CN117858877A - Enl/af9 yeats的c连接抑制剂 - Google Patents

Enl/af9 yeats的c连接抑制剂 Download PDF

Info

Publication number
CN117858877A
CN117858877A CN202280049574.0A CN202280049574A CN117858877A CN 117858877 A CN117858877 A CN 117858877A CN 202280049574 A CN202280049574 A CN 202280049574A CN 117858877 A CN117858877 A CN 117858877A
Authority
CN
China
Prior art keywords
acute
methyl
resulting mixture
leukemia
stirred
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202280049574.0A
Other languages
English (en)
Inventor
塔米·拉杜瓦赫蒂
约瑟夫·P·瓦卡
塞巴斯蒂安·L·德戈斯
布拉德利·谢伯恩
坦维尔·A·汗
戴维·约翰·胡金斯
尼格尔·利弗顿
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Bridge Pharmaceutical Co ltd
Original Assignee
Bridge Pharmaceutical Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bridge Pharmaceutical Co ltd filed Critical Bridge Pharmaceutical Co ltd
Publication of CN117858877A publication Critical patent/CN117858877A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4184—1,3-Diazoles condensed with carbocyclic rings, e.g. benzimidazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4545—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pipamperone, anabasine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

披露了具有式I的化合物和包含具有式I的化合物的药物组合物。还披露了用于使用具有式I的化合物和包含这些化合物的药物组合物治疗急性白血病的方法。

Description

ENL/AF9 YEATS的C连接抑制剂
相关申请的交叉引用
本申请要求2021年5月13日提交的美国临时专利申请号63/188,426的优先权，其全部内容通过引用并入本文。
技术领域
本申请总体上涉及抑制ENL/AF9 YEATS的化合物和使用此类化合物的治疗方法。这些化合物和方法可用于治疗各种不同的疾病，包括血癌如白血病。
背景技术
表观基因组是与DNA相邻的化学化合物的集合，负责修饰基因组而不改变DNA序列。它由DNA、RNA和DNA包裹在其周围的组蛋白的化学变化动态调节。已经证明了编码表观遗传调节因子的基因的突变在急性髓系白血病(AML)发病机理中起作用(Shih AH,Abdel-Wahab O,Patel JP等人“The role of mutations in epigenetic regulators inmyeloid malignancies[表观遗传调节因子的突变在髓系恶性肿瘤中的作用].”Nat.Rev.Cancer[自然综述-癌症]2012；12:599-612)。
ENL是一种染色质阅读蛋白，具有氨基末端YEATS结构域(以该家族中最先发现的成员命名：Yaf9、ENL、AF9、Taf14、Sas5)和无序羧基末端蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)界面。YEATS是一个组蛋白乙酰赖氨酸阅读子家族，其通过允许染色质更容易接近RNA聚合酶和转录因子而发挥效应子作用。Erb等人报告，不成比例数量的白血病原癌基因和依赖性在其启动子处具有ENL(Erb,M.A.等人,“Transcription control by the ENL YEATS domainin acute leukaemia[急性白血病中ENL YEATS结构域的转录控制],”Nature[自然]543,270-274(2017))。Wan等人发现，ENL与乙酰化组蛋白H3结合，然后与H3K27和H3K9ac共定位于白血病必需基因的启动子上，并且ENL是AML维持所需的(Wan L.等人“ENL linkshistone acetylation to oncogenic gene expression in acute myeloid leukaemia[ENL将急性髓系白血病中组蛋白乙酰化与癌基因表达联系起来],”Nature[自然]2017；543:265-9)。
鉴于ENL在白血病增殖中的作用，ENL的YEATS结构域的抑制剂是治疗血癌的潜在靶点。例如，Moustakim等人描述了ENL YEATS结构域的小分子抑制剂(Moustakim,M.等人,“Discovery of an MLLT1/3 YEATS Domain Chemical Probe[一种MLLT1/3YEATS结构域化学探针的发现],”Angew.Chem.Int.Ed.[应用化学国际版]2018,57,16302-16307)。Moustakim的抑制剂化合物含有一个环状含氮杂环，该杂环通过氮原子与附接到苯并咪唑核的亚甲基基团连接。然而，仍然需要可用于治疗血癌的改进的抑制剂。
发明内容
本发明涉及用于抑制YEATS/ENL，从而治疗各种癌症，特别是血癌如白血病的化合物、药物组合物和方法。
在第一方面，本发明涉及具有式I的化合物：
其中：
X1、X2和X3独立地选自N和CH；
R1和R2选自：
(a)R1和R2一起形成吡咯烷或哌啶；以及
(b)R1和R2是甲基；
R3是选自以下的稠合双环：
(a)稠合5,6双环杂环，任选地被一个或多个C1-C6烷基取代；
(b)稠合6,5双环杂环，任选地被一个或多个下列基团取代：C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C3-C8碳环、C1-C6氧杂烷基、C1-C6烷氧基、氧代、卤素、杂环和NHR4，其中R4选自C1-C6烷基和C1-C6氧杂烷基；以及
(c)稠合6,6双环杂环，任选地被一个或多个下列基团取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、卤素、氧代和NHR5，其中R5选自氢和C1-C6烷基。
在第二方面，本发明涉及包含具有式I的化合物和一种或多种药学上可接受的载剂的药物组合物。这些药物组合物可以进一步包含一种或多种治疗剂。示例性治疗剂包括Bcl-2抑制剂、细胞周期蛋白依赖性激酶4和6(CDK 4/6)抑制剂、DNA甲基转移酶抑制剂、组蛋白脱乙酰酶(HDAC)抑制剂、组蛋白脱甲基酶抑制剂、mTOR抑制剂、突变异柠檬酸脱氢酶(IDH1和IDH2)抑制剂、糖皮质激素、表观遗传调节剂和化学治疗剂。
在第三方面，本发明涉及治疗急性白血病的方法，这些方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的具有式I的化合物或包含该化合物的药物组合物。急性白血病可以是急性淋巴细胞白血病(ALL)或急性髓细胞性白血病(AML)。
具体实施方式
I.定义
如本文所用，“酰基”是指甲酰基和通过羰基官能团附接到母体结构的直链、支链、环状构型、饱和、不饱和以及芳香族及其组合的1、2、3、4、5、6、7和8个碳原子的基团。酰基残基中的一个或多个碳可以被氮、氧或硫替代，只要与母体的附接点保持在羰基上。实例包括乙酰基、苯甲酰基、丙酰基、异丁酰基、叔丁氧基羰基、苄氧基羰基等。低级酰基是指含有一至四个碳的基团。双键氧，当被称为取代基本身时，被称为“氧代”。
如本文所用，术语“烷基”包括直链或支链烃结构。低级烷基是指具有1至6个碳原子的烷基基团。低级烷基基团的实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基和叔丁基等。优选的烷基基团是C20或以下的烷基，例如C1-C10烷基、C1-C8烷基和C1-C6烷基。
如本文所用，“芳基”和“杂芳基”意指(i)苯基基团(或苯)或含有1-4个选自O、N或S的杂原子的单环5或6元芳杂环；(ii)含有0-4个选自O、N或S的杂原子的双环9或10元芳香环或芳杂环系统；或(iii)含有0-5个选自O、N或S的杂原子的三环13或14元芳香环或芳杂环系统。芳香族6至14元碳环包括例如，苯、萘、茚满、四氢化萘和芴，并且5至10元芳香族杂环包括例如，咪唑、吡啶、吲哚、噻吩、苯并吡喃酮、噻唑、呋喃、苯并咪唑、喹啉、异喹啉、喹喔啉、嘧啶、吡嗪、四唑和吡唑。如本文所用，芳基和杂芳基是指其中一个或多个环是芳族但不是所有环都必须是芳族的残基。
如本文所用，“芳基烷基”是指其中芳基残基通过烷基附接到母体结构的取代基。实例是苄基、苯乙基等。“杂芳基烷基”是指其中杂芳基残基通过烷基附接到母体结构的取代基。在一个实施例中，芳基烷基或杂芳基烷基的烷基基团是1至6个碳的烷基基团。实例包括例如，吡啶基甲基、嘧啶基乙基等。
如本文所用，“C1至C20烃”或“C1至C20烃基”(作为取代基)包括烷基、环烷基、多环烷基、烯基、炔基、芳基及其组合。实例包括环丙基甲基、苄基、苯乙基、环己基甲基、樟脑基和萘乙基。烃是指由氢和碳作为仅有的元素成分组成的任何取代基。环烷基是烃基的一个子集，并且包括3至8个碳原子的环状烃基团。环烷基基团的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、降冰片基等。
“烷氧基(alkoxy或alkoxyl)”是指通过氧附接到母体结构的直链、支链或环状构型及其组合的1至8个碳原子的基团。实例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、环丙氧基、环己氧基等。低级烷氧基是指含有一至四个碳的基团。出于本申请的目的，烷氧基和低级烷氧基包括亚甲基二氧基和亚乙基二氧基。
如本文所用，“碳环”包括其中环原子都是碳但具有任何氧化态的环系统。因此，(C3-C8)碳环是指非芳香族和芳香族系统两者，包括如环丙烷、苯和环己烯的系统；(C8-C12)碳多环是指如降冰片烷、十氢化萘、二氢化茚和萘的系统。如果没有其他限制，则碳环是指单环、双环和多环。
如本文所用，术语“治疗有效量”是指本发明化合物或任何其他药物活性剂的任何量，其与未接受该量的本发明化合物或其他药物活性剂的相应患者相比，导致疾病、病症或副作用的治疗、治愈、预防或减轻的改善，或者疾病或病症发展速率的降低。
如本文所用，术语“稠合双环”是指其中每个环(碳环或杂环)与另一个环(碳环或杂环)共享两个相邻原子的双环碳环和双环杂环。稠合碳环的每个环可以选自非芳香环或芳香环。在优选的实施例中，芳香环(如苯基)可以与另一个芳香环稠合。在其他实施例中，芳香环可以与非芳香环(例如，环己烷、环戊烷或环己烯)稠合。示例性稠合双环包括6,6；6,5；和5,6稠合双环系统，其中每个数字表示每个环中的原子数量。稠合双环可以在它可以具有氢原子的任何一个或多个位置处被取代。稠合双环在第一个编号的环，例如稠合6,5双环的“6”环处结合到母体结构。
如本文所用，“杂环”意指环烷基或芳基碳环残基，其中一至四个碳被选自由N、O和S组成的组的杂原子替代。氮和硫杂原子可以任选地被氧化，并且氮杂原子可以任选地被季铵化。除非另有说明，否则杂环可以是非芳香族的或芳香族的。落入本发明范围内的杂环的实例包括吡咯烷、吡唑、吡咯、吲哚、喹啉、异喹啉、四氢异喹啉、苯并呋喃、苯并二噁烷、苯并二噁唑(当作为取代基出现时，通常称为亚甲基二氧苯基)、四唑、吗啉、噻唑、吡啶、哒嗪、嘧啶、噻吩、呋喃、噁唑、噁唑啉、异噁唑、二噁烷、四氢呋喃等。应当注意，杂芳基是杂环的一个子集，其中杂环是芳香族的。芳杂环的非限制性实例包括呋喃、苯并呋喃、异苯并呋喃、吡咯、吲哚、异吲哚、噻吩、苯并噻吩、咪唑、苯并咪唑、嘌呤、吡唑、吲唑、噁唑、苯并噁唑、异噁唑、苯并异噁唑、噻唑、苯并噻唑、三唑、四唑、吡啶、喹啉、异喹啉、吡嗪、喹喔啉、吖啶、嘧啶、喹唑啉、哒嗪、噌啉、酞嗪和三嗪。杂环基残基的实例另外地包括哌嗪基、2-氧代哌嗪基、2-氧代哌啶基、2-氧代吡咯烷基、2-氧代氮杂基(2-oxoazepinyl)、氮杂基(azepinyl)、4-哌啶基、吡唑烷基、咪唑基、咪唑啉基、咪唑烷基、吡嗪基、噁唑烷基、异噁唑烷基、噻唑烷基、异噻唑基、奎宁环基、异噻唑烷基、苯并咪唑基、噻二唑基、苯并吡喃基、苯并噻唑基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、噻吩基、苯并噻吩基、硫代吗啉基(thiamorpholinyl)、硫代吗啉亚砜(thiamorpholinylsulfoxide)、硫代吗啉砜(thiamorpholinylsulfone)、噁二唑基、三唑基和四氢喹啉基。
氧杂环是环中含有至少一个氧的杂环；它可以含有另外的氧原子，以及其他杂原子。硫杂环是环中含有至少一个硫的杂环；它可以含有另外的硫原子，以及其他杂原子。氧杂芳基是氧杂环的一个子集；非限制性实例包括呋喃和噁唑。硫杂芳基是硫杂环的一个子集；实例包括噻吩和噻嗪。氮杂环是环中含有至少一个氮的杂环；它可以含有另外的氮原子，以及其他杂原子。非限制性实例包括哌啶、哌嗪、吗啉、吡咯烷和硫代吗啉。氮杂芳基是氮杂环的一个子集；非限制性实例包括吡啶、吡咯和噻唑。
双环含氮杂环包括(1)稠合双环，如八氢环戊并[c]吡咯；(2)氮杂螺己烷、庚烷和辛烷，如6-氧杂-2-氮杂螺[3.4]辛烷、2,6-二氮杂螺[3.4]辛烷、2-氮杂螺[3.3]庚烷、2-氧杂-6-氮杂螺[3.3]庚烷和7-氧杂-2-氮杂螺[3.5]壬烷；和(3)氮杂双环链烷：8-氮杂双环[3.2.1]辛烷。在本文所述的化合物中，这些双环含氮杂环可以经由碳附接到带有R3的碳。
如本文所用，术语“任选地被取代”可以与“未取代的或取代的”可互换地使用。术语“取代的”是指特定基团中的一个或多个氢原子被特定基团替代。例如，取代的芳基、杂环基等是指其中每个残基中的一个或多个hr原子被卤素、卤代烷基、烷基、酰基、烷氧基烷基、羟基低级烷基、羰基、苯基、杂芳基、苯磺酰基、羟基、低级烷氧基、卤代烷氧基、氧杂烷基、羧基、烷氧基羰基[-C(＝O)O-烷基]、羧酰氨基[-C(＝O)NH2]、烷基氨基羰基[-C(＝O)NH-烷基]、氰基、乙酰氧基、硝基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、二烷基氨基烷基、二烷基氨基烷氧基、杂环基烷氧基、芳基烷基、(环烷基)烷基、杂环基、杂环基烷基、烷基氨基烷基、杂环基氨基烷基、杂环基烷基氨基烷基、环烷基氨基烷基、环烷基烷基氨基烷基、芳基氨基烷基、以及芳基烷基氨基烷基、巯基、烷硫基、烷基亚磺酰基、苄基、杂环基、苯氧基、苄氧基、杂芳氧基、氨基磺酰基、脒基、胍基和脲基替代的芳基或杂环基。(C1-6)烃基、-SO2烷基、-SO2NH2或-SO2NH烷基。
如本文所用，“氧杂烷基”是指其中一个或多个碳(及其相关的氢)已被氧替代的烷基残基。实例包括甲氧基丙氧基、3,6,9-三氧杂癸基等。烷氧基是氧杂烷基的一个子集，其中附接点处的碳被氧替代。术语氧杂烷基旨在为本领域所理解的那样[参见Naming andIndexing of Chemical Substances for Chemical Abstracts[化学文摘的化学物质的命名和索引]，由美国化学学会(American Chemical Society)出版，196，但没有127(a)的限制]，即它是指其中氧经由单键与其相邻原子结合(形成醚键)的化合物；它不是指双键氧，如可在羰基基团中找到的氧。类似地，硫烷基和氮杂烷基是指其中一个或多个碳已分别被硫或氮替代的烷基残基。非限制性实例包括乙胺基乙基和甲硫基丙基。
如本文所用，“溶剂化物”是指呈固态的具有式I的化合物，其中合适的溶剂分子与具有式I的化合物一起掺入晶格中。用于治疗施用的合适溶剂在施用的剂量下是生理上可耐受的。用于治疗施用的合适溶剂的实例是乙醇和水。当水是溶剂时，该溶剂化物被称为水合物。通常，溶剂化物是通过将化合物溶解在适当的溶剂中，并且通过冷却或使用反溶剂来分离溶剂化物而形成的。溶剂化物典型地在环境条件下干燥或共沸。
如本文所用，术语“受试者”或“有需要的受试者”在本文中可互换地使用。这些术语是指已被诊断患有待治疗的潜在病症的患者。受试者目前可能正在经历与该病症相关的症状，或者可能在过去已经历过症状。另外，“有需要的受试者”可以是处于发展特定疾病的风险中的患者，或报告了疾病的生理系统中的一个或多个的患者，尽管可能尚未进行这种疾病的诊断。
如本文所用，术语“治疗(treatment)”或“治疗(treating)”可互换地使用。这些术语是指一种用于获得有利或希望的结果的方法，这些结果包括但不限于治疗益处。治疗益处包括根除或改善正治疗的潜在病症；它还包括根除或改善与潜在病症相关联的一种或多种症状，使得在患者中观察到改善，虽然患者可能仍受潜在病症的折磨。
II.化合物
本发明提供了具有式I的化合物：
其中：
X1、X2和X3独立地选自N和CH；
R1和R2选自：
(a)R1和R2一起形成吡咯烷或哌啶；以及
(b)R1和R2是甲基；
R3是选自以下的稠合双环：
(a)稠合5,6双环杂环，任选地被一个或多个C1-C6烷基取代；
(b)稠合6,5双环杂环，任选地被一个或多个下列基团取代：C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C3-C8碳环、C1-C6氧杂烷基、C1-C6烷氧基、氧代、卤素、杂环和NHR4，其中R4选自C1-C6烷基和C1-C6氧杂烷基；以及
(c)稠合6,6双环杂环，任选地被一个或多个下列基团取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、卤素、氧代和NHR5，其中R5选自氢和C1-C6烷基。
在一方面，这些化合物是具有式II的吡咯并[3,2-c]吡啶：
其中R1、R2和R3如上文对于式I所定义。
在特定实施例中，式II的R1和R2是甲基，并且这些化合物具有式IIa：
其中R3如上文对于式I所定义。
在另一个特定实施例中，式II的R1和R2一起形成吡咯烷，并且这些化合物具有式IIb：
其中R3如上文对于式I所定义。
在式IIb的某些子实施例中，R3是稠合5,6双环杂环，任选地被一个或多个C1-C6烷基(即，一个或多个R6)取代。在下文描述的所有实施例中，R6可以是稠合杂环的任何环位置上的取代基。示例性稠合5,6双环杂环为以下：
在式IIb的其他子实施例中，R3是稠合6,5双环杂环，任选地被一个或多个R6(例如，一个或多个以下基团)取代：C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C3-C8碳环、C1-C6氧杂烷基、C1-C6烷氧基、氧代、卤素、杂环和NHR4，其中R4选自C1-C6烷基和C1-C6氧杂烷基。示例性稠合6,5双环杂环包括以下：
在式IIb的仍其他子实施例中，R3是稠合6,6双环杂环，任选地被一个或多个以下基团(即，一个或多个R6)取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、卤素、氧代和NHR5，其中R5选自氢和C1-C6烷基。示例性稠合6,6双环杂环包括以下：
在特定实施例中，式II的R1和R2一起形成哌啶，并且这些化合物具有式IIc：
其中R3如上文对于式I所定义。
在式IIc的某些子实施例中，R3是稠合5,6双环杂环，任选地被一个或多个C1-C6烷基(即，一个或多个R6)取代。在下文描述的所有实施例中，R6可以是稠合杂环的任何环位置上的取代基。示例性稠合5,6双环杂环为以下：
在式IIc的其他子实施例中，R3是稠合6,5双环杂环，任选地被一个或多个R6(例如，一个或多个以下基团)取代：C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C3-C8碳环、C1-C6氧杂烷基、C1-C6烷氧基、氧代、卤素、杂环和NHR4，其中R4选自C1-C6烷基和C1-C6氧杂烷基。示例性稠合6,5双环杂环包括以下：
在式IIc的仍其他子实施例中，R3是稠合6,6双环杂环，任选地被一个或多个以下基团(即，一个或多个R6)取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、卤素、氧代和NHR5，其中R5选自氢和C1-C6烷基。示例性稠合6,6双环杂环包括以下：
在另一方面，这些化合物是具有式III的1H-吡咯并[3,2-b]吡啶：
其中R1、R2和R3如上文对于式I所定义。
在特定实施例中，式III的R1和R2一起形成吡咯烷，并且这些化合物具有式IIIa：
其中R3如上文对于式I所定义。
在式IIIa的某些子实施例中，R3是稠合6,5双环杂环，任选地被一个或多个以下基团(即，一个或多个R6)取代：C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C3-C8碳环、C1-C6氧杂烷基、C1-C6烷氧基、氧代、卤素、杂环和NHR4，其中R4选自C1-C6烷基和C1-C6氧杂烷基。示例性稠合6,5双环杂环包括以下：
在式IIIa的其他子实施例中，R3是稠合6,6双环杂环，任选地被一个或多个以下基团(即，一个或多个R6)取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、卤素和NHR5，其中R5选自氢、C1-C6烷基。示例性稠合6,6双环杂环包括以下：
在仍另一个方面，这些化合物是具有式IV的苯并咪唑：
其中R1、R2和R3如上文对于式I所定义。
在一个特定实施例中，式IV的R1和R2一起形成哌啶，并且这些化合物具有式IVa：
其中R3如上文对于式I所定义。
在另一个特定实施例中，式IV的R1和R2一起形成吡咯烷，并且这些化合物具有式IVb：
其中R3如上文对于式I所定义。
在式IVb的某些子实施例中，R3是稠合6,5双环杂环，任选地被一个或多个以下基团(即，一个或多个R6)取代：C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C3-C8碳环、C1-C6氧杂烷基、C1-C6烷氧基、氧代、卤素、杂环和NHR4，其中R4选自C1-C6烷基和C1-C6氧杂烷基。示例性稠合6,5双环杂环包括以下：
在另外的子实施例中，这些化合物具有式IVb'：
其中R6如上所述。在特定实施例中，R6是杂环。
在式IVb的其他子实施例中，R3是稠合6,6双环杂环，任选地被一个或多个以下基团(即，一个或多个R6)取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、卤素和NHR5，其中R5选自氢、C1-C6烷基。示例性稠合6,6双环杂环包括以下：
在又另一个方面，这些化合物具有式V：
其中R1、R2和R3如上文对于式I所定义。
在特定实施例中，式V的R1和R2一起形成吡咯烷，并且这些化合物具有式Va：
其中R3如上文对于式I所定义。
在式Va的某些子实施例中，R3是稠合6,5双环杂环，任选地被一个或多个以下基团(即，一个或多个R6)取代：C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C3-C8碳环、C1-C6氧杂烷基、C1-C6烷氧基、氧代、卤素、杂环和NHR4，其中R4选自C1-C6烷基和C1-C6氧杂烷基。示例性稠合6,5双环杂环包括以下：
在又另一个方面，这些化合物具有式VI：
其中R1、R2和R3如上文对于式I所定义。
在特定实施例中，式VI的R1和R2一起形成吡咯烷，并且这些化合物具有式VIa：
其中R3如上文对于式I所定义。
在式IVa的某些子实施例中，R3是稠合6,6双环杂环，任选地被一个或多个以下基团(即，一个或多个R6)取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、卤素和NHR5，其中R5选自氢、C1-C6烷基。示例性稠合6,6双环杂环包括以下：
如本文所用，“化合物”-除非明确进一步限定-旨在包括该化合物的盐。因此，例如，如上所述的叙述“具有式I的化合物”将包括盐：
其中X是任何抗衡离子。在特定实施例中，术语“具有式I的化合物”是指该化合物或其药学上可接受的盐。术语“药学上可接受的盐”是指由药学上可接受的无毒酸或无毒碱(包括无机酸和无机碱以及有机酸和有机碱)制备的盐。当本发明的化合物是碱性(如它们通常那样)时，可以从药学上可接受的无毒酸(包括无机酸和有机酸)制备盐。用于本发明化合物的合适的药学上可接受的酸加成盐包括乙酸、己二酸、藻酸、抗坏血酸、天冬氨酸、苯磺酸(苯磺酸盐)、苯甲酸、硼酸、丁酸、樟脑酸、樟脑磺酸、碳酸、柠檬酸、乙二磺酸、乙磺酸、乙二胺四乙酸、甲酸、富马酸、葡庚糖酸、葡萄糖酸、谷氨酸、氢溴酸、盐酸、氢碘酸、羟基萘酸、羟乙磺酸、乳酸、乳糖酸、月桂基磺酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、甲磺酸、粘酸、萘磺酸、硝酸、油酸、帕莫酸、泛酸、磷酸、新戊酸、聚半乳糖醛酸、水杨酸、硬脂酸、琥珀酸、硫酸、鞣酸、酒石酸、硫辛酸、对甲苯磺酸等。适当时，另外的药学上可接受的盐包括附接到具有1至20个碳原子的烷基的无毒铵阳离子和羧酸根、磺酸根和膦酸根阴离子。
除非另有说明或描述，否则本文描述的结构还意味着包括该结构的所有立体异构体(例如，对映异构体、非对映异构体和顺反异构体)形式；例如，每个不对称中心的R和S构型、(Z)和(E)双键异构体，以及(Z)和(E)构象异构体。因此，本发明化合物的单一立体化学异构体以及对映异构体、非对映异构体及顺反异构体(或构型)混合物均在本发明的范围内。
在某些实施例中，该化合物在式I的手性中心处具有R立体化学构型。具有R立体化学的化合物通常显示出比相应的S对映体更高的活性。在其他实施例中，该化合物在式I的手性中心处具有S立体化学构型。
除非另有说明，否则本发明的化合物的所有互变异构体形式皆在本发明的范围内。另外，除非另有说明，否则本文所绘示的结构还意在包含仅在一或多个同位素富集原子存在时不同的化合物。例如，具有本发明结构的化合物(氢由氘或氚替代、或碳由13C-或14C-富集碳替代者除外)均在本发明的范围内。此类化合物对例如作为生物测定中的分析工具或探针是有用的。
III.药物组合物
本发明还提供了包含至少一种本文所述化合物(包括其药学上可接受的盐和溶剂化物)的药物组合物。
药物组合物包含至少一种本文所述的化合物和一种或多种药学上可接受的赋形剂。示例性赋形剂包括但不限于，包括但不限于一种或多种粘合剂、填充剂、缓冲剂、稳定剂、表面活性剂、湿润剂、润滑剂、稀释剂、崩解剂、增粘剂或降粘剂、乳化剂、助悬剂、防腐剂、抗氧化剂、遮光剂(opaquing agent)、助流剂、加工助剂、着色剂、甜味剂、掩味剂、芳香剂、调味剂、稀释剂、抛光剂、聚合物基质系统、增塑剂和其他已知的添加剂，以精美呈现药物或有助于制造包含本发明组合物的药物或药物产品。本领域技术人员熟知的载剂和赋形剂的实例在例如，Ansel,Howard C.等人,Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms andDrug Delivery Systems[Ansel的药物剂型和药物递送系统].Philadelphia:Lippincott,Williams&Wilkins[费城：利平科特·威廉斯·威尔金斯出版公司],2004；Gennaro,Alfonso R.等人Remington:The Science and Practice of Pharmacy[雷明顿：药学的科学与实践].Philadelphia:Lippincott,Williams&Wilkins[费城：利平科特·威廉斯·威尔金斯出版公司],2000；和Rowe,Raymond C.Handbook of Pharmaceutical Excipients[药用赋形剂手册].Chicago,Pharmaceutical Press[芝加哥，制药出版社],2005中有详述描述。
赋形剂的非限制性实例包括但不限于玉米淀粉、马铃薯淀粉或其他淀粉、明胶、天然和合成树胶如阿拉伯胶、藻酸钠、藻酸、其他藻酸盐、粉状黄蓍胶、瓜尔胶、纤维素及其衍生物(例如，乙基纤维素、醋酸纤维素、羧甲基纤维素钙、羧甲基纤维素钠)、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纤维素、预糊化淀粉、羟丙基甲基纤维素(例如2208、2906、2910号)、羟丙基纤维素、二氧化钛、滑石、碳酸钙(例如，颗粒或粉末)、微晶纤维素、粉状纤维素、葡萄糖结合剂(dextrates)、高岭土、硅酸、山梨醇、淀粉、预糊化淀粉、琼脂、藻酸、碳酸钙、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、聚克立林钾(polacrilin potassium)、羟基乙酸淀粉钠、马铃薯或木薯淀粉、其他淀粉、预糊化淀粉、其他淀粉、粘土、其他藻酸盐、其他纤维素、树胶、硬脂酸钙、硬脂酸镁、矿物油、轻质矿物油、甘油、山梨醇、甘露醇、聚乙二醇、其他乙二醇、硬脂酸、十二烷基硫酸钠、滑石、氢化植物油(例如，花生油、棉籽油、葵花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油)、硬脂酸锌、油酸乙酯、月桂酸乙酯、琼脂、syloid硅胶(AEROSIL200，由马里兰州巴尔的摩(Baltimore,MD)的格雷斯公司(W.R.Grace Co.)制造)、合成二氧化硅的凝结气溶胶(由德克萨斯州普莱诺(Plano,TX)的德固赛公司(Degussa Co.)销售)、CAB-O-SIL(由马萨诸塞州波士顿(Boston,MA)的卡博特公司(Cabot Co.)销售的热解二氧化硅产品)、着色剂及其混合物。
这些药物组合物可以任选地包括一种或多种另外的治疗剂。
另外的治疗剂包括Bcl-2抑制剂、细胞周期蛋白依赖性激酶4和6(CDK 4/6)抑制剂、DNA甲基转移酶抑制剂、组蛋白脱乙酰酶(HDAC)抑制剂、组蛋白脱甲基酶抑制剂、mTOR抑制剂、突变异柠檬酸脱氢酶(IDH1和IDH2)抑制剂、糖皮质激素、表观遗传调节剂和化学治疗剂。
AML和ALL的护理标准目前是使用化学治疗剂的化学疗法。示例性化学治疗剂包括但不限于道诺霉素、阿糖胞苷、甲氨蝶呤、米托蒽醌、甲氨蝶呤、马福酰胺和长春新碱。
靶向治疗剂，例如下面讨论的那些，可以单独使用或与化学治疗剂组合使用。
示例性Bcl-2抑制剂包括但不限于，例如奥利默森(oblimersen)、那维妥拉(navitoclax)和维奈妥拉(venetoclax)。
示例性细胞周期蛋白依赖性激酶4和6(CDK 4/6)抑制剂包括但不限于帕博西尼(palbociclib)、瑞博西利(ribociclib)和阿贝西利(abemaciclib)。
表观遗传调节剂包括但不限于menin-组蛋白甲基转移酶MLL(即，menin-MLL)抑制剂、FLT3抑制剂、P-TEFb抑制剂、组蛋白甲基转移酶抑制剂(例如，DOT1L和EZH2抑制剂)、溴结构域和超末端结构域(BET)抑制剂以及二氢乳清酸脱氢酶(DHODH)抑制剂。
示例性FLT3抑制剂包括但不限于索拉非尼、来他替尼(lestaurtinib)、舒尼替尼、坦度替尼、奎扎替尼、米多斯替尼(midostaurin)、吉替替尼、克瑞兰尼(crenolanib)、卡博替尼(cabozantinib)和普纳替尼(ponatinib)。
还考虑了表观遗传调节剂的组合，例如menin-MLL抑制剂和FLT3抑制剂，因为它们在AML模型中显示出增强的凋亡诱导。
在一个实施例中，另外的治疗剂包含至少一种Bcl-2抑制剂和至少一种FLT3抑制剂的组合。
示例性DNA甲基转移酶抑制剂包括但不限于氮杂胞苷和地西他滨。
示例性HDAC抑制剂包括但不限于帕比司他(panobinostat)和伏立诺他(vorinostat)。
示例性mTOR抑制剂包括但不限于依维莫司。
示例性糖皮质激素包括但不限于地塞米松和泼尼松龙。
示例性突变异柠檬酸脱氢酶抑制剂包括但不限于伊沃西尼(ivosidenib)(IDH1)和恩西地平(enasidenib)(IDH2)。
在一个实施例中，另外的治疗剂包含至少一种异柠檬酸脱氢酶抑制剂和至少一种CDK 4/6抑制剂的组合。
IV.使用方法
本发明还涉及使用至少一种本文所述的化合物或本文所述的药物组合物来抑制细胞中癌基因表达的方法。在一个实施例中，抑制细胞中癌基因表达的方法包括将细胞暴露于至少一种本文所述的化合物。本发明还涉及使用至少一种本文所述的化合物或本文所述的药物组合物来治疗急性白血病的方法。在一个实施例中，治疗急性白血病的方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的至少一种本文所述的化合物。
急性白血病是一种进展快速的白血病，其特征在于由造血细胞恶性转化产生的克隆胚细胞替代正常骨髓。这些急性白血病包括急性淋巴细胞白血病(ALL)和急性髓细胞性白血病(AML)。ALL经常累及CNS，而急性原始单核细胞白血病累及牙龈，并且AML累及任何部位的局部集合(粒细胞肉瘤或绿色瘤)。
在一个实施例中，该急性白血病是ALL。ALL是儿童中最常见的恶性肿瘤，峰值发病率为3至5岁龄。它还发生在青少年中，并且在成人中有第二个较低的峰值。典型的治疗强调早期引入强化多药方案，其可以包括泼尼松、长春新碱、蒽环素或天冬酰胺酶。其他药物和组合是阿糖胞苷和依托泊苷，以及环磷酰胺。复发通常发生在骨髓中，但也可能发生在CNS或睾丸中，单独或与骨髓同时发生。虽然许多儿童可以诱导第二次缓解，但随后的缓解往往是短暂的。
在另一个实施例中，该急性白血病是AML。AML的发病率随着年龄而增加；它是成人中较常见的急性白血病。AML可能与化学疗法或放射相关(继发性AML)。缓解诱导率低于ALL，并且据报道仅有20％至40％的患者出现长期无病存活。治疗ALL最大的不同在于AML响应于较少的药物。基础诱导方案包括阿糖胞苷；以及道诺霉素或伊达比星。一些方案包括6-硫鸟嘌呤、依托泊苷、长春新碱和泼尼松。AML的临床方面由C.A.Schiffer和R.M.Stone在Cancer Medicine[癌症医学]编David W.Kufe等人第6版,B.C.Decker公司,2003中回顾。
这种法国、美国和英国(FAB)分类已被开发用于诊断和分类急性髓系白血病。急性髓系白血病的诊断需要成髓细胞构成骨髓细胞或循环白细胞的30％(或基于最近的世界卫生组织(WHO)分类系统为20％)或更多。该疾病的血液学特性定义了下述各种亚型。FAB命名法(M1到M7)根据原始细胞最相似的正常骨髓元素对急性髓系白血病的亚型进行分类。以下列表包括FAB分类以及由WHO认可的另外的类别两者。
急性髓系白血病极小分化型(MO)
急性髓系白血病未成熟型(M1)
急性髓系白血病成熟型(Acute myeloid leukemia with maturation)(M2)
急性髓系白血病成熟型伴t(8；21)
急性早幼粒细胞白血病(M3)
超颗粒型
微粒型
急性粒单核细胞白血病(M4)
急性粒单核细胞白血病伴骨髓嗜酸性粒细胞增多(M4E0)
急性单核细胞白血病(M5)
急性原始单核细胞白血病(M5a)
急性单核细胞白血病成熟型(M5b)
红白血病红系/髓系(M6a)
纯红系恶性肿瘤(M6b)
急性巨核细胞白血病(M7)
与t(1；22)相关的急性巨核细胞白血病
急性嗜碱性粒细胞白血病
急性骨髓纤维化(急性脊髓发育不良伴骨髓纤维化)
唐氏综合征中的急性白血病和暂时性骨髓增生性病症低细胞急性髓系白血病
髓系肉瘤
在一个实施例中，治疗以上列出的AML亚型的方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的至少一种本文所述的化合物。
本发明方法中使用的至少一种化合物可以以上述药物组合物的形式提供。
施用途径包括肠内，如口服；和肠胃外，如静脉内、动脉内、肌内、鼻内、直肠、腹膜内、皮下和局部途径。
对于肠胃外施用，可以将这些活性化合物与合适的载剂或稀释剂(如水、油(特别是植物油)、乙醇、盐溶液、水性右旋糖(葡萄糖)和相关的糖溶液、甘油或二醇，如丙二醇或聚乙二醇)混合。用于肠胃外施用的溶液优选地含有活性剂的水溶性盐。还可以添加稳定剂、抗氧化剂和防腐剂。合适的抗氧化剂包括亚硫酸盐、抗坏血酸、柠檬酸及其盐和EDTA钠。合适的防腐剂包括苯扎氯铵、对羟基苯甲酸甲酯或丙酯和氯丁醇。用于肠胃外施用的组合物可以采取水性或非水性溶液、分散体、悬浮液或乳液的形式。
对于口服施用，可以将这些活性化合物与一种或多种固体的无活性成分组合用于片剂、胶囊、丸剂、粉末、颗粒或其他合适的口服剂型的制备。例如，可以将这些活性化合物与至少一种赋形剂(如填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、溶液阻滞剂、吸收促进剂、润湿剂、吸收剂或润滑剂)组合。
当然，在本发明的组合物和方法中用于获得治疗益处的该一种或多种活性化合物的具体剂量将由个体患者的具体情况决定。此类情况包括患者的体型、体重、年龄和性别，疾病的性质和阶段，疾病的侵袭性，以及施用途径。
对于本文所述的化合物，优先的日剂量例如在约1至约10,000mg、更优选约5至约5,000mg、仍更优选约10至约3,000、最优选约50至约1,000的范围内。在某些实施例中，优先的日剂量在约50mg至约4,000mg、约100mg至约3,000mg、约500至约2,000或约750mg至约1,500mg的范围内。在其他实施例中，优先的日剂量在2,000mg至约10,000mg、约3,000至约9,000mg、约4,000mg至约8,000mg、或约4,500至约7,500mg的范围内。
根据提供治疗益处的需要，可以一天施用一至四次剂量，例如一天一次。在某些实施例中，本发明的治疗化合物通过静脉施用，或者作为一次性剂量，或者作为可能持续几天、几周或几个月的预定给药方案的一部分。根据需要，本发明的化合物还可以通过定期注射施用，以获得治疗益处。
本文所述的方法可以进一步包括施用另外的治疗剂，例如，Bcl-2抑制剂、细胞周期蛋白依赖性激酶4和6(CDK 4/6)抑制剂、DNA甲基转移酶抑制剂、组蛋白脱乙酰酶(HDAC)抑制剂、组蛋白脱甲基酶抑制剂、mTOR抑制剂、突变异柠檬酸脱氢酶(IDH1和IDH2)抑制剂、糖皮质激素、表观遗传调节剂和化学治疗剂。另外的治疗剂可以与本文所述的化合物同时或依次施用。在一些实施例中，施用本文所述的化合物和另外的治疗剂可以产生协同效应。
实例
使用本文披露的方法制备、分离和表征了以下化合物。它们展示了本发明的部分范围，并且不意味着限制本发明的范围。
本发明的化合物通过合成有机化学领域中熟知的方法制备。在合成序列过程中，有时有必要或希望保护任何有关分子上的敏感或反应基团。这是通过常规保护基团实现的，如在T.W.Greene和P.G.M.Wuts Greene’s Protective Groups in Organic Synthesis[有机合成中的格林保护基团],第四版,John Wiley and Sons[约翰威利父子出版公司],2006中描述的那些。使用本领域熟知的方法在方便的随后阶段除去这些保护基团。
除非另有说明，否则所有反应都在干燥的氮气气氛下进行。所示的反应温度是指反应浴，而室温(rt)被认为是25℃。使用如从供应商处收到的商业级试剂和无水溶剂，且没有尝试进行进一步纯化或干燥这些组分。使用Teflon连接的KNf真空泵，用Buchi旋转蒸发器在大约28mm Hg压力下完成在减压下除去溶剂。使用Teledyne Isco CombiFlashCompanion装置和RediSep Rf硅胶柱进行快速柱色谱法。在300MHz和400MHz Bruker核磁共振谱仪上获得质子NMR谱。化学位移(δ)以百万分之一(ppm)报告，并且耦合常数(J)值以Hz给出，其中光谱模式名称如下：s，单峰；d，二重峰；t，三重峰；q，四重峰；dd，双二重峰；m，多重峰；brs，宽单峰。将四甲基硅烷用作内部参考。在Agilent 1200系统上使用正负模式电子喷雾电离(ESI)进行质谱分析。使用Varian Pro Star HPLC系统进行高压液相色谱(HPLC)纯度分析，该系统具有二元溶剂系统A和B，使用梯度洗脱[A，含有0.0284％ NH4OAc和0.0116％乙酸的H2O；B，CH3CN]和流速＝1mL/min，具有用于UV检测的PDA扫描。将以下VarianPro Star HPLC方法用于确定化合物纯度：
中间体1：(R)-2-(1-甲基吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-胺
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的500mL圆底烧瓶中放置2-氨基-4-硝基苯胺(20.00g，133.06mmol，1.00当量)、(2R)-1-甲基吡咯烷-2-甲酸(18.55g，143.64mmol，1.10当量)、HATU(59.56g，156.72mmol，1.20当量)、DIEA(67.48g，552.4mmol，4.00当量)、DCM(200.00mL)。将所得溶液在25℃下搅拌2小时。将所得混合物浓缩。这产生46g(粗品)为棕色固体的(2R)-N-(2-氨基-5-硝基苯基)-1-甲基吡咯烷-2-甲酰胺。
LC-MS:(ES,m/z):[M+1]+＝351。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的1000-mL 3颈圆底烧瓶中放置(2R)-2-[(2-氨基-5-硝基苯基)氨基甲酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(46.00g，131.29mmol，1.00当量)、AcOH(460mL)。将所得溶液在60℃下搅拌48小时。将所得混合物浓缩并通过添加500mL的水淬灭。将所得溶液用3×100mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并。将所得混合物用3×100的盐水洗涤。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:2)的硅胶柱上。这产生32g(73.3％)为棕色固体的(2R)-2-(5-硝基-1H-1,3-苯并二唑-2-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯。
LC-MS:(ES,m/z):[M+1]+＝333。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的500-mL 3颈圆底烧瓶中放置(2R)-2-(5-硝基-1H-1,3-苯并二唑-2-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(32.00g，96.281mmol，1.00当量)。在25℃下，向上述烧瓶中引入于EA(320mL，5605.6mmol，58.22当量)中的HCl(g)。将所得溶液在25℃下搅拌2小时。将固体通过过滤收集。这产生26g(粗品)为黄色固体的5-硝基-2-[(2R)-吡咯烷-2-基]-1H-1,3-苯并二唑盐酸盐。
LC-MS:(ES,m/z):[M+1]+＝233。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的250-mL 3颈圆底烧瓶中放置5-硝基-2-[(2R)-吡咯烷-2-基]-1H-1,3-苯并二唑二盐酸盐(9.00g，29.493mmol，1.00当量)、甲醛(8.86g，294.93mmol，10.00当量)、DCM(90.00mL)、MeOH(45.00mL)、NaBH(OAc)3(62.51g，294.93mmol，10.00当量)。将所得溶液在25℃下搅拌2小时。然后将反应通过添加400mL的水/冰淬灭。将所得溶液用3×200mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并并浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:1)的硅胶柱上。这产生6.3g(86.74％)为棕色固体的2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-5-硝基-1H-1,3-苯并二唑。
LC-MS:(ES,m/z):[M+1]+＝247。
向1000-mL圆底烧瓶中放置2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-5-硝基-1H-1,3-苯并二唑(5.00g，20.30mmol，1.00当量)、Pd/C(432.00mg，4.050mmol，0.20当量)、甲醇(500.00mL)。在25℃下，向上述烧瓶中引入H2(g)。将所得溶液在25℃下搅拌过1夜。将固体滤出。将所得混合物浓缩。这产生4.55g(91.1％)为浅棕色油的2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1H-1,3-苯并二唑-5-胺。
LC-MS:[M+1]+＝217。
1H-NMR(300MHz,甲醇-d4,ppm)δ7.28(dd,J＝8.4,0.6Hz,1H),6.87(dd,J＝2.1,0.6Hz,1H),6.71(dd,J＝8.4,2.1Hz,1H),3.54-3.41(m,1H),3.20(td,J＝8.7,7.5,2.4Hz,1H),2.49-2.36(m,1H),2.35-2.22(m,4H),2.07-1.85(m,3H)。
中间体2：(R)-2-(1-甲基吡咯烷-2-基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的20-L 4颈圆底烧瓶中放置2-氯-5-碘吡啶-4-胺(490.0g，1.90mol，1.00当量)、TEA(974g，9.60mol，5.00当量)、DCM(12.30L)。这之后在0℃-5℃下，伴随搅拌逐滴添加MsCl(882g，7.70mol，4.00当量)于DCM(7.4L)中的溶液。将所得溶液在0℃-10℃下搅拌6小时。将溶液的pH值用NaHCO3(1mol/L)调节至7-8。将所得溶液用3×5L的二氯甲烷萃取，并且将有机层合并并且经无水硫酸钠干燥并浓缩。这产生935g(94.6％)为黄色油的N-(2-氯-5-碘吡啶-4-基)-N-甲磺酰基甲磺酰胺。
LC-MS:(ES,m/z):[M+1]+＝411。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的10-L 4颈圆底烧瓶中放置N-(2-氯-5-碘吡啶-4-基)-N-甲磺酰基甲磺酰胺(935.0g，2.28mol，1.00当量)、THF(4.70L)、H2O(4.70L)、NaOH(455g，11.4mol，5.00当量)。将所得溶液在室温下搅拌16小时。将所得混合物浓缩。将溶液的pH值用柠檬酸(1mol/L)调节至3-4。将固体通过过滤收集。这产生438g(57.9％)为白色固体的N-(2-氯-5-碘吡啶-4-基)甲磺酰胺。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝333。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的10-L 4颈圆底烧瓶中放置(2R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(530.00g，2.6mol，1.00当量)、DCM(5.30L)、DMP(1340g，3.16mol，1.20当量)。将所得溶液在室温下搅拌6小时。将所得溶液用5.3L的H2O稀释。将所得溶液用3×10L的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并。将所得混合物用3×5L的NaS2O3(水性)和3×5L的NaHCO3(水性)洗涤。将所得混合物用3×10L的盐水洗涤。将混合物经无水硫酸钠干燥并浓缩。这产生415g(79.09％)为黄色油的(2R)-2-甲酰基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯。
LC-MS:(ES,m/z):[M+1]+＝200。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的10-L 4颈圆底烧瓶中放置K2CO3(348g，2.5mol，1.20当量)、甲醇(4.15L)、(2R)-2-甲酰基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(415.00g，2.09mol，1.00当量)、(1-重氮-2-氧代丙基)膦酸二甲酯(600g，3.1mol，1.50当量)。将所得溶液在室温下搅拌16小时。将所得溶液用4L的H2O稀释。将所得溶液用3×4L的石油醚萃取，并且将有机层合并并且经无水硫酸钠干燥并浓缩。这产生297g(73.03％)为黄色油的(2R)-2-乙炔基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯。
LC-MS:(ES,m/z):[M+1]+＝196。
/>
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的10-L 4颈圆底烧瓶中放置N-(2-氯-5-碘吡啶-4-基)甲磺酰胺(438.00g，1.32mol，1.00当量)、TEA(533g，5.27mol，4.00当量)、二甲基甲酰胺(4.40L)、(2R)-2-乙炔基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(283g，1.45mol，1.10当量)、Pd(PPh3)2Cl2(46g，0.066mol，0.05当量)、CuI(25g，0.13mol，0.10当量)。将所得溶液在55℃下搅拌6小时。将所得溶液用4.4L的H2O稀释。将所得溶液用3×4.4L的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并。将所得混合物用3×4.4L的盐水洗涤。将混合物经无水硫酸钠干燥并浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:5)的硅胶柱上。这产生363g(68.9％)为白色固体的(2R)-2-[6-氯-1-甲磺酰基吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯。
LC-MS:(ES,m/z):[M+1]+＝400。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的10-L 4颈圆底烧瓶中放置(2R)-2-[6-氯-1-甲磺酰基吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(363.00g，0.91mol，1.00当量)、MeOH(2.50L)、H2O(1.10L)、NaOH(109g，2.72mol，3.00当量)。将所得溶液在室温下搅拌16小时。将所得混合物浓缩。将固体通过过滤收集。这产生259g(88.67％)为白色固体的(2R)-2-[6-氯-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯。
LC-MS:(ES,m/z):[M+1]+＝322。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的5-L 4颈圆底烧瓶中放置(2R)-2-[6-氯-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(259.0g，0.80mol，1.00当量)、Cs2CO3(787g，2.4mol，3.00当量)、DMF(2.60L)。这之后在0℃-5℃下，伴随搅拌逐滴添加SEMCl(161g，0.97mol，1.20当量)。将所得溶液在室温下搅拌6小时。将所得溶液用2.6L的H2O稀释。将所得溶液用3×2.6L的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并。将所得混合物用3×2L的盐水洗涤。将混合物经无水硫酸钠干燥并浓缩。将固体通过过滤收集。这产生248g(68.2％)为白色固体的(2R)-2-(6-氯-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯。
LC-MS:(ES,m/z):[M+1]+＝452。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的10-L 4颈圆底烧瓶中放置(2R)-2-(6-氯-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(248.00g，0.55mol，1.00当量)、MeOH(2.40L)、于MeOH(1.20L)中的HCl(1.5M)。将所得溶液在室温下搅拌12小时。将所得混合物浓缩。将所得溶液用2.5L的H2O稀释。将溶液的pH值用NaHCO3(1mol/L)调节至7-8。将所得溶液用3×2.5L的二氯甲烷萃取，并且将有机层合并并浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:2)的硅胶柱上。这产生177g(91.7％)为白色固体的(2R)-2-(6-氯-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)吡咯烷。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝352。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的10-L 4颈圆底烧瓶中放置(2R)-2-(6-氯-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)吡咯烷(177.00g，0.5mol，1.00当量)、DCM(3.50L)、MeOH(1.77L)、多聚甲醛(453g，5mol，10.00当量)、NaBH(OAc)3(640g，3mol，6.00当量)。将所得溶液在室温下搅拌12小时。将溶液的pH值用NaHCO3(1mol/L)调节至8-9。将固体滤出。将所得溶液用3×1.7L的二氯甲烷萃取，并且将有机层合并并浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:3)的硅胶柱上。这产生129g(70.1％)为黄色油的(2R)-2-(6-氯-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)-1-甲基吡咯烷。
LC-MS:(ES,m/z):[M+1]+＝366。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的5-L 4颈圆底烧瓶中放置(2R)-2-(6-氯-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)-1-甲基吡咯烷(129.00g，0.35mol，1.00当量)、甲苯(2.60L)、BINAP(22g，0.035mol，0.10当量)、t-BuONa(101g，1.06mol，3.00当量)、Pd2(dba)3(16g，0.017mol，0.05当量)、二苯基甲亚胺(192g，1.06mol，3.00当量)。将所得溶液在110℃下搅拌16小时。将所得溶液用2.6L的EA稀释。将所得混合物用3×1L的盐水洗涤。将混合物经无水硫酸钠干燥并浓缩。将残余物施加到使用THF/PE(1:3)的硅胶柱上。这产生131g(72.8％)为黄色油的N-[2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基]-1,1-二苯基甲亚胺。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的10-L 4颈圆底烧瓶中放置N-[2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基]-1,1-二苯基甲亚胺(131.00g，0.26mol，1.00当量)、THF(6.50L)、H2O(1.10L)、HCl(0.5M)(88g，1.28mol，5.00当量)。将所得溶液在室温下搅拌12小时。将所得溶液用2.6L的H2O稀释。将所得溶液用3×1L的二氯甲烷萃取，并且将水层合并。将溶液的pH值用NaHCO3(1mol/L)调节至8-9。将所得溶液用3×2L的二氯甲烷萃取，并且将有机层合并并且经无水硫酸钠干燥并浓缩。将残余物施加到使用THF/PE(1:1)的硅胶柱上。这产生53.1g(59.74％)为棕色油的2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺。
LC-MS:(ES,m/z):[M+1]+＝347。
1H-NMR:(300MHz,CD3OD,ppm):δ8.18(d,J＝1.0Hz,1H),6.68(d,J＝1.0Hz,1H),6.46(s,1H),5.61-5.48(m,2H),3.61-3.49(m,3H),3.23(t,J＝7.9Hz,1H),2.46-2.35(m,2H),2.33(s,3H),2.02-1.84(m,3H),0.90(dd,J＝8.8,7.4Hz,2H)。
中间体3：2-(1-甲基吡咯烷-2-基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
向250-mL圆底烧瓶中放置2-氯-5-硝基吡啶-4-胺(5.00g，28.8mmol，1.00当量)、甲醇(100.00mL)、雷尼镍(Raney Ni)(1.69g，28.808mmol，1.00当量)。在25℃下，向上述烧瓶中引入H2(g)(5atm)。将所得溶液在25℃下搅拌过1夜。将固体滤出。将所得混合物浓缩。这产生4g(96.7％)为棕色固体的6-氯吡啶-3,4-二胺。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝144。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的40-mL圆底烧瓶中放置6-氯吡啶-3,4-二胺(1.00g，6.97mmol，1.00当量)、1-甲基吡咯烷-2-甲酸(0.99g，7.67mmol，1.10当量)、DMF(10.00mL)、HATU(3.18g，8.36mmol，1.20当量)、DIEA(3.60g，27.86mmol，4.00当量)。将所得溶液在25℃下搅拌过1夜。然后将反应通过添加40mL的水/冰淬灭。将所得溶液用4×20mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并。将所得混合物用3×20mL的盐水洗涤。将所得混合物浓缩。这产生4g(粗品)为棕色固体的N-(5-氨基-2-氯吡啶-4-基)-1-甲基吡咯烷-2-甲酰胺。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝255。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的250-mL圆底烧瓶中放置(2R)-N-(5-氨基-2-氯吡啶-4-基)-1-甲基吡咯烷-2-甲酰胺(4.00g，1当量)、乙酸(80.00mL)。将所得溶液在120℃下搅拌48小时。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用THF/PE(1:5)的硅胶柱上。这产生1.7g(32％)为棕色固体的2-[6-氯-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基]-1-甲基吡咯烷。
LC-MS:(ES,m/z):[M+1]+＝237。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL 3颈圆底烧瓶中放置2-[6-氯-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基]-1-甲基吡咯烷(1.00g，4.225mmol，1.00当量)、DMF(15.00mL)。添加NaH(0.20g，8.450mmol，2.00当量)，并且将所得溶液在0℃下搅拌30min。添加[2-(氯甲氧基)乙基]三甲基硅烷(0.70g，4.225mmol，1.00当量)，并且伴随搅拌，使所得溶液在0℃下再反应90min。然后将反应通过添加40mL的水/冰淬灭。将所得溶液用3×20mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并。将所得混合物用3×20mL的盐水洗涤。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用PE/THF(1:2)的硅胶柱上。这产生350mg(22.6％)为棕色油的2-(6-氯-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)-1-甲基吡咯烷。
LC-MS:(ES,m/z):[M+1]+＝367。
在室温下，向50mL圆底烧瓶中添加2-(6-氯-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)-1-甲基吡咯烷(350mg，0.954mmol，1.00当量)、二苯基甲亚胺(518.57mg，2.862mmol，3.0当量)、BINAP(118.78mg，0.191mmol，0.2当量)、三((1E,4E)-1,5-二苯基戊-1,4-二烯-3-酮)三氯甲烷二钯(98.72mg，0.095mmol，0.1当量)、t-BuONa(274.98mg，2.862mmol，3.0当量)和甲苯(10mL，93.989mmol，98.55当量)。将所得混合物在氮气气氛下在110摄氏度下搅拌5h。将混合物冷却至室温。将反应在室温下通过添加水/冰(60mL)淬灭。将水层用CH2Cl2(3×30mL)萃取。将所得混合物在减压下浓缩。将残余物溶解在THF(25ml)中，并且向溶液中添加HCl(0.5M)(10mL)。将所得混合物在室温下搅拌10h。将所得混合物在减压下浓缩以除去THF。将水层用EtOAc(3×10mL)萃取。用饱和NaHCO3(水性)将水层碱化至pH 8。将水层用CH2Cl2(3×40mL)萃取。将所得混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(1:9)洗脱)，以得到为棕色固体的2-(1-甲基吡咯烷-2-基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(180mg，53％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+1]+＝348。
中间体4：(R)-2-(1-甲基哌啶-2-基)-1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺
向50-mL 3颈圆底烧瓶中放置(2R)-2-(羟甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(5.00g，23.22mmol，1.00当量)、戴斯-马丁高碘烷(Dess-Martin periodinane)(19.70g，46.45mmol，2.00当量)、DCM(20.00mL)。将所得溶液在室温下搅拌3小时。然后将反应通过添加Na2S2O3(水性)淬灭。将所得溶液用2x50mL的二氯甲烷萃取，并且将有机层合并并浓缩。这产生4.0g(80.8％)为棕色油的(2R)-2-甲酰基哌啶-1-甲酸叔丁酯。
向50-mL 3颈圆底烧瓶中放置(2R)-2-甲酰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.00g，18.755mmol，1.00当量)、K2CO3(3.11g，22.506mmol，1.20当量)、MeOH(12.00mL)。这之后在0℃下，伴随搅拌逐滴添加(1-重氮-2-氧代丙基)膦酸二甲酯(5.40g，0.028mmol，1.50当量)于MeOH(6mL)中的溶液。将所得溶液在室温下搅拌6小时。将所得溶液用2×50mL的石油醚萃取，并且将有机层合并并浓缩。这产生2g(51％)为黄色油的(2R)-2-乙炔基哌啶-1-甲酸叔丁酯。
GC-MS：(ES,m/z):[M-81]＝128。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL 3颈圆底烧瓶中放置N-(2-氯-5-碘吡啶-4-基)甲磺酰胺(700.0mg，2.1mmol，1.00当量)、(2R)-2-乙炔基哌啶-1-甲酸叔丁酯(881.11mg，4.210mmol，2.00当量)、CuI(40.09mg，0.211mmol，0.10当量)、TEA(852.02mg，8.420mmol，4.00当量)、DMF(10.00mL)、Pd(PPh3)2Cl2(295.5mg，0.421mmol，0.20当量)。将所得溶液在55℃下搅拌2小时。将固体滤出。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:10)的硅胶柱上。这产生540mg(62％)为棕色固体的(2R)-2-[6-氯-1-甲磺酰基吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]＝414
向50-mL圆底烧瓶中放置(2R)-2-[6-氯-1-甲磺酰基吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(430.00mg)、于乙酸乙酯(10.00mL)中的HCl(气体)。将所得溶液在室温下搅拌6小时。将所得混合物浓缩。这产生380mg为棕色固体的(2R)-2-[6-氯-1-甲磺酰基吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]哌啶盐酸盐。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H-HCl]＝314。
向100-mL 3颈圆底烧瓶中放置(2R)-2-[6-氯-1-甲磺酰基吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]哌啶盐酸盐(380.00mg，1.089mmol，1.00当量)、DCM(20.00mL)、MeOH(10.00mL)、多聚甲醛(488.63mg，5.43mmol，5.00当量)、NaBH(OAc)3(2299.37mg，10.85mmol，10.00当量)。将所得溶液在室温下搅拌12小时。然后将反应通过添加20mL的水淬灭。将所得溶液用2×30mL的二氯甲烷萃取，并且将有机层合并并浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:1)的硅胶柱上。这产生201mg(56.5％)为白色固体的(2R)-2-[6-氯-1-甲磺酰基吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]-1-甲基哌啶。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]＝328。
向50-mL圆底烧瓶中放置(2R)-2-[6-氯-1-甲磺酰基吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]-1-甲基哌啶(185.00mg，0.564mmol，1.00当量)、NaOH(67.71mg，0.000mmol，3.00当量)、H2O(1.00mL)、MeOH(5.00mL)。将所得溶液在室温下搅拌2小时。将所得溶液用2×20mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并并浓缩。这产生120mg(85.2％)为棕色固体的(2R)-2-[6-氯-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]-1-甲基哌啶。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]＝250。
向50-mL 3颈圆底烧瓶中放置(2R)-2-[6-氯-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]-1-甲基哌啶(120.0mg，0.480mmol，1.00当量)、Cs2CO3(469.7mg，1.44mmol，3.00当量)、DMF(5.00mL)、SEM-Cl(120.16mg，0.720mmol，1.50当量)。将所得溶液在室温下搅拌2小时。将固体滤出。将所得溶液用2×20mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并并浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:2)的硅胶柱上。这产生85mg(46.6％)为浅棕色油的(2R)-2-(6-氯-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)-1-甲基哌啶。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]＝380。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的8-mL密封管中放置2-(6-氯-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]-八氢吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)-1-甲基哌啶(80.00mg，0.206mmol，1.00当量)、二苯甲酮亚胺(benzenemethanimine)(112.09mg，0.618mmol，3.00当量)、t-BuONa(59.43mg，0.618mmol，3.00当量)、甲苯(3.00mL)、Pd2(dba)3.CHCl3(23.71mg，0.041mmol，0.20当量)、BINAP(51.35mg，0.082mmol，0.40当量)。将所得溶液在100℃下搅拌5小时。将所得混合物浓缩。这产生100mg(粗品)为棕色油的N-[2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基]-1,1-二苯基甲亚胺。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]＝525。
向50-mL圆底烧瓶中放置N-[2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基]-1,1-二苯基甲亚胺(100.00mg，0.191mmol，1.00当量)、THF(5.00mL)、HCl(5.00mL)。将所得溶液在室温下搅拌16小时。将所得溶液用2×20mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并并浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:1)的硅胶柱上。这产生44mg(对于两个步骤为34％)为棕色固体的2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺。将产物用以下条件通过SFC进一步纯化(柱：Lux 5um Amylose-1，5*25cm，10μm；流动相A：CO2，流动相B：IPA(0.5％2M NH3-MeOH)；流速：160mL/min；梯度：等度40％ B；柱温(℃)：35；背压(巴)：100；波长：220nm；RT1(min)：4.47；RT2(min)：5.89；样品溶剂：ACN；进样量：2mL，并且收集主要的对映异构体，以获得>98％ee的物质。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]＝361
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]＝361
1H-NMR(300MHz,甲醇-d4,ppm):δ8.23-8.17(m,1H),6.68(s,1H),6.47(s,1H),3.56(t,J＝8.2Hz,2H),3.08(d,J＝11.9Hz,1H),2.24(d,J＝14.1Hz,1H),2.15(s,3H),1.97-1.68(m,5H),1.48(d,J＝10.5Hz,1H),1.17(d,J＝6.2Hz,3H),0.91(t,J＝8.1Hz,2H),-0.22(s,9H)。
中间体5：2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-b]吡啶-6-胺
在室温下，向2L 4颈圆底烧瓶中添加2,5-二溴-3-硝基吡啶(60g，212.85mmol，1.00当量)和乙酸(900mL，70.41当量)。在氮气气氛下在室温下，分批向搅拌的溶液中添加铁(71.32g，1277mmol，6.0当量)。将所得混合物在室温下搅拌6小时。将反应在室温下通过添加水/冰(2L)淬灭。将沉淀的固体通过过滤收集并且用水(3×300mL)洗涤。这产生为棕色固体的2,5-二溴吡啶-3-胺(60g，粗品)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝251。
在室温下，向3L 4颈圆底烧瓶中添加2,5-二溴吡啶-3-胺(60g，238.2mmol，1.00当量)、乙腈(ACN,1200mL)和吡啶(56.52g，714.5mmol，3.0当量)。在氮气气氛下在0℃下，向搅拌的溶液中逐滴添加甲磺酰氯(81.8g，714.5mmol，3.0当量)。将所得混合物在室温下搅拌6小时。将反应在室温下通过添加水/冰(2000mL)淬灭。将所得混合物用CH2Cl2(2×1000mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×500mL)洗涤、经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。这产生为棕色固体的N-(2,5-二溴吡啶-3-基)-N-甲磺酰基甲磺酰胺(78.5g，80.76％)，将其直接用于下一步骤。
在室温下，向5L 4颈圆底烧瓶中添加N-(2,5-二溴吡啶-3-基)-N-甲磺酰基甲磺酰胺(78.5g，192.4mmol，1.00当量)、四氢呋喃(2400mL，173当量)、水(471mL，136当量)和NaOH(46.16g，1154.2mmol，6.0当量)。将所得混合物在氮气气氛下在室温下搅拌16小时。将水层用CH2Cl2(3×1500mL)萃取。将所得混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(1:1)洗脱)，以得到为棕色固体的N-(2,5-二溴吡啶-3-基)甲磺酰胺(55.1g，86.8％)。
LC-MS(ES,m/z):[M-1]-＝327。
在室温下，向2L 4颈圆底烧瓶中添加N-(2,5-二溴吡啶-3-基)甲磺酰胺(29g，87.9mmol，1.00当量)、(2R)-2-乙炔基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(22.31g，114.2mmol，1.3当量)、碘化铜(I)(1.67g，8.8mmol，0.1当量)、Pd(PPh3)2Cl2、二异丙胺(71.14g，703mmol，8.0当量)和四氢呋喃(850mL)。将所得混合物在氮气气氛下在50℃下搅拌2小时。将混合物冷却至室温。将反应在室温下通过添加饱和NH4Cl(水性)(1500mL)淬灭。将水层用EtOAc(3×600mL)萃取。将所得混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(1:1)洗脱)，以得到为棕色固体的(2R)-2-{6-溴-1-甲磺酰基吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基}吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(18.5g，47.4％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+-＝444。
在室温下，向500mL 3颈圆底烧瓶中添加(2R)-2-{6-溴-1-甲磺酰基吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基}吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(18.7g，42.1mmol，1.00当量)、H2O(56mL)、MeOH(130mL)和NaOH(5.1g，126.3mmol，3.0当量)。将所得混合物在氮气气氛下在室温下搅拌16小时。将所得混合物用水(250mL)稀释。将水层用CH2Cl2(3×200mL)萃取。将所得混合物在减压下浓缩。这产生为棕色固体的(2R)-2-{6-溴-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基}吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(14.6g，94.7％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝366。
在室温下，向500mL 3颈圆底烧瓶中添加(2R)-2-{6-溴-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基}吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(14.6g，40mmol，1.00当量)、N,N-二甲基甲酰胺(220mL)和Cs2CO3(39.1g，119.6mmol，3.0当量)。在室温下，在20min内向上述混合物中逐滴添加[2-(氯甲氧基)乙基]三甲基硅烷(6.65g，39.86mmol，1.0当量)。将所得混合物在室温下再搅拌5.5小时。将反应在室温下用水/冰(600mL)淬灭。将水层用EtOAc(3×300mL)萃取。将所得混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(3:1)洗脱)，以得到为棕色油的(2R)-2-(6-溴-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(14.6g，73.8％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝496。
在室温下，向500mL 3颈圆底烧瓶中添加(2R)-2-(6-溴-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(14.6g，29.4mmol，1.00当量)和于MeOH(200mL，1.5mol/L)中的HCl。将所得混合物在氮气气氛下在室温下搅拌12小时。将反应在室温下用饱和NaHCO3(水性)(600mL)淬灭。用饱和NaHCO3将混合物/残余物碱化至pH 8。将水层用EtOAc(3×300mL)萃取。将所得混合物在减压下浓缩。这产生为棕色油的(2R)-2-(6-溴-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡咯烷(9.2g，78.9％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+-＝396。
/>
在氮气气氛下在室温下，分批向(2R)-2-(6-溴-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)吡咯烷(2.3g，5.8mmol，1.00当量)和多聚甲醛(2.61g，58.02mmol，10当量)、乙酸(0.35g，5.8mmol，1.0当量)于甲醇(46mL)、DCM(23mL)中的搅拌溶液中添加NaBH(OAc)3(11.07g，52.218mmol，9.0当量)。将所得混合物在氮气气氛下在室温下搅拌12小时。将反应在室温下通过添加水/冰(200mL)淬灭。用NaHCO3将混合物/残余物碱化至pH 8。将所得混合物过滤，将滤饼用CH2Cl2(30mL)洗涤。将所得混合物用CH2Cl2(3×60mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×40mL)洗涤、经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。这产生为棕色油的(2R)-2-(6-溴-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)-1-甲基吡咯烷(1.93g，81％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+-＝410。
在室温下，向100mL 3颈圆底烧瓶中添加(2R)-2-(6-溴-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-b]吡啶-2-基)-1-甲基吡咯烷(1.93g，4.7mmol，1.00当量)、二苯基甲亚胺(2.56g，14.1mmol，3.0当量)、BINAP(0.59g，0.940mmol，0.2当量)、Pd2(dba)3(0.43g，0.47mmol，0.1当量)、叔丁醇钠(1.36g，14.1mmol，3.0当量)和甲苯(50mL)。将所得混合物在氮气气氛下在110℃下搅拌16小时。将混合物冷却至室温。将反应在室温下用水/冰淬灭。将水层用CH2Cl2(3×40mL)萃取。将所得混合物在减压下浓缩。这产生为棕色油的N-{2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-b]吡啶-6-基}-1,1-二苯基甲亚胺(5.5g，粗品)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+-＝511。
在室温下，向1000mL 3颈圆底烧瓶中添加N-{2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-b]吡啶-6-基}-1,1-二苯基甲亚胺(5.5g，10.8mmol，1.00当量)、HCl(55mL)(1mol/L)和四氢呋喃(275mL)。将所得混合物在氮气气氛下在室温下搅拌12小时。将所得混合物在减压下浓缩以除去THF。将水层用EtOAc(3×50mL)萃取。将水层用NaHCO3碱化至pH 8。将水层用CH2Cl2(3×40mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×40mL)洗涤、经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。这产生为棕色油的2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-b]吡啶-6-胺(1.4g，37.5％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝347。
1H-NMR(400MHz,甲醇-d4,ppm)δ7.92(d,J＝2.3Hz,1H),7.27(d,J＝2.3Hz,1H),6.51(s,1H),5.64-5.47(m,3H),3.61-3.50(m,2H),3.28-3.19(m,1H),2.34(m,4H),2.03-1.85(m,5H),0.93-0.85(m,2H),-0.04(s,9H)。
中间体6：(R)-2-(1-甲基吡咯烷-2-基)-1H-吲哚-6-胺
在室温下，向250mL 3颈圆底烧瓶中添加苯胺、2-溴-5-硝基-(10g，46.078mmol，1.00当量)、吡啶(80mL)和DCM(120mL)。在0℃下，向上述混合物中逐滴添加甲磺酰氯(21.1g，184.3mmol，4当量)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。将反应在室温下通过添加NaHCO3(水性，500mL)淬灭。分离所得混合物，并且将水层用DCM(2×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(1×400mL)洗涤、经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。这产生为棕色固体的N-(2-溴-5-硝基苯基)-N-甲磺酰基甲磺酰胺(17g，粗品)。将粗产物不经进一步纯化直接用于下一步骤。
在室温下，向500mL圆底烧瓶中添加N-(2-溴-5-硝基苯基)-N-甲磺酰基甲磺酰胺(17g，45.6mmol，1.00当量)和THF(280mL)。向上述混合物中添加NaOH(11g，275.020mmol，6.04当量)于H2O(140mL)中的溶液。将所得混合物在室温下搅拌过夜。将所得混合物在真空下浓缩。将所得混合物用水(250mL)稀释。将混合物用HCl(水性)酸化至pH 3。将沉淀的固体通过过滤收集并且用水(2×100mL)洗涤。将所得固体在红外光下干燥。这产生为棕色固体的N-(2-溴-5-硝基苯基)甲磺酰胺(11g，81.8％)。
1H-NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm)δ9.85(s,1H),8.21(d,J＝3Hz,1H),8.0(s,2H),3.16(s,3H)。
在室温下，向500mL圆底烧瓶中添加N-(2-溴-5-硝基苯基)甲磺酰胺(10g，34mmol，1.00当量)、(2R)-2-乙炔基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(7.94g，40.66mmol，1.2当量)和TEA(27.43g，271.07mmol，8.00当量)。将所得混合物用N2鼓泡10min，然后添加Pd(PPh3)2Cl2(2.38g，3.389mmol，0.1当量)和CuI(1.29g，6.78mmol，0.2当量)。将所得混合物在氮气气氛下在70℃下搅拌过夜。将反应在0℃下通过添加饱和NH4Cl(水性)(75mL)淬灭。将沉淀的固体通过过滤收集并且用水(2×100mL)洗涤。将残余物溶解在乙酸乙酯(500mL)中。将所得混合物经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(3:1)洗脱)，以得到为黄色固体的(2R)-2-(1-甲磺酰基-6-硝基吲哚-2-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(9g，64.9％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+H-56+41]+＝395。
在室温下，向100mL圆底烧瓶中添加(2R)-2-(1-甲磺酰基-6-硝基吲哚-2-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(620mg，1.514mmol，1.00当量)、DCM(13.00mL，204.466mmol，135.05当量)和HCl(EA中的2M)(7.57mL，15.140mmol，10当量)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。将所得混合物在真空下浓缩。这产生为黄色固体的1-甲磺酰基-6-硝基-2-[(2R)-吡咯烷-2-基]吲哚盐酸盐(480mg，91.7％)。将粗品不经进一步纯化直接用于下一步骤。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝310。
在室温下，向500mL 3颈圆底烧瓶中添加1-甲磺酰基-6-硝基-2-[(2R)-吡咯烷-2-基]吲哚盐酸盐(10g，28.9mmol，1.00当量)、DCM(200mL)、MeOH(100mL)和多聚甲醛(10.42g，115.7mmol，4当量)。在室温下，在1.5小时内分成3部分向上述混合物中添加NaBH(OAc)3(36.77g，173.5mmol，6当量)。将所得混合物在室温下再搅拌过夜。将反应在室温下通过添加NaHCO3(sat.)(400mL)淬灭。将水层用DCM(3×100mL)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(1:9)洗脱)，以得到为黄色固体的1-甲磺酰基-2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-6-硝基吲哚(5.7g，61％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝324。
在室温下，向250mL 3颈圆底烧瓶中添加1-甲磺酰基-2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-6-硝基吲哚(5.7g，17.63mmol，1.00当量)、THF(90mL)和TBAF(23.04g，88.1mmol，5当量)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。将所得混合物在减压下浓缩。将残余物溶解在DCM(20mL)中。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用DCM/MeOH(25:1)洗脱)，以得到为黄色固体的2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-6-硝基-1H-吲哚(3.2g，74％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝246。
在室温下，向8mL小瓶中添加LAH(154.74mg，4.080mmol，10当量)和THF(1mL)。在80℃下，向上述混合物中逐滴添加2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-6-硝基-1H-吲哚(100mg，0.408mmol，1.00当量)于THF(2mL)中的混合物。将所得混合物在氮气气氛下在80℃下再搅拌2小时。将反应在0℃下通过添加Na2SO4·10H2O(2g)淬灭。将所得混合物过滤，将滤饼用THF(3x2mL)洗涤。将滤液在减压下浓缩。这产生为黑色固体的(R)-2-(1-甲基吡咯烷-2-基)-1H-吲哚-6-胺(82mg，57.4％)。立即将粗产物不经进一步纯化直接用于下一步骤。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝216。
酸中间体：
酸1：3-(吡啶-4-基)苯并[d]异噁唑-6-甲酸
向50-mL压力反应器中放置4-碘吡啶(1.20g，5.854mmol，1.00当量)、2-氟-4-(甲氧羰基)苯基硼酸(2.32g，0.012mmol，2.00当量)、双(三苯基膦)氯化钯(0.41g，0.585mmol，0.10当量)、碳酸钾(3.26g，0.023mmol，4.00当量)、四氢呋喃(12.00mL)、CO(5atm)。将所得溶液在80℃下搅拌16h过夜。用冰/盐浴将反应混合物冷却至25℃。将固体滤出。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:1)的硅胶柱上。这产生600mg(39.5％)为棕色固体的3-氟-4-(吡啶-4-羰基)苯甲酸甲酯。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝260。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL圆底烧瓶中放置3-氟-4-(吡啶-4-羰基)苯甲酸甲酯(600.00mg，2.31mmol，1.00当量)、NH2OH:HCl(7.00mg，0.101mmol，0.04当量)、吡啶(7.50mL)。将所得溶液在115℃下搅拌3小时。然后将反应通过添加40mL的冰/水淬灭。将所得溶液用3×20mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并。将所得混合物用3×20mL的盐水洗涤。将所得混合物浓缩。这产生420mg(66.2％)为浅黄色固体的3-氟-4-[(1Z)-(羟基亚氨基)(吡啶-4-基)甲基]苯甲酸甲酯。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝275。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL圆底烧瓶中放置3-氟-4-[(1Z)-(羟基亚氨基)(吡啶-4-基)甲基]苯甲酸甲酯(400.00mg，1.459mmol，1.00当量)、四氢呋喃(8mL)、DBU(1102.03mg，4.376mmol，3.00当量)。将所得溶液在65℃下搅拌8小时。然后将反应通过添加30mL的水/冰淬灭。将所得溶液用3×10mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并。将所得混合物用3×10mL的柠檬酸水溶液(5％)洗涤。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/己烷(1:1)的硅胶柱上。这产生160mg(43.2％)为浅黄色固体的3-(吡啶-4-基)-1,2-苯并噁唑-6-甲酸甲酯。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝255。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的8-mL小瓶中放置3-(吡啶-4-基)-1,2-苯并噁唑-6-甲酸甲酯(160.00mg，0.629mmol，1.00当量)、MeOH(4.00mL)、H2O(1.00mL)、氢氧化钠(50.34mg，1.259mmol，2.00当量)。将所得溶液在25℃下搅拌12小时。将溶液的pH值用HCl(37％)调节至pH＝3。将所得混合物浓缩。这产生220mg(含NaCl)为灰白色固体的3-(吡啶-4-基)-1,2-苯并噁唑-6-甲酸。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝241。
酸2：3-乙酰咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸
向50-mL圆底烧瓶中放置2-(氨甲基)吡啶-4-甲酸甲酯盐酸盐(700.00mg，3.454mmol，1.00当量)、丙酮酸(608.40mg，2.00当量)、吡啶(2.00mL)、EDCI(1324.43mg，6.908mmol，2.00当量)。将所得溶液在室温下搅拌5小时。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:1)的硅胶柱上。这产生400mg(49％)为黄色固体的2-[(2-氧代丙酰胺基)甲基]吡啶-4-甲酸甲酯。
LC-MS-:(ES,m/z):[M+H]＝237
向50-mL圆底烧瓶中放置2-[(2-氧代丙酰胺基)甲基]吡啶-4-甲酸甲酯(340.00mg，1.44mmol)、POCl3(5.00mL)。将所得溶液在室温下搅拌10小时。将所得混合物浓缩。然后将反应物通过添加水/冰淬灭。将所得溶液用2×20mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并并浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:1)的硅胶柱上。这产生50mg(16％)为灰白色固体的3-乙酰咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸甲酯。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]＝219。
向8-mL密封管中放置3-乙酰咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸甲酯(50.00mg，0.229mmol，1.00当量)、NaOH(18.33mg，2.00当量)、H2O(1.00mL)、MeOH(5.00mL)。将所得溶液在室温下搅拌16小时。将所得混合物浓缩。将粗产物用以下条件通过制备型HPLC(制备型HPLC-003)纯化：柱，SunFire制备型C18 OBD柱，19*150mm，5nm，流动相，水(0.05％ HCl)和ACN(在7min内15％相B至45％)；检测器，uv 254nm。这产生30mg(64.12％)为白色固体的3-乙酰咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]＝205
酸3：1-甲基-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酸
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的100-mL 3颈圆底烧瓶中放置6-氯-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶(2.00g，13.023mmol，1.00当量)、碘甲烷(2.77g，0.020mmol，1.5当量)、乙腈(40.00mL)、碳酸钾(3.63g，0.026mmol，2.0当量)。将所得溶液在60℃下搅拌6小时。将固体滤出。然后将反应通过添加100mL的水/冰淬灭。将所得溶液用3×50mL的乙酸乙酯萃取。将所得混合物用3×50mL的盐水洗涤。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/己烷(1:5)的硅胶柱上。这产生1g(45.8％)为灰白色固体的6-氯-1-甲基吡唑并[4,3-c]吡啶。
LC-MS:(ES,m/z):[M+1]+＝168。
向50-mL密封管中放置6-氯-1-甲基吡唑并[4,3-c]吡啶(700.00mg，4.177mmol，1.00当量)、TEA(1267.89mg，12.530mmol，3.00当量)、MeOH(20.00mL)、Pd(dppf)Cl2(305.60mg，0.418mmol，0.1当量)、CO(5atm)。将所得溶液在130℃下搅拌3小时。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/己烷(1:3)的硅胶柱上。这产生750mg(94％)为棕色固体的1-甲基吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酸甲酯。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝192。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL圆底烧瓶中放置1-甲基吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酸甲酯(750.00mg，3.923mmol，1.00当量)、MeOH(8.00mL)、H2O(2.00mL)、氢氧化钠(313.80mg，7.846mmol，2.00当量)。将所得溶液在25℃下搅拌16小时。然后将反应通过添加15mL的水/冰淬灭。将溶液的pH值用HCl(37％)调节至3。将所得溶液用3×10mL的二氯甲烷萃取，并且将有机层合并并浓缩。这产生500mg(72％)为浅黄色固体的1-甲基吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酸。
LC-MS:(ES,m/z):[M+1]+＝178。
酸4：5-氟-3-甲基苯并[d]异噁唑-6-甲酸
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的250-mL 3颈圆底烧瓶中放置4-溴-2,5-二氟苯甲酸(4.50g，19mmol，1.00当量)、N,O-二甲基羟胺盐酸盐(2.22g，22.784mmol，1.20当量)、二甲基甲酰胺(90mL)、HATU(10.83g，28.481mmol，1.50当量)、DIEA(9.82g，75.948mmol，4.00当量)。将所得溶液在25℃下搅拌6小时。然后将反应通过添加300mL的水/冰淬灭。将所得溶液用3×80mL的乙酸乙酯萃取。将所得混合物用3×80mL的盐水洗涤。将所得混合物浓缩。这产生4.47g(84.1％)为棕色固体的4-溴-2,5-二氟-N-甲氧基-N-甲基苯甲酰胺。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝280。
/>
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的250-mL 3颈圆底烧瓶中放置4-溴-2,5-二氟-N-甲氧基-N-甲基苯甲酰胺(4.43g，15.82mmol，1.00当量)、四氢呋喃(86mL)，添加甲基溴化镁(Et2O中的3mol/L)(15.82mL，47.45mmol，3.00当量)，并且将所得溶液在78℃下搅拌30min。在25℃下，伴随搅拌使所得溶液再反应2.5小时。然后将反应通过添加300mL的水/冰淬灭。将所得溶液用3×80mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并。将所得混合物用3×80mL的盐水洗涤。将所得混合物浓缩。这产生2.1g(56.49％)为暗黄色固体的1-(4-溴-2,5-二氟苯基)乙酮。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝235。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的40-mL小瓶中放置1-(4-溴-2,5-二氟苯基)乙酮(500.00mg，2.13mmol，1.00当量)、吡啶(10.00mL)、NH2OH:HCl(1035mg，14.889mmol，7.00当量)。将所得溶液在105℃下搅拌3小时。然后将反应通过添加30mL的HCl(10％)淬灭。将所得溶液用4×8mL浓缩的乙酸乙酯萃取。这产生500mg(94.00％)为浅黄色固体的(E)-N-[1-(4-溴-2,5-二氟苯基)亚乙基]羟胺。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝250。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的40-mL小瓶中放置(E)-N-[1-(4-溴-2,5-二氟苯基)亚乙基]羟胺(460.00mg，1.840mmol，1.00当量)、二甲基甲酰胺(10.00mL)、碳酸铯(2405mg,7.360mmol，4.00当量)。将所得溶液在70℃下搅拌2小时。然后将反应通过添加30mL的水/冰淬灭。将所得溶液用3×10mL的乙酸乙酯萃取。将所得混合物用3×10mL的盐水洗涤。将所得混合物浓缩。这产生350mg(82.70％)为暗棕色固体的6-溴-5-氟-3-甲基-1,2-苯并噁唑。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝230。
向50-mL压力反应器中放置6-溴-5-氟-3-甲基-1,2-苯并噁唑(320.00mg，1.39mmol，1.00当量)、甲醇(10.00mg)、乙酸钠(342.35mg，4.173mmol，3.0当量)、Pd(dppf)Cl2(101.79mg，0.139mmol，0.10当量)、CO(20atm)。将所得溶液在80℃下搅拌4小时。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/己烷(1:1)的硅胶柱上。这产生53mg(18.2％)为浅棕色固体的5-氟-3-甲基-1,2-苯并噁唑-6-甲酸甲酯。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝210。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的8-mL圆底烧瓶中放置5-氟-3-甲基-1,2-苯并噁唑-6-甲酸甲酯(53.00mg，0.253mmol，1.00当量)、MeOH(2.00mg)、H2O(0.50mg)、氢氧化钠(20.27mg，0.507mmol，2.00当量)。将所得溶液在25℃下搅拌12小时。将溶液的pH值用HCl(37％)调节至3。将所得溶液用3×3mL浓缩的二氯甲烷萃取。这产生45mg(91％)为灰白色固体的5-氟-3-甲基-1,2-苯并噁唑-6-甲酸。
LC-MS(ES,m/z):[M-1]-＝194。
酸5：7-氟-2-甲基喹啉-6-甲酸
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的250-mL 3颈圆底烧瓶中放置4-溴-3-氟苯胺(5.50g，28.95mmol，1.00当量)、HCl(37％)(110.00mL)、巴豆醛(5.07g，72.335mmol，2.50当量)。将所得溶液在110℃下搅拌5小时。将溶液的pH值用NaOH(10％)调节至9。将所得溶液用3×150mL的二氯甲烷萃取，并且将有机层合并并浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:1)的硅胶柱上。这产生1.5g(21.6％)为棕色固体的6-溴-7-氟-2-甲基喹啉。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝240。
向50-mL密封管中放置6-溴-7-氟-2-甲基喹啉(600.00mg，2.5mmol，1.00当量)、TEA(758.7mg，7.498mmol，3.00当量)、MeOH(20.00mL)、Pd(dppf)Cl2(182.9mg，0.250mmol，0.1当量)、CO(5atm)。将所得溶液在130℃下搅拌3小时。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/己烷(1:3)的硅胶柱上。这产生480mg(87.6％)为棕色固体的7-氟-2-甲基喹啉-6-甲酸甲酯。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝220。
向50-mL圆底烧瓶中放置7-氟-2-甲基喹啉-6-甲酸甲酯(480.00mg，2.19mmol，1.00当量)、MeOH(4.00mL)、H2O(1.00mL)、氢氧化钠(175.16mg，4.38mmol，2.00当量)。将所得溶液在25℃下搅拌16小时。将溶液的pH值用HCl(10％)调节至3。将所得混合物浓缩。将残余物溶解在20mL的MeOH/DCM＝1:4中。将固体滤出。将滤液浓缩。这产生390mg(86.8％)为灰白色固体的7-氟-2-甲基喹啉-6-甲酸。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝206。
酸6：7-氟-3-甲基苯并[d]异噁唑-6-甲酸
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的25-mL 2颈圆底烧瓶中放置6-溴-7-氟-3-甲基-1,2-苯并噁唑(使用4-溴-2,3-二氟苯甲酸，根据酸4，步骤4制备)(150.00mg，0.652mmol，1.00当量)、四氢呋喃(5mL)。添加异丙基氯化镁氯化锂复合物(THF中的1mol/L)(3.91mL，3.912mmol，6.00当量)，并且将所得溶液在-20℃下搅拌30min。在25℃下，伴随搅拌使所得溶液再反应2.5小时。然后将所得溶液倒入CO2(s)中。然后将反应通过添加20mL的水/冰淬灭。将所得溶液用3×8mL的乙酸乙酯萃取，并且将水层合并。将溶液的pH值用HCl(37％)调节至3。将所得溶液用3×8mL浓缩的二氯甲烷萃取。这产生40mg(31.4％)为浅黄色固体的7-氟-3-甲基-1,2-苯并噁唑-6-甲酸。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝196。
酸7：1-甲基咪唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的8-mL小瓶中放置1-(5-溴吡啶-2-基)乙胺(2.20g，10.942mmol，1.00当量)、氧化锌(0.89g，10.942mmol，1.00当量)、甲酸(6.60mL)。将所得溶液在70℃下搅拌8小时。将所得溶液用10mL的DCM稀释。将固体滤出。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用PE/THF(3:1)的硅胶柱上。这产生1.2g(47.9％)为无色油的N-[1-(5-溴吡啶-2-基)乙基]甲酰胺。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝229。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL圆底烧瓶中放置N-[1-(5-溴吡啶-2-基)乙基]甲酰胺(500.00mg，2.18mmol，1.00当量)、三氯氧磷(10mL)。将所得溶液在115℃下搅拌1小时。将所得混合物浓缩。将所得溶液用3×10mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并。将所得混合物用3×10ml的盐水洗涤。将所得混合物浓缩。这产生400mg(86.8％)为浅棕色固体的6-溴-1-甲基咪唑并[1,5-a]吡啶。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝211。
向50-mL密封管中放置6-溴-1-甲基咪唑并[1,5-a]吡啶(400mg，1.9mmol，1.00当量)、Pd(dppf)Cl2(138.67mg，0.190mmol，0.1当量)、TEA(575.32mg，5.685mmol，3.0当量)、MeOH(20.00mL)、CO(5atm)。将所得溶液在120℃下搅拌16小时。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:3)的硅胶柱上。这产生为棕色固体的1-甲基咪唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸(300mg，90％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝191。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL圆底烧瓶中放置1-甲基咪唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸甲酯(300mg，1.577mmol，1.00当量)、氢氧化钠(126.17mg，3.154mmol，2.0当量)、MeOH(4mL，98.8mmol，62.6当量)、H2O(1mL，55.508mmol，35.19当量)。将所得溶液在室温下搅拌16小时。将溶液的pH值用HCl(37％)调节至3。将所得混合物浓缩。这产生为棕色固体的1-甲基咪唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸(450mg，粗品)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝177。
酸8：3-(三氟甲基)-1H-吲唑-5-甲酸
在氮气气氛下在-78℃下，向LDA(1.86mL，13.72mmol，1.2当量)的搅拌溶液中逐滴添加于四氢呋喃(20mL)中的4-溴氟苯(2g，11.429mmol，1.00当量)。将所得混合物在氮气气氛下在-78℃下搅拌1小时。在氮气气氛下在-78℃下向搅拌的溶液中逐滴添加于THF(20mL)中的三氟乙酸乙酯(1.95g，13.72mmol，1.2当量)。将所得混合物在氮气气氛下在-78℃下搅拌1小时。将反应在-78℃下通过添加饱和NH4Cl(水性)(5mL)淬灭。将所得混合物用水(40mL)稀释。将水层用EtOAc(3×20mL)萃取。将所得混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用正己烷/EA(1:1)洗脱)，以得到为浅棕色固体的1-(5-溴-2-氟苯基)-2,2,2-三氟乙酮(1.5g，48.4％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝271。
在90℃下，向100mL 3颈圆底烧瓶中添加1-(5-溴-2-氟苯基)-2,2,2-三氟乙酮(1.5g，5.54mmol，1.00当量)和1,2-二甲氧基乙烷(30mL，332.9mmol，60.14当量)、NH2NH2.H2O(2.77g，55.4mmol，10当量)。将所得混合物在减压下浓缩。将反应通过添加水(40mL)淬灭。将所得混合物用EtOAc(3×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×10mL)洗涤、经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。这产生为浅棕色固体的5-溴-3-(三氟甲基)-1H-吲唑(0.8g，54.5％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝265。
向50-mL密封管中放置5-溴-3-(三氟甲基)-1H-吲唑(0.8g，3.018mmol，1.00当量)、Pd(dppf)Cl2(0.44g，0.604mmol，0.2当量)、TEA(0.92g，9.054mmol，3.0当量)、MeOH(20.00mL)、CO(20atm)。将所得溶液在130℃下搅拌3小时。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:3)的硅胶柱上。这产生为浅棕色固体的3-(三氟甲基)-1H-吲唑-5-甲酸甲酯(0.5g，67.8％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝245
在室温下，向8mL小瓶中添加3-(三氟甲基)-1H-吲唑-5-甲酸甲酯(200mg，0.819mmol，1.00当量)、DCM(4mL，62.920mmol，76.82当量)和三溴化硼(DCM中的1mol/L)(0.41mL，1.638mmol，2.0当量)。将所得混合物在氮气气氛下在室温下搅拌16小时。将反应在室温下通过添加水(10mL)淬灭。将水层用CH2Cl2(3×10mL)萃取。将所得混合物在减压下浓缩。这产生为浅棕色固体的3-(三氟甲基)-1H-吲唑-5-甲酸(110mg，58％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝231
酸9：3-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸
向50-mL密封管中放置6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶(2g，10.150mmol，1.00当量)、Pd(dppf)Cl2(1.49g，2.030mmol，0.2当量)、MeOH(30mL，740.967mmol，73.00当量)、TEA(3.08g，30.450mmol，3.0当量)、CO(20atm)。将所得溶液在80℃下搅拌16小时。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:3)的硅胶柱上。这产生为浅棕色固体的吡唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸甲酯(1.5g，83.88％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝177
在室温下，向50mL圆底烧瓶中添加吡唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸甲酯(0.6g，3.406mmol，1.00当量)、DMF(12mL)和NIS(0.92g，4.087mmol，1.2当量)。将所得混合物在氮气气氛下在室温下搅拌3小时。将反应在室温下通过添加饱和Na2S2O4(水性)(40mL)淬灭。将水层用EtOAc(3×10mL)萃取。将所得混合物用3×10mL的盐水洗涤。将所得混合物在减压下浓缩。这产生为浅棕色固体的3-碘吡唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸甲酯(0.9g，87.5％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝303。
在室温下，向3颈圆底烧瓶中添加3-碘吡唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸甲酯(0.9g，3.00mmol，1.00当量)、三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三硼烷(0.94g，7.5mmol，2.5当量)、碳酸钾(1.24g，8.937mmol，3.0当量)、Pd(dppf)Cl2(0.22g，0.298mmol，0.1当量)和二甲基甲酰胺(20mL)。将所得混合物在氮气气氛下在80℃下搅拌4小时。将混合物冷却至室温。将反应在室温下通过添加水(60mL)淬灭。将水层用EtOAc(3×10mL)萃取。将所得混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(3:1)洗脱)，以得到为浅棕色固体的3-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸甲酯(0.32g，56.5％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝191。
在室温下，向8mL小瓶中添加3-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸甲酯(320mg，1.682mmol，1.00当量)、水(1mL，55.509mmol，32.99当量)、甲醇(4mL，124.836mmol，74.20当量)和氢氧化钠(134.56mg，3.36mmol，2.0当量)。将所得混合物在室温下搅拌16小时。将反应在室温下通过添加水/冰(10mL)淬灭。将混合物/残余物用浓缩HCl酸化至pH 4。将沉淀的固体通过过滤收集。这产生为浅棕色固体的3-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸(200mg，67.5％)。
LC-MS-(ES,m/z):[M+1]+＝177。
酸10：3-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸
向50mL 3颈圆底烧瓶中添加于THF(5mL)中的2-(氨甲基)吡啶-4-甲酸甲酯盐酸盐(500mg，2.5mmol，1.00当量)。在室温下，向混合物中添加TEA(624.20mg，6.168mmol，2.5当量)。将所得混合物在60℃下搅拌3小时。所希望的产物可以通过LCMS检测。将所得混合物在真空下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(1:1)洗脱)，以得到为棕色油的3-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸甲酯(410mg，68.1％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]＝245。
在室温下，向50mL圆底烧瓶中添加3-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸甲酯(300mg，1.23mmol，1.00当量)和于H2O(1mL)中的LiOH(58.85mg，2.456mmol，2.0当量)以及MeOH(5mL)。将所得混合物在室温下搅拌16小时。通过LCMS监测反应。将所得混合物在真空下浓缩。将混合物用1M HCl(水性)酸化至pH 5。将沉淀的固体通过过滤收集并且在烘箱中干燥。这产生为灰白色固体的3-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸(170mg，60.1％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]＝231。
酸11：3-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-5-甲酸
在室温下，向50mL 3颈圆底烧瓶中添加吡唑并[1,5-a]吡啶-5-甲酸(500mg，3.08mmol，1.00当量)、HCl(浓缩)(10mL)和甲醇(10mL，312.09mmol，101.21当量)。将所得混合物在氮气气氛下在70℃下搅拌12小时。将混合物冷却至室温。用饱和NaHCO3(水性)将混合物/残余物中和至pH 8。将水层用EtOAc(3×20mL)萃取。将所得混合物在减压下浓缩。这产生为浅棕色固体的吡唑并[1,5-a]吡啶-5-甲酸甲酯(430mg，79.2％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝177。
在室温下，向50mL圆底烧瓶中添加吡唑并[1,5-a]吡啶-5-甲酸甲酯(430mg，2.44mmol，1.00当量)、NIS(659mg，2.93mmol，1.2当量)、DMF(10mL，129.2mmol，52.9当量)。将所得混合物在氮气气氛下在室温下搅拌3小时。将反应在室温下通过添加饱和Na2S2O4(水性)(40mL)淬灭。将水层用EtOAc(3×10mL)萃取。将所得混合物用3×10mL的盐水洗涤。将所得混合物在减压下浓缩。这产生为浅棕色固体的3-碘吡唑并[1,5-a]吡啶-5-甲酸甲酯(480mg，65.10％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝303。
在室温下，向mL 3颈圆底烧瓶中添加3-碘吡唑并[1,5-a]吡啶-5-甲酸甲酯(480mg，1.6mmol，1.00当量)、三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三硼烷(598.41mg，4.77mmol，3.0当量)、二甲基甲酰胺(10mL，136.8mmol，86.10当量)、Pd(dppf)Cl2(116.27mg，0.159mmol，0.1当量)、K2CO3(658.84mg，4.77mmol，3.0当量)。将所得混合物在氮气气氛下在80℃下搅拌4小时。将混合物冷却至室温。将反应在室温下通过添加水(60mL)淬灭。将水层用EtOAc(3×10mL)萃取。将所得混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(3:1)洗脱)，以得到为浅棕色固体的3-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-5-甲酸甲酯(220mg，72.8％)。
LC-MS-(ES,m/z):[M+1]+＝191
在室温下，向8mL小瓶中添加3-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-5-甲酸甲酯(220mg，1.157mmol，1.00当量)、氢氧化钠(92.53mg，2.314mmol，2.0当量)、水(1mL)、甲醇(4mL)。将所得混合物在室温下搅拌16小时。将反应在室温下通过添加水/冰(10mL)淬灭。将混合物/残余物用浓缩HCl酸化至pH 4。将沉淀的固体通过过滤收集。这产生为浅棕色固体的3-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-5-甲酸(160mg，78.52％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+1]+＝177。
酸12：1-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸
向100mL 3颈圆底烧瓶中添加于DCM(50mL，786.502mmol，29.26当量)中的5-溴吡啶-2-甲醛(5g，26.881mmol，1.00当量)和叔丁基亚磺酰胺(3.26g，26.881mmol，1当量)。在室温下，向混合物中添加CuSO4(8.58g，53.762mmol，2当量)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。通过LCMS监测反应。将所得混合物过滤，将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(1:1)洗脱)，以得到为棕色固体的N-[(1Z)-(5-溴吡啶-2-基)亚甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(7g，90％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]＝289。
在室温下，向100mL 2颈圆底烧瓶中添加于THF(20mL)中的(Z)-N-((5-溴吡啶-2-基)亚甲基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(2g，6.916mmol，1.00当量)和四丁基铵二氟三苯基硅酸盐97％(8.21g，15.215mmol，2.2当量)。在氮气气氛下在-55℃下，向搅拌的溶液中逐滴添加于THF(20mL)中的三氟甲基三甲基硅烷(2.36g，16.6mmol，2.4当量)。将所得混合物在室温下再搅拌1小时。通过LCMS监测反应。将反应在0℃下通过添加饱和NH4Cl(水性)(50mL)淬灭。将所得混合物用EtOAc(2×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×50mL)洗涤、经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。这产生为棕色原油的N-[1-(5-溴吡啶-2-基)-2,2,2-三氟乙基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(2g)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]＝359。
向50mL圆底烧瓶中添加于1,4-二噁烷(20mL)中的N-[1-(5-溴吡啶-2-基)-2,2,2-三氟乙基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(2g)和HCl(气体)。将所得混合物在室温下搅拌2h。通过LCMS监测反应。将所得混合物在真空下浓缩。这产生为灰白色固体的1-(5-溴吡啶-2-基)-2,2,2-三氟乙胺二盐酸盐(1.85g，对于两个步骤为84％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H-2HCl]＝255。
向50mL 3颈圆底烧瓶中添加于吡啶(10mL)中的1-(5-溴吡啶-2-基)-2,2,2-三氟乙胺二盐酸盐(1g，3.049mmol，1.00当量)和HCOOH(0.28g，6.098mmol，2当量)。然后在室温下添加EDCI(2.34g，12.196mmol，4当量)。将所得混合物在室温下搅拌8小时。通过LCMS监测反应。将反应在室温下通过添加水(20mL)淬灭。将所得混合物用EtOAc(2×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×20mL)洗涤、经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(5:1至1:1)洗脱)，以得到为白色固体的N-[1-(5-溴吡啶-2-基)-2,2,2-三氟乙基]甲酰胺(750mg，86.9％)。
LC-MS-(ES,m/z):[M+H]＝283。
向50mL圆底烧瓶中添加N-[1-(5-溴吡啶-2-基)-2,2,2-三氟乙基]甲酰胺(750mg，2.65mmol，1.00当量)和POCl3(2mL，21.46mmol，8.10当量)。将所得混合物在90℃下搅拌1小时。通过LCMS监测反应。将所得混合物在真空下浓缩。将残余物通过添加水(30mL)淬灭。用饱和Na2CO3(水性)将混合物碱化至pH 8。将水层用EtOAc(2×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×20mL)洗涤、经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(1:1)洗脱)，以得到为棕色固体的6-溴-1-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡啶(653mg，93％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]＝265。
在压力罐中，向6-溴-1-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡啶(400mg，1.51mmol，1.00当量)和Pd(dppf)Cl2CH2Cl2(122.95mg，0.151mmol，0.1当量)于10mL MeOH中的溶液中添加TEA(763.60mg，7.545mmol，5当量)。将混合物用氮气吹扫1.0min，并且然后用一氧化碳在120℃下加压至3MPa持续3小时。将反应混合物冷却至室温，并且过滤以除去不溶性固体。将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(2:1)洗脱)，以得到为棕色固体的1-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸甲酯(358mg，97.2％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]＝245。
在50mL圆底烧瓶中，向1-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸甲酯(353mg，1.45mmol，1.00当量)于10mL MeOH和1mL H2O中的溶液中添加LiOH(69.24mg，2.892mmol，2当量)。将所得混合物在室温下搅拌16小时。通过LCMS监测反应。将所得混合物在真空下浓缩。将残余物用柠檬酸酸化至pH 5。将沉淀的固体通过过滤收集。将所得固体在红外光下干燥。这产生为白色固体的1-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸(280mg，84.2％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]＝231。
酸13：1-甲基-3-(三氟甲基)吲唑-6-甲酸
向6-溴-3-(三氟甲基)-1H-吲唑(1g，3.773mmol，1.00当量)于10mL DMF中的溶液中添加Cs2CO3(2.46g，7.546mmol，2.0当量)和MeI(0.70g，4.905mmol，1.3当量)。将所得混合物在室温下搅拌10小时。将所得混合物过滤。将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(1:1)洗脱)，以得到为棕色固体的6-溴-1-甲基-3-(三氟甲基)吲唑(830mg，78.8％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]＝278
在压力罐中，向6-溴-1-甲基-3-(三氟甲基)吲唑(530mg，1.899mmol，1.00当量)于20mL MeOH中的溶液中添加Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(154.72mg，0.190mmol，0.1当量)和TEA(960.92mg，9.495mmol，5当量)。将混合物用氮气吹扫0.5min，并且然后用一氧化碳在100℃下加压至3MPa持续16小时。将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(1:1)洗脱)，以得到为白色固体的1-甲基-3-(三氟甲基)吲唑-6-甲酸甲酯(437mg，89％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]＝259
在50mL圆底烧瓶中，向1-甲基-3-(三氟甲基)吲唑-6-甲酸甲酯(300mg，1.162mmol，1.00当量)于10mL MeOH中的溶液中添加H2O(1mL)和LiOH(55.65mg，2.324mmol，2当量)。将所得混合物在室温下搅拌16小时。通过LCMS监测反应。将所得混合物在真空下浓缩。将残余物用柠檬酸酸化至pH 5。将所得混合物过滤。将沉淀的固体通过过滤收集。将所得固体在红外光下干燥。这产生为白色固体的1-甲基-3-(三氟甲基)吲唑-6-甲酸(226mg，79.7％)。
LC-MS(ES,m/z):[M-H]＝243。
酸14：1-环丙基咪唑-5-甲酸
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的100-mL 3颈圆底烧瓶中放置1H-吲唑-5-甲酸甲酯(1.00g，5.7mmol，1.00当量)、DCE(50mL)、环丙基硼酸(0.98g，11.352mmol，2.00当量)、乙酸铜(1.03g，5.676mmol，1.00当量)、2,2'-联吡啶(0.89g，5.7mmol，1.00当量)。将所得溶液在油浴中在70℃下搅拌16小时。将所得溶液用50mL的NH4Cl稀释。将所得溶液用2×20mL的二氯甲烷萃取，并且将有机层合并并且经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1/8)的硅胶柱上。这产生600mg(48.88％)为灰白色固体的1-环丙基吲唑-5-甲酸甲酯。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝217。
向40-mL小瓶中放置1-环丙基吲唑-5-甲酸甲酯(600mg，2.775mmol，1.00当量)、CH3OH(12.00mL)、H2O(4.00mL)、氢氧化钠(550mg，13.88mmol，5.00当量)。将所得溶液在油浴中在60℃下搅拌10小时。将所得混合物在真空下浓缩。将所得溶液用30mL的H2O稀释。将溶液的pH值用HCl(2mol/L)调节至3。将固体通过过滤收集。这产生450mg(80.2％)为灰白色固体的1-环丙基吲唑-5-甲酸。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝203。
酸15：3-甲基-1-(吡啶-4-基)吲唑-5-甲酸
向150-mL密封管中放置5-溴-3-甲基-1H-吲唑(2.00g，9.476mmol，1.00当量)、TEA(4.79g，47.379mmol，5当量)、MeOH(40mL)、Pd(dppf)Cl2 CH2Cl2(1.54g，1.895mmol，0.20当量)。将所得溶液用CO(30atm)填充并且在80℃下搅拌16小时。将固体滤出。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:2)的硅胶柱上。这产生1.66g(92％)为黄色固体的3-甲基-1H-吲唑-5-甲酸甲酯。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]＝191。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的252-mL 3颈圆底烧瓶中放置二噁烷(30.00mL)、3-甲基-1H-吲唑-5-甲酸甲酯(550.00mg，2.892mmol，1.00当量)、4-碘吡啶(1185.57mg，5.784mmol，2.00当量)、(1R,2R)-环己烷-1,2-二胺(660.41mg，5.784mmol，2.00当量)、CuI(550.72mg，2.892mmol，1.00当量)、Cs2CO3(2827mg，8.676mmol，3.00当量)。将所得溶液在100℃下搅拌24小时。将固体滤出。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:2)的硅胶柱上。这产生770mg为浅棕色固体的(粗品)3-甲基-1-(吡啶-4-基)吲唑-5-甲酸甲酯。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]＝268。
向50-mL圆底烧瓶中放置3-甲基-1-(吡啶-4-基)吲唑-5-甲酸甲酯(300.00mg，1.122mmol，1.00当量)、NaOH(89.78mg，2.244mmol，2.00当量)、H2O(5.00mL)、MeOH(10.00mL)。将所得溶液在室温下搅拌4小时。将所得混合物浓缩。将溶液的pH值用柠檬酸(水性)调节至6。将固体通过过滤收集。这产生200mg(70.4％)为白色固体的3-甲基-1-(吡啶-4-基)吲唑-5-甲酸。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]＝254。
酸16：3-氯-1H-吲唑-5-甲酸
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的40-mL小瓶中放置1H-吲唑-5-甲酸甲酯(550.00mg，3.122mmol，1.00当量)、CHCl3(11.00mL)、NCS(500.25mg，3.746mmol，1.20当量)、DMSO(48.78mg，0.624mmol，0.20当量)。将所得溶液在室温下搅拌24小时。将所得溶液用30mL的H2O稀释。将所得溶液用3×30mL的二氯甲烷萃取，并且将有机层合并。将所得混合物用2×30mL的盐水洗涤。将混合物经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1/3)的硅胶柱上。这产生250mg(38％)为棕色固体的3-氯-1H-吲唑-5-甲酸甲酯。
LC-MS:(ES,m/z):[M-H]+＝209
向50-mL圆底烧瓶中放置3-氯-1H-吲唑-5-甲酸甲酯(250.00mg，1.187mmol，1.00当量)、CH3OH(10.00mL)、H2O(3.00mL)、氢氧化钠(142.43mg，3.561mmol，3.00当量)。将所得溶液在室温下搅拌16小时。将所得溶液用20mL的H2O稀释。将所得溶液用2×20mL的乙酸乙酯萃取，并且将水层合并。将溶液的pH值用HCl(3mol/L)调节至3。将固体通过过滤收集。这产生180mg(77％)为棕色固体的3-氯-1H-吲唑-5-甲酸。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝197。
酸17：3-氟-1H-吲唑-5-甲酸
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的40-mL小瓶中放置1H-吲唑-5-甲酸甲酯(1.05g，5.960mmol，1.00当量)、ACN(乙腈，20.00mL)、HOAc(2.00mL)、SelectFluor(3.17g，8.948mmol，1.50当量)。将所得溶液在油浴中在80℃下搅拌2小时。将所得混合物在真空下浓缩。将所得溶液用30mL的H2O稀释。将所得溶液用3×20mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并。将所得混合物用2×20mL的盐水洗涤。将混合物经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/己烷(1/3)的硅胶柱上。这产生230mg(20％)为黄色固体的3-氟-1H-吲唑-5-甲酸甲酯。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝195。
向50-mL圆底烧瓶中放置3-氟-1H-吲唑-5-甲酸甲酯(230.00mg，1.185mmol，1.00当量)、CH3OH(12.00mL)、H2O(4.00mL)、氢氧化锂(85.11mg，3.554mmol，3.00当量)。将所得溶液在室温下搅拌16小时。将所得溶液用20mL的H2O稀释。将所得混合物在真空下浓缩。将所得溶液用2×10mL的乙酸乙酯萃取，并且将水层合并。将溶液的pH值用HCl(1mol/L)调节至4。将固体通过过滤收集。这产生150mg(70.30％)为固体的3-氟-1H-吲唑-5-甲酸。
LC-MS:(ES,m/z):[M-H]+＝179。
酸18：3-甲氧基-4-(甲氨基)喹啉-7-甲酸
在室温下，向100mL圆底烧瓶中添加2-氨基-4-溴苯甲醛(2.00g，10mmol，1.00当量)、乙醇(40.00mL)、2-(苄氧基)乙醛(3.45g，0.023mmol，2.3当量)和NaOH(2.40g，59.988mmol，6.00当量)。将所得混合物在氮气气氛下在100℃下搅拌4小时。将混合物冷却至室温。将所得混合物用水(100mL)稀释。将沉淀的固体通过过滤收集并且用水(2×30mL)洗涤。将所得固体在红外光下干燥。这产生为棕色固体的3-(苄氧基)-7-溴喹啉(2.5g，63.7％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝314。
在室温下，向100mL压力反应器中添加3-(苄氧基)-7-溴喹啉(2.72g，8.66mmol，1.00当量)、MeOH(60.00mL)、Pd(dppf)Cl2(0.63g，0.866mmol，0.10当量)和TEA(4.38g，43.287mmol，5.00当量)。将所得混合物在一氧化碳(20atm)气氛下在100℃下搅拌3小时。将混合物冷却至室温并且然后倒入300mL的水中。将所得混合物在室温下搅拌2小时。将沉淀的固体通过过滤收集并且用水(3×50mL)洗涤。将所得固体在红外光下干燥。这产生为棕色固体的3-(苄氧基)喹啉-7-甲酸甲酯(2.3g，90.6％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝294。
在室温下，向1L圆底烧瓶中添加3-(苄氧基)喹啉-7-甲酸甲酯(2.30g，7.841mmol，1.00当量)和MeOH(150.00mL)、THF(250.00mL)、Pd/C(0.46g,10％湿)。将烧瓶抽真空并且用氮气吹扫三次，随后用氢气吹扫。将混合物在氢气(气球)气氛下在室温下搅拌36小时。将所得混合物过滤，并且将滤饼用MeOH(3×50mL)洗涤。将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EtOAc(1:9)洗脱)，以得到为灰色固体的3-羟基喹啉-7-甲酸甲酯(1g，62.8％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝204。
在室温下，向100mL圆底烧瓶中添加3-羟基喹啉-7-甲酸甲酯(800.00mg，3.937mmol，1当量)和NaOH(2N)(16.00mL)。在室温下，向上述混合物中逐滴添加I2(1199.12mg，4.724mmol，1.20当量)和KI(20％水性)(16.00mL，20％)的溶液。将所得混合物在室温下再搅拌过夜。将所得混合物用水(50mL)稀释。将混合物用乙酸酸化至pH 4。将沉淀的固体通过过滤收集并且用水(2×10mL)洗涤。将残余物用以下条件通过反向快速色谱法纯化：柱，C18硅胶；流动相，水中的ACN/0.5％TFA，在20min内10％至30％梯度；检测器，UV254nm。这产生为黄色固体的3-羟基-4-碘喹啉-7-甲酸(400mg，32.3％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝316。
在室温下，向20mL小瓶中添加3-羟基-4-碘喹啉-7-甲酸(400.00mg，1.27mmol，1.00当量)、DMF(16.00mL)、Cs2CO3(1.24g，3.8mmol，3.00当量)和CH3I(450.00mg，3.17mmol，2.50当量)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。将所得混合物过滤；将滤饼用EtOAc(2×10mL)洗涤。将滤液用2×10mL盐水洗涤、经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(1:2)洗脱)，以得到为浅黄色固体的4-碘-3-甲氧基喹啉-7-甲酸甲酯(280mg，64.3％)。
LC-MS-(ES,m/z):[M+1]+＝344。
在室温下，向20mL小瓶中添加4-碘-3-甲氧基喹啉-7-甲酸甲酯(280mg，0.816mmol，1.00当量)、甲胺(2M，于THF中)(0.5mg，0.016mmol，0.02当量)、K3PO4(433.05mg，2.040mmol，2.5当量)、[2-[2-(二苯基膦酰基)苯氧基]苯基]二苯基膦(87.90mg，0.163mmol，0.2当量)、二噁烷(10mL，118.041mmol，144.65当量)和Pd(OAc)2(18.32mg，0.082mmol，0.1当量)。将所得混合物在氮气气氛下在90℃下搅拌过夜。将所得混合物用EtOAc(40mL)稀释。将所得混合物过滤。将滤饼用EtOAc(1×10mL)洗涤。将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/THF(1:4)洗脱)，以得到为棕色固体的3-甲氧基-4-(甲氨基)喹啉-7-甲酸甲酯(180mg，78.8％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝247。
将3-甲氧基-4-(甲氨基)喹啉-7-甲酸甲酯(180mg，0.731mmol，1.00当量)和NaOH(116.94mg，2.924mmol，4当量)于MeOH(2mL，49.398mmol，67.58当量)和H2O(2mL，111.017mmol，151.89当量)中的溶液在氮气气氛下在50℃下搅拌2小时。将混合物用稀盐酸酸化至pH 2-3。将沉淀的固体通过过滤收集并且用H2O(10ml)洗涤。这产生为白色固体的3-甲氧基-4-(甲氨基)喹啉-7-甲酸(100mg，59％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝233。
酸19：1-(吡啶-2-基)吲唑-5-甲酸
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的20-mL 4颈圆底烧瓶中放置1H-吲唑-5-甲酸甲酯(500.00mg，2.84mmol，1.00当量)于二噁烷(10mL)中的溶液、2-碘吡啶(1163.6mg，5.676mmol，2.00当量)、反式-1,2-二氨基环己烷(648.17mg，5.68mmol，2.00当量)、Cs2CO3(2774mg,8.5mmol，3.00当量)、CuI(540.51mg，2.84mmol，1.00当量)。将所得溶液在100℃下搅拌12小时。将所得混合物在真空下浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:5)的硅胶柱上。这产生300mg(41.7％)为黄色固体的1-(吡啶-2-基)吲唑-5-甲酸甲酯。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]+＝254。
向20-mL小瓶中放置1-(吡啶-2-基)吲唑-5-甲酸甲酯(300.00mg，1.185mmol，1.00当量)于MeOH(5mL)中的溶液、氢氧化钠(189.51mg，4.740mmol，4.00当量)于H2O(5mL)中的溶液。将所得溶液在室温下搅拌4小时。将所得混合物浓缩。使用HCl(2mol/L)将pH调节至2。将固体通过过滤收集。这产生150mg(52.9％)为白色固体的1-(吡啶-2-基)吲唑-5-甲酸。
酸20：1-(吡啶-3-基)-1H-吲唑-5-甲酸
使用1H-吲唑-5-甲酸甲酯和3-碘吡啶，如对于1-(吡啶-2-基)吲唑-5-甲酸(酸19)进行制备。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]+＝254。
酸21：1-(嘧啶-4-基)吲唑-5-甲酸
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的100-mL圆底烧瓶中放置1H-吲唑-5-甲酸甲酯(500.00mg，2.838mmol，1.00当量)于DMF(20mL)中的溶液。这之后在0℃下，分几批添加NaH(81.73mg，2.043mmol，0.72当量，60％)。在0℃下，向其中添加嘧啶、4-氯-(487.57mg，4.257mmol，1.50当量)。将所得溶液在室温下搅拌3小时。然后将反应通过添加100mL的水/冰淬灭。将固体通过过滤收集。这产生280mg(39％)为黄色固体的1-(嘧啶-4-基)吲唑-5-甲酸甲酯。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]+＝255
/>
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的12-mL小瓶中放置1-(嘧啶-4-基)吲唑-5-甲酸甲酯(280.00mg，1.101mmol，1.00当量)于MeOH(3mL)中的溶液、氢氧化钠(88.10mg，2.202mmol，2.00当量)于H2O(2mL)中的溶液。将所得溶液在室温下搅拌4小时。将所得混合物在真空下浓缩。使用HCl(水性)(2mol/L)将pH调节至2。将固体通过过滤收集。这产生130mg(49％)为白色固体的1-(嘧啶-4-基)吲唑-5-甲酸。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]+＝241。
酸22：1-(哒嗪-4-基)吲唑-5-甲酸
使用1H-吲唑-5-甲酸甲酯和4-溴哒嗪氢溴酸盐，如对于1-(嘧啶-4-基)吲唑-5-甲酸(酸21)进行制备。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝254。
酸23：3-[(叔丁氧基羰基)(2-甲氧基乙基)氨基]-1-甲基吲唑-6-甲酸
在室温下，向20mL小瓶中添加3-[(叔丁氧基羰基)氨基]-1-甲基吲唑-6-甲酸甲酯(500mg，1.638mmol，1.00当量)、Cs2CO3(1333.87mg，4.095mmol，2.5当量)、DMF(10mL)和2-溴乙基甲基醚(341.41mg，2.457mmol，1.5当量)。将所得混合物在氮气气氛下在90℃下搅拌4小时。将所得混合物过滤，并且将滤饼用EtOAc(3×10mL)洗涤。将滤液用水(20mL)处理。分离所得混合物。然后将水层用EtOAc(2×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(1×10mL)洗涤、经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(3:2)洗脱)，以得到为黄色油的3-[(叔丁氧基羰基)(2-甲氧基乙基)氨基]-1-甲基吲唑-6-甲酸甲酯(480mg，80.7％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝364。
/>
在室温下，向20mL小瓶中添加3-[(叔丁氧基羰基)(2-甲氧基乙基)氨基]-1-甲基吲唑-6-甲酸甲酯(480mg，1.321mmol，1.00当量)、MeOH(6mL，148.193mmol，112.20当量)、LiOH(94.89mg，3.963mmol，3当量)和H2O(2mL，111.017mmol，84.05当量)。将所得混合物在室温下搅拌4小时。将所得混合物在真空下浓缩。将残余物溶解在水(10mL)中。将所得混合物用3×10mL的乙酸乙酯洗涤。将水层用HCl(水性)酸化至pH 6。将混合物冷却至4℃。在该温度下停留后，将粗产物结晶，以得到为黄色固体的3-[(叔丁氧基羰基)(2-甲氧基乙基)氨基]-1-甲基吲唑-6-甲酸(130mg，28％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝350。
酸24：3-(氧杂环丁烷-3-基)咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸钠
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL圆底烧瓶中放置2-(氨甲基)吡啶-4-甲酸甲酯盐酸盐(750.00mg，3.7mmol，1.00当量)、氧杂环丁烷-3-甲酸(453.42mg，4.441mmol，1.20当量)、二甲基甲酰胺(10.00mL)、HATU(1688.74mg，4.441mmol，1.20当量)、DIEA(1913.39mg，14.805mmol，4.00当量)。将所得溶液在室温下搅拌6小时。然后将反应通过添加30mL的水/冰淬灭。将所得溶液用4×10mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并并浓缩。这产生400mg(43.19％)为棕色固体的2-[(氧杂环丁烷-3-基甲酰胺基)甲基]吡啶-4-甲酸甲酯。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝251。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL圆底烧瓶中放置2-[(氧杂环丁烷-3-基甲酰胺基)甲基]吡啶-4-甲酸甲酯(400.00mg，1.6mmol，1.00当量)、DCM(8.00mL)、伯吉斯(Burgess)试剂(1142.70mg，4.795mmol，3.0当量)。将所得溶液在室温下搅拌4小时。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用THF/PE(1:3)的硅胶柱上。这产生140mg(39％)为淡黄色固体的(2Z)-2-(氨亚甲基)-1H-吡啶-4-甲酸甲酯；氧杂环丁烷。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝233。
/>
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的8-mL小瓶中放置3-(氧杂环丁烷-3-基)咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸甲酯(140.00mg，0.603mmol，1.00当量)、氢氧化钠(48.22mg，0.000mmol，2.00当量)、MeOH(0.80mL)、H2O(0.20mL)。将所得溶液在室温下搅拌16小时。将所得混合物浓缩。这产生160mg(粗品)为浅黄色固体的3-(氧杂环丁烷-3-基)咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸钠。
LC-M(ES,m/z):[M+1]+＝219。
酸25：1-甲氧基异喹啉-6-甲酸
在50mL圆底烧瓶中，向6-溴-1-氯异喹啉(700mg，2.887mmol，1.00当量)于10mLMeOH中的溶液中添加MeONa(779.72mg，14.435mmol，5当量)。将所得混合物在80℃下搅拌23小时。通过LCMS监测反应。将反应在室温下通过添加水/冰(100mL)淬灭。将所得混合物用EtOAc(2×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×50mL)洗涤、经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(1:1)洗脱)，以得到为黄色固体的6-溴-1-甲氧基异喹啉(610mg，88.8％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]＝238。
在压力罐中，向6-溴-1-甲氧基异喹啉(610mg，2.562mmol，1.00当量)于10.0MeOH中的溶液中添加TEA(1296.31mg，12.810mmol，5当量)和Pd(dppf)Cl2CH2Cl2(208.72mg，0.256mmol，0.1当量)。将混合物用氮气吹扫0.5min，并且然后用一氧化碳在80℃下加压至3MPa持续16小时。将所得混合物在真空下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(1:1)洗脱)，以得到为棕色固体的1-甲氧基异喹啉-6-甲酸甲酯(510mg，91.6％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]＝218。
在室温下，在50mL圆底烧瓶中，向1-甲氧基异喹啉-6-甲酸甲酯(510mg，2.35mmol，1.00当量)于10mL MeOH和2mL H2O中的溶液中添加NaOH(187.81mg，4.696mmol，2当量)。将所得混合物在室温下搅拌16小时。通过LCMS监测反应。将所得混合物在真空下浓缩。将残余物用柠檬酸酸化至pH 5。将沉淀的固体通过过滤收集。将所得固体在红外光下干燥。这产生为白色固体的1-甲氧基异喹啉-6-甲酸(410mg，86％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]＝204。
酸26：3-甲基-1-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸
向1-(5-溴吡啶-2-基)-2,2,2-三氟乙胺二盐酸盐(850mg，2.592mmol，1.00当量)于乙酸酐(10mL，97.954mmol，37.79当量)中的溶液中添加对甲苯磺酸酯(892.64mg，5.184mmol，2.0当量)。将所得混合物在100℃下搅拌3小时。通过LCMS监测反应。将所得混合物在真空下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(3:1)洗脱)，以得到为棕色固体的6-溴-3-甲基-1-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡啶(390mg，53.9％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]＝279。
在压力罐中，向6-溴-3-甲基-1-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡啶(390mg，1.4mmol，1.00当量)于10mL MeOH和TEA(707mg，6.99mmol，5当量)中的溶液中添加Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(113.85mg，0.140mmol，0.1当量)。将混合物用氮气吹扫0.3min，并且然后用一氧化碳在120℃下加压至3MPa持续3小时。将反应混合物冷却至室温，并且过滤以除去不溶性固体。将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(1:1)洗脱)，以得到为黄色固体的3-甲基-1-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸甲酯(290mg，80.4％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]＝259。
在50mL圆底烧瓶中，向3-甲基-1-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸甲酯(290mg，1.123mmol，1.00当量)于10mL MeOH和1mL H2O中的溶液中添加LiOH(53.79mg，2.246mmol，2当量)。将所得混合物在室温下搅拌16小时。通过LCMS监测反应。将所得混合物在真空下浓缩。将残余物用柠檬酸酸化至pH 5。将沉淀的固体通过过滤收集。将所得固体在红外光下干燥。这产生为白色固体的3-甲基-1-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸(220mg，80％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]＝245。
酸27：3-甲基-1-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸
在N2气氛下在-78℃下，在100-mL 3颈圆底烧瓶中，向1-溴-3-氟-2-甲氧基苯(1g，4.9mmol，1.00当量)于THF(20mL)中的溶液中逐滴添加2,2,6,6-四甲基哌啶(1.10g，7.803mmol，1.6当量)和n-BuLi(2.34mL，5.9mmol，1.2当量)。将反应混合物在-78℃下搅拌15min。然后，在-78℃下逐滴添加N-甲氧基-N-甲基乙酰胺(1.51g，14.63mmol，3.0当量)，并且将混合物再搅拌1小时。将混合物加温至室温并且搅拌10min。通过TLC监测反应。将反应用NH4Cl(50mL)猝灭，并且然后将混合物用EtOAc(2×25mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(50mL)洗涤、经无水Na2SO4干燥，将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(5:1)洗脱)，以得到为棕色油的1-(4-溴-2-氟-3-甲氧基苯基)乙酮(1.1g，73％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]＝247。
在50mL圆底烧瓶中，向1-(4-溴-2-氟-3-甲氧基苯基)乙酮(1.1g，4.45mmol，1.00当量)于10mL DME中的溶液中添加NH2NH2.H2O(1mL，20.575mmol，4.62当量)。将所得混合物在100℃下搅拌12小时。通过LCMS监测反应。将所得混合物在真空下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(1:1)洗脱)，以得到为白色固体的6-溴-7-甲氧基-3-甲基-1H-吲唑(220mg，20.50％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]＝241
在压力罐中，向6-溴-7-甲氧基-3-甲基-1H-吲唑(220mg，0.913mmol，1.00当量)于10mL MeOH和TEA(461.69mg，4.565mmol，5当量)中的溶液中添加Pd(dppf)Cl2CH2Cl2(74.34mg，0.091mmol，0.1当量)。将混合物用氮气吹扫0.3min，并且然后用一氧化碳在120℃下加压至3MPa持续4小时。将反应混合物冷却至室温，并且过滤以除去不溶性固体。将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(3:1)洗脱)，以得到为棕色油的7-甲氧基-3-甲基-1H-吲唑-6-甲酸甲酯(160mg，79.6％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]＝221。
在50mL圆底烧瓶中，向7-甲氧基-3-甲基-1H-吲唑-6-甲酸甲酯(160mg，0.727mmol，1.00当量)于10mL MeOH和2mL H2O中的溶液中添加LiOH(34.8mg，1.45mmol，2当量)。将所得混合物在室温下搅拌4小时。通过LCMS监测反应。将所得混合物在真空下浓缩。将残余物用柠檬酸酸化至pH 5。将沉淀的固体通过过滤收集。将所得固体在红外光下干燥。这产生为白色固体的3-甲基-1-(三氟甲基)咪唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸(88mg，58.7％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]＝207。
酸28：3-氟-1-甲基吲唑-6-甲酸
分几批向用氮气惰性气氛吹扫并维持的40-mL小瓶中放置1H-吲唑-6-甲酸甲酯(1.1g，6.244mmol，1.00当量)、ACN(22mL)和SelectFluor(2.21g，6.244mmol，1当量)。将所得溶液在油浴中在50℃下搅拌2小时。将所得混合物在真空下浓缩。将所得溶液用20mL的H2O稀释。将所得溶液用3×20mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并。将所得混合物用2×20mL的盐水洗涤。将混合物经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:1)的硅胶柱上。这产生300mg(24.75％)为白色固体的3-氟-1H-吲唑-6-甲酸甲酯。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝195。
向50-mL圆底烧瓶中放置3-氟-1H-吲唑-6-甲酸甲酯(300mg，1.545mmol，1.00当量)、DMF(9mL)、Cs2CO3(1006.83mg，3.090mmol，2当量)、MeI(328.96mg，2.317mmol，1.5当量)。将所得溶液在室温下搅拌6小时。将所得溶液用30mL的H2O稀释。将所得溶液用2×20mL的乙酸乙酯萃取，并且将水层合并。将所得混合物用盐水(3×30mL)洗涤。将所得混合物在减压下浓缩。这产生为白色固体的3-氟-1-甲基吲唑-6-甲酸甲酯(200mg，62％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝209。
/>
向50-mL圆底烧瓶中放置3-氟-1-甲基吲唑-6-甲酸甲酯(200mg，0.961mmol，1.00当量)、MeOH(9mL)、H2O(3mL)、氢氧化锂(69.02mg，2.883mmol，3当量)。将所得溶液在室温下搅拌16小时。将所得混合物在真空下浓缩。将所得溶液用50mL的H2O稀释。将所得溶液用2×20mL的乙酸乙酯萃取，并且将水层合并。将溶液的pH值用HCl(3mol/L)调节至3。将固体通过过滤收集。这产生为白色固体的3-氟-1-甲基吲唑-6-甲酸(150mg，80.4％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝195
酸29：3-甲基-[1,2,3]三唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸
在室温下，向100mL 3颈圆底烧瓶中添加1-(5-溴吡啶-2-基)乙酮(2g，9.998mmol，1.00当量)、甲醇(40mL，1248.362mmol，124.86当量)和NH2NH2.H2O(1.50g，29.994mmol，3.0当量)。将所得混合物在氮气气氛下在60℃下搅拌6小时。将所得混合物在减压下浓缩。这产生为浅棕色固体的5-溴-2-[(1Z)-乙烷亚肼基]吡啶(2.1g，98.12％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝214。
在室温下，向100mL 3颈圆底烧瓶中添加5-溴-2-[(1Z)-乙烷亚肼基]吡啶(2.1g，9.810mmol，1.00当量)、DCM(40mL，629.202mmol，64.14当量)和二乙酸碘苯(3.79g，11.77mmol，1.20当量)。将所得混合物在氮气气氛下在室温下搅拌2小时。将反应在室温下通过添加饱和亚硫酸氢钠(水性)(40mL)淬灭。将水层用CH2Cl2(3×20mL)萃取。将所得混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(1:1)洗脱)，以得到为浅黄色固体的6-溴-3-甲基-[1,2,3]三唑并[1,5-a]吡啶(1.9g，91.3％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝212。
向50-mL密封管中放置6-溴-3-甲基-[1,2,3]三唑并[1,5-a]吡啶(1.9g，8.960mmol，1.00当量)、乙酸钠(2.21g，26.880mmol，3.0当量)、甲醇(36mL)、Pd(dppf)Cl2(1.31g，1.792mmol，0.2当量)、CO(20atm)。将所得溶液在100℃下搅拌5小时。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:1)的硅胶柱上。这产生为浅棕色固体的3-甲基-[1,2,3]三唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸甲酯(1.6g，93.4％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝191。
/>
在室温下，向100mL圆底烧瓶中添加3-甲基-[1,2,3]三唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸甲酯(1.6g，8.369mmol，1.00当量)、甲醇(32mL)和氢氧化钠(0.67g，16.738mmol，2.00当量)、水(8mL)。将所得混合物在氮气气氛下在室温下搅拌16小时。将混合物/残余物用浓缩HCl酸化至pH 4。将沉淀的固体通过过滤收集。这产生为浅棕色固体的3-甲基-[1,2,3]三唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸(1.3g，88％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝177。
酸30：1-甲基异喹啉-6-甲酸
向50-mL压力反应器中放置6-溴-1-甲基异喹啉(250mg，1.13mmol，1.00当量)、CH3OH(10mL)、Pd(dppf)Cl2(82.37mg，0.113mmol，0.1当量)、TEA(455.64mg，4.504mmol，4当量)、CO(10atm)。将所得溶液在油浴中在120℃下搅拌16小时。将该反应混合物冷却。将所得混合物在真空下浓缩。将所得溶液用30mL的H2O稀释。将所得溶液用3×20mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并。将所得混合物用2×20mL的盐水洗涤。将混合物经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(3:1)的硅胶柱上。这产生为橙色固体的1-甲基异喹啉-6-甲酸甲酯(120mg，53％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝202。
向50-mL圆底烧瓶中放置1-甲基异喹啉-6-甲酸甲酯(120mg，0.596mmol，1.00当量)、MeOH(3mL)、H2O(1mL)、氢氧化锂(42.85mg，1.788mmol，3当量)。将所得溶液在室温下搅拌6小时。将所得混合物在真空下浓缩。将所得溶液用50mL的H2O稀释。将所得溶液用2×20mL的乙酸乙酯萃取，并且将水层合并。将溶液的pH值用HCl(3mol/L)调节至3。将固体通过过滤收集。这产生为灰白色固体的1-甲基异喹啉-6-甲酸(80mg，71.7％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝188。
酸31：3-异丙基咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸
在100mL 3颈圆底烧瓶中，向1-(4-溴吡啶-2-基)甲胺(1g，5.35mmol，1.00当量)于20mL DCM中的溶液中添加异丁酰氯(0.63g，5.881mmol，1.1当量)和TEA(0.81g，8.019mmol，1.5当量)。将所得混合物在室温下搅拌10小时。将反应通过添加水(100mL)淬灭。将水层用CH2Cl2(2×40mL)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。这产生为棕色固体的N-[(4-溴吡啶-2-基)甲基]-2-甲基丙酰胺(1.2g，87.3％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]＝257。
向50mL 3颈圆底烧瓶中添加N-[(4-溴吡啶-2-基)甲基]-2-甲基丙酰胺(1.2g，4.667mmol，1.00当量)和POCl3(10mL，107.284mmol，23当量)。将所得混合物在100℃下搅拌16小时。通过LCMS监测反应。将所得混合物在真空下浓缩。用饱和Na2CO3(水性)将残余物碱化至pH 8。将所得混合物用EtOAc(2×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×50mL)洗涤、经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(1:1)洗脱)，以得到为棕色油的7-溴-3-异丙基咪唑并[1,5-a]吡啶(902mg，80.8％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]＝239。
在压力罐中，向7-溴-3-异丙基咪唑并[1,5-a]吡啶(400mg，1.673mmol，1.00当量)于20mL MeOH中的溶液中添加Pd(dppf)Cl2CH2Cl2(136.3mg，0.167mmol，0.1当量)和NaOAc(686.1mg，8.365mmol，5当量)。将混合物用氮气吹扫0.2min，并且然后用一氧化碳在100℃下加压至3MPa持续1小时。将反应混合物冷却至室温，并且过滤以除去不溶性固体。将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(1:1)洗脱)，以得到为棕色固体的3-异丙基咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸甲酯(310mg，84.9％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]＝219。
在50mL 3颈圆底烧瓶中，向3-异丙基咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸甲酯(310mg，1.42mmol，1.00当量)于10mL MeOH和1mL H2O的溶液中添加LiOH(68.03mg，2.84mmol，2当量)。将所得混合物在室温下搅拌16小时。通过LCMS监测反应。将所得混合物在真空下浓缩。将残余物用柠檬酸酸化至pH 4。将沉淀的固体通过过滤收集并且在红外光下干燥。这产生为白色粗固体的3-异丙基咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸(300mg)。
LC-MS-(ES,m/z):[M+H]＝204。
酸32：3-环丙基咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸
在室温下，向100mL 3颈圆底烧瓶中添加1-(4-溴吡啶-2-基)甲胺(2g，10.693mmol，1.00当量)、环丙烷羧酸(1.20g，13.901mmol，1.3当量)、二甲基甲酰胺(40mL，547.23mmol，51.18当量)、HATU(4.88g，12.83mmol，1.2当量)和DIEA(5.53g，42.77mmol，4.0当量)。将所得混合物在氮气气氛下在室温下搅拌10小时。将反应在室温下通过添加水/冰(150mL)淬灭。将水层用EtOAc(3×60mL)萃取。将所得混合物用3×40mL的盐水洗涤。将所得混合物在减压下浓缩。这产生为浅棕色固体的N-[(4-溴吡啶-2-基)甲基]环丙烷甲酰胺(2.8g，粗品)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝255。
在室温下，向50mL圆底烧瓶中添加N-[(4-溴吡啶-2-基)甲基]环丙烷甲酰胺(1.5g，5.88mmol，1.00当量)和三氯氧磷(10mL，65.22mmol，11.09当量)。将所得混合物在氮气气氛下在110℃下搅拌16小时。将所得混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(3:1)洗脱)，以得到为浅棕色油的7-溴-3-环丙基咪唑并[1,5-a]吡啶(600mg，43％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝237。
向50-mL密封管中放置7-溴-3-环丙基咪唑并[1,5-a]吡啶(600mg，2.531mmol，1.00当量)、乙酸钠(622.8mg，7.593mmol，3.0当量)、Pd(dppf)Cl2(185.16mg，0.253mmol，0.1当量)、MeOH(20.00mL)、CO(20atm)。将所得溶液在100℃下搅拌3小时。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:3)的硅胶柱上。这产生为浅棕色固体的3-环丙基咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸甲酯(210mg，38％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝217。
在室温下，向8mL小瓶中添加3-环丙基咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸甲酯(210mg，0.971mmol，1.00当量)、甲醇(4mL，124.836mmol，128.55当量)、氢氧化锂(46.5mg,1.94mmol，2.0当量)、水(1mL，55.5mmol，57.16当量)。将所得混合物在室温下搅拌16小时。将反应在室温下通过添加水/冰(10mL)淬灭。将混合物/残余物用浓缩HCl酸化至pH 4。将沉淀的固体通过过滤收集。这产生为浅棕色固体的3-环丙基咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸(305mg，粗品)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝203。
酸33：2-甲基吡咯并[1,2-b]哒嗪-6-甲酸
在室温下，向50mL压力反应器中添加3,6-二甲基哒嗪(2g，18.494mmol，1.00当量)、3-溴-2-氧代丙酸乙酯(7.21g，36.99mmol，2.0当量)和碳酸氢钠(4.66g，55.482mmol，3.0当量)、乙醇(30mL，651.197mmol，35.21当量)。将所得混合物在氮气气氛下在120℃下搅拌20小时。将所得混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(1:1)洗脱)，以得到为浅棕色固体的2-甲基吡咯并[1,2-b]哒嗪-6-甲酸乙酯(600mg，16％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝204
在室温下，向8mL小瓶中添加吡咯并[1,2-b]哒嗪-6-甲酸乙酯(600mg，3.2mmol，1.00当量)、甲醇(4mL)、氢氧化锂(151.10mg，6.310mmol，2.0当量)、水(1mL，55.5mmol，17.60当量)。将所得混合物在室温下搅拌16小时。将反应在室温下通过添加水/冰(10mL)淬灭。将混合物/残余物用浓缩HCl酸化至pH 4。将沉淀的固体通过过滤收集。这产生为浅棕色固体的2-甲基吡咯并[1,2-b]哒嗪-6-甲酸(335mg，60.3％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝177。
酸34：1-(吡啶-4-基)吲唑-5-甲酸
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的250-mL 3颈圆底烧瓶中放置1H-吲唑-5-甲酸甲酯(2.0g，11.35mmol，1.00当量)、二噁烷(40.00mL)、4-碘吡啶(2.33g，11.366mmol，1.00当量)、CuI(2.16g，11.342mmol，1.00当量)、DMEDA(二甲基乙二胺，0.20g，2.269mmol，0.20当量)、Cs2CO3(11.10g，34.068mmol，3.00当量)。将所得溶液在油浴中在100℃下搅拌2天。将所得混合物在真空下浓缩。将所得溶液用40mL的H2O稀释。将所得溶液用3×20mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并。将所得混合物用2×30mL的盐水洗涤。将混合物经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。这产生1.6g(37％)为灰白色固体的1-(吡啶-4-基)吲唑-5-甲酸甲酯。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝254。
向100-mL小瓶中放置1-(吡啶-4-基)吲唑-5-甲酸甲酯(1.60g，6.318mmol，1.00当量)、CH3OH(32.00mL)、H2O(10.00mL)、氢氧化钠(1.26g，31.590mmol，5.00当量)。将所得溶液在室温下搅拌16小时。将所得混合物在真空下浓缩。将所得溶液用30mL的H2O稀释。将所得溶液用2×30mL的乙酸乙酯萃取，并且将水层合并。将溶液的pH值用HCl(3mol/L)调节至3。将固体通过过滤收集。这产生350mg(23％)为灰白色固体的1-(吡啶-4-基)吲唑-5-甲酸。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝240。
酸35：3-环丙基-1-甲基吲唑-6-甲酸
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL圆底烧瓶中放置3-碘-1-甲基吲唑-6-甲酸甲酯(1.00g，3.16mmol，1.00当量)、丙基硼酸(815mg，9.49mmol，3.00当量)、Pd(PPh3)4(365mg，0.316mmol，0.10当量)、甲苯(20.00mL)、H2O(2.00mL)、K3PO4(2.69g，12.656mmol，4.00当量)。将所得溶液在油浴中在110℃下搅拌16小时。将固体滤出。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:3)的硅胶柱上。这产生590mg(81％)为黄色固体的3-环丙基-1-甲基吲唑-6-甲酸甲酯。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]+＝231。
向50-mL圆底烧瓶中放置3-环丙基-1-甲基吲唑-6-甲酸甲酯(590.00mg，2.56mmol，1.00当量)、LiOH(184.08mg，3.00当量)、MeOH(10.00mL)、H2O(2.00mL)。将所得溶液在室温下搅拌6小时。将所得混合物浓缩。将溶液的pH值用柠檬酸(水性)调节至2～3。将固体通过过滤收集。这产生450mg为白色固体的3-环丙基-1-甲基吲唑-6-甲酸。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]+＝217。
酸36：3-环丙基-1,2-苯并噁唑-5-甲酸
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的500-mL圆底烧瓶中放置5-溴-2-氟苯腈(5.5g，27.499mmol，1.00当量)、四氢呋喃(110.00mL)。添加环丙基溴化镁(THF中的1mol/L)(68.75mL，68.748mmol，2.50当量)，并且将所得溶液在-78℃下搅拌2小时。在25℃下，伴随搅拌使所得溶液再反应30min。然后将反应通过添加100mL的HCl(10％)淬灭并且再搅拌6小时。将所得溶液用3×50mL的乙酸乙酯萃取，并且将水层合并。将所得混合物用3×50mL的盐水洗涤。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/己烷(1:10)的硅胶柱上。这产生3.3g(49.37％)为灰白色固体的(5-溴-2-氟苯基)(环丙基)甲酮。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝243。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL圆底烧瓶中放置(5-溴-2-氟苯基)(环丙基)甲酮(1.50g，6.17mmol，1.00当量)、NH2OH.HCl(3002mg，0.042mmol，7.00当量)、吡啶(15.00mL，186.353mmol，30.20当量)。将所得溶液在115℃下搅拌3小时。将溶液的pH值用HCl(1mol/L)调节至3。将所得溶液用3×50mL浓缩的乙酸乙酯萃取。这产生1.25g(78.5％)为灰白色固体的(E)-N-[(5-溴-2-氟苯基)(环丙基)亚甲基]羟胺。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝258。
向50-mL压力罐反应器中放置(E)-N-[(5-溴-2-氟苯基)(环丙基)亚甲基]羟胺(1.25g，4.84mmol，1.00当量)、TEA(1470.mg，14.53mmol，3.00当量)、Pd(dppf)Cl2(354mg，0.484mmol，0.10当量)、MeOH(20.00mL)、CO(20atm)。将所得溶液在80℃下搅拌12小时。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/己烷(1:2)的硅胶柱上。这产生850mg(73.98％)为棕色固体的3-[(1E)-环丙基(羟基亚氨基)甲基]-4-氟苯甲酸甲酯。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝238。
/>
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的20-mL小瓶中放置3-[(1E)-环丙基(羟基亚氨基)甲基]-4-氟苯甲酸甲酯(450.00mg，1.897mmol，1.00当量)、四氢呋喃(8mL)、DBU(1433mg,5.691mmol，3.00当量)。将所得溶液在75℃下搅拌12小时。然后将反应通过添加20mL的柠檬酸水溶液(5％)淬灭。将所得溶液用3×10mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并并浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/己烷(1:2)的硅胶柱上。这产生140mg(34％)为灰白色固体的3-环丙基-1,2-苯并噁唑-5-甲酸甲酯。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝218。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的20-mL小瓶中放置3-环丙基-1,2-苯并噁唑-5-甲酸甲酯(140mg，0.644mmol，1.00当量)、H2O(1.00mL)、甲醇(4.00mL)、氢氧化钠(51.6mg，1.3mmol，2当量)。将所得溶液在25℃下搅拌2小时。将溶液的pH值用HCl(37％)调节至3。将所得混合物浓缩。这产生220mg(粗品)为灰白色固体的3-环丙基-1,2-苯并噁唑-5-甲酸。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝204。
酸37：1-甲基-2-氧代-3H-1,3-苯并二唑-5-甲酸
在室温下，向50mL圆底烧瓶中添加3-氨基-4-(甲氨基)苯甲酸甲酯(600.00mg，3.330mmol，1.00当量)、THF(20.00mL)和CDI(1620mg，10mmol，3当量)。将所得混合物在氮气气氛下在室温下搅拌过夜。将反应在室温下通过添加水(5mL)淬灭。将沉淀的固体通过过滤收集并且用水(3×10mL)洗涤。将所得固体在红外光下干燥。这产生为灰色固体的1-甲基-2-氧代-3H-1,3-苯并二唑-5-甲酸甲酯(400mg，58.3％)。
LC-MS-(ES,m/z):[M+1]+＝207
在室温下，向100mL圆底烧瓶中添加1-甲基-2-氧代-3H-1,3-苯并二唑-5-甲酸甲酯(700.00mg，3.4mmol，1.00当量)、MeOH(20.00mL)、水(5.00mL)和NaOH(543.12mg，13.579mmol，4当量)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。将所得混合物在减压下浓缩。将残余物溶解在水(50mL)中。将水层用EtOAc(3×10mL)萃取。将水相用HCl(水性1M)酸化至pH5。将沉淀的固体通过过滤收集并且用水(2×10mL)洗涤。将所得固体在红外光下干燥。这产生为灰色固体的1-甲基-2-氧代-3H-1,3-苯并二唑-5-甲酸(500mg，76.6％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝193。
酸38：3-甲基-1-(氧杂环己烷-2-基)吲唑-5-甲酸锂
向100-mL 3颈圆底烧瓶中放置5-溴-3-甲基-1H-吲唑(2.00g，9.48mmol，1.00当量)、DHP(1.20g，14.214mmol，1.50当量)、DCM(20.00mL)、TsOH(163.18mg，0.948mmol，0.10当量)。将所得溶液在室温下搅拌5小时。然后将反应通过添加50mL的水淬灭。将所得溶液用2×50mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并并浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:3)的硅胶柱上。这产生1.6g(57.2％)为白色固体的5-溴-3-甲基-1-(氧杂环己烷-2-基)吲唑。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]+＝295。
向100-mL压力反应器中放置5-溴-3-甲基-1-(氧杂环己烷-2-基)吲唑(1.60g，5.420mmol，1.00当量)、TEA(1.65g，16.260mmol，3.00当量)、Pd(dppf)Cl2(793.22mg，1.084mmol，0.20当量)、MeOH(20.00mL)。将烧瓶抽真空并且用氮气吹扫三次，随后用CO(气体)吹扫。将混合物在CO(3MPa)气氛下在60℃下搅拌6小时。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:2)的硅胶柱上。这产生1.25g(84％)为白色固体的3-甲基-1-(氧杂环己烷-2-基)吲唑-5-甲酸甲酯。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]+＝275。
向50-mL圆底烧瓶中放置3-甲基-1-(氧杂环己烷-2-基)吲唑-5-甲酸甲酯(600.0mg，2.19mmol，1.00当量)、H2O(2.0mL)、MeOH(10.0mL)、LiOH(157.1mg，6.56mmol，3.00当量)。将所得溶液在40℃下搅拌12小时。将所得混合物浓缩。这产生510mg(87.58％)为白色固的3-甲基-1-(氧杂环己烷-2-基)吲唑-5-甲酸锂。
LC-MS(ES,m/z):[M+2H-Li]＝275。
酸39：1,3-二甲基吲唑-6-甲酸
在室温下，向100mL 3颈圆底烧瓶中添加6-溴-3-甲基-1H-吲唑(2.90g，13.74mmol，1.00当量)和DMF(60mL)、Cs2CO3(8.95g，27.48mmol，2.0当量)。在室温下，向上述混合物中逐滴添加MeI(2.34g，16.49mmol，1.2当量)。将所得混合物在室温下再搅拌2小时。将所得混合物用EtOAc(200mL)稀释并且将所得混合物用3×100mL盐水洗涤。将所得混合物经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EtOAc(3:1)洗脱)，以得到为白色固体的6-溴-1,3-二甲基吲唑(2.25g，72.75％)和为白色固体的6-溴-2,3-二甲基吲唑(0.8g，26％)。
1H-NMR:(300MHz,甲醇-d4,ppm)δ7.72(m,1H),7.60(dd,J＝8.7,1.7Hz,1H),7.23(dd,J＝8.6,1.7Hz,1H),3.95(d,J＝1.1Hz,3H),2.52(s,3H)。
在-78℃下在Ar下，向用氮气惰性气氛吹扫并维持的250-mL 3颈圆底烧瓶中放置6-溴-1,3-二甲基吲唑，逐滴添加n-BuLi(5.86mL，2M溶液，1.5当量)。将所得溶液在-78C下搅拌30min，随后缓慢添加干冰(20.0g)。将所得溶液在-78℃下搅拌30min。在-78℃下，伴随搅拌使所得溶液再反应2小时。然后将反应通过添加100mL的水/冰淬灭。将所得溶液用2×30mL的乙酸乙酯萃取，并且将水层合并。使用HCl(3mol/L)将pH调节至3。将所得溶液用3×30mL乙酸乙酯萃取，经无水硫酸钠干燥并且在真空下浓缩。这产生1.4g(75.3％)为白色固体的1,3-二甲基吲唑-6-甲酸。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝191。
酸40：1-[(叔丁氧基羰基)氨基]异喹啉-6-甲酸
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL压力罐反应器中放置6-溴异喹啉-1-胺(1.20g，5.38mmol，1.00当量)、CH3OH(24.00mL)、Pd(dppf)Cl2(0.39g，mmol，0.53mmol，0.10当量)、NaOAc(1.77g，21.58mmol，4.01当量)、CO(10atm)。将所得溶液在油浴中在80℃下搅拌16小时。将所得混合物在真空下浓缩。将所得溶液用30mL的H2O稀释。将所得溶液用3×30mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并。将所得混合物用2×30mL的盐水洗涤。将混合物经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:1)的硅胶柱上。这产生0.9g(82.7％)为浅黄色固体的1-氨基异喹啉-6-甲酸甲酯。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝203。
向100-mL 3颈圆底烧瓶中放置1-氨基异喹啉-6-甲酸甲酯(0.90g，4.45mmol，1.00当量)、DCM(18.00mL)、Boc2O(2.43g，11.13mmol，2.50当量)、TEA(1.80g，17.80mmol，4.00当量)、DMAP(0.05g，0.45mmol，0.10当量)。将所得溶液在室温下搅拌10小时。将所得溶液用30mL的H2O稀释。将所得溶液用3×30mL的二氯甲烷萃取，并且将有机层合并并且经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:3)的硅胶柱上。这产生1g(55.8％)为棕色油的1-[双(叔丁氧基羰基)氨基]异喹啉-6-甲酸甲酯。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝403。
向100-mL圆底烧瓶中放置1-[双(叔丁氧基羰基)氨基]异喹啉-6-甲酸甲酯(1.00g，2.49mmol，1.00当量)、CH3OH(20.00mL)、H2O(7.00mL)、NaOH(0.30g，7.501mmol，3.02当量)。将所得溶液在室温下搅拌16小时。将所得溶液用20mL的H2O稀释。将所得混合物在真空下浓缩。将溶液的pH值用HCl(3mol/L)调节至3。将所得混合物在真空下浓缩。这产生1g为浅黄色固体的1-[(叔丁氧基羰基)氨基]异喹啉-6-甲酸。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝289。
酸41：3-甲基咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的100-mL 3颈圆底烧瓶中放置2-(氨甲基)吡啶-4-甲酸甲酯盐酸盐(1.00g，4.9mmol，1.00当量)、乙酸酐(20.00mL)、对甲苯磺酸(0.85g，4.936mmol，1.00当量)。将所得溶液在油浴中在100℃下搅拌3小时。将该反应混合物冷却。将所得溶液用40mL的NH3/H2O(10％)稀释。将固体通过过滤收集。这产生500mg(53.3％)为黄色固体的3-甲基咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸甲酯。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝191。
/>
向50-mL圆底烧瓶中放置3-甲基咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸甲酯(500.00mg，2.629mmol，1.00当量)、CH3OH(10.00mL)、H2O(3.00mL)、氢氧化钠(315.43mg，7.886mmol，3.00当量)。将所得溶液在室温下搅拌16小时。将所得混合物在真空下浓缩。将溶液的pH值用HCl(3M)调节至3。这产生300mg(64.8％)为黄色固体的3-甲基咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝177。
酸42：3-[(叔丁氧基羰基)(甲基)氨基]-1-甲基吲唑-6-甲酸
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL圆底烧瓶中放置3-碘-1-甲基吲唑-6-甲酸甲酯(1.00g，3.164mmol，1.00当量)、氨基甲酸叔丁酯(1112mg，0.000mmol，3.00当量)、Pd2(dba)3(289.69mg，0.316mmol，0.10当量)、Xantphos(366.10mg，0.633mmol，0.20当量)、Cs2CO3(4123mg，12.656mmol，4.00当量)、二噁烷(20.00mL)。将所得溶液在油浴中在100℃下搅拌20小时。将固体滤出。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:2)的硅胶柱上。这产生850mg为棕色固体的3-[(叔丁氧基羰基)氨基]-1-甲基吲唑-6-甲酸甲酯。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]+＝306。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的8-mL圆底烧瓶中放置3-[(叔丁氧基羰基)氨基]-1-甲基吲唑-6-甲酸甲酯(200.00mg，0.66mmol，1.00当量)、CH3I(139.5mg，0.983mmol，1.50当量)、Cs2CO3(534mg，1.64mmol，2.50当量)、DMF(3.00mL)。将所得溶液在25℃下搅拌过1夜。然后将反应通过添加10mL的冰/盐淬灭。将所得溶液用3×5mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并并浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/己烷(1:3)的硅胶柱上。这产生120mg(58％)为棕色固体的3-[(叔丁氧基羰基)(甲基)氨基]-1-甲基吲唑-6-甲酸甲酯。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝320。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的8-mL小瓶中放置3-[(叔丁氧基羰基)(甲基)氨基]-1-甲基吲唑-6-甲酸甲酯(120.00mg，0.376mmol，1.00当量)、氢氧化锂(18.00mg，0.75mmol，2.00当量)、MeOH(1.20mL)、H2O(0.30mL)。将所得溶液在25℃下搅拌12小时。将所得混合物浓缩。这产生110mg(96％)为灰白色固体的3-[(叔丁氧基羰基)(甲基)氨基]-1-甲基吲唑-6-甲酸。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝306
酸43：1-甲基咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸
在室温下，向50mL 3颈圆底烧瓶中添加MeOH(14mL，345.785mmol，69.17当量)、于MeOH(7mL，246.616mmol，49.33当量)中的NH3(g)和异丙醇钛(2.84g，9.998mmol，2.0当量)。将所得混合物在氮气气氛下在室温下搅拌0.5小时。在氮气气氛下在室温下，分批向搅拌的溶液/混合物中添加NaBH4(0.28g，7.498mmol，1.5当量)。将所得混合物在氮气气氛下在室温下搅拌16小时。将所得混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/THF(1:8)洗脱)，以得到为浅棕色固体的1-(4-溴吡啶-2-基)乙胺(700mg，69.64％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝201。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的8-mL小瓶中放置1-(4-溴吡啶-2-基)乙胺(700mg，3.481mmol，1.00当量)、ZnO(311.76mg，3.829mmol，1.1当量)、HCOOH(2.2mL，58.316mmol，16.75当量)。将所得溶液在70℃下搅拌8小时。将所得溶液用10mL的DCM稀释。将固体滤出。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用DCM/MeOH(98:2)的硅胶柱上。这产生为无色油的N-[1-(4-溴吡啶-2-基)乙基]甲酰胺(400mg，50％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝229。
在室温下，向8mL小瓶中添加N-[1-(4-溴吡啶-2-基)乙基]甲酰胺(400.00mg，1.746mmol，1.00当量)和POCl3(3.00mL)。将所得混合物在氮气气氛下在80℃下搅拌1h。将所得混合物在减压下浓缩。将所得混合物用CH2Cl2(30mL)稀释。将反应在室温下用饱和NaHCO3(水性)淬灭。分离所得混合物，并且将水层用CH2Cl2(2×10mL)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。这产生为棕色固体的7-溴-1-甲基咪唑并[1,5-a]吡啶(340mg，82％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝211。
向30-mL密封管中放置7-溴-1-甲基咪唑并[1,5-a]吡啶(350mg，1.66mmol，1.00当量)、Pd(dppf)Cl2(145.60mg，0.199mmol，0.12当量)、TEA(503.40mg，4.974mmol，3当量)、MeOH(10.00mL)、CO(5atm)。将所得溶液在120℃下搅拌3小时。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:3)的硅胶柱上。这产生为棕色固体的1-甲基咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸甲酯(300mg，95％)。
LC-MS-(ES,m/z):[M+1]+＝191。
在室温下，向20mL小瓶中添加1-甲基咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸甲酯(300.00mg，1.577mmol，1.00当量)、MeOH(5.00mL)、NaOH(252.00mg，6.300mmol，3.99当量)和H2O(5.00mL)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。将所得混合物在真空下浓缩。将残余物溶解在水(10mL)中。将混合物用HCl(水性)酸化至pH 4。将沉淀的固体通过过滤收集并且用水(3×10mL)洗涤。将所得固体在红外光下干燥。这产生为灰色固体的1-甲基咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸(200mg，72％)。
LC-MS-(ES,m/z):[M+1]+＝177。
酸44：1,3-二甲基咪唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的250-mL 3颈圆底烧瓶中放置1-(5-溴吡啶-2-基)乙酮(5.70g，28.495mmol，1.00当量)、MeOH(80.00mL)、Ti(Oi-Pr)4(16.20g，56.990mmol，2.00当量)。在25℃下，向上述烧瓶中引入于MeOH(40.00mL)中的NH3(g)。将所得溶液在室温下搅拌1小时。这之后在25℃下，添加NaBH4(1617.08mg，42.743mmol，1.50当量)。在室温下伴随搅拌使所得溶液再反应2小时。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用THF的硅胶柱上。这产生4g(69.8％)为浅黄色油的1-(5-溴吡啶-2-基)乙胺。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝201。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL 3颈圆底烧瓶中放置1-(5-溴吡啶-2-基)乙胺(650.0mg，3.23mmol，1.00当量)、乙酸酐(14mL)、p-MeC6H4SO3H(556.7mg，3.233mmol，1.00当量)。将所得溶液在100℃下搅拌3小时。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用THF/PE(2:1)的硅胶柱上。这产生500mg(68.7％)为浅黄色固体的6-溴-1,3-二甲基咪唑并[1,5-a]吡啶。
LC-MS-(ES,m/z):[M+1]+＝225。
向50-mL密封管中放置6-溴-1,3-二甲基咪唑并[1,5-a]吡啶(500mg，2.221mmol，1.00当量)、Pd(dppf)Cl2(325mg，0.444mmol，0.2当量)、TEA(674mg，6.664mmol，3.0当量)、MeOH(20.00mL)、CO(20atm)。将所得溶液在120℃下搅拌3小时。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用THF/PE(2:1)的硅胶柱上。这产生420mg(92.3％)为棕色固体的1,3-二甲基咪唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸甲酯。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝205。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的8-mL小瓶中放置1,3-二甲基咪唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸甲酯(420mg，2.057mmol，1.00当量)、MeOH(4.00mL)、H2O(1.00mL)、氢氧化钠(164.5mg，0.000mmol，2.00当量)。将所得溶液在室温下搅拌16小时。将溶液的pH值用HCl(37％)调节至4。将所得混合物浓缩。这产生600mg(粗品)为棕色固体的1,3-二甲基咪唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸。
LC-MS-(ES,m/z):[M+1]+＝191。
酸45：3,7-二氟-1H-吲唑-6-甲酸
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的40-mL小瓶中放置1H-吲唑-6-甲酸甲酯(1.4g，7.947mmol，1.00当量)、ACN(25mL)、HOAc(2.5mL)和SelectFluor(8.45g，23.841mmol，3当量)。将所得溶液在油浴中在85℃下搅拌2小时。将所得混合物在真空下浓缩。将所得溶液用20mL的H2O稀释。将所得溶液用3×20mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并。将所得混合物用2×20mL的盐水洗涤。将混合物经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1/5)的硅胶柱上。这产生为黄色固体的3,7-二氟-1H-吲唑-6-甲酸甲酯(110mg，6.5％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M-H]+＝211
向50-mL圆底烧瓶中放置3,7-二氟-1H-吲唑-6-甲酸甲酯(110mg，0.518mmol，1.00当量)、MeOH(3mL)、H2O(1mL)、氢氧化锂(37.25mg，1.554mmol，3当量)。将所得溶液在室温下搅拌16小时。将所得混合物在真空下浓缩。将所得溶液用50mL的H2O稀释。将所得溶液用2×20mL的乙酸乙酯萃取，并且将水层合并。将溶液的pH值用HCl(3mol/L)调节至3。将固体通过过滤收集。这产生为黄色固体的3-氟-1-甲基吲唑-6-甲酸(150mg，80.4％)3,7-二氟-1H-吲唑-6-甲酸(50mg，48.7％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M-H]+＝197。
酸46：8-氟-3-甲基咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸
在N2气氛下在-78℃下，在500-mL 3颈圆底烧瓶中，向二异丙胺(6.22g，61.423mmol，1.5当量)于THF(50mL)中的溶液中逐滴添加正丁基锂溶液(己烷中的2.5M，19.6mL)。将反应混合物在-78℃下搅拌10min。然后逐滴添加3-氟吡啶-2-腈(5g，40.949mmol，1.00当量)的溶液，并且将混合物再搅拌20min。然后逐滴添加I2(11.43g，45.044mmol，1.1当量)于50mL THF中的溶液，并且将混合物再搅拌20min。将反应用饱和NH4Cl(100mL)猝灭，并且然后将混合物用EtOAc(2×50mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(100mL)洗涤、经无水Na2SO4干燥并在真空下浓缩，以得到粗产物，将其通过快速色谱法直接纯化。这产生为棕色固体的3-氟-4-碘吡啶-2-腈(8.8g，86.7％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]＝249
在N2气氛下在室温下，在500-mL 3颈圆底烧瓶中，向3-氟-4-碘吡啶-2-腈(2.0g，8.065mmol，1.00当量)于THF(50mL)中的溶液中逐滴添加BH3.THF(24.19mL，24.195mmol，3.0当量)。将反应混合物在室温下搅拌16小时。将反应用1M HCl(20mL)淬灭，用饱和NaHCO3(水性)将混合物碱化至pH 8，并且然后将混合物用DCM:MeOH(4:1)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(100mL)洗涤、经无水Na2SO4干燥并在真空下浓缩，以得到粗产物，将其通过快速色谱法直接纯化。这产生为棕色固体的1-(3-氟-4-碘吡啶-2-基)甲胺(689mg，33.9％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]＝253。
在室温下，向1-(3-氟-4-碘吡啶-2-基)甲胺(689mg，2.734mmol，1.00当量)于THF20mL中的搅拌溶液/混合物中添加Ac2O(1395.44mg，13.670mmol，5当量)。将所得混合物在70℃下搅拌1小时。将所得混合物在真空下浓缩。将粗的所得混合物不经进一步纯化直接用于下一步骤。这产生为棕色油的N-[(3-氟-4-碘吡啶-2-基)甲基]乙酰胺(810mg，粗品)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]＝295。
在室温下，向8mL密封管中添加N-[(3-氟-4-碘吡啶-2-基)甲基]乙酰胺(810mg，1.00当量)和POCl3(5mL)。将所得混合物在100℃下搅拌16小时。将所得混合物在真空下浓缩。用饱和NaHCO3(水性)将残余物碱化至pH 8。将所得混合物过滤。将滤液用CH2Cl2(3×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3×30mL)洗涤、经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(1:1)洗脱)，以得到为棕色固体的8-氟-7-碘-3-甲基咪唑并[1,5-a]吡啶(370mg，对于两个步骤为17％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]＝277。
在压力罐中，向8-氟-7-碘-3-甲基咪唑并[1,5-a]吡啶(370mg，1.340mmol，1.00当量)于20mL MeOH中的溶液中添加TEA(542.5mg，5.360mmol，4当量)和Pd(dppf)Cl2CH2Cl2(109.19mg，0.134mmol，0.1当量)。将混合物用氮气吹扫0.5min，并且然后用一氧化碳在100℃下加压至3MPa持续3小时。将反应混合物冷却至室温，并且过滤以除去不溶性固体。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(3:1)洗脱)，以得到为棕色固体的8-氟-3-甲基咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸甲酯(290mg，104％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]＝209。
在室温下，向8-氟-3-甲基咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸甲酯(120mg)于H2O(1mL)和1,4-二噁烷(5mL)中的搅拌溶液中添加HCl(1mL)。将所得混合物在90℃下搅拌6小时。将所得混合物在真空下浓缩。这产生为棕色固体的8-氟-3-甲基咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸(110mg，98％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]＝195
酸47：3-甲基-1,2,3-苯并三唑-5-甲酸
在压力罐中，向6-溴-1-甲基-1,2,3-苯并三唑(800mg，3.773mmol，1.00当量)于CH3OH(10mL)中的溶液中添加Pd(dppf)Cl2(276.05mg，0.377mmol，0.1当量)、TEA(1527.04mg，15.092mmol，4当量)。将混合物用氮气吹扫10min，并且然后用一氧化碳在100℃下加压至30atm持续16小时。将反应混合物冷却至室温，并且过滤以除去不溶性固体。将所得混合物用EA 3×20mL萃取。将合并的有机层用盐水3×20mL洗涤、经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用THF/PE(1/1)洗脱)，以得到为棕色固体的3-甲基-1,2,3-苯并三唑-5-甲酸甲酯(600mg，83％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝192。
向100-mL圆底烧瓶中放置3-甲基-1,2,3-苯并三唑-5-甲酸甲酯(600mg，3.14mmol，1.00当量)、MeOH(18mL)、H2O(6mL)、氢氧化锂(300.64mg，12.552mmol，4当量)。将所得溶液在室温下搅拌12小时。将所得混合物在真空下浓缩。将所得溶液用30mL的H2O稀释。将所得溶液用2×20mL的乙酸乙酯萃取，并且将水层合并。将溶液的pH值用HCl(3mol/L)调节至3。将固体通过过滤收集。这产生为棕色固体的3-甲基-1,2,3-苯并三唑-5-甲酸(450mg，81％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝178。
酸48：3-甲基-1-(氧杂环己烷-2-基)吲唑-5-甲酸锂
向100-mL 3颈圆底烧瓶中放置5-溴-3-甲基-1H-吲唑(2.00g，9.476mmol，1.00当量)、DHP(1.20g，14.214mmol，1.50当量)、DCM(20.00mL)、TsOH(163.18mg，0.948mmol，0.10当量)。将所得溶液在室温下搅拌5小时。然后将反应通过添加50mL的水淬灭。将所得溶液用2×50mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并并浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:3)的硅胶柱上。这产生1.6g(57.20％)为白色固体的5-溴-3-甲基-1-(氧杂环己烷-2-基)吲唑。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]＝295。
向100-mL压力反应器中放置5-溴-3-甲基-1-(氧杂环己烷-2-基)吲唑(1.60g，5.420mmol，1.00当量)、TEA(1.65g，16.260mmol，3.00当量)、Pd(dppf)Cl2(793.22mg，1.084mmol，0.20当量)、MeOH(20.00mL)。将烧瓶抽真空并且用氮气吹扫三次，随后用CO(气体)吹扫。将混合物在CO(3MPa)气氛下在60℃下搅拌6小时。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:2)的硅胶柱上。这产生1.25g(84％)为白色固体的3-甲基-1-(氧杂环己烷-2-基)吲唑-5-甲酸甲酯。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]＝275。
向50-mL圆底烧瓶中放置3-甲基-1-(氧杂环己烷-2-基)吲唑-5-甲酸甲酯(600.00mg，2.187mmol，1.00当量)、H2O(2.00mL)、MeOH(10.00mL)、LiOH(157.14mg，6.562mmol，3.00当量)。将所得溶液在40℃下搅拌12小时。将所得混合物浓缩。这产生510mg(87.58％)为白色固的3-甲基-1-(氧杂环己烷-2-基)吲唑-5-甲酸锂。
LC-MS(ES,m/z):[M+2H-Li]＝275。
酸49：1-环丙基-1H-吲唑-6-甲酸
向1H-吲唑-6-甲酸甲酯(170487-40-8，1g，5.7mmol，1当量)和环丙基硼酸(0.98g，11.4mmol，2当量)于二氯乙烷(20mL)中的溶液中添加2-(吡啶-2-基)吡啶(0.89g，5.7mmol，1当量)和Cu(OAc)2(1.03g，5.7mmol，1当量)。在氮气气氛下在70°下搅拌16h后，将所得混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用乙酸乙酯/石油醚(1:1)洗脱)，以得到为黄色油的1-环丙基吲唑-6-甲酸甲酯(500mg，41％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝217
在室温下，向50mL圆底烧瓶中添加于CH3OH(10mL)中的1-环丙基吲唑-6-甲酸甲酯(500mg，2.3mmol，1当量)和氢氧化锂(166mg，6.9mmol，3当量)、H2O(3mL)。将所得混合物在室温下搅拌10h。将所得混合物在真空下浓缩。将所得溶液用50mL的H2O稀释。将所得溶液用2x20mL的乙酸乙酯萃取，并且将水层合并。将溶液的pH用HCl(3M)调节至3。将固体通过过滤收集。这产生为黄色固体的1-环丙基-1H-吲唑-6-甲酸(380mg，81.27％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝203
酸50：1-甲基异喹啉-7-甲酸
/>
将NH2OH.HCl(5.6g，80.4mmol，1.6当量)和NaOAc(8.3g，101mmol，2.0当量)于EtOH(100mL)和H2O(25mL)中的溶液在室温下搅拌30min。在室温下，分批向这种混合物中添加间溴苯乙酮(10g，50mmol，1.0当量)，然后将其加温至80℃并且再搅拌3h。将混合物冷却至室温并在减压下浓缩。将所得混合物用水(25mL)稀释并用EtOAc(3x80mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤、经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用乙酸乙酯/石油醚(5:1)洗脱)，以得到为灰白色固体的(E)-N-[1-(3-溴苯基)亚乙基]羟胺(10g)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝214
向250-mL圆底烧瓶中添加(E)-N-[1-(3-溴苯基)亚乙基]羟胺(10.0g，46.7mmol，1.0当量)、乙酸酐(50mL)和AcOH(50mL)。将混合物在室温下搅拌3h，然后在减压下浓缩。将所得溶液用水(100mL)稀释并用EtOAc(3x80mL)萃取。将合并的有机层用NaHCO3(5x50mL)和盐水(80mL)洗涤、经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用乙酸乙酯/石油醚(5:1)洗脱)，以得到为浅黄色固体的(E)-[1-(3-溴苯基)亚乙基]氨基乙酸酯(7.5g)。
LC-MS(ES,m/z):[M+Na+ACN]+＝319
向100-mL圆底烧瓶中添加(E)-[1-(3-溴苯基)亚乙基]氨基乙酸酯(5g，19.5mmol，1.0当量)、乙酸乙烯酯(16.8g，195mmol，10.0当量)、CsOAc(1.1g，5.9mmol，0.3当量)、MeOH(50mL)和五甲基环戊二烯基氯化铑(III)二聚体(120mg，0.195mmol，0.01当量)。将所得混合物在氮气气氛下在60℃下搅拌24h。将混合物冷却至室温并在真空下浓缩。将残余物用以下条件通过制备型HPLC纯化：流动相A：水(0.05％ TFA)，流动相B：乙腈。将收集的溶液在真空下浓缩以除去乙腈，并且将残余物通过冷冻干燥法干燥。这产生为灰白色固体的7-溴-1-甲基异喹啉(1.8g)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝222
向100-mL压力容器中添加7-溴-1-甲基异喹啉(1.8g，8.mmol，1当量)、TEA(2.5g，24mmol，3.0当量)、MeOH(20mL)和Pd(dppf)Cl2(0.59g，0.81mmol，0.1当量)。将所得混合物在一氧化碳气氛下在120℃下搅拌4h。将混合物冷却至室温并过滤，将滤饼用EtOAc(3x20mL)洗涤。将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用乙酸乙酯/石油醚(1:2)洗脱)，以得到为浅黄色固体的1-甲基异喹啉-7-甲酸甲酯(1.3g，80％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝202
向1-甲基异喹啉-7-甲酸甲酯(1.3g，6.5mmol，1当量)于THF(10mL)和H2O(2mL)中的搅拌溶液中添加氢氧化锂(464.2mg，19.4mmol，3.0当量)。将所得混合物在室温下搅拌16h。将混合物在真空下浓缩，并且用2M HCl(水性)碱化至pH 3至4。将沉淀的固体通过过滤收集并且用水(3x5mL)洗涤。这产生为浅黄色固体的1-甲基异喹啉-7-甲酸(900mg，74％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝188
酸51：1,3-二甲基-1H-吲唑-5-甲酸
根据WO 2021127166，酸F制备
酸52：1-(吡啶-4-基)-1H-吲唑-5-甲酸
根据WO 2021127166，酸AC制备
酸53：1-(吡啶-4-基)-1H-苯并[d][1,2,3]三唑-5-甲酸
在0℃下，向3,4-二氨基苯甲酸甲酯(10.0g，60.2mmol，1.0当量)于AcOH(25mL)和H2O(45mL)中的溶液中逐滴添加于H2O(30mL)中的亚硝酸钠(8.30g，120mmol，2.0当量)。将所得混合物在室温下搅拌1h。将混合物用NaHCO3酸化至pH 8并用EtOAc(3x80mL)萃取。将合并的有机层用盐水(60mL)洗涤并经无水Na2SO4干燥。将滤液在减压下浓缩，并且将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用乙酸乙酯/石油醚(1:1)洗脱)，以得到为黄色固体的1H-1,2,3-苯并三唑-5-甲酸甲酯(10.1g)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝178
将1H-1,2,3-苯并三唑-5-甲酸甲酯(200.00mg，1.129mmol，1.0当量)、4-氟吡啶(164.41mg，1.7mmol，1.5当量)、K2CO3(468mg，3.4mmol，3.0当量)于DMF(5mL)中的溶液在80℃下搅拌1.5h。将混合物冷却至室温并用H2O(20mL)稀释。将所得混合物用EtOAc(3x20mL)萃取。将合并的有机层用H2O(5x20mL)和盐水(30mL)洗涤并经无水Na2SO4干燥。在减压下浓缩后，将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用乙酸乙酯/石油醚(1:2)洗脱)，以得到为浅黄色油的1-(吡啶-4-基)-1,2,3-苯并三唑-5-甲酸甲酯(150mg)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝255
向1-(吡啶-4-基)-1,2,3-苯并三唑-5-甲酸甲酯(150mg，0.590mmol，1.0当量)于MeOH(5mL)和H2O(1mL)中的搅拌溶液中添加氢氧化钠(47mg，1.2mmol，2.0当量)。将所得混合物在室温下搅拌6h。将混合物在真空下浓缩，并且用2M HCl(水性)酸化至pH 3至4。将沉淀的固体通过过滤收集并且用水(3x5mL)洗涤。这产生110mg(粗品)。将这种粗产物用以下条件通过制备型HPLC纯化：流动相，A：于水中的0.1％ HCl；B：乙腈；梯度：在7.9min内24-95％B。收集馏分并在真空下浓缩，以得到为白色固体的1-(吡啶-4-基)-1H-苯并[d][1,2,3]三唑-5-甲酸(45mg)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝240
酸54：1,4-二甲基酞嗪-6-甲酸
将2-羟基-4-溴苯乙酮(1g，4.7mmol，1当量)和乙酰肼(0.34g，4.7mmol，1当量)于i-PrOH(20mL)中的溶液在100℃下搅拌5h。将混合物冷却至室温。将沉淀的固体通过过滤收集并且用PrOH(20mL)洗涤。这产生为黄色固体的N'-[(1E)-1-(4-溴-2-羟基苯基)亚乙基]乙酰肼(1.1g,87％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝271,273
将N'-[(1E)-1-(4-溴-2-羟基苯基)亚乙基]乙酰肼(1.1g，4.0mmol，1当量)和(二乙酰氧基碘)苯(3.9g，12.2mmol，3当量)于DCM(30mL)中的溶液在室温下搅拌16h。用NaHCO3将混合物碱化至pH＝8。将所得混合物用DCM(30mL x 2)萃取。将合并的有机层用NaCl(20mL)洗涤并且经无水Na2SO4干燥并在减压下减少。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用1/1乙酸乙酯/石油醚洗脱)，以得到为棕色油的1-(2-乙酰基-4-溴苯基)乙酮(600mg，61％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝241,243
将1-(2-乙酰基-5-溴苯基)乙酮(0.6g，2.5mmol，1当量)和NH2NH2.H2O(2.49g，49.8mmol，20当量)于甲醇(20mL)中的溶液在60℃下搅拌2h。将混合物冷却至室温。将所得混合物在减压下浓缩。将粗产物6-溴-1,4-二甲基酞嗪(0.5g，68％)不经进一步纯化直接用于下一步骤。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝237,239
在压力容器中，向6-溴-1,4-二甲基酞嗪(0.5g，2.1mmol，1当量)于20mL MeOH中的溶液中添加三乙胺(0.64g，6.33mmol，3当量)和Pd(dppf)Cl2(0.17g，0.211mmol，0.1当量)。将混合物用氮气吹扫3min，并且然后用一氧化碳加压并在120℃下加热4h。将反应混合物冷却至室温。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用石油醚/乙酸乙酯(50/50)洗脱)，以得到为棕色固体的1,4-二甲基酞嗪-6-甲酸甲酯(300mg，66％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝217
在室温下，分批向1,4-二甲基酞嗪-6-甲酸甲酯(300mg，1.4mmol，1当量)于MeOH(10mL)、H2O(2mL)中的搅拌溶液中添加氢氧化锂(66.5mg，2.8mmol，2当量)。将所得混合物在室温下搅拌2h。将所得混合物在减压下浓缩。将混合物酸化至pH 3。将沉淀的固体通过过滤收集并且用H2O(5mL)洗涤，以得到为棕色固体的1,4-二甲基酞嗪-6-甲酸(220mg，78％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝203
酸55：1-甲基-2-氧代吲哚啉-6-甲酸
在0℃下，向100mL 3颈圆底烧瓶中添加6-溴-1H-吲哚(2g，10.2mmol，1当量)、DMF(40mL)和NaH(0.37g，15.3mmol，1.5当量)。将所得混合物在氮气气氛下在0℃下搅拌30min。在氮气气氛下在0℃下，向这种搅拌混合物中逐滴添加碘甲烷(1.74g，12.2mmol，1.2当量)。将所得混合物在0℃下搅拌3h。将反应在0℃下用水/冰淬灭。将所得混合物用EtOAc(2x100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2x100mL)洗涤并经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用石油醚/乙酸乙酯(1:1)洗脱)，以得到为棕色油的6-溴-1-甲基吲哚(1.8g，84％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝210
在室温下，向50mL 3颈圆底烧瓶中添加6-溴-1-甲基吲哚(1.8g，8.6mmol，1当量)、2-甲基-2-丙醇(20mL)和N-溴代琥珀酰亚胺(6.1g，34mmol，4当量)。将所得混合物在氮气气氛下在40℃下搅拌1h。将混合物冷却至室温。将所得混合物用水(100mL)稀释。将所得混合物用EtOAc(2x100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2x100mL)洗涤并经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。将粗产物用乙酸(30mL)稀释。在0℃下，向搅拌的溶液中添加锌(2.8g，42.8mmol，5当量)。将所得混合物在氮气气氛下在0℃下搅拌1h。将所得混合物在真空下浓缩并用水(100mL)稀释。将所得混合物用EtOAc(2x100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2x100mL)洗涤、经无水Na2SO4干燥并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用石油醚/乙酸乙酯(1:1)洗脱)，以得到为棕色固体的6-溴-1-甲基-3H-吲哚-2-酮(1.2g，62％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝226
在室温下，向100mL压力容器中添加6-溴-1-甲基-3H-吲哚-2-酮(1200mg，5.308mmol，1当量)、MeOH(24mL)、Pd(dppf)Cl2(388.39mg，0.531mmol，0.10当量)和TEA(1611mg，15.924mmol，3当量)。将所得混合物在一氧化碳气氛下在100℃下搅拌5h。将混合物冷却至室温。将所得混合物用水(100mL)稀释，并且将混合物用EtOAc(2x100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2x100mL)洗涤并经无水Na2SO4干燥。在过滤并在减压下浓缩后，将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用石油醚/乙酸乙酯(1:1)洗脱)，以得到为暗黄色固体的1-甲基-2-氧代-3H-吲哚-6-甲酸甲酯(500mg，46％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝206
在室温下，向40mL圆底烧瓶中添加1-甲基-2-氧代-3H-吲哚-6-甲酸甲酯(300mg，1.5mmol，1当量)、二噁烷(6mL)、水(3mL)和HCl(6M)(3mL)。将所得混合物在氮气气氛下在100℃下搅拌16h并冷却至室温。将反应混合物用水(10mL)稀释并用DCM(2x20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2x15mL)洗涤、经无水Na2SO4干燥并在减压下浓缩。将粗产物不经进一步纯化直接用于下一步骤。这产生为棕色油的1-甲基-2-氧代吲哚啉-6-甲酸(200mg，72％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝192
酸56：1-甲基-2-氧代吲哚啉-5-甲酸
使用5-溴-1H-吲哚，如对于酸55进行制备
酸57：1-甲基-1,3-二氢苯并[c]异噻唑-6-甲酸2,2-二氧化物
在室温下，将4-甲基-3-硝基苯甲酸甲酯(6g，30.7mmol，1当量)于四氯化碳(200mL)中的溶液用NBS(6.0g，34mmol，1.1当量)处理，随后在室温下分批添加过氧化苯甲酰(0.79g，3.1mmol，0.1当量)。将所得混合物在100℃下搅拌16h。将混合物冷却至室温并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用石油醚/乙酸乙酯＝10/1洗脱)，以得到为黄色液体的4-(溴甲基)-3-硝基苯甲酸甲酯(5g，59％)。
在室温下，分批向4-(溴甲基)-3-硝基苯甲酸甲酯(5g，18.2mmol，1当量)和Na2SO3(4.60g，36mmol，2当量)于H2O(50mL)和MeOH(100mL)中的搅拌溶液中添加四丁基溴化铵(5.88g，18.244mmol，1当量)。将所得混合物在100℃下搅拌3h。将混合物冷却至室温并用50mL水稀释。将所得混合物用乙酸乙酯(100mL x 2)萃取。将合并的有机层用NaCl(100mL)洗涤、经无水Na2SO4干燥并在减压下浓缩。将粗产物[4-(甲氧羰基)-2-硝基苯基]甲磺酸(6g)不经进一步纯化直接用于下一步骤。
在压力罐中，向[4-(甲氧羰基)-2-硝基苯基]甲磺酸(6g，22mmol，1当量)于100mLMeOH中的溶液中添加Pd/C(10％，2.3g)。将混合物在室温下在30psi氢气压力下氢化16h，通过Celite垫过滤，并且在减压下浓缩。这产生为白色固体的[2-氨基-4-(甲氧羰基)苯基]甲磺酸(4.5g，84％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝246
将[2-氨基-4-(甲氧羰基)苯基]甲磺酸(2g，5mmol，1当量，60％)于三氯氧磷(15mL)中的溶液在80℃下搅拌1h。将混合物冷却至室温，并且将所得混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用石油醚/乙酸乙酯＝1/1洗脱)，以得到为黄色固体的2,2-二氧代-1,3-二氢-2lambda6,1-苯并噻唑-6-甲酸甲酯(300mg，27％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝228
在0℃下，向1,3-二氢苯并[c]异噻唑-6-甲酸甲酯2,2-二氧化物(300mg，1.3mmol，1当量)和K2CO3(365mg，2.6mmol，2当量)于二甲基甲酰胺(10mL)中的搅拌溶液中逐滴添加MeI(206mg，1.5mmol，1.1当量)。将所得混合物用水淬灭并用乙酸乙酯(10mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤并经无水Na2SO4干燥。将滤液在减压下浓缩，并且将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用石油醚/乙酸乙酯＝1/1洗脱)，以得到为棕色固体的1-甲基-1,3-二氢苯并[c]异噻唑-6-甲酸甲酯2,2-二氧化物(200mg，63％)。
将1-甲基-1,3-二氢苯并[c]异噻唑-6-甲酸甲酯2,2-二氧化物(200mg，0.83mmol，1当量)和氯化氢(二噁烷中的1M，5mL)于1,4-二噁烷中的溶液在80℃下搅拌5h。将所得混合物在减压下浓缩，以得到粗产物1-甲基-1,3-二氢苯并[c]异噻唑-6-甲酸2,2-二氧化物(120mg，64％)，将其不经纯化直接使用。
LC-MS:(ES,m/z):[M-H]-＝226
酸58：1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸
将邻-(三甲基苯磺酰基)羟胺(5g，17.5mmol，1当量)和HClO4(8.8g，87.6mmol，5当量)于1,4-二噁烷(20ml)中的溶液在空气气氛下在0℃下搅拌3h。将所得混合物在真空下浓缩。将所得混合物用水(50mL)稀释，并且将沉淀的固体通过过滤收集并用乙醚(20ml)洗涤。这产生为白色固体的邻-(三甲基苯磺酰基)羟胺(2.5g，31％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝216
在氮气气氛下在室温下，将氨基邻-(三甲基苯磺酰基)羟胺(2.5g，5.3mmol，1当量)和2-(5-溴吡啶-2-基)乙腈(1.05g，5.3mmol，1当量)于DCM(30ml)中的溶液搅拌过夜。将所得混合物在真空下浓缩。向上述混合物中添加于MeOH(40ml)中的K2CO3(3.7g，26.7mmol，5当量)，并在氮气气氛下在室温下搅拌6h。将所得混合物在真空下浓缩并用水(30mL)稀释。将所得混合物用EtOAc(3x30mL)萃取。将合并的有机层用水(2x20ml)洗涤、经无水Na2SO4干燥、过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用乙酸乙酯/乙醚(8:1)洗脱)，以得到为黄色固体的6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-2(1H)-亚胺(0.75g，64％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝212,214
将6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-2(1H)-酮(700mg，3.3mmol，1当量)于50％ H2SO4(10ml)中的溶液在空气气氛下在100℃下搅拌2h。将混合物冷却至室温并用水/冰(100ml)淬灭。用饱和Na2CO3(水性)将混合物碱化至pH 9并用EtOAc(3x60mL)萃取。将合并的有机层用水(2x50mL)洗涤、经无水Na2SO4干燥并在减压下浓缩。这产生为黄色固体的6-溴-1H-吡唑并[1,5-a]吡啶-2-酮(560mg，72％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝213,215
将6-溴-1H-吡唑并[1,5-a]吡啶-2-酮(560mg，2.6mmol，1当量)、碘甲烷(560mg，3.9mmol，1.5当量)和K2CO3(732mg，5.3mmol，2.0当量)于DMF(10ml)中的溶液在氮气气氛下在室温下搅拌16h。将所得混合物用水(50ml)稀释。将所得混合物用EtOAc(3x30ml)萃取。将合并的有机层用水(2x30ml)洗涤、经无水Na2SO4干燥，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用石油醚/乙酸乙酯(4:1)洗脱)，以得到为黄色固体的6-溴-1-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-2-酮(420mg，70％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝227,229
在压力容器中，向6-溴-1-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-2-酮(200mg，0.881mmol，1当量)和Et3N(267mg，2.6mmol，3当量)于20mL MeOH中的溶液中添加Pd(dppf)Cl2(65mg，0.088mmol，0.1当量)。将混合物用氮气吹扫2min，并且然后用一氧化碳在120℃下加压至30atm持续2h。将反应混合物冷却至室温，并且过滤以除去不溶性固体。将所得混合物在真空下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用石油醚/乙酸乙酯(4:1)洗脱)，以得到为浅黄色固体的1-甲基-2-氧代吡唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸甲酯(120mg，66％)。
LC-MS-:(ES,m/z):[M+H]+＝207
将1-甲基-2-氧代吡唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸甲酯(100mg，0.485mmol，1当量)和氢氧化锂(23mg，0.97mmol，2当量)于MeOH(8ml)和水(2ml)中的溶液在空气气氛下在50℃下搅拌2h。将反应混合物冷却至室温。将所得混合物在真空下浓缩。将混合物用浓缩HCl酸化至pH 4。将所得混合物在真空下浓缩。这产生为浅黄色固体的1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸(120mg，粗品)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝193
以下酸购自商业供应商：
/>
/>
实例1：2-甲基-N-{2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基}吡唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酰胺
/>
在0℃至5℃下，在250mL 3颈圆底烧瓶中，向(E)-(N-[(2,4,6-三甲基苯磺酰基)氧基]乙亚胺酸乙酯)(5g，17.52mmol，1.00当量)于100mL 1,4-二噁烷中的溶液中添加HClO4(3.77g，26.28mmol，1.5当量)。将所得混合物在氮气气氛下在5℃下搅拌3小时。通过LCMS监测反应。将反应在5℃下通过添加水/冰(200mL)淬灭。将沉淀的固体通过过滤收集并且用PE(2×50mL)洗涤。这产生为白色粗固体的氨基2,4,6-三甲基苯磺酸盐(1.89g)。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]＝216。
在室温下，向50mL 3颈圆底烧瓶中添加于18mL DCM中的氨基2,4,6-三甲基苯磺酸盐(1.8g，8.362mmol，1.00当量)和烟酸甲酯(1.61g，11.707mmol，1.4当量)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。通过LCMS监测反应。将所得混合物在真空下浓缩。这产生为黄色粗固体的1-氨基-3-(甲氧羰基)吡啶-1-鎓2,4,6-三甲基苯磺酸盐(1.9g)。
LC-MS(ES,m/z):[M-199]＝153。
在100mL 3颈圆底烧瓶中，向丁-2-炔酸乙酯(0.60g，5.39mmol，1.0当量)于20mLCH3CN中的溶液中添加K2CO3(2.98g，21.56mmol，4.0当量)和1-氨基-3-(甲氧羰基)吡啶-1-鎓2,4,6-三甲基苯磺酸盐(1.9g，5.391mmol，1.00当量)。将所得混合物在室温下搅拌16小时。通过LCMS监测反应。将所得混合物过滤。将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用PE/EA(5:1)洗脱)，以得到为黄色固体的3-乙基6-甲基2-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3,6-二甲酸酯(200mg，对于3个步骤为4％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]＝263。
向40mL密封管中，向3-乙基6-甲基2-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3,6-二甲酸酯(180mg，0.686mmol，1.00当量)于1mL AcOH中的溶液中添加HCl(12M)(1mL，32.912mmol，47.95当量)。将所得混合物在100℃下搅拌20小时。通过LCMS监测反应。将所得混合物在真空下浓缩。这产生为白色固体的2-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸(84mg，69.5％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]＝177
在8mL密封管中，向2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺(70mg，0.202mmol，1.00当量)于2mL吡啶中的溶液中添加2-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酸(35.59mg，0.202mmol，1当量)和EDCI(77.44mg，0.404mmol，2当量)。将所得混合物在室温下搅拌16小时。通过LCMS监测反应。将所得混合物在真空下浓缩。这产生为棕色油的2-甲基-N-{2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基}吡唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酰胺(120mg)。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]＝505。
在50mL圆底烧瓶中，向2-甲基-N-{2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基}吡唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酰胺(120mg，0.238mmol，1.00当量)于5mL DCM中的溶液中添加CF3COOH(1mL，13.463mmol，56.62当量)。将所得混合物在室温下搅拌16小时。将所得混合物在真空下浓缩。用NH4OH(水性)将残余物碱化至pH 9。将粗产物用以下条件通过制备型HPLC纯化：柱，Sunfire制备型C18 OBD柱，50*250mm，5μm 10nm；流动相，水(0.05％ NH3H2O)和ACN(在12min内22％ ACN至57％)；检测器，UV 254nm。这得到为棕色固体的2-甲基-N-{2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基}吡唑并[1,5-a]吡啶-6-甲酰胺(26.7mg，对于两个步骤为18％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]＝375。
1H-NMR-(300MHz,甲醇-d4,ppm):δ9.16(s,1H),8.54(s,1H),8.16(s,1H),7.72(dd,J＝9.3,1.6Hz,1H),7.64(d,J＝9.3Hz,1H),6.52(d,J＝9.5Hz,2H),3.45(t,J＝7.9Hz,1H),3.26-3.22(m,1H),2.51(s,3H),2.41(q,J＝8.9Hz,1H),2.31(s,4H),2.08-1.97(m,2H),1.97-1.87(m,1H)。
实例2：1-甲基-N-(2-(1-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-1H-吲唑-5-甲酰胺
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的4-mL小瓶中放置2-(1-甲基吡咯烷-2-基)-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(75.00mg，0.216mmol，1.00当量)、1-甲基吲唑-5-甲酸(B，41.82mg，0.237mmol，1.10当量)、EDCI(62.06mg，0.324mmol，1.50当量)、吡啶(2.00mL)。将所得溶液在25℃下搅拌过1夜。然后将反应通过添加3mL的水淬灭。将所得溶液用3×3mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并。将所得混合物用3×3mL的盐水洗涤。将所得混合物浓缩。这产生160mg(粗品)为棕色油的1-甲基-N-[2-(1-甲基吡咯烷-2-基)-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]吲唑-5-甲酰胺。
LC-MS:(ES,m/z):[M+1]+＝506。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL圆底烧瓶中放置1-甲基-N-[2-(1-甲基吡咯烷-2-基)-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]吲唑-5-甲酰胺(160.0mg，0.316mmol，1.00当量)、CF3COOH(3mL)、DCM(3.00mL)。将所得溶液在25℃下搅拌20小时。将所得混合物浓缩。将粗产物用以下条件通过制备型HPLC纯化：XBridge Prep C18OBD柱，5μm，19*150mm；流动相，水(0.05％NH3.H2O)和ACN(在7min内12％相B升至34％)；检测器，UV254 nm。这产生25.6mg(21.55％)为浅黄色固体的1-甲基-N-[2-(1-甲基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]吲唑-5-甲酰胺。
LC-MS:(ES,m/z):[M+1]+＝376。
H-NMR(300MHz,甲醇-d4,ppm)δ8.65(d,J＝1.1Hz,1H),8.52(dd,J＝1.7,0.8Hz,1H),8.42(d,J＝1.0Hz,1H),8.20(d,J＝0.9Hz,1H),8.09(dd,J＝8.9,1.7Hz,1H),7.71(dt,J＝8.9,1.0Hz,1H),4.15(s,3H),3.66(s,1H),3.27(d,J＝8.0Hz,1H),2.53-2.34(m,5H),2.01(dt,J＝24.1,9.5Hz,3H)。
实例3：(R)-N-(2-(1-甲基吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-1-(吡啶-4-基)-1H-吲唑-5-甲酰胺
向8-mL小瓶中放置1-(吡啶-4-基)吲唑-5-甲酸，酸34(60.00mg，0.251mmol，1.00当量)、吡啶(1.20mL)、2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1H-1,3-苯并二唑-5-胺(54.25mg，0.251mmol，1.00当量)、EDCI(72.12mg，0.376mmol，1.50当量)。将所得溶液在室温下搅拌16小时。将所得混合物在真空下浓缩。将所得溶液用20mL的H2O稀释。将所得溶液用3×10mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并。将所得混合物用2×20mL的盐水洗涤。将混合物经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将粗产物(100mg)用以下条件通过制备型HPLC纯化：XBridgePrep C18 OBD柱，5μm，19*150mm；流动相，水(0.05％NH3H2O)和ACN(在7min内19％相B至26％)；检测器，UV 254nm。这产生18.8mg(17％)为白色固体的N-[2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1H-1,3-苯并二唑-5-基]-1-(吡啶-4-基)吲唑-5-甲酰胺。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝438。
1H-NMR:(300MHz,甲醇-d4,ppm)δ8.74-8.72(m,2H),8.57-8.53(m,2H),8.21(d,J＝1.3Hz,2H),8.10(d,J＝1.9Hz,1H),8.09-8.01(m,2H),7.56(d,J＝8.7Hz,1H),7.47(dd,J＝8.6,2.0Hz,1H),3.67-3.56(m,1H),3.29(t,J＝7.7Hz,1H),2.51-2.26(m,5H),2.14-2.12(m,2H),1.99-1.91(m,1H)。
实例4：3-(1-羟基乙基)-N-(2-((R)-1-甲基吡咯烷-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基)咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酰胺
向8-mL密封管中放置3-乙酰咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸(酸2，30.00mg，0.147mmol，1.00当量)、2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺(50.92mg，0.147mmol，1.00当量)、EDCI(56.33mg，0.294mmol，2.00当量)、吡啶(1.00mL)。将所得溶液在室温下搅拌16小时。将所得混合物浓缩。这产生60mg(粗品)为浅棕色油的3-乙酰基-N-[2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酰胺。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]＝533。
向8-mL密封管中放置3-乙酰基-N-[2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酰胺(60mg，粗品)、CF3COOH(1mL)、DCM(1mL)。将所得溶液在室温下搅拌16小时。将所得混合物浓缩。将粗产物用以下条件通过制备型HPLC纯化：柱，SunFire制备型C18 OBD柱，19*150mm；流动相，水(0.05％HCl)和ACN(在7min内5％相B至35％)；检测器，UV 254nm。这产生12mg(对于两个步骤为19％)为白色固体的3-乙酰基-N-[2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酰胺盐酸盐。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H-HCl]＝403
向8-mL密封管中放置3-乙酰基-N-[2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酰胺盐酸盐(12mg，0.027mmol，1.00当量)、MeOH(1mL)、NaBH4(5.17mg，0.135mmol，5.00当量)。将所得溶液在室温下搅拌2小时。然后将反应通过添加1mL的1N HCl(水性)淬灭。将粗产物用以下条件通过制备型HPLC纯化：柱，XBridgeShield RP18 OBD柱，19*150mm，5nm；流动相，水(0.05％NH3H2O)和ACN(在7min内19％相B至38％)；检测器，UV 254nm。这产生4mg(36.2％)为浅棕色固体的3-(1-羟基乙基)-N-[2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基]咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酰胺。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]＝405。
1H-NMR:(300MHz,CD3OD-d4,ppm):δ8.63(s,1H),8.50(d,J＝7.6Hz,1H),8.33(d,J＝1.8Hz,1H),8.23(s,1H),7.65(s,1H),7.25(dd,J＝7.6,1.8Hz,1H),6.76(s,1H),5.36(q,J＝6.6Hz,1H),4.16(s,1H),3.56(s,1H),2.97(d,J＝9.9Hz,1H),2.63(s,3H),2.54-2.43(m,1H),2.37(d,J＝8.3Hz,1H),2.29-2.10(m,2H),1.76(d,J＝6.6Hz,3H)。
实例5：(R)-1-甲基-N-(2-(1-甲基吡咯烷-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酰胺
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的8-mL圆底烧瓶中放置1-甲基吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酸(酸3，33.00mg，0.186mmol，1.00当量)、2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺(64.55mg，0.186mmol，1.00当量)、EDCI(71.42mg，0.372mmol，2.00当量)、吡啶(2.00mL)。将所得溶液在25℃下搅拌12小时。然后将反应通过添加8mL的水/冰淬灭。将所得溶液用3×3mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并。将所得混合物用3×3mL的盐水洗涤。将所得混合物浓缩。这产生45mg(47.8％)为棕色固体的1-甲基-N-[2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基]吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酰胺。
LC-MS:(ES,m/z):[M+1]+＝506。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的8-mL圆底烧瓶中放置1-甲基-N-[2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基]吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酰胺(45.00mg，0.089mmol，1.00当量)、DCM(2mL)、CF3COOH(2mL)。将所得溶液在25℃下搅拌16小时。将所得混合物浓缩。将粗产物用以下条件通过制备型HPLC纯化：柱，XBridge Prep C18 OBD柱，19*150mm；流动相，水(0.05％NH3.H2O)和ACN(在7min内35％相B至65％)；检测器，UV 254nm。这产生19.7mg(59％)为灰白色固体的1-甲基-N-[2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基]吡唑并[4,3-c]吡啶-6-甲酰胺。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝376。
1H-NMR(300MHz,甲醇-d4,ppm)δ9.17(d,J＝1.1Hz,1H),8.51(d,J＝1.0Hz,1H),8.44(dt,J＝7.5,1.1Hz,2H),8.34(d,J＝1.1Hz,1H),6.54(d,J＝1.0Hz,1H),4.20(s,3H),3.45(t,J＝7.9Hz,1H),3.25(t,J＝7.7Hz,1H),2.49-2.32(m,5H),2.11-1.85(m,3H)。
实例6：(R)-N-(2-(1-甲基吡咯烷-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基)-3-(氧杂环丁烷-3-基)咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酰胺
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL圆底烧瓶中放置2-(氨甲基)吡啶-4-甲酸甲酯盐酸盐(750.0mg，3.7mmol，1.00当量)、氧杂环丁烷-3-甲酸(453.42mg，4.44mmol，1.20当量)、二甲基甲酰胺(10.00mL)、HATU(1688.74mg，4.441mmol，1.20当量)、DIEA(1913mg，14.805mmol，4.00当量)。将所得溶液在室温下搅拌6小时。然后将反应通过添加30mL的水/冰淬灭。将所得溶液用4×10mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并并浓缩。这产生400mg(43％)为棕色固体的2-[(氧杂环丁烷-3-基甲酰胺基)甲基]吡啶-4-甲酸甲酯。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝251。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL圆底烧瓶中放置2-[(氧杂环丁烷-3-基甲酰胺基)甲基]吡啶-4-甲酸甲酯(400.0mg，1.6mmol，1.0当量)、DCM(8.00mL)、伯吉斯试剂(1143mg，4.8mmol，3.0当量)。将所得溶液在室温下搅拌4小时。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用THF/PE(1:3)的硅胶柱上。这产生140mg(39％)为淡黄色固体的(2Z)-2-(氨亚甲基)-1H-吡啶-4-甲酸甲酯；氧杂环丁烷。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝233。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的8-mL小瓶中放置3-(氧杂环丁烷-3-基)咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸甲酯(140.0mg，0.603mmol，1.00当量)、氢氧化钠(48.2mg，1.2mmol，2.00当量)、MeOH(0.80mL)、H2O(0.20mL)。将所得溶液在室温下搅拌16小时。将所得混合物浓缩。这产生160mg(粗品)为浅黄色固体的3-(氧杂环丁烷-3-基)咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸钠。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝219。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的8-mL小瓶中放置3-(氧杂环丁烷-3-基)咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酸钠(160.0mg，0.67mmol，1.00当量)、2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺(92.34mg，0.27mmol，0.40当量)、吡啶(2.00mL)、EDCI(255.40mg，1.33mmol，2.00当量)。将所得溶液在室温下搅拌16小时。然后将反应通过添加10mL的水/冰淬灭。将所得溶液用3×4mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并。将所得混合物用3×4ml的盐水洗涤。将所得混合物浓缩。这产生120mg(33％)为棕色固体的N-[2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基]-3-(氧杂环丁烷-3-基)咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酰胺。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝547。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的8-mL小瓶中放置N-{2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基}-3-(氧杂环丁烷-3-基)咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酰胺(120mg，0.219mmol，1.00当量)、三氟乙酸(2.00mL)、DCM(2.00mL)。将所得溶液在室温下搅拌16小时。将粗产物用以下条件通过制备型HPLC纯化：柱，XBridge Prep C18 OBD柱，5μm,19*150mm；流动相，水(0.05％NH3.H2O)和ACN(在7min内30％相B至57％)；检测器，UV 254nm。这产生为灰白色固体的N-{2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基}-3-(氧杂环丁烷-3-基)咪唑并[1,5-a]吡啶-7-甲酰胺(16mg，17.5％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝417。
1H-NMR(300MHz,甲醇-d4,ppm)δ8.54(s,1H),8.33(t,J＝1.5Hz,1H),8.20-8.10(m,2H),7.75(d,J＝0.9Hz,1H),7.25(dd,J＝7.5,1.8Hz,1H),6.53(d,J＝1.0Hz,1H),5.18(dd,J＝8.5,5.7Hz,2H),5.10(dd,J＝6.8,5.7Hz,2H),5.00-4.89(m,1H),3.45(t,J＝7.9Hz,1H),3.24(t,J＝7.9Hz,1H),2.42(q,J＝8.8Hz,1H),2.32(s,4H),2.13-1.89(m,3H)。
实例7：(R)-6-氟-N-(2-(1-甲基吡咯烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-1-(吡啶-4-基)-1H-吲唑-5-甲酰胺
向8-mL小瓶中放置2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1H-1,3-苯并二唑-5-胺(67.27mg，0.311mmol，1.00当量)、吡啶(1.50mL)、6-氟-1-(吡啶-4-基)吲唑-5-甲酸(使用6-氟-1H-吲唑-5-甲酸和4-碘吡啶，如对于酸16步骤2进行制备，80.00mg，0.311mmol，1.00当量)、EDCI(89.43mg，0.467mmol，1.50当量)。将所得溶液在室温下搅拌4小时。将所得混合物在真空下浓缩。将所得溶液用10mL的H2O稀释。将所得溶液用3×10mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并。将所得混合物用2×20mL的盐水洗涤。将混合物经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将粗产物(90mg)用以下条件通过制备型HPLC纯化：柱，XBridge Shield RP18OBD柱，5μm，19*150mm；流动相，水(0.05％NH3H2O)和ACN(在7min内18％相B至40％)；检测器，UV 254nm。这产生38.2mg(27％)为白色固体的6-氟-N-[2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1H-1,3-苯并二唑-5-基]-1-(吡啶-4-基)吲唑-5-甲酰胺。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝456。
1H-NMR:(300MHz,甲醇-d4,ppm)δ8.78-8.70(m,2H),8.52(s,1H),8.37(d,J＝6.8Hz,1H),8.15(d,J＝1.9Hz,1H),8.07-7.97(m,3H),7.55(d,J＝8.7Hz,1H),7.48-7.39(m,1H),3.64(t,J＝7.7Hz,1H),3.28-2.34(m,5H),2.15-1.95(m,3H)。
F-NMR:(300MHz,甲醇-d4,ppm)δ-114.420
实例8：1-甲基-N-[2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基]吲唑-6-甲酰胺
向8-mL密封管中放置2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺(44.00mg，0.074mmol，1.00当量，61％)、1-甲基吲唑-6-甲酸(A，13.11mg，0.074mmol，1.00当量)、EDCI(28.54mg，0.148mmol，2.00当量)、吡啶(1.00mL)。将所得溶液在室温下搅拌16小时。将所得混合物浓缩。这产生100mg(粗品)为棕色固体的1-甲基-N-[2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基]吲唑-6-甲酰胺。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]＝519。
向8-mL密封管中放置1-甲基-N-[2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基]吲唑-6-甲酰胺(100.00mg，粗品)、CF3COOH(2.00mL)、DCM(2.00mL)。将所得溶液在室温下搅拌12小时。将所得混合物浓缩。将溶液的pH值用NH3.H2O调节至8。将粗产物用以下条件通过制备型HPLC纯化：柱，XBridge Shield RP18OBD柱，19*150mm，5μm；流动相，水(0.05％NH3H2O)和ACN(在7min内25％相B至55％)；检测器，UV 254nm。这产生20mg为浅棕色固体的1-甲基-N-[2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基]吲唑-6-甲酰胺。
LC-MS(ES,m/z):[M+H]＝389。
1H-NMR(300MHz,甲醇-d4,ppm):δ8.56(d,J＝1.0Hz,1H),8.28(s 1H),8.24(t,J＝1.0Hz,1H),8.12(d,J＝1.0Hz,1H),7.93(dd,J＝8.5,0.9Hz,1H),7.79(dd,J＝8.5,1.4Hz,1H),6.53(d,J＝1.0Hz,1H),4.20(s,3H),3.19(dd,J＝9.2,4.6Hz,1H),3.09(d,J＝11.9Hz,1H),2.30-2.21(m,1H),2.14(s,3H),1.90(d,J＝6.1Hz,3H),1.79(s,3H),1.49(s,1H)。
实例9：1-甲基-N-[2-(1-甲基哌啶-2-基)-1H-1,3-苯并二唑-5-基]吲唑-5-甲酰胺
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的100-mL 3颈圆底烧瓶中放置1-甲基哌啶-2-甲酸(5.00g，34.92mmol，1.00当量)、2-氨基-4-硝基苯胺(5.88g，38.412mmol，1.10当量)、DMF(50.00mL)、HATU(15.93g，41.904mmol，1.20当量)、DIEA(18.05g，139.680mmol，4.00当量)。将所得溶液在25℃下搅拌1小时。然后将反应通过添加200mL的水/冰淬灭。将所得溶液用3×70mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并。将所得混合物用3×70mL的盐水洗涤。将所得混合物浓缩。这产生11g(粗品)为棕色固体的N-(2-氨基-5-硝基苯基)-1-甲基哌啶-2-甲酰胺。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝279。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的150-mL圆底烧瓶中放置N-(2-氨基-5-硝基苯基)-1-甲基哌啶-2-甲酰胺(11.00g，39.52mmol，1当量)、乙酸(150.00mL)。将所得溶液在90℃下搅拌2天。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(9:1)的硅胶柱上。这产生5g(48.6％)为棕色固体的2-(1-甲基哌啶-2-基)-5-硝基-1H-1,3-苯并二唑。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝261。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL圆底烧瓶中放置2-(1-甲基哌啶-2-基)-5-硝基-1H-1,3-苯并二唑(500.0mg，1.92mmol，1.00当量)、甲醇(10.00mL)、Pd/C(41mg，0.20当量)、H2(5atm)。将所得溶液在25℃下搅拌过1夜。将固体滤出。将所得混合物浓缩。这产生400mg(90.4％)为棕色固体的2-(1-甲基哌啶-2-基)-1H-1,3-苯并二唑-5-胺。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝231。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的8-mL小瓶中放置2-(1-甲基哌啶-2-基)-1H-1,3-苯并二唑-5-胺(100.00mg，0.434mmol，1.00当量)、1-甲基吲唑-5-甲酸(B，84.14mg，0.477mmol，1.10当量)、DMF(2.00mL)、HATU(198.11mg，0.521mmol，1.20当量)、DIEA(224.46mg，1.74mmol，4.00当量)。将所得溶液在25℃下搅拌2小时。将粗产物用以下条件通过制备型HPLC纯化：XBridge Prep C18 OBD柱，5μm，19*150mm；流动相，水(0.05％NH3.H2O)和ACN(在7min内30％相B至57％)；检测器，UV 254nm。这产生33.2mg(19.7％)为灰白色固体的1-甲基-N-[2-(1-甲基哌啶-2-基)-1H-1,3-苯并二唑-5-基]吲唑-5-甲酰胺。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝389。
1H-NMR(300MHz,甲醇-d4,ppm)δ8.46(dd,J＝1.7,0.8Hz,1H),8.18(d,J＝0.9Hz,1H),8.12-8.00(m,2H),7.68(dt,J＝9.0,1.0Hz,1H),7.55(d,J＝8.6Hz,1H),7.46(d,J＝8.7Hz,1H),4.13(s,3H),3.34-3.24(m,1H),3.08(d,J＝11.3Hz,1H),2.30-2.16(m,1H),2.11(s,3H),1.90(dd,J＝9.4,4.9Hz,3H),1.86-1.71(m,2H)1.50(s,1H)。
使用中间体1和相应的酸，根据实例3制备以下实例。
/>
/>
/>
/>
使用中间体2和相应的酸，根据实例1步骤5和6制备。
/>
/>
/>
/>
/>
/>
/>
/>
/>
/>
/>
/>
/>
/>
使用中间体5和相应的酸，根据实例1步骤5和6制备。
/>
使用中间体6和相应的酸，根据实例1步骤5和6制备。
实例77：N-[2-[1-(二甲氨基)乙基]-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基]-1-甲基吲唑-6-甲酰胺
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的100-mL 3颈圆底烧瓶中放置N,O-二甲基羟胺(1118.58mg，18.312mmol，1.2当量)、DMF(30.00mL)、DIEA(5916.83mg，45.781mmol，3.0当量)、HATU(6962.85mg，18.312mmol，1.2当量)、6-氯-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-甲酸(3.00g，15.260mmol，1.00当量)。将所得溶液在室温下搅拌16小时。将所得溶液用50mL的H2O稀释。将所得溶液用3×50mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并。将所得混合物用3×50ml的盐水洗涤。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:1)的硅胶柱上。这产生1.6g(43.75％)为浅棕色固体的6-氯-N-甲氧基-N-甲基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-甲酰胺。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝240。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL 3颈圆底烧瓶中放置6-氯-N-甲氧基-N-甲基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-甲酰胺(1.60g，6.676mmol，1.00当量)、DMF(16.00mL)、Cs2CO3(6525.64mg，20.028mmol，3.00当量)、SEMCl(1669.58mg，10.014mmol，1.50当量)。将所得溶液在室温下搅拌6小时。将所得溶液用20mL的H2O稀释。将所得溶液用3×20mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并并浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:3)的硅胶柱上。这产生1.5g(60.74％)为浅棕色固体的6-氯-N-甲氧基-N-甲基-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-2-甲酰胺。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝370。
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的50-mL 3颈圆底烧瓶中放置6-氯-N-甲氧基-N-甲基-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-2-甲酰胺(1.50g，4.055mmol，1.00当量)、THF(15.00mL)。这之后在30min内在-78℃下，伴随搅拌逐滴添加溴(甲基)镁(725.29mg，6.082mmol，1.50当量)。将所得溶液在-78℃下搅拌1小时。将所得溶液用20mL的H2O稀释。将所得溶液用3×20mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并并浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:2)的硅胶柱上。这产生600mg(45.55％)为黄色固体的1-(6-氯-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙酮。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝325。
向40-mL圆底烧瓶中放置NH4Cl(166.99mg，3.122mmol，1.10当量)、DMF(5.00mL)、HATU(1618.69mg，4.257mmol，1.50当量)、DIEA(1100.41mg，8.514mmol，3.00当量)、1-甲基吲唑-6-甲酸(A，500.00mg，2.838mmol，1.00当量)。将所得溶液在室温下搅拌12小时。将所得溶液用20mL的H2O稀释。将所得溶液用3×20mL的二氯甲烷萃取，并且将有机层合并并浓缩。将残余物施加至硅胶柱(其中二氯甲烷/甲醇(1:2))上。这产生240mg(48.27％)为白色固体的1-甲基吲唑-6-甲酰胺。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝176。
向40-mL圆底烧瓶中放置1-(6-氯-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基)乙酮(500.00mg，1.539mmol，1.00当量)、二噁烷(5.00mL)、1-甲基吲唑-6-甲酰胺(269.62mg，1.539mmol，1.00当量)、Pd2(dba)3(70.47mg，0.077mmol，0.05当量)、Xantphos(44.53mg，0.077mmol，0.05当量)、Cs2CO3(1504.34mg，4.617mmol，3.00当量)。将所得溶液在110℃下搅拌5小时。将所得溶液用20mL的H2O稀释。将所得溶液用3×20mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并。将所得混合物用3×20ml的盐水洗涤。将所得混合物浓缩。将残余物施加到使用乙酸乙酯/石油醚(1:1)的硅胶柱上。这产生300mg(42.05％)为白色固体的N-(2-乙酰基-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基)-1-甲基吲唑-6-甲酰胺。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝464。
向40-mL圆底烧瓶中放置N-(2-乙酰基-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基)-1-甲基吲唑-6-甲酰胺(200.00mg，0.431mmol，1.00当量)、MeOH(4.00mL)、NaBH4(48.96mg，1.294mmol，3.00当量)。将所得溶液在室温下搅拌3小时。将所得溶液用20mL的H2O稀释。将所得溶液用3×20mL的乙酸乙酯萃取，并且将有机层合并并浓缩。这产生100mg(49.78％)为白色油的N-[2-(1-羟基乙基)-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基]-1-甲基吲唑-6-甲酰胺。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝466。
向8-mL圆底烧瓶中放置N-[2-(1-羟基乙基)-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基]-1-甲基吲唑-6-甲酰胺(100.00mg，0.215mmol，1.00当量)、DCM(2.00mL)、TEA(65.20mg，0.644mmol，3.00当量)、MsCl(29.52mg，0.258mmol，1.20当量)。将所得溶液在室温下搅拌2小时。将所得混合物浓缩。这产生100mg(85.64％)为黄色油的1-[6-(1-甲基吲唑-6-氨基)-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]甲磺酸乙酯。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝544。
向8-mL圆底烧瓶中放置1-[6-(1-甲基吲唑-6-氨基)-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-2-基]甲磺酸乙酯(100.00mg，0.184mmol，1.00当量)、于THF(1.00mL)中的2M二甲胺。将所得溶液在室温下搅拌10小时。将所得混合物浓缩。这产生100mg为黄色油的粗N-[2-[1-(二甲氨基)乙基]-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基]-1-甲基吲唑-6-甲酰胺。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝493。
向8-mL圆底烧瓶中放置N-[2-[1-(二甲氨基)乙基]-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基]-1-甲基吲唑-6-甲酰胺(100.00mg，0.203mmol，1.00当量)、DCM(2.00mL)、CF3COOH(99.48mg，1.015mmol，5.00当量)。将所得溶液在室温下搅拌16小时。将所得混合物浓缩。将所得溶液用10mL的H2O稀释。将溶液的pH值用NaHCO3(1mol/L)调节至8-9。将所得溶液用3×10mL的二氯甲烷萃取，并且将有机层合并并浓缩。将粗产物用以下条件通过制备型HPLC纯化：柱：HPH C18，50*3.0mm，2.6μm；流动相A：水/0.05％ NH3.H2O，流动相B：ACN；流速：1.2mL/min；梯度：在1.1min内5％B至100％B，保持0.7min，检测器，UV254nm。这产生19mg(25.8％)为白色固体的N-[2-[1-(二甲氨基)乙基]-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基]-1-甲基吲唑-6-甲酰胺。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝363。
1H-NMR(300MHz,甲醇-d4,ppm):δ8.58(d,J＝1.0Hz,1H),8.26(m,2H),8.12(d,J＝1.0Hz,1H),7.92(dd,J＝8.5,0.9Hz,1H),7.79(dd,J＝8.5Hz,1H),6.50(m,1H),4.20(s,3H),3.87(m,1H),2.29(s,6H),1.54(d,J＝6.9Hz,3H)。
实例78：(R)-3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(2-(1-甲基吡咯烷-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基)-1H-吲唑-6-甲酰胺
向8-mL密封管中放置3-(二氟甲基)-1-甲基吲唑-6-甲酸(根据WO 2021127166，酸AR制备，52mg，0.23mmol，1.0当量)、2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺(中间体2，79.7mg，0.23mmol，1.00当量)、EDCI(88mg，0.46mmol，2.0当量)和吡啶(2.00mL)。将所得溶液在室温下搅拌12h。将所得混合物浓缩并用2x20mL的乙酸乙酯萃取，将有机层合并并浓缩。这产生150mg(粗品)为棕色固体的3-(二氟甲基)-1-甲基-N-[2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基]吲唑-6-甲酰胺。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]＝555
向50-mL圆底烧瓶中放置3-(二氟甲基)-1-甲基-N-[2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基]吲唑-6-甲酰胺(150.0mg，粗品)、CF3COOH(2.00mL)和DCM(1.00mL)。将所得溶液在室温下搅拌16h并将混合物浓缩。将溶液的pH值用NaHCO3(水性)溶液调节至8并用2x20mL的乙酸乙酯萃取，将有机层合并并浓缩。将粗产物(150mg)通过制备型HPLC纯化(用0.05％NH3/H2O和乙腈洗脱)。浓缩馏分得到20.2mg(在两个步骤中为20.8％)为浅棕色固体的(R)-3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(2-(1-甲基吡咯烷-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基)-1H-吲唑-6-甲酰胺。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]＝425
1H-NMR(300MHz,甲醇-d4,ppm):δ8.56(s,1H),8.34(s,1H),8.24(s,1H),8.03(d,J＝8.4Hz,1H),7.89(d,J＝8.4Hz,1H),7.11(t,J＝54.3Hz,1H),6.55(s,1H),4.23(d,J＝1.6Hz,3H),3.47(t,J＝7.8Hz,1H),3.27-3.22(m,1H),2.55-2.26(m,5H),2.10-1.93(m,3H)。
19F-NMR(282MHz,甲醇-d4,ppm):δ-119.83(s,2F)
实例79：(R)-1-(甲氨基)-N-(2-(1-甲基吡咯烷-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基)异喹啉-6-甲酰胺
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的8-mL小瓶中放置1-(甲氨基)异喹啉-6-甲酸(1374258-72-6，160mg，0.79mmol，1.0当量)、吡啶(3.50mL)、2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺(中间体2，137.1mg，0.4mmol，0.5当量)和EDCI(151.7mg，0.79mmol，1.0当量)。将所得溶液在室温下搅拌16h。将所得混合物在真空下浓缩并用20mL的H2O稀释。将反应混合物用3x10mL的乙酸乙酯萃取并且合并有机层，将其用2x20mL的盐水洗涤并经无水硫酸钠干燥。在真空下浓缩产生120mg(粗品)为棕色油的1-(甲氨基)-N-[2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基]异喹啉-6-甲酰胺。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝531
向50-mL圆底烧瓶中放置1-(甲氨基)-N-[2-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]-1-[[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基]吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基]异喹啉-6-甲酰胺(120.0mg，1当量)、DCM(3.00mL)和CF3COOH(3.00mL)。将反应混合物在室温下搅拌16h并在真空下浓缩。将残余物用4mL的DMF稀释。将溶液的pH值用NH3/H2O调节至8。将粗产物通过制备型HPLC纯化(用0.05％NH3/H2O和乙腈洗脱)，从而产生34.8mg为白色固体的(R)-1-(甲氨基)-N-(2-(1-甲基吡咯烷-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基)异喹啉-6-甲酰胺。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝401
1H-NMR:(300MHz,甲醇-d4,ppm)δ8.55(s,1H),8.33(d,J＝1.8Hz,1H),8.27-8.17(m,2H),8.03(dd,J＝8.7,1.8Hz,1H),7.92(d,J＝6.0Hz,1H),7.05(d,J＝6.0Hz,1H),6.53(s,1H),3.45(t,J＝7.8Hz,1H),3.24(t,J＝7.8Hz,1H),3.10(s,3H),2.45-2.39(m,1H),2.31(s,3H),2.12-1.99(m,1H),2.09-1.91(m,3H)。
实例80：(R)-1-甲基-N-(2-(1-甲基哌啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基)异喹啉-6-甲酰胺
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的8-mL小瓶中放置1-甲基异喹啉-6-甲酸(858646-61-4，30mg，0.16mmol，1.0当量)、吡啶(3.00mL)、2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺(中间体4，57.8mg，0.16mmol，1当量)和EDCI(46mg，0.240mmol，1.5当量)。将所得溶液在室温下搅拌12h并在真空下浓缩。将残余物用20mL的H2O稀释，用3x10mL的乙酸乙酯萃取并且合并有机层。将有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，从而产生为棕色油的1-甲基-N-{2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基}异喹啉-6-甲酰胺(70mg，83％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝530
向50-mL圆底烧瓶中放置1-甲基-N-{2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基}异喹啉-6-甲酰胺(70mg，0.132mmol，1.0当量)、DCM(4.00mL)和CF3COOH(4.00mL)。将所得溶液在室温下搅拌12h并在真空下浓缩。将残余物用4mL的DMF稀释。将溶液的pH用NH3/H2O调节至8。将粗产物(70mg)通过制备型HPLC纯化(用0.05％NH3/H2O和乙腈洗脱)。这产生为白色固体的(R)-1-甲基-N-(2-(1-甲基哌啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基)异喹啉-6-甲酰胺(29mg，55％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝400
1H-NMR:(300MHz,甲醇-d4,ppm)δ8.55(s,2H),8.50-8.40(m,2H),8.23-8.21(m,2H),7.84(d,J＝6.0Hz,1H),6.51(s,1H),3.21-3.17(m,1H),3.16-3.13(m,1H),3.00(s,3H),2.26-2.23(m,1H),2.11(s,3H),1.89-1.76(m,5H),1.55-1.41(m,1H)。
实例81：(R)-3-氟-1-甲基-N-(2-(1-甲基哌啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基)-1H-吲唑-6-甲酰胺
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的8-mL小瓶中放置3-氟-1-甲基吲唑-6-甲酸(酸28，50mg，0.258mmol，1当量)、吡啶(3.00mL)、2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺(中间体4，83.57mg，0.232mmol，0.9当量)和EDCI(148.10mg，0.774mmol，3当量)。将所得溶液在室温下搅拌12h并在真空下浓缩。将残余物用20mL的H2O稀释并用3x10mL的乙酸乙酯萃取。将各有机层合并并用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并且在真空下浓缩。这产生为棕色油的(R)-3-氟-1-甲基-N-(2-(1-甲基哌啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基)-1H-吲唑-6-甲酰胺(80mg，58％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝537
向50-mL圆底烧瓶中放置3-氟-1-甲基-N-{2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基}吲唑-6-甲酰胺(80mg，0.149mmol，1当量)、DCM(4.00mL)和CF3COOH(4.00mL)。将所得溶液在室温下搅拌12h并在真空下浓缩。将残余物用4mL的DMF稀释，并且将溶液的pH用NH3/H2O调节至8。将粗产物(70mg)通过制备型HPLC纯化(用0.05％NH3H2O和乙腈洗脱)。这产生为白色固体的3-氟-1-甲基-N-{2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基}吲唑-6-甲酰胺(24.7mg，41％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝407
1H-NMR:(300MHz,甲醇-d4,ppm)δ8.54(s,1H),8.20(s,2H),7.85-7.72(m,2H),6.50(s,1H),4.03(s,3H),3.15(dd,J＝9.0,4.2Hz,1H),3.06(d,J＝11.1Hz,1H),2.26-2.21(m,1H),2.11(s,3H),1.88-1.76(m,5H),1.48-1.45(m,1H)。
F-NMR:(282MHz,甲醇-d4,ppm)δ-137.611
使用中间体2和相应的酸，如对于实例79进行制备：
使用中间体4和相应的酸，如对于实例2进行制备：
/>
/>
/>
/>
实例99：(R)-1-甲基-N-(2-(1-甲基哌啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基)-2-氧代-1,2-二氢喹啉-6-甲酰胺
在室温下，向6-溴-1H-喹啉-2-酮(1g，4.46mmol，1当量)和K2CO3(1.23g，8.93mmol，2当量)于DMF(20mL)中的搅拌混合物中逐滴添加MeI(0.95g，6.7mmol，1.5当量)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。将反应在0℃下通过添加水(100mL)淬灭并用EtOAc(3x200mL)萃取。将合并的有机层用盐水(1x200mL)洗涤并经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。将残余物通过用EtOAc(50mL)研制来纯化。这产生为浅棕色固体的6-溴-1-甲基喹啉-2-酮(900mg，85％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝238,240
/>
在室温下，向30mL压力容器中添加6-溴-1-甲基喹啉-2-酮(900mg，3.78mmol，1当量)、Pd(dppf)Cl2(138.3mg，0.189mmol，0.05当量)、MeOH(20mL，494mmol)和TEA(1530mg，15.12mmol，4当量)。将所得混合物在一氧化碳气氛下在120℃下搅拌过夜。将混合物冷却至室温并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用石油醚/乙酸乙酯(1:2)洗脱)，以得到为棕色固体的1-甲基-2-氧代喹啉-6-甲酸甲酯(650mg，79％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝218
1H-NMR:(400MHz,DMSO-d6,ppm)δ8.37(d,J＝2.0Hz,1H),8.13(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),8.07(d,J＝9.6Hz,1H),7.64(d,J＝8.8Hz,1H),6.70(d,J＝9.6Hz,1H),3.89(s,3H),3.65(s,3H)。
在室温下，向1-甲基-2-氧代喹啉-6-甲酸甲酯(650mg，3.0mmol，1当量)于MeOH(10mL)中于THF(10mL)中的搅拌溶液中添加LiOH(215mg，9mmol，3当量)于水(2mL)中的溶液。将所得混合物在室温下搅拌过夜，用水(10mL)稀释，然后在减压下浓缩至约10mL。将混合物用HCl(水性)酸化至pH＝3。将沉淀的固体通过过滤收集并且用水(2x10mL)洗涤。将所得固体在红外光下干燥。这产生为浅棕色固体的1-甲基-2-氧代喹啉-6-甲酸(450mg，74％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝204
在室温下，向1-甲基-2-氧代喹啉-6-甲酸(50.72mg，0.249mmol，1.5当量)和2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺(60mg，0.166mmol，1.00当量)于吡啶(2mL)中的搅拌溶液中添加EDCI(63.80mg，0.332mmol，2当量)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。将反应在室温下通过添加水(0.1mL)淬灭并在减压下浓缩。将残余物溶解在水(5mL)中并用EtOAc(3x10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(1x20mL)洗涤、经无水Na2SO4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。这产生为棕色油的1-甲基-N-{2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基}-2-氧代喹啉-6-甲酰胺(90mg，粗品)。将粗产物不经进一步纯化直接用于下一步骤。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝546
在室温下，向8mL小瓶中添加1-甲基-N-{2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基}-2-氧代喹啉-6-甲酰胺(90mg，粗品)、DCM(1.5mL)和CF3COOH(1.5mL)。将所得混合物在室温下搅拌过夜并在减压下浓缩。将残余物溶解在DMF(4mL)中，并且将混合物用氢氧化铵碱化至pH 11。将残余物用以下条件通过制备型HPLC纯化(柱：XBridge Shield RP18 OBD柱；流动相A：0.05％NH3/H2O，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：在7min内26％B至50％ B；波长：220nm；RT1(min)：6.7)，以得到为白色固体的1-甲基-N-{2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基}-2-氧代喹啉-6-甲酰胺(19.6mg)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝416
1H-NMR(300MHz,CD3OD,ppm):δ8.53(s,1H),8.36(d,J＝2.1Hz,1H),8.27(dd,J＝9.0,2.1Hz,1H),8.18(s,1H),8.03(d,J＝9.3Hz,1H),7.73(d,J＝9.0Hz,1H),6.76(d,J＝9.6Hz,1H),6.50(s,1H),3.79(s,3H),3.18-3.14(m,1H),3.08-3.05(m,1H),2.27-2.18(m,1H),2.11(s,3H),1.89-1.82(m,3H),1.76-1.73(m,2H),1.50-1.46(m,1H)。
实例100：(R)-2-甲基-N-(2-(1-甲基哌啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基)-1-氧代-1,2-二氢异喹啉-6-甲酰胺
向100-mL圆底烧瓶中放置甲基6-溴-2H-异喹啉-1-酮(1g，4.46mmol，1当量)、DMF(20mL)、K2CO3(1.85g，13.4mmol，3当量)和CH3I(0.76g，5.4mmol，1.2当量)。将所得溶液在室温下搅拌16h并用50mL的H2O稀释。将反应混合物用3x20mL的乙酸乙酯萃取并且将合并的有机层用盐水洗涤、经无水Na2SO4干燥并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用乙酸乙酯/石油醚(1:1)洗脱)，以得到为棕色固体的6-溴-2-甲基异喹啉-1-酮(900mg，85％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝238
向50-mL压力容器中放置6-溴-2-甲基异喹啉-1-酮(900mg，3.78mmol，1当量)、CH3OH(5mL)、Pd(dppf)Cl2(276.6mg，0.378mmol，0.1当量)、TEA(1530mg，15.12mmol，4当量)和CO(10atm)。将所得溶液在120℃下搅拌16h。将反应混合物冷却并在真空下浓缩。将残余物用60mL的H2O稀释并用3x20mL的乙酸乙酯萃取。将各有机层合并并用3x20mL的盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残余物施加至硅胶柱上并且用乙酸乙酯/石油醚(1:1)洗脱。这产生为橙色固体的2-甲基-1-氧代异喹啉-6-甲酸甲酯(750mg，91％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝218
向100-mL圆底烧瓶中放置2-甲基-1-氧代异喹啉-6-甲酸甲酯(750mg，3.45mmol，1当量)、CH3OH(15mL)、H2O(5.0mL)和氢氧化锂(248mg，10.36mmol，3当量)。将所得溶液在室温下搅拌16h。将所得混合物在真空下浓缩并用20mL的H2O稀释。将反应混合物用2x10mL的乙酸乙酯萃取，并且将水层合并。将溶液的pH值用HCl(3mol/L)调节至3。将固体通过过滤收集。这产生为橙色固体的2-甲基-1-氧代异喹啉-6-甲酸(700mg，99.8％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝204
向用氮气惰性气氛吹扫并维持的8-mL小瓶中放置2-甲基-1-氧代异喹啉-6-甲酸(70mg，0.344mmol，1当量)、吡啶(3.00mL)、2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺(124mg，0.344mmol，1当量)和EDCI(198mg，1.03mmol，3当量)。将所得溶液在室温下搅拌16h并在真空下浓缩。将残余物用20mL的H2O稀释并用3x10mL的乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用2x10mL的盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，然后在真空下浓缩。这产生为棕色油的2-甲基-N-{2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基}-1-氧代异喹啉-6-甲酰胺(80mg，粗品)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝546
向50-mL圆底烧瓶中放置2-甲基-N-{2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基}-1-氧代异喹啉-6-甲酰胺(80mg，0.147mmol，1当量)、DCM(3.0mL)和CF3COOH(3.0mL)。将所得溶液在室温下搅拌16h并在真空下浓缩。将残余物用4mL的DMF稀释，并且将溶液的pH用NH3·H2O调节至8。将粗产物(70mg)用以下条件通过制备型HPLC纯化：(柱，XBridge Shield RP18OBD柱；流动相A，0.05％NH3·H2O)和乙腈(在7min内15％相B至31％)。这产生为白色固体的2-甲基-N-{2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基}-1-氧代异喹啉-6-甲酰胺(36.5mg，60％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝416
1H-NMR:(300MHz,甲醇-d4,ppm)δ8.54(d,J＝0.6Hz,1H),8.45(d,J＝8.4Hz,1H),8.29-8.17(m,2H),8.06(dd,J＝8.4,1.8Hz,1H),7.46(d,J＝7.2Hz,1H),6.82(d,J＝7.2Hz,1H),6.50(s,1H),3.65(s,3H),3.15(dd,J＝9.3,4.5Hz,1H),3.06(d,J＝11.4Hz,1H),2.22(dd,J＝16.5,10.2Hz,1H),2.11(s,3H),1.88-1.75(m,5H),1.53-1.45(m,1H)。
实例101：(R)-3-甲基-N-(2-(1-甲基哌啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-7-甲酰胺
在室温下，向7-氯-3H-喹唑啉-4-酮(1g，5.54mmol，1当量)和K2CO3(2.30g，16.6mmol，3当量)于DMF(20mL)中的搅拌混合物中逐滴添加MeI(1.18g，8.306mmol，1.5当量)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。将反应在0℃下用水(100mL)淬灭并用EtOAc(3x30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(3x20mL)洗涤、经无水Na2SO4干燥并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用石油醚/乙酸乙酯(3:1)洗脱)，以得到为黄色固体的7-氯-3-甲基喹唑啉-4-酮(900mg，84％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝195,197
在室温下，向50mL压力罐反应器中添加7-氯-3-甲基喹唑啉-4-酮(900mg，4.624mmol，1当量)、Pd(dppf)Cl2(169.18mg，0.231mmol，0.05当量)、MeOH(20mL)和TEA(1871.77mg，18.496mmol，4当量)。将所得混合物在一氧化碳气氛下在140℃下搅拌16h。将混合物冷却至室温。将所得混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用石油醚/THF(1:1)洗脱)，以得到为浅黄色固体的3-甲基-4-氧代喹唑啉-7-甲酸甲酯(600mg，60％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝219
在室温下，向3-甲基-4-氧代喹唑啉-7-甲酸甲酯(600mg，2.75mmol，1当量)于MeOH(10mL)中的搅拌溶液中添加NaOH(330mg，8.25mmol，3.00当量)于水(2mL)中的溶液。将所得混合物在室温下搅拌过夜并用(10mL)稀释，然后在减压下浓缩至约10mL。将所得混合物用1x10mL的DCM洗涤，并且将水层用HCl(水性)酸化至pH 3。将沉淀的固体通过过滤收集并且用水(2x10mL)洗涤。将所得固体在红外光下干燥。这产生为灰白色固体的3-甲基-4-氧代喹唑啉-7-甲酸(450mg，80％)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝205
在室温下，向3-甲基-4-氧代喹唑啉-7-甲酸(50.96mg，0.249mmol，1.5当量)和2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺(60mg，0.166mmol，1.00当量)于吡啶(2mL)中的搅拌溶液中添加EDCI(63.80mg，0.332mmol，2当量)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。将反应在室温下通过添加水(0.25mL)淬灭并在减压下浓缩。将残余物溶解在EtOAc(25mL)中并用2x20mL的水洗涤。将有机层经无水Na2SO4干燥并在减压下浓缩。这产生为棕色油的3-甲基-N-{2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基}-4-氧代喹唑啉-7-甲酰胺(100mg，粗品)。将粗产物不经进一步纯化直接用于下一步骤。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝547
在室温下，向8mL小瓶中添加3-甲基-N-{2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基}-4-氧代喹唑啉-7-甲酰胺(100mg，粗品)、DCM(1.5mL)和CF3COOH(1.5mL)。将所得混合物在室温下搅拌过夜并在真空下浓缩。将残余物溶解在DMF(3mL)中。用氢氧化铵将混合物碱化至pH 11。将所得混合物用以下条件通过制备型HPLC纯化(柱：XBridge Prep C18 OBD；流动相A：0.05％ NH3.H2O，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在8min内5％ B至50％B)。将收集的溶液在真空下浓缩以除去ACN，并且将所得溶液通过冷冻干燥法干燥。这产生为白色固体的3-甲基-N-{2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基}-4-氧代喹唑啉-7-甲酰胺(18.2mg)。
LC-MS:(ES,m/z):[M+H]+＝417
1H-NMR(300MHz,CD3OD，ppm):δ8.54(s,1H),8.40-8.37(m,2H),8.28(d,J＝1.2Hz,1H),8.19(s,1H),8.09(dd,J＝8.4,1.8Hz,1H),6.50(s,1H),3.63(s,3H),3.19-3.14(m,1H),3.06(d,J＝11.4Hz,1H),2.27-2.19(m,1H),2.12(s,3H),1.89-1.82(m,3H),1.76-1.73(m,2H),1.48-1.46(m,1H)。
实例102：(R)-3-甲基-N-(2-(1-甲基哌啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-6-甲酰胺
/>
向50-mL压力密封管中添加6-溴-3-甲基喹唑啉-4-酮(1g，4.18mmol，1当量)、TEA(1.27g，12.55mmol，3当量)、MeOH(15mL)和Pd(dppf)Cl2(0.31g，0.418mmol，0.1当量)。将所得混合物在一氧化碳气氛下在120℃下搅拌16h。将混合物冷却至室温并过滤，将滤饼用EtOAc(3x20mL)洗涤。将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用石油醚:乙酸乙酯(1:2)洗脱)，以得到为浅黄色固体的3-甲基-4-氧代喹唑啉-6-甲酸甲酯(810mg，89％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝219
向3-甲基-4-氧代喹唑啉-6-甲酸甲酯(810mg，3.71mmol，1当量)于MeOH(15mL)和H2O(5mL)中的搅拌溶液中添加NaOH(296.9mg，7.42mmol，2当量)。将所得混合物在室温下搅拌4h。将混合物在真空下浓缩，并且用2M HCl(水性)碱化至pH 3至4。将沉淀的固体通过过滤收集并且用水(3x5mL)洗涤。这产生为灰白色固体的3-甲基-4-氧代喹唑啉-6-甲酸(600mg，71％)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝205
向50-mL圆底烧瓶中添加3-甲基-4-氧代喹唑啉-6-甲酸(60mg，0.294mmol，1当量)、2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺(105.96mg，0.294mmol，1当量)、EDCI(225.33mg，1.176mmol，4当量)和吡啶(3mL)。将所得混合物在室温下搅拌16h并在减压下浓缩。将粗产物3-甲基-N-{2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基}-4-氧代喹唑啉-6-甲酰胺(120mg)不经进一步纯化直接用于下一步骤。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝547
向50-mL圆底烧瓶中添加3-甲基-N-{2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基}-4-氧代喹唑啉-6-甲酰胺(120mg，粗品)、DCM(1.5mL)和三氟乙酸(1.5mL)。将所得混合物在室温下搅拌20h并在真空下浓缩。将残余物用添加的DMF(3mL)和NH3.H2O(约10滴)稀释，然后将混合物再搅拌4h。将粗产物用以下条件通过制备型HPLC纯化(柱：XBridge Prep C18 OBD；流动相A：0.05％ NH3.H2O，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在8min内5％ B至50％ B。将馏分在真空下浓缩并通过冷冻干燥法干燥。这产生22.7mg为白色固体的3-甲基-N-{2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基}-4-氧代喹唑啉-6-甲酰胺。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝417
1H-NMR(400MHz,甲醇-d4,ppm)δ8.90(d,J＝2.0Hz,1H),8.53(s,1H),8.39-8.38(m,2H),8.19(s,1H),7.82(d,J＝8.4Hz,1H),6.49-6.47(m,1H),3.63(s,3H),3.17-3.13(m,1H),3.07-3.04(m,1H),2.25-2.18(m,1H),2.11(s,3H),1.93-1.83(m,3H),1.78-1.74(m,2H),1.50-1.44(m,1H)。
实例103：(R)-1,3-二甲基-N-(2-(1-甲基哌啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基)-4-氧代-3,4-二氢酞嗪-6-甲酰胺
在室温下，向50-mL圆底烧瓶中添加2-乙酰基-5-溴苯甲酸(950mg，3.9mmol，1.0当量)、水合肼(85％)(587mg，11.73mmol，3.0当量)和EtOH(10mL)。将所得混合物在室温下搅拌3h。将所得混合物在真空下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用石油醚:乙酸乙酯(1:2)洗脱)，以得到为灰白色固体的7-溴-4-甲基-2H-酞嗪-1-酮(800mg)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝239
将7-溴-4-甲基-2H-酞嗪-1-酮(0.8g，3.35mmol，1当量)和K2CO3(1.39g，10.04mmol，3.0当量)于DMF(10mL)中的溶液在0℃下逐滴用MeI(0.71g，5.02mmol，1.5当量)处理20min。将混合物在室温下搅拌16h。将反应在0℃下用水(50mL)淬灭并用EtOAc(3x60mL)萃取。将合并的有机层用水(8x50mL)和盐水(60mL)洗涤、经无水Na2SO4干燥，然后在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用石油醚:乙酸乙酯(3:1)洗脱)，以得到为黄色固体的7-溴-2,4-二甲基酞嗪-1-酮(450mg)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝253
向50-mL压力密封管中添加7-溴-2,4-二甲基酞嗪-1-酮(440mg，1.74mmol，1当量)、TEA(703.68mg，6.95mmol，4.0当量)、MeOH(10mL)和Pd(dppf)Cl2(63.6mg，0.087mmol，0.05当量)。将所得混合物在一氧化碳气氛下在120℃下搅拌16h。将混合物冷却至室温并过滤，将滤饼用EtOAc(3x20mL)洗涤。将滤液在减压下浓缩，并且将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用石油醚:乙酸乙酯(1:1)洗脱)，以得到为浅黄色固体的1,3-二甲基-4-氧代酞嗪-6-甲酸甲酯(310mg)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝233
向1,3-二甲基-4-氧代酞嗪-6-甲酸甲酯(310mg，1.34mmol，1当量)于MeOH(10mL)和H2O(2mL)中的搅拌溶液中添加NaOH(133.47mg，3.34mmol，2.5当量)。将所得混合物在室温下搅拌16h。将混合物在真空下浓缩，并且用2M HCl(水性)碱化至pH 3至4。将沉淀的固体通过过滤收集并且用水(3x10mL)洗涤。这产生为灰白色固体的1,3-二甲基-4-氧代酞嗪-6-甲酸(220mg)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝219
向50-mL圆底烧瓶中添加1,3-二甲基-4-氧代酞嗪-6-甲酸(60.0mg，0.275mmol，1当量)、2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺(99.14mg，0.275mmol，1当量)、EDCI(210.84mg，1.100mmol，4当量)和吡啶(3mL)。将所得混合物在室温下搅拌16h并在减压下浓缩。将粗产物1,3-二甲基-N-{2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基}-4-氧代酞嗪-6-甲酰胺(110mg)不经进一步纯化直接用于下一步骤。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝561
向50-mL圆底烧瓶中添加1,3-二甲基-N-{2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基}-4-氧代酞嗪-6-甲酰胺(110mg，粗品)、TFA(2mL)和DCM(4mL)。将所得混合物在室温下搅拌16h并在真空下浓缩。将残余物用DMF(3mL)、NH3.H2O(约10滴)稀释，然后将混合物再搅拌4h。将粗产物用以下条件通过制备型HPLC纯化(柱：XBridge Prep C18 OBD；流动相A：0.05％ NH3.H2O，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在8min内5％ B至50％B。将馏分浓缩并通过冷冻干燥法干燥。这产生15mg为白色固体的1,3-二甲基-N-{2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基}-4-氧代酞嗪-6-甲酰胺。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝431
1H-NMR(400MHz,甲醇-d4,ppm)δ8.97(s,1H),8.54(s,1H),8.46(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),8.20(s,1H),8.10(d,J＝8.4Hz,1H),6.50(s,1H),3.82(s,3H),3.17-3.12(m,1H),3.07-3.04(m,1H),2.65(s,3H),2.25-2.22(m,1H),2.21(s,3H),1.88-1.83(m,3H),1.76-1.74(m,2H),1.49-1.40(m,1H)。
实例104：(R)-2,4-二甲基-N-(2-(1-甲基哌啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基)-1-氧代-1,2-二氢酞嗪-6-甲酰胺
在室温下，向100-mL圆底烧瓶中添加于EtOH(30mL)中的4-溴-2-羟基苯甲醛(3.0g，14.92mmol，1当量)和乙酰肼(2.21g，29.85mmol，2.0当量)。将所得混合物在回流下搅拌16h。将混合物冷却至室温并在真空下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用石油醚/乙酸乙酯(1:1)洗脱)，以得到为白色固体的N'-[(1E)-(4-溴-2-羟基苯基)亚甲基]乙酰肼(2.7g)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝257
在室温下，向100-mL圆底烧瓶中添加于THF(35mL)中的N'-[(1E)-(4-溴-2-羟基苯基)亚甲基]乙酰肼(2.7g，10.5mmol，1当量)、Pb(OAc)4(9.31g，21.0mmol，2.0当量)。将所得混合物搅拌4h，并且将所得混合物用水(60mL)稀释并用EtOAc(3x30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤、经无水Na2SO4干燥，然后在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用石油醚/乙酸乙酯(1:1)洗脱)，以得到为灰白色固体的2-乙酰基-4-溴苯甲醛(2g)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝227
将2-乙酰基-4-溴苯甲醛(1.9g，8.37mmol，1.0当量)于CH3CN(30mL)和H2O(3mL)中的溶液在0℃下用H2O2(2.5mL)处理5min，随后在0℃下分批添加NaClO2(3.03g，33.47mmol，4.0当量)。将所得混合物在室温下搅拌2h。将反应在0℃下通过添加2M HCl(20mL)淬灭并用EtOAc(3x50mL)萃取。将合并的有机层用NaHCO3(2x40mL)和盐水(50mL)洗涤、经无水Na2SO4干燥并在减压下浓缩。这产生为灰白色固体的2-乙酰基-4-溴苯甲酸(1.3g)。将粗产物不经进一步纯化直接用于下一步骤。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝243
在室温下，向50-mL圆底烧瓶中添加2-乙酰基-4-溴苯甲酸(1.2g，4.94mmol，1当量)、水合肼(80％)(3mL)和EtOH(15mL)。将所得混合物在室温下搅拌3h并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用石油醚/乙酸乙酯(1:2)洗脱)，以得到为浅黄色固体的6-溴-4-甲基-2H-酞嗪-1-酮(0.9g)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝239
将6-溴-4-甲基-2H-酞嗪-1-酮(900mg，3.77mmol，1当量)和K2CO3(1.56g，11.30mmol，3.0当量)于DMF(10mL)中的溶液在0℃下逐滴用MeI(1.07g，7.53mmol，2.0当量)处理20min。将混合物在室温下搅拌16h。将反应在0℃下用水(50mL)淬灭并用EtOAc(3x60mL)萃取。将合并的有机层用水(8x50mL)和盐水(60mL)洗涤、经无水Na2SO4干燥并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用石油醚/乙酸乙酯(3:1)洗脱)，以得到为浅黄色固体的6-溴-2,4-二甲基酞嗪-1-酮(550mg)。
LC-MS-(ES,m/z):[M+1]+＝253
向50-mL压力密封管中添加6-溴-2,4-二甲基酞嗪-1-酮(550mg，2.17mmol，1当量)、TEA(879.59mg，8.69mmol，4.0当量)、MeOH(10mL)和Pd(dppf)Cl2(79.50mg，0.109mmol，0.05当量)。将所得混合物在一氧化碳气氛下在120℃下搅拌16h，并将其冷却至室温，过滤，并且用EtOAc(3x20mL)洗涤滤饼。将洗涤液在减压下浓缩，并且将残余物通过硅胶柱色谱法纯化(用石油醚/乙酸乙酯(1:1)洗脱)，以得到为浅黄色固体的2,4-二甲基-1-氧代酞嗪-6-甲酸甲酯(400mg)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝233
向2,4-二甲基-1-氧代酞嗪-6-甲酸甲酯(400mg，1.72mmol，1.0当量)于MeOH(6mL)和H2O(3mL)中的搅拌溶液中添加NaOH(137.78mg，3.44mmol，2.0当量)。将所得混合物在室温下搅拌16h。将混合物在真空下浓缩，并且用2M HCl(水性)碱化至pH 3至4。将沉淀的固体通过过滤收集并且用水(3x10mL)洗涤。这产生为灰白色固体的2,4-二甲基-1-氧代酞嗪-6-甲酸(370mg)。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝219
向50-mL圆底烧瓶中添加2,4-二甲基-1-氧代酞嗪-6-甲酸(60mg，0.275mmol，1当量)、2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺(109.06mg，0.303mmol，1.1当量)、EDCI(210.84mg，1.100mmol，4.0当量)和吡啶(3mL)。将所得混合物在室温下搅拌16h。将混合物在减压下浓缩，并且将粗产物2,4-二甲基-N-{2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基}-1-氧代酞嗪-6-甲酰胺(110mg)不经进一步纯化直接用于下一步骤。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝561
向50-mL圆底烧瓶中添加2,4-二甲基-N-{2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基}-1-氧代酞嗪-6-甲酰胺(110mg，粗品)、TFA(2mL)和DCM(2mL)。将所得混合物在室温下搅拌16h并在真空下浓缩。将所得混合物用添加的DMF(3mL)、NH3.H2O(10滴)稀释，并且将混合物再搅拌4h。将粗产物用以下条件通过制备型HPLC纯化：柱：XBridge Prep C18 OBD 19*150mm 5um；流动相A：0.05％ NH3.H2O，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在8min内5％ B至50％ B。将馏分浓缩并通过冷冻干燥法干燥，从而产生15mg为白色固体的2,4-二甲基-N-{2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基}-1-氧代酞嗪-6-甲酰胺。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝431
1H-NMR(400MHz,甲醇-d4,ppm)δ8.54(s,2H),8.49(d,J＝8.0Hz,1H),8.38(dd,J＝8.4,1.6Hz,1H),8.21(s,1H),6.51(s,1H),3.82-3.80(m,3H),3.17-3.12(m,1H),3.08-3.05(m,1H),2.71(s,3H),2.26-2.19(m,1H),2.11(s,3H),1.89-1.80(m,3H),1.74-1.78(m,2H),1.48-1.40(m,1H)。
实例105：(R)-4-甲基-N-(2-(1-甲基哌啶-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基)-3-氧代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]恶嗪-7-甲酰胺
向50-mL圆底烧瓶中添加4-甲基-3-氧代-2H-1,4-苯并噁嗪-7-甲酸(根据WO2021127166，酸CH制备，60mg，0.290mmol，1当量)、2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺(104.42mg，0.290mmol，1当量)、EDCI(222.06mg，1.160mmol，4当量)和吡啶(5mL)。将所得混合物在室温下搅拌16h并在减压下浓缩。将粗产物4-甲基-N-{2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基}-3-氧代-2H-1,4-苯并噁嗪-7-甲酰胺(110mg，粗品)不经进一步纯化直接用于下一步骤。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝550
向50-mL圆底烧瓶中添加4-甲基-N-{2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1-{[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基}吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基}-3-氧代-2H-1,4-苯并噁嗪-7-甲酰胺(110mg，粗品)、三氟乙酸(1.5mL)和DCM(1.5mL)。将所得混合物在室温下搅拌20h并在真空下浓缩。将所得混合物用添加的DMF(3mL)和NH3.H2O(10滴)稀释，然后将混合物再搅拌4h。将粗产物用以下条件通过制备型HPLC纯化：柱：XBridge Prep C18 OBD 19*150mm 5μm；流动相A：0.05％ NH3.H2O，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在8min内5％ B至50％ B。将馏分浓缩并通过冷冻干燥法干燥。这产生11.8mg为白色固体的4-甲基-N-{2-[(2R)-1-甲基哌啶-2-基]-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基}-3-氧代-2H-1,4-苯并噁嗪-7-甲酰胺。
LC-MS(ES,m/z):[M+1]+＝420
1H-NMR(300MHz,甲醇-d4,ppm)δ8.53(d,J＝0.9Hz,1H),8.17(s,1H),7.77(dd,J＝8.4,2.1Hz,1H),7.66(d,J＝1.8Hz,1H),7.32(d,J＝8.7Hz,1H),6.51(d,J＝0.6Hz,1H),4.72(s,2H),3.44(s,3H),3.19-3.06(m,2H),2.29-2.20(m,1H),2.13(s,3H),1.90-1.78(m,5H),1.57-1.46(m,1H)。
实例106：
FRET测定：
在TR-FRET ENL筛选测定中测试了本发明的化合物。TR-FRET(时间分辨荧光能量转移)可以用于定量ENL YEATS结构域与巴豆酰化组蛋白肽(H3K9cr，aa1-20)的结合。链霉亲和素-铕(Eu)螯合物结合生物素化肽，而抗6xHIS ULightTM结合6xHIS-ENL。当Eu螯合物在320nm处被激发时，如果Eu和ULight通过ENL与酰基肽结合而接近，则发生荧光共振能量转移(FRET)。在665nm处测量ULight发射(FRET)，并将其归一化为615nm处的Eu发射，以减少孔之间的可变性。
FRET测定-方案
将本发明的化合物以3mM的浓度溶解在DMSO中，随后在测定缓冲液(50mM HEPESPH7.0，150mM NaCl，0.05％ BSA,，0.2％ Pluronic F-127)中稀释，使得该测定含有1％DMSO。在白色384浅孔微板(Proxiplate-384Plus，珀金埃尔默公司(PerkinElmer)，6008280)中，将用于高对照(HC)孔的150nL化合物或媒介物(1％DMSO，在测定缓冲液中)和5μL的30nM ENL蛋白(6xHIS ENL YEATS结构域，EpiCypher公司，15-0069)合并，并在室温下孵育15分钟。低对照(LC)孔接受5uL测定缓冲液，而不是ENL蛋白。然后添加于测定缓冲液中的5μL的15nM H3K9cr肽(H3 aa1-20，生物素化；EpiCypher公司，12-0099)，并在室温下孵育30分钟。最后，添加5μL 45nM抗6HIS ULight(珀金埃尔默公司，TRF0105)和1.5nM链霉亲和素-铕螯合物(珀金埃尔默公司，AD0060)的混合物，并在室温下再孵育30分钟。使用PerkinElmer 2104EnVision(氙闪光灯激发，320nm±37.5nm激发滤光器，407nm截止分色镜，615nm±4.25(铕)nm和665nm±3.75nM(ULight)发射滤光器)测量TR-FRET信号(665nm信号/615nm信号X10,000)。在0.15nM-30μM的浓度范围内一式两份地进行化合物浓度响应曲线。将每种化合物浓度下的响应减去LC值转化为媒介物对照组响应的抑制百分比(HC-LC)。使用四参数逻辑方程分析抑制％和化合物浓度之间的关系，以估计下和上渐近线、产生50％抑制的化合物浓度(IC50值)和中点位置处的斜率。
表1：FRET测定结果
/>
实例107：
细胞测定：
使用基于细胞的测定来评估测试化合物降低MV4:11(MLL-AF4 MLL)和K562细胞两者的细胞生存力的能力，这些细胞在含有10％ FBS的Iscove氏改良的Dulbecco氏培养基(Gibco，12440061)中培养。测定进行了12天，并且细胞在第4天和第8天分裂。在0.15nM-30μM的浓度范围内一式两份地进行化合物浓度响应曲线。在第0天，将化合物或媒介物以300nL直接接种到96孔细胞培养板(康宁公司(Corning)，3599)中，其中5000个细胞/孔，体积为100μL。空白孔接受细胞培养基。将板在37℃下用5％ CO2孵育4天。在第4天和第8天，将细胞分裂并且再孵育4天，同时取出等份的细胞用于CTG读数。对于细胞分裂，将270nL化合物或DMSO添加到新的96孔细胞培养板中，其中添加了90μL培养基加上10μL来自原始测定板的细胞(混合后)或100μL培养基(空白孔)。这在第8天重复。
根据制造商的说明，使用均相发光测定试剂盒(普洛麦格公司(Promega)，G9243)评估细胞生存力。这量化了ATP，其指示代谢活跃细胞的存在。在第4、8和12天，将20μl剩余的细胞悬浮液吸到384孔板(康宁公司，3570)中，其中添加了等体积的CellTiter-Glo试剂。在使用EnVision读板器(PE，2104)记录发光信号之前，将板在室温下孵育10分钟。所得数据分析如下：
抑制(％)＝100％×(Lum媒介物-Lum样品)/(Lum媒介物-Lum空白)
当媒介物是用0.3％ DMSO处理的细胞时，空白是培养基。通过使用XLfit(v5.3.1.3)拟合曲线来计算IC50测定值：Y＝底部+(顶部-底部)/(1+10^((LogIC50-X)*坡度))。
表2：细胞测定
/>
/>

Claims (33)

1.一种具有式I的化合物：
其中：
X1、X2和X3独立地选自N和CH；
R1和R2选自：
(a)R1和R2一起形成吡咯烷或哌啶；以及
(b)R1和R2是甲基；
R3是选自以下的稠合双环：
(a)稠合5,6双环杂环，任选地被一个或多个C1-C6烷基(甲基)取代；
(b)稠合6,5双环杂环，任选地被一个或多个下列基团取代：C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C3-C8碳环、C1-C6氧杂烷基、C1-C6烷氧基、氧代、卤素、杂环和NHR4，其中R4选自C1-C6烷基和C1-C6氧杂烷基；以及
(c)稠合6,6双环杂环，任选地被一个或多个下列基团取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、卤素和NHR5，其中R5选自氢和C1-C6烷基。
2.根据权利要求1所述的化合物，该化合物具有式II：
其中R1、R2和R3如上文对于式I所定义。
3.根据权利要求1所述的化合物，该化合物具有式III：
其中R1、R2和R3如上文对于式I所定义。
4.根据权利要求1所述的化合物，该化合物具有式IV：
其中R1、R2和R3如上文对于式I所定义。
5.根据权利要求1所述的化合物，该化合物具有式V：
其中R1、R2和R3如上文对于式I所定义。
6.根据权利要求1所述的化合物，该化合物具有式VI
其中R1、R2和R3如上文对于式I所定义。
7.一种药物组合物，该药物组合物包含根据权利要求1-6中任一项所述的化合物以及一种或多种药学上可接受的载剂。
8.根据权利要求7所述的药物组合物，该药物组合物进一步包含一种或多种治疗剂。
9.根据权利要求8所述的药物组合物，其中该一种或多种治疗剂选自由以下组成的组：Bcl-2抑制剂、细胞周期蛋白依赖性激酶4和6(CDK 4/6抑制剂)、DNA甲基转移酶抑制剂、组蛋白脱乙酰酶(HDAC)抑制剂、mTOR抑制剂、突变异柠檬酸脱氢酶(IDH1和IDH2)抑制剂、糖皮质激素、表观遗传调节剂和化学治疗剂。
10.一种治疗急性白血病的方法，该方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的根据权利要求1-6中任一项所述的化合物或根据权利要求7-9所述的药物组合物。
11.根据权利要求10所述的方法，其中该急性白血病是急性淋巴细胞白血病(ALL)。
12.根据权利要求10所述的方法，其中该急性白血病是急性髓细胞性白血病(AML)。
13.根据权利要求12所述的方法，其中该AML是选自由以下组成的组的亚型：急性髓系白血病极小分化型(MO)、急性髓系白血病未成熟型(M1)、急性髓系白血病成熟型(M2)、急性髓系白血病成熟型伴t(8；21)、急性早幼粒细胞白血病(M3)、超颗粒型、微粒型、急性粒单核细胞白血病(M4)、急性粒单核细胞白血病伴骨髓嗜酸性粒细胞增多(M4E0)、急性单核细胞白血病(M5)、急性原始单核细胞白血病(M5a)、急性单核细胞白血病成熟型(M5b)、红白血病红系/髓系(M6a)、纯红系恶性肿瘤(M6b)、急性巨核细胞白血病(M7)、与t(1；22)相关的急性巨核细胞白血病、急性嗜碱性粒细胞白血病、急性骨髓纤维化(急性脊髓发育不良伴骨髓纤维化)、唐氏综合征中的急性白血病和暂时性骨髓增生性病症、低细胞急性髓系白血病和髓系肉瘤。
14.根据权利要求10所述的方法，其中该至少一种化合物是口服施用的。
15.根据权利要求10所述的方法，其中该至少一种化合物每天施用一至四次。
16.一种具有式I的化合物：
其中：
X1、X2和X3独立地选自N和CH；
R1和R2选自：
(a)R1和R2一起形成吡咯烷或哌啶；以及
(b)R1和R2是甲基；
R3是选自以下的稠合双环：
(a)稠合5,6双环杂环，任选地被一个或多个C1-C6烷基(甲基)取代；
(b)稠合6,5双环杂环，任选地被一个或多个下列基团取代：C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C3-C8碳环、C1-C6氧杂烷基、C1-C6烷氧基、氧代、卤素、杂环和NHR4，其中R4选自C1-C6烷基和C1-C6氧杂烷基；以及
(c)稠合6,6双环杂环，任选地被一个或多个下列基团取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、卤素、氧代和NHR5，其中R5选自氢和C1-C6烷基。
17.根据权利要求16所述的化合物，该化合物具有式II：
其中R1、R2和R3如上文对于式I所定义。
18.根据权利要求17所述的化合物，该化合物具有式IIa、IIb或IIc：
其中R3如上文对于式I所定义。
19.根据权利要求18所述的化合物，其中R3是选自以下的稠合6,5双环杂环
任选地被一个或多个选自由以下组成的组的R6取代：C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C3-C8碳环、C1-C6氧杂烷基、C1-C6烷氧基、氧代、卤素、杂环和NHR4，其中R4选自C1-C6烷基和C1-C6氧杂烷基。
20.根据权利要求18所述的化合物，其中R3是选自以下的稠合6,6双环杂环
任选地被一个或多个R6取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、卤素、氧代和NHR5，其中R5选自氢和C1-C6烷基。
21.根据权利要求16所述的化合物，该化合物具有式III：
其中R1、R2和R3如上文对于式I所定义。
22.根据权利要求16所述的化合物，该化合物具有式IV：
其中R1、R2和R3如上文对于式I所定义。
23.根据权利要求16所述的化合物，该化合物具有式V：
其中R1、R2和R3如上文对于式I所定义。
24.根据权利要求16所述的化合物，该化合物具有式VI
其中R1、R2和R3如上文对于式I所定义。
25.一种药物组合物，该药物组合物包含根据权利要求16-24中任一项所述的化合物以及一种或多种药学上可接受的载剂。
26.根据权利要求25所述的药物组合物，该药物组合物进一步包含一种或多种治疗剂。
27.根据权利要求26所述的药物组合物，其中该一种或多种治疗剂选自由以下组成的组：Bcl-2抑制剂、细胞周期蛋白依赖性激酶4和6(CDK 4/6抑制剂)、DNA甲基转移酶抑制剂、组蛋白脱乙酰酶(HDAC)抑制剂、mTOR抑制剂、突变异柠檬酸脱氢酶(IDH1和IDH2)抑制剂、糖皮质激素、表观遗传调节剂和化学治疗剂。
28.一种治疗急性白血病的方法，该方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的根据权利要求16-24中任一项所述的化合物或根据权利要求25-27所述的药物组合物。
29.根据权利要求28所述的方法，其中该急性白血病是急性淋巴细胞白血病(ALL)。
30.根据权利要求28所述的方法，其中该急性白血病是急性髓细胞性白血病(AML)。
31.根据权利要求30所述的方法，其中该AML是选自由以下组成的组的亚型：急性髓系白血病极小分化型(MO)、急性髓系白血病未成熟型(M1)、急性髓系白血病成熟型(M2)、急性髓系白血病成熟型伴t(8；21)、急性早幼粒细胞白血病(M3)、超颗粒型、微粒型、急性粒单核细胞白血病(M4)、急性粒单核细胞白血病伴骨髓嗜酸性粒细胞增多(M4E0)、急性单核细胞白血病(M5)、急性原始单核细胞白血病(M5a)、急性单核细胞白血病成熟型(M5b)、红白血病红系/髓系(M6a)、纯红系恶性肿瘤(M6b)、急性巨核细胞白血病(M7)、与t(1；22)相关的急性巨核细胞白血病、急性嗜碱性粒细胞白血病、急性骨髓纤维化(急性脊髓发育不良伴骨髓纤维化)、唐氏综合征中的急性白血病和暂时性骨髓增生性病症、低细胞急性髓系白血病和髓系肉瘤。
32.根据权利要求28所述的方法，其中该至少一种化合物是口服施用的。
33.根据权利要求28所述的方法，其中该至少一种化合物每天施用一至四次。
CN202280049574.0A 2021-05-13 2022-05-10 Enl/af9 yeats的c连接抑制剂 Pending CN117858877A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US202163188426P 2021-05-13 2021-05-13
US63/188,426 2021-05-13
PCT/US2022/028516 WO2022240830A1 (en) 2021-05-13 2022-05-10 C-linked inhibitors of enl/af9 yeats

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN117858877A true CN117858877A (zh) 2024-04-09

Family

ID=84028826

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202280049574.0A Pending CN117858877A (zh) 2021-05-13 2022-05-10 Enl/af9 yeats的c连接抑制剂

Country Status (10)

Country Link
EP (1) EP4337662A1 (zh)
JP (1) JP2024518824A (zh)
KR (1) KR20240047955A (zh)
CN (1) CN117858877A (zh)
AU (1) AU2022272294A1 (zh)
BR (1) BR112023023578A2 (zh)
CA (1) CA3218317A1 (zh)
CO (1) CO2023017195A2 (zh)
IL (1) IL308430A (zh)
WO (1) WO2022240830A1 (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2024054749A2 (en) * 2022-09-08 2024-03-14 Bridge Medicines Inhibitors of enl/af9 yeats and flt3

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102781914B (zh) * 2010-01-06 2014-09-17 武田药品工业株式会社 吲哚衍生物
EP2818472A1 (en) * 2013-06-27 2014-12-31 Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Imidazo[4,5-c]pyridine and pyrrolo[3,2-c]pyridine compounds as G-protein-coupled receptor kinase 5 (GRK5) modulators
WO2021021904A1 (en) * 2019-07-30 2021-02-04 The Scripps Research Institute Pharmacological inhibitors of the enl yeats domain
KR102085692B1 (ko) * 2019-08-13 2020-03-06 한양대학교 에리카산학협력단 Flt3 저해 활성을 갖는 신규한 이미다졸 유도체 및 이의 용도

Also Published As

Publication number Publication date
AU2022272294A1 (en) 2023-11-30
CA3218317A1 (en) 2022-11-17
KR20240047955A (ko) 2024-04-12
IL308430A (en) 2024-01-01
JP2024518824A (ja) 2024-05-07
BR112023023578A2 (pt) 2024-03-12
CO2023017195A2 (es) 2024-03-18
WO2022240830A1 (en) 2022-11-17
EP4337662A1 (en) 2024-03-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11229631B2 (en) Thiazolecarboxamides and pyridinecarboxamide compounds useful as Pim kinase inhibitors
US10946014B2 (en) Certain triazolopyridines and triazolopyrazines, compositions thereof and methods of use therefor
CN109721620B (zh) Hpk1抑制剂及其用途
CN110573501B (zh) Rho相关蛋白激酶抑制剂、包含其的药物组合物及其制备方法和用途
EP2943485B1 (en) Bicyclic aromatic carboxamide compounds useful as pim kinase inhibitors
CN106928219B (zh) 含氮稠杂环化合物、制备方法、中间体、组合物和应用
WO2012135631A1 (en) Substituted 5-(pyrazin-2-yl)-1h-pyrazolo [3, 4-b] pyridine and pyrazolo [3, 4-b] pyridine derivatives as protein kinase inhibitors
CA3219925A1 (en) Allosteric chromenone inhibitors of phosphoinositide 3-kinase (pi3k) for the treatment of cancer
KR20220051226A (ko) 아자헤테로아릴 화합물 및 이의 용도
CN117858877A (zh) Enl/af9 yeats的c连接抑制剂
IL298397A (en) Competitive and noncompetitive inhibitors of the muscarinic acetylcholine m5 receptor
WO2024109660A1 (zh) Cdk抑制剂
WO2024054749A2 (en) Inhibitors of enl/af9 yeats and flt3
EP4358954A1 (en) Cdk2 inhibitors and methods of using the same

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination