CN117427078A - 化合物g194-0712在制备促进皮肤创面愈合的药物中的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了化合物G194‑0712在制备促进皮肤创面愈合的药物中的用途,其中化合物G194‑0712的分子式为C20H20N3OCl,结构式为本发明提出化合物G194‑0712用于制备促进皮肤创面愈合的药物,特别是以化合物G194‑0712或其药学上可接受的盐作为活性成分的小分子药物,通过促进表皮角质形成细胞迁移从而达到促进皮肤创面愈合的效果,安全性高,药物稳定,可治疗大面积的皮肤创面,合成成本低,为临床治疗皮肤创面愈合提供新的途径,具有重要临床应用价值。
Description
技术领域
本发明属于生物医药领域,特别涉及化合物G194-0712在制备促进皮肤创面愈合的药物中的用途。
背景技术
创伤,是全球发病率及致畸致残率第一位的疾病,占所有疾病的12%。创伤造成的损害中,皮肤创伤最为常见,每年新增病例逾千万。当出现皮肤缺损过大、伤口感染严重或患者基础条件较差等情况时,常导致伤口难以愈合,这对个体患者生活质量和国家医疗开支都有重大影响。仅在美国,难愈性伤口大约需要每年500亿美元的医疗保健费用,其中手术切口和外伤造成的难愈性创面占近120亿美元,烧伤导致的难愈性创面占近75亿美元。但是,目前仍没有十分理想的治疗方法可有效促进皮肤创面愈合。
目前促进皮肤创面愈合的方法有多种,但都有明显的局限性,主要方法有:
1.创面覆盖湿性敷料:仅给创面提供封闭的湿性环境,有利于创面愈合,但并不能直接激活创面细胞的增殖、迁移等能力来加速愈合过程,效果有限。
2.负压封闭引流:通过间断式或持续式负压吸引将创面液化坏死组织排出,达到清除坏死组织,加快创面愈合的目的,本方法间接给创面愈合提供良好的环境,但并不直接促进创面生长,临床疗效有限,且治疗靶点不确切。
3.生长因子/细胞因子:可一定程度上促进肉芽组织增殖,从而加速创面愈合,但生长因子/细胞因子均属于生物制品,容易产生过敏等安全性问题,且其活性不稳定容易失活,限制临床应用。
4.手术治疗:皮肤移植/皮瓣移植通过切除创面,从患者其他部位切取健康皮肤覆盖进行创面治疗,本方法治疗过程非常痛苦,且会造成供皮区损伤及遗留大面积瘢痕,且无法适用于大面积皮肤创面的患者。
5.细胞治疗:是一种新兴的治疗技术,但其有产生肿瘤的风险,安全性不佳。
综上可知,常用的湿性敷料、负压封闭引流等方法均通过为创面愈合提供良好的环境来间接促进愈合,并不能直接促进创面生长,而生长因子、细胞因子、干细胞疗法等均为生物制品,其安全性及稳定性不佳,制备成本较高,限制其临床应用。因此,促进皮肤创面愈合目前仍缺乏方便有效的方法。
G194-0712是来自Chemdiv化合物库(https://www.chemdiv.com)的一种小分子化合物,分子式为C20H20N3OCl,分子量为353.85,结构式如图1所示,其为亲脂性分子,在水中溶解度较低,目前尚无对化合物G194-0712药理活性的相关研究和应用报道。
发明内容
为克服目前常用的湿性敷料和负压封闭引流等方法不能直接促进创面生长,而生长因子、细胞因子、干细胞疗法等生物制品安全性及稳定性不佳的问题,本发明的目的是提供化合物G194-0712在制备促进皮肤创面愈合的药物中的用途,通过对Chemdiv化合物库进行高通量筛选,发现小分子化合物G194-0712能够有效促进表皮角质形成细胞迁移,从而促进皮肤创面愈合,其用于制备促进皮肤创面愈合的新药物,提出一种促进皮肤创面愈合新的临床治疗途径。
本发明的上述目的通过以下技术方案实现:
本发明提供化合物G194-0712或其药学上可接受的盐在制备促进皮肤创面愈合的药物中的用途,化合物G194-0712的分子式为C20H20N3OCl,结构式为
作为优选,所述促进皮肤创面愈合是指已经形成的皮肤创面完全愈合或减小皮肤创面的面积。
作为优选,所述化合物G194-0712药学上可接受的盐选自盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、乙酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、鞣酸盐、枸橼酸盐、三氟醋酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、琥珀酸盐、对甲苯磺酸或苯磺酸盐中的一种或多种以上组合。
本发明还提供一种药物组合物,其包含治疗有效量的化合物G194-0712和/或其药学上可接受的盐,其中化合物G194-0712的分子式为C20H20N3OCl,结构式为
作为优选,所述药物组合物中化合物G194-0712的浓度为1-100μM。
作为更优选,所述药物组合物中化合物G194-0712的浓度为5-20μM。
作为优选,所述药物组合物还包含药学上可接受的载体或赋形剂,可制备成为注射剂、乳剂、片剂、散剂、颗粒剂、软膏、脂质体或口服液。
本发明还提供一种小分子注射制剂,其包含治疗有效量的化合物G194-0712和/或其药学上可接受的盐,其中化合物G194-0712的分子式为C20H20N3OCl,结构式为
作为优选,以化合物G194-0712和/或其药学上可接受的盐作为活性成分,其浓度为1-100μM,更优选为5-20μM。
本发明提出化合物G194-0712在制备促进皮肤创面愈合的药物中的用途,特别是以化合物G194-0712作为活性成分的小分子药物。与现有技术相比,本发明的有益效果在于:
(1)通过化合物G194-0712促进表皮角质形成细胞迁移,从而达到促进皮肤创面愈合的效果。
(2)本发明的小分子药物相对于干细胞治疗安全性高,药物稳定,从而规避安全性差和可能产生肿瘤等缺点;相对于手术治疗,可治疗大面积的皮肤创面,规避治疗范围小、供皮区损伤及遗留大面积瘢痕这些缺陷;相对于创面覆盖湿性敷料及负压封闭引流,规避无明确治疗靶点、效率低、有效性差等缺点;相对于生长因子/细胞因子,规避容易产生过敏、生物制品安全性差,活性不稳定容易失活等缺点;相对于现行药物具有成本上的显著优势,合成成本低。
附图说明
图1为化合物G194-0712的分子结构。
图2为实施例中人表皮角质形成细胞系(HaCaT)划痕后化合物G194-0712处理的细胞迁移能力。
图3为实施例中化合物G194-0712促进皮肤创面愈合模型创面愈合结果。
图4为实施例中化合物G194-0712细胞毒性测试(MTT实验)结果。
图5为实施例中化合物G194-0712创面皮下注射对小鼠肝肾功能检测结果。
具体实施方式
下面结合实施例,对本发明作进一步说明:
实施例1
1.材料
化合物G194-0712分子理化性质:所用化合物G194-0712购自上海筛杰生物医药有限公司,分子式为C20H20N3OCl,分子量为353.85,结构式如图1所示,注射入创面边缘组织后,由于其良好的脂溶性,不易被亲水性组织吸收扩散到毛细血管进入体循环,可以达到局部作用的效果,而不会作用于除皮肤创面组织以外的其他组织器官。
2.实验方法
2.1细胞迁移能力测试(细胞划痕实验)
人表皮角质形成细胞系(HaCaT)播种于六孔板中,当细胞长满六孔板时,用微移液管尖端形成划痕。划痕后,HaCaT细胞分别用1、10μM化合物G194-0712或对照溶剂处理24小时后,观察划痕两侧细胞距离的缩小情况,采用Image J软件测量划痕两侧细胞的距离。
2.2小鼠创面愈合模型的建立
创面愈合模型参考既往文献(The mouse excisional wound splinting model,including applications for stem cell transplantation.Nature Protocol.2013;8(2):302-9.)。简单来说,将12周龄的C57/BL6小鼠麻醉,背部备皮,在背部中线部位制造直径8毫米的皮肤全层切除创面并剪去肉膜,使用4-0丝线将硅胶材质环形夹板环缝合固定于创面周围的皮肤上,防止皮肤收缩导致创面的闭合,小鼠在术后即刻、第7、14天进行拍照记录,利用Image J统计创面面积。
2.3化合物G194-0712针剂注射
小创面愈合模型建立开始的当天,即开始化合物G194-0712针剂注射,注射于创面周围皮下。随机分为对照组(溶剂组)、与实验组(G194-0712给药组)两组小鼠,每组6只小鼠。隔天注射一次,每个创面周围8个点注射,每个点注射药物或对照溶剂10μL,使用34号针头(World Precision Instruments,Sarasota,FL)连接10μL NanoFil微型注射器(WorldPrecision Instruments)进行注射,注射至取材为止,配制注射针剂中化合物G194-0712浓度为20μM。
3.实验结果
3.1化合物G194-0712可促进表皮角质形成细胞迁移
人表皮角质形成细胞系(HaCaT)划痕后小分子化合物G194-0712处理的细胞迁移能力如图2所示,可见化合物G194-0712处理后的细胞,其迁移能力显著高于对照组(P<0.001)。
3.2化合物G194-0712可促进皮肤创面愈合
创面愈合模型建立后,第0、7、14天拍照记录的不同分组小鼠创面愈合情况显示,注射化合物G194-0712治疗组小鼠在0、7、14天的创面面积较对照组均显著减小(P<0.001)(图3)。
实施例2
1)药物细胞毒性测试(MTT实验)
人表皮角质形成细胞系(HaCaT)播种于六孔板中,细胞分别用不同浓度(1-50μM)G194-0712或对照溶剂孵育24小时后,每孔加MTT溶液(5mg/mL)10μL,继续孵育4小时,终止培养,弃去孔内培养液,每孔加100μL DMSO,并使结晶物充分融解,选择490nm波长,在酶标仪上测定各孔光吸收值。
人表皮角质形成细胞系(HaCaT)MTT实验结果图4所示,显示使用不同浓度G194-0712(1-50μM)处理对表皮角质形成细胞无明显毒性。
2)小鼠肝肾功能测试
创面愈合造模小鼠造模后第14天(即G194-0712针剂注射后14天),眼眶后静脉丛取血,后使用ALT检测试剂盒(Abcam公司,货号ab285263)、AST检测试剂盒(Abcam公司,货号ab263882)、肌酐检测试剂盒(酶联生物,货号ml037726)、尿素氮检测试剂盒(酶联生物,货号ml076478)对肝肾功能主要指标进行检测。
小鼠肝功能检测(ALT、AST)及肾功能检测(肌酐、尿素氮)如图5所示,显示20μMG194-0712创面皮下注射对小鼠肝肾功能无明显影响。
以上所述为本发明的较佳实施例,但本发明不应该局限于该实施例所公开的内容。所以凡是不脱离本发明所公开的精神下完成的等效或修改,都落入本发明保护的范围。
Claims (9)
1.化合物G194-0712或其药学上可接受的盐在制备促进皮肤创面愈合的药物中的用途,其中化合物G194-0712的分子式为C20H20N3OCl,结构式为
2.根据权利要求1所述的用途,其特征在于,所述促进皮肤创面愈合是指已经形成的皮肤创面完全愈合或减小皮肤创面的面积。
3.根据权利要求1所述的用途,其特征在于,所述化合物G194-0712药学上可接受的盐选自盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、乙酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、鞣酸盐、枸橼酸盐、三氟醋酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、琥珀酸盐、对甲苯磺酸或苯磺酸盐中的一种或多种以上组合。
4.一种药物组合物,其特征在于,其包含治疗有效量的化合物G194-0712和/或其药学上可接受的盐,其中化合物G194-0712的分子式为C20H20N3OCl,结构式为
5.根据权利要求4所述的药物组合物,其特征在于,所述药物组合物中化合物G194-0712的浓度为1-100μM。
6.根据权利要求5所述的药物组合物,其特征在于,所述药物组合物中化合物G194-0712的浓度为5-20μM。
7.根据权利要求4所述的药物组合物,其特征在于,所述药物组合物还包含药学上可接受的载体或赋形剂,可制备成为注射剂、乳剂、片剂、散剂、颗粒剂、软膏、脂质体或口服液。
8.一种小分子注射制剂,其特征在于,其包含治疗有效量的化合物G194-0712和/或其药学上可接受的盐,其中化合物G194-0712的分子式为C20H20N3OCl,结构式为
9.根据权利要求8所述的小分子注射制剂,其特征在于,以化合物G194-0712和/或其药学上可接受的盐作为活性成分,其浓度为1-100μM。
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