CN117835983A

CN117835983A - 组合药物

Info

Publication number: CN117835983A
Application number: CN202280056164.9A
Authority: CN
Inventors: 曾根正行; 松山弘典; 田鹤圭亮; 小久江洋辅; 赤岭宽树; 周藤俊树
Original assignee: Otsuka Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Otsuka Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2021-08-20
Filing date: 2022-08-19
Publication date: 2024-04-05
Also published as: KR20240051172A; JPWO2023022235A1; WO2023022235A1; IL310867A; AU2022329514A1; TW202322822A; CA3229750A1

Abstract

本发明公开了将含有托利那泮系药剂的药物组合物与含有以表达嵌合抗原受体或重组T细胞受体的方式进行了改造的免疫细胞的药物组合物组合给药。

Description

组合药物

技术领域

本发明公开了含有下述式(1)所示的化合物(托利那泮(Tolinapant)，IUPAC名：1-[6-[(4-氟苯基)甲基]-5-(羟甲基)-3,3-二甲基-2H-吡咯并[3,2-b]吡啶-1-基]-2-[(2R,5R)-5-甲基-2-[[(3R)-3-甲基吗啉-4-基]甲基]哌嗪-1-基]乙酮)、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物(以下称为“托利那泮系药剂”)、或者改造免疫细胞的药物组合物以及与这些有关的主题。

背景技术

凋亡抑制蛋白(IAP)在多种恶性肿瘤中过度表达，参与肿瘤增殖等。IAP家族含有8个成员，即XIAP、cIAP1、cIAP2、NAIP、ILP2、ML-IAP、存活蛋白(survivin)和BRUCE。IAP家族的成员均具有1～3个拷贝的被称为杆状病毒IAP重复序列(BIR)结构域的、由约70个氨基酸构成的锌配位结构域。BIR结构域具有与胱天蛋白酶3、7、9等胱天蛋白酶结合而抑制凋亡的作用。

IAP拮抗剂可通过抑制胱天蛋白酶对BIR结构域的结合、诱导凋亡来治疗肿瘤。作为IAP拮抗剂，已知有托利那泮(ASTX660)等非肽模拟物小分子拮抗剂(例如专利文献1)和比瑞那帕、LCL161、AT406等第2线粒体来源胱天蛋白酶活化因子(SMAC)模拟物。

作为用于治疗肿瘤的其它策略，已知有使用基因改造免疫细胞的过继免疫疗法。

例如已知下述方法：向从生物体采集的T细胞中导入编码嵌合抗原受体的核酸，使得到的T细胞在体外增殖并进行输注(例如专利文献2)。第1代嵌合抗原受体由可识别肿瘤细胞的表面抗原的单链抗体、跨膜结构域和激活T细胞的TCR复合体CD3ζ的胞内信号转导结构域构成。为了增强第1代嵌合抗原受体的T细胞激活能力，开发出了连接有作为T细胞共刺激分子的CD28的胞内信号转导结构域的第2代嵌合抗原受体。进而，还开发出了串联连接有源自作为肿瘤坏死因子(TNF)受体超家族的CD137(4-1BB)或CD134(OX40)的胞内信号转导结构域的第3代嵌合抗原受体。

另外还已知下述方法：向从生物体采集的T细胞中导入编码可识别特定抗原的T细胞受体的核酸，使得到的T细胞在体外增殖并进行输注。作为编码T细胞受体的核酸，已知有例如以gp100、MART-1、CEA、MAGE-A4、WT1、NY-ESO-1等肿瘤抗原为靶标的TCR基因。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：国际公开第2015/092420号

专利文献2：国际公开第1993/019163号

发明内容

发明所要解决的问题

本发明的课题之一是改善基因改造免疫疗法的治疗效果。

用于解决问题的方法

为了解决上述课题进行了深入研究，结果发现，通过将含有托利那泮系药剂的药物组合物与改造免疫细胞组合给药或者将含有改造免疫细胞的药物组合物与托利那泮系药剂组合给药，效力显著增大，发挥出协同效应。

代表性地，本发明包括下述方式。

项1.

一种药物组合物(或者，药剂、药物或IAP抑制剂)，其含有下述式(1)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物，所述药物组合物(或者，药剂、药物或IAP抑制剂)与以表达嵌合抗原受体或重组T细胞受体的方式进行了改造的免疫细胞组合给药。

项1a.

根据项1所述的药物组合物(或者，药剂、药物或IAP抑制剂)，其在上述免疫细胞给药前、给药的同时或给药后给药。

项2.

一种药物组合物，其含有以表达嵌合抗原受体或重组T细胞受体的方式进行了改造的免疫细胞，所述药物组合物与下述式(1)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物组合给药。

项2a.

根据项2所述的药物组合物，其在上述式(1)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物给药前、给药的同时或给药后给药。

项3.

根据项1或2或者项1a或2a所述的药物组合物，其中，上述嵌合抗原受体或重组T细胞受体特异性地识别选自CD19、整联蛋白β7和NY-ESO-1中的抗原。

项4.

根据项1或2或者项1a或2a所述的药物组合物，其中，上述嵌合抗原受体或重组T细胞受体特异性地识别活性型整联蛋白β7。

项5.

根据项1～4、1a和2a中任一项所述的药物组合物，其中，上述免疫细胞为以表达嵌合抗原受体的方式进行了改造的T细胞或NK细胞，上述嵌合抗原受体含有：

(1)能识别抗原的胞外域、

(2)跨膜结构域、

(3)共刺激分子的胞内信号转导结构域、和

(4)CD3ζ的胞内信号转导结构域。

项6.

根据项5所述的药物组合物，其中，上述胞外域为能识别CD19或整联蛋白β7的胞外域。

项7.

根据项5或6所述的药物组合物，其中，上述跨膜结构域为CD28或CD8的跨膜结构域。

项8.

根据项5～7中任一项所述的药物组合物，其中，上述共刺激分子为CD2、CD4、CD5、CD8α、CD8β、CD28、CD134(OX40)、CD137(4-1BB)或CD278(ICOS)。

项9.

根据项1或2或者项1a或2a所述的药物组合物，其中，上述免疫细胞为以表达重组T细胞受体的方式进行了改造的T细胞或NK细胞，上述重组T细胞受体具有能识别NY-ESO-1的可变结构域。

项10.

根据项1或2或者项1a或2a所述的药物组合物，其中，上述免疫细胞为以表达特异性地识别CD19的嵌合抗原受体的方式进行了改造的T细胞、以表达特异性地识别整联蛋白β7的嵌合抗原受体的方式进行了改造的T细胞、以表达特异性地识别CD19的嵌合抗原受体的方式进行了改造的NK细胞或者以表达特异性地识别NY-ESO-1的重组T细胞受体的方式进行了改造的T细胞。

项11.

根据项1～10、1a和2a中任一项所述的药物组合物，其用于预防和/或治疗癌症。

项12.

根据项1～11、1a和2a中任一项所述的药物组合物，其中，上述式(1)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物以10mg～180mg/天进行给药。

项12a.

根据项1～11、1a和2a中任一项所述的药物组合物，其中，上述式(1)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物以少于单独给药时的给药量的量或者单独时无效的量进行给药。

项13.

根据项1～12、1a、2a和12a中任一项所述的药物组合物，其中，上述免疫细胞以1×10³个～1×10⁸个(活细胞数)/kg体重/天进行给药。

项13a.

根据项1～12、1a、2a和12a中任一项所述的药物组合物，其中，上述免疫细胞以少于单独给药时的给药量的量或者单独时无效的量进行给药。

项14.

一种试剂盒，其具备含有下述式(1)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物的第一剂以及含有以表达嵌合抗原受体或重组T细胞受体的方式进行了改造的免疫细胞的第二剂。

项14a.

根据项14所述的试剂盒，其中，上述第一剂和第二剂处于同一制剂中并且同时给药，或者，上述第一剂和第二剂处于不同制剂中并且同时分别地给药或连续地给药。

项14b.

根据项14或14a所述的试剂盒，其中，上述嵌合抗原受体或重组T细胞受体特异性地识别选自CD19、整联蛋白β7和NY-ESO-1中的抗原。

项14c.

根据项14或14a所述的试剂盒，其中，上述嵌合抗原受体或重组T细胞受体特异性地识别活性型整联蛋白β7。

项14d.

根据项14和14a～14c中任一项所述的试剂盒，其中，上述免疫细胞为以表达嵌合抗原受体的方式进行了改造的T细胞或NK细胞，上述嵌合抗原受体含有：

(1)能识别抗原的胞外域、

(2)跨膜结构域、

(3)共刺激分子的胞内信号转导结构域、和

(4)CD3ζ的胞内信号转导结构域。

项14e.

根据项14d所述的试剂盒，其中，上述胞外域为能识别CD19或整联蛋白β7的胞外域。

项14f.

根据项14d或14e所述的试剂盒，其中，上述跨膜结构域为CD28或CD8的跨膜结构域。

项14g.

根据项14d～14f中任一项所述的试剂盒，其中，上述共刺激分子为CD2、CD4、CD5、CD8α、CD8β、CD28、CD134(OX40)、CD137(4-1BB)或CD278(ICOS)。

项14h.

根据项14或14a所述的试剂盒，其中，上述免疫细胞为以表达重组T细胞受体的方式进行了改造的T细胞或NK细胞，上述重组T细胞受体具有能识别NY-ESO-1的可变结构域。

项14i.

根据项14或14a所述的试剂盒，其中，上述免疫细胞为以表达特异性地识别CD19的嵌合抗原受体的方式进行了改造的T细胞、以表达特异性地识别整联蛋白β7的嵌合抗原受体的方式进行了改造的T细胞、以表达特异性地识别CD19的嵌合抗原受体的方式进行了改造的NK细胞或者以表达特异性地识别NY-ESO-1的重组T细胞受体的方式进行了改造的T细胞。

项14j.

根据项14和14a～14i中任一项所述的试剂盒，其用于预防和/或治疗癌症。

项14k.

根据项14和14a～14j中任一项所述的试剂盒，其中，上述式(1)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物以10mg～180mg/天、少于单独给药时的给药量的量或者单独时无效的量进行给药。

项14L.

根据项14和14a～14k中任一项所述的试剂盒，其中，上述免疫细胞以1×10³个～1×10⁸个(活细胞数)/kg体重/天、少于单独给药时的给药量的量或者单独时无效的量进行给药。

项15.

一种预防和/或治疗癌症的方法，其包括下述步骤：

将下述式(1)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物与以表达嵌合抗原受体或重组T细胞受体的方式进行了改造的免疫细胞组合给药于需要预防和/或治疗癌症的对象。

项15a.

根据项15所述的方法，其中，上述给药是在上述免疫细胞给药前、给药的同时或给药后给药上述式(1)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物。

项15b.

根据项15或15a所述的方法，其中，上述嵌合抗原受体或重组T细胞受体特异性地识别选自CD19、整联蛋白β7和NY-ESO-1中的抗原。

项15c.

根据项15或15a所述的方法，其中，上述嵌合抗原受体或重组T细胞受体特异性地识别活性型整联蛋白β7。

项15d.

根据项15和15a～15c中任一项所述的方法，其中，上述免疫细胞为以表达嵌合抗原受体的方式进行了改造的T细胞或NK细胞，上述嵌合抗原受体含有：

(1)能识别抗原的胞外域、

(2)跨膜结构域、

(3)共刺激分子的胞内信号转导结构域、和

(4)CD3ζ的胞内信号转导结构域。

项15e.

根据项15d所述的方法，其中，上述胞外域为能识别CD19或整联蛋白β7的胞外域。

项15f.

根据项15d或15e所述的方法，其中，上述跨膜结构域为CD28或CD8的跨膜结构域。

项15g.

根据项15d～15f中任一项所述的方法，其中，上述共刺激分子为CD2、CD4、CD5、CD8α、CD8β、CD28、CD134(OX40)、CD137(4-1BB)或CD278(ICOS)。

项15h.

根据项15或15a所述的方法，其中，上述免疫细胞为以表达重组T细胞受体的方式进行了改造的T细胞或NK细胞，上述重组T细胞受体具有能识别NY-ESO-1的可变结构域。

项15i.

根据项15或15a所述的方法，其中，上述免疫细胞为以表达特异性地识别CD19的嵌合抗原受体的方式进行了改造的T细胞、以表达特异性地识别整联蛋白β7的嵌合抗原受体的方式进行了改造的T细胞、以表达特异性地识别CD19的嵌合抗原受体的方式进行了改造的NK细胞或者以表达特异性地识别NY-ESO-1的重组T细胞受体的方式进行了改造的T细胞。

项15j.

根据项15和15a～15i中任一项所述的方法，其中，以10mg～180mg/天、少于单独给药时的给药量的量或者单独时无效的量来给药上述式(1)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物。

项15k.

根据项15和15a～15j中任一项所述的方法，其中，以1×10³个～1×10⁸个(活细胞数)/kg体重/天、少于单独给药时的给药量的量或者单独时无效的量来给药上述免疫细胞。

项16.

下述式(1)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物在制备用于与以表达嵌合抗原受体或重组T细胞受体的方式进行了改造的免疫细胞组合给药的药物中的应用。

项16a.

根据项16所述的应用，其中，上述药物为用于在上述免疫细胞给药前、给药的同时或给药后给药的药物。

项16b.

根据项16或16a所述的应用，其中，上述嵌合抗原受体或重组T细胞受体特异性地识别选自CD19、整联蛋白β7和NY-ESO-1中的抗原。

项16c.

根据项16或16a所述的应用，其中，上述嵌合抗原受体或重组T细胞受体特异性地识别活性型整联蛋白β7。

项16d.

根据项16和16a～16c中任一项所述的应用，其中，上述免疫细胞为以表达嵌合抗原受体的方式进行了改造的T细胞或NK细胞，上述嵌合抗原受体含有：

(1)能识别抗原的胞外域、

(2)跨膜结构域、

(3)共刺激分子的胞内信号转导结构域、和

(4)CD3ζ的胞内信号转导结构域。

项16e.

根据项16d所述的应用，其中，上述胞外域为能识别CD19或整联蛋白β7的胞外域。

项16f.

根据项16d或16e所述的应用，其中，上述跨膜结构域为CD28或CD8的跨膜结构域。

项16g.

根据项16d～16f中任一项所述的应用，其中，上述共刺激分子为CD2、CD4、CD5、CD8α、CD8β、CD28、CD134(OX40)、CD137(4-1BB)或CD278(ICOS)。

项16h.

根据项16或16a所述的应用，其中，上述免疫细胞为以表达重组T细胞受体的方式进行了改造的T细胞或NK细胞，上述重组T细胞受体具有能识别NY-ESO-1的可变结构域。

项16i.

根据项16或16a所述的应用，其中，上述免疫细胞为以表达特异性地识别CD19的嵌合抗原受体的方式进行了改造的T细胞、以表达特异性地识别整联蛋白β7的嵌合抗原受体的方式进行了改造的T细胞、以表达特异性地识别CD19的嵌合抗原受体的方式进行了改造的NK细胞或者以表达特异性地识别NY-ESO-1的重组T细胞受体的方式进行了改造的T细胞。

项16j.

根据项16和16a～16i中任一项所述的应用，其中，上述药物为用于预防和/或治疗癌症的药物。

项16k.

根据项16和16a～16j中任一项所述的应用，其中，上述药物为用于以10mg～180mg/天、少于单独给药时的给药量的量或者单独时无效的量来给药上述式(1)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物的药物。

项16L.

根据项16和16a～16k中任一项所述的应用，其中，上述药物为用于与1×10³个～1×10⁸个(活细胞数)/kg体重/天、少于单独给药时的给药量的量或者单独时无效的量的上述免疫细胞组合给药的药物。

项17.

以表达嵌合抗原受体或重组T细胞受体的方式进行了改造的免疫细胞在制备用于与下述式(1)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物组合给药的药物中的应用。

项17a.

根据项17所述的应用，其中，上述药物为用于在上述式(1)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物给药前、给药的同时或给药后给药的药物。

项17b.

根据项17或17a所述的应用，其中，上述嵌合抗原受体或重组T细胞受体特异性地识别选自CD19、整联蛋白β7和NY-ESO-1中的抗原。

项17c.

根据项17或17a所述的应用，其中，上述嵌合抗原受体或重组T细胞受体特异性地识别活性型整联蛋白β7。

项17d.

根据项17和17a～17c中任一项所述的应用，其中，上述免疫细胞为以表达嵌合抗原受体的方式进行了改造的T细胞或NK细胞，上述嵌合抗原受体含有：

(1)能识别抗原的胞外域、

(2)跨膜结构域、

(3)共刺激分子的胞内信号转导结构域、和

(4)CD3ζ的胞内信号转导结构域。

项17e.

根据项17d所述的应用，其中，上述胞外域为能识别CD19或整联蛋白β7的胞外域。

项17f.

根据项17d或17e所述的应用，其中，上述跨膜结构域为CD28或CD8的跨膜结构域。

项17g.

根据项17d～17f中任一项所述的应用，其中，上述共刺激分子为CD2、CD4、CD5、CD8α、CD8β、CD28、CD134(OX40)、CD137(4-1BB)或CD278(ICOS)。

项17h.

根据项17或17a所述的应用，其中，上述免疫细胞为以表达重组T细胞受体的方式进行了改造的T细胞或NK细胞，上述重组T细胞受体具有能识别NY-ESO-1的可变结构域。

项17i.

根据项17或17a所述的应用，其中，上述免疫细胞为以表达特异性地识别CD19的嵌合抗原受体的方式进行了改造的T细胞、以表达特异性地识别整联蛋白β7的嵌合抗原受体的方式进行了改造的T细胞、以表达特异性地识别CD19的嵌合抗原受体的方式进行了改造的NK细胞或者以表达特异性地识别NY-ESO-1的重组T细胞受体的方式进行了改造的T细胞。

项17j.

根据项17和17a～17i中任一项所述的应用，其中，上述药物为用于预防和/或治疗癌症的药物。

项17k.

根据项17和17a～17j中任一项所述的应用，其中，上述药物为用于以1×10³个～1×10⁸个(活细胞数)/kg体重/天、少于单独给药时的给药量的量或者单独时无效的量来给药上述免疫细胞的药物。

项17L.

根据项17和17a～17k中任一项所述的应用，其中，上述药物为用于与10mg～180mg/天、少于单独给药时的给药量的量或者单独时无效的量的上述式(1)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物组合给药的药物。

项18.

下述式(1)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物，其用于与以表达嵌合抗原受体或重组T细胞受体的方式进行了改造的免疫细胞组合给药。

项18a.

根据项18所述的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物，其用于在上述免疫细胞给药前、给药的同时或给药后给药。

项18b.

根据项18或18a所述的应用，其中，上述嵌合抗原受体或重组T细胞受体特异性地识别选自CD19、整联蛋白β7和NY-ESO-1中的抗原。

项18c.

根据项18或18a所述的应用，其中，上述嵌合抗原受体或重组T细胞受体特异性地识别活性型整联蛋白β7。

项18d.

根据项18和18a～18c中任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物，其中，上述免疫细胞为以表达嵌合抗原受体的方式进行了改造的T细胞或NK细胞，上述嵌合抗原受体含有：

(1)能识别抗原的胞外域、

(2)跨膜结构域、

(3)共刺激分子的胞内信号转导结构域、和

(4)CD3ζ的胞内信号转导结构域。

项18e.

根据项18d所述的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物，其中，上述胞外域为能识别CD19或整联蛋白β7的胞外域。

项18f.

根据项18d或18e所述的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物，其中，上述跨膜结构域为CD28或CD8的跨膜结构域。

项18g.

根据项18d～18f中任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物，其中，上述共刺激分子为CD2、CD4、CD5、CD8α、CD8β、CD28、CD134(OX40)、CD137(4-1BB)或CD278(ICOS)。

项18h.

根据项18或18a所述的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物，其中，上述免疫细胞为以表达重组T细胞受体的方式进行了改造的T细胞或NK细胞，上述重组T细胞受体具有能识别NY-ESO-1的可变结构域。

项18i.

根据项18或18a所述的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物，其中，上述免疫细胞为以表达特异性地识别CD19的嵌合抗原受体的方式进行了改造的T细胞、以表达特异性地识别整联蛋白β7的嵌合抗原受体的方式进行了改造的T细胞、以表达特异性地识别CD19的嵌合抗原受体的方式进行了改造的NK细胞或者以表达特异性地识别NY-ESO-1的重组T细胞受体的方式进行了改造的T细胞。

项18j.

根据项18和18a～18i中任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物，其用于预防和/或治疗癌症。

项18k.

根据项18和18a～18j中任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物，其用于以10mg～180mg/天、少于单独给药时的给药量的量或者单独时无效的量进行给药。

项18L.

根据项18和18a～18k中任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物，其用于与1×10³个～1×10⁸个(活细胞数)/kg体重/天、少于单独给药时的给药量的量或者单独时无效的量的上述免疫细胞组合给药。

项19.

以表达嵌合抗原受体或重组T细胞受体的方式进行了改造的免疫细胞，其用于与下述式(1)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物组合给药。

项19a.

根据项19所述的免疫细胞，其用于在上述式(1)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物给药前、给药的同时或给药后给药。

项19b.

根据项19或19a所述的免疫细胞，其中，上述嵌合抗原受体或重组T细胞受体特异性地识别选自CD19、整联蛋白β7和NY-ESO-1中的抗原。

项19c.

根据项19或19a所述的免疫细胞，其中，上述嵌合抗原受体或重组T细胞受体特异性地识别活性型整联蛋白β7。

项19d.

根据项19和19a～19c中任一项所述的免疫细胞，其中，以表达嵌合抗原受体的方式进行了改造的T细胞或NK细胞，上述嵌合抗原受体含有：

(1)能识别抗原的胞外域、

(2)跨膜结构域、

(3)共刺激分子的胞内信号转导结构域、和

(4)CD3ζ的胞内信号转导结构域。

项19e.

根据项19d所述的免疫细胞，其中，上述胞外域为能识别CD19或整联蛋白β7的胞外域。

项19f.

根据项19d或19e所述的免疫细胞，其中，上述跨膜结构域为CD28或CD8的跨膜结构域。

项19g.

根据项19d～19f中任一项所述的免疫细胞，其中，上述共刺激分子为CD2、CD4、CD5、CD8α、CD8β、CD28、CD134(OX40)、CD137(4-1BB)或CD278(ICOS)。

项19h.

根据项19或19a所述的免疫细胞，其中，上述免疫细胞为以表达重组T细胞受体的方式进行了改造的T细胞或NK细胞，上述重组T细胞受体具有能识别NY-ESO-1的可变结构域。

项19i.

根据项19或19i所述的免疫细胞，其中，上述免疫细胞为以表达特异性地识别CD19的嵌合抗原受体的方式进行了改造的T细胞、以表达特异性地识别整联蛋白β7的嵌合抗原受体的方式进行了改造的T细胞、以表达特异性地识别CD19的嵌合抗原受体的方式进行了改造的NK细胞或者以表达特异性地识别NY-ESO-1的重组T细胞受体的方式进行了改造的T细胞。

项19j.

根据项19和19a～19i中任一项所述的免疫细胞，其用于预防和/或治疗癌症。

项19k.

根据项19和19a～19j中任一项所述的免疫细胞，其用于以1×10³个～1×10⁸个(活细胞数)/kg体重/天、少于单独给药时的给药量的量或者单独时无效的量进行给药。

项19L.

根据项19和19a～19k中任一项所述的免疫细胞，其用于与10mg～180mg/天、少于单独给药时的给药量的量或者单独时无效的量的上述式(1)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物组合给药。

发明效果

通过本发明，能够显著地增大托利那泮系药剂或含有改造免疫细胞的药物组合物的效力。

附图说明

图1为示出比瑞那帕(Birinapant)与CD19 CAR-T的联用效果的图。

图2为示出托利那泮(Tolinapant)(该图中是指式(1)所示的化合物的(+)-L-乳酸盐)与CD19 CAR-T的联用效果的图。*表示：进行单因素模型的联用效果检验，相对于对照(托利那泮、CD19 CAR-T(1×10⁵个细胞/个体)各自)，通过托利那泮与CD19 CAR-T(1×10⁵个细胞/个体)的联用显示出显著(p<0.05)的效果。

图3为示出针对低肿瘤量的、托利那泮(该图中是指式(1)所示的化合物的(+)-L-乳酸盐)与CD19 CAR-T的联用效果的图。

图4为示出LCL161与CD19 CAR-T的联用效果的图。

图5为示出AT406与CD19 CAR-T的联用效果的图。

图6为示出给药方案的图。

图7为示出托利那泮与活性型整联蛋白β7 CAR-T的联用效果的图。

图8为示出给药方案的图。

图9为示出托利那泮与CD19 CAR-KHYG-1的联用效果的图。

图10为示出给药方案的图。

具体实施方式

A.含有托利那泮系药剂的药物组合物

本发明的含有托利那泮系药剂的药物组合物(以下称为“药物组合物A”)优选为与以表达嵌合抗原受体或重组T细胞受体的方式进行了改造的免疫细胞(可以为后述的药物组合物B的形态)组合给药的药物组合物，具体而言，优选为在上述免疫细胞给药前、给药的同时或给药后给药的药物组合物。药物组合物A典型情况下可以为IAP拮抗剂，尤其可以为XIAP、cIAP1和cIAP2的拮抗剂。托利那泮系药剂例如与其它IAP拮抗剂相比在与经改造的免疫细胞组合给药时可更迅速地发挥效力。

A-1.托利那泮系药剂

关于式(1)所示的化合物，总量的55％以上、60％以上、65％以上、70％以上、75％以上、80％以上、85％以上、90％以上、95％以上、99％以上、99.5％以上、99.9％以上或100％可以以单一的光学异构体形式存在。

式(1)所示的化合物的药学上可接受的盐优选为酸加成盐。酸加成盐可以为有机酸加成盐，也可以为无机酸加成盐。作为酸加成盐的非限定性例子，可列举乙酸、2,2-二氯乙酸、己二酸、海藻酸、抗坏血酸(例：L-抗坏血酸)、L-天冬氨酸、苯磺酸、苯甲酸、4-乙酰氨基苯甲酸、丁酸、(+)樟脑酸、樟脑磺酸、(+)-(1S)-樟脑-10-磺酸、癸酸、己酸、辛酸、肉桂酸、柠檬酸、环己基氨基磺酸、十二烷基硫酸、乙烷-1,2-二磺酸、乙磺酸、2-羟基乙磺酸、甲酸、富马酸、半乳糖二酸、龙胆酸、葡萄糖庚酸、D-葡糖酸、葡萄糖醛酸(例：D-葡萄糖醛酸)、谷氨酸(例：L-谷氨酸)、α-酮戊二酸、乙醇酸、马尿酸、氢卤酸(例：氢溴酸、盐酸、氢碘酸)、羟乙基磺酸、乳酸(例：(+)-L-乳酸、(-)-D-乳酸、(±)-DL-乳酸)、乳糖酸、马来酸、苹果酸、(-)-L-苹果酸、丙二酸、(±)-DL-苦杏仁酸、甲磺酸、萘-2-磺酸、萘-1,5-二磺酸、1-羟基-2-萘甲酸、烟酸、硝酸、油酸、乳清酸、草酸、棕榈酸、帕莫酸、磷酸、丙酸、丙酮酸、L-焦谷氨酸、水杨酸、4-氨基水杨酸、癸二酸、硬脂酸、琥珀酸、硫酸、鞣酸、(+)-L-酒石酸、硫氰酸、对甲苯磺酸、十一碳烯酸、戊酸、酰化氨基酸等。一个实施方式中，式(1)所示的化合物的药学上可接受的盐优选为乳酸盐(例如(+)-L-乳酸)、盐酸盐(包括二盐酸盐)、硫酸盐或甲磺酸盐。

作为上述药学上可接受的溶剂合物的非限定性例子，可列举水、甲醇、乙醇、异丙醇、乙酸、乙酸乙酯、乙醇胺、二甲基亚砜(DMSO)等。

A-2.其它成分

药物组合物A优选含有药学上可接受的赋形剂作为其它成分。作为药学上可接受的赋形剂，可列举例如载体(包括固体载体、半固体载体和液体载体)、辅助剂、稀释剂、填充剂或增量剂、造粒剂、包衣剂、控释剂、结合剂、崩解剂、润滑剂、保存剂、抗氧化剂、缓冲剂、抗沉淀剂、增稠剂、矫味矫臭剂、稳定剂、表面活性剂、螯合剂或其它的药物组合物所惯用的赋形剂等。药学上可接受的赋形剂可以单独使用1种，也可以组合使用2种以上。

A-3.形态

药物组合物A可以为液状制剂(例：注射剂、滴眼剂、滴鼻剂、悬浮剂)、固体制剂(例：片剂、颗粒剂、散剂)、半固体制剂(例：软膏剂、栓剂)和其它的本领域技术人员公知的制剂形态中的任一种。

A-4.给药

药物组合物A可以用于经口给药，也可以用于非经口给药。药物组合物A可以用于局部给药。药物组合物A例如可以用于眼内、耳、鼻腔内、舌下、支气管内、静脉内、肌肉内、腹腔内、直肠内、阴道内或经皮给药。药物组合物A可以用于注射。

托利那泮系药剂的给药量可以根据给药目的、给药对象和其状态等适当选择。例如，对象每1kg体重的1天给药量的下限可以为0.01mg、0.05mg、0.1mg、0.2mg、0.3mg、0.4mg、0.5mg、0.6mg、0.7mg、0.8mg、0.9mg或1mg。另外，对象每1kg体重的1天给药量的上限也与下限同样地可以适当选择，例如可以为10mg、9mg、8mg、7mg、6mg、5mg、4mg、3mg、2mg或1mg。例如，对象每1kg体重的1天给药量可以为0.01mg～5mg、0.05mg～4mg或0.1mg～3mg。1天给药量例如可以为1mg以上、5mg以上、10mg以上、20mg以上、30mg以上、40mg以上、50mg以上、60mg以上、70mg以上、80mg以上、90mg以上或100mg以上，可以为500mg以下、400mg以下、300mg以下、200mg以下、190mg以下、180mg以下、170mg以下、160mg以下、150mg以下、140mg以下、130mg以下、120mg以下、110mg以下或100mg以下。例如，1天给药量可以为1mg～300mg、5mg～200mg或10mg～180mg。需要说明的是，为托利那泮的盐、溶剂合物时，托利那泮系药剂的给药量可以为换算成托利那泮的游离体(上述式(1)所示的化合物)重量的量，也可以为盐、溶剂合物的实际重量。一个实施方式中，为托利那泮的盐、溶剂合物时，托利那泮系药剂的给药量为换算成托利那泮的游离体重量的量。可以以1天给药量达到上述范围的方式分成2次以上(例：2次或3次)进行给药，优选给药1次。托利那泮系药剂的给药量可以为少于单独给药时的给药量的量或者单独时无效的量。即使在以这样的量给药时，也能够与给药经改造的免疫细胞协同地发挥出优良的效力。

药物组合物A可以以任意的频次进行给药。例如，药物组合物A可以以1天1次、2次或3次、2天1次、3天1次、4天1次、5天1次、6天1次、1周1次、2周1次、3周1次或4周1次的频次给药。另外，药物组合物A可以以上述频次(例：1天1次)在规定时间内(例：1周、2周、3周或4周)持续给药，然后可以在规定时间内(例：1周、2周、3周或4周)中断给药，也可以反复进行给药的持续和中断的循环。例如，可以将按1天1次将药物组合物A给药7天、之后中断给药7天的循环进行1次或2次以上。

药物组合物A可以在经改造的免疫细胞给药前、例如即将给药前、给药前1分钟、给药前2分钟、给药前3分钟、给药前4分钟、给药前5分钟、给药前10分钟、给药前20分钟、给药前30分钟、给药前1小时、给药前2小时、给药前3小时、给药前4小时、给药前5小时、给药前6小时、给药前7小时、给药前8小时、给药前9小时、给药前10小时、给药前11小时、给药前12小时、给药前18小时、给药前24小时、给药前2天、给药前3天、给药前4天、给药前5天、给药前6天或给药前1周给药。药物组合物A可以与经改造的免疫细胞的给药同时进行给药。药物组合物A可以在经改造的免疫细胞给药后、例如给药后即刻、1分钟后、2分钟后、3分钟后、4分钟后、5分钟后、10分钟后、20分钟后、30分钟后、1小时后、2小时后、3小时后、4小时后、5小时后、6小时后、7小时后、8小时后、9小时后、10小时后、11小时后、12小时后、18小时后、24小时后、2天后、3天后、4天后、5天后、6天后或1周后给药。另外，药物组合物A例如可以在经改造的免疫细胞给药后且肿瘤标志物水平超过基线水平时给药。

在药物组合物A的给药与经改造的免疫细胞的给药之间或者从药物组合物A的给药后至下次的药物组合物A的给药之间，可以进行其它化学疗法(其它药剂的给药)，也可以进行非化学疗法(例：放射线疗法、光动力疗法、外科手术、饮食限制)等。作为其它药剂的非限定性例子，可列举烷基化剂、DNA甲基化抑制剂、代谢拮抗剂(例：嘧啶系代谢拮抗剂、嘌呤系代谢拮抗剂、叶酸代谢拮抗剂)等。

作为药物组合物A的给药对象，可列举例如人、狗、猫、猴、绵羊、马、牛、小鼠、大鼠等，但是不限于这些。另外，药物组合物A的给药对象可以为即将或已经给药经改造的免疫细胞的对象。药物组合物A的给药对象优选为需要预防和/或治疗IAP相关疾病、尤其是癌症的对象(或首次发病患者或复发患者)。

药物组合物A的组成、制造方法、给药方法等例如可以基于WO2015/092420(将其整体作为参照整合入说明书)的记载进行设计。

A-5.药物用途

药物组合物A只要用于可增强药物组合物B的效果(基因改造免疫疗法的治疗效果)的用途，则其用途没有特别限制。药物组合物A例如可以用于IAP相关疾病的预防和/或治疗。本说明书中，“预防”例如以包括防止复发的含义来使用，“治疗”例如以包括进展的防止或延缓、减轻、缓和和缓解的含义来使用。作为IAP相关疾病，可列举例如细胞积累相关疾病(例：癌症、自身免疫性疾病、炎症、再狭窄)、过度凋亡导致细胞损失的疾病(例：阿尔茨海默病、帕金森病、亨廷顿病、肌萎缩侧索硬化等神经退行、缺血、脑卒中、心肌梗死、心力衰竭、骨质疏松、AIDS)等。本说明书中，“癌症”以广义来表示“肿瘤”，可与“肿瘤”以相同的含义使用。IAP相关疾病优选为癌症。癌症可以为对选自XIAP、cIAP1、cIAP2、NAIP、ILP2、ML-IAP、存活蛋白和BRUCE、更具体地选自XIAP、cIAP1、cIAP2和ML-IAP、进一步具体地选自XIAP、cIAP1和cIAP2、最具体地选自XIAP中的1种以上的任一IAP拮抗作用具有敏感性的癌症。癌症可以为复发或难治性的癌症。

癌症可以为实体癌，也可以为血液癌。实体癌可以为来自上皮、来自间充质或者其它的癌症。

一个实施方式中，作为实体癌的非限定性例子，可列举：移行细胞癌；膀胱和尿路的癌；乳腺癌；胃肠道(包括食道、胃、小肠、大肠、结肠、直肠和肛门)的癌；肝癌(例：肝细胞癌、肝母细胞瘤)；胆嚢和胆道系统癌(例：胆管癌)；胰腺癌(例：转移性胰腺癌等胰腺内分泌癌、胰腺导管腺癌等胰腺外分泌癌)；肾癌(例：肾细胞癌、肾母细胞瘤)；肺癌(例：腺癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、细支气管肺泡细胞癌、间皮瘤)；头颈部的癌(例：舌、口腔、喉头、咽头、鼻咽腔、扁桃腺、唾液腺、鼻腔、鼻窦的癌、视觉器官和附属器官的癌(例：视网膜母细胞瘤))；卵巢、输卵管、腹膜、阴道、外阴、阴茎、宫颈部、子宫肌层或子宫内膜的癌；甲状腺癌(例：甲状腺髓样癌、甲状腺乳头状癌、未分化甲状腺癌、甲状腺滤泡癌)；肾上腺癌(例：肾上腺皮质癌)；前列腺癌(例：激素难治性前列腺癌)；皮肤癌(例：黑素瘤(例：3期和4期的恶性黑素瘤)、基底细胞癌、鳞状细胞癌、头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)、角化棘皮瘤、发育不良痣、蕈样肉芽肿病)等。一个实施方式中，作为实体癌的其它非限定性例子，可列举梅克尔细胞癌、转移性非小细胞癌、转移性乳腺癌、转移性大肠癌、转移性胃癌、转移性非泌尿生殖系统癌症、转移性非小细胞肺癌、转移性卵巢癌、转移性肾细胞癌、HBV感染症和相关癌症、外阴部疾病等。

一个实施方式中，作为实体癌的另一非限定性例子，可列举软组织肉瘤、骨肉瘤、纤维肉瘤、软骨肉瘤、横纹肌肉瘤、平滑肌肉瘤、脂肪肉瘤、血管肉瘤、卡波西肉瘤、尤文肉瘤、滑膜肉瘤、上皮样肉瘤、消化道间质肿瘤、良性和恶性组织细胞瘤、隆凸性皮肤纤维肉瘤等软纤维、骨或软骨的肉瘤。

一个实施方式中，作为实体癌的进一步的其它非限定性例子，可列举：中枢或外周神经系统的肿瘤(例：星形细胞瘤、胶质瘤、胶质母细胞瘤、脑膜瘤、脑肿瘤、室管膜瘤、松果体区肿瘤、神经鞘瘤)；内分泌腺的肿瘤(例：垂体瘤、肾上腺肿瘤、胰岛细胞瘤、甲状旁腺肿瘤、类癌瘤、甲状腺髓样癌)；生殖细胞和滋养细胞肿瘤(例：畸胎瘤、精原细胞瘤、无性细胞瘤、葡萄胎、绒毛膜癌)；儿童和胚胎肿瘤(例：髓母细胞瘤、神经母细胞瘤、肾母细胞瘤(Wilms tumour)、原始神经外胚层肿瘤)；患者受恶性肿瘤影响的先天性综合征或其他综合征(着色性干皮病)等。

作为血液癌的非限定性例子，可列举：急性淋巴细胞白血病(ALL)(例：B-ALL、T-ALL)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)(例：毛细胞白血病、幼淋巴细胞白血病)等淋巴细胞白血病；B细胞淋巴瘤(例：弥漫大B细胞淋巴瘤[DLBCL]、原发纵膈大B细胞淋巴瘤(PMBCL)、滤泡性淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、淋巴母细胞白血病；边缘区B细胞淋巴瘤、高级别B细胞淋巴瘤、淋巴浆细胞性淋巴瘤、脾边缘区淋巴瘤)；T细胞淋巴瘤(例：外周T细胞淋巴瘤(PTCL)、皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)、成人T细胞淋巴瘤、间变性大细胞淋巴瘤、血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤、塞扎里综合征)；自然杀伤[NK]细胞淋巴瘤；霍奇金淋巴瘤(HL)；非霍奇金淋巴瘤；MALT淋巴瘤；原发性皮肤滤泡中心性淋巴瘤(PCFCL)；T细胞白血病(例：成人T细胞白血病、T细胞大颗粒淋巴细胞白血病、前体T淋巴母细胞性白血病)；白血病/淋巴瘤；成人T细胞白血病/淋巴瘤(ATLL)；毛细胞白血病；意义不明的单克隆丙球蛋白病；浆细胞瘤；多发性骨髓瘤(MM)和移植后淋巴增生性障碍；急性粒细胞白血病；急性髓系白血病(AML)、慢性髓细胞性白血病(CML)等髓细胞性白血病；慢性粒单核细胞性白血病(CMML)；嗜酸细胞增多综合征、真性红细胞增多症、原发性血小板增多症和原发性骨髓纤维化等骨髓增殖综合征、骨髓增生异常综合征和早幼粒细胞性白血病等。

一个实施方式中，癌症为包括急性髓系白血病(AML)、T细胞淋巴瘤(外周T细胞淋巴瘤(PTCL)、皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)、成人T细胞白血病淋巴瘤(ATLL)、慢性粒单核细胞性白血病(CMML)、急性淋巴细胞白血病(ALL)和弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的血液癌。另一实施方式中，癌症为包括多发性骨髓瘤的血液癌。

一个实施方式中，癌症为包括头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)、前列腺癌、胰腺癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、大肠癌、黑素瘤、直肠癌、膀胱、宫颈部的癌和乳腺癌的实体癌。

B.含有以表达嵌合抗原受体或重组T细胞受体的方式进行了改造的免疫细胞的药物组合物

本发明的含有以表达嵌合抗原受体(CAR)或重组T细胞受体(TCR)的方式进行了改造的免疫细胞的药物组合物(以下称为“药物组合物B”)优选为与托利那泮系药剂(可以为药物组合物A的形态)组合给药的药物组合物，具体而言，优选为在上述托利那泮系药剂给药前、给药的同时或给药后给药的药物组合物。

嵌合抗原受体(CAR)或重组T细胞受体(TCR)识别并结合特定抗原。抗原优选为肿瘤抗原。作为肿瘤抗原的非限定性例子，可列举5T4、α5β1-整联蛋白、整联蛋白β7(例如活性型整联蛋白β7)、707-AP、AFP、ART-4、B7H4、BAGE、β-联蛋白/m、Bcr-abl、MN/C IX抗体、CA125、CAMEL、CAP-1、CASP-8、CD4、CD19、CD20、CD22、CD25、CDC27/m、CD30、CD33、CD52、CD56、CD80、CD98、CDK4/m、CEA、CT、Cyp-B、DAM、EGFR、ErbB3、ELF2M、EMMPRIN、EpCam、ETV6-AML1、G250、GAGE、GnT-V、Gp100、HAGE、HER-2/new、HLA-A*0201-R170I、HPV-E7、HSP70-2M、HST-2、hTERT(或hTRT)、iCE、IGF-1R、IL-2R、IL-5、KIAA0205、LAGE、LDLR/FUT、MAGE、MART-1/melan-A、MART-2/Ski、MC1R、肌球蛋白/m、MUC1、MUM-1、MUM-2、MUM-3、NA88-A、PAP、蛋白酶-3、p190minor bcr-abl、Pml/RARα、PRAME、PSA、PSM、PSMA、RAGE、RU1、RU2、SAGE、SART-1、SART-3、存活蛋白、TEL/AML1、TGFβ、TPI/m、TRP-1、TRP-2、TRP-2/INT2、VEGF、WT1、NY-ESO-1、NY-ESO-B、MAGE-A1、MAGE-A3、MAGE-A4等。一个实施方式中，肿瘤抗原优选为CD19、整联蛋白β7或NY-ESO-1。另一实施方式中，肿瘤抗原优选为CD19、活性型整联蛋白β7或NY-ESO-1。

B-1.CAR

CAR优选含有胞外域和胞内信号转导结构域。

B-1-1.胞外域

胞外域只要可识别抗原(或与抗原结合或特异性结合)则没有特别限定。胞外域优选含有抗体的抗原结合位点或受体的抗原(配体)结合位点。

抗体的抗原结合位点可以为抗体的全部区域，也可以为抗体的抗原结合片段。抗体可以为单克隆抗体，也可以为多克隆抗体。另外，抗体例如可以为小鼠抗体、嵌合抗体、人源化抗体或完全人源化抗体。抗原结合片段只要含有H链(重链)和L链(轻链)的可变区则没有特别限定。作为抗原结合片段的非限定性例子，可列举Fv、Fab、Fab’、(Fab’)₂、scFv、scFv-Fc、双抗体、三抗体、四抗体、迷你抗体、纳米抗体等。

受体的抗原结合位点可以为受体的全部区域，也可以为受体的抗原结合结构域。作为受体，可列举例如：TCRα、TCRβ、TCRγ、TCRδ等TCR；CD4、CD8α、CD8β、CD11A、CD11B、CD11C、CD18、CD29、CD41、CD49A、CD49B、CD49D、CD49E、CD49F、CD51、CD61等T细胞辅助受体；NKp30、NKp44、NKp46等NK细胞的天然细胞毒性受体(NCR)等，但是不限于这些。

一个实施方式中，胞外域优选含有抗体的抗原结合位点，更优选含有scFv，进一步优选含有来自抗人CD19抗体(例：FMC63)或抗人活性型整联蛋白β7抗体(例：MMG49)的scFv。scFv可以通过常规方法制备。作为该方法的非限定性例子，可列举美国专利第4694778号、Science,vol.242,pp.423-442(1988)、Nature,vol.334,p.54454(1989)、Science,vol.242,pp.1038-1041(1988)、Molecular Immunology,Vol.34,No.16-17,pp.1157-1165(1997)中记载的方法等。

胞外域可识别或结合的抗原优选为肿瘤抗原。作为肿瘤抗原的非限定性例子，可列举5T4、α5β1-整联蛋白、整联蛋白β7(例如活性型整联蛋白β7)、707-AP、AFP、ART-4、B7H4、BAGE、β-联蛋白/m、Bcr-abl、MN/C IX抗体、CA125、CAMEL、CAP-1、CASP-8、CD4、CD19、CD20、CD22、CD25、CDC27/m、CD30、CD33、CD52、CD56、CD80、CD98、CDK4/m、CEA、CT、Cyp-B、DAM、EGFR、ErbB3、ELF2M、EMMPRIN、EpCam、ETV6-AML1、G250、GAGE、GnT-V、Gp100、HAGE、HER-2/new、HLA-A*0201-R170I、HPV-E7、HSP70-2M、HST-2、hTERT(或hTRT)、iCE、IGF-1R、IL-2R、IL-5、KIAA0205、LAGE、LDLR/FUT、MAGE、MART-1/melan-A、MART-2/Ski、MC1R、肌球蛋白/m、MUC1、MUM-1、MUM-2、MUM-3、NA88-A、PAP、蛋白酶-3、p190 minor bcr-abl、Pml/RARα、PRAME、PSA、PSM、PSMA、RAGE、RU1、RU2、SAGE、SART-1、SART-3、存活蛋白、TEL/AML1、TGFβ、TPI/m、TRP-1、TRP-2、TRP-2/INT2、VEGF、WT1、NY-ESO-1、NY-ESO-B等。一个实施方式中，肿瘤抗原优选为CD19或整联蛋白β7。另一实施方式中，肿瘤抗原优选为CD19或活性型整联蛋白β7。再另一实施方式中，肿瘤抗原优选为活性型整联蛋白β7。需要说明的是，将可识别或结合CD19的CAR称为“CD19 CAR”，将以表达CD19 CAR的方式进行了改造的T细胞和NK细胞分别称为“CD19CAR-T”和“CD19 CAR-NK”。作为CD19 CAR-NK，可列举例如CD19CAR-KHYG-1等。作为可识别或结合活性型整联蛋白β7的CAR，可列举例如活性型整联蛋白β7 CAR等，将以表达活性型整联蛋白β7CAR的方式进行了改造的T细胞称为“活性型整联蛋白β7CAR-T(aITGB7 CAR-T)”。

一个实施方式中，胞外域优选含有具有序列号1所示的氨基酸序列(GVSLPDYG)的重链CDR1、具有序列号2所示的氨基酸序列(IWGSETT)的重链CDR2、具有序列号3所示的氨基酸序列(AKHYYYGGSYAMDY)的重链CDR3、具有序列号4(QDISKY)所示的氨基酸序列的轻链CDR1、具有序列号5(HTS)所示的氨基酸序列的轻链CDR2和具有序列号6(QQGNTLPYT)所示的氨基酸序列的轻链CDR3。需要说明的是，本说明书中，重链CDR1～3和轻链CDR1～3可通过基于IMGT/BlastSearch(http://www.imgt.org/blast/)的同源性检索来确定。

另外，该胞外域优选含有竞争性地抑制含有具有序列号1所示的氨基酸序列的重链CDR1、具有序列号2所示的氨基酸序列的重链CDR2、具有序列号3所示的氨基酸序列的重链CDR3、具有序列号4所示的氨基酸序列的轻链CDR1、具有序列号5所示的氨基酸序列的轻链CDR2和具有序列号6所示的氨基酸序列的轻链CDR3的抗体与CD19的结合的抗体的抗原结合位点(特别是scFv)。

一个实施方式中，胞外域优选含有具有序列号7所示的氨基酸序列(GYTFSSYW)的重链CDR1、具有序列号8所示的氨基酸序列(MLPGSGSS)的重链CDR2、具有序列号9所示的氨基酸序列(ARGDGNYWYFDV)的重链CDR3、具有序列号10(SSVGY)所示的氨基酸序列的轻链CDR1、具有序列号11(ATS)所示的氨基酸序列的轻链CDR2和具有序列号12(QQWSSDPPT)所示的氨基酸序列的轻链CDR3。

另外，该胞外域优选含有下竞争性地抑制含有具有序列号7所示的氨基酸序列的重链CDR1、具有序列号8所示的氨基酸序列的重链CDR2、具有序列号9所示的氨基酸序列的重链CDR3、具有序列号10所示的氨基酸序列的轻链CDR1、具有序列号11所示的氨基酸序列的轻链CDR2和具有序列号12所示的氨基酸序列的轻链CDR3的抗体与CD19的结合的抗体的抗原结合位点(特别是scFv)。

一个实施方式中，胞外域优选含有在由活性型人整联蛋白β7的第20～109位的氨基酸残基构成的区域中具有表位的抗体的抗原结合位点。该抗体优选为对活性型人整联蛋白β7具有亲和性、与骨髓瘤细胞结合但不与正常血液细胞结合的抗体。本发明中的活性型整联蛋白β7CAR-T(aITGB7 CAR-T)在WO2017/026331或Nature Medicine 23 122007 1436中有记载，将其整体整合入说明书中。

本说明书中，氨基酸序列的“一致性”是指使作为比较对象的2个以上氨基酸序列进行最佳比对时的氨基酸的一致程度。氨基酸序列的一致性例如可以在美国国家生物技术信息中心(NCBI)的同源性算法BLAST(基本局部比对搜索工具(Basic local alignmentsearch tool))(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/)中使用默认(初始设定)的参数来计算。另外，“保守性置换”是指以实质上不改变蛋白质的功能或性质的方式将1个或2个以上氨基酸置换为其它氨基酸。作为保守性置换的非限定性例子，可列举非极性氨基酸(疏水性氨基酸)的组：丙氨酸(A)、缬氨酸(V)、亮氨酸(L)、异亮氨酸(I)、脯氨酸(P)、苯丙氨酸(F)、甲硫氨酸(M)、色氨酸(W)的置换、极性氨基酸(中性氨基酸)的组：甘氨酸(G)、天冬酰胺(N)、谷氨酰胺(Q)、丝氨酸(S)、苏氨酸(T)、酪氨酸(Y)、半胱氨酸(C)的置换、酸性氨基酸的组：天冬氨酸(D)、谷氨酸(E)的置换、碱性氨基酸的组：赖氨酸(K)、精氨酸(R)、组氨酸(H)的置换等。

表示胞外域对抗原的结合亲和性的平衡解离常数(K_D)例如可以为1μM以下、500nM以下或100nM以下，可以为0.1pM以上、0.5pM以上或1pM以上。平衡解离常数例如可以通过SPR测定或Biacore(商标)分析来确定。

胞外域可以除了抗体的抗原结合位点或受体的抗原(配体)结合位点以外还含有其它蛋白质的胞外域。作为该其它蛋白质的非限定性例子，可列举CD3ζ、CD3ε、CD4、CD5、CD8、CD9、CD16、CD22、CD28、CD33、CD37、CD64、CD80、CD86、CD134(OX40)、CD137、CD154、CD278(ICOS)等T细胞辅助受体等。一个实施方式中，该其它蛋白质的胞外域优选为CD28的胞外域。另一实施方式中，该其它蛋白质的胞外域优选为：

序列号13所示的氨基酸序列：IEVMYPPPYLDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKP、

相对于该氨基酸序列具有70％以上、75％以上、80％以上、85％以上、90％以上、91％以上、92％以上、93％以上、94％以上、95％以上、96％以上、97％以上、98％以上或99％以上的一致性的氨基酸序列、或

相对于该氨基酸序列缺失、置换(例：保守性置换)、插入和/或添加了1～3个氨基酸的氨基酸序列。

B-1-2.胞内信号转导结构域

胞内信号转导结构域只要能够在胞外域识别到抗原时将信号转导到细胞内则没有特别限定。一个实施方式中，胞内信号转导结构域优选具有能够抗原依赖性初级激活的序列(初级细胞质信号转导序列)和能够抗原非依赖性次级激活或共刺激的序列(次级细胞质信号转导序列)。

初级细胞质信号转导序列可以具有作为免疫受体酪氨酸激活基序(ITAM)(Nature,vol.338,pp.383-384(1989))而已知的信号转导基序，和/或可以具有作为免疫受体酪氨酸抑制基序(ITIM)(J Immunol.,vol.162,No.2,pp.897-902(1999))而已知的信号转导基序。

具有初级细胞质信号转导序列的胞内信号转导结构域优选具有1个以上ITAM，还优选具有外源性STAT3相关基序。作为该胞内信号转导结构域的非限定性例子，可列举CD3ζ、FcRγ、FcRβ、CD3γ、CD3δ、CD3ε、CD5、CD22、CD79a、CD79b、CD66d的胞内信号转导结构域等。一个实施方式中，该胞内信号转导结构域优选为CD3ζ的胞内信号转导结构域。另一实施方式中，该胞内信号转导结构域优选为：

序列号14所示的氨基酸序列：RVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR、

相对于该氨基酸序列具有70％以上、75％以上、80％以上、85％以上、90％以上、91％以上、92％以上、93％以上、94％以上、95％以上、96％以上、97％以上、98％以上或99％以上的一致性的氨基酸序列、或相对于该氨基酸序列缺失、置换(例：保守性置换)、插入和/或添加了1～3个氨基酸的氨基酸序列。

具有次级细胞质信号转导序列的胞内信号转导结构域优选为1个以上共刺激分子的胞内信号转导结构域。作为共刺激分子的非限定性例子，可列举CD2、CD4、CD5、CD8α、CD8β、CD28、CD134(OX40)、CD137(4-1BB)、CD154、CD278(ICOS)等。一个实施方式中，该胞内信号转导结构域优选为CD28的胞内信号转导结构域和/或CD137(4-1BB)的胞内信号转导结构域，进一步优选为CD28的胞内信号转导结构域。另一实施方式中，该胞内信号转导结构域优选为：

序列号15所示的氨基酸序列：RSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRS、

CAR可以具有上述以外的进一步追加的胞内信号转导结构域。例如，CAR可以具有诱导细胞因子(例如IL-12)的表达的结构域。另外，CAR可以含有细胞因子受体的胞内域(例如IL-2Rβ链片段)。追加的胞内信号转导结构域例如可以插入到共刺激分子的胞内信号转导结构域与初级细胞质信号转导序列之间。

B-1-3.跨膜结构域

CAR优选在胞外域与胞内信号转导结构域之间含有跨膜结构域。跨膜结构域可以为具有1个以上跨膜序列的任意多肽来源的跨膜结构域。该多肽可以为天然多肽，也可以为人工多肽。

作为来自天然多肽的跨膜结构域的非限定性例子，可列举：TCRα、TCRβ等TCR；CD3ζ、CD3ε、CD4、CD5、CD8、CD9、CD16、CD22、CD28、CD33、CD37、CD64、CD80、CD86、CD134(OX40)、CD137、CD154、CD278(ICOS)等T细胞辅助受体；GITR等TNF受体的跨膜结构域等。

来自人工多肽的跨膜结构域优选为主要含有亮氨酸和缬氨酸等疏水性残基的多肽。另外，该跨膜结构域优选在各末端具有苯丙氨酸、色氨酸和缬氨酸的三联体。

一个实施方式中，跨膜结构域优选为CD28或CD8的跨膜结构域，进一步优选为CD28的跨膜结构域。另一实施方式中，跨膜结构域优选为：

序列号16所示的氨基酸序列：FWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWV、

B-1-4.接头序列或间隔区结构域

CAR可以在胞外域与跨膜结构域之间、或者跨膜结构域与胞内信号转导结构域之间具有接头序列或间隔区结构域。

接头序列或间隔区结构域只要具有将2个结构域连接的功能则没有特别限定。接头序列优选含有10个以下氨基酸，优选含有2个以上氨基酸。间隔区结构域优选含有300个以下、200个以下、100个以下或50个以下氨基酸，优选含有10个以上、15个以上、20个以上或25个以上氨基酸。

接头序列优选从甘氨酸-丝氨酸连续序列、序列号17所示的氨基酸序列(GSTSGSGKPGSGEGSTKG)和序列号18所示的氨基酸序列(GSTSGGGSGGGSGGGGSS)等中选择。

间隔区结构域优选具有促进CAR与抗原的结合且增强对细胞的信号转导的序列。该序列优选含有半胱氨酸、带电氨基酸、潜在糖基化位点内的丝氨酸或苏氨酸等。作为间隔区结构域的非限定性例子，可列举CD8α、CD8β、CD28、IgG4的一部分(例：铰链区)等。

CAR可以在N末端具有前导序列(信号肽序列)。信号肽序列优选含有15个以上氨基酸，优选含有30个以下氨基酸。作为信号肽的非限定性例子，可列举具有胞内信号转导结构域的上述蛋白质的信号肽。例如，信号肽可以为GM-CSFR信号肽、抑癌蛋白M信号肽或CD8a、IL-2、IL-3等信号肽。或者，可以为Ig重链信号序列(VHCAMP)。信号肽可以来自人，也可以来自非人、例如来自昆虫细胞或病毒。一个实施方式中，前导序列(信号肽序列)优选为：

序列号19所示的氨基酸序列：MLLLVTSLLLCELPHPAFLLIP、

一个实施方式中，CAR优选从N末端侧起依次含有来自抗人CD19抗体(例：FMC63)或抗人活性型整联蛋白β7抗体(例：MMG49)的scFv、CD28胞外域、CD28跨膜结构域、CD28胞内信号转导结构域和CD3ζ胞内信号转导结构域，还优选在来自抗人CD19抗体(例：FMC63)或抗人活性型整联蛋白β7抗体(例：MMG49)的scFv的N末端侧进一步含有GM-CSFR信号肽。

另一实施方式中，CAR优选为：

序列号20所示的氨基酸序列(GenBank登录号HM852952.1)：MLLLVTSLLLCELPHPAFLLIPDIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDISKYLNWYQQKPDGTVKLLIYHTSRLHSGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEQEDIATYFCQQGNTLPYTFGGGTKLEITGSTSGSGKPGSGEGSTKGEVKLQESGPGLVAPSQSLSVTCTVSGVSLPDYGVSWIRQPPRKGLEWLGVIWGSETTYYNSALKSRLTIIKDNSKSQVFLKMNSLQTDDTAIYYCAKHYYYGGSYAMDYWGQGTSVTVSSAAAIEVMYPPPYLDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR、

具有序列号1～6所示的氨基酸序列且相对于序列号20所示的氨基酸序列具有70％以上、75％以上、80％以上、85％以上、90％以上、91％以上、92％以上、93％以上、94％以上、95％以上、96％以上、97％以上、98％以上或99％以上的一致性的氨基酸序列、或

具有序列号1～6所示的氨基酸序列且相对于序列号20所示的氨基酸序列缺失、置换(例：保守性置换)、插入和/或添加了1～3个氨基酸的氨基酸序列。

进而，另一实施方式中，CAR优选为：

序列号21所示的氨基酸序列：MDFQVQIFSFLLISASVIMSRGQIVLSQSPAILSASPGEKVTMTCRASSSVGYMHWFQQKPGSSPKPWIYATSNLASGVPARFSGSESGTSYSLTISRVEAEDAATYYCQQWSSDPPTFGGGTKLEIKRGSTSGSGKPGSGEGSQVQLQQSGAELMKPGASVKISCKASGYTFSSYWIEWVKQRPGHGLEWIGEMLPGSGSSNYNEKFKGKATFTADTSSNTAYMQLSSLTSEDSAVYYCARGDGNYWYFDVWGAGTTVTVSSAAAIEVMYPPPYLDNEKSNGTIIHVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVRSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRSRVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQEGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALPPR、

具有序列号7～12所示的氨基酸序列且相对于序列号21所示的氨基酸序列具有70％以上、75％以上、80％以上、85％以上、90％以上、91％以上、92％以上、93％以上、94％以上、95％以上、96％以上、97％以上、98％以上或99％以上的一致性的氨基酸序列、或

具有序列号7～12所示的氨基酸序列且相对于序列号21所示的氨基酸序列缺失、置换(例：保守性置换)、插入和/或添加了1～3个氨基酸的氨基酸序列。

CAR可以进行二聚体化等多聚体化。例如在借助二硫键使CAR二聚体化时，优选在CAR的间隔区结构域和/或跨膜结构域插入半胱氨酸。

B-2.重组TCR

重组TCR可以为由α链和β链构成的异源二聚体，也可以为由γ链和δ链构成的异源二聚体。各链以下述方式设计：具有可变结构域(V结构域)和恒定结构域(C结构域)，V结构域中具有3个CDR、即CDR1、CDR2和CDR3，且3个CDR序列可识别或结合抗原。

重组TCR可识别(或结合)任意的抗原。即，重组TCR可具有能识别抗原的可变结构域。作为抗原，可列举例如与B-1-1中记载的抗原相同的抗原。一个实施方式中，抗原优选为肿瘤抗原，优选为gp100、MART-1、CEA、MAGE-A1、MAGE-A3、MAGE-A4、WT1或NY-ESO-1。抗原优选为人白细胞抗原A(HLA-A)限制性，进一步优选为HLA-A^*02限制性(例：HLA-A^*02:01限制性、HLA-A^*02:06限制性)或HLA-A^*24限制性(例：HLA-A^*24:02限制性)。重组TCR可以为HLA-A^*02限制性gp100特异性TCR、HLA-A^*02限制性MART-1特异性TCR、HLA-A^*02限制性MAGE-A3特异性TCR、HLA-A^*02限制性NY-ESO-1特异性TCR、HLA-A^*24限制性MAGE-A4特异性TCR或HLA-A^*24限制性WT1特异性TCR。需要说明的是，将可识别或结合NY-ESO-1的TCR称为“NY-ESO-1TCR”，将以表达NY-ESO-1 TCR的方式进行了改造的T细胞称为“NY-ESO-1 TCR-T”。

表示重组TCR与抗原的结合亲和性的平衡解离常数(K_D)例如可以为100μM以下、10μM以下、1μM以下、500nM以下或100nM以下，可以为0.1pM以上、0.5pM以上或1pM以上。平衡解离常数例如可以通过SPR测定或Biacore(商标)分析来确定。

B-3.以表达CAR或重组TCR的方式进行了改造的免疫细胞

以表达CAR的方式进行了改造的免疫细胞(例：CAR-T细胞、CAR-NK细胞)优选为含有CAR表达用核酸(包括核酸构建物)的免疫细胞。同样，以表达重组TCR的方式进行了改造的免疫细胞(例：TCR-T细胞)优选为含有重组TCR表达用核酸(包括核酸构建物)的免疫细胞。

B-3-1.CAR或重组TCR表达用核酸

CAR或重组TCR表达用核酸优选除了含有编码CAR或重组TCR的核酸以外还含有启动子。作为启动子的非限定性例子，可列举：CMV启动子、EF1启动子、SV40启动子、MSCV启动子等pol II系启动子；trc、tac等色氨酸启动子；lac启动子；T7启动子；T5启动子；T3启动子；SP6启动子；阿拉伯糖诱导型启动子；冷休克启动子；四环素诱导型启动子；泛素启动子等。

CAR或重组TCR表达用核酸可以还含有其它元件。作为其它元件的非限定性例子，可列举复制起点、增强子序列、终止子序列、报告蛋白编码序列、抗药基因编码序列等。

重组TCR表达用核酸例如优选如WO2008/153029(将其整体作为参照而整合入说明书中)中记载的那样含有抑制内源性TCR的表达的序列(例：针对内源性TCRα链和β链的siRNA)。

CAR或重组TCR表达用核酸可以为载体的形态。载体可以为非病毒载体，但是优选为病毒载体。

作为病毒载体的非限定性例子，可列举逆转录病毒载体(包括致癌逆转录病毒载体、慢病毒载体和假型载体)、腺病毒载体、腺相关病毒(AAV)载体、猴病毒载体、痘苗病毒载体或仙台病毒载体、EB病毒(EBV)载体、HSV载体等。病毒载体也可以使用缺乏复制能力的病毒载体，以避免在感染细胞内进行自复制。

B-3-2.免疫细胞

免疫细胞只要是以表达CAR或重组TCR的方式进行了改造的免疫细胞则没有特别限定。作为免疫细胞的非限定性例子，可列举单核细胞、巨噬细胞、T细胞、B细胞、NK细胞。一个实施方式中，免疫细胞优选为T细胞或NK细胞。作为T细胞的非限定性例子，可列举CD4阳性T细胞(例：辅助T细胞)、CD8阳性T细胞(例：细胞毒性T细胞)、自然杀伤T细胞、调节性T细胞(Treg)、幼稚T细胞、效应T细胞、记忆T细胞、肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)、αβT细胞、γδT细胞。典型地，免疫细胞可以为细胞群，该细胞群例如可以为含有外周血单核细胞(PBMC)的细胞群。免疫细胞可以由造血干细胞分化而成，优选来自生物体，例如从生物体(外周血、脐带血、骨髓、淋巴结、脾等)采集得到或者从生物体采集后进行扩大培养而得到。免疫细胞可以为自体免疫细胞(要给药药物组合物B的对象的免疫细胞)，也可以为异体免疫细胞。为异体免疫细胞时，优选HLA型一致。

一个实施方式中，免疫细胞可以在转导前用可溶型或膜结合型的抗CD3抗体(例：OKT3或mOKT3)和/或APC(例：人工APC)进行刺激。APC可以表达膜型的抗CD3单克隆抗体。

B-3-3.CAR或重组TCR表达用核酸向免疫细胞的转导

作为将CAR或重组TCR表达用核酸转导到免疫细胞中的方法，可列举例如病毒感染法、磷酸钙法、脂质体法、显微注射法、电穿孔法等，但是不限于这些。

B-3-4.改造免疫细胞的非限定性例子

作为改造免疫细胞中的CAR-T细胞的非限定性例子，可列举以表达CD19 CAR的方式进行了改造的T细胞(例：吉利德公司的Yescarta(axicabtagene ciloleucel)、诺华公司的Kymriah(tisagenlecleucel)、ブリストル·マイヤーズスクイブ公司的Breyanzi(lisocabtagene maraleucel)、宝生物株式会社的TBI-1501、日本セルヴィエ公司的UCART19/ALLO-501)、以表达BCMACAR的方式进行了改造的T细胞(例：セルジーン公司的bb2121,ide-cel、杨森制药公司的JNJ-68284528)、以表达CD98 CAR的方式进行了改造的T细胞(例：美国专利申请公开第2018/0230212号(将其整体作为参照而整合入说明书中)中记载的以表达CAR的方式进行了改造的T细胞)、以表达活性型整联蛋白β7 CAR的方式进行了改造的T细胞(例：美国专利申请公开第2018/0230216号(将其整体作为参照而整合入说明书中)中记载的以表达CAR的方式进行了改造的T细胞)。作为TCR-T细胞的非限定性例子，可列举NY-ESO-1特异性TCR-T细胞(例：Tmunity公司的NY-ESO-1 TCR-T Triple KnockoutTCR(NYCE)、宝生物株式会社的TBI-1301)、MAGE-A4特异性TCR-T细胞(例：Adaptimmune公司的ADP-A2M4 SPEAR T-cells)、MAGE-A3和/或MAGE-A6特异性TCR-T细胞(例：Kite/GileadSciences公司的KITE-718)。一个实施方式中，改造免疫细胞优选为以表达特异性地识别CD19的CAR的方式进行了改造的T细胞、以表达特异性地识别整联蛋白β7(例如活性型整联蛋白β7)的CAR的方式进行了改造的T细胞、以表达特异性地识别CD19的CAR的方式进行了改造的NK细胞或者以表达特异性地识别NY-ESO-1的重组TCR的方式进行了改造的T细胞。

B-4.其它成分

药物组合物B优选含有药学上可接受的赋形剂作为其它成分。作为药学上可接受的赋形剂，可列举例如与A-2中记载的赋形剂相同的赋形剂。一个实施方式中，药学上可接受的赋形剂为选自由下述组成的组中的至少一种：载体(例：灭菌水、生理盐水)、稳定剂、抗氧化剂(例：抗坏血酸)、缓冲剂(例：磷酸、柠檬酸等有机酸)、保存剂、表面活性剂(例：聚乙二醇、吐温(Tween))、螯合剂(例：EDTA)、糖或糖醇(例：葡萄糖、甘露糖、蔗糖、甘露醇)、氨基酸(例：甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、精氨酸、赖氨酸)、多肽或蛋白质(例：血清白蛋白、明胶、免疫球蛋白)和佐剂(例：氢氧化铝等佐剂)。

B-5.给药

经改造的免疫细胞的给药量的下限可根据给药目的、给药对象和其状态等适当选择。例如，关于1天给药量的下限，对象每1kg体重以活细胞数计可以为1×10²个、5×10²个、1×10³个、2×10³个、3×10³个、4×10³个、5×10³个、6×10³个、7×10³个、8×10³个、9×10³个、1×10⁴个、2×10⁴个、3×10⁴个、4×10⁴个、5×10⁴个、6×10⁴个、7×10⁴个、8×10⁴个、9×10⁴个或1×10⁵个。另外，1天给药量的上限也可以与下限同样地适当选择，例如，对象每1kg体重以活细胞数计可以为1×10⁹个、5×10⁸个、1×10⁸个、5×10⁷个、1×10⁷个、5×10⁶个或1×10⁶个。例如，关于1天给药量，对象每1kg体重以活细胞数计可以为1×10³个～1×10⁸个、5×10³个～5×10⁷个或1×10⁴个～1×10⁷个。可以以1天给药量达到上述范围的方式分2次以上(例：2次或3次)进行给药，根据情况也可以分成2天进行给药。经改造的免疫细胞的给药量可以为少于单独给药时的给药量的量或者单独时无效的量。即使在以这样的量给药时，也能够与给药托利那泮系药剂协同地发挥出优良的效力。

药物组合物B可以以任意的频次进行给药。例如，药物组合物B可以以1天1次、2次或3次、2天1次、3天1次、4天1次、5天1次、6天1次、1周1次、2周1次、3周1次或4周1次的频次进行给药。另外，药物组合物B可以以上述频次(例：1天1次)在规定时间内(例：1周、2周、3周或4周)持续给药，然后可以在规定时间内(例：1周、2周、3周或4周)中断给药，还可以反复进行给药的持续和中断的循环。

一个实施方式中，药物组合物B(或经改造的免疫细胞)的给药优选包括：(1)给药药物组合物B(或经改造的免疫细胞)、(2)给药使用从药物组合物B(或经改造的免疫细胞)给药后的对象获得的免疫细胞制作的、新的药物组合物B(或经改造的免疫细胞)、以及根据需要(3)将(2)反复进行。

药物组合物B可以在托利那泮系药剂给药前、例如即将给药前、给药前1分钟、给药前2分钟、给药前3分钟、给药前4分钟、给药前5分钟、给药前10分钟、给药前20分钟、给药前30分钟、给药前1小时、给药前2小时、给药前3小时、给药前4小时、给药前5小时、给药前6小时、给药前7小时、给药前8小时、给药前9小时、给药前10小时、给药前11小时、给药前12小时、给药前18小时、给药前24小时、给药前2天、给药前3天、给药前4天、给药前5天、给药前6天前或给药前1周给药。药物组合物B可以与托利那泮系药剂的给药同时进行给药。药物组合物B可以在托利那泮系药剂给药后、例如给药后即刻、1分钟后、2分钟后、3分钟后、4分钟后、5分钟后、10分钟后、20分钟后、30分钟后、1小时后、2小时后、3小时后、4小时后、5小时后、6小时后、7小时后、8小时后、9小时后、10小时后、11小时后、12小时后、18小时后、24小时后、2天后、3天后、4天后、5天后、6天后或1周后给药。另外，药物组合物B例如可以在托利那泮系药剂给药后且肿瘤标志物水平超过基线水平时给药。

在药物组合物B的给药与托利那泮系药剂的给药之间或者从药物组合物B的给药后至下次的药物组合物B的给药之间，可以进行其它化学疗法(其它药剂的给药)，也可以进行非化学疗法(例：放射线疗法、光动力疗法、外科手术、饮食限制)等。作为其它药剂的非限定性例子，可列举烷基化剂、DNA甲基化抑制剂、代谢拮抗剂(例：嘧啶系代谢拮抗剂、嘌呤系代谢拮抗剂、叶酸代谢拮抗剂)等。

作为药物组合物B的给药对象，可列举例如与药物组合物A的给药对象相同的给药对象。药物组合物B的给药对象可以为即将或已经给药托利那泮系药剂的对象。药物组合物B的给药对象优选为需要预防和/或治疗IAP相关疾病、尤其是癌症的对象(或首次发病患者或复发患者)。

药物组合物B的组成、制造方法、给药方法等例如可以基于WO1993/019163(将其整体作为参照而整合入说明书中)的记载进行设计。

B-6.药物用途

药物组合物B只要以与药物组合物A组合而能够增强其药效(基因改造免疫疗法的治疗效果)的方式使用，则其用途没有特别限制。对于药物组合物B而言，例如优选作为基因改造免疫疗法的对象的疾病、典型情况下为癌症。作为癌症的非限定性例子，可列举与药物组合物A中例示的癌症同样的癌症。

C.试剂盒

本发明的试剂盒优选具备含有式(1)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物的第一剂以及含有以表达嵌合抗原受体或重组T细胞受体的方式进行了改造的免疫细胞的第二剂。

第一剂优选由药物组合物A构成，第二剂优选由药物组合物B构成。第一剂和第二剂可以处于同一制剂中并且同时给药，也可以处于不同制剂中并且同时分别地给药或连续地给药。

针对上述各实施方式说明的各种构成(性质、结构、功能等)可以在确定本发明所包含的主题时任意组合。本发明不限于上述各实施方式，包括本领域技术人员可基于本说明书的公开而确认的全部实施方式。

实施例

以下对本发明所包含的主题更具体地进行说明，但是该主题不受下述例子限定。

1.试验材料和试验方法

1.1受试细胞

1.1.1受试细胞

1-1)细胞名：CD19 CAR-T(宝生物株式会社制)

1-2)来源：来自人外周血的T细胞

1-3)获取渠道：ACCUCELL等

特性：向用抗CD3抗体(克隆；OKT3)对市售人PMBC进行刺激、进而在含有IL-2(250U/mL)的培养基中增殖而诱导出的T细胞中，使用逆转录病毒载体导入连接前导序列、将抗人CD19抗体(克隆；FMC63)的重链和轻链可变区连接而成的单链可变区片段(scFv)序列、接头序列、含有CD28分子的胞外区、跨膜区、胞内区的序列、以及CD3ζ分子的胞内区而成的序列，增殖、培养后冷冻保存的细胞。

2-1)细胞名：活性型整联蛋白β7 CAR-T细胞

2-2)来源：来自人外周血的T细胞

2-3)获取渠道：ACCUCELL等

特性：向用抗CD3抗体(克隆；OKT3)和抗CD28抗体(克隆；28.2)对市售人PMBC进行刺激、进而在含有IL-2(100U/mL)的培养基中增殖而诱导出的T细胞中，使用逆转录病毒载体导入连接将抗人活性型整联蛋白β7抗体(克隆；MMG49)的重链和轻链可变区连接而成的单链可变区片段(scFv)序列、前导序列、接头序列、含有CD28分子的胞外区、跨膜区、胞内区的序列、以及CD3ζ分子的胞内区而成的序列，增殖、培养后冷冻保存的细胞。

3-1)细胞名：HLA-A*02:01限制性NY-ESO-1 TCR-T(以下NY-ESO-1 TCR-T)

3-2)来源：来自人外周血的T细胞

3-3)获取渠道：ACCUCELL等

特性：通过使利用抗CD3抗体(克隆；OKT3)和抗CD28抗体(克隆；28.2)对市售人PMBC进行刺激、进而在含有IL-2(100U/mL)的培养基中增殖而诱导出的T细胞感染逆转录病毒载体MS3II-NYESO1-siTCR(日本专利第5969468号)而进行了基因改造的T细胞(日本专利第5271901号、日本专利第5828861号)，该逆转录病毒载体表达特异性地识别HLA-A*02:01限制性NY-ESO-1的T细胞受体(TCR)α链和β链以及干扰内源性的TCRα链和β链基因的siRNA。制作后冷冻保存的细胞。

4-1)细胞株名：CD19 CAR-KHYG-1

4-2)来源：人NK样细胞

4-3)获取渠道：JCRB

获得后建立CD19 CAR表达株

4-4)培养条件：含有10％灭活(56℃处理30分钟)胎牛血清以及以下的添加物、细胞因子的RPMI1640培养基、CO₂培养箱(37℃、5％CO₂)

a)培养液：RPMI1640

i)获取渠道：ナカライテスク株式会社

b)血清：胎牛血清

i)浓度：10％

ii)获取渠道：Sigma-Aldrich

c)添加物：青霉素-链霉素混合溶液

i)浓度：100单位/mL青霉素、100μg/mL链霉素

ii)获取渠道：ナカライテスク株式会社

d)细胞因子：重组人IL-2

i)浓度：100U/mL

ii)获取渠道：PeproTech

特性：向人NK样细胞株KHYG-1中，使用CD19 CAR逆转录病毒载体进行基因导入，增殖后用FCM分选出阳性细胞，再次扩大培养后冷冻保存的细胞。

1.1.2对照细胞

1-1)细胞株名：对照-T细胞(人T细胞)

1-2)来源：人外周血PBMC

1-3)获取渠道：ACCUCELL等

特性：将市售人PBMC用抗CD3抗体(克隆；OKT3)和抗CD28抗体(克隆；28.2)进行刺激、进而在含有IL-2(100U/mL)的培养基中增殖、培养后冷冻保存的细胞。

2-1)细胞株名：KHYG-1

2-2)来源：人NK样细胞

2-3)获取渠道：JCRB

2-4)培养条件：含有10％灭活(56℃处理30分钟)胎牛血清以及以下的添加物、细胞因子的RPMI1640培养基、CO₂培养箱(37℃、5％CO₂)

a)培养液：RPMI1640

i)获取渠道：ナカライテスク株式会社

b)血清：胎牛血清

i)浓度：10％

ii)获取渠道：Sigma-Aldrich

c)添加物：青霉素-链霉素混合溶液

i)浓度：100单位/mL青霉素、100μg/mL链霉素

ii)获取渠道：ナカライテスク株式会社

d)细胞因子：重组人IL-2

i)浓度：100U/mL

ii)获取渠道：PeproTech

1.1.3细胞稀释液的制备

细胞稀释液使用47％ビカーボン输液、20％低分子デキストラン糖注(低分子右旋糖酐注射液)、28％人血清白蛋白25％、5％二甲基亚砜。将所有溶液混合后，在深度冷冻箱(设定温度-80℃)中保存至使用为止。

1.1.4受试细胞给药液和对照细胞给药液的制备

1)将冷冻保存的CD19 CAR-T在37℃的恒温槽中快速解冻后，悬浮于细胞稀释液中，通过离心(800×g、5分钟、4℃)除去上清。将细胞重新悬浮于细胞稀释液中后，取出悬浮液的一部分，用AOPI染色液对死细胞进行染色，使用血细胞测定装置Cellometer Auto2000 Cell Viability Counter(Nexcelom Bioscience公司制)对活细胞数进行计数。根据细胞的活细胞数的测定结果，按照组构成用细胞稀释液制备成0.1mL/个体。制备后的细胞悬浮液在冰水中保存至给药时为止。

2)将冷冻保存的活性型整联蛋白β7 CAR-T在37℃的恒温槽中快速解冻后，悬浮于细胞稀释液中，通过离心(800×g、5分钟、4℃)除去上清。将细胞重新悬浮于细胞稀释液中后，取出悬浮液的一部分，用AOPI染色液对死细胞进行染色，使用血细胞测定装置对活细胞数进行计数。根据细胞的活细胞数测定结果，按照组构成用细胞稀释液制备成0.1mL/个体。制备后的细胞悬浮液在冰水中保存至给药时为止。

3)将冷冻保存的对照-T在37℃的恒温槽中快速解冻后，悬浮于细胞稀释液中，通过离心(800×g、5分钟、4℃)除去上清。将细胞重新悬浮于细胞稀释液中后，取出悬浮液的一部分，用AOPI染色液对死细胞进行染色，使用血细胞测定装置对活细胞数进行计数。根据细胞的活细胞数测定结果，按照组构成用细胞稀释液制备成0.1mL/个体。制备后的细胞悬浮液在冰水中保存至给药时为止。

4)将冷冻保存的NY-ESO-1 TCR-T在37℃的恒温槽中快速解冻后，悬浮于细胞稀释液中，通过离心(800×g、5分钟、4℃)除去上清。将细胞重新悬浮于细胞稀释液中后，取出悬浮液的一部分，用AOPI染色液对死细胞进行染色，使用血细胞测定装置对活细胞数进行计数。根据细胞的活细胞数测定结果，按照组构成用细胞稀释液制备成0.1mL/个体。制备后的细胞悬浮液在冰水中保存至给药时为止。

5)将冷冻保存的CD19 CAR-KHYG-1和KHYG-1在37℃的恒温槽中快速解冻后，悬浮于培养基中。通过离心(150×g、5分钟、20℃)除去上清。将细胞重新悬浮于培养基中后，将全部量播种于烧瓶中，在37℃、5％CO₂存在下进行培养。培养开始后，用显微镜观察细胞的形态和增殖状态，培养至亚汇合。将亚汇合的细胞悬浮液传代到装有新培养基的培养用烧瓶中。之后也继续进行同样的操作而扩大培养，在试验期间，维持给药所需的细胞。

在各给药日，回收所需量的培养至亚汇合状态的各细胞悬浮液，通过离心操作用D-PBS(-)清洗3次后重新悬浮于无血清的RPMI1640。重新悬浮后，取出细胞悬浮液的一部分，用AOPI染色液对死细胞进行染色，使用血细胞测定装置对活细胞数进行计数。根据细胞的活细胞数的测定结果，按照组构成用细胞稀释液制备成0.1mL/个体。制备后的给药液在冰水中保存至给药时为止。

1.2受试物质

1.2.1受试物质

[表1]

表1受试物质

受试物质名	供给源/厂商
		托利那泮	Astex Pharmaceuticals
比瑞那帕	Medchemexpress
		LCL161	Medchemexpress
AT406	MedKoo Biosciences

托利那泮：仅本实施例中表示式(1)所示的化合物的(+)-L-乳酸盐。

保管条件：冷藏、避光

1.2.2介质的制备

作为基本介质，托利那泮的情况下使用蒸馏水，比瑞那帕的情况下使用磺丁基醚β-环糊精，LCL161的情况下使用乙酸钠，AT406的情况下使用羟丙甲基纤维素。

关于磺丁基醚β-环糊精，在称量所需量后，用蒸馏水溶解而制备成12.5％磺丁基醚β-环糊精溶液，作为比瑞那帕的溶剂。

关于乙酸钠，向3M乙酸钠缓冲液(pH5.2)中加入0.1M盐酸而使pH达到4.3～4.6的范围，作为LCL161的溶剂。

关于羟丙甲基纤维素，在称量所需量后用PBS溶解，制备1％羟丙甲基纤维素溶液。溶解后进行高压灭菌，然后加入0.1％当量的吐温80进行溶解，作为AT406的溶剂。

所有介质均在低温室(设定温度4℃)中保存至药剂制备为止。

1.2.3托利那泮给药液的制备

关于托利那泮的制备，基于现有报道制备成16mg/kg(参考文献1：Mol CancerTher.2018 July；17(7):1381-1391；参考文献2：Oncoimmunology,2020 January 9；9(1):1710398)。将托利那泮以达到1.6mg/mL的方式称量所需量后，用蒸馏水溶解至无色透明。将给药液分注到已灭菌管中，避光且冷冻保存至给药为止。

1.2.4比瑞那帕给药液的制备

关于比瑞那帕的制备，基于现有报道制备成12mg/kg(参考文献3：JessicaMichie,et al.,Cancer Immunol Res.2019；7(2):183-192)。将比瑞那帕以达到1.2mg/mL的方式称量所需量后，在事先制备的磺丁基醚β-环糊精中悬浮。悬浮是使用玛瑙研钵研磨制作成均匀且微细的悬浮液。将给药液分注到已灭菌管中，避光且在低温室(设定温度4℃)中保存至给药为止。

1.2.5 LCL161给药液的制备

关于LCL161的制备，基于现有报道制备成30mg/kg(参考文献4：Peter J Houghtonet al.,Pediatr Blood Cancer.2012；58(4):636-639)。将LCL161以达到3mg/mL的方式称量所需量后，在事先制备的乙酸钠溶液中溶解至无色透明。将给药液分注到已灭菌管中，避光且在低温室(设定温度4℃)中保存至给药为止。

1.2.6 AT406给药液的制备

关于AT406的制备，基于现有报道制备成100mg/kg(参考文献5：Melissa KBrunckhorst et al.,Cancer Biology&Therapy.2012；13(9):804-811)。AT406首先制备成200mg/mL DMSO溶液。接着以达到10mg/mL的方式分取出所需量，在事先制备的羟丙甲基纤维素溶液中悬浮。悬浮是使用玛瑙研钵研磨制作成均匀且微细的悬浮液。将给药液分注到已灭菌管中，避光且在低温室(设定温度4℃)中保存至给药为止。

1.3试验体系

1.3.1使用的细胞

1.3.1.1 NALM6-luc2

1)细胞株名：NALM6-luc2

2)来源：急性淋巴细胞白血病

3)获取渠道：ATCC CRL-3273

获得后：建立luc2株

4)培养条件：含有10％灭活(56℃处理30分钟)胎牛血清的RPMI1640培养基、CO₂培养箱(37℃、5％CO₂)

a)培养液：RPMI1640

i)获取渠道：ナカライテスク株式会社

b)血清：胎牛血清

i)浓度：10％

ii)获取渠道：ニチレイバイオサイエンス

c)添加物：青霉素-链霉素混合溶液

i)浓度：100单位/mL青霉素、100μg/mL链霉素

ii)获取渠道：ナカライテスク株式会社

1.3.1.2 MM.1S-luc2

1)细胞株名：MM.1S

2)来源：多发性骨髓瘤

3)获取渠道：ATCC(获得后建立luc2株)

a)培养液：RPMI1640

i)获取渠道：ナカライテスク株式会社

b)血清：胎牛血清

i)浓度：10％

ii)获取渠道：Sigma-Aldrich

c)添加物：青霉素-链霉素混合溶液

i)浓度：100单位/mL青霉素、100μg/mL链霉素

ii)获取渠道：ナカライテスク株式会社

1.3.1.3 A375

1)细胞株名：A375

2)来源：恶性黑素瘤

3)获取渠道：ATCC CRL-1619

4)培养条件：含有10％灭活(56℃处理30分钟)胎牛血清的DMEM培养基、CO₂培养箱(37℃、5％CO₂)

a)培养液：DMEM

i)获取渠道：ナカライテスク株式会社

b)血清：胎牛血清

i)浓度：10％

ii)获取渠道：Sigma-Aldrich

c)添加物：青霉素-链霉素混合溶液

i)浓度：100单位/mL青霉素、100μg/mL链霉素

ii)获取渠道：ナカライテスク株式会社

1.3.1.4 NALM6

1)细胞株名：NALM6

2)来源：急性淋巴细胞白血病

3)获取渠道：ATCC CRL-3273

a)培养液：RPMI1640

i)获取渠道：ナカライテスク株式会社

b)血清：胎牛血清

i)浓度：10％

ii)获取渠道：Sigma-Aldrich

c)添加物：青霉素-链霉素混合溶液

i)浓度：100单位/mL青霉素、100μg/mL链霉素

ii)获取渠道：ナカライテスク株式会社

1.3.2动物

1)种属/品系：小鼠/NOD/Shi-scid,IL-2RγKO Jic(NOG)

2)微生物学等级：无特定病原体(SPF)

3)获取渠道：インビボサイエンス株式会社

4)周龄(收货时)：6周龄

5)饲养条件

在设为下述条件的环境下进行动物的饲养。

a)温度：23±3℃

b)湿度：55±15％

c)照明：照明时间：午前8时～午后8时

关灯时间：午后8时～午前8时

d)饲料和水：自由摄取、CL-2(固体饲料、已辐射灭菌、日本クレア株式会社)、高压釜灭菌后的自来水

1.3.3组构成

1.3.3.1 IAP拮抗剂与CD19 CAR-T的联用

各试验的组构成如下。

[表2]

表2比瑞那帕联用试验

组	给药1	给药1用法用量	给药2	给药2用法用量	n数	雌雄
							1	-	-	-	-	5	♀
2	比瑞那帕	12mg/kg，q3-4d，ip	-	-	5	♀
							3	CD19 CAR-T	1×10⁵个细胞/个体，iv	-	-	5	♀
4	CD19 CAR-T	1×10⁶个细胞/个体，iv	-	-	5	♀
							5	比瑞那帕	12mg/kg，q3-4d，ip	CD19 CAR-T	1×10⁵个细胞/个体，iv	5	♀

[表3]

表3托利那泮联用试验

组	给药1	给药1用法用量	给药2	给药2用法用量	n数	雌雄
							1	-	-	-	-	5	♀
2	托利那泮	16mg/kg，qd，p0	-	-	5	♀
							3	CD19 CAR-T	1×10⁵个细胞/个体，iv	-	-	5	♀
4	CD19 CAR-T	1×10⁶个细胞/个体，iv	-	-	5	♀
							5	托利那泮	16mg/kg，qd，po	CD19 CAR-T	1×10⁵个细胞/个体，iv	5	♀

[表4]

表4托利那泮联用试验(从低肿瘤量^a起的联用试验)

组	给药1	给药1用法用量	给药2	给药2用法用量	n数	雌雄
							1	-	-	-	-	5	♀
2	托利那泮	16mg/kg，qd，po	-	-	5	♀
							3	CD19 CAR-T	2×10⁴个细胞/个体，iv	-	-	5	♀
4	CD19 CAR-T	1×10⁵个细胞/个体，iv	-	-	5	♀
							5	CD19 CAR-T	1×10⁶个细胞/个体，iv	-	-	5	♀
6	托利那泮	16mg/kg，qd，po	CD19 CAR-T	2×10⁴个细胞/个体，iv	5	♀
							7	托利那泮	16mg/kg，qd.po	CD19 CAR-T	1×10⁵个细胞/个体，iv	5	♀

^a低肿瘤量是指从以往的评价体系的约十分之一量的肿瘤植活量(约2×10⁶个光子/秒的发光量)起的联用评价

[表5]

表5 LCL161，AT406联用试验

组	给药1	给药1用法用量	给药2	给药2用法用量	n数	雌雄
							1	-	-	-	-	5	♀
2	LCL161	30mg/kg，qw，po	-	-	5	♀
							3	AT406	100mg/kg，qd，po	-	-	5	♀
4	CD19 CAR-T	1×10⁵个细胞/个体，iv	-	-	5	♀
							5	CD19 CAR-T	1×10⁶个细胞/个体，iv	-	-	5	♀
6	LCL161	30mg/kg，qw，po	CD19 CAR-T	1×10⁵个细胞/个体，iv	5	♀
							7	AT406	100mg/kg，qd，po	CD19 CAR-T	1×10⁵个细胞/个体，iv	5	♀

1.3.3.2 IAP拮抗剂与活性型整联蛋白β7 CAR-T(aITGB7 CAR-T)的联用

本试验的组构成如下。

[表6]

表6托利那泮联用试验

组	给药1	给药1用法用量	给药2	给药2用法用量	n数	雌雄
							1	-	-	-	-	5	♀
2	-	-	托利那泮	16mg/kg，qd，po	5	♀
							3	对照-T	3×10⁴个细胞/个体，iv	-	-	5	♀
4	对照-T	1×10⁵个细胞/个体，iv	-	-	5	♀
							5	aITGB7 CAR-T	3×10⁴个细胞/个体，iv	-	-	5	♀
6	aITGB7 CAR-T	1×10⁵个细胞/个体，iv	-	-	5	♀
							7	对照-T	3×10⁴个细胞/个体，iv	托利那泮	16mg/kg，qd，po	5	♀
8	对照-T	1×10⁵个细胞/个体，iv	托利那泮	16mg/kg，qd，po	5	♀
							9	aITGB7 CAR-T	3×10⁴个细胞/个体，iv	托利那泮	16mg/kg，qd，po	5	♀
10	aITGB7 CAR-T	1×10⁵个细胞/个体，iv	托利那泮	16mg/kg，qd，po	5	♀

1.3.3.3 IAP拮抗剂与NY-ESO-1 TCR-T的联用

本试验的组构成如下。

[表7]

表7托利那泮联用试验

1.3.3.4 IAP拮抗剂与CD19 CAR-KHYG-1的联用

本试验的组构成如下。

[表8]

表8托利那泮联用试验

it：intratumoral injection(肿瘤内注射)

1.3.4用法用量的设定依据

1.3.4.1托利那泮

根据在IAP拮抗剂的试验中通常使用的人乳腺癌细胞株MDA-MB-231异种移植小鼠系统中显示出效果的用法用量(16mg/kg、每天经口给药)而设定(参考文献1和2)。另外确认了，在作为本试验体系的NALM6-luc2中，相同方案完全没有显示出效果。

1.3.4.2比瑞那帕

根据CAR-T与比瑞那帕联用的论文设定用法用量(12mg/kg、每周2次腹腔内给药)(参考文献3)。另外确认了，在作为本试验体系的NALM6-luc2中，相同方案完全没有显示出效果。

1.3.4.3 LCL161

参考了现有报道的最低用量(30mg/kg、每周2次经口给药)(参考文献4)。确认了，在作为本试验体系的NALM6-luc2中，以30mg/kg、每周2次经口给药时没有显示出效果，另一方面，观察到一半以上的死亡例。据此将用法用量设定为降低到每周1次经口给药(30mg/kg、每周1次经口给药)。

1.3.4.4 AT406

根据现有报道中在人卵巢癌细胞株OVCAR异种移植小鼠系统以及人乳腺癌细胞株MDA-MB-231异种移植小鼠系统中显示出效果的用法用量来设定不停药的最大给药量(100mg/kg、每天经口给药)(参考文献5；参考文献6：Qian Cai,et al.,Med Chem.2011；54(8):2714-2726)。另外确认了，在作为本试验体系的NALM6-luc2中，相同方案完全没有显示出效果。

1.3.4.5 CD19 CAR-KHYG-1和KHYG-1

在胶质母细胞瘤细胞株的皮下肿瘤小鼠模型中，在使用KHYG-1的Ev CAR-KHYG-1的药理试验中，实施1×10⁷个细胞/个体、每周2次(总计3次)的肿瘤内给药(参考文献7：Nakazawa T,et al.,Anticancer Res.2020；40(6):3231-3237)，另外在使用胃癌细胞株的FOLR1 CAR-KHYG-1中，实施每周1次(总计2次)的肿瘤内给药(参考文献8：Minsung Kim,etal.,PLoS One.2018；13(6):e0198347)。

1.4试验方法

1.4.1 IAP拮抗剂与CD19 CAR-T的联用试验方法

购入インビボサイエンス株式会社生产的6周龄NOG小鼠，在7周龄时静脉内移植肿瘤细胞而制作荷瘤小鼠。在移植的前一天腹腔内给药20mg/kg的白消安(BSF)。饲养期间，每笼收容5只，在设定为温度24℃(实测：19.7～25.0℃)、湿度50％(实测：38.6～58.5％)、照明12小时/天(8:00AM至8:00PM)的P2A饲养室中饲养。在此期间使其自由摄取辐射灭菌后的小鼠用固体饲料(日本クレア、CL-2)和装在供水瓶中的高压釜灭菌自来水。

给药的CD19 CAR-T细胞按照组构成在分组同一天iv(静脉注射)给药1次。IAP拮抗剂也在分组同一天开始给药，按照组构成表进行po(经口)或ip(腹腔注射)给药。

评价期设为3周或4周，以基于IVIS(商标)的肿瘤发光值为指标进行分组和药理评价。利用IVIS(商标)的发光值测定以及体重测定每周实施2次。

1.4.2 IAP拮抗剂与活性型整联蛋白β7 CAR-T的联用试验方法

购入インビボサイエンス株式会社生产的6周龄NOG小鼠，在7周龄时静脉内移植肿瘤细胞而制作荷瘤小鼠。在小鼠尾部编号以进行识别。饲养期间，每笼收容5只，在设定为温度24℃(实测：19.7～25.0℃)、湿度50％(实测：38.6～58.5％)、照明12小时/天(8:00AM至8:00PM)的P2A饲养室中进行饲养。在此期间使其自由摄取辐射灭菌后的小鼠用固体饲料(日本クレア、CL-2)和装在供水瓶中的高压釜灭菌自来水。

给药的对照-T细胞以及活性型整联蛋白β7 CAR-T(aITGB7 CAR-T)细胞按照组构成在分组同一天iv给药1次。托利那泮也在分组同一天开始给药，按照组构成表进行每天po给药。

评价期设为至第14天或第21天为止，以基于IVIS的肿瘤发光值为指标进行分组和药理评价。利用IVIS的发光值测定以及体重测定每周实施2次。

1.4.3 IAP拮抗剂与NY-ESO-1 TCR-T的联用试验方法

购入インビボサイエンス株式会社生产的6周龄NOG小鼠，在7周龄时皮下移植肿瘤细胞而制作荷瘤小鼠。在小鼠尾部编号以进行识别。饲养期间，每笼收容5只，在设定为温度23℃、湿度55％、照明12小时/天(8:00AM至8:00PM)的P2A饲养室中进行饲养。在此期间使其自由摄取辐射灭菌后的小鼠用固体饲料(日本クレア、CL-2)和装在供水瓶中的高压釜灭菌自来水。

给药的NY-ESO-1 TCR-T细胞按照组构成在分组同一天iv给药1次。托利那泮也将分组同一天设为给药开始日，按照组构成表进行po给药。

评价期设为2周，根据使用卡尺得到的肿瘤直径测定结果进行分组和药理评价。肿瘤直径测定以及体重测定每周实施2次。

1.4.4 IAP拮抗剂与CD19 CAR-KHYG-1的联用试验方法

购入インビボサイエンス株式会社生产的6周龄NOG小鼠，在7周龄时使用基质胶皮下移植肿瘤细胞而制作荷瘤小鼠。在小鼠尾部编号以进行识别。饲养期间，每笼收容5只，在设定为温度24℃(实测：19.7～25.0℃)、湿度50％(实测：38.6～58.5％)、照明12小时/天(8:00AM至8:00PM)的P2A饲养室中进行饲养。在此期间使其自由摄取辐射灭菌后的小鼠用固体饲料(日本クレア、CL-2)和装在供水瓶中的高压釜灭菌自来水。

给药的CD19 CAR KHYG-1细胞以及KHYG-1细胞按照组构成分组后，进行总计4次肿瘤内给药。托利那泮也在分组同一天开始给药，按照组构成表进行每天经口给药。

评价期设为至第17天为止，将使用卡尺得到的肿瘤体积作为指标进行分组和药理评价。肿瘤体积测定以及体重测定每周实施2次，在各给药前实施。

1.4.1培养用培养基的制备

1.4.1.1 RPMI1640培养基的制备

向500mL的RPMI1640培养基中加入灭活(56℃处理30分钟)胎牛血清50mL、抗生素5mL，作为培养用培养基。另一方面，对于KHYG-1细胞以及CD19 CAR-KHYG-1细胞，将进一步以使终浓度达到100U/mL的方式加入IL-2而成的培养基作为培养用培养基。分别在低温室(设定温度4℃)中保存至使用为止。

1.4.1.2 DMEM培养基的制备

向500mL的DMEM培养基中加入灭活(56℃处理30分钟)胎牛血清50mL和抗生素5mL，在低温室(设定温度4℃)中保存至使用为止。

1.4.2移植用细胞悬浮液的制备

1.4.2.1移植用NALM6-luc2、MM.1S-luc2和NALM6细胞悬浮液的制备

关于细胞的培养，使用培养用培养基(以下记作培养基)在CO₂培养箱内(5％CO₂、37℃)进行培养。将冷冻保存的细胞株在37℃的恒温槽中快速解冻后，悬浮于培养基中，通过离心(150×g、5分钟、20℃)除去上清。将细胞重新悬浮于培养基中后，将全部量播种于烧瓶中，在37℃、5％CO₂存在下进行培养。培养开始后，用显微镜观察细胞的形态和增殖状态，培养至亚汇合(第1次传代)。将亚汇合的细胞悬浮液传代到装有新培养基的培养用烧瓶中(第2次传代)。将解冻后传代培养3次以上的细胞用于移植。进行传代的培养液量设为相对于新培养基的液量为1/10～1/3量的培养液。

将培养至亚汇合状态的细胞悬浮液通过离心操作用D-PBS(-)清洗3次后重新悬浮于无血清的RPMI1640。

NALM6-luc2的情况下，重新悬浮后，取出细胞悬浮液的一部分，用AOPI染色液对死细胞进行染色，使用血细胞测定装置对活细胞数进行计数。根据细胞的活细胞数的测定结果，以达到1×10⁷个细胞/mL的方式用RPMI1640进行稀释，由此制备。同样地，在低肿瘤量的体系中，以达到1×10⁶个细胞/mL的方式用无血清的RPMI1640进行稀释，由此制备。

MM.1S-luc2的情况下，重新悬浮后，取出细胞悬浮液的一部分，用AOPI染色液对死细胞进行染色，使用血细胞测定装置对活细胞数进行计数。根据细胞的活细胞数的测定结果，以达到3×10⁷个细胞/mL的方式用RPMI1640进行稀释，由此制备。

NALM6的情况下，重新悬浮后，取出细胞悬浮液的一部分，用AOPI染色液对死细胞进行染色，使用血细胞测定装置对活细胞数进行计数。根据细胞的活细胞数的测定结果，以达到1×10⁸个细胞/mL的方式用RPMI1640进行稀释，由此制备。将制备的细胞悬浮液与作为支架的基质胶(Corning(商标)高浓度基质胶基底膜基质)等量混和，作为最终的移植用悬浮液(5×10⁷个细胞/mL)。

制备后的细胞悬浮液在冰水中保存至移植时为止。

1.4.2.2移植用A375细胞悬浮液的制备

关于细胞的培养，使用培养用培养基(以下记作培养基)在CO₂培养箱内(5％CO₂、37℃)进行培养。将冷冻保存的A375细胞株在37℃的恒温槽中快速解冻后，悬浮于培养基中，通过离心(150×g、5分钟、20℃)除去上清。将细胞重新悬浮于培养基中后，将全部量播种到培养皿中，在37℃、5％CO₂存在下进行培养。培养开始后，用显微镜观察细胞的形态和增殖状态，培养至亚汇合(第1次传代)。将亚汇合状态的培养皿的上清除去，使用D-PBS(-)(ナカライテスク)进行清洗，加入胰蛋白酶-EDTA(ナカライテスク)，将细胞剥离、回收，进行离心处理(4℃、1200rpm、5分钟)。在DMEM培养基中悬浮，用AOPI染色液测定活细胞数。然后以适合培养皿尺寸的细胞密度进行播种，在CO₂培养箱中培养(第2次传代)。将传代培养3次以上的细胞用于移植。

对于培养的细胞，用胰蛋白酶-EDTA进行剥离回收，进行离心处理(4℃、1200rpm、5分钟)。除去上清后加入D-PBS(-)重新悬浮，同样进行离心分离，清洗细胞。将该清洗操作再重复进行2次。将细胞悬浮液的一部分用AOPI染色液测定活细胞数后，用D-PBS(-)制备1×10⁷个细胞/mL的细胞悬浮液。制备后的细胞悬浮液在冰中保存至移植时为止。

1.4.3移植

1.4.3.1 NALM6-luc2移植

使用固定器具将小鼠固定后，使用27G的Myjector(1mL、泰尔茂株式会社)向无麻醉下的动物的尾静脉中移植1×10⁶个细胞/0.1mL/个体的细胞悬浮液。另外，在低肿瘤量的体系中，移植1×10⁵个细胞/0.1mL/个体的细胞悬浮液。

1.4.3.2 MM.1S-luc2移植

使用固定器具将小鼠固定后，使用27G的Myjector(1mL、泰尔茂株式会社)向无麻醉下的动物的尾静脉中移植3×10⁶个细胞/0.1mL/个体的细胞悬浮液。

1.4.3.3 A375移植

对于皮下移植组，为了容易进行移植操作和其后的肿瘤增殖观察，在肿瘤移植前一天用安全剃刀将移植部位(右腋窝部)的毛剃掉。为了制作荷瘤小鼠，对于细胞悬浮液，在无麻醉下使用带有26G注射针的胰岛素用注射筒(1mL、泰尔茂株式会社)将1×10⁶个细胞/0.1mL/个体的细胞悬浮液移植到腋窝皮下。

1.4.3.4 NALM6移植

对于皮下移植组，为了容易进行移植操作和其后的肿瘤增殖观察，在肿瘤移植前一天用安全剃刀将移植部位(右腋窝部)的毛剃掉。为了制作荷瘤小鼠，对于细胞悬浮液，在无麻醉下使用带有26G注射针的胰岛素用注射筒(1mL、泰尔茂株式会社)将5×10⁶个细胞/0.1mL/个体的细胞悬浮液移植到腋窝皮下。

1.4.4分组

1.4.4.1 NALM6-luc2移植后的分组

按照图6的给药方案，在用白消安处置的第二天移植NALM6-luc2，在第3天使用In-Vivo成像系统IVIS(商标)Lumina X5(Perkin Elmer公司)测定发光值，以该发光值为指标使用SAS软件R9.4(SAS Institute Japan)利用分层随机提取法按照每组5只来进行分配。

1.4.4.2 MM.1S-luc2移植后的分组

按照图9的给药方案，在移植后第7天使用In-Vivo成像系统IVIS(商标)Lumina X5(Perkin Elmer公司)测定发光值，以该发光值为指标使用SAS软件R9.4(SAS InstituteJapan)利用分层随机提取法按照每组5只来进行分配。分组后，在小鼠尾部进行标记，由此进行个体识别。

1.4.4.3 A375移植后的分组

在移植后第8天测定肿瘤的长径和短径，计算肿瘤体积。使用SAS软件R9.4(SASInstitute Japan)，以肿瘤尺寸为指标利用分层随机提取法按照每组5只来进行分配。分组后，在小鼠尾部进行标记，由此进行个体识别。

1.4.4.4 NALM6移植后的分组

在移植后第21天测定肿瘤的长径和短径，计算肿瘤体积。使用SAS软件R9.4(SASInstitute Japan)，以肿瘤尺寸为指标利用分层随机提取法按照每组5只来进行分配。分组后，在小鼠尾部进行标记，由此进行个体识别。

1.4.5给药方法

1)将CD19 CAR-T细胞的悬浮液在分组时给药至尾静脉。关于给药量，对CD19 CAR-T活细胞数进行计数，按照组构成表以0.1mL/个体给药1次。给药时，使用27G的Myjector。

2)将活性型整联蛋白β7 CAR-T(aITGB7 CAR-T)细胞和对照-T细胞的悬浮液在分组时给药至尾静脉。关于给药量，对aITGB7 CAR-T活细胞数进行计数，制备基于组构成表的细胞密度的悬浮液，以0.1mL/个体给药1次。给药时，使用27G的Myjector。

3)将NY-ESO-1 TCR-T细胞的悬浮液从尾静脉进行给药。关于给药量，对NY-ESO-1TCR-T活细胞数进行计数，制备基于组构成表的细胞密度的悬浮液，以0.1mL/个体给药1次。给药时，使用27G的Myjector。

4)关于KHYG-1细胞和CD19 CAR-KHYG-1细胞的给药液，对活细胞数进行计数，制备基于组构成表的细胞密度的悬浮液，以0.1mL/个体每周2次(总计4次)给药至肿瘤内。给药时，使用27G的Myjector。

5)将比瑞那帕按照组构成表以10mL/kg给药至腹腔内，托利那泮、LCL161以及AT406同样地使用胃管按照组构成表以10mL/kg进行经口给药。腹腔内给药时，使用带有26G注射针的胰岛素用注射筒，经口给药时，将注射针换成胃管而进行给药。

1.4.6肿瘤测定

1.4.6.1肿瘤发光值(光子数/秒)的测定

将VivoGlo^TM-萤光素(普洛麦格)用D-PBS(-)溶解为30mg/mL后，在-20℃下避光冷冻保存。测定当天将溶解后的VivoGlo^TM-萤光素用等量的D-PBS(-)稀释。避光下在室温下保存至在试验中使用为止。基于预先测定的体重，以10mL/kg的容量腹腔内给药VivoGlo^TM-萤光素，给药20分钟后，使用IVIS(商标)成像系统测定肿瘤的发光值。测定中使用IVIS(商标)Lumina X5。图1～5和图7中，纵轴的总通量[p/s]表示肿瘤发光值(光子数/秒)。

1.4.6.2肿瘤直径的测定

肿瘤直径的测定中，使用电子卡尺(三丰)测定短径和长径。移植肿瘤细胞后，每周进行2次肿瘤直径的测定。

1.4.6.3肿瘤体积的测定

基于肿瘤直径测定结果，使用下式计算肿瘤体积(TV：tumor volume)。

TV＝L×W²×1/2

其中，

TV：肿瘤体积(mm³)

L：长径(mm)

W：短径(mm)

1.4.7体重

关于体重，在分组日和剖检日进行测定，在给药期间内每周测定2次。

1.5评价项目

肿瘤发光值或肿瘤体积

体重

体重变化

1.6统计分析方法

各数据使用Microsoft Excel 2013计算汇总统计量(平均值、标准偏差和标准误差)。对于进行统计分析的数据，使用SAS软件R9.4(SAS Institute Japan)进行。显著性定义为p<0.05。

2.结果

2.1 IAP拮抗剂与CD19 CAR-T的联用试验

2.1.1比瑞那帕与CD19 CAR-T的联用试验

与CD19 CAR-T单独相比，比瑞那帕与CD19 CAR-T的联用没有使抗肿瘤效果提高(图1)。

2.1.2托利那泮与CD19 CAR-T的联用试验

通过托利那泮与CD19 CAR-T的联用，在第7天及之后确认到显著的联用效果。在将托利那泮与1×10⁵个细胞的CD19 CAR-T联用时，确认到在第14天与1×10⁶个细胞的CD19CAR-T单独时的效果同等、之后进一步提高的肿瘤的消退(图2)。

2.1.3针对低肿瘤的、托利那泮与CD19 CAR-T的联用试验

通过托利那泮与CD19 CAR-T的联用，确认到强的联用效果。将托利那泮与1×10⁵个细胞的CD19 CAR-T联用时，在第17天显示出与1×10⁶个细胞的CD19 CAR-T单独时同等的效果，将托利那泮与2×10⁴个细胞的CD19 CAR-T联用时，在第21天得到与1×10⁶个细胞的CD19 CAR-T单独时同等的效力，结果表明有可能削减实质上50倍以上的CAR-T细胞数(图3)。

2.1.4 LCL161、AT406与CD19 CAR-T的联用试验

通过LCL161与CD19 CAR-T的联用，在第7天及之后确认到联用效果。但是，LCL161的毒性高，一半以上的动物因LCL161而死亡。将LCL161与1×10⁵个细胞的CD19 CAR-T联用时，在第14天及之后与1×10⁶个细胞的CD19 CAR-T单独时的效果达到同等，并且最大效力与托利那泮相比也不足(图4)。

另一方面，通过AT406与CD19 CAR-T的联用，在第10天及之后确认到联用效果。将AT406与1×10⁵个细胞的CD19 CAR-T联用时，在第14天及之后与1×10⁶个细胞的CD19 CAR-T单独时的效果达到同等(图5)。

2.2托利那泮与活性型整联蛋白β7 CAR-T(aITGB7 CAR-T)的联用试验

关于托利那泮与3×10⁴个细胞的aITGB7 CAR-T组合的效果，进行21天的评价，确认到显著的联用效果。在3×10⁴个细胞的aITGB7 CAR-T单独给药组中，在第14天及之后开始显示出抗肿瘤效果，另一方面，与托利那泮的组合在第11天及之后显示出明显的消退，确认到显著的协同效果(图7)。

2.3托利那泮与NY-ESO-1 TCR-T的联用试验

关于第15天的肿瘤体积，3×10⁶个细胞/个体的NY-ESO-1 TCR-T与托利那泮的联用组相对于各单剂组确认到显著性差异。1×10⁷个细胞/个体的NY-ESO-1 TCR-T单独给药组显示出高于3×10⁶个细胞/个体的NY-ESO-1 TCR-T单独给药组的抗肿瘤效果，在第7天及之后达到低于第0天的肿瘤量，但是其组合组确认到进一步高的消退，显示出由联用带来的协同效果。

2.4托利那泮与CD19 CAR-KHYG-1的联用试验

关于托利那泮与CD19 CAR-KHYG-1组合的效果，进行17天的评价，确认到显著的联用效果。CD19 CAR-KHYG-1以及托利那泮的单独给药没有显示出抗肿瘤效果，另一方面，两制剂的组合在第7天及之后显示出显著的增殖抑制效果，在第17天确认到显著的联用效果(图9)。

3结论

包括托利那泮的IAP拮抗剂单独时，没有确认到对NALM6(B-ALL)和MM.1S(MM)的效力。另一方面，关于托利那泮+CD19 CAR-T、托利那泮+活性型整联蛋白β7 CAR-T(aITGB7CAR-T)、托利那泮+NY-ESO-1 TCR-T和托利那泮+CD19 CAR-KHYG-1的联用活性，得到了重现性高的显著的结果。其它作为IAP拮抗剂的AT406、LCL161也确认到与CD19 CAR-T的联用效果，但是，LCL161的情况下，观察到体重减少和能够确认死亡例的毒性。另外，关于最大效果，托利那泮联用也更占优势。其次，AT406显示出与托利那泮相似的联用效果趋势，但是效果的速度不同，因此，通过联用结果的AUC以及最大肿瘤量(发光值)验证了AT406和托利那泮的差别。通过此分析，就到第17天为止的联用数据的AUC而言，可得到与托利那泮联用相伴的显著性，在第14天也得到了同样的结果(表9、表10)。同样，在最大肿瘤量方面，AT406与托利那泮也能够得到显著性差异(表11)。

综上，确认了：托利那泮与其它IAP拮抗剂相比，显示出更高的与CAR-T细胞的联用中的药效增强作用。由此表明，托利那泮系药剂在与包括CAR-T细胞、TCR-T细胞和CAR-NK细胞的改造免疫细胞的联用中的药效增强作用方面也显著地优良。

另外，在体外确认到，本实施例的CAR-T通过与表达靶标CAR抗原的肿瘤细胞(例如CD19阳性NALM6)反应而产生了细胞因子(例如TNF-α)。进而确认到，在由CAR-T产生的细胞因子与托利那泮共存时，不仅对抗原表达细胞、而且对抗原阴性肿瘤细胞(例如CD19阴性NALM6)也诱导了细胞死亡(例如凋亡)。通过这样的对肿瘤细胞的非接触性细胞死亡的诱导，可期待对发生了抗原逃逸的肿瘤细胞、转移到了改造免疫细胞无法接近的部位的肿瘤细胞也发挥抗肿瘤效果。

[表9]

表9以AUC为指标的t检验(第17天)

	AT406	LCL161	比瑞那帕
				托利那泮	＜0.05	＜0.05	＜0.05

[表10]

表10以AUC为指标的t检验(第14天)

	AT406	LCL161	比瑞那帕
				托利那泮	＜0.05	＜0.05	＜0.05

[表11]

表11以最大肿瘤量为指标的t检验

	AT406	LCL161	比瑞那帕
				托利那泮	＜0.05	＜0.05	＜0.05

Claims

1.一种药物组合物，其含有下述式(1)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物，所述药物组合物与以表达嵌合抗原受体或重组T细胞受体的方式进行了改造的免疫细胞组合给药，

2.一种药物组合物，其含有以表达嵌合抗原受体或重组T细胞受体的方式进行了改造的免疫细胞，所述药物组合物与下述式(1)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物组合给药，

3.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其中，所述嵌合抗原受体或重组T细胞受体特异性地识别选自CD19、整联蛋白β7和NY-ESO-1中的抗原。

4.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其中，所述嵌合抗原受体或重组T细胞受体特异性地识别活性型整联蛋白β7。

5.根据权利要求1～4中任一项所述的药物组合物，其中，所述免疫细胞为以表达嵌合抗原受体的方式进行了改造的T细胞或NK细胞，所述嵌合抗原受体含有：

(1)能识别抗原的胞外域、

(2)跨膜结构域、

(3)共刺激分子的胞内信号转导结构域、和

(4)CD3ζ的胞内信号转导结构域。

6.根据权利要求5所述的药物组合物，其中，所述胞外域为能识别CD19或整联蛋白β7的胞外域。

7.根据权利要求5或6所述的药物组合物，其中，所述跨膜结构域为CD28或CD8的跨膜结构域。

8.根据权利要求5～7中任一项所述的药物组合物，其中，所述共刺激分子为CD2、CD4、CD5、CD8α、CD8β、CD28、CD134(OX40)、CD137(4-1BB)或CD278(ICOS)。

9.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其中，所述免疫细胞为以表达重组T细胞受体的方式进行了改造的T细胞或NK细胞，所述重组T细胞受体具有能识别NY-ESO-1的可变结构域。

10.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其中，所述免疫细胞为以表达特异性地识别CD19的嵌合抗原受体的方式进行了改造的T细胞、以表达特异性地识别整联蛋白β7的嵌合抗原受体的方式进行了改造的T细胞、以表达特异性地识别CD19的嵌合抗原受体的方式进行了改造的NK细胞或者以表达特异性地识别NY-ESO-1的重组T细胞受体的方式进行了改造的T细胞。

11.根据权利要求1～10中任一项所述的药物组合物，其用于预防和/或治疗癌症。

12.根据权利要求1～11中任一项所述的药物组合物，其中，所述式(1)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物以10mg～180mg/天进行给药。

13.根据权利要求1～12中任一项所述的药物组合物，其中，所述免疫细胞以1×10³个～1×10⁸个(活细胞数)/kg体重/天进行给药。

14.一种试剂盒，其具备含有下述式(1)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物的第一剂以及含有以表达嵌合抗原受体或重组T细胞受体的方式进行了改造的免疫细胞的第二剂，

15.一种预防和/或治疗癌症的方法，其包括下述步骤：

将下述式(1)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物与以表达嵌合抗原受体或重组T细胞受体的方式进行了改造的免疫细胞组合给药于需要预防和/或治疗癌症的对象，

16.下述式(1)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物在制备用于与以表达嵌合抗原受体或重组T细胞受体的方式进行了改造的免疫细胞组合给药的药物中的应用，

17.以表达嵌合抗原受体或重组T细胞受体的方式进行了改造的免疫细胞在制备用于与下述式(1)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂合物组合给药的药物中的应用，