CN117323339A - 偶氮丝氨酸在制备抗分枝杆菌的药物中的应用 - Google Patents
偶氮丝氨酸在制备抗分枝杆菌的药物中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN117323339A CN117323339A CN202311135741.6A CN202311135741A CN117323339A CN 117323339 A CN117323339 A CN 117323339A CN 202311135741 A CN202311135741 A CN 202311135741A CN 117323339 A CN117323339 A CN 117323339A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- azoserine
- mycobacterium
- rlu
- tuberculosis
- concentration
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 80
- 229940079593 drug Drugs 0.000 title claims abstract description 59
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 13
- 230000001355 anti-mycobacterial effect Effects 0.000 title claims abstract description 8
- 241000186359 Mycobacterium Species 0.000 claims abstract description 23
- 241000187479 Mycobacterium tuberculosis Species 0.000 claims abstract description 18
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 16
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 16
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 8
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 claims description 18
- JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N rifampicin Chemical compound O([C@](C1=O)(C)O/C=C/[C@@H]([C@H]([C@@H](OC(C)=O)[C@H](C)[C@H](O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)\C=C\C=C(C)/C(=O)NC=2C(O)=C3C([O-])=C4C)C)OC)C4=C1C3=C(O)C=2\C=N\N1CC[NH+](C)CC1 JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N 0.000 claims description 10
- 229960001225 rifampicin Drugs 0.000 claims description 10
- 208000027531 mycobacterial infectious disease Diseases 0.000 claims description 8
- 241000187480 Mycobacterium smegmatis Species 0.000 claims description 6
- 241001049988 Mycobacterium tuberculosis H37Ra Species 0.000 claims description 6
- 241001646725 Mycobacterium tuberculosis H37Rv Species 0.000 claims description 6
- 108700035964 Mycobacterium tuberculosis HsaD Proteins 0.000 claims description 6
- 206010062207 Mycobacterial infection Diseases 0.000 claims description 5
- 229940072185 drug for treatment of tuberculosis Drugs 0.000 claims description 4
- AEUTYOVWOVBAKS-UWVGGRQHSA-N ethambutol Chemical compound CC[C@@H](CO)NCCN[C@@H](CC)CO AEUTYOVWOVBAKS-UWVGGRQHSA-N 0.000 claims description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 claims description 4
- 241001508003 Mycobacterium abscessus Species 0.000 claims description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 3
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 3
- 239000006187 pill Substances 0.000 claims description 3
- 208000031729 Bacteremia Diseases 0.000 claims description 2
- 208000028990 Skin injury Diseases 0.000 claims description 2
- 229960000285 ethambutol Drugs 0.000 claims description 2
- 229960003350 isoniazid Drugs 0.000 claims description 2
- QRXWMOHMRWLFEY-UHFFFAOYSA-N isoniazide Chemical compound NNC(=O)C1=CC=NC=C1 QRXWMOHMRWLFEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 claims description 2
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 claims description 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 claims description 2
- 229960005206 pyrazinamide Drugs 0.000 claims description 2
- IPEHBUMCGVEMRF-UHFFFAOYSA-N pyrazinecarboxamide Chemical compound NC(=O)C1=CN=CC=N1 IPEHBUMCGVEMRF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- LISFMEBWQUVKPJ-UHFFFAOYSA-N quinolin-2-ol Chemical compound C1=CC=C2NC(=O)C=CC2=C1 LISFMEBWQUVKPJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000012453 solvate Substances 0.000 claims description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 claims description 2
- 239000000814 tuberculostatic agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000003926 antimycobacterial agent Substances 0.000 claims 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 abstract description 22
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 12
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 abstract description 7
- 238000011160 research Methods 0.000 abstract description 5
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 abstract description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 abstract 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 52
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 45
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 24
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 241000194031 Enterococcus faecium Species 0.000 description 13
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 13
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 description 11
- 241000187492 Mycobacterium marinum Species 0.000 description 9
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 9
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 9
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 9
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 9
- 241000588626 Acinetobacter baumannii Species 0.000 description 8
- 241000588747 Klebsiella pneumoniae Species 0.000 description 8
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 8
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 8
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 8
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 7
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 6
- WDQPAMHFFCXSNU-BGABXYSRSA-N clofazimine Chemical compound C12=CC=CC=C2N=C2C=C(NC=3C=CC(Cl)=CC=3)C(=N/C(C)C)/C=C2N1C1=CC=C(Cl)C=C1 WDQPAMHFFCXSNU-BGABXYSRSA-N 0.000 description 5
- 229960004287 clofazimine Drugs 0.000 description 5
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 5
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 5
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 5
- AGNGYMCLFWQVGX-AGFFZDDWSA-N (e)-1-[(2s)-2-amino-2-carboxyethoxy]-2-diazonioethenolate Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CO\C([O-])=C\[N+]#N AGNGYMCLFWQVGX-AGFFZDDWSA-N 0.000 description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 229950011321 azaserine Drugs 0.000 description 4
- AGOYDEPGAOXOCK-KCBOHYOISA-N clarithromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@](C)([C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)OC)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 AGOYDEPGAOXOCK-KCBOHYOISA-N 0.000 description 4
- 229960002626 clarithromycin Drugs 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 4
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 4
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 4
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 4
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 4
- 208000031998 Mycobacterium Infections Diseases 0.000 description 3
- 206010062255 Soft tissue infection Diseases 0.000 description 3
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 3
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 3
- 206010040872 skin infection Diseases 0.000 description 3
- VXAGJYXIHQKJIP-REOHCLBHSA-N (2S)-2-azido-3-hydroxypropanoic acid Chemical compound [N+](=[N-])=N[C@@H](CO)C(=O)O VXAGJYXIHQKJIP-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- 241000194032 Enterococcus faecalis Species 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 206010000269 abscess Diseases 0.000 description 2
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 210000004767 rumen Anatomy 0.000 description 2
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 2
- FXCXSZASVNNBEK-RUCXOUQFSA-N (2S)-2-amino-3-(2-diazoacetyl)oxypropanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)COC(=O)C=[N+]=[N-].OC(=O)[C@@H](N)COC(=O)C=[N+]=[N-] FXCXSZASVNNBEK-RUCXOUQFSA-N 0.000 description 1
- 208000006448 Buruli Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 208000023081 Buruli ulcer disease Diseases 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 241000322338 Loeseliastrum Species 0.000 description 1
- 208000032376 Lung infection Diseases 0.000 description 1
- 241000187917 Mycobacterium ulcerans Species 0.000 description 1
- 206010066289 Mycobacterium ulcerans infection Diseases 0.000 description 1
- 241000605861 Prevotella Species 0.000 description 1
- 206010036790 Productive cough Diseases 0.000 description 1
- 206010072170 Skin wound Diseases 0.000 description 1
- 208000033809 Suppuration Diseases 0.000 description 1
- 229940098113 Transglutaminase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 229940124350 antibacterial drug Drugs 0.000 description 1
- 229940121383 antituberculosis agent Drugs 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 238000002815 broth microdilution Methods 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000007598 dipping method Methods 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 229940032049 enterococcus faecalis Drugs 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002309 glutamines Chemical class 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 201000003265 lymphadenitis Diseases 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 239000000649 purine antagonist Substances 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 description 1
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 210000003802 sputum Anatomy 0.000 description 1
- 208000024794 sputum Diseases 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/655—Azo (—N=N—), diazo (=N2), azoxy (>N—O—N< or N(=O)—N<), azido (—N3) or diazoamino (—N=N—N<) compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明涉及偶氮丝氨酸在制备抗分枝杆菌的药物中的应用，属于生物医药技术领域。本发明研究发现，偶氮丝氨酸具备良好的抗分枝杆菌的作用，偶氮丝氨酸对结核分枝杆菌和海洋分枝杆菌的抑制作用尤为显著，最小抑菌浓度为4～5μg/mL，能够用于制备抗分枝杆菌的药物，也能够用于制备预防和/或治疗分枝杆菌感染引起的疾病的药物；为分枝杆菌的防治以及分枝杆菌感染引起的疾病的治疗提供新的选择。
Description
技术领域
本发明属于生物医药技术领域，尤其涉及偶氮丝氨酸在制备抗分枝杆菌的药物中的应用。
背景技术
结核病（Tuberculosis，TB）是一种古老的传染病，从1882年由罗伯特·科赫发现其致病菌为结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis，Mtb）至今已有一百多年历史，该病一直是全球十大死亡原因之一。从1980年开始，耐药TB的发病率不断上升使TB疫情再度上升，成为全球关注的重大公共卫生问题。据世界卫生组织发布的《2022年全球结核病报告》的数据，目前全球耐药TB的治疗成功率为60%，仍然很低。因此，面对日益严峻的挑战，继续开发新的抗TB药物尤其是针对耐药TB的药物迫在眉睫。
除TB外，目前由非结核分枝杆菌(Non-tuberculous mycobacteria，NTM)引起的疾病也越来越多。NTM在环境中普遍存在，其中1/3具有致病性或条件致病性。NTM可以侵犯宿主肺脏、淋巴结、骨骼关节、皮肤和软组织等并造成全身播散，如脓肿分枝杆菌(Mycobacterium abscessus，Mab)就可以引起肺部感染、皮肤和软组织感染、淋巴结炎和散播性病变；海洋分枝杆菌(Mycobacterium marinum，Mm)可以引起皮肤和软组织感染及散播性病变；而耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis，Msm)主要引起皮肤和软组织感染。因为NTM很多具有天然耐药性，所以很多抗TB药物对NTM引起的疾病无效，所以开发对NTM有效的药物的也越来越受到重视。
偶氮丝氨酸(Azaserine)，别名重氮丝氨酸、氮杂丝氨酸，是一种天然存在的重氮基丝氨酸类似物，用作嘌呤拮抗剂和谷氨酰胺类似物(谷氨酰胺转移酶抑制剂)，可以竞争性地抑制谷氨酰胺代谢，具有抗肿瘤和抗菌作用。但是目前已知偶氮丝氨酸能够抑制瘤胃细菌普雷沃氏瘤胃短亚种的生长，抗菌谱有限。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足之处而提供偶氮丝氨酸在制备抗分枝杆菌的药物中的应用。
偶氮丝氨酸(Azaserine)，化学名为(2S)-2-amino-3-(2-diazoacetyl)oxypropanoic acid，分子式为C5H7N3O4，分子量为173.13，结构式如下：
为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：
第一方面，本发明提供了偶氮丝氨酸在制备抗分枝杆菌的药物中的应用。
本申请发明人研究发现，偶氮丝氨酸具备良好的抗分枝杆菌的作用，最小抑菌浓度(Minimal inhibitory concentration，MIC)能够达到4μg/mL，抑菌效果显著，能够用于制备抗分枝杆菌的药物。
作为本发明所述应用的优选实施方式，所述分枝杆菌为结核分枝杆菌(Mtb)或非结核分枝杆菌(NTM)。
作为本发明所述应用的优选实施方式，所述非结核分枝杆菌(NTM)包括耻垢分枝杆菌(Msm)、脓肿分枝杆菌(Mab)或海洋分枝杆菌(Mm)。
作为本发明所述应用的优选实施方式，所述非结核分枝杆菌(NTM)为脓肿分枝杆菌(Mab)或海洋分枝杆菌(Mm)。
作为本发明所述应用的优选实施方式，所述非结核分枝杆菌(NTM)为海洋分枝杆菌(Mm)。
发明人研究发现，在体外实验时，偶氮丝氨酸能够有效的抑制结核分枝杆菌(Mtb)以及海洋分枝杆菌(Mm)的增殖，偶氮丝氨酸对结核分枝杆菌(Mtb)的最小抑菌浓(MIC)度为4μg/mL，对海洋分枝杆菌(Mm)的最小抑菌浓度(MIC)为5μg/mL，抑菌效果显著。
作为本发明所述应用的优选实施方式，所述结核分枝杆菌(Mtb)包括结核分枝杆菌H37Rv(Mtb H37Rv)或结核分枝杆菌H37Ra(Mtb H37Ra)。
发明人研究发现，在体外实验时，偶氮丝氨酸能够有效的抑制结核分枝杆菌H37Rv(Mtb H37Rv)或结核分枝杆菌H37Ra(MtbH37Ra)的增殖，对结核分枝杆菌H37Rv(Mtb H37Rv)及结核分枝杆菌H37Ra(Mtb H37Ra)的最小抑菌浓(MIC)度为4μg/mL，抑菌效果显著。
作为本发明所述应用的优选实施方式，所述药物的剂型为片剂、丸剂、胶囊剂、注射剂中的任意一种。
第二方面，本发明提供了偶氮丝氨酸在制备预防和/或治疗由分枝杆菌感染引起的疾病的药物中的应用。
本申请发明人研究发现，偶氮丝氨酸具备良好的抗分枝杆菌的作用，尤其是抗结核分枝杆菌和抗海洋分枝杆菌。分枝杆菌，尤其是结核分枝杆菌和海洋分枝杆菌作为致病菌，能够引起多种疾病的发生，偶氮丝氨酸能够抑制分枝杆菌的增殖，因此能够用于治疗分枝杆菌感染引起的疾病；偶氮丝氨酸尤其能够显著抑制结核分枝杆菌和海洋分枝杆菌的增殖，能够用于治疗结核分枝杆菌和海洋分枝杆菌感染引起的疾病。
作为本发明所述应用的优选实施方式，所述分枝杆菌为结核分枝杆菌(Mtb)或非结核分枝杆菌(NTM)。
作为本发明所述应用的优选实施方式，所述非结核分枝杆菌(NTM)包括耻垢分枝杆菌(Msm)、脓肿分枝杆菌(Mab)或海洋分枝杆菌(Mm)。
作为本发明所述应用的优选实施方式，所述非结核分枝杆菌(NTM)为脓肿分枝杆菌(Mab)或海洋分枝杆菌(Mm)。
作为本发明所述应用的优选实施方式，所述非结核分枝杆菌(NTM)为海洋分枝杆菌(Mm)。
作为本发明所述应用的优选实施方式，所述结核分枝杆菌(Mtb)包括结核分枝杆菌H37Rv(Mtb H37Rv)或结核分枝杆菌H37Ra(Mtb H37Ra)。
作为本发明所述应用的优选实施方式，所述分枝杆菌感染引起的疾病包括Mtb感染引起的结核病(TB)，Mm感染引起的皮肤损伤、菌血症等疾病。
作为本发明所述应用的优选实施方式，所述分枝杆菌感染引起的疾病包括Mtb感染引起的结核病(TB)。
作为本发明所述应用的优选实施方式，所述药物的剂型为片剂、丸剂、胶囊剂、注射剂中的任意一种。
第三方面，本发明提供了一种治疗结核病的药物，所述药物包括偶氮丝氨酸或其药学上可接受的盐、异构体、前药、多晶型物或溶剂化物，和抗结核病药；
所述抗结核病药包括利福平、异烟肼、吡嗪酰胺、乙胺丁醇、链霉素、卷曲霉素、喹诺酮中的任意一种。
作为本发明所述药物的优选实施方式，所述药物还包括药学上可接受的载体。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
本发明发现偶氮丝氨酸能够应用于制备抗分枝杆菌及预防和/或治疗分枝杆菌感染引起的疾病的药物，尤其是制备抗结核分枝杆菌(Mtb)和海洋分枝杆菌(Mm)的药物，以及预防和/或治疗结核病(TB)的药物；本发明通过体外实验发现偶氮丝氨酸具有良好的抑制Mtb H37Rv、Mtb H37Ra和Mm的作用；具体地，在体外实验中发现，偶氮丝氨酸对Mtb H37Ra和Mtb H37Rv的MICLux为4μg/mL，对Mm的MICLux为5μg/mL；因此能够将偶氮丝氨酸用于单独的制备成抗Mtb或抗Mm的药物，也可以作为其它抗菌药物的辅助用药进行联合用药；本发明拓宽了抗分枝杆菌引起的疾病的药物的种类且有望缩短疾病的疗程，发现了一种新的可用于Mtb、Mm等分枝杆菌感染引起的疾病的治疗；同时，本发明属于“老药新用”，节约了药物研发成本和治疗成本，具有明显的经济效益和临床应用价值。
附图说明
图1为本发明实施例1中AlRa菌液的Time(days)-Log10RLU/mL折线图；
图2为本发明实施例1中AlRv菌液的Time(days)-Log10RLU/mL折线图；
图3为本发明实施例2中AlMsm菌液的Time(hours)-Log10RLU/mL折线图；
图4为本发明实施例3中AlMab菌液的Time(hours)-Log10RLU/mL折线图；
图5为本发明实施例4中AlMm菌液的Time(hours)-Log10RLU/mL折线图。
具体实施方式
为更好地说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明。
实施例所用的其他材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
偶氮丝氨酸购买自Cayman公司；Middlebrook7H9液体培养基(即7H9液体培养基)和Middlebrook7H11固体培养基(即7H11固体培养基)购买自美国伯乐(Bio-rad)公司；MH肉汤培养基、MH固体培养基购买自中国大连美仑生物技术有限公司。
结核分枝杆菌H37Ra(MtbH37Ra)、结核分枝杆菌H37Rv(Mtb H37Rv)、耻垢分枝杆菌(Msm)购买自ATCC菌种库。
脓肿分枝杆菌(Mab)、海洋分枝杆菌(Mm)分离自广州市胸科医院临床收集的皮肤伤口脓液样本，经基因测序鉴定正确后并保存在实验室。
铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、金黄色葡萄球菌、屎肠球菌和粪肠球菌均分离自广州市胸科医院临床收集的痰样本，经基因测序鉴定正确后并保存在实验室。
本发明采用检测相对发光单位(Relative Light Units，RLU，利用酶标仪测定发光强度)的方法测定偶氮丝氨酸对Mtb H37Ra、Mtb H37Rv、Msm、Mab和Mm的活性；采用微量肉汤稀释法检测偶氮丝氨酸对铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、金黄色葡萄球菌、屎肠球菌和粪肠球菌的活性。
实施例1偶氮丝氨酸对Mtb H37Ra和Mtb H37Rv的抗菌活性测试
1、方法
以偶氮丝氨酸作为药物，测试偶氮丝氨酸对Mtb H37Ra和Mtb H37Rv的抗菌活性。
(1)不同浓度药物的制备
在无菌的条件下，用无菌水将药物偶氮丝氨酸溶解，用二甲基亚砜(Dimethylsulfoxide，DMSO)将利福平(Rifampicin，RIF)溶解，分别配制成浓度同为10mg/mL的溶液；充分溶解后，再使用无菌水将药物偶氮丝氨酸溶液稀释成9个浓度梯度，使药物浓度分别为：1000、500、200、100、50、25、12.5、6.25、3.125μg/mL；使用DMSO将RIF溶液稀释到浓度为50μg/mL；在高温高压灭菌后的Ep管中分别加入4μL上述浓度梯度的药物,作为试验组，后续再加入稀释的菌液196μL，使药物的终浓度分别为：20、10、4、2、1、0.5、0.25、0.125、0.0625μg/mL；另取4μL的RIF(50μg/mL)和无菌水分别到Ep管中，作为阳性对照组和阴性对照组；每个浓度梯度设置三个平行。
(2)参照文献《Zhang T,Li SY,NuermbergerEL.Autoluminescent Mycobacteriumtuberculosis for rapid,real-time,non-invasive assessment of drug and vaccineefficacy.PLoS One.2012；7(1):e29774.doi:10.1371/journal.pone.0029774.Epub2012Jan 11.PMID:22253776；PMCID:PMC3256174.》中的方法制备自主发光的Mtb H37Ra和Mtb H37Rv(Autoluminescent Mtb H37Ra，简写为AlRa；AutoluminescentMtb H37Rv，简写为AlRv)菌液从-80℃冰箱取出保存的AlRa和AlRv，分别接入5mL含0.05％(v:v)Tween 80的7H9液体培养基培养，加入玻璃珠打散，当菌液的OD600达到0.8时，将菌液稀释10-6(稀释10万倍)，取0.5mL涂布于7H11固体培养基上，37℃培养28天；从平板上挑取单菌落使用酶标仪检测RLU，将确认发光的单菌落接入5mL含0.05％(v:v)Tween 80的7H9液体培养基培养，加入玻璃珠打散；当1mL菌液的RLU达到2百万时，用7H9液体培养基稀释菌液，使稀释后的菌液0.2mL时RLU在2000-5000的范围内；向加完4μL药物溶液的试验组及对照组的Ep管中加入196μL稀释后的菌液，然后盖上Ep管的盖子，做好标记后立即检测每个Ep管的初始RLU；放置在37℃的恒温培养箱中进行培养，每天检测一次每个Ep管的RLU，连续检测5-6天；以时间(Time(days))为横坐标，以检测的RLU的对数值(Log10RLU/mL)作为纵坐标进行作图分析，药物的最小抑菌浓度(Minimal inhibitory concentration，MICLux)定义为与阴性对照组相比，RLU的对数值下降1个Log值的最小浓度。
2、结果
(1)偶氮丝氨酸对Mtb H37Ra抗菌活性结果
不同药物浓度处理的AlRa菌液在不同天数检测的每个Ep管的RLU如下表1-1所示，根据表1-1绘制Time(days)-Log10RLU/mL折线图，AlRa菌液的Time(days)-Log10RLU/mL折线图如图1所示，根据图1得出偶氮丝氨酸对AlRa的MICLux，得到的结果采用平均值标准差表示。
表1-1
(2)偶氮丝氨酸对MtbH37Rv抗菌活性结果
不同药物浓度处理的AlRv菌液在不同天数检测的每个Ep管的RLU如下表1-2所示，根据表1-2绘制Time(days)-Log10RLU/mL折线图，AlRv菌液的Time(days)-Log10RLU/mL折线图如图2所示，根据图2得出偶氮丝氨酸对AlRv的MICLux，得到的结果采用平均值标准差表示。
表1-2
根据表1-1和图1可得，偶氮丝氨酸对AlRa的MICLux为4μg/mL；根据表1-2和图2可得，偶氮丝氨酸对AlRv的MICLux为4μg/mL，说明偶氮丝氨酸对AlRa和AlRv具有很强的抑制作用。
实施例2偶氮丝氨酸对Msm的抗菌活性测试
1、方法
以偶氮丝氨酸作为药物，测试偶氮丝氨酸对Msm的抗菌活性。
(1)不同浓度药物的制备
在无菌的条件下，用无菌水将药物偶氮丝氨酸配制成浓度为5mg/mL的溶液，同时用DMSO将克拉霉素(Clarithromycin，CLR)配制成浓度为10mg/mL的溶液。充分溶解后，再使用无菌水将药物偶氮丝氨酸溶液稀释成8个浓度梯度，使药物浓度分别为：1000、500、250、125、62.5、31.25、15.625、7.8125μg/mL；使用DMSO将CLR溶液稀释到浓度为50μg/mL；在高温高压灭菌后的Ep管中分别加入4μL上述浓度梯度的药物，作为试验组，后续再加入稀释的菌液196μL，使药物的终浓度分别为：20、10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125、0.15625μg/mL；另取4μL的CLR(50μg/mL)和无菌水分别到Ep管中，作为阳性对照组和阴性对照组；每个浓度梯度设置三个平行。
(2)参照文献《Andreu N,Zelmer A,Fletcher T,Elkington PT,Ward TH,RipollJ,Parish T,Bancroft GJ,Schaible U,Robertson BD,Wiles S.Optimisation ofbioluminescent reporters for use with mycobacteria.PLoS One.2010May 24；5(5):e10777.doi:10.1371/journal.pone.0010777.PMID:20520722；PMCID:PMC2875389.》中的方法制备自主发光的Msm(Autoluminescent Msm，简写为AlMsm)菌液
从-80℃冰箱取出保存的AlMsm，接入5mL含0.05％(v:v)Tween 80的7H9液体培养基，于37℃培养至1mL菌液的RLU达到2百万。用7H9液体培养基稀释菌液，使稀释后的菌液0.2mL时RLU在2000-5000的范围内；向加完4μL药物溶液的试验组和对照组的Ep管中加入196μL稀释后的菌液，然后盖上Ep管的盖子，做好标记后立即检测每个Ep管的初始RLU；放置在37℃的恒温培养箱中进行培养，每12h检测一次每个Ep管的RLU，连续检测72h；以时间(Time(hours))为横坐标，以检测的RLU的对数值(Log10RLU/mL)作为纵坐标进行作图分析，药物的MICLux定义为与阴性对照组相比，RLU的对数值下降1个Log值的最小浓度。
2、偶氮丝氨酸对Msm抗菌活性结果
不同药物浓度处理的AlMsm菌液在不同时间检测的每个Ep管的RLU如下表2所示，根据表2绘制Time(hours)-Log10RLU/mL折线图，AlMsm菌液的Time(hours)-Log10RLU/mL折线图如图3所示，根据图3得出偶氮丝氨酸对AlMsm的MICLux，得到的结果采用平均值标准差表示。
表2
根据表2以及图3中可以看出，偶氮丝氨酸对AlMsm的MICLux大于20μg/mL，说明偶氮丝氨酸对AlMsm无明显的抑制作用。
实施例3偶氮丝氨酸对Mab的抗菌活性测试
1、方法
以偶氮丝氨酸作为药物，测试偶氮丝氨酸对Mab的抗菌活性。
(1)不同浓度药物的制备
在无菌的条件下，用无菌水将药物偶氮丝氨酸配制成浓度为5mg/mL的溶液，同时用DMSO将氯法齐明(Clofazimine，CFZ)配制成浓度为10mg/mL的溶液。充分溶解后，再使用无菌水将药物偶氮丝氨酸溶液稀释成8个浓度梯度，使药物浓度分别为：1000、500、250、125、62.5、31.25、15.625、7.8125μg/mL；使用DMSO将CFZ溶液稀释到浓度为200μg/mL；在高温高压灭菌后的Ep管中分别加入4μL上述浓度梯度的药物，作为试验组，后续再加入稀释的菌液196μL，使药物的终浓度分别为：20、10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125、0.15625μg/mL；另取4μL的CFZ(200μg/mL)和无菌水分别到Ep管中，作为阳性对照组和阴性对照组；每个浓度梯度设置三个平行。
(2)参照文献《Liu Y,Tan Y,Islam MM,Cao Y,Lu X,Zeng S,Hameed HMA,Zhou P,Cai X,Wang S,Mugweru JN,Zhang G,Yin H,Liu J,Nuermberger E,Zhang T.Assessmentof Clofazimine and TB47 Combination Activity against Mycobacterium abscessusUsing a Bioluminescent Approach.Antimicrob Agents Chemother.2020Feb 21；64(3):e01881-19.doi:10.1128/AAC.01881-19.PMID:31843996；PMCID:PMC7038284.》中的方法制备自主发光的Mab(Autoluminescent Mab，简写为AlMab)菌液
从-80℃冰箱取出保存的AlMab，接入5mL含0.05％(v:v)Tween 80的7H9液体培养基，于37℃培养至1mL菌液的RLU达到2百万时，用7H9液体培养基稀释菌液，使稀释后的菌液0.2mL时RLU在2000-5000的范围内；向加完4μL药物溶液的试验组和对照组的Ep管中加入196μL稀释后的菌液，然后盖上Ep管的盖子，做好标记后立即检测每个Ep管的初始RLU；放置在37℃的恒温培养箱中进行培养，每12h检测一次每个Ep管的RLU，连续检测72h；以时间(Time(hours))为横坐标，以检测的RLU的对数值(Log10RLU/mL)作为纵坐标进行作图分析，药物的MICLux定义为与阴性对照组相比，RLU的对数值下降1个Log值的最小浓度。
2、偶氮丝氨酸对Mab抗菌活性结果
不同药物浓度处理的AlMab菌液在不同时间检测的每个Ep管的RLU如下表3所示，根据表3绘制Time(hours)-Log10RLU/mL折线图，AlMab菌液的Time(hours)-Log10RLU/mL折线图如图4所示，根据图4得出偶氮丝氨酸对AlMab的MICLux，得到的结果采用平均值标准差表示。
表3
根据表3以及图4中可以看出，偶氮丝氨酸对AlMab的MICLux为20μg/mL，说明偶氮丝氨酸对AlMab有一定的抑制作用。
实施例4偶氮丝氨酸对Mm的抗菌活性测试
1、方法
以偶氮丝氨酸作为药物，测试偶氮丝氨酸对Mm的抗菌活性。
(1)不同浓度药物的制备
在无菌的条件下，用无菌水将药物偶氮丝氨酸配制成浓度为5mg/mL的溶液，同时用DMSO将利福平(Rifampicin，RIF)配制成浓度为10mg/mL的溶液。充分溶解后，再使用无菌水将偶氮丝氨酸溶液稀释成8个浓度梯度，使药物浓度分别为：1000、500、250、125、62.5、31.25、15.625、7.8125μg/mL；使用DMSO将RIF溶液稀释到浓度为100μg/mL；在高温高压灭菌后的Ep管中分别加入4μL上述浓度梯度的药物，作为试验组，后续再加入稀释的菌液196μL，使药物的终浓度分别为：20、10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125、0.15625μg/mL；另取4μL的RIF(100μg/mL)和无菌水分别到Ep管中，作为阳性对照组和阴性对照组；每个浓度梯度设置三个平行。
(2)参照文献《Liu Y,Gao Y,Liu J,Tan Y,Liu Z,Chhotaray C,Jiang H,Lu Z,Chiwala G,Wang S,Makafe G,Islam MM,Hameed HMA,Cai X,Wang C,LiX,TanS,ZhangT.The compound TB47 is highly bactericidal against Mycobacterium ulcerans ina Buruli ulcer mouse model.Nat Commun.2019Jan 31；10(1):524.doi:10.1038/s41467-019-08464-y.PMID:30705268；PMCID:PMC6355801.》中的方法制备自主发光的Mm(Autoluminescent Mm，AlMm)菌液。
从-80℃冰箱取出保存的AlMm，接入5mL含0.05％(v:v)Tween 80的7H9液体培养基，于30℃培养至1mL菌液的RLU达到2百万，用7H9液体培养基稀释菌液，使稀释后的菌液0.2mL时RLU在2000-5000的范围内；向加完4μL药物溶液的试验组和对照组的Ep管中加入196μL稀释后的菌液，然后盖上Ep管的盖子，做好标记后立即检测每个Ep管的初始RLU；放置在30℃的恒温培养箱中进行培养，每12h检测一次每个Ep管的RLU，连续检测72h；以时间(Time(hours))为横坐标，以检测的RLU的对数值(Log10RLU/mL)作为纵坐标进行作图分析，药物的MICLux定义为与阴性对照组相比，RLU的对数值下降1个Log值的最小浓度。
2、偶氮丝氨酸对Mm抗菌活性结果
不同药物浓度处理的AlMm菌液在不同时间检测的每个Ep管的RLU如下表4所示，根据表4绘制Time(hours)-Log10RLU/mL折线图，AlMm菌液的Time(hours)-Log10RLU/mL折线图如图5所示，根据图5得出偶氮丝氨酸对AlMm的MICLux，得到的结果采用平均值标准差表示。
表4
根据表4以及图5中可以看出，偶氮丝氨酸对AlMm的MICLux为5μg/mL，说明偶氮丝氨酸对AlMm具有较强的抑制作用。
实施例5偶氮丝氨酸对铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、金黄色葡萄球菌、屎肠球菌和粪肠球菌的抗菌活性测试
1、方法
以偶氮丝氨酸作为药物，测试偶氮丝氨酸对铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、金黄色葡萄球菌、屎肠球菌和粪肠球菌的抗菌活性。
(1)不同浓度药物的制备
在无菌的条件下，用无菌水将偶氮丝氨酸配制成浓度为10mg/mL的溶液，充分溶解后使用MH肉汤培养基将偶氮丝氨酸溶液稀释至浓度为256μg/mL。取200μL 256μg/mL的偶氮丝氨酸溶液到透明的96孔细胞培养板中的第一列，第二至十二列中加入100μL的MH肉汤培养基。从第一列的每个孔中取100μL到第二列中，混匀后取100μL到第三列，按照这样的方式继续进行倍半稀释至第十一列，从第十一列中取出100μL舍弃。第一列至第十一列的每一列的浓度分别是256、128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25μg/mL，第十二列作为阴性对照。每个浓度梯度设置三个平行。
(2)铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、金黄色葡萄球菌、屎肠球菌和粪肠球菌待测菌液的制备及活性测试从-80℃冰箱取出保存的菌株，在冰盒上融化后，利用接种环蘸取菌液采用三区划线的方法将菌液接种到MH固体培养基平板上。37℃培养箱中培养过夜后，挑取单克隆菌落到MH肉汤培养基中培养至OD600在0.3-0.5。然后用MH肉汤培养基将菌液稀释至OD600为0.125，再将菌液稀释1000倍后作为待测菌液。向96孔板中，每孔加入100μL的待测菌液，此时，第一列至第十一列中偶氮丝氨酸的浓度为128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125μg/mL，第十二列为对照组。之后，放入37℃培养箱中培养20-24h后，通过肉眼观察96孔板中菌液的浊度来判断药物的MIC。MIC的定义为：以肉眼观察没有菌株生长所对应的药物最低浓度。
2、结果
根据上述MIC的定义，观察的偶氮丝氨酸对6种菌株的MIC结果如下表5所示，表5
| 菌株名称 | 革兰氏阴/阳性菌 | MIC(μg/mL) |
| 铜绿假单胞菌 | 革兰氏阴性菌 | ＞128 |
| 肺炎克雷伯菌 | 革兰氏阴性菌 | ＞128 |
| 鲍曼不动杆菌 | 革兰氏阴性菌 | ＞128 |
| 金黄色葡萄球菌 | 革兰氏阳性菌 | ＞128 |
| 屎肠球菌 | 革兰氏阳性菌 | ＞128 |
| 粪肠球菌 | 革兰氏阳性菌 | ＞128 |
根据表5可以看出，偶氮丝氨酸对铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、金黄色葡萄球菌、屎肠球菌和粪肠球菌的MIC均大于128μg/mL，说明偶氮丝氨酸对铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、金黄色葡萄球菌、屎肠球菌和粪肠球菌不具有抑制作用。
最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
Claims (8)
1.偶氮丝氨酸在制备抗分枝杆菌的药物中的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述分枝杆菌为结核分枝杆菌或非结核分枝杆菌。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述非结核分枝杆菌包括耻垢分枝杆菌、脓肿分枝杆菌或海洋分枝杆菌。
4.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述结核分枝杆菌包括结核分枝杆菌H37Rv或结核分枝杆菌H37Ra。
5.偶氮丝氨酸在制备预防和/或治疗由分枝杆菌感染引起的疾病的药物中的应用。
6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述分枝杆菌感染引起的疾病包括结核病、皮肤损伤或菌血症。
7.如权利要求1或5所述的应用，其特征在于，所述药物的剂型为片剂、丸剂、胶囊剂、注射剂中的任意一种。
8.一种治疗结核病的药物，其特征在于，所述药物包括偶氮丝氨酸或其药学上可接受的盐、异构体、前药、多晶型物或溶剂化物，和抗结核病药；
所述抗结核病药包括利福平、异烟肼、吡嗪酰胺、乙胺丁醇、链霉素、卷曲霉素、喹诺酮中的任意一种。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202311135741.6A CN117323339A (zh) | 2023-09-05 | 2023-09-05 | 偶氮丝氨酸在制备抗分枝杆菌的药物中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202311135741.6A CN117323339A (zh) | 2023-09-05 | 2023-09-05 | 偶氮丝氨酸在制备抗分枝杆菌的药物中的应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN117323339A true CN117323339A (zh) | 2024-01-02 |
Family
ID=89289314
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202311135741.6A Pending CN117323339A (zh) | 2023-09-05 | 2023-09-05 | 偶氮丝氨酸在制备抗分枝杆菌的药物中的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN117323339A (zh) |
-
2023
- 2023-09-05 CN CN202311135741.6A patent/CN117323339A/zh active Pending
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Njire et al. | Pyrazinamide resistance in Mycobacterium tuberculosis: Review and update | |
| Wagner et al. | Nontuberculous mycobacterial infections: a clinical review | |
| EP1129212B1 (en) | Screening process for antibacterial agents | |
| Keating et al. | Nontuberculous mycobacterial infections in solid organ transplantation | |
| Hsueh et al. | Melioidosis: an emerging infection in Taiwan? | |
| von Eiff et al. | Bloodstream infections caused by small-colony variants of coagulase-negative staphylococci following pacemaker implantation | |
| US8951992B2 (en) | Mycobacterium membrane protease as a target for inhibitors of intrabacterial pH homeostasis | |
| Fattorini et al. | Targeting dormant bacilli to fight tuberculosis | |
| Shi et al. | In vitro activity of PBTZ169 against multiple Mycobacterium species | |
| WO2006029248A2 (en) | Hollow fiber technique for in vivo study of cell populations | |
| Kobashi et al. | Relationship between clinical efficacy for pulmonary MAC and drug-sensitivity test for isolated MAC in a recent 6-year period | |
| Inderlied et al. | Antibiotics in laboratory medicine | |
| Behra-Miellet et al. | Antianaerobic activity of moxifloxacin compared with that of ofloxacin, ciprofloxacin, clindamycin, metronidazole and β-lactams | |
| Saviola et al. | The genus Mycobacterium-medical | |
| Roman et al. | Malassezia pachydermatis fungemia in an adult with multibacillary leprosy | |
| CN111096969A (zh) | sutezolid(PNU-100480)在鸟分枝杆菌复合群感染中的应用 | |
| Tan et al. | Nontuberculous mycobacteria | |
| Terhes et al. | Four cases of bacteraemia caused by Fusobacterium nucleatum in febrile, neutropenic patients | |
| CN108093637A (zh) | 新型双环脂羊毛硫肽、制备及作为抗微生物剂的用途 | |
| RU2483722C1 (ru) | Аминотиазольные производные усниновой кислоты как новые противотуберкулезные агенты | |
| Youssef et al. | Ecological effects of antibiotic production by dermatophyte fungi | |
| Clarke et al. | The conundrum of the gram-positive rod: are we missing important pathogens in complicated skin and soft-tissue infections? A case report and review of the literature | |
| CN117323339A (zh) | 偶氮丝氨酸在制备抗分枝杆菌的药物中的应用 | |
| CN108420822A (zh) | 色瑞替尼的抗菌新用途 | |
| Yagi et al. | Development of an in vivo-mimic silkworm infection model with Mycobacterium avium complex |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |