CN117731721A - 植物提取物组合物及其应用 - Google Patents

Abstract

本申请涉及生物医药技术领域，特别涉及一种植物提取物组合物及其应用。植物提取物组合物包括水溶性番茄浓缩物以及显齿蛇葡萄提取物。相对于传统技术，本申请实施例的有益效果包括：本申请实施例提供的包括水溶性番茄浓缩物和显齿蛇葡萄提取物的植物提取物组合物，在改善血流和/或抑制血小板聚集、防治脑血栓功能上具有协同作用，水溶性番茄浓缩物和显齿蛇葡萄提取物组合使用，相较于单一提取物使用，效果显著提升，且大大降低了成本，具有非常好的应用前景。

Description

植物提取物组合物及其应用

技术领域

本申请涉及生物医药技术领域，特别涉及一种植物提取物组合物及其应用。

背景技术

脑血栓是常见的缺血性脑血管疾病的一种，病死率和致残率较高。脑血栓的主要危害是使血管闭塞、血流中断，从而使血管供血区的脑组织缺血、缺氧、软化、坏死，进而导致神经功能损伤，具体表现为偏瘫、肢体发麻、运动不灵、言语不清、眩晕、视物模糊等，严重者可出现昏迷、大小便失禁甚至死亡。近年来，饮食结构改变加上生活节奏加快，脑血栓呈现为越来越高的发病率，且发病人群趋于年轻化，给广大人群的健康带来了极大的威胁。

目前，针对脑血栓及其导致的神经功损伤主要以预防为主，包括一级预防（对未发生脑血栓疾病的危险人群而言）和二级预防（对脑血栓患者而言），预防措施无论对脑血栓患者或脑血栓高发危险人群都十分必要。

近年来的研究认为，血小板异常活化和聚集在脑血栓形成中扮演着重要的角色，抗血小板治疗被推荐用于降低脑血栓的风险。目前临床常用的抗血小板药物有以阿司匹林为代表的花生四烯酸环氧酶抑制剂、嘌呤受体拮抗剂氯吡格雷和血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂阿昔单抗等。尽管阿司匹林在脑血栓防治中的重要作用不断被揭示，但由于“阿司匹林抵抗”及出血的不良反应，使其应用受到了一定的限制，其它抗血小板药物也大多因为存在出血的风险而使临床应用受限。基于目前的临床现状，提供新的脑血栓防治方案尤显重要。

普罗维斯天然产物有限公司开发了一种水溶性番茄浓缩物，被称为“天然阿司匹林”，具有非常强的抑制血小板聚集的功能，且没有胃肠道出血等不良反应，预期在脑血栓防治中具有非常好的应用前景。由于水溶性番茄浓缩物为普罗维斯天然产物有限公司的专利原料，且提取纯化的得率低，导致其价格昂贵，极大地限制其在制备防治脑血栓产品中的应用。

发明内容

基于此，本申请的一个实施例提供了一种植物提取物组合物，其能够有效改善血流、抑制血小板聚集、防治脑血栓。

本申请的一个实施例提供一种植物提取物组合物，所述植物提取物组合物包括水溶性番茄浓缩物以及显齿蛇葡萄提取物。

在本申请的一些实施方式中，所述水溶性番茄浓缩物以及显齿蛇葡萄提取物的重量比为1：1-10。

在本申请的一些实施方式中，所述水溶性番茄浓缩物以及显齿蛇葡萄提取物的重量比为1：4。

本申请的又一个实施例提供一种所述的植物提取物组合物在制备防治脑血栓的药物中的应用。

本申请的再一个实施例提供一种防治脑血栓的药物，所述药物包括如上所述的植物提取物组合物以及药学上可接受的辅料。

在本申请的一些实施方式中，所述药物的剂型为片剂、胶囊或者粉剂。

在本申请的一些实施方式中，所述药学上可接受的辅料包括填充剂、崩解剂、粘合剂和润滑剂中的一种或者多种。

在本申请的一些实施方式中，所述填充剂包括无水糖粉、乳糖、蔗糖、淀粉、微晶纤维素和麦芽糊精中的一种或多种。

在本申请的一些实施方式中，所述崩解剂包括羧甲基淀粉钠、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、甲基纤维素、十二烷基硫酸钠和聚乙烯吡咯烷酮中的一种或者多种。

在本申请的一些实施方式中，所述粘合剂包括淀粉浆、羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素和羟丙基甲基纤维素中的一种或者多种。

在本申请的一些实施方式中，所述润滑剂包括硬脂酸镁、滑石粉、聚乙二醇类和月挂醇硫酸镁中的一种或者多种。

本申请的再一个实施例提供一种所述的植物提取物组合物在制备改善血流和/或抑制血小板聚集的保健食品中的应用。

本申请的再一个实施例提供一种改善血流和/或抑制血小板聚集的保健食品，所述保健食品包括所述的植物提取物组合物以及食品中可接受的辅料。

在本申请的一些实施方式中，所述保健食品包括片剂、胶囊或粉剂。

在本申请的一些实施方式中，所述保健食品中可接受的辅料包括填充剂、赋形剂、崩解剂、润滑剂和粘合剂中的一种或者多种。

在本申请的一些实施方式中，所述填充剂包括无水乳糖微晶纤维素和麦芽糊精中的一种或多种。

在本申请的一些实施方式中，所述赋形剂包括麦芽糊精。

在本申请的一些实施方式中，所述崩解剂包括交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠和交联聚维酮中的一种或者多种。

在本申请的一些实施方式中，所述润滑剂包括硬脂酸镁和二氧化硅中的一种或者多种。

在本申请的一些实施方式中，所述粘合剂包括淀粉浆、羧甲基纤维素钠和羟丙基纤维素中的一种或者多种。

相对于传统技术，本申请实施例的有益效果包括：

本申请实施例提供的包括水溶性番茄浓缩物和显齿蛇葡萄提取物的植物提取物组合物，在改善血流、抑制血小板聚集、防治脑血栓功能上具有协同作用，水溶性番茄浓缩物和显齿蛇葡萄提取物组合使用，相较于单一提取物的使用，效果显著提升，且大大降低了成本，具有非常好的应用前景。

附图说明

为了更清楚地说明本申请实施例中的技术方案、更完整地理解本申请及其有益效果，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单的介绍。显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本申请的一些实施例，对本领域技术人员来说，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为正常对照对、模型对照组、阿司匹林组斑马鱼脑血栓染色效果图；

图2为样品1不同给药剂量组斑马鱼脑血栓染色效果图；

图3为样品2不同给药剂量组斑马鱼脑血栓染色效果图；

图4为样品3、4、5给药组斑马鱼脑血栓染色效果图。

具体实施方式

下面结合附图、实施方式和实施例，对本申请作进一步详细的说明。应理解，这些实施方式和实施例仅用于说明本申请而不用于限制本申请的范围，提供这些实施方式和实施例的目的是使对本申请公开内容理解更加透彻全面。还应理解，本申请可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施方式和实施例，本领域技术人员可以在不违背本申请内涵的情况下作各种改动或修改，得到的等价形式同样落于本申请的保护范围。此外，在下文的描述中，给出了大量具体的细节以便提供对本申请更为充分地理解，应理解，本申请可以无需一个或多个这些细节而得以实施。

除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本申请的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本申请的说明书中所使用的术语只是为了描述实施方式和实施例的目的，不是旨在于限制本申请。

术语

除非另外说明或存在矛盾之处，本文中使用的术语或短语具有以下含义：

本文所使用的术语“和/或”、“或/和”、“及/或”的选择范围包括两个或两个以上相关所列项目中任一个项目，也包括相关所列项目的任意的和所有的组合，所述任意的和所有的组合包括任意的两个相关所列项目、任意的更多个相关所列项目、或者全部相关所列项目的组合。需要说明的是，当用至少两个选自“和/或”、“或/和”、“及/或”的连词组合连接至少三个项目时，应当理解，在本申请中，该技术方案毫无疑问地包括均用“逻辑与”连接的技术方案，还毫无疑问地包括均用“逻辑或”连接的技术方案。比如，“A及/或B”包括A、B和A+B三种并列方案。又比如，“A，及/或，B，及/或，C，及/或，D”的技术方案，包括A、B、C、D中任一项（也即均用“逻辑或”连接的技术方案），也包括A、B、C、D的任意的和所有的组合，也即包括A、B、C、D中任两项或任三项的组合，还包括A、B、C、D的四项组合（也即均用“逻辑与”连接的技术方案）。

本申请中涉及“多个”、“多种”、“多次”、“多元”等，如无特别限定，指在数量上大于2或等于2。例如，“一种或多种”表示一种或大于等于两种。

本文中所使用的“其组合”、“其任意组合”、“其任意组合方式”等中包括所列项目中任两个或任两个以上项目的所有合适的组合方式。

本文中，“合适的组合方式”、“合适的方式”、“任意合适的方式”等中所述“合适”，以能够实施本申请的技术方案、解决本申请的技术问题、实现本申请预期的技术效果为准。

本申请中，“进一步”、“更进一步”、“特别”等用于描述目的，表示内容上的差异，但并不应理解为对本申请保护范围的限制。

本申请中，“可选地”、“可选的”、“可选”，指可有可无，也即指选自“有”或“无”两种并列方案中的任一种。如果一个技术方案中出现多处“可选”，如无特别说明，且无矛盾之处或相互制约关系，则每项“可选”各自独立。

本申请中，“第一方面”、“第二方面”、“第三方面”、“第四方面”等中，术语“第一”、“第二”、“第三”、“第四”等仅用于描述目的，不能理解为指示或暗示相对重要性或数量，也不能理解为隐含指明所指示的技术特征的重要性或数量。而且“第一”、“第二”、“第三”、“第四”等仅起到非穷举式的列举描述目的，应当理解并不构成对数量的封闭式限定。

本申请中，以开放式描述的技术特征中，包括所列举特征组成的封闭式技术方案，也包括包含所列举特征的开放式技术方案。

本申请中，涉及到数值区间（也即数值范围），如无特别说明，可选的数值分布在上述数值区间内视为连续，且包括该数值范围的两个数值端点（即最小值及最大值），以及这两个数值端点之间的每一个数值。如无特别说明，当数值区间仅仅指向该数值区间内的整数时，包括该数值范围的两个端点整数，以及两个端点之间的每一个整数，在本文中，相当于直接列举了每一个整数，比如t为选自1~10的整数，表示t为选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10构成的整数组的任一个整数。此外，当提供多个范围描述特征或特性时，可以合并这些范围。换言之，除非另有指明，否则本文中所公开之范围应理解为包括其中所归入的任何及所有的子范围。

本申请中的温度参数，如无特别限定，既允许为恒温处理，也允许在一定温度区间内存在变动。应当理解的是，所述的恒温处理允许温度在仪器控制的精度范围内进行波动。允许在如±5℃、±4℃、±3℃、±2℃、±1℃的范围内波动。

本申请中，%(w/w)与wt%均表示重量百分比，%(v/v)指体积百分比，%(w/v)指质量体积百分数。

在本申请提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。除非和本申请的申请目的和/或技术方案相冲突，否则，本申请涉及的引用文献以全部内容、全部目的被引用。本申请中涉及引用文献时，相关技术特征、术语、名词、短语等在引用文献中的定义也一并被引用。本申请中涉及引用文献时，被引用的相关技术特征的举例、优选方式也可作为参考纳入本申请中，但以能够实施本申请为限。应当理解，当引用内容与本申请中的描述相冲突时，以本申请为准或者适应性地根据本申请的描述进行修正。

在本申请中，“组合物”可以为多种物质的组合，进一步地，可以为组合使用，也可以为组合而成的混合物。

在本申请中，“防治”与“预防和/或治疗”具有相同含义，可以互换使用。在本申请中，“防治”包括预防、治疗、辅助治疗等方面。如本文所用，“防治”是指减轻、延缓进展、衰减、预防，或维持现有疾病或病症。“防治”还包括将疾病或病症的一个或多个症状治愈、预防其发展或减轻到某种程度。

在本申请中，“药物”包括在体内或体外提供药理作用的任何药剂、化合物、组合物或混合物，且往往提供的是有益效果。“药物”在体内产生药理作用的范围没有特别限制，可以为全身效果，也可以只在局部产生效果。所述“药物”的活性没有特别限制，可以为能与其它物质发生相互作用的活性物质，也可以为不发生相互作用的惰性物质。

在本申请中，“药学上可接受的”指在合理医学判断范围内适于施用患者且与合理益处/风险比相称的那些配体、材料、组合物和/或剂型。

应当理解，“药物”中含有治疗有效量的本申请所述植物提物组合物。在本申请中，“治疗有效量”是指针对疾病、病症和/或症状，将引起个体的生物学或医学响应的药物活性成分的量，例如为个体带来药理上积极效果的本申请的植物提物组合物的量，所述药理上积极效果包括但不限于降低或抑制酶或蛋白质活性或改善症状、缓解病症、减缓或延迟疾病进程或预防疾病等。

本申请实施例的第一方面

本申请实施例提供一种植物提取物组合物，所述植物提取物组合物包括水溶性番茄浓缩物以及显齿蛇葡萄提取物。

本申请将水溶性番茄浓缩物与显齿蛇葡萄提取物复配，在降低水溶性番茄浓缩物用量的情况下获得良好脑血栓防治效果，降低成本。

在其中一些示例中，所述水溶性番茄浓缩物以及显齿蛇葡萄提取物的重量比为1：1-10（例如为1：1、1：2、1：3、1：4、1：5、1：6、1：7、1：8、1：9、1：10）。

在其中一些示例中，所述水溶性番茄浓缩物以及显齿蛇葡萄提取物的重量比为1：4。

本申请实施例的第二方面

本申请实施例提供一种所述的植物提取物组合物在制备防治脑血栓的药物中的应用。

本申请实施例的第三方面

本申请实施例提供一种防治脑血栓的药物，所述药物包括如上所述的植物提取物组合物以及药学上可接受的辅料。

本申请实施例对药物的剂型不做特别限定，可以根据临床需求选择合适的药学上可接受的辅料制备成相应的剂型，包括但不限于片剂、胶囊或者粉剂。药学上可接受的辅料包括但不限于填充剂、崩解剂、粘合剂和润滑剂。所述填充剂包括但不限于无水糖粉、乳糖、蔗糖、淀粉、微晶纤维素和麦芽糊精。所述崩解剂包括但不限于羧甲基淀粉钠、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、甲基纤维素、十二烷基硫酸钠和聚乙烯吡咯烷酮。所述粘合剂包括但不限于淀粉浆、羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素和羟丙基甲基纤维素。所述润滑剂包括但不限于硬脂酸镁、滑石粉、聚乙二醇类和月挂醇硫酸镁中。

本申请实施例的第四方面

本申请实施例提供了一种所述的植物提取物组合物在制备改善血流和/或抑制血小板聚集的保健食品中的应用。

在本申请中，“保健食品”指具有保健功能的食品，其能够调节动物体（人或其它动物）生理机能，且往往提供的是有益效果。“保健食品”在体内产生有益作用的范围没有特别限制，可以为全身效果，也可以只在局部产生效果。在本申请中，“食品”指可直接食用的制品。应当理解，本申请中的食品可以包含前述的植物提取物组合物外，还允许包含任意合适的其他可食用物质。在一些实施例中，其他可食用物质可选自食品管理规范中允许添加的物质，进一步地，不包含食品管理规范中禁止添加的物质。如无特别限定，食品管理规范指生产时的现行规范。

在本申请中，“抑制血小板聚集”的保健食品中的“抑制血小板聚集”是指抑制受试者血小板的聚集率异常升高，所述血小板聚集率异常升高会导致血栓的发生，进一步诱发脑梗死、心肌梗死、心绞痛等疾病的发生。

在本申请中，“改善血流的保健食品”中的“改善血流”是指有益性改善血流，也即“改善血流”为健康带来有益性效果。在某些具体实施中，所述“改善血流”是指提高血流速度异常过缓受试者的血流速度。

本申请实施例的第五方面

本申请实施例提供了一种改善血流和/或抑制血小板聚集的保健食品，所述保健食品包括所述的植物提取物组合物以及食品中可接受的辅料。

在本申请中，“食品中可接受的辅料”指可食用原料、可食用辅料或者两者的组合。其中，“可食用原料”指能够单独提供保健功能的可食用物质，但不是植物提取物组合物；“可食用辅料”指不具有单独提供保健功能的可食用物质。应当理解，“食品中可接受的辅料”可以选自保健食品管理规范中允许添加的物质，进一步地，不包含保健食品管理规范中禁止添加的物质。如无特别限定，保健食品管理规范指生产时的现行规范。

应当理解，保健食品中含有保健有效量的本申请的所述植物提取物组合物。此处的“保健有效量”指能够有益性改善血流和/或抑制血小板聚集的量，在正常的保健食品的食用剂量时能够发挥有益性改善血流和/或抑制血小板聚集的作用。

本申请实施例对保健食品的剂型不做特别限定，可以根据保健需求选择合适的食品上可接受的辅料制备成相应的剂型，包括但不限于片剂、胶囊或粉剂。

例如保健食品为片剂，所述保健食品中可接受的辅料包括但不限于填充剂、赋形剂、崩解剂、润滑剂和粘合剂。所述填充剂包括但不限于无水乳糖微晶纤维素和麦芽糊精。所述赋形剂包括但不限于麦芽糊精。所述崩解剂包括但不限于交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠和交联聚维酮。所述润滑剂包括但不限于硬脂酸镁和二氧化硅。所述粘合剂包括但不限于淀粉浆、羧甲基纤维素钠和羟丙基纤维素。

本申请中，“受试者”指服用药物的患者或食用保健食品的食用者。

本申请中，“受试者”是动物，优选为哺乳动物，更优选地为人，受试者包括但不限于保健食品的食用者和具有疾病、病症和/或症状的患者。本发明中的受试者优选为哺乳动物。术语“哺乳动物”主要是指温血脊椎类哺乳动物，包括但不限于：如猫、狗、兔、熊、狐狸、狼、猴子、鹿、鼠（如大鼠、小鼠）、猪、牛、羊、马、人等，优选灵长类动物，更优选为人。本申请中，“患者”是指一种动物，优选为哺乳动物，如人，又如大鼠或小鼠。受试者的不同可能会导致前述药物或保健食品中的其他成分的选择范围不同。

本申请实施例的第六方面

本申请实施例提供一种防治脑血栓的方法，包括给予受试者治疗有效量的本申请所述植物提物组合物或者所述药物。

本申请实施例的第七方面

本申请实施例提供一种有益性改善血流和/或抑制血小板聚集的方法，包括给予受试者保健有效量的本申请所述植物提物组合物，或者给予受试者保健有效量的含有本申请所述保健食品。

下面将结合实施例对本申请的实施方案进行详细描述。应理解，这些实施例仅用于说明本申请而不用于限制本申请的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，优先参考本申请中给出的指引，还可以按照本领域的实验手册或常规条件，还可以按照制造厂商所建议的条件，或者参考本领域已知的实验方法。

下述的具体实施例中，涉及原料组分的量度参数，如无特别说明，可能存在称量精度范围内的细微偏差。涉及温度和时间参数，允许仪器测试精度或操作精度导致的可接受的偏差。

实施例1：组合物制备

水溶性番茄浓缩物的制备方法参见普罗维斯天然产物有限公司在先专利“200980148421.6”。水溶性番茄浓缩物是使用物理方法除去番茄中的脂溶性成分，并将水溶性成分浓缩而得到的。

显齿蛇葡萄也提取物采购自广州清平中药材市场，所述显齿蛇葡萄提取物的制备方法包括：提供显齿蛇葡萄茎和/或叶的干品，将所述干品粉碎后用水和/或乙醇（优选纯水作为提取物溶剂，显齿蛇葡萄干品质量与水质量之比为1：10-60，优选 1:40）作为溶剂提取，提取温度30提取时间15min-3h（优选2h），提取1-3次（优选2次）。收集提取液后离心(优选纯水作为提取物溶剂，显齿蛇葡萄干品质量与水质量之比为1：10-60，优选1:40)、过滤取上清液浓缩至1/3-1/10 体积的浓缩液、浓缩液再经60-80℃喷雾干燥，以获得显齿蛇葡萄提取物。

实施例2：功效的验证

1. 检测材料

1.1. 样品配制信息

样品1、样品2和样品3，均用超纯水配制成20.0mg/mL母液，-20℃储存。样品1是水溶性番茄浓缩物，样品2是显齿蛇葡萄提取物，样品3是水溶性番茄浓缩物+显齿蛇葡萄提取物（1:1比例，w/w），样品4是水溶性番茄浓缩物+显齿蛇葡萄提取物（比例1:10）、样品5是水溶性番茄浓缩物+显齿蛇葡萄提取物（比例1:4）。阳性对照：阿司匹林肠溶片（以下简称阿司匹林），白色片剂，批号BJ54728，拜耳医药保健有限公司，阴凉储存。用DMSO配制成45.0mg/mL母液，-20℃储存。

1.2. 实验动物

斑马鱼均饲养于28℃的养鱼用水中（水质：每1L反渗透水中加入200mg速溶海盐，电导率为450~550μS/cm；pH为6.5~8.5；硬度为50~100mg/L CaCO₃），由环特养鱼中心繁殖提供，实验动物使用许可证号为：SYXK（浙）2022-0004，饲养管理符合国际AAALAC认证（认证编号：001458）的要求。

黑色素等位基因突变斑马鱼（albino），以自然成对交配繁殖方式进行。年龄为受精后2天（2dpf）的斑马鱼用于样品防治脑血栓功效最大检测浓度（MTC）测定及其功效评价。

1.3. 仪器、耗材与试剂

解剖显微镜（SZX7，OLYMPUS，Japan）；CCD相机（VertA1，上海土森视觉科技有限公司，China）；生物显微镜（CX31，OLYMPUS，Japan）；斑马鱼心跳血液分析系统（PB2084C，Viewpoint，USA）；精密电子天平（CP214，OHAUS，USA）；6孔板（浙江贝兰伯生物科技有限公司，China）。

普纳替尼（批号13771，MedChemExpress，USA）；邻联茴香胺（批号MKBX3619V，Sigma，USA）；二甲基亚砜（DMSO，批号BCCD8942，Sigma，Switzerland）；甲基纤维素（批号C2004046，上海阿拉丁生化科技股份有限公司，China）。

2. 检测方法

2.1 防治脑血栓功效（发生率）评价

随机选取2dpf黑色素等位基因突变斑马鱼（albino）于6孔板中，每孔（实验组）均处理30尾斑马鱼。分别水溶给予样品（浓度见表1），阳性对照组阿司匹林100µg/mL浓度，同时设置正常对照组和模型对照组，每孔容量为3 mL。除正常对照组外，其余各实验组均水溶给予普纳替尼建立斑马鱼脑血栓模型。

28℃处理1天后，用邻联茴香胺进行染色，染色结束后，每个实验组置于解剖显微镜下观察，统计斑马鱼脑血栓发生数，计算每个实验组的脑血栓发生率（%），以该指标的统计学分析结果评价样品防治脑血栓功效（发生率）。用SPSS26.0软件进行统计学分析，p<0.05表明差异具有统计学意义。

表1、样品防治脑血栓功效（发生率）评价实验结果（n=30）

与模型对照组比较，*P＜0.05，***p < 0.001。

脑血栓抑制率（%）=（模型对照组脑血栓数－给药组脑血栓数数）/模型组脑血栓数×100%。

在本实验条件下，样品1、样品2高剂量具有防治脑血栓功效，其中样品1、样品2降低剂量、不同比例复配后，样品3、4、5三个剂量组均具有防治脑血栓功效具体表现为降低脑血栓发生率。详见表1、图1、图2、图3、图4。由于斑马鱼大脑具有典型脊椎动物脑部形态学特征，而且拥有凝血因子、血小板受体，在摄入大量普纳替尼后也会诱发脑血栓。经过红细胞特异性染色（呈红色），患有脑缺血的斑马鱼的头部血栓会明显比正常斑马鱼增多。如图所示正常对照组未加入普纳替尼，模型对照组与样品组都摄入了等量的普纳替尼（普纳替尼通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内），服用样品一段时间后，本实施例对斑马鱼整体做红细胞特异性染色，观察头部的血栓情况，其中模型组血栓增多，阿司匹林组血栓减少，样品1 剂量组随着剂量的增加，血栓减少，样品2剂量组血栓较多，高剂量组血栓明显减少，样品3、4、5的血栓明显减少。

进一步根据金正均Q值法计算组合物中各成分之间的相互作用，公式如下：

Q=E[a+b]/[Ea+(1-Ea)×Eb]；式中：

E[a+b]为组方a和组方b联用用药时候的抑制率；Ea、Eb分别组方a和组方b单独用药时候的抑制率。当q＜0.85时候，表示两组方具有拮抗作用；当q＞1.15时候，表示两组方具有协同作用。

由表1的实验结果看出，25μg/mL水溶性番茄浓缩物对脑血栓的抑制率为55.56%，100μg/mL显齿蛇葡萄提取物对脑血栓的抑制率为3.70%，而25μg/mL水溶性番茄浓缩物与100μg/mL显齿蛇葡萄提取物联用对脑血栓的抑制率为100%，由此可见，两者联用是q值为1.75，远大于1.15，所以水溶性番茄浓缩物与显齿蛇葡萄提取物联用在抑制脑血栓上表现出明显的协同作用。

2.2 防治脑血栓功效（血流）评价

随机选取2dpf黑色素等位基因突变斑马鱼（albino）于6孔板中，每孔（实验组）均处理30尾斑马鱼。分别水溶给予样品（浓度见表2），阳性对照组阿司匹林100µg/mL浓度，同时设置正常对照组和模型对照组，每孔容量为3mL。除正常对照组外，其余各实验组均水溶给予普纳替尼建立斑马鱼脑血栓模型。28℃处理1天后，每个实验组随机选取10尾斑马鱼置于心跳血液分析系统下录制斑马鱼血流视频，分析斑马鱼血流速度，以该指标的统计学分析结果评价样品防治脑血栓功效（血流）。统计学处理结果采用mean ± SE表示。用SPSS26.0软件进行统计学分析，p<0.05表明差异具有统计学意义。

表2、样品防治脑血栓功效（血流）评价实验结果（n=10）

与模型对照组比较，*p<0.05，**p<0.01。

血流促进率的计算，血流促进率=给药组血流速度-模型组血流速度/模型组血流速度×100%。

试验结果表明，模型组给与普纳替尼造模后血流速度明显减少，与正常组比较有统计学差异，说明造模成功，样品1组25、100、125μg/mL样品2组2000μg/mL组，样品3、4、5给药后血流速度均明显增多。

2.3.血小板聚集率评价

SD大鼠3%戊巴比妥钠（60mg/kg）麻醉，腹主动脉取血，以3.8%枸橼酸钠（1:9）抗凝，离心200g，10min，制备富血小板血浆PRP。剩余部分离心2000g，10min，制备贫血小板血浆PPP。根据实验需要用PPP调节PRP的血小板数量。计数方法：于清洁试管中加入稀释液1.98mL(1%草酸铵溶液)，准确吸取PRP 20μL，置于血小板稀释液内，立即充分混匀。取上述均匀的血小板悬液10μL，注入计数池内，静置10min，使血小板下沉。显微镜下计数。

血小板聚集率测定：先连接电脑，打开软件，再打开仪器，预热30min，注意软件显示温度表示电脑与仪器连接。在温育小室内加入洁净的测试杯，并加入搅拌子，在测试杯中以9:1加入总量为300μL的PRP与供试品/生理盐水，调零PPP中分别加入等量的不同浓度的供试品/生理盐水。PRP与供试品分别温育4min。测量开始，将装有相应PPP测试杯插入比色槽，用PPP的透光率来调节零点，系统自动将聚集前的透光率调整为100％，按照仪器提示按下相应通道键，取出PPP后再插入含有不同浓度供试品的PRP测试杯，系统记录下此时的透光率，待数字稳定后按下相应通道键，随即加入相应量的诱导剂（胶原），立即按下相应通道键，仪器开始测定血小板在5min（胶原诱导时为6min）内的聚集效应。相同的实验条件下重复至少2次实验，统计分析数据，考察实验结果稳定性。测定血小板最大聚集率，并按照如下公式计算供试品对血小板聚集的抑制率。

血小板聚集抑制率=（对照组最大聚集率-供试品组最大聚集率）/对照组最大聚集率×100%。

表3、样品体外抑制胶原诱导的血小板聚集的效应（Mean±SD)

*：注：与空白对照组相比，*P＜0.05；**，P＜0.01

试验结果表明：阿司匹林组，样品1低、中、高剂量组，样品2中、高剂量组，样品3剂量组对血小板聚集有显著性抑制作用

在本实施例实验条件下，样品1具有改善血流速度、防治脑血栓、抑制血小板聚集的功效；样品2在高剂量下表现出改善血流速度、防治脑血栓、抑制血小板聚集的功效。使用低剂量样品1和样品2复配制得样品3、4、5表现出很强的改善血流速度、防治脑血栓、抑制血小板聚集的功效，且两者之间表现出很强的协同作用，详见表2。

本实施例试验显示，样品1、样品2高剂量、样品3、4、5具有改善血流速度、防治脑血栓功效、抑制血小板聚集的作用，其中，水溶性番茄浓缩物和显齿蛇提取物复配能降低两者的剂量，具有减量增效的作用。

以上所述实施方式和实施例的各技术特征可以进行任意合适方式的组合，为使描述简洁，未对上述实施方式和实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为在本说明书记载的范围中。

以上所述实施例仅表达了本申请的几种实施方式，便于具体和详细地理解本申请的技术方案，但并不能因此而理解为对申请专利保护范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本申请构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本申请的保护范围。此外应理解，在阅读了本申请的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本申请作各种改动或修改，得到的等价形式同样落于本申请的保护范围。还应当理解，本领域技术人员在本申请提供的技术方案的基础上，通过合乎逻辑的分析、推理或者有限的试验得到的技术方案，均在本申请所附权利要求的保护范围内。因此，本申请专利的保护范围应以所附权利要求的内容为准，说明书及附图可以用于解释权利要求的内容。

Claims (10)

1.一种植物提取物组合物，其特征在于，所述植物提取物组合物包括水溶性番茄浓缩物以及显齿蛇葡萄提取物。

2.根据权利要求1所述的植物提取物组合物，其特征在于，所述水溶性番茄浓缩物以及显齿蛇葡萄提取物的重量比为1：1~10；可选地，所述重量比为1：4。

3.权利要求1至2中任一项所述的植物提取物组合物在制备防治脑血栓的药物中的应用。

4.一种防治脑血栓的药物，其特征在于，所述药物包括权利要求1至2中任一项所述的植物提取物组合物以及药学上可接受的辅料。

5.根据权利要求4所述的防治脑血栓的药物，其特征在于，所述药物的剂型为片剂、胶囊或者粉剂。

6.根据权利要求4或者5所述的防治脑血栓的药物，其特征在于，所述药学上可接受的辅料包括填充剂、崩解剂、粘合剂和润滑剂中的一种或者多种；

可选地，所述填充剂包括无水糖粉、乳糖、蔗糖、淀粉、微晶纤维素和麦芽糊精中的一种或多种；

可选地，所述崩解剂包括羧甲基淀粉钠、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、甲基纤维素、十二烷基硫酸钠和聚乙烯吡咯烷酮中的一种或者多种；

可选地，所述粘合剂包括淀粉浆、羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素和羟丙基甲基纤维素中的一种或者多种；

可选地，所述润滑剂包括硬脂酸镁、滑石粉、聚乙二醇类和月挂醇硫酸镁中的一种或者多种。

7.权利要求1至2中任一项所述的植物提取物组合物在制备改善血流和/或抑制血小板聚集的保健食品中的应用。

8.一种改善血流和/或抑制血小板聚集的保健食品，其特征在于，所述保健食品包括权利要求1至2中任一项所述的植物提取物组合物以及食品中可接受的辅料。

9.根据权利要求8所述的改善血流和/或抑制血小板聚集的保健食品，其特征在于，所述保健食品包括片剂、胶囊或粉剂。

10.根据权利要求8或者9所述的改善血流和/或抑制血小板聚集的保健食品，其特征在于，所述保健食品中可接受的辅料包括填充剂、赋形剂、崩解剂、润滑剂和粘合剂中的一种或者多种；

可选地，所述填充剂包括无水乳糖微晶纤维素和麦芽糊精中的一种或多种；所述赋形剂包括麦芽糊精；

可选地，所述崩解剂包括交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠和交联聚维酮中的一种或者多种；

可选地，所述润滑剂包括硬脂酸镁和二氧化硅中的一种或者多种；

可选地，所述粘合剂包括淀粉浆、羧甲基纤维素钠和羟丙基纤维素中的一种或者多种。