CN117599150A - 一种含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物及其在制备具有抗炎作用的产品中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及生物医药技术领域，具体公开了一种含γ‑氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物及其在制备具有抗炎作用的产品中的应用。所述的益生菌活性肽，具有SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列；其中，SEQ ID NO:1的氨基酸序列为：Thr‑Glu‑Trp‑Ala‑Glu；SEQ ID NO:2的氨基酸序列为：Thr‑Gly‑Glu‑Pro；SEQ ID NO:3的氨基酸序列为：Thr‑Glu‑Gly‑Phe‑Ala。所述的含γ‑氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物，包含γ‑氨基丁酸以及益生菌活性肽。由于本发明所述的益生菌活性肽和含γ‑氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物具有抗炎、抗氧化以及提高细胞抗紫外辐照损伤活性作用；因此，将其作为有效成分用于制备具有相应作用的产品具有重要的应用前景。

Description

一种含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物及其在制备 具有抗炎作用的产品中的应用
技术领域
本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物及其在制备具有抗炎作用的产品中的应用。
背景技术
炎症是一种生物防御反应，通常是机体对外部损伤、感染、刺激或者损害的一种生物学反应。炎症因子是介导炎症反应的生物活性分子，包括细胞因子、化学介质和细胞黏附分子等。它们在炎症过程中起着重要的调节作用，促使免疫细胞趋向炎症部位，引导免疫细胞趋化和迁移，增加炎症部位的血管通透性，激活免疫细胞等。炎症和炎症因子可能通过氧化应激、DNA损伤和修复能力下降、炎症性细胞因子对细胞和组织的直接损害、免疫系统的调节失衡以及对组织修复能力的影响等多种途径参与引起衰老的过程。长期的慢性炎症和过度的炎症因子活化可能加速细胞和组织的功能衰老，导致炎症性疾病的发生，并可能与免疫衰老有关。
研究表明，益生菌可能通过调节肠道微生物群的平衡、改善肠道屏障功能、减轻慢性炎症、增强免疫系统功能等途径对抗衰老可能产生积极作用。而活性肽是一种在抗衰老领域中具有生物活性的分子，它们通过多种机制对皮肤产生积极的抗衰老效应。例如，它们可以促进胶原蛋白的合成，增强皮肤的弹性和紧致性；具有抗氧化作用，有助于中和自由基对皮肤的损害；促进细胞修复和再生，改善皮肤的质地和光泽；以及调节细胞内信号传导通路，对皮肤的抗衰老过程产生积极影响。因此，开发更多结构新颖的具有抗炎作用的益生菌活性肽具有广阔的应用前景。
γ-氨基丁酸，又称为γ-氨基丁酸或γ-氨基丁酸(GABA)，是一种非蛋白质的氨基酸，它在生物体内充当神经递质的角色。GABA主要存在于中枢神经系统中，起到抑制性神经递质的作用，对调节神经活动和情绪具有重要作用。然而，γ-氨基丁酸与益生菌活性肽组合后是否具有抗炎作用，现有技术并未有报道。
发明内容
为了克服现有技术中存在的至少之一的技术问题，本发明提供了一种益生菌活性肽和含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物。
本发明的技术方案如下：
本发明首先提供了一种益生菌活性肽，所述的益生菌活性肽具有SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列；
其中，SEQ ID NO:1的氨基酸序列为：Thr-Glu-Trp-Ala-Glu；
SEQ ID NO:2的氨基酸序列为：Thr-Gly-Glu-Pro；
SEQ ID NO:3的氨基酸序列为：Thr-Glu-Gly-Phe-Ala。
本发明还提供了一种含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物，其包含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽；
所述的益生菌活性肽为权利要求1所述SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列的任意一种或一种以上混合的益生菌活性肽。
优选地，所述的含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物，包含γ-氨基丁酸以及SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的益生菌活性肽、SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的益生菌活性肽、SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列的益生菌活性肽。
优选地，所述组合物中，γ-氨基丁酸与SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的益生菌活性肽、SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的益生菌活性肽、SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列的益生菌活性肽的质量比为1:(1-100):(1-100):(1-100)。
进一步优选地，所述组合物中，γ-氨基丁酸与SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的益生菌活性肽、SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的益生菌活性肽、SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列的益生菌活性肽的质量比为1:(1-50):(1-50):(1-50)。
最优选地，所述组合物中，γ-氨基丁酸与SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的益生菌活性肽、SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的益生菌活性肽、SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列的益生菌活性肽的质量比为1:11.5:15.7:15.3。
本发明还提供一种上述益生菌活性肽或含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物在制备具有抗炎作用的产品中的应用。
本发明还提供一种上述益生菌活性肽或含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物在制备预防或治疗紫外辐照诱发的人皮肤成纤维细胞炎症的产品中的应用。
本发明还提供一种上述益生菌活性肽或含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物在制备具有提高细胞抗紫外辐照损伤活性作用的产品中的应用。
本发明还提供一种上述益生菌活性肽或含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物在制备具有抗氧化作用的产品中的应用。
优选地，所述的产品为食品、功能性食品、护肤品以及药品。
有益效果：
(1)本发明提供了一种全新的具有SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2以及SEQ ID NO:3所示氨基酸序列的益生菌活性肽；研究表明，本发明所述的益生菌活性肽具有抗炎，尤其是抗紫外辐照诱发的人皮肤成纤维细胞炎症作用；此外，还具有提高细胞抗紫外辐照损伤活性作用以及抗氧化作用。
(2)研究表明，本发明具有SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2以及SEQ ID NO:3所示氨基酸序列的益生菌活性肽，其抗炎作用要强于谷胱甘肽。
(3)本发明还提供了一种全新的含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物；研究表明，将γ-氨基丁酸与SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2以及SEQ ID NO:3所示氨基酸序列的益生菌活性肽组合后得到的含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物，其抗炎、抗氧化以及提高细胞抗紫外辐照损伤活性作用相比于单独的γ-氨基丁酸或单独的SEQ ID NO:1、SEQID NO:2或SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列的益生菌活性肽，得到了进一步的显著提高；这可能是将γ-氨基丁酸与SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2以及SEQ ID NO:3所示氨基酸序列的益生菌活性肽组合后产生协同增效作用的结果。
(4)由于本发明所述的益生菌活性肽和含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物具有抗炎、抗氧化以及提高细胞抗紫外辐照损伤活性作用；因此，将其作为有效成分用于制备具有相应作用的产品具有重要的应用前景。
附图说明
图1为本发明益生菌活性肽-1的HPLC检测谱图。
图2为本发明益生菌活性肽-1的HR-ESI-MS谱图。
图3为本发明益生菌活性肽-2的HPLC检测谱图。
图4为本发明益生菌活性肽-2的HR-ESI-MS谱图。
图5为本发明益生菌活性肽-3的HPLC检测谱图。
图6为本发明益生菌活性肽-3的HR-ESI-MS谱图。
图7为本发明益生菌活性肽和含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物对对紫外辐照皮肤成纤维细胞氧化性指标的影响实验结果图。
图8为本发明益生菌活性肽和含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物对对衰老小鼠氧化性指标、炎性因子的影响实验结果图。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1本发明益生菌活性肽的制备
(1)取100g罗伊氏乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)HCLR01(保藏编号为GDMCC 63144，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏日期为2023年1月13日)与1000mL水混合超声破碎15min，离心，收集菌体裂解物，冻干。
(2)将菌体裂解物与水混合并用1kD的透析膜透析，透析液冻干，得分子量＜1kDa的菌体裂解物；
(3)将分子量＜1kDa的菌体裂解物进一步上葡聚糖凝胶(Sephadex G 15)柱色谱柱；依次用0.20,0.40,0.60,0.80,1.00,1.20,1.40,1.60mM(NH4)2SO4缓冲液梯度洗脱(每个梯度缓冲液的用量为葡聚糖凝胶(sephadex G 15)柱柱体积的1倍)，分别收集0.80、1.00以及1.20mM(NH4)2SO4缓冲液洗脱下来的洗脱液浓缩干燥后得菌体活性部位-1菌体活性部位-2以及菌体活性部位-3；
(4)将菌体活性部位-1菌体活性部位-2以及菌体活性部位-3分别进一步通过HPLC制备，分别得到益生菌活性肽-1、益生菌活性肽-2及益生菌活性肽-3；
HPLC的制备条件为：以0.1％三氟乙酸-乙腈溶液为流动相A，以0.1％三氟乙酸的水溶液为流动相B，进行梯度洗脱(梯度洗脱条件见表1)；测波长为220nm，流速为10mL/min；色谱柱为：XBridge BEH C18 OBD Prep Column,5μm,19mm*150mm；
收集11.97min色谱峰对应的洗脱液，浓缩干燥后得本发明所述的益生菌活性肽-1；
收集11.51min色谱峰对应的洗脱液，浓缩干燥后得本发明所述的益生菌活性肽-2；
收集11.71min色谱峰对应的洗脱液，浓缩干燥后得本发明所述的益生菌活性肽-3。
表1HPLC洗脱条件
进一步的，我们利用通过质谱及结合Marfey方法鉴定益生菌活性肽-1、益生菌活性肽-2及益生菌活性肽-3的结构，结果如下：
益生菌活性肽-1：m/z 635.2657是[M+H]+离子；m/z 617.2577是[M-H2O+H]+离子；m/z 488.2138是y4离子；m/z 417.1764是y3离子；m/z 388.1504是[y4-y1+H]+离子；m/z258.1240是[b3-b1+H]+离子；m/z 231.0976是y2离子；m/z 159.0915是[Trp-COOH+H]+离子；130.0652是[Glu-H2O+H]+离子。结合Marfey方法，最终确定，益生菌活性肽-1为氨基酸序列为Thr-Glu-Trp-Ala-Glu的寡肽，即本发明具有SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的益生菌活性肽。
益生菌活性肽-2：m/z 403.1828是[M+H]+离子；m/z 288.1195是y3离子；m/z227.1028是[b2-H2O+H]+离子；m/z 159.0764是y2离子；m/z 131.0814是[b2-b1+2H]+离子；m/z 116.0705是[b1+H]+离子；m/z 102.0548是y1离子。结合Marfey方法，最终确定，益生菌活性肽-2为氨基酸序列为Thr-Gly-Glu-Pro的寡肽，即本发明具有SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的益生菌活性肽。
益生菌活性肽-3：m/z 524.2348是[M+H]+离子；m/z 435.1877是y4离子；m/z288.1194是y3离子；m/z 231.0973是y2离子；m/z 203.1024是[b3-b1+H]+离子；m/z177.1020是[b3-b1-COOH+H]+离子；m/z 140.0706是[y3-by1-COOH+H]+离子。结合Marfey方法，最终确定，益生菌活性肽-3为氨基酸序列为Thr-Glu-Gly-Phe-Ala的寡肽，即本发明具有SEQ ID NO:3所示氨基酸序列的益生菌活性肽。
实施例2含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物的制备
将γ-氨基丁酸与益生菌活性肽-1、益生菌活性肽-2、益生菌活性肽-3按质量比为1:11.5:15.7:15.3混匀，得γ-氨基丁酸、益生菌活性肽组合物，即本发明所述的含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物。
效果实施例1
实施方法：人皮肤成纤维细胞正常培养至细胞生长至90％融合时，用0.25％胰蛋白酶消化后分别接种于6孔培养板中，待细胞80％融合时进行紫外辐照实验。实验中，先将紫外线灯管消毒后置入超净台中，恒温水浴箱消毒后加入纯水置入超净台中，超净台紫外灯消毒30min。照射前将长波紫外灯(360nm)置于恒温水浴箱上，测量灯管与6孔板照射平面之间距离为12cm。照射前，紫外灯预热30min，待照射功率稳定后，功率为20.0mJ/s照射。紫外照射时以PBS置换培养基，掀开盖子在恒温水浴箱中将细胞暴露于紫外辐照装置下，照射距离为12cm。照射前2h加入PBS液，培养板置入37℃恒温水浴箱中，照射后置换含10％小牛血清及活性物(终浓度为50μg/mL)的DMEM置入培养箱中继续培养，24h后收集细胞及培养上清，CCK 8试剂盒检测细胞活力；按ROS、SOD、MDA、CAT及TNF-α、IL-6、IL-1β含量ELISA试剂盒操作说明书操作，检测其活性、含量，实验分组如表2所示。
表2效果实施例1实验分组
本效果实验例中的益生菌活性肽-1、益生菌活性肽-2以及益生菌活性肽-3为按实施例1所述方法制备得到的益生菌活性肽-1、益生菌活性肽-2以及益生菌活性肽-3；所述的γ-氨基丁酸、益生菌活性肽组合物为按实施例2所述方法制备得到的含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物。
分析本效果实施例实验结果(图7a)显示，与空白对照组相比，紫外辐照使皮肤成纤维细胞活力降低27.5％(p<0.01)，但经本发明益生菌活性肽或含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物治疗后，皮肤成纤维细胞活性均高于辐照组。与辐照组相比，γ-氨基丁酸、益生菌活性肽组合物组皮肤成纤维细胞活力提高30.1％(p<0.01)。而相比于同等浓度的γ-氨基丁酸、谷胱甘肽、益生菌活性肽-1、益生菌活性肽-2或益生菌活性肽-3，γ-氨基丁酸、益生菌活性肽组合物能更好的提高紫外辐照条件下的细胞活力。
而进一步分析本效果实施例实验结果发现，与γ-氨基丁酸、谷胱甘肽、益生菌活性肽-1、益生菌活性肽-2或益生菌活性肽-3组相比，γ-氨基丁酸、益生菌活性肽组合物组的细胞活力的提升更明显。说明，γ-氨基丁酸、益生菌活性肽组合物提升细胞活力的活性强于γ-氨基丁酸、谷胱甘肽、益生菌活性肽-1、益生菌活性肽-2或益生菌活性肽-3。
进一步分析本效果实施例实验结果(图7b)显示，与空白对照组相比，紫外辐照使细胞ROS含量增加198.5％(p<0.01)，但分析本效果实施例实验结果发现，经本发明益生菌活性肽，尤其是γ-氨基丁酸、益生菌活性肽组合物处理的细胞内ROS含量显著低于紫外辐照组。其中，与紫外辐照组相比，γ-氨基丁酸、益生菌活性肽组合物组细胞ROS含量减少53.6％(p<0.01)。相比于同等浓度的γ-氨基丁酸、谷胱甘肽、益生菌活性肽-1、益生菌活性肽-2或益生菌活性肽-3，γ-氨基丁酸、益生菌活性肽组合物能够更好的提高紫外辐照条件下的细胞清除ROS的活性。
进一步分析本效果实施例实验结果(图7c)显示，与空白对照组相比，紫外辐照使细胞SOD活性降低21.4％(p<0.01)，但分析本效果实施例实验结果发现，经经本发明益生菌活性肽，尤其是γ-氨基丁酸、益生菌活性肽组合物处理的细胞SOD活性显著恢复并高于紫外辐照组。其中，与紫外辐照组相比，γ-氨基丁酸、益生菌活性肽组合物组细胞SOD活性提高19.8％(p<0.01)。且进一步分析实验结果发现，相比于同等浓度的γ-氨基丁酸、谷胱甘肽、益生菌活性肽-1、益生菌活性肽-2或益生菌活性肽-3，γ-氨基丁酸、益生菌活性肽组合物能够更好的提高紫外辐照条件下的细胞SOD活性的活性，说明γ-氨基丁酸、益生菌活性肽组合物具有更好的提高细胞的抗紫外辐照损伤的活性。
进一步分析本效果实施例实验结果发现，与空白对照组相比，紫外辐照组(图7d、e、f)炎性因子TNF-α、IL-6、IL-1β的含量显著增加，我们推测紫外辐照损伤皮肤成纤维细胞，诱导炎性细胞因子表达或分泌，进而诱发细胞炎症，降低细胞活力。与空白对照组相比，紫外辐照组炎性因子TNF-α、IL-6、IL-1β的含量分别增加175.3％(p<0.01)、165.3％(p<0.01)、166.4％(p<0.01)，而本发明益生菌活性肽或含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物组炎性因子TNF-α、IL-6、IL-1β的含量有所减少。其中，γ-氨基丁酸、益生菌活性肽组合物组炎性因子TNF-α、IL-6、IL-1β的含量显著低于紫外辐照组。其中，与紫外辐照组相比，γ-氨基丁酸、益生菌活性肽组炎性因子TNF-α、IL-6、IL-1β的含量分别减少51.6％(p<0.01)、30.6％(p<0.01)、42.1％(p<0.01)。
分析本效果实施例实验结果发现，同等浓度条件下，γ-氨基丁酸、益生菌活性肽组合物组炎性因子TNF-α、IL-6、IL-1β的含量低于γ-氨基丁酸、谷胱甘肽、益生菌活性肽-1、益生菌活性肽-2或益生菌活性肽-3组。我们推测，γ-氨基丁酸与本发明益生菌活性肽可通过协同作用抑制紫外辐照诱发的人皮肤成纤维细胞炎性因子表达或分泌，进而发挥更好的抑制紫外辐照诱发的人皮肤成纤维细胞炎症，发挥更好的保护活性。
效果实施例2
健康Balb/c小鼠56只，饲养温度为20-22℃，自然光照，自由进食饮水，用普通饲料喂养5d。将小鼠随机分成8组，(正常组及模型组、γ-氨基丁酸组、谷胱甘肽组、益生菌活性肽-1组、益生菌活性肽-2组、益生菌活性肽-3组、γ-氨基丁酸、益生菌活性肽组合物组；本效果实施例分组见表3。
除正常对照组外，其余各组腹部注射700mg/(kg·d)D-半乳糖建立氧化损伤模型，γ-氨基丁酸组、谷胱甘肽组、益生菌活性肽-1组、益生菌活性肽-2组、益生菌活性肽-3组及γ-氨基丁酸、益生菌活性肽组合物组按照6mg/(kg·d)的剂量灌胃，正常对照组注射等体积的生理盐水，灌胃等体积的蒸馏水，每2d称体质量1次，持续28d。实验结束后，眼球取血处死小鼠，参考ELISA试剂盒使用说明测定血清中SOD、GSH-Px活性及ROS、MDA、TNF-α、IL-6、IL-1β、PGE2含量。
表3效果实施例2实验分组
本效果实验例中的益生菌活性肽-1、益生菌活性肽-2以及益生菌活性肽-3为按实施例1所述方法制备得到的益生菌活性肽-1、益生菌活性肽-2以及益生菌活性肽-3；所述的γ-氨基丁酸、益生菌活性肽组合物为按实施例2所述方法制备得到的含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物。
实验结果分析：由图8a、b可知，模型组小鼠血清GSH-Px、SOD活性与正常组相比显著下降；相比于正常组，D-半乳糖刺激使模型组小鼠血清GSH-Px、SOD活性分别降低28.4％(p<0.01)、25.3％(p<0.01)，说明，D-半乳糖刺激使小鼠的抗氧化酶活性降低，降低小鼠的抗氧化能力。而进一步分析本效果实施例实验结果(图8c、d)发现，小鼠血清MDA及ROS含量与正常组相比显著升高，与正常组相比，模型组小鼠血清MDA及ROS含量分别升高234.1％(p<0.01)及165.4％(p<0.01)，说明D-半乳糖刺激诱导小鼠体内MDA及ROS的过量生成或降低其清除体内MDA及ROS的能力。D-半乳糖刺激在诱导小鼠体内氧化性物质过量积累的同时使小鼠体内抗氧化酶活性降低，最终使小鼠抗氧化能力降低，对小鼠造成严重的氧化损伤。而经本发明益生菌活性肽治疗之后，尤其是经γ-氨基丁酸、益生菌活性肽组合物治疗之后，与模型组相比，小鼠血清GSH-Px及SOD的活性得到有效恢复，小鼠血清中MDA及ROS含量显著减少。其中，经γ-氨基丁酸、益生菌活性肽组合物治疗之后，与模型组相比，小鼠血清GSH-Px、SOD活性分别提高26.8％(p<0.01)、29.5％(p<0.01)，而模型组小鼠血清MDA及ROS含量减少40.7％(p<0.01)及41.5％(p<0.01)。
进一步分析γ-氨基丁酸、益生菌活性肽组合物对D-半乳糖刺激诱导的小鼠炎性因子分泌的影响实验结果(图8e、f、g)可知，模型组小鼠血清中炎性因子(TNF-α、IL-6、IL-1β、PGE2)含量与正常组相比显著增加；相比于正常组，D-半乳糖刺激使模型组小鼠血清炎性因子(TNF-α、IL-6、IL-1β、PGE2)含量分别增加211.0％(p<0.01)、205.2％(p<0.01)、311.6％(p<0.01)、101.7％(p<0.01)，说明，D-半乳糖刺激诱发小鼠氧化损伤的同时也诱发了小鼠炎症，使小鼠分泌炎症因子增加，加重炎症反应，对小鼠造成严重的炎性损伤，进而损伤小鼠免疫，使其免疫力降低。而经本发明益生菌活性肽或γ-氨基丁酸、益生菌活性肽组合物等的治疗之后，尤其是经γ-氨基丁酸、益生菌活性肽组合物治疗之后，与模型组相比，小鼠血清炎性因子(TNF-α、IL-6、IL-1β、PGE2)含量显著减少。其中，经γ-氨基丁酸、益生菌活性肽组合物治疗之后，与模型组相比，小鼠血清炎性因子(TNF-α、IL-6、IL-1β、PGE2)含量分别降低49.8％(p<0.01)、45.6％(p<0.01)、54.7％(p<0.01)及36.3％(p<0.01)。说明本发明益生菌活性肽以及γ-氨基丁酸、益生菌活性肽组合物能够有效抑制D-半乳糖刺激诱发的炎性因子分泌，减轻D-半乳糖刺激导致的小鼠炎性损伤，也说明本发明益生菌活性肽以及γ-氨基丁酸、益生菌活性肽组合物能够有效提高小鼠免疫力以抵抗D-半乳糖刺激导致的小鼠炎性损伤。
进一步分析实验结果发现，本发明益生菌活性肽-1、益生菌活性肽-2及益生菌活性肽-3对小鼠清除血清MDA、ROS的活性及提高小鼠血清SOD及GSH-Px活力强于同等浓度条件下的谷胱甘肽或γ-氨基丁酸；同时，本发明益生菌活性肽-1、益生菌活性肽-2及益生菌活性肽-3对抑制小鼠炎性因子(TNF-α、IL-6、IL-1β、PGE2)分泌的活力强于同等浓度条件下的谷胱甘肽或γ-氨基丁酸。此外，我们分析实验结果还发现，相同剂量条件下，γ-氨基丁酸、益生菌活性肽组合物对提升实验小鼠的氧化、炎性损伤的恢复能力比γ-氨基丁酸、益生菌活性肽-1、益生菌活性肽-2或益生菌活性肽-3更优秀。我们推测，γ-氨基丁酸、益生菌活性肽组合物中的γ-氨基丁酸、益生菌活性肽-1、益生菌活性肽-2或益生菌活性肽-3能够通过协同作用提升小鼠血清中抗氧化酶活性及提高小鼠清除血清中MDA、ROS的能力、提高小鼠炎性因子分泌的活性，更好的提高小鼠的抗氧化、抗炎活性，从而提高小鼠的免疫调节及抗衰老能力。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，便于具体和详细地理解本发明的技术方案，但并不能因此而理解为对发明专利保护范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。应当理解，本领域技术人员在本发明提供的技术方案的基础上，通过合乎逻辑的分析、推理或者有限的试验得到的技术方案，均在本发明所附权利要求的保护范围内。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求的内容为准，说明书可以用于解释权利要求的内容。

Claims (10)

1.一种益生菌活性肽，其特征在于，具有SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列；
其中，SEQ ID NO:1的氨基酸序列为：Thr-Glu-Trp-Ala-Glu；
SEQ ID NO:2的氨基酸序列为：Thr-Gly-Glu-Pro；
SEQ ID NO:3的氨基酸序列为：Thr-Glu-Gly-Phe-Ala。
2.一种含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物，其特征在于，包含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽；
所述的益生菌活性肽为权利要求1所述SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列的任意一种或一种以上混合的益生菌活性肽。
3.根据权利要求2所述的含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物，其特征在于，包含γ-氨基丁酸以及SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的益生菌活性肽、SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的益生菌活性肽、SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列的益生菌活性肽。
4.根据权利要求3所述的含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物，其特征在于，所述组合物中，γ-氨基丁酸与SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的益生菌活性肽、SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的益生菌活性肽、SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列的益生菌活性肽的质量比为1:(1-100):(1-100):(1-100)。
5.根据权利要求5所述的含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物，其特征在于，所述组合物中，γ-氨基丁酸与SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的益生菌活性肽、SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的益生菌活性肽、SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列的益生菌活性肽的质量比为1:(1-50):(1-50):(1-50)。
6.根据权利要求5所述的含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物，其特征在于，所述组合物中，γ-氨基丁酸与SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的益生菌活性肽、SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的益生菌活性肽、SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列的益生菌活性肽的质量比为1:11.5:15.7:15.3。
7.权利要求1所述的益生菌活性肽或权利要求2～6任一项所述的含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物在制备具有抗炎作用的产品中的应用。
8.权利要求1所述的益生菌活性肽或权利要求2～6任一项所述的含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物在制备预防或治疗紫外辐照诱发的人皮肤成纤维细胞炎症的产品中的应用。
9.权利要求1所述的益生菌活性肽或权利要求2～6任一项所述的含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物在制备具有提高细胞抗紫外辐照损伤活性作用的产品中的应用。
10.权利要求1所述的益生菌活性肽或权利要求2～6任一项所述的含γ-氨基丁酸以及益生菌活性肽的组合物在制备具有抗氧化作用的产品中的应用。
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