CN117838439A - 一种可检测经血中hpv病毒的取样卫生巾及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种可检测经血中HPV病毒的取样卫生巾，包括面层、底膜、吸收芯体和生物膜层，所述吸收芯体粘合在底膜上，所述生物膜层设置在面层和吸收芯体之间。本发明的取样卫生巾，能收集随月经血一起排出体外的脱落细胞，包括来自宫腔、宫颈、阴道穹窿和阴道的脱落细胞，适用于女性生殖道疾病相关的病原体检测，特别是检测HPV病毒的感染，为宫颈癌的早期筛查提供辅助诊断的依据，具有广阔的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及女性卫生用品技术领域，特别涉及一种可检测经血中HPV病毒的取样卫生巾及其应用。
背景技术
月经是女性随着卵巢激素的变化，而引起的子宫内膜周期性脱落并伴随子宫内膜层血管破裂的周期性出血，是女性生殖功能成熟的标志。月经血中除血液外，还含有子宫内膜碎片、宫颈黏液及脱落的宫颈上皮细胞。
月经血是女性一个特殊的检测标本，利用月经血进行生殖道疾病相关病原体检测,对生殖道疾病的早期筛查和诊断具有重要意义。但是，目前临床上还没有采集月经血的理想用品，不利于临床检测和推广应用。
卫生巾是女性月经期间使用的物品。其中，卫生巾一般包括面层、底膜，和位于面层与底膜之间的吸收芯体。面层是直接与肌肤接触的部分，其材质需要柔软，面层表面的织法和压痕起到经血吸收不回渗的效果。吸收芯体主要是由棉、不织布、纸浆或这些材质复合物制成的吸收芯，帮助卫生巾本体吸收血液。卫生巾的底膜是不透水材质，可将经血保留在吸收芯体中,防止血液泄露污染衣物。
目前市场上的卫生巾产品多以舒适、大容量、防测漏等为设计目的，其用途仅为女性卫生用品，使用完通常作为生活垃圾直接丢弃，目前尚无可应用于临床检测的具有取样功能的卫生巾产品。
发明内容
本发明要解决目前尚无可用于临床检测的取样卫生巾产品的技术问题，提供了一种可检测经血中HPV病毒的取样卫生巾，该卫生巾能收集随月经血一起排出体外的脱落细胞，包括来自宫腔、宫颈、阴道穹隆和阴道的脱落细胞，适用于生殖道疾病相关病原体的检测，特别是检测人乳头瘤病毒(HPV病毒)。
为了解决上述技术问题，本发明通过如下技术方案实现:
在本发明的一个方面，提供了一种可检测经血中HPV病毒的取样卫生巾，该取样卫生巾包括面层、底膜、吸收芯体、和生物膜层，所述吸收芯体粘合在底膜上，所述生物膜层设置在面层和吸收芯体之间。
优选的，所述生物膜层包含过滤膜，该过滤膜的材料包括：聚醚砜(PES)、聚偏二氟乙烯(PVDF)、或尼龙。这些膜材料具有低蛋白质结合特性和广泛的化学相容性。在医疗中的应用主要包括生物制品除菌过滤、缓冲液、培养液除菌过滤、抗生素溶液、生理盐水等液体药剂的除菌过滤等。
本发明的过滤膜可以设置不同孔径尺寸，以实现有效过滤并收集经血中的细胞及潜在病原体。例如，宫颈鳞状上皮细胞一般直径10-60μm；病毒直径一般在0.02-0.4μm之间(病毒颗粒一般是与所感染的细胞共同存在),细菌的直径在0.2-50μm之间，支原体、衣原体的直径一般为0.2-0.3μm之间。优选的，所述过滤膜的孔径为0.02～10μm。根据滤膜孔径大小的设置，可以有效过滤病原体。0.45μm孔径的过滤膜可有效过滤细菌，0.22μm孔径的过滤膜可过滤病毒，0.1μm孔径的过滤膜可过滤支原体。
优选的，所述面层外侧设有一圈凸起挡条，用于防侧漏，该凸起档条采用疏水透气材料制成。
优选的，所述取样卫生巾在面层上设置有开口和点断线，便于使用者从开口处沿着点断线撕开面层，取出生物膜层。
所述取样卫生巾在底膜表面附有压敏胶带，该压敏胶带表面粘贴有离型纸，使用本发明的取样卫生巾时，可将离型纸撕去，用底膜上的压敏胶带固定在衣物上。
所述取样卫生巾还包含侧翼，该侧翼是面层和底膜共同向外延伸的部分，所述侧翼的底面附有压敏胶带，该压敏胶带表面粘贴有离型纸，帮助固定卫生巾与衣物的相对位置，使卫生巾在使用过程中不易移动，也使得皮肤不直接与卫生巾边缘接触，增加舒适感。
所述取样卫生巾的使用方法包括以下步骤：待测者在月经期间采用所述取样卫生巾收集经血细胞，再从开口处撕开面层，取出生物膜层，然后将该生物膜层放入含细胞保存液的保存管中，用于HPV病毒的检测。
优选的，所述HPV病毒的检测包括以下步骤：离心收集经血细胞；提取经血细胞的总核酸，采用实时荧光定量PCR检测HPV病毒，所述检测HPV病毒的实时荧光定量PCR引物包括下述任意一对或两对以上的组合：SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2，SEQ ID NO：3和SEQ IDNO：4，SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6，SEQ ID NO：7和SEQ ID NO：8，SEQ ID NO：9和SEQ IDNO：10，SEQ ID NO：11和SEQ ID NO：12，SEQ ID NO：13和SEQ ID NO：14，SEQ ID NO：15和SEQID NO：16，SEQ ID NO：17和SEQ ID NO：18，SEQ ID NO：19和SEQ ID NO：20，SEQ ID NO：21和SEQ ID NO：22，SEQ ID NO：23和SEQ ID NO：24，SEQ ID NO：25和SEQ ID NO：26，SEQ ID NO：27和SEQ ID NO：28，SEQ ID NO：29和SEQ ID NO：30。
在本发明的另一方面，还提供了上述卫生巾的应用，用于制备检测分析女性生殖道疾病相关病原体的产品，所述生殖道疾病相关病原体包括细菌、病毒、霉菌及滴虫，其中病毒主要是HPV病毒。
本发明的取样卫生巾，可方便无创性地收集女性月经血中的脱落细胞及生殖道疾病相关病原体，使用者本人只需沿开口和点断线撕开卫生巾面层，即可便捷地取出生物膜，将其放入相应保存管中，送到指定医疗机构进行相关的病原学检测。经核酸提取后，进行病原体特征基因核酸检测和分析，可用于女性生殖道相关疾病早期筛查或诊断，为宫颈癌的筛查提供辅助诊断依据，具有广阔的应用前景。
附图说明
图1是本发明取样卫生巾的正面结构示意图；
图2是本发明取样卫生巾的剖视结构示意图；
图3是本发明取样卫生巾采集样品示意图；
图4是本发明取样卫生巾生物膜层放入细胞保存管中的示意图；
图5是从生物膜层收集的经血中提取总DNA的电泳图。
图1-3中的附图标记：
1、面层；2、底膜；3、吸收芯体；4、生物膜层；5、凸起挡条；6、开口；7、点断线；8、压敏胶带；9、离型纸；10、侧翼。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。
如图1、2、3所示，本发明一种可检测经血中HPV病毒的取样卫生巾，包括面层1、底膜2和位于面层1与底膜2之间的吸收芯体3，所述面层1和吸收芯体3之间还设有生物膜层4。所述生物膜层4优选为除菌的过滤膜。所述过滤膜材料，可选择聚醚砜(PES)、聚偏二氟乙烯(PVDF)或尼龙材料制成，该生物膜可以根据需求设置不同大小的孔径，用于过滤经血中的细胞及病原体。在面层1外侧沿边缘设有一圈凸起挡条5，起到防侧漏作用，该凸起档条5采用疏水透气材料制成。
本发明的一个优选实施方式中，在卫生巾面层1的表面设有开口6和点断线7，便于使用者本人从开口6处沿点断线7撕开面层1(见图3)，取出表面留存有脱落细胞、阴道分泌物等的生物膜层4，该生物膜上留存有可能含有HPV病原体的经血有形成分，将该生物膜放入含细胞保存液的保存管中(见图4)，送到医疗机构进行相关生殖道疾病的病原学检测，为医生诊断疾病提供参考数据。
本发明的另一个优选实施方式中，取样卫生巾在底膜2表面附有压敏胶带8，该压敏胶带8表面粘贴有离型纸9，使用者在使用取样卫生巾时，可将离型纸9撕去，用底膜2上的压敏胶带8固定在衣物上。取样卫生巾还包含侧翼10，侧翼10是面层1和底膜2共同向外延伸的部分，侧翼10的底面附有压敏胶带8，该压敏胶带8表面粘贴有离型纸9。侧翼10可以帮助固定取样卫生巾与衣物的相对位置，使取样卫生巾在使用过程中不易移动，也使得皮肤不直接与取样卫生巾边缘接触，增加舒适感。
实施例1成功从生物膜层收集的经血中提取总DNA
使用本发明的取样卫生巾收集10例使用者的经血中的脱落细胞，并将生物膜层放入含细胞保存液(深圳亚能生物技术有限公司)的细胞保存管中，经过震荡和离心，成功收集到肉眼可见的细胞沉淀。对细胞沉淀进一步利用DP340柱式提取试剂盒(天根生化科技(北京)有限公司)，提取样本中的总DNA。并使用Biorad电泳仪，2％琼脂糖凝胶(生工生物工程(上海)股份有限公司)进行核酸电泳，证明本发明的生物膜层可以成功收集经血中的脱落细胞，并可以进一步地从经血脱落细胞中提取到DNA。DNA电泳结果见图5。图中1-10的数字表示10位使用者的编号。在本实验中，影响DNA电泳条带清晰度的一个主要原因是使用者使用本发明的取样卫生巾后是否及时将留存有经血细胞的生物膜层取出，放入细胞保存液中妥善保存。如使用者3、6、9、10为及时生物膜层收集，DNA条带清晰，无拖尾；使用者1、2、5、8为排出月经血后1小时左右完成生物膜层收集，DNA条带清晰，但有拖尾；使用者4、7为排出月经血后2小时左右完成生物膜层收集，DNA条带较清晰，但有明显拖尾。
实施例2利用qPCR核酸检测技术检测经血中的HPV感染情况
选择10例就诊于妇科门诊，且TCT结果异常和(或)HPV结果阳性的女性患者，发放取样卫生巾和含细胞保存液试管，并告知使用方法。月经期中收集至少一次经血细胞，并按要求将生物膜层放入专用保存管中送到医院。检测人员经过离心收集脱落细胞，使用DP340柱式提取试剂盒(天根生化科技(北京)有限公司)提取总核酸，并利用实时荧光定量PCR(qPCR)核酸检测技术，对15种常见HPV型别进行检测和分析，qPCR仪为Roche LC96，所使用的HPV PCR引物见表1。15种常见HPV分别是HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68。qPCR检测结果见表2，结果显示利用本发明的取样卫生巾可成功检测到HPV病毒感染情况。
表1检测HPV病毒感染的qPCR引物信息
表2利用本发明的取样卫生巾检测HPV病毒感染
| 使用者编号 | 检测技术 | HPV检测结果 | 临床HPV结果 |
| 病人1 | qPCR | 16+ | 16+ |
| 病人2 | qPCR | 16+/45+ | 16+/45+ |
| 病人3 | qPCR | 16+/33+ | 16+/33+ |
| 病人4 | qPCR | 阴性 | 阴性 |
| 病人5 | qPCR | 阴性 | 阴性 |
| 病人6 | qPCR | 阴性 | 阴性 |
| 病人7 | qPCR | 52+/59+ | 52+/59+ |
| 病人8 | qPCR | 阴性 | 阴性 |
| 病人9 | qPCR | HPV16/58+ | HPV16/58+ |
| 病人10 | qPCR | 阴性 | 阴性 |
以上所述的几种实施方式较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (10)
1.一种可检测经血中HPV病毒的取样卫生巾，该取样卫生巾包括面层(1)、底膜(2)、吸收芯体(3)、和生物膜层(4)，所述吸收芯体(3)粘合在底膜(2)上，所述生物膜层(4)设置在面层(1)和吸收芯体(3)之间。
2.根据权利要求1所述的取样卫生巾，其特征在于，所述生物膜层包含过滤膜，该过滤膜的材料包括：聚醚砜、聚偏二氟乙烯、或尼龙。
3.根据权利要求2所述的取样卫生巾，其特征在于，所述过滤膜的孔径为0.02～10μm。
4.根据权利要求1所述的取样卫生巾，其特征在于，所述面层(1)外侧设有一圈凸起挡条(5)，用于防侧漏，该凸起档条(5)采用疏水透气材料制成。
5.根据权利要求1所述的取样卫生巾，其特征在于，所述取样卫生巾在面层(1)上设置有开口(6)和点断线(7)，用于从开口(6)处撕开面层(1)，取出生物膜层(4)。
6.根据权利要求1所述的取样卫生巾，其特征在于，所述取样卫生巾在底膜(2)表面附有压敏胶带(8)，该压敏胶带(8)表面粘贴有离型纸(9)。
7.根据权利要求1所述的取样卫生巾，其特征在于，所述取样卫生巾还包含侧翼(10)，该侧翼(10)是面层(1)和底膜(2)共同向外延伸的部分，所述侧翼(10)的底面附有压敏胶带(8)，该压敏胶带(8)表面粘贴有离型纸(9)。
8.根据权利要求1所述的取样卫生巾，其特征在于，所述取样卫生巾的使用方法包括以下步骤：待测者在月经期间采用所述取样卫生巾收集经血细胞，再从开口(6)处撕开面层(1)，取出生物膜层(4)，然后将该生物膜层放入含细胞保存液的保存管中，用于HPV病毒的检测。
9.根据权利要求8所述的取样卫生巾，其特征在于，所述HPV病毒的检测包括以下步骤：离心收集经血细胞；提取经血细胞的总核酸，采用实时荧光定量PCR检测HPV病毒，所述检测HPV病毒的实时荧光定量PCR引物包括下述任意一对或两对以上的组合：SEQ ID NO：1和SEQID NO：2，SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4，SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6，SEQ ID NO：7和SEQ IDNO：8，SEQ ID NO：9和SEQ ID NO：10，SEQ ID NO：11和SEQ ID NO：12，SEQ ID NO：13和SEQID NO：14，SEQ ID NO：15和SEQ ID NO：16，SEQ ID NO：17和SEQ ID NO：18，SEQ ID NO：19和SEQ ID NO：20，SEQ ID NO：21和SEQ ID NO：22，SEQ ID NO：23和SEQ ID NO：24，SEQ ID NO：25和SEQ ID NO：26，SEQ ID NO：27和SEQ ID NO：28，SEQ ID NO：29和SEQ ID NO：30。
10.权利要求1所述取样卫生巾的应用，用于制备检测分析女性生殖道疾病相关病原体的产品，所述生殖道疾病相关病原体包括HPV病毒。
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| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202311814349.4A Pending CN117838439A (zh) | 2023-12-27 | 2023-12-27 | 一种可检测经血中hpv病毒的取样卫生巾及其应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN117838439A (zh) |
-
2023
- 2023-12-27 CN CN202311814349.4A patent/CN117838439A/zh active Pending
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication |