CN117716018A - 乳球菌属菌株 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及乳酸乳球菌或乳脂乳球菌的细菌菌株,其可用作起子培养物,能够为它们所掺入的基于植物的介质提供令人满意的流变学和感官特性以及令人满意的保质期两者。本发明还提供了包含这些乳酸乳球菌或乳脂乳球菌的菌株中的一种的组合物,以及用这些菌株获得的饲料产品或食物产品,特别地基于植物的饲料产品或食物产品。
Description
技术领域
本发明涉及乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)的细菌菌株,如亚种乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactis subsp.lactis)或乳酸乳球菌霍氏亚种(Lactococcuslactis subsp.hordniae)的细菌菌株,或物种乳脂乳球菌(Lactococcus cremoris)的细菌菌株,如亚种乳脂乳球菌鳟鱼亚种(Lactococcus cremoris subsp.tructuae)或乳脂乳球菌乳脂亚种(Lactococcus cremoris subsp.cremoris)的细菌菌株.其可用作起子培养物(starter culture),能够为它们所掺入的基于植物的介质提供令人满意的流变学和感官特性以及令人满意的保质期两者。本发明还提供了包含这些乳酸乳球菌,如亚种乳酸乳球菌乳酸亚种或乳酸乳球菌霍氏亚种,或物种乳脂乳球菌,如亚种乳脂乳球菌鳟鱼亚种或乳脂乳球菌乳脂亚种的菌株中的一种的组合物,以及用这些菌株获得的饲料产品或食物产品,特别地基于植物的饲料产品或食物产品。
背景技术
食品行业使用细菌来改进食物产品或饲料产品的口味和质地。在乳制品行业的情况下,常使用乳酸菌(LAB)来例如引起奶的酸化(通过发酵),并且改变乳酸菌所掺入的产品的质地。食品行业中常使用的乳酸菌的实例包括链球菌属(Streptococcus)、乳球菌属(Lactococcus)、乳杆菌属(Lactobacillus)、明串珠菌属(Leuconostoc)、片球菌属(Pediococcus)和双歧杆菌属(Bifidobacterium)。
乳酸菌特别地用于配制起子培养物,这些起子培养物用于生产发酵奶(例如酸奶)以及用于制造酸奶和奶酪(如埃曼塔(Emmental)奶酪、高达(Gouda)奶酪、切达(Cheddar)奶酪和意大利奶酪)。
本领域需要能够从基于植物的替代物制备这些乳制产品,所谓的基于植物的乳制品替代产品,并且因此需要新的且改良的细菌菌株,特别地物种乳酸乳球菌或乳脂乳球菌的菌株,这些细菌菌株可用于基于植物的底物的发酵,这些底物具有与用已知细菌菌株获得的食物产品相同的流变学或感官特性,如质地和风味,并且具有令人满意的食物产品或饲料产品的保质期。
附图说明
图1.大豆奶在40℃的酸化曲线。在大豆酸奶制备期间添加乳酸乳球菌DGCC1526对VEGE 3lS的酸化动力学的影响
图2.燕麦中在40℃的酸化曲线。在燕麦酸奶制备期间添加乳酸乳球菌DGCC1526对VEGE 31S的酸化动力学的影响
图3.接种了Danisco起子培养物或Danisco起子培养物和DSM33924菌株的大豆奶中的酸化曲线,温度37℃。
发明内容
本发明实施例的目的是提供适用于制备经发酵的基于植物的乳制品替代物的细菌菌株。
在宽泛的方面,本发明涉及乳酸乳球菌的细菌菌株,如亚种乳酸乳球菌乳酸亚种或乳酸乳球菌霍氏亚种的细菌菌株,或物种乳脂乳球菌的细菌菌株,如亚种乳脂乳球菌鳟鱼亚种或乳脂乳球菌乳脂亚种的细菌菌株,这些细菌菌株具有以必要的速度使基于植物的底物酸化并在基于植物的制剂中以显著的生长速率生长的能力。
在另一个宽泛的方面,本发明涉及乳酸乳球菌的细菌菌株,如亚种乳酸乳球菌乳酸亚种或乳酸乳球菌霍氏亚种的细菌菌株,或物种乳脂乳球菌的细菌菌株,如亚种乳脂乳球菌鳟鱼亚种或乳脂乳球菌乳脂亚种的细菌菌株用于酸化基于植物的底物的用途。
因此,在第一方面,本发明涉及细菌菌株,该细菌菌株选自乳酸乳球菌,如亚种乳酸乳球菌乳酸亚种或乳酸乳球菌霍氏亚种,或物种乳脂乳球菌,如亚种乳脂乳球菌鳟鱼亚种或乳脂乳球菌乳脂亚种的物种,其中所述细菌菌株在源自第一植物、含有1%-4%的来自所述植物的蛋白质和2%葡萄糖的水性制剂中的酸化动力学的特征在于:
-如测定I中所述测量的,达到pH 6.00的平均时间小于约510min,如小于500min,如小于490min,如小于480min、470min、460min、450min、440min、430min、420min、410min、400min、390min或380min,以及
-如测定I中所述测量的,达到pH 5.5的平均时间小于约660min,如小于640min、620min、600min、580min、560min、540min、520min或500rnin。
在第二方面,本发明涉及组合物,如起子培养物的组合物,其包含以下或由以下组成:乳酸乳球菌,如亚种乳酸乳球菌乳酸亚种或乳酸乳球菌霍氏亚种,或物种乳脂乳球菌,如亚种乳脂乳球菌鳟鱼亚种或乳脂乳球菌乳脂亚种的一种或多种培养物,并且任选地进一步包含至少一种其他微生物,如至少一种其他乳酸菌和/或至少一种丙酸细菌。
在第三方面,本发明涉及根据本发明的细菌菌株的培养物或根据本发明的组合物用于制备产品的用途,该培养物如是起子培养物,该产品特别地是食物产品或饲料产品,如基于植物如豌豆、大豆和燕麦的食物产品,特别地发酵产品,特别地基于植物的发酵食物产品或饲料产品。
在另外的方面,本发明涉及用于制备产品的方法,该产品特别地是食物产品或饲料产品,如基于植物如豌豆、大豆和燕麦的食物产品或饲料产品,特别地发酵产品,特别地基于植物如豌豆、大豆和燕麦的发酵食物产品或饲料产品,其中所述方法包括使底物,特别地植物奶底物与根据本发明的细菌菌株的培养物或根据本发明的组合物接触,或在存在根据本发明的细菌菌株的培养物或根据本发明的组合物的情况下接触该底物,特别地植物奶底物,任选地发酵所述底物,以及获得所述产品。
在另外的方面,本发明涉及用于使源自植物的水性制剂酸化的方法,该水性制剂含有0%-10%、如1%-8%、或2%-7%、或3%-6%的来自所述植物的蛋白质和糖,如选自葡萄糖、蔗糖和右旋糖的糖,如所述植物的天然糖如量为1%-10%、如2%-8%、如2%-7%、如2%-6%、如2%-5%。
在另外的方面,本发明涉及产品,特别地食物产品或饲料产品,特别地发酵产品,特别地发酵食物产品或发酵饲料产品,特别地基于植物如豌豆、大豆和燕麦的发酵食物产品或饲料产品,该产品可通过根据本发明的方法获得。
在一些实施例中,上文提及的此植物选自豆类,如豆类的种子,包括黄豆,如大豆、豌豆、蚕豆、鹰嘴豆、扁豆、绿豆;坚果,如杏仁、椰子、腰果、巴西坚果、榛子、澳洲坚果、山核桃、开心果和核桃;谷类和假谷类,如小麦、玉米/玉蜀黍、燕麦、高粱、水稻、大麦、粟、黑小麦、荞麦、黑麦、画眉草;块茎,如木薯、马铃薯、树薯(tapioca)、竹芋;含油植物,如大麻、低芥酸菜籽、油菜籽和向日葵。
在另外的方面,本发明涉及非乳发酵产品,该非乳发酵产品包含源自基于植物的来源的一种或多种蛋白和根据本发明的细菌菌株。
具体实施方式
本发明的诸位发明人已经鉴定出乳球菌属的菌株,特别地乳酸乳球菌的菌株,其在酸化由植物的基于水的提取物(也称为“植物奶”)制成的植物汁时具有令人惊讶的良好酸化动力学。令人惊讶地,本发明的诸位发明人发现乳酸乳球菌乳亚种菌株非常适于在37℃发酵例如基于豌豆植物的原材料(3.7%豌豆蛋白)(含有至少2%葡萄糖)。在对约130种生物多样性菌株(超过11个属和20个种)的研究中,在3种基于植物的酸奶型模型(基于豌豆、大豆和燕麦)中,与其他LAB菌株相比,乳酸乳球菌乳酸亚种菌株的酸化曲线非常稳健并且影响/变异较小。本发明的诸位发明人设想,根据本发明,亚种乳酸乳球菌霍氏亚种,或物种乳脂乳球菌,如亚种乳脂乳球菌鳟鱼亚种或乳脂乳球菌乳脂亚种的菌株可能同样适合。
这在豌豆模型中尤其令人惊讶,其中所有28个乳酸乳球菌乳酸亚种酸化曲线均很早就开始:达到pH 6的时间(即与模型的初始pH相比,ΔpH为1)少于8小时(28个菌株的范围为min:6.35h,max:8.38h),其中对于其他物种,该时间是8.4小时且通常超过9小时-10小时,并且大多数的时间甚至更长。
还发现乳酸乳球菌乳酸亚种菌株的生长非常高(无论基于植物的模型考虑什么):当以1.10E6cfu/mL接种时,仅在发酵6小时后群体达到高达1.10E8cfu/mL。值得注意的是,在豌豆模型中,其他测试物种中均未达到此群体水平。
对于基于植物的发酵食品生产,本发明可以在温和的温度(27℃-37℃,或高达39℃,如30℃-39℃的范围内)提供较短的生产持续时间(少于8小时)。这可以降低用于生产的能耗,从而增加技术的可持续性,符合用于工业食品生产的可持续工艺的要求。这种短的生产时间还可以允许增加基于植物的发酵食品制造商的生产率,为消费者提供更实惠的食品,从而增加基于植物的发酵食品的吸引力。
所测试的基于不同植物的材料(大豆、豌豆、燕麦)的酸化一致性也可以用于设计具有优异性能的稳健起子培养物,用于生产基于植物的发酵食品,如用豆类、谷类或两者混合生产的食品。
除上述外,乳球菌属的菌株(例如乳酸乳球菌乳酸亚种菌株)预期在发酵期间产生目的代谢物,以i)控制发酵产品的质地,如胞外多糖,ii)控制发酵产品的风味,如通过二乙酰/乙偶姻/3-甲基-丁醛产生,iii)通过维生素K2产生增加营养价值,和iv)通过乳酸链球菌素产生限制革兰氏阳性病原体腐败的生长。
此外,为了制备发酵乳制品替代产品的单独使用或与其他乳酸菌菌株组合使用的乳球菌属的菌株(如乳酸乳球菌的物种,如乳酸乳球菌乳酸亚种)有利地影响发酵产品的气味或香味。可以注意到与异常特征(off-note)如“苦杏仁味”、“豌豆气味”、“大豆香味”、“谷物气味”或“谷物香味”相关的感官属性降低。这种现象在基于大豆或基于豌豆的发酵豆类制剂中特别明显。
因此,能够在基于植物的材料中广泛生长的乳酸乳球菌乳酸亚种菌株的使用将有利地影响基于植物的发酵食品的感官特征、营养价值和安全性。
如本文所用,“源自植物的水性制剂”或“源自第一植物的水性制剂”或“植物奶”是指由基于水的植物提取物制成的植物汁,通常类似于奶的颜色。植物奶是作为乳制奶的基于植物的替代物食用的纯素饮品,并且通常具有奶油般的口感。在用于制造植物奶的植物中,杏仁、大豆和椰子(如椰奶)是全世界最优选的植物奶。“植物奶”可以包括“大豆奶”、“燕麦奶”或“豌豆奶”。植物奶可以是经过处理的植物材料的提取物,如来自豆科植物(大豆、鹰嘴豆、扁豆等)或来自油籽(油菜(colza)、低芥酸菜籽油、大豆、芝麻、棉花等)的提取物,该提取物含有在溶液或胶体悬浮液中的蛋白质,该蛋白质可通过化学作用、酸发酵和/或热凝结。在一些特定实施例中,奶底物是植物奶和动物奶的混合物。术语“第一植物”或“第二值物”或“第三植物”在本文中仅用于区分不同的植物,因此“第一植物”或“第二植物”或“第三植物”可以是相同的植物或不同的植物。
在一些实施例中,源自植物(如第一植物、第二植物或第三植物)的水性制剂不源自大豆。
我们特此确认保藏人丹麦杜邦营养生物科学公司(DuPont NutritionBiosciences ApS,Denmark)已经无保留且不可反悔地同意所保藏的生物材料对公众开放。就寻求欧洲专利保护的那些指定而言,在提及授予欧洲专利的公告之前或在所述申请被驳回或撤回、或被视为撤回之日之前可获得保藏的微生物的样品,且这样的样品的发放仅限于由请求获得所述样品的请求人指定的专家,且视情况需征得i)申请人和/或ii)欧洲专利局同意(欧洲专利公约细则第32条)。
本发明的组合物,优选地在用作起子培养物时,可以是纯培养物或混合培养物。因此,纯培养物被定义为其中所有或基本上所有培养物由本发明的乳酸乳球菌或乳脂乳球菌的相同细菌菌株组成的培养物。在替代方案中,混合培养物被定义为包含几种微生物的培养物,特别地包含几种细菌菌株(包括本发明的乳球菌属菌株)的培养物。
在特定实施例中,本发明的组合物是如本文定义的乳酸乳球菌或乳脂乳球菌的特定菌株的纯培养物或由其组成。
在另一实施例中,除了本发明的乳酸乳球菌或乳脂乳球菌的特定菌株的培养物之外,本发明的组合物还包含至少一种其他微生物。术语“微生物”在本文中定义为可以与本发明的乳球菌属组合的任何生物体,特别地用于在制备根据本发明的产品中使用。术语“微生物”涵盖酵母、霉菌和细菌,如乳酸菌物种、双歧杆菌属物种、短杆菌属(Brevibacterium)物种和/或丙酸杆菌属(Propionibacterium)物种。
在混合培养物的特定实施例中,除了本发明的乳球菌属的培养物之外,组合物还包含至少一种乳酸菌的培养物和/或至少一种其他的丙酸细菌培养物。合适的乳酸菌包括链球菌属物种、乳杆菌属物种包括嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、肠球菌属(Enterococcus)物种、片球菌属物种、明串珠菌属物种和酒球菌属(Oenococcus)物种的菌株或其任何组合。其他乳酸菌物种包括明串珠菌属物种、嗜热链球菌(Streptococcusthermophilus)、德氏乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckiisubsp.bulgaricus)和.瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)。
因此,作为特定实施例,本发明还涉及如本文定义的组合物,该组合物包含以下或由以下组成:本发明的乳球菌属,本发明的乳酸乳球菌或乳脂乳球菌菌株的至少或确切的1种、2种、3种、4种、5种、6种、7种、8种、9种或10种菌株的培养物。
在特定实施例中,组合物包含以下或由以下组成:本发明的乳酸乳球菌或乳脂乳球菌,和至少一种,特别地至少或确切的1种、2种、3种、4种、5种、6种、7种、8种、9种或10种不同于本发明的乳球菌属菌株的菌株,如物种嗜热链球菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种的一种或儿种菌株,和/或物种嗜热链球菌和瑞士乳杆菌的一种或儿种菌株和/或其任何组合的培养物。在特定实施例中,组合物包含以下或由以下组成:本发明的乳球菌属菌株,如物种乳酸乳球菌或乳脂乳球菌的一种菌株,以及物种嗜热链球菌和德氏乳杆菌保加利亚亚种的菌株的培养物。在另一特定实施例中,组合物包含以下或由以下组成:为物种乳酸乳球菌或乳脂乳球菌的两种菌株的本发明的乳球菌属菌株,以及物种嗜热链球菌和德氏乳杆菌保加利亚亚种的菌株的培养物。
在特定实施例中,组合物包含以下或由以下组成:本发明的乳酸乳球菌或乳脂乳球菌的培养物和复合混合起子培养物。
在本文定义的作为纯培养物或混合培养物的任何组合物的特定实施例中,组合物进一步包含至少一种益生菌株,如动物双歧杆菌乳酸亚种(Bifidobacterium animalissubsp.lactis)、嗜酸乳杆菌、副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)或干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)。
在特定实施例中,无论作为如以上定义的纯培养物还是混合培养物,如本文定义的组合物进一步包含特别地是食品可接受的一种或多种组分,如但不限于,冷冻保护剂(cryoprotective agent或cryoprotectant)、促进剂和/或常用添加剂。“组分”意指并非如上定义的微生物的任何分子或溶液。举例来说,冷冻保护剂包括环糊精、麦茅糖醇、海藻糖、蔗糖、麦芽糊精或其组合。举例来说,增强剂包括核苷酸。举例来说,常用添加剂包括营养物,如酵母提取物、糖和维生素。
在特定实施例中,无论作为如上定义的纯培养物还是混合培养物、具有或不具有一种或多种另外的组分,如本文定义的组合物呈液体、冷冻或干燥粉末形式,如在冷干后获得的。
在特定实施例中,无论作为如上定义的纯培养物还是混合培养物、具有或不具有一种或多种另外的组分,本发明的组合物包含呈浓缩形式(浓缩物)的本发明的乳酸乳球菌或乳脂乳球菌菌株(以及任选地至少一种其他微生物),包括冷冻的或干燥的浓缩物。因此,本发明的乳酸乳球菌或乳脂乳球菌菌株在组合物中的浓度范围为105至4x1012CFU(菌落形成单位)/克组合物,优选地107至1012CFU,并且更优选地至少107、至少108、至少109、至少1010或至少1011CFU/g组合物。
本发明还提供了本发明的乳酸乳球菌或乳脂乳球菌菌株的培养物用于制备产品的用途或如本文定义的组合物用于制备产品的用途,该产品特别地是食物产品或饲料产品,特别地发酵产品,特别地发酵食物产品或发酵饲料产品,特别地基于植物的发酵食物产品或饲料产品。因此,本发明还提供了用于制备产品的方法,该产品优选地是食物产品或饲料产品,其中所述方法包括a)使底物与本发明的乳酸乳球菌或乳脂乳球菌菌株的培养物或如本文定义的组合物接触,或在存在本发明的乳酸乳球菌或乳脂乳球菌菌株的培养物或如本文定义的组合物的情况下接触底物[或将底物与本发明的乳酸乳球菌或乳脂乳球菌菌株的培养物或如本文定义的组合物混合],b)任选地发酵所述底物,和c)获得所述产品。在特定实施例中,本发明还提供了用于制备发酵产品的方法,该发酵产品优选地是发酵食物产品或饲料产品,其中所述方法包括用本发明的乳酸乳球菌或乳脂乳球菌菌株的培养物或如本文定义的组合物或在存在其的情况下发酵底物,以及获得所述发酵产品,特别地基于植物的发酵食物产品或饲料产品。
本发明还涉及任何产品,该产品由本发明的乳酸乳球菌或乳脂乳球菌菌株或如本文定义的组合物制备,特别地通过本文公开的方法制备,或其含有或包合本发明的乳酸乳球菌或乳脂乳球菌菌株或如本文定义的组合物。在特定实施例中,本发明提供了产品,特别地食物产品或饲料产品,特别地发酵产品,特别地发酵食品或发酵饲料产品,特别地通过如本文所述的方法可获得或获得的基于植物的发酵食物产品或饲料产品。本发明还提供了产品,特别地食物产品或饲料产品,特别地发酵产品,特别地基于植物的发酵食品或发酵饲料产品,其包含本发明的乳酸乳球菌或乳脂乳球菌菌株的培养物或包含如本文定义的组合物。
合适的产品包括但不限于食品、食物、食品成分、食品添加剂、食品补充剂、功能性食品、饲料、营养补充剂或益生补充剂。根据本发明,“食品”意指旨在用于人类食用的产品。根据本发明,“饲料”意指意在喂养动物的产品。如本文所用,术语“食品成分”包括被添加到或可以被添加到食品中的配制品,并且包括可以在需要例如酸化的多种多样产品中以低水平使用的配制品。如本文所用,术语“功能性食品”意指不仅能够提供营养效果和/或味道满足感而且还能够向消费者递送另外的有益效果的食品。合适的产品包括但不限于水果、蔬菜、饲料作物和蔬菜(包括衍生产品)、谷物和谷物衍生产品、乳制品食品和乳制品食品衍生产品、肉类、禽肉和海鲜。本发明的乳酸乳球菌或乳脂乳球菌菌株或如本文定义的组合物可以用于在食物产品的制备中使用,该食物产品是如糖果产品、乳制产品、肉类产品、禽肉产品、鱼产品和烘焙产品中的一种或多种。举例来说,本发明的乳酸乳球菌或乳脂乳球菌菌株或如本文定义的组合物可以用作软饮料、果汁或包含乳清蛋白的饮品、保健茶、可可饮料、奶饮料和乳酸菌饮料、酸奶、饮用酸奶和酒的成分。
在特定实施例中,添加本发明的乳酸乳球菌或乳脂乳球菌菌株或如本文定义的组合物或与其混合的底物是植物奶底物。因此,在特定实施例中.本发明还提供了本发明的乳酸乳球菌或乳脂乳球菌菌株的培养物用于制备非乳制的基于植物的产品的用途或如本文定义的组合物用于制备非乳制的基于植物的产品的用途,该非乳制的基于植物的产品特别地是非乳制的基于植物的食物产品或非乳制的基于植物的饲料产品,特别地发酵的非乳制的基于植物的产品,特别地发酵的非乳制的基于植物的食物产品或发酵的非乳制的基于植物的饲料产品。因此,本发明还提供了用于制备非乳制的基于植物的产品的方法,特别地非乳制的基于植物的食物产品或非乳制的基于植物的饲料产品,特别地发酵的非乳制的基于植物的产品,特别地发酵的非乳制的基于植物的食物产品或发酵的非乳制的基于植物的饲料产品,其中所述方法包括a)使植物奶底物与本发明的乳酸乳球菌或乳脂乳球菌菌株的培养物接触,或在存在本发明的乳酸乳球菌或乳脂乳球菌菌株的培养物的情况下接触植物奶底物,或使植物奶底物与如本文定义的组合物接触,b)任选地发酵所述植物奶底物以及c)获得所述产品。在特定实施例中,本发明还提供了用于制备发酵的非乳制的基于植物的产品的方法,该发酵的非乳制的基于植物的产品优选地是发酵的非乳制的基于植物的食物产品或饲料产品,其中所述方法包括用本发明的乳酸乳球菌或乳脂乳球菌菌株的培养物或如本文定义的组合物或在存在其的情况下发酵植物奶底物,以及获得所述发酵的非乳制的基于植物的产品。在特定实施例中,植物奶底物包含固体物品,如水果、巧克力产品或谷类。在特定实施例中,本发明还涉及本发明的乳酸乳球菌或乳脂乳球菌菌株或如本文定义的任何组合物(纯培养物或混合培养物)的用途,其用于,与不用本发明的乳酸乳球菌或乳脂乳球菌菌株获得的或不用其发酵的或在不存在其的情况下发酵的非乳制的基于植物的产品相比,减少用所述乳酸乳球菌或乳脂乳球菌菌株或所述组合物获得的非乳制的基于植物的产品或用其发酵的或在存在其的情况下发酵的非乳制的基于植物的产品的后酸化现象,并且本发明涉及非乳制的基于植物的产品本身。在特定实施例中,本发明还涉及本发明的乳酸乳球菌或乳脂乳球菌菌株或如本文定义的任何组合物(纯培养物或混合培养物)获得非乳制的基于植物的产品的用途,该非乳制的基于植物的产品特别地是基于植物的酸奶,其pH为4.4±0.1,并且当该产品在低于10℃的正温度储存14天期间是稳定的。在特定实施例中,本发明还涉及本发明的乳酸乳球菌或乳脂乳球菌菌株或如本文定义的任何组合物(纯培养物或混合培养物)获得非乳制的基于植物的产品的用途,该非乳制的基于植物的产品特别地是基于植物的酸奶,当该非乳制的基于植物的产品在低于10℃的正温度储存14天期间,其pH为4.5±0.1或为4.4±0.05,并且任选地其pH稳定(即,在同一范围内)直至2S天。
因此,本发明提供了非乳制的基于植物的产品,特别地非乳制的基于植物的食物产品或非乳制的基于植物的饲料产品,特别地发酵的非乳制的基于植物的产品,特别地发酵的非乳制的基于植物的食物产品或发酵的非乳制的基于植物的饲料产品,其通过如本文所述的方法用植物奶底物可获得或获得。本发明还提供了非乳制的基于植物的产品,特别地发酵的非乳制的基于植物的产品,其包含本发明的乳酸乳球菌或乳脂乳球菌菌株的培养物或包含如本文定义的组合物。在特定的实施例中,非乳制的基于植物的产品或发酵的非乳制的基于植物的产品是或包含基于植物的酸奶、基于植物的奶酪(如酸的基于植物的凝乳干酪、硬的基于植物的奶酪、半硬的基于植物的奶酪、基于植物的农家奶酪)、基于植物的夸克干酪(quark)、基于植物的开菲尔、基于植物的乳酒、基于植物的酸奶饮料、基于植物的白干酪、基于植物的农家奶酪、基于植物的奶油甜点。
如上所详述,本发明涉及细菌菌株,其选自乳酸乳球菌或乳脂乳球菌的物种,其中该细菌菌株在源自第一植物、含有1%-4%的来自所述植物的蛋白质和2%葡萄糖的水性制剂中的酸化动力学特征在于:
-如测定I中所述测量的,达到pH 6.00的平均时间小于约510min,如小于500min,如小于490min,如小于480min、470min、460min、450min、440min、430min、420min、410min、400min、390min或380min,以及
-如测定I中所述测量的,达到pH 5.5的平均时间小于约660min,如小于640min、620min、600min、580min、560min、540min、520min或500min。
在一些特定实施例中,细菌菌株是乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)的物种,这些物种也可以被称为乳酸乳球菌(Lactoccocus lactis lactis)。
在一些实施例中,如测定II中所述测量的,细菌菌株在源自第二植物、含有I%-4%的来自所述植物的蛋自质和2%葡萄糖的水性制剂中的生长的特征在于:
-在源自植物的水性制剂中以1x106cfu/ml接种孵育6小时后平均至少约1.5x108cfu/ml。
在一些实施例中,细菌菌株来源于源自第三植物的水性制剂中的发酵。
应当理解,当提到第一植物、第二植物和第三植物时,意指它们可以是相同的植物,或者它们可以是不同的植物。因此,本发明的特定菌株可以源自一种植物或用于一种植物的发酵中,而基于酸化动力学和/或生长的选择是基于在源自另一种(或相同)植物的水性制剂中的测试。
因此,在一些实施例中,第一植物、第二植物和第三植物中的两种或三种是相同的植物。
在一些实施例中,第一植物、第二植物和第三植物中的两种或三种是不同的植物。
在一些实施例中,第一植物、第二植物和/或第三植物独立地选自豆类,如豆类的种子,包括黄豆,如大豆、豌豆、蚕豆、鹰嘴豆、扁豆、绿豆;坚果,如杏仁、椰子、腰果、巴西坚果、榛子、澳洲坚果、山核桃、开心果和核桃;谷类和假谷类,如小麦、玉米/玉蜀黍、燕麦、高粱、水稻、大麦、粟、黑小麦、荞麦、黑麦、画眉草:块茎,如木薯、马铃薯、树薯、竹芋;含油植物,如大麻、低芥酸菜籽、油菜籽和向日葵。
在一些实施例中,第一植物、第二植物和/或第三植物独立地选自豌豆、大豆和燕麦。
在一些实施例中,本发明的细菌菌株是蛋白酶阴性细菌菌株。
在一些实施例中,本发明的细菌菌株是亚种乳酸乳球菌乳酸亚种的菌株。
在一些实施例中,本发明的细菌菌株选自由以下组成的组:
(1)DSM 33924细菌菌株,于2021年6月30日根据布达佩斯条约以丹麦杜邦营养生物科学公司的名义保藏于莱布尼兹研究所DSMZ-德国微生物和细胞培养物保藏中心(Leibniz-Institut DSMZ-Deutsche Sammlung von Mikroorganismen undZellkulturen,GmbH);
(2)DSM 33925细菌菌株,于2021年6月30日根据布达佩斯条约以丹麦杜邦营养生物科学公司的名义保藏于菜布尼兹研究所DSMZ-德国微生物和细胞培养物保藏中心;
(3)DSM 33926细菌菌株,于2021年6月30日根据布达佩斯条约以丹麦杜邦营养生物科学公司的名义保藏于莱布尼兹研究所DSMZ-德国微生物和细胞培养物保藏中心;
(4)DSM 33927细菌菌株,于2021年6月30日根据布达佩斯条约以丹麦杜邦营养生物科学公司的名义保藏于莱布尼兹研究所DSMZ-德国微生物和细胞培养物保藏中心;
(5)DSM 33928细菌菌株,于2021年6月30日根据布达佩斯条约以丹麦杜邦营养生物科学公司的名义保藏于莱布尼兹研究所DSMZ-德国微生物和细胞培养物保藏中心;
(6)DSM 33929细菌菌株,于2021年6月30日根据布达佩斯条约以丹麦杜邦营养生物科学公司的名义保藏于莱布尼兹研究所DSMZ-德国微生物和细胞培养物保藏中心;以及
(7)DSM 33924菌株、DSM 33925菌株、DSM 33926菌株、DSM 33927菌株、DSM 33928菌株或DSM 33929菌株的突变细菌菌株。
本发明的一方面涉及组合物,该组合物包含本发明的细菌菌株的一种或多种培养物或由其组成,并且任选地进一步包含至少一种其他微生物,如至少一种其他乳酸菌和/或至少一种丙酸细菌。
在一些实施例中,至少一种其他乳酸菌是物种乳酸乳球菌的不同细菌菌株、物种乳脂乳球菌的不同细菌菌株、物种霍氏乳球菌(Lactococcus hordinae)的不同细菌菌株、物种嗜热链球菌的细菌菌株、和/或乳杆菌属物种的细菌菌株如亚种德氏乳杆菌保加利亚亚种的细菌菌株、和/或双歧杆菌属的细菌菌株、和/或其任何组合。
在一些实施例中,本发明的组合物包含以下或由以下组成:本发明的细菌菌株、物种嗜热链球菌的细菌菌株以及德氏乳杆菌保加利亚亚种的细菌菌株的一种或多种培养物。
在一些实施例中,本发明的组合物进一步包含特别地是食品可接受的一种或多种组分,如冷冻保护剂和/或常用添加剂。
在一些实施例中,本发明的组合物呈液体、冷冻或干燥粉末形式。
在一些实施例中,本发明的组合物包含本发明的细菌菌株的一种或多种培养物或由其组成,并且没有其他细菌菌株。
在一些实施例中,本发明的组合物包含本发明的细菌菌株乳酸乳球菌的一种或多种培养物或由其组成,并且没有其他细菌菌株。
本发明的编号的实施例:
1.一种细菌菌株,所述细菌菌株选自乳酸乳球菌(Lactococcus lactis),如亚种乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactis subsp.lactis)或乳酸乳球菌霍氏亚种(Lactococcus lactis subsp.hordniae),或物种乳脂乳球菌(Lactococcus cremoris),如亚种乳脂乳球菌鳟鱼亚种(Lactococcus cremoris subsp.tructuae)或乳脂乳球菌乳脂亚种(Lactococcus cremoris subsp.cremoris)的物种,其中所述细菌菌株在源自第一植物、含有1%-4%的来自所述植物的蛋白质和2%葡萄糖的水性制剂中的酸化动力学的特征在于:
-如测定I中所述测量的,达到pH 6.00的平均时间小于约510min,如小于500min,如小于490min,如小于480min、470min、460min、450min、440min、430min、420min、410min、400min、390min或380min,以及
-如测定I中所述测量的,达到pH 5.5的平均时间小于约660min,如小于640min、620min、600min、580min、560min、540min、520min或500min。
2.根据实施例1所述的细菌菌株,其中如测定II中所述测量的,所述细菌菌株在源自第二植物、含有1%-4%的来自所述植物的蛋白质和2%葡萄糖的水性制剂中的生长的特征在于:
-在源自植物的所述水性制剂中以1x106cfu/ml接种孵育6小时后平均至少约1.5x108cfu/ml。
3.根据实施例1或2中任一项所述的细菌菌株,其中所述细菌菌株来源于源自第三植物的水性制剂中的发酵。
4.根据实施例1-3中任一项所述的细菌菌株,其中所述第一植物、第二植物和第三植物中的两种或三种是相同的植物。
5.根据实施例1-3中任一项所述的细菌菌株,其中所述第一植物、第二植物和第三植物中的两种或三种是不同的植物。
6.根据实施例1-5中任一项所述的细菌菌株,其中所述第一植物、第二植物和/或第三植物独立地选自豆类,如豆类的种子,包括黄豆,如大豆、豌豆、蚕豆、鹰嘴豆、扁豆、绿豆;坚果,如杏仁、椰子、腰果、巴西坚果、榛了、澳洲坚果、山核桃、开心果和核桃;谷类和假谷类,如小麦、玉米/玉蜀黍、燕麦、高粱、水稻、大麦、粟、黑小麦、荞麦、黑麦、画眉草;块茎,如木薯、马铃薯、树薯、竹芋;含油植物,如大麻、低芥酸菜籽、油菜籽和向日葵。
7.根据实施例1-6中任一项所述的细菌菌株,其中所述第一植物、第二植物和/或第三植物独立地选自豌豆、大豆和燕麦。
8.根据实施例1-7中任一项所述的细菌菌株,所述细菌菌株是蛋白酶阴性细菌菌株。
9.根据实施例1-8中任一项所述的细菌菌株,所述细菌菌株是亚种乳酸乳球菌乳酸亚种的菌株。
10.根据实施例1-9中任一项所述的细菌菌株,所述细菌菌株选自由以下组成的组:
(1)DSM 33924细菌菌株,于2021年6月30日根据布达佩斯条约以丹麦杜邦营养生物科学公司的名义保藏于莱布尼兹研究所DSMZ-德国微生物和细胞培养物保藏中心;
(2)DSM 33925细菌菌株,于2021年6月30日根据布达佩斯条约以丹麦杜邦营养生物科学公司的名义保藏于莱布尼兹研究所DSMZ-德国微生物和细胞培养物保藏中心;
(3)DSM 33926细菌菌株,于2021年6月30日根据布达佩斯条约以丹麦杜邦营养生物科学公司的名义保藏于菜布尼兹研究所DSMZ-德国微生物和细胞培养物保藏中心;
(4)DSM 33927细菌菌株,于2021年6月30日根据布达佩斯条约以丹麦杜邦营养生物科学公司的名义保藏于菜布尼兹研究所DSMZ-德国微生物和细胞培养物保藏中心;
(5)DSM 33928细菌菌株,于2021年6月30日根据布达佩斯条约以丹麦杜邦营养生物科学公司的名义保藏于莱布尼兹研究所DSMZ-德国微生物和细胞培养物保藏中心;
(6)DSM 33929细菌菌株,于2021年6月30日根据布达佩斯条约以丹麦杜邦营养生物科学公司的名义保藏于莱布尼兹研究所DSMZ-德国微生物和细胞培养物保藏中心;以及
(7)所述DSM 33924菌株、所述DSM 33925菌株、所述DSM 33926菌株、所述DSM33927菌株、所述DSM 33928菌株或所述DSM 33929菌株的突变细菌菌株。
11.根据实施例1-10中任一项所述的细菌菌株,其中所述酸化动力学在低于39℃,如低于37℃,如低于35℃,如低于33℃或甚至低于30℃,如在27℃-37℃的范围内或在27℃-39℃的范围内,如在30℃-39℃的范围内的温度测量。
12.一种组合物,如起子培养物的组合物,其包含如实施例1-11中任一项所定义的细菌菌株的一种或多种培养物或由其组成,并且任选地进一步包含至少一种其他微生物,如至少一种其他乳酸菌和/或至少一种丙酸细菌。
13.根据实施例12所述的组合物,其中所述至少一种其他乳酸菌是物种乳酸乳球菌的不同细菌菌株、物种乳脂乳球菌的不同细菌菌株、物种霍氏乳球菌的不同细菌菌株、物种嗜热链球菌的细菌菌株、和/或乳杆菌属物种的细菌菌株如亚种德氏乳杆菌保加利亚亚种的细菌菌株、和/或双歧杆菌属的细菌菌株、和/或其任何组合。
14.根据实施例12或13中任一项所述的组合物,所述组合物包含以下或由以下组成:如实施例1-11中任一项所定义的细菌菌株、物种嗜热链球菌的细菌菌株以及德氏乳杆菌保加利亚亚种的细菌菌株的一种或多种培养物。
15.根据实施例12-14中任一项所述的组合物,所述组合物进一步包含特别地是食品可接受的一种或多种组分,如冷冻保护剂和/或常用添加剂。
16.根据实施例12-15中任一项所述的组合物,所述组合物呈液体、冷冻或干燥粉末形式。
17.根据实施例12、14-16中任一项所述的组合物,所述组合物包含如实施例1-11中任一项所定义的细菌菌株的一种或多种培养物或由其组成,并且没有其他细菌菌株。
18.根据实施例12-17中任一项所述的组合物,所述组合物包含如实施例1-11中任一项所定义的细菌菌株乳酸乳球菌的一种或多种培养物或由其组成,并且没有其他细菌菌株。
19.细菌菌株的培养物用于制备产品的用途,所述细菌菌株选自乳酸乳球菌,如亚种乳酸乳球菌乳酸亚种或乳酸乳球菌霍氏亚种,或物种乳脂乳球菌,如亚种乳脂乳球菌鳟鱼亚种或乳脂乳球菌乳脂亚种的物种,所述培养物如起子培养物,所述产品特别地是食物产品或饲料产品,如基于植物如豌豆、大豆和燕麦的食物产品,特别地发酵产品,特别地基于植物的发酵食物产品或饲料产品。
20.如实施例1-11中任一项所定义的细菌菌株的培养物或如实施例12-18中任一项所定义的组合物用于制备产品的用途,所述培养物如起子培养物,所述产品特别地是食物产品或饲料产品,如基于植物如豌豆、大豆和燕麦的食物产品,特别地发酵产品,特别地基于植物的发酵食物产品或饲料产品。
21.根据实施例19或20中任一项所述的用途,其中所述植物选自豆类,如豆类的种子,包括黄豆,如大豆、豌豆、蚕豆、鹰嘴豆、扁豆、绿豆;坚果,如杏仁、椰子、腰果、巴西坚果、榛子、澳洲坚果、山核桃、开心果和核桃;谷类和假谷类,如小麦、玉米/玉蜀黍、燕麦、高粱、水稻、大麦、粟、黑小麦、荞麦、黑麦、画眉草;块茎,如木薯、马铃薯、树薯、竹芋;含油植物,如大麻、低芥酸菜籽、油菜籽和向日葵。
22.一种用于制备产品的方法,所述产品特别地是食物产品或饲料产品,如基于植物如豌豆、大豆和燕麦的食物产品或饲料产品,特别地发酵产品,特别地基于植物如豌豆、大豆和燕麦的发酵食物产品或饲料产品,其中所述方法包括使底物,特别地植物奶底物与细菌菌株的培养物接触,或在存在所述细菌菌株的培养物的情况下接触所述底物,特别地植物奶底物,所述细菌菌株选自乳酸乳球菌,如亚种乳酸乳球菌乳酸亚种或乳酸乳球菌霍氏亚种,或物种乳脂乳球菌,如亚种乳脂乳球菌鳟鱼亚种或乳脂乳球菌乳脂亚种的物种,任选地发酵所述底物,以及获得所述产品。
23.一种用于制备产品的方法,所述产品特别地是食物产品或饲料产品.如基于植物如豌豆、大豆和燕麦的食物产品或饲料产品,特别地发酵产品,特别地基于植物如豌豆、大豆和燕麦的发酵食物产品或饲料产品,其中所述方法包括使底物,特别地植物奶底物与如实施例1-11中任一项所定义的细菌菌株的培养物或如实施例12-18中任一项所定义的组合物接触,或在存在如实施例1-11中任一项所定义的细菌菌株的培养物或如实施例12-18中任一项所定义的组合物的情况下接触所述底物,特别地植物奶底物,任选地发酵所述底物,以及获得所述产品。
24.一种用于酸化水性制剂的方法,所述水性制剂源自植物如豌豆、大豆和燕麦,所述水性制剂含有0%-10%,如l%-8%、或2%-7%、或3%-6%的来自所述植物的蛋白质和糖,如选自葡萄糖、蔗糖和右旋糖的糖,如所述植物的天然糖,如量为1%-10%,如2%-8%、如2%-7%、如2%-6%、如2%-5%,所述方法包括使所述水性制剂,特别地植物奶底物与细菌菌株的培养物接触,或在存在所述细菌菌株的培养物的情况下接触所述水性制剂,特别地植物奶底物,所述细菌菌株选自乳酸乳球菌,如亚种乳酸乳球菌乳酸亚种或乳酸乳球菌霍氏亚种,或物种乳脂乳球菌,如亚种乳脂乳球菌鳟鱼亚种或乳脂乳球菌乳脂亚种的物种。
25.一种用于酸化水性制剂的方法,所述水性制剂源自植物如豌豆、大豆和燕麦,所述水性制剂含有0%-10%,如1%-8%、或2%-7%、或3%-6%的来自所述植物的蛋白质和糖,如选自葡萄糖、蔗糖和右旋糖的糖,如所述植物的天然糖,如量为1%-10%、如2%-8%、如2%-7%、如2%-6%、如2%v5%,所述方法包括使所述水性制剂,特别地植物奶底物与如实施例1-11中任一项所定义的细菌菌株的培养物或如实施例12-18中任一项所定义的组合物接触,或在存在如实施例1-11中任一项所定义的细菌菌株的培养物或如实施例12-18中任一项所定义的组合物的情况下接触所述水性制剂,特别地植物奶底物。
26.根据实施例22-25中任一项所述的方法,其中所述植物选自豆类,如豆类的种子,包括黄豆,如大豆、豌豆、蚕豆、鹰嘴豆、扁豆、绿豆;坚果,如杏仁、椰子、腰果、巴西坚果、榛子、澳洲坚果、山核桃、开心果和核桃;谷类和假谷类,如小麦、玉米/玉蜀黍、燕麦、高粱、水稻、大麦、粟、黑小麦、荞麦、黑麦、画眉草;块茎,如木薯、马铃薯、树薯、竹芋;含油植物,如大麻、低芥酸菜籽、油菜籽和向日葵。
27.一种产品,特别地食物产品或饲料产品,特别地发酵产品,特别地发酵食品或发酵饲料产品,特别地基于植物如豌豆、大豆和燕麦的发酵食物产品或饲料产品,所述产品可通过根据实施例22-26的方法获得。
28.一种产品,特别地食物产品或饲料产品,特别地发酵产品,特别地发酵食品或发酵饲料产品,特别地基于植物如豌豆、大豆和燕麦的发酵食物产品或饲料产品,所述产品包含如实施例1-11中任一项所定义的细菌菌株的培养物或如实施例12-18中任一项所定义的组合物。
29.根据实施例27或28中任一项所述的产品,所述产品是基于植物的乳制品替代产品,特别地基于植物如豌豆、大豆和燕麦的产品,如基于植物的酸奶、奶酪、夸克干酪、酸性稀奶油(sour cream)、开菲尔、乳酒、基于植物的黄油、植物奶饮品、酸奶植物饮料、发酵植物奶、成熟奶油、白干酪、农家奶酪或奶油甜点。
30.一种非乳发酵产品,所述非乳发酵产品包含源自基于植物的来源的一种或多种蛋白和如实施例1-11中任一项所定义的细菌菌株。
31.根据实施例12-18中任一项所述的组合物,或根据实施例27-30中任一项所述的产品,如非乳发酵产品,其中如实施例1-11中任一项所定义的细菌菌株的培养物以至少约1x106cfu/ml的量存在。
分析方法
测定I
细菌菌株发酵的酸化动力学用源自植物的水性制剂(如豌豆蛋白制剂)进行评估。
基于植物的制剂(如基于豌豆、大豆或燕麦的制剂)使用植物蛋白分离物如豌豆蛋白的2000(IFF营养与生物科学公司(IFF,Nutrition&Biosciences))制备。将植物蛋白分离物在水中重构以达到1%-4%范围内的最终浓度,如3.7%-3.9%蛋白。将葡萄糖添加到制剂中以实现2%葡萄糖的浓度。将制剂在80℃的温度用Thermomix充分混合10分钟,然后在90℃巴氏灭菌90分钟。将制剂在冷藏温度(即4℃)储存过夜。接种前,使基于植物的制剂升温至37℃。接种率为IE6cfu/ml。在37℃发醇期间,使用在线pH测量装置(来自Absciss仪器科学公司(Absciss Instrumentation Scientifique)的Abscia)监测植物制剂的pH,并确定达到pH 6.00(按分钟计的T PH 6.00)和5.5(按分钟计的TpH 5.50)的时间。
测定II
基于植物的制剂(如基于豌豆、大豆或燕麦的制剂)按照测定I制备。接种前,使制剂升温至37℃。接种率为1E6cfu/ml。孵育6小时后,通过使用标准板计数技术测量以CFU/g基于植物的制剂计的浓度。
实例
实例1:使用乳酸菌的豌豆蛋白制剂的酸化
评估了用不同乳酸菌发酵的豌豆蛋白制剂的酸化动力学。
使用豌豆蛋白分离物2000豌豆蛋白(IFF营养与生物科学公司)制备基于豌豆的制剂。将TRUPRO 2000粉末以4.5%(W/W)在水中重构,以达到3.7%蛋白质的最终浓度。将葡萄糖添加到制剂中以实现2%葡萄糖的浓度。将制剂在80℃的温度用Thermomix充分混合10分钟,然后在90℃巴氏灭菌90分钟。将制剂在冷藏温度(即4℃)储存过夜。
接种前,使豌豆制剂升温至37℃。对于所测试的每一种细菌菌株,接种率为1E6cfu/ml。在37℃发酵期间,使用在线pH测量装置(来自Absciss仪器科学公司的Abscia)监测豌豆制剂的pH,并确定达到pH 6.00(按分钟计的T PH 6,00)和5.5(按分钟计的TpH5.50)的时间。
所测试的乳酸菌包括生物多样性的乳酸乳球菌(28种菌株)、嗜热链球菌(6种菌株)、副干酪乳杆菌(Lacticaseibacillus)(23种菌株)、植物乳杆菌(Lactiplantbacillus plantarum)(7种菌株)、戊糖乳杆菌(Lactiplantibacilluspentosus)(15种菌株)、短乳杆菌(Levilactobacillus brevis)(14种菌株)、发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillus fermentum)(9种菌株)和戊糖片球菌(Pediococcuspentosaceus)(3种菌株)。表1示出了所测试的105种菌株中的每一种达到pH 6.00(按分钟计的T PH 6,00)和pH 5,5(按分钟计的TpH 5.50)的时间。表1:在豌豆制剂发酵期间测量的104种不同乳酸菌菌株的TpH 6,00和T PH 5,5。/>
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对于乳酸乳球菌物种,平均TpH6.00为434分钟,标准偏差为32分钟,并且对于所测试的其他乳酸菌物种,平均TpH 6.00为1040分钟,标准偏差为345分钟。对于乳酸乳球菌物种,平均TpH5.50为543分钟,标准偏差为46分钟,并且对于所测试的其他乳酸菌物种,平均TpH 5.50为1693分钟,标准偏差为639分钟。平均而言,乳酸乳球菌物种酸化豌豆蛋白制剂的速率比所测试的其他乳酸菌快大约2倍-3倍。
这些结果表明乳酸乳球菌物种可用于豌豆制剂酸化。
实例2:乳酸乳球菌菌株在基于大豆奶的制剂中的酸化测试
评估了用不同乳酸菌发酵的大豆奶的酸化动力学。
商业大豆奶(Bjorg品牌)用作原材料进行发酵测试。它是含有3.9%蛋白质的UHT饮料。在制备期间添加2%的葡萄糖。
接种前,使大豆奶升温至37℃。对于所测试的每一种细菌菌株,接种率为1E6cfu/ml。在37℃发酵期间,使用在线pH测量装置(来自Absciss仪器科学公司的Abscia)监测大豆奶的pH,并确定达到pH 6.00(按分钟计的TpH 6.00)和5.5(按分钟计的TpH 5.50)的时间。
所测试的乳酸菌包括生物多样性的乳酸乳球菌(28种菌株)、嗜热链球菌(6种菌株)、副干酪乳杆菌(23种菌株)、植物乳杆菌(7种菌株)、戊糖乳杆菌(15种菌株)、短乳杆菌(14种菌株)、发酵粘液乳杆菌(9种菌株)和戊糖片球菌(3种菌株)。表2示出了所测试的105种菌株中的每一种达到pH 6.00(按分钟计的T PH 6.00)和pH 5.5(按分钟计的TpH 5.50)的时间。
表2:在大豆奶发酵期间测量的105种不同乳酸菌菌株的TpH 6.00和T PH 5.5,按最小到最大TpH 5.50排列
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属于乳酸乳球菌物种的28种菌株均在表2的顶部,说明此物种在大豆奶中实现pH5.5所需的时间短。只有嗜热链球菌菌株(熟知的适应大豆奶的物种)在从初始大豆奶pH到pH 5.5的pH范围内更快。所测试的所有来自其他物种的菌株都表现出比乳酸乳球菌菌株更高的TpH5.50。
这些结果表明乳酸乳球菌物种可用于大豆奶酸化。
实例3:乳酸乳球菌菌株在基于豌豆蛋白制剂、大豆奶和燕麦奶的制剂中的生长测试
使用豌豆蛋白分离物TRUPRO 2000(IFF)制备基于豌豆的制剂。将TRUPRO 2000粉末以4.5%(W/W)在水中重构,以达到3.7%蛋白质的最终浓度。将葡萄糖添加到制剂中以实现2%葡萄糖的浓度。将制剂在80℃的温度用Thermomix充分混合10分钟,然后在90℃巴氏灭菌90分钟。将制剂在冷藏温度(即4℃)储存过夜。
商业大豆奶(Bjorg品牌)用作原材料进行发酵测试。它是含有3.9%蛋白质的UHT饮料。在制备期间添加2%的葡萄糖。
燕麦奶用燕麦粉(含有约1.35%的蛋白质)制备,并经酶处理(Foodpro Alt和Foodpro CGL)。此制剂已采用超高温灭菌方式灭菌。
接种前,使3种制剂升温至37℃。所测试的属于乳酸乳球菌物种的每一种细菌菌株的接种率为1E6cfu/ml。孵育6小时后,通过使用用于乳酸乳球菌的标准板计数技术测量了按CFU/g基于植物的制剂计的浓度(在37℃ M 17-乳糖琼脂厌氧孵育48h)。表3报告了按CFU/g计的每种菌株在每种基于植物的制剂中的浓度
表3:28种乳酸乳球菌菌株在燕麦奶、豌豆蛋自制剂和大豆奶中于37℃发酵6h后的CFU浓度。
发酵6小时后,所有菌株在三种不同的基于植物的制剂中的浓度的最小值为1.5E8cfu/ml,并且最大值为9.9E8cfu/ml。
结果表明了乳酸乳球菌物种在基于植物的制剂中生长的突出能力。
实例4:用于大豆奶发酵和用于燕麦奶发酵的乳酸乳球菌菌株与Danisco Vege起子培养物的组合
通过向商业大豆奶中添加1%右旋糖、0.1%果胶SY715(Danisco)和0.05%盐来制备大豆奶。这是一个制造基于大豆的乳制品替代酸奶的经典配方。
通过使用稀释10倍的燕麦糖浆(Natu oat 62,Meurens公司)作为基础并添加4%VEGEDAN YO(Danisco)和0.05%盐来制备燕麦奶。这是一个制造基于燕麦的乳制品替代酸奶的经典配方。
对于大豆奶和燕麦奶,由嗜热链球菌和德氏乳杆菌保加利亚(Lactobacillusdelbrueckii bulgaricus)菌株的混合物组成的商业起子培养物VEGE 31S的接种率为20DCU/100L。与此商业起子培养物组合的乳酸乳球菌菌株(DSM33924)以1.10E12cfu/100L的接种水平使用。发酵期间pH的演变报告于图1和图2中。
将乳酸乳球菌DSM33924添加到商业起子培养物Vege中导致大豆奶和燕麦奶的酸化动力学明显加速。已观察到,与单独用/>VEGE31S生产的酸奶相比,对于达到pH 4.60(其代表开始使酸奶从40℃冷却到6℃的pH),添加乳酸乳球菌DSM33924使大豆酸奶的时间减少了2.5h,并且将燕麦酸奶的时间减少了2.4h。这一结果表明了在酸奶乳制品替代生产期间使用乳酸乳球菌物种来提高工业酸奶工厂生产率的明显优势。
实例5:用于大豆奶发酵的乳酸乳球菌菌株与Danisco Vege起子培养物的组合
通过向商业大豆奶中添加2%右旋糖来制备大豆奶。然后将大豆奶制剂在95℃热处理6分钟。
由嗜热链球菌和德氏乳杆菌保加利亚菌株的混合物组成的商业起子培养物VEGE 038的接种率为20DCU/100L。由嗜热链球菌和德氏乳杆菌保加利亚菌株的混合物组成的商业起子培养物/>VEGE 033的接种率为20DCU/100L。与此商业起子培养物组合的乳酸乳球菌乳酸亚种菌株(DSM33924)以1.10E11cfu/100L或1.10E12cfu/100L的接种水平使用。将接种的奶在37℃孵育。发酵期间pH的演变报告于图3。将乳酸乳球菌DSM33924添加到商业起子培养物/>Vege中导致酸化动力学明显加速。酸化的滞后期和实现pH 4.60(其代表开始将酸奶从37℃冷却到6℃的pH)的时间显著减少(图3和表4)。表4报告了不同试验的Tph4,60。/>
表4:接种了Danisco起子培养物或Danisco起子培养物和DSM33924菌株的大豆奶中实现pH 4,60的时间,温度37℃。
DSM33924的添加减少了至少1小时(在一种情况下1.5小时)的技术时间。这一结果表明了在酸奶乳制品替代生产期间使用乳酸乳球菌物种来提高工业酸奶工厂生产率的明显优势。
(电子版原件)
(本表不是国际申请的一部分,也不算作国际申请的表)
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(本表不是国际申请的一部分,也不算作国际申请的表)
仅供受理局使用
仅供国际局使用
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Claims (31)
1.一种细菌菌株,所述细菌菌株选自乳酸乳球菌(Lactococcus lactis),如亚种乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactis subsp.lactis)或乳酸乳球菌霍氏亚种(Lactococcus lactissubsp.hordniae),或物种乳脂乳球菌(Lactococcus cremoris),如亚种乳脂乳球菌鳟鱼亚种(Lactococcus cremoris subsp.tructuae)或乳脂乳球菌乳脂亚种(Lactococcus cremoris subsp.cremoris)的物种,其中所述细菌菌株在源自第一植物、含有1%-4%的来自所述植物的蛋白质和2%葡萄糖的水性制剂中的酸化动力学的特征在于:
-如测定I中所述测量的,达到pH 6.00的平均时间小于约510min,如小于500min,如小于490min,如小于480min、470min、460min、450min、440min、430min、420min、410min、400min、390min或380min,以及
-如测定I中所述测量的,达到pH 5.5的平均时间小于约660min,如小于640min、620min、600min、580min、560min、540min、520min或500min。
2.根据权利要求1所述的细菌菌株,其中如测定II中所述测量的,所述细菌菌株在源自第二植物、含有1%-4%的来自所述植物的蛋白质和2%葡萄糖的水性制剂中的生长的特征在于:
-在源自植物的所述水性制剂中以1x106cfu/ml接种孵育6小时后平均至少约1.5x108cfu/ml。
3.根据权利要求1或2中任一项所述的细菌菌株,其中所述细菌菌株来源于源自第三植物的水性制剂中的发酵。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的细菌菌株,其中所述第一植物、第二植物和第三植物中的两种或三种是相同的植物。
5.根据权利要求1-3中任一项所述的细菌菌株,其中所述第一植物、第二植物和第三植物中的两种或三种是不同的植物。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的细菌菌株,其中所述第一植物、第二植物和/或第三植物独立地选自豆类,如豆类的种子,包括黄豆,如大豆、豌豆、蚕豆、鹰嘴豆、扁豆、绿豆;坚果,如杏仁、椰子、腰果、巴西坚果、榛子、澳洲坚果、山核桃、开心果和核桃;谷类和假谷类,如小麦、玉米/玉蜀黍、燕麦、高粱、水稻、大麦、粟、黑小麦、荞麦、黑麦、画眉草;块茎,如木薯、马铃薯、树薯、竹芋;含油植物,如大麻、低芥酸菜籽、油菜籽和向日葵。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的细菌菌株,其中所述第一植物、第二植物和/或第三植物独立地选自豌豆、大豆和燕麦。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的细菌菌株,所述细菌菌株是蛋自酶阴性细菌菌株。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的细菌菌株,所述细菌菌株是亚种乳酸乳球菌乳酸亚种的菌株。
10.根据权利要求1-9中任一项所述的细菌菌株,所述细菌菌株选自由以下组成的组:
(1)DSM 33924细菌菌株,于2021年6月30日根据布达佩斯条约以丹麦杜邦营养生物科学公司的名义保藏于莱布尼兹研究所DSMZ-德国微生物和细胞培养物保藏中心;
(2)DSM 33925细菌菌株,于2021年6月30日根据布达佩斯条约以丹麦杜邦营养生物科学公司的名义保藏于莱布尼兹研究所DSMZ-德国微生物和细胞培养物保藏中心;
(3)DSM 33926细菌菌株,于2021年6月30日根据布达佩斯条约以丹麦杜邦营养生物科学公司的名义保藏于莱布尼兹研究所DSMZ-德国微生物和细胞培养物保藏中心;
(4)DSM 33927细菌菌株,于2021年6月30日根据布达佩斯条约以丹麦杜邦营养生物科学公司的名义保藏于菜布尼兹研究所DSMZ-德国微生物和细胞培养物保藏中心;
(5)DSM 33928细菌菌株,于2021年6月30日根据布达佩斯条约以丹麦杜邦营养生物科学公司的名义保藏于莱布尼兹研究所DSMZ-德国微生物和细胞培养物保藏中心;
(6)DSM 33929细菌菌株,于2021年6月30日根据布达佩斯条约以丹麦杜邦营养生物科学公司的名义保藏于莱布尼兹研究所DSMZ-德国微生物和细胞培养物保藏中心;以及
(7)所述DSM 33924菌株、所述DSM 33925菌株、所述DSM 33926菌株、所述DSM 33927菌株、所述DSM 33928菌株或所述DSM 33929菌株的突变细菌菌株。
11.根据权利要求1-10中任一项所述的细菌菌株,其中所述酸化动力学在低于39℃,如低于37℃,如低于35℃,如低于33℃或甚至低于30℃,如在27℃-37℃的范围内或在27℃-39℃的范围内,如在30℃-39℃的范围内的温度测量。
12.一种组合物,如起子培养物的组合物,其包含如权利要求1-11中任一项所定义的细菌菌株的一种或多种培养物或由其组成,并且任选地进一步包含至少一种其他微生物,如至少一种其他乳酸菌和/或至少一种丙酸细菌。
13.根据权利要求12所述的组合物,其中所述至少一种其他乳酸菌是物种乳酸乳球菌的不同细菌菌株、物种乳脂乳球菌的不同细菌菌株、物种霍氏乳球菌(Lactococcushordinae)的不同细菌菌株、物种嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)的细菌菌株、和/或乳杆菌属(Lactobacillus)物种的细菌菌株如亚种德氏乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus)的细菌菌株、和/或双歧杆菌属(Bifidobacterium)的细菌菌株、和/或其任何组合。
14.根据权利要求12或13中任一项所述的组合物,所述组合物包含以下或由以下组成:如权利要求1-11中任一项所定义的细菌菌株、物种嗜热链球菌的细菌菌株以及德氏乳杆菌保加利亚亚种的细菌菌株的一种或多种培养物。
15.根据权利要求12-14中任一项所述的组合物,所述组合物进一步包含特别地是食品可接受的一种或多种组分,如冷冻保护剂和/或常用添加剂。
16.根据权利要求12-15中任一项所述的组合物,所述组合物呈液体、冷冻或干燥粉末形式。
17.根据权利要求12、14-16中任一项所述的组合物,所述组合物包含如权利要求1-11中任一项所定义的细菌菌株的一种或多种培养物或由其组成,并且没有其他细菌菌株。
18.根据权利要求12-17中任一项所述的组合物,所述组合物包含如权利要求1-11中任一项所定义的细菌菌株乳酸乳球菌的一种或多种培养物或由其组成,并且没有其他细菌菌株。
19.细菌菌株的培养物用于制备产品的用途,所述细菌菌株选自乳酸乳球菌,如亚种乳酸乳球菌乳酸亚种或乳酸乳球菌霍氏亚种,或物种乳脂乳球菌,如亚种乳脂乳球菌鳟鱼亚种或乳脂乳球菌乳脂亚种的物种,所述培养物如起子培养物,所述产品特别地是食物产品或饲料产品,如基于植物如豌豆、大豆和燕麦的食物产品,特别地发酵产品,特别地基于植物的发酵食物产品或饲料产品。
20.如权利要求1-11中任一项所定义的细菌菌株的培养物或如权利要求12-18中任一项所定义的组合物用于制备产品的用途,所述培养物如起子培养物,所述产品特别地是食物产品或饲料产品,如基于植物如豌豆、大豆和燕麦的食物产品,特别地发酵产品,特别地基于植物的发酵食物产品或饲料产品。
21.根据权利要求19或20中任一项所述的用途,其中所述植物选自豆类,如豆类的种子,包括黄豆,如大豆、豌豆、蚕豆、鹰嘴豆、扁豆、绿豆;坚果,如杏仁、椰子、腰果、巴西坚果、榛子、澳洲坚果、山核桃、开心果和核桃:谷类和假谷类,如小麦、玉米/玉蜀黍、燕麦、高粱、水稻、大麦、粟、黑小麦、荞麦、黑麦、画眉草;块茎,如木薯、马铃薯、树薯、竹芋;含油植物,如大麻、低芥酸菜籽、油菜籽和向日葵。
22.一种用于制备产品的方法,所述产品特别地是食物产品或饲料产品,如基于植物如豌豆、大豆和燕麦的食物产品或饲料产品,特别地发酵产品,特别地基于植物如豌豆、大豆和燕麦的发酵食物产品或饲料产品,其中所述方法包括使底物,特别地植物奶底物与细菌菌株的培养物接触,或在存在所述细菌菌株的培养物的情况下接触所述底物,特别地植物奶底物,所述细菌菌株选自乳酸乳球菌,如亚种乳酸乳球菌乳酸亚种或乳酸乳球菌霍氏亚种,或物种乳脂乳球菌,如亚种乳脂乳球菌鳟鱼亚种或乳脂乳球菌乳脂亚种的物种,任选地发酵所述底物,以及获得所述产品。
23.一种用于制备产品的方法,所述产品特别地是食物产品或饲料产品,如基于植物如豌豆、大豆和燕麦的食物产品或饲料产品,特别地发酵产品,特别地基于植物如豌豆、大豆和燕麦的发酵食物产品或饲料产品,其中所述方法包括使底物,特别地植物奶底物与如权利要求1-11中任一项所定义的细菌菌株的培养物或如权利要求12-18中任一项所定义的组合物接触,或在存在如权利要求1-11中任一项所定义的细菌菌株的培养物或如权利要求12-18中任一项所定义的组合物的情况下接触所述底物,特别地植物奶底物,任选地发酵所述底物,以及获得所述产品。
24.一种用于酸化水性制剂的方法,所述水性制剂源自植物如豌豆、大豆和燕麦,所述水性制剂含有0%-10%,如1%-8%、或2%-7%、或3%-6%的来自所述植物的蛋白质和糖,如选自葡萄糖、蔗糖和右旋糖的糖,如所述植物的天然糖,如量为1%-10%,如2%-8%、如2%-7%、如2%-6%、如2%-5%,所述方法包括使所述水性制剂,特别地植物奶底物与细菌菌株的培养物接触,或在存在所述细菌菌株的培养物的情况下接触所述水性制剂,特别地植物奶底物.所述细菌菌株选自乳酸乳球菌,如亚种乳酸乳球菌乳酸亚种或乳酸乳球菌霍氏亚种,或物种乳脂乳球菌,如亚种乳脂乳球菌鳟鱼亚种或乳脂乳球菌乳脂亚种的物种。
25.一种用于酸化水性制剂的方法,所述水性制剂源自植物如豌豆、大豆和燕麦,所述水性制剂含有0%-10%,如1%-8%、或2%-7%、或3%-6%的来自所述植物的蛋白质和糖,如选自葡萄糖、蔗糖和右旋糖的糖,如所述植物的天然糖,如量为1%-10%、如2%-8%、如2%-7%、如2%-6%、如2%-5%,所述方法包括使所述水性制剂,特别地植物奶底物与如权利要求1-11中任一项所定义的细菌菌株的培养物或如权利要求12-18中任一项所定义的组合物接触,或在存在如权利要求1-11中任一项所定义的细菌菌株的培养物或如权利要求12-18中任一项所定义的组合物的情况下接触所述水性制剂,特别地植物奶底物。
26.根据权利要求22-25中任一项所述的方法,其中所述植物选自豆类,如豆类的种子,包括黄豆,如大豆、豌豆、蚕豆、鹰嘴豆、扁豆、绿豆;坚果,如杏仁、椰子、腰果、巴西坚果、榛子、澳洲坚果、山核桃、开心果和核桃;谷类和假谷类,如小麦、玉术/玉蜀黍、燕麦、高粱、水稻、大麦、粟、黑小麦、荞麦、黑麦、画眉草;块茎,如木薯、马铃薯、树薯、竹芋;含油植物,如大麻、低芥酸菜籽、油菜籽和向日葵。
27.一种产品,特别地食物产品或饲料产品,特别地发酵产品,特别地发酵食品或发酵饲料产品,特别地基于植物如豌豆、大豆和燕麦的发酵食物产品或饲料产品,所述产品可通过根据权利要求22-26的方法获得。
28.一种产品,特别地食物产品或饲料产品,特别地发酵产品,特别地发酵食品或发酵饲料产品,特别地基于植物如豌豆、大豆和燕麦的发酵食物产品或饲料产品,所述产品包含如权利要求1-11中任一项所定义的细菌菌株的培养物或如权利要求12-18中任一项所定义的组合物。
29.根据权利要求27或28中任一项所述的产品,所述产品是基于植物的乳制品替代产品,特别地基于植物如豌豆、大豆和燕麦的产品,如基于植物的酸奶、奶酪、夸克干酪、酸性稀奶油、开菲尔、乳酒、基于植物的黄油、植物奶饮品、酸奶植物饮料、发酵植物奶、成熟奶油、白干酪、农家奶酪或奶油甜点。
30.一种非乳发酵产品,所述非乳发酵产品包含源自基于植物的来源的一种或多种蛋白和如权利要求1-11中任一项所定义的细菌菌株。
31.根据权利要求12-18中任一项所述的组合物,或根据权利要求27-30中任一项所述的产品,如非乳发酵产品,其中如权利要求1-11中任一项所定义的细菌菌株的培养物以至少约1x106cfu/ml的量存在。
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