CN117757702B - 一株瑞士乳杆菌及其在控制血糖中的应用 - Google Patents
一株瑞士乳杆菌及其在控制血糖中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN117757702B CN117757702B CN202410194514.9A CN202410194514A CN117757702B CN 117757702 B CN117757702 B CN 117757702B CN 202410194514 A CN202410194514 A CN 202410194514A CN 117757702 B CN117757702 B CN 117757702B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- lactobacillus helveticus
- wis02
- cfu
- culture
- strain
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 240000002605 Lactobacillus helveticus Species 0.000 title claims abstract description 133
- 235000013967 Lactobacillus helveticus Nutrition 0.000 title claims abstract description 130
- 229940054346 lactobacillus helveticus Drugs 0.000 title claims abstract description 130
- 239000008280 blood Substances 0.000 title claims abstract description 64
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 title claims abstract description 64
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 title abstract description 14
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims abstract description 63
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims abstract description 60
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 23
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 18
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims abstract description 8
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 23
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 7
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 25
- 210000004051 gastric juice Anatomy 0.000 abstract description 19
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 16
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 15
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 abstract description 13
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 abstract description 12
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 abstract description 10
- 230000037396 body weight Effects 0.000 abstract description 9
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 abstract description 9
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 abstract description 8
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 abstract description 7
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 abstract description 7
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 7
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 abstract description 5
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 abstract description 4
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 abstract description 4
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 abstract description 3
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 abstract description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 61
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 34
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 33
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 31
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 30
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 25
- -1 N-acetylglucoside Chemical compound 0.000 description 22
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 21
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 18
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 17
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 17
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 16
- 241001052560 Thallis Species 0.000 description 15
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 15
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 13
- 230000007760 free radical scavenging Effects 0.000 description 12
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 12
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 11
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 11
- 230000003064 anti-oxidating effect Effects 0.000 description 10
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 10
- OETHQSJEHLVLGH-UHFFFAOYSA-N metformin hydrochloride Chemical compound Cl.CN(C)C(=N)N=C(N)N OETHQSJEHLVLGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 10
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 8
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerol Natural products OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 8
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 8
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 8
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 8
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 8
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 8
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 8
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 8
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 8
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 8
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 8
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 8
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 7
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 7
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 7
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 7
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 7
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 7
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 7
- 229960004329 metformin hydrochloride Drugs 0.000 description 7
- XZWYZXLIPXDOLR-UHFFFAOYSA-N metformin hydrochloride Natural products CN(C)C(=N)NC(N)=N XZWYZXLIPXDOLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- 239000008107 starch Chemical class 0.000 description 7
- 229940032147 starch Drugs 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 6
- 230000002292 Radical scavenging effect Effects 0.000 description 6
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 6
- 235000010633 broth Nutrition 0.000 description 6
- HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N dpph Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1[N]N(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 6
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 6
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 6
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 6
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 6
- 229960004793 sucrose Drugs 0.000 description 6
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 5
- 239000001913 cellulose Chemical class 0.000 description 5
- 229920002678 cellulose Chemical class 0.000 description 5
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 5
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 5
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 5
- XUFXOAAUWZOOIT-SXARVLRPSA-N (2R,3R,4R,5S,6R)-5-[[(2R,3R,4R,5S,6R)-5-[[(2R,3R,4S,5S,6R)-3,4-dihydroxy-6-methyl-5-[[(1S,4R,5S,6S)-4,5,6-trihydroxy-3-(hydroxymethyl)-1-cyclohex-2-enyl]amino]-2-oxanyl]oxy]-3,4-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-2-oxanyl]oxy]-6-(hydroxymethyl)oxane-2,3,4-triol Chemical compound O([C@H]1O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]1O[C@@H]([C@H]([C@H](O)[C@H]1O)N[C@@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)C(CO)=C1)O)C)[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O XUFXOAAUWZOOIT-SXARVLRPSA-N 0.000 description 4
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 4
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 4
- 208000004232 Enteritis Diseases 0.000 description 4
- ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N Erythromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N 0.000 description 4
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 description 4
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 4
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 4
- 240000000696 Lactobacillus helveticus R0052 Species 0.000 description 4
- 235000005877 Lactobacillus helveticus R0052 Nutrition 0.000 description 4
- 239000005913 Maltodextrin Substances 0.000 description 4
- 229920002774 Maltodextrin Polymers 0.000 description 4
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 4
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 4
- OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L calcium sulfate Chemical compound [Ca+2].[O-]S([O-])(=O)=O OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 4
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 4
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 4
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 4
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 description 4
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 4
- BJRNKVDFDLYUGJ-RMPHRYRLSA-N hydroquinone O-beta-D-glucopyranoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=C(O)C=C1 BJRNKVDFDLYUGJ-RMPHRYRLSA-N 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 4
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 4
- 230000006799 invasive growth in response to glucose limitation Effects 0.000 description 4
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 4
- 229940035034 maltodextrin Drugs 0.000 description 4
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 4
- 231100000956 nontoxicity Toxicity 0.000 description 4
- 230000000291 postprandial effect Effects 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 4
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N streptozocin Chemical compound O=NN(C)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N 0.000 description 4
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- 206010003210 Arteriosclerosis Diseases 0.000 description 3
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 3
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 3
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 229960002632 acarbose Drugs 0.000 description 3
- XUFXOAAUWZOOIT-UHFFFAOYSA-N acarviostatin I01 Natural products OC1C(O)C(NC2C(C(O)C(O)C(CO)=C2)O)C(C)OC1OC(C(C1O)O)C(CO)OC1OC1C(CO)OC(O)C(O)C1O XUFXOAAUWZOOIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 3
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 3
- 208000011775 arteriosclerosis disease Diseases 0.000 description 3
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 3
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 3
- MGJZITXUQXWAKY-UHFFFAOYSA-N diphenyl-(2,4,6-trinitrophenyl)iminoazanium Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1N=[N+](C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 MGJZITXUQXWAKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 3
- 208000030533 eye disease Diseases 0.000 description 3
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 3
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 3
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 3
- TUJKJAMUKRIRHC-UHFFFAOYSA-N hydroxyl Chemical compound [OH] TUJKJAMUKRIRHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 3
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 3
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 3
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 description 3
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 3
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 3
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 3
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 3
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 3
- 208000016261 weight loss Diseases 0.000 description 3
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N (2r,3r,4s,5r,6s)-4,5-dimethoxy-2-(methoxymethyl)-3-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trimethoxy-6-(methoxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-4,5,6-trimethoxy-2-(methoxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxane Chemical compound CO[C@@H]1[C@@H](OC)[C@H](OC)[C@@H](COC)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](OC)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OC)[C@H](OC)O[C@@H]2COC)OC)O[C@@H]1COC LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N 0.000 description 2
- AYRXSINWFIIFAE-UDKQPYHCSA-N (2r,3s,4r,5r)-2,3,4,5-tetrahydroxy-6-[(2r,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyhexanal Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O AYRXSINWFIIFAE-UDKQPYHCSA-N 0.000 description 2
- XUCIJNAGGSZNQT-JHSLDZJXSA-N (R)-amygdalin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H](C#N)C=2C=CC=CC=2)O1 XUCIJNAGGSZNQT-JHSLDZJXSA-N 0.000 description 2
- LDVVTQMJQSCDMK-UHFFFAOYSA-N 1,3-dihydroxypropan-2-yl formate Chemical compound OCC(CO)OC=O LDVVTQMJQSCDMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-2,4-dioxo-1,3-diazinane-5-carboximidamide Chemical compound CN1CC(C(N)=N)C(=O)NC1=O IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 2
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-DCSYEGIMSA-N Beta-Lactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-DCSYEGIMSA-N 0.000 description 2
- 241001135265 Cronobacter sakazakii Species 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-UHFFFAOYSA-N D-Cellobiose Natural products OCC1OC(OC2C(O)C(O)C(O)OC2CO)C(O)C(O)C1O GUBGYTABKSRVRQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N D-Cellobiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N 0.000 description 2
- RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N D-Fructose Natural products OC[C@H]1OC(O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 2
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M D-gluconate Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 2
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 2
- 238000003794 Gram staining Methods 0.000 description 2
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010060378 Hyperinsulinaemia Diseases 0.000 description 2
- 239000004166 Lanolin Substances 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- DKXNBNKWCZZMJT-UHFFFAOYSA-N O4-alpha-D-Mannopyranosyl-D-mannose Natural products O=CC(O)C(O)C(C(O)CO)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O DKXNBNKWCZZMJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 2
- NGFMICBWJRZIBI-JZRPKSSGSA-N Salicin Natural products O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1)c1c(CO)cccc1 NGFMICBWJRZIBI-JZRPKSSGSA-N 0.000 description 2
- 241000607762 Shigella flexneri Species 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 description 2
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 2
- YKTSYUJCYHOUJP-UHFFFAOYSA-N [O--].[Al+3].[Al+3].[O-][Si]([O-])([O-])[O-] Chemical compound [O--].[Al+3].[Al+3].[O-][Si]([O-])([O-])[O-] YKTSYUJCYHOUJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 2
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- GZCGUPFRVQAUEE-KCDKBNATSA-N aldehydo-D-galactose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O GZCGUPFRVQAUEE-KCDKBNATSA-N 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 2
- NGFMICBWJRZIBI-UHFFFAOYSA-N alpha-salicin Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC=CC=C1CO NGFMICBWJRZIBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 2
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 2
- 229940089837 amygdalin Drugs 0.000 description 2
- YZLOSXFCSIDECK-UHFFFAOYSA-N amygdalin Natural products OCC1OC(OCC2OC(O)C(O)C(O)C2O)C(O)C(O)C1OC(C#N)c3ccccc3 YZLOSXFCSIDECK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003472 antidiabetic agent Substances 0.000 description 2
- 229960000271 arbutin Drugs 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 229960003563 calcium carbonate Drugs 0.000 description 2
- FUFJGUQYACFECW-UHFFFAOYSA-L calcium hydrogenphosphate Chemical compound [Ca+2].OP([O-])([O-])=O FUFJGUQYACFECW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- MKJXYGKVIBWPFZ-UHFFFAOYSA-L calcium lactate Chemical compound [Ca+2].CC(O)C([O-])=O.CC(O)C([O-])=O MKJXYGKVIBWPFZ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 235000011086 calcium lactate Nutrition 0.000 description 2
- 239000001527 calcium lactate Substances 0.000 description 2
- 229960002401 calcium lactate Drugs 0.000 description 2
- 235000011132 calcium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 2
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 2
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 2
- 229960005091 chloramphenicol Drugs 0.000 description 2
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 2
- OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N chlorobutanol Chemical compound CC(C)(O)C(Cl)(Cl)Cl OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 239000008119 colloidal silica Substances 0.000 description 2
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 2
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019700 dicalcium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 2
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 229960003276 erythromycin Drugs 0.000 description 2
- YGHHWSRCTPQFFC-UHFFFAOYSA-N eucalyptosin A Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(OC(C#N)C=2C=CC=CC=2)OC(CO)C(O)C1O YGHHWSRCTPQFFC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 2
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 2
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 210000003495 flagella Anatomy 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 229940050410 gluconate Drugs 0.000 description 2
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 description 2
- 235000020256 human milk Nutrition 0.000 description 2
- 210000004251 human milk Anatomy 0.000 description 2
- 239000001341 hydroxy propyl starch Substances 0.000 description 2
- 239000001866 hydroxypropyl methyl cellulose Substances 0.000 description 2
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N hydroxypropyl methyl cellulose Chemical compound OC1C(O)C(OC)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000013828 hydroxypropyl starch Nutrition 0.000 description 2
- 201000001421 hyperglycemia Diseases 0.000 description 2
- 230000003451 hyperinsulinaemic effect Effects 0.000 description 2
- 201000008980 hyperinsulinism Diseases 0.000 description 2
- 230000002218 hypoglycaemic effect Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 2
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 2
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000000832 lactitol Substances 0.000 description 2
- 235000010448 lactitol Nutrition 0.000 description 2
- VQHSOMBJVWLPSR-JVCRWLNRSA-N lactitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]([C@H](O)CO)O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O VQHSOMBJVWLPSR-JVCRWLNRSA-N 0.000 description 2
- 229960003451 lactitol Drugs 0.000 description 2
- 235000019388 lanolin Nutrition 0.000 description 2
- 229940039717 lanolin Drugs 0.000 description 2
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 2
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 2
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229960002160 maltose Drugs 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 2
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 2
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 description 2
- 230000010494 opalescence Effects 0.000 description 2
- BJRNKVDFDLYUGJ-UHFFFAOYSA-N p-hydroxyphenyl beta-D-alloside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC=C(O)C=C1 BJRNKVDFDLYUGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 2
- GSFHMOMWXNDPMM-YMDUGQBDSA-M potassium;(2r,3s,4s)-2,3,4,6-tetrahydroxy-5-oxohexanoate Chemical compound [K+].OCC(=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O GSFHMOMWXNDPMM-YMDUGQBDSA-M 0.000 description 2
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 2
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 description 2
- 235000013772 propylene glycol Nutrition 0.000 description 2
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- NGFMICBWJRZIBI-UJPOAAIJSA-N salicin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=CC=C1CO NGFMICBWJRZIBI-UJPOAAIJSA-N 0.000 description 2
- 229940120668 salicin Drugs 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000010413 sodium alginate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000661 sodium alginate Substances 0.000 description 2
- 229940005550 sodium alginate Drugs 0.000 description 2
- 229940080313 sodium starch Drugs 0.000 description 2
- GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L sodium sulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])=O GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 2
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 2
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 229960001052 streptozocin Drugs 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 2
- LJVAJPDWBABPEJ-PNUFFHFMSA-N telithromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@]2(OC(=O)N(CCCCN3C=C(N=C3)C=3C=NC=CC=3)[C@@H]2[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@@]1(C)OC)C)CC)[C@@H]1O[C@H](C)C[C@H](N(C)C)[C@H]1O LJVAJPDWBABPEJ-PNUFFHFMSA-N 0.000 description 2
- 229960003250 telithromycin Drugs 0.000 description 2
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 2
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 2
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 2
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 2
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 2
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 2
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 2
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 229940123208 Biguanide Drugs 0.000 description 1
- 206010006895 Cachexia Diseases 0.000 description 1
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 238000001712 DNA sequencing Methods 0.000 description 1
- 241000194032 Enterococcus faecalis Species 0.000 description 1
- 241000943303 Enterococcus faecalis ATCC 29212 Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 241001360526 Escherichia coli ATCC 25922 Species 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 206010020710 Hyperphagia Diseases 0.000 description 1
- 208000013016 Hypoglycemia Diseases 0.000 description 1
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 description 1
- 238000012449 Kunming mouse Methods 0.000 description 1
- 241000186840 Lactobacillus fermentum Species 0.000 description 1
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 description 1
- 206010034133 Pathogen resistance Diseases 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M Sodium bisulfite Chemical compound [Na+].OS([O-])=O DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- ZSJLQEPLLKMAKR-UHFFFAOYSA-N Streptozotocin Natural products O=NN(C)C(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O ZSJLQEPLLKMAKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940100389 Sulfonylurea Drugs 0.000 description 1
- 102000004357 Transferases Human genes 0.000 description 1
- 108090000992 Transferases Proteins 0.000 description 1
- 108010059993 Vancomycin Proteins 0.000 description 1
- 206010049040 Weight fluctuation Diseases 0.000 description 1
- 238000009098 adjuvant therapy Methods 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 1
- 229940127003 anti-diabetic drug Drugs 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 235000021405 artificial diet Nutrition 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 1
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004283 biguanides Chemical class 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 230000025938 carbohydrate utilization Effects 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 210000005056 cell body Anatomy 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 229960004926 chlorobutanol Drugs 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 239000006781 columbia blood agar Substances 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 230000003750 conditioning effect Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000010227 cup method (microbiological evaluation) Methods 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 208000016097 disease of metabolism Diseases 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 208000026500 emaciation Diseases 0.000 description 1
- 229940032049 enterococcus faecalis Drugs 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 230000002550 fecal effect Effects 0.000 description 1
- 238000002376 fluorescence recovery after photobleaching Methods 0.000 description 1
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000007602 hot air drying Methods 0.000 description 1
- 229940126904 hypoglycaemic agent Drugs 0.000 description 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 229940012969 lactobacillus fermentum Drugs 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 230000003340 mental effect Effects 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000027939 micturition Effects 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000006872 mrs medium Substances 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 235000021062 nutrient metabolism Nutrition 0.000 description 1
- 235000021231 nutrient uptake Nutrition 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 229940055695 pancreatin Drugs 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010036067 polydipsia Diseases 0.000 description 1
- 208000022530 polyphagia Diseases 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 235000010232 propyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004405 propyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003223 protective agent Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 108010027322 single cell proteins Proteins 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000010802 sludge Substances 0.000 description 1
- 239000004289 sodium hydrogen sulphite Substances 0.000 description 1
- 235000010267 sodium hydrogen sulphite Nutrition 0.000 description 1
- 235000010265 sodium sulphite Nutrition 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 239000004575 stone Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000820 toxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 210000003934 vacuole Anatomy 0.000 description 1
- 238000009777 vacuum freeze-drying Methods 0.000 description 1
- 229960003165 vancomycin Drugs 0.000 description 1
- MYPYJXKWCTUITO-LYRMYLQWSA-N vancomycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=C2C=C3C=C1OC1=CC=C(C=C1Cl)[C@@H](O)[C@H](C(N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H]3C(=O)N[C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](C3=CC(O)=CC(O)=C3C=3C(O)=CC=C1C=3)C(O)=O)=O)[C@H](O)C1=CC=C(C(=C1)Cl)O2)=O)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC)[C@H]1C[C@](C)(N)[C@H](O)[C@H](C)O1 MYPYJXKWCTUITO-LYRMYLQWSA-N 0.000 description 1
- MYPYJXKWCTUITO-UHFFFAOYSA-N vancomycin Natural products O1C(C(=C2)Cl)=CC=C2C(O)C(C(NC(C2=CC(O)=CC(O)=C2C=2C(O)=CC=C3C=2)C(O)=O)=O)NC(=O)C3NC(=O)C2NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(CC(C)C)NC)C(O)C(C=C3Cl)=CC=C3OC3=CC2=CC1=C3OC1OC(CO)C(O)C(O)C1OC1CC(C)(N)C(O)C(C)O1 MYPYJXKWCTUITO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 229940126673 western medicines Drugs 0.000 description 1
Abstract
本申请公开了一株瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)WIS02及其在控制血糖中的应用,瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)WIS02的保藏编号为CGMCC No.29243。瑞士乳杆菌在一定的酸性环境下具有良好的生物活性,可以耐人工胃液;其具有良好的抑菌能力,良好的粘附能力、自聚合能力且不含外源抗生素耐药基因,食用安全;其具有良好的体外抗氧化能力、具有控制血糖水平和降低及稳定体重水平的作用。本申请还提供药物、饲料以及该菌的应用和方法也分别具有上述有益效果。
Description
技术领域
本申请属于微生物学技术领域,尤其涉及一株瑞士乳杆菌及其在控制血糖中的应用。
背景技术
糖尿病是慢性代谢性疾病,该病受遗传因素、免疫功能紊乱、微生物感染及其毒素、自由基毒素、精神因素等各种致病因子影响,导致机体胰岛素功能减退、胰岛素抵抗,引发机体对糖、蛋白质、脂肪、水和电解质等一系列的代谢紊乱。临床以高血糖为主要特点,典型病例可出现多尿、多饮、多食、消瘦等表现,即“三多一少”症状。
临床治疗糖尿病方法有:西药治疗、中药治疗和饮食运动治疗。药物大致分为磺脲类、双胍类、中药制剂、其他降糖药及辅助用药类。西药治疗糖尿病,可快速降低血糖,减轻糖尿病的症状,常伴随的不良反应有。中药治疗糖尿病,副作用小、调理性强、对于提高生活质量和延长寿命的作用有显著效果,但疗程长、起效慢、作用物质不明确,个体差异性及煎服方式复杂等缺点无法广泛应用。饮食运动治疗:该治疗方法简便,无副作用,辅助治疗高血糖病症,作用效果有限。临床急需开发出具有良好降糖活性、低副作用或无副作用的新型抗糖尿病药物。
发明内容
本申请实施例提供了一株瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)WIS02,其在一定的酸性环境下具有良好的生物活性,可以耐人工胃液;具有良好的体外抗氧化能力、具有控制血糖水平和降低及稳定体重水平的作用、具有良好的抑菌能力,优秀的耐人工肠液能力,良好的粘附能力、自聚合能力且不含外源抗生素耐药基因,食用安全。本申请还提供瑞士乳杆菌在控制血糖中的应用也分别具有上述有益效果。
第一方面,本申请实施例提供了一种瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)WIS02,其保藏编号为CGMCC No.29243。
第二方面,本申请实施例提供了一种包含瑞士乳杆菌的菌体。
第三方面,本申请实施例提供了一种包含瑞士乳杆菌的提取物。
第四方面,本申请实施例提供了一种包含瑞士乳杆菌的培养物。
第五方面,本申请实施例提供了一种包含瑞士乳杆菌的裂解物。
第八方面,本申请实施例提供了一种饲料,包括第一方面的瑞士乳杆菌或第二方面的菌体或第三方面的提取物或第四方面的培养物或第五方面的裂解物。
根据本申请一个方面的实施例,饲料包括1×103~1×1014CFU/mL或1×103~1×1014CFU/g瑞士乳杆菌。
第九方面,本申请实施例提供了一种药物,包括第一方面的瑞士乳杆菌或第二方面的菌体或第三方面的提取物或第四方面的培养物或第五方面的裂解物。
根据本申请一个方面的实施例,药物包括1×103~1×1014CFU/mL或1×103~1×1014CFU/g瑞士乳杆菌。
第十方面,本申请实施例提供了第一方面的瑞士乳杆菌或第二方面的菌体或第三方面的提取物或第四方面的培养物或第五方面的裂解物中的一种或多种在制备用于控制糖尿病患者血糖水平和/或降低血糖水平或治疗身体肥胖症状或在制备延缓或预防或治疗与自由基相关的疾病的药物中的应用,所述与自由基相关的疾病包括动脉硬化、糖尿病、心血管病疾病、风湿性关节炎、老年性眼病、肠炎中的任意一种或多种。
第十一方面,本申请实施例提供了一种用于管理人体体重和/或促进人体的新陈代谢的方法,包括:
提供第一方面的瑞士乳杆菌或第二方面的菌体或第三方面的提取物或第四方面的培养物或第五方面的裂解物;
将载剂与瑞士乳杆菌、及其菌体、及其提取物、及其培养物、及其裂解物一种或多种混合,以得到混合物;
使需要管理人体体重和/或促进人体的新陈代谢的对象食用混合物。
第十二方面,本申请实施例提供了一种用于控制糖尿病患者血糖水平和/或降低血糖水平或治疗身体肥胖症状的方法,包括:
提供第一方面的瑞士乳杆菌或第二方面的菌体或第三方面的提取物或第四方面的培养物或第五方面的裂解物;
将载剂与瑞士乳杆菌、及其干品、及其提取物、及其培养物、及其裂解物一种或多种混合,以得到混合物;
使需要控制糖尿病患者血糖水平和/或降低血糖水平或治疗身体肥胖症状的疾病的对象食用混合物。
第十三方面,本申请实施例提供了一种用于延缓或预防或治疗与自由基相关的疾病的方法,包括:
提供第一方面的瑞士乳杆菌或第二方面的菌体或第三方面的提取物或第四方面的培养物或第五方面的裂解物;
将载剂与所述瑞士乳杆菌、及其菌体、及其提取物、及其培养物、及其裂解物中的一种或多种混合,以得到混合物;
使需要延缓或预防或治疗与自由基相关的疾病的对象食用所述混合物,所述与自由基相关的疾病包括动脉硬化、糖尿病、心血管疾病、风湿性关节炎、老年性眼病、肠炎中的任意一种或多种。
本申请实施例至少具有以下有益效果:
本申请实施例提供的瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)WIS02具有良好的体外抗氧化能力,包括DPPH自由基清除能力、羟基自由基清除能力和总抗氧化能力,有无毒力及良好的安全性,具有良好的抑菌能力,优秀的耐人工肠液能力,良好的粘附能力、自聚合能力且不含外源抗生素耐药基因,食用安全。瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)WIS02具有控制血糖水平和降低及稳定体重水平的作用。
附图说明
为了更清楚地说明本申请实施例的技术方案,下面将对本申请实施例中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面所描述的附图仅仅是本申请的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1示出了本申请实施例的菌株在MRS培养基上的菌落特征图(A)、哥伦比亚血平板溶血特征图(B)与革兰氏染色显微镜检图(C);
图2示出了本申请实施例的瑞士乳杆菌的生长曲线图;
图3示出了本申请实施例的采用不同干预方式后实验动物餐后2h血糖值;
图4示出了本申请实施例的采用不同组喂养小鼠后小鼠体重变化情况;
图5示出了本申请实施例的采用不同干预方式后糖尿病模型动物阻止空腹血糖情况;
图6示出了本申请实施例的采用不同干预方式后糖尿病模型动物后42天时空腹血糖值。
菌种保藏信息
本申请提供的瑞士乳杆菌Lactobacillus helveticus,菌株名为WIS02,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC),地址为:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,保藏编号为CGMCC No.29243,该菌株于2023年12月06日由保藏中心收到并登记入册,且经保藏中心于2023年12月06日检测为存活菌株。
具体实施方式
为了使本申请的发明目的、技术方案和有益技术效果更加清晰,以下结合具体实施例对本申请进行详细说明。应当理解的是,本说明书中描述的实施例仅仅是为了解释本申请,并非为了限定本申请。
为了简便,本文仅明确地公开了一些数值范围。然而,任意下限可以与任何上限组合形成未明确记载的范围;以及任意下限可以与其它下限组合形成未明确记载的范围,同样任意上限可以与任意其它上限组合形成未明确记载的范围。此外,尽管未明确记载,但是范围端点间的每个点或单个数值都包含在该范围内。因而,每个点或单个数值可以作为自身的下限或上限与任意其他点或单个数值组合或与其它下限或上限组合形成未明确记载的范围。
在本文的描述中,需要说明的是,除非另有说明,“以上”、“以下”为包含本数,“一种或几种”中“几种”的含义是两种或两种以上。“一种或多种”中“多种”的含义是两种或两种以上。
本申请的上述发明内容并不意欲描述本申请中的每个公开的实施方式或每种实现方式。如下描述更具体地举例说明示例性实施方式。在整篇申请中的多处,通过一系列实施例提供了指导,这些实施例可以以各种组合形式使用。在各个实例中,列举仅作为代表性组,不应解释为穷举。
第一方面,本申请实施例提供了一种瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)WIS02,其保藏编号为CGMCC No.29243。
经研究发现,糖尿病患者粪便益生菌数量明显低于健康人群,乳酸菌是一类能利用碳水化合物产生乳酸的非病原性、革兰氏阳性细菌的通称,被认为是一种安全有效降血糖的生物效应调节剂。
从母乳中分离纯化出来的乳杆菌菌株,筛选出有效控制血糖水平和降低及稳定体重水平的一株优势菌株,可作为健康人群和糖尿病患者控制血糖水平和管理体重的潜在益生菌,鉴定为瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)WIS02。本申请实施例提供了一株瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)WIS02,保藏编号为WIS02,于2023年12月06日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
在一些可选的实施方式中,发酵粘液乳杆菌包括如SEQ ID NO:1所示核苷酸序列。
在本申请实施例中,如SEQ ID NO:1所示核苷酸序列可以为编码16S rRNA序列的基因(16S rDNA)。
本申请实施例提供的瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)WIS02在MRS培养基上菌落特征:菌落白色,不透明、圆形、表面光滑湿润、边缘整齐、中央凸起。在哥伦比亚血平板上的菌落特征:不溶血、单菌落呈圆形、乳白色不透明、边缘规则、菌落凸起。
本申请实施例提供的瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)WIS02显微形态为:革兰氏染色后细菌形态呈现杆状,不产芽孢,无鞭毛,不运动。
本申请实施例测定前述的瑞士乳杆菌的49种碳水化合物利用情况。结果显示:菌株生长利用17种碳水化合物:D-半乳糖、D-葡萄糖、D-果糖、D-甘露糖、N-乙酰葡萄糖苷、苦杏仁苷、熊果苷、水杨苷、D-纤维二糖、D-麦芽糖、D-麦芽糖、D-乳糖、D-蔗糖、D-海藻糖、D-龙胆二糖、葡萄糖酸盐和5-酮基葡萄糖酸钾。
本申请实施例提供的瑞士乳杆菌具有良好的体外抗氧化能力,包括DPPH自由基清除能力、羟基自由基清除能力和总抗氧化能力,具有控制血糖水平和降低及稳定体重水平的作用。
本申请实施例提供的瑞士乳杆菌具有无毒力及良好的安全性,具有良好的抑菌能力,优秀的耐人工肠液能力,良好的粘附能力、自聚合能力且不含外源抗生素耐药基因,食用安全。
在本申请实施例中,培养第一方面的瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)WIS02可以使用用于培养乳杆菌属的培养基和其他培养条件,而没有特别限制,只要它们通常用于培养乳杆菌属的微生物即可。
在本申请实施例中,培养温度可以为25℃~48℃,并更具体地,36℃~38℃,但温度不限于此。培养可以持续直到获得所需量的有用材料,具体地,1~100h,但培养时间不限于此。
第二方面,本申请实施例提供了一种包含瑞士乳杆菌的菌体。
在本申请任意的实施例中,术语“菌体”可以指通过干燥瑞士乳杆菌的菌株或其培养物等的制备,或者通过离心沉淀得到的菌体。干燥可以为用热风干燥,或冻干干燥。冻干干燥可以为取上述瑞士乳杆菌培养之后的培养液或将该培养液的进行冻干处理而得到的冻干粉末。
在一些实施例中,菌体为瑞士乳杆菌的活菌。在另一些实施例中,菌体为瑞士乳杆菌的灭活菌体。例如,经过巴氏杀菌的灭活菌体。菌体中可以包括死菌。在另一些实施例中,上述菌体中的瑞士乳杆菌为瑞士乳杆菌活菌和瑞士乳杆菌的灭活菌体的混合物。
在本申请任意的实施例中,菌体可以为发酵液沉淀、活菌、死菌通过干燥后制得的制品。
第三方面,本申请实施例提供了一种包含瑞士乳杆菌的提取物。
在本申请任意的实施例中,术语“提取物”可以为“菌株提取物”的概念互换,可以指从菌株的细胞体分离之后剩余的物质。具体地,其可以是通过裂解菌株细胞获得的。提取物可以包括蛋白质、碳水化合物、核酸和纤维中的一种或多种水溶性组分,但其中所包含的组分不限于此。
第四方面,本申请实施例提供了一种包含瑞士乳杆菌的培养物。
在本申请任意的实施例中,术语“培养物”可以指由培养本发明的菌株得到的产物。例如,培养物可以是含有副产物的培养基,该副产物在培养基中培养菌株期间通过营养摄入和代谢产生。又如,培养物可以包括通过使用上述的培养基形成的所有类型的培养物。如培养基的稀释液或浓缩液、通过干燥培养基获得的菌体、培养基的粗纯化产物或纯化产物或其混合物等。本申请实施例的瑞士乳杆菌培养物可以包括或可以不包括瑞士乳杆菌。
第五方面,本申请实施例提供了一种包含瑞士乳杆菌的裂解物。
在本申请任意的实施例中,术语“裂解物”可以指由破裂或裂解菌株或其培养物产生的产物。裂解物可以包括水溶性成分或不具有水溶特性的组分。例如,裂解物可以通过离心裂解物获得,包括其上清液。
在本申请任意的实施例中,培养物、裂解物、其上清液和其分馏物也包括在本申请的范围内。该方法还可以包括在收集步骤之前或与收集步骤同时裂解菌株的步骤。菌株的裂解可以通过本发明所属技术领域常用的方法进行,例如裂解缓冲液、超声波仪、热处理、法式压机(French press)等。另外,裂解步骤可包括酶诸如细胞壁降解酶、核酸酶、核苷酸转移酶、蛋白酶等的反应,但裂解步骤不限于此。
根据上述实施例,包含该瑞士乳杆菌的菌体、提取物、培养物、裂解物也分别具有瑞士乳杆菌的效果。
第八方面,本申请实施例提供了一种饲料,包括第一方面的瑞士乳杆菌或第二方面的菌体或第三方面的提取物或第四方面的培养物或第五方面的裂解物。
饲料可以包括按照原样的本发明的菌株、菌株的菌体、和菌株的提取物中的任意一种或多种,或者可以包括在制备菌株的提取物期间获得的细胞壁组分,以及例如菌株的菌体(干菌株)和/或菌株的提取物(菌株提取物),但不限于此。
本公开的“饲料”是供动物食用、摄取和消化的任何适当的天然或人工饮食、单餐等,或单餐的组分。根据本申请,包含瑞士乳杆菌、其菌体、提取物、培养物、裂解物中一种或多种的饲料可以以本领域已知的各种饲料形式制备,具体地,可以包括浓缩饲料、粗饲料和/或特殊饲料。
饲料的类型没有特别限制,可以使用本领域常用的任何饲料。饲料的非限制性实例可包括植物型饲料,诸如谷物、根系植物、食品加工副产品、海藻、纤维、药物副产品、油、淀粉、谷类、谷物副产品等;和动物型饲料,诸如蛋白质、无机物、矿物质、脂肪和油、单细胞蛋白、浮游动物、食物等。这些饲料可以单独或以其两种或更多种组合使用。
在一些实施例中,饲料中瑞士乳杆菌的菌数为1×103~1×1014CFU/mL或1×103~1×1014CFU/g,该菌可以为活菌数。具体可以为1×103CFU/mL(CFU/g)、1×104CFU/mL(CFU/g)、1×105CFU/mL(CFU/g)、1×106CFU/mL(CFU/g)、1×107CFU/mL(CFU/g)、1×108CFU/mL(CFU/g)、1×109CFU/mL(CFU/g)、1×1010CFU/mL(CFU/g)、1×1011CFU/mL(CFU/g)、1×1012CFU/mL(CFU/g)、1×1013CFU/mL(CFU/g)、1×1014CFU/mL(CFU/g)中的任意数值或其组成的范围。
在本申请上述任意的实施例中,例如饲料中,还包括载剂。载剂可以是天然存在的或非天然存在的添加剂,但不限于此。
第九方面,本申请实施例提供了一种药物,包括第一方面的瑞士乳杆菌或第二方面的菌体或第三方面的提取物或第四方面的培养物或第五方面的裂解物;以及
药学上可接受的载体;
药学上可接受的载体可以是本领域常用的赋形剂或稀释剂,以及药学上可接受的盐的任意一种或多种。药学上可接受的载体包括例如口服给药或胃肠外给药的载体,可以另外包括药学上可接受的载体。药学上可接受的载体可以为固态载体或液体载体。所述固态载体包括乳糖,淀粉,纤维素衍生物,硬脂酸镁,硬脂酸等。此外,液态载体包括水,合适的油,盐水,含水葡萄糖和乙二醇等,还可以添加稳定剂和防腐剂。例如,合适的稳定剂可以包括亚硫酸氢钠,亚硫酸钠或抗坏血酸可以是抗氧化剂,合适的防腐剂包括苯扎氯铵,对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯和氯丁醇。
根据本申请实施例,该药物使用了瑞士乳杆菌,因而该方法在一定的酸性环境下具有良好的生物活性,可以耐人工胃液;其具有良好的抑菌能力,良好的粘附能力、自聚合能力且不含外源抗生素耐药基因,食用安全。在一些可选的实施方式中,药物包含瑞士乳杆菌、其菌体、提取物、培养物、裂解物中一种或多种。
在一些实施例中,饲料中瑞士乳杆菌的菌数为1×103~1×1014CFU/mL或1×103~1×1014CFU/g,该菌可以为活菌数。具体可以为1×103CFU/mL(CFU/g)、1×104CFU/mL(CFU/g)、1×105CFU/mL(CFU/g)、1×106CFU/mL(CFU/g)、1×107CFU/mL(CFU/g)、1×108CFU/mL(CFU/g)、1×109CFU/mL(CFU/g)、1×1010CFU/mL(CFU/g)、1×1011CFU/mL(CFU/g)、1×1012CFU/mL(CFU/g)、1×1013CFU/mL(CFU/g)、1×1014CFU/mL(CFU/g)中的任意数值或其组成的范围。
第十方面,本申请实施例提供了第一方面的瑞士乳杆菌或第二方面的菌体或第三方面的提取物或第四方面的培养物或第五方面的裂解物在制备用于控制糖尿病患者血糖水平和/或降低血糖水平或治疗身体肥胖症状的药物中的应用。
根据本申请实施例,使用了瑞士乳杆菌,因而制备的药物可以具有良好的体外抗氧化能力,包括DPPH自由基清除能力、羟基自由基清除能力和总抗氧化能力、有效控制血糖水平和降低及稳定体重水平;具有无毒力及良好的安全性,具有良好的抑菌能力,优秀的耐人工肠液能力,良好的粘附能力、自聚合能力且不含外源抗生素耐药基因,食用安全。
第十一方面,本申请实施例提供了一种用于管理人体体重和/或促进人体的新陈代谢的方法,包括:
提供第一方面的瑞士乳杆菌或第二方面的菌体或第三方面的提取物或第四方面的培养物或第五方面的裂解物;
将载剂与瑞士乳杆菌、及其菌体、及其提取物、及其培养物、及其裂解物一种或多种混合,以得到混合物;
使需要管理人体体重和/或促进人体的新陈代谢的对象食用混合物。
根据本申请实施例,使用了瑞士乳杆菌,因而该方法可以具有良好的体外抗氧化能力,包括DPPH自由基清除能力、羟基自由基清除能力和总抗氧化能力、有效管理人体体重和/或促进人体的新陈代谢;具有无毒力及良好的安全性,具有良好的抑菌能力,优秀的耐人工肠液能力,良好的粘附能力、自聚合能力且不含外源抗生素耐药基因,食用安全。
在本申请实施例中,载剂可以是天然存在的或非天然存在的添加剂,但不限于此。
在本申请实施例中,载剂可以为赋形剂,赋形剂可以根据其预期用途或形式适当地选择进行使用。载剂可以是选自淀粉、葡萄糖、纤维素、乳糖、糖原、D-甘露醇、山梨糖醇、乳糖醇、麦芽糖糊精、碳酸钙、合成硅酸铝、磷酸氢钙、硫酸钙、氯化钠、碳酸氢钠、纯化羊毛脂、糊精、藻酸钠、甲基纤维素、胶体硅胶、羟丙基淀粉、羟丙基甲基纤维素、丙二醇、酪蛋白、乳酸钙、淀粉钠(primogel)、阿拉伯树胶中的一种或多种,具体地是选自淀粉、葡萄糖、纤维素、乳糖、糊精、糖原、D-甘露醇和麦芽糖糊精中的一种或多种,但赋形剂不限于此。乳化剂可以是甘油酯、脱水山梨糖醇酯、甘油单酯、甘油二酯、甘油三酯、蔗糖酯、脱水山梨糖醇酯、丙二醇酯、甘油脂肪酸酯、脱水山梨糖醇脂肪酸酯、丙二醇脂肪酸酯、蔗糖脂肪酸酯、卵磷脂或它们的混合物,但乳化剂不限于此,可以适当使用本领域已知的那些。
在本申请任意的实施例中,赋形剂可包括例如防腐剂、润湿剂、分散剂、助悬剂、缓冲剂、稳定剂或等渗剂,但赋形剂不限于此。
第十二方面,本申请实施例提供了一种用于控制糖尿病患者血糖水平和/或降低血糖水平或治疗身体肥胖症状的方法,包括:
提供第一方面的瑞士乳杆菌或第二方面的菌体或第三方面的提取物或第四方面的培养物或第五方面的裂解物;
将载剂与瑞士乳杆菌、及其干品、及其提取物、及其培养物、及其裂解物一种或多种混合,以得到混合物;
使需要控制糖尿病患者血糖水平和/或降低血糖水平或治疗身体肥胖症状的对象食用混合物。
根据本申请实施例,使用了瑞士乳杆菌,因而该方法可以具有良好的体外抗氧化能力,包括DPPH自由基清除能力、羟基自由基清除能力和总抗氧化能力、可以控制糖尿病患者血糖水平和/或降低血糖水平或治疗身体肥胖症状或预防或治疗肠炎或其并发症;具有无毒力及良好的安全性,具有良好的抑菌能力,优秀的耐人工肠液能力,良好的粘附能力、自聚合能力且不含外源抗生素耐药基因,食用安全。此外,该方法可以用于患病人群。
第十三方面,本申请实施例提供了一种用于延缓或预防或治疗与自由基相关的疾病的方法,包括:
提供第一方面的瑞士乳杆菌或第二方面的菌体或第三方面的提取物或第四方面的培养物或第五方面的裂解物;将载剂与所述瑞士乳杆菌、及其菌体、及其提取物、及其培养物、及其裂解物一种或多种混合,以得到混合物;
使需要延缓或预防或治疗与自由基相关的疾病的对象食用所述混合物,所述与自由基相关的疾病包括动脉硬化、糖尿病、心血管疾病、风湿性关节炎、老年性眼病、肠炎中的任意一种或多种。
在本申请任意的实施例中,载剂可以是天然存在的或非天然存在的添加剂,但不限于此。
在本申请任意的实施例中,载剂可以为赋形剂,赋形剂可以根据其预期用途或形式适当地选择进行使用。例如载剂可以是选自淀粉、葡萄糖、纤维素、乳糖、糖原、D-甘露醇、山梨糖醇、乳糖醇、麦芽糖糊精、碳酸钙、合成硅酸铝、磷酸氢钙、硫酸钙、氯化钠、碳酸氢钠、纯化羊毛脂、糊精、藻酸钠、甲基纤维素、胶体硅胶、羟丙基淀粉、羟丙基甲基纤维素、丙二醇、酪蛋白、乳酸钙、淀粉钠(primogel)、阿拉伯树胶中的一种或多种,具体地是选自淀粉、葡萄糖、纤维素、乳糖、糊精、糖原、D-甘露醇和麦芽糖糊精中的一种或多种,但赋形剂不限于此。乳化剂可以是甘油酯、脱水山梨糖醇酯、甘油单酯、甘油二酯、甘油三酯、蔗糖酯、脱水山梨糖醇酯、丙二醇酯、甘油脂肪酸酯、脱水山梨糖醇脂肪酸酯、丙二醇脂肪酸酯、蔗糖脂肪酸酯、卵磷脂或它们的混合物,但乳化剂不限于此,可以适当使用本领域已知的那些。
在本申请实施例中,赋形剂可包括例如防腐剂、润湿剂、分散剂、助悬剂、缓冲剂、稳定剂或等渗剂,但赋形剂不限于此。
实施例
下述实施例更具体地描述了本申请公开的内容,这些实施例仅仅用于阐述性说明,因为在本申请公开内容的范围内进行各种修改和变化对本领域技术人员来说是明显的。除非另有声明,以下实施例中所报道的所有份、百分比、和比值都是基于重量计,而且实施例中使用的所有试剂都可商购获得或是按照常规方法进行合成获得,并且可直接使用而无需进一步处理,以及实施例中使用的仪器均可商购获得。
实施例1 瑞士乳杆菌WIS02的分离与鉴定
自健康母乳中分离得到的若干菌株,筛选出优势菌株,进行鉴定。
16S DNA鉴定:将培养后的菌液,使用细菌通用引物27F:AGAGTTTGAT CCTGGCTCAG;1540R:AGGAGGTGATCCAGCCGCA,进行菌落PCR扩增后,进行16S DNA测序鉴定,编码16S rRNA序列的基因(16S rDNA)的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。将各个菌株的16S DNA序列与数据库中所有已测定微生物的编码16S rRNA序列的基因序列进行比对,其中发现有菌株WIS02与瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)的编码16S rRNA序列的基因的同源相似性99.93%,判断为该物种属于瑞士乳杆菌,命名为一株瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)WIS02。将筛选到的瑞士乳杆菌WIS02于2023年12月06日保藏于,保藏编号为CGMCC No. 29243,分类命名为瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)WIS02。
实施例2 瑞士乳杆菌WIS02的菌落形态和生物特性检测
1、瑞士乳杆菌WIS02形态及菌落观察、溶血特征
用接种环蘸取一环菌液在MRS琼脂培养基(北京陆桥生物科技有限公司)进行划线,在37°C培养48h后对其菌落形态进行观察。瑞士乳杆菌微生物学特性如下:菌落形态:如图1中A图所示,在MRS琼脂培养基中生长形态为白色菌落,不透明、圆形、表面光滑湿润、边缘整齐、中央凸起。
将该菌株置于哥伦比亚血琼脂培养基(青岛海博生物科技有限公司)上进行培养,在37°C培养48h后对其菌落形态进行观察。如图1中B图显示,在哥伦比亚血平板上的菌落特征:不溶血、单菌落呈圆形、乳白色不透明、边缘规则、菌落凸起。
取纯培养菌液均匀涂抹于载玻片酒精灯外焰固定,进行革兰氏染色,革兰氏染色完成后用去离子水缓慢冲洗,洗掉多余的染色液,待玻片干燥后于显微镜下油镜观察并拍照。其显微形态包括:如图1中C图显示,染色后细菌形态呈现杆状,不产芽孢,无鞭毛,不运动。
2、瑞士乳杆菌WIS02对不同碳水化合物的利用情况
将菌株WIS02在MRS琼脂平板上划线培养,将平板上的菌落挑到2mL生理盐水中,振荡混匀,取适量菌液(v)于5mL生理盐水中,测定调整至2麦氏浊度,再从原菌液中取(2v)于10mL API( 梅里埃碳水化合物鉴定试剂条API 50CH)配套培养基中,混匀;在孵育盒底盘孔中加上无菌去离子水,保证环境湿润,从包装袋中取出试条放在孵育盒底盘中,使用移液枪吸取115μL左右菌液,仅加满管的部分,管的上部(杯)加无菌液体石蜡封口,管内保持厌氧环境。将孵育盒放在37℃培养箱中进行孵育,24h和48h观察试剂条颜色变化。
按照API50 CH碳水化合物鉴定试剂的说明书进行使用API 50CHL系统培养,表1中列出了本实施例的菌株瑞士乳杆菌WIS02的API 50CHL测试的结果。其中,对照组采用没有添加菌株的API 50CHL系统培养。
表1 瑞士乳杆菌WIS02 API 50CHL测试结果
通过表1的结果可知,菌株生长利用17种碳水化合物:D-半乳糖、D-葡萄糖、D-果糖、D-甘露糖、N-乙酰葡萄糖苷、苦杏仁苷、熊果苷、水杨苷、D-纤维二糖、D-麦芽糖、D-麦芽糖、D-乳糖、D-蔗糖、D-海藻糖、D-龙胆二糖、葡萄糖酸盐和5-酮基葡萄糖酸钾。
3、瑞士乳杆菌WIS02生长曲线测定
将甘油保存的菌种(1×1012CFU/mL)活化两次,测定其生长曲线。第一次活化:菌种转入预装灭菌的MRS液体培养基的离心管中,接种量1%(V/V),37℃厌氧静置培养16 h;
第二次活化:第一次活化益生菌转入预装灭菌的MRS液体培养基的96孔细胞培养板中,接种量1%(V/V),37℃厌氧静置培养8 h;
生长曲线测定:第二次活化益生菌转入预装灭菌的MRS液体培养基的96孔细胞培养板中,重复三次,接种量1%(V/V),37℃厌氧振荡培养,每隔1 h测定一次OD600nm,连续测定24 h。
结果如图2显示,WIS02接种6h左右进入对数期,12h左右进入稳定期,到达稳定期的OD600nm值约为0.9。
4、瑞士乳杆菌WIS02体外抗氧化能力
将菌株WIS02及对照组的市售的菌株瑞士乳杆菌R0052活化三代后,培养进入平台期,微生物细胞分析仪测定活菌数密度,通过无菌MRS培养液调整两菌株活菌数密度1×1010CFU/mL,收集益生菌发酵液上清及菌体裂解物。利用商品化试剂盒分别测试发酵液上清和菌体裂解液的DPPH自由基清除能力、羟基自由基清除能力、总抗氧化能力。
DPPH自由基清除能力的检测使用DPPH自由基清除能力试剂盒(购自南京建成,货号为A153-1-1);羟基自由基清除能力的检测使用羟自由基清除能力测试盒(微量法)(购自莱尔生物,货号为YX-W-A505);总抗氧化能力的检测使用总抗氧化能力(T-AOC)检测试剂盒(FRAP法)微板法(购自南京建成,货号为A015-3-1)。
表2瑞士乳杆菌WIS02体外抗氧化能力
检测结果见表2,通过表2的结果可知,WIS02的菌体裂解物DPPH自由基清除能力是R0052菌体裂解物的1.81倍,WIS02的菌体裂解物的羟基自由基清除能力是R0052的2.31倍;两株菌的上清发酵液在三项检测中差异不明显。
5、瑞士乳杆菌WIS02的毒力实验及安全性检测
将上述的瑞士乳杆菌WIS02接种于MRS液体培养基中,36± 1℃厌氧培养18h,计数培养液中WIS02活菌数为2 .5× 109CFU/mL,将培养物的原液和5倍浓缩液,经口以20mL/kg给受试小鼠连续灌胃3天,观察7天。试验设培养基原液和5倍浓缩液对照组。试验结果表明:瑞士乳杆菌WIS02的培养物原液和5倍浓缩液组与各自对照组相比,对小鼠体重增长的影响无统计学意义(p>0 .05),同时未观察到受试小鼠有毒性反应或死亡。
采用SN/T 1944-2016《动物及其制品中细菌耐药性的测定 纸片扩散法》方法,评估瑞士乳杆菌WIS02的抗生素敏感性能。评价结果显示,瑞士乳杆菌WIS02对链霉素Streptomycin、四环素Tetracycline、氯霉素Chloramphenicol、氨苄西林Ampicillin、红霉素Erythromycin、万古霉素Vancomycin和泰利霉素Telithromycin敏感。符合欧洲食品安全委员会(European Food Safety Authority)对食用细菌耐药性评价规范中的要求。瑞士乳杆菌WIS02不含外源抗生素耐药基因,食用安全。
6、瑞士乳杆菌WIS02抑菌能力检测
采用牛津杯法测定菌株的抑菌活性。病原指示菌选用6种常见致病菌:大肠埃希氏菌 ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC25923、铜绿假单胞菌ATCC27853、粪肠球菌ATCC29212、福氏志贺氏菌 CICC 21534、阪崎肠杆菌CICC 21560。微生物分析仪测6种病原菌活菌浓度并调整至1×109CFU/mL,病原菌接种至BHI液体培养基中,接种量1%(V/V),37℃静置培养16h,分别取病原菌培养液,加入呈流体状的BHI琼脂培养基(约50℃)并混匀,调整其OD600nm=0.025,混合物倒入琼脂平板冷凝。菌株WIS02、对照菌株R0052平台期培养液(其中包含的是MRS液体培养基),离心取培养液上清200µL,加至提前放置在琼脂培养板的无菌牛津杯中,无菌MRS液体培养基作为空白对照,通过乳酸调节MRS培养基pH值至4.15作为阳性对照。4℃环境益生菌平台期上清液在琼脂平板上静置扩散24h,37℃环境静置培养24h。观察益生菌平台期上清液对抑制病原菌生长的抑菌圈,游标卡尺测定抑菌圈直径(含牛津杯直径7.8mm)。结果如表3。
表3两种瑞士乳杆菌上清液对病原菌的抑制能力
注:以上数值为抑菌圈直径(含牛津杯直径7.8mm),单位mm。
通过表3的结果可知,菌株WIS02、R0052对6株致病菌皆有抑制效果,且抑菌效果较好。对阪崎肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑制效果,WIS02优于对照菌株R0052;对福氏志贺氏菌、粪肠球菌的抑菌效果,WIS02比对照菌株R0052差;对铜绿假单胞菌和大肠埃希氏菌的抑菌效果,WIS02与对照菌株R0052相差无几。
7、两种瑞士乳杆菌耐人工胃液实验
人工胃液配制:称取NaCl 0.1 g,胃蛋白酶0.175 g,加水50 mL,充分溶解,稀盐酸调节pH 2.5,混匀后用0.22 μm滤膜在无菌环境条件下过滤,备用。
将甘油保存的菌种WIS02(1×1012CFU/mL)和R0052(1×1012CFU/mL)活化一次,菌种转入预装灭菌的MRS液体培养基的离心管中,接种量1%(V/V),在37℃厌氧静置培养16 h,菌体生长进入平台期,10 mL菌体培养液,6000 g离心10 min,弃上清,无菌生理盐水清洗菌体2次,10 mL人工胃液重悬菌泥,37℃厌氧静置培养3 h,取100μl进行耐人工胃液实验,两种处理方式:分为人工胃液处理3h和人工胃液不处理。MRS平板分别接种不同处理方式的菌体,37℃厌氧静置培养48h,计数不同处理方式后菌体生长的菌落个数,还原不同处理方式菌体的活菌数,推算不同处理方式的菌体耐人工胃液能力。通过下列公式计算人工胃液处理3 h的菌体存活率。结果如表4。
耐人工胃液能力=(人工胃液处理3 h后菌体的活菌数/平台期菌体的活菌数)×100%。
表4两种瑞士乳杆菌耐人工胃液能力(人工胃液3h后菌体存活率%)
通过表4可知,两种瑞士乳杆菌耐人工胃液能力一般,菌株WIS02的耐人工胃液优于菌株R0052。
8、两种瑞士乳杆菌耐人工肠液实验
人工肠液配制:取磷酸二氢钾6.8 g,加水500 mL使溶解,用0.1 mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.8,另取胰酶10 g,加水适量至溶解,将两液混合后,加水稀释成1000 mL,混匀后用0.22 μm滤膜在无菌环境条件下过滤。
将甘油保存的菌种WIS02(1×1012CFU/mL)和R0052(1×1012CFU/mL)活化一次,菌种转入预装灭菌的MRS液体培养基的离心管中,接种量1%(V/V),在37℃厌氧静置培养16 h,菌体生长进入平台期,10 mL菌体培养液,6000 g离心10 min,弃上清,无菌生理盐水清洗菌体2次,10 mL人工肠液重悬菌泥,37℃厌氧静置培养3 h,取100μl进行耐人工肠液实验,两种处理方式:分为人工肠液处理3h和人工肠液不处理。MRS平板分别接种不同处理方式的菌体,37℃厌氧静置培养48h,计数不同处理方式后菌体生长的菌落个数,还原不同处理方式菌体的活菌数,推算不同处理方式的菌体耐人工肠液能力。通过下列公式计算人工胃液处理3 h的菌体存活率。结果如表5。
耐人工胃液能力=(人工肠液处理3 h后菌体的活菌数/平台期菌体的活菌数)×100%。
表5 两种瑞士乳杆菌耐人工肠液能力(人工肠液3h后菌体存活率%)
通过表5的结果可知,两株瑞士乳杆菌耐人工肠液能力优秀,菌株WIS02的耐人工胃液优于菌株R0052。
9、两种瑞士乳杆菌黏附能力测定
将甘油保存的菌种WIS02(1×1012CFU/mL)和R0052(1×1012CFU/mL)活化一次,菌种转入预装灭菌的MRS液体培养基的离心管中,接种量1%(V/V),在37℃厌氧静置培养16 h,菌体生长进入平台期,DMEM培养基(购自GIBCO)洗涤菌体3次,并调节菌体浓度至5×107 CFU/mL。
Caco-2接种于24孔细胞培养板,1×105/mL,1mL/孔,5%CO2 37℃培养72-96h,镜下观察初期细胞呈现岛状生长,后期岛状生长汇合呈现铺石子路形态,细胞间紧密连接无缝隙,细胞群含有巨大空泡。
弃Caco-2细胞培养液,每孔加入1mL 含菌体(5×107 CFU/mL)的DMEM培养基,无细胞孔加入1mL 含菌体(5×107 CFU/mL)的DMEM培养基作为阴性参照,37℃ 5% CO2 培养箱中孵育2h。
除阴性对照组外,其他孔弃培养液,无菌生理盐水洗涤细胞2次,加入Trypsin-EDTA消化细胞,利用含FBS的完全培养液终止消化并吹到细胞呈均匀个体。
MRS平板接种不同处理方式的菌体,37℃厌氧静置培养48h,计数不同处理方式后菌体生长的菌落个数,还原不同处理方式菌体的活菌数,计算菌株黏附Caco-2细胞的能力。结果如表6。
黏附率(%)=(黏附细胞洗涤后菌落数/未黏附细胞的阴性对照菌落数)×100%
表 6两种瑞士乳杆菌菌株黏附能力
通过表6结果显示:两株瑞士乳杆菌黏附能力优秀,WIS02的粘附性优于对照菌株R0052。
10、两种瑞士乳杆菌自聚合能力测定
将甘油保存的菌种WIS02(1×1012CFU/mL)和R0052(1×1012CFU/mL)活化一次,菌种转入预装灭菌的MRS液体培养基的离心管中,接种量1%(V/V),在37℃厌氧静置培养16 h,菌体生长进入平台期,10mL菌液离心收集沉淀,4℃环境6000g离心10min,无菌生理盐水洗涤菌体两次,10mL生理盐水重悬菌体,测定OD600nm,记为A0,并于菌液静置2h时取上清测定OD600nm,记为At,计算自聚合能力。结果如表7。
自聚合能力(%)=(1-At/A0)*100
表7 两种瑞士乳杆菌菌株自聚合能力测定
通过表7结果显示:两株瑞士乳杆菌均具备一定的自聚合能力,WIS02的自聚合强于对照菌株R0052。
实施例3
1.不同干预方式后实验动物餐后血糖评估
取8周龄昆明雄性小鼠32只,每组8只,随机分为4组:空白、R0052、WIS02、阿卡波糖。瑞士乳杆菌R0052、WIS02菌液浓度分别为2×109CFU/mL,阿卡波糖浓度3mg/mL。
表8实验动物分组及处理方法见下表
小鼠灌胃益生菌或阿卡波糖1周,随后配制水淀粉溶液0.4g/mL,4g/kg(水溶淀粉/小鼠)灌胃,测量餐后2h血糖值,结果参考图3。结果显示:空白组、R0052组、WIS02组和阿卡波糖组小鼠餐后血糖均属于正常值,组间差异无统计学意义,说明正常小鼠服用WIS02瑞士乳杆菌不能引起小鼠低血糖症状。
2.不同干预方式后糖尿病模型动物体重和血糖评估
取8周龄昆明雄性小鼠40只,每组8只,随机分为5组:空白、模型、R0052、WIS02、盐酸二甲双胍。盐酸二甲双胍片,用于单纯饮食控制不满意的Ⅱ型糖尿病病人,尤其是肥胖和伴高胰岛素血症者,用本药不但有降血糖作用,还可能有减轻体重和高胰岛素血症的效果。
表9不同组小鼠建模前(第1天至7天)灌服成分和剂量参照下表
停止灌胃两天,模型、R0052、WIS02、盐酸二甲双胍组一次性腹腔注射链脲佐菌素(Streptozocin,STZ)15mg/mL 150mg/kg建造糖尿病模型,建模标准:注射STZ三天后,模型组空腹血糖浓度>16.7mmol/L。
建模后小鼠饲养(第10天至42天),不同组小鼠灌服成分和剂量参照下表:
表10
不同组小鼠饲养过程:于第14、21、28、35、42天监测体重指标;于第9、14、28、42天监测空腹血糖指标。
实验动物饲养过程中监测小鼠体重变化,结果参照图4,结果显示:不同组小鼠饲养过程出现不同程度的减重、增重现象,饲养结束时各组小鼠体重差异大。
空白组健康小鼠表现出增重现象;盐酸二甲双胍组前期出现减重情况,中后期该组实验动物体重几乎恢复至实验前水平;模型组、R0052组全程持续减重;WIS02组全程体重稳定,未出现剧烈波动和减重情况。糖尿病模型动物控制体重,减少体重波动,利于动物健康,瑞士乳杆菌WIS02在该方面性能表现优于瑞士乳杆菌R0052和盐酸二甲双胍。
实验动物饲养过程中监测小鼠阻止空腹血糖变化,结果参照图5。结果显示:无干预手段的糖尿病模型组小鼠空腹血糖浓度升高并维持高位,空白组、WIS02干预组和R0052干预组、降糖药盐酸二甲双胍干预组小鼠空腹血糖浓度维持相对低位。图6显示小鼠第42天周空腹血糖浓度:模型组与空白组之间有极其显著的统计学差异(P<0.001),模型组与WIS02组之间有显著统计学差异(P<0.01),模型组与R0052组和盐酸二甲双胍组之间具有统计学差异(P<0.05)。WIS02干预组小鼠血糖浓度较其他组,更接近空白组,表明瑞士乳杆菌WIS02干预组小鼠控制血糖浓度升高性能优于瑞士乳杆菌R0052和盐酸二甲双胍。
实施例4
瑞士乳杆菌WIS02进行发酵后离心收集菌体,两次洗涤后加入10%脱脂奶粉作为保护剂,真空冷冻干燥制备成瑞士乳杆菌WIS02冻干菌粉,分装0.5g/袋,总活菌数2×1011CFU/g,保存环境2~8℃。招募常规服用临床药物控制血糖浓度的糖尿病志愿者5名。
干预方法:正常服用临床药物控制血糖的糖尿病患者,每天在原有控制血糖方法的基础上服用瑞士乳杆菌WIS02,每天早晚各一袋,连续服用2周。若患者有服用抗生素情况,服用冻干菌粉需间隔至少2小时。2周后问卷访查结果发现,瑞士乳杆菌WIS02冻干菌粉的糖尿病患者空腹血糖水平下降,说明本发明瑞士乳杆菌WIS02具有阻止糖尿病患者空腹血糖升高的作用。
糖尿病志愿者服用效果:
志愿者1:性别:女,年龄:57岁,服用拜唐平控糖24个月。未服用WIS02菌株空腹血糖8.3mmol/L,服用1周WIS02菌株空腹血糖7.8mmol/L,服用2周WIS02空腹血糖6.7mmol/L。
志愿者2:性别:女,年龄:74岁;服用盐酸二甲双胍控糖60个月。未服用WIS02菌株空腹血糖8.7mmol/L,服用1周WIS02菌株空腹血糖8.1mmol/L,服用2周WIS02空腹血糖7.2mmol/L。
志愿者3:性别:男,年龄:72岁;服用拜唐平、盐酸二甲双胍控糖48个月。未服用WIS02菌株空腹血糖13.2mmol/L,服用1周WIS02菌株空腹血糖9.2mmol/L,服用2周WIS02菌株空腹血糖8.4mmol/L。
志愿者4:性别:女,年龄:67岁;注射胰岛素和服用盐酸二甲双胍控糖168个月。未服用WIS02菌株空腹血糖12.6mmol/L,服用1周WIS02菌株空腹血糖9.4mmol/L,服用2周WIS02菌株空腹血糖8.2mmol/L。
志愿者5:性别:男,年龄:47岁;注射胰岛素24个月。未服用WIS02菌株空腹血糖15.6mmol/L,服用1周WIS02菌株空腹血糖10.4mmol/L,服用2周WIS02菌株空腹血糖8.6mmol/L。
还需要说明的是,本申请中提及的示例性实施例,基于一系列的步骤或者装置描述一些方法或系统。但是,本申请不局限于上述步骤的顺序,也就是说,可以按照实施例中提及的顺序执行步骤,也可以不同于实施例中的顺序,或者若干步骤同时执行。
以上所述,仅为本申请的具体实施方式,但本申请的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本申请揭露的技术范围内,可轻易想到各种等效的修改或替换,这些修改或替换都应涵盖在本申请的保护范围之内。因此,本申请的保护范围应以权利要求的保护范围为准。
Claims (6)
1.一种瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)WIS02,其保藏编号为CGMCCNo.29243。
2.一种菌体或培养物,包含权利要求1所述的瑞士乳杆菌。
3.一种饲料,其特征在于,包括权利要求1所述的瑞士乳杆菌或权利要求2所述菌体或所述培养物中一种或多种。
4. 一种药物,其特征在于,包括:
权利要求1所述的瑞士乳杆菌或权利要求2所述菌体或所述培养物中一种或多种;以及
药学上可接受的载体。
5.根据权利要求3所述的饲料或权利要求4所述的药物,其特征在于,包括1×103~1×1014CFU/mL或1×103~1×1014CFU/g的所述瑞士乳杆菌。
6.一种权利要求1瑞士乳杆菌其菌体或权利要求2所述菌体或所述培养物中一种或多种在制备用于降低糖尿病患者血糖水平的疾病的药物中的应用。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202410194514.9A CN117757702B (zh) | 2024-02-21 | 一株瑞士乳杆菌及其在控制血糖中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202410194514.9A CN117757702B (zh) | 2024-02-21 | 一株瑞士乳杆菌及其在控制血糖中的应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN117757702A CN117757702A (zh) | 2024-03-26 |
CN117757702B true CN117757702B (zh) | 2024-07-16 |
Family
ID=
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN116064286A (zh) * | 2022-08-19 | 2023-05-05 | 浙江大学 | 具有改善非酒精性肝病的瑞士乳杆菌zjuids11及其应用 |
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN116064286A (zh) * | 2022-08-19 | 2023-05-05 | 浙江大学 | 具有改善非酒精性肝病的瑞士乳杆菌zjuids11及其应用 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN110122877B (zh) | 鼠李糖乳杆菌及其用途 | |
CN1888051B (zh) | 一株植物乳杆菌及其应用 | |
US11376289B2 (en) | Composition and uses thereof | |
CN113604384A (zh) | 一种鼠李糖乳杆菌及其应用 | |
CN113088463A (zh) | 一种具有益生特性的嗜酸乳杆菌及其应用 | |
CN116083325B (zh) | 一种改善幽门螺杆菌相关性胃肠疾病的鼠李糖乳杆菌及其应用 | |
CN112094785A (zh) | 一种动物双歧杆菌及其制剂与应用 | |
CN109810913A (zh) | 一株鼠李糖乳杆菌asd-9及其应用 | |
CN111387506A (zh) | 一种嗜酸乳杆菌的用途及含所述嗜酸乳杆菌的组合物 | |
CN117327608A (zh) | 鼠李糖乳杆菌菌株及其用途 | |
CN114752529A (zh) | 植物乳杆菌hom3201菌株及其活菌制剂、制备方法和用途 | |
CN116814501B (zh) | 一种缓解肥胖的长双歧杆菌长亚种及其应用 | |
CN109652334A (zh) | 一种微生物复合菌剂及其制备方法和应用 | |
JP7090288B2 (ja) | 新規乳酸菌、新規乳酸菌を有効成分として含有する自然免疫活性化剤、及び新規乳酸菌を含有する飲食品 | |
CN111743158B (zh) | 一种具有增强免疫功能的益生菌片剂及其制备方法 | |
CN111685255B (zh) | 一种增强免疫功能的益生菌固体饮料及其制备方法 | |
CN116970512A (zh) | 一种植物乳杆菌、植物乳杆菌的培养方法及其应用 | |
CN116445356A (zh) | 一种调节肠道菌群及增强免疫力的动物双歧杆菌乳亚种ba67及其应用 | |
CN117757702B (zh) | 一株瑞士乳杆菌及其在控制血糖中的应用 | |
CN114806953B (zh) | 一种具有改善1型糖尿病特性的格氏乳杆菌 | |
CN115838661A (zh) | 一种植物乳杆菌扁鹊君18、植物乳杆菌制剂及其应用 | |
CN109517765A (zh) | 一种粪链球菌及其应用 | |
CN117757702A (zh) | 瑞士乳杆菌、可食用添加剂、食品、药物、饲料以及该菌的应用和方法 | |
CN116376770B (zh) | 一种鼠李糖乳酪杆菌rh0121在制备降血糖制品中的应用 | |
CN117264850B (zh) | 一种具有辅助治疗阴道炎和增强免疫力功能的戊糖片球菌sw006及其应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant |