CN117396508A - 用于治疗和预防与avb8整合素相关的疾病的组合物和方法 - Google Patents

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Abstract

提供了包含整合素β8抗体的组合物和方法。

Description

用于治疗和预防与AVB8整合素相关的疾病的组合物和方法
相关申请的交叉引用
本申请要求2021年1月26日递交的第63/141,703号美国临时申请的优先权，其公开内容在此通过引用整体并入本文中，用于所有目的。
背景
整合素家族的成员识别各种空间受限的细胞外配体。典型地，整合素的连接激活表达整合素的细胞中的细胞质信号，并有助于细胞粘附、迁移、增殖和存活。该家族中的至少两个成员(即αvβ6和αvβ8)执行另外的功能，激活转化生长因子β的潜伏复合物。实际上，该过程允许一个细胞上的整合素激活相邻细胞(在αvβ6的情况下)或附近细胞(在αvβ8的情况下)上的信号。整合素介导的TGFβ激活已被证明在例如调节组织纤维化、急性肺损伤和肺气肿中发挥作用。
概述
在一方面，本公开的特征在于分离的抗体，其特异性结合人整合素β8并抑制潜伏相关肽(LAP)粘附至αvβ8，其中所述分离的抗体包含：(1)重链互补决定区1(HCDR1)，其具有SEQ ID NO:1、5和6中任一项的序列；(2)HCDR2，其具有SEQ ID NO:2、4和7中任一项的序列；(3)HCDR3，其具有SEQ ID NO:3的序列；(4)轻链互补决定区1(LCDR1)，其具有SEQ ID NO:8、11、13和14中任一项的序列；(5)LCDR2，其具有SEQ ID NO:9和12中任一项的序列；以及(6)LCDR3，其具有SEQ ID NO:10的序列。
在一些实施方案中，所述抗体包含具有SEQ ID NO:1的序列的HCDR1、具有SEQ IDNO:2的序列的HCDR2和具有SEQ ID NO:3的序列的HCDR3。
在一些实施方案中，所述抗体包含具有SEQ ID NO:1的序列的HCDR1、具有SEQ IDNO:4的序列的HCDR2和具有SEQ ID NO:3的序列的HCDR3。
在一些实施方案中，所述抗体包含具有SEQ ID NO:5的序列的HCDR1、具有SEQ IDNO:2的序列的HCDR2和具有SEQ ID NO:3的序列的HCDR3。
在一些实施方案中，所述抗体包含具有SEQ ID NO:6的序列的HCDR1、具有SEQ IDNO:2的序列的HCDR2和具有SEQ ID NO:3的序列的HCDR3。
在一些实施方案中，所述抗体包含具有SEQ ID NO:1的序列的HCDR1、具有SEQ IDNO:7的序列的HCDR2和具有SEQ ID NO:3的序列的HCDR3。
在一些实施方案中，所述抗体包含具有SEQ ID NO:8的序列的LCDR1、具有SEQ IDNO:9的序列的LCDR2和具有SEQ ID NO:10的序列的LCDR3。
在一些实施方案中，所述抗体包含具有SEQ ID NO:11的序列的LCDR1、具有SEQ IDNO:9的序列的LCDR2和具有SEQ ID NO:10的序列的LCDR3。
在一些实施方案中，所述抗体包含具有SEQ ID NO:8的序列的LCDR1、具有SEQ IDNO:12的序列的LCDR2和具有SEQ ID NO:10的序列的LCDR3。
在一些实施方案中，所述抗体包含具有SEQ ID NO:13的序列的LCDR1、具有SEQ IDNO:12的序列的LCDR2和具有SEQ ID NO:10的序列的LCDR3。
在一些实施方案中，所述抗体包含具有SEQ ID NO:14的序列的LCDR1、具有SEQ IDNO:9的序列的LCDR2和具有SEQ ID NO:10的序列的LCDR3。
在一些实施方案中，所述抗体包含与SEQ ID NO:15-19中任一项的序列具有至少90％同一性的重链可变区。在一些实施方案中，所述抗体包含与SEQ ID NO:20-25中任一项的序列具有至少90％同一性的轻链可变区。
此外，所述抗体可以包含与SEQ ID NO:47-50中任一项的序列具有至少90％同一性的Fc多肽。所述Fc多肽可以包含氨基酸取代L234A和L235A。此外，所述Fc多肽可以包含氨基酸取代N297A。
在一些实施方案中，所述抗体包含：(1)具有SEQ ID NO:1的序列的HCDR1；(2)具有SEQ ID NO:4的序列的HCDR2；(3)具有SEQ ID NO:3的序列的HCDR3；(4)具有SEQ ID NO:8的序列的LCDR1；(5)具有SEQ ID NO:12的序列的LCDR2；以及(6)具有SEQ ID NO:10的序列的LCDR3。所述抗体可以包含重链可变区，其与SEQ ID NO:16的序列具有至少90％同一性。所述抗体可以包含轻链可变区，其与SEQ ID NO:22的序列具有至少90％同一性。在特定的实施方案中，所述抗体可以包含与SEQ ID NO:47-50中任一项的序列具有至少90％同一性的Fc多肽。所述Fc多肽可以包含氨基酸取代L234A和L235A。然而，所述Fc多肽可以包含氨基酸取代N297A。
在该方面的一些实施方案中，所述抗体是单克隆抗体。在一些实施方案中，所述抗体是人源化抗体。在一些实施方案中，所述抗体与小鼠整合素β8交叉反应。在一些实施方案中，所述抗体阻断TGFβ激活。在一些实施方案中，所述抗体以低于5nM的IC50拮抗LAP与αvβ8的结合。在一些实施方案中，所述抗体包含一个或多个人框架区。
在另一方面，本公开的特征在于分离的核酸，其编码本文所述的分离的抗体。在另一方面，本公开的特征在于表达载体，其包含编码本文所述的分离的抗体的核酸。在又一方面，本公开的特征在于分离的宿主细胞，其包含所述表达载体。
在另一方面，本公开的特征在于药物组合物，其包含本文所述的分离的抗体和药学上可接受的载体。
在另一方面，本公开的特征在于减少有需要的人的TGFβ激活的方法，所述方法包括向所述人施用治疗有效量的本文所述的分离的抗体或包含分离的抗体的药物组合物，从而减少所述人的TGFβ激活。在一些实施方案中，所述人患有选自哮喘、多发性硬化或急性肺损伤的疾病，并且所述疾病的至少一种症状通过减少的TGFβ激活而得到改善。在一些实施方案中，所述人患有选自类风湿性关节炎、牛皮癣和慢性阻塞性肺疾病的疾病，并且所述疾病的至少一种症状通过减少的TGFβ激活而得到改善。
在另一方面，本公开的特征在于治疗所述人的癌症的方法，所述方法包括向所述人施用治疗有效量的本文所述的分离的抗体或向所述人施用包含分离的抗体的药物组合物，从而治疗所述癌症。在一些实施方案中，所述癌症是转移性癌症。在一些实施方案中，所述癌症是实体瘤癌症。在一些实施方案中，所述方法增强对所述人的癌症的免疫应答。在所述方法的某些实施方案中，所述分离的抗体与免疫调节剂(例如，PD1拮抗剂、PDL1拮抗剂、CTLA4拮抗剂、41BB激动剂)组合施用。在所述方法的某些实施方案中，所述分离的抗体与放射疗法组合施用。在所述方法的某些实施方案中，所述分离的抗体与化学疗法组合施用。
附图简述
图1显示了与ADWA11相比，ADWA16在抑制表达αvβ8的L229细胞粘附至TGFb1 LAP方面更有效。
图2A和图2B显示了未标记的ADWA11有效竞争标记的ADWA11与表达αvβ8的L229细胞的结合，但未标记的ADWA16不能，证明两种抗体识别不同的表位。
图3A-图3E显示了每种抗体的缔合/解离曲线。
图4显示了人源化的、亲和力成熟的IgG(ADWA16-1、ADWA16-2、ADWA16-3和ADWA16-4)对细胞表面表达的人αvβ8显示出与亲本鼠IgG(ADWA16嵌合体和ADWA16)等同的亲和力。
图5A和图5B显示了ADWA16-3和ADWA16-3.2对重组人αvβ8展示出与亲本鼠IgG(ADWA16嵌合体)等同的亲和力，并且展示出对重组小鼠αvβ8的显著改善的亲和力。
图6显示了ADWA16-3和ADWA16-3.2对细胞表面表达的人αvβ8展示出与亲本鼠IgG(ADWA16嵌合体和ADWA16)等同的亲和力。
图7显示了与亲本鼠IgG(ADWA16)相比，ADWA16-3.2IgG展示出与表面表达的小鼠αvβ8的显著改善的结合。
图8显示了ADWA16-3和ADWA16-3.2未与表达αvβ3、αvβ5或αvβ6的SW480细胞结合，但仅展示出与表达αvβ3、αvβ5和αvβ8的SNB19细胞的结合。
图9A-图9C显示了ADWA16-3和ADWA16-3.2保留了鼠亲本ADWA16抑制TGFβ激活的高效力。
图10A和图10B显示了ADWA16-3.2保留了抑制SNB19细胞粘附至TGFβ1-LAP的低纳摩尔效力。
图11显示了与亲本鼠抗体ADWA-16相比，ADWA16-3.2展示出改善的热稳定性。
图12显示了SNB19人星形细胞瘤细胞中ADWA16-3.2和ADWA11的结合。
图13A和图13B显示了ADWA16-3.2和ADWA11抑制的SNB19细胞粘附至TGFb1 LAP。
详述
I.引言
本申请的发明人已经发现与鼠和人整合素β8结合，并且是αvβ8配体粘附的更有效抑制剂的新抗体。本文所述的抗体可以被用于治疗或预防与αvβ8表达相关的疾病(如癌症和肺纤维化)。
II.定义
“拮抗剂”是指与整合素(例如，αvβ8)结合，并部分或完全阻断整合素的刺激，减少、阻止、延迟整合素的激活，使整合素失活、脱敏，或下调整合素的活性的试剂。
术语“相同的”或百分比“同一性”在两条或更多条核酸或多肽序列的上下文中，是指两条或更多条序列或子序列，其是相同的或具有特定百分比的相同(即当在比较窗或指定区域上比较和比对最大对应性时，在指定区域上的约60％同一性，优选65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更高同一性)氨基酸残基或核苷酸，如使用利用下述默认参数的BLAST 2.0序列比较算法，或者通过手动比对和目视检查测量的(参见例如，NCBI网站ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/等)。然后，此类序列被称为“实质上相同的”。如下所述的，优选的算法可以考虑空位等。优选地，同一性存在于长度为至少约25个氨基酸或核苷酸的区域上，或者更优选地，存在于长度为50-100个或更多个氨基酸或核苷酸的区域上。
对于序列比较，通常一个序列充当参考序列，将测试序列与之进行比较。当使用序列比较算法时，将测试序列和参考序列输入计算机中，必要时指定子序列坐标，并指定序列算法程序参数。优选地，可以使用默认程序参数，或者可以指定可替代参数。序列比较算法然后基于程序参数，计算测试序列相对于参考序列的序列同一性百分比。
如本文所使用的“比较窗口”包括参考选自20至600个，通常约50个至约200个，更通常约100个至约150个的连续位置数量中的任一个的区段，其中在将两个序列最佳对齐之后，可以将序列与相同数量的连续位置的参考序列进行比较。用于比较的序列比对方法在本领域中是众所周知的。
适合于确定序列同一性和序列相似性百分比的算法是BLAST和BLAST 2.0算法，其分别描述于Altschul等人,Nuc.Acids Res.25:3389-3402(1977)和Altschul等人,J.Mol.Biol.215:403-410(1990)中。BLAST和BLAST 2.0与本文所述的参数一起用于确定本公开的核酸和蛋白质的序列同一性百分比。用于进行BLAST分析的软件可通过国家生物技术信息中心(the National Center for Biotechnology Information，http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)公开获得。该算法涉及首先通过识别查询序列中长度为W的短词来鉴定高分数序列对(HSP)，当与数据库序列中相同长度的词比对时，其匹配或满足某个正值阈值得分T。T被称为邻域词得分阈值(Altschul等人，同上)。这些最初的邻域词命中充当启动搜索以找到包含它们的较长HSP的种子。词命中沿着每个序列在两个方向上延伸，直到累积比对得分可以增加为止。对于核苷酸序列，使用参数M(一对匹配残基的奖励得分；始终>0)和N(错配残基的惩罚得分；始终<0)来计算累积得分。对于氨基酸序列，使用评分矩阵来计算累积得分。当出现以下情况时，词命中在每个方向上的延伸停止：累计比对得分从其最大实现值下降量X；由于一个或多个负得分残基比对的积累，累积分数变为零或更低；或者到达任一序列的末端。BLAST算法参数W、T和X决定了比对的灵敏度和速度。BLASTN程序(对于核苷酸序列)默认使用11的词长(W)、10的期望值(E)，M＝5，N＝-4，以及两条链的比较。对于氨基酸序列，BLASTP程序默认使用3的词长和10的期望值(E)，以及50的BLOSUM62评分矩阵(参见Henikoff&Henikoff,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 89:10915(1989))比对(B)、10的期望值(E)，M＝5，N＝-4，以及两条链的比较。
术语“核酸”是指单链或双链形式的脱氧核糖核苷酸或核糖核苷酸及其聚合物，以及它们的互补物。该术语包括含有已知核苷酸类似物或修饰的主链残基或链接的核酸，其是合成的、天然存在的和非天然存在的，其具有与参考核酸相似的结合特性，并且其以与参考核苷酸相似的方式代谢。此类类似物的实例包括但不限于硫代磷酸酯、氨基磷酸酯、甲基膦酸酯、手性甲基膦酸酯、2-O-甲基核糖核苷酸、肽核酸(PNA)。
除非另有指示，否则特定核酸序列还隐含地包括其保守修饰的变体(例如，简并密码子取代)和互补序列，以及明确指出的序列。具体地，简并密码子取代可以通过生成其中一个或多个选定的(或所有)密码子的第三位置被混合碱基和/或脱氧肌苷残基取代的序列来实现(Batzer等人,Nucleic Acid Res.19:5081(1991)；Ohtsuka等人,J.Biol.Chem.260:2605-2608(1985)；Rossolini等人,Mol.Cell.Probes 8:91-98(1994))。
术语“多肽”、“肽”和“蛋白质”在本文中可互换使用，是指氨基酸残基的聚合物。该术语包括其中一个或多个氨基酸残基是相应天然存在的氨基酸的人工化学模拟物的氨基酸聚合物，以及天然存在的氨基酸聚合物和非天然存在的氨基酸聚合物。
术语“氨基酸”是指天然存在的和合成的氨基酸，以及以类似于天然存在的氨基酸的方式发挥作用的氨基酸类似物和氨基酸模拟物。天然存在的氨基酸是由遗传密码编码的那些氨基酸，以及后来被修饰的那些氨基酸，例如，羟脯氨酸、γ-羧基谷氨酸和O-磷酸丝氨酸。氨基酸类似物是指与天然存在的氨基酸具有相同基本化学结构(即与氢、羧基、氨基和R基团结合的α碳)的化合物，例如高丝氨酸、正亮氨酸、甲硫氨酸亚砜、甲硫氨酸甲基锍。此类类似物具有修饰的R基团(例如，正亮氨酸)或修饰的肽主链，但保留与天然存在的氨基酸相同的基本化学结构。氨基酸模拟物是指具有与氨基酸的一般化学结构不同的结构，但以类似于天然存在的氨基酸的方式发挥作用的化合物。
氨基酸在本文中可以通过其通常已知的三字母符号或通过IUPAC-IUB生物化学命名委员会推荐的一字母符号来指代。同样，核苷酸可以通过它们普遍接受的单字母代码来指代。
术语“重组”当参考例如细胞或核酸、蛋白质或载体使用时，表示该细胞、核酸、蛋白质或载体已通过引入异源核酸或蛋白质或者天然核酸或蛋白质的改变而被修饰，或者该细胞来源于如此修饰的细胞。因此，例如，重组细胞表达在细胞的天然(非重组)形式内未发现的基因，或者表达以其他方式异常表达、低表达或根本不表达的天然基因。
本文所述的抗体可以由实质上由免疫球蛋白基因或免疫球蛋白基因的片段编码的一种或多种多肽组成。公认的免疫球蛋白基因包括κ、λ、α、γ、δ、ε和μ恒定区基因，以及大量免疫球蛋白可变区基因。轻链被分类为κ或λ。重链被分类为γ、μ、α、δ或ε，其分别依次定义免疫球蛋白类别IgG、IgM、IgA、IgD和IgE。在一些实施方案中，抗体是IgG(例如，IgG1、IgG2、IgG3、IgG4)、IgM、IgA、IgD或IgE。
已知典型的免疫球蛋白(抗体)结构单元包含四聚体。每个四聚体由两对相同的多肽链组成，每对具有一条“轻”链(约25kD)和一条“重”链(约50-70kD)。每条链的N末端限定了主要负责抗原识别的约100至110个或更多个氨基酸的可变区。术语可变轻链(VL)和可变重链(VH)分别指这些轻链和重链。
如本文所使用的术语“抗体”包括保留结合特异性的抗体片段。例如，存在许多充分表征的抗体片段。因此，例如，胃蛋白酶消化铰链区中的二硫化物链接C末端的抗体，以产生F(ab)'2，即Fab的二聚体，其本身是通过二硫键连接到VH-CH1的轻链。F(ab)'2可以在温和的条件下被还原，以破坏铰链区中的二硫化物链接，从而将(Fab')2二聚体转化为Fab'单体。Fab'单体本质上是具有部分铰链区的Fab(对于其他抗体片段的更详细描述，参见Fundamental Immunology,W.E.Paul编辑,Raven Press,N.Y.(1993))。虽然各种抗体片段是根据完整抗体的消化来定义的，但本领域技术人员将理解，片段可以通过化学方法或利用重组DNA方法从头合成。因此，如本文所用的术语抗体还包括通过修饰整个抗体产生的或使用重组DNA方法合成的抗体片段。
在抗体中，取代变体去除了至少一个氨基酸残基，并在其位置中插入了不同的残基。用于取代诱变的最感兴趣的位点包括高变区，但也考虑了框架的改变。上文描述了保守取代的实例。
抗体生物特性的实质性修饰是通过选择在维持(a)取代区域中多肽主链的结构，例如作为β-折叠或螺旋构象，(b)分子在靶位点处的电荷或疏水性，或者(c)侧链的体积方面效果显著不同的取代来实现的。天然存在的残基基于共同的侧链特性被划分为组：
(1)非极性的：正亮氨酸、Met、Ala、Val、Leu、Ile；
(2)极性不带电荷的：Cys、Ser、Thr、Asn、Gln；
(3)酸性的(带负电荷的)：Asp、Glu；
(4)碱性的(带正电荷的)：Lys、Arg；
(5)影响链取向的残基：Gly、Pro；以及
(6)芳香族的：Trp、Tyr、Phe、His。
非保守性取代是通过将这些类别中的一个的成员交换为另一类别来实现的。
可以进行的一种类型的取代是将抗体中可能具有化学反应性的一个或多个半胱氨酸变成另一残基，诸如但不限于丙氨酸或丝氨酸。例如，可能存在非经典半胱氨酸的取代。取代可以在可变结构域的CDR或框架区或在抗体的恒定区中进行。在一些实施方案中，半胱氨酸是经典的(例如，参与二硫键的形成)。任何不参与维持抗体适当构象的半胱氨酸残基也可以被取代，通常用丝氨酸取代，以提高分子的氧化稳定性并防止异常交联。相反，半胱氨酸键可被添加到抗体中以提高其稳定性，特别是当抗体是抗体片段(如Fv片段)时。
抗体包括VH-VL二聚体，包括单链抗体(作为单个多肽链存在的抗体)，如单链Fv抗体(sFv或scFv)，其中可变重区和可变轻区连接在一起(直接或通过肽连接子)，以形成连续的多肽。单链Fv抗体是共价连接的VH-VL，其可从包括直接连接或通过编码肽的连接子连接的编码VH和VL的序列的核酸表达(例如，Huston等人，Proc.Nat.Acad.Sci.USA,85:5879-5883,1988)。当VH和VL作为单个多肽链彼此连接时，VH和VL结构域非共价缔合。可替代地，抗体可以是另一片段。也可以产生其他片段，例如，使用重组技术，作为可溶性蛋白质或作为从展示方法获得的片段。抗体也可以包括双抗体和小抗体。本公开的抗体还包括重链二聚体，如来自骆驼的抗体。在一些实施方案中，抗体是二聚体。在其他实施方案中，抗体可以是具有活性同种型的单体形式。在一些实施方案中，抗体是多价形式，例如，三价或四价形式。
如本文所用的，术语“可变区”和“可变结构域”是指抗体的轻链和重链的部分，其包括互补决定区(CDR，例如HCDR1、HCDR2、HCR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3)和框架区(FR)的氨基酸序列。重链和轻链的可变区通常分别命名为VH和VL。可变区包括在本文所述的Fab、F(ab’)2、Fv和scFv抗体片段上，并参与特异性抗原识别。
如本文所用的，“互补决定区(CDR)”是指每条链中的三个高变区，它们中断了由轻链和重链可变区建立的四个框架区。CDR主要负责与抗原的表位结合。每条链的CDR通常被称为CDR1、CDR2和CDR3，从N末端开始按顺序编号，并且通常还通过特定CDR所位于的链来识别。因此，VH CDR3位于发现其的抗体重链的可变结构域中，而VL CDR1是来自发现其的抗体轻链的可变结构域的CDR1。
不同轻链或重链的框架区的序列在物种内是相对保守的。抗体的框架区，即组成型轻链和重链的组合框架区，用于在三维空间中定位和比对CDR。
CDR和框架区的氨基酸序列可以使用本领域中的各种众所周知的定义来确定，例如Kabat、North方法(参见例如，North等人,J Mol Biol.406(2):228-256,2011)、Chothia、国际ImMunoGeneTics数据库(IMGT)和AbM(参见例如，Johnson等人，同上；Chothia&Lesk,1987,Canonical structures for the hypervariable regions ofimmunoglobulins.J.Mol.Biol.196,901-917；Chothia C.等人，1989,Conformations ofimmunoglobulin hypervariable regions.Nature 342,877-883；Chothia C.等人,1992,structural repertoire of the human VH segments J.Mol.Biol.227,799-817；Al-Lazikani等人,J.Mol.Biol 1997,273(4))。抗原组合位点的定义也描述于以下文献中：Ruiz等人,IMGT,the international ImMunoGeneTics database.Nucleic Acids Res.,28,219–221(2000)；以及Lefranc,M.-P.IMGT,the international ImMunoGeneTicsdatabase.Nucleic Acids Res.Jan 1；29(1):207-9(2001)；MacCallum等人,Antibody-antigen interactions:Contact analysis and binding site topography,J.Mol.Biol.,262(5),732-745(1996)；以及Martin等人,Proc.Natl Acad.Sci.USA,86,9268–9272(1989)；Martin等人,Methods Enzymol.,203,121–153,(1991)；Pedersen等人,Immunomethods,1,126,(1992)；以及Rees等人,In Sternberg M.J.E.(编辑),ProteinStructure Prediction.Oxford University Press,Oxford,141–172 1996)。
如本文所用的，“嵌合抗体”是指免疫球蛋白分子，其中(a)恒定区或其一部分被改变、替换或交换，使得抗原结合位点(可变区)连接到不同或改变的类别、效应子功能和/或物种的恒定区，或者赋予嵌合抗体新特性的完全不同的分子，例如酶、毒素、激素、生长因子、药物等；或者(b)可变区或其一部分被具有不同或改变的抗原特异性的可变区或其部分改变、取代或交换；或者具有来自另一物种或来自另一抗体类别或亚类的相应序列改变、取代或交换。
如本文所用的，“人源化抗体”是指来自供体抗体的CDR中的免疫球蛋白分子被移植到人框架序列上。人源化抗体也可以在框架序列中包含供体来源的残基。人源化抗体还可以包含人免疫球蛋白恒定区的至少一部分。人源化抗体还可以包含既不存在于受体抗体中也不存在于导入的CDR或框架序列中的残基。可以使用本领域已知的方法进行人源化(例如，Jones等人,Nature 321:522-525；1986；Riechmann等人,Nature 332:323-327,1988；Verhoeyen等人,Science 239:1534-1536,1988)；Presta,Curr.Op.Struct.Biol.2:593-596,1992；第4,816,567号美国专利)，包括诸如“超人源化(superhumanizing)”抗体(Tan等人,J.Immunol.169:1119,2002)和“表面重塑(resurfacing)”(例如，Staelens等人,Mol.Immunol.43:1243,2006；以及Roguska等人,Proc.Natl.Acad.Sci USA 91:969,1994)等技术。
术语“抗原”、“免疫原”、“抗体靶标”、“靶标分析物”和类似术语在本文中用于指被抗体识别，即可以被抗体特异性结合的分子、化合物或复合物。该术语可指任何可被抗体特异性识别的分子，例如多肽、多核苷酸、碳水化合物、脂质、化学部分或以上的组合(例如，磷酸化或糖基化的多肽等)。技术人员将理解，该术语并不表示该分子在每种情况下都具有免疫原性，而是简单地表明它可以被抗体靶向。
抗体与抗原上的“表位”结合。表位是抗原上被抗体识别和结合的定位位点。表位可以包括几个氨基酸或几个氨基酸的部分，例如5个或6个或更多个，例如20个或更多个氨基酸，或者那些氨基酸的部分。在一些情况下，表位包括非蛋白质组分，例如来自碳水化合物、核酸或脂质。在一些情况下，表位是三维部分。因此，例如，在靶标是蛋白质的情况下，表位可以由连续的氨基酸组成，或者由通过蛋白质折叠而接近的来自蛋白质不同部分的氨基酸组成(例如，不连续表位)。对于形成三维结构的其他类型的靶标分子也是如此。表位通常包括具有独特空间构象的至少3个，且更通常是至少5个或8-10个氨基酸。确定表位空间构象的方法包括例如，x-射线晶体学和2维核磁共振。参见例如，Epitope Mapping Protocolsin Methods in Molecular Biology,第66卷,Glenn E.Morris，编辑(1996)。
“标记”或“可检测部分”是通过光谱、放射学、光化学、生物化学、免疫化学、化学或其他物理方式可检测的诊断试剂或组分。示例性的标记包括放射性标记(例如，111In、99mTc、131I、67Ga)和其他FDA批准的成像剂。另外的标记包括32P、荧光染料、电子致密试剂、酶、生物素、地高辛或半抗原和蛋白质或其他可被检测的实体，例如通过将放射性标记物掺入靶向剂中。可以采用本领域已知的用于将核酸或纳米载体缀合到标记上的任何方法，例如，使用Hermanson,Bioconjugate Techniques 1996,Academic Press,Inc.,San Diego中描述的方法。
“标记的(labeled)”或“加标签的(tagged)”抗体或试剂是通过连接子或化学键共价结合，或者通过离子键、范德瓦尔斯键、静电键或氢键非共价结合到标记上的抗体或试剂，从而可以通过检测结合到抗体或试剂上的标记的存在来检测抗体或试剂的存在。
用于将可检测的和治疗性的试剂缀合到抗体上的技术是众所周知的(参见例如，Arnon等人,"Monoclonal Antibodies For Immunotargeting Of Drugs In CancerTherapy",于Monoclonal Antibodies And Cancer Therapy,Reisfeld等人(编辑)，第243-256页(Alan R.Liss,Inc.1985)中；Hellstrom等人，"Antibodies For Drug Delivery"于Controlled Drug Delivery(第2版),Robinson等人(编辑)，第623-653页(Marcel Dekker,Inc.1987)中；Thorpe,"Antibody Carriers Of Cytotoxic Agents In Cancer Therapy:AReview"于Monoclonal Antibodies'84:Biological And Clinical Applications,Pinchera等人(编辑)，第475-506页(1985)中；以及Thorpe等人,"The Preparation AndCytotoxic Properties Of Antibody-Toxin Conjugates",Immunol.Rev.,62:119-158(1982))。
术语“对…特异性的(specific for)”、“特异性结合”和类似术语是指以比非靶标化合物大至少2倍的亲和力结合靶标的分子(例如，抗体或抗体片段)，例如，至少大4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍、10倍、20倍、25倍、50倍或100倍的亲和力中的任一项。例如，特异性结合靶标的抗体(例如，人或鼠αvβ8)通常会以比非靶标大至少2倍的亲和力结合靶标。特异性可以使用标准方法来确定，例如固相ELISA免疫测定法(参见例如，Harlow&Lane,UsingAntibodies,A Laboratory Manual(1998),有关可用于确定特异性免疫反应的免疫测定格式和条件的说明)。
关于抗体靶标(例如，抗原、分析物、免疫复合物)的术语“结合”，通常表示抗体结合纯群体中的大多数抗体靶标(假设适当的摩尔比)。例如，结合给定抗体靶标的抗体通常结合溶液中至少2/3的抗体靶标(例如，至少75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％中的任一项)。技术人员将认识到，取决于确定结合的方法和/或阈值，将出现一些可变性。
“对照”样品或值是指作为参考，通常是已知的参考，以用于与测试样品进行比较的样品。例如，测试样品可以取自测试条件，例如，在测试化合物存在的情况下，并与来自已知条件的样品进行比较，例如，在不存在测试化合物(阴性对照)的情况下或在存在已知化合物(阳性对照)的情况下。对照还可以表示从多项测试或结果中收集的平均值或范围。本领域技术人员将认识到，可以将对照设计为用于评估任意数量的参数。例如，可以设计对照以基于药理学数据(例如，半衰期)或治疗措施(例如，益处和/或副作用的比较)来比较治疗益处。对照可以被设计为用于体外应用。本领域技术人员将理解哪些对照在给定情况下是有价值的，并且能够基于与对照值的比较来分析数据。对照对于确定数据的显著性也是有价值的。例如，如果给定参数的值在对照中变化很大，则测试样品中的变化不会被认为是显著的。
本文中的术语“治疗有效剂量”、“有效剂量”或“治疗有效量”意指产生施用效果的剂量。确切的剂量和制剂将取决于治疗的目的，并且可由本领域技术人员使用已知技术进行确定(参见例如，Lieberman,Pharmaceutical Dosage Forms(第1-3卷,1992)；Lloyd,TheArt,Science and Technology of Pharmaceutical Compounding(1999)；Remington:TheScience and Practice of Pharmacy,第20版,Gennaro，编辑(2003)，以及Pickar,DosageCalculations(1999))。例如，对于给定参数，治疗有效量将显示至少5％、10％、15％、20％、25％、40％、50％、60％、75％、80％、90％中的任一项或至少100％的治疗效果增加或减少。治疗效果也可以表示为“-倍”的增加或减少。例如，治疗有效量可以相比对照具有至少1.2倍、1.5倍、2倍、5倍或更多倍中的任一项的效果。
术语“药学上可接受的盐”或“药学上可接受的载体”意指包括用相对无毒的酸或碱制备的活性化合物的盐，这取决于在本文所述抗体上发现的特定取代基。药学上可接受的碱加成盐的实例包括钠、钾、钙、铵、有机氨基或镁盐或类似盐。当本公开的化合物含有相对碱性的官能团时，酸加成盐可以通过使此类化合物的中性形式与足量的纯的或于合适的惰性溶剂中的所需酸接触而获得。药学上可接受的酸加成盐的实例包括来源于无机酸(如盐酸、氢溴酸、硝酸、碳酸、单氢碳酸、磷酸、单氢磷酸、二氢磷酸、硫酸、单氢硫酸、氢碘酸或亚磷酸等)的那些，以及来源于相对无毒的有机酸(如乙酸、丙酸、异丁酸、马来酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、富马酸、乳酸、扁桃酸、邻苯二甲酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、柠檬酸、酒石酸、甲磺酸等)的盐。还包括氨基酸的盐(如精氨酸盐等)，以及有机酸(如葡糖醛酸或半乳糖醛酸等)的盐(参见例如，Berge等人，Journal of Pharmaceutical Science 66:1-19(1977))。本公开的某些特定化合物同时含有碱性和酸性官能团，这允许化合物转化为碱或酸加成盐。本领域技术人员已知的其他药学上可接受的载体适用于本公开。
术语“减少(reduce)”、“减少(reducing)”或“减少(reduction)”，当用于αvβ8介导的TGFβ激活的上下文中时，是指与在相同条件下但在不存在本文所述抗体(例如，抗αvβ8抗体)的情况下获得的标准值相比，反映TGFβ激活的参数数量的任何可检测的负变化或减少。在一些实施方案中，暴露于本文所述的抗体(例如，抗αvβ8拮抗剂、抗αvβ8抗体和免疫缀合物)后的这种降低水平为至少10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或100％。
如本文中关于抗体所使用的术语“竞争”意指第一抗体或其抗原结合部分与第二抗体或其抗原结合部分竞争结合，其中与不存在第二抗体情况下第一抗体的结合相比，在第二抗体存在的情况下，第一抗体与其同源表位的结合可检测地降低。在第一抗体存在的情况下，第二抗体与其表位的结合也可检测地降低的可替代方案可以但不一定是这种情况。也就是说，第一抗体可以抑制第二抗体与其表位的结合，而第二抗体不抑制第一抗体与其各自表位的结合。然而，在每种抗体可检测地抑制另一种抗体与其同源表位或配体的结合的情况下，无论是在相同、更大或更小的程度上，抗体都被称为相互“交叉竞争”结合其各自的表位。竞争性抗体和交叉竞争性抗体都包括在本公开中。无论发生此类所竞争或交叉竞争的机制如何(例如，空间位阻、构象变化或与共同表位或其部分的结合等)，技术人员将理解，基于本文提供的教导，此类竞争性和/或交叉竞争性抗体被包括并且可用于本文所公开的方法。
已知多种类型的竞争性结合测定，例如：固相直接或间接放射免疫测定(RIA)、固相直接或直接酶免疫测定(EIA)、夹心竞争测定(参见Stahli等人,Methods in Enzymology9:242-253(1983))；固相直接生物素-抗生物素蛋白EIA(参见Kirkland等人,J.Immunol.137:3614-3619(1986))；固相直接标记的测定、固相直接标记的夹心测定(参见Harlow和Lane,Antibodies,A Laboratory Manual,Cold Spring Harbor Press(1988))；使用I-125标记的固相直接标记RIA(参见Morel等人,Molec.Immunol.25(1):7-15(1988))；固相直接生物素-抗生物素蛋白EIA(Cheung等人,Virology176:546-552(1990))；以及直接标记的RIA(Moldenhauer等人,Scand.J.Immunol.32:77-82(1990))。通常，此类测定涉及使用结合到携带这些中的任一种的固体表面或细胞的纯化的抗原、未标记的测试免疫球蛋白和标记的参考免疫球蛋白。竞争性抑制是通过测定在测试免疫球蛋白存在下结合到固体表面或细胞的标记的量来测量的。通常，测试免疫球蛋白过量存在。通过竞争测定鉴定的抗体(竞争性抗体)包括与参考抗体相同表位结合的抗体以及与参考抗体结合的表位足够近以用于发生空间位阻的相邻表位结合的抗体。通常，当竞争性抗体过量存在时，它将参考抗体与共同抗原的特异性结合抑制至少50％或75％。
III.结合整合素β8的抗体
提供了特异性结合人整合素β8的抗体(包括抗体片段)，以及用于治疗或预防TGFβ激活的减少对其有改善效应的疾病的方法。“整合素β8”可与β8和β8(beta-8)互换使用。人整合素β8蛋白序列可在Uniprot登录号P26012下找到，而鼠整合素β8序列具有Uniprot登录号Q0VBD0。也参见Moyle等人，Journal of Biological Chemistry 266:19650-19658(1991)；Nishimura等人,J.Biological Chemistry 269:28708-28715(1994)。
在一些实施方案中，提供了特异性结合整合素β8并抑制(部分或完全阻断)潜伏相关肽(LAP)与αvβ8结合的抗体。LAP是αvβ8的配体。参见例如，Sheppard,Cancer andMetastasis Reviews 24(3):395-402(2005)；Lu等人，J Cell Sci 115:4641-4648(2002)。抗体可以以例如小于例如，10、5、1、0.1nM或更低的IC50拮抗LAP与αvβ8的结合。
在一些实施方案中，本公开的抗体特异性结合小鼠整合素β8和/或人整合素β8。此类抗体的一项优势在于可以在小鼠以及人中生成这些抗体的临床数据。在一些实施方案中，本公开的抗体结合人整合素β8。
阻断细胞中LAP与αvβ8结合的一个方面可能是抗体阻止或减少细胞对TGFβ的激活。因此，在一些实施方案中，本文所述的抗体可用于降低细胞或动物(例如，小鼠或人)中的TGFβ激活。
在一些实施方案中，本公开的抗体可包含表1中所述的重链互补决定区1(HCDR1)、HCDR2、HCDR3、轻链互补决定区1(LCDR1)、LCDR2、LCDR3、重链可变区(VH)和/或轻链可变区(VL)的序列。通过North方法确定表1中所述的CDR(参见例如，North等人,J Mol Biol.406(2):228-256,2011)。
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在一些实施方案中，本公开的抗体包含：(1)具有SEQ ID NO:1、5和6中任一项或其变体的序列的HCDR1，所述变体具有相对于SEQ ID NO:1、5和6中任一项的序列具有一个、两个或三个氨基酸取代的序列；(2)具有SEQ ID NO:2、4和7中任一项或其变体的序列的HCDR2，所述变体具有相对于SEQ ID NO:1、4和7中任一项的序列具有一个、两个或三个氨基酸取代的序列；(3)具有SEQ ID NO:3或其变体的序列的HCDR3，所述变体具有相对于SEQ IDNO:3的序列具有一个、两个或三个氨基酸取代的序列；(4)具有SEQ ID NO:8、11、13和14中任一项或其变体的序列的LCDR1，所述变体具有相对于SEQ ID NO:8、11、13和14中任一项的序列具有一个、两个或三个氨基酸取代的序列；(5)具有SEQ ID NO:9和12中任一项或其变体的序列的LCDR2，所述变体具有相对于SEQ ID NO:9和12中任一项的序列具有一个或两个氨基酸取代的序列；以及(6)具有SEQ ID NO:10或其变体的序列的LCDR3，所述变体具有相对于SEQ ID NO:10的序列具有一个或两个氨基酸取代的序列。
在一些实施方案中，本公开的抗体可包含具有SEQ ID NO:1或具有相对于SEQ IDNO:1的序列具有一个、两个或三个氨基酸取代的序列的其变体的序列的HCDR1，具有SEQ IDNO:4或具有相对于SEQ ID NO:4的序列具有一个、两个或三个氨基酸取代的序列的其变体的序列的HCDR2，以及具有SEQ ID NO:3或具有相对于SEQ ID NO:3的序列具有一个、两个或三个氨基酸取代的序列的其变体的序列的HCDR3。在一些实施方案中，本公开的抗体可包含具有SEQ ID NO:1或具有相对于SEQ ID NO:1的序列具有一个、两个或三个氨基酸取代的序列的其变体的序列的HCDR1，HCDR2具有SEQ ID NO:2或具有相对于SEQ ID NO:2的序列具有一个、两个或三个氨基酸取代的序列的其变体的序列，以及具有SEQ ID NO:3或具有相对于SEQ ID NO:3的序列具有一个、两个或三个氨基酸取代的序列的其变体的序列的HCDR3。在一些实施方案中，本公开的抗体可包含具有SEQ ID NO:1或具有相对于SEQ ID NO:1的序列具有一个、两个或三个氨基酸取代的序列的其变体的序列的HCDR1，具有SEQ ID NO:7或具有相对于SEQ ID NO:7的序列具有一个、两个或三个氨基酸取代的序列的其变体的序列的HCDR2，以及具有SEQ ID NO:3或具有相对于SEQ ID NO:3的序列具有一个、两个或三个氨基酸取代的序列的其变体的序列的HCDR3。在一些实施方案中，本公开的抗体可包含具有SEQID NO:5或具有相对于SEQ ID NO:5的序列具有一个、两个或三个氨基酸取代的序列的其变体的序列的HCDR1，具有SEQ ID NO:2或具有相对于SEQ ID NO:2的序列具有一个、两个或三个氨基酸取代的序列的其变体的序列的HCDR2，以及具有SEQ ID NO:3或具有相对于SEQ IDNO:3的序列具有一个、两个或三个氨基酸取代的序列的其变体的序列的HCDR3。在其他实施方案中，本公开的抗体可包含具有SEQ ID NO:6或具有相对于SEQ ID NO:6的序列具有一个、两个或三个氨基酸取代的序列的其变体的序列的HCDR1，具有SEQ ID NO:2或具有相对于SEQ ID NO:2的序列具有一个、两个或三个氨基酸取代的序列的其变体的序列的HCDR2，以及具有SEQ ID NO:3或具有相对于SEQ ID NO:3的序列具有一个、两个或三个氨基酸取代的序列的其变体的序列的HCDR3。
本公开的抗体可包含具有本文所述的HCDR1、HCDR2和HCDR3的重链可变区(VH)。在某些实施方案中，本公开的抗体可包含重链可变区，其分别具有SEQ ID NO:1-3的HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且与SEQ ID NO:15的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)的同一性。在某些实施方案中，本公开的抗体可包含重链可变区，其分别具有SEQ ID NO:1、4和3的HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且与SEQ IDNO:16的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)的同一性。在某些实施方案中，本公开的抗体可包含重链可变区，其分别具有SEQ ID NO:5、2和3的HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且与SEQ ID NO:17的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)的同一性。在某些实施方案中，本公开的抗体可包含重链可变区，其分别具有SEQ ID NO:6、2和3的HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且与SEQ ID NO:18的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)的同一性。在某些实施方案中，本公开的抗体可包含重链可变区，其分别具有SEQ ID NO:1、7和3的HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且与SEQ ID NO:19的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)的同一性。
在一些实施方案中，本公开的抗体可包含具有SEQ ID NO:8或具有相对于SEQ IDNO:8的序列具有一个、两个或三个氨基酸取代的序列的其变体的序列的LCDR1，具有SEQ IDNO:12或具有相对于SEQ ID NO:12的序列具有一个或两个氨基酸取代的序列的其变体的序列的LCDR2，以及具有SEQ ID NO:10或具有相对于SEQ ID NO:10的序列具有一个或两个氨基酸取代的序列的其变体的序列的LCDR3。在一些实施方案中，本公开的抗体可包含具有SEQ ID NO:8或具有相对于SEQ ID NO:8的序列具有一个、两个或三个氨基酸取代的序列的其变体的序列的LCDR1，具有SEQ ID NO:9或具有相对于SEQ ID NO:9的序列具有一个或两个氨基酸取代的序列的其变体的序列的LCDR2，以及具有SEQ ID NO:10或具有相对于SEQID NO:10的序列具有一个或两个氨基酸取代的序列的其变体的序列的LCDR3。在一些实施方案中，本公开的抗体可包含具有SEQ ID NO:11或具有相对于SEQ ID NO:11的序列具有一个、两个或三个氨基酸取代的序列的其变体的序列的LCDR1，具有SEQ ID NO:9或具有相对于SEQ ID NO:9的序列具有一个或两个氨基酸取代的序列的其变体的序列的LCDR2，以及具有SEQ ID NO:10或具有相对于SEQ ID NO:10的序列具有一个或两个氨基酸取代的序列的其变体的序列的LCDR3。
在一些实施方案中，本公开的抗体可包含具有SEQ ID NO:13或具有相对于SEQ IDNO:13的序列具有一个、两个或三个氨基酸取代的序列的其变体的序列的LCDR1，具有SEQID NO:12或具有相对于SEQ ID NO:12的序列具有一个或两个氨基酸取代的序列的其变体的序列的LCDR2，以及具有SEQ ID NO:10或具有相对于SEQ ID NO:10的序列具有一个或两个氨基酸取代的序列的其变体的序列的LCDR3。在一些实施方案中，本公开的抗体可包含具有SEQ ID NO:14或具有相对于SEQ ID NO:14的序列具有一个、两个或三个氨基酸取代的序列的其变体的序列的LCDR1，具有SEQ ID NO:9或具有相对于SEQ ID NO:9的序列具有一个或两个氨基酸取代的序列的其变体的序列的LCDR2，以及具有SEQ ID NO:10或具有相对于SEQ ID NO:10的序列具有一个或两个氨基酸取代的序列的其变体的序列的LCDR3。
本公开的抗体可包含具有本文所述的LCDR1、LCDR2和LCDR3的轻链可变区(VL)。在某些实施方案中，本公开的抗体可包含轻链可变区，其分别具有SEQ ID NO:8-10的LCDR1、LCDR2和LCDR3，并且与SEQ ID NO:20的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)的同一性。在某些实施方案中，本公开的抗体可包含轻链可变区，其分别具有SEQ ID NO:11、9和10的LCDR1、LCDR2和LCDR3，并且与SEQ IDNO:21的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)的同一性。在某些实施方案中，本公开的抗体可包含轻链可变区，其分别具有SEQ ID NO:8、12和10的LCDR1、LCDR2和LCDR3，并且与SEQ ID NO:22的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)的同一性。在某些实施方案中，本公开的抗体可包含轻链可变区，其分别具有SEQ ID NO:13、12和10的LCDR1、LCDR2和LCDR3，并且与SEQ ID NO:23的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)的同一性。在某些实施方案中，本公开的抗体可包含轻链可变区，其分别具有SEQ ID NO:14、9和10的LCDR1、LCDR2和LCDR3，并且与SEQ ID NO:24的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)的同一性。在某些实施方案中，本公开的抗体可包含轻链可变区，其分别具有SEQ ID NO:14、9和10的LCDR1、LCDR2和LCDR3，并且与SEQ ID NO:25的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)的同一性。
ADWA16-1
在特定的实施方案中，本公开的抗体可包含：(1)HCDR1，其具有SEQ ID NO:1的序列；(2)HCDR2，其具有SEQ ID NO:2的序列；(3)HCDR3，其具有SEQ ID NO:3的序列；(4)LCDR1，其具有SEQ ID NO:8的序列；(5)LCDR2，其具有SEQ ID NO:9的序列；以及(6)LCDR3，其具有SEQ ID NO:10的序列。在一些实施方案中，抗体可包含(1)重链可变区，其分别具有SEQ ID NO:1-3的HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且与SEQ ID NO:15的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)的同一性，以及(2)轻链可变区，其分别具有SEQ ID NO:8-10的LCDR1、LCDR2和LCDR3，并且与SEQ ID NO:20的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)的同一性。此类抗体可以是IgG1、IgG2、IgG3或IgG4。
在某些实施方案中，抗体包含与以下SEQ ID NO:26的序列具有至少90％(例如，90％,91％,92％,93％,94％,95％,96％,97％,98％,99％,or 100％)同一性的重链：EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGYIFSSYWVYWVRQAPGKGLEWVGYINPTTGYTEYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATEGGNWEDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK，以及与以下SEQID NO:27的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的轻链：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDISNYINWYQQKPGKAPKLLIYYTSRLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFSELPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC。
在某些实施方案中，抗体包含与以下SEQ ID NO:28的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的重链：EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGYIFSSYWVYWVRQAPGKGLEWVGYINPTTGYTEYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATEGGNWEDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK，以及与以下SEQID NO:27的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的轻链：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDISNYINWYQQKPGKAPKLLIYYTSRLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFSELPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC。
在某些实施方案中，抗体包含与以下SEQ ID NO:29的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的重链：EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGYIFSSYWVYWVRQAPGKGLEWVGYINPTTGYTEYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATEGGNWEDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYASTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK，以及与以下SEQID NO:27的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的轻链：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDISNYINWYQQKPGKAPKLLIYYTSRLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFSELPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC。
ADWA16-2
在特定的实施方案中，本公开的抗体可包含：(1)HCDR1，其具有SEQ ID NO:1的序列；(2)HCDR2，其具有SEQ ID NO:2的序列；(3)HCDR3，其具有SEQ ID NO:3的序列；(4)LCDR1，其具有SEQ ID NO:11的序列；(5)LCDR2，其具有SEQ ID NO:9的序列；以及(6)LCDR3，其具有SEQ ID NO:10的序列。在一些实施方案中，抗体可包含(1)重链可变区，其分别具有SEQ ID NO:1-3的HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且与SEQ ID NO:15的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)的同一性，以及(2)轻链可变区，其分别具有SEQ ID NO:11、9和10的LCDR1、LCDR2和LCDR3，并且与SEQ ID NO:21的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性。此类抗体可以是IgG1、IgG2、IgG3或IgG4。
在某些实施方案中，抗体包含与以下SEQ ID NO:26的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的重链：EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGYIFSSYWVYWVRQAPGKGLEWVGYINPTTGYTEYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATEGGNWEDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK，以及与以下SEQID NO:30的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、or 100％)同一性的轻链：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASKDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSRLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFSELPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC。
在某些实施方案中，抗体包含与以下SEQ ID NO:28的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的重链：EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGYIFSSYWVYWVRQAPGKGLEWVGYINPTTGYTEYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATEGGNWEDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK，以及与以下SEQID NO:30的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的轻链：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASKDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSRLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFSELPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC。
在某些实施方案中，抗体包含与以下SEQ ID NO:29的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的重链：EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGYIFSSYWVYWVRQAPGKGLEWVGYINPTTGYTEYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATEGGNWEDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYASTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK，以及与以下SEQID NO:30的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的轻链：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASKDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSRLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFSELPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC。
ADWA16-3
在特定的实施方案中，本公开的抗体可包含：(1)HCDR1，其具有SEQ ID NO:1的序列；(2)HCDR2，其具有SEQ ID NO:2的序列；(3)HCDR3，其具有SEQ ID NO:3的序列；(4)LCDR1，其具有SEQ ID NO:8的序列；(5)LCDR2，其具有SEQ ID NO:12的序列；以及(6)LCDR3，其具有SEQ ID NO:10的序列。在一些实施方案中，抗体可包含(1)重链可变区，其分别具有SEQ ID NO:1-3的HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且与SEQ ID NO:15的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)的同一性，以及(2)轻链可变区，其分别具有SEQ ID NO:8、12和10的LCDR1、LCDR2和LCDR3，并且与SEQ ID NO:22的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)的同一性。此类抗体可以是IgG1、IgG2、IgG3或IgG4。
在某些实施方案中，抗体包含与以下SEQ ID NO:26的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的重链：EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGYIFSSYWVYWVRQAPGKGLEWVGYINPTTGYTEYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATEGGNWEDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK，以及与以下SEQID NO:31的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的轻链：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDISNYINWYQQKPGKAPKLLIYYTSRLYGGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFSELPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC。
在某些实施方案中，抗体包含与以下SEQ ID NO:28的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的重链：EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGYIFSSYWVYWVRQAPGKGLEWVGYINPTTGYTEYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATEGGNWEDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK，以及与以下SEQID NO:31的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的轻链：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDISNYINWYQQKPGKAPKLLIYYTSRLYGGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFSELPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC。
在某些实施方案中，抗体包含与以下SEQ ID NO:29的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的重链：EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGYIFSSYWVYWVRQAPGKGLEWVGYINPTTGYTEYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATEGGNWEDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYASTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK，以及与以下SEQID NO:31的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的轻链：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDISNYINWYQQKPGKAPKLLIYYTSRLYGGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFSELPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC。
ADWA16-4
在特定的实施方案中，本公开的抗体可包含：(1)HCDR1，其具有SEQ ID NO:1的序列；(2)HCDR2，其具有SEQ ID NO:2的序列；(3)HCDR3，其具有SEQ ID NO:3的序列；(4)LCDR1，其具有SEQ ID NO:13的序列；(5)LCDR2，其具有SEQ ID NO:12的序列；以及(6)LCDR3，其具有SEQ ID NO:10的序列。在一些实施方案中，抗体可包含(1)重链可变区，其分别具有SEQ ID NO:1-3的HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且与SEQ ID NO:15的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)的同一性，以及(2)轻链可变区，其分别具有SEQ ID NO:13、12和10的LCDR1、LCDR2和LCDR3，并且与SEQ IDNO:23的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)的同一性。此类抗体可以是IgG1、IgG2、IgG3或IgG4。
在某些实施方案中，抗体包含与以下SEQ ID NO:26的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的重链：EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGYIFSSYWVYWVRQAPGKGLEWVGYINPTTGYTEYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATEGGNWEDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK，以及与以下SEQID NO:32的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的轻链：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASKDISNYINWYQQKPGKAPKLLIYYTSRLYGGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFSELPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC。
在某些实施方案中，抗体包含与以下SEQ ID NO:28的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的重链：EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGYIFSSYWVYWVRQAPGKGLEWVGYINPTTGYTEYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATEGGNWEDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK，以及与以下SEQID NO:32的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的轻链：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASKDISNYINWYQQKPGKAPKLLIYYTSRLYGGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFSELPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC。
在某些实施方案中，抗体包含与以下SEQ ID NO:29的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的重链：EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGYIFSSYWVYWVRQAPGKGLEWVGYINPTTGYTEYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATEGGNWEDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYASTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK，以及与以下SEQID NO:32的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的轻链：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASKDISNYINWYQQKPGKAPKLLIYYTSRLYGGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFSELPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC。
ADWA16-3.2
在特定的实施方案中，本公开的抗体可包含：(1)HCDR1，其具有SEQ ID NO:1的序列；(2)HCDR2，其具有SEQ ID NO:4的序列；(3)HCDR3，其具有SEQ ID NO:3的序列；(4)LCDR1，其具有SEQ ID NO:8的序列；(5)LCDR2，其具有SEQ ID NO:12的序列；以及(6)LCDR3，其具有SEQ ID NO:10的序列。在一些实施方案中，抗体可包含(1)重链可变区，其分别具有SEQ ID NO:1、4和3的HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且与SEQ ID NO:16的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)的同一性，以及(2)轻链可变区，其分别具有SEQ ID NO:8、12和10的LCDR1、LCDR2和LCDR3，并且与SEQ ID NO:22的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)的同一性。此类抗体可以是IgG1、IgG2、IgG3或IgG4。
在某些实施方案中，抗体包含与以下SEQ ID NO:33的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的重链：
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGYIFSSYWVYWVRQAPGKGLEW
VGYISPTTGYTVYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYY
CATEGGNWEDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAAL
GCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSS
SLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPS
VFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHN
AKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIE
KTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEW
ESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK，以及与以下SEQ ID NO:31的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的轻链：
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDISNYINWYQQKPGKAPKLLIY
YTSRLYGGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFSELPRTFG
QGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQ
WKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC。
在某些实施方案中，抗体包含与以下SEQ ID NO:34的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的重链：
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGYIFSSYWVYWVRQAPGKGLEW
VGYISPTTGYTVYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYY
CATEGGNWEDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAAL
GCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSS
SLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPS
VFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHN
AKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIE
KTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEW
ESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK，以及与以下SEQ ID NO:31的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的轻链：
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDISNYINWYQQKPGKAPKLLIY
YTSRLYGGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFSELPRTFG
QGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQ
WKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC。
在某些实施方案中，抗体包含与以下SEQ ID NO:35的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的重链：
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGYIFSSYWVYWVRQAPGKGLEW
VGYISPTTGYTVYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYY
CATEGGNWEDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAAL
GCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSS
SLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPS
VFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHN
AKTKPREEQYASTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIE
KTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEW
ESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK，以及与以下SEQ ID NO:31的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的轻链：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDISNYINWYQQKPGKAPKLLIYYTSRLYGGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFSELPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC。
ADWA16hugraft
在特定的实施方案中，本公开的抗体可包含：(1)HCDR1，其具有SEQ ID NO:5的序列；(2)HCDR2，其具有SEQ ID NO:2的序列；(3)HCDR3，其具有SEQ ID NO:3的序列；(4)LCDR1，其具有SEQ ID NO:14的序列；(5)LCDR2，其具有SEQ ID NO:9的序列；以及(6)LCDR3，其具有SEQ ID NO:10的序列。在一些实施方案中，抗体可包含(1)重链可变区，其分别具有SEQ ID NO:5、2和3的HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且与SEQ ID NO:17的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)的同一性，以及(2)轻链可变区，其分别具有SEQ ID NO:14、9和10的LCDR1、LCDR2和LCDR3，并且与SEQ ID NO:24的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)的同一性。此类抗体可以是IgG1、IgG2、IgG3或IgG4。
在某些实施方案中，抗体包含与以下SEQ ID NO:36的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的重链：EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGYTFSSYWIYWVRQAPGKGLEWVSYINPTTGYTEYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATEGGNWEDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK，以及与以下SEQID NO:37的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的轻链：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSRLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFSELPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC。
在某些实施方案中，抗体包含与以下SEQ ID NO:38的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的重链：EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGYTFSSYWIYWVRQAPGKGLEWVSYINPTTGYTEYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATEGGNWEDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK，以及与以下SEQID NO:37的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的轻链：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSRLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFSELPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC。
在某些实施方案中，抗体包含与以下SEQ ID NO:39的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的重链：EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGYTFSSYWIYWVRQAPGKGLEWVSYINPTTGYTEYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATEGGNWEDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYASTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK，以及与以下SEQID NO:37的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的轻链：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSRLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFSELPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC。
ADWA16
在特定的实施方案中，本公开的抗体可包含：(1)HCDR1，其具有SEQ ID NO:6的序列；(2)HCDR2，其具有SEQ ID NO:2的序列；(3)HCDR3，其具有SEQ ID NO:3的序列；(4)LCDR1，其具有SEQ ID NO:14的序列；(5)LCDR2，其具有SEQ ID NO:9的序列；以及(6)LCDR3，其具有SEQ ID NO:10的序列。在一些实施方案中，抗体可包含(1)重链可变区，其分别具有SEQ ID NO:6、2和3的HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且与SEQ ID NO:18的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)的同一性，以及(2)轻链可变区，其分别具有SEQ ID NO:14、9和10的LCDR1、LCDR2和LCDR3，并且与SEQ ID NO:25的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)的同一性。此类抗体可以是IgG1、IgG2、IgG3或IgG4。
在某些实施方案中，抗体包含与以下SEQ ID NO:40的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的重链：QVQLQQSGAELAKPGASMKMSCKASGYTFSSYWIYWVKQRPGQGLEWIGYINPTTGYTEYNQKFRDKATLTADKSSNTAYMQLSSLTSEDSAVYYCATEGGNWEDYWGQGTTLTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK，以及与以下SEQID NO:41的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的轻链：DIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDISNYLNWYQQKPDGTVKLLIYYTSRLYSGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEPKDIATYYCQQFSELPRTFGGGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC。
在某些实施方案中，抗体包含与以下SEQ ID NO:42的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的重链：QVQLQQSGAELAKPGASMKMSCKASGYTFSSYWIYWVKQRPGQGLEWIGYINPTTGYTEYNQKFRDKATLTADKSSNTAYMQLSSLTSEDSAVYYCATEGGNWEDYWGQGTTLTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK，以及与以下SEQID NO:41的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的轻链：DIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDISNYLNWYQQKPDGTVKLLIYYTSRLYSGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEPKDIATYYCQQFSELPRTFGGGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC.
在某些实施方案中，抗体包含与以下SEQ ID NO:43的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的重链：QVQLQQSGAELAKPGASMKMSCKASGYTFSSYWIYWVKQRPGQGLEWIGYINPTTGYTEYNQKFRDKATLTADKSSNTAYMQLSSLTSEDSAVYYCATEGGNWEDYWGQGTTLTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYASTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK，以及与以下SEQID NO:41的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的轻链：DIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDISNYLNWYQQKPDGTVKLLIYYTSRLYSGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEPKDIATYYCQQFSELPRTFGGGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC。
Ab1
在特定的实施方案中，本公开的抗体可包含：(1)HCDR1，其具有SEQ ID NO:1的序列；(2)HCDR2，其具有SEQ ID NO:4的序列；(3)HCDR3，其具有SEQ ID NO:3的序列；(4)LCDR1，其具有SEQ ID NO:8的序列；(5)LCDR2，其具有SEQ ID NO:9的序列；以及(6)LCDR3，其具有SEQ ID NO:10的序列。在一些实施方案中，抗体可包含(1)重链可变区，其分别具有SEQ ID NO:1、4和3的HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且与SEQ ID NO:16的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)的同一性，以及(2)轻链可变区，其分别具有SEQ ID NO:8-10的LCDR1、LCDR2和LCDR3，并且与SEQ ID NO:20的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)的同一性。此类抗体可以是IgG1、IgG2、IgG3或IgG4。
在某些实施方案中，抗体包含与以下SEQ ID NO:33的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的重链：EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGYIFSSYWVYWVRQAPGKGLEWVGYISPTTGYTVYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATEGGNWEDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK，以及与以下SEQID NO:27的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的轻链：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDISNYINWYQQKPGKAPKLLIYYTSRLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFSELPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC。
在某些实施方案中，抗体包含与以下SEQ ID NO:34的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的重链：EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGYIFSSYWVYWVRQAPGKGLEWVGYISPTTGYTVYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATEGGNWEDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK，以及与以下SEQID NO:27的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的轻链：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDISNYINWYQQKPGKAPKLLIYYTSRLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFSELPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC。
在某些实施方案中，抗体包含与以下SEQ ID NO:35的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的重链：EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGYIFSSYWVYWVRQAPGKGLEWVGYISPTTGYTVYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATEGGNWEDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYASTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK，以及与以下SEQID NO:27的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的轻链：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDISNYINWYQQKPGKAPKLLIYYTSRLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFSELPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC。
Ab2
在特定的实施方案中，本公开的抗体可包含：(1)HCDR1，其具有SEQ ID NO:1的序列；(2)HCDR2，其具有SEQ ID NO:7的序列；(3)HCDR3，其具有SEQ ID NO:3的序列；(4)LCDR1，其具有SEQ ID NO:8的序列；(5)LCDR2，其具有SEQ ID NO:12的序列；以及(6)LCDR3，其具有SEQ ID NO:10的序列。在一些实施方案中，抗体可包含(1)重链可变区，其分别具有SEQ ID NO:1、7和3的HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且与SEQ ID NO:19的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)的同一性，以及(2)轻链可变区，其分别具有SEQ ID NO:8、12和10的LCDR1、LCDR2和LCDR3，并且与SEQ ID NO:22的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)的同一性。此类抗体可以是IgG1、IgG2、IgG3或IgG4。
在某些实施方案中，抗体包含与以下SEQ ID NO:44的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的重链：EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGYIFSSYWVYWVRQAPGKGLEWVGYISPTTGYTEYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATEGGNWEDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK，以及与以下SEQID NO:31的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的轻链：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDISNYINWYQQKPGKAPKLLIYYTSRLYGGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFSELPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC.
在某些实施方案中，抗体包含与以下SEQ ID NO:45的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的重链：EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGYIFSSYWVYWVRQAPGKGLEWVGYISPTTGYTEYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATEGGNWEDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK，以及与以下SEQID NO:31的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的轻链：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDISNYINWYQQKPGKAPKLLIYYTSRLYGGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFSELPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
在某些实施方案中，抗体包含与以下SEQ ID NO:46的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的重链：EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGYIFSSYWVYWVRQAPGKGLEWVGYISPTTGYTEYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATEGGNWEDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYASTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK，以及与以下SEQID NO:31的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的轻链：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDISNYINWYQQKPGKAPKLLIYYTSRLYGGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFSELPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC。
Ab3
在特定的实施方案中，本公开的抗体可包含：(1)HCDR1，其具有SEQ ID NO:1的序列；(2)HCDR2，其具有SEQ ID NO:7的序列；(3)HCDR3，其具有SEQ ID NO:3的序列；(4)LCDR1，其具有SEQ ID NO:8的序列；(5)LCDR2，其具有SEQ ID NO:9的序列；以及(6)LCDR3，其具有SEQ ID NO:10的序列。在一些实施方案中，抗体可包含(1)重链可变区，其分别具有SEQ ID NO:1、7和3的HCDR1、HCDR2和HCDR3，并且与SEQ ID NO:19的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)的同一性；以及(2)轻链可变区，其分别具有SEQ ID NO:8-10的LCDR1、LCDR2和LCDR3，并且与SEQ ID NO:20的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)的同一性。此类抗体可以是IgG1、IgG2、IgG3或IgG4。
在某些实施方案中，抗体包含与以下SEQ ID NO:44的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的重链：EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGYIFSSYWVYWVRQAPGKGLEWVGYISPTTGYTEYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCATEGGNWEDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK，以及与以下SEQID NO:27的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的轻链：
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDISNYINWYQQKPGKAPKLLIY
YTSRLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFSELPRTFG
QGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQ
WKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC。
在某些实施方案中，抗体包含与以下SEQ ID NO:45的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的重链：
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGYIFSSYWVYWVRQAPGKGLEW
VGYISPTTGYTEYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYY
CATEGGNWEDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAAL
GCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSS
SLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPS
VFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHN
AKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIE
KTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEW
ESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK，以及与以下SEQ ID NO:27的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的轻链：
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDISNYINWYQQKPGKAPKLLIY
YTSRLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFSELPRTFG
QGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQ
WKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC。
在某些实施方案中，抗体包含与SEQ ID NO:46的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的重链：
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGYIFSSYWVYWVRQAPGKGLEW
VGYISPTTGYTEYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYY
CATEGGNWEDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAAL
GCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSS
SLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPS
VFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHN
AKTKPREEQYASTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIE
KTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEW
ESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK，以及与以下SEQ ID NO:27的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的轻链：
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDISNYINWYQQKPGKAPKLLIY
YTSRLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFSELPRTFG
QGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQ
WKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC。
在一些实施方案中，重链可变区的CDR1、CDR2和CDR3以及轻链可变区的CDR1、CDR2和CDR3通过North方法确定(参见例如，North等人,J Mol Biol.406(2):228-256,2011)。在一些实施方案中，抗体包含如通过North方法(参见例如，North等人,J Mol Biol.406(2):228-256,2011)确定的选自ADWA16-1、ADWA16-2、ADWA16-3、ADWA16-4、ADWA16-3.2、ADWA16hugraft、ADWA16、Ab1、Ab2和Ab3的抗体的重链和轻链可变区的CDR1、CDR2和CDR3。
在其他实施方案中，可通过Kabat编号方案从本文所提供的重链可变区和轻链可变区确定抗体的CDR。
本文所述的任何抗体可包括一个或多个人框架区(例如，1、2、3或4个FR)。在一些实施方案中，一个或多个人框架区包括至少一个回复突变。
在其他实施方案中，本文所述的抗体可以与小鼠整合素β8交叉反应。在某些实施方案中，抗体可以阻断TGFβ激活。此外，抗体可以以低于5nM(例如，低于4.5nM、4nM、3.5nM、3nM、2.5nM、2nM、1.5nM、1nM或0.5nM)的IC50拮抗LAP与αvβ8的结合。
在一些实施方案中，可以任选地将修饰引入抗体中(例如，在多肽链内或在N末端或C末端处)，例如，以延长体内半衰期，如聚PEG化或掺入长链聚乙二醇聚合物(PEG)。PEG或PEG的长链聚合物的引入增加了多肽的有效分子量，例如，以防止快速过滤到尿液中。在一些实施方案中，序列中的赖氨酸残基直接或通过连接子缀合到PEG。此类连接子可以是例如Glu残基或含有硫醇官能团的酰基残基，以用于链接到适当修饰的PEG链。用于引入PEG链的可替代方法是首先在C末端或在溶剂暴露的残基(如Arg或Lys残基的替代物)处引入Cys残基。然后将该Cys残基位点特异性地附接到含有例如马来酰亚胺官能团的PEG链上。用于掺入PEG或PEG的长链聚合物的方法在本领域中是已知的(例如，描述于Veronese,F.M.等人,Drug Disc.Today 10:1451-8(2005)；Greenwald,R.B.等人,Adv.Drug Deliv.Rev.55:217-50(2003)；Roberts,M.J.等人,Adv.Drug Deliv.Rev.,54:459-76(2002)中描述的)，其内容通过引用并入本文中。
在某些实施方案中，可以使抗体的特异性突变改变多肽的糖基化。可以选择此类突变来引入或消除一个或多个糖基化位点，包括但不限于O-连接或N-连接的糖基化位点。在某些实施方案中，蛋白质具有相对于天然存在的蛋白质未改变的糖基化位点和模式。在某些实施方案中，蛋白质的变体包括糖基化变体，其中糖基化位点的数量和/或类型已经相对于天然存在的蛋白质发生改变。在某些实施方案中，多肽的变体包含相对于天然多肽更多或更少数量的N-连接的糖基化位点。N-连接的糖基化位点的特征在于序列：Asn-X-Ser或Asn-X-Thr，其中指定为X的氨基酸残基可以是任何氨基酸残基。取代氨基酸残基以产生该序列为添加N-连接的碳水化合物链提供了潜在的新位点。可替代地，消除该序列的取代将去除现有的N-连接的碳水化合物链。在某些实施方案中，提供了N-连接的碳水化合物链的重排，其中一个或多个N-连接的糖基化位点(通常是天然存在的那些)被消除，并且一个或多个新的N-连接的位点被产生。在一些实施方案中，本文所述的抗体具有在HCDR2序列中引入的氨基酸取代，以消除N-连接的糖基化位点。在一些实施方案中，如YINPTTGYTE(SEQ IDNO:2)序列中的粗体所示，N-糖基化位点可以经历从N到S、从N到I或从N到V的氨基酸取代。
单克隆抗体和嵌合抗体，且特别是人源化抗体，特别适用于本文所述抗体的人类治疗用途。单克隆抗体可以通过本领域技术人员熟悉的各种技术获得。简言之，来自用所期望抗原免疫的动物的脾细胞通常通过与骨髓瘤细胞融合而永生化(参见例如，Kohler&Milstein,Eur.J.Immunol.6:511-519(1976))。永生化的可替代方法包括用Epstein Barr病毒、癌基因或逆转录病毒转化，或者本领域众所周知的其他方法。筛选由单个永生化细胞产生的集落，以产生对抗原具有所期望特异性和亲和力的抗体，并且由此类细胞产生的单克隆抗体的产量可以通过各种技术来提高，包括注射到脊椎动物宿主的腹膜腔中。可替代地，可以根据Huse等人,Science 246:1275-1281(1989)概述的一般方案，通过从人B细胞中筛选DNA文库，来分离编码单克隆抗体或其结合片段的DNA序列。
此外，可以收集单克隆抗体，并在免疫测定，例如，将配体固定在固体支持物上的固相免疫测定中对β8配体(例如，LAP)进行滴定。在一些实施方案中，单克隆抗体可以以至少约0.1mM(例如，至少约1μM，例如至少约0.1μM或更好，例如，0.01μM或更低的)Kd结合。
在示例性的实施方案中，可以用β8多肽或编码此类多肽的核酸构建体免疫动物(如兔或小鼠)。可以使用标准方法分离作为免疫结果产生的抗体。在一些实施方案中，动物被敲除整合素β8，并用人β8整合素多肽或其片段免疫。
本公开的免疫球蛋白(包括其结合片段和其他衍生物)可以通过各种重组DNA技术容易地产生，包括通过在转染的细胞(例如，永生化的真核细胞，如骨髓瘤或杂交瘤细胞)中或在能够通过众所周知的方法产生抗体的小鼠、大鼠、兔或其他脊椎动物中表达。DNA序列的合适来源细胞和用于免疫球蛋白表达和分泌的宿主细胞可以从多种来源获得，如美国典型培养物保藏中心(the American Type Culture Collection，Catalogue of Cell Linesand Hybridomas,第5版(1985)Rockville,Md)。
在一些实施方案中，抗体是人源化抗体，即保留非人抗体的反应性同时在人类中具有较少免疫原性的抗体。例如，这可以通过保留非人类CDR区域并用其人类对应物替换抗体的剩余部分来实现。参见例如，Morrison等人,PNAS USA,81:6851-6855(1984)；Morrison和Oi,Adv.Immunol.,44:65-92(1988)；Verhoeyen等人,Science,239:1534-1536(1988)；Padlan,Molec.Immun.,28:489-498(1991)；Padlan,Molec.Immun.,31(3):169-217(1994)。用于人源化抗体的技术是本领域众所周知的，并且描述于例如，第4,816,567号；第5,530,101号；第5,859,205号；第5,585,089号；第5,693,761号；第5,693,762号；第5,777,085号；第6,180,370号；第6,210,671号；以及第6,329,511号美国专利；WO 87/02671；EP专利申请0173494；Jones等人，(1986)Nature 321:522；以及Verhoyen等人，(1988)Science 239:1534中。人源化抗体还被描述于例如，Winter和Milstein(1991)Nature 349:293中。例如，可以合成或通过组合适当的cDNA和基因组DNA区段来产生包含编码人源化免疫球蛋白框架区的第一序列和编码所期望免疫球蛋白互补决定区的第二序列集的多核苷酸。可以根据众所周知的程序从各种人类细胞中分离人恒定区DNA序列。本公开的用于产生免疫球蛋白的CDR可以类似地来源于能够特异性结合αvβ8整合素的单克隆抗体。
在一些实施方案中，抗体是抗体片段，如Fab、F(ab’)2、Fv或scFv。抗体片段可以使用本领域已知的任何方式产生，包括化学消化(例如，木瓜蛋白酶或胃蛋白酶)和重组方法。用于分离和制备重组核酸的方法是本领域技术人员已知的(参见Sambrook等人,MolecularCloning.ALaboratory Manual(第2版1989)；Ausubel等人,Current Protocols inMolecular Biology(1995))。抗体可以在多种宿主细胞中表达，包括大肠杆菌(E.coli)、其他细菌宿主、酵母和各种更高级真核细胞(如COS、CHO和HeLa细胞系和骨髓瘤细胞系)。
竞争性结合测定可被用于鉴定与本文所述抗体竞争特异性结合αvβ8整合素的抗体。本领域已知的多种竞争性结合测定中的任何一种都可以用于测量两种抗体对同一抗原之间的竞争。简言之，可以测试不同抗体抑制另一抗体结合的能力。例如，可以使用夹心ELISA测定法，通过抗体结合的表位来区分抗体。这可以通过使用捕获抗体涂覆小孔的表面来进行。然后可以将亚饱和浓度的加标签的抗原添加到捕获表面。这种蛋白质可以通过特异性抗体:表位相互作用与抗体结合。洗涤后，可以将已共价连接到可检测部分(例如HRP，标记的抗体被定义为检测抗体)的第二抗体加入ELISA。如果该抗体识别与捕获抗体相同的表位，它将不能与靶蛋白结合，因为该特定表位将不再可用于结合。然而，如果该第二抗体识别靶蛋白上的不同表位，它将能够结合，并且这种结合可以通过使用相关底物量化活性水平(以及因此结合的抗体)来检测。背景可以通过使用单一抗体作为捕获和检测抗体来定义，而最大信号可以通过用抗原特异性抗体捕获并用针对抗原上的标签的抗体检测来建立。通过使用背景和最大信号作为参考，可以以成对的方式评估抗体以确定表位特异性。在一些实施方案中，如果在第一抗体存在的情况下，使用上述任何测定法，第二抗体与抗原的结合减少至少30％，通常至少约40％、50％、60％或75％，并且通常至少约90％，则第一抗体被认为竞争性抑制第二抗体的结合。
IV.Fc多肽
本文所述的抗体可包含Fc多肽。Fc多肽可以是野生型Fc多肽，例如，人IgG1 Fc多肽。在某些实施方案中，本文所述的抗体可包含具有以下SEQ ID NO:47的序列的野生型Fc多肽：
APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWY
VDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVS
NKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFY
PSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK。在其他实施方案中，本文所述的抗体可包含各种野生型Fc多肽，其与野生型Fc多肽(例如，SEQ ID NO:47)的序列具有至少90％(例如，90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或99.5％)的同一性，并且相对于野生型Fc多肽(例如，SEQ ID NO:47)的序列具有至少一个氨基酸取代。
在一些实施方案中，本文所述抗体中的Fc多肽可包括调节效应子功能的氨基酸取代。在某些实施方案中，本文所述抗体中的Fc多肽可包括降低或消除效应子功能的氨基酸取代。降低效应子功能的说明性Fc多肽氨基酸取代包括但不限于CH2结构域中的取代，例如在位置234和235处(相对于SEQ ID NO:26的序列的位置编号)或在位置4和5处(相对于SEQID NO:47的序列的位置编号)(参见例如，Lund等人,J Immunol.147(8):2657-62,1991)。例如，在一些实施方案中，本文所述抗体中的一个或两个Fc多肽可包含L234A和L235A取代。在特定实施方案中，本文所述抗体中的一个或两个Fc多肽可具有以下SEQ ID NO:48的序列：APEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK。
调节效应子功能的另外的Fc多肽氨基酸取代包括例如，在位置329处的取代和在位置297处的取代(相对于SEQ ID NO:26的序列的位置编号)。例如，在一些实施方案中，本文所述抗体中的一个或两个Fc多肽可包含P329G取代。在某些实施方案中，本文所述抗体中的一个或两个Fc多肽可具有L234A、L235A和P329G取代。在特定的实施方案中，本文所述抗体中的一个或两个Fc多肽可具有以下SEQ ID NO:49的序列：
APEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWY
VDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVS
NKALGAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGF
YPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK。此外，本文所述抗体中的一个或两个Fc多肽可包含N297A取代(相对于SEQ ID NO:26的序列的位置编号)或N67A取代(相对于SEQ ID NO:47的序列的位置编号)(参见例如，Tao和Morrison,J Immunol.143(8):2595-601,1989)。在特定的实施方案中，本文所述抗体中的一个或两个Fc多肽可具有以下SEQ ID NO:50的序列。APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYASTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
V.治疗性治疗
本文所述的抗体(包括抗体片段)可被用于减少细胞或动物中TGFβ的激活。因此，可以向有需要的动物(例如，人类或非人动物)施用抗体，从而减少动物中的TGFβ激活。减少TGFβ至少可以改善的疾病包括但不限于哮喘、多发性硬化、急性肺损伤、类风湿性关节炎、牛皮癣和慢性阻塞性肺疾病。例如，发明人已经发现，与表达天然整合素β8的那些小鼠模型相比，在哮喘、多发性硬化和急性肺损伤小鼠模型中，β8敲除小鼠的症状得到改善。
癌症
此外，本文所述的抗体可以被用于治疗或预防癌症。在一些实施方案中，癌症包括在细胞表面或由表达αvβ8的细胞组成的组织上表达αvβ8的细胞。在某些实施方案中，癌症包括在细胞表面上表达αvβ8的肿瘤细胞。在一些实施方案中，本文所述的抗体与癌细胞上表达的αvβ8结合，并阻断配体与αvβ8结合，以治疗或预防癌症。在某些实施方案中，本文所述的抗体可减少肿瘤大小、癌细胞的数量、癌细胞的生长速率、癌细胞的转移活性和/或非癌细胞的细胞死亡。在一些实施方案中，本文所述的抗体可用于减少或预防癌症转移。
此外，本文所述的抗体可以增强免疫调节剂(如检查点拮抗剂和检查点激动剂)以及其他基于非药物的免疫疗法(如放射疗法)的有效性。检查点拮抗剂的实例包括但不限于PD1拮抗剂(例如，RMP1-14、派姆单抗、纳武单抗、西米普利单抗、JTX-4014、斯巴达珠单抗(spartalizumab)(PDR001)、卡瑞利珠单抗(SHR1210)、信迪利单抗(IBI308)、替雷利珠单抗(BGB-A317)、特瑞普利单抗(JS 001)、多塔利单抗(TSR-042、WBP-285)、INCMGA00012(MGA012)、AMP-224、AMP-514)、PDL1拮抗剂(例如，阿特珠单抗、阿维单抗、德瓦鲁单抗、KN035、CK-301、AUNP12、CA-170、BMS-986189)和CTLA4拮抗剂(例如，9D9、伊匹单抗、替西木单抗)。
检查点激动剂的实例包括但不限于41BB激动剂(例如，MAB9371、乌托鲁单抗、乌瑞芦单抗(urelumab))。
在一些实施方案中，本文所述的抗体可用于与检查点拮抗剂(例如，如上文所述的PD1拮抗剂、PDL1拮抗剂或CTLA4拮抗剂)组合治疗或预防癌症。在一些实施方案中，本文所述的抗体可用于与检查点激动剂(例如，如上文所述的41BB激动剂)组合治疗或预防癌症。此外，本文所述的抗体也可与基于非药物的免疫疗法(如放射疗法)组合使用，以治疗或预防癌症。
在一些实施方案中，本文所述的抗体还可以与免疫细胞(例如调节性T细胞)上表达的αvβ8结合。在一些实施方案中，αvβ8阻断免疫细胞(例如，调节性T细胞)的功能和/或发育，并且本文所述的抗体可以刺激对癌细胞的免疫。
可通过本文所述抗体治疗的癌症包括癌前细胞、肿瘤细胞、转化细胞和癌细胞，并且可指实体瘤或非实体癌症(参见例如，例如，Edge等人，AJCC Cancer Staging Manual(第7版2009)；Cibas and Ducatman Cytology:Diagnostic principles and clinicalcorrelates(第3版2009))。癌症可以包括良性和恶性肿瘤(异常生长)。此外，癌症可以包括癌、肉瘤、腺癌、淋巴瘤、白血病、实体癌和淋巴癌等。不同类型的癌症的实例包括但不限于肺癌(例如，非小细胞肺癌或NSCLC)、卵巢癌、前列腺癌、结直肠癌、肝癌(liver cancer)(即肝癌(hepatocarcinoma))、肾癌(即肾细胞癌)、膀胱癌、乳腺癌、甲状腺癌、胸膜癌、胰腺癌、子宫癌、宫颈癌、睾丸癌、肛门癌、胰腺癌、胆管癌、胃肠类癌肿瘤、食管癌、胆囊癌、阑尾癌、小肠癌、胃(胃部)癌、中枢神经系统癌症、皮肤癌、绒毛膜癌；头颈癌、血液癌症、骨原性肉瘤、纤维肉瘤、神经母细胞瘤、神经胶质瘤、黑色素瘤、B细胞淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、小细胞淋巴瘤、大细胞淋巴瘤、单核细胞白血病、髓细胞性白血病、急性淋巴细胞白血病、急性髓细胞白血病(AML)、慢性粒细胞白血病(CML)和多发性骨髓瘤。
VI.药物组合物和施用
抗体可以在药物组合物中提供。本公开的药物组合物可以包含药学上可接受的载体。药学上可接受的载体部分由所施用的特定组合物以及用于施用组合物的特定方法来确定。因此，本公开的药物组合物有多种合适的制剂(参见例如，Remington’sPharmaceutical Sciences,第17版,1989)。
适用于施用的制剂包括水性溶液和非水性溶液、等渗无菌溶液，其可含有抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和使制剂等渗的溶质，以及水性和非水性无菌悬浮液，其可包括悬浮剂、增溶剂、增稠剂、稳定剂和防腐剂。在本公开的实践中，组合物可以例如经口、鼻、局部、静脉内、腹膜内或鞘内施用。化合物的制剂可以在单位剂量或多剂量密封容器(如安瓿和小瓶)中呈现。溶液和悬浮液可从前述类型的无菌粉末、颗粒和片剂制备。调节剂也可以作为制备的食物或药物的一部分施用。
施用于患者的剂量应足以随着时间的推移在对象中产生有益的应答。任何患者的最佳剂量水平将取决于多种因素，包括所采用的抗体的疗效、患者的年龄、体重、体力活动和饮食，以及与其他药物的可能组合。剂量还将由特定对象中伴随施用特定化合物或载体的任何不良副作用的存在、性质和程度决定。
在确定待施用的αvβ8整合素的抗体拮抗剂的有效量时，医生可以评估拮抗剂的循环血浆水平和拮抗剂毒性。通常，对于典型的对象，拮抗剂的剂量当量约为1ng/kg至10mg/kg。在一些实施方案中，皮下或静脉施用的剂量范围为0.1-20mg/kg，例如0.3-10mg/kg。
对于施用，αvβ8整合素的拮抗剂可以以由拮抗剂的LD50和拮抗剂在不同浓度下的副作用确定的速率施用，这适用于对象的质量和整体健康。施用可经由单次给药或分次给药完成。
组合物可基于定期(例如，每天)施用一段时间(例如2、3、4、5、6天或1-3周或更长时间)。包含本文所述抗体的制剂可取决于如何施用制剂的方式。
实施例
实施例1–L229细胞粘附的抑制
用于PBS中的1μg/ml LAP包被96孔组织培养板，在37℃C下孵育1hr。在37℃C下，用2％ BSA另外封闭孔1hr。将SNB19细胞以50k个细胞/孔接种。对于封闭条件，在最终接种前，在4℃C下将细胞与所示抗体一起孵育10min。通过以500rpm离心5min来去除非粘附细胞。使用0.5％结晶紫对剩余的粘附细胞进行染色。在2％ Triton X-100中溶解后测定细胞的相对数量。所有测定均以一式三份进行。如图1所示，与ADWA11相比，ADWA16在抑制表达αvβ8的L229细胞与其主要配体TGFb1 LAP的粘附方面的效力高出10倍以上。
实施例2–结合竞争
从10cm培养皿中收集LN-229细胞，并将其重新悬浮于PBS中。最初用1μg、3μg、30μg和100μg的针对β8(ADWA11、ADWA16)的一抗封闭细胞。在随后以最终1:500稀释的APC缀合的ADWA11孵育之前，用PBS洗涤细胞。在BD FACSCantoll上分析细胞的APC表达。如图2A和图2B所示的，未标记的ADWA11有效地竞争标记的ADWA11与表达αvβ8的L229细胞的结合，但未标记的ADWA16不能，证明两种抗体识别不同的表位。
实施例3–结合αvβ8的抗体
使用生物层干涉术测量人源化的、亲和力成熟的抗αvβ8IgG(ADWA16-1、ADWA16-2、ADWA16-3和ADWA16-4)和亲本ADWA-16鼠IgG的嵌合形式(ADWA16-嵌合体)对重组人和小鼠αvβ8的亲和力。用人源化的抗αvβ8IgG(ADWA16-1、ADWA16-2、ADWA16-3和ADWA16-4)或嵌合的ADWA-16加载抗人Fab-CH1尖端，然后是与人或小鼠αvβ8(200nM)的缔合步骤和随后的解离步骤。所有步骤均在结合缓冲液(25mM Tris、0.15M NaCl、0.05％ Tween-20，pH 7.5)中进行。使用曲线拟合软件计算结合亲和力(如表2中所示的)。图3A-图3E显示了每种抗体的缔合/解离曲线。如在图3A-图3E中可见的，人源化的、亲和力成熟的IgG(ADWA16-1、ADWA16-2、ADWA16-3和ADWA16-4)对重组人αvβ8表现出与亲本鼠IgG(ADWA16-嵌合体)等效的亲和力和改善的对重组小鼠αvβ8的亲和力。
表2
IgG 人αvβ8KD(nM) 小鼠αvβ8KD(nM)
ADWA16-嵌合体 0.95 21
ADWA16-1 0.73 4.8
ADWA16-2 2.0 8.5
ADWA16-3 0.83 5.0
ADWA16-4 0.86 8.0
实施例4–结合表达αvβ8的人SNB19星形细胞瘤细胞的抗体
通过FACS，在SNB19人星形细胞瘤细胞上，测量了人源化的、亲和力成熟的抗αvβ8IgG(ADWA16-1、ADWA16-2、ADWA16-3和ADWA16-4)，亲本ADWA16鼠IgG(ADWA16-嵌合体)的嵌合形式和ADWA16的亲和力。在RT下，将IgG以不同浓度与SNB19细胞在PBS中孵育1hr。用PBS洗涤细胞两次，并通过与荧光标记的抗人(ADWA16-1、ADWA16-2、ADWA16-3、ADWA16-4和ADWA16-嵌合体)或抗小鼠(ADWA16)二抗一起孵育，随后进行两次PBS洗涤步骤并通过FACS分析来检测结合。使用曲线拟合软件计算结合亲和力(如表3所示)。如图4中可见的，人源化的、亲和力成熟的IgG(ADWA16-1、ADWA16-2、ADWA16-3和ADWA16-4)对细胞表面表达的人αvβ8表现出与亲本鼠IgG(ADWA16-嵌合体和ADWA16)等效的亲和力。
表3
ADWA16 16-嵌合体 16-1 16-2 16-3 16-4
KD(pM) 417 302 459 498 389 614
实施例5–N-糖基化位点的去除
ADWA16重链CDR2的计算机分析揭示了潜在的N糖基化位点(YINPTTGYTE(SEQ IDNO:2)的序列中的粗体)。ADWA16-3 scFv的酵母表面展示被用于筛选重链CDR2中预测的潜在N-糖基化位点处的氨基酸取代。发现N-糖基化位点的N到S取代导致与人αvβ8类似的结合，并改善了与小鼠αvβ8的结合(相对于16-3)。
实施例6–结合αvβ8的ADWA16-3、ADWA16-3.2和ADWA16-嵌合体
使用生物层干涉术测量人源化的、亲和力成熟的抗αvβ8IgG(ADWA16-3和ADWA16-3.2)以及亲本ADWA16鼠IgG的嵌合形式(ADWA16-嵌合体)对重组人和小鼠αvβ8的亲和力。用人源化的抗αvβ8IgG或嵌合ADWA16加载抗人Fab-CH1尖端，随后是与人或小鼠αvβ8(200nM)的缔合步骤和随后的解离步骤。所有步骤均在结合缓冲液(25mM Tris、0.15M NaCl、0.05％吐温20，pH 7.5)中进行。使用曲线拟合软件计算结合亲和力(如表4所示)。如图5A和图5B所示的，人源化的、亲和力成熟的和去除N-糖基化位点的IgG(ADWA16-3.2)对重组人αvβ8表现出与亲本鼠IgG(ADWA16-嵌合体)等效的亲和力，以及对重组小鼠αvβ8的显著改善的亲和力。相对于ADWA16-3，ADWA16-3.2的亲和力也得到改善。
表4
实施例7–表达αvβ8的ADWA16-3和ADWA16-3.2人SNB19星形细胞瘤细胞
通过FACS，在SNB19人星形细胞瘤细胞上测量人源化的、亲和力成熟的和去除N-糖基化位点的抗αvβ8IgG(ADWA16-3和ADWA16-3.2)的亲和力。在RT下，将IgG以不同浓度与SNB19细胞在PBS中孵育1hr。用PBS洗涤细胞两次，并通过与荧光标记的抗人二抗一起孵育，随后进行两次PBS洗涤步骤并通过FACS分析来检测结合。ADWA16-3表现出830pM的结合亲和力，且ADWA16-3.2表现出512pm的结合亲和力。如图6中可见的，人源化的、亲和力成熟的和去除N-糖基化位点的抗αvβ8IgG(ADWA16-3和ADWA16-3.2)对细胞表面表达的人αvβ8展示出与亲本鼠IgG(ADWA16-嵌合体和ADWA16)等效的亲和力。
实施例8–结合鼠星形胶质细胞的抗体
通过FACS，在鼠星形胶质细胞上测量ADWA16、ADWA11和ADWA16-3.2的亲和力。在RT下，将不同浓度的IgG与细胞一起在PBS中孵育1hr。用PBS洗涤细胞两次，并通过与荧光标记的抗人或抗小鼠二抗一起孵育，随后进行两次PBS洗涤步骤和通过FACS分析来检测结合。ADWA16-3.2表现出1.1nM的结合亲和力，且ADWA11表现出5.6nM的结合亲和力。如图7中所示的，与亲本鼠IgG(ADWA16)相比，ADWA16-3.2IgG展示出与表面表达的小鼠αvβ8的显著改善的结合。
实施例9–结合特异性
通过FACS，测试ADWA16和ADWA16-3.2与细胞表面表达的人αvβ3、αvβ5、αvβ6和αvβ8的结合。利用模拟转染的SW480细胞(其仅表达αvβ5整合素)，用ADWA16-3或ADWA16-3.2进行流式细胞术。也转染SW480细胞，以表达αvβ3或αvβ6。SNB19细胞表达αvβ3、αvβ5和αvβ8。如图8中所示的，ADWA16和ADWA16-3.2不与表达αvβ3、αvβ5或αvβ6的SW480细胞结合，而仅展示与表达αvβ3、αvβ5和αvβ8的SNB19细胞结合。
实施例10–TGFβ激活的抑制
在96孔组织培养板中，将表达αvβ8作为其唯一的TGFβ激活整合素的SNB19细胞与经转染以表达驱动萤火虫萤光素酶表达的PAI-1启动子的TGFβ应答部分的水貂肺报告细胞(TMLC细胞)共培养过夜。在每个实验开始时加入一系列ADWA16、ADWA16-3或ADWA16-3.2的稀释液。裂解细胞，并测量荧光素酶活性，并将其绘制为来自在没有抗体的情况下共培养的TMLC和SNB19细胞的萤光素酶活性的分数。所有测定均以一式三份进行。误差棒显示+/-SEM。ADWA16表现出364pM的IC50；ADWA16-3表现出1360pM的IC50；并且ADWA16-3.2表现出580pM的IC50。如图9A-图9C中所示的，ADWA16-3和ADWA16-3.2保留了鼠亲本ADWA16抑制TGFβ激活的高效力。
实施例11–SNB19细胞粘附至TGFβ1-LAP的抑制
用于PBS中的1μg/ml LAP包被96孔组织培养板，在37℃下孵育1hr。在37℃下，用2％ BSA另外封闭孔1hr。SNB19细胞以50k个细胞/孔接种。对于封闭条件，在最终接种前，将细胞与所示的抗体一起在4℃下孵育10min。通过以500rpm离心5min来去除非粘附细胞。使用0.5％结晶紫对剩余的粘附细胞进行染色。在2％ Triton X-100中溶解后，通过吸光度来量化细胞粘附。所有测定均以一式三份进行。误差棒显示+/-SEM。ADWA16展示出1.1nM的IC50；并且ADWA16-3.2展示出2.1nM的IC50。如图10A和图10B中所示的，ADWA16-3.2在抑制SNB19细胞与TGFβ1-LAP的粘附方面保持低纳摩尔效力。
实施例12–热稳定性
将与蛋白质聚集体表面结合的分子旋转染料与达雷木单抗(Daratumumab)、ADWA16-3.2抗体和ADWA16抗体混合，并对实时PCR仪器进行编程，以3℃/分钟的速度将温度从30℃升高到90℃，同时连续读取荧光。使用一阶导数图来计算抗体的聚集温度。图11显示与亲本鼠抗体ADWA-16相比，ADWA16-3.2展示出改善的热稳定性。
实施例13–结合人星形细胞瘤系SNB19的抗体
通过FACS，在SNB19人星形细胞瘤细胞上测量ADWA16-3.2和ADWA11的亲和力。在RT下，将不同浓度的IgG与SNB19细胞一起在PBS中孵育1小时。用PBS洗涤细胞两次，并通过与荧光标记的抗人二抗一起孵育，随后进行两次PBS洗涤步骤和通过FACS分析来检测结合。使用曲线拟合软件计算结合亲和力。ADWA16-3.2和ADWA11分别展示出392pM和1040pM的KD值。结合曲线如图12所示。如同证明的，与ADWA11相比，ADWA16-3.2对细胞表面表达的人αvβ8展示出更大的亲和力。
实施例14–SNB19细胞粘附至TGFb1 LAP的抑制
用于PBS中的1μg/ml LAP包被96孔组织培养板，在37℃下孵育1hr。在37℃下，用2％ BSA另外封闭孔1hr。SNB19细胞以50k个细胞/孔接种。对于封闭条件，在最终接种前，将细胞与所示的抗体一起在4℃下孵育10min。通过以500rpm离心5min来去除非粘附细胞。使用0.5％结晶紫对剩余的粘附细胞进行染色。在2％ Triton X-100中溶解后，通过吸光度量化细胞粘附。所有测定均以一式三份进行。误差棒显示+/-SEM。如图13A和图13B中所示的，ADWA16的人源化衍生物ADWA16-3.2以比ADWA11更大的效力抑制SNB19细胞粘附至TGFb1LAP。ADWA11展示出1435pM的IC50；ADWA16-3.2展示出650pM的IC50。
提供上述实例是为了说明本公开内容，但不限制其范围。本公开的其他变型对于本领域普通技术人员来说易于显而易见，并且被所附权利要求所涵盖。本文引用的所有出版物、数据库、互联网资源、专利、专利申请和登录号均在此通过引用整体并入本文中，用于所有目的。

Claims (42)

1.分离的抗体，其特异性结合人整合素β8并抑制潜伏相关肽(LAP)粘附至αvβ8，其中所述分离的抗体包含：
(1)重链互补决定区1(HCDR1)，其具有SEQ ID NO:1、5和6中任一项的序列；
(2)HCDR2，其具有SEQ ID NO:2、4和7中任一项的序列；
(3)HCDR3，其具有SEQ ID NO:3的序列；
(4)轻链互补决定区1(LCDR1)，其具有SEQ ID NO:8、11、13和14中任一项的序列；
(5)LCDR2，其具有SEQ ID NO:9和12中任一项的序列；以及
(6)LCDR3，其具有SEQ ID NO:10的序列。
2.如权利要求1所述的分离的抗体，其中所述抗体包含具有SEQ ID NO:1的序列的HCDR1、具有SEQ ID NO:2的序列的HCDR2和具有SEQ ID NO:3的序列的HCDR3。
3.如权利要求1所述的分离的抗体，其中所述抗体包含具有SEQ ID NO:1的序列的HCDR1、具有SEQ ID NO:4的序列的HCDR2和具有SEQ ID NO:3的序列的HCDR3。
4.如权利要求1所述的分离的抗体，其中所述抗体包含具有SEQ ID NO:5的序列的HCDR1、具有SEQ ID NO:2的序列的HCDR2和具有SEQ ID NO:3的序列的HCDR3。
5.如权利要求1所述的分离的抗体，其中所述抗体包含具有SEQ ID NO:6的序列的HCDR1、具有SEQ ID NO:2的序列的HCDR2和具有SEQ ID NO:3的序列的HCDR3。
6.如权利要求1所述的分离的抗体，其中所述抗体包含具有SEQ ID NO:1的序列的HCDR1、具有SEQ ID NO:7的序列的HCDR2和具有SEQ ID NO:3的序列的HCDR3。
7.如权利要求1-6中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含具有SEQ ID NO:8的序列的LCDR1、具有SEQ ID NO:9的序列的LCDR2和具有SEQ ID NO:10的序列的LCDR3。
8.如权利要求1-6中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含具有SEQ ID NO:11的序列的LCDR1、具有SEQ ID NO:9的序列的LCDR2和具有SEQ ID NO:10的序列的LCDR3。
9.如权利要求1-6中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含具有SEQ ID NO:8的序列的LCDR1、具有SEQ ID NO:12的序列的LCDR2和具有SEQ ID NO:10的序列的LCDR3。
10.如权利要求1-6中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含具有SEQ ID NO:13的序列的LCDR1、具有SEQ ID NO:12的序列的LCDR2和具有SEQ ID NO:10的序列的LCDR3。
11.如权利要求1-6中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含具有SEQ ID NO:14的序列的LCDR1、具有SEQ ID NO:9的序列的LCDR2和具有SEQ ID NO:10的序列的LCDR3。
12.如权利要求1-11中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含与SEQ ID NO:15-19中任一项的序列具有至少90％同一性的重链可变区。
13.如权利要求1-12中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含与SEQ ID NO:20-25中任一项的序列具有至少90％同一性的轻链可变区。
14.如权利要求1-13中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含与SEQ ID NO:47-50中任一项的序列具有至少90％同一性的Fc多肽。
15.如权利要求14所述的分离的抗体，其中所述Fc多肽包含氨基酸取代L234A和L235A。
16.如权利要求14或15所述的分离的抗体，其中所述Fc多肽包含氨基酸取代N297A。
17.如权利要求1所述的分离的抗体，其中所述抗体包含：
(1)HCDR1，其具有SEQ ID NO:1的序列；
(2)HCDR2，其具有SEQ ID NO:4的序列；
(3)HCDR3，其具有SEQ ID NO:3的序列；
(4)LCDR1，其具有SEQ ID NO:8的序列；
(5)LCDR2，其具有SEQ ID NO:12的序列；以及
(6)LCDR3，其具有SEQ ID NO:10的序列。
18.如权利要求17所述的分离的抗体，其中所述抗体包含与SEQ ID NO:16的序列具有至少90％同一性的重链可变区。
19.如权利要求17或18所述的分离的抗体，其中所述抗体包含与SEQ ID NO:22的序列具有至少90％同一性的轻链可变区。
20.如权利要求17-19中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含与SEQ ID NO:47-50中任一项的序列具有至少90％同一性的Fc多肽。
21.如权利要求20所述的分离的抗体，其中所述Fc多肽包含氨基酸取代L234A和L235A。
22.如权利要求19或20所述的分离的抗体，其中所述Fc多肽包含氨基酸取代N297A。
23.如权利要求1-22中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体是单克隆抗体。
24.如权利要求1-23中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体是人源化抗体。
25.如权利要求1-24中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体与小鼠整合素β8交叉反应。
26.如权利要求1-25中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体阻断TGFβ激活。
27.如权利要求1-26中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体以低于5nM的IC50拮抗LAP与αvβ8的结合。
28.如权利要求1-27中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含一个或多个人框架区。
29.分离的核酸，其编码权利要求1-28中任一项所述的分离的抗体。
30.表达载体，其包含权利要求29所述的核酸。
31.分离的宿主细胞，其包含权利要求30所述的载体。
32.药物组合物，其包含权利要求1-28中任一项所述的分离的抗体和药学上可接受的载体。
33.减少有需要的人的TGFβ激活的方法，所述方法包括向所述人施用治疗有效量的权利要求1-28中任一项所述的分离的抗体或权利要求32所述的药物组合物，从而减少所述人的TGFβ激活。
34.如权利要求33所述的方法，其中所述人患有选自哮喘、多发性硬化或急性肺损伤的疾病，并且所述疾病的至少一种症状通过减少的TGFβ激活而得到改善。
35.如权利要求33所述的方法，其中所述人患有选自类风湿性关节炎、牛皮癣和慢性阻塞性肺疾病的疾病，并且所述疾病的至少一种症状通过减少的TGFβ激活而得到改善。
36.治疗人的癌症的方法，所述方法包括向所述人施用治疗有效量的权利要求1-28中任一项所述的分离的抗体或向所述人施用权利要求32所述的药物组合物，从而治疗所述癌症。
37.如权利要求36所述的方法，其中所述癌症是转移性癌症。
38.如权利要求36或37所述的方法，其中所述癌症是实体瘤癌症。
39.如权利要求36-38中任一项所述的方法，其中所述方法增强对所述人的癌症的免疫应答。
40.如权利要求36-39中任一项所述的方法，其中所述方法还包括向所述人施用免疫调节剂。
41.如权利要求40所述的方法，其中所述免疫调节剂是PD1拮抗剂、PDL1拮抗剂、CTLA4拮抗剂或41BB激动剂。
42.如权利要求36-41中任一项所述的方法，其中所述方法还包括向所述人施用放射疗法。
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