CN117223542B - 一种丛枝菌根真菌菌丝收集器以及收集方法 - Google Patents

一种丛枝菌根真菌菌丝收集器以及收集方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及微生物真菌菌丝收集的技术领域,特别是涉及一种丛枝菌根真菌菌丝收集器以及收集方法;其可保证植物体健康自然繁殖,提高丛枝菌根真菌活性,直接对植物体根系处丛枝菌根真菌菌丝进行收集,提高丛枝菌根真菌收集效率和收集量;包括台座、植物体、安装于台座上的培养盆、内置于培养盆内的架体和循环喷淋组件,架体包括上放置板、下放置板以及连接上放置板和下放置板的多个连杆,上放置板上设有用于植物体茎部固定的卡槽,下放置板处设有集液漏斗;循环喷淋组件包括安装于上放置板上部的供液环管、与供液环管内部连通的布液环管、均布于布液环管底部的多根竖管和循环泵,多根竖管处自上而下设有多个朝向培养盆中心轴线处的喷淋嘴。

Description

一种丛枝菌根真菌菌丝收集器以及收集方法
技术领域
本发明涉及微生物真菌菌丝收集的技术领域,特别是涉及一种丛枝菌根真菌菌丝收集器以及收集方法。
背景技术
众所周知,菌根是自然界中一种普遍的植物共生现象,它是土壤中的菌根真菌菌丝与高等植物营养根系形成的一种联合体;丛枝菌根的菌丝有根外菌丝和根内菌丝之分。根外菌丝在根的外面扩散,发达时可在根的外围形成松散的菌丝网,甚至将根遮掩,但不会像外生菌根那样形成菌套。
如中国发明专利公开了一种可连续收集丛枝菌根真菌菌丝装置及方法(授权公告号CN110476713B),是在培养箱内装置菌根室与菌丝室,在对应处倒置种植植物,添加丛枝菌根真菌菌剂于无菌苗根系,添加菌根室下基质与上基质并间隔向菌根室内浇灌低磷营养液,向菌丝室内浇灌高磷营养液,菌丝可以穿过菌丝入口进入菌丝室内大量繁殖,更好地向植物提供磷营养以换取所需的碳源,过六十天后将菌丝室从培养箱内取出收集菌丝,然后再依次将菌丝室下基质与菌丝室上基质填充到菌丝室内培养菌丝,由于利用了根系的向重力性以及菌丝的无向重力性,加之菌丝吸磷的特性,完全能够达到可连续收集到大量丛枝菌根真菌菌丝的目的,操作简单,装置可重复利用,可行性高。
然而,本发明人具体实施此装置时,发现存在以下缺陷:植物倒置生长违背植物的自然生长规律,不利于植物根系的健康生长,从而影响共生于植物根系的丛枝菌根真菌活性,影响丛枝菌根真菌的繁殖量;在进行植物根系处丛枝菌根真菌繁殖收集过程中,虽然丛枝菌根真菌有一定的吸磷性,但脱离植物根系繁殖的丛枝菌根真菌培养环境发生变化,丛枝菌根真菌的繁殖活性受限,丛枝菌根真菌的繁殖量并不高;且丛枝菌根真菌在植物根系处共生并形成松散的菌丝网,菌丝之间相互相对牢固牵连,植物体根系处更适于丛枝菌根真菌的繁殖,在磷等元素的“吸引”作用下丛枝菌根真菌自植物根系处的脱离量不大,丛枝菌根真菌的收集量有待进一步提高。
发明内容
(一)解决的技术问题
针对现有技术的不足,本发明提供一种保证植物体健康自然繁殖,提高丛枝菌根真菌活性,直接对植物体根系处丛枝菌根真菌菌丝进行收集,提高丛枝菌根真菌收集效率和收集量的丛枝菌根真菌菌丝收集器以及收集方法。
(二)技术方案
为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:一种丛枝菌根真菌菌丝收集器;包括台座、植物体、安装于台座上的培养盆、内置于培养盆内的架体和循环喷淋组件,所述架体包括上放置板、下放置板以及连接上放置板和下放置板的多个连杆,所述上放置板上设有用于植物体茎部固定的卡槽,所述下放置板处设有集液漏斗;所述循环喷淋组件包括安装于上放置板上部的供液环管、与供液环管内部连通的布液环管、均布于布液环管底部的多根竖管和循环泵,多根所述竖管处自上而下设有多个朝向培养盆中心轴线处的喷淋嘴;所述循环泵的输入端伸入至培养盆底部,所述循环泵的输出端与供液环管内部连通;进一步的,所述架体可活动放置于培养盆内;所述集液漏斗内可放置滤网或滤纸;所述卡槽位于上放置板的中心处;植物体优选绿萝等喜水植物。
优选的,所述布液环管转动安装于上放置板底部,所述布液环管上设有伸入至供液环管的环圈部,所述布液环管与供液环管通过环圈部连通,所述环圈部顶部设有多个周向均布的驱动叶板,所述循环泵伸入至供液环管的输出端与一对应驱动叶板之间呈锐角夹角布置;进一步的,所述环圈部与供液环管之间转动密封连接,如通过机械轴封件、密封润滑油等实现环圈部和供液环管之间的密封连接。
优选的,还包括用于架体上下移动的升降提升组件;所述升降提升组件包括安装架、转动安装于安装架上的螺纹丝杠、可上下滑动安装于安装架上的连接架以及为螺纹丝杠转动提供动力的电动机,所述连接架与螺纹丝杠螺纹传动连接;所述连接架与上放置板固定连接;进一步的,升降提升组件也可采用驱动缸或其他具有上下直线驱动效果的等同件。
优选的,还包括放大镜组件和光源灯,所述放大镜组件和光源灯分布于培养盆的外壁异侧,所述放大镜组件和光源灯的中心轴线重合,所述培养盆上设有与放大镜组件和光源灯安装位置对应的透明视窗;进一步的,透明视窗优选玻璃视窗;所述培养盆优选不通光的陶瓷或塑料材质;放大镜组件内置放大镜。
优选的,还包括固定安装于上放置板底部的遮挡罩,所述遮挡罩底部呈锥形收口状;进一步的,遮挡罩优选透明塑料罩或玻璃罩;所述遮挡罩的中心轴线与集液漏斗的中心轴线重合。
优选的,所述卡槽包括环槽以及与环槽相通的多个条形槽;所述条形槽绕环槽周向均布;进一步的,所述植物体的茎部卡入至条形槽内。
优选的,还包括与卡槽内壁契合的卡板,所述卡板顶部固定安装有提环。
优选的,所述台座采用震荡台。
优选的,所述台座上安装有用于控制循环泵以及升降提升组件启闭的控制器;进一步的,控制器内置PLC控制程序,通过控制器可实现对循环泵的启停控制,以及对升降提升组件的升降提升控制。
一种应用上述丛枝菌根真菌菌丝收集器的丛枝菌根真菌菌丝的收集方法,包括以下步骤:
S1、丛枝菌根真菌接种:将植物体根系进行灭菌处理后,在无菌环境内将丛枝菌根真菌接种至植物根系处,并将植物体的茎部卡入至卡槽内;
S2、 液体培养基配置:将含有氨态氮、硝态氮;含Fe、Mg、 Ca的无机盐;0.4 % -0.8%的琼脂;0.5 % - 4 %的蔗糖;含有维生素、烟酸、肌醇有机成分的培养基进行配置;将配置好的培养基放入至培养盆内;
S3、静置培养:将植物体连同植物体根系处接种的丛枝菌根真菌在无菌室内连续培养10-15天,期间每隔5天向培养盆内补充S2中配置好的培养基,同时模拟阳光照射对植物体进行不低于10小时的充足光照;通过放大镜组件定期观察植物根系处丛枝菌根真菌菌丝繁殖情况;
S4、丛枝菌根真菌菌丝收集:丛枝菌根真菌培养大于60天后,观察丛枝菌根真菌菌丝生长状况,当丛枝菌根真菌在植物体根系外围形成松散的菌丝网后,对丛枝菌根真菌菌丝进行收集,通过升降提升组件带动架体上移,直至集液漏斗底部高于培养盆内培养基液面,将过滤网或滤纸折叠后放入至集液漏斗处,启动循环泵,循环泵将培养盆内培养基加压后经供液环管、布液环管、竖管和喷淋嘴喷出,喷淋出的液态培养基将植物根系处的菌丝冲离,含有菌丝的培养基落至过滤网或滤纸处,过滤网或滤纸对菌丝进行截留,而培养基落至培养盆底部;将过滤有丛枝菌根真菌菌丝的过滤网或滤纸取出,完成丛枝菌根真菌菌丝的收集;
S5、连续培养:无需在植物根系处重复接种丛枝菌根真菌,利用培养基内剩余丛枝菌根真菌以及植物体根系处残留的丛枝菌根真菌按上述步骤连续培养;如此反复实现对丛枝菌根真菌菌丝的重复收集。
(三)有益效果
与现有技术相比,本发明提供了一种丛枝菌根真菌菌丝收集器以及收集方法,具备以下有益效果:该丛枝菌根真菌菌丝收集器以及收集方法,将植物体的根系接种丛枝菌根真菌,植物体卡入至卡槽内,培养盆内注满液体培养基,对植物体和丛枝菌根真菌进行培养,当植物体根系产生成松散的菌丝网后,将架体自培养盆内提起,直至集液漏斗底部自培养基液面处移出,将过滤网或滤纸折叠后放入至集液漏斗内,通过启动循环泵,经循环泵加压后将液态培养基经供液环管、布液环管、竖管以及竖管上的多个喷淋嘴喷出,喷出的培养基将植物体根系处的菌丝网冲离,液态培养基和菌丝一同落至过滤网或滤纸处,通过过滤网和滤纸将菌丝进行过滤截留而液态培养基以及散落的丛枝菌根真菌进行重复利用,植物体模拟自然状态自由生长,保证植物体健康自然繁殖,使植物体根系为丛枝菌根真菌提供充足的营养,提高丛枝菌根真菌活性,直接对植物体根系处丛枝菌根真菌菌丝进行收集,有效提高丛枝菌根真菌收集效率和收集量。
附图说明
图1是本发明的立体结构示意图;
图2是本发明的俯视结构示意图;
图3是本发明的图2中A-A处剖面结构示意图;
图4是本发明的图2中B-B处剖面结构示意图;
图5是本发明的图4中C-C处剖面结构示意图;
图6是本发明的内部半剖立体结构示意图;
图7是本发明的图6中A处局部放大结构示意图;
附图中标记:1、台座;2、植物体;3、培养盆;4、架体;5、上放置板;6、下放置板;7、连杆;8、集液漏斗;9、供液环管;10、布液环管;11、竖管;12、循环泵;13、喷淋嘴;14、环圈部;15、驱动叶板;16、安装架;17、螺纹丝杠;18、连接架;19、电动机;20、放大镜组件;21、光源灯;22、透明视窗;23、遮挡罩;24、环槽;25、条形槽;26、卡板;27、提环;28、控制器。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
请参阅图1-7,本发明的一种丛枝菌根真菌菌丝收集器,包括台座1、植物体2、安装于台座1上的培养盆3、内置于培养盆3内的架体4和循环喷淋组件,架体4包括上放置板5、下放置板6以及连接上放置板5和下放置板6的多个连杆7,上放置板5上设有用于植物体2茎部固定的卡槽,下放置板6处设有集液漏斗8;循环喷淋组件包括安装于上放置板5上部的供液环管9、与供液环管9内部连通的布液环管10、均布于布液环管10底部的多根竖管11和循环泵12,多根竖管11处自上而下设有多个朝向培养盆3中心轴线处的喷淋嘴13;循环泵12的输入端伸入至培养盆3底部,循环泵12的输出端与供液环管9内部连通;进一步的,架体4可活动放置于培养盆3内;集液漏斗8内可放置滤网或滤纸;卡槽位于上放置板5的中心处;植物体2优选绿萝等喜水植物;进一步的,喷淋嘴13处的出液压力不宜过大,保持在0.01MPa-0.05Mpa;将植物体2根系处菌丝网冲离的同时避免对植物体2根系或菌丝网造成损坏;通过对植物体2根系处菌丝网直接冲离的方式直接对丛枝菌根真菌菌丝进行收集,可大大提高菌丝的收集效率和收集量;而部分游离状态的丛枝菌根真菌溶于培养基内,对植物体2根系进行自然培养时,此部分游离丛枝菌根真菌重新附着于植物根系处繁殖,无需进行重复接种,可连续对植物体2根系处的菌丝网进行收集。
具体的,布液环管10转动安装于上放置板5底部,布液环管10上设有伸入至供液环管9的环圈部14,布液环管10与供液环管9通过环圈部14连通,环圈部14顶部设有多个周向均布的驱动叶板15,循环泵12伸入至供液环管9的输出端与一对应驱动叶板15之间呈锐角夹角布置;进一步的,环圈部14与供液环管9之间转动密封连接,如通过机械轴封件、密封润滑油等实现环圈部14和供液环管9之间的密封连接;循环泵12将加压后的培养基注入至供液环管9内,并喷淋至驱动叶板15上,驱动叶板15受力后带动环圈部14转动,使布液环管10带动各竖管11同步缓慢转动,从而使喷淋嘴13处喷出的液态培养基均匀分散的喷至植物体2的根系处,提高对植物体2根系处成型菌丝网的冲离彻底性;同时,在驱动叶板15对循环泵12注入至供液环管9内液态培养基的泄压作用下,有效降低喷淋嘴13处喷出的液态培养基出液压力。
具体的,还包括用于架体4上下移动的升降提升组件;升降提升组件包括安装架16、转动安装于安装架16上的螺纹丝杠17、可上下滑动安装于安装架16上的连接架18以及为螺纹丝杠17转动提供动力的电动机19,连接架18与螺纹丝杠17螺纹传动连接;连接架18与上放置板5固定连接;进一步的,升降提升组件也可采用驱动缸或其他具有上下直线驱动效果的等同件;通过启动电动机19,电动机19带动螺纹丝杠17转动,经螺纹传动后带动连接架18上下移动,从而对架体4的高度位置进行调整,无需人为对架体4进行调整,提高操作便捷性;且采用上述设置可实现架体4的到位悬停。
具体的,还包括放大镜组件20和光源灯21,放大镜组件20和光源灯21分布于培养盆3的外壁异侧,放大镜组件20和光源灯21的中心轴线重合,培养盆3上设有与放大镜组件20和光源灯21安装位置对应的透明视窗22;进一步的,透明视窗22优选玻璃视窗;培养盆3优选不通光的陶瓷或塑料材质;放大镜组件20内置放大镜;在植物根系接种的丛枝菌根真菌培养过程中,开启光源,光源经透明视窗22照入至培养盆3内,通过放大镜组件20对培养盆3内植物体2根系处的丛枝菌根真菌菌丝生长情况以及培养基内部进行实时观察,一旦丛枝菌根真菌菌丝繁殖或培养基出现问题可及时发现并进行处理,避免长时间后发现。造成无法补救,减少培养基、植被以及丛枝菌根真菌的浪费。
具体的,还包括固定安装于上放置板5底部的遮挡罩23,遮挡罩23底部呈锥形收口状;进一步的,遮挡罩23优选透明塑料罩或玻璃罩;遮挡罩23的中心轴线与集液漏斗8的中心轴线重合;当喷淋嘴13处培养基对植物根系处的菌丝进行冲离时,遮挡罩23可对喷出的液体培养基进行阻挡,避免培养基四处飞溅,培养基连同菌丝经遮挡罩23底部的锥形收口部精准、顺利落至集液漏斗8内的过滤网或滤纸处,以进一步提高丛枝菌根真菌菌丝的收集量。
具体的,卡槽包括环槽24以及与环槽24相通的多个条形槽25;条形槽25绕环槽24周向均布;进一步的,植物体2的茎部卡入至条形槽25内;将植物体2的根系经环槽24处插入至培养盆3内,植物体2的茎部移动至条形槽25内,将植物体2进行卡固;实现植物体2在上放置板5处的自由取放;更为具体的,条形槽25内壁处粘接有柔质橡胶层,避免对植物体2茎部造成损伤;可在环槽24处向培养盆3内加注培养基。
具体的,还包括与卡槽内壁契合的卡板26,卡板26顶部固定安装有提环27;植物体2的茎部卡入至条形槽25内后,卡板26盖合于卡槽处,将植物体2进行限制,防止植物体2移位,提高植物体2的放置稳定性;提环27可为操作人员提供较好的施力点,使操作人员更为便捷的将卡板26进行取放。
具体的,台座1采用震荡台;进一步的,震荡台可采用如公开号CN208694872U公开的漩涡振荡器,包括基座和位于基座上方的震荡台,基座与震荡台之间设置有马达,马达上端固定于震荡台底部,马达下方的输出轴上安装有离心轮;基座与震荡台上分别对称安装有极性相反的吸附磁铁;基座与震荡台之间设置有滚动钢珠,滚动钢珠控制基座与震荡台上的吸附磁铁保持非接触状态;马达优选调速电机;也可采用其他具有等同振动效果的振动台;台座1采用振动台,可在培养盆3内培养基配比时产生振动效果,以提高培养基的各成分分散均匀度,同时在对植物体2根系处的丛枝菌根真菌菌丝网进行冲离时,在振动状态下,可进一步提高植物体2根系处菌丝网的抖落顺畅性,为后续的菌丝收集提供保障。
具体的,台座1上安装有用于控制循环泵12以及升降提升组件启闭的控制器28;进一步的,控制器28内置PLC控制程序,通过控制器28可实现对循环泵12的启停控制,以及对升降提升组件的升降提升控制;控制器28为市面常规已知产品,其内部具体结构以及控制原理等此处不作进一步赘述和限定,可实现上述循环泵12以及升降提升组件自动控制的各市面常规控制器28均可。
一种应用上述丛枝菌根真菌菌丝收集器的丛枝菌根真菌菌丝的收集方法,包括以下步骤:
S1、丛枝菌根真菌接种:将植物体2根系进行灭菌处理后,在无菌环境内将丛枝菌根真菌接种至植物根系处,并将植物体2的茎部卡入至卡槽内;
S2、 液体培养基配置:将含有氨态氮、硝态氮;含Fe、Mg、 Ca的无机盐;0.4 % -0.8%的琼脂;0.5 % - 4 %的蔗糖;含有维生素、烟酸、肌醇有机成分的培养基进行配置;将配置好的培养基放入至培养盆3内;此步骤中的培养基成分和配比不作进一步限定,可根据植物体2的品种适应性调整培养基的配比,上述配比仅为一般植物体2培养所需的基础营养成分;
S3、静置培养:将植物体2连同植物体2根系处接种的丛枝菌根真菌在无菌室内连续培养10-15天,期间每隔5天向培养盆3内补充S2中配置好的培养基,同时模拟阳光照射对植物体2进行不低于10小时的充足光照;通过放大镜组件20定期观察植物根系处丛枝菌根真菌菌丝繁殖情况;
S4、丛枝菌根真菌菌丝收集:丛枝菌根真菌培养大于60天后,观察丛枝菌根真菌菌丝生长状况,当丛枝菌根真菌在植物体2根系外围形成松散的菌丝网后,对丛枝菌根真菌菌丝进行收集,通过升降提升组件带动架体4上移,直至集液漏斗8底部高于培养盆3内培养基液面,将过滤网或滤纸折叠后放入至集液漏斗8处,启动循环泵12,循环泵12将培养盆3内培养基加压后经供液环管9、布液环管10、竖管11和喷淋嘴13喷出,喷淋出的液态培养基将植物根系处的菌丝冲离,含有菌丝的培养基落至过滤网或滤纸处,过滤网或滤纸对菌丝进行截留,而培养基落至培养盆3底部;将过滤有丛枝菌根真菌菌丝的过滤网或滤纸取出,完成丛枝菌根真菌菌丝的收集;
S5、连续培养:无需在植物根系处重复接种丛枝菌根真菌,利用培养基内剩余丛枝菌根真菌以及植物体2根系处残留的丛枝菌根真菌按上述步骤连续培养;如此反复实现对丛枝菌根真菌菌丝的重复收集。
最后应说明的是:以上各实施例仅用以说明本申请的技术方案,而非对其限制;尽管参照前述各实施例对本申请进行了详细的说明,本领域的普通技术人员应当理解:其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换;而这些修改或者替换,并不使相应技术方案的本质脱离本申请各实施例技术方案的范围。

Claims (8)

1.一种丛枝菌根真菌菌丝收集器,其特征在于,包括台座(1)、植物体(2)、安装于台座(1)上的培养盆(3)、内置于培养盆(3)内的架体(4)和循环喷淋组件,所述架体(4)包括上放置板(5)、下放置板(6)以及连接上放置板(5)和下放置板(6)的多个连杆(7),所述上放置板(5)上设有用于植物体(2)茎部固定的卡槽,所述下放置板(6)处设有集液漏斗(8);所述循环喷淋组件包括安装于上放置板(5)上部的供液环管(9)、与供液环管(9)内部连通的布液环管(10)、均布于布液环管(10)底部的多根竖管(11)和循环泵(12),多根所述竖管(11)处自上而下设有多个朝向培养盆(3)中心轴线处的喷淋嘴(13);所述循环泵(12)的输入端伸入至培养盆(3)底部,所述循环泵(12)的输出端与供液环管(9)内部连通;
所述布液环管(10)转动安装于上放置板(5)底部,所述布液环管(10)上设有伸入至供液环管(9)的环圈部(14),所述布液环管(10)与供液环管(9)通过环圈部(14)连通,所述环圈部(14)顶部设有多个周向均布的驱动叶板(15),所述循环泵(12)伸入至供液环管(9)的输出端与一对应驱动叶板(15)之间呈锐角夹角布置;
还包括用于架体(4)上下移动的升降提升组件;所述升降提升组件包括安装架(16)、转动安装于安装架(16)上的螺纹丝杠(17)、可上下滑动安装于安装架(16)上的连接架(18)以及为螺纹丝杠(17)转动提供动力的电动机(19),所述连接架(18)与螺纹丝杠(17)螺纹传动连接;所述连接架(18)与上放置板(5)固定连接;
所述架体(4)可活动放置于培养盆(3)内;集液漏斗(8)内可放置滤网或滤纸;卡槽位于上放置板(5)的中心处;喷淋嘴(13)处的出液压力保持在0.01MPa-0.05Mpa。
2.根据权利要求1所述的丛枝菌根真菌菌丝收集器,其特征在于,还包括放大镜组件(20)和光源灯(21),所述放大镜组件(20)和光源灯(21)分布于培养盆(3)的外壁异侧,所述放大镜组件(20)和光源灯(21)的中心轴线重合,所述培养盆(3)上设有与放大镜组件(20)和光源灯(21)安装位置对应的透明视窗(22)。
3.根据权利要求2所述的丛枝菌根真菌菌丝收集器,其特征在于,还包括固定安装于上放置板(5)底部的遮挡罩(23),所述遮挡罩(23)底部呈锥形收口状。
4.根据权利要求3所述的丛枝菌根真菌菌丝收集器,其特征在于,所述卡槽包括环槽(24)以及与环槽(24)相通的多个条形槽(25);所述条形槽(25)绕环槽(24)周向均布。
5.根据权利要求4所述的丛枝菌根真菌菌丝收集器,其特征在于,还包括与卡槽内壁契合的卡板(26),所述卡板(26)顶部固定安装有提环(27)。
6.根据权利要求5所述的丛枝菌根真菌菌丝收集器,其特征在于,所述台座(1)采用震荡台。
7.根据权利要求6所述的丛枝菌根真菌菌丝收集器,其特征在于,所述台座(1)上安装有用于控制循环泵(12)以及升降提升组件启闭的控制器(28)。
8.应用如权利要求7所述的丛枝菌根真菌菌丝收集器的丛枝菌根真菌菌丝的收集方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、丛枝菌根真菌接种:将植物体(2)根系进行灭菌处理后,在无菌环境内将丛枝菌根真菌接种至植物根系处,并将植物体(2)的茎部卡入至卡槽内;
S2、 液体培养基配置:将含有氨态氮、硝态氮;含Fe、Mg、 Ca的无机盐;0.4 % - 0.8%的琼脂;0.5 % - 4 %的蔗糖;含有维生素、烟酸、肌醇有机成分的培养基进行配置;将配置好的培养基放入至培养盆(3)内;
S3、静置培养:将植物体(2)连同植物体(2)根系处接种的丛枝菌根真菌在无菌室内连续培养10-15天,期间每隔5天向培养盆(3)内补充S2中配置好的培养基,同时模拟阳光照射对植物体(2)进行不低于10小时的充足光照;通过放大镜组件(20)定期观察植物根系处丛枝菌根真菌菌丝繁殖情况;
S4、丛枝菌根真菌菌丝收集:丛枝菌根真菌培养大于60天后,观察丛枝菌根真菌菌丝生长状况,当丛枝菌根真菌在植物体(2)根系外围形成松散的菌丝网后,对丛枝菌根真菌菌丝进行收集,通过升降提升组件带动架体(4)上移,直至集液漏斗(8)底部高于培养盆(3)内培养基液面,将过滤网或滤纸折叠后放入至集液漏斗(8)处,启动循环泵(12),循环泵(12)将培养盆(3)内培养基加压后经供液环管(9)、布液环管(10)、竖管(11)和喷淋嘴(13)喷出,喷淋出的液态培养基将植物根系处的菌丝冲离,含有菌丝的培养基落至过滤网或滤纸处,过滤网或滤纸对菌丝进行截留,而培养基落至培养盆(3)底部;将过滤有丛枝菌根真菌菌丝的过滤网或滤纸取出,完成丛枝菌根真菌菌丝的收集;
S5、连续培养:无需在植物根系处重复接种丛枝菌根真菌,利用培养基内剩余丛枝菌根真菌以及植物体(2)根系处残留的丛枝菌根真菌按上述步骤连续培养;如此反复实现对丛枝菌根真菌菌丝的重复收集。
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