CN117979968A - 用于治疗脑肿瘤的EGFR抑制剂(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基-氨基-苯基-丙烯酰胺 - Google Patents

用于治疗脑肿瘤的EGFR抑制剂(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基-氨基-苯基-丙烯酰胺 Download PDF

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CN117979968A CN202280052361.3A CN202280052361A CN117979968A CN 117979968 A CN117979968 A CN 117979968A CN 202280052361 A CN202280052361 A CN 202280052361A CN 117979968 A CN117979968 A CN 117979968A
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J·赵
W·科恩斯
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Chiyuan Biopharmaceutical Co
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Chiyuan Biopharmaceutical Co
Dana Farber Cancer Institute Inc
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Abstract

本发明总体上涉及药物和治疗方法。更具体地，本发明提供了小分子EGFR抑制剂(例如，EGFR酪氨酸激酶抑制剂化合物)和其药物组合物，以及其用于治疗各种疾病和病状，如中枢神经系统癌症(例如，原发性和转移性脑癌)和肺癌的方法。

Description

用于治疗脑肿瘤的EGFR抑制剂(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1- 基)嘧啶-2-基-氨基-苯基-丙烯酰胺
相关申请的交叉引用
本申请要求于2021年6月22日提交的美国临时专利申请第63/213,301号以及于2021年10月20日提交的美国临时专利申请第63/257,907号的优先权权益。这些申请中的每个申请的内容特此通过引用整体并入本文。
背景技术
胶质母细胞瘤(GBM)是成人中最常见的和恶性的原发性脑肿瘤。许多靶向疗法在其它癌症类型中取得了广泛成功，但对GBM功效有限，并且患有GBM的患者的预后仍然令人沮丧。
超过50％的胶质母细胞瘤具有异常EGFR遗传变体。这些EGFR变体中的大多数通过突变出现在细胞外结构域中。其中，最常见的EGFR变体(v)，即EGFRvIII(外显子2-7缺失)具有框架内细胞外结构域截短。已经表明，EGFR突变的GBM细胞可能对EGFR信号传导成瘾。因此，EGFR是GBM中有吸引力的治疗靶标。
目前，在美国，食品和药物管理局(FDA)批准了五种EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKI；吉非替尼(gefitinib)、厄洛替尼(erlotinib)、阿法替尼(afatinib)、达可替尼(dacomitinib)和奥希替尼(osimertinib))用于治疗EGFR突变的肺癌。吉非替尼和厄洛替尼是第一代EGFR-TKI，其通过与ATP竞争用于与激酶结构域上的ATP结合位点结合来抑制催化活性。吉非替尼或厄洛替尼的施用使得显著提高经历铂化疗的患者的存活率。第二代EGFR抑制剂阿法替尼和达可替尼不可逆地抑制包含EGFR的所有四种ErbB受体。如此，其是EGFR的更强效的抑制剂，但毒性也会增加。作为唯一经FDA批准的第三代EGFR-TKI，奥希替尼是一种被设计成靶向EGFR-TKI治疗中出现的EGFR抗性突变的共价抑制剂。
虽然这些第一代和第二代EGFR-TKI在临床前实验中已经表明抑制GBM细胞的增殖，但其在临床上对GBM患者尚未有效。其失败的主要原因有两个。第一，第一代和第二代EGFR-TKI不能穿过血脑屏障(BBB)。另一方面，第三代EGFR-TKI奥希替尼已经被报道针对具有EGFR突变的肺癌的脑转移具有活性，并且具有更高的脑渗透，被提出用于治疗EGFR突变的GBM。第二，剂量限制性毒性(DLT)可能会防止经批准的EGFR-TKI成为对患有GBM的患者而言安全且有效的药物。与肺癌中的EGFR突变，如外显子-19缺失或L858R和T790M取代不同，其驻留在细胞内激酶结构域(KD)中，GBM中的EGFR变体的共同特征是突变型细胞外结构域，其中细胞内KD为野生型(WT)。由于这些并发症，迄今为止还不可能设计真正的靶向治疗，所述靶向治疗在中枢神经系统(CNS)肿瘤内以保证体内全身WT EGFR功能的浓度来抑制EGFR信号传导。
发明内容
在某些方面，本公开提供了治疗多形性胶质母细胞瘤、星形细胞瘤、先天性脑肿瘤、室管膜瘤、生殖细胞瘤、胶质瘤、神经胶质过多、胶质肉瘤、髓母细胞瘤、脑膜瘤、脑膜肉瘤、少突胶质细胞瘤、松果体瘤、视网膜母细胞瘤、神经鞘瘤或脊髓神经纤维瘤的方法，所述方法包括向有需要的人类受试者施用治疗有效量的式I化合物：
或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体或互变异构体，其中所述治疗有效量为至少100mg/天，并且
其中：
Z1、Z2和Z3各自独立地为N或CR8，其中Z1、Z2和Z3中的至少两者为N；
R8为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R1为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、NH2、NH(C1-C4)烷基、N((C1-C4)烷基)2或卤素；
R2为H或(C1-C6)烷基；
R3为(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R4为NR9R10或5元至7元杂环，所述5元至7元杂环包括1-3个选自N、O和S的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
R9为H或(C1-C4)烷基；
R10为(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
每个R11独立地为(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、(C1-C4)烷氧基或卤素；
R5为NR12C(O)R13或C(O)NR12R13；
R12为H或(C1-C6)烷基；
R13为(C1-C6)烷基或(C2-C6)烯基，其中所述烷基或所述烯基任选地被一个或多个独立地选自卤素、OH、CN和NH2的取代基取代；
R6和R7与其所连接的氮原子一起形成所述式的取代基；
其中
X3为N；
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CH或CR15；并且
每个R15独立地为(C1-C6)烷基、(C1-C6)卤代烷基、(C1-C6)烷氧基、OH、NH2、NH(C1-C6)烷基、N((C1-C6)烷基)2或卤素。
在某些实施例中，所述方法进一步包括在施用之后1个月内检查所述受试者的皮肤，其中所述受试者在施用之后1个月内没有表现出皮肤病变。
在某些实施例中，所述方法是治疗多形性胶质母细胞瘤的方法。在某些实施例中，所述式I化合物的特征在于与所述受试者EGFR和/或突变的EGFR的结合亲和力不超过10nM。
在某些实施例中，所述化合物为N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺或其药学上可接受的盐。
在一些实施例中，所述受试者在施用之后1个月内其体重减轻不超过10％。可以每天向受试者施用治疗有效量的所述化合物，持续至少1个月。所述治疗有效量可以为100mg/天至1000mg/天、100mg/天至800mg/天、100mg/天至500mg/天和/或200mg/天至500mg/天。
所述方法可以进一步涉及在施用之后1个月内检查所述受试者的皮肤，其中所述受试者在施用之后1个月内没有表现出皮肤病变。在一些实施例中，所述方法进一步涉及在施用之后2个月内检查所述受试者的皮肤，其中所述受试者在施用之后2个月内没有表现出皮肤病变。
在一些实施例中，这些方法是治疗多形性胶质母细胞瘤的方法。所述多形性胶质母细胞瘤的特征可以在于EGFR和/或突变的EGFR的水平升高。在一些实施例中，所述式I化合物不是外排转运体的底物。在一些实施例中，所述式I化合物的特征在于与所述受试者体内的EGFR和/或突变的EGFR的结合亲和力不超过10nM，如不超过9nM、不超过8nM、不超过7nM、不超过6nM、不超过5nM、不超过4nM、不超过3nM、不超过2nM、不超过1nM、不超过0.9nM、不超过0.8nM、不超过0.7nM、不超过0.6nM、不超过0.5nM、不超过0.4nM、不超过0.3nM、不超过0.2nM、不超过0.15nM、不超过0.12nM、不超过0.11nM或不超过0.10nM。
这些方法可以是治疗星形细胞瘤的方法。
在一些实施例中，Z1和Z2各自为N并且Z3为CR8，R1为H或NH2，R2为H，R3为(C1-C4)烷氧基，R4为NR9R10，R5为NR12C(O)R13，和/或R15选自(C1-C6)烷基和(C1-C6)卤代烷基和/或选自甲基和CF3。
在一些实施例中，R8为H或卤素，R9为(C1-C4)烷基和/或R10为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2。在一些实施例中，R4为NR9R10，并且R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。在一些实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为H，并且R13为(C2-C6)烯基。在一些实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为(C1-C6)烷基，并且R13为(C2-C6)烯基。
在一些实施例中，所述式I化合物为式Ia化合物：
或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体或互变异构体，其中：
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CR15；
R91为(C1-C4)烷基；
R101为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R91和R101与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
在仍另一个实施例中，所述化合物选自由以下组成的组：
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺；
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺；以及
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺，
或其药学上可接受的盐。
在一些实施例中，所述化合物为N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺或其药学上可接受的盐。
所述化合物可以每天施用一次、每天施用两次或每天施用三次。
在一些实施例中，所述化合物是全身施用的。在其它实施例中，所述化合物是口服施用的。在仍其它实施例中，所述化合物是静脉内施用的。
在一些方面，本公开提供了用于治疗或减轻脑肿瘤或相关疾病或病状的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的具有化合物1的式的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在一些方面，本公开提供了用于抑制或降低患有脑肿瘤的受试者的表皮生长因子受体(EGFR)的活性的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的具有化合物1的式的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在一些方面，本公开提供了用于治疗或减轻由表皮生长因子受体(EGFR)介导的脑疾病或脑病状的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的具有化合物1的式的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在一些实施例中，所述脑肿瘤包括原发性肿瘤。在其它实施例中，所述脑肿瘤包括转移性肿瘤。在某些实施例中，所述脑肿瘤为胶质母细胞瘤。
在一些实施例中，所述治疗有效量在每天约0.1mg/kg体重至约20mg/kg体重的范围内。在一些此类实施例中，所述治疗有效量在每天约0.5mg/kg体重至约5mg/kg体重的范围内。
在其它方面，本发明总体上涉及一种用于治疗脑肿瘤或相关疾病或病状的药物组合物，所述药物组合物包括具有化合物1的式的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在一些实施例中，所述脑肿瘤包括原发性肿瘤，如胶质母细胞瘤。在其它方面，所述脑肿瘤包括转移性肿瘤。
在又其它方面，本公开提供了一种化合物，其具有化合物2的结构式：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在又其它方面，本公开提供了药物组合物，其包括具有化合物2的结构式的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物以及药学上可接受的赋形剂、载剂或稀释剂。在某些实施例中，所述药物组合物适于口服施用。在其它实施例中，所述药物组合物适于静脉内施用。
在一些实施例中，所述药物组合物适于治疗选自以下的疾病或病状：肺癌、结肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌、胰腺癌(pancreas cancer)、脑癌、肾癌、卵巢癌、胃癌(stomachcancer)、皮肤癌、骨癌、胃癌(gastric cancer)、乳腺癌、胰腺癌(pancreatic cancer)、胶质瘤、胶质母细胞瘤、肝细胞癌、乳头状肾癌、头颈部鳞状细胞癌、白血病、淋巴瘤和骨髓瘤。
在又其它方面，本公开提供了一种单位剂型，其包括本文所公开的药物组合物。
在又其它方面，本公开提供了用于治疗或减轻疾病或病状的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的具有化合物2的式的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在又其它方面，本公开提供了用于抑制或降低患有疾病或其相关病状的受试者的EGFR的活性的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗量的具有化合物2的式的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在又其它方面，本公开提供了用于治疗或减轻由EGFR介导的疾病或病状的方法，所述方法包括向所述有需要的受试者施用治疗有效量的具有化合物2的式的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在一些实施例中，所述疾病或病状为癌症，如选自以下的癌症：肺癌、结肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌、胰腺癌(pancreas cancer)、脑癌、肾癌、卵巢癌、胃癌(stomachcancer)、皮肤癌、骨癌、胃癌(gastric cancer)、乳腺癌、胰腺癌(pancreatic cancer)、胶质瘤、胶质母细胞瘤、肝细胞癌、乳头状肾癌、头颈部鳞状细胞癌、白血病、淋巴瘤和骨髓瘤。在一些此类实施例中，所述癌症包括原发性肿瘤。在其它此类实施例中，所述癌症包括转移性肿瘤。在仍其它此类实施例中，所述癌症为胶质母细胞瘤。在甚至仍其它此类实施例，所述癌症为肺癌，如非小细胞肺癌(NSCLC)或小细胞肺癌(SCLC)。
在某些实施例中，所述受试者携带EGFR突变，如T790M EGFR突变。
在一些实施例中，所述治疗有效量在每天约0.1mg/kg体重至约20mg/kg体重的范围内，如其中所述治疗有效量在每天约0.5mg/kg体重至约5mg/kg体重的范围内。
在又其它方面，本公开提供了用于治疗或减轻脑肿瘤或相关疾病或病状的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的具有化合物2的式的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在又其它方面，本公开提供了用于抑制或降低患有脑肿瘤的受试者的EGFR的活性的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗量的具有化合物2的式的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在仍其它方面，本公开提供了用于治疗或减轻由EGFR介导的脑疾病或脑病状的方法，所述方法包括向所述有需要的受试者施用治疗有效量的具有化合物2的式的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在一些实施例中，所述脑肿瘤包括原发性肿瘤。在其它实施例中，所述脑肿瘤包括转移性肿瘤。在某些实施例中，所述脑肿瘤为胶质母细胞瘤。
在又其它方面，本公开提供了一种化合物或其药物组合物的用途，其用于治疗或减轻脑肿瘤或相关疾病或病状，其中所述化合物具有化合物1的式：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在又其它方面，本发明通常涉及一种化合物或其药物组合物的用途，其用于抑制或降低患有脑肿瘤的受试者的EGFR的活性，其中所述化合物具有化合物1的式：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在又其它方面，本公开提供了一种化合物或其药物组合物的用途，其用于治疗或减轻由EGFR介导的脑疾病或脑病状，所述用途包括向所述有需要的受试者施用治疗有效量的具有化合物1的式的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在一些实施例中，所述脑肿瘤包括原发性肿瘤。在其它实施例中，所述脑肿瘤包括转移性肿瘤。在仍其它实施例中，所述脑肿瘤为胶质母细胞瘤。
在又其它方面，本公开提供了一种化合物或其药物组合物的用途，其用于治疗或减轻疾病或病状，其中所述化合物具有化合物2的式：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在又其它方面，本公开提供了一种化合物或其药物组合物的用途，其用于抑制或降低患有疾病或其相关病状的受试者的EGFR的活性，其中所述化合物具有化合物2的式：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在又其它方面，本公开提供了一种化合物或其药物组合物的用途，其用于治疗或减轻由EGFR介导的疾病或病状，其中所述化合物具有化合物2的式：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在一些实施例中，所述疾病或病状为癌症，如选自以下的癌症：肺癌、结肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌、胰腺癌(pancreas cancer)、脑癌、肾癌、卵巢癌、胃癌(stomachcancer)、皮肤癌、骨癌、胃癌(gastric cancer)、乳腺癌、胰腺癌(pancreatic cancer)、胶质瘤、胶质母细胞瘤、肝细胞癌、乳头状肾癌、头颈部鳞状细胞癌、白血病、淋巴瘤和骨髓瘤。在一些此类实施例中，所述脑肿瘤包括原发性肿瘤。在其它此类实施例中，所述脑肿瘤包括转移性肿瘤。在仍其它此类实施例中，所述癌症为胶质母细胞瘤。在又其它此类实施例中，所述癌症为肺癌，如非小细胞肺癌(NSCLC)。
附图说明
专利或申请文件含有至少一张彩色附图。在请求并支付必要的费用后，将由专利局提供带有彩色附图的本专利或专利申请公开的副本。
图1A是在用化合物1或所指示的剂量的厄洛替尼处理293-EGFRvIII细胞6小时之后，用所指示的抗体进行的蛋白质印迹分析。
图1B是示出了在具有针对pEGFRvIII1068和EGFRvIII的抗体的情况下以所指示的剂量用化合物1处理293-EGFRvIII细胞6小时的蛋白质印迹分析以确定用于抑制pEGFRvIII1068的IC50的图。α-微管蛋白用作上样对照。
图1C是示出了如通过293-EGFRvIII细胞的活力所指示的化合物1和其它EGFR-TKI的IC50(μM)的图。
图2A是示出了在每种药物的0.156μM至20μM的剂量滴定下，用化合物1处理3天的BT122细胞的活力的图。表中还示出了汇编化合物1和其它EGFR抑制剂针对BT112细胞的IC50。
图2B是示出了在每种药物的0.156μM至20μM的剂量滴定下，用化合物1处理3天的BT179细胞的活力的图。表中还示出了汇编化合物1和其它EGFR抑制剂针对BT179细胞的IC50。
图2C是示出了在每种药物的0.156μM至20μM的剂量滴定下，用化合物1处理3天的BT333细胞的活力的图。表中还示出了汇编化合物1和其它EGFR抑制剂针对BT333细胞的IC50。
图3A是示出了在具有针对pEGFRvIII1068和EGFRvIII的抗体的情况下以所指示的剂量用化合物1处理U251-EGFRvIII细胞20小时的蛋白质印迹分析以确定用于抑制pEGFRvIII1068的IC50的图。IC50为0.174μM。
图3B是示出了如所指示的用化合物1或其它EGFR TKI处理U251-EGFRvIII细胞的图。化合物1和其它EGFR TKI的IC50在曲线下方的表中指示。
图3C示出了在每种药物的0.156μM至20μM的剂量滴定下，用化合物1和其它EGFR抑制剂处理3天的U251细胞的增殖的图。表中还示出了汇编化合物1和其它EGFR抑制剂针对U251细胞的IC50。
图4A是在用媒剂对照(n＝3)、37.5mg/kg(QD，n＝3)或75mg/kg(QD，n＝2)的化合物1处理后，携带U251-EGFRvIII的第一队列小鼠在所指示周的一组代表性生物发光图像。
图4B是示出了与被设定为基线的零周相比，在治疗四周后第一队列中的每只小鼠的所关注区(ROI)的定量的条形图。
图4C是在用对照(n＝4)、37.5mg/kg(QD，n＝5)或75mg/kg(QD，n＝5)的化合物1处理后，携带U251-EGFRvIII的第二队列小鼠在所指示时间(周)的一组代表性生物发光图像。
图4D是示出了与被设定为基线的零周相比，在治疗四周后第二队列中的每只小鼠的所关注区(ROI)的定量的条形图。
图4E是用化合物1(37.5mg/kg，PO QD，n＝8)、化合物1(75mg/kg，PO QD，n＝7)或媒剂对照(n＝7)处理来自两个队列的携带U251-EGFRvIII异种移植的小鼠的卡普兰-梅尔存活率分析(Kaplan-Meier survival analysis)。平均值±SD，*p<0.05；**p<0.01，对数秩(Mantel-Cox)测试。
图4F是用化合物1(37.5mg/kg，PO QD，n＝8)、化合物1(75mg/kg，PO QD，n＝7)或媒剂对照(黑线，n＝7)处理来自两个队列的携带U251-EGFRvIII异种移植的小鼠的体重记录。平均值±SD，*p<0.05；**p<0.01，对数秩(Mantel-Cox)测试。
图5A示出了实例5中描述的由Cdkn2a无效；Pten无效；hEGFRvIII驱动的胶质母细胞瘤的同基因遗传工程化小鼠模型中的遗传改变的表示。
图5B是用化合物1处理1天的原代小鼠CPEvIII细胞的蛋白质印迹分析。
图5C是用化合物1(75mg/kg，PO QD，n＝5)或媒剂对照(n＝6)处理的荷瘤小鼠的卡普兰-梅尔存活率分析。*p<0.05(p＝0.017)，对数秩(Mantel-Cox)测试。
图5D是在终点从用化合物1或媒剂对照处理的小鼠收集的CPEvIII肿瘤的IHC分析。比例尺，100μm。
图5E是示出了用化合物1或媒剂对照处理的荷瘤小鼠的体重的图。
图6A示出了用10-25mg/kg/天奥希替尼处理的小鼠。
图6B示出了而是用10-50mg/kg/天化合物1处理的小鼠。
图7示出了用化合物1(25-50mg/kg)或奥希替尼(25mg/kg)处理的小鼠在处理过程中体重的变化。
图8示出了如实例11所描述的给药有化合物1或奥希替尼的携带NSCLC脑转移的雌性SCID小鼠的体重减轻。
图9示出了如实例11所描述的通过两种化合物对脑转移的抑制。
图10A是在治疗后7小时处死的口服施用给药100mg/kg化合物1的携带GBM的小鼠或对照小鼠的生物发光图像。
图10B是源自用苏木精和伊红(H&E)染色的对照和化合物1处理的小鼠的脑组织图像。
图10C示出了铺板在MALDI底物上的对照模拟物以及来自对照组和化合物1处理的小鼠的脑组织切片。
图10D示出了在MALDI-MSI分析期间从模拟样品观察到的信号。
图10E示出了从对铺板在MALDI底物上不同浓度的模拟物观察到根据强度生成的归一化曲线。
图10F是对脑组织样品观察到的强度的图像。
图10G示出了从模拟物的MALDI分析中观察到的绝对强度。
图10H示出了从源自化合物1处理的小鼠的脑组织样品的MALDI分析观察到的绝对强度。
图10I示出了化合物1的MSMS分析。
图11示出了通过使用实例18中所讨论的AZD9291、化合物1和化合物2的激酶分析结果。
具体实施方式
本申请涉及小分子EGFR-TKI化合物和其药物组合物，以及其用于治疗各种疾病和病状，如癌症，任选地中枢神经系统(CNS)癌症和肺癌的方法。在一些非限制性实例中，癌症为原发性或转移性脑癌。在其它非限制性实例中，癌症为CNS癌症，如胶质母细胞瘤(GBM)，如具有异常EGFR的成人GBM。在仍其它非限制性实例中，癌症为肺癌，如非小细胞肺癌(NSCLC)或小细胞肺癌(SCLC)。
本申请部分基于用于治疗各种疾病和病状，包含原发性脑癌(例如，GBM)、转移性脑癌和肺癌的新型治疗剂、组合物和方法的发现。具体地，本发明提供了如下所示的化合物11和化合物12和其组合物和使用方法，以治疗GBM和其它具有异常EGFR的癌症。重要的是，化合物11和化合物12两者都显示出有利的药代动力学(PK)和安全性特性，有非同寻常的脑特异性分布和累积。在化合物11的情况下，在估计稳态下，脑与血浆的比率已被证明大于20倍，这与其它报道的EGFR抑制剂形成鲜明对比。
在某些实施例中，本文所描述的是使用共价结合的EGFR-TKI，化合物1治疗中枢神经系统(CNS)癌症，例如GBM，如具有异常EGFR的成人GBM的方法。临床前功效研究显示出，相较于其它EGFR-TKI，化合物1在阻断来自具有EGFR扩增和/或EGFRvIII突变的两个患者来源和培养的人GBM细胞系的GBM肿瘤细胞的增殖方面更有效。另外，化合物1作为单一药剂施用能够以剂量依赖性方式减弱原位U251-EGFRvIII异种移植物的生长，并且延长荷瘤小鼠的生存期。此外，化合物1在体外和体内均抑制来自具有EGFRvIII表达的GBM的新型基因工程化小鼠(GEM)模型的GBM肿瘤中的EGFR磷酸化。化合物1还延长GBM的携带异位移植物的小鼠的生存期。值得注意的是，小鼠在用每天至多75mg/kg的增加剂量的化合物1的治疗期间维持稳定体重。
在某些实施例中，化合物1比与其它报道的EGFR抑制剂具有更有利的药代动力学(PK)和安全性特性。
在某些方面，本公开提供了化合物，其具有化合物2的结构：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在某些方面，本公开提供了治疗多形性胶质母细胞瘤、星形细胞瘤、先天性脑肿瘤、室管膜瘤、生殖细胞瘤、胶质瘤、神经胶质过多、胶质肉瘤、髓母细胞瘤、脑膜瘤、脑膜肉瘤、少突胶质细胞瘤、松果体瘤、视网膜母细胞瘤、神经鞘瘤或脊髓神经纤维瘤的方法，所述方法包括向有需要的人类受试者施用治疗有效量的式I化合物：
或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体或互变异构体，其中所述治疗有效量为至少100mg/天，并且
其中：
Z1、Z2和Z3各自独立地为N或CR8，其中Z1、Z2和Z3中的至少两者为N；
R8为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R1为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、NH2、NH(C1-C4)烷基、N((C1-C4)烷基)2或卤素；
R2为H或(C1-C6)烷基；
R3为(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R4为NR9R10或5元至7元杂环，所述5元至7元杂环包括1-3个选自N、O和S的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
R9为H或(C1-C4)烷基；
R10为(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
每个R11独立地为(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、(C1-C4)烷氧基或卤素；
R5为NR12C(O)R13或C(O)NR12R13；
R12为H或(C1-C6)烷基；
R13为(C1-C6)烷基或(C2-C6)烯基，其中所述烷基或所述烯基任选地被一个或多个独立地选自卤素、OH、CN和NH2的取代基取代；
R6和R7与其所连接的氮原子一起形成所述式的取代基；
其中
X3为N；
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CH或CR15；并且
每个R15独立地为(C1-C6)烷基、(C1-C6)卤代烷基、(C1-C6)烷氧基、OH、NH2、NH(C1-C6)烷基、N((C1-C6)烷基)2或卤素。
在某些实施例中，所述受试者在施用之后1个月内其体重减轻不超过10％。在其它实施例中，每天向所述受试者施用所述治疗有效量的所述化合物，持续至少一个月；并且所述受试者在每天施用之后1个月内其体重减轻不超过10％。可以通过本领域已知的任何合适方式测量受试者体重的变化。
在某些实施例中，所述治疗有效量是100mg/天至1000mg/天，如100mg/天至800mg/天、100mg/天至500mg/天或200mg/天至500mg/天。
在某些实施例中，所述方法进一步包括在施用之后1个月内检查所述受试者的皮肤，其中所述受试者在施用之后1个月内没有表现出皮肤病变。在其它实施例中，所述方法进一步包括在施用之后2个月内检查所述受试者的皮肤，其中所述受试者在施用之后2个月内没有表现出皮肤病变。如本文所使用的，“检查受试者的皮肤”可以包含受试者本人和/或医疗专业人员的视觉观察。如果受试者本人和/或医疗专业人员在视觉检查皮肤时未观察到皮肤病变，则所述受试者没有表现出皮肤病变。
在某些实施例中，所述方法是治疗多形性胶质母细胞瘤的方法。在一些此类实施例中，所述多形性胶质母细胞瘤的特征在于EGFR和/或突变的EGFR的水平升高。如果受试者(如受试者的肿瘤)的EGFR的水平高于健康受试者的EGFR的水平，则所述受试者的EGFR升高。如果EGFR的氨基酸序列与野生型EGFR的氨基酸序列不同，则EGFR发生突变。与多形性胶质母细胞瘤相关的EGFR突变包含本领域观察到的突变，但不限于EGFRvIII、EGFR扩增、EGFR错义突变和EGFR多体性。在其它此类实施例中，所述式I化合物不是外排转运体的底物。外排转运体是本领域已知的并且包含但不限于P-gp和Bcrp。如果化合物不以大于10μM的结合亲和力与外排转运体结合，则所述化合物不是外排转运体的底物。
在一些实施例中，所述式I化合物的特征在于与所述受试者体内的EGFR和/或突变的EGFR的结合亲和力不超过10nM，如不超过9nM、不超过8nM、不超过7nM、不超过6nM、不超过5nM、不超过4nM、不超过3nM、不超过2nM、不超过1nM、不超过0.9nM、不超过0.8nM、不超过0.7nM、不超过0.6nM、不超过0.5nM、不超过0.4nM、不超过0.3nM、不超过0.2nM、不超过0.15nM、不超过0.12nM、不超过0.11nM或不超过0.10nM。结合亲和力可以通过本领域已知的任何合适的方法确定。
在其它实施例中，所述方法是治疗星形细胞瘤的方法。
在某些实施例中，Z1和Z2各自为N，并且Z3为CR8。
在某些实施例中，R1为H或NH2，如H。
在某些实施例中，R3为(C1-C4)烷氧基。
在某些实施例中，R4为NR9R10。
在某些实施例中，R5为NR12C(O)R13。
在某些实施例中，R15选自(C1-C6)烷基和(C1-C6)卤代烷基。在一些此类实施例中，R15选自甲基和CF3。
在某些实施例中，R8为H或卤素。
在某些实施例中，R9为(C1-C4)烷基。
在某些实施例中，R10为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2。
在某些实施例中，R4为NR9R10，并且R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
在某些实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为H，并且R13为(C2-C6)烯基。在其它实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为(C1-C6)烷基，并且R13为(C2-C6)烯基。
在一些实施例中，所述式I化合物为式Ia化合物：
或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体或互变异构体，其中：
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CR15；
R91为(C1-C4)烷基；
R101为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R91和R101与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
在某些实施例中，所述化合物选自由以下组成的组：
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺；
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺；以及
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺，
或其药学上可接受的盐。
在某些实施例中，所述化合物为N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺或其药学上可接受的盐。
在某些实施例中，所述化合物的对甲苯磺酸盐具有以下结构：
(“化合物1”甲苯磺酸盐或“化合物1”对甲苯磺酸盐)
在某些实施例中，所述化合物是化合物1:
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在某些实施例中，所述化合物是化合物2:
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在某些实施例中，所述化合物每天施用一次。在其它实施例中，所述化合物每天施用两次。在仍其它实施例中，所述化合物每天施用三次。
在某些实施例中，所述化合物是全身施用的。在一些此类实施例中，所述化合物是口服施用的。在其它此类实施例中，所述化合物是静脉内施用的。
在某些方面，本公开提供了用于治疗或减轻脑肿瘤或相关疾病或病状的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的具有式I的结构的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物，其中：
Z1、Z2和Z3各自独立地为N或CR8，其中Z1、Z2和Z3中的至少两者为N；
R8为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R1为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、NH2、NH(C1-C4)烷基、N((C1-C4)烷基)2或卤素；
R2为H或(C1-C6)烷基；
R3为(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R4为NR9R10或5元至7元杂环，所述5元至7元杂环包括1-3个选自N、O和S的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
R9为H或(C1-C4)烷基；
R10为(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
每个R11独立地为(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、(C1-C4)烷氧基或卤素；
R5为NR12C(O)R13或C(O)NR12R13；
R12为H或(C1-C6)烷基；
R13为(C1-C6)烷基或(C2-C6)烯基，其中所述烷基或所述烯基任选地被一个或多个独立地选自卤素、OH、CN和NH2的取代基取代；
R6和R7与其所连接的氮原子一起形成所述式的取代基；
其中
X3为N；
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CH或CR15；并且
每个R15独立地为(C1-C6)烷基、(C1-C6)卤代烷基、(C1-C6)烷氧基、OH、NH2、NH(C1-C6)烷基、N((C1-C6)烷基)2或卤素。
在某些实施例中，Z1和Z2各自为N，并且Z3为CR8。
在某些实施例中，R1为H或NH2，如H。
在某些实施例中，R3为(C1-C4)烷氧基。
在某些实施例中，R4为NR9R10。
在某些实施例中，R5为NR12C(O)R13。
在某些实施例中，R15选自(C1-C6)烷基和(C1-C6)卤代烷基。在一些此类实施例中，R15选自甲基和CF3。
在某些实施例中，R8为H或卤素。
在某些实施例中，R9为(C1-C4)烷基。
在某些实施例中，R10为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2。
在某些实施例中，R4为NR9R10，并且R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
在某些实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为H，并且R13为(C2-C6)烯基。在其它实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为(C1-C6)烷基，并且R13为(C2-C6)烯基。
在一些实施例中，所述式I化合物为式Ia化合物：
或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体或互变异构体，其中：
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CR15；
R91为(C1-C4)烷基；
R101为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R91和R101与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
在某些实施例中，所述化合物选自由以下组成的组：
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺；
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺；以及
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺，
或其药学上可接受的盐。
在某些实施例中，所述化合物为N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺或其药学上可接受的盐。
在某些实施例中，所述式I化合物是化合物1：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在某些实施例中，所述式I化合物是化合物2：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在某些实施例中，所述脑肿瘤为胶质母细胞瘤。
在某些实施例中，所述化合物每天施用一次。在其它实施例中，所述化合物每天施用两次。在仍其它实施例中，所述化合物每天施用三次。
在某些实施例中，所述化合物是全身施用的。在一些此类实施例中，所述化合物是口服施用的。在其它此类实施例中，所述化合物是静脉内施用的。
在其它方面，本公开提供了用于抑制或降低患有脑肿瘤的受试者的EGFR的活性的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的具有式I的结构的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物，其中：
Z1、Z2和Z3各自独立地为N或CR8，其中Z1、Z2和Z3中的至少两者为N；
R8为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R1为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、NH2、NH(C1-C4)烷基、N((C1-C4)烷基)2或卤素；
R2为H或(C1-C6)烷基；
R3为(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R4为NR9R10或5元至7元杂环，所述5元至7元杂环包括1-3个选自N、O和S的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
R9为H或(C1-C4)烷基；
R10为(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
每个R11独立地为(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、(C1-C4)烷氧基或卤素；
R5为NR12C(O)R13或C(O)NR12R13；
R12为H或(C1-C6)烷基；
R13为(C1-C6)烷基或(C2-C6)烯基，其中所述烷基或所述烯基任选地被一个或多个独立地选自卤素、OH、CN和NH2的取代基取代；
R6和R7与其所连接的氮原子一起形成所述式的取代基；
其中
X3为N；
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CH或CR15；并且
每个R15独立地为(C1-C6)烷基、(C1-C6)卤代烷基、(C1-C6)烷氧基、OH、NH2、NH(C1-C6)烷基、N((C1-C6)烷基)2或卤素。
在某些实施例中，Z1和Z2各自为N，并且Z3为CR8。
在某些实施例中，R1为H或NH2，如H。
在某些实施例中，R3为(C1-C4)烷氧基。
在某些实施例中，R4为NR9R10。
在某些实施例中，R5为NR12C(O)R13。
在某些实施例中，R15选自(C1-C6)烷基和(C1-C6)卤代烷基。在一些此类实施例中，R15选自甲基和CF3。
在某些实施例中，R8为H或卤素。
在某些实施例中，R9为(C1-C4)烷基。
在某些实施例中，R10为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2。
在某些实施例中，R4为NR9R10，并且R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
在某些实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为H，并且R13为(C2-C6)烯基。在其它实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为(C1-C6)烷基，并且R13为(C2-C6)烯基。
在一些实施例中，所述式I化合物为式Ia化合物：
或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体或互变异构体，其中：
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CR15；
R91为(C1-C4)烷基；
R101为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R91和R101与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
在某些实施例中，所述化合物选自由以下组成的组：
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺；
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺；以及
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺，
或其药学上可接受的盐。
在某些实施例中，所述化合物为N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺或其药学上可接受的盐。
在某些实施例中，所述式I化合物是化合物1：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在某些实施例中，所述式I化合物是化合物2：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在某些实施例中，所述脑肿瘤为胶质母细胞瘤。
在某些实施例中，所述化合物每天施用一次。在其它实施例中，所述化合物每天施用两次。在仍其它实施例中，所述化合物每天施用三次。
在某些实施例中，所述化合物是全身施用的。在一些此类实施例中，所述化合物是口服施用的。在其它此类实施例中，所述化合物是静脉内施用的。
在其它方面，本公开提供了用于治疗或减轻由EGFR介导的脑疾病或脑病状的方法，所述方法包括向所述有需要的受试者施用治疗有效量的具有式I的结构的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物，其中：
Z1、Z2和Z3各自独立地为N或CR8，其中Z1、Z2和Z3中的至少两者为N；
R8为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R1为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、NH2、NH(C1-C4)烷基、N((C1-C4)烷基)2或卤素；
R2为H或(C1-C6)烷基；
R3为(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R4为NR9R10或5元至7元杂环，所述5元至7元杂环包括1-3个选自N、O和S的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
R9为H或(C1-C4)烷基；
R10为(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
每个R11独立地为(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、(C1-C4)烷氧基或卤素；
R5为NR12C(O)R13或C(O)NR12R13；
R12为H或(C1-C6)烷基；
R13为(C1-C6)烷基或(C2-C6)烯基，其中所述烷基或所述烯基任选地被一个或多个独立地选自卤素、OH、CN和NH2的取代基取代；
R6和R7与其所连接的氮原子一起形成所述式的取代基；
其中
X3为N；
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CH或CR15；并且
每个R15独立地为(C1-C6)烷基、(C1-C6)卤代烷基、(C1-C6)烷氧基、OH、NH2、NH(C1-C6)烷基、N((C1-C6)烷基)2或卤素。
在某些实施例中，Z1和Z2各自为N，并且Z3为CR8。
在某些实施例中，R1为H或NH2，如H。
在某些实施例中，R3为(C1-C4)烷氧基。
在某些实施例中，R4为NR9R10。
在某些实施例中，R5为NR12C(O)R13。
在某些实施例中，R15选自(C1-C6)烷基和(C1-C6)卤代烷基。在一些此类实施例中，R15选自甲基和CF3。
在某些实施例中，R8为H或卤素。
在某些实施例中，R9为(C1-C4)烷基。
在某些实施例中，R10为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2。
在某些实施例中，R4为NR9R10，并且R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
在某些实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为H，并且R13为(C2-C6)烯基。在其它实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为(C1-C6)烷基，并且R13为(C2-C6)烯基。
在一些实施例中，所述式I化合物为式Ia化合物：
或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体或互变异构体，其中：
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CR15；
R91为(C1-C4)烷基；
R101为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R91和R101与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
在某些实施例中，所述化合物选自由以下组成的组：
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺；
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺；以及
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺，
或其药学上可接受的盐。
在某些实施例中，所述化合物为N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺或其药学上可接受的盐。
在某些实施例中，所述式I化合物是化合物1：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在某些实施例中，所述式I化合物是化合物2：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在某些实施例中，所述脑肿瘤为胶质母细胞瘤。
在某些实施例中，所述化合物每天施用一次。在其它实施例中，所述化合物每天施用两次。在仍其它实施例中，所述化合物每天施用三次。
在某些实施例中，所述化合物是全身施用的。在一些此类实施例中，所述化合物是口服施用的。在其它此类实施例中，所述化合物是静脉内施用的。
在其它方面，本公开提供了用于治疗脑肿瘤或相关疾病或病状的药物组合物，所述药物组合物包括具有式I的结构的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物以及药学上可接受的赋形剂、载剂或稀释剂；其中：
Z1、Z2和Z3各自独立地为N或CR8，其中Z1、Z2和Z3中的至少两者为N；
R8为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R1为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、NH2、NH(C1-C4)烷基、N((C1-C4)烷基)2或卤素；
R2为H或(C1-C6)烷基；
R3为(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R4为NR9R10或5元至7元杂环，所述5元至7元杂环包括1-3个选自N、O和S的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
R9为H或(C1-C4)烷基；
R10为(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
每个R11独立地为(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、(C1-C4)烷氧基或卤素；
R5为NR12C(O)R13或C(O)NR12R13；
R12为H或(C1-C6)烷基；
R13为(C1-C6)烷基或(C2-C6)烯基，其中所述烷基或所述烯基任选地被一个或多个独立地选自卤素、OH、CN和NH2的取代基取代；
R6和R7与其所连接的氮原子一起形成所述式的取代基；
其中
X3为N；
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CH或CR15；并且
每个R15独立地为(C1-C6)烷基、(C1-C6)卤代烷基、(C1-C6)烷氧基、OH、NH2、NH(C1-C6)烷基、N((C1-C6)烷基)2或卤素。
在某些实施例中，Z1和Z2各自为N，并且Z3为CR8。
在某些实施例中，R1为H或NH2，如H。
在某些实施例中，R3为(C1-C4)烷氧基。
在某些实施例中，R4为NR9R10。
在某些实施例中，R5为NR12C(O)R13。
在某些实施例中，R15选自(C1-C6)烷基和(C1-C6)卤代烷基。在一些此类实施例中，R15选自甲基和CF3。
在某些实施例中，R8为H或卤素。
在某些实施例中，R9为(C1-C4)烷基。
在某些实施例中，R10为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2。
在某些实施例中，R4为NR9R10，并且R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
在某些实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为H，并且R13为(C2-C6)烯基。在其它实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为(C1-C6)烷基，并且R13为(C2-C6)烯基。
在一些实施例中，所述式I化合物为式Ia化合物：
或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体或互变异构体，其中：
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CR15；
R91为(C1-C4)烷基；
R101为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R91和R101与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
在某些实施例中，所述化合物选自由以下组成的组：
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺；
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺；以及
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺，
或其药学上可接受的盐。
在某些实施例中，所述化合物为N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺或其药学上可接受的盐。
在某些实施例中，所述式I化合物是化合物1：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在某些实施例中，所述式I化合物是化合物2：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在某些实施例中，所述脑肿瘤为胶质母细胞瘤。
在其它方面，本公开提供了药物组合物，其包括具有式I的结构的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物以及药学上可接受的赋形剂、载剂或稀释剂；其中：
Z1、Z2和Z3各自独立地为N或CR8，其中Z1、Z2和Z3中的至少两者为N；
R8为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R1为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、NH2、NH(C1-C4)烷基、N((C1-C4)烷基)2或卤素；
R2为H或(C1-C6)烷基；
R3为(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R4为NR9R10或5元至7元杂环，所述5元至7元杂环包括1-3个选自N、O和S的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
R9为H或(C1-C4)烷基；
R10为(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
每个R11独立地为(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、(C1-C4)烷氧基或卤素；
R5为NR12C(O)R13或C(O)NR12R13；
R12为H或(C1-C6)烷基；
R13为(C1-C6)烷基或(C2-C6)烯基，其中所述烷基或所述烯基任选地被一个或多个独立地选自卤素、OH、CN和NH2的取代基取代；
R6和R7与其所连接的氮原子一起形成所述式的取代基；
其中
X3为N；
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CH或CR15；并且
每个R15独立地为(C1-C6)烷基、(C1-C6)卤代烷基、(C1-C6)烷氧基、OH、NH2、NH(C1-C6)烷基、N((C1-C6)烷基)2或卤素。
在某些实施例中，Z1和Z2各自为N，并且Z3为CR8。
在某些实施例中，R1为H或NH2，如H。
在某些实施例中，R3为(C1-C4)烷氧基。
在某些实施例中，R4为NR9R10。
在某些实施例中，R5为NR12C(O)R13。
在某些实施例中，R15选自(C1-C6)烷基和(C1-C6)卤代烷基。在一些此类实施例中，R15选自甲基和CF3。
在某些实施例中，R8为H或卤素。
在某些实施例中，R9为(C1-C4)烷基。
在某些实施例中，R10为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2。
在某些实施例中，R4为NR9R10，并且R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
在某些实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为H，并且R13为(C2-C6)烯基。在其它实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为(C1-C6)烷基，并且R13为(C2-C6)烯基。
在一些实施例中，所述式I化合物为式Ia化合物：
或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体或互变异构体，其中：
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CR15；
R91为(C1-C4)烷基；
R101为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R91和R101与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
在某些实施例中，所述化合物选自由以下组成的组：
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺；
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺；以及
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺，
或其药学上可接受的盐。
在某些实施例中，所述化合物为N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺或其药学上可接受的盐。
在某些实施例中，所述式I化合物是化合物1：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在某些实施例中，所述式I化合物是化合物2：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在某些实施例中，所述药物组合物适于口服施用。
在某些实施例中，所述药物组合物适于静脉内施用。
在某些实施例中，所述药物组合物适于治疗选自以下的疾病或病状：肺癌、结肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌、胰腺癌(pancreas cancer)、脑癌、肾癌、卵巢癌、胃癌(stomachcancer)、皮肤癌、骨癌、胃癌(gastric cancer)、乳腺癌、胰腺癌(pancreatic cancer)、胶质瘤、胶质母细胞瘤、肝细胞癌、乳头状肾癌、头颈部鳞状细胞癌、白血病、淋巴瘤和骨髓瘤。
在其它方面，本公开提供了单位剂型，其包括本文所公开的药物组合物。
在其它方面，本公开提供了用于治疗或减轻疾病或病状的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的具有式I的结构的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物，其中：
Z1、Z2和Z3各自独立地为N或CR8，其中Z1、Z2和Z3中的至少两者为N；
R8为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R1为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、NH2、NH(C1-C4)烷基、N((C1-C4)烷基)2或卤素；
R2为H或(C1-C6)烷基；
R3为(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R4为NR9R10或5元至7元杂环，所述5元至7元杂环包括1-3个选自N、O和S的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
R9为H或(C1-C4)烷基；
R10为(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
每个R11独立地为(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、(C1-C4)烷氧基或卤素；
R5为NR12C(O)R13或C(O)NR12R13；
R12为H或(C1-C6)烷基；
R13为(C1-C6)烷基或(C2-C6)烯基，其中所述烷基或所述烯基任选地被一个或多个独立地选自卤素、OH、CN和NH2的取代基取代；
R6和R7与其所连接的氮原子一起形成所述式的取代基；
其中
X3为N；
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CH或CR15；并且
每个R15独立地为(C1-C6)烷基、(C1-C6)卤代烷基、(C1-C6)烷氧基、OH、NH2、NH(C1-C6)烷基、N((C1-C6)烷基)2或卤素。
在某些实施例中，Z1和Z2各自为N，并且Z3为CR8。
在某些实施例中，R1为H或NH2，如H。
在某些实施例中，R3为(C1-C4)烷氧基。
在某些实施例中，R4为NR9R10。
在某些实施例中，R5为NR12C(O)R13。
在某些实施例中，R15选自(C1-C6)烷基和(C1-C6)卤代烷基。在一些此类实施例中，R15选自甲基和CF3。
在某些实施例中，R8为H或卤素。
在某些实施例中，R9为(C1-C4)烷基。
在某些实施例中，R10为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2。
在某些实施例中，R4为NR9R10，并且R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
在某些实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为H，并且R13为(C2-C6)烯基。在其它实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为(C1-C6)烷基，并且R13为(C2-C6)烯基。
在一些实施例中，所述式I化合物为式Ia化合物：
或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体或互变异构体，其中：
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CR15；
R91为(C1-C4)烷基；
R101为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R91和R101与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
在某些实施例中，所述化合物选自由以下组成的组：
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺；
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺；以及
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺，
或其药学上可接受的盐。
在某些实施例中，所述化合物为N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺或其药学上可接受的盐。
在某些实施例中，所述式I化合物是化合物1：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在某些实施例中，所述式I化合物是化合物2：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在其它方面，本公开提供了用于抑制或降低患有疾病或其相关病状的受试者的EGFR的活性的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的具有式I的结构的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物，其中：
Z1、Z2和Z3各自独立地为N或CR8，其中Z1、Z2和Z3中的至少两者为N；
R8为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R1为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、NH2、NH(C1-C4)烷基、N((C1-C4)烷基)2或卤素；
R2为H或(C1-C6)烷基；
R3为(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R4为NR9R10或5元至7元杂环，所述5元至7元杂环包括1-3个选自N、O和S的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
R9为H或(C1-C4)烷基；
R10为(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
每个R11独立地为(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、(C1-C4)烷氧基或卤素；
R5为NR12C(O)R13或C(O)NR12R13；
R12为H或(C1-C6)烷基；
R13为(C1-C6)烷基或(C2-C6)烯基，其中所述烷基或所述烯基任选地被一个或多个独立地选自卤素、OH、CN和NH2的取代基取代；
R6和R7与其所连接的氮原子一起形成所述式的取代基；
其中
X3为N；
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CH或CR15；并且
每个R15独立地为(C1-C6)烷基、(C1-C6)卤代烷基、(C1-C6)烷氧基、OH、NH2、NH(C1-C6)烷基、N((C1-C6)烷基)2或卤素。
在某些实施例中，Z1和Z2各自为N，并且Z3为CR8。
在某些实施例中，R1为H或NH2，如H。
在某些实施例中，R3为(C1-C4)烷氧基。
在某些实施例中，R4为NR9R10。
在某些实施例中，R5为NR12C(O)R13。
在某些实施例中，R15选自(C1-C6)烷基和(C1-C6)卤代烷基。在一些此类实施例中，R15选自甲基和CF3。
在某些实施例中，R8为H或卤素。
在某些实施例中，R9为(C1-C4)烷基。
在某些实施例中，R10为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2。
在某些实施例中，R4为NR9R10，并且R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
在某些实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为H，并且R13为(C2-C6)烯基。在其它实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为(C1-C6)烷基，并且R13为(C2-C6)烯基。
在一些实施例中，所述式I化合物为式Ia化合物：
或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体或互变异构体，其中：
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CR15；
R91为(C1-C4)烷基；
R101为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R91和R101与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
在某些实施例中，所述化合物选自由以下组成的组：
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺；
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺；以及
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺，
或其药学上可接受的盐。
在某些实施例中，所述化合物为N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺或其药学上可接受的盐。
在某些实施例中，所述式I化合物是化合物1：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在某些实施例中，所述式I化合物是化合物2：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在其它方面，本公开提供了用于治疗或减轻由EGFR介导的疾病或病状的方法，所述方法包括向所述有需要的受试者施用治疗有效量的具有式I的结构的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物，其中：
Z1、Z2和Z3各自独立地为N或CR8，其中Z1、Z2和Z3中的至少两者为N；
R8为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R1为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、NH2、NH(C1-C4)烷基、N((C1-C4)烷基)2或卤素；
R2为H或(C1-C6)烷基；
R3为(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R4为NR9R10或5元至7元杂环，所述5元至7元杂环包括1-3个选自N、O和S的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
R9为H或(C1-C4)烷基；
R10为(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
每个R11独立地为(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、(C1-C4)烷氧基或卤素；
R5为NR12C(O)R13或C(O)NR12R13；
R12为H或(C1-C6)烷基；
R13为(C1-C6)烷基或(C2-C6)烯基，其中所述烷基或所述烯基任选地被一个或多个独立地选自卤素、OH、CN和NH2的取代基取代；
R6和R7与其所连接的氮原子一起形成所述式的取代基；
其中
X3为N；
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CH或CR15；并且
每个R15独立地为(C1-C6)烷基、(C1-C6)卤代烷基、(C1-C6)烷氧基、OH、NH2、NH(C1-C6)烷基、N((C1-C6)烷基)2或卤素。
在某些实施例中，Z1和Z2各自为N，并且Z3为CR8。
在某些实施例中，R1为H或NH2，如H。
在某些实施例中，R3为(C1-C4)烷氧基。
在某些实施例中，R4为NR9R10。
在某些实施例中，R5为NR12C(O)R13。
在某些实施例中，R15选自(C1-C6)烷基和(C1-C6)卤代烷基。在一些此类实施例中，R15选自甲基和CF3。
在某些实施例中，R8为H或卤素。
在某些实施例中，R9为(C1-C4)烷基。
在某些实施例中，R10为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2。
在某些实施例中，R4为NR9R10，并且R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
在某些实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为H，并且R13为(C2-C6)烯基。在其它实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为(C1-C6)烷基，并且R13为(C2-C6)烯基。
在一些实施例中，所述式I化合物为式Ia化合物：
或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体或互变异构体，其中：
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CR15；
R91为(C1-C4)烷基；
R101为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R91和R101与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
在某些实施例中，所述化合物选自由以下组成的组：
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺；
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺；以及
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺，
或其药学上可接受的盐。
在某些实施例中，所述化合物为N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺或其药学上可接受的盐。
在某些实施例中，所述式I化合物是化合物1：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在某些实施例中，所述式I化合物是化合物2：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在某些实施例中，所述疾病或病状是癌症。
在某些实施例中，所述癌症选自肺癌、结肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌、胰腺癌(pancreas cancer)、脑癌、肾癌、卵巢癌、胃癌(stomach cancer)、皮肤癌、骨癌、胃癌(gastric cancer)、乳腺癌、胰腺癌(pancreatic cancer)、胶质瘤、胶质母细胞瘤、肝细胞癌、乳头状肾癌、头颈部鳞状细胞癌、白血病、淋巴瘤和骨髓瘤。
在某些实施例中，所述癌症为胶质母细胞瘤。
在某些实施例中，所述癌症为肺癌。
在某些实施例中，所述癌症为NSCLC。
在某些实施例中，所述癌症为SCLC。
在某些实施例中，所述受试者携带EGFR突变。
在某些实施例中，所述受试者携带T790M EGFR突变。
在又其它方面，本公开提供了一种化合物或其药物组合物的用途，其用于治疗或减轻脑肿瘤或相关疾病或病状，其中所述化合物具有式I的结构：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物，其中：
Z1、Z2和Z3各自独立地为N或CR8，其中Z1、Z2和Z3中的至少两者为N；
R8为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R1为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、NH2、NH(C1-C4)烷基、N((C1-C4)烷基)2或卤素；
R2为H或(C1-C6)烷基；
R3为(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R4为NR9R10或5元至7元杂环，所述5元至7元杂环包括1-3个选自N、O和S的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
R9为H或(C1-C4)烷基；
R10为(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
每个R11独立地为(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、(C1-C4)烷氧基或卤素；
R5为NR12C(O)R13或C(O)NR12R13；
R12为H或(C1-C6)烷基；
R13为(C1-C6)烷基或(C2-C6)烯基，其中所述烷基或所述烯基任选地被一个或多个独立地选自卤素、OH、CN和NH2的取代基取代；
R6和R7与其所连接的氮原子一起形成所述式的取代基；
其中
X3为N；
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CH或CR15；并且
每个R15独立地为(C1-C6)烷基、(C1-C6)卤代烷基、(C1-C6)烷氧基、OH、NH2、NH(C1-C6)烷基、N((C1-C6)烷基)2或卤素。
在某些实施例中，Z1和Z2各自为N，并且Z3为CR8。
在某些实施例中，R1为H或NH2，如H。
在某些实施例中，R3为(C1-C4)烷氧基。
在某些实施例中，R4为NR9R10。
在某些实施例中，R5为NR12C(O)R13。
在某些实施例中，R15选自(C1-C6)烷基和(C1-C6)卤代烷基。在一些此类实施例中，R15选自甲基和CF3。
在某些实施例中，R8为H或卤素。
在某些实施例中，R9为(C1-C4)烷基。
在某些实施例中，R10为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2。
在某些实施例中，R4为NR9R10，并且R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
在某些实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为H，并且R13为(C2-C6)烯基。在其它实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为(C1-C6)烷基，并且R13为(C2-C6)烯基。
在一些实施例中，所述式I化合物为式Ia化合物：
或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体或互变异构体，其中：
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CR15；
R91为(C1-C4)烷基；
R101为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R91和R101与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
在某些实施例中，所述化合物选自由以下组成的组：
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺；
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺；以及
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺，
或其药学上可接受的盐。
在某些实施例中，所述化合物为N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺或其药学上可接受的盐。
在某些实施例中，所述式I化合物是化合物1：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在某些实施例中，所述式I化合物是化合物2：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在某些实施例中，所述用途用于治疗癌症。
在某些实施例中，所述用途用于治疗癌症，所述癌症选自肺癌、结肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌、胰腺癌(pancreas cancer)、脑癌、肾癌、卵巢癌、胃癌(stomach cancer)、皮肤癌、骨癌、胃癌(gastric cancer)、乳腺癌、胰腺癌(pancreatic cancer)、胶质瘤、胶质母细胞瘤、肝细胞癌、乳头状肾癌、头颈部鳞状细胞癌、白血病、淋巴瘤和骨髓瘤。
在某些实施例中，所述用途用于治疗胶质母细胞瘤。
在某些实施例中，所述用途用于治疗肺癌。
在某些实施例中，所述用途用于治疗非小细胞肺癌NSCLC。
在其它方面，本公开提供了一种化合物或其药物组合物的用途，其用于抑制或降低患有脑肿瘤的受试者的EGFR的活性，其中所述化合物具有式I的结构：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物，其中：
Z1、Z2和Z3各自独立地为N或CR8，其中Z1、Z2和Z3中的至少两者为N；
R8为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R1为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、NH2、NH(C1-C4)烷基、N((C1-C4)烷基)2或卤素；
R2为H或(C1-C6)烷基；
R3为(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R4为NR9R10或5元至7元杂环，所述5元至7元杂环包括1-3个选自N、O和S的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
R9为H或(C1-C4)烷基；
R10为(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
每个R11独立地为(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、(C1-C4)烷氧基或卤素；
R5为NR12C(O)R13或C(O)NR12R13；
R12为H或(C1-C6)烷基；
R13为(C1-C6)烷基或(C2-C6)烯基，其中所述烷基或所述烯基任选地被一个或多个独立地选自卤素、OH、CN和NH2的取代基取代；
R6和R7与其所连接的氮原子一起形成所述式的取代基；
其中
X3为N；
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CH或CR15；并且
每个R15独立地为(C1-C6)烷基、(C1-C6)卤代烷基、(C1-C6)烷氧基、OH、NH2、NH(C1-C6)烷基、N((C1-C6)烷基)2或卤素。
在某些实施例中，Z1和Z2各自为N，并且Z3为CR8。
在某些实施例中，R1为H或NH2，如H。
在某些实施例中，R3为(C1-C4)烷氧基。
在某些实施例中，R4为NR9R10。
在某些实施例中，R5为NR12C(O)R13。
在某些实施例中，R15选自(C1-C6)烷基和(C1-C6)卤代烷基。在一些此类实施例中，R15选自甲基和CF3。
在某些实施例中，R8为H或卤素。
在某些实施例中，R9为(C1-C4)烷基。
在某些实施例中，R10为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2。
在某些实施例中，R4为NR9R10，并且R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
在某些实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为H，并且R13为(C2-C6)烯基。在其它实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为(C1-C6)烷基，并且R13为(C2-C6)烯基。
在一些实施例中，所述式I化合物为式Ia化合物：
或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体或互变异构体，其中：
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CR15；
R91为(C1-C4)烷基；
R101为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R91和R101与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
在某些实施例中，所述化合物选自由以下组成的组：
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺；
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺；以及
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺，
或其药学上可接受的盐。
在某些实施例中，所述化合物为N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺或其药学上可接受的盐。
在某些实施例中，所述式I化合物是化合物1：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在某些实施例中，所述式I化合物是化合物2：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在某些实施例中，所述用途用于治疗癌症。
在某些实施例中，所述用途用于治疗癌症，所述癌症选自肺癌、结肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌、胰腺癌(pancreas cancer)、脑癌、肾癌、卵巢癌、胃癌(stomach cancer)、皮肤癌、骨癌、胃癌(gastric cancer)、乳腺癌、胰腺癌(pancreatic cancer)、胶质瘤、胶质母细胞瘤、肝细胞癌、乳头状肾癌、头颈部鳞状细胞癌、白血病、淋巴瘤和骨髓瘤。
在某些实施例中，所述用途用于治疗胶质母细胞瘤。
在某些实施例中，所述用途用于治疗肺癌。
在某些实施例中，所述用途用于治疗非小细胞肺癌NSCLC。
在仍其它方面，本公开提供了用于治疗或减轻由EGFR介导的脑疾病或脑病状的化合物或其药物组合物的用途，所述用途包括向所述有需要的受试者施用治疗有效量的具有式I的结构的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物，其中：
Z1、Z2和Z3各自独立地为N或CR8，其中Z1、Z2和Z3中的至少两者为N；
R8为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R1为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、NH2、NH(C1-C4)烷基、N((C1-C4)烷基)2或卤素；
R2为H或(C1-C6)烷基；
R3为(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R4为NR9R10或5元至7元杂环，所述5元至7元杂环包括1-3个选自N、O和S的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
R9为H或(C1-C4)烷基；
R10为(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
每个R11独立地为(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、(C1-C4)烷氧基或卤素；
R5为NR12C(O)R13或C(O)NR12R13；
R12为H或(C1-C6)烷基；
R13为(C1-C6)烷基或(C2-C6)烯基，其中所述烷基或所述烯基任选地被一个或多个独立地选自卤素、OH、CN和NH2的取代基取代；
R6和R7与其所连接的氮原子一起形成所述式的取代基；
其中
X3为N；
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CH或CR15；并且
每个R15独立地为(C1-C6)烷基、(C1-C6)卤代烷基、(C1-C6)烷氧基、OH、NH2、NH(C1-C6)烷基、N((C1-C6)烷基)2或卤素。
在某些实施例中，Z1和Z2各自为N，并且Z3为CR8。
在某些实施例中，R1为H或NH2，如H。
在某些实施例中，R3为(C1-C4)烷氧基。
在某些实施例中，R4为NR9R10。
在某些实施例中，R5为NR12C(O)R13。
在某些实施例中，R15选自(C1-C6)烷基和(C1-C6)卤代烷基。在一些此类实施例中，R15选自甲基和CF3。
在某些实施例中，R8为H或卤素。
在某些实施例中，R9为(C1-C4)烷基。
在某些实施例中，R10为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2。
在某些实施例中，R4为NR9R10，并且R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
在某些实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为H，并且R13为(C2-C6)烯基。在其它实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为(C1-C6)烷基，并且R13为(C2-C6)烯基。
在一些实施例中，所述式I化合物为式Ia化合物：
或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体或互变异构体，其中：
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CR15；
R91为(C1-C4)烷基；
R101为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R91和R101与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
在某些实施例中，所述化合物选自由以下组成的组：
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺；
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺；以及
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺，
或其药学上可接受的盐。
在某些实施例中，所述化合物为N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺或其药学上可接受的盐。
在某些实施例中，所述式I化合物是化合物1：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在某些实施例中，所述式I化合物是化合物2：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在某些实施例中，所述用途用于治疗癌症。
在某些实施例中，所述用途用于治疗脑癌。
在某些实施例中，所述用途用于治疗胶质母细胞瘤。
在仍其它方面，本公开提供了一种化合物或其药物组合物的用途，其用于治疗或减轻疾病或病状，其中所述化合物具有式I的结构：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物，其中：
Z1、Z2和Z3各自独立地为N或CR8，其中Z1、Z2和Z3中的至少两者为N；
R8为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R1为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、NH2、NH(C1-C4)烷基、N((C1-C4)烷基)2或卤素；
R2为H或(C1-C6)烷基；
R3为(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R4为NR9R10或5元至7元杂环，所述5元至7元杂环包括1-3个选自N、O和S的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
R9为H或(C1-C4)烷基；
R10为(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
每个R11独立地为(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、(C1-C4)烷氧基或卤素；
R5为NR12C(O)R13或C(O)NR12R13；
R12为H或(C1-C6)烷基；
R13为(C1-C6)烷基或(C2-C6)烯基，其中所述烷基或所述烯基任选地被一个或多个独立地选自卤素、OH、CN和NH2的取代基取代；
R6和R7与其所连接的氮原子一起形成所述式的取代基；
其中
X3为N；
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CH或CR15；并且
每个R15独立地为(C1-C6)烷基、(C1-C6)卤代烷基、(C1-C6)烷氧基、OH、NH2、NH(C1-C6)烷基、N((C1-C6)烷基)2或卤素。
在某些实施例中，Z1和Z2各自为N，并且Z3为CR8。
在某些实施例中，R1为H或NH2，如H。
在某些实施例中，R3为(C1-C4)烷氧基。
在某些实施例中，R4为NR9R10。
在某些实施例中，R5为NR12C(O)R13。
在某些实施例中，R15选自(C1-C6)烷基和(C1-C6)卤代烷基。在一些此类实施例中，R15选自甲基和CF3。
在某些实施例中，R8为H或卤素。
在某些实施例中，R9为(C1-C4)烷基。
在某些实施例中，R10为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2。
在某些实施例中，R4为NR9R10，并且R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
在某些实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为H，并且R13为(C2-C6)烯基。在其它实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为(C1-C6)烷基，并且R13为(C2-C6)烯基。
在一些实施例中，所述式I化合物为式Ia化合物：
或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体或互变异构体，其中：
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CR15；
R91为(C1-C4)烷基；
R101为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R91和R101与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
在某些实施例中，所述化合物选自由以下组成的组：
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺；
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺；以及
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺，
或其药学上可接受的盐。
在某些实施例中，所述化合物为N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺或其药学上可接受的盐。
在某些实施例中，所述式I化合物是化合物1：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在某些实施例中，所述式I化合物是化合物2：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在某些实施例中，所述用途用于治疗癌症。
在某些实施例中，所述用途用于治疗癌症，所述癌症选自肺癌、结肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌、胰腺癌(pancreas cancer)、脑癌、肾癌、卵巢癌、胃癌(stomach cancer)、皮肤癌、骨癌、胃癌(gastric cancer)、乳腺癌、胰腺癌(pancreatic cancer)、胶质瘤、胶质母细胞瘤、肝细胞癌、乳头状肾癌、头颈部鳞状细胞癌、白血病、淋巴瘤和骨髓瘤。
在某些实施例中，所述用途用于治疗胶质母细胞瘤。
在某些实施例中，所述用途用于治疗肺癌。
在某些实施例中，所述用途用于治疗非小细胞肺癌NSCLC。
在仍其它方面，本公开提供了一种化合物或其药物组合物的用途，其用于抑制或降低患有疾病或其相关病状的受试者EGFR的活性，其中所述化合物具有式I的结构：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物，其中：
Z1、Z2和Z3各自独立地为N或CR8，其中Z1、Z2和Z3中的至少两者为N；
R8为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R1为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、NH2、NH(C1-C4)烷基、N((C1-C4)烷基)2或卤素；
R2为H或(C1-C6)烷基；
R3为(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R4为NR9R10或5元至7元杂环，所述5元至7元杂环包括1-3个选自N、O和S的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
R9为H或(C1-C4)烷基；
R10为(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
每个R11独立地为(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、(C1-C4)烷氧基或卤素；
R5为NR12C(O)R13或C(O)NR12R13；
R12为H或(C1-C6)烷基；
R13为(C1-C6)烷基或(C2-C6)烯基，其中所述烷基或所述烯基任选地被一个或多个独立地选自卤素、OH、CN和NH2的取代基取代；
R6和R7与其所连接的氮原子一起形成所述式的取代基；
其中
X3为N；
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CH或CR15；并且
每个R15独立地为(C1-C6)烷基、(C1-C6)卤代烷基、(C1-C6)烷氧基、OH、NH2、NH(C1-C6)烷基、N((C1-C6)烷基)2或卤素。
在某些实施例中，Z1和Z2各自为N，并且Z3为CR8。
在某些实施例中，R1为H或NH2，如H。
在某些实施例中，R3为(C1-C4)烷氧基。
在某些实施例中，R4为NR9R10。
在某些实施例中，R5为NR12C(O)R13。
在某些实施例中，R15选自(C1-C6)烷基和(C1-C6)卤代烷基。在一些此类实施例中，R15选自甲基和CF3。
在某些实施例中，R8为H或卤素。
在某些实施例中，R9为(C1-C4)烷基。
在某些实施例中，R10为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2。
在某些实施例中，R4为NR9R10，并且R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
在某些实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为H，并且R13为(C2-C6)烯基。在其它实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为(C1-C6)烷基，并且R13为(C2-C6)烯基。
在一些实施例中，所述式I化合物为式Ia化合物：
或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体或互变异构体，其中：
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CR15；
R91为(C1-C4)烷基；
R101为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R91和R101与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
在某些实施例中，所述化合物选自由以下组成的组：
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺；
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺；以及
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺，
或其药学上可接受的盐。
在某些实施例中，所述化合物为N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺或其药学上可接受的盐。
在某些实施例中，所述式I化合物是化合物1：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在某些实施例中，所述式I化合物是化合物2：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在某些实施例中，所述用途用于治疗癌症。
在某些实施例中，所述用途用于治疗癌症，所述癌症选自肺癌、结肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌、胰腺癌(pancreas cancer)、脑癌、肾癌、卵巢癌、胃癌(stomach cancer)、皮肤癌、骨癌、胃癌(gastric cancer)、乳腺癌、胰腺癌(pancreatic cancer)、胶质瘤、胶质母细胞瘤、肝细胞癌、乳头状肾癌、头颈部鳞状细胞癌、白血病、淋巴瘤和骨髓瘤。
在某些实施例中，所述用途用于治疗胶质母细胞瘤。
在某些实施例中，所述用途用于治疗肺癌。
在某些实施例中，所述用途用于治疗非小细胞肺癌NSCLC。
在仍其它方面，本公开提供了一种化合物或其药物组合物的用途，其用于治疗或减轻由EGFR介导的疾病或病状，其中所述化合物具有式I的结构：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物，其中：
Z1、Z2和Z3各自独立地为N或CR8，其中Z1、Z2和Z3中的至少两者为N；
R8为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R1为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、NH2、NH(C1-C4)烷基、N((C1-C4)烷基)2或卤素；
R2为H或(C1-C6)烷基；
R3为(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R4为NR9R10或5元至7元杂环，所述5元至7元杂环包括1-3个选自N、O和S的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
R9为H或(C1-C4)烷基；
R10为(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
每个R11独立地为(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、(C1-C4)烷氧基或卤素；
R5为NR12C(O)R13或C(O)NR12R13；
R12为H或(C1-C6)烷基；
R13为(C1-C6)烷基或(C2-C6)烯基，其中所述烷基或所述烯基任选地被一个或多个独立地选自卤素、OH、CN和NH2的取代基取代；
R6和R7与其所连接的氮原子一起形成所述式的取代基；
其中
X3为N；
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CH或CR15；并且
每个R15独立地为(C1-C6)烷基、(C1-C6)卤代烷基、(C1-C6)烷氧基、OH、NH2、NH(C1-C6)烷基、N((C1-C6)烷基)2或卤素。
在某些实施例中，Z1和Z2各自为N，并且Z3为CR8。
在某些实施例中，R1为H或NH2，如H。
在某些实施例中，R3为(C1-C4)烷氧基。
在某些实施例中，R4为NR9R10。
在某些实施例中，R5为NR12C(O)R13。
在某些实施例中，R15选自(C1-C6)烷基和(C1-C6)卤代烷基。在一些此类实施例中，R15选自甲基和CF3。
在某些实施例中，R8为H或卤素。
在某些实施例中，R9为(C1-C4)烷基。
在某些实施例中，R10为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2。
在某些实施例中，R4为NR9R10，并且R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
在某些实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为H，并且R13为(C2-C6)烯基。在其它实施例中，R11为(C1-C4)烷基，R12为(C1-C6)烷基，并且R13为(C2-C6)烯基。
在一些实施例中，所述式I化合物为式Ia化合物：
或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体或互变异构体，其中：
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CR15；
R91为(C1-C4)烷基；
R101为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R91和R101与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
在某些实施例中，所述化合物选自由以下组成的组：
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺；
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺；以及
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺，
或其药学上可接受的盐。
在某些实施例中，所述化合物为N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺或其药学上可接受的盐。
在某些实施例中，所述式I化合物是化合物1：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在某些实施例中，所述式I化合物是化合物2：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
在某些实施例中，所述用途用于治疗癌症。
在某些实施例中，所述用途用于治疗癌症，所述癌症选自肺癌、结肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌、胰腺癌(pancreas cancer)、脑癌、肾癌、卵巢癌、胃癌(stomach cancer)、皮肤癌、骨癌、胃癌(gastric cancer)、乳腺癌、胰腺癌(pancreatic cancer)、胶质瘤、胶质母细胞瘤、肝细胞癌、乳头状肾癌、头颈部鳞状细胞癌、白血病、淋巴瘤和骨髓瘤。
在某些实施例中，所述用途用于治疗胶质母细胞瘤。
在某些实施例中，所述用途用于治疗肺癌。
在某些实施例中，所述用途用于治疗非小细胞肺癌NSCLC。
定义
以下列出了用于描述本申请的各种术语的定义。这些定义适用于贯穿本说明书和权利要求所使用的术语，除非在具体实例中单独或作为更大组的一部分以其它方式进行限制。
如本文所使用的，“至少”一个特定值应理解为所述值以及大于所述值的所有值。
当用于定义组合物和方法时，术语“包括”旨在意味着所述组合物和所述方法包含所叙述的要素，但不排除其它要素。当用于定义组合物和方法时，术语“基本上由……组成”应当意味着所述组合物和所述方法包含所叙述的要素，并且排除对所述组合物和所述方法具有任何重要意义的其它要素。例如，“基本上由……组成”是指明确叙述的药理活性剂的施用，并且排除未明确叙述的药理活性剂。术语基本上由……组成并不排除药理无活性或惰性剂，例如，药学上可接受的赋形剂、载剂或稀释剂。当用于定义组合物和方法时，术语“由……组成”应当意味着排除微量元素的其它成分和大量方法步骤。由这些过渡术语中的每个过渡术语定义的实施例在本发明的范围内。
除非明确规定或根据上下文显而易见，否则如本文所使用的，术语“约”被理解为在本领域的正常公差范围内，例如，在平均值的2个标准偏差之内。“约”可以被理解为在规定值的10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.5％、0.1％、0.05％或0.01％之内。除非上下文另有明确说明，否则本文提供的所有数值均可以由术语“约”修饰。
如本文所使用的，所公开的化合物的术语“施用”涵盖使用如本文讨论的任何合适的调配物或施用途径向受试者递送本文所描述的化合物或其前药或其它药学上可接受的形式。
除非另有说明，术语“疾病”、“病症”和“病状”在本文中可互换地使用。
术语“癌症”或“肿瘤”在本文中可互换地使用并且是指涉及异常细胞生长和/或增殖的疾病或病症，如神经胶质瘤、甲状腺癌、乳腺癌、脑癌(例如，胶质母细胞瘤)、肺癌(例如，小细胞肺癌、非小细胞肺癌)、胃癌、胃肠道间质瘤、胰腺癌、胆管癌、卵巢癌、子宫内膜癌、前列腺癌、肾细胞癌、淋巴瘤(例如间变性大细胞淋巴瘤)、白血病(例如急性髓性白血病、T细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病)、多发性骨髓瘤、恶性间皮瘤、恶性黑色素瘤和结肠癌(例如，高度微卫星不稳定性结直肠癌)。
如本文所使用的，术语“有效量”或“治疗有效量”是指本文所描述的足以影响预期应用(包含但不限于疾病治疗)的化合物或药物组合物的量，如下所示。
在一些实施例中，量有效用于可检测地杀死或抑制癌细胞的生长或扩散；肿瘤的大小或数量；或癌症水平、阶段、进展或严重程度的其它度量的有效量。
治疗有效量可以根据预期应用或受试者和正在治疗的疾病病状而变化，例如期望的生物终点、化合物的药代动力学、正在治疗的疾病、施用模式以及患者的体重和年龄，这可以由本领域普通技术人员容易地确定。所述术语还适用于将在靶细胞中诱导特定应答例如，细胞迁移减少的剂量。具体剂量将根据例如所选择的特定化合物、受试者的物种以及其年龄/现有健康状况或健康状况风险、所遵循的给药方案、疾病的严重程度、其是否与其它药剂组合施用、施用定时、被施用的组织以及被承载的物理递送系统而变化。
如本文所使用的，术语“烷基”是指饱和、直链或支链烃基，在某些实施例中，所述烃基分别含有介于一个与六个或一个与八个之间的碳原子。C1-C6烷基的实例包含但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、新戊基、正己基；C1-C8烷基的实例包含但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、新戊基、正己基、庚基、辛基。
如本文所使用的，术语“烯基”表示衍生自烃部分的单价基团，在某些实施例中，所述烃部分含有具有至少一个碳-碳双键的两个至六个或两个至八个碳原子。双键可以是或可以不是另一个基团的连接点。烯基包含但不限于例如乙烯基、丙烯基、丁烯基、1-甲基-2-丁烯-1-基、庚烯基、辛烯基等。
如本文所使用的，术语“炔基”表示衍生自烃部分的单价基团，在某些实施例中，所述烃部分含有具有至少一个碳-碳三键的两个至六个或两个至八个碳原子。炔基组可以是或可以不是另一个基团的连接点。代表性炔基的实例包含但不限于例如乙炔基、1-丙炔基、1-丁炔基、庚炔基、辛炔基等。
术语“烷氧基”是-O-烷基。
如本文所使用的，术语“芳基”是指具有一个或多个稠合或非稠合的芳香族环的单环碳环或多环碳环体系，包含但不限于苯基、萘基、四氢萘基、茚满基、茚基等。
如本文所使用的，术语“芳烷基”是指与芳环连接的烷基残基。实例包含但不限于苄基、苯乙基等。
如本文所使用的，术语“环烷基”表示衍生自单环或多环饱和或部分不饱和碳环化合物的单价基团。C3-C8-环烷基的实例包含但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环戊基和环辛基；并且C3-C12-环烷基的实例包含但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、双环[2.2.1]庚基和双环[2.2.2]辛基。还考虑了通过除去单个氢原子而衍生自具有至少一个碳-碳双键的单环或多环碳环化合物的单价基团。此类基团的实例包含但不限于环丙烯基、环丁烯基、环戊烯基、环己烯基、环庚烯基、环辛烯基等。
如本文所使用的，术语“杂芳基”是指具有至少一个芳香族环的单环或多环(例如，双环或三环或更多环)稠合或非稠合基团或环体系，所述芳香族环具有五个至十个环原子，其中至少一个环原子选自S、O和N；零个、一个或两个环原子是独立地选自S、O和N的另外的杂原子；并且剩余的环原子是碳。杂芳基包含但不限于吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、异噁唑基、噻二唑基、噁二唑基、苯硫基、呋喃基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、喹喔啉基等。
如本文所使用的，术语“杂芳烷基”是指与杂芳基环连接的烷基残基。实例包含但不限于吡啶基甲基、嘧啶基乙基等。
如本文所使用的，术语“杂环基”或“杂环烷基”是指非芳香族3元、4元、5元、6元或7元环或双环或三环基团稠合或非稠合体系，其中(i)每个环含有独立地选自氧、硫和氮的介于一个与三个之间的杂原子；(ii)每个5元环具有0到1个双键，并且每个6元环具有0到2个双键；(iii)氮和硫杂原子可以任选地被氧化；(iv)氮杂原子可以任选地被季铵化；以及和(v)上述环中的任一个都可以与苯环稠合。代表性杂环烷基包含但不限于[1,3]二氧戊环、吡咯烷基、吡唑啉基、吡唑烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、哌啶基、哌嗪基、噁唑烷基、异噁唑烷基、吗啉基、噻唑烷基、异噻唑烷基和四氢呋喃基。
术语“烷基氨基”是指具有结构-NH(C1-C12烷基)的基团，其中C1-C12烷基是如先前所定义的。
术语“二烷基氨基”是指具有结构-N(C1-C12烷基)2的基团，其中C1-C12烷基是如先前所定义的。
术语“酰基”包含衍生自酸的残基，包含但不限于羧酸、氨基甲酸、碳酸、磺酸和亚磷酸。实例包含脂肪族羰基、芳香族羰基、脂肪族磺酰基、芳香族亚磺酰基、脂肪族亚磺酰基、芳香族磷酸酯和脂肪族磷酸酯。脂肪族羰基的实例包含但不限于乙酰基、丙酰基、2-氟代乙酰基、丁酰基、2-羟基乙酰基等。
根据本申请，本文所描述的芳基、经取代的芳基、杂芳基和经取代的杂芳基中的任一者可以是任何芳香族基团。芳香族基团可以是经取代的或未经取代的。
如本文所使用的，术语“卤”、“卤代”和“卤素”是指选自氟、氯、溴和碘的原子。
如本文所描述的，本申请的化合物可以任选地被一个或多个取代基取代，如以上一般说明的，或如本申请的特定类别、子类和种类所例示的。应当理解的是，短语“任选地取代的”可与短语“经过取代的或未经取代的”互换使用。通常，术语“经过取代的”(无论前面是否有术语“任选地”)是指用指定取代基的自由基替代给定结构中的氢。除非另有说明，否则任选地经取代的基团可以在基团的每个可取代位置处具有取代基，并且在任何给定结构中的多于一个位置可以被多于一个选自指定组的取代基取代时，在每个位置处，取代基可以相同或不同。如本文所使用的，术语“任选地经取代的”、“任选地经取代的烷基”、“任选地经取代的”、“任选地经取代的烯基”、“任选地经取代的炔基”、“任选地经取代的环烷基”、“任选地经取代的环烯基”、“任选地经取代的芳基”、“任选地经取代的杂芳基”、“任选地经取代的芳烷基”，“任选地经取代的杂芳烷基”、“任选地经取代的杂环烷基”和任何其它任选地经取代的基团是指通过用取代基独立替代其上的一个、两个或三个以上氢原子而被取代或未被取代的基团，所述取代基包含但不限于：-F、-CI、-Br、-I、-OH、受保护的羟基、-NO2、-CN、-NH2、受保护的氨基、-NH-C1-C12-烷基、-NH-C2-C12-烯基、-NH-C2-C12-烯基、-NH-C3-C12-环烷基、-NH-芳基、-NH-杂芳基、-NH-杂环烷基、-二烷基氨基、-二芳基氨基、-二异芳基氨基、-O-C1-C12-烷基、-O-C2-C12-烯基、-O-C2-C12-烯基、-O-C3-C12-环烷基、-O-芳基、-O-杂芳基、-O-杂环烷基、-C(O)-C1-C12-烷基、-C(O)-C2-C12-烯基、-C(O)-C2-C12-烯基、-C(O)-C3-C12-环烷基、-C(O)-芳基、-C(O)-杂芳基、-C(O)-杂环烷基、-CONH2、-CONH-C1-C12-烷基、-CONH-C2-C12-烯基、-CONH-C2-C12-烯基、-CONH-C3-C12-环烷基、-CONH-芳基、-CONH-杂芳基、-CONH-杂环烷基、-OCO2-C1-C12-烷基；-OCO2-C2-C12-烯基、-OCO2-C2-C12-烯基、-OCO2-C3-C12-环烷基、-OCO2-芳基、-OCO2-杂芳基、-OCO2-杂环烷基、-OCONH2、-OCONH-C1-C12-烷基、-OCONH-C2-C12-烯基、-OCONH-C2-C12-烯基、-OCONH-C3-C12-环烷基、-OCONH-芳基、-OCONH-杂芳基、-OCONH-杂环烷基、-NHC(O)-C1-C12-烷基、-NHC(O)-C2-C12-烯基、-NHC(O)-C2-C12-烯基、-NHC(O)-C3-C12-环烷基、-NHC(O)-芳基、-NHC(O)-杂芳基、-NHC(O)-杂环烷基、-NHCO2-C1-C12-烷基、-NHCO2-C2-C12-烯基、-NHCO2-C2-C12-烯基、-NHCO2-C3-C12-环烷基、-NHCO2-芳基、-NHCO2-杂芳基、-NHCO2-杂环烷基、NHC(O)NH2、-NHC(O)NH-C1-C12-烷基、-NHC(O)NH-C2-C12-烯基、-NHC(O)NH-C2-C12-烯基、-NHC(O)NH-C3-C12-环烷基、-NHC(O)NH-芳基、-NHC(O)NH-杂芳基、NHC(O)NH-杂环烷基、NHC(S)NH2、-NHC(S)NH-C1-C12-烷基、-NHC(S)NH-C2-C12-烯基、-NHC(S)NH-C2-C12-烯基、-NHC(S)NH-C3-C12-环烷基、-NHC(S)NH-芳基、-NHC(S)NH-杂芳基、-NHC(S)NH-杂环烷基、-NHC(NH)NH2、-NHC(NH)NH-C1-C12-烷基、-NHC(NH)NH-C2-C12-烯基、-NHC(NH)NH-C2-C12-烯基、-NHC(NH)NH-C3-C12-环烷基、-NHC(NH)NH-芳基、-NHC(NH)NH-杂芳基、-NHC(NH)NH-杂环烷基、-NHC(NH)-C1-C12-烷基、-NHC(NH)-C2-C12-烯基、-NHC(NH)-C2-C12-烯基、-NHC(NH)-C3-C12-环烷基、-NHC(NH)-芳基、-NHC(NH)-杂芳基、-NHC(NH)-杂环烷基、-C(NH)NH-C1-C12-烷基、-C(NH)NH-C2-C12-烯基、-C(NH)NH-C2-C12-烯基、C(NH)NH-C3-C12-环烷基、-C(NH)NH-芳基、-C(NH)NH-杂芳基、-C(NH)NH杂环烷基、-S(O)-C1-C12-烷基、-S(O)-C2-C12-烯基、-S(O)-C2-C12-烯基、-S(O)-C3-C12-环烷基、-S(O)-芳基、-S(O)-杂芳基、-S(O)-杂环烷基-SO2NH2、-SO2NH-C1-C12-烷基、-SO2NH-C2-C12-烯基、-SO2NH-C2-C12-烯基、-SO2NH-C3-C12-环烷基、-SO2NH-芳基、-SO2NH-杂芳基、-SO2NH-杂环烷基、-NHSO2-C1-C12-烷基、-NHSO2-C2-C12-烯基、-NHSO2-C2-C12-烯基、-NHSO2-C3-C12-环烷基、-NHSO2-芳基、-NHSO2-杂芳基、-NHSO2-杂环烷基、-CH2NH2、-CH2SO2CH3、-芳基、-芳基烷基、-杂芳基、-杂芳基烷基、-杂环烷基、-C3-C12-环烷基、聚烷氧基烷基、聚烷氧基、-甲氧基甲氧基、-甲氧基乙氧基、-SH、-S-C1-C12-烷基、-S-C2-C12-烯基、-S-C2-C12-烯基、-S-C3-C12-环烷基、-S-芳基、-S-杂芳基、-S-杂环烷基或甲基硫代甲基。
应当理解，芳基、杂芳基、烷基等可以被进一步取代。
术语“EGFR”在本文指表皮生长因子受体激酶。
术语“HER”或“Her”在本文指人表皮生长因子受体激酶。
如本文所使用的，术语“受试者”是指任何动物(例如，哺乳动物)，包含但不限于人、非人灵长类动物、啮齿动物等，其将成为特定治疗的受体。因此，受试者指例如犬、猫、马、牛、猪、豚鼠等。优选地，受试者为人。当受试者为人时，受试者在本文中可以被称为患者。在一些实施例中，所述受试者具有EGFR突变。在其它实施例中，所述受试者具有T790MEGFR突变。在其它实施例中，所述受试者具有外显子19EGFR突变缺失。在一些实施例中，所述受试者具有L858R/T790M EGFR突变。
“治疗(Treat)”、“治疗(treating)”和“治疗(treatment)”是指缓解或缓和疾病和/或其伴随症状的方法。
如本文所使用的，所公开的化合物的“药学上可接受的形式”包含但不限于所公开化合物的药学上可接受的盐、酯、水合物、溶剂化物、异构体、前药和同位素标记的衍生物。在一个实施例中，“药学上可接受的形式”包含但不限于所公开化合物的药学上可接受的盐、酯、异构体、前药和同位素标记的衍生物。在一些实施例中，“药学上可接受的形式”包含但不限于所公开的化合物的药学上可接受的盐、酯、立体异构体、前药和同位素标记的衍生物。
如本文所使用的，术语“药学上可接受的盐”是指通过本申请的方法形成的在合理的医学判断范围内适合用于与人和低等动物的组织接触而没有过度毒性、刺激、过敏应答等并与合理的利益/风险比相称的那些盐；然而，药学上不可接受的盐可以用于制备本文所描述的化合物和其药学上可接受的盐。药学上可接受的盐是本领域所熟知的。例如，S.M.Berge等人在《药物科学杂志(J.Pharmaceutical Sciences)》，66:1-19(1977)中详细描述了药学上可接受的盐。如通过使游离碱与合适的有机酸起作用反应，盐可以在本申请的化合物的最终分离和纯化期间原位制备或单独地制备。当化合物是酸性的时，合适的“药学上可接受的盐”是指由药学上可接受的无毒碱制备的盐，包含无机碱和有机碱。衍生自无机碱的盐包含铝、铵、钙、铜、铁、亚铁、锂、镁、正锰、亚锰、钾、钠、锌等。具体的实施例包含铵盐、钙盐、镁盐、钾盐和钠盐。衍生自药学上可接受的有机无毒性碱的盐包含伯胺、仲胺和叔胺、经取代的胺，包含天然存在的经取代的胺、环状胺、精氨酸、甜菜碱、咖啡碱、胆碱、N,N1-二苄基乙二胺、二乙胺、2-二乙氨基乙醇、2-二甲基氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、还原葡糖胺、葡萄糖胺、组氨酸、海巴明、异丙胺、赖氨酸、甲葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨丁三醇等等。当化合物是碱性的时，盐可以由药学上可接受的无毒性酸，包含无机酸和有机酸制备。此类酸包含乙酸盐、乙酸、酸性柠檬酸盐、酸性磷酸盐、抗坏血酸盐、苯磺酸、苯磺酸盐、苯甲酸、苯甲酸盐、溴化物、硫酸氢盐、酒石酸氢盐、樟脑磺酸、氯化物、柠檬酸盐、柠檬酸、乙磺酸盐、乙磺酸、甲酸盐、富马酸盐、富马酸、龙胆酸盐、葡糖酸盐、葡糖酸、葡萄糖醛酸盐、谷氨酸盐、谷氨酸、氢溴酸、氯化氢、碘化物、羟乙磺酸、异烟酸盐、乳酸盐、乳酸、马来酸盐、马来酸、苹果酸、扁桃酸、甲磺酸、甲磺酸盐、粘酸、硝酸盐、硝酸、油酸盐、草酸盐、双羟萘酸、双羟萘酸盐(即，1,1'-亚甲基-双-(2-羟基-3-萘甲酸酯))、泛酸、泛酸盐、磷酸盐、磷酸、蔗糖酸盐、水杨酸盐、琥珀酸、琥珀酸盐、硫酸、硫酸盐、单宁酸盐、酒石酸盐、酒石酸、对甲苯磺酸盐、甲苯磺酸(TsOH)等。特定的实施例包含TsOH、柠檬酸、氢溴酸、盐酸、马来酸、磷酸、硫酸和酒石酸。
药学上可接受的实例包含但不限于无毒的酸加成盐，其是用如盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸和高氯酸等无机酸或用如乙酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、琥珀酸或丙二酸等有机酸或通过使用所属领域中所使用的其它方法如离子交换形成的具有氨基的盐。其它药学上可接受的盐包含但不限于己二酸盐、藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、葡糖酸盐、半硫酸盐(hemisulfate)、庚酸盐、己酸盐、氢碘化物、2-羟基-乙磺酸盐、乳糖酸盐(lactobionate)、乳酸盐、月桂酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、扑酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸盐、十一酸盐、戊酸盐等。代表性碱或碱土金属盐包含钠、锂、钾、钙、镁等。另外的药学上可接受的盐包含：在适当时，使用抗衡离子如卤离子、氢氧根、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、具有1到6个碳原子的烷基、磺酸根以及芳基磺酸根形成的无毒的铵、季铵以及胺阳离子。
如本文所使用的，术语“药学上可接受的酯”是指通过本申请的方法形成的化合物的酯，其在体内水解并且包含在人体内容易分解而留下母体化合物或其盐的那些酯。此类酯可以充当如本文所定义的前药。合适的酯基包含例如衍生自药学上可接受的脂肪族羧酸，具体地链烷酸、链烯酸、环烷基酸以及链烷双酸的那些，其中每个烷基或烯基部分有利地具有不超过6个碳原子。药学上可接受的酯包含但不限于酸性基团(包含但不限于羧酸、磷酸、次膦酸、亚磺酸、磺酸和硼酸)的烷基酯、烯基酯、炔基酯、芳基酯、芳烷基酯和环烷基酯。具体的酯的实例包含但不限于甲酸酯、乙酸酯、丙酸酯、丁酸酯、丙烯酸酯以及乙基琥珀酸酯。酯可以用母体化合物的羟基或羧酸基团形成。
如本文所使用的，术语“药学上可接受的前药”是指通过本申请的方法形成的在合理的医学判断范围内适合用于与人和低等动物的组织接触而没有过度毒性、刺激、过敏应答等并与合理的利益/风险比相称并且在可能的情况下对于本申请的化合物的预期用途以及两性离子形式有效的那些前药。如本文所使用的，“前药”是指可通过代谢手段(例如，通过水解)在体内转化以提供由本申请的式描述的任何化合物的化合物。各种形式的前药是本领域已知的，例如如在以下中讨论的：Bundgaard,(编者),《前药设计(Design ofProdrugs)》,爱思唯尔出版公司(Elsevier),(1985)；Widder等人,(编辑),《酶学方法(Methods in Enzymology)》,第4卷,学术出版社(Academic Press),(1985)；Krogsgaard-Larsen等人,(编辑),“前药的设计和应用(Design and Application of Prodrugs)”,《药物设计和开发教科书(Textbook of Drug Design and Development)》,第5章,113-191(1991)；Bundgaard等人,《药物递送评论杂志(Journal of Drug Deliver Reviews)》,8:1-38(1992)；Bundgaard,《药物科学杂志(J.of Pharmaceutical Sciences)》,77:285及其后续版本(1988)；Higuchi和Stella(编辑)《作为新颖药物递送系统的前药(Prodrugs asNovel Drug Delivery Systems)》,美国化学学会(American Chemical Society),(1975)；以及Bernard Testa和Joachim Mayer,“药物和前药代谢中的水解：化学、生物化学和酶学(Hydrolysis In Drug And Prodrug Metabolism:Chemistry,Biochemistry AndEnzymology)”,约翰威利父子出版公司(John Wiley and Sons,Ltd.)(2002)。前药在向受试者施用时可以是无活性的，但是例如通过水解(例如，在血液中的水解)在体内转化成活性化合物。在某些情况下，前药相较于母体化合物具有改善的物理和/或递送特性。将前药在向受试者施用时可以增加化合物的生物利用度(例如，通过在口服施用后允许增强吸收到血液中)或相对于母体化合物，增强对所关注的生物隔室(例如，脑或淋巴系统)的递送。示例性前药包含所公开的化合物的衍生物，其相对于母体化合物具有增强的水溶性或通过肠膜的主动转运。前药化合物通常在哺乳动物生物体中提供溶解性、组织相容性或延迟释放的优点(参见例如Bundgard,H.,《前药设计(Design of Prodrugs)》(1985),第7-9页,21-24(阿姆斯特丹的爱思唯尔出版社(Elsevier,Amsterdam))。Higuchi,T.等人,“作为新型递送系统的前药(Pro-drugs as Novel Delivery Systems)”,《A.C.S.会议录(A.C.S.Symposium Series)》,第14卷以及“药物设计中的生物可逆载剂(BioreversibleCarriers in Drug Design)”,编辑.Edward B.Roche,美国制药协会(AmericanPharmaceutical Association)和培格曼出版社(Pergamon Press),1987提供了前药的讨论，所述文献中的两者均通过引用完全并入本文。前药的示例性优点可以包含但不限于其物理特性，如与母体化合物相比在生理pH下肠胃外施用的水溶性增强，或者它可以增强从消化道的吸收，或者它可以增强药物长期储存的稳定性。
本申请还涵盖含有本申请的化合物的药学上可接受的前药的药物组合物和通过施用本申请的化合物的药学上可接受的前药治疗病症的方法。例如，具有游离氨基、酰氨基、羟基或羧基的本申请的化合物可以转化成前药。前药包含这样的化合物，其中氨基酸残基或两个或更多个(例如，两个、三个或四个)氨基酸残基的多肽链通过酰胺或酯键共价连接到本申请的化合物的游离氨基、羟基或羧酸基团。氨基酸残基包含但不限于通常由三个字母符号表示的20种天然存在的氨基酸，并且还包含4-羟基脯氨酸、羟基赖氨酸、锁链素(demosine)、异锁链素(isodemosine)、3-甲基组氨酸、正缬氨酸、β-丙氨酸、γ-氨基丁酸、瓜氨酸、同型半胱氨酸、高丝氨酸、鸟氨酸和甲硫氨酸砜。还涵盖另一种类型的前药。例如，游离羧基基团可以被衍生为酰胺或烷基酯。如在《先进的药物递送评论(Advanced DrugDelivery Reviews)》,1996,19,1 15中所概述的，游离羟基基团可以使用包含但不限于琥珀酸半酯、磷酸酯、二甲基氨基乙酸酯和磷酰氧基甲基氧基羰基的基团进行衍生化。还包含羟基和氨基基团的氨基甲酸酯前药，以及羟基基团的碳酸酯前药、磺酸酯和硫酸酯。还涵盖将羟基基团衍生为(酰氧基)甲基醚和(酰氧基)乙基醚，其中酰基基团可以是任选地被包含但不限于醚、胺和羧酸官能团的基团取代的烷基酯，或其中酰基基团是如上文所描述的氨基酸酯。这种类型的前药描述于《药物化学杂志(J.Med.Chem.)》1996,39,10中。游离胺还可以衍生为酰胺、磺酰胺或磷酰胺。所有这些前药部分都可以并入包含但不限于醚、胺和羧酸官能团的基团。
本申请预期的取代基和变量的组合仅是导致形成稳定化合物的那些组合。如本文所使用的，术语“稳定的”是指具有足以允许其制造并且维持化合物的完整性足以用于本文详述的目的的时间段的化合物(例如，用于受试者的对受试者的治疗性或预防性施用，调配成治疗对治疗剂有应答的疾病或病状的治疗性产品、用于产生治疗性化合物的中间体、可隔离或可储存的中间化合物)。
本申请还提供了使用药物组合物的方法，所述药物组合物包括式(I)化合物或其药学上可接受的酯、盐或前药以及药学上可接受的载剂。
如本文所使用的，术语“药学上可接受的”赋形剂、载剂或稀释剂是指如液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂溶剂或包囊材料等涉及将主题药物药剂从一个器官或身体的一部分承载或运输到另一个器官或身体的另一部分的药学上可接受的材料、组合物或媒剂。在与调配物的其它成分相容并且对患者无害的意义上来讲，每种载剂必须是“可接受的”。可以充当药学上可接受的载剂的材料的一些实例包含：糖类，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素和其衍生物，如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素；粉末黄蓍胶；麦芽；明胶；滑石粉；赋形剂，如可可脂和栓剂蜡；油，如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；二醇，如丙二醇；多元醇，如甘油、山梨醇、甘露醇以及聚乙二醇；酯，如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，如氢氧化镁和氢氧化铝；海藻酸；无热原水；等渗盐水；林格氏溶液(Ringer'ssolution)；乙醇；磷酸盐缓冲液；以及药物调配物中采用的其它无毒的相容物质。润湿剂、乳化剂和如十二烷基硫酸钠、硬脂酸镁和聚乙烯氧化物-聚丙烯氧化物共聚物等润滑剂以及着色剂、脱模剂、包衣剂、甜味剂、调味剂和香味剂、防腐剂和抗氧化剂也可以存在于组合物中。
本领域技术人员公知的合适的载剂、稀释剂和赋形剂包含如碳水化合物、蜡、水溶性和/或可溶胀性聚合物、亲水性或疏水性材料、明胶、油、溶剂、水等材料。所使用的特定载剂、稀释剂或赋形剂将取决于本文所描述的化合物的调配方式和用途。溶剂通常基于本领域技术人员认为对于施用于哺乳动物而言为安全(GRAS-通常被认为是安全的)的溶剂来选择。通常，安全溶剂为无毒水性溶剂，如水和可溶于或可混溶于水中的其它无毒溶剂。合适的水性溶剂包含水、乙醇、丙二醇、聚乙二醇(例如，PEG400、PEG300)等以及其混合物。调配物还可以包含其它类型的赋形剂，如一种或多种缓冲剂、稳定剂、抗粘附剂、表面活性剂、润湿剂、润滑剂、乳化剂、粘合剂、悬浮剂、崩解剂、填料、吸附剂、涂层(例如，肠溶或缓释)防腐剂、抗氧化剂、遮光剂、助流剂、加工助剂、着色剂、甜味剂、芳香剂、调味剂和其它已知添加剂以提供药物(即，本文所描述的化合物或其药物组合物)的最佳呈现形式或帮助制备药物产品(即，药物)。
另一方面，本申请提供了使用试剂盒的方法，所述试剂盒包括能够抑制选自式(I)的一种或多种化合物的EGFR活性的化合物、或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、前药、立体异构体或互变异构体以及用于治疗癌症的说明书。
式(I)化合物和其合成方法描述于美国专利第10,266,517号中，所述美国专利特此通过引用整体并入。
另一方面是本文所描绘的任何式的同位素标记的化合物。这种化合物具有可能是或可能不是放射性的一个或多个同位素原子(例如，3H、2H、14C、13C、18、35S、32P、125I和131I)，所述一个或多个同位素原子引入到所述化合物中。这些化合物可用于药物代谢研究和诊断以及治疗应用。
本公开涵盖本文所公开的化合物的盐和其药物组合物。本公开的化合物的盐是可以在化合物的酸性与碱性基团(如氨基官能团)之间或化合物的碱性与酸性基团(如羧基官能团)之间形成。根据其它实施例，所述化合物为药学上可接受的酸加成盐。可以通过使化合物的游离碱形式与药学上可接受的无机酸或有机酸反应来制备作为药学上可接受的酸加成盐的本申请的化合物。可替代地，本申请的化合物的药学上可接受的碱加成盐可以通过使化合物的游离酸形式与药学上可接受的无机或有机碱反应来制备。
可替代地，本申请的化合物的盐形式可以使用起始材料或中间体的盐来制备。
本申请的化合物的游离酸形式或游离碱形式可以分别由对应的碱加成盐或酸加成盐制备。例如，本申请的呈酸加成盐形式的化合物可以通过用合适的碱(例如，氢氧化铵溶液、氢氧化钠等)处理而转化成对应的游离碱。本申请的呈碱加成盐形式的化合物可以通过用合适的酸(例如，盐酸等)处理而转化成对应的游离酸。
本申请的化合物的前药衍生物可以通过本领域普通技术人员已知的方法制备(例如，另外的细节参见Saulnier等人,(1994),《生物有机和药物化学快报(Bioorganic andMedicinal Chemistry Letters)》,第4卷,第1985页)。例如，合适的前药可以通过使本申请的非衍生化合物与合适的氨基甲酰化药剂(例如，1,1-酰氧基烷基碳酰氯、对硝基苯基碳酸酯等)反应来制备。
本发明的化合物可以通过如部分地通过以下合成方案阐述的有机合成领域中已知的方法制备。在以下所描述的方案中，应该更好地理解的是，根据一般化学原理，在必要的情况下，采用针对敏感基团或反应性基团的保护基团。本申请的化合物的受保护衍生物可以通过本领域普通技术人员已知的方法制备。对适用于保护基团的产生和其去除的技术的详细描述可以在T.W.Greene,《有机化学中的保护基团(Protecting Groups in OrganicChemistry)》,第3版,约翰威利父子公司,1999中找到。这些基团在化合物合成的方便阶段可以使用本领域技术人员显而易见的方法进行去除。选择过程以及反应条件和其执行顺序应与本文所描述的化合物的制备一致。
本文所描述的化合物可以由可商购获得的起始材料制成，或者使用已知的有机、无机和/或酶促方法合成。
在本申请中使用的所有缩写见于约翰威利父子公司的《有机合成中的保护基团》或默克公司(MERCK&Co.,Inc.)的《默克索引(MERCK INDEX)》、或由化学品供应商如奥德里奇(Aldrich)或根据本领域中的使用技术提供的其它化学书或化学品目录中。
参考本文所公开的示例性合成和实例，本领域普通技术人员可以容易地实现本文所描述的化合物的合成。此类方法可以利用对应的氘化和任选地其它含同位素试剂和/或中间体以合成本文描述的化合物，或援引本领域已知的用于将同位素原子引入化学结构的标准合成协议来实施。
合成的化合物可以从反应混合物中分离出来，并通过如柱色谱、高压液相色谱或重结晶等方法进一步纯化。如本领域技术人员可以理解的，合成本文式的化合物的另外的方法对于本领域普通技术人员来说是显而易见的。另外，不同合成步骤可以按替代性顺序或次序进行以给出期望的化合物。另外，本文所描绘的溶剂、温度、反应持续时间等仅仅是为了说明的目的，并且本领域普通技术人员将认识到反应条件的变化可以产生本申请所期望的桥连大环。可用于合成本文所描述的化合物的合成化学转化和保护基团方法(保护和去保护)是本领域已知的并且包含例如在如R.Larock,《综合有机转化(ComprehensiveOrganic Transformations)》,VCH出版社(VCH Publishers)(1989)中所描述的那些方法；T.W.Greene和P.G.M.Wuts,《有机合成中的保护基团》,第2版,约翰威利父子公司(1991)；L.Fieser和M.Fieser,《费舍尔和用于有机合成的费舍尔氏试剂(Fieser and Fieser'sReagents for Organic Synthesis)》,约翰威利父子公司(John Wiley and Sons)(1994)；以及L.Paquette编辑,《用于有机合成的试剂百科全书(Encyclopedia of Reagents forOrganic Synthesis)》,约翰威利父子公司(1995)以及其后续的版本。
在制备本发明的化合物之后，优选地将其分离和纯化，以获得含有等于或大于95％重量(“基本上纯的”)的组合物，然后如本文所描述的使用或调配所述组合物。在某些实施例中，本发明的化合物的纯度超过99％。
如本文所使用的，术语“分离的”或“基本上分离的”分子(如多肽或多核苷酸)是指已被操纵以比自然界中的浓度更高的浓度存在于天然环境中或已从天然环境中去除的分子。例如，当与受试者抗体天然缔合的非受试者抗体材料的至少10％、或20％、或40％、或50％、或70％或90％已被去除时，受试者抗体被分离、纯化、基本上分离或基本上纯化。例如，天然存在于活体动物中的多核苷酸或多肽不是“分离的”，但是与其天然状态的共存材料分开的相同多核苷酸或多肽是“分离的”。进一步地，出于本发明的目的，载体中含有的重组DNA分子被认为是分离的。分离的RNA分子包含DNA和RNA分子的体内或体外RNA复制产物。分离的核酸分子进一步包含合成产生的分子。另外，还分离出含在重组宿主细胞中的载体分子。因此，并非所有“分离的”分子都需要“纯化”
如本文所使用的，术语“纯化”当相对于分子使用时，意指被纯化的分子的浓度相对于其自然环境中或其产生、发现或合成的环境中与其相关的分子的浓度已经增加。天然缔合的分子包含蛋白质、核酸、脂质和糖，但通常不包含水、缓冲液和为维持纯化的分子的完整性或促进其纯化而添加的试剂。根据此定义，当相对于其污染物考虑时，物质的纯度可以是5％或更多、10％或更多、20％或更多、30％或更多、40％或更多、50％或更多、60％或更多、70％或更多、80％或更多、90％或更多、95％或更多、98％或更多、99％或更多或100％。
本发明的一些方面包含一种抑制受试者的EGFR活性的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的至少一种本文所描述的化合物、或其药学上可接受的盐或本文所描述的药物组合物。
在一些实施例中，本文所描述的化合物、或其药学上可接受的盐、或本文所描述的药物组合物能够抑制含有一个或多个突变的EGFR的活性。在一些实施例中，突变体EGFR含有一个或多个选自以下的突变：T790M、L718Q、L844Y、L858R和Del。在一些实施例中，突变体EGFR含有突变的组合，其中所述组合选自Del/L718Q、De1/L844Y、Del/T790M、De1/T790M/L718Q、De1/T790M/L844Y、L858R/L718Q、L858R/L844Y、L858R/T790M和L858R/T790M/L718Q。在一些实施例中，EGFR突变是T790M突变。在其它实施例中，EGFR突变是外显子19中的缺失。在具体实施例中，EGFR突变是L858R/T790M突变。
在一些实施例中，本文所描述的化合物、或其药学上可接受的盐、或本文所描述的药物组合物能够抑制含有一个或多个突变的EGFR的活性但不影响野生型EGFR的活性。
抑制含有一个或多个突变，如本文所描述的突变的EGFR而不是野生型EGFR，这提供了一种用于治疗、预防或改善疾病的新型方法，所述疾病包含但不限于癌症和转移、炎症、关节炎、系统性红斑狼疮、皮肤相关病症、肺部病症、心血管疾病、局部缺血、神经退行性病症、肝病、胃肠病症、病毒和细菌感染、中枢神经系统病症、阿尔茨海默氏症(Alzheimer'sdisease)、帕金森氏病(Parkinson's disease)、亨廷顿氏病(Huntington'sdisease)、肌萎缩性侧索硬化、脊髓损伤和周围神经病变。
在一些实施例中，药物抗性EGFR突变体包括致敏突变，如Del和L858R。
在一些实施例中，本申请提供了一种抑制携带致敏突变(例如，Del和L858R)和药物抗性突变(例如，T790M、L718Q和L844V)的药物抗性EGFR突变体的激酶活性的化合物，所述药物抗性EGFR突变体相对于携带致敏突变但不携带药物抗性突变的EGFR突变体具有小于10倍的效力差异(例如，如通过IC50测量)。在一些实施例中，效力差异小于约9倍、8倍、7倍、6倍、5倍、4倍、3倍或2倍。
在一些实施例中，在抑制含有如本文所描述的一个或多个突变如T790M、L718Q、L844Y、L858R、Del或其组合的EGFR的活性方面，本公开提供了比一种或多种已知的EGFR抑制剂更强效的化合物，所述抑制剂包含但不限于吉非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、WZ4002、HKI-272、CL-387、785和AZD9291。例如，在抑制含有如本文所描述的一个或多个突变的EGFR的活性方面，所述化合物的效力可以是吉非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、WZ4002、HKI-272、CL-387、785和AZD9291的至少约2倍、3倍、5倍、10倍、25倍、50倍或约100倍(例如，如通过IC50测量的)。在其它实施例中，在抑制含有如本文所描述的一个或多个突变如T790M、L718Q、L844Y、L858R、Del或其组合的EGFR的活性方面，本申请提供了不如一种或多种已知的EGFR抑制剂强效的化合物，所述化合物包含但不限于吉非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、WZ4002、HKI-272、CL-387、785和AZD9291。
可以通过IC50值来确定化合物的效力。相对于具有较高IC50值的化合物，如在基本上类似的条件下确定的，具有较低IC50值的化合物是更有效的抑制剂。在一些实施例中，基本上类似的条件包括测定表达野生型EGFR、突变型EGFR或其任何片段的3T3细胞中的EGFR依赖性磷酸化水平。
EGFR致敏突变包括但不限于L858R、G719S、G719C、G719A、L861Q、外显子19中的缺失和/或外显子20中的插入。药物抗性EGFR突变体可以具有但不限于包括T790M、T854A、L718Q或D761Y的药物抗性突变。
测量对EGFR活性的影响的另一种方法是测定EGFR磷酸化。野生型或突变型(L858R/T790M、De1/T790M、Del/T790M/L 718Q或L858R/T790M/L718Q)EGFR可以转染到NIH-3T3细胞(其通常不表达内源性EGFR)中，并且可以测定抑制剂(使用上述的浓度)抑制EGFR磷酸化的能力。将细胞暴露于浓度增加的抑制剂6小时，并用EGFR刺激10分钟。使用磷酸特异性(Y1068)EGFR抗体通过蛋白质印迹测定对EGFR磷酸化的影响。
在一些实施例中，本发明提供了一种治疗受试者的由EGFR介导的疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的至少一种本文所描述的化合物、或其药学上可接受的盐或本文所描述的药物组合物。在上文所公开的方面的一些实施例中，由EGFR介导的疾病是癌症。
在一些实施例中，本发明提供了一种治疗肺癌的方法。在一些实施例中，本发明提供了一种治疗非小细胞肺癌(NSCLC)的方法。在一些实施例中，本发明提供了一种治疗小细胞肺癌(SCLC)的方法。
向哺乳动物施用本文所描述的化合物或其药学上可接受的盐或药物组合物包括任何合适的递送方法。对特定患者最合适的施用方式将取决于正在治疗的疾病或病状的性质和严重程度，或正在使用的疗法的性质以及活性化合物的性质。向哺乳动物施用本文所描述的化合物或其药学上可接受的形式(例如，盐)或药物组合物包含向哺乳动物局部、肠内、肠胃外、经皮、经粘膜、通过吸入、脑池内、硬膜外、阴道内、静脉内、肌肉内、皮下、皮内或玻璃体内施用本文所描述的化合物或药学上可接受的类型(例如，盐)或药物组合物。向哺乳动物施用本文所描述的化合物或其药学上可接受的盐或药物组合物还包含向哺乳动物局部、肠内、肠胃外、经皮、经粘膜、通过吸入、脑池内、硬膜外、阴道内、静脉内、肌肉内、皮下、皮内或玻璃体内施用在哺乳动物体内或体表代谢为化合物或其药学上可接受的盐或药物组合物的本文所描述的化合物或药学上可接受的盐或药物组合物。
因此，本文所描述的化合物或其药学上可接受的盐或药物组合物可以与药学上可接受的媒剂，如惰性稀释剂或可同化的可食用载剂组合全身施用，例如口服。所述活性剂可以包封在硬壳或软壳明胶胶囊中、可以压成片剂或者可以直接与患者饮食中的食物一起掺入。对于口服治疗施用，如本文所描述的化合物或其药学上可接受的盐、或药物组合物可以与一种或多种赋形剂组合并且以可摄入的片剂、口含片剂、锭剂、胶囊、酏剂、悬浮液、糖浆或薄片等形式使用。此类组合物和制剂应含有至少约0.1％的活性化合物。当然，这些组合物和制剂的百分比可以变化，并且可以方便地介于给定单位剂型的约2％与约60％之间。活性化合物在此类治疗上有用的组合物中的量可以使得将获得有效剂量水平。
药物组合物包括药学上可接受的无菌水溶液或非水溶液、分散体、悬浮液或乳液以及用于在即将使用前重构成无菌可注射溶液或分散体的无菌粉末。合适的水性和非水性载剂、稀释剂、溶剂或媒剂的实例包含水、乙醇、多元醇(如甘油、丙二醇、聚乙二醇等)、羧甲基纤维素和其合适的混合物、植物油(如橄榄油)和可注射有机酯，如油酸乙酯。可以例如通过使用如卵磷脂等包衣材料，在分散体的情况下通过维持所需粒度以及通过使用表面活性剂来维持适当的流动性。
这些组合物还可以含有佐剂，如防腐剂、润湿剂、乳化剂以及分散剂。可以通过包含各种抗细菌剂和抗真菌剂，例如羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸等来确保防止微生物的作用。还可能令人期望的是包含如糖、氯化钠等等渗剂。通过包含延迟吸收的如单硬脂酸铝和明胶等药剂可以实现可注射药物形式的延长的吸收。
本发明的化合物还可以以脂质体的形式施用。如本领域已知的，脂质体通常源自磷脂或其它脂质物质。脂质体由分散在水性介质中的单层或多层水合液晶形成。可以使用任何能够形成脂质体的无毒的、生理上可接受的和可代谢的脂质。除了本发明的化合物之外，呈脂质体形式的本发明的组合物还可以含有稳定剂、防腐剂、赋形剂等。优选的脂质是天然和合成的磷脂质和磷脂酰胆碱(卵磷脂)。形成脂质体的方法是本领域已知的。参见例如Prescott,编辑,《细胞生物学方法(Methods in Cell Biology)》,第十四卷,纽约州纽约市的学术出版社(Academic Press,New York,N.Y.)(1976),第33页以及之后。
本文所描述的化合物的有用剂量可以通过比较其在动物模型中的体外活性和体内活性来确定。用于将小鼠和其它动物的有效剂量外推到人的方法是本领已知的；例如参见美国专利第4,938,949号，所述美国专利通过引用整体并入。
用于治疗所需的本文所描述的化合物的量不仅可以随所选择的具体盐而变化，而且随着施用途径、正在治疗的病状的性质和患者的年龄与病状而变化，并且可以最终由主治医师或临床医师自行决定。通常，以单一剂量或分次剂量向人或其它哺乳动物宿主施用的本发明组合物的总每日剂量可以是例如每天约0.1mg/kg体重至约20mg/kg体重、约0.5mg/kg体重至约5mg/kg体重、约5mg/kg体重到约10mg/kg体重的量。在一些实施例中，5mg/kg或更小的剂量可以是合适的。期望剂量可以方便地以单个剂量或以适当间隔施用的分次剂量提供。本文所描述的化合物可以方便地以单位剂量形式施用；例如，每单位剂型含有约25mg至约500mg、约50mg至约300mg或约100mg至约250mg的活性成分。
用于口服施用的固体剂型包含胶囊、片剂、丸剂、粉末和颗粒剂。在此类固体剂型中，将本文所描述的化合物或其衍生物与以下混合：至少一种惰性惯用赋形剂(或载剂)，如柠檬酸钠或磷酸二钙或(i)填充剂或增量剂，例如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；(ii)粘合剂，例如羧甲纤维素、海藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；(iii)保湿剂，例如甘油；(iv)崩解剂，例如琼脂-琼脂、碳酸钙、马铃薯木薯淀粉、海藻酸、某些复杂的硅酸盐和碳酸钠；(v)溶液缓凝剂，例如石蜡；(vi)吸收促进剂，例如季铵化合物；(vii)湿润剂，例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；(viii)吸附剂，例如高岭土和膨润土；以及(ix)润滑剂，例如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠或其混合物。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，剂型还可以包括缓冲剂。类似类型的固体组合物也可以用作软填充明胶胶囊和硬填充明胶胶囊中的填充剂，所述明胶胶囊使用如乳糖(lactose或milk sugar)等赋形剂以及高分子量聚乙二醇等。如片剂、糖衣丸、胶囊、丸剂和颗粒剂等固体剂型可制备有包衣和壳，如肠溶衣和本领域已知的其它包衣。
用于口服施用的液体剂型包含药学上可接受的乳液、溶液、悬浮液、糖浆和酏剂。除了活性化合物之外，液体剂型可以含有本领域常用的惰性稀释剂，如水或其它溶剂、增溶剂和乳化剂，例如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油，具体地为棉籽油、花生油、玉米胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油、甘油、四氢糠醇、聚乙二醇和脱水山梨醇的脂肪酸酯，或这些物质的混合物，等等。除了这种惰性稀释剂之外，所述组合物还可以包含另外的药剂，如润湿剂、乳化剂、悬浮剂、甜味剂、调味剂或芳香剂。
用于注射或输注的示例性药物剂型可以包含无菌水溶液或分散体或包括活性成分的无菌粉末，其适于无菌注射或可输注溶液或分散液的即时制备。在所有的情况下，最终剂型在制造和储存条件下应当是无菌的、流体和稳定的。可以通过将活性化合物以所需的量根据需要与以上枚举的各种其它成分一起并入适当的溶剂中、然后进行过滤灭菌来制备无菌可注射溶液。在用于制备无菌可注射溶液的无菌粉末的情况下，优选的制备方法可以是真空干燥和冷冻干燥技术，其产生活性成分的粉末加上其先前无菌过滤溶液存在的任何另外的期望成分。
本文所公开的材料、组合物和组分可以用于所公开的方法和组合物，可以与所公开的方法和组合物结合使用，可以用于制备或可以是所公开的方法和组合物的产物。应当理解，当公开这些材料的组合、子集、相互作用、组等时，虽然可能没有明确公开这些化合物的每一种不同的单独和集体组合和排列的具体参考，但每一种都在本文中被具体设想和描述。例如，如果公开并讨论了方法并且讨论了可以对包含所述方法的多个分子进行的许多修饰，则除非具体地相反地指明，否则具体地考虑了所述方法的每种组合和排列以及可能的修饰。同样，还具体考虑和公开了这些组合物或方法的任何子集或组合。此概念适用于本公开的所有方面，包含但不限于使用所公开的组合物的方法中的步骤。因此，如果存在可执行的各种另外步骤，则应理解，这些另外步骤各自可用所公开方法的任何特定方法步骤或方法步骤的组合来执行，并且每个这样的组合或组合的子集特别加以考虑并且应该视为公开的。
所公开的方法可以包含试剂盒，所述试剂盒包括本文所描述的化合物或其药学上可接受的盐、或药物组合物，以及可以描述向细胞或受试者施用本文所描述的化合物或其药学上可接受的盐或组合物的指导材料。这应被解释为包含本领域技术人员已知的试剂盒的其它实施例，如在向细胞或受试者施用本文所描述的化合物或其药学上可接受的盐或组合物之前包括用于溶解或悬浮化合物或其药学上可接受的盐或本文所描述的组合物的(如无菌的)溶剂的试剂盒。在一些实施例中，受试者可以是人。
本申请的化合物可以在本申请的过程期间作为溶剂化物(例如，水合物)方便地制备或形成。本申请的化合物的水合物可以通过使用如二噁英、四氢呋喃或甲醇等有机溶剂从水性/有机溶剂混合物中重结晶来方便地制备。
可用于本文中的方法的酸和碱是本领域已知的。酸催化剂是本质上可以是无机的(例如，盐酸、硫酸、硝酸、三氯化铝)或有机的(例如，樟脑磺酸、对甲苯磺酸、乙酸、三氟甲磺酸镱)任何酸性化学物质。酸可以催化量或化学计量的量来促进化学反应。碱是本质上可以是无机的(例如，碳酸氢钠、氢氧化钾)或有机的(例如，三乙胺、吡啶)任何碱性化学物质。碱可以催化量或化学计量的量来促进化学反应。
另外，在某些实施例中，本申请的化合物中的一些化合物具有一个或多个双键或一个或多个不对称中心。此类化合物可以作为外消旋体、外消旋混合物、单一对映异构体、单个非对映异构体、非对映异构体混合物以及顺式或反式或E-或Z-双异构形式，以及根据绝对立体化学可以定义为用于氨基酸的(R)-或(S)-或(D)-或(L)-的其它立体异构形式存在。这些化合物的所有此类异构体形式明确地包含在本申请中。光学异构体可以由其相应的光学活性前体通过本文所描述的步骤或通过拆分外消旋混合物来制备。拆分可以在拆分剂的存在下通过色谱法或通过重复结晶或通过本领域技术人员已知的这些技术的某种组合来进行。关于拆分的另外细节可以在Jacques等人,《对映异构体、外消旋体和拆分(Enantiomers,Racemates,and Resolutions)》,(约翰威利父子公司》,1981中找到。本申请的化合物还可以以多种互变异构形式表示，在这种情况下，本申请明确包含本文所描述的化合物的所有互变异构形式(例如，环系统的烷基化可能导致多个位点处的烷基化，本发明明确包含所有这种反应产物)。当本文所描述的这些化合物含有烯烃双键或几何不对称的其它中心时，并且除非另外指明，否则意图是这些化合物包含E几何异构体和Z几何异构体两者。同样，所有的互变异构形式也旨在包含在内。本文中出现的任何碳-碳双键的构型仅是为了方便而选择的，并且不旨在指定特定的构型，除非文中如此陈述；因此，本文中任意描绘为反式的碳-碳双键可以是式、反式或两者以任何比例的混合物。此类化合物的所有此类异构体形式明确地包含在本申请中。本文描述的化合物的所有晶型都明确地包含在本申请内。
在其它实施例中，如本文所描述的化合物或其药学上可接受的盐可以包含不对称碳原子，例如，作为氘取代或其它的结果。如此，本发明的化合物可以作为单独的对映体或两个对映体的混合物存在。因此，本发明的化合物可以作为外消旋混合物或非外消旋混合物(scalemic mixture)存在，或作为基本上不含另一可能的立体异构体的相应的单个立体异构体而存在。如本文所使用的，术语“基本上不含其它立体异构体”指的是存在少于25％的其它立体异构体，优选地少于10％的其它立体异构体，更优选地少于5％的其它立体异构体，并且最优选地少于2％的其它立体异构体。本领域已知获得或合成给定化合物的单个对映体的方法，并且可以按照实际情况应用于最终的化合物或起始材料或中间体。
在本说明书中，为了方便，所述化合物的结构式在某些情况下表示某种异构体，但本申请包含所有异构体，如几何异构体、基于不对称碳的光学异构体、立体异构体、互变异构体等。另外，由式表示的化合物可能存在晶体多态性。需要注意的是，任何晶型、晶型混合物、或其酸酐或水合物都包含在本申请的范围内。此外，本发明化合物在体内降解产生的所谓代谢物也包含在本申请的范围内。
“同分异构现象”意指具有相同分子式但其原子键合顺序不同或其原子空间布置不同的化合物。原子空间布置不同的异构体被称为“立体异构体”。并非彼此的镜像的立体异构体称为“非对映异构体”，并且是彼此的不可重叠的镜像的立体异构体称为“对映异构体”或有时称为光学异构体。含有等量的具有相反手性的单独对映异构形式的混合物称为“外消旋混合物”。
与四个不相同取代基键合的碳原子称为“手性中心”。
“手性异构体”意指具有至少一个手性中心的化合物。具有超过一个手性中心的化合物可以作为单独的非对映异构体存在或作为非对映异构体的混合物(称为“非对映异构体混合物”)存在。在存在一个手性中心时，立体异构体可以通过所述手性中心的绝对构型(R或S)来表征。绝对构型是指与手性中心连接的取代基的空间布置。所考虑的与手性中心连接的取代基根据Cahn、Ingold和Prelog的《顺序规则(Sequence Rule)》排序(Cahn等人,《应用化学国际版(Angew.Chem.Inter.Edit.)》1966,5,385；勘误表511；Cahn等人,《应用化学(Angew.Chem.)》1966,78,413；Cahn和Ingold,《社会化学杂志(J.Chem.Soc.)》1951(伦敦),612；Cahn等人,《实验(Experientia)》,1956,12,81；Cahn,《化学教育杂志(J.Chem.Educ.)》1964,41,116)。
“几何异构体”意指其存在归因于围绕双键的旋转受阻的非对映异构体。这些构型的名称通过前缀顺式和反式、或Z和E加以区分，根据Cahn-Ingold-Prelog规则，所述前缀指示基团在分子中的双键的相同或相对侧上。
此外，本申请中讨论的结构和其它化合物包含其所有阻转异构体。“阻转异构体”是其中两种异构体的原子空间布置不同的一类立体异构体。阻转异构体是因大基团围绕中心键的旋转受阻引起的旋转受限而存在。此类阻转异构体通常作为混合物存在，然而，由于最近在色谱技术方面的进展，已经可在所选情况下分离两种阻转异构体的混合物。
根据本发明，可以使用含有多种异构体比率中的任一种的异构体混合物。例如，在仅两种异构体合并的情况下，本发明设想了含有50:50、60:40、70:30、80:20、90:10、95:5、96:4、97:3、98:2、99:1或100:0的异构体比率的混合物。本领域普通技术人员将容易理解，对于更复杂的异构体混合物，可以设想类似的比率。
例如，如果期望本发明的化合物的特定对映异构体，则其可以通过不对称合成或通过用手性助剂进行的衍生来制备，其中将所得非对映异构体混合物分离并将辅助基团裂解以提供纯的期望的对映异构体。可替代地，在分子含有碱性官能团(如氨基)或酸性官能团(如羧基)的情况下，用适当的光学活性酸或碱形成非对映异构体盐，然后通过分步结晶或本领域众所周知的色谱方法对因此形成的非对映异构体进行归结，并且随后回收纯的对映异构体。
“互变异构体”是平衡地存在并且易于从一种异构体形式转化成另一种形式的两种或更多种结构异构体之一。这种转化导致氢原子的形式迁移，伴随着相邻共轭双键的转化。互变异构体在溶液中作为互变异构组的混合物存在。在固体形式下，通常以一种互变异构体为主。在可能发生互变异构的溶液中，互变异构体将达到化学平衡。互变异构体的确切比率取决于若干因素，包含温度、溶剂和pH。可通过互变异构作用相互转化的互变异构体的概念被称为互变异构现象。
在可能的多种类型的互变异构现象中，通常观察到两种。在酮-烯醇互变异构现象中，电子和氢原子发生同时转移。环-链互变异构现象由于糖链分子中的醛基基团(-CHO)与同一分子中的一个羟基基团(-OH)反应而赋予其如葡萄糖所展现的环状(环形状)形式而发生。常见的互变异构对是：杂环中(例如，在核碱基中，如鸟嘌呤、胸腺嘧啶和胞嘧啶)的酮-烯醇、酰胺-腈、内酰胺-内酰亚胺、酰胺-亚胺酸互变异构现象、胺-烯胺和烯胺-烯胺。
另外，本申请的化合物(例如，化合物的盐)可以以水合或非水合(无水的)形式存在或作为与其它溶剂分子的溶剂化物存在。水合物的非限制性实例包含一水合物、二水合物等。溶剂化物的非限制性实例包含乙醇溶剂化物、丙酮溶剂化物等。
本文还可以设想本发明的化合物的溶剂化物和多晶型物。“溶剂化物”意指含有化学计量量或非化学计量量的溶剂的溶剂加成形式。一些化合物具有在晶体固态中捕获固定摩尔比的溶剂分子，从而形成溶剂化物的趋势。溶剂化物可以是所公开的化合物或其药学上可接受的盐。如果溶剂是水，则所形成的溶剂化物是水合物，并且如果溶剂是醇，所形成的溶剂化物是醇化物。水合物是通过将一个或多个水分子与水保持其作为H2O的分子状态的物质的一个分子组合来形成的。本发明的化合物的溶剂化物包含例如水合物。药学上可接受的溶剂化物和水合物是例如可以包含1至约100、或1至约10、或1至约2、约3或约4个溶剂或水分子的复合物。应当理解，如本文所使用的，术语“化合物”涵盖化合物和化合物的溶剂化物以及其混合物。
本申请旨在包含在本发明化合物中存在的原子的所有同位素。同位素包含具有相同原子序数但不同质量数的那些原子。通过一般举例但不具有限制性，氢的同位素包含氚和氘，并且碳的同位素包含C-13和C-14。同位素标记的化合物也在本公开的范围内。如本文所使用的，“同位素标记的化合物”是指目前公开的化合物，包含药物盐和其前药，每一种如本文所描述的，其中一个或多个原子被原子质量或质量数不同于通常在自然界中发现的原子质量或质量数的原子替代。可以并入本发明所公开的化合物的同位素的实例包含氢、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，如分别为2H、3H、13C、14C、15N、18O、17O、31P、32P、35S、18F和36Cl。
通过同位素标记本发明所公开的化合物，所述化合物可以用于药物和/或底物组织分布测定。氚(即，3H)和碳-14(即，14C)标记的化合物因其易于制备和可检测性而是特别优选的。进一步地，使用较重的同位素，如氘(2H)的取代可以得到由更大代谢稳定性产生的某些治疗优点，例如体内半衰期增加或剂量需求降低，并且因此在一些情况可能是优选的。本发明公开的同位素标记的化合物，包含其药物盐、酯和前药可以通过本领域已知的任何方式制备。
进一步地，用较重的同位素如氘取代通常富含的氢(1H)可以提供某些治疗优势，例如，由于改进了吸收、分布、代谢和/或排泄(ADME)特性，产生了具有改进的功效、安全性和/或耐受性的药物。用13C替代通常富含的12C也可以获得益处。(参见WO 2007/005643、WO2007/005644、WO 2007/016361和WO 2007/016431。)
应理解，本申请的作为靶细胞的化合物可以被描绘为不同互变异构体。还应理解，当化合物具有互变异构形式时，所有互变异构形式包含在落入本申请的范围内，并且化合物的命名不排除任何互变异构体形式。
合成的化合物可以从反应混合物中分离出来，并通过如柱色谱、高压液相色谱或重结晶等方法进一步纯化。如本领域技术人员可以理解的，合成本文式的化合物的另外的方法对于本领域普通技术人员来说是显而易见的。另外，不同合成步骤可以按替代性顺序或次序进行以给出期望的化合物。另外，本文所描绘的溶剂、温度、反应持续时间等仅仅是为了说明的目的，并且本领域普通技术人员将认识到反应条件的变化可以产生本申请所期望的桥连大环等等。可用于合成本文所描述的化合物的合成化学转化和保护基团方法(保护和去保护)是本领域已知的并且包含例如在如R.Larock,《综合有机转化(ComprehensiveOrganic Transformations)》,VCH出版社(VCH Publishers)(1989)中所描述的那些方法；T.W.Greene和P.G.M.Wuts,《有机合成中的保护基团》,第2版,约翰威利父子公司(1991)；L.Fieser和M.Fieser,《费舍尔和用于有机合成的费舍尔氏试剂》,约翰威利父子公司(1994)；以及L.Paquette编辑,《用于有机合成的试剂百科全书》,约翰威利父子公司(1995)以及其后续的版本。
本申请的化合物可以通过本文所描绘的任何合成方法添加各种功能来进行修饰，以增强选择性生物特性。此类修饰是本领域中已知的并且包含增加生物渗透到给定生物系统(例如，血液、淋巴系统、中枢神经系统)中、增加口服利用度、增加溶解度以允许注射施用、改变代谢以及改变排泄速率的那些修饰。
本申请的化合物在本文中由其化学结构和/或化学名称定义。当化合物通过化学结构和化学名称两者进行指代，并且化学结构和化学名称冲突时，化学结构决定了所述化合物的特性。
在本文中的变量的任何定义中，对化学基团的清单的详述包含作为任何单个基团或所列基团的组合的变量的定义。针对本文变量的实施例的详述包含作为任何单一实施例或与任何其它实施例或其部分的组合的实施例。
实例
为了可以更全面地理解本文所描述的本发明，阐述了以下实例。本申请中描述的实例用于说明本文中提供的化合物、组合物、材料、装置和方法，并且不得以任何方式解释为限制其范围。
关于N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(化合物1)的合成、表征和调配的各个方面可以在例如Gray等人的美国专利申请公开第2017/0362204A1号中找到。
材料和方法
脑暴露
通过Inotiv对化合物1和吉非替尼在单次口服(PO)或静脉内(IV)施用于斯普拉格·道利大鼠(sprague dawley rat)后的脑暴露进行比较评估。方案可根据要求提供。
细胞培养
将HEK293细胞和U251细胞维持在补充有10％胎牛血清(FBS)和100μg/ml青霉素-链霉素的DMEM中。在补充有20ng/ml EGF的NeuroCult增殖培养基(小鼠)(干细胞技术公司(StemCell Technologies))中扩增小鼠神经干细胞(NSC)。在补充有20ng/ml EGF、10ng/mlFGF和0.0002％肝素的NeuroCult增殖培养基(小鼠)(干细胞技术公司)中培养原代小鼠胶质瘤细胞(CPEvIII)。将原发性人胶质母细胞瘤系BT112、BT179和BT333维持在具有20ng/mlEGF、10ng/ml FGF和0.0002％肝素的NeuroCult增殖培养基(人)(干细胞技术公司)中。
化合物和试剂
吉非替尼和厄洛替尼从赛立克化学品公司(Selleck Chemicals)购买。拉帕替尼从医药快报公司(MedChemexpress)购买。奥希替尼(AZD9291)从商业来源获得。化合物1由Pharmaron合成(Wang等人,bioRxiv,2020.2003.2009.984500)。对于体外研究，将化合物溶解于DMSO中。对于体内研究，将化合物1溶解于10％ NMP/90％ PEG300中，并以37.5mg/kg或75mg/kg每日口服强饲施用。
蛋白质印迹分析
如先前所描述地进行蛋白质印迹分析(Ni,J.等人,(2012).《癌症发现(Cancerdiscovery)》2,425-433；Ni,J.等人,(2016).《自然医学(Nature medicine)》22,723-726；Ni,J.等人,(2017).《神经肿瘤学(Neurooncology)》19,22-30)。抗pEGFR-1068(编号3777)、抗pEGFR-1173(编号4407)、抗EGFR(编号4267)、抗pERK1/2(编号9101)、抗ERK1/2(编号9102)、抗S6RP(编号2211)和抗S6RP(编号2217)抗体从细胞信号传导技术公司(CellSignaling Technology)购买。抗α-微管蛋白抗体从西格玛公司(Sigma)购买。
细胞活力测定
将细胞以每孔1,000个细胞的密度接种在96孔板中，并用起始浓度为20μM的两倍连续稀释的化合物处理。在用CellTiter-Glo(普洛麦格公司(Promega))处理三天之后评估细胞活力。使用GraphPad Prism 8进行曲线拟合分析和IC50值测定。
小鼠
Ptenf/f(来自UCLA的Hong Wu博士)小鼠与C57BL/6菌株背景回交10代。然后将其与C57BL/6背景上的Cdkn2a-null(Ink4a-/-；/Arf-/-)小鼠(Ni等人,2017)杂交以产生Cdkn2a-null；Ptenf/f小鼠。ICR-SCID小鼠从泰康利公司(Taconic)购买。所有动物实验均根据经丹娜—法伯癌症(Dana-Farber Cancer)研究所动物护理和使用委员会(IACUC)批准的NIH动物使用指南和方案进行。
颅内注射细胞
将细胞(重悬于1μl PBS中的100,000个细胞)颅内注射到8-10周龄ICR-SCID小鼠的右纹状体(前囟前面0mm，前囟侧面2mm，以及前囟腹侧2.5mm)中。每天监测动物的神经系统缺陷的发展。
原发性小鼠CPEvIII胶质瘤
如先前所描述的，分离和培养来自E14.5胚胎小鼠(Cdkn2a-null；Ptenf/f)纹状体的神经干细胞(NSC)(Rietze,R.L.和Reynolds,B.A.(2006).酶学方法(Methods inenzymology)419,3-23)。将NSC用表达Cre重组酶的腺病毒(AdCre；MOI50)(爱荷华大学)感染两次以敲除固定的Pten。然后用表达EGFRvIII的逆转录病毒(pBabe-puro-EGFRvIII)(来自DFCI的Charles Stiles博士)转导细胞，并用1μg/ml嘌呤霉素进行选择。所得细胞(Cdkn2anull；Ptennulll；EGFRvIII，命名为CPEvIII)在移植到小鼠脑之后可以形成胶质瘤。然后分离肿瘤并机械解离以在体外和体内扩增。
生物发光成像
将细胞用慢病毒荧光素酶(HIV-Luc-zsGreen，addgene编号39196)转导。在用IVISLumina III成像系统(珀金埃尔默公司(PerkinElmer))腹膜内注射D-荧光素(80mg/kg)(金生物技术公司(Gold Biotechnology))之后，记录来自活小鼠中的表达荧光素酶的细胞的生物发光信号，持续10分钟。用活体图像软件(珀金埃尔默公司)对信号进行分析。
统计学分析
动物存活率的统计学分析通过对数秩(Mantel Cox)测试(Prism)确定。当P<0.05时，数据被认为具有统计显著性。
实例1：化合物1在表达EGFRvIII的HEK293细胞中的体外活性
由于EGFRvIII是GBM中最常见的EGFR变体，因此测试了化合物1对EGFRvIII的活性的影响。产生了稳定表达EGFRvIII的HEK293-EGFRvIII细胞(293-EGFRvIII)。化合物1以与厄洛替尼的剂量依赖性方式相当的剂量依赖性方式降低了两个酪氨酸位点1068和1173处的EGFRvIII的磷酸化(pEGFRvIIIY1068和pEGFRvIIIY1173)，以及下游信号传导分子ERK1和ERK2(ERK1/2)的磷酸化。(图1A)。另外的剂量滴定揭示化合物1对EGFRvIII磷酸化的IC50值为0.19μM(图1B)。此外，化合物1降低了293-EGFRvIII细胞的活力，其中IC50为1.48μM，这低于厄洛替尼(IC50 4.83μM)、吉非替尼(IC50 15.67μM)和奥希替尼(IC50 2.19μM)(图1C)。
实例2：化合物1针对携带EGFR扩增和/或突变的GBM患者来源的细胞系的体外活性
培养以EGFR扩增(EGFRamp)和/或突变为特征的患者来源的胶质母细胞瘤细胞系(PDCL BT112、BT179和BT333)，并用化合物1、厄洛替尼、吉非替尼或拉帕替尼(一种在体外针对GBM EGFR变体具有高活性的II型EGFR TKI)处理(Vivanco,I.等人,(2012).《癌症发现》2,458-471))。拉帕替尼在体外比I型EGFR TKI厄洛替尼和吉非替尼更积极地抑制GBM患者来源的细胞的存活(图2A-2C)。值得注意的是，化合物1是此组内最强效的TKI，如在降低这些具有最低IC50值的PDCL的活力方面的更大的效力所示(表1)。
表1：激酶抑制剂的IC50值
实例3：化合物1针对表达EGFRvIII的人GBM U251细胞的体外活性
同时，常规的人GBM U251细胞系用作体外和体内研究两者的替代模型。通过逆转录病毒介导的基因转移，对U251细胞进行工程化以稳定表达EGFRvIII(U251-EGFRvIII)。化合物1能够在IC50值为0.174μM的培养物中以剂量依赖性方式减少U251-EGFRvIII细胞中的EGFRvIII磷酸化(图3A和3B)。对化合物1以及其它EGFR-TKI对U251-EGFRvIII细胞的活力的影响的检查揭示，类似于对293-EGFRvIII细胞的影响(图1A-1C)，化合物1和奥希替尼(AZD9291或)在抑制U251-EGFRvIII细胞的活力方面具有相当的潜力，其中IC50值分别为1.52μM和2.64μM，而厄洛替尼和吉非替尼显示出高得多的IC50值，分别为13.65μM和20.35μM(图3C和表2)。
表2：激酶抑制剂对U251-EGFRvIII细胞增殖的IC50值。
化合物1 厄罗替尼 吉非替尼 奥希替尼
IC50(μM) 1.484 14.96 22.10 2.453
实例4：化合物1针对原位异种移植物模型GBM U251-EGFRvIII的体内活性
为了评估化合物1在具有突变体EGFR的GBM中的体内活性，产生表达荧光素酶的U251-EGFRvIII GBM细胞，以便于通过生物发光成像分析在体内监测药物应答。当可检测到发光信号时，将携带原位U251-EGFRvIII肿瘤的小鼠随机分为三个处理组：媒剂处理组、37.5mg/kg的化合物1或75mg/kg的化合物1。执行了两个独立实验。在两个队列中，用化合物1处理以剂量依赖性方式降低了发光信号并延长了携带原位U251-EGFRvIII肿瘤的小鼠的生存期(图4A-4D)。对照小鼠的培养基生存期为68天，用37.5mg/kg的化合物1处理的小鼠的培养基生存期为80天，并且用75mg/kg的化合物1处理的小鼠的培养基生存期为89.5天(图4E)。所有小鼠在处理时间期间均表现正常，没有显著的体重减轻(图4F)，这表明化合物1在U251-EGFRvIII的原位肿瘤中具有活性，并且在小鼠中具有良好的耐受性。
实例5：化合物1针对GBM的基因工程化小鼠(GEM)模型的体外和体内活性
在GBM中，EGFR突变经常与CDKN2A缺失和PTEN缺乏共存(Brennan,C.W.等人,(2013).《细胞(Cell)》155,462-477；癌症基因组图谱研究N.(2008).《自然(Nature)》455,1061-1068)。已经产生了由Cdkn2a和Pten双缺失伴随EGFRvIII表达驱动的GBM的同基因遗传工程化小鼠(GEM)模型(被称为CPEvIII)。图5A是示出了在GBM中的这些基因中观察到的遗传改变。将原发性CPEvIII肿瘤细胞分离并培养为神经球，并在小鼠颅内同种异体移植。如图5B所示，化合物1在神经球培养物中在体外以剂量依赖性方式显著降低EGFRvIII、ERK1/2和S6RP的磷酸化。化合物1(75mg/kg，QD)也延长了携带CPEvIII的颅内原位同种异体移植物的小鼠的生存期，其中对照小鼠的中值生存期为25.5天，并且化合物1处理的小鼠的中值生存期为33天，p＝0.017(图5C)。在终点从小鼠采集的肿瘤中的pEGFR的免疫组织化学(IHC)分析揭示，用化合物1处理的小鼠中EGFRvIII的磷酸化水平降低(图5D)。化合物1在小鼠的此队列中也具有良好的耐受性，其中在化合物1处理期间没有观察到显著的体重减轻(图5E)。总之，这些结果表明化合物1在体外和体内都具有针对CPEvIII GBM肿瘤细胞的活性。
实例6：化合物1和吉非替尼在施用于斯普拉格·道利大鼠后的脑暴露的比较评估
化合物1和吉非替尼以单次口服(PO)剂量(分别为30mg/kg或50mg/kg)施用于斯普拉格·道利大鼠。
化合物1和吉非替尼也通过静脉内输注施用9周(±周)雄性斯普拉格·道利大鼠。每只小鼠有两个手术植入的导管以用于血液采集和IV给药(分别为股骨和颈静脉)。化合物1和吉非替尼的调配物在施用24小时内制备。对每只动物施用5小时的单次IV注射，然后进行两次临床观察(给药后30分钟至1小时以及研究结束时(T终末))。在5小时的输注时间段内(5分钟、1小时、2小时、3小时和T终末)，在5个时间点时从每只动物采集血液样品，并处理成血浆。在T终末时收集脑(印迹、称重和快速冷冻)，并比较脑暴露。
通过LC-MS/MS从第1组动物的脑和血浆中定量吉非替尼浓度。通过LC-MS/MS从第2组动物的脑和血浆中定量化合物1和代谢物(M38)浓度。使用Phoenix WinNonlin或WatsonLIMS进行非房室分析，其中提供了PK参数(当可计算时)，包含但不限于T＝0时的估计浓度(C0)、全身清除率(CL)、稳态预测分布体积(Vss)、消除半衰期、最大浓度(Cmax)、达到最大浓度的时间(Tmax)、曲线下面积与给药间隔(AUC0-t)；计算脑与血浆的比率。
表3和4分别示出了口服和IV给药的小鼠的研究结果。
表3
表4
实例7：化合物1脑渗透
将先前公布的关于EGFR TKI在GMB中的脑渗透的报告中获得的数据与本文所描述的脑渗透数据进行比较(表5)。这项比较表明，吉非替尼、厄洛替尼、阿法替尼和维森普罗(visimpro)未能有效治疗GBM，并且奥希替尼的有效性尚未确定。除维森普罗外，这些药物中的每一种似乎都是P-gp和Bcrp(外排转运蛋白)的底物。相比之下，观察到化合物1的脑渗透相对于其它药物的脑渗透明显增加，这表明化合物1不是外排转运蛋白的底物。
表5：脑渗透数据
ND＝未确定；*＝Kim等人,《药物代谢与处置(Drug Metab.Dispos.)》47(4):393-404(2019)。
实例8：化合物1的激酶概况分析
EGFR扩增和/或突变在GBM中常见，估计在50％以上的患者中发生。因此，表征了化合物1对wt-EGFR和几种突变体的结合亲和力，并将其与第二代激酶抑制剂奥希替尼的结合亲和力进行了比较(表6)。
表6
实例9：化合物1的皮肤毒性比奥希替尼的皮肤毒性低
用奥希替尼(10-25mg/kg/天)或化合物1(10-50mg/kg/天)处理小鼠，并目测观察皮肤毒性。(奥希替尼，图6A；化合物1，图6B)。
实例10：化合物1的治疗窗口比奥希替尼的治疗窗口大
图7示出了用化合物1(25-50mg/kg)或奥希替尼(25mg/kg)处理的小鼠在处理过程中的体重。用奥希替尼(25mg/kg)处理的小鼠由于体重显著减轻，在一个月内达到研究终点。
实例11：化合物1和奥希替尼对NSCLC脑转移的影响
对携带非小细胞肺癌(NSCLC)脑转移的雌性SCID小鼠给药化合物1(25-50mg/kg)或奥希替尼(AZD9291；25mg/kg)。相对于对照治疗后，在所有经处理的动物中观察到脑转移减少。然而，如表1和图8所示，AZD9291组的小鼠由于体重减轻和皮肤病变，在4周时达到了研究终点，并且因此没有表现出延长的生存期。然而，用化合物1处理的小鼠的中值生存期为80.5天(25mg/kg)或超过100天(50mg/kg)(表7)。这些数据表明，化合物1有更大的治疗窗口用于治疗NSCLC脑转移(图9)。
表7
实例12：源自化合物1处理的小鼠的组织的成像
为了更灵敏地对脑组织中的药物进行成像，采用了基质辅助激光解吸电离质谱法成像(MALDI-MSI)技术。简而言之，在治疗后7小时处死口服施用给药100mg/kg化合物1的携带GBM的小鼠或对照小鼠。使用生物发光获得脑组织并成像(图10A)，并用苏木精和伊红(H&E)染色(图10B)以提供与使用MALDI-MSI获得的图像进行比较的结果。
制备组织切片并将其沉积在MALDI基质(80mg/mL)、超DHB(sDHB)基质上，所述基质是2,5-二羟基苯甲酸(DHB)与2-羟基-5-甲氧基苯甲酸的9:1混合物、70:30MeOH和0.1％三氟乙酸(TFA)。组织-MALDI样品制备系统(TM喷雾器)参数为75℃，在10psi流速为0.18毫升/分钟。
将对照模拟物与来自对照和经处理的小鼠的脑组织切片一起铺板到MALDI底物上(图10C、10D)，并进行MALDI-MSI。图10E示出了根据针对不同浓度观察到的强度产生的归一化曲线。图10F是对脑组织样品观察到的强度的图像。图10G和10H示出了对模拟物和源自化合物1处理的小鼠的脑组织样品观察到的绝对强度。图10I示出了化合物1的MSMS分析。
实例13：另外的测试
在多项体外和体内药理学研究中评估了化合物1和其活性/主要代谢物化合物2，以评估肺和脑模型中的靶标应答。还探索了激酶选择性。
在大量受体和离子通道中评估化合物1和/或化合物2(活性/主要代谢物)的脱靶活性，包含人醚-à-go-go相关基因(hERG)测定。化合物1在良好实验室规范(GLP)安全性药理学研究中进行了全面评估，包含心血管、呼吸和中枢神经系统功能的研究。
用化合物1进行药代动力学/毒代动力学(小鼠/大鼠/犬)、比较蛋白质结合、P450抑制和诱导、转运体概况分析、比较体外代谢和体内代谢(大鼠)研究。通过口服和静脉内施用评估CNS暴露。大鼠和犬是非临床开发项目的代谢和药理学相关物种。
在大鼠和犬的剂量范围和4周口服GLP研究中评估了化合物1的毒性和代谢作用，即其主要代谢物化合物2。所有GLP研究均使用甲苯磺酸盐(批号A05993-056LB)进行。1期临床研究将用来自批号NB化合物1-A-3的药物物质进行。临床批次中的杂质在GLP毒理学研究中是合格的。药品在胶囊中仅含有纯净的药物物质。
药理学
如表8所示，化合物1已在初级、次级和安全性药理学研究中得到充分评估。
表8：药理学研究的总结
药理学综述
在多项体外和体内研究中评估了化合物1和其活性代谢物化合物2，以评估在靶和脱靶药理学。
在468种人类激酶和疾病相关突变体变体的小组中评估化合物1和化合物2(主要代谢物)。化合物1和化合物2以<对照的1％与少数非突变激酶结合。数据表明，化合物1和其主要代谢物没有显示出与野生型蛋白显著的非选择性激酶结合。靶向非突变激酶包含化合物1：MAST1、PAK4、PDGFRB和ULK3以及化合物1-M38：ERBB2、JAK3(JH1结构域催化的)、MKNK2、MTOR、OSR1和TNK1。虽然化合物1与化合物2之间存在一些变异性，但很明显，这两种化合物在与大量突变激酶结合方面都非常有效。证实ALK、EGFR和FLT3突变体的结合常数(Kd)<100nM。与野生型EGFR的结合常数为4.9nM。化合物1的EGFR(E746A-740del、L858R-T790M和T790M)双突变体和单一突变体的结合常数<1nM是明显的；化合物2显示出与EGFR(L858R-T790M；T790M)双突变体和单一突变体的活性类似的活性。
在稳定表达EGFRvIII(人GBM中最常见的EGFR变体)的HEK293细胞中，化合物1以剂量依赖性方式降低了酪氨酸位点1068和1173处的EGFRvIII(pEGFRvIII)的磷酸化以及下游信号传导分子ERK1和ERK2(ERK1/2)的磷酸化。另外的剂量滴定揭示化合物1对pEGFRvIII的IC50为0.19μM(表4-2)。化合物1还降低了HEK293-EGFRvIII细胞中的活力，其中IC50为1.48μM。这与奥希替尼大致相同，但活性是厄洛替尼和吉非替尼的3倍和10倍。
在稳定表达EGFRvIII的人GBM细胞系(U251细胞)中，化合物1降低pEGFR，其中IC50为0.17μM(表9)。在这项研究中，化合物1(IC50 1.5μM)的降低的细胞活力与奥希替尼(IC502.6μM)的细胞活力大致相同；然而，细胞存活率分别是厄洛替尼和吉非替尼的细胞存活率的1/9和1/13。
在神经球培养系统中的携带EGFR扩增和/或突变的三种原发性患者来源的GBM细胞系中，当与厄洛替尼、吉非替尼或拉帕替尼相比时，化合物1是最强效的细胞活力抑制剂，其中IC50在0.89至3.28μM的范围内。
表9：化合物1体外胶质母细胞瘤活性
为了评估化合物1在具有突变EGFR的GBM中的体内活性，通过逆转录病毒介导的基因转移产生U251细胞以稳定表达EGFRvIII(U251-EGFRvIII)。U251-EGFRvIII细胞被进一步工程化以表达荧光素酶，以通过生物发光成像分析促进体内药物应答的监测。在将U251-EGFRvIII细胞(表达荧光素酶)植入在脑中的体内原位先导研究中，从植入后第28天开始对小鼠进行处理；在第28天在脑中检测到发光信号。化合物1的剂量分别为0(n＝7)、37.5(n＝8)和75(n＝7)mg/kg/QD。在研究期间，体重没有减轻。对照组的中值生存期为68天，低剂量组的中值生存期为80天，并且高剂量化合物1的中值生存期为89.5天。这些数据表明化合物1在这项初步研究中是安全且有效的。
在GBM中，EGFR突变经常与Cdkn2a缺失和Pten缺乏共存(Brennan 2013)。在由Cdkn2a和Pten双缺失伴随EGFRvIII表达驱动的GBM的基因工程化小鼠模型(CPEvIII模型)中，将原代CPEvIII肿瘤细胞培养为神经球，并在小鼠颅内移植。化合物1在神经球培养物中在体外以剂量依赖性方式显著降低EGFRvIII、ERK1/2和S6RP的磷酸化。化合物1(75mg/kg，QD)也延长了携带CPEvIII的颅内移植物的小鼠的生存期，其中对照小鼠的中值生存期为25.5天，并且化合物1处理的小鼠的中值生存期为33天(p＝0.017)(表10)。在终点从小鼠采集的肿瘤中的pEGFR的免疫组织化学分析揭示，用化合物1处理的小鼠中EGFRvIII的磷酸化水平降低。化合物1在小鼠的此队列中也具有良好的耐受性，其中在化合物1处理期间没有观察到显著的体重减轻。总之，这些结果表明化合物1在体外和体内都具有针对CPEvIIIGBM肿瘤细胞的活性。
表10：化合物1体内胶质母细胞瘤活性
化合物1区别于所有竞争者的一个关键特征在于其在脑组织中的非同寻常的分布。在连续输注的大鼠中，化合物1的脑/血浆比率为约20。最近一项关于竞争性EGFR-TKI的脑分布的研究表明，吉非替尼的脑渗透率为27％，厄洛替尼的脑渗透率为13.7％，并且奥希替尼的脑渗透率为180％(Kim 2019)。同一项研究还表明，5种经批准的EGFR-TKI具有广泛的外排转运。相比之下，目前的Crimson体外数据表明，化合物1不可能是转运体底物，而是乳腺癌抗性蛋白(BCRP)的弱抑制剂，并且不抑制P-糖蛋白(P-gp)。
总之，数据表明化合物1在GBM模型中具有令人印象深刻的体外和体内活性。
在使用携带Ex19del/T790M双突变的PC9GR4细胞和携带L858R/T790M双突变的H1975细胞的体外非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖测定中，化合物1抑制了IC50为3.66nM的PC9GR4细胞系和IC50为4.39nM的H1975细胞中的生长(Wang 2020)。
在小鼠中的携带EGFR单一突变和双突变的肺肿瘤细胞系的异种移植物模型中也评估了化合物1。具有SQ人肺植入物(H1975细胞：EGFR L858R-T790M和PC-9细胞：EGFREx19Del)的NOD.SCID小鼠的研究表明，口服化合物1(30或50mg/kg)是有效且安全的。在H1975和PC-9模型中，在给药后4小时，化合物1的血浆浓度分别为800ng/mL(1.6μM)和1500ng/mL(3.1μM)时，观察到抗肿瘤活性。在H1975肺肿瘤植入物中，在研究过程中发生了实质性肿瘤消退(基本上治愈)。
安全性药理学研究表明没有呼吸道或CNS风险。在心血管(CV)犬研究中，在高剂量(100mg/kg)化合物1后10小时至24小时，每4只犬中就有1只表现出可逆性心室传导障碍的迹象。这种心律失常与母体或代谢物的最大血浆浓度(Cmax)或Tmax无关。无法鉴定与测试制品的确切联系。考虑到这只高剂量(100mg/kg)遥测犬出现无法解释的可逆性心律失常，推荐在1期进行常规心电图(ECG)监测。
尽管hERG IC50为1.9μM(925ng/mL)，IC100为约30μM，但在高保真犬CV遥测研究中没有QTc信号(Spence 1998；Miyazaki 2002)，其中剂量为至多100mg/kg，并且化合物1的估计单次剂量Cmax为2618ng/mL(5.4μM)，并且化合物1-M38的估计单次剂量Cmax为约367ng/mL(0.75μM)；对血压或心间期没有不良影响。对大鼠功能观察组合中的CNS没有不良影响，并且对犬的呼吸速率也没有不良影响。受体结合研究表明，化合物1几乎没有脱靶风险。
化合物1在体外和体内对小鼠肿瘤模型有效，并且对所关注的突变激酶具有相对选择性。安全性药理学研究表明，没有呼吸道或CNS风险，并且也没有脱靶受体参与。在4周的犬毒理学研究中，考虑到一只高剂量(100mg/kg)遥测犬出现无法解释的心律失常，以及一只与心肌变性相关的高剂量(100mg/kg)死亡(第13天)，推荐在给药后8小时内进行常规ECG监测，以覆盖母体和代谢物，并在1期监测心肌酶(肌钙蛋白)以及药代动力学。
药理学和脑暴露概况分析支持人类1期肿瘤学剂量递增研究。
代谢-药代动力学
在表11中概述的研究中探索了化合物1的吸收、分布和代谢。
表11：代谢-药代动力学研究的总结
开发并验证了灵敏且可再现的液相色谱法-串联质谱法(LC-MS/MS)测定，以支持化合物1和其主要活性代谢物化合物2的代谢-药代动力学-毒代动力学研究。
化合物1是在大鼠中具有大体积分布的中等高清除率的化合物。在大鼠中，化合物1的口服Tmax通常为约5小时，并且化合物2的口服Tmax通常为约7小时；T1/2针对化合物1通常为约5小时，并且针对化合物1-M38通常为约9小时。不存在性别差异，并且大鼠的生物利用度为平均50％，并且与剂量无关。暴露通常是剂量成比例的。
通过连续静脉内输注和口服给药，在估计稳态下，化合物1的全脑暴露比血浆中的暴露高20倍；化合物2的脑暴露基本上等于血浆中的暴露。在这些研究中没有发现不良反应。
化合物1是瑞舒伐他汀通过人BCRP转运的弱抑制剂，其中表观IC50值为3.02μM(1471ng/mL)。化合物1不抑制P-gp介导的地高辛的转运(IC50>30.0μM)。化合物1在Caco-2细胞中具有中等的渗透性，并且不可能是外排转运体的底物。基于这些数据，在治疗血浆浓度下，通过对这些转运体的影响，药物与药物发生显著相互作用的风险通常较低。进一步了解DDI风险将等待2期剂量和暴露的定义。
化合物1主要由CYP3A4/3A5代谢；在IC50为4.89μM(2381ng/mL)的情况下，观察到对CYP3A4-T的弱抑制，但对CYP3A4-M没有抑制。没有基于酶活性的CYP诱导；基于mRNA，在1μM时有CYP3A4诱导，但在较低浓度时没有。在其它CYP中未观察到代谢、抑制和诱导。与作为CYP3A4-T抑制剂的药物或通过CYP3A4/3A5代谢的药物存在潜在的DDI相互作用；一旦有了人药代动力学(PK)数据，这些DDI风险将得到更好的定义。
化合物1跨物种与血浆蛋白高度蛋白结合(95.6％至98.7％)。结合与浓度无关。
在体外研究中，人肝细胞的代谢稳定性最高；在人、猴、犬、大鼠和/或小鼠肝细胞中检测到22种代谢物。化合物2在所有物种中都是主要的去甲基活性代谢物，并且除人肝细胞中的次要代谢物M48外，所有人代谢物都在大鼠和/或犬(毒理学物种)中存在。
在大鼠、犬和猴的体内研究中，鉴定出35种代谢物。所有物种中主要的循环化合物是母体化合物；亲本也是大鼠粪便中的主要组分。化合物2，作为去甲基代谢物是血浆和大鼠粪便中所有物种中的主要活性代谢物。M34作为谷胱甘肽结合和水解以及乙酰化代谢物，是大鼠尿液中的主要代谢物。化合物1在排泄期间被广泛代谢，其中大鼠尿液中有31种代谢物，并且大鼠粪便中有32种代谢物。
化合物1在所评估的所有物种中具有许多代谢物和一种主要活性代谢物。与作为CYP3A4-T的抑制剂的药物或通过CYP3A4/3A5代谢的药物存在潜在的代谢相互作用。一旦有人类PK数据并鉴定了2期的靶向有效血浆浓度，这些代谢风险的重要性将得到更好的定义。
毒理学
化合物1已在大鼠和犬的重复剂量毒性研究中测试，持续至多4周(表12)。在GLP下进行的研究的设计完全符合相关的国际指南。验证了剂量调配物分析方法。GLP毒理学程序用化合物1批号A05993-056LB完成。1期临床研究将用来自批号NB化合物1-A-3的药物物质进行。在加速条件下储存6个月的临床批次中的所有杂质在毒理学程序中是合格的。药品为胶囊中的纯化合物1。
表12：化合物1毒理学程序
大鼠口服剂量范围研究
雄性和雌性斯普拉格-道利大鼠通过强饲口服给予化合物1一次(30、100、500、1000mg/kg/天)或每天一次直至14天(30、100、300mg/kg/天)。单次口服剂量的化合物1在30至1000mg/kg的剂量下耐受性良好。当给药持续14天时，在300mg/kg下观察到发病率和死亡率与食物消耗和体重显著下降相关(6.9％-F和20.8％-M)；此组在第9天终止。在胸腺和脾中观察到淋巴耗竭，在此高剂量下肾小管空泡也是如此。在第14天在100mg/kg/天下观察到类似但不那么严重的胸腺病变。在30mg/kg/天下未观察到显著毒性。在这项研究中，STD10估计为100mg/kg/天。
大鼠口服4周研究
向雄性和雌性斯普拉格-道利大鼠通过强饲口服给予化合物1(0、10、30和100mg/kg/天)，每天一次，直至28天。发病率与明显的体重减轻相关，需要在第12/13天终止高剂量组的给药。此时，对高剂量组中的5只/性别进行尸检，并且在研究的剩余时间里，5只/性别开始恢复。
在第28天，化合物1和化合物2的暴露随着剂量从10增加至30mg/kg而增加；作为曲线下面积(AUC)的暴露通常与剂量成比例。没有明显的性别差异或累积(表13)。
表13：大鼠第28天平均化合物1和化合物2毒代动力学(TK)的总结参数
中期尸检(100mg/kg)的主要组织学发现包含全身性淋巴耗竭、肺水肿/炎症和睾丸细精管变性。在这项研究中，除睾丸变性外，所有发现都是可逆的(约14天)；可逆期不足以评估睾丸变化的可逆性。在第29天，在30和100mg/kg下仅观察到睾丸变性。在10mg/kg下未观察到毒性。STD10是30mg/kg。
犬口服剂量范围研究
在犬剂量范围研究中，化合物1通过强饲口服给予雄性和雌性比格犬一次(30、100、600、1000mg/kg)或每天一次，持续14天(30、100、300mg/kg/天)。单次口服剂量的化合物1在30至1000mg/kg的剂量下耐受性良好。当给药持续14天时，在300mg/kg/天下，观察到发病率和死亡率与食物消耗的轻度减少和体重的显著下降相关(7.6％-M和10.6％-F)；在这些犬中观察到胸腺淋巴耗竭、肝细胞色素、肾小管空泡化和胃底胃侵蚀。在第15天在100mg/kg/天下观察到类似但不那么严重的胸腺和肝变化。
在100mg/kg/天下未观察到显著毒性。在这项研究中，HNSTD估计为100mg/kg/天。
犬口服4周研究
向雄性和雌性比格犬(4只/性别)通过强饲口服给予化合物1(0、10、30和100mg/kg/天)，每天一次，直至28天。在高剂量组中，发现一只雄性在第13天死亡；异常临床观察和此剂量下的体重下降需要在第18-M天和第17-F天暂停高剂量组的给药。高剂量幸存者在第18/17天至第29天开始恢复期。此高剂量雄性的死因归因于心肌变性。在研究的任何其它犬中都没有观察到这种病变。在研究中期在高剂量组中观察到碱性磷酸酶、球蛋白、胆固醇、甘油三酯和纤维蛋白原增加，并且网织红细胞计数减少，这在研究结束在11/12天恢复后返回到基线。在这项短期研究中，所有剂量下的睾丸变化(10和30mg/kg下的生精上皮空泡化并且在100mg/kg下变性/萎缩)都是不可逆的；可逆期不足以评估睾丸变化的可逆性。
在第1天和第28天，通过Cmax和AUC0-24评估的化合物1和化合物2的暴露通常随着剂量的增加而增加。在第1天和第28天，通常以与剂量成比例的方式增加或以大于剂量成比例的方式增加。没有观察到性别差异。没有观察到化合物1或化合物2的显著累积。表14示出了这些数据。
表14：犬第28天平均化合物1和化合物2TK参数的总结
雌性在10或30mg/kg/天下未观察到显著毒性。HNSTD估计为30mg/kg/天。
综合非临床功效和安全性概述
GBM是成人最常见的原发性脑肿瘤(Ostrom 2018)。许多靶向疗法在其它癌症类型中取得了广泛成功，但对GBM功效有限；患有GBM的患者的预后仍然令人沮丧(Kurz 2018；Miller和Wen 2016)。超过50％的GBM具有异常EGFR遗传变体。这些EGFR变体中的大多数通过突变出现在细胞外结构域中(Vivanco 2012)。其中，最常见的EGFR变体(v)，即EGFRvIII(外显子2-7缺失)具有框架内细胞外结构域截短(Furnari 2015)。已经表明，EGFR突变的GBM细胞可能对EGFR信号传导成(An 2018；Huang 2009)。因此，EGFR是GBM中有吸引力的治疗靶标。
化合物1是第三代酪氨酸激酶抑制剂，正在开发GBM(Wang 2020)化合物1与其靶标共价结合。化合物1已经证明了对几种EGFR单一突变体和双突变体的突变体激酶结合(Kd<1nM)选择性；针对野生型EGFR几乎没有活性。化合物2(主要活性代谢物)显示出类似的选择性活性。在口服GBM小鼠研究中，化合物1在37.5和75mg/kg下表现出安全和活性；IC50在靶向磷酸化EGFR的体外研究中降低，并且细胞活力在0.17至3.28μM的范围内。
对血压或心间期，包含QT和QTc没有不良影响。一只高剂量遥测犬在给药后12小时至24小时内出现可逆性交界性心律失常，与母体或代谢物的Tmax无关，这表明其不是由化合物1或化合物2引起的。对CNS参数或呼吸速率没有不良影响。受体结合研究表明，化合物1几乎没有脱靶风险。考虑到一只高剂量遥测犬出现无法解释的心律失常，推荐在1期给药后8小时进行常规ECG监测。
化合物1是在大鼠中具有大体积分布的中等高清除率的化合物。在大鼠中，化合物1的口服Tmax通常为约5小时，并且化合物2的口服Tmax通常为7小时；T1/2针对化合物1通常为约5小时，并且针对化合物2通常为约9小时。不存在性别差异，并且大鼠的生物利用度为平均50％，并且与剂量无关。暴露通常是剂量成比例的。化合物1是跨物种与血浆蛋白高度结合的蛋白；结合与浓度无关。
化合物1在所评估的所有物种中具有许多代谢物和鉴定的一种主要活性代谢物(化合物2)。与作为CYP3A4-T的抑制剂的药物或通过CYP3A4/3A5代谢的药物存在潜在的代谢相互作用。一旦有人类PK数据并在人类中鉴定了靶向有效血浆浓度，这些代谢风险的重要性将得到更好的定义。
在一项4周的大鼠毒性研究中，100mg/kg下有死亡率；中期尸检(100mg/kg)的主要组织学发现包含全身性淋巴耗竭、肺水肿/炎症和睾丸细精管变性。在这项研究中，除睾丸变性外，所有发现都是可逆的；可逆期不足以评估睾丸变化的可逆性。在第29天，在30和100mg/kg下观察到睾丸变性。在10mg/kg下未观察到毒性。STD10是30mg/kg。
在4周的犬毒性研究中，在第12天，在100mg/kg下有一例死亡归因于心肌变性；这是唯一的具有心肌病变的高剂量犬。在所有剂量下观察到睾丸变化(10和30mg/kg下的生精上皮空泡化并且在100mg/kg下变性/萎缩)都是不可逆的；可逆期不足以评估睾丸变化的可逆性。雌性在10或30mg/kg/天下未观察到显著毒性。HNSTD估计为30mg/kg/天。
在犬和大鼠中发现睾丸病变；在犬中没有建立NOEL，并且在大鼠中为10mg/kg；这些研究没有足够的持续时间来研究可逆性。在100mg/kg下观察到一只犬出现可逆性交界性心律失常，并且另一只犬发生心肌病变导致死亡；心肌风险的NOEL在犬中为30mg/kg，在大鼠中为100mg/kg。这些潜在风险应在知情同意书中确定，并在开始剂量计算时予以考虑。1期临床计划推荐在给药后8小时内进行ECG监测，以覆盖母体和代谢物以及心脏肌钙蛋白评估。
1期起始剂量推荐
基于药理学效力和非临床安全性药理学、代谢和药代动力学研究以及剂量应答，预期化合物1在肿瘤患者的治疗剂量下是相对安全且有效的化合物。基于肿瘤学剂量选择指南，犬的毒理学计划(HNSTD＝30mg/kg)支持至多300mg/60kg的起始剂量。基于肿瘤学剂量选择指南，大鼠的毒理学数据(STD10＝30mg/kg)支持至多180mg/60kg的起始剂量。
在大鼠和犬两者中分别观察到30mg/kg和10mg/kg的睾丸病变。如所描述的，犬在100mg/kg下有心肌风险，但在30mg/kg下没有；心肌风险的NOEL为30mg/kg(人等效剂量[HED]＝15mg/kg)。基于这些数据，此口服化合物的起始剂量将是1.5mg/kg或90mg/60kg。
1期肿瘤患者的推荐起始剂量为100mg QD。
非临床亮点
●在口服37.5和75mg/kg QD下对GBM小鼠模型的药理学活性
●在口服30和50mg/kg OD下对NSCLC小鼠模型的药理学活性
·在给药后4小时，血浆浓度分别为800ng/mL(1.6μM)和1500ng/mL(3.1μM)时，观察到活性
●在包含人肝细胞的所有经评估的物种中鉴定出许多代谢物(人、猴、犬、大鼠和/或小鼠肝细胞中的22种)和一种主要活性代谢物(化合物2)
●在大鼠中具有大体积分布的中等高清除率
●化合物1和化合物2的口服Tmax通常为约5小时和7小时
●化合物1和化合物2的T1/2通常为约5小时和9小时
●跨物种与血浆蛋白高度结合；并且高度结合与浓度无关
●大鼠的绝对生物利用度为约50％
●在大鼠中通过连续静脉内输注和口服给药，在估计稳态下，化合物1的全脑暴露比血浆中的暴露高20倍；化合物2的脑暴露基本上等于血浆中的暴露
●与作为CYP3A4-T的抑制剂的药物或通过CYP3A4/3A5代谢的药物存在潜在的代谢
●瑞舒伐他汀通过人BCRP转运的弱抑制剂，其中表观IC50值为3.02μM(1471ng/mL)
●无P-gp抑制
●在Caco-2细胞中具有中等的渗透性，并且不可能是外排转运体的底物
●对犬的心率、血压或心间期，包含QT和QTc没有不良影响
·一只高剂量遥测犬在给药后12小时至24小时内出现可逆性交界性心律失常，与母体或代谢物的Tmax无关，这表明其不是由化合物1或化合物2引起的
●大鼠和犬的睾丸变性；研究没有足够的持续时间来评估可逆性
●一只高剂量犬在第12天(100mg/kg)出现心肌病变导致死亡
●心肌风险的NOEL在犬中为30mg/kg，并且在大鼠中为100mg/kg
●4周犬毒理学未观察到不良反应水平(NOAEL)-10mg/kg
●4周大鼠毒理学NOAEL-10mg/kg
●大鼠的STD10是30mg/kg
●犬的HNSTD是30mg/kg
剂量和施用
化合物1以单次每日剂量口服施用(尽管可以响应于新出现的安全性、耐受性或PK数据启动替代性频率或间歇时间表)。每天应在大致相同的时间空腹给药(即至少在进食前1小时或进食后2小时)。首次人体试验的初始日剂量将为100mg。
基于肿瘤学剂量选择指南，犬的毒理学计划(HNSTD＝30mg/kg)支持至多300mg/60kg的起始剂量。基于肿瘤学剂量选择指南，大鼠的毒理学数据(STD10＝30mg/kg)支持至多180mg/60kg的起始剂量。
在大鼠和犬两者中分别观察到30mg/kg和10mg/kg的睾丸病变。如所描述的，犬在100mg/kg下有心肌风险，但在30mg/kg下没有；心肌风险的NOEL为30mg/kg(HED＝15mg/kg)。基于这些数据，起始剂量将是1.5mg/kg或90mg/60kg。
1期肿瘤患者的推荐起始剂量为100mg QD。
实例14
跨血脑屏障(BBB)的药物递送是所有用于脑癌的EGFR靶向药剂都必须面对的主要障碍。尽管有证据表明EGFR信号传导是EGFR突变型GBM细胞的活力所必需的，但许多EGFR-TKI已被评估未成功治疗GBM(Westphal,M.等人,《CNS药物(CNS Drugs)》31,2017,723-735)。这些抑制剂中的许多未能穿过BBB，或者是药物外排泵的底物，并且经常具有相对较小的治疗窗口。
为了确定化合物1的脑渗透，在大鼠单次口服给药化合物11(30mg/kg)或吉非替尼(50mg/kg)后七小时，对化合物1和吉非替尼的脑暴露进行比较评估。结果显示，化合物11的脑/血浆(B/P)比为28.3，并且吉非替尼的B/P比为0.22(表3和4)。对化合物11和吉非替尼在大鼠持续静脉内输注至估计稳态后的脑暴露进行了更深入的比较评估。两种化合物在五小时内以3mg/kg的总剂量输注。结果显示，化合物11B/P比为20.3，并且吉非替尼为0.55，这与口服施用的数据一致。值得注意的是，在口服和静脉内施用两者的所有时间点，化合物11的血浆浓度都远低于吉非替尼的血浆浓度(表3和4)。这些数据证实，化合物11是治疗GBM的理想化合物，因为在这些初步研究中，其优先以高浓度存在于脑中，没有明显的不良反应。
化合物11是瑞舒伐他汀通过人乳腺癌抗性蛋白(BCRP)转运的弱抑制剂，其中表观IC50值为3.02μM。化合物11不抑制P-糖蛋白(P-gp)介导的地高辛转运(IC50＞30.0μM)。化合物11在Caco-2细胞中也显示出中等渗透性。基于这些数据，化合物11不太可能是外排转运体的底物，并且在治疗血浆浓度下，通过对这些转运体的影响，药物与药物发生显著相互作用的风险通常较低。
值得注意的是，化合物11在脑中的分布和累积水平是血浆水平的大约20倍。与其它受外排转运体影响的EGFR-TKI不同，化合物11不是P-gp或BCRP介导的药物转运功能的底物；相反，其是BCRP的适度抑制剂。此外，化合物11表现出相对高的清除率以维持相对低的血浆水平。
最近的一项研究表明，尽管EGFR对胚胎和出生后早期的脑发育很重要，但具有EGFR的脑特异性缺失的成年小鼠似乎是正常的(Robson,J.P.等人,《FEBS杂志(The FEBSJournal)》285,2018,3175-3196)，这表明CNS中的EGFR抑制将不会导致剂量限制性毒性。因此，化合物11的独特药理学特性，具体地其高脑/血浆比将潜在地提供“基于组织的”治疗窗口，以允许有效抑制肿瘤中的EGFR，同时系统性地相对保留受体。临床前数据表明，化合物11提供了足够宽的治疗窗口，以在颅内有效抑制EGFRvIII，而没有显著的颅外毒性。
实例15：N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基- 2-(甲基(2-(甲基氨基)乙基)氨基)苯基)丙烯酰胺的盐(化合物12的盐)的制备
步骤1：(2-((4-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-2-硝基苯基)(甲基)氨基)乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(化合物b)的合成
在20℃下向N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)-4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-胺(化合物a；17.2g，1.0当量)于ACN(260mL)中的溶液中添加(2-(甲基氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯甲酯(12.7g，1.5当量)和DIPEA(11.7g，2.0当量)，并将所得混合物在80℃下搅拌24小时。将反应混合物冷却至38℃，添加H2O(200mL)并且搅拌另外30分钟。将所得混合物通过硅藻土过滤，并用H2O并且然后用ACN冲洗滤饼。将滤饼在40-45℃(罐温)下在真空下干燥，以得到呈红色固体的粗化合物b(通过HPLC测定的，23.0g，93％产率，97.9％纯度)。Rt＝5.329分钟。MS m/z:225.2[(M-Boc)/2+l]。
步骤2和3：(2-((4-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-丙烯酰胺基-5-甲氧基苯基)(甲基)氨基)乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(化合物d)的合成
向化合物b(16g，1.0当量)于THF(160mL)中的溶液中添加Pd/C(0.8g，5wt％)，并且将所得混合物抽真空至≤-80KPa，并且然后用氢气充气至atm三次。氢化反应在25±5℃下保持42小时。将反应混合物通过硅藻土过滤，并且将滤饼用THF冲洗。将滤液冷却至0-5℃，并且添加3-氯丙酰基氯，同时将反应混合物保持在0-5℃下。在15分钟之后，沉淀出黄色固体。LC-MA分析显示中间体(2-((4-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-氨基-5-甲氧基苯基)(甲基)氨基)乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(化合物c)在1小时内完全消失。在20-25℃下向反应混合物中添加NaOH(4.7g，4.0当量)于水(128mL)中的溶液，并搅拌21小时。将有机相分离，并在低于40℃的温度下在减压下浓缩。将浓缩的有机相添加乙酸乙酯并用水洗涤。将有机层收集并在低于40℃的温度下在减压下浓缩。通过色谱法(硅胶200-300目，PE:EA＝3:1)纯化，以得到呈浅黄色固体的化合物d(通过HPLC测定的，10g，60％产率，94.6％纯度)。Rt＝4.221分钟。MS m/z:573.2[M+l]。
步骤4：N-(5-((4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基-2-(甲基(2-(甲基氨基)乙基)氨基)苯基)丙烯酰胺双(2,2,2-三氟乙酸盐)(化合物2·2TFA)的合成
在20-25℃下向化合物d(3.0g，1.0当量)于DCM(45mL)中的溶液中添加TFA(11.1g，18.6当量)。在18小时之后，将反应混合物在40℃下在真空下浓缩至干燥。将浓缩的残留物溶解于EA中，并且然后添加饱和碳酸氢钠溶液，直至PH为7-8。将所得混合物通过硅藻土过滤，并且将滤饼用H2O，然后是ACN冲洗。将滤饼在40-45℃(罐温)下在真空下干燥，以得到呈红色固体的化合物2·2TFA(通过HPLC测定的，2.0g，80.6％产率，97.8％纯度)。Rt＝13.299分钟。MS m/z:473.2[M+l]。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.31(s,1H),8.92(s,1H),8.73(d,J＝4.0Hz,1H),8.63–8.53(m,3H),8.52–8.40(m,2H),8.20(s,1H),8.13(dd,J＝7.8,1.6Hz,1H),7.33(dd,J＝7.8,4.8Hz,1H),7.00(s,1H),6.83–6.67(m,2H),6.36(dd,J＝16.9,2.1Hz,1H),5.81(dd,J＝10.1,2.1Hz,1H),3.90(s,3H),3.22(t,J＝5.7Hz,2H),3.14(d,J＝5.7Hz,2H),2.64(s,3H),2.60(s,3H)。
实例16：AZD9291和化合物1的细胞活力测定
本文所描述的已知EGFR抑制剂AZD9291和化合物1的细胞活力测定是按照通用生物测定A，细胞活力测定中所列出的程序进行的。此处使用了CellTier-Glo(普洛麦格公司)测定试剂盒(https://www.promega.com/resources/protocols/technical-bulletins/0/celltiter-glo-luminescentcell-viability-assay-protocol/)。NCI-H1975细胞(EGFRL858R/T790M突变)和PC-9细胞(EGFR外显子19缺失)用于细胞活力测定。
AZD9291从商业来源获得。化合物2如实例15中所描述的进行合成。化合物1根据Gray等人的美国专利申请公开第2017/0362204A1号中公开的方法进行合成。
将NCI-H1975细胞(EGFR L858R/T790M突变)与AZD9291和化合物1中的每一个温育72小时。AZD9291表现出12.93nM的IC50。化合物1表现出34.39nM的IC50。
将PC-9细胞(EGFR外显子19缺失)与AZD9291、化合物1中的每一个一起温育。AZD9291表现出18.12nM的IC50。化合物1表现出62.78nM的IC50。
在细胞活力测定中，化合物1在抑制具有L858R/T790M突变的EGFR和具有外显子19缺失的两个EGFR方面显示出优异的效力。
实例17：AZD9291和化合物1的体外EGFR/ERK磷酸化测定
EGFR/ERK磷酸化测定按照已知程序进行。NCI-H1975细胞(EGFR L858R/T790M突变)和PC-9细胞(EGFR外显子19缺失)用于磷酸化测定。
将NCI-H1975细胞(EGFR L858R/T790M突变)用AZD9291和化合物1中的每一个处理6小时。通过蛋白质印迹分析确定EGFR信号传导通路。
将PC-9细胞(EGFR外显子19缺失)用AZD9291和化合物1中的每一个处理6小时。通过蛋白质印迹分析确定EGFR信号传导通路。
实例18：EGFR抑制剂化合物1的毒代动力学分析
将三十二只比格犬(常规犬、幼犬)分为四组。每组由四名雄性和四名雌性组成。第1组比格犬施用媒剂，并且第2-4组比格犬分别以10mg/kg、30mg/kg和100mg/kg口服强饲化合物1，每天一次，连续28天(表15)。在第1天测定化合物1的8小时的T1/2和4小时的Tmax。获得第2-4组的化合物1在第1天的Cmax(ng/mL)和AUClast(小时*纳克/毫升)(表15)。
表15
在多项体外和体内药理学研究中评估了化合物1和其活性/主要代谢物化合物2，以评估肺和脑模型中的靶标应答。还探索了激酶选择性。
在大量受体和离子通道中评估化合物1和/或化合物2(活性/主要代谢物)的脱靶活性，包含人醚-à-go-go相关基因(hERG)测定。化合物1在GLP安全性药理学研究中进行了全面评估，包含心血管、呼吸和中枢神经系统功能的研究。
用化合物1进行药代动力学/毒代动力学(小鼠/大鼠/犬)、比较蛋白质结合、P450抑制和诱导、转运体概况分析、比较体外代谢和体内代谢(大鼠)研究。通过口服和静脉内施用评估CNS暴露。大鼠和犬是非临床开发项目的代谢和药理学相关物种。
在大鼠和犬的剂量范围和4周口服GLP研究中评估了化合物1的毒性和代谢作用，即其主要代谢物化合物2。所有GLP研究均使用甲苯磺酸盐进行。
药理学和活性概况分析
如图11所示，进行了比较活性概况分析研究，这表明化合物1优于奥希替尼或相较于奥希替尼具有竞争力。(还参见Ni,J.等人,2021“用新型脑渗透剂小分子EGFR-TKI靶向胶质母细胞瘤中的EGFR(Targeting EGFR in glioblastoma with a novel brain-penetrant small molecule EGFR-TKI)”bioRxiv预印本doi:https://doi.org/10.1101/2021.01.09.426030。)
在多项体外和体内研究中评估了化合物1和其活性代谢物化合物2，以评估在靶和脱靶药理学。
在468种人类激酶和疾病相关突变体变体的小组中评估化合物1和化合物2(主要代谢物)。化合物1和化合物2以<对照的1％与少数非突变激酶结合。数据表明，化合物1和其主要代谢物没有显示出与野生型蛋白显著的非选择性激酶结合。靶向非突变激酶包含化合物1：MAST1、PAK4、PDGFRB和ULK3以及化合物2：ERBB2、JAK3(JH1结构域催化的)、MKNK2、MTOR、OSR1和TNK1。虽然化合物1与化合物2之间存在一些变异性，但很明显，这两种化合物在与大量突变激酶结合方面都非常有效。证实ALK、EGFR和FLT3突变体的结合常数(Kd)<100nM。与野生型EGFR的结合常数为4.9nM。化合物1的EGFR(E746A-740del、L858R-T790M和T790M)双突变体和单一突变体的结合常数<1nM是明显的；化合物2显示出与EGFR(L858R-T790M；T790M)双突变体和单一突变体的活性类似的活性。
安全性药理学研究表明没有心肺或CNS风险。
对大鼠功能观察组合中的CNS没有不良影响，并且对犬的呼吸速率也没有不良影响。受体结合研究表明，化合物1几乎没有脱靶风险。
代谢-药代动力学
开发并验证了灵敏且可再现的LC-MS/MS测定，以支持化合物1和其主要活性代谢物化合物2的代谢-药代动力学-毒代动力学研究。
化合物1是在大鼠中具有大体积分布的中等高清除率的化合物。在大鼠中，化合物1的口服Tmax通常为约5小时，并且化合物2的口服Tmax通常为约7小时；T1/2针对化合物1通常为约5小时，并且针对化合物2通常为约9小时。不存在性别差异，并且大鼠的生物利用度为平均50％，并且与剂量无关。暴露通常是剂量成比例的。
发现通过连续静脉内输注和口服给药，在估计稳态下，化合物1的全脑暴露比血浆中的暴露高约20倍；化合物2的脑暴露基本上等于血浆中的暴露。在这些研究中没有发现不良反应。
化合物1主要由CYP3A4/3A5代谢；在IC50为4.89μM(2381ng/mL)的情况下，观察到对CYP3A4-T的弱抑制，但对CYP3A4-M没有抑制。没有基于酶活性的CYP诱导；基于mRNA，在1μM时有CYP3A4诱导，但在较低浓度时没有。在其它CYP中未观察到代谢、抑制和诱导。与作为CYP3A4-T抑制剂的药物或通过CYP3A4/3A5代谢的药物存在潜在的DDI相互作用；一旦有了人PK数据，这些DDI风险将得到更好的定义。
化合物1跨物种与血浆蛋白高度蛋白结合(95.6％至98.7％)。结合与浓度无关。
在体外研究中，人肝细胞的代谢稳定性最高，并且在人、猴、犬、大鼠和/或小鼠肝细胞中检测到22种代谢物。化合物2在所有物种中并且除次要代谢物外都是主要的去甲基化活性代谢物。
在大鼠、犬和猴的体内研究中，鉴定出35种代谢物。所有物种中主要的循环化合物是母体化合物；亲本也是大鼠粪便中的主要组分。化合物2，作为去甲基代谢物是血浆和大鼠粪便中所有物种中的主要活性代谢物。化合物1在排泄期间被广泛代谢，其中大鼠尿液中有31种代谢物，并且大鼠粪便中有32种代谢物。
脑和血浆暴露研究
对化合物1、化合物2和吉非替尼的脑和血浆暴露进行比较评估。
表16：化合物1和吉非替尼在施用于斯普拉格·道利大鼠后的脑暴露的比较评估 (单一口服PO)
表17：化合物11、化合物12和吉非替尼在施用于斯普拉格·道利大鼠后的脑暴露 的比较评估(途径(IV)，3mg/kg)
表18：化合物1在斯普拉格·道利大鼠的血浆、脑与肺之间的比较(n＝4，po，qd，持 续7天，在最后给药之后24小时)
通过引用的方式并入
本文引用的所有美国专利以及美国和PCT公布的专利申请特此通过引用并入。
等效形式
前述书面说明书被认为足以使本领域的技术人员能够实践本发明。本发明的范围不受所提供的实例的限制，因为这些实施例旨在作为本发明的一个方面的单一说明，并且其它功能等效的实施例在本发明的范围内。除了本文所示出和所描述的那些之外，本发明的各种修改对于本领域的技术人员来说将从前面的描述中变得显而易见，并且落入所附权利要求的范围内。本发明的优点和目的不一定涵盖在本发明的每个实施例中。

Claims (92)

1.一种治疗多形性胶质母细胞瘤、星形细胞瘤、先天性脑肿瘤、室管膜瘤、生殖细胞瘤、胶质瘤、神经胶质过多、胶质肉瘤、髓母细胞瘤、脑膜瘤、脑膜肉瘤、少突胶质细胞瘤、松果体瘤、视网膜母细胞瘤、神经鞘瘤或脊髓神经纤维瘤的方法，所述方法包括向有需要的人类受试者施用治疗有效量的式I化合物：
或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体或互变异构体，其中所述治疗有效量为至少100mg/天，并且
其中：
Z1、Z2和Z3各自独立地为N或CR8，其中Z1、Z2和Z3中的至少两者为N；
R8为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R1为H、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、NH2、NH(C1-C4)烷基、N((C1-C4)烷基)2或卤素；
R2为H或(C1-C6)烷基；
R3为(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基或卤素；
R4为NR9R10或5元至7元杂环，所述5元至7元杂环包括1-3个选自N、O和S的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
R9为H或(C1-C4)烷基；
R10为(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和s的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代；
每个R11独立地为(C1-C4)烷基、(C1-C4)卤代烷基、(C1-C4)烷氧基或卤素；
R5为NR12C(O)R13或C(O)NR12R13；
R12为H或(C1-C6)烷基；
R13为(C1-C6)烷基或(C2-C6)烯基，其中所述烷基或所述烯基任选地被一个或多个独立地选自卤素、OH、CN和NH2的取代基取代；
R6和R7与其所连接的氮原子一起形成所述式的取代基；
其中
X3为N；
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CH或CR1s；并且
每个R15独立地为(C1-C6)烷基、(C1-C6)卤代烷基、(C1-C6)烷氧基、OH、NH2、NH(C1-C6)烷基、N((C1-C6)烷基)2或卤素。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述受试者在施用之后1个月内其体重减轻不超过10％。
3.根据权利要求1所述的方法，其中每天向所述受试者施用所述治疗有效量的所述化合物，持续至少1个月；并且受试者在每天施用的1个月内其体重减轻不超过10％。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述治疗有效量为100mg/天至1000mg/天。
5.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述治疗有效量为100mg/天至800mg/天。
6.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述治疗有效量为100mg/天至500mg/天。
7.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述治疗有效量为200mg/天至500mg/天。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其进一步包括在施用之后1个月内检查所述受试者的皮肤，其中所述受试者在施用之后1个月内没有表现出皮肤病变。
9.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其进一步包括在施用之后2个月内检查所述受试者的皮肤，其中所述受试者在施用之后2个月内没有表现出皮肤病变。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述方法是治疗多形性胶质母细胞瘤的方法。
11.根据权利要求10所述的方法，其中所述多形性胶质母细胞瘤的特征在于EGFR和/或突变的EGFR的水平升高。
12.根据权利要求10或权利要求11所述的方法，其中所述式I化合物不是外排转运体的底物。
13.根据权利要求11所述的方法，其中所述式I化合物的特征在于与所述受试者体内的EGFR和/或突变的EGFR的结合亲和力不超过10nM，如不超过9nM、不超过8nM、不超过7nM、不超过6nM、不超过5nM、不超过4nM、不超过3nM、不超过2nM、不超过1nM、不超过0.9nM、不超过0.8nM、不超过0.7nM、不超过0.6nM、不超过0.5nM、不超过0.4nM、不超过0.3nM、不超过0.2nM、不超过0.15nM、不超过0.12nM、不超过0.11nM或不超过0.10nM。
14.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述方法是治疗星形细胞瘤的方法。
15.根据权利要求1至14中任一项所述的方法，其中Z1和Z2各自为N，并且Z3为CR8。
16.根据权利要求1至15中任一项所述的方法，其中R1为H或NH2。
17.根据权利要求1至16中任一项所述的方法，其中R2为H。
18.根据权利要求1至17中任一项所述的方法，其中R3为(C1-C4)烷氧基。
19.根据权利要求1至18中任一项所述的方法，其中R4为NR9R10。
20.根据权利要求1至19中任一项所述的方法，其中R5为NR12C(O)R13。
21.根据权利要求1至20中任一项所述的方法，其中R15选自(C1-C6)烷基和(C1-C6)卤代烷基。
22.根据权利要求21所述的方法，其中R15选自甲基和CF3。
23.根据权利要求1至22中任一项所述的方法，其中R8为H或卤素。
24.根据权利要求1至23中任一项所述的方法，其中R9为(C1-C4)烷基。
25.根据权利要求1至24中任一项所述的方法，其中R10为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2。
26.根据权利要求1至25中任一项所述的方法，其中R4为NR9R10，并且R9和R10与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
27.根据权利要求1至26中任一项所述的方法，其中R11为(C1-C4)烷基，R12为H，并且R13为(C2-C6)烯基。
28.根据权利要求1至26中任一项所述的方法，其中R11为(C1-C4)烷基，R12为(C1-C6)烷基，并且R13为(C2-C6)烯基。
29.根据权利要求1至14中任一项所述的方法，其中所述式I化合物为式Ia化合物：
或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体或互变异构体，其中：
X1、X2、X4、X5和X6各自独立地为CR15；
R91为(C1-C4)烷基；
R101为(C1-C4)烷基-NH(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷基-N((C1-C4)烷基)2；
或者R91和R101与其所连接的氮原子一起形成5元至7元杂环，所述5元至7元杂环任选地包括1个或2个选自N、O和S的另外的杂原子并且任选地被一个或多个R11取代。
30.根据权利要求1至14中任一项所述的方法，其中所述化合物选自由以下组成的组：
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺；
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-((4-(3-(三氟甲基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺；
N-(5-((4-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺；以及
N-(2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基-5-((4-(3-(甲基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)丙烯酰胺，
或其药学上可接受的盐。
31.根据权利要求1至14中任一项所述的方法，其中所述化合物为N-(5-((4-(1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺或其药学上可接受的盐。
32.根据权利要求1至31中任一项所述的方法，其中所述化合物每天施用一次。
33.根据权利要求1至31中任一项所述的方法，其中所述化合物每天施用两次。
34.根据权利要求1至31中任一项所述的方法，其中所述化合物每天施用三次。
35.根据权利要求1至34中任一项所述的方法，其中所述化合物是全身施用的。
36.根据权利要求35所述的方法，其中所述化合物是口服施用的。
37.根据权利要求35所述的方法，其中所述化合物是静脉内施用的。
38.一种用于治疗或减轻脑肿瘤或相关疾病或病状的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的具有化合物1的式的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
39.一种用于抑制或降低患有脑肿瘤的受试者的表皮生长因子受体(EGFR)的活性的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的具有化合物1的式的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
40.一种用于治疗或减轻由表皮生长因子受体(EGFR)介导的脑疾病或脑病状的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的具有化合物1的式的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
41.根据权利要求38至40中任一项所述的方法，其中所述脑肿瘤包括原发性肿瘤。
42.根据权利要求38至40中任一项所述的方法，其中所述脑肿瘤包括转移性肿瘤。
43.根据权利要求41所述的方法，其中所述脑肿瘤为胶质母细胞瘤。
44.根据权利要求38至43中任一项所述的方法，其中所述治疗有效量在每天约0.1mg/kg体重至约20mg/kg体重的范围内。
45.根据权利要求44所述的方法，其中所述治疗有效量在每天约0.5mg/kg体重至约5mg/kg体重的范围内。
46.一种用于治疗脑肿瘤或相关疾病或病状的药物组合物，所述药物组合物包括具有化合物1的式的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
47.根据权利要求46所述的药物组合物，其中所述脑肿瘤包括原发性肿瘤。
48.根据权利要求46所述的药物组合物，其中所述脑肿瘤包括转移性肿瘤。
49.根据权利要求47所述的药物组合物，其中所述脑肿瘤为胶质母细胞瘤。
50.一种化合物，其具有化合物2的结构式：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
51.一种药物组合物，其包括具有化合物2的结构式的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物以及药学上可接受的赋形剂、载剂或稀释剂。
52.根据权利要求51所述的药物组合物，其适于口服施用。
53.根据权利要求51所述的药物组合物，其适于静脉内施用。
54.根据权利要求51至53中任一项所述的药物组合物，其适于治疗选自以下的疾病或病状：肺癌、结肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌、胰腺癌(pancreas cancer)、脑癌、肾癌、卵巢癌、胃癌(stomach cancer)、皮肤癌、骨癌、胃癌(gastric cancer)、乳腺癌、胰腺癌(pancreatic cancer)、胶质瘤、胶质母细胞瘤、肝细胞癌、乳头状肾癌、头颈部鳞状细胞癌、白血病、淋巴瘤和骨髓瘤。
55.一种单位剂型，其包括根据权利要求51至54中任一项所述的药物组合物。
56.一种用于治疗或减轻疾病或病状的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的具有化合物2的式的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
57.一种用于抑制或降低患有疾病或其相关病状的受试者的表皮生长因子受体(EGFR)的活性的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的具有化合物2的式的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
58.一种用于治疗或减轻由表皮生长因子受体(EGFR)介导的疾病或病状的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的具有化合物2的式的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
59.根据权利要求56至58中任一项所述的方法，其中所述疾病或所述病状为癌症。
60.根据权利要求56至59中任一项所述的方法，其中所述癌症选自肺癌、结肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌、胰腺癌(pancreas cancer)、脑癌、肾癌、卵巢癌、胃癌(stomachcancer)、皮肤癌、骨癌、胃癌(gastric cancer)、乳腺癌、胰腺癌(pancreatic cancer)、胶质瘤、胶质母细胞瘤、肝细胞癌、乳头状肾癌、头颈部鳞状细胞癌、白血病、淋巴瘤和骨髓瘤。
61.根据权利要求60所述的方法，其中所述癌症包括原发性肿瘤。
62.根据权利要求60所述的方法，其中所述癌症包括转移性肿瘤。
63.根据权利要求60所述的方法，其中所述癌症为胶质母细胞瘤。
64.根据权利要求60所述的方法，其中所述癌症为肺癌。
65.根据权利要求64所述的方法，其中所述癌症为非小细胞肺癌（NSCLC)。
66.根据权利要求64所述的方法，其中所述癌症为小细胞肺癌(SCLC)。
67.根据权利要求56至66中任一项所述的方法，其中所述受试者携带EGFR突变。
68.根据权利要求67所述的方法，其中所述受试者携带T790M EGFR突变。
69.根据权利要求58至68中任一项所述的方法，其中所述治疗有效量在每天约0.1mg/kg体重至约20mg/kg体重的范围内。
70.根据权利要求69所述的方法，其中所述治疗有效量在每天约0.5mg/kg体重至约5mg/kg体重的范围内。
71.一种用于治疗或减轻脑肿瘤或相关疾病或病状的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的具有化合物2的式的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
72.一种用于抑制或降低患有脑肿瘤的受试者的表皮生长因子受体(EGFR)的活性的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的具有化合物2的式的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
73.一种用于治疗或减轻由表皮生长因子受体(EGFR)介导的脑疾病或脑病状的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的具有化合物2的式的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
74.根据权利要求73所述的方法，其中所述脑肿瘤包括原发性肿瘤。
75.根据权利要求73所述的方法，其中所述脑肿瘤包括转移性肿瘤。
76.根据权利要求71至73中任一项所述的方法，其中所述脑肿瘤为胶质母细胞瘤。
77.一种化合物或其药物组合物的用途，其用于治疗或减轻脑肿瘤或相关疾病或病状，其中所述化合物具有化合物1的式：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
78.一种化合物或其药物组合物的用途，其用于抑制或降低患有脑肿瘤的受试者的表皮生长因子受体(EGFR)的活性，其中所述化合物具有化合物1的式：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
79.一种化合物或其药物组合物的用途，其用于治疗或减轻由表皮生长因子受体(EGFR)介导的脑疾病或脑病状，所述用途包括向有需要的受试者施用治疗有效量的具有化合物1的式的化合物：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
80.根据权利要求77至79中任一项所述的用途，其中所述脑肿瘤包括原发性肿瘤。
81.根据权利要求77至79中任一项所述的用途，其中所述脑肿瘤包括转移性肿瘤。
82.根据权利要求77至79中任一项所述的用途，其中所述脑肿瘤为胶质母细胞瘤。
83.一种化合物或其药物组合物的用途，其用于治疗或减轻疾病或病状，其中所述化合物具有化合物2的式：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
84.一种化合物或其药物组合物的用途，其用于抑制或降低患有疾病或其相关病状的受试者的表皮生长因子受体(EGFR)的活性，其中所述化合物具有化合物2的式：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
85.一种化合物或其药物组合物的用途，其用于治疗或减轻由表皮生长因子受体(EGFR)介导的疾病或病状，其中所述化合物具有化合物2的式：
或其药学上可接受的形式或同位素衍生物。
86.根据权利要求83至85中任一项所述的用途，其中所述疾病或所述病状为癌症。
87.根据权利要求86所述的用途，其中所述癌症选自肺癌、结肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌、胰腺癌(pancreas cancer)、脑癌、肾癌、卵巢癌、胃癌(stomach cancer)、皮肤癌、骨癌、胃癌(gastric cancer)、乳腺癌、胰腺癌(pancreatic cancer)、胶质瘤、胶质母细胞瘤、肝细胞癌、乳头状肾癌、头颈部鳞状细胞癌、白血病、淋巴瘤和骨髓瘤。
88.根据权利要求87所述的用途，其中所述脑肿瘤包括原发性肿瘤。
89.根据权利要求87所述的用途，其中所述脑肿瘤包括转移性肿瘤。
90.根据权利要求87所述的用途，其中所述癌症为胶质母细胞瘤。
91.根据权利要求87所述的用途，其中所述癌症为肺癌。
92.根据权利要求91所述的用途，其中所述癌症为非小细胞肺癌(NSCLC)。
CN202280052361.3A 2021-06-22 2022-06-22 用于治疗脑肿瘤的EGFR抑制剂(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基-氨基-苯基-丙烯酰胺 Pending CN117979968A (zh)

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