)，以得到白色悬浮液。将所得混合物在20℃搅拌2h。将悬浮液在减压下干燥以得到残余物。残余物通过制备型HPLC纯化并冷冻干燥，以得到白色固体状(2S,4R)-N-[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-2-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺；甲酸(45.0mg，0.08mmol，53％收率)。

(2S,4R)-N-[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-2-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺；甲酸(45.0mg，0.08mmol，1.0当量)的差向异构体通过手性SFC分离以得到：峰1，其为白色固体状(2S,4R)-N-[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-2-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺差向异构体A(14.2mg，0.02mmol，30.7％收率)；和峰2，其为白色固体状(2S,4R)-N-[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-2-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺差向异构体B(19.4mg，0.03mmol，41.17％收率)。MS(ESP)m/z＝596.3[M+H]⁺。

中间体

中间体1

6-[5-(2-氨基乙基)-2-氧代-噁唑烷-3-基]-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮；2,2,2-三氟乙酸

步骤1：6-溴-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮

在N₂下，在60℃向乙醇酸甲酯(60.0mL，777.31mmol，7.86当量)在3,6-二溴吡嗪-2-胺[CAS#2376926-19-9](25.0g，98.86mmol，1当量)中的溶液中添加叔丁醇钾(34.0g，303mmol，3.07当量)。添加乙醇酸甲酯(10.0mL，98.86mmol，1当量)，并将混合物在60℃搅拌3h。将反应混合物倒入HCl水溶液(1N,350mL)中并过滤。滤饼用H₂O(50mL x3)和MTBE(50mLx3)洗涤，然后在减压下干燥。水性洗涤液用EtOAc(150mL x3)萃取并与有机滤液(MTBE)合并，并将混合物浓缩以得到残余物。将滤饼与残余物合并，以得到粗制标题化合物(23g，100mmol，定量收率)。

步骤2：5：6-溴-4-(2-三甲基硅烷基乙氧基甲基)吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮

在0℃向6-溴-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮(15.0g，65.21mmol，1当量)、碳酸钾(27.0g，195.36mmol，3当量)在DMF(100mL)中的溶液中添加2-(三甲基硅烷基)乙氧基甲基氯(18.0mL，101.7mmol，1.56当量)。然后将反应在15℃搅拌0.5h。反应混合物用H₂O(600mL)稀释，并通过过滤收集所得固体。固体用water(50mL x3)洗涤并在减压下干燥，以得到黄色固体状标题化合物(23g，63.84mmol，97.9％收率)。

步骤3：N-[2-[2-氧代-3-[3-氧代-4-(2-三甲基硅烷基乙氧基甲基)吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基]噁唑烷-5-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯

向6-溴-4-(2-三甲基硅烷基乙氧基甲基)吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮(23.47g，65.14mmol，1当量)和N-[2-(2-氧代噁唑烷-5-基)乙基]氨基甲酸叔丁酯[CAS#2353503-50-9](15.0g，65.14mmol，1当量)在1,4-二噁烷(150mL)中的溶液中添加碘化铜(I)(3722mg，19.54mmol，0.300当量)、反式-N,N'-二甲基环己烷-1,2-二胺(5560.5mg，39.09mmol，0.600当量)和碳酸钾(27009.8mg，195.43mmol，3当量)。将混合物在100℃搅拌3h。将混合物浓缩以得到残余物。用EtOAc(200mL)稀释残余物，并用盐水(100mL×2)洗涤。有机相经Na₂SO₄干燥，然后浓缩以得到粗产物。残余物通过快速柱色谱(PE/EtOAc＝3:1至1:1)纯化并浓缩，以得到标题化合物(26.25g，51.51mmol，79.1％收率)。

步骤4：6-[5-(2-氨基乙基)-2-氧代-噁唑烷-3-基]-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮；2,2,2-三氟乙酸

向N-[2-[2-氧代-3-[3-氧代-4-(2-三甲基硅烷基乙氧基甲基)吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基]噁唑烷-5-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(47.2g，92.62mmol，1当量)在DCM(100mL)中的混合物中添加三氟乙酸(472.0mL，6126mmol，66.15当量)，然后将溶液在40℃搅拌16h。通过空气蒸馏去时除约100mL溶剂，然后添加另外100mL三氟乙酸，并将混合物在70℃搅拌48h。通过浓缩去，然后将残余物吸收于水(100mL)中并用EtOAc(100mL x2)洗涤，弃去有机物并形成固体，通过过滤收集该固体并在减压下干燥，以得到白色固体状标题化合物(14.0g，35.6mmol，35.36％收率)。将滤液浓缩以得到粗品，将该粗品与甲苯(100mL)共沸，并将所得固体在MeCN(100mL)中研磨，并且通过过滤收集所得固体并在减压下干燥，以得到灰白色固体状标题化合物(15.3g，38.9mmol，38.6％收率)。MS(ESP)m/z＝280.1[M+H]⁺。

中间体2

6-[(5R)-5-(2-氨基乙基)-2-氧代-噁唑烷-3-基]-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮；甲酸

步骤1：N-[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯

在冰水冷却下，向6-[5-(2-氨基乙基)-2-氧代-噁唑烷-3-基]-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮；2,2,2-三氟乙酸(中间体1，5.0g，12.71mmol，1当量)在THF(50mL)和甲醇(100mL)中的溶液中添加二碳酸二叔丁酯(4162.11mg，19.07mmol，1.5当量)，然后将混合物在25℃搅拌2h。将该混合物在真空下浓缩，以得到残余物。将残余物与EtOAc(20mL x2)一起研磨，以得到灰白色固体状标题化合物(3.8g，10.02mmol，78.79％收率)。MS(ESP)m/z＝402.0[M+Na]⁺。

步骤2：N-[2-[(5S)-2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯和N-[2-[(5R)-2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯

N-[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(3.7g,9.8mmol)的对映体通过制备型手性SFC分离以得到：峰1，其为黄色固体状N-[2-[(5S)-2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(1.8g，4.74mmol，48.65％收率)；和峰2，其为黄色固体状N-[2-[(5R)-2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(1.7g，4.48mmol，45.95％收率)。

步骤3：6-[(5R)-5-(2-氨基乙基)-2-氧代-噁唑烷-3-基]-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮；甲酸

将N-[2-[(5R)-2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(1.7g，4.48mmol，1当量)在HCOOH(10.0mL，4.48mmol，1当量)中的溶液在25℃搅拌2h。然后去除溶剂以得到粗品，将残余物吸收于MeCN(10mL)中，然后通过过滤收集固体并在减压下干燥，以得到灰白色固体状标题化合物(1400mg，4.3mmol，96.05％收率)。

中间体3

6-[(5S)-5-(2-氨基乙基)-2-氧代-噁唑烷-3-基]-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮；甲酸

类似于中间体2，步骤3，由N-[2-[(5S)-2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体2，步骤2)，制备并获得白色固体状标题化合物。

中间体4

6-(2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-基)-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮；2,2,2-甲酸

类似于中间体1，使用2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯[CAS#169206-55-7]代替N-[2-(2-氧代噁唑烷-5-基)乙基]氨基甲酸叔丁酯，制备并获得浅黄色固体状标题化合物。MS(ESP)m/z＝306.1[M+H]⁺。

中间体5

(6-氨基-4-氟-茚满-2-基)甲醇

步骤1：4-氟-1-氧代-茚满-2-甲酸乙酯

将氢化钠(60％，在油中)(7.99g，199.8mmol，3当量)在甲苯(120mL)中的混合物冷却至0℃，并且向其中逐滴添加碳酸二乙酯(18.56mL，153.18mmol，2.3当量)。将混合物加热至120℃，并在1.5h中逐滴添加4-氟-茚满-1-酮[CAS#699-99-0](10.0g，66.6mmol，1当量)在甲苯(120mL)中的溶液。将混合物在120℃搅拌1h，然后冷却至RT。然后将反应混合物缓慢倒入冷却的NH₄Cl(饱和水溶液)中并添加乙酸以将pH调节为5。产物用EtOAc萃取，分离各相，有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。获得的粗品(18.1g)通过二氧化硅小柱色谱(200g，0％-12％EtOAc/环己烷)纯化，以得到黄色油状标题化合物(13.86g，62.37mmol，91.78％收率)。MS(ESP)m/z＝223.1[M+H]⁺。

步骤2：4-氟茚满-2-甲酸乙酯

将4-氟-1-氧代-茚满-2-甲酸乙酯(13.2g，59.4mmol，1当量)在乙醇(480mL)和HCl(4.5mL)中的溶液在氢气氛下在Pd/C(12.64g，11.88mmol，0.200当量)的存在下搅拌4h。将混合物过滤并用EtOAc洗涤，然后将其在真空中浓缩。将其用EtOAc稀释，用水(2x)和盐水(1x)洗涤并真空浓缩，以得到标题化合物(12.7g，60.99mmol，定量收率)。MS(ESP)m/z＝209.1[M+H]⁺。

步骤3：4-氟-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)茚满-2-甲酸乙酯、4-氟-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)茚满-2-甲酸乙酯、4-氟-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)茚满-2-甲酸乙酯

将4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(27.09mL，186.72mmol，2当量)和3,4,7,8-四甲基-1,10-二氮杂菲(882.46mg，3.73mmol，0.040当量)的搅拌溶液脱气3次，并在N₂气氛下添加(1,5-环辛二烯)(甲氧基)铱(I)二聚体(1237.67mg,1.87mmol,0.020当量)。将_N2向反应混合物中鼓泡15分钟，然后历时20分钟添加4-氟茚满-2-甲酸乙酯(19.44g，93.36mmol，1当量)。将混合物在65℃搅拌4h，然后冷却至RT。添加EtOAc(200mL)，将混合物搅拌30分钟，滤出催化剂，在减压下蒸发溶剂，以得到粗制标题化合物混合物(35g，104.73mmol，定量收率)，其直接用于下一步中。MS(ESP)m/z＝335.3[M+H]⁺。

步骤4：4-氟-5-羟基-茚满-2-甲酸乙酯；4-氟-6-羟基-茚满-2-甲酸乙酯；4-氟-7-羟基-茚满-2-甲酸乙酯

在0℃向4-氟-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)茚满-2-甲酸乙酯、4-氟-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)茚满-2-甲酸乙酯、4-氟-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2二氧杂环戊硼烷-2-基)茚满-2-甲酸乙酯(24.07g，72.02mmol，1当量)在THF(50mL)中的搅拌溶液中添加在水(50mL)中的一水合过硼酸钠(21.78g，216.07mmol，3当量)将混合物在RT搅拌1.5h。过滤固体并用EtOAc洗涤。添加水以洗涤有机层，将其分离，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。粗制物质通过快速柱色谱(二氧化硅350g，从100％环己烷至80:20环己烷:EtOAc)纯化，以得到标题化合物(9.5g，42.37mmol，58.85％收率)，其为三种异构体的混合物(25:72:3)。MS(ESP)m/z＝225.1[M+H]⁺。

步骤5：4-氟-6-(三氟甲基磺酰氧基)茚满-2-甲酸乙酯

向4-氟-5-羟基-茚满-2-甲酸乙酯、4-氟-6-羟基-茚满-2-甲酸乙酯、4-氟-7-羟基-茚满-2-甲酸乙酯(9.5g，42.37mmol，1当量)在DCM(30mL)中的溶液中添加2,6-二甲基吡啶(19.74mL，169.47mmol，4当量)，并将溶液冷却至0℃。缓慢添加三氟甲磺酸酐(14.32mL，84.73mmol，2当量)在DCM(30mL)中的溶液，然后将混合物在0℃搅拌1h。添加另外的DCM(200mL)，并且有机相用NH₄Cl(饱和/水溶液)(3x200mL)洗涤，分离，用Na₂SO₄干燥，过滤，并在减压下浓缩。将粗产物混合物加载到二氧化硅柱(200g)上进行粗纯化(在环己烷中的0％至5％乙酸乙酯)，以获得含有标题化合物的混合物。该粗产物通过快速色谱(二氧化硅350g，在环己烷中的从0％至8％乙酸乙酯)纯化，以得到浅黄色油状纯标题化合物(9.24g，25.93mmol，61.21％收率)。MS(ESP)m/z＝357.1[M+H]⁺。

步骤6：6-(二苯亚甲基氨基)-4-氟-茚满-2-甲酸乙酯

将4-氟-6-(三氟甲基磺酰氧基)茚满-2-甲酸乙酯(9.24g，25.93mmol，1当量)、碳酸铯(25.35g，77.8mmol，3当量)、XPhos(3.71g，7.78mmol，0.300当量)、叁(二亚苄基丙酮)二钯(0)(3.56g，3.89mmol，0.150当量)和α-苯基-苯甲胺(8.7mL，51.87mmol，2当量)在1,4-二噁烷(31.51mL)中的混合物在90℃搅拌20h。添加EtOAc(200mL)并用水(2x200mL)和盐水(1x200mL)洗涤有机物。分离有机相，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以获得粗制物质，将该粗制物质加载到二氧化硅柱(200g)上进行粗纯化(在环己烷中的0％至10％EtOAc)，以得到含有所期望产物的混合物。然后该粗产物通过快速柱色谱(200g，在环己烷中的从0％至10％EtOAc)纯化，以得到黄色油状标题化合物(8.46g，22.6mmol，87.2％收率)。MS(ESP)m/z＝388.2[M+H]⁺。

步骤7：6-氨基-4-氟-茚满-2-甲酸乙酯

将6-(二苯亚甲基氨基)-4-氟-茚满-2-甲酸乙酯(8.76g，22.61mmol，1当量)和6MHCl(7.54mL，45.22mmol，2当量)在THF(82.52mL)中的混合物在RT搅拌1h。添加EtOAc并用水和盐水洗涤有机相。然后将NaHCO₃添加至水层直至达到pH 8，并用EtOAc萃取产物。分离有机相，经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩，以获得粗制物质，该粗制物质通过快速柱色谱(50g，在环己烷中的0至50％EtOAc)纯化，以获得灰白色固体状标题化合物(3.05g，13.66mmol，54.4％收率)。MS(ESP)m/z＝224.1[M+H]⁺。

步骤8：(6-氨基-4-氟-茚满-2-基)甲醇

在0℃向6-氨基-4-氟-茚满-2-甲酸乙酯(2.8g，12.54mmol，1当量)在干燥THF(100.34mL)中的溶液中小心地逐滴添加在2-MeTHF中的2.3M氢化铝锂(12.54mL，28.85mmol，2.3当量)，保持温度低于5℃(历时30分钟)。将反应混合物在相同温度搅拌30分钟，然后将其用十水合硫酸钠淬灭并用EtOAc稀释。将所得悬浮液在RT搅拌30分钟，然后通过垫滤出固体。收集滤液，在减压下去除挥发物，并且获得的粗品通过快速柱色谱(在环己烷中的0％至100％EtOAc)纯化，以得到浅黄色固体状标题化合物(2.14g，11.81mmol，94.16％收率)。MS(ESP)m/z＝182.0[M+H]⁺。

中间体6

6-[[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基甲基]-4-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-2-胺

步骤1：4-甲基吡啶-2,3-二甲酸二甲酯

在0℃向4-甲基吡啶-2,3-二甲酸(CAS号517-40-8，1000.0mg，5.52mmol，1当量)在DMF(20mL)中的溶液中添加(三甲基硅烷基)重氮甲烷(8.28mL，16.56mmol，3当量)，然后将温度温热至25℃并将混合物搅拌16h。去除溶剂以得到粗产物，该粗产物通过色谱在硅胶上(PE:EtOAc＝3:1)纯化，以得到棕色油状标题化合物(800mg，3.82mmol，69.3％收率)。MS(ESP):m/z＝210.1[M+H]⁺。

步骤2：[2-(羟基甲基)-4-甲基-3-吡啶基]甲醇

向4-甲基吡啶-2,3-二甲酸二甲酯(800.0mg,3.82mmol,1eq)在乙醇(20mL)中的溶液中加入硼氢化钠(868.0mg,22.94mmol,6eq)，然后将溶液在25℃搅拌16h。逐渐加入甲酸，将溶液的pH调节至约6，然后滤出固体，并且浓缩滤液，以得到白色固体状的标题化合物(600mg，3.92mmol，定量产率)。MS(ESP):m/z＝154.1[M+H]⁺。

步骤3：2,3-双(氯甲基)-4-甲基-吡啶

向[2-(羟基甲基)-4-甲基-3-吡啶基]甲醇(0.6g，3.92mmol，1当量)在DCM(10mL)中的溶液中添加亚硫酰氯(4.66g，39.17mmol，10当量)，然后将溶液在25℃搅拌16h。通过浓缩去除溶剂，并且将残余物吸收于50mL DCM中，然后将溶液倒入冰水(20mL)中，并且通过逐渐添加NaHCO₃水溶液将溶液的pH调节至约8，然后将该溶液用DCM(20mL x2)萃取，与有机相合并，并且经Na₂SO₄干燥。去除溶剂，以得到棕色油状的标题化合物(400mg，2.1mmol，产率53.7％)。

步骤4：4-甲基-5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,6-二甲酸二乙酯

在0℃向丙二酸二乙酯(0.337g，2.1mmol，1当量)在200mL THF中的溶液中添加叔丁醇钾(0.5g，4.42mmol，2.1当量)，并且将溶液在0℃搅拌1h。然后将该溶液添加至2,3-双(氯甲基)-4-甲基-吡啶(0.4g，2.1mmol，1当量)在THF(10.0mL)中的搅拌冷却(0℃)溶液中，并将所得混合物在70℃搅拌16h。将混合物倒入50mL冰水中并且用EtOAc(30mL x2)萃取，与有机物合并，并经Na₂SO₄干燥。去除溶剂以得到粗产物，该粗产物通过硅胶色谱(PE:EtOAc＝10:1)纯化，以得到无色油状标题化合物(350mg，1.26mmol，60％收率)。MS(ESP):m/z＝278.1[M+H]⁺。

步骤5：4-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-6-甲酸盐酸盐

将4-甲基-5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,6-二甲酸二乙酯(350.0mg，1.26mmol，1当量)在盐酸(0.13mL，1.26mmol，1当量)中的溶液在100℃搅拌16h。通过浓缩去除溶剂，并且向残余物中添加甲苯(20mL)，然后将混合物共沸，以得到黄色固体状标题化合物(200mg，0.940mmol，74.2％收率)。MS(ESP):m/z＝178.1[M+H]⁺。

步骤6：4-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-6-甲酸乙酯

将4-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-6-甲酸盐酸盐(758mg，3.55mmol，1当量)溶解在乙醇(40mL)中。在0℃添加浓硫酸(990μL)，然后将溶液在RT搅拌5分钟，然后在回流下搅拌2.5h。去除挥发物，将残余物小心地吸收于Na₂CO₃(饱和水溶液)中并用EtOAc(3x)萃取。有机层用盐水(碱性，含Na₂CO₃)洗涤，经Na₂SO₄干燥并蒸发，以得到残余物，该残余物通过快速柱色谱(50g二氧化硅，庚烷/EtOAc 90:10-50:50)纯化，以得到无色油状标题化合物(656mg，3.20mmol，90.1％收率)。MS(ESP)m/z＝206.1[M+H]⁺。

步骤7：(4-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-6-基)甲醇

将氢化铝锂(181mg，4.78mmol，1.5当量)添加至4-甲基-6,7-二氢--5H-环戊二烯并[b]吡啶-6-甲酸乙酯(654mg，3.19mmol，1当量)在THF(22mL)中的溶液中。将所得灰色悬浮液在RT搅拌3h。添加Et₂O(30mL)并将混合物冷却至0℃。逐滴添加Na₂SO₄(饱和水溶液)直至气体停止逸出。加入固体Na₂SO₄。滤出固体并且用Et₂O充分洗涤。将滤液浓缩以得到残余物，该残余物通过快速柱色谱(50g二氧化硅；DCM/MeOH 98:2至95:5)纯化，以得到白色固体状标题化合物(444mg，2.72mmol，85.38％收率)。MS(ESP)m/z＝164.1[M+H]⁺。

步骤8：叔丁基-二甲基-[(4-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-6-基)甲氧基]硅烷

将咪唑(321.17mg，4.72mmol，2.2当量)溶解在THF(65mL)中，并添加和(4-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-6-基)甲醇(350.0mg，2.14mmol，1当量)。将反应冷却至0℃并逐滴添加在THF(20mL)中的叔丁基二甲基氯硅烷(646.39mg，4.29mmol，2当量)。将反应在RT搅拌16h。然后添加水，并且混合物用乙酸乙酯(3x30mL)萃取。收集有机层，干燥，经Na₂SO₄干燥，过滤并在真空下浓缩，以得到粗制化合物，该粗制化合物通过二氧化硅小柱色谱(50g，环己烷/EtOAc＝80/20)纯化，以得到黄色油状标题化合物(584mg，2.1mmol，98.15％收率)。MS(ESP)m/z＝278.2[M+H]⁺。

步骤9：叔丁基-二甲基-[(4-甲基-1-氧化-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-1-鎓-6-基)甲氧基]硅烷

在0℃向叔丁基-二甲基-[(4-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-6-基)甲氧基]硅烷(584.0mg，2.1mmol，1当量)在DCM(4.21mL)中的搅拌溶液中添加3-氯过苯甲酸(467.91mg，2.71mmol，1.29当量)。将反应混合物在RT搅拌2h。然后添加饱和Na₂CO₃水溶液(pH＝7至8)，并且混合物用DCM(3x10mL)萃取。收集有机层，经Na₂SO₄干燥，过滤并且在真空下浓缩，以得到无色油状标题化合物(622mg，2.12mmol，定量收率)。MS(ESP)m/z＝294.2[M+H]⁺。

步骤10：6-[[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基甲基]-N-[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-4-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-2-胺

在0℃向叔丁基-二甲基-[(4-甲基-1-氧化-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-1-鎓-6-基)甲氧基]硅烷(491.0mg，1.67mmol，1当量)在DCM(16.73mL)中的溶液中添加溴代三吡咯烷子基鏻六氟磷酸盐(1403.88mg，3.01mmol，1.8当量)、2,4-二甲氧基苄胺(0.33mL，2.17mmol，1.3当量)和N,N-二异丙基乙胺(1.02mL，5.86mmol，3.5当量)。将所得混合物在25℃搅拌16h。然后添加水，并且混合物用DCM(3x50mL)萃取。收集有机层，干燥，经Na₂SO₄干燥，过滤并在真空下浓缩，以得到粗产物，该粗产物通过二氧化硅小柱色谱(50g，环己烷/乙酸乙酯从100:0至80:20)纯化，以得到黄色油状标题化合物(184mg，0.420mmol，24.84％收率)。MS(ESP)m/z＝443.3[M+H]⁺。

步骤11：(2-氨基-4-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-6-基)甲醇

将6-[[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基甲基]-N-[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-4-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-2-胺(230.0mg，0.520mmol，1当量)在HCl(0.67mL，4.02mmol，7.75当量)中的溶液在70℃搅拌1h。将混合物在真空下浓缩并通过SCX色谱纯化，以得到浅黄色固体状标题化合物(72mg，0.400mmol，77.75％收率)。MS(ESP)m/z＝179.1[M+H]⁺。

步骤12：6-[[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基甲基]-4-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-2-胺

向(2-氨基-4-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-6-基)甲醇(376.0mg，2.11mmol，1当量)在THF(14mL)中的溶液中添加咪唑(315.97mg，4.64mmol，2.2当量)。将混合物冷却至0℃并逐滴添加叔丁基二甲基氯硅烷(635.44mg，4.22mmol，2当量)在THF(12mL)中的溶液。将反应混合物在25℃搅拌16h。然后添加饱和NH₄Cl水溶液，并且混合物用乙酸乙酯(3x50mL)萃取。合并的有机萃取物经Na₂SO₄干燥，过滤并在真空下浓缩，以得到粗产物，该粗产物通过二氧化硅小柱色谱(50g，环己烷/乙酸乙酯从0:100至90:10)纯化，以得到浅黄色油状标题化合物(442mg，1.51mmol，71.63％收率)。MS(ESP)m/z＝293.3[M+H]⁺。

中间体7

2-(二甲基氨基)-N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)乙酰胺

步骤1：2-(二甲基氨基)-N-[7-氟-2-(羟基甲基)茚满-5-基]乙酰胺

向(6-氨基-4-氟-茚满-2-基)甲醇(中间体5，85.0mg，0.470mmol，1当量)和N,N-二甲基甘氨酸[CAS#1118-68-9](53.21mg，0.520mmol，1.1当量)在MeCN(5mL)中的混合物中添加1-甲基咪唑(0.13mL，1.64mmol，3.5当量)和TCFH(157.93mg，0.560mmol，1.2当量)。将混合物在RT搅拌过夜，然后浓缩并通过快速柱色谱(在DCM中的20％-100％MeCN)纯化，以得到标题化合物(35mg，0.130mmol，28.02％收率)。MS(ESP)m/z＝267.0[M+H]⁺。

步骤2：2-(二甲基氨基)-N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)乙酰胺

将2-(二甲基氨基)-N-[7-氟-2-(羟基甲基)茚满-5-基]乙酰胺(35.0mg，0.130mmol，1当量)在DCM(2mL)中的混合物冷却至0℃，并添加戴斯-马丁氧化剂(83.61mg，0.200mmol，1.5当量)。将混合物历时30分钟温热至RT，然后将其在RT搅拌3h。添加另外的DCM和NaHCO₃(稀释的饱和水溶液)。分离各相，并且有机相经Na₂SO₄、过滤并浓缩，以得到粗制标题化合物(77mg)，其不经进一步纯化而直接用于下一步。MS(ESP)m/z＝265.0[M+H]⁺。

中间体8

1-(二甲基氨基)-N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)环丙烷甲酰胺

类似于中间体7，使用1-(二甲基氨基)环丙烷甲酸[CAS#119111-65-8]代替N,N-二甲基甘氨酸，制备并获得无色粘稠油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝291.1[M+H]⁺。

中间体9

2-(二甲基氨基)-N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)-2-甲基丙酰胺

步骤1：2-(二甲基氨基)-N-[7-氟-2-(羟基甲基)茚满-5-基]-2-甲基丙酰胺

将2-(二甲基氨基)-2-甲基-丙酸；盐酸盐[CAS#97874-26-5](233.33mg，1.4mmol，1.01当量)在DCM(7mL)中的混合物冷却至-15℃。添加4-二甲基氨基吡啶(505.63mg，4.14mmol，3当量)，随后逐滴添加T3P(1053.52mg，1.66mmol，1.2当量)。将混合物在-15℃搅拌1h，然后添加(6-氨基-4-氟-茚满-2-基)甲醇(中间体5，250.0mg，1.38mmol，1当量)。将混合物在-15℃搅拌1h，然后历时2h温热至RT。添加DCM和NaHCO₃(饱和水溶液)，分离各相，用DCM(x3)萃取水相。合并的有机相经Na₂SO₄干燥，过滤，并在减压下浓缩。获得的粗品通过快速柱色谱(在DCM中的0％-10％MeOH)纯化，以得到无色油状标题化合物(122mg，0.410mmol，30.04％收率)。MS(ESP)m/z＝295.1[M+H]⁺。

步骤2：2-(二甲基氨基)-N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)-2-甲基丙酰胺

类似于中间体7，步骤2，制备并获得棕色油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝293.1[M+H]⁺。

中间体10

(2R)-2-(二甲基氨基)-N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)丙酰胺

类似于中间体7，使用(2R)-2-(二甲基氨基)丙酸[CAS#157431-09-9]代替N,N-二甲基甘氨酸，制备并获得棕色油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝279.1[M+H]⁺。

中间体11

N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)-2-吗啉代-乙酰胺

步骤1：

将(6-氨基-4-氟-茚满-2-基)甲醇(中间体5，100.0mg，0.550mmol，1当量)在DCM(2.5mL)中的混合物冷却至0℃，然后添加三乙胺(0.15mL，1.1mmol，2当量)。逐滴添加氯乙酰氯(0.04mL，0.550mmol，1当量)在DCM(2.5mL)中的溶液。将混合物在0℃搅拌2h。添加水和另外的DCM，分离各相，用DCM萃取水相。合并的有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩，以得到棕色油状标题化合物(174mg，0.680mmol，定量收率)。MS(ESP)m/z＝258.1[M+H]⁺。

步骤2：N-[7-氟-2-(羟基甲基)茚满-5-基]-2-吗啉代-乙酰胺

将2-氯-N-[7-氟-2-(羟基甲基)茚满-5-基]乙酰胺(177.16mg，0.550mmol，1当量)、N,N-二异丙基乙胺(0.19mL，1.1mmol，2当量)和吗啉(0.14mL，1.65mmol，3当量)在THF(5mL)中的混合物在60℃搅拌5h。将混合物温热至RT，然后添加EtOAc和H₂O。分离各相，水相用EtOAc(x2)萃取。合并的有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。获得的粗品通过快速柱色谱(在EtOAc中的0％-100％MeCN)纯化，以得到标题化合物(27mg，0.090mmol，15.9％收率)。MS(ESP)m/z＝309.2[M+H]⁺。

步骤3：N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)-2-吗啉代-乙酰胺

类似于中间体7，步骤2，制备标题化合物。MS(ESP)m/z＝307.2[M+H]⁺。

中间体12

2-(氮杂环丁烷-1-基)-N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)乙酰胺

步骤1：2-(氮杂环丁烷-1-基)-N-[7-氟-2-(羟基甲基)茚满-5-基]乙酰胺

将(6-氨基-4-氟-茚满-2-基)甲醇(中间体5，80.0mg，0.440mmol，1当量)在THF(4mL)中的混合物冷却至0℃，然后逐滴添加N,N-二异丙基乙胺(0.15mL，0.880mmol，2当量)和氯乙酰氯(0.04mL，0.440mmol，1当量)在THF(1mL)中的溶液。将混合物在0℃搅拌30分钟。添加另外的N,N-二异丙基乙胺(0.15mL，0.880mmol，2当量)，之后添加氮杂环丁烷(0.15mL，2.21mmol，5当量)。将混合物加热至50℃并在此温度搅拌4h。添加水和EtOAc，分离各相。有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩。获得的粗品通过快速柱色谱(在DCM中的0％-10％MeOH)纯化，以得到黄色油状标题化合物(63mg，0.230mmol，51.27％收率)。MS(ESP)m/z＝279.1[M+H]⁺。

步骤2：2-(氮杂环丁烷-1-基)-N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)乙酰胺

类似于中间体7，步骤2，制备并获得黄色泡沫状标题化合物。MS(ESP)m/z＝277.1[M+H]⁺。

中间体13

(2S)-2-(二甲基氨基)-N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)丙酰胺

类似于中间体7，使用(2S)-2-(二甲基氨基)丙酸[CAS#2812-31-9]代替N,N-二甲基甘氨酸，制备标题化合物。MS(ESP)m/z＝279.2[M+H]⁺。

中间体14

(2S)-N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)-1-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺

类似于中间体7，使用(2S)-1-甲基吡咯烷-2-甲酸；水合物[CAS#199917-42-5]代替N,N-二甲基甘氨酸，制备并获得无色油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝291.2[M+H]⁺。

中间体15

N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)-2-[甲基(氧杂环丁烷-3-基)氨基]乙酰胺

类似于中间体12，使用N-甲基-3-氨基氧杂环丁烷[CAS#952182-03-5]代替氮杂环丁烷，制备并获得白色泡沫状标题化合物。MS(ESP)m/z＝307.5[M+H]⁺。

中间体16

2-(3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)-N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)乙酰胺

类似于中间体12，使用3-氮杂双环[3.1.0]己烷盐酸盐[CAS#73799-64-1]代替氮杂环丁烷，制备并获得黄色油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝303.3[M+H]⁺。

中间体17

2-[环丙基(甲基)氨基]-N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)乙酰胺

类似于中间体12，使用N-甲基环丙胺[CAS#5163-20-2]代替氮杂环丁烷，制备并获得白色固体状标题化合物。MS(ESP)m/z＝291.4[M+H]⁺。

中间体18

(2R)-N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)-1-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺

类似于中间体7，使用(2R)-1-甲基吡咯烷-2-甲酸[CAS#58123-62-9]代替N,N-二甲基甘氨酸，制备并获得淡黄色半固体状标题化合物。MS(ESP)m/z＝291.3[M+H]⁺。

中间体19

N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)-2-甲基-噁唑-5-甲酰胺

类似于中间体7，使用2-甲基-噁唑-5-甲酸[CAS#1216012-87-1]代替N,N-二甲基甘氨酸，制备并获得黄色油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝289.1[M+H]⁺。

中间体20

2-(氮杂环丁烷-1-基)-N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)丙酰胺

类似于中间体7，使用2-(氮杂环丁烷-1-基)丙酸；盐酸盐[CAS#2219370-85-9]代替N,N-二甲基甘氨酸，制备并获得黄色油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝291.3[M+H]⁺。

中间体21

(2S,4R)-N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)-4-甲氧基-1-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺

步骤1：(2S,4R)-2-[[7-氟-2-(羟基甲基)茚满-5-基]氨基甲酰基]-4-甲氧基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯

类似于中间体7，步骤1，使用(2S,4R)-1-叔丁氧基羰基-4-甲氧基-吡咯烷-2-甲酸[CAS#83624-01-5]代替N,N-二甲基甘氨酸，制备并获得无色油状标题化合物。(ESP)m/z＝409.3[M+H]⁺。

步骤2：(2S,4R)-N-[7-氟-2-(羟基甲基)茚满-5-基]-4-甲氧基-吡咯烷-2-甲酰胺

将(2S,4R)-2-[[7-氟-2-(羟基甲基)茚满-5-基]氨基甲酰基]-4-甲氧基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(198.0mg，0.480mmol，1当量)和三氟乙酸(0.37mL，4.85mmol，10当量)在DCM(5mL)中的混合物在RT搅拌过夜。将混合物浓缩并通过快速柱色谱(在H₂O中的1％-50％MeCN+0.1％NH₃)纯化，以得到粘稠油状标题化合物(81mg，0.260mmol，54.19％收率)。MS(ESP)m/z＝309.2[M+H]⁺。

步骤3：(2S,4R)-N-[7-氟-2-(羟基甲基)茚满-5-基]-4-甲氧基-1-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺

将(2S,4R)-N-[7-氟-2-(羟基甲基)茚满-5-基]-4-甲氧基-吡咯烷-2-甲酰胺(81.0mg，0.260mmol，1当量)和甲醛(25.43uL，0.340mmol，1.3当量)在四氢呋喃(5mL)中的混合物在RT搅拌5分钟，然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(16.7mg，0.080mmol，0.300当量)。将混合物在20℃搅拌过夜。将其用EtOAc稀释并用NaHCO₃(饱和水溶液)洗涤。水层用EtOAc(x3)萃取。合并的有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。获得的粗品通过快速柱色谱(在DCM中的1％-10％MeOH)纯化，以得到无色油状标题化合物(69mg，0.210mmol，81.48％收率)。MS(ESP)m/z＝323.4[M+H]⁺。

步骤4：(2S,4R)-N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)-4-甲氧基-1-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺

类似于中间体7，步骤2，制备并获得粉色粘稠油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝321.4[M+H]⁺。

中间体22

N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)-2-羟基-2-甲基-丙酰胺

步骤1：4-氟-6-[(2-羟基-2-甲基-丙酰基)氨基]茚满-2-甲酸乙酯

在-10℃将亚硫酰氯(45.74uL，0.630mmol，1.4当量)添加至2-羟基异丁酸(65.28mg，0.630mmol，1.4当量)在DMA(1mL)中的溶液中。搅拌30分钟后，添加在DMA中的6-氨基-4-氟-茚满-2-甲酸乙酯(中间体5，步骤7，100.0mg，0.450mmol，1当量)，并将混合物在RT搅拌2h。将混合物吸收于EtOAc中，并且用水、1M HCl和NaHCO₃溶液(饱和水溶液)洗涤有机物。将有机物干燥(Na₂SO₄)并浓缩至干，以得到浅黄色油状标题化合物(134mg，0.430mmol，96.71％收率)。MS(ESP)m/z＝268.2[M+H]⁺。

步骤2：N-[7-氟-2-(羟基甲基)茚满-5-基]-2-羟基-2-甲基-丙酰胺

向4-氟-6-[(2-羟基-2-甲基-丙酰基)氨基]茚满-2-甲酸乙酯(135.0mg，0.440mmol，1当量)在干燥THF(3.64mL)和乙醇(1.82mL)中的搅拌溶液中添加氯化钙(96.87mg，0.870mmol，2当量)和硼氢化钠(49.53mg，1.31mmol，3当量)，并将混合物在RT搅拌18h。将混合物冷却至0℃，小心地用NH₄Cl(饱和水溶液)淬灭并用EtOAc(x3)萃取。有机相经Na₂SO₄干燥并真空浓缩。粗品通过二氧化硅小柱色谱(5g，在环己烷中的50％-80％EtOAc)纯化，以得到黄色油状标题化合物(90mg，0.340mmol，77.15％收率)。MS(ESP)m/z＝310.2[M+H]⁺。

步骤3：N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)-2-羟基-2-甲基-丙酰胺

类似于中间体7，步骤2，制备并获得棕色油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝266.3[M+H]⁺。

中间体23

(3R)-3-(二甲基氨基)-N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)四氢呋喃-3-甲酰胺

步骤1：(3R)-3-(叔丁氧基羰基氨基)四氢呋喃-3-甲酸

向(3R)-3-氨基四氢呋喃-3-甲酸[CAS#1315053-78-1](200.0mg，1.53mmol，1当量)在水(3mL)和1,4-二噁烷(3mL)中的溶液中添加氢氧化钠(1.6mL，1.6mmol，1.05当量)(1M溶液)。将混合物冷却至0℃并添加二碳酸二叔丁酯(366.16mg，1.68mmol，1.1当量)，并将混合物温热至RT并搅拌过夜。将反应混合物用0.1M HCl酸化至pH 2.0，用EtOAc萃取，干燥(Na₂SO₄)，过滤并在减压下浓缩，以获得标题化合物(195mg，0.840mmol，55.29％收率)。MS(ESP)m/z＝232.1[M+H]⁺。

步骤2和3：6-[[(3R)-3-氨基四氢呋喃-3-羰基]氨基]-4-氟-茚满-2-甲酸乙酯

类似于中间体21，步骤1和2，使用(3R)-3-(叔丁氧基羰基氨基)四氢呋喃-3-甲酸代替(2S,4R)-1-叔丁氧基羰基-4-甲氧基-吡咯烷-2-甲酸，制备并获得浅黄色油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝337.7[M+H]⁺。

步骤4：6-[[(3R)-3-(二甲基氨基)四氢呋喃-3-羰基]氨基]-4-氟-茚满-2-甲酸乙酯

向6-[[(3R)-3-氨基四氢呋喃-3-羰基]氨基]-4-氟-茚满-2-甲酸乙酯(77.0mg，0.230mmol，1当量)在甲醇(3.3mL)中的溶液中添加甲醛37wt％水溶液(14.51uL，0.530mmol，2.3当量)，之后添加乙酸(0.05mL，0.920mmol，4当量)和氰基硼氢化钠(28.77mg，0.460mmol，2当量)。将混合物在RT搅拌5h。将混合物在减压下浓缩，然后用水淬灭并用EtOAc(2x)萃取。将有机相干燥，过滤并蒸发。粗品通过二氧化硅小柱色谱(5g，在环己烷中的0％-40％EtOAc)纯化，以得到无色油状标题化合物(77mg，0.210mmol，92.3％收率)。MS(ESP)m/z＝365.2[M+H]⁺。

步骤5和6：(3R)-3-(二甲基氨基)-N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)四氢呋喃-3-甲酰胺

类似于中间体22，步骤2和3，制备并获得浅粉色油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝321.4[M+H]⁺。

中间体24

N-(7-氰基-2-甲酰基-茚满-5-基)-2-羟基-2-甲基-丙酰胺

步骤1：4-氰基茚满-2-甲酸乙酯

将4-溴茚满-2-甲酸乙酯[CAS#2091562-14-8](8.7g，32.3mmol，1当量)溶解在N,N-二甲基乙酰胺(12.5mL)中。添加氰化锌(5.31g，45.3mmol，1.4当量)和2-二叔丁基膦基-2',4',6'-三异丙基联苯(2.75g，6.47mmol，0.2当量)。将氩气鼓泡通过溶液，然后添加叁(二亚苄基丙酮)二钯(0)(5.92g，6.47mmol，0.2当量)，并将混合物在80℃搅拌2h。将混合物倒在水上并用EtOAc(3x)萃取，经Na₂SO₄干燥并完全蒸发。残余物通过二氧化硅小柱色谱(70g，庚烷至5％EtOAc/庚烷；然后是100g，庚烷至10％MTBE/庚烷)纯化，以得到浅黄色油状标题化合物(5.99g，27.8mmol，86.1％收率)。MS(ESP)m/z＝216.2[M+H]⁺。

步骤2：4-氰基-6-硝基-茚满-2-甲酸乙酯

在-7℃，历时30分钟向4-氰基茚满-2-甲酸乙酯(1700.0mg，7.9mmol，1当量)在硫酸(24.42mL，458.07mmol，58当量)中的搅拌溶液中逐滴添加硝酸(0.5mL，7.9mmol，1当量)。将混合物在-7℃搅拌1h。通过将反应混合物小心地逐滴倾倒至冰冷的盐水和水的混合物(50mL)上并搅拌15分钟来淬灭反应混合物。产物用EtOAc(3x30mL)萃取。合并的有机相通过分相器干燥并在减压下蒸发，以得到粗制物质，该粗制物质通过二氧化硅小柱色谱(200g，环己烷中的0％-60％EtOAc)纯化，以得到黄色蜡状固体状标题化合物(1216mg，4.67mmol，54.43％收率)。MS(ESP)m/z＝261.1[M+H]⁺。

步骤3：6-氨基-4-氰基-茚满-2-甲酸乙酯

将4-氰基-6-硝基-茚满-2-甲酸乙酯(1060.0mg，3.75mmol，1当量)在乙醇(67.88mL)中的溶液在Pd/C(174.14mg，0.160mmol，0.040当量)的存在下在H₂气氛下搅拌75分钟。过滤溶液，用EtOH洗涤钯，并在减压下浓缩滤液，以得到黄色油状标题化合物(921mg，4mmol，97.14％收率)。MS(ESP)m/z＝231.2[M+H]⁺。

步骤4至6：N-(7-氰基-2-甲酰基-茚满-5-基)-2-羟基-2-甲基-丙酰胺

类似于中间体22，制备并获得棕色油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝273.1[M+H]⁺。

中间体25

(2R)-N-(7-氰基-2-甲酰基-茚满-5-基)-2-(二甲基氨基)丙酰胺

步骤1：4-氰基-6-[[(2R)-2-(二甲基氨基)丙酰基]氨基]茚满-2-甲酸乙酯

类似于中间体7，步骤1，由6-氨基-4-氰基-茚满-2-甲酸乙酯(中间体24，步骤3)和(2R)-2-(二甲基氨基)丙酸[CAS#157431-09-9]制备并获得淡黄色油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝330.3[M+H]⁺。

步骤2和3：(2R)-N-(7-氰基-2-甲酰基-茚满-5-基)-2-(二甲基氨基)丙酰胺

类似于中间体22，步骤2和3，制备并获得浅黄色油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝286.2[M+H]⁺。

中间体26

(2R)-2-(二甲基氨基)-N-(4-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)丙酰胺

类似于中间体7，使用(5-氨基-4-氟-茚满-2-基)甲醇代替(6-氨基-4-氟-茚满-2-基)甲醇并且使用(2R)-2-(二甲基氨基)丙酸[CAS#157431-09-9]代替N,N-二甲基甘氨酸，制备标题化合物。MS(ESP)m/z＝279.5[M+H]⁺。

类似于中间体5，步骤5至8，由4-氟-5-羟基-茚满-2-甲酸乙酯(中间体5，步骤4)制备并获得浅黄色固体状用作起始原料的(5-氨基-4-氟-茚满-2-基)甲醇。MS(ESP)m/z＝182.1[M+H]⁺。

中间体27

2-(二甲基氨基)-N-(6-甲酰基-4-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-2-基)乙酰胺

步骤1：N-[6-[[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基甲基]-4-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-2-基]-2-(二甲基氨基)乙酰胺

在0℃向6-[[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基甲基]-4-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-2-胺(中间体6，22.0mg，0.080mmol，1当量)和N,N-二甲基甘氨酸(19.39mg，0.190mmol，2.5当量)在MeCN(0.752mL)中的混合物中添加1-甲基咪唑(0.04mL，0.530mmol，7当量)和TCFH(52.76mg，0.190mmol，2.5当量)。将所得混合物在20℃搅拌1h。然后添加NH₄Cl的饱和水溶液，并且混合物用EtOAc(3x10mL)萃取。收集有机层，干燥，经Na₂SO₄干燥，过滤并在真空下浓缩，以得到粗产物，该粗产物通过快速柱色谱(25g，DCM/MeOH从100:0至90:10)纯化，以得到无色油状标题化合物(23mg，0.060mmol，80.98％收率)。MS(ESP)m/z＝378.4[M+H]⁺。

步骤2：2-(二甲基氨基)-N-[6-(羟基甲基)-4-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-2-基]乙酰胺

向N-[6-[[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基甲基]-4-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-2-基]-2-(二甲基氨基)乙酰胺(37.0mg，0.100mmol，1当量)在甲醇(0.980mL)中的搅拌溶液中添加HCl(0.13mL，0.760mmol，7.75当量)。将混合物在25℃搅拌3h。然后将混合物在真空下浓缩并通过SCX色谱纯化，以得到浅黄色固体状标题化合物(15.5mg，0.060mmol，60.07％收率)。MS(ESP)m/z＝264.4[M+H]⁺。

步骤3：2-(二甲基氨基)-N-(6-甲酰基-4-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-2-基)乙酰胺

类似于中间体7，步骤2，制备并获得浅棕色油状标题化合物。它不经纯化即用于下一步。MS(ESP)m/z＝262.4[M+H]⁺。

中间体28

(2R)-2-(二甲基氨基)-N-(6-甲酰基-4-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-2-基)丙酰胺

类似于中间体27，使用(2R)-2-(二甲基氨基)丙酸代替N,N-二甲基甘氨酸，制备并获得棕色油状标题化合物。它不经纯化即用于下一步。MS(ESP)m/z＝276.2[M+H]⁺。

中间体29

2-(氮杂环丁烷-1-基)-N-(6-甲酰基-4-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-2-基)乙酰胺

步骤1：2-(氮杂环丁烷-1-基)-N-[6-[[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基甲基]-4-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-2-基]乙酰胺

类似于中间体12，步骤1，由6-[[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基甲基]-4-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-2-胺(中间体6)制备并获得无色油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝390.4[M+H]⁺。

步骤2和3：2-(氮杂环丁烷-1-基)-N-(6-甲酰基-4-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-2-基)乙酰胺

类似于中间体27，步骤2和3，制备并获得深棕色油状标题化合物。它不经纯化即用于下一步。MS(ESP)m/z＝274.4[M+H]⁺。

中间体30

(2S)-N-(6-甲酰基-4-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-2-基)-1-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺

类似于中间体27，使用(2S)-1-甲基吡咯烷-2-甲酸；水合物[CAS#199917-42-5]代替N,N-二甲基甘氨酸，制备并获得深棕色泡沫状标题化合物。它不经纯化即用于下一步。MS(ESP)m/z＝288.4[M+H]⁺。

中间体31

(2R)-2-(二甲基氨基)-N-(6-甲酰基-1-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[c]吡啶-3-基)丙酰胺

步骤1至6：叔丁基-[(1-氯-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[c]吡啶-6-基)甲氧基]-二甲基-硅烷

类似于中间体6，步骤3至8，使用[2-氯-3-(羟基甲基)-4-吡啶基]甲醇[CAS#1454285-52-9]代替[2-(羟基甲基)-4-甲基-3-吡啶基]甲醇，制备并获得无色油状标题化合物。

步骤7：叔丁基-二甲基-[(1-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[c]吡啶-6-基)甲氧基]硅烷

在密封管中，对于叔丁基-[(1-氯-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[c]吡啶-6-基)甲氧基]-二甲基-硅烷(431.0mg，1.45mmol，1当量)、三甲基环三硼氧烷(0.3mL，2.17mmol，1.5当量)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(105.86mg，0.140mmol，0.100当量)和碳酸钾(599.87mg，4.34mmol，3当量)在1,4-二噁烷(7.23mL)中的悬浮液，通过用三个真空/氮气气氛吹扫该体系而将其，然后将混合物在100℃搅拌1.5h。将反应混合物冷却至r.t.并在EtOAc与水之间分配。分离各相，并且水层用EtOAc(x3)萃取。合并的有机相通过分相器过滤，并在减压下去除挥发物，以得到粗制化合物，该粗制化合物通过二氧化硅小柱色谱(25g，从环己烷100％至环己烷/EtOAc 7:3)纯化，以得到浅黄色油状标题化合物(337mg，1.21mmol，83.94％收率)。MS(ESP)m/z＝278.2[M+H]⁺。

步骤8至12：6-[[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基甲基]-1-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[c]吡啶-3-胺

类似于中间体6，步骤8至12，制备并获得浅黄色固体状标题化合物。MS(ESP)m/z＝293.4[M+H]⁺。

步骤12至14：(2R)-2-(二甲基氨基)-N-(6-甲酰基-1-甲基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[c]吡啶-3-基)丙酰胺

类似于中间体28，制备并获得浅棕色粘稠油状标题化合物，其不经进一步纯化即用于下一步。MS(ESP)m/z＝276.2[M+H]⁺。

中间体32

(2R)-N-(4,7-二氟-2-甲酰基-2-羟基-茚满-5-基)-2-(二甲基氨基)丙酰胺

步骤1：4,7-二氟-1-氧代-茚满-2-甲酸甲酯

类似于中间体5，步骤1，使用4,7-二氟茚满-1-酮[CAS#130408-16-1]代替4-氟茚满-1-酮并使用碳酸二甲酯代替碳酸二乙酯，制备并获得橙色固体状标题化合物。MS(ESP)m/z＝227.0[M+H]⁺。

步骤2：4,7-二氟-2-羟基-1-氧代-茚满-2-甲酸甲酯

向冷却至0℃的3-氯过苯甲酸(8545.34mg，49.52mmol，1.6当量)在DCM(140.22mL)中的溶液中添加4,7-二氟-1-氧代-茚满-2-甲酸甲酯(7.0g，30.95mmol，1当量)在DCM(109.37mL)中的溶液。将混合物搅拌30分钟。反应完成后，添加硫代硫酸钠水溶液和碳酸氢钠水溶液，并且混合物用DCM萃取两次。有机层用氯化钠溶液(饱和水溶液)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在减压下浓缩。残余物通过二氧化硅小柱色谱(100g，环己烷/乙酸乙酯＝98:2至70:30)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(5300mg，21.88mmol，70.71％收率)。MS(ESP)m/z＝243.0[M+H]⁺。

步骤3：4,7-二氟-1,2-二羟基-茚满-2-甲酸甲酯

将4,7-二氟-2-羟基-1-氧代-茚满-2-甲酸甲酯(5.83g，24.07mmol，1当量)在EtOAc(130mL)中的溶液在10％钯碳(5.0mg，4.81mmol，0.200当量)的存在下在25℃在氢气气氛(3atm.)下搅拌16h。将所得滤液在减压下浓缩，以得到黄色胶状标题化合物(5570mg，22.81，94.75％收率)。

步骤4：1-氯-4,7-二氟-2-羟基-茚满-2-甲酸甲酯

向冷却至0℃的4,7-二氟-1,2-二羟基-茚满-2-甲酸甲酯(1.34g，5.49mmol，1当量)在DCM(26mL)中的搅拌溶液中添加三乙胺(0.92mL，6.59mmol，1.2当量)，之后逐滴添加亚硫酰氯(0.4mL，5.49mmol，1当量)在DCM(3mL)中的溶液。将混合物在0℃搅拌30分钟。将均匀混合物在5℃搅拌过夜，然后将其倒入冰水中，用DCM(1x)萃取，经分相器过滤并真空浓缩。粗产物通过二氧化硅小柱色谱(10g，100％环己烷至70:30环己烷/EtOAc)纯化，以得到无色油状标题化合物(652mg，2.48mmol，45.24％收率)。

步骤5：4,7-二氟-2-羟基-茚满-2-甲酸甲酯

将1-氯-4,7-二氟-2-羟基-茚满-2-甲酸甲酯(652.0mg，2.48mmol，1当量)在EtOAc(30mL)中的溶液在钯催化剂(1.03mL，0.500mmol，0.200当量)(5％碳载钯，50％水溶液)的存在下在氢气气氛(3atm.)下于25℃搅拌。将所得滤液在减压下浓缩，以得到无色油状标题化合物(460mg，2.02mmol，81.2％收率)。MS(ESP)m/z＝229.0[M+H]⁺。

步骤6：4,7-二氟-2-羟基-5-硝基-茚满-2-甲酸甲酯

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在0℃向4,7-二氟-2-羟基-茚满-2-甲酸乙酯(392.0mg，1.62mmol，1当量)在硫酸(5.0mL，93.87mmol，58当量)中的溶液中添加硝酸(0.1mL，1.62mmol，1当量)，并将混合物在0℃搅拌30分钟。将混合物倒在0℃的水和冰上，然后用EtOAc萃取。有机相用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并在真空下浓缩。所得粗制物质通过二氧化硅小柱色谱(10g，环己烷至70:30环己烷/EtOAc)纯化，以获得浅黄色液体状标题化合物(323mg，1.12mmol，69.49％收率)。MS(ESP)m/z＝274.0[M+H]⁺。

步骤7：5-氨基-4,7-二氟-2-羟基-茚满-2-甲酸甲酯

将4,7-二氟-2-羟基-5-硝基-茚满-2-甲酸甲酯(323.0mg，1.18mmol，1当量)和Pd/C(32.07mg，0.030mmol，0.030当量)在甲醇(10mL)中的混合物在H₂气氛下搅拌1h。过滤溶液，用EtOH洗涤钯，并且在减压下浓缩滤液，以得到红色油状标题化合物(252mg，1.04mmol，87.64％收率)。MS(ESP)m/z＝244.1[M+H]⁺。

步骤8：2-[2-(二甲基氨基)丙酰氧基]-4,7-二氟-5-[[(2R)-2-(二甲基氨基)丙酰基]氨基]茚满-2-甲酸甲酯

类似于中间体10，步骤1，制备并获得红色油状标题化合物，其不经进一步纯化即用于下一步。MS(ESN)m/z＝440.3[M-H]^-。

步骤9：(2R)-N-[4,7-二氟-2-羟基-2-(羟基甲基)茚满-5-基]-2-(二甲基氨基)丙酰胺

将氢化铝锂在Me-THF中的2.3M溶液(1.5mL，3.45mmol，4.2当量)添加至2-[2-(二甲基氨基)丙酰氧基]-4,7-二氟-5-[[(2R)-2-(二甲基氨基)丙酰基]氨基]茚满-2-甲酸甲酯(363.0mg，0.820mmol，1当量)在四氢呋喃(16.45mL)中的溶液，冷却至0℃。将混合物搅拌0.5h，然后在0℃用十水硫酸钠淬灭，搅拌10分钟。然后滤出并真空浓缩。粗产物通过反相小柱色谱(97:3至70:30NH₄OH 0.1％水溶液/MeCN)纯化，以得到灰白色胶状标题化合物(131mg，0.420mmol，50.69％收率)。MS(ESP)m/z＝316.0[M+H]⁺。

步骤10：(2R)-N-(4,7-二氟-2-甲酰基-2-羟基-茚满-5-基)-2-(二甲基氨基)丙酰胺

在氮气气氛下，将三氧化硫吡啶复合物(134.75mg，0.850mmol，5.12当量)添加至(2R)-N-[4,7-二氟-2-羟基-2-(羟基甲基)茚满-5-基]-2-(二甲基氨基)丙酰胺(51.97mg，0.170mmol，1当量)、三乙胺(0.43mL，3.08mmol，18.6当量)和干燥二甲基亚砜(1.23mL，17.26mmol，104.4当量)在干燥二氯甲烷(1mL)中溶液中，冷却至0℃。将所得混合物温热至25℃并搅拌1h。将反应用NaHCO₃溶液(饱和水溶液)淬灭并用DCM(2x)萃取。收集的有机相用Na₂SO₄干燥并真空浓缩，以得到无色液体状标题化合物。MS(ESP)m/z＝331.1[M+H+H₂O]⁺。

中间体33

(2R)-N-(4,7-二氟-2-甲酰基-2-甲氧基-茚满-5-基)-2-(二甲基氨基)丙酰胺

步骤1：4,7-二氟-2-甲氧基-茚满-2-甲酸甲酯

在0℃向4,7-二氟-2-羟基-茚满-2-甲酸甲酯(中间体32，步骤5，200.0mg，0.880mmol，1当量)在四氢呋喃(3mL)中的溶液中添加氢化钠(60％，在油中)(42.07mg，1.05mmol，1.2当量)，之后添加碘甲烷(0.08mL，1.31mmol，1.5当量)。将反应混合物在N₂下温热至45℃并搅拌1h。将混合物冷却至室温并添加NH₄Cl溶液(饱和水溶液)。添加EtOAc并分离有机层，用水和盐水洗涤，然后经Na₂SO₄干燥。去除挥发物以得到粗品，该粗品通过硅胶色谱(从100％环己烷至50:50环己烷/EtOAc)纯化，以得到标题化合物(106mg，0.440mmol，49.93％收率)。MS(ESP)m/z＝243.1[M+H]⁺。

步骤2至6：(2R)-N-(4,7-二氟-2-甲酰基-2-甲氧基-茚满-5-基)-2-(二甲基氨基)丙酰胺

类似于中间体32，步骤6至10，制备并获得棕色油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝345.1[M+H+H₂O]⁺。

中间体34

(2R)-2-(二甲基氨基)-N-(2,4,7-三氟-2-甲酰基-茚满-5-基)丙酰胺

步骤1：2,4,7-三氟茚满-2-甲酸甲酯

在-78℃向4,7-二氟-2-羟基-茚满-2-甲酸甲酯(中间体32，步骤5，424.0mg，1.86mmol，1当量)在DCM(8.01mL)中的溶液中逐滴添加二乙基氨基三氟化硫(0.37mL，2.79mmol，1.5当量)在DCM(800.79uL)中的溶液。将反应混合物逐渐温热至0℃与5℃之间并搅拌16h。然后用二氯甲烷稀释，用NaHCO₃(饱和水溶液)洗涤，通过分相器过滤并真空浓缩，以得到无色油状标题化合物(402mg，1.75mmol，93.99％收率)。

步骤2至6：(2R)-2-(二甲基氨基)-N-(2,4,7-三氟-2-甲酰基-茚满-5-基)丙酰胺

类似于中间体32，步骤6至10，制备并获得浅棕色固体状标题化合物。MS(ESP)m/z＝315.1[M+H]⁺。

中间体35

(2R)-N-(2,7-二氟-2-甲酰基-茚满-5-基)-2-(二甲基氨基)丙酰胺

步骤1：6-(叔丁氧基羰基氨基)-4-氟-茚满-2-甲酸乙酯

向6-氨基-4-氟-茚满-2-甲酸乙酯(中间体5，步骤7，718.0mg，3.22mmol，1当量)在干燥THF(20mL)中的搅拌溶液中添加二碳酸二叔丁酯(842.34mg，3.86mmol，1.2当量)，并将反应混合物加热至60℃。17h后，将反应冷却并将混合物在减压下浓缩。获得的粗品通过快速柱色谱(在环己烷中的0％-50％EtOAc)纯化，以得到浅黄色油状标题化合物(979mg，3.03mmol，94.13％收率)。MS(ESP)m/z＝324.2[M+H]⁺。

步骤2：6-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-4-氟-茚满-2-甲酸乙酯

向6-(叔丁氧基羰基氨基)-4-氟-茚满-2-甲酸乙酯(879.0mg，2.72mmol，1当量)在干燥MeCN(25mL)中的搅拌溶液中添加二碳酸二叔丁酯(652.6mg，2.99mmol，1.1当量)和DMAP(332.1mg，2.72mmol，1当量)，并将反应混合物在室温搅拌17h。然后将反应挥发物蒸发，并且粗产物通过快速柱色谱(在环己烷中的0％-10％EtOAc)纯化，以得到无色油状标题化合物(1.24g，2.93mmol，107.72％收率)。MS(ESP)m/z＝446.3[M+Na]⁺。

步骤3：6-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-2,4-二氟-茚满-2-甲酸乙酯

将6-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-4-氟-茚满-2-甲酸乙酯(300.0mg，0.710mmol，1当量)在THF(5mL)中的溶液在-78℃搅拌20分钟。此后，逐滴添加在THF(5mL)中的二异丙基氨基锂溶液(0.35mL，0.710mmol，1当量)。将混合物在-78℃搅拌15分钟，然后添加在THF(2mL)中的N-氟苯磺酰亚胺(268.07mg，0.850mmol，1.2当量)。将混合物在-78℃搅拌1h，然后用NH₄Cl溶液(饱和水溶液)淬灭。添加EtOAc，使混合物达到室温。分离各相，并且有机相经Na₂SO₄干燥、过滤并在减压下浓缩。获得的粗品通过快速柱色谱(在环己烷中的0％-30％EtOAc)纯化，以得到无色油状标题化合物(416mg，0.940mmol，定量收率)。MS(ESP)m/z＝442.3[M+H]⁺。

步骤4：N-[2,7-二氟-2-(羟基甲基)茚满-5-基]氨基甲酸叔丁酯

将6-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-2,4-二氟-茚满-2-甲酸乙酯(416.0mg，0.940mmol，1当量)在THF(2mL)中的混合物冷却至-15℃，然后添加氢化铝锂(0.45mL，1.04mmol，1.1当量)。将混合物在-15℃搅拌0.25h，然后用Na₂SO₄.10H₂O淬灭。将所得混合物搅拌30分钟，用EtOAc稀释并过滤。在减压下浓缩滤液，并且获得的粗品通过快速柱色谱(在环己烷中的5％-60％EtOAc)纯化，以得到无色油状标题化合物(157.8mg，0.530mmol，55.95％收率)。MS(ESN)m/z＝298.3[M-H]^-。

步骤5：(6-氨基-2,4-二氟-茚满-2-基)甲醇

将N-[2,7-二氟-2-(羟基甲基)茚满-5-基]氨基甲酸叔丁酯(157.8mg，0.530mmol，1当量)和三氟乙酸(0.41mL，5.27mmol，10当量)在DCM(5mL)中的混合物在20℃搅拌6h。将其在DCM与NaHCO₃溶液(饱和水溶液)之间分配。分离各相，并且水相用DCM(x2)萃取。合并的有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。获得的粗品通过快速柱色谱(在环己烷中的10％-100％EtOAc)纯化，以得到无色油状标题化合物(41.6mg，0.210mmol，39.61％收率)。MS(ESP)m/z＝200.1[M+H]⁺。

步骤6：(2R)-N-[2,7-二氟-2-(羟基甲基)茚满-5-基]-2-(二甲基氨基)丙酰胺

在0℃向(6-氨基-2,4-二氟-茚满-2-基)甲醇(41.5mg，0.210mmol，1当量)、(2R)-2-(二甲基氨基)丙酸(26.85mg，0.230mmol，1.1当量)在MeCN(2mL)中的混合物中添加1-甲基咪唑(58.12uL，0.730mmol，3.5当量)和TCFH(64.3mg，0.230mmol，1.1当量)。历时20分钟将混合物温热至RT，并在RT搅拌1h。将其在减压下浓缩，并且残余物通过快速柱色谱(0-10％MeOH/DCM)纯化，以得到无色油状标题化合物(38.8mg，0.130mmol，62.43％收率)。MS(ESP)m/z＝299.1[M+H]⁺。

步骤7：(2R)-N-(2,7-二氟-2-甲酰基-茚满-5-基)-2-(二甲基氨基)丙酰胺

类似于中间体7，步骤2，制备并获得黄色油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝297.1[M+H]⁺。

中间体36

(2R)-N-(7-氰基-2-甲酰基-2-羟基-茚满-5-基)-2-(二甲基氨基)丙酰胺

步骤1：4-溴-2-羟基-1-氧代-茚满-2-甲酸乙酯

类似于中间体32，步骤2，由4-溴-1-氧代-茚满-2-甲酸乙酯[CAS#1693851-34-1]制备并获得白色固体状标题化合物。MS(ESP)m/z＝299[M+H]⁺。

步骤2：4-氰基-2-羟基-1-氧代-茚满-2-甲酸乙酯

对密封小瓶中的4-溴-2-羟基-1-氧代-茚满-2-甲酸乙酯(1.6g，5.35mmol，1当量)、四钾；六氰基铁；三水合物(564.84mg，1.34mmol，0.250当量)、XPhos-G3-Pd(362.64mg，0.430mmol，0.080当量)和tBuXPhos(427.92mg，1.01mmol，0.190当量)的混合物抽真空并用N₂回填。添加1,4-二噁烷(10mL)和乙酸钾(78.74mg，0.800mmol，0.150当量)在脱气水(10mL)中的溶液。将混合物脱气2分钟，然后在90℃搅拌5h。使混合物达到室温。将前述程序再进行两次，然后将三个反应混合物合并。添加EtOAc和盐水，分离各相，并且有机相用EtOAc(x2)萃取。合并的有机相经Na₂SO₄干燥，过滤，并在减压下浓缩。获得的粗品通过快速柱色谱(5％-50％EtOAc/环己烷)纯化，以得到黄色固体状标题化合物(2.9g，11.83mmol，73.69％收率)。MS(ESP)m/z＝246.1[M+H]⁺。

步骤3：4-氰基-1,2-二羟基-茚满-2-甲酸乙酯

在0℃向4-氰基-2-羟基-1-氧代-茚满-2-甲酸乙酯(2.9g，11.83mmol，1当量)在乙醇(80mL)中的搅拌溶液中分批添加硼氢化钠(536.84mg，14.19mmol，1.2当量)，并将反应混合物搅拌0.25h。将反应用氯化铵溶液(饱和水溶液)淬灭并用DCM萃取。分离各相，并且水相用DCM萃取两次。合并有机层并经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩以获得粗品，该粗品通过快速柱色谱(5％-50％EtOAc/环己烷)纯化，以得到黄色油状标题化合物(1.37g，5.54mmol，46.86％收率)。MS(ESP)m/z＝248.0[M+H]⁺。

步骤4至6：4-氰基-2-羟基-6-硝基-茚满-2-甲酸乙酯

类似于中间体32，步骤4至6，制备并获得无色油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝277.1[M+H]⁺。

步骤7：6-氨基-4-氰基-2-羟基-茚满-2-甲酸乙酯

向4-氰基-2-羟基-6-硝基-茚满-2-甲酸乙酯(289.0mg，1.05mmol，1当量)在乙醇(15mL)和水(5mL)中的混合物中添加NH₄Cl(223.84mg，4.18mmol，4当量)和铁(292.12mg，5.23mmol，5当量)。将混合物在75℃搅拌0.5h，然后使其冷却至室温。过滤混合物并在H₂O与EtOAc之间分配。合并的有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。获得的粗品通过快速柱色谱(5％-60％EtOAc/环己烷)纯化，以得到黄色油状标题化合物(157mg，0.640mmol，60.94％收率)。MS(ESP)m/z＝247.1[M+H]⁺。

步骤8：4-氰基-6-[[(2R)-2-(二甲基氨基)丙酰基]氨基]-2-羟基-茚满-2-甲酸乙酯

类似于中间体10，步骤1，制备并获得灰白色固体状标题化合物。MS(ESP)m/z＝346.3[M+H]⁺。

步骤9：(2R)-N-[7-氰基-2-羟基-2-(羟基甲基)茚满-5-基]-2-(二甲基氨基)丙酰胺

类似于中间体22，步骤2，制备并获得无色油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝304.2[M+H]⁺。

步骤10：(2R)-N-(7-氰基-2-甲酰基-2-羟基-茚满-5-基)-2-(二甲基氨基)丙酰胺

类似于中间体32，步骤10，制备并获得黄色油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝302.2[M+H]⁺。

中间体37

(2S)-2-[(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯

类似于中间体7，使用BOC-L-脯氨酸[CAS#15761-39-4]代替N,N-二甲基甘氨酸，制备并获得黄色油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝377.2[M+H]⁺。

中间体38

(2S,4R)-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-2-[(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯

步骤1：(2S,4R)-1-叔丁氧基羰基-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-吡咯烷-2-甲酸

将(2S,4R)-4-羟基-1,2-吡咯烷二甲酸叔丁酯[CAS#13726-69-7](300.0mg，1.3mmol，1当量)和咪唑(441.58mg，6.49mmol，5当量)在DCM(4mL)和DMF(1mL)中的混合物冷却至0℃，然后添加叔丁基二甲基氯硅烷(430.16mg，2.85mmol，2.2当量)。使混合物达到室温并搅拌36h。添加EtOAc，混合物用水(x3)洗涤，然后经Na₂SO₄干燥并在减压下浓缩，以得到无色油状标题化合物(455mg，1.32mmol，定量收率)。MS(ESN)m/z＝344.5[M-H]^-。

步骤2和3：(2S,4R)-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-2-[(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯

类似于中间体7，使用(2S,4R)-1-叔丁氧基羰基-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-吡咯烷-2-甲酸代替N,N-二甲基甘氨酸，制备标题化合物。MS(ESP)m/z＝507.3[M+H]⁺。

中间体39

N-[(1R)-1-(叔丁氧基甲基)-2-[(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)氨基]-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯

类似于中间体7，使用(2R)-3-叔丁氧基-2-(叔丁氧基羰基氨基)丙酸[CAS#248921-66-6]代替N,N-二甲基甘氨酸，制备标题化合物。MS(ESP)m/z＝423.2[M+H]⁺。

中间体40

N-[(1R)-2-[(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)氨基]-1-(甲氧基甲基)-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯

类似于中间体7，使用(2R)-2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-甲氧基-丙酸[CAS#86123-95-7]代替N,N-二甲基甘氨酸，制备标题化合物。MS(ESP)m/z＝381.2[M+H]⁺。

中间体41

N-[(3R)-3-[(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)氨基甲酰基]四氢呋喃-3-基]氨基甲酸叔丁酯

步骤1：(3R)-3-(叔丁氧基羰基氨基)四氢呋喃-3-甲酸

向(3R)-3-氨基四氢呋喃-3-甲酸[CAS#1315053-78-1](200.0mg，1.53mmol，1当量)在水(3mL)和1,4-二噁烷(3mL)中的溶液中添加氢氧化钠(1.6mL，1.6mmol，1.05当量)(1M溶液)。将混合物冷却至0℃并添加二碳酸二叔丁酯(366.16mg，1.68mmol，1.1当量)，并将混合物温热至r.t.并搅拌过夜。将反应混合物用0.1M HCl酸化至pH 2.0，用EtOAc萃取，干燥(Na₂SO₄)，过滤并在减压下浓缩，以获得标题化合物(195mg，0.840mmol，55.29％收率)。MS(ESP)m/z＝232.1[M+H]⁺。

步骤2和3：N-[(3R)-3-[(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)氨基甲酰基]四氢呋喃-3-基]氨基甲酸叔丁酯

类似于中间体7，使用(3R)-3-(叔丁氧基羰基氨基)四氢呋喃-3-甲酸代替N,N-二甲基甘氨酸，制备标题化合物。MS(ESP)m/z＝393.2[M+H]⁺。

中间体42

N-[(3S)-3-[(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)氨基甲酰基]四氢呋喃-3-基]氨基甲酸叔丁酯

类似于中间体41，使用(3S)-3-氨基四氢呋喃-3-甲酸[CAS#1315052-80-2]代替(3R)-3-氨基四氢呋喃-3-甲酸，制备标题化合物。

中间体43

N-[2-[(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)氨基]-1,1-二甲基-2-氧代-乙基]氨基甲酸叔丁酯

类似于中间体9，使用N-BOC-2-甲基丙氨酸[CAS#30992-29-1]代替2-(二甲基氨基)-2-甲基-丙酸；盐酸盐，制备并获得浅黄色固体状标题化合物。(ESP)m/z＝365.2[M+H]⁺。

中间体44

(2S,4R)-2-[(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)氨基甲酰基]-4-甲氧基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯

类似于中间体7，使用(2S,4R)-1-叔丁氧基羰基-4-甲氧基-吡咯烷-2-甲酸[CAS#83624-01-5]代替N,N-二甲基甘氨酸，制备并获得黄色半固体状标题化合物。MS(ESP)m/z＝407.4[M+H]⁺。

中间体45

(2R,4R)-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-2-[(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯

类似于中间体38，使用(2R,4R)-4-羟基-1,2-吡咯烷二甲酸叔丁酯[CAS#135042-12-5]代替(2S,4R)-4-羟基-1,2-吡咯烷二甲酸叔丁酯，制备标题化合物。MS(ESP)m/z＝507.4[M+H]⁺。

中间体46

(2S,4S)-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-2-[(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯

类似于中间体38，使用(2S,4S)-4-羟基-1,2-吡咯烷二甲酸叔丁酯[CAS#87691-27-8]代替(2S,4R)-4-羟基-1,2-吡咯烷二甲酸叔丁酯，制备标题化合物。MS(ESP)m/z＝507.4[M+H]⁺。

中间体47

(2R,4S)-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-2-[(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯

类似于中间体38，使用(2R,4S)-4-羟基-1,2-吡咯烷二甲酸叔丁酯[CAS#147266-92--0]代替(2S,4R)-4-羟基-1,2-吡咯烷二甲酸叔丁酯，制备并获得浅黄色油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝507.4[M+H]⁺。

中间体48

(3S)-3-(叔丁氧基羰基氨基)-4-[(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)氨基]-4-氧代-丁酸叔丁酯

类似于中间体7，使用N-(叔丁氧基羰基)-L-天冬氨酸4-叔丁酯[CAS#1676-90-0]代替N,N-二甲基甘氨酸，制备并获得黄色油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝451.5[M+H]⁺。

中间体49

(2S,4R)-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)-1-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺

类似于中间体38，使用(2S,4R)-4-羟基-1-甲基-吡咯烷-2-甲酸[CAS#4252-82-8]代替(2S,4R)-4-羟基-1,2-吡咯烷二甲酸叔丁酯，制备并获得橙色粘稠油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝421.5[M+H]⁺。

中间体50

2-[(3R)-3-[叔丁基(二苯基)硅烷基]氧基吡咯烷-1-基]-N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)乙酰胺

步骤1：叔丁基-二苯基-[(3R)-吡咯烷-3-基]氧基-硅烷

将(R)-3-羟基吡咯烷[CAS#2799-21-5](0.19mL，2.3mmol，1当量)和咪唑(390.71mg，5.74mmol，2.5当量)在二氯甲烷(15mL)中的混合物冷却至0℃，然后分批添加叔丁基氯二苯基硅烷(757.19mg，2.75mmol，1.2当量)。使混合物达到室温，并搅拌过夜。将混合物浓缩并通过快速柱色谱(在DCM中的0％-10％MeOH)纯化，以得到标题化合物(253mg，0.780mmol，33.86％收率)。MS(ESP)m/z＝326.3[M+H]⁺。

步骤2：2-[(3R)-3-[叔丁基(二苯基)硅烷基]氧基吡咯烷-1-基]-N-[7-氟-2-(羟基甲基)茚满-5-基]乙酰胺

类似于中间体12，步骤1，使用叔丁基-二苯基-[(3R)-吡咯烷-3-基]氧基-硅烷代替氮杂环丁烷，制备并获得黄色油状标题化合物。MS(ESN)m/z＝545.4[M-H]^-。

步骤3：2-[(3R)-3-[叔丁基(二苯基)硅烷基]氧基吡咯烷-1-基]-N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)乙酰胺

类似于中间体7，步骤3，制备并获得棕色泡沫状标题化合物。MS(ESN)m/z＝543.4[M-H]^-。

中间体51

6-[8-[(6-氨基-4-氟-茚满-2-基)甲基]-2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-基]-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮

步骤1：N-[7-氟-2-(羟基甲基)茚满-5-基]氨基甲酸叔丁酯

在RT向(6-氨基-4-氟-茚满-2-基)甲醇(中间体5，244.0mg，1.35mmol，1当量)在THF(9mL)中的溶液中添加二碳酸二叔丁酯(295.76mg，1.36mmol，1.01当量)，并将反应混合物在RT摇动17h。反应混合物用EtOAc和水稀释，分离各相，并且水层用EtOAc(x3)萃取。合并的有机相通过分相器过滤，并在减压下去除挥发物，以得到残余物，该残余物通过二氧化硅小柱色谱(25g二氧化硅，从环己烷100％至环己烷/EtOAc 7:3)纯化，以得到白色泡沫状标题化合物(290mg，1.03mmol，76.56％收率)。MS(ESP)m/z＝282.2[M+H]⁺。

步骤2：N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)氨基甲酸叔丁酯

/>

类似于中间体7，步骤2，制备并获得黄色粘稠油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝224.02[M+H-tBu]⁺。

步骤3：N-[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]氨基甲酸叔丁酯

在RT向6-(2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-基)-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮；盐酸盐(中间体4，264.29mg，0.770mmol，1当量)和N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)氨基甲酸叔丁酯(216.0mg，0.770mmol，1当量)在DMA(2mL)和四氢呋喃(6mL)中的悬浮液中添加N-乙基二异丙胺(0.34mL，1.93mmol，2.5当量)。将反应混合物在RT搅拌30分钟。然后添加乙酸(0.2mL，3.48mmol，4.5当量)和三乙酰氧基硼氢化钠(409.75mg，1.93mmol，2.5当量)，并将混合物在RT搅拌15.5h。反应混合物用EtOAc和NaHCO₃(饱和水溶液)稀释。分离各相，并且有机层用NaHCO₃(饱和水溶液)(x2)和盐水洗涤。合并的有机相通过分相器过滤，并在减压下去除挥发物，以得到残余物，该残余物通过二氧化硅小柱色谱(28g二氧化硅-NH，从DCM 100％至DCM/[EtOAc/MeOH 9:1]95:5)纯化，以得到白色固体状标题化合物(315mg，0.550mmol，71.64％收率)。MS(ESP)m/z＝569.4[M+H]⁺。

步骤4：6-[8-[(6-氨基-4-氟-茚满-2-基)甲基]-2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-基]-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮

将N-[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]氨基甲酸叔丁酯(315.0mg，0.550mmol，1当量)在DCM(4mL)和三氟乙酸(2.0mL，25.96mmol，46.86当量)中的溶液在RT搅拌2h。在减压下去除挥发物，将残余物在EtOAc/MeOH 9:1与NaHCO₃(饱和水溶液)之间分配。分离各相，并且水层用EtOAc/MeOH 9:1(x3)萃取。将合并的有机相通过分相器过滤，并在减压下去除挥发物，以得到灰白色固体状粗制标题化合物(260mg，0.550mmol，100.18％收率)。MS(ESP)m/z＝469.4[M+H]⁺。

中间体52

6-[8-[(5-氨基-4,7-二氟-茚满-2-基)甲基]-2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-基]-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮

步骤1：4,7-二氟茚满-2,2-二甲酸二乙酯

在0℃向丙二酸二乙酯(3.39mL，22.34mmol，1当量)在THF(709.14mL)中的溶液中添加叔丁醇钾(5.26g，46.91mmol，2.1当量)。将混合物在相同温度搅拌1h，然后添加溶解在THF(354.57mL)中的2,3-双(溴甲基)-1,4-二氟-苯[CAS#912999-77-0](6.7g，22.34mmol，1当量)，并将混合物在60℃搅拌24h。将反应真空浓缩。将混合物在水与EtOAC之间分配。分离各相，并且水相用EtOAc(x1)萃取。合并的有机层经Na₂SO₄干燥、过滤并在真空下浓缩，以得到标题化合物(6.7g，22.46mmol，定量收率)，其直接不经进一步纯化即用于之后的反应。

步骤2：4,7-二氟茚满-2-甲酸乙酯

将4,7-二氟茚满-2,2-二甲酸二乙酯(1250.0mg，4.19mmol，1当量)、水(75.5uL，4.19mmol，1当量)和氯化锂(461.92mg，10.9mmol，2.6当量)在DMSO(14.97mL)中的混合物在160℃搅拌3.5h。添加另外的氯化锂(177.66mg，4.19mmol，1当量)，并延长搅拌1h。将温度升至175℃并延长搅拌1h。将反应冷却至室温，并且用EtOAc稀释并用水(x1)洗涤，然后用盐水(x1)洗涤。合并的有机相经Na₂SO₄干燥并真空浓缩，以得到粗制标题化合物(330mg，1.46mmol，34.8％粗收率)，其通过二氧化硅小柱色谱(环己烷:EtOAc从99:1至90:10，然后至20:80)纯化，以得到标题化合物。MS(ESP)m/z＝227.0[M+H]⁺。

步骤3和4：5-氨基-4,7-二氟-茚满-2-甲酸乙酯

类似于中间体24，步骤2和3，制备并获得红色油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝242.1[M+H]⁺。

步骤5：5-(叔丁氧基羰基氨基)-4,7-二氟-茚满-2-甲酸乙酯

类似于中间体51，步骤1，制备标题化合物。MS(ESP)m/z＝286.1[M+H-tBu]⁺。

步骤6：N-[4,7-二氟-2-(羟基甲基)茚满-5-基]氨基甲酸叔丁酯

在-15℃向5-(叔丁氧基羰基氨基)-4,7-二氟-茚满-2-甲酸乙酯(149.0mg，0.440mmol，1当量)在THF(5mL)中的溶液中添加氢化铝锂(0.19mL，0.440mmol，1当量)，并将混合物搅拌15分钟。将反应混合物用十水硫酸钠淬灭并搅拌30分钟。所得悬浮液用EtOAc稀释并过滤。收集滤液并在减压下去除挥发物，以获得标题化合物(130mg，0.430mmol，99.5％收率)。MS(ESP)m/z＝244.2[M+H-tBu]⁺。

步骤7至9：6-[8-[(5-氨基-4,7-二氟-茚满-2-基)甲基]-2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-基]-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮

类似于中间体51，步骤2至4，制备标题化合物。MS(ESP)m/z＝487.4[M+H]⁺。

中间体53

(2R)-2-[[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基甲基]-2-[[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯

步骤1：(2R)-1-叔丁氧基羰基-2-[[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基甲基]吡咯烷-2-甲酸

类似于中间体38，步骤1，使用(2R)-1-叔丁氧基羰基-2-(羟基甲基)吡咯烷-2-甲酸[CAS#287401-41-6]代替(2S,4R)-4-羟基-1,2-吡咯烷二甲酸叔丁酯，制备并获得无色油状标题化合物。

步骤2：(2R)-2-[[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基甲基]-2-[(2-乙氧基羰基-7-氟-茚满-5-基)氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯

/>

类似于中间体7，步骤1，由6-氨基-4-氟-茚满-2-甲酸乙酯(中间体5，步骤7)和(2R)-1-叔丁氧基羰基-2-[[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基甲基]吡咯烷-2-甲酸，制备并获得灰白色固体状标题化合物。MS(ESN)m/z＝563.3[M-H]^-。

步骤3：(2R)-2-[[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基甲基]-2-[[7-氟-2-(羟基甲基)茚满-5-基]氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯

类似于中间体22，步骤2，制备并获得灰白色固体状标题化合物。MS(ESP)m/z＝523.3[M+H]⁺。

步骤4(2R)-2-[[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基甲基]-2-[(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯

类似于中间体7，步骤2，制备并获得无色油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝521.3[M+H]⁺。

步骤5：(2R)-2-[[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基甲基]-2-[[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯

类似于中间体51，步骤3，使用(2R)-2-[[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基甲基]-2-[(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯代替N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)氨基甲酸叔丁酯，制备并获得灰白色固体状标题化合物。MS(ESP)m/z＝810.5[M+H]⁺。

中间体54

(2S,3S)-3-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-2-[[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯

类似于中间体41，步骤1和2，使用(2S,3S)-1-叔丁氧基羰基-3-羟基-吡咯烷-2-甲酸[CAS#187039-57-2]代替步骤1中的(3R)-3-氨基四氢呋喃-3-甲酸，并使用6-[8-[(6-氨基-4-氟-茚满-2-基)甲基]-2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-基]-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮(中间体51)代替步骤2中的(6-氨基-4-氟-茚满-2-基)甲醇，制备并获得黄色油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝796.2[M+H]⁺。

中间体55

6-氨基-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-4-甲腈

步骤1：6-(叔丁氧基羰基氨基)-4-氰基-茚满-2-甲酸乙酯

类似于中间体51，步骤1，由6-氨基-4-氰基-茚满-2-甲酸乙酯(中间体24，步骤3)制备并获得淡黄色油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝331.2[M+H]⁺。

步骤2：N-[7-氰基-2-(羟基甲基)茚满-5-基]氨基甲酸叔丁酯

类似于中间体22，步骤2，制备并获得无色油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝289.3[M+H]⁺。

步骤3至5：6-氨基-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-4-甲腈

类似于中间体51，步骤2至4，制备并获得浅黄色固体状标题化合物。MS(ESP)m/z＝476.4[M+H]⁺。

中间体56

(2S,4R)-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-2-[[6-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-3-基]氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯

步骤1至3：3-溴-5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,6-二甲酸二乙酯

类似于中间体6，步骤2至4，使用5-溴吡啶-2,3-二甲酸二甲酯[CAS#521980-82-5]代替4-甲基吡啶-2,3-二甲酸二甲酯，制备并获得深棕色粘稠油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝342.1[M+H]⁺。

步骤4：3-溴-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-6-甲酸；硫酸

将3-溴-5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,6-二甲酸二乙酯(245.0mg，0.720mmol，1当量)在水(3.6mL)和硫酸(0.46mL，8.63mmol，12.05当量)中的悬浮液在100℃搅拌16h。将反应混合物冷却至r.t.并在减压下去除挥发物，以得到橙色油状粗制标题化合物(2150mg)。MS(ESP)m/z＝241.2[M+H]⁺。

步骤5：3-溴-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-6-甲酸乙酯

将3-溴-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-6-甲酸和硫酸(532.0mg，1.56mmol，1当量)在EtOH(20.0mL，354.24mmol，226.5当量)中的溶液在85℃搅拌21h。将反应混合物冷却至r.t.并在减压下去除挥发物，将残余物倒入NaHCO₃(饱和水溶液)中并在r.t.搅拌15钟。水层用EtOAc(x3)萃取。将合并的有机相通过分相器过滤，并在减压下去除挥发物，以得到棕色粘稠油状标题化合物(390mg，1.44mmol，92.31％收率)。MS(ESP)m/z＝270.0[M+H]⁺。

步骤6：3-(叔丁氧基羰基氨基)-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-6-甲酸乙酯

在密封管中，将3-溴-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-6-甲酸乙酯(390.0mg，1.44mmol，1当量)、氨基甲酸叔丁酯(676.57mg，5.78mmol,4当量)、xantphos(167.09mg，0.290mmol，0.200当量)、叁(二亚苄基丙酮)二钯(0)(132.21mg，0.140mmol，0.100当量)和碳酸铯(1411.26mg，4.33mmol，3当量)在1,4-二噁烷(14.1mL)中的悬浮液用真空/氮气气氛吹扫三次。将反应混合物在100℃摇动1h。反应混合物用EtOAc和水稀释，分离各相，并且用水层EtOAc(x3)萃取。合并的有机相通过分相器过滤，并在减压下去除挥发物，以得到残余物，该残余物通过二氧化硅小柱色谱(50g，从环己烷100％至环己烷/EtOAc6:4)纯化，以得到橙色固体状标题化合物(316mg，1.03mmol，71.44％收率)。MS(ESP)m/z＝307.2[M+H]⁺。

步骤7至10：6-[8-[(3-氨基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-6-基)甲基]-2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-基]-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮

类似于中间体52，步骤6至9，制备并获得灰白色固体状标题化合物。MS(ESP)m/z＝452.3[M+H]⁺。

步骤11：(2S,4R)-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-2-[[6-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-3-基]氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯

将6-[8-[(3-氨基-6,7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶-6-基)甲基]-2-氧代-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-3-基]-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮(40.0mg，0.090mmol，1当量)、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(30.57mg，0.160mmol，1.8当量)、(2S,4R)-1-叔丁氧基羰基-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-吡咯烷-2-甲酸(中间体38，步骤1，45.92mg，0.130mmol，1.5当量)、HATU(60.64mg，0.160mmol，1.8当量)和N,N-二异丙基乙胺(46.3uL，0.270mmol，3当量)在DCM(0.500mL)和DMF(0.500mL)中的溶液在r.t.搅拌2h。反应混合物用EtOAc和NaHCO₃(饱和水溶液)稀释。分离各相，并且有机层用NaHCO₃(饱和水溶液)(x2)和盐水洗涤。有机相通过分相器过滤，并在减压下去除挥发物，以得到残余物，该残余物通过二氧化硅小柱色谱(5g二氧化硅-NH，从DCM 100％至DCM/[DCM/MeOH 9:1]75:25)纯化，以得到无色油状标题化合物(30mg，0.040mmol，43.47％收率)。MS(ESP)m/z＝779.6[M+H]⁺。

中间体57

(2S,4R)-2-[[2-[[叔丁氧基羰基-[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基]氨基]甲基]-7-氰基-茚满-5-基]氨基甲酰基]-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯

步骤1和2：2-甲酰基-6-硝基-茚满-4-甲腈

类似于中间体22，步骤2和3，由4-氰基-6-硝基-茚满-2-甲酸乙酯(中间体24，步骤2)制备并获得淡黄色油状标题化合物。MS(ESN)m/z＝215.0[M-H]^-。

步骤3：6-硝基-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-4-甲腈

类似于中间体51，步骤3，由6-[5-(2-氨基乙基)-2-氧代-噁唑烷-3-基]-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮；2,2,2-三氟乙酸(中间体1)和2-甲酰基-6-硝基-茚满-4-甲腈制备并获得浅棕色泡沫状标题化合物。MS(ESP)m/z＝480.3[M+H]⁺。

步骤4：N-[(4-氰基-6-硝基茚满-2-基)甲基]-N-[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯

类似于中间体51，步骤1，制备并获得浅棕色泡沫状标题化合物。MS(ESP)m/z＝580.4[M+H]⁺。

步骤5：N-[(6-氨基-4-氰基茚满-2-基)甲基]-N-[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯

类似于中间体24，步骤3，制备并获得浅黄色泡沫状标题化合物。MS(ESN)m/z＝548.4[M-H]^-。

步骤6：(2S,4R)-2-[[2-[[叔丁氧基羰基-[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基]氨基]甲基]-7-氰基-茚满-5-基]氨基甲酰基]-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯

类似于中间体7，步骤1，由N-[(6-氨基-4-氰基-茚满-2-基)甲基]-N-[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯和(2S,4R)-1-叔丁氧基羰基-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-吡咯烷-2-甲酸(中间体38，步骤1)，制备并获得白色固体状标题化合物。MS(ESN)m/z＝875.8[M-H]^-。

中间体58

(2S,4R)-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-2-[[7-氟-2-[[甲基-[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基]氨基]甲基]茚满-5-基]氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯

步骤1：(2S,4R)-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-2-[[7-氟-2-[[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯

类似于实例1，使用(2S,4R)-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-2-[(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(中间体38)代替2-(二甲基氨基)-N-(7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基)乙酰胺，制备标题化合物。MS(ESP)m/z＝770.6[M+H]⁺。

步骤2：(2S,4R)-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-2-[[7-氟-2-[[甲基-[2-[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基]乙基]氨基]甲基]茚满-5-基]氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯

类似于中间体21，步骤3，制备并获得浅黄色油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝784.6[M+H]⁺。

中间体59

(2R)-N-[3-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基]-2-(二甲基氨基)丙酰胺

步骤1：6-溴-4-氟-1-氧代-茚满-2-甲酸乙酯

类似于中间体5，步骤1，使用6-溴-4-氟-茚满-1-酮[CAS#881189-74-8]代替4-氟-茚满-1-酮，制备并获得粉红色固体状标题化合物。MS(ESP)m/z＝301.0[M+H]⁺。

步骤2：6-(叔丁氧基羰基氨基)-4-氟-1-氧代-茚满-2-甲酸乙酯

类似于中间体56，步骤6，制备并获得浅黄色固体状标题化合物。MS(ESP)m/z＝338.1[M+H]⁺。

步骤3：6-(叔丁氧基羰基氨基)-4-氟-1-羟基-茚满-2-甲酸乙酯

类似于中间体36，步骤3，制备并获得淡黄色油状标题化合物。MS(ESN)m/z＝338.2[M-H]^-。

步骤4：6-氨基-4-氟-1-羟基-茚满-2-甲酸乙酯

类似于中间体35，步骤5，制备并获得灰白色固体状标题化合物。MS(ESP)m/z＝240.1[M+H]⁺。

步骤5：6-氨基-1-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-4-氟-茚满-2-甲酸乙酯

将6-氨基-4-氟-1-羟基-茚满-2-甲酸乙酯(275.0mg，1.15mmol，1当量)、叔丁基二甲基氯硅烷(346.5mg，2.3mmol，2当量)、咪唑(172.16mg，2.53mmol，2.2当量)和4-二甲基氨基吡啶(14.04mg，0.110mmol，0.100当量)在DCM(5.5mL)和DMA(0.800mL)中的悬浮液在r.t.搅拌18h。反应混合物用NH₄Cl(饱和水溶液)淬灭并用DCM稀释。分离各相，并且水层用DCM萃取。合并的有机相通过分相器过滤，并在减压下去除挥发物，以得到粗制物质，该粗制物质通过二氧化硅小柱色谱(25g，从环己烷100％至环己烷/EtOAc 7:3)纯化，以得到浅黄色油状标题化合物(369mg，1.04mmol，90.81％收率)。MS(ESP)m/z＝354.2[M+H]⁺。

步骤6和7：(2R)-N-[3-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-7-氟-2-(羟基甲基)茚满-5-基]-2-(二甲基氨基)丙酰胺

类似于中间体32，步骤8和9，制备并获得浅黄色油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝411.5[M+H]⁺。

步骤8：(2R)-N-[3-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-7-氟-2-甲酰基-茚满-5-基]-2-(二甲基氨基)丙酰胺

类似于中间体7，步骤2，制备并获得棕色油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝409.5[M+H]⁺。

中间体60

(2R)-N-[3,7-二氟-2-[[2-[(5R)-2-氧代-3-[3-氧代-4-(2-三甲基硅烷基乙氧基甲基)吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基]噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-2-(二甲基氨基)丙酰胺

步骤1：6-(叔丁氧基羰基氨基)-1,4-二氟-茚满-2-甲酸乙酯

在-78℃向在无水DCM(23.93mL)中的6-(叔丁氧基羰基氨基)-4-氟-1-羟基-茚满-2-甲酸乙酯(中间体59，步骤3，766.0mg，2.03mmol，1当量)中逐滴添加二乙基氨基三氟化硫(0.4mL，3.05mmol，1.5当量)在无水DCM(8.35mL)中的溶液。将反应混合物在-78℃搅拌2h，然后逐滴添加另外的在DCM(8.35mL)中的二乙氨基三氟化硫(0.13mL，0.980mmol，0.480当量)，然后将反应混合物搅拌2h。混合物用二氯甲烷稀释，用冷的碳酸钠稀溶液洗涤，通过分相器过滤并真空浓缩，以得到粗品，该粗品通过二氧化硅小柱色谱(EtOAc/环己烷0％-20％)纯化，以得到浅黄色泡沫状标题化合物(432mg，1.27mmol，62.3％收率)。MS(ESP)m/z＝364.1[M+Na]⁺。

步骤2：6-氨基-1,4-二氟-茚满-2-甲酸乙酯

类似于中间体35，步骤5，制备并获得浅黄色油状标题化合物。MS(ESP)m/z＝242.1[M+H]⁺。

步骤3和4：(2R)-N-[3,7-二氟-2-(羟基甲基)茚满-5-基]-2-(二甲基氨基)丙酰胺

类似于中间体32，步骤8和9，制备并获得浅黄色固体状标题化合物。MS(ESP)m/z＝299.1[M+H]⁺。

步骤5：甲磺酸[6-[[(2R)-2-(二甲基氨基)丙酰基]氨基]-1,4-二氟-茚满-2-基]甲酯

在0℃向(2R)-N-[3,7-二氟-2-(羟基甲基)茚满-5-基]-2-(二甲基氨基)丙酰胺(72.0mg，0.240mmol，1当量)在DCM(2.41mL)中的溶液中添加甲磺酰氯(0.02mL，0.250mmol，1.05当量)，之后添加三乙胺(0.04mL，0.310mmol，1.3当量)并将混合物搅拌3小时，使温度升高。将反应混合物再次冷却至0℃，添加另外的甲磺酰氯(0.0mL，0.020mmol，0.100当量)，并将混合物搅拌30分钟。然后将反应混合物用DCM稀释并倒入冷的NaHCO₃溶液(饱和水溶液)中。分离各相，并且水相用DCM(x3)萃取。合并的有机相通过分相器过滤，在减压下浓缩以获得粗品，该粗品通过二氧化硅小柱色谱(5g，甲醇/DCM从0％至20％)纯化，以得到浅绿色固体状标题化合物(81.5mg，0.200mmol，89.71％收率)。MS(ESP)m/z＝377.3[M+H]⁺。

步骤6：(2R)-N-[3,7-二氟-2-(碘甲基)茚满-5-基]-2-(二甲基氨基)丙酰胺

将甲磺酸[6-[[(2R)-2-(二甲基氨基)丙酰基]氨基]-1,4-二氟-茚满-2-基]甲酯(71.0mg，0.190mmol，1当量)溶解在MeCN(0.472mL)中，然后添加碘化钠(282.72mg，1.89mmol，10当量)，并将混合物在60℃搅拌18h。然后将反应冷却至RT并添加水。混合物用NaHCO₃(饱和水溶液)稍微碱化并用EtOAc(x3)萃取。合并的有机萃取物通过分相器干燥并在减压下浓缩，以得到残余物，该残余物通过二氧化硅小柱色谱(5g,95:5DCM/MeOH)纯化，以得到浅棕色油状标题化合物(42.3mg，0.100mmol，54.94％收率)。MS(ESP)m/z＝409.3[M+H]⁺。

步骤7：(2R)-N-[3,7-二氟-2-[[2-[(5R)-2-氧代-3-[3-氧代-4-(2-三甲基硅烷基乙氧基甲基)吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基]噁唑烷-5-基]乙基氨基]甲基]茚满-5-基]-2-(二甲基氨基)丙酰胺

将6-[(5R)-5-(2-氨基乙基)-2-氧代-噁唑烷-3-基]-4-(2-三甲基硅烷基乙氧基甲基)吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮；盐酸盐(中间体61，45.88mg，0.100mmol，1当量)和(2R)-N-[3,7-二氟-2-(碘甲基)茚满-5-基]-2-(二甲基氨基)丙酰胺(42.0mg，0.100mmol，1当量)与MeCN(0.935mL)混合，然后添加碳酸钾(35.55mg，0.260mmol，2.5当量)。将混合物在80℃搅拌3天。然后将反应混合物冷却，通过布氏漏斗过滤，用MeCN洗涤。在减压下浓缩滤液，粗产物通过反相二氧化硅小柱色谱(MeCN/(H₂O+0.1％NH₄OH),1to 75％)纯化，之后冻干，以得到灰白色固体状标题化合物(18.9mg，0.030mmol，26.63％收率)。MS(ESP)m/z＝690.4[M+H]⁺。

中间体61

6-[(5R)-5-(2-氨基乙基)-2-氧代-噁唑烷-3-基]-4-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮；盐酸盐

步骤1：(R)-(2-(2-氧代-3-(3-氧代-4-((2-(三甲基硅烷基)乙氧基)甲基)-3,4-二氢-2H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯

N-[2-[2-氧代-3-[3-氧代-4-(2-三甲基硅烷基乙氧基甲基)吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基]噁唑烷-5-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(中间体1，步骤3)的对映体通过制备型手性SFC分离，以得到白色固体状标题化合物。MS(ESN)m/z＝554.4[M+HCOO]^-。

步骤2：6-[(5R)-5-(2-氨基乙基)-2-氧代-噁唑烷-3-基]-4-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮；盐酸盐

将(R)-(2-(2-氧代-3-(3-氧代-4-((2-(三甲基硅烷基)乙氧基)甲基)-3,4-二氢-2H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)噁唑烷-5-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(5.40g，10.6mmol，1当量)溶解在1,1,1,3,3,3-六氟-2-丙醇(75ml，10.6mmol，1当量)中，并将混合物在145℃在微波中照射90分钟。将混合物冷却至0℃并添加37％HCl水溶液(1.1g，929μl，11.1mmol，1.05当量)。将混合物在25℃蒸发。将残余物溶解在MeCN(5mL)中，添加水(150mL)，并将混合物冻干，以得到白色固体状标题化合物(4.52g，10.1mmol，95.7％收率)。MS(ESP)m/z＝410.3[M+H]⁺。

中间体62

6-[(5R)-5-(2-氨基乙基)-2-氧代-噁唑烷-3-基]-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮；2,2,2-三氟乙酸

步骤1：甲磺酸2-(2-氧代噁唑烷-5-基)乙酯

向5-(2-羟基乙基)噁唑烷-2-酮[CAS#1211594-02-3](25.0g，190.65mmol，1当量)和DCM(250mL)的混合物中添加三乙胺(70.0mL，502.22mmol，2.63当量)。用冰浴将混合物冷却至低于10℃。将甲磺酰氯(20.0mL，258.4mmol，1.36当量)逐滴添加至搅拌的混合物中，保持内部温度低于20℃。添加后，将混合物在RT搅拌30分钟。将混合物在分相器上过滤，并且残余物用DCM(100mL)洗涤。向搅拌的滤液中添加NaHCO₃(15g)，之后添加水(100mL)。将有机层用分相器分离并在减压下浓缩，以得到黄色油状标题化合物(28.3g，135.26mmol，70.95％收率)。产物不经进一步纯化即用于下一步。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ6.09(s,1H),4.89–4.76(m,1H),4.46–4.36(m,2H),3.77(t,J＝8.6Hz,1H),3.12(q,J＝7.3Hz,1H),3.05(s,3H),2.17(dtd,J＝7.5,5.4,1.9Hz,2H)。

步骤2：N-叔丁氧基羰基-N-[2-(2-氧代噁唑烷-5-基)乙基]氨基甲酸叔丁酯

用亚氨基二甲酸二叔丁酯(31.0g，142.7mmol，0.890当量)在DMF(240mL)中的溶液填充1L圆底烧瓶。将混合物冷却至0℃，并添加叔丁醇钾(15.91g，141.76mmol，0.880当量)。将混合物在该温度搅拌15分钟。逐滴添加甲磺酸2-(2-氧代噁唑烷-5-基)乙酯(33.7g，161.07mmol，1当量)在DMF(60mL)中的溶液，同时保持内部温度低于5℃，然后使混合物温热至RT并在该温度搅拌16h。将混合物用冰浴冷却并添加NH₄Cl(饱和水溶液，500mL)。混合物用EtOAc(3x200mL)萃取，然后将合并的有机相用水(300mL)和盐水(300mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩。棕色油状残余物通过二氧化硅小柱色谱(340g，EtOAc/环己烷25至100％)纯化，以得到白色固体状标题化合物(18g，54.48mmol，33.82％收率)。

步骤3：N-叔丁氧基羰基-N-[2-[(5R)-2-氧代-3-[3-氧代-4-(2-三甲基硅烷基乙氧基甲基)吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基]噁唑烷-5-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯和N-叔丁氧基羰基-N-[2-[(5S)-2-氧代-3-[3-氧代-4-(2-三甲基硅烷基乙氧基甲基)吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基]噁唑烷-5-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯

类似于中间体1，步骤3，使用N-叔丁氧基羰基-N-[2-(2-氧代噁唑烷-5-基)乙基]氨基甲酸叔丁酯代替N-[2-(2-氧代噁唑烷-5-基)乙基]氨基甲酸叔丁酯，制备并获得黄色油状外消旋的N-叔丁氧基羰基-N-[2-[2-氧代-3-[3-氧代-4-(2-三甲基硅烷基乙氧基甲基)吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基]噁唑烷-5-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯。N-叔丁氧基羰基-N-[2-[2-氧代-3-[3-氧代-4-(2-三甲基硅烷基乙氧基甲基)吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基]噁唑烷-5-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(20g，32.8mmol，1当量)的对映体通过制备型手性SFC分离以得到：峰1，其为浅棕色固体状N-叔丁氧基羰基-N-[2-[(5R)-2-氧代-3-[3-氧代-4-(2-三甲基硅烷基乙氧基甲基)吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基]噁唑烷-5-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(7840mg,38.02％)；峰2，其为浅棕色固体状N-叔丁氧基羰基-N-[2-[(5S)-2-氧代-3-[3-氧代-4-(2-三甲基硅烷基乙氧基甲基)吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基]噁唑烷-5-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(8480mg,39.86％)。

步骤4：6-[(5R)-5-(2-氨基乙基)-2-氧代-噁唑烷-3-基]-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-3-酮；2,2,2-三氟乙酸

将N-叔丁氧基羰基-N-[2-[(5R)-2-氧代-3-[3-氧代-4-(2-三甲基硅烷基乙氧基甲基)吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基]噁唑烷-5-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(2.0g，3.28mmol，1当量)在三氟乙酸(18.75mL，243.38mmol，74.2当量)中的溶液在60℃搅拌过夜。将混合物在真空下浓缩并与DCM和MeCN一起蒸发。将所得物质在MeCN中研磨。收集固体并在真空下干燥，以得到灰白色固体状标题化合物(827mg，2.1mmol，64.11％收率)。MS(ESP)m/z＝280.3[M+H]⁺。

中间体63

(2S,4R)-1-叔丁氧基羰基-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-2-甲基-吡咯烷-2-甲酸

步骤1：(2S,4R)-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基吡咯烷-1,2-二甲酸O1-叔丁基O2-甲酯

向叔丁基二甲基氯硅烷(3687mg，24.46mmol，1.2当量)在DMF(20mL)中的溶液中添加4-二甲基氨基吡啶(249mg，2.04mmol，0.1当量)、咪唑(3608mg，53.0mmol，2.6当量)和N-BOC-反式-4-羟基-L-脯氨酸甲酯(5.0g，20.39mmol，1.0当量)。将所得混合物在25℃搅拌16h。向该混合物中添加水(50mL)。将混合物用EtOAc(50mL×3)萃取。将有机层合并，经Na₂SO₄干燥并在减压下浓缩，以得到粗产物，该粗产物通过快速柱色谱(PE:EtOAc＝5:1)纯化，以得到无色油状标题化合物(6.9g，19.19mmol，88.9％收率)。

步骤2：(2S,4R)-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-2-甲基-吡咯烷-1,2-二甲酸O1-叔丁酯O2-甲酯

向0℃的二异丙基氨基锂(9.6mL，19.19mmol，1.0当量)在THF(20mL)中的溶液中添加–25℃的六甲基磷酰胺(3.34mL，19.19mmol，1.0当量)，然后向该溶液中添加(2S,4R)-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基吡咯烷-1,2-二甲酸O1-叔丁酯O2-甲酯(6.9g，19.19mmol，1.0当量)在THF(20mL)中的溶液。添加后，将溶液在0℃搅拌1h。1h后，将溶液冷却至–78℃。向该溶液中逐滴添加碘甲烷(4086.11mg，28.79mmol，1.5当量)，然后将溶液在–78℃搅拌2h。将溶液倒入冰冷的NH₄Cl水溶液中。然后将溶液用EtOAc(100mL x3)萃取。合并的有机层用饱和盐溶液洗涤并经Na₂SO₄干燥。将溶液在减压下浓缩以得到粗品。粗品通过快速柱色谱(PE:EtOAc＝5:1)纯化，以得到无色油状标题化合物(2.6g，6.96mmol，32.6％收率)。

步骤3：(2S,4R)-1-叔丁氧基羰基-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-2-甲基-吡咯烷-2-甲酸

在20℃向(2S,4R)-4-[叔丁基(二甲基)硅烷基]氧基-2-甲基-吡咯烷-1,2-二甲酸O1-叔丁酯O2-甲酯(600.0mg，1.61mmol，1.0当量)在甲醇(6mL)和水(2mL)中的溶液中添加一水合氢氧化锂(192.34mg，4.58mmol，2.85当量)。将所得溶液在60℃搅拌12h。用1M HCl水溶液将反应混合物pH调节为3。添加EtOAc(20mL)和水(20mL)，并分离各层。将水相用EtOAc(20mL×2)萃取。合并的萃取物用盐水(20mL x2)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，并在减压下浓缩，以得到残余物。残余物通过制备型TLC(洗脱剂PE/EtOAc＝1:1)纯化，以得到黄色油状标题化合物(150.0mg，0.42mmol，23.4％收率)。¹H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ12.47(br s,1H),4.41(m,1H),3.52(m,1H),3.25(m,1H),2.26(m,1H),1.83(m,1H),1.52(s,3H),1.37(s,9H),0.86(s,9H),0.06(s,6H)ppm。

Claims

1.一种由以下通式(I)表示的化合物，

其中

A¹为-N-；

A²选自

i)-N-，和

ii)-CH-；

A³为-CH-；

A⁴选自

i)-O-，和

ii)-S-；

A⁵为-CH-；

A⁶为-O-；

B¹选自

i)-N-，和

ii)–CR⁵-；

B²选自

i)-N-，和

ii)–CR⁶-；

B³为–CNH-C(＝O)R⁷-；

B⁴选自

i)-N-，和

ii)–CR⁸-；

R²为H；

R^3a选自

i)H，

ii)卤素，和

iii)OH；

R^3b选自

i)H，

ii)卤素，和

iii)OH；

其中R^3a和R^3b中的至少一者为H；

R⁴选自

i)H，

ii)卤素，

iii)C_1-6-烷氧基，和

iii)OH；

R⁵选自

i)H，

ii)卤素，

iii)氰基，和

iv)C_1-6-烷基；

R⁶选自

i)H，和

ii)C_1-6-烷基；

R⁷选自

i)CR^aR^bNR^cR^d，

ii)CR^aR^bOH，

iii)CHR^eR^f，

iv)杂环烷基，

v)杂环烷基烷基，

vi)经取代的杂环烷基，

vii)经取代的杂环烷基烷基，和

vii)经取代的杂芳基，

R⁸选自

i)H，

ii)卤素，和

iii)氰基；

L为-L₁-NR⁹-L₂-；

L₁为(CH₂)_x，其中x表示1至6的整数；

L₂为(CH₂)_y，其中y表示1至6的整数，

R¹为H，且R⁹选自

i)H，和

ii)C_1-6-烷基；

或者R¹和L₂以及它们所键合的原子形成3元至6元烷基环；

R^a和R^b独立地选自

iv)H，

v)C_1-6-烷基，和

vi)卤素，

或者R^a和R^b形成3元环烷基环；

R^c和R^d独立地选自

i)H，

ii)C_1-6-烷基，

iii)C₃-C₆-环烷基，和

iv)包含单个氧杂原子的4元至6元杂环烷基，

或者R^c和R^d形成包含单个N杂原子的4元环；

R^e和R^f独立地选自

i)H，

ii)NH₂，

iii)羟基烷基，和

iv)烷基-COOH；

或其药用盐。

2.根据权利要求1所述的化合物或其药用盐，其中A⁴为–O-。

3.根据权利要求1或2所述的化合物或其药用盐，其中R⁶为H。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的化合物或其药用盐，其中R⁸为H或卤素。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的化合物或其药用盐，其中R⁸为H。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的化合物或其药用盐，其中A²为–N-。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的化合物或其药用盐，其中B¹为–CR⁵-。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的化合物或其药用盐，其中B²为–CR⁶-。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的化合物或其药用盐，其中B⁴为–CR⁸-。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的化合物或其药用盐，其中R⁴为H。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的化合物或其药用盐，其中R⁵为氰基或卤素。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的化合物或其药用盐，其中R⁵为卤素。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的化合物或其药用盐，其中R⁷选自

i)CR^aR^bNR^cR^d，

ii)CR^aR^bOH，

iii)CHR^eR^f，

iv)包含单个N杂原子的5元杂环烷基，

v)包含单个N杂原子的3元至6元杂环烷基烷基，

vi)包含单个N或O杂原子的5元经取代的杂环烷基，

vii)包含单个N杂原子的5元经取代的杂环烷基烷基，和

viii)经取代的噁唑，

14.根据权利要求1至13中任一项所述的化合物或其药用盐，其中R⁷选自

i)CR^aR^bNR^cR^d，

ii)CR^aR^bOH，

iii)包含单个N杂原子的4元杂环烷基烷基，

iv)包含单个N杂原子的5元经取代的杂环烷基，

15.根据权利要求1至14中任一项所述的化合物或其药用盐，其中R⁷为CR^aR^bNR^cR^d。

16.根据权利要求1至15中任一项所述的化合物或其药用盐，其中R⁹为H。

17.根据权利要求1至16中任一项所述的化合物或其药用盐，其中R^a和R^b独立地选自H、C_1-6-烷基和卤素。

18.根据权利要求1至17中任一项所述的化合物或其药用盐，其中R^a为H且R^b为C_1-6-烷基。

19.根据权利要求1至18中任一项所述的化合物或其药用盐，其中R^c和R^d独立地选自C_1-6-烷基或者一起形成包含单个N杂原子的4元环。

20.根据权利要求1至19中任一项所述的化合物或其药用盐，其中R^c和R^d两者均为C_1-6-烷基。

21.根据权利要求1至20中任一项所述的化合物或其药用盐，其中x为2。

22.根据权利要求1至21中任一项所述的化合物或其药用盐，其中y为1。

23.根据权利要求1至22中任一项所述的化合物或其药用盐，其中R¹、R⁹和L₂以及它们所键合的原子形成如下哌啶环，

24.根据权利要求1所述的化合物或其药用盐，其中

A¹为-N-；

A²为–N-；

A³为-CH-；

A⁴为-O-；

A⁵为-CH-；

A⁶为-O-；

B¹为–CR⁵-；

B²为–CR⁶-；

B³为–CNH-C(＝O)R⁷-；

B⁴为–CR⁸-；

R²为H；

R^3a为H；

R^3b为H；

R⁴为H；

R⁵选自

i)卤素，和

ii)氰基；

R⁶为H；

R⁷选自

i)CR^aR^bNR^cR^d，

ii)CR^aR^bOH，

iii)包含单个N杂原子的4元杂环烷基烷基，

R⁸选自

i)H，和

ii)卤素；

L为-L₁-NR⁹-L₂-；

L₁为(CH₂)_x，其中x为1；

L₂为(CH₂)_y，其中y为2；

R¹和R⁹为H，

或者R¹、R⁹和L₂以及它们所键合的原子形成如下哌啶环，

R^a和R^b独立地选自

i)H，

ii)C_1-6-烷基，和

iii)卤素，

或其药用盐。

25.根据权利要求1所述的化合物或其药用盐，其中

A¹为-N-；

A²为–N-；

A³为-CH-；

A⁴为-O-；

A⁵为-CH-；

A⁶为-O-；

B¹为–CR⁵-；

B²为–CR⁶-；

B³为–CNH-C(＝O)R⁷-；

B⁴为–CR⁸-；

R²为H；

R^3a为H；

R^3b为H；

R⁴为H；

R⁵为卤素；

R⁶为H；

R⁷为CR^aR^bNR^cR^d；

R⁸为H；

L为-L₁-NR⁹-L₂-；

L₁为(CH₂)_x，其中x为1；

R¹和R⁹为H；

L₂为(CH₂)_y，其中y为2；

R^a和R^b独立地选自

i)H，和

ii)C_1-6-烷基；

R^c和R^d为C_1-6-烷基；

或其药用盐。

26.根据权利要求1所述的化合物，其选自

或其药用盐。

27.根据权利要求1或26中任一项所述的化合物，其选自

(2S,4R)-N-[7-氟-2-[[2-氧代-3-(3-氧代-4H-吡嗪并[2,3-b][1,4]噁嗪-6-基)-1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]甲基]茚满-5-基]-4-羟基-2-甲基-吡咯烷-2-甲酰胺

或其药用盐。

28.根据权利要求1、26或27中任一项所述的化合物，其选自

或其药用盐。

29.根据权利要求1至28中任一项所述的化合物，其用作治疗活性物质。

30.一种药物组合物，其包含根据权利要求1至28中任一项所述的化合物以及治疗惰性载体。

31.根据权利要求1至28中任一项所述的化合物或其药用盐，其用作抗生素。

32.根据权利要求1至28中任一项所述的化合物或其药用盐用于治疗或预防细菌感染的用途。

33.根据权利要求1至28中任一项所述的化合物用于治疗或预防由大肠杆菌引起的感染和由此所致的疾病的用途。

34.根据权利要求1至28中任一项所述的化合物，其用于治疗或预防细菌感染。

35.根据权利要求1至28中任一项所述的化合物，其用于治疗或预防由大肠杆菌引起的感染和由此所致的疾病。

36.根据权利要求1至28中任一项所述的化合物用于制备药物的用途，所述药物用于治疗或预防细菌感染。

37.根据权利要求1至28中任一项所述的化合物用于制备药物的用途，所述药物用于治疗或预防由大肠杆菌引起的感染和由此所致的疾病。

38.一种用于治疗或预防由大肠杆菌引起的感染和由此所致的疾病的方法，所述方法包括施用有效量的根据权利要求1至28中任一项所述的化合物。

39.一种用于治疗或预防细菌感染的方法，所述方法包括施用有效量的根据权利要求1至28中任一项所述的化合物。

40.一种制备根据权利要求1至28中任一项所述的化合物的方法，所述方法包括在包括三乙酰氧基硼氢化钠或氰基硼氢化钠的反应条件下，任选地在添加剂诸如N,N-二异丙基乙胺或三乙胺或乙酸或粉末状分子筛的存在下，在诸如室温的温度在溶剂诸如甲醇、THF或1,2-二氯乙烷中，使式III化合物与式II化合物进行反应，

其中R¹、R²、R^3a、R^3b、R⁴、A¹、A²、A³、A⁴、A⁵、A⁶、B¹、B²、B³、B⁴和L如上所述。

41.根据权利要求1至28中任一项所述的化合物，其根据权利要求40所述的方法进行制造。

42.如前所述的本发明。