CN117177767A - 用于治疗银屑病的蛋白水解酶混合物 - Google Patents

Abstract

本发明提供了治疗银屑病的皮肤表现的方法，该方法包括向受试者的受影响的皮肤区域局部应用药物组合物，从而治疗银屑病的皮肤表现，所述药物组合物包含从粗制菠萝蛋白酶获得的部分纯化的蛋白水解酶混合物和药学上可接受的载体。

Description

用于治疗银屑病的蛋白水解酶混合物

发明领域

本发明涉及用于治疗银屑病的药物组合物，所述药物组合物包含从粗制菠萝蛋白酶(bromelain)获得的蛋白水解酶混合物。特别地，本发明涉及治疗银屑病的皮肤表现的方法，所述方法包括向受试者的受影响的皮肤区域局部应用药物组合物，从而治疗银屑病的一种或更多种皮肤表现，所述药物组合物包含从粗制菠萝蛋白酶获得的部分纯化的蛋白水解酶混合物和药学上可接受的载体。

发明背景

银屑病是以异常皮肤的隆起区域为特征的慢性、非传染性的自身免疫性疾病。这些区域从被银色鳞片覆盖的离散的红斑丘疹和斑块到当鳞片被去除时出血的鳞状瘙痒斑变化。这种慢性疾病的皮肤病变通常经受缓解和恶化。银屑病的严重程度从小的、局部的斑到全身覆盖变化。

银屑病通常被认为是一种由环境因素引发的遗传疾病。据估计，它影响了2％-4％的西方世界人口。它可以发生在任何年龄，虽然它最常见地第一次出现在15岁和25岁之间。

银屑病折磨表皮皮肤层。存在表皮的五个层：基底层、棘层、颗粒层、透明层和角质层，角质层是表皮的最外层。这些不同的皮肤层常规地通过被称为脱屑(desquamation)的自然过程更新，其中最深层的皮肤细胞被推向皮肤表面。在经历脱屑时，位于基底层的正常且健康的鳞状细胞分裂并且开始产生角蛋白，当细胞被推向角质层时，角蛋白将最终在其内容物中占主导。

银屑病是这样的现象的结果：其中最深层的细胞过快地增殖。健康的皮肤以及表皮的正常结构化层不能足够快地脱落这些增生性增殖细胞，因此增生性细胞积聚并且形成厚的干燥的斑，被称为斑块。此外，由于细胞的群体过剩和免疫细胞例如树突细胞、巨噬细胞和T细胞从真皮向表皮的移动，表皮皮肤层变得高度发炎，在表皮中免疫细胞分泌细胞因子，诸如白介素-36γ、肿瘤坏死因子-α、白介素-1β、白介素-6和白介素-22。这些分泌的炎性信号被认为刺激角质细胞增殖。因此，在这些增生性细胞的群体过剩的情况下，正常的上皮被严重破坏。在银屑病中，皮肤细胞每3-5天更换一次，而不是通常的28-30天更换一次。

存在五种主要类型的银屑病：斑块型银屑病、滴状银屑病、反向型银屑病、脓疱型银屑病和红皮病型银屑病。斑块型银屑病，也被称为寻常型银屑病，占病例的约90％。它通常表现为在顶部具有白色鳞片的红色斑。身体最常受影响的区域是前臂后部、胫部、肚脐区域和头皮。

目前还不知道银屑病的治愈方法，但多种治疗可以帮助控制症状，尽管它们不提供将被认为是理想的效力和安全性。这些治疗包括用包含皮质类固醇、维生素D₃类似物或钙调磷酸酶抑制剂的乳膏或软膏的局部疗法；用阳光或紫外线的光疗法；和口服或注射药物，诸如类固醇、类视黄醇或免疫抑制药物诸如甲氨蝶呤或环孢菌素。

皮质类固醇乳膏或软膏是用于治疗轻度至中度银屑病的最常用的处方药物。温和的皮质类固醇软膏(氢化可的松)通常被推荐用于敏感区域，诸如面部或皮肤褶皱，以及用于治疗大面积的斑。局部皮质类固醇可以在发病期间每天应用一次，并且隔天应用或仅周末应用以维持缓解。曲安奈德或氯倍他索乳膏或软膏被开处方用于较小的、较不敏感或较难以治疗的区域。长期使用或过度使用强皮质类固醇可以使皮肤变薄，并且可能发展永久性妊娠纹(条纹)、瘀伤、变色和薄蜘蛛状血管(毛细管扩张)。局部类固醇可能具有全身不良作用，引发或恶化其他皮肤紊乱，诸如痤疮、酒渣鼻和口周皮炎。随着时间的推移，局部皮质类固醇可能变得无效。

包含合成形式的维生素D₃诸如卡泊三烯(calcipotriene)和骨化三醇的乳膏或软膏减缓皮肤细胞生长。维生素D类似物可以单独使用或与局部皮质类固醇一起使用。卡泊三烯和骨化三醇通常不如局部皮质类固醇有效。

还使用类视黄醇。例如，他扎罗汀作为凝胶或乳膏可得，并且每天应用一次或两次。他扎罗汀的最常见的副作用是皮肤刺激和增加的对光的敏感性。他扎罗汀通过皮肤吸收，并且可能与全身不良作用相关，所述全身不良作用包括唇炎、粘膜和皮肤干燥、脱发、光敏感性、皮肤脆性、肌肉和关节疼痛、升高的颅内压和升高的血脂。他扎罗汀不推荐用于孕妇、哺乳期妇女和打算怀孕的妇女。

钙调磷酸酶抑制剂，诸如他克莫司和吡美莫司，减少炎症和斑块积聚。它们在薄的皮肤的区域中可以特别有帮助，诸如眼睛周围，这些区域中类固醇乳膏或类视黄醇太刺激或可能造成有害影响。钙调磷酸酶抑制剂通过皮肤吸收，并且可能与全身不良作用相关，所述全身不良作用包括震颤、恶心、呕吐、受影响的皮肤的烧灼感或瘙痒、胃部不适、痤疮、肌肉或背部疼痛、眼睛发红/疼痛、毛囊炎、失眠、高血压、视力模糊、贫血、低磷血症、无力、上呼吸道感染、咳嗽和肾毒性。钙调磷酸酶抑制剂不推荐用于孕妇、哺乳期妇女或打算怀孕的妇女。它不意图用于长期使用，这是因为潜在的皮肤癌和淋巴瘤的增加的风险。

美国专利第5,560,910号公开了用于局部治疗炎症的组合物和方法，其中该组合物包含菠萝蛋白酶、辣椒素和渗透剂，优选地正癸基甲基亚砜和/或卵磷脂有机凝胶。

美国专利第7,731,958号公开了用于增加个体中IL-8水平的方法，该方法包括向个体施用包含菠萝蛋白酶的组合物。根据美国专利第7,731,958号，菠萝蛋白酶可以是热处理的菠萝蛋白酶，因为菠萝蛋白酶对IL-8水平的刺激活性归因于菠萝蛋白酶的非蛋白酶组分。

美国专利第9,821,040号和第10,568,944号公开了包含粗制菠萝蛋白酶的组合物，其用作局部治疗剂以恢复健康皮肤，并且用于立即和长期缓解与接触性皮炎、昆虫叮咬、特发性瘙痒、慢性瘙痒、荨麻疹、银屑病、皮脂溢出、湿疹等相关的瘙痒和刺激。

美国专利申请第2019/0047769号公开了蛋白酶优选地菠萝蛋白酶的局部制剂，以及包括该制剂的装置。

本发明的申请人的WO 2006/054309公开了一种从菠萝蛋白酶获得的清创组合物，其包含菠萝蛋白酶中存在的大部分蛋白水解酶；及其用于清创无活力组织的用途。

本发明的申请人的WO 2013/011514公开了一种从菠萝蛋白酶获得的蛋白水解提取物，用于治疗结缔组织疾病，特别是掌腱膜挛缩症(Dupuytren's disease)和佩罗尼氏病(Peyronie's disease)。

本发明的申请人的WO 2017/130204公开了一种清创组合物，该清创组合物包含可用于清创和治疗伤口的水凝胶形式的从菠萝蛋白酶获得的蛋白水解酶混合物。

本发明的申请人的WO 2017/183018公开了慢性伤口的清创方法，该方法包括向伤口部位局部应用呈水凝胶形式的清创制剂，该清创制剂包含从菠萝蛋白酶获得的蛋白水解酶混合物和水溶性胶凝剂，该清创制剂在长达四周的时间段内被应用至伤口部位多达十次，从而实现慢性伤口的清创。

对于避免不良作用的用于治疗银屑病病变的改进的方法仍然存在未满足的需求。

发明概述

本发明提供了治疗银屑病的至少一种皮肤表现的方法，所述方法包括向受试者的受影响的皮肤区域局部应用药物组合物，从而治疗银屑病的至少一种皮肤表现，所述药物组合物包含治疗有效量的从粗制菠萝蛋白酶获得的部分纯化的蛋白水解酶混合物和药学上可接受的载体。

本发明首次公开了将呈水凝胶形式的包含从粗制菠萝蛋白酶获得的部分纯化的蛋白水解酶混合物的药物组合物局部应用至银屑病病变导致消除表皮斑块增厚、去鳞和剥落。本发明的药物组合物的皮肤修复活性是在短时间段期间，即在两周时间段期间，在少量局部应用，典型地3-6次应用之后观察到的。在治疗开始之后的一个月内，皮肤恢复了更健康和更有吸引力的外观，并且在治疗开始之后的两到三个月，皮肤示出完全健康的皮肤外观。

现在公开的是，本发明的药物组合物具有长期效果，在停止治疗之后持续数月，在此期间不需要局部皮质类固醇或任何其他抗银屑病药物。

还公开的是，本发明的药物组合物基本上没有不良作用。重要的是，本发明的方法避免了由目前用于银屑病的局部治疗的皮质类固醇、类视黄醇和/或钙调磷酸酶抑制剂的使用可能引起的不良作用。因此，本发明的药物组合物可用于患有银屑病的所有年龄的妇女和男性，并且特别是孕妇、哺乳期妇女和打算怀孕的妇女，对于这些人群，用于治疗银屑病的常用局部药物诸如包含类视黄醇例如他扎罗汀或钙调磷酸酶抑制剂的乳膏由于其对妇女、胎儿和/或新生儿的可能风险而被禁忌使用。

由于短期治疗、长期临床效果、不存在可检测到的不良作用以及其使用简单，本发明的药物组合物相对于目前可用于治疗银屑病的皮肤表现的常用的局部乳膏或软膏是高度有利的。

根据第一方面，本发明提供了一种治疗银屑病的一种或更多种皮肤表现的方法，该方法包括在需要这样的治疗的受试者的受影响的皮肤区域上局部应用药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的从粗制菠萝蛋白酶获得的部分纯化的蛋白水解酶混合物和药学上可接受的载体，其中所述方法避免了由使用已知用于治疗银屑病的皮质类固醇、类视黄醇和/或钙调磷酸酶抑制剂引起的不良作用。

根据一些实施方案，部分纯化的蛋白水解酶混合物大体上不含磷酸酶、过氧化物酶和/或纤维素酶。根据某种实施方案，部分纯化的蛋白水解酶混合物大体上不含磷酸酶、过氧化物酶和纤维素酶。

根据另外的实施方案，药物组合物不含辣椒素。

根据还另外的实施方案，药物组合物不含油和/或脂肪酸。

根据一些实施方案，银屑病的一种或更多种皮肤表现选自由以下组成的组：表皮斑块增厚、覆盖有白色鳞状皮肤的红色斑、充满脓液的水疱、干燥且发痒的破裂皮肤及其组合。每种可能性代表本发明的单独的实施方案。

根据另外的实施方案，由使用皮质类固醇、类视黄醇和/或钙调磷酸酶抑制剂引起的不良作用选自由以下组成的组：皮肤变薄、永久性妊娠纹(条纹)、皮肤变色、薄蜘蛛状血管、唇炎、粘膜和皮肤干燥、脱发、光敏感性、皮肤脆性、受影响的皮肤的烧灼感或瘙痒、肌肉疼痛、关节痛、升高的颅内压、升高的血脂、震颤、恶心、呕吐、胃部不适、眼睛发红/疼痛、毛囊炎、失眠、高血压、视力模糊、贫血、低磷血症、无力、上呼吸道感染、肾毒性及其组合。每种可能性代表本发明的单独的实施方案。

根据还另外的实施方案，受试者对用皮质类固醇的治疗不依从或无响应。根据一种示例性实施方案，受试者不依从用氢化可的松、曲安奈德和/或氯倍他索的治疗。根据某种实施方案，受试者不依从用氢化可的松、曲安奈德和氯倍他索的治疗。根据另一种示例性实施方案，受试者对用氢化可的松、曲安奈德和/或氯倍他索的治疗无响应。根据某种实施方案，受试者对用氢化可的松、曲安奈德和氯倍他索的治疗无响应。

根据一些实施方案，类视黄醇和钙调磷酸酶抑制剂对受试者是禁忌的。根据某种实施方案，受试者是孕妇、哺乳期妇女或打算怀孕的妇女。

根据另外的实施方案，将药物组合物局部应用到受影响的皮肤区域上，持续约1小时至约12小时的持续时间，进行1次至10次应用，或根据需要应用，以治疗银屑病的所述一种或更多种皮肤表现。根据某种实施方案，将药物组合物局部应用到受影响的皮肤区域上，进行高达6次应用。

根据另外的实施方案，将药物组合物每天一次、每2天一次、每3天一次、每4天一次、每5天一次、每6天一次、每7天一次或其任何组合局部应用到受影响的皮肤区域上。根据示例性实施方案，将药物组合物局部应用到受影响的皮肤区域上，每次应用持续约1小时至约4小时的持续时间，每2-5天一次，进行3次至5次应用。

根据一些实施方案，方法还包括在从治疗开始起约3-12个月的时间段期间，根据需要将药物组合物局部应用到受影响的皮肤区域上一次、两次、三次或更多次的步骤。根据某些实施方案，在从治疗开始起约6个月的时间段期间，将药物组合物应用到受影响的皮肤区域上一次或两次。

根据一些实施方案，部分纯化的蛋白水解酶混合物包含茎菠萝蛋白酶(EC3.4.22.32)和ananain(EC 3.4.22.31)，以及任选的木菠萝素样凝集素和/或菠萝蛋白酶抑制剂。根据示例性实施方案，部分纯化的蛋白水解酶混合物包含茎菠萝蛋白酶(EC3.4.22.32)、ananain(EC 3.4.22.31)、木菠萝素样凝集素和菠萝蛋白酶抑制剂。

根据另外的实施方案，在整个说明书和权利要求中也表示为活性药物成分(API)的部分纯化的蛋白水解酶混合物的量在药物组合物的总重量的从约0.1％(w/w)至约3％(w/w)的范围内。根据另外的实施方案，部分纯化的蛋白水解酶混合物的量在药物组合物的总重量的从约0.5％(w/w)至约2％(w/w)的范围内。根据还另外的实施方案，部分纯化的蛋白水解酶混合物的量在药物组合物的总重量的从约0.6％(w/w)至约1.5％(w/w)的范围内。根据示例性实施方案，部分纯化的蛋白水解酶混合物的量是药物组合物的总重量的约1.25％(w/w)。

根据一些实施方案，药物组合物还包含水溶性胶凝剂。根据另外的实施方案，水溶性胶凝剂选自由以下组成的组：天然存在的胶凝剂、半合成胶凝剂、合成胶凝剂及其任何组合。每种可能性代表本发明的单独的实施方案。根据还另外的实施方案，水溶性天然存在的胶凝剂是多糖。根据还另外的实施方案，多糖是半乳甘露聚糖、葡甘露聚糖或其组合。根据示例性实施方案，半乳甘露聚糖是瓜尔胶，所述瓜尔胶以在药物组合物的总重量的从约0.25％(w/w)至约5％(w/w)的范围内的量存在。

根据一些实施方案，药物组合物还包含填充剂。根据另外的实施方案，填充剂是寡糖。根据还另外的实施方案，寡糖选自由以下组成的组：乳糖、蔗糖、甘露糖醇、葡萄糖及其任何组合。每种可能性代表本发明的单独的实施方案。根据示例性实施方案，寡糖是乳糖，所述乳糖以在药物组合物的总重量的从约10％(w/w)至约25％(w/w)的范围内的量存在。

根据一些实施方案，药物组合物还包含pH调节剂。根据另外的实施方案，pH调节剂是磷酸钾，所述磷酸钾以在药物组合物的总重量的从约2％(w/w)至约10％(w/w)的范围内的量存在。根据还另外的实施方案，磷酸钾是磷酸氢二钾和磷酸二氢钾的组合。

根据一些实施方案，药物组合物的pH在从约6.0至约8.0的范围内。根据某种实施方案，药物组合物的pH在从约6.0至约7.0的范围内。

根据另外的实施方案，药学上可接受的载体是水，所述水以在药物组合物的总重量的从约55％(w/w)至约90％(w/w)的范围内的量存在。

根据一些实施方案，药物组合物包含：

(i)蛋白水解酶混合物，其量在药物组合物的总重量的从约0.1％(w/w)至约3％(w/w)的范围内；

(ii)瓜尔胶，其量在药物组合物的总重量的从约0.25％(w/w)至约5％(w/w)的范围内；

(iii)乳糖，其量在药物组合物的总重量的从约10％(w/w)至约25％(w/w)的范围内；

(iv)磷酸钾，其量在药物组合物的总重量的从约2％(w/w)至约10％(w/w)的范围内；以及

(v)水，其量补足至药物组合物的总重量的100％(w/w)。

根据某种实施方案，药物组合物包含：

成分	制剂的(％)w/w
		API	0.5-1.5
瓜尔胶	3.5
		乳糖	20.05
磷酸氢二钾	2.5
		磷酸二氢钾	0.8
注射用水	补足至100

根据一些实施方案，部分纯化的蛋白水解酶混合物以粉末状组合物的形式存在，并且在使用前，将粉末状组合物与药学上可接受的载体混合以形成药物组合物。根据另外的实施方案，粉末状组合物还包含所述胶凝剂，并且任选地还包含所述pH调节剂、所述填充剂或其组合。根据某种实施方案，粉末状组合物还包含所述胶凝剂、所述pH调节剂和所述填充剂，并且在使用前，将粉末状组合物与水混合以形成水凝胶，优选地均质水凝胶。

根据另一个方面，本发明提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含从粗制菠萝蛋白酶获得的部分纯化的蛋白水解酶混合物和药学上可接受的载体，用于通过将该药物组合物局部应用到受试者的受影响的皮肤区域上来治疗银屑病的一种或更多种皮肤表现。

结合下文的描述、实施例和权利要求，将更好地理解本发明的这些和其他实施方案。

附图简述

图1A-图1H示出了用水凝胶治疗之前或之后的银屑病病变的照片，所述水凝胶包含从粗制菠萝蛋白酶获得的部分纯化的蛋白水解酶混合物；水凝胶在下文中被称为“制剂”。图1A-图1B示出了在用该制剂进行第1次治疗之前或之后受银屑病影响的皮肤区域的照片。图1C-图1D示出了在用该制剂进行第2次治疗之前或之后受银屑病影响的皮肤区域的照片。图1E-图1F示出了在用该制剂进行第4次治疗之前或之后受银屑病影响的皮肤区域的照片。图1G-图1H示出了分别在治疗开始之后第57天和第77天的图1C-图1D的皮肤区域的照片，其中皮肤接受了用该制剂的5次治疗，并且然后每天用软膏治疗，直到第57天或第77天。

发明详述

本发明提供了用于缓解或治疗银屑病的皮肤表现的药物组合物，其中所述药物组合物包含从粗制菠萝蛋白酶获得的部分纯化的蛋白水解酶混合物和药学上可接受的载体。

药物组合物

本发明提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含作为活性成分的从粗制菠萝蛋白酶获得的部分纯化的蛋白水解酶混合物、药学上可接受的载体和一种或更多种赋形剂。

术语“粗制菠萝蛋白酶”是指来源于菠萝植物的茎的蛋白质提取物，其包含大量蛋白质，包括酶和多糖。粗制菠萝蛋白酶可以商业上购买。

如本文使用的术语“从菠萝蛋白酶中部分纯化的蛋白水解酶混合物”是指包含从菠萝蛋白酶中存在的其他非蛋白水解酶，例如磷酸酶、过氧化物酶和/或纤维素酶中分级或分离的蛋白水解酶的混合物。蛋白水解酶混合物不是纯蛋白水解酶制品。本发明的蛋白水解酶混合物包含蛋白水解酶以及如下文详述的其他蛋白质和成分。然而，蛋白水解酶混合物大体上不含在粗制菠萝蛋白酶中存在的磷酸酶、过氧化物酶和纤维素酶。

关于蛋白水解酶混合物，术语“大体上不含”意在指示蛋白水解酶混合物包含这样的量的非蛋白水解酶，诸如磷酸酶、过氧化物酶和/或纤维素酶：不大于分级前粗制菠萝蛋白酶中该酶的量的20％(w/w)，可选择地不大于分级前粗制菠萝蛋白酶中非蛋白水解酶的量的15％(w/w)、10％(w/w)、5％(w/w)、2％(w/w)，或者不大于分级前粗制菠萝蛋白酶中非蛋白水解酶的量的1％(w/w)。涵盖其间的任何整数。根据某种实施方案，蛋白水解酶混合物不含磷酸酶、过氧化物酶和纤维素酶。

在WO 2006/054309和WO 2013/011514中公开了通过从粗制菠萝蛋白酶部分纯化从粗制菠萝蛋白酶获得的部分纯化的蛋白水解酶混合物(还被称为或/>)及其制品，WO 2006/054309和WO 2013/011514的内容通过引用并入，如同在本文中充分阐述。从粗制菠萝蛋白酶获得的蛋白水解酶混合物包含存在于粗制菠萝蛋白酶中的半胱氨酸蛋白酶中的至少两种：茎菠萝蛋白酶(EC 3.4.22.32)和ananain(EC 3.4.22.31)。蛋白水解酶混合物还可以包含存在于粗制菠萝蛋白酶中的半胱氨酸蛋白酶前体中的一种或更多种，诸如例如ananain(EC 3.4.22.31)前体、果实菠萝蛋白酶(EC 3.4.22.33)前体和茎菠萝蛋白酶(EC 3.4.22.31)前体。蛋白水解酶混合物还可以包含半胱氨酸蛋白酶片段(参见例如WO 2006/054309)、木菠萝素样凝集素和/或菠萝蛋白酶抑制剂。根据某种实施方案，从粗制菠萝蛋白酶获得的蛋白水解酶混合物包含茎菠萝蛋白酶(EC 3.4.22.32)、ananain(EC3.4.22.31)、菠萝蛋白酶的半胱氨酸蛋白酶前体和木菠萝素样凝集素。

蛋白水解酶混合物可以通过WO 2013/011514中公开的程序获得。作为制备的最后步骤，将蛋白水解酶混合物冻干，并且作为粉末状组合物储存，直到使用。

呈其粉末状形式的蛋白水解酶混合物是高度稳定的，并且可以在2℃-8℃储存持续长的时间段，例如长达三年。在该时间段之后，蛋白水解酶混合物保持至少90％的在其储存前确定的原始蛋白水解活性。

蛋白水解酶混合物在整个说明书和权利要求中被表示为活性药物成分(API)。根据一些实施方案，药物组合物中API的量在清创制剂的总重量的从约0.1％(w/w)至约3％(w/w)的范围内。根据另外的实施方案，API的量在药物组合物的总重量的从约0.5％(w/w)至约2％(w/w)的范围内，诸如约0.6％(w/w)、0.7％(w/w)、0.8％(w/w)、0.9％(w/w)、1％(w/w)、1.1％(w/w)、1.2％(w/w)、1.3％(w/w)、1.4％(w/w)或约1.5％(w/w)。根据某种实施方案，API的量是药物组合物的总重量的约1.25％(w/w)。

术语“约”是指所指示的值的±10％。

如在整个说明书和权利要求中使用的术语“粉末状”组合物是指呈干燥形式或冻干形式的组合物，其包含不大于组合物的总重量的约5％(w/w)，可选择地不大于组合物的总重量的约3％(w/w)、2％(w/w)、1％(w/w)、0.5％(w/w)，或者另外可选择地不大于组合物的总重量的约0.1％(w/w)的量的水。根据某种实施方案，粉末状组合物不含水。

如本文使用的术语“水凝胶”是指能够保持凝胶样形式的含水组合物。根据一些实施方案，水凝胶是均质的。

术语“均质的”水凝胶意指具有均匀粘度(例如，整体良好混合)的水凝胶。

药物组合物的载体和赋形剂都是药学上可接受的。术语“药学上可接受的”意指由联邦或州政府的监管机构批准，或者在美国药典或其他公认的药典中列出用于在人类中使用。

术语“载体”是指与活性成分一起施用的稀释剂或媒介物。载体在与组合物的其他成分相容且对其接受者无害的意义上是“可接受的”。药学上可接受的载体可以是水、右旋糖溶液、缓冲液或任何与活性成分相容的含水溶液。根据示例性实施方案，载体是水。根据另外的实施方案，载体是水，还包含一种或更多种赋形剂。可选择地或另外地，粉末状组合物还可以包含一种或更多种赋形剂。

根据一些实施方案，赋形剂是水溶性的。术语“水溶性的”是指在室温，即22℃-25℃，通常具有在1g/ml至1g/30ml的范围内的在水中的溶解度的剂。

本发明的药物组合物可以包含作为赋形剂的水溶性胶凝剂，所述水溶性胶凝剂可以是天然存在的胶凝剂、半合成胶凝剂、合成胶凝剂及其任何组合。

水溶性的天然存在的胶凝剂包括但不限于水溶性的天然存在的多糖，诸如例如半乳甘露聚糖、葡甘露聚糖、淀粉、琼脂、果胶、海藻酸盐、角叉菜胶或其任何组合。半乳甘露聚糖和葡甘露聚糖的非限制性实例是瓜尔胶、刺槐豆胶、黄原胶、阿拉伯树胶、黄蓍胶、结冷胶(gellan gum)及其混合物。根据示例性实施方案，水溶性的天然存在的胶凝剂是瓜尔胶。根据某种实施方案，瓜尔胶以在药物组合物的总重量的从约0.25％(w/w)至约5％(w/w)的范围内的量存在。

其他天然存在的胶凝剂包括例如甲壳质、壳聚糖、糖胺聚糖，诸如例如肝素、硫酸软骨素、硫酸皮肤素、硫酸乙酰肝素和蛋白聚糖。

半合成胶凝剂包括但不限于纤维素醚(例如，羟乙基纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素)、聚乙烯醇、羟丙基瓜尔胶等。

合成胶凝剂包括但不限于羧基乙烯基聚合物、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙酸乙烯酯聚合物、聚氯乙烯聚合物、聚偏二氯乙烯聚合物、丙烯酸的交联的聚合物诸如卡波姆或卡波普(carbopol)等。

药物组合物还可以包含作为赋形剂的填充剂和/或pH调节剂。

适用于实施本发明的填充剂是任何已知的填充剂，诸如寡糖，例如乳糖、蔗糖、甘露糖醇、山梨糖醇和葡萄糖；氨基酸，例如甘氨酸。根据某种实施方案，填充剂是乳糖。根据一种实施方案，乳糖以在药物组合物的总重量的从约10％(w/w)至约25％(w/w)的范围内的量存在。

pH调节剂优选地具有高于6.0的pKa。在一些实施方案中，pH调节剂可以是任何已知的pH调节剂，诸如例如磷酸钾、碳酸钾、碳酸钠和磷酸钠。根据一些实施方案，pH调节剂是磷酸二氢钾和磷酸氢二钾的组合，其以在药物组合物的总重量的从约2％(w/w)至约10％(w/w)的范围内的量存在。

根据一种示例性实施方案，药物组合物包含以下或由以下组成：

成分	制剂的(％)w/w
		API	0.5-1.5
瓜尔胶	3.5
		乳糖	20.05
磷酸氢二钾	2.5
		磷酸二氢钾	0.8
注射用水	补足至100

药物组合物还可以包含消泡剂。消泡剂是本领域已知的，并且包括但不限于聚乙二醇，例如PEG-1450、PEG-3350以及类似物。

根据另一种示例性实施方案，药物组合物包含以下或由以下组成：

成分	制剂的(％)w/w
		API	0.5-1.5
瓜尔胶	3.5
		乳糖	18.05
磷酸氢二钾	2.5
		磷酸二氢钾	0.8
PEG-3350	2
		注射用水	补足至100

组合物还可以包含防腐剂，诸如例如苯甲醇、对羟基苯甲酸酯、羟基苯甲酸甲酯或羟基苯甲酸丙酯；和/或抗氧化剂，诸如例如抗坏血酸、二氢醌、丁基化羟基甲苯和二硫苏糖醇。

药物组合物还可以包含选自由麻醉剂、抗细菌剂、抗真菌剂、抗炎剂、镇痛剂和促进愈合的剂组成的组的另外的活性剂。

麻醉剂包括但不限于阿美索卡因(amethocaine)(丁卡因)、利多卡因(lignocaine)(利多卡因(lidocaine))、赛罗卡因(xylocaine)、布比卡因(bupivacaine)、丙胺卡因、罗哌卡因(ropivacaine)、苯佐卡因、马比佛卡因(mepivocaine)、可卡因。每种可能性代表单独的实施方案。

抗细菌剂包括但不限于阿米卡星、硫酸阿米卡星、氨基糖苷类、阿莫西林、氨苄西林、安沙霉素(ansamycin)、杆菌肽、β-内酰胺类、卷曲霉素、羧苄西林、头孢氨苄(cephalexin)、头孢噻啶(cephaloridine)、头孢噻吩(cephalothin)、头孢唑林、头孢匹林(cephapirin)、头孢拉定、头孢甘氨酸(cephaloglycin)、氯霉素、氯己定、葡萄糖酸氯己定、盐酸氯己定、氯喔星(chloroxine)、氯喹那多、金霉素、盐酸金霉素、环丙沙星、环杆菌素(circulin)、克林霉素、盐酸克林霉素、克霉唑、氯唑西林、去甲氯四环素(demeclocycline)、双氯西林、二碘羟喹(diiodohydroxyquin)、多西环素、乙胺丁醇、盐酸乙胺丁醇、红霉素、依托红霉素(erythromycin estolate)、硬脂酸红霉素、法呢醇(farnesol)、氟氯西林(floxacillin)、庆大霉素、硫酸庆大霉素、短杆菌肽(gramicidin)、灰黄霉素、卤普罗近(haloprogin)、哈喹诺(halquinol)、六氯酚(hexachlorophene)、米诺环素、碘氯羟喹(iodochlorhydroxyquin)、卡那霉素、硫酸卡那霉素、林可霉素、林可霉素、盐酸林可霉素、大环内酯类、甲氯环素(meclocycline)、甲烯土霉素(methacycline)、盐酸甲烯土霉素、乌洛托品、马尿酸乌洛托品、扁桃酸乌洛托品、甲氧西林(methicillin)、甲硝唑、咪康唑、盐酸咪康唑、米诺环素、盐酸米诺环素、莫匹罗星、萘夫西林、新霉素、硫酸新霉素、奈替米星、硫酸奈替米星、呋喃西林、诺氟沙星、制霉素、竹桃霉素(oleandomycin)、头孢菌素类、苯唑西林、土霉素、盐酸土霉素、对氯间二甲苯酚、巴龙霉素、硫酸巴龙霉素、青霉素类、青霉素G、青霉素V、喷他脒、盐酸喷他脒、非奈西林(pheneticillin)、多粘菌素、喹诺酮类、硫酸链霉素、四环素、妥布霉素、托萘酯(tolnaftate)、三氯生(triclosan)、利福平、利福霉素、罗利环素(rolitetracycline)、银盐、大观霉素、乙酰螺旋霉素、链霉素、磺酰胺、四环素类、四环素、妥布霉素、硫酸妥布霉素、三氯卡班、三氯生、甲氧苄啶-磺胺甲噁唑、泰洛星(tylosin)、万古霉素和短杆菌素(tyrothricin)。每种可能性代表单独的实施方案。

抗真菌剂包括但不限于制霉素、克霉唑、咪康唑、酮康唑、氟康唑、噻苯达唑(thiabendazole)、益康唑、氯咪达唑(chlormidazole)、异康唑(isoconazole)、噻苯达唑、噻康唑(tioconazole)、硫康唑、联苯苄唑、奥昔康唑、芬替康唑(fenticonazole)、奥莫康唑(omoconazole)、舍他康唑和氟曲马唑。每种可能性代表单独的实施方案。

抗炎剂可以是非甾体抗炎剂、甾体抗炎剂或其组合。非甾体抗炎剂的非限制性实例包括昔康类(oxicams)，诸如吡罗昔康、伊索昔康(isoxicam)、替诺昔康(tenoxicam)、舒多昔康(sudoxicam)；水杨酸盐类，诸如阿司匹林、双水杨酸、贝诺酯(benorylate)、三水杨酸胆碱镁(trilisate)、沙发普林(safapryn)、索普林(solprin)、二氟尼柳和芬度柳(fendosal)；乙酸衍生物，诸如双氯芬酸、芬氯酸(fenclofenac)、吲哚美辛、舒林酸、托美丁、伊索克酸(isoxepac)、呋罗芬酸(furofenac)、硫平酸(tiopinac)、齐多美辛(zidometacin)、阿西美辛、芬替酸(fentiazac)、佐美酸(zomepirac)、克林霉素、奥昔平酸(oxepinac)、联苯乙酸和酮咯酸；芬那酸盐类，诸如甲芬那酸、甲氯芬那酸(meclofenamicacid)、氟芬那酸、尼氟酸(niflumic acid)和托芬那酸(tolfenamic acid)；丙酸衍生物，诸如布洛芬、萘普生、苯噁洛芬(benoxaprofen)、氟比洛芬、酮洛芬、非诺洛芬、芬布芬、吲哚洛芬(indoprofen)、吡洛芬(pirprofen)、卡洛芬(carprofen)、奥沙普秦、普拉洛芬、咪洛芬(miroprofen)、硫噁洛芬(tioxaprofen)、舒洛芬(suprofen)、阿明洛芬(alminoprofen)和噻洛芬酸(tiaprofenic)；吡唑类，诸如保泰松(phenylbutazone)、羟布宗(oxyphenbutazone)、非普拉宗、阿扎丙宗(azapropazone)和三甲保泰松(trimethazone)。也可以使用这些非甾体抗炎剂的提取物。每种可能性代表单独的实施方案。

甾体抗炎药物的非限制性实例包括皮质类固醇，诸如氢化可的松、羟基-曲安奈德、α-甲基地塞米松、地塞米松-磷酸盐、二丙酸倍氯米松、戊酸氯倍他索、地奈德、去羟米松(desoximetasone)、乙酸脱氧皮质酮、地塞米松、二氯松(dichlorisone)、醋酸双氟拉松、戊酸二氟可龙、氟氢缩松(flurandrenolone)、氟氯奈德(fluclorolone acetonide)、氟氢可的松、新戊酸氟米松(flumethasone pivalate)、醋酸氟轻松(fluocinolone acetonide)、氟轻松、氟米松丁酯(flucortine butyl ester)、氟可龙(fluocortolone)、醋酸氟泼尼定(醋酸氟甲叉龙)、氟氢缩松(flurandrenolone)、哈西奈德、醋酸氢化可的松、丁酸氢化可的松、甲泼尼龙、曲安奈德(triamcinolone acetonide)、可的松、可托多松(cortodoxone)、氟轻松、氟氢可的松、醋酸双氟拉松、氟氢缩松、氟氢可的松、醋酸双氟拉松、氟氢缩松(flurandrenolone acetonide)、甲羟松(medrysone)、安西法尔(amcinafal)、安西非特(amcinafide)、倍他米松及余量的其酯、氯泼尼松(chloroprednisone)、醋酸氯泼尼松、氯可托龙(clorcortolone)、clescinolone、二氯松、二氟泼尼酯(diflurprednate)、氟氯奈德(flucloronide)、氟尼缩松(flunisolide)、氟米龙、氟培龙(fluperolone)、氟泼尼龙(fluprednisolone)、戊酸氢化可的松、氢化可的松环戊丙酸酯、氢可他酯(hydrocortamate)、甲泼尼松(meprednisone)、帕拉米松(paramethasone)、泼尼松龙、泼尼松、二丙酸倍氯米松和曲安奈德。每种可能性代表单独的实施方案。

镇痛剂包括但不限于可待因、氢可酮、羟考酮、芬太尼和丙氧芬。局部镇痛剂包括可卡因衍生物，包括但不限于利多卡因、利多卡因和潘妥卡因(pontocaine)。每种可能性代表单独的实施方案。

促进愈合的剂包括但不限于透明质酸。

根据一些实施方案，蛋白水解酶混合物作为粉末状组合物储存，并且在使用前，将粉末状组合物与药学上可接受的载体混合以形成药物组合物。根据一些实施方案，粉末状组合物还包含水溶性胶凝剂，并且在使用前，所述粉末状组合物与水或含水溶液混合以形成具有期望pH的水凝胶。根据另外的实施方案，粉末状组合物还可以包含pH调节剂和/或填充剂。可选择地，药学上可接受的载体可以包含水溶性胶凝剂、pH调节剂和/或填充剂。

根据一些实施方案，粉末状组合物和药学上可接受的载体，诸如水，分别储存在单个容器的第一隔室和第二隔室中，或者可以储存在两个单独的容器中。在使用之前，将粉末状组合物和水混合，以形成呈水凝胶形式的药物组合物。

根据一些实施方案，本发明的药物组合物是无菌的。

根据一些实施方案，药物组合物包含：

(a)粉末状组合物，其包含：

(i)从粗制菠萝蛋白酶获得的部分纯化的蛋白水解酶混合物；

(ii)水溶性胶凝剂；

(iii)填充剂；

(iv)pH调节剂；以及

(b)水，

其中将(a)的粉末状组合物与(b)的水混合以形成呈水凝胶形式的药物组合物，所述药物组合物具有在从约6.0至约8.0的范围内的pH，并且其中蛋白水解酶混合物的量在药物组合物的总重量的从约0.1％(w/w)至约3％(w/w)的范围内。

根据一些实施方案，药物组合物包含：

(a)粉末状组合物，其存在于容器的第一隔室中或第一容器中，所述粉末状组合物包含：

(i)从粗制菠萝蛋白酶获得的部分纯化的蛋白水解酶混合物；

(ii)瓜尔胶，其量在清创制剂的总重量的从约0.25％(w/w)至约5％(w/w)的范围内；

(iii)乳糖，其量在清创制剂的总重量的从约10％(w/w)至约25％(w/w)的范围内；

(iv)pH调节剂；以及

(b)水，其存在于容器的第二隔室中或第二容器中，其量在约55％(w/w)至约90％(w/w)的范围内。

在整个说明书和权利要求中指示的数值的范围包括其间的任何整数或其分数。

应当理解，本发明的部分纯化的蛋白水解酶混合物大体上不含非蛋白水解酶，诸如磷酸酶、过氧化物酶和/或纤维素酶。根据某种实施方案，部分纯化的蛋白水解酶混合物包含存在于粗制菠萝蛋白酶中的磷酸酶、过氧化物酶和纤维素酶的量的不大于1％。根据某种实施方案，本发明的药物组合物不含磷酸酶、过氧化物酶、纤维素酶和辣椒素。

由于从菠萝蛋白酶获得的蛋白水解酶是水溶性的，通常避免了油和/或脂肪酸的添加。

用途

本发明提供了一种治疗银屑病的一种或更多种皮肤表现的方法，所述方法包括向需要这样的治疗的受试者的受影响的皮肤区域局部应用药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的从粗制菠萝蛋白酶获得的部分纯化的蛋白水解酶混合物和药学上可接受的载体，其中所述方法避免了由使用皮质类固醇、类视黄醇和/或钙调磷酸酶抑制剂引起的不良作用。

本发明还提供了一种治疗银屑病的方法，所述方法包括向需要这样的治疗的受试者的受影响的皮肤区域局部应用药物组合物，从而治疗银屑病，所述药物组合物包含治疗有效量的从粗制菠萝蛋白酶获得的部分纯化的蛋白水解酶混合物和药学上可接受的载体。

如本文使用的术语银屑病的“皮肤表现”是指与银屑病相关的异常皮肤外观、异常皮肤生长和/或异常皮肤感觉，并且包括但不限于隆起的和干燥的皮肤区域(还被称为“斑块表皮增厚”)、覆盖有白色鳞状皮肤的红色皮肤区域、充满脓液的水疱、皮肤剥落、红斑、皮肤干裂、瘙痒和烧灼感。银屑病的皮肤表现也通过银屑病病变的组织学检查来证明。因此，银屑病的皮肤表现包括，但不限于，伴有细长的网嵴(rete ridge)的过度增生的表皮、改变的角质化、角质层中的嗜中性粒细胞和真皮中扩张的毛细血管。

术语“治疗有效量”是部分纯化的蛋白水解酶混合物的这样的量，该量足以向应用该组合物的受试者提供有益效果。因此，治疗有效量是足以引起例如表皮斑块增厚缩小或愈合和/或降低斑块的生长速率(诸如抑制斑块生长)和/或恢复正常、健康的皮肤外观的量。

如本文可互换地使用的术语“治疗(treatment)”或“治疗(treating)”是指获得有益的或期望的临床结果，或受试者中银屑病的任何可测量的减轻，包括疾病的消退、减少、停止进展和/或减缓进展。有益的或期望的临床结果包括但不限于以下中的一种或更多种：缓解银屑病的一种或更多种症状或皮肤表现(诸如减少或阻止斑块生长、皮肤去鳞或剥落、皮肤干裂、出血、瘙痒和烧灼感)，减少银屑病的程度，稳定(即，不恶化)银屑病的状态，预防或延迟银屑病的复发，延迟或减缓银屑病进展，改善银屑病状态，以及恢复正常、健康的皮肤外观。

术语“皮肤去鳞”和“皮肤剥落”可互换地使用，指的是表皮外层在大的鳞状剥落中的损失。

存在五种主要类型的银屑病：斑块型银屑病、滴状银屑病、反向型银屑病、脓疱型银屑病和红皮病型银屑病。

斑块型银屑病，也被称为寻常型银屑病，占病例的约90％。它通常表现为在顶部具有白色鳞片的红色斑。身体最常受影响的区域是前臂后部、胫部、肚脐区域和头皮。

滴状银屑病具有滴状病变。

脓疱型银屑病表现为小的、非传染性的、充满脓液的水疱。

反向型银屑病在皮肤褶皱中形成红色斑。

红皮病型银屑病在皮疹变得非常广泛时发生，并且可以从任何其他类型发展而来。

根据一些实施方案，本发明的方法可用于治疗任何类型的银屑病。所述方法还可用于治疗指甲银屑病和/或头皮银屑病。

本发明的方法避免了与目前用于治疗银屑病的已知药物相关的不良作用。应当注意，当用本发明的药物组合物引起轻度刺激时，这种轻度刺激是暂时的，并且一旦将药物组合物从被治疗的皮肤去除，并且将保湿润肤乳膏应用在被治疗的皮肤上，这种轻度刺激就消失。不受任何作用机制的约束，认为轻度刺激是蛋白水解酶混合物的治疗效果，即蛋白水解活性的结果。因此，这不被视为不良作用。

虽然皮质类固醇、类视黄醇和钙调磷酸酶抑制剂在银屑病病变上的局部应用可能与不良作用相关，但本发明的药物组合物避免了由使用这些药物引起的不良作用。皮质类固醇(例如，氢化可的松、曲安奈德和氯倍他索)，类视黄醇(例如，他扎罗汀)和钙调磷酸酶抑制剂(例如，他克莫司和吡美莫司)的不良作用包括但不限于皮肤变薄、永久性妊娠纹(条纹)、皮肤变色、薄蜘蛛状血管、唇炎、粘膜和皮肤干燥、脱发、光敏感性、皮肤脆性、受影响的皮肤的烧灼感或瘙痒、肌肉疼痛、关节痛、升高的颅内压、升高的血脂、震颤、恶心、呕吐、胃部不适、眼睛发红/疼痛、毛囊炎、失眠、高血压、视力模糊、贫血、低磷血症、无力、上呼吸道感染和肾毒性。

根据一些实施方案，本发明的方法可用于治疗对用局部皮质类固醇的治疗不依从或无响应的患有银屑病的受试者。

术语“无响应”是指已经用局部皮质类固醇治疗的患有银屑病的受试者，其中皮质类固醇不具有有益的治疗效果。

根据另外的实施方案，本发明的方法可用于患有银屑病的育龄妇女，特别是孕妇、哺乳期妇女和打算怀孕的妇女。由于用类视黄醇和/或钙调磷酸酶抑制剂局部治疗银屑病病变可以引起的不良作用，孕妇、哺乳期妇女和打算怀孕的妇女应当避免使用这些药物。

根据一些实施方案，方法包括将药物组合物应用到受影响的皮肤区域上，持续约1小时至约12小时的持续时间，进行1次至10次应用，或者根据需要应用，以治疗银屑病的一种或更多种皮肤表现或治疗银屑病。

根据另外的实施方案，药物组合物以选自由以下项组成的组的频率局部应用持续约1小时至约12小时的持续时间：每天一次、2天一次、3天一次、4天一次、5天一次、6天一次、每周一次、每月两次、每月一次及其任何组合，进行1次至10次应用，或者根据需要应用，以治疗银屑病的一种或更多种皮肤表现或治疗银屑病。

根据一些实施方案，方法包括每2天至5天应用药物组合物持续约1小时至约4小时的持续时间，进行1次至10次应用，或者根据需要应用，以治疗银屑病的一种或更多种皮肤表现或治疗银屑病。根据另外的实施方案，方法包括每2天、3天、4天、5天或其任何组合应用药物组合物持续1小时至4小时的持续时间，进行3次、4次、5次、6次或7次应用。根据某些实施方案，方法包括每3天将药物组合物应用到受影响的皮肤区域上，持续1小时至4小时的持续时间，进行3次、4次或5次应用。

本发明的方法可用于将患有银屑病的受试者的皮肤恢复到更健康和更有吸引力的状态，优选地将处于受银屑病影响区域的皮肤恢复到正常状态。

根据一些实施方案，在应用药物组合物后，方法还包括邻近经治疗的区域的边缘在健康的正常皮肤上应用粘合剂屏障的步骤。粘合剂屏障可以是疏水性软膏或糊剂，包括但不限于石油凝胶、脂肪软膏、氧化锌糊剂和硅胶。粘合剂屏障粘附至健康的正常皮肤并且形成排斥屏障，该排斥屏障防止药物组合物到达并且影响正常的健康皮肤。

根据一些实施方案，在应用药物组合物后，方法还可以包括用封闭层或敷料仅覆盖药物组合物或者覆盖药物组合物和粘合剂屏障以将组合物维持或保持在经治疗的部位的步骤。

根据另外的实施方案，方法还包括在应用1小时至12小时之后去除药物组合物，并且应用润肤剂。应用润肤剂可以一天一次、一天两次或根据需要多次进行，以保护皮肤或软化皮肤。

如本文使用的术语“润肤剂”是指脂质、蜡、脂肪酸或具有类似稠度的物质，或其任何组合，当应用至皮肤时，它们保护皮肤并且软化皮肤，使皮肤更柔软。润肤剂主要用作软膏和其他皮肤病学制剂诸如例如保湿乳膏和洗剂的赋形剂或基质。

尽管本发明的方法意图替代用于治疗银屑病的皮质类固醇、类视黄醇和钙调磷酸酶抑制剂，但是根据一些实施方案，本发明的方法可以与已知的用于治疗银屑病的方法组合，诸如日光或UV疗法，局部药物，例如皮质类固醇、维生素D₃类似物、类视黄醇、钙调磷酸酶抑制剂、煤焦油提取物、水杨酸盐，或者口服或可注射药物，例如类固醇、类视黄醇、甲氨蝶呤、环孢菌素、依那西普(etanercept)、英夫利西单抗、阿达木单抗、乌司奴单抗(ustekinumab)、司库奇尤单抗(secukinumab)和伊卡组单抗(ixekizumab)。根据一些实施方案，本发明的方法可以在任何已知的银屑病的治疗方法之前、同时或之后进行。

根据一些实施方案，应用的API的量在每100cm²的银屑病病变约0.1g至约2g之间的无菌冻干蛋白水解酶混合物的范围内。根据另外的实施方案，应用至银屑病部位的水凝胶的量是每100cm²的皮肤病变约20g。

应当理解，在整个说明书中公开的每种可能性代表本发明的单独的实施方案。

实施例1

水凝胶制剂

在使用前，将包含如下文表中详述的从粗制菠萝蛋白酶获得的蛋白水解酶混合物(API)、瓜尔胶、乳糖、磷酸二氢钾和磷酸氢二钾以及聚乙二醇的干燥制剂与水混合，以获得水凝胶，将该水凝胶在下文描述的实验中应用至银屑病病变。形成的水凝胶在下文中被称为“制剂”。

表1.制剂的成分。

成分	制剂的(％)w/w
		API	1.25或0.625
瓜尔胶	3.5
		乳糖	18.05
磷酸氢二钾	2.5
		磷酸二氢钾	0.8
PEG-3350	2
		注射用水	补足至100

实施例2

银屑病病变的治疗

用类固醇治疗持续12年和用光疗法治疗持续1年均不成功的轻度斑块型银屑病病变和中度斑块型银屑病病变如下治疗：在第1天、第3天、第8天和第11天应用包含1.25％w/wAPI的制剂持续3-4小时。这些天被称为“去除阶段”，即治疗的前两周。在每次用该制剂治疗之后，清洁并且擦拭银屑病病变，并且应用润肤保湿滋养软膏(Aquaphor和Vaseline)。在第29天(本文被称为“恢复阶段”，即从治疗开始起的第3周直到2个月)，将包含1.25％w/w API的制剂应用一次，持续3-4小时，并且然后擦拭，并且将润肤保湿滋养软膏再次应用到病变上。在“维持阶段”期间，即从治疗开始起的第3个月直到6个月，以较低的API的量(0.625％w/w)应用一次制剂。在恢复阶段和维持阶段期间，每天应用润肤保湿滋养软膏。

根据该方案应用制剂没有引起可检测到的不良作用。对于使用来说，它是安全的。在发生一些刺激或疼痛的那些少数情况下，在使用3-4小时之后擦拭制剂，并且应用润肤保湿滋养软膏使刺激和/或疼痛停止。

如图1A-图1F中示出的，用该制剂治疗的银屑病病变在第1次、第2次、第3次治疗之后逐渐去除，并且在第4次治疗之后明显去除，并且在这些治疗之后的皮肤在润肤保湿滋养软膏的维持护理下恢复到几乎正常的外观。在恢复阶段和维持阶段期间，例如分别在第57天和第77天，皮肤外观被改善，分别如图1G和图1H中示出的。从治疗开始起的四个月(在从第一次治疗起的第120天)，不存在对应用该制剂或任何特定的抗银屑病治疗的需求。这些结果指示，该制剂是安全的，因为它不引起可检测到的不良作用，并且它是高度有效的，因为对于治疗银屑病的皮肤表现并且因此恢复健康的皮肤外观，需要在两周时间段内的非常少的应用。

本领域的技术人员将理解，本发明不受上文特别示出和描述的内容的限制。而是，本发明的范围由所附的权利要求限定。

Claims (44)

1.一种治疗银屑病的一种或更多种皮肤表现的方法，所述方法包括在需要这样的治疗的受试者的受影响的皮肤区域上局部应用药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的从粗制菠萝蛋白酶获得的部分纯化的蛋白水解酶混合物和药学上可接受的载体，其中所述方法避免了由使用已知用于治疗银屑病的皮质类固醇、类视黄醇和/或钙调磷酸酶抑制剂引起的不良作用。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述部分纯化的蛋白水解酶混合物大体上不含磷酸酶、过氧化物酶和/或纤维素酶。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述部分纯化的蛋白水解酶混合物大体上不含磷酸酶、过氧化物酶和纤维素酶。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述药物组合物不含辣椒素。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述药物组合物不含油和/或脂肪酸。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述银屑病的一种或更多种皮肤表现选自由以下组成的组：表皮斑块增厚、覆盖有白色鳞状皮肤的红色斑、充满脓液的水疱、干燥且发痒的破裂皮肤及其组合。

7.根据权利要求6所述的方法，其中由使用皮质类固醇、类视黄醇和/或钙调磷酸酶抑制剂引起的所述不良作用选自由以下组成的组：皮肤变薄、永久性妊娠纹(条纹)、皮肤变色、薄蜘蛛状血管、唇炎、粘膜和皮肤干燥、脱发、光敏感性、皮肤脆性、受影响的皮肤的烧灼感或瘙痒、肌肉疼痛、关节痛、升高的颅内压、升高的血脂、震颤、恶心、呕吐、胃部不适、眼睛发红/疼痛、毛囊炎、失眠、高血压、视力模糊、贫血、低磷血症、无力、上呼吸道感染、肾毒性及其组合。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述受试者对用皮质类固醇的治疗不依从或无响应。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述受试者不依从用氢化可的松、曲安奈德和/或氯倍他索的治疗。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述受试者对用氢化可的松、曲安奈德和/或氯倍他索的治疗无响应。

11.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中类视黄醇和钙调磷酸酶抑制剂对所述受试者是禁忌的。

12.根据权利要求11所述的方法，其中所述受试者是孕妇、哺乳期妇女或打算怀孕的妇女。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的方法，其中将所述药物组合物局部应用到所述受影响的皮肤区域上，持续约1小时至约12小时的持续时间，进行1次至10次应用，或者根据需要应用，以治疗所述银屑病的一种或更多种皮肤表现。

14.根据权利要求13所述的方法，其中将所述药物组合物局部应用到所述受影响的皮肤区域上，进行高达6次应用。

15.根据权利要求13和14中任一项所述的组合物，其中将所述药物组合物每天一次、每2天一次、每3天一次、每4天一次、每5天一次、每6天一次、每7天一次或其任何组合局部应用到所述受影响的皮肤区域上。

16.根据权利要求13至15中任一项所述的方法，其中将所述药物组合物局部应用到所述受影响的皮肤区域上持续约1小时至约4小时的持续时间，每2-5天一次，进行3次至5次应用。

17.根据权利要求13至16中任一项所述的方法，还包括在从治疗开始起约3-12个月的时间段期间将所述药物组合物局部应用到所述受影响的皮肤区域上一次、两次、三次或按需要应用。

18.根据权利要求17所述的方法，其中在从治疗开始起约6个月的时间段期间，将所述药物组合物应用到所述受影响的皮肤区域上一次或两次。

19.根据权利要求1至18中任一项所述的方法，其中所述部分纯化的蛋白水解酶混合物包含茎菠萝蛋白酶(EC 3.4.22.32)和ananain(EC 3.4.22.31)，以及任选的木菠萝素样凝集素和/或菠萝蛋白酶抑制剂。

20.根据权利要求19所述的方法，其中所述部分纯化的蛋白水解酶混合物包含茎菠萝蛋白酶(EC 3.4.22.32)、ananain(EC 3.4.22.31)、木菠萝素样凝集素和菠萝蛋白酶抑制剂。

21.根据权利要求1至20中任一项所述的方法，其中所述部分纯化的蛋白水解酶混合物的量在所述药物组合物的总重量的从约0.1％(w/w)至约3％(w/w)的范围内。

22.根据权利要求21所述的方法，其中所述部分纯化的蛋白水解酶混合物的量在所述药物组合物的总重量的从约0.5％(w/w)至约2％(w/w)的范围内。

23.根据权利要求22所述的方法，其中所述部分纯化的蛋白水解酶混合物的量在所述药物组合物的总重量的从约0.6％(w/w)至约1.5％(w/w)的范围内。

24.根据权利要求23所述的方法，其中所述部分纯化的蛋白水解酶混合物的量是所述药物组合物的总重量的约1.25％(w/w)。

25.根据权利要求1至24中任一项所述的方法，其中所述药物组合物还包含水溶性胶凝剂。

26.根据权利要求25所述的方法，其中所述水溶性胶凝剂选自由以下组成的组：天然存在的胶凝剂、半合成胶凝剂、合成胶凝剂及其任何组合。

27.根据权利要求26所述的方法，其中所述水溶性天然存在的胶凝剂是多糖。

28.根据权利要求27所述的方法，其中所述多糖是半乳甘露聚糖、葡甘露聚糖或其组合。

29.根据权利要求28所述的方法，其中所述半乳甘露聚糖是瓜尔胶，所述瓜尔胶以在所述药物组合物的总重量的从约0.25％(w/w)至约5％(w/w)的范围内的量存在。

30.根据权利要求1至29中任一项所述的方法，其中所述药物组合物还包含填充剂。

31.根据权利要求30所述的方法，其中所述填充剂是寡糖。

32.根据权利要求31所述的方法，其中所述寡糖选自由以下组成的组：乳糖、蔗糖、甘露糖醇、葡萄糖及其组合。

33.根据权利要求32所述的方法，其中所述寡糖是乳糖，所述乳糖以在所述药物组合物的总重量的从约10％(w/w)至约25％(w/w)的范围内的量存在。

34.根据权利要求1至33中任一项所述的方法，其中所述药物组合物还包含pH调节剂。

35.根据权利要求34所述的方法，其中所述pH调节剂是磷酸钾，所述磷酸钾以在所述药物组合物的总重量的从约2％(w/w)至约10％(w/w)的范围内的量存在。

36.根据权利要求35所述的方法，其中所述磷酸钾是磷酸氢二钾和磷酸二氢钾的组合。

37.根据权利要求1至36中任一项所述的方法，其中所述药物组合物的pH在从约6.0至约8.0的范围内。

38.根据权利要求37所述的方法，其中所述药物组合物的pH在从约6.0至约7.0的范围内。

39.根据权利要求1至38中任一项所述的方法，其中所述药学上可接受的载体是水，所述水以在所述药物组合物的总重量的从约55％(w/w)至约90％(w/w)的范围内的量存在。

40.根据权利要求1至39中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含：

(i)蛋白水解酶混合物，其量在所述药物组合物的总重量的从约0.1％(w/w)至约3％(w/w)的范围内；

(ii)瓜尔胶，其量在所述药物组合物的总重量的从约0.25％(w/w)至约5％(w/w)的范围内；

(iii)乳糖，其量在所述药物组合物的总重量的从约10％(w/w)至约25％(w/w)的范围内；

(iv)磷酸钾，其量在所述药物组合物的总重量的从约2％(w/w)至约10％(w/w)的范围内；以及

(v)水，其量补足至所述药物组合物的总重量的100％(w/w)。

41.根据权利要求40所述的方法，其中所述药物组合物包含：

成分 制剂的(％)w/w API 0.5-1.5 瓜尔胶 3.5 乳糖 20.05 磷酸氢二钾 2.5 磷酸二氢钾 0.8 注射用水 补足至100

。

42.根据权利要求1至41中任一项所述的方法，其中所述部分纯化的蛋白水解酶混合物以粉末状组合物的形式存在，并且在使用之前，将所述粉末状组合物与所述药学上可接受的载体混合以形成呈水凝胶形式的所述药物组合物。

43.根据权利要求42所述的方法，其中所述粉末状组合物还包含所述胶凝剂，并且任选地还包含所述pH调节剂、所述填充剂或其组合。

44.根据权利要求43所述的方法，其中所述粉末状组合物还包含所述胶凝剂、所述pH调节剂和所述填充剂。