CN117204427B - 一种用于苹果疏花疏果的农用组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明属于苹果种植技术领域，涉及一种用于苹果疏花疏果的农用组合物。该农用组合物由萘乙酸、极细链格孢激活蛋白和内生球毛壳菌MG2的发酵液提取物组成；以质量比计，萘乙酸、极细链格孢激活蛋白和内生球毛壳菌MG2的发酵液提取物的配比为10~30:0.01~0.05:5~20。该农用组合物在盛花期进行疏花疏果，可有效疏除侧花，优于萘乙酸单剂的施用效果，能提高萘乙酸在高温天气下对苹果疏花疏果的稳定性，并能缓解萘乙酸对苹果植株的化学胁迫作用。
Description
技术领域
本发明属于农用组合物技术领域，具体涉及一种用于苹果疏花疏果的农用组合物。
背景技术
苹果的疏花疏果是保证果品质量和稳产的有效措施。由于苹果树在自然条件下有结果过多的习性，过量结果的果实品质往往较差，商品价值低，容易形成隔年结果的恶性循环现象，所以必须通过人为调节才能达到连年优质稳产的栽培目的。在苹果种植管理过程中，人工疏花疏果是最稳妥的办法，但费工费时，劳动力成本高，难以实现大规模的苹果种植集约化生产管理。
萘乙酸（NAA，naphthalene acetic acid）是人工合成的一种植物生长调节剂，作为疏果剂已得到大量研究证实，但作为疏花剂目前少有报道。萘乙酸疏花主要是阻止或破坏花粉管的正常生长，使受精不良或无法受精而导致坐果失败。萘乙酸使用范围很窄，在盛花后两周喷布0.02g/L的萘乙酸，对花果的疏除率较高。萘乙酸疏果作用强，但疏花疏果效果不太稳定。田间实践和相关研究表明萘乙酸疏果时会产生副作用，如叶片偏上生长、叶畸形、抑制果实肥大、出现侏儒果等。
极细链格孢激活蛋白作为真菌激活蛋白（Activator protein），是一种新型的植物免疫诱抗剂，广泛存在于真菌孢子和菌丝体中。植物免疫诱抗剂能够通过级联放大作用调节植物的新陈代谢，增强植物抗病和抗逆能力，最终可以达到作物增产效果，同时可以降低农药过度使用对环境和农产品带来的污染。极细链格孢激活蛋白在蔬菜、粮食作物以及大田经济作物施用研究表明，不仅能够通过诱导、激发、调节植物体内的一系列功能蛋白，启动植物防卫反应，激活植物的免疫系统，提高植物自身免疫力而且通过调节植物生长代谢系统，促进植物生长，提高作物产量和产品品质。
经研究表明，内生球毛壳菌MG2及其发酵液对苹果离体枝条均有一定的保护和治疗效果，但其保护作用优于治疗作用，对苹果树腐烂病菌有显著的拮抗抑制作用。
与人工疏花疏果相比，化学疏花疏果省工省力，大大降低生产成本。目前大部分化学疏花疏果剂为化学药剂或激素类物质，长期喷施则会对果树体内的激素平衡产生影响，使其发生紊乱，间接引起树体及果实的生长发育不良。此外，在高温天气，萘乙酸有疏除过量的风险。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足，解决萘乙酸在高温（＞30℃）天气下对苹果疏花疏果的稳定性不佳，萘乙酸对苹果植株的化学胁迫作用严重的技术问题。
基于上述目的，本发明提供了一种用于苹果疏花疏果的农用组合物来满足本领域内的这种需要。
一方面，本发明涉及一种用于苹果疏花疏果的农用组合物，其由萘乙酸、极细链格孢激活蛋白和内生球毛壳菌MG2的发酵液提取物组成。
其中，所述内生球毛壳菌MG2的菌种保藏号为CGMCC No.40070。
以质量比计，萘乙酸、极细链格孢激活蛋白和内生球毛壳菌MG2的发酵液提取物的配比为10~30:0.01~0.05:5~20。
进一步地，本发明提供的农用组合物中，所述内生球毛壳菌MG2的发酵液提取物为：内生球毛壳菌MG2在PDB培养基中去除菌体后的发酵液。
进一步地，本发明提供的农用组合物中，所述内生球毛壳菌MG2的发酵液提取物的制备方法为：将内生球毛壳菌MG2接种于PDB培养基，摇瓶发酵至发酵液的OD600为1.0~2.0，过滤去除菌体得发酵清液，用乙酸乙酯萃取后干燥获得。
进一步地，本发明提供的农用组合物中，所述干燥为真空冷冻干燥。真空冷冻干燥的目的是尽可能地保留内生球毛壳菌MG2次生代谢产物的生物活性。
进一步地，本发明提供的农用组合物中，所述发酵清液与乙酸乙酯的体积比为1:1。
与现有技术相比，本发明提供的技术方案至少具备下述的有益效果或优点：
高温时某些生化环节发生障碍，使得植物生长所必需的活性物质（如维生素、核苷酸、激素）不足，从而引起植物生长不良或引起伤害。萘乙酸的作用机理是因其通过对树体内一些激素进行干扰，间接促进乙烯的形成，并最终引起落果。在高温情况下，萘乙酸对树体内激素干扰，会进一步导致苹果疏除过量。田间试验发现，适量的极细链格孢激活蛋白和内生球毛壳菌MG2的发酵液提取物，与萘乙酸组合使用能有效刺激苹果的防卫反应，特别是当萘乙酸过量或高温天气时，能有效提高单果率和中心果率，与人工疏花疏果的效果相当。
具体实施方式
下面，结合实施例对本发明的技术方案进行说明，但是，本发明并不限于下述的实施例。各实施例中所述实验方法和检测方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均可在市场上购买得到。
萘乙酸购自上海江莱生物有限公司，极细链格孢激活蛋白购自北京中保绿农科技集团有限公司，内生球毛壳菌MG2由西北农林科技大学提供。
实施例1
本实施例提供了用于苹果疏花疏果的农用组合物的施用试验。
内生球毛壳菌MG2发酵液提取物的制备方法为：将内生球毛壳菌MG2活化后接种于PDB培养基（称取去皮马铃薯200g，切成小块双蒸水煮沸，四层纱布过滤煮沸液至1L的量杯，加入20g葡萄糖搅拌均匀后双蒸水定容至1L，封口121℃高压灭菌20min），摇瓶发酵至发酵液的OD600为1.4，用2层灭菌滤纸和0.22μm微孔滤膜细菌过滤器过滤去除菌体得发酵清液，用乙酸乙酯等体积萃取，在真空冷冻干燥机（Freezone-6L）中干燥（设定为程序升温-40℃~20℃，升温速率为0.6℃/min，真空度为133×10-3mbar）8h。
取萘乙酸、极细链格孢激活蛋白和内生球毛壳菌MG2的发酵液提取物，调整萘乙酸、极细链格孢激活蛋白和内生球毛壳菌MG2的发酵液提取物的质量比，依照常规制剂方法制成可湿性粉剂，即为用于苹果疏花疏果的农用组合物。
本实验于陕西省渭南市白水县的果园进行，平均气温为11℃，供试苹果品种为9年生的富士/新疆野苹果基砧，株行距3m×6m。选树冠大小、花量、生长势大体一致的树作为试验树。萘乙酸处理组采用的萘乙酸浓度为20mg/L、30mg/L、40mg/L、50mg/L。等萘乙酸浓度进行分组，例如采用萘乙酸、极细链格孢激活蛋白和内生球毛壳菌MG2的发酵液提取物的质量比为30:0.01:5的用于苹果疏花疏果的农用组合物，萘乙酸、极细链格孢激活蛋白和内生球毛壳菌MG2的发酵液提取物的施用浓度为30mg/L+10μg/L+5mg/L作为农用组合物处理组2，对应30mg/L萘乙酸作为萘乙酸处理组2。另设人工疏花疏果作为对照。所有试验以1株为小区，3次重复。于果盛花期后2d用背负式半自动喷雾器对全树进行喷布至滴下为止，喷后选三大主枝调查花序的基数，喷施当天气温为14.5℃。生理落果后调查座果率、单果率和中心果率，单果率是指只结一个果的花序所占的百分比，中心果率是指单果中具有中心果的花序所占的百分比，这两个指标可说明药剂对侧花的疏除效果，试验结果如表1所示。
表1 对苹果的疏除效果（%）
由表1可知，本申请提供的农用组合物处理组相较萘乙酸处理组在萘乙酸使用浓度为30mg/L~50mg/L时坐果率具有更优的稳定性，农用组合物的坐果率为26.6~30.9%，萘乙酸的坐果率为8.4~27.7%。根据红富士顶芽中心花座果率高，果实大，果形端正、品质好的习性，所以要求尽可能保留中心果，疏去侧果和腋花果。在萘乙酸使用浓度为30mg/L~50mg/L时农用组合物的单果率为62.0~75.6%，中心果率为80.2~89.9%，优于萘乙酸处理组。综合表1数据可知，本申请提供的农用组合物处理组相较萘乙酸处理组在萘乙酸使用浓度为30mg/L~50mg/L时，表现出更强的稳定性，这可能与极细链格孢激活蛋白和内生球毛壳菌MG2的发酵液提取物能够激活苹果的防御机制有关，当萘乙酸浓度变高时，对苹果树体内激素干扰作用的越强，当低浓度（萘乙酸使用浓度为20mg/L）时，极细链格孢激活蛋白和内生球毛壳菌MG2的发酵液提取物的稳定效果不明显，而当萘乙酸使用浓度变高时，极细链格孢激活蛋白和内生球毛壳菌MG2的发酵液提取物则起到了一定的稳定苹果树体内激素的作用。
采收期时随机选取每株数的30个中心果，统计果形指数、果实质量和可溶性固形物（采用折射仪法测定），调查各药剂的疏花喷布对果实生长的果实品质的影响。
表2 对苹果果实生长和品质的影响
由表2可知，本申请提供的农用组合物处理组相较萘乙酸处理组的单果质量更佳，可溶性固形物更高。萘乙酸处理组当萘乙酸浓度为40mg/L~50mg/L时，果形指数出现显著下降，提示畸形。田间试验观察到萘乙酸处理组当萘乙酸浓度为40mg/L~50mg/L时处理出现了叶片偏上生长、畸形果的问题，而农用组合物处理组没有，这表明农用组合物的疏花喷布对苹果果实生长和品质无不利影响。
实施例2
本实施例提供了用于苹果疏花疏果的农用组合物在高温天气的施用试验。
本实验于河南省商丘市梁园区双八镇的果园进行，供试苹果品种为7年生的夏红苹果，株行距3m×6m。选树冠大小、花量、生长势大体一致的树作为试验树。萘乙酸处理组采用的萘乙酸浓度为40mg/L采用萘乙酸、极细链格孢激活蛋白和内生球毛壳菌MG2的发酵液提取物的质量比分别为10:0.01:5、20:0.03:15、30:0.05:20的用于苹果疏花疏果的农用组合物，等萘乙酸浓度（40mg/L）进行分组，另设人工疏花疏果作为对照。在初盛花期（花开30%）和盛花期（花开75%）各喷1次，喷施时间分别为初盛花期后的31℃和盛花期后的35℃用背负式半自动喷雾器对全树进行喷布至滴下为止，所有试验以1株为小区，3次重复。生理落果后调查座果率、单果率和中心果率，试验结果如表3所示。
表3 高温下对苹果的疏除效果（%）
由表3可知，本申请提供的农用组合物处理相较萘乙酸处理组在高温天气时，能有效保护高温天气下联合萘乙酸对苹果的毒害作用。本申请提供的农用组合物处理的坐果率达到了20.6~21.9%，优于人工疏花和萘乙酸处理，单果率达到了69.0~70.4%，中心果率达到了90.0~90.3%，接近人工疏花效果。
以上所述的实施例是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施例。在依据本发明构思的条件下本领域普通技术人员进行的相关推演和替换，在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
Claims (3)
1.一种用于苹果疏花疏果的农用组合物，其特征在于，由萘乙酸、极细链格孢激活蛋白和内生球毛壳菌MG2的发酵液提取物组成；
内生球毛壳菌MG2的菌种保藏号为CGMCC No.40070；
以质量比计，萘乙酸、极细链格孢激活蛋白和内生球毛壳菌MG2的发酵液提取物的配比为10~30:0.01~0.05:5~20；
所述内生球毛壳菌MG2的发酵液提取物的制备方法为：将内生球毛壳菌MG2接种于PDB培养基，摇瓶发酵至发酵液的OD600为1.0~2.0，过滤去除菌体得发酵清液，用乙酸乙酯萃取后干燥获得；
所述农用组合物中萘乙酸的浓度为30mg/L~50mg/L。
2.根据权利要求1所述的农用组合物，其特征在于，所述干燥为真空冷冻干燥。
3.根据权利要求1所述的农用组合物，其特征在于，所述发酵清液与乙酸乙酯的体积比为1:1。
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