CN117794927A - 作为DNA聚合酶θ抑制剂的O-连接噻二唑基化合物 - Google Patents

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CN117794927A CN202280054416.4A CN202280054416A CN117794927A CN 117794927 A CN117794927 A CN 117794927A CN 202280054416 A CN202280054416 A CN 202280054416A CN 117794927 A CN117794927 A CN 117794927A
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P·A·巴尔桑蒂
F·A·斋浦里
D·L·塞弗兰斯
C·王
K·J·达菲
B·G·劳霍恩
N·D·亚当斯
J·博特扬斯基
M·G·达西
T·J·基耶索
J·J·迈卡蒂
C·玛特耶尔
A·布伊特拉戈圣塔尼拉
X·田
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Abstract

本文公开了某些式(I)的噻二唑基衍生物，其抑制DNA聚合酶θ(Pol#)活性，特别是通过抑制Pol#的ATP依赖性解旋酶结构域活性来抑制Pol#活性。还公开了包含此类化合物的药物组合物以及治疗和/或预防可通过抑制Pol#治疗的疾病如癌症的方法，所述癌症包括同源重组(HR)缺陷型癌症。

Description

作为DNA聚合酶θ抑制剂的O-连接噻二唑基化合物
背景技术
针对DNA修复缺陷已成为癌症治疗中经过验证且有效的策略。然而，DNA修复缺陷型癌症往往变得依赖于备用DNA修复途径，这是一个“致命弱点”，可以针对性地消除癌细胞，并且是合成致死的基础。合成致死的实例是聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)抑制剂在治疗BRCA缺陷型乳腺癌和卵巢癌中的成功(Audeh M.W.等人，Lancet(2010)；376(9737)：245-51)。
DNA损伤修复过程对于基因组的维持和稳定性至关重要，其中双链断裂(DSB)主要通过细胞周期G1期的非同源末端连接(NHEJ)途径和S-G2期的同源重组(HR)修复。较少被关注的替代末端连接(alt-EJ)，也称为微同源介导的末端连接(MMEJ)途径，通常被认为是NHEJ或HR受损时的“备用”DSB修复途径。许多遗传学研究强调了DNA聚合酶θ(Polθ，由POLQ编码)在高等生物体中刺激MMEJ中的作用(Chan S.H.等人,PLoS Genet.(2010)；6:e1001005；Roerink S.F.等人,Genome research.(2014)；24:954–962；Ceccaldi R.等人,Nature(2015)；518:258-62；和Mateos-Gomez P.A.等人,Nature(2015)；518:254-57)。
Polθ在人类DNA聚合酶中是独特的，不仅表现出C端DNA聚合酶结构域，而且表现出N端解旋酶结构域，该结构域被长且不太保守的中心结构域隔开，该中心结构域除了Rad51结合外功能未知(Seki等人，2003年，Shima等人，2003年；Yousefzadeh和Wood，2013年)。N端ATP酶/解旋酶结构域属于SF2解旋酶超家族的HELQ类。在同源重组缺陷(HRD)细胞中，Polθ可以通过alt-EJ途径在DNA损伤位点进行容易出错的DNA合成。已经表明，Polθ的解旋酶结构域通过破坏Rad51核蛋白复合物的形成来抑制HR通路，而Rad51核蛋白复合物的形成涉及电离辐射后HR依赖性DNA修复反应的启动。Polθ的这种抗重组酶活性促进alt-EJ途径。此外，Polθ的解旋酶结构域有助于微同源介导的链退火(Chan SH等人，PLoS Genet.(2010)；6:e1001005；和Kawamura K等人，Int.J.Cancer(2004)；109：9-16)。当ssDNA突出端包含>2bp的微同源性时，Polθ通过利用这种退火活性，有效促进alt-EJ途径中的末端连接(KentT.等人,Elife(2016)；5:e13740)和Kent T.等人，Nat.Struct.Mol.Biol.(2015)；22:230–237)。这种重新退火活性是通过Rad51相互作用的耦合作用以及随后ATP酶介导的Rad51从DSB损伤位点的置换来实现的。退火后，DNA的引物链可以通过Polθ的聚合酶结构域延伸。
Polθ的表达在正常细胞中基本不存在，但在乳腺癌、肺癌和卵巢癌中表达上调(Ceccaldi R.等人,Nature(2015)；518,258-62)。另外，Polθ表达的增加与乳腺癌的不良预后相关(Lemee F等人，Pr℃Natl Acad Sci USA.(2010)；107:13390-5)。已经表明，HR、NHEJ或ATM缺陷的癌细胞高度依赖于Polθ表达(Ceccaldi R.等人,Nature(2015)；518:258-62,Mateos-Gomez PA等人,Nature(2015)；518:254-57，以及Wyatt D.W.等人，Mol.Cell(2016)；63:662-73)。因此，Polθ是针对含有DNA修复缺陷的癌症的新型合成致死疗法的一个有吸引力的靶点。
发明概述
本文公开了抑制Polθ活性，特别是通过抑制Polθ的ATP依赖性解旋酶结构域活性来抑制Polθ活性的某些噻二唑基衍生物。本文公开了抑制Polθ活性的某些噻二唑基衍生物，特别是通过抑制Polθ的ATP依赖性解旋酶结构域活性来抑制Polθ活性。还公开了包含此类化合物的药物组合物以及治疗和/或预防可通过抑制Polθ来治疗的疾病的方法，所述疾病例如癌症，包括同源重组(HR)缺陷型癌症。
在一个方面，提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐:
其中环A、Ar1、R1、R2、R3和下标n和m具有下文提供的含义。
在相关方面，提供了包含式(I)化合物或其亚实施方案或药学上可接受的盐的药物组合物，并且至少一个药学上可接受的赋形剂。
在另一方面，提供了治疗和/或预防患者中以Polθ过表达为特征的疾病的方法，包括向患者给药治疗有效量的式(I)化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐。在一个实施方案中，患者被认为需要这样的治疗。在另一个实施方案中，式(I)化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐以药物组合物给药。在又一个实施方案中，该疾病为癌症。
又一方面，提供了用于治疗和/或预防患者的同源重组(HR)缺陷型癌症的方法，其包括向患者给药治疗有效量的式(I)化合物或亚实施方案或其药学上可接受的盐。在一个实施方案中，患者被认为需要这样的治疗。在另一个实施方案中，式(I)化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐以药物组合物给药。
在另一个方面，提供了用于抑制癌细胞中由Polθ进行的DNA修复的方法，其包括使细胞与有效量的式(I)化合物或亚实施方案或其药学上可接受的盐接触。在一个实施方案中，癌症是HR缺陷型癌症。
在又一方面，提供了治疗和/或预防患者癌症的方法，其中该癌症的特征在于BRCA基因表达的减少或缺乏，BRCA基因的缺乏，或BRCA蛋白功能的减少，包括向受试者给药治疗有效量的式(I)化合物或其亚实施方案或药学上可接受的盐，任选地在药物组合物中。
在又一个方面，提供用于治疗方法的式(I)化合物或其亚实施方案或药学上可接受的盐。
在又一个方面，提供用于抑制细胞中由Polθ引起的DNA修复的式(I)化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐。在一个实施方案中，细胞是HR缺陷细胞。
在另一方面，提供用于治疗和/或预防患者疾病的式(I)化合物或其亚实施方案或药学上可接受的盐，其中所述疾病的特征是Polθ的过表达。
在又一方面，提供用于治疗和/或预防患者癌症的式(I)化合物或其亚实施方案或药学上可接受的盐，其中该癌症的特征在于BRCA基因表达减少或缺失、BRCA基因缺失或BRCA蛋白功能降低。
在又一个方面，提供用于治疗和/或预防患者HR缺陷型癌症的式(I)化合物或其亚实施方案或药学上可接受的盐。
在另一方面，提供用于治疗和/或预防对聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)抑制剂疗法有抗性的患者的癌症的式(I)化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐。对PARP抑制剂具有抗性的癌症的实例包括但不限于乳腺癌、卵巢癌、肺癌、膀胱癌、肝癌、头颈癌、胰腺癌、胃肠癌和结直肠癌。
在另一方面，提供了式(I)化合物或其亚实施方案或药学上可接受的盐在制备用于治疗或预防癌症的药物中的用途，其中该癌症的特征在于BRCA基因表达减少或缺失、BRCA基因缺失或BRCA蛋白功能降低。
在另一方面，提供了式(I)化合物或其亚实施方案或药学上可接受的盐在制备用于治疗或预防HR缺陷型癌症的药物中的用途。
在另一方面，提供了式(I)化合物或其亚实施方案或药学上可接受的盐在制备用于治疗患者中对聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)抑制剂疗法有抗性的癌症的药物中的用途。
在上述方法、用途和组合物的相关方面，所述癌症是淋巴瘤、横纹肌样瘤(rhabdoid tumor)、多发性骨髓瘤、子宫癌、胃部癌症、周围神经系统癌症、横纹肌肉瘤、骨癌、结直肠癌、间皮瘤、乳腺癌、卵巢癌、肺癌、成纤维细胞癌、中枢神经系统癌症、泌尿道癌症、上呼吸消化道癌(upper aerodigestive cancer)、白血病、肾癌、皮肤癌、食管癌和胰腺癌(来自癌细胞系大规模脱落筛选的数据表明，来自上述癌症的一些细胞系依赖于聚合酶θ进行增殖(https://depmap.org/portal/)。
在一些实施方案中，HR缺陷型癌症是乳腺癌。乳腺癌包括但不限于小叶原位癌(LCIS)、导管原位癌(DCIS)、浸润性导管癌(IDC)、炎性乳腺癌、乳头佩吉特病、叶状肿瘤、血管肉瘤、腺样囊性癌、低度恶性腺鳞癌、髓样癌、粘液癌、乳头状癌、管状癌、化生性癌、微乳头状癌、混合癌或其他乳腺癌，包括但不限于三阴性、HER阳性、雌激素受体阳性、孕激素受体阳性、HER和雌激素受体阳性、HER和孕激素受体阳性、雌激素和孕激素受体阳性，以及HER和雌激素和黄体酮受体阳性的。在其他实施方案中，HR缺陷型癌症是卵巢癌。卵巢癌包括但不限于上皮性卵巢癌(E℃)、成熟畸胎瘤、无性细胞瘤、内胚窦肿瘤、颗粒卵泡膜肿瘤、支持间质细胞肿瘤和原发性腹膜弧癌。
详细说明
在进一步描述本发明之前，应当理解，本发明不限于本文阐述的特定实施例，并且还应当理解，本文使用的术语仅用于描述特定实施例的目的，并且并非旨在限制。
本文和所附权利要求中使用的单数形式“一”、“一个”和“所述”包括复数指示物，除非上下文另有明确说明。还应当注意的是，权利要求可以被起草为排除任何可选元素。因此，该陈述旨在充当与权利要求要素的叙述相关的诸如“唯一”、“仅”等的排他性术语的使用或“否定”限制的使用的先行基础。
在提供数值范围的情况下，应当理解，除非上下文另外明确指出，否则在该范围的上限和下限与该规定范围内的任何其他规定值或中间值之间的每个中间值，直至下限单位的十分之一，都涵盖在本发明内。这些较小范围的上限和下限可以独立地包括在较小范围内，并且也涵盖在本发明内，但受到所述范围中任何具体排除的限制的影响。当所述范围包括一个或两个限制时，排除其中一个或两个所包括的限制的范围也包括在本发明中。除非另有定义，本文中使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
当需要时，本文中的任何定义可以与任何其他定义组合使用来描述复合结构基团。按照惯例，任何此类定义的尾部元素都是附加到母体部分的元素。例如，复合基团烷氧基烷基是指烷氧基通过烷基连接至母体分子。
本文讨论的出版物仅是为了它们在本申请的提交日期之前的公开而提供的。此外，所提供的发布日期可能与实际发布日期不同，这可能需要独立确认。
定义：
除非另有说明，说明书和权利要求书中使用的以下术语是为本申请的目的而定义的，并且具有以下含义：
除非另有说明，术语“烷基”本身或作为另一取代基的一部分是指具有指定碳原子数的饱和直链或支链烃基(即C1-8指1至8个碳)。烷基可包括任意数量的碳，例如C1-2、C1-3、C1-4、C1-5、C1-6、C1-7、C1-8、C1-9、C1-10、C2-3、C2-4、C2-5、C2-6、C3-4、C3-5、C3-6、C4-5、C4-6和C5-6。烷基的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、仲丁基、正戊基、正己基、正庚基、正辛基等。
术语“亚烷基”是指具有所示碳原子数并连接至少两个其他基团的直链或支链饱和脂族基团，即二价烃基。连接至亚烷基的两个部分可以连接至亚烷基的相同原子或不同原子。例如，直链亚烷基可以是-(CH2)n-的二价基团，其中n是1、2、3、4、5或6。代表性的亚烷基包括但不限于亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚异丙基、亚丁基、亚异丁基、亚仲-丁基、亚戊基、亚己基等。
术语“烷氧基”是指具有将烷基连接至连接点的氧原子的烷基：烷基-O-。对于烷基，烷氧基可以具有任何合适数量的碳原子，例如C1-6，并且可以是直链或支链的。烷氧基包括例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙-氧基、丁氧基、2-丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、己氧基等。
如本文所用，术语“氰基”本身或作为另一取代基的一部分，是指具有式-CN的部分，即，与氮原子三键键合的碳原子。
术语“环烷基”是指具有指定数量的环原子的饱和或部分不饱和烃环(例如，C3-6环烷基)。环烷基可包括任意数量的碳，例如C3-6、C4-6、C5-6、C3-8、C4-8、C5-8、C6-8、C3-9和C3-10。部分不饱和环烷基在环中具有一个或多个双键或三键，但环烷基不是芳香族的。饱和单环环烷基环包括例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环辛基。
术语“环烷氧基”是指具有将环烷基连接至连接点的氧原子的环烷基：环烷基-O-。环烷基如本文所定义。
术语“螺环基”或“螺环烷基”是指具有6至12个环原子的饱和或部分不饱和的双环，其中两个环通过单个碳原子(也称为螺原子)连接。部分不饱和的螺环烷基在环中具有一个或多个双键或三键，但螺环烷基不是芳香族的。代表性实例包括但不限于螺[3.3]庚烷、螺[4.4]壬烷、螺[3.4]辛烷等。
术语“桥连环烷基”是指单环6至11元烃基，其中两个非相邻环A原子通过(CH2)n基团连接，其中n为1至3(本文也称为桥连基团))。桥连环烷基的实例包括但不限于双环[2.2.1]庚烷和双环[2.2.2]辛烷。为简洁起见，该术语还意在包括桥连多环烃基，例如金刚烷。
术语“杂环烷基”是指具有指定数量的环顶点(例如3至7元环)并且具有1至5个选自N、O和S的杂原子作为环顶点的饱和或部分不饱和的单环。部分不饱和的杂环烷基在环中具有一个或多个双键或三键，但杂环烷基不是芳香族的。杂环烷基可包括任何数量的环原子，例如3至6、4至6、5至6、3至7、4至7或5至7个环成员。杂环烷基中可包含任何合适数量的杂原子，例如1、2、3或4，或1至2、1至3、1至4、2至3、2至4或3至4。杂环烷基的非限制性实例包括吡咯烷、咪唑烷、吡唑烷、丁内酰胺、戊内酰胺、咪唑烷酮、乙内酰脲、二氧戊环、邻苯二甲酰亚胺、哌啶、1,4-二噁烷、吗啉、硫代吗啉、硫代吗啉-S-氧化物、硫代吗啉-S,S-氧化物、哌嗪、吡喃、吡啶酮、3-吡咯啉、噻喃、吡喃酮、四氢呋喃、四氢噻吩、奎宁环等。杂环烷基可以通过环碳或杂原子连接至分子的其余部分。
术语“双环杂环烷基”或“双环杂环基”是指具有指定数目的环顶点(例如6至12元环)并具有1至5个选自N、O和S的杂原子作为环顶点的饱和或部分不饱和的稠合双环。部分不饱和的双环杂环烷基在环中具有一个或多个双键或三键，但双环杂环烷基不是芳香族的。双环杂环烷基可包括任何数量的环原子，例如6至8、6至9、6至10、6至11或6至12个环成员。杂环烷基中可包含任何合适数量的杂原子，例如1、2、3或4，或1至2、1至3、1至4、2至3、2至4或3至4。双环杂环烷基的非限制性实例包括十氢-1,5-萘啶、八氢吡咯并[1,2-a]吡嗪等。
术语“桥连杂环基”或“桥连杂环烷基”是指杂环烷基环(具有5至8个环顶点)，其中两个不相邻的环原子通过(CRR')n基团连接，其中n为1至3并且每个R独立地是H或甲基(本文也可称为“桥连”基团)。桥连杂环基具有1至5个选自N、O和S的杂原子作为环顶点。杂原子环顶点可以位于杂环烷基环部分以及桥连基团两者中。当在桥连基团中时，杂原子替代CRR'基团。实例包括但不限于2-氮杂双环[2.2.2]辛烷、奎宁环、7-氧杂双环[2.2.1]庚烷等。
术语“螺杂环基”或“螺杂环烷基”是指具有6至12个环原子的饱和或部分不饱和的双环，其中两个环通过单个碳原子(也称为螺原子)连接。螺杂环基具有1至5个选自N、O和S的杂原子作为环顶点，并且氮原子任选被季铵化。部分不饱和螺杂环烷基在环中具有一个或多个双键或三键，但螺杂环烷基不是芳香族的。代表性实例包括但不限于4-氧杂螺[2.4]庚烷、2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷、2,6-二氮杂螺[3.4]辛烷、2-氮杂螺[3.4]辛烷、2-氮杂螺[3.5]-壬烷、2,7-二氮杂螺[4.4]壬烷等。
除非另有说明，术语“卤代”或“卤素”本身或作为另一取代基的一部分是指氟、氯、溴或碘原子。
术语“卤代烷基”是指如上所定义的烷基，其中一些或全部氢原子被卤素原子替代。对于烷基，卤代烷基可具有任何合适数量的碳原子，例如C1-6。例如，术语“C1-4卤代烷基”意在包括三氟甲基、2,2,2-三氟乙基、4-氯丁基、3-溴丙基等。
术语“卤代烷氧基”是指其中一些或全部氢原子被卤素原子取代的烷氧基。对于烷基，卤代烷氧基可以具有任何合适数量的碳原子，例如C1-6，并且可以是直链或支链的，并且被1、2、3或更多个卤素取代。当所有氢被卤素例如氟取代时，化合物被全-取代，例如全氟化。卤代烷氧基包括但不限于三氟甲氧基、2,2,2-三氟乙氧基、全氟乙氧基等。
术语“羟基烷基”是指其中一个氢原子被羟基(-OH)基团取代的烷基基团。对于烷基，羟基烷基可以具有任何合适的碳原子数，例如C1-6，并且可以是直链或支链的。羟基烷基包括例如羟基甲基、1-羟基乙基、2-羟基乙基、2-羟基丙-2-基等。
除非另有说明，术语“芳基”是指多不饱和的、通常为芳族的烃基，其可以是单环或稠合在一起或共价连接的多个环(最多三个环)。芳基的非限制性实例包括苯基、萘基和联苯基。
术语“杂芳基”是指含有1至5个选自N、O和S的杂原子的5至10元芳环(或稠合环系统)。杂芳基可以包括任意数量的环原子，例如、5至6、5至8、6至8、6至9、9至10、9、10个环成员。杂芳基中可包含任何合适数量的杂原子，例如1、2、3、4或5，或1至2、1至3、1至4、1至5、2至3、2至4、2至5、3至4或3至5。杂芳基可通过杂原子连接至分子的其余部分。杂芳基的非限制性实例包括吡啶基、哒嗪基、吡嗪基、嘧啶基、三嗪基、喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、辛啉基、酞嗪基、苯并三嗪基、嘌呤基、苯并咪唑基、苯并吡唑基、苯并三唑基、苯并异噁唑基、异苯并呋喃基、异吲哚基、中氮茚基、苯并三嗪基、噻吩并吡啶基、噻吩并嘧啶基、吡唑并嘧啶基、咪唑并吡啶、苯并噻唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、异噻唑基、吡唑基、吲唑基、蝶啶基、咪唑基、三唑基、四唑基、噁唑基、异噁唑基、噻二唑基、吡咯基、噻唑基、呋喃基、噻吩基等。
如本文所用，术语“杂原子”意在包括氧(O)、氮(N)、硫(S)。
术语"药学上可接受的盐"意在包括活性化合物的用相对无毒性的酸或碱(取决于本申请所述化合物上存在的具体取代基)制备的盐。当本发明化合物含有相对酸性的官能团时，碱加成盐可如下得到：使中性形式的上述化合物与足够量的所需碱在存在或不存在合适惰性溶剂的情况下接触。由药学上可接受的无机碱得到的盐的实例包括铝盐、铵盐、钙盐、铜盐、铁盐、亚铁盐、锂盐、镁盐、锰盐、亚锰盐、钾盐、钠盐、锌盐等。由药学上可接受的有机碱得到的盐包括以下物质的盐：伯胺、仲胺和叔胺，包括取代的胺、环胺、天然存在的胺等，例如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N,N’-二苄基乙二胺、二乙胺、2-二乙基氨基乙醇、2-二甲基氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡萄糖胺(glucamine)、氨基葡萄糖(glucosamine)、组氨酸、哈胺、异丙胺、赖氨酸、甲基葡萄糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨基丁三醇等。当本发明化合物含有相对碱性的官能团时，酸加成盐可如下得到：使中性形式的上述化合物与足够量的所需酸在存在或不存在合适惰性溶剂的情况下接触。药学上可接受的酸加成盐的实例包括由以下无机酸得到的那些盐：例如盐酸、氢溴酸、硝酸、碳酸、单氢碳酸、磷酸、单氢磷酸、二氢磷酸、硫酸、单氢硫酸、氢碘酸或亚磷酸等；及由以下相对无毒性的有机酸得到的盐：例如乙酸、丙酸、异丁酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、富马酸、扁桃酸、邻苯二甲酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、枸橼酸、酒石酸、甲磺酸等。本发明还包括氨基酸例如精氨酸等的盐及有机酸例如葡萄糖醛酸或半乳糖醛酸等的盐(参见例如Berge,S.M.,etal.,"PharmaceuticalSalts",Journal of Pharmaceutical Science,1977,66,1-19)。本发明一些具体化合物同时含有碱性官能团和酸性官能团，从而可将所述化合物转化成碱加成盐或酸加成盐。
中性形式的化合物可如下重新得到：使盐与碱或酸接触且以常规方式对母体化合物进行分离。母体形式的化合物在一些物理性质(例如在极性溶剂中的溶解度)上不同于各种盐形式，但就本发明目的而言，盐与母体形式的化合物是等价的。
本公开的某些化合物可以以非溶剂化形式以及溶剂化形式存在，包括水合形式。就本公开的目的而言，溶剂化形式与非溶剂化形式等同并且旨在涵盖在本发明的范围内。本发明的某些化合物可以多种结晶或无定形形式存在。所有潜在的物理形式都旨在落入本发明的范围内。
本发明的某些化合物具有不对称碳原子(光学中心)；外消旋体、非对映异构体和单独的异构体(例如单独的对映异构体)都旨在涵盖在本发明的范围内。当显示立体化学描述时，其意指其中存在一种异构体并且基本上不含另一种异构体的化合物。“基本上不含”另一种异构体表示两种异构体的比例至少为80/20，更优选90/10，或95/5或更高。在一些实施方案中，异构体之一将以至少99％的量存在。
本发明的化合物还可以在构成此类化合物的一个或多个原子上含有非天然比例的原子同位素。同位素的非天然比例可以定义为从自然界中发现的量到由100％的相关原子组成的量。例如，化合物可掺入放射性同位素，例如氚(3H)、碘-125(125I)或碳-14(14C)，或非放射性同位素，例如氘(2H)或碳-13(13C)。此类同位素变体可以向本申请中别处描述的那些提供额外的效用。例如，本发明化合物的同位素变体可具有额外的用途，包括但不限于作为诊断和/或成像试剂，或作为细胞毒性/放射性毒性治疗剂。另外，本发明化合物的同位素变体可以具有改变的药代动力学和药效学特征，这可以有助于增强治疗过程中的安全性、耐受性或功效。本发明化合物的所有同位素变体，无论是否具有放射性，都旨在涵盖在本发明的范围内。
当术语“给药”、“施用”等应用于例如受试者、细胞、组织、器官或生物流体时，是指使例如Polθ调节剂、包含其的药物组合物或诊断剂与受试者、细胞、组织、器官或生物流体接触。在细胞的情况下，施用包括试剂与细胞的接触(例如，体外或离体)，以及试剂与流体的接触，其中流体与细胞接触。
术语“治疗”等是指在疾病、障碍或病症或其症状被诊断、观察等之后启动的一系列行动(例如给予Polθ调节剂或包含Polθ调节剂的药物组合物)，以便暂时或永久地消除、减少、抑制、减轻或改善困扰受试者的疾病、障碍或病症的至少一种根本原因，或与困扰受试者的疾病、障碍、病症相关的至少一种症状。因此，治疗包括抑制(例如，阻止疾病、障碍或病症或与其相关的临床症状的发展或进一步发展)活动性疾病。
本文使用的术语“需要治疗”是指医生或其他护理人员做出的受试者需要治疗或将从治疗中受益的判断。该判断是根据医生或护理人员专业知识范围内的各种因素做出的。例如，患者已被诊断为患有与Polθ过表达相关的疾病或同源重组(HR)缺陷型癌症。
术语“防止”和“预防”等是指以某种方式(例如，在疾病、障碍、病症或其症状发作之前)启动的一系列行动(例如给予Polθ调节剂或包含Polθ调节剂的药物组合物)，以便暂时或永久地预防、压制、抑制或降低受试者发生疾病、障碍、病症等(如通过例如不存在临床症状来确定)的风险，或延迟其发作，这通常在易患特定疾病、障碍或病症的受试者的背景下。
术语“需要预防”是指医生或其他护理人员做出的受试者需要预防或将从预防性护理中受益的判断。该判断是根据医生或护理人员专业知识范围内的各种因素做出的。
短语“治疗有效量”是指以当施用给受试者时能够对疾病、障碍或病症的任何症状、方面或特征具有任何可检测的积极作用的量将药剂单独或作为药物组合物的一部分并且以单次剂量或作为一系列剂量的一部分向受试者施用。治疗有效量可以通过测量相关的生理效应来确定，并且可以结合给药方案和受试者状况的诊断分析等进行调整。举例来说，在施用后的特定时间测量Polθ调节剂的血清水平(或者例如其代谢物)可以指示是否已经使用了治疗有效量。
术语“调制”，“调节”等是指分子(例如激活剂或抑制剂)直接或间接增加或减少Polθ的功能或活性的能力。调节剂可以单独起作用，或者它可以使用辅因子，例如蛋白质、金属离子或小分子。调节剂的实例包括小分子化合物和其他生物有机分子。
分子的“活性”可以描述或是指分子与配体或受体的结合；催化活性；刺激基因表达或细胞信号传导、分化或成熟的能力；抗原活性；调节其他分子的活性；等等。术语“增殖活性”涵盖促进例如正常细胞分裂以及癌症、肿瘤、发育不良、细胞转化、转移和血管生成所必需的或与其特异性相关的活性。
本公开的某些化合物可以作为互变异构体和/或几何异构体存在。所有可能的互变异构体以及顺式和反式异构体，作为单独形式及其混合物都在本公开的范围内。例如，某些羟基取代的化合物可以作为互变异构体存在，如下所示：
“药学上可接受的载体或赋形剂”是指可用于制备药物组合物的载体或赋形剂，其通常是安全的、无毒的并且在生物学上或其他方面都不是不期望的，并且包括对于兽医用途以及人类药物用途可接受的载体或赋形剂。说明书和权利要求书中使用的“药学上可接受的载体/赋形剂”包括一种和多于一种这样的赋形剂。
如本文所用，与本文描述的任何化学结构中的单键、双键或三键相交的波浪线代表单键、双键或三键与分子的其余部分的点连接。另外，延伸至环(例如苯环)中心的键意在表示在任何可用的环顶点处的连接。本领域技术人员将理解，显示为连接至环的多个取代基将占据环顶点，从而提供稳定的化合物并且在其他方面是空间相容的。
本文所用的“约”旨在限定其所修饰的数值，表示这样的值是在误差范围内的变量。当没有提及特定的误差幅度，例如数据图表或数据表中给出的平均值的标准偏差时，术语“约”应理解为表示数值涵盖所列举数值的±10％，优选±5％。
本文所用的“疾病”通常与术语“障碍”、“综合征”和“病症”(如在医学状况中)同义，并且可互换使用，因为它们都反映了人类或动物身体的异常状况或其某一部分损害正常功能，通常表现为明显的体征和症状，并导致人类或动物的持续时间或生活质量降低。
“患者”通常与术语“受试者”同义，并且如本文所用，包括所有哺乳动物，包括人类。患者的实例包括人类、家畜如牛、山羊、绵羊、猪和兔子，以及伴侣动物如狗、猫、兔子和马。优选地，患者是人。
Polθ有关的“抑制”、“减少”或这些术语的任何变体包括任何可测量的减少或完全抑制以实现期望的结果。例如，与正常活性相比，Polθ活性可降低约、至多约或至少约5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、99％或更多，或其中可推导的任何范围。
术语“同源重组”是指基因重组的细胞过程，其中核苷酸序列在两个相似或相同的DNA之间交换。
术语“同源重组(HR)缺陷型癌症”是指特征在于功能性HR修复途径减少或缺失的癌症。HR缺陷可能是由于一种或多种HR相关基因的缺失或一种或多种HR相关基因中一个或多个突变的存在引起的。HR相关基因的实例包括BRCA1、BRCA2、RAD54、RAD51B、Ct1P(胆碱转运蛋白样蛋白)、PALB2(BRCA2的伙伴和定位器)、XRCC2(补充中国仓鼠细胞2中缺陷修复的X射线修复)、RECQL4(RecQ蛋白样4)、BLM(布卢姆综合征、RecQ解旋酶样)、WRN(沃纳综合征，一种或多种HR相关基因)Nbs1(尼布林)以及编码范可尼贫血(FA)蛋白的基因或FA类似基因，例如FANCA、FANCB、FANCC、FANCD1(BRCA2)、FANCD2、FANCE、FANCF、FANCG、FANCI、FANJ(BRIP1)、FANCL、FANCM、FANCN(RALB2)、FANCP(SLX4)、FANCS(BRCA1)、RAD51C和XPF。
术语“Polθ过表达”是指相对于正常细胞(例如同类非患病细胞)中Polθ的表达或活性，疾病细胞例如癌细胞中Polθ的表达或活性增加。相对于正常细胞中的Polθ表达，Polθ的量可以是至少2倍、至少3倍、至少4倍、至少5倍、至少10倍或更多。Polθ癌的实例包括但不限于乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、肺癌、结直肠癌、胃癌、膀胱癌和前列腺癌。
化合物:
在一些方面，本文提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐，
其中:
环A选自苯基和具有1至4个独立地选自N、O和S的杂原子的5-至6-元杂芳基环；
下标m和n各自独立地是0或1；
R1选自C1-6烷基，卤素，C1-6卤代烷基，–X1–O–C1-6烷基，C1-6卤代烷氧基，–X1–氰基，–NO2，–C(O)ORa，–NRaC(O)Rb，–X1–C(O)NRaRb，–X1–OH，C3-6环烷基，–X1–O–C3-6环烷基，C1-6羟基炔基，–X1–NRaRb，–X1–S(O)2Ra，–X1–S(O)2NRaRb，X1–X1a–ORa，和具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子的4-至6-元杂环烷基；
R2选自C1-6烷基，卤素，C1-6卤代烷基，C1-6卤代烷氧基，和–X1–氰基，其中
每个X1独立地选自键和C1-4亚烷基，
X1a为具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子的3-至6-元杂环亚烷基，和
Ra和Rb独立地选自氢，C1-6烷基，和C1-6卤代烷基；和
Ar1选自苯基，萘基，吡啶-2-酮，和具有1至4个独立地选自N、O和S的杂原子的5-至10-元杂芳基环，其中Ar1取代有0至4个R1a取代基；
每个R1a独立地选自C1-6烷基，卤素，C1-6卤代烷基，–X2–O–C1-6烷基，C1-6卤代烷氧基，C3-6环烷基，C3-6环烷基氧基，–C(O)Rc，–C(O)2Rc，–NRcC(O)Rd，–O–C1-4亚烷基-O–C1-4烷基，–X2-C(O)NRcRd，–X2-S(O)2NRcRd，–X2–NRcRd，–C(O)NRcRd，–X2–氰基，–O-X2–氰基，–X2–S(O)Rc，–X2–S(O)2Rc，–X2–N(Rd)S(O)2Rc，–P(O)RcRd，-Y和–X2–OH；或
相邻环顶点上的两个R1a基团结合形成4-6元环烷基或杂环烷基，其具有0至2个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子，且其取代有0-4个选自氧代，卤素，C1-4烷基，C1-4烷氧基，和C1-4卤代烷基的基团；
其中
每个Y独立地选自苯基，苄基，4-至6-元杂环烷基，和5或6元杂芳基，其中每个杂环烷基和杂芳基具有1或2个独立地选自O、N和S的环成员；且每个Y取代有0、1或2个独立地选自卤素，氧代，C1-4烷基，C1-4烷氧基，和C1-4卤代烷基的基团；
每个X2独立地选自键和C1-4亚烷基；和
每个Rc和Rd独立地选自氢，C1-6烷基，C3-5环烷基和C1-6卤代烷基；和
R3是选自下组的成员：
(i)C3-6环烷基，C6-11桥连环烷基和C6-12螺环烷基；
(ii)3-至6-元杂环烷基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(iii)6-至10-元双环杂环基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(iv)6-至10-元桥连杂环基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(v)6-至12-元螺杂环基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(vi)氢；
(vii)C1-6烷基，或C2-6炔基，
其中
每个R3的成员(i)至(v)取代有0至4个R3a取代基，其各自独立地选自C1-6烷基，C2-6烯基，C2-6炔基，卤素，C1-6卤代烷基，C1-6卤代烷氧基，–X3–O–C1-6烷基，–X3–OH，–NReRf，-ONO2，具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子的4-至6-元杂环烷基，–NReC(O)Rf，–X3–NReRf，–X3–氰基，和氧代；且
R3的成员(vii)取代有0至3个R3b取代基，所述取代基选自卤素，C1-3卤代烷基，C1-6卤代烷氧基，–O–C1-6烷基，氰基，–OH，–NReRf，–CONReRf，和氧代，其中
每个X3独立地选自键和C1-4亚烷基，和
每个Re和Rf独立地选自H，C1-6烷基，C1-6卤代烷基，C3-6环烷基和-C1-3亚烷基-C3-6环烷基。
在一些方面，本文提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐：
其中：
环A选自苯基和具有1至4个独立地选自N、O和S的杂原子的5-至10-元杂芳基环；
下标m和n各自独立地是0或1；
R1选自C1-6烷基，卤素，C1-6卤代烷基，–X1–O–C1-6烷基，C1-6卤代烷氧基，–X1–氰基，–NO2，–C(O)ORa，–NRaC(O)Rb，–X1–C(O)NRaRb，–X1–OH，C3-6环烷基，–X1–O–C3-6环烷基，C1-6羟基炔基，–X1–NRaRb，–X1–S(O)2Ra，–X1–S(O)2NRaRb，X1–X1a–ORa，和具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子的4-至6-元杂环烷基；
R2选自C1-6烷基，卤素，C1-6卤代烷基，C1-6卤代烷氧基，和–X1–氰基，其中
每个X1独立地选自键和C1-4亚烷基，
X1a为具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子的3-至6-元杂环亚烷基，和
Ra和Rb独立地选自氢，C1-6烷基，和C1-6卤代烷基；和
Ar1选自苯基，萘基，吡啶-2-酮，和具有1至4个独立地选自N、O和S的杂原子的5-至10-元杂芳基环，其中Ar1取代有0至4个R1a取代基；
每个R1a独立地选自C1-6烷基，卤素，C1-6卤代烷基，–X2–O–C1-6烷基，C1-6卤代烷氧基，C3-6环烷基，C3-6环烷基氧基，–C(O)Rc，–C(O)2Rc、–NRcC(O)Rd、–O–C1-4亚烷基-O–C1-4烷基、–X2-C(O)NRcRd、–X2-S(O)2NRcRd、–X2–NRcRd、–C(O)NRcRd、–X2–氰基、–O-X2–氰基、–X2–S(O)Rc、–X2–S(O)2Rc、–X2–N(Rd)S(O)2Rc、–P(O)RcRd、-Y和–X2–OH；或
相邻环顶点上的两个R1a基团结合形成4-6元环烷基或杂环烷基，其具有0至2个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子，且其取代有0-4个选自氧代，卤素，C1-4烷基，C1-4烷氧基，和C1-4卤代烷基的基团；
其中
每个Y独立地选自苯基，苄基，4-至6-元杂环烷基，和5或6元杂芳基，其中每个杂环烷基和杂芳基具有1或2个独立地选自O、N和S的环成员；且每个Y取代有0、1或2个独立地选自卤素，氧代，C1-4烷基，C1-4烷氧基，和C1-4卤代烷基的基团；
每个X2独立地选自键和C1-4亚烷基；和
每个Rc和Rd独立地选自氢，C1-6烷基，C3-5环烷基和C1-6卤代烷基；和
R3是选自下组的成员：
(i)C3-6环烷基，C6-11桥连环烷基和C6-12螺环烷基；
(ii)3-至6-元杂环烷基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(iii)6-至10-元双环杂环基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(iv)6-至10-元桥连杂环基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(v)6-至12-元螺杂环基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(vi)氢；
(vii)C1-6烷基，或C2-6炔基，
其中
每个R3的成员(i)至(v)取代有0至4个R3a取代基，其各自独立地选自C1-6烷基，C2-6烯基，C2-6炔基，卤素，C1-6卤代烷基，C1-6卤代烷氧基，–X3–O–C1-6烷基，–X3–OH，–NReRf，-ONO2，具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子的4-至6-元杂环烷基，–NReC(O)Rf，–X3–NReRf，–X3–氰基，和氧代；且
R3的成员(vii)取代有0至3个R3b取代基，所述取代基选自卤素，C1-3卤代烷基，C1-6卤代烷氧基，–O–C1-6烷基，氰基，–OH，–NReRf，–CONReRf，和氧代，其中
每个X3独立地选自键和C1-4亚烷基，和
每个Re和Rf独立地选自H，C1-6烷基，C1-6卤代烷基，C3-6环烷基和-C1-3亚烷基-C3-6环烷基；
条件是式I化合物不是
在一些方面，本文提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐，
其中：
环A选自苯基和具有1至4个独立地选自N、O和S的杂原子的5-至10-元杂芳基环；
下标m和n各自独立地是0或1；
R1选自C1-6烷基，卤素，C1-6卤代烷基，–X1–O–C1-6烷基，C1-6卤代烷氧基，–X1–氰基，–NO2，–C(O)ORa，–NRaC(O)Rb，–X1–C(O)NRaRb，–X1–OH，C3-6环烷基，–X1–O–C3-6环烷基，C1-6羟基炔基，–X1–NRaRb，–X1–S(O)2Ra，–X1–S(O)2NRaRb，X1–X1a–ORa，和具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子的4-至6-元杂环烷基；
R2选自C1-6烷基，卤素，C1-6卤代烷基，C1-6卤代烷氧基，和–X1–氰基，其中
每个X1独立地选自键和C1-4亚烷基，
X1a is具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子的3-至6-元杂环亚烷基，和
Ra和Rb独立地选自氢，C1-6烷基，和C1-6卤代烷基；和
Ar1选自苯基，萘基，吡啶-2-酮，和具有1至4个独立地选自N、O和S的杂原子的5-至10-元杂芳基环，其中Ar1取代有0至4个R1a取代基；
每个R1a独立地选自C1-6烷基，卤素，C1-6卤代烷基，–X2–O–C1-6烷基，C1-6卤代烷氧基，C3-6环烷基，C3-6环烷基氧基，–C(O)Rc，–C(O)2Rc，–NRcC(O)Rd，–O–C1-4亚烷基-O–C1-4烷基，–X2-C(O)NRcRd，–X2-S(O)2NRcRd，–X2–NRcRd，–C(O)NRcRd，–X2–氰基，–O-X2–氰基，–X2–S(O)Rc，–X2–S(O)2Rc，–X2–N(Rd)S(O)2Rc，–P(O)RcRd，-Y和–X2–OH；或
相邻环顶点上的两个R1a基团结合形成4-6元环烷基或杂环烷基，其具有0至2个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子，且其取代有0-4个选自氧代，卤素，C1-4烷基，C1-4烷氧基，和C1-4卤代烷基的基团；
其中
每个Y独立地选自苯基，苄基，4-至6-元杂环烷基，和5或6元杂芳基，其中每个杂环烷基和杂芳基具有1或2个独立地选自O、N和S的环成员；且每个Y取代有0、1或2个独立地选自卤素，氧代，C1-4烷基，C1-4烷氧基，和C1-4卤代烷基的基团；
每个X2独立地选自键和C1-4亚烷基；和
每个Rc和Rd独立地选自氢，C1-6烷基，C3-5环烷基和C1-6卤代烷基；和
R3是选自下组的成员：
(i)C3-6环烷基，C6-11桥连环烷基和C6-12螺环烷基；
(ii)3-至6-元杂环烷基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(iii)6-至10-元双环杂环基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(iv)6-至10-元桥连杂环基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(v)6-至12-元螺杂环基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(vi)氢；
(vii)C1-6烷基，或C2-6炔基，
其中
每个R3的成员(i)至(v)取代有0至4个R3a取代基，其各自独立地选自C1-6烷基，C2-6烯基，C2-6炔基，卤素，C1-6卤代烷基，C1-6卤代烷氧基，–X3–O–C1-6烷基，–X3–OH，–NReRf，-ONO2，具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子的4-至6-元杂环烷基，–NReC(O)Rf，–X3–NReRf，–X3–氰基，和氧代；且
R3的成员(vii)取代有0至3个R3b取代基，所述取代基选自卤素，C1-3卤代烷基，C1-6卤代烷氧基，–O–C1-6烷基，氰基，–OH，–NReRf，
–CONReRf，和氧代，其中
每个X3独立地选自键和C1-4亚烷基，和
每个Re和Rf独立地选自H，C1-6烷基，C1-6卤代烷基，C3-6环烷基和-C1-3亚烷基-C3-6环烷基。
在一些实施方案中，式I的化合物不是
N-(4,5-二氢-5-氧代-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-(4,5,6,7-四氢-6,6-二甲基-1H-吲唑-3-基)-1H-吲哚-5-甲酰胺(CAS No.1309787-94-7)；或
N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-2-(4,5,6,7-四氢-6,6-二甲基-1H-吲唑-3-基)-1H-吲哚-5-甲酰胺(CAS No.1309795-15-0)。
在一些实施方案中，式I的化合物不是那些其中环A为的化合物。
在一些实施方案中，式I的化合物不是那些其中环A为吲哚的化合物。
在一些方面，本文提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，
其中：
环A选自苯基和具有1至4个独立地选自N、O和S的杂原子的5-至10-元杂芳基环；
下标m和n各自独立地是0或1；
R1选自C1-6烷基，卤素，C1-6卤代烷基，–X1–O–C1-6烷基，C1-6卤代烷氧基，–X1–氰基，–C(O)ORa，–NRaC(O)Rb，–X1–C(O)NRaRb，–X1–OH，C3-6环烷基，–X1–O–C3-6环烷基，C1-6羟基炔基，–X1–NRaRb，–X1–S(O)2Ra，–X1–S(O)2NRaRb，和X1–X1a–ORa；
R2选自C1-6烷基，卤素，C1-6卤代烷基，C1-6卤代烷氧基，和–X1–氰基，其中
每个X1独立地选自键和C1-4亚烷基，
X1a为具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子的3-至6-元杂环亚烷基，且
Ra和Rb独立地选自氢，C1-6烷基，和C1-6卤代烷基；和
Ar1选自苯基和具有1至4个独立地选自N、O和S的杂原子的5-至10-元杂芳基环，其中Ar1取代有0至4个R1a取代基；
每个R1a独立地选自C1-6烷基，卤素，C1-6卤代烷基，–X2–O–C1-6烷基，C1-6卤代烷氧基，C3-6环烷基，C3-6环烷基氧基，–C(O)Rc，–NRcC(O)Rd，–NRcRd，–X2–NRcRd，–C(O)NRcRd，–X2–氰基，–X2–S(O)Rc和–X2–OH；或
相邻环顶点上的两个R1a基团结合形成4-6元杂环烷基，其具有1至2个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子，其中
每个X2独立地选自键和C1-4亚烷基；和
每个Rc和Rd独立地选自氢，C1-6烷基，和C1-6卤代烷基；
和
R3是选自下组的成员：
(i)C3-6环烷基和C6-12螺环烷基；
(ii)3-至6-元杂环烷基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(iii)6-至10-元双环杂环基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(iv)6-至10-元桥连杂环基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(v)6-至12-元螺杂环基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(vi)氢；
(vii)C1-6烷基，或C2-6炔基，
其中
每个R3的成员(i)至(v)取代有0至4个R3a取代基，其各自独立地选自C1-6烷基，C2-6烯基，C2-6炔基，卤素，C1-6卤代烷基，C1-6卤代烷氧基，–X3–O–C1-6烷基，–X3–OH，–NReRf，–NReC(O)Rf，–X3–NReRf，–X3–氰基，和氧代；且
R3的成员(vii)取代有0至3个R3b取代基，所述取代基选自卤素，C1-6卤代烷氧基，–O–C1-6烷基，氰基，–OH，–NReRf，和氧代，其中
每个X3独立地选自键和C1-4亚烷基，和
每个Re和Rf独立地选自H和C1-6烷基。
在一些方面，本文提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，
其中：
环A选自苯基和具有1至4个独立地选自N、O和S的杂原子的5-至10-元杂芳基环；
下标m和n各自独立地是0或1；
R1选自C1-6烷基，卤素，C1-6卤代烷基，–X1–O–C1-6烷基，C1-6卤代烷氧基，–X1–氰基，–C(O)ORa，–NRaC(O)Rb，–X1–C(O)NRaRb，–X1–OH，C3-6环烷基，C1-6羟基炔基，–X1–NRaRb，–X1–S(O)2Ra，和–X1–S(O)2NRaRb；
R2选自C1-6烷基，卤素，C1-6卤代烷基，C1-6卤代烷氧基，和–X1–氰基，其中
每个X1独立地选自键和C1-4亚烷基，和
Ra和Rb独立地选自氢，C1-6烷基，和C1-6卤代烷基；和
Ar1选自苯基和具有1至4个独立地选自N、O和S的杂原子的5-至10-元杂芳基环，其中Ar1取代有0至4个R1a取代基；
每个R1a独立地选自C1-6烷基，卤素，C1-6卤代烷基，–X2–O–C1-6烷基，C1-6卤代烷氧基，C3-6环烷基，C3-6环烷基氧基，–C(O)Rc，–NRcC(O)Rd，–NRcRd，–X2–NRcRd，–C(O)NRcRd，–X2–氰基，和–X2–OH，其中
每个X2独立地选自键和C1-4亚烷基；和
每个Rc和Rd独立地选自氢，C1-6烷基，和C1-6卤代烷基；
和
R3是选自下组的成员：
(i)C3-6环烷基和C6-12螺环烷基；
(ii)3-至6-元杂环烷基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(iii)6-至10-元双环杂环基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(iv)6-至10-元桥连杂环基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(v)6-至12-元螺杂环基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(vi)氢；
(vii)C1-6烷基，或C2-6炔基，
其中
每个R3的成员(i)至(v)取代有0至4个R3a取代基，其各自独立地选自C1-6烷基，C2-6烯基，C2-6炔基，卤素，C1-6卤代烷基，C1-6卤代烷氧基，–X3–O–C1-6烷基，–X3–OH，–NReRf，–NReC(O)Rf，–X3–
NReRf，–X3–氰基，和氧代；且
R3的成员(vii)取代有0至3个R3b取代基，所述取代基选自卤素，C1-6卤代烷氧基，–O–C1-6烷基，氰基，–OH，–NReRf，和氧代，其中
每个X3独立地选自键和C1-4亚烷基，和
每个Re和Rf独立地选自H和C1-6烷基。
在一些实施方案中，式(I)中的环A为苯基，吡啶基，哒嗪基，咪唑基，吡唑基，三唑基，咪唑并[1,2-a]吡啶基，[1,2,3]三唑并[1,5-a]吡啶基，咪唑并[1,5-a]吡啶基，吡咯并[2,3-b]吡啶基，吡咯并[3,2-b]吡啶基，吡唑并[1,5-a]吡啶基，[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶基，1,6-萘啶基，或1,7-萘啶基。
在一些实施方案中，式(I)中的环A为九或十元杂芳基环。在一些实施方案中，式(I)中的环A为9元杂芳基环。在一些实施方案中，式(I)中的环A为10元杂芳基环。
在一些实施方案中，式(I)中的环A为咪唑并[1,2-a]吡啶基，[1,2,3]三唑并[1,5-a]吡啶基，咪唑并[1,5-a]吡啶基，吡咯并[2,3-b]吡啶基，吡咯并[3,2-b]吡啶基，吡唑并[1,5-a]吡啶基，[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶基，1,6-萘啶基，或1,7-萘啶基。
在一些实施方案中，式(I)中的环A为五或六元杂芳基环。在一些实施方案中，式(I)中的环A为五元杂芳基环。在一些实施方案中，式(I)中的环A为六元杂芳基环。
在一些实施方案中，式(I)中的环A为吡啶基，哒嗪基，嘧啶基，咪唑基，吡唑基，或三唑基。
在一些实施方案中，环A与式(I)中的Ar1、R1和R2一起，选自：
在一些实施方案中，环A与式(I)中的Ar1、R1和R2一起，选自：
在一些实施方案中，环A与式(I)中的Ar1、R1和R2一起，选自：
在一些实施方案中，环A与式(I)中的Ar1、R1和R2一起，选自：
在一些实施方案中，环A与式(I)中的Ar1和R1一起，选自：
在一些实施方案中，环A与式(I)中的Ar1一起，选自：
在一些实施方案中，环A与式(I)中的Ar1一起，选自：
在一些实施方案中，环A与式(I)中的Ar1一起，选自：
在一些实施方案中，环A与式(I)中的Ar1一起，选自：
在一些实施方案中，式(I)中的环A不是嘧啶。
在一些实施方案中，式(I)中的环A选自苯基，吡啶基，嘧啶基，和咪唑并[1,2-a]吡啶基，1,2,3-三唑，吡唑基，异噁唑基，咪唑并[1,5-a]吡啶基。
在一些实施方案中，式(I)中的环A选自苯基，吡啶基，嘧啶基，和咪唑并[1,2-a]吡啶基。
在一些实施方案中，式(I)中的环A为苯基。
在一些实施方案中，式(I)中的环A为吡啶基。
在一些实施方案中，Ar1在相对于酰胺取代基的邻位连接到环A上。
在一些实施方案中，当环A是吡啶基时，吡啶基的N原子被氧化形成N-氧化物。
在一些实施方案中，式(I)及其亚实施方案中的n是1。在一些实施方案中，式(I)及其亚实施方案中的n是0。
在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中，n是1，并且R1为4-至6-元杂环烷基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中，n是1，并且R1为6-元杂环烷基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中，n是1，并且R1为5-元杂环烷基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中，n是1，并且R1为4-元杂环烷基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中，n是1，并且R1选自氮杂环丁烷基，吡咯烷基，吡唑烷基，哌啶基，和哌嗪基。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中，n是1，并且R1为氮杂环丁烷基。
在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中，n是1，并且R1选自C1-6烷基，卤素，C1-6卤代烷基，–X1–O–C1-6烷基，C1-6卤代烷氧基，–X1–氰基，–X1–OH，C3-6环烷基，和–X1–NRaRb。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中，n是1，并且R1选自C1-6烷基，卤素，–X1–氰基，和C1-6卤代烷基。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中，n是1，并且R1选自–X1–O–C1-6烷基，C1-6卤代烷氧基，–X1–OH，和–X1–NRaRb。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中，n是1，并且R1选自–X1–O–C3-6环烷基，和X1–X1a–ORa。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中，n是1，并且R1选自C1-6烷基，卤素，–X1–氰基，和C1-6卤代烷基，–X1–O–C3-6环烷基，和X1–X1a–ORa。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中，n是1，并且R1选自C1-6烷基，卤素，–X1–氰基，和C1-6卤代烷基，和–X1–O–C3-6环烷基。
在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中，n是1，并且R1选自C1-6烷基和–X1–OH.
在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中，n是1，并且R1选自甲基和羟甲基。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中，n是1，并且R1选自乙基和羟乙基。
在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中，n是1，并且R1是甲基。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中，n是1，并且R1是乙基或丙基。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中，n是1，并且R1是O-环丙基。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中，n是1，并且R1是O-环丙基。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中，n是1，并且R1是-CH2-O-环丙基。
在一些实施方案中，在式(I)中，m是1，并且R2为C1-6烷基，卤素，C1-6卤代烷基，和C1-6卤代烷氧基。在一些实施方案中，在式(I)中，m是1，并且R2为C1-6烷基，卤素，和C1-6卤代烷基。
在一些实施方案中，式(I)及其亚实施方案中的m是0。在一些实施方案中，式(I)及其亚实施方案中的m是1。
在一些实施方案中，式(I)及其亚实施方案中的每个X1是键。在一些实施方案中，式(I)及其亚实施方案中的每个X1是C1-4亚烷基。在一些实施方案中，式(I)及其亚实施方案中的每个X1为C1-2亚烷基。在一些实施方案中，式(I)及其亚实施方案中的每个X1是亚甲基。
在一些实施方案中，式(I)及其亚实施方案中的每个Ra和Rb是氢。在一些实施方案中，式(I)及其亚实施方案中的每个Ra是氢且每个Rb为C1-4烷基或C1-4卤代烷基。在一些实施方案中，式(I)及其亚实施方案中的每个Ra和Rb为C1-4烷基。在一些实施方案中，式(I)及其亚实施方案中的每个Ra和Rb为C1-2烷基。在一些实施方案中，式(I)及其亚实施方案中的每个Ra和Rb为甲基。在一些实施方案中，式(I)及其亚实施方案中的每个Ra和Rb为C1-4卤代烷基。在一些实施方案中，式(I)及其亚实施方案中的每个Ra和Rb为C1-2卤代烷基。
在一些实施方案中，该化合物具有式(Iaa):
或其药学上可接受的盐，其中Z1和Z2是通过单键或双键连接的环A的环顶点，且Z1和Z2中的每个为碳。
在一些实施方案中，该化合物具有式(Ia)：
或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，该化合物具有式(Ib)：
或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，该化合物具有式(Ic)：
或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，式(I)、(Ia)、(Ib)和(Ic)中的Ar1选自苯基，吡啶基，苯并吡唑基，苯并咪唑基，咪唑基，哒嗪基，咪唑并[1,2-a]嘧啶基，噁唑并[4,5-b]吡啶基，噁唑并[5,4-b]吡啶基，噻唑并[4,5-b]吡啶基，苯并[d]噻唑，吲唑基，[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶基，[1,2,4]三唑并[1,5-b]哒嗪基，和四唑并[1,5-a]吡啶基，其每个取代有0至4个R1a
在一些实施方案中，式(I)、(Ia)、(Ib)和(Ic)中的Ar1选自苯基，吡啶基，苯并吡唑基，苯并咪唑基，咪唑基，和哒嗪基，其每个取代有0至4个R1a。
在一些实施方案中，式(I)、(Ia)、(Ib)和(Ic)中的Ar1选自3H-咪唑并[4,5-b]吡啶基，咪唑并[1,2-a]嘧啶基，噁唑并[4,5-b]吡啶基，噁唑并[5,4-b]吡啶基，噻唑并[4,5-b]吡啶基，苯并[d]噻唑，苯并[c]异噻唑基，吲唑基，[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶基，[1,2,4]三唑并[1,5-b]哒嗪基，四唑并[1,5-a]吡啶基，和[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶基，其每个取代有0至4个R1a。
在一些实施方案中，式(I)、(Ia)、(Ib)和(Ic)中的Ar1为取代有0至4个R1a的苯基。
在一些实施方案中，式(I)、(Ia)、(Ib)和(Ic)中的Ar1为
在一些实施方案中，式(I)、(Ia)、(Ib)和(Ic)中的Ar1为取代有0至4个R1a的吡啶基。
在一些实施方案中，式(I)、(Ia)、(Ib)和(Ic)中的Ar1为取代有0至4个R1a的萘基。
在一些实施方案中，式(I)、(Ia)、(Ib)和(Ic)中的Ar1为取代有0至4个R1a的吡啶-2-酮。
在一些实施方案中，式(I)、(Ia)、(Ib)和(Ic)中的Ar1为取代有0至4个R1a的萘基。
在一些实施方案中，式(I)、(Ia)、(Ib)和(Ic)中的Ar1为取代有0至4个R1a的吡啶-2-酮。
在一些实施方案中，式(I)、(Ia)、(Ib)和(Ic)中的Ar1取代有0至3个R1a。
在一些实施方案中，式(I)、(Ia)、(Ib)和(Ic)中的Ar1取代有0至2个R1a。
在一些实施方案中，该化合物具有式(Ia1)：
或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，该化合物具有式(Ib1)：
或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，该化合物具有式(Ic1)：
或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，该化合物具有式(Ia2)：
或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，该化合物具有式(Ib2)：
或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，该化合物具有式(Ic2)：
或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个R1a独立地选自C1-6烷基，卤素，C1-6卤代烷基，–X2–O–C1-6烷基，C1-6卤代烷氧基，C3-6环烷基，–NRaRb，–X2–氰基，和–X2–OH。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个R1a独立地选自C1-6烷基，卤素，C1-6卤代烷基，–X2–O–C1-6烷基，C1-6卤代烷氧基，C3-6环烷基，–NRaRb，–X2–氰基，–X2–OH，和–X2–S(O)Rc。
在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个R1a独立地选自C1-6烷基，卤素，C1-6卤代烷基，–O–C1-6烷基，C1-6卤代烷氧基，C3-6环烷基，–NRaRb，和–X2–OH。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个R1a独立地选自C1-6烷基，卤素，C1-6卤代烷基，–X2–O–C1-6烷基，C1-6卤代烷氧基，C3-6环烷基，–NRaRb，–X2–氰基，–X2–OH，和–S(O)Rc。
在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个R1a独立地选自甲基、乙基、氟代、氯代、溴代、三氟甲基、二氟甲基、甲氧基、乙氧基、二氟甲氧基、环丙基、–NH2、羟甲基，和1-羟乙基。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个R1a独立地选自甲基、乙基、氟代、氯代、溴代、三氟甲基、二氟甲基、甲氧基、乙氧基、二氟甲氧基、环丙基、–NH2，羟甲基，1-羟乙基和-S(＝O)CH3。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个R1a独立地选自甲基、乙基、氟代、氯代、溴代、三氟甲基、二氟甲基、甲氧基、乙氧基，和二氟甲氧基。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个R1a独立地选自乙基、氟代、氯代、二氟甲基，和乙氧基。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个R1a独立地选自甲基、氟代、氯代、三氟甲基、二氟甲基、甲氧基，和二氟甲氧基。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个R1a独立地选自甲基、乙基、氟代、环丙基、–NH2，羟甲基，和1-羟乙基。
在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个R1a独立地选自C1-6烷基，卤素，–O–C1-6烷基，–C(O)2Rc，-C1-4烷氧基-C1-4烷氧基，–X2-C(O)NRcRd，–X2-S(O)2NRcRd，–O-X2–氰基，–X2–S(O)2Rc，和–X2–N(Rd)S(O)2Rc。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个R1a独立地选自–C(O)2Rc，-C1-4烷氧基-C1-4烷氧基，–X2-C(O)NRcRd，–X2-S(O)2NRcRd，–O-X2–氰基，–X2–S(O)2Rc，和–X2–N(Rd)S(O)2Rc。
在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个R1a，其中至少一个R1a为Y且Y选自苯基，苄基，4-至6-元杂环烷基，和5或6元杂芳基，其中每个杂环烷基和杂芳基具有1或2个独立地选自O、N和S的环成员；且每个Y取代有0、1或2个独立地选自卤素，氧代，C1-4烷基，C1-4烷氧基，和C1-4卤代烷基的基团。
在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个R1a，其中至少一个R1a为Y且Y为苯基或苄基；且每个Y取代有0、1或2个独立地选自卤素，氧代，C1-4烷基，C1-4烷氧基，和C1-4卤代烷基的基团。
在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个R1a，其中至少一个R1a为Y且Y为4-至6-元杂环烷基或5或6元杂芳基，其中每个杂环烷基和杂芳基具有1或2个独立地选自O、N和S的环成员；且每个Y取代有0、1或2个独立地选自卤素，氧代，C1-4烷基，C1-4烷氧基，和C1-4卤代烷基的基团。
在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个R1a，其中至少一个R1a为Y且Y为4-至6-元杂环烷基，其中每个杂环烷基具有1或2个独立地选自O、N和S的环成员；且每个Y取代有0、1或2个独立地选自卤素，氧代，C1-4烷基，C1-4烷氧基，和C1-4卤代烷基的基团。在一些实施方案中，所述4-至6-元杂环烷基选自哌啶基，吗啉基，和四氢吡喃基。
在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个R1a，其中至少一个R1a为Y且Y为5或6元杂芳基，其中每个杂芳基具有1或2个独立地选自O、N和S的环成员；且每个Y取代有0、1或2个独立地选自卤素，氧代，C1-4烷基，C1-4烷氧基，和C1-4卤代烷基的基团。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个R1a，其中至少一个R1a为Y且Y为5-元杂芳基，其中每个杂芳基具有1或2个独立地选自O、N和S的环成员；且每个Y取代有0、1或2个独立地选自卤素，氧代，C1-4烷基，C1-4烷氧基，和C1-4卤代烷基的基团。在一些实施方案中，所述5-至6-元杂芳基为吡唑基。
在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中在相邻的环顶点上的两个R1a基团结合形成4-6元杂环烷基，其具有1-2个独立地选自N、O，和S的作为环顶点的杂原子。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的在式(I)及其亚实施方案中在相邻的环顶点上的两个R1a基团结合形成5元杂环烷基其具有1-2个独立地选自N、O，和S的作为环顶点的杂原子。在一些实施方案中所述杂环烷基环在环成员之间具有1或2个双键。在一些实施方案中所述杂环烷基环取代有0至4个独立地选自氧代，卤素，C1-4烷基，C1-4烷氧基，和C1-4卤代烷基的基团。
在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的在式(I)及其亚实施方案中在相邻的环顶点上的两个R1a基团结合形成4至6元环烷基。在一些实施方案中所述环烷基环在环成员之间具有1或2个双键。在一些实施方案中所述环烷基环取代有0至4个独立地选自氧代，卤素，C1-4烷基，C1-4烷氧基，和C1-4卤代烷基的基团。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个R1a独立地选自甲基、氟代、氯代、三氟甲基、二氟甲基、甲氧基、乙氧基、二氟甲氧基，和环丙基。
在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个X2为键。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个X2为C1-4亚烷基。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个X2为C1-2亚烷基。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个X2为亚甲基。
在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个Rc和Rd为氢，C1-6烷基，C3-5环烷基和C1-6卤代烷基。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个Rc和Rd为氢，C1-6烷基，和C1-6卤代烷基。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个Rc和Rd为氢。在一些实施方案中，每个Rc是氢且在式(I)及其亚实施方案中的每个Rd为C1-4烷基或C1-4卤代烷基。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个Rc和Rd为C1-4烷基。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个Rc和Rd为C1-2烷基。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个Rc和Rd为甲基。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个Rc和Rd为C1-4卤代烷基。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个Rc和Rd为C1-2卤代烷基。
在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的R3为C6-12螺环基或C3-6环烷基，其每个取代有0至4个R3a。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的R3选自环丙基、环丁基、环戊基，和环己基，且取代有0至4个R3a。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的R3选自螺[3.3]庚烷、螺[4.4]壬烷、螺[3.4]辛烷。
在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的R3为C6-11桥连环烷基，其每个取代有0至4个R3a。在一些实施方案中，所述C6-11桥连环烷基具有如下结构
其每个取代有0至4个R3a。
在一些实施方案中，R3为3-至6-元杂环烷基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子，且取代有0至4个R3a。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的R3为5-元杂环烷基，其取代有0至4个R3a。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的R3为6-元杂环烷基，其取代有0至4个R3a。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的R3选自哌啶基，哌嗪基，吗啉基，2-氧代哌嗪基，2-四氢吡喃基，3,6-二氢-2H-吡喃基，2-氧代-1,2-二氢吡啶基，硫代吗啉基，和1,1-二氧硫代吗啉基，其每个取代有0至4个R3a。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的R3选自四氢吡喃、氧杂环丁烷基、四氢呋喃基，和四氢硫代吡喃基，其每个取代有0至4个R3a。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的R3为被2个氧代基团取代的四氢噻喃基。
在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的R3为6-至10-元双环杂环基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子，且取代有0至4个R3a。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的R3选自6-氧代六氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-2(1H)-基和2,3-二氢-4H-苯并[b][1,4]噁嗪-4-基且取代有0至4个R3a。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的R3选自6-氧代六氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-2(1H)-基，3-氧代-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-8-基，苯并[d][1,3]二氧杂环己烷-4-基，(3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-8-基)，[5H,6H,7H-吡唑并[1,5-a]嘧啶-4-基]和2,3-二氢-4H-苯并[b][1,4]噁嗪-4-基，其取代有0至4个R3a。
在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的R3为6-至10-元桥连杂环基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子，且取代有0至4个R3a。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的R3选自2-氮杂双环[2.2.2]辛烷，奎宁环，和7-氧杂双环[2.2.1]庚烷，且取代有0至4个R3a。
在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的R3为6-至12-元螺杂环基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子，且取代有0至4个R3a。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的R3选自4-氧杂螺[2.4]庚烷，2，6-二氮杂螺[3.3]庚烷，2，6-二氮杂螺[3.4]辛烷，2-氮杂螺[3.4]辛烷，2-氮杂螺[3.5]-壬烷，和2,7-二氮杂螺[4.4]壬烷，且取代有0至4个R3a。
在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的R3取代有0至2个R3a。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的R3取代有1个R3a。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的R3取代有2个R3a。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个R3a选自C1-6烷基，卤素，–X3–O–C1-6烷基，C1-6卤代烷基，C1-6卤代烷氧基，–X3–OH，-ONO2，具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子的4-至6-元杂环烷基和氧代。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个R3a选自C1-6烷基，卤素，–X3–O–C1-6烷基，C1-6卤代烷基，C1-6卤代烷氧基，–X3–OH，和氧代。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个R3a选自C1-6烷基，卤素，–X3–OH，和氧代。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个R3a选自甲基，–OH，和氧代。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的至少一个R3a选自具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子的4-至6-元杂环烷基和氧代。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的至少一个R3a选自四氢吡喃基和氧杂环丁烷。
在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的R3为氢。
在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的R3为C1-6烷基或C2-6炔基，取代有0至4个R3b。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的R3选自2-丙炔基、乙基、甲基、2，2-二甲基丙基、异丁基、异丙基、和正丙基，且取代有0至4个R3b。
在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的R3为甲基且取代有0至3个R3b。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的R3为甲基。
在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的R3为C1-6烷基或C2-6炔基且取代有0至3个R3b。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的R3为C1-6烷基或C2-6炔基且取代有0至2个R3b。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的R3为C1-6烷基或C2-6炔基且取代有1个R3b。
在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个R3b选自卤素，C1-3卤代烷基，–O–C1-6烷基，氰基，–OH，和–CONReRf。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个R3b选自卤素，–O–C1-6烷基，氰基，和–OH。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个R3b选自氟代，甲氧基，氰基，和–OH。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个R3b选自–O–C1-6烷基，氰基，和–OH。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个R3b选自甲氧基，氰基，和–OH.
在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个X3为键。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个X3为C1-4亚烷基。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个X3为C1-2亚烷基。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个X3为亚甲基。
在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个Re和Rf为氢。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个Re是氢和每个Rf为C1-4烷基或C1-4卤代烷基。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个Re和Rf为C1-4烷基。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个Re和Rf为C1-2烷基。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个Re和Rf为甲基。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个Re和Rf为C1-4卤代烷基。在一些实施方案中，在式(I)及其亚实施方案中的每个Re和Rf为C1-2卤代烷基。
式(I)的代表性化合物列于下表1中：
表1
式(I)的其他代表性化合物列于下表2中：
表2.
式(I)的其它代表性化合物列于下表3中:
表3.
在一些实施方案中，所述化合物或其药学上可接受的盐是表1、表2或实施例中的化合物。
在一些实施方案中，所述化合物或其药学上可接受的盐是表1、表2、表3或实施例中的化合物。
在一些实施方案中，所述化合物或其药学上可接受的盐是表1、表2或表3中的化合物。
在一些实施方案中，所述化合物或其药学上可接受的盐是表1或表2中的化合物。
在一些实施方案中，所述化合物或其药学上可接受的盐是表1中的化合物。
在一些实施方案中，所述化合物或其药学上可接受的盐是表2中的化合物。
在一些实施方案中，所述化合物或其药学上可接受的盐是表3中的化合物。
在一些实施方案中，该化合物或其药学上可接受的盐是选自实施例86、87、89、90、96、97、106、108、111和113的化合物。
在一些实施方案中，该化合物或其药学上可接受的盐是选自实施例79至85、88、91至93、100至105、109、112、114至119、122、124至143，和145至233的化合物。
本文公开的化合物可以按照下面的实施例部分中的描述来制备。对于那些没有详细合成说明的化合物，应当理解的是，这些化合物可以按照本文中描述的一般程序来制备。
测定
本公开的化合物抑制Pol1的能力可以如下面的生物测定中所述来测量。
药物组合物
本文提供的式(I)化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐可以是适于对受试者给药的组合物形式。一般而言，此类组合物是包含式(I)化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐和一种或多种药学上可接受的赋形剂的药物组合物。在某些实施方案中，式(I)化合物或其亚实施方案或药学上可接受的盐以治疗有效量存在。药物组合物可用于本文公开的所有方法中；因此，例如，药物组合物可以离体或体内给药于受试者，以实施本文所述的治疗方法和用途。
所述药物组合物可以配制为与预期的给药方法或途径相容；本文阐述了示例性的给药途径。此外，所述药物组合物可以与本文所述的其他治疗活性剂或化合物组合使用，以治疗本公开所考虑的疾病、障碍和病症。
含有活性成分(例如式(I)化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐)的药物组合物可以是适合口服使用的形式，例如作为片剂、胶囊、糖锭、锭剂、水性或油性悬浮液、可分散粉末或颗粒、乳剂、硬或软胶囊、或糖浆、溶液、微珠或酏剂。
片剂、胶囊等含有与无毒的药学上可接受的赋形剂混合的活性成分，所述赋形剂适用于片剂、胶囊等。这些赋形剂可以包括稀释剂、制粒剂、崩解剂、粘合剂，和润滑剂。
适用于口服给药的片剂、胶囊等可以不包衣或用已知技术包衣，以延迟在胃肠道中的崩解和吸收，从而提供持续的作用。
口服制剂也可以是硬明胶胶囊，其中所述活性成分与惰性固体稀释剂混合，或者是软明胶胶囊，其中所述活性成分与水或油介质混合。
水性悬浮液含有与适合其制造的赋形剂混合的活性物质。此类赋形剂可包括悬浮剂、分散剂和润湿剂。水性悬浮液还可包含一种或多种防腐剂。
油性混悬剂可以通过将活性成分悬浮在油中来配制。合适的油是本领域已知的。油性混悬剂可含有额外的试剂，如增稠剂或甜味剂。
适于通过加水制备水悬浮液的可分散粉末和颗粒提供了与分散剂或润湿剂、悬浮剂和一种或多种防腐剂混合的活性成分。合适的分散剂或湿润剂和悬浮剂在本文中举例说明。
所述药物组合物也可以是水包油乳剂的形式。合适的乳化剂是本领域已知的。
所述药物组合物通常包含治疗有效量的式(I)化合物或其亚实施方案或药学上可接受的盐，和一种或多种药学上可接受的赋形剂。合适的药学上可接受的赋形剂包括但不限于抗氧化剂、防腐剂、乳化剂、悬浮剂、分散剂、溶剂、填充剂、增容剂、去污剂、缓冲剂、媒介物、稀释剂和/或佐剂。本领域技术人员将容易认识到可用于本文所考虑的药物组合物和剂型中的各种赋形剂。
通常皮下或肌内给药的储库注射剂也可用于在限定的时间内释放本文公开的式(I)化合物或其亚实施方案或药学上可接受的盐。储库注射剂通常是固体或油基的，通常包括至少一个在此列出的配方成分。本领域普通技术人员熟悉储库注射剂的可能配方和用途。
所述药物组合物可以是无菌注射的水性或油性混悬液的形式。所述悬浮液可以根据已知的技术，使用这里提到的那些合适的分散剂或湿润剂和悬浮剂来配制。所述无菌注射制剂也可以是在无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌注射溶液或悬浮液，所述无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂是本领域已知的。
式(I)的化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐还可以以用于直肠施用的栓剂或用于鼻或吸入使用的喷雾剂的形式施用。栓剂可通过将药物与合适的非刺激性赋形剂混合来制备，所述赋形剂在常温为固体但在直肠温度为液体，因此将在直肠中熔化以释放药物。这样的材料是本领域已知的。
本文提供的所有化合物和药物组合物可以用于本文提供的所有方法中。例如，本文提供的化合物和药物组合物可以用于治疗和/或预防本文提供的所有疾病或障碍的所有方法中。因此，本文提供的化合物和药物组合物用作药物。
给药途径
式(I)的化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐和包含其的组合物可以以任何适当的方式施用。合适的施用途径包括口服、肠胃外(例如肌内、静脉内、皮下(例如注射或植入)、腹膜内、脑池内、关节内、腹膜内、脑内(实质内)和脑室内)、鼻、阴道、舌下、眼内、直肠、局部(例如透皮)、含服和吸入。通常皮下或肌内施用的储库注射也可用于在规定的时间内施用式(I)的化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐。本发明的具体实施方案涵盖口服给药。
组合疗法
本发明涵盖式(I)的化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐与一种或多种活性治疗剂(例如化疗剂)或其他预防或治疗方式(例如放射)组合使用。在此类组合治疗中，各种活性剂常常具有不同的、互补的作用机制。这种组合疗法可以是特别有利的，因为允许减少一种或多种药剂的剂量，从而减少或消除与一种或多种药剂相关的副作用。此外，这样的组合治疗可以对潜在的疾病、障碍或病症具有协同的治疗或预防作用。
如本文所用，“组合”意指包括可以分开施用的疗法，例如，分开配制用于分开施用的疗法(例如，如可以在试剂盒中提供的)，以及可以在单一制剂中一起施用的疗法(即“复合制剂”)。
在某些实施方案中，式(I)的化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐顺序施用或给予，例如，其中一种药剂在一种药剂之前施用。或更多其他代理。在其他实施方案中，式(I)的化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐同时施用，例如，其中两种或更多种药剂在同一时间或大约在同一时间施用；两种或更多种药剂可以存在于两种或更多种分开的制剂中或组合成单一制剂(即，复合制剂)。无论两种或更多种药剂是顺序施用还是同时施用，出于本公开的目的，它们被认为是组合施用。
式(I)的化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐可以与至少一种其他(活性)剂以任何适合情况的方式组合使用。在一个实施方案中，用至少一种活性剂和至少一种式(I)的化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐的治疗维持一段时间。在另一个实施方案中，减少或中断用至少一种活性剂的治疗(例如，当受试者稳定时)，同时用式(I)的化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐的治疗维持恒定的给药方案。在进一步的实施方案中，减少或中断用至少一种活性剂的治疗(例如，当受试者稳定时)，同时将用式(I)的化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐的治疗减少(例如，较低的剂量、较低的给药频率或较短的治疗方案)。在又一个实施方案中，减少或中断用至少一种活性剂的治疗(例如，当受试者稳定时)，并且将用式(I)的化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐的治疗增加(例如，更高的剂量、更频繁的给药或更长时间的治疗方案)。在又一个实施方案中，维持用至少一种活性剂的治疗并减少或终止用式(I)的化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐的治疗(例如，降低剂量、降低给药频率或缩短治疗方案)。在又一个实施方案中，减少或停止用至少一种活性剂的治疗和用式(I)的化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐的治疗(例如，较低剂量、较低给药频率或较短治疗方案)。
本公开提供了用式(I)的化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐和至少一种另外的治疗剂或诊断剂治疗癌症的方法。
在一些实施方案中，式(I)的化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐与至少一种另外的治疗剂组合给药。在一些实施方案中，另外的治疗剂为信号转导抑制剂(STI)或化疗剂。
在某些实施方案中，本公开提供了治疗癌症的方法，包括施用本文所述的式(I)的化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐与信号转导抑制剂(STI)组合，以实现对肿瘤生长的加性或协同抑制。如本文所用，术语“信号转导抑制剂”是指选择性抑制信号转导途径中的一个或多个步骤的药剂。参与免疫调节的药剂也可以与本文所述的一种或多种式(I)的化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐组合使用，用于抑制癌症患者中肿瘤的生长。
在某些实施方案中，本公开提供了用于治疗癌症的方法，该方法包括与化疗剂联合给药本文所述的式(I)化合物或其亚实施方案或药学上可接受的盐。
化疗剂还包括调节或抑制激素对肿瘤的作用的抗激素剂，例如抗雌激素。在某些实施方案中，组合疗法包括施用激素或相关激素剂。
本公开还涵盖本文所述的式(I)的化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐与免疫检查点抑制剂组合的用途。所有癌症所特有的大量遗传和表观遗传改变提供了一组多样化的抗原，免疫系统可以利用这些抗原来区分肿瘤细胞和正常细胞。对于T细胞，由T细胞受体(TCR)控制的通过抗原识别启动的反应的最终幅度(例如，细胞因子产生或增殖的水平)和质量(例如，产生的免疫反应的类型，例如细胞因子产生的模式)受共刺激信号和抑制信号(免疫检查点)之间的平衡调节。在正常生理条件下，免疫检查点对于预防自身免疫(即维持自我耐受)以及在免疫系统对病原体感染做出反应时保护组织免受损伤至关重要。免疫检查点蛋白的表达可能被肿瘤调节失调，作为一种重要的免疫抵抗机制。免疫检查点抑制剂的实例包括但不限于CTLA-4、PD-1、PD-L1、BTLA、TIM3、LAG3、OX40、41BB、VISTA、CD96、TGFβ、CD73、CD39、A2AR、A2BR、IDO1、TDO2、精氨酸酶、B7-H3、B7-H4。还涵盖了基于细胞的抗癌免疫调节剂。此类调节剂的实例包括但不限于嵌合抗原受体T细胞、肿瘤浸润T细胞和树突细胞。
本公开涵盖任何上述物质的药学上可接受的盐、酸或衍生物。
剂量
本文提供的式(I)的化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐可以以取决于例如以下因素的量施用于受试者：给药目标(例如，所需的解决程度)；施用制剂的受试者的年龄、体重、性别以及健康和身体状况；给药途径；及其疾病、障碍、病症或症状的性质。给药方案还可以考虑与所施用的药剂相关的任何副作用的存在、性质和程度。有效剂量和剂量方案可容易地从例如安全性和剂量递增试验、体内研究(例如动物模型)和本领域技术人员已知的其他方法确定。
一般而言，给药参数规定剂量小于可能对受试者产生不可逆毒性的量(最大耐受剂量(MTD))并且不小于对受试者产生可测量效果所需的量。这样的量是通过例如与ADME相关的药代动力学和药效学参数来确定的，同时考虑到施用途径和其他因素。
有效剂量(ED)是在服用该药物的受试者的某些部分中产生治疗反应或期望效果的药剂的剂量或量。药剂的“中位有效剂量”或ED50是在所施用的50％的人群中产生治疗反应或期望效果的药剂的剂量或量。尽管ED50通常用作药物效果合理预期的衡量标准，但考虑到所有相关因素，它不一定是临床医生认为合适的剂量。因此，在一些情况下，有效量大于计算的ED50，在其他情况下，有效量小于计算的ED50，并且在又一些情况下，有效量与计算的ED50相同。
此外，本文提供的式(I)的化合物或其亚实施方案或其盐的有效剂量可以是当以一个或多个剂量施用于受试者时相对于健康受试者产生期望结果的量。例如，对于经历特定障碍的受试者，有效剂量可以是将该障碍的诊断参数、测量值、标志物等改善至少约5％、至少约10％、至少约20％、至少约25％、至少约30％、至少约40％、至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％、至少约90％，或大于90％的剂量，其中100％定义为正常受试者表现出的诊断参数、测量值、标志物等。
在某些实施方案中，本文公开的式(I)的化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐可以以以下剂量水平施用(例如口服)：每天约0.01mg/kg至约50mg/kg受试者体重，或约1mg/kg至约25mg/kg受试者体重，每天一次或多次，以获得期望的治疗效果。
对于口服药剂的施用，组合物可以以片剂、胶囊等形式提供，其含有1.0至1000毫克活性成分，特别是1.0、3.0、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0、50.0、75.0、100.0、150.0、200.0、250.0、300.0、400.0、500.0、600.0、750.0、800.0、900.0和1000.0毫克活性成分。
在某些实施方案中，式(I)的化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐的剂量包含在“单位剂型”中。短语“单位剂型”是指物理上离散的单位，每个单位含有预定量的单独或与一种或多种另外的试剂组合的式(I)的化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐，足以产生所需的效果。应当理解，单位剂型的参数将取决于具体的药剂和要实现的效果。
试剂盒
本发明还涉及包含式(I)的化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐及其药物组合物的试剂盒。如下所述，试剂盒通常呈容纳各种部件的物理结构的形式，并且可以用于例如实践上述方法。
试剂盒可以包括本文公开的式(I)的化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐中的一种或多种(在例如无菌容器中提供)，其可以是适合施用于受试者的药物组合物的形式。式(I)的化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐可以以即用型形式(例如片剂或胶囊)或以需要例如在施用前重构或稀释(例如粉末)的形式提供。当式(I)的化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐为需要由使用者重构或稀释的形式时，试剂盒还可以包括与式(I)的化合物或其亚实施方案或其药学上可接受的盐一起包装或单独包装的稀释剂(例如，无菌水)、缓冲剂、药学上可接受的赋形剂等。当考虑组合治疗时，试剂盒可以含有数种分开的药剂，或者它们可以已经组合在试剂盒中。试剂盒的每个部件可以封装在单独的容器内，并且所有各种容器可以在单个包装内。本发明的试剂盒可以被设计用于适当地维持容纳在其中的部件所必需的条件(例如，冷藏或冷冻)。
试剂盒可包含标签或包装插页，包括其中成分的识别信息及其使用说明(例如剂量参数、活性成分的临床药理学，包括作用机制、药代动力学和药效学、不良反应、禁忌症等)。标签或插页可以包含制造商信息，例如批号和有效期。标签或包装插入物可以例如集成到容纳部件的物理结构中、单独地包含在物理结构内、或者固定到试剂盒的部件(例如安瓿、管或小瓶)。
标签或插入物还可包括或并入计算机可读介质中，例如盘(例如硬盘、卡、存储盘)、光盘例如CD-或DVD-ROM/RAM、DVD、MP3、磁带、或电存储介质(例如RAM和ROM)或这些介质的混合(例如磁/光存储介质、闪存介质或记忆卡)。在一些实施方案中，实际的说明书不存在于试剂盒中，但是提供了用于从远程源例如经由互联网获取说明书的装置。
实施例
提出以下实施例和参考文献(中间体)是为了向本领域普通技术人员提供如何制造和使用本发明的完整公开和描述，并且不旨在限制发明人视为他们的发明的范围，也不意图表示进行了以下实验或者它们是可以进行的所有实验。应当理解，不一定执行以现在时写的示例性描述，而是可以执行该描述以生成其中描述的性质的数据等。已努力确保所用数字(例如数量、温度等)的准确性，但应考虑一些实验误差和偏差。
除非另有说明，份数是重量份，分子量是重均分子量，温度是摄氏度(℃)，以及压力是大气压或接近大气压。使用标准缩写，包括以下内容：THF＝四氢呋喃；DIEA＝二异丙基乙基胺；EtOAc＝乙酸乙酯；NMP＝N-甲基吡啶,TFA＝三氟乙酸；DCM＝二氯甲烷；Cs2CO3＝碳酸铯；XPhos Pd G3＝2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基-1,1′-联苯)(2-(2′-氨基-1,1′-联苯))钯-(II)甲烷磺酸盐；LiCl＝氯化锂；POCl3＝三氯氧磷；PE＝石油醚；DMSO＝二甲基亚砜；HCl＝盐酸；Na2SO4＝硫酸钠；DMF＝二甲基甲酰胺；NaOH＝氢氧化钠；K2CO3＝碳酸钾；MeCN＝乙腈；BOC＝叔丁氧羰基；MTBE＝甲基叔丁基醚；MeOH＝甲醇；NaHCO3＝碳酸氢钠；NaBH3CN＝氰基硼氢化钠；EtOH＝乙醇；PCl5＝五氯化磷；NH4OAc＝乙酸铵；Et2O＝乙醚(ether)；HOAc＝乙酸；Ac2O＝乙酸酐；i-PrOH＝异丙醇；NCS＝N-氯琥珀酰亚胺；K3PO4＝磷酸钾；Pd(dtbpf)Cl2＝1,1′-二(二-叔丁基膦基)二茂铁)二氯化钯(II)；Zn(CN)2＝氰化锌；Pd(PPh3)4＝四(三苯基膦)钯(0)；Et3N＝三乙胺；CuCN＝氰化亚铜；t-BuONO＝亚硝酸叔丁酯；HATU＝1-(二(二甲基氨基)亚甲基)-1H-1,2,3-三唑并(4,5-b)吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐；DBU＝1,8-二氮杂二环(5.4.0)十一碳-7-烯；LiAlH4＝氢化铝锂；NH3＝氨；H2SO4＝硫酸；H2O2＝过氧化氢；EDCI＝N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐；HOBT＝1-羟基苯并三唑水合物；DHP＝二氢吡喃；TsOH＝对-甲苯磺酸；FA＝甲酸；TCFH＝N,N,N,N’-四甲基氯甲脒六氟磷酸盐；NMI＝N-甲基咪唑；Pd(dppf)Cl2＝(1,1’-二(二苯基膦基)二茂铁)二氯化钯(II)；Pd(dppf)Cl2-DCM＝(1,1’-二(二苯基膦基)二茂铁)二氯化钯(II)与二氯甲烷的复合物。
当一个或多个实例的绝对或相对立体化学未被确定时，实施例的正文表示相同。这些实施例和化合物表中报道的特征任意地指定了绝对立体化学。应当理解，普通技术人员技术范围内的常规工作可以证实本文公开的每个相关实施例的绝对立体化学。
合成实施例
中间体A
3-(2-甲氧基苯基)吡啶-4-甲酸
在室温在氮气下向3-溴吡啶-4-甲酸(2.0g,9.9mmol)在二噁烷(10mL)和水(10mL)中的溶液添加2-甲氧基苯基硼酸(2.3g,14.9mmol)、Na2CO3(1.1g,9.9mmol)和Pd(PPh3)4(1.1g,0.99mmol)。将混合物在100℃搅拌过夜。将混合物冷却至室温并用水稀释。将混合物用EtOAc(2x)萃取。将水层用HCl(1M)酸化至pH 6。形成固体，并将混合物过滤，得到3-(2-甲氧基苯基)吡啶-4-甲酸，其为白色固体，将其不经进一步纯化就用于后续步骤。
中间体B
5-((5-氯吡啶-2-基)甲氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
步骤1.制备(5-氯吡啶-2-基)甲醇
在0℃向5-氯吡啶-2-甲酸甲酯(95g,554mmol)在MeOH(950mL)中的溶液分份添加NaBH4(42.0g,1.11mol)。然后将混合物在室温搅拌2h。将混合物倒入H2O中。将混合物冷却至0℃并添加6N HCl，直到溶液pH为1～2。溶液温度为0-10℃。然后将混合物在减压下浓缩以除去MeOH。添加6N NaOH，直到溶液pH为8～10。将混合物用EtOAc(3x)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩，得到标题化合物(158g)，其为黄色油状物，其不经进一步纯化就用于后续步骤中。
步骤2.制备5-((5-氯吡啶-2-基)甲氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
在5℃向NaH(65.7g,1.64mol,60.0％纯度)在THF(1.20L)中的溶液逐滴添加(5-氯吡啶-2-基)甲醇(158g,1.10mol)在THF(400mL)中的溶液。将混合物在5℃搅拌1h。然后在5℃分份添加2-氨基-5-溴-1,3,4-噻二唑(237g,1.31mol)。将混合物在5℃搅拌4h。将混合物倒入H2O中并用EtOAc(4x)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物用MeOH稀释，并将浆料在25℃搅拌0.5h。将固体收集并用MeOH稀释。将浆料在80℃搅拌2h。将固体收集，得到5-((5-氯吡啶-2-基)甲氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(57.6g,21％收率)，其为灰色固体。
中间体C
4-(2-甲氧基苯基)-6-甲基烟酸
步骤1 4-氯-6-甲基烟酸甲酯
在0℃，向4-氯-6-甲基烟酸(5.0g，29.1mmol)的二氯甲烷(100mL)搅拌溶液中滴加甲醇(10mL)和(重氮甲基)三甲基硅烷(29mL，58.3mmol)。将所得溶液在室温搅拌16小时。真空除去有机溶剂。将所得残余物溶解在二氯甲烷(5mL)中并通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，将其应用于80.0g硅胶柱，在30分钟内用0～50％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到4-氯-6-甲基烟酸甲酯(4.5g，收率81％)，为黄色油状物。MS(ESI)(C8H8ClNO2)(M+1)+，计算值186.0；实测值186.0。
步骤2：制备4-(2-甲氧基苯基)-6-甲基烟酸甲酯
在23℃向4-氯-6-甲基烟酸甲酯(500.0mg，2.69mmol)和2-甲氧基苯基硼酸(819.0mg，5.39mmol)的1,4-二噁烷(1mL)搅拌溶液中依次加入水(0.2mL)，(1,1'-双(二苯基膦)二茂铁)二氯化钯(II)(591.0mg，0.81mmol)和碳酸钾(1.1g，8.08mmol)。将所得溶液在氮气下于80℃搅拌2小时。将合并的有机层用乙酸乙酯稀释并将悬浮液过滤。收集滤液并在真空下浓缩。将所得残余物溶解在二氯甲烷(5mL)中并通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，将其应用于40g硅胶柱，在30分钟内用0～35％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到4-(2-甲氧基苯基)-6-甲基烟酸甲酯(700.0mg，98％)，为黄色油状物。MS(ESI)(C15H15NO3)(M+1)+，计算值258.1；实测值258.0。
步骤3 4-(2-甲氧基苯基)-6-甲基烟酸
在23℃，向4-(2-甲氧基苯基)-6-甲基烟酸甲酯(400.0mg，1.56mmol)的甲醇(3mL)搅拌溶液中加入水(3mL)和氢氧化钠(249.0mg，6.22mmol)。将所得溶液在23℃搅拌2小时。真空除去有机溶剂。水层用柠檬酸溶液酸化至pH～6，用乙酸乙酯萃取。合并的有机层用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩，得到4-(2-甲氧基苯基)-6-甲基烟酸(342.0mg，粗品)，为黄色油状物。MS(ESI)(C14H13NO3)(M+1)+，计算值244.1；实测值244.0。
中间体D
4-(2-(二氟甲氧基)-6-氟苯基)-6-甲基烟酸
步骤-1:2-溴-1-(二氟甲氧基)-3-氟苯
在室温向2-溴-3-氟苯酚(25.00g，130.89mmol)在DMF(100.00mL)和H2O(10mL)中的搅拌溶液中分批次添加2-氯-2,2-二氟乙酸钠(16.95g，130.89mmol)。将所得混合物在80℃搅拌16小时。冷却至室温后，将所得混合物用水稀释，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，和真空浓缩。将残余物通过快速柱色谱纯化，用0～10％乙酸乙酯的石油醚溶液纯化，得到2-溴-1-(二氟甲氧基)-3-氟苯(12.2g，34.8％)，为白色油状物。MS(ESI)(C7H4BrF3O)(M+1)+，计算值240.9；实测值241.0.
步骤-2:2-(2-(二氟甲氧基)-6-氟苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷
向脱气的2-溴-1-(二氟甲氧基)-3-氟苯(3.00g，12.44mmol)的二噁烷(15.00ml)溶液中加入Pd(dppf)Cl2(0.91g，1.245mmol)，B2Pin2(6.30g，24.89mmol)和KOAc(2.44g，24.89mmol)。将所得混合物在氮气氛下于90℃搅拌过夜。真空除去溶剂，用0～10％乙酸乙酯的石油醚溶液通过快速柱色谱法纯化残余物，得到2-(2-(二氟甲氧基))-6-氟苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷(3.3g，46.01％)，为绿色固体。
步骤-3:4-(2-(二氟甲氧基)-6-氟苯基)-6-甲基吡啶-3-甲酸甲酯
向2-(2-(二氟甲氧基)-6-氟苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷(3.00g，10.41mmol)在二噁烷(15.00mL)和水(3mL)中的脱气溶液中加入4-氯-6-甲基吡啶-3-甲酸甲酯(1.93g，10.39mmol)、K2CO3(4.32g，31.25mmol)和Pd(dppf)Cl2(762.00mg，1.041mmol)。将所得混合物在氮气气氛下于80℃搅拌12小时。用水淬灭所述反应混合物，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。使用0～50％乙酸乙酯的石油醚溶液将残余物通过快速柱色谱法纯化，得到4-(2-(二氟甲氧基)-6-氟苯基)-6-甲基吡啶-3-甲酸甲酯(700mg，19％)，为黄色固体。MS(ESI)(C15H12F3NO3)(M+1)+，计算值312.1；实测值312.0。
步骤-4:4-(2-(二氟甲氧基)-6-氟苯基)-6-甲基吡啶-3-甲酸
向4-(2-(二氟甲氧基)-6-氟苯基)-6-甲基吡啶-3-甲酸甲酯(470.00mg，1.51mmol)在THF(3.00mL)和水(3mL)中的搅拌溶液中加入LiOH.H2O(253.68mg，6.040mmol)。将所得混合物在室温搅拌16h。在真空下除去有机溶剂，然后用水稀释。用HCl(1N)将溶液酸化至pH～6。用乙酸乙酯萃取所得混合物。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩得到4-(2-(二氟甲氧基)-6-氟苯基)-6-甲基吡啶-3-甲酸(370mg，82.4％)，为白色固体。MS(ESI)(C14H10F3NO3)(M+1)+，计算值298.1；实测值298.0。
中间体E
4-(2-(二氟甲氧基)-6-氟苯基)-6-甲基烟酸
标题化合物按照用于中间体C，步骤2和3的操作，使用3-溴异烟酸甲酯和2-氟-6-甲氧基苯基硼酸制备，得到4-(2-氟-6-甲氧基苯基)-6-甲基烟酸，其为白色固体，其不经进一步纯化就使用。
中间体F
5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸
步骤1 4-氯-6-甲基烟酸苄酯
向4-氯-6-甲基吡啶-3-甲酸(10.00g,58.3mmol)和Cs2CO3(37.98g,116.6mmol)在DMF(100mL)中的混合物添加苄基溴(14.95g,87.45mmol)。所得混合物在室温搅拌16h。将反应混合物用水淬灭并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤，并在真空下浓缩。将残余物通过快速色谱法在硅胶上用0～30％乙酸乙酯/石油醚纯化，得到4-氯-6-甲基烟酸苄酯(12.94g,84.8％)，其，为黄色油状物。MS(ESI)(C14H12ClNO2)(M+1)+，计算值262.0，实测值262.1。
步骤2 2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸苄酯
向甲基4-氯-6-甲基吡啶-3-甲酸苄酯(6.00g,22.926mmol)和2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基硼酸(4.30g,22.926mmol)在1,4-二噁烷(50mL)和H2O(5mL)中的脱气的混合物添加K2CO3(9.51g,0.069mmol)和Pd(DtBPF)Cl2(1.49g,2.29mmol)。将所得混合物在氮气气氛下在80℃搅拌2h。将反应混合物用水淬灭并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤，并在真空下浓缩。将残余物通过快速色谱法在硅胶上用0～50％乙酸乙酯/石油醚纯化，得到2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸苄酯(4g,47.3％)，其，为黄色油状物。MS(ESI)(C20H17ClN2O3)(M+1)+，计算值369.1，实测值369.0。
步骤3 5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸苄酯
向2-氯-5-甲氧基-6-甲基-(4,4-联吡啶)-3-甲酸苄酯(4.00g,10.845mmol)和K2CO3(4.50g,33.0mmol)在DME(30mL)中的脱气的混合物添加Pd(dppf)Cl2(0.79g,1.0mmol)和三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三硼杂环己烷(1.50g,12.0mmol)。将所得混合物在氮气气氛下在120℃搅拌2h。将反应混合物用水淬灭并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤，并在真空下浓缩。将残余物通过反相快速色谱法用5～70％乙腈/水纯化，得到5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸苄酯(2.8g,74.1％)，其，为黄色油状物。MS(ESI)(C21H20N2O3)(M+1)+，计算值349.1，实测值349.0。
步骤4 5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸
向5-甲氧基-2,6-二甲基-(4,4-联吡啶)-3-甲酸苄酯(2.80g,8.037mmol)在THF(20.00mL)中的混合物添加Pd/C(2.80g,10％)。所得混合物在氢气气氛下在室温搅拌1h。将所得混合物过滤。将滤液真空浓缩，得到5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(2.5g,粗品)，其为黄色固体，其不经进一步纯化直接用于后续步骤。MS(ESI)(C14H14N2O3)(M+1)+，计算值259.1，实测值259.0。
中间体G
2-氯-5-甲氧基-6-甲基-(4,4-联吡啶)-3-甲酸
步骤-1：2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基硼酸
在-78℃在氮气气氛下向2-氯-5-甲氧基吡啶(10.0g,69.65mmol)在THF(500mL)中的搅拌的溶液逐滴添加LDA(14.9g,139.30mmol)。将所得混合物在-78℃搅拌2h，然后在-78℃将硼酸三异丙基酯(26.2g,139.30mmol)添加至上述混合物。将所得混合物在-78℃搅拌2h。然后将所得混合物在室温搅拌16h。将所得混合物用HCl(2N)淬灭并在室温搅拌30分钟。将所得混合物用乙酸乙酯萃取。将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤，并在真空下浓缩。2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基硼酸(9g,68.9％)，其为褐色固体。MS(ESI)(C6H7BClNO3)(M+1)+，计算值188.0；实测值188.0。
步骤-2：2-氯-5-甲氧基6-甲基-(4,4-联吡啶)-3-甲酸甲酯
在氮气气氛下向4-氯-6-甲基吡啶-3-甲酸甲酯(700mg,3.77mmol)和2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基硼酸(918mg,4.90mmol)在二噁烷(6mL)和H2O(2mL)中的脱气的溶液添加Pd(dppf)Cl2(275mg,0.37mmol)和K2CO3(1563mg,11.31mmol)。将所得混合物在氮气气氛下在80℃搅拌16h。将所得混合物过滤并将滤液在减压下浓缩。将残余物通过快速柱色谱法用0～60％乙酸乙酯/石油醚纯化，得到2-氯-5-甲氧基6-甲基-(4,4-联吡啶)-3-甲酸甲酯(220mg,19.9％)，其为白色固体。MS(ESI)(C14H13ClN2O3)(M+1)+，计算值293.1；实测值293.1。
步骤-3:2-氯-5-甲氧基-6-甲基-(4,4-联吡啶)-3-甲酸
向2-氯-5-甲氧基-6-甲基-(4,4-联吡啶)-3-甲酸甲酯(220mg,0.75mmol)在THF(2mL)和水(2mL)中的搅拌的溶液添加LiOH.H2O(126mg,3.01mmol)。所得混合物在室温搅拌2h。将混合物用柠檬酸酸化至pH 3。将所得混合物用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤，并在真空下浓缩，得到2-氯-5-甲氧基-6-甲基-(4,4-联吡啶)-3-甲酸(160mg,76.3％)，其为白色固体。MS(ESI)(C13H11ClN2O3)(M+1)+，计算值279.0；实测值279.0。
实施例1
3-(2-甲氧基苯基)-N-(5-(丙-2-炔-1-基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)异烟酰胺
步骤1S-O-(丙-2-炔-1-基)二硫代碳酸甲酯
在0℃、氮气氛下，向炔丙醇(15.00g，267.551mmol，1.00当量)的THF(200mL)搅拌溶液中分批加入NaH(12.84g，321.062mmol，1.20当量，60％)。在氮气氛下，将所得混合物在0℃搅拌30分钟。在0℃向上述混合物中滴加CS2(24.45g，0.321mmol，1.2当量)。将所得混合物在0℃再搅拌10分钟，然后加入MeI(45.57g，0.321mmol，1.2当量)。将所得混合物在0℃搅拌10分钟。通过加入100mlNH4Cl(水溶液)淬灭反应。在室温，用乙酸乙酯(2×2，100ml)萃取水层。残余物经硅胶柱层析纯化，PE/EA(20:1)洗脱，得(甲硫基)(丙-2-炔-1-基氧基)甲硫酮，为棕色油状物。
步骤2O-(丙-2-炔-1-基)肼基硫代甲酸酯
氮气气氛下于0℃向(甲硫基)(丙-2-炔-1-基氧基)甲硫酮(25.00g，170.975mmol，1.00当量)在MeOH中的搅拌溶液/混合物中滴加(甲硫基)(丙-2-炔-1-基氧基)甲硫酮(25.00g，170.975mmol，1.00当量)。将所得混合物在室温搅拌30分钟。将所得混合物减压浓缩。粗产物不经进一步纯化直接用于下一步。这产生棕色油状的((丙-2-炔-1-基氧基)甲硫酰基)氨基)胺(23g,95.08％)。
步骤3 5-(丙-2-炔-1-基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
氮气气氛下于0℃向((丙-2-炔-1-基氧基)甲硫酰基)氨基)胺(23.00g，176.692mmol，1.00当量)和TEA(35.76g，353.384mmol，2当量)的搅拌MeOH溶液中分批次添加BrCN(22.46g，212.030mmol，1.2当量)。所得混合物在室温搅拌2小时。所得混合物用水(200ml)稀释。所得混合物用乙酸乙酯(2×100ml)萃取。合并的有机层用无水Na2SO4干燥。过滤后，滤液减压浓缩。通过加入EtOAc沉淀产物。这产生5-(丙-2-炔-1-基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(7.8g,26.46％),为灰白色固体。
步骤4:3-(2-甲氧基苯基)-N-(5-(丙-2-炔-1-基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)异烟酰胺
于室温在氮气气氛下向中间体A(5.00g，0.22mmol，1.00当量)和DIEA(8.45g，0.65mmol，3.00当量)在DMF(150mL)中的搅拌溶液中添加HATU(9.94mg，0.26mmol，1.20当量)。将所得混合物在室温搅拌1小时。在室温向上述混合物中加入5-(丙-2-炔-1-基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(3.38g，0.22mmol，1.00当量)。所得混合物在室温再搅拌2小时。所得混合物用水(450ml)稀释。水层用EtOAc(3×200ml)萃取。残余物通过硅胶柱色谱纯化，用CH2Cl2/MeOH(40∶1)洗脱。残余物通过反向快速色谱纯化，条件如下:柱，C18硅胶；流动相，MeCN水溶液，20分钟内0％至50％梯度；检测器，UV 254nm，产生3-(2-甲氧基苯基)-N-(5-(丙-2-炔-1-基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)异烟酰胺(5.01g，61.84％)，为橙色固体。
LC-MS:m/z 367(M+H)+；H-NMR:1H NMR(300MHz，甲醇-d4)δ8.68-8.67(d，1H)，8.60(s，1H)，7.65 -7.64(d，1H)，7.42-7.36(m，2H)，7.11-7.08(m，1H)，6.99-6.96(d，1H)，5.09(s，2H)，3.60(s，3H)，3.11(s，1H)ppm.
实施例2
4-(2-氟-6-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基吡啶-3-甲酰胺
向5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(33.1mg，0.25mmol)在乙腈(2ml)中的混合物中加入中间体E(55.0mg，0.21mmol)和NMI(36.3mg，0.44mmol)。在氮气下向其中滴加TCFH(64.9mg，0.23mmol)的乙腈(1mL)溶液。混合物在氮气下于20℃搅拌2小时。混合物在真空下浓缩。将残余物溶解在DMF(1mL)中，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于20g C18柱，用5～60％乙腈水溶液洗脱，得到5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基吡啶-3-甲酰胺(47.1mg，58％)，为白色固体。MS(ESI)(C17H15FN4O3S)(M+1)+，计算值375.1，实测值375.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.87(s，1H)，8.80(s，1H)，7.40–7.36(m，1H)，7.34–7.28(m，1H)，6.95–6.86(m，2H)，4.06(s，3H)，3.58(s，3H)，2.56(s，3H).
实施例3
4-(2-氟-6-甲氧基苯基)-N-(5-羟基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
步骤-1:N-(5-((5-氯吡啶-2-基)甲氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-4-(2-氟-6-甲氧基苯基)-6-甲基烟酰胺
向中间体B(111.4mg，0.46mmol)在乙腈(2mL)中的混合物中加入中间体E(100.0mg，0.38mmol)和NMI(66.0mg，0.80mmol)。在氮气下向其中滴加TCFH(118.1mg，0.42mmol)的乙腈(1mL)溶液。混合物在氮气下于20℃搅拌2小时。所得混合物在真空下浓缩。将残余物溶解在DMF(3mL)中，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，其应用于40g C18柱，在30分钟内用15～60％乙腈水溶液洗脱，得到N-(5-((5-氯吡啶-2-基)甲氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-4-(2-氟-6-甲氧基苯基)-6-甲基烟酰胺(170.0mg，91％)，为白色固体。MS(ESI)(C22H17ClFN5O3S)(M+1)+，计算值486.1，实测值486.0。
步骤-2:4-(2-氟-6-甲氧基苯基)-N-(5-羟基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
在室温搅拌N-(5-((5-氯吡啶-2-基)甲氧基)-1,3,4噻二唑-2-基)-4-(2-氟-6-甲氧基苯基)-6-甲基吡啶-3-甲酰胺(170.0mg，0.35mmol)在浓HCl(3mL)溶液中的混合物2小时，然后真空浓缩。残余物用NH3碱化。加入H2O使pH值达到9～10。用EtOAc萃取水溶液。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。残余物通过制备-HPLC纯化，条件如下:(柱:XBridge制备型OBD C18柱，30×150mm 5μm；流动相A:水(10mmol/LNH4HCO3)，流动相B:ACN；流速:60mL/分钟；梯度:8min内10B到40b；220nm；RT:7.23分钟)以得到4-(2-氟-6-甲氧基苯基)-N-(5-羟基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(56.4mg，44％)，为白色固体。MS(ESI)(C16H13FN4O3S)(M+1)+，计算值361.1，实测值361.0。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.28(s，2H)，8.75(s，1H)，7.46–7.32(m，1H)，7.30(s，1H)，6.95–6.82(t，J＝8.0Hz，2H)，3.64(s，3H)，2.55(s，3H)。
实施例4
4-(2-氟-6-甲氧基苯基)-6-甲基-N-(5-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)吡啶-3-甲酰胺
步骤1(甲硫基)(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙氧基)甲硫酮
向3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙-1-醇(100.0mg，0.71mmol)的无水四氢呋喃(3mL)脱气溶液中分批次加入NaH(34.0mg，1.41mmol，60％)0℃，然后在氮气气氛下0℃搅拌1h。然后在0℃，在20分钟内将CS2(81.0mg，1.00mmol)加入上述混合物中。然后在0℃将MeI(150.0mg，1.05mmol)加入到上述混合物中30分钟。然后将所得混合物在氮气氛下室温搅拌2小时。通过加入水淬灭反应混合物，并用EtOAc萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(2mL)中，将其应用于40g C18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～45％乙腈水溶液洗脱，得到(甲硫基)(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙氧基)甲硫酮(160.0mg,97％),为白色固体。MS(ESI)(C7H11F3N2OS)(M+1)+，计算值234.0；实测值234.0。
步骤2(((3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙氧基)甲硫酰基)氨基)胺
在0℃氮气气氛下向搅拌的(甲硫基)(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙氧基)甲硫酮(160.0mg，0.70mmol)的MeOH(3mL)溶液中滴加NH2NH2.H2O(34.0mg，0.70mmol)。将所得混合物在氮气氛下于0℃搅拌1小时。所得混合物在真空下浓缩，得到(((3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙氧基)甲硫酰基)氨基)胺(150.0mg,粗),，为黄色油状物。MS(ESI)(C6H11F3N2OS)(M+1)+，计算值217.1；实测值217.1.
步骤3 5-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
在0℃氮气气氛下向(((3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙氧基)甲硫酰基)氨基)胺(150.0mg，0.70mmol)在MeOH(3mL)中的搅拌溶液中添加TEA(140.0mg，1.39mmol)和BrCN(81.0mg，0.76mmol)。将所得混合物在氮气氛下于0℃搅拌1小时。通过加入水淬灭反应混合物，并用EtOAc萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩得到5-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(140.0mg,粗产物)，为粉红色固体。MS(ESI)(C7H10F3N3OS)(M+1)+，计算值242.1；实测值242.1。
步骤4 4-(2-氟-6-甲氧基苯基)-6-甲基-N-(5-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)吡啶-3-甲酰胺
在25℃，氮气气氛下向5-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(50.0mg，0.21mmol)和中间体E(54.0mg，0.21mmol)的DMF(1mL)的搅拌溶液中加入NMI(68.0mg，0.83mmol)和TCFH(87.0mg，0.31mmol)。混合物在氮气氛下于25℃搅拌1小时。通过制备-HPLC在以下条件下纯化所得混合物:(柱:XBridge制备型OBD C18柱，30×150mm 5um；流动相A:水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B:ACN；流速:60mL/分钟；梯度:在8分钟内从42％B到57％B，UV:254nm)以得到4-(2-氟-6-甲氧基苯基)-6-甲基-N-(5-(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)吡啶-3-甲酰胺(23.2mg,23％)，为白色固体。MS(ESI)(C21H20F4N4O3S)(M+1)+，计算值485.1；实测值，485.3。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.87(s，1H)，8.83(s，1H)，7.42–7.37(m，1H)，7.31(d，J＝1.6Hz，1H)，6.93–6.87(m，2H)，4.45(s，2H)，3.58(s，3H)，2.57(s，3H)，1.22(s，6H).
实施例5
2'-氯-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
向中间体G(50.0mg，0.17mmol)在MeCN(1mL)中的混合物中加入5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(28.2mg，0.21mmol)和NMI(30.9mg，0.37mmol)。在氮气下向其中滴加TCFH(55.3mg，0.19mmol)的MeCN(1mL)溶液。混合物在氮气下于20℃搅拌2小时。所得混合物在真空下浓缩。将残余物溶解在DMF(3mL)中，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，其应用于40g C18柱，在30分钟内用10～60％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(34.7mg，33％)，为白色固体。MS(ESI)(C16H14ClN5O3S)(M+1)+，计算值392.0，实测值392.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.93(s，1H)，8.81(s，1H)，8.17(s，1H)，7.55(s，1H)，7.44(s，1H)，4.08(s，3H)，3.63(s，3H)，2.59(s，3H)。
实施例6
2'-氯-N-(5-异丙氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:((异丙氧基甲硫酰基)氨基)胺
将异丙氧基(硫基钾)甲硫酮(1.0g，5.73mmol)和肼(200.0mg，5.61mmol)在MeOH(10mL)中的混合物在室温搅拌2小时。混合物在真空下浓缩，得到黄色固体形式的((异丙氧基甲硫酰基)氨基)胺(800.0mg，粗产物)，其无需进一步纯化即可用于下一步。
步骤-2:5-异丙氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺
向((异丙氧基甲硫酰基)氨基)胺(400.0mg，2.98mmol)，TEA(603.2mg，5.96mmol)在MeOH(20mL)中的混合物中添加BrCN(173.6mg，1.63mmol)。将所得混合物在室温搅拌2小时。用水淬灭所述反应混合物，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将残余物溶解在DMF(3mL)中，并通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，其应用于40g C18柱，在30分钟内用15～90％乙腈水溶液洗脱，得到5-异丙氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(79.0mg，16％)，为白色固体。MS(ESI)(C5H9N3OS)(M+1)+，计算值160.0，实测值160.0.
步骤-3:2'-氯-N-(5-异丙氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
中间体G(80.0mg，0.28mmol)在MeCN(3mL)中的混合物中加入5-异丙二醇-1,3,4-噻二唑-2-胺(59.4mg，0.37mmol)和NMI(49.4mg，0.60mmol)。在氮气下向其中滴加TCFH(88.6mg，0.31mmol)在MeCN(1mL)中的溶液。将所得混合物在室温搅拌2小时。所得混合物在真空下浓缩。将残余物溶解在DMF(3mL)中，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，其应用于40g C18柱，在30分钟内用15～65％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-N-(5-异丙氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(29.4mg，23％)，为白色固体。MS(ESI)(C18H18ClN5O3S)(M+1)+，计算值420.0，实测值420.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.88(s，1H)，8.81(s，1H)，8.17(s，1H)，7.53(s，1H)，7.41(s，1H)，5.17–5.05(m，1H)，3.63(s，3H)，2.58(s，3H)，1.37(d，J＝6.0Hz，6H).
实施例7
2'-氯-N-(5-环丙氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤1环丙氧基(甲硫基)甲硫酮
在0℃，向环丙醇(1.0g，17.21mmol)在THF(20mL)中的混合物中分批加入NaH(1.4g，34.40mmol，60％)，并在0℃搅拌30分钟。在0℃向上述混合物中加入CS2(1.9g，25.82mmol)并在0℃搅拌30分钟。然后在0℃将MeI(3.7g，25.82mmol)加入到上述混合物中。将所得溶液在0℃搅拌30分钟。用水淬灭所述反应混合物，用乙酸乙酯萃取。用硫酸钠干燥合并的有机溶液，过滤，并真空浓缩，得到黄色油状的环丙氧基(甲硫基)甲硫酮(2.0g，粗品)。
步骤2N-氨基-1-环丙氧基甲烷硫代酰胺
向环丙氧基(甲基硫基)甲硫酮(1.5g，10.11mmol)在MeOH(10mL)中的混合物中添加肼(389.1mg，12.14mmol)。将混合物在25℃搅拌2小时。混合物用水(20mL)稀释。水层用乙酸乙酯萃取。用硫酸钠干燥合并的有机溶液，过滤，并真空浓缩，得到为黄色油状物的N-氨基-1-环丙氧基甲烷硫代酰胺(2.4g，粗产物)。MS(ESI)(C4H8N2OS)(M-1)+，计算值133.0，实测值133.0
步骤3 5-环丙氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺
向N-氨基-1-环丙氧基甲烷硫代酰胺(1.5g，11.34mmol)、TEA(2.3g，22.69mmol)在MeOH(10mL)中的混合物中加入BrCN(1.3g，12.48mmol)，所得溶液在25℃搅拌30分钟。混合物用水淬灭。水层用乙酸乙酯萃取。用硫酸钠干燥合并的有机溶液，过滤，并真空浓缩得到粗产物。将残余物溶解在DMF(3mL)中，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，其应用于40g C18柱，在30分钟内用15～90％乙腈水溶液洗脱，得到5-环丙氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(400.0mg，三步骤中共22％)，为黄色固体。MS(ESI)(C5H7N3OS)(M+1)+，计算值158.0，实测值158.0。
步骤4 2'-氯-N-(5-环丙氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
向中间体G(100.0mg，0.35mmol)在DMF(5mL)中的混合物中加入5-环丙氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(84.6mg，0.53mmol)，HATU(204.6mg，0.53mmol)和DIEA(139.1mg，1.07mmol)。将所得溶液在25℃搅拌2小时。通过制备型HPLC纯化所得混合物，条件如下:(柱:YMC-Actus Triart C18 ExRS，30mm×150mm，5μm；流动相A:水(10MMOL/L NH4HCO3)，流动相B:ACN；流速:60mL/分钟；梯度:8分钟内从25％B到40％B，9分钟内从40％B到95％B，9.5分钟内从95％B到95％B，10分钟内从95％B到5％B；波长:254nm；RT(min):7.80)以得到2'-氯-N-(5-环丙氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-5-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(54.6mg，36％)，为白色固体。MS(ESI)(C18H16ClN5O3S)(M+1)+，计算值418.0，实测值418.0。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.90(s，1H)，8.83(s，1H)，8.17(s，1H)，7.51(s，1H)，7.40(s，1H)，4.39–4.29(m，1H)，3.64(s，3H)，2.59(s，3H)，0.91–0.77(m，4H).
实施例8
5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
向5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(60.9mg，0.46mmol)在DMF(1mL)和乙腈(1mL)中的混合物中加入中间体F(100.0mg，0.38mmol)，NMI(95.0mg，1.16mmol)。在氮气下向其中滴加TCFH(163.0mg，0.58mmol)的乙腈(1mL)溶液。混合物在氮气下于20℃搅拌2小时。得到的溶液通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，其应用于40g C18柱，在30分钟内用5～30％乙腈水溶液洗脱，得到5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(124.0mg，85％)，为白色固体。MS(ESI)(C17H17N5O3S)(M+1)+，计算值372.1；实测值，372.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.85(s，1H)，8.75(s，1H)，8.19(s，1H)，7.36(s，1H)，7.26(s，1H)，4.08(s，3H)，3.58(s，3H)，2.59(s，3H)，2.48(s，3H)。
实施例9
4-(5-氯-2-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
步骤1 4-(5-氯-2-甲氧基苯基)-6-甲基吡啶-3-甲酸甲酯
向4-氯-6-甲基吡啶-3-甲酸甲酯(600.0mg，3.23mmol)和5-氯-2-甲氧基苯基硼酸(905.0mg，4.85mmol)在二噁烷(6mL)中的搅拌溶液中加入水(2mL)和Pd(PPh3)4(375.0mg，0.32mmol)和K2CO3(1.3g，9.72mmol)。将所得混合物在氮气气氛下于80℃搅拌2小时，然后真空浓缩。将粗残余物应用到40g C18柱上，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在45分钟内用5～50％乙腈水溶液洗脱，得到4-(5-氯-2-甲氧基苯基)-6-甲基吡啶-3-甲酸甲酯(730.0mg，76％)，为黄色油状物。MS(ESI)(C15H14ClNO3)(M+1)+，计算值292.1；实测值，292.0。
步骤2 4-(5-氯-2-甲氧基苯基)-6-甲基吡啶-3-甲酸
向搅拌的4-(5-氯-2-甲氧基苯基)-6-甲基吡啶-3-甲酸甲酯(100.0mg，0.34mmol)的四氢呋喃(1mL)溶液中加入LiOH.H2O(58.0mg，1.38mmol)和水(0.3mL)。将所得混合物在25℃搅拌1小时。用柠檬酸将残余物酸化至pH 7。用乙酸乙酯萃取所得混合物。用盐水洗涤合并的有机层，用无水Na2SO4干燥。过滤后，滤液在减压下浓缩，得到4-(5-氯-2-甲氧基苯基)-6-甲基吡啶-3-甲酸(93.0mg，粗品)，为白色固体。MS(ESI)(C14H12ClNO3)(M+1)+，计算值278.1；实测值，278.1。
步骤3 4-(5-氯-2-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
向5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(57.0mg，0.43mmol)的乙腈(3mL)混合物中加入4-(5-氯-2-甲氧基苯基)-6-甲基烟酸(93.0mg，0.36mmol)和NMI(89.0mg，1.08mmol)。在氮气下向其中滴加TCFH(111.0mg，0.39mmol)的乙腈(1mL)溶液。混合物在氮气下于20℃搅拌2小时。将反应混合物应用到40g C18柱上，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，并在45分钟内用5～40％乙腈水溶液洗脱，得到4-(5-氯-2-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(91.3mg，64％)，为白色固体。MS(ESI)(C17H15ClN4O3S)(M+1)+，计算值391.0，实测值391.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.75(s，1H)，8.70(s，1H)，7.48–7.40(m，2H)，7.35(s，1H)，7.01(d，J＝8.0Hz，1H)，4.07(s，3H)，3.50(s，3H)，2.57(s，3H)。
实施例10
2'-氯-N-(5-(2-氰基-2-甲基丙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:3-((5-氨基-1,3,4-噻二唑-2-基)氧基)-2,2-二甲基丙腈
在0℃向NaH(303.0mg，7.57mmol，60％)的四氢呋喃(5mL)溶液中滴加3-羟基-2,2-二甲基丙腈(500.0mg，5.04mmol)的四氢呋喃(2mL)溶液，然后在0℃搅拌30min。在0℃和氮气下向上述溶液中加入5-溴-1,3,4-噻二唑-2-胺(908.0mg，5.04mmol)。然后将所得溶液在0℃搅拌1.5小时。加入水使反应混合物淬灭。所得混合物在真空下浓缩。将残余物溶解在DMF(5mL)中，并通过Combi Flash纯化，将其应用于80g C18柱，在30分钟内用5～70％乙腈水溶液洗脱，得到3-((5-氨基-1,3,4-噻二唑-2-基)氧基)-2,2-二甲基丙腈(50.0mg，5％)，为黄色固体。MS(ESI)(C7H10N4OS)(M+1)+，计算值199.1；实测值199.2。
步骤-2:2'-氯-N-(5-(2-氰基-2-甲基丙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在20℃向中间体G(70.0mg，0.25mmol)和3-((5-氨基-1,3,4-噻二唑-2-基)氧基)-2,2-二甲基丙腈(50.0mg，0.25mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(2mL)溶液加入DIEA(98mg，0.76mmol)和HATU(142.5mg，037mmol)。将所得溶液在氮气下于80℃搅拌2小时。将所得混合物应用到20g C18柱上，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～60％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-N-(5-(2-氰基-2-甲基丙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(51.6mg，43％)，为白色固体。MS(ESI)(C20H19ClN6O3S)(M+1)+，计算值459.1；实测值，459.0。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.97(s，1H)，8.82(s，1H)，8.17(s，1H)，7.55(s，1H)，7.44(s，1H)，4.49(s，2H)，3.64(s，3H)，2.60(s，3H)，1.42(s，6H)。
实施例11
2'-氯-N-(5-环丁氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤1 5-环丁氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺
在0℃向NaH(416.0mg，10.40mmol，60％)的四氢呋喃(THF)(5mL)溶液中滴加环丁醇(500.0mg，6.93mmol)。然后在氮气下将所得溶液在0℃搅拌30分钟。在0℃和氮气下向上述溶液中加入5-溴-1,3,4-噻二唑-2-胺(1.3g，6.93mmol)。然后将所得溶液在0℃搅拌1小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DCM(1mL)中，并上样到20g硅胶柱上，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用0～50％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到5-环丁氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(140.0mg，12％)，为黄色固体。MS(ESI)(C6H9N3OS)(M+1)+,172.1，实测值172.1。
步骤2 2'-氯-N-(5-环丁氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
向中间体G(146.0mg，0.53mmol)的乙腈(1mL)溶液中加入5-环丁氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(90.0mg，0.53mmol)和NMI(216.0mg，2.63mmol)。在23℃向上述溶液中加入TCFH(162.0mg，0.58mmol)。所得溶液在23℃搅拌1小时。将混合物溶解在DMF(1mL)中，并应用于20g C18柱，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～50％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-N-(5-环丁氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(24.7mg，11％)，为白色固体。MS(ESI)(C19H18ClN5O4S)(M+1)+432.1；实测值432.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.83(s，1H)，8.79(s，1H)，8.17(s，1H)，7.53–7.34(m，2H)，5.22–5.16(m，1H)，3.63(s，3H)，2.59(s，3H)，2.59–2.18(m，4H)，1.77–1.85(m，1H)，1.71–1.53(m，1H)。
实施例12
2'-氯-N-(5-(环己基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤1O-环己基S-二硫代碳酸甲酯
在0℃向脱气的NaH(200.0mg，4.99mmol，60％)的四氢呋喃(6mL)混合物中滴加环己醇(500.0mg，4.99mmol)并在0℃搅拌30min。在0℃向上述溶液中滴加CS2(570.0mg，7.49mmol)，并在0℃搅拌20分钟。在0℃向上述溶液中滴加MeI(1.1g，7.49mmol)并在0℃搅拌30分钟。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DCM(3mL)中，并应用于20g硅胶柱，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在20分钟内用0～10％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到O-环己基S-二硫代碳酸甲酯(400.0mg，42％)，为无色油状物。MS(ESI)(C8H14OS)(M+1)+，计算值191.0；实测值，191.1。
步骤2O-环己基肼基硫代碳酸酯
在0℃、氮气气氛下，向O-环己基S-二硫代碳酸甲酯(400.0mg，2.10mmol)的甲醇(4mL)溶液中加入肼(126.1mg，3.15mmol)。然后将所得溶液在23℃搅拌1小时。用水稀释反应混合物，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩以得到O-环己基肼基硫代碳酸酯(320.1mg，粗品)，为白色固体。MS(ESI)(C7H14N2OS)(M+1)+，计算值175.1；实测值，175.1。
步骤3 5-(环己基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
在23℃、氮气氛下，向脱气后的O-环己基肼基硫代碳酸酯(320.0mg，1.84mmol)的甲醇(4mL)溶液中加入TEA(372.0mg，3.67mmol)和BrCN(270.0mg，2.57mmol)。将所得溶液在氮气下于23℃搅拌2小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。得到的残余物通过Combi Flash纯化，其应用于20g硅胶柱，通过Combi Flash纯化(Biotage Isolera Prime)，在25分钟内用0～30％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到5-(环己基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(220.0mg，57％)，为白色固体。MS(ESI)(C8H13N3OS)(M+1)+,200.1，实测值200.1。
步骤4 2'-氯-N-(5-(环己基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
向中间体G(280.1mg，1.01mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(2mL)溶液中加入5-(环己基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(200.0mg，1.01mmol)和1-甲基咪唑(247.2mg，3.01mmol)。在23℃，向上述溶液中加入TCFH(310.0mg，1.10mmol)的乙腈(1mL)溶液。所得溶液在氮气下于23℃搅拌2小时。将混合物用DMF(2mL)稀释，将其应用于20g C18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～50％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-N-(5-(环己基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(240.1mg，52％)，为白色固体。MS(ESI)(C21H22ClN5O3S)(M+1)+，计算值460.1，实测值460.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.89(s，1H)，8.80(s，1H)，8.18(s，1H)，7.54(s，1H)，7.43(s，1H)，4.94–4.83(m，1H)，3.63(s，3H)，2.59(s，3H)，2.10–1.99(m，2H)，1.75–1.67(m，2H)，1.56–1.49(m，3H)，1.45–1.23(m，3H)。
实施例13
2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤1 5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
在0℃向脱气的NaH(405.2mg，10.12mmol，60％)的四氢呋喃(8mL)溶液中加入氧杂环丁烷-3-醇(500.1mg，6.75mmol)并在0℃搅拌30min。在氮气下向上述混合物中加入5-溴-1,3,4-噻二唑-2-胺(1.2g，6.75mmol)。然后将所得溶液在0℃搅拌1小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(1.5mL)中，应用于40g C18柱，通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，在20分钟内用5～20％乙腈水溶液洗脱，得到5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(112.2mg，9％)，为黄色固体。MS(ESI)(C5H7N3O2S)(M+1)+，计算值174.0；实测值174.0。
步骤2 2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
向5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(100.0mg，0.58mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(1mL)和乙腈(1mL)溶液加入中间体G(161.2mg，0.58mmol)和1-甲基咪唑(142.2mg，1.73mmol)。在23℃，向上述混合物中加入TCFH(178.3mg，0.64mmol)的乙腈(1mL)溶液。混合物在氮气下于23℃搅拌2小时。将所得混合物溶解在DMF(2mL)中，将其应用于20gC18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～40％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(65.3mg，25％)，为白色固体。MS(ESI)(C18H16ClN5O4S)(M+1)+，计算值434.1；实测值，434.0。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.01(s，1H)，8.80(s，1H)，8.18(s，1H)，7.55(s，1H)，7.44(s，1H)，5.72–5.62(m，1H)，4.94–4.86(m，2H)，4.69–4.61(m，2H)，3.63(s，3H)，2.59(s，3H)。
实施例14
2’-氯-N-(5-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5’-甲氧基-6-甲基-(4,4’-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:2-((5-氨基-1,3,4-噻二唑-2-基)氧基)乙酸甲酯
在0℃向2-羟基乙酸甲酯(3.0g，33.3mmol)的四氢呋喃(30mL)脱气溶液中分批加入NaH(2.0g，50.0mmol，60％)。将所得溶液在氮气下于0℃搅拌1小时。于0℃向上述溶液中加入5-溴-1,3,4-噻二唑-2-胺(6.0g，33.3mmol)。然后将所得溶液在氮气下于0℃搅拌2小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。所得残余物通过应用于40g硅胶柱的正相快速色谱法纯化，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，并在30分钟内用0～66％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到2-((5-氨基-1,3,4-噻二唑-2-基)氧基)乙酸甲酯(418.0mg，6％)，为白色固体。MS(ESI)(C5H7N3O3S)(M+1)+，计算值190.0；实测值，190.0。
步骤-2:2-((5-(2’-氯-5’-甲氧基-6-甲基-(4,4’-联吡啶)-3-甲酰胺基)-1,3,4-噻二唑-2-基)氧基)乙酸甲酯
向2-((5-氨基-1,3,4-噻二唑-2-基)氧基)乙酸甲酯(200.0mg，1.06mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(2mL)的搅拌溶液中依次添加中间体G(295.0mg，1.06mmol)和1-甲基-1H-咪唑(347.0mg，4.23mmol)。在23℃，向其中加入TCFH(445.0mg，1.59mmol)的乙腈(2mL)溶液，混合物在23℃搅拌1小时。将所得混合物稀释在DMF(2mL)中，并应用于40g C18柱，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，并在30分钟内用5～34％乙腈水溶液洗脱，得到2-((5-(2’-氯-5’-甲氧基-6-甲基-(4,4’-联吡啶)-3-甲酰胺基)-1,3,4-噻二唑-2-基)氧基)乙酸甲酯(350.0mg，72％)，为白色固体。MS(ESI)(C18H16ClN5O5S)(M+1)+，计算值450.1；实测值，450.1。
步骤-3:2’-氯-N-(5-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5’-甲氧基-6-甲基-(4,4’-联吡啶)-3-甲酰胺
在0℃向2-((5-(2’-氯-5’-甲氧基-6-甲基-(4,4’-联吡啶)-3-甲酰胺基)-1,3,4-噻二唑-2-基)氧基)乙酸甲酯(100.0mg，0.22mmol)的无水四氢呋喃(1mL)脱气溶液中滴加甲基溴化镁(0.3mL，0.90mmol，3N的THF溶液)中。将混合物在氮气气氛下于0℃搅拌30分钟。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将残余物溶解在甲醇(4mL)中并通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：Xbridge Prep OBD C18柱，30*150mm，5μm；流动相A:水(10mmol/LNH4HCO3)，流动相B:MeOH—HPLC；流速：60mL/min；梯度：在8分钟内从38％B到55％B，在8.2分钟内从55％B到95％B，在10分钟内从95％B到95％B，在11分钟内从95％B到38％B，38％B；波长：254/220nm；RT1(min):7；进样体积：0.8mL；运行次数：5)以得到2’-氯-N-(5-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5’-甲氧基-6-甲基-(4,4’-联吡啶)-3-甲酰胺(41.7mg，41％)，为白色固体。MS(ESI)(C19H20ClN5O4S)(M+1)+，计算值450.1；实测值，450.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.87(s，1H)，8.82(s，1H)，8.17(s，1H)，7.52(s，1H)，7.41(s，1H)，4.77(s，1H)，4.18(s，2H)，3.64(s，3H)，2.59(s，3H)，1.18(s，6H)。
实施例15和16
2'-氯-N-(5-((1s,3s)-3-羟基环丁氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺和2'-氯-N-(5-((1r,3r)-3-羟基环丁氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤1O-(3-(苯甲基氧基)环丁基)S-甲基二硫代碳酸酯
0℃向NaH(242mg，6.06mmol，60％)的THF(5mL)溶液中滴加3-(苯甲基氧基)环丁-1-醇(900mg，5.06mmol)的THF(5mL)溶液。将所得混合物在0℃搅拌30分钟。在0℃向上述混合物中滴加CS2(576mg，7.59mmol)并在0℃搅拌20分钟。然后在0℃向上述混合物中滴加MeI(1.07mg，7.59mmol)将所得混合物在室温搅拌1小时。所得混合物用水淬灭。水层用乙酸乙酯萃取。合并有机层，用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并过滤。滤液在真空下浓缩。将所得残余物溶解在酰基乙酸酯(5mL)中，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于40g硅胶柱，在35分钟内用0～82％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到O-(3-(苯甲基氧基)环丁基)S-甲基二硫代碳酸酯(940mg,69％)，为黄色油状物。MS(ESI)(C13H16O2S2)(M+1)+，计算值269.06；实测值，269.06。
步骤2O-(3-(苯甲基氧基)环丁基)肼基硫代碳酸酯
向S-甲基O-(3-(苯甲基)环丁基)S-甲基二硫代碳酸酯(940mg，3.50mmol)的MeOH(5mL)混合物中加入肼(241mg，3.80mmol 80％)。混合物在0℃搅拌1小时。所得混合物在真空下浓缩，然后用水稀释。用乙酸乙酯萃取所得混合物。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩以得到O-(3-(苯甲基氧基)环丁基)肼基硫代碳酸酯(830mg，粗品)，为黄色油状物。MS(ESI)(C12H16N2O2S)(M+1)+，计算值253.09；实测值，253.09。
步骤3 5-(3-(苯甲基氧基)环丁氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
向O-(3-(苯甲基氧基)环丁基)肼基硫代碳酸酯(860mg，3.40mmol)和Et3N(689mg，6.81mmol)的MeOH(5mL)溶液中加入BrCN(394mg，3.74mmol)。混合物在23℃搅拌1小时。所得混合物用水淬灭。水层用乙酸乙酯萃取。合并有机层，用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并过滤。所得残余物通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，其应用于40g硅胶柱，并在35分钟内用0～55％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到5-(3-(苯甲基氧基)环丁氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(410mg，43％)，为白色固体。MS(ESI)(C13H15N3O2S)(M+1)+，计算值278.09；实测值，278.09。
步骤4 3-((5-氨基-1,3,4-噻二唑-2-基)氧基)环丁-1-醇
在-78℃向搅拌的5-(3-(苯甲基氧基)环丁氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺的二氯甲烷(5mL)溶液中加入BBr3(0.545mL，5.77mmol)。将所得溶液在-78℃搅拌1小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用水洗涤合并的有机层，用无水Na2SO4干燥，减压浓缩。将所得残余物溶解在DMF(3mL)中，将其应用于20g C18柱，并通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，在25分钟内用5～35％乙腈水溶液洗脱，得到3-((5-氨基-1,3,4-噻二唑-2-基)氧基)环丁-1-醇(105mg，48％)，为白色固体。MS(ESI)(C6H9N3O2S)(M+1)+，计算值188.04；实测值，188.04。
步骤5 2'-氯-N-(5-(3-羟基环丁氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在23℃向3-((5-氨基-1,3,4-噻二唑-2-基)氧基)环丁-1-醇(100mg，0.534mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(0.5mL)和乙腈(0.5mL)中的搅拌溶液中加入1-甲基咪唑(0.213mL，2.67mmol)，中间体G(149mg，0.534mmol)，和TCFH(165mg，0.588mmol)。将所得溶液在23℃搅拌1小时。将所得残余物溶解在DMF(0.5mL)中，将其应用于20g C18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在25分钟内用5～42％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-N-(5-(3-羟基环丁氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(50mg，19％)，为黄色固体。MS(ESI)(C19H18ClN5O4S)(M+1)+，计算值448.1；实测值，448.1。
步骤6 2'-氯-N-(5-((1s,3s)-3-羟基环丁氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺和2'-氯-N-(5-((1r,3r)-3-羟基环丁氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
将化合物的混合物(50mg)溶解在DMF(7mL)中，其通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：XBridge制备型苯基OBD柱，19*250mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B:MeOH-----制备级(Preparative)；流速：25mL/min；梯度：12分钟内40％B到50％B，12.2分钟内50％B到95％B，14分钟内95％B到95％B，14.2分钟内95％B到5％B，16分钟内5％B到5％B；波长：254nm；进样体积：0.6mL；运行次数：11)以得到2'-氯-N-(5-((1r,3r)-3-羟基环丁氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(18.8mg，产率：37.1％)，为白色固体和2'-氯-N-(5-((1s,3s)-3-羟基环丁氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(5.8mg，产率：11.43％)，为白色固体。
2'-氯-N-(5-((1s,3s)-3-羟基环丁氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺:MS(ESI)(C19H18ClN5O4S)(M+1)+，计算值448.1；实测值，448.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.88(s，1H)，8.81(s，1H)，8.17(s，1H)，7.53(s，1H)，7.42(s，1H)，5.24(d，J＝6.0Hz，1H)，4.72(d，J＝6.0Hz，1H)，3.83(d，J＝6.0Hz，1H)，3.63(s，3H)，2.82–2.76(m，2H)，2.59(s，3H)，2.10–1.96(m，2H)。
2'-氯-N-(5-((1r,3r)-3-羟基环丁氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺:MS(ESI)(C19H18ClN5O4S)(M+1)+，计算值448.1；实测值，448.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.89(s，1H)，8.82(s，1H)，8.17(s，1H)，7.51(s，1H)，7.40(s，1H)，5.29–5.25(m，2H)，4.39(d，J＝6.0Hz，1H)，3.63(s，3H)，2.58(s，3H)，2.43–2.38(m，2H)，2.36–2.31(m，2H)。
使用(1s,3s)-3-(苯甲基氧基)环丁-1-醇作为起始材料再次合成2'-氯-N-(5-((1s,3s)-3-羟基环丁氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺以确认绝对立体化学。
实施例17
2'-氯-N-(5-(环戊基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤1O-环戊基S-甲基二硫代碳酸酯
在0℃，向环戊醇(500mg，5.80mmol)在无水四氢呋喃(THF)(2mL)中的脱气溶液中分批次加入NaH(464mg，11.61mmol)，并在25℃搅拌30分钟。在25℃，向上述溶液中依次加入CS2(0.525mL，8.71mmol)和MeI(0.544mL，8.71mmol)，然后将所得混合物在25℃搅拌30分钟。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DCM(3mL)中，并应用于20g硅胶柱，在25分钟内用0～30％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到O-环戊基S-甲基二硫代碳酸酯(972mg，产率：93％)为无色油状物。MS(ESI)(C7H12OS2)(M+1)+,177.0，实测值177.0。
步骤2O-环戊基肼基硫代碳酸酯
在25℃向搅拌的O-环戊基S-甲基二硫代碳酸酯(970mg，5.50mmol)的甲醇(5mL)溶液中加入N2H4·H2O(344mg，5.50mmol)。将所得溶液在25℃搅拌2小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩以得到O-环戊基肼基硫代碳酸酯(826mg，粗品)，为黄色油状物。粗产物无需进一步纯化即可用于下一步。MS(ESI)(C6H12N2OS)(M+1)+,161.11，实测值161.1.
步骤3 5-(环戊基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
在25℃，向搅拌的O-环戊基肼基硫代碳酸酯(826mg，5.15mmol)的乙醇(5mL)溶液中加入TEA(0.719mL，5.15mmol)和BrCN(546mg，5.15mmol)。将所得溶液在25℃搅拌1小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DCM(5mL)中，并应用于40g硅胶柱，在30分钟内用0～50％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到5-(环戊基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(627mg，44％产率)，为黄色固体。MS(ESI)(C7H11N3OS)(M+1)+,185.1，实测值185.1。
步骤4 2'-氯-N-(5-(环戊基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在25℃向中间体G(301mg，1.080mmol)和5-(环戊基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(200mg，1.080mmol)的ACN(2mL)和N,N-二甲基甲酰胺(1mL)的搅拌溶液中加入1-甲基咪唑(0.430mL，5.40mmol)和TCFH(333mg，1.188mmol)。将所得溶液在25℃搅拌1小时。所述反应混合物(3mL)通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B:ACN；流速：60mL/min；梯度：在8分钟内34％B至50％B，在8.2分钟内50％B至95％B，在9.5分钟内95％B至95％B，在11分钟内95％B至5％B，2％B；波长：254nm；RT1(min):6；进样体积：0.5mL；运行次数：5)以得到2'-氯-N-(5-(环戊基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(51.7mg，产率：10％)，为白色固体MS(ESI)(C20H20ClN5O3S)(M+1)+446.1；实测值446.1。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.86(s，1H)，8.82(s，1H)，8.16(s，1H)，7.50(s，1H)，7.39(s，1H)，5.29–5.28(m，1H)，3.63(s，3H)，2.58–2.51(m，3H)，1.99–1.91(m，2H)，1.85–1.82(m，2H)，1.72–1.59(m，4H)。
实施例18
2'-氯-N-(5-(2,2-二氟乙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤1 5-(2,2-二氟乙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
在0℃，向2,2-二氟乙-1-醇(1g，12.19mmol)的干燥四氢呋喃(THF)(10mL)脱气溶液中分批加入氢化钠(0.975g，24.38mmol，60％)并在氮气下搅拌30分钟。然后将5-溴-1,3,4-噻二唑-2-胺(2.63g，14.63mmol)在0℃加入到上述混合物中，所得溶液在0～5℃搅拌30分钟。所得混合物用水淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(4mL)中，并应用于80g C18柱，在20min内用5～36％乙腈水溶液洗脱，得到5-(2,2-二氟乙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(330mg，产率：12％)，为白色固体。MS(ESI)(C4H5F2N3OS)(M+1)+，计算值182.0，实测值182.1。
步骤2 2'-氯-N-(5-(2,2-二氟乙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在23℃向中间体G(250mg，0.897mmol)的乙腈(3mL)溶液中依次加入NMI(221mg，2.69mmol)，5-(2,2-二氟乙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(244mg，1.346mmol)和TCFH(302mg，1.076mmol)，然后在30℃搅拌2小时。在真空下除去有机溶剂。将所得残余物溶解在DMF(2mL)中，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于40g C18柱，在22分钟内用5～53％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-N-(5-(2,2-二氟乙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(34.9mg，产率：9％)，为白色固体。MS(ESI)(C17H14ClF2N5O3S)(M+1)+，计算值442.0，实测值442.0。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.04(s，1H)，8.82(s，1H)，8.17(s，1H)，7.55(s，1H)，7.43(s，1H)，6.65–6.25(m，1H)，4.85–4.62(m，2H)，3.63(s，3H)，2.59(s，3H)。
实施例19
2'-氯-N-(5-(2-氟-2-甲基丙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:5-(2-氟-2-甲基丙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
在0℃，向搅拌的2-氟-2-甲基丙-1-醇(600.0mg，6.52mmol)的THF(10mL)溶液中分批加入NaH(313.0mg，7.82mmol，60％)，并在氮气气氛于0℃搅拌30min。然后将5-溴-1,3,4-噻二唑-2-胺(1.4g，7.82mmol)在0℃加入到上述混合物中。将所得溶液在0℃搅拌2小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(1mL)中，将其应用于40gC18柱，并通过CombiFlash(Biotage Isolera Prime)纯化，在20分钟内用5～50％乙腈水溶液洗脱，得到5-(2-氟-2-甲基丙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(150.0mg，25％)，为白色固体。MS(ESI)(C6H10FN3OS)(M+1)+，计算值192.2；实测值，192.1。
步骤-2:2'-氯-N-(5-(2-氟-2-甲基丙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
向5-(2-氟-2-甲基丙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(130.0mg，0.68mmol)的乙腈(1mL)搅拌溶液中加入中间体G(189.0mg，0.68mmol)和1-甲基咪唑(278.8mg，3.40mmol)。在23℃，向上述溶液中加入TCFH(191.0mg，0.68mmol)的乙腈(1mL)溶液，所得溶液在23℃搅拌1小时。该反应混合物(4mL)通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：YMC-Actus Triart C18ExRS，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B:MeOH-----制备级(Preparative)；流速：60mL/min；梯度：在8分钟内从50％B至70％B，70％B；波长：254nm；RT1(min):7.2)以得到2'-氯-N-(5-(2-氟-2-甲基丙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(142.0mg，46％)，为白色固体。MS(ESI)(C19H19ClFN5O3S)(M+1)+，计算值452.1；实测值，452.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.96(s，1H)，8.81(s，1H)，8.17(s，1H)，7.55(s，1H)，7.44(s，1H)，4.48(d，J＝20.8Hz，2H)，3.63(s，3H)，2.67(s，3H)，1.44(s，3H)，1.39(s，3H)。
实施例20
6'-氯-N-(5-(2,2-二氟丙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-3'-甲氧基-6-甲基-4,4'-联吡啶-3-甲酰胺
步骤-1:5-(2,2-二氟丙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
在0℃向脱气的2,2-二氟丙-1-醇(1.0g，10.41mmol)的干燥四氢呋喃(10mL)溶液中分批加入氢化钠(0.8g，20.82mmol)并搅拌30min。然后将5-溴-1,3,4-噻二唑-2-胺(1.8g，10.41mmol)在0℃加入到上述混合物中，所得溶液在0℃搅拌30分钟。用水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(4mL)中，并应用于80g C18柱，通过Combi Flash(Biotage IsoleraPrime)纯化，在20分钟内用5～36％乙腈水溶液洗脱，得到5-(2,2-二氟丙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(300.0mg，9％)为棕色固体。MS(ESI)(C5H7F2N3OS)(M+1)+，计算值196.0，实测值196.0。
步骤-2:6'-氯-N-(5-(2,2-二氟丙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-3'-甲氧基-6-甲基-4,4'-联吡啶-3-甲酰胺
在20℃向中间体G(200.0mg，0.71mmol)的乙腈(4mL)溶液中依次加入1-甲基-1H-咪唑(206.0mg，2.51mmol)，5-(2,2-二氟丙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(140.0mg，0.71mmol))和TCFH(201.0mg，0.71mmol)。所述混合物在30℃搅拌16小时。在真空下除去有机溶剂。将残余物溶解在DMF(2mL)中，然后通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：XBridgeShield RP18 OBD柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B:MeOH--HPLC；流速：60mL/min；梯度：8分钟内从44％B至58％B，8.2分钟内从58％B至95％B，9.5分钟内从95％B至95％B，11分钟内从95％B至2％B，2％B；波长：254nm；RT1(min):7；进样体积：0.7mL；运行次数：3)以得到2'-氯-N-(5-(2,2-二氟丙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(24.7mg，7％)，为白色固体。MS(ESI)(C18H16ClF2N5O3S)(M+1)+，计算值456.0，实测值456.0。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.01(s，1H)，8.82(s，1H)，8.17(s，1H)，7.54(s，1H)，7.43(s，1H)，4.74(t，J＝12.8Hz，2H)，3.63(s，3H)，2.59(s，3H)，1.74(t，J＝19.2Hz，3H)。
实施例21
2'-氯-N-(5-异丁氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:5-异丁氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺
在0℃，向2-甲基丙-1-醇(1.0g，13.49mmol)的无水四氢呋喃(10mL)脱气溶液中分批加入NaH(540.0mg，13.49mmol，60％)。将所得溶液在0℃搅拌40分钟。向上述溶液中加入5-溴-1,3,4-噻二唑-2-胺(2.4g，13.49mmol)。然后将所得混合物在0℃搅拌1小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。所得残余物通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于40g硅胶柱，在30分钟内用0～40％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到5-异丁氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(25.0mg，1％)，为白色固体。MS(ESI)(C6H11N3OS)(M+1)+，计算值174.1；实测值，174.0。
步骤-2:2'-氯-N-(5-异丁氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
向中间体G(40.0mg，0.14mmol)在乙腈(3mL)中的混合物中加入5-异丁氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(24.0mg，0.14mmol)和1-甲基-1H-咪唑(58.0mg，0.71mmol)。向其中滴加TCFH(60.0mg，0.21mmol)的乙腈(1mL)溶液。将混合物在30℃搅拌16小时。在真空下除去溶剂。将所得残余物溶解在DMF(2mL)中，将其应用于40g C18柱，并通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，在40分钟内用5～45％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-N-(5-异丁氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(21.1mg，45％)，为白色固体。MS(ESI)(C19H20ClN5O3S)(M+1)+，计算值434.1，实测值434.0。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.87(s，1H)，8.81(s，1H)，8.17(s，1H)，7.54(s，1H)，7.43(s，1H)，4.21(d，J＝6.4Hz，2H)，3.64(s，3H)，2.59(s，3H)，2.15–2.03(m，J＝6.8Hz，1H)，0.97(d，J＝6.4Hz，6H)。
实施例22和23
(S)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-((四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺和(R)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-((四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤1 5-((四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
在0℃分批向四氢呋喃-3-醇(1.0g，11.35mmol)的干燥四氢呋喃(20mL)脱气溶液中加入并在0℃搅拌30分钟。在0℃向上述混合物中加入5-溴-1,3,4-噻二唑-2-胺(2.0g，11.35mmol)。将所得溶液在氮气下于23℃搅拌1小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(2.5mL)中，应用于40g C18柱，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～30％乙腈水溶液洗脱，得到5-((四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(80.0mg，3％)，为黄色固体。MS(ESI)(C6H9N3O2S)(M+1)+，计算值188.1，实测值188.2。
步骤2 2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-((四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
向5-((四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(80.0mg，0.43mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(1mL)和乙腈(1mL)的搅拌溶液中加入中间体G(119.0mg，0.43mmol)和1-甲基咪唑(175.0mg，2.13mmol)。在23℃，向上述混合物中加入TCFH(132.0mg，0.47mmol)的乙腈(1mL)溶液，所得溶液在23℃搅拌1小时。将所得混合物溶解在DMF(3mL)中并通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B:ACN；流速：60mL/min；梯度：在8分钟内17％B至35％，在8.2分钟内35％B至95％B，在9.5分钟内95％B至95％B，在11分钟内95％B至5％B，5％B；波长：254nm；RT1(min):7.3；进样体积：0.5mL；运行次数：8)以得到2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-((四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(100.0mg，49％)，为白色固体。MS(ESI)(C19H18ClN5O4S)(M+1)+，计算值448.0，实测值448.0。
步骤3(S)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-((四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺和(R)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-((四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
外消旋化合物(99.0mg)通过制备手性HPLC分离，条件如下：(柱：CHIRAL ARTCellulose-SC，2*25cm，5μm；流动相A:Hex--HPLC，流动相B:MeOH:EtOH＝1:1--HPLC；流速：20mL/min；梯度：50％B to 50％B in 15.5min；波长：220/254nm；RT1(min):9.82；RT2(min):13.73；样品溶剂：MeOH:DCM＝1:1；进样体积：1mL；运行次数：8)以得到(S)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-((四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(24.3mg，24％)，为白色固体，保留时间为9.82分钟，和(R)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-((四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(20.9mg，21％)，为白色固体，保留时间为13.73分钟.
(S)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-((四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺:MS(ESI)(C19H18ClN5O4S)(M+1)+，计算值448.0，实测值448.0。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.92(s，1H)，8.89(s，1H)，8.14(s，1H)，7.42(s，1H)，7.28(s，1H)，5.44(s，1H)，3.91–3.81(m，3H)，3.81–3.70(m，1H)，3.63(s，3H)，2.56(s，3H)，2.28–2.20(m，1H)，2.13–2.05(m，1H)。
(R)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-((四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺:MS(ESI)(C19H18ClN5O4S)(M+1)+，计算值448.0，实测值448.0。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.92(s，1H)，8.83(s，1H)，8.16(s，1H)，7.51(s，1H)，7.39(s，1H)，5.49(s，1H)，3.91–3.81(m，3H)，3.81–3.72(m，1H)，3.64(s，3H)，2.58(s，3H)，2.34–2.20(m，1H)，2.20–2.11(m，1H)。
以(R)-四氢呋喃-3-醇为起始原料，使用上述方法重新合成(R)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-((四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺，以确定绝对立体化学。
实施例24
2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-((3-甲基氧杂环丁烷-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:5-((3-甲基氧杂环丁烷-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
在0℃向3-甲基氧杂环丁烷-3-醇(500.0mg，5.67mmol)的无水四氢呋喃(10mL)脱气溶液中分批加入氢化钠(340.0mg，8.51mmol，60％)并在0℃氮气气氛下搅拌1小时。然后在0℃将5-溴-1,3,4-噻二唑-2-胺(1.0g，5.67mmol)加入到上述混合物中，所述混合物在室温搅拌2小时。所得混合物用水淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。所得残余物通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，其应用于40g硅胶柱，并在40分钟内用0～90％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到5-((3-甲基氧杂环丁烷-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(35.0mg，1％)，为黄色油状物。MS(ESI)(C6H9N3O2S)(M+1)+，计算值188.0；实测值188.0。
步骤-2:2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-((3-甲基氧杂环丁烷-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在23℃向5-((3-甲基氧杂环丁烷-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(60.0mg，0.32mmol)和中间体G(93.0mg，0.35mmol)的乙腈(1.5mL)搅拌溶液中依次加入1-甲基咪唑(131.2mg，1.60mmol)和TCFH(90.0mg，0.32mmol)。将所得溶液在氮气下于23℃搅拌2小时。将所得残余物溶解在乙腈(1mL)中，将其应用于20g C18柱，并通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，在25分钟内用544％乙腈水溶液洗脱，并进一步通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：XBridge Prep OBD C18柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/LNH4HCO3)，流动相B:ACN；流速：60mL/min；梯度：8分钟内从20％B至30％B，30％B；波长：254nm；RT1(min):7.85)以得到2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-((3-甲基氧杂环丁烷-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(30.0mg，20％)，为白色固体。MS(ESI)(C19H18ClN5O4S)(M+1)+，计算值448.1；实测值448.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.96(s，1H)，8.83(s，1H)，8.17(s，1H)，7.51(s，1H)，7.40(s，1H)，4.80(d，J＝7.2Hz，2H)，4.55(d，J＝7.2Hz，2H)，3.64(s，3H)，2.59(s，3H)，1.80(s，3H)。
实施例25
2'-氯-N-(5-((1,1-二氧四氢-2H-噻喃-4-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤1O-(1,1-二氧四氢-2H-噻喃-4-基)S-甲基二硫代碳酸酯
在0℃于氮气下向4-羟基四氢-2H-噻喃1,1-二氧化物(300.0mg，2.00mmol)在无水四氢呋喃(THF)(6mL)中的脱气溶液中分批添加NaH(160.0mg，4.00mmol，60％)。将所得溶液在0℃搅拌30分钟。在0℃和氮气下向上述溶液中加入CS2(228.0mg，3.0mmol)。然后将所得溶液在0℃搅拌20分钟。在氮气下于0℃向上述溶液中加入MeI(426.0mg，3.0mmol)。然后将所得混合物在23℃搅拌2小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DCM(1mL)中，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于20g硅胶柱，在30分钟内用0～40％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到O-(1,1-二氧四氢-2H-噻喃-4-基)S-甲基二硫代碳酸酯(370.0mg，76％)，为白色固体MS(ESI)(C7H12O3S3)(M+1)+，计算值241.0；实测值，241.0.
步骤2O-(1,1-二氧四氢-2H-噻喃-4-基)肼基硫代碳酸酯
在23℃向O-(1,1-二氧四氢-2H-噻喃-4-基)S-甲基二硫代碳酸酯(350.0mg，1.46mmol)在甲醇(5mL)中的搅拌溶液中添加氢氧化肼溶液(58.0mg，1.46mmol)。将所得溶液在23℃搅拌1小时。所得混合物在真空下浓缩，得到O-(1,1-二氧四氢-2H-噻喃-4-基)肼基硫代碳酸酯(322.0mg，粗品)，为黄色固体。MS(ESI)(C6H12N2O3S2)(M+1)+，计算值225.0；实测值，225.0。
步骤3 4-((5-氨基-1,3,4-噻二唑-2-基)氧基)四氢-2H-噻喃1,1-二氧化物
在0℃向O-(1,1-二氧四氢-2H-噻喃-4-基)肼基硫代碳酸酯(322.0mg，1.44mmol)的甲醇(3mL)搅拌溶液中依次加入TEA(436.3mg，4.32mmol)和溴化氰(167.0mg，1.58mmol)。将所得溶液在23℃搅拌2小时。用冰冷水稀释反应混合物，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩以得到4-((5-氨基-1,3,4-噻二唑-2-基)氧基)四氢-2H-噻喃1,1-二氧化物(230.0mg，46％)为黄色固体。MS(ESI)(C7H11N3O3S2)(M+1)+，计算值250.0；实测值，250.0。
步骤4 2'-氯-N-(5-((1,1-二氧四氢-2H-噻喃-4-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在23℃、氮气下向4-((5-氨基-1,3,4-噻二唑-2-基)氧基)四氢-2H-噻喃1,1-二氧化物(190.0mg，0.76mmol)和中间体G(234.0mg，0.84mmol)的乙腈(0.5mL)搅拌溶液依次加入1-甲基咪唑(0.3mL)和TCFH(214.0mg，0.76mmol)的乙腈(0.2mL)溶液。将所得溶液在23℃搅拌2小时。将混合物溶解在乙腈(2mL)中，将其应用到20g C18柱上，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～40％乙腈水溶液洗脱，得到灰白色固体(纯度88％)。将产物溶解在DMF(3mL)中并进一步通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：Xselect CSH F-苯基OBD柱，19*250mm，5μm；流动相A：水(0.05％TFA)，流动相B:MeOH--HPLC；流速：25mL/min；梯度：10分钟内从53％B至68％B，10.2分钟内从68％B至95％B，12分钟内从95％B至95％B，12.2分钟内从95％B至5％B，14分钟内从5％B至5％B；波长：254nm；RT1(min):8；进样体积：0.7mL；运行次数：4)以得到2'-氯-N-(5-((1,1-二氧四氢-2H-噻喃-4-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(100.0mg，25％)，为白色固体。MS(ESI)(C20H20ClN5O5S2)(M+1)+，计算值510.1；实测值，510.2。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.84(s，1H)，8.15(s，1H)，7.65–7.48(m，2H)，5.25–5.15(m，1H)，3.62(s，3H)，3.29–3.10(m，4H)，2.63(s，3H)，2.44–2.26(m，4H)。
实施例26和27
2'-氯-N-(5-(((1s,4s)-4-羟基环己基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-[4,4'-联吡啶]-3-甲酰胺和2'-氯-N-(5-(((1r,4r)-4-羟基环己基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-[4,4'-联吡啶]-3-甲酰胺
步骤1O-(4-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环己基)S-甲基二硫代碳酸酯
在0℃向4-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环己-1-醇(550.0mg，2.39mmol)的无水四氢呋喃(4mL)脱气溶液中加入NaH(191.0mg，4.77mmol，60％)并在0℃于氮气气氛下搅拌30min。然后在0℃向上述混合物中加入CS2(0.2mL，3.58mmol)，并在0℃搅拌20分钟。在氮气下于0℃向上述溶液中加入MeI(0.2mL，3.58mmol)。然后将所得混合物在0℃搅拌1小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DCM(1mL)中，并通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，将其应用于40g硅胶柱，在20分钟内用0～20％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到O-(4-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环己基)S-甲基二硫代碳酸酯(711.0mg，产率：74％)，为黄色油状物。
步骤2O-(4-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环己基)肼基硫代碳酸酯
在20℃向O-(4-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环己基)S-甲基二硫代碳酸酯(710.0mg，2.22mmol)的甲醇(4mL)的搅拌溶液中加入肼(0.1mL，2.22mmol)。将所得溶液在20℃搅拌30分钟。在真空下除去挥发物，得到O-(4-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环己基)肼基硫代碳酸酯(670.0mg，粗品)，为淡黄色油状物。MS(ESI)(C13H28N2O2SSi)(M+1)+，计算值305.0；实测值，305.3。
步骤3 5-((4-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环己基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
在20℃向O-(4-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环己基)肼基硫代碳酸酯(730.0mg，2.40mmol)的甲醇(3mL)的搅拌溶液中依次加入TEA(0.7mL，4.79mmol)和BrCN(279.0mg，2.64mmol)。将所得溶液在20℃搅拌1小时。将所得残余物溶解在DMF(3mL)中，将其应用于40.0g C18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在40分钟内用5～50％乙腈水溶液洗脱，得到5-((4-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环己基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(290.0mg，33％)，为白色固体。MS(ESI)(C14H27N3O2SSi)(M+1)+，计算值330.0；实测值，659.5。
步骤4N-(5-((4-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环己基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
向5-((4-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环己基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(290.0mg，0.88mmol)的乙腈(5mL)的搅拌溶液中依次加入中间体G(270.0mg，0.97mmol)，1-甲基咪唑(361.0mg，4.40mmol)。然后在20℃将TCFH(247.0mg，0.88mmol)的乙腈(1mL)溶液加入到上述混合物中，所得溶液在20℃搅拌16小时。在真空下除去挥发物。将所得残余物溶解在DMF(4mL)中，将其应用于40.0g C18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在40分钟内用5～60％乙腈水溶液洗脱，得到N-(5-((4-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环己基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(400.0mg，75％)，为白色固体。MS(ESI)(C27H36ClN5O4SSi)(M+1)+，计算值590.0；实测值，590.4。
步骤5 2'-氯-N-(5-(((1s,4s)-4-羟基环己基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-[4,4'-联吡啶]-3-甲酰胺，和2'-氯-N-(5-(((1r,4r)-4-羟基环己基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-[4,4'-联吡啶]-3-甲酰胺
向N-(5-((4-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环己基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(400.0mg，0.68mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液中加入三氟乙酸(0.4mL)。将所述混合物在20℃搅拌30分钟。在真空下除去有机溶剂。残余物用水稀释。水层用NaHCO3溶液碱化，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(2mL)中，将其应用于40.0g C18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在45分钟内用25～90％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-N-(5-((4-羟基环己基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(204.0mg，63％)，为白色固体。化合物混合物(204.0mg)通过制备型手性HPLC分离，条件如下：(柱：CHIRALPAK IE，2*25cm，5μm；流动相A:Hex--HPLC，流动相B:MeOH:EtOH＝1:1--HPLC；流速：14mL/min；梯度：29分钟内从80％B至80％B；波长：220/254nm；RT1(min):16.46；RT2(min):20.27；样品溶剂：MeOH:DCM＝1:1；进样体积：0.5mL；运行次数：8)以得到2'-氯-N-(5-(((1s,4s)-4-羟基环己基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-[4,4'-联吡啶]-3-甲酰胺，(45.6mg，22％)，为白色固体，具有手性HPLC上的第一个峰，和2'-氯-N-(5-(((1r,4r)-4-羟基环己基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-[4,4'-联吡啶]-3-甲酰胺(98.5mg，48％)，为白色固体，具有手性HPLC上的第二个峰。绝对立体化学没有确定，是任意指定的。
2'-氯-N-(5-(((1s,4s)-4-羟基环己基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-[4,4'-联吡啶]-3-甲酰胺:MS(ESI)(C21H22ClN5O4S)(M+1)+，计算值476.0；实测值，476.2，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.89(s，1H)，8.81(s，1H)，8.17(s，1H)，7.52(s，1H)，7.41(s，1H)，4.93–4.90(m，1H)，4.55–4.54(m，1H)，3.63–3.59(m，4H)，2.58(s，3H)，1.99–1.91(m，4H)，1.75–1.72(m，4H)。
2'-氯-N-(5-(((1r,4r)-4-羟基环己基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-[4,4'-联吡啶]-3-甲酰胺:MS(ESI)(C21H22ClN5O4S)(M+1)+，计算值476.0；实测值，476.2，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.87(s，1H)，8.81(s，1H)，8.16(s，1H)，7.52(s，1H)，7.43(s，1H)，4.89–4.82(m，1H)，4.61–4.60(m，1H)，3.63(s，3H)，3.62–3.45(m，1H)，2.59(s，3H)，2.14–2.08(m，2H)，1.86–1.82(m，2H)，1.60–1.50(m，2H)，1.38–1.24(m，2H)。
实施例28
2'-氯-N-(5-乙氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:O-乙基肼基硫代碳酸酯
在20℃将O-乙基碳二硫代酸钾(2.0g，12.48mmol)和水合肼(0.8g，12.48mmol)在甲醇(20mL)中的混合物搅拌2小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩以得到O-乙基肼基硫代碳酸酯(1.4g，粗品)，为黄色油状物。MS(ESI)(C3H8N2OS)(M+1)+，计算值121.0，实测值121.0。
步骤-2:5-乙氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺
在20℃，向O-乙基肼基硫代碳酸酯(1.4g，9.32mmol)在甲醇(10mL)中的混合物中加入NaOH(0.8g，18.64mmol)和氰化溴(1.1g，10.25mmol)。将所得溶液在20℃搅拌30分钟。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将残余物溶解在DMF(3mL)中，并通过Combi Flash(Biotage IsoleraPrime)纯化，其应用于40g C18柱，在45分钟内用5～40％乙腈水溶液洗脱，得到5-乙氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(280mg，10％)，为红色固体。MS(ESI)(C4H7N3OS)(M+1)+，计算值146.0，实测值146.0。
步骤-3:2'-氯-N-(5-乙氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
向5-乙氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(268.0mg，0.92mmol)在乙腈(2mL)中的混合物中加入中间体G(260.0mg，0.84mmol)，和NMI(344.0mg，4.20mmol)。在氮气下向其中滴加TCFH(259.0mg，0.92mmol)的乙腈(1mL)溶液。混合物在氮气下于20℃搅拌2小时。将所得混合物溶解在DMF(6mL)中，并通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B:ACN；流速：60mL/min；梯度：在8分钟内2 5％B至40％，在8.2分钟内40％B至95％B，在9.5分钟内95％B至95％B，在11分钟内95％B至5％B，5％B；波长：254nm；RT1(min):7.5；进样体积：1mL；运行次数：6)以得到2'-氯-N-(5-乙氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(144.3mg，42％)，为白色固体。MS(ESI)(C17H16ClN5O3S)(M+1)+，计算值406.0，实测值406.0。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.81(s，1H)，8.83(s，1H)，8.16(s，1H)，7.51(s，1H)，7.39(s，1H)，4.48–4.42(m，2H)，3.63(s，3H)，2.58(s，3H)，1.37(t，J＝8.0Hz，3H)。
实施例29
2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-(2,2,2-三氟乙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:5-(2,2,2-三氟乙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
0℃，向2,2,2-三氟乙-1-醇(1.0g，10.00mmol)的四氢呋喃(30mL)溶液中分批加入NaH(0.80g，19.99mmol，60％)，并在0℃搅拌1小时。在0℃向上述溶液中加入5-溴-1,3,4-噻二唑-2-胺(1.8g，10.00mmol)。将所得溶液在0℃搅拌2小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩得到粗产物(1.3g，粗品)为灰色固体。将所得残余物溶解在DMF(8mL)中，将其应用于80gC18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在39分钟内用5～23％乙腈水溶液洗脱，得到5-(2,2,2-三氟乙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(583.0mg，25％)，为灰色固体。MS(ESI)(C4H4F3N3OS)(M+1)+，计算值200.0，实测值200.0。
步骤-2:2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-(2,2,2-三氟乙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
向中间体G(100.0mg，0.35mmol)在乙腈(2mL)中的混合物中添加5-(2,2,2-三氟乙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(100.0mg，0.423mmol)和1-甲基-1H-咪唑(87.0mg，1.05mmol)。在氮气下向其中滴加TCFH(148.0mg，0.52mmol)的乙腈(1mL)溶液。将所得溶液在氮气下于20℃搅拌2小时。得到的混合物通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，其应用于40g C18柱，在45分钟内用5～54％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-(2,2,2-三氟乙氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(60.7mg，36％)，为白色固体。MS(ESI)(C17H13ClF3N5O3S)(M+1)+，计算值460.0，实测值460.0。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.08(s，1H)，8.82(s，1H)，8.17(s，1H)，7.55(s，1H)，7.44(s，1H)，5.16–5.22(m，2H)，3.63(s，3H)，2.60(s，3H)。
实施例30
N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-4-(2-甲氧基-5-甲基苯基)-6-甲基烟酰胺
步骤-1:4-(2-甲氧基-5-甲基苯基)-6-甲基吡啶-3-甲酸甲酯
在氮气下于110℃将4-氯-6-甲基吡啶-3-甲酸甲酯(500.0mg，2.69mmol)，2-甲氧基-5-甲基苯基硼酸(894.2mg，5.388mmol)，Pd(dppf)Cl2(394.21mg，0.53mmol)，碳酸钾(744.6mg，5.38mmol)的二噁烷(10.0mL)和水(1.0mL)溶液搅拌2h。在真空下除去溶剂。残余物通过快速柱色谱用0～44％乙酸乙酯的石油醚溶液纯化，得到4-(2-甲氧基-5-甲基苯基)-6-甲基吡啶-3-甲酸甲酯(800.0mg，57％)，为黄色油状物。MS(ESI)(C16H17NO3)(M+1)+，计算值272.1，实测值272.1。
步骤-2:4-(2-甲氧基-5-甲基苯基)-6-甲基吡啶-3-甲酸
将4-(2-甲氧基-5-甲基苯基)-6-甲基吡啶-3-甲酸甲酯(700.0mg，2.58mmol)，NaOH(309.5mg，7.74mmol)在THF(10.0mL)和水(3.0mL)中的化合物在室温搅拌16小时。用HCl(1N)将反应混合物酸化至pH～4。水层用乙酸乙酯萃取。用硫酸钠干燥合并的有机溶液，过滤，并真空浓缩得到4-(2-甲氧基-5-甲基苯基)-6-甲基吡啶-3-甲酸(550.0mg，粗品)，为黄色油状物。MS(ESI)(C15H15NO3)(M+1)+，计算值258.1，实测值258.4。
步骤-3:N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-4-(2-甲氧基-5-甲基苯基)-6-甲基烟酰胺
在23℃向4-(2-甲氧基-5-甲基苯基)-6-甲基烟酸(100.0mg，0.39mmol)的乙腈(1mL)搅拌溶液中加入5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(51.1mg，0.39mmol)和1-甲基咪唑(160.0mg，1.94mmol)。在23℃和氮气下，向上述溶液中加入TCFH(109.6mg，0.39mmol)的乙腈(1mL)溶液。然后将所得混合物在氮气下于23℃搅拌2小时。混合物用DMF(2mL)稀释并通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B:ACN；流速：60mL/min；梯度：8分钟内从27％B至43％B，8.2分钟内从43％B至95％B，9.5分钟内从95％B至95％B，11分钟内从95％B至5％B，5％B；波长：254nm；RT1(min):7.4；进样体积：0.5mL；运行次数：5)以得到N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-4-(2-甲氧基-5-甲基苯基)-6-甲基烟酰胺(72.6mg，50％)，为白色固体。MS(ESI)(C18H18N4O3S)(M+1)+，计算值371.1；实测值，371.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.69(s，1H)，8.65(s，1H)，7.29(s，1H)，7.26–7.15(m，2H)，6.86(d，J＝8.4Hz，1H)，4.06(s，3H)，3.46(s，3H)，2.56(s，3H)，2.31(s，3H)。
实施例31
2'-氯-N-(5-羟基-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:2'-氯-N-(5-((5氯吡啶-2-基)甲氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在20℃，氮气下向中间体G(300.0mg，1.08mmol)的乙腈(2mL)溶液中加入中间体B(261.1mg，1.08mmol)和1-甲基咪唑(441.2mg，5.38mmol)。在20℃和氮气下，向上述溶液中加入TCFH(301.5mg，1.08mmol)的乙腈(2mL)溶液。然后将所得混合物在20℃搅拌1小时。将混合物溶解在DMF(1mL)中，将其应用于20g C18柱，并通过Combi Flash(Biotage IsoleraPrime)纯化，在30分钟内用5～55％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-N-(5-((5氯吡啶-2-基)甲氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(372.0mg，63％)，为白色固体。MS(ESI)(C21H16Cl2N6O3S)(M+1)+，计算值503.1；实测值，503.1。
步骤-2:2'-氯-N-(5-羟基-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
2'-氯-N-(5-((5氯吡啶-2-基)甲氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(320.0mg，0.64mmol)的浓盐酸(1mL)溶液中于20℃搅拌1小时。所述混合物用水稀释。所述水层用NaHCO3溶液中和，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(1mL)中，将其应用于20g C18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在25分钟内用5～60％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-N-(5-羟基-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(61.4mg，产率：25％)，为白色固体。MS(ESI)(C15H12ClN5O3S)(M+1)+，计算值378.1实测值378.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.35–12.30(m，2H)，8.75(s，1H)，8.20(s，1H)，7.52(s，1H)，7.47(s，1H)，3.72(s，3H)，2.58(s，3H)。
实施例32
4-(2-(二氟甲氧基)-6-氟苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
将中间体D(65.0mg，0.19mmol)在乙腈(1mL)中的混合物中加入5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(28.4mg，0.21mmol)和NMI(81.0mg，0.98mmol)。在氮气下向其中滴加TCFH(60.6mg，0.21mmol)的乙腈(0.5mL)溶液。混合物在氮气下于20℃搅拌2小时。将所得混合物溶解在DMF(2mL)中并通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：XBridge Prep OBD C18柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B:ACN；流速：60mL/min；梯度：在8分钟内25％B至38％，在8.2分钟内38％B至95％B，在9.5分钟内95％B至95％B，在11分钟内95％B至5％B，5％B；波长：254nm；RT1(min):7.67；进样体积：0.7mL；运行次数：3)以得到4-(2-(二氟甲氧基)-6-氟苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(54.4mg，67％)，为白色固体，MS(ESI)(C17H13F3N4O3S)(M+1)+，计算值411.0，实测值411.1。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.98(s，1H)，7.49–7.43(m，1H)，7.32(s，1H)，7.14–7.05(m，2H)，6.92–6.55(m，1H)，4.08(s，3H)，2.65(s，3H)。
实施例33
4-(5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
步骤-1:2-(5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷
在25℃向2-溴-4-氯-1-(二氟甲氧基)苯(1.0g，3.88mmol)的1,4-二噁烷(10mL)搅拌溶液中依次加入乙酸钾(1.1g，11.65mmol)，4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双(1,3,2-二氧硼杂环戊烷)(1.2g，4.66mmol)和PdCl2(dppf)(280.0mg，0.39mmol)。将所得溶液在氮气下于80℃搅拌16小时。在真空下除去溶剂。所得残余物通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，其应用于40g硅胶柱，并在30分钟内用0～25％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到2-(5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷(800.0mg，67％)为棕色固体。MS(ESI)(C13H16BClF2O3)(M+1)+，计算值305.0，实测值305.1。
步骤-2:4-(5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基)-6-甲基烟酸甲酯
在25℃向2-(5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷(800.0mg，2.63mmol)的1,4-二噁烷(10mL)和水(0.5mL)的搅拌溶液中依次加入K2CO3(1.1g，7.88mmol)、PdCl2(dppf)(192.0mg，0.26mmol)和4-氯-6-甲基烟酸甲酯(683.0mg，3.68mmol)。将所得溶液在氮气下于80℃搅拌2小时。所述混合物用水稀释。所述水层用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。所得残余物通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，其应用于40g硅胶柱，并在30分钟内用0～80％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到4-(5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基)-6-甲基烟酸甲酯(1.2g，98％)为白色固体。MS(ESI)(C15H12ClF2NO3)(M+1)+，计算值328.0，实测值328.1。
步骤-3:4-(5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基)-6-甲基烟酸
在25℃向4-(5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基)-6-甲基烟酸甲酯(1.2g，3.66mmol)在四氢呋喃(10mL)和水(5mL)的搅拌溶液中添加氢氧化锂(87.8mg，3.66mmol)。将所得溶液在25℃搅拌1小时。在真空下除去有机溶剂。水层用2N HCl酸化至pH～4，并用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩以得到4-(5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基)-6-甲基烟酸(900mg，粗品)为淡黄色油状物。MS(ESI)(C14H10ClF2NO3)(M+1)+，计算值314.0，实测值314.0。
步骤-4:4-(5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
在25℃向4-(5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基)-6-甲基烟酸(200.0mg，0.57mmol)的乙腈(2mL)的搅拌溶液中依次加入1-甲基-1H-咪唑(236mg，2.87mmol)和5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(77.1mg，0.57mmol)。在25℃和氮气下，向上述溶液中加入TCFH(161.0mg，0.57mmol)溶液。然后将所得混合物在25℃搅拌2小时。将所得残余物溶解在DMF(3mL)中，将其应用于40g C18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在40分钟内用5～100％乙腈水溶液洗脱，得到4-(5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(52.0mg，21％)，为白色固体。MS(ESI)(C17H13ClF2N4O3S)(M+1)+，计算值427.0，实测值427.0。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.93(s，1H)，8.85(s，1H)，7.60–7.51(m，2H)，7.38(s，1H)，7.31–7.21(m，1H)，7.04–6.82(m，1H)，4.07(s，3H)，2.59(s，3H)。
实施例34
4-(2,6-二氯苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
步骤-1:4-(2,6-二氯苯基)-6-甲基烟酸甲酯
在23℃向4-氯-6-甲基烟酸甲酯(500.0mg，2.69mmol)和(2,6-二氯甲烷)硼酸(1.0g，5.39mmol)的甲苯(5mL)搅拌溶液中依次添加三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(247.0mg，0.27mmol)和K2CO3(1.1g，8.08mmol)。在氮气氛下，将所得溶液在100℃搅拌16小时。所述悬浮液被过滤。收集滤液并在真空下浓缩。将所得残余物溶解在DCM(2mL)中，并通过CombiFlash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于40g硅胶柱，在30分钟内用0～20％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到4-(2,6-二氯苯基)-6-甲基烟酸甲酯(498.0mg，61％)，为黄色固体。MS(ESI)(C14H11Cl2NO2)(M+1)+，计算值296.0；实测值，296.0。
步骤-2:4-(2,6-二氯苯基)-6-甲基烟酸
在20℃向4-(2,6-二氯苯)-6-甲基烟酸甲酯(490.0mg，1.66mmol)在甲醇(3mL)中的搅拌溶液中加入氢氧化钠(265.0mg，6.62mmol)在水(3mL)中的溶液。将所得溶液在80℃搅拌30分钟。在真空下除去有机溶剂。所述水层用柠檬酸酸化至pH 5～6，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩以得到4-(2,6-二氯苯基)-6-甲基烟酸(430.0mg，粗品)，为黄色固体。MS(ESI)(C13H9Cl2NO2)(M+1)+，计算值282.0；实测值，282.0。
步骤-3:4-(2,6-二氯苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
向4-(2,6-二氯苯基)-6-甲基烟酸(300.0mg，1.06mmol)和5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(139.0mg，1.06mmol)的乙腈(3mL)的搅拌溶液中加入1-甲基咪唑(437.0mg，5.32mmol)。在20℃和氮气下，向上述溶液中加入TCFH(298.0mg，1.06mmol)的乙腈溶液。将所得溶液在20℃搅拌2小时。将所得混合物溶解在DMF(3mL)中并通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：Atlantis HILIC OBD柱，19*150mm*5um；流动相A：水(10mmol/LNH4HCO3)，流动相B:ACN；流速：60mL/min；梯度：8分钟内从27％B至48％B，48％B；波长：254nm；RT1(min):7.8)以得到4-(2,6-二氯苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(29.1mg，产率：7％)，为白色固体。MS(ESI)(C16H12Cl2N4O2S)(M+1)+，计算值395.0；实测值，395.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.07(s，1H)，9.04(s，1H)，7.65–7.55(m，2H)，7.48–7.40(m，1H)，7.33–7.20(m，1H)，4.06(s，3H)，2.61(s，3H)。
实施例35
4-(2-氯-6-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
步骤-1:4-(2-氯-6-甲氧基苯基)-6-甲基烟酸甲酯
在17℃向4-氯-6-甲基烟酸甲酯(500.0mg，2.69mmol)的1,4-二噁烷(5mL)的搅拌溶液中依次加入水(1.0mL)、K2CO3(1.1g，8.08mmol)和Pd(dppf)Cl2(220.0mg，0.27mmol)。将所得溶液在氮气下于80℃搅拌1小时。所述悬浮液被过滤。收集滤液并在真空下浓缩。将所得残余物溶解在DMF(3mL)中，将其应用于40g C18柱，并通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，在35分钟内用5～60％乙腈水溶液洗脱，得到4-(2-氯-6-甲氧基苯基)-6-甲基烟酸甲酯(635.0mg，80％)，为黄色油状物。MS(ESI)(C15H14ClNO3)(M+1)+，计算值292.0；实测值，292.2。
步骤-2:4-(2-氯-6-甲氧基苯基)-6-甲基烟酸
在17℃向4-(2-氯-6-甲氧基苯基)-6-甲基烟酸甲酯(635.0mg，2.18mmol)的甲醇(4mL)搅拌溶液中依次加入水(4mL)和NaOH(348.0mg，8.71mmol)。所得溶液在80℃搅拌30分钟，然后用水稀释。水层用柠檬酸酸化至pH～6，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩以得到4-(2-氯-6-甲氧基苯基)-6-甲基烟酸(600.0mg，粗品)为棕色固体。MS(ESI)(C14H12ClNO3)(M+1)+，计算值278.0；实测值，278.0。
步骤-3:4-(2-氯-6-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
在17℃向4-(2-氯-6-甲氧基苯基)-6-甲基烟酸(300.0mg，1.08mmol)的乙腈(2mL)的搅拌溶液中依次加入5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(156.0mg，1.19mmol)和1-甲基咪唑(443.0mg，5.40mmol)。在17℃和氮气下，向上述溶液中加入TCFH(303.0mg，1.08mmol)的乙腈(1mL)溶液。然后将所得混合物在17℃搅拌1小时。在真空下除去溶剂。将所得残余物溶解在DCM(3mL)中，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于40g硅胶柱，在20分钟内用0～10％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到4-(2-氯-6-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(86.1mg，20％)，为白色固体。MS(ESI)(C17H15ClN4O3S)(M+1)+，计算值391.0；实测值，391.15。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.88(s，1H)，8.86(s，1H)，7.39–7.35(m，1H)，7.25(s，1H)，7.14–7.11(m，1H)，7.04–7.02(m，1H)，4.06(s，3H)，3.60(s，3H)，2.57(s，3H)。
实施例36
4-(2-(二氟甲氧基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
步骤-1:4-(2-(二氟甲氧基)苯基)-6-甲基烟酸甲酯
在23℃向4-氯-6-甲基烟酸甲酯(1.0g，5.39mmol)在1,4-二噁烷(5mL)中的搅拌溶液中依次加入双(频那醇)二硼(2.7g，10.78mmol)、乙酸钾(1.6g，16.16mmol)和(1,1'-双(二苯基膦)二茂铁)二氯化钯(II)(1.2g，1.62mmol)。将所得溶液在氮气下于100℃搅拌4小时。在23℃向上述混合物中加入1-溴-2-(二氟甲氧基)苯(1.0g，4.50mmol)、水(2mL)、碳酸钾(1.9g，13.50mmol)和(1,1'-双(二苯基膦)二茂铁)二氯化钯(II)(800.0mg，1.09mmol)的二噁烷(10mL)溶液。将所得溶液在氮气下于80℃搅拌2小时。悬浮液被过滤。收集滤液并在真空下浓缩。所得残余物通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，其应用于80.0g硅胶柱，并在40分钟内用0～14％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到4-(2-(二氟甲氧基)苯基)-6-甲基烟酸甲酯(1.1g，97％产率)，为棕色油状物。MS(ESI)(C15H13F2NO3)(M+1)+，计算值294.1；实测值，294.1。
步骤-2:4-(2-(二氟甲氧基)苯基)-6-甲基烟酸
在20℃向搅拌的4-(2-(二氟甲氧基)苯基)-6-甲基烟酸甲酯(1.0g，3.41mmol)在甲醇(4mL)中的搅拌溶液中添加水(4mL)和氢氧化钠(546.0mg，13.64mmol)。将所得溶液在氮气下于20℃搅拌2小时。在真空下除去有机溶剂。所述水层用饱和柠檬酸溶液酸化至pH～6，并用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩以得到4-(2-(二氟甲氧基)苯基)-6-甲基烟酸(823.0mg，产率：70％)为棕色固体。MS(ESI)(C14H11F2NO3)(M+1)+，计算值280.1，实测值280.1。
步骤-3:4-(2-(二氟甲氧基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
向4-(2-(二氟甲氧基)苯基)-6-甲基烟酸(200.0mg，0.72mmol)和5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(103.0mg，0.79mmol)的乙腈(2mL)搅拌溶液加入1-甲基咪唑(293.5mg，3.58mmol)。然后在20℃将TCFH(201.0mg，0.72mmol)的乙腈(1mL)溶液加入到上述混合物中，所得溶液在氮气下于20℃搅拌2小时。将所得残余物溶解在乙腈(1mL)中，将其应用于20g C18柱并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～40％乙腈水溶液洗脱，得到4-(2-(二氟甲氧基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(143.0mg，产率：50％)，为白色固体。MS(ESI)(C17H14F2N4O3S)(M+1)+，计算值393.1；实测值393.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.90(s，1H)，8.81(s，1H)，7.53–7.39(m，2H)，7.37–7.30(m，2H)，7.23–6.84(m，2H)，4.06(s，3H)，2.59(s，3H)。
实施例37
2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-丙氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:O-丙基肼基硫代碳酸酯
在16℃向O-丙基二硫代碳酸酯(2.0g，11.47mmol)的甲醇(15mL)溶液中加入肼(0.5mL，13.77mmol)。将所得溶液在16℃搅拌2小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩以得到O-丙基肼基硫代碳酸酯(2.3g，粗品)，为黄色油状物。
步骤-2:5-丙氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺
在20℃，向O-丙基肼基硫代碳酸酯(2.0g，8.94mmol)的甲醇(10mL)溶液中加入TEA(1.2mL，8.94mmol)和氰化溴(1.0g，9.84mmol)。将所得溶液在20℃搅拌30分钟。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将残余物溶解在DMF(4mL)中，将其应用于40g C18柱，通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，在43分钟内用5～24％乙腈水溶液洗脱，得到5-丙氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(97.0mg，6％)，为黄色固体。MS(ESI)(C5H9N3OS)(M+1)+，计算值160.0；实测值160.0。
步骤-3:2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-丙氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
向5-丙氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(89.0mg，0.49mmol)在乙腈(4mL)中的混合物中加入中间体G(120.0mg，0.40mmol)，和1-甲基-1H-咪唑(101.0mg，1.22mmol)。在氮气下向其中滴加TCFH(172.0mg，0.61mmol)的乙腈(1mL)溶液。将所得溶液在20℃搅拌2小时在真空下除去有机溶剂。将残余物溶解在DMF(5mL)中并通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：XBridge Prep OBD C18柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/LNH4HCO3)，流动相B:ACN；流速：60mL/min；梯度：8分钟内从28％B至40％B，40％B；波长：254nm；RT1(min):7.82)以得到2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-丙氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(102.9mg，59％)，为白色固体。MS(ESI)(C18H18ClN5O3S)(M+1)+，计算值420.0；实测值420.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.89(s，1H)，8.83(s，1H)，8.16(s，1H)，7.51(s，1H)，7.40(s，1H)，4.33–4.37(t，J＝6.4Hz，2H)，3.63(s，3H)，2.58(s，3H)，1.73–1.81(m，2H)，0.94–0.98(t，J＝7.6Hz，3H)。
实施例38
4-(2-氯-6-氟苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
步骤1 4-(2-氯-6-氟苯基)-6-甲基烟酸甲酯
在23℃向(2-氯-6-氟苯基)硼酸(2.0g，11.47mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的搅拌溶液中添加4-氯-6-甲基烟酸甲酯(532.2mg，2.87mmol)，碳酸钾(1.1g，8.60mmol)和水(2mL)。在氮气下于23℃向上述溶液中加入Pd(dtbpf)Cl2(187.2mg，0.28mmol)。然后将所得混合物在氮气下于80℃搅拌2小时。加入水稀释反应混合物，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DCM(5mL)中，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于80g硅胶柱，在30分钟内用0～60％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到4-(2-氯-6-氟苯基)-6-甲基烟酸甲酯(200.0mg24％)，为黄色油状物。MS(ESI)(C14H11ClFNO2)(M+1)+，计算值280.0；实测值，280.0。
步骤2 4-(2-氯-6-氟苯基)-6-甲基烟酸
在23℃向4-(2-氯-6-氟苯基)-6-甲基烟酸甲酯(200.0mg，0.72mmol)的四氢呋喃(1mL)和水(1mL)的搅拌溶液中添加LiOH(34.2mg，1.44mmol))。所得溶液在23℃搅拌1小时，然后用水稀释。所述水层用柠檬酸酸化至pH～3，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(2mL)中，将其应用于20g C18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在25分钟内用5～60％乙腈水溶液洗脱，得到4-(2-氯-6-氟苯基)-6-甲基烟酸(100.0mg，50％)，为白色固体。MS(ESI)(C13H9ClFNO2)(M+1)+，计算值266.0；实测值，266.1。
步骤3 4-(2-氯-6-氟苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
在23℃向4-(2-氯-6-氟苯基)-6-甲基烟酸(80.0mg，0.30mmol)的乙腈(2mL)搅拌溶液中加入5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(39.5mg，0.30mmol)和1-甲基咪唑(124.2mg，1.50mmol)。在23℃和氮气下，向上述溶液中加入TCFH(85.0mg，0.30mmol)的乙腈(0.5mL)溶液。然后将所得混合物在氮气下于23℃搅拌2小时。将混合物溶解在DMF(4mL)中并通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B:ACN；流速：60mL/min；梯度：在8分钟内25％B至45％,在8.2分钟内45％B至95％B，在9.5分钟内95％B至95％B，在11分钟内95％B至5％B，5％B；波长：254nm；RT1(min):7；进样体积：1.5mL；运行次数：4)以得到4-(2-氯-6-氟苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(51.3mg，45％)，为白色固体。MS(ESI)(C16H12ClFN4O2S)(M+1)+，计算值379.0；实测值，379.0。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.09(s，1H)，9.01(s，1H)，7.53–7.28(m，4H)，4.05(s，3H)，2.60(s，3H)。
实施例39
2'-氯-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-5',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:2'-氯-5',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯
氮气下于20℃向4-氯-6-甲基烟酸甲酯(1.5g，7.89mmol)的1,4-二噁烷(5mL)和水(1mL)溶液中添加6-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊-2-基)烟酸甲酯(4.4g，15.88mmol)，K2CO3(1.6g，11.8mmol)和PdCl2(dppf)(0.8g，1.19mmol)。将所得溶液在氮气下于80℃搅拌2小时。过滤悬浮液。收集滤液并在真空下浓缩。所得残余物通过CombiFlash(Biotage Isolera Prime)纯化，其应用于40g硅胶柱，并在35分钟内用0～50％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到2'-氯-5',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(1.1g，96％)，为黄色固体。MS(ESI)(C14H13ClN2O2)(M+1)+，计算值277.1；实测值，277.1。
步骤-2:2'-氯-5',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸
在20℃向2'-氯-5',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(500.0mg，1.81mmol)的四氢呋喃(2mL)搅拌溶液中加入氢氧化锂(43.3mg，1.81mmol)的水(2mL)溶液。将所得溶液在20℃搅拌1小时。在真空下除去有机溶剂。水层用柠檬酸酸化至pH～5，并用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩以得到2'-氯-5',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(384.0mg，粗品)，为黄色固体。MS(ESI)(C13H11ClN2O2)(M+1)+，计算值263.1；实测值，263.1。
步骤-3:2'-氯-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-5',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在20℃于氮气下向2'-氯-5',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(150.0mg，0.57mmol)的乙腈(2mL)溶液中加入5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(74.9mg，0.57mmol)和1-甲基咪唑(234.5mg，2.86mmol)。在20℃和氮气下，向上述溶液中加入TCFH(160.0mg，0.57mmol)的乙腈(2mL)溶液。然后将混合物在20℃搅拌1小时。将所得混合物用DMF(1mL)溶解，将其应用于20gC18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～55％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-5',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(48.5mg，22％)，为白色固体。MS(ESI)(C16H14ClN5O2S)(M+1)+，计算值376.1；实测值376.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.05(s，1H)，8.98(s，1H)，8.30(s，1H)，7.29–7.36(m，2H)，4.04(s，3H)，2.58(s，3H)，1.98(s，3H)。
实施例40
4-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
步骤-1:4-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-6-甲基烟酸甲酯
在17℃向4-氯烟酸甲酯(500.0mg，2.91mmol)的1,4-二噁烷(5mL)的搅拌溶液中依次加入3,5-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊-2-基)-1H-吡唑(971.0mg，4.37mmol)，水(1.0mL)，K2CO3(1.2g，8.74mmol)和Pd(dppf)Cl2(238.0mg，0.29mmol)。将所得溶液在氮气下于80℃搅拌16小时。悬浮液被过滤。收集滤液并在真空下浓缩。所得残余物通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，其应用于80.0g硅胶柱，并在25分钟内用0～10％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到4-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-6-甲基烟酸甲酯(202.0mg，26％)，为红色固体。MS(ESI)(C13H15N3O2)(M+1)+，计算值246.0；实测值，246.2。
步骤-2:4-(3,5-二甲基-4H-吡唑-4-基)-6-甲基烟酸
于17℃向4-(3,5-二甲基-4H-吡唑-4-基)-6-甲基烟酸甲酯(160.0mg，0.65mmol)的甲醇(2mL)搅拌溶液中加入NaOH(104.0mg，2.61mmol)的水(2mL)溶液。所得溶液在17℃搅拌30分钟，然后用水稀释。在真空下除去有机溶剂。所述水层用柠檬酸酸化至pH～6，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(2mL)中，将其应用于40g C18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在20分钟内用5～7％乙腈水溶液洗脱，得到4-(3,5-二甲基-4H-吡唑-4-基)-6-甲基烟酸(42.0mg，27％)，为白色固体。MS(ESI)(C12H13N3O2)(M+1)+，计算值231.0；实测值，231。
步骤-3:4-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
在17℃向4-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-6-甲基烟酸(140.0mg，0.61mmol)的乙腈(2mL)的搅拌溶液中依次添加5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(87.0mg，0.67mmol)和1-甲基咪唑(249.0mg，3.03mmol)。在17℃和氮气下，向上述溶液中加入TCFH(170.0mg，0.61mmol)的乙腈(1mL)溶液。然后将所得混合物在17℃搅拌1小时。在真空下除去有机溶剂。将残余物溶解在DMF(3mL)中并通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：XBridge Prep OBDC18柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B:ACN；流速：60mL/min；梯度：7％B to 27％B in 8min，27％B；波长：254nm；RT1(min):7)以得到4-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(60.4mg，29％)，为白色固体。MS(ESI)(C15H16N6O2S)(M+1)+，计算值345.0；实测值，345.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.38(s，1H)，8.68(s，1H)，7.18(s，1H)，4.06(s，3H)，2.59(s，3H)，2.08–1.87(m，6H)。
实施例41
5'-氯-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:2',5'-二氯-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯
于25℃向(2,5-二氯吡啶-4-基)硼酸(0.5g，2.69mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的搅拌溶液中依次加入4-氯-6-甲基烟酸甲酯(1.0g，5.39mmol)，PdCl2(DTBPF)(0.3g，0.53mmol)和K2CO3(2.2g，16.16mmol)。所得溶液在氮气下于80℃搅拌2小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。所得残余物通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，其应用于40g硅胶柱，并在30分钟内用石油醚中的50～80％乙酸乙酯洗脱，得到2',5'-二氯-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(400.0mg,20％)，为淡黄色固体。MS(ESI)(C13H10Cl2N2O2)(M+1)+，计算值297.0，实测值297.0。
步骤-2:5'-氯-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯
在25℃向2',5'-二氯-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(400.0mg，1.34mmol)的四氢呋喃(3mL)搅拌溶液中加入三甲基铝(4mL，4.04mmol)。将所得溶液在85℃搅拌16小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩以得到粗产品，为黄色油状物。通过Combi Flash(Biotage IsoleraPrime)纯化所得残余物，将其应用于20g硅胶柱，并在30分钟内用30-60％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到5'-氯-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(270.0mg，58％)为无色油状物。MS(ESI)(C14H13ClN2O2)(M+1)+，计算值277.0，实测值277.1。
步骤-3:5'-氯-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸
在25℃向5'-氯-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(270.0mg，0.78mmol)的四氢呋喃(3mL)和水(1mL)的搅拌溶液中加入氢氧化锂(18.6mg，0.78mmol)。将所得溶液在25℃搅拌1小时然后用水稀释。在真空下除去有机溶剂。水层用2N HCl酸化至pH～4，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩以得到5'-氯-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(150.0mg，粗品)，为白色固体。MS(ESI)(C13H11ClN2O2)(M+1)，263.0，实测值263.0。
步骤-4:5'-氯-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在25℃向5'-氯-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(150.0mg，0.51mmol)的乙腈(2mL)搅拌溶液中依次添加1-甲基-1H-咪唑(211.0mg，2.57mmol)和5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(81.0mg，0.61mmol)。在氮气下，于25℃向上述溶液中加入TCFH(159.0mg，0.56mmol)。然后将所得混合物在25℃搅拌2小时，将悬浮液过滤。滤饼用水(20mL×3)和叔丁基甲基醚(20mL)洗涤。收集固体，真空干燥，得到5'-氯-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(79.0mg，40％)，为淡黄色固体。MS(ESI)(C16H14ClN5O2S)(M+1)+，计算值376.0，实测值376.1。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ13.10(s，1H)，δ8.97(s，1H)，8.51(s，1H)，7.36–7.30(m，2H)，4.06(s，3H)，2.69(s，3H)，2.59(s，3H).
实施例42
2'-氯-5'-乙氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤1 2-氯-5-乙氧基吡啶
在20℃向6-氯吡啶-3-醇(1.0g，7.72mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(15mL)溶液中依次加入K2CO3(2.1g，15.44mmol)和碘乙烷(1.4g，8.97mmol)。将所得溶液在40℃搅拌2小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DCM(4mL)中，并通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，将其应用于40g硅胶柱，在30分钟内用0～20％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到2-氯-5-乙氧基吡啶(827.0mg，67％)，为白色固体。MS(ESI)(C7H8ClNO)(M+1)+，计算值158.0；实测值，158.0。
步骤2(2-氯-5-乙氧基吡啶-4-基)硼酸
在-78℃向2-氯-5-乙氧基吡啶(800.0mg，5.08mmol)的四氢呋喃(30mL)搅拌溶液中滴加二异丙基氨基锂(5ml，10.00mmol，2N的THF溶液)。将所得溶液在氮气下于-78℃搅拌3小时。在氮气下，在-78℃向上述溶液中滴加硼酸三异丙酯(1.9g，10.15mmol)。然后将混合物在-78℃搅拌2小时，然后在0℃用HCl(2N)酸化至pH 4～5。将所得混合物在0℃至室温搅拌30分钟，和用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩以得到(2-氯-5-乙氧基吡啶-4-基)硼酸(650.0mg，粗品)，为黄色固体。MS(ESI)(C7H9BClNO3)(M+1)+，计算值202.0；实测值，202.0.
步骤3 2'-氯-5'-乙氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯
于23℃向4-氯-6-甲基烟酸甲酯(500.0mg，2.69mmol)的1,4-二噁烷(7mL)搅拌溶液中依次加入水(1.5mL)，(2-氯-5-乙氧基吡啶-4-基)硼酸(543.0mg，2.69mmol)，二氯(1,1'-双(二叔丁基膦)二茂铁)钯(II)(176.0mg，0.27mmol)和K2CO3(1.1g，8.08mmol)。将所得溶液在氮气下于80℃搅拌3小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DCM(3mL)中，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于40g硅胶柱，在20分钟内用0～3％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到2'-氯-5'-乙氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(360.0mg，43％)，为无色油状物。MS(ESI)(C15H15ClN2O3)(M+1)+，计算值307.1；实测值，307.1。
步骤4 2'-氯-5'-乙氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸
在20℃向2'-氯-5'-乙氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(350.0mg，1.14mmol)的甲醇(3mL)搅拌溶液中加入氢氧化钠(183.0mg，4.56mmol)的水(3mL)溶液。将所得溶液在80℃搅拌1小时。将混合物用水稀释。在真空下除去挥发物。所述水层用柠檬酸酸化至pH 5～6，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩以得到2'-氯-5'-乙氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(330.0mg，粗品)，为粉色固体。MS(ESI)(C14H13ClN2O3)(M+1)+，计算值293.1；实测值，293.1。
步骤5 2'-氯-5'-乙氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
向2'-氯-5'-乙氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(310.0mg，1.06mmol)的乙腈(4mL)的搅拌溶液中添加5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(153.0mg，1.17mmol)和1-甲基咪唑(435.0mg，5.30mmol)。在20℃和氮气下，向上述溶液中加入TCFH(297.0mg，1.06mmol)的乙腈(1mL)溶液。将所得溶液在20℃搅拌2小时。将所得混合物溶解在DMF(2mL)中，将其应用于40gC18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～70％乙腈水溶液洗脱，得到黄色固体(88％纯度)。将产物溶解在DMF(3mL)中并通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：XBridge Prep苯基OBD柱，19*250mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B:MeOH--HPLC；流速：25mL/min；梯度：在8分钟内从55％B至65％B，在8.2分钟内从65％B至95％B，在10分钟内从95％B至95％B，在11分钟内从95％B至5％B，5％B；波长：220\254nm；RT1(min):8；进样体积：500mL；运行次数：5)得到2'-氯-5'-乙氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(70.5mg，16％)，为白色固体。MS(ESI)(C17H16ClN5O3S)(M+1)+，计算值406.1；实测值，406.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.95(s，1H)，8.83(s，1H)，8.13(s，1H)，7.52(s，1H)，7.41(s，1H)，4.08(s，3H)，3.97–3.87(m，2H)，2.59(s，3H)，1.12–1.04(m，3H)。
实施例43
N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-4-(3-甲氧基-6-甲基哒嗪-4-基)-6-甲基烟酰胺
步骤1；4-(6-氯-3-甲氧基哒嗪-4-基)-6-甲基烟酸甲酯
在23℃向4-氯-6-甲基烟酸甲酯(1.0g，5.39mmol)在1,4-二噁烷(5mL)中的搅拌溶液中依次加入双(频那醇)二硼(2.7g，10.78mmol)、乙酸钾(1.6g，16.16mmol)和(1,1'-双(二苯基膦)二茂铁)二氯化钯(II)(1.2g，1.62mmol)。将所得溶液在氮气下于100℃搅拌4小时。在23℃向上述混合物中加入水(0.4mL)、碳酸钾(299.0mg，2.17mmol)和(1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁)二氯钯(II)(158.0mg，0.22mmol)的1,4-二噁烷(2mL)溶液。所得溶液在氮气下于80℃搅拌16小时。过滤悬浮液。收集滤液并在真空下浓缩。将所得残余物溶解在乙腈(2mL)中，将其应用于40.0g C18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～38％乙腈水溶液洗脱，得到4-(6-氯-3-甲氧基哒嗪-4-基)-6-甲基烟酸甲酯(114.0mg，50％)，为黄色油状物。MS(ESI)(C13H12ClN3O3)(M+1)+，计算值294.1；实测值，294.1。
步骤-2:4-(3-甲氧基-6-甲基哒嗪-4-基)-6-甲基烟酸甲酯
在23℃向4-(6-氯-3-甲氧基哒嗪-4-基)-6-甲基烟酸甲酯(100.0mg，0.34mmol)的1,4-二噁烷(1mL)的搅拌溶液中依次加入三甲基环硼氧烷(trimethylboroxine)(51.0mg，0.41mmol)，碳酸铯(333.0mg，1.02mmol)和(1,1'-双(二苯基膦)二茂铁)二氯化钯(II)(25.0mg，0.03mmol)。将所得溶液在氮气下于100℃搅拌16小时。用乙酸乙酯稀释反应混合物并过滤。收集滤液并在真空下浓缩。将所得残余物溶解在乙腈(2mL)中，将其应用于40.0gC18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～28％乙腈水溶液洗脱，得到4-(3-甲氧基-6-甲基哒嗪-4-基)-6-甲基烟酸甲酯(75.0mg，79％)，为黄色油状物。MS(ESI)(C14H15N3O3)(M+1)+，计算值274.1，实测值274.1。
步骤-3:4-(3-甲氧基-6-甲基哒嗪-4-基)-6-甲基烟酸
在23℃向4-(3-甲氧基-6-甲基哒嗪-4-基)-6-甲基烟酸甲酯(55.0mg，0.20mmol)的甲醇(0.9mL)搅拌溶液中加入水(0.3mL)和氢氧化锂(19.0mg，0.81mmol)。将所得溶液在氮气下于23℃搅拌0.5小时。用柠檬酸酸化所得残余物，将其应用于20.0g C18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～28％乙腈水溶液洗脱，得到4-(3-甲氧基-6-甲基哒嗪-4-基)-6-甲基烟酸(47.0mg，89％)，为黄色固体。MS(ESI)(C13H13N3O3)(M+1)+，计算值260.1，实测值260.1。
步骤-4:N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-4-(3-甲氧基-6-甲基哒嗪-4-基)-6-甲基烟酰胺
向4-(3-甲氧基-6-甲基哒嗪-4-基)-6-甲基烟酸(47.0mg，0.18mmol)和5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(26.0mg，0.20mmol)的乙腈(1mL)搅拌溶液加入1-甲基咪唑(74.6mg，0.91mmol)。然后在23℃将TCFH(51.0mg，0.18mmol)的乙腈(1mL)加入到上述混合物中，所得溶液在氮气下于23℃搅拌2小时。将所得残余物溶解在乙腈(1mL)中，将其应用于20.0g C18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～34％乙腈水溶液洗脱，得到N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-4-(3-甲氧基-6-甲基哒嗪-4-基)-6-甲基烟酰胺(31.0mg，45％)，为白色固体。MS(ESI)(C16H16N6O3S)(M+1)+，计算值373.1；实测值373.2。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.01(s，1H)，8.86(s，1H)，7.62(s，1H)，7.46(s，1H)，4.08(s，3H)，3.74(s，3H)，2.60(s，6H)。
实施例44
2'-乙基-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:5'-甲氧基-6-甲基-2'-乙烯基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯
在20℃向2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(400.0mg，1.33mmol)的1,4-二噁烷(8mL)溶液中加入Pd(dppf)Cl2(87.0mg，0.13mmol)，K2CO3(370.0mg，2.68mmol)和三氟(乙烯基)-14-硼烷钾盐(179.0mg，1.33mmol)，水(2mL)。将所得溶液在80℃搅拌2小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将残余物溶解在DCM(5mL)中，通过CombiFlash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于40g硅胶柱，用0～26％乙酸乙酯的石油醚溶液在35分钟内洗脱，得到5'-甲氧基-6-甲基-2'-乙烯基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(350.0mg，65％)，为红色油状物。MS(ESI)(C16H16N2O3)(M+1)+，计算值285.1，实测值285.1。
步骤-2:2'-乙基-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯
氢气气氛下向5'-甲氧基-6-甲基-2'-乙烯基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(342.0mg，0.85mmol)的甲醇(2mL)混合物中加入Pd/C(干燥，50.0mg)。将所得溶液在氢气气氛下于20℃搅拌2小时。过滤悬浮液。收集滤液并在真空下浓缩。将残余物溶解在DCM(3mL)中，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于40g硅胶柱，在35分钟内用0～7％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到2'-乙基-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(300.0mg，96％)，为黄色油状物。MS(ESI)(C16H18N2O3)(M+1)+，计算值287.1，实测值287.1。
步骤-3:2'-乙基-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸
于17℃向2'-乙基-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(300.0mg，0.81mmol)的四氢呋喃(THF)(3mL)溶液中加入LiOH(78.0mg，3.27mmol)和水(1.0mL)。将所得溶液在50℃搅拌2小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩以得到2'-乙基-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(246.0mg，88％)，为红色油状物。MS(ESI)(C15H16N2O3)(M+1)+，计算值273.1，实测值273.1。
步骤-4:2'-乙基-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
向5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(69.4mg，0.52mmol)的乙腈(2mL)混合物中加入2'-乙基-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(150.0mg，0.44mmol)和1-甲基-1H-咪唑(109.0mg，1.32mmol)。在氮气下向其中滴加TCFH(185.0mg，0.66mmol)的乙腈(1mL)溶液。在真空下除去有机溶剂。将所得残余物溶解在DMF(5mL)中，将其应用于40g C18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在34分钟内用5～23％乙腈水溶液洗脱，得到白色固体(70％)。将所述产物(70％)溶解在DMF(5mL)中并进一步通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/LNH4HCO3)，流动相B:ACN；流速：60mL/min；梯度：8分钟内从20％B至40％B，8.2分钟内从40％B至95％B，9.5分钟内从95％B至95％B，11分钟内从95％B至5％B，5％B；波长：254nm；RT1(min):5.6；进样体积：1.5mL；运行次数：3)以得到2'-乙基-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(51.1mg，29％)，为白色固体。MS(ESI)(C18H19N5O3S)(M+1)+，计算值386.1，实测值386.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.87(s，1H)，8.76(s，1H)，8.22(s，1H)，7.36(s，1H)，7.24(s，1H)，4.06(s，3H)，3.60(s，3H)，2.74–2.76(m，2H)，2.58(s，3H)，1.24(t，J＝7.6Hz，3H)。
实施例45和46
2'-氯-N-(5-(((1s,3s)-3-羟基环戊基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺，和2'-氯-N-(5-(((1s,3r)-3-羟基环戊基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤1 3-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环戊-1-醇
在0℃，向环戊-1,3-二醇(1.0g，9.79mmol)的二氯甲烷(5mL)搅拌溶液中依次加入TBS-Cl(1.5g，9.79mmol)和咪唑(0.7g，9.79mmol)。将所得溶液在0℃搅拌2小时。在真空下除去有机溶剂。将所得残余物溶解在DCM(2mL)中，并通过Combi Flash(Biotage IsoleraPrime)纯化，将其应用于40g硅胶柱，在30分钟内用0～10％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到3-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环戊-1-醇(620.0mg，25％)，为无色油状物。
步骤2O-(3-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环戊基)S-甲基二硫代碳酸酯
于0℃向3-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环戊-1-醇(600.0mg，2.77mmol)的无水四氢呋喃(4mL)的脱气溶液中分批加入NaH(222.0mg，5.55mmol，60％)，并在氮气气氛下0℃搅拌30min。然后在0℃向上述混合物中加入CS2(0.3mL，4.16mmol)，并在0℃搅拌20分钟。在0℃和氮气下向上述溶液中加入MeI(0.3mL，4.16mmol)。然后将所得混合物在0℃搅拌1小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DCM(2mL)中，并通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，将其应用于40g硅胶柱，在20分钟内用0～30％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到O-(3-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环戊基)S-甲基二硫代碳酸酯(744.0mg，74％)，为黄色油状物。
步骤3O-(3-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环戊基)肼基硫代碳酸酯
于20℃向O-(3-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环戊基)S-甲基二硫代碳酸酯(710.0mg，2.32mmol)的甲醇(5mL)的搅拌溶液中加入肼(0.1mL，2.32mmol)。将所得溶液在20℃搅拌1小时。在真空下除去溶剂，得到O-(3-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环戊基)肼基硫代碳酸酯(673.0mg，粗品)，为无色油状物。MS(ESI)(C12H26N2O2SSi)(M+1)+，计算值291.0；实测值，291.3。
步骤4 5-((3-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环戊基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
在20℃向O-(3-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环戊基)肼基硫代碳酸酯(670.0mg，2.31mmol)的甲醇(4mL)搅拌溶液中依次添加TEA(0.7mL，4.61mmol)和BrCN(366.0mg，3.46mmol)。将所得溶液在20℃搅拌2小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(4mL)中，将其应用于40g C18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用15～80％乙腈水溶液洗脱，得到5-((3-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环戊基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(301.0mg，34％)，为黄色固体。MS(ESI)(C13H25N3O2SSi)(M+1)+，计算值316.0；实测值，316.3。
步骤5 2-(5-((3-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环戊基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-1-(2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-基)乙-1-酮
在23℃向5-((3-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环戊基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(300.0mg，0.95mmol)的乙腈(3mL)的搅拌溶液中加入中间体G(240.6mg，0.86mmol)和1-甲基咪唑(354.0mg，4.32mmol)。在23℃和氮气下，向上述溶液中加入TCFH(242.0mg，0.86mmol)的乙腈(1mL)溶液。然后将所得混合物在23℃搅拌1小时。在真空下除去溶剂。将所得残余物溶解在DMF(4mL)中，将其应用于40g C18柱，并通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，在35分钟内用5～70％乙腈水溶液洗脱，得到2-(5-((3-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环戊基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-1-(2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-基)乙-1-酮(330.0mg，66％)，为白色固体。MS(ESI)(C26H34ClN5O4SSi)(M+1)+，计算值576.0；实测值，576.4。
步骤6 2'-氯-N-(5-(((1s,3s)-3-羟基环戊基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺和2'-氯-N-(5-(((1s,3r)-3-羟基环戊基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在0℃向N-(5-((3-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)环戊基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(330.0mg，0.57mmol)的二氯甲烷(4mL)的搅拌溶液中加入三氟乙酸(0.8mL)。将所得溶液在23℃搅拌2小时。在真空下除去有机溶剂。混合物用水稀释。水层用NaHCO3碱化至pH 7～8，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(6mL)中，将其应用于80g C18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～80％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-N-(5-((3-羟基环戊基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(160.0mg，59％)的混合物，为白色固体。所述化合物的混合物(160.0mg)通过制备手性HPLC分离，条件如下：(柱：XBridge Shield RP18OBD柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B:ACN；流速：60mL/min；梯度：8分钟内从20％B至40％B，40％B；波长：254nm；RT1(min):6.25)以得到2'-氯-N-(5-(((1s,3s)-3-羟基环戊基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺，(9.0mg，产率：6％)，为白色固体，其具有手性HPLC上的第一个峰，和2'-氯-N-(5-(((1s,3r)-3-羟基环戊基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺，(70.2mg，产率：43％)，为白色固体，其具有手性HPLC上的第二个峰。绝对立体化学没有确定，是任意指定的。
2'-氯-N-(5-(((1s,3s)-3-羟基环戊基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺:MS(ESI)(C20H20ClN5O4S)(M+1)+，计算值462.0；实测值，462.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.92(s，1H)，8.83(s，1H)，8.15(s，1H)，7.49(s，1H)，7.37(s，1H)，5.25–5.11(m，1H)，4.68–4.53(m，1H)，4.27–4.09(m，1H)，3.63(s，3H)，2.67(s，3H)，2.35–2.28(m，1H)，2.02–1.76(m，2H)，1.74–1.73(m，3H)。
2'-氯-N-(5-(((1s,3r)-3-羟基环戊基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺:MS(ESI)(C20H20ClN5O4S)(M+1)+，计算值462.0；实测值，462.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.85(s，1H)，8.81(s，1H)，8.17(s，1H)，7.52(s，1H)，7.41(s，1H)，5.39–5.26(m，1H)，4.64–4.50(m，1H)，4.27–4.13(m，1H)，3.63(s，3H)，2.59(s，3H)，2.20–2.18(m，1H)，2.00–1.70(m，2H)，1.74–1.73(m，2H)，1.54–1.50(m，1H).
实施例47
2'-氯-3'-氟-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:2-氯-3-氟-5-甲氧基吡啶
在氮气气氛下在25℃向6-氯-5-氟吡啶-3-醇(20.0g，135.60mmol)的丙酮(150mL)溶液中加入MeI(17mL，271.00mmol)和K2CO3(37.5g，271.00mmol)。将所得溶液在氮气下于25℃搅拌16小时，然后真空浓缩。用水淬灭所述反应混合物，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。所得残余物通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，其应用于330g硅胶柱，并在45分钟内用0～22％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到2-氯-3-氟-5-甲氧基吡啶(16.0g，80％)，为无色油状物。MS(ESI)(C6H5ClFNO)(M+1)+，计算值162.0；实测值162.0。
步骤-2:2-氯-3-氟-4-碘-5-甲氧基吡啶
在-60℃向2-氯-3-氟-5-甲氧基吡啶(16.0g，99.00mmol)的干燥四氢呋喃(160mL)溶液中滴加正丁基锂(44mL，110.00mmol，2.5N于己烷溶液)，并在氮气气氛下在-60℃搅拌1小时。然后在-60℃向上述混合物中加入碘(27.6g，109.00mmol)。将所得溶液在-60～20℃搅拌2小时。通过加入饱和硫代硫酸钠水溶液淬灭反应混合物，并用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。所得残余物通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，其应用于330g硅胶柱，并在40分钟内用0～50％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到2-氯-3-氟-4-碘-5-甲氧基吡啶(22.0g，73％)，为白色固体MS(ESI)(C6H4ClFINO)(M+1)+，计算值287.9；实测值，287.9。
步骤-3:2'-氯-3'-氟-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯
在25℃、氮气气氛下向6-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)烟酸甲酯(7.2g，26.10mmol)和2-氯-3-氟-4-碘-5-甲氧基吡啶(5.0g，17.39mmol)的干燥1,4-二噁烷(50mL)脱气溶液中加入水(10mL)，(1,1'-双(二苯基膦))二茂铁)二氯化钯(II)，其与二氯甲烷(4.2g，5.15mmol)络合，和K2CO3(7.2g，52.20mmol)。氮气气氛下将所得溶液在25℃搅拌2小时。过滤悬浮液。收集滤液并在真空下浓缩。所得残余物通过CombiFlash(Biotage Isolera Prime)纯化，其应用于120g硅胶柱，并在45分钟内用0～46％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到2'-氯-3'-氟-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(2.8g，53％)，为白色固体。MS(ESI)(C14H12ClFN2O3)(M+1)+，计算值311.1；实测值，311.1。
步骤-4:2'-氯-3'-氟-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸
在25℃向2'-氯-3'-氟-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(2.8g，9.17mmol)的甲醇(10mL)搅拌溶液加入NaOH(1.4g，36.70mmol)和水(10mL)。将所得溶液在25℃搅拌2小时，然后用水稀释。在真空下除去有机溶剂。所述水层用柠檬酸酸化至pH～5，并用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩以得到2'-氯-3'-氟-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(1.3g，粗品)，为黄色油状物。MS(ESI)(C13H10ClFN2O3)(M+1)+，计算值297.0，实测值297.0。
步骤-5:2'-氯-3'-氟-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在25℃向2'-氯-3'-氟-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(130.0mg，0.43mmol)的干燥乙腈(1mL)溶液中加入5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(57.0mg，0.43mmol)和1-甲基-1H-咪唑(180.0mg，2.15mmol)。然后在25℃将TCFH(123mg，0.44mmol)的乙腈溶液加入到上述混合物中。将所得溶液在25℃搅拌2小时。将所述混合物应用到20g C18柱，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在40分钟内用5～45％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-3'-氟-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(21.4mg，11％)，为白色固体。MS(ESI)(C16H13ClF2N2O3S)(M+1)+，计算值410.0，实测值410.0。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.04(s，1H)，8.98(s，1H)，8.18(s，1H)，7.47(s，1H)，4.07(s，3H)，3.74(s，3H)，2.60(s，3H)。
实施例48
2'-氯-5'-(二氟甲氧基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:2-氯-5-(二氟甲氧基)-4-碘吡啶
在25℃向6-氯-4-碘吡啶-3-醇(10.0g，39.14mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(DMF)(50mL)的搅拌溶液中添加2-氯-2,2-二氟乙酸钠(11.9g，78.20mmol)和Cs2CO3(16.6g，50.80mmol)。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。所得残余物通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于330g硅胶柱，在40分钟内用0～25％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到2-氯-5-(二氟甲氧基)-4-碘吡啶(10.5g，79％)，为白色固体。MS(ESI)(C6H3ClF2INO)(M+1)+，计算值305.4；实测值305.4。
步骤-2:2'-氯-5'-(二氟甲氧基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯
在23℃、氮气气氛下向6-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)烟酸甲酯(5.0g，18.04mmol)的1,4-二噁烷(40mL)的脱气溶液中加入2-氯-5-(二氟甲氧基)-4-碘吡啶(5.5g，18.04mmol)，水(8mL)，K2CO3(7.5g，54.1mmol)和(1,1'-双(二苯基膦)二茂铁)二氯化钯(II)，其与二氯甲烷(4.4g，5.41mmol)络合。将所得溶液在氮气氛下于80℃搅拌2小时。过滤悬浮液。滤液在真空下浓缩。所得残余物通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，其应用于120g硅胶柱，并在40分钟内用0～56％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到2'-氯-5'-(二氟甲氧基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(5.7g，63％)，为白色固体。MS(ESI)(C14H11ClF2N2O3)(M+1)+，计算值329.0；实测值，329.0。
步骤-3:2'-氯-5'-(二氟甲氧基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸
在25℃向2'-氯-5'-(二氟甲氧基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(3.0g，9.13mmol)的甲醇(20mL)搅拌溶液加入NaOH(1.4g，36.50mmol)和水(20mL)。将所得溶液在25℃搅拌1小时然后用水稀释。在真空下除去有机溶剂。水层用柠檬酸酸化至pH～6，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩以得到2'-氯-5'-(二氟甲氧基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(2.5g，粗品)，为黄色油状物。MS(ESI)(C13H9ClF2N2O3)(M+1)+，计算值315.0，实测值315.0。
步骤-4:2'-氯-5'-(二氟甲氧基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在25℃向2'-氯-5'-(二氟甲氧基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(50.0mg，0.15mmol)的乙腈(1mL)搅拌溶液中加入5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(22.0mg，0.17mmol)和1-甲基-1H-咪唑(65.0mg，0.79mmol)。然后在25℃将TCFH(44.0mg，0.15mmol)的乙腈(0.5mL)溶液加入到上述混合物中。将所得溶液在25℃搅拌1小时。将所得混合物应用到20gC18柱，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在40分钟内用5～45％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-5'-(二氟甲氧基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(27.5mg，产率：38％)，为白色固体。MS(ESI)(C16H12ClF2N5O3S)(M+1)+,428.0，实测值428.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.08(s，1H)，8.97(s，1H)，8.33(s，1H)，7.72(s，1H)，7.45(s，1H)，7.31–6.80(m，1H)，4.07(s，3H)，2.61(s，3H)。
实施例49
2'-氯-5'-乙基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:5'-溴-2'-氯-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯
在25℃、在氮气气氛下向4-氯-6-甲基烟酸甲酯(1.0g，5.39mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的脱气溶液中依次加入双(频哪醇)二硼(2.7g，10.78mmol)、乙酸钾(1.6g，16.16mmol)和(1,1'-双(二苯基膦)二茂铁)二氯化钯(II)(1.2g，1.62mmol)。将所得溶液在氮气下于30℃搅拌3小时。于25℃，氮气氛下向上述混合物中加入5-溴-2-氯-4-碘吡啶(1.0g，3.61mmol)、水(2mL)、碳酸钾(1.5g，10.83mmol)和1,4-二噁烷(10mL)中的(1,1'-双(二苯基膦)二茂铁)二氯化钯(II)(0792.0mg，1.08mmol)。将所得溶液在氮气下于80℃搅拌2小时。悬浮液被过滤。收集滤液并在真空下浓缩。所得残余物通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，其应用于80g硅胶柱，并在40分钟内用0～10％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到5'-溴-2'-氯-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(2.1g，99％)，为棕色油状物。MS(ESI)(C13H10BrClN2O2)(M+1)+，计算值341.0；实测值，341.0。
步骤-2:2'-氯-6-甲基-5'-乙烯基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯
在20℃、氮气气氛下向5'-溴-2'-氯-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(400.0mg，1.17mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷(180.0mg，1.17mmol)的甲苯(2mL)溶液中加入1,1'-双(二叔丁基膦)二茂铁二氯化钯(76.0mg，0.12mmol)。在50℃向上述溶液中加入磷酸钾(994.0mg，4.68mmol)的水(0.2mL)溶液。将所得溶液在氮气下于100℃搅拌16小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DCM(4mL)中，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于40g硅胶柱，在30分钟内用0～40％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到2'-氯-6-甲基-5'-乙烯基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(260.0mg，67％)，为棕色油状物。MS(ESI)(C15H13ClN2O2)(M+1)+，计算值289.1；实测值，289.1.
步骤-3:2'-氯-5'-乙基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯
在20℃向2'-氯-6-甲基-5'-乙烯基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(250.0mg，0.87mmol)的乙酸乙酯(10mL)搅拌溶液中添加氧化铂(IV)(25.0mg，0.11mmol)。将所得溶液在氢气气氛下于20℃搅拌1小时。过滤悬浮液。收集滤液并在真空下浓缩，得到2'-氯-5'-乙基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(240.0mg，粗品)，为棕色油状物。MS(ESI)(C15H15ClN2O2)(M+1)+，计算值291.1；实测值，291.1。
步骤-4:2'-氯-5'-乙基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸
在20℃向2'-氯-5'-乙基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(240.0mg，0.83mmol)的甲醇(3mL)搅拌溶液中添加氢氧化钠(132.0mg，3.30mmol)的水(3mL)溶液。将所得溶液在80℃搅拌1小时。在真空下除去有机溶剂。水层用柠檬酸酸化至pH 5～6，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩以得到2'-氯-5'-乙基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(190.0mg，粗品)，为白色固体。MS(ESI)(C14H13ClN2O2)(M+1)+，计算值277.1；实测值，277.1。
步骤-5:2'-氯-5'-乙基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
向2'-氯-5'-乙基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(210.0mg，0.76mmol)和5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(100.0mg，0.76mmol)的乙腈(1mL)搅拌溶液中加入1-甲基-1H-咪唑(312.0mg，3.79mmol)。在20℃和氮气下，向上述溶液中加入TCFH(213.0mg，0.76mmol)的乙腈(1mL)溶液。将所得溶液在20℃搅拌2小时。将所得残余物溶解在DMF(3mL)中，将其应用于40g C18柱并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～60％乙腈水溶液洗脱，得到黄色固体(90％纯度)。将所述黄色固体(90％纯度)溶解在DMF(2mL)中，并通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：Atlantis HILIC OBD柱，19*150mm*5um；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B:MeOH--HPLC；流速：25mL/min；梯度：在8分钟内从65％B至65％B，在8.2分钟内从65％B至95％B，在10分钟内从95％B至95％B，在11分钟内从95％B至65％B，65％B；波长：220\254nm；RT1(min):7；进样体积：0.4mL；运行次数：5)以得到2'-氯-5'-乙基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(64.5mg，21％)，为白色固体。MS(ESI)(C17H16ClN5O2S)(M+1)+，计算值390.1；实测值，390.0。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.04(s，1H)，8.97(s，1H)，8.36(s，1H)，7.33(s，1H)，7.29(s，1H)，4.06(s，3H)，2.60(s，3H)，2.41–2.29(m，2H)，1.00–0.92(m，3H)。
实施例50
7-(2-氟-6-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)咪唑并(1,2-a)吡啶-6-甲酰胺
步骤-1:7-氯咪唑并(1,2-a)吡啶-6-甲酸甲酯
在20℃向6-氨基-4-氯烟酸甲酯(900.0mg，4.82mmol)的乙醇(6mL)溶液中加入碳酸氢钠(689.0mg，8.20mmol)，2-氯乙醛(4.3g，40％水溶液，21.70mmol)。将所得溶液在氮气下于80℃搅拌2小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得混合物溶解在DCM(6mL)中，并通过CombiFlash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于80g硅胶柱，在35分钟内用0～10％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到7-氯咪唑并(1,2-a)吡啶-6-甲酸甲酯(900.0mg，70％)。MS(ESI)(C9H7ClN2O2)(M+1)+，计算值211.0，实测值211.0.
步骤-2:7-(2-氟-6-甲氧基苯基)咪唑并(1,2-a)吡啶-6-甲酸甲酯
将7-氯咪唑并(1,2-a)吡啶-6-甲酸甲酯(600.0mg，2.56mmol)，(2-氟-6-甲氧基苯基)硼酸(654.0mg，3.85mmol)的混合物)，XPhos(146.0mg，0.31mmol)和XPhos Pd G3(217.0mg，0.26mmol)在1,4-二噁烷(1mL)和水(0.3mL)中的化合物在氮气下于80℃搅拌2小时。用水稀释反应混合物，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得混合物溶解在DMF(5mL)中，将其应用于40g C18柱，并通过CombiFlash(Biotage Isolera Prime)纯化，在40分钟内用5～35％乙腈水溶液洗脱，得到7-(2-氟-6-甲氧基苯基)咪唑并(1,2-a)吡啶-6-甲酸甲酯(200.0mg，23％)，为白色固体。MS(ESI)(C16H13FN2O3)(M+1)+，计算值301.0，实测值301.0。
步骤-3:7-(2-氟-6-甲氧基苯基)咪唑并(1,2-a)吡啶-6-甲酸
将7-(2-氟-6-甲氧基苯基)咪唑并(1,2-a)吡啶-6-甲酸甲酯(120.0mg，0.36mmol)和LiOH(34.5mg，1.43mmol)在四氢呋喃(3mL)和水(1mL)中的混合物在50℃搅拌12小时。真空下除去挥发物。水层用柠檬酸酸化至pH～5。在真空下除去溶剂，得到7-(2-氟-6-甲氧基苯基)咪唑并(1,2-a)吡啶-6-甲酸(950.0mg，粗品)，为黄色固体，其不经进一步纯化直接使用。MS(ESI)(C15H11FN2O3)(M+1)+，计算值287.0，实测值286.9。
步骤-4:7-(2-氟-6-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)咪唑并(1,2-a)吡啶-6-甲酰胺
向7-(2-氟-6-甲氧基苯基)咪唑并(1,2-a)吡啶-6-甲酸(700.0mg，0.24mmol)在乙腈(3mL)中的混合物中添加5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(38.5mg，0.29mmol)，和NMI(120.0mg，1.46mmol)。在20℃和氮气下，向上述溶液中加入TCFH(103.0mg，0.36mmol)的乙腈(1mL)溶液。混合物在氮气下于20℃搅拌2小时。真空下除去挥发物。将残余物溶解在DMF(3mL)中，将其应用于40g C18柱，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在40分钟内用5～30％乙腈水溶液洗脱，得到7-(2-氟-6-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)咪唑并(1,2-a)吡啶-6-甲酰胺(30.9mg，30％)，为黄色固体。MS(ESI)(C18H14FN5O3S)(M+1)+，计算值400.0，实测值400.0。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.82(s，1H)，9.13(s，1H)，8.12(d，J＝1.2Hz，1H)，7.73(d，J＝1.2Hz，1H)，7.54(s，1H)，7.45–7.32(m，1H)，6.97–6.75(m，2H)，4.07(s，3H)，3.59(s，3H)。
实施例51
2'-环丙基-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:2'-环丙基-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯
于20℃向2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(800.0mg，2.73mmol)的1,4-二噁烷(10mL)的搅拌溶液中加入环丙基硼酸(235.0mg，2.73mmol)和K3PO4(1.2g，5.47mmol)。在氮气下于20℃向上述溶液中加入PdAMphos(230.1mg，0.27mmol)。然后将所得混合物在氮气下于80℃搅拌2小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DCM(5mL)中，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于40g硅胶柱，在25分钟内用0～70％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到2'-环丙基-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(300.0mg，33％)，为黄色油状物。MS(ESI)(C17H18N2O3)(M+1)+，计算值299.2；实测值，299.2。
步骤-2:2'-环丙基-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸
在20℃向2'-环丙基-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(300.0mg，1.01mmol)的四氢呋喃(2mL)搅拌溶液中加入氢氧化锂(24.1mg，1.01mmol)的水(2mL)溶液。将所得溶液在20℃搅拌1小时。在真空下除去有机溶剂。水层用柠檬酸酸化至pH～5，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩以得到2'-环丙基-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(111.0mg，粗品)，为黄色固体。MS(ESI)(C16H16N2O3)(M+1)+，计算值245.1；实测值，245.1。
步骤-3:2'-环丙基-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在20℃、于氮气下向2'-环丙基-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(100mg，0.35mmol)的乙腈(2mL)溶液中加入5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(46.1mg，0.35mmol)和1-甲基咪唑(144.3mg，1.76mmol)。在20℃和氮气下，向上述溶液中加入TCFH(98.3mg，0.35mmol)的乙腈(2mL)溶液。然后将所得混合物在20℃搅拌1小时。将所得残余物溶解在DMF(1mL)中，将其应用于20g C18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～55％乙腈水溶液洗脱，得到2'-环丙基-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(82.4mg，58％)，为白色固体。MS(ESI)(C19H19N5O3S)(M+1)+，计算值398.1；实测值398.1。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.84(s，1H)，8.75(s，1H)，8.15(s，1H)，7.39(s，1H)，7.28(s，1H)，4.07(s，3H)，3.56(s，3H)，2.59(s，3H)，2.13–2.16(m，1H)，0.98–0.85(m，4H)。
实施例52
5'-(二氟甲氧基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤1 5'-(二氟甲氧基)-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯
在25℃、氮气气氛下向2'-氯-5'-(二氟甲氧基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(150.0mg，0.45mmol)的1,2-二甲氧基乙烷(2mL)的脱气溶液中加入(1,1'-双(二苯基膦)二茂铁)二氯化钯(II)，K2CO3(186.3mg，1.35mmol)。然后在120℃向上述混合物中加入2,4,6-三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三硼杂环己烷(63mg，0.50mmol)，所得混合物在120℃搅拌3小时。过滤悬浮液。滤液在真空下浓缩。将所得残余物溶解在乙腈(4mL)中，将其应用于40g C18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在40分钟内用5～55％乙腈水溶液洗脱，得到5'-(二氟甲氧基)-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(70mg，42％)，为黄色油状物。MS(ESI)(C15H14F2N2O3)(M+1)+，计算值309.1；实测值309.1。
步骤2 5'-(二氟甲氧基)-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸
在25℃向5'-(二氟甲氧基)-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(70.0mg，0.227mmol)的甲醇(1mL)搅拌溶液中加入NaOH(36.0mg，0.91mmol)和水(1mL)。将所得溶液在25℃搅拌2小时。在真空下除去有机溶剂。水层用柠檬酸酸化至pH～7，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在乙腈(2mL)中，将其应用于20g C18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～30％乙腈水溶液洗脱，得到5'-(二氟甲氧基)-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(60.0mg，89％)，为黄色油状物。MS(ESI)(C14H12F2N2O3)(M+1)+，计算值295.1；实测值，295.1。
步骤3 5'-(二氟甲氧基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在25℃向5'-(二氟甲氧基)-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(60.0mg，0.20mmol)和5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(26.0mg，0.20mmol)的乙腈(1mL)的搅拌溶液中加入1-甲基-1H-咪唑(84.0mg，1.02mmol)。然后在25℃将TCFH(56.0mg，0.20mmol)的乙腈(0.5mL)溶液加入到上述混合物中，混合物在25℃搅拌1小时。将所得混合物应用到20g C18柱上，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～38％乙腈水溶液洗脱，得到5'-(二氟甲氧基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(25.0mg，29％)，为白色固体。MS(ESI)(C17H15F2N5O3S)(M+1)+,408.1，实测值408.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.01(s，1H)，8.91(s，1H)，8.32(s，1H)，7.42–7.32(m，2H)，7.22–6.85(m，1H)，4.07(s，3H)，2.60(s，3H)，2.53(s，3H)。
实施例53
4-(5-氯-2-乙氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
步骤1 4-(5-氯-2-乙氧基苯基)-6-甲基烟酸甲酯
在18℃向4-氯-6-甲基烟酸甲酯(500.0mg，2.56mmol)的1,4-二噁烷(8mL)溶液中加入(5-氯-2-乙氧基苯基)硼酸(513.0mg，2.56mmol))，Pd(dppf)Cl2(209.0mg，0.25mmol)，K2CO3(707.0mg，5.12mmol)和水(2mL)。将所得溶液在80℃搅拌2小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将残余物溶解在DCM(6mL)中，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于80g硅胶柱，在40分钟内用0～45％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到4-(5-氯-2-乙氧基苯基)-6-甲基烟酸甲酯(680.0mg，70％)，为白色固体。MS(ESI)(C16H16ClNO3)(M+1)+，计算值306.0；实测值306.0。
步骤2 4-(5-氯-2-乙氧基苯基)-6-甲基烟酸
在20℃向4-(5-氯-2-乙氧基苯基)-6-甲基烟酸甲酯(200.0mg，0.52mmol)的四氢呋喃(1.5mL)溶液中加入LiOH(37.6mg，1.57mmol)和水(0.5mL)。将所得溶液在50℃搅拌16小时。用水稀释反应混合物。水层用柠檬酸酸化至pH～5，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩以得到4-(5-氯-2-乙氧基苯基)-6-甲基烟酸(160.0mg，粗品)，为黄色固体。MS(ESI)(C15H14ClNO3)(M+1)+，计算值292.0；实测值292.0。
步骤3 4-(5-氯-2-乙氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
向乙腈(1mL)中的4-(5-氯-2-乙氧基苯基)-6-甲基烟酸(160.0mg，0.43mmol)的混合物中添加5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(69.1mg，0.52mmol)和1-甲基-1H-咪唑(108.0mg，1.31mmol)。在氮气下向其中滴加TCFH(184.0mg，0.65mmol)的乙腈(1mL)溶液。将所得溶液在20℃搅拌2小时。在真空下除去有机溶剂。将残余物溶解在DMF(3mL)中，将其应用于40gC18柱，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在40分钟内用5～46％乙腈水溶液洗脱，得到4-(5-氯-2-乙氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(42.0mg，23％)，为白色固体。MS(ESI)(C18H17ClN4O3S)(M+1)+，计算值405.0；实测值405.0。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.74(s，1H)，8.73(s，1H)，7.40–7.33(m，3H)，6.97–6.99(d，J＝8.8Hz，1H)，4.07(s，3H)，3.78(d，J＝6.8Hz，2H)，2.58(s，3H)，1.06–1.09(t，J＝6.8Hz，3H)。
实施例54
N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-4-(2-甲氧基苯基)-6-甲基烟酰胺
向中间体C(310.0mg，1.27mmol)和5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(167.0mg，1.27mmol)的乙腈(2mL)搅拌溶液中添加1-甲基咪唑(522.3mg，6.37mmol)。然后在23℃将乙腈(1mL)中的TCFH(358.0mg，1.27mmol)加入到上述混合物中，所得溶液在氮气下于23℃搅拌2小时。将所得残余物溶解在乙腈(2mL)中，将其应用于40.0g C18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～38％乙腈水溶液洗脱，得到N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-4-(2-甲氧基苯基)-6-甲基烟酰胺(219.0mg，产率：47％)，为白色固体。MS(ESI)(C17H16N4O3S)(M+1)+，计算值357.1；实测值357.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.71(s，1H)，8.67(s，1H)，7.45–7.23(m，3H)，7.12–7.02(m，1H)，7.02–6.95(m，1H)，4.07(s，3H)，3.64(s，3H)，2.57(s，3H)。
实施例55
4-(2-氯-6-(二氟甲氧基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
步骤-1:2-溴-1-氯-3-(二氟甲氧基)苯
在23℃，向2-溴-3-氯苯酚(5.0g，24.10mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(30mL)中的搅拌溶液中加入K2CO3(10.0g，72.30mmol)在水(3mL)中的溶液。在23℃和氮气下，向上述溶液中加入氯二氟乙酸钠(7.4g，48.20mmol)。将所得溶液在100℃搅拌16小时。用乙酸乙酯萃取反应混合物。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DCM(4mL)中，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于120g硅胶柱，在25分钟内用0～20％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到2-溴-1-氯-3-(二氟甲氧基)苯(4.9g，75％)，为无色油状物。MS(ESI)(C7H4BrClF2O)(M+1)+，计算值256.9；实测值，257.0。
步骤-2:2-(2-氯-6-(二氟甲氧基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷
至23℃向2-溴-1-氯-3-(二氟甲氧基)苯(4.9g，19.03mmol)在1,4-二噁烷(20mL)中的搅拌溶液中添加双(频那醇)二硼(9.7g)，38.10mmol)，AcOK(3.7g，38.10mmol)和Pd(dppf)Cl2(1.6g，1.90mmol)。将所得溶液在氮气下于100℃搅拌3小时。在真空下除去有机溶剂。所得残余物通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，其应用于120g硅胶柱，并在20分钟内用0～10％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到2-(2-氯-6-(二氟甲氧基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷(1.6g，22％)，为无色油状物。MS(ESI)(C13H16BClF2O3)(M+1)+，计算值305.1；实测值，305.0。
步骤-3:4-(2-氯-6-(二氟甲氧基)苯基)-6-甲基烟酸甲酯
向2-(2-氯-6-(二氟甲氧基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷(1.6g，5.25mmol)的1,4-二噁烷(6mL)搅拌溶液加入4-碘-6-甲基烟酸甲酯(728.1mg，2.63mmol，K2CO3(1.4g，10.51mmol)和水(1.2mL)。在氮气下于23℃向上述溶液中加入Pd(dppf)Cl2(429.0mg，0.53mmol)。将所得溶液在氮气下于100℃搅拌16小时。用水稀释反应混合物，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(3mL)中，将其应用于40g C18柱，并通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，在30分钟内用5～50％乙腈水溶液洗脱，得到4-(2-氯-6-(二氟甲氧基)苯基)-6-甲基烟酸甲酯(140.0mg，8％)，为白色固体。MS(ESI)(C15H12ClF2NO3)(M+1)+，计算值328.0，实测值328.2。
步骤-4:4-(2-氯-6-(二氟甲氧基)苯基)-6-甲基烟酸
在23℃向4-(2-氯-6-(二氟甲氧基)苯基)-6-甲基烟酸甲酯(140.0mg，0.43mmol)在四氢呋喃(1mL)和水(1mL)中的搅拌溶液中添加LiOH(20.0mg，0.85mmol)。将所得溶液在23℃搅拌3小时。混合物用水稀释。水层用柠檬酸酸化至pH～3，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(2mL)中，将其应用于40g C18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在25分钟内用5～50％乙腈水溶液洗脱，得到4-(2-氯-6-(二氟甲氧基)苯基)-6-甲基烟酸(60.0mg，44％)，为白色固体。MS(ESI)(C14H10ClF2NO3)(M+1)+，计算值314.0，实测值，314.0。
步骤-5:4-(2-氯-6-(二氟甲氧基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
向4-(2-氯-6-(二氟甲氧基)苯基)-6-甲基烟酸(50.0mg，0.159mmol)的乙腈(1mL)搅拌溶液中加入5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(21.0mg，0.16mmol)和1-甲基咪唑(65.0mg，0.79mmol)。向上述溶液中加入TCFH(45.0mg，0.16mmol)的乙腈(0.5mL)溶液。然后将混合物在23℃搅拌2小时。将所得混合物溶解在DMF(1mL)中，将其应用于20g C18柱并通过CombiFlash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～50％乙腈水溶液洗脱，得到4-(2-氯-6-(二氟甲氧基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(40.6mg，59％)，为白色固体。MS(ESI)(C17H13ClF2N4O3S)(M+1)+，计算值427.0，实测值，427.2。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.01(s，1H)，8.99(s，1H)，7.57–7.41(m，2H)，7.30–7.22(m，2H)，7.22–6.93(m，1H)，4.06(s，3H)，2.60(s，3H)。
实施例56
N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-2',5',6-三甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤1 2'-氯-5',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯
在23℃向4-溴-2-氯-5-甲基吡啶(1.0g，4.84mmol)的1,4-二噁烷(8mL)搅拌溶液中依次添加6-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)烟酸甲酯(1.3g，4.84mmol)，水(1.6mL)和K2CO3(2.0g，14.53mmol)。在23℃向上述溶液中加入PdCl2(dppf)(354.0mg，0.48mmol)。将所得溶液在80℃搅拌2小时。过滤悬浮液。收集滤液并在真空下浓缩。将所得残余物溶解在DMF(3mL)中，将其应用于40g C18柱，并通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，在30分钟内用5～60％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-5',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(588.0mg，37％)，为棕色油状物。MS(ESI)(C14H13ClN2O2)(M+1)+，计算值277.1；实测值，277.1。
步骤2 2',5',6-三甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯
在23℃向2'-氯-5',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(150.0mg，0.54mmol)的1,4-二噁烷(1mL)搅拌溶液中依次加入三甲基环三硼氧烷(136.0mg，1.08mmol)，K2CO3(225.0mg，1.63mmol)和水(0.2mL)。在氮气下于25℃向上述溶液中加入PdCl2(dppf)(39.7mg，0.05mmol)。然后将所得混合物在氮气下于120℃搅拌1小时。真空下除去挥发物，并直接纯化。将所得残余物溶解在DMF(3mL)中，将其应用于80g C18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～50％乙腈水溶液洗脱，得到2',5',6-三甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(60.0mg，41％)，为棕色油状物。MS(ESI)(C15H16N2O2)(M+1)+，计算值257.1；实测值，257.1。
步骤3 2',5',6-三甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸
在20℃向2',5',6-三甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(160.0mg，0.63mmol)的甲醇(2mL)搅拌溶液中加入氢氧化钠(50.4mg，1.26mmol)的水(1mL)溶液。将所得溶液在室温搅拌4小时。在真空下除去有机溶剂。水层用柠檬酸酸化至pH 5～6，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(2mL)中，将其应用于40g C18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～30％乙腈水溶液洗脱，得到2',5',6-三甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(36.0mg，24％)，为黄色固体。MS(ESI)(C14H14N2O2)(M+1)+，计算值243.1；实测值，243.1。
步骤4N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-2',5',6-三甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在25℃向2',5',6-三甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(36.0mg，0.15mmol)和5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(19.5mg，0.15mmol)的乙腈(1mL)搅拌溶液中加入1-甲基-1H-咪唑(61.0mg，0.74mmol)。在25℃，向上述溶液中加入TCFH(41.7mg，0.15mmol)的乙腈(0.5mL)溶液。将所得溶液在氮气下于25℃搅拌2小时。将混合物溶解在DMF(3mL)中并通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：XBridge Prep OBD C18柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/LNH4HCO3)，流动相B:ACN；流速：60mL/min；梯度：在8分钟内10％B至30％B，在8.2分钟内30％B至95％B，在9.5分钟内95％B至95％B，在11分钟内95％B至5％B，5％B；波长：254nm；RT1(min):7；进样体积：1mL；运行次数：4)以得到N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-2',5',6-三甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(26.1mg，49％)，为白色固体。MS(ESI)(C17H17N5O2S)(M+1)+，计算值356.1；实测值，356.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.99(br，1H)，8.90(s，1H)，8.31(s，1H)，7.23(s，1H)，6.99(s，1H)，4.04(s，3H)，2.58(s，3H)，2.42(s，3H)，1.97(s，3H)。
实施例57
5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-2'-(三氟甲基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:5-甲氧基-2-(三氟甲基)吡啶
在23℃向6-(三氟甲基)吡啶-3-醇(4.0g，24.52mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(DMF)(40mL)搅拌溶液中加入K2CO3(10.2g，73.6mmol)和MeI(1.8mL，29.4mmol)。将所得溶液在23℃搅拌2小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DCM(3mL)中，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于40g硅胶柱，在20分钟内用0～10％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到5-甲氧基-2-(三氟甲基)吡啶(3.5g，80％)，为无色油状物。MS(ESI)(C7H6F3NO)(M+1)+，计算值178.0；实测值，178.1。
步骤-2:4-碘-5-甲氧基-2-(三氟甲基)吡啶
在-60℃向5-甲氧基-2-(三氟甲基)吡啶(1.0g，5.65mmol)的无水四氢呋喃(THF)(5mL)脱气溶液中滴加正丁基锂(4.5mL，11.29mmol，2.5M在己烷中)并在氮气气氛下在-60℃搅拌1小时。然后在-60℃向上述混合物中加入I2(2.8g，11.29mmol)的THF溶液。将所得溶液从-60℃至23℃搅拌2小时，加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(8mL)中，将其应用于80g C18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在35分钟内用5～90％乙腈水溶液洗脱，得到4-碘-5-甲氧基-2-(三氟甲基)吡啶(135.0mg，产率8％)，为黄色固体。MS(ESI)(C7H5F3INO)(M+1)+，计算值304；实测值，353.1。
步骤-3:5'-甲氧基-6-甲基-2'-(三氟甲基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯
在23℃向4-碘-5-甲氧基-2-(三氟甲基)吡啶(300.0mg，0.99mmol)的1,4-二噁烷(1.5mL)搅拌溶液中依次添加6-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)烟酸甲酯(412.0mg，1.49mmol)，水(0.3mL)和K2CO3(410.0mg，2.97mmol)。在23℃向上述溶液中加入PdCl2(dppf)(72.4mg，0.10mmol)，所得溶液在氮气下于80℃搅拌2小时。将所得混合物溶解在DMF(4mL)中，并过滤。将滤液应用到40g C18柱上，通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，在30分钟内用5～70％乙腈水溶液洗脱，得到5'-甲氧基-6-甲基-2'-(三氟甲基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(140.0mg，产率：43％)，为黄色油状物。MS(ESI)(C15H13F3N2O3)(M+1)+，计算值327.0；实测值，327.1。
步骤-4:5'-甲氧基-6-甲基-2'-(三氟甲基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸
在23℃向5'-甲氧基-6-甲基-2'-(三氟甲基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(140.0mg，0.43mmol)的甲醇(1mL)搅拌溶液加入NaOH(68.6mg，1.72mmol)和水(1.0mL)。将所得溶液在50℃搅拌1小时然后用水稀释。在真空下除去有机溶剂。水层用柠檬酸酸化至pH～6，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(1mL)中，将其应用于25g C18柱，并通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，在30分钟内用5～60％乙腈水溶液洗脱，得到5'-甲氧基-6-甲基-2'-(三氟甲基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(80.0mg，59％)，为白色固体。MS(ESI)(C14H11F3N2O3)(M+1)+，计算值313.0；实测值，313.1。
步骤-5:5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-2'-(三氟甲基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在23℃，在氩气气氛下向5'-甲氧基-6-甲基-2'-(三氟甲基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(47.0mg，0.15mmol)的乙腈(1mL)搅拌溶液中加入5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(21.7mg，0.17mmol)和1-甲基咪唑(61.5mg，0.75mmol)。在23℃和氮气下，向上述溶液中加入TCFH(0.15mmol)的乙腈(0.5mL)溶液。然后将所得混合物在23℃搅拌1小时。在真空下除去溶剂。将残余物溶解在DMF(2mL)中并通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：XBridge PrepOBD C18柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B:ACN；流速：60mL/min；梯度：在8分钟内25％B至35％B，在15分钟内35％B至40％B，40％B；波长：254nm；RT1(min):7.7)以得到5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-2'-(三氟甲基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(14.3mg，22％)，为白色固体。MS(ESI)(C17H14F3N5O3S)(M+1)+，计算值426；实测值，426.10。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.87(s，1H)，8.86(s，1H)，8.54(s，1H)，7.88(s，1H)，7.43(s，1H)，4.05(s，3H)，3.74(s，3H)，2.59(s，3H)。
实施例58和59
2'-氯-N-(5-(((1S,3R)-3-羟基环戊基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺和2'-氯-N-(5-(((1R,3S)-3-羟基环戊基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
将化合物的混合物2'-氯-N-(5-(((1s,3r)-3-羟基环戊基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-[4,4'-联吡啶]-3-甲酰胺(42.6mg)通过制备型手性HPLC分离，条件如下：(柱：CHIRALPAK IE，2*25cm，5μm；流动相A:Hex:DCM＝3:1(0.1％FA)--HPLC，流动相B:EtOH--HPLC；流速：15mL/min；梯度：50％B to 50％B in 34min；波长：220/254nm；RT1(min):18.26；RT2(min):26.54；样品溶剂：MeOH:DCM＝1:1；进样体积：1.5mL；运行次数：2)以得到2'-氯-N-(5-(((1S,3R)-3-羟基环戊基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(16.2mg，产率：38％)，为白色固体，其具有手性HPLC上的第一个峰，2'-氯-N-(5-(((1R,3S)-3-羟基环戊基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(16.6mg，产率：39％)，为白色固体，其具有手性HPLC上的第二个峰。绝对立体化学没有确定，是任意指定的。
2'-氯-N-(5-(((1S,3R)-3-羟基环戊基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺:MS(ESI)(C20H20ClN5O4S)(M+1)+，计算值462.1；实测值，462.1，1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.87(s，1H)，8.82(s，1H)，8.16(s，1H)，7.51(s，1H)，7.39(s，1H)，7.14(s，1H)，5.39–5.26(m，1H)，4.64–4.50(m，1H)，4.27–4.13(m，1H)，3.63(s，3H)，2.58(s，3H)，2.22–2.15(m，1H)，2.01–1.99(m，2H)，1.93–1.91(m，1H)，1.89–1.88(m，1H).
2'-氯-N-(5-(((1R,3S)-3-羟基环戊基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺:MS(ESI)(C20H20ClN5O4S)(M+1)+，计算值462.1；实测值，462.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.87(s，1H)，8.82(s，1H)，8.16(s，1H)，7.51(s，1H)，7.39(s，1H)，7.14(s，1H)，5.39–5.26(m，1H)，4.64–4.50(m，1H)，4.27–4.13(m，1H)，3.63(s，3H)，2.58(s，3H)，2.22–2.15(m，1H)，2.01–1.99(m，2H)，1.93–1.91(m,1H)，1.89–1.88(m，1H)。
实施例60
2'-氯-3'-氟-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤1 2-氯-3-氟-5-甲氧基吡啶
在20℃，在氮气气氛下向6-氯-5-氟吡啶-3-醇(3.0g，20.33mmol)的丙酮(15mL)溶液中加入MeI(2.5mL，40.7mmol)和K2CO3(5.6g，40.7mmol)。将所得溶液在氮气下于20℃搅拌18小时。用乙酸乙酯萃取反应混合物。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在二氯甲烷(5mL)中，并通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，将其应用于120.0g硅胶柱，在25分钟内用0～30％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到2-氯-3-氟-5-甲氧基吡啶(2.1g，产率：63％)，为无色油状物。MS(ESI)(C6H5ClFNO)(M+1)+，计算值162.0；实测值162.0。
步骤2 2-氯-3-氟-4-碘-5-甲氧基吡啶
在-60℃向2-氯-3-氟-5-甲氧基吡啶(2.1g，13.00mmol)的无水四氢呋喃(5mL)脱气溶液中滴加正丁基锂(5.8mL，14.30mmol，2.5M在己烷中)，并在氮气气氛下在-60℃搅拌1小时。然后在-60℃向上述混合物中加入碘(3.6g，14.30mmol)。将所得溶液在氮气下于20℃搅拌2小时。通过加入饱和硫代硫酸钠水溶液淬灭反应混合物，并用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在二氯甲烷(2mL)中，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于40g硅胶柱，在30分钟内用0～15％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到2-氯-3-氟-4-碘-5-甲氧基吡啶(3.5g，产率：89％)，为白色固体。MS(ESI)(C6H4ClFINO)(M+1)+，计算值287.9；实测值，288.0。
步骤3 2'-氯-3'-氟-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯
在25℃向6-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)烟酸甲酯(3.0g，10.83mmol)和2-氯-3-氟-4-碘-5-甲氧基吡啶(2.1g，7.31mmol)的1,4-二噁烷(20mL)脱气溶液中依次加入水(4mL)、碳酸钾(3.0g，21.71mmol)和(1,1'-双(二苯基膦)二茂铁)二氯化钯(II)(1.6g，2.19mmol)。将所得溶液在氮气下于80℃搅拌2小时。过滤悬浮液收集滤液并在真空下浓缩。将所得残余物溶解在二氯甲烷(10mL)中，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于120g硅胶柱，在30分钟内用0～50％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到4-(2-(二氟甲氧基)苯基)-6-甲基烟酸甲酯(2.2g，产率：87％)，为白色固体。MS(ESI)(C14H12ClFN2O3)(M+1)+，计算值311.1，实测值311.1。
步骤4 2'-氯-3'-氟-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸
在23℃向2'-氯-3'-氟-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(800.0mg，2.57mmol)的甲醇(5mL)搅拌溶液加入水(5mL)和氢氧化钠(412.0mg，10.30mmol)。将所得溶液在23℃搅拌1小时。在真空下除去有机溶剂。水层用饱和柠檬酸溶液酸化至pH～6。将所得混合物溶解在乙腈(3mL)中，将其应用于40.0g C18柱，并通过CombiFlash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用0～10％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-3'-氟-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(260.0mg，产率：32％)，为黄色油状物。MS(ESI)(C13H10ClFN2O3)(M+1)+，计算值297.0，实测值297.0。
步骤5 2'-氯-3'-氟-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
向2'-氯-3'-氟-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(100mg，0.34mmol)和5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(58.4mg，0.34mmol，实施例13，步骤1)的乙腈(1mL)搅拌溶液中加入1-甲基咪唑(110.7mg，1.35mmol)。然后在23℃将溶于乙腈(0.5mL)中的TCFH(95.0mg，0.34mmol)加入到上述混合物中，所得溶液在氮气下于23℃搅拌2小时。将混合物溶解在乙腈(2mL)中并通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：XBridge Prep OBDC18柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B:ACN；流速：60mL/min；梯度：8分钟内从20％B至30％B，30％B；波长：254nm；RT1(min):7.5)以得到2'-氯-3'-氟-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(56.0mg，产率：36％)，为白色固体。MS(ESI)(C18H15ClFN5O4S)(M+1)+，计算值452.1；实测值452.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.15(s，1H)，8.98(s，1H)，8.18(s，1H)，7.46(s，1H)，5.75–5.62(m，1H)，4.92–4.78(m，2H)，4.68–4.52(m，2H)，3.74(s，3H)，2.59(s，3H)。
实施例61
3'-氟-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤1 3'-氟-5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯
在23℃向2'-氯-3'-氟-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(800.0mg，2.57mmol)的1,4-二噁烷(8mL)搅拌溶液中依次加入三甲基环三硼氧烷(388.0mg，3.09mmol)、(1,1'-双(二苯基膦)二茂铁)二氯化钯(II)(188.0mg，0.26mmol)和碳酸钾(1.0g，7.72mmol)。将所得溶液在氮气下于100℃搅拌2小时。用乙酸乙酯稀释反应溶液，并过滤悬浮液。收集滤液并在真空下浓缩。将所得残余物溶解在二氯甲烷(3mL)中，将其应用于80.0C18柱并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～45％乙腈水溶液洗脱，得到3'-氟-5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(268.0mg，产率：32％)，为棕色油状物。MS(ESI)(C15H15FN2O3)(M+1)+，计算值291.1；实测值291.1。
步骤2 3'-氟-5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸
在23℃向3'-氟-5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(260.0mg，0.90mmol)的甲醇(1.5mL)的搅拌溶液中加入水(1.5mL)和氢氧化钠(143.0mg，3.58mmol)。将所得溶液在氮气下于23℃搅拌1小时。在真空下除去有机溶剂。水层用饱和柠檬酸溶液酸化至pH～6。将所得混合物溶解在乙腈(2mL)中，将其应用于20g C18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用0～10％乙腈水溶液洗脱，得到3'-氟-5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(168.0mg，产率：64％)，为白色固体。MS(ESI)(C14H13FN2O3)(M+1)+，计算值277.1；实测值，277.1。
步骤3 3'-氟-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
向3'-氟-5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(140.0mg，0.51mmol)和5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(67.0mg，0.51mmol)的乙腈(1mL)搅拌溶液加入1-甲基咪唑(166.5mg，2.03mmol)。然后在23℃将溶于乙腈(1mL)中的TCFH(142.0mg，0.51mmol)加入到上述混合物中，所得溶液在氮气下于23℃搅拌2小时。将所得残余物溶解在乙腈(5mL)中，将其应用于80gC18柱并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～43％乙腈水溶液洗脱，得到3'-氟-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(85.0mg，产率：43％)，为白色固体。MS(ESI)(C17H16FN5O3S)(M+1)+，计算值390.1；实测值390.2。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.98(s，1H)，8.91(s，1H)，8.17(s，1H)，7.39(s，1H)，4.07(s，3H)，3.68(s，3H)，2.59(s，3H)，2.43(s，3H)。
实施例62
2'-氯-5'-(二氟甲氧基)-6-甲基-N-(5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤1 2-氯-5-(二氟甲氧基)-4-碘吡啶
在25℃向6-氯-4-碘吡啶-3-醇(2.0g，7.83mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的搅拌溶液中添加2-氯-2,2-二氟乙酸钠(2.4g，15.68mmol)和Cs2CO3(3.3g，10.18mmol)。将所得溶液在80℃搅拌2小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DCM(4mL)中，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于80g硅胶柱，用0～21％乙酸乙酯的石油醚溶液在30分钟内洗脱，得到2-氯-5-(二氟甲氧基)-4-碘吡啶(1.9g，76％)，为白色固体。MS(ESI)(C6H3ClF2INO)(M+1)+，计算值305.0；实测值，305.7。
步骤2 2'-氯-5'-(二氟甲氧基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯
在23℃、氮气气氛下向6-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)烟酸甲酯(2.3g，8.44mmol)和2-氯-5-(二氟甲氧基)-4-碘吡啶(1.9g，6.22mmol)的1,4-二噁烷(9mL)和水(1.8mL)的脱气溶液中加入K2CO3(2.3g，16.93mmol)和(1,1′-双(二苯基膦)二茂铁)二氯化钯(II)，其与二氯甲烷(1.4g，1.69mmol)络合。将所得溶液在氮气氛下于80℃搅拌2小时。过滤悬浮液。滤液在真空下浓缩。将所得残余物溶解在DCM(10mL)中，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于120g硅胶柱，在30分钟内用0～45％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到2'-氯-5'-(二氟甲氧基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(1.7g，82％)，为黄色油状物。MS(ESI)(C14H11ClF2N2O3)(M+1)+，计算值329.0；实测值，329.10。
步骤3 2'-氯-5'-(二氟甲氧基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸
于25℃向2'-氯-5'-(二氟甲氧基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(1.7g，5.17mmol)的甲醇(5mL)搅拌溶液中加入NaOH(0.83g，20.69mmol)的H2O(1mL)溶液。将所得溶液在25℃搅拌1小时。在真空下除去有机溶剂。水层用柠檬酸酸化至pH～6。将所得混合物用DMF(2mL)稀释，将其应用于80g C18柱并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在35分钟内用5～60％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-5'-(二氟甲氧基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(120.0mg，6％)，为白色固体。MS(ESI)(C13H9ClF2N2O3)(M+1)+，计算值315.0；实测值，315.10。
步骤4 2'-氯-5'-(二氟甲氧基)-6-甲基-N-(5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在23℃向2'-氯-5'-(二氟甲氧基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(347.0mg，1.10mmol)的乙腈(4mL)搅拌溶液中加入5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(191.0mg，1.10mmol，实施例13，步骤1)和1-甲基咪唑(452.0mg，5.51mmol)。在23℃和氮气下，向上述溶液中加入TCFH(309.0mg，1.10mmol)的乙腈(2mL)溶液。然后将所得混合物在23℃搅拌1小时。反应混合物(2mL)通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：XBridge Prep OBDC18柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B:ACN；流速：60mL/min；梯度：在8分钟内21％B至31％B，在8.2分钟内31％B至95％B，在9.5分钟内95％B至95％B，在11分钟内95％B至5％B，5％B；波长：254nm；RT1(min):7；进样体积：0.5mL；运行次数：3)以得到2'-氯-5'-(二氟甲氧基)-6-甲基-N-(5-(氧杂环丁烷-3-基氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(52.9mg，10％)，为白色固体。MS(ESI)(C18H14ClF2N5O4S)(M+1)+，计算值470；实测值，470.15。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.19(s，1H)，8.96(s，1H)，8.34(s，1H)，7.73(s，1H)，7.46(s，1H),7.32–6.82(m，1H)，5.70–5.64(m，1H),4.92–4.88(m，2H)，4.66–4.62(m，2H)，2.68(s，3H)。
实施例63
2'-溴-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤1 2-溴-4-碘-5-甲氧基吡啶
在0℃向甲醇(380.0mg，11.84mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(15mL)搅拌溶液中加入NaH(230.0mg，5.68mmol)。将反应混合物在0℃搅拌0.5小时，然后在0℃将2-溴-5-氟-4-碘吡啶(1.4g，4.74mmol)加入到上述混合物中，然后将所得溶液在25℃搅拌1小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在二氯甲烷(5mL)中，并通过Combi Flash(Biotage IsoleraPrime)纯化，将其应用于80.0g硅胶柱，在25分钟内用0～20％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到2-溴-4-碘-5-甲氧基吡啶(1.2g，产率：54％)，为白色固体。MS(ESI)(C6H5BrINO)(M+1)+，计算值313.9；实测值313.9。
步骤2 2'-溴-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯
在23℃向2-溴-4-碘-5-甲氧基吡啶(200.0mg，0.64mmol)和6-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)烟酸甲酯(265.0mg，0.96mmol)的1,4-二噁烷(2mL)搅拌溶液中依次加入水(0.4mL)、碳酸钾(264.0mg，1.91)mmol)和1,1'-双(二苯基膦)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷络合物(52.0mg，0.06mmol)。将所得溶液在氮气下于80℃搅拌2小时。过滤悬浮液。收集滤液并在真空下浓缩。将所得残余物溶解在乙腈(3mL)中，将其应用于40.0g C18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～45％乙腈水溶液洗脱，得到2'-溴-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(80.0mg，产率：36％)，为无色油状物。MS(ESI)(C14H13BrN2O3)(M+1)+，计算值337.0，实测值337.0。
步骤3 2'-溴-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸
在25℃向2'-溴-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(175.0mg，0.52mmol)的甲醇(0.3mL)搅拌溶液中加入水(0.3mL)和氢氧化钠(83.0mg，2.08mmol)。在氮气下将所得溶液在25℃搅拌2小时。在真空下除去有机溶剂。水层用饱和柠檬酸溶液酸化至pH～6，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩以得到2'-溴-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(100.0mg，产率：58％)，为黄色固体。MS(ESI)(C13H11BrN2O3)(M+1)+，计算值323.0，实测值323.1。
步骤4 2'-溴-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
向2'-溴-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(100.0mg，0.31mmol)和5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(40.0mg，0.31mmol)的乙腈(1mL)搅拌溶液中加入1-甲基咪唑(0.1mL，1.24mmol)。然后在23℃将乙腈(1mL)中的TCFH(87.0mg，0.31mmol)加入到上述混合物中，所得溶液在氮气下于23℃搅拌2小时。用DMF(2mL)稀释反应混合物并通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：XBridge Prep OBD C18柱，19*250mm，5μm；流动相A：水(10mmol/LNH4HCO3)，流动相B:MeOH--HPLC；流速：25mL/min；梯度：10分钟内50％B至55％B，10.2分钟内55％B至95％B，12分钟内95％B至95％B，12.2分钟内95％B至5％B，14分钟内5％B至5％B；波长：254nm；RT1(min):9；进样体积：0.6mL；运行次数：4)以得到2'-溴-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(45.0mg，33％产率)，为白色固体。MS(ESI)(C16H14BrN5O3S)(M+1)+，计算值436.0；实测值436.2。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.90(s，1H)，8.82(s，1H)，8.17(s，1H)，7.62(s，1H)，7.41(s，1H)，4.07(s，3H)，3.62(s，3H)，2.59(s，3H)。
实施例64
2'-氯-6-(羟甲基)-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤1 2'-氯-6-(羟甲基)-5'-甲氧基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸
在18℃向2'-氯-6-(羟甲基)-5'-甲氧基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸乙酯(300.0mg，0.93mmol)的四氢呋喃(1.5mL)溶液中加入LiOH(66.8mg，2.79mmol)和水(0.5mL)。将所得溶液在50℃搅拌16小时。用水稀释反应混合物，用柠檬酸酸化至pH 4～5，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩以得到2'-氯-6-(羟甲基)-5'-甲氧基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(120.0mg，39％)，为棕色固体。MS(ESI)(C13H11ClN2O4)(M+1)+，计算值295.0；实测值295.0。
步骤2 2'-氯-6-(羟甲基)-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
向2'-氯-6-(羟甲基)-5'-甲氧基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(250.0mg，0.76mmol)在乙腈(3mL)中的混合物添加5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(120.0mg，0.91mmol)和1-甲基-1H-咪唑(188.0mg，2.21mmol)。在氮气下向其中滴加TCFH(321.0mg，1.14mmol)的乙腈(1mL)溶液。将所得溶液在18℃搅拌2小时在真空下除去溶剂。将残余物溶解在DMF(3mL)中并通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：Xselect CSH C18 OBD柱30*150mm 5μm；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B:ACN；流速：60mL/min；梯度：8分钟内从20％B至30％B，8.2分钟内从30％B至95％B，9.7分钟内从95％B至95％B，11分钟内从95％B至5％B，5％B；波长：220nm；RT1(min):6.68；进样体积：0.8mL；运行次数：3)以得到2'-氯-6-(羟甲基)-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(75.2mg，24％)，为白色固体MS(ESI)(C16H14ClN5O4S)(M+1)+，计算值408.0；实测值408.0。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.94(s，1H)，8.87(s，1H)，8.19(s，1H)，7.51(s，2H)，5.59(t，J＝5.6Hz，1H)，4.67(d，J＝5.6Hz，2H)，4.08(s，3H)，3.64(s，3H)。
实施例65
2'-氯-5'-甲氧基-5-((5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)氨甲酰基)-2-甲基-(4,4'-联吡啶)1-氧化物
步骤1 4-氯-6-甲基烟酸甲酯
在20℃向4-氯-6-甲基烟酸(10.0g，58.30mmol)和碳酸钾(24.1g，175.00mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(DMF)(150mL)中的搅拌溶液中添加碘甲烷(5.47mL，87.00mmol)。将所得溶液在20℃搅拌16小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。所得残余物通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，将其应用于120g硅胶柱，在30分钟内用0～60％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到4-氯-6-甲基烟酸甲酯(8.5g，78％)，为黄色油状物。MS(ESI)(C8H8ClNO2)(M+1)+，计算值186.0，实测值186.0。
步骤2 4-氯-5-(甲氧羰基)-2-甲基吡啶1-氧化物
向4-氯-6-甲基烟酸甲酯(1.0g，5.39mmol)在二氯甲烷(15mL)中的搅拌溶液中添加mCPBA(1.3g，6.47mmol)。混合物在25℃搅拌2小时。通过加入水淬灭反应混合物，并用二氯甲烷萃取。用饱和硫代硫酸钠溶液、饱和碳酸钠溶液和盐水洗涤合并的有机层。用无水硫酸钠干燥合并的有机层，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在ACN(6mL)中，将其应用于80gC18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在22分钟内用5～18％乙腈水溶液洗脱，得到4-氯-5-(甲氧羰基)-2-甲基吡啶1-氧化物(870.0mg，78％)，为白色固体。MS(ESI)(C8H8ClNO3)(M+1)+，计算值202.0，实测值202.0。
步骤3 2'-氯-5'-甲氧基-5-(甲氧羰基)-2-甲基-(4,4'-联吡啶)1-氧化物
在25℃，在氮气氛下向4-氯-5-(甲氧羰基)-2-甲基吡啶1-氧化物(600.0mg，2.98mmol)于1,4-二噁烷(5mL)和水(1.7mL)中的搅拌溶液添加(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)硼酸(837.0mg，4.46mmol)，K2CO3(1234.0mg，8.93mmol)和(1,1'-双(二叔丁基膦)二茂铁)二氯(194.0mg，0.29mmol)。将反应混合物在氮气气氛下在80℃搅拌2小时，然后过滤。收集滤液并在真空下浓缩。将所得残余物溶解在DMF(5mL)中，应用到80g C18柱上，通过CombiFlash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～28％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-5'-甲氧基-5-(甲氧羰基)-2-甲基-(4,4'-联吡啶)1-氧化物(500.0mg，53％)，为黄色固体。MS(ESI)(C14H13ClN2O4)(M+1)+，计算值309.0，实测值309.0。
步骤4 5-羧基-2'-氯-5'-甲氧基-2-甲基-(4,4'-联吡啶)1-氧化物
于25℃向2'-氯-5'-甲氧基-5-(甲氧羰基)-2-甲基-(4,4'-联吡啶)1-氧化物(250.0mg，0.81mmol)在甲醇(1.5mL)和水(1.5mL)的搅拌溶液中加入NaOH(130.0mg，3.24mmol)。将所得溶液在25℃搅拌2小时。用柠檬酸将混合物酸化至pH～6，应用于40g C18柱并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在20分钟内用5～34％乙腈水溶液洗脱，得到5-羧基-2'-氯-5'-甲氧基-2-甲基-(4,4'-联吡啶)1-氧化物(220.0mg，90％)，为白色固体。MS(ESI)(C13H11ClN2O4)(M+1)+，计算值295.0，实测值295.0。
步骤5 2'-氯-5'-甲氧基-5-((5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)氨甲酰基)-2-甲基-(4,4'-联吡啶)1-氧化物
向5-羧基-2'-氯-5'-甲氧基-2-甲基-(4,4'-联吡啶)1-氧化物(180.0mg，0.61mmol)和5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(80.0mg，0.61mmol)的乙腈(3mL)搅拌溶液中加入1-甲基-1H-咪唑(251.0mg，3.05mmol)。在25℃向其中加入TCFH(172.0mg，0.61mmol)的乙腈(1mL)溶液，混合物在25℃搅拌3小时。将所得混合物(5mL)应用到80g C18柱上，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～51％乙腈水溶液洗脱，得到灰白色固体(85％)，并进一步通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：Xselect CSH F-苯基OBD柱，19*250mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B:MeOH--HPLC；流速：25mL/min；梯度：10分钟内从20％B至50％B，50％B；波长：254nm；RT1(min):10)以得到2'-氯-5'-甲氧基-5-((5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)氨甲酰基)-2-甲基-(4,4'-联吡啶)1-氧化物(80.0mg，32％)，为白色固体。MS(ESI)(C16H14ClN5O4S)(M+1)+，计算值408.0，实测值408.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.03(s，1H)，8.63(s，1H)，8.15(s，1H)，7.69(s，1H)，7.54(s，1H)，4.07(s，3H)，3.62(s，3H)，2.44(s，3H)。
实施例66
4-(5-氯-2-(羟甲基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
步骤1 4-氯-6-甲基烟酸叔丁酯
在0℃向4-氯-6-甲基烟酸(5.0g，29.10mmol)的二氯甲烷(50mL)搅拌溶液中加入二碳酸二叔丁酯(9.5g，43.70mmol)和DMAP(356.1mg，2.91mmol)。将所得溶液在23℃搅拌16小时。在真空下除去有机溶剂。将所得残余物溶解在DCM(10mL)中，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于120g硅胶柱，在35分钟内用0～30％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到4-氯-6-甲基烟酸叔丁酯(3.0g，45％)，为无色油状物。MS(ESI)(C11H14ClNO2)(M+1)+，计算值228.0；实测值228.1。
步骤2 6-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)烟酸叔丁酯
在23℃向4-氯-6-甲基烟酸叔丁酯(3.0g，13.18mmol)的1,4-二噁烷(50mL)搅拌溶液中添加双(频哪醇)二硼(16.7g，65.90mmol)，AcOK(2.6g，26.40mmol)和Pd(dppf)Cl2(1.1g，1.32mmol)。所得溶液在氮气下于100℃搅拌16小时。用水稀释反应混合物。水层用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。所得残余物通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于120g硅胶柱，在35分钟内用0～30％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到6-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)烟酸叔丁酯(4.6g，98％)，为无色油状物。MS(ESI)(C17H26BNO4)(M+1)+，计算值320.2；实测值，320.2。
步骤3 4-(5-氯-2-(甲氧羰基)苯基)-6-甲基烟酸叔丁酯
在23℃向6-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)烟酸叔丁酯(2.0g，6.27mmol)的1,4-二噁烷(30mL)搅拌溶液中加入4-氯-2-碘苯甲酸甲酯(1.8g，6.27mmol)，K2CO3(2.6g，18.80mmol)和水(3mL)。在氮气下于23℃向上述溶液中加入Pd(dppf)Cl2(512.2mg，0.63mmol)。将所得混合物在氮气下于80℃搅拌2小时。用水稀释反应混合物。水层用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DCM(5mL)中，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于80g硅胶柱，在25分钟内用0～40％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到4-(5-氯-2-(甲氧羰基)苯基)-6-甲基烟酸叔丁酯(2.0g，86％)，为无色油状物MS(ESI)(C19H20ClNO4)(M+1)+，计算值362.1，实测值362.2。
步骤4 4-(5-氯-2-(甲氧羰基)苯基)-6-甲基烟酸
在23℃向4-(5-氯-2-(甲氧羰基)苯基)-6-甲基烟酸叔丁酯(500.0mg，1.38mmol)的二氯甲烷(6mL)溶液中添加TFA(3mL)。将所得溶液在23℃搅拌16小时。在真空下除去有机溶剂，得到4-(5-氯-2-(甲氧羰基)苯基)-6-甲基烟酸TFA盐(425.0mg，98％)，为黄色油状物。MS(ESI)(C15H12ClNO4)(M+1)+，计算值306.1，实测值306.3。
步骤5 4-氯-2-(5-((5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)氨甲酰基)-2-甲基吡啶-4-基)苯甲酸甲酯
向4-(5-氯-2-(甲氧羰基)苯基)-6-甲基烟酸(420.0mg，1.37mmol)的乙腈(5mL)搅拌溶液中加入5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(180.0mg，1.37mmol)和1-甲基咪唑(564.0mg，6.87mmol)。向上述溶液中加入TCFH(386.0mg，1.37mmol)的乙腈(3mL)溶液。将所得混合物在23℃搅拌2小时。过滤悬浮液。收集滤饼，用乙腈洗涤，真空干燥，得到4-氯-2-(5-((5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)氨甲酰基)-2-甲基吡啶-4-基)苯甲酸甲酯(450.0mg，76％)，为白色固体。MS(ESI)(C18H15ClN4O4S)(M+1)+，计算值419.0，实测值419.0.
步骤6 4-(5-氯-2-(羟甲基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
在0℃向4-氯-2-(5-((5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)氨甲酰基)-2-甲基吡啶-4-基)苯甲酸甲酯(70.0mg，0.17mmol)的四氢呋喃(1mL)搅拌溶液中分批加入氢化铝锂(31.1mg，0.82mmol)。将所得溶液在0℃搅拌2小时。通过加入水将反应混合物淬灭并用柠檬酸酸化至pH～5，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(2mL)中，将其应用于20g C18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在25分钟内用5～50％乙腈水溶液洗脱，得到4-(5-氯-2-(羟甲基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(26.6mg，40％)，为白色固体。MS(ESI)(C17H15ClN4O3S)(M+1)+，计算值391.1；实测值391.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.79(s，1H)，8.82(s，1H)，7.54(d，J＝8.4Hz，1H)，7.46(dd，J＝8.4，2.4Hz，1H)，7.30(s，1H)，7.15(d，J＝2.4Hz，1H)，5.37(br，1H)，4.23(s，2H)，4.05(s，3H)，2.58(s，3H)。
实施例67
N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-4-(5-甲氧基-1H-吲唑-6-基)-6-甲基烟酰胺
步骤1 4-(5-甲氧基-1H-吲唑-6-基)-6-甲基烟酸甲酯
在20℃向6-溴-5-甲氧基-1H-吲唑(500.0mg，2.20mmol)的1,4-二噁烷(5mL)搅拌溶液中添加6-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)烟酸甲酯(915.1mg，3.30mmol)。在20℃向上述溶液中依次加入K2CO3(913.2mg，6.61mmol)，水(1mL)和PdCl2(dtbpf)(143.2mg，0.22mmol)。然后将所得混合物在氮气下于80℃搅拌2小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DCM(5mL)中，并通过Combi Flash(Biotage IsoleraPrime)纯化，将其应用于40g硅胶柱，在25分钟内用0～20％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到4-(5-甲氧基-1H-吲唑-6-基)-6-甲基烟酸甲酯(341.0mg，51％)，为黄色固体。MS(ESI)(C16H15N3O3)(M+1)+，计算值298.1。实测值:298.0。
步骤2 4-(5-甲氧基-1H-吲唑-6-基)-6-甲基烟酸
在20℃向4-(5-甲氧基-1H-吲唑-6-基)-6-甲基烟酸甲酯(300.0mg，1.00mmol)的四氢呋喃(THF)(1.5mL)搅拌溶液中加入水(1.5mL))和LiOH(48.3mg，2.01mmol)。将所得溶液在20℃搅拌6小时。用水稀释所述混合物(5mL)。水层用柠檬酸酸化至pH～3。过滤悬浮液。用水洗涤滤饼，真空干燥，得到4-(5-甲氧基-1H-吲唑-6-基)-6-甲基烟酸(54.0mg，粗品)，为白色固体。MS(ESI)(C15H13N3O3)(M+1)+，计算值284.1。实测值:284.0。
步骤3N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-4-(5-甲氧基-1H-吲唑-6-基)-6-甲基烟酰胺
在20℃向4-(5-甲氧基-1H-吲唑-6-基)-6-甲基烟酸(54.0mg，0.19mmol)的乙腈(2mL)搅拌溶液中加入5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(25.0mg，0.19mmol)和1-甲基-1H-咪唑(78.0mg，0.95mmol)。在20℃和氮气下，向上述溶液中加入TCFH(53.6mg，0.19mmol)的乙腈(2mL)溶液。然后将所得混合物在氮气下于20℃搅拌2小时。将混合物用乙腈(2mL)稀释，将其应用到20g C18柱上，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在25分钟内用5～100％乙腈水溶液洗脱，得到N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-4-(5-甲氧基-1H-吲唑-6-基)-6-甲基烟酰胺(68.6mg，88％)，为黄色固体。MS(ESI)(C18H16N6O3S)(M+1)+，计算值397.1实测值:397.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.11(s，1H)，12.70(s，1H)，8.73(s，1H)，8.00(s，1H)，7.50–7.45(m，2H)，7.18(s，1H)，4.06(s，3H)，3.49(s，3H)2.62(s，3H)。
实施例68和69
(R)-2'-(1-羟乙基)-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺和(S)-2'-(1-羟乙基)-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤1 2'-乙酰基-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯
在25℃向2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(1.5g，5.13mmol)的甲苯(15mL)搅拌溶液中加入双(三苯基膦)氯化钯(II)(3.6g，5.12mmol)和三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(3.7g，10.26mmol)。将所得溶液在100℃搅拌4小时。在真空下除去有机溶剂。在25℃将残余物用甲醇(10mL)和盐酸(2mL，浓)溶解。将所得混合物在25℃搅拌1小时。残余物用水稀释。水层用饱和NaHCO3水溶液碱化至pH 7～8，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DCM(4mL)中，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于40g硅胶柱，在30分钟内用0～9％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到2'-乙酰基-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(680.0mg，58％)，为白色固体。MS(ESI)(C16H16N2O4)(M+1)+，计算值301.1；实测值，301.1
步骤2 2'-乙酰基-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸
在25℃向2'-乙酰基-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(650.0mg，2.16mmol)的甲醇(3mL)搅拌溶液加入NaOH(325.0mg，8.12mmol)和水(3mL)。将所得溶液在25℃搅拌16小时，然后用水稀释。在真空下除去有机溶剂。水层用柠檬酸酸化至pH 5～6，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩，得到2'-乙酰基-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(550.0mg，粗品)，为白色固体。MS(ESI)(C15H14N2O4)(M+1)+，计算值287.1；实测值，287.1
步骤3 2'-乙酰基-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在25℃向2'-乙酰基-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(530.0mg，1.82mmol)和5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(241.0mg，1.82mmol)的乙腈(4mL)的搅拌溶液中加入1-甲基-1H-咪唑(759.0mg，9.14mmol)。在25℃、氮气下向上述混合物中加入N-(氯(二甲基氨基)亚甲基)-N-甲基甲铵六氟磷酸盐(V)(518.0mg，1.82mmol)的乙腈(2mL)溶液。所得溶液25℃搅拌2小时。在25℃向其中加入NaOH(0.3mL，1N)。将所得混合物在25℃搅拌10分钟，然后用柠檬酸酸化至pH 5～6。真空下除去挥发物。将所得残余物溶解在DMF(3mL)中，将其应用到40g C18柱上，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～40％乙腈水溶液洗脱，得到2'-乙酰基-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(450.0mg，40％)，为白色固体.MS(ESI)(C18H17N5O4S)(M+1)+，计算值400.1；实测值，400.1
步骤4 2'-(1-羟乙基)-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在25℃向2'-乙酰基-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(450.0mg，1.12mmol)的甲醇(4mL)搅拌溶液中加入NaBH4(85.0mg，2.25mmol)。将所得溶液在0℃搅拌1小时。将所得混合物应用到40g C18柱上，通过CombiFlash(Biotage Isolera Prime)纯化，在45分钟内用5～20％乙腈水溶液洗脱，得到2'-(1-羟乙基)-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(150.0mg，32％)，为白色固体。MS(ESI)(C18H19N5O4S)(M+1)+，计算值402.1；实测值，402.2
步骤5(R)-2'-(1-羟乙基)-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺和(S)-2'-(1-羟乙基)-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
外消旋化合物(150.0mg)通过制备手性HPLC分离，条件如下：(柱：CHIRALPAK IE，2*25cm，5μm；流动相A:MtBE--HPLC，流动相B:MeOH--HPLC；流速：16mL/min；梯度：23分钟内从10％B至10％B；波长：220/254nm；RT1(min):13.43；RT2(min):19.75；样品溶剂：MeOH:DCM＝1:1；进样体积：1.1mL；运行次数：3)，得到(R)-2'-(1-羟乙基)-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(56.6mg，37％)，为白色固体，其在手性高效液相色谱上具有较短的保留时间，(S)-2'-(1-羟乙基)-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(58.0mg，38％)，为白色固体，其在手性高效液相色谱上具有较长的保留时间。绝对立体化学没有确定，是任意指定的。
(R)-2'-(1-羟乙基)-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺:MS(ESI)(C18H19N5O4S)(M+1)+，计算值402.1；实测值，402.2。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.89(s，1H)，8.76(s，1H)，8.23(s，1H)，7.45(s，1H)，7.36(s，1H)，5.35(d，J＝4.8Hz，1H)，4.81–4.71(m，1H)，4.08(s，3H)，3.62(s，3H)，2.60(s，3H)，1.40(d，J＝6.4Hz，3H)。
(S)-2'-(1-羟乙基)-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺:MS(ESI)(C18H19N5O4S)(M+1)+，计算值402.1；实测值，402.2。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.88(s，1H)，8.76(s，1H)，8.23(s，1H)，7.45(s，1H)，7.36(s，1H)，5.34(d，J＝4.8Hz，1H)，4.81–4.70(m，1H)，4.08(s，3H)，3.62(s，3H)，2.60(s，3H)，1.40(d，J＝6.4Hz，3H)。
实施例70
2'-(二氟甲基)-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤1 2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯
在0℃向2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(3.0g，10.76mmol)的二氯甲烷(30mL)搅拌溶液中依次加入甲醇(3mL)和(三甲基甲硅烷基)重氮甲烷(2.5g，21.54mmol)。将所得溶液在氮气下室温搅拌16小时。在真空下除去有机溶剂。所得残余物通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，其应用于80g硅胶柱，并在40分钟内用0～65％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(2.5g，78％)，为白色固体。MS(ESI)(C14H13ClN2O3)(M+1)+，计算值293.1；实测值293.2。
步骤2 5'-甲氧基-6-甲基-2'-乙烯基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯
在23℃向2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(500.0mg，1.71mmol)的1,4-二噁烷(4.5mL)搅拌溶液中依次加入水(1.5mL)、三氟(乙烯基)-14-硼烷，钾盐(343.0mg，2.56mmol)，1,1'-双(二苯基膦)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷络合物(139.0mg，0.17mmol)和K2CO3(708.0mg，5.12mmol)。将所得溶液在氮气下于80℃搅拌2小时。过滤悬浮液。收集滤液并在真空下浓缩。将所得残余物溶解在乙腈(4mL)中，将其应用到40gC18柱上，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～35％乙腈水溶液洗脱，得到5'-甲氧基-6-甲基-2'-乙烯基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(420.0mg，85％)，为白色固体。MS(ESI)(C16H16N2O3)(M+1)+，计算值285.1；实测值，285.3。
步骤3 2'-甲酰基-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯
在20℃向5'-甲氧基-6-甲基-2'-乙烯基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(370.0mg，1.30mmol)的四氢呋喃(10mL)搅拌溶液中依次加入水(10mL)、高碘酸钠(1.1g，5.21mmol)和四氧化锇(0.04mL，0.13mmol)。将所得溶液在氮气下于20℃搅拌1小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在二氯甲烷(3mL)中，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于40g硅胶柱，在30分钟内用0～71％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到2'-甲酰基-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(255.0mg，67％)，为白色固体。MS(ESI)(C15H14N2O4)(M+1)+，计算值287.1，实测值287.2。
步骤4 2'-(二氟甲基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯
在0℃向2'-甲酰基-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(230.0mg，0.80mmol)的二氯甲烷(2mL)搅拌溶液中加入DAST(0.2mL，1.61mmol)。将所得溶液在氮气下于20℃搅拌48小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用硫酸钠干燥并真空浓缩。将所得残余物溶解在乙腈(3mL)中，将其应用到40g C18柱上，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～40％乙腈水溶液洗脱，得到2'-(二氟甲基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(160.0mg，63％)，为棕色油状物。MS(ESI)(C15H14F2N2O3)(M+1)+，计算值309.1，实测值309.2。
步骤5 2'-(二氟甲基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸
在23℃向2'-(二氟甲基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(160.0mg，0.52mmol)的四氢呋喃(1.5mL)搅拌溶液中依次加入水(0.5mL)和氢氧化锂(49.7mg，2.08mmol)。将所得溶液在氮气下于23℃搅拌2小时。在真空下除去有机溶剂。水层用柠檬酸溶液酸化至pH 5～6，并用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩，得到2'-(二氟甲基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(150.0mg，93％)，为黄色固体。MS(ESI)(C14H12F2N2O3)(M+1)+，计算值295.1，实测值295.2。
步骤6 2'-(二氟甲基)-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
向2'-(二氟甲基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(200.0mg，0.68mmol)和5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(89.0mg，0.68mmol)的乙腈(2mL)的搅拌溶液中加入1-甲基咪唑(0.2mL，2.72mmol)。然后在23℃将TCFH(191.0mg，0.68mmol)的乙腈(2mL)溶液加入到上述混合物中，所得溶液在氮气下于23℃搅拌2小时。所述反应混合物(2mL)通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：XBridge Prep苯基OBD柱，19*250mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B:ACN；流速：25mL/min；梯度：在8分钟内27％B至27％,在9.2分钟内27％B至95％B，在10.5分钟内95％B至95％B，在11分钟内95％B至5％B，5％B；波长：254nm；RT1(min):7；进样体积：05mL；运行次数：4)，得到2'-(二氟甲基)-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(78.5mg，27％)，为白色固体。MS(ESI)(C17H15F2N5O3S)(M+1)+，计算值408.1；实测值408.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.88(s，1H)，8.44(s，1H)，7.61(s，1H)，7.32(s，1H)，7.15–6.82(m，1H)，4.02(s，3H)，3.70(s，3H)，2.57(s，3H)。
实施例71
N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-4-(5-甲氧基-1H-苯并(d)咪唑-6-基)-6-甲基烟酰胺
步骤1 4-(5-甲氧基-1H-苯并(d)咪唑-6-基)-6-甲基烟酸甲酯
在23℃向6-溴-5-甲氧基-1H-苯并(d)咪唑(500.0mg，2.20mmol)的1,4-二噁烷(5mL)搅拌溶液中添加6-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)烟酸甲酯(1.2g，4.40mmol)。在23℃向上述溶液中加入K2CO3(913.0mg，6.61mmol)的水(1mL)溶液和Pd(dtbpf)Cl2(143.2mg，0.22mmol)，然后将所得混合物在氮气下于80℃搅拌2小时。用水淬灭所述反应混合物，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DCM(3mL)中，并通过Combi Flash(Biotage IsoleraPrime)纯化，将其应用于40g硅胶柱，在35分钟内用0～20％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到4-(5-甲氧基-1H-苯并(d)咪唑-6-基)-6-甲基烟酸甲酯(142.0mg，20％)，为黄色油状物。MS(ESI)(C16H15N3O3)(M+1)+，计算值298.1；实测值298.1。
步骤2:4-(5-甲氧基-1H-苯并(d)咪唑-6-基)-6-甲基烟酸
在23℃向4-(5-甲氧基-1H-苯并(d)咪唑-6-基)-6-甲基烟酸甲酯(140.0mg，0.47mmol)在THF(1.5mL)和水(1.5mL)的搅拌溶液加入LiOH(22.6mg，0.94mmol)。将所得溶液在50℃搅拌2小时。用柠檬酸将反应混合物酸化至pH～5，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩，得到4-(5-甲氧基-1H-苯并(d)咪唑-6-基)-6-甲基烟酸(60.0mg，粗品)，为白色固体。MS(ESI)(C15H13N3O3)(M+1)+,284.1；实测值，284.1。
步骤3N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-4-(5-甲氧基-1H-苯并(d)咪唑-6-基)-6-甲基烟酰胺
向4-(5-甲氧基-1H-苯并(d)咪唑-6-基)-6-甲基烟酸(50.0mg，0.17mmol)，5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(23.2mg，0.17mmol)和1-甲基咪唑(72.5mg，0.88mmol)的乙腈(1mL)搅拌溶液。向其中加入TCFH(49.6mg，0.17mmol)的乙腈(1mL)溶液。将所得混合物在23℃搅拌2小时。将混合物溶解在DMF(2mL)中，并通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：X BridgePrep苯基OBD柱，19*250mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B:MeOH--HPLC；流速：25mL/min；梯度：在10分钟内48％B至48％B，在11.2分钟内48％B至95％B，在12.5分钟内95％B至95％B，在13分钟内95％B至5％B，5％B；波长：254nm；RT1(min):7)，得到N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-4-(5-甲氧基-1H-苯并(d)咪唑-6-基)-6-甲基烟酰胺(14.4mg，20％)，为白色固体。MS(ESI)(C18H16N6O3S)(M+1)+，计算值397.1，实测值397.2。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.48(br，2H)，8.66(s，1H)，8.16(s，1H)，7.53(s，1H)，7.33(s，1H)，7.06(s，1H)，4.04(s，3H)，3.53(s，3H)，2.57(s，3H)。
实施例72
2'-氯-5'-(羟甲基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤1 5'-溴-2'-氯-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯
在20℃，氮气下向5-溴-2-氯-4-碘吡啶(1.0g，3.24mmol)和6-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)烟酸甲酯(2.7g，9.71mmol)的1,4-二噁烷(5mL)和水(1mL)溶液加入K3PO4(0.9g，6.47mmol)和Pd(PPh3)2Cl2(0.2g，0.32mmol)。将所得溶液在氮气下于80℃搅拌2小时。用乙酸乙酯萃取反应混合物。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DCM(2mL)中，并通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，将其应用于40g硅胶柱，在35分钟内用0～50％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到5'-溴-2'-氯-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(770.0mg，51％)，为黄色固体。MS(ESI)(C13H10BrClN2O2)(M+1)+，计算值341.0，实测值341.0。
步骤2:2'-氯-6-甲基-5'-乙烯基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯
在20℃，氮气下向5'-溴-2'-氯-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(770.0mg，2.25mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷(347.0mg，2.25mmol)的甲苯(4mL)和水(1mL)溶液中加入磷酸钾(393.0mg，2.25mmol)和Pd(dtbpf)Cl2(1039.0mg，2.25mmol)。将所得溶液在氮气下于100℃搅拌2小时。用乙酸乙酯萃取反应混合物。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(2mL)中，将其应用于40g C18柱并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在25分钟内用5～75％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-6-甲基-5'-乙烯基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(240.0mg，33％)，为黄色油状物。MS(ESI)(C15H13ClN2O2)(M+1)+，计算值289.1；实测值289.1。
步骤3 2'-氯-6-甲基-5'-乙烯基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸
在0℃向2'-氯-6-甲基-5'-乙烯基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(30.0mg，0.11mmol)的THF(1mL)搅拌溶液中添加氢氧化锂(3.0mg，0.11mmol)的水(0.2mL)溶液。将所得溶液在20℃搅拌1小时。在真空下除去有机溶剂。水层用柠檬酸酸化至pH～5，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩，得到2'-氯-6-甲基-5'-乙烯基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(40.0mg，粗品)，为黄色固体。MS(ESI)(C14H11ClN2O2)(M+1)+，计算值275.1；实测值275.1。
步骤4 2'-氯-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-5'-乙烯基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在20℃，氮气下向2'-氯-6-甲基-5'-乙烯基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(40.0mg，0.14mmol)的乙腈(0.5mL)溶液中添加5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(19.1mg，0.14mmol)和1-甲基咪唑(59.6mg，0.73mmol)。在20℃和氮气下，向上述溶液中加入TCFH(40.8mg，0.14mmol)的乙腈(0.5mL)溶液。然后将所得混合物在20℃搅拌1小时。过滤悬浮液。收集滤饼并在真空下干燥，得到2'-氯-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-5'-乙烯基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(18.0mg，32％)，为白色固体。MS(ESI)(C17H14ClN5O2S)(M+1)+，计算值388.1；实测值388.1。
步骤5 2'-氯-5'-甲酰基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在20℃，氮气下向2'-氯-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-5'-乙烯基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(18.0mg，0.04mmol)的四氢呋喃(THF)(1mL)和水(0.3mL)的溶液中加入四氧化锇(11.2mg，0.04mmol)和高碘酸钠(9.9mg，0.04mmol)。将所得溶液在20℃搅拌2小时。用乙酸乙酯萃取反应混合物。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩，得到2'-氯-5'-甲酰基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(34.0mg，粗品)，为黄色固体。MS(ESI)(C16H12ClN5O5S)(M+1)+，计算值390.0；实测值390.0.
步骤6 2'-氯-5'-(羟甲基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在0℃向2'-氯-5'-甲酰基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(34.0mg，0.08mmol)的甲醇(1mL)搅拌溶液中加入硼氢化钠(6.6mg，0.17mmol)。将所得溶液在0℃搅拌1小时。将所得混合物应用到20g C18柱上，通过CombiFlash(Biotage Isolera Prime)纯化，在35分钟内用5～55％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-5'-(羟甲基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(8.3mg，23％)，为白色固体。MS(ESI)(C16H14ClN5O3S)(M+1)+，计算值392.1；实测值392.1。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.05(s，1H)，8.40(s，1H)，7.15(s，1H)，7.00(s，1H)，5.53(s，1H)，4.21(s，2H)，3.89(s，3H)，2.50(s，3H)。
实施例73
2'-氨基-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤1 2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯
于25℃，在氮气气氛下向2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(2.0g，7.18mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(20mL)的搅拌溶液中加入K2CO3(1.9g，14.35mmol)和MeI(1.5g，10.76mmol)。将反应混合物在氮气氛下于25℃搅拌16小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。残余物用DMF(8mL)溶解，用Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在40min内用5～48％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(1.4g，67％)，为白色固体。MS(ESI)(C14H13ClN2O3)(M+1)+，计算值293.0，实测值293.1。
步骤2 2'-((二苯基亚甲基)氨基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯
向2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(500.0mg，1.70mmol)的1,4-二噁烷(6mL)搅拌溶液中加入二苯基甲胺(464.0mg，2.56mmol)，Cs2CO3(1670.0mg，5.12mmol)，Pd(OAc)2(38.3mg，0.17mmol)和BINAP(213.0mg，0.34mmol)。混合物在80℃和氮气气氛下搅拌16小时。过滤混合物。收集滤液并在真空下浓缩。将所得残余物溶解在DMF(5mL)中，应用到80g C18柱上，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～51％乙腈水溶液洗脱，得到2'-((二苯基亚甲基)氨基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(600.0mg，79％)，为黄色固体。MS(ESI)(C27H23N3O3)(M+1)+，计算值438.1，实测值438.1。
步骤3:2'-((二苯基亚甲基)氨基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸
向2'-((二苯基亚甲基)氨基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(560.0mg，1.28mmol)的甲醇(3mL)和水(3mL)搅拌溶液中加入NaOH(205.0mg，5.12mmol)。将所得溶液在60℃搅拌2小时。在真空下除去有机溶剂。水层用柠檬酸酸化至pH～6，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩，得到2'-((二苯基亚甲基)氨基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(500.0mg，粗品)，为黄色固体。MS(ESI)(C26H21N3O3)(M+1)+，计算值424.1，实测值424.2。
步骤4 2'-((二苯基亚甲基)氨基)-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在25℃，氮气下向2'-((二苯基亚甲基)氨基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(480.0mg，1.13mmol)的乙腈(5mL)搅拌溶液中依次加入5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(149.0mg，1.13mmol)和1-甲基-1H-咪唑(465.0mg，5.67mmol)。在25℃和氮气下，向上述溶液中加入TCFH(318.0mg，1.133mmol)的乙腈(1mL)溶液。然后将所得混合物在25℃搅拌2小时。将所得溶液(6mL)应用到80g C18柱上，通过Combi Flash(Biotage IsoleraPrime)纯化，在45分钟内用5～45％乙腈水溶液洗脱，得到2'-((二苯基亚甲基)氨基)-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(320.0mg，50％)，为黄色固体。MS(ESI)(C29H24N6O3S)(M+1)+，计算值537.1，实测值537.3。
步骤5 2'-氨基-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在25℃向2'-((二苯基亚甲基)氨基)-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(300.0mg，0.55mmol)的四氢呋喃(3mL)搅拌溶液加入HCl(0.6mL，1.20mmol，2N)。将所得溶液在25℃搅拌2小时并真空浓缩。将所得残余物溶解在乙腈(2mL)中，并通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：Xselect CSH C18 OBD柱30*150mm5μm；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B:ACN；流速：60mL/min；梯度：8分钟内从6％B至13％B，13％B；波长：220nm；RT1(min):5.43.；进样体积：0.6mL；运行次数：4)，得到2'-氨基-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(64.3mg，30％)，为白色固体。MS(ESI)(C16H16N6O3S)(M+1)+，计算值373.1，实测值373.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6+D2O)δ8.67(s，1H)，7.58(s，1H)，7.29(s，1H)，6.50(s，1H)，4.04(s，3H)，3.42(s，3H)，2.56(s，3H)。
实施例74
2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-((2-甲基四氢呋喃-3-基)甲氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤1S-甲基O-((2-甲基四氢呋喃-3-基)甲基)二硫代碳酸酯
在0℃，向NaH(41.3mg，1.03mmol，60％)在THF(2mL)中的混合物中分批加入(2-甲基四氢呋喃-3-基)甲醇(100.0mg，0.86mmol)，并在0℃搅拌1小时。然后向上述混合物中加入CS2(98.1mg，1.29mmol)并在0℃搅拌10分钟，然后在5℃将MeI(183.1mg，1.29mmol)加入到上述混合物中。将所得混合物在室温搅拌1小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DCM(2mL)中，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于20g硅胶柱，在20分钟内用0～20％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到S-甲基O-((2-甲基四氢呋喃-3-基)甲基)二硫代碳酸酯(140.0mg，76％)，为无色油状物。MS(ESI)(C8H14O2S2)(M+1)+，计算值206.0。
步骤2O-((2-甲基四氢呋喃-3-基)甲基)肼基硫代碳酸酯
在23℃向S-甲基O-((2-甲基四氢呋喃-3-基)甲基)二硫代碳酸酯(140.0mg，0.68mmol)的甲醇(1mL)搅拌溶液中加入肼(24.0mg，0.75mmol，80％)。将所得溶液在23℃搅拌1小时。在真空下除去有机溶剂，得到O-((2-甲基四氢呋喃-3-基)甲基)肼基硫代碳酸酯(130.0mg，粗品)，为无色油状物。MS(ESI)(C7H14N2O2S)(M+1)+，计算值191.1。
步骤3 5-((2-甲基四氢呋喃-3-基)甲氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
在23℃向O-((2-甲基四氢呋喃-3-基)甲基)肼基硫代碳酸酯(130.0mg，0.68mmol)的甲醇(1mL)搅拌溶液中加入TEA(138.4mg，1.37mmol)，溴化氰(80.0mg，0.75mmol)。将所得溶液在23℃搅拌1小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DCM(2mL)中，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于20g硅胶柱，在25分钟内用0～10％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到5-((2-甲基四氢呋喃-3-基)甲氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(70.0mg，47％)，为黄色固体。MS(ESI)(C8H13N3O2S)(M+1)+,216.1，实测值216.1。
步骤4 2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-((2-甲基四氢呋喃-3-基)甲氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
向5-((2-甲基四氢呋喃-3-基)甲氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(60.0mg，0.28mmol)，中间体G(78.0mg)，0.28mmol)和1-甲基咪唑(114mg，1.39mmol)的乙腈(1.5mL)搅拌溶液中加入TCFH(78.0mg，0.28mmol)的乙腈(1.5mL)溶液。将所得混合物在23℃搅拌2小时。将所得混合物应用到20g C18柱上，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在25分钟内用5～50％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-((2-甲基四氢呋喃-3-基)甲氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(83.2mg，62％)，为白色固体。MS(ESI)(C21H22ClN5O4S)(M+1)+，计算值476.1，实测值476.2。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.90(s，1H)，8.81(s，1H)，8.18(s，1H)，7.54(s，1H)，7.43(s，1H)，4.49–4.41(m，1H)，4.40–4.26(m，1H)，4.03–3.96(m，1H)，3.90–3.79(m，1H)，3.72–3.54(m，4H)，2.65–2.52(m，4H)，2.15–1.97(m，1H)，1.80–1.74(m，1H)，1.20(d，J＝6.4Hz，1H)，1.11(d，J＝6.4Hz，2H)。
实施例75
2'-氯-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤1 2'-氯-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯
在20℃向4-溴-2-氯吡啶(100.0mg，0.52mmol)在1,4-二噁烷(5mL)和水(1mL)中的搅拌溶液中依次添加6-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)烟酸甲酯(288.0mg，1.04mmol)，K2CO3(215.0mg，1.56mmol)和Pd(dppf)Cl2(76.0mg，0.10mmol)。将所得溶液在氮气气氛下在100℃搅拌2小时。过滤混合物。滤液在真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(4mL)中，将其应用到40g C18柱上，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～50％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(120.0mg，83％)，为灰色固体。MS(ESI)(C13H11ClN2O2)(M+1)+，计算值263.0；实测值，263.1。
步骤2 2'-氯-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸
在20℃向2'-氯-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(340.0mg，1.29mmol)的四氢呋喃(2mL)和水(0.7mL)的溶液中添加锂氢氧化物(93.0mg，3.88mmol)。将所得溶液在40℃搅拌2小时。用柠檬酸将水层酸化至pH～4，并用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩，得到2'-氯-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(150.0mg，粗品)为棕色固体。MS(ESI)(C12H9ClN2O2)(M+1)+，计算值249.0；实测值，249.0。
步骤3 2'-氯-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
向5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(82.0mg，0.63mmol)在乙腈(5mL)中的混合物中加入2'-氯-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(130.0mg，0.52mmol)和NMI(215.0mg，2.61mmol)。在氮气下，向其中加入TCFH(161.0mg，0.58mmol)的乙腈(1mL)溶液。将所得溶液在20℃搅拌2小时。在真空下除去有机溶剂。将所得残余物溶解在DMF(3mL)中，将其应用于40g C18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在40分钟内用5％～40％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(100.9mg，53％)，为白色固体。MS(ESI)(C15H12ClN5O2S)(M+1)+，计算值362.0；实测值，362.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)，δ13.03(br，1H)，8.85(s，1H)，8.46(d，J＝5.2Hz，1H)，7.58(d，J＝1.6Hz，1H)，7.51(s，1H)，7.36(dd，J＝5.2，1.6Hz，1H)，4.08(s，3H)，2.61(s，3H)。
实施例76和77
2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-(((2r,3r)-2-甲基四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺和2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-(((2r,3s)-2-甲基四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤1S-甲基O-(2-甲基四氢呋喃-3-基)二硫代碳酸酯
在0℃向2-甲基四氢呋喃-3-醇(300.0mg，2.94mmol)的THF(10mL)溶液中分批加入NaH(141.0mg，3.52mmol，60％)，然后在0℃搅拌30min。然后向上述混合物中加入CS2(0.26mL，4.41mmol)并在0℃搅拌10分钟。然后在0℃向上述混合物中加入MeI(0.3mL，4.41mmol)。将所得混合物在室温搅拌1小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩，得到S-甲基O-(2-甲基四氢呋喃-3-基)二硫代碳酸酯(534.0mg，粗品)，为黄色油状物。MS(ESI)(C7H12O2S2)(M+1)+，计算值193.0.
步骤2O-(2-甲基四氢呋喃-3-基)肼基硫代碳酸酯
在20℃，向S-甲基O-(2-甲基四氢呋喃-3-基)二硫代碳酸酯(530.0mg，2.76mmol)的甲醇(5mL)搅拌溶液中加入肼(121.2mg，3.03mmol，80％)。将所得溶液在20℃搅拌30分钟。在真空下除去有机溶剂，得到O-(2-甲基四氢呋喃-3-基)肼基硫代碳酸酯(460.0mg，粗品)，为黄色油状物。MS(ESI)(C6H12N2O2S)(M+1)+，计算值177.1；实测值177.0
步骤3 5-((2-甲基四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
在20℃向O-(2-甲基四氢呋喃-3-基)肼基硫代碳酸酯(460.0mg，2.61mmol)的甲醇(2.5mL)搅拌溶液中加入TEA(0.7mL，5.22mmol)和BrCN(301.0mg，2.87mmol)。将所得溶液在20℃搅拌1小时。用水淬灭所述反应混合物，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在MeOH/DCM(0.2/2mL)中，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于40g硅胶柱，在30分钟内用0～20％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到5-((2-甲基四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(144.0mg，27％)，为黄色固体。MS(ESI)(C7H11N3O2S)(M+1)+，计算值202.1；实测值202.1。
步骤4 2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-((2-甲基四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在20℃向5-((2-甲基四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(120.0mg，0.59mmol)的乙腈(1mL)搅拌溶液中添加中间体G(166.0mg，0.59mmol)和1-甲基咪唑(0.23mL，2.98mmol)。在20℃和氮气下，向上述溶液中加入TCFH(168.0mg，0.59mmol)的乙腈(0.5mL)溶液。然后将所得混合物在20℃搅拌2小时。将所得混合物溶解在DMF(3mL)中，将其应用到20g C18柱上，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在45分钟内用5～80％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-((2-甲基四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(181.6mg，65％)，为白色固体。MS(ESI)(C20H20ClN5O4S)(M+1)+，计算值462.1；实测值，462.2。
步骤5 2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-(((2r,3r)-2-甲基四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺和2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-(((2r,3s)-2-甲基四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
将2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-((2-甲基四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(181.6mg)的混合物通过制备型HPLC分离，条件如下：(柱：Xselect CSH C18 OBD柱30*150mm 5μm，n；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B:ACN；流速：60mL/min；梯度：12分钟内从28％B至32％B，12.2分钟内从32％B至95％B，13.7分钟内从95％B至95％B，15分钟内从95％B至5％B，5％B；波长：220nm；RT1(min):8.92，11.35(min):；进样体积：1.2mL；运行次数：2)，得到2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-(((2r,3r)-2-甲基四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(40.7mg，22％)，为白色固体，其具有在制备型高效液相色谱上更短的保留时间，和2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-(((2r,3s)-2-甲基四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(51.6mg，28％)，为白色固体，其具有在制备型高效液相色谱上更长的保留时间。绝对立体化学没有确定，是任意指定的。
2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-(((2r,3r)-2-甲基四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺:MS(ESI)(C20H20ClN5O4S)(M+1)+，计算值462.1；实测值，462.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.92(s，1H)，8.82(s，1H)，8.17(s，1H)，7.53(s，1H)，7.41(s，1H)，5.40(s，1H)，3.98–3.87(m，2H)，3.70–3.34(m，4H)，2.58(s，3H)，2.47–2.34(m，1H)，2.15–2.04(m，1H)，1.19(d，J＝6.4Hz，3H)。
2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-N-(5-(((2r,3s)-2-甲基四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺:MS(ESI)(C20H20ClN5O4S)(M+1)+，计算值462.1；实测值，462.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.90(s，1H)，8.81(s，1H)，8.18(s，1H)，7.54(s，1H)，7.44(s，1H)，5.14–5.07(m，1H)，4.17–4.07(m，1H)，3.99–3.89(m，1H)，3.84–3.74(m，1H)，3.64(s，3H)，2.60(s，3H)，2.39–2.25(m，1H)，2.15–2.05(m，1H)，1.21(d，J＝6.4Hz，3H)。
实施例95，228和117
N-(5-((4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺，(S)-N-(5-((4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺和(R)-N-(5-((4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:S-甲基O-(4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)二硫代碳酸酯
在0℃向4-氧杂螺(2.4)庚-6-醇(100.0mg，0.87mmol)的四氢呋喃(3mL)搅拌溶液中加入NaH(42.0mg，1.05mmol，60％)。将反应混合物在0℃搅拌0.5h。然后在0℃将CS2(100.0mg，1.31mmol)加入到上述混合物中，然后将所得溶液在0℃搅拌0.5小时。然后在0℃将MeI(187.0mg，1.31mmol)加入到上述混合物中，然后将所得溶液在0℃搅拌1小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩，得到S-甲基O-(4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)二硫代碳酸酯(150.0mg，粗品)为黄色油状物。粗产品无需进一步纯化用于下一步骤。
步骤-2:O-(4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)肼基硫代碳酸酯
在25℃向S-甲基O-(4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)二硫代碳酸酯(150.0mg，0.73mmol)的甲醇(3mL)搅拌溶液中添加肼(47.1mg，0.73mmol)。将反应混合物在25℃搅拌1小时。在真空下除去有机溶剂，得到O-(4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)肼基硫代碳酸酯(130.0mg，粗品)为黄色油状物，其无需进一步纯化即可用于下一步。
步骤-3:5-((4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
在氮气气氛下于25℃将O-(4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)肼基硫代碳酸酯(130.0mg，0.69mmol)、溴化氰(110.0mg，1.03mmol)和Et3N(175.0mg，1.72mmol)的甲醇(3mL)的搅拌溶液搅拌2h。在真空下除去有机溶剂。将所得残余物溶解在甲醇(2mL)中，将其应用于20g C18柱，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在20分钟内用5～17％乙腈水溶液洗脱，得到5-((4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(80.0mg，43％overthree steps)，为白色固体。MS(ESI)(C8H11N3O2S)(M+1)+，计算值214.1，实测值214.1。
步骤-4:(S)-N-(5-((4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺和(R)-N-(5-((4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在25℃向中间体G(92.0mg，0.33mmol)的乙腈(5mL)搅拌溶液中依次加入5-((4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(70.4mg，0.33mmol)，1-甲基-1H-咪唑(136.0mg，1.65mmol)和N,N,N',N'-四甲基氯甲脒六氟磷酸盐(93.0mg，0.33mmol)。将所得溶液在25℃搅拌2小时。在真空下除去有机溶剂。将所得残余物溶解在乙腈(2mL)中，应用到20g C18柱上，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在35分钟内用5～40％乙腈水溶液洗脱，得到外消旋的N-(5-((4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(65.0mg，38％)，为黄色固体。外消旋化合物通过制备手性HPLC分离，条件如下:(柱：CHIRAL ART Cellulose-SC，2*25cm，5μm；流速：20mL/min；梯度：16分钟内从30％B至30％B；波长：220/254nm；RT1(min):12.80；RT2(min):14.92；样品溶剂：MeOH:DCM＝1:1；进样体积：0.3mL；运行次数：8)，得到(S)-N-(5-((4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(14.3mg，21％)，为白色固体，其具有手性HPLC上的第一个峰，和(S)-N-(5-((4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(21.1mg，32％)，为黄色固体，其具有手性HPLC上的第二个峰。使用振动圆二色性(VCD)和从头计算法(ab initio calculations)确定绝对立体化学。
(S)-N-(5-((4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺:MS(ESI)(C21H20ClN5O4S)(M+1)+，计算值474.1；实测值，474.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.92(s，1H)，8.83(s，1H)，8.17(s，1H)，7.51(s，1H)，7.40(s，1H)，5.62–5.54(m，1H)，4.10–3.94(m，2H)，3.64(s，3H)，2.58(s，3H)，2.50–2.42(m，1H)，2.19–2.11(m，1H)，0.87–0.77(m，1H)，0.77–0.68(m，1H)，0.66–0.56(m，1H)，0.56–0.46(m，1H)。
(R)-N-(5-((4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺:MS(ESI)(C21H20ClN5O4S)(M+1)+，计算值474.1；实测值，474.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.96(s，1H)，8.82(s，1H)，8.17(s，1H)，7.51(s，1H)，7.40(s，1H)，5.62–5.55(m，1H)，4.09–3.93(m，2H)，3.63(s，3H)，2.58(s，3H)，2.51–2.42(m，1H)，2.19–2.10(m，1H)，0.88–0.78(m，1H)，0.77–0.70(m，1H)，0.66–0.56(m，1H)，0.56–0.46(m，1H)。
实施例120
7-(2-氟-6-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-3-甲基咪唑并(1,2-a)吡啶-6-甲酰胺
步骤-1:6-氨基-4-(2-氟-6-甲氧基苯基)烟酸甲酯
在20℃，氮气下向6-氨基-4-溴烟酸甲酯(200.0mg，0.86mmol)的1,4-二噁烷(5mL)和水(1mL)溶液中加入(2-氟-6-甲氧基苯基)硼酸(177.0mg，1.03mmol)，Pd(dtbpf)Cl2(56.4mg，0.087mmol)和磷酸钾(367.0mg，1.73mmol)。将所得溶液在氮气下于90℃搅拌2小时。真空除去溶剂，将残余物应用到40g C18柱上，通过Combi Flash(Biotage IsoleraPrime)纯化，在40分钟内用5～40％乙腈水溶液洗脱，得到6-氨基-4-(2-氟-6-甲氧基苯基)烟酸甲酯(180.0mg，62％)为棕色固体。MS(ESI)(C14H13FN2O3)(M+1)+，计算值277.1，实测值277.1。
步骤-2:7-(2-氟-6-甲氧基苯基)-3-甲基咪唑并(1,2-a)吡啶-6-甲酸甲酯
将6-氨基-4-(2-氟-6-甲氧基苯基)烟酸甲酯(230.0mg，0.66mmol)和1-溴丙-2-酮(109.0mg，0.79mmol)在乙醇(4mL)中的混合物于60℃搅拌16小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(3mL)中，将其应用到40g C18柱上，通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，在40分钟内用5～45％乙腈水溶液洗脱，得到7-(2-氟-6-甲氧基苯基)-3-甲基咪唑并(1,2-a)吡啶-6-甲酸甲酯(100.0mg，46％)，为红色固体。MS(ESI)(C17H15FN2O3)(M+1)+，计算值315.3，实测值315.2。
步骤-3:7-(2-氟-6-甲氧基苯基)-3-甲基咪唑并(1,2-a)吡啶-6-甲酸
向7-(2-氟-6-甲氧基苯基)-3-甲基咪唑并(1,2-a)吡啶-6-甲酸甲酯(100.0mg，0.32mmol)的甲醇(1mL)溶液中加入NaOH(38.2mg，0.95mmol)的水(1mL)溶液。将所得溶液在50℃搅拌3小时。水层用柠檬酸酸化至pH～4，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得粗残余物应用到20g C18柱上，通过CombiFlash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～14％乙腈水溶液洗脱，得到7-(2-氟-6-甲氧基苯基)-3-甲基咪唑并(1,2-a)吡啶-6-甲酸(50.0mg，52％)，为白色固体。MS(ESI)(C16H13FN2O3)(M+1)+，计算值301.1，实测值301.1。
步骤-4:7-(2-氟-6-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-3-甲基咪唑并(1,2-a)吡啶-6-甲酰胺
在20℃向7-(2-氟-6-甲氧基苯基)-3-甲基咪唑并(1,2-a)吡啶-6-甲酸(20.0mg，0.067mmol)的DMF(1mL)搅拌溶液中加入HATU(38.0mg，0.10mmol)。将所得溶液在20℃搅拌10分钟。向上述溶液中加入5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(8.8mg，0.067mmol)和N,N-二异丙基乙胺(17.2mg，0.13mmol)。将所得溶液在20℃搅拌1小时。将所得残余物应用到20g C18柱上，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～80％乙腈水溶液洗脱，得到7-(2-氟-6-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-3-甲基咪唑并(1,2-a)吡啶-6-甲酰胺(4.8mg，17％)，为白色固体。MS(ESI)(C19H16FN5O3S)(M+1)+，计算值414.1；实测值，414.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.90(s，1H)，9.35(d，J＝1.6Hz，1H)，7.89(d，J＝1.2Hz，1H)，7.68(d，J＝1.6Hz，1H)，7.54–7.44(m，1H)，7.03(d，J＝8.4Hz，1H)，6.99–6.90(m，1H)，4.10(s，3H)，3.72(s，3H)，2.31(s，3H).
实施例121
5-(2-氟-6-甲氧基苯基)-2-(羟甲基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)异烟酰胺
步骤-1:2,5-二氯异烟酸甲酯
在0℃，向2,5-二氯异烟酸(10.0g，52.00mmol)的二氯甲烷(100.0mL)搅拌溶液中加入甲醇(10.0mL)和(重氮甲基)三甲基硅烷(52mL，104.20mmol)。将所得溶液在0℃搅拌2小时。在真空下除去有机溶剂。将所得残余物溶解在二氯甲烷(10mL)中，并通过CombiFlash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于330g硅胶柱，在40分钟内用0～38％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到2,5-二氯异烟酸甲酯(9.3g，83％)，为无色油状物。MS(ESI)(C7H5ClNO2)(M+1)+，计算值206.0；实测值206.0。
步骤-2:5-氯-2-乙烯基异烟酸甲酯
于25℃，氮气气氛下向2,5-二氯异烟酸甲酯(4.8g，23.35mmol)和三氟(乙烯基)-14-硼烷钾盐(3.1g，23.35mmol)在1,4-二噁烷(50.0mL)中的搅拌溶液中添加K2CO3(9.7g，70.00mmol的水(5.0mL)溶液和PdCl2(dppf)(1.7g，2.35mmol)。将所得溶液在氮气氛下于80℃搅拌2小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在二氯甲烷(9.0mL)中，并通过CombiFlash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于120g硅胶柱，在40分钟内用0～35％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到5-氯-2-乙烯基异烟酸甲酯(3.4g，73％)，为无色油状物。MS(ESI)(C9H8ClNO2)(M+1)+，计算值198.0；实测值198.0。
步骤-3:5-氯-2-甲酰基异烟酸甲酯
在25℃向5-氯-2-乙烯基异烟酸甲酯(2.7g，13.66mmol)在四氢呋喃(15.0mL)和水(15.0mL)中的搅拌溶液中添加四氧化锇(0.9mL，2.73mmol)和高碘酸钠(6.9g，27.3mmol)。将所得溶液在25℃搅拌2小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在二氯甲烷(10.0mL)中，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于120g硅胶柱，在40分钟内用0～35％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到5-氯-2-甲酰基异烟酸甲酯(1.6g，56％)，为无色油状物。MS(ESI)(C8H6ClNO3)(M+1)+,200.0；实测值200.0。
步骤-4:5-氯-2-(羟甲基)异烟酸甲酯
在0℃向5-氯-2-甲酰基异烟酸甲酯(1.2g，6.01mmol)的甲醇(10.0mL)搅拌溶液中加入NaBH4(0.1g，3.01mmol)。将所得溶液在0℃搅拌15分钟。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩，得到5-氯-2-(羟甲基)异烟酸甲酯(840mg，粗品)，为黄色固体。MS(ESI)(C8H8ClNO3)(M+1)+，计算值202.0；实测值202.0。
步骤-5:5-(2-氟-6-甲氧基苯基)-2-(羟甲基)异烟酸甲酯
在23℃，氮气下向5-氯-2-(羟甲基)异烟酸甲酯(1.0g，5.16mmol)在1,4-二噁烷(8.0mL)和水(1.6mL)中的脱气溶液中添加(2-氟-6-甲氧基苯基)硼酸(1.7g，10.32mmol)和K2CO3(2.2g，15.48mmol)，1,1'-双(二叔丁基膦)二茂铁二氯化钯(1.0g，1.55mmol)。将所得溶液在氮气下于80℃搅拌2小时。悬浮液用硅藻土过滤。收集滤液并真空浓缩。所得残余物通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，其应用于80g硅胶柱，并在45分钟内用0～75％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到5-(2-氟-6-甲氧基苯基)-2-(羟甲基)异烟酸甲酯(950mg，61％)，为白色固体。MS(ESI)(C15H14FNO4)(M+1)+，计算值292.1；实测值292.1。
步骤-6:5-(2-氟-6-甲氧基苯基)-2-(羟甲基)异烟酸
在25℃向5-(2-氟-6-甲氧基苯基)-2-(羟甲基)异烟酸甲酯(500.0mg，1.71mmol)的四氢呋喃(3.0mL)搅拌溶液中加入LiOH(164.0mg，6.87mmol)和水(1.0mL)。将所得溶液在25℃搅拌1小时。在真空下除去有机溶剂。水层用柠檬酸酸化至pH～4，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩，得到5-(2-氟-6-甲氧基苯基)-2-(羟甲基)异烟酸(250mg，粗品)，为白色固体。MS(ESI)(C14H12FNO4)(M+1)+，计算值278.1；实测值278.1。
步骤-7:5-(2-氟-6-甲氧基苯基)-2-(羟甲基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)异烟酰胺
在23℃向5-(2-氟-6-甲氧基苯基)-2-(羟甲基)异烟酸(100mg，0.36mmol)的乙腈(1mL)搅拌溶液中依次加入5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(47mg，0.36mmol)和1-甲基-1H-咪唑(148mg，1.80mmol)。然后在25℃将N,N,N',N'-四甲基氯甲脒六氟磷酸盐(101mg，0.36mmol)的乙腈(1mL)溶液添加至上述混合物中。将所得溶液在25℃搅拌2小时。所述反应混合物(2mL)通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，19*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B:ACN；流速：25mL/min；梯度：8分钟内15％B至35％B，35％B；波长：254nm)，得到5-(2-氟-6-甲氧基苯基)-2-(羟甲基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)异烟酰胺(43.7mg，30％)，为白色固体。MS(ESI)(C17H15FN4O4S)(M+1)+，计算值391.1；实测值391.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.99(br，1H)，8.49(s，1H)，7.81(s，1H)，7.44–7.34(m，1H)，6.96–6.85(m，2H)，5.60(t，J＝5.6Hz，1H)，4.68(d，J＝5.6Hz，2H)，4.06(s，3H)，3.58(s，3H)。
实施例123
4-((1,2,4)三唑并(1,5-a)吡啶-8-基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
步骤-1:4-((1,2,4)三唑并(1,5-a)吡啶-8-基)-6-甲基烟酸甲酯
于20℃向6-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)烟酸甲酯(1.0g，3.79mmol)的1,4-二噁烷(10mL)搅拌溶液中加入8-溴-(1,2,4)三唑并(1,5-a)吡啶(500.0mg，2.52mmol)，K2CO3(1.0g，7.57mmol)的水(2mL)溶液和Pd(dtbpf)Cl2(164.0mg，0.25mmol)。在氮气氛下，将所得溶液在80℃搅拌1小时。用水稀释反应混合物，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DCM(2mL)中，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于40g硅胶柱，在30分钟内用0～100％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到4-((1,2,4)三唑并(1,5-a)吡啶-8-基)-6-甲基烟酸甲酯(500.0mg，70％)，为黄色固体。MS(ESI)(C14H12N4O2)(M+1)+，计算值269.1，实测值，269.1。
步骤-2:4-((1,2,4)三唑并(1,5-a)吡啶-8-基)-6-甲基烟酸
在20℃向4-((1,2,4)三唑并(1,5-a)吡啶-8-基)-6-甲基烟酸甲酯(380.0mg，1.41mmol)的四氢呋喃(2mL)和水(2mL)的搅拌溶液中加入LiOH(67.8mg，2.83mmol)。将所得溶液在25℃搅拌1小时。混合物用柠檬酸酸化至pH～3。将所得残余物溶解在DMF(1mL)中，将其应用于20g C18柱，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，并在20分钟内用5～30％乙腈水溶液洗脱，得到4-((1,2,4)三唑并(1,5-a)吡啶-8-基)-6-甲基烟酸(256.0mg，70％)，为白色固体。MS(ESI)(C13H10N4O2)(M+1)+，计算值255.1，实测值，255.1。
步骤-3:4-((1,2,4)三唑并(1,5-a)吡啶-8-基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
在20℃向4-((1,2,4)三唑并(1,5-a)吡啶-8-基)-6-甲基烟酸(100.0mg，0.39mmol)的乙酸乙酯(2mL)搅拌溶液中加入5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(51.6mg，0.39mmol)。在0℃和氮气下，向上述溶液中加入吡啶(0.06mL，0.78mmol)和T3P(501.0mg，0.78mmol，50％于EtOAc溶液)。将所得溶液在80℃搅拌3小时。反应混合物在真空下浓缩。将所得残余物溶解在DMSO(1.5mL)中，将其应用于20g C18柱，并通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，在25分钟内用5～100％乙腈水溶液洗脱，得到4-((1,2,4)三唑并(1,5-a)吡啶-8-基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(48.8mg，33％)，为浅棕色固体。MS(ESI)(C16H13N7O2S)(M+1)+，计算值368.1；实测值，368.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.00(s，1H)，9.01(d，J＝4.0Hz，1H)，8.88(s，1H)，8.39(s，1H)，7.76(d，J＝8.0Hz，1H)，7.60(s，1H)，7.33(t，J＝8.0Hz，1H)，4.04(s，3H)，2.63(s，3H)。
实施例126
4-(2,3-二氢吡唑并(5,1-b)噁唑-7-基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
步骤-1:2,3-二氢吡唑并(5,1-b)噁唑
向1,2-二氢-3H-吡唑-3-酮(5.0g，59.50mmol)的乙腈(80mL)溶液中加入1,2-二溴乙烷(33.5g，178.50mmol)和K2CO3(24.6g，178.50mmol)。将上述溶液在90℃搅拌16h。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(3mL)中，将其应用于120g C18柱，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，并在35分钟内用5～90％乙腈水溶液洗脱，得到2,3-二氢吡唑并(5,1-b)噁唑(1.2g，14％)，为白色固体。MS(ESI)(C5H6N2O)(M+1)+，计算值111.0；实测值，111.0。
步骤-2:7-溴-2,3-二氢吡唑并(5,1-b)噁唑
在0℃，氮气气氛下向2,3-二氢吡唑并(5,1-b)噁唑(1.2g，8.50mmol)的乙腈(15mL)搅拌溶液中加入NBS(1.8g，10.11mmol)。在氮气氛下，将所得溶液在0℃搅拌2小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(1mL)中，将其应用于40g C18柱，通过CombiFlash(Biotage Isolera Prime)纯化，并在30分钟内用5～85％乙腈水溶液洗脱，得到7-溴-2,3-二氢吡唑并(5,1-b)噁唑(840.0mg，47％)为棕色固体。MS(ESI)(C5H5BrN2O)(M+1)+，计算值189.0；实测值，189.0。
步骤-3:4-(2,3-二氢吡唑并(5,1-b)噁唑-7-基)-6-甲基烟酸甲酯
在23℃向6-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)烟酸甲酯(440.0mg，1.59mmol)的1,4-二噁烷(3mL)搅拌溶液中依次加入7-溴-2,3-二氢吡唑并(5,1-b)噁唑(300.0mg，1.59mmol)，K2CO3(439.0mg，3.17mmol)和Pd(dppf)Cl2(116.0mg，0.16mmol)。将所得溶液在氮气下于80℃搅拌2小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DCM(1mL)中，并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于40g硅胶柱，在25分钟内用0～50％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到4-(2,3-二氢吡唑并(5,1-b)噁唑-7-基)-6-甲基烟酸甲酯(210.0mg，50％)，为黄色固体。MS(ESI)(C13H13N3O3)(M+1)+，计算值260.1；实测值，260.1。
步骤-4:4-(2,3-二氢吡唑并(5,1-b)噁唑-7-基)-6-甲基烟酸
在25℃向4-(2,3-二氢吡唑并(5,1-b)噁唑-7-基)-6-甲基烟酸甲酯(200.0mg，0.77mmol)在水(0.3mL)和THF(1mL)中的搅拌溶液中加入LiOH(162.0mg，3.86mmol)。将反应混合物在氮气氛下于25℃搅拌16小时。用甲酸将所得残余物酸化至pH～5，然后用DMF(1mL)稀释，将其应用于25g C18柱，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，并在20分钟内用5～30％乙腈水溶液洗脱，得到4-(2,3-二氢吡唑并(5,1-b)噁唑-7-基)-6-甲基烟酸(90.0mg，40％)，为黄色固体。MS(ESI)(C12H11N3O3)(M+1)+，计算值246.1；实测值，246.1。
步骤-5:4-(2,3-二氢吡唑并(5,1-b)噁唑-7-基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
向4-(2,3-二氢吡唑并(5,1-b)噁唑-7-基)-6-甲基烟酸(85.0mg，0.35mmol)在乙腈(4mL)中的搅拌溶液中加入5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(68.0mg，0.52mmol)和NMI(285.0mg，3.47mmol)。在25℃和氮气氛下，向上述溶液中加入在MeCN(0.5mL)中的TCFH(97.0mg，0.35mmol)。在氮气气氛下将所得溶液在25℃搅拌1小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(0.5mL)中，将其应用于20g C18柱，通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，并在30分钟内用5～80％乙腈水溶液洗脱，得到4-(2,3-二氢吡唑并(5,1-b)噁唑-7-基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(64.7mg，50％)，为黄色固体。MS(ESI)(C15H14N6O3S)(M+1)+，计算值359.1；实测值，359.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.82(s，1H)，8.49(s，1H)，7.57(s，1H)，7.38(s，1H)，5.17–5.06(m，2H)，4.37–4.24(m，2H)，4.10(s，3H)，2.51(s，3H)。
实施例127和128
(R)-2'-氯-N-(5-((4,4-二氟四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺和(S)-2'-氯-N-(5-((4,4-二氟四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:O-(4,4-二氟四氢呋喃-3-基)S-甲基二硫代碳酸酯
在0℃向NaH(38.7mg，0.97mmol，60％)的THF(2mL)溶液中滴加4,4-二氟四氢呋喃-3-醇(100.0mg，0.81mmol)的THF(2mL)溶液。所得混合物在0℃搅拌30分钟。在0℃向上述混合物中滴加CS2(92.0mg，1.21mmol)并在0℃搅拌20分钟。然后在0℃将MeI(172.0mg，1.21mmol)滴加到上述混合物中。所得混合物在氮气下在0℃搅拌1小时。所得混合物用水淬灭。水层用乙酸乙酯萃取。合并有机层，用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并过滤。滤液在真空下浓缩，得到O-(4,4-二氟四氢呋喃-3-基)S-甲基二硫代碳酸酯(180.0mg，粗品)，为黄色油状物。MS(ESI)(C6H8F2O2S2)(M+1)+，计算值215.0。
步骤-2:O-(4,4-二氟四氢呋喃-3-基)肼基硫代碳酸酯
向O-(4,4-二氟四氢呋喃-3-基)S-甲基二硫代碳酸酯(180.0mg，0.84mmol)的甲醇(3mL)混合物中加入水合肼(52.56mg，0.84mmol，80％)。所得溶液在23℃搅拌1小时。在真空下除去溶剂，得到O-(4,4-二氟四氢呋喃-3-基)肼基硫代碳酸酯(160.0mg，粗品)，为黄色油状物。MS(ESI)(C5H8 F2N2O2S)(M+1)+，计算值199.0。
步骤-3:5-((4,4-二氟四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
向O-(4,4-二氟四氢呋喃-3-基)肼基硫代碳酸酯(160.0mg，0.81mmol)在甲醇(3mL)中的混合物中依次加入TEA(163.0mg，1.62mmol)和溴氰化物(94.0mg，0.89mmol)。混合物在23℃搅拌1小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。所得残余物通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，其应用于20g硅胶柱并在30分钟内用0～80％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到5-((4,4-二氟四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(75.0mg，三个步骤为39％)，为黄色固体。MS(ESI)(C6H7F2N3O2S)(M+1)+，计算值224.0；实测值，224.0。
步骤-4:2'-氯-N-(5-((4,4-二氟四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
向中间体G(74.9mg，0.27mmol)在乙腈(2mL)中的搅拌溶液中添加1-甲基咪唑(0.1mL，1.34mmol)和5-((4,4-二氟四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(60.0mg，0.27mmol)。然后在23℃，将溶于乙腈(0.5mL)中的TCFH(75.0mg，0.27mmol)加入到上述混合物中。所得溶液在氮气下于23℃搅拌2小时。将所得残余物应用于20g C18柱，通过CombiFlash(Biotage Isolera Prime)纯化，并在30分钟内用5～45％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-N-(5-((4,4-二氟四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(60.0mg，46％)，为白色固体。MS(ESI)(C19H16ClF2N5O4S)(M+1)+，计算值484.1；实测值，484.1。
步骤-5:(R)-2'-氯-N-(5-((4,4-二氟四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺和(S)-2'-氯-N-(5-((4,4-二氟四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
2'-氯-N-(5-((4,4-二氟四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(60.0mg)通过制备型手性HPLC分离，条件如下：(柱：CHIRALPAK IE，2*25cm，5μm；流动相A:Hex(0.2％FA)--HPLC，流动相B:MeOH:EtOH＝1:1--HPLC；流速：15mL/min；梯度：24分钟内从80％B至80％B；波长：220/254nm；RT1(min):13.10；RT2(min):19.39；样品溶剂：MeOH:DCM＝1:1；进样体积：1.5mL；运行次数：2)，得到(R)-2'-氯-N-(5-((4,4-二氟四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(23.5mg，39％)，为白色固体，其具有手性HPLC的第一个峰，和(S)-2'-氯-N-(5-((4,4-二氟四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(23.2mg，38％)，为白色固体，其具有手性HPLC的第二个峰。绝对立体化学尚未确定。
(R)-2'-氯-N-(5-((4,4-二氟四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺:MS(ESI)(C19H16ClF2N5O4S)(M+1)+，计算值484.1；实测值，484.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.05(s，1H)，8.82(s，1H)，8.18(s，1H)，7.55(s，1H)，7.44(s，1H)，5.64–5.60(m，1H)，4.44–4.33(m，1H)，4.15–3.97(m，3H)，3.63(s，3H)，2.60(s，3H)。
(S)-2'-氯-N-(5-((4,4-二氟四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺:MS(ESI)(C19H16ClF2N5O4S)(M+1)+，计算值484.1；实测值，484.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.05(s，1H)，8.82(s，1H)，8.18(s，1H)，7.55(s，1H)，7.44(s，1H)，5.64–5.60(m，1H)，4.39–4.33(m，1H)，4.14–3.97(m，3H)，3.63(s，3H)，2.60(s，3H)。
实施例134
(R)-2'-氯-6-环戊基-5'-甲氧基-N-(5-((四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:4-氯-6-(环戊-1-烯-1-基)烟酸甲酯
向6-溴-4-氯烟酸甲酯(1.0g，3.99mmol)在水(6mL)和1,4-二噁烷(20mL)中的搅拌溶液中依次添加2-(环戊-1-烯-1-)基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷(0.6g，3.19mmol)，Pd(PPh3)2Cl2(0.3g，0.43mmol)和K2CO3(1.1g，7.96mmol)。所得溶液在氮气气氛下于60℃搅拌1小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。所得残余物通过Combi Flash(Biotage IsoleraPrime)纯化，其应用于40g硅胶柱并在20分钟内用0～50％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到4-氯-6-(环戊-1-烯-1-基)烟酸甲酯(360.0mg，34％)，为白色固体。MS(ESI)(C12H12ClNO2)(M+1)+，计算值238.1；实测值，238.1.
步骤-2:4-氯-6-环戊基烟酸甲酯
在30℃，氮气气氛下向搅拌的4-氯-6-(环戊-1-烯-1-基)烟酸甲酯(200.0mg，0.72mmol)的甲醇(5mL)溶液中加入雷尼镍(900.0mg，15.33mmol)。所得溶液在氢气(20大气压)下于30℃搅拌5分钟。过滤悬浮液。收集滤液并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(1mL)中，将其应用于20g C18柱，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，并在20分钟内用10～90％乙腈水溶液洗脱，得到4-氯-6-环戊基烟酸甲酯(150.0mg，80％)，为黄色油状物。MS(ESI)(C12H14ClNO2)(M+1)+，计算值240.1；实测值，240.1。
步骤-3:2'-氯-6-环戊基-5'-甲氧基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯
向4-氯-6-环戊基烟酸甲酯(140.0mg，0.58mmol)在1,4-二噁烷(2mL)和水(0.2mL)中的搅拌溶液中依次添加(2-氯-5-甲氧基吡啶)-4-基)硼酸(109.0mg，0.58mmol)，Pd(dtbpf)Cl2(38.1mg，0.06mmol)和K2CO3(161.0mg，1.17mmol)。所得溶液在氮气下于80℃搅拌16小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(1mL)中，将其应用于25gC18柱并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在20分钟内用10～100％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-6-环戊基-5'-甲氧基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(120.0mg，50％)，为黄色油状物。MS(ESI)(C18H19ClN2O3)(M+1)+，计算值347.1；实测值，347.1。
步骤-4:2'-氯-6-环戊基-5'-甲氧基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸
将2'-氯-6-环戊基-5'-甲氧基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸甲酯(110.0mg，0.32mmol)的四氢呋喃(1mL)和水(1mL)的搅拌溶液中加入氢氧化锂(38.0mg，1.59mmol)。所得溶液在室温搅拌2小时。水层用HCl(1N)酸化至pH～3，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(1mL)中，将其应用于20gC18柱，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，并在15分钟内用30～80％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-6-环戊基-5'-甲氧基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(80.0mg，74％)，为白色固体。MS(ESI)(C17H17ClN2O3)(M+1)+，计算值333.1；实测值，333.1。
步骤-5:(R)-5-((四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
在0℃，向(R)-四氢呋喃-3-醇(1.0g，11.35mmol)的四氢呋喃(10mL)溶液中分批加入NaH(460mg，13.50mmol，60％)，并在0℃，氮气气氛下搅拌1小时。在0℃、氮气氛下向上述混合物中加入5-溴-1,3,4-噻二唑-2-胺(2.0g，11.35mmol)。所得溶液在0℃搅拌2小时。然后加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(4mL)中，将其应用于80g C18柱并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在25分钟内用5～15％乙腈水溶液洗脱，得到(R)-5-((四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(330mg，14％)，为白色固体。MS(ESI)(C6H9N3O2S)(M+1)+，计算值188.0；实测值，188.1。
步骤-6:(R)-2'-氯-6-环戊基-5'-甲氧基-N-(5-((四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
将2'-氯-6-环戊基-5'-甲氧基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(30.0mg，0.09mmol)的乙腈(1mL)的搅拌溶液加入(R)-5-((四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(16.9mg，0.09mmol)和1-甲基-1H-咪唑(37.0mg，0.45mmol)。向上述溶液中加入TCFH(25.3mg，0.09mmol)的乙腈(1mL)溶液。所得溶液在氮气下于25℃搅拌1小时。在真空下除去有机溶剂。将所得残余物溶解在DMF(1mL)中，将其应用于20g C18柱，通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，并在35分钟内用40～70％乙腈水溶液洗脱，得到(R)-2'-氯-6-环戊基-5'-甲氧基-N-(5-((四氢呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(30.3mg，66％)，为白色固体。MS(ESI)(C23H24ClN5O4S)(M+1)+，计算值502.1；实测值，502.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.86(s，1H)，8.83(s，1H)，8.17(s，1H)，7.58(s，1H)，7.43(s，1H)，5.55–5.48(m，1H)，4.02–3.76(m，4H)，3.63(s，3H)，3.22–3.20(m，1H)，2.32–2.22(m，1H)，2.18–2.00(m，3H)，1.81–1.68(m，6H)。
实施例136和137
(S)-N-(5-((2-氧杂螺(3.3)庚-5-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺和(R)-N-(5-((2-氧杂螺(3.3)庚-5-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:S-甲基O-(2-氧杂螺(3.3)庚-5-基)二硫代碳酸酯
在0℃，向搅拌的2-氧杂螺(3.3)庚-5-醇(500.0mg，4.38mmol)的THF(10mL)溶液中分批加入NaH(350.0mg，8.75mmol，60％)。所得溶液在氮气气氛下于0℃搅拌0.5小时。在0℃向上述溶液中加入CS2(500.0mg，6.57mmol)。然后将所得混合物在0℃搅拌0.5小时。在0℃向上述溶液中加入MeI(935.0mg，6.59mmol)。然后将所得混合物在氮气氛下于0℃搅拌0.5小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩，得到S-甲基O-(2-氧杂螺(3.3)庚-5-基)二硫代碳酸酯(620.0mg，粗品)，为黄色油状物，粗产物无需进一步纯化即可用于下一步。
步骤-2:O-(2-氧杂螺(3.3)庚-5-基)肼基硫代碳酸酯
在25℃向S-甲基O-(2-氧杂螺(3.3)庚-5-基)二硫代碳酸酯(620.0mg，3.03mmol)在甲醇(8mL)中的搅拌溶液中添加水合肼(190.0mg，3.03mmol，80％)。所得溶液在氮气氛下于25℃搅拌0.5小时。在真空下除去溶剂，得到O-(2-氧杂螺(3.3)庚-5-基)肼基硫代碳酸酯(450.0mg，粗品)，为黄色油状物，其无需进一步纯化即可用于下一步。
步骤-3:5-((2-氧杂螺(3.3)庚-5-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
在25℃向O-(2-氧杂螺(3.3)庚-5-基)肼基硫代碳酸酯(450.0mg，2.39mmol)的甲醇(8mL)搅拌溶液中添加BrCN(279.0mg，2.63mmol))和TEA(483.0mg，4.78mmol)。在氮气气氛下将所得溶液在25℃搅拌1小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DCM(1mL)中并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于40g硅胶柱，在35分钟内用0～10％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到5-((2-氧杂螺(3.3)庚-5-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(280.0mg，51％)，为黄色固体。MS(ESI)(C8H11N3O2S)(M+1)+,214.1；实测值，214.1。
步骤-4:N-(5-((2-氧杂螺(3.3)庚-5-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
向5-((2-氧杂螺(3.3)庚-5-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(280.0mg，1.22mmol)的乙腈(5mL)搅拌溶液中加入中间体G(340.0mg，1.22mmol)和NMI(501.0mg，6.11mmol)。在25℃，向上述溶液中加入TCFH(343.0mg，1.22mmol)的MeCN(0.5mL)溶液。在氮气气氛下将所得溶液在25℃搅拌1小时。在真空下除去溶剂。将所得残余物溶解在DMF(1mL)中，将其应用于25g C18柱，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，并在30分钟内用5～80％乙腈水溶液洗脱，得到N-(5-((2-氧杂螺(3.3)庚-5-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(170.0mg，27％)，为白色固体。MS(ESI)(C21H20ClN5O4S)(M+1)+，计算值474.1；实测值，474.1。
步骤-5:(S)-N-(5-((2-氧杂螺(3.3)庚-5-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺和(R)-N-(5-((2-氧杂螺(3.3)庚-5-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
N-(5-((2-氧杂螺(3.3)庚-5-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(170.0mg)通过制备型手性HPLC分离，条件如下:(柱：CHIRALPAK IE，2*25cm，5μm；流动相A:MtBE(0.1％FA)--HPLC，流动相B:MeOH:DCM＝1:1；流速：18mL/min；梯度：20分钟内从50％B至50％B；波长：220/254nm；RT1(min):12.21；RT2(min):15.93；样品溶剂：MeOH:DCM＝1:1；进样体积：0.8mL；运行次数：4)，得到(S)-N-(5-((2-氧杂螺(3.3)庚-5-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(40.9mg，24％)，为白色固体，其具有手性HPLC的第一个峰，和(R)-N-(5-((2-氧杂螺(3.3)庚-5-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(34.0mg，19％)，为白色固体，其具有手性HPLC的第二个峰。绝对立体化学尚未确定。
(S)-N-(5-((2-氧杂螺(3.3)庚-5-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺:MS(ESI)(C21H20ClN5O4S)(M+1)+，计算值474.1；实测值，474.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.92(s，1H)，8.82(s，1H)，8.18(s，1H)，7.54(s，1H)，7.44(s，1H)，5.24–5.15(m，1H)，4.87(d，J＝6.4Hz，1H)，4.76(d，J＝6.8Hz，1H)，4.53(d，J＝6.4Hz，1H)，4.46(d，J＝6.8Hz，1H)，3.65(s，3H)，2.60(s，3H)，2.32–2.21(m，1H)，2.19–2.06(m，1H)，1.94–1.79(m，2H).
(R)-N-(5-((2-氧杂螺(3.3)庚-5-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺:MS(ESI)(C21H22ClN5O4S)(M+1)+，计算值474.1；实测值，474.2。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.90(s，1H)，8.82(s，1H)，8.18(s，1H)，7.54(s，1H)，7.43(s，1H)，5.23–5.15(m，1H)，4.87(d，J＝6.4Hz，1H)，4.76(d，J＝6.8Hz，1H)，4.53(d，J＝6.4Hz，1H)，4.46(d，J＝6.8Hz，1H)，3.65(s，3H)，2.60(s，3H)，2.32–2.21(m，1H)，2.19–2.06(m，1H)，1.94–1.82(m，2H).
实施例144
2'-氯-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-((3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)甲基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:4-氯-6-((3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)甲基)烟酸乙酯
于25℃向4-氯-6-(氯甲基)烟酸乙酯(500.0mg，2.14mmol)的无水乙醇(5mL)脱气溶液中滴加3-甲氧基氮杂环丁烷(149.0mg，1.71mmol)和TEA(432.0mg，4.27mmol))并在氮气气氛下于25℃搅拌1小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DCM(2ml)中，并通过Combi Flash纯化，将其应用于40g硅胶柱，在25分钟内用0～50％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到4-氯-6-((3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)甲基)烟酸乙酯(460.0mg，56％)，为黄色油状物。MS(ESI)(C13H17ClN2O3)(M+1)+，计算值285.1；实测值，285.1。
步骤-2:2'-氯-5'-甲氧基-6-((3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)甲基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸乙酯
在25℃向4-氯-6-((3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)甲基)烟酸乙酯(460.0mg，1.62mmol)在二噁烷(5ml)中的搅拌溶液中添加(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)硼酸(908.0mg，4.85mmol)，K2CO3(447.0mg，3.23mmol)和Pd(dppf)Cl2(119.0mg，0.16mmol)。反应混合物在氮气气氛下于80℃搅拌2小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。所得残余物通过Combi Flash纯化，其应用于40g硅胶柱并在25分钟内用0～50％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到2'-氯-5'-甲氧基-6-((3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)甲基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸乙酯(250.0mg，23％)，为白色固体。MS(ESI)(C19H22ClN3O4)(M+1)+，计算值392.1；实测值，392.1。
步骤-3:2'-氯-5'-甲氧基-6-((3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)甲基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸
在25℃向2'-氯-5'-甲氧基-6-((3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)甲基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸乙酯(250.0mg，0.64mmol)的四氢呋喃(THF)(2mL)和水(2mL)的搅拌溶液中加入LiOH(134.0mg，3.19mmol)。将所得溶液在25℃搅拌2小时。在真空下除去有机溶剂。水层用柠檬酸酸化至pH～2，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(1mL)中，将其应用于25g C18柱并通过CombiFlash纯化，在20分钟内用5～30％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-5'-甲氧基-6-((3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)甲基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(90.0mg，36％)，为白色固体。MS(ESI)(C17H18ClN3O4)(M+1)+，计算值364.1；实测值，364.1。
步骤-4:2'-氯-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-((3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)甲基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
向2'-氯-5'-甲氧基-6-((3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)甲基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(100.0mg，0.28mmol)的乙腈(2mL)搅拌溶液中加入5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(36.1mg，0.28mmol)和NMI(113.0mg，1.37mmol)。向上述溶液中加入TCFH(77.0mg，0.28mmol)的乙腈(1mL)溶液。所得溶液在氮气下于25℃搅拌1小时。在真空下除去溶剂。将所得残余物溶解在DMF(2ml)中并通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：Xselect CSH C18OBD柱30*150mm5μm，n；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B:ACN；流速：60mL/min；梯度：10分钟内从10％B至30％B，30％B；波长：220nm；RT1(min):8.25；进样体积：1.2mL；运行次数：3)，得到2'-氯-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-((3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)甲基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(15.1mg，11％)，为白色固体。MS(ESI)(C20H21ClN6O4S)(M+1)+，计算值477.1；实测值，477.2。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.73(s，1H)，8.27(s，1H)，8.12(s，1H)，7.20(s，1H)，6.40(s，1H)，4.32–4.22(m，1H)，4.18–4.06(m，5H)，3.98–3.92(m，2H)，3.90(s，3H)，3.74–3.68(m，2H)，3.21(s，3H)。
实施例158
2'-氯-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-(甲氧基甲基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:4-氯-6-乙烯基烟酸乙酯
在23℃向4,6-二氯烟酸乙酯(10.0g，45.40mmol)在1,4-二噁烷(60mL)和水(6mL)中的搅拌溶液中添加三氟(乙烯基)-l4-硼烷钾盐(6.1g，45.40mmol)，
K2CO3(12.5g，91.00mmol)和PdCl2(dppf).CH2Cl2(3.7g，4.54mmol)。所得溶液在氮气气氛下于80℃搅拌1.5小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。所得残余物通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，其应用于120g硅胶柱并在35分钟内用0～50％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到4-氯-6-乙烯基烟酸乙酯(9.0g，75％)，为黄色固体。MS(ESI)(C10H10ClNO2)(M+1)+，计算值212.0；实测值，212.0。
步骤-2:4-氯-6-甲酰基烟酸乙酯
在20℃向4-氯-6-乙烯基烟酸乙酯(9.0g，42.50mmol)在四氢呋喃(210mL)和水(70mL)中的搅拌溶液中添加四氧化锇(2.1g，8.50mmol)和高碘酸钠(18.2g，85.00mmol)。将所得溶液在20℃搅拌16h。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DCM(8mL)中并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于330g硅胶柱，在25分钟内用0～50％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到4-氯-6-甲酰基烟酸乙酯(3.1g，31％)，为黄色固体。MS(ESI)(C9H8ClNO3)(M+1)+，计算值214.0；实测值，214.0。
步骤-3:4-氯-6-(羟甲基)烟酸乙酯
在0℃向4-氯-6-甲酰基烟酸乙酯(2.0g，9.36mmol)的乙醇(20mL)搅拌溶液中添加NaBH4(0.4g，9.34mmol)。将所得溶液在0℃搅拌30分钟。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩，得到4-氯-6-(羟甲基)烟酸乙酯(2.0g，粗品)，为黄色油状物。MS(ESI)(C9H10ClNO3)(M+1)+,216.0；实测值，216.0。
步骤-4:2'-氯-6-(羟甲基)-5'-甲氧基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸乙酯
在20℃向4-氯-6-(羟甲基)烟酸乙酯(2.0g，9.28mmol)的1,4-二噁烷(20mL)搅拌溶液中添加(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)硼酸(2.4g，12.99mmol)，K2CO3(3.9g，27.80mmol)的水(4mL)溶液和Pd(dtbpf)Cl2(604.0mg，0.93mmol)。所得溶液在氮气气氛下于80℃搅拌1小时。用乙酸乙酯稀释反应混合物并过滤。收集滤液并用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DCM(8mL)中并通过Combi Flash(Biotage IsoleraPrime)纯化，将其应用于80g硅胶柱，在30分钟内用0～90％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到2'-氯-6-(羟甲基)-5'-甲氧基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸乙酯(1.1g，30％)，为棕色油状物。MS(ESI)(C15H15ClN2O4)(M+1)+，计算值323.1；实测值，323.1。
步骤-5:2'-氯-5'-甲氧基-6-(甲氧基甲基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸乙酯
在0℃向NaH(109.1mg，2.73mmol，60％)的N,N-二甲基甲酰胺(2ml)搅拌溶液中加入2'-氯-6-(羟甲基)-5'-甲氧基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸乙酯(600.0mg，1.86mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(2ml)溶液。所得溶液在0℃搅拌30分钟。在0℃和氮气下向上述溶液中加入硫酸二甲酯(251.0mg，1.99mmol)。然后将所得混合物在25℃搅拌3小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(2ml)中，将其应用于40g C18柱并通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，在30分钟内用5～30％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-5'-甲氧基-6-(甲氧基甲基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸乙酯(210.0mg，34％)，为棕色油状物。MS(ESI)(C16H17ClN2O4)(M+1)+，计算值337.1；实测值，337.1。
步骤-6:2'-氯-5'-甲氧基-6-(甲氧基甲基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸
在25℃向2'-氯-5'-甲氧基-6-(甲氧基甲基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸乙酯(180.0mg，0.53mmol)的四氢呋喃(THF)(1mL)搅拌溶液中加入LiOH(38.4mg，1.60mmol)的水(0.3mL)溶液。将所得溶液在25℃搅拌16h。反应混合物用柠檬酸酸化至pH 4～5并直接纯化。所得残余物用乙腈(2mL)稀释，然后应用于40g C18柱，通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，并在30分钟内用5～30％乙腈水溶液(0.05％FA)洗脱，得到2'-氯-5'-甲氧基-6-(甲氧基甲基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(120.0mg，70％)，为白色固体。MS(ESI)(C14H13ClN2O4)(M+1)+，计算值309.1；实测值，309.1。
步骤-7:2'-氯-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-(甲氧基甲基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在25℃，向2'-氯-5'-甲氧基-6-(甲氧基甲基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(60.0mg，0.19mmol)的乙腈(1mL)搅拌溶液中加入1-甲基-1H-咪唑(80.0mg，0.97mmol)和5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(25.5mg，0.19mmol)。在25℃和氮气下，向上述溶液中加入TCFH(54.5mg，0.19mmol)的MeCN(0.5mL)溶液。然后将所得混合物在25℃搅拌2小时。将残余物溶解在DMF(1mL)中并通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：XBridge Prep OBD C18柱，30*150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B:ACN；流速：60mL/min；梯度：8分钟内从16％B至26％B，26％B；波长：254nm；RT1(min):7)，得到2'-氯-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-(甲氧基甲基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(19.1mg，23％)，为白色固体。MS(ESI)(C17H16ClN5O4S)(M+1)+，计算值422.1；实测值，422.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.97(s，1H)，8.91(s，1H)，8.18(s，1H)，7.54(s，1H)，7.46(s，1H)，4.62(s，2H)，4.07(s，3H)，3.64(s，3H)，3.42(s，3H)。
实施例173和174
N-(5-(((5s,8r)-1-氧杂螺(4.5)癸烷-8-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺和N-(5-(((5r,8s)-1-氧杂螺(4.5)癸烷-8-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:1-氧杂螺(4.5)癸-8-醇
在0℃、氮气氛下，向搅拌的1-氧杂螺(4.5)癸-8-酮(100.0mg，0.64mmol)的甲醇(1mL)溶液中分批加入NaBH4(50.0mg，1.32mmol)。在氮气气氛下将所得溶液在25℃搅拌2小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DCM(1mL)中并通过Combi Flash(BiotageIsolera Prime)纯化，将其应用于20g硅胶柱，在35分钟内用0～50％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到1-氧杂螺(4.5)癸-8-醇(80.0mg，71％)，为无色油状物.
步骤-2:S-甲基O-(1-氧杂螺(4.5)癸烷-8-基)二硫代碳酸酯
在0℃向NaH(41.0mg，1.02mmol，60％)的THF(5mL)混合物中分批加入1-氧杂螺(4.5)癸-8-醇(80.0mg，0.51mmol)并氮气下于0℃搅拌反应1h。然后向上述混合物中加入CS2(58.0mg，0.76mmol)并在0℃搅拌20分钟，然后在5℃将MeI(109.0mg，0.76mmol)加入上述混合物中。将所得混合物在0℃搅拌1小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩，得到S-甲基O-(1-氧杂螺(4.5)癸烷-8-基)二硫代碳酸酯(100.0mg，粗品)，为黄色油状物，其无需进一步纯化即可用于下一步。
步骤-3:O-(1-氧杂螺(4.5)癸烷-8-基)肼基硫代碳酸酯
在25℃氮气气氛下向S-甲基O-(1-氧杂螺(4.5)癸烷-8-基)二硫代碳酸酯(100.0mg，0.40mmol)在甲醇(4mL)中的搅拌溶液中添加水合肼(20.0mg，0.49mmol)，80％)。所得溶液在25℃搅拌0.5小时。在真空下除去溶剂，得到O-(1-氧杂螺(4.5)癸烷-8-基)肼基硫代碳酸酯(120.0mg，粗品)，为黄色油状物，其无需进一步纯化即可用于下一步。
步骤-4:5-((1-氧杂螺(4.5)癸烷-8-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
在氮气气氛下于25℃向O-(1-氧杂螺(4.5)癸烷-8-基)肼基硫代碳酸酯(120.0mg，0.38mmol)和TEA(76.0mg，0.76mmol)的甲醇(4mL)搅拌溶液中加入BrCN(45.0mg，0.42mmol)。在氮气气氛下将所得溶液在25℃搅拌1小时。在真空下除去溶剂。将所得残余物溶解在DCM(1mL)中并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于20g硅胶柱，在30分钟内用0～10％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到5-((1-氧杂螺(4.5)癸烷-8-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(80.0mg，81％)，为黄色固体。MS(ESI)(C11H17N3O2S)(M+1)+，计算值256.1；实测值，256.1。
步骤-5:N-(5-((1-氧杂螺(4.5)癸烷-8-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
向5-((1-氧杂螺(4.5)癸烷-8-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(80.0mg，0.31mmol)的乙腈(1mL)搅拌溶液中加入中间体G(87.0mg，0.31mmol)和1-甲基-1H-咪唑(129.0mg，1.56mmol)。向上述溶液中加入TCFH(88.0mg，0.31mmol)的MeCN(0.5mL)溶液。将所得溶液在氮气下于25℃搅拌1小时。将所得残余物溶解在DMF(1mL)中，将其应用于20g C18柱并通过Combi Flash纯化，在25分钟内用5～80％乙腈水溶液洗脱，得到N-(5-((1-氧杂螺(4.5)癸烷-8-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(97.0mg，42％)，为白色固体。MS(ESI)(C24H26ClN5O4S)(M+1)+，计算值516.1；实测值，516.2。
步骤-6:N-(5-(((5s,8r)-1-氧杂螺(4.5)癸烷-8-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺和N-(5-(((5r,8s)-1-氧杂螺(4.5)癸烷-8-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
N-(5-((1-氧杂螺(4.5)癸烷-8-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(90.0mg)通过制备型手性HPLC分离，条件如下：(柱：CHIRAL ART Amylose-SA，2*25cm，5μm；流动相A:Hex(0.2％FA)--HPLC，流动相B:MeOH:DCM＝1:1--HPLC；流速：20mL/min；梯度：12.5分钟内20％B至20％B；波长：220/254nm；RT1(min):9.02；RT2(min):11.22；样品溶剂：MeOH:DCM＝1:1--HPLC；进样体积：0.5mL；运行次数：5)，得到N-(5-(((5s,8r)-1-氧杂螺(4.5)癸烷-8-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(42.6mg，47％)，为白色固体，其具有手性HPLC的第一个峰，和N-(5-(((5r,8s)-1-氧杂螺(4.5)癸烷-8-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(22.7mg，25％)，为白色固体，其具有手性HPLC的第二个峰。相对立体化学尚未确定。
N-(5-(((5s,8r)-1-氧杂螺(4.5)癸烷-8-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺:MS(ESI)(C24H26ClN5O4S)(M+1)+，计算值516.1；实测值，516.2。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.85(s，1H)，8.81(s，1H)，8.18(s，1H)，7.54(s，1H)，7.43(s，1H)，4.95–4.85(m，1H)，3.80–3.56(m，5H)，2.60(s，3H)，2.13–1.75(m，6H)，1.74–1.58(m，4H)，1.56–1.40(m，2H).
N-(5-(((5r,8s)-1-氧杂螺(4.5)癸烷-8-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺:MS(ESI)(C24H26ClN5O4S)(M+1)+，计算值516.1；实测值，516.2。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.86(s，1H)，8.80(s，1H)，8.18(s，1H)，7.53(s，1H)，7.43(s，1H)，5.04–4.98(m，1H)，3.76–3.68(m，2H)，3.64(s，3H)，2.59(s，3H)，2.04–1.94(m，2H)，1.94–1.81(m，2H)，1.81–1.73(m，2H)，1.72–1.58(m，4H)，1.55–1.45(m，2H).
实施例185和186
N-(5-(((4s,7s)-1-氧杂螺(3.5)壬烷-7-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺和N-(5-(((4r,7r)-1-氧杂螺(3.5)壬烷-7-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:S-甲基O-(1-氧杂螺(3.5)壬烷-7-基)二硫代碳酸酯
在0℃，向1-氧杂螺(3.5)壬-7-醇(100.0mg，0.70mmol)的四氢呋喃(THF)(3mL)搅拌溶液中加入NaH(33.8mg，0.84mmol，60％)。所得溶液在0℃搅拌30分钟。在0℃和氮气下向上述溶液中加入CS2(80.0mg，1.05mmol)。然后将所得混合物在0℃搅拌20分钟。在0℃和氮气下向上述溶液中加入MeI(150.0mg，1.05mmol)。然后将所得混合物在25℃搅拌1小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩，得到S-甲基O-(1-氧杂螺(3.5)壬烷-7-基)二硫代碳酸酯(160.0mg，粗品)，为黄色油状物。
步骤-2:O-(1-氧杂螺(3.5)壬烷-7-基)肼基硫代碳酸酯
在氮气下于25℃将S-甲基O-(1-氧杂螺(3.5)壬烷-7-基)二硫代碳酸酯(160.0mg，0.69mmol)、氢氧化肼(43.1mg，0.69mmol)在甲醇(3mL)中的混合物搅拌反应2h。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩，得到O-(1-氧杂螺(3.5)壬烷-7-基)肼基硫代碳酸酯(170.0mg，粗品)，为黄色油状物。MS(ESI)(C9H16N2O2S)(M+1)+，计算值217.1；实测值217.1.
步骤-3:5-((1-氧杂螺(3.5)壬烷-7-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
在25℃向O-(1-氧杂螺(3.5)壬烷-7-基)肼基硫代碳酸酯(170.0mg，0.78mmol)在甲醇(3mL)中的混合物中加入TEA(159.0mg，1.57mmol))和溴化氰(100.0mg，0.94mmol)。将所得溶液在氮气下于25℃搅拌1小时，然后真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(1mL)中，将其应用于20g C18柱并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在20分钟内用5～30％乙腈水溶液洗脱，得到5-((1-氧杂螺(3.5)壬烷-7-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(89.0mg，三步骤中45％)，为黄色固体。MS(ESI)(C10H15N3O2S)(M+1)+，计算值242.2；实测值242.2。
步骤-4:N-(5-((1-氧杂螺(3.5)壬烷-7-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
中间体G(81.0mg，0.29mmol)，5-((1-氧杂螺(3.5)壬烷-7-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(70.0mg，0.29mmol)和1-甲基咪唑(119.0mg，1.45mmol)的乙腈(1mL)搅拌溶液。在25℃、氮气环境下向其中加入N-(氯(二甲氨基)亚甲基)-N-甲基甲胺六氟磷酸盐(V)(90.0mg，0.32mmol)的乙腈(1mL)溶液。将所得混合物在25℃搅拌2小时。将所得残余物溶解在DMF(1mL)中，将其应用于20g C18柱并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～60％乙腈水溶液洗脱，得到N-(5-((1-氧杂螺(3.5)壬烷-7-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(80.0mg，52％)，为黄色固体。MS(ESI)(C23H24ClN5O4S)(M+1)+，计算值502.1；实测值502.1。
步骤-5:N-(5-(((4s,7s)-1-氧杂螺(3.5)壬烷-7-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺和N-(5-(((4r,7r)-1-氧杂螺(3.5)壬烷-7-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
N-(5-((1-氧杂螺(3.5)壬烷-7-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(80mg)的外消旋化合物通过制备型手性HPLC分离，条件如下：(柱：CHIRALPAK IE，2*25cm，5μm；流动相A:Hex(0.2％FA)--HPLC，流动相B:EtOH:DCM＝1:1--HPLC；流速：17mL/min；梯度：70％B to 70％B in 18min；波长：220/254nm；RT1(min):9.42；RT2(min):15.47；样品溶剂：MeOH:DCM＝1:1--HPLC；进样体积：0.8mL；运行次数：3)，得到N-(5-(((4s,7s)-1-氧杂螺(3.5)壬烷-7-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(40.2mg，49％)，为白色固体，其在手性HPLC上具有较短的保留时间，和N-(5-(((4r,7r)-1-氧杂螺(3.5)壬烷-7-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(15.0mg，18％)，为白色固体，其在手性HPLC上具有较长的保留时间。立体化学尚未确定。
N-(5-(((4s,7s)-1-氧杂螺(3.5)壬烷-7-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺:MS(ESI)(C23H24ClN5O4S)(M+1)+，计算值502.2；实测值,502.2。11H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.86(s，1H)，8.80(s，1H)，8.17(s，1H)，7.53(s，1H)，7.43(s，1H)，4.95–4.850(m，1H)，4.37(t，J＝7.6Hz，2H)，3.64(s，3H)，2.59(s，3H)，2.34(t，J＝7.6Hz，2H)，2.01–1.64(m，8H)。
N-(5-(((4r,7r)-1-氧杂螺(3.5)壬烷-7-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺:MS(ESI)(C23H24ClN5O4S)(M+1)+，计算值502.2；实测值,502.2。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.86(s，1H)，8.81(s，1H)，8.17(s，1H)，7.53(s，1H)，7.42(s，1H)，4.96–4.89(m，1H)，4.38(t，J＝7.6Hz，2H)，3.64(s，3H)，2.59(s，3H)，2.36(t，J＝7.6Hz，2H)，2.14–1.86(m，4H)，1.76–1.66(m，4H)。
实施例196
2'-氯-6-环丙氧基-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:2,4-二氯-5-(乙氧基羰基)吡啶1-氧化物
在25℃、氮气下，向4,6-二氯烟酸乙酯(10.0g，45.66mmol)的DCM(100mL)搅拌溶液中加入TFAA(19.2g，90.89mmol)和尿素H2O2(8.6g，90.89mmol)。混合物在25℃搅拌2小时。所得混合物用DCM(100mL)稀释。用饱和Na2CO3水溶液和食盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。所得残余物通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，其应用于120g硅胶柱并在30分钟内用0～48％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到2,4-二氯-5-(乙氧基羰基)吡啶1-氧化物(8.9g，75％)，为白色固体。MS(ESI)(C8H7Cl2NO3)(M+1)+，计算值236.0；实测值，236.0.
步骤-2:4-氯-2-环丙氧基-5-(乙氧基羰基)吡啶1-氧化物
在0℃向2,4-二氯-5-(乙氧基羰基)吡啶1-氧化物(5.0g，21.18mmol)的THF(50mL)搅拌溶液中分批加入NaH(1.0g，25.00mmol，60％)。所得溶液在0℃搅拌40分钟。在0℃和氮气下向上述溶液中加入环丙醇(1.4g，24.14mmol)。将所得溶液在25℃搅拌2小时。反应混合物用水淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(5ml)中，将其应用于120g C18柱并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～55％乙腈水溶液洗脱，得到4-氯-2-环丙氧基-5-(乙氧基羰基)吡啶1-氧化物(2.9g，53％)，为白色固体。MS(ESI)(C11H12ClNO4)(M+1)+，计算值258.0；实测值，258.0.
步骤-3:4-氯-6-环丙氧基烟酸乙酯
在25℃向4-氯-2-环丙氧基-5-(乙氧基羰基)吡啶1-氧化物(2.9g，112.84mmol)在HOAc(30mL)中的搅拌溶液中添加Fe(2.5g，446.42mmol)。所得溶液在氮气下于60℃搅拌16小时。过滤悬浮液。用乙酸乙酯洗涤滤饼。收集滤液并在真空下干燥。将所得残余物溶解在DMF(5ml)中，将其应用于80g C18柱并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用15～85％乙腈水溶液洗脱，得到4-氯-6-环丙氧基烟酸乙酯(1.5g，55％)，为黄色固体。MS(ESI)(C11H12ClNO3)(M+1)+，计算值242.1；实测值，242.0。
步骤-4:2'-氯-6-环丙氧基-5'-甲氧基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸乙酯
在25℃向4-氯-6-环丙氧基烟酸乙酯(1.0g，4.15mmol)的二噁烷(5mL)溶液中加入Pd(dtbpf)Cl2(269.7mg，0.41mmol)，K2CO3(1.7g，12.32mmol)和(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)硼酸(1.2g，6.41mmol)。所得溶液在80℃搅拌16小时。用水稀释反应混合物，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(3mL)中，将其应用于40g C18柱并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～80％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-6-环丙氧基-5'-甲氧基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸乙酯(500.0mg，34％)，为黄色固体。MS(ESI)(C17H17ClN2O4)(M+1)+，计算值349.1；实测值，349.1。
步骤-5:2'-氯-6-环丙氧基-5'-甲氧基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸
在0℃向2'-氯-6-环丙氧基-5'-甲氧基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸乙酯(200.0mg，0.57mmol)的四氢呋喃(THF)搅拌溶液中(1mL)加入LiOH(27.5mg，1.14mmol)的水(1mL)溶液。所得溶液在室温搅拌1小时。在真空下除去有机溶剂。水层用柠檬酸酸化至pH～5，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩，得到2'-氯-6-环丙氧基-5'-甲氧基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(173mg，粗品)，为黄色固体。MS(ESI)(C15H13ClN2O4)(M+1)+，计算值321.1；实测值321.1。
步骤-6:2'-氯-6-环丙氧基-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在20℃、氮气下向2'-氯-6-环丙氧基-5'-甲氧基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(120.0mg，0.37mmol)的乙腈(0.5mL)溶液加入5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(49.1mg，0.37mmol)和NMI(153.0mg，1.87mmol)。在25℃和氮气下，向上述溶液中加入TCFH(105.0mg，0.37mmol)的乙腈(0.5mL)溶液。然后将所得混合物在25℃搅拌1小时。将所得残余物溶解在DMF(2ml)中，将其应用于20g C18柱并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在25分钟内用5～75％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-6-环丙氧基-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(62.3mg，37％)，为白色固体。MS(ESI)(C18H16ClN5O4S)(M+1)+，计算值434.1；实测值434.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.80(s，1H)，8.62(s，1H)，8.16(s，1H)，7.54(s，1H)，6.99(s，1H)，4.41–4.31(m，1H)，4.08(s，3H)，3.64(s，3H)，0.89–0.77(m，2H)，0.80–0.70(m，2H).
实施例207和208
N-(5-(((S)-4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-3'-氟-5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺和N-(5-(((R)-4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-3'-氟-5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:N-(5-((4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-3'-氟-5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在25℃向3'-氟-5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(259.0mg，0.94mmol，实施例61，步骤2)的乙腈(2mL)搅拌溶液中依次加入5-((4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(200.0mg，0.94mmol，实施例95和107，步骤3)和1-甲基-1H-咪唑(385.0mg，4.69mmol)。然后在25℃将N,N,N',N'-四甲基氯甲脒六氟磷酸盐(263.0mg，0.94mmol)的乙腈(1mL)溶液加入上述混合物中。将所得溶液在25℃搅拌2小时。将所得残余物溶解在乙腈(3mL)中，将其应用于20g C18柱并通过Combi Flash(Biotage IsoleraPrime)纯化，在30分钟内用5～42％乙腈水溶液洗脱，得到N-(5-((4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-3'-氟-5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(290.0mg，63％)，为白色固体。MS(ESI)(C22H22FN5O4S)(M+1)+，计算值472.1；实测值，472.2。
步骤-2:N-(5-(((S)-4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-3'-氟-5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺和N-(5-(((R)-4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-3'-氟-5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
N-(5-((4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-3'-氟-5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(200.0mg)通过制备型手性HPLC分离，条件如下：(柱：CHIRAL ART Cellulose-SB，2*25cm，5μm；流动相A:Hex(0.2％FA)--HPLC，流动相B:EtOH:DCM＝1:1--HPLC；流速：20mL/min；梯度：10分钟内从20％B至20％B；波长：220/254nm；RT1(min):7.86；RT2(min):9.68；样品溶剂：MeOH:DCM＝2:1(0.1％FA)；进样体积：0.8mL；运行次数：14)，得到N-(5-(((S)-4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-3'-氟-5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(87.3mg，43.3％)，为白色固体，其具有手性HPLC的第一个峰，和N-(5-(((R)-4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-3'-氟-5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(81.6mg，40％)，为白色固体，其具有手性HPLC的第二个峰。绝对立体化学尚未确定。
N-(5-(((S)-4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-3'-氟-5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺:MS(ESI)(C22H22FN5O4S)(M+1)+，计算值472.1；实测值，472.2。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.00(s，1H)，8.91(s，1H)，8.18(s，1H)，7.40(s，1H)，5.59–5.56(m，1H)，4.02–4.00(m，2H)，3.69(s，3H)，2.59(s，3H)，2.49–2.44(m，1H)，2.43(s，3H)，2.15–2.14(m，1H)，0.82–0.51(m，4H).
N-(5-(((R)-4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-3'-氟-5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺:MS(ESI)(C22H22FN5O4S)(M+1)+，计算值472.1；实测值，472.2。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.00(s，1H)，8.91(s，1H)，8.18(s，1H)，7.40(s，1H)，5.59–5.56(m，1H)，4.02–4.00(m，2H)，3.69(s，3H)，2.59(s，3H)，2.49–2.44(m，1H)，2.43(s，3H)，2.15–2.14(m，1H)，0.82–0.53(m，4H).
实施例215
2'-氯-6-(环丙氧基甲基)-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:4-氯-6-(氯甲基)烟酸乙酯
在0℃向4-氯-6-(羟基甲基)烟酸乙酯(2.0g，9.28mmol)的二氯甲烷(30mL)搅拌溶液中加入SOCl2(1.6g，13.91mmol)。然后将所得溶液在25℃搅拌2小时。通过加入饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应混合物，并用二氯甲烷萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩，得到4-氯-6-(氯甲基)烟酸乙酯(1.8g，粗品)，为黄色油状物，其不经进一步纯化用于下一步。MS(ESI)(C9H9Cl2NO2)(M+1)+，计算值234.0，实测值234.1。
步骤-2:4-氯-6-(环丙氧基甲基)烟酸乙酯
在0℃，向环丙醇(223.0mg，3.84mmol)的四氢呋喃(20mL)搅拌溶液中分批加入NaH(185.0mg，4.61mmol，60％)。将反应混合物在0℃搅拌0.5小时。然后在0℃将4-氯-6-(氯甲基)烟酸乙酯(900.0mg，3.84mmol)的四氢呋喃(20mL)溶液加入到上述混合物中。然后将所得溶液在25℃搅拌1.5小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DMF(6mL)中，将其应用于80g C18柱并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在25分钟内用5～50％乙腈水溶液洗脱，得到4-氯-6-(环丙氧基甲基)烟酸乙酯(330.0mg，30％)，为黄色固体。MS(ESI)(C12H14ClNO3)(M+1)+，计算值256.0，实测值256。
步骤-3:2'-氯-6-(环丙氧基甲基)-5'-甲氧基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸乙酯
在25℃向4-氯-6-(环丙氧基甲基)烟酸乙酯(220.0mg，0.86mmol)在1,4-二噁烷(2mL)和水(0.4mL)中的搅拌溶液中依次添加(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)硼酸(484.0mg，2.58mmol)，K2CO3(357.0mg，2.58mmol)和1,1'-双(二叔丁基膦)二茂铁二氯化钯(56.1mg，0.08)mmol)。所得溶液在氮气气氛下于80℃搅拌16小时。过滤悬浮液。滤液在真空下浓缩。将残余物应用到40g C18柱，通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～43％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-6-(环丙氧基甲基)-5'-甲氧基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸乙酯(110.0mg，30％)，为黄色固体。MS(ESI)(C18H19ClN2O4)(M+1)+，计算值363.1，实测值363.0。
步骤-4:2'-氯-6-(环丙氧基甲基)-5'-甲氧基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸
在25℃向2'-氯-6-(环丙氧基甲基)-5'-甲氧基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸乙酯(189.0mg，0.52mmol)的四氢呋喃(1.5mL)和水(0.5mL)的搅拌溶液中加入LiOH(37.4mg，1.56mmol)。将所得溶液在25℃搅拌2小时。有机溶剂用柠檬酸酸化至pH 5～6。将有机溶剂应用于20g C18柱并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～40％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-6-(环丙氧基甲基)-5'-甲氧基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(80.0mg，8％)，为白色固体。MS(ESI)(C16H15ClN2O4)(M+1)+，计算值335.0，实测值335.0。
步骤-5:2'-氯-6-(环丙氧基甲基)-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在25℃向2'-氯-6-(环丙氧基甲基)-5'-甲氧基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(30.0mg，0.09mmol)的乙腈搅拌溶液(1mL)中依次加入1-甲基-1H-咪唑(36.8mg，0.44mmol)，5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(14.1mg，0.10mmol)和TCFH(25.1mg，0.09mmol)。将所得溶液在25℃搅拌2小时。有机溶剂用柠檬酸酸化至pH～6。将有机溶剂(2mL)应用于20g C18柱并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在30分钟内用5～60％乙腈水溶液洗脱，得到2'-氯-6-(环丙氧基甲基)-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(20.5mg，50％)，为白色固体。MS(ESI)(C19H18ClN5O4S)(M+1)+，计算值448.0，实测值448.0。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.20(s，1H)，8.52(s，1H)，8.15(s，1H)，7.41(s，1H)，7.31(s，1H)，4.20–4.00(m，6H)，3.90(s，3H)，0.92–0.78(m，4H)。
实施例216和217
N-(5-(((1S,2R,4R)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺和N-(5-(((1R,2S,4S)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:外消旋-O-((1R,2S,4S)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)S-甲基二硫代碳酸酯
在5分钟内在氮气下、于0℃向外消旋-(1R,2S,4S)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-醇(750mg，6.57mmol)的四氢呋喃(15mL)搅拌溶液中分批添加氢化钠(315mg，13.14mmol)。加入后，反应混合物在室温搅拌30分钟。30分钟后，在室温向上述反应混合物中加入二硫化碳(0.792mL，13.14mmol)，然后加入碘甲烷(0.411mL，6.57mmol)。然后将反应混合物在室温再搅拌30分钟。用冷水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取(2×40mL)。合并的有机层用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到外消旋-O-((1R,2S,4S)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)S-甲基二硫代碳酸酯(1.3g，6.29mmol，96％产率)，为黄色液体。MS(ESI)(C8H12O2S2)(M+1)+，计算值205.04，实测值，205.0。
步骤-2:外消旋-O-((1R,2S,4S)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)肼基硫代碳酸酯
在室温向外消旋-O-((1R,2S,4S)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)S-甲基二硫代碳酸酯(1.3g，6.24mmol)的甲醇(5mL)的搅拌溶液中加入一水合肼(0.343g，6.86mmol)。反应混合物在室温搅拌1小时。在真空下除去有机溶剂。所得残余物用水(40mL)稀释，用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤并减压浓缩，得到外消旋-O-((1R,2S,4S)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)肼基硫代碳酸酯(1g，5.29mmol，85％产率)为淡黄色固体。
MS(ESI)(C7H12N2O2S)(M+1)+，计算值189.07；实测值，189.2。
步骤-3:外消旋-5-(((1R,2S,4S)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
于室温向外消旋-O-((1R,2S,4S)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)肼基硫代碳酸酯(1g，5.31mmol)的乙醇(5mL)搅拌溶液中加入三乙胺(0.740mL，5.31mmol)，然后加入溴化氰(0.563g，5.31mmol)。反应混合物在室温搅拌30分钟。在真空下除去有机溶剂。所得残余物用水(30mL)稀释，用10％MeOH的乙酸乙酯溶液(2×50mL)萃取。有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩，得到棕色树胶状粗产物。
将所得残余物溶解在ACN(4mL)和THF(2mL)中，将液体注入100gC18柱，用GRACErevelleris X2纯化，在40分钟内用0～100％乙腈水溶液洗脱。得到外消旋-5-(((1R,2S,4S)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(500mg，2.258mmol，42.5％产率)为棕色固体。
MS(ESI)(C8H11N3O2S)(M+1)+，计算值214.07；实测值，214.2
步骤-4:外消旋-N-(5-(((1R,2S,4S)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在室温向中间体G(200mg，0.718mmol)的乙腈(3mL)和N,N-二甲基甲酰胺(0.6mL)搅拌溶液中加入1-甲基-1H-咪唑(177mg，2.153mmol)，氯-N,N,N′,N′-四甲基甲脒六氟磷酸盐(221mg，0.789mmol)和外消旋-5-5-(((1R,2S,4S)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(153mg，0.718mmol)。反应混合物在室温搅拌3小时。用冷水淬灭反应混合物，用乙酸乙酯(2×10mL)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩得到棕色胶状粗产物。
将所得残余物溶解在ACN(4mL)和THF(2mL)中，将液体注入100gC18柱，用GRACErevelleris X2纯化，在40分钟内用0～100％乙腈水溶液洗脱，得到外消旋-N-(5-(((1R,2S,4S)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(200mg，58％)，为白色固体。
MS(ESI)(C21H20ClN5O4S)(M+1)+，计算值474.1；实测值，474.2.
步骤-5:N-(5-(((1S,2R,4R)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺和N-(5-(((1R,2S,4S)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
The外消旋-N-(5-(((1R,2S,4S)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(200mg)通过制备型手性SFC在以下条件下进行分离:(柱：YMC Cellulose SZ(250*30)mm，5μm；流动相A:CO2，流动相B:甲醇中的0.5％异丙胺；梯度：等度洗脱40％B；柱温(℃):35；背压(bar):100；波长：220nm；RT1(min):3.42；RT2(min):4.03；样品溶剂：DCM/MeOH-HPLC；进样体积：0.9mL/注射；周期:7.5min)，得到N-(5-(((1S,2R,4R)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(50mg，0.105mmol，14.67％产率)为浅棕色固体，其具有在手性SFC上的第一个峰，其保留时间较短，和N-(5-(((1R,2S,4S)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(52mg，0.110mmol，15.26％产率)为浅棕色固体，其具有在手性SFC上的第二个峰，其保留时间更长。绝对立体化学尚未确定。
N-(5-(((1S,2R,4R)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺:MS(ESI)(C21H20ClN5O4S)(M+1)+，计算值474.1；实测值，474.0。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ12.92(s，1H)，8.81(s，1H)，8.17(s，1H)，7.54(s，1H)，7.43(s，1H)，5.00(dd，J＝2.4Hz，7.2Hz，1H)，4.66(d，J＝5.6Hz，1H)，4.62(t，J＝5.2Hz，1H)，3.63(s，3H)，2.59(s，3H)，2.12-2.05(m，1H)，1.72-1.69(m，1H)，1.61-1.58(m，1H)，1.53-1.38(m，3H)。
N-(5-(((1R,2S,4S)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺:MS(ESI)(C21H20ClN5O4S)(M+1)+，计算值474.1；实测值，474.0。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ12.92(s，1H)，8.81(s，1H)，8.17(s，1H)，7.54(s，1H)，7.42(s，1H)，5.00(dd，J＝2.0Hz，6.8Hz，1H)，4.66(d，J＝6.0Hz，1H)，4.62(t，J＝4.8Hz，1H)，3.63(s，3H)，2.59(s，3H)，2.12-2.05(m，1H)，1.72-1.69(m，1H)，1.61-1.58(m，1H)，1.53-1.38(m，3H).
实施例218和219
N-(5-(((1S,2R,4R)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-3'-氟-5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺和N-(5-(((1R,2S,4S)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-3'-氟-5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤1:外消旋-N-(5-(((1R,2S,4S)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-3'-氟-5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在室温向3'-氟-5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(80mg，0.290mmol，实施例61，步骤2)的乙腈(3mL)和N,N-二甲基甲酰胺(0.6mL)的搅拌溶液中加入1-甲基-1H-咪唑(71.3mg，0.869mmol)，氯-N,N,N′,N′-四甲基甲脒六氟磷酸盐(89mg，0.319mmol)和外消旋-5-(((1R,2S,4S)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(61.8mg，0.290mmol，实施例216和217，步骤3)。反应混合物在室温搅拌3小时。用冷水淬灭反应混合物，用乙酸乙酯(2×10mL)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩得到棕色胶状粗产物。
将所得残余物溶解在ACN(4mL)中，将液体注入100g C18柱中，用GRACErevellerisX2纯化，在40分钟内用0～100％乙腈(0.1M甲酸)水溶液洗脱。得到外消旋-N-(5-(((1R,2S,4S)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-3'-氟-5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(60mg，44％)，为白色固体。MS(ESI)(C22H22FN5O4S)(M+1)+，计算值472.15；实测值，472.2。
步骤-2:N-(5-(((1S,2R,4R)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-3'-氟-5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺和N-(5-(((1R,2S,4S)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-3'-氟-5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
所述外消旋-N-(5-(((1R,2S,4S)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-3'-氟-5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(合并2批90mg)通过制备型手性SFC在以下条件下进行分离：(柱：Lux Amylose-1(250*30)mm，5μm；流动相A:CO2，流动相B:0.5％甲醇中的异丙胺；梯度：等度洗脱40％B；柱温(℃):35；背压(bar):100；总流量:100g/mL；波长：210nm；RT1(min):2.29；RT2(min):3.65；样品溶剂：MeOH-HPLC；进样体积：0.6mL/注射；周期:6min)，得到N-(5-(((1S,2R,4R)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-3'-氟-5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(22mg，0.046mmol，15.95％产率)，为白色固体，其具有在手性SFC上的第一个峰，其保留时间较短，和N-(5-(((1R,2S,4S)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-3'-氟-5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(25mg，0.052mmol，17.85％产率)，为浅棕色固体，其具有在手性SFC上的第二个峰，其保留时间更长。绝对立体化学尚未确定。
N-(5-(((1S,2R,4R)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-3'-氟-5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺:MS(ESI)(C22H22FN5O4S)(M+1)+，计算值472.15；实测值，472.2。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ13.0(s，1H)，8.90(s，1H)，8.18(s，1H)，7.40(s，1H)，4.99(dd，J＝2.00Hz，7.2Hz，1H)，4.65(d，J＝5.6Hz，1H)，4.62(t，J＝5.2Hz，1H)，3.68(d，J＝2.0Hz，3H)，2.59(s，3H)，2.42(d，J＝2.8Hz，3H)，2.11-2.03(m，1H)，1.73-1.56(m，2H)，1.55-1.36(m，3H).
N-(5-(((1R,2S,4S)-7-氧杂二环(2.2.1)庚-2-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-3'-氟-5'-甲氧基-2',6-二甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺:MS(ESI)(C22H22FN5O4S)(M+1)+，计算值472.15；实测值，472.0。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ13.0(s，1H)，8.92(s，1H)，8.17(s，1H)，7.38(s，1H)，4.98(dd，J＝2.00Hz，6.80Hz，1H)，4.65(d，J＝6.0Hz，1H)，4.61(t，J＝4.8Hz，1H)，3.68(s，3H)，2.58(s，3H)，2.42(d，J＝3.2Hz，3H)，2.11-2.03(m，1H)，1.73-1.56(m，2H)，1.55-1.35(m，3H).
实施例226
(S)-N-(5-((4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-溴-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:(S)-5-((4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺和(R)-5-((4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
外消旋5-((4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(1.8g，8.44mmol，实施例95和107，步骤3)通过制备型手性SFC在以下条件下进行分离：(柱：Lux A1(250*30)mm，5μm；流动相A:CO2，流动相B:甲醇；梯度：等度洗脱30％B；柱温(℃):35；背压(bar):100；波长：254nm；RT1(min):2.59；RT2(min):3.24；样品溶剂：MeOH-HPLC(100mL)；进样体积：1mL/注射；周期:5min)，得到(S)-5-((4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.750g，3.51mmol，41.6％产率)为淡棕色固体，其具有在手性SFC上的第一个峰，其保留时间较短，和(R)-5-((4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.650g，3.02mmol，35.8％产率)为淡棕色固体，其具有在手性SFC上的第二个峰，其保留时间更长。绝对立体化学尚未确定。
(S)-5-((4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺:MS(ESI)(C8H11N3O2S)(M+1)+，计算值214.07；实测值，214.0。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ6.79(s，2H)，5.49-5.40(m，1H)，4.01-3.89(m，2H)，2.41(q，J＝6.80Hz，1H)，2.08(d，J＝14.0Hz，1H)，0.85-0.76(m，1H)，0.75-0.68(m，1H)，0.62-0.55(m，1H)，0.54-0.45(m，1H)，
(R)-5-((4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺:MS(ESI)(C8H11N3O2S)(M+1)+，计算值214.07；实测值，214.0。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ6.79(s，2H)，5.49-5.40(m，1H)，4.01-3.89(m，2H)，2.41(q，J＝6.80Hz，1H)，2.08(d，J＝14.00Hz，1H)，0.85-0.76(m，1H)，0.75-0.68(m，1H)，0.62-0.55(m，1H)，0.54-0.45(m，1H)，
步骤-2:(S)-N-(5-((4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-溴-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在室温向2'-溴-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(150mg，0.464mmol，实施例63，步骤3)在乙腈(3mL)和N,N-二甲基甲酰胺(0.5mL)中的搅拌溶液中加入氯-N,N,N′,N′-四甲基甲脒六氟磷酸盐(143mg，0.511mmol)，1-甲基咪唑(0.148mL，1.857mmol)，和(S)-5-((4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(99mg，0.464mmol)。反应混合物在相同温度搅拌3小时。用水稀释反应混合物，用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到黄色胶质粗产物。
所述粗产物通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：X-SELECT C18(19*250)MM5MICRON；流动相A:10mM ABC于Milli Q水80％，流动相B:乙腈20％；流速：12mL/min；运行时间:21min；(样品溶剂：THF:ACN；进样体积：200μL；注射次数：38)，得到(S)-N-(5-((4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-溴-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(110mg，0.209mmol，45.1％产率)为灰白色固体。绝对立体化学尚未确定。
MS(ESI)(C21H20BrN5O4S)(M+1)+，计算值518.05；实测值，518.0。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ12.93(s，1H)，8.80(s，1H)，8.18(s，1H)，7.64(s，1H)，7.43(s，1H)，5.63-5.58(m，1H)，4.08-3.95(m，2H)，3.63(s，3H)，2.59(s，3H)，2.50-2.45(m，1H)，2.15(d，J＝13.60Hz，1H)，0.88-0.78(m，1H)，0.77-0.69(m，1H)，0.68-0.57(m，1H)，0.56-0.46(m，1H)。
实施例227
(R)-N-(5-((4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-溴-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
在室温向2'-溴-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酸(150mg，0.464mmol，实施例63，步骤3)在乙腈(3mL)和N，N-二甲基甲酰胺(0.5mL)中的搅拌溶液中加入氯-N,N,N′,N′-四甲基甲脒六氟磷酸盐(195mg，0.696mmol)，1-甲基咪唑(0.148mL，1.857)mmol)，和(R)-5-((4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(99mg，0.464mmol，实施例226，步骤1)。反应混合物在室温搅拌3小时。完成后，用水稀释反应混合物并用乙酸乙酯(2X20mL)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到黄色胶状粗产物。
所述粗产物通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：X-SELECT C18(19*250MM)5MICRON；流动相A:10mM ABC于Milli Q水80％，流动相B：乙腈20％；流速：10mL/min；运行时间:21min；(样品溶剂：THF:ACN；进样体积：200μL；注射次数：24)，得到(R)-N-(5-((4-氧杂螺(2.4)庚-6-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-溴-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(75mg，0.144mmol，31.1％产率)为灰白色固体。绝对立体化学尚未确定。
MS(ESI)(C21H20BrN5O4S)(M+1)+，计算值518.05；实测值，518.0。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ12.93(s，1H)，8.81(s，1H)，8.17(s，1H)，7.63(s，1H)，7.42(s，1H)，5.63-5.58(m，1H)，4.09-3.96(m，2H)，3.63(s，3H)，2.59(s，3H)，2.50-2.40(m，1H)，2.15(d，J＝14.40Hz，1H)，0.88-0.78(m，1H)，0.77-0.69(m，1H)，0.67-0.57(m，1H)，0.56-0.46(m，1H)。
实施例229和230
(S)-N-(5-((1-氧杂螺(4.4)壬-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺和(R)-N-(5-((1-氧杂螺(4.4)壬-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
步骤-1:S-甲基O-(1-氧杂螺(4.4)壬-3-基)二硫代碳酸酯：
在氮气下、0℃向1-氧杂螺(4.4)壬-3-醇(0.7g，4.92mmol)的四氢呋喃(10mL)的搅拌溶液中在5分钟内分批加入氢化钠(0.394g，9.85mmol)。加入后，反应混合物在室温搅拌30分钟。30分钟后，向上述反应混合物中加入二硫化碳(0.593mL，9.85mmol)，然后在室温加入碘甲烷(0.308mL，4.92mmol)。将反应混合物在室温再搅拌30分钟。30分钟后，用冷水淬灭反应并用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。合并的有机层用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到S-甲基O-(1-氧杂螺(4.4)壬-3-基)二硫代碳酸酯(0.95g，3.90mmol，79％产率)为橙色油状物。
MS(ESI)(C10H16O2S2)(M+H)+，计算值233.07；实测值，233.0
步骤-2:O-(1-氧杂螺(4.4)壬-3-基)肼基硫代碳酸酯
在室温、氮气下向S-甲基O-(1-氧杂螺(4.4)壬-3-基)二硫代碳酸酯(1.1g，4.73mmol)在甲醇(10mL)中的搅拌溶液中添加水合肼(0.237g，4.73mmol)。反应混合物在室温搅拌2小时。在真空下除去有机溶剂。残余物用水稀释。水层用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩，得到O-(1-氧杂螺(4.4)壬-3-基)肼基硫代碳酸酯(0.68g，2.69mmol，56.8％产率)为橙色液体。
MS(ESI)(C9H16N2O2S)(M+1)+，计算值217.1；实测值，217.2。
步骤-3:5-((1-氧杂螺(4.4)壬-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
向O-(1-氧杂螺(4.4)壬-3-基)肼基硫代碳酸酯(0.68g，3.14mmol)在乙醇(10mL)中的搅拌溶液中加入三乙胺(0.438mL，3.14mmol)，然后在室温加入溴化氰(0.333g，3.14mmol)。反应混合物在室温搅拌1小时。在真空下除去有机溶剂。残余物用水稀释。水层用乙酸乙酯(30mL×3)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩得到橙色固体粗产物。将粗产物预吸附在二氧化硅上(使用10mL DCM，10g二氧化硅(60-120目)，装载在biotage 40g snap上，并用7-9％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱30分钟，流速为30mL/分钟。收集合适的级分并真空浓缩，得到5-((1-氧杂螺(4.4)壬-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.24g，0.733mmol，23.31％产率)为黄色固体。
MS(ESI)(C10H15N3O2S)(M+1)+，计算值242.1；实测值，242.1
步骤-4:N-(5-((1-氧杂螺(4.4)壬-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺。
在室温、氮气下向中间体G(200mg，0.718mmol)和5-((1-氧杂螺(4.4)壬-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(237mg，0.718mmol)的乙腈(2mL)和N,N-二甲基甲酰胺(1.2mL)的搅拌溶液中加入1-甲基咪唑(0.286mL，3.59mmol)和氯-N,N,N′,N′-四甲基甲脒六氟磷酸盐(221mg，0.789mmol)。将反应混合物搅拌1小时。用冷水淬灭反应混合物，用乙酸乙酯萃取(10mL×3次)。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩，得到橙色油状粗产品。
所述粗产物通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：YMC C8(20x250)MM 5MICRON；流动相A:10mM ABC in MQ WATER 80％，流动相B：乙腈20％；流速：12mL/min；运行时间:25min；(样品溶剂：THF:ACN；进样体积：200μL；注射次数：18)，得到外消旋-N-(5-((1-氧杂螺(4.4)壬-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(35mg，0.068mmol，9.42％产率)为白色固体。
步骤-5:(S)-N-(5-((1-氧杂螺(4.4)壬-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺和(R)-N-(5-((1-氧杂螺(4.4)壬-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺
外消旋化合物N-(5-((1-氧杂螺(4.4)壬-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(35mg)通过手性SFC使用以下方法在以下条件下纯化：柱：YMC Cellulose SC(250*30)mm，5μm，流动相：CO2:0.5％异丙胺于IPA中(60:40)％，总流量：100g/min，背压：100bar，波长：220nm,周期:10min，将样品溶解在2.0mL的MeOH/乙腈中并注射800μl/注射。
SFC纯化后，收集两个合适的级分。
将级分-1浓缩并冻干，得到(S)-N-(5-((1-氧杂螺(4.4)壬-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(12mg)为灰白色固体。
DMSO-d6中的1H NMR显示了所需化合物的所需质子以及捕获的异丙胺。
为了除去异丙胺，(S)-N-(5-((1-氧杂螺(4.4)壬-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(12mg)用MTBE&己烷洗涤并冻干，得到(S)-N-(5-((1-氧杂螺(4.4)壬-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(8mg，0.016mmol，23.04％产率)为灰白色固体。绝对立体化学尚未确定。
(S)-N-(5-((1-氧杂螺(4.4)壬-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺:MS(ESI)(C23H24ClN5O4S)(M+1)+，计算值502.13；实测值，502.1。1H-NMR(400MHz，CD3OD):δ8.81(s，1H)，8.10(s，1H)，7.50(s，1H)，7.44(s，1H)，5.54-5.49(m，1H)，4.13(dd，J＝4.8Hz，10.8Hz，1H)，4.04(d，J＝10.8Hz，1H)，3.74(s，3H)，2.69(s，3H)，2.40(dd，J＝6.4Hz，14.4Hz，1H)，2.25(d，J＝14.8Hz，1H)，1.96-1.81(m，2H)，1.80-1.60(m，6H).
将级分-2浓缩并冻干，得到(R)-N-(5-((1-氧杂螺(4.4)壬-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺(4mg，7.49μmol，11.08％产率)为灰白色固体。绝对立体化学尚未确定。
(R)-N-(5-((1-氧杂螺(4.4)壬-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-2'-氯-5'-甲氧基-6-甲基-(4,4'-联吡啶)-3-甲酰胺:MS(ESI)(C23H24ClN5O4S)(M+1)+，计算值502.13；实测值，502.1。1H-NMR(400MHz，CD3OD):δ8.81(s，1H)，8.10(s，1H)，7.50(s，1H)，7.43(s，1H)，5.54-5.49(m，1H)，4.13(dd，J＝4.8Hz，10.8Hz，1H)，4.04(d，J＝10.8Hz，1H)，3.74(s，3H)，2.68(s，3H)，2.40(dd，J＝6.4Hz，14.4Hz，1H)，2.25(d，J＝14.4Hz，1H)，1.96-1.81(m，2H)，1.80-1.60(m，6H)。
实施例231
4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
步骤-1:(5-(甲氧羰基)-2-甲基吡啶-4-基)硼酸：
在室温向4-氯-6-甲基烟酸甲酯(1g，5.39mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的搅拌溶液中添加4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双(1,3,2-二氧硼杂环戊烷)(2.052g，8.08mmol)和乙酸钾(1.586g，16.16mmol)并用氮气脱气持续20分钟。20分钟后，加入PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(0.308g，0.377mmol)并再次用氮气脱气5分钟。将反应混合物在90℃搅拌16小时。将反应混合物冷却至室温，通过硅藻土垫过滤无机固体并用乙酸乙酯(200mL)洗涤。滤液在真空下浓缩，得到棕色油状粗产品。
粗产物通过反相色谱纯化，条件如下:(柱：40g Reveleris柱，C18；流动相A:0.1％FA于水中，流动相B:乙腈，0-100％)，得到(5-(甲氧羰基)-2-甲基吡啶-4-基)硼酸(250mg，1.281mmol，23.77％产率)为灰白色固体。
MS(ESI)(C8H10BNO4)(M+1)+，计算值196.08；实测值，196.2
步骤-2:(4-溴-2-氯-5-甲氧基苯基)(甲基)硫烷：
将4-溴-2-氯-5-甲氧基苯胺(500mg，2.114mmol)的2N HCl(15.86mL，31.7mmol)溶液加热至50℃保持30分钟，然后将反应混合物冷却至0℃，并滴加亚硝酸钠(160mg，2.326mmol)的水(10mL)溶液。将所得反应混合物在0℃搅拌40分钟，然后在0℃滴加硫代甲醇钠(296mg，4.23mmol)的水(10mL)溶液。将反应混合物在室温再次搅拌18小时。反应完成后，用10％NaOH水溶液(15mL)稀释反应混合物。并用EtOAc(2x 50mL)萃取。分离的有机层用无水Na2SO4干燥并真空浓缩，得到浅黄色油状粗产物。
将粗产物预吸附在二氧化硅上(使用5mL DCM，3g二氧化硅(60-120目))，装载在预填充Orochem 40g色谱柱上，以0-30％乙酸乙酯的PET乙醚溶液洗脱45分钟，流速为20mL/分钟。收集合适的级分并减压浓缩，得到(4-溴-2-氯-5-乙氧基苯基)(甲基)硫烷(420mg，1.428mmol，67.6％产率)为黄色固体。
GCMS(C8H8BrClOS)(M)+，计算值267.91；实测值，(m/z)267.9
步骤-3:1-溴-5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯：
在0℃、氮气气氛下向(4-溴-2-氯-5-甲氧基苯基)(甲基)硫烷(500mg，1.869mmol)的二氯甲烷(10mL)搅拌溶液中分批加入mCPBA(355mg，2.056mmol)。将所得混合物在室温搅拌16h。用10％Na2CO3水溶液(30mL)稀释反应混合物。并用乙酸乙酯(2x 50mL)萃取，用盐水洗涤。分离有机层，用无水Na2SO4干燥，真空浓缩，得到浅黄色油状粗产品。将粗产物预吸附在二氧化硅上(使用5mLDCM，2g二氧化硅(60-120目))，装载在预填充Orochem 40g色谱柱上，以0-60％乙酸乙酯的PET乙醚溶液洗脱60分钟，流速为15mL/分钟。收集合适的级分并减压浓缩，得到1-溴-5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯(200mg，0.684mmol，36.6％产率)为棕色固体。
MS(ESI)(C8H8BrClO2S)(M+1)+，计算值282.92；实测值，282.8
步骤-4:4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-6-甲基烟酸甲酯：
在室温向1-溴-5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯(200mg，0.705mmol)的1,4-二噁烷(10mL)搅拌溶液中加入甲基(5-(甲氧羰基)-2-甲基吡啶-4-基)硼酸(275mg，1.411mmol)和碳酸钾(292mg，2.116mmol)，氮气脱气10分钟。向所得反应混合物中加入PdCl2(dppf)(103mg，0.141mmol)。将反应混合物在100℃搅拌16小时。反应完成后，将反应混合物冷却至室温，通过硅藻土垫过滤无机固体并用乙酸乙酯(100mL)洗涤。用水(50mL)洗涤滤液，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到浅棕色油状粗产品。
将粗产物预吸附在二氧化硅上(使用10mLDCM，3g二氧化硅(60-120目))，装载在40g预填充Orochem柱上，并以15mL/分钟的流速在0-80％乙酸乙酯的PET醚中洗脱45分钟。收集合适的级分并减压浓缩，得到4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-6-甲基烟酸甲酯(120mg，0.326mmol，46.2％产率)为浅棕色油状物。
MS(ESI)(C16H16ClNO4S)(M+1)+，计算值354.06；实测值，354.0
步骤-5:4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-6-甲基烟酸：
在室温向4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-6-甲基烟酸甲酯(120mg，0.339mmol)在四氢呋喃(2mL)、甲醇(2mL)和水(2mL)的混合物中的搅拌溶液中加入一水合氢氧化锂(40.6mg，1.696mmol)。反应混合物在室温搅拌2.5小时。反应完成后，反应混合物在真空下浓缩。所得残余物用水(3mL)稀释，水层用1.5N HCl酸化至pH-6，用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-6-甲基烟酸(60mg，0.155mmol，45.8％产率)为浅棕色固体。
MS(ESI)(C15H14ClNO4S)(M+1)+，计算值340.04；实测值，340.0
步骤-6:4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺。
向4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-6-甲基烟酸(30mg，0.088mmol)，的乙腈(2mL)搅拌溶液中加入氯-N,N,N′,N′-四甲基甲脒六氟磷酸盐(27.2mg，0.097mmol)和1-甲基咪唑(0.028mL，0.353mmol)，在室温、氮气下搅拌反应混合物30分钟，然后加入5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(13.90mg，0.106mmol)。反应混合物在相同温度搅拌16小时。用水稀释反应混合物，用乙酸乙酯(2×10mL)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到棕色油状粗产品。
所述粗产物通过制备型HPLC纯化，条件如下:(柱：X-select C18(19*150)MM5MICRON；流动相A:10mM ABC于Milli Q水90％，流动相B：乙腈10％；流速：8mL/min；运行时间:18min；(样品溶剂：THF:ACN；进样体积：200μL；注射次数：12)，得到4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(4.5mg，9.06μmol，10.26％产率)，为白色固体。MS(ESI)(C18H17ClN4O4S2)(M+1)+，计算值453.05；实测值，453.0。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ12.85(s，1H)，8.77(s，1H)，7.60(s，1H)，7.38(s，1H)，7.34(s，1H)，4.06(s，3H)，3.61(s，3H)，2.86(s，3H)，2.58(s，3H).
实施例234
1-(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺
步骤-1:4-叠氮基-2-氯-5-甲氧基吡啶
在23℃向(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)硼酸(4.0g，21.35mmol)的甲醇(5mL)脱气溶液中加入CuSO4(171.0mg，1.06mmol)和叠氮化钠(0.7mg，10.67mmol)。所得溶液在80℃搅拌1小时。加入水使反应混合物淬灭，并用二氯甲烷萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将所得残余物溶解在DCM(5ml)中并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，将其应用于40g硅胶柱，在25分钟内用0～80％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到4-叠氮基-2-氯-5-甲氧基吡啶(570mg，13％)，为白色固体。MS(ESI)(C6H5ClN4O)(M+1)+，计算值185.0；实测值185.0。
步骤-2:1-(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸乙酯
在23℃，向4-叠氮基-2-氯-5-甲氧基吡啶(570.0mg，3.09mmol)的甲苯(1mL)搅拌溶液中添加丙炔酸乙酯(218.0mg，2.22mmol)。所得溶液在80℃搅拌1小时。在真空下除去溶剂，得到1-(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸乙酯(800.0mg，粗品)，为黄色固体。MS(ESI)(C11H11ClN4O3)(M+1)+，计算值283.1；实测值，283.1。
步骤-3:1-(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸
向1-(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸乙酯(400.0mg，1.41mmol)的THF(5mL)和水(5mL)的搅拌溶液中加入LiOH(67.8mg，2.83mmol)。所得溶液在23℃搅拌1小时。在真空下除去有机溶剂。水层用柠檬酸酸化至pH～3。将所得残余物溶解在DMF(1mL)中，将其应用于40g C18柱并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在20分钟内用5～50％乙腈水溶液洗脱，得到1-(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸(160.0mg，44％)，为白色固体MS(ESI)(C9H7ClN4O3)(M+1)+，计算值255.0；实测值，255.0。
步骤-4:1-(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺
向1-(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸 (100 mg，0.39mmol)，5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺 (51.5 mg，0.39 mmol) 的乙腈(0.2 mL)搅拌溶液中加入1-甲基咪唑 (161.0 mg，1.96 mmol) 和TCFH (110.0 mg，0.39mmol)。然后将所得混合物在23℃搅拌1小时。过滤悬浮液。收集滤饼并在真空下干燥，得到1-(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺(69.2 mg，47％)， 为白色固体。MS (ESI)(C12H10ClN7O3S) (M+1)+，计算值368.0，实测值 368.0。1H NMR (400 MHz，DMSO-d6) δ 13.02 (s，1H)，9.42 (s，1H)，8.59 (s，1H)，8.06 (s，1H)，4.10(s，6H)。
实施例235
1-(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-1H-吡唑-3-甲酰胺
步骤-1: 2-氯-4-碘-5-甲氧基吡啶
在0℃，向6-氯-4-碘吡啶-3-醇(5.0g，19.57mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(20mL)脱气溶液中分批加入NaH(939.0mg，23.49mmol，60％)，并在0℃搅拌40min。在0 ℃和氮气下向上述溶液中加入MeI(4.1 g，29.40 mmol)。然后将所得溶液在25℃搅拌16小时。加入水使反应混合物淬灭，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。所得残余物通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，其应用于120 g硅胶柱并在45分钟内用0～50％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到2-氯-4-碘-5-甲氧基吡啶(3.1g，51％)，为白色固体。MS(ESI)(C6H5ClINO)(M+1)+，计算值269.9；实测值269.9。
步骤-2:1-(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-甲酸乙酯
向2-氯-4-碘-5-甲氧基吡啶(1.0g，3.71mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)脱气溶液中加入Cs2CO3(2.4g，7.42mmol)，1H-吡唑-5-甲酸乙酯(728.0mg，5.20mmol)和碘化亚铜(I)(141.0mg，0.74mmol)。所得溶液在氮气下于25℃搅拌30分钟，然后将溶液加热至100℃再搅拌1小时。过滤悬浮液。收集滤液并真空浓缩。将混合物溶解在DMF(3mL)中，将其应用于80g C18柱并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在25分钟内用5～60％乙腈水溶液洗脱，得到1-(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-甲酸乙酯(690.1mg，59％)，为白色固体。MS(ESI)(C12H12ClN3O3)(M+1)+，计算值282.1；实测值，282.1。
步骤-3:1-(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-甲酸
向1-(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-甲酸乙酯(300.0mg，1.07mmol)的四氢呋喃(3mL)和水(1mL)的溶液中加入LiOH(25.5mg，1.06mmol)。所得溶液在25℃搅拌2小时。在真空下除去有机溶剂。水层用甲酸酸化至pH～3，并用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将混合物溶解在DMF(2ml)中，将其应用于40g C18柱并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在20分钟内用5～50％乙腈水溶液洗脱，得到1-(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-甲酸(270.2mg，90％)，为白色固体。MS(ESI)(C10H8ClN3O3)(M+1)+，计算值254.0.1；实测值，254.0。
步骤-4:1-(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-1H-吡唑-3-甲酰胺
向1-(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)-1H-吡唑-3-甲酸(100.0mg，0.39mmol)的乙腈(1mL)溶液中加入5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(51.7mg，0.39mmol)和1-甲基-1H-咪唑(162.2mg，1.97mmol)。在25℃向其中加入TCFH(111.1mg，0.39mmol)的乙腈(1mL)溶液。氮气下将所得溶液在25℃搅拌2小时。将混合物溶解在DMF(2ml)中，将其应用于40g C18柱并通过Combi Flash(Biotage Isolera Prime)纯化，在20分钟内用5～50％乙腈水溶液洗脱，得到1-(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-1H-吡唑-3-甲酰胺(53.1mg，36％)，为白色固体。MS(ESI)(C13H11ClN6O3S)(M+1)+，计算值367.0；实测值，367.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.82(s，1H)，8.67(d，J＝2.8Hz，1H)，8.47(s，1H)，8.36(s，1H)，7.15(d，J＝2.4Hz，1H)，4.11(s，3H)，4.08(s，3H).
实施例242
2'-氯-5',6-二甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-[3,4'-联吡啶]-4-甲酰胺
步骤-1:2'-氯-5',6-二甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸甲酯的合成：
向5-溴-2-甲氧基异烟酸甲酯(1g，4.06mmol)在二噁烷(15ml)和H2O(1.5ml)中的搅拌溶液中添加碳酸钾(0.674g，4.88mmol)，双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(0.178g，0.244mmol)和(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)硼酸(0.838g，4.47mmol)。将反应混合物在85℃搅拌8小时。完成后，将反应混合物冷却至室温，用水(100mL)稀释并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。合并的有机层用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到为棕色固体的粗产物。
将粗产物预吸附在二氧化硅上，装载在预填充Biotage(12g)柱上，用含20％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱20分钟，流速为30ml/min。收集合适的级分并真空浓缩，得到2'-氯-5',6-二甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸甲酯(680mg，2.203mmol，54.2％产率)，为白色固体。
MS(ESI)(C14H13ClN2O4)(M+1)+，计算值309.07；实测值，309.0
步骤-2:2'-氯-5',6-二甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-[3,4'-联吡啶]-4-甲酰胺的合成：
在0℃向2'-氯-5',6-二甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸甲酯(680mg，2.203mmol)的四氢呋喃(6mL)，甲醇(3mL)和水(3mL)的搅拌溶液中加入一水合氢氧化锂(92mg，2.203mmol)。反应混合物在室温搅拌2小时。完成后，反应混合物在真空下浓缩，残余物用1.5N HCl酸化至pH-3，得到灰白色沉淀。过滤得到的沉淀物并在真空下干燥，得到2'-氯-5',6-二甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸(440mg，1.380mmol，62.6％产率)，为白色固体。
MS(ESI)(C13H11ClN2O4)(M+1)+，计算值295.05；实测值，295.0
步骤-3:2'-氯-5',6-二甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-[3,4'-联吡啶]-4-甲酰胺的合成：
在室温向2'-氯-5',6-二甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸(50mg，0.170mmol)的乙腈(3mL)和N,N-二甲基甲酰胺(0.6mL)的搅拌溶液中加入氯-N,N,N′,N′-四甲基甲脒六氟磷酸盐(52.4mg，0.187mmol)，1-甲基-1H-咪唑(41.8mg，0.509mmol)和5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(22.25mg，0.170mmol)。反应混合物在室温搅拌8小时。完成后，反应混合物用冷水(10mL)淬灭，用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩，得到黄色半固体粗产物。
将该批次的粗产物(200mg)与另一批次的粗产物(170mg)混合，并使用制备型HPLC将两个批次合并在一起进行纯化。
所述粗产物通过制备型HPLC纯化，条件如下:(X-select(19*250mm)5MICRON；流动相A:10mM ABC于Milli Q水80％，流动相B：乙腈20％流速：12mL/min；运行时间:17min；(样品溶剂：THF:ACN；进样体积：400μL；注射次数：25)，得到2'-氯-5',6-二甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-[3,4'-联吡啶]-4-甲酰胺(52mg，0.125mmol，73.4％产率)为灰白色固体.
MS(ESI)(C16H14ClN5O4S)(M+1)+，计算值408.06；实测值，408.0
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ12.98(brs，1H)，8.30(s，1H)，8.11(s，1H)，7.53(s，1H)，7.20(s，1H)，4.08(s，3H)，3.97(s，3H)，3.60(s，3H)
实施例243
3'-氟-N-(5-(((3R,3aS,6aR)-六氢呋喃并[2,3-b]呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-2',6-二甲基-[4,4'-联吡啶]-3-甲酰胺
步骤-1O-((3R,3aS,6aR)-六氢呋喃并[2,3-b]呋喃-3-基)S-甲基二硫代碳酸酯
在0℃向((3R,3aS,6aR)-六氢呋喃并[2,3-b]呋喃-3-醇(3.7g，28.4mmol)的四氢呋喃(THF)(100mL)溶液中添加NaH(60％，1.478g，37.0mmol)。混合物在0℃搅拌5分钟，然后滴加二硫化碳(2.60mL，31.3mmol)，接着滴加碘甲烷(1.955mL，31.3mmol)。将混合物搅拌10分钟，然后用饱和NH4Cl水溶液(5mL)和盐水(10mL)淬灭。混合物用EtOAc(30mL)稀释，然后分离各层。水层用乙酸乙酯(2x20mL)洗涤。合并的有机层用MgSO4干燥，过滤，滤液真空浓缩。残余物通过硅胶纯化(0-100％乙酸乙酯/庚烷，80g柱)得到所需产物，为黄色油状物。LCMS(ES)＝221.2[M+H]+1H NMR(400MHz，CHLOROFORM-d)δ5.91(dt，J＝8.3，6.4Hz，1H)，5.76(d，J＝4.9Hz，1H)，4.17(dd，J＝10.3，6.4Hz，1H)，4.04–3.88(m，3H)，3.28–3.17(m，1H)，2.59(s，3H)，2.08–2.00(m，1H)，1.98–1.87(m，1H).
步骤-2。O-((3R,3aS,6aR)-六氢呋喃并[2,3-b]呋喃-3-基)肼基硫代碳酸酯
在0℃向(O-((3R,3aS,6aR)-六氢呋喃并[2,3-b]呋喃-3-基)S-甲基二硫代碳酸酯(5.8g，26.3mmol)的溶液中滴加甲醇(100mL)水合肼溶液(1.136mL，29.0mmol)。混合物在0℃搅拌2小时。完成后，反应在真空下浓缩。残余物在甲醇/甲苯混合物(1mL/10mL)中共沸得到粗产物O-((3R,3aS,6aR)-六氢呋喃并[2,3-b]呋喃-3-基)肼基硫代碳酸酯(5.38g，26.3mmol，100％产率)。LCMS(ES)＝205.2[M+H]+。
步骤-3. 5-(((3R,3aS,6aR)-六氢呋喃并[2,3-b]呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺
在0℃向(O-((3R,3aS,6aR)-六氢呋喃并[2,3-b]呋喃-3-基)肼基硫代碳酸酯(5.3g，25.9mmol)的甲醇(100mL)溶液中加入三乙胺(7.96mL，57.1mmol)，然后滴加氰化氢(3M的DCM溶液)(10.38mL，31.1mmol)。混合物在0℃搅拌2小时。反应完成后，在真空下浓缩反应物，残余物通过硅胶色谱纯化(0-5％甲醇/DCM，80g柱)，得到为棕色固体的所需产物。LCMS(ES)＝230.2[M+H]+。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ6.90(s，2H)，5.64(d，J＝5.4Hz，1H)，5.24(dt，J＝8.3，6.4Hz，1H)，4.06(dd，J＝9.8，6.4Hz，1H)，3.87(td，J＝8.1，2.4Hz，1H)，3.79–3.70(m，2H)，3.21–3.10(m，1H)，2.04–1.93(m，1H)，1.88–1.73(m，1H)。
步骤-4. 3'-氟-N-(5-(((3R,3aS,6aR)-六氢呋喃并[2,3-b]呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-2',6-二甲基-[4,4'-联吡啶]-3-甲酰胺
在23℃向3'-氟-5'-甲氧基-2',6-二甲基-[4,4'-联吡啶]-3-甲酸(100mg，0.362mmol，实施例61，步骤2)的乙腈(10mL)溶液中加入N-(氯(二甲氨基)亚甲基)-N-甲基甲铵六氟磷酸盐(V)和1-甲基-1H-咪唑(62.4mg，0.760mmol)。将反应搅拌5分钟，然后加入5-(((3R,3aS,6aR)-六氢呋喃并[2,3-b]呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(91mg，0.398mmol)，之后让反应在23℃搅拌1.5小时。反应在真空下浓缩，溶于EtOAc中，用饱和NH4Cl水溶液洗涤。EtOAc层用MgSO4干燥，过滤，滤液真空浓缩。残余物用硅胶柱纯化(0-100％(3:1)(EtOAc/EtOH)/庚烷，40g柱)，得到所需产物3'-氟-N-(5-(((3R,3aS,6aR)-六氢呋喃并[2,3-b]呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-2',6-二甲基-[4,4'-联吡啶]-3-甲酰胺(122mg，0.250mmol，69.1％产率)，为浅棕色固体。MS(ESI)(C22H22FN5O5S)(M+1)+，计算值488.0，实测值488.3。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.89(s，1H)，8.09(s，1H)，7.46(s，1H)，5.74(d，J＝5.4Hz，1H)，5.46(dt，J＝7.9，6.1Hz，1H)，4.20(dd，J＝9.8，6.4Hz，1H)，4.01–3.88(m，3H)，3.77(d，J＝1.5Hz，3H)，3.32–3.25(m，1H)，2.68(s，3H)，2.50(d，J＝2.9Hz，3H)，2.23–2.08(m，
1H)，2.03–1.84(m，1H)。
实施例262
2'-氯-N-(5-(((3R,3aS,6aR)-六氢呋喃并[2,3-b]呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-[4,4'-联吡啶]-3-甲酰胺
在0℃向中间体G(498mg，1.788mmol)，5-(((3R,3aS,6aR)-六氢呋喃并[2,3-b]呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-胺(410mg，1.788mmol)，和1-甲基-1H-咪唑(147mg，1.788mmol，实施例243，步骤3)的乙腈(10mL)溶液中加入N-(氯(二甲氨基)亚甲基)-N-甲基甲铵六氟磷酸盐(V)(552mg，1.967mmol)。让混合物在0℃搅拌1小时。反应混合物在真空下浓缩，通过硅胶柱纯化(0-100％(3:1)(EtOAc/EtOH)/庚烷，40g柱，20分钟)得到所需产物2'-氯-N-(5-(((3R,3aS,6aR)-六氢呋喃并[2,3-b]呋喃-3-基)氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-6-甲基-[4,4'-联吡啶]-3-甲酰胺(326mg，0.665mmol，37.2％产率)为淡粉色固体。MS(ESI)(C21H20ClN5O5S)(M+1)+，计算值490.0，实测值490.2。1H NMR(400MHz，CHLOROFORM-d)δ12.98–12.59(m，1H)，9.08(s，1H)，8.05(s，1H)，7.26(s，1H)，7.21(s，1H)，5.81(d，J＝5.4Hz，1H)，5.42–5.33(m，1H)，4.21(dd，J＝9.8，6.8Hz，1H)，4.08–3.93(m，2H)，3.88(dd，J＝9.8，7.3Hz，1H)，3.74(s，3H)，3.34–3.23(m，1H)，2.70(s，3H)，2.23–2.11(m，1H)，2.03–1.87(m，1H).
实施例270
2'-氯-6-乙基-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-[3,4'-联吡啶]-4-甲酰胺
步骤-1:5-氯-2-乙烯基异烟酸甲酯的合成：
将2,5-二氯异烟酸甲酯(1g，4.85mmol)，4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷(0.822g，5.34mmol)和碳酸钾(1.342g，9.71mmol)的乙腈(15mL)和甲醇(2mL)溶液用氮气脱气15分钟，然后加入乙酸钯(II)(54mg，0.243mmol)和三苯基膦(0.127g，0.485mmol)。将反应混合物加热至40℃并搅拌16小时。用水淬灭所述反应混合物，用乙酸乙酯萃取(2x 200mL)。合并的有机层用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到为黄色液体的粗产物。
将粗产物预吸附在二氧化硅上，装载在预填充的biotage柱(25g)上，然后用2-10％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱40分钟，流速为25mL/分钟。收集级分并减压浓缩，得到5-氯-2-乙烯基异烟酸甲酯(730mg，3.66mmol，75％产率)为无色液体。
MS(ESI)(C9H8ClNO2)(M+1)+，计算值198.03；实测值，198.0
步骤-2:5-氯-2-乙基异烟酸甲酯的合成：
向在氮气下于室温搅拌的5-氯-2-乙烯基异烟酸甲酯(0.62g，3.14mmol)的乙酸乙酯(25mL)溶液中一次性添加钯(5wt％于碳酸钙上，用铅毒化，1.669g，0.784mmol)。反应混合物在氢气气氛下室温搅拌2小时。完成后，反应混合物通过硅藻土床过滤，用乙酸乙酯(100mL)洗涤。滤液在减压下浓缩，得到棕色液体粗产物。
将粗产物预吸附在二氧化硅上，装载在预填充的Orochem 25g柱上，并以5-15％乙酸乙酯的PET醚溶液洗脱20分钟，流速为25ml/min。收集适当的级分并减压浓缩，得到5-氯-2-乙基异烟酸甲酯(530mg，2.56mmol，81％产率)为棕色油状物。
LCMS(C9H10ClNO2)(M+1)+，计算值200.05；实测值，200.2
步骤-3:2'-氯-6-乙基-5'-甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸甲酯的合成：
在氮气气氛下于室温向5-氯-2-乙基异烟酸甲酯(530mg，2.65mmol)和(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)硼酸(497mg，2.65mmol)的1,4-二噁烷(15mL)溶液中一次性加入碳酸钾(734mg，5.31mmol)的水(3.00mL)溶液。反应混合物用氮气脱气10分钟，然后在室温加入[1,1’-双(二叔丁基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(173mg，0.265mmol)。将所得反应混合物在80℃搅拌16小时。完成后，将反应混合物冷却至室温，通过硅藻土床过滤，用乙酸乙酯(25mL)洗涤。用水(20mL)和盐水溶液洗涤滤液。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤并减压浓缩，得到为棕色液体的粗产物。
将粗产物预吸附在二氧化硅上，装载在预先填充的Orochem 40g柱上，以25-30％乙酸乙酯的PET醚溶液洗脱30分钟，流速为20ml/min。收集适当的级分并减压浓缩，得到2'-氯-6-乙基-5'-甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸甲酯(500mg，1.508mmol，56.8％产率)为棕色固体。
MS(ESI)(C15H15ClN2O3)(M+1)+，计算值307.09；实测值，307.2
步骤-4:2'-氯-6-乙基-5'-甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸的合成：
在室温向2'-氯-6-乙基-5'-甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸甲酯(500mg，1.630mmol)的四氢呋喃(10mL)和水(2.000mL)的搅拌溶液中加入一水合氢氧化锂(342mg，8.15mmol)。在室温搅拌反应5小时。完成后，将反应混合物减压浓缩。所得残余物用水(10mL)稀释，用乙酸乙酯(40mL)洗涤。用1.5N HCl(～pH 2)酸化水相部分，用20％MeOH的DCM(60mL)溶液萃取。合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到2'-氯-6-乙基-5'-甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸(400mg，1.306mmol，80％产率；LCMS纯度80％)为白色固体。
MS(ESI)(C14H13ClN2O3)(M+1)+，计算值293.07；实测值，293.0
步骤-5:2'-氯-6-乙基-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-[3,4'-联吡啶]-4-甲酰胺的合成：
在室温向2'-氯-6-乙基-5'-甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸(70mg，0.239mmol)的乙腈(5mL)和N,N-二甲基甲酰胺(0.5mL)的搅拌溶液中加入氯-N,N,N′,N′-四甲基甲脒六氟磷酸盐(81mg，0.287mmol)，1-甲基-1H-咪唑(0.057mL，0.717mmol)和5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(31.4mg，0.239mmol)。在室温搅拌反应3小时。反应完成后，反应混合物在真空下浓缩。残余物用水(10mL)稀释，用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。用水(5×10mL)和盐水洗涤合并的有机层。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤并减压浓缩，得到为黄色粘稠液体状的粗产物。
用GRACErevelleris X2(反相)纯化粗产物，条件如下：(柱：40g Grace C18catriage；流动相A:0.1％NH4HCO3的水溶液，流动相B:乙腈)在0-50min内0-100％B于A中，其流速：15mL/min。纯产物用40-45％的B的A溶液洗脱。将合适的级分合并并真空蒸发，得到2'-氯-6-乙基-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-[3,4'-联吡啶]-4-甲酰胺(60mg，0.147mmol，61.4％产率)为白色固体。
MS(ESI)(C17H16ClN5O3S)(MH)+，计算值406.07；实测值，406.0。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ13.00(s，1H)，8.58(s，1H)，8.14(s，1H)，7.66(s，1H)，7.56(s，1H)，4.08(s，3H)，3.61(s，3H)，2.89(q，J＝7.60Hz，2H)，1.31(t，J＝7.60Hz，3H).
实施例276
2'-氯-6-乙氧基-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-[3,4'-联吡啶]-4-甲酰胺
步骤-1:5-溴-2-乙氧基异烟酸甲酯的合成:
在氮气下向5-溴-2-羟基异烟酸甲酯(700mg，3.02mmol)在甲苯(15mL)中的搅拌溶液中添加碳酸银(1081mg，3.92mmol)，然后添加碘乙烷(0.364mL，4.53mmol)。将反应混合物在100℃搅拌1小时。反应完成后，将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土床，硅藻土床用乙酸乙酯(125mL)洗涤。用水(100mL)和盐水(50mL)洗涤滤液。用Na2SO4干燥有机层，过滤并减压浓缩，得到为黄色液体的粗产品。
将预吸附的粗产品装载在预填充柱上(orochem，12g)，并以0-30％乙酸乙酯的Pet乙醚溶液洗脱20分钟，流速为25ml/min。用含5％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱纯产物。收集适当的级分并减压浓缩，得到5-溴-2-乙氧基异烟酸甲酯(700mg，2.61mmol，87％产率)，为白色固体。
MS(ESI)(C9H10BrNO3)(M+1)+，计算值259.99；实测值，260.0
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ8.46(s，1H)，7.14(s，1H)，4.32(q，J＝7.2Hz，2H)，3.89(s，3H)，1.32(t，J＝7.2Hz，3H)
步骤-2:2'-氯-6-乙氧基-5'-甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸甲酯的合成：
在室温向5-溴-2-乙氧基异烟酸甲酯(700mg，2.69mmol)的1,4-二噁烷(15mL)和水(2mL)的搅拌溶液中添加(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)硼酸(756mg，4.04mmol)和碳酸钾(744mg，5.38mmol)，并将反应混合物用氮气脱气10分钟。加入PdCl2(dppf)(98mg，0.135mmol)，并将反应混合物在100℃搅拌2小时。反应完成后，将反应混合物冷却至室温，通过硅藻土垫过滤无机固体并用乙酸乙酯(100mL)洗涤。用水(80mL)洗涤滤液，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到为棕色液体的粗产物。
将预吸附的粗产物装载在Biotage 24g snap上，并以20％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱10分钟，流速为20ml/min。收集适当的级分并减压浓缩，得到2'-氯-6-乙氧基-5'-甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸甲酯(570mg，1.698mmol，63.1％产率)，为白色固体。
MS(ESI)(C15H15ClN2O4)(M+1)+，计算值323.08；实测值，323.0
步骤-3:2'-氯-6-乙氧基-5'-甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸的合成：
于0℃向2'-氯-6-乙氧基-5'-甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸甲酯(670mg，2.076mmol)在四氢呋喃(5.0mL)和甲醇(5.0mL)的搅拌溶液中滴加氢氧化锂(149mg，6.23mmol)的水(1mL)溶液。反应混合物在室温搅拌16小时。完成后，反应混合物在真空下浓缩。所得残余物用水(50mL)稀释，用DCM(100mL)洗涤以除去杂质，水层用饱和柠檬酸水溶液酸化至pH 5-6，用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。用无水硫酸钠干燥合并的有机层，过滤并减压浓缩，得到2'-氯-6-乙氧基-5'-甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸(570mg，1.837mmol，88％产率)为白色固体。
MS(ESI)(C14H13ClN2O4)(M+1)+，计算值309.06；实测值，309.0.
步骤-4:2'-氯-6-乙氧基-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-[3,4'-联吡啶]-4-甲酰胺的合成：
在室温向2'-氯-6-乙氧基-5'-甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸(100mg，0.324mmol)，的乙腈(4mL)和N,N-二甲基甲酰胺(0.4mL)的搅拌溶液中加入1-甲基-1H-咪唑(106mg，1.296mmol)，氯-N,N,N′,N′-四甲基甲脒六氟磷酸盐(136mg，0.486mmol)，和5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(42.5mg，0.324mmol)。反应混合物在相同温度搅拌16小时。用水稀释反应混合物，用乙酸乙酯(2×25mL)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到为黄色液体的粗产物。
将预吸附的粗产物装载在Orochem 12g预填充柱上，并用45％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱30分钟，流速为25ml/min。收集适当的级分并减压浓缩，得到产物，其为白色固体。
将固体溶于10％甲醇的二氯甲烷(20mL)溶液中，用盐水溶液(25mL)洗涤，用硫酸钠干燥有机层并减压浓缩，得到2'-氯-6-乙氧基-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-[3,4'-联吡啶]-4-甲酰胺(70mg，0.162mmol，50％产率)。
MS(ESI)(C17H16ClN5O4S)(M+1)+，计算值422.07；实测值，422.0
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ12.96(s，1H)，8.28(s，1H)，8.10(s，1H)，7.54(s，1H)，7.16(s，1H)，4.42(q，J＝7.20Hz，2H)，4.08(s，3H)，3.59(s，3H)，1.37(t，J＝7.20Hz，3H).
实施例277和298
(S)-4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺和(R)-4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺:
硼酸酯的制备:
步骤-1:4-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环己烷-2-基)-6-甲基烟酸甲酯的合成：
在室温向4-氯-6-甲基烟酸甲酯(10g，53.9mmol)的1,4-二噁烷(100mL)搅拌溶液中添加5,5,5',5'-四甲基-2,2'-双(1,3,2-二氧硼烷)(18.26g，81mmol)，叔丁基二苯基膦(2.61g，10.78mmol)和乙酸钾(15.86g，162mmol)，并用氮气脱气20分钟。加入PdOAc2(1.210g，5.39mmol)且混合物再次用氮气脱气5分钟。将反应混合物在100℃搅拌3小时。将反应混合物冷却至室温，通过硅藻土垫过滤无机固体并用乙酸乙酯(500mL)洗涤。滤液在真空下浓缩，得到为棕色油状物的粗产品。
将粗产物预吸附在二氧化硅上(使用20mLDCM，50g二氧化硅(60-120目))，装载在预填充的Orochem 120g柱上，并用25-40％乙酸乙酯的PET醚洗脱45分钟，流速为40ml/分钟。收集适当的级分并减压浓缩，得到4-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环己烷-2-基)-6-甲基烟酸甲酯(14.1g，47.7mmol，89％产率)为棕色胶状物。
MS(ESI)(C13H18BNO4)(M+1)+，计算值264.14；实测值，264.1
酸的制备：
步骤-2:(4-溴-2-氯-5-甲氧基苯基)(甲基)硫烷的合成：
将4-溴-2-氯-5-甲氧基苯胺(2.5g，10.57mmol)的2N HCl(26.4mL，52.9mmol)溶液加热至50℃并保持30min，然后将反应混合物冷却至0℃，并滴加亚硝酸钠(0.802g，11.63mmol)的水(20mL)溶液。将所得反应混合物在0℃搅拌40分钟，然后在0℃滴加硫代甲醇钠(1.482g，21.14mmol)的水(20mL)溶液。将反应混合物在室温再次搅拌18小时。反应完成后，用10％NaOH水溶液(50mL)稀释反应混合物并用EtOAc(2x 200mL)萃取。分离的有机层用无水Na2SO4干燥并真空浓缩，得到为浅黄色油状物的粗产物。
将粗产物预吸附在二氧化硅上(使用10mLDCM，10g二氧化硅(60-120目))，装载在预填充的Orochem 120g柱上，并以0-30％乙酸乙酯的PET醚溶液以20ml/分钟的流速洗脱45分钟。收集适当的级分并减压浓缩，得到(4-溴-2-氯-5-甲氧基苯基)(甲基)硫烷(2.1g，6.99mmol，66.1％产率)为黄色固体。
LCMS(C8H8BrClOS)(M)+，计算值267.91；实测值，(m/z)not ionized
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ7.67(s，1H)，6.88(s，1H)，3.93(s，3H)，2.57(s，3H).
步骤-3:1-溴-5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯的合成：
在0℃、氮气气氛下向(4-溴-2-氯-5-甲氧基苯基)(甲基)硫烷(2.1g，7.85mmol)的二氯甲烷(30mL)的搅拌溶液中分批添加mCPBA(1.490g，8.63mmol)。将所得混合物在室温搅拌16h。用10％Na2CO3水溶液(100mL)稀释反应混合物并用EtOAc(2x 300mL)萃取，用盐水洗涤。分离有机层，用无水Na2SO4干燥，真空浓缩，得到为浅黄色油状物的粗产品。将粗产物预吸附在二氧化硅上(使用15mLDCM，9g二氧化硅(60-120目))，装载在预填充的Orochem 50g柱上，并用0-100％乙酸乙酯的PET醚溶液洗脱60分钟，流速为15ml/分钟。收集适当的级分并减压浓缩，得到1-溴-5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯(1.5g，5.27mmol，67.2％产率)为黄色固体。
MS(ESI)(C8H8BrClO2S)(M+1)+，计算值282.92；实测值，283.0
步骤-4:4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-6-甲基烟酸甲酯的合成：
在室温向1-溴-5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯(500mg，1.763mmol)在甲苯(30mL)中的搅拌溶液中添加4-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环己烷-2-基)-6-甲基烟酸甲酯(1392mg，5.29mmol)和碳酸钾(731mg，5.29mmol)，并用氮气脱气10分钟。向所得反应混合物中加入PdCl2(dppf)(258mg，0.353mmol)。将反应混合物在120℃搅拌16小时。
反应完成后，将反应混合物冷却至室温，蒸发溶剂，然后将反应混合物溶于水(100ml)中，用EtOAc(100×2ml)萃取，用盐水(30ml)洗涤。用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到棕色半固体粗产物。
将粗产物与另一批(500mg)混合，合并2批预吸附在二氧化硅上的粗产物(使用20mL DCM，10g二氧化硅(60-120目))，装载在预填充Orochem50g柱上，以2-10％DCM的甲醇溶液洗脱60分钟，流速为25ml/min。收集适当的级分并减压浓缩，得到4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-6-甲基烟酸甲酯(1.3g，2.83mmol)为棕色固体。
MS(ESI)(C16H16ClNO4S)(M+1)+，计算值354.06；实测值，354.0
步骤-5:外消旋-4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-6-甲基烟酸的合成：
在室温向4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-6-甲基烟酸甲酯(900mg，2.54mmol)的四氢呋喃(1.5mL)，甲醇(1mL)和水(0.5mL)的混合物中加入氢氧化锂(747mg，17.81mmol)。反应混合物在室温搅拌2小时。反应完成后，反应混合物在真空下浓缩。所得残余物用水(50ml)稀释，用EtOAc(25mL)洗涤。水层用1.5N盐酸酸化至pH-6，用10％甲醇的DCM溶液(3×150ml)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到外消旋-4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-6-甲基烟酸(750mg，2.185mmol，86％产率)为灰色固体。
MS(ESI)(C15H14ClNO4S)(M+1)+，计算值340.04；实测值，340.0
步骤-6:(R)-4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-6-甲基烟酸和(S)-4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-6-甲基烟酸的分离
外消旋-4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-6-甲基烟酸(650mg)通过手性SFC使用以下方法纯化：
柱：Chiralpak IG(250*30)mm，5μm，流动相：CO2:MeOH(70:30)％，总流量：100g/min，背压：100bar，波长：220nm,周期:5.5min，将650mg样品溶解在8.0ml MeOH/THF中并注射700μl/注射；
SFC纯化后，收集两个合适的级分。
级分-1在减压下浓缩，得到(R)-4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-6-甲基烟酸-同分异构体-1(270mg，0.763mmol，39.9％产率)为灰白色固体。手性SFC纯度:100％；Rt＝2.4mins；
MS(ESI)(C15H14ClNO4S)(M+1)+，计算值340.04；实测值，340.0
级分-2在减压下浓缩，得到(S)-4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-6-甲基烟酸(290mg，0.819mmol，42.8％产率)为灰白色固体。手性SFC纯度:99.74％；Rt＝3.29mins；
MS(ESI)(C15H14ClNO4S)(M+1)+，计算值340.04；实测值，340.0
绝对立体化学尚未确定。
酸-胺偶联：
步骤-6:(S)-4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺的合成：
在室温向(S)-4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-6-甲基烟酸-同分异构体-2(80mg，0.235mmol)的乙腈(3mL)和N,N-二甲基甲酰胺(0.5mL)的搅拌溶液中加入1-甲基-1H-咪唑(77mg，0.942mmol)，氯-N,N,N′,N′-四甲基甲脒六氟磷酸盐(99mg，0.353mmol)，和5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(37.1mg，0.283mmol)。反应混合物在室温搅拌16小时。完成后，反应混合物用冷水淬灭，蒸发掉所有挥发物。然后用乙酸乙酯稀释并用乙酸乙酯萃取(150mL×3)。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到为棕色固体的粗产物。
所述粗产物通过制备型HPLC纯化，条件如下:(Atlantis C18(19*250mm)5MICRON；流动相A:10mM ABC于Milli Q水70％，流动相B：乙腈30％)；流速：12.00ml/min；注射量：200.00μL；注射次数：14；稀释剂：THF/ACN；运行时间：19min；，得到(S)-4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(40mg，0.087mmol，37.1％产率)为灰白色固体。绝对立体化学尚未确定。
MS(ESI)(C18H17ClN4O4S2)(M+1)+，计算值453.05；实测值，453.0。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ12.85(s，1H)，8.75(s，1H)，7.61(s，1H)，7.40(s，1H)，7.34(s，1H)，4.07(s，3H)，3.61(s，3H)，2.86(s，3H)，2.58(s，3H).
步骤-6:(R)-4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺的合成。
在室温向(R)-4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-6-甲基烟酸(80mg，0.235mmol)的乙腈(5mL)和N,N-二甲基甲酰胺(1mL)的搅拌溶液中加入1-甲基-1H-咪唑(77mg，0.942mmol)，氯-N,N,N′,N′-四甲基甲脒六氟磷酸盐(99mg，0.353mmol)，和5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(37.1mg，0.283mmol)。反应混合物在室温搅拌4小时。完成后，反应混合物用冷水淬灭，蒸发掉所有挥发物。然后用乙酸乙酯稀释并用乙酸乙酯萃取(50mLx3)。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到为橙色固体的粗产物。
所述粗产物通过制备型HPLC纯化，条件如下:(X-select(19*250mm)5MICRON；流动相A:0.1％FA于MQ水80％中，流动相B：乙腈20％)；流速：12.00ml/min；注射量：200μL；注射次数：16；稀释剂：THF/ACN；运行时间：18min；将纯产物冻干，得到(R)-4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(32mg，0.07mmol，29.6％产率)为淡黄色固体。绝对立体化学尚未确定。
MS(ESI)(C18H17ClN4O4S2)(M+1)+，计算值453.05；实测值，453.0。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ12.83(s，1H)，8.75(s，1H)，7.62(s，1H)，7.40(s，1H)，7.34(s，1H)，4.08(s，3H)，3.61(s，3H)，2.86(s，3H)，2.59(s，3H).
实施例294
4-(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基哒嗪-3-甲酰胺
步骤-1:2-重氮-3-氧代丁酸甲酯的合成：
在0℃，向3-氧代丁酸甲酯(5g，43.1mmol)的乙腈(50mL)搅拌溶液中依次加入三乙胺(7.80mL，56.0mmol)和4-乙酰氨基苯磺酰叠氮化物(10.34g，43.1mmol)。将反应混合物在0℃搅拌2小时。反应完成后，使反应混合物达到室温，用100mL的MTBE/己烷(1:1)稀释，然后过滤。滤液在减压下浓缩，得到黄色胶状物粗残余物。
将粗产物预吸附在硅胶上，装载在预填充Biotage柱(50g)上，以10-20％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱60分钟，流速为30ml/min。收集适当的级分并减压浓缩，得到2-重氮-3-氧代丁酸甲酯(5.1g，35.9mmol，83％产率)，为黄色油状物。
MS(ESI)(C5H6N2O3)(M+1)+，计算值143.05；实测值，电离不良。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ3.78(s，3H)，2.38(s，3H)
步骤-2:2-重氮-5-羟基-3-氧代己酸甲酯的合成：
在-78℃向2-重氮-3-氧代丁酸甲酯(6g，42.2mmol)的二氯甲烷(60mL)搅拌溶液中依次加入四氯化钛(TiCl4)(5.12mL，46.4mmol)和三乙胺(6.47mL，46.4mmol)。将反应混合物在-78℃搅拌1小时。1小时后，在-78℃加入乙醛(2.384ml，42.2mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液，并在相同温度搅拌2小时。完成后，反应混合物用饱和NH4Cl溶液(50ml)淬灭，用DCM(2×100ml)萃取。将合并的有机层用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到为黄色液体的粗产物。
将粗产物预吸附在硅胶上，装载在预填充Biotage柱(100g)上，并用中20-40％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱60分钟，流速为40ml/min。收集适当的级分并减压浓缩，得到2-重氮基-5-羟基-3-氧代己酸甲酯(6.1g，32.5mmol，77％产率)，为黄色油状物。
MS(ESI)(C7H10N2O4)(M+1)+，计算值187.07；实测值，187.0
步骤-3:2-重氮-3,5-二氧代己酸甲酯的合成：
在室温向2-重氮-5-羟基-3-氧代己酸甲酯(5g，26.9mmol)的乙腈(50mL)搅拌溶液中添加2-碘氧基苯甲酸(IBX)(20.05g，32.2mmol)。将反应混合物在80℃搅拌2小时。反应完成后，将反应混合物升至室温然后过滤。滤液在减压下浓缩，得到为黄色胶状物的粗残余物。
将粗产物预吸附在硅胶上，装载在预填充Biotage柱(50g)上，以10-20％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱60分钟，流速为35ml/min。收集适当的级分并减压浓缩，得到2-重氮-3,5-二氧代己酸甲酯(5.1g，14.49mmol，53.9％产率；LCMS纯度：52.31％)为灰白色固体。
MS(ESI)(C7H8N2O4)(M+1)+，计算值185.06；实测值，185.0
步骤-4:4-羟基-6-甲基哒嗪-3-甲酸甲酯的合成：
在室温，向2-重氮-3,5-二氧代己酸甲酯(5.10g，14.49mmol)的叔丁基甲基醚(50mL)的搅拌溶液中加入三正丁基膦(3.57mL，14.49mmol)。反应混合物在室温搅拌30分钟。反应完成后，收集所得沉淀并在减压下干燥，得到产物4-羟基-6-甲基哒嗪-3-甲酸甲酯(2.2g，12.64mmol，87％产率)为灰白色固体。
MS(ESI)(C7H8N2O3)(M+1)+，计算值169.06；实测值，169.0
步骤-5:4-氯-6-甲基哒嗪-3-甲酸甲酯的合成：
将4-羟基-6-甲基哒嗪-3-甲酸甲酯(2.2g，13.08mmol)的POCl3(20mL，215mmol)溶液在100℃搅拌1小时。反应完成后，将反应混合物冷却至室温，减压蒸馏出过量的POCl3，得到粗残余物。残余物用饱和碳酸氢钠溶液(50mL)淬灭，用乙酸乙酯(2×100ml)萃取。将合并的有机层用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到为黄色胶状物的粗产物。
将粗产物预吸附在二氧化硅上，装载在Orochem 40g snap上，并用20-50％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱60分钟，流速为30ml/min。收集适当的级分并减压浓缩，得到产物4-氯-6-甲基哒嗪-3-甲酸甲酯(1.5g，7.99mmol，61.1％产率)为淡黄色固体。
MS(ESI)(C7H7ClN2O2)(M+1)+，计算值187.03；实测值，187.0
步骤-6:4-(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)-6-甲基哒嗪-3-甲酸甲酯的合成：
在室温向4-氯-6-甲基哒嗪-3-甲酸甲酯(1.5g，8.04mmol)的1,4-二噁烷(20mL)搅拌溶液中添加(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)硼酸(2.260g，12.06mmol)和碳酸钾(3.33g，24.12mmol)，并将反应混合物用氮气脱气5分钟。脱气后，加入PdCl2(dppf)(0.588g，0.804mmol)，反应混合物再次用氮气脱气5分钟。然后将反应混合物在80℃搅拌16小时。完成后，将反应混合物冷却至室温，通过硅藻土垫过滤无机固体并用乙酸乙酯(100mL)洗涤。用水(50mL)洗涤滤液，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到为棕色胶状物的粗产物。
将粗产物预吸附在硅胶上，装载在预填充的Orochem柱(25g)上，并以50-60％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱60分钟，流速为30ml/min。收集适当的级分并减压浓缩，得到4-(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)-6-甲基哒嗪-3-甲酸甲酯(1.3g，4.37mmol，54.3％产率)为淡黄色固体。
MS(ESI)(C13H12ClN3O3)(M+1)+，计算值294.06；实测值，294.0
步骤-7:4-(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)-6-甲基哒嗪-3-甲酸的合成：
向4-(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)-6-甲基哒嗪-3-甲酸甲酯(1.3g，4.43mmol)的四氢呋喃(15mL)的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(0.929g，22.13mmol)和水(5mL)。然后将反应混合物在室温搅拌2小时。反应完成后，减压浓缩反应混合物，得到粗残余物。所得残余物用水(5mL)稀释，水层用1.5NHCl酸化至pH-6，滤出沉淀的固体并减压干燥，得到产物4-(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)-6-甲基哒嗪-3-甲酸(700mg，2.478mmol，56.0％产率)为灰白色固体。
MS(ESI)(C12H10ClN3O3)(M+1)+，计算值280.05；实测值，280.0
步骤-8:4-(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基哒嗪-3-甲酰胺的合成：
在室温向4-(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)-6-甲基哒嗪-3-甲酸(150mg，0.536mmol)的乙腈(4mL)的搅拌溶液中加入氯-N,N,N′,N′-四甲基甲脒六氟磷酸盐(166mg，0.590mmol)，1-甲基咪唑(0.128mL，1.609mmol)，N,N-二甲基甲酰胺(DMF)(0.8mL)和5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(70.3mg，0.536mmol)。反应混合物在室温搅拌16小时。完成后，用水(15mL)稀释反应混合物，用10％MeOH的DCM溶液(2×30ml)萃取。用无水硫酸钠干燥合并的有机层，过滤并减压浓缩，得到为黄色胶状物的产物。将粗产物预吸附在硅胶上，装载在预填充的Orochem柱(12g)上，并在DCM中以2-3％MeOH的DCM溶液洗脱60分钟，流速为25ml/min。收集适当的级分，减压浓缩得到产物。将产物溶于20％乙醇的乙腈(3mL)溶液中，减压浓缩，得到产物4-(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基哒嗪-3-甲酰胺(90mg，0.227mmol，42.4％产率)为灰白色固体。
MS(ESI)(C15H13ClN6O3S)(M+1)+，计算值393.05；实测值，393.0。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ13.21(s，1H)，8.24(s，1H)，7.89(s，1H)，7.68(s，1H)，4.10(s，3H)，3.67(s，3H)，2.78(s，3H).
实施例311
2'-氯-6-(二甲基氨基)-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-[3,4'-联吡啶]-4-甲酰胺
步骤-1:5-溴-2-(二甲基氨基)异烟酸甲酯的合成：
在0℃向2-氨基-5-溴异烟酸甲酯(2.5g，10.82mmol)的乙腈(75mL)的搅拌悬浮液中依次加入水(12.50mL)，然后加入甲醛(24.97mL，335mmol)和乙酸(6.00mL，105mmol)。反应混合物在相同温度搅拌10分钟。然后在0℃加入氰基硼氢化钠(2.040g，32.5mmol)。所得反应混合物在室温搅拌16小时。完成后，蒸发溶剂，残余物用饱和碳酸氢钠水溶液(15mL)处理，用乙酸乙酯(3×50ml)萃取。用盐水洗涤合并的有机物，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到为黄色胶状物的粗产物。
将粗产物预吸附在硅胶上，装载在biotage预填充柱(110g)上，并用0-100％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱60分钟，流速为40ml/min。收集适当的级分并减压浓缩，得到5-溴-2-(二甲基氨基)异烟酸甲酯(1.02g，3.93mmol，36.3％产率)为黄色固体。
MS(ESI)(C9H11BrN2O2)(M+1)+，计算值259.01；实测值，259.0
步骤-2:2'-氯-6-(二甲基氨基)-5'-甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸甲酯的合成：
在室温向5-溴-2-(二甲基氨基)异烟酸甲酯(860mg，3.32mmol)在1,4-二噁烷(15mL)中的搅拌溶液中加入(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)硼酸(933mg，4.98mmol)和碳酸钾(1376mg，9.96mmol)，并用氮气脱气5分钟。加入PdCl2(dppf)(486mg，0.664mmol)，反应混合物再次用氮气脱气5分钟。然后将反应混合物在100℃搅拌16小时。反应完成后，将反应混合物冷却至室温，通过硅藻土垫过滤无机固体并用乙酸乙酯(50mL)洗涤。用水(80ml)稀释滤液并分离各层。水层用乙酸乙酯(2×100ml)萃取。用盐水(100mL)洗涤合并的有机层，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到为棕色胶状物的粗产物。
将粗产物预吸附在硅胶上，应用到biotage预填充柱(50g)上，用0-100％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱50分钟，流速45ml/min。纯产物用30％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱。收集适当的级分并减压浓缩，得到2'-氯-6-(二甲基氨基)-5'-甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸甲酯(590mg，1.787mmol，53.8％产率)为黄色固体。
MS(ESI)(C15H16ClN3O3)(M+1)+，计算值322.10；实测值，322.0
步骤-3:2'-氯-6-(二甲基氨基)-5'-甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸的合成：
在室温向2'-氯-6-(二甲基氨基)-5'-甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸甲酯(590mg，1.834mmol)的甲醇(4mL)和四氢呋喃(4mL)搅拌溶液中加入一水合氢氧化锂(115mg，2.75mmol)的水(0.8mL)溶液。反应混合物在室温搅拌16小时。反应完成后，反应混合物用水(25mL)稀释，水溶液用EtOAc(25mL)洗涤。水层用饱和柠檬酸水溶液酸化并用乙酸乙酯(4X 25mL)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到2'-氯-6-(二甲基氨基)-5'-甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸(356mg，1.150mmol，62.7％产率)为黄色固体。
MS(ESI)(C14H14ClN3O3)(M+1)+，计算值308.08；实测值，308.0
步骤-4:2'-氯-6-(二甲基氨基)-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-[3,4'-联吡啶]-4-甲酰胺的合成：
在室温向2'-氯-6-(二甲基氨基)-5'-甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸(80mg，0.260mmol)的乙腈(0.5mL)和N,N-二甲基甲酰胺(0.10mL)的搅拌溶液中加入1-甲基咪唑(0.062mL，0.780mmol)，氯-N,N,N′,N′-四甲基甲脒六氟磷酸盐(146mg，0.520mmol)，和5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(34.1mg，0.260mmol)。反应混合物在室温搅拌3小时。用饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)淬灭反应混合物，并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。用水(15mL)和盐水洗涤合并的有机层。有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到为黄色胶状物的粗产物。
用GRACErevelleris X2(反相)纯化粗产物，条件如下：(柱：80g Grace C18catriage；流动相A:0.1％FA的水溶液，流动相B:乙腈)在0-50min内0-100％的B的A溶液。纯产物用60％的B的A溶液洗脱。将适当的级分合并并真空蒸发，得到固体产物。干燥所得固体冷冻物，得到2'-氯-6-(二甲基氨基)-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-[3,4'-联吡啶]-4-甲酰胺(86mg，0.204mmol，78％产率)。用X射线晶体学证实了该结构。
MS(ESI)(C17H17ClN6O3S)(M+1)+，计算值421.09；实测值，420.8。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ12.85(s，1H)，8.16(s，1H)，8.03(s，1H)，7.45(s，1H)，6.97(s，1H)，4.08(s，3H)，3.57(s，3H)，3.15(s，6H).
实施例312和313
(S)-4-(5-氯-4-(乙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺和(R)-4-(5-氯-4-(乙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺：
步骤-1:(4-溴-2-氯-5-甲氧基苯基)(乙基)硫烷的合成：
将4-溴-2-氯-5-甲氧基苯胺(2.0g，8.46mmol)的2N HCl(28.2mL，42.3mmol)溶液加热至50℃并保持30min，然后将反应混合物冷却至0℃，并滴加亚硝酸钠(0.642g，9.30mmol)的水(20mL)溶液。将所得反应混合物在0℃搅拌40分钟，然后在0℃滴加乙硫醇钠(1.423g，16.91mmol)的水(20mL)溶液。将反应混合物在室温再次搅拌18小时。反应完成后，用10％NaOH的水溶液(50ml)稀释反应混合物并用EtOAc(2x 50ml)萃取。分离的有机层用无水Na2SO4干燥并真空浓缩，得到粗产物，其为黄色油状物。
将粗产物预吸附在二氧化硅上(使用10mlDCM，10g二氧化硅(60-120目))，装载在预填充的Orochem 120g柱上，并用0-40％乙酸乙酯的PET醚溶液以20ml/分钟的流速洗脱，收集适当的级分并减压浓缩，得到(4-溴-2-氯-5-甲氧基苯基)(乙基)硫烷(1.49g，3.03mmol，35.8％产率；57.6％purity by GCMS)为黄色固体。
LCMS(C9H10BrClOS)(M)+，计算值279.9；实测值，(m/z)未电离。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ7.68(s，1H)，6.96(s，1H)，3.91(m，3H)，3.10(q，J＝7.2Hz，2H)，1.30(t，J＝7.2Hz，3H).
步骤-2:1-溴-5-氯-4-(乙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯的合成：
在0℃、氮气气氛下向(4-溴-2-氯-5-甲氧基苯基)(乙基)硫烷(3.0g，10.65mmol)的二氯甲烷(30mL)溶液中分批加入mCPBA (2.02g，11.72mmol)。将所得混合物在室温搅拌14h。用10％碳酸氢钠水溶液稀释反应混合物。溶液(20ml)并用二氯甲烷(2x 50ml)萃取。分离有机层，用无水Na2SO4干燥，真空浓缩，得到棕色液体粗产品。
将预吸附的粗产物装载在预填充的Orochem 100g柱上，并以PET醚中0-40％的乙酸乙酯洗脱，流速为20ml/min。收集适当的级分并减压浓缩，得到1-溴-5-氯-4-(乙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯(1.3g，4.22mmol，39.2％产率)为棕色固体。
MS(ESI)(C9H10BrClO2S)(M+1)+，计算值296.93；实测值，296.8
步骤-3:4-(5-氯-4-(乙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-6-甲基烟酸甲酯：
在室温向二氧六环(10mL)和水(2mL)中的1-溴-5-氯-4-(乙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯(1.3g，4.37mmol)的搅拌溶液中添加4-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环己烷-2-基)-6-甲基烟酸甲酯(2.069g，7.86mmol)和碳酸钾(1.81g，13.11mmol)并将混合物用氮气脱气10分钟。然后加入PdCl2(dppf)(0.32g，0.437mmol)然后将反应混合物在90℃搅拌16小时。反应完成后，将反应混合物冷却至室温，并通过硅藻土过滤。用乙酸乙酯(50ml)洗涤硅藻土床。滤液用水(50ml)稀释。分离各层。用水和盐水洗涤有机层，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到为棕色液体的粗产物。
将预吸附的粗产物装载在预填充Orochem 125g柱上，并用5-6％的甲醇的DCM溶液以20ml/min的流速洗脱。收集适当的级分并减压浓缩，得到4-(5-氯-4-(乙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-6-甲基烟酸甲酯(1.2g，3.02mmol，69.1％)为棕色胶状物。
MS(ESI)(C17H18ClNO4S)(M+1)+，计算值368.08；实测值，367.8.
步骤-4:4-(5-氯-4-(乙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-6-甲基烟酸的合成：
在室温向4-(5-氯-4-(乙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-6-甲基烟酸甲酯(1.2g，3.26mmol)在四氢呋喃(10mL)和水(1mL)的混合物中的搅拌溶液中加入一水合氢氧化锂(0.684g，16.31mmol)。反应混合物在室温搅拌16小时。反应完成后，反应混合物在真空下浓缩。所得残余物用水(30ml)稀释，用EtOAc(25ml)洗涤。水层用1.5N HCl酸化至pH-6，用10％MeOH的DCM溶液(2X 30mL)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到4-(5-氯-4-(乙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-6-甲基烟酸(1.1g，3.10mmol，95％产率)为棕色固体。MS(ESI)(C16H16ClNO4S)(M+1)+，计算值354.06；实测值，354.0。
步骤-5:外消旋-4-(5-氯-4-(乙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺的合成：
在室温、氮气下向4-(5-氯-4-(乙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-6-甲基烟酸(0.6g，1.696mmol)和5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(0.222g，1.696mmol)的乙腈(10mL)和N,N-二甲基甲酰胺(DMF)(2.5mL)的搅拌溶液中加入1-甲基咪唑(0.418g，5.09mmol)，然后加入氯-N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟磷酸盐(0.952g，3.39mmol)。将反应混合物搅拌16小时。用冷水淬灭反应混合物，用10％甲醇的二氯甲烷(30mL×2)溶液萃取。用水和盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到为棕色液体的粗产物。
将预吸附的粗产物装载在预填充Orochem 25g柱上，以6-8％甲醇的DCM溶液洗脱，流速为20ml/min。收集适当的级分并减压浓缩，得到外消旋-4-(5-氯-4-(乙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(0.45g，0.890mmol，52.5％)为灰白色固体。
MS(ESI)(C19H19ClN4O4S2)(M+1)+，计算值467.06；实测值，467.0.
步骤-5:(S)-4-(5-氯-4-(乙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺-同分异构体-1和(R)-4-(5-氯-4-(乙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺-同分异构体-2的分离：
外消旋-4-(5-氯-4-(乙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(0.45g)通过手性SFC使用以下方法纯化：(柱：Lux A1(250*30)mm，5μm；流动相A:CO2，流动相B:异丙醇；梯度：等度洗脱35％B；柱温(℃):35；背压(bar):100；总流量：100g/min；波长：220nm；RT1(min):2.15；RT2(min):2.92；样品溶剂：ACN/MeOH-HPLC；进样体积：0.3mL/注射；周期:6.5min)，得到(S)-4-(5-氯-4-(乙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(90mg，0.192mmol，19.96％产率)为白色固体，其具有在手性SFC上的第一个峰，其保留时间较短，和(R)-4-(5-氯-4-(乙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(65mg，0.139mmol，14.44％产率)为白色固体，其具有在手性SFC上的第二个峰，其保留时间较长。
绝对立体化学尚未确定。
(S)-4-(5-氯-4-(乙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
MS(ESI)(C19H19ClN4O4S2)(M+1)+，计算值467.06；实测值，467.0.
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ12.82(brs，1H)，8.76(s，1H)，7.60(s，1H)，7.40(s，1H)，7.23(s，1H)，4.06(s，3H)，3.59(s，3H)，3.22-3.17(m，1H)，2.90-2.85(m，1H)，2.58(s，3H)，1.12(t，J＝7.60Hz，3H).
(R)-4-(5-氯-4-(乙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
MS(ESI)(C19H19ClN4O4S2)(M+1)+，计算值467.06；实测值，467.0.
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ12.81(s，1H)，8.75(s，1H)，7.62(s，1H)，7.41(s，1H)，7.24(s，1H)，4.07(s，3H)，3.59(s，3H)，3.22-3.16(m，1H)，2.92-2.85(m，1H)，2.58(s，3H)，1.12(t，J＝7.60Hz，3H).
实施例259
2'-氯-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-[3,4'-联吡啶]-4-甲酰胺.
步骤-1:2'-氯-5'-甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸甲酯的合成：
在室温向3-溴异烟酸甲酯(1g，4.63mmol)的1,4-二噁烷(10mL)和水(1mL)搅拌溶液中加入(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)硼酸(1.041g，5.55mmol)，碳酸钾(0.960g，6.94mmol)。然后将反应混合物用氮气脱气10分钟。加入PdCl2(dppf)(3.39g，4.63mmol)。将反应混合物在90℃搅拌3小时。完成后，将反应混合物冷却至室温，通过硅藻土床过滤并用乙酸乙酯(18mL)洗涤。用水(50ml)稀释滤液，分离各层且水层用乙酸乙酯(2×10ml)萃取。用无水硫酸钠干燥合并的有机层，过滤并减压蒸发，得到为棕色胶状物的粗产物。
将粗产物预吸附在二氧化硅上，装载在预填充的Orochem(25g)柱上，并用0-100％乙酸乙酯的石油醚溶液以25ml/min的流速洗脱。用15-25％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱纯产物。收集适当的级分并减压浓缩，得到2'-氯-5'-甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸甲酯(900mg，3.05mmol，65.8％产率)为白色固体。
MS(ESI)(C13H11ClN2O3)(M+1)+，计算值279.06；实测值，279.0
步骤-2:2'-氯-5'-甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸的合成：
在室温向2'-氯-5'-甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸甲酯(900mg，3.23mmol)在四氢呋喃(10mL)、甲醇(10mL)和水(1mL)的混合物中的搅拌溶液中加入一水合氢氧化锂(155mg，6.46mmol)。反应混合物在室温搅拌2小时。完成后，将反应混合物减压浓缩。残余物用水(1ml)稀释，用1(N)HCl(8ml)中和。形成的沉淀物通过布氏漏斗过滤，用水(2mL)洗涤，真空干燥，得到2'-氯-5'-甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸(600mg，2.154mmol，66.7％产率)，为白色固体。
MS(ESI)(C12H9ClN2O3)(M+1)+，计算值265.04；实测值265.0
步骤-3:2'-氯-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-[3,4'-联吡啶]-4-甲酰胺的合成：
在室温向2'-氯-5'-甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸(150mg，0.567mmol)的乙腈(3mL)和N,N-二甲基甲酰胺(0.6mL)的搅拌溶液中加入氯-N,N,N′,N′-四甲基甲脒六氟磷酸盐(175mg，0.623mmol)，1-甲基-1H-咪唑(140mg，1.7mmol)和5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(74.3mg，0.567mmol)。反应混合物在室温搅拌3小时。完成后，用冰冷水(10mL)淬灭反应混合物，通过布氏漏斗过滤沉淀的固体，用1∶1乙腈和水(2mL)洗涤，真空干燥得到粗产物，其为白色固体。
用GRACErevelleris X2(反相)纯化粗产物，条件如下：(柱：100g Grace C18catriage；流动相A:0.1％甲酸水溶液，流动相B:乙腈)40分钟内A中0-100％的B，流速为18ml/min。将合适的级分合并并真空蒸发，得到2'-氯-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-[3,4'-联吡啶]-4-甲酰胺(75mg，0.197mmol，34.8％产率)为白色固体。
MS(ESI)(C15H12ClN5O3S)(M+1)+，计算值378.05；实测值，378.0
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ13.05(s，1H)，8.84(d，J＝4.80Hz，1H)，8.72(s，1H)，8.16(s，1H)，7.76(d，J＝4.80Hz，1H)，7.61(s，1H)，4.08(s，3H)，3.62(s，3H).
实施例272
4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲磺酰基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
步骤-1:1-溴-5-氯-2-甲氧基-4-(甲磺酰基)苯的合成：
氮气气氛下在0℃向(4-溴-2-氯-5-甲氧基苯基)(甲基)硫烷(1.1g，4.11mmol)的二氯甲烷(5mL)搅拌溶液中分批滴加3-氯过氧苯甲酸(mCPBA)(1.774g，10.28mmol)。将所得混合物在室温搅拌16h。用10％Na2CO3水溶液(25ml)稀释反应混合物并用乙酸乙酯(2x25ml)萃取，用盐水洗涤。分离有机层，用无水硫酸钠干燥，真空浓缩，得到1-溴-5-氯-2-甲氧基-4-(甲磺酰基)苯(1.17g，3.91mmol，95％产率)为黄色固体。
MS(ESI)(C8H8BrClO3S)(M+1)+，计算值298.92；实测值，无电离
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ8.08(s，1H)，7.58(s，1H)，3.97(s，3H)，3.38(s，3H)。
步骤-2:4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲磺酰基)苯基)-6-甲基烟酸甲酯的合成：
在室温向1-溴-5-氯-2-甲氧基-4-(甲磺酰基)苯(500mg，1.669mmol)的1,4-二噁烷(5mL)和水(1mL)的搅拌溶液中添加4-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环己烷-2-基)-6-甲基烟酸甲酯(527mg，2.003mmol)和碳酸钾(692mg，5.01mmol)，然后用氮气脱气10分钟。向所得反应混合物中加入PdCl2(dppf)(122mg，0.167mmol)。将反应混合物在90℃搅拌16小时。完成后，将反应混合物通过硅藻土床过滤，用乙酸乙酯(125mL)洗涤。用水(100ml)和盐水溶液(100ml)洗涤滤液。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤并减压浓缩，得到为棕色液体的粗产物。
将粗产物预吸附在二氧化硅上，装载在预填充的Orochem 25g柱上，并用0-100％乙酸乙酯的石油醚溶液以25ml/min的流速洗脱。用44％的乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱纯产物。收集适当的级分并减压浓缩，得到4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲磺酰基)苯基)-6-甲基烟酸甲酯(240mg，0.6mmol)，为黄色油状物。
MS(ESI)(C16H16ClNO5S)(M+1)+，计算值370.05；实测值，370.0
步骤-3:4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲磺酰基)苯基)-6-甲基烟酸的合成：
在0℃向4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲磺酰基)苯基)-6-烟酸甲酯(240mg，0.649mmol)在四氢呋喃(4mL)、甲醇(1.3mL)和水(1.3mL)的混合物中的搅拌溶液中加入氢氧化锂(46.6mg，1.947mmol)。反应混合物在室温搅拌16小时。反应完成后，反应混合物在真空下浓缩。所得残余物用水(20ml)稀释，用二氯甲烷(2×30ml)洗涤。水层用饱和柠檬酸溶液酸化至pH-6，并用乙酸乙酯(2x 40mL)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲磺酰基)苯基)-6-甲基烟酸(126mg，0.346mmol，53.4％产率)为灰白色固体。
MS(ESI)(C15H14ClNO5S)(M+1)+，计算值356.04；实测值，356.0
步骤-4:4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲磺酰基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺的合成。
在室温向4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲磺酰基)苯基)-6-甲基烟酸(50mg，0.141mmol)的乙腈(2mL)和N,N-二甲基甲酰胺(0.4mL)的搅拌溶液中加入1-甲基-1H-咪唑(0.045mL，0.562mmol)，氯-N,N,N′,N′-四甲基甲脒六氟磷酸盐(59.1mg，0.211mmol)，和5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(18.43mg，0.141mmol)。反应混合物在室温搅拌16小时。完成后，反应混合物在减压下浓缩。残余物用水稀释，用乙酸乙酯(2x 5mL)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到粗产物。
将粗产物预吸附在二氧化硅上，装载在预填充的Orochem 12g柱上，用0-10％甲醇的二氯甲烷溶液以20ml/min的流速洗脱。收集适当的级分并减压浓缩，得到4-(5-氯-2-甲氧基-4-(甲磺酰基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(25mg，0.053mmol，37.8％产率)为灰白色固体。
MS(ESI)(C18H17ClN4O5S2)(M+1)+，计算值469.04；实测值，469.1
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ12.93(s，1H)，8.79(s，1H)，7.77(s，1H)，7.50(s，1H)，7.42(s，1H)，4.08(s，3H)，3.61(s，3H)，3.45(s，3H)，2.59(s，3H).
实施例321和318
(R)-4-(5-氯-4-(环丙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺和(S)-4-(5-氯-4-(环丙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺。
步骤-1:4-溴-2-氯-5-甲氧基苯磺酰氯的合成:
在-5℃将亚硫酰氯(6.17mL，85mmol)加入到水(30mL)中，然后加入氯化亚铜(I)(0.042g，0.423mmol)，并将所得反应混合物在室温搅拌5小时。在另一个烧瓶中，在0℃向4-溴-2-氯-5-甲氧基苯胺(2.0g，8.46mmol)的乙腈(20mL)溶液中滴加HCl(12M)(1.409mL，16.91mmol)。将混合物在0℃搅拌10分钟，然后在0℃滴加亚硝酸钠(0.875g，12.69mmol)的水(15mL)溶液，并在相同温度搅拌1小时。1小时后，在0℃将重氮盐加入到亚硫酰氯溶液中，并将所得反应混合物在0℃搅拌1小时。完成后，用二氯甲烷(100mL)稀释反应混合物。分离各层，并用二氯甲烷(100ml)萃取水层。合并的有机层用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到4-溴-2-氯-5-甲氧基苯磺酰氯(2.7g)为红色胶状物。粗产物未经纯化就被送至下一步。
MS(ESI)(C7H5BrCl2O3S)(M+1)+，计算值318.86；实测值，无电离
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ7.60(s，1H)，7.55(s，1H)，3.85(s，3H)。
步骤-2:4-溴-2-氯-5-甲氧基苯硫醇的合成：
向搅拌的4-溴-2-氯-5-甲氧基苯磺酰氯(2.70g，8.44mmol)在甲苯(30mL)的搅拌溶液中添加三苯基膦(6.64g，25.3mmol)。将所得反应混合物在110℃搅拌30分钟。30分钟后，让反应混合物冷却至60℃，然后加入水(6ml)。将所得混合物在60℃再搅拌30分钟。完成后，让反应混合物冷却至室温，用20％氢氧化钠溶液(25mL)碱化。所得混合物用甲苯(100ml)洗涤。水层用1.5N盐酸酸化至pH 2，用二氯甲烷(2×50ml)萃取。合并的二氯甲烷层用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到4-溴-2-氯-5-甲氧基苯硫醇(1.10g，3.28mmol，38.8％产率；LCMS纯度：75.5％)为灰白色固体。
MS(ESI)(C7H6BrClOS)(M-1)-，252.89；实测值，252.8
步骤-3:(4-溴-2-氯-5-甲氧基苯基)(环丙基)硫烷的合成：
在室温向4-溴-2-氯-5-甲氧基苯硫醇(1.1g，3.28mmol)的1,2-二氯乙烷(20mL)的搅拌溶液中加入环丙基硼酸(0.422g，4.92mmol)，2,2'-联吡啶(0.512g，3.28mmol)和乙酸铜(II)(0.595g，3.28mmol)。将反应混合物在70℃搅拌16小时。完成后，将反应混合物冷却至室温，用水(30ml)淬灭并用二氯甲烷(2×50ml)萃取。用无水硫酸钠干燥合并的有机层，过滤并减压蒸发，得到为黑色胶状物的粗产物。
将粗产物预吸附在二氧化硅上，装载在预填充Orochem(50g)柱上，并在30分钟内以0-100％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，流速为20ml/min。纯产物用10％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱。收集适当的级分并减压浓缩，得到(4-溴-2-氯-5-甲氧基苯基)(环丙基)硫烷(1.6g，5.41mmol，165％产率)为灰白色固体。
MS(ESI)(C10H10BrClOS)(M)+，计算值293.9；实测值，GCMS m/z293.9
步骤-4:1-溴-5-氯-4-(环丙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯的合成：
将(4-溴-2-氯-5-甲氧基苯基)(环丙基)硫烷(1.17g，3.98mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液冷却至0℃，然后在0℃分批加入间氯过氧苯甲酸(m-CPBA)(0.688g，3.98mmol)。反应混合物在室温搅拌1小时。完成后，反应混合物用饱和碳酸氢钠溶液(20ml)淬灭。并用二氯甲烷(2x 50ml)萃取。分离有机层，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩，得到为无色胶状物的粗产物。
将粗产物预吸附在二氧化硅上，装载在预填充的Orochem(50g)柱上，并在50分钟内以0-100％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，流速为20ml/min。用80％的乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱纯产物。收集适当的级分并减压浓缩，得到1-溴-5-氯-4-(环丙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯(1.2g，3.71mmol，93％产率)为灰白色固体。
MS(ESI)(C10H10BrClO2S)(M+1)+，计算值308.94；实测值，309.0
步骤-5:4-(5-氯-4-(环丙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-6-甲基烟酸甲酯的合成：
在室温向1-溴-5-氯-4-(环丙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯(1.0g，3.23mmol)在1,4-二噁烷(10mL)和水(4mL)中的搅拌溶液中加入4-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环己烷-2-基)-6-甲基烟酸甲酯(1.530g，5.81mmol)，碳酸钾(1.339g，9.69mmol)。然后将反应混合物用氮气脱气10分钟。加入PdCl2(dppf)(0.236g，0.323mmol)。将反应混合物在90℃搅拌16小时。完成后，反应混合物用水(10ml)淬灭，用乙酸乙酯(2×50ml)萃取。用无水硫酸钠干燥合并的有机层，过滤并减压蒸发，得到为黑色胶状物的粗产物。
将粗产物预吸附在二氧化硅上，装载在预填充Orochem(50g)柱上，并在50分钟内以0-100％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，流速为30ml/min。用80％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱纯产物。收集适当的级分并减压浓缩，得到产物4-(5-氯-4-(环丙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-6-甲基烟酸甲酯(0.8g，2.027mmol，62.8％产率)为灰白色固体。
MS(ESI)(C18H18ClNO4S)(M+1)+，计算值380.08；实测值，380.0
步骤-6:4-(5-氯-4-(环丙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-6-甲基烟酸的合成：
在室温向4-(5-氯-4-(环丙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-6-甲基烟酸甲酯(0.8g，2.106mmol)在甲醇(15mL)和水(5mL)的混合物中的搅拌溶液中加入一水合氢氧化锂(0.252g，10.53mmol)。反应混合物在室温搅拌16小时。完成后，将反应混合物减压浓缩。残余物用水(10ml)稀释，用1.5(N)盐酸中和。通过GRACErevelleris X2(反相)在以下条件下纯化水层：(柱：50gGrace C18 catriage；流动相A:0.1％甲酸水溶液，流动相B：乙腈)在30分钟内0-100％B的A溶液，流速为20mL/min，纯产物用55％B的A溶液洗脱。将合适的级分合并并真空蒸发，得到4-(5-氯-4-(环丙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-6-甲基烟酸(0.7g，1.907mmol，91％产率)为灰白色固体。
MS(ESI)(C17H16ClNO4S)(M+1)+，计算值366.05；实测值366.0
步骤-7:4-(5-氯-4-(环丙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺的合成：
在室温向4-(5-氯-4-(环丙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-6-甲基烟酸(150mg，0.410mmol)的乙腈(5mL)和N,N-二甲基甲酰胺(1mL)的搅拌溶液中加入1-甲基-1H-咪唑(0.131mL，1.640mmol)，氯-N,N,N′,N′-四甲基甲脒六氟磷酸盐(173mg，0.615mmol)和5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(64.5mg，0.492mmol)。在室温搅拌16小时。完成后，反应混合物用水(2mL)淬灭，并通过GRACErevelleris X2(反相)在以下条件下纯化：(柱：50g GraceC18catriage；流动相A:0.1％甲酸水溶液，流动相B：乙腈)0-100％B的A溶液，其流速为25mL/min，纯产物用40％B的A溶液洗脱。将合适的级分合并并真空蒸发，得到4-(5-氯-4-(环丙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(125mg，0.258mmol，62.9％产率)为灰白色固体。
MS(ESI)(C20H19ClN4O4S2)(M+1)+，计算值479.06；实测值，479.0
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ12.83(s，1H)，8.74(s，1H)，7.63(s，1H)，7.43(s，1H)，7.20(s，1H)，4.07(s，3H)，3.59(s，3H)，2.74-2.67(m，1H)，2.58(s，3H)，1.08-0.95(m，3H)，0.80-0.72(m，1H)。
步骤8:(R)-4-(5-氯-4-(环丙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺和(S)-4-(5-氯-4-(环丙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺的手性分离：
4-(5-氯-4-(环丙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(160mg)通过制备型手性SFC在以下条件下进行分离：(柱：Lux Amylose-1(250*30)mm，5μm；流动相A:CO2，流动相B:甲醇；梯度：等度洗脱40％B；柱温(℃):35；背压(bar):100；波长：220nm；RT1(min):2.16；RT2(min):3.52；(样品溶剂：3mL MeOH-HPLC；进样体积：0.4mL/注射；周期:9min)，得到(R)-4-(5-氯-4-(环丙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(70mg，0.146mmol，43.7％产率)为灰白色固体，其具有在手性SFC上的第一个峰，其保留时间较短，和(S)-4-(5-氯-4-(环丙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(65mg，0.134mmol，40.1％产率)为灰白色固体，其具有在手性SFC上的第二个峰，其保留时间较长。
绝对立体化学尚未确定。
(R)-4-(5-氯-4-(环丙基亚磺酰基)-2-甲氧基苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
MS(ESI)(C20H19ClN4O4S2)(M+1)+，计算值479.06；实测值，478.8
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ12.84(s，1H)，8.76(s，1H)，7.61(s，1H)，7.41(s，1H)，7.20(s，1H)，4.06(s，3H)，3.59(s，3H)，2.74-2.67(m，1H)，2.58(s，3H)，1.08-0.95(m，3H)，0.80-0.72(m，1H).
(S)-4-(5-溴-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
MS(ESI)(C20H19ClN4O4S2)(M-1)-，477.04；实测值，477.0
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ12.83(s，1H)，8.75(s，1H)，7.63(s，1H)，7.43(s，1H)，7.20(s，1H)，4.07(s，3H)，3.59(s，3H)，2.74-2.67(m，1H)，2.58(s，3H)，1.08-0.94(m，3H)，0.80-0.71(m，1H).
实施例320
4-(6-氯-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-8-基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺.
步骤-1:2-溴-4-氯-6-硝基苯酚的合成:
将4-氯-2-硝基苯酚(10g，57.6mmol)的乙酸(80mL)溶液冷却至5-10℃，滴加溴(3.56mL，69.1mmol)。在10℃搅拌反应混合物30分钟，然后在室温搅拌16小时。完成后，用冰冷水(220ml)淬灭反应混合物，用二氯甲烷(2×30ml)萃取。用10％碳酸氢钠溶液(100ml)、水(100ml)和盐水(100ml)洗涤合并的有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到2-溴-4-氯-6-硝基苯酚(14g，49.1mmol，85％产率)为黄色固体。
MS(ESI)(C6H3BrClNO3)(M-1)-，249.89；实测值，249.8
步骤-2:1-溴-2-(2-溴乙氧基)-5-氯-3-硝基苯的合成:
向2-溴-4-氯-6-硝基苯酚(14g，49.1mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(100mL)中的搅拌溶液中分批添加碳酸钾(20.35g，147mmol)，然后加入1,2-二溴乙烷(21.15mL，245mmol)。将反应混合物在80℃搅拌5小时。完成后，用冰冷水(200mL)淬灭反应混合物，用乙酸乙酯(2×200mL)萃取。用水(100mL)、盐水(100mL)洗涤合并的有机层，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到为棕色固体的粗产物。
将粗产物预吸附在二氧化硅上，装载在预填充的Orochem(125g)柱上，以0-10％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，流速为20ml/min。纯产物用4-6％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱。收集适当的级分并减压浓缩，得到1-溴-2-(2-溴乙氧基)-5-氯-3-硝基苯(14.2g，36.7mmol，74.8％产率)为黄色固体。
MS(ESI)(C8H6Br2ClNO3)(M+1)+，计算值329.6；实测值，329.8
步骤-3:3-溴-2-(2-溴乙氧基)-5-氯苯胺的合成：
在室温向1-溴-2-(2-溴乙氧基)-5-氯-3-硝基苯(14g，39.0mmol))的乙酸(100mL)搅拌溶液中分批添加铁(8.70g，156mmol)。反应混合物在室温搅拌16小时。完成后，用乙酸乙酯(400mL)稀释反应混合物，并通过硅藻土过滤。用乙酸乙酯(100mL)洗涤硅藻土床。用水(200mL)稀释滤液并分离各层。用水、盐水洗涤有机层，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到3-溴-2-(2-溴乙氧基)-5-氯苯胺(12.1g，29.7mmol，76％产率；LCMS纯度：80.8％)为棕色液体。
MS(ESI)(C8H8Br2ClNO)(M)+，计算值329.42；实测值，329.8
步骤-4:8-溴-6-氯-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪的合成：
在室温向3-溴-2-(2-溴乙氧基)-5-氯苯胺(12g，29.4mmol)与N,N-二甲基甲酰胺(120mL)的混合物中分批加入碳酸钾(18.31g，132mmol)。该反应在80℃搅拌3小时。完成后，用冰冷水(200mL)淬灭反应混合物，用乙酸乙酯(2×200mL)萃取。用水、盐水洗涤合并的有机层，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到为棕色液体的粗产物。
将粗产物预吸附在二氧化硅上，装载在预填充的Orochem(125g)柱上，以0-10％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，流速为20ml/min。用15-18％的乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱纯产物。收集适当的级分并减压浓缩，得到8-溴-6-氯-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪(7.1g，28.3mmol，96％产率)为棕色胶状物。
MS(ESI)(C8H7BrClNO)(M+2)+，计算值250.52；实测值，250.0
步骤-5:8-溴-6-氯-2,3-二氢-4H-苯并[b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯的合成：
在0℃向8-溴-6-氯-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪(3g，12.07mmol)的四氢呋喃(45mL)搅拌溶液中添加DMAP(0.737g，6.04mmol)和Boc-酸酐(3.36mL，14.49mmol)。所得反应混合物在室温搅拌16小时。完成后，反应混合物用冰冷水(50mL)淬灭，用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。用水(50mL)和盐水(50mL)洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到为棕色液体的粗产物。
将粗产物预吸附在二氧化硅上，装载在预填充的Orochem(125g)柱上，以0-50％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，流速为20ml/min。用8-10％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱纯产物。收集适当的级分并减压浓缩，得到8-溴-6-氯-2,3-二氢-4H-苯并[b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯(3.1g，8.87mmol，73.5％产率)为灰白色固体。
MS(ESI)(C13H15BrClNO3)(M-100)-，248；实测值，247.8
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ7.90(brs，1H)，7.41(d，J＝2.4Hz，1H)，4.33(t，J＝4.4Hz 2H)，3.83(t，J＝4.4Hz 2H)，1.50(s，9H)。
步骤-6:6-氯-8-(5-(甲氧羰基)-2-甲基吡啶-4-基)-2,3-二氢-4H-苯并[b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯的合成：
在室温向8-溴-6-氯-2,3-二氢-4H-苯并[b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯(1.5g，4.30mmol)的1,4-二噁烷(10mL)和水(0.5mL)的搅拌溶液中加入4-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环己烷-2-基)-6-甲基烟酸甲酯(1.698g，6.45mmol)，碳酸钾(1.784g，12.91mmol)。然后反应混合物用氮气脱气5分钟。加入PdCl2(dppf)(0.315g，0.430mmol)。将反应混合物在90℃搅拌16小时。完成后，将反应混合物冷却至室温，通过硅藻土床过滤，用乙酸乙酯(50mL)洗涤。用水(50mL)稀释滤液，分离各层并将水层用乙酸乙酯(50mL)萃取。用无水硫酸钠干燥合并的有机层，过滤并减压蒸发，得到为棕色液体的粗产物。
将粗产物预吸附在二氧化硅上，装载在预填充的Orochem(125g)柱上，并用0-100％乙酸乙酯的石油醚溶液以20ml/min的流速洗脱。纯产物用42％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱。收集适当的级分并减压浓缩，得到6-氯-8-(5-(甲氧羰基)-2-甲基吡啶-4-基)-2,3-二氢-4H-苯并[b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯(1.7g，3.99mmol，93％产率)为黄色胶状物。
MS(ESI)(C21H23ClN2O5)(M+1)+，计算值419.14；实测值，419.0
步骤-7:4-(4-(叔丁氧基羰基)-6-氯-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-8-基)-6-甲基烟酸:
在室温向6-氯-8-(5-(甲氧羰基)-2-甲基吡啶-4-基)-2,3-二氢-4H-苯并[b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯(1.7g，4.06mmol)在四氢呋喃(20mL)，和水(6.67mL)中的搅拌溶液中加入一水合氢氧化锂(0.852g，20.29mmol)。反应混合物在室温搅拌16小时。完成后，将反应混合物减压浓缩。残余物用水(20mL)稀释，用1.5(N)HCl(15mL)中和，用10％甲醇的二氯甲烷溶液(2×30ml)萃取。用无水硫酸钠干燥合并的有机层，过滤并减压蒸发，得到4-(4-(叔丁氧基羰基)-6-氯-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-8-基)-6-甲基烟酸(1.2g，2.87mmol，70.7％产率)，为黄色固体。
MS(ESI)(C20H21ClN2O5)(M+1)+，计算值405.12；实测值405.0
步骤-8:6-氯-8-(5-((5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)氨甲酰基)-2-甲基吡啶-4-基)-2,3-二氢-4H-苯并[b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯的合成：
在室温向4-(4-(叔丁氧基羰基)-6-氯-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-8-基)-6-甲基烟酸(300mg，0.741mmol)的乙腈(3mL)和N,N-二甲基甲酰胺(075mL)的搅拌溶液中加入5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(97mg，0.741mmol)，1-甲基-1H-咪唑(0.177mL，2.223mmol)和氯-N,N,N′,N′-四甲基甲脒六氟磷酸盐(312mg，1.112mmol)。反应混合物在室温搅拌16小时。完成后，反应混合物用冰冷水(50mL)淬灭，用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。用水(40ml)、盐水(40mL)洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到为棕色液体的粗产物。
将粗产物预吸附在二氧化硅上，装载在预填充的Orochem(25g)柱上，并以0-10％甲醇的二氯甲烷溶液以流速30ml/min洗脱。用6-8％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱纯产物。收集适当的级分并减压浓缩，得到6-氯-8-(5-((5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)氨甲酰基)-2-甲基吡啶-4-基)-2,3-二氢-4H-苯并[b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯(110mg，0.202mmol，27.3％产率)为灰白色固体。
MS(ESI)(C23H24ClN5O5S)(M+1)+，计算值518.13；实测值，518.0
步骤-9:4-(6-氯-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-8-基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺:
在0℃向6-氯-8-(5-((5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)氨甲酰基)-2-甲基吡啶-4-基)-2,3-二氢-4H-苯并[b][1,4]噁嗪-4-甲酸叔丁酯(110mg，0.212mmol)的二氯甲烷(3mL)搅拌溶液中加入三氟乙酸(0.082mL，1.062mmol)。反应混合物在室温搅拌13小时。完成后，反应混合物在室温用冰冷水(20mL)淬灭，并用10％甲醇的二氯甲烷溶液(2x 20mL)萃取。用水(20mL)、盐水(30mL)洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到为棕色固体的粗产物。
通过Isolera biotage(反相)在以下条件下纯化粗产物:(柱：30g GraceC18Redisep Gold；流动相A：水，流动相B:乙腈；中性方法)0-100％的B的A溶液持续30分钟，其流速为25mL/min。将合适的级分合并并真空蒸发，得到4-(6-氯-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-8-基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(51mg，0.118mmol，55.6％产率)为白色固体。
MS(ESI)(C18H16ClN5O3S)(M+1)+，计算值418.08；实测值，418.0
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ12.75(s，1H)，8.66(s，1H)，7.33(s，1H)，6.62(d，J＝2.4Hz 1H)，6.56(d，J＝2.4Hz 1H)，6.19(brs，1H)，4.08(s，3H)，3.76(brs，2H)，3.14(t，J＝4.00Hz，2H)，2.56(s，3H).
实施例319和322
(R)-4-(5-溴-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺和(S)-4-(5-溴-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺。
步骤-1:2-溴-4-碘-5-甲氧基苯胺的合成：
在室温向2-溴-5-甲氧基苯胺(2.5g，12.37mmol)和碳酸钙(1.610g，16.09mmol)在二氯甲烷(50mL)和甲醇(25mL)中的混合物中一次性添加二氯碘酸四甲基铵(I)(3.70g，13.61mmol)。反应在室温搅拌1小时。完成后，将反应混合物与另一批(0.5g)混合，用二氯甲烷(500mL)稀释，用水(2x 200mL)洗涤。用无水硫酸钠干燥合并的有机层，过滤并减压浓缩，得到为黑色固体的粗产物。
将粗产物预吸附在二氧化硅上，装载在预填充的Orochem(120g)柱上，并以50ml/分钟的流速用0-10％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱。收集适当的级分并减压浓缩，得到产物2-溴-4-碘-5-甲氧基苯胺(4g，11.71mmol，95％产率)为棕色固体。
MS(ESI)(C7H7BrINO)(M+2)+，计算值329.89；实测值，329.8
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ7.56(s，1H)，6.49(s，1H)，5.51(brs，2H)，3.72(s，3H)。
步骤-2:(2-溴-4-碘-5-甲氧基苯基)(甲基)硫烷的合成：
向2-溴-4-碘-5-甲氧基苯胺(4g，12.20mmol)在2N HCl氯化氢(48.8mL，98mmol)中的搅拌溶液中，将反应混合物加热至50℃持续30分钟，然后将反应混合物冷却至0℃，滴加亚硝酸钠(0.926g，13.42mmol)的水(40ml)溶液并在0℃搅拌40分钟，然后在0℃滴加硫代甲醇钠(1.710g，24.39mmol)的水(40ml)溶液。反应混合物在室温搅拌18小时。完成后，将反应混合物在乙酸乙酯(200mL)中稀释，并分离各层。有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩，得到为深棕色油状物的粗产品。
将粗产物预吸附在二氧化硅上，装载在预填充的Orochem(120g)柱上，并以0-100％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，流速为50ml/min。用15-20％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱纯产物。收集适当的级分并减压浓缩，得到产物(2-溴-4-碘-5-甲氧基苯基)(甲基)硫烷(3g，7.37mmol，60.4％产率)，为棕色固体。
MS(ESI)(C8H8BrIOS)(M)+，计算值357.85；实测值，GCMS m/z357.8
步骤-3:1-溴-5-碘-4-甲氧基-2-(甲基亚磺酰基)苯的合成：
将(2-溴-4-碘-5-甲氧基苯基)(甲基)硫烷(3g，8.36mmol)的二氯甲烷(30mL)溶液冷却至0℃，然后在0℃分批加入间氯过氧苯甲酸(m-CPBA)(1.442g，8.36mmol)。反应混合物在室温搅拌16小时。完成后，反应混合物用饱和碳酸氢钠溶液(50ml)淬灭并用二氯甲烷(2x100ml)萃取。分离有机层，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩，得到为橙色固体的粗产物。
将粗产物预吸附在二氧化硅上，装载在预先填充的Orochem(40g)柱上，并用0-100％乙酸乙酯的石油醚溶液以20ml/min的流速洗脱。用45-50％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱纯产物。收集适当的级分并减压浓缩，得到产物1-溴-5-碘-4-甲氧基-2-(甲基亚磺酰基)苯(1.25g，3.12mmol，37.3％产率)为橙色固体并回收原料(0.4g)。
MS(ESI)(C8H8BrIO2S)(M+1)+，计算值374.86；实测值，374.8
步骤-4:4-(5-溴-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-6-甲基烟酸甲酯的合成：
在室温向1-溴-5-碘-4-甲氧基-2-(甲基亚磺酰基)苯(600mg，1.498mmol)的1,4-二噁烷(25mL)的搅拌溶液中加入4-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环己烷-2-基)-6-甲基烟酸甲酯(621mg，2.246mmol)，碳酸钾(621mg，4.49mmol)。然后将反应混合物用氮气脱气10分钟。加入PdCl2(dppf)(219mg，0.300mmol)。将反应混合物在90℃搅拌16小时。完成后，将反应混合物冷却至室温，通过硅藻土床过滤，用乙酸乙酯(40mL)洗涤。用水(40mL)稀释滤液，分离各层并将水层用乙酸乙酯(2×40mL)萃取。用无水硫酸钠干燥合并的有机层，过滤并减压蒸发，得到为棕色液体的粗产物。
将粗产物预吸附在二氧化硅上，装载在预填充的Orochem(50g)柱上，并以15ml/min的流速用0-100％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱。纯产物用75-80％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱。收集适当的级分并减压浓缩，得到产物4-(5-溴-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-6-甲基烟酸甲酯(330mg，0.813mmol，54.3％产率)为棕色固体。
MS(ESI)(C16H16BrNO4S)(M+1)+，计算值398.0；实测值，397.8
步骤-5:4-(5-溴-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-6-甲基烟酸：
在室温向4-(5-溴-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-6-甲基烟酸甲酯(330mg，0.829mmol)在四氢呋喃和水(2mL)的混合物中的搅拌溶液(10mL)中加入一水合氢氧化锂(174mg，4.14mmol)。反应混合物在室温搅拌16小时。完成后，将反应混合物减压浓缩。残余物用水(10ml)稀释，用乙酸乙酯(2×15ml)洗涤。水层用1.5(N)HCl(5mL)中和，用乙酸乙酯(2×15ml)萃取。用无水硫酸钠干燥合并的有机层，过滤并减压蒸发，得到4-(5-溴-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-6-甲基烟酸(300mg，0.773mmol，93％产率)为棕色固体。
MS(ESI)(C15H14BrNO4S)(M+1)+，计算值383.99；实测值383.8
步骤-6:4-(5-溴-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺的合成：
在室温向4-(5-溴-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-6-甲基烟酸(70mg，0.180mmol)的乙腈(5mL)和N,N-二甲基甲酰胺(0.5mL)的搅拌溶液中加入5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(28.4mg，0.216mmol)，1-甲基-1H-咪唑(0.043mL，0.541mmol)和氯-N,N,N′,N′-四甲基甲脒六氟磷酸盐(76mg，0.271mmol)。反应混合物在室温搅拌16小时。完成后，将反应混合物减压浓缩。残余物用水(10ml)稀释，用乙酸乙酯(2×10ml)萃取。用水、盐水洗涤合并的有机层，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩得到为棕色固体的粗产物。
用GRACErevelleris X2(反相)纯化粗产物，条件如下：(柱：40g Grace C18catriage；流动相A:0.1％碳酸氢铵的水溶液，流动相B：乙腈)0-100％B的A溶液持续30分钟，其流速为25mL/min，春产物用40％B的A溶液洗脱。将合适的级分合并并真空蒸发，得到4-(5-溴-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(70mg，0.134mmol，74.4％产率)为白色固体。
MS(ESI)(C18H17BrN4O4S2)(M+2)+，计算值499.0；实测值，499.0
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ12.84(s，1H)，8.75(s，1H)，7.73(s，1H)，7.41(s，1H)，7.34(s，1H)，4.07(s，3H)，3.60(s，3H)，2.85(s，3H)，2.58(s，3H)。
步骤7:(R)-4-(5-溴-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺和(S)-4-(5-溴-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺的手性分离：
4-(5-溴-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(69mg)通过制备型手性SFC在以下条件下进行分离：(柱：YMC CelluloseSZ(250*30)mm，5μm；流动相A:CO2，流动相B:甲醇；梯度：等度洗脱40％B；柱温(℃):35；背压(bar):100；波长：220nm；RT1(min):4.54；RT2(min):5.52；(样品溶剂：2mL THF/MeOH-HPLC；进样体积：0.5mL/注射；周期:7.5min)，得到(R)-4-(5-溴-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(30mg，0.059mmol，44.6％产率)为白色固体，其具有在手性SFC上的第一个峰，其保留时间较短，和(S)-4-(5-溴-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(22mg，0.043mmol，32.6％产率)为白色固体，其具有在手性SFC上的第二个峰，其保留时间较长。
绝对立体化学尚未确定。
(R)-4-(5-溴-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
MS(ESI)(C18H17BrN4O4S2)(M+2)+，计算值499.0；实测值，499.0
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ12.82(s，1H)，8.75(s，1H)，7.62(s，1H)，7.34(s，1H)，7.28(s，1H)，4.01(s，3H)，3.60(s，3H)，2.85(s，3H)，2.55(s，3H)。
(S)-4-(5-溴-2-甲氧基-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
MS(ESI)(C18H17BrN4O4S2)(M+2)+，计算值499.0；实测值，499.0
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ12.85(s，1H)，8.80(s，1H)，7.66(s，1H)，7.34(s，1H)，7.30(s，1H)，4.03(s，3H)，3.60(s，3H)，2.85(s，3H)，2.56(s，3H).
实施例323
6-(氮杂环丁烷-1-基)-2'-氯-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-[3,4'-联吡啶]-4-甲酰胺
步骤-1:2-(氮杂环丁烷-1-基)-5-溴异烟酸甲酯的合成：
在室温向5-溴-2-氯异烟酸甲酯(1.5g，5.99mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(30mL)搅拌溶液中依次加入二异丙基乙胺(3.13mL，17.97mmol)，然后加入氮杂环丁烷(0.444mL，6.59mmol)。所得反应混合物在90℃搅拌6小时。完成后，用水淬灭所述反应混合物，用乙酸乙酯萃取(2x 200mL)。用盐水洗涤合并的有机物，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到为棕色固体的粗产物。
将粗产物预吸附在硅胶上，装载在biotage预填充柱(40g)上，并用0-100％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱60分钟，流速为25ml/min。纯产物用10-20％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱。收集适当的级分并减压浓缩，得到2-(氮杂环丁烷-1-基)-5-溴异烟酸甲酯(700mg，2.350mmol，39.2％产率)为黄色固体。
MS(ESI)(C10H11BrN2O2)(M+1)+，计算值271.01；实测值，271.0
步骤-2:6-(氮杂环丁烷-1-基)-2'-氯-5'-甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸甲酯的合成：
在室温向2-(氮杂环丁烷-1-基)-5-溴异烟酸甲酯(100mg，0.369mmol)在1,4-二噁烷(5mL)和水(1mL)中的搅拌溶液中添加(2-氯-5-甲氧基吡啶-4-基)硼酸(83mg，0.443mmol)和碳酸钾(102mg，0.738mmol)，氮气脱气15分钟。15分钟后向其中加入PdCl2(dppf)(27.0mg，0.037mmol)。然后将反应混合物在80℃搅拌16小时。反应完成后，将反应混合物冷却至室温，通过硅藻土垫过滤无机固体。滤液在减压下浓缩，得到为棕色胶状物的粗产物。
将粗产物预吸附在硅胶上，装载在biotage预填充柱(12g)上，并用0-100％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱50分钟，流速为25ml/min。纯产物用5-15％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱。收集适当的级分并减压浓缩，得到6-(氮杂环丁烷-1-基)-2'-氯-5'-甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸甲酯(110mg，0.319mmol，86％产率)为灰白色固体。
MS(ESI)(C16H16ClN3O3)(M+1)+，计算值334.10；实测值，334.0
步骤-3:6-(氮杂环丁烷-1-基)-2'-氯-5'-甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸的合成：
于0℃向6-(氮杂环丁烷-1-基)-2'-氯-5'-甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸甲酯(110mg，0.330mmol)的四氢呋喃(5mL)，甲醇(1mL)和水(1mL)的搅拌溶液中加入一水合氢氧化锂(55.3mg，1.318mmol)。反应混合物在室温搅拌2小时。完成后，将反应混合物减压浓缩。残余物用水(20ml)稀释，水层用乙酸乙酯(25ml)洗涤。水层用1.5N HCl酸化，用10％甲醇的二氯甲烷溶液(3×50ml)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到6-(氮杂环丁烷-1-基)-2'-氯-5'-甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸(45mg，0.134mmol，40.6％产率)为灰白色固体。
MS(ESI)(C15H14ClN3O3)(M+1)+，计算值320.08；实测值，320.0
步骤-4:6-(氮杂环丁烷-1-基)-2'-氯-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-[3,4'-联吡啶]-4-甲酰胺的合成：
在室温向6-(氮杂环丁烷-1-基)-2'-氯-5'-甲氧基-[3,4'-联吡啶]-4-甲酸(45mg，0.141mmol)的乙腈(3mL)和N,N-二甲基甲酰胺(1mL)的搅拌溶液中加入1-甲基-1H-咪唑(46.2mg，0.563mmol)，5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(22.15mg，0.169mmol)和氯-N,N,N′,N′-四甲基甲脒六氟磷酸盐(59.2mg，0.211mmol)。反应混合物在室温搅拌4小时。用冷水淬灭反应混合物，减压浓缩。残余物用水(30mL)稀释，用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。用水和盐水洗涤合并的有机层。有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到为橙色固体的粗产物。
将粗产物预吸附在硅胶上，装载在biotage预填充柱(10g)上，并用0-10％甲醇的二氯甲烷溶液以25ml/min的流速洗脱50分钟。收集适当的级分并减压浓缩，得到6-(氮杂环丁烷-1-基)-2'-氯-5'-甲氧基-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-[3,4'-联吡啶]-4-甲酰胺(20.22mg，0.046mmol，32.8％产率)为灰白色固体。
MS(ESI)(C18H17ClN6O3S)(M+1)+，计算值433.09；实测值，433.0
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6):δ12.87(s，1H)，8.11(s，1H)，8.03(s，1H)，7.42(s，1H)，6.70(s，1H)，4.13-4.03(m，7H)，3.57(s，3H)，2.44-2.36(m，2H).
实施例325
N-(5-羟基-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-2',6-二甲基-[4,4'-联吡啶]-3-甲酰胺
将N-(5-((5-氯吡啶-2-基)甲氧基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-2',6-二甲基-[4,4'-联吡啶]-3-甲酰胺(5g，10.35mmol，实施例8)溶于6N HCl(20.71ml，124mmol)并在室温搅拌20分钟，然后LCMS(Waters CSH C18柱(30mm x 2.1mm，1.7微米)，0.1％TFA于CH3CN/H2O中，2分钟)显示所述反应仅进行了一部分。两小时后，LCMS显示反应进一步进行，但速度缓慢，因此加入2mL浓盐酸并将混合物搅拌过夜，此后反应进一步进行，但不完全。加入另一份浓HCl(20.71ml，248mmol)和12g氯化钠并搅拌30分钟，此后苯甲基醚完全裂解。在反应过程中形成的苯甲基氯副产物，5-氯-2-(氯甲基)吡啶，原位转化为苯甲基胺，(5-氯吡啶-2-基)甲胺，因为此苯甲基胺化合物相比苯甲基氯更容易从产物中分离。为此，加入28-30％的氨(35.0ml，518mmol)并搅拌两小时，此后LCMS表示所有的苯甲基氯都已转化为苯甲基胺。首先用浓HCl，然后用柠檬酸将pH值调节到6到7之间，这导致产品从溶液中沉淀出来。将悬浮液剧烈搅拌，并偶尔进行超声处理，直到所有的块状物破碎，这样悬浮液就是在浅黄色液体中的白色粉末。将固体滤出并风干1小时，然后在高真空下放置过夜以得到N-(5-羟基-1,3,4-噻二唑-2-基)-5'-甲氧基-2',6-二甲基-[4,4'-联吡啶]-3-甲酰胺(2.55g，7.06mmol，68％产率)。MS(ESI)(C16H15N5O3S)(M+1)+，计算值358.1；实测值358.1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.4(s，1H)，8.75(s，1H)，8.25(s，1H)，7.42(s，1H)，7.25(s，1H)，3.70(s，3H)，2.62(s，3H)，2.48(s，3H)。
实施例377
N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-4-(4-甲氧基苯基)-6-甲基吡啶-3-甲酰胺
步骤1:4-氯-6-甲基烟酸锂
在室温将4-氯-6-甲基烟酸甲酯(10g，53.9mmol)悬浮于水(20mL)和1,4-二噁烷(100.0mL)中，快速搅拌，并用氢氧化锂(2.261g，53.9mmol)处理。将反应混合物在室温搅拌5分钟，此后LCMS(Waters CSH C18柱(30mm x2.1mm，1.7微米)，0.1％TFA于CH3CN/H2O中，2分钟)显示所述反应仅进行了一部分。将反应混合物在室温搅拌72小时，此后反应完成。通过旋转蒸发除去溶剂，将粗残余物重新悬浮在200mL二噁烷中，再次通过旋转蒸发除去溶剂，共沸除去任何残留的水。该过程重复两次以上，然后将所得浅橙色固体在高真空下放置48小时以得到4-氯-6-甲基烟酸锂(9.76g，53.9mmol，100％产率)其在下一步中用作合成中间体。MS(ESI)(C7H5ClLiNO2)(M+H-Li，在LCMS上通过酸/碱交换产生的游离酸形式)+，计算值172；实测值172.0。1H NMR(400MHz，D2O)δ8.45(s，1H)，7.38(s，1H)，2.50(s，3H)。
步骤2:4-氯-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺
在干燥氮气的气氛下，于室温将4-氯-6-甲基烟酸锂(19.57g，110mmol)悬浮于乙腈(100mL)并按以下顺序用5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-胺(17.35g，132mmol)，1-甲基咪唑(30.8mL，386mmol)，和N-(氯(二甲氨基)亚甲基)-N-甲基甲铵六氟磷酸盐(V)(46.4g，165mmol)处理。将反应混合物在室温搅拌18小时，此后LCMS(Waters CSH C18柱(30mm x2.1mm，1.7微米)，0.1％TFA于CH3CN/H2O中，2分钟)显示反应完成。通过旋转蒸发除去溶剂，将所得残余物倒入KOH(40g，713mmol)的2L水溶液中，并剧烈搅拌5分钟以水解脲类副产物，LCMS观察到该副产物的保留时间略短于所需产物的保留时间。在高pH值(～14)时混合物是一种均匀的溶液。然后一次性加入溶于300ml水中的柠檬酸(128g，666mmol)溶液，使产物沉淀。计算该混合物中碱与酸的量，以产生pH值为4的柠檬酸钾/1-甲基咪唑鎓柠檬酸缓冲液。将测得pH值为4的混合物剧烈搅拌20分钟。滤出沉淀物并用水(3x 2L)、乙腈/水的50/50混合物(1x 2L)、乙腈(1x 500ml)，和乙醚(2x 1L)洗涤。将所述固体风干1小时，然后在高真空下放置过夜以提供4-氯-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(25.6g，89mmol，81％产率)作为浅褐色固体，其用作下一步的合成中间体。MS(ESI)(C10H9ClN4O2S)(M+H)+，计算值285.0；实测值285.0。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.2(s，1H)，8.71(s，1H)，7.59(s，1H)，4.31(s，3H)，2.50(s，3H)。
步骤3:N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-4-(4-甲氧基苯基)-6-甲基烟酰胺
在干燥氩气气氛下将4-氯-N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-6-甲基烟酰胺(0.030g，0.105mmol)溶解在二甲基亚砜(DMSO)(2mL)中并用(4-甲氧基苯基)硼酸(0.019g，0.126mmol)，碳酸钾的2M氮气脱气水溶液(0.158mL，0.316mmol)，和1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷络合物(8.60mg，10.54μmol)处理。将反应混合物加热至75℃并搅拌过夜，此后LCMS(Waters CSH C18柱(30mm x 2.1mm，1.7微米)，0.1％TFA于CH3CN/H2O中，2分钟)表明反应完成。让反应混合物冷却至室温，然后在室温通过0.2um PTFE过滤盘过滤并通过反相制备色谱纯化(XBridge C18柱(75mm x 30mm i.d.5μm填充直径)，溶剂A＝10mM的用氨调节pH值为10的碳酸氢铵的H2O溶液。溶剂B＝乙腈。12.5分钟内从95％A/5％B至0％A/100％B梯度洗脱，流速＝43mL/min)以得到N-(5-甲氧基-1,3,4-噻二唑-2-基)-4-(4-甲氧基苯基)-6-甲基烟酰胺。MS(ESI)(C17H16N4O3S)(M+H)+，计算值357.1；实测值357.1。
根据上述一般化学和本领域已知的知识，合成了以下实施例。除非另有说明，下列化合物的立体化学是不确定的，是任意指定的。
遵循与实施例377，步骤3中描述的钯催化偶联方法相似的方法合成了以下实施例。
生物学测定
使用下述测定法测定式(I)或表1的化合物抑制Polθ(1-899)的ATP酶活性的能力。
PolθATP酶活性通过测量NADH氧化偶联酶测定中ATP周转率来确定。10点稀释系列化合物用于384孔形式的抑制测定。于测定缓冲液(20mM Tris HCl(pH 7.80)，80mM KCl，10mM MgCl2，1mM DTT，0.01％BSA，0.01％吐温，5％甘油)中的Polθ(1-899)(5nM)被转移到测试孔(20μL)，除了低对照孔(向低对照孔中加入20μL测定缓冲液)。然后将平板在室温温育15分钟。将测定缓冲液中的等体积(20μL)100μM ATP，300nM dT50(单链DNA(ssDNA)，其含有50个胸腺嘧啶碱基)，300μM NADH，6mM PEP，10U/mL乳酸脱氢酶和20U/mL丙酮酸激酶添加到所有的测试孔中。然后将平板以1000rpm离心1分钟。通过每分钟在Tecan Spark多模式板读数器中测量吸光度(λ＝340nm)来监控反应60分钟。具有低吸收强度的高对照(含酶的DMSO)代表没有抑制ATP酶反应，而具有高吸收强度的低对照(含缓冲液的DMSO)代表完全抑制ATP酶活性。反应进程曲线的斜率用于计算ATP水解的速率。使用四参数抑制模型来确定抑制百分比，以产生IC50、Hill斜率和最大抑制。
下表4中公开了上表1中化合物的IC50:
IC50:10uM≥(+)>1uM；1uM≥(++)>500nM；
500nM≥(+++)>200nM；200nM≥(++++)
下表5中公开了上表2中化合物的IC50:
IC50:10uM≥(+)>1uM；1uM≥(++)>500nM；
500nM≥(+++)>200nM；200nM≥(++++)
下表6中公开了上表3中化合物的IC50:
IC50:10uM≥(+)>1uM；1uM≥(++)>500nM；
500nM≥(+++)>200nM；200nM≥(++++)
*ND的意思是“未确定”。
本文描述了本发明的具体实施方案，包括发明人已知的用于实施本发明的最佳模式。在阅读了前面的描述后，所公开的实施方案的变化对于本领域技术人员来说是显而易见的，并且预期技术人员可以适当地采用这样的变化。因此，本发明旨在以不同于本文具体描述的方式来实践，并且本发明包括适用法律允许的所附权利要求中列举的主题的所有修改和等同物。此外，除非本文另有说明或与上下文明显矛盾，否则本发明涵盖上述元件在其所有可能变化中的任何组合。
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Claims (71)

1.式(I)的化合物：
其中：
环A选自苯基和具有1至4个独立地选自N、O和S的杂原子的5-至6-元杂芳基环；
下标m和n各自独立地是0或1；
R1为选自C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、–X1–O–C1-6烷基、C1-6卤代烷氧基、–X1–氰基、–NO2、–C(O)ORa、–NRaC(O)Rb、–X1–C(O)NRaRb、–X1–OH、C3-6环烷基、–X1–O–C3-6环烷基、C1-6羟基炔基、–X1–NRaRb、–X1–S(O)2Ra、–X1–S(O)2NRaRb、X1–X1a–ORa，和具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子的4-至6-元杂环烷基；
R2选自C1-6烷基，卤素，C1-6卤代烷基，C1-6卤代烷氧基，和–X1–氰基，其中
每个X1独立地选自键和C1-4亚烷基，
X1a为具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子的3-至6-元杂环亚烷基，和
Ra和Rb独立地选自氢，C1-6烷基，和C1-6卤代烷基；和
Ar1选自苯基、萘基、吡啶-2-酮，和具有1至4个独立地选自N、O和S的杂原子的5-至10-元杂芳基环，其中Ar1取代有0至4个R1a取代基；
每个R1a独立地选自C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、–X2–O–C1-6烷基、C1-6卤代烷氧基、C3-6环烷基、C3-6环烷基氧基、–C(O)Rc、–C(O)2Rc、–NRcC(O)Rd、–O–C1-4亚烷基-O–C1-4烷基、–X2-C(O)NRcRd、–X2-S(O)2NRcRd、–X2–NRcRd、–C(O)NRcRd、–X2–氰基、–O-X2–氰基、–X2–S(O)Rc、–X2–S(O)2Rc、–X2–N(Rd)S(O)2Rc、–P(O)RcRd、-Y和–X2–OH；或
相邻环顶点上的两个R1a基团结合形成4-6元环烷基或杂环烷基，其具有0至2个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子，且其取代有0-4个选自氧代、卤素、C1-4烷基、C1-4烷氧基，和C1-4卤代烷基的基团；
其中
每个Y独立地选自苯基、苄基、4-至6-元杂环烷基和5或6元杂芳基、其中每个杂环烷基和杂芳基具有1或2个独立地选自O、N和S的环成员；且每个Y取代有0、1或2个独立地选自卤素、氧代、C1-4烷基、C1-4烷氧基，和C1-4卤代烷基的基团；
每个X2独立地选自键和C1-4亚烷基；和
每个Rc和Rd独立地选自氢、C1-6烷基、C3-5环烷基和C1-6卤代烷基；和
R3是选自下组的成员：
(i)C3-6环烷基，C6-11桥连环烷基和C6-12螺环烷基；
(ii)3-至6-元杂环烷基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(iii)6-至10-元双环杂环基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(iv)6-至10-元桥连杂环基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(v)6-至12-元螺杂环基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(vi)氢；
(vii)C1-6烷基，或C2-6炔基，
其中
每个R3的成员(i)至(v)取代有0至4个R3a取代基，其各自独立地选自C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、卤素、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、–X3–O–C1-6烷基、–X3–OH、–NReRf、-ONO2、具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子的4-至6-元杂环烷基、–NReC(O)Rf、–X3–NReRf、–X3–氰基，和氧代；且
R3的成员(vii)取代有0至3个R3b取代基，所述取代基选自卤素、C1-3卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、–O–C1-6烷基、氰基、–OH、–NReRf、–CONReRf，和氧代，其中
每个X3独立地选自键和C1-4亚烷基，和
每个Re和Rf独立地选自H、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-6环烷基和-C1-3亚烷基-C3-6环烷基；
或其药学上可接受的盐。
2.式(I)的化合物：
其中：
环A选自苯基和具有1至4个独立地选自N、O和S的杂原子的5-至10-元杂芳基环；
下标m和n各自独立地是0或1；
R1选自C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、–X1–O–C1-6烷基、C1-6卤代烷氧基、–X1–氰基、–C(O)ORa、–NRaC(O)Rb、–X1–C(O)NRaRb、–X1–OH、C3-6环烷基、–X1–O–C3-6环烷基、C1-6羟基炔基、–X1–NRaRb、–X1–S(O)2Ra、–X1–S(O)2NRaRb，和X1–X1a–ORa；
R2选自C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基，和–X1–氰基，其中
每个X1独立地选自键和C1-4亚烷基，
X1a为具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子的3-至6-元杂环亚烷基，和
Ra和Rb独立地选自氢、C1-6烷基，和C1-6卤代烷基；和Ar1选自苯基和具有1至4个独立地选自N、O和S的杂原子的5-至10-元杂芳基环，其中Ar1取代有0至4个R1a取代基；
每个R1a独立地选自C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、–X2–O–C1-6烷基、C1-6卤代烷氧基、C3-6环烷基、C3-6环烷基氧基、–C(O)Rc、–NRcC(O)Rd、–NRcRd、–X2–NRcRd、–C(O)NRcRd、–X2–氰基、–X2–S(O)Rc和–X2–OH；或
在相邻的环顶点上的两个R1a基团结合形成4至6元杂环烷基，其具有1-2个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子，其中
每个X2独立地选自键和C1-4亚烷基；和
每个Rc和Rd独立地选自氢、C1-6烷基，和C1-6卤代烷基；和
R3是选自下组的成员：
(i)C3-6环烷基和C6-12螺环烷基；
(ii)3-至6-元杂环烷基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(iii)6-至10-元双环杂环基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(iv)6-至10-元桥连杂环基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(v)6-至12-元螺杂环基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(vi)氢；
(vii)C1-6烷基，或C2-6炔基，
其中
每个R3的成员(i)至(v)取代有0至4个R3a取代基，其各自独立地选自C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、卤素、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、–X3–O–C1-6烷基、–X3–OH、–NReRf、–NReC(O)Rf、–X3–NReRf、–X3–氰基，和氧代；且
R3的成员(vii)取代有0至3个R3b取代基，所述取代基选自卤素、C1-6卤代烷氧基、–O–C1-6烷基、氰基、–OH、–NReRf，和氧代，其中
每个X3独立地选自键和C1-4亚烷基，和
每个Re和Rf独立地选自H和C1-6烷基；
或其药学上可接受的盐。
3.式(I)的化合物：
其中：
环A选自苯基和具有1至4个独立地选自N、O和S的杂原子的5-至10-元杂芳基环；
下标m和n各自独立地是0或1；
R1选自C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、–X1–O–C1-6烷基、C1-6卤代烷氧基、–X1–氰基、–C(O)ORa、–NRaC(O)Rb、–X1–C(O)NRaRb、–X1–OH、C3-6环烷基、C1-6羟基炔基、–X1–NRaRb、–X1–S(O)2Ra，和–X1–S(O)2NRaRb；
R2选自C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基，和–X1–氰基，其中
每个X1独立地选自键和C1-4亚烷基，和
Ra和Rb独立地选自氢、C1-6烷基，和C1-6卤代烷基；和
Ar1选自苯基和具有1至4个独立地选自N、O和S的杂原子的5-至10-元杂芳基环，其中Ar1取代有0至4个R1a取代基；
每个R1a独立地选自C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、–X2–O–C1-6烷基、C1-6卤代烷氧基、C3-6环烷基、C3-6环烷基氧基、–C(O)Rc、–NRcC(O)Rd、–NRcRd、–X2–NRcRd、–C(O)NRcRd、–X2–氰基，和–X2–OH，其中
每个X2独立地选自键和C1-4亚烷基；和
每个Rc和Rd独立地选自氢，C1-6烷基，和C1-6卤代烷基；和
R3是选自下组的成员：
(i)C3-6环烷基和C6-12螺环烷基；
(ii)3-至6-元杂环烷基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(iii)6-至10-元双环杂环基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(iv)6-至10-元桥连杂环基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(v)6-至12-元螺杂环基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子；
(vi)氢；
(vii)C1-6烷基，或C2-6炔基，
其中
每个R3的成员(i)至(v)取代有0至4个R3a取代基，其各自独立地选自C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、卤素、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、–X3–O–C1-6烷基、–X3–OH、–NReRf、–NReC(O)Rf、–X3–NReRf、–X3–氰基，和氧代；且
R3的成员(vii)取代有0至3个R3b取代基，所述取代基选自卤素、C1-6卤代烷氧基、–O–C1-6烷基、氰基、–OH、–NReRf，和氧代，其中
每个X3独立地选自键和C1-4亚烷基，和
每个Re和Rf独立地选自H和C1-6烷基；
或其药学上可接受的盐。
4.权利要求1至3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中环A选自苯基，吡啶基，嘧啶基，咪唑并[1,2-a]吡啶基，1,2,3-三唑，吡唑基，异噁唑基，和咪唑并[1,5-a]吡啶基。
5.权利要求1至3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中环A选自苯基、吡啶基、嘧啶基，和咪唑并[1,2-a]吡啶基。
6.权利要求1至3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中环A为吡啶基。
7.权利要求1至3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中环A为苯基。
8.权利要求1至7中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中n为1且R1为具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子的4-至6-元杂环烷基。
9.权利要求1至7中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中n为1且R1选自C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、–X1–O–C1-6烷基、C1-6卤代烷氧基、–X1–氰基、–X1–OH、C3-6环烷基、–X1–NRaRb。
10.权利要求1至7中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中n为1且R1选自C1-6烷基和–X1–OH。
11.权利要求1至7中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中n为1且R1选自甲基和羟甲基。
12.权利要求1至7中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中n为1且R1为甲基。
13.根据权利要求1至12中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中m为0。
14.权利要求1至12中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中m为1且R2为C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基，和C1-6卤代烷氧基。
15.权利要求1至14中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其具有式(Ia)、(Ib)或(Ic)：
16.权利要求1至15中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中Ar1为萘基或吡啶-2-酮，其每个取代有0至4个R1a。
17.权利要求1至15中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中Ar1选自苯基、吡啶基、苯并吡唑基、苯并咪唑基、咪唑基、哒嗪基、咪唑并[1,2-a]嘧啶基、噁唑并[4,5-b]吡啶基、噁唑并[5,4-b]吡啶基、噻唑并[4,5-b]吡啶基、苯并[d]噻唑、吲唑基、[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶基、[1,2,4]三唑并[1,5-b]哒嗪基，和四唑并[1,5-a]吡啶基，其每个取代有0至4个R1a。
18.权利要求1至15中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中Ar1选自苯基、吡啶基、苯并吡唑基、苯并咪唑基、咪唑基，和哒嗪基，其每个取代有0至4个R1a。
19.权利要求1至15中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中Ar1为吡啶基，其取代有0至4个R1a。
20.权利要求1至15中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中Ar1为苯基，其取代有0至4个R1a。
21.权利要求1至20中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中Ar1被0至3个R1a取代。
22.根据权利要求1至20中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中Ar1被0至2个R1a取代。
23.权利要求1至15中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其具有式(Ia2)、(Ib2)或(Ic2)：
24.权利要求1至15中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其具有式(Ia1)、(Ib1)或(Ic1)：
25.权利要求1至24中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中每个R1a独立地选自C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、–X2–O–C1-6烷基、C1-6卤代烷氧基、C3-6环烷基、–NRaRb、–X2–氰基，和–X2–OH。
26.权利要求1至24中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中每个R1a独立地选自C1-6烷基、卤素、–O–C1-6烷基、–C(O)2Rc、-C1-4烷氧基-C1-4烷氧基、–X2-C(O)NRcRd、–X2-S(O)2NRcRd、–O-X2–氰基、–X2–S(O)2Rc，和–X2–N(Rd)S(O)2Rc。
27.权利要求1至24中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中每个R1a独立地选自C1-6烷基、卤素、C1-6卤代烷基、–O–C1-6烷基、C1-6卤代烷氧基、C3-6环烷基、–NRaRb，和–X2–OH。
28.权利要求1至24中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中每个R1a独立地选自甲基、乙基、氟代、氯代、溴代、三氟甲基、二氟甲基、甲氧基、乙氧基、二氟甲氧基、环丙基、–NH2，羟甲基，和1-羟乙基。
29.权利要求1至24中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中每个R1a独立地选自甲基、氟代、氯代、三氟甲基、二氟甲基、甲氧基、乙氧基、二氟甲氧基，和环丙基。
30.权利要求1至24中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中至少一个R1a为Y且Y选自苯基，苄基，4-至6-元杂环烷基，和5或6元杂芳基，其中每个杂环烷基和杂芳基具有1或2个独立地选自O、N和S的环成员；且每个Y取代有0、1或2个独立地选自卤素，氧代，C1-4烷基，C1-4烷氧基，和C1-4卤代烷基的基团。
31.权利要求1至24中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中至少一个R1a为Y且Y为苯基或苄基；且每个Y取代有0、1或2个独立地选自卤素，氧代，C1-4烷基，C1-4烷氧基，和C1-4卤代烷基的基团。
32.权利要求1至24中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中至少一个R1a为Y且Y为4-至6-元杂环烷基，和5或6元杂芳基，其中每个杂环烷基和杂芳基具有1或2个独立地选自O、N和S的环成员；且每个Y取代有0、1或2个独立地选自卤素，氧代，C1-4烷基，C1-4烷氧基，和C1-4卤代烷基的基团。
33.权利要求1至22中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中相邻环顶点上的两个R1a基团结合形成4-6元环烷基或杂环烷基，其具有0至2个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子，且其取代有0-4个选自氧代，卤素，C1-4烷基，C1-4烷氧基，和C1-4卤代烷基的基团。
34.权利要求1至33中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R3为氢。
35.权利要求1至33中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R3为C1-6烷基或C2-6炔基，且取代有0至4个R3b。
36.权利要求35的化合物或其药学上可接受的盐，其中R3选自2-丙炔基、乙基、甲基、2,2,-二甲基丙基、异丁基、异丙基，和正丙基，且取代有0至4个R3b。
37.权利要求35的化合物或其药学上可接受的盐，其中R3为甲基且被0至3个R3b取代。
38.权利要求35或36的化合物或其药学上可接受的盐，其中R3被0至3个R3b取代。
39.权利要求35或37的化合物或其药学上可接受的盐，其中R3被0至2个R3b取代。
40.权利要求35至39中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中每个R3b选自卤素、C1-3卤代烷基、–O–C1-6烷基、氰基、–OH，和–CONReRf。
41.权利要求35至39中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中每个R3b选自卤素、–O–C1-6烷基、氰基，和–OH。
42.权利要求35至39中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中每个R3b选自氟、甲氧基、氰基，和–OH。
43.权利要求1至33中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R3为C6-12螺环基或C3-6环烷基，其每个取代有0至4个R3a。
44.权利要求43所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R3选自环丙基、环丁基、环戊基，和环己基。
45.权利要求1至33中任一项的化合物或其药学上可接受的盐，其中R3为C6-11桥连环烷基，其每个取代有0至4个R3a。
46.权利要求1至33中任一项的化合物或其药学上可接受的盐，其中R3为3-至6-元杂环烷基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子，且取代有0至4个R3a。
47.权利要求46的化合物或其药学上可接受的盐，其中R3为5-元杂环烷基，其取代有0至4个R3a。
48.权利要求46的化合物或其药学上可接受的盐，其中R3为6-元杂环烷基，其取代有0至4个R3a。
49.权利要求46的化合物或其药学上可接受的盐，其中R3选自四氢吡喃、氧杂环丁基、四氢呋喃基、和四氢噻喃基，其每个取代有0至4个R3a。
50.权利要求46的化合物或其药学上可接受的盐，其中R3是被2个氧代基团取代的四氢噻喃基。
51.权利要求1至33中任一项的化合物或其药学上可接受的盐，其中R3为6-至10-元双环杂环基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子，且取代有0至4个R3a。
52.权利要求1至33中任一项的化合物或其药学上可接受的盐，其中R3为6-至10-元桥连杂环基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子，且取代有0至4个R3a。
53.权利要求1至33中任一项的化合物或其药学上可接受的盐，其中R3为6-至12-元螺杂环基，其具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子，且取代有0至4个R3a。
54.权利要求43至49或51至53中任一项的化合物或其药学上可接受的盐，其中R3被0至2个R3a取代。
55.权利要求43至49或51至54中任一项的化合物或其药学上可接受的盐，其中每个R3a选自C1-6烷基、卤素、–X3–O–C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、–X3–OH、-ONO2、具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子的4-至6-元杂环烷基和氧代。
56.权利要求43至49或51至54任一项的化合物或其药学上可接受的盐，其中每个R3a选自C1-6烷基、卤素、–X3–O–C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、–X3–OH，和氧代。
57.权利要求43至49或51至54任一项的化合物或其药学上可接受的盐，其中每个R3a选自C1-6烷基、卤素、–X3–OH和氧代。
58.权利要求43至49或51至54任一项的化合物或其药学上可接受的盐，其中每个R3a选自甲基、–OH和氧代。
59.权利要求43至49或51至54任一项的化合物或其药学上可接受的盐，其中至少一个R3a为具有1至4个独立地选自N、O和S的作为环顶点的杂原子的4-至6-元杂环烷基和氧代。
60.选自表1的化合物或其药学上可接受的盐、选自表2的化合物或其药学上可接受的盐、选自表3的化合物或其药学上可接受的盐、或选自实施例中的化合物或其药学上可接受的盐。
61.药物组合物，其包含权利要求1至60中任一项所述的化合物，和至少一种药学上可接受的赋形剂。
62.治疗患者中以Polθ过度表达为特征的疾病的方法，包括向患者给药治疗有效量的权利要求1至60中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，或权利要求61的药物组合物。
63.权利要求62所述的方法，其中所述患者被认为需要这样的治疗并且所述疾病为癌症。
64.治疗患者中同源重组(HR)缺陷型癌症的方法，包括向所述患者给药治疗有效量的权利要求1至60中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，或权利要求61所述的药物组合物。
65.权利要求64所述的方法，其中所述患者被认为需要这样的治疗。
66.一种治疗患者中癌症的方法，其中所述癌症的特征在于BRCA基因表达减少或缺失、BRCA基因缺失、或BRCA蛋白功能降低，所述方法包括向所述受试者给药治疗有效量的权利要求1至60中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，或权利要求61所述的药物组合物。
67.权利要求62至66中任一项所述的方法，其中所述癌症为淋巴瘤、横纹肌样瘤、多发性骨髓瘤、子宫癌、胃癌、周围神经系统癌、横纹肌肉瘤、骨癌、结直肠癌、间皮瘤、乳腺癌、卵巢癌、肺癌、成纤维细胞癌、中枢神经系统癌、泌尿道癌、上呼吸消化道癌、白血病、肾癌、皮肤癌、食道癌和胰腺癌。
68.权利要求1至60中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或权利要求61所述的药物组合物在制备用于治疗以Polθ过度表达为特征的疾病的药物中的用途。
69.权利要求1至60中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或权利要求61所述的药物组合物在制备用于治疗同源重组(HR)缺陷型癌症的药物中的用途。
70.权利要求1至60中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或权利要求61所述的药物组合物在制备用于治疗以BRCA基因表达减少或缺失、BRCA基因缺失，或BRCA蛋白功能降低为特征的癌症的药物中的用途。
71.权利要求1至60中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或权利要求61所述的药物组合物在制备用于治疗癌症的药物中的用途。
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