CN117940452A - 用于治疗癌症的方法和组合物 - Google Patents

用于治疗癌症的方法和组合物 Download PDF

Info

Publication number
CN117940452A
CN117940452A CN202280046443.7A CN202280046443A CN117940452A CN 117940452 A CN117940452 A CN 117940452A CN 202280046443 A CN202280046443 A CN 202280046443A CN 117940452 A CN117940452 A CN 117940452A
Authority
CN
China
Prior art keywords
antibody
suni
subject
administered
dosing
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202280046443.7A
Other languages
English (en)
Inventor
C·马克特
R·D·孟
M·米克
S·森
V·泰希格雷贝尔
V·A·韦伯金
E·N·查
C·R·科特
M·Y·多拉
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
F Hoffmann La Roche AG
Genentech Inc
Original Assignee
F Hoffmann La Roche AG
Genentech Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by F Hoffmann La Roche AG, Genentech Inc filed Critical F Hoffmann La Roche AG
Priority claimed from PCT/US2022/073365 external-priority patent/WO2023279092A2/en
Publication of CN117940452A publication Critical patent/CN117940452A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Landscapes

  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

本发明涉及在治疗受试者的癌症中使用的方法和组合物。例如，本发明涉及在通过向受试者施用抗具有Ig和ITIM结构域的T细胞免疫受体(TIGIT)拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)和PD‑1轴结合拮抗剂(例如，阿特珠单抗)来治疗所述受试者的食管癌或结直肠癌(CRC)(例如，转移性CRC(例如，微卫星不稳定性(MSI)高(MSI‑H)转移性CRC))中使用的方法和组合物；在通过向受试者施用抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)、PD‑1轴结合拮抗剂(例如，阿特珠单抗)和抗VEGF抗体(例如，贝伐单抗)来治疗所述受试者的转移性CRC(例如，MSI‑H转移性CRC)中使用的方法和组合物；在通过向受试者施用靶向程序性细胞死亡蛋白1(PD‑1)和淋巴细胞活化基因3(LAG3)的双特异性抗体、任选地与抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)来治疗所述受试者的黑素瘤中使用的方法和组合物；以及在通过向受试者施用靶向CD20和CD3的双特异性抗体(莫苏尼妥珠单抗)和抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)、任选地与PD‑1轴结合拮抗剂(例如，阿特珠单抗)来治疗所述受试者的CD20阳性细胞增殖性疾患(例如，非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)；例如，复发性或难治性NHL)中使用的方法和组合物。

Description

用于治疗癌症的方法和组合物
序列表
本申请含有序列表，该序列表已经以ASCII格式以电子方式提交并且以全文引用的方式并入本文中。所述ASCII副本创建于2022年6月24日，命名为50474-257WO4_Sequence_Listing_6_24_22_xml，并且大小为102,270个字节。
技术领域
本发明涉及在治疗受试者的癌症中使用的方法和组合物。例如，本发明涉及在通过向受试者施用抗具有Ig和ITIM结构域的T细胞免疫受体(TIGIT)拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)和PD-1轴结合拮抗剂(例如，阿特珠单抗)来治疗该受试者的食管癌或结直肠癌(CRC)(例如，转移性CRC(例如，微卫星不稳定性(MSI)高(MSI-H)转移性CRC))中使用的方法和组合物；在通过向受试者施用抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)、PD-1轴结合拮抗剂(例如，阿特珠单抗)和抗VEGF抗体(例如，贝伐单抗)来治疗该受试者的转移性CRC(例如，MSI-H转移性CRC)中使用的方法和组合物；在通过向受试者施用靶向程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)和淋巴细胞活化基因3(LAG3)的双特异性抗体、任选地与抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)来治疗该受试者的黑素瘤中使用的方法和组合物；以及在通过向受试者施用靶向CD20和CD3的双特异性抗体(莫苏尼妥珠单抗)和抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)、任选地与PD-1轴结合拮抗剂(例如，阿特珠单抗)来治疗该受试者的CD20阳性细胞增殖性疾患(例如，非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)；例如，复发性或难治性NHL)中使用的方法和组合物。
背景技术
癌症的特征是细胞亚群不受控制的生长。癌症是发达国家的主要死因，也是发展中国家的第二大死因，每年新诊断的癌症病例超过1400万，癌症死亡人数超过800万。因此，癌症护理代表了一项重大且不断增加的社会负担。
针对用于治疗常见且难以治疗的癌症的治疗方法，存在特别迫切的需求。
食管癌是全球第七大最常被诊断出的癌症，并且是第六大癌症相关死亡的原因。大多数患有食管癌患者被诊断为患有晚期疾病，其中该疾病经常复发。患有晚期或转移性食管癌的患者的治疗选项择有限，并且患者的预后差，由当前治疗所获得的总存活益处极小。因此，该群体仍然迫切需要新颖的治疗方法。
黑素瘤是黑色素细胞的恶性肿瘤。这种皮肤癌潜在致命性形式是增长最快的恶性肿瘤之一。目前，全球每年有超过300,000人被诊断出患有黑素瘤，并且57,000人死于该疾病。大多数晚期黑素瘤患者的预后差。淋巴结受累的患者(III期)在手术后局部和远处复发的风险高，并且该患者组的5年存活率为32％至93％。很少有患者就诊时患有转移性疾病(IV期)，但一些患者在其最初的确定性治疗后出现转移。免疫疗法和靶向疗法已改善了这些患者的结局，并且5年存活率为约50％。黑素瘤仍然是一个严重的健康问题，具有高医疗需求，并且过去30年来发病率逐步上升。因此，该群体仍然迫切需要新颖的治疗方法。
B细胞增殖性疾患是癌症相关死亡的主要原因。例如，非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)进展迅速，如果不加治疗，则是致命的。在美国，B细胞淋巴瘤大约占所有NHL病例的80％至85％。弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)是最常见的NHL类型，占所有NHL诊断的大约30％至40％，其次是滤泡性淋巴瘤(FL；占所有NHL诊断的20％至25％)和套细胞淋巴瘤(MCL；占所有NHL诊断的6％至10％)。B细胞慢性淋巴细胞白血病(CLL)是成人中最常见的白血病，美国每年大约有15,000例新病例(美国癌症协会，2015)。因此，该群体仍然迫切需要新颖的疗法。
结直肠癌(CRC)是从结肠或直肠发展而来的癌症。具有错配修复(MMR)缺陷的CRC肿瘤细胞在DNA复制期间中调整微卫星长度的能力受损，这被称为微卫星不稳定性(MSI)。CRC肿瘤的特征可进一步在于高MSI(MSI-H)。大部分患有MSI-H转移性CRC的患者无法从目前批准的免疫疗法中获益，并且一些最初对疗法有反应的患者后来产生对疗法的继发性抗性。因此，患有MSI-H转移性CRC的患者迫切需要新颖、有效的疗法。
因此，在该领域中对于开发有效的免疫疗法和给药该免疫疗法以用于治疗癌症(包括食管癌、黑素瘤、B细胞增殖性疾患和CRC)的方法存在未满足的需求。
发明内容
本发明涉及在患有癌症(例如，转移性食管癌、复发性和/或难治性非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)或黑素瘤)的受试者中实现临床缓解的方法，该方法包括以有效实现临床缓解的量向受试者施用包括一个或多个给药周期的以下治疗方案的给药方案：包括抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)和PD-1轴结合拮抗剂(例如，阿特珠单抗)的治疗方案；包括靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体的治疗方案；包括莫苏尼妥珠单抗和抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)的治疗方案，或包括靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体和抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)的治疗方案。
在一个方面，本公开提供了一种用于治疗患有黑素瘤的受试者的方法，该方法包括向受试者施用一个或多个给药周期的抗TIGIT拮抗剂抗体以及靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体，该双特异性抗体包含特异性结合至程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)的第一抗原结合结构域和特异性结合至淋巴细胞活化基因3(LAG3)的第二抗原结合结构域。
在另一方面，本公开提供了与靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体组合在治疗患有黑素瘤的受试者中使用的抗TIGIT拮抗剂抗体，该双特异性抗体包含特异性结合至程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)的第一抗原结合结构域和特异性结合至淋巴细胞活化基因3(LAG3)的第二抗原结合结构域，其中抗TIGIT拮抗剂抗体和靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体被配制用于以包括一个或多个给药周期的给药方案向受试者施用。
在另一方面，本公开提供了与抗TIGIT拮抗剂抗体组合在治疗患有黑素瘤的受试者中使用的靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体，该双特异性抗体包含特异性结合至PD-1的第一抗原结合结构域和特异性结合至LAG3的第二抗原结合结构域，其中靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体和抗TIGIT拮抗剂抗体被配制用于以包括一个或多个给药周期的给药方案向受试者施用。
在另一方面，本公开的特征在于一种用于治疗患有黑素瘤的受试者的方法，该方法包括向受试者施用一个或多个给药周期的靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体，该双特异性抗体包含特异性结合至PD-1的第一抗原结合结构域和特异性结合至LAG3的第二抗原结合结构域，其中所述一个或多个给药周期是作为新辅助疗法施用的。
在另一方面，本公开提供了一种在治疗患有黑素瘤的受试者中使用的靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体，该双特异性抗体包含特异性结合至PD-1的第一抗原结合结构域和特异性结合至LAG3的第二抗原结合结构域，其中靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体被配制用于作为新辅助疗法以包括一个或多个给药周期的给药方案向受试者施用。
在另一方面，本公开的特征在于一种用于治疗患有黑素瘤的受试者的方法，该方法包括向受试者施用一个或多个给药周期的抗TIGIT拮抗剂抗体和PD-1轴结合拮抗剂，其中所述一个或多个给药周期是作为新辅助疗法施用的。
在另一方面，本公开提供了一种与PD-1轴结合拮抗剂组合在治疗患有黑素瘤的受试者中使用的抗TIGIT拮抗剂抗体，其中抗TIGIT拮抗剂抗体和PD-1轴结合拮抗剂被配制用于作为新辅助疗法以包括一个或多个给药周期的给药方案向受试者施用。
在另一方面，本公开提供了一种与抗TIGIT拮抗剂抗体组合在治疗患有黑素瘤的受试者中使用的PD-1轴结合拮抗剂，其中PD-1轴结合拮抗剂和抗TIGIT拮抗剂抗体被配制用于作为新辅助疗法以包括一个或多个给药周期的给药方案向受试者施用。
在另一方面，本公开提供了一种在患有转移性食管癌的受试者中实现临床缓解的方法，该方法包括以有效实现临床缓解的量向该受试者施用包括一个或多个给药周期的替瑞利尤单抗和阿特珠单抗的给药方案。
在另一方面，本公开提供了与阿特珠单抗组合使用以在患有转移性食管癌的受试者中实现临床缓解的替瑞利尤单抗，其中替瑞利尤单抗和阿特珠单抗被配制用于以包括一个或多个给药周期的给药方案向受试者施用。
在另一方面，本公开提供了与替瑞利尤单抗组合使用以在患有转移性食管癌的受试者中实现临床缓解的阿特珠单抗，其中替瑞利尤单抗和阿特珠单抗被配制用于以包括一个或多个给药周期的给药方案向受试者施用。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)的受试者的方法，该方法包括向受试者施用替瑞利尤单抗和莫苏尼妥珠单抗。
在另一方面，本发明的特征在于与莫苏尼妥珠单抗组合在治疗患有R/R NHL的受试者中使用的替瑞利尤单抗，其中替瑞利尤单抗和莫苏尼妥珠单抗被配制用于向受试者施用。
在另一方面，本发明的特征在于与替瑞利尤单抗组合在治疗患有R/R NHL的受试者中使用的莫苏尼妥珠单抗，其中替瑞利尤单抗和莫苏尼妥珠单抗被配制用于向受试者施用。
在另一方面，本公开的特征在于一种治疗患有转移性结直肠癌(CRC)的受试者的方法，该方法包括向受试者施用替瑞利尤单抗和阿特珠单抗，其中转移性CRC为微卫星不稳定性高(MSI-H)CRC。
在另一方面，本公开的特征在于与阿特珠单抗组合在治疗患有转移性CRC的受试者中使用的替瑞利尤单抗，其中替瑞利尤单抗和阿特珠单抗被配制用于向受试者施用，并且其中转移性CRC为MSI-H CRC。
在另一方面，本公开的特征在于与替瑞利尤单抗组合在治疗患有转移性CRC的受试者中使用的阿特珠单抗，其中替瑞利尤单抗和阿特珠单抗被配制用于向受试者施用，并且其中转移性CRC为MSI-H CRC。
在另一方面，本公开的特征在于一种治疗患有转移性CRC的受试者的方法，该方法包括向受试者施用替瑞利尤单抗、阿特珠单抗和贝伐单抗，其中转移性CRC为MSI-H CRC。
在另一方面，本公开的特征在于与阿特珠单抗和贝伐单抗组合在治疗患有转移性CRC的受试者中使用的替瑞利尤单抗，其中替瑞利尤单抗、阿特珠单抗和贝伐单抗被配制用于向受试者施用，并且其中转移性CRC为MSI-H CRC。
在另一方面，本公开的特征在于与替瑞利尤单抗和贝伐单抗组合在治疗患有转移性CRC的受试者中使用的阿特珠单抗，其中替瑞利尤单抗、阿特珠单抗和贝伐单抗被配制用于向受试者施用，并且其中转移性CRC为MSI-H CRC。
在另一方面，本公开的特征在于与阿特珠单抗和替瑞利尤单抗组合在治疗患有转移性CRC的受试者中使用的贝伐单抗，其中替瑞利尤单抗、阿特珠单抗和贝伐单抗被配制用于向受试者施用，并且其中转移性CRC为MSI-H CRC。
在另一方面，本公开的特征在于一种治疗患有转移性CRC的受试者的方法，该方法包括向受试者施用包括一个或多个21天给药周期的替瑞利尤单抗和阿特珠单抗的给药方案，该替瑞利尤单抗是以约600mg的剂量在每个给药周期的第1天，该阿特珠单抗是以约1200mg的剂量在每个给药周期的第1天，其中转移性CRC为MSI-H CRC。
在另一方面，本公开的特征在于一种治疗患有转移性CRC的受试者的方法，该方法包括向受试者施用包括一个或多个21天给药周期的替瑞利尤单抗、阿特珠单抗和贝伐单抗的给药方案，该替瑞利尤单抗是以约600mg的剂量在每个给药周期的第1天，该阿特珠单抗是以约1200mg的剂量在每个给药周期的第1天，该贝伐单抗是以约15mg/kg的剂量在每个给药周期的第1天，其中转移性CRC为MSI-H CRC。
附图说明
图1为示出用替瑞利尤单抗和阿特珠单抗治疗的患有转移性食管癌的患者的最长直径之和(SLD)的最佳百分比变化的条形图。每例患者由数据条表示。显示了每例患者的腺癌(浅灰色)或鳞状细胞癌(深灰色)食道组织病理学亚型。每例患者的先前多线全身性疗法的数量以及肿瘤细胞(TC)或免疫细胞(IC)(<5％或≥5％)的PD-L1表达状态显示在x轴下。显示了指示SLD的最佳变化增加20％和SLD的最佳变化减少30％的参考线。PD-L1表达是使用SP142 IHC测定法测量的。NTL＝非靶病灶；PD＝疾病进展。
图2为示出用替瑞利尤单抗和阿特珠单抗治疗的患有转移性食管癌的患者的SLD随时间(研究天数)推移的百分比变化的图。显示了每例患者的腺癌(浅灰色)或鳞状细胞癌(深灰色)食道组织病理学亚型。显示了指示SLD增加20％和SLD减少30％的参考线。
图3为示出转移性食道腺癌的横切面的一系列计算机化/计算机断层扫描(CT)扫描图像，显示了接受过多线先前疗法的患者的持久的部分缓解。这些图像是在显示的日期拍摄的。
图4为示出患有黑素瘤的患者中的Ib/II期临床试验的研究设计的流程图。Atezo＝阿特珠单抗；CIT＝癌症免疫疗法；CLND＝完全性淋巴结清扫；Ipi＝伊匹木单抗；Nivo＝纳武利尤单抗；R＝随机化；Tira＝替瑞利尤单抗。
图5为研究方案的示意图，显示了患有黑素瘤的患者中的Ib/II期临床试验的队列1中的研究计划和活动的概述。CLND＝完全性淋巴结清扫；Comp.＝完成；CT＝计算机断层扫描；Discon.＝中止；M＝月；R＝随机化；Q3M＝每3个月；SFU＝存活随访；Tx＝治疗；W＝周。
图6为研究方案的示意图，显示了患有复发性或难治性B细胞非霍奇金氏淋巴瘤的患者中的Ib/II期临床试验的队列A至F中的研究计划和活动的概述。DLBCL＝弥漫性大B细胞淋巴瘤；FL＝滤泡性淋巴瘤；Gr＝级别；HGBL＝高级别B细胞淋巴瘤；IV＝静脉内施用；R/R＝复发性或难治性；SC＝皮下施用；trFL＝转化性滤泡性淋巴瘤。a对于队列A，详细给药计划和给药信息见图7A。b对于队列B，详细给药计划和给药信息见图7B。c/d对于队列E和F，详细给药计划和给药信息见图7C。基于队列A和B的安全性结果，针对队列C、D、E和F的莫苏尼妥珠单抗和替瑞利尤单抗给药将遵循队列A或队列B的莫苏尼妥珠单抗和替瑞利尤单抗给药。
图7A为患有复发性或难治性B细胞非霍奇金氏淋巴瘤的患者中的Ib/II期临床试验的队列A的给药计划和给药水平的示意图。D＝天；DLT＝剂量限制性毒性；IV＝静脉内施用；SC＝皮下施用。a参与者在最后一次研究药物施用结束后住院72小时。
图7B为患有复发性或难治性B细胞非霍奇金氏淋巴瘤的患者中的Ib/II期临床试验的队列B的给药计划和给药水平的示意图。D＝天；DLT＝剂量限制性毒性；IV＝静脉内施用；SC＝皮下施用。a参与者在最后一次研究药物施用结束后住院72小时。
图7C为患有复发性或难治性B细胞非霍奇金氏淋巴瘤的患者中的Ib/II期临床试验的队列E和F的给药计划和给药水平的示意图。D＝天；DLT＝剂量限制性毒性；IV＝静脉内施用；SC＝皮下施用。a参与者在最后一次研究药物施用结束后住院72小时。
图8A为针对INTRINSIC(鉴别和靶向CRC中的亚群)Ib/II期研究中的微卫星不稳定性高(MSI-H)转移性结直肠癌(CRC)队列中的患者的阿特珠单抗+替瑞利尤单抗+贝伐单抗治疗臂的研究设计的示意图。Atezo＝阿特珠单抗；Bev＝贝伐单抗；C＝周期；IHC＝免疫组织化学；MSI-H＝微卫星不稳定性高；NGS＝二代测序；Q3W＝每3周；Q6W＝每6周；Q12W＝每12周；Tira＝替瑞利尤单抗。
图8B为针对INTRINSIC(鉴别和靶向CRC中的亚群)Ib/II期研究中的MSI-H转移性CRC队列中的患者的阿特珠单抗+替瑞利尤单抗治疗臂的研究设计的示意图。Atezo＝阿特珠单抗；Bev＝贝伐单抗；C＝周期；IHC＝免疫组织化学；MSI-H＝微卫星不稳定性高；NGS＝二代测序；Q3W＝每3周；Q6W＝每6周；Q12W＝每12周；Tira＝替瑞利尤单抗。
具体实施方式
本发明提供了用于治疗癌症(例如，食管癌、黑素瘤、CD20阳性细胞增殖性疾患和结直肠癌)的治疗方法和组合物。本发明至少部分地基于以下发现：包括抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，抗TIGIT拮抗剂抗体，诸如替瑞利尤单抗)与PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗程序性死亡配体-1(PD-L1)抗体(例如，阿特珠单抗)或抗程序性死亡-1(PD-1)抗体)组合的免疫疗法可用于治疗癌症。本文还提供涉及此类组合和/或给药方案的组合物、用途和试剂盒。
I.定义
本文使用以下缩写：
ASCT 自体干细胞疗法 MSI 微卫星不稳定性
CAR 嵌合抗原受体 MSI-H 微卫星不稳定性高
CAS 化学文摘社 NHL 非霍奇金氏淋巴瘤
CDR 互补决定区 ORR 总缓解率/客观缓解率
CR 完全缓解 OS 总存活期
CRC 结直肠癌 PD-1 程序性死亡1
DLBCL 弥漫性大B细胞淋巴瘤 PD-L1 程序性死亡配体1
DNA 脱氧核糖核酸 PD-L2 程序性死亡配体2
DCR 疾病控制率 PFS 无进展存活期
DOR 缓解持续时间 PR 部分缓解
Fab 抗原结合片段 Q2W 每2周一次
Fc 可结晶片段 Q3W 每3周一次
FFPE 福尔马林固定石蜡包埋 Q4W 每4周一次
FL 滤泡性淋巴瘤 RNA 核糖核酸
FR 框架 R/R 复发性或难治性
HGBL 高级别B细胞淋巴瘤 SC 皮下
HVR 高变区 SLD 最长直径之和
IHC 免疫组织化学 trFL 转化性滤泡性淋巴瘤
IV 静脉内
如本文所用，术语“约”是指为此技术领域中的技术人员容易知晓的相应值的常见误差范围。在本文中提及“约”值或参数包括(且描述)涉及该值或参数本身的方面。例如，提及“约X”的描述包括“X”的描述。
如本文所用，“实现临床缓解”指在患者或患者群体中用一种或多种旨在治疗疾病的药剂治疗期间或之后(例如，在包括一种或多种药物的给药方案期间或之后，例如，在包括一个或多个给药周期的替瑞利尤单抗和阿特珠单抗的给药方案期间或之后)达到疾病(例如，癌症，例如食管癌)的疗效的一项或多项指标，其中该改善归因于治疗。疗效的指标可以为例如无进展存活期(PFS)(例如，等于或高于目标PFS持续时间的PFS持续时间)；总存活期(OS)(例如，等于或高于目标OS持续时间的OS持续时间)；部分缓解(PR)；完全缓解(CR)；一个或多个靶病灶的最长直径之和(SLD)减小；患者群体的病理缓解率(pRR)等于或高于目标pRR；患者群体的总缓解率(ORR)等于或高于目标ORR；患者的缓解持续时间(DOR)等于或高于目标DOR；患者群体的中位DOR等于或高于目标DOR；或患者群体的疾病控制率(DCR)等于或高于目标DCR。在一些情况下，疗效的指标为相对于比较群体(例如，研究的比较臂)的改善，例如，PFS持续时间等于或高于比较臂中的PFS持续时间；OS持续时间等于或高于比较臂中的OS持续时间；相对于比较臂，实现PR或CR的患者比例更高；相对于比较臂中的肿瘤SLD的减小，一个或多个靶病灶的SLD减小幅度更大；患者群体中的pRR等于或高于比较臂中的pRR；患者群体的ORR等于或高于比较臂中的ORR；患者的DOR等于或高于比较臂中的DOR；患者群体的中位DOR等于或高于比较臂中的DOR；或患者群体的DCR等于或高于比较臂中的DCR。
如本文所用的术语“比较”或“比较臂”是指在研究(例如，临床试验)中用作治疗或治疗臂的比较基础的参考(例如，参考患者群体)。例如，比较臂可以为临床试验中的对照臂。比较臂可包括接受对照治疗(诸如一种或多种先前批准的治疗或市售产品)的患者群体。
除非另外指明，否则如本文所用的术语“TIGIT”或“带有Ig和ITIM结构域的T细胞免疫受体”是指来自任何脊椎动物来源的任何天然TIGIT，该脊椎动物来源包括哺乳动物诸如灵长类动物(例如，人)和啮齿动物(例如，小鼠和大鼠)。TIGIT在本领域中也称为DKFZp667A205、FLJ39873、V-set和含有免疫球蛋白结构域的蛋白质9、含有V-set和跨膜结构域的蛋白质3、VSIG9、VSTM3和WUCAM。该术语涵盖“全长”、未加工的TIGIT(例如，具有SEQID NO:30的氨基酸序列的全长人TIGIT)，以及在细胞中加工产生的任何形式的TIGIT(例如，经过加工的没有信号序列的人TIGIT，其具有氨基酸序列SEQ ID NO:31)。该术语还涵盖TIGIT的天然存在变体，例如剪接变体或等位基因变体。示例性人TIGIT的氨基酸序列可以以UniProt登录号Q495A1找到。
如本文所用，“替瑞利尤单抗”为在开放单克隆技术(OMT)大鼠中由完全人IgG1/κMAb衍生的，其结合TIGIT并包含SEQ ID NO:33的重链序列和SEQ ID NO:34的轻链序列。替瑞利尤单抗在Fc结构域中包含两个N连接的糖基化位点(N306)。替瑞利尤单抗也描述于WHODrug Information(国际非专利药名)，拟定INN：清单117，第31卷，第2期，2017年7月7日发布(见第343页)中。
术语“抗TIGIT拮抗剂抗体”是指能够以足够的亲和力结合TIGIT从而基本上或完全抑制TIGIT的生物活性的抗体或其抗原结合片段或变体。例如，抗TIGIT拮抗剂抗体可以阻断通过PVR、PVRL2和/或PVRL3的信号传导，从而将由T细胞进行的功能性应答(例如，增殖、细胞因子产生、靶细胞杀伤)从功能障碍状态恢复到抗原刺激。例如，抗TIGIT拮抗剂抗体可以阻断通过PVR的信号传导，而不影响PVR-CD226相互作用。本领域普通技术人员将理解，在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体可以拮抗一种TIGIT活性而不影响另一种TIGIT活性。例如，用于本文所述的某些方法或用途中的抗TIGIT拮抗剂抗体是响应PVR相互作用、PVRL3相互作用或PVRL2相互作用之一而拮抗TIGIT活性的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，不影响或最小程度地影响任何其他TIGIT相互作用。在一个方面，例如如通过放射免疫测定(RIA)所测得的，抗TIGIT拮抗剂抗体与不相关的非TIGIT蛋白的结合程度小于所述抗体与TIGIT结合程度的约10％。在某些方面，与TIGIT结合的抗TIGIT拮抗剂抗体的解离常数(KD)为≤1μM、≤100nM、≤10nM、≤1nM、≤0.1nM、≤0.01nM或≤0.001nM(例如，10-8M或更小，例如10-8M至10-13M，例如10-9M至10-13M)。在某些方面，抗TIGIT拮抗剂抗体结合在来自不同物种的TIGIT之间保守的TIGIT表位或允许跨物种反应性的TIGIT上的表位。在一些方面，抗TIGIT结合抗体具有完整的Fc介导的效应子功能(例如，替瑞利尤单抗、维博利单抗(vibostolimab)、etigilimab、EOS084448或TJ-T6)。在一些方面，抗TIGIT结合抗体具有增强的Fc介导的效应子功能(例如，SGN-TGT)。在其他方面，抗TIGIT结合抗体缺乏Fc介导的效应子功能(例如，domvanalimab、BMS-986207、ASP8374或COM902)。在一些方面，抗TIGIT结合抗体为IgG1类抗体(例如，替瑞利尤单抗、维博利单抗、domvanalimab、BMS-986207、etigilimab、BGB-A1217、SGN-TGT、EOS084448(EOS-448)、TJ-T6或AB308)。在其他方面，抗TIGIT结合抗体为IgG4类抗体(例如，ASP8374或COM902)。在一方面，抗TIGIT拮抗剂抗体为替瑞利尤单抗。
术语“PD-1轴结合拮抗剂”是指一种分子，该分子抑制PD-1轴结合配偶体与其结合配偶体中的一者或多者的相互作用以消除由PD-1信号传导轴上的信号传导引起的T细胞功能障碍，其结果是恢复或增强T细胞功能(例如，增殖、细胞因子产生和/或靶细胞杀伤)。如本文所用，PD-1轴结合拮抗剂包括PD-L1结合拮抗剂、PD-1结合拮抗剂和PD-L2结合拮抗剂。在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂包括PD-L1结合拮抗剂或PD-1结合拮抗剂。在一优选的方面，PD-1轴结合拮抗剂为PD-L1结合拮抗剂。
术语“PD-L1结合拮抗剂”是指降低、阻断、抑制、消除或干扰由PD-L1与其结合配偶体中的一者或多者(诸如PD-1和/或B7-1)相互作用产生的信号传导的分子。在一些情况下，PD-L1结合拮抗剂为抑制PD-L1与其结合配偶体的结合的分子。在一个具体方面，PD-L1结合拮抗剂抑制PD-L1与PD-1和/或B7-1的结合。在一些情况下，PD-L1结合拮抗剂包括抗PD-L1抗体、其抗原结合片段、免疫粘附素、融合蛋白、寡肽和其他降低、阻断、抑制、消除或干扰由PD-L1与其结合配偶体中的一者或多者(诸如PD-1和/或B7-1)相互作用产生的信号转导的分子。在一种情况下，PD-L1结合拮抗剂减少由或通过T淋巴细胞上表达的细胞表面蛋白介导的通过PD-L1的信号传导所介导的负共刺激信号，从而使功能障碍的T细胞功能障碍较少(例如，提高效应子对抗原识别的响应)。在一些情况下，PD-L1结合拮抗剂与PD-L1结合。在一些情况下，PD-L1结合拮抗剂为抗PD-L1抗体(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体)。示例性抗PD-L1拮抗剂抗体包括阿特珠单抗、MDX-1105、MEDI4736(德瓦鲁单抗(durvalumab))、MSB0010718C(阿维单抗(avelumab))、SHR-1316、CS1001、恩沃利单抗(envafolimab)、TQB2450、ZKAB001、LP-002、CX-072、IMC-001、KL-A167、APL-502、柯希利单抗(cosibelimab)、洛达利单抗(lodapolimab)、FAZ053、TG-1501、BGB-A333、BCD-135、AK-106、LDP、GR1405、HLX20、MSB2311、RC98、PDL-GEX、KD036、KY1003、YBL-007和HS-636。在一些方面，抗PD-L1抗体为阿特珠单抗、MDX-1105、MEDI4736(德瓦鲁单抗)或MSB0010718C(阿维单抗)。在一个具体方面，PD-L1结合拮抗剂为MDX-1105。在另一具体方面，PD-L1结合拮抗剂为MEDI4736(德瓦鲁单抗)。在另一具体方面，PD-L1结合拮抗剂为MSB0010718C(阿维单抗)。在其他方面，PD-L1结合拮抗剂可以是小分子，例如，GS-4224、INCB086550、MAX-10181、INCB090244、CA-170或ABSK041，其在一些情况下可以口服施用。其他示例性PD-L1结合拮抗剂包括AVA-004、MT-6035、VXM10、LYN192、GB7003和JS-003。在一优选的方面，PD-L1结合拮抗剂为阿特珠单抗。
术语“PD-1结合拮抗剂”是指减少、阻断、抑制、消除或干扰由PD-1与其结合配偶体中的一者或多者(诸如PD-L1和/或PD-L2)相互作用产生的信号传导的分子。PD-1(程序性死亡1)在本领域中也称为“程序性细胞死亡1”、“PDCD1”、“CD279”和“SLEB2”。示例性人PD-1在UniProtKB/Swiss-Prot登录号Q15116中示出。在一些情况下，PD-1结合拮抗剂为抑制PD-1与其结合配偶体中的一者或多者结合的分子。在一个具体方面，PD-1结合拮抗剂抑制PD-1与PD-L1和/或PD-L2的结合。例如，PD-1结合拮抗剂包括抗PD-1抗体及其抗原结合片段、免疫粘附素、融合蛋白、寡肽以及其他减少、阻断、抑制、消除或干扰由PD-1与PD-L1和/或PD-L2相互作用产生的信号传导的分子。在一种情况下，PD-1结合拮抗剂减少由或通过T淋巴细胞上表达的细胞表面蛋白介导的通过PD-1的信号传导所介导的负共刺激信号，从而使功能障碍的T细胞功能障碍较少(例如，提高效应子对抗原识别的应答)。在一些情况下，PD-1结合拮抗剂与PD-1结合。在一些情况下，PD-1结合拮抗剂为抗PD-1抗体(例如，抗PD-1拮抗剂抗体)。示例性的抗PD-1拮抗剂抗体包括纳武单抗、帕博利珠单抗、MEDI-0680、PDR001(斯巴达珠单抗)、REGN2810(西米普利单抗)、BGB-108、帕洛利单抗、卡瑞利珠单抗、信迪利单抗、替雷利珠单抗、特瑞普利单抗、多塔利单抗、瑞弗利单抗、萨善利单抗、派安普利单抗、CS1003、HLX10、SCT-I10A、赛帕利单抗、巴替利单抗、杰诺单抗、BI 754091、西利单抗、YBL-006、BAT1306、HX008、布格利单抗、AMG 404、CX-188、JTX-4014、609A、Sym021、LZM009、F520、SG001、AM0001、ENUM 244C8、ENUM 388D4、STI-1110、AK-103和hAb21。在一个具体方面，PD-1结合拮抗剂为MDX-1106(纳武单抗)。在另一具体方面，PD-1结合拮抗剂为MK-3475(派姆单抗)。在另一具体方面，PD-1结合拮抗剂为PD-L2融合蛋白，例如，AMP-224。在另一具体方面，PD-1结合拮抗剂为MED1-0680。在另一具体方面，PD-1结合拮抗剂为PDR001(斯巴达珠单抗)。在另一具体方面，PD-1结合拮抗剂为REGN2810(西米普利单抗)。在另一具体方面，PD-1结合拮抗剂为BGB-108。在另一具体方面，PD-1结合拮抗剂为帕洛利单抗。在另一具体方面，PD-1结合拮抗剂为卡瑞利珠单抗。在另一具体方面，PD-1结合拮抗剂为信迪利单抗。在另一具体方面，PD-1结合拮抗剂为替雷利珠单抗。在另一具体方面，PD-1结合拮抗剂为特瑞普利单抗。其他额外的示例性PD-1结合拮抗剂包括BION-004、CB201、AUNP-012、ADG104和LBL-006。
术语“PD-L2结合拮抗剂”是指减少、阻断、抑制、消除或干扰由PD-L2与其一种或多种结合配偶体(诸如PD-1)的相互作用产生的信号传导的分子。PD-L2(程序性死亡配体2)在本领域中也称为“程序性细胞死亡1配体2”、“PDCD1LG2”、“CD273”、“B7-DC”、“Btdc”和“PDL2”。示例性人PD-L2在UniProtKB/Swiss-Prot登录号Q9BQ51中示出。在一些情况下，PD-L2结合拮抗剂为抑制PD-L2与其结合配偶体中的一者或多者的结合的分子。在一个具体方面，PD-L2结合拮抗剂抑制PD-L2与PD-1的结合。示例性PD-L2拮抗剂包括抗PD-L2抗体、其抗原结合片段、免疫粘附素、融合蛋白、寡肽和其他降低、阻断、抑制、消除或干扰由PD-L2与其结合配偶体(诸如PD-1)中的一者或多者相互作用产生的信号传导的分子。在一方面，PD-L2结合拮抗剂减少由T淋巴细胞上表达的细胞表面蛋白介导的或通过其表达的负共刺激信号，该表面蛋白通过PD-L2介导的信号传导使功能障碍的T细胞功能障碍较少(例如，提高效应子对抗原识别的反应)。在一些方面，PD-L2结合拮抗剂与PD-L2结合。在一些方面，PD-L2结合拮抗剂为免疫粘附素。在其他方面，PD-L2结合拮抗剂为抗PD-L2拮抗剂抗体。
术语“程序性死亡配体1”和“PD-L1”在本文中是指天然序列人PD-L1多肽。天然序列PD-L1多肽在Uniprot登录号Q9NZQ7下提供。例如，天然序列PD-L1可具有如Uniprot登录号Q9NZQ7-1(异构体1)中所示的氨基酸序列(SEQ ID NO:32)。在另一示例中，天然序列PD-L1可以具有如Uniprot登录号Q9NZQ7-2(异构体2)中所述的氨基酸序列。在又一示例中，天然序列PD-L1可以具有如Uniprot登录号Q9NZQ7-3(异构体3)中所述的氨基酸序列。PD-L1在本领域中也称为“程序性细胞死亡1配体1”、“PDCD1LG1”、“CD274”、“B7-H”和“PDL1”。
当提及可变结构域中的残基(大约为轻链的残基1-107和重链的残基1-113)时，通常使用Kabat编号系统(例如，Kabat等人,Sequences of Immunological Interest.第5版,Public Health Service,National Institutes of Health,Bethesda,Md.(1991))。当提及免疫球蛋白重链恒定区中的残基时，通常使用“EU编号系统”或“EU索引”(例如，上述Kabat等人所报道的EU索引)。“Kabat所述的EU索引”是指人类IgG1 EU抗体的残基编号。
出于本文的目的，“阿特珠单抗”为Fc工程化的、人源化的、非糖基化的IgG1 kappa免疫球蛋白，其结合PD-L1并且包含SEQ ID NO:1的重链序列和SEQ ID NO:2的轻链序列。阿特珠单抗在重链上的位置297处包含单个氨基酸取代(天冬酰胺到丙氨酸)(N297A)，使用Fc区氨基酸残基的EU编号，这导致与Fc受体结合最小的非糖基化抗体。阿特珠单抗也描述于WHO Drug Information(国际非专利药名)，拟定INN：清单112，第28卷，第4期，2015年1月16日发布(见第485页)中。
术语“癌症”是指由部分身体中异常细胞不受控制的分裂引起的疾病。在一种情况下，癌症为食管癌。癌症可能是局部晚期的或转移性的。在一些情况下，癌症为局部晚期的。在其他情况下，癌症为转移性的。在一些情况下，癌症可能是不可切除的(例如，不可切除的局部晚期或转移性癌症)。癌症的示例包括但不限于癌、淋巴瘤、母细胞瘤、肉瘤和白血病或淋巴样恶性肿瘤。癌症的更特定的实例包括但不限于食管癌(例如，鳞状细胞癌(例如，食道鳞状细胞癌(ESCC))、腺癌(例如，食道腺癌(EAC))或具有神经内分泌组织病理的食管癌(例如，食道神经内分泌癌(ENEC))。另外的实例包括转移性食管癌(例如，转移性ESCC、转移性EAC或转移性ENEC)。在一种情况下，癌症为结直肠癌(CRC)。如本文所用，术语“结直肠癌”、“CRC”、“结肠癌”或“肠癌”是指从大肠(例如，结肠或直肠)发展而来的癌症(例如，结直肠腺癌)。在一些情况下，CRC为转移性的。在一些情况下，CRC为微卫星不稳定性(MSI)高(MSI-H)的(例如，MSI-H转移性CRC)。癌症的其他实例包括但不限于血液癌症诸如成熟B细胞癌症，不包括霍奇金氏淋巴瘤，但包括非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)诸如弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)(其可以为复发性或难治性DLBCL或Richter转化)。癌症的其他具体实例还生发中心B细胞样(GCB)弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、活化B细胞样(ABC)DLBCL、滤泡性淋巴瘤(FL)、转化性FL、套细胞淋巴瘤(MCL)、急性骨髓性白血病(AML)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、边缘区淋巴瘤(MZL)、转化性MZL、高级别B细胞淋巴瘤、原发性纵隔(胸腺)大B细胞淋巴瘤(PMLBCL)、小淋巴细胞白血病(SLL)、淋巴浆细胞性淋巴瘤(LL)、转化性LL、华氏巨球蛋白血症(Waldenstrom macroglobulinemia,WM)、中枢神经系统淋巴瘤(CNSL)、伯基特淋巴瘤(Burkitt's lymphoma,BL)、B细胞幼淋巴细胞白血病、脾边缘区淋巴瘤、毛细胞白血病、脾脏淋巴瘤/白血病(无法分类)、脾脏弥漫性红髓小B细胞淋巴瘤、变异型毛细胞白血病、重链病(α重链病、γ重链病、μ重链病)、浆细胞骨髓瘤、骨孤立性浆细胞瘤、骨外浆细胞瘤、黏膜相关淋巴组织结外边缘区淋巴瘤(MALT淋巴瘤)、淋巴结边缘区淋巴瘤、小儿淋巴结边缘区淋巴瘤、小儿滤泡性淋巴瘤、原发性皮肤滤泡中心淋巴瘤、富含T细胞/组织细胞的大B细胞淋巴瘤、CNS的原发性DLBCL、原发性皮肤DLBCL(腿型)、老年EBV阳性DLBCL、与慢性炎症相关的DLBCL、淋巴瘤样肉芽肿、原发性纵隔(胸腺)大B细胞淋巴瘤、血管内大B细胞淋巴瘤、ALK阳性大B细胞淋巴瘤、浆母细胞淋巴瘤、HHV8相关多中心卡斯尔曼病(Castlemandisease)引起的大B细胞淋巴瘤、原发性渗出性淋巴瘤：具有在DLBCL与伯基特淋巴瘤之间的特征的无法分类的B细胞淋巴瘤，以及具有在DLBCL与典型霍奇金氏淋巴瘤之间第特征的无法分类的B细胞淋巴瘤。癌症的另外的实例包括但不限于癌、淋巴瘤、母细胞瘤、肉瘤和白血病或淋巴样恶性肿瘤，包括B细胞淋巴瘤。此类癌症的更特定的实例包括但不限于多发性骨髓瘤(MM)；低级别/滤泡性NHL；小淋巴细胞(SL)NHL；中级别/滤泡性NHL；中级别弥漫性NHL；高级别免疫母细胞NHL；高级别淋巴母细胞NHL；-高级别小非截切细胞NHL；大块病NHL；AIDS相关淋巴瘤；和急性淋巴母细胞白血病(ALL)；慢性骨髓胚细胞性白血病；以及移植后淋巴增殖性疾患(PTLD)。
术语“B细胞增殖性疾患”或“B细胞恶性肿瘤”是指与某种程度的异常B细胞增殖相关的疾患，并且包括例如淋巴瘤、白血病、骨髓瘤和骨髓增生异常综合征。在一些情况下，B细胞增殖性疾患为淋巴瘤，诸如非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)，包括例如滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，复发性和/或难治性FL或转化性FL)、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)(例如，复发性或难治性DLBCL或Richter转化)、MCL、高级别B细胞淋巴瘤或PMLBCL)。在另一个实施例中，B细胞增殖性疾患为白血病，诸如慢性淋巴细胞白血病(CLL)。在一个实施例中，B细胞增殖性疾患为复发性和/或难治性FL。
术语“肿瘤”是指所有赘生性细胞生长和增殖，无论是恶性还是良性，以及所有前癌性和癌性细胞和组织。术语“癌症”、“癌性”、“细胞增生性疾患”、“增生性疾患”和“肿瘤”在本文中并不互相排斥。
如本文所用，“肿瘤细胞”是指存在于肿瘤或其样品中的任何肿瘤细胞。使用本领域已知的和/或本文所述的方法，可以将肿瘤细胞与可能存在于肿瘤样品中的其他细胞，例如基质细胞和肿瘤浸润免疫细胞区分开来。
如本文所用，“微卫星不稳定性状态”或“MSI状态”是指患者肿瘤组织中微卫星稳定性的表征。患者的肿瘤组织的特征可以在于“微卫星不稳定性高”(“MSI-H”)或“微卫星稳定”(“MSS”)。例如，可以通过使用基于PCR的方法来评估MSI状态，诸如MSI分析系统(Promega,Madison,WI)，它由五个假单态单核苷酸重复序列(BAT-25、BAT-26、NR-21、NR-24和MONO-27)构成以检测MSI和不允许两个五核苷酸基因座(PentaC和PendaD)，以确认正常样品与肿瘤样品之间的同一性。每个微卫星基因座的碱基大小可以例如通过凝胶电泳确定，并且如果两个或更多个单核苷酸基因座与种系DNA相比长度不同，则可以将肿瘤指定为MSI-H。参见例如，Le等人NEJM 372:2509-2520,2015。MSI状态还可以例如通过使用二代测序(例如，基于血液的Liquid CDx NGS测定)、免疫组织化学(IHC)或其组合来评定。在其他实施例中，患者可能具有低水平的微卫星不稳定性(例如，MSS)。
“肿瘤免疫”是指肿瘤逃避免疫识别和清除的过程。因此，作为治疗概念，当这种逃避被减弱，并且肿瘤被免疫系统识别和攻击时，肿瘤免疫被“治疗”。肿瘤识别的实例包括肿瘤结合、肿瘤缩小和肿瘤清除。
如本文所用，“转移”是指癌症从其原发部位扩散到身体的其他部位。癌细胞可以脱离原发肿瘤，渗入淋巴管和血管，在血流中循环，并在身体其他部位的正常组织的远处病灶中生长(转移)。转移可以是局部的或远处的。转移是一个连续的过程，取决于肿瘤细胞从原发肿瘤脱落，穿过血流，并在远处停止。在新部位，细胞建立血液供应，并可以生长形成危及生命的肿块。肿瘤细胞内的刺激性和抑制性分子通路调节这种行为，并且肿瘤细胞与远处宿主细胞之间的相互作用也很重要。
“难治性疾病”被定义为在至少一线疗法后未发生完全缓解的疾病，特别是CD20阳性细胞增殖性疾患(例如，B细胞增殖性疾患，例如非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)，例如弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)、滤泡性淋巴瘤(FL)，例如转化性FL(trFL)以及1、2、3a或3b级FL)。在一个实施例中，难治性CD20阳性细胞增殖性疾患(例如，难治性NHL)被定义为对先前疗法无反应或在6个月内复发。在一个实施例中，难治性NHL的特征在于以下一者或多者：疾病进展(PD)为针对一线疗法的最佳应答；疾病稳定(SD)为至少一种一线疗法(例如，至少一种含有抗CD20定向疗法，例如包括抗CD20抗体，例如抗CD20单克隆抗体，例如利妥昔单抗或奥滨尤妥珠单抗)后的最佳应答；部分缓解(PR)为最佳应答；以及在部分缓解后发生经活检证明的残留疾病或疾病进展。“复发性疾病”被定义为在一线疗法后发生完全缓解，随后疾病(例如，CD20阳性细胞增殖性疾患，例如NHL)复发)的疾病，特别是CD20阳性细胞增殖性疾患(例如，B细胞增殖性疾患，例如非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)，例如弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)、滤泡性淋巴瘤(FL)，例如转化性FL(trFL)和1级、2级、3a级或3b级FL)。在一个实施例中，NHL复发通过活检证明。在一个实施例中，患者在至少一种先前全身性治疗方案(例如，至少一种含有抗CD20定向疗法，例如包括抗CD20抗体，例如抗CD20单克隆抗体，例如利妥昔单抗或奥滨尤妥珠单抗)之后复发或未能缓解。在一个实施例中，患者在至少两种先前全身性治疗方案(例如，至少一种含有抗CD20定向疗法，例如包括抗CD20抗体，例如抗CD20单克隆抗体，例如利妥昔单抗或奥滨尤妥珠单抗)之后复发或未能缓解。
如本文所用，“治疗”包括用有效量的治疗剂(例如，PD-1轴结合拮抗剂(例如，阿特珠单抗))或治疗剂的组合(例如，PD-1轴拮抗剂和抗TIGIT拮抗剂抗体，例如阿特珠单抗和替瑞利尤单抗)进行的有效的癌症治疗。本文中的治疗尤其包括辅助疗法、新辅助疗法、非转移性癌症疗法(例如，局部晚期癌症疗法)和转移性癌症疗法。治疗可以是一线治疗(例如，患者可能之前未治疗或不曾接受过既往全身性疗法)，或者二线或后续治疗。
在本文中，“有效量”是指实现治疗效果的治疗剂(例如，PD-1轴结合拮抗剂(例如，阿特珠单抗))或治疗剂的组合(例如，PD-1轴拮抗剂和抗TIGIT拮抗剂抗体，例如阿特珠单抗和替瑞利尤单抗))的量。在一些实例中，治疗剂或治疗剂组合的有效量是实现改善的病理缓解率(PRR)、改善的总缓解率(ORR)、改善的疾病控制率(DCR)、完全缓解(CR)、病理完全缓解(pCR)、部分缓解(PR)、改善的存活期(例如，无疾病存活期(DFS)和/或无进展存活期(PFS)和/或总存活期(OS))和/或改善的缓解持续时间(DOR)的临床终点的治疗剂或治疗剂组合的量。
如本文所用，“完全缓解”和“CR”是指所有靶病灶的消失。
如本文所用，“部分缓解”和“PR”是指以治疗之前的基线最长直径之和(SLD)为参考，靶病灶的SLD减少至少30％。
如本文所用，“疾病进展”和“PD”是指靶病灶的SLD增加至少20％，以包括基线在内的研究中的最小总和(最低点)为参考。出现一个或多个新病灶也可被视为PD。
如本文所用，“疾病稳定”和“SD”是指以最小总和作为参考，既没有充分缩小以符合PR，也没有充分增加以符合PD。
如本文所用，“疾病控制率”和“DCR”是指已实现CR、PR和疾病稳定(SD)的患有晚期或转移性癌症的患者的百分比。例如，DCR可定义为具有持续≥12周的SD、或CR或PR患者的比例，如研究者根据RECIST v1.1所确定。
如本文所用，“总缓解率”、“客观缓解率”和“ORR”可互换，是指完全CR率与PR率之和。例如，客观缓解可定义为符合实体瘤疗效评估标准(RECIST)v.1.1的CR或PR，如由研究者所确定并且通过初始记录后≥4周的重复评定所确认。在另一实例中，ORR可定义为相隔≥4周连续两次具有CR或PR的患者比例，如由研究者根据RECIST v1.1所确定。
如本文所用，“病理缓解率”和“pRR”可互换地指具有病理完全缓解(pCR，例如，所治疗的肿瘤床中完全不存在活肿瘤)、病理接近完全缓解(pnCR，例如，<10％的经治疗的肿瘤床被活肿瘤细胞占据)以及病理部分缓解(pPR，例如，<50％的经治疗的肿瘤床被活肿瘤细胞占据)的患者的比例，例如在手术时。
如本文所用，“无进展存活期”和“PFS”是指在治疗期间和治疗后，癌症在其期间不恶化的时间长度。PFS可包括患者已经历CR或PR的时间量，以及患者已经历疾病稳定的时间量。例如，PFS可定义为从第一次研究治疗到第一次出现进展或因任何原因死亡(以先发生者为准)的时间，如由研究者根据RECIST v.1.1所确定。在另一实例中，PFS可定义为从研究入组到第一次出现进展或因任何原因死亡(以先发生者为准)的时间，如由研究者根据RECIST v.1.1所确定。
如本文所用，“总存活期”和“OS”是指从诊断日期或开始对疾病(例如，癌症)的治疗起，患者仍然活着的时间长度。例如，OS可定义为从第一次研究治疗到因任何原因死亡的时间。
如本文所用，术语“缓解持续时间”和“DOR”是指从记录到肿瘤缓解直至疾病进展或死亡(以先发生者为准)的时间长度。例如，DOR可定义为从首次出现记录的客观缓解到首次记录的疾病进展或因任何原因死亡的时间(以先发生者为准)的时间，如由研究者根据RECIST v1.1所确定。
如本文所用，术语“化学治疗剂”是指可用于治疗癌症(诸如食管癌)的化合物。化学治疗剂的实例包括EGFR抑制剂(包括小分子抑制剂(例如厄洛替尼(基因泰克/OSIPharm.)；PD 183805(CI 1033，2-丙烯酰胺，N-[4-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]-7-[3-(4-吗啉基)丙氧基]-6-喹唑啉基]-，二盐酸盐，Pfizer Inc.)；ZD1839，吉非替尼(4-(3'-氯-4'-氟苯氨基)-7-甲氧基-6-(3-吗啉代丙氧基)喹唑啉，阿斯利康)；ZM 105180((6-氨基-4-(3-甲基苯基-氨基)-喹唑啉，Zeneca)；BIBX-1382(N8-(3-氯-4-氟-苯基)-N2-(1-甲基-哌啶-4-基)-嘧啶并[5,4-d]嘧啶-2,8-二胺，BoehringerIngelheim)；PKI-166((R)-4-[4-[(1-苯乙基)氨基]-1H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-基]-苯酚)；(R)-6-(4-羟苯基)-4-[(1-苯乙基)氨基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶)；CL-387785(N-[4-[(3-溴苯基)氨基]-6-喹唑啉基]-2-丁炔酰胺)；EKB-569(N-[4-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺)(Wyeth)；AG1478(Pfizer)；AG1571(SU 5271；Pfizer)；以及双重EGFR/HER2酪氨酸激酶抑制剂，诸如拉帕替尼(GSK572016或N-[3-氯-4-[(3氟苯基)甲氧基]苯基]-6[5[[[2甲基磺酰基)乙基]氨基]甲基]-2-呋喃基]-4-喹唑啉胺))；酪氨酸激酶抑制剂(例如EGFR抑制剂；小分子HER2酪氨酸激酶抑制剂，诸如TAK165(Takeda)；CP-724,714，ErbB2受体酪氨酸激酶之口服选择性抑制剂(Pfizer和OSI)；双重HER抑制剂，诸如EKB-569(可从Wyeth获得)，其优先结合EGFR但同时抑制HER2和EGFR过表达细胞；PKI-166(Novartis)；泛HER抑制剂，诸如卡那替尼(CI-1033；Pharmacia)；Raf-1抑制剂，诸如反义剂ISIS-5132(ISIS Pharmaceuticals)，其抑制Raf-1信号传导；非HER靶向酪氨酸激酶抑制剂，诸如甲磺酸伊马替尼(/>Glaxo SmithKline)；多靶点酪氨酸激酶抑制剂，诸如舒尼替尼(/>Pfizer)；VEGF受体酪氨酸激酶抑制剂，诸如瓦他拉尼(PTK787/ZK222584,Novartis/Schering AG)；MAPK细胞外调节激酶I抑制剂CI-1040(Pharmacia)；喹唑啉，诸如PD 153035,4-(3-氯苯胺)喹唑啉；吡啶并嘧啶；嘧啶并嘧啶；吡咯并嘧啶，诸如CGP 59326、CGP 60261和CGP 62706；吡唑并嘧啶，4-(苯基氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶；姜黄素(二阿魏酰甲烷，4,5-双(4-氟苯氨基)邻苯二甲酰亚胺)；含有硝基噻吩部分的酪氨酸；PD-0183805(Warner-Lamber)；反义分子(例如，那些与HER编码核酸结合的分子)；喹喔啉(美国专利号5,804,396)；色氨酸(美国专利号5,804,396)；ZD6474(Astra Zeneca)；PTK-787(Novartis/Schering AG)；泛HER抑制剂，诸如CI-1033(Pfizer)；Affinitac(ISIS 3521；Isis/Lilly)；PKI 166(Novartis)；GW2016(Glaxo SmithKline)；CI-1033(Pfizer)；EKB-569(Wyeth)；Semaxinib(Pfizer)；ZD6474(阿斯利康)；PTK-787(Novartis/Schering AG)；INC-1C11(Imclone)；以及雷帕霉素(西罗莫司，/>))；蛋白酶体抑制剂，诸如硼替佐米(/>Millennium Pharm.)；双硫仑；表没食子儿茶素没食子酸酯；盐孢菌素A；卡非佐米；17-AAG(格尔德霉素)；根赤壳菌素；乳酸脱氢酶A(LDH-A)；氟维司群(/>阿斯利康)；利妥唑(/>Novartis)，菲那舒那(finasunate)(/>Novartis)；奥沙利铂(/>Sanofi)；5-FU(5-氟尿嘧啶)；亚叶酸；洛那米布(SCH 66336)；索拉非尼(/>Bayer Labs)；AG1478，烷化剂，诸如噻替哌和/>环磷酰胺；烷基磺酸盐，诸如硫酸布他卡因、英丙舒凡和哌泊舒凡；氮丙啶，诸如苯佐替派、卡波醌、美妥替派和乌瑞替派；乙烯亚胺和甲基三聚氰胺，包括六甲蜜胺、三伸乙基三聚氰胺、三伸乙基磷酰胺、三伸乙基硫代磷酰胺和三甲基三聚氰胺；多聚乙酰(尤其是布拉他辛及布拉他西酮)；喜树碱(包括拓扑替康和抗癌妥)；苔藓抑素；卡拉汀(Callystatin)；CC-1065(包括其阿多来新、卡折来新和比折来新合成类似物)；隐藻素(尤其是隐藻素1和隐藻素8)；肾上腺皮质激素(包括泼尼松和泼尼松龙)；醋酸环丙孕酮；5α-还原酶，包括非那雄胺和度他雄胺)；伏立诺他、罗米地辛、帕比司他、丙戊酸、莫西司他多拉司他(mocetinostatdolastatin)；阿地白介素、滑石倍癌霉素(包括合成类似物，KW-2189和CB1-TM1)；五加素；水鬼蕉碱；匍枝珊瑚醇；海绵抑素；氮芥类，诸如氮芥苯丁酸、萘氮芥、氯磷酰胺、雌莫司汀、异环磷酰胺、二氯甲基二乙胺、盐酸甲氧氮芥、霉法兰、新氮芥、苯芥胆甾醇(phenesterine)、泼尼莫司汀、曲磷胺、尿嘧啶氮芥；亚硝基脲类，诸如卡莫司汀、氯脲霉素、福莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀和雷莫司汀；抗生素，诸如烯二炔抗生素(例如加利车霉素，尤其是加利车霉素γ1和加利车霉素ω1)；蒽环抗生素，包括蒽环抗生素A；双膦酸盐，诸如氯膦酸盐；埃斯培拉霉素；以及新制癌素生色团及相关色蛋白烯二炔抗生素生色团)、阿克拉霉素、放线菌素、氨茴霉素、重氮丝氨酸、放线菌素C、卡拉比星、洋红霉素、嗜癌霉素、色霉素、放线菌素D、地托比星、6-二氮-5-氧-L-正白氨酸、吗啉代阿霉素、氰基吗啉基代阿霉素、2-吡咯并-阿霉素及脱氧阿霉素)、表柔比星、依索比星、伊达比星、麻西罗霉素、丝裂霉素诸如丝裂霉素C、霉酚酸、诺拉霉素、橄榄霉素、培洛霉素、泊非霉素、嘌呤霉素、三铁阿霉素、罗多比星、链黑霉素、链佐星、杀结核菌素、乌苯美司、净司他丁、佐柔比星；抗代谢物类诸如甲氨蝶呤和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物诸如二甲叶酸、甲氨蝶呤、蝶罗呤、三甲曲沙；嘌呤类似物诸如氟达拉滨、6-巯基嘌呤、硫脒嘌呤、硫鸟嘌呤；嘧啶类似物诸如安西他滨、阿扎胞苷、6-氮尿苷、卡莫氟、阿糖胞苷、双脱氧尿苷、脱氧氟尿苷、依诺他滨、氟尿苷；雄激素类诸如卡鲁睪酮、丙酸屈他雄酮、环硫雄醇、美雄烷、睪内酯；抗肾上腺素类诸如氨鲁米特、米托坦、曲洛司坦；叶酸补充剂诸如亚叶酸；醋葡醛内酯；醛磷酰胺糖苷；氨基乙酰丙酸；恩尿嘧啶、安吖啶；阿莫司汀；比生群；依达曲沙；地磷酰胺；地美可辛；地吖醌；伊佛米新；依利醋铵；埃博霉素；依托格鲁；硝酸镓；羟基脲；香菇多糖；洛尼达明；美登素类生物碱类，诸如美登素和安丝菌素；米托胍腙；米托蒽醌；莫哌达醇；二胺硝吖啶；喷司他丁；蛋氨氮芥；吡柔比星；洛索蒽醌；鬼臼酸；2-乙基酰肼；丙卡巴肼；/>多糖复合物(JHS NaturalProducts)；雷佐生；根霉素；西索菲兰；螺旋锗；细交链孢菌酮酸；三亚胺醌；2,2',2”-三氯三乙胺；单端孢菌素类(尤其是T-2毒素、疣孢菌素A、杆孢菌素A和蛇行菌素)；乌拉坦；长春地辛；达喀尔巴嗪；甘露醇氮；二溴甘露醇；二溴卫矛醇；哌泊溴烷；加西托星；阿拉伯糖苷(“Ara-C”)；环磷酰胺、塞替派；苯丁酸氮芥；/>(吉西他滨)；6-硫鸟嘌呤；巯嘌呤；甲氨蝶呤；依托泊苷(VP-16)；异环磷酰胺；米托蒽醌；诺凡酮；替尼泊苷；依达曲沙；道诺霉素；氨基喋呤；卡培他滨/>伊班膦酸盐；CPT-11；拓扑异构酶抑制剂RFS2000；二氟甲基鸟氨酸(DMFO)；类视色素诸如视黄酸；以及上述任一者的药用盐、酸、前药和衍生物。
化疗剂还包括：(i)起到调节或抑制激素对肿瘤的作用的抗激素剂，诸如抗雌激素和选择性雌激素受体调节剂(SERM)，包括例如他莫昔芬(包括枸橼酸他莫昔芬)、雷洛昔芬、屈洛昔芬(droloxifene)、iodoxyfene、4-羟基他莫昔芬、曲奥昔芬(trioxifene)、雷洛昔芬盐酸盐(keoxifene)、LY117018、奥那司酮(onapristone)和(枸橼酸托米芬(toremifine citrate))；(ii)抑制芳香化酶的芳香化酶抑制剂，该酶调节肾上腺的雌激素产生，诸如，例如4(5)-咪唑、氨鲁米特、/>(醋酸甲地孕酮)、/>(依西美坦；辉瑞公司)、福美司坦(formestanie)、法屈唑(fadrozole)、/>(伏洛唑(vorozole))、/>(来曲唑；诺华公司)和(阿那曲唑；阿斯利康公司)；(iii)抗雄激素，诸如氟他胺(flutamide)、尼鲁米特(nilutamide)、比卡鲁胺(bicalutamide)、亮丙瑞林(leuprolide)和戈舍瑞林(goserelin)；布舍瑞林(buserelin)、曲普瑞林(tripterelin)、醋酸甲羟孕酮、己烯雌酚、倍美力、氟甲睾酮、所有反式视黄酸、维甲酰酚胺(fenretinide)以及曲沙他滨(1,3-二氧戊环核苷胞嘧啶类似物)；(iv)蛋白激酶抑制剂；(v)脂质激酶抑制剂；(vi)反义寡核苷酸，特别是那些抑制与异常细胞增殖有关的信号传导途径中的基因表达的寡核苷酸，诸如，例如PKC-α、Ralf和H-Ras；(vii)核酶，诸如VEGF表达抑制剂(例如，/>)和HER2表达抑制剂；(viii)疫苗，诸如基因疗法疫苗，例如/>和(ix)生长抑制剂，包括长春类(例如，长春新碱和长春碱)、/>(长春瑞滨)、紫杉烷类(例如，紫杉醇、白蛋白结合型紫杉醇和多西他赛(docetaxel))、拓扑异构酶II抑制剂(例如，多柔比星、表柔比星、道诺霉素、依托泊苷和博来霉素)和DNA烷化剂(例如，它莫西芬(tamoxigen)、强的松、达卡巴嗪、二氯甲基二乙胺、顺铂、甲氨蝶呤、5-氟尿嘧啶和ara-C)；以及(x)上述任一项的药用盐、酸、前药和衍生物。
如本文所用，术语“细胞毒性剂”是指对细胞有害(例如，造成细胞死亡、抑制增殖或以其他方式阻碍细胞功能)的任何试剂。细胞毒性剂包括但不限于放射性同位素(例如，At211、I131、I125、Y90、Re186、Re188、Sm153、Bi212、P32、Pb212和Lu的放射性同位素)；化疗剂；酶及其片段，诸如溶核酶；以及毒素，诸如细菌、真菌、植物或动物来源的小分子毒素或酶活性毒素，包括其片段和/或变体。示例性细胞毒性剂可以选自抗微管剂、铂配位络合物、烷化剂、抗生素剂、拓扑异构酶II抑制剂、抗代谢物、拓扑异构酶I抑制剂、激素和激素类似物、信号转导途径抑制剂、非受体酪氨酸激酶血管生成抑制剂、免疫治疗剂、促凋亡剂、LDH-A抑制剂、脂肪酸生物合成抑制剂、细胞周期信号传导抑制剂、HDAC抑制剂、蛋白酶体抑制剂和癌症代谢抑制剂。在一种情况下，细胞毒性剂为铂类化疗剂(例如，卡铂或顺铂)。在一种情况下，细胞毒性剂为EGFR的拮抗剂，例如，N-(3-乙炔基苯基)-6,7-双(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-胺(例如，厄洛替尼)。在一种情况下，细胞毒性剂为RAF抑制剂，例如，BRAF和/或CRAF抑制剂。在一种情况下，RAF抑制剂为维罗非尼(vemurafenib)。在一种情况下，细胞毒性剂为PI3K抑制剂。
术语“患者”或“受试者”是指人类患者或受试者。例如，患者或受试者可以是成年的。
本文的术语“抗体”具体地覆盖单克隆抗体(包括全长单克隆抗体)、多克隆抗体、多特异性抗体(例如，双特异性抗体)和抗体片段，只要它们表现出所需的生物学活性即可。在一种情况下，抗体为全长单克隆抗体。
如本文所用，术语IgG“同种型”或“亚类”是指由免疫球蛋白恒定区的化学和抗原特征定义的免疫球蛋白的任何亚类。
根据其重链恒定结构域的氨基酸序列，可以将抗体(免疫球蛋白)分为不同的类别。免疫球蛋白主要分为五类：IgA、IgD、IgE、IgG和IgM，并且它们中的一些可以进一步分为亚类(同种型)，例如，IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2。对应于不同类别的免疫球蛋白的重链恒定结构域分别称为α、γ、ε、γ和μ。不同种类的免疫球蛋白的亚基结构和三维构型是众所周知的，并且在例如以下文献中有一般描述：Abbas等人,Cellular andMol.Immunology,第4版(W.B.Saunders,Co.,2000)。抗体可以是较大融合分子的一部分，该融合分子是通过抗体与一个或多个其他蛋白质或肽的共价或非共价缔合形成的。
术语“全长抗体”、“完整抗体”和“全抗体”在本文中可互换使用，是指其基本上完整形式的抗体而不是如下文定义的抗体片段。该术语是指包含Fc区的抗体。
本文的术语“Fc区”用于定义免疫球蛋白重链的C末端区，该C末端区包含恒定区的至少一部分。该术语包括天然序列Fc区和变体Fc区。在一个方面，人IgG重链Fc区从Cys226或从Pro230延伸至重链的羧基末端。然而，由宿主细胞产生的抗体可以经历对来自重链C末端的一个或多个(特别是一个或两个)氨基酸的翻译后裂解。因此，由宿主细胞通过表达编码全长重链的特定核酸分子产生的抗体可以包括全长重链，或者所述抗体可以包括全长重链的切割变体。这可能是重链的最后两个C末端氨基酸为甘氨酸(G446)和赖氨酸(K447)的情况。因此，Fc区的C末端赖氨酸(Lys447)或C末端甘氨酸(Gly446)和赖氨酸(Lys447)可以存在或可以不存在。如果没有另做指示，则包括Fc区的重链的氨基酸序列在本文中表示为没有C末端赖氨酸(Lys447)。在一方面，包括如本文所指定的Fc区的重链包含在根据本文公开的抗体中，该重链包含额外的C末端甘氨酸-赖氨酸二肽(G446和K447)。在一方面，包括如本文所指定的Fc区的重链包含在根据本文公开的抗体中，该重链包含额外的C末端甘氨酸残基(G446)。在一方面，包括如本文所指定的Fc区的重链包含在根据本文公开的抗体中，该重链包含额外的C末端赖氨酸残基(K447)。在一实施例中，Fc区含有重链的单个氨基酸取代N297A。除非本文另有说明，否则Fc区或恒定区中氨基酸残基的编号是根据EU编号系统，也称为EU索引，如Kabat等人所述(Sequences of Proteins of Immunological Interest，第5版，Public Health Service,National Institutes of Health,Bethesda,MD,1991)。
“裸抗体”是指不缀合至异源部分(例如，细胞毒性部分)或放射性标记物的抗体。裸抗体可存在于药物组合物中。
如本文所用的术语“单克隆抗体”是指从基本上同质的抗体群体获得的抗体，即，除了可能的变体抗体(例如，含有天然存在的突变或在单克隆抗体制剂的生产过程中产生，此类变体通常以少量形式存在)之外，包括该群体的个别抗体具有同一性和/或结合相同表位。与通常包括针对不同决定簇(表位)的不同抗体的多克隆抗体制剂相反，单克隆抗体制剂中的每种单克隆抗体针对抗原上的单一决定簇。因此，修饰语“单克隆”表示抗体的特征是从基本上同质的抗体群体获得的，并且不应解释为需要通过任何特定方法生产抗体。例如，根据本发明的单克隆抗体可以通过多种技术制备，包括但不限于杂交瘤方法、重组DNA方法、噬菌体展示方法，以及利用包含全部或部分人免疫球蛋白基因座的转基因动物的方法。
如本文所用的术语“高变区”或“HVR”是指抗体可变结构域中在序列上高变并确定抗原结合特异性的各个区域，例如“互补决定区”(“CDR”)。
通常，抗体包含六个CDR；三个在VH中(CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3)，并且三个在VL中的(CDR-L1、CDR-L2、CDR-L3)。本文中的示例性CDR包括：
(a)出现在以下氨基酸残基处的高可变环：26至32(L1)、50至52(L2)、91至96(L3)、26至32(H1)、53至55(H2)和96至101(H3)(Chothia和Lesk,J.Mol.Biol.196:901-917(1987))；
(b)出现在以下氨基酸残基处的CDR：24至34(L1)、50至56(L2)、89至97(L3)、31至35b(H1)、50至65(H2)和95至102(H3)(Kabat等人,Sequences of Proteins ofImmunological Interest,第5版,Public Health Service,National Institutes ofHealth,Bethesda,MD(1991))；以及
(c)存在于氨基酸残基27c-36(L1)、46-55(L2)、89-96(L3)、30-35b(H1)、47-58(H2)和93-101(H3)处的抗原接触点(MacCallum等人J.Mol.Biol.262:732-745(1996))。
除非另外指明，否则CDR根据出处同上的Kabat等人所述的方法确定。本领域的技术人员将理解，CDR名称也可以根据出处同上的Chothia所述的方法、出处同上的McCallum所述的方法或者任何其他在科学上接受的命名系统来确定。
“框架”或“FR”是指除互补决定区(CDR)之外的可变结构域残基。可变结构域的FR通常由以下四个FR结构域组成：FR1、FR2、FR3和FR4。因此，CDR和FR序列通常在VH(或VL)中以如下序列出现：FR1-CDR-H1(CDR-L1)-FR2-CDR-H2(CDR-L2)-FR3-CDR-H3(CDR-L3)-FR4。
术语“Kabat所述的可变结构域残基编号”或“Kabat所述的氨基酸位置编号”及其变型是指在上述Kabat等人的文献中提出的用于重链可变结构域或轻链可变结构域的编号系统。使用该编号系统，实际线性氨基酸序列可能包含较少或附加的氨基酸，其对应于可变结构域的FR或HVR的缩短或插入。例如，重链可变结构域可在H2的残基52之后包括单个氨基酸插入片段(根据Kabat编号的残基52a)以及重链FR残基82之后的插入残基(例如，根据Kabat编号的残基82a、82b和82c等)。可通过将抗体序列与“标准”Kabat编号序列的同源性区域进行比对来确定给定抗体的残基的Kabat编号。
如本文所用，术语“单特异性”抗体表示具有一个或多个结合位点的抗体，每个结合位点与相同抗原的相同表位结合。如本文所用的术语“双特异性”意指抗体能够特异性结合至少两种不同的抗原，例如各自由一对抗体重链可变结构域(VH)和抗体轻链可变结构域(VL)形成的两个结合位点与不同抗原或同一抗原上的不同表位结合。此类双特异性抗体为1+1形式。其他双特异性抗体形式是2+1形式(包含第一抗原或表位的两个结合位点和第二抗原或表位的一个结合位点)或2+2形式(包含第一抗原或表位的两个结合位点和第二抗原或表位的两个结合位点)。典型地，双特异性抗体包含两个抗原结合位点，这两个抗原结合位点中的每一个对不同的抗原具有特异性。
如本文所用，“PD-L1阳性肿瘤细胞分数”为，在免疫组化(IHC)测定法例如使用抗体SP142、SP263、22C3或28-8对PD-L1染色的IHC测定法的背景下，在染色后，相对于样品中存在的所有活肿瘤细胞，以任何强度显示部分或完全膜染色(不包括细胞质染色)的活肿瘤细胞的百分比。因此，可以使用PD-L1 IHC SP142(Ventana)测定法，例如，通过公式PD-L1阳性肿瘤细胞分数＝(PD-L1阳性肿瘤数细胞)/(PD-L1阳性和PD-L1阴性肿瘤细胞的总数)来计算PD-L1阳性肿瘤细胞分数，其中PD-L1对肿瘤细胞和所有非肿瘤细胞(例如，肿瘤浸润性免疫细胞、正常细胞、坏死细胞和碎片)的细胞质染色被排除在评估和评分之外。应当理解，任何给定的诊断性PD-L1抗体可以对应于可用于得出PD-L1阳性肿瘤细胞分数的特定IHC测定方案和/或评分术语。例如，PD-L1阳性肿瘤细胞分数可以分别使用Benchmark ULTRA上的检测、AutostainerLink 48上的EnVision Flex、Benchmark ULTRA上的检测和扩增或AutostainerLink 48上的EnVision Flex从用SP263、22C3、SP142或28-8染色的肿瘤细胞样品得出。
如本文所用，“Ventana SP142 IHC测定法”是根据Ventana PD-L1(SP142)测定法包装插页(Tucson,AZ:Ventana Medical Systems,Inc.)进行，该包装插页通过引用以其整体并入本文。
如本文所用，“Ventana SP263 IHC测定法”是根据Ventana PD-L1(SP263)测定法包装插页(Tucson,AZ:Ventana Medical Systems,Inc.)进行，该包装插页通过引用以其整体并入本文。
如本文所用，“pharmDx 22C3 IHC测定法”是根据PD-L1 IHC 22C3pharmDx包装插页(Carpinteria,CA:Dako,Agilent Pathology Solutions)进行，该包装插页通过引用以其整体并入本文。
如本文所用，“pharmDx 28-8IHC测定法”是根据PD-L1 IHC 28-8pharmDx包装插页(Carpinteria,CA:Dako,Agilent Pathology Solutions)进行，该包装插页通过引用以其整体并入本文。
术语“包装插页”用于指治疗产品的商业包装中通常包括的说明书，其含有涉及此类治疗产品的使用的有关适应症、用法、剂量、施用、组合疗法、禁忌和/或警告的信息。
如本文所用，“与……组合”是指在一种治疗方式以外还施用另一种治疗方式，例如，包括施用PD-1轴结合拮抗剂(例如，阿特珠单抗)和抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)的治疗方案。这样，“与……组合”是指在向患者施用一种治疗方式之前、期间或之后施用另一种治疗方式。
与一种或多种其他药物“同时”施用的药物是在同一治疗周期内，在与一种或多种其他药物的治疗的同一天，以及任选地与一种或多种其他药物同时施用。例如，对于每3周给予的癌症治疗，同时施用的药物各自在3周周期的第1天施用。
如本文所用，术语“不良事件”或“AE”是指任何与使用医疗或程序暂时相关的不利和意外的迹象(包括异常的实验室发现)、症状或疾病，这些治疗或程序可能会或可能不会被认为与医疗或程序有关。不良事件可按“级别”分类，如美国国家癌症研究所不良事件通用术语标准v4.0或v5.0(NIH CTCAE)所定义。在一些方面，AE为低级别AE，例如1级或2级AE。1级包括无症状或有轻微症状的AE。2级包括中等和限制适合年龄的日常生活的辅助活动(例如，准备饭菜、购买杂货或衣物)并且表明局部或非侵入性干预的AE。在其他情况下，AE为高级别AE，例如3级、4级或5级AE。在一些情况下，AE为3级或4级AE。3级包括严重的或具有医学意义的但不会立即危及生命并且表明住院治疗或住院治疗延长的AE。4级包括具有危及生命的后果并且表明需要紧急干预的AE。5级包括导致死亡或与死亡相关的AE。
如本文所用，术语“治疗相关的AE”是指由研究者判断由于治疗(例如，PD-1轴结合拮抗剂疗法(例如，阿特珠单抗疗法)和/或抗TIGIT拮抗剂抗体疗法(例如，替瑞利尤单抗疗法))而发生的AE。
如在本申请中所用的术语“价”表示抗原结合分子中存在指定数目的结合结构域。因此，术语“二价”“四价”和“六价”分别表示抗原结合分子中存在两个结合结构域、四个结合结构域和六个结合结构域。根据本发明的双特异性抗体是至少“二价的”，并且可以是“三价的”或“多价的”(例如，“四价的”或“六价的”)。在一个特定方面，本发明的抗体具有两个或更多个结合位点并且是双特异性的。也就是说，即使在存在多于两个结合位点(即，抗体是三价的或多价的)的情况下，抗体也可以是双特异性的。
“抗体片段”是指除了完整抗体以外的分子，该分子包含完整抗体的一部分，该部分结合完整抗体所结合的抗原。抗体片段的实例包括但不限于Fv、Fab、Fab'、Fab'-SH、F(ab')2；双体抗体、三体抗体、四体抗体、交叉Fab片段；线性抗体；单链抗体分子(例如，scFv)；由抗体片段和单结构域抗体形成的多特异性抗体。关于某些抗体片段的综述，参见Hudson等人，Nat Med 9,129-134(2003)。关于scFv片段的综述，参见例如Plückthun在Theharmacology of Monoclonal Antibodies,第113卷,Rosenburg和Moore编,Springer-Verlag,New York,第269-315页(1994)中所述；还可参见WO 93/16185；以及美国专利5,571,894号和5,587,458号。关于对包含补救受体结合表位残基并且具有增加的体内半衰期的Fab片段和F(ab')2片段的讨论，参见美国专利号5,869,046。双体抗体是具有两个抗原结合结构域的抗体片段，该双体抗体可以是二价的或双特异性的，参见例如，EP 404,097；WO1993/01161；Hudson等人，Nat Med 9，129-134(2003)；以及Hollinger等人，Proc NatlAcad Sci USA 90，6444-6448(1993)。在Hudson等人，Nat Med 9,129-134(2003)中也描述了三体抗体和四体抗体。单结构域抗体为包含抗体的全部或部分重链可变结构域或全部或部分轻链可变结构域的抗体片段。在某些实施例中，单结构域抗体是人单结构域抗体(Domantis,Inc.，Waltham，MA；参见例如美国专利号6,248,516B1)。另外，抗体片段包含单链多肽，该单链多肽的特征在于具有VH结构域，即能够与VL结构域一起装配到功能性抗原结合位点；或具有VL结构域的特征，即能够与VH结构域一起装配到功能性抗原结合位点，从而提供全长抗体的抗原结合特性。抗体片段可以通过各种技术制备，如本文所述，包括但不限于完整抗体的蛋白水解消化以及由重组宿主细胞(例如大肠杆菌或噬菌体)产生。
木瓜蛋白酶消化完整抗体产生两个称为“Fab”片段的相同的抗原结合片段，每个“Fab”片段含有重链可变结构域和轻链可变结构域以及轻链的恒定结构域和重链的第一恒定结构域(CH1)。因此，如本文所用，术语“Fab片段”是指包含轻链片段以及重链的VH结构域和第一恒定结构域(CH1)的抗体片段，所述轻链片段包含VL结构域和轻链恒定结构域(CL)。Fab'片段与Fab片段的不同之处在于Fab'片段在重链CH1结构域的羧基末端添加了一些残基，这些残基包括来自抗体铰链区的一个或多个半胱氨酸。Fab'-SH是Fab'片段，其中恒定结构域的半胱氨酸残基具有游离的硫醇基。胃蛋白酶处理产生F(ab')2片段，其具有两个抗原结合位点(两个Fab片段)和Fc区的一部分。
术语“交叉Fab片段(cross-Fab fragment)”或“xFab片段”或“交叉Fab片段(crossover Fab fragment)”是指其中重链和轻链的可变区或恒定区被交换的Fab片段。交叉Fab分子的两种不同链组成是可能的，并且包含在本发明的双特异性抗体中：在一个方面，Fab重链和轻链的可变区被交换，即交叉Fab分子包含由轻链可变区(VL)和重链恒定区(CH1)构成的肽链，以及由重链可变区(VH)和轻链恒定区(CL)构成的肽链。该交叉Fab分子也称为CrossFab(VLVH)。在另一方面，当Fab重链和轻链的恒定区被交换时，交换型Fab分子包含由重链可变区(VH)和轻链恒定区(CL)组成的肽链，以及由轻链可变区(VL)和重链恒定区(CH1)组成的肽链。该交叉Fab分子也称为CrossFab(CLCH1)。
“单链Fab片段”或“scFab”是由抗体重链可变结构域(VH)、抗体恒定结构域1(CH1)、抗体轻链可变结构域(VL)、抗体轻链恒定结构域(CL)和接头组成的多肽，其中所述抗体结构域和所述接头在N-末端至C-末端方向上具有以下顺序中的一种：a)VH-CH1-接头-VL-CL，b)VL-CL-接头-VH-CH1，c)VH-CL-接头-VL-CH1，或d)VL-CH1-接头-VH-CL；并且其中所述接头是至少30个氨基酸，优选是32个至50个氨基酸的多肽。所述单链Fab片段经由CL结构域与CH1结构域之间的天然二硫键而稳定化。此外，这些单链Fab分子可以通过经由插入半胱氨酸残基(例如根据Kabat编号的可变重链中的位置44和可变轻链中的位置100)生成链间二硫键，而进一步稳定化。
“交叉单链Fab片段”或“x-scFab”是由抗体重链可变结构域(VH)、抗体恒定结构域1(CH1)、抗体轻链可变结构域(VL)、抗体轻链恒定结构域(CL)和接头组成的多肽，其中所述抗体结构域和所述接头在N末端至C末端方向上具有以下顺序中的一种：a)VH-CL-接头-VL-CH1和b)VL-CH1-接头-VH-CL；其中VH和VL一起形成与抗原特异性结合的抗原结合结构域，并且其中所述接头是至少30个氨基酸的多肽。此外，这些x-scFab分子可以通过经由插入半胱氨酸残基(例如根据Kabat编号的可变重链中的位置44和可变轻链中的位置100)生成链间二硫键，而进一步稳定化。
“单链可变片段(scFv)”是抗体的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)的融合蛋白，通过十个至约25个氨基酸的短接头肽连接。接头通常富含甘氨酸以获得柔性，以及富含丝氨酸或苏氨酸以获得溶解度，并且可以将VH的N末端与VL的C末端连接，或反之亦然。尽管去除了恒定区并引入了接头，但该蛋白质保留了原始抗体的特异性。scFv抗体例如描述于以下文献中：Houston,J.S.,Methods in Enzymol.203(1991)46-96。另外，抗体片段包含单链多肽，该单链多肽的特征在于具有VH结构域，即能够与VL结构域一起装配到功能性抗原结合位点；或具有VL结构域的特征，即能够与VH结构域一起装配到功能性抗原结合位点，从而提供全长抗体的抗原结合特性。
“支架抗原结合蛋白”是本领域已知的，例如纤连蛋白和设计的锚蛋白重复序列蛋白(DARPin)已被用作抗原结合结构域的替代支架，参见例如以下文献：Gebauer和Skerra，Engineered protein scaffolds as next-generation antibody therapeutics.CurrOpin Chem Biol 13:245-255(2009)；以及Stumpp等人，Darpins:A new generation ofprotein therapeutics.Drug Discovery Today 13:695-701(2008)。在本发明的一个方面，支架抗原结合蛋白选自由以下项组成的组：CTLA-4(Evibody)、脂质运载蛋白(Anticalin)、蛋白A衍生的分子(诸如蛋白A的Z结构域(亲和体))、A结构域(Avimer/巨型抗体)、血清转铁蛋白(反式体)；设计的锚蛋白重复序列蛋白(DARPin)、抗体轻链或重链的可变结构域(单结构域抗体，sdAb)、抗体重链的可变结构域(纳米抗体，aVH)、VNAR片段、纤连蛋白(AdNectin)、C型凝集素结构域(四连接素)；新抗原受体β-内酰胺酶的可变结构域(VNAR片段)、人γ-晶体蛋白或泛素蛋白(Affilin分子)；人蛋白酶抑制剂的kunitz型结构域、微型体(诸如来自knottin家族的蛋白质)、肽适体和纤连蛋白(adnectin)。CTLA-4(细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4)是主要在CD4+T细胞上表达的CD28家族受体。其细胞外结构域具有可变结构域样Ig折叠。对应于抗体CDR的环可以用异源序列取代，以赋予不同的结合性质。经工程化以具有不同结合特异性的CTLA-4分子也称为Evibody(例如US7166697B1)。Evibody与抗体(例如结构域抗体)的分离的可变区大小大致相同。关于进一步的细节，参见Journalof Immunological Methods 248(1-2),31-45(2001)。脂质运载蛋白是细胞外蛋白质家族，可转运小的疏水性分子，诸如类固醇、胆素、类视黄醇和脂质。它们具有刚性β-片层二级结构，在锥形结构的开口端处具有许多环，可以工程化改造成与不同的靶抗原结合。Anticalin的大小介于160-180个氨基酸之间，并且来源于脂质运载蛋白。关于进一步的细节，参见Biochim Biophys Acta 1482:337-350(2000)、US7250297B1和US20070224633。亲和体是来源于金黄色酿脓葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的蛋白A的支架，其可以被工程化改造以结合抗原。该结构域由约58个氨基酸的三螺旋束组成。已经通过表面残基的随机化形成了文库。关于进一步细节，参见Protein Eng.Des.Sel.2004,17,455-462和EP1641818A1。Avimer是来源于A结构域支架家族的多结构域蛋白质。约35个氨基酸的天然结构域采用确定的二硫键键合结构。多样性是通过重组A结构域家族表现出的自然变异而形成的。关于进一步的细节，参见Nature Biotechnology 23(12),1556-1561(2005)和ExpertOpinion on Investigational Drugs 16(6),909-917(2007年6月)。转铁蛋白是单体血清转运糖蛋白。可以通过在允许的表面环中插入肽序列来工程化改造转铁蛋白，以结合不同的靶抗原。工程化改造的转铁蛋白支架的示例包括反式体。关于进一步细节，参见J.Biol.Chem 274,24066-24073(1999)。设计的锚蛋白重复序列蛋白(DARPin)来源于锚蛋白，锚蛋白是介导整合膜蛋白与细胞支架的附接的蛋白质家族。单个锚蛋白重复序列是由两个α-螺旋和一个β-转角组成的33残基基序。它们可通过随机化每个重复序列中的第一α-螺旋和β-转角中的残基，而设计成结合不同的靶抗原。它们的结合界面可以通过增加模块的数量来增加(亲和力成熟方法)。关于进一步细节，参见J.Mol.Biol.332,489-503(2003)；PNAS100(4),1700-1705(2003)；以及J.Mol.Biol.369,1015-1028(2007)和US20040132028A1。
单结构域抗体是由单一单体可变抗体结构域组成的抗体片段。第一单结构域来源于骆驼科动物的抗体重链的可变结构域(纳米抗体或VHH片段)。此外，术语单结构域抗体包含自体人重链可变结构域(aVH)或来源于鲨鱼的VNAR片段。纤连蛋白可以经工程化改造以结合抗原的支架。Adnectin由III型人纤连蛋白(FN3)的15个重复单元的第10结构域的天然氨基酸序列的主链组成。β-夹层的一个端部处的三个环可以经工程化改造，以使Adnectin能够特异性识别目标治疗靶标。关于进一步细节，参见Protein Eng.Des.Sel.18,435-444(2005)、US20080139791、WO2005056764和US6818418B1。肽适体是组合的识别分子，该组合的识别分子由恒定的支架蛋白，通常是硫氧还蛋白(TrxA)组成，该恒定的支架蛋白含有在活性位点处插入的受约束的可变肽环。关于进一步细节，参见Expert Opin.Biol.Ther.5,783-797(2005)。微型体来源于含有3个至4个半胱氨酸桥、长度为25个至50个氨基酸的天然存在的微蛋白，该微蛋白的示例包括KalataBI和芋螺毒素以及knottin。微蛋白具有环，其可以经工程化改造为包括多达25个氨基酸而不影响微蛋白的整体折叠。关于工程化改造的knottin结构域的进一步细节，参见WO2008098796。
术语“包含特异性结合至PD-1的第一抗原结合结构域和特异性结合至LAG3的第二抗原结合结构域的双特异性抗体”、“特异性结合PD-1和LAG3的双特异性抗体”、“特异于PD-1和LAG3的双特异性抗原结合分子”或“抗PD-1/抗LAG3抗体”在本文中可互换使用，并且是指能够以足够的亲和力结合PD-1和LAG3，使得该抗体可用作靶向PD-1和LAG3的诊断和/或治疗剂的双特异性抗体。
术语“PD-1”，也称为程序性细胞死亡蛋白1，是一种由288个氨基酸组成的I型膜蛋白，最初描述于1992年(Ishida等人,EMBO J.,11(1992),3887–3895)。PD-1是T细胞调节因子的扩展CD28/CTLA-4家族的成员，并具有两个配体PD-L1(B7-H1、CD274)和PD-L2(B7-DC、CD273)。蛋白质结构包括细胞外IgV结构域，之后是跨膜区和细胞内尾部。细胞内尾部含有位于免疫受体酪氨酸基抑制基序和免疫受体酪氨酸基转换基序中的两个磷酸化位点，这表明PD-1负调节TCR信号。这与配体结合后SHP-1磷酸酶和SHP-2磷酸酶与PD-1的细胞质尾部的结合一致。虽然PD-1不在原初T细胞上表达，但其在T细胞受体(TCR)介导的活化后上调，并且在活化的和耗竭的T细胞上都被观察到(Agata等人，Int.Immunology 8(1996),765-772)。这些耗竭的T细胞具有功能障碍的表型并且不能适当地作出反应。尽管PD-1具有相对宽的表达模式，但其最重要的作用可能是作为T细胞上的共抑制受体(Chinai等人，Trendsin Pharmacological Sciences 36(2015),587-595)。因此，目前的治疗方法聚焦于阻断PD-1与其配体的相互作用以增强T细胞应答。术语“程序性死亡1”“程序性细胞死亡1”“蛋白质PD-1”“PD-1”“PD1”“PDCD1”“hPD-1”和“hPD-1”可互换使用，并且包括人PD-1的变体、同种型、物种同源物，以及与PD-1具有至少一个共同表位的类似物。人PD-1的氨基酸序列示出于UniProt(www.uniprot.org)登录号Q15116(SEQ ID NO:55)中。
除非另有说明，否则如本文所用的术语“LAG3”或“Lag-3”或“淋巴细胞活化基因-3”或“CD223”是指来自任何脊椎动物来源的任何天然LAG3，该脊椎动物来源包括诸如灵长类动物(例如，人)和啮齿动物(例如，小鼠和大鼠)等哺乳动物。该术语涵盖“全长”、未加工的LAG3，以及由细胞内加工而产生的任何形式的LAG3。该术语还涵盖LAG3的天然存在变体，例如剪接变体或等位基因变体。在一个优选实施例中，术语“LAG3”是指人LAG3。示例性经加工(无信号序列)的LAG3的氨基酸序列如SEQ ID NO:56所示。示例性细胞外结构域(ECD)LAG3的氨基酸序列如SEQ ID NO:57所示。
术语“抗LAG3抗体”和“结合LAG3的抗体”是指这样的抗体，其能够以足够的亲和力结合LAG3，使得该抗体可用作靶向LAG3的诊断和/或治疗剂。在一个方面，例如，如通过放射免疫测定(RIA)所测得的，抗LAG3抗体与不相关的非LAG3蛋白的结合程度小于该抗体与LAG3结合程度的约10％。在某些实施例中，结合至LAG3的抗体具有≤1μM、≤100nM、≤10nM、≤1nM、≤0.1nM、≤0.01nM或≤0.001nM(例如，10-8M或更低，例如10-8M至10-13M，例如10-9M至10-13M)的解离常数(KD)。在某些方面，抗LAG3抗体与LAG3的表位结合，所述表位在来自不同物种的LAG3中是保守的。在一个优选实施例中，“抗LAG3抗体”、“特异性结合至人LAG3的抗体”和“结合至人LAG3的抗体”是指特异性结合至人LAG3抗原或其细胞外结构域(ECD)的抗体，其具有KD值为1.0×10-8mol/l或更低、在一个实施例中KD值为1.0×10-9mol/l或更低、在一个实施例中KD值为1.0×10-9mol/l至1.0×10-13mol/l的结合亲和力。在此上下文中，例如使用LAG3细胞外结构域，使用标准结合测定(诸如表面等离子体共振技术(GE-Healthcare Uppsala，瑞典))来确定结合亲和力。术语“抗LAG3抗体”还涵盖能够结合LAG3和第二抗原的双特异性抗体。
“杵臼(knob-into-hole)”技术描述于例如US 5,731,168；US 7,695,936；Ridgway等人,Prot Eng 9,617-621(1996)和Carter,J Immunol Meth 248,7-15(2001)中。通常，该方法涉及在第一多肽的界面处引入突起(“杵”)并在第二多肽的界面中引入相应的空腔(“臼”)，使得该突起可以定位在该空腔中，以便促进异二聚体的形成并阻碍同二聚体的形成。突起是通过用较大侧链(例如，酪氨酸或色氨酸)取代来自第一多肽的界面的小氨基酸侧链而构建的。具有与突起相同或相似大小的补偿空腔是通过用较小的氨基酸侧链(例如，丙氨酸或苏氨酸)取代大氨基酸侧链而在第二多肽的界面中创建的。凸起和空腔可以通过改变编码多肽的核酸(例如，通过位点特异性诱变或通过肽合成)来制备。在具体实施例中，杵修饰包含Fc结构域的两个亚基中的一个亚基中的氨基酸取代T366W，而臼修饰包含Fc结构域的两个亚基中的另一个亚基中的氨基酸取代T366S、L368A和Y407V。在另一具体实施例中，包含杵修饰的Fc结构域的亚基另外包含氨基酸取代S354C，而包含臼修饰的Fc结构域的亚基另外包含氨基酸取代Y349C。引入这两个半胱氨酸残基导致在Fc区的两个亚基之间形成二硫键，从而进一步稳定化二聚体(Carter,J Immunol Methods248,7-15(2001))。
术语“效应子功能”是指可归因于抗体的Fc区、随着抗体同种型的变化而变化的那些生物活性。抗体效应子功能的实例包括：C1q结合和补体依赖性细胞毒性(CDC)、Fc受体结合、抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)、抗体依赖性细胞吞噬作用(ADCP)、细胞因子分泌、免疫复合物介导的抗原呈递细胞的抗原摄取、下调细胞表面受体(例如，B细胞受体)以及B细胞活化。
“活化性Fc受体”是如下Fc受体，其在抗体的Fc区接合后，引起刺激携带受体的细胞执行效应功能的信号传导事件。活化性Fc受体包括FcγRIIIa(CD16a)、FcγRI(CD64)、FcγRIIa(CD32)和FcαRI(CD89)。特定的活化性Fc受体是人FcγRIIIa(参见UniProt登录号P08637，版本141)。
术语“肽接头”是指包含一个或多个氨基酸，通常约2至20个氨基酸的肽。肽接头是本领域中已知的或在本文中描述的。合适的非免疫原性接头肽为例如(G4S)n、(SG4)n或G4(SG4)n肽接头，其中“n”通常为介于1与10之间、通常介于2与4之间的数字，特定而言2，即选自由以下项组成的组的肽：GGGGS(SEQ ID NO:58)、GGGGSGGGGS(SEQ ID NO:59)、SGGGGSGGGG(SEQ ID NO:60)和GGGGSGGGGSGGGG(SEQ ID NO:61)，但也包括以下序列：GSPGSSSSGS(SEQ ID NO:62)、(G4S)3(SEQ ID NO:63)、(G4S)4(SEQ ID NO:64)、GSGSGSGS(SEQ ID NO:65)、GSGSGNGS(SEQ ID NO:66)、GGSGSGSG(SEQ ID NO:67)、GGSGSG(SEQ IDNO:68)、GGSG(SEQ ID NO:69)、GGSGNGSG(SEQ ID NO:70)、GGNGSGSG(SEQ ID NO:71)和GGNGSG(SEQ ID NO:72)。特别感兴趣的肽接头为(G4S)(SEQ ID NO:58)、(G4S)2或GGGGSGGGGS(SEQ ID NO:59)、(G4S)3(SEQ ID NO:63)和(G4S)4(SEQ ID NO:65)，并且更特定地为(G4S)2或GGGGSGGGGS(SEQ ID NO:59)。
“融合至”或“连接至”意指部件(例如，抗原结合结构域和Fc结构域)直接地或经由一个或多个肽接头而通过肽键连接。
除非另外指明，否则如本文所用的术语“分化簇3”或“CD3”是指来自任何脊椎动物来源的任何天然CD3，该脊椎动物来源包括诸如灵长类动物(例如，人)和啮齿动物(例如，小鼠和大鼠)，包括例如CD3ε、CD3γ、CD3α和CD3β链。该术语涵盖“全长”的未加工CD3(例如，未加工或未修饰的CD3ε或CD3γ)，以及通过细胞中加工产生的任何形式的CD3。该术语还涵盖CD3的天然存在变体，包括，例如，剪接变体或等位基因变体。CD3包括，例如，长度为207个氨基酸的人CD3ε蛋白(NCBI RefSeq No.NP_000724)和长度为182个氨基酸的人CD3γ蛋白(NCBI RefSeq No.NP_000064)。
术语“抗CD20抗体”和“结合CD20的抗体”是指这样的抗体，其能够以足够的亲和力结合CD20，使得所述抗体可用作靶向CD20的诊断和/或治疗剂。在一个实施例中，例如通过放射免疫测定(RIA)所测量的，抗CD20抗体与不相关的非CD20蛋白的结合程度小于该抗体与CD20的结合程度的约10％。在某些实施例中，结合至CD20抗体具有≤1μM、≤100nM、≤10nM、≤1nM、≤0.1nM、≤0.01nM或≤0.001nM(例如，10-8M或更小，例如10-8M至10-13M，例如10-9M至10-13M)的解离常数(KD)。在某些实施例中，抗CD20抗体与CD20的表位结合，该表位在来自不同物种的CD20中是保守的。在一些实施例中，抗CD20抗体是单克隆抗体。在一些实施例中，抗CD20抗体或抗CD20单克隆抗体为利妥昔单抗。在一些实施例中，抗CD20抗体或抗CD20单克隆抗体为奥滨尤妥珠单抗。
如本文所用，术语“阿特珠单抗”或是指具有拟定国际非专利药名(拟定INN)清单77(WHO Drug Information，第11卷，第2期，1997年，第99页)或CAS登记号174722-31-7的抗CD20抗体(例如，抗CD20单克隆抗体)。
如本文所用，术语“奥滨尤妥珠单抗”或是指具有拟定国际非专利药名(拟定INN)清单99(WHO Drug Information，第22卷，第2期，2008年，第396页)、拟定国际非专利药名(拟定INN)清单108(WHO Drug Information，第26卷，第4期，2012年，第453页)或CAS登记号949142-50-1的抗CD20抗体(例如，抗CD20单克隆抗体)。
除非另外指明，否则如本文所用的术语“分化簇20”或“CD20”是指来自任何脊椎动物来源的任何天然CD20，该脊椎动物来源包括哺乳动物诸如灵长类动物(例如，人)和啮齿动物(例如，小鼠和大鼠)。该术语包括“全长”的未加工CD20，以及通过细胞中加工产生的任何形式的CD20。该术语还涵盖CD20的天然存在变体，包括，例如，剪接变体或等位基因变体。CD20包括例如人CD20蛋白(参见例如NCBI RefSeq编号NP_068769.2和NP_690605.1)，其长度为297个氨基酸并且可例如从缺少5'UTR的一部分的变异mRNA转录本(参见例如NCBIRefSeq编号NM_021950.3)或更长的变异mRNA转录本(参见例如NCBI RefSeq编号NM_152866.2)产生。
术语“抗CD20/抗CD3双特异性抗体”、“双特异性抗CD20/抗CD3抗体”和“结合至CD20和CD3的抗体”是指莫苏尼妥珠单抗。
如本文所用，术语“莫苏尼妥珠单抗”是指具有国际非专利药名(INN)清单117(WHODrug Information，第31卷，第2期，2017年，第303页)或CAS登记号1905409-39-3的抗CD20/抗CD3双特异性抗体。
“VEGF拮抗剂”或“VEGF特异性拮抗剂”是指能够与VEGF结合、降低VEGF表达水平或者中和、阻断、抑制、消除、降低或干扰VEGF生物活性的分子，包括但不限于VEGF与一种或多种VEGF受体的结合、VEGF信号传导以及VEGF介导的血管生成和内皮细胞存活或增殖。例如，能够中和、阻断、抑制、消除、降低或干扰VEGF生物活性的分子可通过与一种或多种VEGF受体(VEGFR)(例如，VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、膜结合VEGF受体(mbVEGFR)或可溶性VEGF受体(sVEGFR))来发挥其作用。此类拮抗剂在本文中也称为“VEGFR抑制剂”。作为可用于本发明的方法中的VEGF特异性拮抗剂，包括与VEGF特异性结合的多肽、抗VEGF抗体及其抗原结合片段、与VEGF特异性结合从而隔绝其与一种或多种受体的受体分子和衍生物、融合蛋白(例如，VEGF-Trap(Regeneron))以及VEGF121-多花白树毒蛋白(Peregrine))。VEGF特异性拮抗剂还包括VEGF多肽的拮抗剂变体、与编码VEGF多肽的核酸分子的至少一个片段互补的反义核碱基寡聚体；与编码VEGF多肽的核酸分子的至少一个片段互补的小RNA；靶向VEGF的核酶；针对VEGF的肽体；以及VEGF适体。VEGF拮抗剂还包括与VEGFR结合的多肽、抗VEGFR抗体及其抗原结合片段，以及与VEGFR结合从而阻断、抑制、消除、降低或干扰VEGF生物活性(例如，VEGF信号传导)的衍生物，或融合蛋白。VEGF特异性拮抗剂还包括与VEGF或VEGFR结合并且能够阻断、抑制、消除、降低或干扰VEGF生物活性的非肽小分子。因此，术语“VEGF生物活性”具体地包括VEGF介导的VEGF生物活性。在某些实施例中，VEGF拮抗剂降低或抑制至少10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或更多的VEGF的表达水平或生物活性。在一些实施例中，受VEGF特异性拮抗剂抑制的VEGF为VEGF(8-109)、VEGF(1-109)或VEGF165。
如本文所用，VEGF拮抗剂可包括但不限于：抗VEGFR2抗体及相关分子(例如，雷莫芦单抗(ramucirumab)、他尼比鲁单抗(tanibirumab)、阿柏西普(阿柏西普))；抗VEGFR1抗体及相关分子(例如，伊克鲁单抗(icrucumab)、阿柏西普(VEGF Trap-Eye；)和ziv-阿柏西普(VEGF Trap；/>))；双特异性VEGF抗体(例如MP-0250、伐努赛珠单抗(vanucizumab)(VEGF-ANG2)和US2001/0236388中公开的双特异性抗体)；包括抗VEGF、抗VEGFR1和抗VEGFR2臂中的两者的组合的双特异性抗体；抗VEGFA抗体(例如，贝伐单抗(bevacizumab)、赛伐珠单抗(sevacizumab))；抗VEGFB抗体、抗VEGFC抗体(例如，VGX-100)、抗VEGFD抗体以及非肽小分子VEGF拮抗剂(例如，帕唑帕尼(pazopanib)、阿西替尼(axitinib)、凡德他尼(vandetanib)、Stivarga、卡博替尼(cabozantinib)、乐伐替尼(lenvatinib)、尼达尼布(nintedanib)、奥兰替尼(orantinib)、替拉替尼(telatinib)、多韦替尼(dovitinig)、西地尼布(cediranib)、莫特塞尼(motesanib)、索凡替尼(sulfatinib)、阿帕替尼(apatinib)、氟瑞替尼(foretinib)、法米替尼(famitinib)和替肟扎尼(tivozanib))。在一些实例中，VEGF拮抗剂可以为酪氨酸激酶抑制剂，包括受体酪氨酸激酶抑制剂(例如，多靶点受体酪氨酸激酶抑制剂，诸如舒尼替尼或阿西替尼)。
“抗VEGF抗体”是以足够的亲和力和特异性与VEGF结合的抗体。在某些实施例中，抗体将对VEGF具有足够高的结合亲和力，例如，抗体可以以100nM与1pM之间的KD值结合hVEGF。抗体亲和力可例如通过基于表面等离子共振的测定法(诸如PCT申请公开号WO2005/012359中所述的测定法)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和竞争测定法(例如，放射免疫测定法(RIA))来确定。
在某些实施例中，抗VEGF抗体可用作靶向和干扰VEGF活性参与其中的疾病或病症的治疗剂。而且，可以对抗体进行其他生物活性测定，例如，以评价其作为治疗剂的有效性。此类测定是本领域已知的，并且取决于靶抗原和抗体的预期用途。实例包括HUVEC抑制测定；肿瘤细胞生长抑制测定(例如，如WO 89/06692中所述)；抗体依赖性细胞毒性(ADCC)和补体介导的细胞毒性(CDC)测定(美国专利号5,500,362)；以及激动活性或造血作用测定(参见WO 95/27062)。抗VEGF抗体通常不会与其他VEGF同源物(诸如VEGF-B或VEGF-C)结合，也不会与其他生长因子(诸如PlGF、PDGF或bFGF)结合。在一个实施例中，抗VEGF抗体是与由杂交瘤ATCC HB 10709产生的单克隆抗VEGF抗体A4.6.1结合至相同表位的单克隆抗体。在另一个实施例中，抗VEGF抗体为根据Presta等人(Cancer Res.57:4593-4599,1997)产生的重组人源化抗VEGF单克隆抗体，包括但不限于称为贝伐单抗(BV；)的抗体。
抗VEGF抗体“贝伐单抗(BV)”也称为“rhuMAb VEGF”或为根据Presta等人(Cancer Res.57:4593-4599,1997)产生的重组人源化抗VEGF单克隆抗体。它包含突变的人IgG1框架区和来自鼠抗hVEGF单克隆抗体A.4.6.1的阻断人VEGF与其受体结合的抗原结合互补决定区。贝伐单抗的约93％的氨基酸序列，包括大部分框架区，来源于人IgG1，并且约7％的序列来源于鼠抗体A4.6.1。贝伐单抗具有约149,000道尔顿的分子量并且经糖基化。贝伐单抗和其他人源化抗VEGF抗体进一步描述于2005年2月26日授权的美国专利号6,884,879，其全部公开内容以引用方式明确并入本文。
II.用于食管癌的治疗方法和组合物
A.实现临床缓解的方法
在一个方面，本文提供了一种在患有转移性食管癌的受试者中实现临床缓解的方法，该方法包括以有效实现临床缓解的量向受试者施用替瑞利尤单抗和阿特珠单抗。在一些实施例中，以包括一个或多个给药周期的给药方案向受试者施用替瑞利尤单抗和阿特珠单抗。在一些实施例中，转移性食管癌为鳞状细胞癌、腺癌或具有神经内分泌组织病理的食管癌。
在一些方面，临床缓解维持至少1个月、至少2个月、至少3个月、至少4个月、至少5个月、至少6个月、至少7个月、至少8个月、至少9个月、至少10个月、至少11个月、至少1年、至少1年零1个月、至少1年零2个月、至少1年零3个月、至少1年零4个月、至少1年零5个月、至少1年零6个月、至少1年零7个月、至少1年零8个月、至少1年零9个月、至少1年零10个月、至少1年零11个月、至少2年、至少2年零1个月、至少2年零2个月、至少2年零3个月、至少2年零4个月、至少2年零5个月、至少2年零6个月、至少2年零7个月、至少2年零8个月、至少2年零9个月、至少2年零10个月、至少两年零11个月、至少3年、至少3.5年、至少4年、至少4.5年、至少5年、至少5.5年、至少6年、至少6.5年、至少7年、至少7.5年、至少8年、至少8.5年、至少9年、至少9.5年、至少10年、或超过10年(例如，临床缓解维持至少1个月至2个月、2个月至4个月、4个月至6个月、6个月至8个月、8个月至10个月、10个月至12个月、1年至1.5年、1.5年至2年、2年至2.5年、2.5年至3年、3年至3.5年、3.5年至4年、4年至4.5年、4.5年至5年、5年至6年、6年至7年、7年至8年、8年至9年、或9年至10年)。例如，在一些方面，临床缓解维持1个月至10年、6个月至5年、1年至4年、1年至3年、或1年至2年。
在一些方面，临床缓解维持至少1年。在一些方面，临床缓解维持至少2年。
i.临床缓解
在一些方面，临床缓解为无进展存活期(PFS)。PFS是指治疗期间和治疗后受试者的癌症(例如，转移性食管癌)未恶化的时间长度。PFS可包括受试者经历完全缓解(CR)、部分缓解(PR)或疾病稳定的时间量。
在一些方面，临床缓解为部分缓解(PR)。PR是指以治疗之前的基线最长直径之和(SLD)为参考，靶病灶的SLD减小至少30％。
在一些方面，临床缓解为完全缓解(CR)。CR是指所有靶病灶消失。
在一些方面，临床缓解为一个或多个靶病灶(例如，转移性食管癌肿瘤)的最长直径之和(SLD)的减小。在一些方面，在施用一个或多个给药周期的替瑞利尤单抗和阿特珠单抗期间或之后，SLD减小至少1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％、21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％、29％、30％、31％、32％、33％、34％、35％、36％、37％、38％、39％、40％、41％、42％、43％、44％、45％、46％、47％、48％、49％、50％、51％、52％、53％、54％、55％、56％、57％、58％、59％、60％、71％、72％、73％、74％、75％、76％、77％、78％、79％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％，或SLD减小100％(例如，靶病灶消失)(例如，相对于在施用一个或多个给药周期的替瑞利尤单抗和阿特珠单抗之前取得的测量结果减小)。在一些方面，在施用一个或多个给药周期的替瑞利尤单抗和阿特珠单抗期间或之后，SLD减小约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约7％、约8％、约9％、约10％、约11％、约12％、约13％、约14％、约15％、约16％、约17％、约18％、约19％、约20％、约21％、约22％、约23％、约24％、约25％、约26％、约27％、约28％、约29％、约30％、约31％、约32％、约33％、约34％、约35％、约36％、约37％、约38％、约39％、约40％、约41％、约42％、约43％、约44％、约45％、约46％、约47％、约48％、约49％、约50％、约51％、约52％、约53％、约54％、约55％、约56％、约57％、约58％、约59％、约60％、约71％、约72％、约73％、约74％、约75％、约76％、约77％、约78％、约79％、约80％、约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、约89％、约90％、约91％、约92％、约93％、约94％、约95％、约96％、约97％、约98％、约99％，或SLD减小约100％(例如，靶病灶消失)。在一些方面，在施用一个或多个给药周期的替瑞利尤单抗和阿特珠单抗期间或之后，SLD减小1％至5％、5％至10％、10％至15％、15％至20％、20％至25％、25％至30％、30％至35％、35％至40％、40％至45％、45％至50％、50％至55％、55％至60％、60％至65％、65％至70％、70％至75％、75％至80％、80％至85％、85％至90％、90％至95％、或95％至100％。在一些情况下，SLD相对于施用替瑞利尤单抗和阿特珠单抗之前取得的测量结果减小。在某些情况下，临床缓解可以为一个或多个靶病灶的SLD相对于比较臂中的SLD减小。
ii.先前疗法
在一些实施例中，受试者之前没有用针对癌症(例如，食管癌，例如转移性食管癌)的抗癌疗法(例如，癌症免疫疗法和/或化学治疗剂)治疗。在一些实施例中，受试者接受过用针对癌症(例如，食管癌，例如转移性食管癌)的抗癌疗法(例如，癌症免疫疗法和/或化学治疗剂)的先前治疗。在一些情况下，受试者已接受至少一线的先前疗法。在一些情况下，受试者已接受针对癌症(例如，食管癌)的两种或更多种先前抗癌疗法。在一些情况下，受试者已接受针对癌症(例如，食管癌)的三种或更多种先前抗癌疗法。在一些情况下，受试者已接受两线的先前疗法。在一些情况下，受试者已接受三线的先前疗法。在一些情况下，受试者已接受四线的先前疗法。在一些情况下，受试者已接受多于四线的先前疗法。在一些情况下，受试者在用先前抗癌疗法治疗期间或之后经历疾病进展。在一些情况下，既往疗法为化学疗法、手术和/或放射疗法。
在一些情况下，受试者在施用PD-1轴结合拮抗剂和抗TIGIT拮抗剂抗体之前的至少一个月内(例如，施用PD-1轴结合拮抗剂和抗TIGIT拮抗剂抗体之前的两个月、三个月、四个月、六个月、一年、两年、三年、四年、五年或十年内)不曾接受既往全身性疗法(例如，以治愈为目的的既往全身性疗法，例如，化学疗法)。在一些情况下，受试者为化学疗法初治的。在一些情况下，受试者不曾接受先前免疫疗法。
iii.缺少治疗相关不良事件
在一些实施例中，受试者在一个或多个给药周期的替瑞利尤单抗和阿特珠单抗期间或之后未经历治疗相关不良事件(AE)(例如，1级、2级、3级或4级治疗相关不良事件)。在一些实施例中，受试者在替瑞利尤单抗和阿特珠单抗的一个或多个给药周期期间或之后经历治疗相关的1级或2级不良事件。在一些实施例中，受试者在替瑞利尤单抗和阿特珠单抗的一个或多个给药周期期间或之后未经历治疗相关的3级或4级不良事件。治疗相关的不良事件包括例如与替瑞利尤单抗相关的不良事件和/或与阿特珠单抗相关的不良事件。不良事件是根据美国国家癌症研究所不良事件通用术语标准(NCI CTCAE)4.0版进行分级的。
不良事件的因果关系(例如，确定不良事件是否与治疗相关)可基于以下指南：
·事件发生与开始研究药物的时间关系。
·事件的过程，尤其考虑剂量减低、研究药物停用或重新引入研究药物(如果适用)的影响。
·事件与研究药物或类似治疗的已知关联。
·事件与所研究的疾病的已知关联。
·受试者存在风险因素或使用已知会增加事件发生率的伴随用药。
·存在已知与事件发生相关的非治疗相关因素。
一般而言，可在以下情况下将不良事件归因于研究药物(例如，替瑞利尤单抗和/或阿特珠单抗)：不良事件的发生与研究药物的施用之间存在合理的时间关系，并且不良事件不能容易地用受试者的临床状态、并发疾病或伴随疗法来解释；和/或不良事件遵循研究药物的已知缓解模式；和/或不良事件在研究药物停用或剂量减低后减轻或消退，并且如果适用，在重新用药时再次出现。
可以在以下情况下将不良事件确定为与治疗无关；有证据表明不良事件的病因在研究药物之外(例如，既往医疗状况、基础疾病、并发疾病或伴随用药)；和/或不良事件与研究药物的施用无合理的时间关系(例如，在研究药物的第一剂量后2天诊断出癌症)。
基于作用机制、类似检查点抑制剂的已知效应、以及非临床数据，替瑞利尤单抗存在若干潜在风险。作为TIGIT的拮抗剂，预计替瑞利尤单抗将增强T细胞和NK细胞的增殖、存活和功能。因此，替瑞利尤单抗可能会增加自身免疫性炎症(也称为免疫介导的不良事件)的风险。此外，由于替瑞利尤单抗具有完整的Fc效应子功能，因此通过抗体依赖性细胞毒性(ADCC)引起的淋巴细胞减少是一种理论上的风险。与替瑞利尤单抗相关联的特定不良事件包括输注相关反应(IRR)、免疫介导的不良事件和淋巴细胞减少。
阿特珠单抗已与诸如以下的风险相关联：输注相关反应(IRR)和免疫介导的肝炎、肺炎、结肠炎、胰腺炎、糖尿病、甲状腺功能减退、甲状腺功能亢进、肾上腺功能不全、垂体炎、吉兰-巴雷综合征、肌无力综合征或重症肌无力、脑膜脑炎、心肌炎、肌炎和肾炎。免疫介导的不良反应可能涉及任何器官系统，并且可能导致噬血细胞性淋巴组织细胞增多症(HLH)和巨噬细胞活化综合征(MAS)。
在任何前述示例中，每个给药周期可以具有任何合适的长度，例如，约7天、约14天、约21天、约28天或更长。在一些情况下，每个给药周期为约21天。在一些情况下，替瑞利尤单抗每三周(例如，在每个21天给药周期的第1天)施用，并且阿特珠单抗每三周(例如，在每个21天给药周期的第1天)施用。
受试者优选为人。
本发明包括涉及以下的方法和用途：每三周(例如，在每个21天给药周期的第1天)向有此需要的受试者施用有效量的抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)。在一些情况下，每三周(例如，在每个21天给药周期的第1天)施用抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)，并且每两周(例如，在每个28天给药周期的第1天和第15天)、每三周(例如，在每个21天给药周期的第1天)或每四周(例如，在每个28天给药周期的第1天)施用PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体，例如，阿特珠单抗，或抗PD-1拮抗剂抗体，例如帕博利珠单抗)。在某些情况下，本发明包括涉及以下的方法和用途：每三周(例如，在每个21天给药周期的第1天)向有此需要的受试者施用有效量的抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)。在一些情况下，施用有效量的抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)导致CR或PR。在一些情况下，施用有效量的抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)导致受试者的PFS与参考相比增加。在一些情况下，施用有效量的抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)延长受试者的OS。在一些情况下，本发明包括治疗患有癌症的受试者的方法，该方法包括向受试者施用给药方案，该给药方案包括一个或多个给药周期的以下项：每三周约500mg至约700mg的剂量的抗TIGIT拮抗剂抗体、每三周约900mg至约1500mg的剂量的PD-1轴结合拮抗剂、每三周的铂类化疗剂和每三周的非铂类化疗剂。在一些情况下，该方法包括向受试者施用给药方案，该给药方案包括一个或多个给药周期的以下项：每三周500mg至700mg的剂量的抗TIGIT拮抗剂抗体、每三周900mg至1500mg的剂量的PD-1轴结合拮抗剂、每三周的铂类化疗剂和每三周的非铂类化疗剂。
在某些情况下，施用PD-1轴结合拮抗剂和抗TIGIT拮抗剂抗体而不使用化疗剂(例如，不使用何化疗剂，例如，整个给药方案不向受试者施用化疗剂)。
iv.对治疗的应答
在本文所述的任何方法的一些实施例中，患有癌症(例如，食管癌(例如，转移性食管癌))受试者或受试者群体对治疗(例如，阿特珠单抗和替瑞利尤单抗)的反应可通过一种或多种量度来表征。在一些实施例中，治疗引起受试者的PFS或DOR增加。在一些实施例中，治疗引起受试者群体的ORR或DCR增加。在一些实施例中，治疗引起受试者的CR或PR。
在一些情况下，治疗引起受试者的PFS的增加，例如，与用PD-1轴结合拮抗剂而不使用抗TIGIT拮抗剂抗体治疗、或用抗TIGIT拮抗剂抗体而不使用PD-1轴结合拮抗剂治疗的群体(例如，比较臂)的PFS相比。例如，在其中不施用化学治疗剂的实施例中(例如，仅施用抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)与PD-1轴结合拮抗剂(例如，阿特珠单抗)组合)，治疗可引起受试者的PFS增加，例如，与用PD-1轴结合拮抗剂而不使用抗TIGIT拮抗剂抗体治疗、或用抗TIGIT拮抗剂抗体而不使用PD-1轴结合拮抗剂治疗的群体(例如，比较臂)的PFS相比。
在一些情况下，治疗延长受试者的OS，例如，例如，与用PD-1轴结合拮抗剂而不使用抗TIGIT拮抗剂抗体治疗、或用抗TIGIT拮抗剂抗体而不使用PD-1轴结合拮抗剂治疗的群体(例如，比较臂)的OS相比。例如，在其中不施用化学治疗剂的实施例中(例如，仅施用抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)与PD-1轴结合拮抗剂(例如，阿特珠单抗)组合)，治疗可引起受试者的OS增加，例如，与用PD-1轴结合拮抗剂而不使用抗TIGIT拮抗剂抗体治疗、或用抗TIGIT拮抗剂抗体而不使用PD-1轴结合拮抗剂治疗的群体(例如，比较臂)的OS相比。
可根据RECIST v1.1标准来测量受试者的无进展存活期，如Eisenhauer等人,Eur.J.Cancer.2009,45:228-47中所述。在一些实施例中，PFS被测量为从治疗开始到首次出现疾病进展的时间段，如RECIST v1.1标准所确定。在一些实施例中，PFS被测量为从治疗开始到死亡时的时间。
在一些实施例中，本文所述的治疗引起受试者的至少约1个月(例如，1个月、1.5个月、2个月、2.5个月、3.0个月、3.5个月、4.0个月、4.5个月、5.0个月、5.5个月、6.0个月、6.5个月、7.0个月、7.5个月、8.0个月、8.5个月、9.0个月、9.5个月、10个月、10.5个月、11个月、11.5个月、12个月、13个月、14个月、15个月、16个月、17个月、18个月、19个月、20个月、21个月、22个月、23个月、24个月、25个月、26个月、27个月、28个月、29个月、30个月、31个月、32个月、33个月、34个月、35个月或36个月)的PFS。
在一些实施例中，治疗引起受试者群体的约1.2个月至约5.6个月(例如，1.2个月、1.3个月、1.4个月、1.5个月、1.6个月、1.7个月、1.8个月、1.9个月、2.0个月、2.1个月、2.2个月、2.3个月、2.4个月、2.5个月、2.6个月、2.7个月、2.8个月、2.9个月、3.0个月、3.1个月、3.2个月、3.3个月、3.4个月、3.5个月、3.6个月、3.7个月、3.8个月、3.9个月、4.0个月、4.1个月、4.2个月、4.3个月、4.4个月、4.5个月、4.6个月、4.7个月、4.7个月、4.8个月、4.9个月、5.0个月、5.1个月、5.2个月、5.3个月、5.4个月、5.5个月或5.6个月，例如1.2个月至1.4个月、1.4个月至1.6个月、1.6个月至1.8个月、1.8个月至2.0个月、2.0个月至2.2个月、2.2个月至2.4个月、2.4个月至2.6个月、2.6个月至2.8个月、2.8个月至3.0个月、3.0个月至3.2个月、3.2个月至3.4个月、3.4个月至3.6个月、3.6个月至3.8个月、3.8个月至4.0个月、4.0个月至4.2个月、4.2个月至4.4个月、4.4个月至4.6个月、4.6个月至4.8个月、4.8个月至5.0个月、5.0个月至5.2个月、5.2个月至5.4个月、或5.4个月至5.6个月)的中位PFS。
在一些实施例中，本文所述的治疗引起受试者的至少约7个月(例如，7个月、7.5个月、8.0个月、8.5个月、9.0个月、9.5个月、10个月、10.5个月、11个月、11.5个月、12个月、12.5个月、13个月、13.5个月、14个月、14.5个月、15个月、15.5个月、16个月、16.5个月、17个月、17.5个月、18个月、18.5个月、19个月、19.5个月、20个月、20.5个月、21个月、21.5个月、22个月、23个月、24个月、25个月、26个月、27个月、28个月、29个月、30个月、31个月、32个月、33个月、34个月、35个月或36个月)的DOR。
在一些实施例中，治疗引起受试者群体的约7个月至约25个月(例如，7.0个月、7.5个月、8.0个月、8.5个月、9.0个月、9.5个月、10.0个月、10.5个月、11.0个月、11.5个月、12.0个月、12.5个月、13.0个月、13.5个月、14.0个月、14.5个月、15.0个月、15.5个月、16.0个月、16.5个月、17.0个月、17.5个月、18.0个月、18.5个月、19.0个月、19.5个月、20.0个月、20.5个月、21.0个月、21.5个月、22.0个月、23.0个月、24.0个月或25.0个月，例如7.0个月至7.5个月、7.5个月至8.0个月、8.0个月至8.5个月、8.5个月至9.0个月、9.0个月至9.5个月、9.5个月至10.0个月、10.0个月至10.5个月、10.5个月至11.0个月、11.0个月至11.5个月、11.5个月至12.0个月、12.0个月至12.5个月、12.5个月至13.0个月、13.0个月至13.5个月、13.5个月至14.0个月、14.0个月至14.5个月、14.5个月至15.0个月、15.0个月至15.5个月、15.5个月至16.0个月、16.0个月至16.5个月、16.5个月至17.0个月、17.0个月至17.5个月、17.5个月至18.0个月、18.0个月至18.5个月、18.5个月至19.0个月、19.0个月至19.5个月、19.5个月至20.0个月、20.0个月至20.5个月、20.5个月至21.0个月、21.0个月至21.5个月、21.5个月至22.0个月、22.0个月至22.5个月、22.5个月至23.0个月、23.0个月至23.5个月、23.5个月至24.0个月、24.0个月至24.5个月、或24.5个月至25.0个月)的中位DOR。
在本文所述的任何方法的一些实施例中，受试者群体对治疗(例如，阿特珠单抗和替瑞利尤单抗)的反应可通过一种或多种量度来表征。在一些实施例中，对受试者群体的治疗引起增加的ORR或DCR。
在一些情况下，治疗引起受试者群体的ORR的增加，例如，与用PD-1轴结合拮抗剂而不使用抗TIGIT拮抗剂抗体治疗或用抗TIGIT拮抗剂抗体而不使用PD-1轴结合拮抗剂治疗的群体(例如，比较臂)的ORR相比。例如，治疗可引起受试者群体的ORR的增加，例如，与用PD-1轴结合拮抗剂而不使用抗TIGIT拮抗剂抗体治疗或用抗TIGIT拮抗剂抗体而不使用PD-1轴结合拮抗剂治疗的群体(例如，比较臂)的ORR相比。
在一些情况下，治疗引起受试者群体的DCR的增加，例如，与用PD-1轴结合拮抗剂而不使用抗TIGIT拮抗剂抗体治疗或用抗TIGIT拮抗剂抗体而不使用PD-1轴结合拮抗剂治疗的群体(例如，比较臂)的DCR相比。例如，治疗可引起受试者群体的DCR的增加，例如，与用PD-1轴结合拮抗剂而不使用抗TIGIT拮抗剂抗体治疗或用抗TIGIT拮抗剂抗体而不使用PD-1轴结合拮抗剂治疗的群体(例如，比较臂)的DCR相比。
在一些实施例中，如本文所述治疗的受试者群体具有至少约28％(例如，28.0％、28.1％、28.2％、28.3％、28.4％、28.5％、28.6％、28.7％、28.8％、28.9％、29.0％、29.1％、29.2％、29.3％、29.4％、29.5％、29.6％、29.7％、29.8％、29.9％、30.0％、30.1％、30.2％、30.3％、30.4％、30.5％、30.6％、30.7％、30.8％、30.9％、31.0％、31.1％、31.2％、31.3％、31.4％、31.5％、31.6％、31.7％、31.8％、31.9％、32.0％、32.1％、32.2％、32.3％、32.4％、32.5％、32.6％、32.7％、32.8％、32.9％、33.0％、33.1％、33.2％、33.3％、33.4％、33.5％、33.6％、33.7％、33.8％、33.9％、34.0％、34.1％、34.2％、34.3％、34.4％、34.5％、34.6％、34.7％、34.8％、34.9％、35％、35.5％、40.0％、40.5％、41.0％、41.5％、42.0％、42.5％、43.0％、43.5％、44.0％、45.0％、46.0％、47.0％、48.0％、49.0％、50.0％或55.0％)的ORR。在一些实施例中，如本文所述治疗的受试者群体具有约25％至约55％(例如，25.0％至25.5％、25.5％至26.0％、26.0％至26.5％、26.5％至27.0％、27.0％至27.5％、27.5％至28.0％、28.0％至28.5％、28.5％至29.0％、29.0％至29.5％、29.5％至30.0％、30.0％至30.5％、30.5％至31.0％、31.0％至31.5％、31.5％至32.0％、32.0％至32.5％、32.5％至33.0％、33.0％至33.5％、33.5％至34.0％、34.0％至34.5％、34.5％至35.0％、35.0％至36.0％、36.0％至37.0％、37.0％至38.0％、38.0％至39.0％、39.0％至40.0％、40.0％至41.0％、41.0％至42.0％、42.0％至43.0％、43.0％至44.0％、44.0％至45.0％、45.0％至46.0％、46.0％至47.0％、47.0％至48.0％、48.0％至49.0％、49.0％至50.0％、50.0％至51.0％、51.0％至52.0％、52.0％至53.0％、53.0％至54.0％、或54.0％至55.0％)的ORR。
在一些实施例中，如本文所述治疗的受试者群体具有至少约50％(例如，50.0％、50.1％、50.2％、50.3％、50.4％、50.5％、50.6％、50.7％、50.8％、50.9％、51.0％、51.1％、51.2％、51.3％、51.4％、51.5％、51.6％、51.7％、51.8％、51.9％、52.0％、52.1％、52.2％、52.3％、52.4％、52.5％、52.6％、52.7％、52.8％、52.9％、53.0％、53.1％、53.2％、53.3％、53.4％、53.5％、53.6％、53.7％、53.8％、53.9％、54.0％、54.1％、54.2％、54.3％、54.4％、54.5％、54.6％、54.7％、54.8％、54.9％、55.0％、55.1％、55.2％、55.3％、55.4％、55.5％、55.6％、55.7％、55.8％、55.9％、56.0％、56.1％、56.2％、56.3％、56.4％、56.5％、56.6％、56.7％、56.8％、56.9％、57％、57.5％、58.0％、58.5％、59.0％、59.5％、60.0％、60.5％、61.0％、61.5％、62.0％、63.0％、64.0％、65.0％、66.0％、67.0％、68.0％或73.0％)的DCR。在一些实施例中，如本文所述治疗的受试者群体具有约45％至约55％(例如，45.0％至45.2％、45.2％至45.4％、45.4％至45.6％、45.6％至45.8％、45.8％至46.0％、46.0％至46.2％、46.2％至46.4％、46.4％至46.6％、46.6％至46.8％、46.8％至47.0％、47.0％至47.2％、47.2％至47.4％、47.4％至47.6％、47.6％至47.8％、47.8％至48.0％、48.0％至48.2％、48.2％至48.4％、48.4％至48.6％、48.6％至48.8％、48.8％至49.0％、49.0％至49.2％、49.2％至49.4％、49.4％至49.6％、49.6％至49.8％、49.8％至50.0％、50.0％至50.2％、50.2％至50.4％、50.4％至50.6％、50.6％至50.8％、50.8％至51.0％、51.0％至51.2％、51.2％至51.4％、51.4％至51.6％、51.6％至51.8％、51.8％至52.0％、52.0％至52.2％、52.2％至52.4％、52.4％至52.6％、52.6％至52.8％、52.8％至53.0％、53.0％至53.2％、53.2％至53.4％、53.4％至53.6％、53.6％至53.8％、53.8％至54.0％、54.0％至54.2％、54.2％至54.4％、54.4％至54.6％、54.6％至54.8％、或54.8％至55.0％)的DCR。
III.用于黑素瘤的治疗方法和组合物
A.包括抗TIGIT拮抗剂抗体以及靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体的方法
在一个方面，本公开提供了一种用于治疗患有黑素瘤的受试者的方法，该方法包括向受试者施用抗TIGIT拮抗剂抗体以及靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体，该双特异性抗体包含特异性结合至程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)的第一抗原结合结构域和特异性结合至淋巴细胞活化基因3(LAG3)的第二抗原结合结构域。在一些实施例中，以包括一个或多个给药周期的给药方案向受试者施用抗TIGIT拮抗剂抗体和双特异性抗体。
在一些方面，该方法包括向受试者施用：(a)抗TIGIT拮抗剂抗体，其是每三周以约600mg的固定剂量(例如，600mg的固定剂量)施用；以及(b)双特异性抗体，其是每三周以约2100mg的固定剂量(例如，2100mg的固定剂量)施用。
在一些方面，该方法包括向受试者施用：(a)抗TIGIT拮抗剂抗体，其是每三周以约600mg的固定剂量(例如，600mg的固定剂量)施用；以及(b)双特异性抗体，其是每三周以约600mg的固定剂量(例如，600mg的固定剂量)施用。
在一些方面，一个或多个给药周期中的每一个的长度为21天。在一些方面，该方法包括在一个或多个给药周期中的每一个的约第1天(例如，在第1天)向受试者施用抗TIGIT拮抗剂抗体和双特异性抗体。
在一些方面，该方法包括在抗TIGIT拮抗剂抗体之前向受试者施用双特异性抗体。在其他方面，该方法包括在双特异性抗体之前向受试者施用抗TIGIT拮抗剂抗体。
在一些方面，该方法包括向受试者静脉内施用双特异性抗体和抗TIGIT拮抗剂抗体。
i.新辅助疗法
在一些方面，一个或多个给药周期是作为新辅助疗法施用的。
在一些方面，抗TIGIT拮抗剂抗体以及靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体是作为新辅助疗法施用的。
在一些方面，黑素瘤为具有可测量的淋巴结转移的III期黑素瘤。
在一些方面，受试者在开始治疗之前的六个月内未发生过移行转移。
在一些方面，受试者既往未使用癌症免疫疗法治疗。
在一些方面，黑素瘤并非黏膜黑素瘤或葡萄膜黑素瘤。
在一些方面，在手术之前开始第一给药周期。
在一些方面，在手术之前完成至少一个给药周期(例如，一个、两个、三个、四个或多于四个给药周期)或至少两个给药周期(例如，两个、三个、四个或多于四个给药周期)。在一些情况下，在手术之前完成两个给药周期。
在一些方面，在最后一个给药周期后约一周内进行手术。
在一些方面，手术为完全性淋巴结清扫(CLND)。
在一些方面，治疗引起病理缓解率(pRR)与参考pRR相比增加。在一些方面，参考pRR为已接受对照疗法的受试者群体的pRR。在一些方面，对照疗法为包括抗TIGIT拮抗剂抗体并且不包括靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体的疗法；包括靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体并且不包括抗TIGIT拮抗剂抗体的疗法；或包括伊匹木单抗和纳武利尤单抗的疗法。
在一些方面，治疗引起无事件存活(EFS)与参考EFS相比增加；无复发存活(RFS)与参考RFS相比增加；总存活(OS)与参考OS相比增加；和/或总缓解率(ORR)与参考ORR相比增加。在一些方面，参考EFS、RFS、OS或ORR为已接受对照疗法的受试者群体的值。在一些方面，对照疗法为包括抗TIGIT拮抗剂抗体并且不包括靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体的疗法；包括靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体并且不包括抗TIGIT拮抗剂抗体的疗法；或包括伊匹木单抗和纳武利尤单抗的疗法。
ii.IV期黑素瘤的治疗
在一些方面，黑素瘤为IV期黑素瘤。
在一些方面，(a)受试者已接受不超过两线的先前全身性治疗；或者(b)黑素瘤为BRAF突变型黑素瘤，并且受试者已接受不超过三线的先前全身性治疗。
在一些方面，治疗引起总缓解率(ORR)与参考ORR时间相比增加。在一些方面，参考ORR是已接受以下的受试者群体的ORR：(a)包括靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体并且不包括抗TIGIT拮抗剂抗体的治疗；和/或(b)包括抗TIGIT拮抗剂抗体并且不包括靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体的治疗。
在一些方面，治疗引起无进展存活期(PFS)与参考PFS相比增加；缓解持续时间(DOR)与参考DOR相比增加；OS与参考OS相比增加；疾病控制率(DCR，例如疾病稳定持续12周或更长时间、完全缓解(CR)或部分缓解(PR))与参考DCR相比增加。在一些方面，参考PFS、OS、DOR或DCR为已接受对照疗法的受试者群体的值。在一些方面，对照疗法为包括抗TIGIT拮抗剂抗体并且不包括靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体的疗法；包括靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体并且不包括抗TIGIT拮抗剂抗体的疗法；或包括伊匹木单抗和纳武利尤单抗的疗法。
在一些方面，受试者为人。
B.包括靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体的方法
在另一方面，本公开的特征在于一种用于治疗患有黑素瘤的受试者的方法，该方法包括向受试者施用靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体，该双特异性抗体包含特异性结合至PD-1的第一抗原结合结构域和特异性结合至LAG3的第二抗原结合结构域。在一些实施例中，以包括一个或多个给药周期的给药方案向受试者施用双特异性抗体。在一些实施例中，一个或多个给药周期是作为新辅助疗法施用的。
在一些方面，该方法包括每三周以约2100mg的固定剂量(例如，2100mg的固定剂量)向受试者施用双特异性抗体。
在一些方面，该方法包括每三周以约600mg的固定剂量(例如，600mg的固定剂量)向受试者施用双特异性抗体。
在一些方面，一个或多个给药周期中的每一个的长度为21天。在一些方面，该方法包括在一个或多个给药周期中的每一个的约第1天(例如，在第1天)向受试者施用双特异性抗体。
在一些方面，该方法包括向受试者静脉内施用双特异性抗体。
在一些方面，黑素瘤为具有可测量的淋巴结转移的III期黑素瘤。
在一些方面，受试者在开始治疗之前的六个月内未发生过移行转移。
在一些方面，受试者既往未使用癌症免疫疗法治疗。
在一些方面，黑素瘤并非黏膜黑素瘤或葡萄膜黑素瘤。
在一些方面，在手术之前开始第一给药周期。
在一些方面，在手术之前完成至少一个给药周期(例如，一个、两个、三个、四个或多于四个给药周期)或至少两个给药周期(例如，两个、三个、四个或多于四个给药周期)。在一些情况下，在手术之前完成两个给药周期。
在一些方面，在最后一个给药周期后约一周内进行手术。
在一些方面，手术为完全性淋巴结清扫(CLND)。
在一些方面，治疗引起病理缓解率(pRR)与参考pRR相比增加。在一些方面，参考pRR为已接受对照疗法的受试者群体的pRR。在一些方面，对照疗法为包括伊匹木单抗和纳武利尤单抗的疗法。
在一些方面，治疗引起无事件存活(EFS)与参考EFS相比增加；无复发存活(RFS)与参考RFS相比增加；总存活(OS)与参考OS相比增加；和/或总缓解率(ORR)与参考ORR相比增加。在一些方面，参考EFS、RFS、OS或ORR为已接受对照疗法的受试者群体的值。在一些方面，对照疗法为包括伊匹木单抗和纳武利尤单抗的疗法。
在一些方面，受试者为人。
C.包括抗TIGIT拮抗剂抗体和PD-1轴结合拮抗剂的方法
在另一方面，本公开的特征在于一种用于治疗患有黑素瘤的受试者的方法，该方法包括向受试者施用一个或多个给药周期的抗TIGIT拮抗剂抗体和PD-1轴结合拮抗剂，其中所述一个或多个给药周期是作为新辅助疗法施用的。在另一方面，本公开的特征在于一种用于治疗患有黑素瘤的受试者的方法，该方法包括向受试者施用抗TIGIT拮抗剂抗体和PD-1轴结合拮抗剂，其中抗TIGIT拮抗剂抗体和PD-1轴结合拮抗剂是作为新辅助疗法施用的。
在一些方面，该方法包括向受试者施用：(a)抗TIGIT拮抗剂抗体，其是每三周以约600mg的固定剂量(例如，600mg的固定剂量)施用；以及(b)PD-1轴结合拮抗剂，其是每三周以约1200mg的固定剂量(例如，1200mg的固定剂量)施用。
在一些方面，一个或多个给药周期中的每一个的长度为21天。
在一些方面，该方法包括在一个或多个给药周期每一个的约第1天(例如，在第1天)向受试者施用抗TIGIT拮抗剂抗体和PD-1轴结合拮抗剂。
在一些方面，该方法包括在抗TIGIT拮抗剂抗体之前向受试者施用PD-1轴结合拮抗剂。在其他方面，该方法包括在PD-1轴结合拮抗剂之前向受试者施用抗TIGIT拮抗剂抗体。
在一些方面，该方法包括向受试者静脉内施用PD-1轴结合拮抗剂和抗TIGIT拮抗剂抗体。
在一些方面，黑素瘤为具有可测量的淋巴结转移的III期黑素瘤。
在一些方面，受试者在开始治疗之前的六个月内未发生过移行转移。
在一些方面，受试者既往未使用癌症免疫疗法治疗。
在一些方面，黑素瘤并非黏膜黑素瘤或葡萄膜黑素瘤。
在一些方面，在手术之前开始第一给药周期。
在一些方面，在手术之前完成至少一个给药周期(例如，一个、两个、三个、四个或多于四个给药周期)或至少两个给药周期(例如，两个、三个、四个或多于四个给药周期)。在一些情况下，在手术之前完成两个给药周期。
在一些方面，在最后一个给药周期后约一周内进行手术。
在一些方面，手术为完全性淋巴结清扫(CLND)。
在一些方面，治疗引起病理缓解率(pRR)与参考pRR相比增加。在一些方面，参考pRR为已接受对照疗法的受试者群体的pRR。在一些方面，对照疗法为包括抗TIGIT拮抗剂抗体并且不包括PD-1轴结合拮抗剂的疗法；包括抗TIGIT拮抗剂抗体并且不包括PD-1轴结合拮抗剂的疗法；或包括伊匹木单抗和纳武利尤单抗的疗法。
在一些方面，治疗引起无事件存活(EFS)与参考EFS相比增加；无复发存活(RFS)与参考RFS相比增加；总存活(OS)与参考OS相比增加；和/或总缓解率(ORR)与参考ORR相比增加。在一些方面，参考EFS、RFS、OS或ORR为已接受对照疗法的受试者群体的值。在一些方面，对照疗法为包括抗TIGIT拮抗剂抗体并且不包括PD-1轴结合拮抗剂的疗法；包括抗TIGIT拮抗剂抗体并且不包括PD-1轴结合拮抗剂的疗法；或包括伊匹木单抗和纳武利尤单抗的疗法。
在一些方面，受试者为人。
D.在治疗黑素瘤的方法中使用的药剂
i.靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体
下文第XI节提供了靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体及其给药方案的另外的实例。
ii.抗TIGIT拮抗剂抗体
示例性抗TIGIT拮抗剂抗体及其给药方案提供于下文第VI节和第IX节中。
iii.PD-1轴结合拮抗剂
示例性PD-1轴结合拮抗剂及其给药方案提供于下文第VI节和第X节中。
IV.用于CD20阳性细胞增殖性疾患的治疗方法和组合物
本文提供了治疗患有CD20阳性细胞增殖性疾患(例如，B细胞增殖性疾患，例如NHL(例如，侵袭性NHL或复发性或难治性(R/R)NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者的方法，该方法包括向受试者施用替瑞利尤单抗和莫苏尼妥珠单抗。在一些实施例中，受试者在至少两种先前疗法后已复发或是用其难治的。
A.用于替瑞利尤单抗和莫苏尼妥珠单抗的给药的治疗方法
本发明提供了治疗患有复发性或难治性非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，B细胞增殖性疾患，例如NHL(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R DLBCL、R/R FL(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者的方法，这些方法包括向受试者施用替瑞利尤单抗和莫苏尼妥珠单抗。
在一些方面，R/R NHL为R/R滤泡性淋巴瘤(FL)、R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)。
在一些方面，R/R FL为R/R转化性FL(trFL)或R/R 3b级FL。
在一些方面，受试者在至少两种(例如，至少三种、至少四种、至少五种、至少六种、至少七种、至少八种、至少九种或至少十种；例如两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种、十种或更多种)先前疗法(例如，先前全身性疗法)后已复发或是用其难治的。
在一些方面，受试者在至少一种(例如，至少两种、至少三种、至少四种、至少五种、至少六种、至少七种、至少八种、至少九种或至少十种；例如，一种、两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种、十种或更多种)包括抗CD20单克隆抗体的先前疗法后已复发或是用其难治的。
在一些方面，抗CD20单克隆抗体为利妥昔单抗或奥滨尤妥珠单抗。在一些方面，抗CD20单克隆抗体为利妥昔单抗。在一些方面，抗CD20单克隆抗体为奥滨尤妥珠单抗。
在一些方面，受试者在至少一种(例如，至少两种、至少三种、至少四种、至少五种、至少六种、至少七种、至少八种、至少九种或至少十种；例如，一种、两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种、十种或更多种)包括蒽环类药物的先前疗法后已复发或是用其难治的。
在一些方面，蒽环类药物为柔红霉素或多柔比星。在一些方面，蒽环类药物为柔红霉素。在一些方面，蒽环类药物为多柔比星。
在一些方面，受试者在至少一种(例如，至少两种、至少三种、至少四种、至少五种、至少六种、至少七种、至少八种、至少一种)之后复发或难以治愈。至少九种，或至少十种；例如，一种、两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种、十种或更多种)包括烷化剂的先前疗法后已复发或是用其难治的。
在一些方面，烷化剂为苯达莫司汀、卡铂、顺铂或环磷酰胺。在一些方面，烷化剂为苯达莫司汀、卡铂、顺铂或环磷酰胺。在一些方面，烷化剂为苯达莫司汀。在一些方面，烷化剂为卡铂。在一些方面，烷化剂为顺铂。在一些方面，烷化剂为环磷酰胺。
在一些方面，受试者不符合自体干细胞疗法(ASCT)或嵌合抗原受体(CAR)T细胞疗法的条件。在一些方面，受试者不符合自体干细胞疗法(ASCT)的条件。在一些方面，受试者不符合嵌合抗原受体(CAR)T细胞疗法的条件。
在一些方面，以包括至少第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者施用替瑞利尤单抗和莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)和莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1在1mg至10mg之间(例如，在1mg至9mg之间、在1mg至8mg之间、在1mg至7mg之间、在1mg至6mg之间、在2mg至9mg之间、在3mg至9mg之间、在4mg至9mg之间、在3mg至7mg之间、在4mg至6mg之间、在4.5mg至5.5mg之间、在1mg至5mg之间、在5mg至10mg之间、在2.5mg至5mg之间、或在5mg至7.5mg之间；例如，约1mg、约2mg、约3mg、约3.5mg、约4mg、约4.5mg、约4.8mg、约4.9mg、约5mg、约5.1mg、约5.2mg、约5.3mg、约5.5mg、约6mg、约6.5mg、约7mg、约8mg、约9mg或约10mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2在40mg与50mg之间(例如，在41mg至49mg之间、在41mg至48mg之间、在41mg至47mg之间、在41mg至46mg之间、在42mg至49mg之间、在43mg至49mg之间、在44mg至49mg之间、在43mg至47mg之间、在44mg至46mg之间、在44.5mg至45.5mg之间、在41mg至45mg之间、在45mg至50mg之间、在42.5mg至45mg之间、或在45mg至47.5mg之间；例如，约41mg、约42mg、约43mg、约43.5mg、约44mg、约44.5mg、约44.8mg、约44.9mg、约45mg、约45.1mg、约45.2mg、约45.3mg、约45.5mg、约46mg、约46.5mg、约47mg、约48mg、约49mg或约50mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3在40mg与50mg之间(例如，在41mg至49mg之间、在41mg至48mg之间、在41mg至47mg之间、在41mg至46mg之间、在42mg至49mg之间、在43mg至49mg之间、在44mg至49mg之间、在43mg至47mg之间、在44mg至46mg之间、在44.5mg至45.5mg之间、在41mg至45mg之间、在45mg至50mg之间、在42.5mg至45mg之间、或在45mg至47.5mg之间；例如，约41mg、约42mg、约43mg、约43.5mg、约44mg、约44.5mg、约44.8mg、约44.9mg、约45mg、约45.1mg、约45.2mg、约45.3mg、约45.5mg、约46mg、约46.5mg、约47mg、约48mg、约49mg或约50mg)；并且(b)第二给药周期包括莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的C2D1在40mg与50mg之间(例如，在41mg至49mg之间、在41mg至48mg之间、在41mg至47mg之间、在41mg至46mg之间、在42mg至49mg之间、在43mg至49mg之间、在44mg至49mg之间、在43mg至47mg之间、在44mg至46mg之间、在44.5mg至45.5mg之间、在41mg至45mg之间、在45mg至50mg之间、在42.5mg至45mg之间、或在45mg至47.5mg之间；例如，约41mg、约42mg、约43mg、约43.5mg、约44mg、约44.5mg、约44.8mg、约44.9mg、约45mg、约45.1mg、约45.2mg、约45.3mg、约45.5mg、约46mg、约46.5mg、约47mg、约48mg、约49mg或约50mg)。
在一些方面，以包括至少第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者施用替瑞利尤单抗和莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)和莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约5mg，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约45mg，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约45mg；并且(b)第二给药周期包括莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的C2D1为约45mg。在一些方面，莫苏尼妥珠单抗的C1D1为5mg，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为45mg，莫苏尼妥珠单抗的C1D3为45mg，并且莫苏尼妥珠单抗的C2D1为45mg。
在一些方面，以包括至少第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者施用替瑞利尤单抗和莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)和莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1在1mg至10mg之间(例如，在1mg至9mg之间、在1mg至8mg之间、在1mg至7mg之间、在1mg至6mg之间、在2mg至9mg之间、在3mg至9mg之间、在4mg至9mg之间、在3mg至7mg之间、在4mg至6mg之间、在4.5mg至5.5mg之间、在1mg至5mg之间、在5mg至10mg之间、在2.5mg至5mg之间、或在5mg至7.5mg之间；例如，约1mg、约2mg、约3mg、约3.5mg、约4mg、约4.5mg、约4.8mg、约4.9mg、约5mg、约5.1mg、约5.2mg、约5.3mg、约5.5mg、约6mg、约6.5mg、约7mg、约8mg、约9mg或约10mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2在10mg与20mg之间(例如，在11mg至19mg之间、在11mg至18mg之间、在11mg至17mg之间、在11mg至16mg之间、在12mg至19mg之间、在13mg至19mg之间、在14mg至19mg之间、在13mg至17mg之间、在14mg至16mg之间、在14.5mg至15.5mg之间、在11mg至15mg之间、在15mg至20mg之间、在12.5mg至15mg之间、或在15mg至17.5mg之间；例如，约11mg、约12mg、约13mg、约13.5mg、约14mg、约14.5mg、约14.8mg、约14.9mg、约15mg、约15.1mg、约15.2mg、约15.3mg、约15.5mg、约16mg、约16.5mg、约17mg、约18mg、约19mg或约20mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3在40mg与50mg之间(例如，在41mg至49mg之间、在41mg至48mg之间、在41mg至47mg之间、在41mg至46mg之间、在42mg至49mg之间、在43mg至49mg之间、在44mg至49mg之间、在43mg至47mg之间、在44mg至46mg之间、在44.5mg至45.5mg之间、在41mg至45mg之间、在45mg至50mg之间、在42.5mg至45mg之间、或在45mg至47.5mg之间；例如，约41mg、约42mg、约43mg、约43.5mg、约44mg、约44.5mg、约44.8mg、约44.9mg、约45mg、约45.1mg、约45.2mg、约45.3mg、约45.5mg、约46mg、约46.5mg、约47mg、约48mg、约49mg或约50mg)；并且(b)第二给药周期包括莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的C2D1在40mg与50mg之间(例如，在41mg至49mg之间、在41mg至48mg之间、在41mg至47mg之间、在41mg至46mg之间、在42mg至49mg之间、在43mg至49mg之间、在44mg至49mg之间、在43mg至47mg之间、在44mg至46mg之间、在44.5mg至45.5mg之间、在41mg至45mg之间、在45mg至50mg之间、在42.5mg至45mg之间、或在45mg至47.5mg之间；例如，约41mg、约42mg、约43mg、约43.5mg、约44mg、约44.5mg、约44.8mg、约44.9mg、约45mg、约45.1mg、约45.2mg、约45.3mg、约45.5mg、约46mg、约46.5mg、约47mg、约48mg、约49mg或约50mg)。
在一些方面，以包括至少第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者施用替瑞利尤单抗和莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)和莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约5mg，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约15mg，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约45mg；并且(b)第二给药周期包括莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的C2D1为约45mg。在一些方面，莫苏尼妥珠单抗的C1D1为5mg，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为15mg，莫苏尼妥珠单抗的C1D3为45mg，并且莫苏尼妥珠单抗的C2D1为45mg。
在一些方面，以包括至少第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者施用替瑞利尤单抗和莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)和莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1在0.5mg与2mg之间(例如，在0.5mg与1mg之间、在1mg与2mg之间、在1mg与1.5mg之间、在0.75mg与1.25mg之间、在0.8mg与1.2mg之间、或在0.9mg与2.1mg之间；例如，约0.5mg、约0.6mg、约0.7mg、约0.8mg、约0.9mg、约1mg、约1.1mg、约1.2mg、约1.3mg、约1.4mg、约1.5mg、约1.6mg、约1.7mg、约1.8mg、约1.9mg或约2.0mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约2mg，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3在25mg与35mg之间(例如，在26mg与35mg之间、在27mg与35mg之间、在28mg与35mg之间、在29mg与35mg之间、在26mg与34mg之间、在26mg与33mg之间、在26mg与32mg之间、在26mg与31mg之间、在27.5mg与32.5mg之间、在28mg与32mg之间、在29mg与31mg之间、在25mg与30mg之间、或在30mg与35mg之间；例如，约25mg、约26mg、约27mg、约28mg、约28.5mg、约29mg、约29.5mg、约29.8mg、约29.9mg、约30mg、约30.1mg、约30.2mg、约30.5mg、约31mg、约31.5mg、约32mg、约33mg、约34mg或约35mg)；并且(b)第二给药周期包括莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的C2D1在25mg与35mg之间(例如，在26mg与35mg之间、在27mg与35mg之间、在28mg与35mg之间、在29mg与35mg之间、在26mg与34mg之间、在26mg与33mg之间、在26mg与32mg之间、在26mg与31mg之间、在27.5mg与32.5mg之间、在28mg与32mg之间、在29mg与31mg之间、在25mg与30mg之间、或在30mg与35mg之间；例如，约25mg、约26mg、约27mg、约28mg、约28.5mg、约29mg、约29.5mg、约29.8mg、约29.9mg、约30mg、约30.1mg、约30.2mg、约30.5mg、约31mg、约31.5mg、约32mg、约33mg、约34mg或约35mg)。
在一些方面，以包括至少第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者施用替瑞利尤单抗和莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)和莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约1mg，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约2mg，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约30mg；并且(b)第二给药周期包括莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的C2D1为约30mg。在一些方面，莫苏尼妥珠单抗的C1D1为1mg，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为2mg，莫苏尼妥珠单抗的C1D3为30mg，并且莫苏尼妥珠单抗的C2D1为30mg。
在一些方面，以包括至少第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者施用替瑞利尤单抗和莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)和莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1在0.5mg与2mg之间(例如，在0.5mg与1mg之间、在1mg与2mg之间、在1mg与1.5mg之间、在0.75mg与1.25mg之间、在0.8mg与1.2mg之间、或在0.9mg与2.1mg之间；例如，约0.5mg、约0.6mg、约0.7mg、约0.8mg、约0.9mg、约1mg、约1.1mg、约1.2mg、约1.3mg、约1.4mg、约1.5mg、约1.6mg、约1.7mg、约1.8mg、约1.9mg或约2.0mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约2mg，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3在55mg与65mg之间(例如，在56mg与65mg之间、在57mg与65mg之间、在58mg与65mg之间、在59mg与65mg之间、在56mg与64mg之间、在56mg与63mg之间、在56mg与62mg之间、在56mg与61mg之间、在57.5mg与62.5mg之间、在58mg与62mg之间、在59mg与61mg之间、在55mg与60mg之间、或在60mg与65mg之间；例如，约55mg、约56mg、约57mg、约58mg、约58.5mg、约59mg、约59.5mg、约59.8mg、约59.9mg、约60mg、约60.1mg、约60.2mg、约60.5mg、约61mg、约61.5mg、约62mg、约63mg、约64mg、或约65mg)；并且(b)第二给药周期包括莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的C2D1为约60mg(例如，在56mg与65mg之间、在57mg与65mg之间、在58mg与65mg之间、在59mg与65mg之间、在56mg与64mg之间、在56mg与63mg之间、在56mg与62mg之间、在56mg与61mg之间、在57.5mg与62.5mg之间、在58mg与62mg之间、在59mg与61mg之间、在55mg与60mg之间、或在60mg与65mg之间；例如，约55mg、约56mg、约57mg、约58mg、约58.5mg、约59mg、约59.5mg、约59.8mg、约59.9mg、约60mg、约60.1mg、约60.2mg、约60.5mg、约61mg、约61.5mg、约62mg、约63mg、约64mg或约65mg)。
在一些方面，以包括至少第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者施用替瑞利尤单抗和莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)和莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约1mg，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约2mg，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约60mg；并且(b)第二给药周期包括莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的C2D1为约60mg。在一些方面，莫苏尼妥珠单抗的C1D1为1mg，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为2mg，莫苏尼妥珠单抗的C1D3为60mg，并且莫苏尼妥珠单抗的C2D1为60mg。
在一些方面，第一给药周期和第二给药周期为21天给药周期(±1天)。在一些方面，第一给药周期和第二给药周期为28天给药周期(±1天)。在一些方面，第一给药周期为21天给药周期(±1天)并且第二给药周期为28天给药周期(±1天)。
在一些方面，分别在或约在第一给药周期的第1天、第8天(±1天)和第15天(±1天)施用莫苏尼妥珠单抗的C1D1、C1D2和C1D3。在一些方面，分别在第一给药周期的第1天、第8天和第15天施用莫苏尼妥珠单抗的C1D1、C1D2和C1D3。
在一些方面，在第二给药周期的第1天施用莫苏尼妥珠单抗的C2D1。
在一些方面，第一给药周期包括替瑞利尤单抗的单一剂量(C1D1)。
在一些方面，在第一给药周期的第1天施用替瑞利尤单抗的C1D1。
在一些方面，替瑞利尤单抗的C1D1在约30mg至约1200mg之间(例如在约30mg至约1100mg之间，例如在约60mg至约1000mg之间，例如在约100mg至约900mg之间，例如在约200mg至约800mg之间，例如在约300mg至约800mg之间，例如在约400mg至约800mg之间，例如在约400mg至约750mg之间，例如在约450mg至约750mg之间，例如在约500mg至约700mg之间，例如在约550mg至约650mg之间，例如600mg±10mg，例如600±6mg，例如600±5mg，例如600±3mg，例如600±1mg，例如600±0.5mg，例如600mg)。在一些方面，替瑞利尤单抗的C1D1为约600mg。在一些方面，替瑞利尤单抗的C1D1为600mg。
在一些方面，在施用莫苏尼妥珠单抗的C1D1之后施用替瑞利尤单抗的C1D1。在一些方面，替瑞利尤单抗的C1D1与莫苏尼妥珠单抗的C1D1的施用同时施用。
在一些方面，在第一给药周期期间不向受试者施用替瑞利尤单抗在一些方面，第二给药周期包括替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1)。
在一些方面，在第二给药周期的第1天施用替瑞利尤单抗的C2D1。
在一些方面，替瑞利尤单抗的C2D1在约30mg至约1200mg之间(例如在约30mg至约1100mg之间，例如在约60mg至约1000mg之间，例如在约100mg至约900mg之间，例如在约200mg至约800mg之间，例如在约300mg至约800mg之间，例如在约400mg至约800mg之间，例如在约400mg至约750mg之间，例如在约450mg至约750mg之间，例如在约500mg至约700mg之间，例如在约550mg至约650mg之间，例如600mg±10mg，例如600±6mg，例如600±5mg，例如600±3mg，例如600±1mg，例如600±0.5mg，例如600mg)。在一些方面，替瑞利尤单抗的C2D1为约600mg。在一些方面，替瑞利尤单抗的C2D1为600mg。
在一些方面，在施用莫苏尼妥珠单抗的C2D1之后施用替瑞利尤单抗的C2D1。在一些方面，替瑞利尤单抗的C2D1与莫苏尼妥珠单抗的C2D1的施用同时施用。
在一些方面，给药方案另外包括向受试者施用阿特珠单抗。
在一些方面，第二给药周期包括阿特珠单抗的单一剂量(C2D1)。
在一些方面，在第二给药周期的第1天施用阿特珠单抗的C2D1。
在一些方面，阿特珠单抗的C2D1约80mg至约1600mg之间(例如在约100mg至约1600mg之间，例如在约200mg至约1600mg之间，例如在约300mg至约1600mg之间，例如在约400mg至约1600mg之间，例如在约500mg至约1600mg之间，例如在约600mg至约1600mg之间，例如在约700mg至约1600mg之间，例如在约800mg至约1600mg之间，例如在约900mg至约1500mg之间，例如在约1000mg至约1400mg之间，例如在约1050mg至约1350mg之间，例如在约1100mg至约1300mg之间，例如在约1150mg至约1250mg之间，例如在约1175mg至约1225mg之间，例如在约1190mg至约1210mg之间，例如1200mg±5mg，例如1200±2.5mg，例如1200±1.0mg，例如1200±0.5mg，例如1200mg)。在一些方面，阿特珠单抗的C2D1为约1200mg。在一些方面，阿特珠单抗的C2D1为1200mg。
在一些方面，在施用替瑞利尤单抗的C2D1之后施用阿特珠单抗的C2D1。
在一些方面，在第一给药周期期间不向受试者施用阿特珠单抗。
在一些方面，给药方案进一步包括一个或多个(例如，一个、两个、三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个、十个、十一个、十二个、十三个、十四个、十五个或更多个)额外给药周期。
在一些方面，给药方案进一步包括六至十五个(例如，六个、七个、八个、九个、十个、十一个、十二个、十三个、十四个或十五个)额外给药周期。
在一些方面，给药方案进一步包括六个额外给药周期。
在一些方面，给药方案进一步包括十五个额外给药周期。
在一些方面，每个额外给药周期为21天给药周期(±1天)。在一些方面，每个额外给药周期为28天给药周期(±1天)。
在一些方面，每个额外给药周期包括施用莫苏尼妥珠单抗的额外剂量。
在一些方面，莫苏尼妥珠单抗的每个额外剂量在40mg与50mg之间(例如，在41mg至49mg之间、在41mg至48mg之间、在41mg至47mg之间、在41mg至46mg之间、在42mg至49mg之间、在43mg至49mg之间、在44mg至49mg之间、在43mg至47mg之间、在44mg至46mg之间、在44.5mg至45.5mg之间、在41mg至45mg之间、在45mg至50mg之间、在42.5mg至45mg之间、或在45mg至47.5mg之间；例如，约41mg、约42mg、约43mg、约43.5mg、约44mg、约44.5mg、约44.8mg、约44.9mg、约45mg、约45.1mg、约45.2mg、约45.3mg、约45.5mg、约46mg、约46.5mg、约47mg、约48mg、约49mg或约50mg)。在一些方面，莫苏尼妥珠单抗的每个额外剂量为约45mg。在一些方面，莫苏尼妥珠单抗的每个额外剂量为45mg。
在一些方面，莫苏尼妥珠单抗的每个额外剂量在25mg与35mg之间(例如，在26mg与35mg之间、在27mg与35mg之间、在28mg与35mg之间、在29mg与35mg之间、在26mg与34mg之间、在26mg与33mg之间、在26mg与32mg之间、在26mg与31mg之间、在27.5mg与32.5mg之间、在28mg与32mg之间、在29mg与31mg之间、在25mg与30mg之间、或在30mg与35mg之间；例如，约25mg、约26mg、约27mg、约28mg、约28.5mg、约29mg、约29.5mg、约29.8mg、约29.9mg、约30mg、约30.1mg、约30.2mg、约30.5mg、约31mg、约31.5mg、约32mg、约33mg、约34mg或约35mg)。在一些方面，莫苏尼妥珠单抗的每个额外剂量为约30mg。在一些方面，莫苏尼妥珠单抗的每个额外剂量为30mg。
在一些方面，在每个相应的额外给药周期的第1天施用莫苏尼妥珠单抗的每个额外剂量。
在一些方面，每个额外给药周期包括施用替瑞利尤单抗的额外剂量。
在一些方面，替瑞利尤单抗的每个额外剂量为约30mg至约1200mg(例如在约30mg至约1100mg之间，例如在约60mg至约1000mg之间，例如在约100mg至约900mg之间，例如在约200mg至约800mg之间，例如在约300mg至约800mg之间，例如在约400mg至约800mg之间，例如在约400mg至约750mg之间，例如在约450mg至约750mg之间，例如在约500mg至约700mg之间，例如在约550mg至约650mg之间，例如600mg±10mg，例如600±6mg，例如600±5mg，例如600±3mg，例如600±1mg，例如600±0.5mg，例如600mg)。在一些方面，替瑞利尤单抗的每个额外剂量为约600mg。在一些方面，替瑞利尤单抗的每个额外剂量为600mg。
在一些方面，在每个相应的额外给药周期的第1天施用替瑞利尤单抗的每个额外剂量。
在一些方面，在施用莫苏尼妥珠单抗的每个额外剂量之后施用替瑞利尤单抗的每个额外剂量。在一些方面，替瑞利尤单抗的每个额外剂量与莫苏尼妥珠单抗的每个额外剂量的施用同时施用。
在一些方面，每个额外给药周期包括施用阿特珠单抗的额外剂量。
在一些方面，阿特珠单抗的每个额外剂量在约80mg至约1600mg之间(例如在约100mg至约1600mg之间，例如在约200mg至约1600mg之间，例如在约300mg至约1600mg之间，例如在约400mg至约1600mg之间，例如在约500mg至约1600mg之间，例如在约600mg至约1600mg之间，例如在约700mg至约1600mg之间，例如在约800mg至约1600mg之间，例如在约900mg至约1500mg之间，例如在约1000mg至约1400mg之间，例如在约1050mg至约1350mg之间，例如在约1100mg至约1300mg之间，例如在约1150mg至约1250mg之间，例如在约1175mg至约1225mg之间，例如在约1190mg至约1210mg之间，例如1200mg±5mg，例如1200±2.5mg，例如1200±1.0mg，例如1200±0.5mg，例如1200mg)。在一些方面，阿特珠单抗的每个额外剂量为约1200mg。在一些方面，阿特珠单抗的每个额外剂量为1200mg。
在一些方面，在每个相应的额外给药周期的第1天施用阿特珠单抗的每个额外剂量。
在一些方面，在施用替瑞利尤单抗的每个额外剂量之后施用阿特珠单抗的每个额外剂量。
在一些方面，向受试者静脉内施用替瑞利尤单抗。
在一些方面，向受试者皮下施用莫苏尼妥珠单抗。在一些方面，向受试者静脉内施用莫苏尼妥珠单抗。在一些方面，向受试者皮下施用莫苏尼妥珠单抗的每个剂量。在一些方面，向受试者静脉内注射施用莫苏尼妥珠单抗的每个剂量。
在一些方面，向受试者静脉内施用阿特珠单抗。
在一些方面，该方法进一步包括向受试者施用一种或多种(例如，一种、两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种、十种或更多种)另外的治疗剂。
在一些方面，一种或多种另外的治疗剂为IL-6R拮抗剂或皮质类固醇。在一些方面，一种或多种另外的治疗剂为IL-6R拮抗剂。在一些方面，一种或多种另外的治疗剂为皮质类固醇。
在一些方面，IL-6R拮抗剂为托珠单抗。
在一些方面，皮质类固醇为甲泼尼龙、地塞米松或泼尼松。在一些方面，皮质类固醇为甲泼尼龙。在一些方面，皮质类固醇为地塞米松。在一些方面，皮质类固醇为泼尼松。
在一些方面，受试者为人。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括至少第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗以及向受试者群体皮下施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约5mg(例如，5mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约45mg(例如，45mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约45mg(例如，45mg)；并且(b)第二给药周期包括在该第二给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的C2D1为约45mg(例如，45mg)并且替瑞利尤单抗的C2D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括至少第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗以及向受试者群体皮下施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约5mg(例如，5mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约45mg(例如，45mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约45mg(例如，45mg)；并且(b)第二给药周期包括在该第二给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的C2D1为约45mg(例如，45mg)，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C1D1和C2D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括至少第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗、向受试者群体静脉内施用阿特珠单抗以及向受试者群体皮下施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约5mg(例如，5mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约45mg(例如，45mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约45mg(例如，45mg)；并且(b)第二给药周期包括在第二给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1)、替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1)和阿特珠单抗的单一剂量(C2D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的C2D1为约45mg(例如，45mg)，替瑞利尤单抗的C2D1为约600mg(例如，600mg)，并且阿特珠单抗的C2D1为约1200mg(例如，1200mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括至少第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗、向受试者群体静脉内施用阿特珠单抗以及向受试者群体皮下施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约5mg(例如，5mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约45mg(例如，45mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约45mg(例如，45mg)；并且(b)第二给药周期包括在第二给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1)、替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1)和阿特珠单抗的单一剂量(C2D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的C2D1为约45mg(例如，45mg)并且阿特珠单抗的C2D1为约1200mg(例如，1200mg)，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C1D1和C2D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括八个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗以及向受试者群体皮下施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约5mg(例如，5mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约45mg(例如，45mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约45mg(例如，45mg)；并且(b)第二给药周期至第八给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C2D1至C8D1剂量为约45mg(例如，45mg)，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C2D1至C8D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括八个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗以及向受试者群体皮下施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约5mg(例如，5mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约45mg(例如，45mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约45mg(例如，45mg)；并且(b)第二给药周期至第八给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C2D1至C8D1剂量为约45mg(例如，45mg)，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C1D1至C8D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括八个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗、向受试者群体静脉内施用阿特珠单抗以及向受试者群体皮下施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约5mg(例如，5mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约45mg(例如，45mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约45mg(例如，45mg)；并且(b)第二给药周期至第八给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)、替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)和阿特珠单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C2D1至C8D1为约45mg(例如，45mg)，替瑞利尤单抗的每个单一剂量C2D1至C8D1为约600mg(例如，600mg)，并且阿特珠单抗的每个单一剂量C2D1至C8D1为约1200mg(例如，1200mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括八个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗、向受试者群体静脉内施用阿特珠单抗以及向受试者群体皮下施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约5mg(例如，5mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约45mg(例如，45mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约45mg(例如，45mg)；并且(b)第二给药周期至第八给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)、替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)和阿特珠单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C2D1至C8D1为约45mg(例如，45mg)并且阿特珠单抗的每个单一剂量C2D1至C8D1为约1200mg(例如，1200mg)，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C1D1至C8D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括十七个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗以及向受试者群体皮下施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约5mg(例如，5mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约45mg(例如，45mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约45mg(例如，45mg)；并且(b)第二给药周期至第十七给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C2D1至C17D1为约45mg(例如，45mg)，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C2D1至C17D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括十七个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗以及向受试者群体皮下施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约5mg(例如，5mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约45mg(例如，45mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约45mg(例如，45mg)；并且(b)第二给药周期至第十七给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C2D1至C17D1为约45mg(例如，45mg)，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C1D1至C17D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括十七个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗、向受试者群体静脉内施用阿特珠单抗以及向受试者群体皮下施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约5mg(例如，5mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约45mg(例如，45mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约45mg(例如，45mg)；并且(b)第二给药周期至第十七给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)、替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)和阿特珠单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C2D1至C17D1为约45mg(例如，45mg)，替瑞利尤单抗的每个单一剂量C2D1至C17D1为约600mg(例如，600mg)，并且阿特珠单抗的每个单一剂量C2D1至C17D1为约1200mg(例如，1200mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括十七个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗、向受试者群体静脉内施用阿特珠单抗以及向受试者群体皮下施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约5mg(例如，5mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约45mg(例如，45mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约45mg(例如，45mg)；并且(b)第二给药周期至第十七给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)、替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)和阿特珠单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C2D1至C17D1为约45mg(例如，45mg)并且阿特珠单抗的每个单一剂量C2D1至C17D1为约1200mg(例如，1200mg)，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C1D1至C17D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括至少第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗以及向受试者群体皮下施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约5mg(例如，5mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约15mg(例如，15mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约45mg(例如，45mg)；并且(b)第二给药周期包括在该第二给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的C2D1为约45mg(例如，45mg)并且替瑞利尤单抗的C2D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括至少第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗以及向受试者群体皮下施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约5mg(例如，5mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约15mg(例如，15mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约45mg(例如，45mg)；并且(b)第二给药周期包括在该第二给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的C2D1为约45mg(例如，45mg)，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C1D1和C2D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括至少第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗、向受试者群体静脉内施用阿特珠单抗以及向受试者群体皮下施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约5mg(例如，5mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约15mg(例如，15mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约45mg(例如，45mg)；并且(b)第二给药周期包括在第二给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1)、替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1)和阿特珠单抗的单一剂量(C2D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的C2D1为约45mg(例如，45mg)，替瑞利尤单抗的C2D1为约600mg(例如，600mg)，并且阿特珠单抗的C2D1为约1200mg(例如，1200mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括至少第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗、向受试者群体静脉内施用阿特珠单抗以及向受试者群体皮下施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约5mg(例如，5mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约15mg(例如，15mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约45mg(例如，45mg)；并且(b)第二给药周期包括在第二给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1)、替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1)和阿特珠单抗的单一剂量(C2D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的C2D1为约45mg(例如，45mg)并且阿特珠单抗的C2D1为约1200mg(例如，1200mg)，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C1D1和C2D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括八个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗以及向受试者群体皮下施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约5mg(例如，5mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约15mg(例如，15mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约45mg(例如，45mg)；并且(b)第二给药周期至第八给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C2D1至C8D1剂量为约45mg(例如，45mg)，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C2D1至C8D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括八个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗以及向受试者群体皮下施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约5mg(例如，5mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约15mg(例如，15mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约45mg(例如，45mg)；并且(b)第二给药周期至第八给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C2D1至C8D1剂量为约45mg(例如，45mg)，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C1D1至C8D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括八个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗、向受试者群体静脉内施用阿特珠单抗以及向受试者群体皮下施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约5mg(例如，5mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约15mg(例如，15mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约45mg(例如，45mg)；并且(b)第二给药周期至第八给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)、替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)和阿特珠单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C2D1至C8D1为约45mg(例如，45mg)，替瑞利尤单抗的每个单一剂量C2D1至C8D1为约600mg(例如，600mg)，并且阿特珠单抗的每个单一剂量C2D1至C8D1为约1200mg(例如，1200mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括八个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗、向受试者群体静脉内施用阿特珠单抗以及向受试者群体皮下施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约5mg(例如，5mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约15mg(例如，15mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约45mg(例如，45mg)；并且(b)第二给药周期至第八给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)、替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)和阿特珠单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C2D1至C8D1为约45mg(例如，45mg)并且阿特珠单抗的每个单一剂量C2D1至C8D1为约1200mg(例如，1200mg)，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C1D1至C8D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括十七个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗以及向受试者群体皮下施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约5mg(例如，5mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约15mg(例如，15mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约45mg(例如，45mg)；并且(b)第二给药周期至第十七给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C2D1至C17D1为约45mg(例如，45mg)，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C2D1至C17D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括十七个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗以及向受试者群体皮下施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约5mg(例如，5mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约15mg(例如，15mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约45mg(例如，45mg)；并且(b)第二给药周期至第十七给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C2D1至C17D1为约45mg(例如，45mg)，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C1D1至C17D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括十七个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗、向受试者群体静脉内施用阿特珠单抗以及向受试者群体皮下施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约5mg(例如，5mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约15mg(例如，15mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约45mg(例如，45mg)；并且(b)第二给药周期至第十七给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)、替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)和阿特珠单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C2D1至C17D1为约45mg(例如，45mg)，替瑞利尤单抗的每个单一剂量C2D1至C17D1为约600mg(例如，600mg)，并且阿特珠单抗的每个单一剂量C2D1至C17D1为约1200mg(例如，1200mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括十七个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗、向受试者群体静脉内施用阿特珠单抗以及向受试者群体皮下施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约5mg(例如，5mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约15mg(例如，15mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约45mg(例如，45mg)；并且(b)第二给药周期至第十七给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)、替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)和阿特珠单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C2D1至C17D1为约45mg(例如，45mg)并且阿特珠单抗的每个单一剂量C2D1至C17D1为约1200mg(例如，1200mg)，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C1D1至C17D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括至少第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗以及向受试者群体静脉内施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约1mg(例如，1mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约2mg(例如，2mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约30mg(例如，30mg)；并且(b)第二给药周期包括在该第二给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的C2D1为约30mg(例如，30mg)并且替瑞利尤单抗的C2D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括至少第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗以及向受试者群体静脉内施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约1mg(例如，1mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约2mg(例如，2mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约30mg(例如，30mg)；并且(b)第二给药周期包括在该第二给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的C2D1为约30mg(例如，30mg)，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C1D1和C2D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括至少第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗、向受试者群体静脉内施用阿特珠单抗以及向受试者群体静脉内施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约1mg(例如，1mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约2mg(例如，2mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约30mg(例如，30mg)；并且(b)第二给药周期包括在第二给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1)、替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1)和阿特珠单抗的单一剂量(C2D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的C2D1为约30mg(例如，30mg)，替瑞利尤单抗的C2D1为约600mg(例如，600mg)，并且阿特珠单抗的C2D1为约1200mg(例如，1200mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括至少第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗、向受试者群体静脉内施用阿特珠单抗以及向受试者群体静脉内施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约1mg(例如，1mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约2mg(例如，2mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约30mg(例如，30mg)；并且(b)第二给药周期包括在第二给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1)、替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1)和阿特珠单抗的单一剂量(C2D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的C2D1为约30mg(例如，30mg)并且阿特珠单抗的C2D1为约1200mg(例如，1200mg)，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C1D1和C2D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括八个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗以及向受试者群体静脉内施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约1mg(例如，1mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约2mg(例如，2mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约30mg(例如，30mg)；并且(b)第二给药周期至第八给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C2D1至C8D1剂量为约30mg(例如，30mg)，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C2D1至C8D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括八个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗以及向受试者群体静脉内施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约1mg(例如，1mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约2mg(例如，2mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约30mg(例如，30mg)；并且(b)第二给药周期至第八给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C2D1至C8D1剂量为约30mg(例如，30mg)，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C1D1至C8D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括八个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗、向受试者群体静脉内施用阿特珠单抗以及向受试者群体静脉内施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约1mg(例如，1mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约2mg(例如，2mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约30mg(例如，30mg)；并且(b)第二给药周期至第八给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)、替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)和阿特珠单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C2D1至C8D1为约30mg(例如，30mg)，替瑞利尤单抗的每个单一剂量C2D1至C8D1为约600mg(例如，600mg)，并且阿特珠单抗的每个单一剂量C2D1至C8D1为约1200mg(例如，1200mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括八个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗、向受试者群体静脉内施用阿特珠单抗以及向受试者群体静脉内施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约1mg(例如，1mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约2mg(例如，2mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约30mg(例如，30mg)；并且(b)第二给药周期至第八给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)、替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)和阿特珠单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C2D1至C8D1为约30mg(例如，30mg)并且阿特珠单抗的每个单一剂量C2D1至C8D1为约1200mg(例如，1200mg)，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C1D1至C8D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括十七个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗以及向受试者群体静脉内施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约1mg(例如，1mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约2mg(例如，2mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约30mg(例如，30mg)；并且(b)第二给药周期至第十七给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C2D1至C17D1为约30mg(例如，30mg)，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C2D1至C17D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括十七个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗以及向受试者群体静脉内施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约1mg(例如，1mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约2mg(例如，2mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约30mg(例如，30mg)；并且(b)第二给药周期至第十七给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C2D1至C17D1为约30mg(例如，30mg)，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C1D1至C17D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括十七个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗、向受试者群体静脉内施用阿特珠单抗以及向受试者群体静脉内施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约1mg(例如，1mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约2mg(例如，2mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约30mg(例如，30mg)；并且(b)第二给药周期至第十七给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)、替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)和阿特珠单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C2D1至C17D1为约30mg(例如，30mg)，替瑞利尤单抗的每个单一剂量C2D1至C17D1为约600mg(例如，600mg)，并且阿特珠单抗的每个单一剂量C2D1至C17D1为约1200mg(例如，1200mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括十七个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗、向受试者群体静脉内施用阿特珠单抗以及向受试者群体静脉内施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约1mg(例如，1mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约2mg(例如，2mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约30mg(例如，30mg)；并且(b)第二给药周期至第十七给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)、替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)和阿特珠单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C2D1至C17D1为约30mg(例如，30mg)并且阿特珠单抗的每个单一剂量C2D1至C17D1为约1200mg(例如，1200mg)，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C1D1至C17D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括至少第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗以及向受试者群体静脉内施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约1mg(例如，1mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约2mg(例如，2mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约60mg(例如，60mg)；并且(b)第二给药周期包括在该第二给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的C2D1为约60mg(例如，60mg)并且替瑞利尤单抗的C2D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括至少第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗以及向受试者群体静脉内施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约1mg(例如，1mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约2mg(例如，2mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约60mg(例如，60mg)；并且(b)第二给药周期包括在该第二给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的C2D1为约60mg(例如，60mg)，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C1D1和C2D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括至少第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗、向受试者群体静脉内施用阿特珠单抗以及向受试者群体静脉内施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约1mg(例如，1mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约2mg(例如，2mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约60mg(例如，60mg)；并且(b)第二给药周期包括在第二给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1)、替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1)和阿特珠单抗的单一剂量(C2D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的C2D1为约60mg(例如，60mg)，替瑞利尤单抗的C2D1为约600mg(例如，600mg)，并且阿特珠单抗的C2D1为约1200mg(例如，1200mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括至少第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗、向受试者群体静脉内施用阿特珠单抗以及向受试者群体静脉内施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约1mg(例如，1mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约2mg(例如，2mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约60mg(例如，60mg)；并且(b)第二给药周期包括在第二给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1)、替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1)和阿特珠单抗的单一剂量(C2D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的C2D1为约60mg(例如，60mg)并且阿特珠单抗的C2D1为约1200mg(例如，1200mg)，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C1D1和C2D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括八个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗以及向受试者群体静脉内施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约1mg(例如，1mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约2mg(例如，2mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约60mg(例如，60mg)；并且(b)第二给药周期至第八给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)，其中C2D1为约60mg(例如，60mg)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C3D1至C8D1为约30mg(例如，30mg)，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C2D1至C8D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括八个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗以及向受试者群体静脉内施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约1mg(例如，1mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约2mg(例如，2mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约60mg(例如，60mg)；并且(b)第二给药周期至第八给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)，其中C2D1为约60mg(例如，60mg)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C3D1至C8D1为约30mg(例如，30mg)，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C1D1至C8D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括八个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗、向受试者群体静脉内施用阿特珠单抗以及向受试者群体静脉内施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约1mg(例如，1mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约2mg(例如，2mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约60mg(例如，60mg)；并且(b)第二给药周期至第八给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)、替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)和阿特珠单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)，其中C2D1为约60mg(例如，60mg)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C3D1至C8D1为约30mg(例如，30mg)，替瑞利尤单抗的每个单一剂量C2D1至C8D1为约600mg(例如，600mg)，并且阿特珠单抗的每个单一剂量C2D1至C8D1为约1200mg(例如，1200mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括八个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗、向受试者群体静脉内施用阿特珠单抗以及向受试者群体静脉内施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约1mg(例如，1mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约2mg(例如，2mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约60mg(例如，60mg)；并且(b)第二给药周期至第八给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)、替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)和阿特珠单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)，其中C2D1为约60mg(例如，60mg)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C3D1至C8D1为约30mg(例如，30mg)并且阿特珠单抗的每个单一剂量C2D1至C8D1为约1200mg(例如，1200mg)，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C1D1至C8D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括十七个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗以及向受试者群体静脉内施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约1mg(例如，1mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约2mg(例如，2mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约60mg(例如，60mg)；并且(b)第二给药周期至第十七给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)，其中C2D1为约60mg(例如，60mg)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C3D1至C17D1为约30mg(例如，30mg)并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C2D1至C17D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括十七个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗以及向受试者群体静脉内施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约1mg(例如，1mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约2mg(例如，2mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约60mg(例如，60mg)；并且(b)第二给药周期至第十七给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)，其中C2D1为约60mg(例如，60mg)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C3D1至C17D1为约30mg(例如，30mg)，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C1D1至C17D1为约600mg(例如，600mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括十七个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗、向受试者群体静脉内施用阿特珠单抗以及向受试者群体静脉内施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约1mg(例如，1mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约2mg(例如，2mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约60mg(例如，60mg)；并且(b)第二给药周期至第十七给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)、替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)和阿特珠单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)，其中C2D1为约60mg(例如，60mg)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C3D1至C17D1为约30mg(例如，30mg)，替瑞利尤单抗的每个单一剂量C2D1至C17D1为约600mg(例如，600mg)，并且阿特珠单抗的每个单一剂量C2D1至C17D1为约1200mg(例如，1200mg)。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者群体的方法，该方法包括以包括十七个给药周期的给药方案向受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗、向受试者群体静脉内施用阿特珠单抗以及向受试者群体静脉内施用莫苏尼妥珠单抗，其中：(a)第一给药周期包括在该第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天(±1天)施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的C1D1为约1mg(例如，1mg)，莫苏尼妥珠单抗的C1D2为约2mg(例如2mg)，并且莫苏尼妥珠单抗的C1D3为约60mg(例如，60mg)；并且(b)第二给药周期至第十七给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)、替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)和阿特珠单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)，其中C2D1为约60mg(例如，60mg)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C3D1至C17D1为约30mg(例如，30mg)并且阿特珠单抗的每个单一剂量C2D1至C17D1为约1200mg(例如，1200mg)，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C1D1至C17D1为约600mg(例如，600mg)。
在一些方面，受试者群体中的完全缓解率高于用包括莫苏尼妥珠单抗的单一疗法治疗的参考受试者群体中的参考完全缓解率。
在一些方面，受试者群体中的客观缓解率高于用包括莫苏尼妥珠单抗的单一疗法治疗的参考受试者群体中的参考客观缓解率。
在一些方面，受试者群体中的不良事件率与用包括莫苏尼妥珠单抗的单一疗法治疗的参考受试者群体中不良事件的参考率基本上相同。
在一些方面，受试者群体中细胞因子释放综合征(CRS)事件率与用包括莫苏尼妥珠单抗的单一疗法治疗的参考受试者群体中CRS事件的参考率基本上相同。
在一些方面，受试者群体中具有如美国移植和细胞疗法学会(ASTCT)细胞因子释放综合征共识分级(“ASTCT CRS分级”)所定义的3级或更高级别的CRS事件率与用包括莫苏尼妥珠单抗的单一疗法治疗的参考受试者群体中具有如ASCT CRS分级所定义的3级或更高级别的CRS事件的参考率基本上相同。
在一些方面，受试者群体中的完全缓解率高于用包括皮下施用莫苏尼妥珠单抗的单一疗法治疗的参考受试者群体中的参考完全缓解率。
在一些方面，受试者群体中的客观缓解率高于用包括皮下施用莫苏尼妥珠单抗的单一疗法治疗的参考受试者群体中的参考客观缓解率。
在一些方面，受试者群体中的不良事件率与用包括皮下施用莫苏尼妥珠单抗的单一疗法治疗的参考受试者群体中不良事件的参考率基本上相同。
在一些方面，受试者群体中的CRS事件率与用包括皮下施用莫苏尼妥珠单抗的单一疗法治疗的参考受试者群体中CRS事件的参考率基本上相同。
在一些方面，受试者群体中具有如ASTCT CRS分级所定义的3级或更高级别的CRS事件率与用包括皮下施用莫苏尼妥珠单抗的单一疗法治疗的参考受试者群体中具有如ASCT CRS分级所定义的3级或更高级别的CRS事件的参考率基本上相同。
在一些方面，受试者为人。
本文所述的任何方法可涉及监测受试者的细胞因子释放综合征(CRS)，例如在开始上述任何方法之后的CRS事件。当前的临床管理侧重于治疗受试者病征和症状，提供支持性护理，并且试图使用高剂量皮质类固醇来抑制炎性反应。但是，该方法并非始终能够成功，尤其在后期干预的情况下。CRS分级和CRS事件管理策略将在下文第XIII节中详细讨论。
B.莫苏尼妥珠单抗
本发明提供了可用于治疗复发性和/或难治性(R/R)滤泡性淋巴瘤(FL)的莫苏尼妥珠单抗(一种结合至CD20和CD3的双特异性抗体)。FL可以为1级、2级或3a级，但并非3b级。
在一些情况下，本发明提供了包括以下的莫苏尼妥珠单抗：(1)具有第一结合结构域的抗CD20臂，该第一结合结构域包含选自以下项的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个HVR：(a)HVR-H1，其包含GYTFTSYNMH(SEQ ID NO:74)的氨基酸序列；(b)HVR-H2，其包含AIYPGNGDTSYNQKFKG(SEQ ID NO:75)的氨基酸序列；(c)HVR-H3，其包含VVYYSNSYWYFDV(SEQID NO:76)的氨基酸序列；(d)HVR-L1，其包含RASSSVSYMH(SEQ ID NO:77)的氨基酸序列；(e)HVR-L2，其包含APSNLAS(SEQ ID NO:78)的氨基酸序列；和(f)HVR-L3，其包含QQWSFNPPT(SEQ ID NO:79)的氨基酸序列；以及(2)具有第二结合结构域的抗CD3臂，该第二结合结构域包含选自以下项的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个HVR：(a)HVR-H1，其包含NYYIH(SEQ ID NO:90)的氨基酸序列；(b)HVR-H2，其包含WIYPGDGNTKYNEKFKG(SEQ ID NO:91)的氨基酸序列；(c)HVR-H3，其包含DSYSNYYFDY(SEQ ID NO:92)的氨基酸序列；(d)HVR-L1，其包含KSSQSLLNSRTRKNYLA(SEQ ID NO:93)的氨基酸序列；(e)HVR-L2，其包含WASTRES(SEQID NO:94)的氨基酸序列；和(f)HVR-L3，其包含TQSFILRT(SEQ ID NO:95)的氨基酸序列。在一些情况下，莫苏尼妥珠单抗包含：(1)分别包含SEQ ID NO:82至85的序列的重链框架区FR-H1、FR-H2、FR-H3和FR-H4中的至少一个(例如，1个、2个、3个或4个)，和/或分别包含SEQID NO:86至89的序列的轻链框架区FR-L1、FR-L2、FR-L3和FR-L4中的至少一个(例如，1个、2个、3个或4个)；以及(2)分别包含SEQ ID NO:98至101的序列的重链框架区FR-H1、FR-H2、FR-H3和FR-H4中的至少一个(例如，1个、2个、3个或4个)，和/或分别包含SEQ ID NO:102至105的序列的轻链框架区FR-L1、FR-L2、FR-L3和FR-L4中的至少一个(例如，1个、2个、3个或4个)。
在一些情况下，莫苏尼妥珠单抗包含：(1)抗CD20臂，其包含第一结合结构域，该第一结合结构域包含：(a)VH结构域，其包含与SEQ ID NO:80的序列具有至少90％序列同一性(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性)或该序列的氨基酸序列；(b)VL结构域，其包含与SEQ ID NO:81的序列具有至少90％序列同一性(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性)或该序列的氨基酸序列；或(c)如(a)中所述的VH结构域和如(b)中所述的VL结构域；以及(2)抗CD3臂，其包含第二结合结构域，该第二结合结构域包含：(a)VH结构域，其包含与SEQ ID NO:96的序列具有至少90％序列同一性(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性)或该序列的氨基酸序列；(b)VL结构域，其包含与SEQ ID NO:97的序列具有至少90％序列同一性(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性)或该序列的氨基酸序列；或(c)如(a)中所述的VH结构域和如(b)中所述的VL结构域。在一些情况下，莫苏尼妥珠单抗包含：(1)第一结合结构域，其包含VH结构域和VL结构域，该VH结构域包含SEQ ID NO:80的氨基酸序列，该VL结构域包含SEQ ID NO:81的氨基酸序列；以及(2)第二结合结构域，其包含VH结构域和VL结构域，该VH结构域包含SEQ ID NO:96的氨基酸序列，该VL结构域包含SEQ ID NO:97的氨基酸序列。
在一些情况下，莫苏尼妥珠单抗具有国际非专利药名(INN)清单117(WHO DrugInformation，第31卷，第2期，2017年，第303页)或CAS登记号1905409-39-3，并且具有(1)抗CD20臂，其分别包含SEQ ID NO:106和107的重链和轻链序列；(2)抗CD3臂，其分别包含SEQID NO:108和109的重链和轻链序列。在一些情况下，莫苏尼妥珠单抗包含：(1)抗CD20臂，其包含第一结合结构域，该第一结合结构域包含：(a)重链，其包含与SEQ ID NO:106的序列具有至少90％序列同一性(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性)或该序列的氨基酸序列；(b)轻链，其包含与SEQ ID NO:107的序列具有至少90％序列同一性(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性)或该序列的氨基酸序列；或(c)如(a)中所述的重链和如(b)中所述的轻链；以及(2)抗CD3臂，其包含第二结合结构域，该第二结合结构域包含：(a)重链，其包含与SEQ ID NO:108的序列具有至少90％序列同一性(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性)或该序列的氨基酸序列；(b)轻链，其包含与SEQ ID NO:109的序列具有至少90％序列同一性(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性)或该序列的氨基酸序列；或(c)如(a)中所述的重链和如(b)中所述的轻链。在一些情况下，莫苏尼妥珠单抗包含：(1)抗CD20臂，其包含第一结合结构域，该第一结合结构域包含重链和轻链，该重链包含SEQ ID NO:106的氨基酸序列，该轻链包含SEQ ID NO:107的氨基酸序列；以及(2)抗CD3臂，其包含第二结合结构域，该第二结合结构域包含重链和轻链，该重链包含SEQ ID NO:108的氨基酸序列，该轻链包含SEQ ID NO:109的氨基酸序列。
下表1中汇总了莫苏尼妥珠单抗的氨基酸序列。
表1.莫苏尼妥珠单抗的序列ID
可使用重组方法及组合物产生莫苏尼妥珠单抗，例如，如美国专利号4,816,567中所述。
C.另外的治疗剂
在一些情况下，本文所述的方法包括与一种或多种另外的治疗剂组合施用双特异性抗CD20/抗CD3抗体(例如，莫苏尼妥珠单抗)和抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)
在一些情况下，另外的治疗剂为本文所述的PD-1轴结合拮抗剂。在一些情况下，另外的治疗剂为阿特珠单抗。在一些情况下，根据本文所述的给药方案，将阿特珠单抗与莫苏尼妥珠单抗和替瑞利尤单抗组合施用于受试者。
在一些情况下，一种或多种另外的治疗剂可降低细胞因子释放综合征(CRS)的发生率或严重程度。在一些情况下，一种或多种另外的治疗剂可预防与CRS相关联的症状。在特定情况下，用于降低CRS的发生率或严重程度或预防与CRS相关联的症状的另外的治疗剂为皮质类固醇(例如，地塞米松(CAS号：50-02-2)、泼尼松(CAS号：53-03-2)、泼尼松龙(CAS号50-42-8)或甲泼尼龙(CAS号：83-43-2))或IL-6R拮抗剂(例如，托珠单抗、沙利鲁单抗、伏巴利珠单抗(ALX-0061)、萨特利珠单抗(SA-237)以及它们的变体)。在一些情况下，另外的治疗剂为托珠单抗。在一些情况下，另外的治疗剂为皮质类固醇。在一些情况下，在施用莫苏尼妥珠单抗之前施用皮质类固醇。在一些情况下，在施用莫苏尼妥珠单抗之前5分钟、10分钟、15分钟、20分钟、30分钟、40分钟、50分钟、1小时、1.5小时、2小时、2.5小时、3小时、3.5小时、4小时、4.5小时、5小时、6小时、7小时、8小时、9小时、10小时、11小时或12小时施用皮质类固醇。在一些情况下，皮质类固醇是静脉内施用的。在一些情况下，皮质类固醇为地塞米松。在一些情况下，在向受试者施用莫苏尼妥珠单抗之前5分钟、10分钟、15分钟、20分钟、30分钟、40分钟、50分钟、1小时、1.5小时、2小时、2.5小时、3小时、3.5小时、4小时、4.5小时、5小时、6小时、7小时、8小时、9小时、10小时、11小时或12小时向该受试者施用10mg地塞米松。在一些情况下，皮质类固醇为甲泼尼龙。在一些情况下，皮质类固醇为泼尼松。
本文所述的方法可引起正在用莫苏尼妥珠单抗治疗的患有复发性或难治性非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，B细胞增殖性疾患，例如NHL(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如，R/R DLBCL、R/R FL(例如，R/R3b级FL)或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者的改善的获益-风险特征。在一些情况下，相对于用莫苏尼妥珠单抗使用非分次给药方案进行治疗，使用本文所述的引起在分次、剂量递增给药方案的背景下皮下施用莫苏尼妥珠单抗抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)的方法进行治疗引起在用莫苏尼妥珠单抗使用本发明的分次、剂量递增给药方案治疗后，不良事件诸如细胞因子驱动的毒性(例如，细胞因子释放综合征(CRS))、输注相关反应(IRR)、巨噬细胞活化综合征(MAS)、神经系统毒性、严重肿瘤溶解综合征(TLS)、中性粒细胞减少症、血小板减少症、肝酶升高和/或肝毒性减少(例如，减少20％或更大、25％或更大、30％或更大、35％或更大、40％或更大、45％或更大、50％或更大、55％或更大、60％或更大、65％或更大、70％或更大、75％或更大、80％或更大、85％或更大、90％或更大、95％或更大、96％或更大、97％或更大、98％或更大、或99％或更大；例如，在20％与100％之间、在20％与90％之间、在20％与80％之间、在20％与70％之间、在20％与60％之间、在20％与50％之间、在20％与40％之间、在20％与30％之间、在40％与100％之间、在60％与100％之间、在80％与100％之间、在30％与70％之间、在40％与60％之间、在30％与50％之间、在50％与80％之间、或在90％与100％之间；例如，约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约97％、约99％或约100％)或完全抑制(100％减少)。
对于本文所述的所有方法，莫苏尼妥珠单抗以符合良好医学实践的方式配制、给药和施用。在这种情况下要考虑的因素包括所治疗的具体病症、所治疗的特定哺乳动物、个体受试者的临床状况、病症的原因、药剂的递送部位、施用方法、施用方案，以及医生已知的其他因素。莫苏尼妥珠单抗不是必须地而是任选地与一种或多种目前用于预防或治疗所讨论的疾患的制剂共同配制。此类其他药剂的有效量取决于所用制剂中存在的莫苏尼妥珠单抗的量、疾患或治疗的类型，以及上文讨论的其他因素。莫苏尼妥珠单抗可通过一系列治疗适当地施用于受试者。在一些方面，莫苏尼妥珠单抗是皮下施用的。在一些方面，莫苏尼妥珠单抗是静脉内施用的。
在一些情况下，可用于本发明中的另外的治疗剂包括治疗性抗体，诸如阿仑单抗贝伐单抗(/>基因泰克)；西妥昔单抗(/>Imclone)；帕尼单抗(/>Amgen)、利妥昔单抗(/>基因泰克/Biogen Idec)、帕妥珠单抗(/>2C4，基因泰克)、曲妥珠单抗(基因泰克)、托西莫单抗(/>Corixia)和抗体药物缀合物、吉妥珠单抗奥佐米星(/>Wyeth)。与本发明的化合物组合用作药剂的具有治疗潜力的另外的人源化单克隆抗体包括：阿泊珠单抗(apolizumab)、阿塞珠单抗、阿利珠单抗、巴比妥珠单抗、莫比伐珠单抗(bivatuzumab mertansine)、莫坎妥珠单抗(cantuzumabmertansine)、西利珠单抗(cedelizumab)、塞妥珠单抗(certolizumab pegol)、西孚昔珠单抗(cidfusituzumab)、西土珠单抗(cidtuzumab)、达利珠单抗、依库珠单抗(eculizumab)、依法珠单抗(efalizumab)、依帕珠单抗(epratuzumab)、厄利珠单抗(erlizumab)、泛维珠单抗(felvizumab)、芳妥珠单抗(fontolizumab)、奥英妥珠单抗(inotuzumab ozogamicin)、伊匹单抗、拉贝珠单抗(labetuzumab)、林妥珠单抗、马妥珠单抗、美泊利单抗、莫维珠单抗、莫妥维珠单抗(motovizumab)、那他珠单抗、尼妥珠单抗、诺罗维珠单抗(nolovizumab)、奴马维珠单抗(numavizumab)、奥瑞珠单抗(ocrelizumab)、奥玛珠单抗、帕丽珠单抗、帕考珠单抗(pascolizumab)、培孚昔单抗(pecfusituzumab)、培土珠单抗(pectuzumab)、培克珠单抗(pexelizumab)、拉利维珠单抗(ralivizumab)、兰尼单抗、瑞丽维珠单抗(reslivizumab)、瑞利珠单抗(reslizumab)、瑞希维珠单抗(resyvizumab)、罗维珠单抗(rovelizumab)、卢丽珠单抗(ruplizumab)、西罗珠单抗、西利珠单抗、松妥珠单抗(Sontuzumab)、替珠单抗(tacatuzumab tetraxetan)、他度珠单抗(tadocizumab)、坦昔妥单抗(tafasitamab)、他利珠单抗、替非珠单抗(tefibazumab)、托珠单抗、托利珠单抗(toralizumab)、西莫白介素单抗(tucotuzumab celmoleukin)、土库昔珠单抗(tucusituzumab)、乌马维珠单抗(umavizumab)、乌珠单抗、尤特克单抗(ustekinumab)、维西珠单抗(visilizumab)和布雷努单抗(briakinumab)。
V.用于结直肠癌的治疗方法和组合物
A.用于替瑞利尤单抗和阿特珠单抗的给药的治疗方法
在一个方面，本公开提供了一种用于治疗患有结直肠癌(CRC)(例如，转移性CRC(例如，微卫星不稳定性高(MSI-H)转移性CRC))的受试者的方法，该方法包括向受试者施用替瑞利尤单抗和阿特珠单抗。
在一些方面，转移性CRC(例如，MSI-H转移性CRC)为腺癌。
在一些方面，受试者在既往基于检查点抑制剂的疗法(例如，至少一种、至少两种、至少三种、至少四种、至少五种、至少六种、至少七种、至少八种、至少九种或至少既往先前疗法；例如，一种、两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种、十种或多于十种既往疗法)时已经历疾病进展。
在一些方面，以包括一个或多个给药周期(1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个或30个或更多个给药周期)的给药方案向受试者施用替瑞利尤单抗和阿特珠单抗。在一些方面，给药方案包括至少16个给药周期(例如，16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、44个、45个、46个、47个、48个、49个或50个或更多个给药周期)。
在一些方面，每个给药周期的长度为约18至24天(例如，15天、16天、17天、18天、19天、20天、21天、22天、23天或24天)。在一些方面，每个给药周期的长度为约21天。在一些方面，一个或多个给药周期中的每一个的长度为21天。在一些方面，在一个或多个给药周期中的每一个的约第1天(例如，第1天)向受试者施用替瑞利尤单抗和阿特珠单抗。
在一些方面，替瑞利尤单抗是每三周以在约30mg至约1200mg之间(例如在约30mg至约1100mg之间，例如在约60mg至约1000mg之间，例如在约100mg至约900mg之间，例如在约200mg至约800mg之间，例如在约300mg至约800mg之间，例如在约400mg至约800mg之间，例如在约400mg至约750mg之间，例如在约450mg至约750mg之间，例如在约500mg至约700mg之间，例如在约550mg至约650mg之间，例如600mg±10mg，例如600±6mg，例如600±5mg，例如600±3mg，例如600±1mg，例如600±0.5mg，例如600mg)的剂量(例如，固定剂量)向受试者施用。在一些方面，替瑞利尤单抗是每三周以在约30mg至约600mg之间(例如在约50mg至约600mg之间，例如在约60mg至约600mg之间，例如在约100mg至约600mg之间，例如在约200mg至约600mg之间，例如在约200mg至约550mg之间，例如在约250mg至约500mg之间，例如在约300mg至约450mg之间，例如在约350mg至约400mg之间，例如约375mg)的剂量(例如，固定剂量)向受试者施用。在一些方面，替瑞利尤单抗是每三周以约600mg的剂量(例如，固定剂量)向受试者施用。
在一些方面，替瑞利尤单抗是每三周以在约30mg至约1200mg之间(例如在30mg至1100mg之间，例如在60mg至1000mg之间，例如在100mg至900mg之间，例如在200mg至800mg之间，例如在300mg至800mg之间，例如在400mg至800mg之间，例如在400mg至750mg之间，例如在450mg至750mg之间，例如在500mg至700mg之间，例如在550mg至650mg之间，例如600mg±10mg，例如600±6mg，例如600±5mg，例如600±3mg，例如600±1mg，例如600±0.5mg，例如600mg)的剂量(例如，固定剂量)向受试者施用。在一些方面，替瑞利尤单抗是每三周以在30mg至600mg之间(例如在50mg至600mg之间，例如在60mg至600mg之间，例如在100mg至600mg之间，例如在200mg至600mg之间，例如在200mg至550mg之间，例如在250mg至500mg之间，例如在300mg至450mg之间，例如在350mg至400mg之间，例如375mg)的剂量(例如，固定剂量)向受试者施用。在一些方面，替瑞利尤单抗是每三周以600mg的剂量(例如，固定剂量)向受试者施用。
在一些方面，阿特珠单抗是每三周以在约80mg至约2000mg之间(例如在约100mg至约1600mg之间，例如在约200mg至约1600mg之间，例如在约300mg至约1600mg之间，例如在约400mg至约1600mg之间，例如在约500mg至约1600mg之间，例如在约600mg至约1600mg之间，例如在约700mg至约1600mg之间，例如在约800mg至约1600mg之间，例如在约900mg至约1500mg之间，例如在约1000mg至约1400mg之间，例如在约1050mg至约1350mg之间，例如在约1100mg至约1300mg之间，例如在约1150mg至约1250mg之间，例如在约1175mg至约1225mg之间，例如在约1190mg至约1210mg之间，例如1200mg±5mg，例如1200±2.5mg，例如1200±1.0mg，例如1200±0.5mg，例如1200mg)的剂量(例如，固定剂量)向受试者施用。在一些方面，阿特珠单抗是每三周以约1200mg的剂量(例如，固定剂量)向受试者施用。在一些方面，阿特珠单抗是每三周以在80mg至2000mg之间(例如在100mg至1600mg之间，例如在200mg至1600mg之间，例如在300mg至1600mg之间，例如在400mg至1600mg之间，例如在500mg至1600mg之间，例如在600mg至1600mg之间，例如在700mg至1600mg之间，例如在800mg至1600mg之间，例如在900mg至1500mg之间，例如在1000mg至1400mg之间，例如在1050mg至1350mg之间，例如在1100mg至1300mg之间，例如在1150mg至1250mg之间，例如在1175mg至1225mg之间，例如在1190mg至1210mg之间，例如1200mg±5mg，例如1200±2.5mg，例如1200±1.0mg，例如1200±0.5mg，例如1200mg)的剂量(例如，固定剂量)向受试者施用。
在一些方面，替瑞利尤单抗是每三周以约600mg的剂量(例如，600mg的固定剂量)向受试者施用，并且阿特珠单抗是每三周以约1200mg的剂量(例如，1200mg的固定剂量)向受试者施用。
在一些方面，在替瑞利尤单抗之前向受试者施用阿特珠单抗。在一些方面，在阿特珠单抗之前向受试者施用替瑞利尤单抗。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有转移性CRC(例如，MSI-H转移性CRC)的受试者的方法，该方法包括向受试者施用包括一个或多个21天给药周期的替瑞利尤单抗和阿特珠单抗的给药方案，该替瑞利尤单抗是以约600mg的剂量(例如，600mg的固定剂量)在每个给药周期的第1天，该阿特珠单抗是以约1200mg的剂量(例如，1200mg的固定剂量)在每个给药周期的第1天。
在一些方面，替瑞利尤单抗是静脉内施用的。在一些方面，阿特珠单抗是静脉内施用的。
在一些方面，MSI-H状态是通过二代测序、聚合酶链式反应(PCR)、免疫组织化学(IHC)、Liquid CDx测试或它们的组合来确定。
在一些方面，受试者为人。
B.用于替瑞利尤单抗、阿特珠单抗和贝伐单抗的给药的治疗方法
在一个方面，本公开提供了一种用于治疗患有结直肠癌(CRC)(例如，转移性CRC(例如，微卫星不稳定性高(MSI-H)转移性CRC))的受试者的方法，该方法包括向受试者施用替瑞利尤单抗、阿特珠单抗和贝伐单抗。
在一些方面，转移性CRC(例如，MSI-H转移性CRC)为腺癌。
在一些方面，受试者在既往基于检查点抑制剂的疗法(例如，至少一种、至少两种、至少三种、至少四种、至少五种、至少六种、至少七种、至少八种、至少九种或至少既往先前疗法；例如，一种、两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种、十种或更多种既往疗法)时已经历疾病进展。
在一些方面，以包括一个或多个给药周期(1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个或30个或更多个给药周期)的给药方案向受试者施用替瑞利尤单抗、阿特珠单抗和贝伐单抗。在一些方面，给药方案包括至少16个给药周期(例如，16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、44个、45个、46个、47个、48个、49个或50个或更多个给药周期)。
在一些方面，每个给药周期的长度为约18至24天(例如，15天、16天、17天、18天、19天、20天、21天、22天、23天或24天)。在一些方面，每个给药周期的长度为约21天。在一些方面，一个或多个给药周期中的每一个的长度为21天。在一些方面，在一个或多个给药周期中的每一个的约第1天(例如，第1天)向受试者施用替瑞利尤单抗、阿特珠单抗和贝伐单抗。
在一些方面，替瑞利尤单抗是每三周以在约30mg至约1200mg之间(例如在约30mg至约1100mg之间，例如在约60mg至约1000mg之间，例如在约100mg至约900mg之间，例如在约200mg至约800mg之间，例如在约300mg至约800mg之间，例如在约400mg至约800mg之间，例如在约400mg至约750mg之间，例如在约450mg至约750mg之间，例如在约500mg至约700mg之间，例如在约550mg至约650mg之间，例如600mg±10mg，例如600±6mg，例如600±5mg，例如600±3mg，例如600±1mg，例如600±0.5mg，例如600mg)的剂量(例如，固定剂量)向受试者施用。在一些方面，替瑞利尤单抗是每三周以在约30mg至约600mg之间(例如在约50mg至约600mg之间，例如在约60mg至约600mg之间，例如在约100mg至约600mg之间，例如在约200mg至约600mg之间，例如在约200mg至约550mg之间，例如在约250mg至约500mg之间，例如在约300mg至约450mg之间，例如在约350mg至约400mg之间，例如约375mg)的剂量(例如，固定剂量)向受试者施用。在一些方面，替瑞利尤单抗是每三周以约600mg的剂量(例如，固定剂量)向受试者施用。
在一些方面，替瑞利尤单抗是每三周以在约30mg至约1200mg之间(例如在30mg至1100mg之间，例如在60mg至1000mg之间，例如在100mg至900mg之间，例如在200mg至800mg之间，例如在300mg至800mg之间，例如在400mg至800mg之间，例如在400mg至750mg之间，例如在450mg至750mg之间，例如在500mg至700mg之间，例如在550mg至650mg之间，例如600mg±10mg，例如600±6mg，例如600±5mg，例如600±3mg，例如600±1mg，例如600±0.5mg，例如600mg)的剂量(例如，固定剂量)向受试者施用。在一些方面，替瑞利尤单抗是每三周以在30mg至600mg之间(例如在50mg至600mg之间，例如在60mg至600mg之间，例如在100mg至600mg之间，例如在200mg至600mg之间，例如在200mg至550mg之间，例如在250mg至500mg之间，例如在300mg至450mg之间，例如在350mg至400mg之间，例如375mg)的剂量(例如，固定剂量)向受试者施用。在一些方面，替瑞利尤单抗是每三周以600mg的剂量(例如，固定剂量)向受试者施用。
在一些方面，阿特珠单抗是每三周以在约80mg至约2000mg之间(例如在约100mg至约1600mg之间，例如在约200mg至约1600mg之间，例如在约300mg至约1600mg之间，例如在约400mg至约1600mg之间，例如在约500mg至约1600mg之间，例如在约600mg至约1600mg之间，例如在约700mg至约1600mg之间，例如在约800mg至约1600mg之间，例如在约900mg至约1500mg之间，例如在约1000mg至约1400mg之间，例如在约1050mg至约1350mg之间，例如在约1100mg至约1300mg之间，例如在约1150mg至约1250mg之间，例如在约1175mg至约1225mg之间，例如在约1190mg至约1210mg之间，例如1200mg±5mg，例如1200±2.5mg，例如1200±1.0mg，例如1200±0.5mg，例如1200mg)的剂量(例如，固定剂量)向受试者施用。在一些方面，阿特珠单抗是每三周以约1200mg的剂量(例如，固定剂量)向受试者施用。在一些方面，阿特珠单抗是每三周以在80mg至2000mg之间(例如在100mg至1600mg之间，例如在200mg至1600mg之间，例如在300mg至1600mg之间，例如在400mg至1600mg之间，例如在500mg至1600mg之间，例如在600mg至1600mg之间，例如在700mg至1600mg之间，例如在800mg至1600mg之间，例如在900mg至1500mg之间，例如在1000mg至1400mg之间，例如在1050mg至1350mg之间，例如在1100mg至1300mg之间，例如在1150mg至1250mg之间，例如在1175mg至1225mg之间，例如在1190mg至1210mg之间，例如1200mg±5mg，例如1200±2.5mg，例如1200±1.0mg，例如1200±0.5mg，例如1200mg)的剂量(例如，固定剂量)向受试者施用。
在一些方面，贝伐单抗是每三周以在约0.01mg/kg至约50mg/kg受试者体重之间(例如在约0.01mg/kg至约45mg/kg之间，例如在约0.1mg/kg至约40mg/kg之间，例如在约1mg/kg至约35mg/kg之间，例如在约2.5mg/kg至约30mg/kg之间，例如在约5mg/kg至约25mg/kg之间，例如在约10mg/kg至约20mg/kg之间，例如在约12.5mg/kg至约15mg/kg之间，例如约15mg/kg±2mg/kg、约15mg/kg±1mg/kg、约15mg/kg±0.5mg/kg、约15mg/kg±0.2mg/kg、或约15mg/kg±0.1mg/kg，例如约15mg/kg)的剂量向受试者施用。在一些方面，贝伐单抗是每三周以在约0.01mg/kg至约15mg/kg受试者体重之间(例如在约0.1mg/kg至约15mg/kg之间，例如在约0.5mg/kg至约15mg/kg之间，例如在约1mg/kg至约15mg/kg之间，例如在约2.5mg/kg至约15mg/kg之间，例如在约5mg/kg至约15mg/kg之间，例如在约7.5mg/kg至约15mg/kg之间，例如在约10mg/kg至约15mg/kg之间，例如在约12.5mg/kg至约15mg/kg之间，例如在约14mg/kg至约15mg/kg之间，例如约15±1mg/kg，例如约15±0.5mg/kg，例如约15±0.2mg/kg，例如约15±0.1mg/kg，例如约15mg/kg)的剂量向受试者施用。在一些方面，贝伐单抗是每三周以约15mg/kg的剂量向受试者施用。
在一些方面，贝伐单抗是每三周以在0.01mg/kg至50mg/kg受试者体重之间(例如在0.01mg/kg至45mg/kg之间，例如在0.1mg/kg至40mg/kg之间，例如在1mg/kg至35mg/kg之间，例如在2.5mg/kg至30mg/kg之间，例如在5mg/kg至25mg/kg之间，例如在10mg/kg至20mg/kg之间，例如在12.5mg/kg至15mg/kg之间，例如15mg/kg±2mg/kg、15mg/kg±1mg/kg、15mg/kg±0.5mg/kg、15mg/kg±0.2mg/kg、或15mg/kg±0.1mg/kg，例如15mg/kg)的剂量向受试者施用。在一些方面，贝伐单抗是每三周以在0.01mg/kg至15mg/kg受试者体重之间(例如在0.1mg/kg至15mg/kg之间，例如在0.5mg/kg至15mg/kg之间，例如在1mg/kg至15mg/kg之间，例如在2.5mg/kg至15mg/kg之间，例如在5mg/kg至15mg/kg之间，例如在7.5mg/kg至15mg/kg之间，例如在10mg/kg至15mg/kg之间，例如在12.5mg/kg至15mg/kg之间，例如在14mg/kg至15mg/kg之间，例如15±1mg/kg，例如15±0.5mg/kg，例如15±0.2mg/kg，例如15±0.1mg/kg，例如15mg/kg)的剂量向受试者施用。在一些方面，贝伐单抗是每三周以15mg/kg的剂量向受试者施用。
在一些方面，替瑞利尤单抗是每三周以约600mg的剂量(例如，600mg的固定剂量)向受试者施用，阿特珠单抗是每三周以约1200mg的剂量(例如，1200mg的固定剂量)向受试者施用，并且贝伐单抗是每三周以约15mg/kg(例如，15mg/kg)的剂量向受试者施用。
在一些方面，在替瑞利尤单抗之前向受试者施用阿特珠单抗。在一些方面，在阿特珠单抗之前向受试者施用替瑞利尤单抗。在一些方面，在贝伐单抗之前施用阿特珠单抗并且在替瑞利尤单抗之前施用贝伐单抗。在一些方面，其中在同一天施用替瑞利尤单抗、阿特珠单抗和贝伐单抗，在一些方面，首先施用替瑞利尤单抗，其次施用贝伐单抗，并且最后施用阿特珠单抗。在一些方面，首先施用替瑞利尤单抗，其次施用阿特珠单抗，并且最后施用贝伐单抗。在一些方面，首先施用阿特珠单抗，其次施用替瑞利尤单抗，并且最后施用贝伐单抗。在一些方面，首先施用贝伐单抗，其次施用阿特珠单抗，并且最后施用替瑞利尤单抗。在一些方面，首先施用贝伐单抗，其次施用替瑞利尤单抗，并且最后施用阿特珠单抗。在一些方面，同时施用替瑞利尤单抗和阿特珠单抗。在一些方面，替瑞利尤单抗和阿特珠单抗在施用前组合在IV袋中。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有转移性CRC(例如，MSI-H转移性CRC)的受试者的方法，该方法包括向受试者施用包括一个或多个21天给药周期的替瑞利尤单抗、阿特珠单抗和贝伐单抗的给药方案，该替瑞利尤单抗是以约600mg的剂量(例如，600mg的固定剂量)在每个给药周期的第1天，该阿特珠单抗是以约1200mg的剂量(例如，1200mg的固定剂量)在每个给药周期的第1天，该贝伐单抗是以约15mg/kg(例如，15mg/kg)的剂量在每个给药周期的第1天。
在一些方面，替瑞利尤单抗是静脉内施用的。在一些方面，阿特珠单抗是静脉内施用的。在一些方面，贝伐单抗是静脉内施用的。
在一些方面，MSI-H状态是通过二代测序、聚合酶链式反应(PCR)、免疫组织化学(IHC)、Liquid CDx测试或它们的组合来确定。
在一些方面，受试者为人。
VI.抗TIGIT拮抗剂抗体和PD-1轴结合拮抗剂的组合给药
在一些情况下，有效量剂量的抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如替瑞利尤单抗)与有效量剂量的PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))在组合疗法(例如，抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如替瑞利尤单抗)与PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗)的组合治疗)中一起施用，用于治疗患有癌症(例如，食管癌(例如，转移性食管癌))的受试者。
在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)以阶梯式给药方案(例如，基于受试者的体重(BW)或身体表面积(BSA)给药)(例如，每三周)施用，且PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体，诸如阿特珠单抗)以例如每三周约0.01mg/kg至约50mg/kg(例如，约15mg/kg)且至多1200mg的剂量施用。在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)以阶梯式给药方案(例如，基于受试者的体重(BW)或身体表面积(BSA)给药)(例如，每三周)施用，且PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体，诸如阿特珠单抗)以例如每三周0.01mg/kg至50mg/kg(例如，15mg/kg)且至多1200mg的剂量施用。此类给药方案可用于治疗体重相对较低(例如，40kg或更少(例如，5kg至40kg、15kg至40kg或5kg至15kg))的受试者，并已经通过基于成人数据估计的药代动力学参数外推的生物模拟研究开发。在一些情况下，每三周将该剂量(例如，约600mg)的抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)与基于受试者体重(例如，15mg/kg)的剂量的PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))组合施用。在一些情况下，每三周将阶梯式剂量(例如，体重(BW)>40kg：600mg；BW>15kg且≤40kg：400mg；和BW≤15kg：300mg)的抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如替瑞利尤单抗)与基于受试者体重的剂量(例如，15mg/kg)的PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))组合施用。在一些情况下，每三周将阶梯式剂量(例如，体重(BW)>40kg：600mg；BW>15kg且≤40kg：400mg；和BW≤15kg：300mg)的抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如替瑞利尤单抗)与基于受试者身体表面积的剂量(例如，BSA>1.25m2：600mg；BSA>0.75m2且≤1.25m2：450mg；BSA>0.5m2且≤0.75m2：350mg；和BSA≤0.5m2：300mg)的PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))组合施用。在一些实施例中，PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))以每三周1200mg的最大剂量施用。
i.抗TIGIT拮抗剂抗体的给药
一般来说，向患有癌症(例如，食管癌(例如，转移性食管癌))的受试者施用的抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的对抗TIGIT拮抗剂抗体，例如替瑞利尤单抗)的治疗有效量将在约0.01mg/kg至约50mg/kg受试者体重的范围内(无论通过一次还是多次施用)。在一些实施例中，向受试者施用的抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的对抗TIGIT拮抗剂抗体，例如替瑞利尤单抗)的治疗有效量在0.01mg/kg至约50mg/kg受试者体重的范围内(无论通过一次还是多次施用)。
在一些示例性实施例中，抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)以约0.01至约45mg/kg、约0.01至约40mg/kg、约0.01至约35mg/kg、约0.01至约30mg/kg、约0.01至约25mg/kg、约0.01至约20mg/kg、约0.01至约15mg/kg、约0.01至约10mg/kg、约0.01至约5mg/kg或约0.01至约1mg/kg的剂量施用，例如，每天、每周、每两周、每三周或每四周施用。在示例性实施例中，抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)以0.01至45mg/kg、0.01至40mg/kg、0.01至35mg/kg、0.01至30mg/kg、0.01至25mg/kg、0.01至20mg/kg、0.01至15mg/kg、0.01至10mg/kg、0.01至5mg/kg或0.01至1mg/kg的剂量施用，例如，每天、每周、每两周、每三周或每四周施用。
在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)在每个给药周期的约第1天(例如，第-3天、第-2天、第-1天、第1天、第2天、第3天)施用。
在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文所公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如替瑞利尤单抗)的有效量为每三周(Q3W)在约30mg至约1200mg之间(例如，在约30mg至约1100mg之间，例如，在约60mg至约1000mg之间，例如，在约100mg至约900mg之间，例如，在约200mg至约800mg之间，例如，在约300mg至约800mg之间，例如，在约400mg至约800mg之间，例如，在约400mg至约750mg之间，例如，在约450mg至约750mg之间，例如，在约500mg至约700mg之间，例如，在约550mg至约650mg之间，例如，600mg±10mg，例如，600mg±6mg，例如，600mg±5mg，例如，600mg±3mg，例如，600mg±1mg，例如，600mg±0.5mg，例如，600mg)的固定剂量。在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文所公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如替瑞利尤单抗)的有效量为每三周在约30mg至约600mg之间(例如，在约50mg至约600mg之间，例如，在约60mg至约600mg之间，例如，在约100mg至约600mg之间，例如，在约200mg至约600mg之间，例如，在约200mg至约550mg之间，例如，在约250mg至约500mg之间，例如，在约300mg至约450mg之间，例如，在约350mg至约400mg之间，例如，约375mg)的固定剂量。在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文所公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如替瑞利尤单抗)的有效量为每三周约600mg的固定剂量。在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文所公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如替瑞利尤单抗)的有效量为每三周600mg的固定剂量。在一些情况下，与作为单一疗法施用的抗TIGIT拮抗剂抗体的标准剂量相比，在组合疗法(例如，与PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗)的组合治疗)中施用的抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)的固定剂量可以减少。
在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文所公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如替瑞利尤单抗)的有效量为每两周(Q2W)在约10mg至约1000mg之间(例如，在约20mg至约1000mg之间，例如，在约50mg至约900mg之间，例如，在约100mg至约850mg之间，例如，在约200mg至约800mg之间，例如，在约300mg至约600mg之间，例如，在约400mg至约500mg之间，例如，在约405mg至约450mg之间，例如，在约410mg至约430mg，例如，约420mg)的固定剂量。在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)的有效量为每两周约420mg的固定剂量(例如，每两周420mg±10mg，例如，420mg±6mg，例如，420mg±5mg，例如，420mg±3mg，例如，420mg±1mg，例如，420mg±0.5mg，例如，420mg)。
在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)的有效量为每四周(Q4W)在约200mg至约2000mg之间(例如，在约200mg至约1600mg之间，例如，在约250mg至约1600mg之间，例如，在约300mg至约1600mg之间，例如，在约400mg至约1500mg之间，例如，在约500mg至约1400mg之间，例如，在约600mg至约1200mg之间，例如，在约700mg至约1100mg之间，例如，在约800mg至约1000mg之间，例如，在约800mg至约900mg之间，例如，约800mg、约810mg、约820mg、约830mg、约840mg、约850mg、约860mg、约870mg、约880mg、约890mg或约900mg)的固定剂量。在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如替瑞利尤单抗)的有效量为每四周约840mg的固定剂量(例如，每四周840mg±10mg，例如，840mg±6mg，例如，840mg±5mg，例如，840mg±3mg，例如，840mg±1mg，例如，840mg±0.5mg，例如，840mg)。
在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如替瑞利尤单抗)的剂量为基于受试者体重的阶梯式剂量(例如，体重(BW)>40kg：600mg；BW>15kg且≤40kg：400mg；和BW≤15kg：300mg)。
在一些情况下，与作为单一疗法施用的抗TIGIT拮抗剂抗体的标准剂量相比，在组合疗法(例如，与PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗)的组合治疗)中施用的抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如替瑞利尤单抗)的剂量可以减少。
在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如替瑞利尤单抗)是静脉内施用的。替代性地，在一些实施例中，抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)皮下施用。在一些情况下，替瑞利尤单抗是每2周以约420mg的剂量、每3周以约600mg的剂量或每4周以约840mg的剂量向受试者静脉内施用。在一些情况下，替瑞利尤单抗是每2周以420mg的剂量、每3周以600mg的剂量或每4周以840mg的剂量向受试者静脉内施用。
在一些情况下，与作为单一疗法施用的抗TIGIT拮抗剂抗体的标准剂量相比，在组合疗法(例如，与PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体，例如，阿特珠单抗)或抗PD-1拮抗剂抗体(例如，MDX-1106(纳武单抗)或MK-3475(帕博利珠单抗，先前称为派姆单抗))的组合治疗)中施用的抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)的剂量可以减少。在一些情况下，与作为单一疗法施用的抗TIGIT拮抗剂抗体的标准剂量相比，在组合疗法(例如，与PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))的组合治疗，使用或不使用一种或多种化疗剂(例如，铂类化疗剂(例如，卡铂或顺铂)和/或非铂类化疗剂(例如，烷化剂(例如环磷酰胺)、紫杉烷(例如，紫杉醇或nab-紫杉醇)和/或拓扑异构酶II抑制剂(例如，多柔比星)))和/或G-CSF或GM-CSF)施用的抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)的剂量可以减少。
在一些情况下，向受试者施用总计1至60个剂量的抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如替瑞利尤单抗)，例如，1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、44个、45个、46个、47个、48个、49个、50个、51个、52个、53个、54个、55个、56个、57个、58个、59个或60个剂量。在一些情况下，向受试者施用总计1至60个剂量的抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如替瑞利尤单抗)，例如，1至60个剂量、1至55个剂量、1至50个剂量、1至45个剂量、1至40个剂量、1至35个剂量、1至30个剂量、1至25个剂量、1至20个剂量、1至15个剂量、1至10个剂量、1至5个剂量、2至60个剂量、2至55个剂量、2至50个剂量、2至45个剂量、2至40个剂量、2至35个剂量、2至30个剂量、2至25个剂量、2至20个剂量、2至15个剂量、2至10个剂量、2至5个剂量、3至60个剂量、3至55个剂量、3至50个剂量、3至45个剂量、3至40个剂量、3至35个剂量、3至30个剂量、3至25个剂量、3至20个剂量、3至15个剂量、3至10个剂量、3至5个剂量、4至60个剂量、4至55个剂量、4至50个剂量、4至45个剂量、4至40个剂量、4至35个剂量、4至30个剂量、4至25个剂量、4至20个剂量、4至15个剂量、4至10个剂量、4至5个剂量、5至60个剂量、5至55个剂量、5至50个剂量、5至45个剂量、5至40个剂量、5至35个剂量、5至30个剂量、5至25个剂量、5至20个剂量、5至15个剂量、5至10个剂量、10至60个剂量、10至55个剂量、10至50个剂量、10至45个剂量、10至40个剂量、10至35个剂量、10至30个剂量、10至25个剂量、10至20个剂量、10至15个剂量、15至60个剂量、15至55个剂量、15至50个剂量、15至45个剂量、15至40个剂量、15至35个剂量、15至30个剂量、15至25个剂量、15至20个剂量、20至60个剂量、20至55个剂量、20至50个剂量、20至45个剂量、20至40个剂量、20至35个剂量、20至30个剂量、20至25个剂量、25至60个剂量、25至55个剂量、25至50个剂量、25至45个剂量、25至40个剂量、25至35个剂量、25至30个剂量、30至60个剂量、30至55个剂量、30至50个剂量、30至45个剂量、30至40个剂量、30至35个剂量、35至60个剂量、35至55个剂量、35至50个剂量、35至45个剂量、35至40个剂量、40至60个剂量、40至55个剂量、40至50个剂量、40至45个剂量、45至50个剂量、50至60个剂量、或55至60个剂量。在特定情况下，剂量可以静脉内施用。
PD-1轴结合拮抗剂和抗TIGIT拮抗剂抗体可以本领域已知的任何合适方式施用。例如，PD-1轴结合拮抗剂和抗TIGIT拮抗剂抗体可以依次(在不同的日子)或同期(在同一天或在同一治疗周期内)施用。在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体和/或PD-1轴结合拮抗剂在给药周期的大约第1天(例如，第-3天、第-2天、第-1天、第1天、第2天或第3天)施用。在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂和抗TIGIT拮抗剂抗体可以在同一天施用。在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂在抗TIGIT拮抗剂抗体之前施用。在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂在抗TIGIT拮抗剂抗体之后施用。在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂与抗TIGIT拮抗剂抗体同时施用。在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂可以在同一天施用的抗TIGIT拮抗剂抗体之前施用。在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂可以在同一天施用的抗TIGIT拮抗剂抗体之后施用。在其他情况下，PD-1轴结合拮抗剂与抗TIGIT拮抗剂抗体在同一时间施用。在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂与抗TIGIT拮抗剂抗体在分开的组合物中。在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂与抗TIGIT拮抗剂抗体在相同的组合物中。在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂通过与在同一天向受试者施用的任何其他治疗剂分开的静脉内管线施用。PD-1轴结合拮抗剂与抗TIGIT拮抗剂抗体可通过相同的施用途径或通过不同的施用途径施用。在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂通过静脉内、肌肉内、皮下、局部、口服、经皮、腹膜内、眶内、植入、吸入、鞘内、心室内或鼻内施用。在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂静脉内施用。在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体静脉内、肌肉内、皮下、局部、口服、透皮、腹膜内、眶内、通过植入、通过吸入、鞘内、心室内或鼻内施用。在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体静脉内施用。在一些情况下，在施用PD-1轴结合拮抗剂后存在第一观察期。在一些情况下，在施用PD-1轴结合拮抗剂后存在第二观察期。在一些情况下，在施用抗TIGIT拮抗剂抗体后存在第一观察期。在一些情况下，在施用抗TIGIT拮抗剂抗体后存在第二观察期。在一些情况下，观察期的长度在约30分钟至约60分钟之间。在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体和/或PD-1轴结合拮抗剂静脉内或皮下施用。
在一些情况下，静脉内输注历经30±10分钟和/或历经60±10分钟。在一个示例中，阿特珠单抗可以历经60分钟静脉内施用；如果可以耐受首次输注，则所有后续输注可历经30分钟递送。在一个实例中，替瑞利尤单抗可以历经60分钟静脉内施用；如果可以耐受首次输注，则所有后续输注可历经30分钟递送。
在一些示例中，PD-1轴结合拮抗剂不作为静脉推注或快速注射施用。在一些实例中，抗TIGIT拮抗剂抗体不作为静脉推注或快速注射施用。
在任何前述实例中，每个给药周期可具有任何合适的长度，例如约7天(约5、6、7、8或9天)、约14天(例如，约12、13、14、15或16天)、约21天(例如，约18、19、20、21、22、23或24天)、约28天(约25、26、27、28、29、30或31天)或更长。在一些情况下，每个给药周期为约21天。
ii.PD-1轴结合拮抗剂的给药
一般来说，向患有癌症(例如，食管癌(例如，转移性食管癌))的受试者施用的PD-1轴结合拮抗剂(例如，阿特珠单抗)的治疗有效量将在约0.01mg/kg至约50mg/kg受试者体重的范围内(无论通过一次还是多次施用)。
在一些示例性实施例中，PD-1轴结合拮抗剂(例如，阿特珠单抗)以约0.01mg/kg至约45mg/kg、约0.01mg/kg至约40mg/kg、约0.01mg/kg至约35mg/kg、约0.01mg/kg至约30mg/kg、约0.01mg/kg至约25mg/kg、约0.01mg/kg至约20mg/kg、约0.01mg/kg至约15mg/kg、约0.01mg/kg至约10mg/kg、约0.01mg/kg至约5mg/kg、或约0.01mg/kg至约1mg/kg的剂量施用，例如，每天、每周、每两周、每三周或每四周施用。
在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))的剂量为基于受试者体重的剂量(例如，15mg/kg)。在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))的剂量为基于受试者身体表面积的剂量(例如，身体表面积(BSA)>1.25m2：600mg；BSA>0.75m2且≤1.25m2：450mg；BSA>0.5m2且≤0.75m2：350mg；和BSA≤0.5m2：300mg)。
在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))的有效量为每三周在约80mg至约1600mg之间(例如，在约100mg至约1600mg之间，例如，在约200mg至约1600mg之间，例如，在约300mg至约1600mg之间，例如，在约400mg至约1600mg之间，例如，在约500mg至约1600mg之间，例如，在约600mg至约1600mg之间，例如，在约700mg至约1600mg之间，例如，在约800mg至约1600mg之间，例如，在约900mg至约1500mg之间，例如，在约1000mg至约1400mg之间，例如，在约1050mg至约1350mg之间，例如，在约1100mg至约1300mg之间，例如，在约1150mg至约1250mg之间，例如，在约1175mg至约1225mg之间，例如，在约1190mg至约1210mg，例如，1200mg±5mg，例如，1200mg±2.5mg，例如，1200mg±1.0mg，例如，1200mg±0.5mg，例如，1200mg)的固定剂量。在一些实施例中，有效量的PD-1轴结合拮抗剂为固定剂量为每三周约1200mg的阿特珠单抗。在一些实施例中，有效量的PD-1轴结合拮抗剂为固定剂量为每三周约200mg的派姆单抗，或替代性地，固定剂量为每六周约400mg的派姆单抗。
在一些情况下，与作为单一疗法施用的PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))的标准剂量相比，在组合疗法(例如，与抗TIGIT拮抗剂抗体(诸如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)的组合治疗)中施用的PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))的固定剂量可以减少。
在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))的有效量为每三周在约0.01mg/kg至约50mg/kg受试者体重之间(例如，在约0.01mg/kg至约45mg/kg之间，例如，在约0.1mg/kg至约40mg/kg之间，例如没在约1mg/kg至约35mg/kg之间，例如，在约2.5mg/kg至约30mg/kg之间，例如，在约5mg/kg至约25mg/kg之间，例如，在约10mg/kg至约20mg/kg之间，例如，在约12.5mg/kg至约15mg/kg之间，例如，约15mg/kg±2mg/kg、约15mg/kg±1mg/kg、约15mg/kg±0.5mg/kg、约15mg/kg±0.2mg/kg或约15mg/kg±0.1mg/kg，例如，约15mg/kg)的剂量。在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))的有效量为每三周在约0.01mg/kg至约15mg/kg受试者体重之间(例如，在约0.1mg/kg至约15mg/kg之间，例如，在约0.5mg/kg至约15mg/kg之间，例如没在约1mg/kg至约15mg/kg之间，例如，在约2.5mg/kg至约15mg/kg之间，例如，在约5mg/kg至约15mg/kg之间，例如，在约7.5mg/kg至约15mg/kg之间，例如，在约10mg/kg至约15mg/kg之间，例如，在约12.5mg/kg至约15mg/kg之间，例如，在约14mg/kg至约15mg/kg之间，例如，约15mg/kg±1mg/kg，例如，约15mg/kg±0.5mg/kg，例如，约15mg/kg±0.2mg/kg，例如，约15mg/kg±0.1mg/kg，例如，约15mg/kg)的剂量。在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))的有效量为每三周施用的约15mg/kg的剂量。在一些情况下，与作为单一疗法施用的PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))的标准剂量相比，在组合疗法(例如，与抗TIGIT拮抗剂抗体(诸如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)的组合治疗)中施用的PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))的剂量可以减少。
在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))的有效量为每两周(Q2W)在约20mg至约1600mg之间(例如，在约40mg至约1500mg之间，例如，在约200mg至约1400mg之间，例如，在约300mg至约1400mg之间，例如，在约400mg至约1400mg之间，例如，在约500mg至约1300mg之间，例如，在约600mg至约1200mg之间，例如，在约700mg至约1100mg之间，例如，在约800mg至约1000mg之间，例如，在约800mg至约900mg之间，例如，约800mg、约810mg、约820mg、约830mg、约840mg、约850mg、约860mg、约870mg、约880mg、约890mg或约900mg)的固定剂量。在一些情况下，有效量的PD-1轴结合拮抗剂为固定剂量为每两周约840mg(例如，每两周840mg±10mg，例如，840mg±6mg，例如，840mg±5mg，例如，840mg±3mg，例如，840mg±1mg，例如，840mg±0.5mg，例如，840mg)的阿特珠单抗。在一些实施例中，有效量的PD-1轴结合拮抗剂为固定剂量为每两周约800mg的阿维单抗。在一些实施例中，有效量的PD-1轴结合拮抗剂为固定剂量为每两周约240mg的纳武单抗。
在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))的有效量为每四周(Q4W)在约500mg至约3000mg之间(例如，在约500mg至约2800mg之间，例如，在约600mg至约2700mg之间，例如，在约650mg至约2600mg之间，例如，在约700mg至约2500mg之间，例如，在约1000mg至约2400mg之间，例如，在约1100mg至约2300mg之间，例如，在约1200mg至约2200mg之间，例如，在约1300mg至约2100mg之间，例如，在约1400mg至约2000mg之间，例如，在约1500mg至约1900mg之间，例如，在约1600mg至约1800mg之间，例如，在约1620mg至约1700mg之间，例如，在约1640mg至约1690mg之间，例如，在约1660mg至约1680mg之间，约1680mg，例如，约1600mg、约1610mg、约1620mg、约1630mg、约1640mg、约1650mg、约1660mg、约1670mg、约1680mg、约1690mg或约1700mg)的固定剂量。在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))的有效量为每四周1680mg(例如，每四周1680mg±10mg，例如，1680mg±6mg，例如，1680mg±5mg，例如，1680mg±3mg，例如，1680mg±1mg，例如，1680mg±0.5mg，例如，1680mg)的固定剂量。在一些实施例中，有效量的PD-1轴结合拮抗剂为固定剂量为每四周约480mg的纳武单抗。
在一些情况下，与作为单一疗法施用的抗PD-L1拮抗剂抗体的标准剂量相比，在组合疗法(例如，与抗TIGIT拮抗剂抗体(诸如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗))的组合治疗)中施用的PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))的剂量可以减少。在一些情况下，与作为单一疗法施用的PD-1轴结合拮抗剂的标准剂量相比，在组合疗法(例如，与抗TIGIT拮抗剂抗体，诸如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗的组合治疗，使用或不使用一种或多种化疗剂(例如，铂类化疗剂(例如，卡铂或顺铂)和/或非铂类化疗剂(例如，烷化剂(例如环磷酰胺)、紫杉烷(例如，紫杉醇或nab-紫杉醇)和/或拓扑异构酶II抑制剂(例如，多柔比星)))和/或G-CSF或GM-CSF)中施用的PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))的剂量可以减少。
在一些情况下，向受试者施用总计1至60个剂量的PD-1轴结合拮抗剂(例如，阿特珠单抗)，例如，1至60个剂量、1至55个剂量、1至50个剂量、1至45个剂量、1至40个剂量、1至35个剂量、1至30个剂量、1至25个剂量、1至20个剂量、1至15个剂量、1至10个剂量、1至5个剂量、2至60个剂量、2至55个剂量、2至50个剂量、2至45个剂量、2至40个剂量、2至35个剂量、2至30个剂量、2至25个剂量、2至20个剂量、2至15个剂量、2至10个剂量、2至5个剂量、3至60个剂量、3至55个剂量、3至50个剂量、3至45个剂量、3至40个剂量、3至35个剂量、3至30个剂量、3至25个剂量、3至20个剂量、3至15个剂量、3至10个剂量、3至5个剂量、4至60个剂量、4至55个剂量、4至50个剂量、4至45个剂量、4至40个剂量、4至35个剂量、4至30个剂量、4至25个剂量、4至20个剂量、4至15个剂量、4至10个剂量、4至5个剂量、5至60个剂量、5至55个剂量、5至50个剂量、5至45个剂量、5至40个剂量、5至35个剂量、5至30个剂量、5至25个剂量、5至20个剂量、5至15个剂量、5至10个剂量、10至60个剂量、10至55个剂量、10至50个剂量、10至45个剂量、10至40个剂量、10至35个剂量、10至30个剂量、10至25个剂量、10至20个剂量、10至15个剂量、15至60个剂量、15至55个剂量、15至50个剂量、15至45个剂量、15至40个剂量、15至35个剂量、15至30个剂量、15至25个剂量、15至20个剂量、20至60个剂量、20至55个剂量、20至50个剂量、20至45个剂量、20至40个剂量、20至35个剂量、20至30个剂量、20至25个剂量、25至50个剂量、25至45个剂量、25至40个剂量、25至35个剂量、25至30个剂量、30至60个剂量、30至55个剂量、30至50个剂量、30至45个剂量、30至40个剂量、30至35个剂量、35至60个剂量、35至55个剂量、35至50个剂量、35至45个剂量、35至40个剂量、40至60个剂量、40至55个剂量、40至50个剂量、40至45个剂量、45至50个剂量、50至60个剂量、或55至60个剂量。在特定情况下，剂量可以静脉内施用。
在一些情况下，阿特珠单抗是每2周以约840mg的剂量、每3周以约1200mg的剂量或每4周以约1680mg的剂量向受试者静脉内施用。例如，在一些方面，阿特珠单抗是每3周以1200mg的剂量向受试者静脉内施用。在一些方面，阿特珠单抗是每2周以840mg的剂量向受试者静脉内施用。在一些方面，阿特珠单抗是每4周以1680mg的剂量向受试者静脉内施用。
PD-1轴结合拮抗剂和/或任何额外的治疗剂可以以本领域已知的任何合适方式施用。例如，PD-1轴结合拮抗剂和/或任何额外的治疗剂可以依次(在不同的日子)或同时(在同一天或在同一治疗周期内)施用。在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂在额外的治疗剂之前施用。在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂在额外的治疗剂之后施用。在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂和/或额外的治疗剂可以在同一天施用。在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂可以在同一天施用的额外的治疗剂之前施用。例如，PD-1轴结合拮抗剂可以在同一天在化疗之前施用。在另一示例中，PD-1轴结合拮抗剂可以在同一天在化疗和另一药物(例如，贝伐单抗)之前施用。在其他情况下，PD-1轴结合拮抗剂可以在同一天施用的额外的治疗剂后施用。在其他情况下，PD-1轴结合拮抗剂与额外的治疗剂在同一时间施用。在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂与额外的治疗剂在分开的组合物中。在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂与额外的治疗剂在同一组合物中。在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂通过与在同一天向受试者施用的任何其他治疗剂分开的静脉内管线施用。
PD-1轴结合拮抗剂和任何额外的治疗剂可通过相同的施用途径或通过不同的施用途径施用。在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂通过静脉内、肌肉内、皮下、局部、口服、经皮、腹膜内、眶内、植入、吸入、鞘内、心室内或鼻内施用。在一些情况下，额外的治疗剂通过静脉内、肌肉内、皮下、局部、口服、透皮、腹膜内、眶内、通过植入、通过吸入、鞘内、心室内或鼻内施用。
在优选的实施例中，PD-1轴结合拮抗剂静脉内施用。在一个示例中，阿特珠单抗可以历经60分钟静脉内施用；如果可以耐受首次输注，则所有后续输注可历经30分钟递送。在一些示例中，PD-1轴结合拮抗剂不作为静脉推注或快速注射施用。
本文还提供了用于治疗患者的食管癌的方法，该方法包括向受试者施用包括有效量的PD-1轴结合拮抗剂(例如，阿特珠单抗)和抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)与另一抗癌剂或癌症疗法组合的治疗方案。例如，PD-1轴结合拮抗剂可以与以下项组合施用：额外的化学疗法或化疗剂(见上文定义)；靶向疗法或靶向治疗剂；免疫疗法或免疫治疗剂，例如，单克隆抗体；一种或多种细胞毒性剂(见上文定义)；或它们的组合。例如，PD-1轴结合拮抗剂可以与贝伐单抗、紫杉醇、蛋白结合型紫杉醇(例如，白蛋白结合型紫杉醇)、卡铂、顺铂、培美曲塞、吉西他滨、依托泊苷、考比替尼(cobimetinib)、威罗非尼或它们的组合联合施用。PD-1轴结合拮抗剂为抗PD-L1抗体(例如，阿特珠单抗)或抗PD-1抗体。
在一些情况下，该治疗可进一步包括额外的疗法。可以使用本领域已知的或本文描述的任何合适的额外的疗法。额外的疗法可以是放疗、手术、基因疗法、DNA疗法、病毒疗法、RNA疗法、免疫疗法、骨髓移植、纳米疗法、单克隆抗体疗法、γ辐射或上述疗法的组合。
在一些情况下，额外的疗法为施用副作用限制剂(例如，旨在减轻治疗副作用的发生和/或严重程度的药剂，例如，抗恶心剂、皮质类固醇(例如，泼尼松或等价物，例如，剂量为1至2mg/kg/天)、激素替代药物等)。
iii.抗TIGIT拮抗剂抗体和PD-1轴结合拮抗剂的给药周期
在本发明的任何方法和用途中，可以在一个或多个给药周期(例如，1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、44个、45个、46个、47个、48个、49个、50个、51个、52个、53个、54个、55个、56个、57个、58个、59个或60个或更多个给药周期)中向患有癌症(例如，食管癌(例如，转移性食管癌))的受试者施用抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如替瑞利尤单抗)和PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))。在一些方面，一个或多个给药周期包括向患有癌症(例如，食管癌(例如，转移性食管癌))的受试者施用分别如第IX节和第X节中所述的抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如替瑞利尤单抗)和PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))的一个或多个剂量。在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)和PD-1轴结合拮抗剂(例如抗PD-L1抗体(例如阿特珠单抗)的给药周期持续直到临床益处丧失(例如，确认的疾病进展、耐药性、死亡或不可接受的毒性)。在一些情况下，每个给药周期的长度为约7至42天(例如，7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天、15天、16天、17天、18天、19天、20天、21天、22天、23天、24天、25天、26天、27天、28天、29天、30天、31天、32天、33天、34天、35天、36天、37天、38天、39天、41天、42天)。在一些情况下，每个给药周期的长度为约14天。在一些情况下，每个给药周期的长度为约21天。在一些情况下，每个给药周期的长度为约28天。在一些情况下，每个给药周期的长度为约42天。在一些情况下，每个给药周期的长度为约7天。
在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如替瑞利尤单抗)和PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体，例如阿特珠单抗)或抗PD-1拮抗剂抗体(例如，MDX-1106(纳武利尤单抗)或MK-3475(帕博利珠单抗，先前称为lambrolizumab))是在每个给药周期的约第1天(例如，第1天±3天)施用。在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如替瑞利尤单抗)和PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体，例如阿特珠单抗)或抗PD-1拮抗剂抗体(例如，MDX-1106(纳武利尤单抗)或MK-3475(帕博利珠单抗，先前称为lambrolizumab))是在每个给药周期的约第15天(例如，第15天±3天)施用。
在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)和PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体，例如，阿特珠单抗)在每个给药周期的约第1天(例如，第1天±3天)施用。
在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)在每个21天周期的第1天以约600mg的剂量(即，以每三周约600mg的剂量)静脉内施用，并且PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗)在每个21天周期的第1天以约1200mg的剂量(即，以每三周约1200mg的剂量)静脉内施用。在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)在每个21天周期的第1天以600mg的剂量(即，以每三周600mg的剂量)静脉内施用，并且PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗)在每个21天周期的第1天以1200mg的剂量(即，以每三周1200mg的剂量)静脉内施用。
在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如替瑞利尤单抗)在每个14天周期的第1天以约420mg的剂量(即，以每两周约420mg的剂量)静脉内施用，并且PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗)在每个14天周期的第1天以约840mg的剂量(即，以每两周约840mg的剂量)静脉内施用。
在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)在每个28天周期的第1天以840mg的剂量(即，以每四周840mg的剂量)静脉内施用，并且PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗)在每个28天周期的第1天以1680mg的剂量(即，以每四周1680mg的剂量)静脉内施用。
iv.抗TIGIT拮抗剂抗体和PD-1轴结合拮抗剂的静脉内输注和皮下施用
在一些情况下，向患有癌症(例如，食管癌(例如，转移性食管癌))的受试者静脉内施用抗TIGIT拮抗剂抗体(例如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如替瑞利尤单抗)。替代性地，在一些实施例中，抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)皮下施用。在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))静脉内施用。替代性地，在一些实施例中，PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))皮下施用。
在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如替瑞利尤单抗)通过历经约60±15分钟(例如，约45分钟、约46分钟、约47分钟、约48分钟、约49分钟、约50分钟、约51分钟、约52分钟、约53分钟、约54分钟、约55分钟、约56分钟、约57分钟、约58分钟、约59分钟、约60分钟、约61分钟、约62分钟、约63分钟、约64分钟、约65分钟、约66分钟、约67分钟、约68分钟、约69分钟、约70分钟、约71分钟、约72分钟、约73分钟、约74分钟或约75分钟)的静脉内输注向受试者或受试者群体施用。在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)通过历经约60±10分钟(例如，约50分钟、约51分钟、约52分钟、约53分钟、约54分钟、约55分钟、约56分钟、约57分钟、约58分钟、约59分钟、约60分钟、约61分钟、约62分钟、约63分钟、约64分钟、约65分钟、约66分钟、约67分钟、约68分钟、约69分钟或约70分钟)的静脉内输注向受试者或受试者群体施用。在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))通过历经约60±15分钟(例如，约45分钟、约46分钟、约47分钟、约48分钟、约49分钟、约50分钟、约51分钟、约52分钟、约53分钟、约54分钟、约55分钟、约56分钟、约57分钟、约58分钟、约59分钟、约60分钟、约61分钟、约62分钟、约63分钟、约64分钟、约65分钟、约66分钟、约67分钟、约68分钟、约69分钟、约70分钟、约71分钟、约72分钟、约73分钟、约74分钟或约75分钟)的静脉内输注向受试者施用。
在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)通过历经约30±10分钟(例如，约20分钟、约21分钟、约22分钟、约23分钟、约24分钟、约25分钟、约26分钟、约27分钟、约28分钟、约29分钟、约30分钟、约31分钟、约32分钟、约33分钟、约34分钟、约35分钟、约36分钟、约37分钟、约38分钟、约39分钟或约40分钟)的静脉内输注向受试者施用。在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂体(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))通过历经约30±10分钟(例如，约20分钟、约21分钟、约22分钟、约23分钟、约24分钟、约25分钟、约26分钟、约27分钟、约28分钟、约29分钟、约30分钟、约31分钟、约32分钟、约33分钟、约34分钟、约35分钟、约36分钟、约37分钟、约38分钟、约39分钟或约40分钟)的静脉内输注向受试者施用。
v.施用次序和观察期
在其中向患有癌症(例如，食管癌(例如，转移性食管癌))的受试者或受试者群体施用抗TIGIT拮抗剂抗体和PD-1轴结合拮抗剂两者的一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如替瑞利尤单抗)是在PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))之前向受试者施用。
在一些情况下，例如，在施用抗TIGIT拮抗剂抗体之后且在施用PD-1轴结合拮抗剂之前，该方法包括中间的第一观察期。在一些情况下，例如，在施用抗TIGIT拮抗剂抗体之后，向受试者施用PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))。在一些情况下，首先向受试者施用抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)，且PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1抗体(例如，阿特珠单抗))在施用抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)之后向受试者施用。
在一些情况下，该方法进一步包括在施用PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))之后的第二观察期。
在一些情况下，该方法包括在施用抗TIGIT拮抗剂抗体之后的第一观察期和在施用PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))之后的第二观察期两者。在一些情况下，第一和第二观察期各自的长度在约30分钟至约60分钟之间。在第一观察期和第二观察期的长度各自为约60分钟的情况下，该方法可包括在施用抗TIGIT拮抗剂抗体、PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))后约30±10分钟，在第一或第二观察期内记录受试者的生命体征(例如，脉搏率、呼吸率、血压和体温)。在第一观察期和第二观察期的长度各自为约30分钟的情况下，该方法可包括在施用抗TIGIT拮抗剂抗体或PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))后约15±10分钟，在第一或第二观察期内记录受试者的生命体征(例如，脉搏率、呼吸率、血压和体温)。
在一些情况下，在抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如替瑞利尤单抗)之前向受试者或受试者群体施用PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1抗体(例如，阿特珠单抗))。在一些情况下，例如，在施用PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))之后且在施用抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)之前，该方法包括中间的第一观察期。
在一些情况下，该方法进一步包括在施用抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)之后的第二观察期。
在一些情况下，该方法包括在施用PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))之后的第一观察期和在施用抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)之后的第二观察期两者。在一些情况下，第一和第二观察期各自的长度在约30分钟至约60分钟之间。在第一和第二观察期各自的长度为约60分钟的情况下，该方法可包括在施用PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))或抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)后约30±10分钟，在第一或第二观察期内记录受试者的生命体征(例如，脉搏率、呼吸率、血压和体温)。在第一和第二观察期各自的长度为约30分钟的情况下，该方法可包括在施用PD-1轴结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体(例如，阿特珠单抗))、抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，如本文公开的抗TIGIT拮抗剂抗体，例如，替瑞利尤单抗)后约15±10分钟，在第一或第二观察期内记录受试者的生命体征(例如，脉搏率、呼吸率、血压和体温)。
VII.PD-L1表达的评定
可以评定根据本文所述的供使用的任何方法和组合物治疗的受试者中的PD-L1的表达。供使用的方法和组合物可包括确定获得自患有癌症(例如，食管癌(例如，转移性食管癌))的受试者的生物学样品(例如，肿瘤样品)中PD-L1的表达水平。在其他实例中，从受试者获得的生物样品(例如，肿瘤样品)中的PD-L1表达水平已经在治疗启动之前或治疗启动之后确定。PD-L1表达可以使用任何合适的方法来确定。例如，PD-L1表达可以如美国专利申请号15/787,988和15/790,680中所述来确定。可使用任何合适的肿瘤样品，例如，福尔马林固定且石蜡包埋的(FFPE)肿瘤样品、存档肿瘤样品、新鲜肿瘤样品或冷冻肿瘤样品。
例如，PD-L1表达可以根据表达可检测的PD-L1表达水平的肿瘤浸润性免疫细胞所占据的肿瘤样品的百分比来确定，作为肿瘤样品中表达可检测的PD-L1表达水平的肿瘤浸润性免疫细胞的百分比，和/或作为肿瘤样品中表达可检测PD-L1表达水平的肿瘤细胞的百分比。应当理解，在任何前述实例中，肿瘤浸润性免疫细胞所占据的肿瘤样品的百分比可以是肿瘤浸润性免疫细胞在从受试者获得的肿瘤样品的切片中覆盖的肿瘤面积的百分比，例如，如通过IHC使用抗PD-L1抗体(例如SP142抗体)所评定。可以使用任何合适的抗PD-L1抗体，包括例如SP142(Ventana)、SP263(Ventana)、22C3(Dako)、28-8(Dako)、E1L3N(CellSignaling Technology)、4059(ProSci,Inc.)、h5H1(Advanced Cell Diagnostics)和9A11。在一些示例中，抗PD-L1抗体为SP142。在其他示例中，抗PD-L1抗体为SP263。
在一些实例中，从受试者获得的肿瘤样品在肿瘤样品中小于1％的肿瘤细胞中、在肿瘤样品中1％或更多的肿瘤细胞中、在肿瘤样品中1％至小于5％的肿瘤细胞中、在肿瘤样品中5％或更多的肿瘤细胞中、在肿瘤样品中5％至小于50％的肿瘤细胞中或在肿瘤样品中50％或更多的肿瘤细胞中具有可检测的PD-L1表达水平。
在一些实例中，从受试者获得的肿瘤样品在肿瘤浸润免疫细胞中具有可检测的PD-L1表达水平，该肿瘤浸润免疫细胞占据小于1％的肿瘤样品、超过1％的肿瘤样品、1％到小于5％的肿瘤样品、大于5％的肿瘤样品、5％到小于10％的肿瘤样品或大于10％的肿瘤样品。
在一些方面，根据本文提供的任何方法治疗的受试者的食管癌具有<5％的PD-L1阳性肿瘤细胞(TC)分数或肿瘤浸润性免疫细胞(IC)分数。在一些方面，食管癌具有<1％的PD-L1阳性TC分数。在其他方面，根据本文提供的任何方法治疗的受试者的食管癌具有≥5％的PD-L1阳性TC分数或IC分数。在一些方面，PD-L1是使用Ventana SP142 IHC测定法、Ventana SP263 IHC测定法、pharmDx 22C3 IHC测定法或pharmDx 28-8IHC测定法检测的。
在一些实施例中，可以分别根据表2和/或表3中所示的诊断评定标准针对在肿瘤浸润性免疫细胞和/或肿瘤细胞中的PD-L1阳性对肿瘤样品进行评分。
表2.肿瘤浸润免疫细胞(IC)IHC诊断标准
表3.肿瘤细胞(TC)IHC诊断标准
/>
VIII.TIGIT表达的评定
可以在已根据本文所述的任何方法、用途和组合物治疗的患有癌症(例如，食管癌(例如，转移性食管癌))的受试者中评定TIGIT的表达水平。该方法、用途和供使用的组合物可以包括确定从受试者获得的生物样品(例如，肿瘤样品)中TIGIT的表达水平。在其他实例中，从受试者获得的生物样品(例如，肿瘤样品)中的TIGIT表达水平已经在治疗启动之前或治疗启动之后确定。TIGIT表达可以使用任何合适的方法来确定。可使用任何合适的肿瘤样品，例如，福尔马林固定且石蜡包埋的(FFPE)肿瘤样品、存档肿瘤样品、新鲜肿瘤样品或冷冻肿瘤样品。
例如，TIGIT表达可以根据表达可检测的TIGIT表达水平的肿瘤浸润性免疫细胞所占据的肿瘤样品的百分比来确定，作为肿瘤样品中表达可检测的TIGIT表达水平的肿瘤浸润性免疫细胞的百分比，和/或作为肿瘤样品中表达可检测TIGIT表达水平的肿瘤细胞的百分比。应当理解，在任何前述实例中，肿瘤浸润性免疫细胞所占据的肿瘤样品的百分比可以是肿瘤浸润性免疫细胞在从受试者获得的肿瘤样品的切片中覆盖的肿瘤面积的百分比，例如，如通过IHC使用抗TIGIT拮抗剂抗体所评定。可以使用任何合适的抗TIGIT拮抗剂抗体。在一些实例中，抗TIGIT拮抗剂抗体为10A7(WO 2009/126688A3；美国专利号：9,499,596)。
IX.抗TIGIT拮抗剂抗体
本发明提供了可用于治疗患有癌症(例如，食管癌(例如，转移性食管癌))的受试者(例如，人)的癌症的抗TIGIT拮抗剂抗体。
在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体为替瑞利尤单抗(CAS登记号：1918185-84-8)。替瑞利尤单抗(基因泰克公司)也称为MTIG7192A。
在某些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体包括至少一个、两个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)HVR-H1，其包含SNSAAWN(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列；(b)HVR-H2，其包含KTYYRFKWYSDYAVSVKG(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列；(c)HVR-H3，其包含ESTTYDLLAGPFDY(SEQ ID NO:13)的氨基酸序列；(d)HVR-L1，其包含KSSQTVLYSSNNKKYLA(SEQ ID NO:14)的氨基酸序列，(e)HVR-L2，其包含WASTRES(SEQ ID NO:15)的氨基酸序列；和/或(f)HVR-L3，其包含QQYYSTPFT(SEQ ID NO:16)的氨基酸序列，或者一个或多个上述HVR和与SEQ ID NO:11至16中的任一者具有至少约90％序列同一性(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性)的其一个或多个变体的组合。
在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体可包括：(a)HVR-H1，其包含SNSAAWN(SEQ IDNO:11)的氨基酸序列；(b)HVR-H2，其包含KTYYRFKWYSDYAVSVKG(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列；(c)HVR-H3，其包含ESTTYDLLAGPFDY(SEQ ID NO:13)的氨基酸序列；(d)HVR-L1，其包含KSSQTVLYSSNNKKYLA(SEQ ID NO:14)的氨基酸序列；(e)HVR-L2，其包含WASTRES(SEQ IDNO:15)的氨基酸序列；和(f)HVR-L3，其包含QQYYSTPFT(SEQ ID NO:16)的氨基酸序列。在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体具有VH结构域和/或VL结构域，该VH结构域包含与EVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVSSNSAAWNWIRQ SPSRGLEWLGKTYYRFKWYSDYAVSVKGRITINPDTSKNQFSLQLNSVTP EDTAVFYCTRESTTYDLLAGPFDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:27)的序列具有至少90％序列同一性(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性)或该序列的氨基酸序列，或与序列QVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVSSNSAAWNWIRQSPSRGLEWLGKTYYRFKWYSDYAVSVKGRITINPDTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVFYCTRESTTYDLLAGPFDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:28)具有至少90％序列同一性(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性)或该序列的氨基酸序列；该VL结构域包含与序列DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQTVLYSSNNKKYLAWYQQKPGQP PNLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYS TPFTFGPGTKVEIK(SEQ ID NO:29)具有至少90％序列同一性(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性)或该序列的氨基酸序列。在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体具有VH结构域和/或VL结构域，该VH结构域包含与SEQ ID NO:27的序列具有至少90％序列同一性(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性)或该序列的氨基酸序列，该VL结构域包含与SEQ IDNO:29的序列具有至少90％序列同一性(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性)或该序列的氨基酸序列。在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体具有：VH结构域，其包含SEQ ID NO:27的氨基酸序列；以及VL结构域，其包含SEQ ID NO:29的氨基酸序列。在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体具有VH结构域和/或VL结构域，该VH结构域包含与SEQ ID NO:28的序列具有至少90％序列同一性(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性)或该序列的氨基酸序列，该VL结构域包含与SEQ ID NO:29的序列具有至少90％序列同一性(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性)或该序列的氨基酸序列。在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体具有：VH结构域，其包含SEQ ID NO:28的氨基酸序列；以及VL结构域，其包含SEQ IDNO:29的氨基酸序列。
在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体包含重链和轻链序列，其中：(a)重链包含氨基酸序列：EVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSV SSNSAAWNWIRQSPSRGLEWLGKTYYRFKWYSDYAVSVKGRITINPDTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVFYCTRESTTYDLLAGPFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCL VKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO:33)；并且(b)轻链包含氨基酸序列：DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQTVLY SSNNKKYLAWYQQKPGQPPNLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYSTPFTFGPGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQ IDNO:34)。
在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体进一步包含以下轻链可变区框架区(FR)中的至少一个、两个、三个或四个：FR-L1，其包含DIVMTQSPDSLAVSLGERATINC(SEQ ID NO:17)的氨基酸序列；FR-L2，其包含WYQQKPGQPPNLLIY(SEQ ID NO:18)的氨基酸序列；FR-L3，其包含GVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYC(SEQ ID NO:19)的氨基酸序列；和/或FR-L4，其包含FGPGTKVEIK(SEQ ID NO:20)的氨基酸序列，或者上述FR中的一者或多者与一个或多个其变体的组合，该一个或多个其变体与SEQ ID NO:17至20中的任一者具有至少约90％序列同一性(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性)。在一些情况下，例如抗体进一步包括：FR-L1，其包含DIVMTQSPDSLAVSLGERATINC(SEQ ID NO:17)的氨基酸序列；FR-L2，其包含WYQQKPGQPPNLLIY(SEQ ID NO:18)的氨基酸序列；FR-L3，其包含GVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYC(SEQ ID NO:19)的氨基酸序列；和FR-L4，其包含FGPGTKVEIK(SEQ ID NO:20)的氨基酸序列。
在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体进一步包含以下重链可变区FR中的至少一个、两个、三个或四个：FR-H1，其包含X1VQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVS(SEQ ID NO:21)的氨基酸序列，其中X1为E或Q；FR-H2，其包含WIRQSPSRGLEWLG(SEQ ID NO:22)的氨基酸序列；FR-H3，其包含RITINPDTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVFYCTR(SEQ ID NO:23)的氨基酸序列；和/或FR-H4，其包含WGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:24)的氨基酸序列，或者上述FR中的一者或多者与一个或多个其变体的组合，该一个或多个其变体与SEQ ID NO:21至24中的任一者具有至少约90％序列同一性(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性)。抗TIGIT拮抗剂抗体可进一步包括，例如，以下重链可变区FR中的至少一个、两个、三个或四个：FR-H1，其包含EVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVS(SEQ ID NO:25)的氨基酸序列；FR-H2，其包含WIRQSPSRGLEWLG(SEQ ID NO:22)的氨基酸序列；FR-H3，其包含RITINPDTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVFYCTR(SEQ ID NO:23)的氨基酸序列；和/或FR-H4，其包含WGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:24)的氨基酸序列，或者上述FR中的一者或多者与一个或多个其变体的组合，该一个或多个其变体与SEQ ID NO:22至25中的任一者具有至少约90％序列同一性(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性)。在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体包括：FR-H1，其包含EVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVS(SEQ ID NO:25)的氨基酸序列；FR-H2，其包含WIRQSPSRGLEWLG(SEQ ID NO:22)的氨基酸序列；FR-H3，其包含RITINPDTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVFYCTR(SEQ ID NO:23)的氨基酸序列；和FR-H4，其包含WGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:24)的氨基酸序列。在另一种情况下，例如，抗TIGIT拮抗剂抗体可进一步包括以下重链可变区FR中的至少一个、两个、三个或四个：FR-H1，其包含QVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVS(SEQ ID NO:26)的氨基酸序列；FR-H2，其包含WIRQSPSRGLEWLG(SEQ ID NO:22)的氨基酸序列；FR-H3，其包含RITINPDTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVFYCTR(SEQ ID NO:23)的氨基酸序列；和/或FR-H4，其包含WGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:24)的氨基酸序列，或者上述FR中的一者或多者与一个或多个其变体的组合，该一个或多个其变体与SEQ ID NO:22至24和26中的任一者具有至少约90％序列同一性(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性)。在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体包括：FR-H1，其包含QVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVS(SEQ ID NO:26)的氨基酸序列；FR-H2，其包含WIRQSPSRGLEWLG(SEQ ID NO:22)的氨基酸序列；FR-H3，其包含RITINPDTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVFYCTR(SEQ ID NO:23)的氨基酸序列；和FR-H4，其包含WGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:24)的氨基酸序列。
在另一方面，提供一种抗TIGIT拮抗剂抗体，其中该抗体包含如以上提供的任何情况下的VH和如以上提供的任何情况下的VL，其中一个或两个可变结构域序列包括翻译后修饰。
在一些情况下，上述任何一个抗TIGIT拮抗剂抗体除了能够与人TIGIT结合之外，也能够与兔TIGIT结合。在一些情况下，上述任何一个抗TIGIT拮抗剂抗体能够与人TIGIT和食蟹猴(cyno)TIGIT结合。在一些情况下，上述任何一个抗TIGIT拮抗剂抗体能够与人TIGIT、cyno TIGIT和兔TIGIT结合。在一些情况下，上述任何一个抗TIGIT拮抗剂抗体能够与人TIGIT、cyno TIGIT和兔TIGIT结合，但不能与鼠TIGIT结合。
在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体以约10nM或更低的KD结合人TIGIT并且以约10nM或更低的KD结合cyno TIGIT(例如以约0.1nM至约1nM的KD结合人TIGIT并且以约0.5nM至约1nM的KD结合cyno TIGIT，例如以约0.1nM或更低的KD结合人TIGIT并且以约0.5nM或更低的KD结合cyno TIGIT)。
在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体与TIGIT特异性结合并抑制或阻断TIGIT与脊髓灰质炎病毒受体(PVR)的相互作用(例如，拮抗剂抗体抑制由TIGIT与PVR结合介导的细胞内信号传导)。在一些情况下，拮抗剂抗体以10nM或更低(例如，1nM至约10nM)的IC50值抑制或阻断人TIGIT与人PVR的结合。在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体与TIGIT特异性结合并抑制或阻断TIGIT与PVR的相互作用，而不影响PVR-CD226相互作用。在一些情况下，拮抗剂抗体以50nM或更低(例如，1nM至约50nM，例如1nM至约5nM)的IC50值抑制或阻断cyno TIGIT与cyno PVR的结合。在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体抑制和/或阻断CD226与TIGIT的相互作用。在一些情况下，抗TIGIT拮抗剂抗体抑制和/或阻断TIGIT破坏CD226同源二聚化的能力。
在一些情况下，本文所述的方法或用途可包括使用或施用分离的抗TIGIT拮抗剂抗体，该抗体与上述任何抗TIGIT拮抗剂抗体竞争结合TIGIT。例如，该方法可以包括施用分离的抗TIGIT拮抗剂抗体，该抗TIGIT拮抗剂抗体与具有以下六个HVR的抗TIGIT拮抗剂抗体竞争结合TIGIT：(a)HVR-H1，其包含SNSAAWN(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列；(b)HVR-H2，其包含KTYYRFKWYSDYAVSVKG(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列；(c)HVR-H3，其包含ESTTYDLLAGPFDY(SEQ ID NO:13)的氨基酸序列；(d)HVR-L1，其包含KSSQTVLYSSNNKKYLA(SEQ ID NO:14)的氨基酸序列；(e)HVR-L2，其包含WASTRES(SEQ ID NO:15)的氨基酸序列；和(f)HVR-L3，其包含QQYYSTPFT(SEQ ID NO:16)的氨基酸序列。本文所述的方法还可包括施用与上述抗TIGIT拮抗剂抗体结合相同表位的分离的抗TIGIT拮抗剂抗体。
在一些方面，抗TIGIT拮抗剂抗体表现出Fc介导的效应子功能，例如参与抗体依赖性细胞毒性(ADCC)。在一些方面，抗TIGIT拮抗剂抗体为具有完整的Fc介导的效应子功能(例如，替瑞利尤单抗、维博利单抗、etigilimab、EOS084448或TJ-T6)或增强的效应子功能(例如，SGN-TGT)的抗体。
在其他方面，抗TIGIT拮抗剂抗体为缺乏Fc介导的效应子功能的抗体(例如，domvanalimab、BMS-986207、ASP8374或COM902)。
在一些方面，抗TIGIT拮抗剂抗体是IgG类抗体。在一些方面，抗TIGIT拮抗剂抗体为IgG1类抗体，例如，替瑞利尤单抗、维博利单抗、domvanalimab、BMS-986207、etigilimab、BGB-A1217、SGN-TGT、EOS084448(EOS-448)、TJ-T6或AB308。在一些方面，抗体为包含Fc区的人单克隆全长IgG1类抗体。
在一些方面，抗TIGIT拮抗剂抗体为包含以下的人单克隆全长IgG1亚类抗体：人IgG1 Fc区；重链可变区(VH)，其包含SEQ ID NO:27的氨基酸序列；和轻链可变区(VL)，其包含SEQ ID NO:29的氨基酸序列。
在其他方面，抗TIGIT拮抗剂抗体为IgG4类抗体，例如，ASP8374或COM902。
可用于本发明的抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)，包括含有此类抗体的组合物，可以与PD-1轴结合拮抗剂(例如，PD-L1结合拮抗剂(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体，例如，阿特珠单抗)、PD-1结合拮抗剂(例如，抗PD-1拮抗剂抗体，例如，帕博利珠单抗)和PD-L2结合拮抗剂(例如，抗PD-L2拮抗剂抗体))。
在一些实施例中，抗TIGIT拮抗剂抗体起到抑制TIGIT信号传导的作用。在一些实施例中，抗TIGIT拮抗剂抗体抑制TIGIT与其结合配偶体的结合。示例性TIGIT结合配偶体包括CD155(PVR)、CD112(PVRL2或Nectin-2)和CD113(PVRL3或Nectin-3)。在一些实施例中，抗TIGIT拮抗剂抗体能够抑制TIGIT与CD155之间的结合。在一些实施例中，抗TIGIT拮抗剂抗体可以抑制TIGIT与CD112之间的结合。在一些实施例中，抗TIGIT拮抗剂抗体抑制TIGIT与CD113之间的结合。在一些实施例中，抗TIGIT拮抗剂抗体抑制免疫细胞中TIGIT介导的细胞信号传导。在一些实施例中，抗TIGIT拮抗剂抗体通过消耗调节性T细胞来抑制TIGIT(例如，当接合FcγR时)。
在一些实施例中，抗TIGIT抗体为单克隆抗体。在一些实施例中，抗TIGIT抗体为选自由Fab、Fab'-SH、Fv、scFv和(Fab')2片段组成的组的抗体片段。在一些实施例中，抗TIGIT抗体为人源化抗体。在一些实施例中，抗TIGIT抗体为人抗体。在一些实施例中，本文所述的抗TIGIT抗体与人TIGIT结合。在一些实施例中，抗TIGIT抗体为Fc融合蛋白。
在一些实施例中，抗TIGIT抗体选自由以下项组成的组：替瑞利尤单抗(MTIG7192A、RG6058或RO7092284)、维博利单抗(MK-7684)、ASP8374(PTZ-201)、EOS884448(EOS-448)、SEA-TGT(SGN-TGT))、BGB-A1217、BMS-986207(ONO-4686)、COM902(CGEN-15137)、IBI939、domvanalimab(AB154)、M6223、AB308、AB154、TJ-T6、MG1131、NB6253、HLX301、HLX53、SL-9258(TIGIT-Fc-LIGHT)、STW264和YBL-012。在一些实施例中，抗TIGIT抗体选自由以下项组成的组：替瑞利尤单抗(MTIG7192A、RG6058或RO7092284)、维博利单抗(MK-7684)、ASP8374(PTZ-201)、EOS-448和SEA-TGT(SGN-TGT)。抗TIGIT抗体可以是替瑞利尤单抗(MTIG7192A、RG6058或RO7092284)。
在一些实施例中，抗TIGIT抗体包含本文公开的任何抗TIGIT抗体的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个互补决定区(CDR)。在一些实施例中，抗TIGIT抗体包含本文公开的任何抗TIGIT抗体的六个CDR。在一些实施例中，抗TIGIT抗体包含选自由替瑞利尤单抗、ASP8374(PTZ-201)、BGB-A1217、BMS-986207(ONO-4686)、COM902(CGEN-15137)、M6223、IBI939、EOS884448(EOS-448)、domvanalimab(AB154)、维博利单抗(MK-7684)和SEA-TGT(SGN-TGT)组成的组的抗体中任一抗体的六个CDR。
在一些实施例中，抗TIGIT抗体包含重链和轻链，其中重链包含本文公开的任何一种抗TIGIT抗体的重链可变区(VH)序列，并且轻链包含同一抗体的轻链可变区(VL)。在一些实施例中，抗TIGIT抗体包含选自由替瑞利尤单抗、ASP8374(PTZ-201)、BGB-A1217、BMS-986207(ONO-4686)、COM902(CGEN-15137)、M6223、IBI939、EOS884448(EOS-448)、domvanalimab(AB154)、维博利单抗(MK-7684)和SEA-TGT(SGN-TGT)组成的组的抗TIGIT抗体的VH和VL。
在一些实施例中，抗TIGIT抗体包含本文公开的任何抗TIGIT抗体的重链和轻链。在一些实施例中，抗TIGIT抗体包含选自由替瑞利尤单抗、ASP8374(PTZ-201)、BGB-A1217、BMS-986207(ONO-4686)、COM902(CGEN-15137)、M6223、IBI939、EOS884448(EOS-448)、domvanalimab(AB154)、维博利单抗(MK-7684)和SEA-TGT(SGN-TGT)组成的组的抗TIGIT抗体的重链和轻链。
X.PD-1轴结合拮抗剂
PD-1轴结合拮抗剂可包括PD-L1结合拮抗剂、PD-1结合拮抗剂和PD-L2结合拮抗剂。任何合适的PD-1轴结合拮抗剂均可用于治疗患有癌症(例如，食管癌(例如，转移性食管癌))的受试者。
A.PD-L1结合拮抗剂
在一些情况下，PD-L1结合拮抗剂抑制PD-L1与其配体结合配偶体中的一者或多者的结合。在其他情况下，PD-L1结合拮抗剂抑制PD-L1与PD-1的结合。在又一些情况下，PD-L1结合拮抗剂抑制PD-L1与B7-1的结合。在一些情况下，PD-L1结合拮抗剂抑制PD-L1与PD-1和B7-1两者的结合。PD-L1结合拮抗剂可以是但不限于抗体、其抗原结合片段、免疫粘附素、融合蛋白、寡肽或小分子。在一些情况下，PD-L1结合拮抗剂为抑制PD-L1的小分子(例如，GS-4224、INCB086550、MAX-10181、INCB090244、CA-170或ABSK041)。在一些情况下，PD-L1结合拮抗剂为抑制PD-L1和VISTA的小分子。在一些情况下，PD-L1结合拮抗剂为CA-170(也称为AUPM-170)。在一些情况下，PD-L1结合拮抗剂为抑制PD-L1和TIM3的小分子。在一些情况下，该小分子为WO 2015/033301和WO 2015/033299中所述的化合物。
在一些情况下，PD-L1结合拮抗剂为抗PD-L1抗体。本文考虑并描述了多种抗PD-L1抗体。在本文的任何情况下，分离的抗PD-L1抗体可以与人PD-L1(例如UniProtKB/Swiss-Prot登录号Q9NZQ7-1中所示的人PD-L1，或其变体)结合。在一些情况下，抗PD-L1抗体能够抑制PD-L1与PD-1之间和/或PD-L1与B7-1之间的结合。在一些情况下，抗PD-L1抗体为单克隆抗体。在一些情况下，抗PD-L1抗体是选自由Fab、Fab'-SH、Fv、scFv和(Fab')2片段组成的组的抗体片段。在一些情况下，抗PD-L1抗体为人源化抗体。在一些情况下，抗PD-L1抗体为人抗体。示例性抗PD-L1抗体包括阿特珠单抗、MDX-1105、MEDI4736(德瓦鲁单抗)、MSB0010718C(阿维单抗)、SHR-1316、CS1001、恩沃利单抗、TQB2450、ZKAB001、LP-002、CX-072、IMC-001、KL-A167、APL-502、柯希利单抗、洛达利单抗、FAZ053、TG-1501、BGB-A333、BCD-135、AK-106、LDP、GR1405、HLX20、MSB2311、RC98、PDL-GEX、KD036、KY1003、YBL-007和HS-636。可用于本发明方法的抗PD-L1抗体的示例及其制备方法在国际专利申请公开号WO2010/077634和美国专利号8,217,149中描述，其各自通过引用整体并入本文。
在一些情况下，抗PD-L1抗体包含：
(a)分别为GFTFSDSWIH(SEQ ID NO:3)、AWISPYGGSTYYADSVKG(SEQ ID NO:4)和RHWPGGFDY(SEQ ID NO:5)的HVR-H1、HVR-H2和HVR-H3序列，和
(b)分别为RASQDVSTAVA(SEQ ID NO:6)、SASFLYS(SEQ ID NO:7)和QQYLYHPAT(SEQID NO:8)的HVR-L1、HVR-L2和HVR-L3序列。
在一个实施例中，抗PD-L1抗体包含：
(a)重链可变区(VH)，其包含氨基酸序列：EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDSWIHWVRQAPGKGLEWVAWISPYGGSTYYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCARRHWPGGFDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:9)，和
(b)轻链可变区(VL)，其包含氨基酸序列：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVSTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYLYHPATFGQGTKVEIKR(SEQ ID NO:10)。
在一些情况下，抗PD-L1抗体包含(a)VH，其包含与SEQ ID NO:9的序列具有至少95％序列同一性(例如，至少95％、96％、97％、98％或99％序列同一性)的氨基酸序列，或包含SEQ ID NO:9的序列；(b)VL，其包含与SEQ ID NO:10的序列具有至少95％序列同一性(例如，至少95％、96％、97％、98％或99％序列同一性)的氨基酸序列，或包含SEQID NO:10的序列；或(c)如(a)中所述的VH和如(b)中所述的VL。
在一个实施例中，抗PD-L1抗体包括阿特珠单抗，其包含：
(a)重链氨基酸序列：
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDSWIHWVRQAPGKGLEWVAWISPYGGSTYYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCARRHWPGGFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYASTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG(SEQ ID NO:1)，和
(b)轻链氨基酸序列：
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVSTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYLYHPATFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVD
NALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQID NO:2)。
在一些情况下，抗PD-L1抗体为阿维单抗(CAS登记号：1537032-82-8)。阿维单抗，也称为MSB0010718C，是人单克隆IgG1抗PD-L1抗体(默克集团(Merck KGaA)，辉瑞公司)。
在一些情况下，抗PD-L1抗体为度伐利尤单抗(CAS登记号：1428935-60-7)。德瓦鲁单抗，也称为MEDI4736，为WO 2011/066389和US2013/034559中所述的Fc优化的人单克隆IgG1 kappa抗PD-L1抗体(MedImmune，阿斯利康)。
在一些情况下，抗PD-L1抗体为MDX-1105(百时美施贵宝公司(Bristol MyersSquibb))。MDX-1105，也称为BMS-936559，为WO 2007/005874中所述的抗PD-L1抗体。
在一些情况下，抗PD-L1抗体为LY3300054(礼来公司(Eli Lilly))。
在一些情况下，抗PD-L1抗体为STI-A1014(索伦托公司)。STI-A1014是人抗PD-L1抗体。
在一些情况下，抗PD-L1抗体为KN035(苏州康宁杰瑞公司(Suzhou Alphamab))。KN035是从骆驼噬菌体展示文库生成的单结构域抗体(dAB)。
在一些情况下，抗PD-L1抗体包含可裂解的部分或接头，当被(例如，通过肿瘤微环境中的蛋白酶)裂解时，该部分或接头活化抗体抗原结合结构域以使其结合其抗原，例如，通过去除非结合空间部分进行。在一些情况下，抗PD-L1抗体为CX-072(CytomXTherapeutics)。
在一些情况下，抗PD-L1抗体包含来自以下专利中描述的抗PD-L1抗体的六个HVR序列(例如，三个重链HVR和三个轻链HVR)和/或重链可变结构域和轻链可变结构域：US20160108123、WO 2016/000619、WO 2012/145493、美国专利号9,205,148、WO 2013/181634或WO 2016/061142。
在更进一步具体方面，抗PD-L1抗体具有降低的或最小的效应子功能。在更进一步具体方面，最小的效应子功能来自“无效应子的Fc突变”或无糖基化突变。在更进一步的情况下，无效应子Fc突变是恒定区中的N297A或D265A/N297A取代。在更进一步的情况下，无效应子Fc突变是恒定区中的N297A取代。在一些情况下，分离的抗PD-L1抗体为无糖基化的。抗体的糖基化通常为N-连接或O-连接的。N-连接的是指碳水化合物部分连接至天冬酰胺残基的侧链。三肽序列天冬酰胺-X-丝氨酸和天冬酰胺-X-苏氨酸(其中X为脯氨酸以外的任何氨基酸)为用于将碳水化合物部分酶促连接至天冬酰胺侧链的识别序列。因此，多肽中这些三肽序列中任一者的存在产生潜在的糖基化位点。O-联糖基化是指糖N-乙酰基半乳糖胺、半乳糖或木糖中的一者与羟基氨基酸(最通常为丝氨酸或苏氨酸，尽管也可以使用5-羟基脯氨酸或5-羟基赖氨酸)的连接。通过改变氨基酸序列以去除上述三肽序列之一(对于N-连接的糖基化位点)，可以方便地从抗体去除糖基化位点。可以通过将糖基化位点内的天冬酰胺、丝氨酸或苏氨酸残基取代为另一氨基酸残基(例如，甘氨酸、丙氨酸或保守取代)来进行变异。
B.PD-1结合拮抗剂
在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂为PD-1结合拮抗剂。例如，在一些情况下，PD-1结合拮抗剂抑制PD-1与其配体结合配偶体中的一者或多者的结合。在一些情况下，PD-1结合拮抗剂抑制PD-1与PD-L1的结合。在其他情况下，PD-1结合拮抗剂抑制PD-1与PD-L2的结合。在又一些情况下，PD-1结合拮抗剂抑制PD-1与PD-L1和PD-L2两者的结合。PD-1结合拮抗剂可以是但不限于抗体、其抗原结合片段、免疫粘附素、融合蛋白、寡肽或小分子。在一些情况下，PD-1结合拮抗剂为免疫粘附素(例如，包含与恒定区(例如，免疫球蛋白序列的Fc区)融合的PD-L1或PD-L2的细胞外或PD-1结合部分的免疫粘附素)。例如，在一些情况下，PD-1结合拮抗剂为Fc融合蛋白。在一些情况下，PD-1结合拮抗剂为AMP-224。AMP-224也称为B7-DCIg，为WO 2010/027827和WO 2011/066342中所述的PD-L2-Fc融合可溶性受体。在一些情况下，PD-1结合拮抗剂为肽或小分子化合物。在一些情况下，PD-1结合拮抗剂为AUNP-12(皮尔法伯公司(PierreFabre)/Aurigene)。参见例如，WO 2012/168944、WO 2015/036927、WO2015/044900、WO 2015/033303、WO2013/144704、WO 2013/132317和WO 2011/161699。在一些情况下，PD-1结合拮抗剂为抑制PD-1的小分子。
在一些情况下，PD-1结合拮抗剂为抗PD-1抗体。在本文公开的方法和用途中可以利用多种抗PD-1抗体。在本文的任何情况下，PD-1抗体可以与人PD-1或其变体结合。在一些情况下，抗PD-1抗体为单克隆抗体。在一些情况下，抗PD-1抗体为选自由以下项组成的组的抗体片段：Fab、Fab'、Fab'-SH、Fv、scFv和(Fab')2片段。在一些情况下，抗PD-1抗体为人源化抗体。在其他情况下，抗PD-1抗体为人抗体。示例性的抗PD-1拮抗剂抗体包括纳武单抗、帕博利珠单抗、MEDI-0680、PDR001(斯巴达珠单抗)、REGN2810(西米普利单抗)、BGB-108、帕洛利单抗、卡瑞利珠单抗、信迪利单抗、替雷利珠单抗、特瑞普利单抗、多塔利单抗、瑞弗利单抗、萨善利单抗、派安普利单抗、CS1003、HLX10、SCT-I10A、赛帕利单抗、巴替利单抗、杰诺单抗、BI 754091、西利单抗、YBL-006、BAT1306、HX008、布格利单抗、AMG 404、CX-188、JTX-4014、609A、Sym021、LZM009、F520、SG001、AM0001、ENUM 244C8、ENUM 388D4、STI-1110、AK-103和hAb21。
在一些情况下，抗PD-1抗体为纳武利尤单抗(CAS登记号：946414-94-4)。纳武单抗(百时美施贵宝/大野制药(Ono))，也称为MDX-1106-04、MDX-1106、ONO-4538、BMS-936558和为WO 2006/121168中所述的抗PD-1抗体。
在一些情况下，抗PD-1抗体为帕博利珠单抗(CAS登记号：1374853-91-4)。帕博利珠单抗(默克)，也称为MK-3475、Merck3475、派姆单抗、SCH-900475和为WO 2009/114335中所述的抗PD-1抗体。
在一些情况下，抗PD-1抗体为MEDI-0680(AMP-514；阿斯利康)。MEDI-0680为人源化IgG4抗PD-1抗体。
在一些情况下，抗PD-1抗体为PDR001(CAS注册号1859072-53-9；诺华)。PDR001为人源化IgG4抗PD-1抗体，可阻断PD-L1和PD-L2与PD-1的结合。
在一些情况下，抗PD-1抗体为REGN2810(再生元公司(Regeneron))。REGN2810是人抗PD-1抗体。
在一些情况下，抗PD-1抗体为BGB-108(百济神州)。
在一些情况下，抗PD-1抗体为BGB-A317(百济神州)。
在一些情况下，抗PD-1抗体为JS-001(上海君实生物)。JS-001为人源化抗PD-1抗体。
在一些情况下，抗PD-1抗体为STI-A1110(索伦托公司)。STI-A1110是人抗PD-1抗体。
在一些情况下，抗PD-1抗体为INCSHR-1210(因赛特医疗公司(Incyte))。INCSHR-1210为人IgG4抗PD-1抗体。
在一些情况下，抗PD-1抗体为PF-06801591(辉瑞公司)。
在一些情况下，抗PD-1抗体为TSR-042(也称为ANB011；Tesaro/AnaptysBio)。
在一些情况下，抗PD-1抗体为AM0001(ARMO Biosciences)。
在一些情况下，抗PD-1抗体为ENUM 244C8(Enumeral Biomedical Holdings)。ENUM 244C8为抗PD-1抗体，可抑制PD-1的功能而不阻止PD-L1与PD-1的结合。
在一些情况下，抗PD-1抗体为ENUM 388D4(Enumeral Biomedical Holdings)。ENUM 388D4是抗PD-1抗体，可竞争性抑制PD-L1与PD-1的结合。
在一些情况下，抗PD-1抗体包含来自以下专利中所述的抗PD-1抗体的六个HVR序列(例如，三个重链HVR和三个轻链HVR)和/或重链可变结构域和轻链可变结构域：WO 2015/112800、WO 2015/112805、WO 2015/112900、US20150210769、WO2016/089873、WO 2015/035606、WO 2015/085847、WO 2014/206107、WO 2012/145493、US 9,205,148、WO 2015/119930、WO 2015/119923、WO 2016/032927、WO 2014/179664、WO 2016/106160和WO 2014/194302。
在更进一步具体方面，抗PD-1抗体具有降低的或最小的效应子功能。在更进一步具体方面，最小的效应子功能来自“无效应子的Fc突变”或无糖基化突变。在更进一步的情况下，无效应子Fc突变是恒定区中的N297A或D265A/N297A取代。在一些情况下，分离的抗PD-1抗体为无糖基化的。
C.PD-L2结合拮抗剂
在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂为PD-L2结合拮抗剂。在一些情况下，PD-L2结合拮抗剂为抑制PD-L2与其配体结合配偶体结合的分子。在一个具体方面，PD-L2结合配体配偶体为PD-1。PD-L2结合拮抗剂可以是但不限于抗体、其抗原结合片段、免疫粘附素、融合蛋白、寡肽或小分子。
在一些情况下，PD-L2结合拮抗剂为抗PD-L2抗体。在本文的任何情况下，抗PD-L2抗体可以与人PD-L2或其变体结合。在一些情况下，抗PD-L2抗体为单克隆抗体。在一些情况下，抗PD-L2抗体为选自由以下项组成的组的抗体片段：Fab、Fab'、Fab'-SH、Fv、scFv和(Fab')2片段。在一些情况下，抗PD-L2抗体为人源化抗体。在其他情况下，抗PD-L2抗体为人抗体。在更进一步具体方面，抗PD-L2抗体具有降低的或最小的效应子功能。在更进一步具体方面，最小的效应子功能来自“无效应子的Fc突变”或无糖基化突变。在更进一步的情况下，无效应子Fc突变是恒定区中的N297A或D265A/N297A取代。在一些情况下，分离的抗PD-L2抗体为无糖基化的。
XI.靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体
A.结合PD-1和LAG3的示例性双特异性抗体
在一个方面，本发明提供了一种双特异性抗体，其包含特异性结合至PD-1的第一抗原结合结构域和特异性结合至LAG3的第二抗原结合结构域，其中特异性结合至PD-1的所述第一抗原结合结构域包含VH结构域，其包含：
(i)HVR-H1，其包含GFSFSSY(SEQ ID NO:35)的氨基酸序列，
(ii)HVR-H2，其包含氨基酸序列GGR，和
(iii)HVR-H3，其包含TGRVYFALD(SEQ ID NO:37)的氨基酸序列；以及VL结构域，其包含：
(i)HVR-L1，其包含SESVDTSDNSF(SEQ ID NO:38)的氨基酸序列；
(ii)HVR-L2，其包含氨基酸序列RSS，和
(iii)HVR-L3，其包含NYDVPW(SEQ ID NO:40)的氨基酸序列。
在一个方面，双特异性抗体包含Fc结构域，所述Fc结构域是IgG，具体地是IgG1 Fc结构域或IgG4 Fc结构域，并且其中Fc结构域具有降低或甚至消除的效应子功能。特定而言，Fc结构域包含一个或多个氨基酸取代，所述一个或多个氨基酸取代减少与Fc受体的结合，特定而言与Fcγ受体的结合。
在另一方面，提供了一种包含特异性结合至PD-1的第一抗原结合结构域和特异性结合至LAG3的第二抗原结合结构域的双特异性抗体，其中双特异性抗体包含Fc结构域，该Fc结构域为IgG，特别是IgG1 Fc结构域或IgG4 Fc结构域，并且其中Fc结构域包含一个或多个氨基酸取代，所述一个或多个氨基酸取代减少与Fc受体的结合，特定而言与Fcγ受体的结合。
在另一方面，提供了一种双特异性抗体，其包含特异性结合至PD-1的第一抗原结合结构域和特异性结合至LAG3的第二抗原结合结构域，其中特异性结合至LAG3的第二抗原结合结构域包含
VH结构域，其包含：
(i)HVR-H1，其包含DYTMN(SEQ ID NO:43)的氨基酸序列，
(ii)HVR-H2，其包含VISWDGGGTYYTDSVKG(SEQ ID NO:44)的氨基酸序列，和
(iii)HVR-H3，其包含GLTDTTLYGSDY(SEQ ID NO:45)的氨基酸序列；以及
VL结构域，其包含：
(i)HVR-L1，其包含RASQSISSYLN(SEQ ID NO:46)的氨基酸序列，
(ii)HVR-L2，其包含AASTLQS(SEQ ID NO:47)的氨基酸序列，和
(iii)HVR-L3，其包含QQTYSSPLT(SEQ ID NO:48)的氨基酸序列。
在另一方面，提供了一种双特异性抗体，其包含特异性结合至PD-1的第一抗原结合结构域和特异性结合至LAG3的第二抗原结合结构域，其中特异性结合至PD-1的第一抗原结合结构域包含
VH结构域，其包含
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFSFSSYTMSWVRQAPGKGLE
WVATISGGGRDIYYPDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVLLTGRVYFALDSWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:41)的氨基酸序列；以及VL结构域，其包含
DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKASESVDTSDNSFIHWYQQKPGQSPKLLIYRSSTLESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQNYDVPWTFGQGTKVEIK(SEQ ID NO:42)的氨基酸序列。
在另一方面，提供了一种双特异性抗体，其包含特异性结合至PD-1的第一抗原结合结构域和特异性结合至LAG3的第二抗原结合结构域，其中特异性结合至LAG3的第二抗原结合结构域包含
VH结构域，其包含EVQLLESGGGLVQPGGSLRL
SCAASGFIFDDYTMNWVRQAPGKGLEWVAVISWDGGGTYYTDSVKGRFTISRDDFKNTLY
LQMNSLRAEDTAVYYCAKGLTDTTLYGSDYWGQGTLVTVSS(SEQID NO:49)的氨基酸序列；以及VL结构域，其包含
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASTLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQTYSSPLTFGGGTKVEIK(SEQ ID NO:50)的氨基酸序列。
在一个特定方面，提供了一种双特异性抗体，其包含特异性结合至PD-1的第一抗原结合结构域和特异性结合至LAG3的第二抗原结合结构域，其中
特异性结合至PD-1的第一抗原结合结构域包含：VH结构域，其包含SEQ ID NO:41的氨基酸序列；以及VL结构域其包含SEQ ID NO:42的氨基酸序列，
并且特异性结合至LAG3的第二抗原结合结构域包含：VH结构域和，其包含SEQ IDNO:49的氨基酸序列；以及VL结构域，其包含SEQ ID NO:50的氨基酸序列。
在另一方面，包含特异性结合至PD-1的第一抗原结合结构域和特异性结合至LAG3的第二抗原结合结构域的双特异性抗体为人抗体、人源化抗体或嵌合抗体。具体地，所述抗体是人源化或嵌合抗体。
在一个方面，包含特异性结合至PD-1的第一抗原结合结构域和特异性结合至LAG3的第二抗原结合结构域的双特异性抗体为二价的。这意指双特异性抗体包含特异性结合至PD-1的一个抗原结合结构域和特异性结合至LAG3的一个抗原结合结构域(1+1形式)。
在一个方面，提供了一种包含特异性结合至PD-1的第一抗原结合结构域和特异性结合至LAG3的第二抗原结合结构域的双特异性抗体，其中双特异性抗体包含：Fc结构域；第一Fab片段，其包含特异性结合至PD-1的抗原结合结构域；和第二Fab片段，其包含特异性结合至LAG3的抗原结合结构域。在一个特定方面，在Fab片段中的一个中，可变结构域VL和VH彼此替换，使得VH结构域是轻链的一部分而VL结构域是重链的一部分。在一个特定方面，在包含特异性结合至PD-1的抗原结合结构域的第一Fab片段中，可变结构域VL和VH彼此替换。
在一个特定方面，提供了一种包含特异性结合至PD-1的第一抗原结合结构域和特异性结合至LAG3的第二抗原结合结构域的双特异性抗体，其中双特异性抗体包含
第一重链，其包含与SEQ ID NO:51的序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；第一轻链，其包含与SEQ ID NO:52的序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；
第二重链，其包含与SEQ ID NO:53的序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；第二轻链，其包含与SEQ ID NO:54的序列具有至少95％
序列同一性的氨基酸序列。
更特定地，双特异性抗体包含：第一重链，其包含SEQ ID NO:96的氨基酸序列；第一轻链，其包含SEQ ID NO:98的氨基酸序列；第二重链，其包含SEQ ID NO:100的氨基酸序列；第二轻链，其包含SEQ ID NO:101的氨基酸序列(RO7247699)。
在另一方面，提供了一种包含特异性结合至PD-1的第一抗原结合结构域和特异性结合至LAG3的第二抗原结合结构域的双特异性抗体，其中双特异性抗体包含：Fc结构域；第一Fab片段，其包含特异性结合至PD-1的抗原结合结构域；和第二Fab片段，其包含特异性结合至LAG3的抗原结合结构域，该第二Fab片段融合至Fc结构域的C末端。特定地，包含特异性结合至LAG3的抗原结合结构域的Fab片段经由其VH结构域融合至Fc结构域的C末端(反式1+1形式)。
在特定方面，双特异性抗体包含：第一重链，其包含与SEQ ID NO:51的序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；第一轻链，其包含与SEQ ID NO:52的序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；第二重链，其包含与SEQ ID NO:73的序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；和第二轻链，其包含与SEQ ID NO:54的序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列。更特定地，双特异性抗体包含：第一重链，其包含SEQ ID NO:51的氨基酸序列；第一轻链，其包含SEQ ID NO:52的氨基酸序列；第二重链，其包含SEQ ID NO:73的氨基酸序列；和第二轻链，其包含SEQ ID NO:54的氨基酸序列。
i.减少Fc受体结合和/或效应子功能的Fc结构域修饰
在某些方面，提供了一种包含特异性结合至PD-1的第一抗原结合结构域和特异性结合至LAG3的第二抗原结合结构域的双特异性抗体，其中双特异性抗体包含Fc结构域，该Fc结构域包含一个或多个氨基酸修饰，所述一个或多个氨基酸修饰减少与Fc受体的结合，特定而言与Fcγ受体的结合，并且降低或消除效应子功能。
在某些方面，一个或多个氨基酸修饰可引入本文提供的抗体的Fc区中，从而生成Fc区变体。Fc区变体可包含人Fc区序列(例如，人IgG1、IgG2、IgG3或IgG4 Fc区)，其在一个或多个氨基酸位置处包含氨基酸修饰(例如，取代)。
以下章节描述了包含减少Fc受体结合和/或效应子功能的Fc结构域修饰的本发明的双特异性抗原结合分子的优选的方面。在一个方面，本发明涉及一种包含特异性结合至PD-1的第一抗原结合结构域和特异性结合至LAG3的第二抗原结合结构域的双特异性抗体，其中Fc结构域包含一个或多个氨基酸取代，所述一个或多个氨基酸取代减少与Fc受体的结合，特定而言与Fcγ受体的结合。具体地，Fc结构域属于人IgG1亚类，具有氨基酸突变L234A、L235A和P329G(根据Kabat EU索引编号)。
Fc结构域对本发明的双特异性抗体赋予有利的药代动力学特性，包括有助于靶组织中的良好积聚的长血清半衰期和有利的组织-血液分配比率。然而，与此同时，可能导致本发明的双特异性抗体不期望地靶向表达Fc受体的细胞，而不是优选的抗原携带细胞。因此，在特定实施例中，与天然IgG Fc结构域，具体地是IgG1 Fc结构域或IgG4 Fc结构域相比，本发明的双特异性抗体的Fc结构域表现出降低的对Fc受体的结合亲和力和/或降低的效应子功能。更具体地，Fc结构域是IgG1 FC结构域。
在一个此类方面，与天然IgG1 Fc结构域(或包含天然IgG1 Fc结构域的本发明的双特异性抗原结合分子)相比，该Fc结构域(或包含该Fc结构域的本发明的双特异性抗原结合分子)表现出对Fc受体的结合亲和力的小于50％、优选地少小20％、更优选地小于10％且最优选地小于5％；和/或与天然IgG1 Fc结构域(或包含天然IgG1 Fc结构域的本发明的双特异性抗原结合分子)相比，该Fc结构域(或包含该Fc结构域的本发明的双特异性抗原结合分子)表现出效应子功能的小于50％、优选地小于20％、更优选地小于10％且最优选地小于5％。在一方面，Fc结构域(或包含所述Fc结构域的本发明的双特异性抗原结合分子)不显著结合Fc受体和/或诱导效应子功能。在特定方面，Fc受体为Fcγ受体。在一个方面，Fc受体是人Fc受体。在一个方面，Fc受体是活化性Fc受体。在一个具体方面，Fc受体是活化性人Fcγ受体，更具体地是人FcγRIIIa、FcγRI或FcγRIIa，最具体地是人FcγRIIIa。在一个方面，Fc受体是抑制性Fc受体。在一个具体方面，Fc受体为抑制性人Fcγ受体，更具体地为人FcγRIIB。在一个方面，效应子功能是CDC、ADCC、ADCP和细胞因子分泌中的一者或多者。在特定方面，效应子功能为ADCC。在一个方面，与天然IgG1 Fc结构域相比较，Fc结构域表现出基本上类似的对新生Fc受体(FcRn)的结合亲和力。当Fc结构域(或包含所述Fc结构域的本发明的双特异性抗原结合分子)表现出天然IgG1 Fc结构域(或包含天然IgG1 Fc结构域的本发明的双特异性抗原结合分子)对FcRn的结合亲和力的大于约70％、具体地大于约80％、更具体地大于约90％时，实现了基本上类似的与FcRn的结合。
在特定方面，Fc结构域经过工程化改造，以与非工程化改造的Fc结构域相比具有降低的对Fc受体的结合亲和力和/或降低的效应子功能。在特定方面，本发明的双特异性抗原结合分子的Fc结构域包含降低Fc结构域对Fc受体的结合亲和力和/或效应子功能的一个或多个氨基酸突变。典型地，相同的一个或多个氨基酸突变存在于Fc结构域的两个亚基中的每一个中。在一个方面，氨基酸突变降低Fc结构域对Fc受体的结合亲和力。在另一方面，氨基酸突变将Fc结构域对Fc受体的结合亲和力降低至少2倍、至少5倍或至少10倍。在一个方面，与包含非工程化改造的Fc结构域的本发明的双特异性抗体相比，包含工程化改造的Fc结构域的本发明的双特异性抗原结合分子表现出对Fc受体的结合亲和力的少于20％、具体地少于10％、更具体地少于5％。在特定方面，Fc受体是Fcγ受体。在其他方面，Fc受体是人Fc受体。在一个方面，Fc受体是抑制性Fc受体。在一个具体方面，Fc受体为抑制性人Fcγ受体，更具体地为人FcγRIIB。在一些方面，Fc受体是活化Fc受体。在一个具体方面，Fc受体是活化性人Fcγ受体，更具体地是人FcγRIIIa、FcγRI或FcγRIIa，最具体地是人FcγRIIIa。优选地，与这些受体中的每一个的结合降低。在一些方面，对互补组分的结合亲和力，尤其对C1q的特异性结合亲和力也降低了。在一个方面，对新生Fc受体(FcRn)的结合亲和力不降低。当Fc结构域(或包含所述Fc结构域的本发明的双特异性抗原结合分子)表现出Fc结构域的非工程化改造形式(或包含Fc结构域的所述非工程化改造形式的本发明的双特异性抗原结合分子)对FcRn的结合亲和力的大于约70％时，实现了基本上类似的与FcRn的结合，即实现了Fc结构域对所述受体的结合亲和力的保留。Fc结构域或包含所述Fc结构域的本发明的双特异性抗原结合分子可表现出这种亲和力的大于约80％或甚至大于约90％。在某些实施例中，本发明的双特异性抗原结合分子的Fc结构域被工程化改造，以相比于非工程化改造的Fc结构域具有降低的效应子功能。降低的效应子功能可以包括但不限于以下中的一个或多个：降低的补体依赖性细胞毒性(CDC)、降低的抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)、降低的抗体依赖性细胞吞噬(ADCP)、减少的细胞因子分泌、减少的免疫复合物介导的抗原呈递细胞的抗原摄取、减少的与NK细胞的结合、减少的与巨噬细胞的结合、减少的与单核细胞的结合、减少的与多形核细胞的结合、减少的直接信号传导诱导性细胞凋亡、降低的树突细胞成熟或减少的T细胞引发。
具有降低的效应子功能的抗体包括具有Fc区残基238、265、269、270、297、327和329中一个或多个的取代的那些(美国专利号6,737,056)。此类Fc突变体包括在氨基酸位置265、269、270、297和327处的两个或更多个处具有取代的Fc突变体，包括所谓的“DANA”Fc突变体，其残基265和297被取代为丙氨酸(美国专利号7,332,581)。描述了具有改善的或降低的与FcR的结合的某些抗体变体。(参见例如，美国专利号6,737,056；WO 2004/056312；以及Shields,R.L.等人,J.Biol.Chem.276(2001)6591-6604)。
在本发明的一个方面，Fc结构域在E233、L234、L235、N297、P331和P329位处包含氨基酸取代。在一些方面，Fc结构域包含氨基酸取代L234A和L235A(“LALA”)。在一个这样的实施例中，Fc结构域是IgG1Fc结构域，特别是人IgG1 Fc结构域。在一个方面，所述Fc结构域在位置P329处包含氨基酸取代。在一个更具体的方面，氨基酸取代是P329A或P329G，特别是P329G。在一个实施例中，Fc结构域在位置P329处包含氨基酸取代并且包含选自由E233P、L234A、L235A、L235E、N297A、N297D或P331S组成的组的另外的氨基酸取代。在更特定的实施例中，Fc结构域包含氨基酸突变L234A、L235A和P329G(“P329G LALA”)。氨基酸取代的“P329G LALA”组合几乎完全消除人IgG1 Fc结构域的Fcγ受体结合，如PCT专利申请No.WO2012/130831 A1中所述。所述文档还描述了制备此类突变Fc结构域的方法和用于确定其性质(诸如Fc受体结合或效应子功能)的方法。此类抗体为具有突变L234A和L235A或具有突变L234A、L235A和P329G的IgG1(根据以下文献所述的EU索引编号：Kabat等人,Sequences ofProteins of Immunological Interest,第5版,Public Health Service,NationalInstitutes of Health,Bethesda,MD,1991)。
在一个方面，本发明的双特异性抗体包含(所有位置均根据Kabat的EU索引)(i)任选地具有突变P329G、L234A和L235A的人IgG1亚类的同二聚体Fc区，或(ii)任选地具有突变P329G、S228P和L235E的人IgG4亚类的同二聚体Fc区，或(iii)任选地具有突变P329G、L234A、L235A、I253A、H310A和H435A，或任选地具有突变P329G、L234A、L235A、H310A、H433A和Y436A的人IgG1亚类的同二聚体Fc区，或(iv)异二聚体Fc区，其中一个Fc区多肽包含突变T366W并且另一个Fc区多肽包含突变T366S、L368A和Y407V，或者其中一个Fc区多肽包含突变T366W和Y349C并且另一个Fc区多肽包含突变T366S、L368A、Y407V和S354C，或者其中一个Fc区多肽包含突变T366W和S354C并且另一个Fc区多肽包含突变T366S、L368A、Y407V和Y349C，或(v)人IgG1亚类的异二聚体Fc区，其中两个Fc区多肽均包含突变P329G、L234A和L235A，并且一个Fc区多肽包含突变T366W，而另一个Fc区多肽包含突变T366S、L368A和Y407V；或其中一个Fc区多肽包含突变T366W和Y349C，而另一个Fc区多肽包含突变T366S、L368A、Y407V和S354C；或其中一个Fc区多肽包含突变T366W和S354C，并且另一个Fc区多肽包含突变T366S、L368A、Y407V和Y349C。
在一个方面，Fc结构域为IgG4 Fc结构域。在一个更具体的实施例中，Fc结构域是在S228位处(Kabat编号)包含氨基酸取代，具体地是氨基酸取代S228P的IgG4 Fc结构域。在一个更具体的实施例中，Fc结构域是包含氨基酸取代L235E和S228P以及P329G的IgG4 Fc结构域。这种氨基酸取代减少IgG4抗体的体内Fab臂交换(参见Stubenrauch等人，DrugMetabolism and Disposition 38,84-91(2010))。因此，在一个方面，提供了一种双特异性抗体，其包含(所有位置均根据Kabat的EU索引)人IgG4亚类的异二聚体Fc区，其中两个Fc区多肽均包含突变P329G、S228P和L235E并且一个Fc区多肽包含突变T366W而另一个Fc区多肽包含突变T366S、L368A和Y407V，或者其中一个Fc区多肽包含突变T366W和Y349C并且另一个Fc区多肽包含突变T366S、L368A、Y407V和S354C，或者其中一个Fc区多肽包含突变T366W和S354C并且另一个Fc区多肽包含突变T366S、L368A、Y407V和Y349C。
具有增加的半衰期和改善的与新生儿Fc受体(FcRn)的结合，负责将母体IgG转移至胎儿的抗体(Guyer,R.L.等人,J.Immunol.117(1976)587-593；和Kim,J.K.等人,J.Immunol.24(1994)2429-2434)描述于US 2005/0014934中。那些抗体包含Fc区，该Fc区中具有改善Fc区与FcRn的结合的一个或多个取代。此类Fc变体包括在以下Fc区残基中的一处或多处具有取代的Fc变体：238、256、265、272、286、303、305、307、311、312、317、340、356、360、362、376、378、380、382、413、424或434，例如对Fc区残基434的取代(美国专利号7,371,826)。关于Fc区变体的其他实例，另外参见Duncan,A.R.和Winter,G.,Nature 322(1988)738-740；US 5,648,260；US 5,624,821；以及WO 94/29351。
与Fc受体的结合可例如通过ELISA或通过表面等离子体共振(SPR)使用标准仪器(诸如BIAcore仪器(GE Healthcare))容易地确定，并且Fc受体诸如可以通过重组表达获得。本文描述了合适的此类结合测定。替代性地，可以使用已知表达特定Fc受体的细胞系(诸如表达FcγIIIa受体的人NK细胞)来评估Fc结构域或包含Fc结构域的细胞活化双特异性抗原结合分子对Fc受体的结合亲和力。Fc结构域的效应子功能，或本发明的包含Fc结构域的双特异性抗体，可以通过本领域已知的方法来测量。本文描述了用于测量ADCC的合适测定。用于评定目的分子的ADCC活性的体外测定的其他实例描述于以下文献中：美国专利号5,500,362；Hellstrom等人Proc Natl Acad Sci USA 83,7059-7063(1986)；以及Hellstrom等人,Proc Natl Acad Sci USA 82,1499-1502(1985)；美国专利号5,821,337；Bruggemann等人,J Exp Med 166,1351-1361(1987)。另选地，可以使用非放射性测定方法(参见例如，用于流式细胞术的ACTITM非放射性细胞毒性测定(CellTechnology,Inc.Mountain View,CA)；以及CytoTox非放射性细胞毒性测定(Promega,Madison,WI))。用于此类测定的有用效应细胞包括外周血单核细胞(PBMC)和自然杀伤(NK)细胞。替代性地或另外地，可例如在诸如在Clynes等人，Proc Natl Acad Sci USA 95,652-656(1998)中公开的动物模型中体内评定目的分子的ADCC活性。
以下部分描述了包含降低Fc受体结合和/或效应子功能的Fc结构域修饰的本发明的双特异性抗体的优选方面。在一个方面，本发明涉及双特异性抗体，其包含特异性结合至PD-1的第一抗原结合结构域和特异性结合至LAG3的第二抗原结合结构域，其中Fc结构域包含一个或多个氨基酸取代，所述一个或多个氨基酸取代降低抗体与Fc受体的结合亲和力，特别是对Fcγ受体的结合亲和力。在另一方面，本发明涉及双特异性抗体，其包含特异性结合至PD-1的第一抗原结合结构域和特异性结合至LAG3的第二抗原结合结构域，其中Fc结构域包含降低效应子功能的一个或多个氨基酸取代。在特定的方面，Fc结构域属于人IgG1亚类，其具有氨基酸突变L234A、L235A和P329G(根据Kabat EU索引编号)。
ii.促进异源二聚化的Fc结构域修饰
本发明的双特异性抗原结合分子包含融合至Fc结构域的两个亚基中的一个或另一个亚基的不同抗原结合位点，因此该Fc结构域的两个亚基可包含在两个不相同的多肽链中。这些多肽的重组共表达和随后的二聚化导致了两种多肽的几种可能的组合。为了在重组生产中提高本发明的双特异性抗体的产率和纯度，因此在本发明的双特异性抗原结合分子的Fc结构域中引入促进所需多肽的缔合的修饰将是有利的。
因此，在特定方面，本发明涉及一种包含特异性结合至PD-1的第一抗原结合结构域和特异性结合至LAG3的第二抗原结合结构域的双特异性抗体，其中Fc结构域包含促进该Fc结构域的第一亚基和第二亚基的缔合的修饰。人IgG Fc结构域的两个亚基之间最广泛的蛋白质间相互作用位点在Fc结构域的CH3结构域中。因此，在一个方面，所述修饰在Fc结构域的CH3结构域中。
在具体方面，该修饰是所谓的“杵臼结构”修饰，该修饰包括Fc结构域的两个亚基中的一个中的“杵”修饰和Fc结构域的两个亚基中的另一个中的“臼”修饰。因此，本发明涉及一种双特异性抗体，其包含特异性结合至PD-1的第一抗原结合结构域和特异性结合至LAG3的第二抗原结合位点，其中根据杵臼方法，Fc结构域的第一亚基包含杵并且Fc结构域的第二亚基包含臼。在特定方面，Fc结构域的第一亚基包含氨基酸取代S354C和T366W(EU编号)并且Fc结构域的第二亚基包含氨基酸取代Y349C、T366S和Y407V(根据Kabat EU索引编号)。
杵臼技术描述于例如US 5,731,168；US 7,695,936；Ridgway等人,Prot Eng 9,617-621(1996)；和Carter,J Immunol Meth 248,7-15(2001)中。通常，该方法涉及在第一多肽的界面处引入突起(“杵”)并在第二多肽的界面中引入相应的空腔(“臼”)，使得该突起可以定位在该空腔中，以便促进异二聚体的形成并阻碍同二聚体的形成。突起是通过用较大侧链(例如，酪氨酸或色氨酸)取代来自第一多肽的界面的小氨基酸侧链而构建的。具有与突起相同或相似大小的补偿空腔是通过用较小的氨基酸侧链(例如，丙氨酸或苏氨酸)取代大氨基酸侧链而在第二多肽的界面中创建的。
因此，在一个方面，在本发明的双特异性抗原结合分子的Fc结构域的第一亚基的CH3结构域中，氨基酸残基被具有较大侧链体积的氨基酸残基替代，从而在第一亚基的CH3结构域内产生突起，该突起可定位于第二亚基的CH3结构域内的空腔中，并且在Fc结构域的第二亚基的CH3结构域中，氨基酸残基被具有较小侧链体积的氨基酸残基替代，从而在第二亚基的CH3结构域内产生空腔，第一亚基的CH3结构域内的突起可定位在该空腔内。凸起和空腔可以通过改变编码多肽的核酸(例如，通过位点特异性诱变或通过肽合成)来制备。在具体方面，在Fc结构域的第一亚基的CH3结构域中，在位置366处的苏氨酸残基被色氨酸残基(T366W)替代，而在Fc结构域的第二亚基的CH3结构域中，在位置407处的酪氨酸残基被缬氨酸残基(Y407V)替代。在一个方面，另外在Fc结构域的第二亚基中，366位处的苏氨酸残基被丝氨酸残基(T366S)替代，并且368位处的亮氨酸残基被丙氨酸残基(L368A)替代。
在又进一步的方面，另外在Fc结构域的第一亚基中，354位处的丝氨酸残基被半胱氨酸残基(S354C)替代，并且另外在Fc结构域的第二亚基中，349位的酪氨酸残基被半胱氨酸残基(Y349C)替代。引入这两个半胱氨酸残基导致在Fc结构域的两个亚基之间形成二硫桥，从而进一步稳定化二聚体(Carter(2001),J Immunol Methods 248,7-15)。在特定方面，Fc结构域的第一亚基包含氨基酸取代S354C和T366W(EU编号)并且Fc结构域的第二亚基包含氨基酸取代Y349C、T366S和Y407V(根据Kabat EU索引编号)。
但是，也可以替代地或另外地使用如EP 1 870 459所述的其他杵臼结构技术。在一个实施例中，多特异性抗体包含“杵链”的CH3结构域中的突变R409D和K370E，以及“臼链”的CH3结构域中的突变D399K和E357K(根据Kabat EU索引编号)。
在一个方面中，双特异性抗体包含“杵链”的CH3结构域中的T366W突变和“臼链”的CH3结构域中的突变T366S、L368A和Y407V，以及另外“杵链”的CH3结构域中的突变R409D和K370E和“臼链”的CH3结构域中的突变D399K和E357K(根据Kabat EU索引编号)。
在一个方面中，双特异性抗体包含在所述两个CH3结构域中的一个中的突变Y349C和T366W和在所述两个CH3结构域中的另一个中的突变S354C、T366S、L368A和Y407V，或者多特异性抗体包含在所述两个CH3结构域中的一个中的突变Y349C和T366W和在所述两个CH3结构域中的另一个中的突变S354C、T366S、L368A和Y407V以及另外在“杵链”的CH3结构域中的突变R409D和K370E和在“臼链”的CH3结构域中的突变D399K和E357K(根据Kabat EU索引编号)。
在替代方面，促进Fc结构域的第一亚基和第二亚基缔合的修饰包括介导静电转向效应的修饰，例如如在PCT公开WO 2009/089004中所述。一般而言，该方法涉及用带电荷的氨基酸残基取代两个Fc结构域亚基的界面处的一个或多个氨基酸残基，使得同源二聚体形成变得在静电上不利，但异源二聚化在静电上有利。
除了“杵臼结构技术”之外，用于修饰多特异性抗体的重链的CH3结构域以实施异源二聚化的其他技术也是本领域中已知的。这些技术，尤其是在WO 96/27011、WO 98/050431、EP 1870459、WO 2007/110205、WO 2007/147901、WO 2009/089004、WO 2010/129304、WO 2011/90754、WO 2011/143545、WO 2012/058768、WO 2013/157954和WO 2013/096291中描述的技术，在本文中被认为是“杵臼结构技术”与双特异性抗体的组合的替代方案。
在一个方面中，在双特异性抗体中，使用EP 1870459中描述的方法来支持多特异性抗体的第一重链和第二重链的异源二聚化。该方法基于在第一和第二重链两者之间的CH3/CH3-结构域-界面中的特定氨基酸位处引入带相反电荷的带电氨基酸。
因此，在多特异性抗体的三级结构的该方面中，第一重链的CH3结构域和第二重链的CH3结构域形成位于相应的抗体CH3结构域之间的界面，其中第一重链的CH3结构域的相应氨基酸序列和第二重链的CH3结构域的氨基酸序列各自包含位于所述抗体的三级结构中的所述界面内的一组氨基酸，其中从位于一条重链的CH3结构域中的界面中的所述一组氨基酸，第一氨基酸被带正电荷的氨基酸取代，并且从位于另一条重链的CH3结构域中的界面中的所述一组氨基酸，第二氨基酸被带负电荷的氨基酸取代。根据该方面的双特异性抗体在本文中也称为“CH3(+/-)工程化的双特异性抗体”(其中缩写“+/-”代表在相应CH3结构域中引入的带相反电荷的氨基酸)。
在一个方面中，在CH3(+/-)工程化的双特异性抗体中，带正电荷的氨基酸选自K、R和H，而带负电荷的氨基酸选自E或D。
在一个方面中，在CH3(+/-)工程化的双特异性抗体中，带正电荷的氨基酸选自K和R，而带负电荷的氨基酸选自E或D。
在一个方面中，在CH3(+/-)工程化的双特异性抗体中，带正电荷的氨基酸是K，而带负电荷的氨基酸是E。
在一个方面中，在一条重链的CH3结构域中的CH3(+/-)工程化的双特异性抗体中，409位处的氨基酸R被D取代并且位处的氨基酸K被E取代，而在另一条重链的CH3结构域中，399位的氨基酸D被K取代并且357位处的氨基酸E被K取代(根据Kabat EU索引编号)。
在一个方面中，使用WO 2013/157953中描述的方法来支持多特异性抗体的第一重链和第二重链的异源二聚化。在一个实施例中，在一条重链的CH3结构域中，366位处的氨基酸T被K取代，而在另一条重链的CH3结构域中，351位处的氨基酸L被D取代(根据Kabat EU索引编号)。在另一个实施例中，在一条重链的CH3结构域中，366位处的氨基酸T被K取代并且351位处的氨基酸L被K取代，而在另一条重链的CH3结构域中，351位处的氨基酸L被D取代(根据Kabat EU索引编号)。
在另一个方面中，在一条重链的CH3结构域中，366位处的氨基酸T被K取代并且351位处的氨基酸L被K取代，而在另一条重链的CH3结构域中，351位处的氨基酸L被D取代(根据Kabat EU索引编号)。另外，下列取代中的至少一种取代包含在另一条重链的CH3结构域中：349位处的氨基酸Y被E取代，349位处的氨基酸Y被D取代，并且368位处的氨基酸L被E取代(根据Kabat EU索引编号)。在一个实施例中，368位处的氨基酸L被E取代(根据Kabat EU索引编号)。
在一个方面中，使用WO 2012/058768中描述的方法来支持多特异性抗体的第一重链和第二重链的异源二聚化。在一个方面中，在一条重链的CH3结构域中，351位处的氨基酸L被Y取代并且407位处的氨基酸Y被A取代，而在另一条重链的CH3结构域中，366位处的氨基酸T被A取代并且409位处的氨基酸K被F取代(根据Kabat EU索引编号)。在另一个实施例中，除了上述取代之外，在另一条重链的CH3结构域中，411位处的氨基酸(最初为T)、399位处的氨基酸(最初为D)、400位处的氨基酸(最初为S)、405位处的氨基酸(最初为F)、390位处的氨基酸(最初为N)和392位处的氨基酸(最初为K)中的至少一个氨基酸被取代(根据Kabat EU索引编号)。优选的取代是：
-用选自N、R、Q、K、D、E和W的氨基酸取代在位置411处的氨基酸T(根据Kabat EU索引编号)，
-用选自R、W、Y和K的氨基酸取代在位置399处的氨基酸D(根据Kabat EU索引编号)，
-用选自E、D、R和K的氨基酸取代在位置400处的氨基酸S(根据Kabat EU索引编号)，
-用选自I、M、T、S、V和W的氨基酸取代在位置405处的氨基酸F(根据Kabat EU索引编号)；
-用选自R、K和D的氨基酸取代在位置390处的氨基酸N(根据Kabat EU索引编号)；以及
-用选自V、M、R、L、F和E的氨基酸取代在位置392处的氨基酸K(根据Kabat EU索引编号)。
在另一个方面中，根据WO 2012/058768对双特异性抗体进行工程化，即在一条重链的CH3结构域中，351位处的氨基酸L被Y取代并且407位处的氨基酸Y被A取代，而在另一条重链的CH3结构域中，366位处的氨基酸T被V取代并且409位处的氨基酸K被F取代(根据Kabat EU索引编号)。在多特异性抗体的另一个实施例中，在一条重链的CH3结构域中，407位处的氨基酸Y被A取代，而在另一条重链的CH3结构域中，366位处的氨基酸T被A取代并且409位处的氨基酸K被F取代(根据Kabat EU索引编号)。在最后一个上述实施例中，在另一条重链的CH3结构域中，392位处的氨基酸K被E取代，411位处的氨基酸T被E取代，399位处的氨基酸D被R取代，并且400位处的氨基酸S被R取代(根据Kabat EU索引编号)。
在一个方面中，使用WO 2011/143545中描述的方法来支持多特异性抗体的第一重链和第二重链的异源二聚化。在一个方面中，在两条重链的CH3结构域中在368和/或409位处引入氨基酸修饰(根据Kabat EU索引编号)。
在一个方面中，使用WO 2011/090762中描述的方法来支持双特异性抗体的第一重链和第二重链的异源二聚化。WO 2011/090762涉及根据“杵臼结构”(KiH)技术的氨基酸修饰。在一个实施例中，在一条重链的CH3结构域中，366位处的氨基酸T被W取代，而在另一条重链的CH3结构域中，407位处的氨基酸Y被A取代(根据Kabat EU索引编号)。在另一个实施例中，在一条重链的CH3结构域中，366位处的氨基酸T被Y取代，而在另一条重链的CH3结构域中，407位处的氨基酸Y被T取代(根据Kabat EU索引编号)。
在一个方面中，使用WO 2009/089004中描述的方法来支持双特异性抗体的第一重链和第二重链的异源二聚化。在一个实施例中，在一条重链的CH3结构域中，392位处的氨基酸K或N被带负电荷的氨基酸取代(在一个实施例中被E或D取代，在一个优选实施例中被D取代)，而在另一条重链的CH3结构域中，399位处的氨基酸D、356位处的氨基酸E或D或357位处的氨基酸E被带正电荷的氨基酸取代(在一个实施例中被K或R取代，在一个优选实施例中被K取代，在一个优选的实施例中，399或356位处的氨基酸被K取代)(根据Kabat EU索引编号)。在另一个实施例中，除了上述取代之外，在一条重链的CH3结构域中，409位处的氨基酸K或R被带负电荷的氨基酸取代(在一个实施例中被E或D取代，在一个优选实施例中被D取代)(根据Kabat EU索引编号)。在另一方面中，作为上述取代的补充或作为上述取代的替代，在一条重链的CH3结构域中，439位处的氨基酸K和/或370位处的氨基酸K彼此独立地被带负电荷的氨基酸取代(在一个实施例中被E或D取代，在一个优选实施例中被D取代)(根据Kabat EU索引编号)。
在一个方面中，使用WO 2007/147901中描述的方法来支持多特异性抗体的第一重链和第二重链的异源二聚化。在一个实施例中，在一条重链的CH3结构域中，253位处的氨基酸K被E取代，282位处的氨基酸D被K取代，并且322位的氨基酸K被D取代，而在另一条重链的CH3结构域中，239位处的氨基酸D被K取代，240位处的氨基酸E被K取代，并且292位处的氨基酸K被D取代(根据Kabat EU索引编号)。
如本文报道的双特异性抗体的重链的C末端可以是以氨基酸残基PGK结束的完整C末端。重链的C末端可以是缩短的C末端，在所述缩短的C末端中已经去除了一个或两个C末端氨基酸残基。在一个优选的方面，重链的C末端是以PG结束的缩短的C末端。
在本文报道的所有方面中的一个方面，如本文所指定的包含含有C-末端CH3结构域的重链的双特异性抗体，包含C-末端甘氨酸-赖氨酸二肽(G446和K447，根据Kabat EU索引编号)。在本文报道的所有方面的一个实施例中，如本文所指定的包含含有C末端CH3结构域的重链的双特异性抗体，包含C末端甘氨酸残基(G446，根据Kabat EU索引编号)。
iii.Fab结构域中的修饰
在一个方面，本发明涉及一种包含特异性结合至PD-1的第一Fab片段和特异性结合至LAG3的第二Fab片段的双特异性抗体，其中在Fab片段的一个中，可变结构域VH和VL或恒定结构域CH1和CL被交换。根据Crossmab技术制备双特异性抗体。
在WO2009/080252、WO2009/080253和Schaefer,W.等人，PNAS,108(2011)11187-1191中详细描述了在一个结合臂中具有结构域置换/交换的多特异性抗体(CrossMabVH-VL或CrossMabCH-CL)。它们明显减少了由针对第一抗原的轻链与针对第二抗原的错误重链的错配导致的副产物(与没有此类结构域交换的方法相比)。
在一个具体方面中，本发明涉及一种双特异性抗体，其包含特异性结合PD-1的第一Fab片段和特异性结合LAG3的第二Fab片段，其中在所述Fab片段中的一个中，可变结构域VL和VH彼此替换，使得所述VH结构域是轻链的一部分而所述VL结构域是重链的一部分。在特定方面，双特异性抗体是这样的双特异性抗体，其中在包含特异性结合至PD-1的抗原结合结构域的第一Fab片段中，可变结构域VL和VH彼此替换。
在另一方面中，并且为了进一步改善正确的配对，包含特异性结合PD-1的第一Fab片段和特异性结合LAG3的第二Fab片段的双特异性抗体可含有不同的带电氨基酸取代(所谓的“带电残基”)。将这些修饰引入交叉或非交叉的CH1和CL结构域中。此类修饰描述于例如WO2015/150447、WO2016/020309和PCT/EP2016/073408中。
在一个特定方面中，本发明涉及一种双特异性抗体，其包含特异性结合PD-1的第一Fab片段和特异性结合LAG3的第二Fab片段，其中在恒定结构域CL中的Fab片段的一个中，124位处的氨基酸被赖氨酸(K)、精氨酸(R)或组氨酸(H)独立地取代(根据Kabat EU索引编号)，而在恒定结构域CH1中147位和213位处的氨基酸被谷氨酸(E)或天冬氨酸(D)独立地取代(根据Kabat EU索引编号)。在特定方面，双特异性抗体是这样的双特异性抗体，其中在包含特异性结合至TIM3的抗原结合结构域的第二Fab片段中，在恒定结构域CL中，在位置124处的氨基酸被赖氨酸(K)、精氨酸(R)或组氨酸(H)独立地取代(根据Kabat EU索引编号)，并且在恒定结构域CH1中，在位置147和213处的氨基酸被谷氨酸(E)或天冬氨酸(D)独立地取代(根据Kabat EU索引编号)。
在一个特定方面中，本发明涉及一种双特异性抗体，其包含特异性结合PD-1的第一Fab片段和特异性结合LAG3的第二Fab片段，其中在CL结构域中的一个中，123位(EU编号)处的氨基酸已经被精氨酸(R)取代并且124位(EU编号)处的氨基酸已经被赖氨酸(K)取代，而其中在CH1结构域的一个中，147位(EU编号)和213位(EU编号)处的氨基酸已经被谷氨酸(E)取代。在特定方面，双特异性抗体是这样的双特异性抗体，其中在包含与LAG3特异性结合的抗原结合结构域的Fab片段中，在位置123处(EU编号)的氨基酸已被精氨酸(R)取代并且在位置124处(EU编号)的氨基酸已被赖氨酸(K)取代，而其中在CH1结构域中的一个中，在位置147处(EU编号)和在位置213处(EU编号)的氨基酸已被谷氨酸(E)取代。
在另一方面中，双特异性抗体是二价抗体，其包含
a)特异性结合第一抗原的抗体的第一轻链和第一重链，以及
b)特异性结合第二抗原的抗体的第二轻链和第二重链，其中所述第二轻链和所述第二重链的可变结构域VL和VH彼此替换。
a)下的抗体不含有如b)下报道的修饰，并且a)下的重链和轻链是分离的链。
在b)下的抗体中，在轻链内可变轻链结构域VL被所述抗体的可变重链结构域VH替换，而在重链内可变重链结构域VH被所述抗体的可变轻链结构域VL替换。
在一个方面，(i)在a)下的第一轻链的恒定结构域CL中，124位(根据Kabat编号)处的氨基酸被带正电荷的氨基酸取代，而其中在a)下的第一重链的恒定结构域CH1中，147位处的氨基酸或213位处的氨基酸(根据Kabat EU索引编号)被带负电荷的氨基酸取代；或(ii)在b)下的第二轻链的恒定结构域CL中，124位(根据Kabat编号)处的氨基酸被带正电荷的氨基酸取代，而其中在b)下的第二重链的恒定结构域CH1中，147位处的氨基酸或213位处的氨基酸(根据Kabat EU索引编号)被带负电荷的氨基酸取代。
在另一方面中，(i)在a)下的第一轻链的恒定结构域CL中，124位处的氨基酸被赖氨酸(K)、精氨酸(R)或组氨酸(H)独立地取代(根据Kabat编号)(在一个优选的实施例中，被赖氨酸(K)或精氨酸(R)独立地取代)，而其中在a)下的第一重链的恒定结构域CH1中，147位处的氨基酸或213位处的氨基酸被谷氨酸(E)或天冬氨酸(D)独立地取代(根据Kabat EU索引编号)；或(ii)在b)下的第二轻链的恒定结构域CL中，124位处的氨基酸被赖氨酸(K)、精氨酸(R)或组氨酸(H)独立地取代(根据Kabat编号)(在一个优选的实施例中，被赖氨酸(K)或精氨酸(R)独立地取代)，而其中在b)下的第二重链的恒定结构域CH1中，147位处的氨基酸或213位处的氨基酸被谷氨酸(E)或天冬氨酸(D)独立地取代(根据Kabat EU索引编号)。
在一个方面中，在第二重链的恒定结构域CL中，124位和123位处的氨基酸被K取代(根据Kabat EU索引编号)。
在一个方面中，在第二重链的恒定结构域CL中，123位处的氨基酸被R取代并且124位处的氨基酸被K取代(根据Kabat EU索引编号)。
在一个方面中，在第二轻链的恒定结构域CH1中，147位和213位处的氨基酸被E取代(根据Kabat EU索引编号)。
在一个方面中，在第一轻链的恒定结构域CL中，124位和123位处的氨基酸被K取代，而在第一重链的恒定结构域CH1中，147位和213位处的氨基酸被E取代(根据Kabat EU索引编号)。
在一个方面中，在第一轻链的恒定结构域CL中，123位处的氨基酸被R取代并且124位处的氨基酸被K取代，而在第一重链的恒定结构域CH1中，147位和213位的氨基酸都被E取代(根据Kabat EU索引编号)。
在一个方面中，在第二重链的恒定结构域CL中，124位和123位处的氨基酸被K取代，并且其中在第二轻链的恒定结构域CH1中，147位和213位处的氨基酸被E取代；在第一轻链的可变结构域VL中，38位处的氨基酸被K取代；在第一重链的可变结构域VH中，39位处的氨基酸被E取代；在第二重链的可变结构域VL中，38位处的氨基酸被K取代；并且在第二轻链的可变结构域VH中，39位处的氨基酸被E取代(根据Kabat EU索引编号)。
在一个方面中，双特异性抗体是二价抗体，其包含
a)特异性结合第一抗原的抗体的第一轻链和第一重链，以及
b)特异性结合第二抗原的抗体的第二轻链和第二重链，其中第二轻链和第二重链的可变结构域VL和VH彼此替换，而其中第二轻链和第二重链的恒定结构域CL和CH1彼此替换。
a)下的抗体不含有如b)下报道的修饰，并且a)下的重链和轻链是分离的链。在b)下的抗体中，在轻链内，可变轻链结构域VL被所述抗体的可变重链结构域VH替换，而恒定轻链结构域CL被所述抗体的恒定重链结构域CH1替换；在重链内，可变重链结构域VH被所述抗体的可变轻链结构域VL替换，而恒定重链结构域CH1被所述抗体的恒定轻链结构域CL替换。
在一个方面中，双特异性抗体是二价抗体，其包含
a)特异性结合第一抗原的抗体的第一轻链和第一重链，以及
b)特异性结合第二抗原的抗体的第二轻链和第二重链，其中所述第二轻链和所述第二重链的恒定结构域CL和CH1彼此替换。
a)下的抗体不含有如b)下报道的修饰，并且a)下的重链和轻链是分离的链。在b)下的抗体中，在轻链内，恒定轻链结构域CL被所述抗体的恒定重链结构域CH1替换；而在重链内，恒定重链结构域CH1被所述抗体的恒定轻链结构域CL替换。
在一个方面中，双特异性抗体是双特异性抗体，其包含
a)全长抗体，其特异性结合至第一抗原并且由两条抗体重链和两条抗体轻链组成；以及
b)特异性结合第二抗原的一个、两个、三个或四个单链Fab片段，
其中b)下的所述单链Fab片段经由在所述全长抗体的重链或轻链的C末端或N末端处的肽接头融合至a)下的所述全长抗体。
在一个方面，结合至第二抗原的一个或两个相同的单链Fab片段经由在所述全长抗体的重链或轻链的C末端处的肽接头融合至所述全长抗体。
在一个方面，结合至第二抗原的一个或两个相同的单链Fab(scFab)片段经由在所述全长抗体的重链的C末端处的肽接头融合至所述全长抗体。
在一个方面，结合至第二抗原的一个或两个相同的单链Fab(scFab)片段经由在所述全长抗体的轻链的C末端处的肽接头融合至所述全长抗体。
在一个方面，结合至第二抗原的两个相同的单链Fab(scFab)片段经由在所述全长抗体的每条重链或轻链的C末端处的肽接头融合至所述全长抗体。
在一个方面，结合至第二抗原的两个相同的单链Fab(scFab)片段经由在所述全长抗体的每条重链的C末端处的肽接头融合至所述全长抗体。
在一个方面，结合至第二抗原的两个相同的单链Fab(scFab)片段经由在所述全长抗体的每条轻链的C末端处的肽接头融合至所述全长抗体。
在一个方面中，双特异性抗体是三价抗体，其包含
a)全长抗体，其特异性结合至第一抗原并且由两条抗体重链和两条抗体轻链组成，
b)第一多肽，其由以下项组成：
ba)抗体重链可变结构域(VH)，或
bb)抗体重链可变结构域(VH)和抗体恒定结构域1(CH1)，
其中所述第一多肽以其VH结构域的N末端经由肽接头与所述全长抗体的两条重链中的一条的C末端融合，
c)第二多肽，其由以下项组成：
ca)抗体轻链可变结构域(VL)，或
cb)抗体轻链可变结构域(VL)和抗体轻链恒定结构域(CL)，
其中所述第二多肽以VL结构域的N末端经由肽接头与所述全长抗体的两条重链中的另一条的C末端融合，并且
其中第一多肽的抗体重链可变结构域(VH)和第二多肽的抗体轻链可变结构域(VL)一起形成特异性结合至第二抗原的抗原结合结构域。
在一个方面中，b)下的多肽的抗体重链可变结构域(VH)和c)下的多肽的抗体轻链可变结构域(VL)通过在以下位置之间引入二硫键而经由链间二硫桥连接和稳定化：
(i)重链可变结构域44位至轻链可变结构域100位，或
(ii)重链可变结构域105位至轻链可变结构域43位，或
(iii)重链可变结构域101位至轻链可变结构域100位(总是根据Kabat EU索引编号)。
引入非天然二硫桥以用于稳定化的技术描述于例如以下文献中：WO 94/029350；Rajagopal,V.等人,Prot.Eng.(1997)1453-1459；Kobayashi,H.等人,Nucl.Med.Biol.25(1998)387-393；以及Schmidt,M.等人,Oncogene 18(1999)1711-1721。在一个实施例中，b)和c)下多肽的可变结构域之间的任选二硫键在重链可变结构域44位与轻链可变结构域100位之间。在一个实施例中，b)和c)下多肽的可变结构域之间的任选二硫键在重链可变结构域105位与轻链可变结构域43位之间(总是根据Kabat编号)。在一个实施例中，在单链Fab片段的可变结构域VH与VL之间没有所述任选的二硫键稳定化的三价双特异性抗体是优选的。
在一个方面中，双特异性抗体是包含以下项的三特异性或四特异性抗体
a)特异性结合至第一抗原的全长抗体的第一轻链和第一重链，以及
b)特异性结合至第二抗原的全长抗体的第二(修饰的)轻链和第二(修饰的)重链，其中可变结构域VL和VH彼此替换，和/或其中恒定结构域CL和CH1彼此替换，并且
c)其中特异性结合至一种或两种其他抗原(即，结合至第三抗原和/或第四抗原)的一至四个抗原结合结构域经由肽接头融合至a)和/或b)的轻链或重链的C末端或N末端。
a)下的抗体不含有如b)下报道的修饰，并且a)下的重链和轻链是分离的链。
在一个方面，在c)下的三特异性或四特异性抗体包含特异性结合至一种或两种其他抗原的一个或两个抗原结合结构域。
在一个方面，抗原结合结构域选自由scFv片段和scFab片段组成的组。
在一个方面，抗原结合结构域是scFv片段。
在一个方面，抗原结合结构域是scFab片段。
在一个方面，抗原结合结构域融合至a)和/或b)的重链的C末端。
在一个方面，在c)下的三特异性或四特异性抗体包含特异性结合至另一抗原的一个或两个抗原结合结构域。
在一个方面，在c)下的三特异性或四特异性抗体包含特异性结合至第三抗原的两个相同的抗原结合结构域。在一个优选的实施例中，此类两个相同的抗原结合结构域均经由相同的肽接头融合至a)和b)的重链的C末端。在一个优选的实施例中，两个相同的抗原结合结构域是scFv片段或scFab片段。
在一个方面，在c)下的三特异性或四特异性抗体包含特异性结合至第三抗原和第四抗原的两个抗原结合结构域。在一个实施例中，所述两个抗原结合结构域经由相同的肽接头融合至a)和b)的重链的C末端。在一个优选的实施例中，所述两个抗原结合结构域是scFv片段或scFab片段。
在一个方面中，双特异性抗体是双特异性的四价抗体，其包含
a)特异性结合第一抗原(并包含两个Fab片段)的抗体的两条轻链和两条重链，
b)特异性结合第二抗原的抗体的另外两个Fab片段，其中所述另外的Fab片段均经由肽接头与a)的重链的C末端或N末端融合，并且
其中在Fab片段中执行以下修饰
(i)在a)的两个Fab片段中，或在b)的两个Fab片段中，可变结构域VL和VH彼此替换，和/或恒定结构域CL和CH1彼此替换，或者
(ii)在a)的两个Fab片段中，可变结构域VL和VH彼此替换，并且恒定结构域CL和CH1彼此替换，而在b)的两个Fab片段中，可变结构域VL和VH彼此替换，或恒定结构域CL和CH1彼此替换，或者
(iii)在a)的两个Fab片段中，可变结构域VL和VH彼此替换，或恒定结构域CL和CH1彼此替换，而在b)的两个Fab片段中，可变结构域VL和VH彼此替换，并且恒定结构域CL和CH1彼此替换，或者
(iv)在a)的两个Fab片段中，可变结构域VL和VH彼此替换，而在b)的两个Fab片段中，恒定结构域CL和CH1彼此替换，或者
(v)在a)的两个Fab片段中，恒定结构域CL和CH1彼此替换，而在b)的两个Fab片段中，可变结构域VL和VH彼此替换。
在一个方面中，所述另外的Fab片段均经由肽接头与a)的重链的C末端或a)的重链的N末端融合。
在一个方面中，所述另外的Fab片段经由肽接头与a)的重链的C末端融合。
在一个方面中，所述另外的Fab片段经由肽接头与a)的重链的N末端融合。
在一个方面中，在Fab片段中，执行以下修饰：在a)的两个Fab片段中，或在b)的两个Fab片段中，可变结构域VL和VH彼此替换，和/或恒定结构域CL和CH1彼此替换。
在一个方面中，双特异性抗体是四价抗体，其包含：
a)特异性结合第一抗原并且包含第一VH-CH1结构域对的第一抗体的(经修饰的)重链，其中所述第一抗体的第二VH-CH1结构域对的N末端经由肽接头与所述重链的C末端融合，
b)a)的所述第一抗体的两条轻链，
c)特异性结合第二抗原并包含第一VH-CL结构域对的第二抗体的(经修饰的)重链，其中所述第二抗体的第二VH-CL结构域对的N末端经由肽接头与所述重链的C末端融合，以及
d)c)的所述第二抗体的两条(经修饰的)轻链，每条轻链包含CL-CH1结构域对。
在一个方面中，双特异性抗体包含
a)特异性结合至第一抗原的第一全长抗体的重链和轻链，以及
b)特异性结合至第二抗原的第二全长抗体的重链和轻链，其中重链的N末端经由肽接头连接至轻链的C末端。
a)下的抗体不含有如b)下报道的修饰，并且重链和轻链是分离的链。
在一个方面中，双特异性抗体包含
a)全长抗体，其特异性结合至第一抗原并且由两条抗体重链和两条抗体轻链组成；以及
b)特异性结合第二抗原的Fv片段，所述Fv片段包含VH2结构域和VL2结构域，其中所述两个结构域经由二硫桥相互连接，
其中只有VH2结构域或VL2结构域中的一者经由肽接头与特异性结合至第一抗原的全长抗体的重链或轻链融合。
在双特异性抗体中，a)下的重链和轻链是分离的链。
在一个方面，VH2结构域或VL2结构域中的另一个不经由肽接头与特异性结合至第一抗原的全长抗体的重链或轻链融合。
在本文报道的所有方面中，第一轻链包含VL结构域和CL结构域，并且第一重链包含VH结构域、CH1结构域、铰链区、CH2结构域和CH3结构域。
在一个方面中，双特异性抗体是三价抗体，其包含
a)特异性结合第一抗原的两个Fab片段，
b)特异性结合第二抗原的一个CrossFab片段，在所述CrossFab片段中CH1和CL结构域彼此交换，
c)一个Fc区，其包含第一Fc区重链和第二Fc区重链，
其中两个Fab片段的CH1结构域的C末端连接到重链Fc区多肽的N末端，而其中CrossFab片段的CL结构域的C末端连接到Fab片段中的一个的VH结构域的N末端。
在一个方面中，双特异性抗体是三价抗体，其包含
a)特异性结合第一抗原的两个Fab片段，
b)特异性结合第二抗原的一个CrossFab片段，在所述CrossFab片段中CH1和CL结构域彼此交换，
c)一个Fc区，其包含第一Fc区重链和第二Fc区重链，
其中第一Fab片段的CH1结构域的C末端连接到重链Fc区多肽中的一个的N末端，并且CrossFab片段的CL结构域的C末端连接到另一重链Fc区多肽的N末端，而其中第二Fab片段的CH1结构域的C末端连接到第一Fab片段的VH结构域的N末端或连接到CrossFab片段的VH结构域的N末端。
在一个方面中，双特异性抗体包含
a)全长抗体，其特异性结合至第一抗原并且由两条抗体重链和两条抗体轻链组成；以及
b)特异性结合至第二抗原的Fab片段，该Fab片段包含含有重链片段和轻链片段的VH2结构域和VL2结构域，其中在轻链片段内，可变轻链结构域VL2被所述抗体的可变重链结构域VH2替代，并且在重链片段内，可变重链结构域VH2被所述抗体的可变轻链结构域VL2替代
其中重链Fab片段插入在全长抗体的重链中的一条的CH1结构域与所述全长抗体的相应Fc区之间，并且轻链Fab片段的N末端缀合至全长抗体的轻链的C末端，该全长抗体的轻链与已插入重链Fab片段的全长抗体的重链配对。
在一个方面中，双特异性抗体包含
a)全长抗体，其特异性结合至第一抗原并且由两条抗体重链和两条抗体轻链组成；以及
b)特异性结合至第二抗原的Fab片段，该Fab片段包含含有重链片段和轻链片段的VH2结构域和VL2结构域，其中在轻链片段内，可变轻链结构域VL2被所述抗体的可变重链结构域VH2替代，并且在重链片段内，可变重链结构域VH2被所述抗体的可变轻链结构域VL2替代，并且其中Fab片段的重链片段的C末端缀合至全长抗体的重链中的一条的N末端，并且Fab片段的轻链片段的C末端缀合至全长抗体的轻链的N末端，该全长抗体的轻链与Fab片段的重链片段缀合至的全长抗体的重链配对。
B.结合至PD-1和LAG3的双特异性抗体的给药
为了预防或治疗疾病，本发明的包含特异性结合至PD-1的第一抗原结合结构域和特异性结合至LAG3的第二抗原结合结构域的双特异性抗体(当单独使用或与一种或多种另外的治疗剂组合使用时)的适当剂量将取决于待治疗疾病的类型、施用途径、受试者的体重、融合蛋白的类型、疾病的严重程度和进程、双特异性抗体是出于预防还是治疗目的而施用、先前或同时进行的治疗性干预、受试者的临床病史和对融合蛋白的反应，以及主治医师的判断。在任何情况下，负责施用的执业者将针对个体受试者来确定组合物中活性成分的浓度和适当剂量。本文考虑了各种投配时间安排，包括但不限于在各个时间点处的单次或多次施用、推注施用，以及脉冲输注。
在一个时刻或在一系列治疗中适当地向受试者施用如本文所定义的包含特异性结合至PD-1的第一抗原结合结构域和特异性结合至LAG3的第二抗原结合结构域的双特异性抗体。取决于疾病的类型和严重程度，约1μg/kg至15mg/kg(例如，0.1mg/kg至10mg/kg)的双特异性抗体可为例如通过一次或多次单独施用或通过连续输注而向受试者施用的初始候选剂量。取决于上述因素，一种典型的日剂量的范围可以为约1μg/kg至100mg/kg或更多。对于数天或更长时间的重复施用，取决于病症，治疗通常会持续直至发生所需的疾病症状抑制。双特异性抗体的一种示例性的剂量的范围为约0.005mg/kg至约10mg/kg。在其他示例中，剂量还可包括每次施用约1μg/kg体重、约5μg/kg体重、约10μg/kg体重、约50μg/kg体重、约100μg/kg体重、约200μg/kg体重、约350μg/kg体重、约500μg/kg体重、约1mg/kg体重、约5mg/kg体重、约10mg/kg体重、约50mg/kg体重、约100mg/kg体重、约200mg/kg体重、约350mg/kg体重、约500mg/kg体重至约1000mg/kg体重或更多，以及其中可推导出的任何范围。在从本文所列数字可推导出的范围的示例中，可以基于上述数字施用约5mg/kg体重至约100mg/kg体重、约5μg/kg体重至约500mg/kg体重等的范围。因此，可以向受试者施用约0.5mg/kg、2.0mg/kg、5.0mg/kg或10mg/kg(或它们的任何组合)中的一种或多种剂量。此类剂量可以间歇地施用，例如每周或每三周施用(例如，使得受试者接受融合蛋白的约2个至约20个、或例如约6个剂量)。可施用初始较高负荷剂量，然后施用一种或多种较低剂量。然而，其他剂量方案可能有用。通过常规技术和测定可以容易地监测该疗法的进展。
XII.VEGF拮抗剂
本文提供了用于治疗受试者的CRC(例如，转移性CRC，例如，MSI-H转移性CRC)的方法，这些方法包括向受试者施用包括抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)、PD-1轴结合拮抗剂(例如，阿特珠单抗)和VEGF拮抗剂(例如，贝伐单抗)的治疗方案。还提供相关的供使用的组合物(例如，药物组合物)、试剂盒和制品。本文所述的任何方法、供使用的组合物、试剂盒或制品可以包括或涉及下述任何药剂。
VEGF拮抗剂包括能够与VEGF结合、降低VEGF表达水平或中和、阻断、抑制、消除、降低或干扰VEGF生物活性的任何分子。示例性人VEGF在UniProtKB/Swiss-Prot登录号P15692，基因ID(NCBI)：7422下示出。
在一些情况下，VEGF拮抗剂为抗VEGF抗体。在一些实施例中，抗VEGF抗体为贝伐单抗，也称为“rhuMab VEGF”或贝伐单抗为重组人源化抗VEGF单克隆抗体，其根据Presta等人(Cancer Res.57:4593-4599,1997)产生。它包含突变的人IgG1框架区和来自鼠抗hVEGF单克隆抗体A.4.6.1的阻断人VEGF与其受体结合的抗原结合互补决定区。贝伐单抗的约93％的氨基酸序列，包括大部分框架区，来源于人IgG1，并且约7％的序列来源于鼠抗体A4.6.1。贝伐单抗具有约149,000道尔顿的分子量并且经糖基化。贝伐单抗和其他人源化抗VEGF抗体进一步描述于2005年2月26日授权的美国专利号6,884,879，其全部公开内容以引用方式明确并入本文。
其他优选的抗体包括G6或B20系列抗体(例如，G6-31、B20-4.1)，如PCT申请公开号WO 2005/012359中所述。有关另外的优选抗体，参见美国专利号7,060,269、6,582,959、6,703,020；6,054,297；WO98/45332；WO 96/30046；WO94/10202；EP 0666868B1；美国专利申请公开号2006009360、20050186208、20030206899、20030190317、20030203409和20050112126；和Popkov等人(Journal of Immunological Methods 288:149-164,2004)。其他优选抗体包括与人VEGF上的功能表位结合的抗体，该表位包含残基F17、M18、D19、Y21、Y25、Q89、191、K101、E103和C104，或者替代地，包含残基F17、Y21、Q22、Y25、D63、183和Q89。
在其他情况下，VEGF拮抗剂为抗VEGFR2抗体或相关分子(例如，雷莫芦单抗(ramucirumab)、tanibirumab、阿柏西普(aflibercept))；抗VEGFR1抗体或相关分子(例如，艾芦库单抗(icrucumab)、阿柏西普(VEGF Trap-Eye；)或ziv-阿柏西普(VEGFTrap；/>))；双特异性VEGF抗体(例如MP-0250、伐努赛珠单(vanucizumab)(VEGF-ANG2)或US2001/0236388中公开的双特异性抗体)；双特异性抗体，其包括抗VEGF、抗VEGFR1和抗VEGFR2臂中的两者的组合；抗VEGFA抗体(例如，贝伐单抗、塞伐单抗(sevacizumab))；抗VEGFB抗体；抗VEGFC抗体(例如，VGX-100)；抗VEGFD抗体；或非肽小分子VEGF拮抗剂(例如，帕唑帕尼(pazopanib)、阿西替尼(axitinib)、凡德他尼(vandetanib)、瑞戈非尼(stivarga)、卡博替尼(cabozantinib)、乐伐替尼(lenvatinib)、尼达尼布(nintedanib)、奥兰替尼(orantinib)、泰拉替尼(telatinib)、多维替尼(dovitinig)、西地拉尼(cediranib)、莫特塞尼(motesanib)、磺胺替尼(sulfatinib)、阿帕替尼(apatinib)、福瑞替尼(foretinib)、法米替尼(famitinib)或替沃扎尼(tivozanib))。在一些实例中，VEGF拮抗剂可以为酪氨酸激酶抑制剂，包括受体酪氨酸激酶抑制剂(例如，多靶点受体酪氨酸激酶抑制剂，诸如舒尼替尼或阿西替尼)。XIII.托珠单抗用于治疗细胞因子释放综合征(CRS)
A.背景
已经将涉及T细胞活化的双特异性抗体治疗药物与细胞因子释放综合征(CRS)相关联。CRS是一种可能危及生命的复合症状，是由免疫效应子或靶细胞在过度且持续的免疫应答期间中过度释放细胞因子引起的。
CRS与高IL-6水平相关联(Panelli等人,J Transl Med,2:17,2004；Lee等人,Blood,124:188-195,2014；Doessegger和Banholzer,Clin Transl Immunology,4:e39,2015)，并且IL-6与CRS的严重程度相关，其中与未经历CRS或经历较轻微CRS反应(NCICTCAE 0级至3级)的对应患者相比，经历重度或危及生命的CRS的患者(NCI CTCAE 4级或5级)具有高得多的IL-6水平(Chen等人,J Immunol Methods,434:1-8,2016)。
托珠单抗是一种针对可溶性及膜结合IL-6R的重组人源化抗人单克隆抗体，其抑制IL-6介导的信号传导(参见例如WO 1992/019579，其通过引用以其整体并入本文)。因此，托珠单抗前驱用药还可以减少与双特异性抗体疗法相关联的CRS的发生频率或降低其严重程度。可与托珠单抗组合使用的其他抗IL-6R抗体包括沙利鲁单抗(sarilumab)、伏巴利珠单抗(vobarilizumab)(ALX-0061)、SA-237及其变体。
B.CRS症状和分级
本文所述的方法使用的CRS分级标准由美国移植和细胞疗法学会(ASTCT)发布，用于定义轻度、中度、重度或危及生命的CRS并且协调跨临床试验的报告，以便快速识别和治疗CRS(Lee等人,Biology of Blood and Marrow Transplantation.25(4):625-638,2019)。ASTCT标准旨在客观、易于应用并且更准确地对CRS的严重程度进行分类。该修订的CRS分级系统如下表4所示。除诊断标准以外，表4还提供并且引用了基于严重程度的CRS管理建议，包括使用皮质类固醇和/或抗细胞因子疗法进行早期干预。
表4.CRS分级系统
/>
ASTCT＝美国移植和细胞疗法学会；BiPAP＝双相气道正压通气；CPAP＝持续气道正压通气；CRS＝细胞因子释放综合征；CTCAE＝不良事件通用术语标准。5级＝死亡。
ASTCT共识分级：Lee等人,Biol Blood Marrow Transplant,25(4):625-638,2019。
轻度至中度的CRS和/或输注相关反应(IRR)可包括发热、头痛和肌痛等症状，并且可根据需要使用镇痛药、退热药和抗组胺药对症治疗。重度或危及生命的CRS和/或IRR表现，诸如低血压、心动过速、呼吸困难或胸部不适，应根据指示采取支持和复苏措施积极治疗，包括使用高剂量皮质类固醇、IV输液、进入重症监护病房和其他支持性措施。重度CRS可能与其他临床后遗症相关联，诸如弥散性血管内凝血、毛细血管渗漏综合征或巨噬细胞活化综合征(MAS)。
C.托珠单抗作为前驱用药
在一些方面，有效量的托珠单抗作为前驱用药施用，例如在施用双特异性抗体之前施用于受试者。托珠单抗作为前驱用药施用可降低CRS的发生频率或严重程度。在一些方面，托珠单抗在第1周期中作为前驱用药施用，例如在双特异性抗体的第一剂量(C1D1)、第二剂量(C1D2)和/或第三剂量(C1D3)之前施用。在一些方面，托珠单抗以约1mg/kg至约15mg/kg(例如，约4mg/kg至约10mg/kg，例如约6mg/kg至约10mg/kg，例如约8mg/kg)的单一剂量向受试者静脉内施用。在一些方面，托珠单抗以约8mg/kg的单一剂量向受试者静脉内施用。可与托珠单抗组合使用的其他抗IL-6R抗体包括沙利鲁单抗(sarilumab)、伏巴利珠单抗(vobarilizumab)(ALX-0061)、SA-237及其变体。
例如，在一个实施例中，双特异性抗体与托珠单抗 共同施用，其中首先向受试者施用托珠单抗然后单独施用双特异性抗体(例如，受试者经托珠单抗/>预治疗)。
在一些方面，本公开的特征在于本发明的双特异性抗体在制造用于与一种或多种另外的治疗剂(例如，托珠单抗)组合来治疗患有复发性或难治性非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，B细胞增殖性疾患，例如NHL(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如，R/R DLBCL、R/R FL(例如，R/R3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者的药物中的用途。
在一些方面，双特异性抗体与一种或多种另外的治疗剂是单独配制的。在一些方面，双特异性抗体是在一种或多种另外的治疗剂之前向受试者施用。在其他方面，双特异性抗体是在一种或多种另外的治疗剂之后向受试者施用，例如在施用有效量的托珠单抗之后向受试者施用。
在一些方面，双特异性抗体与一种或多种另外的治疗剂是一起配制的。
在一些方面，本公开的特征在于本发明的双特异性抗体，其在与一种或多种另外的治疗剂组合来治疗患有复发性或难治性非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如，B细胞增殖性疾患，例如NHL(例如，侵袭性NHL或R/R NHL；例如，R/R DLBCL、R/R FL(例如，R/R 3b级FL)、或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))的受试者中使用。
在一些方面，双特异性抗体与一种或多种另外的治疗剂是单独配制的。在一些方面，双特异性抗体是在一种或多种另外的治疗剂之前向受试者施用。在其他方面，双特异性抗体是在一种或多种另外的治疗剂之后向受试者施用，例如在施用有效量的托珠单抗之后向受试者施用。
在一些方面，双特异性抗体与一种或多种另外的治疗剂是一起配制的。
D.托珠单抗用于治疗CRS
在一些方面，受试者在用治疗性双特异性抗体治疗期间经历CRS事件，并且施用有效量的托珠单抗以管理CRS事件。
在一些方面，受试者发生CRS事件(例如，在用双特异性抗体治疗之后发生CRS事件，例如在双特异性抗体的第一剂量或后续剂量之后发生CRS事件)，并且方法进一步包括在暂停用双特异性抗体治疗时治疗CRS事件的症状。
在一些方面，受试者经历CRS事件，并且方法进一步包括在暂停用双特异性抗体治疗时向受试者施用有效量的白介素-6受体(IL-6R)拮抗剂(例如，抗IL-6R抗体，例如托珠单抗)来管理CRS事件。在一些方面，IL-6R拮抗剂(例如，托珠单抗)是以约1mg/kg至约15mg/kg(例如，约4mg/kg至约10mg/kg，例如约6mg/kg至约10mg/kg，例如约8mg/kg)的单一剂量向受试者静脉内施用。在一些方面，托珠单抗以约8mg/kg的单一剂量向受试者静脉内施用。可与托珠单抗组合使用的其他抗IL-6R抗体包括沙利鲁单抗(sarilumab)、伏巴利珠单抗(vobarilizumab)(ALX-0061)、SA-237及其变体。
在一些方面，CRS事件在治疗CRS事件的症状后24小时内未消退或恶化，并且方法进一步包括向受试者施用IL-6R拮抗剂(例如，抗IL-6R抗体，例如托珠单抗)的一个或多个额外剂量来管理CRS事件，例如，以约1mg/kg至约15mg/kg、例如约4mg/kg至约10mg/kg、例如约6mg/kg至约10mg/kg、例如约8mg/kg的剂量向受试者静脉内施用托珠单抗的一个或多个额外剂量。在一些方面，托珠单抗的一个或多个额外剂量是以约8mg/kg的单一剂量向受试者静脉内施用。
在一些方面，方法进一步包括向受试者施用有效量的皮质类固醇。可以向受试者静脉内施用皮质类固醇。在一些方面，皮质类固醇是甲基强的松(甲泼尼龙)。在一些情况下，甲基强的松是以每天约1mg/kg至每天约5mg/kg、例如每天约2mg/kg的剂量施用。在一些情况下，皮质类固醇为地塞米松。在一些情况下，地塞米松是以约10mg的剂量施用(例如，以约10mg的单一剂量静脉内施用)或以约0.5mg/kg/天的剂量施用。
如果单独施用IL-6R拮抗剂(例如，托珠单抗)无法管理CRS事件，则可以向受试者施用皮质类固醇，诸如甲泼尼龙或地塞米松。在一些方面，治疗CRS事件的症状进一步包括用高剂量血管加压药(例如，去甲肾上腺素、多巴胺、去氧肾上腺素、肾上腺素、或血管加压素和去甲肾上腺素)治疗，例如，如表4至6中所述。表6和表7提供了有关托珠单抗治疗重度或危及生命的CRS的详细信息。
在一些方面，本公开的特征在于托珠单抗在制造用于治疗发生CRS事件的受试者的药物中的用途，其中CRS事件是在用本发明的双特异性抗体治疗受试者期间出现的。
在一些方面，药物将在暂停用本发明的双特异性抗体治疗时向受试者施用。
在一些方面，药物被配制用于以约1mg/kg至约15mg/kg、例如约4mg/kg至约10mg/kg、例如约6mg/kg至约10mg/kg、例如约8mg/kg的单一剂量静脉内施用托珠单抗。
在一些方面，CRS事件在治疗CRS事件的症状后24小时内未消退或恶化，并且将向受试者施用托珠单抗的一个或多个额外剂量。托珠单抗的一个或多个额外剂量可以以约1mg/kg至约15mg/kg(例如，约4mg/kg至约10mg/kg，例如约6mg/kg至约10mg/kg，例如约8mg/kg)的剂量向受试者静脉内施用。
在一些方面，药物与有效量的皮质类固醇组合使用以治疗CRS事件。托珠单抗和皮质类固醇可以单独配制。
在一些方面，将向受试者静脉内施用皮质类固醇。在一些方面，皮质类固醇为甲泼尼龙，例如，甲泼尼龙是以每天约1mg/kg至每天约5mg/kg、例如每天约2mg/kg的剂量向受试者施用。在一些方面，皮质类固醇为地塞米松，例如，地塞米松是以每天约10mg的剂量或约以0.5mg/kg的剂量向受试者施用。
在一些方面，本公开的特征在于托珠单抗用于治疗发生CRS事件的受试者，其中CRS事件是在用本发明的双特异性抗体治疗受试者期间出现的。
在一些方面，托珠单抗将在暂停用本发明的双特异性抗体治疗时向受试者施用。
在一些方面，托珠单抗被配制用于以约1mg/kg至约15mg/kg、例如约4mg/kg至约10mg/kg、例如约6mg/kg至约10mg/kg、例如约8mg/kg的单一剂量静脉内施用。
在一些方面，CRS事件在治疗CRS事件的症状后24小时内未消退或恶化，并且将向受试者施用托珠单抗的一个或多个额外剂量。托珠单抗的一个或多个额外剂量可以以约1mg/kg至约15mg/kg(例如，约4mg/kg至约10mg/kg，例如约6mg/kg至约10mg/kg，例如约8mg/kg)的剂量向受试者静脉内施用。
在一些方面，托珠单抗与有效量的皮质类固醇组合使用以治疗CRS事件。托珠单抗和皮质类固醇可以单独配制。
在一些方面，将向受试者静脉内施用皮质类固醇。在一些方面，皮质类固醇为甲泼尼龙，例如，甲泼尼龙是以每天约1mg/kg至每天约5mg/kg、例如每天约2mg/kg的剂量向受试者施用。在一些方面，皮质类固醇为地塞米松，例如，地塞米松是以每天约10mg的剂量或约以0.5mg/kg的剂量向受试者施用。
XIV.药物组合物和制剂
本文还提供药物组合物和制剂，其包含PD-1轴结合拮抗剂(例如，阿特珠单抗)和任选地药用载体。本文进一步提供了药物组合物和制剂，其包含抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)以及任选地药用载体。本文进一步提供了药物组合物和制剂，其包含靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体以及任选地药用载体。本公开还提供了：(i)药物组合物和制剂，其包含PD-1轴结合拮抗剂(例如，阿特珠单抗)和抗TIGIT拮抗剂抗体，以及任选地药用载体；(ii)药物组合物和制剂，其包含PD-1轴结合拮抗剂(例如，阿特珠单抗)、抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)和抗VEGF抗体(例如，贝伐单抗)，以及任选地药用载体；(iii)药物组合物和制剂，其包含抗TIGIT拮抗剂抗体以及靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体以及任选地药用载体。本公开还提供了药物组合物和制剂，其包含莫苏尼妥珠单抗、抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)和/或PD-1轴结合拮抗剂(例如，阿特珠单抗)的。莫苏尼妥珠单抗、替瑞利尤单抗和阿特珠单抗和/或本文所述的其他药剂(例如，地塞米松)的药物组合物和制剂可通过将具有所需纯度的一种、两种、三种或全部四种药剂与一种或多种任选的药用载体混合(Remington's Pharmaceutical Sciences第16版,Osol,A.编(1980))，制成冻干制剂或水溶液的形式。在一些实施例中，莫苏尼妥珠单抗被配制用于皮下施用。在一些实施例中，莫苏尼妥珠单抗被配制用于静脉内施用。
如本文所述的药物组合物和制剂可通过将具有所需纯度的活性成分(例如，PD-1轴结合拮抗剂、抗TIGIT拮抗剂抗体和/或靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体；PD-1轴结合拮抗剂、抗TIGIT拮抗剂抗体和抗VEGF抗体；或莫苏尼妥珠单抗、抗TIGIT拮抗剂抗体和/或PD-1轴结合拮抗剂)与一种或多种任选的药用载体混合(参见例如，Remington'sPharmaceutical Sciences第16版,Osol,A.编(1980))，例如制成冻干制剂或水溶液的形式。
示例性的替瑞利尤单抗制剂包含组氨酸溶液，该组氨酸溶液含有聚山梨醇酯20、蔗糖、L-甲硫氨酸和WFI。替瑞利尤单抗可以在15mL小瓶中提供，该小瓶中含有10mL替瑞利尤单抗药物产品，替瑞利尤单抗抗体的近似浓度为60mg/mL。
示例性的阿特珠单抗制剂包含冰醋酸、L-组氨酸、聚山梨醇酯20和蔗糖，pH为5.8。例如，阿特珠单抗可以在20mL小瓶中提供，该小瓶含有1200mg阿特珠单抗，其配制在冰醋酸(16.5mg)、L-组氨酸(62mg)、聚山梨醇酯20(8mg)和蔗糖(821.6mg)中，pH为5.8。在另一示例中，阿特珠单抗可以在14mL小瓶中提供，该小瓶含有840mg阿特珠单抗，其配制在冰醋酸(11.5mg)、L-组氨酸(43.4mg)、聚山梨醇酯20(5.6mg)和蔗糖(575.1mg)中，pH为5.8。
药用载体在所用的剂量和浓度下对受治疗者一般无毒，并且包括但不限于：缓冲剂，诸如磷酸盐、柠檬酸盐和其他有机酸；抗氧化剂，包括抗坏血酸和蛋氨酸；防腐剂(诸如十八烷基二甲基苄基氯化铵；氯化六甲双铵；苯扎氯铵；苄索氯铵；苯酚、丁醇或苄醇；对羟基苯甲酸烷基酯，诸如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯；儿茶酚；间苯二酚；环己醇；3-戊醇；间甲酚)；低分子量(少于约10个残基)多肽；蛋白质，诸如血清白蛋白、明胶或免疫球蛋白；亲水性聚合物，诸如聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸，诸如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、组氨酸、精氨酸或赖氨酸；单糖、二糖和其他碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合剂，诸如EDTA；糖，诸如蔗糖、甘露醇、海藻糖或山梨糖醇；成盐抗衡离子，诸如钠；金属络合物(例如锌蛋白络合物)；和/或非离子表面活性剂，诸如聚乙二醇(PEG)。本文的示例性药用载体进一步包括间质药物分散剂，诸如可溶中性活性透明质酸酶糖蛋白(sHASEGP)，例如人可溶性PH-20透明质酸酶糖蛋白，诸如rHuPH20(Baxter International,Inc.)。某些示例性sHASEGP和使用方法，包括rHuPH20，描述于美国专利公开号2005/0260186和2006/0104968中。在一个方面中，将sHASEGP与一种或多种另外的糖胺聚糖酶(诸如软骨素酶)组合。
示例性的冻干抗体制剂描述于美国专利号6,267,958中。水性抗体制剂包括在美国专利号6,171,586和WO2006/044908中描述的那些，后一者中的制剂包括组氨酸-乙酸盐缓冲液。
本文的制剂还可含有多于一种对于所治疗的特定适应症是必需的活性成分，优选是具有不会彼此不利地影响的互补活性的活性成分。例如，可以期望进一步提供另外的治疗剂(例如，化疗剂、细胞毒性剂、生长抑制剂和/或抗激素剂，诸如上文所述的那些)。此类活性成分适当地以对预期目的有效的量组合存在。
活性成分可以包埋在例如通过凝聚技术或通过界面聚合而制备的微胶囊(例如，分别为羟甲基纤维素或明胶微胶囊和聚(甲基丙烯酸甲酯)微胶囊)中；包埋在胶体药物递送系统(例如，脂质体、白蛋白微球、微乳液、纳米粒子和纳米胶囊)中；或包埋在粗乳液中。此类技术公开于Remington's Pharmaceutical Sciences第16版,Osol,A.编(1980)。
可以制备缓释制备物。缓释制备物的合适实例包括含有抗体的固态疏水聚合物的半透性基质，所述基质是例如膜或微胶囊等成型制品的形式。
用于体内施用的制剂通常是无菌的。例如，无菌可以通过无菌过滤膜过滤而容易地实现。
XV.制品或试剂盒
A.包括PD-1轴结合拮抗剂和抗TIGIT拮抗剂抗体的试剂盒在另一方面，本文提供了制品或试剂盒，其包括PD-1轴结合拮抗剂(例如，阿特珠单抗)和抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)。在一些情况下，制品或试剂盒进一步包括包装插页，该包装插页包含关于使用抗TIGIT拮抗剂抗体与PD-1轴结合拮抗剂组合来治疗受试者的癌症(例如，食管癌(例如，转移性食管癌)或结直肠癌(CRC)(例如，转移性CRC(例如，微卫星不稳定性高(MSI-H)转移性CRC)))或黑素瘤或延缓其进展的说明。在一些情况下，制品或试剂盒进一步包括包装插页，该包装插页包含关于使用抗TIGIT拮抗剂抗体和PD-1轴结合拮抗剂来治疗受试者的癌症(例如，食管癌(例如，转移性食管癌)或CRC(例如，转移性CRC(例如，MSI-H转移性CRC)))或黑素瘤或延缓其进展的说明。在制品或试剂盒中可以包括本文所述的任何PD-1轴结合拮抗剂和/或抗TIGIT拮抗剂抗体。
在本发明的另一实施例中，提供一种试剂盒，其包括PD-1轴结合拮抗剂，该PD-1轴结合拮抗剂用于根据本文所述的任何方法与抗TIGIT拮抗剂抗体组合使用来治疗患有癌症的受试者。在一些情况下，该试剂盒进一步包括抗TIGIT拮抗剂抗体。在一些情况下，制品或试剂盒进一步包括包装插页，该包装插页包含关于使用PD-1轴结合拮抗剂与抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)组合来治疗受试者的癌症或延缓其进展的说明。
在另一实施例中，试剂盒包括替瑞利尤单抗，替瑞利尤单抗用于根据本文所述的任何方法与阿特珠单抗组合使用来治疗患有癌症的受试者。在一些实施例中，试剂盒进一步包括阿特珠单抗。在一些情况下，制品或试剂盒进一步包括包装插页，该包装插页包含关于使用替瑞利尤单抗与阿特珠单抗组合来治疗受试者的癌症或延缓其进展的说明。
在另一实施例中，试剂盒包括阿特珠单抗，阿特珠单抗用于根据本文所述的任何方法与替瑞利尤单抗组合使用来治疗患有癌症的受试者。在一些实施例中，试剂盒进一步包括替瑞利尤单抗。在一些情况下，制品或试剂盒进一步包括包装插页，该包装插页包含关于使用阿特珠单抗与替瑞利尤单抗组合来治疗受试者的癌症或延缓其进展的说明。
在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂和TIGIT拮抗剂抗体在同一容器中或分开的容器中。合适的容器包括例如瓶、小瓶、袋子和注射器。容器可以由多种材料形成，例如玻璃、塑料(诸如聚氯乙烯或聚烯烃)或金属合金(诸如不锈钢或哈氏合金)。在一些情况下，容器容纳制剂，容器上或与容器相关的标签可以指示使用说明。制品或试剂盒还可以包括从商业和用户角度出发期望的其它材料，包括其它缓冲剂、稀释剂、过滤器、针头、注射器和带有使用说明的包装插页。在一些情况下中，制品进一步包括一种或多种其他药剂(例如，额外化疗剂和抗肿瘤剂)。用于一种或多种试剂的合适容器包括例如瓶、小瓶、袋子和注射器。
在制品或试剂盒中可以包括本文所述的任何PD-1轴结合拮抗剂和/或抗TIGIT拮抗剂抗体。制品或试剂盒中的任一者均可包括根据本文所述的任何方法(例如，上文第II节、第III节或第V节中所示的任何方法)向受试者施用PD-1轴结合拮抗剂和/或抗TIGIT拮抗剂抗体的说明。
B.包括靶向PD-1和LAG的双特异性抗体以及抗TIGIT拮抗剂抗体的试剂盒
在另一方面，本文提供了一种包括PD-1轴结合拮抗剂(例如，阿特珠单抗)和靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体的制品或试剂盒。在一些情况下，制品或试剂盒进一步包括包装插页，该包装插页包含关于使用抗TIGIT拮抗剂抗体与靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体组合来治疗受试者的癌症(例如食管癌(例如转移性食管癌))或黑素瘤或延缓其进展的说明。在一些情况下，制品或试剂盒进一步包括包装插页，该包装插页包含关于使用抗TIGIT拮抗剂抗体以及靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体来治疗受试者的癌症(例如食管癌(例如转移性食管癌))或黑素瘤或延缓其进展的说明。在制品或试剂盒中可以包括本文所述的靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体和/或抗TIGIT拮抗剂抗体中的任一者。
在本发明的另一实施例中，提供一种试剂盒，其包括靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体，该双特异性抗体用于根据本文所述的任何方法与抗TIGIT拮抗剂抗体组合使用来治疗患有癌症的受试者。在一些情况下，该试剂盒进一步包括抗TIGIT拮抗剂抗体。在一些情况下，制品或试剂盒进一步包括包装插页，该包装插页包含关于使用靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体与抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)组合来治疗受试者的癌症或延缓其进展的说明。
在一些情况下，靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体以及抗TIGIT拮抗剂抗体在同一容器中或分开的容器中。合适的容器包括例如瓶、小瓶、袋子和注射器。容器可以由多种材料形成，例如玻璃、塑料(诸如聚氯乙烯或聚烯烃)或金属合金(诸如不锈钢或哈氏合金)。在一些情况下，容器容纳制剂，容器上或与容器相关的标签可以指示使用说明。制品或试剂盒还可以包括从商业和用户角度出发期望的其它材料，包括其它缓冲剂、稀释剂、过滤器、针头、注射器和带有使用说明的包装插页。在一些情况下中，制品进一步包括一种或多种其他药剂(例如，额外化疗剂和抗肿瘤剂)。用于一种或多种试剂的合适容器包括例如瓶、小瓶、袋子和注射器。
在制品或试剂盒中可以包括本文所述的靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体和/或抗TIGIT拮抗剂抗体中的任一者。任何制品或试剂盒均可包括根据本文所述的任何方法(例如，上文第III节或第V节中所示的任何方法)向受试者施用靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体和/或抗TIGIT拮抗剂抗体的说明。
C.包括莫苏尼妥珠单抗和抗TIGIT拮抗剂抗体和/或PD-1轴结合拮抗剂的试剂盒
在另一方面，本文提供了制品或试剂盒，其包含莫苏尼妥珠单抗、抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)和任选的PD-1轴结合拮抗剂(例如，阿特珠单抗)。在一些情况下，制品或试剂盒进一步包括包装插页，该包装插页包含关于使用莫苏尼妥珠单抗与抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)组合以及任选地与PD-1轴结合拮抗剂(例如，阿特珠单抗)组合来治疗受试者的CD20阳性细胞增殖性疾患(例如，B细胞增殖性疾患，例如NHL(例如，侵袭性NHL或复发性或难治性(R/R)NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))。在一些情况下，制品或试剂盒进一步包括包装插页，该包装插页包含关于使用莫苏尼妥珠单抗与抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)以及任选地与PD-1轴结合拮抗剂(例如，阿特珠单抗)来治疗受试者的CD20阳性细胞增殖性疾患(例如，B细胞增殖性疾患，例如NHL(例如，侵袭性NHL或复发性或难治性(R/R)NHL；例如R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、R/R滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，R/R 3b级FL)或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)或R/R转化性FL(trFL))。在制品或试剂盒中可以包括本文所述的莫苏尼妥珠单抗、抗TIGIT拮抗剂抗体(替瑞利尤单抗)和/或PD-1轴结合拮抗剂(阿特珠单抗)中的任一者。
在另一实施例中，试剂盒包括莫苏尼妥珠单抗，该莫苏尼妥珠单抗用于根据本文所述的任何方法与替瑞利尤单抗组合并且任选地与阿特珠单抗组合使用来治疗患有癌症的受试者。在一些实施例中，试剂盒进一步包括莫苏尼妥珠单抗。在一些情况下，制品或试剂盒进一步包括包装插页，该包装插页包括关于使用莫苏尼妥珠单抗与替瑞利尤单抗组合并且任选地与阿特珠单抗组合来治疗受试者的癌症或延缓其进展的说明。
在另一实施例中，试剂盒包括替瑞利尤单抗，该替瑞利尤单抗用于根据本文所述的任何方法与莫苏尼妥珠单抗组合并且任选地与阿特珠单抗组合使用来治疗患有癌症的受试者。在一些实施例中，试剂盒进一步包括替瑞利尤单抗。在一些情况下，制品或试剂盒进一步包括包装插页，该包装插页包括关于使用替瑞利尤单抗与莫苏尼妥珠单抗组合并且任选地与阿特珠单抗组合来治疗受试者的癌症或延缓其进展的说明。
在一些情况下，莫苏尼妥珠单抗、抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)和/或PD-1轴结合拮抗剂(例如，阿特珠单抗)在同一容器中或分开的容器中。合适的容器包括例如瓶、小瓶、袋子和注射器。容器可以由多种材料形成，例如玻璃、塑料(诸如聚氯乙烯或聚烯烃)或金属合金(诸如不锈钢或哈氏合金)。在一些情况下，容器容纳制剂，容器上或与容器相关的标签可以指示使用说明。制品或试剂盒还可以包括从商业和用户角度出发期望的其它材料，包括其它缓冲剂、稀释剂、过滤器、针头、注射器和带有使用说明的包装插页。在一些情况下中，制品进一步包括一种或多种其他药剂(例如，额外化疗剂和抗肿瘤剂)。用于一种或多种药剂的合适的容器包括例如瓶、小瓶、袋子和注射器。
在制品或试剂盒中可以包括本文所述的莫苏尼妥珠单抗、抗TIGIT拮抗剂抗体(替瑞利尤单抗)和/或PD-1轴结合拮抗剂(阿特珠单抗)中的任一者。制品或试剂盒中的任一者可包括根据本文所述的任何方法(例如，上文第IV节中所示的任何方法)向受试者施用莫苏尼妥珠单抗、抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)和/或PD-1轴结合拮抗剂(例如，阿特珠单抗)的说明。
D.包括PD-1轴结合拮抗剂、抗TIGIT拮抗剂抗体和抗VEGF抗体的试剂盒
在另一方面，本文提供了制品或试剂盒，其包括PD-1轴结合拮抗剂(例如，阿特珠单抗)、抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)和抗VEGF抗体(例如，贝伐单抗)。在一些情况下，制品或试剂盒进一步包括包装插页，该包装插页包含关于使用抗TIGIT拮抗剂抗体、PD-1轴结合拮抗剂和抗VEGF抗体来治疗受试者的癌症(例如，结直肠癌(CRC)(例如，转移性CRC(例如，微卫星不稳定性(MSI)高(MSI-H)转移性CRC)))或延缓其进展的说明。在一些情况下，制品或试剂盒进一步包括包装插页，该包装插页包含关于使用抗TIGIT拮抗剂抗体、PD-1轴结合拮抗剂和抗VEGF抗体来治疗受试者的癌症(例如，转移性CRC(例如，MSI-H转移性CRC))或延缓其进展的说明。在制品或试剂盒中可以包括本文所述的PD-1轴结合拮抗剂、抗TIGIT拮抗剂抗体和/或VEGF拮抗剂(例如，抗VEGF抗体)中的任一者。
在本发明的另一实施例中，提供一种试剂盒，其包括PD-1轴结合拮抗剂，该PD-1轴结合拮抗剂用于根据本文所述的任何方法与抗TIGIT拮抗剂抗体和抗VEGF抗体组合使用来治疗患有癌症的受试者。在一些情况下，该试剂盒进一步包括抗TIGIT拮抗剂抗体。在一些情况下，试剂盒进一步包括抗VEGF抗体。在一些情况下，试剂盒进一步包括抗TIGIT拮抗剂抗体和抗VEGF抗体。在一些情况下，制品或试剂盒进一步包括包装插页，该包装插页包含关于使用PD-1轴结合拮抗剂与抗TIGIT拮抗剂抗体(例如，替瑞利尤单抗)和抗VEGF抗体(例如，贝伐单抗)组合来治疗受试者的癌症或延缓其进展的说明。
在另一实施例中，试剂盒包括替瑞利尤单抗，该替瑞利尤单抗用于根据本文所述的任何方法与阿特珠单抗和贝伐单抗组合使用来治疗患有癌症的受试者。在一些实施例中，试剂盒进一步包括阿特珠单抗。在一些实施例中，试剂盒进一步包括贝伐单抗。在一些实施例中，试剂盒进一步包括阿特珠单抗和贝伐单抗。在一些情况下，制品或试剂盒进一步包括包装插页，该包装插页包含关于使用替瑞利尤单抗与阿特珠单抗和贝伐单抗组合来治疗受试者的癌症或延缓其进展的说明。
在另一实施例中，试剂盒包括阿特珠单抗，阿特珠单抗用于根据本文所述的任何方法与替瑞利尤单抗组合使用来治疗患有癌症的受试者。在一些实施例中，试剂盒进一步包括替瑞利尤单抗。在一些实施例中，试剂盒进一步包括贝伐单抗。在一些实施例中，试剂盒进一步包括替瑞利尤单抗和贝伐单抗。在一些情况下，制品或试剂盒进一步包括包装插页，该包装插页包含关于使用阿特珠单抗与替瑞利尤单抗和贝伐单抗组合来治疗受试者的癌症或延缓其进展的说明。
在另一实施例中，试剂盒包括贝伐单抗，该贝伐单抗用于根据本文所述的任何方法与阿特珠单抗组合使用来治疗患有癌症的受试者。在一些实施例中，试剂盒进一步包括阿特珠单抗。在一些实施例中，试剂盒进一步包括替瑞利尤单抗。在一些实施例中，试剂盒进一步包括阿特珠单抗和替瑞利尤单抗。在一些情况下，制品或试剂盒进一步包括包装插页，该包装插页包含关于使用贝伐单抗与阿特珠单抗和替瑞利尤单抗组合来治疗受试者的癌症或延缓其进展的说明。
在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂、抗TIGIT拮抗剂抗体和抗VEGF抗体在同一容器中或分开的容器中。合适的容器包括例如瓶、小瓶、袋子和注射器。容器可以由多种材料形成，例如玻璃、塑料(诸如聚氯乙烯或聚烯烃)或金属合金(诸如不锈钢或哈氏合金)。在一些情况下，容器容纳制剂，容器上或与容器相关的标签可以指示使用说明。制品或试剂盒还可以包括从商业和用户角度出发期望的其它材料，包括其它缓冲剂、稀释剂、过滤器、针头、注射器和带有使用说明的包装插页。在一些情况下中，制品进一步包括一种或多种其他药剂(例如，额外化疗剂和抗肿瘤剂)。用于一种或多种试剂的合适容器包括例如瓶、小瓶、袋子和注射器。
在制品或试剂盒中可以包括本文所述的PD-1轴结合拮抗剂、抗TIGIT拮抗剂抗体和/或VEGF拮抗剂(例如，抗VEGF抗体)中的任一者。制品或试剂盒中的任一者均可包括根据本文所述的任何方法(例如，上文第II节、第III节或第V节中所示的任何方法)向受试者施用PD-1轴结合拮抗剂、抗TIGIT拮抗剂抗体和VEGF拮抗剂(例如，抗VEGF抗体)的说明。
实例
实例1：抗TIGIT抗体替瑞利尤单抗与阿特珠单抗组合在患有转移性食管癌的患者中的Ib期、剂量扩展研究
在Ib期扩展队列研究中评估替瑞利尤单抗与阿特珠单抗组合施用来治疗患有转移性食管癌的患者的安全性、药效学和抗肿瘤活性。
本研究是GO30103的适应症特定的扩展队列，一项Ia/Ib期开放标签、多中心、剂量递增和剂量扩展研究，旨在评估替瑞利尤单抗与阿特珠单抗组合在患有局部晚期、复发性或转移性无法治愈的肿瘤的患者中的安全性、耐受性和PK。GO30103研究表明，替瑞利尤单抗在推荐II期剂量600mg IV Q3W和阿特珠单抗1200mg IV Q3W下具有良好的耐受性，并且在患有PD-L1阳性非小细胞肺癌的患者的Ib期扩展队列中观察到活性，经确认的总缓解率(ORR)为46％(Bendell等人,Cancer Res:80(16增刊),779,2020)。
本研究提供了替瑞利尤单抗与阿特珠单抗组合施用在既往未使用癌症免疫疗法治疗的患有转移性食管癌的患者中的安全性和抗肿瘤活性结果。
A.目标和终点
该研究的目的是确定替瑞利尤单抗(600mg,IV,Q3W)与阿特珠单抗(1200mg,IV,Q3W)组合在患有转移性食管癌的患者中的初步安全性、耐受性和有效性。下表5中概述了研究的具体目标和相对应的终点。
表5.目标和终点
/>
/>
B.研究设计
本研究旨在评估替瑞利尤单抗与阿特珠单抗组合施用时在患有转移性食管癌的患者(例如，未接受过先前免疫疗法的患有转移性食管癌的患者)中的安全性、耐受性和有效性。
C.研究治疗
给药和施用
替瑞利尤单抗是以600mg每3周(Q3W)通过静脉内输注施用。
阿特珠单抗与替瑞利尤单抗组合施用的剂量为每3周1200mg IV。阿特珠单抗是在替瑞利尤单抗输注和后续的观察期后施用。
有关替瑞利尤单抗和阿特珠单抗的剂量制备和施用说明的详细信息，请参阅相应的研究者手册和GO30103药房手册。
D.伴随疗法
伴随疗法包括患者从筛选之前7天到治疗中止访视所使用的任何用药(例如，处方药、非处方药、草药或顺势疗法药物和/或营养补充剂)。
E.纳入标准
特定于食管癌的纳入标准
资格标准汇总如下。
·具有任何组织学特征(包括例如鳞状细胞癌和腺癌)的转移性食管癌。
·先前多线疗法的数量不受限制。
·既往未使用免疫疗法治疗。
·任何PD-L1状态。
另外的特定于癌症的纳入标准
·具有局部晚期、复发性或转移性无法治愈的恶性肿瘤组织学记录的患者，该患者已在至少一种可用的标准疗法后发生进展；或对这些患者而言，标准疗法已被证明无效或无法忍受，或被认为不合适；或试验用药剂的临床试验是公认的对于这些患者的标准护理。
·具有局部晚期、复发性或转移性无法治愈的恶性肿瘤组织学记录的患者，且研究药剂与抗PD-L1抗体组合在与或不与化学疗法合用的情况下的临床试验对于该患者为可接受的治疗选项，这些患者也可能符合条件。
·患有根据RECIST v1.1的可测量的疾病的患者
·先前照射过的病灶计为靶病灶。
·旨在用于活检的病灶不计为靶病灶。
扩展队列中患者的额外入选标准
·扩展队列的入组仅限于其肿瘤为PD-L1和/或TIGIT选择的患者。因此，要求在入组前提交存档肿瘤组织并且评估PD-L1和/或TIGIT表达。其肿瘤组织不可评估PD-L1和/或TIGIT表达的患者不符合条件。可能已评估免疫浸润细胞或肿瘤细胞中的PD-L1和/或TIGIT表达。如果提交了多个肿瘤样本(例如，存档样本和来自复发的疾病的组织)，如果至少有一个样本可评估PD-L1和/或TIGIT表达，则患者可能符合条件。患者的PD-L1和/或TIGIT得分分别为样品中的最大PD-L1和/或TIGIT得分。
·对入组进行管理，使得扩展队列中大约多达一半的应计患者是同意接受任选的活检的患者。
一般标准
其他纳入标准如下所述。需要满足这些患者标准才能进入研究。
·年龄≥18岁
·根据研究者的判断，能够遵守研究方案
·东部肿瘤协作组(ECOG)体力状况为0或1
·预期寿命≥12周
·足够的血液和终末器官功能，由在首次研究治疗(第1周期第1天)前14天内获得的以下实验室结果定义：绝对中性粒细胞计数(ANC)≥1,500个细胞/μL；白细胞(WBC)计数≥2,500/μL；淋巴细胞计数≥500/μL；血小板计数≥100,000/μL(在第1周期第1天前14天内未输血)；血红蛋白≥9g/dL(患者可能已接受输血或可能已根据当地标准护理接受红细胞生成治疗)；总胆红素≤1.5×正常值上限(ULN)(要求接受紫杉醇的患者(队列B)具有≤1.25×ULN的总胆红素)；AST和ALT≤3×ULN；碱性磷酸酶≤2.5×ULN(有记录的肝或骨转移记录的患者可以具有≤5×ULN的碱性磷酸酶)；血清白蛋白≥2.5g/dL；PT和活化部分凝血活酶时间(aPTT)≤1.5×ULN(仅适用于未接受治疗性抗凝的患者。接受治疗性抗凝的患者剂量稳定)。
·实测或计算的肌酐清除率≥50mL/min，基于Cockcroft-Gault肾小球滤过率估计：
(140－年龄)×(以千克计的体重)×(0.85，如果为女性)72×(以mg/dL计的血清肌酐)
接受顺铂(队列A或队列C)的患者必须具有≥60mL/min的实测或计算的肌酐清除率，基于Cockcroft-Gault GFR估计
·有生育能力的女性(包括接受过输卵管结扎术的女性)必须在第1周期第1天之前的14天内进行血清妊娠测试并且记录为阴性。
·对于有生育能力的女性：同意保持禁欲(避免异性性交)或使用避孕方法，并同意不捐献卵子。
·对于男性：同意保持禁欲(避免异性性交)或使用避孕措施，并同意不捐赠精子。
F.排除标准
特定于癌症的排除标准
·在研究治疗启动前3周内，进行任何抗癌疗法，无论是研究或批准的，包括化学疗法、激素疗法和/或放射疗法，但以下情况除外：
·使用促性腺激素释放激素(GnRH)激动剂或拮抗剂的激素疗法用于前列腺癌
·激素替代疗法或口服避孕药
·经当地监管机构批准的用于治疗癌症的酪氨酸激酶抑制剂(TKI)已在第1周期第1天前＞7天中止；基线扫描必须在既往TKI中止后获得，并且必须满足有关归因于既往癌症治疗的不良事件的标准
·在第1周期第1天前＞1周的草药疗法
·在第1周期第1天前＞2周的针对疼痛转移或潜在敏感部位(例如，硬膜外腔)转移的姑息性放射疗法
·不允许使用先前抗TIGIT药剂
·允许使用癌症疫苗和/或细胞因子进行先前治疗，前提是在最后一次给药与建议的第1周期第1天之间已过去了至少6周或5个药物半衰期(以较短者为准)。
·对于任何先前全身性癌症治疗，最短清除时间为3周。
·患有NSCLC肺淋巴上皮瘤样癌亚型的患者
·原发性CNS恶性肿瘤、未经治疗的CNS转移灶或活动性CNS转移灶(进展或需要皮质类固醇来控制症状)
·具有经治疗的CNS转移史的患者符合条件，前提是满足以下所有标准：CNS之外的可测量疾病；没有使用皮质类固醇治疗CNS转移的持续要求，在入组之前的≥2周中止皮质类固醇，并且没有可归因于CNS转移的持续症状(允许使用稳定剂量的抗惊厥药)；在完成CNS定向疗法后的放射摄影证明病情有所改善，并且没有证据表明在完成CNS定向疗法与筛选放射摄影研究之间有临时进展；筛选CNS放射影像研究距放射疗法完成后≥4周。
·软脑膜疾病
·不受控制的肿瘤相关疼痛
·不受控制的胸腔积液、心包积液或腹水，需要反复引流(每月一次或更频繁)。允许患者使用留置导管(例如，PleurX导管)。
·在第1周期第1天前5年内，除正在研究的疾病以外的恶性肿瘤，但转移或死亡风险可忽略不计的恶性肿瘤除外(诸如经充分治疗的宫颈原位癌、基底细胞或鳞状细胞皮肤癌、局部前列腺癌或导管原位癌)
·不受控制的高钙血症(＞1.5mmol/L离子钙或Ca＞12mg/dL或校正后血清钙≥ULN)或需要继续使用双膦酸盐疗法或地诺单抗(denosumab)的症状性高钙血症。
·患者患有未经手术和/或放疗进行明确治疗的脊髓压迫症，或先前经诊断和治疗的脊髓压迫症，但没有证据表明筛选前疾病在临床上稳定≥2周。
特定于治疗的排除标准
·自身免疫性疾病病史，包括但不限于系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、炎症性肠病、与抗磷脂综合征相关的血管血栓形成、韦格纳肉芽肿、舍格林综合征、贝尔麻痹(仅自身免疫病因)、格林巴利综合征、多发性硬化、血管炎或肾小球肾炎，但以下情况除外：
有自身免疫性甲状腺功能减退症病史并且接受稳定剂量的甲状腺替代激素的患者可能符合条件。
患有湿疹、银屑病、慢性单纯性苔藓或仅具有皮肤病表现(例如，无银屑病关节炎)的白癜风的患者可能符合条件，前提是满足以下条件：皮疹覆盖面积小于体表面积的10％；疾病被良好控制在基线并且仅需要使用低效局部皮质类固醇；过去12个月内未发生基础疾病的急性恶化情况。
·在第1周期第1天前2周内用全身性免疫抑制用药治疗(包括但不限于泼尼松＞10mg/天、环磷酰胺、硫唑嘌呤、甲氨蝶呤、沙利度胺和肿瘤环伺因子-α[TNF-α]拮抗剂)。曾接受急性、低剂量、全身性免疫抑制用药(例如，用于治疗恶心的一次性剂量的地塞米松)的患者可以入组该研究。允许使用吸入性皮质类固醇(例如，用于慢性阻塞性肺疾病的氟替卡松)、口服盐皮质激素(例如，用于患有直立性低血压的患者的氟氢可的松)和用于肾上腺功能不全的生理剂量的皮质类固醇。
·特发性肺纤维化、肺炎(包括药物引起的肺炎)、机化性肺炎(即闭塞性细支气管炎、隐源性机化性肺炎等)病史，或在筛查胸部CT扫描时发现活动性肺炎的证据
允许有辐射场中的放射性肺炎(纤维化)病史。
·HIV感染检测呈阳性
·活动性乙型肝炎(定义为筛选时乙型肝炎表面抗原[HBsAg]检测呈阳性)；活动性丙型肝炎；筛选时活动性EBV感染和已知或疑似慢性活动性EBV感染；或活动性肺结核。在第1周期第1天前4周内发生严重感染，包括但不限于因感染、菌血症或严重肺炎的并发症而住院
·最近发生的不满足上述严重感染标准的感染，包括以下情况：
·在第1周期第1天前2周内出现感染的迹象或症状
·在第1周期第1天前2周内接受口服或IV抗生素
·接受预防性抗生素(例如，用于预防尿路感染或慢性阻塞性肺疾病)的患者符合条件。
·既往接受过同种异体骨髓移植或既往接受过实体器官移植
·在第1周期第1天前4周内接种减毒活疫苗或预期在研究期间需要接种此类减毒活疫苗
·流感疫苗接种仅在流感季节给予。在第1周期第1天前4周内或研究期间的任意时间以及最后一次研究治疗后5个月内，患者不得接种减毒活流感疫苗(例如，)。
·存在对嵌合或人源化抗体或融合蛋白的重度变应性、过敏或其他超敏反应史
·已知对CHO细胞产品过敏
·对阿特珠单抗制剂成分有变态反应或有过敏反应
G.分析
活性分析
下述分析基于根据RECIST v1.1对客观缓解的定义。
客观缓解率
ORR的分析包括接受任何量的研究治疗并且在基线时患有可测量疾病的患者。客观缓解定义为CR或PR，如由研究者评定所确定并且通过在初始记录后≥4周的重复评定所确认。将缺失基线或无应答评定的患者归类为无应答者。
缓解持续时间
在有客观缓解的患者中，客观缓解的持续时间定义为从最初的完全或部分缓解到疾病进展或死亡的时间，以先发生者为准。对于在研究结束前没有死亡或疾病进展或失访的患者，客观缓解的持续时间在最后一次肿瘤评定的当天删失。
无进展存活期
PFS的分析包括已接受任何量的研究治疗的患者。PFS定义为从研究治疗第1天直至记录的疾病进展或死亡的时间，以先发生者为准。对于在研究结束前未记录PD或死亡或失访的患者，PFS在最后一次肿瘤评定当天删失。对于没有任何基线后肿瘤评定估的患者，PFS在研究治疗的第一天删失。
安全性分析
通过汇总DLT、不良事件、实验室测试结果的变化、生命体征和ECG的变化以及对任何研究治疗(替瑞利尤单抗或阿特珠单抗)的暴露来评定安全性。所有接受任何量的研究治疗药物的患者均包括在安全性分析中。
H.患者特征
患者的基线特征和处置如表6所示。二十一例患有转移性食管癌的患者接受治疗(组织病理学亚型：鳞状癌(13例患者)、腺癌(7例患者)和神经内分泌(1例患者))。包括接受过大量预治疗的群体，其中15例患者(71.4％)接受过≥2种先前疗法。中位年龄为62岁。五例患者(23.8％)具有ECOGPS 0，并且16例患者(76.2％)具有ECOGPS1。
表6.基线特征和患者处置
/>
a包括新辅助和/或辅助疗法
ECOG；东部肿瘤协作组；IC，免疫细胞；TC，肿瘤细胞
I.不良事件
不良事件的安全性总结如表7所示。如研究者所评定，14例患者(66.7％)发生治疗相关不良事件(TRAE)，其中1例患者发生3级TRAE。12例患者(57.1％)发生免疫介导的AE(imAE)。未观察到4级或5级TRAE或imAE。
表7.不良事件的安全性汇总
a一例患者发生淋巴细胞计数减少的相关3级AE。
b一例患者因与研究药物无关的5级上气道阻塞而中止治疗。
c3级免疫介导的AE包括淀粉酶升高(n＝2)和转氨酶升高(n＝1)。
最常见的AE和所有免疫介导的AE如表8所示。报告的最常见的AE(≥15％的患者)是恶性肿瘤进展(28.6％)、贫血(23.8％)、食欲下降、咳嗽、天冬氨酸转氨酶升高和淀粉酶升高(均为19.0％)。TRAE，包括免疫介导的AE(主要是皮疹和实验室异常)，主要为1级至2级。总体而言，替瑞利尤单抗和阿特珠单抗在患有转移性食管癌的患者中具有良好的耐受性，并且具有可接受的安全性特征。
表8.最常见的AE和所有免疫介导的AE
/>
a按医学概念报告的imAE；b所有病例仅具有实验室异常，未确诊(无临床症状)。
J.功效
进行了有效性分析。在经过至少一次肿瘤评定的18例可评估患者中，有5例发生部分缓解(PR)(经确认的客观缓解率(ORR)为27.8％(5/18例患者))(图1)。疾病控制率(DCR)为50％(9/18例患者)。中位无进展存活期为3.5个月(95％置信区间(CI)：1.2至5.6)(表9)。一例患者在超过2年的时间里仍在研究中(治疗正在进行；图1)，表现出持久缓解(图2)。具有<5％或≥5％的PD-L1 TC或IC的患者的肿瘤大小减小(3/5的缓解者具有<5％的PD-L1 TC或IC)(图1)，表明无论PD-L1状态如何均具有抗肿瘤活性。
表9.治疗反应
CI，置信区间；DOR，缓解持续时间；NR，未达到；PFS，无进展存活期。
一例患有转移性食道腺癌的78岁白人男性于2018年11月入组研究，并且在第一次肿瘤评定时表现出部分缓解(PR)，该部分缓解状态维持了2年(图3)。根据VENTANA SP142测定法，该患者的PD-L1状态为PD-L1 TC<1％并且PD-L1 IC为6％。该患者接受过多线先前疗法，包括：一线改进的5-氟尿嘧啶、亚叶酸和奥沙利铂(mFOLFOX6)，其中疾病稳定(SD)是疾病进展(PD)之前对该治疗的最佳应答(2018年3月至2018年6月)；以及二线紫杉醇和雷莫芦单抗，其中疾病进展(PD)为最佳应答(2018年6月至2018年9月)。该病例证明了经过大量预治疗的患者的临床缓解的持久性。
总之，替瑞利尤单抗与阿特珠单抗组合在未接受过先前免疫疗法的患有经过大量预治疗的转移性食管癌的患者中显示出有前景的初步抗肿瘤活性。在肿瘤患者中发生持久缓解，与PD-L1状态或组织学无关。
实例2：一项评估多种治疗组合在患有黑素瘤的患者中的有效性和安全性的Ib/II期、开放标签、多中心、随机、伞式研究
黑素瘤是一种潜在致命的皮肤癌，并且是增长最快的恶性肿瘤之一(Algazi等人,Cancer Manag Res.2:197-211,2010；Finn等人,BMC Med.10:23,2012)。目前，全球每年有超过300,000人被诊断出患有黑素瘤，并且57,000人死于该疾病。黑素瘤患者的临床结果高度依赖于就诊时的分期。大多数患有晚期黑素瘤的人预后差(Finn等人,BMC Med.10:23,2012)。淋巴结受累的患者(III期)在手术后局部和远处复发的风险高，并且该患者组的5年存活率为32％至93％(Gershenwald等人,CA Cancer J Clin.67:472-492,2017)。很少有患者就诊时患有转移性疾病(IV期)，但一些患者在其最初的确定性治疗后出现转移。免疫疗法和靶向疗法已改善了这些患者的结局，并且5年存活率为约50％(Larkin等人,N Engl JMed.373:23-34,2015；Wolchok等人,N Engl J Med.377:1345-1356,2017；Larkin等人,NEngl J Med.381:1535-1546,2019；Robert等人,Lancet Oncol.20:1239-1251,2019；Long等人,J Clin Oncol.38(增刊15):10013，2020)。尽管最近取得了进展，但黑素瘤仍然是一个严重的健康问题，具有高医疗需求，并且过去30年来发病率逐步上升(Bataille.ExpertRev Dermatol.4:533-539,2009)。
BO43328是一项在患有可切除III期(队列1)或IV期(队列2)黑素瘤的患者中的Ib/II期、开放标签、多中心、随机、伞式研究。该研究的设计具有灵活性，以在新疗法可用时开放新的治疗臂，关闭表现出最小临床活动性或不可接受的毒性的现有治疗臂，调整患者群体(例如，关于既往抗癌治疗或生物标志物状态)，或引入额外的患有其他类型的黑素瘤的患者队列。
A.研究设计概述
本研究评估了治疗组合在患有可切除III期黑素瘤的癌症免疫疗法(CIT)初治患者(队列1)和IV期黑素瘤患者(队列2)中的有效性、安全性和药代动力学。下文概述了队列1(见表10)和队列2(见表11)的具体研究目标以及对应的终点。
表10.队列1的目标和对应的终点
/>
/>
ADA＝抗药抗体；ASTCT＝美国移植和细胞疗法学会；CLND＝完全性淋巴结清扫；CR＝完全缓解；CRS＝细胞因子释放综合征；EFS＝无事件存活期；NCI CTCAE v5.0＝美国国家癌症研究所不良事件通用术语标准，5.0版；ORR＝客观缓解率；OS＝总存活期；pCR＝病理完全缓解；PK＝药代动力学；pnCR＝病理接近完全缓解；pPR＝病理部分缓解；PR＝部分缓解；pRR＝病理缓解率；RECIST v1.1＝实体瘤疗效评估标准，1.1版；RFS＝无复发存活期。
表11.队列2的目标和对应的终点
/>
/>
ADA＝抗药抗体；ASTCT＝美国移植和细胞疗法学会；CR＝完全缓解；CRS＝细胞因子释放综合征；DOR＝缓解持续时间；iRECIST＝改进的RECIST v1.1，用于基于免疫的治疗剂；NCI CTCAE v5.0＝美国国家癌症研究所不良事件通用术语标准，5.0版；ORR＝客观缓解率；OS＝总存活期；PFS＝无进展存活期；PK＝药代动力学；PR＝部分缓解；RECIST v1.1＝实体瘤疗效评估标准，1.1版。
注：研究者使用RECIST v1.1评估单个时间点的总体缓解。
在本研究中，平行入组两个队列。队列1入组患有可活检的根据实体瘤疗效评估标准1.1版(RECIST v1.1)的有可测量的淋巴结转移的可切除III期黑素瘤的患者，这些患者在过去6个月内无移行转移史，并且未接受过针对其疾病的全身性CIT，例如PD-1/PD-L1和/或CTLA-4阻断剂或其他药剂。
队列2入组患有IV期黑素瘤的患者，其在至少一种但不超过两个针对转移性疾病的治疗线期间或之后经历疾病进展。最多允许两线检查点抑制疗法(单一疗法或组合疗法)。患有BRAF突变型疾病的患者可能已接受额外的靶向疗法线(在检查点抑制疗法之前、间歇或之后)，或者可能已同时接受靶向疗法和检查点抑制疗法作为一种组合治疗。
治疗分配
在队列1中，将患者随机分配到对照组(纳武利尤单抗加伊匹木单抗(Nivo+Ipi))或由RO7247669(一种结合至PD-1和LAG3结合的双特异性抗体)、阿特珠单抗与替瑞利尤单抗组合(Atezo+Tira)、或RO7247669与替瑞利尤单抗组合(RO7247669+Tira)所组成的实验臂。将患者按地理区域(澳大利亚与世界其他地区)和基线LDH(≤正常值上限(ULN)与>ULN)进行分层。表12和图4提供了有关治疗方案的详细信息。
在队列2中，患者入组由RO7247669与替瑞利尤单抗组合(RO7247669+Tira)所组成的实验臂。入组以包括6例患者的安全性导入阶段开始。
研究期间入组大约61例至191例患者，其中包括入组队列2的安全性导入阶段的大约6例患者。实验臂的入组分两期进行，即初步期和扩展期。在初步阶段，大约有15例至20例入组各治疗臂。如果在初步阶段在实验臂中观察到临床活性(队列1中的病理缓解)，则大约20名的额外患者可以在扩展阶段入组该臂中。
主办方可以决定延迟或暂停给定治疗臂的入组。具有不足的临床活动性或不可接受的毒性的实验臂不扩展。可以纳入额外患者以确保治疗臂之间在人口统计学和基线特征方面的平衡，包括潜在的预测性生物标志物，以便进行进一步的亚组分析。
随机化比率取决于可用的实验臂的数量(例如，如果增加一个臂或暂停一个臂的入组以等待初步期的结果分析)，其中规定划拨到对照臂的可能性不超过35％。随机化考虑了特定于臂的排除标准。如果患者满足为该臂概述的任何排除标准，则他们不符合加入特定臂的条件。
表12提供了有关治疗方案的详细信息。
表12.治疗方案
a申办方可以决定延迟或暂停给定治疗臂的入组。因此，所有实验臂可能不会同时开放入组。
b在安全性导入阶段期间，将患者分配到可用的治疗臂。治疗分配比率取决于开放入组的实验臂的数量。
c随机化比率取决于开放随机化的实验臂的数量(例如，如果增加一个臂或暂停一个臂的随机化以等待初步阶段的结果分析)，其中规定分配给对照臂的可能性不超过35％。
d如果在初步阶段在实验臂中观察到临床活性，则大约20例额外的患者在扩展阶段入组该臂中。具有最小临床活动性或不可接受的毒性的实验臂不会进行扩展。
e在队列1RO7247669、Atezo+Tira和RO7247669+Tira臂中暂停入组，以便对至少6例患者进行安全性评估。
f在对队列2中的治疗组合进行安全性评估后，队列1中的RO7247669+Tira臂开放入组。
在队列1中，对照臂和实验臂中的患者在6周期间接受新辅助治疗。新辅助治疗完成后，或由于毒性而中止且不存在疾病进展的情况下，患者在第7周经历手术(完全性淋巴结清扫(CLND))。根据研究者的判断，在本研究之外，患者随后从第13周开始辅助疗法或观察(图5)。
由于在用CIT的T细胞应答(称为假性进展)的环境中，免疫细胞浸润可能导致转移性淋巴结大小的初始增加，因此根据RECIST v1.1的疑似临床或放射摄影进展可能不指示真正的疾病进展。在不存在不可接受的毒性的情况下，在接受用CIT药物治疗期间满足根据RECIST v1.1的疾病进展标准的患者如果满足以下所有标准，则允许继续研究治疗直至手术。在中止研究治疗和/或取消手术之前，由额外的专家审查员通过活检或重复放射摄影评定来确认进展。预计所有患者都将进行手术，前提是不存在远处转移并且外科医生认为疾病能够完全切除。
在队列2中，患者继续接受治疗，直至由研究者在综合评定放射摄影和生化数据、局部活检结果(如果有)和临床状态(例如，症状恶化，诸如疾病继发性疼痛)后确定的不可接受的毒性或临床益处丧失。由于在用阿特珠单抗和其他CIT的T细胞应答(称为假性进展)的环境中，免疫细胞浸润可能导致肿瘤负荷的初始增加，因此根据RECIST v1.1的放射摄影进展可能不指示真正的疾病进展。在不存在不可接受的毒性的情况下，在接受用CIT组合治疗期间满足根据RECIST v1.1的疾病进展标准的患者如果满足以下所有标准，则允许继续治疗：
·临床益处的证据，如由研究人员在审查所有可用数据后所确定。
·不存在指示明确的疾病进展的症状和体征(包括实验室值，诸如新发或恶化的高钙血症)。
·不存在可归因于疾病进展的东部肿瘤协作组(ECOG)体能状态下降。
·在方案允许的医学干预措施无法解决的关键解剖部位(例如软脑膜疾病)无肿瘤进展。
研究者告知符合进展后治疗条件的患者，他们在继续接受研究治疗的同时可能会放弃已知可带来临床获益的其他治疗选择。患者有权随时以任何理由自愿退出研究。此外，研究者有权因患者的医疗状况(如果患者继续参加研究，研究者或申办者确定这些医疗状况可能危及患者的安全)而让患者退出研究。
如果在随后的肿瘤评定中排除了假性进展并且确认了疾病的进展，则患者中止研究治疗。
安全性评估阶段(队列1)
为评估新辅助环境中实验治疗的毒性，在入组大约6例患者后暂停入组，以便进行安全性评估。安全性评估是基于来自最少6例患者的安全性数据，这些患者已接受治疗的至少一个剂量(即给定组合的每种药剂的一个剂量)并且在手术之前已完成安全性随访评定。值得注意的是，及时进行手术(CLND)是治疗耐受性的指标。在6例患者安全性评估期间，或在安全性评估后的任何时间，如果≥30％的患者经历被认为至少可能与研究治疗相关的以下事件中的一者或多者，则在申办方评估该治疗的获益-风险特征时暂停该组合的入组：
·在2周内未改善(经过或不经治疗)至2级或更好的治疗相关的≥3级不良事件。
·治疗相关的不良事件导致手术延迟>2周。
·治疗相关的严重不良事件。
·需要永久中止研究药物的治疗相关的不良事件。
·死亡，但无可争议地与疾病进展或外部原因(诸如事故)相关的死亡除外。
如果未检测到新的安全性信号，将恢复该臂中的入组。
安全性导入阶段(队列2)
为评定首次临床测试的新颖组合的安全性和耐受性，在队列2中实施了初始安全性导入阶段。将大约6例患有转移性疾病的患者用新颖组合(即，RO7247669+Tira)治疗，并且评定安全性和耐受性持续至少28天。
队列2中至少有6例患者必须完成初始安全性导入阶段。如果确定RO7247669+Tira组合是可耐受的，则可以开放初步阶段的入组，并且可以开放队列1中的RO7247669+Tira臂的入组。在安全性导入阶段的患者按顺序入组和治疗，其中第一例患者与其余患者之间间隔至少一周。
评定是基于来自最少6例患者的安全性数据，这些患者已接受治疗的至少一个剂量(即，每种药剂的一个剂量)并且已完成持续至少28天的安全性随访评定。如果≥30％的患者经历被认为至少可能与研究治疗相关的以下事件中的一者或多者，则在申办方评估该治疗的获益-风险特征时暂停该组合的入组：
·在2周内未改善(经过或不经治疗)至2级或更好的治疗相关的≥3级不良事件。
·治疗相关的严重不良事件。
·需要永久中止研究药物的治疗相关的不良事件。
·死亡，但无可争议地与疾病进展或外部原因(诸如事故)相关的死亡除外。
如果未检测到新的安全性信号，则也在队列1中开始该组合。
B.研究结束和研究时长
本研究的结束定义为当最后一例患者完成末次访视之日，包括通过电话或在诊所进行的存活随访。研究的总长度(从第一个患者的筛选到研究结束)预计为大约5个月。
C.研究设计的基本原理
患者群体的依据
队列1入组患有可活检的有可测量的淋巴结转移的可切除III期黑素瘤(根据RECIST v1.1)的患者，并且这些患者在过去6个月内无移行转移史。入组的患者未接受过针对其疾病的先前免疫疗法。
同一患者群体入组OpACIN和OpACIN-neo研究，包括PRADO扩展队列。这些研究在患有可切除黑素瘤的患者中评估了纳武利尤单抗与伊匹木单抗的新辅助(和辅助)组合。已发现，与辅助疗法相比，新辅助疗法具有统计学上显著并且具有临床意义的益处(Rozeman等人,Lancet Oncol.20:948-960,2019；Blank等人,J Clin Oncol.38:15S,2020；Rozeman等人,Nat Med.27:256-263,2021)。此外，在优化的治疗计划中，治疗的安全性是可耐受的。
尽管最近证明了检查点抑制疗法的获益，但仍然需要对患有可切除黑素瘤的患者更有效(即，在手术样本中具有更广泛且更深入的病理反应)和耐受性更好的治疗方案。本研究中的多种治疗选择预计会通过多种机制刺激免疫系统。目的是将CIT的益处扩展到当前检查点抑制以外的更大的患有可切除黑素瘤的群体。
队列2入组患有IV期黑素瘤的患者，其在至少一种但不超过两个针对转移性疾病的治疗线期间或之后经历疾病进展。最多允许两线检查点抑制疗法(单一疗法或组合疗法)。患有BRAF突变型疾病的患者可能已接受额外的靶向疗法线(在检查点抑制疗法之前、间歇或之后)，或者可能已同时接受靶向疗法和检查点抑制疗法作为一种组合治疗。
在队列2中研究了尚未经过临床测试的具有抗黑素瘤活性的临床和/或生物学依据的化合物的新颖组合。重要的是，对于考虑用于新颖组合的单个化合物，在其他研究中已经确定了安全性和耐受性，并且可使用安全剂量和计划。队列2安全性导入阶段评定新颖组合在潜在的叠加毒性方面的安全性。
D.纳入标准
队列1和队列2的共同纳入标准
患者必须满足所有以下标准才能取得进入队列1和队列2的资格：
·签署知情同意书时年龄为≥18岁。
·代表性肿瘤样本的可用性，该样本适用于经由中心测试来确定PD-L1和/或其他生物标志物状态。
–通过在筛选时对转移性淋巴结(队列1)或其他转移性病灶(队列2)进行活检，从所有患者(队列2安全性导入阶段的患者除外)收集基线肿瘤组织样品。
–此外，所有患者都会提交存档原发性肿瘤组织(如果有)。如果没有可用的存档原发性组织(例如，对于患有未知原发性肿瘤的患者)，则允许入组。对于存档组织，福尔马林固定、石蜡包埋(FFPE)的石蜡块中的肿瘤样本(首选)具有足够的大小和肿瘤含量代表性，优选地包括浸润边缘，或至少16张含有未染色、新鲜切割、连续切片的载玻片必须与相关联的病理报告一起提交。如果只有10至15张载玻片可用，则患者仍符合研究条件。
·适当的血液和终末器官功能，通过在研究治疗启动前14天内获得的以下实验室测试结果定义：绝对中性粒细胞计数(ANC)≥1.5×109/L(1500/μL)；淋巴细胞计数≥0.5×109个细胞/L(500/μL)(边缘机器淋巴细胞计数可通过手动计数来确认)；血小板计数≥100×109/L(100,000/μL)；血红蛋白≥90g/L(9g/dL)；AST、ALT和ALP≤2.5×ULN(有肝转移记录的参与者可具有≤5×ULN的AST和ALT；有肝或骨转移记录的参与者可具有≤5×ULN的ALP)；总胆红素≤1.5×ULN(已知患有吉尔伯特病的患者可能具有≤3×ULN的胆红素水平)；肌酐≤1.5×ULN或肌酐清除率≥30mL/min(使用Cockcroft-Gault公式计算)；血清白蛋白≥25g/L(2.5g/dL)。未接受治疗性抗凝的患者可具有≤1.5×ULN的INR和aPTT。
·对于接受治疗性抗凝的患者：稳定的抗凝剂方案(即，研究治疗开始之前3个月内没有新血栓形成、血栓栓塞事件或出血事件)。
·筛选时HIV测试呈阴性。除非当地法规不允许，否则没有既往HIV检测结果呈阳性的患者将在筛选时接受HIV测试。
·筛选时乙型肝炎表面抗体(HBsAb)呈阴性，并且乙型肝炎核心抗体(HBcAb)检测呈阴性。如果患者在筛选时乙型肝炎表面抗原(HBsAg)检测呈阴性并且总HBcAb检测呈阳性，则还必须进行乙型肝炎病毒(HBV)DNA检测以排除活动性HBV。
·筛选时丙型肝炎病毒(HCV)抗体检测呈阴性；或筛选时HCV抗体检测呈阳性，之后HCV RNA检测呈阴性。仅对HCV抗体测试呈阳性的患者进行HCV RNA测试。
·对于有生育能力的女性：同意保持禁欲(避免异性性交)或使用避孕措施。
·对于男性：同意保持禁欲(避免异性性交)或使用避孕措施，并且同意不捐赠精子，如针对各具体治疗臂所概述。
队列1的纳入标准
患者必须满足所有以下标准才能取得进入队列1的资格：
·ECOG体能状态(PS)为0或1。
·经组织学证实的可切除III期黑素瘤(T：T0、Tx或T1-4；N：cN1-3、pN1b/2b/3b；M：根据AJCC-8的M0(Gershenwald等人,CA Cancer J Clin.67:472-492,2017))并且在过去6个月内无移行转移史。
–患者可能患有原发性黑素瘤伴有并发区域淋巴结转移，或有临床检测到区域淋巴结复发的原发性黑素瘤或未知的原发性黑素瘤第病史，并且可能属于以下组中的任一者：原发性皮肤黑素瘤伴有并发临床/放射学明显的区域淋巴结转移淋巴结转移；临床/放射学检测到的近端区域淋巴结盆地复发性黑素瘤；或临床/放射学检测到的由未知原发灶引起的淋巴结黑素瘤(如果是单个部位)。
·适合并且计划进行CLND(如由外科医生在随机化之前根据当地指南所评定)。
·根据RECIST v1.1的可测量的疾病(至少一个靶病灶)。至少一个肉眼可见的淋巴结转移(根据RECIST v1.1为可测量的)进行活检。
队列2的纳入标准
患者必须满足所有以下标准才能取得进入队列2的资格：
·ECOGPS为0、1或2。
·预期寿命≥3个月，如由研究者所确定。
·根据AJCC-8，经组织学证实的IV期(转移性)黑素瘤(Gershenwald等人,CACancer J Clin.67:472-492,2017)。
·在至少一线但不超过两线针对转移性疾病的治疗期间或之后发生疾病进展。最多允许两线检查点抑制疗法(单一疗法或组合疗法)。患有BRAF突变型疾病的患者可能已接受额外的靶向疗法线(在检查点抑制疗法之前、间歇或之后)，或者可能已同时接受靶向疗法和检查点抑制疗法作为一种组合治疗。
·在针对局部黑素瘤的辅助疗法期间或完成后6个月内复发或发生全身性进展的患者可能符合条件。
·根据RECIST v1.1的可测量的疾病(至少一个靶病灶)。
至少一处转移(根据RECIST v1.1为可测量的)。
E.排除标准
如果患者符合随后的部分中概述的任何适用的标准，则将患者排除在具体的臂的入组之外，如以下治疗臂所指定：
队列1和队列2的排除标准
符合以下任何条件的患者将被排除在研究之外：
·黏膜和葡萄膜黑素瘤。
–对于队列1，排除肢端雀斑样痣黑素瘤。
–对于队列2，允许肢端雀斑样痣黑素瘤；但是，患者的比例不应超过反应可评估的患者的20％。
·在研究治疗启动前28天内用试验用疗法治疗。
·在研究治疗启动前4周内或5个药物消除半衰期(以较长者为准)内，用全身性免疫刺激剂(包括但不限于IFN和IL-2)治疗。
·既往异基因干细胞或实体器官移植。
·已知的免疫缺陷或需要全身性免疫抑制药物治疗的病状(包括但不限于环磷酰胺、硫唑嘌呤、甲氨蝶呤、沙利度胺和抗肿瘤坏死因子-α药剂)，或预期在研究治疗期间需要全身性免疫抑制用药，但以下情况除外：使用替代剂量的皮质类固醇管理垂体功能低下或肾上腺功能不全的患者符合该研究的条件；在与医学监查员讨论后，接受急性、低剂量、全身性免疫抑制剂用药或一次性脉冲剂量的全身性免疫抑制剂用药(例如，48小时皮质类固醇用于造影剂过敏)的患者符合该研究的条件；接受盐皮质激素(例如，氟氢可的松)、用于慢性阻塞性肺病或哮喘的皮质类固醇或用于治疗体位性低血压或肾上腺功能不全的低剂量皮质类固醇的患者符合该研究的条件。
·在开始研究治疗之前4周内用减毒活疫苗治疗，或者预期在研究治疗期间或在最后一剂研究治疗后5个月内需要此类疫苗。
·自身免疫性疾病或免疫缺陷活动期或病史，包括但不限于重症肌无力、肌炎、自身免疫性肝炎、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、炎症性肠病、抗磷脂抗体综合征、韦格纳肉芽肿病、干燥综合征、格林-巴雷综合征或多发性硬化症，但以下情况除外：
有自身免疫相关的甲状腺功能减退症病史并且正在接受稳定剂量的甲状腺替代激素的患者符合该研究的条件。
患有1型糖尿病且正在接受稳定的胰岛素方案的患者符合该研究的条件。
–如果满足以下所有条件，患有湿疹、银屑病、慢性单纯性苔藓或仅具有皮肤病表现的白癜风(例如，银屑病关节炎患者除外)的患者符合该研究的条件：皮疹必须覆盖<10％的身体表面积；疾病被良好控制在基线并且仅需要使用低效局部皮质类固醇；在过去12个月内没有发生需要补骨脂素加紫外线A辐射、甲氨蝶呤、类视黄醇、生物制剂、口服钙调神经磷酸酶抑制剂或高效或口服皮质类固醇的潜在病症的急性恶化。
·具有特发性肺纤维化、机化性肺炎(例如，闭塞性细支气管炎)、药源性肺部炎症或特发性肺部炎症的病史，或在胸部计算机断层扫描(CT)扫描中发现存在活动性肺部炎症的证据。在与医学监查员讨论后，有CIT相关的<2级肺炎病史的患者可能符合条件。
·筛选前2年内有除恶性黑素瘤以外的恶性肿瘤病史，但转移或死亡风险可忽略不计(例如，5年OS率>90％)的恶性肿瘤除外，诸如经过充分治疗的宫颈原位癌、非黑素瘤皮肤癌、局部前列腺癌、导管原位癌或I期子宫癌。
·活动性肺结核(TB)。
·在研究治疗启动前4周内发生过严重感染，包括但不限于，因感染、菌血症或严重肺炎的并发症或研究人员认为可能影响患者安全的任何活动性感染而住院。
·在研究治疗启动前2周内用治疗性或预防性口服或IV抗生素治疗。
·重大心血管疾病，诸如美国纽约心脏协会心脏病(II级或更高级别)、在研究治疗启动前3个月内发生过心肌梗死或脑血管意外、不稳定心律失常或不稳定心绞痛。
·不受控制的高血压(定义为在两次或更多次连续测量中，静息收缩压>150mmHg和/或舒张压>100mmHg)。
·在研究治疗启动前4周内进行过除用于诊断外的大手术或预计在研究期间需要进行除CLND外的大手术。
–放置中心静脉通路导管(例如，端口或类似导管)不视为大手术，因此是允许的。
·任何其他疾病、新陈代谢功能障碍、体格检查发现或临床实验室发现，这些发现禁止使用研究药物，可能影响对结果的解释，损害患者参与研究的能力或可能使患者处于治疗并发症的高风险中的疾病或病症。
·对嵌合抗体或人源化抗体或融合蛋白的重度过敏反应史。
·已知对中国仓鼠卵巢细胞产物或重组人抗体有过敏反应。
·已知对任何研究药物或其赋形剂的变态反应或过敏。
·已知对预防性用药所需的任何药物(对乙酰氨基酚、雷尼替丁、苯海拉明和甲泼尼龙)不耐受。
·妊娠或哺乳，或打算在研究期间妊娠。
–有生育能力的女性在研究治疗启动前14天内的血清妊娠试验结果必须呈阴性。
·仅符合对照臂的条件。
队列1的排除标准
将满足以下任何标准的患者排除在队列1之外：
·远处转移的黑素瘤
·过去6个月内有移行转移史
·先前放射疗法
·先前免疫疗法，包括抗CTLA-4、抗PD-1和抗PD-L1治疗性抗体以及针对黑素瘤的其他全身性治疗
队列2的排除标准
将满足以下任何标准的患者排除在队列2之外：
·有症状的、未经治疗的或进行性CNS转移。
–具有经治疗的CNS病灶的无症状患者符合条件，前提是满足以下所有标准：根据RECIST v1.1确定的可测量疾病必须存在于CNS之外；患者无颅内出血或脊髓出血史；CNS转移在研究开始前稳定≥4周，或神经外科切除发生在研究治疗开始之前≥28天；在开始研究治疗之前至少14天，患者不需要使用皮质类固醇来治疗CNS疾病；允许使用稳定剂量的抗惊厥疗法。
·有活动的癌性脑膜炎/软脑膜病或相应病史。
·不受控制的肿瘤相关疼痛。需要止痛药的患者在筛选时必须采用稳定的治疗方案。适合姑息性放疗后的症状性病灶(例如，骨转移或引起神经碰触的转移)应在入组前进行治疗。患者应当已从放射治疗的影响中恢复。不要求最短恢复期。在进一步增长的情况下可能导致功能缺陷或顽固性疼痛的无症状性转移性病灶(例如，目前与脊髓压迫无关的硬膜外转移)，应在入组前考虑进行局部区域治疗(如果合适的话)。
·不受控制的胸腔积液、心包积液或腹水，需要反复引流(每月一次或更频繁)。留置导管(例如，)的患者是允许的。
·不受控制或有症状的高钙血症(离子化钙>1.5mmol/L，钙>12mg/dL，或校正钙>ULN)。
·任何归因于先前CIT的免疫介导的4级不良事件发生史(通过替代疗法得到控制的内分泌疾病或无症状的血清淀粉酶或脂肪酶升高除外)，该不良事件导致先前免疫治疗剂永久中止。
·所有与先前免疫调节疗法相关的免疫介导不良事件(通过替代疗法得到控制的内分泌疾病或稳定型白斑病除外)尚未完全消退至基线。因免疫介导的不良事件而用皮质类固醇治疗的患者，但用于治疗肾上腺功能不全的皮质类固醇替代疗法(前提是患者每天接受≤10mg泼尼松或等效药物)除外，在中止皮质类固醇后≥4周内不得具有相关症状或体征。
·与任何先前放射疗法、化学疗法、靶向疗法、CPI疗法或外科手术相关的不良事件必须已消退至1级或更好，但稳定剂量的激素替代疗法(例如，甲状腺素、氢化可的松、泼尼松龙等)时的脱发(任何级别)、2级周围神经病灶以及甲状腺功能减退症和/或垂体功能减退症除外。
含有RO7247669的臂的排除标准(队列1和队列2)
将满足以下任何标准的患者排除在含有RO7247669的臂之外：
·先前使用抗LAG-3药剂治疗。
·心肌炎病史(无论病因如何)。
·在开始研究治疗之前6个月内，通过经胸超声心动图(TTE)或多门控采集(MUGA)扫描(TTE首选测试)评定左心室射血分数(LVEF)<50％。
·肌钙蛋白T(TnT)或肌钙蛋白I(TnI)>机构ULN。如果24小时内的重复水平≤1×ULN，则具有在>1至<2×ULN之间的TnT或TnI水平的患者符合条件。如果24小时内的重复水平在>1至<2×ULN之间，患者需要经历心脏评估，如果不存在临床上显著的发现，则可以考虑治疗。
含有替瑞利尤单抗的臂的排除标准(队列1和队列2)
将满足以下任何标准的患者排除在含有替瑞利尤单抗的臂之外：
·先前使用抗TIGIT药剂治疗。
·筛选时活动性爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)感染或已知或疑似慢性活动性EBV感染。将筛选时EBV病毒衣壳抗原(VCA)IgM测试呈阳性的患者排除在含有替瑞利尤单抗的臂之外。应根据临床指征进行EBV PCR测试，以筛选活动性感染或疑似慢性活动性感染。将EBVPCR测试呈阳性的患者排除在含有替瑞利尤单抗的臂之外。
F.研究治疗
用于本研究的试验用药品是阿特珠单抗、替瑞利尤单抗、RO7247669、纳武利尤单抗和伊匹木单抗。
对照臂(纳武利尤单抗+伊匹木单抗)
纳武利尤单抗加伊匹木单抗(Nivo+Ipi)对照臂的患者接受如表13中所概述的2个周期(6周)治疗，直至手术，或直至出现不可接受的毒性或临床获益丧失，以先发生者为准。建议不迟于随机化后7天开始治疗。
表13.纳武利尤单抗+伊匹木单抗臂的治疗方案
纳武利尤单抗在每个21天周期的第1天(Q3W)通过IV输注以3mg/kg的剂量施用。伊匹木单抗在每个21天周期的第1天(Q3W)通过IV输注以1mg/kg的剂量施用。
RO7247669臂
RO7247669臂的患者接受如表14中所概述的2个周期(6周)治疗，直至手术，或直至出现不可接受的毒性或临床获益丧失，以先发生者为准。建议不迟于随机化后7天开始治疗。
表14.RO7247669臂的治疗方案
RO7247669是Q3W以2100mg的固定剂量(在每个21天周期的第1天，2100mg)施用。RO7247669的施用是在受监测的环境中进行，在该环境中，可以立即接触到训练有素的人员以及足够的设备和药物来管理潜在的危重反应。根据表15中概述的说明施用RO7247669输注。
表15.首次和第二次RO7247669输注的施用
IRR＝输注相关反应。
对于经历2级输注相关反应(IRR)的患者，在随后的输注之前需要用扑热息痛500mg至1000mg口服(PO)或IV以及苯海拉明25mg至50mg PO或IV(或足够剂量的替代组胺H1/2拮抗剂))进行前驱用药。如果发生与研究治疗相关的3级或4级IRR，则患者应永久中止研究治疗。
不允许对RO7247669进行剂量调整。
阿特珠单抗+替瑞利尤单抗
阿特珠单抗加替瑞利尤单抗(Atezo+Tira)臂的患者将接受如表16中所概述的2个周期(6周)治疗，直至手术，或直至出现不可接受的毒性或临床获益丧失，以先发生者为准。建议不迟于随机化后7天开始治疗。
表16.阿特珠单抗+替瑞利尤单抗臂的治疗方案
阿特珠单抗是每3周一次(Q3W)以1200mg的固定剂量(在每个21天周期的第1天，1200mg)施用。阿特珠单抗的施用在受监测的环境中进行，在该环境中，可以立即接触到训练有素的人员以及足够的设备和药物来管理潜在的危重反应。根据表17中概述的说明施用阿特珠单抗输注。
不允许对阿特珠单抗进行剂量调整。
表17.首次和后续阿特珠单抗输注的施用
IRR＝输注相关反应。
替瑞利尤单抗以600mg IV Q3W的固定剂量施用(在每个21天周期的第1天，600mg)。替瑞利尤单抗的施用在受监测的环境中进行，在该环境中，可以立即接触到训练有素的人员以及足够的设备和药物来管理潜在的危重反应。根据表18中概述的说明施用替瑞利尤单抗输注。
表18.首次和后续替瑞利尤单抗输注的施用
/>
IRR＝输注相关反应。
在经历被认为与研究治疗相关的毒性的患者中，可以暂时停用阿特珠单抗和替瑞利尤单抗。如果开始用皮质类固醇治疗毒性，则如果需要，必须在≥1个月内逐渐减量至等效于≤10mg/天口服泼尼松，然后才能恢复研究治疗。在新辅助环境中，研究治疗仅限于6周的术前窗口。在此期间，不应中断治疗，除非患者经历毒性。如果毒性符合中断/停用阿特珠单抗和/或替瑞利尤单抗的标准，则应中断/停用阿特珠单抗和/或替瑞利尤单抗。毒性消退后，只有在获益/风险特征可接受并且手术可在计划日期2周内进行的情况下，才应考虑后续的治疗周期。否则，应省略后续的治疗周期，以允许患者直接进行手术，不再进一步拖延。
基于现有的作用机制特征，替瑞利尤单抗可能引起与阿特珠单抗相似但独立于阿特珠单抗的不良事件。替瑞利尤单抗还可能加剧与阿特珠单抗相关的不良事件的频率或严重程度，或者可能具有与阿特珠单抗不重叠的毒性。由于这些情况在临床环境中可能无法彼此区分，因此不良事件通常应归因于两种药剂，并且应将响应于不良事件的剂量中断或治疗中止应用于替瑞利尤单抗和阿特珠单抗两者。如果停用或中止阿特珠单抗，则也应停用或中止替瑞利尤单抗。如果停用或中止替瑞利尤单抗，则也应停用或中止阿特珠单抗。
RO7247669+替瑞利尤单抗(队列1和队列2)
RO7247669加替瑞利尤单抗(RO7247669+Tira)臂中的患者接受如表19中所概述的治疗。
队列1中的患者接受2个周期(6周)治疗，直至手术，或直至出现不可接受的毒性或临床获益丧失，以先发生者为准。
队列2中的患者接受研究治疗，直至由研究者在综合评定放射摄影和生化数据、局部活检结果(如果有)和临床状态(例如，症状恶化，诸如疾病继发性疼痛)后确定的不可接受的毒性或临床获益丧失。
建议在随机化(队列1)或入组(队列2)后不迟于7天开始治疗。
表19.RO7247669+替瑞利尤单抗臂的治疗方案
a在安全性导入完成后，申办方可以决定探索更低的剂量(例如1200mg和600mg)。
RO7247669是在每个21天周期的第1天以2100mg的固定剂量通过IV输注施用。替瑞利尤单抗是在每个21天周期(具有输注后观察期)的第1天以600mg的固定剂量通过IV输注施用，如表18中所述。
RO7247669的施用是在受监测的环境中进行，在该环境中，可以立即接触到训练有素的人员以及足够的设备和药物来管理潜在的危重反应。根据表20中概述的说明施用RO7247669输注。
表20.首次、第二次和后续RO7247669输注的施用
IRR＝输注相关反应。
对于经历≥2级输注相关反应(IRR)的患者，在随后的输注之前需要用扑热息痛500mg至1000mg口服(PO)或IV以及苯海拉明25mg至50mg PO或IV(或足够剂量的替代组胺H1/2拮抗剂))进行前驱用药。如果发生与研究治疗相关的3级或4级IRR，则患者应永久中止研究治疗。
不允许对RO7247669进行剂量调整。但是，基于新出现的安全性和有效性数据，申办方可以探索更低的剂量(例如，1200mg和600mg)。RO7247669治疗可能因毒性以外的原因(例如，外科手术)而中断。
研究者和医学监查员将确定可接受的治疗中断时间长度。
在经历被认为与研究治疗相关的毒性的患者中，可能会暂时停止用RO7247669和替瑞利尤单抗治疗。如果开始用皮质类固醇治疗毒性，则如果需要，必须在≥1个月内逐渐减量至等效于≤10mg/天口服泼尼松，然后才能恢复研究治疗。
对于队列1，在新辅助环境中，研究治疗仅限于6周的术前窗口。在此期间，不应中断治疗，除非患者经历毒性。如果毒性符合中断/停用RO7247669和替瑞利尤单抗的标准，则应中断/停用RO7247669和替瑞利尤单抗。毒性消退后，只有在获益/风险特征可接受并且手术可在计划日期2周内进行的情况下，才应考虑后续的治疗周期。否则，应省略后续的治疗周期，以允许患者直接进行手术，不再进一步拖延。
对于队列2，如果因毒性而停用RO7247669和替瑞利尤单抗达12周或更长时间，则患者应中止RO7247669和替瑞利尤单抗。但是，RO7247669和替瑞利尤单抗可以停用超过12周，以便患者在恢复治疗前逐渐减少皮质类固醇的用量。如果医学监查员同意患者可能获得临床益处，则可以在停用12周后恢复使用RO7247669和替瑞利尤单抗。RO7247669和替瑞利尤单抗可能因毒性以外的原因(例如，外科手术)而暂停。可接受的延长时间段的长度必须取得研究者与医学监查员的同意。
基于现有的作用机制特征，替瑞利尤单抗可能引起与阿特珠单抗相似但独立于RO7247669的不良事件。替瑞利尤单抗还可能加剧与RO7247669相关的不良事件的频率或严重程度，或者可能具有与RO7247669不重叠的毒性。由于这些情况在临床环境中可能无法彼此区分，因此不良事件通常应归因于两种药剂，并且应将响应于不良事件的剂量中断或治疗中止应用于替瑞利尤单抗和RO7247669两者。如果停用或中止RO7247669，则也应停用或中止替瑞利尤单抗。如果停用或中止替瑞利尤单抗，则也应停用或中止RO7247669。
G.伴随疗法
伴随疗法包括患者使用除方案规定的研究治疗外的任何用药(例如，处方药、非处方药、疫苗、草药或顺势疗法药物、营养补充剂)从研究治疗启动前7天到治疗中止访视。
一般而言，按照当地护理实践，研究人员应使用支持疗法而不是根据临床指征定义为谨慎或禁止疗法的疗法来管理患者的护理(包括既往病症)。经历输注相关症状的患者可以使用对乙酰氨基酚、布洛芬、苯海拉明和/或H2受体拮抗剂(例如法莫替丁、西咪替丁)或当地标准做法的等效药物进行对症治疗。严重的输注相关事件表现为呼吸困难、低血压、喘息、支气管痉挛、心动过速、血氧饱和度降低或呼吸窘迫，并应根据临床指示采用支持疗法进行治疗(例如，补充氧和β2-肾上腺素能激动剂)。
RO7247669、Atezo+Tira和RO7247669+Tira臂的允许疗法
允许患者在研究期间使用以下疗法：
·年失败率<1％的口服避孕药。
·激素替代疗法。
·预防性或治疗性抗凝疗法(诸如稳定剂量的华法林或低分子量肝素)。
·灭活疫苗(例如，流感疫苗)。
·施用甲地孕酮醋酸酯作为食欲刺激剂
·盐皮质激素(例如，氟氢可的松)
·施用皮质类固醇用于慢性阻塞性肺疾病(COPD)或哮喘。
·施用低剂量皮质类固醇用于体位性低血压或肾上腺皮质功能不全。
·局部疗法(例如，手术(完全性淋巴结清扫(CLND)和非黑素瘤特异性除外)。
对于RO7247669臂，由研究者酌情决定，抗组胺药、解热药和/或镇痛药的前驱用药仅可针对第二次RO7247669输注施用。
对于阿特珠单抗加替瑞利尤单抗臂，由研究者酌情决定，抗组胺药、解热药和/或镇痛药的前驱用药仅可针对第二次阿特珠单抗和替瑞利尤单抗输注施用。
队列2中RO7247669+Tira臂的额外允许疗法
允许患者在研究期间使用以下疗法：
·如下文概述的姑息性放射疗法(例如，治疗已知的骨转移灶或缓解疼痛症状)：姑息性放射疗法是允许的，只要它不干扰对肿瘤靶病灶的评定(例如，待辐射的病灶不能是可测量疾病的唯一部位)。姑息性放射疗法期间可继续用替瑞利尤单抗治疗。在姑息性放疗期间可继续用RO7247669进行治疗，但以下情况除外：在施用RO7247669当天不允许进行姑息性放射疗法。
–
·如下文概述的局部疗法(例如，手术、立体定向放射外科、放射疗法、射频消融)：在获得医学监查员批准后，经历需要局部疗法以控制三个或更少病灶的混合应答的患者仍符合继续研究治疗的条件。接受针对靶病灶的局部疗法的患者将不再可评估放射摄影缓解，但仍可评估进展情况。
由研究这酌情决定，抗组胺药、解热药和/或镇痛药的前驱用药仅可针对第二次和后续RO7247669和替瑞利尤单抗输注施用。
H.评定
在整个研究过程中密切监测所有患者的不良事件。不良事件是根据美国国家癌症研究所不良事件通用术语标准5.0版(NCI CTCAE v5.0)进行分级的。细胞因子释放综合征(CRS)严重程度也根据美国移植和细胞疗法学会(ASTCT)CRS共识分级量表进行分级。
队列1中的患者接受持续2个周期(6周)的新辅助治疗，并且在第7周接受手术(CLND)。预计所有患者都将进行手术，前提是不存在远处转移并且外科医生认为疾病能够完全切除。病理缓解是在本地并且由独立病理审查进行评定。
因不可接受的毒性而中止治疗并且一直不存在转移性疾病证据的患者仍然符合手术条件，并且在不良事件消退并重新分期确认III期疾病后继续进行CLND。如果患者发生经确认的疾病进展，则患者管理和治疗选择由主治医师酌情决定。这些患者留在研究中接受随访。
患者在手术(CLND)之前在第6周(从第1周期的第1天开始)接受放射学肿瘤评定。缓解是由研究者根据RECIST v1.1进行评定和确定的，但不需要通过后续的影像学研究进行确认。
队列2中的患者在前54周内每9周(从第1周期的第1天开始)进行肿瘤评定，然后每12周进行肿瘤评定。应答由研究人员使用RECIST v1.1评估。基于研究者评定的个体病灶数据，由申办方以编程方式按照改进的RECIST v1.1，用于基于免疫的治疗剂(iRECIST)确定缓解。
对于队列1和队列2，如果在实验臂中证明了临床活动性，则申办方可能要求提交该臂的肿瘤评定扫描以供独立审查机构进行评估。
肿瘤和应答评估
所有可测量和可评估的病灶均应在筛选时进行评定和记录。在获得知情同意之前以及随机化/入组之前14天内作为标准护理进行的肿瘤评定不必在筛选时重复。
对于队列1和2，在基线确定的所有可测量和/或可评估的病灶应在后续肿瘤评估中重新评定。后续肿瘤评定应使用在筛选时用来评定疾病部位的相同放射摄影过程(例如，与CT扫描相同的造影剂方案)。
队列1肿瘤和缓解评估
评定队列1中的患者对治疗的病理和放射学缓解。患者在基线时和手术(CLND)治疗6周后接受病理肿瘤评定。第7周完全切除III期淋巴结(CLND)必须符合治疗性淋巴结清扫的适当的外科手术标准。如果患者正在接受皮质类固醇或其他抗炎药物来管理免疫介导的不良事件，则应按计划进行CLND，前提是这些药物以稳定或逐渐减少的剂量给予，并且不良事件的严重程度为2级或更低。如果在计划手术时研究治疗相关的不良事件尚未充分改善，则CLND可以延迟最多2周。病理缓解是由当地独立的病理审查根据INMC指南来确定的(Tetzlaff等人,Ann Oncol.29:1861-1868,2018)。
手术并发症是根据Clavien-Dindo分类进行评分。对接受CLND的患者报告每个级别的并发症发生率并且进行评分。
根据RECIST v1.1，患者在基线、手术前治疗6周后(CLND)以及第13周治疗完成/中止时接受放射摄影肿瘤评定。
研究人员使用RECIST v1.1评估单个时间点的总体缓解。
疾病随访以及疾病进展或复发的确认
在新辅助治疗期间，疾病进展的诊断应通过临床、实验室、放射学和/或组织学发现来确认。手术后，在开始辅助治疗或观察之前，在第13周进行肿瘤评定以关闭新辅助疗法-手术干预窗口。
此后，在研究之外的辅助治疗/观察阶段(即，从第13周开始)，必须对所有患者进行随访，以评定如针对各臂所概述的疾病复发和存活。
完成治疗期的患者在手术后3个月接受其首次存活随访。提前中止研究药物的患者将在最后一剂研究治疗后3个月接受首次存活随访。只有当临床、实验室、放射学和/或组织学发现确认诊断时，才能指定疾病复发(无论是局部、区域还是远处)。
在术后期间，应按照机构指南对疾病状态进行临床评估和记录(例如，前2年每3个月一次；第三年每6个月一次；第四年及以后每年一次)。此外，当根据临床指征排除转移性疾病时，可以考虑肝功能检测、骨扫描、胸部X线/诊断性CT扫描、肝脏成像和/或其他放射摄影方式。
只要在临床上可能，即应通过组织学手段来确认对进展或复发的诊断。应使用并且记录疾病进展或复发性疾病的最早诊断日期。该日期应基于客观的临床、放射学、组织学或细胞学证据。复发性疾病包括局部、区域或远处复发。
下文提供了确认疾病复发、死亡和其他值得注意的随访事件的定义和程序。复发的记录需要指定所有累及的部位以确定复发的模式。以下治疗失败标准构成疾病复发的唯一可接受的证据：
·肺部：在存在单个新病灶的情况下细胞学或活检呈阳性，或出现与转移性疾病一致的多个病灶
·肝脏：在存在单个新病灶的情况下细胞学或活检呈阳性，或出现与转移性疾病一致的多个病灶
·中枢神经系统：脑部CT或MRI扫描或CSF细胞学检查呈阳性
·皮肤、皮下和淋巴结复发：在存在单个新病灶的情况下细胞学或活检呈阳性，或出现与转移性疾病一致的多个病灶
·骨骼和其他器官：在存在单个新病灶的情况下细胞学或活检呈阳性，
或出现与在两项不同放射学研究(即，阳性核骨显像或PET扫描以及造影GI系列或针对腹部疾病的腹部超声波、X线或CT)中确定的转移性疾病一致的多个病灶。
队列2肿瘤和缓解评估
队列2中的患者在前54周内每9(±1)周(自第1周期的第1天)进行肿瘤评定，然后每12(±2)周进行肿瘤评定(无论是否发生剂量延迟)。例外情况是在放射摄影疾病进展后继续治疗的患者。此类患者每9周接受一次肿瘤评定，直至研究者确定临床获益丧失。因此，在因临床获益丧失以外的原因中止治疗的患者中，即使他们开始新的非方案指定的抗癌疗法，肿瘤评定仍应按计划继续进行。由研究人员酌情决定，如果怀疑疾病进展，则随时重复肿瘤评定。
用放射疗法或手术治疗的脑转移灶不视为可测量或可评估的，但在筛选时作为转移性疾病的部位记录。在基线时鉴定的已用放射疗法或手术治疗的脑转移灶将不视为可测量或可评估的，除非大脑中存在疑似疾病进展(即患者出现症状)。因此，除非有临床指征，否则不需要后续的头部扫描。
为了促进按照iRECIST评估队列2中的缓解，对于在进展后继续接受治疗的患者，必须在符合RECIST v1.1的疾病进展后继续进行肿瘤评定。这包括持续测量靶病灶，评估非靶病灶(包括监测任何已显示明确进展的非靶病灶的进一步恶化)，以及在所有后续评定中评估任何新鉴定的病灶(包括测量，如果病灶是可测量的)。
研究人员使用RECIST v1.1评估单个时间点的总体缓解。
生物标志物评定
通过在筛选时对转移性淋巴结(队列1)或其他转移性病灶(队列2)进行活检，从所有患者(队列2安全性导入阶段的患者除外)收集基线肿瘤组织样品。对于队列1中的患者，在第2周期的第1天和在手术时(CLND)通过活检收集治疗中的组织样品。对于入组队列2的患者，在第2周期的第8天通过活检收集治疗中的组织样品。
进行探索性生物标志物分析以了解生物标志物与对研究药物的缓解的关联，同时考虑有效性和安全性终点。探索性生物标志物研究可包括但不限于与肿瘤免疫生物学相关联的基因或基因特征、PD-L1、淋巴细胞亚群、T细胞受体谱系或与T细胞活化相关联的细胞因子的分析。研究可涉及DNA或RNA提取、分析体细胞突变以及使用二代测序(NGS)(包括全外显子组测序(WES))。研究可能涉及提取DNA、无细胞DNA或RNA；分析突变、单核苷酸多态性和其他基因组变异；以及通过使用全面基因组的NGS进行基因组分析。从血液中提取的DNA可以与从组织中提取的DNA进行比较，以通过区分种系变体与体细胞变体来鉴定体细胞变体。
NGS方法可包括组织和血液样品的全基因组测序(WGS)或WES。在参与中心，收集血液样品用于DNA提取，以能够进行WGS或WES，从而鉴定可预测对研究药物的缓解、与进展为更严重的疾病状态相关、与对研究药物的获得性耐药性相关、与发展不良事件易感性相关的变体，这可以改善不良事件监测或调查，或者可以增加对疾病生物学和药物安全性的认识和了解。从血液中提取的DNA可以与从组织中提取的DNA进行比较，以通过区分种系变体与体细胞变体来鉴定体细胞变体。
I.分析
最终研究分析基于通过研究中止收集的患者数据。如果没有另外指定，则疗效分析基于疗效可评估群体，定义为所有患者在他们的分配的治疗方案中接受每种药物的至少一个剂量，并且安全性分析基于安全性可评估群体，定义为所有接受任何量的研究治疗的患者。
入组情况按地区、国家和治疗臂的研究者进行汇总。患者处置按治疗臂进行汇总。重大方案偏差，包括纳入和排除标准方面的重大偏差，按治疗臂进行汇总。
对于安全性可评估的患者，研究药物施用数据按治疗臂制表或列出，并且标记任何剂量调整。利用平均值和标准偏差汇总每种研究药物的总剂量和剂量强度。将中止研究药物的原因制表。
人口统计学和基线特征(包括年龄、性别、种族/民族、体重、恶性肿瘤持续时间、转移性疾病部位(如果适用)和基线ECOGPS)按总体并且按治疗臂进行汇总。
样品体量的确定
本研究并非旨在为假设测试做出明确的功效和I类错误考虑。相反，本研究旨在获得基于治疗或治疗组合在向患有黑素瘤的患者施用时的初步有效性、安全性和PK数据。队列1由患有可切除的III期黑素瘤的患者组成，这些患者未接受过针对其疾病的先前全身性疗法。队列2由患有IV期黑素瘤的患者组成，这些患者在至少一种但不超过两个针对转移性疾病的治疗线期间或之后经历疾病进展。
在队列1中，将大约55例至145例患者随机分配到对照臂和实验臂。在队列2中，将大约6例至46例患者分配到实验臂。
功效分析
队列1中的主要有效性终点
队列1中的主要有效性终点为手术时的pRR。pRR是在新辅助治疗完成后(第7周)在CLND时进行评定。pRR定义为实现pCR(所治疗的肿瘤床中完全不存在活肿瘤)、病理接近完全缓解(pnCR；所治疗的肿瘤床中的活肿瘤<10％)；病理部分缓解(pPR；所治疗的肿瘤床中的<50％被活肿瘤细胞占据)的患者的比例，如通过独立病理审查所确定。计算各臂的pRR以及90％ CI。还计算实验臂与对照臂之间的pRR差异以及90％CI。置信区间是通过精确方法或Wald方法估计的，取决于样品体量。
队列1中的次要有效性终点
队列1中的次要有效性终点为手术时的pRR(如通过局部病理评定所确定)、手术之前的无事件存活期(EFS)、RFS、OS和ORR。pRR的定义见表10。
EFS定义为从随机化到以下任何事件(以先发生者为准)的时间：由研究者根据RECIST v1.1评定的排除手术的疾病进展；局部、区域或远处疾病复发；或因任何原因死亡。未经历过此类事件的患者在最后一次肿瘤后肿瘤评定时删失。
RFS定义为从手术到首次记录的疾病复发或任何原因导致死亡的时间。对于没有记录的疾病复发或死亡的患者，RFS在最后一次肿瘤评定当天删失。
OS定义为从随机化到任何原因导致的死亡的时间。在OS分析时仍然存活的患者在已知他们存活的最后日期删失。
利用Kaplan-Meier方法估计RFS、EFS和OS的中位数，并且通过使用Brookmeyer和Crowley方法来构建90％ CI。还使用Kaplan-Meier方法估计特定时间点的RFS、EFS和OS，其中基于针对方差的Greenwood估计来计算90％ CI。
根据RECIST v1.1的ORR是在新辅助治疗完成后(第7周)进行评定，并定义为发生CR或PR(如由研究者根据RECIST v1.1所确定)的患者的比例。将缺失或无应答评定的患者归类为无应答者。请注意，ORR是使用未经确认的术前放射学缓解来确定的。尽管RECISTv1.1要求在初始缓解后至少4周完成确认性影像学评定，但由于CLND的时间安排，这些缓解无法用后续的影像学来确认。
使用Clopper-Pearson方法来计算各臂的ORR以及90％ CI。还计算实验臂与对照臂之间的ORR差异，以及90％ CI。CI是通过精确方法或Wald方法估计的，取决于样品体量。
队列1中的探索性疗效终点
队列1中的探索性疗效终点为特定时间点(1年、2年、3年和5年)处的标志性EFS、标志性RFS和标志性OS。
使用Kaplan-Meier方法估计每个研究臂的界标EFS率、界标RFS率和界标OS率，通过使用Greenwood公式计算90％的CI。
队列2中的主要有效性终点
队列2中的主要有效性终点为ORR，如表11中所定义。ORR是由研究者根据RECISTv1.1确定的。将缺失或无应答评定的患者归类为无应答者。
计算各臂的ORR，即，发生完全缓解或部分缓解的患者比例，以及90％ CI(Clopper-Pearson方法)。CI是通过精确方法或Wald方法估计的，取决于样品体量。
队列2中的次要有效性终点
队列2中的次要有效性终点是PFS、OS、特定时间点(例如，6个月)处的OS、缓解持续时间(DOR)和疾病控制，如表11中所定义。PFS、DOR和疾病控制由研究人员根据RECIST v1.1确定。
DOR源自具有CR或PR的疗效可评估的患者。
对于不曾记录疾病进展或死亡的患者，在最后一次肿瘤评定当天删失PFS和DOR。
在OS分析时仍然存活的患者在已知他们存活的最后日期删失。
Kaplan-Meier方法用于估计PFS、OS和DOR的中位数，且通过使用Brookmeyer和Crowley方法构建90％ CI。还使用Kaplan-Meier方法估计特定时间点的OS率，且基于针对方差的Greenwood估计来计算90％ CI。
将计算每个治疗臂的疾病控制率(SD≥12周的患者的比例)、PR或CR，其中通过使用Clopper-Pearson精确方法来估计90％ CI。
队列2中的探索性疗效终点
探索性疗效终点是如研究者根据iRECIST所确定的ORR、PFS、DOR和疾病控制。
ORR、PFS、DOR和疾病控制是通过使用上文章节“队列2中的主要有效性终点”和“队列2中的次要有效性终点”中描述的相同方法进行分析。DOR是针对具有完全或部分缓解的疗效可评估的患者得出的。
安全性分析
将逐字记录的不良事件术语映射到监管活动医学词典词库术语，并且根据NCICTCAE v5.0，还根据用于CRS的ASTCT CRS共识分级量表，对不良事件严重程度进行分级。
通过汇总不良事件、实验室测试结果的变化、生命体征和ECG的变化以及对研究药物的暴露来评定安全性。按治疗臂汇总组合治疗的暴露和安全性随访的长度。
将所有逐字记录的不良事件术语映射至监管活动医学词典词库术语。根据NCICTCAE v5.0对不良事件严重程度进行分级，并且还由研究者根据ASTCT共识分级对CRS的严重程度进行分级(Lee等人,Biol Blood Marrow Transplant.25:625-638,2019)。在第一次研究治疗给药期间或之后发生的所有不良事件、危重不良事件、导致死亡的不良事件、特别关注的不良事件和导致研究治疗中止的不良事件(即治疗中出现的不良事件)通过映射的术语、适当的词库水平和严重性等级进行汇总。对于不同严重程度的事件，在总结中使用最高等级。汇总死亡和死因。
相关实验室、生命体征(脉搏率、呼吸率、血压、脉搏血氧饱和度和体温)和ECG数据将按时间显示，并且在适当处标明级别。此外，使用选定实验室测试结果的转置表来汇总基线和最大基线后严重程度等级。汇总了生命体征和ECG的变化。
此外，在队列1中，前12周期间≥3级免疫相关不良事件的发生率、性质，以及因治疗相关的不良事件而导致的手术延迟的发生率和持续时间，将按治疗臂进行汇总。如果在计划手术时研究治疗相关的不良事件尚未充分改善，则CLND可以延迟最多2周。
此外，手术并发症是根据Clavien-Dindo分类进行评分。对接受CLND的患者报告每个级别的并发症发生率并且进行评分。
免疫原性分析
在适当情况下，可以评定阿特珠单抗和其他研究治疗的免疫原性。免疫原性分析包括所有进行至少一种抗药物抗体(ADA)评定的患者。根据接受的治疗将患者分组，或者如果在研究中止前未接受治疗，则根据分配的治疗分组。
对于阿特珠单抗，按治疗组汇总基线时(基线发生率)和药物施用后(基线后发生率)的ADA阳性和ADA阴性患者的数量和比例。在确定基线后发生率时，如果患者为ADA阴性或基线数据缺失，但在研究药物暴露后出现ADA应答(治疗诱导的ADA应答)，或者如果他们在基线时为ADA阳性并且一个或多个基线后样品的滴度比基线样品的滴度高至少0.60个滴度单位(治疗增强的ADA应答)，则认为患者为ADA阳性。如果患者为ADA阴性或基线数据缺失且所有基线后样本均为阴性，或者如果他们在基线时为ADA阳性但没有任何基线后样品的滴度比基线样品的滴度高至少0.60个滴度单位(治疗不受影响)，则认为患者为ADA阴性。
对于测试针对其的ADA的其他研究治疗，阳性是根据在该药物的先前研究中建立的标准方法确定的。
ADA状态与安全性、疗效、PK和生物标志物终点之间的关系可经由描述性统计进行分析和报告。
中期分析
鉴于本研究的探索性，预计在研究期间进行中期分析，其中最早的中期分析是在至少一个实验臂已完成初步阶段的入组并且患者已完成其病理缓解评估时(队列1)，或在至少一个实验臂已完成初步阶段的入组并且患者已经过至少9周的主要终点分析(ORR)随访时(队列2)进行。若申办方认为适合，可进行进一步的中期分析。在队列1中，基于实验臂与对照臂相比的临床活动性的中期分析，后验概率可用于指导进一步入组。如果中期分析表明实验臂的活动性高于对照臂，则实验臂可进一步入组20名额外患者(扩展期)。
在队列2中，基于实验臂与预定义的ORR阈值(定义为相较于标准护理的改善)相比的临床活性的中期分析，后验概率可用于指导治疗臂的进一步入组。例如，如果可用数据表明标准护理ORR为10％并且ORR改善10％被视为临床上有意义的变化，这将导致计算后验概率时的ORR阈值为20％。
标准护理治疗的ORR是基于同类免疫调节试验用化合物和其他化合物对于队列2中的患者群体(在分析时已接受过至少两线先前治疗)的新出现的内部和外部数据。
申办方可基于全部可用数据(包括但不限于观察到的缓解持续时间、PFS和潜在的早期OS数据)做出扩展研究臂的入组的决定。从充分的获益-风险评定的角度，还考虑到安全性和生物标志物数据(做出此决定时可用)。
实例3：一项评估莫苏尼妥珠单抗与替瑞利尤单抗组合(与或不与阿特珠单抗组合)在患有复发性或难治性B细胞非霍奇金氏淋巴瘤的患者中的安全性、有效性和药代动力学的Ib/II期、开放标签、多中心研究
本研究的目的是评估莫苏尼妥珠单抗(一种靶向CD20和CD3的双特异性抗体)与替瑞利尤单抗(一种抗TIGIT(具有Ig和ITIM结构域的T细胞免疫受体)抗体)组合(与或不与阿特珠单抗(一种靶向PD-L1的抗体)组合)在患有治疗复发性或难治性(R/R)滤泡性淋巴瘤(FL)或弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的患者中的安全性、有效性和药代动力学。患有这些疾病的一部分患者是标准一线化学免疫疗法难治的或最终复发，并且复发的特征在于难治性增加以及对后续疗法线的缓解持续时间缩短。这强调了在后续疗法线中对新颖治疗的需求，从而延长无进展存活期(PFS)和总存活期(OS)并且改善获益-风险特征。
A.目标和终点
本研究评估了莫苏尼妥珠单抗与替瑞利尤单抗组合(与或不与阿特珠单抗组合)在既往接受过两线全身性疗法的患有R/R DLBCL或FL的受试者中的安全性、有效性和药代动力学。下表21中概述了研究的具体目标和终点。
表21.研究的目标和对应的终点
/>
/>
/>
/>
/>
/>
ADA＝抗药抗体；ASTCT＝美国移植和细胞疗法学会；AUC＝浓度-时间曲线下面积；Cmax＝观察到的最大浓度；Cmin＝稳态时的最低浓度；CR＝完全缓解；CRS＝细胞因子释放综合征；CT＝计算机断层扫描；DLT＝剂量限制性毒性；DLBCL＝弥漫性大B细胞淋巴瘤；DOR＝缓解持续时间；FL＝滤泡性淋巴瘤；NALT＝新的抗淋巴瘤治疗；NCI CTCAE＝美国国家癌症研究所不良事件通用术语标准；ORR＝客观缓解率；PR＝部分缓解；R/R＝复发性或难治性。Lugano 2014标准：Cheson BD等人,J Clin Oncol 2014；32:1-9
B.研究设计
本研究旨在评估莫苏尼妥珠单抗SC与替瑞利尤单抗IV组合(与或不与阿特珠单抗IV组合)在已接受过至少两线先前全身性治疗的患有R/R B细胞NHL的参与者、具体地为患有DLBCL、HGBL、trFL或FL(1级至3b级)的受试者中的安全性、耐受性、药代动力学和初步有效性。本研究设计的示意图如图6所示。
参与者接受8个周期的研究治疗，包括其中至少施用一种研究药物的所有周期。在主要缓解评定(PRA)时实现PR或SD的参与者在不存在疾病进展的情况下继续治疗达总共17个周期。
·臂1：莫苏尼妥珠单抗SC与替瑞利尤单抗IV组合：安全性导入队列A(初始；参见图7A)和队列B(替代；参见图7B)在每个队列中入组大约6例患有R/R DLBCL、HGBL、trFL或R/R FL(1级至3b级)的参与者。按照IMC关于剂量的建议，扩展队列C入组大约40例患有R/R FL(1级至3a级)的参与者，扩展队列D入组大约40例患有R/R DLBCL、HGBL、trFL或R/R FL(3b级)的参与者
·臂2：莫苏尼妥珠单抗SC与替瑞利尤单抗IV和阿特珠单抗IV组合：安全性导入队列E(参见图7C)入组大约6例患有R/R DLBCL、HGBL、trFL或R/R FL(1级至3b级)的参与者。按照IMC关于剂量的建议，扩展队列F入组大约20例患有R/R FL(1级至3a级)的参与者。
不满足参与本研究的标准(筛选失败)的个体可能有资格获得2次重新筛选机会(每位个体总共进行3次筛选)，由研究者酌情决定。对于重新筛选的患者，必须重新评估所有资格标准，并且重复筛选评定(如果适用)以满足资格标准。
在整个研究过程中以及最后一剂研究治疗后至少90天内，密切监测所有参与者的不良事件。不良事件根据NCI CTCAE 5.0进行分级，其中CRS根据ASTCT 2019CRS共识分级进行分级(Lee等人,2019，参见表4)。通过正电子发射断层扫描(PET)/计算机断层扫描(CT)和CT在中期反应评定(IRA；第4周期，第15天至第21天)和PRA(第8周期，第15天至第21天)以及在研究治疗和随访期期间定期评定参与者的肿瘤反应。肿瘤反应是使用2014年Lugano缓解标准进行评估(Cheson BD等人,J Clin Oncol 2014；32:1-9)。为表征研究治疗的PK特征和免疫应答，在给药前和给药后的不同时间点处采集血液样品。扩展队列C、D或F中同意的参与者可以在基线时以及第1周期的第15天和第2周期的第1天或第2周期的第15天和第3周期的第1天之间经历任选的配对肿瘤活检(取决于选自安全性导入队列的方案)。参与者还可以在任何其他时间经历额外的治疗中活检，由研究者酌情决定(如果研究者认为临床上可行)。
参与者人数
总体而言，全球大约30个研究地点的大约6例至118例参与者入组本研究。
研究治疗
用于本研究的试验用药品(IMP)为莫苏尼妥珠单抗SC、替瑞利尤单抗IV、阿特珠单抗IV和托珠单抗IV。具体给药信息见表22。
表22.研究治疗描述
C＝周期；D＝剂量；C1D1在第1周期的第1天施用的剂量；C1D2在第1周期第8天施用的剂量；C1D3在第1周期第15天施用的剂量；C2+D1各自在第2+周期的各相应剂量的第1天施用的剂量。
参与持续时间
如果在PRA时实现CR，则继续治疗，持续总共8个治疗周期；或者如果在PRA时将缓解评定为PR或SD(如通过Lugano分类所确定(Cheson BD等人,J Clin Oncol 2014；32:1-9)，则继续治疗，持续17个周期。如果发生经确认的疾病进展或不可接受的毒性，则中止治疗。各个体参与研究的总持续时间在1天至超过36个月的范围内。
IB期：安全性导入队列
Ib期安全性导入队列的目的是确定在患有R/R NHL的患者中与替瑞利尤单抗IV组合(与或不与阿特珠单抗组合IV)使用的莫苏尼妥珠单抗SC分步给药计划和方案。
为了评定任何重度和意外的急性药物或注射或输注相关毒性，安全性导入队列A、B和E的入组交错进行。每个队列中前3例参与者的每个C1D1剂量之间必须间隔至少72小时。同一队列中的后续参与者的每个C1D1剂量之间必须间隔至少24小时。在下一例参与者接受研究治疗之前，申办方必须收到有关前一例参与者的状态的确认。此外，安全性导入队列中的所有参与者在首次接受先前未经评估的组合剂量后均需住院72小时(基于最后一次药物施用结束的时间)：
·队列A中的参与者在C1D1住院72小时(基于最后一次药物施用结束的时间)
·队列B和队列E中的参与者在C2D1住院72小时(基于最后一次药物施用结束的时间)
如果参与者在单一药剂莫苏尼妥珠单抗或组合施用后经历≥2级的CRS，则可能需要在后续施用时住院。研究者基于参与者的医疗因素(诸如虚弱)、针对CRS的风险因素和既往CRS事件以及社会因素(包括家中护理人员的可用性和距试验中心的距离)积极评定对住院的需要。除非另有说明，否则所有不良事件，包括本文定义的剂量限制性毒性(DLT)，均根据NCI CTCAE v5.0进行报告和分级。CRS事件根据ASTCT CRS共识分级标准进行分级(表4)。
莫苏尼妥珠单抗SC与替瑞利尤单抗IV组合(臂1，队列A和B)
队列A(图7A)以推荐的II期莫苏尼妥珠单抗SC分步剂量和方案开始：第1周期的第1天，5mg(C1D1剂量)；第1周期的第8天，45mg(C1D2剂量)；和第1周期的第15天，45mg(C1D3剂量)。替瑞利尤单抗IV从C1开始，在每个周期的D1以600mg Q3W施用。
如果6例DLT可评估参与者中有不超过1例经历DLT，则臂1的扩展队列和臂2的安全性导入队列可以开放入组。这些队列中的替瑞利尤单抗施用是基于队列A中的计划，即从C1D1开始。
但是，如果2例或更多参与者在队列A DLT评定期期间经历DLT，或者如果全部数据支持不同的剂量方案，则可以按照IMC建议开始队列B(使用替代剂量方案)(图7B)。在队列B中，以与队列A相同的剂量和计划施用莫苏尼妥珠单抗SC，但替瑞利尤单抗的第一剂量是在第2周期的第1天施用(C2D1剂量)。
如果队列B中的6例DLT可评估参与者中有不超过1例经历DLT，则臂1的扩展队列和臂2的安全性导入队列可以开放入组。这些队列中的替瑞利尤单抗施用是基于队列B中的计划，即从C2D1开始。
但是，如果队列B中有2例或更多参与者经历DLT，或者全部数据支持更低的剂量，则可以按照IMC建议开始各自具有大约6例参与者的额外剂量递减队列，以评定莫苏尼妥珠单抗或替瑞利尤单抗的较低剂量水平与队列B中相同的给药计划和住院要求组合(即，第1周期中的莫苏尼妥珠单抗分步给药，并且在第2周期中开始替瑞利尤单抗施用)。在该队列的6例参与者已完成21天的研究治疗(第2周期的第1天至第21天)后，评估该较低剂量组的安全性数据。
如果该剂量递减队列中的6例DLT可评估参与者中有不超过1例经历DLT，则臂1的扩展队列和臂2的安全性导入队列可以开放入组，其中替瑞利尤单抗施用在C2D1以剂量递减队列中评估的剂量开始。
莫苏尼妥珠单抗SC与替瑞利尤单抗IV和阿特珠单抗IV组合(队列E)
队列E可以基于来自臂1的安全性导入队列的莫苏尼妥珠单抗SC与替瑞利尤单抗IV组合的安全性数据的审查，按照IMC的建议开放入组。队列E评定莫苏尼妥珠单抗SC与替瑞利尤单抗IV和阿特珠单抗1200mg IV组合在患有R/R DLBCL、HGBL、trFL或R/R FL(1级至3b级)的参与者中的安全性(图7C)。如果队列E中的6例DLT可评估参与者中有不超过1例经历DLT，则臂2的扩展队列可以开放入组。
II期：扩展阶段
II期扩展队列C、D和F的目的是进一步评定莫苏尼妥珠单抗SC和替瑞利尤单抗IV(与或不与阿特珠单抗组合IV)在通过安全性导入所确定的剂量和计划下的安全性和有效性。在扩展队列中待评定的研究治疗的剂量和计划是基于安全性导入队列和IMC对累积安全性数据的审查来选择的。患有R/R FL或R/R DLBCL的患者在扩展阶段入组并且按下文所述进行治疗：
·队列C(莫苏尼妥珠单抗SC和替瑞利尤单抗IV)：R/R FL(1级至3a级)；大约40例患者
·队列D(莫苏尼妥珠单抗SC和替瑞利尤单抗IV)：R/R DLBCL、HGBL、trFL或R/R FL(3b级)；大约40例患者
·队列F(莫苏尼妥珠单抗SC、替瑞利尤单抗IV和阿特珠单抗IV)：R/R FL级(1级至3a级)；大约20例患者
莫苏尼妥珠单抗SC、替瑞利尤单抗IV和阿特珠单抗IV再治疗
在初始治疗期间实现完全缓解并且在完成研究治疗后经历疾病复发的参与者符合接受如下所述的使用莫苏尼妥珠单抗和替瑞利尤单抗(队列A、队列B、队列C和队列D)或莫苏尼妥珠单抗、替瑞利尤单抗和阿特珠单抗(队列E和队列F)的再治疗的条件。研究再治疗剂量和计划为先前已在安全性导入队列中证明安全的剂量，前提是满足以下标准：
·在重新开始时满足相关的资格标准，但以下情况除外：
–允许既往用莫苏尼妥珠单抗治疗
–除非有临床指征，否则无需重复血清学检测以证明人类免疫缺陷病毒(HIV)、丙型肝炎病毒(HCV)和乙型肝炎病毒(HBV)状态。必须重复EB病毒(EBV)和巨细胞病毒(CMV)定量PCR
–允许初始研究治疗的可管理且可逆的1级至3级免疫相关不良事件，并且不构成自身免疫病的排除病史
–允许通过替代疗法管理的任何级别的内分泌疾病或任何级别的无症状血清淀粉酶或脂肪酶升高。
·患者在初始研究治疗期间不得经历不认为可归因于另一明确可鉴定原因的4级非血液学不良事件，TLS和CRS可能除外。
·在初始治疗期间经历不认为可归因于另一明确可鉴定原因的2级或3级不良事件的患者必须已消退至≤1级。实验室值必须满足纳入标准中指定的要求，但有相应的例外情况。
·在完成初始研究治疗与重新开始研究治疗之间，不施用干预性全身性抗癌疗法。
·提供书面知情同意书，以确认推迟任何可能存在的标准治疗方案，以利于重新开始研究治疗，并且在临床上可行的情况下对复发或进展的肿瘤进行活检。
对于发生疾病进展后进行再治疗的患者，如果病灶适合在疾病进展时进行活检，强烈建议重复进行肿瘤活检，以便评定评估肿瘤的状态(例如，CD20、TIGIT和PD-1表达状态)以及免疫微环境的变化/状态。对接受再治疗的患者施用的研究治疗的剂量和计划由医学监查员确定，并且为先前测试的相应的安全性导入队列的所有患者均完成DLT观察期的剂量和计划。针对相应剂量和计划的住院要求基于IMC的建议适用。在首次再治疗施用后，患者可能需要住院治疗。
参与持续时间
如果在主要缓解评定(PRA)中实现CR，则继续治疗，持续总共8个治疗周期；或者如果在PRA时将缓解评定为部分缓解(PR)或疾病稳定(SD)(如通过Lugano分类所确定(ChesonBD等人,J Clin Oncol 2014；32:1-9)，则继续治疗，持续17个周期。如果发生经确认的疾病进展或不可接受的毒性，将中止治疗。各个体参与研究的总持续时间预计在1天至超过36个月的范围内。
C.纳入标准
只有当满足所有下列标准时，参与者才有资格被纳入研究中：
·参与者能够签署知情同意书，包括遵守知情同意书和本方案中列出的要求和限制
·参与者签署知情同意书时年龄≥18岁，根据研究者的判断需要住院治疗
·参与者具有0、1或2的东部肿瘤协作组(ECOG)体能状态评分
·参与者具有至少12周的预期寿命
·参与者具有组织学记录的FL或DLBCL
–已复发或对至少两种先前全身性治疗方案无反应，并且不存在以治愈为目的或更高优先级的合适疗法(例如，标准化学疗法、ASCT、CAR T细胞)，包括至少一线含有CD20定向疗法的疗法、用于患有DLBCL、HGBL、trFL和FL 3b级的参与者的至少一种含有蒽环类药物的先前治疗方案，用于患有FL的参与者的至少一种含有烷化剂的先前方案。清髓性高剂量化学疗法后进行巩固性自体HSCT应计为一个疗法线，与先前的挽救性化学疗法分开。桥接疗法后进行CAR T细胞疗法将被计为一个疗法线。局部疗法(例如，放射疗法或鞘内疗法)不会被视为疗法线
–表达CD20，如由当地实验室所确定
–包括在2016年WHO淋巴肿瘤分类诊断列表中：FL(包括原位滤泡瘤和十二指肠型FL)、小儿型FL、DLBCL、NOS(包括生发中心B细胞型和活化型B细胞型)、富含T细胞/组织细胞的大B细胞淋巴瘤、具有MYC和BCL-2、BCL-6重排的高级别B细胞淋巴瘤、非特指型(NOS)高级别B细胞淋巴瘤、NOS EBV+DLBCL、NOS HHV8+DLBCL和/或间变性淋巴瘤激酶(ALK)+大B细胞淋巴瘤
–如果转化后的疾病组织学为DLBCL或HGBCL，则转化性FL为符合条件的诊断，并且参与者必须对用于转化性FL的标准疗法为R/R的；具有Richter转化的参与者不符合入组研究的条件；患有FL 3b级的参与者如果对用于侵袭性NHL标准疗法为R/R的，则仅符合入组安全性导入队列A、B和E以及扩展队列D的条件。
·参与者具有至少一个二维可测量的(>1.5cm)结节病灶，或至少一个二维可测量的(>1.0cm)结外病灶
·参与者具有已确认可用的肿瘤组织(首选在基线时获得的新采集的肿瘤组织样品；如果根据研究者评定无法获得新鲜活检样本，则可以接受存档组织)。
·可以针对其采集骨髓活检和抽吸物的患有FL(包括trFL)的参与者
·参与者具有适当的血液和内脏器官功能，由首次研究治疗(C1D1)之前14天内获得的以下实验室结果定义：AST和ALT≤2.5×ULN；总胆红素≤1.5×ULN；有记录的吉尔伯特综合征病史且总胆红素升高伴随间接胆红素升高的参与者符合条件；在不存在治疗性抗凝的情况下，INR≤1.5×ULN；在不存在狼疮抗凝剂并且不存在治疗性抗凝的情况下，PTT或aPTT≤1.5×ULN；通过机构标准方法测量或估计的肌酐清除率≥50mL/min；在72小时内未输注血小板时的血小板计数≥75,000/μL；在21天内未输血时的总血红蛋白≥9g/dL；中性粒细胞绝对计数(ANC)≥1000/μL；并且参与者在用于资格的ANC之前7天内不得接受生长因子。对于由于NHL广泛的骨髓受累和/或疾病相关的血细胞减少症(例如，免疫性血小板减少症)，不符合血液学功能标准的参与者可以在满足以下标准中的每一者的情况下入组研究：在14天内未输血的情况下血小板计数≥50,000/μL，ANC≥500/mm3，以及任何血红蛋白但在7天内未输血
·对于有生育能力的女性：参与者同意保持禁欲(避免异性性交)或使用避孕措施。
·对于男性：参与者同意保持禁欲(避免异性性交)或使用安全套，并且同意不捐献精子。
D.排除标准
·参与者处于妊娠或哺乳期，或打算在研究期间或最后一剂莫苏尼妥珠单抗后3个月内、最后一剂替瑞利尤单抗后3个月、最后一剂阿特珠单抗(如果适用)后5个月和最后一剂托珠单抗(如果适用)后3个月(以较长者为准)内妊娠。
·有生育能力的女性在研究治疗启动前14天内的血清妊娠试验结果必须呈阴性。
·参与者在进入研究之前已接受以下任何治疗：用莫苏尼妥珠单抗或其他CD20/CD3定向双特异性抗体治疗；用替瑞利尤单抗或其他抗TIGIT药物治疗；同种异体SCT；和/或实体器官移植
·参与者在开始研究治疗之前的相应时间段内接受过以下任何治疗，无论是试验性的还是已批准的：在第一剂研究治疗之前2周内接受过放射疗法。如果参与者在首次研究治疗施用之前4周内接受过放射疗法，参与者必须在辐射场之外具有至少一个可测量的病灶；在首次研究治疗之前100天内进行自体SCT；在首次研究治疗前30天内进行CAR T细胞疗法在首次研究治疗之前4周内使用单克隆抗体或抗体药物缀合物在首次研究治疗之前前12周内使用放射免疫缀合物；在第一剂研究治疗之前2周内使用全身性免疫抑制用药(包括但不限于环磷酰胺、硫唑嘌呤、甲氨蝶呤、沙利度胺和抗肿瘤坏死因子药剂)；允许全身皮质类固醇治疗≤10mg/天泼尼松或等效药物以及吸入皮质类固醇；允许使用急性、低剂量、全身性免疫抑制剂(例如，用于恶心或B症状的单一剂量的地塞米松)；允许使用盐皮质激素管理直立性低血压，使用皮质类固醇管理肾上腺功能不全；和/或在开始研究治疗之前4周或5个药物半衰期内(以较短者为准)的任何其他抗癌疗法，无论是试验性的还是已批准的，包括但不限于化学疗法。
·参与者在第一剂研究治疗前4周内接种过减毒活疫苗，或者预计参与者在研究期间或最后一剂研究治疗后5个月内需要此类减毒活疫苗
·参与者患有侵袭性NHL，其目前符合自体SCT条件
·参与者目前或既往有CNS淋巴瘤或软脑膜浸润病史
·参与者对人源化或鼠单克隆抗体疗法(或重组抗体相关融合蛋白)有重度变应性、过敏反应史
·参与者具有对阿特珠单抗(特定于研究的臂2)或托珠单抗的禁忌症
·参与者在首次研究药物施用之前，由先前疗法引起的临床上显著的毒性尚未消退至≤1级(根据NCI CTCAE v5.0)，但以下情况除外：2级周围感觉或运动神经病变；任何级别的脱发或白癜风；和/或通过替代疗法管理的内分泌疾病
·参与者发生与先前免疫治疗药剂相关联的治疗中出现的免疫介导的不良事件，如下所述：因先前免疫检查点抑制剂(ICI)疗法而发生≥3级免疫介导的不良事件的病史；除通过替代疗法管理的内分泌疾病或血清淀粉酶或脂肪酶无症状升高以外)；和/或与先前癌症免疫疗法相关的所有免疫介导的不良事件(除通过替代疗法管理的内分泌疾病、符合纳入标准的稳定型白癜风和稳定型血细胞减少症)必须已消退至基线
·因免疫介导不良事件接受皮质类固醇治疗的参与者必须证明在中止皮质类固醇后≥4周内无相关症状或体征。
·有证据表明参与者患有任何可能影响方案依从性或结果解释的重大伴随疾病，包括但不限于：
–可能影响方案依从性或结果解释的其他恶性肿瘤病史，但以下情况除外：先前接受过治疗的任何以下恶性肿瘤：宫颈原位癌、预后良好的宫颈原位导管癌乳腺癌、基底或鳞状细胞皮肤癌；无转移性疾病证据且未接受除抗雄激素疗法外的积极疗法的前列腺癌；和/或患有任何其他恶性肿瘤的参与者经过以治愈为目的的适当治疗并且在入组之前≥2年内未治疗而处于缓解期时符合条件
–重大心血管疾病(例如，纽约心脏协会III级或IV级心脏病、先前6个月内的心肌梗死、不稳定心律失常或不稳定心绞痛)
–重大肺疾病(诸如阻塞性肺疾病或支气管痉挛病史)
–临床上显著的肝病史，包括病毒性肝炎或其他肝炎、或肝硬化
–当前或既往CNS疾病史，诸如卒中、癫痫、CNS血管炎或神经退化性疾病
–允许有卒中病史，在过去1年内未经历卒中或短暂性脑缺血发作，并且根据研究者的判断不具有残留神经功能缺损的参与者。
–有癫痫病史且过去2年内未曾癫痫发作(使用或不使用抗癫痫用药)的参与者仅符合扩展队列C、D和F的条件。
–有确认的进行性多灶性白质脑病(PML)的病史
–研究入组时已知的活动性细菌、病毒(包括SARS-CoV-2)、真菌、分枝杆菌、寄生虫或其他感染(不包括甲床真菌感染)，或首次研究治疗给药前4周内的任何需要IV抗生素治疗或住院治疗的重大感染事件(与抗生素疗程完成有关)
–筛选时血清学HIV检测呈阳性
–慢性乙型肝炎病毒感染检测结果呈阳性(定义为乙型肝炎表面抗原[HBsAg]血清学检测呈阳性)
–如果筛选时未检测到HBV DNA，则可以纳入具有隐匿性或既往乙型肝炎感染(定义为乙型肝炎总核心抗体呈阳性并且HBsAg呈阴性)的参与者。这些参与者必须愿意每月经历DNA检测和所示的适当的抗病毒疗法。
–急性或慢性HCV感染
–HCV抗体阳性的参与者必须通过PCR检测为HCV阴性才有资格参加研究。
–已知或疑似慢性活动性EBV感染
–已知或疑似HLH病史
–自身免疫性疾病的病史，包括但不限于：重症肌无力、肌炎、自身免疫性肝炎、全身性红斑狼疮、类风湿性关节炎、炎症性肠病、与抗磷脂综合征相关的血管血栓形成、韦格纳肉芽肿、干燥综合征、吉兰-巴雷综合征、多发性硬化、血管炎或肾小球肾炎
–有自身免疫相关的甲状腺功能减退症病史并且接受稳定剂量的甲状腺替代激素的参与者可能符合条件。
–患有1型糖尿病且正在接受胰岛素方案的参与者符合该研究的条件。
–有疾病相关免疫性血小板减少性紫癜或自身免疫性溶血性贫血病史的参与者符合条件
–如果满足以下所有条件，患有湿疹、银屑病、慢性单纯性苔藓或仅具有皮肤病表现的白癜风(例如，银屑病关节炎患者除外)的患者符合该研究的条件：皮疹必须覆盖10％的身体表面积；疾病被良好控制在基线并且仅需要使用低效局部皮质类固醇；在过去12个月内没有发生需要补骨脂素加紫外线A辐射、甲氨蝶呤、类视黄醇、生物制剂、口服钙调神经磷酸酶抑制剂或高效或口服皮质类固醇的潜在病症的急性恶化
·参与者在首次研究治疗施用之前4周内最近接受过大手术，方案规定的程序(例如，肿瘤活检和骨髓活检)除外
E.研究治疗和伴随疗法
用于本研究的试验用药品(IMP)为莫苏尼妥珠单抗、替瑞利尤单抗、阿特珠单抗和托珠单抗。任何前驱用药(例如，皮质类固醇)均被视为非试验用药品。
本研究的指定的研究治疗如上文表22中所述。治疗方案汇总于上文第B节以及图6和7A至7C中。
在给予两种或更多种IMP的日期，施用顺序应为莫苏尼妥珠单抗、包含中间观察期的替瑞利尤单抗、以及阿特珠单抗(如果适用)。
莫苏尼妥珠单抗
莫苏尼妥珠单抗使用与体重无关的统一给药。队列A中莫苏尼妥珠单抗的起始剂量为5mg/45mg/45mg(C1D1/C1D2/C1D3剂量分别在第1周期的第1天、第8天和第15天施用)。第2周期的第1天和后续周期的第1天的剂量与C1D3剂量(45mg)相同。
当SC施用时，莫苏尼妥珠单抗通过标准医用注射器递送，最终体积不超过2.0mL。相容性测试表明，莫苏尼妥珠单抗在延伸装置和聚丙烯注射器中保持稳定。
莫苏尼妥珠单抗施用于补液充足的参与者。在施用每个莫苏尼妥珠单抗剂量之前，应施用包含20mg地塞米松的皮质类固醇前驱用药。基于研究者的评定，在第2周期及之后，皮质类固醇前驱用药可能是任选的。仅在入组时与医学监查员讨论后才允许使用替代皮质类固醇化合物(例如，由于地塞米松不可用)。但是，如果参与者在先前施用莫苏尼妥珠单抗时经历CRS，则必须在后续剂量中施用包含类固醇的前驱用药，直至未观察到额外的CRS事件。
此外，在施用莫苏尼妥珠单抗之前，可按照标准机构实践施用口服对乙酰氨基酚或扑热息痛(例如500mg至1000mg)和/或50mg至100mg苯海拉明。
在莫苏尼妥珠单抗注射之前(注射之前30分钟内)评定生命体征。莫苏尼妥珠单抗是由合格的工作人员历经30秒至2分钟内施用。所有参与者必须在至少前2个周期的莫苏尼妥珠单抗SC施用之前建立IV通路。首次施用莫苏尼妥珠单抗后，将观察参与者至少30分钟，确定其在莫苏尼妥珠单抗施用后是否出现发热、发冷、寒颤、低血压、恶心、或CRS的其他体征和症状。如果在先前剂量下发生CRS事件，则在注射后续剂量后也应观察患者30分钟。如果在先前剂量下未发生CRS，则针对后续剂量的观察时间可以缩短至15分钟。在此观察期期间，每15(±10)分钟记录生命体征(首次注射莫苏尼妥珠单抗后30分钟；以及如果在先前剂量下未发生CRS，则针对后续剂量为15分钟)。此后，每4小时监测一次生命体征，直至出院。如果针对其他研究药物的输注指南要求，则进行额外的生命体征测量。
替瑞利尤单抗
替瑞利尤单抗将根据表23，在从第1周期或第2周期开始的每个21天周期的第1天以600mg的固定剂量通过IV输注来施用。不允许对替瑞利尤单抗进行单个剂量调整。
表23.替瑞利尤单抗的首次和后续输注的施用
/>
阿特珠单抗
在队列E和F中，阿特珠单抗将根据表24在从第2周期开始的每个21天周期的第1天以1200mg的固定剂量通过IV输注施用。在阿特珠单抗与莫苏尼妥珠单抗和替瑞利尤单抗组合施用的日期，阿特珠单抗将在针对替瑞利尤单抗的观察期结束后施用。不允许对阿特珠单抗进行单个剂量调整。
表24.阿特珠单抗的首次和后续输注的施用
/>
托珠单抗
托珠单抗是一种针对可溶性及膜结合IL-6受体的重组人源化抗人单克隆抗体，其抑制IL-6介导的信号传导。必要时，托珠单抗将作为救援IMP向经历CRS事件的参与者施用(参见第XIII节)。
伴随疗法
从开始研究治疗之前7天到研究完成/中止访视，参与者使用的除方案规定的治疗之外的任何用药或疫苗(包括非处方药或处方药、维生素和/或草药补充剂)都必须与以下信息一起记录在伴随用药和相关eCRF上：
·使用理由
·施用日期，包括开始日期和结束日期
·剂量信息，包括剂量和频率
允许的疗法
一般而言，研究者可按照临床指征和根据当地标准实践，通过使用支持性疗法来管理参与者的护理(包括既往病症)，但本文中定义的禁止疗法除外，并且统考到本文中定义的警示疗法。经历输注相关症状的参与者可以使用对乙酰氨基酚、布洛芬、苯海拉明和/或H2受体拮抗剂(例如，法莫替丁、西咪替丁)或当地标准做法的等效药物进行对症治疗。严重的输注相关事件表现为呼吸困难、低血压、喘息、支气管痉挛、心动过速、血氧饱和度降低或呼吸窘迫，并且应根据临床指征采用支持疗法进行管理(例如，补充氧和β2肾上腺素能激动剂)：
允许使用以下伴随疗法，如下文所述：
·研究者可酌情决定使用抗组胺药、解热药和/或镇痛药进行前驱用药。
·年失败率<1％的口服避孕药
·激素替代疗法
·根据第XIII节治疗CRS
·根据已发布的建议和/或机构实践治疗HLH
·根据已发布的建议和/或机构实践进行TLS预防/治疗
·根据已发布的建议和/或机构实践进行止吐预防/治疗
·允许根据药品说明书、机构实践和/或已发布的指南(Smith等人,2015)中提供的说明进行G-CSF(非格司亭、培非格司亭)的预防性和治疗性使用。当ANC低于500/mm3时应开始生长因子支持，除非有医学禁忌；如果禁用生长因子，则应与医学监查员讨论。
·非活疫苗接种
·允许根据包装插页、机构实践和/或已发布的指南中提供的说明同时使用其他造血生长因子，诸如促红细胞生成素、粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子(沙格司亭)或血小板生成素(奥普瑞白介素、艾曲泊帕)。
允许对病毒、真菌、细菌或肺孢子菌感染进行抗感染预防，并且应按照机构实践或研究者偏好基于个体患者风险因素制定。
F.功效评估
肿瘤和应答评估
参与者在筛选时经历肿瘤评估，在第4周期结束时经历IRA(在第4周期的第15天与第21天之间，在第5周期开始之前)，并且在第8周期结束时经历PRA(在第8周期的第15天与第21天之间)。缓解是根据2014年Lugano标准进行评估(Cheson BD等人,J Clin Oncol2014；32:1-9)。PRA后，治疗开始后第一年期间每3个月继续评估一次缓解，然后每6个月评估一次，直到参与者发生疾病进展、研究中止和/或开始新的淋巴瘤治疗，或在怀疑发生疾病进展时随时评估。由研究者酌情决定，如果怀疑疾病进展，则随时重复肿瘤评定。
在筛选时记录所有可测量和/或可评估的疾病，并且在随后的每次肿瘤评估中重新评估。研究者基于体格检查、CT扫描、氟脱氧葡萄糖(FDG)PET-CT扫描和骨髓检查来评定缓解。
基于临床检查的疾病进展的诊断必须尽快(30天内)并且在开始非方案规定的抗癌疗法之前通过影像学检查(例如，CT扫描、FDG PET-CT扫描)进行确认。
在获得知情同意和开始研究治疗之前28天内，作为标准护理进行的肿瘤评定不必在筛选时重复，只要它们符合下文所概述的标准并且参与者自评定以来未接受过抗癌疗法。
放射摄影评定
在筛选、IRA和PRA时需要进行氟脱氧葡萄糖PET-CT扫描结合诊断质量的CT扫描。在PRA后，应进行CT扫描(包括或不包括PET)。
FDG PET-CT扫描应从颅底延伸至大腿中部。在临床上适当时，应进行全身FDGPET-CT扫描。
造影剂CT扫描(根据机构标准操作程序)应包括胸部、腹部和骨盆。应根据临床指征对其他疾病部位进行CT或磁共振成像(MRI)扫描。如果有造影剂CT扫描的禁忌(例如，在具有造影剂变态反应或肾清除率受损的参与者中)，则允许使用无造影剂CT扫描，前提是它可以在研究期间对靶病灶进行一致且精确的测量。对于有禁忌症的患者，可以使用MRI扫描代替CT扫描。后续肿瘤评定应使用在筛选时用来评定疾病部位的相同放射摄影过程(例如，与CT扫描相同的造影剂方案)。作为PET-CT扫描的一部分获得的诊断增强CT扫描可用于代替专用CT扫描。
骨髓检查
患有DLBCL的参与者可以使用筛选PET/CT扫描来评定骨髓受累情况；除非有临床指征，否则不需要进行骨髓检查(Cheson BD等人,J Clin Oncol 2014；32:1-9)。
在研究开始之前任何时间出现骨髓浸润的患有FL或trFL的参与者需要在筛选时(开始研究治疗之前90天内)经历骨髓检查以进行分期。患有FL的参与者需要经历重复骨髓检查，以确认在筛选时是否存在肿瘤浸润骨髓的CR放射学评估，并且确认在骨髓中复发。
骨髓检查应包括针对形态学的活检以及针对局部血液学的抽吸(流动研究为任选的)。骨髓抽吸/活检的不成功尝试不会被视为方案偏差。
缓解评估
客观缓解将由研究者在指定时间点根据Lugano缓解标准确定(Cheson BD等人,JClin Oncol 2014；32:1-9)。终点(例如，ORR、CRR、PFS、EFS)将基于研究者在每个指定时间点对缓解的评定以编程方式来计算。
G.安全性评定
特别关注的不良事件
本研究特别关注的不良事件如下：
·潜在的药物诱导的肝损伤病例，包括ALT或AST升高结合胆红素升高或临床黄疸(如海氏规律(Hy's Law)所定义)
·怀疑通过研究治疗进行的传染性病原体传播，如下文所定义：
–任何致病或非致病的生物体、病毒或感染性颗粒(例如，朊蛋白传播可传播的海绵状脑病)都视为感染源。可能根据临床症状或实验室检查结果怀疑传染源的传播，这些症状和检查结果指示暴露于药品的参与者发生感染。该术语仅适用于怀疑研究治疗受到污染的情况。
特定于莫苏尼妥珠单抗的特别关注的不良事件
特定于莫苏尼妥珠单抗的特别关注的不良事件包括：≥2级CRS；≥2级神经系统不良事件；≥2级注射部位反应；任何疑似HLH或MAS；TLS(根据定义最低为3级)；发热性中性粒细胞减少症(根据定义至少为3级)；≥2级AST、ALT或总胆红素升高；任何级别的弥散性血管内凝血(根据定义最低为2级)；≥2级肿瘤爆发(例如，通过临床或放射摄影评定，出现与已知结节或结外病灶大小增加相关联的体征/症状，先前存在的胸腔积液新发作或恶化)；以及任何级别的肺炎/间质性肺病(ILD)(不包括具有传染性病因的肺炎)
特定于阿特珠单抗和替瑞利尤单抗的特别关注的不良事件
特定于阿特珠单抗和替瑞利尤单抗的特别关注的不良事件包括：肺炎；结肠炎；内分泌疾病：糖尿病、胰腺炎、肾上腺功能不全、甲状腺功能亢进和垂体炎；肝炎，包括AST或ALT>10×ULN；系统性红斑狼疮神经系统疾患：吉兰-巴雷综合征、肌无力综合征或重症肌无力以及脑膜脑炎；提示超敏反应、输注相关反应、CRS、HLH和MAS的事件；肾炎；眼毒性(例如，葡萄膜炎、视网膜炎、视神经炎)；肌炎；肌病，包括横纹肌溶解症；≥2级心脏疾患(例如，心房颤动、心肌炎、心包炎)；血管炎自身免疫性溶血性贫血；以及重度皮肤反应(例如，史-约综合征、大疱性皮炎、中毒性表皮坏死松解症)
药代动力学
样品将用于评估莫苏尼妥珠单抗、替瑞利尤单抗和阿特珠单抗的药代动力学。为分析莫苏尼妥珠单抗、替瑞利尤单抗和阿特珠单抗血清浓度而采集的样品也可用于评估与研究期间或之后产生的问题相关的安全性或有效性方面。另外，这些数据将用于了解PK暴露与剂量的关系，并且支持在组合环境中表征剂量/暴露-反应关系。此外，这些数据将用于探索和表征替瑞利尤单抗、阿特珠单抗与莫苏尼妥珠单抗之间潜在PK相互作用。
生物标志物评定
如果适用，将从所有部位采集参与者的以下生物标志物样品：
·用于生物标志物探索性研究和生物标志物测定法开发的血液、PBMC和血浆样品
·用于生物标志物探索性研究和生物标志物测定法开发的基线时获得的新采集(或存档)的肿瘤组织样品
探索性生物标志物研究可包括但不限于基于RNA的表达分析和基于DNA的NGS基因突变分析，诸如MS4A1(CD20)或与肿瘤免疫生物学、淋巴细胞、免疫细胞的活化状态和表型相关联的基因特征、与T细胞活化、CRS和神经毒性相关联的细胞因子。
筛选血浆、血液和肿瘤组织样品，包括采集自未入组研究的个体的样品，可用于未来的研究和/或疾病相关测试或工具的开发。
H.分析
Lugano标准
主要有效性终点为研究中的最佳ORR(CR或PR)，如由研究者使用Lugano 2014年标准确定。
缓解应基于疾病的放射摄影和临床证据来确定。正电子发射断层扫描/计算机断层扫描(PET/CT)扫描的评定应遵循以下标准(Cheson BD等人,J Clin Oncol 2014；32:1-9)。造影剂增强CT是更精确地测量淋巴结肿块以及区分纵隔和腹腔的正常解剖结构与疾病淋巴结浸润的首选方法。
靶病灶和非靶病灶
应从代表参与者的总体疾病负担的不同身体区域中识别最多六个最大的靶淋巴结、淋巴结肿块或其他淋巴瘤病灶，这些病灶可通过两个直径进行测量，并且包括纵隔和腹膜后疾病(如果涉及)。在基线时，可测量淋巴结点必须具有>15mm的最长直径(LDi)。可测量的结外疾病可包括在六个代表性的测量病灶中。在基线时，可测量的结外病灶应大于10mmLDi。所有其他病灶(包括淋巴结、结外和可评估的疾病)应作为非靶病灶(例如皮肤、胃肠道、骨、脾、肝、肾、胸腔或心包积液、腹水、骨、骨髓)。
脾脏受累
脾脏可能具有正常大小，也可能肿大、均匀性脾肿大或弥漫性浸润，伴有小病灶或大的实性肿块。优选与体积相关性好的单次测量，并且建议脾肿大的垂直长度截止值>13cm。
肝脏受累
通过CT测量肝脏大小不可靠。肝脏受累与脾脏受累类似，在PET上显示弥漫性增加或局灶性摄取，具有或不具有局灶性病变。
骨髓受累
如果适用，PET中的骨髓受累摄取采用5分制作为淋巴结部位进行评分。
分裂病灶和融合病灶
随着时间的推移，病灶可能会分裂或融合。在分裂病灶的情况下，淋巴结点的垂直直径(PPD)的单个乘积应加在一起以代表分裂病灶的PPD；该PPD被添加到剩余病灶的PPD总和中以测量应答。如果这些离散淋巴结点中的任何一个或所有后续发生增长，则使用每个单独淋巴结点的最低点来确定进展。在融合病灶的情况下，融合肿块的PPD应与单个淋巴结的PPD总和进行比较，融合肿块的PPD与单个淋巴结总和相比增加50％以上，表明进展性疾病。不再需要LDi和最小直径(SDi)来确定进展。
主要终点
每个研究阶段的主要终点如下：
Ib期
·不良事件(包括DLT)的发生率和严重程度，其中严重程度根据NCI CTCAE v5.0确定；对于CRS，严重程度根据ASTCT CRS共识分级标准确定。
II期
·最佳ORR，定义为研究期间最佳总体缓解为PR或CR的参与者的比例，如由研究者使用Lugano 2014标准所确定。
次要终点
每个研究阶段的次要终点如下：
Ib期
·研究中的最佳ORR(任何时间处的CR或PR)由研究者使用Lugano 2014标准确定。
·最佳CR率，定义为研究期间最佳总体缓解为完全缓解的参与者的比例，如使用Lugano 2014标准所确定。
·DOR，定义为从首次出现有记录的客观缓解(CR或PR)开始到疾病进展或复发(如使用Lugano 2014标准所确定)或因任何原因死亡(以先发生者为准)的时间。
II期
·研究中的最佳CR率，如由研究者使用Lugano 2014标准所确定。
·DOR，定义为从首次出现有记录的客观缓解(CR或PR)开始到疾病进展或复发(如使用Lugano 2014标准所确定)或因任何原因死亡(以先发生者为准)的时间。
·PFS，定义为从首次研究治疗到首次出现疾病进展或复发(如由使用Lugano2014标准所确定)或因任何原因死亡(以先发生者为准)的时间
·EFS，定义为从首次研究治疗到首次出现疾病进展或复发(如使用Lugano 2014标准所确定)、开始NALT或因任何原因死亡(以先发生者为准)的时间。
·OS，定义为从首次研究治疗到因任何原因死亡的时间。
·不良事件的发生和严重程度，其中严重程度根据NCI CTCAE v5.0确定。对于CRS，严重程度根据ASTCT CRS共识分级标准确定。
Ib期和II期
·Cmax
·Cmin
·总暴露量(AUC)、CL和分布容积，如通过群体PK模型(在适当情况下)所估计，并且由数据提供支持。
探索性终点
探索性有效性终点为研究中的最佳ORR(任何时间处的CR或PR)，由使用Lugano2014年标准的自动化缓解评估(aLugano)(一种深度学习算法)来确定。aLugano的分析是在PET/CT可评估的群体中进行的，该群体定义为在基线和治疗期间具有可用的PET/CT扫描的所有患者。
自动化总代谢肿瘤体积(aTMTV)是一种探索性影像学生物标志物，是使用深度学习算法对具有基线可用的PET/CT扫描的可评估患者群体进行计算的。
可以对aLugano、aTMTV和其他探索性生物标志物进行额外的分析。实例4：一项针对患有转移性结直肠癌的患者的Ib/II期、全球、多中心、开放标签、多队列伞式研究-微卫星不稳定性高(MSI-H)队列
INTRINSIC(鉴别和靶向结直肠癌(CRC)中的亚群)是一项I/Ib期、全球、多中心、开放标签、多队列伞式研究。该研究旨在评估靶向疗法或免疫治疗作为单一药剂或以合理、特定的组合在患有转移性CRC的患者中的安全性和有效性，这些患者的肿瘤根据特定于队列的定义为生物标志物阳性。本实例描述了INTRINSIC研究的微卫星不稳定性(MSI-H)高的队列。
A.研究设计概述
INTRINSIC研究的总体结构为伞式介入研究，其中符合条件的患有转移性CRC的患者基于其生物标志物测定结果入组特定队列。基于在生物标记物资格测试、筛选期间通过基于血液的Liquid CDx二代测序(NGS)测定确定的基因组改变的存在，或通过使用如纳入标准中所述的经验证的测试进行先前测试，将患者分配到队列。队列内的随机化可用于定量评估与治疗效果相关的证据。该研究旨在灵活地引入新的经验证的生物标志物测试，随着针对各种已鉴别的体细胞突变或其他生物标志物的定制治疗变得可用而开放新的治疗臂和/或队列，关闭表现出最小临床活性或不可接受的毒性的现有治疗臂和/或队列，或调整患者群体(例如，关于先前抗癌治疗或生物标志物状态)。
符合所有一般资格标准和相应的特定于队列的标准的患者将基于其基因改变或相应的生物标志物分配到适当的治疗。
MSI-H队列使用随机、开放标签研究设计，其中患者随机分配接受阿特珠单抗、替瑞利尤单抗和贝伐单抗(Atezo+Tira+Bev)或阿特珠单抗和替瑞利尤单抗(Atezo+Tira)。入组MSI-H队列是基于通过如纳入标准中所述的经验证的基于NGS、聚合酶链反应(PCR)或免疫组织化学(IHC)的测定的先前结果确认MSI-H存在。替代性地，患者可基于FoundationMedicine,Inc.(FMI)在生物标志物资格测试或筛选期间提供的中心Liquid CDx测试来入组队列。
针对各臂的研究设计的总结如图8A和8B所示。下文概述了MSI-H队列的具体目标和对应的终点(参见表25)。
表25.目标和终点：MSI-H队列的阿特珠单抗+替瑞利尤单抗+贝伐单抗和阿特珠单抗+替瑞利尤单抗治疗臂
/>
/>
ADA＝抗药抗体；ASTCT＝美国移植和细胞疗法学会；CRC＝结直肠癌；CRS＝细胞因子释放综合征；DCR＝疾病控制率；DOR＝缓解持续时间；MSI-H＝微卫星不稳定性高；NCICTCAE v5.0＝美国国家癌症研究所不良事件通用术语标准5.0版；ORR＝客观缓解率；OS＝总存活期；PFS＝无进展存活期；PK＝药代动力学；RECIST v1.1＝实体瘤疗效评估标准1.1版。
该研究具有特定于队列的纳入和排除标准。患者基于相关致癌基因型被分配至队列，并且除非另有说明，否则将继续治疗直至发生疾病进展(如由研究者使用实体瘤反应评估标准1.1版(RECIST v1.1；Eisenhauer等人,Eur J Cancer.45:228-247,2009)所评定)；临床获益丧失；不可接受的毒性；患者或医师决定中止；或死亡，以先发生者为准。
中止研究治疗后，患者将在末次研究治疗后接受30天的安全性评定(30天安全性随访，包括30天随访访视)，或直至开始另一种抗癌疗法，以先发生者为准。
针对每例患者的随访数据收集(包括存活和后续的抗癌疗法)继续进行，指导死亡、失访、撤回同意、或研究或治疗臂和/或队列关闭，以先发生者为准。收集关于后续疗法的性质和持续时间的信息。
在事先同意后，因疾病进展、临床获益丧失或毒性而中止研究治疗的患者可以重新进入筛选，并且可能符合在INTINSIC的不同队列中接受治疗的条件。在此情景下，根据特定于队列的定义，生物标志物呈阳性(如通过对开始新的抗癌疗法之前的治疗中止访视期间获得的血液样品进行基于血液的Liquid CDx分析所确定)并且满足并继续满足当前开放入组的不同队列的所有资格标准的患者，可以在先前特定于队列的知情同意后重新入组。特定于队列的限制仍然适用。
为重新入组到不同的队列，INTINSIC患者可以尽快开始新的研究治疗，同时确保充分清除先前的治疗方案。
本研究的伞式结构允许随着针对各种已鉴别的体细胞突变或其他生物标志物的新的定制治疗变得可用，通过未来的方案修正案来添加新的治疗臂和/或队列。任何额外的治疗臂和/或队列都会增加样品体量和筛选的患者数量。
B.研究结束和研究时长
本研究的结束被定义为最后一例患者、末次访视(LPLV)或针对最后一个治疗臂的最后一个数据点的收集进行评定的日期。当治疗臂的所有预定义的治疗、随访和数据收集完成时，任何治疗臂和/或组均可能会在整个研究结束之前关闭。此外，主办者可随时决定终止治疗臂、队列或研究。
基于该试验的纵向性质，使用当前的治疗臂，预期本研究从第一例患者入组到研究结束(包括存活随访访视)的预计持续时间为大约36个月。但是，该方案的伞式平台性质可能会延长本研究的总体持续时间，以满足通过方案修正案添加的额外治疗臂和/或队列的目标，从而改变LPLV的假设和预测。
C.研究设计的基本原理
MSI-H转移性CRC患者群体的依据
功能失调或缺失的错配修复(MMR)蛋白无法正确纠正DNA复制过程中的主要单核苷酸插入或删除错误(Chung和Rustgi,Gastroenterology.109:1685-1699,1995)。DNA复制期间的这些校正事件通常发生在包含重复碱基对的DNA区域，也称为微卫星。当这些MMR缺陷型肿瘤携带无法修复的DNA区域时，错误导致肿瘤和种系序列中存在的微卫星长度发生变化，其称为MSI-H。MMR缺陷可能偶尔发生，也可能是由于若干MMR基因中的一者的种系突变而发生(称为林奇综合征的病状)。MSI-H CRC也可能通过偶发机制发生，诸如MLH1的启动子区域的高甲基化，这会导致其基因产物的表观遗传沉默。
过去，认为MSI-H状态主要影响晚期患者的预后。但是，最近的发现表明，靶向免疫检查点(诸如PD-L1/PD-1通路)能够在MSI-H CRC中提供有意义且持久的缓解，并且改善存活。帕博利珠单抗是美国食品药品监督管理局(FDA)批准的第一种用于MSI-H转移性CRC的免疫检查点抑制剂。第一项证明帕博利珠单抗在该患者群体中的有效性的研究是KEYNOTE-016研究，该研究对患有MSI-H晚期癌症患者进行治疗，表明针对各种肿瘤类型的缓解率超过50％，其中2016年12月的初始数据截止日期时未达到中位PFS和OS(Le等人,Science.357:409-413,2017)。来自一系列其他多队列试验(诸如KEYNOTE-028研究)的患有MSI-H CRC的患者的汇总分析证明了该患者群体中的抗肿瘤活性，使FDA批准帕博利珠单抗用于化疗难治性情况下(Marcus等人,Clin Cancer Res.25:3753-3758,2019)。
尽管在治疗患有MSI-H转移性CRC的患者方面取得了上述成功，但大部分患者无法从目前批准的免疫疗法中获益，并且一些最初对疗法有反应的患者后来产生对疗法的继发性抗性。迄今为止，对于对基于标准检查点抑制剂的疗法为难治的患有MSI-H转移性CRC的患者，尚未开发出任何新颖、有效的疗法。该研究的MSI-H队列中的组合疗法评估了阿特珠单抗和替瑞利尤单抗(与或不与贝伐单抗组合)是否可以使对标准免疫检查点抑制剂为难治的患有MSI-H转移性CRC的患者获益。
施用抗PD-L1、抗TIGIT和抗VEGF的组合治疗的依据
需要针对抗PD-L1/PD-1疗法的抗性机制的疗法，以改善对这些疗法为难治的患者的结局。强有力的科学依据和新出现的临床数据表明，组合的PD-L1、VEGF和TIGIT抑制可能对多种肿瘤类型具有临床获益。
对PD-L1/PD-1阻断的抗性可能导致效应T细胞表面表达多种共抑制受体。非临床肿瘤模型已经表明，TIGIT选择性抑制经长期刺激的CD8+T细胞的效应子功能，并且与单一药剂治疗相比，以更优异的有效性同时抑制TIGIT和PD-L1/PD-1结果(Johnston等人,Cancer Cell.26:923-937,2014)。在患有晚期CRC的患者的肿瘤组织中也观察到较高水平的若干共抑制受体(包括PD-1和TIGIT)(Saleh等人,Cancer Immunol Immunother.69:1989-1999,2020)。因此，分别用替瑞利尤单抗和阿特珠单抗靶向TIGIT和PD-L1可以增强PD-L1/PD-1阻断在不同癌症类型(包括MSI-H CRC)中的有效性。
抗VEGF药剂促进肿瘤血管系统的正常化，从而增加治疗剂的可得性(Jain.NatMed.7:987-989,2001)。此外，贝伐单抗可恢复和/或维持DC的抗原呈递能力，引起肿瘤中增强的T细胞浸润(Oelkrug和Ramage.Clin Exp Immunol.178:1-8,2014；Wallin等人,NatCommun.7:12624,2016)。抗VEGF-A的施用已被证明能够减弱肿瘤内皮FasL的表达，并且显著增加肿瘤排斥CD8+T细胞的流入，从而抑制肿瘤生长(Motz等人,Nat Med.20:607-615,2014)。抗-VEGF疗法还能够减少骨髓源性抑制细胞的频率，减少抑制性细胞因子的产生，并且降低肿瘤中CD8+T细胞上抑制性检查点的表达(Roland等人,PloS One.4:e7669,2009；Voron等人,J Exp Med.212:139-148,2015)。
贝伐单抗的免疫调节效应预计会增加CD8+T细胞募集并且缓解瘤内免疫抑制，从而增强免疫疗法的效果。此外，VEGF将巨噬细胞募集到具有M2极化状态的肿瘤微环境中，该肿瘤微环境通常参与伤口愈合。这些M2肿瘤相关联的巨噬细胞最终有助于建立和维持免疫抑制微环境(Chen和Mellman.Immunity.39:1-10,2013)。事实上，临床数据已经证明抗血管生成和免疫调节在阿特珠单抗治疗背景下的有益作用。使用阿特珠单抗和贝伐单抗的组合治疗的活性已经在针对NSCLC、RCC和HCC患者的多项大规模随机化III期临床研究中得到证明。
基于上述数据，推测使用阿特珠单抗、贝伐单抗和替瑞利尤单抗的组合治疗可能会增强抗肿瘤免疫应答，在患有对检查点抑制剂为难治的MSI-H CRC的患者中带来改善和更持久的临床获益。
D.纳入标准
为符合入组资格，患者必须满足以下一般纳入标准。要入组MSI-H队列，除下文所概述的特定于治疗臂标准以外，患者还必须满足并持续满足所有一般纳入标准。
一般纳入标准
生物标志物资格测试的纳入标准
患者必须满足以下所有标准才能参加生物标志物资格测试：
·签署NGS生物标志物资格知情同意书。
·签署知情同意书时年龄≥18岁。
·不符合筛选标准的先前测试结果的完整报告(如有)(参见生物标志物资格测试和筛选部分)。具有符合筛选标准的阳性生物标志物状态检测结果的患者可直接进入筛选阶段。
筛选时的纳入标准
患者必须满足以下所有标准才能进入研究：
·生物标志物资格(根据MSI-H队列定义)由美国病理学家学会/临床实验室改进修正案认证或同等认可的诊断实验室使用经验证的测试来确定，该测试基于：
–先前的测试结果和测试结果的完整报告的可用性(参见下文MSI-H队列的额外纳入标准)。
或
–基于血液的Liquid CDx生物标志物资格测试结果在筛选之前或期间生成，或者在治疗中止后重新入组的情况下，在开始新的抗癌疗法生成。
·签署知情同意书时年龄≥18岁。
·ECOG体能状态≤1。
·预期寿命≥3个月，如由研究者所确定。
·经组织学证实的源自结肠或直肠的腺癌。
·转移性疾病(IV期，美国癌症联合委员会，第7版)。
·根据研究者的判断，能够遵守研究方案。
·根据RECIST v1.1的可测量的疾病(至少一个靶病灶)。只有在放射后该部位明确记录了疾病进展时，才能将先前辐射过的病灶视为可测量的疾病。
·在开始研究治疗之前14天内具有足够的血液学和器官功能，定义如下：绝对中性粒细胞计数(ANC)≥1500/μL(不含粒细胞集落刺激因子)；白细胞(WBC)计数≥2.5×109/L(2500/μL)；淋巴细胞计数≥0.5×109/L(500/μL)；血小板计数≥100,000/μL；血红蛋白≥9g/dL(患者在筛选前2周内不得输血以满足此标准)；总胆红素≤1.5×正常值上限(ULN)(如果是吉尔伯特综合征，则为≤3×ULN)；血清白蛋白≥2.8g/dL或28g/L；AST和ALT≤2.5×ULN(有肝转移记录的患者可具有≤5.0×ULN的AST和/或ALT)；ALP≤2.5×ULN(有肝或骨转移记录的患者可具有≤5.0×ULN的ALP)；肌酐清除率≥50mL/min(通过使用Cockcroft-Gault公式计算)或肌酐≤1.5×ULN。
·对于未接受抗凝治疗的患者：INR≤1.5×ULN和活化部分凝血活酶时间(aPTT)≤1.5×ULN
·对于接受治疗性抗凝的患者：稳定的抗凝剂方案
·对于有生育能力的女性：同意保持禁欲(避免异性性交)或使用避孕措施，如每个相应的附录中所概述
·对于男性：同意保持禁欲(避免异性性交)或使用避孕措施，并且同意不捐赠精子，如每个相应的附录中所概述
MSI-H队列的额外纳入标准
除以上纳入标准以外，患者还必须满足下文列出的额外纳入标准才能进入MSI-H队列(即Atezo+Tira+Bev和Atezo+Tira治疗臂)。
·生物标志物资格由经验证的基于二代测序(NGS)、PCR或免疫组织化学(IHC)的测定的先前结果确定。
–患者可基于Foundation Medicine在生物标志物资格测试或筛选期间提供的中心Liquid CDx测试入组。
·根据特定于治疗臂的定义的生物标志物资格(与下文额外排除标准部分一起阅读)：
–MSI-H或高MSI名称(微卫星不稳定)
·在先前基于检查点抑制剂的疗法时的疾病进展
–先前疗法方案的数量不受限制。
·筛选时乙型肝炎表面抗原(HBsAg)检测呈阴性。
·筛选时乙型肝炎表面抗体(HBsAb)检测呈阳性，或筛选时HBsAb阴性并伴有以下任一者：乙型肝炎核心抗体(HBcAb)阴性或总HBcAb检测呈阳性，随后定量乙型肝炎病毒(HBV)DNA<500IU/mL。
·筛选时丙型肝炎病毒(HCV)抗体检测呈阴性；或筛选时HCV抗体检测呈阳性，之后HCV RNA检测呈阴性。
·对于有生育能力的女性：同意保持禁欲(避免异性性交)或使用避孕措施。
·对于男性：同意保持禁欲(避免异性性交)或使用安全套，并且同意不捐献精子。
E.排除标准
一般排除标准
符合以下任何条件的患者将被排除在研究中的任何队列之外：
·目前正在参与或入组另一介入性临床试验。
·在研究治疗开始前2周或5个半衰期(以较短者为准)内接受过任何全身性抗癌治疗。
·在研究治疗启动前28天内用试验用疗法治疗。注：对于中止研究治疗后重新入组不同队列的情况，开始新的研究治疗的时间点(即，第1周期的第1天)可能早于先前研究治疗的最终剂量后28天。
·妊娠或哺乳，或计划在研究期间妊娠。
·临床实验室测试中存在严重医疗状况或异常的病史或并发，根据研究者的判断，这些严重医疗状况或异常会妨碍患者安全参与和完成研究或混淆解释研究数据的能力。
·在开始研究治疗之前4周内发生过严重感染，包括但不限于，因感染、菌血症或严重肺炎的并发症或研究者认为可能影响患者安全的任何活动性感染而住院。
·将干扰研究治疗的安全性或有效性的确定的开始研究治疗之前从任何手术的不完全恢复。
·不受控制的胸腔积液、心包积液或腹水，需要反复引流(每月一次或更频繁)。允许使用留置导管(例如，)。
·不受控制的肿瘤相关疼痛。
–需要止痛药的患者在进入研究时必须采用稳定的治疗方案。适合姑息性放疗后的症状性病灶(例如，骨转移或引起神经碰触的转移)应在入组前进行治疗。患者应当已从放射治疗的影响中恢复。不要求最短恢复期。在进一步增长的情况下可能导致功能缺陷或顽固性疼痛的无症状性转移性病灶(例如，目前与脊髓压迫无关的硬膜外转移)，应在入组前评估局部区域治疗(如果合适的话)。
·不受控制或有症状的高钙血症(离子化钙>1.5mmol/L，钙>12mg/dL，或校正的血清钙>ULN)。
·临床上显著的活动性肝病，包括病毒性肝炎或其他肝炎、当前酗酒或肝硬化。
·已知的HIV感染。
·有症状的、未经治疗的或活动性进展的CNS转移。
–有经治疗的CNS转移史的患者符合条件，前提是满足以下所有标准：根据RECISTv1.1，可测量的疾病必须存在于CNS之外；患者无颅内出血、脊髓出血病史；转移仅限于小脑或幕上区域(即没有转移至中脑、脑桥、髓质或脊髓)；没有证据表明在完成CNS定向疗法与筛选脑部扫描之间存在中期进展；患者在开始研究治疗之前7天内未接受过立体定向放射疗法，或者在开始研究治疗之前14天内未接受过全脑放射疗法；患者不需要持续使用皮质类固醇来治疗CNS疾病；如果患者正在接受抗惊厥疗法，则剂量被认为是稳定的；筛选时新检测到有CNS转移的无症状患者在接受放射疗法或手术后符合该研究的条件，无需重复筛选脑部扫描。
·软脑膜病或癌性脑膜炎病史。
·筛选前2年内有除CRC以外的恶性肿瘤病史，但转移或死亡风险可忽略不计(例如，5年OS率＞90％)的恶性肿瘤除外，诸如经过充分治疗的宫颈原位癌、非黑素瘤皮肤癌、局部前列腺癌、导管原位癌或I期子宫癌。
MSI-H队列的额外排除标准
符合下列任何额外排除标准的患者将被排除在Atezo+Tira+Bev和Atezo+Tira治疗臂之外：
·有炎症性肠病史或活动性症性肠病(例如，克罗恩病或溃疡性结肠炎)。
·任何活动性肠道炎症(包括憩室炎)。
·在开始研究治疗之前6个月内有腹瘘、胃肠道(GI)穿孔、腹腔内脓肿或活动性GI出血病史。
·GI梗阻的临床体征或症状或需要常规的肠外补液、肠外营养或管饲。
·腹腔穿刺术或最近的手术无法解释的腹部游离空气的证据。
·≥2级蛋白尿，如通过试纸尿液分析中≥2+蛋白质和24小时尿液收集物中≥1.0g蛋白质所证明。
·有临床上显著的心血管功能障碍病史或活动性心血管功能障碍，包括以下：在第一剂研究治疗之前6个月内有卒中或短暂性脑缺血发作史；在第一剂研究治疗之前6个月内有心肌梗死病史；纽约心脏协会III级或IV级心脏病；不受控制的心律失常，有室性心律失常病史或需要用药的活动性室性心律失常；有症状的冠心病或不稳定心绞痛。
·每天≥10mg泼尼松或同等剂量的其他抗炎皮质类固醇或免疫抑制剂的慢性皮质类固醇疗法，用于慢性疾病。
·对阿特珠单抗、替瑞利尤单抗或贝伐单抗制剂成分有变态反应或有过敏反应。
·在开始研究治疗之前的4周内用减毒活疫苗治疗，或者预计在阿特珠单抗和替瑞利尤单抗治疗期间、在最后一剂阿特珠单抗后5个月内或在最后一剂替瑞利尤单抗后90天内需要减毒活疫苗。
·先前使用抗TIGIT药剂治疗。
·筛选时活动性爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)感染或已知或疑似慢性活动性EBV感染。
·在第1周期的第1天之前的28天内经历重大外科手术或重大外伤，或者预计在研究治疗过程中需要进行大手术。
·在第一剂研究治疗之前7天内经历小型外科手术，不包括放置血管通路装置。
·在开始研究治疗之前3天内进行芯活检或其他小手术，不包括放置血管通路装置。患者必须从任何先前任何手术中充分恢复，包括伤口充分愈合。
·严重、不愈合的伤口；活动性溃疡；或未经治疗的骨折。
·有症状的、未经治疗的或活动性进展的CNS转移。
–具有经治疗的CNS病灶的无症状患者符合条件，前提是满足以下所有标准：根据RECIST v1.1，可测量的疾病必须存在于CNS之外；患者无颅内出血、脊髓出血病史；患者在开始研究治疗之前7天内未接受过立体定向放射疗法，在开始研究治疗之前14天内未接受过全脑放射疗法，后者在开始研究治疗之前28天内未接受过神经外科切除术；患者不需要持续使用皮质类固醇作为CNS疾病的疗法(允许使用稳定剂量的抗惊厥疗法)；没有证据表明完成CNS定向疗法与开始研究治疗之间存在中期进展。筛选时新检测到CNS转移的无症状患者在接受放射疗法或手术后符合该研究的条件，无需重复筛选脑部扫描。
·既往异基因干细胞或实体器官移植。
·高血压控制不充分(定义为收缩压＞150mmHg和/或舒张压＞100mmHg)，并且基于≥2次治疗的平均≥3次血压读数。允许进行抗高血压治疗以实现这些参数。
·高血压危象或高血压脑病史。
·在开始研究治疗之前6个月内的重大血管疾病(例如，需要手术修复的主动脉瘤或最近发生的外周动脉血栓形成)。
·4级静脉血栓栓塞病史。
·筛选之前1个月内有≥2级咯血史(定义为每次发作≥2.5mL鲜红色血液)。
·有遗传性出血素质的病史或证据，或存在出血风险的严重凝血障碍(即，在不存在治疗性抗凝的情况下)。
·当前或最近(开始研究治疗之前<10天)使用阿司匹林(>325mg/
天)或氯吡格雷(>75mg/天)。注：只要在开始研究治疗之前7天内INR和aPTT在治疗限度(根据机构标准)内并且患者在开始研究治疗前≥2周内一直接受稳定剂量的抗凝剂，允许使用出于治疗性目的的全剂量口服或胃肠外抗凝。允许预防性使用抗凝剂。
F.生物标志物资格测试和筛选
本研究旨在入组具有先前已知的阳性生物标志物结果的患者。对于直接进入筛选的患者，必须满足以下标准：
·根据目前开放入组的队列特定的定义，同意的患者的生物标志物必须呈阳性。
·先前的阳性生物标志物结果必须基于如纳入标准中所述的经验证的测试(参见筛选纳入标准部分)，并且必须提供测试结果的完整报告。
·先前的生物标志物结果必须满足针对测定类型和测定时间点的队列特定的生物标志物资格标准(参见表26)。
·同意的患者必须同意在第1周期的第1天提供给药前血液样品，以便通过Liquid CDx测试进行回顾性生物标志物确认。
·如果结果不一致，患者的治疗不受影响。但是，申办方可以决定替换患者，以实现有效性可评估的患者所需的样品体量。相关(不一致)的患者数据被排除在有效性分析之外，但包括在安全性分析中(参见下文分析部分)。
表26.先前生物标志物测试的MSI-H队列生物标志物资格标准
Atezo＝阿特珠单抗；Bev＝贝伐单抗；IHC＝免疫组织化学；MSI-H＝微卫星不稳定性高；NGS＝二代测序；Tira＝替瑞利尤单抗。
注：阳性生物标志物结果必须基于如纳入标准中所述的经验证的测试(参见筛选纳入标准部分)。
a在患有转移性CRC患者中，MSI-H的患病率为4％至12％(来源：FoundationMedicine,Inc.数据库，2020年11月版。可从以下网址获取：www.foundationmedicine.com/insights-and-trials/foundation-insights)。
不符合上述筛选标准的同意的患者可经历使用LiquidCDx的中心生物标志物资格测试。仅在以下条件下才允许这样做：
·先前的生物标志物测试结果不符合表26中所概述的要求，但由于以下一者或多者而有足够的信心认为患者为生物标志物阳性：
–先前存在已知的阳性生物标志物结果，但无法定位或验证。
–先前存在已知的阳性生物标志物结果，但通过先前测试不符合测定时间点的生物标志物资格标准。
–先前存在的阳性生物标志物结果所基于的测试未按照纳入标准中所述被视为经验证(参见生物标志物资格测试的纳入标准部分)，或者不符合针对测定类型的标准。
–存在部分阳性生物标志物特征，不完全符合特定于队列定义。
·如果由申办方确定入组速度过慢，也可以对生物标志物状态未知的同意的患者进行生物标志物资格测试。
·所有经历中心生物标志物资格测试的患者在进入筛选阶段前都需要阳性Liquid CDx生物标志物结果。如果由研究者酌情决定，需要简化的流程，则患者可以在等待/>
Liquid CDx生物标志物资格测试结果的同时进入筛选阶段并且经历其他筛选评定。
G.研究治疗
阿特珠单抗+替瑞利尤单抗+贝伐单抗(Atezo+Tira+Bev)和阿特珠单抗+替瑞利尤单抗(Atezo+Tira)治疗臂中的患者分别接受表27和28中所概述的治疗，直至发生明确的疾病进展、不可接受的毒性、患者或医师决定、或研究/治疗臂终止。建议在不迟于臂入组后7天开始治疗；但是，第一剂研究治疗不得在芯活检或其他手术过程后3天内进行。
阿特珠单抗是Q3W以1200mg的固定剂量(在每个21天周期的第1天，1200mg)施用，并且替瑞利尤单抗是Q3W以600mg的固定剂量(在每个21天周期的第1天，600mg)施用。对于随机分配到包含贝伐单抗的三药物组的患者，贝伐单抗是以15mg/kg Q3W的剂量(在每个21天周期的第1天，15mg/kg)施用。
表27.针对Atezo+Tira+Bev治疗臂的治疗方案
Atezo＝阿特珠单抗；Bev＝贝伐单抗；Tira＝替瑞利尤单抗。
表28.针对Atezo+Tira治疗臂的治疗方案
Atezo＝阿特珠单抗；Tira＝替瑞利尤单抗。
阿特珠单抗施用
阿特珠单抗在每个21天周期的第1天通过IV输注以1200mg的固定剂量施用。阿特珠单抗的施用在受监测的环境中进行，在该环境中，可以立即接触到训练有素的人员以及足够的设备和药物来管理潜在的危重反应。根据表29中概述的说明施用阿特珠单抗输注。
不允许对阿特珠单抗进行剂量调整。
表29.首次和后续阿特珠单抗输注的施用
IRR＝输注相关反应。
贝伐单抗施用
对于Atezo+Tira+Bev治疗臂中的患者，贝伐单抗以15mg/kg体重Q3W的剂量在每个21天周期的第1天通过IV输注施用。在每个周期的第1天，贝伐单抗是在完成阿特珠单抗输注后至少5分钟施用。应使用基线时的体重来计算所需的贝伐单抗的剂量。如果观察到较基线的体重变化>10％，则应相应地调整治疗剂量(即，该体重成为用于剂量计算的新体重)。为了在实际中便于施用，剂量的向上四舍五入和/或向下四舍五入是可接受的。剂量的舍入为任选的，如果主治医师决定对贝伐单抗的总剂量进行舍入，则应四舍五入到最接近的5mg。
贝伐单抗的施用在受监测的环境中进行，在该环境中，可以立即接触到训练有素的人员以及足够的设备和药物来管理潜在的危重反应。根据表30中概述的说明施用贝伐单抗。
不允许对贝伐单抗进行剂量调整(但以下情况除外：如果注意到体重较基线变化>10％，则重新计算剂量)。
表30.首次和后续贝伐单抗输注的施用
/>
IRR＝输注相关反应。
替瑞利尤单抗施用
替瑞利尤单抗在每个21天周期(具有输注后观察期)的第1天以600mg的固定剂量通过IV输注施用，如表31中所述。
对于Atezo+Tira+Bev治疗臂中的患者，在第1周期的第1天，在贝伐单抗输注完成60分钟后施用替瑞利尤单抗。如果先前贝伐单抗输注不使用前驱用药而施用且被耐受而没有IRR，则后续输注之间的间隔将会为30分钟，或者如果患者在先前贝伐单抗输注中经历IRR，则间隔60分钟。
对于Atezo+Tira治疗臂中的患者，在第1个周期的第1天，在阿特珠单抗输注完成后60分钟施用替瑞利尤单抗。如果先前阿特珠单抗输注不使用前驱用药而施用且被耐受而没有输注相关反应(IRR)，则后续输注之间的间隔为30分钟，或如果患者在先前阿特珠单抗输注中经历IRR，则间隔60分钟。
替瑞利尤单抗的施用在受监测的环境中进行，在该环境中，可以立即接触到训练有素的人员以及足够的设备和药物来管理潜在的危重反应。
不允许对替瑞利尤单抗进行剂量调整。
表31.首次和后续替瑞利尤单抗输注的施用
IRR＝输注相关反应。
治疗中断
在经历被认为与研究治疗相关的毒性的患者中，可能会暂时停用阿特珠单抗和/或替瑞利尤单抗。如果开始用皮质类固醇治疗毒性，则必须在≥1个月内逐渐减量至等效于≤10mg/天口服泼尼松或等效剂量，然后才能恢复使用阿特珠单抗和替瑞利尤单抗。但是，该药物可能会停用>12周，以便患者在恢复治疗前逐渐减少皮质类固醇的用量。如果患者可能取得临床获益，则可在停用>12周后恢复使用阿特珠单抗或替瑞利尤单抗。对患者重新使用阿特珠单抗和替瑞利尤单抗的决定应基于研究者对获益-风险的评定并且由研究者记录。
基于现有的作用机制特征，替瑞利尤单抗可能引起与阿特珠单抗相似但独立于阿特珠单抗的不良事件。替瑞利尤单抗还可能加剧与阿特珠单抗相关的不良事件的频率或严重程度，或者可能具有与阿特珠单抗不重叠的毒性。由于这些情况在临床环境中可能无法彼此区分，免疫介导的不良事件通常应归因于两种药剂，并且应将应答免疫介导的不良事件的剂量中断或治疗中止应用于替瑞利尤单抗和阿特珠单抗两者。
在经历被认为与研究治疗相关的毒性的患者中，可以暂时停用贝伐单抗。如果贝伐单抗停用超过>42天，患者将中止贝伐单抗。如果患者可能取得临床获益，则可在停用>42天数后恢复使用贝伐单抗。对患者重新使用贝伐单抗的决定应基于研究者对获益-风险的评定并且由研究者记录。
阿特珠单抗、替瑞利尤单抗和贝伐单抗治疗可能因毒性以外的原因(例如，外科手术)而暂停。可接受的治疗中断时间长度必须基于研究者对获益-风险的评定，并且符合治疗持续时间的方案要求并且由研究者记录。
如果中止阿特珠单抗、贝伐单抗或替瑞利尤单抗，并且没有继续使用其他药物的明确禁忌症，如果研究者根据医学判断确定患者可能取得临床获益，则可以继续使用其他药物。
疾病进展后研究治疗的给药
含有免疫疗法的治疗臂中的患者接受治疗，直至出现不可接受的毒性或临床获益丧失，定义为：
1.根据RECIST v1.1发现放射摄影进展后，在肿瘤评定中确认的疾病进展；或者
2.不存在持续获益，如由研究者在综合评定放射摄影和生化数据、局部活检结果(如果有)和临床状态(例如，症状恶化，诸如疾病继发性疼痛)后确定。
由于在用癌症免疫疗法(CIT)(诸如阿特珠单抗)的T细胞应答(称为假性进展)的环境中，免疫细胞浸润可能导致肿瘤负荷的初始增加，因此根据RECIST v1.1的放射摄影进展可能不指示真正的疾病进展。在首次肿瘤评定满足根据RECIST v1.1的疾病进展的标准后，如果接受CIT药物治疗的患者符合以下所有标准，则可以继续研究治疗：
·临床益处的证据，如由研究人员在审查所有可用数据后所确定。
·不存在指示明确的疾病进展的症状和体征(包括实验室值，诸如新发或恶化的高钙血症)。
·不存在可归因于疾病进展的东部肿瘤协作组(ECOG)体能状态下降。
·在方案允许的医学干预措施无法管理的关键解剖部位(例如，软脑膜疾病)处不存在肿瘤进展。
H.伴随疗法
伴随疗法包括患者使用除方案规定的研究治疗外的任何用药(例如，处方药、非处方药、疫苗、草药或顺势疗法药物、营养补充剂)从研究治疗启动前7天到治疗中止访视。
如果患者经历了输注相关反应，则由研究者酌情决定，可以在后续输注之前施用抗组胺药、解热药和/或镇痛药的前驱用药。
一般而言，按照当地护理实践，研究人员应使用支持疗法而不是根据临床指征定义为谨慎或禁止疗法的疗法来管理患者的护理(包括既往病症)。经历输注相关症状的患者可以使用对乙酰氨基酚、布洛芬、苯海拉明和/或H2受体拮抗剂(例如法莫替丁、西咪替丁)或当地标准做法的等效药物进行对症治疗。严重的输注相关事件表现为呼吸困难、低血压、喘息、支气管痉挛、心动过速、血氧饱和度降低或呼吸窘迫，并应根据临床指示采用支持疗法进行治疗(例如，补充氧和β2-肾上腺素能激动剂)。
允许的疗法
允许患者在研究期间使用以下疗法：
·年失败率<1％的口服避孕药。
·激素替代疗法。
·对于Atezo+Tira治疗臂中的患者：预防性或治疗性抗凝疗法(诸如稳定剂量的华法林或低分子量肝素(LMWH))。
·对于Atezo+Tira+Bev治疗臂中的患者：仅预防性使用低剂量抗凝剂、未分级肝素或LMWH。预防性使用抗凝剂需要遵守标签推荐的剂量。按照美国临床肿瘤学会(ASCO)指南，优选的抗凝治疗选择应为LMWH(Key等人,J Clin Oncol.38:496-520,2020)。
·疫苗接种(诸如流感、COVID-19)。不允许使用减毒活疫苗。
·对于Atezo+Tira+Bev治疗臂中的患者：低剂量阿司匹林(<325mg/天)。强烈建议同时施用质子泵抑制剂以减少潜在的GI损伤。
·施用甲地孕酮醋酸酯作为食欲刺激剂。
·盐皮质激素(例如，氟氢可的松)。
·施用皮质类固醇用于慢性阻塞性肺疾病或哮喘。
·施用低剂量皮质类固醇用于体位性低血压或肾上腺皮质功能不全。
·如下文概述的姑息性放射疗法(例如，治疗已知的骨转移灶或缓解疼痛症状)：姑息性放射疗法是允许的，只要它不干扰对肿瘤靶病灶的评定(例如，待辐射的病灶不能是可测量疾病的唯一部位)。姑息性放射疗法期间可继续用阿特珠单抗和替瑞利尤单抗治疗。姑息性放射疗法期间应暂停用贝伐单抗治疗。姑息性放射疗法完成后，如果研究者认为安全，可以继续用贝伐单抗治疗。
·对脑部的放射疗法概述如下：其颅外肿瘤负荷稳定或对研究治疗有应答且后续发现具有三个或更少脑转移灶的患者可以接受脑部放射疗法(立体定向放射手术或全脑放射疗法)，前提是满足以下所有标准：患者在完成CNS定向疗法后没有进展或出血的证据；患者不需要持续使用皮质类固醇来治疗CNS疾病；以及使用稳定剂量的抗惊厥疗法(如果需要)。注：在CNS定向放射疗法期间，应停用阿特珠单抗、贝伐单抗和替瑞利尤单抗进行治疗。
·如下文概述的局部疗法(例如，手术、立体定向放射外科、放射疗法、射频消融)：由研究者酌情决定，经历需要局部疗法以控制三个或更少病灶的混合应答的患者仍符合继续研究治疗的条件。接受针对靶病灶的局部疗法的患者不再能够评估放射摄影缓解，但仍可评估进展情况。
I.评定
在整个研究过程中密切监测患者的安全性和耐受性。每次给药前应对患者进行毒性评定；只有在临床评定和当地实验室测试值可接受时才进行给药。
生物标志物资格测试
基于先前测试结果符合生物标志物条件并直接进入筛选阶段的患者在第1周期的第1天提供给药前血液样品，并且先前的生物标志物测试结果通过基于血液的Liquid CDx测试进行回顾性确认。
不符合生物标志物资格测试和筛选部分中概述的生物标志物资格标准以直接进入筛选阶段的患者可以首先经历使用Liquid CDx的生物标志物资格测试(或者如果需要简化的流程，则经历筛选，由研究者酌情决定)。
肿瘤和应答评估
患者在基线时、开始治疗后的前48周内每6周(±1周)以及此后每12周(±2周)经历肿瘤评定，无论是否发生剂量延迟，直至根据研究者评定的RECIST v1.1的影像学疾病进展，在含有免疫疗法的队列中的患者在影像学疾病进展后继续治疗的情况下除外；此类患者每6周(±1周)经历肿瘤评定，直至定义如下的临床获益丧失：(1)经确认的疾病进展或(2)缺乏持续获益，如由研究者所确定(详细信息参见研究治疗部分)。因此，在因疾病进展或临床获益丧失以外的原因中止治疗的患者中，即使他们开始新的非方案指定的抗癌疗法，肿瘤评定仍应按计划继续进行。由研究人员酌情决定，如果怀疑疾病进展，则随时重复肿瘤评定。
筛选评定必须包括胸部、腹部、骨盆和头部的计算机断层扫描(CT)(使用IV造影剂；使用或不使用口腔造影剂)或磁共振成像(MRI)扫描(使用IV造影剂)。可以获得胸部螺旋CT扫描，但不是必需的。如果有造影剂CT扫描的禁忌(即，具有造影剂变态反应或肾脏清除功能受损的患者)，应进行胸部非造影剂CT扫描以及腹部、骨盆和头部的MRI扫描(如果可行，使用IV造影剂)。
筛选时必须用造影剂对头部进行CT或MRI扫描，以评估所有患者的CNS转移情况；如果由造影剂的禁忌，则必须通过MRI进行评定。如果有临床指征，还应进行颈部的骨扫描和CT扫描。由研究者酌情决定，可使用对根据RECIST v1.1的可测量的疾病的其他评定方法。如果在正电子发射断层扫描/CT扫描仪中进行了用于肿瘤评定的CT扫描，则必须进行CT采集以符合全造影剂诊断性CT扫描的标准。
在基线确定的所有可测量和/或可评估的病灶应根据上述计划在后续肿瘤评估中重新评定。在基线时鉴定的已用放射疗法或手术治疗的脑转移灶不视为可测量或可评估的，除非大脑中存在疑似疾病进展(即患者出现症状)。因此，除非有临床指征，否则不需要后续的头部扫描。后续肿瘤评定应使用在筛选时用来评定疾病部位的相同放射摄影程序(例如，与CT扫描相同的造影剂方案)。
给定时间点的总体缓解由研究者使用RECIST v1.1来评定。
生物标志物评定
从所有符合条件的患者获得血液样品进行生物标志物评估(包括但不限于与疾病病理学或肿瘤免疫生物学相关的生物标志物)。处理血液样品以确定基于血液的生物标志物的变化，并且评估癌症相关、免疫相关、肿瘤类型相关的生物标志物和其他探索性生物标志物。
必须在研究入组之前提交存档肿瘤组织样品进行生物标志物的探索性研究。处理肿瘤样品以获得其衍生物(例如，DNA、RNA)，并且评估生物标志物资格以及癌症相关、免疫相关、肿瘤类型相关的生物标志物和其他探索性生物标志物(例如，基因表达或单核苷酸多态性的改变)。
探索性生物标志物研究可包括但不限于癌症相关的基因组改变、ctDNA分析、与肿瘤生物学和肿瘤免疫生物学相关联的基因或基因特征。研究可能涉及IHC提取DNA、无细胞DNA或RNA；分析突变、单核苷酸多态性和其他基因组变异；以及通过使用全面基因组的NGS进行基因组分析。从血液中提取的DNA可以与从组织中提取的DNA进行比较，以通过区分种系变体与体细胞变体来鉴定体细胞变体。NGS方法可包括组织样品的全基因组测序(WGS)或全外显子组测序(WES)。
在参与中心，患者提供粪便样品进行探索性生物标志物研究，包括整个宏基因组测序和微生物组的综合分析。患者在基线和第3周期第1天访视之前接受收集装置。
J.分析
有效性分析是基于有效性可评估的群体，该群体定义为针对其指定的治疗方案接受每种药物的至少一个剂量并且符合MSI-H队列特异性生物标志物资格定义的所有患者(参见表26)。安全性分析是基于安全性可评估的群体，该群体定义为接受任何量的研究治疗的所有患者。对于有效性分析，申办方还可以对符合方案的群体进行分析，该群体定义为接受过目标剂量水平的经过至少一次可用的肿瘤评定(参见评定部分)的有效性可评估的群体。
样品体量的确定
这项I/Ib期探索性研究并非旨在为假设测试做出明确的功效和I类错误考虑。相反，本研究旨在获得分子导向治疗方案(包括单一疗法以及合理的药物组合)向患有生物标志物阳性转移性CRC的患者(如在生物标志物资格测试或筛选期间通过基于血液的Liquid CDx测试、或使用如纳入标准部分中所述的经验证的测试进行先前测试并且通过/>Liquid CDx测试进行回顾性确认所鉴别)时的初步有效性、安全性和PK数据。
大约15例至80例患者入组每个队列。入组在大约41个中心进行。在初步入组阶段后显示出初步有效性的治疗臂可以进行扩展并且在治疗臂内继续入组。由于疾病进展或治疗中出现的毒性以外的原因而提前中止研究药物或研究的患者的额外入组，和/或如果入组是基于先前的测试结果而替换具有不一致的生物标志物结果的患者，可以增加数量，以获得足够数量的可评估的患者。
功效分析
除非另有说明，否则对所有治疗臂进行以下有效性分析。有效性终点的分析群体是特定于臂的有效性可评估的群体。申办方还可以对符合方案的群体进行分析。
主要有效性分析
对于每个治疗臂，主要有效性终点为ORR，其定义为如研究者所评估的根据RECISTv1.1达到客观缓解的患者比例。客观缓解定义为根据RECIST v1.1的完全缓解(CR)或部分缓解(PR)。不符合此标准的患者被视为无反应者。
对于ORR，需要确认客观缓解(在两次单独的肿瘤评定中相隔≥4周进行确认)。还计算未确认的缓解率。
计算ORR的估计值及其90％置信区间(使用Clopper-Pearson方法估计)，与针对给定的研究治疗/队列的设定阈值进行比较。
次要有效性分析
次要有效性终点包括缓解持续时间(DOR)和疾病控制率(DCR)，如由研究者根据RECIST v1.1确定。
DOR定义为从首次出现经确认的CR或PR(以先记录的状态为准)日期到首次记录的疾病进展或因任何原因死亡日期(以先发生者为准)的时间。DOR是在研究期间已实现确认的客观缓解的患者中评定的，如由研究者根据RECIST v1.1所确定。将在分析时既未发生进展也未死亡的患者在末次肿瘤评估日期删失。如果在首次发生CR或PR的日期后未进行肿瘤评定，则将DOR在首次发生CR或PR的日期加1天删失。
Kaplan-Meier方法用于估计中位DOR，其中通过使用Brookmeyer和Crowley方法构建90％置信区间。
DCR定义为疾病稳定≥12周或达到CR或PR的患者比例，如由研究者根据RECISTv1.1所确定，是使用Clopper-Pearson精确估计方法以90％置信区间针对每个治疗臂计算的。
探索性有效性分析
探索性有效性终点包括PFS、OS、特定时间点的PFS以及特定时间点的OS。
PFS定义为从治疗第一天到首次记录的疾病进展或死亡日期的时间，以先发生者为准。疾病进展由研究者使用RECIST v1.1评估。将在分析时既未经历疾病进展也未死亡的患者在末次肿瘤评估日期删失。将未接受基线后肿瘤评定的患者在首个治疗日期加1天删失。
OS定义为从治疗第一天到因任何原因死亡的日期的时间。在分析时未报告为已死亡的患者在最后已知他们存活之日被删失。如果没有可用的基线后信息，则OS在治疗第一天加1天被删失。
Kaplan-Meier方法用于估计PFS和OS的中位数，其中通过使用Brookmeyer和Crowley方法构建90％置信区间。
使用Kaplan-Meier方法估计特定时间点的标志性PFS率和OS率，其中基于针对方差的Greenwood估计来计算90％置信区间。
安全性分析
安全性可评估的群体由接受至少一剂研究治疗的所有入组的患者组成，其中根据所接受的治疗对患者进行分组。
通过对研究治疗的暴露、不良事件和实验室测试结果的变化的总结来评定安全性。
研究治疗暴露(诸如治疗持续时间、接受的总剂量以及周期数和剂量修改次数)用描述性统计进行汇总。
所有逐字记录的不良事件术语映射到MedDRA词库术语，并且根据NCI CTCAE v5.0对不良事件严重程度进行分级。在第一次研究治疗给药期间或之后发生的所有不良事件、严重不良事件、导致死亡的不良事件、特别关注的不良事件、导致剂量减低或中断的不良时间以及导致研究治疗中止的不良事件(即治疗中出现的不良事件)通过映射的术语、适当的词库水平和严重程度级别进行汇总。对于不同严重程度的事件，在总结中使用最高等级。汇总死亡和死因。
使用选定实验室测试的转置表来汇总基线和最大基线后严重程度等级。
免疫原性分析
在适当情况下，可以评定研究治疗的免疫原性。免疫原性分析包括所有进行至少一种ADA评定的患者。根据所接受的治疗对患者分组。
生物标志物分析
进行探索性生物标志物分析以了解这些生物标志物与对研究药物的应答的关联，同时考虑疗效和安全性终点。
中期分析
在初步阶段每个治疗臂中已入组大约20例有效性可评估的患者后，进行中期分析。将Atezo+Tira+Bev治疗臂与Atezo+Tira治疗臂进行比较，以证明贝伐单抗的贡献。Atezo+Tira+Bev和Atezo+Tira治疗臂均与预先指定的标准护理基准进行比较。如果治疗臂与标准护理相比显示出积极的获益-风险平衡，则在扩展阶段期间入组大约20例另外的患者，在每个治疗臂中总共有大约40例患者。选择进行扩展的治疗臂取决于贝伐单抗的贡献。
入组MSI-H队列的患者可以由对CIT为原发性难治的患者以及对CIT为继发性难治的患者。由于不能排除基于CIT难治性状态的差异性活动，申办方在扩展入组时可能决定限制或停止具有特定的难治性状态的患者群体的入组，该患者群体在获益-风险评定中未表现出优势，但不排除在初始阶段具有特定的难治性状态的患者的入组。
初步阶段每个臂大约20例患者的样品体量能够将假阳性率和假阴性率均控制在所需容许偏差范围内，确保以可接受的概率证明阿特珠单抗与替瑞利尤单抗组合(与或不与贝伐单抗组合)的临床效果。申办方可基于全部可用数据(包括但不限于ORR、观察到的缓解持续时间、PFS、疾病控制率和潜在的早期OS数据)做出扩展入组的决定。从充分的获益-风险评定的角度，还考虑到安全性和生物标志物数据(做出此决定时可用)。
其他实施例
尽管为了清楚理解的目的先前已通过举例说明和实施方案相当详细地描述了本发明，但是这些描述和实施方案不应解释为限制本发明的范围。

Claims (122)

1.一种用于治疗患有黑素瘤的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用一个或多个给药周期的抗TIGIT拮抗剂抗体以及靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体，所述双特异性抗体包含与程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)特异性结合的第一抗原结合结构域和与淋巴细胞活化基因3(LAG3)特异性结合的第二抗原结合结构域。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用：
(a)所述抗TIGIT拮抗剂抗体，其是以每三周600mg的固定剂量施用；以及
(b)所述双特异性抗体，其是以每三周2100mg的固定剂量施用。
3.根据权利要求1所述的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用：
(a)所述抗TIGIT拮抗剂抗体，其是以每三周600mg的固定剂量施用；以及
(b)所述双特异性抗体，其是以每三周600mg的固定剂量施用。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述一个或多个给药周期中的每一个的长度为21天，任选地其中所述方法包括在所述一个或多个给药周期中的每一个的第1天向所述受试者施用所述抗TIGIT拮抗剂抗体和所述双特异性抗体。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述方法包括在所述抗TIGIT拮抗剂抗体之前向所述受试者施用所述双特异性抗体。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述方法包括向所述受试者静脉内施用所述双特异性抗体和所述抗TIGIT拮抗剂抗体。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述一个或多个给药周期是作为新辅助疗法施用的。
8.一种用于治疗患有黑素瘤的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用一个或多个给药周期的靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体，所述双特异性抗体包含与PD-1特异性结合的第一抗原结合结构域和与LAG3特异性结合的第二抗原结合结构域，其中所述一个或多个给药周期是作为新辅助疗法施用的。
9.根据权利要求8所述的方法，其中所述方法包括以每三周2100mg的固定剂量向所述受试者施用所述双特异性抗体。
10.根据权利要求8所述的方法，其中所述方法包括以每三周600mg的固定剂量向所述受试者施用所述双特异性抗体。
11.根据权利要求8至10中任一项所述的方法，其中所述一个或多个给药周期中的每一个的长度为21天，任选地其中所述方法包括在所述一个或多个给药周期中的每一个的第1天向所述受试者施用所述双特异性抗体。
12.根据权利要求8至11中任一项所述的方法，其中所述方法包括向所述受试者静脉内施用所述双特异性抗体。
13.一种用于治疗患有黑素瘤的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用一个或多个给药周期的抗TIGIT拮抗剂抗体和PD-1轴结合拮抗剂，其中所述一个或多个给药周期是作为新辅助疗法施用的。
14.根据权利要求13所述的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用：
(a)所述抗TIGIT拮抗剂抗体，其是以每三周600mg的固定剂量施用；以及
(b)所述PD-1轴结合拮抗剂，其是以每三周1200mg的固定剂量施用。
15.根据权利要求13或14所述的方法，其中所述一个或多个给药周期中的每一个的长度为21天，任选地其中所述方法包括在所述一个或多个给药周期中的每一个的第1天向所述受试者施用所述抗TIGIT拮抗剂抗体和所述PD-1轴结合拮抗剂。
16.根据权利要求13至15中任一项所述的方法，其中所述方法包括在所述抗TIGIT拮抗剂抗体之前向所述受试者施用所述PD-1轴结合拮抗剂。
17.根据权利要求13至16中任一项所述的方法，其中所述方法包括向所述受试者静脉内施用所述PD-1轴结合拮抗剂和所述抗TIGIT拮抗剂抗体。
18.根据权利要求1至17中任一项所述的方法，其中所述黑素瘤为：
(a)具有可测量的淋巴结转移的III期黑素瘤；或
(b)IV期黑素瘤；
任选地其中所述黑素瘤并非黏膜黑素瘤或葡萄膜黑素瘤。
19.根据权利要求1至18中任一项所述的方法，其中所述受试者在开始治疗之前的六个月内未发生过移行转移。
20.根据权利要求1至19中任一项所述的方法，其中所述受试者既往未使用癌症免疫疗法治疗。
21.根据权利要求1至7和18中任一项所述的方法，其中(a)所述受试者已接受不超过两线的先前全身性治疗；或者(b)所述黑素瘤为BRAF突变型黑素瘤，并且所述受试者已接受不超过三线的先前全身性治疗。
22.根据权利要求1至20中任一项所述的方法，其中在手术之前开始第一给药周期。
23.根据权利要求22所述的方法，其中在所述手术之前完成两个给药周期。
24.根据权利要求22或23所述的方法，其中在最后给药周期之后约一周内进行所述手术。
25.根据权利要求22至24中任一项所述的方法，其中所述手术为完全性淋巴结清扫(CLND)。
26.根据权利要求1至20和22至25中任一项所述的方法，其中所述治疗引起病理缓解率(pRR)与参考pRR相比增加，任选地其中所述参考pRR为已接受对照疗法的受试者群体的pRR。
27.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述治疗引起总缓解率(ORR)与参考ORR相比增加，任选地其中所述参考ORR为已接受以下的受试者群体的ORR：
(a)包括靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体并且不包括抗TIGIT拮抗剂抗体的治疗；和/或
(b)包括抗TIGIT拮抗剂抗体并且不包括靶向PD-1和LAG3的双特异性抗体的治疗。
28.根据权利要求1至12和18至27中任一项所述的方法，其中靶向PD-1和LAG3的所述双特异性抗体包含第一抗原结合结构域，所述第一抗原结合结构域包含：VH结构域，其包含：
(i)HVR-H1序列，其包含SEQ ID NO:35的氨基酸序列，
(ii)HVR-H2序列，其包含氨基酸序列GGR，和
(iii)HVR-H3序列，其包含SEQ ID NO:37的氨基酸序列；以及VL结构域，其包含：
(i)HVR-L1序列，其包含SEQ ID NO:38的氨基酸序列；
(ii)HVR-L2序列，其包含氨基酸序列RSS，和
(iii)HVR-L3序列，其包含SEQ ID NO:40的氨基酸序列。
29.根据权利要求28所述的方法，其中靶向PD-1和LAG3的所述双特异性抗体包含Fc结构域，所述Fc结构域为IgG，任选地其中IgGFc结构域为IgG1 Fc结构域或IgG4 Fc结构域。
30.根据权利要求29所述的方法，其中所述Fc结构域包含减少与Fc受体的结合的一个或多个氨基酸取代，任选地其中所述Fc受体为Fcγ受体。
31.根据权利要求28至30中任一项所述的方法，其中靶向PD-1和LAG3的所述双特异性抗体包含第二抗原结合结构域，所述第二抗原结合结构域包含：VH结构域，其包含：
VH结构域，其包含：
(i)HVR-H1序列，其包含SEQ ID NO:43的氨基酸序列，
(ii)HVR-H2序列，其包含SEQ ID NO:44的氨基酸序列，和
(iii)HVR-H3序列，其包含SEQ ID NO:45的氨基酸序列；以及VL结构域，其包含：
(i)HVR-L1序列，其包含SEQ ID NO:46的氨基酸序列，
(ii)HVR-L2序列，其包含SEQ ID NO:47的氨基酸序列，和
(iii)HVR-L3序列，其包含SEQ ID NO:48的氨基酸序列。
32.根据权利要求28至31中任一项所述的方法，其中所述第一抗原结合结构域包含：VH结构域，其包含SEQ ID NO:41的氨基酸序列；以及VL结构域，其包含SEQ ID NO:42的氨基酸序列；并且
所述第二抗原结合结构域包含：VH结构域，其包含SEQ ID NO:49的氨基酸序列；以及VL结构域，其包含SEQ ID NO:50的氨基酸序列。
33.根据权利要求28至32中任一项所述的方法，其中靶向PD-1和LAG3的所述双特异性抗体包含：
(a)属于人IgG1亚类的Fc结构域，其具有氨基酸突变L234A、L235A和P329G(根据KabatEU索引编号)；和/或
(b)包含促进所述Fc结构域的第一亚基和第二亚基缔合的修饰的Fc结构域。
34.根据权利要求29至33中任一项所述的方法，其中所述Fc结构域的第一亚基包含氨基酸取代S354C和T366W(根据Kabat EU索引编号)，并且所述Fc结构域的第二亚基包含氨基酸取代Y349C、T366S和Y407V(根据Kabat EU索引编号)。
35.根据权利要求29至34中任一项所述的方法，其中靶向PD-1和LAG3的所述双特异性抗体包含：Fc结构域、包含所述第一抗原结合结构域的第一Fab片段以及包含所述第二抗原结合结构域的第二Fab片段。
36.根据权利要求35所述的方法，其中在靶向PD-1和LAG3的所述双特异性抗体的所述Fab片段中的一者中，可变结构域VL和VH彼此替换，使得所述VH结构域为轻链的一部分并且所述VL结构域为重链的一部分，任选地其中在所述第一Fab片段中，所述可变结构域VL和VH彼此替换。
37.根据权利要求35或36所述的方法，其中在所述Fab片段中的一者的恒定结构域CL中，位置124处的氨基酸独立地被赖氨酸(K)、精氨酸(R)或组氨酸(H)取代(根据Kabat EU索引编号)，并且在恒定结构域CH1中，位置147和213处的氨基酸独立地被谷氨酸(E)或天冬氨酸(D)取代(根据Kabat EU索引编号)，任选地其中在所述第二Fab片段的恒定结构域CL中，位置124处的氨基酸独立地被赖氨酸(K)、精氨酸(R)或组氨酸(H)取代(根据Kabat EU索引编号)，并且在恒定结构域CH1中，位置147和213处的氨基酸独立地被谷氨酸(E)或天冬氨酸(D)取代(根据Kabat EU索引编号)。
38.根据权利要求28至37中任一项所述的方法，其中所述双特异性抗体包含：第一重链，其包含与SEQ ID NO:51的序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；第一轻链，其包含与SEQ ID NO:52的序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；第二重链，其包含与SEQID NO:53的序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；以及第二轻链，其包含与SEQ IDNO:54的序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列。
39.根据权利要求1至38中任一项所述的方法，其中所述抗TIGIT拮抗剂抗体包含以下高变区(HVR)：
HVR-H1序列，其包含SNSAAWN(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列；
HVR-H2序列，其包含KTYYRFKWYSDYAVSVKG(SEQ ID NO:
12)的氨基酸序列；
HVR-H3序列，其包含ESTTYDLLAGPFDY(SEQ ID NO:13)的氨基酸序列；
HVR-L1序列，其包含KSSQTVLYSSNNKKYLA(SEQ ID NO:14)的氨基酸序列；
HVR-L2序列，其包含WASTRES(SEQ ID NO:15)的氨基酸序列；和
HVR-L3序列，其包含QQYYSTPFT(SEQ ID NO:16)的氨基酸序列。
40.根据权利要求1至39中任一项所述的方法，其中所述抗TIGIT拮抗剂抗体包含：
(a)重链可变(VH)结构域，其包含与SEQ ID NO:27或28的氨基酸序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；
(b)轻链可变(VL)结构域，其包含与SEQ ID NO:29的氨基酸序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；或
(c)如(a)中的VH结构域和如(b)中的VL结构域。
41.根据权利要求1至40中任一项所述的方法，其中所述抗TIGIT拮抗剂抗体为单克隆抗体、人抗体或全长抗体。
42.根据权利要求1至41中任一项所述的方法，其中所述抗TIGIT拮抗剂抗体为替瑞利尤单抗。
43.根据权利要求1至41中任一项所述的方法，其中所述抗TIGIT拮抗剂抗体为选自由以下项组成的组的结合TIGIT的抗体片段：Fab、Fab'、Fab'-SH、Fv、单链可变片段(scFv)和(Fab')2片段。
44.根据权利要求1至43中任一项所述的方法，其中所述抗TIGIT拮抗剂抗体为IgG类抗体，任选地其中所述IgG类抗体为IgG1亚类抗体。
45.根据权利要求13至17中任一项所述的方法，其中所述PD-1轴结合拮抗剂选自由PD-L1结合拮抗剂、PD-1结合拮抗剂和PD-L2结合拮抗剂组成的组。
46.根据权利要求45所述的方法，其中所述PD-L1结合拮抗剂为抗PD-L1拮抗剂抗体。
47.根据权利要求46所述的方法，其中所述抗PD-L1拮抗剂抗体为阿特珠单抗。
48.根据权利要求13至17、46和47中任一项所述的方法，其中所述抗PD-L1拮抗剂抗体包含以下HVR：
HVR-H1序列，其包含GFTFSDSWIH(SEQ ID NO:3)的氨基酸序列；
HVR-H2序列，其包含AWISPYGGSTYYADSVKG(SEQ ID NO:4)的氨基酸序列；
HVR-H3序列，其包含RHWPGGFDY(SEQ ID NO:5)的氨基酸序列；
HVR-L1序列，其包含RASQDVSTAVA(SEQ ID NO:6)的氨基酸序列；
HVR-L2序列，其包含SASFLYS(SEQ ID NO:7)的氨基酸序列；和
HVR-L3序列，其包含QQYLYHPAT(SEQ ID NO:8)的氨基酸序列。
49.根据权利要求13至17和46至48中任一项所述的方法，其中所述抗PD-L1拮抗剂抗体包含：
(a)重链可变(VH)结构域，其包含与SEQ ID NO:9的氨基酸序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；
(b)轻链可变(VL)结构域，其包含与SEQ ID NO:10的氨基酸序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；或
(c)如(a)中的VH结构域和如(b)中的VL结构域。
50.根据权利要求46至49中任一项所述的方法，其中所述抗PD-L1拮抗剂抗体为单克隆抗体、人源化抗体或全长抗体。
51.根据权利要求46和48至50中任一项所述的方法，其中所述抗PD-L1拮抗剂抗体为选自由以下项组成的组的结合PD-L1的抗体片段：Fab、Fab'、Fab'-SH、Fv、单链可变片段(scFv)和(Fab')2片段。
52.根据权利要求46和48至50中任一项所述的方法，其中所述抗PD-L1拮抗剂抗体为IgG类抗体，任选地其中所述IgG类抗体为IgG1亚类抗体。
53.一种在患有转移性食管癌的受试者中实现临床缓解的方法，所述方法包括以有效实现所述临床缓解的量向所述受试者施用包括一个或多个给药周期的替瑞利尤单抗和阿特珠单抗的给药方案。
54.根据权利要求53所述的方法，其中所述临床缓解维持至少一年，任选地其中所述临床缓解维持至少两年。
55.根据权利要求53或54所述的方法，其中所述临床缓解为：
(a)无进展存活期(PFS)；
(b)一个或多个靶病灶的最长直径之和(SLD)的减小；
(c)部分缓解(PR)；或
(d)完全缓解(CR)。
56.根据权利要求53至55中任一项所述的方法，其中所述方法包括：
(a)向所述受试者以每三周约600mg的剂量施用替瑞利尤单抗以及以每三周约1200mg的剂量施用阿特珠单抗；
(b)向所述受试者以每两周约420mg的剂量施用替瑞利尤单抗以及以每两周约840mg的剂量施用阿特珠单抗；或者
(c)向所述受试者以每四周约840mg的剂量施用替瑞利尤单抗以及以每四周约1680mg的剂量施用阿特珠单抗。
57.根据权利要求53至56中任一项所述的方法，其中所述替瑞利尤单抗和阿特珠单抗是静脉内施用的。
58.根据权利要求53至57中任一项所述的方法，其中所述食管癌为鳞状细胞癌或腺癌。
59.根据权利要求53至58中任一项所述的方法，其中所述食管癌具有<5％的PD-L1阳性肿瘤细胞(TC)分数或肿瘤浸润性免疫细胞(IC)分数，任选地其中所述食管癌具有<1％的PD-L1阳性TC分数。
60.根据权利要求59所述的方法，其中PD-L1是使用Ventana SP142IHC测定法、VentanaSP263 IHC测定法、pharmDx 22C3 IHC测定法或pharmDx 28-8IHC测定法检测的。
61.根据权利要求53至60中任一项所述的方法，其中所述受试者已接受两种或更多种针对食管癌的先前抗癌疗法，任选地其中所述受试者已接受三种或更多种针对食管癌的先前抗癌疗法，进一步任选地其中所述受试者在用所述先前抗癌疗法治疗期间经历疾病进展。
62.根据权利要求53至61中任一项所述的方法，其中所述受试者在替瑞利尤单抗和阿特珠单抗的所述一个或多个给药周期期间或之后未经历治疗相关的3级或4级不良事件。
63.一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用替瑞利尤单抗和莫苏尼妥珠单抗。
64.根据权利要求63所述的方法，其中所述R/R NHL为R/R滤泡性淋巴瘤(FL)、R/R弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)或R/R高级别B细胞淋巴瘤(HGBL)，任选地其中所述R/R FL为R/R转化性FL(trFL)或R/R 3b级FL。
65.根据权利要求63或64所述的方法，其中：
(a)所述受试者在至少两种先前疗法之后已复发或是用其难治的；
(b)所述受试者在至少一种包括抗CD20单克隆抗体的先前疗法之后已复发或是用其难治的；
(c)所述受试者在至少一种包括蒽环类药物的先前疗法之后已复发或是用其难治的；并且/或者
(d)所述受试者在至少一种包括烷化剂的先前疗法之后已复发或是用其难治的。
66.根据权利要求65所述的方法，其中所述抗CD20单克隆抗体为利妥昔单抗或奥滨尤妥珠单抗；所述蒽环类药物为柔红霉素或多柔比星；并且/或者所述烷化剂为苯达莫司汀、卡铂、顺铂或环磷酰胺。
67.根据权利要求63至66中任一项所述的方法，其中所述受试者不符合自体干细胞疗法(ASCT)或嵌合抗原受体(CAR)T细胞疗法的条件。
68.根据权利要求63至67中任一项所述的方法，其中以包括至少第一给药周期和第二给药周期的给药方案向所述受试者施用所述替瑞利尤单抗和莫苏尼妥珠单抗，其中：
(a)所述第一给药周期包括莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)和莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的所述C1D1为约5mg，莫苏尼妥珠单抗的所述C1D2为约45mg，并且莫苏尼妥珠单抗的所述C1D3为约45mg；并且
(b)所述第二给药周期包括莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的所述C2D1为约45mg。
69.根据权利要求68所述的方法，其中所述第一给药周期和所述第二给药周期为21天给药周期，任选地其中分别在所述第一给药周期的第1天、第8天和第15天施用莫苏尼妥珠单抗的所述C1D1、所述C1D2和所述C1D3。
70.根据权利要求68或69所述的方法，其中在所述第二给药周期的第1天施用莫苏尼妥珠单抗的所述C2D1。
71.根据权利要求68至70中任一项所述的方法，其中所述第一给药周期包括替瑞利尤单抗的单一剂量(C1D1)，任选地其中在所述第一给药周期的第1天施用替瑞利尤单抗的所述C1D1。
72.根据权利要求71所述的方法，其中替瑞利尤单抗的所述C1D1为约600mg。
73.根据权利要求71或72所述的方法，其中在施用莫苏尼妥珠单抗的所述C1D1之后施用替瑞利尤单抗的所述C1D1。
74.根据权利要求68至70中任一项所述的方法，其中在所述第一给药周期期间，不向所述受试者施用替瑞利尤单抗
75.根据权利要求68至74中任一项所述的方法，其中所述第二给药周期包括替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1)，任选地其中在所述第二给药周期的第1天施用替瑞利尤单抗的所述C2D1。
76.根据权利要求75所述的方法，其中替瑞利尤单抗的所述C2D1为约600mg。
77.根据权利要求75或76所述的方法，其中在施用莫苏尼妥珠单抗的所述C2D1之后施用替瑞利尤单抗的所述C2D1。
78.根据权利要求68至77中任一项所述的方法，其中所述给药方案另外包括向所述受试者施用阿特珠单抗。
79.根据权利要求78所述的方法，其中所述第二给药周期包括阿特珠单抗的单一剂量(C2D1)；任选地其中在所述第二给药周期的第1天施用阿特珠单抗的所述C2D1。
80.根据权利要求79所述的方法，其中阿特珠单抗的所述C2D1为约1200mg。
81.根据权利要求79或80所述的方法，其中在施用替瑞利尤单抗的所述C2D1之后施用阿特珠单抗的所述C2D1。
82.根据权利要求78至81中任一项所述的方法，其中在所述第一给药周期期间，不向所述受试者施用阿特珠单抗。
83.根据权利要求68至82中任一项所述的方法，其中所述给药方案进一步包括一个或多个额外给药周期，任选地其中所述给药方案包括六至十五个额外给药周期，进一步任选地其中每个额外给药周期为21天给药周期。
84.根据权利要求83所述的方法，其中所述给药方案进一步包括六个额外给药周期或十五个额外给药周期。
85.根据权利要求83或84所述的方法，其中每个额外给药周期包括施用莫苏尼妥珠单抗的额外剂量，任选地其中在每个相应额外给药周期的第1天施用莫苏尼妥珠单抗的每个额外剂量。
86.根据权利要求85所述的方法，其中莫苏尼妥珠单抗的每个额外剂量为约45mg。
87.根据权利要求83至86中任一项所述的方法，其中每个额外给药周期包括施用替瑞利尤单抗的额外剂量，任选地其中在每个相应额外给药周期的第1天施用替瑞利尤单抗的每个额外剂量。
88.根据权利要求87所述的方法，其中替瑞利尤单抗的每个额外剂量为约600mg。
89.根据权利要求87或88所述的方法，其中在施用莫苏尼妥珠单抗的每个额外剂量之后施用替瑞利尤单抗的每个额外剂量。
90.根据权利要求87至89中任一项所述的方法，其中每个额外给药周期包括施用阿特珠单抗的额外剂量，任选地其中在每个相应额外给药周期的第1天施用阿特珠单抗的每个额外剂量。
91.根据权利要求90所述的方法，其中阿特珠单抗的每个额外剂量为约1200mg。
92.根据权利要求90或91所述的方法，其中在施用替瑞利尤单抗的每个额外剂量之后施用阿特珠单抗的每个额外剂量。
93.根据权利要求63至92中任一项所述的方法，其中向所述受试者静脉内施用替瑞利尤单抗。
94.根据权利要求63至93中任一项所述的方法，其中向所述受试者皮下施用莫苏尼妥珠单抗。
95.根据权利要求78至81和90至92中任一项所述的方法，其中向所述受试者静脉内施用阿特珠单抗。
96.根据权利要求63至95中任一项所述的方法，其中所述方法进一步包括向所述受试者施用一种或多种额外治疗剂。
97.根据权利要求96所述的方法，其中所述一种或多种额外治疗剂为IL-6R拮抗剂或皮质类固醇，任选地其中所述IL-6R拮抗剂为托珠单抗或者所述皮质类固醇为甲泼尼龙、地塞米松或泼尼松。
98.一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)的受试者群体的方法，所述方法包括以包括至少第一给药周期和第二给药周期的给药方案向所述受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗以及向所述受试者群体皮下施用莫苏尼妥珠单抗，其中：
(a)所述第一给药周期包括在所述第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、在所述第一给药周期的第8天施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在所述第一给药周期的第15天施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的所述C1D1为约5mg，莫苏尼妥珠单抗的所述C1D2为约45mg，并且莫苏尼妥珠单抗的所述C1D3为约45mg，任选地其中所述第一给药周期进一步包括在所述第一给药周期的第1天施用的替瑞利尤单抗的约600mg的单一剂量(C1D1)；并且
(b)所述第二给药周期包括在所述第二给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的所述C2D1为约45mg并且替瑞利尤单抗的所述C2D1为约600mg，任选地其中所述第二给药周期进一步包括在所述第二给药周期的第1天施用的阿特珠单抗的约1200mg的单一剂量(C2D1)。
99.一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)的受试者群体的方法，所述方法包括以包括八个给药周期的给药方案向所述受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗以及向所述受试者群体皮下施用莫苏尼妥珠单抗，其中：
(a)第一给药周期包括在所述第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、在所述第一给药周期的第8天施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在所述第一给药周期的第15天施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的所述C1D1为约5mg，莫苏尼妥珠单抗的所述C1D2为约45mg，并且莫苏尼妥珠单抗的所述C1D3为约45mg，任选地其中所述第一给药周期进一步包括在所述第一给药周期的第1天施用的替瑞利尤单抗的约600mg的单一剂量(C1D1)；并且
(b)第二给药周期至第八给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C8D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C2D1至C8D1为约45mg，并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C2D1至C8D1为约600mg，任选地其中所述第二给药周期至所述第八给药周期各自进一步包括在所述每个相应给药周期的第1天施用的阿特珠单抗的约1200mg的单一剂量(C2D1至C8D1)。
100.一种治疗患有复发性或难治性(R/R)非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)的受试者群体的方法，所述方法包括以包括十七个给药周期的给药方案向所述受试者群体静脉内施用替瑞利尤单抗以及向所述受试者群体皮下施用莫苏尼妥珠单抗，其中：
(a)第一给药周期包括在所述第一给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的第一剂量(C1D1)、在所述第一给药周期的第8天施用的莫苏尼妥珠单抗的第二剂量(C1D2)以及在所述第一给药周期的第15天施用的莫苏尼妥珠单抗的第三剂量(C1D3)，其中莫苏尼妥珠单抗的所述C1D1为约5mg，莫苏尼妥珠单抗的所述C1D2为约45mg，并且莫苏尼妥珠单抗的所述C1D3为约45mg，任选地其中所述第一给药周期进一步包括在所述第一给药周期的第1天施用的替瑞利尤单抗的约600mg的单一剂量(C1D1)；并且
(b)第二给药周期至第十七给药周期各自包括在每个相应给药周期的第1天施用的莫苏尼妥珠单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)和替瑞利尤单抗的单一剂量(C2D1至C17D1)，其中莫苏尼妥珠单抗的每个单一剂量C2D1至C17D1为约45mg并且其中替瑞利尤单抗的每个单一剂量C2D1至C17D1为约600mg，任选地其中所述第二给药周期至所述第十七给药周期各自进一步包括在所述每个相应给药周期的第1天施用的阿特珠单抗的约1200mg的单一剂量(C2D1至C17D1)。
101.根据权利要求98至100中任一项所述的方法，其中：
(a)所述受试者群体中的完全缓解率高于用包括莫苏尼妥珠单抗的单一疗法治疗的参考受试者群体中的参考完全缓解率；并且/或者
(b)所述受试者群体中的客观缓解率高于用包括莫苏尼妥珠单抗的单一疗法治疗的参考受试者群体中的参考客观缓解率。
102.根据权利要求98至100中任一项所述的方法，其中：
(a)所述受试者群体中的不良事件发生率与用包括莫苏尼妥珠单抗的单一疗法治疗的参考受试者群体中不良事件的参考发生率基本上相同；并且/或者
(b)所述受试者群体中细胞因子释放综合征(CRS)事件的发生率与用包括莫苏尼妥珠单抗的单一疗法治疗的参考受试者群体中CRS事件的参考发生率基本上相同。
103.根据权利要求98至100中任一项所述的方法，其中所述受试者群体中具有如美国移植和细胞疗法学会(ASTCT)细胞因子释放综合征共识分级(“ASTCT CRS分级”)所定义的3级或更高级别的CRS事件的发生率与用包括莫苏尼妥珠单抗的单一疗法治疗的参考受试者群体中具有如ASCT CRS分级所定义的3级或更高级别的CRS事件的参考发生率基本上相同。
104.根据权利要求98至100中任一项所述的方法，其中：
(a)所述受试者群体中的完全缓解率高于用包括皮下施用莫苏尼妥珠单抗的单一疗法治疗的参考受试者群体中的参考完全缓解率；
并且/或者
(b)所述受试者群体中的客观缓解率高于用包括皮下施用莫苏尼妥珠单抗的单一疗法治疗的参考受试者群体中的参考客观缓解率。
105.根据权利要求98至100中任一项所述的方法，其中：
(a)所述受试者群体中的不良事件发生率与用包括皮下施用莫苏尼妥珠单抗的单一疗法治疗的参考受试者群体中不良事件的参考发生率基本上相同；并且/或者
(b)所述受试者群体中CRS事件的发生率与用包括皮下施用莫苏尼妥珠单抗的单一疗法治疗的参考受试者群体中CRS事件的参考发生率基本上相同。
106.根据权利要求98至100中任一项所述的方法，其中所述受试者群体中具有如ASTCTCRS分级所定义的3级或更高级别的CRS事件的发生率与用包括皮下施用莫苏尼妥珠单抗的单一疗法治疗的参考受试者群体中具有如ASCT CRS分级所定义的3级或更高级别的CRS事件的参考发生率基本上相同。
107.一种治疗患有转移性结直肠癌(CRC)的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用替瑞利尤单抗和阿特珠单抗，其中所述转移性CRC为微卫星不稳定性高(MSI-H)CRC。
108.一种治疗患有转移性CRC的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用替瑞利尤单抗、阿特珠单抗和贝伐单抗，其中所述转移性CRC为MSI-H CRC。
109.根据权利要求107或108所述的方法，其中所述转移性CRC为腺癌。
110.根据权利要求107至109中任一项所述的方法，其中所述受试者在既往基于检查点抑制剂的疗法时已经历疾病进展。
111.根据权利要求107至110中任一项所述的方法，其中：
(a)以包括一个或多个给药周期的给药方案向所述受试者施用所述替瑞利尤单抗和所述阿特珠单抗；并且/或者
(b)以包括一个或多个给药周期的给药方案向所述受试者施用所述贝伐单抗。
112.根据权利要求107至111中任一项所述的方法，其中每三周以约600mg的剂量施用所述替瑞利尤单抗，并且每三周以约1200mg的剂量施用所述阿特珠单抗。
113.根据权利要求108至112中任一项所述的方法，其中每三周以约15mg/kg的剂量施用所述贝伐单抗。
114.根据权利要求111至113中任一项所述的方法，其中所述一个或多个给药周期中的每一个的长度为21天，任选地其中在所述一个或多个给药周期中的每一个的第1天施用所述替瑞利尤单抗和所述阿特珠单抗，并且/或者在所述一个或多个给药周期中的每一个的第1天施用所述贝伐单抗。
115.根据权利要求107至114中任一项所述的方法，其中所述阿特珠单抗在所述替瑞利尤单抗之前施用。
116.根据权利要求108至115中任一项所述的方法，其中所述阿特珠单抗在所述贝伐单抗之前施用，并且所述贝伐单抗在所述替瑞利尤单抗之前施用。
117.根据权利要求111至116中任一项所述的方法，其中所述给药方案包括至少16个给药周期。
118.一种治疗患有转移性CRC的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用包括一个或多个21天给药周期的替瑞利尤单抗和阿特珠单抗的给药方案，所述替瑞利尤单抗是以约600mg的剂量在每个给药周期的第1天，所述阿特珠单抗是以约1200mg的剂量在每个给药周期的第1天，其中所述转移性CRC为MSI-H CRC。
119.一种治疗患有转移性CRC的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用包括一个或多个21天给药周期的替瑞利尤单抗、阿特珠单抗和贝伐单抗的给药方案，所述替瑞利尤单抗是以约600mg的剂量在每个给药周期的第1天，所述阿特珠单抗是以约1200mg的剂量在每个给药周期的第1天，所述贝伐单抗是以约15mg/kg的剂量在每个给药周期的第1天，其中所述转移性CRC为MSI-HCRC。
120.根据权利要求107至119中任一项所述的方法，其中：
(a)所述替瑞利尤单抗是静脉内施用的；
(b)所述阿特珠单抗是静脉内施用的；并且/或者
(c)所述贝伐单抗是静脉内施用的。
121.根据权利要求107至120中任一项所述的方法，其中MSI-H状态是通过下一代测序、聚合酶链式反应(PCR)、免疫组织化学(IHC)或Liquid CDx测试或其组合来确定的。
122.根据权利要求1至121中任一项所述的方法，其中一个或多个受试者为人。
CN202280046443.7A 2021-07-02 2022-07-01 用于治疗癌症的方法和组合物 Pending CN117940452A (zh)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US63/218,194 2021-07-02
US63/226,714 2021-07-28
US202163286525P 2021-12-06 2021-12-06
US63/286,525 2021-12-06
PCT/US2022/073365 WO2023279092A2 (en) 2021-07-02 2022-07-01 Methods and compositions for treating cancer

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN117940452A true CN117940452A (zh) 2024-04-26

Family

ID=90754130

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202280046443.7A Pending CN117940452A (zh) 2021-07-02 2022-07-01 用于治疗癌症的方法和组合物

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN117940452A (zh)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6586087B2 (ja) Ｐｄ−１アンタゴニストとジナシクリブとの組合せでの癌治療
JP2023036582A (ja) がんのための治療方法及び診断方法
JP6805428B2 (ja) Ｃｅａｃａｍ１に対するヒト化抗体
JP2023511595A (ja) 抗ｔｉｇｉｔアンタゴニスト抗体を用いたがんを処置するための方法
US11572405B2 (en) Combination therapy with anti-IL-8 antibodies and anti-PD-1 antibodies for treating cancer
US20230131598A1 (en) Combination treatment for cancer
JP2023525085A (ja) がんを治療するための組成物および方法
US20220016243A1 (en) Methods for treatment of cancer with an anti-tigit antagonist antibody
CN112839644A (zh) 用pd-1轴结合拮抗剂、抗代谢物和铂剂治疗肺癌的方法
JP2023539506A (ja) 非小細胞肺がんの治療における抗ｐｄ－１抗体及び細胞毒性抗がん剤の用途
CN117940452A (zh) 用于治疗癌症的方法和组合物
KR20240028452A (ko) 암을 치료하기 위한 방법 및 조성물
US20230149543A1 (en) Combination treatment for cancer based upon an icos antbody and a pd-l1 antibody tgf-bets-receptor fusion protein
US20230365691A1 (en) Use of anti-pd-1 antibody in treatment of nasopharyngeal carcinoma
US20240092934A1 (en) Assessment of ceacam1 expression on tumor infiltrating lymphocytes
US20230140694A1 (en) Combination treatment for cancer involving anti-icos and anti-pd1 antibodies, optionally further involving anti-tim3 antibodies
WO2023010095A1 (en) Methods and compositions for treating cancer
TW202320848A (zh) 治療癌症之方法及組成物
JP2023523450A (ja) 非小細胞肺がん免疫療法のための方法及び組成物

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication