CN117462551A

CN117462551A - 茚地那韦和/或其衍生物在制备抗结核药物中的应用

Info

Publication number: CN117462551A
Application number: CN202311811103.1A
Authority: CN
Inventors: 郭庆龙; 毕静; 张国良
Original assignee: Shenzhen National Clinical Research Center For Infectious Diseases
Current assignee: Shenzhen National Clinical Research Center For Infectious Diseases
Priority date: 2023-12-27
Filing date: 2023-12-27
Publication date: 2024-01-30
Anticipated expiration: 2043-12-27

Abstract

本申请提供了茚地那韦和/或其衍生物在制备抗结核药物中的应用，涉及医药技术领域。茚地那韦为抗逆转录蛋白酶抑制剂，可与HIV蛋白酶催化部位结合，抑制病毒多蛋白前体分裂成为病毒复制所需的成熟的功能蛋白。茚地那韦可与其他抗逆转录病毒药剂配合使用治疗HIV感染；本申请发现茚地那韦具有在巨噬细胞水平抑制结核杆菌胞内存活的作用，即茚地那韦具有作为抗结核药物的潜力，在HIV合并MTB感染的临床治疗中具有重要的应用价值。

Description

茚地那韦和/或其衍生物在制备抗结核药物中的应用

技术领域

本申请涉及医药技术领域，特别涉及茚地那韦和/或其衍生物在制备抗结核药物中的应用。

背景技术

艾滋病(acquired immunodeficiency syndrome，AIDS)是威胁公众健康的重要公共卫生问题。

AIDS患者免疫缺陷，常合并多种机会性感染，而结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis，MTB)是其中较为常见的病原体，且病情多进展，仅HIV感染合并结核分枝杆菌潜伏感染(Latent TB Infection，LTBI)者进展为活动性结核病的概率就是HIV阴性者的30倍。因此，HIV与MTB相互作用、相互影响，诊治复杂且困难。尽早识别和发现结核病（包括LTBI和活动性结核病）、制定有效的抗结核及抗病毒治疗(anti-retroviral therapy，ART)方案是降低HIV/MTB双重感染发病风险最为有效的关键措施；而相关技术中并不存在对HIV/MTB双重感染具有防控和促进疗效作用的药物。

发明内容

本申请是鉴于上述课题而进行的，其目的在于，提供一种茚地那韦和/或其衍生物在制备抗结核药物中的应用；上述药物能够对HIV/MTB双重感染进行防控。

本申请第一方面提供了茚地那韦和/或其衍生物在制备抗结核药物中的应用。

茚地那韦为抗逆转录蛋白酶抑制剂，可与HIV蛋白酶催化部位结合，抑制病毒多蛋白前体分裂成为病毒复制所需的成熟的功能蛋白。其分子式为：

茚地那韦可与其他抗逆转录病毒药剂配合使用治疗HIV感染；本申请发现茚地那韦具有在巨噬细胞水平抑制结核杆菌胞内存活的作用，即茚地那韦具有作为抗结核药物的潜力，在HIV合并MTB感染的临床治疗中具有重要的应用价值。

可选地，所述茚地那韦的衍生物包括其在药理上容许的盐。

可选地，所述药理学上容许的盐包括与无机酸、有机酸、碱金属、碱土金属和氨基酸形成的盐。

可选地，所述抗结核药物用于预防或治疗结核杆菌的感染。

可选地，所述抗结核药物的制备原料还包括药用载体。

可选地，所述药用载体包括稀释剂、赋形剂、填充剂、黏合剂、润湿剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂、甜味剂和香味剂中的至少一种。

本申请第二方面提供了一种预防和/或治疗结核病的药物，所述药物的有效成分包含茚地那韦和/或其衍生物。

可选地，所述药物中茚地那韦和/或其衍生物的质量含量为0.1%～99%。

可选地，所述结核病包括肺结核或肺外结核。

可选地，所述药物的给药剂型选自散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、溶液剂、乳剂和混悬剂中的至少一种。

本申请第三方面提供了一种结核病治疗药盒，所述药盒中包括上述预防和/或治疗结核病的药物。

可选地，所述药盒中茚地那韦和/或其衍生物的含量按如下日给药量标准配制：

茚地那韦和/或其衍生物：0.1mg/kg体重/天~1000mg/kg体重/天。

附图说明

为了更清楚地说明本附图实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本附图的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图示出的结构获得其他的附图。

图1为实施例1中不同浓度茚地那韦对THP-1巨噬细胞的细胞活力影响结果图。

图2为实施例2中茚地那韦在巨噬细胞水平对结核分枝杆菌H37Rv的抑制情况结果图。

本附图目的的实现、功能特点及优点将结合实施例，参照附图做进一步说明。

具体实施方式

以下，适当地参照附图详细说明具体公开了本申请的茚地那韦和/或其衍生物在制备抗结核药物中的应用的实施方式。但是会有省略不必要的详细说明的情况。例如，有省略对已众所周知的事项的详细说明、实际相同结构的重复说明的情况。这是为了避免以下的说明不必要地变得冗长，便于本领域技术人员的理解。此外，附图及以下说明是为了本领域技术人员充分理解本申请而提供的，并不旨在限定权利要求书所记载的主题。

本申请所公开的“范围”以下限和上限的形式来限定，给定范围是通过选定一个下限和一个上限进行限定的，选定的下限和上限限定了特别范围的边界。这种方式进行限定的范围可以是包括端值或不包括端值的，并且可以进行任意地组合，即任何下限可以与任何上限组合形成一个范围。例如，如果针对特定参数列出了60-120和80-110的范围，理解为60-110和80-120的范围也是预料到的。此外，如果列出的最小范围值1和2，和如果列出了最大范围值3，4和5，则下面的范围可全部预料到：1-3、1-4、1-5、2-3、2-4和2-5。在本申请中，除非有其他说明，数值范围“a-b”表示a到b之间的任意实数组合的缩略表示，其中a和b都是实数。例如数值范围“0-5”表示本文中已经全部列出了“0-5”之间的全部实数，“0-5”只是这些数值组合的缩略表示。另外，当表述某个参数为≥2的整数，则相当于公开了该参数为例如整数2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12等。

如果没有特别的说明，本申请的所有实施方式以及可选实施方式可以相互组合形成新的技术方案。

如果没有特别的说明，本申请的所有技术特征以及可选技术特征可以相互组合形成新的技术方案。

如果没有特别的说明，本申请的所有步骤可以顺序进行，也可以随机进行，优选是顺序进行的。例如，所述方法包括步骤(a)和(b)，表示所述方法可包括顺序进行的步骤(a)和(b)，也可以包括顺序进行的步骤(b)和(a)。例如，所述提到所述方法还可包括步骤(c)，表示步骤(c)可以任意顺序加入到所述方法，例如，所述方法可以包括步骤(a)、(b)和(c)，也可包括步骤(a)、(c)和(b)，也可以包括步骤(c)、(a)和(b)等。

如果没有特别的说明，本申请所提到的“包括”和“包含”表示开放式，也可以是封闭式。例如，所述“包括”和“包含”可以表示还可以包括或包含没有列出的其他组分，也可以仅包括或包含列出的组分。

如果没有特别的说明，在本申请中，术语“或”是包括性的。举例来说，短语“A或B”表示“A，B，或A和B两者”。更具体地，以下任一条件均满足条件“A或B”：A为真（或存在）并且B为假（或不存在）；A为假（或不存在）而B为真（或存在）；或A和B都为真（或存在）。

结核病是由结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex，简称结核分枝杆菌或结核菌)引起的慢性感染性疾病，可累及全身多器官系统，最常见的患病部位是肺脏，占各器官结核病总数的80%~90％。结核分枝杆菌复合群包括结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis，MTB)、牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌和田鼠分枝杆菌，引起人类疾病的主要是结核分枝杆菌。

AIDS患者免疫缺陷，常合并多种机会性感染，而结核分枝杆菌是其中较为常见的病原体，且病情多进展，仅HIV感染合并结核分枝杆菌潜伏感染者进展为活动性结核病的概率就是HIV阴性者的30倍。因此，HIV与MTB相互作用、相互影响，诊治复杂且困难。因此，控制结核病的蔓延、预防HIV新发感染以及规范双重感染者的诊治是疾病防控方面的重要工作和挑战。而相关技术中并不存在对HIV/MTB双重感染具有防控和促进疗效作用的药物。

针对于此，本申请实施例第一方面提供了茚地那韦和/或其衍生物在制备抗结核药物中的应用。

茚地那韦是一种非核苷逆转录酶抑制剂，其分子式为：

；

茚地那韦与HIV-1逆转录酶直接结合，通过破坏酶催化部位而阻断RNA依赖性及DNA依赖性的DNA聚合酶活性，是一种用于治疗HIV的药物。本申请实施例发现茚地那韦具有在巨噬细胞水平抑制结核杆菌胞内存活的作用，可见茚地那韦具有作为抗结核药物的潜力，在HIV合并MTB感染的临床治疗中具有重要的应用价值。

在一些实施例中，所述茚地那韦的衍生物包括其在药理上容许的盐。

在一些实施例中，所述药理学上容许的盐包括与无机酸、有机酸、碱金属、碱土金属和氨基酸形成的盐。

在一些实施例中，本申请所述药理学上容许的盐包括与无机酸、有机酸、碱金属、碱土金属和氨基酸形成的盐。

在一些实施例中，所述无机酸包括盐酸、硝酸、硫酸、磷酸、氢溴酸中的至少一种。

在一些实施例中，所述有机酸包括马来酸、富马酸、酒石酸、乳酸、柠檬酸、乙酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、己二酸、棕榈酸和单宁酸中的至少一种。

在一些实施例中，所述碱金属包括锂、钠和钾中至少一种。

在一些实施例中，所述碱土金属包括钙和镁中至少一种。

在一些实施例中，所述氨基酸包括赖氨酸。

在一些实施例中，所述抗结核药物用于预防或治疗结核杆菌的感染。

结核分枝杆菌也被称为结核杆菌，是引起结核病的病原菌。结核分枝杆菌H37Rv是1905年分离出来的并被全球广泛应用于生物医学研究的菌株，有完整毒性的肺结核动物模型。

在一些实施例中，所述预防或治疗结核杆菌的感染具体是指杀死结核杆菌或抑制结核杆菌的生长和繁殖。

在一些实施例中，所述抗结核药物的制备原料还包括药用载体。

在一些实施例中，所述药用载体包括稀释剂、赋形剂、填充剂、黏合剂、润湿剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂、甜味剂和香味剂中的至少一种。

在一些实施例中，所述赋形剂包括乳糖、聚乙二醇、柠檬酸钠、磷酸二钙和水中的至少一种。

在一些实施例中，所述填充剂包括淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和硅酸中的至少一种。

在一些实施例中，所述黏合剂包括纤维素衍生物、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯树胶中的至少一种。

在一些实施例中，所述纤维素衍生物包括羧甲基纤维素。

在一些实施例中，所述藻酸盐包括海藻酸盐。

在一些实施例中，所述湿润剂包括甘油。

在一些实施例中，所述崩解剂包括琼脂、碳酸钙、碳酸氢钠、马铃薯淀粉、木薯淀粉、海藻酸、硅酸盐和碳酸钠中的至少一种。

在一些实施例中，所述吸收促进剂包括季铵化合物。

在一些实施例中，所述表面活性剂包括十六烷醇。

在一些实施例中，所述吸附载体包括高岭土、膨润土和皂黏土中的至少一种。

在一些实施例中，所述润滑剂包括滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠和聚乙二醇中的至少一种。

在一些实施例中，所述药物的剂型为本领域常规的各种剂型。

在一些实施例中，所述预防和/或治疗结核病的药物中茚地那韦和/或其衍生物的质量含量为0.1%～99%。

在一些实施例中，所述预防和/或治疗结核病的药物中茚地那韦和/或其衍生物的质量含量为0.1%～95%。

在一些实施例中，所述结核病是指结核分枝杆菌能够引起的各种类型的结核病。

在一些实施例中，所述结核病包括肺结核或肺外结核。

在一些实施例中，所述肺外结核包括骨关节结核、结核性脑膜炎、结核性胸膜炎、肾结核和肠结核中的至少一种。

在一些实施例中，所述预防和/或治疗结核病的药物可以制备成多种剂型，以便于给药。

在一些实施例中，所述预防和/或治疗结核病的药物剂型为散剂、片剂、胶囊剂、软胶囊剂、颗粒剂、丸剂、口服液、干混悬剂、滴丸剂、干浸膏剂、注射剂和输注剂中的至少一种。

在一些实施例中，所述预防和/或治疗结核病的药物给药方式可以为本领域常规的给药方式，包括但不限于注射给药或口服给药。

在一些实施例中，所述注射给药可以为静脉注射、肌肉注射、腹腔注射、皮内注射或皮下注射等途径。

在一些实施例中，所述预防和/或治疗结核病的药物通过口服、直肠、胃肠外、阴道内、腹膜内、局部、口颊给予人类和其他哺乳动物，或者作为口腔喷雾剂或鼻腔喷雾剂给予。

在一些实施例中，所述局部包括通过散剂、软膏剂或滴剂给予人类和其他哺乳动物。

本申请所用术语“胃肠外”指包括静脉内、肌肉内、腹膜内、胸骨内、皮下和关节内注射和输液的给药方式。

在一些实施例中，所述预防和/或治疗结核病的药物具体可为口服制剂，以便于口服给药。

在一些实施例中，所述口服制剂具体为固体剂型或液体剂型；可选地，所述固体剂型具体的如片剂、糖衣丸剂、丸剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂或包衣剂；可选地，所述液体剂型具体的可为乳剂、溶液剂、混悬剂、糖浆剂或酏剂。

在一些实施例中，所述胶囊剂、片剂或丸剂中，还包含缓冲剂。

在一些实施例中，所述片剂、糖衣丸剂、胶囊剂、丸剂和颗粒剂的固体剂型可与包衣和壳料一起制备；可选地，所述壳料包括肠溶衣材和医药制剂领域公知的其他衣材。

在一些实施例中，所述固体剂型添加遮光剂。

在一些实施例中，所述预防和/或治疗结核病的药物的组成还可使其只在肠道某个部位或优先地在肠道的某个部位以延迟方式释放活性成分。

在一些实施例中，所述预防和/或治疗结核病的药物使用高分子物质或蜡类制备成包埋组合物的形式。

在一些实施例中，所述预防和/或治疗结核病的药物配成微囊形式。

在一些实施例中，所述口服制剂中的液体剂型除包括所述预防和/或治疗结核病的药物外，还包括稀释剂或增溶剂。

在一些实施例中，所述稀释剂包括水或有机溶剂。

在一些实施例中，所述增溶剂包括乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1 ,3-丁二醇、二甲基甲酰胺、植物油、甘油、四氢糠醇、聚乙二醇和脱水山梨糖醇的脂肪酸酯中的至少一种。

在一些实施例中，所述植物油包括棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油中的至少一种。

在一些实施例中，所述药物具体可为肠道外用药制剂。

在一些实施例中，所述肠道外用药制剂包括注射剂或栓剂。

在一些实施例中，所述注射剂为溶液、混悬液或者可注射的干燥粉末。

可注射的干燥粉末指在注射前加入注射水可立即使用。

在一些实施例中，所述注射剂除包括预防和/或治疗结核病的药物外，还包括以下载体或助剂：生理上可接受的无菌含水溶液剂、非水溶液剂、分散剂、混悬剂、乳剂、含水载体、非水载体、稀释剂、溶剂或媒介物，具体的如水、乙醇、多元醇、植物油和可注射有机酯中的至少一种。

在一些实施例中，所述多元醇包括丙二醇、聚乙二醇和甘油中的至少一种。

在一些实施例中，所述植物油包括橄榄油。

在一些实施例中，所述可注射有机酯包括油酸乙酯。

在一些实施例中，所述注射剂还可以是可注射贮库制剂形式。

在一些实施例中，所述可注射贮库制剂可通过在可生物可降解聚合物中形成药物的微胶囊基质来制备。

在一些实施例中，所述可生物可降解聚合物包括聚丙交酯-聚乙交酯、聚原酸酯或聚类酐类。

在一些实施例中，所述可注射贮库制剂能够通过药物与聚合物之比及其所采用的具体聚合物的性质对药物的释放速度加以控制。

在一些实施例中，所述可注射贮库制剂也可通过将药物包埋于能与身体组织相容的脂质体或微乳中来制备。

在一些实施例中，所述可注射制剂还经过灭菌处理。

在一些实施例中，所述灭菌处理包括用滤菌器过滤或掺入无菌固体组合物形式的灭菌剂。

在一些实施例中，所述无菌固体组合物可在临用前溶解或分散于无菌水或其他无菌可注射介质中。

在一些实施例中，所述注射用混悬剂和口服用混悬剂中还可包括悬浮剂。

在一些实施例中，所述悬浮剂包括乙氧基化异十八醇、聚氧乙烯山梨醇、聚氧乙烯失水山梨糖醇酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂和黄蓍胶中的至少一种。

此外，在一些情况下，为延长药物的作用，期望减慢皮下或肌内注射药物的吸收。此时可通过使用水溶性差的晶体或无定形物质的液体混悬剂来实现；药物的吸收速度取决于其溶解速度，而溶解速度又可取决于晶体大小和晶型，通过添加上述物质可以达到延长药物作用的目的。此外，胃肠外给药的药物形式的延迟吸收可以通过将药物溶解或悬浮于油媒介物中来实现。

在一些实施例中，所述栓剂可用于直肠或阴道给药；所述栓剂可通过将本实施例的预防和/或治疗结核病的药物与合适的非刺激性赋形剂或载体混合进行制备；所述赋型剂或载体具体优选为可可脂、聚乙二醇或栓剂蜡；所述赋型剂或载体在室温下为固体，但在人类或其他哺乳动物的体温下则为液体，因此可在直肠腔或阴道腔内熔化而释放出活性化合物。

在一些实施例中，所述预防和/或治疗结核病的药物具体可为局部给药制剂，如散剂、喷雾剂、软膏剂和吸入剂。

在无菌条件下将本申请的预防和/或治疗结核病的药物中有效成分（茚地那韦和/或其衍生物）与药学可接受的载体以及所需的防腐剂、缓冲剂、推进剂混合即可得到局部给药制剂；此外，眼用制剂、眼软膏剂、散剂和溶液剂也被考虑在实施例的范围内。

在一些实施例中，所述茚地那韦和/或其衍生物具体可为脂质体制剂，以脂质体形式给药。实施例中对所述脂质体制剂的具体制备方法没有特殊要求，使用本领域技术人员熟知的方法即可。

在本领域中，脂质体通常用磷脂或其他脂类物质制得；脂质体由分散于含水介质中的单层或多层水化液晶所形成，任何能够形成脂质体的无毒、生理上可接受和可代谢的脂质均可使用。在一些实施例中，所述脂类为天然和合成的磷脂和/或磷脂酰胆碱(卵磷脂)。此外，所述脂质体形式制剂除含有本申请的预防和/或治疗结核病的药物中有效成分外，还可含有稳定剂、防腐剂、赋形剂等。

本申请对上述方案所述剂型的制备方法没有特殊要求，使用本领域技术人员熟知的方法，将本申请提供的预防和/或治疗结核病的药物中有效成分制备成相应剂型的药物即可。

本申请对所述预防和/或治疗结核病的药物可用于预防或治疗哺乳动物(例如人)的结核病，在治疗或预防过程中，给有需要的受试者预防或治疗有效量的本申请提供的预防和/或治疗结核病的药物。本申请的预防和/或治疗结核病的药物可以以纯形式应用，或者以前药形式应用，或者以含本申请提供的预防和/或治疗结核病的药物形式应用。

在本申请的具体实施例中，可改变本申请药物中活性成分(茚地那韦和/或其衍生物)的实际剂量水平，以使活性化合物的量能有效针对具体患者、组合物和给药方式得到所需的治疗反应。剂量水平须根据具体化合物的活性、给药途径、所治疗病况的严重程度以及待治疗患者的病况和既往病史来选定。

在本申请中，“治疗和/或预防有效量”的本申请预防和/或治疗结核病的药物指以适用于任何医学治疗和/或预防的合理效果/风险比治疗障碍的足够量的预防和/或治疗结核病的药物。

本申请预防和/或治疗结核病的药物的总日用量须由主诊医师在可靠的医学判断范围内作出决定。对于任何具体的患者，具体的治疗有效剂量水平须根据多种因素而定，所述因素包括所治疗的障碍和该障碍的严重程度；所采用的具体预防和/或治疗结核病的药物的活性；所采用的具体组合物；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；所采用的具体预防和/或治疗结核病的药物的给药时间、给药途径和排泄率；治疗持续时间；与所采用的具体预防和/或治疗结核病的药物组合使用或同时使用的预防和/或治疗结核病的药物；及医疗领域公知的类似因素。本领域的常规做法是，预防和/或治疗结核病的药物的剂量从低于为得到所需治疗效果而要求的水平开始，逐渐增加剂量，直到得到所需的效果。

在一些实施例中，所述药盒中茚地那韦和/或其衍生物的含量按如下日给药量标准配制：

茚地那韦和/或其衍生物：0.1mg/kg体重/天~1000mg/kg体重/天。

茚地那韦和/或其衍生物：0.1mg/kg体重/天～100mg/kg体重/天。

茚地那韦和/或其衍生物：0.1mg/kg体重/天～10mg/kg体重/天。

本实施例所述的茚地那韦和/或其衍生物的剂量是以单元剂型中存在的化合物量计算的。

在一些实施例中，在单元剂型中所述茚地那韦和/或其衍生物的含量为1mg～5000mg。

在一些实施例中，在单元剂型中所述茚地那韦和/或其衍生物的含量为10mg～500mg。

在一些实施例中，在单元剂型中所述茚地那韦和/或其衍生物的含量为20mg～300mg。

实施例中THP-1巨噬细胞的分化方法如下：

THP-1（Tohoku Hospital Pediatrics-1 ）细胞（人单核细胞白血病细胞）购自中国科学院细胞库，用含10%胎牛血清、0.05mM β-巯基乙醇、10mM HEPES和1mM 丙酮酸钠的1640培养基在37℃，5%CO₂的细胞培养箱中培养，96孔板按每孔2.5×10⁴个细胞数铺板，加入终浓度50ng/ml的PMA（佛波酯）刺激过夜，使其分化为巨噬细胞，24h后更换为上述1640培养基。

实施例1

本实施例为不同浓度茚地那韦对THP-1巨噬细胞存活率影响。

细胞存活率的测定：将诱导分化的巨噬细胞继续培养24h后加入茚地那韦，茚地那韦浓度分别为5μM、10μM、20μM，每个浓度分别做三个重复，利用溶剂DMSO作为对照孔，无细胞培养基为空白孔，37℃，5%CO₂继续培养48h，利用CCK-8试剂盒检测细胞活性，每孔加入10μl CCK-8，培养箱培养2h后，利用酶标仪测定OD 450nm的吸光度，计算细胞存活率。

细胞存活率按以下公式计算：

细胞存活率=[(As-Ab)/(Ac-Ab)]×100%；

As：实验孔（含有细胞的培养基、CCK-8、不同浓度的茚地那韦）；

Ac：对照孔（含有细胞的培养基、CCK-8、DMSO）；

Ab：空白孔（不含细胞的培养基、CCK-8）。

图1为茚地那韦的剂量反应曲线，结果表明，与对照组相比，实验组不同茚地那韦处理后THP-1巨噬细胞细胞存活率无显著差异，可见，茚地那韦对THP-1的毒性较低。

实施例2

本实施例为茚地那韦在抑制结核分枝杆菌生长中的应用。

本实施例应用，由以下步骤组成：

S1、结核分枝杆菌的感染：THP-1细胞以24孔板每孔2.5×10⁵个细胞数的数量按上述方法诱导成为巨噬细胞，实验组加入25 μM茚地那韦，对照组加入等体积溶剂DMSO，预处理1h后，用结核分枝杆菌H37Rv按MOI（multiplicity of infection，感染复数）=10感染细胞，4h后用PBS（phosphate buffer saline，磷酸缓冲盐溶液）清洗3遍，加入1640完全培养基培养在37℃，5% CO₂的培养箱中继续培养，在此过程中一直维持实验组25 μM茚地那韦以及对照组等体积溶剂DMSO的添加。

S2、涂板计数CFU（Colony-Forming Units，菌落形成单位）：感染4h、72h后，用0.025%的SDS裂解液（SDS Lysis Buffer）裂解细胞，分别按10²、10³稀释倍数涂板，37℃细菌培养箱培养约三周计数CFU。

本实施例中50μM茚地那韦在THP-1巨噬细胞水平对结核分枝杆菌H37Rv的抑制情况见图2，图2中ns代表没有显著性差异，****代表显著性小于0.0001，结果表明，茚地那韦能抑制巨噬细胞内结核分枝杆菌的生长，和DMSO对照组相比，加入茚地那韦后结核分枝杆菌的存活能力有明显下降，存活率下降45~59%。

实施例3

本实施例为茚地那韦最小抑菌浓度（MIC）检测。

本实施例中检测步骤如下：

取96孔板，在96孔板最外围每孔加入100μL ddH₂O，B2-G2每孔加入98μL 7H9-OADC全培养基，其余每孔加入50μL 7H9-OADC全培养基。B2-D2每孔加入2μL茚地那韦，E2-G2每孔加入2μL INH（异烟肼）作为阳性对照。从B2-G2到B10-G10 两倍稀释，B11-G11为不加药物处理的阴性对照孔，最后每孔（除ddH2O孔）加入含2×10⁵CFU/50μL的结核分枝杆菌H37Rv菌液，封口膜封口后置于37℃细菌培养箱培养10-14天。取出后观察含不同浓度药物的细菌抑制情况，读取MIC值。

表1为茚地那韦和INH对结核分枝杆菌H37Rv的MIC，结果表明，茚地那韦在体外对结核分枝杆菌的最小抑菌浓度大于500 μM，远大于细胞水平使用浓度，可见茚地那韦在巨噬细胞水平的抗结核作用并不是作为抗生素直接作用于细菌，而是通过靶向宿主调控宿主免疫反应从而抑制结核菌的胞内存活。INH对结核分枝杆菌的最小抑菌浓度为0.02 μg/mL，与相关技术的浓度范围相符，作为阳性对照说明本实验数据的可靠性。

表1 为茚地那韦和INH对结核分枝杆菌H37Rv的MIC

需要说明的是，本申请不限定于上述实施方式。上述实施方式仅为示例，在本申请的技术方案范围内具有与技术思想实质相同的构成、发挥相同作用效果的实施方式均包含在本申请的技术范围内。此外，在不脱离本申请主旨的范围内，对实施方式施加本领域技术人员能够想到的各种变形、将实施方式中的一部分构成要素加以组合而构筑的其它方式也包含在本申请的范围内。

Claims

1.茚地那韦和/或其衍生物在制备抗结核药物中的应用。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述茚地那韦的衍生物包括其在药理上容许的盐；

和/或，所述药理学上容许的盐包括与无机酸、有机酸、碱金属、碱土金属和氨基酸形成的盐。

3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述抗结核药物用于预防或治疗结核杆菌的感染。

4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述抗结核药物的制备原料还包括药用载体；

和/或，所述药用载体包括稀释剂、赋形剂、填充剂、黏合剂、润湿剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂、甜味剂和香味剂中的至少一种。

5.一种预防和/或治疗结核病的药物，其特征在于，所述药物的有效成分包含茚地那韦和/或其衍生物。

6.如权利要求5所述的预防和/或治疗结核病的药物，其特征在于，所述药物中茚地那韦和/或其衍生物的质量含量为0.1%～99%。

7.如权利要求5所述的预防和/或治疗结核病的药物，其特征在于，所述结核病包括肺结核或肺外结核。

8.如权利要求5所述的预防和/或治疗结核病的药物，其特征在于，所述药物的给药剂型选自散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、溶液剂、乳剂和混悬剂中的至少一种。

9.一种结核病治疗药盒，其特征在于，所述药盒中包括如权利要求5至7中任一项所述的药物。

10.如权利要求9所述的结核病治疗药盒，其特征在于，所述药盒中茚地那韦和/或其衍生物的含量按如下日给药量标准配制：

茚地那韦和/或其衍生物：0.1mg/kg体重/天~1000mg/kg体重/天。