CN117377390A - 稳定的s-(+)-脱落酸非水性液体溶液 - Google Patents

Abstract

稳定的S‑(+)‑脱落酸(S‑ABA)非水性液体溶液的获得一般无需在S‑(+)‑脱落酸中使用有效量的抗氧化剂和/或紫外线吸收剂。在优选的实施例中，稳定的S‑(+)‑脱落酸(S‑ABA)非水性液体溶液包括至少一种有机溶剂，例如至少一种聚乙二醇、至少一种乙二醇、和/或至少一种乳酰胺和/或至少一种戊酸酯。

Description

稳定的S-(+)-脱落酸非水性液体溶液

相关申请的交叉引用

本申请根据35U.S.C.119(e)要求于2021年5月6日提交的美国临时申请号63/184,963的权益，其内容通过引用并入本文。

技术领域

本发明一般涉及稳定的S-(+)-脱落酸非水性液体溶液。优选地，液体溶液不包括有效量的任何UV吸收剂和/或抗氧化剂。

背景技术

脱落酸是天然存在的植物激素，其主要作用是抑制生长、维持芽的休眠、促进果实成熟或着色、激活病原体抗性响应防御、诱导已经受损的细胞及其近邻的衰老，以及帮助植物耐受应激条件。

脱落酸的天然存在形式是S-(+)-脱落酸。据报道，R-(-)-脱落酸还具有一些生物活性。根据定义，天然脱落酸的侧链是2-顺式,-4-反式。

在1960年代初，脱落酸首次被定义为生长抑制剂，其在脱落的棉花果实和美国梧桐树(sycamore tree)的叶子中积累，光周期性地诱导进入休眠。从那时起，脱落酸已被证明调节植物生长和发育的许多方面，包括胚胎成熟、种子休眠、萌芽、细胞分裂和伸长。尽管在历史上脱落酸已被认为是生长抑制剂，但年轻的组织具有高的脱落酸水平，脱落酸缺乏的突变植物会严重发育不良，因为它们减少蒸腾作用和建立膨胀(turgor)的能力受损。突变体的外源性脱落酸处理恢复正常的细胞扩增和生长。

尽管脱落酸的身份和位置在很大程度上仍然未知，脱落酸被认为通过与受体蛋白结合来启动其对细胞的作用。推定受体(putative receptor)的激活引起一系列事件，其导致离子通道的快速变化和基因转录模式的缓慢变化。虽然已经确定这一系列事件的许多单个组件，但尚未获得完整的情况。

包含脱落酸的商业制剂在农业中用于各种目的，例如提高作物产量、促进果实成熟和颜色变化、提高抗逆性、减缓生长速率、调整开花期和用于其他用途。据报道，脱落酸还具有抑制昆虫的特性。粉末状的脱落酸目前可以从多家中国供应商处获得，这些供应商将其作为除其他用途外，还可以提高某些作物的产量和质量的物质进行销售。

在水性介质中含有S-(+)-脱落酸的几种液体制剂是已知的。生物活性分子可以与有机碱的加入结合。或者，在水性介质中将生物活性成分与防冻剂一起使用。一些制剂使用具有稳定剂的水性S-(+)-脱落酸液体溶液制剂。已知制剂包括活性农用化学品成分，其表面活性剂以等于或大于活性农用化学品成分的量存在。

然而，与脱落酸制剂的工业用途相关的问题之一是基于溶剂的脱落酸液体制剂的储存稳定性相对较差，这是由于植物中8'和9'甲基的羟基化(失活)和阳光诱导的活性的2-顺式,4-反式-S-(+)脱落酸降解和异构化为非活性的2-反式,4-反式-S-(+)-脱落酸异构体。

已经证明，通过添加有效量的至少一种抗氧化剂和紫外线吸收剂，使用颗粒和/或液体制剂提供解决稳定性问题的方案。据报道，在没有至少一种抗氧化剂的情况下，没有观察到2-顺式,4-反式-(S)-脱落酸的储存稳定性。此外，据报道，没有抗氧化剂，S-ABA会随着时间的推移而降解；原因可能是具有高度共轭结构的S-ABA分子的氧化降解。此外，活性的2-顺式,4-反式-(S)-脱落酸倾向于异构化为非活性的2-反式,4-反式-(S)异构体。据报道，添加紫外线吸收剂会很大程度上减缓异构化。

目前市场上的S-ABA可溶性溶液仅限于10％的活性成分含量的水性基制剂。由于S-ABA在这些溶剂中的溶解度差，已经确定基于水性的物质和基于溶剂的物质都不具有较高的浓度。

因此，针对用于不需要至少一种抗氧化剂和/或紫外线吸收剂的商业应用的稳定的S-(+)-脱落酸制剂，以及用于开发含有S-ABA的低VOC液体制剂以满足法规要求，本领域仍存在未满足的需求。

发明内容

本发明一般涉及稳定的S-(+)-脱落酸(S-ABA)非水性液体溶液，其包括至少一种有机溶剂。稳定的非水性液体溶液的获得一般无需在S-(+)-脱落酸中使用有效量的抗氧化剂和/或紫外线吸收剂。在本发明的一个实施例中，稳定的S-(+)-脱落酸(S-ABA)非水性液体溶液包括至少一种聚乙二醇，例如聚乙二醇(PEG 200)。在本发明的一个实施例中，稳定的S-(+)-脱落酸(S-ABA)非水性液体溶液包括至少一种二元醇(glycol)，例如丙二醇。在本发明的一个实施例中，稳定的S-(+)-脱落酸(S-ABA)非水性液体溶液包括至少一种乳酰胺(lactamide)，例如N,N-二甲基乳酰胺(N,N-dimethyl lactamide)。在本发明的一个实施例中，稳定的S-(+)-脱落酸(S-ABA)非水性液体溶液包括至少一种戊酸酯，例如5-二甲胺基-2-甲基-5-氧代戊酸甲酯。

本发明还涉及非水性液体溶液，其包含有效量的2-顺式,4-反式-(S)-脱落酸与有效量的另一种植物生长调节剂结合。优选地，这种非水性液体溶液不包括有效量的任何抗氧化剂和/或任何紫外线吸收剂。

附图说明

结合附图，本发明的特征和优点将从以下对其优选实施例的详细描述中变得显而易见，在其中：

图1是示出关于对照处理、商业处理和本发明处理(“Stoller”)的葡萄中花青素含量的图表。

具体实施方式

本发明涉及稳定的S-(+)-脱落酸非水性液体溶液以及使用这些溶液以提高2-顺式,4-反式-(S)-脱落酸的储存和光稳定性的方法。更具体地说，本发明涉及在不向溶液添加有效量的至少一种抗氧化剂和/或紫外线(UV)吸收剂的情况下，提高2-顺式,4-反式-(S)-脱落酸在非水性溶液中的储存稳定性和光化学稳定性的方法。

在优选实施例中，稳定的S-(+)-脱落酸(S-ABA)非水性液体溶液包括约20-99.9wt.％的至少一种有机溶剂。优选地，有机溶剂为至少一种聚乙二醇、或至少一种二元醇、或至少一种乳酰胺、或至少一种戊酸酯。在一个实施例中，有机溶剂是低挥发性有机化合物(VOC)溶剂。低VOC稳定的液体制剂通常通过使用低VOC溶剂体系来实现。在2006年5月30日，加州农药法规部(California Department of Pesticide Regulation，DPR)宣布了一项空气质量倡议以减少与农药相关的挥发性有机化合物(VOC)排放。在加利福尼亚州销售的所有农药制剂都需要<30％的VOC含量，如通过热重分析(TGA)所估算的。因此，上面指定的低VOC溶剂体系将满足DPR要求。通常，本发明的非水性液体溶液具有低水平的挥发性有机化学物质，使得非水性液体溶液在20℃时的蒸气压小于0.08mm Hg，或者非水性液体溶液的挥发性有机化学品(VOC)排放电位为≦25％。

优选的低VOC溶剂体系是基于高沸点溶剂，例如聚乙二醇，其分子量等于或小于400，优选190至400分子量，优选190至310分子量，更优选190至210分子量。低VOC溶剂例如聚乙二醇(PEG 200)可以用于本发明的非水性液体溶液中。还可以使用PEG 200与其他极性非质子溶剂的混合物。这种极性非质子溶剂包括但不限于醇、二烷基酮、碳酸亚烷基酯、烷基酯和芳基酯。

在一个实施例中，非水性液体溶液包括至少一种非水性共溶剂。非水性共溶剂选自由以下组成的组：乙醇、正丙醇、异丙醇、乳酸乙酯、3-羟基丁酸乙酯、3-羟基丁酸丙酯、二元醇、丙三醇、聚乙二醇、聚丙二醇、碳酸丙烯酯、乳酰胺、戊酸酯及其进一步组合。在一个实施例中，非水性液体溶液包括0至约50wt.％的非水性共溶剂。

脱落酸是光学活性的15-C弱酸，其在环中具有8'、9'和10'CH3基团。脱落酸的结构式如下所示：

本发明的非水性液体溶液利用S-(+)对映异构体而不是立体异构体的外消旋混合物。除非另有明确规定，否则在本申请提及脱落酸的所有情况下，脱落酸均指S-(+)-脱落酸。

本文所用的术语“抗氧化剂”是指抑制氧化的任何化学或生物化合物或物质。抗氧化剂包括但不限于叔丁基对苯二酚(TBHQ)、没食子酸丙酯、丁香油和/或乙氧基喹啉。

本文所用的术语“UV吸收剂”是指任何化合物或物质，其作用是吸收UV光，以减少由UV辐射引起的2-顺式,4-反式-(S)-ABA的降解和异构化。UV吸收剂包括但不限于二苯酮-3和/或甲氧基肉桂酸乙基己酯。

词组“有效量”的抗氧化剂或紫外线吸收剂是指无毒但足够量的抗氧化剂或紫外线吸收剂以提供所需效果。“有效”的抗氧化剂或紫外线吸收剂的量将因组合物而异，取决于特定的组合物、特定的抗氧化剂或紫外线吸收剂等。因此，并不总是能够指定准确的“有效量”。然而，在任何个别情况下，适当的“有效量”可以由本领域的普通技术人员使用常规实验确定。基于溶液的总重量，该量一般为至少0.1重量％的抗氧化剂和至少0.1重量％的UV吸收剂。

本发明优选的非水性液体溶液包含0.001至40重量％的至少一种形式的脱落酸(例如S-ABA)，或0.001至25重量％、或1至25重量％、或1至20.5重量％、或0.001至10重量％。这些非水性液体溶液包括小于0.1wt.％的抗氧化剂、或小于0.08wt.％的抗氧化剂、或小于0.05wt.％的抗氧化剂；以及小于0.1wt.％的UV吸收剂，或小于0.08wt.％的UV吸收剂、或小于0.05wt.％的UV吸收剂。非水性液体溶液还可以含有0至20重量％的表面活性剂，并且将含有75至99.9重量％的至少一种有机溶剂、或50至80wt.％的至少一种有机溶剂、或75至95wt.％的至少一种有机溶剂。非水性液体溶液还可以含有0至50重量％的共溶剂。然后如本领域众所周知可以在使用前稀释非水性液体溶液，以将有效量的S-ABA施用于正在处理的植物，如下所讨论的。

在本发明的一个实施例中，非水性液体溶液包括约10至20.5wt.％的一种形式的ABA(例如S-ABA)以及约79.5至90wt.％的聚乙二醇。

术语“非水性”是指稳定的非水性液体溶液含有≤10wt.％的水，更优选≤5wt.％的水，更优选≤2.5wt.％的水，更优选≤1wt.％的水。

在优选的实施例中，稳定的非水性液体溶液还将包括有效量的表面活性剂，以改善S-ABA在使用稀释液中的润湿性、喷雾保留性和渗透性。在一个实施例中，非水性液体溶液包括0至约20wt.％的至少一种表面活性剂。表面活性剂包括但不限于由以下组成的组：羧酸盐、磺酸盐、天然油、烷基酰胺、芳基酰胺、烷基酚、芳基酚、乙氧基化醇、聚氧乙烯、羧酸酯、聚烷基乙二醇酯、脱水山梨糖醇、乙二醇酯、羧酸酰胺、单链烷醇胺、聚氧乙烯脂肪酸酰胺、聚山梨醇酯、环糊精、糖基醇、硅基醇、聚烷基化醇和烷基芳基乙氧基化物。可以使用的表面活性剂包括但不限于脱水山梨糖醇衍生物(例如(/>是CrodaAmericas,Inc.的注册商标，/>和85可以从Croda,Inc.获得))、乙氧基化醇(例如(/>是Uniqema Americas LLC的注册商标，/>可以从Croda Inc.获得))、乙氧基化烷基酚(例如来自Rhodia Inc.的Igepol CA-630、Igepol和Igepol CO-630)、乙氧基化脂肪酸(例如Myrj52(Myrj是Atlas Powder Company的注册商标，/>可以从Croda Inc.获得))、硅基表面活性剂(例如Silwet/>(Silwet和Silwet L-77是Momentive Performance Chemicals的注册商标，Silwet/>可以从MomentivePerformance Chemicals获得))，以及嵌段聚合物表面活性剂(例如/>P85和P104(Pluronic是BASF Corporation的注册商标，/>和P104可以从BASF Corporation获得))。

应该理解，值范围的叙述包括最高值和最低值之间的所有特定值。例如，“0.001至40重量％的S-ABA”的叙述包括约0.001至约40之间的所有值，使得上限或下限可以包括但不限于0.001、0.005、0.01、0.05、0.1、0.5、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39和40。例如，“小于0.1wt.％”的抗氧化剂和紫外线吸收剂的叙述包括0至0.1wt.％之间的所有值，使得上限或下限可以包括但不限于0、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09和0.10。例如，“0至20重量％的表面活性剂”的叙述包括0至20之间的所有值，使得上限或下限可以包括但不限于0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19和20。例如，“20至99.9重量％”的有机溶剂的叙述包括20至99.9之间的所有值，使得上限或下限可以包括但不限于20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99和99.9。例如，“小于10wt.％的水”的叙述包括0至10wt.％之间的所有值，使得上限或下限可以包括但不限于0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10。例如，“0至约50wt.％的非水性共溶剂”的叙述包括0至50之间的所有值，使得上限或下限可以包括但不限于0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49和50。

在另一个实施例中，本发明还涉及包含有效量的2-顺式,4-反式-(S)-脱落酸和有效量的另一种植物生长调节剂和/或另一种植物营养成分的液体溶液。优选地，这种溶液不包括有效量的任何抗氧化剂和/或任何UV稳定剂。在优选的实施例中，其它植物生长调节剂选自由以下组成的组：赤霉酸(GA₃)、6-苄基腺嘌呤(6-BA)、激动素、吲哚-3-丁酸(IBA)、吲哚-3-乙酸(IAA)、水杨酸(SA)和/或N-(2-氯-4-吡啶基)-N’-苯基脲(CPPU)。在优选的实施例中，其它植物营养成分选自化合物的组，化合物包括氮、磷、钾、钙、镁、硫、硼、铜、铁、锰、钼和/或锌。例如，植物营养成分可以是硼酸和/或钼酸钠。S-ABA与其他植物生长调节剂的混合物可以改善植物生长、作物产量、抗逆性和抗病性，以及促进花芽发端和开花。在优选的实施例中，液体溶液包括≤25wt.％的额外的植物生长调节剂，或≤20wt.％、或≤15wt.％、或≤10wt.％、或≤5wt.％、或≤1wt.％。在优选的实施例中，液体溶液包括≤25wt.％的额外的植物营养成分，或≤20wt.％、或≤15wt.％、或≤10wt.％、或≤5wt.％、或≤1wt.％。

本发明的非水性液体溶液可以制备为即用型稀释液或可稀释的浓缩物。可稀释的浓缩物可以稀释到最终应用浓度或任何中间稀释度，而没有活性成分沉淀的风险。根据本发明的非水性液体溶液制造成本低廉，在储存和运输条件下稳定，处理和使用安全。本领域普通技术人员将能够确定如何在无需过度实验的情况下制备稀释液。

(S)-(+)-脱落酸具有多种农业应用。例如，本发明的制剂可以用于提高植物的抗逆性、减缓生长速度、调整开花期、处理种子、抑制茎叶的生长、防止收获前果实和花朵掉落、改善果实的质量和颜色等。脱落酸的非水性液体制剂的长期稳定是有益且非常有用的，节省最终用户购买新制剂相关的时间和金钱。可能的用途将包括，例如，分发和销售根据本发明的含有(S)-(+)-脱落酸的非水性液体溶液而无需有效量的任何抗氧化剂和/或任何紫外线吸收剂。然后，最终用户可以长时间储存非水性液体溶液。

如本文所用，所有与量、重量百分比等有关的数值，被定义为“约(about)”或“近似(approximately)”每个特定值的加或减10％。例如，词组“大于0.1％”应理解为包含大于0.09％的值。因此，权利要求的范围涵盖所要求保护的值的10％以内的量。

在优选的实施例中，非水性液体溶液包括以下、由以下组成或基本上由以下组成：a)约0.001至约40wt.％、或约0.001至约25wt.％、或约0.001至约10wt.％的至少一种形式的S-(+)脱落酸(S-ABA)；b)约20至99.9wt.％、或约40至99.9wt.％的至少一种有机溶剂；c)可选地，0至约50wt.％的至少一种非水性共溶剂；d)可选地，0至约20wt.％的至少一种表面活性剂；e)可选地，额外的植物生长调节剂；f)可选地，额外的植物营养成分；g)小于0.1wt.％的抗氧化剂；h)小于0.1wt.％的UV吸收剂；以及i)≤10wt.％的水，优选≤5wt.％的水。优选地，至少一种有机溶剂为至少一种聚乙二醇、和/或至少一种二元醇、和/或至少一种乳酰胺、和/或至少一种戊酸酯。在本发明的一个实施例中，至少一种有机溶剂为聚乙二醇200(PEG 200)。在本发明的一个实施例中，至少一种有机溶剂为丙二醇。在本发明的一个实施例中，至少一种有机溶剂为N,N-二甲基乳酰胺。在本发明的一个实施例中，至少一种有机溶剂为5-二甲胺基-2-甲基-5-氧代戊酸甲酯。

在优选的实施例中，非水性液体溶液由以下组成，或基本上由以下组成：a)约0.001至约40wt.％、或约0.001至约25wt.％、或约0.001至约10wt.％的至少一种形式的S-(+)脱落酸(S-ABA)；b)约20至99.9wt.％、或约40至99.9wt.％的至少一种有机溶剂；c)可选地，0至约50wt.％的至少一种非水性共溶剂；d)可选地，0至约20wt.％的至少一种表面活性剂；e)可选地，额外的植物生长调节剂；f)可选地，额外的植物营养成分；g)小于0.1wt.％的抗氧化剂；h)小于0.1wt.％的UV吸收剂；i)≤10wt.％的水，优选≤5wt.％的水；j)<10wt.％的其他成分、或<5wt.％的其他成分、或<1wt.％的其他成分。其中所述的“其它成分”是指不影响所要求保护的溶液的基本和新颖性质的任何物质。这些“基本和新颖性质”包括但不限于下文引用的EPA、联合国粮食及农业组织(Food and Agriculture Organization of theUnited Nations，FAO)和世界卫生组织(World Health Organization，WHO)指南中规定的稳定性性能。优选地，至少一种有机溶剂为至少一种聚乙二醇、和/或丙二醇、和/或至少一种乳酰胺、和/或至少一种戊酸酯。在本发明的一个实施例中，至少一种有机溶剂为聚乙二醇200(PEG 200)。在本发明的一个实施例中，至少一种有机溶剂为丙二醇。在本发明的一个实施例中，至少一种有机溶剂为N,N-二甲基乳酰胺。在本发明的一个实施例中，至少一种有机溶剂为5-二甲胺基-2-甲基-5-氧代戊酸甲酯。

以下示例旨在说明本发明并教导本领域普通技术人员如何制作和使用本发明。它们不旨在以任何方式限制本发明或其保护。

示例1：1wt％的S-ABA制剂的稳定性

表1：

如上表1所示，在不使用稳定剂和抗氧化剂的情况下，在室温下通过将S-ABA溶解在各种二元醇溶剂中来制备1.11％的S-ABA的四种制剂。2012年11月16日农药计划办公室(Office of Pesticide Programs，OPP)发布的EPA稳定性指南涉及“加速储存稳定性和腐蚀特性研究方案(Accelerated Storage Stability and Corrosion CharacteristicsStudy Protocol)”(其通过引用并入本文)，其使用透明瓶以允许UV辐射可以用于溶液。根据EPA、FAO和WHO指南的规定，加速储存稳定性可以用于满足EPA和多国监管数据要求。OPP已经确定，这项研究在升高的温度(54℃)下进行14天，在某些情况下提供了足够的数据，以允许EPA做出关于产品的稳定性和制剂对产品包装的影响的监管发现。《联合国粮食及农业组织和世界卫生组织农药标准制定和使用手册(Manual on the Development and Use ofFAO and WHO Specifications for Pesticides)》(其内容通过引用并入本文)引用所配制的产品中活性成分含量为25至50％的容差为+/-5％，制剂中活性成分含量为10至25％的容差为+/-6％，以及有效含量低于2.5％的制剂中的容差>+/-10％。结果总结如下表2所示：

表2：通过HPLC测定所测量的S-ABA的量

如表2所示，在加速储存稳定性期间，含有丙二醇的制剂A表现出S-ABA的显著降解。利用本发明的溶液，观察到小于5％的降解。

示例2：10+wt％的S-ABA制剂的稳定性

表3：

如上表3所示，在不使用稳定剂和抗氧化剂的情况下，通过在<90℃下在溶剂中将S-ABA加热到高于室温，在各种二元醇溶剂中制备了10+wt.％的S-ABA的四种制剂。还对这些溶液进行了加速稳定性测试。结果总结如下表4所示：

表4：通过HPLC测定所测量的S-ABA的量(wt.％)

如表4所示，在加速储存稳定性期间，含有聚乙二醇的制剂F至H显示出S-ABA的最小降解。

示例3：使用二元醇溶剂的高浓度ABA溶液

表5：

如上表5所示，在不使用稳定剂和抗氧化剂的情况下，通过在<90℃下在溶剂中将S-ABA加热到高于室温，在各种二元醇溶剂中制备了>10wt.％的S-ABA的四种制剂。还对这些溶液进行了加速稳定性测试。结果总结如下表6所示：

表6：通过HPLC测定所测量的S-ABA的量(wt.％)

如表6所示，在加速储存稳定性期间，含有聚乙二醇的制剂J至L显示出S-ABA的最小降解。

示例4：使用共溶剂的高浓度ABA溶液

表7：

如上表7所示，在不使用稳定剂和抗氧化剂的情况下，通过在<90℃下在共溶剂中将S-ABA加热到高于室温，在各种共溶剂中制备了约18wt.％的S-ABA的八种制剂。还对这些溶液进行了加速稳定性测试。结果总结如下表8所示：

表8：通过HPLC测定所测量的S-ABA的量(wt.％)

如表8所示，在加速储存稳定性期间，制剂M至T显示出S-ABA的最小降解。观察到较低沸点共溶剂的一些蒸发，导致第0天结果略高。

示例5：使用较高浓度共溶剂的高浓度ABA溶液

表9：

如上表9所示，在不使用稳定剂和抗氧化剂的情况下，通过在<90℃下在共溶剂中将S-ABA加热到高于室温，在各种共溶剂中制备了约18wt.％的S-ABA的另外六种制剂。还对这些溶液进行了加速稳定性测试。结果总结如下表10所示：

表10：通过HPLC测定所测量的S-ABA的量(wt.％)

如表10所示，在加速储存稳定性期间，制剂AA至AF显示出S-ABA的最小降解。

示例6：含有各种浓度的水的高浓度ABA溶液

表11：

如上表11所示，在不使用稳定剂和抗氧化剂的情况下，通过在<90℃下在共溶剂中将S-ABA加热到高于室温，在含有各种量的水的PEG 200中制备了约10wt.％的S-ABA的四种制剂。还对这些溶液进行了加速稳定性测试。结果总结如下表12所示：

表12：通过HPLC测定所测量的S-ABA的量(wt.％)

如表12所示，在加速储存稳定性期间，制剂U至W显示出S-ABA的最小降解。制剂X中水浓度高于5％表明ABA的损失为>5％。观察到水的一些蒸发，导致第0天结果略高。

示例7：使用非二元醇溶剂的高浓度ABA溶液

表13：

如上表13所示，在不使用稳定剂和抗氧化剂的情况下，通过在<90℃下在溶剂中将S-ABA加热到高于室温，在各种非二元醇溶剂中制备了约40wt.％的S-ABA的两种制剂。还对这些溶液进行了加速稳定性测试。结果总结如下表14所示：

表14：通过HPLC测定所测量的S-ABA的量(wt.％)

如表14所示，在加速储存稳定性期间，含有高ABA浓度和使用非二元醇溶剂的制剂Y至Z显示出S-ABA的最小降解。

示例8：具有各种表面活性剂的高浓度ABA溶液

表15：

如上表15所示，在不使用稳定剂和抗氧化剂的情况下，通过在<90℃下在共溶剂中将S-ABA加热到高于室温，在含有5至10％的各类型的表面活性剂的PEG 200中制备了约20wt.％的S-ABA的四种制剂。还对这些溶液进行了加速稳定性测试。结果总结如下表16所示：

表16：通过HPLC测定所测量的S-ABA的量(wt.％)

如表16所示，在加速储存稳定性期间，含有高ABA浓度和使用各类型的表面活性剂的制剂AG至AJ显示出S-ABA的最小降解。

示例9：具有各种植物生长调节剂的高浓度ABA溶液

表17：

如上表17所示，在不使用稳定剂和抗氧化剂的情况下，通过在<90℃下在共溶剂中将S-ABA和植物生长调节剂加热到高于室温，在含有各类型的植物生长调节剂(PGR)的PEG200中制备了约10wt.％的S-ABA的四种制剂。还对这些溶液进行了加速稳定性测试。结果总结如下表18所示：

表18：通过HPLC测定所测量的S-ABA的量(wt.％)

通过HPLC测定所测量的额外的量(wt.％)

如表18所示，在加速储存稳定性期间，含有高ABA浓度和使用各种PGR的制剂AK至AN显示出S-ABA的最小降解和各自的PGR。

示例10：具有各种植物营养成分的高浓度ABA溶液

表19：

如上表19所示，在不使用稳定剂和抗氧化剂的情况下，通过在<90℃下在共溶剂中将S-ABA和植物生长调节剂加热到高于室温，在含有各类型的植物营养成分的PEG 200中制备了约10wt.％的S-ABA的两种制剂。还对这些溶液进行了加速稳定性测试。结果总结如下表20所示：

表20：通过HPLC测定所测量的S-ABA的量(wt.％)

如表20所示，在加速储存稳定性期间，含有高ABA浓度和各种营养成分的制剂AO至AP显示出S-ABA的最小降解和各自的PGR。

示例11：N,N-二甲基乳酰胺和共溶剂中的高浓度ABA溶液

表21：

如上表21所示，在不使用稳定剂和抗氧化剂的情况下，通过在<90℃下在共溶剂中将S-ABA加热到高于室温，在N,N-二甲基乳酰胺以及各种共溶剂中制备了约30wt.％的S-ABA的五种制剂。还对这些溶液进行了加速稳定性测试。结果总结如下表22所示：

表22：通过HPLC测定所测量的S-ABA的量(wt.％)

如表22所示，在加速储存稳定性期间，含有N,N-二甲基乳酰胺和其他共溶剂的制剂AQ至AU显示出S-ABA的最小降解。

示例11：在5-二甲胺基-2-甲基-5-氧代戊酸甲酯和共溶剂中的高浓度ABA溶液

表23：

如上表23所示，在不使用稳定剂和抗氧化剂的情况下，通过在<90℃下在共溶剂中将S-ABA加热到高于室温，在5-二甲胺基-2-甲基-5-氧代戊酸甲酯以及各种共溶剂中制备了约30wt.％的S-ABA的五种制剂。还对这些溶液进行了加速稳定性测试。结果总结如下表24所示：

表24：通过HPLC测定所测量的S-ABA的量(wt.％)

如表24所示，在加速储存稳定性期间，含有5-二甲胺基-2-甲基-5-氧代戊酸甲酯和其他共溶剂的制剂AV至AZ显示出S-ABA的最小降解。

示例13：在葡萄着色中本发明的性能

如上所述，(S)-(+)-脱落酸制剂在商业上用于促进水果(特别是食用葡萄)的着色。在智利洛斯奥尔尼约斯(Los Lirios,Chile)对深红无籽葡萄进行了实验。在正常施用时间(1月22日和2月5日)期间，与水/表面活性剂对照相比，使用Valent的Protone SL(10％S-ABA)和Stoller的实验性SL(18％ S-ABA)进行了两次施用。将比例调整至可溶性液体(SL)制剂中S-ABA的浓度：

试验结果表明，与商业溶液相比，使用本发明的溶液的果实重量和浆果尺寸明显更高。与对照相比，本发明的溶液没有显示出任何统计学差异。

结果：果实重量和浆果尺寸的总结

*P值：<0.0001

**P值：<0.0001

此外，与商业处理相比，使用本发明的溶液明显改善了颜色强度和覆盖颜色。

结果：颜色强度随时间变化的总结

*P值：<0.0001

**P值：<0.0001

***P值：<0.0001

#基于红色全球颜色指数(Red Globe Color Index，CIRG)的颜色强度

结果：覆盖颜色随时间变化的总结

*P值：<0.0001

**P值：<0.0001

***P值：<0.01

#基于以下类别分配的颜色覆盖：

如图1所示，本发明还显著证明了葡萄中花青素的含量高于商业处理和对照处理两者。

综上所述，与商业处理相比，本发明以较低的有效剂量比例表明具有在统计学上显著更好的果实重量、更高的颜色强度、更高的颜色覆盖和花青素。

尽管本发明已经以优选实施例的方式公开，但应理解，可以在不偏离以下权利要求所定义的本发明范围的情况下对其进行许多附加的修改和变化。

Claims (18)

1.非水性液体溶液，其包含：

a)约0.001至约25wt.％的至少一种形式的S-(+)脱落酸(S-ABA)；

b)约40至99.9wt.％的至少一种有机溶剂，所述有机溶剂选自由至少一种形式的聚乙二醇组成的组；

c)可选地，0至约50wt.％的至少一种非水性共溶剂；

d)可选地，0至约20wt.％的至少一种表面活性剂；

e)可选地，额外的植物生长调节剂；

f)可选地，额外的植物营养成分；

g)小于0.1wt.％的抗氧化剂；

h)小于0.1wt.％的UV吸收剂；和

i)≤10wt.％的水。

2.根据权利要求1所述的溶液，其包含约75至99.9wt.％的聚乙二醇作为所述至少一种有机溶剂，所述聚乙二醇具有约190至410的分子量。

3.根据权利要求1所述的溶液，其包含约79.5至90wt.％的聚乙二醇作为所述至少一种有机溶剂，所述聚乙二醇具有约190至210的分子量。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的溶液，其包含约10至20.5wt.％的一种形式的S-(+)脱落酸。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的溶液，其包含≤5wt.％的水。

6.非水性液体溶液，其包含：

a)约0.001至约40wt.％的至少一种形式的S-(+)脱落酸(S-ABA)；

b)约20至99.9wt.％的至少一种有机溶剂，所述有机溶剂选自由至少一种形式的乳酰胺组成的组；

c)可选地，0至约50wt.％的至少一种非水性共溶剂；

d)可选地，0至约20wt.％的至少一种表面活性剂；

e)可选地，额外的植物生长调节剂；

f)可选地，额外的植物营养成分；

g)小于0.1wt.％的抗氧化剂；

h)小于0.1wt.％的UV吸收剂；和

i)≤10wt.％的水。

7.根据权利要求6所述的溶液，其包含约60-90wt.％的N,N-二甲基乳酰胺作为所述至少一种有机溶剂。

8.根据权利要求6或7所述的溶液，其包含约10至40wt.％的一种形式的S-(+)脱落酸。

9.非水性液体溶液，其包含：

a)约0.001至约40wt.％的至少一种形式的S-(+)脱落酸(S-ABA)；

b)约20至99.9wt.％的至少一种有机溶剂，所述有机溶剂选自由至少一种形式的戊酸酯组成的组；

c)可选地，0至约50wt.％的至少一种非水性共溶剂；

d)可选地，0至约20wt.％的至少一种表面活性剂；

e)可选地，额外的植物生长调节剂；

f)可选地，额外的植物营养成分；

g)小于0.1wt.％的抗氧化剂；

h)小于0.1wt.％的UV吸收剂；和

i)≤10wt.％的水。

10.根据权利要求9所述的溶液，其包含约60-90wt.％的5-二甲胺基-2-甲基-5-氧代戊酸甲酯作为所述至少一种有机溶剂。

11.根据权利要求9或10所述的溶液，其包含约10-40wt.％的一种形式的S-(+)脱落酸。

12.非水性液体溶液，其包含：

a)约0.001至约10wt.％的至少一种形式的S-(+)脱落酸(S-ABA)；

b)约40至99.9wt.％的至少一种有机溶剂，所述有机溶剂选自由至少一种形式的二元醇组成的组；

c)可选地，0至约50wt.％的至少一种非水性共溶剂；

d)可选地，0至约20wt.％的至少一种表面活性剂；

e)可选地，额外的植物生长调节剂；

f)可选地，额外的植物营养成分；

g)小于0.1wt.％的抗氧化剂；

h)小于0.1wt.％的UV吸收剂；和

i)≤10wt.％的水。

13.根据权利要求12所述的溶液，其中所述至少一种有机溶剂为丙二醇。

14.根据权利要求12或13所述的溶液，其包含85至99.9wt.％的丙二醇。

15.根据权利要求1至14中任一项所述的溶液，其中至少一种形式的S-(+)脱落酸是2-顺式,4-反式-(S)-脱落酸。

16.根据权利要求1至15中任一项所述的溶液，其包含≤2wt.％的水。

17.根据权利要求1至16中任一项所述的溶液，其中所述抗氧剂选自由以下组成的组：叔丁基对苯二酚(TBHQ)、没食子酸丙酯、丁香油、乙氧基喹啉及其混合物。

18.根据权利要求1至17中任一项所述的溶液，其中所述UV吸收剂选自由以下组成的组：二苯酮-3、甲氧基肉桂酸乙基己酯及其组合。