CN117957050A - 用于使用直列式恒压罐“icpt”进行处理强化的集成解决方案 - Google Patents

用于使用直列式恒压罐“icpt”进行处理强化的集成解决方案 Download PDF

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Abstract

用于操作生物制剂或生物制药纯化实验方案的方法和过程，其中，不同的处理步骤需要显著不同的处理参数(例如，压力和流量)以进行连续处理，而无需使用稳压罐、保温罐或类似物。

Description

用于使用直列式恒压罐“ICPT”进行处理强化的集成解决方案
背景技术
对生物制剂和生物制药进行的处理需要多个处理步骤，其包括例如层析步骤和过滤步骤。通常，这些步骤在纯化处理中以分批模式进行。这是因为不同的步骤经常需要在(特别是在流量和压力方面)变化很大的条件下进行。例如，来自以相对恒定的流量操作的层析柱的洗脱液在被通过下一处理步骤进行处理之前，通常需要被暂时存储在罐中。如果下一步骤(例如许多过滤步骤)在恒压条件下操作，则情况尤其如此。
在所谓的“连续处理”中，通常使用稳压罐(surge tank)或保温罐(holdingtank)，因为不同处理步骤所需的不同条件不允许将处理步骤直接连接。在当前可用的系统中必须使用稳压罐和保温罐的必要性可能会降低生产实验方案的生产率和效率。
本领域的其他人已经试图解决这个问题。例如，Schick(过滤与分离(Filter andSeparation)，2003年12月第30-33页和EP 1 623 752 A2)公开了一种自动方法，该方法最初利用恒定流量进行过滤，直到达到用户定义的压力极限为止，然后自动切换到恒定的压力设置值。然而，这种方法不能确保维持恒定的流量或压力，也可能无法确保省略掉稳压罐或保温罐。此外，改变该系统所需的流量可能会对上游处理步骤产生负面影响。
此外，Bohonak等人(生物技术进展(Biotechnology Progress)，2020年10月05日，37:e3088；doi.org/10.1002/btpr.3088)公开了一种利用两个平行处理队列的系统，其中一个队列被使用，而另一队列处于检修中。换言之，处理流交替通过两个队列，从而允许整个处理的连续操作。然而，该系统并不能够使不同处理参数(例如处理队列内的流量和压力)无缝融合。
本领域所需的是允许在无需使用保温罐、稳压罐或储罐等来中断处理的情况下，连续操作恒定流量(恒流)处理步骤(例如层析步骤)与恒定压力(恒压)步骤(例如过滤)的方法、处理系统和装置。
发明内容
ICPT(直列式恒压罐)允许耦合无需在相同的操作条件下(例如，恒流和恒压)执行的两个纯化步骤。事实上，本发明提供了在不使用稳压罐和/或保温罐(或类似物)、不中断该处理或例如在多个队列之间不切换/重定向处理流的流动的情况下，耦合两个不同步骤的方法、处理系统和装置：一个步骤在恒流下操作，另一个步骤在恒压下操作。
在本发明的一个方面，加压储器(本文中也称为“储器”)将恒流步骤(例如，层析、切向流过滤(TFF)或单程切向流过滤(SPTFF))和恒压步骤(例如，病毒过滤、无菌过滤)联系起来。该罐被设计和操作成用以接收来自一个处理步骤的以恒定流量或基本恒定的流量流动的流(例如，来自层析柱的流出物)，并将该流以恒定压力或基本恒定的压力输送到下一处理步骤(例如，过滤)。在需要或期望的情况下，可以在一个生产工艺中使用多个储器。本发明的方法和处理系统的使用允许生物纯化生产工艺的连续操作，而无需增加稳压罐或保温罐的费用和占用面积，也无需使用平行过滤队列。
本发明的实施简化了生产工艺，缩短了生产时间，减少了占用面积，从而节省了成本和空间。除了简化生产工艺之外，本发明还提高了生产工艺的过滤步骤中的过滤能力(参见，例示部分)，这进一步提高了处理能力(process productivity)。虽然本发明并不局限于理论，但据信过滤能力的提高可能是跨膜极化的结果。换言之，例如，由于装填期间的浓度梯度(例如，可逆自聚集、弱相互作用、范德壁、亲和相互作用等)，导致抗体沉淀并形成类似网状物。该网状物可以通过保留其他堵塞化合物/分子/病毒等起到“防护性预过滤器”的作用。为了支持这一理论，在一次试验中，测量了该罐中的不同深度处的物质浓度。结果表明，该罐的底部中的浓度要高得多。
此外，在本发明的ICPT的情况下，来自例如(马萨诸塞州伯灵顿市的Milliporesigma)/>CP-FT柱的非均相洗脱液被通过“病毒过滤器”进行连续过滤。相比之下，在分批模式操作中，过滤给定量的几乎均相的溶液。在利用本发明的ICPT系统的情况下，在过滤处理开始时，洗脱液在集料(aggregate)中的浓度比在结束时的低。由于过滤比/>CP-FT后的洗脱花费更多的时间，因此以洗脱液将储器装填到一定的水平，然后同时进行过滤。因此，在加压罐中可能会产生集料浓度梯度，并且该梯度可能是过滤能力提高的原因。为了支持这一理论，执行了在预过滤储器中实施搅拌和未实施搅拌的实验；当溶液被搅拌，从而产生均相洗脱液时，与具有非均相洗脱液的“未搅拌”处理相比，显著降低了病毒过滤能力。
事实上，当储器充满例如层析柱的洗脱液时，随后的步骤在生产工艺的至少大部分(例如，超过75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％)上同时进行。例如，为了将处理流体输送到所有操作区域，在装填储器和操作下游步骤(例如，过滤步骤)的同时操作中存在初始延迟会是必要的。同样，在上游步骤已经完成之后，下游步骤可以持续一段时间。因此，与传统处理相比，本发明缩短了处理时间并提高了过滤能力。
在一方面，本发明设想到一种以与进料流流量无关的方式向过滤设备提供恒定压力的方法，该方法包括：提供i)储器，该储器包括一个或多个流体进料流入口和一个或多个流体进料流出口，以及ii)压力源，该压力源用于在操作时提供并维持储器中的压力，所述压力源包括由压力调节器控制的加压气源和位于所述压力调节器与所述储器之间并与所述压力调节器和所述储器流体连接的压力调节阀；其中，所述流体进料流以一定的流量经由所述一个或多个流体进料流入口进入所述储器；其中，所述储器由通过所述压力源供应的气体加压；当所述压力调节阀在所述储器中的压力超过第一预设压力的情况下打开以从所述供气管线排放掉过量压力或所述压力调节阀在所述储器中的压力处于或低于第二预设压力的情况下关闭以允许来自所述供气管线的气体进入所述储器以维持或提高所述储器中的压力时，在所述储器中维持恒定压力；其中，所述流体进料流经由所述一个或多个流体进料流出口以与它进入所述储器时大致相同的流量离开所述储器；其中，将所述流体进料流以恒定压力输送到位于一个或多个储器出口的下游的一个或多个过滤器。
在另一方面，本发明设想到第一预设压力低于第二预设压力。
在另一方面，本发明设想到气源是无菌的。
在另一方面，本发明设想到气源的气体是空气。
在另一方面，本发明设想到第一压力或第二压力为约4巴至高达约7巴。
在另一方面，本发明设想到该过滤器是病毒过滤器。
在另一方面，本发明设想到该过滤器是用于对流体进料流进行灭菌的过滤器。
在另一方面，本发明设想到该过滤器是用于浓缩该进料流的过滤器。
在另一方面，本发明设想到进入该储器的流体进料流是连续的。
在另一方面，本发明设想到一种用于过滤来自上游处理步骤的流体流的方法，该方法包括：提供i)来自上游处理步骤的待过滤的流体进料流，ii)在操作时被维持处于基本恒定的压力的储器，以及iii)位于所述储器的下游的过滤设备；所述储器具有i)用于使所述流体流进入所述储器的多个入口中的一个，ii)一个或多个出口，iii)加压气源和iv)压力调节阀，所述压力调节阀与所述加压气源和所述储器流体连接中并且位于所述加压气源与所述储器之间，并且其中，所述储器被以与进入所述储器中的流体进料流的流量无关的方式维持于恒定压力；其中，当所述压力调节阀在所述储器中的压力超过第一预设压力的情况下打开以从供气管线排放掉过量压力或所述压力调节阀在所述储器中的压力处于或低于第二预设压力的情况下关闭以允许来自所述供气管线的气体进入所述储器以维持或提高所述储器中的压力时，在所述储器中维持恒定压力；所述储器的出口与所述过滤器流体连通；并且，其中，来自上游处理步骤的所述流体进料流在被朝向所述过滤设备引导之前进入到被维持处于恒定压力的所述储器中。
在另一方面，本发明设想到第一预设压力低于第二预设压力。
在另一方面，本发明设想到气源是无菌的。
在另一方面，本发明设想到气源的气体是空气。
在另一方面，本发明设想到第一压力或第二压力为约4巴至高达约7巴。
在另一方面，本发明设想到过滤器是病毒过滤器。
在另一方面，本发明设想到过滤器是用于对流体进料流进行灭菌的过滤器。
在另一方面，本发明设想到过滤器是用于浓缩该进料流的过滤器。
在另一方面，本发明设想到进入储器的流体进料流是连续的。
附图说明
图1A和图1B示出了本发明的两个实施例的示意图。
图2示出了在mAb(mAb2；150kDa)的处理过程中，流到处于与ICPT解耦(方形/下面的一系列数据点)以及耦合(本发明的ICPT处理；菱形/上面的一系列数据点)模式下的Pro过滤器中的/>CP-FT通流(flow-through)的通量衰减(％)随质量通量(g/m2)变化的比较情况。
图3示出了在mAb(mAbμ；105kDa)的处理过程中，流到处于与ICPT解耦(方形/下面的一系列数据点)以及耦合(本发明的ICPT处理；菱形/上面的一系列数据点)模式下的Pro过滤器中的/>CP-FT通流的通量衰减(％)随质量通量(g/m2)变化的比较情况。
图4示出了流到Pro过滤器中的/>CP-FT通流的标准渗透率(％LMH/psi)随质量通量(g/m2)变化的比较情况。解耦模式＝方形/下方数据点；耦合模式(ICPT)＝菱形/上方数据点，而直接耦合模式＝圆形/中层数据点。“直接耦合”系统是指在两个步骤之间没有任何东西(例如，稳压罐)的系统：即，柱(column)出口被直接耦合到后续过滤器的入口。
图5示出了本发明的ICPT处理系统和方法的示意图。有关该图的详细描述，参见“例示”。
具体实施方式
定义
本文使用的术语“层析法”是指将所关注的分析物(例如，靶分子)与混合物中存在的其他分子分离开的任何类型的技术。通常，由于混合物的单个分子在运动相的影响下或在结合和洗脱处理中迁移通过固定培养基的速率的差异，导致所关注的分析物与其他分子分离开。
术语“层析树脂”或“层析培养基”在本文中是可互换使用的，并且指的是将所关注的分析物(例如，靶分子)与混合物中存在的其他分子分离开的任何种类的相(例如，固相)。通常，由于混合物的各个分子在运动相的影响下或在结合和洗脱处理中迁移通过固定的固相的速率的差异，导致所关注的分析物与其他分子分离开。各种类型的层析培养基的非限制性示例包括例如阳离子交换树脂、亲和树脂、阴离子交换树脂、阳离子交换膜、疏水相互作用树脂和离子交换整料。其他层析培养基在提交本申请时可被本领域技术人员所获知并被包括在本文中。
本文中使用的术语“捕获步骤”通常是指用于将靶分子与刺激响应性聚合物或层析树脂相结合的方法，其产生含有靶分子和聚合物或树脂的沉淀物(析出物)的固相。通常，随后使用洗脱步骤来回收该靶分子，该洗脱步骤将靶分子从固相中去除，从而导致将靶分子与一种或多种杂质分离开。在多种实施例中，该捕获步骤可被使用层析培养基(例如树脂、膜或整料)或聚合物(例如刺激响应性聚合物、聚电解质或结合有靶分子的聚合物)来进行。
本文中用于描述靶分子(例如，含有Fc区的蛋白质)和被附着到基质的配体(例如，被结合到固相基质或树脂的蛋白质A)之间的相互作用的术语“结合”是指靶分子通过与结合位点处的静电力、氢键、疏水力和/或范德华力相耦合的该结合位点处的例如蛋白质和配体结构的空间互补性的组合效应而与配体的通常可逆的结合。通常，空间互补性越大，结合位点处的其他力就越强，蛋白质对其相应配体的结合特异性就将越大。特异性结合的非限制性示例包括抗体-抗原结合、酶-底物结合、酶-辅助因子结合、金属离子螯合、DNA结合蛋白-DNA结合、调节蛋白-蛋白相互作用等。在理想情况下，在亲和层析法中，在自由溶液中以约10-4至10-8M的亲和力发生特异性结合。
术语“洗涤剂”是指离子和非离子表面活性剂，例如聚山梨醇酯(例如聚山梨醇酯20或80)；泊洛沙姆(例如泊洛沙姆188)；Triton；十二烷基硫酸钠(SDS)；月桂硫酸钠；辛基糖苷钠；月桂基磺基甜菜碱、肉豆蔻基磺基甜菜碱、亚油烯基磺基甜菜碱或硬脂酰基磺基甜菜碱；月桂基肌氨酸、肉豆蔻基肌氨酸、亚油烯基肌氨酸或硬脂酰基肌氨酸；亚油烯基甜菜碱、肉豆蔻基甜菜碱或乙酰基甜菜碱；月桂酰胺丙基甜菜碱、椰油酰胺丙基甜菜碱、亚麻酰胺丙基甜菜碱、肉豆蔻酰基丙基甜菜碱、棕榈酰基丙基甜菜碱或异硬脂酰胺丙基甜菜碱(例如月桂酰氨基丙酯)；肉豆蔻酰基丙基二甲胺、棕榈酰基丙基二甲胺或异硬脂酰胺丙基二甲胺；甲基椰油酰基牛磺酸二钠或甲基油酰基牛磺酸二钠；以及MONAQU ATTM系列(莫纳工业公司(Mona Industries,Inc.)，Paterson，新泽西州)。可用作洗涤剂的是聚山梨醇酯，例如聚山梨醇酯20(TWEEN)或聚山梨醇酯80(TWEEN/>)或各种酸，例如辛酸。
“缓冲剂”是一种通过其酸碱共轭组分的作用来抵抗pH值变化的溶液。(例如，取决于缓冲剂的预期pH值)可以使用的各种缓冲剂被描述于下列文章中：缓冲剂。《生物系统中的缓冲剂的制备和使用指南(A Guide for the Preparation and Use of Buffer inBiological Systems)》，Gueffroy，D.编辑，Calbiochem Corporation(1975)。缓冲剂的非限制性示例包括MES缓冲剂、MOPS缓冲剂、MOPSO缓冲剂、Tris缓冲剂、HEPES缓冲剂、磷酸盐缓冲剂、乙酸盐缓冲剂、柠檬酸盐缓冲剂、琥珀酸盐缓冲剂和铵缓冲剂及其组合。
根据本发明，术语“缓冲剂”或“溶剂”用于装载、洗涤、洗脱和再平衡分离单元所使用的任何液体组合物。
当“装载”分离柱以“流经”靶分子时，使用缓冲剂将包含靶分子(例如，含有Fc区的靶蛋白)和一种或多种杂质的样本或组合物装载到层析柱(例如，亲和柱或离子交换柱)上。缓冲剂的电导率和/或pH值使得靶分子并不与层析基质结合并流过该柱，而在理想情况下，所有杂质都与该柱结合。
术语“再平衡”是指在装载靶分子之前使用缓冲剂对层析基质进行再平衡。通常，装载缓冲剂用于再平衡。
术语“清洗”或“洗涤”层析基质是指使适当的液体(例如，缓冲剂)通过或越过基质。通常，洗涤用于在洗脱靶分子之前从基质中去除弱结合污染物和/或在装载后去除未结合或弱结合的靶分子。
本文中使用的术语“亲和层析基质”是指携带适用于亲和层析的配体的层析基质。通常，配体(例如，蛋白A或其功能变体或片段)共价附着到层析基质物质上，并且当溶液接触层析基质时，配体可以接触到溶液中的靶分子。亲和层析基质的一个示例是蛋白A基质。亲和层析基质通常基于锁/键机制(例如抗原/抗体或酶/受体结合)将高特异性与靶分子相结合。亲和基质的示例是携带蛋白A配体的基质，例如蛋白A SEPHAROSETM(马萨诸塞州波士顿市的GE Healthcare)或-A(马萨诸塞州伯灵顿市的MilliporeSigma)。在本文所述的处理和系统中，亲和层析步骤可被在整个纯化处理中用作结合和洗脱层析步骤。
本文中使用的术语“离子交换”和“离子交换层析法”是指层析处理，在该层析处理中，混合混合物中所关注的溶质或分析物(例如，纯化后的靶分子)与(例如通过共价附着)键合到固相离子交换物质的带电化合物相互作用，使得所关注的溶剂或分析物与带电化合物的非特异性相互作用比混合物中的溶质杂质或污染物更多或更少。混合物中的污染溶质比所关注的溶质更快或更慢地从离子交换物质柱洗脱，或者相对于所关注的溶剂被结合到树脂或被从树脂中去除。
“离子交换层析”具体包括阳离子交换层析、阴离子交换层析和混合模式离子交换层析。例如，靶分子(例如，具有总正电荷或带正电荷的区域的靶蛋白)可以结合阳离子交换层析树脂，然后进行洗脱(例如，使用阳离子交换结合和洗脱层析法或“CIEX”)，或者可以在靶分子“流经”该柱时主要结合杂质(阳离子交换流过层析法FT-CIEX)。阴离子交换层析靶分子(例如，具有总负电荷或带负电荷的区域的靶蛋白)可以结合阴离子交换树脂，然后进行洗脱，或者可以在靶分子“流经”该柱时主要结合杂质，这也被称为负层析。在一些实施例中并且如本文所述的示例中所示，阴离子交换层析步骤以流经(flow-through)模式进行。如本领域技术人员所知，柱层析条件(例如，pH值)可能影响靶分子电荷特性。
术语“离子交换基质”是指带负电的基质(即，阳离子交换培养基)或带正电的基质(即，阴离子交换培养基)。电荷可以通过将一个或多个带电配体(例如，通过共价键)附着到该基质上来提供。作为替代，或者除此之外，电荷可以是该基质的固有性质(例如，就像二氧化硅的情况一样，其具有总负电荷)。
混合模式阴离子交换物质通常具有阴离子交换基团和疏水部分。适用的混合模式阴离子交换物质是粘附剂(GE Healthcare)。
术语“阴离子交换基质”在本文中用于指代带正电的基质，例如，附着有一个或多个带正电的配体(例如季铵基团)的基质。市售阴离子交换树脂包括DEAE纤维素、QAESEPHADEXTM和FAST Q SEPHAROSETM(马萨诸塞州波士顿市的GE Healthcare)。可用于本文所述的处理和系统的其他示例性材料为EMD TMAE、/>EMDTMAE HIGHCAP、/>Q和/>EMD DEAE(马萨诸塞州伯灵顿市的MilliporeSigma)。
术语“阳离子交换基质”是指带负电的基质，其具有自由阳离子以与同该基质的固相相接触的水溶液中的阳离子进行交换。附着在固相上以形成阳离子交换基质或树脂的带负电配体可以例如是羧酸盐或磺酸盐。市售的阳离子交换基质包括羧甲基纤维素、固定在琼脂糖上的硫丙基(SP)(例如，来自马萨诸塞州波士顿市的GE Healthcare的SP-SEPHAROSEFAST FLOWTM或SP-SEPHAROS HIGH PERFORMANCETM)和固定在琼脂上的磺酰基(例如，来自GEHealthcare的SP-SEPHAROSE FAST FLOWTM)。首选的是EMD SO3、EMD SE HIGHCAP、/>S和/>EMD COO(马萨诸塞州伯灵顿市的MilliporeSigma)。
术语“平衡缓冲剂”是指用于中和条件或以其他方式偏置靶分子以与层析柱或生物反应器内的配体有效地相互作用的溶液或试剂。例如，本文所述的缓冲溶液能够在发生化学变化时使生物系统的pH值保持几乎恒定。在根据本公开的实施例的一些示例中，尽管生物系统的pH值在例如7.0至10.0之间，但平衡缓冲剂仍使pH值保持几乎恒定。
术语“洗脱缓冲剂”是指用于脱除或洗脱被结合到层析培养基的产物的缓冲剂或试剂。例如，洗脱缓冲剂可能能够在第一次洗脱期间洗脱空AAV(腺相关病毒)粒子，并且在第二次洗脱期间能够洗脱完整AAV粒子，从而给出完整AAV粒子的浓度。
术语“流出物”是指在层析处理期间可移动的(即，离开的)组分(也称为洗脱液)，例如，其使用恒定组成的洗脱缓冲剂，而并不增加或减少缓冲剂组成。
术语“等度洗脱条件”是指层析处理期间洗脱缓冲剂的组成不变的条件。
术语“梯度洗脱条件”是指在层析处理期间，通过将两种或多种缓冲剂混合(例如在特定时间和/或在多个柱体积期间，由0-100％的缓冲剂形成洗脱缓冲剂的梯度)来改变洗脱缓冲剂的组成的条件。
层析法可以在三种模式中的任一种模式下操作：(1)分批模式，其中，以靶蛋白装载培养基，停止装载，对培养基进行洗涤和洗脱，并收集该池；(2)半连续模式，其中，连续进行该装载，而洗脱是间歇性的(例如，在连续多柱层析的情况下)；和(3)完全“连续模式”，其中，装载和洗脱两者都是连续进行的。美国专利申请US2013/0280788(全文被结合到本文中)描述了被称为连续层析法和设备的实施例，该方法和设备依次使用若干个层析柱。连续层析法可以是“连续处理”纯化过程或操作的一部分。
本文可互换使用的术语“连续处理”或“相邻处理”是指用于纯化靶分子的处理，该处理包括两个或多个处理步骤(或单元操作)，使得来自一个处理步骤的输出直接流入到该处理中的下一处理步骤，而不会中断，并且其中两个或多个个处理步骤可在这些处理步骤的持续时间的至少一部分内同时进行。换言之，在连续处理的情况下，如本文所述，无需在下一处理步骤开始之前完成这一处理步骤，但样本的一部分总是移动通过这些处理步骤。术语“连续处理”也适用于一个处理步骤内的多个步骤，在这种情况下，在包括多个步骤的处理步骤的执行期间，样本连续流过执行该处理步骤所需的多个步骤。本文所述的这种处理步骤的一个示例是流经纯化步骤，其包括以连续方式进行的多个步骤，例如，流经活性炭，然后流经AEX培养基，接着流经CEX培养基，继而流经病毒过滤器。
本文使用的术语“半连续处理”是指用于纯化靶分子的大致连续的过程，其中流体物质在任何单个处理步骤中的输入或输出是不连续的或间歇的。例如，在根据本发明的一些实施例中，处理步骤(例如，结合和洗脱层析步骤)中的输入可被连续装载；然而，该输出可被间歇性地收集(例如，在稳压罐或池罐(pool tank)中)，其中，纯化处理中的其他处理步骤是连续的。因此，在一些实施例中，本文所述的处理和系统本质上是“半连续的”，因为它们包括被以间歇的方式操作的至少一个单元操作，而该处理或系统中的其他单元操作可被以连续的方式操作。
术语“连接处理”是指用于纯化靶分子的处理，其中，该处理包括彼此直接流体连通的两个或多个处理步骤(或单元操作)，使得流体物质连续流过该处理中的处理步骤，并在该处理的正常操作期间与两个或多个个处理步骤同时接触。所明白的是，有时，该处理中的至少一个处理步骤可被通过处于关闭位置中的诸如阀之类的屏障件而与其他处理步骤暂时隔离。各个处理步骤的这种暂时隔离可能例如在该处理启动或停止期间或在各个单元操作的去除/更换期间是必要的。术语“连接处理”也适用于处理步骤内的多个步骤，例如，当一个处理步骤需要按照顺序执行若干个步骤以便实现该处理步骤的预期结果时。一个这种示例是本文所述的流经纯化处理步骤，其可以包括以流经模式执行的若干个步骤，例如，活性炭、阴离子交换层析、阳离子交换层析和病毒过滤。
本文中使用的术语“流体连通”是指两个处理步骤之间的流体物质(液体或气体)的流动或一个处理步骤的步骤之间的流体物质的流动，其中，这些处理步骤被通过任何适用的方式(例如，连接管线或稳压罐)连接，从而使流体能够从一个处理步骤流动到另一处理步骤。在一些实施例中，两个单元操作之间的连接管线可被一个或多个阀所中断，以控制通过该连接管线的流体流动。
本文所用的术语“提纯”、“纯化”、“分离”、“分开”、“隔离”、“隔开”或“分隔”是指提高来自包含靶分子和一种或多种杂质的样本的靶分子的纯度。通常，通过从样本中(完全或部分)去除至少一种杂质来提高靶分子的纯度。在一些实施例中，通过使用例如本文所述的层析处理从样本中(完全或部分)去除一种或多种杂质来提高样本中的靶分子的纯度。在另一实施例中，通过使靶分子沉淀远离该样本中的一种或多种杂质来提高样本中的靶分子的纯度。本文中可互换使用的术语多肽的“pI”或“等电点”是指多肽的正电荷平衡其负电荷所处的pH值。pI可被根据多肽的所附碳水化合物的氨基酸残基或唾液酸残基的净电荷予以计算，或者可以通过等电聚焦来确定。
本领域已知术语“pH值”是指液体中的氢离子浓度的测量值。它是溶液的酸度或碱度的度量。1909年，丹麦生物化学家Peter Lauritz 提出了用于计算pH值的方程式：
pH＝-log[H+]
式中log是以10为底的对数，[H+]表示氢离子浓度，单位为摩尔/升溶液。术语“pH”来自德语单词“potenz”，意思是“程度”，其与H(氢的元素符号)相组合，因此pH是“氢离子浓度”的缩写。
本文使用的术语“处理参数”是指纯化处理中使用的条件。这些处理参数可被利用例如一个或多个传感器和/或探针来予以监测。处理参数的示例是温度、压力、pH值、电导率、溶解氧(DO)、溶解二氧化碳(DCO2)、混合速率和流量。在一些情况下，传感器也可以是光学传感器。该传感器可被连接到用于调节处理参数的自动控制系统。
本文使用的术语“电导率”是指水溶液在两个电极之间传导电流的能力。在溶液中，电流通过离子传输而流动。因此，随着水溶液中存在的离子量的增加，溶液将具有更高的电导率。电导率的测量值的单位是毫西门子每厘米(mS/cm或mS)，并且可被使用市售的电导率计(例如，由Orion出售)进行测量。溶液的电导率可以通过改变其中的离子浓度来改变。例如，可以改变溶液中的缓冲剂的浓度和/或盐(例如，NaCl或KCl)的浓度，以获得所需的电导率。在一些实施例中，改变各种缓冲剂的盐浓度以获得所需的电导率。在一些实施例中，在将一种或多种添加剂添加到样本负载的处理中，如果随后使用一个或多个洗涤步骤，则这种洗涤步骤使用电导率为约20mS/cm或更小的缓冲剂。
本文使用的术语“盐”是指由酸和碱相互作用而形成的化合物。可用于本文所述方法中使用的各种缓冲剂中的各种盐包括但不限于乙酸盐(例如，乙酸钠)、柠檬酸盐(例如，柠檬酸钠)、氯化物(例如，氯化钠)、硫酸盐(例如，硫酸钠)或钾盐。
本文中使用的术语“结合和洗脱模式”和“结合和洗脱处理”是指一种分离技术，其中，样本中包含的至少一种靶分子(例如，含有Fc区的蛋白质)与合适的树脂或培养基(例如，亲和层析培养基或阳离子交换层析培养基)结合，随后被洗脱。
本文可互换使用的术语“流经处理”、“流经模式”和“流经操作”是指一种分离技术，其中，意在使生物制药制剂中包含的至少一种靶分子(例如，含Fc区的蛋白质，例如含Fc的融合蛋白或抗体)与一种或多种杂质一起流过通常结合有一种或多种杂质的物质，其中，靶分子通常不结合(即，流过)。
本文可互换使用的术语“处理步骤”或“单元操作”是指使用一种或多种方法或装置在纯化处理中获得特定的结果。可用于本文所述的处理和系统的处理步骤或单元操作的示例包括但不限于澄清、结合和洗脱层析、病毒灭活、流经纯化、过滤和配制。所明白的是，每个处理步骤或单元操作可以采用不止一个步骤或方法或装置来获得该处理步骤或单位操作的预期结果。例如，在一些实施例中，如本文所述的澄清步骤和/或流经纯化步骤可以采用不止一个步骤或方法或装置来实现该处理步骤或单元操作。在一些实施例中，用于执行处理步骤或单元操作的一个或多个装置是一次性装置，并且可以在无需更换该处理中的任何其他装置乃至不必停止处理运行的情况下被去除和/或更换。
本文可互换使用的术语“稳压罐”或“保温罐”或类似物是指在处理步骤之间或处理步骤内(例如，当单个处理步骤包括不止一个步骤时)使用的任何容器或器皿或袋；其中来自一个步骤的输出通过该稳压罐流到下一步骤。因此，稳压罐与“池罐”的不同之处在于，并非意在保持或收集来自一个步骤的全部输出；而是使得来自一个步骤的输出能够连续流动到下一步骤。根据本文的定义以及如本文所理解的那样，稳压罐(或保温罐或类似物)处于环境压力或接近环境压力。这并不是纯化处理中不可或缺的步骤，因为它对该处理的整体效率并没有贡献。相反，稳压罐(或类似物)中断了一个或多个处理参数，例如流量和/或压力。在本发明的一些方面中，本发明明确排除了稳压罐、保温罐、池罐或类似物的使用。
在一些实施例中，在本文所述的处理或系统中，在两个处理步骤之间或处理步骤内使用的稳压罐的体积不超过来自处理步骤的输出的总体积的25％。在另一实施例中，稳压罐的体积不超过来自处理步骤的输出的总体积的10％。在一些其它实施例中，稳压罐的体积小于生物反应器中的细胞培养物的总体积的35％、或小于其30％、或小于其25％、或小于其20％、或小于其15％、或小于其10％，该细胞培养物构成了待从中纯化靶分子的初始物质。
术语“储器”或“加压储器”在本文中被视为同义词，并且是指在恒压或基本恒压(即，大于环境压力且处于与下游处理步骤(例如，下游过滤步骤)中所需的压力相同或基本相同的压力下的压力)下操作的处理罐。本发明中的储器与稳压罐(或类似物)的不同之处在于，它们实现明显不同的功能：即，稳压罐仅在处理步骤之间保持处理溶液，而储器是纯化处理的组成部分，从而例如提供下游处理步骤所需的恒定压力，同时不妨碍上游处理步骤的恒定流量。如上所述，稳压罐(或类似物)中断一个或多个处理参数(例如流量或压力)，同时本发明的储器维持恒定的处理参数。
本文中使用的术语“过滤器”可包括但不限于一种或多种多孔材料，例如膜、片材、过滤器、过滤元件、过滤介质及其组合。过滤器可以是褶皱的、扁平的、螺旋缠绕的及其组合。过滤器可以是单层或多层膜装置，并且可以用于过滤不需要的物质，其包括污染物(例如传染性生物体和病毒)以及可以通过尺寸排除和化学或物理吸附或其组合来去除的环境毒素和污染物。过滤材料可以由任何合适的材料组成，其包括但不限于聚醚砜、聚酰胺(例如，尼龙)、纤维素、聚四氟乙烯、聚砜、聚酯、聚偏二氟乙烯、聚丙烯、氟碳化合物(例如，聚(四氟乙烯-共-全氟(烷基乙烯基醚)))、聚碳酸酯、聚乙烯、玻璃纤维、聚碳酸酯、陶瓷和金属。
操作条件
图1A为本发明的实施例的示意图。该图是具有代表性的，并且本领域技术人员在掌握了本专利说明书的教导的情况下，将能够研发这种设置的变体。
储器1具有至少一个进料口2、加压气源3、至少一个供气入口4、第一压力调节器5和位于第一压力调节器的下游且位于加压气源与储器之间并与该加压气源流体连通的单向阀5a、与通向供气入口的供气管线流体连通并位于第一压力调节器的下游的第二压力调节器6以及进料流出口8。第二压力调节器的上游设置有用以防止回流的单向阀7(箭头)。此外，存在位于进料流出口上并与储器流体连通的一个或多个过滤器9(例如，病毒过滤器或除菌过滤器)、分别位于过滤器的上游和下游的入口阀10和出口阀11以及用于收集滤液的收集装置12。该过滤器可以具有过滤器排气口13。进料流入口管线是用于防止回流的单向阀(即，止回阀)14。
图1B示出了本发明的第二实施例的示意图。该图是具有代表性的，并且本领域技术人员在掌握了本专利说明书的教导的情况下，将能够研发这种设置的变体。
本实施例与上述实施例相似，但不需要第二压力调节器(图1A的元件6)以及位于第二压力调节器的上游的单向阀(图1A的元件7)。所有其他元件编号保持与图1A相同。
因此，储器1具有至少一个进料入口2、加压气源3、至少一个供气入口4、压力调节器5、在该压力调节器的下游且在加压气源与储器之间并未设置单向阀，从而允许在该管线中进行双向流动(参见，指示双向流动的箭头)以及进料流出口8。此外，存在位于进料流出口上并与该储器流体连通的一个或多个过滤器9(例如，病毒过滤器或除菌过滤器)、分别位于过滤器的上游和下游的入口阀10和出口阀11以及用于收集滤液的收集装置12。该过滤器可以具有过滤器排气口13。进料流入口管线是用于防止回流的单向阀14。
这种设置的一个优点是简化了所需的设备，因为不需要第二压力阀和压力调节器。也就是说，与第一版本相比，图1B中的该设置在硬件/管道/零件方面更轻，因此更便宜且更容易搭建。然而，根据使用情况，可能需要由图1A中所示的该设置所提供的更大控制。
操作
在这里我们讨论该系统的代表性操作。结合本领域技术人员的知识，在掌握了本专利说明书的教导的情况下，本领域技术人员将明白，本发明的系统的替代操作模式会是可能的并且是可设想到的且被结合到本文中。
在一方面，该系统操作如下。来自源的液体以恒定或基本恒定的流量通过进料流入口流到储器中。“基本恒定的流量”在本文中被定义为处于所需流量的±25％、20％、15％、10％、5％、2％或1％的范围内。进入到储器中的入口流量将低于离开储器的出口流量。由于储器可能在开始过滤前就被“预装填”至所需液位，因此该储器并不会干涸。此外，如有必要，可暂时停止过滤以增大储器容积。
该储器由来自气源的气体加压，并由第一压力调节器进行调节。所使用的压力由所使用的过滤器确定。一些过滤器可能需要更大或更小的压力来运行。在一个实施例中，该压力被设定在7巴，尽管根据该处理设置的能力，它可以更低或更高。所设想到的是，该压力为至少约4巴。所使用的压力可被针对具体的处理运行或针对具体的可用处理资源而改变(即，更高或更低)。本领域技术人员将能够在本专利说明书的指导下确定正确的压力。在另一实施例中，压力调节器仅允许降低该压力。因此，该压力供应必须高于(或至少等于)该处理压力。
例如，如果过滤器开始堵塞，则在处理运行期间，压力可能会被改变。在本发明的上下文中，“恒压”和“维持恒压”意指所需压力以及在生产运行中的任何位置处维持所需压力(即，由操作员设定的压力)，而不是说在生产运行期间该压力不能被重置为不同的所需压力。“基本恒定的压力”在本文中被定义为处于所需压力的±25％、20％、15％、10％、5％、2％或1％的范围内。
在本发明的一方面，储器中的压力被经由第二阀来维持。即使流入和流出储器的流量会是相等的或近乎相等的，如果压力并未被适当地调节，则该储器中的液位的变化仍然可能发生，从而导致压力的变化。此外，随着过滤器在使用的情况下堵塞，如果调节不当，储器中的压力就可能会上升。这可能会对流量产生不利影响，从而影响上游处理。该第二阀被设置成使得如果储器中的压力上升到高于设定值，则该第二阀打开以通过从气源中卸掉压力来降低储器中的压力。同样，如果储器中的压力处于或低于该设定压力，则第二阀将关闭或保持关闭，使得储器中的压力将升高或被维持住。
在本发明的另一方面，仅使用了一个压力调节器。一个调节器可以类似于双调节器系统中的第一调节器的方式被定位在供气馈送管线上，或者可被定位在双调节器系统中的第二调节器所在的位置。然而，尽管采用一个调节器的系统中的压力调节是起作用的并且是本发明的一方面，但是它可能并不像采用两个调节器的系统中那样精确地调节压力。
在本发明的另一方面，本发明可以耦合其他处理参数或不同顺序的处理参数。例如，所设想到的是，本发明可以将上游恒压步骤与下游恒流步骤相耦合。
例如，所设想到的是，将本发明的ICPT系统连接到SPTFF(或TFF)或其他过滤步骤。在这种情况下，回流压力不会被利用压力控制阀予以设定，而是被利用罐中的压力传感器(ICPT)予以设定。该设置允许将恒定流量与恒定压力或将恒定压力与(不同的)恒定压力相耦合，例如以清空该罐。应该同样可行的是，将恒压步骤的出口连接到ICPT，该ICPT然后将会被使用非贯流泵(例如，蠕动泵)连接(出口)到恒流步骤。该第二步骤的压力由罐的压力加上由泵产生的压力来确定。
在一个示例性实施例中，层析步骤(第一步骤)和过滤步骤(第二步骤)同时或基本上同时结束；例如，根据系统的大小，相对于彼此在数秒钟内、相对于彼此在不到一分钟内、相对于彼此在不到两分钟内或相对于彼此在不到三分钟内结束。
例示
ICPT：直列式恒压罐处理
组装说明。参见，图5。
1)设置上游步骤，并将其连接到单向阀液体(ow1)，该单向阀液体随后必须被连接到ICPT的液体入口(I1)端口—组装入口液体(b)
2)组装液体出口(c)管线，并在下游步骤前设置阀(v2)。该阀可被以非贯流泵(例如蠕动泵)来代替—然后必须关闭该阀以确保系统完整性
3)将进料压力调节器(P1)连接到压力源，然后在P1的出口处紧邻其后添加单向阀(ow2)。然后可以使用T形连接器将进料压力源连接到储器(R)和压力调节管线的排放部分。必须添加额外的单向阀(ow3)，然后再添加第二排气压力调节器(P2)。紧邻该第二压力调节器之后必须添加隔断阀(v1)。然后，该管线可被连接到T形连接器的用于被连接到储器(R)的入口调节管线端口(I2)的自由端口。
处理指令。参见，图5。
1)在先使用注意事项：验证该系统是否被正确组装、是完整的、无任何泄漏。确保所使用的泵能够支持由该罐产生的背压。
2)打开该压力源并将进料压力调节器(P1)设定于所需的测试压力(例如，30psi)。
3)将排放压力调节器设定于相同的压力(即，此处为30psi)并关闭该阀(v1)。
4)关闭该阀(v2)—装填阶段。
5)开始上游步骤，随着处理的进行，对该罐进行装填，利用压力调节管线(a)将压力维持恒定。
6)当该罐中积累了足够的容积(必须准确地知道并预先确定该容积/装填罐液位)时，打开该阀(v2)，从而开始下游步骤。
7)经由该上游步骤对该罐进行装填，即，维持容积，同时进行下游步骤。
8)如果一切操作正确，则两个步骤将同时或基本上同时(例如，相对于彼此在数秒钟内)结束。
9)可关闭压力源，并可对系统进行拆卸和/或灭菌。
结果
与已知的现有技术处理相比，本处理缩短了处理时间并延长了过滤器使用期限，从而节省了劳动力和材料成本。示例性运行的结果示于图2、图3和图4。
图2示出了具有示例性单克隆抗体mAb2(150kDa)的流体流动流的质量通量(g/m2)的图。图上的下面一行数据点是经由不使用本发明的ICPT处理和设置的解耦设置而生成的。上面一组数据点示出了使用具有与解耦设置相同特性的流体流动流但包括本发明的ICPT处理的处理运行。如图上可见，在解耦处理中，通量衰减被大大降低，并且质量通量被大大增加。
图3示出了具有示例性单克隆抗体mAbμ(105kDa)的流体流动流的质量通量(g/m2)的图。图上的下面一行数据点是经由不使用本发明的ICPT处理和设置的解耦设置生成的。上面一组数据点示出了使用具有与解耦设置相同特性的流体流动流但包括本发明的ICPT处理的处理运行。如在图上可见，在解耦处理中，通量衰减被大大降低，并且质量通量被大大增加。
图4示出了在三种模式下运行的CP-FT流经式/>Pro过滤器(马萨诸塞州贝德福德的MilliporeSigma)的质量流量(g/m2)—标准渗透率(LMH/psi)的图。下面一行数据点(方形)使用解耦处理。中间一行数据点(圆形)使用直接耦合处理，而上面一行数据点(菱形)使用本发明的ICPT处理。可以看出，与控制运行相比，本发明的ICPT处理导致了更大的质量通量。
如从这些详细实验的结果可以很容易地看出，本发明的ICPT处理提供了一种将迥然不同的处理步骤耦合的处理，从而节省材料、劳动力和空间，同时大大提高了过滤能力。

Claims (18)

1.一种用于以与进料流流量无关的方式向过滤设备提供恒定压力的方法，所述方法包括：
a)提供：i)储器，所述储器包括一个或多个流体进料流入口和一个或多个流体进料流出口，以及ii)压力源，所述压力源用于在操作时提供和维持所述储器中的压力，所述压力源包括加压气源和压力调节阀，所述加压气源由压力调节器控制，所述压力调节阀位于所述压力调节器与所述储器之间并与所述压力调节器和所述储器流体连通；
b)其中，所述流体进料流以一定流量经由所述一个或多个流体进料流入口进入所述储器；
c)其中，所述储器由通过所述压力源供应的气体加压；
d)其中，当所述压力调节阀在所述储器中的压力超过第一预设压力的情况下打开以从供气管线排放掉过量压力或所述压力调节阀在所述储器中的压力处于或低于第二预设压力的情况下关闭以允许来自所述供气管线的气体进入所述储器以维持或提高所述储器中的压力时，在所述储器中维持恒定压力；
e)其中，所述流体进料流经由所述一个或多个流体进料流出口以与所述流体进料流进入所述储器时大致相同的流量离开所述储器；
f)其中，将所述流体进料流以恒定压力输送到位于所述一个或多个储器出口的下游的一个或多个过滤器。
2.如权利要求1所述的方法，其中，所述第一预设压力低于所述第二预设压力。
3.如权利要求1或2所述的方法，其中，所述气源是无菌的。
4.如权利要求1-3中的任一项所述的方法，其中，所述气源的气体为空气。
5.如权利要求1-4中的任一项所述的方法，其中，所述第一压力或所述第二压力为约4巴至高达约7巴。
6.如权利要求1-5中的任一项所述的方法，其中，所述过滤器是病毒过滤器。
7.如权利要求1-6中的任一项所述的方法，其中，所述过滤器是用于对所述流体进料流进行灭菌的过滤器。
8.如权利要求1-7中的任一项所述的方法，其中，所述过滤器是用于浓缩所述进料流的过滤器。
9.如权利要求1-8中的任一项所述的方法，其中，进入所述储器的所述流体进料流是连续的。
10.一种用于过滤来自上游处理步骤的流体流的方法，所述方法包括：
a)提供：i)来自上游处理步骤的待过滤的流体进料流，ii)储器，所述储器在被操作时被维持处于基本恒定的压力，以及iii)所述过滤设备，所述过滤设备位于所述储器的下游；
b)所述储器具有i)用于使所述流体流进入所述储器中的一个或多个入口，ii)一个或多个出口，iii)加压气源和iv)压力调节阀，所述压力调节阀与所述加压气源和所述储器流体连接并且位于所述加压气源与所述储器之间，其中，所述储器被以与进入到所述储器中的所述流体进料流的流量无关的方式维持处于恒定压力；
c)其中，当所述压力调节阀在所述储器中的压力超过第一预设压力的情况下打开以从供气管线排放掉过量压力或所述压力调节阀在所述储器中的压力处于或低于第二预设压力的情况下关闭以允许来自所述供气管线的气体进入所述储器以维持或提高所述储器中的压力时，在所述储器中维持恒定压力；
d)所述储器的出口与所述过滤器流体连通；以及
e)其中，来自上游处理步骤的所述流体进料流在被朝向所述过滤设备引导之前进入到被维持处于恒定压力的所述储器中。
11.如权利要求10所述的方法，其中，所述第一预设压力低于所述第二预设压力。
12.如权利要求10或11所述的方法，其中，所述气源是无菌的。
13.如权利要求10-12中的任一项所述的方法，其中，所述气源的气体为空气。
14.如权利要求10-13中的任一项所述的方法，其中，所述第一压力或所述第二压力为约4巴至高达约7巴。
15.如权利要求10-14中的任一项所述的方法，其中，所述过滤器是病毒过滤器。
16.如权利要求10-15中的任一项所述的方法，其中，所述过滤器是用于对所述流体进料流进行灭菌的过滤器。
17.如权利要求10-16中的任一项所述的方法，其中，所述过滤器是用于浓缩所述进料流的过滤器。
18.如权利要求10-16中的任一项所述的方法，其中，进入所述储器的所述流体进料流是连续的。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7410587B2 (en) 2004-08-03 2008-08-12 Scilog, Inc. Liquid handling for filtration and preparative chromatography
EP2656892A1 (en) 2012-04-23 2013-10-30 Merck Patent GmbH Chromatography method
CA3140009C (en) * 2014-05-13 2023-09-05 Amgen Inc. Process control systems and methods for use with filters and filtration processes
CN104436815B (zh) * 2014-12-20 2016-08-17 应跃斌 气动恒压的液体连续送料装置及方法
TW202100248A (zh) * 2019-03-11 2021-01-01 美商健臻公司 切向式病毒過濾
MX2021012078A (es) * 2019-04-03 2022-01-04 Genzyme Corp Produccion continua de proteinas recombinantes.

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