CN117157285A - 作为泛素特异性蛋白酶19(usp19)抑制剂的药物化合物 - Google Patents

作为泛素特异性蛋白酶19(usp19)抑制剂的药物化合物 Download PDF

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Abstract

Description

作为泛素特异性蛋白酶19(USP19)抑制剂的药物化合物
技术领域
本发明涉及泛素特异性蛋白酶19(USP19)抑制剂及其使用方法。
背景技术
在过去十年中，蛋白泛素化已成为重要的翻译后修饰，在多种细胞过程(包括蛋白水解、基因表达、DNA修复、免疫反应、代谢或细胞周期调节)中发挥作用。泛素蛋白酶体系统(UPS)的失调也与多种人疾病的发病机制有关，这些人疾病包括但不限于癌症(Hoeller D.等人,自然癌症综述(Nat.Rev.Cancer)(2006),6,776-788)、病毒感染(Gao等人,生理药理学杂志(J.Physiol.,Pharmacol.)(2006),84,5-14)、代谢或神经退行性病症(LoosdregtJ.等人,免疫(Immunity)(2013),39,259-271；Rubinsztein D.等人,自然(Nature)(2006),443,780-786)以及免疫和炎症相关的医学病况(Wang J.等人,细胞免疫学杂志(J.CellImmunol.)(2006),3,255-261；Corn J.等人,自然结构和分子生物学(Nat.Struct.&Mol.Biol.)(2014),21,297-300；Nicholson B.等人,细胞生物化学与生物物理学(CellBiochem.Biophys.)(2013),60,61-68)。
蛋白酶体抑制剂(硼替佐米)或/>(卡非佐米)获批和临床成功用于治疗套细胞淋巴瘤(AML)和多发性骨髓瘤(MM)验证了UPS作为适合药物干预的癌症靶标。尽管有效，但由于选择性差和急性毒性问题，它们的临床应用受到严重限制。目前的蛋白酶体抑制剂通过抑制26S蛋白酶体，无差别地损害癌细胞和正常细胞中的蛋白水解作用，并且具有治疗指数低的特点。为了解决这个问题，有前景的可选方法可能靶向蛋白酶体上游的UPS。干扰泛素(Ub)缀合/解缀合机制，例如在泛素特异性蛋白酶(USP)水平上，将实现开发具有增强特异性和降低毒性特征的改进疗法。
USP是去泛素化酶(DUB)家族中最大的亚家族，迄今为止已报道有超过60个家族成员(Komander D.等人,自然分子综述(Nat.Rev.Mol).(2009),10,550-563；Clague M.等人,生理学综述(Physiol.Rev.)(2013),93,1289-1315)。USP通常是半胱氨酸蛋白酶，其催化从特异性靶底物去除Ub，从而防止它们被蛋白酶体诱导的降解，或调节它们的激活和/或亚细胞定位(Colland F.等人,生物化学(Biochimie)(2008),90,270-283；Nicholson B.等人,细胞生物化学与生物物理学(Cell Biochem.Biophys.)(2013),60,61-68)。现已明确，USP调节参与人疾病发病机制的众多蛋白(包括癌基因和肿瘤抑制因子)的稳定性和激活。因此，USP代表药物干预的新兴且有吸引力的靶向类别。
在所有USP中，USP19是重要成员，因为它与许多对病理病况(包括但不限于癌症、神经退行性和退行性疾病以及抗病毒免疫应答)有影响的重要途径相关。USP19表达为长度从71.09kDa(同种型2)至156.03kDa(同种型5)不等的多个同种型，其中典型序列(同种型1)大小为145.65kDa(uniprot.org)。USP19的细胞定位可以是胞质或结合到内质网(Lee J.等人,生物化学杂志(J.Biol.Chem.)(2014),289,3510-3507；Lee J.等热,自然细胞生物学(Nat.Cell Biol.)(2016),18,765-776)。USP19定位于内质网，其是内质网相关降解(ERAD)途径的关键组成部分(Hassink B.等人,欧洲分子生物学组织会刊(EMBO J.)(2009),10,755-761；Lee J.等人,生物化学杂志(J.Biol.Chem.)(2014),289,3510-3507；Lee J.等人,自然细胞生物学(Nat.Cell Biol.)(2016),18,765-776)。特别地，USP19参与蛋白质量控制机制的后期步骤，拯救已逆向移位至胞液的ERAD底物。还已证明USP19可以调节E3连接酶MARCH6和HRD1的稳定性(Nakamura N.等人,实验细胞研究(Exp.Cell Res.)(2014),328,207-216；Harada K.等人,国际分子科学杂志(Int.J.Mol.Sci.)(2016),17,E1829)。此外，最近已表明USP19与多种潜在重要蛋白底物的稳定有关。例如，USP19与SIAH蛋白相互作用，以拯救HIF1α在缺氧条件下免于降解(Altun M.等人,生物化学杂志(J.Biol.Chem.)(2012),287,1962-1969；Velasco K.等人,生物化学与生物物理进展(Biochem.Biophys.Res.Commun.)(2013),433,390-395)。USP19还稳定KPC1泛素连接酶，该酶参与p27Kip1细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂的调节(Lu Y.等人,分子细胞生物学(Mol.Cell Biol.)(2009),29,547-558)。通过RNAi敲除USP19导致p27Kip1蓄积并抑制细胞增殖(Lu L.等人,美国科学公共图书馆(PLoS ONE)(2011),6,e15936)。还发现USP19与细胞凋亡抑制剂(IAP，包括c-IAP1和c-IAP2)相互作用(Mei Y.等人,生物化学杂志(J.Biol.Chem.)(2011),286,35380-35387)。USP19敲低降低这些c-IAP的总水平，而过表达增加BIRC2/cIAP1和BIRC3/cIAP2的水平。USP19敲低还以BIRC2/c-IAP1和BIRC3/c-IAP2依赖性方式增强TNFα诱导的胱天蛋白酶激活和细胞凋亡。除了一些直接参与调节缺氧反应和ER应激外，最近还表明USP19通过去泛素化Beclin-1作为自噬的正调节因子和I型干扰素信号传导(IFN，抗病毒免疫应答)的负调节因子。发现USP19通过去除Beclin-1在赖氨酸437处的K11连接泛素链，在翻译后水平稳定Beclin-1(Jin S.等人,欧洲分子生物学组织会刊(EMBO J.)(2016),35,866-880)。USP19通过以Beclin-1依赖性方式阻断RIG-I-MAVS相互作用，负调节I型IFN信号传导通路。USP19或Beclin-1耗竭抑制自噬流并促进I型IFN信号传导以及细胞抗病毒免疫(Jin S.等人,欧洲分子生物学组织会刊(EMBO J.)(2016),35,866-880；Cui J.等人,自噬(Autophagy)(2016),12,1210-1211)。最近的发现还表明，USP19可以通过调节TRAF3底物对细胞抗病毒I型IFN信号传导产生负作用(Gu Z.等人,未来微生物学(Future Microbiol.)(2017),12,767-779)。最近还表明USP19通过稳定辅助受体LRP6参与Wnt信号传导通路(Perrody E.等人,eLife(2016),5,e19083)，并通过HDAC1和HDAC2蛋白参与调节DNA修复过程，尤其是染色体稳定性和完整性(Wu M.等人,肿瘤靶标(Oncotarget)(2017),8,2197-2208)。
除了癌症和相关病况外，基因敲除研究还发现USP19与肌肉消耗综合征和其他骨骼肌肉萎缩病症有关(Wing S.,国际生物化学与细胞生物学杂志(Int.J.Biochem.CellBiol.)(2013),45,2130-2135；Wing S.等人,国际生物化学与细胞生物学杂志(Int.J.Biochem.Cell Biol.)(2016),79,426-468；Wiles B.等人,分子生物细胞(Mol.Biol.Cell)(2015),26,913-923；Combaret L.等人,美国生理学内分泌代谢杂志(Am.J.Physiol.Endocrinol.Metab.)(2005),288,E693-700，其各自通过引用并入本文)。已知与病症(例如恶病质)相关的肌肉消耗损害生活质量和治疗反应，从而增加癌症患者的发病率和死亡率。肌肉消耗还与其他严重疾病有关，例如HIV/AIDS、心力衰竭、类风湿性关节炎和慢性阻塞性肺病(Wiles B.等人,分子生物细胞(Mol.Biol.Cell)(2015),26,913-923)。肌肉消耗还是衰老的突出特征。
除了上述病理病况之外，USP19还可能通过调节重要底物(例如α-突触核蛋白或含聚谷氨酰胺蛋白、Ataxin3、亨廷顿蛋白)对退行性疾病(包括但不限于帕金森病和其他朊病毒样传播病症)的发病机制产生影响(He W.等人,美国科学公共图书馆(PLoS ONE)(2016),11,e0147515；Bieri G.等人,疾病神经生物学(Neurobiol Dis.)(2018),109B,219-225)。通过USP19的活性调节coronin 2A(CORO2A)已被证明影响视黄酸受体(RAR)的转录抑制活性，表明USP19还可能参与RAR介导的脂肪生成的调节(Lim K.等人,肿瘤靶标(Oncotarget)(2016),7,34759-34772)。
USP19与人病理学中涉及的众多蛋白之间已建立且不断增长的联系表明，USP19的小分子抑制剂可能具有有益于人健康的广泛治疗应用。然而，就目前所知，尚未报道靶向USP19的抑制剂，因此鉴定具有药物样潜力的此类抑制剂仍然是最重要和高度优先的。
发明内容
在第一方面，提供了式(I)的化合物：
其中
R0是H、NH2、F或OCH3；
R1是任选取代的C1-C6烷基、乙基环丙基、乙基环丁基、任选取代的C5-C8芳基、任选取代的C3-C8杂芳基、任选取代的C3-C8杂环烷基、NRaRb、NRaCH2Rb、ORa或OCH2Ra
其中Ra和Rb独立地选自H、C1-C6烷基、CF3、任选取代的C3-C6环烷基、任选取代的C5-C8芳基、任选取代的C6-C9芳烷基和任选取代的C2-C8杂芳基，并且其中当R1是NRaCH2Rb时，亚甲基基团可以任选地被CF3取代，
或R1是NRaRb并且Ra和Rb与它们所附接的N一起形成任选取代的C2-C9杂环；
R2和R3独立地选自H和C1-C6烷基，或与它们所附接的碳一起形成C3-C6环烷基或C3-C6杂环烷基；
X不存在，是C、CR4a、CR4aR4b、N、NR4a或C＝O，
其中R4a和R4b独立地选自H、任选取代的C1-C6烷基和卤素；
或其中R4a和R4b一起形成包括它们所附接的碳的C3-C6环烷基或C3-C6杂环烷基；
Y是C、CR5、CR5R6、N、NR5或O，
其中R5和R6独立地选自H、卤素、任选取代的C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、任选取代的C3-C6环烷基、任选取代的C3-C6杂环烷基、任选取代的C5-C8芳基、任选取代的C6-C9芳基烷基、任选取代的C3-C8杂芳基、CH2OH、NR’R”、NS(O)R’R”、SO2R’、C(O)R’、COR’、C(O)OR’、C(O)NR’R”、OR’，其中R’和R”独立地选自H、C1-C6烷基、C5-C8芳基、C6-C9芳基烷基和C3-C8杂芳基，或其中R5是NR’R”并且R’和R”一起形成包括它们所附接的氮的任选取代的C3-6杂环烷基，
或其中R5和R6一起形成包括它们所附接的碳的C3-6环烷基或C3-C6杂环烷基；
Z是N、NR7、C、CR7、CR7R8或C＝O，
其中R7和R8独立地选自H、卤素、氰基、氧代、任选取代的C1-C6烷基、C2-C6烯烃、C2-C6炔烃、C3-C6环烷基、任选取代的C3-C6杂环烷基、C5-C8芳基、C6-C9芳基烷基、C3-C8杂芳基、CN、C(O)ORc、CONRcRd、NRcRd、NS(O)RcRd、S(O)(Rc)NRd、SORc、SO2Rc和SRc，其中Rc和Rd独立地是H、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C5-C6芳基、C6-C9芳基烷基、C3-C6杂芳基、CN、COOH或COCH3，或Rc和Rd与它们所附接的杂原子一起形成任选取代的C3-C7杂环；
或其中R7和R8一起形成包括它们所附接的碳的C3-6环烷基或C3-C6杂环烷基；
M不存在，是C、CR13或CR13R14，其中R13和R14独立地选自H和C1-C6烷基，或其中R13和R14与它们所附接的碳一起形成C3-C6环烷基或C3-C6杂环烷基；
和
A是CR9、CHR9、N、NR9、S或O；
D是CR9、CHR9、N或NR9，
G不存在，是CR9、CHR9或N，
其中R9独立地选自H、卤素、C1-C6烷基、CF3和OR*，其中R*选自任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C3-C6环烷基和任选取代的C3-C6杂环烷基，
E是CR10、CHR10、N、NR10、S或O，
其中R10选自H、卤素、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C5-C8芳基、C6-C9芳基烷基、C4-C8杂芳基、SRx、ORx、NRxRy和NS(O)RxRy、S(O)(Rx)NRy
其中Rx和Ry独立地选自H、C1-C6烷基、CF3、C3-C6环烷基、C5-C8芳基、C6-C9芳烷基、C4-C8杂芳基、COOH、酰氨基、氰基、C2-C6烯烃、C2-C6炔烃，或其中Rx和Ry与它们所附接的氮一起形成任选取代的C4-C6杂环烷基；
或A、D、E和G均不存在，任选地其中X和M不存在，或任选地其中Y和Z一起形成任选取代的C5-C6芳基或C3-C6杂芳基稠合环，或Z和M一起形成任选取代的C5-C6芳基或C5-C6杂芳基稠合环；
或具有选自以下结构的化合物：
或其立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐。
第二方面提供了药物组合物，其包含根据第一方面的化合物或其立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体或稀释剂。
USP19与许多疾病和病况相关，包括(但不限于)癌症和肿瘤病况。通过RNAi敲除USP19导致p27Kip1蓄积并抑制细胞增殖(Lu L.等人,美国科学公共图书馆(PLoS ONE)(2011),6,e15936)。还发现USP19与细胞凋亡抑制剂(IAP，包括c-IAP1和c-IAP2)相互作用(Mei Y.等人,生物化学杂志(J.Biol.Chem.)(2011),286,35380-35387)。USP19敲低降低这些c-IAP的总水平，而过表达增加BIRC2/cIAP1和BIRC3/cIAP2的水平。USP19敲低还以BIRC2/c-IAP1和BIRC3/c-IAP2依赖性方式增强TNFα诱导的胱天蛋白酶激活和细胞凋亡。最近还表明USP19通过稳定辅助受体LRP6参与Wnt信号传导通路(Perrody E.等人,eLife(2016),5,e19083)，并通过HDAC1和HDAC2蛋白参与调节DNA修复过程，尤其是染色体稳定性和完整性(Wu M.等人,肿瘤靶标(Oncotarget)(2017),8,2197-2208)。
本文进一步证明，如第一方面所述的USP19抑制剂化合物在癌细胞系中表现出细胞渗透性和有效的靶标接合。癌细胞中的细胞渗透性和靶标接合与肌细胞中观察到的相当。如本文所证明的，USP19抑制剂对肌肉消耗表现出有效的体内治疗效果。因此，通过扩展，由于在癌细胞中观察到类似的靶标接合，因此由于USP19与上述致癌过程的关联，预期药理学USP19抑制剂将有效地在癌症中发挥治疗作用。
体内研究还表明，缺乏USP19基因的小鼠(USP19 KO小鼠)在喂食高脂肪饲料时表现出脂肪量减少(Coyne E,等人,糖尿病学(Diabetologia)(2019),62,136-146，其通过引用并入本文)。当喂食高脂肪饲料时，USP19KO小鼠还表现出更高的葡萄糖耐量和更高的胰岛素敏感性。
这些基因敲除研究描述了USP19与肥胖以及USP19与胰岛素敏感性之间的联系。然而，在本文提供的数据之前，尚未描述过体内研究证明USP19的药理学抑制剂是治疗肥胖的有效方法。类似地，在本文提供的数据之前，没有体内研究证明USP19的药理学抑制剂可以有效增加胰岛素敏感性。
USP19还涉及肌肉萎缩、肌肉消耗综合征和其他骨骼肌肉萎缩病症(Wing S.,国际生物化学与细胞生物学杂志(Int.J.Biochem.Cell Biol.)(2013),45,2130-2135；Wing S.等人,国际生物化学与细胞生物学杂志(Int.J.Biochem.Cell Biol.)(2016),79,426-468；Wiles B.等人,分子生物细胞(Mol.Biol.Cell)(2015),26,913-923；Combaret L.等人,美国生理学内分泌代谢杂志(Am.J.Physiol.Endocrinol.Metab.)(2005),288,E693-700)。例如，研究证明USP19沉默诱导肌原纤维蛋白的表达并促进肌生成(Sundaram P.等人,美国生理学内分泌代谢杂志(Am.J.Physiol.Endocrinol.Metab.)(2009),297,E1283-90；OgawaM.等人,生物化学杂志(J.Biol.Chem.)(2011),286,41455-41465；Ogawa M.等人,内分泌杂志(J.Endocrinol.)(2015),225,135-145)。
敲除研究表明，缺乏USP19基因的小鼠对肌肉消耗有抵抗力，这是对糖皮质激素(肌肉萎缩的常见全身性病因)的反应，以及对去神经支配(失用性萎缩模型)的反应(Bedard N.等人,美国实验生物学联合会会刊(FASEB J.)(2015),29,3889-3898，其通过引用并入本文)。
如所附实施例中所阐述，本文证明了在野生型体内模型中用USP19抑制剂进行药理学处理可以诱导治疗效果。
特别地，证明了在体内模型中USP19抑制剂可以减少脂肪沉积，表明USP19抑制剂可以成为肥胖的有效治疗方法。
类似地，本文证明了在肌肉萎缩体内模型中USP19抑制剂可以减少肌肉质量的损失。
类似地，本文证明了USP19抑制剂可以治疗胰岛素抵抗的症状，如对葡萄糖的反应改善所表明。
根据本发明的化合物能够选择性抑制USP19活性。实施例进一步证明有效抑制USP19活性的化合物可以是有效的治疗性化合物。因此，本发明的化合物适用于治疗方法。适合用本发明化合物治疗的适应症包括：治疗和预防癌症和肿瘤病况；免疫和炎症病况，例如通过促进抗病毒免疫应答；治疗和预防肌肉萎缩，例如恶病质和少肌症；治疗和预防肥胖；治疗和预防胰岛素抵抗，例如糖尿病；治疗和预防神经退行性疾病，包括帕金森病和其他基于朊病毒的病症。
因此，在还一方面，提供了根据第一方面的化合物或其立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，或根据第二方面的药物组合物，其用于治疗。
在还一方面，提供了根据第一方面的化合物或其立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，或根据第二方面的药物组合物，其用于治疗或预防癌症的方法。在某些优选的实施方案中，待治疗的癌症是乳腺癌或神经母细胞瘤。
在还一方面，提供了根据第一方面的化合物或其立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，或根据第二方面的药物组合物，其用于治疗或预防肌肉萎缩症、任选的恶病质或少肌症的方法。
在还一方面，提供了根据第一方面的化合物或其立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，或根据第二方面的药物组合物，其用于治疗或预防肥胖的方法。
在还一方面，提供了根据第一方面的化合物或其立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，或根据第二方面的药物组合物，其用于治疗或预防胰岛素抵抗的方法。
在还一方面，提供了根据第一方面的化合物或其立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，或根据第二方面的药物组合物，其用于治疗或预防II型糖尿病的方法。
在还一方面，提供了根据第一方面的化合物或其立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，或根据第二方面的药物组合物，其用于治疗或预防帕金森病的方法。
在还一方面，提供了治疗癌症的方法，其包括向受试者施用有效量的根据第一方面的化合物或其立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，或根据第二方面的药物组合物。
在还一方面，提供了治疗肌肉萎缩的方法，其包括向受试者施用有效量的根据第一方面的化合物或其立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，或根据第二方面的药物组合物。
在还一方面，提供了治疗帕金森病的方法，其包括向受试者施用有效量的根据第一方面的化合物或其立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，或根据第二方面的药物组合物。
该化合物或其立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐可以用作单药治疗或用作与放疗和/或另外的治疗剂的联合治疗。
本文提供的化合物的其他优选的实施方案出现在整个说明书中，特别是在实施例中。特别优选的是那些经测试具有更高活性的指定化合物。具有较高活性的化合物比具有较低活性的化合物更优选。
如本文所限定的每个方面或实施方案可以与任何其他方面或实施方案组合，除非明确相反地指示。具体地，被指示为优选或有利的任何特征可以与被指示为优选或有利的任何其他特征组合。
附图说明
图1：USP19药理学抑制对胫骨前肌质量的影响。(A)用溶媒或USP19抑制剂化合物ADC-141处理的小鼠的胫骨前肌质量(mg)。提供了经历坐骨神经去神经支配(DEN)的肢体以及受神经支配的肢体(INN)的肌肉的质量。(B)溶媒和USP19抑制剂(ADC-141)处理的小鼠中由于去神经支配而导致的胫骨前肌质量损失百分比。百分比计算为同一小鼠受神经支配的肢体的肌肉质量的比例。(C)由于溶媒处理和USP19抑制剂(ADC-141)处理的小鼠去神经支配而导致胫骨前肌质量的损失(以mg计)。P<0.025。
图2：USP19药理学抑制对腓肠肌质量的影响。(A)用溶媒或USP19抑制剂化合物ADC-141处理的小鼠的腓肠肌质量(mg)。提供了经历坐骨神经去神经支配(DEN)的肢体以及受神经支配的肢体(INN)的肌肉的质量。(B)溶媒和USP19抑制剂(ADC-141)处理的小鼠中由于去神经支配而导致腓肠肌质量损失百分比。百分比计算为同一小鼠受神经支配的肢体的肌肉质量的比例。(C)由于溶媒处理和USP19抑制剂(ADC-141)处理的小鼠去神经支配而导致腓肠肌质量损失(以mg计)。
图3：(A)USP19药理学抑制对脂肪量的影响。从溶媒和USP19抑制剂(ADC-141)处理的小鼠收集附睾脂肪垫，USP19抑制剂处理的小鼠显示脂肪质量显著减少。(B)USP19药理学抑制对肝脏质量的影响。从溶媒和USP19抑制剂(ADC-141)处理的小鼠收集肝脏。观察到肝脏质量增加，可能是由于药物化合物在肝脏中蓄积所致。(C)溶媒处理的对照DIO小鼠的总体体重百分比变化。USP19抑制剂5mg/kg ip BID、USP19抑制剂25mg/kg ip BID或阳性对照利拉鲁肽0.1mg/kg sc BID(分别为从左到右的柱状图)；(D)溶媒、USP19抑制剂5mg/kg、USP19抑制剂25mg/kg和利拉鲁肽处理的小鼠的总体瘦质量百分比变化和(E)总体脂肪质量百分比变化(分别从左到右)。***p<0.001vs溶媒
图4：USP19抑制剂化合物在乳腺癌、神经母细胞瘤和骨骼肌细胞系中的细胞靶标接合。通过密度测定法测定EC50。
图5：肥胖小鼠对口服葡萄糖耐量试验(OGTT)的反应。(A)溶媒处理的对照小鼠(圆圈)、USP19抑制剂5mg/kg ip BID(三角形)、USP19抑制剂25mg/kg ip BID(实心圆圈)或阳性对照利拉鲁肽0.1mg/kg sc BID(菱形)的血浆葡萄糖反应时间线；(B)溶媒、USP19抑制剂5mg/kg、USP19抑制剂25mg/kg和利拉鲁肽的葡萄糖AUC(mM.hr)和(C)胰岛素AUC(ng.hr/ml)(分别从左到右)。**p<0.01vs溶媒；***p<0.001vs溶媒。
具体实施方式
除非本文另有定义，与本发明相关的科学和技术术语应具有本领域普通技术人员通常理解的含义。术语的含义和范围应该清楚，但是，如果存在任何潜在的歧义，本文提供的定义优先于任何字典或外部定义。
如说明书和所附权利要求中所使用，除非有相反说明，否则以下术语具有所指示的含义：
术语“烷基基团”(单独使用或与其他术语组合使用)意指通常含有1至15个碳原子(例如1至10个、1至8个、1至6个或1至4个碳原子)的直链或支链饱和烃取代基。“Cn烷基”基团是指含有n个碳原子的脂肪族基团。例如，C1-C10烷基基团含有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子。通过碳原子附接至烷基基团。此类取代基的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基(支链或直链)、己基(支链或直链)、庚基(支链或直链)、辛基(支链或直链)、壬基(支链或直链)和癸基(支链或直链)。
术语“烯基基团”(单独使用或与其他术语组合使用)意指含有一个或多个双键且通常含有2至15个碳原子(例如2至10个、2至8个、2至6个或2至4个碳原子)的直链或支链烃取代基。此类取代基的实例包括乙烯基(乙烯基)、1-丙烯基、3-丙烯基、1,4-戊二烯基、1,4-丁二烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、戊烯基和己烯基。
术语“炔基基团”(单独使用或与其他术语组合使用)意指含有一个或多个三键且通常含有2至15个碳原子(例如2至10个、2至8个、2至6个或2至4个碳原子)的直链或支链烃取代基。此类取代基的实例包括乙炔基、1-丙炔基、3-丙炔基、1-丁炔基、3-丁炔基和4-丁炔基。
术语“杂烷基基团”(单独使用或与另一个术语组合使用)意指通常含有1至15个原子(例如1至10个、1至8个、1至6个或1至4个原子)的直链或支链饱和烃基取代基，其中至少一个原子是杂原子(即氧、氮或硫)，其余原子是碳原子。“Cn杂烷基”基团是指含有n个碳原子和一个或多个杂原子(例如一个杂原子)的脂肪族基团。例如，除了一个或多个杂原子(例如一个杂原子)之外，C1-C10杂烷基基团还含有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子。通过碳原子或通过杂原子发生附接至杂烷基。
术语“杂烯基基团”(单独使用或与其他术语组合使用)意指含有一个或多个碳-碳双键且通常含有2至15个原子(例如2至10个、2至8个、2至6个或2至4个原子)的直链或支链烃取代基，其中至少一个原子是杂原子(即氧、氮或硫)，其余原子是碳原子。“Cn杂烯基”基团是指含有n个碳原子和一个或多个杂原子(例如一个杂原子)的脂肪族基团。例如，除了一个或多个杂原子(例如一个杂原子)之外，C2-C10杂烯基基团还含有2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子。通过碳原子或通过杂原子发生附接至杂烯基。
术语“杂炔基基团”(单独使用或与其他术语组合使用)意指含有一个或多个碳-碳三键且通常含有2至15个碳原子(例如2至10个、2至8个、2至6个或2至4个碳原子)的直链或支链烃取代基，其中至少一个原子是杂原子(即氧、氮或硫)，其余原子是碳原子。“Cn杂炔基”基团是指含有n个碳原子和一个或多个杂原子(例如一个杂原子)的脂肪族基团。例如，除了一个或多个杂原子(例如一个杂原子)之外，C2-C10杂炔基基团还含有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子。通过碳原子或通过杂原子发生附接至杂炔基。
术语“碳环基基团”(单独使用或与其他术语组合使用)意指饱和环状(即“环烷基”)、部分饱和环状(即“环烯基”)或完全不饱和(即“芳基”)烃取代基。含有3至14个碳环原子(“环原子”是键合在一起形成环状取代基的一个或多个环的原子)。碳环基可以是单环或多环结构。
碳环基可以是单环结构，其通常含有3至8个环原子，更通常3至7个环原子，并且更通常5至6个环原子。此类单环碳环基的实例包括环丙基(环丙烷基)、环丁基(环丁烷基)、环戊基(环戊烷基)、环戊烯基、环戊二烯基、环己基(环己烷基)、环己烯基、环己二烯基和苯基。可选地，碳环基可以是多环的(即可以含有多于一个环)。多环碳环基的实例包括桥连、稠合和螺环碳环基。在螺环碳环基中，两个不同的环共有一个原子。螺环碳环基的实例是螺戊基。在桥连碳环基中，环共享至少两个共同的不相邻原子。桥连碳环基的实例包括双环[2.2.1]庚基、双环[2.2.1]庚-2-烯基和金刚烷基。在稠合环碳环基体系中，两个或更多个环可以稠合在一起，使得两个环共享一个共同键。二或三稠合环碳环基的实例包括萘基、四氢萘基(四氢化萘基)、茚基、茚满基(二氢茚基)、蒽基、菲基和十氢化萘基。
术语“环烷基基团”(单独使用或与其他术语组合使用)是指含有3至14个碳环原子的饱和环状烃取代基。环烷基可以是单个碳环，其通常含有3至8个碳环原子，更通常含有3至6个环原子。应当理解，经环烷基基团的环原子附接至环烷基。单环环烷基的实例包括环丙基、环丁基、环戊基和环己基。可选地，环烷基可以是多环的或含有多于一个环。多环环烷基包括桥连、稠合和螺环环烷基。
术语“烷基环烷基”是指经烷基链附接的环烷基取代基。烷基环烷基取代基的实例包括环己基乙烷，其中环己烷经乙烷连接基附接。其他实例包括环丙基乙烷、环丁基乙烷、环戊基乙烷、环庚基乙烷、环己基甲烷。在“Cn”烷基环烷基中，Cn包括烷基链和环烷基环中的碳原子。例如，环己基乙烷是C8烷基环烷基。
术语“芳基基团”(单独使用或与其他术语组合使用)意指含有5至14个碳环原子，任选5至8个、5至7个，任选5至6个碳环原子的芳香族碳环基。“Cn芳基”基团是指含有n个碳原子的芳香族基团。例如，C6-C10芳基基团含有6、7、8、9或10个碳原子。优选芳基基团是C6芳基——即苯基。通过碳原子发生附接至芳基基团。芳基可以是单环的或多环的(即可以含有多于一个环)。在多环芳环的情况下，多环体系中仅需要一个环是不饱和的，而其余环可以是饱和的、部分饱和的或不饱和的。通过环中所含的碳原子发生附接至芳基基团。芳基基团的实例包括苯基、萘基、吖啶基、茚基、茚满基和四氢萘基。
术语“芳基烷基”是指经烷基链附接的芳基取代基。芳烷基取代基的实例包括苄基和苯乙烷/乙苯，其中乙烷链在附接点连接至苯基基团。在“Cn”芳基烷基中，Cn包括烷基链和芳基基团中的碳原子。例如，乙苯是C8芳烷基。
术语“杂环基基团”(单独使用或与其他术语组合使用)是指饱和的(即“杂环烷基”)、部分饱和的(即“杂环烯基”)或完全不饱和的(即“杂芳基”)环结构，其含有总共3至14个环原子，其中至少一个环原子是杂原子(即氧、氮或硫)，其余环原子是碳原子。杂环基基团可以例如含有一个、两个、三个、四个或五个杂原子。可以通过环中所含的碳原子和/或一个或多个杂原子发生附接至杂环基基团。杂环基可以是单环或多环结构。
杂环基基团可以是单环，其通常含有3至7个环原子，更通常3至6个环原子，甚至更通常5至6个环原子。单环杂环基的实例包括呋喃基、二氢呋喃基、四氢呋喃基、噻吩基(硫呋喃基)、二氢噻吩基、四氢噻吩基、吡咯基、吡咯啉基、吡咯烷基、咪唑基、咪唑啉基、咪唑烷基、吡唑基、吡唑啉基、吡唑烷基、三唑基、四唑基、噁唑基、噁唑烷基、异噁唑烷基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、噻唑啉基、异噻唑啉基、噻唑烷基、异噻唑烷基、硫代二唑基、氧杂二唑基(包括1,2,3-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基(呋吖基)或1,3,4-噁二唑基)、噁三唑基、二噁唑基氧硫杂基、吡喃基、二氢吡喃基、四氢吡喃基、噻喃基、四氢噻喃基、吡啶基(吖嗪基)、哌啶基、二嗪基(包括哒嗪基(1,2-二嗪基)、嘧啶基(1,3-二嗪基)或吡嗪基(1,4-二嗪基))、哌嗪基、三嗪基(包括1,3,5-三嗪基、1,2,4-三嗪基和1,2,3-三嗪基)、噁嗪基(包括1,2-噁嗪基、1,3-噁嗪基或1,4-噁嗪基)、噁二嗪基(包括1,2,3-噁二嗪基、1,2,4-噁二嗪基、1,4,2-噁二嗪基或1,3,5-噁二嗪基)、吗啉基、氮杂基(azepinyl)、氧杂基(oxepinyl)、硫杂基(thiepinyl)和二氮杂基。
可选地，杂环基基团可以是多环的(即可以含有多于一个环)。多环杂环基基团的实例包括桥连、稠合和螺环杂环基基团。在螺环杂环基基团中，两个不同的环共有一个原子。在桥连杂环基中，环共享至少两个共同的不相邻原子。在稠合环杂环基中，两个或更多个环可以稠合在一起，使得两个环共享一个共同的键。含有两个或三个环的稠合环杂环基基团的实例包括中氮茚基、吡喃并吡咯基、4H-喹嗪基、嘌呤基、萘啶基、吡啶并吡啶基(包括吡啶并[3,4-b]-吡啶基、吡啶并[3,2-b]-吡啶基或吡啶并[4,3-b]-吡啶基)和蝶啶基。稠合环杂环基基团的其他实例包括苯并稠合杂环基基团，例如吲哚基、异吲哚基(异苯并唑基、假异吲哚基)、吲哚基(假吲哚基)、异吲唑基(苯并吡唑基)、苯并嗪基(包括喹啉基(1-苯并嗪基)或异喹啉基(2-苯并嗪基))、二氮杂萘基、喹喔啉基、喹唑啉基、苯并二嗪基(包括噌啉基(1,2-苯并二嗪基)或喹唑啉基(1,3-苯并二嗪基))、苯并吡喃基(包括苯并二氢吡喃基或异苯并二氢吡喃基)、苯并呋喃基、二氢苯并呋喃基和苯并异噁嗪基(包括1,2-苯并异噁嗪基或1,4-苯并异噁嗪基)。
术语“杂环烷基基团”(单独使用或与其他术语组合使用)意指饱和杂环基。“Cn杂环烷基”基团是指除了至少一个杂原子(例如氮之外)还含有n个碳原子的环状脂肪族基团。例如，除了至少一个杂原子之外，C1-C10杂环烷基还含有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳环原子。通过碳原子或至少一个杂原子中的一个发生附接至杂环烷基基团。
术语“烷基杂环烷基”是指经烷基链附接的杂环烷基取代基。在“Cn”烷基杂环烷基中，Cn包括烷基链和杂环烷基环中的碳原子。例如，乙基哌啶是C7烷基杂环烷基。
术语“杂芳基基团”(单独使用或与其他术语组合使用)意指含有5至14个环原子的芳香族杂环基。“Cn杂芳基”基团是指含有n个碳原子和至少一个杂原子的芳香族基团。例如，除了至少一个杂原子之外，C2-C10芳基基团还含有2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子。通过碳原子或通过杂原子发生附接至杂芳基基团。杂芳基基团可以是单环的或多环的。杂芳基可以是单环或2或3个稠合环。单环杂芳基基团的实例包括6元环，例如吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基和1,3,5-三嗪基、1,2,4-三嗪基或1,2,3-三嗪基；5元环例如咪唑基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、1,2,3-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基或1,3,4-噁二唑基和异噻唑基。多环杂芳基基团可以是2或3个稠合环。多环杂芳基基团的实例包括6/5元稠合环基团，例如苯并硫代呋喃基、苯并异噁唑基、苯并噁唑基和嘌呤基；以及6/6元稠合环基团，例如苯并吡喃基、喹啉基、异喹啉基、辛啉基、喹唑啉基和苯并噁嗪基。在多环杂芳基基团的情况下，多环体系中仅需要一个环是不饱和的，而其余环可以是饱和的、部分饱和的或不饱和的。
含氮杂芳基基团是其中环中的一个或多个杂原子中的至少一个是氮的杂芳基。
术语“杂芳基烷基”是指经烷基链附接的杂芳基取代基。杂芳基烷基取代基的实例包括乙基吡啶，其中乙烷链将吡啶基团与附接点连接。
术语“氨基”是指-NRmRn基团。氨基可以任选地被取代。在未取代的氨基中，Rm和Rn是氢。在取代的氨基中，Rm和Rn各自独立地可以是但不限于氢、烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、烷基环烷基、烷基杂环烷基、烷氧基、磺酰基、烯基、烷酰基、芳基、芳基烷基或杂芳基，条件是Rm和Rn不都是氢。在取代的氨基中，Rm和Rn可以环化形成环状氨基，例如，吡咯烷基或哌啶基。这种环状氨基可以掺入其他杂原子，例如形成哌嗪或吗啉基团。这种环状氨基可以任选地被例如氨基、羟基或氧基取代。例如，在取代的氨基中，Rm和Rn可以独立地选自H；任选地被OH或卤素取代的C1-C3烷基；任选地被甲基和/或卤素取代的C3-C4环烷基；任选地被氧代、甲基或氟甲基取代的C3-C4杂环烷基；任选地被甲基取代的C3-C5杂芳基；Boc；COOH；和COOCH3；条件是Rm和Rn中至少一个不是H。
术语“氨基烷基”基团是指-RaNRmRn基团，其中Ra是如上所定义的烷基链并且NRmRn是如上所定义的任选取代的氨基。“Cn氨基烷基”基团是指含有n个碳原子的基团。例如，C1-C10氨基烷基含有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子。当氨基烷基基团的氨基是取代氨基时，碳原子数包括取代基中的任何碳原子。通过R烷基基团的碳原子发生附接至氨基烷基基团。氨基烷基取代基的实例包括甲胺、乙胺、甲氨基甲基、二甲氨基甲基、甲氨基乙基、二甲氨基乙基、甲基吡咯烷和乙基吡咯烷
术语“酰胺基”是指-C(＝O)-NR-基团。可以通过碳或氮原子进行附接。例如，酰胺基可以仅经碳原子作为取代基附接，在这种情况下，氮原子具有两个附接的R基团(-C(＝O)-NR2)。酰胺基可以仅通过氮原子附接，在这种情况下，碳原子具有附接的R基团(-NR-C(＝O)R)。
术语亚磺酰亚胺是指S-连接的或N-连接的亚磺酰亚胺取代基，即，可以通过硫或氮原子附接。例如，可以经硫原子附接亚磺酰亚胺基团作为取代基，在这种情况下，除了氧代基团之外，硫还具有单个R基团，并且与硫结合的氮原子具有一个附接的R基团——即该基团是–S(O)(R)NR’。作为进一步的实例，可以经氮原子附接亚磺酰亚胺基团作为取代基，在这种情况下，除了氧代基团之外，硫原子还具有两个附接的R基团——即，该基团是–NS(O)RR’。在未取代的亚砜亚胺基团中，R和R’各自是H。可选地，亚砜亚胺基团可以在R和R’中的一个或两者处被取代，例如以形成二甲基亚砜亚胺，其中R和R’均是甲基。
术语“醚”是指-O-烷基基团或-烷基-O-烷基基团，例如甲氧基基团、甲氧基甲基基团或乙氧基乙基基团。醚的烷基链可以是直链、支链或环状链。醚基团可以任选地被一个或多个取代基取代(“取代的醚”)。Cn醚是指在醚基团的所有烷基链中具有n个碳的醚基团。例如，CH(CH3)-O-C6H11醚是C8醚基团。
术语“烷氧基”是指-O-烷基。烷氧基可以指直链、支链或环状的饱和或不饱和的氧-烃链，包括，例如，甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、叔丁氧基和戊氧基。烷氧基可以任选地被一个或多个烷氧基取代基取代(“取代的烷氧基”)。
术语“芳氧基”是指-O-芳基，例如苯氧基。芳氧基取代基本身可以任选地被取代，例如被卤素取代。
术语“烷基酯”是指-C(O)OR基团，其中R是如本文所定义的烷基。烷基酯的实例是甲酸乙酯——即R是乙基基团。
术语“羟基”是指-OH基团。
术语“氧代基团”是指(＝O)基团，即通过双键与另一个原子连接的取代基氧原子。例如，羰基(-C(＝O)-)是通过双键与氧原子连接的碳原子，即附接至碳原子的氧代基团。羰基取代基的实例包括醛(-C(＝O)H)、乙酰基(-C(＝O)CH3)和羧基/羧酸基团(-C(＝O)OH)。
术语“卤素”是指选自氯、氟、溴和碘的取代基。优选地，卤素取代基选自氯和氟。
烷基、烯基、炔基、碳环基(包括环烷基、环烯基和芳基)、杂环基(包括杂环烷基、杂环烯基、杂芳基、含氮杂环基)、氨基、酰胺基、酯、醚、烷氧基或磺酰胺基团可以任选地被一个或多个取代基(其可以是相同的或不同的)取代。可以通过烷基、烯基、炔基、碳环基(包括环烷基、环烯基和芳基)、杂环基(包括杂环烷基、杂环烯基、杂芳基、含氮杂环基、含氮杂芳基)、氨基、酰胺基、酯、醚、烷氧基或磺酰胺基团中的碳原子和/或杂原子附接取代基。术语“取代基”(或“基团”)包括但不限于烷基、取代的烷基、杂烷基、取代的杂烷基、芳烷基、取代的芳烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、卤素、羟基、氰基、氨基、酰胺基、烷基氨基、芳基氨基、碳环基、环烷基、取代的环烷基、杂环烷基、取代的杂环烷基、环烯基、取代的环烯基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、硝基、硫基、烷酰基、羟基、芳氧基、烷氧基、烷硫基、芳硫基、芳烷氧基、芳烷硫基、羧基、烷氧基羰基、氧代、烷基磺酰基、芳基磺酰基和亚磺酰亚胺基。
在某些方面，取代基是烷基、取代的烷基、杂烷基、取代的杂烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、卤素、羟基、氰基、氨基、酰胺基、烷基氨基、芳基氨基、碳环基、环烷基、取代的环烷基、杂环烷基、取代的杂环烷基、环烯基、取代的环烯基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、硝基、硫基、烷酰基、羟基、芳氧基、烷氧基、烷硫基、芳硫基、芳烷氧基、芳烷硫基、羧基、烷氧基羰基、氧代、烷基磺酰基和芳基磺酰基。
如果基团(例如烷基)是“任选取代的”，则应理解该基团具有一个或多个附接的(取代的)取代基或不具有任何附接的(未取代的)取代基。
如果基团被另外的任选取代的基团取代，则应当理解第一取代基本身可以是未取代的或取代的。
为了完整，还应注意本文使用的某些化学式定义了离域体系。该定义在本领域中被称为芳香性的定义，并且可以指示例如含有(4n+2)个电子的平面单环、二环或三环体系的存在，其中n是整数。换言之，这些体系可以表现出Hückel芳香性。
在任何方面，本发明的化合物可以具有立体化学的某些方面。例如，化合物可以具有手性中心和/或对称面和/或轴。因此，除非另有说明，否则化合物可以作为单一立体异构体、单一非对映异构体、立体异构体的混合物或作为外消旋混合物提供。本领域已知立体异构体是具有相同分子式和键合原子序列但其原子和/或基团的空间取向不同的分子。
此外，本发明的化合物可以表现出互变异构现象。每种互变异构形式均落入本发明的范围内。
另外，本发明的化合物可以作为前药提供。前药通常在体内从一种形式转化成本文所述药物的活性形式。
另外，应当理解本文描述的元素可以是共同同位素或除了共同同位素之外的同位素。例如，氢原子可以是1H、2H(氘)或3H(氚)。
此外，本发明的化合物可以以其药学上可接受的盐的形式或作为共晶提供。
术语“药学上可接受的盐”是指通过酸与碱加成形成的离子化合物。该术语是指在本领域中被认为适合用于与患者接触(例如在体内)的盐，并且药学上可接受的盐通常因其无毒、无刺激的特性而被选择。
术语“共晶”是指多组分分子晶体，其可以包含非离子相互作用。
药学上可接受的盐和共晶可以通过以下进行制备：通过离子交换色谱，或通过使化合物的游离碱或酸形式与化学计量的量或与过量的期望成盐无机或有机酸或碱在一种或多种合适的溶剂中反应，或通过将化合物与另一种能够形成共晶的药学上可接受的化合物混合。
本领域已知的通常适用于与患者接触的盐包括衍生自无机酸和/或有机酸的盐，该无机酸和/或有机酸包括氢溴酸盐、盐酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、硝酸盐、乙酸盐、草酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、硬脂酸盐、月桂酸盐、苯甲酸盐、乳酸盐、磷酸盐、甲苯磺酸盐、柠檬酸盐、马来酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐和酒石酸盐。这些可以包括基于碱金属和碱土金属的阳离子，例如钠、钾、钙和镁，以及铵、四甲基铵、四乙基铵。进一步参考调查合适的药学上可接受的盐的许多文献来源，例如由IUPAC出版的药用盐手册。
此外，本发明的化合物有时可以作为两性离子存在，这被认为是本发明的一部分。
如本文所用，USP19抑制剂是指作用于USP19以降低酶活性的化合物。USP19抑制剂的实例是本文的示例性化合物。优选地，USP19抑制剂表现出小于5μM，优选小于0.5μM的IC50。
如本文所用，“肥胖”是指以体内脂肪过多为特征的医学病况。肥胖的特征可以在于例如体重指数(BMI)大于30。肥胖的治疗可以通过例如以百分比和/或绝对质量形式表示的身体脂肪的减少来指示。肥胖的治疗还可以通过与治疗前相比受试者体内脂肪蓄积速率的降低来例证。
如本文所用，“胰岛素抵抗”是指以对胰岛素的异常弱反应为特征的医学病况。由于胰岛素抵抗通常不通过外源胰岛素治疗来治疗，所以抵抗通常是针对受试者身体产生的胰岛素，尽管受试者也可以对外源胰岛素有抵抗。“胰岛素抵抗”涵盖“糖尿病前期”和II型糖尿病病况。胰岛素抵抗可以例如通过7.8mmol/L或更高的葡萄糖耐量试验(GTT)血糖来指示。II型糖尿病通常在葡萄糖耐量试验(GTT)血糖达到11.1mmol/L或更高后诊断。
与治疗前相比，受试者的GTT血糖有所改善(即降低)，可以表明胰岛素抵抗得到治疗。与治疗前相比，正常条件下受试者的血糖浓度降低也可以表明治疗。
如本文所用，“肌肉萎缩”和“肌肉消耗”可互换使用，是指受试者肌肉质量减少，包括例如恶病质或少肌症的情况。肌肉萎缩可能是由于暂时或永久残疾、肢体暂时或永久固定、长期卧床、恶病质(例如由于癌症、心力衰竭或慢性阻塞性肺病)或少肌症所致。
肌肉萎缩的治疗可以以减缓萎缩速率为特征——即，治疗导致在给定的时间段内减少肌肉质量损失。优选地，成功的治疗不导致肌肉质量损失。
因此，在第一方面，提供了式(I)的化合物：
其中
R0是H、F、NH2或OCH3；
R1是任选取代的C1-C6烷基、乙基环丙基、乙基环丁基、任选取代的C5-C8芳基、任选取代的C3-C8杂芳基、任选取代的C3-C8杂环烷基、NRaRb、NRaCH2Rb、ORa或OCH2Ra，其中Ra和Rb独立地选自H、C1-C6烷基、CF3、任选取代的C3-C6环烷基、任选取代的C5-C8芳基、任选取代的C6-C9芳烷基和任选取代的C2-C8杂芳基(任选取代的C4-C8杂芳基)，并且其中当R1是NRaCH2Rb时，亚甲基基团可以任选地被CF3取代，
或其中R1是NRaRb并且Ra和Rb与它们所附接的N一起形成任选取代的C2-C9杂环，任选地与它们所附接的N一起形成C3-C5杂环；
R2和R3独立地选自H和C1-C6烷基，或与它们所附接的碳一起形成C3-C6环烷基或杂环烷基；
X不存在，是C、CR4a、CR4aR4b、N、NR4a或C＝O，
其中R4a和R4b独立地选自H、任选取代的C1-C6烷基或卤素；
或其中R4a和R4b一起形成包括它们所附接的碳的C3-C6环烷基或C3-C6杂环烷基；
Y是C、CR5、CR5R6、N、NR5或O，
其中R5和R6独立地选自H、卤素、任选取代的C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、任选取代的C3-C6环烷基、任选取代的C3-C6杂环烷基、任选取代的C5-C8芳基、任选取代的C6-C9芳基烷基、任选取代的C3-C8杂芳基、CH2OH、NR’R”、NS(O)R’R”、SO2R’、C(O)R’、COR’、C(O)OR’、C(O)NR’R’、OR’，其中R’和R”独立地选自H、C1-C6烷基、C5-C8芳基、C6-C9芳基烷基和C3-C8杂芳基，或其中R5是NR’R”并且R’和R”一起形成包括它们所附接的氮的任选取代的C3-6杂环烷基
或其中R5和R6一起形成包括它们所附接的碳的C3-6环烷基或C3-C6杂环烷基；
Z是N、NR7、C、CR7、CR7R8或C＝O，
其中R7和R8独立地选自H、卤素、氰基、氧代、任选取代的C1-C6烷基、C2-C6烯烃、C2-C6炔烃、C3-C6环烷基、任选取代的C3-C6杂环烷基、C5-C8芳基、C6-C9芳基烷基、C3-C8杂芳基、CN、C(O)ORc、CONRcRd、NRcRd、NS(O)RcRd、S(O)(Rc)NRd、SORc、SO2Rc和SRc，其中Rc和Rd独立地是H、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C5-C6芳基、C6-C9芳基烷基、C3-C6杂芳基、CN、COOH或COCH3或Rc和Rd与它们所附接的杂原子一起形成任选取代的C3-C7杂环；
或其中R7和R8一起形成包括它们所附接的碳的C3-6环烷基或C3-C6杂环烷基；
M不存在，是C、CR13或CR13R14，其中R13和R14独立地选自H和C1-C6烷基，或其中R13和R14与它们所附接的碳一起形成C3-C6环烷基或C3-C6杂环烷基；和
A是CR9、CHR9、N、NR9、S或O，
D是CR9、CHR9、N或NR9，
G不存在，是CR9、CHR9或N，
其中R9独立地选自H、卤素、C1-C6烷基、CF3和OR*，其中R*是任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C3-C6环烷基或任选取代的杂环烷基，
E是CR10、CHR10、N、NR10、S或O，
其中R10选自H、卤素、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C5-C8芳基、C6-C9芳基烷基、C4-C8杂芳基、SRx、ORx、NRxRy和NS(O)RxRy、S(O)(Rx)NRy，其中Rx和Ry独立地选自H、C1-C6烷基、CF3、C3-C6环烷基、C5-C8芳基、C6-C9芳烷基、C4-C8杂芳基、COOH、酰氨基、氰基、C2-C6烯烃、C2-C6炔烃，或其中Rx和Ry与它们所附接的氮一起形成任选取代的C4-C6杂环烷基；
或A、D、E和G均不存在，并且X、Y、Z和M如上所定义，并且
任选地其中X和M均不存在，或
任选地其中Y和Z一起形成任选取代的C5-C6芳基或C3-C6杂芳基稠合环，或Z和M一起形成任选取代的C5-C6芳基或C5-C6杂芳基稠合环；
或具有选自以下结构的化合物：
或其立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐。
为了避免疑问，在式(I)中，如果存在位置A、D、E或G中的任一个，则还存在其他位置A、D和E(以及任选的G)中的每一个以形成稠合环体系。
为了避免疑问，当位置X、M或G中的一个不存在时，环的其余成员形成5元环。在X和M不存在的那些实施方案中，其余成员形成4元环。例如，如果M不存在，则环位置Z处的原子与环氮键合。
式(I)中的虚线表示任选的键。即，虚线表示包括位置X、Y、Z、M的环可以是脂肪族的(例如饱和的或部分不饱和的)或芳香族的。类似地，在式(I)中，虚线表示当存在时，包括位置A、D、E和任选的G的环可以是脂肪族的(例如饱和的或部分不饱和的)或芳香族的。
对于式(I)的化合物，对于每个任选取代的基团，存在一个或多个独立选择的任选的取代基。在某些实施方案中，一个或多个任选的取代基中的每一个独立地选自C1-C4烷基、C3-C4环烷基、卤素、CHF2、CF3、羟基、NH2、取代的氨基、NO2、CH2OH、CH2OCH3、甲氧基、OCHF2、OCF3、环丙氧基、苯基、氟取代的苯基(例如二氟取代的苯基)、苄基和氧代。
在某些实施方案中，一个或多个任选的取代基中的每一个独立地选自C1-C4烷基、C3-C4环烷基、卤素、CHF2、CF3、羟基、NH2、NHCH3、NHCH2CH3、NO2、CH2OH、CH2OCH3、甲氧基、OCHF2、OCF3、环丙氧基、苯基、氟取代的苯基(例如二氟取代的苯基)、苄基和氧代。
在R0是H并且R2和/或R3不是H的实施方案中，R0所附接的环碳是手性的。根据实施例中描述的命名惯例，环碳处的(R)-构型被指定为对于其中R0是H并且环碳是手性的示例化合物而言更活跃的立体异构体。当R0是F、NH2或OMe并且R0所附接的环碳是手性时，在示例化合物中该立构中心处的更活跃的构象被指定为(S)-构型。
在式(I)的化合物在R0所附接的环碳的立构中心处是手性的本发明的实施方案中，更活跃的构型是优选的。
在R0是H的实施方案中，优选地该立构中心是(R)-构型。
在R0不是H的实施方案中，优选地该立构中心是(S)-构型。
然而应该注意的是，可能存在R0位置处的任何或所有构型被错误分配的情况，例如，由于原始X射线晶体学数据的测定或从其他化合物推断立体化学的策略中的错误。因此，这些化合物可能在该位置处具有相反的构型。如已经描述的，更活跃的构型是优选的。因此，在R0是H的实施方案中，优选地环碳处的立构中心是(R)-构型。在R0不是H的实施方案中，优选地该立构中心是(S)-构型。
表1.R0＝OH和R0＝H匹配对之间靶标接合效力(HTRF，HEK293T细胞)、caco-2渗透性(A:B)和热力学溶解度(TSol)的比较。
在式(I)的化合物的某些实施方案中，R0是H。如表1所示，与其中R0是OH的直接类似物(其中一些先前在WO2019150119或WO2020115501中报道)相比，其中R0是H的化合物表现出改善的细胞靶标接合效力(HEK293T细胞中的HTRF测定)和改善的体外ADME特性，例如caco-2渗透性(AB：所示的顶端到基底外侧数据)和热力学溶解度(TSol)。此外，与其中R0是OH的直接类似物相比，其中R0是H的化合物在IV半衰期增加(t1/2@IV 1mg/kg)、降低IV清除率(CL@IV 1mg/kg)方面表现出改善的体内小鼠PK数据，以及极大优异的口服暴露量(曲线下面积，AUC@PO 30mg/kg)和口服生物利用度(F@PO 30mg/kg)，如表2所示。
表2.R0＝OH和R0＝H匹配对之间体内小鼠PK数据(C57BL/6N小鼠；溶媒：2:98DMSO/20％2-羟丙基-β-环糊精；IV 1mg/kg；PO 30mg/kg)的比较。
在式(I)的化合物的某些优选的实施方案中，R0是H。
在式(I)的化合物的某些实施方案中，R0是NH2。与在位置R0处具有OH的类似物相比，在位置R0处具有NH2的化合物表现出改善的动力学溶解度(KSol)和/或代谢稳定性(通过较低的预测肝清除率CLhep，使用小鼠肝微粒体数据证明)。这如表3所示。
表3.R0＝OH和R0＝NH2配对之间动力学溶解度(KSol)和预测肝清除率(使用小鼠肝微粒体数据)的比较。
因此，在某些优选的此类实施方案中，R0是NH2。
在某些优选的实施方案中，R0是F。
在某些优选的实施方案中，R0是OCH3。
在某些优选的实施方案中，R1是任选取代的C1-C6烷基。在某些实施方案中，任选的取代基选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和OH。
在式(I)的化合物的某些优选的实施方案中，R1是任选取代的三氟丙基。在某些优选的此类实施方案中，每个任选的取代基选自甲基、CH2OCH3和CH2OH。
在某些优选的实施方案中，R1是：
在某些优选的实施方案中，R1是：
在某些优选的实施方案中，其中R1是任选取代的三氟丙基，R0是H。
在某些优选的实施方案中，其中R1是任选取代的三氟丙基，R0是NH2。
在式(I)的化合物的某些优选的实施方案中，R1是NRaRb或NRaCH2Rb，其中Ra和Rb独立地选自H、甲基、乙基、丙基、CF3、任选取代的环丙基、任选取代的环丁基、任选取代的环戊基、任选取代的环己基、任选取代的苯基、任选取代的苄基、任选取代的吡啶基、吡唑、咪唑、呋喃、苯并二氧杂环戊烯、任选取代的噁二唑、噻唑和噻吩，其中一个或多个任选的取代基中的每一个独立地选自卤素、甲基、环丙基和CN，
任选地其中R1是NRaCH2Rb并且亚甲基基团被CF3取代。
或
在某些实施方案中，R1是NRaRb并且Ra和Rb与它们所附接的N一起形成任选取代的C3-C9杂环。
在某些实施方案中，R1是NRaRb并且Ra和Rb与它们所附接的N一起形成任选取代的C3-C9杂环，其中一个或多个任选的取代基中的每一个选自OH、氧代、任选地被OH和/或卤素取代的C1-C3烷基、任选取代的苯基、任选取代的苄基、C1-C3烷氧基、NRmRn、NHC(O)Rm和NHCH2Rn，
其中Rm和Rn独立地选自H；任选地被OH、甲氧基或卤素取代的C1-C3烷基；任选地被甲基和/或卤素取代的C3-C4环烷基；任选地被氧代、甲基或氟甲基取代的C3-C4杂环烷基；任选地被甲基取代的C3-C5杂芳基；和Boc；和/或其中Rn进一步选自CH2OCH3、COOH和COOCH3，
或其中Rm和Rn与它们所附接的N一起形成C3-C5杂环基，任选地其中Rm和Rn与它们所附接的N一起形成吗啉基基团。
在某些实施方案中，R1是NRaRb并且Ra和Rb与它们所附接的N一起形成任选取代的C3-C9杂环，其中一个或多个任选的取代基中的每一个选自任选地卤素取代的苯基、NRmRn、NHC(O)Rm和NHCH2Rn，
其中Rm和Rn独立地选自H；任选地被OH、甲氧基或卤素取代的C1-C3烷基；任选地被甲基和/或卤素取代的C3-C4环烷基；任选地被氧代、甲基或氟甲基取代的C3-C4杂环烷基；任选地被甲基取代的C3-C5杂芳基；和Boc；和/或其中Rn进一步选自CH2OCH3、COOH和COOCH3，
或其中Rm和Rn与它们所附接的N一起形成C3-C5杂环基基团，任选地其中Rm和Rn与它们所附接的N一起形成吗啉基基团。
在某些实施方案中，R1是NRaRb并且Ra和Rb与它们所附接的N一起形成取代的C3-C9杂环，其中一个或多个取代基中的每一个选自OH、CH2OH、CH2OCH3、氧代、NH2、C1-C3氨基烷基、氨基二氧化硫杂环丁烷、甲基、乙基、丙基、CF3、苯基、取代的苯基和苄基。
在某些实施方案中，R1是NRaRb并且Ra和Rb与它们所附接的N一起形成任选取代的杂环，其中所述杂环选自吡咯烷基、嘧啶基、哌啶基、吗啉代、哌嗪基和硫代吗啉代。在某些此类实施方案中，杂环任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：甲基、螺环丙基、C1-C3氨基烷基、NH2、CH2OH、CH2CF3、氧代、噻吩、任选地被F或CF3取代的苯基和OH，条件是相同的环碳也没有被甲基取代。
在某些实施方案中，R1是NRaRb并且Ra和Rb与它们所附接的N一起形成杂环，其中杂环选自吡咯烷基、哌啶基、吗啉代、哌嗪基和硫代吗啉代，
其中杂环任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：甲基、NH2、C1或C2氨基烷基、CH2CF3、氧代、噻吩、任选地被F或CF3取代的苯基和OH，条件是相同的环碳也没有被甲基取代。
在某些实施方案中，R1是NRaRb并且Ra和Rb与它们所附接的N一起形成杂环，其中该杂环选自哌啶基和哌嗪基，
其中杂环任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：甲基、NH2、C1或C2氨基烷基、CH2CF3、氧代、噻吩、任选地被F或CF3取代的苯基和OH，条件是相同的环碳也没有被甲基取代。
在某些实施方案中，R1是NRaRb并且Ra和Rb与它们所附接的N一起形成任选取代的杂环，其中该杂环选自哌啶基和哌嗪基。
优选地，R1形成被氟-苯基或二氟苯基取代的哌嗪基基团。
在某些实施方案中，哌嗪基基团任选地进一步被甲基取代。
在某些实施方案中，哌嗪基基团任选地进一步被CH2OH或螺环丙基取代。
在某些实施方案中，R1是NRaRb并且Ra和Rb形成任选取代的杂环，其中该杂环是被苯基取代的哌啶基基团。在某些优选的此类实施方案中，哌啶基基团任选地进一步被NH2或NHCH3取代。
在某些实施方案中，R1是NRaRb并且Ra和Rb与它们所附接的N一起形成任选地被苯基、氟-苯基或二氟-苯基取代的哌啶基基团，并且其中哌啶基基团任选地进一步被NRmRn、NHC(O)Rm或NHCH2Rn取代，
其中Rm和Rn独立地选自H；任选地被OH、甲氧基或卤素取代的C1-C3烷基；任选地被甲基和/或卤素取代的C3-C4环烷基；任选地被氧代、甲基或氟甲基取代的C3-C4杂环烷基；任选地被甲基取代的C3-C5杂芳基；和Boc；和/或其中Rn进一步选自CH2OCH3、COOH和COOCH3，
或其中Rm和Rn与它们所附接的N一起形成C3-C5杂环基基团，任选地其中Rm和Rn与它们所附接的N一起形成吗啉基基团。
在某些实施方案中，R1是NRaRb并且Ra和Rb与它们所附接的N一起形成任选地被苯基、氟-苯基或二氟-苯基取代的哌啶基基团，并且其中哌啶基基团任选地进一步被NRmRn、NHC(O)Rm或NHCH2Rn取代，
其中Rm选自H；任选地被OH或卤素取代的C1-C3烷基；任选地被甲基和/或卤素取代的C3-C4环烷基；任选地被氧代、甲基或氟甲基取代的C3-C4杂环烷基；任选地被甲基取代的C3-C5杂芳基；和Boc；以及
其中Rn选自H；任选地被OH或卤素取代的C1-C3烷基；任选地被甲基和/或卤素取代的C3-C4环烷基；任选地被氧代、甲基或氟甲基取代的C3-C4杂环烷基；任选地被甲基取代的C3-C5杂芳基；Boc；COOH和COOCH3。
在某些优选的实施方案中，R1形成的哌啶基环被NRmRn取代，其中Rm和Rn独立地选自H；任选地被OH或卤素(优选F)取代的C1-C3烷基；任选地被甲基和/或卤素(优选F)取代的C3-C4环烷基；任选地被氧代、甲基或氟甲基取代的C3-C4杂环烷基；任选地被甲基取代的C3-C5杂芳基；和Boc。
在某些优选的实施方案中，其中R1被NRmRn取代，Rm是H。
在某些优选的实施方案中，Rm是H并且Rn选自：H；甲基；任选地被氟或OH取代的乙基；丙基(包括异丙基)；任选地被甲基取代的环丙基；任选地被氟取代的环丁基；和任选地被甲基或氟-甲基取代的氧杂环丁基。
在某些优选的实施方案中，R1形成的哌啶基环被NHC(O)Rm取代，其中Rm选自H；任选地被OH或卤素(优选F)取代的C1-C3烷基；任选地被甲基和/或卤素(优选F)取代的C3-C4环烷基；任选地被氧代、甲基或氟甲基取代的C3-C4杂环烷基；任选地被甲基取代的C3-C5杂芳基；和Boc。
在某些优选的实施方案中，其中R1被NHC(O)Rm取代，Rm选自C1-C3烷基、C3-C4环烷基和C4-C5杂芳基，例如吡啶。
在某些实施方案中，R1是NRaRb并且Ra和Rb与它们所附接的N一起形成任选地被苯基、氟-苯基或二氟-苯基取代的哌啶基基团，并且其中哌啶基基团任选地进一步被NRmRn取代，
其中Rm和Rn与它们所附接的N一起形成C3-C5杂环基基团。在某些此类实施方案中，Rm和Rn与它们所附接的N一起形成吗啉基基团。
在某些实施方案中，R1是NRaRb并且Ra和Rb与它们所附接的N一起形成任选地被苯基、氟-苯基或二氟-苯基取代的哌啶基基团，并且其中哌啶基基团任选地进一步被NH2、NHCH3或NHCH2CH3取代。
在其中由R1形成的杂环被取代的某些实施方案中，其在对位(4位)被取代。
在其中由R1形成的杂环被取代的某些实施方案中，其在邻位(2位)被取代。
在某些此类实施方案中，由R1形成的杂环在邻位和对位(2,4位)被取代。
在某些实施方案中，R1是NRaRb并且Ra和Rb与它们所附接的N一起形成哌啶基基团，其中哌啶基基团在4位被NRmRn、NHC(O)Rm和NHCH2Rn取代，并且在2位进一步被苯基、氟-苯基或二氟-苯基取代。在此类实施方案中，Rm和Rn如上文和本文别处所定义。
在优选的此类实施方案中，其中R1是在邻位或2位(例如被苯基)取代的杂环并且是手性的，该化合物在该位置是(R)-构型。在其中R1在邻位或2位(例如被苯基)取代并且是手性的优选的实施方案中，该化合物在该位置是(S)-构型。
在优选的此类实施方案中，其中R1是在邻位或2位和在对位或4位(例如被NH2或C1-C2烷基氨基)取代的杂环并且是手性的，该化合物在对位是(R)-构型并且在邻位是(S)-构型。在优选的此类实施方案中，其中R1在邻位或2位和在对位或4位(例如被NH2或C1-C2烷基氨基)取代并且是手性的，该化合物在对位是(S)-构型并且在邻位是(R)-构型。
在某些优选的实施方案中，R1形成被苯基、氟-苯基、二氟-苯基或噻吩基取代的哌嗪基基团。在某些优选的实施方案中，R1形成被苯基、氟-苯基、二氟-苯基或苯硫基取代的4-氨基哌啶基基团。优选地R1形成被苯基取代的哌嗪基或4-氨基哌啶基基团。优选地R1形成被氟-苯基取代的哌嗪基或4-氨基哌啶基基团。优选地R1形成被二氟-苯基取代的哌嗪基或4-氨基哌啶基基团。
在其中R1被二氟-苯基取代的优选的实施方案中，取代基是2,5二氟-苯基或3,5二氟-苯基。
在某些实施方案中，哌嗪基或4-氨基哌啶基基团任选地进一步被一个或两个，优选一个N-烷基(例如甲基或乙基)取代。
在某些优选的实施方案中，R1是：
在某些优选的实施方案中，R1是：
在某些优选的实施方案中，R1是：
在某些优选的实施方案中，R1是：
在某些优选的此类实施方案中，苯环被氟单取代或二取代。
在某些优选的实施方案中，R1选自：
在式(I)的化合物的某些优选的实施方案中，R1是NRaRb或NRaCH2Rb，其中Ra和Rb独立地选自H、甲基、乙基、丙基、CF3、环丙基、环丁基，环戊基、环己基、苯基、苄基、吡啶基、吡唑、咪唑，或其中Ra和Rb与它们所附接的N一起形成C3-C5杂环，任选地被OH、CH2OH、CH2OCH3、甲基、乙基、丙基、CF3、苯基或苄基取代。
在某些优选的实施方案中，R1是NRaCH2Rb，其中Ra是H或甲基并且Rb选自任选地被F取代的环丁基、环己基、任选地被F取代的苯基、呋喃和噻吩，任选地其中亚甲基被CF3取代。
在某些优选的此类实施方案中，Rb是苯基或氟取代的苯基。
在某些优选的实施方案中，R1形成经碳环原子与式(I)的羰基连接的任选取代的C4或C5杂环烷基环，其中任选的取代基是苯基。在某些此类实施方案中，杂环烷基环中的杂原子是N。
在式(I)的化合物的某些优选的实施方案中，R2和R3独立地选自H、甲基和乙基，或与它们所附接的碳一起形成任选取代的环丙基、任选取代的环丁基、任选取代的环戊基、任选取代的环己基、任选取代的吡咯烷、任选取代的四氢吡喃或任选取代的四氢呋喃。
在某些此类实施方案中，R2和R3独立地选自H和甲基。在某些实施方案中，R2和R3均是甲基。在某些实施方案中，R2和R3均是H。
在某些优选的实施方案中，R2和R3与它们所附接的碳一起形成环己基、环戊基或环丁基。优选地R2和R3一起形成环戊基。可选地，优选地R2和R3一起形成环己基。
在某些实施方案中，提供了式(I)的化合物，其中：
X是CR4a，其中R4a独立地选自H、任选取代的C1-C6烷基或卤素，优选H或C1-C6烷基；
Y是N；
Z是CR7，其中R7选自H、卤素、C1-C6烷基、C2-C6烯烃、C2-C6炔烃、C3-C6环烷基、任选取代的C3-C6杂环烷基、C5-C8芳基、C6-C9芳基烷基、C3-C8杂芳基、CN、COORc、CONRcRd、NRcRd、NS(O)RcRd、S(O)(Rc)NRd、SORc、SO2Rc和SRc，其中Rc和Rd独立地是H、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C5-C6芳基、C6-C9芳烷基、C3-C6杂芳基、CN、COOH或COCH3，或Rc和Rd与它们所附接的杂原子一起形成任选取代的C3-C7杂环；
M是CH或C-CH3；
并且包括X、Y、Z的环是芳香族的，并且A、D、E、G均不存在。
在某些优选的此类实施方案中，Z是CR7并且R7选自H、甲基、环丙基、苯基、吡啶、吡唑、吲唑、咪唑、Cl、Br、COOH、COOCH3、C(O)NRcRd、NRcRd，其中RcRd选自甲基，或其中Rc和Rd与它们所附接的N一起形成任选取代的哌嗪、吗啉或任选取代的吡咯烷。
在某些优选的实施方案中，R7是Cl、Br或C(O)OCH3，或R7是CONRcRd并且Rc和Rd各自是甲基，或Rc和Rd与它们所附接的N一起形成哌嗪基环。
在某些实施方案中，
X是CR4a，其中R4a选自H、任选取代的C1-C6烷基和卤素，任选地其中R4a是H或C1-C6烷基；
Y是CR5；
Z是N或CR7；
M是CH或C-CH3；
其中包括X、Y和Z的环是芳香族的，并且A、D、E和G均不存在，和
R5选自H、卤素、任选取代的C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、任选取代的C3-C6环烷基、任选取代的C5-C8芳基、任选取代的C6-C9芳烷基、任选取代的C3-C8杂芳基、CH2OH、NR’R”、NS(O)R’R”、SO2R’、C(O)R’、COR’、C(O)OR’、C(O)NR’R”、OR’和SR’，其中R’和R”独立地选自H、C1-C6烷基、C5-C8芳基，C6-C9芳基烷基和C3-C8杂芳基，和
R7选自H、卤素、氰基、氧代、任选取代的C1-C6烷基、C2-C6烯烃、C2-C6炔烃、C3-C6环烷基、任选取代的C3-C6杂环烷基、C5-C8芳基、C6-C9芳烷基、C3-C8杂芳基、CN、C(O)ORc、CONRcRd、NRcRd、NS(O)RcRd、S(O)(Rc)NRd、SORc、SO2Rc和SRc，其中Rc和Rd独立地是H、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C5-C6芳基、C6-C9芳烷基、C3-C6杂芳基、CN、COOH或COCH3，或Rc和Rd与它们所附接的杂原子一起形成任选取代的C3-C7杂环。
在某些优选的实施方案中，Z是N或CR7，其中R7是H、C1-C6烷基、NR’R”、C(O)NR’R”、氰基、羧基、卤素、C1-C6烷基胺、C3-C6烷基酯、任选取代的C6-C10芳基或任选取代的C2-C6杂芳基，其中一个或多个杂原子选自N和O，并且芳基或杂芳基的一个或多个任选的取代基选自C1-C6烷基、C1-C6烷基胺、酰胺基和氰基，
其中R’和R”独立地选自H、任选地被OH取代的C1-C6烷基、C3-C7环烷基、C1-C7杂环烷基、C4-C7烷基环烷基、C3-C7烷基杂环烷基、苄基、苯基和甲氧基，或其中R’和R”彼此连接形成包括它们所附接的N的C2-C7杂环，其中杂环任选地是羟基取代的、氧代取代的、甲基取代的、CH2OH取代的或乙酰基取代的。
在某些优选的实施方案中，Z是N或CR7，其中R7选自：任选地被酰氨基、氰基或甲胺取代的苯基；吡啶；噁唑；吡唑；羧基；C(O)NR’R”；或NR’R”；
其中R’和R”独立地选自H、C1-C6烷基、C3-C7环烷基、C3-C7杂环烷基，其中杂原子是N或O，或其中R’和R”彼此连接形成包括它们所附接的N的C2-C7杂环烷基，其中杂环烷基任选地是羟基取代的、氧代取代的、甲基取代的、CH2OH取代的或乙酰基取代的。
在某些优选的实施方案中，Z是CR7，其中R7是C(O)NR’R”并且其中R’和R”彼此连接形成包括它们所附接的N的任选取代的吡咯烷、哌啶、哌嗪或吗啉，其中哌啶、吡咯烷、哌嗪或吗啉任选地是羟基取代的、氧代取代的、甲基取代的、羟甲基取代的或乙酰基取代的。
在某些优选的实施方案中，R5是任选地被独立地选自甲基、卤素(例如氟)和OCH3的一个或多个取代基取代的苯基。在某些优选的实施方案中，R5是卤素，例如Cl。在某些优选的实施方案中，R5是任选地被甲基取代的环丙基。在某些优选的实施方案中，R5是任选地被两个或三个氟取代的甲基。在某些优选的实施方案中，R5是SCH3。
在某些优选的此类实施方案中，R4a是H，R5是Cl或任选地被氟、甲基或OCH3取代的苯基，并且Z是N或CR7。
在某些优选的实施方案中，Z是CR7，其中R7是Cl、Br或C(O)OCH3，或R7是CONRcRd并且Rc和Rd各自是甲基，或其中Rc和Rd与它们所附接的N一起形成哌嗪基环。在某些优选的此类实施方案中，R7是二甲基酰胺。
在某些优选的实施方案中，Z是CR7，其中R7是H。
在某些优选的实施方案中，Z是N。
在某些实施方案中，提供了式(I)的化合物，其中包括X、Y和Z的环是芳香族的，并且A、D、E和G全部不存在，并且其中：
X是CR4a，其中R4a选自H、任选取代的C1-C6烷基和卤素，优选H或C1-C6烷基；
Y是CR5；
Z是N或CR7；
M是CH或C-CH3，
在某些此类实施方案中，R4a是H，R5是Cl或任选地被氟取代的苯基，并且Z是N或CR7。
在某些实施方案中：
X是CH
Z是N或CH
M是CH
Y是CR5，其中R5选自卤素、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C3-C6环烷基、任选取代的C3-C6杂环烷基、任选取代的C5-C8芳基、任选取代的C3-C8杂芳基和NR’R”，其中R’和R”一起形成包括它们所附接的氮的任选取代的C3-C6杂环烷基。
在某些优选的此类实施方案中，R5选自卤素、任选取代的环丙基、任选取代的苯基、任选取代的噻吩基、任选取代的哌啶基、任选取代的吡唑基、任选取代的吡咯烷基、任选取代的二氢苯并呋喃基、任选取代的氮杂双环己基和任选取代的氮杂环丁烷基。优选地R5是任选取代的苯基。
在优选的此类实施方案中，R5的一个或多个取代基中的每一个选自由以下组成的组：Cl、F、甲基、CHF2、CF3、甲氧基、OCHF2、OCF3和环丙氧基。
在某些实施方案中，R5选自由以下组成的组：卤素；任选地被氟、甲氧基或甲基取代的苯基；任选地被氟、二氟或三氟取代的甲基；任选地被甲基取代的环丙基。
在某些优选的实施方案中，R5是任选地被F、OCH3或甲基取代的苯基。在某些优选的实施方案中，R5是任选地被氟取代的甲基。在某些优选的实施方案中，R5是CHF2或CF3。
在某些优选的实施方案中，R5是Cl。
优选地，在某些此类实施方案中，Z是N。可选地优选地，在某些此类实施方案中，Z是CH。
在某些实施方案中，X是CR4a，Y是CR5；Z是N或CH；M是CH或C-CH3，其中R4a是H并且R5是Cl或任选地被氟或甲氧基取代的苯基。
在某些实施方案中，提供了式(I)的化合物，其中包括X、Y和Z的环是脂肪族的，其中A、D、E和G全部不存在并且其中：
X不存在，是CR4aR4b、NR4a或C＝O，其中R4a和R4b是H、任选取代的C1-C6烷基或卤素，或其中R4a和R4b一起形成包括它们所附接的碳的C3-C6环烷基或C3-C6杂环烷基；
Y是O、CR5R6或NR5，其中R5和R6独立地选自H、卤素、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C3-C6环烷基、任选取代的C5-C8芳基、任选取代的C6-C9芳烷基、任选取代取代的C3-C8杂芳基、CH2OH、NR’R”、NS(O)R’R”、COR’、COOR’、C(O)NR’R”、OR’，其中R’和R”独立地选自C1-C6烷基、C5-C8芳基、C6-C9芳基烷基和C3-C8杂芳基，
或其中R5和R6一起形成包括它们所附接的碳的C3-6环烷基或C3-C6杂环烷基；
Z是CR7R8，其中R7和R8独立地选自H、卤素、C1-C6烷基、C2-C6烯烃、C2-C6炔烃、C3-C6环烷基、任选取代的C3-C6杂环烷基、C5-C8芳基、C6-C9芳基烷基、C3-C8杂芳基、CN、COORc、CONRcRd、NRcRd，其中Rc和Rd独立地选自H、C1-C6烷基和C3-C6环烷基、C5-C6芳基、C6-C9芳烷基、C3-C6杂芳基、CN、COOH或COCH3，或Rc和Rd与它们所附接的杂原子一起形成任选取代的C3-C7杂环，
或其中R7和R8一起形成包括它们所附接的碳的C3-6环烷基或C3-C6杂环烷基；
M不存在，是CH2，或Z和M一起形成任选取代的苯基或吡啶环的一部分；
或M不存在并且Y和Z一起形成稠合苯基或杂芳基环，
或M和X均不存在并且Z是CHR7，其中R7选自H、卤素、C1-C6烷基、C2-C6烯烃、C2-C6炔烃、C3-C6环烷基、任选取代的C3-C6杂环烷基、C5-C8芳基、C6-C9芳烷基、C3-C8杂芳基、CN、COORc、CONRcRd、NRcRd，其中Rc和Rd独立地是H、C1-C6烷基或Rc和Rd与它们所附接的杂原子一起形成任选取代的C3-C7杂环。
在某些优选的此类实施方案中：
R4a选自H、C1-C6烷基或卤素，并且R4b是H，优选地其中X是CR4aR4b并且R4a选自H和C1-C6烷基，并且R4b是H；
R5和R6独立地选自H、卤素、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的苯基、苄基、吡啶基、CH2OH、C(O)R’、COR’、C(O)OR’、C(O)NR’R”和SO2R’，其中R’和R”独立地选自甲基、乙基、丙基、丁基、苯基和苄基，或其中R5和R6一起形成包括它们所附接的碳的环己基，优选地其中Y是O或CR5R6并且R5和R6独立地选自H、卤素、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的苯基、苄基、吡啶基、CH2OH、C(O)R’、COR’、C(O)OR’、C(O)NR’R”和SO2R’，其中R’和R”独立地选自甲基、乙基、丙基、丁基、苯基和苄基，或其中R5和R6一起形成包括它们所附接的碳的环己基；
R7选自H、C1-C6烷基、苯基和CONRcRd，其中Rc和Rd独立地是H、甲基或Rc和Rd与它们所附接的氮一起形成任选取代的吡咯烷，并且R8是H，优选地其中Z是CR7R8并且R7选自H、C1-C6烷基、苯基和CONRcRd，其中Rc和Rd独立地是H、甲基或Rc和Rd与它们所附接的氮一起形成任选取代的吡咯烷，并且R8是H。
在某些实施方案中，Z是CH2并且Y是NR5。在某些此类实施方案中，R5是C(O)CH3。
在某些优选的实施方案中：
X是CR4aR4b并且R4a和R4b均是H；
Y是O或CR5R6，其中R5是苯基或C(O)NR’R”，其中R’和R”均是甲基，并且R6是H；和
Z是CR7R8，其中R7是苯基或C(O)NRcRd，其中Rc和Rd均是甲基。在某些此类实施方案中，R8是H。
在某些优选的此类实施方案中：
X是CR4aR4b并且R4a和R4b均是H；
Y是O；和
Z是CR7R8，其中R7和R8均是H。
在某些优选的实施方案中，X是CR4aR4b并且R4a和R4b均是H；Y是N并且Z是C并且Y和Z一起形成稠合杂芳基环，任选地一起形成稠合咪唑基环。
在某些实施方案中，Z是C R7R8并且Y是NR5。在某些优选的此类实施方案中，R5是苯基、吡啶基、羧酸丁酯或C(O)CH3，优选地其中R5是苯基。在某些优选的此类实施方案中，Z是CH2。
在式(I)的化合物的某些优选的实施方案中，包括X、Y和Z的环是脂肪族的，并且：
A、D、E和G各自是C或N并与脂肪族环形成稠合芳基或杂芳基环，在5元环(其中M不存在)的情况下其包括X、Y和Z，并且在6元环的情况下其包括X、Y、Z和M，
X是C
Y是C
Z是NR7、CR7R8或C＝O，其中R7和R8独立地选自H、卤素、C1-C6烷基、C2-C6烯烃、C2-C6炔烃、C3-C6环烷基、任选取代的C3-C6杂环烷基、C5-C8芳基、C6-C9芳基烷基、C3-C8杂芳基、CN、COORc、CONRcRd、NRcRd、NS(O)RcRd、S(O)(Rc)NRd、SORc、SO2Rc和SRc，其中Rc和Rd独立地是H、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C5-C6芳基、C6-C9芳烷基、C3-C6杂芳基、CN、COOH或COCH3，或Rc和Rd与它们所附接的杂原子一起形成任选取代的C3-C7杂环，
或其中R7和R8一起形成包括它们所附接的碳的C3-6环烷基或C3-C6杂环烷基；和
M不存在或是CR13R14，其中R13和R14独立地选自H和C1-C6烷基，或其中R13和R14与它们所附接的碳一起形成C3-C6环烷基。
在某些优选的此类实施方案中，M不存在并且Z是CR7R8并且其中R7和R8是H。
在某些优选的此类实施方案中，A、D和E是C，并且G是C或N。
在式(I)的化合物的某些优选的实施方案中：
X是C或N
Y是C或N
Z是N或CR7，其中R7选自H、卤素、C1-C6烷基、C2-C6烯烃、C2-C6炔烃、C3-C6环烷基、任选取代的C3-C6杂环烷基、C5-C8芳基、C6-C9芳基烷基、C3-C8杂芳基、CN、COORc、CONRcRd、NRcRd、NS(O)RcRd、S(O)(Rc)NRd、SORc、SO2Rc和SRc，其中Rc和Rd独立地是H、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C5-C6芳基、C6-C9芳烷基、C3-C6杂芳基、CN、COOH或COCH3，或Rc和Rd与它们所附接的杂原子一起形成任选取代的C3-C7杂环；
M不存在，是CH或C-CH3，
A是CR9、CHR9、N、NR9、S或O，
D是CR9、CHR9、N或NR9，
G不存在，是CR9、CHR9或N，
其中R9独立地选自H、卤素、C1-C6烷基、CF3和OR*，其中R*是任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C1-C6环烷基或任选取代的杂环烷基，和
E是CR10、CHR10、N、NR10、S或O，
其中R10选自H、卤素、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C5-C8芳基、C6-C9芳基烷基、C4-C8杂芳基、SRx、ORx、NRxRy和NS(O)RxRy、S(O)(Rx)NRy，其中Rx和Ry独立地选自H、C1-C6烷基、CF3、C3-C6环烷基、C5-C8芳基、C6-C9芳烷基、C4-C8杂芳基、COOH、酰氨基、氰基、C2-C6烯烃、C2-C6炔烃，或其中Rx和Ry与它们所附接的氮一起形成任选取代的C4-C6杂环烷基。
在某些优选的此类实施方案中，Z是N或CR7，其中R7选自H、C1-C6烷基、CN或C(O)NRcRd，其中Rc和Rd独立地是H、甲基，或与它们所附接的氮一起形成任选取代的哌啶、哌嗪或吗啉环。
在某些优选的此类实施方案中，Z是N或CR7，其中R7选自H、C1-C6烷基、CN或C(O)NRcRd，其中Rc和Rd独立地是H、甲基，或与它们所附接的氮一起形成任选取代的哌啶、哌嗪或吗啉环。
在某些优选的此类实施方案中：
E是CR10、CHR10、N、NR10、S或O，
其中R10选自H、F、Cl、Br、甲基、乙基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、SRx、ORx、NRxRy和NS(O)(CH3)2，其中Rx和Ry独立地选自H、甲基、乙基、CF3、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、COOH、酰胺基、氰基，或其中Rx和Ry与它们所附接的氮一起形成哌啶、哌嗪或吗啉，任选地被甲基取代。
在某些优选的实施方案中：
A、M、X和Y是C，E是CR10，
D是N，
G是C或N，并且
Z是C或N，
使得包括A、D、E、G、X、Y、Z和M的环形成稠合芳环体系。在某些优选的此类实施方案中，G是C并且Z是C。
在某些优选的实施方案中：
M不存在，
A、X和Y是C，D并且G是N，
E是CR10，并且Z是NR7，
并且包括A、D、E、G、X和Y的环形成与包括X、Y和Z的环稠合的芳香环，
其中R7是H或C1-C6烷基，任选地其中R7是甲基。
在某些优选的实施方案中：
M、A、X、Y和Z是C，
D和G是N，
E是CR10，
并且包括A、D、E、G、X和Y的环形成与包括X、Y、M和Z的环稠合的芳香环。
在某些优选的实施方案中，E是CR10，其中R10是H或SRx，其中Rx是C1-C6烷基。优选地Rx是甲基。
在某些优选的实施方案中：
X、Y、M、A和G是C，
Z是N，D是CR9，并且E是CR10，
使得包括A、D、E、G、X、Y、Z和M的环形成稠合芳环体系，其中R9是卤素，优选F或Cl，并且R10是H或卤素，任选F或Cl。
在某些优选的实施方案中：
G不存在，A是C，D和Z是N，并且E是NR10，
使得包括A、D、E、X、Y、Z和M的环形成稠合芳环体系，其中R10选自H、乙基、环丙基、苯基和苄基。在优选的实施方案中，R10是环丙基。
在优选的此类实施方案中，R2不是H，并且R3不是H。该实施方案是特别有利的，因为与其他USP相比，它提高了USP19抑制的选择性。在某些优选的此类实施方案中，R2和R3均是CH3，或与它们所附接的碳一起形成C3-C6环烷基。在某些优选的实施方案中，R2和R3与它们所附接的碳一起形成环戊基。
在式(I)的化合物的某些优选的实施方案中：
X是CR4，其中R4独立地选自H、C1-C6烷基或卤素；
Y是CR5，其中R5选自H、卤素、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、任选地被卤素取代的苯基、任选地被卤素取代的苄基、吡啶基、吡唑、咪唑、CH2OH、NR’R”、COR’、C(O)OR’、C(O)NR’R”、OR’，其中R’和R”独立地选自C1-C6烷基和苯基、苄基、吡啶基、吡唑、咪唑；
Z是CR7，其中R7选自H、卤素、C1-C6烷基、C2-C6烯烃、C2-C6炔烃、C3-C6环烷基、任选取代的C3-C6杂环烷基、C5-C8芳基、C6-C9芳基烷基，C3-C8杂芳基、CN、COORc、CONRcRd、NRcRd、NS(O)RcRd、S(O)(Rc)NRd、SORc、SO2Rc和SRc，其中Rc和Rd独立地是H、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C5-C6芳基、C6-C9芳烷基、C3-C6杂芳基、CN、COOH或COCH3，或Rc和Rd与它们所附接的杂原子一起形成任选取代的C3-C7杂环；
M是CH；并且包括X、Y、Z的环是芳香族的，并且A、D、E、G均不存在。
在某些优选的实施方案中，Z是CH。
在某些优选的实施方案中，R5是任选地被F、OCH3或甲基取代的苯基。在某些优选的实施方案中，R5是任选地被氟取代的甲基。在某些优选的实施方案中，R5是CHF2或CF3。
在本文提供的化合物的某些实施方案中，该化合物在式(I)的叔醇位是手性的。在优选的实施方案中，该化合物是(R)-构型。在可选的优选的实施方案中，该化合物是(S)-构型。
在某些优选的实施方案中：
X是CR4aR4b，其中R4a和R4b独立地选自H、任选取代的C1-C6烷基和卤素；或其中R4a和R4b一起形成包括它们所附接的碳的C3-C6环烷基或C3-C6杂环烷基；
Y是O，
Z是CR7R8，其中R7和R8独立地选自H、卤素、氰基、氧代、任选取代的C1-C6烷基、C2-C6烯烃、C2-C6炔烃、C3-C6环烷基、任选取代的C3-C6杂环烷基、C5-C8芳基、C6-C9芳基烷基、C3-C8杂芳基、CN、C(O)ORc、CONRcRd、NRcRd、NS(O)RcRd、S(O)(Rc)NRd、SORc、SO2Rc和SRc，其中Rc和Rd独立地是H、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C5-C6芳基、C6-C9芳基烷基、C3-C6杂芳基、CN、COOH或COCH3，或Rc和Rd与它们所附接的杂原子一起形成任选取代的C3-C7杂环；或其中R7和R8一起形成包括它们所附接的碳的C3-6环烷基或C3-C6杂环烷基；
M是CR13R14，其中R13和R14独立地选自H和C1-C6烷基，或其中R13和R14与它们所附接的碳一起形成C3-C6环烷基或C3-C6杂环烷基；
其中包括XYZM的环是脂肪族的。
在某些优选的此类实施方案中，X、Z和M是CH2并且Y是O。
在某些实施方案中，提供了选自以下的化合物：
(R)-6-苯基-3-((1-(2-苯基哌嗪-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
(R)-6-苯基-3-((7-(2-苯基哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-9-烯-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
(R,Z)-6-苯基-3-((7-(2-苯基哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-亚基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
6-苯基-3-((7-((R)-4,4,4-三氟-2-甲基丁酰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
4-苯基-1-((7-((R)-4,4,4-三氟-2-甲基丁酰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮
(R)-4-苯基-1-((1-(2-苯基哌嗪-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮
6-苯基-3-((7-((S)-4,4,4-三氟-2-(甲氧基甲基)丁酰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
6-苯基-3-((7-((S)-2-苯基吡咯烷-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
3-((1-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
N-苄基-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-甲酰胺
3-((7-((R)-2-(3,5-二氟苯基)哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-((7-((3R,4R)-1-亚氨基-1-氧化-4-苯基四氢-1H-1λ6-噻吩-3-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-((7-((3S,4S)-1-亚氨基-1-氧化-4-苯基四氢-1H-1λ6-噻吩-3-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
6-苯基-3-(((S)-7-((R)-2-苯基哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
6-苯基-3-(((R)-7-((R)-2-苯基哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
4-苯基-1-(((S)-7-((R)-2-苯基哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮
4-苯基-1-(((R)-7-((R)-2-苯基哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮
1-((1-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
3-((3,3-二甲基-1-((R)-2-苯基哌嗪-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-((1-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
1-((3,3-二甲基-1-((R)-2-苯基哌嗪-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-((1-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
(R)-1-((1-(2-(2,5-二氟苯基)哌嗪-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-(((S)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((S)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮
3-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(二氟甲基)嘧啶-4(3H)-酮
3-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-环丙基嘧啶-4(3H)-酮
3-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
1-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)吡嗪-2(1H)-酮
3-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-甲基嘧啶-4(3H)-酮
2-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮
3-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4(3H)-酮
5-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-1-环丙基-1,5-二氢-4H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-酮
3-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(1-甲基环丙基)嘧啶-4(3H)-酮
3-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6,7-二氟喹唑啉-4(3H)-酮
1-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-(二氟甲基)吡啶-2(1H)-酮
1-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-甲基吡啶-2(1H)-酮
6-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-2-(甲硫基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-5(6H)-酮
4-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)吗啉-3-酮
7-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-7,8-二氢咪唑并[1,2-a]吡嗪-6(5H)-酮
1-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-(三氟甲基)吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-羟基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-(乙氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-(二甲氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-((1-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
3-((10-氨基-7-((R)-4,4,4-三氟-2-甲基丁酰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-((1,1-二氧化硫杂环己烷-3-基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4S)-4-((1,1-二氧化硫杂环己烷-3-基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-羟基-4-甲基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
4-(2-甲氧基苯基)-1-(((R)-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-(邻甲苯基)吡啶-2(1H)-酮
4-(2-氟苯基)-1-(((R)-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-10-氟-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
1-(((S)-10-甲氧基-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-(2-甲氧基苯基)吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-(邻甲苯基)吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-(2-氟苯基)吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-(乙氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3-氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3-氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(3-氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(3-氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-氯吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2R,4R)-4-氨基-2-乙基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-1-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4S)-4-氨基-2-苯基吡咯烷-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-((2,2-二氟乙基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
1-(((R)-3,3-二甲基-1-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-(((S)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-10-甲氧基-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
3-((1-((2S,4R)-2-(3-氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-((1-((2S,4R)-4-(乙氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
(2S,4R)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-羧酸甲酯
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(邻-甲苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-(环丙氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(2,4-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(3-氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(邻甲苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(邻甲苯基)嘧啶-4(3H)-酮
4-氯-1-(((R)-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(邻甲苯基)嘧啶-4(3H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4S,5R)-4-氨基-5-氟-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4S,5S)-4-氨基-5-氟-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(3-氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-(2-甲氧基苯基)吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-(2-甲氧基苯基)吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4S)-4-(甲基氨基)-2-苯基吡咯烷-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮
N-((2S,4R)-1-((R)-10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,4-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,4-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
N-((2S,4R)-1-((R)-10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)环丙甲酰胺
6-(2-甲氧基苯基)-3-(((R)-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
1-((1-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮
6-氟-3-(((R)-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)喹唑啉-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3-氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2-氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(4-氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮
((2S,4R)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)甘氨酸甲酯
((2S,4R)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)甘氨酸
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(3,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(3,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
6-(2-氟苯基)-3-(((R)-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
6-(2-甲氧基苯基)-3-(((R)-7-((2S,4R)-4-吗啉代-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-((3-甲基氧杂环丁烷-3-基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-((3-(氟甲基)氧杂环丁烷-3-基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-(2-甲氧基苯基)吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(邻甲苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((R)-2-(3-氟苯基)哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((R)-2-(2,5-二氟苯基)哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,4-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2-氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-(2-甲氧基苯基)吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3-氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(邻甲苯基)嘧啶-4(3H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(4-氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-(2-甲氧基苯基)吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
4-氯-1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-10-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-(2-甲氧基苯基)吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,4-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-(2-甲氧基苯基)-5,6-二氢吡啶-2(1H)-酮
1-(((S)-7-((2S,4R)-2-(2,4-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-(2-甲氧基苯基)-5,6-二氢吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,4-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-2(1H)-酮
2-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,4-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮
6-(二氟甲基)-3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,4-二氟苯基)-4-(甲氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,3-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-(2-甲氧基苯基)吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,3-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3,4-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-((2,2-二氟乙基)氨基)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-((3,3-二氟环丁基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,3-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(邻甲苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,4-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(邻甲苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3,4-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3,4-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(邻甲苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,3-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-氟苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,4-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-氟苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3,4-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-氟苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-氟苯基)嘧啶-4(3H)-酮
6-苯基-3-(((R)-7-((2S,4R)-2-苯基-4-((吡啶-2-基甲基)氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-氟苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(邻甲苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-((1-甲基-1H-吡唑-3-基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-(((5-氟吡啶-2-基)甲基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,3-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮
6-苯基-3-(((R)-7-((2S,4R)-2-苯基-4-(苯氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-((1-甲基环丙基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-((2,2-二氟乙基)氨基)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(二氟甲基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮
((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)甘氨酸叔丁酯
N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)乙酰胺
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(乙氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-((2,2-二氟乙基)氨基)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮
((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)甘氨酸
4-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)吗啉-3-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(异丙氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-((2-羟乙基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(乙氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮
6-环丙基-3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)环丙烷甲酰胺
N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)吡啶酰胺
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,3-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮
6-氟-3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3-氟苯基)-4-(甲氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)喹唑啉-4(3H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基-5,6-二氢吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-((嘧啶-2-基甲基)氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-((嘧啶-4-基甲基)氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
6-氟-3-(((R)-7-((2S,4R)-4-吗啉代-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)喹唑啉-4(3H)-酮盐酸盐
N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-((R)-10-((6-氟-4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)乙酰胺
N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-((R)-10-((6-氟-4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)环丙烷甲酰胺
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(二甲氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮
(2S,4R)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-羧酸
(2S,4R)-N-甲基-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-甲酰胺
(2S,4R)-N,N-二甲基-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-甲酰胺
1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基-1,5-二氢-2H-吡咯-2-酮
4-氯-1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(乙氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-10-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(乙氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(3,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮盐酸盐
6-环丙基-3-(((R)-7-((2S,4R)-4-((2,2-二氟乙基)氨基)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-((3,3-二氟环丁基)氨基)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(二氟甲基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3,5-二氟苯基)-4-(二甲氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮盐酸盐
4-氯-1-(((R)-7-((2S,4R)-4-((2,2-二氟乙基)氨基)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮
4-氯-1-(((R)-7-((2S,4R)-4-((3,3-二氟环丁基)氨基)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮
3-(((S)-7-((R)-2-(2,5-二氟苯基)哌嗪-1-羰基)-10-甲氧基-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,5R)-5-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2R,5S)-5-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(异丙氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮
3-(((S)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(异丙氨基)哌啶-1-羰基)-10-甲氧基-7-氮杂螺[4.5]癸烷-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,4-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3,5-二氟苯基)-4-(异丙氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-(((3-甲基吡啶-2-基)甲基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-(((4,6-二甲基嘧啶-2-基)甲基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3-氟苯基)-4-((2-甲氧基乙基)氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-((2-氟乙基)氨基)-2-(3-氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-((2S,4R)-2-(3-氟苯基)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)噁唑烷-2-酮
6-氯-3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-10-基)甲基)喹唑啉-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)喹唑啉-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,5R)-5-(2,5-二氟苯基)-2-甲基吗啉-4-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,5R)-5-(2,5-二氟苯基)-2-甲基吗啉-4-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
或其立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐。
在某些实施方案中，提供了作为USP19，优选人USP19的抑制剂的如上所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐。
USP19抑制剂化合物还公开于WO2018/020242、WO2020/115500、WO2019/150119和WO2020/115501中，其各自通过引用明确并入本文。WO2018/020242、WO2020/115500、WO2019/150119和WO2020/115501中公开的根据式(I)的化合物的类似物——即其中R0是H、F、NH2或OCH3——明确地并入本文并且可以由本领域技术人员按照本文以及WO2018/020242、WO2020/115500、WO2019/150119和WO2020/115501中提供的合成方案获得。
在第二方面，本发明提供了药物组合物，其包含根据第一方面的任何实施方案的化合物，或其立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的辅料。
药物组合物可以根据其具体用途和目的通过混合例如辅料、粘合剂、润滑剂、崩解剂、包衣材料、乳化剂、混悬剂、溶剂、稳定剂、吸收促进剂和/或软膏基质进行配制。该组合物可适用于口服、注射、直肠或外用施用。
合适的药学上可接受的辅料是本领域技术人员已知的，例如：脂肪、水、生理盐水、醇(例如乙醇)、甘油、多元醇、葡萄糖水溶液、增量剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂、润湿剂、稳定剂、乳化剂、分散剂、防腐剂、甜味剂、着色剂、调味剂或芳香剂、浓缩剂、稀释剂、缓冲物质、溶剂或增溶剂、用于实现储存效果的化学品、用于改变渗透压的盐、包衣剂或抗氧化剂、糖类，例如乳糖或葡萄糖；玉米、小麦或大米的淀粉；脂肪酸，例如硬脂酸；无机盐，例如偏硅酸铝酸镁或无水磷酸钙；合成聚合物，例如聚乙烯吡咯烷酮或聚亚烷基二醇；醇类，例如硬脂醇或苯甲醇；合成纤维素衍生物，例如甲基纤维素、羧甲基纤维素、乙基纤维素或羟丙基甲基纤维素；以及其他常规使用的添加剂，例如明胶、滑石粉、植物油和阿拉伯树胶。
例如，药物组合物可以口服施用，例如以片剂、包衣片剂、硬或软明胶胶囊、溶液、乳液或混悬剂的形式。还可以直肠施用，例如使用栓剂，局部或经皮施用，例如使用软膏剂、乳膏剂、凝胶或溶液，或肠胃外施用，例如使用注射溶液。
为了制备片剂、包衣片剂或硬明胶胶囊，可以将本发明的化合物与药学上惰性的无机或有机辅料混合。合适的辅料的实例包括乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石粉或硬脂酸或其盐。与软明胶胶囊一起使用的合适的辅料包括，例如，植物油、蜡、脂肪和半固体或液体多元醇。
为了制备溶液和糖浆，辅料包括，例如，水、多元醇、蔗糖、转化糖和葡萄糖。
对于注射溶液，辅料包括，例如，水、醇、多元醇、甘油和植物油。
对于栓剂以及对于局部和经皮施用，辅料包括，例如，天然或硬化油、蜡、脂肪和半固体或液体多元醇。
药物组合物还可以含有防腐剂、增溶剂、稳定剂、润湿剂、乳化剂、甜味剂、着色剂、增味剂、缓冲剂、包衣剂和/或抗氧化剂。
对于联合疗法，第二药物可以与本发明一起在药物组合物中提供或者可以单独提供。
因此，用于口服施用的药物制剂可以是，例如，颗粒剂、片剂、糖衣片剂、胶囊剂、丸剂、混悬剂或乳剂。对于肠胃外注射，例如，静脉内、肌内或皮下使用，可以提供无菌水溶液，其可以含有其他物质，包括例如盐和/或葡萄糖以使溶液等渗。抗癌剂还可以以栓剂或子宫托的形式施用，或可以以洗剂、溶液、乳膏、软膏或扑粉的形式外用施用。
在还一方面，本发明提供了根据第一方面的化合物，包括其立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其用于治疗。
在还一方面，本发明提供了根据第二方面的药物组合物，其用于治疗。
在还一方面，本发明提供了根据第一方面的任何实施方案的化合物，或其立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其用于治疗和/或预防癌症。
在还一方面，本发明提供了根据第二方面的药物组合物，其用于治疗和/或预防癌症。
在还一方面，本发明提供了治疗或预防癌症的方法，其包括向受试者施用根据本发明的第一方面的任何实施方案的化合物，包括其立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，或根据本发明的第二方面的任何实施方案的药物组合物。
在还一方面，本发明提供了根据第一方面的任何实施方案的化合物，包括其立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，在生产用于治疗或预防癌症的药物中的用途。
适合用根据本发明的化合物或组合物治疗的癌症或肿瘤病况包括，例如：前列腺癌、结肠癌、乳腺癌、肺癌、肾癌、CNS癌症(例如神经母细胞瘤、胶质母细胞瘤)、骨肉瘤、血液恶性肿瘤(例如白血病、多发性骨髓瘤和套细胞淋巴瘤)。在某些优选的实施方案中，癌症与p53失调相关。在某些优选的实施方案中，癌症选自血液恶性肿瘤(例如套细胞淋巴瘤、多发性骨髓瘤)、前列腺癌、神经母细胞瘤或胶质母细胞瘤。在某些优选的实施方案中，癌症是神经母细胞瘤或乳腺癌。
本文证明，有效的USP19抑制化合物可有效减少体内脂肪蓄积。基因敲除研究描述了USP19与脂肪蓄积之间可能的关联(Coyne等人,糖尿病学(Diabetologia),2019,62,136-146，其通过引用并入本文)。然而，这些研究中见到的影响需要与敲除研究中固有的可能混杂因素(例如发育或潜在生理过程的改变)一起考虑。由于这些原因，酶的急性或慢性药理学抑制并不总是导致与基因消融类似的生理结局。
本文提供的数据证明USP19的药理学抑制可以减少野生型背景中的脂肪蓄积。总之，体外和体内数据表明，有效抑制USP19活性的化合物可以有效治疗肥胖。
在还一方面，提供了根据第一方面的化合物，或其药学上可接受的盐、互变异构体、立体异构体或N-氧化物衍生物，其用于治疗肥胖的方法中。
在还一方面，提供了根据第二方面的药物组合物，其用于治疗肥胖的方法中。
根据本发明还提供了治疗肥胖的方法，其包括向有需要的受试者施用有效量的根据第一方面的化合物、药学上可接受的盐、互变异构体、立体异构体或N-氧化物衍生物，或有效量的根据第二方面的药物组合物。
本文进一步证明了本文提供的有效USP19抑制化合物可以有效治疗胰岛素抵抗。基因敲除研究描述了USP19和胰岛素敏感性之间的关联(Coyne等人，同上)。Coyne等人描述了USP19敲除小鼠胰岛素敏感性的改善，但是，如上所述，不能假设这些效应将转化成野生型受试者中USP19的药理学抑制。
本文提供的数据表明，USP19的药理学抑制可以有效治疗胰岛素抵抗(例如II型糖尿病)。
在还一方面，提供了如本发明的第一方面所限定的化合物或其药学上可接受的盐、互变异构体、立体异构体或N-氧化物衍生物，其用于治疗胰岛素抵抗的方法中。
在本发明的还一方面，提供了如本发明的第一方面所限定的化合物或其药学上可接受的盐、互变异构体、立体异构体或N-氧化物衍生物，其用于治疗II型糖尿病的方法中。
在本发明的还一方面中，提供了根据第二方面的药物组合物，其用于治疗胰岛素抵抗的方法中。
在本发明的还一方面中，提供了根据第二方面的药物组合物，其用于治疗II型糖尿病的方法中。
根据本发明还提供了治疗胰岛素抵抗的方法，其包括向有需要的受试者施用有效量的如本发明的第一方面所限定的化合物、药学上可接受的盐、互变异构体、立体异构体或N-氧化物衍生物，或有效量的包含如本发明的第一方面所限定的化合物、药学上可接受的盐、互变异构体、立体异构体或N-氧化物衍生物的药物组合物。
根据本发明还提供了治疗II型糖尿病的方法，其包括向有需要的受试者施用有效量的如本发明的第一方面所限定的化合物、药学上可接受的盐、互变异构体、立体异构体或N-氧化物衍生物，或有效量的包含如本发明的第一方面所限定的化合物、药学上可接受的盐、互变异构体、立体异构体或N-氧化物衍生物的药物组合物。
在所附实施例中证明本文提供的化合物是有效USP19抑制剂，并且进一步证明在体内疾病模型中，有效USP19抑制化合物有效治疗肌肉损失。总之，体外和体内数据证明有效抑制USP19活性的化合物可以有效治疗肌肉萎缩。
在还一方面，提供了如本发明的第一方面所限定的化合物或其药学上可接受的盐、互变异构体、立体异构体或N-氧化物衍生物，其用于治疗肌肉萎缩的方法中。
在还一方面，本发明提供了如第一方面所限定的化合物或其药学上可接受的盐、互变异构体、立体异构体或N-氧化物衍生物，其用于治疗恶病质或少肌症的方法中。
在本发明的还一方面，提供了根据第二方面的药物组合物，其用于治疗肌肉萎缩的方法中。
本发明的还一方面，提供了根据第二方面的药物组合物，其用于治疗恶病质或少肌症的方法中。
根据本发明还提供了治疗肌肉萎缩的方法，其包括向有需要的受试者施用有效量的如本发明的第一方面所限定的化合物、药学上可接受的盐、互变异构体、立体异构体或N-氧化物衍生物，或有效量的包含如本发明的第一方面所限定的化合物、药学上可接受的盐、互变异构体、立体异构体或N-氧化物衍生物的药物组合物。
根据本发明还提供了治疗恶病质或少肌症的方法，其包括向有需要的受试者施用有效量的如第一方面所限定的化合物、药学上可接受的盐、互变异构体、立体异构体或N-氧化物衍生物，或有效量的包含如本发明的第一方面所限定的化合物、药学上可接受的盐、互变异构体、立体异构体或N-氧化物衍生物的药物组合物。
肌肉萎缩、恶病质或少肌症可能与HIV感染/AIDS、心力衰竭、类风湿性关节炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、囊性纤维化、多发性硬化症、运动神经元病(MND)、帕金森病、痴呆或癌症相关或由其诱导。
在还一方面，本发明提供了根据第一方面或第二方面的任何实施方案的化合物或组合物，其用于治疗和/或预防帕金森病。在还一方面，本发明提供了治疗或预防帕金森病的方法，其包括向受试者施用有效量的根据本发明的化合物，其药学上可接受的盐、互变异构体、立体异构体或N-氧化物衍生物，或药物组合物。在还一方面，本发明提供了根据本发明的化合物，或其药学上可接受的盐、互变异构体、立体异构体或N-氧化物衍生物，在生产用于治疗帕金森病的药物中的用途。
本发明的化合物或组合物可以用于单药治疗和/或联合形式。与根据本发明的化合物或组合物一起用于此类联合形式的合适试剂包括抗癌剂、抗炎剂、免疫调节剂(例如免疫抑制剂)、神经病学剂、抗糖尿病剂、抗病毒剂、抗菌剂和/或放疗中的一种或多种。
与本发明的化合物联合使用的试剂可以靶向与本发明化合物靶向的生物途径相同或相似的生物途径，或可以作用于不同或不相关的途径。
根据待治疗的疾病，多种联合搭档可以与本发明的化合物共同施用。第二活性成分可以包括但不限于：烷化剂，包括环磷酰胺、异环磷酰胺、塞替派、美法仑、氯乙基亚硝基脲和苯达莫司汀；铂衍生物，包括顺铂、奥沙利铂、卡铂和赛特铂(satraplatin)；抗有丝分裂剂，包括长春花生物碱(长春新碱、长春瑞滨和长春碱)、紫杉烷类(紫杉醇、多西他赛)、埃博霉素和有丝分裂激酶(包括aurora和polo激酶)抑制剂；拓扑异构酶抑制剂，包括蒽环类、表鬼臼毒素、喜树碱和喜树碱类似物；抗代谢药，包括5-氟尿嘧啶、卡培他滨、阿糖胞苷、吉西他滨、6-巯嘌呤、6-硫鸟嘌呤、氟达拉滨、甲氨蝶呤和premetrexed；蛋白激酶抑制剂，包括伊马替尼、吉非替尼、索拉非尼、舒尼替尼、厄洛替尼、达沙替尼和拉帕替尼；蛋白酶体抑制剂，包括硼替佐米；组蛋白脱乙酰酶抑制剂，包括丙戊酸和SAHA；抗血管生成药物，包括贝伐珠单抗；单克隆抗体，包括曲妥珠单抗、利妥昔单抗、阿仑单抗(alemtuzumab)、托西莫单抗(tositumomab)、西妥昔单抗、帕尼单抗(panitumumab)；肌克隆抗体的缀合物，包括吉妥珠单抗奥唑米星(Gemtuzumab ozogamicin)、替伊莫单抗(Ibritumomab tiuxetan)；激素疗法，包括抗雌激素(他莫昔芬、雷洛昔芬、阿那曲唑(anastrazole)、来曲唑、依西美坦(examestane))、抗雄激素(氟他胺、比卡鲁胺(Biclutamide))和黄体激素类似物或拮抗剂。
关于本发明涉及根据本发明的化合物的治疗用途的方面，可以将化合物以“有效量”施用至需要治疗的受试者。术语“有效量”是指在向受试者施用单剂量或多剂量时提供疾病治疗中的治疗功效的化合物的量或剂量。根据本发明的化合物的治疗有效量可以包含每单剂量约0.1mg/kg至约20mg/kg范围内的量。对于任何个体患者的治疗有效量可以由医疗保健专业人员通过技术人员理解的方法来确定。在任何给定时间点施用的化合物的量可以变化，以在治疗过程中施用最佳量的化合物，无论单独使用还是与任何其他治疗剂联合使用。还设想将根据本发明的化合物或包含此类化合物的药物组合物与任何其他癌症治疗联合施用，作为联合疗法。
对于联合疗法，第二药物可以与本发明在药物组合物中一起提供或可以单独提供。
施用途径
在某些优选的实施方案中，根据本发明的治疗包括肠胃外施用治疗剂(即，用于根据本发明用途的化合物、药学上可接受的盐、互变异构体、立体异构体或N-氧化物衍生物，或药物组合物)。
在某些优选的实施方案中，口服施用治疗剂。
在某些优选的实施方案中，静脉内施用治疗剂。在某些优选的实施方案中，腹腔施用治疗剂。在某些优选的实施方案中，皮下施用治疗剂。
给药方案
在本发明的某些优选的实施方案中，治疗包括以10至150mg/kg范围内的剂量施用治疗剂(即，用于根据本发明的用途的化合物、药学上可接受的盐、互变异构体、立体异构体或N-氧化物衍生物，或药物组合物)。在此类实施方案中，剂量是指每次单次施用，施用至受试者的活性成分的量。
在某些优选的实施方案中，治疗包括以25至125mg/kg范围内的剂量施用治疗剂。在某些优选的实施方案中，治疗包括以50至100mg/kg范围内的剂量施用治疗剂。
在某些优选的实施方案中，该方法包括以75mg/kg的剂量施用治疗剂。
在某些优选的实施方案中，治疗包括每天1、2、3或4次施用治疗剂(即，用于根据本发明的用途的化合物、药学上可接受的盐、互变异构体、立体异构体或N-氧化物衍生物，或药物组合物)。在某些优选的实施方案中，治疗剂每天施用一次或两次，最优选地每天两次。
在某些优选的实施方案中，以10至300mg/kg范围内的日剂量施用治疗剂。即，一天内施用至受试者的活性剂的总量在10-300mg/kg的范围内。在此类实施方案中，治疗剂可以如本文所述每天施用一次或多次，条件是每日总剂量在指定范围内。
在某些优选的实施方案中，以50至250mg/kg范围内的日剂量施用治疗剂。在某些优选的实施方案中，以75至250mg/kg范围内的日剂量施用治疗剂。在某些优选的实施方案中，以100至200mg/kg范围内的日剂量施用治疗剂。在某些优选的实施方案中，以150mg/kg的日剂量施用治疗剂。
在某些优选的实施方案中，治疗剂(例如本文提供的化合物)以75mg/kg的剂量每天施用两次。
关于本发明涉及根据本发明的化合物的治疗用途的方面，在优选的实施方案中，待治疗的受试者是人。
当介绍本公开或其优选的实施方案的要素时，冠词“一种(a、an)”、、“该”和“所述”旨在表示存在一个或多个要素。术语“包含”、“包括”和“具有”旨在是包容性的，并且表示可以存在除了所列出的要素之外的另外要素。
前述详细描述通过解释和说明的方式提供，并且不旨在限制所附权利要求的范围。本文所示的当前优选的实施方案的许多变化对于本领域普通技术人员而言将是显而易见的，并且仍在所附权利要求及其等同方案的范围内。
实施例
现将结合几个实施例对本发明进行描述。
以下所示的实施例根据随后描述的方法合成。IC50值如下所述测定并表示在下表中。
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表3.示例化合物对USP19的抑制。USP19抑制活性分类如下：
使用异肽泛素-Lys-TAMRA底物(AUB-101，Almac Sciences Scotland Limited，或U-558，Boston Biochem，两者给出相同的结果)，在荧光偏振(FP)均相测定中测定USP19活性。全长USP19购自Boston Biochem(E-576)。除非另有说明，否则所有其他试剂均购自Sigma。在黑色平底聚苯乙烯384孔板(Nunc)中并以30μL总体积进行酶促反应。在存在或不存在抑制剂的情况下，将USP19(2.5nM，10μL)在测定缓冲液(50mM HEPES(pH 7.4)、150mMNaCl、5mM DTT、0.05％BSA(w/v)、0.05％CHAPS)中孵育(10μL)。使用系统(Roylan Developments)将抑制剂以10mM DMSO储备液形式储存在惰性环境(低湿度、黑暗、低氧、rt)中，并在测定前在缓冲液中制备系列稀释液(200μM至2pM，8-18个数据点曲线)。在RT下孵育30min后，通过分配Ub底物(500nM，10μL)启动酶反应。使用Synergy 4酶标仪(BioTek)在90min内(在测定的线性范围内)每15min测量FP，在530nm处激发并测量575nm处平行和垂直光的量。随后将FP信号归一化为无化合物对照。对数据进行制图和拟合，并使用GraphPad(Prism)的非线性回归曲线拟合模型计算得出50％抑制的浓度(IC50)。本发明的抑制剂的IC50值汇总在表1和3中并且表示至少两次重复实验的平均值。
使用western印迹进行细胞靶标接合
将来自乳腺癌细胞系、神经母细胞瘤细胞系和小鼠骨骼肌细胞系的细胞用USP19抑制剂化合物(ADC-141)处理2h，裂解(裂解缓冲液：50mM Tris pH 7.4；150mM NaCl；5mMMgCl2；0.5mM EDTA；0.5％NP40；10％甘油；2mM DTT)，然后加入泛素-炔丙胺(Ub-PA；UbiQ)或泛素-乙烯基甲酯(Ub-VME；Almac Sciences Scotland Limited)。通过USP19的western印迹探测分析样品(通过光密度测定法测定EC50)。
在每个细胞系中，USP19抑制剂化合物均表现出良好的细胞渗透性并表现出低纳摩尔EC50。每个细胞系的结果如图4所示。
使用HTRF测定进行细胞靶标接合
使用带HA标签的泛素乙烯基戊炔基砜(VPS)探针(UbiQ-193，UbiQ Bio)和USP19-Flag过表达构建体，在均相时间分辨荧光(HTRF)测定中测定USP19细胞靶标接合。使用系统(Roylan Developments)将抑制剂以10mM DMSO储备液形式储存在惰性环境(低湿度、黑暗、低氧、rt)中。USP19-Flag转染细胞与连续稀释的化合物按11点剂量效应曲线(50μM至0.01nM)孵育2h，然后在PBS中洗涤并裂解。除非另有说明，否则所有HTRF试剂均购自CisBio。使用细胞裂解物的HTRF测定在384孔板(Greiner)中完成，总体积为20μL。将细胞裂解物与带HA标签的泛素VPS探针在PPI检测缓冲液中孵育40min，然后加入抗HA和抗FLAG HTRF检测试剂。使用Pherastar FSX酶标仪(激发波长337nm，发射波长620/665nm)每1h测量HTRF，持续18h。将数据归一化为DMSO(无化合物对照)，并使用IC50值进行拟合，该IC50值使用Prism(GraphPad)采用非线性回归曲线拟合得出。
Caco-2渗透性测定
Caco-2细胞通常用作预测人肠道对测试化合物的吸收的体外模型。培养时，Caco-2细胞(源自人结直肠癌)自发分化成单层极化肠上皮细胞。将细胞接种在多孔插入板上，并在测定前20d内形成汇合单层。第20天，将化合物加入膜的顶端侧，并监测在2h内化合物穿过单层的通量。表1中仅显示了顶端至基底外侧方向(Papp A:B)的渗透系数数据。所有数据均在Cyptotex生成。
热力学溶解度测定
将测试化合物(～0.5mg，准确称重)悬浮于在高回收率玻璃瓶中的PBS缓冲液pH7.4(Dulbecco A)中至浓度为1mg/mL，重复两次。将悬浮液在rt下以300rpm振荡64h。然后，将约250μL悬浮液转移至Solubility过滤板(Millipore)，重复两次。然后，根据乙腈/PBS缓冲液混合物(最高浓度500μM)中的5点校准曲线对滤液浓度进行定量。过滤和基质匹配后，在Bioteck Synergy 4酶标仪(240-400nm)上分析校准板和测定板。使用校准曲线的斜率计算滤液中测试化合物的终浓度。
体内活性
以下来自体内模型的数据首次证明USP19抑制剂可用于治疗肌肉损失、减少脂肪沉积和提高胰岛素敏感性。这些数据表明，有效抑制USP19活性的化合物可以有效治疗肌肉萎缩、肥胖和/或胰岛素抵抗。
方法：
为了诱导肌肉消耗，在异氟烷麻醉和卡洛芬镇痛下，从小鼠(8-10周龄的雄性C57bl/6小鼠；每组n＝10)切除大腿中1cm的坐骨神经段。在另一条腿上进行假手术作为对照。
将小鼠随机分为溶媒组或测试组，对所有动物进行称重以确保每组的平均体重类似。ADC-141(75mg/kg的USP19抑制性化合物)或溶媒从术后晚上开始每天两次IP施用两次。
14天后处死小鼠。收获脂肪垫、肝脏、腓肠肌和胫骨前肌。测量两组的组织质量。
为了评估肥胖和胰岛素抵抗，使用饲料诱导的肥胖小鼠模型。饲料诱导的肥胖(DIO)小鼠是特征明确的肥胖模型，其表现出肥胖、胰岛素抵抗和葡萄糖不耐受增加。
在研究期间，给雄性C57BL6/J小鼠连续提供高脂肪饲料(D12451，45％kcal脂肪；研究饲料，新泽西州，美国)和随意引用的过滤自来水。从第0天开始，小鼠i.p.BID施用溶媒，以5mg/kg或25mg/kg i.p.BID施用USP19抑制剂(ADC-141)，或以0.1mg/kg s.c.BID阳性对照利拉鲁肽。
每天测量体重。在第13天，通过DEXA评估身体成分。在第15天，在口服葡萄糖耐量试验(OGTT)之前和期间测量空腹血糖和胰岛素水平，以评估血糖控制的改善情况。在禁食过夜后进行OGTT。因此，在第14天，在PM给药后约16:45立即开始撤食(但不包括水)。次日清晨进行OGTT(禁食后约16h)。在进行葡萄糖激发(2.0g/kg po)施用之前30min，按照定时方案给小鼠施用溶媒或测试化合物(从08.45开始)。在给药前(B1)、葡萄糖施用前立即(B2)以及葡萄糖施用后15、30、60和120min采集血液样品。
ADC-141是1-(((S)-7-((R)-3-环己基-2-甲基丙酰基)-10-羟基-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基-5-(哌嗪-1-羰基)吡啶-2(1H)-酮，对应于WO2018/020242中提供的示例性化合物212。使用上述荧光偏振测定法显示ADC-141和本文提供的化合物均具有USP19抑制活性。因此，预期本文提供的USP19抑制剂化合物将显示与以下针对ADC-141描述的类似的功效水平。
结果：
肌肉萎缩
如图1所示，与仅接受溶媒的小鼠相比，接受USP19抑制剂的小鼠的胫骨前肌的肌肉质量损失显著较低。在百分比质量(图1B)和绝对肌肉质量(图1C)方面，肌肉萎缩的情况很明显。
腓肠肌的肌肉消耗也减少(图2)，但趋势并未达到显著水平。同样，在质量百分比(图2B)和绝对肌肉质量(图2C)方面，接受USP19抑制剂的小鼠表现出较少肌肉消耗。
这些数据证明USP19在体内的药理学抑制可以减少肌肉萎缩。数据表明，USP19的药理学抑制对于减少由于不活动、活动受限或其他废用而导致的肌肉消耗特别有效。基于本文提供的结果，还预期药理学USP19抑制有效治疗恶病质或少肌症导致的肌肉萎缩。
肥胖
图3A显示了接受USP19抑制剂或单独溶媒2周后小鼠的附睾脂肪垫的质量。如图3所示，与溶媒处理的小鼠相比，接受USP19抑制剂的小鼠脂肪垫明显更小。
图3B显示了用USP19抑制剂处理的小鼠的肝脏质量增加。这被认为是药物在肝脏中蓄积的结果。
图3C显示了接受USP19抑制剂的小鼠在进食高脂肪饲料时表现出总体体重增加减少。图3D和3E显示了这是由于脂肪量减少，但保持瘦体重。与溶媒对照小鼠相比，用USP19抑制剂处理的DIO小鼠也表现出累积食物摄入量减少。
图3中显示的数据首次证明USP19的药理学抑制可以减少野生型背景下的脂肪蓄积。基因敲除研究描述了USP19与脂肪蓄积之间可能的关联(Coyne等人，糖尿病学(Diabetologia).2018Nov 1.doi:10.1007/s00125-018-4754-4，其通过引用并入本文)。然而，酶的急性或慢性药理学抑制并不总是导致与基因消融类似的生理结局。
本文提供的体内药理学抑制数据证明有效抑制USP19活性的化合物可以有效治疗肥胖。
胰岛素抵抗
图5显示了饲料引起的肥胖小鼠的口服葡萄糖耐量试验(OGTT)的结果。未处理的小鼠表现出胰岛素抵抗的症状，其特征是血浆葡萄糖和血浆胰岛素水平升高。用USP19抑制剂处理的小鼠表现出OGTT反应的剂量依赖性改善，其特征是血浆葡萄糖和血浆胰岛素降低。
图5中显示的数据首次证明USP19的药理学抑制可以降低野生型背景下的胰岛素抵抗。基因敲除研究还描述了USP19与胰岛素敏感性之间的关联(Coyne等人，同上)。Coyne等人描述了USP19敲除小鼠中胰岛素敏感性的改善，但如上所述，不能假设这种效果将转化成野生型受试者中USP19的药理学抑制。
本文提供的数据首次证明USP19的药理学抑制可有效治疗胰岛素抵抗。
本文提供的数据首次证明USP19药理学抑制的治疗效果。因此，本文提供的USP19抑制剂化合物可以有效治疗肌肉萎缩、肥胖和/或胰岛素抵抗。
实验部分
缩写与首字母缩略词
AcOH：乙酸；aq：水性的；atm：大气；dba：二亚苄基丙酮；Bn：苄基；Boc：叔丁氧基羰基；br：广泛；CAN：硝酸高铈铵；Cbz：羧基苄基；CDI：羰基二咪唑；DBU：1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯；DCM：二氯甲烷；d：双合峰(光谱)；de：非对映异构体过量；DIPEA：二异丙基乙胺；DMA：N，N-二甲基乙酰胺；DMAP：4-二甲氨基吡啶；DME：二甲氧基乙烷；DMF：N，N-二甲基甲酰胺；DMSO：二甲亚砜；dppf：1，1’-双(二苯基膦)二茂铁；Eaton试剂：五氧化二磷，7.7wt％，在甲磺酸中；EDC：N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳二亚胺盐酸盐；ee：对映体过量；equiv：等同物；EtOAc：乙酸乙酯；EtOH：乙醇；Ex.：实施例；PE：石油醚40/60；ESI：电喷雾电离；h：小时；GCMS：气相色谱质谱联用；HATU：N-[(二甲氨基)-1H-1，2，3-三唑并-[4，5-b]吡啶-1-基亚甲基]-N-甲基甲铵六氟磷酸盐N-氧化物；hept：七重峰(光谱)；HPLC：高效液相色谱；IPA：2-丙醇；LC：液相色谱；LCMS：液相色谱质谱联用；LiHMDS：双(三甲基甲硅烷基)氨基锂；M：摩尔；m/z：质荷比；mCPBA：3-氯过苯甲酸；MeCN：乙腈；MeOH：甲醇；min：分钟；mmol：毫摩尔；MS：质谱；MTBE：甲基叔丁基醚；m：多重峰(光谱)；NaHMDS：双(三甲基甲硅烷基)氨基钠；NMP：N-甲基-2-吡咯烷酮；NMR：核磁共振；p：五重峰(光谱)；Ph：苯基；PMB：对甲氧基苄基；ppm：百万分之一；q：四重峰(光谱)；quint：五重峰(光谱)；RBF：圆底烧瓶；RT：保留时间；rt：室温；s：单峰；SCX：强阳离子交换；SFC：超临界流体色谱；SM：起始材料；TBDMS：叔丁基二甲基甲硅烷基；Teoc：2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基羰基；TFA：三氟乙酸；THF：四氢呋喃；t：三重峰；UV：紫外线；v/v：每单位体积的体积；wt％：重量百分比；w/v：每单位体积的重量；w/w：每单位重量的重量；Xantphos：4，5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基呫吨；XPhos：2-二环己基膦-2’,4’,6’-三异丙基联苯。
一般实验条件
溶剂和试剂
反应中使用的常见有机溶剂(例如THF、DMF、DCM和MeOH)均购自装在Sure/SealTM瓶中，无水，并在氮气下进行适当处理。使用Elga PURELAB Option-Q对水进行去离子处理。使用的所有其他溶剂(即用于后处理程序和纯化)通常是HPLC级，并且按从各种商业来源提供的形式使用。除非另有说明，否则使用的所有起始材料均购自商业供应商并按所提供的形式使用。
微波合成
使用Biotage InitiatorTM8仪器进行微波实验。该系统在60-250℃的温度范围和最高20bar的压力下具有良好的重现性和控制性。
快速色谱
使用Biotage Isolera Four系统通过快速色谱纯化化合物。除非另有说明，否则使用Biotage KP-Sil SNAP柱(10-340g)或Grace GraceResolv柱(4-330g)以及所述溶剂系统和取决于化合物极性的适当溶剂梯度。对于极性和碱性较强的化合物，使用Biotage KP-NH SNAP柱(11g)。
NMR波谱
使用Avance(300MHz)、Bruker Avance III(400MHz)或Bruker Ascend(500MHz)光谱仪在环境温度下记录1H NMR光谱。所有化学位移(δ)均以ppm表示。残留溶剂信号用作内标，并且特征溶剂峰根据有机快报(J.Org.Chem.),1997,62,p7512-7515中列出的参考数据进行校正；在其他情况下，NMR溶剂含有四甲基硅烷，其用作内标。
液相色谱质谱联用(LCMS)
使用以下方法进行液相色谱质谱联用(LCMS)实验以确定保留时间(RT)和相关离子质量：
方法A：系统由与配备UV二极管阵列检测器和自动进样器的AgilentTechnologies 1290Infinity LC系统的Agilent Technologies 6130四极杆质谱仪组成。该光谱仪由以正离子和负离子模式运行的电喷雾电离源组成。使用以下条件对提供的每个样品进行LCMS实验：LC柱：Agilent Eclipse Plus C18 RRHD，1.8μm，50×2.1mm，保持在40℃。流动相：A)在水中的0.1％(v/v)甲酸；B)在乙腈中的0.1％(v/v)甲酸。
方法B：系统由与配备UV二极管阵列检测器和自动进样器的AgilentTechnologies 1290Infinity LC系统相连的Agilent Technologies 6140单四极杆质谱仪组成。该光谱仪由以正离子和负离子模式运行的多模式电离源(电喷雾和大气压化学电离)组成。使用以下条件对提供的每个样品进行LCMS实验：LC柱：Zorbax Eclipse Plus C18RRHD，1.8μm，50×2.1mm，保持在40℃。流动相：A)在水中的0.1％(v/v)甲酸；B)在乙腈中的0.1％(v/v)甲酸。
方法C：系统由Shimadzu Prominence HPLC/Applied Biosystem LCMS/MS API2000仪器组成。光谱仪电离技术：ESI使用以正离子模式运行的API源。使用以下条件对提供的每个样品进行LCMS实验：LC柱：XBridge C18，5μm，4.6×50mm，保持在25℃。流动相：A)10mM乙酸铵(aq)；B)乙腈。
方法D：系统由Shimadzu Prominence HPLC/Applied Biosystem LCMS/MS API2000仪器组成。光谱仪电离技术：ESI使用以正离子模式运行的API源。使用以下条件对提供的每个样品进行LCMS实验：LC柱：Zorbax Extend C18，5μm，4.6×50mm，保持在25℃。流动相：A)10mM乙酸铵(aq)；B)乙腈。
方法E：系统由Waters ACQUITY UPLC/Waters ACQUITY SQD质谱仪组成。光谱仪电离技术：ESI在正离子模式下运行。使用以下条件对提供的每个样品进行LCMS实验：LC柱：YMC Triart C18，3μm，2.1×33mm，保持在50℃。流动相：A)在水中的0.05％(v/v)甲酸；B)乙腈。
方法F：系统由配备UV二极管阵列检测器和蒸发光散射检测器(DAD/ELSD)的Agilent Technologies 1100系列LC/MSD系统以及Agilent LC/MSD VL(G1956A)、SL(G1956B)质谱仪或配备DAD/ELSD和Agilent LC/MSD SL(G6130A)、SL(G6140A)质谱仪的Agilent 1200系列LC/MSD系统组成。所有LCMS数据均使用大气压化学电离模式获得，正负离子模式切换，扫描范围为m/z 80-1000。使用以下条件对提供的每个样品进行LCMS实验：LC柱：Zorbax SB-C18 RRHD，1.8μm，4.6×15mm。流动相：A)在水中的0.1％(v/v)甲酸；B)在乙腈中的0.1％(v/v)甲酸。
方法G：系统由Waters ACQUITY UPLC/Waters ACQUITY SQD质谱仪组成。光谱仪电离技术：ESI在正离子模式下运行。使用以下条件对提供的每个样品进行LCMS实验：LC柱：Luna Omega，3μm，4.6×100mm，保持在50℃。流动相：A)在水中的0.05％(v/v)TFA；B)乙腈。
方法H：系统由Waters ACQUITY H Class UPLC/Waters ACQUITY SQD 2质谱仪组成。光谱仪电离技术：ESI在正离子模式下运行。使用以下条件对提供的每个样品进行LCMS实验：LC柱：XBridge C18，3.5μm，3×50mm，保持在50℃。流动相：A)5mM乙酸铵(aq)；B)在乙腈/水中的9:1 5mM乙酸铵。
方法I：系统由Waters ACQUITY H Class UPLC/Waters ACQUITY SQD 2质谱仪组成。光谱仪电离技术：ESI在正离子模式下运行。使用以下条件对提供的每个样品进行LCMS实验：LC柱：Waters Acquity UPLC BEH C8，1.7μm，2.1×50mm，保持在50℃。流动相：A)在水中的0.05％(v/v)甲酸；B)在乙腈/水中的9:1 0.05％(v/v)。
方法J：系统由Waters ACQUITY H Class UPLC/Waters ACQUITY SQD 2质谱仪组成。光谱仪电离技术：ESI在正离子模式下运行。使用以下条件对提供的每个样品进行LCMS实验：LC柱：Waters Acquity UPLC BEH C8，1.7μm，2.1×30mm，保持在50℃。流动相：A)5mM乙酸铵(aq)；B)在乙腈/水中的9:1 5mM乙酸铵。
方法K：系统由配备UV检测器和自动进样器的Waters ACQUITY H Class PlusUPLC/Waters ACQUITY QDa质谱仪组成。光谱仪电离技术：ESI在正离子模式和负离子模式下运行。使用以下条件对提供的每个样品进行LCMS实验：LC柱：Agilent Extend-C18 RRHD，1.8μm，2.1×50mm，保持在40℃。流动相：A)在水中的0.1％(v/v)甲酸；B)在乙腈中的0.1％(v/v)甲酸。
气相色谱质谱联用(GCMS)
方法A：系统由Agilent 7890B GC和Agilent 5977B GC/MSD仪器组成。使用以下条件对提供的每个样品进行GCMS实验：GC柱：HP-5ms(30m×0.25mm，0.25μm)。载气：氦气。进样口温度：250℃。分流比：20:1。载气流量：1.0mL/min。升温曲线：柱温箱初始最初为60℃，保持2min，经2min升至100℃(20℃/min)，并保持2min，然后经5.25min升至310℃(40℃/min)，然后保持4min(总运行时间：15.25min)。
制备型高效液相色谱
系统由与配备多波长检测器和自动进样器的Agilent Technologies 1200制备型LC系统相连的Agilent Technologies 6120单四极杆质谱仪组成。质谱仪使用以正离子和负离子模式运行的多模式电离源(电喷雾和大气压化学电离)。级分收集是质量触发的(多模式正离子和负离子)。除非另有说明，否则纯化实验在碱性条件下以适当的溶剂梯度进行，溶剂梯度通常由使用LCMS方法发现的保留时间确定。如果碱性条件不成功，则采用酸性条件。
碱性条件：LC柱：Waters XBridgeTMPrep C18 5μm OBDTM 30×100mm色谱柱，在rt下。流动相：A)在水中的0.1％(v/v)氢氧化铵；B)在95:5乙腈/水中的0.1％(v/v)氢氧化铵。总实验时间为约10min，并显示通用方法：
通过超临界流体色谱(SFC)手性分离立体异构体
使用以下一般程序进行立体异构体混合物的分离。将立体异构体混合物溶解于甲醇中至50mg/mL，并在规定条件下通过SFC纯化。使用旋转蒸发器将每种立体异构体的合并级分蒸发至接近干燥，使用DCM转移至最终容器中，将其在40℃下在压缩空气流下除去，然后在40℃和5mbar下在真空柱温箱中储存16h。
通过HPLC手性分离立体异构体
使用以下一般程序进行立体异构体混合物的分离。将立体异构体混合物溶解于甲醇中至66mg/mL，并在规定条件下通过HPLC纯化。使用旋转蒸发器将每种立体异构体的合并级分蒸发至接近干燥，使用MeOH转移至最终容器中，将其在35℃下在压缩空气流下除去，然后在35℃和5mbar下在真空柱温箱中储存16h。
手性纯度分析
在立体异构体混合物的手性分离之后，在规定条件下使用以下分析SFC或HPLC方法分析每种立体异构体以确定手性纯度。
方法A(SFC)：
柱详细信息 Chiralpak IG(4.6mm x250mm,5μm)
柱温 40℃
流速 4mL/min
BPR 125BarG
检测器波长 210–400nm
进样量 1μL
等度条件 30:70MeOH:CO2(0.2％v/v NH3)
方法B(HPLC)：
柱详细信息 Lux A2(4.6mm x250mm,5μm)
柱温 环境
流速 1mL/min
检测器波长 254nm
进样量 1μL
等度条件 50:50heptane:IPA(0.2％v/v NH3)
方法C(HPLC)：
柱详细信息 Lux C1(4.6mm x150mm,5μm)
柱温 环境
流速 1mL/min
检测器波长 254nm
进样量 1μL
等度条件 MeOH(0.2％v/v NH3)
方法D(SFC)：
柱详细信息 Lux C1(4.6mm x250mm,5μm)
柱温 40℃
流速 4mL/min
检测器波长 210–400nm
进样量 1μL
BPR 125BarG
等度条件 50:50MeOH:CO2(0.2％v/v NH3)
方法E(SFC)：
柱详细信息 Lux C4(4.6mm x150mm,5μm)
柱温 40℃
流速 4mL/min
检测器波长 210–400nm
进样量 1μL
BPR 125BarG
等度条件 60:40MeOH:CO2(0.2％v/v NH3)
命名法
除非另有说明，否则结构的命名法对于实施例1至58使用ChemDraw Professional17.1的“将结构转换成名称”功能确定，对于实施例59至201使用ChemDraw Professional20.1(CambridgeSoft/PerkinElmer)的“将结构转换成名称”功能确定。在R2和R3不是H并且R0是手性的情况下，活性构象已被暂时指定为R0键相对于式(I)中所绘制的结构为“向上”。这是从先前的观察中推断出来的，该观察表明当R0＝OH时就是这种情况，并且使用X射线晶体学数据进行确认(WO2018020242)。因此，在以下实施例中，当R0＝H时，该立体中心处的活性构象被指定为(R)-构型，并且当R0＝F、NH2或OMe时，该立体中心处的活性构象被指定为(S)-构型，其中R0是手性的。然而，应该指出的是，对于所有这些实例，可能的情况是由于原始X射线晶体学数据的测定或从其他化合物推断立体化学的策略中的错误，它们在叔醇位置上被分配了错误的构型。因此，这些化合物可能在该位置具有相反的构型。本文公开了(R)-对映体和(S)-对映体，优选最有效的对映体。
一般程序
一般程序1：Boc脱保护成游离碱
将Boc保护的胺(1当量)溶解于DCM中并加入TFA或在1,4-二噁烷中的4M HCl。将反应混合物在rt下搅拌1-24h。将混合物装填至预平衡的SCX-2柱上。用DCM/MeOH的4:1混合物洗涤柱并使用DCM/7M NH3在MeOH中的4:1混合物洗脱碱性化合物。真空浓缩含氨级分，得到期望产物。
一般程序2：经氨基甲酰氯中间体形成尿素
在0℃下，向三光气(0.3-0.6当量)在MeCN中的溶液中加入吡啶或DIPEA(2-5当量)并将溶液搅拌10min。加入适当的第一胺(1当量)在MeCN中的溶液并搅拌反应，同时温热至rt持续1-24h。将混合物加入适当的第二胺(1当量)中，随后加入DIPEA(2-5当量)并再搅拌1-24h。加入饱和NaHCO3(aq)。使用相分离器用DCM(x3)萃取所得混合物，减压浓缩合并的有机相并通过快速色谱纯化残留物，得到期望产物。
一般程序3：HATU偶联
将适当的胺(1当量)、羧酸(1.0-1.5当量)和HATU(1-1.5当量)溶解于DCM中并加入DIPEA(1-4当量)。搅拌反应1-24h，然后通过加入饱和NaHCO3(aq)进行猝灭。使用相分离器用DCM(x3)萃取所得混合物。减压浓缩合并的有机萃取物，并通过快速色谱纯化剩余残留物，得到产物。
一般程序4：使用烷基卤化物烷基化亲核试剂
向适当的亲核试剂(1当量)在1,4-二噁烷中的溶液中加入适当的烷基卤(1.1当量)和碳酸铯(2.0当量)。将反应混合物在100℃下加热40h。冷却后，过滤反应混合物并蒸发至干。通过快速色谱纯化剩余残留物，得到期望产物。
一般程序5：Suzuki偶联
将适当的卤化物(1当量)、有机硼试剂(1-3当量)、Pd催化剂(0.05-0.1当量)和无机碱(2-5当量)的混合物装入反应瓶中。如上所述，在水和1,4-二噁烷或甲苯的混合物中。通过抽真空并重新填充N2三次或通过鼓泡N2穿过5-15min使混合物脱气，然后密封反应管。将反应在指定条件下加热指定时间并冷却至rt。加入水或饱和NH4Cl(aq)并使用DCM(x3)萃取所得混合物。将合并的有机萃取物干燥(相分离器)，减压浓缩，并通过快速色谱纯化剩余残留物，得到期望产物。
一般程序6：三氟乙酰胺脱保护成游离碱
将适当的三氟乙酰胺(1当量)溶解于MeOH和水(10:1)中并加入碳酸钾(5当量)。将所得混合物在rt或至多50℃下搅拌1-18h。将反应混合物用DCM稀释并装填至预平衡的SCX-2柱上。用DCM/MeOH的4:1混合物洗涤柱并使用DCM/7M NH3在MeOH中的4:1混合物洗脱碱性化合物。真空浓缩含氨级分并通过快速色谱(通常在DCM中的0-20％MeOH或在EtOAc中的0-20％MeOH)进一步纯化，得到期望产物。
一般程序7：使用氨基甲酰氯中间体形成尿素
在rt下，将适当的氨基甲酰氯(1-2当量)、胺或胺.HCl盐(1-3当量)和DIPEA(2-6当量)在所述溶剂中搅拌1-18h，然后用0.5M HCl(aq)猝灭并使用相分离器用DCM(x3)萃取。真空浓缩合并的有机相并通过快速色谱纯化残留物，得到期望产物。
一般程序8：氨基甲酰氯形成
在0℃下，向搅拌的三光气(1当量)在DCM中的溶液中滴加吡啶(10当量)。30min后，在0℃下滴加适当的胺(1当量)在DCM中的溶液，或胺盐(1当量)和DIPEA(1.5当量)在DCM中的溶液。经1-18h升温至rt。通过加入1M HCl(aq)猝灭反应混合物并使用相分离器用DCM(x3)萃取所得混合物。真空浓缩合并的有机相，得到期望产物，无需进一步纯化。
一般程序9：PMB脱保护成游离碱
将PMB保护的胺(1当量)溶解于MeCN中，并在0℃下将硝酸铈铵水溶液(4当量)滴加至搅拌的溶液中。升温至rt。18h后，真空除去挥发物，用过量的K 2CO 3碱化剩余的水溶液并用MTBE萃取。真空除去溶剂，并通过快速色谱或制备型HPLC纯化剩余残留物，得到期望产物。
一般程序10：Teoc脱保护成游离碱
将Teoc保护的胺(1当量)溶解于DCM中并加入TFA(通常为2:1，DCM/TFA按体积计)。将反应物在rt下搅拌0.5-24h，然后装填至预平衡的SCX-2柱上。用DCM/MeOH的3:1混合物洗涤柱并使用DCM/7M NH3在MeOH中的3:1混合物洗脱碱性化合物。真空浓缩含氨级分并通过快速色谱进一步纯化，得到期望产物。
中间体1：((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯
步骤1：(S)-3-氨基-3-苯基丙酸甲酯盐酸盐：在0℃下，向搅拌的(S)-3-氨基-3-苯基丙酸(144g，873mmol)在MeOH(1.44L)中的溶液中滴加SOCl2(76mL，1047mmol)并在rt下搅拌16h。减压浓缩反应混合物并将残留物与戊烷一起研磨并真空干燥，得到标题化合物(156g，87％)。LCMS(方法C):RT＝2.23min,m/z＝180[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.75(br s,3H),7.54(d,2H),7.43-7.35(m,3H),4.57(br s,1H),3.54(s,3H),3.24-31.6(m,1H),3.03-2.97(m,1H)。
步骤2：(S)-3-((3-甲氧基-3-氧代丙基)氨基)-3-苯基丙酸甲酯：将(S)-3-氨基-3-苯基丙酸甲酯盐酸盐(165g，766mmol)溶解于甲醇(1.65L)。加入三乙胺(160mL，1149mmol)在MeOH(1.48L)中的溶液，随后在rt下滴加丙烯酸甲酯(104mL，1149mmol)在MeOH(1.48L)中的溶液。将反应用水(3L)稀释并用EtOAc(3×5L)萃取。将有机层干燥(Na2SO4)，减压浓缩，得到粗品，其通过快速色谱(在己烷中的0-50％EtOAc)纯化，得到标题化合物(180g，88.6％)。LCMS(方法C):RT＝3.02min,m/z＝266[M+H]+.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.31-7.23(m,5H),4.07-4.04(m,1H),3.64(s,3H),3.62(s,3H),2.69-2.55(m,4H),2.49-2.37(m,2H)。
步骤3：(S)-3-((叔丁氧基羰基)(3-甲氧基-3-氧代丙基)氨基)-3-苯基丙酸甲酯：将(S)-3-((3-甲氧基-3-氧代丙基)氨基)-3-苯基丙酸甲酯(184g，694mmol)悬浮于MeOH(1.84L)中并滴加Boc2O(191mL，833mmol)。将反应混合物在rt下搅拌32h。将反应混合物用水(3L)稀释并用乙酸乙酯(3×5L)萃取。将有机层干燥(Na2SO4)并减压浓缩。通过快速色谱(在己烷中的0-20％EtOAc)纯化残留物，得到标题化合物(220g，87％)。LCMS(方法D):RT＝3.44min,m/z＝366[M+H]+.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.33-7.24(m,5H),5.69-5.52(m,1H),3.65(s,3H),3.58(s,3H),3.32(br s,2H),3.03-2.97(m,2H),2.47(br s,1H),2.16-2.02(m,1H),1.45(s,9H)。
步骤4：3-甲基(6S)-4-羟基-6-苯基-1,2,5,6-四氢吡啶-1,3-二羧酸1-叔丁酯和3-甲基(2S)-4-羟基-2-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶-1,3-二羧酸1-叔丁酯：将(S)-3-((叔丁氧基羰基)(3-甲氧基-3-氧代丙基)氨基)-3-苯基丙酸甲酯(55g，151mmol)溶解于甲苯(1.1L)中并冷却至-78℃。滴加1M的LiHMDS在THF中的溶液(181mL，180mmol)。加入完成后，将反应混合物在-78℃下搅拌2h。用水(1L)猝灭反应并使用乙酸乙酯(3×2L)萃取。将有机层经Na2SO4干燥并减压浓缩，得到粗品，其通过快速色谱(在己烷中的0-10％EtOAc)纯化，得到标题化合物的混合物(25g，50％)。LCMS(方法D):RT＝3.40,3.69min(2种化合物),m/z＝334[M+H]+。
步骤5：(S)-4-氧代-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯：将3-甲基(6S)-4-羟基-6-苯基-1,2,5,6-四氢吡啶-1,3-二甲酸1-叔丁酯和3-甲基(2S)-4-羟基-2-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶-1,3-二羧酸1-叔丁酯(40g，120mmol)的混合物溶解于DMSO(200mL)中。加入氯化钠(21g，360mmol)和水(7.5mL)并将反应混合物在145℃下加热6h。将反应混合物用水(500mL)稀释并用乙酸乙酯(2×2L)萃取。将有机层干燥(Na2SO4)并减压浓缩。通过快速色谱(在己烷中的0-20％EtOAc)纯化粗化合物，得到标题化合物(20g，60％)。LCMS(方法C):RT＝1.59min,m/z＝276[M+H]+.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.33-7.22(m,5H),5.70(br s,1H),4.19(br s,1H),3.18-3.11(m,1H),2.97-2.92(dd,1H),2.85-2.80(dd,1H),2.53-2.47(m,1H),2.37-2.31(m,1H),1.46(s,9H)。
步骤6：(S)-2-苯基哌啶-4-酮盐酸盐：在0℃下，向(S)-4-氧代-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(5g，18.2mmol)在DCM(4mL)中的溶液中加入在1,4-二噁烷(20mL)的4M HCl，并将反应混合物在rt下搅拌16h。减压浓缩反应物，得到粗标题化合物(3.18g，82％)，其不经纯化即用于下一步骤。LCMS(方法C):RT＝2.13min,m/z＝176[M+H]+。
步骤7：(S)-2-苯基-1-(2,2,2-三氟乙酰基)哌啶-4-酮：将(S)-2-苯基哌啶-4-酮盐酸盐(3.8g，18.1mmol)悬浮于DCM(100mL)。在0℃下，将Et3N(5.54mL，39.7mmol)和三氟乙酸酐(5.52mL，39.7mmol)加入反应混合物中并在rt下搅拌16h。将反应混合物用水(100mL)稀释并使用乙酸乙酯(2×250mL)萃取。将有机层干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到粗品，其通过快速色谱(在己烷中的0-30％EtOAc)纯化，得到标题化合物(3.5g，71％)。GCMS(方法A):m/z＝271M+。
步骤8：2,2,2-三氟-1-((2S)-4-((4-甲氧基苄基)氨基)-2-苯基哌啶-1-基)乙烷-1-酮：在rt下，向(S)-2-苯基-1-(2,2,2-三氟乙酰基)哌啶-4-酮(1.0g，3.63mmol)的MeOH(10mL)中的溶液中加入4-甲氧基苄胺(1.42g，10.9mmol)和催化的AcOH(1-2滴)。将反应混合物搅拌1h。将NaBH3CN(0.69g，10.9mmol)加入反应混合物中并在rt下搅拌16h。将反应混合物用水(50mL)稀释并使用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将有机层干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到粗品，其通过快速色谱(在DCM中的0-10％MeOH)纯化，得到标题化合物(750mg，52％)。LCMS(方法D):RT＝3.45min,m/z＝393[M+H]+。
步骤9：1-((2S)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-基)-2,2,2-三氟乙烷-1-酮：向2,2,2-三氟-1-((2S)-4-((4-甲氧基苄基)氨基)-2-苯基哌啶-1-基)乙烷-1-酮(1.9g，4.85mmol)在1:1MeCN/水(20mL)的溶液加入CAN(7.97g，14.5mmol)并将反应混合物在rt下搅拌5h。将反应混合物用饱和NaHCO3(aq)溶液(25mL)猝灭，用水(50mL)稀释，并使用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机相干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到粗品，其通过快速色谱(在DCM中的0-5％MeOH)纯化，得到标题化合物(950mg，72％)。LCMS(方法C):RT＝2.54min,m/z＝273[M+H]+。
步骤10：((2S,4R)-2-苯基-1-(2,2,2-三氟乙酰基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯：在0℃下，向1-((2S)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-基)-2,2,2-三氟乙烷-1-酮(950mg，3.5mmol)在DCM(5mL)中的溶液中加入Et3N(1.46mL，10.5mmol)和Boc2O(0.96mL，4.19mmol)。加入后，将反应混合物在rt下搅拌16h。将反应混合物用水(50mL)稀释并使用乙酸乙酯(100mL)萃取。将有机层用饱和NaHCO3(aq)溶液(50mL)、水(50mL)洗涤并干燥(Na2SO4)。减压蒸发溶剂，得到粗品((2S)-2-苯基-1-(2,2,2-三氟乙酰基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体的混合物)，将其纯化并通过快速色谱(在己烷中的0-30％EtOAc)分离，得到((2S,4S)-2-苯基-1-(2,2,2-三氟乙酰基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯)(首先洗脱非对映异构体：400mg，30％)。LCMS(方法C):RT＝3.65min,m/z＝273[M-Boc+H]+.[α]D 25＝+5.2(在MeOH中c0.25)；和标题化合物(第二洗脱非对映异构体：300mg,23％)。LCMS(方法C):RT＝3.58min,m/z＝373[M+H]+.[α]D 25＝+36.1(在MeOH中c 0.25)。[注：基于旋光度数据与通过WO2020115501，p317中概述的可选方法制备的相同化合物记录的旋光度数据进行比较来确定标题化合物的立体化学：[α]D 21＝+49.82(在MeOH中c 0.25)，先前未发表]。
步骤11：((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯：将在4:1MeOH/H2O(10mL)中的((2S,4R)-2-苯基-1-(2,2,2-三氟乙酰基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(300mg，0.8mmol)加入K2CO3(168mg，0.2mmol)并在rt下搅拌16h。将反应混合物用水(25mL)稀释并用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将有机物干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到粗品，其通过快速色谱(在己烷中的0-30％EtOAc)纯化，得到标题化合物(150mg，67％，de＝100％)。LCMS(方法E):RT＝1.34min,m/z＝277[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.34-7.19(m,5H),6.79(d,1H),3.54(d,1H),3.40(br s,1H),3.03(d,1H),2.65-2.59(m,1H),1.82-1.69(m,2H),1.36(s,9H),1.30-1.05(m,3H).[α]D 20＝+36.11(在MeOH中c 0.25)。
中间体2：(R)-3-(3,5-二氟苯基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
使用Chiralpak IG(20mm×250mm,5μm)柱，采用等度溶剂条件：20:80MeOH/CO2(0.2％v/v NH3)，通过手性SFC将3-(3,5-二氟苯基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(10.2g)[市售]解析成单一立体异构体。第一洗脱物质提供(S)-3-(3,5-二氟苯基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(4.75g)。手性纯度(方法A)：RT＝1.07min，99.9％ee。第二洗脱物质提供标题化合物(4.83g)。手性纯度(方法A)：RT＝1.55min，99.7％ee。[注：基于衍生物的相对效力分配立体化学——已知(R)-立体异构体的效力显著更强，参见WO2020115501]。
中间体3：(R)-3-(2,5-二氟苯基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
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使用Lux A2(21.2mm×250mm,5μm)柱，采用等度溶剂条件：50:50庚烷/IPA(0.2％v/v NH3)，通过手性HPLC将3-(2,5-二氟苯基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(9.88g)[市售]解析成单一立体异构体。第一洗脱物质提供标题化合物(4.55g)。手性纯度(方法B)：RT＝4.05min，100％ee。第二洗脱物质提供(S)-3-(2,5-二氟苯基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(4.47g)。手性纯度(方法B)：RT＝6.29min，100％ee。[注：基于衍生物的相对效力分配立体化学——已知(R)-立体异构体的效力显著更强，参见WO2020115501]。
中间体4：(2S,4R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-苯基哌啶
步骤1：(2S)-4-羟基-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯：在0℃下，在氮气下向(S)-4-氧代-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.5g，9.08mmol)在THF(100mL)中的溶液中的溶液中加入1MLiAlH4的THF溶液(10.9mL，10.9mmol)，并将反应混合物在0℃下搅拌40min。通过滴加Na2SO4(aq)溶液猝灭反应混合物并用水(50mL)和乙酸乙酯(100mL)稀释。分离有机层并用盐水(75mL)洗涤并干燥(Na2SO4)。减压蒸发溶剂，得到粗品，其通过快速色谱(在己烷中的0-20％EtOAc)纯化，得到标题化合物(1.85g，73％)。LCMS(方法D):RT＝3.07min，m/z＝278[M+H]+。
步骤2：(2S,4R)-2-苯基哌啶-4-醇：向(2S)-4-羟基-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.3g，4.69mmol)在DCM(58.5mL)中的溶液中加入TFA(6.5mL)并将反应混合物在rt下搅拌4h。减压蒸发溶剂。将残留物用水(50mL)稀释并用NaHCO3溶液碱化至至多～pH 9-10，用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将有机层用盐水(80mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并减压蒸发溶剂，得到(2S)-2-苯基哌啶-4-醇(690mg，83％)。使用Chiralpak IG(21mm×250mm,5μm)柱，采用等度溶剂条件：90:10己烷/EtOH(0.1％v/v异丙胺)，通过手性HPLC将该物质解析成单一立体异构体，得到标题化合物(150mg)。GCMS(方法A):m/z＝177M+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.36-7.29(m,4H),7.26-7.23(m,1H,重叠CDCl3信号),3.82-3.74(m,1H),3.64-3.61(m,1H),3.25-3.20(m,1H),2.82-2.75(m,1H),2.15-2.11(m,1H),2.03-1.99(m,1H),1.54-1.44(m,2H)[注：符合来自四面体：不对称(Tetrahedron:Asymmetry),1999,10,4231–4237的文献数据来确认结构分配]。
步骤3：(2S,4R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-苯基哌啶：向搅拌的(2S,4R)-2-苯基哌啶-4-醇(60mg，0.339mmol)和TBDMSCl(128mg，0.846mmol)在DCM(2mL)中的溶液中加入咪唑(92mg，1.35mmol)，并将所得混合物在rt下搅拌18h。将反应用饱和NaHCO3(aq)猝灭并使用相分离器用DCM(x3)萃取。真空浓缩合并的有机相，并使用Biotage Sfar AminoD柱(在环己烷中的0-50％DCM)通过快速色谱纯化粗品，得到标题化合物(77mg，78％)。LCMS(方法B):RT＝1.04min,m/z＝292[M+H]+。
中间体5：((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯
步骤1：1-((2S)-4-(乙氨基)-2-苯基哌啶-1-基)-2,2,2-三氟乙烷-1-酮：在rt下，向(S)-2-苯基-1-(2,2,2-三氟乙酰基)哌啶-4-酮(1.6g，5.81mmol)在MeOH(5mL)中的溶液中加入2M EtNH2在EtOH中的溶液(8.22mL，17.4mmol)和催化的AcOH(1-2滴)并搅拌1h。将NaBH3CN(1.09g，17.4mmol)加入反应混合物中并在rt下搅拌16h。将反应混合物用水(50mL)稀释并用乙酸乙酯(2×150mL)萃取。将有机层干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到粗品，其通过快速色谱(0-10％MeOH/DCM)纯化，得到标题化合物(1.0g，57％)。LCMS(方法D):RT＝2.61min,m/z＝301[M+H]+。
步骤2：乙基((2S)-2-苯基-1-(2,2,2-三氟乙酰基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯：在0℃下，向1-((2S)-4-(乙氨基)-2-苯基哌啶-1-基)-2,2,2-三氟乙烷-1-酮(1g，3.33mmol)在DCM(10mL)中的溶液中加入Et3N(1.4mL，10mmol)和Boc2O(0.920mL，4mmol)。将反应混合物在rt下搅拌16h。将反应混合物用水(50mL)稀释并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将有机层用饱和NaHCO3(aq)溶液(80mL)、水(80mL)洗涤并干燥(Na2SO4)。减压蒸发溶剂，得到粗品，其通过快速色谱(在己烷中的0-20％EtOAc)纯化，得到标题化合物(1g，75％)。LCMS(方法D):RT＝3.81,3.89min,m/z＝401[M+H]+。
步骤3：乙基((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯：在rt下，向乙基((2S)-2-苯基-1-(2,2,2-)-三氟乙酰基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(1g，2.5mmol)在4:1MeOH/H2O(10mL)中的溶液中加入K2CO3(518mg，3.75mmol)并搅拌16h。将反应混合物用水(50mL)稀释并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将有机层干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到粗品，其通过快速色谱(在己烷中的0-30％EtOAc)纯化，得到乙基((2S)-2-苯基哌啶-4-基))氨基甲酸叔丁酯(600mg，79％)。使用Chiralpak AY-H(21mm×250mm,5μm)柱，采用等度溶剂条件：含有0.1％v/v异丙胺的90:10己烷/EtOH，通过手性HPLC将该物质解析成单一立体异构体，得到：
((2S,4S)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(第一洗脱：130mg，de＝100％)。LCMS(方法D):RT＝3.07min,m/z＝305[M+H]+.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.48(d,2H),7.35(t,2H),7.23-7.20(m,1H),4.34(d,1H),4.11-4.08(m,1H),3.26-3.12(m,2H),2.90-2.85(m,1H),2.75-2.69(m,1H),2.33-2.29(m,1H),2.07-1.99(m,1H),1.73-1.70(m,1H),1.68(1H),1.44(s,9H),1.12 9t,3H)；和
标题化合物(第二洗脱：330mg，de＝100％)。LCMS(方法D):RT＝3.14min,m/z＝305[M+H]+.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.36-7.29(m,4H),7.23-7.22(m,1H),4.22(bs,1H),3.68(d,1H),3.27-3.22(m,1H),3.14(br s,2H),2.88-2.82(m,1H),1.88-1.85(m,1H),1.75-1.72(m,2H),1.63(br s,1H),1.45(s,9H),1.07(t,3H)。
[注：通过1H NMR nOe数据的比较确认立体异构体]。
中间体6：2,2,2-三氟-N-甲基-N-((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺盐酸盐
步骤1：(2S)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯：在rt下，向(S)-4-氧代-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(5.00g，18.2mmol)在MeOH(20mL)中的溶液中加入在MeOH中的40％MeNH2(1.69g，54.5mmol)和催化的AcOH(1-2滴)并搅拌1h。将NaBH3CN(3.44g，54.5mmol)加入反应混合物中并在rt下搅拌16h。将反应混合物用水(100mL)稀释并用乙酸乙酯(2×250mL)萃取。将有机层干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到粗品，其通过快速色谱(在DCM中的0-10％MeOH)纯化，得到标题化合物(3.3g，62％)。LCMS(方法C):RT＝2.77min,m/z＝291[M+H]+。
步骤2：(2S)-2-苯基-4-(2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：在0℃下，向(2S)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(3.3g，11.4mmol)在DCM(30mL)中的溶液中加入Et3N(3.5mL，25.0mmol)，随后加入三氟乙酸酐(3.48mL，25.0mmol)。将反应混合物在rt下搅拌16h。将反应混合物用水(50mL)稀释并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将有机层干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到粗品，其通过快速色谱(在己烷中的0-30％EtOAc)纯化，得到标题化合物(2.5g，57％)。
步骤3：(2S,4R)-2-苯基-4-(2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：使用Chiralpak IC(20mm×250mm,5μm)柱，采用等度溶剂条件：95:5己烷/EtOH，通过手性HPLC将(2S)-2-苯基-4-(2,2,2-三氟-N-甲基乙酰氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(3.2g)分离成单一立体异构体，得到：
(2S,4S)-2-苯基-4-(2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(第一洗脱异构体，0.8g)。LCMS(方法C):RT＝3.81min,m/z＝387[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.39(t,2H),7.29-7.25(m,3H),5.53(br s,1H),4.28-4.10(m,3H),2.97-2.92(m,2H)，2.87-2.81(m,1H),2.39-2.35(m，1H),2.16(br s,1H),1.82(br s,1H)，1.63-1.60(m,1H),1.45(s，9H)；和
标题化合物(第二洗脱异构体：1.2g)。LCMS(方法C):RT＝3.77min,m/z＝387[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.34-7.21(m,5H),4.85-4.81(m,1H),4.40(br s,1H),3.97-3.91(m,1H),3.53-3.46(m,1H),2.15-2.10(m,3H),1.79(br s,1H),1.41(s,9H)。
[注：通过1H NMR nOe数据的比较确认立体异构体]。
步骤4：2,2,2-三氟-N-甲基-N-((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺盐酸盐：将(2S,4R)-2-苯基-4-将(2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.20g，3.11mmol)悬浮于DCM(3mL)中，随后加入在1,4-二噁烷(10mL)中的4M HCl。将反应混合物在rt下搅拌3h。减压蒸发溶剂，并将残留物与DCM和戊烷一起研磨，得到标题化合物(890mg，89％，de＝100％)。LCMS(方法C):RT＝2.39min,m/z＝287[M+H]+。
在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.39(br s,2H),7.64(d,2H)，7.46-7.39(m,3H),4.61(br s,1H),4.45(d，1H),3.40-3.44(m,1H),3.27-3.21(m,1H),3.0(3H,与HDO信号重叠),2.44(m,1H),1.99(d,1H),1.87(d,1H)。
中间体7：3-(((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)氨基)硫杂环丁烷1,1-二氧化物盐酸盐
步骤1：(2S)-4-((1,1-二氧化硫杂环己烷-3-基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯：在rt下，向(S)-4-氧代-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(500mg，1.82mmol)在MeOH(10mL)中的溶液中加入3-氨基硫杂环丁烷1,1-二氧化物(264mg，2.18mmol)和催化的AcOH(1滴)。将反应混合物搅拌1h。将NaBH3CN(344mg，5.45mmol)加入反应混合物中并在rt下搅拌16h。将反应混合物用水(20mL)稀释并用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将有机层干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到粗品，其通过快速色谱(在DCM中的0-10％甲醇)纯化，得到标题化合物(500mg，72％)，其用于下一步骤。
步骤2：(2S,4R)-4-((1,1-二氧化硫杂环己烷-3-基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯：使用Chiralpak AY-H(21mm×250mm，5μm)柱，采用等度溶剂条件：含有0.1％v/v异丙胺的80:20己烷/EtOH，通过手性HPLC将(2S)-4-((1,1-二氧化硫杂环己烷(3-基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.2g)分离成单一立体异构体，得到：
(2S,4S)-4-((1,1-二氧化硫杂环己烷-3-基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(第一洗脱非对映异构体：125mg)。LCMS(方法D):RT＝3.21min,m/z＝381[M+H]+；和
标题化合物(第二洗脱非对映异构体：292mg)。LCMS(方法C):RT＝3.39min,m/z＝381[M+H]+。
步骤3：3-(((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)氨基)硫杂环丁烷1,1-二氧化物盐酸盐：在0℃下，向(2S,4R)-4-((1,1-二氧化硫杂环己烷-3-基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(700mg，1.84mmol)在DCM(2mL)中的溶液中加入在1,4-二噁烷(10mL)中的4M HCl并在rt下搅拌4h。减压浓缩反应混合物，得到粗品，将其使用DCM和戊烷研磨，得到标题化合物(575mg，98％，de＝100％)。LCMS(方法G):RT＝2.83min,m/z＝281[M+H]+.1H NMR(400MHz,甲醇-d4):δ7.57-7.47(m,5H),4.65-4.60(m,2H)，4.53-4.50(m,4H),3.74(t,1H),3.66-3.63(m,1H),3.35(d,1H),2.57-2.54(m,2H),2.32-2.11(m,2H)。[注：通过与中间体8的1H NMRnOe数据比较确认立体异构体]。
中间体8：3-(((2S,4S)-2-苯基哌啶-4-基)氨基)硫杂环丁烷1,1-二氧化物盐酸盐
在0℃下，向(2S,4S)-4-((1,1-二氧化硫杂环己烷-3-基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(300mg，0.79mmol)在DCM(2mL)中的悬浮液中加入在1,4-二噁烷(7mL)中的4M HCl并在rt下搅拌4h。减压浓缩反应混合物，得到粗品，将其使用DCM和戊烷研磨，得到标题化合物(245mg，98％，de＝100％)。LCMS(方法G):RT＝3.34min,m/z＝281[M+H]+.1H NMR(400MHz,甲醇-d4):δ7.54-7.46(m,5H),4.98(d,1H),4.59-4.45(m,4H),4.35-4.33(m 1H),3.80-3.71(m,2H),3.44-3.41(m,1H),2.49-2.36(m,2H),2.29-2.27m,2H)。[注：通过与中间体7的1H NMR nOe数据比较确认立体异构体]。
中间体9：(2S,4R)-4-甲基-2-苯基哌啶-4-醇盐酸盐
步骤1：(2S,4R)-4-羟基-4-甲基-2-苯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯：在-10℃下，向搅拌的(S)-4-氧代-2-哌啶-1-羧酸叔丁酯(1g，3.36mmol)在THF(50mL)中的溶液中滴加3MMeMgBr在乙醚溶液(2.42mL，7.26mmol)中的溶液并在rt下搅拌16h。通过滴加饱和氯化铵(aq)溶液猝灭反应混合物，用水(50mL)稀释并使用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将有机层用盐水(60mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到粗品，其通过快速色谱(在己烷中的0-75％EtOAc)纯化，得到标题化合物(0.5g，47％)。LCMS(方法D):RT＝3.34min,m/z＝292[M+H]+.1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.29-7.25(m,2H),7.19-7.14(m,3H),5.11-5.10(d,1H),3.21-3.12(m，1H),2.22-2.28(dd,1H),1.82-1.76(dd,1H),1.47-1.44(m,2H),1.32(s,9H),1.13(s,3H)。
步骤2：(2S,4R)-4-甲基-2-苯基哌啶-4-醇盐酸盐：将(2S,4R)-4-羟基-4-甲基-2-苯基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(425mg，1.46mmol)溶解于DCM(50mL)中。在0℃下滴加在1,4-二噁烷溶液(12.5mL)中的4M HCl并在rt下搅拌4h。减压浓缩反应混合物，得到粗品，将其用乙醚研磨，得到标题化合物(190mg，68％)。LCMS(方法C):RT＝1.72min,m/z＝192[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.27(br s,1H),7.58-7.56(d,2H),7.46-7.38(m,3H),5.01(s,1H),4.31-4.28(d,1H),3.31-3.26(m,1H),3.09-3.03(m,1H),2.07-1.91(m,2H),1.80-1.73(m,2H),1.34(s,3H)。[注：通过1H NMR nOe数据分析确认立体异构体(仅形成一种)]。
中间体10：2,2,2-三氟-N-((2S,4R)-2-(3-氟苯基)哌啶-4-基)-N-甲基乙酰胺盐 酸盐
步骤1：(S)-2-(3-氟苯基)-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯：标题化合物的制备类似于(S)-4-氧代-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(中间体1，步骤1至5)，除了使用(S)-3-氨基-3-(3-氟苯基)丙酸代替(S)-3-氨基-3-苯基丙酸作为起始物质。LCMS(方法C):RT＝3.47min,m/z＝294[M+H]+.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.31-7.27(m,1H),57.01(d,1H),6.97-6.93(m,2H),5.66(br s,1H),4.20(br s,1H),3.18(dt,1H),2.93-2.81(m,2H),2.56-2.47(m,1H),2.38-2.33(m,1H),1.46(s,9H)。
步骤2：(2S)-2-(3-氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：向搅拌的(S)-2-(3-氟苯基)-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.5g，8.52mmol)在MeOH(100mL)中的溶液中加入MeNH2(10mL)并在rt下搅拌1h。在rt下分批加入NaBH3CN(2.4g，38.4mmol)。24h后，用水(25mL)猝灭反应混合物并减压浓缩以除去挥发物。将剩余的混合物用水(50mL)稀释并使用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机相干燥(Na2SO4)并浓缩，得到粗产物，其通过快速色谱(在己烷中的70-80％EtOAc)纯化，得到标题化合物(2.5g，95％)。LCMS(方法E):RT＝1.53min,m/z＝309[M+H]+。
步骤3：(2S)-2-(3-氟苯基)-4-(2,2,2-三氟-N-甲基乙酰氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：在0℃下，向搅拌的(2S)-2-(3-氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.5g，8.11mmol)在DCM(50mL)中的溶液中加入三乙胺(4.5mL，32.4mmol)，随后加入三氟乙酸酐(2.5mL，17.8mmol)，并将反应混合物在rt下搅拌。16h后，将反应混合物用水(70mL)稀释并用DCM(2×150mL)萃取。将合并的有机相干燥(Na2SO4)并浓缩，得到粗产物，将其通过快速色谱(在己烷中的30％EtOAc)纯化，得到标题化合物(1.2g，40％)。
步骤4：(2S,4R)-2-(3-氟苯基)-4-(2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：使用Chiralpak IC(20mm×250mm,5μm)柱，采用等度溶剂条件：95:5己烷/EtOH，将(2S)-2-(3-氟苯基)-4-(2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺基)哌啶-1-羧酸叔丁酯分离成单一立体异构体，得到：
(2S,4S)-2-(3-氟苯基)-4-(2,2,2-三氟-N-甲基乙酰氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(第一洗脱异构体：0.25g，de＝100％)。LCMS(方法D):RT＝3.58min,m/z＝405[M+H]+.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.33(br s，1H),7.12-7.85(m,3H),5.71-5.53(br s,2峰,1H),4.53-4.11(m,2H),2.99-2.92(s,2峰,3H),2.85-2.71(m,1H),2.35(d,1H),2.21-2.00(m,1H),1.78-1.60(m,2H),1.52(s,2峰,9H)；和
标题化合物(第二洗脱异构体：0.45g，de＝100％)。LCMS(方法D):RT＝3.58min,m/z＝405[M+H]+.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.28-7.23(m,1H),6.98-6.88(m,3H),4.79(t,1H),4.77-4.58(m,1H),4.12-4.06(m,1H),3.51-3.45(m,1H),2.97-2.88(m,3H),2.21-2.15(m,1H),2.07-1.97(m,2H),1.71-1.69(m,1H),1.25(s，9H)。
[注：通过1H NMR nOe数据的比较确认立体异构体]。
步骤5：2,2,2-三氟-N-((2S,4R)-2-(3-氟苯基)哌啶-4-基)-N-甲基乙酰胺盐酸盐：在0℃下，向搅拌的(2S,4R)-2-(3-氟苯基)-4-(2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(650mg，1.61mmol)在DCM(10mL)中的溶液中加入在1,4-二噁烷(10mL)中的4MHCl。将反应混合物在0℃下搅拌3h，然后减压浓缩。将剩余的粗产物与乙醚和戊烷一起研磨，得到标题化合物(445mg，81％，de＝100％)。LCMS(方法C):RT＝2.71min,m/z＝305[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.60(br s,2H),7.58-7.43(m,3H),7.28-7.24(m,1H),4.67-4.52(m,2H),3.46-3.43(m,1H),3.24-3.21(m,1H),3.01-2.92(s，2峰,3H),2.36-2.27(m,2H),1.98-1.82(m,2H)。
中间体11：2,2,2-三氟-N-((2S,4R)-2-(3-氟苯基)哌啶-4-基)乙酰胺盐酸盐
步骤1：(2S)-4-氨基-2-(3-氟苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：向搅拌的(S)-2-(3-氟苯基)-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(6.0g，20.5mmol)在MeOH(10mL)中的溶液中加入在MeOH(30mL)中的7M NH3，随后加入催化的AcOH(1-2滴)并在rt下搅拌1h。在rt下分批加入NaBH3CN(3.86g，61.4mmol)并在rt下搅拌。16h后，将反应混合物用水(50mL)稀释并使用乙酸乙酯(2×150mL)萃取。将合并的有机相干燥(Na2SO4)并浓缩，得到粗品，其通过快速色谱(在DCM中的10％MeOH)纯化，得到标题化合物(2.6g，43％)。LCMS(方法C):RT＝2.81min,m/z＝295[M+H]+。
步骤2：(2S)-2-(3-氟苯基)-4-(2,2,2-三氟乙酰氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：在0℃下，向搅拌的(2S)-4-氨基-2-(3-氟苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.4g，8.16mmol)在DCM(25mL)中的溶液中加入TEA(3.66mL，26.1mmol)，随后加入三氟乙酸酐(2.50mL，18.0mmol)并将反应混合物在rt下搅拌。16h后，将反应混合物用水(70mL)稀释并使用DCM(2×150mL)萃取。将有机相干燥(Na2SO4)并浓缩，得到粗品，其通过快速色谱(在己烷中的30％EtOAc)纯化，得到标题化合物(2.0g，62％)。
步骤3：(2S,4R)-2-(3-氟苯基)-4-(2,2,2-三氟乙酰氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：使用Chiralpak IC(20mm×250mm，5μm)柱，采用等度溶剂条件：95:5己烷/EtOH，通过手性HPLC将(2S)-2-(3-氟苯基)-4-(2,2,2-三氟乙酰氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.0g)分离成单一立体异构体，得到：
(2S,4S)-2-(3-氟苯基)-4-(2,2,2-三氟-N-甲基乙酰氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(第一洗脱异构体：0.45g，de＝100％)LCMS(方法C):RT＝3.71min,m/z＝391[M+H]+；和
标题化合物(第二洗脱异构体：0.65g，de＝100％)。LCMS(方法C):RT＝3.63min,m/z＝391[M+H]+。
[注：通过1H NMR nOe数据的比较确认立体异构体]。
步骤4：2,2,2-三氟-N-((2S,4R)-2-(3-氟苯基)哌啶-4-基)乙酰胺盐酸盐：在0℃下，向搅拌的(2S,4R)-2-(3-氟苯基)-4-(2,2,2-三氟乙酰氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(650mg，1.67mmol)在DCM(5mL)中的溶液中加入在二噁烷(10mL)中的4M HCl，并将反应混合物在rt下搅拌3h。减压浓缩反应混合物并冻干，得到标题化合物(480mg，99％)。LCMS(方法C):RT＝2.87min,m/z＝291[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.59(br s,2H),9.37(br s,1H),7.52-7.43(m,3H),7.21(t,1H),4.46-4.43(m,1H),4.17-4.12(m,1H),3.43(d,1H),3.21-3.14(m,1H),2.18-2.02(m,4H)。
中间体12：(R)-1-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-氯吡啶-2(1H)-酮盐酸盐
/>
将(R)-10-((4-氯-2-氧代吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(300mg,0.788mmol)[实施例44，步骤2]在1,4-二噁烷(2mL)中的4M HCl中的溶液在rt下搅拌18h。然后将反应物真空浓缩，得到标题化合物(249mg，定量)。LCMS(方法B):RT＝0.62min,m/z＝281,283[M+H]+。
中间体13：((2R,4R)-2-乙基哌啶-4-基)氨基甲酸2-(三甲基甲硅烷基)乙酯
步骤1：外消旋-(2R,4R)-2-乙基哌啶-4-羧酸：向在甲醇(150mL)中的2-乙基吡啶-4-羧酸(5.00g，33mmol)中加入10％(w/w)Pd/C(2.00g)并在50℃下在氢气(100atm)下搅拌。48h后，过滤反应混合物并蒸发至干，得到标题化合物(4.72g，90％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.21(br s,1H),3.22(m,1H),2.93(m,1H),2.84(m,1H),2.53(m，1H),2.03(m,1H),1.93(m,1H),1.69(m,2H),1.2(m,1H),1.40(m,1H),0.90(t,3H)。
步骤2：外消旋-(2R,4R)-2-乙基-4-(((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)氨基)哌啶-1-羧酸酯：向1,4-二噁烷(200mL)和水(100mL)中的外消旋-(2R,4R)-2-乙基哌啶-4-羧酸(4.72g，30.0mmol)中加入氢氧化钠(4.80g，120mmol)。将反应混合物冷却至0℃并滴加CbzCl(7.70g，45.0mmol)。24h后，蒸发挥发物并用MTBE洗涤剩余的水相，使用饱和硫酸氢钠(aq)酸化至～pH 4，得到油状物，使用EtOAc萃取该油状物。蒸发溶剂得到粗品外消旋-(2R,4R)-1-((苄氧基)羰基)-2-乙基哌啶-4-羧酸(7.8g)，将其溶解于甲苯(200mL)中，随后加入二苯基磷酰基叠氮化物(11.1g，40.0mmol)和三乙胺(4.06g，40.0mmol)。将反应混合物在75℃下加热4h，随后加入三甲基甲硅烷基乙醇(9.50g，80.0mmol)。将反应混合物在100℃下加热。24h后，真空除去溶剂并通过快速色谱纯化剩余残留物，得到标题化合物(5.40g，44％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.30(m,5H),7.09(br s,1H),5.02(m,2H),4.00(m,2H),3.81(m,1H),3.64(m,1H),3.53(m,1H),3.22(m,1H),1.71–1.63(m,4H),1.47(m,2H),0.88(m,2H),0.71(t,3H),-0.02(s,9H)。
步骤3：外消旋-((2R，4R)-2-乙基哌啶-4-基)氨基甲酸2-(三甲基甲硅烷基)乙酯：将外消旋-(2R，4R)-2-乙基-4-(((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)氨基)哌啶-1-羧酸苄酯(5.40g，13.3mmol)溶解于甲醇(70mL)中，加入10％(w/w)Pd/C(0.5g)并在rt下在氢气(1atm)下搅拌。24h后，过滤反应混合物，真空除去溶剂并通过快速色谱纯化残留物，得到标题化合物(1.72g，47％)。LCMS(方法F):RT＝0.92min，m/z＝273[M+H]+.1H NMR(400MHz，DMSO-d6):δ7.01(m，1H),4.00(m,2H),3.25(m,1H),2.91(m,1H),2.27(m,1H),1.75–1.61(m,2H),1.30–1.11(m,3H),0.88(m,2H)，0.83(t,3H)，-0.01(s，9H)。
步骤4：((2R，4R)-2-乙基哌啶-4-基)氨基甲酸2-(三甲基甲硅烷基)乙酯：使用Chiralpak AD-H(20mm×250mm，5μm)柱，采用等度溶剂条件：80:10:10己烷/IPA/MeOH，通过手性HPLC将外消旋-2-(三甲基甲硅烷基)乙基((2R,4R)-2-乙基哌啶-4-基)氨基甲酸酯(1.4g)解析成单一立体异构体。第一洗脱物质(RT＝9.48min)提供((2S,4S)-2-乙基哌啶-4-基)氨基甲酸2-(三甲基甲硅烷基)乙酯(0.65g)。[α]D 25＝-9.88(在CHCl3中c 0.25)；第二洗脱物质(RT＝13.27min)提供标题化合物(0.62g)。[α]D 25＝+11.42(在CHCl3中c 0.25)。
中间体14：(R)-3,3-二甲基-4-((2-氧代-4-氯吡啶-1(2H)-基)甲基)哌啶-1-羧酸 叔丁酯
步骤1：4-(碘甲基)-3,3-二甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯：在0℃下，向搅拌的4-(羟甲基)-3,3-二甲基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(15.3g，63.0mmol)、咪唑(5.14g，75.6mmol)和三苯基膦(19.8g，75.6mmol)在THF(153mL)中的混合物中滴加碘(19.2g，75.6mmol)在THF(150mL)中的溶液。将反应混合物在rt下搅拌过夜，用饱和Na2SO3(aq)溶液猝灭直至颜色完全消失，随后使用乙酸乙酯(3×500mL)萃取。合并的有机相依次使用盐水(300mL)、水(300mL)、盐水(300mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并真空除去溶剂。通过快速色谱(在己烷中的10％MTBE)纯化剩余残留物，得到标题化合物(18g，81％)，为粘性无色油状物。1H NMR(500MHz,CDCl3):δ4.20(s,1H),3.54(m,2H),2.78(t,1H),2.66(s,1H),2.43(s,1H),1.98(m,1H),1.54(m,1H),1.44(s,9H),1.25(m,1H),0.97(s,3H),0.78(s,3H)。
步骤2：3,3-二甲基-4-((2-氧代-4-氯吡啶-1(2H)-基)甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：将4-氯吡啶-2(1H)-酮(2.70g，20.8mmol)、4-(碘甲基)-3,3-二甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯(8.83g，25mmol)、Cs2CO3(8.15g，25mmol)和1,4-二噁烷(106mL)的混合物置于密封管中并在120℃下加热48h。冷却至rt后，蒸发溶剂。将残留物溶解于DCM中，过滤，并蒸发溶剂。通过快速色谱纯化剩余残留物，得到标题化合物(2.3g，26％)。LCMS(方法F):RT＝1.34min,m/z＝299[M-丁烯+H]+。
步骤3：(R)-3,3-二甲基-4-((2-氧代-4-氯吡啶-1(2H)-基)甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：使用Chiralcel OD-H(4.6mm×250mm，5μm)柱，采用等度溶剂条件：80:10:10己烷/IPA/MeOH，通过手性HPLC将3,3-二甲基-4-((2-氧代-4-氯吡啶-1(2H)-基)甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.62g)解析成单一立体异构体。第一洗脱物质(RT＝7.79min)提供(S)-3,3-二甲基-4-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(674mg)。LCMS(方法F):RT＝1.30min,m/z＝299[M-丁烯+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.72(d,1H),6.51(s,1H),6.35(d,1H),4.12(d,1H),3.90(m,1H),3.50(m,2H),2.60(m,1H),2.42(m,1H),1.68(m,1H),1.38(s,9H),1.27(m,1H),0.97(s,3H),0.81(s,3H).[α]D 25＝+85.58(在MeOH中c 0.4)；和第二洗脱物质(RT＝9.44min)提供标题化合物(692mg)。LCMS(方法F):RT＝1.30min,m/z＝299[M-丁烯+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.72(d,1H),6.51(s,1H),6.35(d,1H),4.12(d,1H),3.90(m,1H),3.50(m,2H),2.60(m,1H),2.42(m,1H),1.68(m,1H),1.38(s,9H),1.27(m,1H),0.97(s,3H),0.81(s,3H).[α]D 25＝-78.98(在MeOH中c 0.4)。
中间体15：((3S,5S)-5-苯基吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯
步骤1：外消旋-((3S,5S)-5-苯基-1-(2,2,2-三氟乙酰基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯：在0℃下，向外消旋-((3S,5S)-5-苯基吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(2.52g，9.6mmol)在DCM(100mL)中的溶液中加入三乙胺(2.92g，28.8mmol)，随后滴加三氟乙酸酐(2.22g，10.6mmol)。24h后，将反应混合物用水洗涤数次，将合并的有机相干燥(Na2SO4)并真空除去溶剂，得到标题化合物(3.41g，99％)。LCMS(方法F):RT＝1.23min,m/z＝303[M-丁烯+H]+。
步骤2：((3S,5S)-5-苯基-1-(2,2,2-三氟乙酰基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯：使用Chiralpak IB(20mm×250mm，5μm)柱，采用等度溶剂条件：90:5:5己烷/IPA/MeOH(流速：12mL/min)，通过手性HPLC将外消旋-((3S,5S)-5-苯基-1-(2,2,2-三氟乙酰基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(2.80g)解析成单一立体异构体。第一洗脱物质(RT＝12.12min)提供标题化合物(1.49g)。[α]D 25＝-9.76(在CHCl3中c 0.25)；第二洗脱物质(RT＝25.22min)提供((3R,5R)-5-苯基-1-(2,2,2-三氟乙酰基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(0.95g)。[α]D 25＝+10.44(在CHCl3中c 0.25)。
步骤3：((3S,5S)-5-苯基吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯：在rt下，向搅拌的((3S,5S)-5-苯基-1-(2,2,2-三氟乙酰基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(1.49g，4.16mmol)在DCM(70mL)中的溶液中加入2M K2CO3(aq)溶液(20mL)。24h后，停止搅拌并分离所得双相混合物并进一步使用DCM(x3)萃取。将合并的有机相干燥(Na2SO4)并真空除去溶剂，得到标题化合物(0.89g，82％)。LCMS(方法F):RT＝0.76min,m/z＝263[M+H]+.1H NMR(500MHz,CDCl3):δ7.38–7.24(m,5H),4.83(m,1H),4.24(m,1H),4.14(m,1H),3.24(m,1H),3.01(m,1H),2.64(m,1H),2.22(m,1H),1.51(m,1H),1.44(s,9H).[α]D 21＝-19.76(在MeOH中c 0.25)。
中间体16：(2S,4R)-N-(2,2-二氟乙基)-2-苯基哌啶-4-胺盐酸盐
步骤1：(2S)-4-((2,2-二氟乙基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯：在rt下，向搅拌的(S)-4-氧代-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.0g，3.63mmol)在MeOH(10mL)中的溶液中加入2,2-二氟乙-1-胺(0.512mL，7.26mmol)和催化的AcOH(1-2滴)。1h后，加入NaBH3CN(0.69g，10.9mmol)。16h后，将反应混合物用水(50mL)稀释并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机相干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到粗品，其通过快速色谱(在DCM中的0-10％MeOH)纯化，得到标题化合物(1.0g，80％)。
步骤2：(2S,4R)-4-((2,2-二氟乙基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯：使用Chiralcel OD-H(20mm×250mm，5μm)柱，采用等度溶剂条件：95:5己烷/EtOH+0.1％三乙胺，通过手性HPLC将(2S)-4-((2,2-二氟乙基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.1g)分离成单一立体异构体，得到(2S,4S)-4-((2,2-二氟乙基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(第一洗脱异构体：300mg，de＝100％)。LCMS(方法D):RT＝3.48min,m/z＝341[M+H]+；和标题化合物(第二洗脱异构体：600mg,de＝100％)。LCMS(方法D):RT＝3.48min,m/z＝341[M+H]+。[注：通过1H NMR nOe数据的比较确认立体异构体]。
步骤3：(2S,4R)-N-(2,2-二氟乙基)-2-苯基哌啶-4-胺盐酸盐：向(2S,4R)-4-((2,2-二氟乙基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(600mg，1.77mmol)在DCM(5mL)中的溶液中加入在1,4-二噁烷溶液(5mL)中的4M HCl并将反应混合物在rt下搅拌。16h后，真空除去溶剂并将剩余残留物与戊烷一起研磨，得到标题化合物(412mg，97％)。LCMS(方法C):RT＝1.82min,m/z＝241[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.01(br s,2H),9.82(br s,1H),9.46(br s,1H),7.64-7.58(m,2H),7.48-7.42(m,3H),6.47(t,1H),4.37(t,1H),3.56-3.40(m,4H),3.16-3.12(m,1H),2.49(m,1H,重叠DMSO信号),2.34-2.31(m,1H),2.18-2.10(m,2H)。
中间体17：(2S,4R)-2-苯基哌啶-4-羧酸甲酯
步骤1：2-苯基异烟酸：使用在3:1 1,4-二噁烷/水(400mL)中的2-溴异烟酸甲酯(10.8g，50mmol)[市售]、苯基硼酸(9.15g，75mmol)、磷酸三钾(31.8g，150mmol)和Pd(dppf)Cl2.DCM(1.22g，1.5mmol)，根据一般程序5制备标题化合物，得到标题化合物(9.5g，95％)。LCMS(方法F):RT＝1.01min,m/z＝200[M+H]+。
步骤2：2-苯基异烟酸甲酯：在0℃下，向2-苯基异烟酸(9.5g，47.7mmol)在甲醇(285mL)中的溶液中滴加亚硫酰氯(17.0g，143mmol)。将反应混合物回流，16h后，真空除去溶剂，并将所得物质在60℃下真空干燥，得到标题化合物(10.0g，98％)。1H NMR(500MHz,CDCl3):δ9.11(d,1H),8.62(s,1H),8.26(m,3H),7.65(m,3H),4.08(s,3H)。
步骤3：外消旋-(2S,4R)-2-苯基哌啶-4-羧酸甲酯：向2-苯基异烟酸甲酯(10.0g，47.0mmol)[市售]在甲醇(400mL)中的溶液中加入10％(w/w)Pd/C(2.0g)，并将反应混合物置于高压釜中并在60℃下氢化(100atm)。48h后，过滤反应混合物并蒸发至干，得到标题化合物(10g，97％)。LCMS(方法F):RT＝0.60min,m/z＝220[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ9.55(s,1H),7.58(d,2H),7.41(m,3H),4.29(t,1H),3.61(s,3H),3.37(m,1H),3.09(t,1H),2.88(t,1H),2.11(d,1H),2.00(m,3H)。
步骤4：(2S,4R)-2-苯基哌啶-4-羧酸甲酯：使用Chiralpak OD-H(4.6mm×250mm，5μm)柱，采用等度溶剂条件：80:10:10己烷/IPA/MeOH(流速：0.6mL/min)，通过手性HPLC将外消旋-(2S,4R)-2-苯基哌啶-4-羧酸甲酯(0.80g)解析成单一立体异构体。第一洗脱物质(RT＝10.93min)提供(2R,4S)-2-苯基哌啶-4-羧酸甲酯(281mg)。[α]D 25＝-37.86(在MeOH中c0.4)；和第二洗脱物质(RT＝12.87min)提供标题化合物(275mg)。[α]D 25＝+36.57(在MeOH中c 0.4)。
中间体18：(R)-10-((6-氧代-4-(邻甲苯基)嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺 [4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯
步骤1：10-((6-氧代-4-(邻甲苯基)嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯：向在1,4-二噁烷(400mL)中的6-(邻甲苯基)嘧啶-4(3H)-酮(7.00g，37.6mmol)[市售]中加入10-(碘甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(20.0g，52.6mmol)和2当量的碳酸铯(24.5g，75.2mmol)。将反应混合物在100℃下加热并搅拌。40h后，过滤反应混合物并真空除去溶剂。通过快速色谱纯化剩余残留物，得到标题化合物(6.40g，39％)。LCMS(方法F):RT＝1.68min,m/z＝382[M-丁烯+H]+。
步骤2：(R)-10-((6-氧代-4-(邻甲苯基)嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯：使用Chiralpak IA-III(20mm×250mm，5μm)柱，采用等度溶剂条件：90:5:5己烷/IPA/MeOH(流速：15mL/min)，通过手性HPLC将10-((6-氧代-4-(邻甲苯基)嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(7.30g)解析成单一立体异构体。第一洗脱物质(RT＝17.25min)提供(S)-10-((6-氧代-4-(邻甲苯基)嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(2.33g)。[α]D 25＝+77.60(在CHCl3中c 0.1)；和第二洗脱物质(RT＝23.76min)提供标题化合物(2.26g)。[α]D 25＝-77.50(在CHCl3中c 0.1)。
中间体19：N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-4-基)-2,2,2-三氟-N-甲基乙酰 胺盐酸盐
步骤1：(S)-3-氨基-3-(2,5-二氟苯基)丙酸甲酯盐酸盐：在0℃下，向搅拌的(S)-3-氨基-3-(2,5-二氟苯基)丙酸(10g，49.7mmol)在MeOH(80mL)中的溶液中滴加SOCl2(4.33mL，59.7mmol)，然后在rt下搅拌。16h后。减压浓缩反应混合物并将残留物与戊烷一起研磨并真空干燥，得到标题化合物(10g，83％)。LCMS(方法C):RT＝2.72min,m/z＝216[M+H]+。
步骤2：(S)-3-((1-(2,5-二氟苯基)-3-(甲基过氧基)-3λ2-丙基)氨基)丙酸甲酯：将(S)-3-氨基-3-(2,5-二氟苯基)丙酸甲酯盐酸盐(15.6g，62.0mmol)溶解于MeOH(130mL)中并在rt下搅拌。加入TEA(12.7mL，93.0mmol)，随后滴加丙烯酸甲酯(8.43mL，93.0mmol)在MeOH(5mL)中的溶液。16h后，减压浓缩反应混合物并用水(500mL)稀释并用EtOAc(2×750mL)萃取。将有机层干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到粗产物，其通过快速色谱(在己烷中的0-10％EtOAc)纯化，得到标题化合物(12g，64％)。LCMS(方法C):RT＝1.72min,m/z＝302[M+H]+。
步骤3：(S)-3-((叔丁氧基羰基)(3-甲氧基-3-氧代丙基)氨基)-3-(2,5-二氟苯基)丙酸甲酯：将(S)-3-((1-(2,5-二氟苯基)-3-(甲基过氧基)-3λ2-丙基)氨基)丙酸甲酯(10.6g，35.2mmol)悬浮于MeOH(90mL)中，并在rt下在搅拌下滴加Boc2O(14.6mL，63.3mmol)。16h后，将反应混合物用水(750mL)稀释并用乙酸乙酯(2×1L)萃取。将合并的有机相干燥(Na2SO4)并减压浓缩。通过快速色谱(在己烷中的0-20％EtOAc)纯化剩余残留物，得到标题化合物(12g，84％)。LCMS(方法C):RT＝3.67min,m/z＝402[M+H]+。
步骤4：1-叔丁基3-甲基(6S)-4-羟基-6-(2,5-二氟苯基)-1,2,5,6-四氢吡啶-1,3-二羧酸酯和1-(叔丁基)3-甲基(2S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-羟基-3,6-二氢吡啶-1,3(2H)-二羧酸酯：将(S)-3-((叔丁氧基羰基)(3-甲氧基-3-氧代丙基)氨基)-3-(2,5-二氟苯基)丙酸甲酯(15.0g，37.4mmol)溶解于甲苯(300mL)中并冷却至-78℃。滴加1M LiHMDS在THF(9.38mL，56.0mmol)中的溶液。加入完成后，将反应混合物在-78℃下搅拌4h，然后用水(500mL)猝灭反应并使用乙酸乙酯(2×750mL)萃取。将有机层干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到粗产物，其通过快速色谱(在己烷中的0-20％EtOAc)纯化，得到标题化合物异构体的混合物(8.0g，57％)。LCMS(方法D):RT＝3.49,3.77min(2峰),m/z＝370[M+H]+。
步骤5：(S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯：将1-叔丁基3-甲基(6S)-4-羟基-6-(2,5-二氟苯基)-1,2,5,6-四氢吡啶-1,3-二羧酸酯和1-(叔丁基)3-甲基(2S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-羟基将-3,6-二氢吡啶-1,3(2H)-二羧酸酯(12.5g，33.8mmol)溶解于DMSO(62mL)中。将NaCl(5.93g，102mmol)和水(4mL)加入反应混合物中并在145℃下加热。4h后，将反应混合物用水(100mL)稀释并用乙酸乙酯(3×500mL)萃取。将合并的有机相干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到粗产物，其通过快速色谱(在己烷中的0-20％EtOAc)纯化，得到标题化合物(8g，75％)。LCMS(方法C):RT＝3.49min,m/z＝312[M+H]+。
步骤6：(2S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：在rt下，向搅拌的(S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.1g，6.43mmol)在MeOH(20mL)中的溶液中加入在EtOH中的33％(w/w)MeNH2(7.94mL，64.34mmol)和催化的AcOH(1-2滴)。2h后，加入NaBH3CN(1.21g，19.3mmol)。再过16h后，将反应混合物用水(100mL)稀释并用乙酸乙酯(2×250mL)萃取。将合并的有机相干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到粗产物，其通过快速色谱(在DCM中的0-10％MeOH)纯化，得到标题化合物(1.8g，81％)。LCMS(方法C):RT＝2.9min,m/z＝327[M+H]+。
步骤7：(2S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：在0℃下，向搅拌的(2S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.5g，7.66mmol)在DCM(25mL)中的溶液中加入吡啶(6.17mL，76.6mmol)，随后加入三氟乙酸酐(1.59mL，11.5mmol)。将反应混合物在rt下搅拌16h，然后用水(100mL)稀释并使用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机相干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到粗产物，其通过快速色谱(在己烷中的0-30％EtOAc)纯化，得到标题化合物(2.8g，86％)。
步骤8：(2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：使用Chiralpak IC(20mm×250mm,5μm)柱，采用等度溶剂条件：95:2.5/2.5己烷/DCM/EtOH(流速：18mL/min)，通过手性HPLC将(2S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(2,2,2-三氟-N-甲基乙酰氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.8g)分离成单一立体异构体，得到标题化合物(第一洗脱异构体：1.3g)。LCMS(方法C):RT＝3.68min,m/z＝423[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.17-7.08(m,3H),4.97-4.93(m,1H),4.39(br s,1H),3.92-3.88(m,1H),3.66-3.59(m,1H),2.96(d,3H),2.24-2.12(m,1H),2.06-2.02(m,1H),1.98-1.95(m,1H),1.83(br s,1H),1.24(s,9H)；和(2S,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(第二洗脱异构体：0.65g)。LCMS(方法C):RT＝3.77min,m/z＝423[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.26-7.15(m,2H),7.04(br s,1H),5.62-5.61(d,1H),4.32(br s,1H),4.21-4.17(d,1H),3.91-3.88(br s,1H),3.18-3.07(brs,1H),2.67(s,3H),2.32-2.24(m,1H),2.13-2.10(m,1H),1.98-1.17(m,2H),1.38(s,9H)。[注：通过与相近类似物的1H NMR数据比较确认立体异构体]。
步骤9：N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-4-基)-2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺盐酸盐：将(2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(2,2,2-三氟-N-甲基乙酰氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.6g，3.78mmol)悬浮于DCM(5mL)中并加入在1,4-二噁烷(20mL)中的4M HCl。将反应混合物在rt下搅拌3h。减压蒸发溶剂，并将残留物与DCM和戊烷一起研磨，随后冻干，得到标题化合物(1.2g，99％)。LCMS(方法C):RT＝2.52min,m/z＝323[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.76(br s,2H),7.93(s,1H),7.32-7.29(m,2H),4.75-4.72(m,2H),3.50-3.32(m,2H),3.02(s,3H,重叠水信号),2.49(m,2H,重叠DMSO信号),2.00-1.86(m,2H)。
中间体20：((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯
步骤1：1-((2S)-4-(环丙氨基)-2-苯基哌啶-1-基)-2,2,2-三氟乙烷-1-酮：在rt下，向搅拌的(S)-2-苯基-1-(2,2,2-三氟乙酰基)哌啶-4-酮(2.0g，7.26mmol)在MeOH(10mL)中的溶液中加入环丙胺(1.5mL，21.8mmol)和催化的AcOH(1-2滴)。1h后，加入NaBH3CN(1.4g，21.8mmol)。再过16h后，将反应混合物用水(100mL)稀释并用乙酸乙酯(2×150mL)萃取。将合并的有机相干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到粗产物，其通过快速色谱(在己烷中的0-30％EtOAc)纯化，得到标题化合物(1.6g，70％)。LCMS(方法C):RT＝3.33min,m/z＝313[M+H]+。
步骤2：环丙基((2S)-2-苯基-1-(2,2,2-三氟乙酰基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯：在rt下，向搅拌的1-((2S)-4-环丙氨基)-2-苯基哌啶-1-基)-2,2,2-三氟乙烷-1-酮(1.6g，5.13mmol)在DCM(10mL)中的溶液中加入TEA(2.15mL，15.4mmol)和Boc2O(1.4mL，6.15mmol)。16h后，将反应混合物用饱和NaHCO3(aq)溶液(10mL)猝灭，用水(100mL)稀释并使用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机相干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到粗产物，其通过快速色谱(在己烷中的30％EtOAc)纯化，得到标题化合物(1.5g，70％)。LCMS(方法D):RT＝3.94min,m/z＝413[M+H]+。
步骤3：环丙基((2S)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯：在rt下，向搅拌的环丙基((2S)-2-苯基-1-(2,2,2-三氟乙酰基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(1.5g，4.80mmol)在4:1MeOH/水(20mL)中的溶液中加入K2CO3(0.997g，7.21mmol)。16h后，将反应混合物用水(50mL)稀释并使用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机相干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到粗产物，其通过快速色谱(在己烷中的0-30％EtOAc)纯化，得到标题化合物(900mg，59％)。
步骤4：环丙基((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯：使用Chiralpak IC(20mm×250mm，5μm)柱，采用等度溶剂条件：95:5己烷/EtOH(流速：21mL/min)，通过手性HPLC将环丙基((2S)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(900mg)分离成单一立体异构体，得到标题化合物(第一洗脱异构体：400mg)。LCMS(方法D):RT＝3.06min,m/z＝317[M+H]+.1HNMR(400MHz,CDCl3):δ7.37-7.24(m,5H),3.92-3.89(m,1H),3.68-3.65(m,1H),3.27-3.24(m,1H),2.83(t,1H),2.31(br s,1H),2.02-1.91(m,3H),1.79-1.76(m,1H),2.45(s,9H),0.74-0.67(m,4H)；和环丙基((2S,4S)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(第二洗脱异构体：300mg)。LCMS(方法D):RT＝3.19min,m/z＝317[M+H]+.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.49(d,2H),7.34(t,2H),7.21(t,1H),4.35(s,1H),3.87-3.85(m,1H),2.91(d,1H),2.77-2.71(m,1H),2.36-2.32(m,3H),2.12-2.02(m,1H),1.44(s,9H),0.77-0.68(m,4H)。
中间体21：N-((2S,4R)-2-(2,4-二氟苯基)哌啶-4-基)-2,2,2-三氟乙酰胺盐酸盐
步骤1：(S)-2-(2,4-二氟苯基)-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯：标题化合物的制备类似于(S)-4-氧代-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(中间体1，步骤1至5)，除了使用(S)-3-氨基-3-(2,4-二氟苯基)丙酸代替(S)-3-氨基-3-苯基丙酸作为起始物质。
LCMS(方法C):RT＝3.45min,m/z＝312[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.37-7.31(m,1H),7.26-7.20(m,1H),7.08(t,1H),5.42(br s,1H),4.07-3.99(m,1H),3.69-3.62(m,1H),2.92-2.86(m,1H),2.75-2.70(m,1H),2.48-2.40(m,2H),1.26(s,9H)。
步骤2：N-((2S,4R)-2-(2,4-二氟苯基)哌啶-4-基)-2,2,2-三氟乙酰胺盐酸盐：标题化合物的制备类似于2,2,2-三氟-N-((2S,4R)-2-(3-氟苯基)哌啶-4-基)乙酰胺盐酸盐(中间体11，步骤1至4)，除了使用(S)-2-(2,4-二氟苯基)-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯代替(S)-2-(3-氟苯基)-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯，并且可能使用快速色谱分离非对映异构体。LCMS(方法E):RT＝1.81min,m/z＝309[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.48(br s,1H),9.36(br s,1H),7.93-7.87(m,1H),7.27-7.17(m,2H),4.66-4.62(m,1H),4.20-4.17(m,1H),3.43(d,1H),3.30-3.14(m,1H),2.19-2.05(m,4H)。
中间体22：N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-4-基)-2,2,2-三氟乙酰胺盐酸盐
标题化合物的制备类似于2,2,2-三氟-N-((2S,4R)-2-(3-氟苯基)哌啶-4-基)乙酰胺盐酸盐(中间体11，步骤1至4)，除了使用(S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯代替(S)-2-(3-氟苯基)-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯，并且用于非对映异构体分离的条件如下：CHIRALCEL OJ-H(20mm×250mm，5μm)柱，等度溶剂条件：95:5己烷/EtOH(流速：21mL/min)。LCMS(方法C):RT＝2.97min,m/z＝309[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.03(br s,1H),9.70(d,1H),7.80(s,1H),7.41-7.34(m,2H),4.71(br s,1H),4.20(br s,1H),3.43(d,1H),2.07-1.96(m,4H)。
中间体23：(2S,4S)-4-叠氮基-5-氟-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯
在-10℃下，向搅拌的(2S,4S,5S)-4-叠氮基-5-羟基-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.02g，3.3mmol)[根据德国应用化学杂志(Angew.Chem.Int.Ed.),2011,50,2734–2737制备，除了使用市售的(S)-1-苯基丁-3-烯-1-胺生成(S)-2-苯基-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯作为通过本文中所述的后续步骤采取的期望单一立体异构体]在DCM(30mL)中的溶液中加入碳酸氢钠(1.62g，19.2mmol)，随后滴加4-吗啉基三氟化硫(0.72g，5.2mmol)。24h后，用水(x3)洗涤反应混合物，干燥(Na2SO4)有机相，真空除去溶剂，通过制备型HPLC纯化剩余残留物，得到标题化合物(0.361g，35％)。LCMS(方法F):RT＝2.86min,m/z＝265[M-丁烯+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.38–7.19(m,5H),5.31–5.24(m,1H),4.85–4.29(m,2H),4.10–3.87(m,1H),3.49–3.32(m,1H),2.66–2.38(m,1H),2.24–2.05(m,1H),1.43–1.38(d,9H)。
中间体24：甲基((3S,5S)-5-苯基吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯
步骤1：外消旋-((3S,5S)-1-(4-甲氧基苄基)-5-苯基吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯：在rt下，向搅拌的外消旋-((3S,5S)-5-苯基吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(2.0g，7.63mmol，1当量)[市售]在DCE(60mL)中的溶液中加入对甲氧基苯甲醛(1.14g，8.40mmol)、乙酸(0.458g，7.63mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(4.85g，22.9mmol)。48h后，将反应混合物用DCM(200mL)稀释，用饱和K2CO3(aq)溶液、水和盐水洗涤。真空除去挥发物并通过快速色谱(0-100％，在己烷中的EtOAc)纯化剩余残留物，得到标题化合物(2.65g，91％)。LCMS(方法F):RT＝1.01min,m/z＝383[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ1.28–1.37(m,10H),1.52–1.66(m,1H),2.39(t,J＝9.9Hz,2H),2.72(d,J＝9.9Hz,1H),2.92(d,J＝13.2Hz,1H),3.54(d,J＝13.2Hz,1H),3.71(s,3H),3.89–3.99(m,1H),6.84(d,J＝8.0Hz,2H),7.06(d,J＝6.8Hz,1H),7.14(d,J＝8.0Hz,2H),7.25(t,J＝6.8Hz,1H),7.35(t,J＝7.4Hz,2H),7.49(d,J＝7.4Hz,2H)。
步骤2：((3S,5S)-1-(4-甲氧基苄基)-5-苯基吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯：使用Chiralcel OJ-H(20mm×250mm，5μm)柱，采用等度溶剂条件：90:10CO2/MeOH(流速：50mL/分钟)，通过手性SFC将外消旋-((3S,5S)-1-(4-甲氧基苄基)-5-苯基吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(2.5g)解析成单一立体异构体。第一洗脱物质(RT＝11.63min)提供标题化合物(1.20g)。将该物质的样品(40mg)在一般程序9的条件下进行N-PMB脱保护，并测量产物的旋光度以确认其与((3S,5S)-5-苯基吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体15)的旋光度相匹配。因此，确认第一洗脱物质为标题化合物并进行下一步骤。第二洗脱物质(RT＝13.79min)提供((3R,5R)-1-(4-甲氧基苄基)-5-苯基吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(501mg)。
步骤3：(3S,5S)-1-(4-甲氧基苄基)-N-甲基-5-苯基吡咯烷-3-胺：向搅拌的((3S,5S)-1-(4-甲氧基苄基)-5-苯基吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(0.76g，1.99mmol)在THF(20mL)中的溶液中分批加入LiAlH4(0.2g，5.26mmol)，并将所得混合物回流。5h后，将反应混合物冷却至0℃并使用35％NaOH(aq)溶液猝灭。将所得悬浮液过滤，使用热THF洗涤，真空除去溶剂，得到标题化合物(0.47g，79％)，为黄色油状物。LCMS(方法F):RT＝0.86min,m/z＝297[M+H]+。
步骤4：((3S,5S)-1-(4-甲氧基苄基)-5-苯基吡咯烷-3-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯：在rt下，向搅拌的(3S,5S)-1-(4-甲氧基苄基)-N-甲基-5-苯基吡咯烷-3-胺(0.51g，1.72mmol)在甲醇(15mL)中的溶液中加入Boc2O(0.417g，1.91mmol)。16h后，真空除去挥发物，粗标题化合物(0.68g，定量)，为黄色油状物，其不经纯化即用于下一步骤。LCMS(方法F):RT＝1.11min,m/z＝397[M+H]+。
步骤5：甲基((3S,5S)-5-苯基吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯：将搅拌的((3S,5S)-1-(4-甲氧基苄基)-5-苯基吡咯烷-3-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(0.68g，1.72mmol)的溶液溶解于乙腈(13.5mL)中并在0℃下滴加在水(13.5mL)中的硝酸高铈铵(3.76g，6.67mmol)。18h后，真空除去挥发物，使用过量K2CO3碱化剩余混合物并使用MTBE萃取。真空除去溶剂并通过制备型HPLC纯化粗品(0.37g，52％纯)，得到标题化合物(11.5mg，2.4％)。LCMS(方法F):RT＝0.98min,m/z＝277[M+H]+。
中间体25：(R)-10-((4-(2-甲氧基苯基)-6-氧代嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺 [4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯
标题化合物的制备类似于(R)-10-((6-氧代-4-(邻甲苯基)嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(中间体18)，除了在第一步骤中使用6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮[市售]代替6-(邻甲苯基)嘧啶-4(3H)-酮。使用Chiralpak IG(20mm×250mm，5μm)柱，采用等度溶剂条件：60:20:20己烷/IPA/MeOH(流速：12mL/min)，通过手性HPLC将10-((4-(2-甲氧基苯基)-6-氧代嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(3.75g)解析成单一立体异构体。第一洗脱物质(RT＝26.2min)提供(S)-10-((4-(2-甲氧基苯基)-6-氧代嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]7-癸烷-7-羧酸叔丁酯(1.77g)。[α]D 25＝+7.28(在CHCl3中c 0.1)；第二洗脱物质(RT＝32.0min)提供标题化合物(1.82g)。LCMS(方法F):RT＝1.63min,m/z＝454[M+H]+.[α]D 25＝-9.76(在CHCl3中c 0.1)。
中间体26：N-((2S,4R)-2-(2,4-二氟苯基)哌啶-4-基)-2,2,2-三氟-N-甲基乙酰 胺盐酸盐
标题化合物的制备类似于N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-4-基)-2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺盐酸盐(中间体19)，除了使用(S)-3-氨基-3-(2,4-二氟苯基)丙酸代替(S)-3-氨基-3-(2,5-二氟苯基)丙酸作为起始物质。通过反相制备型HPLC(C18柱)分离(2S)-2-(2,4-二氟苯基)-4-(2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.0g)，得到(2S,4R)-2-(2,4-二氟苯基)-4-(2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(第一洗脱异构体：1.0g，de＝100％)。[注：通过nOe数据分配顺式和反式立体化学]。LCMS(方法C):RT＝3.73min,m/z＝423[M+H]+。将该物质脱保护，得到标题化合物(610mg)。LCMS(方法E):RT＝1.81min,m/z＝323[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.72(br s,2H),8.11-8.05(m,1H),7.26-7.16(m,2H),4.72-4.69(m,2H),3.48-3.40(m,2H),3.02(s,3H,重叠水信号),2.49(m,1H,重叠DMSO信号),2.00-1.85(m,2H)。
中间体27：(R)-10-((6-氟-4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷- 7-羧酸叔丁酯
标题化合物的制备类似于(R)-10-((6-氧代-4-(邻甲苯基)嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(中间体18)，除了在第一步骤中使用6-氟喹唑啉-4(3H)-酮[市售]代替6-(邻甲苯基)嘧啶-4(3H)-酮。使用CHIRAL ART Cellulose-SC(20mm×250mm，5μm)柱，采用等度溶剂条件：80:10:10己烷/IPA/MeOH(流速：13mL/min)，通过手性HPLC将10-((6-氟-4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(2.46g)解析成单一立体异构体。第一洗脱物质(RT＝12.9min)提供(S)-10-((6-氟-4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(1.11g)。[α]D 25＝+77.96(在CHCl3中c 0.25)；和第二洗脱物质(RT＝16.9min)提供标题化合物(1.09g)。LCMS(方法F):RT＝4.13min,m/z＝360[M-丁烯+H]+.1H NMR(DMSO-d6)δ:8.37(s,1H),7.83–7.71(m,3H),4.18(m,1H),3.80(m,1H),3.67(m,1H),3.52(m,1H),2.82–2.55(m,2H),1.79(m,2H),1.65(m,2H),1.53(m,2H),1.38(s,9H),1.40–1.14(m,5H).[α]D 25＝-77.36(在CHCl3中c 0.25)。
中间体28：((2S,4R)-2-(2-氟苯基)哌啶-4-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯
步骤1：外消旋-(2S,4R)-1-((苄氧基)羰基)-2-(2-氟苯基)哌啶-4-羧酸：在0℃下，向搅拌的外消旋-(2S,4R)-2-(2-氟苯基)哌啶-4-羧酸甲酯[根据中间体17的程序，步骤1-3制备，除了使用(2-氟苯基)硼酸(21g，150mmol)代替苯基硼酸与2-溴异烟酸甲酯(21.6g，100mmol)反应]在2:1 1,4-二噁烷/水中的溶液中加入氢氧化钠(4当量)，随后滴加在1,4-二噁烷中的CbzCl(1.5当量)。16h后，真空除去溶剂，用水稀释剩余残留物，并使用MTBE(×2)洗涤水性混合物，然后使用饱和NaHSO4(aq)酸化至～pH 2，并使用EtOAc萃取。真空除去溶剂，得到标题化合物(12.1g，33.9mmol)，其无需进一步纯化即用于下一步骤。
步骤2：外消旋-(2S,4R)-4-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-2-(2-氟苯基)哌啶-1-羧酸苄酯：将外消旋-(2S,4R)-1-((苄氧基)羰基)-2-(2-氟苯基)哌啶-4-羧酸(12.1g，33.9mmol)溶解于甲苯(242mL)中并用二苯基磷酰叠氮化物(11.2g，40.7mmol)和三乙胺(4.11g，40.7mmol)处理。将反应混合物在75℃下加热4h，随后加入三甲基甲硅烷基乙醇(12.0g，102mmol)。将反应混合物在100℃下加热。24h后，真空除去溶剂并通过快速色谱纯化粗品，得到外消旋-(2S,4R)-2-(2-氟苯基)-4-(((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)氨基)哌啶-1-羧酸苄酯(9.80g，61％)，将其溶解于THF(98mL)中并加入1M TBAF的THF溶液(35.3mL，35.3mmol，1.7当量)，并将反应混合物在50℃下加热。18h后，真空除去溶剂，将剩余残留物溶解于EtOAc(320mL)中，依次用水、盐水洗涤，并干燥(Na2SO4)。真空除去溶剂，得到粗(2S,4R)-4-氨基-2-(2-氟苯基)哌啶-1-羧酸苄酯(6.13g，90％)，随后将其用在甲醇(125mL)中的Boc2O(5.0g，23.4mmol，1.25当量)处理并在rt下搅拌。16h后，真空除去溶剂并通过快速色谱纯化剩余残留物，得到外消旋-(2S,4R)-4-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-(2-氟苯基)哌啶-1-羧酸苄酯(2.2g，28％)，随后将其溶解于DMF(22mL)中并冷却至0℃。加入氢化钠(60％，在矿物油中，0.26g，5.92mmol，1.15当量)和碘甲烷(0.95g，6.68mmol，1.3当量)，并将反应混合物在rt下搅拌。18h后，将反应混合物用水(85mL)稀释并用饱和NH4Cl(aq)溶液猝灭。使用MTBE(x3)萃取所得混合物，浓缩合并的有机相，并通过快速色谱纯化剩余残留物，得到标题化合物(1.9g，84％)。LCMS(方法F):RT＝1.49min,m/z＝443[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.28(m,5H),7.16(m,2H),7.05(m,2H),4.97(m,3H),4.00(m,1H),3.57(m,1H),3.31(m,1H),2.66(s,3H),2.04(m,2H),1.85(m,1H),1.67(m,1H),1.37(s,9H)。
步骤3：(2S,4R)-4-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-2-(2-氟苯基)哌啶-1-羧酸苄酯：使用Chiralpak AD-H(20mm×250mm，5μm)柱，采用等度溶剂条件：80:10:10己烷/IPA/MeOH(流速：12mL/min)，通过手性HPLC将外消旋-(2S,4R)-4-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-2-(2-氟苯基)哌啶-1-羧酸苄酯(1.9g)解析成单一立体异构体。第一洗脱物质(RT＝12.32min)提供(2R,4S)-4-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-2-(2-氟苯基)哌啶-1-羧酸苄酯(0.85g)，和第二洗脱物质(RT＝15.35min)提供标题化合物(0.84g)。
步骤4：((2S,4R)-2-(2-氟苯基)哌啶-4-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯：向搅拌的(2S,4R)-4-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)-2-(2-氟苯基)哌啶-1-羧酸苄酯(0.84g，1.90mmol)在甲醇(30mL)中的溶液中加入10％(w/w)Pd/C(80mg，40mol％)并将反应混合物在rt下氢化(～1atm，气球)。24h后，过滤反应混合物并蒸发至干，得到标题化合物(0.43g，74％)。LCMS(方法F):RT＝1.00min,m/z＝309[M+H]+.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.50(m,1H),7.20(m,1H),7.10(m,1H),6.98(m,1H),4.05(m,2H),3.25(m,1H),2.85(m,1H),2.72(s,3H),2.08(m,1H),1.85(dd,1H),1.70(m,3H),1.45(s,9H).[α]D 25＝+44.6(在MeOH中c 0.35)。
中间体29：((2S,4R)-2-(4-氟苯基)哌啶-4-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯
根据中间体28的程序制备标题化合物，除了使用(4-氟苯基)硼酸代替(2-氟苯基)硼酸并按照步骤制备外消旋-(2S,4R)-4-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)-2-(4-氟苯基)哌啶-1-羧酸苄酯(2.2g)，使用Chiralpak AD-H(20mm×250mm，5μm)柱，采用等度溶剂条件：80:10:10己烷/IPA/MeOH(流速：12mL/min)，通过手性HPLC将其解析成单一立体异构体。第一洗脱物质(RT＝15.85min)提供(2S,4R)-4-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-2-(4-氟苯基)哌啶-1-羧酸苄酯(996mg)，和第二洗脱物质(RT＝33.58min)提供(2R,4S)-4-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-2-(4-氟苯基)哌啶-1-羧酸苄酯(1.08g)。(2S,4R)-4-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)-2-(4-氟苯基)哌啶-1-羧酸苄酯(996mg)用于最终步骤(Cbz脱保护)，得到标题化合物(0.58g，84％)。LCMS(方法F):RT＝0.82min,m/z＝309[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.66(m,2H),7.24(t,2H),4.30(m,2H),3.31(m,1H),3.05(m,1H),2.67(s,3H),2.12(q,2H),1.70(dd,2H),1.38(s,9H).[α]D 25＝+46.5(在MeOH中c0.25)。
中间体30：N-((2S,4R)-2-(3,5-二氟苯基)哌啶-4-基)-2,2,2-三氟乙酰胺盐酸盐
(S)-2-(3,5-二氟苯基)-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯的制备类似于(S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氧代哌啶-1羧酸叔丁酯(中间体19，步骤1至5)，除了使用(S)-3-氨基-3-(3,5-二氟苯基)丙酸代替(S)-3-氨基-3-(2,5-二氟苯基)丙酸。标题化合物的制备类似于2,2,2-三氟-N-((2S,4R)-2-(3-氟苯基)哌啶-4-基)乙酰胺盐酸盐(中间体11，步骤1至4)，除了使用(S)-2-(3,5-二氟苯基)-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯代替(S)-2-(3-氟苯基)-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯，以及使用反相制备型HPLC(C18柱)代替手性制备型HPLC方法分离类似步骤3中的非对映异构体。LCMS(方法C):RT＝1.82min,m/z＝309[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.71(br s,1H),9.38(d,1H),7.41(t,2H),7.21-7.16(m,1H),4.48-4.45(m,1H),4.16-4.08(m,1H),3.58-3.42(m,1H),3.19-3.12(m,1H),2.19-2.01(m,4H)。
中间体31：(R)-10-((4-(2-氟苯基)-6-氧代嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺 [4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯
标题化合物的制备类似于(R)-10-((6-氧代-4-(邻甲苯基)嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(中间体18)，除了在第一步骤中使用6-(2-氟苯基)嘧啶-4(3H)-酮[市售]代替6-(邻甲苯基)嘧啶-4(3H)-酮。使用Chiralpak IB(20mm×250mm,5μm)柱，采用等度溶剂条件：75:15:15己烷/IPA/MeOH(流速：15mL/min)，通过手性HPLC将10-((4-(2-氟苯基)-6-氧代嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(0.53g)解析成单一立体异构体。第一洗脱物质(RT＝6.70min)提供(S)-10-((4-(2-氟苯基)-6-氧代嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]7-癸烷-7-羧酸叔丁酯(0.18g)。[α]D 25＝+70.15(在CHCl3中c 0.25)；和第二洗脱物质(RT＝7.98min)提供标题化合物(0.17g)。LCMS(方法F):RT＝3.66min,m/z＝386[M-丁烯+H]+.[α]D 25＝-60.15(在CHCl3中c 0.25)。
中间体32：4-((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)吗啉盐酸盐
步骤1：(2S)-4-吗啉基-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯：在rt下，向搅拌的(S)-4-氧代-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(800mg，2.9mmol)在MeOH(10mL)中的溶液中加入吗啉(0.75mL，8.72mmol)和催化量的AcOH(1-2滴)。1h后，加入NaBH3CN(550mg，8.72mmol)。再过16h后，将反应混合物用水(50mL)稀释并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机相干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到粗产物，其通过快速色谱(在DCM中的0-10％MeOH)纯化，得到标题化合物(800mg，80％)。LCMS(方法D):RT＝3.29min,m/z＝347[M+H]+。
步骤2：(2S,4R)-4-吗啉代-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯：使用Chiralpak IC(20mm×250mm，5μm)柱，采用等度溶剂条件：85/15己烷/EtOH+0.1％异丙胺(流速：18mL/min)，通过手性HPLC将(2S)-4-吗啉代-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(900mg)分离成单一立体异构体，得到(2S,4S)-4-吗啉代-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(第一洗脱异构体：90mg)。LCMS(方法D):RT＝3.33min,m/z＝347[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.37(t,2H),2.23(t,1H),7.17(t,2H),5.41(br s,1H),4.05-4.01(m,1H),3.54(t,4H),2.71(br s,1H),2.45-2.38(m,4H),2.18-2.15(m,1H),1.73-1.65(m,2H),1.39(s,9H),1.32-1.28(m,1H)；和标题化合物(第二洗脱异构体：450mg)。LCMS(方法D):RT＝3.29min,m/z＝347[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.29(t,2H),7.22-7.17(m,3H),4.73-4.69(m,1H),3.91-3.86(m,1H),3.46-3.34(m,4H),2.35-2.32(m,4H),2.05-1.99(m,1H),1.85-1.71(m,2H),1.66-1.63(m,1H),1.21(s,9H)。[注：通过nOe数据分配顺式和反式立体化学]。
步骤3：4-((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)吗啉盐酸盐：在rt下，向搅拌的(2S,4R)-4-吗啉基-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(450mg，1.30mmol)在DCM(3mL)中的溶液中加入在1,4-二噁烷(10mL)中的4M HCl，持续16h。减压蒸发溶剂，并将残留物与戊烷一起研磨，得到标题化合物(320mg，87％)。LCMS(方法E):RT＝0.14min,m/z＝247[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.64(br s,1H),9.75(d,1H),9.51(d,1H),7.62(d,2H),7.50-7.42(m,3H),4.35(t,1H),3.99-3.84(m,4H),3.61(br s,1H),3.52(br s,2H),3.12-3.10(m,3H),2.53(br s,1H,与DMSO合并),2.38-2.16(m,3H)。
中间体33：(2S,4R)-N-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)-2-苯基哌啶-4-胺2,2,2-三氟 乙酸酯
步骤1：(2S)-4-((3-甲基氧杂环丁烷-3-基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯：在rt下，向搅拌的4-氧代-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(600mg，2.18mmol)在MeOH(20mL)中的溶液中加入3-甲基氧杂环丁烷-3-胺(569mg，6.54mmol)，随后加入催化量的AcOH(1-2滴)。3h后，在0℃下分批加入NaBH3CN(412mg，6.54mmol)并升温至rt。16h后，将反应混合物用DCM(500mL)稀释，用水(100mL)、盐水(150mL)洗涤，并干燥(Na2SO4)。减压蒸发溶剂，得到粗产物，其通过快速色谱(在己烷中的0-50％EtOAc)纯化，得到标题化合物(520mg，69％)。LCMS(方法C):RT＝3.17min,m/z＝347[M+H]+。
步骤2：(2S,4R)-4-((3-甲基氧杂环丁烷-3-基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯：使用Lux i-Amylose-3(21.2mm×250mm，5μm)柱，采用等度溶剂条件：80:20CO2/MeOH+0.3％异丙胺(流速：30g/min)，通过手性HPLC将(2S)-4-((3-甲基氧杂环丁烷-3-基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(600mg)分离成单一立体异构体，得到标题化合物(第二洗脱异构体：140mg)。LCMS(方法D):RT＝3.17min,m/z＝347[M+H]+.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.33-7.12(m,5H),4.99(t,1H,J＝6.8Hz),4.25-4.28(m,4H),4.02-3.98(m,1H),3.40-3.33(m,1H),3.08(bs,1H),3.09-1.88(m,4H),1.46(s,3H).1.30(s,9H)；和(2S,4S)-4-((甲基氧杂环丁烷-3-基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(第一洗脱异构体：140mg)。LCMS(方法D):RT＝3.17min,m/z＝347[M+H]+.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.36-7.29(m,2H),7.19-7.17(m,3H),5.54-5.51(m,1H),4.49-4.44(m,2H),4.40-4.34(m,2H),4.17-4.11(m,1H),2.80-2.74(m,2H),2.43-2.39(m,1H),1.62(m,2H),1.45(s,12H),1.32-1.29(m,1H)。[注：通过nOe数据确认立体化学]。
步骤3：(2S,4R)-N-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)-2-苯基哌啶-4-胺2,2,2-三氟乙酸酯：在0℃下向搅拌的(2S,4R)-4-((3-甲基氧杂环丁烷-3-基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(130mg，0.36mmol)在DCM(10mL)中的溶液中滴加TFA(0.5mL)。升温至rt，5h后，将反应混合物在低温(即≤35℃)下减压浓缩，然后用戊烷/乙醚研磨，得到标题化合物(135mg，76％)。LCMS(方法G):RT＝1.38min,m/z＝247[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.94(brs,1H),9.32(br s,1H),9.22(br s,1H),7.51-7.42(m,5H),4.77-4.73(m,2H),4.41-4.38(m,3H),3.52-3.45(m,2H),3.22-3.16(m,1H),2.10-2.02(m,3H),1.95-1.89(m,1H),1.71(s,3H)。
中间体34：(2S,4R)-N-(3-(氟甲基)氧杂环丁烷-3-基)-2-苯基哌啶-4-胺
根据(2S,4R)-N-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)-2-苯基哌啶-4-胺TFA盐(中间体33)的程序制备标题化合物，除了使3-(氟甲基)氧杂环丁烷-3-胺(801mg，7.64mmol)代替3-甲基氧杂环丁烷-3-胺与4-氧代-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(700mg，2.55mmol)反应，并按以下条件分离非对映异构体：Chiralpak IG(21mm×250mm，5μm)柱，采用等度溶剂条件：70:30己烷/EtOH(流速：21mL/min)。LCMS(方法I):RT＝0.33min,m/z＝265[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.06(br s,1H),8.90(br s,1H),7.51-7.42(m,5H),5.00-4.88(m,2H),4.59(brs,2H),4.49-4.44(m,2H),4.36-4.34(m,1H),3.47-3.40(m,2H),3.15-3.12(m,1H),2.05-1.96(m,2H),1.86-1.73(m,2H)。
中间体35：N-((2S,4R)-2-(3,5-二氟苯基)哌啶-4-基)-2,2,2-三氟-N-甲基乙酰 胺盐酸盐
标题化合物的制备类似于N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-4-基)-2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺盐酸盐(中间体19)，除了使用(S)-3-氨基-3-(3,5-二氟苯基)丙酸代替(S)-3-氨基-3-(2,5-二氟苯基)丙酸和使用反相制备型HPLC(C18柱)代替手性制备型HPLC方法分离类似步骤8中的非对映异构体。LCMS(方法H):RT＝1.86min,m/z＝323[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.74(br s,1H),7.48(t,2H),7.21-7.17(m,1H),4.62-4.52(m,2H),3.50-3.46(m,1H),3.25-3.18(m,2H),3.05(s,3H),2.5-2.49(m,2H),2.03(d,1H),1.87(d,1H)。
中间体36：10-((4-(2-甲氧基苯基)-6-氧代-3,6-二氢吡啶-1(2H)-基)甲基)-7- 氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯
步骤1：10-((6-氧代-4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯：在0℃下，向搅拌的10-(氨甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(5.00g，18.6mmol)[市售]在甲醇(150mL)中的溶液中滴加丙烯酸甲酯(1.60g，18.6mmol)。24h后，真空除去挥发物，将剩余残留物溶解于DCM(150mL)中，加入三乙胺(2.07g，20.5mmol)，随后在在0℃下滴加3-氯-3-氧代丙酸甲酯(2.80g，20.5mmol)。24h后，将反应混合物用水(x3)洗涤并干燥(Na2SO4)。真空除去溶剂并将粗产物溶解于甲醇钠(4.02g，74.4mmol)在甲醇(100mL)中的溶液中并加热至回流。48h后，将反应混合物浓缩并用乙酸小心地酸化。使用DCM(x3)萃取粗产物，真空除去溶剂，并将剩余残留物溶解于1:1乙腈/水中并加热至回流。再过48h后，将反应混合物蒸发至干，并将粗产物溶解于无水THF(150mL)中，随后加入叔丁醇钾(2.03g，18mmol)和N-苯基-双(三氟甲磺酰亚胺)(6.47g，18mmol)。24h后，蒸发溶剂并将剩余残留物溶解于DCM中并用饱和NH4Cl(aq)溶液洗涤。将有机相干燥(Na2SO4)，真空除去溶剂，并通过快速色谱纯化粗产物，得到标题化合物(3.40g，45％，经过5个步骤)。LCMS(方法F):RT＝1.40min,m/z＝396[M-Boc+H]+。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.97(s,1H),6.26(s,1H),4.25(m,1H),4.00(m,1H),3.66(m,1H),3.48(m,1H),2.78–2.60(m,2H),1.78(m,3H),1.75–1.53(m,6H),1.38(s,9H),1.40–1.22(m,5H)。
步骤2：10-((4-(2-甲氧基苯基)-6-氧代-3,6-二氢吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯：在氩气气氛下，向搅拌的10-((6-氧代-4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(0.50g，1.00mmol)在3:1 1,4-二噁烷/水(40mL)中的溶液中加入(2-甲氧基苯基)硼酸(0.141g，1.10mmol)、Pd(dppf)Cl2.DCM(0.041g，0.05mmol)和碳酸钠(0.32g，3.00mmol)。将反应混合物加热至回流。24h后，分离有机相并蒸发至干。通过反相制备型HPLC(C18柱)纯化粗产物，得到标题化合物(0.22g，57％)。LCMS(方法F):RT＝1.60min,m/z＝355[M-Boc+H]+.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.28(t,1H),7.22(d,1H),6.99(t,1H),6.87(d,1H),6.12(s,1H),4.00–3.48(m,5H),3.78(s,3H),2.90–2.61(m,4H),1.75–1.48(m,8H),1.42(s,9H),1.38–1.21(m,3H)。
中间体37：(R)-10-((2-氧代嘧啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸 叔丁酯
标题化合物的制备类似于(R)-10-((6-氧代-4-(邻甲苯基)嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(中间体18)，除了在第一步骤中使用嘧啶-2(1H)-酮(1.25g，13mmol)[市售]代替6-(邻甲苯基)嘧啶-4(3H)-酮。使用Chiralpak IA-3(20mm×250mm,5μm)柱，采用等度溶剂条件：80:10:10己烷/IPA/MeOH(流速：15mL/min)，通过手性HPLC将10-((2-氧代嘧啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(0.41g)解析成单一立体异构体。第一洗脱物质(RT＝18.84min)提供(S)-10-((2-氧代嘧啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(143mg)。[α]D 25＝+142.56(在CHCl3中c0.25)；和第二洗脱物质(RT＝25.30min)提供标题化合物(147mg)。LCMS(方法F):RT＝1.26min,m/z＝292[M-丁烯+H]+.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.60(m,1H),7.61(m,1H),6.32(m,1H),4.25(m,1H),4.12(m,1H),4.02(m,1H),3.72(m,1H),2.82–2.65(m,2H),2.01(m,2H),1.65(m,3H),1.53(m,2H),1.38(s,9H),1.40–1.15(m,5H).[α]D 25＝-130.68(在CHCl3中c 0.25)。
中间体38：(R)-10-((6-氧代哒嗪-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸 叔丁酯
标题化合物的制备类似于(R)-10-((6-氧代-4-(邻甲苯基)嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(中间体18)，除了在第一步骤中使用哒嗪-3(2H)-酮(2.5g，26mmol)[市售]代替6-(邻甲苯基)嘧啶-4(3H)-酮。使用Chiralpak IC(4.6mm×250mm，5μm)柱，采用等度溶剂条件：70:15:15己烷/IPA/MeOH(流速：0.6mL/min)，通过手性HPLC将10-((6-氧代哒嗪-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(2.60g)解析成单一立体异构体。第一洗脱物质(RT＝20.28min)提供标题化合物(1.22g)。LCMS(方法F):RT＝1.46min,m/z＝248[M-Boc+H]+.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.75(d,1H),7.16(m,1H),6.92(d,1H),4.07(m,1H),3.79(m,1H),3.67(m,1H),3.52(m,1H),2.82–2.65(m,2H),2.01(m,1H),1.65(m,3H),1.53(m,2H),1.38(s,9H),1.40–1.15(m,5H).[α]D 25＝-26.2(在CHCl3中c 0.25)；和第二洗脱物质(RT＝24.17min)得到(S)-10-((6-氧代哒嗪-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(1.32g)。[α]D 25＝+26.5(在CHCl3中c 0.25)。
中间体39：(R)-10-((4-(二氟甲基)-6-氧代嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺 [4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯
标题化合物的制备类似于(R)-10-((6-氧代-4-(邻甲苯基)嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(中间体18)，除了在第一步骤中使用6-(二氟甲基)嘧啶-4(3H)-酮(0.38g，2.6mmol)[市售]代替6-(邻甲苯基)嘧啶-4(3H)-酮。使用ChiralpakIC(20mm×250mm，5μm)柱，采用等度溶剂条件：70:15:15己烷/IPA/MeOH(流速：12mL/min)，通过手性HPLC将10-((4-(二氟甲基)-6-氧代嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(0.9g)解析成单一立体异构体。第一洗脱物质(RT＝15.03min)提供(S)-10-((4-(二氟甲基)-6-氧代嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(0.396g)。[α]D 25＝+65.16(在CHCl3中c 0.25)；和第二洗脱物质(RT＝25.28min)提供标题化合物(0.379g)。LCMS(方法F):RT＝4.04min,m/z＝342[M-丁烯+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.59(s,1H),6.75(m,1H),6.67(s,1H),4.07(m,1H),3.79(m,1H),3.67(m,1H),3.52(m,1H),2.82–2.55(m,2H),1.80(m,2H),1.65(m,2H),1.53(m,2H),1.38(s,9H),1.40–1.15(m,5H).[α]D 25＝-67.52(在CHCl3中c 0.25)。
中间体40：N-((2S,4R)-2-(2,3-二氟苯基)哌啶-4-基)-2,2,2-三氟-N-甲基乙酰 胺盐酸盐
标题化合物的制备类似于N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-4-基)-2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺盐酸盐(中间体19)，除了使用(S)-3-氨基-3-(2,3-二氟苯基)丙酸代替(S)-3-氨基-3-(2,5-二氟苯基)丙酸和使用快速色谱代替手性制备型HPLC方法分离类似步骤8中的非对映异构体。LCMS(方法H):RT＝1.82min,m/z＝323[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.63(br s,1H),7.77(s,1H),7.49-7.42(m,1H),7.33-7.32(m,1H),4.80-4.77(d,1H),4.69(m,1H),3.50-3.47(m,1H),3.39-3.33(t,1H),3.03(s,3H),2.50-2.46(m,2H),2.03-2.00(d,1H),1.90-1.87(d,1H),1.27(1H),0.87(m,1H)。
中间体41：N-((2S,4R)-2-(3,4-二氟苯基)哌啶-4-基)-2,2,2-三氟-N-甲基乙酰 胺盐酸盐
标题化合物的制备类似于N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-4-基)-2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺盐酸盐(中间体19)，除了使用(S)-3-氨基-3-(3,4-二氟苯基)丙酸代替(S)-3-氨基-3-(2,5-二氟苯基)丙酸和使用以下条件：Chiralpak IG(21mm×250mm，5μm)柱，采用等度溶剂条件：90:10己烷/EtOH+0.1％异丙胺(流速：21mL/min)分离类似步骤8中的非对映异构体。LCMS(方法C):RT＝1.75min,m/z＝323[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.49(br s,2H),7.83-7.78(m,1H),7.50-7.43(m,2H),4.60(br s,1H),4.50(d,1H),3.47(d,1H),3.21(t,1H),3.01(d,3H),2.44(m,2H),2.0(d,1H),1.88(d,1H)。
中间体42：N-(2,2-二氟乙基)-N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-4-基)-2,2, 2-三氟乙酰胺盐酸盐
步骤1：(2S)-4-((2,2-二氟乙基)氨基)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：在rt下，向搅拌的(S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.0g，3.21mmol)在MeOH(10mL)中的溶液中加入2,2-二氟乙-1-胺(0.312mL，3.85mmol)。8h后，加入NaBH3CN(0.606g，9.63mmol)。再过16h后，减压浓缩反应混合物，得到粗产物，其通过快速色谱(在DCM中的0-10％MeOH)纯化，得到标题化合物(700mg，58％)。LCMS(方法C):RT＝3.55min,m/z＝377[M+H]+。
步骤2：(2S)-4-(N-(2,2-二氟乙基)-2,2,2-三氟乙酰氨基)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：将(2S)-4-((2,2-二氟乙基)氨基)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(3.0g，7.97mmol)悬浮于DCM(25mL)中并在0℃下搅拌。加入三乙胺(1.65mL，12.0mmol)和三氟乙酸酐(1.66mL，12.0mmol)并升温至rt。16h后，减压浓缩反应混合物，得到粗产物，其通过快速色谱(在己烷中的0-30％EtOAc)纯化，得到标题化合物(2.4g，64％)。LCMS(方法C):RT＝3.78min,m/z＝473[M+H]+。
步骤3：(2S,4R)-4-(N-(2,2-二氟乙基)-2,2,2-三氟乙酰胺基)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：通过反相制备型HPLC(C18柱)，将(2S)-4-(N-(2,2-二氟乙基)-2,2,2-三氟乙酰氨基)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯分离成单一立体异构体，得到标题化合物(第一洗脱异构体：840mg)。LCMS(方法C):RT＝3.75min,m/z＝473[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.21-7.06(m,3H),6.31(t,1H),4.96-4.92(m,1H),4.04(br s,1H),3.93-3.85(m,3H),3.69-3.61(m,1H),2.31-2.32(m,1H),2.16-2.13(m,1H),2.11-2.08(m,1H),1.21(s,9H)；和(2S,4S)-4-(N-(2,2-二氟乙基)-2,2,2-三氟乙酰胺基)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(第二洗脱异构体：300mg)。LCMS(方法C):RT＝3.81min,m/z＝473[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.26-7.12(m,2H),6.97(br s,1H),6.33-6.03(dt,1H),5.61(d,1H),4.17(d,1H),3.92-3.81(m,3H),3.68(br s,1H),3.25-3.21(m,2H),2.41-2.33(m,1H),2.20-2.16(m,1H),2.02-1.92(m,1H),1.84-1.81(m,1H),1.37(s,9H)。[注：通过与相近类似物的1H NMR数据比较确认立体异构体]。
步骤4：N-(2,2-二氟乙基)-N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-4-基)-2,2,2-三氟乙酰胺盐酸盐：在rt下，向搅拌的(2S,4R)-4-(N-(2,2-二氟乙基)-2,2,2-三氟乙酰氨基)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.8g，3.81mmol)在DCM(25mL)中的悬浮液中加入在1,4-二噁烷(10mL)中的4M HCl。3h后，真空除去溶剂，并将剩余残留物与DCM和戊烷一起研磨，随后冻干，得到标题化合物(1.4g，90％)。LCMS(方法H):RT＝2.77min,m/z＝373[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.4(br s,2H),7.77(s,1H),7.31(s,2H),6.28(t,1H),4.74(br s,1H),4.35(br s,1H),3.92-3.86(m,2H),3.51-3.48(m,1H),3.37-3.28(m,1H),2.01(dd,2H)。
中间体43：N-(3,3-二氟环丁基)-2,2,2-三氟-N-((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)乙 酰胺盐酸盐
步骤1：(2S)-4-((3,3-二氟环丁基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯：在rt下，向搅拌的(S)-4-氧代-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.0g，3.63mmol)在MeOH(10mL)中的溶液中加入3,3-二氟环丁-1-胺(1.16mL，10.9mmol)。8h后，加入NaBH3CN(1.14g，18.2mmol)。再过16h后，减压浓缩反应混合物，得到粗产物，其通过快速色谱(在DCM中的0-10％MeOH)纯化，得到标题化合物(970mg，73％)。LCMS(方法C):RT＝3.67min,m/z＝367[M+H]+。
步骤2：(2S)-4-(N-(3,3-二氟环丁基)-2,2,2-三氟乙酰胺基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯：将(2S)-4-(将(3,3-二氟环丁基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.0g，2.73mmol)悬浮于DCM(25mL)中并在0℃下搅拌。加入三乙胺(2.30g，16.4mmol)和三氟乙酸酐(0.80mL，5.74mmol)并升温至rt。16h后，将反应混合物用水(100mL)稀释并使用DCM(2×100mL)萃取。将有机层用饱和NaHCO3(aq)溶液(50mL)、水(50mL)洗涤并干燥(Na2SO4)。减压蒸发溶剂，得到粗产物，其通过快速色谱(在己烷中的0-30％EtOAc)纯化，得到标题化合物(980mg，77％)。LCMS(方法C):RT＝3.96min,m/z＝463[M+H]+。
步骤3：(2S,4R)-4-(N-(3,3-二氟环丁基)-2,2,2-三氟乙酰氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯：通过反相制备型HPLC(C18柱)将(2S)-4-(N-(3,3-二氟环丁基)-2,2,2-三氟乙酰氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯分离成单一立体异构体，得到标题化合物(第一洗脱异构体：200mg)。LCMS(方法C):RT＝3.94min,m/z＝463[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.35-7.22(m,5H),4.78-4.73(m,1H),4.20-4.17(m,1H),3.96-3.91(m,2H),3.59-3.51(m,1H),3.47-3.37(m,1H),3.29-2.93(m,1H),2.91-2.68(m,2H),2.35-2.28(m,1H),2.25-2.08(m,1H),1.96-1.93(m,1H),1.83-1.71(m,1H),1.23-1.14(m,9H)；和(2S,4S)-4-(N-(3,3-二氟环丁基)-2,2,2-三氟乙酰氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(第二洗脱异构体：65mg)。LCMS(方法C):RT＝3.99min,m/z＝463[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.4-7.37(m,2H),7.29-7.27(m,1H),7.25-7.18(m,2H),5.56-5.47(m,1H),4.23-4.05(m,2H),3.64-3.55(m,1H),3.51-3.43(m,2H),2.75-2.65(m,3H),2.44-2.32(m,2H),1.93-1.91(m,1H),1.56-1.54(m,1H),1.38(s,9H)。[注：通过nOe数据确认立体化学]。
步骤3：N-(3,3-二氟环丁基)-2,2,2-三氟-N-((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺盐酸盐：在rt下，向搅拌的(2S,4R)-4-(N-(3,3-二氟环丁基)-2,2,2-三氟乙酰氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(200mg 0.432mmol)在DCM(5mL)中的溶液中加入在1,4-二噁烷(1mL)中的4M HCl。3h后，减压蒸发溶剂，并将残留物与DCM和戊烷一起研磨，随后冻干，得到标题化合物(120mg，70％)。LCMS(方法H):RT＝1.93min,m/z＝363[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.35(br s,1H),7.63(d,2H),7.47-7.44(m,3H),4.50(d,1H),4.28-4.24(m,1H),4.14(m,1H),3.46-3.24(m,4H),2.85-2.83(m,2H),2.73-2.60(m,2H),2.03(d,1H),1.92(d,1H)。
中间体44：2,2,2-三氟-N-((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)-N-(吡啶-2-基甲基)乙酰 胺盐酸盐
步骤1：(2S)-2-苯基-4-((吡啶-2-基甲基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：在rt下，向搅拌的(S)-4-氧代-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.0g，3.63mmol)在MeOH(10mL)中的溶液中加入吡啶-2-基甲胺(436mg，4.03mmol)。2h后，加入NaBH3CN(914mg，14.5mmol)。再过16h后，将反应混合物用水(100mL)稀释并用9:1DCM/MeOH(2×250mL)萃取。将有机层干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到粗产物，其通过快速色谱(在己烷中的50％EtOAc)纯化，得到标题化合物(1.2g，90％)。LCMS(方法C):RT＝3.27min,m/z＝368[M+H]+。
步骤2：(2S)-2-苯基-4-(2,2,2-三氟-N-(吡啶-2-基甲基)乙酰胺基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：在0℃下，向搅拌的(2S)-2-苯基-4-((吡啶-2-基甲基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.2g，3.26mmol)在DCM(25mL)中的溶液中加入三乙胺(1.36mL，9.76mmol)。10min后，加入三氟乙酸酐(0.68mL，4.89mmol)。升温至rt。16h后，将反应混合物用水(50mL)稀释并使用DCM(2×50mL)萃取。将有机层用饱和NaHCO3(aq)溶液(100mL)洗涤，并干燥(Na2SO4)。真空除去溶剂，得到粗产物，其通过快速色谱(在己烷中的30％EtOAc)纯化，得到标题化合物(350mg，45％)。LCMS(方法C):RT＝3.81min,m/z＝464[M+H]+。
步骤3：(2S,4R)-2-苯基-4-(2,2,2-三氟-N-(吡啶-2-基甲基)乙酰胺基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：使用Chiralpak OD-H(4.6mm×250mm，5μm)柱，采用等度溶剂条件：90/10己烷/EtOH+0.1％异丙胺(流速：21mL/min)，通过手性HPLC将(2S)-2-苯基-4-(2,2,2-三氟-N-(吡啶-2-基甲基)乙酰胺基)哌啶-1-羧酸叔丁酯分离成单一立体异构体，得到(2S,4S)-2-苯基-4-(2,2,2-三氟-N-(吡啶-2-基甲基)乙酰氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(第一洗脱异构体：120mg)。LCMS(方法C):RT＝3.81min,m/z＝464[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.53(d,1H),7.77(t.1H),7.38-7.23(m,5H),7.17(d,2H),5.47(br s,1H),4.81-4.71(m,2H),4.05-3.99(m,2H),2.78(br s,1H),2.43(d,1H),2.32-2.16(m,1H),1.86-1.76(m,1H),1.67(d,1H),1.42(m,9H).；和标题化合物(第二洗脱异构体：250mg LCMS(方法C):RT＝3.81min,m/z＝464[M+H]+。[注：通过与类似物的NMR数据比较分配顺式和反式立体化学]。
步骤4：2,2,2-三氟-N-(1-甲基环丙基)-N-((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺盐酸盐：在rt向，向搅拌的(2S,4R)-2-苯基-4-(2,2,2-三氟-N-(吡啶-2-基甲基)乙酰氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(230mg，0.496)在DCM(5mL)中的悬浮液中加入在1,4-二噁烷(2.5mL)中的4M HCl。3h后，减压蒸发溶剂，并将残留物与DCM和戊烷一起研磨，随后冻干，得到标题化合物(220mg，定量)。LCMS(方法H):RT＝1.71min,m/z＝364[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.69(br s,1H),9.29(br s,1H),8.52(s,1H),7.80(t,1H),7.64-7.57(m,3H),7.42-7.28(m,5H),4.83(s,2H),4.49-4.46(m,2H),3.42-3.20(m,3H),2.33(br s,2H),2.06(d,1H),1.95(d,1H)。
中间体45：2,2,2-三氟-N-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-N-((2S,4R)-2-苯基哌啶-4- 基)乙酰胺盐酸盐
步骤1：(2S)-4-((1-甲基-1H-吡唑-3-基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯：在rt下，向搅拌的(S)-4-氧代-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(500mg，1.82mmol)在MeOH(5mL)中的溶液中加入1-甲基-1H-吡唑-3-胺(530mg，5.46mmol)和催化的AcOH(1-2滴)。1h后，分批加入NaBH3CN(571mg，9.10mmol)。再过16h后，用水(10mL)猝灭反应混合物并减压浓缩以除去挥发物。将反应混合物用水(25mL)稀释并使用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机相干燥(Na2SO4)并浓缩，得到粗产物，其通过快速色谱(在己烷中的70-80％EtOAc)纯化，得到标题化合物(450mg，69％)。LCMS(方法C):RT＝3.43min,m/z＝357[M+H]+。
步骤2：(2S,4R)-4-((1-甲基-1H-吡唑-3-基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯：通过反相制备型HPLC(C18柱)将(2S)-4-((1-甲基-1H-吡唑-3-基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(900mg)分离成单一立体异构体，得到标题化合物(第一洗脱异构体：480mg)。LCMS(方法C):RT＝3.41min,m/z＝357[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.32-7.26(m,3H),7.21-7.17(m,3H),5.33(d,1H),4.82-4.78(m,1H),4.65(d,1H),3.87-3.82(m,1H),3.57(s,3H),3.51-3.49(m,1H),3.37-3.34(m,1H),2.17-2.13(m,1H),2.05-2.02(m,1H),1.84-1.81(m,1H),1.51-1.47(m,1H),1.22(s,9H)；和(2S,4S)-4-((1-甲基-1H-吡唑-3-基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(第二洗脱异构体：120mg LCMS(方法C):RT＝3.46min,m/z＝357[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.39(t,2H),7.28-7.26(m,4H),5.40(bs,1H),5.30(s,1H),4.97(d,1H),3.98(d,1H),3.57(s,3H),2.74-2.63(m,2H),1.88(d,1H),1.62-1.54(m,1H),1.41(s,9H).[注：通过nOe数据确认立体化学]。
步骤3：(2S,4R)-2-苯基-4-(2,2,2-三氟-N-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)乙酰胺基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：在0℃下，向搅拌的(2S,4R)-4-((1-甲基-1H-吡唑-3-基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(432mg，1.21mmol)在DCM(5ml)中的溶液中加入三乙胺(1.02mL，7.28mmol)，随后加入三氟乙酸酐(0.36mL，2.55mmol)。升温至rt。16h后，将反应混合物用水(30mL)稀释并用DCM(2×75mL)萃取。将合并的有机相干燥(Na2SO4)并浓缩，得到粗产物，其通过快速色谱(在己烷中的0-30％EtOAc)纯化，得到标题化合物(350mg，64％)。LCMS(方法C):RT＝3.67min,m/z＝453[M+H]+。
步骤4：2,2,2-三氟-N-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-N-((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺盐酸盐：在0℃和rt下，向搅拌的(2S,4R)-2-苯基-4-(2,2,2-三氟-N-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)乙酰氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(325mg，1.07mmol)在DCM(5mL)中的溶液中加入在1,4-二噁烷(0.2mL)中的4M HCl。3h后，减压浓缩反应混合物，得到粗产物，将其与乙醚和戊烷一起研磨，得到标题化合物(280mg，71％)。LCMS(方法H):RT＝1.65min,m/z＝353[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.47(br s,2H),7.81(d,1H),7.51(d,2H),7.44-7.37(m,3H),6.33(d,1H),4.82(t,1H),4.51(t,1H),3.84(s,3H),3.35(br s,1H),3.26-3.20(m,1H),2.10-1.96(m,2H),1.90-1.79(m,2H)。
中间体46：2,2,2-三氟-N-((5-氟吡啶-2-基)甲基)-N-((2S,4R)-2-苯基哌啶-4- 基)乙酰胺盐酸盐
根据2,2,2-三氟-N-((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)-N-(吡啶-2-基甲基)乙酰胺盐酸盐的程序制备标题化合物(中间体44)，除了用(5-氟吡啶-2-基)甲胺(330mg，2.61mmol)代替吡啶-2-基甲胺与4-氧代-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(700mg，2.55mmol)反应以及以下用于分离非对映异构体的条件：Chiralpak IG(4.6mm×250mm,5μm)柱，采用等度溶剂条件：80:20己烷/EtOH+0.1％异丙胺(流速：21mL/min)。LCMS(方法H):RT＝1.74min,m/z＝382[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.45(s,1H),7.64(br s,1H),7.39-7.19(m,5H),4.75(s,2H),4.14(br s,1H),3.63(d,1H),3.13(d,1H),2.71(t,1H),2.19(br s,1H),1.8-1.68(m,4H)。
中间体47：2,2,2-三氟-N-苯基-N-((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺盐酸盐
根据2,2,2-三氟-N-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-N-((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺盐酸盐(中间体45)的程序制备标题化合物，除了使用苯胺(0.246mL，2.72mmol)代替1-甲基-1H-吡唑-3-胺与4-氧代-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(500mg，1.81mmol)反应以及以下用于分离非对映异构体的条件：Chiralpak IG(21mm×250mm,5μm)柱，采用等度溶剂条件：90:10己烷/EtOH+0.1％异丙胺(流速：21mL/min)。LCMS(方法I):RT＝1.57min,m/z＝349[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.20(br s,1H),7.51-7.39(m,10H),4.85(t,1H),4.49(d,1H)3.42-3.39(m,1H),3.29-3.22(m,1H),2.32-2.26(m,1H),2.11(d,1H)1.94-1.83(m,2H)。
中间体48：2,2,2-三氟-N-(1-甲基环丙基)-N-((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰 胺盐酸盐
步骤1：(2S)-4-((1-甲基环丙基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯：在rt下，向搅拌的(S)-4-氧代-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.0g，3.63mmol)在MeOH(50mL)中的溶液中加入1-甲基环丙烷-1-胺盐酸盐(584mg，5.44mmol)。2h后，加入NaBH3CN(684mg，10.9mmol)。再过16h后，将反应混合物用水(100mL)稀释并使用在DCM(2×200mL)中的5％(v/v)MeOH萃取。将合并的有机相干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到粗产物，其通过快速色谱(在己烷中的50％EtOAc)纯化，得到标题化合物(600mg，50％)。LCMS(方法C):RT＝3.62min,m/z＝331[M+H]+。
步骤2：(2S)-2-苯基-4-(2,2,2-三氟-N-(1-甲基环丙基)乙酰胺基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：在0℃下，向搅拌的(2S)-4-((1-甲基环丙基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(600mg，1.81mmol)在DCM(5mL)中的溶液中加入三乙胺(0.5mL，3.63mmol)。10min后，加入三氟乙酸酐(0.38mL，2.71mmol)并升温至rt。再过16h后，将反应混合物用水(50mL)稀释并使用DCM(2×50mL)萃取。使用饱和NaHCO3(aq)溶液(100mL)洗涤合并的有机相，并干燥(Na2SO4)。减压蒸发溶剂，得到粗产物，其通过快速色谱纯化，得到标题化合物(350mg，45％)。LCMS(方法C):RT＝3.84min,m/z＝427[M+H]+。
步骤3：(2S,4R)-2-苯基-4-(2,2,2-三氟-N-(1-甲基环丙基)乙酰胺基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：使用Chiralpak IC(4.6mm×250mm，5μm)柱，采用等度溶剂条件：90/10己烷/EtOH+0.1％异丙胺(流速：21mL/min)，通过手性HPLC将(2S)-2-苯基-4-(2,2,2-三氟-N-(1-甲基环丙基)乙酰胺基)哌啶-1-羧酸叔丁酯分离成单一立体异构体，得到标题化合物(第一洗脱异构体：150mg)。LCMS(方法C):RT＝3.84min,m/z＝427[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.33-7.29(m,2H),7.25-7.19(m,3H),4.78-.4.74(m,1H),4.01-3.97(m,1H),3.89-3.87(m,1H),3.54-3.46(m,1H),2.56-2.53(m,1H),2.15(br s,1H),1.95-1.92(m,2H),1.42(s,3H),1.22(s,9H),1.17-1.06(br s,2H),0.83(br s,2H)；和(2S,4S)-2-苯基-4-(2,2,2-三氟-N-(1-甲基环丙基)乙酰胺基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(第二洗脱异构体：130mg)。LCMS(方法C):RT＝3.85min,m/z＝427[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.43-7.39(m,2H),7.29-7.23(m,3H),5.66(s,0.35H),5.49(s,1H),4.09-4.05(m,1H),3.63-3.57(m,1H),2.92-2.85(m,1H),2.67-2.64(m,1H),2.43-2.40(m,1H),2.32-2.26(m,1H),1.72-1.69(d,1H),1.44(s,9H),1.35(s,3H),1.08(br s,2H),0.85-0.74(br s,2H).[注：通过与类似物的NMR数据比较分配反式和顺式立体化学]。
步骤3：2,2,2-三氟-N-(1-甲基环丙基)-N-((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺盐酸盐：在rt下，向搅拌的(2S,4R)-2-苯基-4-(2,2,2-三氟-N-(1-甲基环丙基)乙酰氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(150mg，0.351mmol)在DCM(5mL)中的溶液中加入在1,4-二噁烷(1mL)中的4M HCl。3h后，减压蒸发溶剂，并将残留物与DCM和戊烷一起研磨，随后冻干，得到标题化合物(89mg，70％)。LCMS(方法C):RT＝2.49min,m/z＝327[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.30(br s,1H),7.58-7.56(m,2H),7.47-7.41(m,3H),4.43-4.40(d,1H),4.11-4.06(m,1H),3.43-3.40(m,1H),3.24-3.18(m,1H),2.84-2.72(m,2H),2.08(d,1H),1.97(d,1H),1.44(s,3H),1.20(s,2H),0.84(br s,2H)。
中间体49：N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-4-基)-N-乙基-2,2,2-三氟乙酰 胺盐酸盐
步骤1：(2S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(乙氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：在rt下，向搅拌的(S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(700mg，2.41mmol)在MeOH(5mL)中的溶液中加入乙胺(163mg，3.61mmol)。2h后，加入NaBH3CN(454mg，7.23mmol)。再过16h后，减压浓缩反应混合物，得到粗产物，其通过快速色谱(在DCM中的0-10％MeOH)纯化，得到标题化合物(820mg，91％)。LCMS(方法C):RT＝2.94min,m/z＝341[M+H]+。
步骤2：(2S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(N-乙基-2,2,2-三氟乙酰胺基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：将(2S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(乙氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(700mg，2.06mmol)悬浮于DCM(5mL)中并在0℃下搅拌。加入吡啶(1.63mg，20.6mmol)和三氟乙酸酐(648mg，3.08mmol)并升温至rt。16h后，减压浓缩反应混合物，得到粗产物，其通过快速色谱(在己烷中的0-30％EtOAc)纯化，得到标题化合物(960mg，77％)。LCMS(方法C):RT＝3.79min,m/z＝437[M+H]+。
步骤3：(2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(N-乙基-2,2,2-三氟乙酰胺基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：通过反相制备型HPLC(C18柱)将(2S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(N-乙基-2,2,2-三氟乙酰氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯分离成单一立体异构体，得到标题化合物(第一洗脱异构体：250mg)。LCMS(方法C):RT＝3.79min,m/z＝437[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.20-7.08(m,3H),4.95-4.90(m,1H),3.98-3.89(m,2H),3.68-3.61(m,1H),3.44(s,2H),2.16-2.06(m,1H),1.98-1.90(m,2H),1.90-1.07(d,12H)；和(2S,4S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(N-乙基-2,2,2-三氟乙酰胺基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(第二洗脱异构体：100mg)。LCMS(方法C):RT＝3.80min,m/z＝437[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.26-7.20(m,1H),7.17-7.13(m,1H),7.00(br s,1H),5.62-5.60(d,1H),4.18-4.18(d,1H),3.89(brs,1H),3.44-3.39(m,2H),3.19(t,1H),2.50-2.32(m,1H),2.18-2.14(m,1H),2.01-1.93(m,1H),1.84-1.81(m,1H),1.37(s,9H),1.16(m,3H).[注：通过nOe数据确认反式和顺式立体化学]。
步骤3：N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-4-基)-N-乙基-2,2,2-三氟乙酰胺盐酸盐：在rt下，向搅拌的(2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(N-乙基-2,2,2-三氟乙酰胺基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(290mg 0.664mmol)在DCM(5mL)中的溶液中加入在1,4-二噁烷(2mL)中的4M HCl。3h后，减压蒸发溶剂，并将残留物与DCM和戊烷一起研磨，随后冻干，得到标题化合物(232mg，97％)。LCMS(方法H):RT＝2.64min,m/z＝337[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.81(br s,2H),7.91(s,1H),7.35-7.28(m,2H),4.73-4.70(m,1H),4.38-4.32(m,1H),3.51-3.46(m,3H),3.36-3.30(m,1H),2.67-2.63(m,2H),2.05-1.92(dd,2H),1.22(s,3H)。
中间体50：N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-4-基)-2,2,2-三氟-N-异丙基乙 酰胺盐酸盐
根据N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-4-基)-N-乙基-2,2,2-三氟乙酰胺盐酸盐(中间体49)的程序制备标题化合物，除了使用异丙胺(171mg，2.89mmol)代替乙胺与(S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(600mg，1.93mmol)以及使用反相制备型HPLC(C18柱)分离非对映异构体。LCMS(方法C):RT＝1.75min,m/z＝255[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.24(br s,1H),9.75(br s,1H),9.24(br s,2H),7.85(s,1H),7.44-7.34(m,2H),4.68(t,1H),3.72(m,1H),3.56-3.43(m,2H),3.22(m,1H),2.38-2.35(m,1H),2.27-2.24(m,1H),2.16-2.07(m,2H),1.27(d,6H)。
中间体51：N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2,2,2-三氟-N-((2S, 4R)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺
步骤1：(2S)-4-((2-羟乙基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯：在rt下，向搅拌的(S)-4-氧代-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.00g，3.63mmol)在MeOH(25mL)中的溶液中加入2-氨基乙醇-1-醇(0.32mL，5.44mmol)和催化的AcOH(1-2滴)。2h后，加入NaBH3CN(0.685g，10.9mmol)。再过16h后，将反应混合物用水(50mL)稀释并用在DCM(3×50mL)中的5％(v/v)MeOH的萃取。将有机层干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到粗产物，其通过快速色谱(在DCM中的0-10％MeOH)纯化，得到标题化合物(1.00g，86％)。LCMS(方法C):RT＝2.79min，m/z＝321[M+H]+。
步骤2：(2S)-4-((2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯：在rt下，向搅拌的(2S)-4-((2-羟乙基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.00g，3.12mmol)在DCM(25mL)中的溶液中加入TBDMSCl(940mg，6.24mmol)和咪唑(1.06g，15.6mmol)。16h后，将反应混合物用水(100mL)稀释并用EtOAc(2×100mL)萃取。将合并的有机相用饱和NaHCO3(aq)溶液(100mL)洗涤并干燥(Na2SO4)。减压蒸发溶剂，得到粗产物，其通过快速色谱纯化，得到标题化合物(750mg，55％)。LCMS(方法C):RT＝2.51min，m/z＝435[M+H]+。
步骤3：(2S)-4-(N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2,2,2-三氟乙酰胺基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯：在0℃下，向搅拌的(2S)-4-((2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(750mg，1.73mmol)在DCM(25mL)中的溶液中加入吡啶(1.39mL，17.3mmol)，随后加入三氟乙酸酐(0.362mL，2.56mmol)。16h后，将反应混合物用水(100mL)稀释并使用DCM(2×100mL)萃取。将有机层用饱和NaHCO3(aq)溶液(100mL)洗涤并干燥(Na2SO4)。减压蒸发溶剂，得到粗产物，其通过快速色谱纯化，得到标题化合物(750mg，82％)。LCMS(方法C):RT＝2.81min，m/z＝531[M+H]+。
步骤4：(2S，4R)-4-(N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2，2，2-三氟乙酰氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯：通过反相制备型HPLC(C18柱)分离(2S)-4-(N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2，2，2-三氟乙酰氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯，得到标题化合物(第一洗脱异构体：200mg)。LCMS(方法C):RT＝2.81min,m/z＝531[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz，DMSO-d6):δ7.33-7.30(m，2H),7.25-7.20(m,3H),4.79-4.75(m,1H)，3.96-3.92(m，1H)，3.78-3.76(m，2H)，3.56-3.48(m，3H)，2.07-2.04(m，1H)，1.94-1.90(m，4H)，1.83-1.2(m，9H)，0.85(s，9H)，0.03(s，6H)；和(2S,4S)-4-(N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2,2,2-三氟乙酰氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(第二洗脱异构体：190mg)。LCMS(方法C):RT＝2.79min,m/z＝531[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.40-7.36(m,2H),7.27-7.23(m,3H),5.52(s,1H),4.12-4.08(m,1H),3.96-3.92(m,1H),3.83-3.82(m,1H),3.75-3.72(m,2H),3.50-3.45(m,2H),2.87-2.80(m,1H),2.49-2.41(m,1H),2.32(br s,1H),1.68-1.64(d,1H),1.60(s,9H),0.85(s,9H),0.06(s,6H).[注：通过与类似物的NMR数据比较分配反式和顺式立体化学]。
步骤4：N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2,2,2-三氟-N-((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺：将(2S,4R)-4-(N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2,2,2-三氟乙酰氨基)-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(250mg，0.471mmol)悬浮于1,1,1,3,3,3-六氟丙-2-醇(5mL)中并加热至120℃。16h后，减压蒸发溶剂并通过反相制备型HPLC纯化残留物，得到标题化合物(164mg，81％)。LCMS(方法J):RT＝4.00min,m/z＝431[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.38-7.36(m,2H),7.32-7.20(m,3H),3.93(br s,1H),3.75-3.72(m,2H),3.66-3.62(m,1H),3.49(br s,2H),3.21-3.16(m,1H),2.76-2.70(m,1H),1.91(br s,1H),1.18-1.67(m,4H),0.85(s,9H),0.21(s,1H)。
中间体52：(R)-10-((4-环丙基-6-氧代嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸 烷-7-羧酸叔丁酯
标题化合物的制备类似于(R)-10-((6-氧代-4-(邻甲苯基)嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(中间体18)，除了在第一步骤中使用6-环丙基嘧啶-4(3H)-酮(0.35g，2.6mmol)[市售]代替6-(邻甲苯基)嘧啶-4(3H)-酮。使用ChiralpakIA(20mm×250mm，5μm)柱，采用等度溶剂条件：70:15:15己烷/IPA/MeOH(流速：15mL/min)，通过手性HPLC将10-((4-环丙基-6-氧代嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(0.30g)解析成单一立体异构体。第一洗脱物质(RT＝12.03min)提供(S)-10-((4-(二氟甲基)-6-氧代嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(92mg)。[α]D 25＝+59.6(在MeOH中c 0.25)；和第二洗脱物质(RT＝19.82min)提供标题化合物(99mg)。LCMS(方法F):RT＝4.17min，m/z＝332[M-丁烯+H]+.1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ:8.28(s,1H),6.31(s,1H),4.06(m,1H),3.80(m,1H),3.65(m,1H),3.52(m,1H),2.80–2.54(m,2H)，1.85(m,1H),1.80(m,2H),1.65(m,2H),1.53(m,2H)，1.39(s，9H)，1.40–1.15(m，5H),0.90(m，4H).[α]D 25＝-59.2(在MeOH中c 0.25)。
中间体53：10-((6-氧代-4-苯基-3,6-二氢吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5] 癸烷-7-羧酸叔丁酯
在氩气氛下，向搅拌的10-((6-氧代-4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(0.50g，1.00mmol)在3:1 1,4-二噁烷/水(40mL)中的溶液中加入苯基硼酸(0.135g，1.10mmol)、Pd(dppf).Cl2(0.041g，0.05mmol)和碳酸钠(0.32g，3.00mmol)。将反应混合物脱气，用氩气回填并回流。24h后，分离有机相并蒸发至干。通过反相制备型HPLC(C18柱)纯化粗产物，得到标题化合物(0.32g，72％)。LCMS(方法F):RT＝1.53min,m/z＝369[M-丁烯+H]+.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.49(m,2H),7.38(m,3H),6.28(s,1H),4.00–3.48(m,5H),2.90–2.61(m,4H),1.75–1.48(m,8H),1.43(s,9H),1.40–1.22(m,3H)。
中间体54：(R)-10-((2-氧代-4-苯基-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)甲基)-7-氮杂螺 [4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯
标题化合物的制备类似于(R)-10-((6-氧代-4-(邻甲苯基)嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(中间体18)，除了在第一步骤中使用4-苯基-1,5-二氢-2H-吡咯-2-酮(2.00g，12.6mmol)[市售]代替6-(邻甲苯基)嘧啶-4(3H))-酮。使用CHIRALCEL OZ-H(20mm×250mm，5μm)柱，采用等度溶剂条件：80:10:10己烷/IPA/MeOH(流速：20mL/min)，通过手性HPLC将10-((2-氧代-4-苯基-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(1.1g)解析成单一立体异构体。第一洗脱物质(RT＝13.43min)提供标题化合物(0.43g)。LCMS(方法F):RT＝1.49min,m/z＝355[M-丁烯+H]+.1HNMR(500MHz,CDCl3)δ:8.37(s,1H),7.43–7.35(m,5H),6.35(s,1H),4.26–4.15(m,2H),3.74(m,1H),3.54(m,1H),2.68–2.36(m,3H),1.79(m,2H),1.65(m,2H),1.53(m,2H),1.38(s,9H),1.40–1.14(m,5H).[α]D 25＝-9.76(在CHCl3中c 0.25)；和第二洗脱物质(RT＝22.43min)提供(R)-10-((2-氧代-4-苯基-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(0.44g)。[α]D 25＝+10.44(在CHCl3中c 0.25)。
中间体55：N-(3,3-二氟环丁基)-N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-4-基)-2, 2,2-三氟乙酰胺盐酸盐
根据N-(3,3-二氟环丁基)-2,2,2-三氟-N-((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺盐酸盐(中间体43)的程序制备标题化合物，除了使用(S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯代替(S)-4-氧代-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯以及以下用于分离非对映异构体的条件：Chiralpak IG(21mm×250mm，5μm)柱，采用等度溶剂条件：98:2己烷/EtOH+0.1％异丙胺(流速：21mL/min)。LCMS(方法H):RT＝2.92min,m/z＝399[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.44(br s,2H),7.78(s,1H),7.30(m,2H),4.77(d,1H),4.23-4.21(m,2H),3.58-3.34(m,4H),2.85-2.82(m,2H),2.66-2.56(m,2H),2.00(d,1H),1.90(d,1H)。
中间体56：((3R,6S)-6-苯基哌啶-3-基)氨基甲酸2-(三甲基甲硅烷基)乙酯和 ((3S,6R)-6-苯基哌啶-3-基)氨基甲酸2-(三甲基甲硅烷基)乙酯
外消旋-(2S,5R)-2-(2,5-二氟苯基)-5-(((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)氨基)哌啶-1-羧酸苄酯的制备类似于外消旋-(2S,4R)-2-(2-氟苯基)-4-(((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)羰基)氨基)哌啶-1-羧酸苄酯(参见中间体28)，除了在初始步骤中使用6-溴烟酸甲酯和(2,5-二氟苯基)硼酸代替2-溴异烟酸甲酯和(2-氟苯基)硼酸。使用一般程序10除去Teoc基团，得到标题化合物，通过2D NMR分析确认其为反式。LCMS(方法A):RT＝0.65min,m/z 321[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.34(d,2H),7.28(t,2H),7.21(t,1H),6.94(d,1H),4.12-3.98(m,2H),3.43(d,1H),3.40-3.32(m,1H),3.07(d,1H),2.37(t,1H),1.91-1.84(m,1H),1.76-1.70(m,1H),1.43-1.32(m,2H),0.98-0.88(m,2H),0.03(s,9H).[未观察到1x NH信号]。
中间体57：2,2,2-三氟-N-(2-氟乙基)-N-((2S,4R)-2-(3-氟苯基)哌啶-4-基)乙 酰胺盐酸盐
根据N-(2,2-二氟乙基)-N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-4-基)-2,2,2-三氟乙酰胺盐酸盐(中间体42)的程序制备标题化合物，除了使用(S)-2-(3-氟苯基)-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯代替(S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯、2-氟乙烷-1-胺代替2,2-二氟乙烷-1-胺，以及用于分离非对映异构体的反相制备型HPLC(C18柱)。LCMS(方法C):RT＝2.56min,m/z＝337[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.59(br s,1H),7.57-7.46(m,3H),7.22(t,1H),4.70(s,1H),4.58(s,1H),4.48(d,1H),4.29-4.23(m,1H),3.82-3.76(m,2H),3.48-3.41(m,1H),3.21(t,1H),2.67-2.56(m,2H),2.09-1.93(m,2H)。
中间体58：2,2,2-三氟-N-((2S,4R)-2-(3-氟苯基)哌啶-4-基)-N-(2-甲氧基乙 基)乙酰胺盐酸盐
根据N-(2,2-二氟乙基)-N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-4-基)-2,2,2-三氟乙酰胺盐酸盐(中间体42)的程序制备标题化合物，除了使用(S)-2-(3-氟苯基)-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯代替(S)-2-(2,5-二氟苯基)-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯、2-甲氧基乙烷-1-胺代替2,2-二氟乙烷-1-胺，以及用于分离非对映异构体的反相制备型HPLC(C18柱)。LCMS(方法C):RT＝2.56min,m/z＝349[M+H]+。在100℃下，1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.50(br s,2H),7.53-7.44(m,3H),7.22(t,1H),4.46(d,1H),4.21(t,1H),3.60-3.55(m,4H),3.48-3.44(m,1H),3.31(s,3H),3.20(t,1H),2.61-2.55(m,1H),2.08-1.92(m,2H)。
中间体59：(R)-10-((6-氯-4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷- 7-羧酸叔丁酯
标题化合物的制备类似于(R)-10-((6-氟-4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(中间体27)的程序，除了使用6-氯喹唑啉-4(3H)-酮代替6-氟喹唑啉-4(3H)-酮。LCMS(方法B):RT＝1.91min,m/z＝432[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.40(s,1H),8.09(d,J＝2.5Hz,1H),7.86(dd,J＝8.7,2.5Hz,1H),7.72(d,J＝8.7Hz,1H),4.17(dd,J＝13.3,3.0Hz,1H),3.83–3.72(m,2H),3.55(s,1H),2.83–2.65(m,1H),1.92–1.82(m,2H),1.74–1.62(m,2H),1.62–1.50(m,2H),1.49–1.40(m,2H),1.39(s,9H),1.36–1.16(m,4H)。
中间体60：(R)-10-((4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧 酸叔丁酯
标题化合物的制备类似于(R)-10-((6-氟-4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(中间体27)的程序，除了使用喹唑啉-4(3H)-酮代替6-氟喹唑啉-4(3H)-酮。LCMS(方法B):RT＝1.68min,m/z＝398[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.37(s,1H),8.15(dd,J＝8.0,1.5Hz,1H),7.83(ddd,J＝8.5,7.1,1.6Hz,1H),7.71–7.66(m,1H),7.55(ddd,J＝8.2，7.1，1.2Hz,1H),4.18(dd，J＝13.3，3.0Hz,1H),3.83–3.73(m,2H),3.55(s,1H),2.83–2.65(m,1H),1.94–1.84(m,2H),1.74–1.62(m,2H),1.62–1.52(m,2H),1.50–1.40(m,2H),2H),1.39(s,9H),1.36–1.17(m,4H)
中间体61：(2S,5R)-5-(2,5-二氟苯基)-2-甲基吗啉
向搅拌的(S)-2-((三丁基甲锡烷基)甲氧基)丙-1-胺(1.00g，2.65mmol)[根据有机快报(Org.Lett.),2014,16,1236–1239进行制备，除了使用市售的(S)-1-氨基丙-2-醇代替1-氨基丙-2-醇]在DCM(50mL)中的溶液中加入2,5-二氟苯甲醛(376mg，2.65mmol)，随后加入细粉状4A分子筛(5g)。16h后，通过NMR分析监测醛的消耗(在CDCl3中～10.35ppm)确定反应完成。过滤反应混合物，真空除去挥发物，将得到的(S,E/Z)-N-(2,5-二氟亚苄基)-2-((三丁基甲锡烷基)甲氧基)丙-1-胺的粗品溶解于1:1DCM/六氟-2-丙醇(20mL)。将该溶液加入预先制备的无水三氟甲磺酸铜(II)(958mg，2.65mmol)在六氟-2-丙醇(50mL)中的悬浮液中，其中加入2,6-二甲基吡啶(284mg，2.65mmol)，并搅拌6h直至颜色由浅蓝色变为深绿色。将所得混合物在rt下搅拌。2天后，加入25％NH3(aq)(50mL)和盐水(50mL)，并将所得双相混合物搅拌30min。分离所得双相混合物，使用DCM(2×50mL)萃取水相，干燥(Na2SO4)合并的有机相，真空除去溶剂，并通过快速色谱纯化粗产物，得到标题化合物(248mg，44％)。LCMS(方法F):RT＝0.74min,m/z＝214[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ1.06(d,J＝6.2Hz,3H),2.83–2.89(m,1H),2.93(dd,J＝11.9,2.4Hz,1H),3.16(t,J＝10.4Hz,1H),3.46–3.58(m,1H),3.73(dd,J＝10.7,3.1Hz,1H),3.93–4.05(m,1H),7.15(td,J＝8.7,8.2,3.8Hz,1H),7.22(td,J＝9.3,4.6Hz,1H),7.34(ddd,J＝9.3,5.5,3.3Hz,1H)。
实施例1：(R)-6-苯基-3-((1-(2-苯基哌嗪-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)嘧啶-4 (3H)-酮
步骤1：4-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：将6-苯基嘧啶-4(3H)-酮(106mg，0.62mmol)、4-(碘甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(200mg，0.62mmol)和碳酸铯(401mg，1.23mmol)在无水1,4-二噁烷(4mL)中的溶液在rt下加热16h，然后在120℃下20h。将混合物在DCM(20mL)和盐水/水(1:1，40mL)之间分配。分离水层并用DCM(3×10mL)萃取。将合并的DCM级分干燥(分相器)，过滤并真空浓缩。通过快速色谱(在环己烷中的0-100％EtOAc)纯化残留物，得到标题化合物(187mg，82％)。LCMS(方法B):RT＝1.32min,m/z314[M-丁烯+H]+。
步骤2：6-苯基-3-(哌啶-4-基甲基)嘧啶-4(3H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用4-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(187mg，0.51mmol)和TFA(2.3mL)，搅拌20min，得到标题化合物(134mg，98％)。LCMS(方法B):RT＝0.57min,m/z 270[M+H]+。
步骤3：(R)-4-(4-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)哌啶-1-羰基)-3-苯基哌嗪-1-羧酸叔丁酯：根据一般程序2进行制备，使用三光气(13.8mg，0.046mmol)、吡啶(37.4μL，0.46mmol)、(R)-3-苯基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(29.2mg，0.11mmol)[市售]、6-苯基-3-(哌啶-4-基甲基)嘧啶-4(3H)-酮(25.0mg，0.093mmol)和DIPEA(81.1μL，0.46mmol)，得到标题化合物(48.6mg，94％)。LCMS(方法B):RT＝1.48min,m/z 502[M-丁烯+H]+。
步骤4：(R)-6-苯基-3-((1-(2-苯基哌嗪-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用(R)-4-(4-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)哌啶-1-羰基)-3-苯基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(48.6mg，0.087mmol)和TFA(1.0mL)，搅拌20min，得到标题化合物(36.1mg，89％)。LCMS(方法B):RT＝0.77min，m/z 458[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.53(s,1H),8.09-8.02(m,2H),7.53-7.46(m,3H),7.32-7.26(m,4H),7.20-7.14(m,1H),6.97(s，1H)，4.48-4.43(m,1H),3.87-3.79(m，2H),3.79-3.72(m,2H),3.09-2.98(m,3H),2.96-2.90(m,1H),2.81-2.71(m,3H),2.70-2.62(m，1H),2.04-1.93(m,1H),1.62-1.48(m，2H),1.22-1.09(m,2H)。未观察到NH信号。
实施例2和3：(R)-6-苯基-3-((7-(2-苯基哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-9-烯- 10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮和(R,Z)-6-苯基-3-((7-(2-苯基哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺 [4.5]癸-10-亚基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
步骤1：(R)-10-羟基-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯：将搅拌的(R)-10-((4-氯-6-氧代嘧啶-1(6H)-基)甲基)-10-羟基-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(500mg，1.26mmol)[根据WO2019/150119：其中实施例210，步骤1进行制备]、苯基硼酸(306mg，2.51mmol)、碳酸钠(400mg，3.77mmol)和Pd(dppf)Cl2.DCM(53.9mg，0.063mmol)在1,4-二噁烷(9mL)和水(3mL)中的悬浮液在密封的微波容器中脱气(真空下并用氮气回填，三次)。通过微波辐射将混合物加热至120℃，持续1h。冷却后，将混合物倒入水中并搅拌15min。通过真空过滤收集固体，用水(100mL)洗涤，并在50℃下真空干燥68h，得到粗标题化合物(583mg，100％)，其无需进一步纯化即用于下一步骤。LCMS(方法B):RT＝1.44min，m/z 384[M-丁烯+H]+。
步骤2：(Z)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)亚甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯和10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸-9-烯-7-羧酸酯：在氮气氛下，向搅拌的(R)-10-羟基-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(583mg，1.33mmol)在无水DCM(5mL)中的溶液中加入吡啶(0.32mL，3.98mmol)并将溶液冷却至0℃。滴加亚硫酰氯(0.19mL，2.65mmol)并将混合物搅拌过夜，同时温热至rt。将混合物在DCM(20mL)和水(20mL)之间分配。分离水层并用DCM(3×10mL)萃取。将合并的DCM级分干燥(分相器)并真空浓缩。通过快速色谱(在环己烷中的0-50％EtOAc)纯化残留物，得到标题化合物的混合物(165mg，15％)。LCMS(方法B):RT＝1.56min，m/z 422[M+H]+。
步骤3：(Z)-3-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-亚基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮和3-((7-氮杂螺[4.5]癸-9)-烯-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮(混合物)：根据一般程序1进行制备，使用(Z)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)亚甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯和10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸-9-烯-7-羧酸叔丁酯(50.0mg，0.059mmol)的混合物以及TFA(0.5mL)，搅拌20min，得到标题化合物的混合物(35.4mg，93％)。LCMS(方法B):RT＝0.70min,322[M+H]+。
步骤4：(R,Z)-4-(10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)亚甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-3-苯基哌嗪-1-羧酸叔丁酯和(R)-4-(10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸-9-烯-7-羰基)-3-苯基哌嗪-1-羧酸叔丁酯：根据一般程序2进行制备，使用三光气(8.2mg，0.028mmol)、吡啶(22.2μL，0.28mmol)、(R)-3-苯基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(17.3mg，0.066mmol)、(Z)-3-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-亚基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮和3-((7-氮杂螺[4.5]癸-9-烯-)(10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮(17.7mg，0.028mmol)的混合物以及DIPEA(48.1μL，0.28mmol)，得到标题化合物的混合物(32.8mg，98％)。LCMS(方法B):RT＝1.63min,m/z 610[M+H]+。
步骤5：(R)-6-苯基-3-((7-(2-苯基哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-9-烯-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮和(R,Z)-6-苯基-3-((7-(2-苯基哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-亚基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用(R,Z)-4-(10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)亚甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-3-苯基哌嗪-1-羧酸叔丁酯和(R)-4-(10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸-9-烯-7-羰基)-3-苯基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(32.8mg，0.0538mmol)的混合物以及TFA(0.3mL)，搅拌20min，得到标题化合物的混合物。使用以下梯度通过制备型HPLC纯化混合物：
将分离的残留物各自溶解于MeCN(2mL)和水(10mL)中，然后冷冻干燥，得到(R)-6-苯基-3-((7-(2-苯基哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-9-烯-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮(第一洗脱化合物：6.2mg，收率22％)。LCMS(方法B):RT＝0.96min,m/z 510[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.49(s，1H),8.12-8.06(m,2H),7.53-7.47(m,3H),7.31-7.23(m,4H),7.22-7.17(m，1H),7.01(s,1H),5.02-4.98(m,1H),4.57-4.51(m,2H),4.30(dd,1H)，4.00-3.83(m,2H),3.27-3.24(m,2H),3.18-2.82(m,7H),1.77-1.69(m,1H),1.69-1.52(m,5H),1.38-1.25(m,2H)和(R,Z)-6-苯基-3-((7-(2-苯基哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-亚基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮(第二洗脱化合物：8.6mg，30％)。LCMS(方法B):RT＝0.93min,m/z510[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.32(s,1H),8.12-8.05(m,2H),7.54-7.46(m,3H),7.37-7.27(m,4H),7.25-7.15(m,1H),7.01(s,1H),6.42(s,1H),4.47-4.40(m,1H),3.46-3.32(m,2H),3.23-2.96(m,6H),2.92-2.81(m,2H),2.23-2.12(m,2H),1.74-1.56(m,6H),1.56-1.41(m,2H),1.29-1.20(m,1H)。
实施例4：6-苯基-3-((7-((R)-4,4,4-三氟-2-甲基丁酰基)-7-氮杂螺[4.5]癸- 10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
步骤1：10-氧代-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯：在N2气氛下，将叔丁醇钾(24.8g，221mmol)分批加入搅拌的4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(20.0g，100mmol)在甲苯(200mL)中的溶液。将混合物搅拌1h。经15min滴加1,4-二溴丁烷(12.0mL，100mmol)，然后将混合物加热回流2h。将混合物冷却，然后在1:1饱和氯化铵(aq)溶液/水(200mL)和EtOAc(75mL)之间分配。分离水层并用EtOAc(2×75mL)萃取。将合并的EtOAc级分干燥(Na2SO4)、过滤(分相器)并真空浓缩。通过快速色谱(在环己烷中的0-10％EtOAc)纯化残留物，得到标题化合物(9.4g，37％)。1H NMR(500MHz,CDCl3):3.71(t,2H),3.45(s,2H),2.48(t,2H),1.97-1.88(m,2H),1.72-1.62(m,4H),1.49(s,9H),1.51-1.44(m,2H)。
步骤2：10-亚甲基-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯：在-78℃下，在N2气氛下向搅拌的(甲基)三苯基溴化鏻(6.2g，17.3mmol)在无水THF(55mL)中的溶液中滴加在己烷(5.5mL，13.7mmol)中的2.5M正丁基锂。移去冷却并在rt下继续搅拌45min。滴加10-氧代-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(3.7g，14.4mmol)在无水THF(20mL)中的溶液并将混合物搅拌3h。然后将混合物加热回流40h。冷却后，真空除去溶剂。将残留物在乙醚(150mL)中研磨。通过过滤(二氧化硅塞)除去固体并真空浓缩滤液。将残留物在乙醚(50mL)中研磨。通过过滤(二氧化硅塞)除去固体并真空浓缩滤液。将过快速色谱(在环己烷中的0-10％EtOAc)纯化剩余残留物，得到标题化合物(2.8g，78％)。1H NMR(500MHz,CDCl3):δ4.70(d,2H),2.52-3.35(m,2H),3.18(s,2H),2.24(t,2H),1.73-1.58(m,6H),1.55-1.49(m,2H),1.47(s,9H)。
步骤3：10-(羟甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯：在0℃下，在N2气氛下向搅拌的10-亚甲基-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯在无水THF(145mL)中的溶液中滴加0.5M 9-硼双环[3.3.1]壬烷在THF(97.6mL，48.8mmol)中的溶液。将混合物搅拌16h，同时升温至rt。加入5M乙酸钠溶液(aq)(14.1mL，70.5mmol)，随后加入过氧化氢(30％w/w水溶液)(14.1mL，138.1mmol)。继续搅拌68h。将混合物在EtOAc(750mL)和饱和碳酸氢钠(aq)(750mL)之间分配。分离水层并用EtOAc(2×250mL)萃取。将合并的EtOAc级分干燥(Na2SO4)、过滤并真空浓缩。通过快速色谱(在环己烷中的0-100％EtOAc)纯化残留物，得到标题化合物(4.7g，86％)。1H NMR(500MHz,CDCl3):δ4.04-3.85(m,1H),3.81(dd,1H),3.68-3.49(m,1H),3.45(t,1H),2.92(t,1H),2.62(d,1H),1.82(dq,1H),1.72-1.56(m,5H),1.54-1.46(m,2H),1.45(s,9H),1.43-1.18(4H)。
步骤4：10-(溴甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯：在0℃下，向搅拌的10-(羟甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(4.7g，17.5mmol)和三苯基膦(6.0g，22.8mmol)在无水DCM(150mL)中的溶液中加入四溴化碳(7.6g，22.8mmol)。将混合物温热至rt并搅拌40h。真空除去溶剂。通过快速色谱(在环己烷中的0-20％EtOAc)纯化残留物，得到标题化合物(4.6g，79％)。1H NMR(500MHz,CDCl3):δ4.04-3.78(m,1H),3.68-3.48(m,2H),3.15(t,1H),2.92(t,1H),2.61(d,1H),2.05-1.95(m,1H),1.78(tt,1H),1.74-1.67(m,1H),1.67-1.54(m,3H),1.53-1.42(m,2H),1.45(s,9H),1.39-1.28(m,2H),1.25-1.15(m,1H)。
步骤5：10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯：向搅拌的10-(溴甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(110mg，0.33mmol)在无水DMF(2mL)中的溶液中加入6-苯基嘧啶-4(3H)-酮(57.0mg，0.33mmol)，随后加入碳酸铯(21mg，0.66mmol)。将混合物在80℃下加热16h。将混合物在EtOAc(5mL)和1:1盐水/水(20mL)之间分配。分离水层并用EtOAc(3×5mL)萃取。将合并的EtOAc级分用1:1盐水/水(4×5mL)洗涤、干燥(Na2SO4)、过滤并真空浓缩。通过快速色谱(在环己烷中的0-50％EtOAc)纯化残留物，得到标题化合物(30.8mg，22％)。LCMS(方法B):RT＝1.57min,m/z 368[M-丁烯+H]+。
步骤6：3-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用10-((6-氧代)制备-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(15.6mg，0.037mmol)和TFA(0.25mL)，搅拌20min，得到标题化合物(10.1mg，85％)。LCMS(方法B):RT＝0.73min,m/z 324[M+H]+。
步骤7：6-苯基-3-((7-((R)-4,4,4-三氟-2-甲基丁酰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮：根据一般程序3进行制备，使用3-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮(10.0mg，0.031mmol)、(R)-4,4,4-三氟-2-甲基丁酸(5.3mg，0.034mmol)[根据WO2019/150119：酸3制备]、HATU(14.1mg，0.037mmol)和DIPEA(16.2μL，0.093mmol)，得到标题化合物(8.3mg，56％)。LCMS(方法B):RT＝1.42min,m/z 462[M+H]+.1HNMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.62-8.51(m,1H),8.13-8.00(m,2H),7.57-7.42(m,3H),6.97(s,1H),4.32-3.39(m，4H),3.19-2.94(m,2H),2.88-2.65(m,1H),2.61-2.54(m,1H),2.34-2.18(m,1H),2.00-1.81(m,2H),1.78-1.48(m，4H),1.46-1.14(m,5H),1.14-1.01(m,3H)。
实施例5：4-苯基-1-((7-((R)-4,4,4-三氟-2-甲基丁酰基)-7-氮杂螺[4.5]癸- 10-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮
步骤1：10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯：向搅拌的10-(溴甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(100mg，0.30mmol)在无水DMF(2mL)中的溶液中加入4-苯基吡啶-2(1H)-酮(51.5mg，0.30mmol)，随后加入碳酸铯(196mg，0.60mmol)。将混合物在rt下加热72h。单独地，向搅拌的10-(溴甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(200mg，0.60mmol)在无水DMF(4mL)中的溶液中加入4-苯基吡啶-2(1H))-酮(103mg，0.60mmol)，随后加入碳酸铯(392mg，1.20mmol)。将混合物在80℃下加热16h。冷却后，将合并的混合物在EtOAc(15mL)和1:1盐水/水(60mL)之间分配。分离水层并用EtOAc(3×15mL)萃取。将合并的EtOAc级分用1:1盐水/水(4×15mL)洗涤、干燥(Na2SO4)、过滤并真空浓缩。通过快速色谱(在环己烷中的0-100％EtOAc)纯化残留物，得到标题化合物(33.8mg，13％)。LCMS(方法B):RT＝1.56min，m/z 367[M-丁烯+H]+。
步骤2：1-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(33.8mg，0.080mmol)和TFA(0.3mL)，搅拌20min，得到标题化合物(13.5mg，52％)。LCMS(方法B):RT＝0.79min,m/z 323[M+H]+。
步骤3：4-苯基-1-((7-((R)-4,4,4-三氟-2-甲基丁酰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮：根据一般程序3进行制备，使用1-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮(10.0mg，0.0310mmol)、(R)-4,4,4-三氟-2-甲基丁酸(5.3mg，0.034mmol)[根据WO2019/150119：酸3制备]、HATU(14.2mg，0.037mmol)和DIPEA(16.3μL，0.093mmol)，得到标题化合物(9mg，60％)。LCMS(方法B):RT＝1.41min,m/z 461[M+H]+.1HNMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.78-7.68(m,3H),7.52-7.43(m,3H),6.68-6.63(m,1H),6.60-6.55(m,1H),4.30-3.39(m,4H),3.19-2.96(m,2H),2.88-2.56(m,2H),2.33-2.19(m,1H),2.02-1.72(m,2H),1.72-1.46(m,4H)，1.46-1.15(m,5H),1.14-0.98(m,3H)。
实施例6：(R)-4-苯基-1-((1-(2-苯基哌嗪-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)吡啶-2 (1H)-酮
步骤1：4-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：将搅拌的4-苯基吡啶-2(1H)-酮(105mg)4-(碘甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(200mg，0.62mmol)和碳酸铯(401mg，1.23mmol)在无水1,4-二噁烷(4mL)中的溶液在rt下加热16h，然后在120℃下加热20h。将混合物在DCM(20mL)和1:1盐水/水(40mL)之间分配。分离水层并用DCM(3×10mL)萃取。将合并的DCM级分干燥(分相器)、过滤并真空浓缩。通过快速色谱(在环己烷中的0-100％EtOAc)纯化残留物，得到标题化合物(132mg，58％)。LCMS(方法B):RT＝1.31min，m/z313[M-丁烯+H]+。
步骤2：4-苯基-1-(哌啶-4-基甲基)吡啶-2(1H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用4-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(132mg，0.36mmol)和TFA(1.0mL，13.0mmol)，搅拌20min，得到标题化合物(86.7mg，90％)。LCMS(方法B):RT＝0.55min,m/z 269[M+H]+。
步骤3：(R)-4-(4-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)哌啶-1-羰基)-3-苯基哌嗪-1-羧酸叔丁酯：根据一般程序2进行制备，使用三光气(13.8mg，0.047mmol)、吡啶(37.5μL,0.47mmol)、(R)-3-苯基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(29.3mg，0.11mmol)、4-苯基-1-(哌啶-4-基甲基)吡啶-2(1H)-酮(25.0mg，0.093mmol)和DIPEA(81.4μL，0.47mmol)，得到标题化合物(49.7mg，95％)。LCMS(方法B):RT＝1.47min，m/z 557[M+H]+。
步骤4：(R)-4-苯基-1-((1-(2-苯基哌嗪-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用(R)-4-(4-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)哌啶-1-羰基)-3-苯基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(49.7mg，0.089mmol)和TFA(1.0mL，0.18mmol)，搅拌20min，得到标题化合物(17.7mg，41％)。LCMS(方法B):RT＝0.83min,m/z 457[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.77-7.68(m,3H),7.52-7.43(m,3H),7.33-7.25(m,4H),7.21-7.14(m,1H),6.68-6.64(m,1H),6.59-6.54(m,1H),4.45(t,1H),3.86-3.78(m,2H),3.78-3.71(m,2H),3.28-3.25(m,1H),3.09-2.97(m,3H),2.95-2.88(m,1H),2.81-2.70(m,3H),2.69-2.64(m,1H),2.04-1.93(m,1H),1.60-1.46(m,2H),1.22-1.09(m,2H)。
实施例7：6-苯基-3-((7-((S)-4,4,4-三氟-2-(甲氧基甲基)丁酰基)-7-氮杂螺 [4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
步骤1：(R)-4-苄基-3-(4,4,4-三氟丁酰基)噁唑烷-2-酮：在-78℃下，向在THF溶液(100mL)中的(R)-4-苄基噁唑烷-2-酮(8.06g，45.5mmol)加入2.5M BuLi在THF中的溶液(45.5mL，114mmol)。15min后，加入3-三氟甲基丙酰氯(7.30g，45.5mmol)。24h后，使用饱和NH4Cl(aq)分配反应混合物。分离有机相、干燥(Na2SO4)并蒸发至干。通过快速色谱纯化粗品，得到标题化合物(2.80g，20％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.38–7.15(m,5H),4.70(m,1H),4.22(m,2H),3.30–3.15(m,3H),2.74(m,1H),2.56(m,2H)。
步骤2：(R)-4-苄基-3-((S)-4,4,4-三氟-2-(甲氧基甲基)丁酰基)噁唑烷-2-酮：在-70℃下，向在THF(70mL)中的(R)-4-苄基-3-(4,4,4-三氟丁酰基)噁唑烷-2-酮(2.60g，8.6mmol)加入1.7M NaHMDS的THF溶液(7.5mL)，随后加入甲氧基甲基溴(1.62g，13mmol)。24h后，将反应混合物用饱和NH4Cl(aq)分配。分离有机相、干燥(Na2SO4)并蒸发至干。通过快速色谱纯化粗品，得到标题化合物(0.75g，25％)。LCMS(方法F):RT＝1.50min,m/z 346[M+H]+。
步骤3：(S)-4,4,4-三氟-2-(甲氧基甲基)丁酸：向在1:1THF/水(20mL)中的(R)-4-苄基-3-((S)-4,4,4-三氟-2-(甲氧基甲基)丁酰基)噁唑烷-2-酮(0.60g，1.7mmol)中加入30％过氧化氢(aq)(0.79mL，6.8mmol)和水合氢氧化锂(0.15g，3.5mmol)。24h后，蒸发挥发物并使用乙酸乙酯萃取剩余的水性混合物。使用硫酸氢钠(aq)溶液酸化水相并使用DCM(x2)萃取。将有机相干燥(Na2SO4)并蒸发，得到标题化合物(0.14g，43％)。GCMS(方法A):m/z186M+.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ3.69–3.57(m,2H),3.35(s,3H),2.95(m,1H),2.70–2.59(m,1H),2.45–2.35(m,1H)。
步骤4：6-苯基-3-((7-((S)-4,4,4-三氟-2-(甲氧基甲基)丁酰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮：根据一般程序3进行制备，使用3-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮(10.0mg，0.031mmol)、(S)-4,4,4-三氟-2-(甲氧基甲基)丁酸(6.3mg，0.034mmol)、HATU(14.1mg，0.037mmol)和DIPEA(16.2μL，0.093mmol)，得到标题化合物(9.5mg，60％)。LCMS(方法B):RT＝1.40min,m/z 492[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.62-8.52(m,1H)，8.11-8.02(m,2H),7.55-7.45(m,3H),6.97(s，1H),4.26(d,0.16H),4.18-4.08(m,1H),4.00(d,0.39H),3.96-3.87(m,1H),3.86-3.64(m,1H),3.59(d,0.16),3.50-3.42(m,0.34H),3.42-3.33(m,2H),3.28-3.19(m,3H),3.12-2.82(m,1H),2.82-2.64(m,1H),2.62-2.54(m,1H),2.44-2.29(m,1H),2.00-1.90(m,1H),1.89-1.73(m,1H),1.72-1.02(m,10H)。
实施例8：6-苯基-3-((7-((S)-2-苯基吡咯烷-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基) 甲基)嘧啶-4(3H)-酮
根据一般程序2进行制备，使用三光气(4.6mg，0.016mmol)、吡啶(12.5μL，0.15mmol)、(S)-2-苯基吡咯烷(5.5μL，0.037mmol)、3-((7-氮杂螺[4.5])癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮(10.0mg，0.031mmol)和DIPEA(27.0μL，0.15mmol)，得到标题化合物(11.5mg，67％)。LCMS(方法B):RT＝1.53min,m/z 497[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.58(d,1H),8.10-8.00(m,2H),7.54-7.44(m,3H),7.30-7.16(m,5H),6.95(s,1H),4.90(t,1H),4.15-4.02(m,1H),3.84(t,0.5H),3.75(d,0.5H),3.68-3.55(m,1.5H),3.51-3.43(m,1H),3.40(t,0.5H),3.34(t,1H),3.27-3.25(m,0.5H),2.98-2.89(t,0.5H),2.58(t,1H),2.31-2.22(m,1H),1.94-1.80(m,2.5H),1.80-1.72(m,1H),1.72-1.46(m,6H),1.46-1.35(m,1H),1.33-1.15(m,3.5H)。
实施例9：3-((1-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)-6-苯 基嘧啶-4(3H)-酮
步骤1：((2S,4R)-1-(4-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)哌啶-1-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯：根据一般程序3进行制备，使用三光气(5.5mg，0.019mmol)、吡啶(15.0μL，0.19mmol)、((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(12.3mg，0.045mmol)、6-苯基-3-(哌啶-4-基甲基)嘧啶-4(3H)-酮(10.0mg，0.037mmol)和DIPEA(32.4μL，0.19mmol)，得到标题化合物(14.7mg，69％)。LCMS(方法B):RT＝1.41min,m/z 572[M-丁烯+H]+。
步骤2：3-((1-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮：根据按照一般程序1进行制备，使用((2S,4R)-1-(4-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)哌啶-1-羰基)-2-苯基哌啶-(4-基)氨基甲酸叔丁酯(14.7mg，0.026mmol)和TFA(0.3mL)，搅拌20min，得到标题化合物(10.9mg，87％)。LCMS(方法B):RT＝0.78min,m/z 472[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.53(s,1H),8.10-8.03(m,2H),7.53-7.46(m,3H),7.22(t,2H),7.17(d,2H),7.08(t,1H),6.97(s,1H),4.05-3.90(m,3H),3.87-3.76(m,2H),3.26-3.20(m,2H),2.89-2.59(m,5H),2.03-1.91(m,1H),1.81(d,2H),1.59(d,1H),1.51(d,1H),1.37(q,1H),1.23(q,1H),1.08(dq,1H),0.99(m,1H)。
实施例10：N-苄基-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸 烷-7-甲酰胺
根据一般程序2进行制备，使用三光气(4.6mg，0.016mmol)、吡啶(12.5μL，0.15mmol)、苄胺(4.1μL，0.037mmol)、3-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮(10.0mg，0.031mmol)和DIPEA(27.0μL，0.15mmol)，得到标题化合物(9.3mg，65％)。LCMS(方法B):RT＝1.34min,m/z 457[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.56(s,1H),8.11-8.02(m,2H),7.52-7.45(m,3H),7.29(t,2H),7.23(d,2H),7.19(t,1H),6.98(t,1H),6.96(s,1H),4.28-4.18(m,2H),4.13(dd,1H),3.90-3.82(m,1H),3.72(t,1H),3.61(d,1H),2.78-2.69(m,1H),2.59(d,1H),1.90-1.79(m,2H),1.74-1.65(m,1H),1.65-1.57(m,2H),1.57-1.48(m,1H),1.48-1.39(m,2H),1.36-1.27(m,2H),1.26-1.17(m,1H)。
实施例11：3-((7-((R)-2-(3,5-二氟苯基)哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10- 基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
步骤1：(3R)-3-(3,5-二氟苯基)-4-(10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯：根据一般程序2进行制备，使用三光气(4.6mg，0.0156mmol)、吡啶(12.5μL，0.15mmol)、(R)-3-(3,5-二氟苯基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(11.1mg，0.037mmol)[中间体2]、3-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮(10.0mg，0.031mmol)和DIPEA(27.0μL，0.15mmol)，得到标题化合物(13.9mg，69％)。LCMS(方法B):RT＝1.68min,m/z 648[M+H]+。
步骤2：3-((7-((R)-2-(3,5-二氟苯基)哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用(3R)-3-(3,5-二氟苯基)-4-(10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(13.9mg，0.022mmol)和TFA(0.3mL)，搅拌20min，得到标题化合物(11.6mg，98％)。LCMS(方法B):RT＝1.04min,m/z 548[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.59-8.52(m,1H),8.09-8.02(m,2H),7.53-7.46(m,3H),7.09-7.03(m,1H),7.00(t,2H),6.96(s,1H),4.41-4.27(m,1H),4.15-4.03(m,1H),3.82-3.68(m,2H),3.43-3.32(m,1H),3.28-3.23(m,1H),3.13-3.01(m,1H),3.01-2.90(m,3H),2.88-2.75(m,2H),2.74-2.59(m,1H),1.92-1.74(m,2H),1.70-1.44(m,4H),1.44-1.20(m,5H)。
实施例12：3-((7-((3R,4R)-1-亚氨基-1-氧化-4-苯基四氢-1H-1λ6-噻吩-3-羰 基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮和3-((7-((3S,4S)-1-亚氨基- 1-氧化-4-苯基四氢-1H-1λ6-噻吩-3-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶- 4(3H)-酮
步骤1：外消旋-6-苯基-3-((7-((3R,4R)-4-苯基四氢噻吩-3-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮：根据一般程序3进行制备，使用3-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮(10.0mg，0.031mmol)、外消旋-(3R,4R)-4-苯基四氢噻吩-3-羧酸(7.1mg，0.034mmol)、HATU(14.1mg，0.037mmol)和DIPEA(16.2μL，0.093mmol)，得到标题化合物(13.7mg，86％)。LCMS(方法B):RT＝1.55min,m/z 514[M+H]+。
步骤2：3-((7-((3R,4R)-1-亚氨基-1-氧化-4-苯基四氢-1H-1λ6-噻吩-3-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮和3-((7-((3S,4S)-1-亚氨基-1-氧化-4-苯基四氢-1H-1λ6-噻吩-3-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮：向搅拌的外消旋-6-苯基-3-((7-((3R,4R)-4-苯基四氢噻吩-3-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮(13.7mg，0.027mmol)在MeOH(0.5mL)中的溶液中加入(二乙酰氧基碘)苯(21.5mg，0.067mmol)和碳酸铵(5.1mg，0.053mmol)，并将悬浮液搅拌30min。将混合物真空浓缩。通过快速色谱(在EtOAc中的0-100％MeOH)纯化残留物并冻干，得到标题化合物(11.9mg，79％)。LCMS(方法B):RT＝1.19min,m/z 545[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.52-8.37(m,1H),8.10-7.97(m,2H),7.53-7.44(m,3H),7.42-7.18(m,5H),6.98-6.91(m,1H),4.28-3.84(m,4H),3.84-3.30(m,5.5H),3.27-3.08(m,1.5H),2.98-2.65(m,1H),1.90-1.32(m,7H),1.30-1.01(m,3H),1.00-0.80(m,1H),0.76-0.38(m,1H)。
实施例13：6-苯基-3-(((S)-7-((R)-2-苯基哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10- 基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
和
实施例14：6-苯基-3-(((R)-7-((R)-2-苯基哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10- 基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
步骤1：(3R)-4-[10-[(6-氧代-4-苯基-嘧啶-1-基)甲基]-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基]-3-苯基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯：根据一般程序2进行制备，使用三光气(22.9mg，0.077mmol)、吡啶(62.3μL，0.77mmol)、(R)-3-苯基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(48.7mg，0.19mmol)、3-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮(50.0mg，0.15mmol)和DIPEA(135μL,0.77mmol)，得到标题化合物(89.7mg，95％)。LCMS(方法B):RT＝1.64min，m/z 612[M+H]+。
步骤2：6-苯基-3-(((S)-7-((R)-2-苯基哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮和6-苯基-3-(((R)-7-((R)-2-苯基哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用(3R)-4-[10-[(6-氧代-4-苯基-嘧啶-1-基)甲基]-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基]-3-苯基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(89.7mg，0.15mmol)和TFA(1.0mL)，搅拌20min，得到标题化合物的混合物(76.2mg，100％)。LCMS(方法B):RT＝0.96min,m/z 512[M+H]+。使用Lux C1(21.2mm×250mm,5μm)柱，采用等度溶剂条件：MeOH(0.2％v/v NH3)，通过手性制备型HPLC分离该物质并冻干，得到：
6-苯基-3-(((S)-7-((R)-2-苯基哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮(第一洗脱：27.1mg，35％)。LCMS(方法B):RT＝0.96min,m/z 512[M+H]+.1HNMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.59-8.54(m,1H),8.09-8.03(m,2H),7.53-7.45(m,3H),7.38-7.28(m,4H),7.27-7.17(m,1H),6.98-6.94(m,1H),4.48-4.27(m,1H),4.12-4.04(dd,1H),3.84-3.65(m,2H),3.43-3.34(m,1H),3.28-3.25(m,1H),3.13-2.79(m,7H),2.62-2.55(m,1H),1.92-1.82(m,1H),1.82-1.72(m,1H),1.65-1.41(m,4H),1.41-1.34(m,1H),1.34-1.18(m,4H).手性纯度(方法C):RT＝8.08min,99.5％ee。
6-苯基-3-(((R)-7-((R)-2-苯基哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮(第二洗脱：27.0mg，35％)。LCMS(方法B):RT＝0.99min,m/z 512[M+H]+.1HNMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.55(s,1H),8.08-8.03(m,2H),7.52-7.46(m,3H),7.32-7.24(m,4H),7.21-7.15(m,1H),6.96(s,1H),4.40-4.32(m,1H),4.11(dd,1H),3.79-3.66(m,2H),3.34(d,1H),3.28-3.24(m,1H),3.09-3.02(m,1H),3.01-2.88(m,3H),2.81-2.71(m,3H),2.65(d,1H),1.90-1.79(m,2H),1.68-1.58(m,2H),1.56-1.45(m,2H),1.40-1.20(m,5H).手性纯度(方法C):RT＝11.1min,99.3％ee。
实施例15：4-苯基-1-(((S)-7-((R)-2-苯基哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10- 基)甲基)吡啶-2(1H)-酮
和
实施例16：4-苯基-1-(((R)-7-((R)-2-苯基哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10- 基)甲基)吡啶-2(1H)-酮
步骤1：(3R)-4-(10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-3-苯基哌嗪-1-羧酸叔丁酯：根据一般程序2进行制备，使用三光气(23.0mg，0.078mmol)、吡啶(62.5μL，0.78mmol)、(R)-3-苯基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(48.8mg，0.19mmol)、1-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮(50.0mg，0.16mmol)和DIPEA(135μL，0.78mmol)，得到标题化合物(89.7mg，95％)。LCMS(方法B):RT＝1.63min,m/z 611[M+H]+。
步骤2：4-苯基-1-(((S)-7-((R)-2-苯基哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮和4-苯基-1-(((R)-7-((R)-2-苯基哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用(3R)-4-(10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-3-苯基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(89.7mg，0.15mmol)和TFA(1.0mL)，搅拌20min，得到标题化合物的混合物(70.3mg，91％)。LCMS(方法B):RT＝0.85min,m/z 511[M+H]+。使用Lux C1(21.2mm×250mm，5μm)柱，采用等度溶剂条件：MeOH(0.2％v/v NH3)，通过手性制备型HPLC分离该材料并冻干，得到：
4-苯基-1-(((S)-7-((R)-2-苯基哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮(第一洗脱：22.0mg，29％)。LCMS(方法B):RT＝0.97min,m/z 511[M+H]+.1HNMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.77-7.69(m,3H),7.51-7.43(m,3H),7.34-7.24(m,4H),7.23-7.17(m,1H),6.67-6.63(m,1H),6.60-6.55(m,1H),4.50-4.23(m,1H),4.07(dd,1H),3.82-3.64(m,2H),3.41-3.33(m,1H),3.13-2.86(m,5H),2.85-2.70(m,2H),2.60(d,1H),1.91-1.82(m,1H),1.82-1.73(m,1H),1.65-1.42(m,4.5H),1.41-1.20(m,5.5H).手性纯度(方法C):RT＝5.89min,99.5％ee。
4-苯基-1-(((R)-7-((R)-2-苯基哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮(第二洗脱：18.6mg，25％)。LCMS(方法B):RT＝0.97min,m/z 511[M+H]+.1HNMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.75-7.69(m,3H),7.52-7.43(m,3H),7.33-7.24(m,4H),7.23-7.15(m,1H),6.67-6.63(m,1H),6.59-6.54(m,1H),4.60-4.32(m,1H),4.10(dd,1H),3.78-3.64(m,2H),3.35-3.31(m,1H),3.28-3.24(m,1H),3.11-3.02(m,1H),2.99-2.88(m,3H),2.82-2.72(m,3H),2.65(d,1H),1.90-1.80(m,2H),1.67-1.57(m,2H),1.55-1.44(m,2H),1.41-1.19(m,5H).手性纯度(方法C):RT＝7.33min,99.5％ee。
实施例17：1-((1-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)-4-苯 基吡啶-2(1H)-酮
步骤1：((2S,4R)-1-(4-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)哌啶-1-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯：根据一般程序2进行制备，使用三光气(11.1mg，0.037mmol)、吡啶(30.0μL，0.37mmol)、((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(24.7mg，0.089mmol)、4-苯基-1-(哌啶-4-基甲基)吡啶-2(1H)-酮(20.0mg，0.075mmol)和DIPEA(65.1μL，0.37mmol)，得到标题化合物(11.8mg，28％)。LCMS(方法B):RT＝1.40min,m/z 571[M+H]+。
步骤2：1-((1-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用((2S,4R)-1-(4-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)哌啶-1-羰基)-2-苯基哌啶-(4-基)氨基甲酸叔丁酯(11.8mg，0.021mmol)和TFA(0.2mL)，搅拌20min，得到标题化合物(9.5mg，93％)。LCMS(方法B):RT＝0.82min,m/z471[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.74-7.68(m,3H),7.51-7.44(m,3H),7.24(t,2H),7.17(d,2H),7.11(t,1H),6.67(d,1H),6.56(dd,1H),4.03-3.91(m,3H),3.85-3.74(m,2H),3.27-3.20(m,2H),2.88-2.65(m 3H),2.03-1.92(m,1H),1.85(d,2H),1.57(d,1H),1.50(d,1H),1.46-1.35(m,1H),1.27(q,1H),1.16-0.93(m,2H)。
实施例18：3-((3,3-二甲基-1-((R)-2-苯基哌嗪-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)-6-苯 基嘧啶-4(3H)-酮
步骤1：4-(羟甲基)-3,3-二甲基-哌啶-1-羧酸叔丁酯：在0℃下，在N2气氛下向搅拌的3,3-二甲基-4-亚甲基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(500mg，2.22mmol)在无水THF(10mL)中的溶液中滴加硼烷-THF复合物(5.6mL，5.55mmol)。将混合物搅拌24h，同时升温至rt。将溶液加热至50℃并继续搅拌5天。加入5M乙酸钠(aq)(1.5mL，7.69mmol)，随后加入过氧化氢(在水中30％w/w)(1.5mL，15.1mmol)。继续搅拌16h。将混合物在EtOAc(10mL)和饱和碳酸氢钠(aq)溶液(10mL)之间分配。分离水层并用EtOAc(2×5mL)萃取。将合并的EtOAc级分干燥(Na2SO4)、过滤并真空浓缩。通过快速色谱(在环己烷中的0-100％EtOAc)纯化残留物，得到标题化合物(502mg，93％)。1H NMR(500MHz,CDCl3):δ4.30-4.01(m,1H),3.84(d,1H),3.76-3.50(m,1H),3.35(dd,1H),2.79-2.60(m,1H),2.58-2.38(m,1H),1.79-1.67(m,1H),1.45(s,9H),1.43-1.32(2H),1.23-1.14(m,1H),0.97(s,3H),0.81(s,3H)。
步骤2：4-(溴甲基)-3,3-二甲基-哌啶-1-羧酸叔丁酯：在0℃下，向搅拌的4-(羟甲基)-3,3-二甲基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(502mg，2.06mmol)和三苯基膦(704mg，2.68mmol)在无水DCM(15mL)中的溶液中加入四溴化碳(890mg，2.68mmol)。在rt下搅拌68h后，将混合物冷却至0℃，然后加入另外的三苯基膦(704mg，2.68mmol)和四溴化碳(890mg，2.68mmol)。继续搅拌20h，同时升温至rt。真空除去溶剂。通过快速色谱(在环己烷中的0-20％EtOAc)纯化残留物，得到标题化合物(93.3mg，15％)。1H NMR(500MHz,CDCl3):δ4.35-3.97(m,1H),3.84-3.52(m,2H),3.03(t,1H),2.80-2.58(m,1H),2.57-2.33(m,1H),2.04-1.96(m,1H),1.60(tt,1H),1.45(s,9H),1.36-1.29(m,1H),0.98(s,3H),0.80(s,3H)。
步骤3：3,3-二甲基-4-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：将搅拌的6-苯基嘧啶-4(3H)-酮(25.4mg，0.15mmol)、4-(溴甲基)-3,3-二甲基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(45.1mg，0.15mmol)和碳酸铯(96.0mg，0.29mmol)在无水1,4-二噁烷(1mL)中的溶液在120℃下加热68h。将混合物在DCM(6mL)和1:1盐水/水(12mL)之间分配。分离水层并用DCM(3×3mL)萃取。将合并的DCM级分干燥(分相器)、过滤并真空浓缩。通过快速色谱(在环己烷中的0-50％EtOAc)纯化残留物，得到标题化合物(31.8mg，21％)。LCMS(方法B):RT＝1.45min,m/z 342[M-丁烯+H]+。
步骤4：3-((3,3-二甲基哌啶-4-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用3,3-二甲基-4-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(31.8mg，0.080mmol)和TFA(0.2mL)，搅拌20min，得到标题化合物(22.5mg，95％)。LCMS(方法B):RT＝0.65min,m/z 298[M+H]+。
步骤5：(3R)-4-(3,3-二甲基-4-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)哌啶-1-羰基)-3-苯基哌嗪-1-羧酸叔丁酯：根据一般程序2进行制备，使用三光气(6.0mg，0.020mmol)、吡啶(16.3μL，0.20mmol)、(R)-3-苯基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(12.7mg，0.048mmol)、3-((3,3-二甲基哌啶-4-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮(12.0mg，0.040mmol)和DIPEA(35.2μL,0.20mmol)，得到标题化合物(23.8mg，99％)。LCMS(方法B):RT＝1.56min,m/z 586[M+H]+。
步骤6：3-((3,3-二甲基-1-((R)-2-苯基哌嗪-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用(3R)-4-(3,3-二甲基-4-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)哌啶-1-羰基)-3-苯基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(23.8mg，0.04mmol)和TFA(0.3mL)，搅拌20min，得到标题化合物(19.6mg，99％)。LCMS(方法B):RT＝0.85min,m/z 486[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.55(s,0.5H),8.51(s,0.5H),8.09-8.03(m,2H),7.52-7.47(m,3H),7.40-7.22(m,6H),6.97-6.94(m,1H),4.49(dd,0.5H),4.42(dd,0.5H),4.20-4.10(m,1H),4.02(d,0.5H),3.89(d,0.5H),3.62-3.53(m,1H),3.49-3.41(m,1H),3.26-3.05(m,6H),2.80-2.70(m,0.5H),2.63-2.56(m,1H),2.47-2.44(m,0.5H),1.80-1.70(m,1H),1.44-1.30(m,1H),1.28-1.18(m，1H),1.02(s,1.5H),0.96(s,1.5H),0.81(s,1.5H),0.59(s,1.5H)。
实施例19：3-((1-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-3,3-二甲基哌啶-4- 基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
步骤1：((2S,4R)-1-(3,3-二甲基-4-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)哌啶-1-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯：根据一般程序2进行制备，使用三光气(5.3mg，0.018mmol)、吡啶(14.4μL，0.18mmol)、((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(11.8mg，0.043mmol)、3-((3,3-二甲基哌啶-4-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮(10.6mg，0.036mmol)和DIPEA(31.1μL，0.18mmol)，得到标题化合物(19.5mg，91％)。LCMS(方法B):RT＝1.51min,m/z 600[M+H]+
步骤2：3-((1-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用((2S,4R)-1-(3,3-二甲基-4-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)哌啶-1-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(19.5mg，0.033mmol)和TFA(0.3mL)，搅拌20min，得到标题化合物(14.7mg，90％)。LCMS(方法B):RT＝0.84min,m/z 500[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.59-8.51(m,1H),8.11-8.01(m,2H),7.55-7.44(m,3H),7.29-7.24(m,1H),7.24-7.17(m,3H)，7.17-7.10(m，1H),6.97-6.93(m,1H),4.21-4.09(m,1.5H),4.00(d,0.5H),3.96-3.87(m,1H)，3.60-3.49(m，2H),3.26-3.22(m,0.5H)，3.14(dt，0.5H),2.80-2.66(m,1.5H),2.66-2.53(m，2H),2.40-2.34(m,0.5H),2.11-1.56(m,5H)，1.44-1.16(m,4H),1.01(s,1.5H),0.95(s,1.5H),0.82(s,1.5H),0.49(s,1.5H)。
实施例20：1-((3,3-二甲基-1-((R)-2-苯基哌嗪-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)-4-苯 基吡啶-2(1H)-酮
步骤1：3,3-二甲基-4-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：将搅拌的4-苯基吡啶-2(1H)-酮(23.9mg，0.14mmol)、4-(溴甲基)-3,3-二甲基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(42.7mg，0.14mmol)和碳酸铯(90.9mg，0.28mmol)在无水1,4-二噁烷(1mL)中的溶液在120℃下加热68h。将混合物在DCM(6mL)和1:1盐水/水(12mL)之间分配。分离水层并用DCM(3×3mL)萃取。将合并的DCM级分干燥(分相器)、过滤并真空浓缩。通过快速色谱(在环己烷中的0-50％EtOAc)纯化残留物，得到标题化合物(31.9mg，58％)。LCMS(方法B):RT＝1.45min,m/z 341[M-丁烯+H]+。
步骤2：1-((3,3-二甲基哌啶-4-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用3,3-二甲基-4-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(31.9mg，0.080mmol)和TFA(0.2mL)，搅拌20min，得到标题化合物(21.6mg，91％)。LCMS(方法B):RT＝0.65min,m/z297[M+H]+。
步骤3：(3R)-4-(3,3-二甲基-4-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)哌啶-1-羰基)-3-苯基哌嗪-1-羧酸叔丁酯：根据一般程序2进行制备，使用三光气(5.0mg，0.017mmol)、吡啶(13.5μL，0.17mmol)、(R)-3-苯基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(10.5mg，0.040mmol)、1-((3,3-二甲基哌啶-4-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮(9.9mg，0.033mmol)和DIPEA(29.2μL，0.17mmol)，得到标题化合物(17.7mg，91％)。LCMS(方法B):RT＝1.54min,m/z 585[M+H]+。
步骤4：1-((3,3-二甲基-1-((R)-2-苯基哌嗪-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用(3R)-4-(3,3-二甲基-4-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)哌啶-1-羰基)-3-苯基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(17.7mg，0.030mmol)和TFA(0.2mL)，搅拌20min，得到标题化合物(13.1mg，82％)。LCMS(方法B):RT＝0.84min,m/z485[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.74-7.67(m,3H),7.53-7.42(m,3H),7.34-7.24(m,4H),7.24-7.16(m,1H),6.67-6.62(m,1H),6.59-6.53(m,1H),4.44-4.39(m,0.5H),4.33-4.27(m,0.5H),4.19-4.09(m,1H),3.92-3.77(m,1H),3.63-3.53(m,1H),3.40-3.32(m，1H)，3.11-3.05(m，0.5H),3.05-2.97(m，2H),2.97-2.92(m,1H),2.86-2.75(m,2H),2.71(td,0.5H),2.62-2.53(m,1H),2.48-2.42(m,1H),1.78-1.69(m,1H),1.47-1.36(m,1H),1.29-1.17(m,1H),1.01(s,1.5H),0.96(s,1.5H)，0.82(s,1.5H)，0.70(s,1.5H)。
实施例21：1-((1-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-3,3-二甲基哌啶-4- 基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
步骤1：((2S,4R)-1-(3,3-二甲基-4-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)哌啶-1-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯：根据一般程序2进行制备，使用三光气(5.9mg，0.020mmol)、吡啶(15.9μL，0.20mmol)、((2S,4R)-2-苯基哌啶-4)-基)氨基甲酸叔丁酯(13.1mg，0.047mmol)、1-((3,3-二甲基哌啶-4-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮(11.7mg，0.040mmol)和DIPEA(34.5μL，0.20mmol)得到标题化合物(16.2mg，69％)。LCMS(方法B):RT＝1.49min,m/z 599[M+H]+。
步骤2：1-((1-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用((2S,4R)-1-(3,3-二甲基-4-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)哌啶-1-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(16.2mg，0.027mmol)和TFA(0.2mL)，搅拌20min，得到标题化合物(12.9mg，91％收率)。LCMS(方法B):RT＝0.85min,m/z 499[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.75-7.67(m,3H),7.52-7.43(m,3H),7.29-7.24(m,1H),7.24-7.10(m,4H),6.68-6.62(m,1H),6.60-6.54(m,1H),4.19-4.07(m,1.5H),4.00(d,0.5H),3.97-3.88(m,1H),3.62-3.47(m,2H),3.26-3.23(m,0.5H),3.15(dt,0.5H),2.81-2.70(m,1.5H),2.69-2.54(m,2H),2.43-2.37(m,0.5H),1.87-1.70(m,3H),1.45-1.19(m,4H),1.00(s,1.5H),0.94(s,1.5H),0.82(s,1.5H),0.50(s,1.5H)。
实施例22：(R)-1-((1-(2-(2，5-二氟苯基)哌嗪-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)-4-苯 基吡啶-2(1H)-酮
步骤1：(R)-3-(2,5-二氟苯基)-4-(4-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)哌啶-1-羰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯：根据一般程序2进行制备，使用三光气(5.5mg，0.019mmol)、吡啶(15.0μL，0.19mmol)、(R)-3-(2,5-二氟苯基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(13.3mg，0.045mmol)、4-苯基-1-(哌啶-4-基甲基)吡啶-2(1H)-酮(10.0mg，0.037mmol)和DIPEA(32.5μL，0.19mmol)，得到标题化合物(12.1mg，55％)。LCMS(方法B):RT＝1.48min,m/z 593[M+H]+。
步骤2：(R)-1-((1-(2-(2,5-二氟苯基)哌嗪-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用(R)-3-(2,5-二氟苯基)-4-(4-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)哌啶-1-羰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(12.1mg，0.020mmol)和TFA(0.2mL)，搅拌20min，得到标题化合物(8.9mg，87％)。LCMS(方法B):RT＝0.82min,m/z 493[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.74-7.67(m,3H),7.52-7.44(m,3H),7.22(ddd,1H),7.16(td,1H),7.10-7.02(m,1H),6.66(d,1H),6.56(dd,1H),4.49(dd,1H),3.88-3.73(m,4H),3.17(dt,1H),2.92(dd,1H),2.86(dd,1H),2.84-2.69(m,4H),2.69-2.63(m,1H),2.04-1.93(m,1H),1.58(d,1H),1.50(d,1H)，1.18-1.02(m，2H)。
实施例23：1-(((R)-7-((2S，4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5] 癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
步骤1：((2S，4R)-1-((R)-10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯和((2S，4R)-1-((S)-10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基))甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯：根据一般程序2进行制备，使用三光气(23.0mg，0.078mmol)、吡啶(62.5μL，0.78mmol)、((2S，4R)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(51.4mg，0.19mmol)、1-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮(50.0mg，0.16mmol)和DIPEA(135μL，0.78mmol)，得到标题化合物的混合物。使用Lux C1(21.2mm×250mm，5μm)柱，采用等度溶剂条件：60:40MeOH/CO2，通过手性SFC纯化该物质，得到：
((2S，4R)-1-((R)-10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(第二洗脱：33.5mg，34％)。LCMS(方法B):RT＝1.61min,m/z 625[M+H]+.1H NMR(500MHz，CDCl3):δ7.59-7.55(m,2H),7.48-7.41(m,3H)，7.26-7.23(m，4H)，7.22(d,1H),7.20-7.14(m,1H),6.77(d，1H),6.43(dd,1H),4.36(brs,1H),4.18(dd,1H),4.10(d,1H),3.97(dt，1H)，3.84-3.72(m，1H)，3.71-3.59(m,1H)，3.56-3.45(m，2H),3.28(dt,1H),3.02-2.84(m,2H),2.72(d,1H),2.14(d,1H),2.07(d,1H),1.91(tt,1H),1.86-1.75(m，1H),1.74-1.65(m,2H)，1.65-1.58(m,1H),1.54-1.45(m，4H)，1.42(s，9H)，1.35-1.21(m，3H).手性纯度(方法D):RT＝3.27min，100％ee。
((2S，4R)-1-((S)-10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(第一洗脱：30.8mg，32％)。LCMS(方法B):RT＝1.60min，m/z 625[M+H]+.1H NMR(500MHz，CDCl3):δ7.60-7.55(m,2H)，7.49-7.43(m，3H)，7.31-7.26(m，4H)，7.24(d，1H)，7.21-7.17(m,1H),6.78(d,1H),6.44(dd,1H),4.35(brs,1H),4.15(dd,1H),4.09(dd,1H),4.01(d,1H),3.80-3.64(m,2H),3.60(d,1H),3.21(dt,1H),3.02-2.88(m,2H),2.61(d,1H),2.15(d,1H),2.06(d,1H),1.93(tt,1H),1.84-1.75(m,1H),1.73-1.63(m,1H),1.53-1.44(m,5H),1.41(s,9H),1.40-1.23(m,3H),1.22-1.06(m,2H).手性纯度(方法D):RT＝1.56min,100％ee。
步骤2：1-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用((2S,4R)-1-((R)-10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(33.5mg，0.054mmol)和TFA(0.3mL)，搅拌20min，得到标题化合物(28.1mg，98％)。LCMS(方法B):RT＝0.89min,m/z 525[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.76-7.68(m,3H),7.51-7.42(m,3H),7.22(t,2H),7.18(d,2H),7.14(t,1H),6.65(s,1H),6.57(dd,1H),4.08(dd,1H),3.95(dd,1H),3.91-3.82(m,1H),3.72(t,1H),3.41(d,1H),3.25-3.20(m,1H),2.95-2.77(m,2H),2.72-2.64(m,2H),1.92-1.72(m,4H),1.70-1.57(m,2H),1.57-1.40(m,3H),1.39-1.25(m,4H),1.25-1.12(m,2H)。
实施例24：1-(((S)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5] 癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
根据一般程序1进行制备，使用((2S,4R)-1-((S)-10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(30.8mg，0.049mmol)和TFA(0.3mL)，搅拌20min，得到标题化合物(25.5mg，98％)。LCMS(方法B):RT＝0.92min,m/z 525[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.81-7.68(m,3H),7.59-7.40(m,3H),7.31-7.23(m,2H),7.23-7.12(m,3H),6.66(s,1H),6.58(d,1H),4.06(d,1H),4.00-3.86(m,2H),3.70(t,1H),3.49(d,1H),3.16(d,1H),2.98(t,1H),2.78-2.70(m,1H),2.66-2.56(m,3H),1.92-1.72(m,4H),1.64-1.54(m,1H),1.53-1.43(m,2H),1.42-1.13(m,8H),1.08-0.96(m,1H)。
实施例25：3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5] 癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
步骤1：((2S,4R)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯和((2S,4R)-1-((S)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基))甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯：根据一般程序2进行制备，使用三光气(22.9mg，0.077mmol)、吡啶(62.3μL，0.77mmol)、((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(51.3mg，0.19mmol)、3-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮(50.0mg，0.15mmol)和DIPEA(135μL，0.77mmol)，得到标题化合物的混合物。使用Lux C4(21.2mm×250mm,5μm)柱，采用等度溶剂条件：50:50MeOH/CO2，通过手性SFC纯化该物质，得到：
((2S,4R)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(第一洗脱：29.3mg，30％)。LCMS(方法B):RT＝1.63min,m/z 626[M+H]+.1H NMR(500MHz,CDCl3):δ8.07(s,1H),7.97-7.91(m,2H),7.51-7.44(m,3H),7.26-7.23(m,4H),7.21-7.12(m,1H),6.86(s,1H),4.36(br s,1H),4.22-4.14(m,2H),3.98(dt,1H),3.74-3.46(m,3H),3.27(dt,1H),3.00-2.84(m,2H),2.68(d,1H),2.14(d,1H),2.08(d,1H),1.90(tt,1H),1.86-1.78(m,1H),1.77-1.67(m,2H),1.67-1.57(m,1H),1.53-1.43(m,5H),1.42(s,9H),1.35-1.23(m,3H).手性纯度(方法E):RT＝2.25min,100％ee。
((2S,4R)-1-((S)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸酯(第二洗脱：27.1mg，27％)。LCMS(方法B):RT＝1.62min,m/z 626[M+H]+.1H NMR(500MHz,CDCl3):δ8.09(s,1H),7.98-7.92(m,2H),7.50-7.45(m,3H),7.31-7.26(m,4H),7.22-7.17(m,1H),6.86(s,1H),4.36(br s,1H),4.21-4.12(m,2H),4.04(d,1H),3.76-3.53(m,3H),3.20(dt,1H),2.94(t,2H),2.56(d,1H),2.15(d,1H),2.07(d,1H),1.91(tt,1H),1.85-1.75(m,1H),1.75-1.62(m,1H),1.59-1.55(m,1H),1.52-1.44(m,4H),1.41(s,9H),1.37-1.24(m,3H)1.17-1.06(m,2H).手性纯度(方法E):RT＝3.28min,99.8％ee。
步骤2：3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用((2S,4R)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(29.3mg，0.047mmol)和TFA(0.3mL)，搅拌20min，得到标题化合物(23.3mg，94％)。LCMS(方法B):RT＝0.90min,m/z 526[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.54(s,1H),8.09-8.02(m,2H),7.54-7.45(m,3H),7.22-7.16(m,4H),7.13(t,1H),6.96(s,1H),4.10(dd,1H),3.93(dd,1H),3.88(dt,1H),3.71(t,1H),3.44(d,1H),3.22(dt,1H),2.93-2.79(m,1H),2.73(tt,1H),2.69-2.60(m,2H),2.27(br s,2H),1.90-1.72(m,4H),1.71-1.58(m,2H),1.58-1.44(m,2H),1.42-1.15(m,7H)。
实施例26：3-(((S)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5] 癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
根据一般程序1进行制备，使用((2S,4R)-1-((S)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(27.1mg，0.043mmol)和TFA(0.3mL)，搅拌20min，得到标题化合物(22.1mg，96％)。LCMS(方法B):RT＝0.92min,m/z 526[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.58(s,1H),8.10-8.04(m,2H),7.53-7.46(m,3H),7.26(t,2H),7.19(d,2H),7.15(t,1H),6.97(s,1H),4.08(dd,1H),3.96(d,1H),3.91(dd,1H),3.70(t,1H),3.52(d,1H),3.15(dt,1H),2.97(t,1H),2.73(tt,1H),2.62(t,1H),2.17(br s,2H),1.91-1.72(m,4H),1.65-1.54(m,1H),1.53-1.43(m,2H),1.43-1.11(m,8H),1.08-0.96(m,1H)。
实施例27：3-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10- 基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮
步骤1：10-(碘甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯：向在THF(600mL)中的10-(羟甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(36.0g，134mmol)加入三苯基膦(45.6g，174mmol)和三甲胺(20.0g，174mmol)，随后加入碘(44.2g，174mmol)。24h后，将反应混合物用水处理并用MTBE萃取。倾析有机相，用饱和硫代硫酸钠(aq)溶液洗涤、干燥(Na2SO4)并蒸发至干，得到标题化合物(41.2g，81％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ4.03–3.78(m,1H),3.68–3.48(m,2H),3.12(t,1H),2.90(t,1H),2.60(d,1H),2.02–1.95(m,1H),1.79(m,1H),1.74–1.40(m,6H),1.44(s,9H),1.39–1.14(m,3H)。
步骤2：10-((6-氟-4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯：根据一般程序4进行制备，使用6-氟喹唑啉-4(3H)-酮(0.45g，2.6mmol)、10-(碘甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(1.09g，2.9mmol)和碳酸铯(1.70g,5.2mmol)，得到标题化合物(0.070g，5％)。LCMS(方法F):RT＝4.13min,m/z 360[M-丁烯+H]+。
步骤3：3-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用10-((6-氟-4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(21.7mg，0.052mmol)和TFA(0.2mL)，搅拌20min，得到标题化合物(11.8mg，72％)。LCMS(方法B):RT＝0.61min,m/z 316[M+H]+。
步骤4：((2S,4R)-1-(10-((6-氟-4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯：根据一般程序2进行制备，使用三光气(5.6mg，0.019mmol)、吡啶(15.1μL，0.19mmol)、((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(12.4mg，0.045mmol)、3-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮(11.8mg，0.037mmol)和DIPEA(32.7μL，0.19mmol)，得到标题化合物(21.7mg，94％)。LCMS(方法A):RT＝1.76min,m/z 618[M+H]+。
步骤5：3-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用((2S,4R)-1-(10-((6-氟-4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)甲基)-7-氮杂螺环[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(21.7mg，0.035mmol)和TFA(0.2mL)，搅拌20min，得到标题化合物(15mg，75％)。LCMS(方法B):RT＝0.83min,m/z 518[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.40(s,0.5H),8.36(s,0.5H),7.86-7.80(m,1H),7.80-7.68(m,2H),7.27(t,1H),7.24-7.10(m,4H),4.19-4.10(m,1H),4.01-3.82(m,2H),3.77(t,1H),3.53(d,0.5H),3.45(d,0.5H),3.22(dt,0.5H),3.14(dt,0.5H),2.94(t,0.5H),2.88-2.79(m,0.5H),2.79-2.71(m,1H),2.69-2.56(m,2H),1.99-1.73(m,4.5H),1.72-1.45(m,4H),1.45-1.10(m,8H),1.06-0.98(m,0.5H)。
类似于实施例27的程序，由市售亲核试剂或下述中间体制备下表中列出的实施例，得到相应的最终化合物(实施例28-43)。
实施例36的中间体：6-(1-甲基环丙基)嘧啶-4(3H)-酮
向在甲醇(80mL)中的3-(1-甲基环丙基)-3-氧代丙酸甲酯(3.00g，19mmol)中加入乙酸甲脒(4.00g，38mmol)和甲醇钠(7.30g，134mmol)。将反应混合物加热回流2天。蒸发溶剂，用水稀释剩余残留物，并用HCl(aq)溶液酸化。过滤沉淀物，用水和MTBE洗涤，并真空干燥，得到标题化合物(1.50g，52％)。LCMS(方法F):RT＝0.79min,m/z 151[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ12.21(s,1H),8.01(s,1H),6.18(s,1H),1.31(s,3H),1.17(d,2H),0.75(d,2H)。
实施例41的中间体：10-((3-氧代吗啉代)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁 酯
步骤1：10-甲酰基-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯：向在DCM(150mL)中的10-(羟甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(8.00g，29.8mmol)加入1,1,1-三(乙酰氧基)-1,1-二氢-1,2-苯并氧醇-3-(1H)-酮(Dess-Martin碘烷)(15.2g，35.8mmol)。3h后，将反应混合物用硫代硫酸钠溶液(在饱和碳酸钾(aq)溶液中1M)处理。倾析有机相，干燥(Na2SO4)，蒸发至干，得到粗标题化合物，其无需进一步纯化即用于下一步骤。
步骤2：10-(((2-((三甲基甲硅烷基)氧基)乙基)氨基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯：向在二氯乙烷(40mL)中的10-甲酰基-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(1.50g，5.6mmol)中加入2-((三甲基甲硅烷基)氧基)乙胺(0.75g，5.6mmol)，随后加入三乙酰氧基硼氢化钠(3.58g，16.9mmol)。24h后，将溶液用饱和碳酸氢钠(aq)溶液处理，将有机相倾析，干燥(Na2SO4)，并蒸发至干，得到粗标题化合物(2.16g，粗品)，其无需进一步纯化即用于下一步骤。
步骤3：10-((3-氧代吗啉基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯：在0℃下，向在DCM(50mL)中的10-(((2-((三甲基甲硅烷基)氧基)乙基)氨基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(2.16g，粗品)加入10％w/v氢氧化钠(aq)溶液(50mL)和氯乙酰氯(0.63g，5.6mmol)，随后加入三甲基苄基氯化铵(0.1g)。10h后，分离有机相，干燥(Na2SO4)，蒸发至干，并通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物(0.32g，16％)。LCMS(方法F):RT＝3.50min,m/z 297[M-丁烯+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ4.02(s,2H),3.80(m,2H),3.71(m,1H),3.60(m,1H),3.45–3.20(m,3H),3.05(m,1H),2.95–2.60(m,2H),1.79(m,2H),1.65(m,2H),1.53(m,2H),1.38(s,9H),1.40–1.14(m,5H)。
实施例42的中间体：10-((6-氧代-5,6-二氢咪唑并[1,2-a]吡嗪-7(8H)-基)甲 基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯
步骤1：10-((((1H-咪唑-2-基)甲基)氨基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯：向在二氯乙烷(40mL)中的10-甲酰基-7-氮杂螺环[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(1.50g，5.6mmol)中加入2-氨基甲基咪唑二盐酸盐(0.96g，5.6mmol)和乙酸钠(1.39g，16.9mmol)，随后加入三乙酰氧基硼氢化钠(3.58g，16.9mmol)。24h后，将溶液用饱和碳酸氢钠(aq)溶液处理，将有机相倾析，干燥(Na2SO4)，并蒸发至干，得到标题化合物(1.90g，粗品)，其无需进一步纯化即用于下一步骤。
步骤2：10-((6-氧代-5,6-二氢咪唑并[1,2-a]吡嗪-7(8H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯：在0℃下，向在DCM(50mL)中的10-((((1H-咪唑-2-基)甲基)氨基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(1.90g，粗品)中加入10％w/v氢氧化钠(aq)溶液(50mL)和氯乙酰氯(0.63g，5.6mmol)，随后加入三甲基苄基氯化铵(0.1g)。10h后，分离有机相，干燥(Na2SO4)，蒸发至干并通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物(0.11g，8％)。LCMS(方法F):RT＝2.52min,m/z 389[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.09(s,1H),6.95(s,1H),4.69(s,2H),4.62–4.45(m,2H),3.71(m,2H),3.49(m,1H),3.20(m,1H),2.95–2.60(m,2H),1.79(m,2H),1.65(m,2H),1.53(m,2H),1.38(s,9H),1.40–1.14(m,5H)。
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实施例44：1-(((R)-7-((2S,4R)-4-羟基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5] 癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
步骤1：10-((4-氯-2-氧代吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯：根据一般程序4进行制备，使用4-氯吡啶酮(5.00g，38.6mmol)、10-(溴甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(14.1g，42.5mmol)和碳酸铯(25.2g，77.2mmol)，得到标题化合物(4.00g，27％)。LCMS(方法F):RT＝1.52min,m/z＝281[M-Boc+H]+.1H NMR(CDCl3):δ7.11(d,1H),6.59(d,1H),6.17(m,1H),4.31(m,1H),4.02(m,1H),3.75–3.40(m,2H),2.79(m,1H),2.63(d,1H),1.95(m,2H),1.80–1.25(d,1H),1.43(s,9H)。
步骤2：(R)-10-((4-氯-2-氧代吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯和(S)-10-((4-氯-2-氧代吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯：使用Chiralpak IA(20mm×250mm,5μm)柱，采用等度溶剂条件：70:15:15己烷/IPA/MeOH，通过手性HPLC将10-((4-氯-2-氧代吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(4.00g)解析成单一立体异构体。第一洗脱物质提供(R)-10-((4-氯-2-氧代吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(1.54g)。[α]D 25＝+84.2(在MeOH中c0.25)。第二洗脱物质提供(S)-10-((4-氯-2-氧代吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(1.52g)。[α]D 25＝-86.2(在MeOH中c 0.25)。
步骤3：(R)-10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯：根据一般程序5进行制备，使用在1,4-二噁烷(1.2mL)和水(0.4mL)中的(R)-10-((4-氯-2-氧代吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(100mg,0.26mmol)、苯基硼酸(64mg，0.53mmol)、Na2CO3(84mg，0.79mmol)和PdCl2(dppf)·DCM(11.1mg，0.013mmol)，得到标题化合物(106mg，95％)。LCMS(方法B):RT＝1.56min,m/z＝367[M-丁烯+H]+。
步骤4：(R)-1-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用在DCM(2mL)中的(R)-10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(110mg，0.26mmol)和TFA(0.5mL)，得到标题化合物(80mg，95％)。LCMS(方法B):RT＝0.73min,m/z＝323[M+H]+。
步骤5：1-(((R)-7-((2S,4R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮：根据一般程序2进行制备，使用在MeCN(1mL)中的(R)-1-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮(30.0mg，0.093mmol)、(2S,4R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-苯基哌啶(29.8mg，0.102mmol)、三光气(11mg，0.037mmol)、吡啶(30μL，0.37mmol)和DIPEA(52μL，0.37mmol)，得到标题化合物(40mg，67％)。LCMS(方法B):RT＝2.04min,m/z＝640[M+H]+。
步骤6：1-(((R)-7-((2S,4R)-4-羟基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮：向搅拌的1-(((R)-7-((2S,4R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮(40mg，0.063mmol)在MeOH(1mL)中的溶液中加入对甲苯磺酸一水合物(2.4mg，0.013mmol)，并将所得溶液在rt下搅拌18h。将反应用饱和NaHCO3(aq)猝灭并使用相分离器用DCM(x3)萃取。真空浓缩合并的有机相，并通过快速色谱(在环己烷中的10-100％EtOAc，然后在EtOAc中的0-20％MeOH)纯化粗品，得到标题化合物(16mg，48％)。LCMS(方法B):RT＝1.27min,m/z＝526[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.76–7.67(m,3H),7.48(q,J＝6.6Hz,3H),7.24–7.16(m,4H),7.16–7.10(m,1H),6.65(d,J＝2.0Hz,1H),6.57(dd,J＝7.1,2.0Hz,1H),4.70(d,J＝4.4Hz,1H),4.08(dd,J＝12.8,3.1Hz,1H),3.99(dd,J＝11.4,3.1Hz,1H),3.85(dd,J＝11.7,6.5Hz,1H),3.72(t,J＝11.8Hz,1H),3.59(tq,J＝9.4,4.4Hz,1H),3.40(d,J＝12.9Hz,1H),3.22(dt,J＝12.4,4.0Hz,1H),2.87(s,1H),2.68(t,J＝12.0Hz,2H),1.93–1.80(m,3H),1.76(s,1H),1.71–1.12(m,11H)。
实施例45：1-(((R)-7-((2S,4R)-4-(乙基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺 [4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
步骤1：乙基((2S,4R)-1-((R)-10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯：根据一般程序2进行制备，使用在MeCN(1mL)中的(R)-1-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮(20.0mg，0.062mmol)、乙基((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(20.6mg，0.074mmol)、三光气(6.4mg，0.022mmol)、吡啶(20μL，0.248mmol)和DIPEA(43μL，0.248mmol)，得到标题化合物(32mg，79％)。LCMS(方法B):RT＝1.76min,m/z＝653[M+H]+。
步骤2：1-(((R)-7-((2S,4R)-4-(乙氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用在DCM(2mL)中的乙基((2S,4R)-1-((R)-10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(30.0mg，0.046mmol)和TFA(0.5mL)，冻干后得到标题化合物(12mg，45％)。LCMS(方法B):RT＝0.94min,m/z＝553[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.75–7.67(m,3H),7.51–7.43(m,3H),7.25–7.16(m,4H),7.16–7.09(m,1H),6.65(d,J＝2.1Hz,1H),6.57(dd,J＝7.1,2.1Hz,1H),4.08(dd,J＝12.8,3.1Hz,1H),3.96(dd,J＝11.7,3.1Hz,1H),3.91–3.81(m,1H),3.71(t,J＝11.8Hz,1H),3.41(d,J＝12.9Hz,1H),3.27–3.21(m,1H),2.86(s,1H),2.72–2.64(m,2H),2.60–2.54(m,2H,与溶剂信号重叠),1.96–1.71(m,4H),1.70–1.12(m,12H),0.96(t,J＝7.1Hz,3H).[未观察到NH信号]。
实施例46：1-(((R)-7-((2S,4R)-4-(二甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂 螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
向1-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮(30.0mg，0.057mmol)在MeCN(0.6mL)和MeOH(0.6mL)中的溶液中加入甲醛(37％水溶液，85μL，1.14mmol)，随后每15min加入三乙酰氧基硼氢化钠(242mg，1.14mmol)，分成4份。将反应物再搅拌3h。将反应混合物用饱和NaHCO3(aq)猝灭并使用相分离器用DCM(x3)萃取。真空浓缩合并的有机相，并使用Biotage Sfar Amino D柱(在环己烷中的0-100％DCM；然后在DCM中的0-15％MeOH)通过快速色谱纯化粗品并冻干，得到标题化合物(23.7mg，74％)。LCMS(方法B):RT＝0.94min,m/z＝553[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.75–7.68(m,3H),7.52–7.45(m,3H),7.21(h,J＝6.0Hz,4H),7.14(td,J＝6.3,2.5Hz,1H),6.66(d,J＝2.1Hz,1H),6.57(dd,J＝7.1,2.1Hz,1H),4.08(dd,J＝12.8,3.2Hz,1H),3.94(dd,J＝11.8,3.1Hz,1H),3.87(dd,J＝13.3,4.5Hz,1H),3.72(t,J＝11.7Hz,1H),3.40(d,J＝12.9Hz,1H),2.89(s,1H),2.72–2.64(m,2H),2.31(tt,J＝11.7,4.0Hz,1H),2.15(s,6H),1.89–1.71(m,4H),1.69–1.42(m,5H),1.41–1.13(m,6H).[缺失被HDO遮蔽的1H信号]。
实施例47：1-((1-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)哌啶-4-基)甲 基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
步骤1：2,2,2-三氟-N-甲基-N-((2S,4R)-1-(4-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)哌啶-1-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺：根据一般程序2进行制备，使用在MeCN(1mL)中的4-苯基-1-(哌啶-4-基甲基)吡啶-2(1H)-酮(20.0mg，0.075mmol)、2,2,2-三氟-N-甲基-N-((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺盐酸盐(24.0mg，0.075mmol)、三光气(8.8mg，0.030mmol)、吡啶(30μL，0.373mmol)和DIPEA(65μL，0.373mmol)，得到标题化合物(17mg，39％)。LCMS(方法B):RT＝1.76min,m/z＝653[M+H]+。
步骤2：1-((1-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮：根据一般程序6进行制备，使用在MeOH(2mL)和水(0.2mL)中的2,2,2-三氟-N-甲基-N-((2S,4R)-1-(4-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)哌啶-1-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺(17.0mg，0.029mmol)和碳酸钾(20.2mg，0.146mmol)，得到标题化合物(13mg，87％)。LCMS(方法B):RT＝0.79min,m/z＝485[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.76–7.68(m,3H),7.52–7.43(m,3H),7.23(dd,J＝8.1,7.1Hz,2H),7.21–7.15(m,2H),7.14–7.08(m,1H),6.67(d,J＝2.0Hz,1H),6.57(dd,J＝7.1,2.1Hz,1H),3.96(td,J＝11.9,9.7,5.9Hz,3H),3.85–3.74(m,2H),3.36–3.22(m,2H,被HDO信号遮蔽),2.80–2.66(m,2H),2.48–2.41(1H,m,被DMSO信号遮蔽),2.25(s,3H),2.03–1.86(m,3H),1.57(d,J＝13.0Hz,1H),1.50(d,J＝12.9Hz,1H),1.38–1.28(m,1H),1.26–0.94(m,3H).[未观察到NH信号]。
实施例48：1-(((R)-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺 [4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
步骤1：2,2,2-三氟-N-甲基-N-((2S,4R)-1-((R)-10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺：根据一般程序2进行制备，使用在MeCN(1mL)中的(R)-1-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮(30.0mg，0.093mmol)、2,2,2-三氟-N-甲基-N-((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺盐酸盐(30.0mg，0.093mmol)、三光气(11mg，0.037mmol)、吡啶(38μL，0.465mmol)和DIPEA(81μL，0.465mmol)，得到标题化合物(26mg，44％)。LCMS(方法B):RT＝1.58min,m/z＝634[M+H]+。
步骤2：1-(((R)-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮：根据一般程序6进行制备，使用在MeOH(2mL)和水(0.2mL)中的2,2,2-三氟-N-甲基-N-((2S,4R)-1-((R)-10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺(26.0mg，0.041mmol)和碳酸钾(28.3mg，0.205mmol)，得到标题化合物(21mg，93％)。LCMS(方法B):RT＝0.93min,m/z＝539[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.75–7.69(m,3H),7.52–7.43(m,3H),7.25–7.16(m,4H),7.16–7.10(m,1H),6.66(d,J＝2.1Hz,1H),6.57(dd,J＝7.1,2.1Hz,1H),4.08(dd,J＝12.7,3.1Hz,1H),3.95(dd,J＝11.7,3.1Hz,1H),3.87(dd,J＝10.7,6.4Hz,1H),3.71(t,J＝11.7Hz,1H),3.41(d,J＝12.8Hz,1H),3.25(dt,J＝12.1,3.8Hz,1H),2.86(s,1H),2.72–2.65(m,2H),2.57–2.45(m,2H,被DMSO信号遮蔽),2.25(s,3H),1.97–1.72(m,4H),1.70–1.42(m,4H),1.40–1.11(m,7H)。
实施例49：3-((10-氨基-7-((R)-4,4,4-三氟-2-甲基丁酰基)-7-氮杂螺[4.5]癸- 10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
步骤1：1-((4-硝基苯基)磺酰基)-1,10-二氮杂二螺[2.0.44.43]十二烷-10-羧酸叔丁酯：向在无水脱气乙腈(70mL)中的10-亚甲基-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(4.00g，15.9mmol)中加入对硝基叠氮化物(5.45g，23.9mmol)和六氟磷酸铜(I)(0.33g，1.6mmol)。将反应混合物加热至80℃并保持48h。真空除去溶剂并通过快速色谱纯化残留物，得到标题化合物(2.50g，35％)。LCMS(方法F):RT＝1.62min,m/z＝352[M-Boc+H]+。
步骤2：10-((4-硝基苯基)磺酰胺基)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯：向在无水DMF(10mL)中的1-((4-硝基苯基)磺酰基)-1,10-二氮杂二螺[2.0.44.43]十二烷-10-羧酸叔丁酯(0.60g，1.3mmol)中加入6-苯基嘧啶酮(0.23g，1.3mmol)，并将反应混合物在85℃下加热40h。真空除去溶剂并通过快速色谱纯化残留物，得到标题化合物(0.29g，35％)。LCMS(方法F):RT＝4.08min,m/z＝624[M+H]+。
步骤3：4-硝基-N-(10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)苯磺酰胺：根据一般程序1进行制备，使用10-((4-硝基苯基)磺酰胺基)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(34.7mg，0.056mmol)、DCM(1mL)和TFA(0.5mL)，在rt下搅拌1h，得到标题化合物(26.1mg，88％)。LCMS(方法B):RT＝0.84min,m/z＝524[M+H]+。
步骤4：4-硝基-N-(10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-((R)-4,4,4-三氟-2-甲基丁酰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)苯磺酰胺：根据一般程序3进行制备，使用在DCM(1mL)中的4-硝基-N-(10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)苯磺酰胺(26.1mg,0.050mmol)、(R)-4,4,4-三氟-2-甲基丁酸(7.8mg，0.050mmol)、HATU(19.0mg，0.050mmol)和DIPEA(28μL，0.199mmol)，得到标题化合物(12.0mg，36％)。LCMS(方法B):RT＝1.43min,m/z＝662[M+H]+。
步骤5：3-((10-氨基-7-((R)-4,4,4-三氟-2-甲基丁酰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮：向搅拌的4-硝基-N-(10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-((R)-4,4,4-三氟-2-甲基丁酰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)苯磺酰胺(12.0mg，0.018mmol)在无水MeCN(0.6mL)中的溶液中加入碳酸钾(25.1mg，0.182mmol)和硫酚(10μL，0.121mmol)。将反应混合物在50℃下搅拌2h，然后用EtOAc稀释并用饱和NaHCO3(aq)溶液(x2)洗涤。使用EtOAc(x2)萃取水相并将合并的有机物干燥(分相器)并真空浓缩。使用KP-NH柱通过快速色谱(在环己烷中的0-100％EtOAc)纯化该物质并冻干，得到标题化合物(3.5mg，41％)。LCMS(方法B):RT＝0.85min,m/z＝477[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.64-8.59(m,1H),8.12-8.04(m,2H),7.53-7.46(m,3H),6.99-6.93(m,1H),4.54-4.45(m,1H),3.78-3.38(m,5.5H),3.19-3.06(m,1.5H),2.79-2.67(m,1H),2.32-2.20(m,1H),1.87-1.77(m,1H),1.73-1.52(m,6H),1.44-1.29(m,2H),1.20-1.01(m,5H)。
实施例50：1-(((R)-7-((2S,4R)-4-((1,1-二氧化硫杂环己烷-3-基)氨基)-2-苯 基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
步骤1：(R)-10-((2-Oxo-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-碳酰氯：向冷却至0℃的三光气(110mg，0.372mmol)在DCM(6mL)中的溶液中加入吡啶(251μL，3.10mmol)，并将所得混合物在0℃下搅拌10min。将(R)-1-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮(200mg，0.620mmol)在DCM(6mL)中的溶液滴加至三光气溶液中。将所得混合物温热至rt并搅拌16h。将反应用1M HCl(aq)溶液猝灭并使用相分离器用DCM(x3)萃取。真空浓缩合并的有机相，得到标题化合物(230mg，96％)，其无需纯化即可用于下一步。[注：由于中间体的化学不稳定性，未生成LCMS数据]。
步骤2：1-(((R)-7-((2S,4R)-4-((1,1-二氧化硫杂环己烷-3-基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮：向(R)-10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-碳酰氯(34mg，0.091mmol)和3-(((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)氨基)硫杂环丁烷1,1-二氧化物盐酸盐(32.4mg，0.102mmol)在MeCN(1mL)中的溶液中加入DIPEA(81μL，0.465mmol)。将所得混合物在rt下搅拌18h。将反应用饱和NaHCO3(aq)猝灭并使用相分离器用DCM(x3)萃取。真空浓缩合并的有机相，并使用Biotage Sfar Amino D柱通过快速色谱(在环己烷中的10-100％EtOAc；然后在EtOAc中的0-20％MeOH)纯化粗品并冻干，得到标题化合物(16mg，26％)。LCMS(方法B):RT＝1.03min,m/z＝629[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.76–7.69(m,3H),7.51–7.43(m,3H),7.24–7.16(m,4H),7.16–7.11(m,1H),6.66(d,J＝2.0Hz,1H),6.57(dd,J＝7.1,2.1Hz,1H),4.34–4.21(m,2H),4.08(dd,J＝12.8,3.1Hz,1H),3.93(dd,J＝11.8,3.1Hz,1H),3.90–3.79(m,3H),3.76–3.60(m,2H),3.41(d,J＝12.8Hz,1H),3.23(dt,J＝12.2,3.7Hz,1H),2.86(s,1H),2.68(d,J＝13.5Hz,1H),2.59–2.39(m,2H,信号被DMSO遮蔽),1.86(dt,J＝21.3,10.9Hz,3H),1.76(s,1H),1.70–1.11(m,12H)。
实施例51：1-(((R)-7-((2S,4S)-4-((1,1-二氧化硫杂环己烷-3-基)氨基)-2-苯 基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
制备类似于实施例50，使用在MeCN(1mL)中的(R)-10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-碳酰氯(34mg，0.091mmol)、3-(((2S,4S)-2-苯基哌啶-4-基)氨基)硫杂环丁烷1,1-二氧化物盐酸盐(32.4mg，0.102mmol)和DIPEA(81μL,0.465mmol)，得到标题化合物(20mg，32％)。LCMS(方法B):RT＝1.07min,m/z＝629[M+H]+.1HNMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.77–7.68(m,3H),7.52–7.43(m,3H),7.34(dd,J＝8.2,7.1Hz,2H),7.28(dt,J＝8.4,1.2Hz,2H),7.22(t,J＝7.3Hz,1H),6.66(d,J＝2.1Hz,1H),6.57(dd,J＝7.1,2.2Hz,1H),4.99(s,1H),4.34–4.21(m,2H),4.11(dd,J＝12.6,3.1Hz,1H),3.88–3.78(m,2H),3.74–3.56(m,3H),3.47(d,J＝13.6Hz,1H),3.26(d,J＝12.9Hz,1H),2.84–2.69(m,2H),2.67–2.60(m,1H,被DMSO卫星信号遮蔽),2.44(s,2H),1.87(dq,J＝11.6,7.1Hz,2H),1.75–1.11(m,13H)。
实施例52：1-(((R)-7-((2S,4R)-4-羟基-4-甲基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺 [4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
根据一般程序7进行制备，使用(R)-10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-碳酰氯(15mg，0.039mmol)、(2S,4R)-4-甲基-2-苯基哌啶-4-醇(10.7mg，0.047mmol)和DIPEA(27μL，0.156mmol)，冻干后得到标题化合物(8mg，37％)。LCMS(方法B):RT＝1.30min,m/z＝540[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.75–7.69(m,3H),7.52–7.43(m,3H),7.25–7.20(m,4H),7.13(ddd,J＝8.5,5.6,2.3Hz,1H),6.65(d,J＝2.1Hz,1H),6.57(dd,J＝7.1,2.2Hz,1H),4.31(dd,J＝9.2,4.4Hz,1H),4.27(s,1H),4.09(dd,J＝12.8,3.1Hz,1H),3.76(d,J＝13.1Hz,1H),3.73–3.65(m,1H),3.34(d,J＝12.9Hz,1H),3.24(ddd,J＝12.6,6.7,3.8Hz,1H),2.96(ddd,J＝12.3,8.7,3.4Hz,1H),2.79(t,J＝11.9Hz,1H),2.67–2.60(m,1H),1.82(ddd,J＝16.3,11.8,8.1Hz,3H),1.70–1.42(m,7H),1.40–1.14(m,8H)。
实施例53：4-(2-甲氧基苯基)-1-(((R)-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶- 1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-10-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮
步骤1：N-((2S,4R)-1-((R)-10-((4-氯-2-氧代吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)-2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺：向含有(R)-10-((4-氯-2-氧代吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(300mg，0.788mmol)的反应容器中向中加入在1,4-二噁烷(5mL)中的4M HCl。将反应物在rt下搅拌1h，然后真空浓缩并在真空烘箱中在50℃下干燥18h。同时，在0℃下，在含有在MeCN(8mL)中的三光气(93.4mg，0.315mmol)的单独容器中加入吡啶(319μL，3.94mmol)，并将所得混合物搅拌10min，然后将2,2,2-三氟-N-甲基-N-((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺盐酸盐(305mg,0.945mmol)和DIPEA(179μL，1.02mmol)的溶液滴加至三光气混合物中。将所得反应在rt下搅拌18h。然后将反应物转移至含有真空干燥残留物的容器中并加入DIPEA(509μL，2.91mmol)。在rt下搅拌40h后，用0.5M HCl(aq)猝灭反应并使用相分离器用DCM(x3)萃取。真空浓缩合并的有机相，并通过快速色谱(在环己烷中的10-100％EtOAc)纯化粗品，得到标题化合物(376mg，80％)。LCMS(方法B):RT＝1.49min,m/z＝593,595[M+H]+。
步骤2：2,2,2-三氟-N-((2S,4R)-1-((R)-10-((4-(2-甲氧基苯基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基))甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)-N-甲基乙酰胺：根据一般程序5进行制备，使用在1,4-二噁烷(0.6mL)和水(0.2mL)中的N-((2S,4R)-1-((R)-10-((4-氯-2-氧代吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)-2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺(50mg，0.084mmol)、(2-甲氧基苯基)硼酸(25.6mg，0.169mmol)、Na2CO3(26.8mg，0.253mmol)和PdCl2(dppf)·DCM(3.57mg，0.004mmol)，得到标题化合物(41mg，73％)。LCMS(方法B):RT＝1.56min,m/z＝665[M+H]+。
步骤3：4-(2-甲氧基苯基)-1-(((R)-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-10-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮：根据一般程序6进行制备，使用在MeOH(2mL)和水(0.2mL)的2,2,2-三氟-N-((2S,4R)-1-((R)-10-((4-(2-甲氧基苯基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)-N-甲基乙酰胺(41.0mg，0.062mmol)和碳酸钾(42.6mg，0.308mmol)，得到标题化合物(26mg，73％)，为无色固体。LCMS(方法B):RT＝0.94min,m/z＝569[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.61(d,J＝7.0Hz,1H),7.41(ddd,J＝8.3,7.4,1.8Hz,1H),7.34(dd,J＝7.6,1.7Hz,1H),7.24–7.17(m,4H),7.16–7.10(m,2H),7.03(td,J＝7.5,1.0Hz,1H),6.45(d,J＝1.9Hz,1H),6.36(dd,J＝7.0,2.0Hz,1H),4.06(dd,J＝12.7,3.0Hz,1H),3.95(dd,J＝11.8,3.1Hz,1H),3.92–3.83(m,1H),3.80(s,3H),3.68(t,J＝11.8Hz,1H),3.41(d,J＝12.8Hz,1H),3.25(dt,J＝12.1,3.8Hz,1H),2.88(s,1H),2.72–2.65(m,2H),2.43(tt,J＝10.6,4.0Hz,1H),2.24(s,3H),1.96–1.72(m,4H),1.71–1.42(m,5H),1.40–1.11(m,7H)。
实施例54：1-(((R)-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺 [4.5]癸-10-基)甲基)-4-(邻甲苯基)吡啶-2(1H)-酮
步骤1：2,2,2-三氟-N-甲基-N-((2S,4R)-1-((R)-10-((2-氧代-4-(邻甲苯基)吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺：根据一般程序5进行制备，使用在1,4-二噁烷(0.6mL)和水(0.2mL)中的N-((2S,4R)-1-((R)-10-((4-氯-2-氧代吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)-2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺(50mg，0.084mmol)、邻甲苯基硼酸(22.9mg，0.169mmol)、Na2CO3(26.8mg，0.253mmol)和PdCl2(dppf)·DCM(3.57mg，0.004mmol)，得到标题化合物(40mg，73％)。LCMS(方法B):RT＝1.62min,m/z＝649[M+H]+。
步骤2：1-(((R)-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-(邻甲苯基)吡啶-2(1H)-酮：根据一般程序6进行制备，使用在MeOH(2mL)和水(0.2mL)中的2,2,2-三氟-N-甲基-N-((2S,4R)-1-((R)-10-((2-氧代-4-(邻甲苯基)吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺(40.0mg，0.062mmol)和碳酸钾(42.6mg，0.308mmol)，得到标题化合物(22mg，63％)。LCMS(方法B):RT＝0.96min,m/z＝553[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.68(d,J＝6.9Hz,1H),7.34–7.17(m,8H),7.16–7.11(m,1H),6.27(d,J＝1.9Hz,1H),6.22(dd,J＝6.9,2.0Hz,1H),4.09(dd,J＝12.8,3.1Hz,1H),3.96(dd,J＝11.7,3.1Hz,1H),3.88(dd,J＝11.0,6.4Hz,1H),3.72(t,J＝11.8Hz,1H),3.40(d,J＝12.9Hz,1H),3.28–3.22(m,1H),2.90(s,1H),2.74–2.66(m,2H),2.56–2.38(m,2H,被DMSO信号遮蔽),2.27(s,3H),2.26(s,3H),1.97–1.82(m,3H),1.76(s,1H),1.70–1.43(m,4H),1.41–1.11(m,7H)。
实施例55：4-(2-氟苯基)-1-(((R)-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰 基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-10-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮
步骤1：2,2,2-三氟-N-((2S,4R)-1-((R)-10-((4-(2-氟苯基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基))甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)-N-甲基乙酰胺：根据一般程序5进行制备，使用在1,4-二噁烷(0.6mL)和水(0.2mL)中的N-((2S,4R)-1-((R)-10-((4-氯-2-氧代吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)-2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺(50mg，0.084mmol)、(2-氟苯基)硼酸(23.6mg，0.169mmol)、Na2CO3(26.8mg，0.253mmol)和PdCl2(dppf)·DCM(3.57mg，0.004mmol)，得到标题化合物(50mg，91％)。LCMS(方法B):RT＝1.56min,m/z＝653[M+H]+。
步骤2：4-(2-氟苯基)-1-(((R)-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-10-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮：根据一般程序6进行制备，使用在MeOH(2mL)和水(0.2mL)中的2,2,2-三氟-N-((2S,4R)-1-((R)-10-((4-(2-氟苯基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)-N-甲基乙酰胺(50.0mg，0.077mmol)和碳酸钾(52.9mg，0.383mmol)，得到标题化合物(18.7mg，43％)。LCMS(方法B):RT＝0.95min,m/z＝557[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.73(d,J＝7.1Hz,1H),7.59(td,J＝7.8,1.8Hz,1H),7.50(dddd,J＝8.5,7.2,5.2,1.8Hz,1H),7.37–7.29(m,2H),7.24–7.17(m,4H),7.15–7.11(m,1H),6.54(t,J＝1.5Hz,1H),6.42(dt,J＝7.0,2.0Hz,1H),4.09(dd,J＝12.7,3.1Hz,1H),3.95(dd,J＝11.7,3.1Hz,1H),3.88(dd,J＝11.1,6.5Hz,1H),3.71(t,J＝11.8Hz,1H),3.41(d,J＝12.8Hz,1H),3.25(dt,J＝12.1,3.8Hz,1H),2.87(s,1H),2.70–2.64(m,2H),2.56–2.39(m,2H,被DMSO信号遮蔽),2.24(s,3H),1.96–1.71(m,4H),1.70–1.42(m,4H),1.40–1.12(m,7H)。
实施例56：3-(((R)-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺 [4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
步骤1：10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯：根据一般程序4进行制备，使用6-苯基嘧啶酮(6.00g，35mmol)、10-(溴甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(12.8g，38mmol)和碳酸铯(22.7g，70mmol)，得到标题化合物(7.30g，50％)。LCMS(方法F):RT＝1.49min,m/z＝368[M-丁烯+H]+。
步骤2：(R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯和(S)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯：使用Chiralpak IB(30mm×250mm，5μm)柱，采用等度溶剂条件：80:20己烷/IPA，通过手性HPLC将10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(7.30g)解析成单一立体异构体。第一洗脱物质提供(R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(3.30g)。[α]D 25＝+69.3(在MeOH中c0.25)。第二洗脱物质提供(S)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(3.12g)。[α]D 25＝-72.4(在MeOH中c 0.25)。
步骤3：(R)-3-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用(R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(1000mg，2.36mmol)、DCM(20mL)和TFA(10mL)，在rt下搅拌1h，得到标题化合物(764mg，定量)。
LCMS(方法B):RT＝0.716min,m/z＝324[M+H]+。
步骤4：2,2,2-三氟-N-甲基-N-((2S,4R)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基))甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺：根据一般程序2进行制备，使用在无水MeCN(1mL)中的(R)-3-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮(50mg，0.155mmol)、2,2,2-三氟-N-甲基-N-((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺盐酸盐(50.0mg，0.155mmol)、三光气(18.4mg，0.062mmol)、吡啶(63μL)，0.773mmol)和DIPEA(108μL，0.773mmol)，得到标题化合物(53.5mg，54％)。LCMS(方法A):RT＝1.75min,m/z＝636[M+H]+。
步骤5：3-(((R)-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮：根据一般程序6进行制备，使用在MeOH(3mL)和水(0.3mL)中的2,2,2-三氟-N-甲基-N-((2S,4R)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺(53.5mg，0.084mmol)和碳酸钾(58.2mg，0.421mmol)。使用KP-NH柱通过快速色谱(在环己烷中的0-100％EtOAc；然后在EtOAc中的0-20％MeOH)纯化粗残留物并冻干，得到标题化合物(27.4mg，59％)。LCMS(方法B):RT＝0.905min,m/z＝540[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.55(s,1H),8.09-8.03(m,2H),7.52-7.46(m,3H),7.25-7.10(m,5H),6.97(s,1H),4.13-4.07(m,1H),3.98-3.92(m,1H),3.91-3.84(m,1H),3.75-3.66(m,1H),3.48-3.39(m,1H),2.89-2.76(m,1H),2.68-2.61(m,2H),2.48-2.40(m,1H),2.24(s,3H),1.96-1.43(m,9H),1.39-1.13(m,8H)。
实施例57：3-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-10-氟-7-氮杂螺[4.5] 癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
步骤1：10-氟-10-((甲苯磺酰氧基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯：在0℃下，向在苯(300mL)中的1-氧杂-10-氮杂二螺[2.0.44.43]十二烷-10-羧酸叔丁酯(9.00g，33.7mmol)[根据WO2020115501(p99，环氧化物2)制备]加入氟化硼乙醚合物(4.78g，33.7mmol)并搅拌2h。向反应混合物中加入三乙胺(17.0g，168mmol)和对甲苯磺酰氯(7.70g，40.4mmol)。24h后，过滤反应混合物并蒸发至干。通过快速色谱纯化剩余残留物，得到标题化合物(5.00g，34％)。LCMS(方法F):RT＝1.59min,m/z＝386[M-丁烯+H]+。
步骤2：10-氟-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯：向在DMF(25mL)中的6-苯基嘧啶-4(3H)-酮(0.50g，2.9mmol)中加入10-氟-10-((甲苯磺酰氧基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(1.41g，3.2mmol)和碳酸铯(1.89g，5.8mmol)，并将所得混合物在120℃下搅拌48h。冷却至rt后，过滤反应混合物并蒸发至干。通过制备型HPLC纯化粗品，得到标题化合物(0.044g，3.4％)。LCMS(方法F):RT＝1.45min,m/z＝386[M-丁烯+H]+。
步骤3：3-((10-氟-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用在1,4-二噁烷(2mL)中的10-氟-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(44mg，0.100mmol)和4M HCl，得到标题化合物(37mg，98％)。LCMS(方法B):RT＝0.77min,m/z＝322[M-丁烯+H]+。
步骤4：(2S,4R)-1-(10-氟-10-(6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯：根据一般程序2进行制备，使用在MeCN(1mL)中的3-((10-氟-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮(14mg，0.037mmol)、(2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(11.3mg，0.041mmol)、三光气(3.85mg，0.013mmol)、吡啶(15.0μL，0.185mmol)和DIPEA(32.4μL，0.185mmol)，得到标题化合物(10mg，42％)。LCMS(方法B):RT＝1.62min,m/z＝644[M+H]+。
步骤5：3-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-10-氟-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用在1,4-二噁烷(1mL)中的(2S,4R)-1-(10-氟-10-(6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(10mg，0.016mmol)和4M HCl，得到标题化合(2.5mg，26％)。LCMS(方法B):RT＝0.99min,m/z＝544[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.45(d,J＝2.2Hz,1H),8.14–8.06(m,2H),7.51(qd,J＝4.3,1.6Hz,3H),7.26–7.17(m,4H),7.17–7.12(m,1H),7.04(d,J＝0.8Hz,1H),4.63(dd,J＝35.9,14.4Hz,1H),4.12(dd,J＝14.4,10.2Hz,1H),3.95(dd,J＝11.7,3.1Hz,1H),3.81–3.70(m,1H),3.26–3.18(m,2H),3.11(d,J＝13.5Hz,1H),2.75–2.63(m,2H(被DMSO卫星遮蔽)),1.96–1.32(m,13H),1.26(q,J＝12.0Hz,2H),1.09–1.00(m,1H).[未完全观察到NH信号]。
实施例58：1-(((S)-10-甲氧基-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰 基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
步骤1：(S)-10-((4-氯-2-氧代吡啶-1(2H)-基)甲基)-10-甲氧基-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯：向搅拌的(S)-10-((4-氯-2-氧代吡啶-1(2H)-基)甲基)-10-羟基-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(500mg，1.26mmol)[根据WO2020115501(p263，实施例287，步骤1)制备]在冷却至0℃的DMF(10mL)中的溶液中分批加入氢化钠(60％分散在矿物油中，60.5mg，1.51mmol)，并将所得混合物在0℃下搅拌1h。加入碘甲烷(118μL，1.89mmol)并将所得混合物温热至rt过夜，同时搅拌。将反应混合物用EtOAc稀释并用1:1水/盐水混合物(x3)洗涤，然后用盐水洗涤、干燥(MgSO4)、过滤并真空浓缩。通过快速色谱(在环己烷中的0-60％EtOAc)纯化粗残留物，得到标题化合物(365mg，70％)。LCMS(方法A):RT＝1.76min,m/z＝355,357[M-丁烯+H]+。
步骤2：(S)-10-甲氧基-10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯：根据一般程序5进行制备，使用在1,4-二噁烷(3mL)和水(1mL)的(S)-10-((4-氯-2-氧代吡啶-1(2H)-基)甲基)-10-甲氧基-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(200mg，0.487mmol)、苯基硼酸(119mg，0.973mmol)、Na2CO3(155mg，1.46mmol)和PdCl2(dppf)·DCM(20.6mg,0.024mmol)，得到标题化合物(220mg，定量)。LCMS(方法A):RT＝1.87min,m/z＝453[M+H]+。
步骤3：(S)-1-((10-甲氧基-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用在DCM(3mL)中的(S)-10-甲氧基-10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(220mg，0.486mmol)和TFA(1mL)，得到标题化合物(170mg，99％)。LCMS(方法A):RT＝0.72min,m/z＝353[M+H]+。
步骤4：2,2,2-三氟-N-((2S,4R)-1-((S)-10-甲氧基-10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基))甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)-N-甲基乙酰胺：根据一般程序2进行制备，使用在MeCN(2mL)中的(S)-1-((10-甲氧基-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮(30mg，0.085mmol)、2,2,2-三氟-N-甲基-N-((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺盐酸盐(30.2mg,0.094mmol)、三光气(8.8mg，0.030mmol)、吡啶(34μL，0.426mmol)和DIPEA(74μL，0.426mmol)，得到标题化合物(41mg，72％)。LCMS(方法B):RT＝1.63min,m/z＝665[M+H]+。
步骤5：1-(((S)-10-甲氧基-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮：根据一般程序6进行制备，使用在MeOH(2mL)和水(0.2mL)中的2,2,2-三氟-N-((2S,4R)-1-((S)-10-甲氧基-10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)-N-甲基乙酰胺(41mg，0.062mmol)和K2CO3(42.6mg，0.308mmol)，得到标题化合物(21mg，60％)。LCMS(方法B):RT＝1.02min,m/z＝569[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.77–7.72(m,2H),7.58(d,J＝7.2Hz,1H),7.53–7.44(m,3H),7.26–7.17(m,4H),7.16–7.10(m,1H),6.70(d,J＝2.1Hz,1H),6.62(dd,J＝7.2,2.2Hz,1H),4.48(d,J＝14.1Hz,1H),4.01–3.90(m,2H),3.76–3.47(m,2H),3.26–3.20(m,1H),3.15(s,3H),3.04–2.93(m,1H),2.69–2.64(m,1H),2.47–2.39(m,2H),2.25(s,3H),1.92(t,J＝12.9Hz,2H),1.74–1.26(m,10H),1.25–1.14(m,2H),0.90(s,1H)。
下表含有使用与前述实施例中概述的化学程序类似的化学程序制备的其他实施例。实施例59、60和61的制备分别类似于实施例53、54和55，除了使用中间体1代替中间体6，因此在所有情况下使用一般程序1代替一般程序6进行最终的脱保护步骤。实施例62的制备类似于实施例56，除了使用中间体5代替中间体6，因此使用一般程序1代替一般程序6进行最终的脱保护步骤。实施例63和实施例64的制备分别类似于实施例56和实施例48，除了使用2,2,2-三氟-N-((2S,4R)-2-(3-氟苯基)哌啶-4-基)-N-甲基乙酰胺盐酸盐(中间体10)代替2,2,2-三氟-N-甲基-N-((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺盐酸盐。实施例65和实施例66的制备分别类似于实施例48和实施例56，除了使用2,2,2-三氟-N-((2S,4R)-2-(3-氟苯基)哌啶-4-基)乙酰胺盐酸盐(中间体11)代替2,2,2-三氟-N-甲基-N-((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺盐酸盐。实施例67的制备类似于实施例45，除了使用中间体12代替(R)-1-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮和中间体1代替中间体5。实施例68的制备类似于实施例45，除了使用中间体13代替中间体5并且使用一般程序10除去保护基团。实施例69的制备类似于实施例45，除了使用中间体14并且转化成(R)-3,3-二甲基-4-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，使用苯基硼酸和一般程序5代替(R)-10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯并且使用中间体1代替中间体5。实施例70的制备类似于实施例56，除了使用中间体15代替中间体6，因此使用一般程序1代替一般程序6进行最终的脱保护步骤。实施例71的制备类似于实施例56，除了使用中间体16代替中间体6并且不需要最终的脱保护步骤。实施例72的制备类似于实施例69，除了使用中间体6和一般程序6代替中间体1和一般程序1。实施例73的制备类似于实施例58，除了使用中间体1和一般程序1代替中间体6和一般程序6。实施例74的制备类似于实施例9，除了使用中间体10和一般程序6代替中间体1和一般程序1。实施例75的制备类似于实施例9，除了使用中间体5。实施例76的制备类似于实施例56，除了使用中间体17代替中间体6并且不需要最终的脱保护步骤。实施例77的制备类似于实施例45，除了使用中间体18代替(R)-10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯并且使用中间体1代替中间体5。实施例78的制备类似于实施例56，除了使用中间体19代替中间体6。实施例79的制备类似于实施例62，除了使用中间体20代替中间体5。实施例80的制备类似于实施例66，除了使用中间体21代替中间体11。实施例81的制备类似于实施例77，除了使用中间体11和一般程序6代替中间体1和一般程序1。实施例82的制备类似于实施例81，除了使用中间体22代替中间体11。实施例83的制备类似于实施例67，除了使用中间体6和一般程序6代替中间体1和一般程序1。实施例84的制备类似于实施例81，除了使用中间体6代替中间体11。
实施例85：1-(((R)-7-((2S,4S,5R)-4-氨基-5-氟-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂 螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮和1-(((R)-7-((2S,4S,5S)-4-氨基-5-氟- 2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
步骤1：(2S,4S)-4-氨基-5-氟-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯：向搅拌的(2S,4S)-4-叠氮基-5-氟-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(80mg，0.250mmol)[中间体23]在THF(3mL)和水(1mL)中的溶液中加入三苯基膦(72mg，0.275mmol)。将所得混合物在40℃下搅拌18h。将反应混合物真空浓缩并使用KP-NH柱通过快速色谱(在环己烷中的5-100％EtOAc；然后在EtOAc中的0-20％MeOH)纯化剩余残留物，得到标题化合物(65mg，88％)。LCMS(方法B):RT＝0.79min,m/z＝239[M-丁烯+H]+。
步骤2：(2S,4S)-5-氟-2-苯基-4-(2,2,2-三氟乙酰胺基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：在0℃下，向搅拌的(2S,4S)-4-氨基-5-氟-2-苯基哌啶-1-羧酸叔丁酯(100mg，0.340mmol)在DCM(1.7mL)和三氟乙酸酐(58μL，0.408mmol)中的溶液中加入DIPEA(0.24mL，1.36mmol)和吡啶(82μL，1.02mmol)。将反应物温热至rt并搅拌1.5h。将反应用饱和NaHCO3(aq)溶液猝灭并使用相分离器用DCM(x3)萃取。真空浓缩合并的有机相，得到标题化合物(130mg，定量)。LCMS(方法B):RT＝1.43min,m/z＝291[M-Boc+H]+。
步骤3：2,2,2-三氟-N-((2S,4S)-5-氟-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺：根据一般程序1进行制备，使用在DCM(3mL)中的(2S,4S)-5-氟-2-苯基-4-(2,2,2-三氟乙酰氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(130mg，0.333mmol)和TFA(1mL)，得到标题化合物(90mg，93％)。LCMS(方法B):RT＝0.56min,0.62min,m/z＝291[M+H]+.[注：LCMS建议采用1:1的立体异构体混合物]。
步骤4：2,2,2-三氟-N-((2S,4S)-5-氟-1-((R)-10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺：根据一般程序2进行制备，使用在MeCN(2mL)中的(R)-1-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮(25mg,0.078mmol)、2,2,2-三氟-N-((2S,4S)-5-氟-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺(27mg，0.093mmol)、三光气(9.2mg，0.031mmol)、吡啶(31μL，0.388mmol)和DIPEA(68μL，0.388mmol)，得到标题化合物(10mg，20％)。LCMS(方法B):RT＝1.47min,m/z＝639[M+H]+。
步骤5：1-(((R)-7-((2S,4S,5R)-4-氨基-5-氟-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮和1-(((R)-7-((2S,4S,5S)-4-氨基-5-氟-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮：根据一般程序6进行制备，使用在MeOH(1mL)和水(0.1mL)中的2,2,2-三氟-N-((2S,4S)-5-氟-1-((R)-10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H))-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺(10mg,0.016mmol)、碳酸钾(10.8mg,0.078mmol)，得到标题化合物(4.2mg，47％)，为无色固体。LCMS(方法B):RT＝0.93min,m/z＝543[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.77–7.69(m,3H),7.51–7.44(m,3H),7.27–7.14(m,5H),6.66(d,J＝2.1Hz,1H),6.58(dd,J＝7.1,2.1Hz,1H),4.55–4.39(m,1H),4.21(dd,J＝11.6,3.5Hz,1H),4.09(dd,J＝12.8,3.1Hz,1H),3.83(dd,J＝11.0,6.9Hz,1H),3.69(t,J＝11.7Hz,1H),3.49(ddd,J＝14.0,12.1,4.1Hz,1H),3.36(d,J＝12.9Hz,1H),2.92(ddt,J＝19.5,15.1,5.6Hz,2H),2.82(s,1H),2.69(d,J＝12.8Hz,1H),1.95–1.74(m,3H),1.69–1.57(m,2H),1.57–1.43(m,3H),1.43–1.28(m,3H),1.28–1.13(m,4H)。
实施例86的制备类似于实施例66，除了使用中间体22代替中间体11。实施例87的制备类似于实施例65，除了使用中间体22代替中间体11。实施例88和实施例89的制备类似于实施例59，除了分别使用中间体11和中间体22，并且在两种情况下使用一般程序6代替一般程序1。实施例90的制备类似于实施例70，除了使用中间体24代替中间体15。实施例91的制备类似于实施例64，除了使用中间体19代替中间体10。实施例92的制备类似于实施例77，除了使用中间体25代替中间体18。
实施例93：N-((2S,4R)-1-((R)-10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮 杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺
向搅拌的1-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮(40mg，0.075mmol)[实施例23]和乙酸酐(36μL，0.376mmol)在DCM(0.5mL)中的溶液中加入DIPEA(131μL，0.751mmol)。将反应混合物在rt下搅拌1h。将反应用饱和NaHCO3(aq)溶液猝灭并使用相分离器用DCM(x3)萃取。真空浓缩合并的有机相，并通过快速色谱(在环己烷中的10-100％EtOAc；然后在EtOAc中的0-20％MeOH)纯化粗品，得到标题化合物(33mg，76％)。LCMS(方法B):RT＝1.26min,m/z＝567[M+H]+.1HNMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.78–7.68(m,4H),7.53–7.43(m,3H),7.26–7.12(m,5H),6.66(d,J＝2.1Hz,1H),6.58(dd,J＝7.1,2.1Hz,1H),4.08(dd,J＝12.7,3.1Hz,1H),3.98(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.86(d,J＝13.2Hz,1H),3.70(tdd,J＝11.6,7.2,3.5Hz,2H),3.41(d,J＝12.9Hz,1H),3.29–3.20(m,1H),2.88(s,1H),2.70(dd,J＝15.6,12.2Hz,2H),1.93–1.71(m,7H),1.71–1.43(m,5H),1.43–1.26(m,4H),1.18(dq,J＝14.1,7.4Hz,2H)。
实施例94的制备类似于实施例78，除了使用中间体26代替中间体19。实施例95的制备类似于实施例91，除了使用中间体26代替中间体19。
实施例96：N-((2S,4R)-1-((R)-10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮 杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)环丙烷甲酰胺
根据一般程序3进行制备，使用在DCM(1mL)中的1-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮(40mg，0.075mmol)[实施例23]、环丙烷甲酸(7.8mg，0.090mmol)、HATU(34mg，0.090mmol)和DIPEA(39μL，0.225mmol)，得到标题化合物(27mg，60％)。LCMS(方法B):RT＝1.37min,m/z＝593[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.97(d,J＝7.6Hz,1H),7.76–7.69(m,3H),7.52–7.42(m,3H),7.26–7.12(m,5H),6.66(d,J＝2.1Hz,1H),6.58(dd,J＝7.1,2.1Hz,1H),4.09(dd,J＝12.8,3.1Hz,1H),3.97(dd,J＝11.7,3.2Hz,1H),3.86(dd,J＝11.3,6.6Hz,1H),3.73(dtd,J＝12.2,8.4,8.0,4.5Hz,2H),3.42(d,J＝12.9Hz,1H),3.26(dt,J＝12.3,3.8Hz,1H),2.88(s,1H),2.70(dd,J＝12.6,10.0Hz,2H),1.95–1.72(m,4H),1.72–1.13(m,12H),0.68–0.54(m,4H)。
实施例97的制备类似于实施例92，除了使用中间体6和一般程序6代替中间体1和一般程序1。实施例98的制备类似于实施例47，除了使用中间体19代替中间体6。实施例99的制备类似于实施例97，除了使用中间体19代替中间体6。实施例100的制备类似于实施例92，除了使用中间体27代替中间体25。实施例101的制备类似于实施例97，除了使用中间体27代替中间体25。实施例102的制备类似于实施例99，除了使用中间体10代替中间体19。实施例103的制备类似于实施例99，除了使用中间体28代替中间体19。实施例104的制备类似于实施例99，除了使用中间体29代替中间体19。
实施例105：((2S,4R)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮 杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)甘氨酸甲酯
向搅拌的3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮(40mg，0.076mmol)[实施例25]和碳酸钾(31.5mg，0.228mmol)在DCM(1mL)中的溶液中加入2-溴乙酸甲酯(10μL，0.106mmol)。将反应混合物在rt下搅拌20h。将反应物用EtOAc稀释并用水(x3)洗涤，然后用盐水洗涤、干燥(MgSO4)、过滤并真空浓缩。使用KP-NH柱通过快速色谱(在环己烷中的10-100％EtOAc；然后在EtOAc中的0-20％MeOH)纯化所得粗品，得到标题化合物(36mg，74％)。LCMS(方法B):RT＝0.98min,m/z＝598[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.55(s,1H),8.09–8.04(m,2H),7.49(dd,J＝5.1,1.9Hz,3H),7.25–7.17(m,4H),7.13(ddt,J＝8.6,6.1,1.8Hz,1H),6.97(d,J＝0.8Hz,1H),4.10(dd,J＝13.2,3.1Hz,1H),3.93(dd,J＝11.6,3.1Hz,1H),3.87(d,J＝13.3Hz,1H),3.70(t,J＝12.0Hz,1H),3.61(s,3H),3.43(d,J＝12.7Hz,1H),3.37–3.32(m,2H),3.27–3.19(m,1H),2.83(s,1H),2.69–2.56(m,2H,被DMSO卫星遮蔽),1.98(s,1H),1.85(dd,J＝20.6,10.6Hz,3H),1.76(s,1H),1.71–1.42(m,4H),1.42–1.13(m,8H)。
实施例106：((2S,4R)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮 杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)甘氨酸钠
向搅拌的((2S,4R)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)甘氨酸甲酯(30mg，0.050mmol)[实施例105]在MeOH(0.5mL)中的溶液加入1M NaOH(aq)(55μL，0.055mmol)，并将反应物在rt下搅拌96h。将反应物真空浓缩并将所得残留物用EtOAc(x3)研磨。真空除去剩余溶剂，并将剩余固体从水/MeCN溶液中冻干，得到标题化合物(27mg，79％)。LCMS(方法B):RT＝1.08min,m/z＝584[M+H]+.1H NMR(500MHz,MeOH-d4):δ8.44(s,1H),8.04–7.98(m,2H),7.51–7.46(m,3H),7.29–7.22(m,4H),7.19–7.14(m,1H),6.91(s,1H),4.26(dd,J＝13.2,3.1Hz,1H),4.07–3.98(m,2H),3.81(t,J＝11.9Hz,1H),3.53(d,J＝13.0Hz,1H),3.46–3.40(m,1H),3.27–3.24(m,2H),3.04(s,1H),2.91–2.76(m,3H),2.07(t,J＝14.0Hz,2H),2.00–1.93(m,1H),1.85(s,1H),1.79–1.22(m,12H)。
实施例107的制备类似于实施例66，除了使用中间体30代替中间体11。实施例108的制备类似于实施例65，除了使用中间体30代替中间体11。实施例109的制备类似于实施例97，除了使用中间体31代替中间体25。实施例110的制备类似于实施例97，除了使用中间体32代替中间体6并且不需要最终的脱保护步骤。实施例111的制备类似于实施例64，除了使用中间体33代替中间体10并且不需要最终的脱保护步骤。实施例112的制备类似于实施例64，除了使用中间体34代替中间体10并且不需要最终的脱保护步骤。实施例113的制备类似于实施例53，除了使用中间体19代替中间体6。实施例114的制备类似于实施例84，除了使用中间体19代替中间体6。实施例115的制备类似于实施例92，除了使用(R)-3-(3-氟苯基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯[根据WO2019150119制备]代替中间体1。实施例116的制备类似于实施例92，除了使用中间体3代替中间体1。实施例117的制备类似于实施例99，除了使用中间体26代替中间体19。实施例118的制备类似于实施例53，除了使用中间体28代替中间体6。实施例119的制备类似于实施例114，除了使用中间体10代替中间体19。实施例120的制备类似于实施例53，除了使用中间体29代替中间体6。实施例121的制备类似于实施例91，除了使用中间体35代替中间体19。实施例122的制备类似于实施例78，除了使用中间体35代替中间体19。实施例123的制备类似于实施例83，除了使用中间体19代替中间体6。实施例124的制备类似于实施例97，除了使用中间体35代替中间体6。实施例125的制备类似于实施例101，除了使用中间体19代替中间体6。实施例126的制备类似于实施例53，除了使用中间体35代替中间体6。实施例127的制备类似于实施例117，除了使用中间体36代替中间体25。实施例128的制备类似于实施例117，除了使用中间体37代替中间体25。实施例129的制备类似于实施例117，除了使用中间体38代替中间体25。实施例130的制备类似于实施例117，除了使用中间体39代替中间体25。实施例131的制备类似于实施例53，除了使用中间体40代替中间体6。实施例132的制备类似于实施例56，除了使用中间体40代替中间体6。实施例133的制备类似于实施例56，除了使用中间体41代替中间体6。实施例134的制备类似于实施例97，除了使用中间体42代替中间体6。实施例135的制备类似于实施例56，除了使用中间体43代替中间体6。实施例136的制备类似于实施例84，除了使用中间体40代替中间体6。实施例137的制备类似于实施例84，除了使用中间体26代替中间体6。实施例138的制备类似于实施例97，除了使用中间体41代替中间体6。实施例139的制备类似于实施例84，除了使用中间体41代替中间体6。实施例140的制备类似于实施例109，除了使用中间体40代替中间体6。实施例141的制备类似于实施例109，除了使用中间体26代替中间体6。实施例142的制备类似于实施例109，除了使用中间体41代替中间体6。实施例143的制备类似于实施例109，除了使用中间体35代替中间体6。实施例144的制备类似于实施例56，除了使用中间体44代替中间体6。实施例145的制备类似于实施例109，除了使用中间体19代替中间体6。实施例146的制备类似于实施例84，除了使用中间体35代替中间体6。实施例147的制备类似于实施例56，除了使用中间体45代替中间体6。实施例148的制备类似于实施例56，除了使用中间体46代替中间体6。实施例149的制备类似于实施例97，除了使用中间体40代替中间体6。实施例150的制备类似于实施例56，除了使用中间体47代替中间体6。实施例151的制备类似于实施例56，除了使用中间体48代替中间体6。实施例152的制备类似于实施例130，除了使用中间体42代替中间体26。实施例153的制备类似于实施例101，除了使用中间体35代替中间体6。
实施例154：((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1 (6H)-基)甲基))-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)甘氨酸叔丁酯
在rt下，向搅拌的3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮(72mg，0.128mmol)[实施例86]和碳酸钾(53mg，0.385mmol)在DMF(1mL)中的溶液中加入2-溴乙酸叔丁酯(19μL，0.128mmol)。1h后，将反应物用DCM稀释并用水(x3)洗涤，然后用盐水洗涤、干燥(MgSO4)、过滤并真空浓缩。使用Biotage Sfar Amino D柱(在环己烷中的10-100％EtOAc)通过快速色谱纯化所得粗品，得到标题化合物(48mg，53％)。LCMS(方法B):RT＝1.06min,m/z＝676[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ9.08(s,2H),8.54(s,1H),8.06(dd,J＝6.6,3.0Hz,2H),7.49(dd,J＝5.2,2.0Hz,3H),7.19(td,J＝9.3,4.5Hz,1H),7.10(ddd,J＝8.6,6.5,3.6Hz,1H),7.01–6.93(m,2H),4.33–4.23(m,1H),4.10(dd,J＝12.9,3.0Hz,1H),4.01–3.80(m,3H),3.73(s,1H),3.46–3.34(m,2H),2.85(s,1H),2.77(d,J＝12.9Hz,1H),2.69(t,J＝12.2Hz,1H),2.11(s,2H),1.94–1.84(m,1H),1.84–1.48(m,7H),1.46(s,9H),1.41–1.13(m,5H)。
实施例155：N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1 (6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)乙酰胺
在rt下，向搅拌的3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮(26mg，0.046mmol)[实施例86]和乙酸酐(22μL，0.232mmol)在DCM(0.5mL)中的溶液中加入DIPEA(81μL，0.463mmol)。1.5h后，用饱和NaHCO3(aq)猝灭反应并使用相分离器用DCM(x3)萃取。真空浓缩合并的有机相，并通过快速色谱(在环己烷中的10-100％EtOAc；然后在EtOAc中的0-20％MeOH)纯化粗品，得到标题化合物(19mg，68％)。
实施例156的制备类似于实施例56，除了使用中间体49代替中间体6。实施例157的制备类似于实施例101，除了使用中间体42代替中间体6。
实施例158：((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1 (6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)甘氨酸
将((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)甘氨酸叔丁酯(35mg，0.052mmol)[实施例154]在1,4-二噁烷(1mL)中的4M HCl中的溶液在rt下搅拌18h。将反应混合物真空浓缩并通过反相制备型HPLC纯化，得到标题化合物(22mg，68％)。LCMS(方法B):RT＝1.02min,m/z＝620[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.54(s,1H),8.06(dd,J＝6.7,3.0Hz,2H),7.49(dd,J＝5.1,1.9Hz,3H),7.16(td,J＝9.3,4.5Hz,1H),7.06(ddd,J＝8.9,7.4,3.5Hz,1H),7.00–6.93(m,2H),4.29–4.21(m,1H),4.11(dd,J＝13.1,3.0Hz,1H),3.84(dt,J＝12.5,3.8Hz,1H),3.70(d,J＝11.1Hz,1H),3.46–3.36(m,3H,被HDO信号遮蔽),3.18–3.09(m,3H),3.02(d,J＝11.5Hz,1H),2.85(s,1H),2.75(d,J＝12.9Hz,1H),2.70–2.64(m,1H),2.01(d,J＝10.9Hz,2H),1.86(td,J＝10.6,5.3Hz,1H),1.75(s,1H),1.72–1.43(m,6H),1.42–1.12(m,5H)。
实施例159：4-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰 基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)吗啉-3-酮
步骤1：N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-(10-((3-氧代吗啉代)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)-2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺：标题化合物的制备类似于实施例41，除了使用中间体19和一般程序6代替中间体1和一般程序1。LCMS(方法A):RT＝1.36min,m/z＝601[M+H]+。
步骤2：N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-((R)-10-((3-氧代吗啉代)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)-2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺：使用Lux C4(21.2mm×250mm,5μm)柱，采用等度溶剂条件：100％MeOH(流速：21mL/min)，通过手性HPLC将N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-(10-((3-氧代吗啉代)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)-2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺(210mg)分离成单一立体异构体，得到标题化合物(第一洗脱异构体，1.25min：73.9mg)；和N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-((S)-10-((3-氧代吗啉代)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)-2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺(第二洗脱异构体，2.78min：75.0mg)。[注：通过脱保护衍生物与相近类似物的效力SAR比较来分配立体化学]。
步骤3：4-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)吗啉-3-酮：根据一般程序6进行制备，使用N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-((R)-10-((3-氧代吗啉代)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)-2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺(70mg，0.117mmol)和碳酸钾(80.5mg，0.583mmol)的MeOH(1mL)和水(0.1mL)溶液。使用Biotage Sfar Amino D柱通过快速色谱(在环己烷中的10-100％EtOAc；然后在EtOAc中的0-10％MeOH)纯化粗残留物并冻干，得到标题化合物(29.1mg，49％)。LCMS(方法B):RT＝0.72min,m/z＝505[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.13(td,J＝9.2,4.5Hz,1H),7.00(dddd,J＝14.9,8.9,6.5,3.4Hz,2H),4.24(dd,J＝11.8,2.5Hz,1H),4.02(s,2H),3.85–3.73(m,3H),3.67(s,1H),3.37(dt,J＝12.3,5.1Hz,1H),3.29–3.17(m,3H),3.16–2.96(m,2H),2.81(d,J＝12.8Hz,1H),2.69–2.60(m,1H),2.45–2.38(m,1H),2.24(s,3H),1.98–1.87(m,2H),1.80–1.69(m,1H),1.67–1.29(m,8H),1.29–1.08(m,5H)。
实施例160的制备类似于实施例56，除了使用中间体50代替中间体6。
实施例161：3-(((R)-7-((2S,4R)-4-((2-羟乙基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7- 氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
步骤1：(R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-碳酰氯：根据一般程序8进行制备，使用在DCM(30mL)中的(R)-3-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮(330mg，1.02mmol)、三光气(242mg，0.816mmol)和吡啶(0.83mL)，得到标题化合物(400mg，定量)。LCMS(方法B):RT＝1.43min,m/z＝386[M+H]+。
步骤2：N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2,2,2-三氟-N-((2S,4R)-1-((R)-10-((6-氧代)-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺：根据一般程序7进行制备，使用在DCM(2mL)中的(R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-碳酰氯(50mg，0.130mmol)、N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2,2,2-三氟-N-((2S,4R)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺(61mg，0.143mmol)[中间体51]和DIPEA(121μL，0.694mmol)，得到标题化合物(76mg，75％)。LCMS(方法A):RT＝1.97min,m/z＝自>750未观察。
步骤3：3-(((R)-7-((2S,4R)-4-((2-羟乙基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮：将碳酸钾(133mg，0.962mmol)加入搅拌的N-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2,2,2-三氟-N-((2S,4R)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺(75mg，0.096mmol)在MeOH(2mL)和水(0.2mL)中的溶液中，并将反应混合物在rt下搅拌48h。将水加入反应中并使用相分离器用DCM(x3)萃取所得混合物。真空浓缩合并的有机相并将所得残留物溶解于DCM(3mL)中。加入TFA(1mL)并将反应搅拌18h。使用Biotage SCX-2柱(用3:1DCM/MeOH预平衡，装填反应混合物并用3:1DCM/MeOH洗涤柱)分离期望产物，使用在MeOH中的3:1DCM/7M氨洗脱产物，并使用Biotage Sfar Amino D柱通过快速色谱(在环己烷中的10-100％EtOAc；然后在EtOAc中的0-10％MeOH)进一步纯化，得到标题化合物(31.6mg，57％)。LCMS(方法B):RT＝0.90min,m/z＝570[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.55(s,1H),8.06(dd,J＝6.6,3.0Hz,2H),7.49(dd,J＝5.1,1.9Hz,3H),7.25–7.16(m,4H),7.16–7.09(m,1H),6.97(s,1H),4.41(t,J＝5.3Hz,1H),4.10(dd,J＝13.0,3.0Hz,1H),3.95(dd,J＝11.7,3.1Hz,1H),3.92–3.83(m,1H),3.70(t,J＝12.0Hz,1H),3.44(d,J＝13.0Hz,1H),3.40(q,J＝5.6Hz,2H),3.25(dt,J＝12.2,3.7Hz,1H),2.83(s,1H),2.72–2.62(m,2H),2.58(t,J＝5.9Hz,3H),1.95–1.81(m,3H),1.77(s,1H),1.72–1.42(m,4H),1.42–1.12(m,7H).[未观察到OH信号]。
实施例162的制备类似于实施例101，除了使用中间体49代替中间体6。实施例163的制备类似于实施例78，除了使用中间体52代替(R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯。实施例164的制备类似于实施例96，除了使用3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺环[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮[实施例86]代替1-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2)-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮。实施例165的制备类似于实施例164，除了使用吡啶甲酸代替环丙烷甲酸。实施例166的制备类似于实施例101，除了使用中间体40代替中间体6。实施例167的制备类似于实施例101，除了使用中间体10代替中间体6。
实施例168：1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰 基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基-5,6-二氢吡啶-2(1H)-酮
步骤1：1-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基-5,6-二氢吡啶-2(1H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用10-((6-氧代-4-苯基-3,6-二氢吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(150.0mg，0.35mmol)和3:2TFA/DCM(2.5mL)并搅拌20min，得到标题化合物(121mg，99％)。LCMS(方法B):RT＝0.71min,m/z 325[M+H]+.。
步骤2：((2S,4R)-1-(氯羰基)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-4-基)(甲基)氨基甲酸三氟甲酯：根据一般程序8进行制备，使用三光气(49.6mg,0.17mmol)、吡啶(135uL,1.7mmol)、N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-4-基)-2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺盐酸盐(120mg，0.33mmol)和DIPEA(87.6uL，0.50mmol)，得到标题化合物(119mg，92％)。
步骤3：N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-(10-((6-氧代-4-苯基-3,6-二氢吡啶-1(2H)-基))甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)-2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺：根据一般程序7进行制备，使用1-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基-5,6-二氢吡啶-2(1H)-酮(121mg，0.35mmol)、DIPEA(307uL，1.76mmol)和((2S,4R)-1-(氯羰基)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-4-基)(甲基)氨基甲酸三氟甲酯(119mg，0.31mmol)，得到标题化合物(159mg，67％)。LCMS(方法B):RT＝1.66min,m/z 673[M+H]+。
步骤4：N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基-3,6-二氢吡啶-1(2H))-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)-2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺：使用Lux C4(21.2mm×250mm,5μm)柱，采用等度溶剂条件：50:50MeOH/CO2(流速：50mL/min)，通过手性制备型SFC将N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-(10-((6-氧代-4-苯基-3,6-二氢吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)-2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺(157mg)分离成单一立体异构体，得到标题化合物(第一洗脱异构体，2.15min：53.7mg)；和N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-((S)-10-((6-氧代-4-苯基-3,6-二氢吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)-2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺(第二洗脱异构体，3.76min：62.1mg)。[注：通过脱保护衍生物与相近类似物的效力SAR来分配立体化学]。
步骤5：1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基-5,6-二氢吡啶-2(1H)-酮：根据一般程序6进行制备，使用N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基-3,6-二氢吡啶)-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)-2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺(53mg，0.080mmol)和碳酸钾(55mg，0.40mmol)，得到标题化合物(45mg，98％)。LCMS(方法B):RT＝0.99min,m/z577[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.62(d,2H),7.51-7.35(m,3H),7.13(td,1H),7.07-6.95(m,2H),6.20(s,1H),4.24(d,1H),3.84-3.74(m,1H),3.67-3.56(m,1H),3.55-3.43(m,2H),3.28-3.19(m,2H),3.19-3.01(m,2H),2.87-2.72(m,3H),2.69-2.61(m,1H),2.47-2.40(m,2H),2.25(s,3H),1.92(d,2H),1.77-1.68(m,1H),1.65-1.47(m,5H),1.47-1.32(m,2H),1.32-1.10(m,5H)。
实施例169：3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-((嘧啶-2-基甲基)氨基) 哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
向搅拌的3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮(40mg，0.071mmol)[实施例86]和2-(溴甲基)嘧啶(12mg，0.071mmol)在DMF(1mL)中的溶液中加入碳酸钾(29mg，0.213mmol)。将反应混合物在rt下搅拌1h。将反应物用DCM稀释并用水(x3)洗涤，然后用盐水洗涤、过滤(相分离器)并真空浓缩。使用Biotage Sfar Amino D柱通过快速色谱(在环己烷中的10-100％EtOAc；然后在EtOAc中的0-10％MeOH；随后Silisep二氧化硅柱，在EtOAc中的0-20％MeOH)纯化剩余残留物，得到标题化合物(16.4mg，34％)。LCMS(方法B):RT＝0.94min,m/z＝654[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.85(d,J＝4.9Hz,2H),8.55(s,1H),8.06(dd,J＝6.7,3.0Hz,2H),7.49(dd,J＝5.2,2.0Hz,4H),7.17(td,J＝9.3,4.5Hz,1H),7.07(tt,J＝8.3,3.5Hz,1H),7.03–6.95(m,2H),4.30(d,J＝11.6Hz,3H),4.11(dd,J＝13.1,3.0Hz,1H),3.85(d,J＝12.9Hz,1H),3.73(t,J＝11.2Hz,1H),3.45–3.37(m,1H),3.37–3.31(m,1H),2.87(s,1H),2.77(d,J＝12.9Hz,1H),2.69(t,J＝12.3Hz,1H),2.46–2.41(m,1H,被DMSO信号遮蔽),2.12(s,2H),1.88(t,J＝10.7Hz,1H),1.64(q,J＝43.9,35.7Hz,7H),1.42–1.13(m,6H)。
实施例170：3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-((嘧啶-4-基甲基)氨基) 哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
向搅拌的3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮(40mg，0.071mmol)[实施例86]和4-(氯甲基)嘧啶(9.1mg，0.071mmol)在DMF(1mL)中的溶液中加入碳酸钾(29mg，0.213mmol)。将反应混合物在rt下搅拌65h。将反应物用DCM稀释并用水(x3)洗涤，然后用盐水洗涤、过滤(相分离器)并真空浓缩。使用Biotage Sfar Amino D柱通过快速色谱(在环己烷中的10-100％EtOAc；然后在EtOAc中的0-10％MeOH；随后Silisep二氧化硅柱，在EtOAc中的0-20％MeOH)纯化剩余残留物，得到标题化合物(19.6mg，41％)。LCMS(方法B):RT＝0.94min,m/z＝654[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ9.17(s,1H),8.80(s,1H),8.55(s,1H),8.08–8.03(m,2H),7.59(dd,J＝5.2,1.4Hz,1H),7.49(dd,J＝5.0,1.9Hz,3H),7.17(td,J＝9.3,4.4Hz,1H),7.07(s,1H),7.02–6.95(m,2H),4.38–3.96(m,3H),3.85(d,J＝13.2Hz,1H),3.73(s,1H),3.39(s,1H),3.34(s,1H),2.86(s,1H),2.77(d,J＝12.9Hz,1H),2.74–2.65(m,1H),2.53–2.51(m,2H),2.09(s,2H),1.92–1.84(m,1H),1.78(s,1H),1.73–1.43(m,6H),1.43–1.13(m,6H)。
实施例171的制备类似于实施例101，除了使用中间体32代替中间体6并且不需要最终的脱保护步骤，然而，在冻干之前加入在二噁烷中的4M HCl以助于溶解于乙腈/水中，导致形成HCl盐。
实施例172：N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-((R)-10-((6-氟-4-氧代喹唑啉-3 (4H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)乙酰胺
步骤1：(R)-10-((6-氟-4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-碳酰氯：根据一般程序8进行制备，使用在DCM(10mL)中的三光气(150mg，0.507mmol)、吡啶(0.51mL，6.34mmol)和(R)-3-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮(200mg，0.634mmol)，得到标题化合物(220mg，91％)。LCMS(方法B):RT＝1.42min,m/z＝378[M+H]+。
步骤2：((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-((R)-10-((6-氟-4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)甲基))-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯：根据一般程序7进行制备，在50℃下，使用在MeCN中的(R)-10-((6-氟-4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-碳酰氯(150mg，0.397mmol)、((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(149mg,0.476mmol)和DIPEA(0.35mL,1.99mmol)，得到标题化合物(220mg，85％)。LCMS(方法B):RT＝1.61min,m/z＝598[M-丁烯+H]+。
步骤3：3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用在DCM(4mL)中的((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-((R)-10-((6-氟-4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(220mg，0.337mmol)和TFA(2mL)，得到标题化合物(170mg，91％)。LCMS(方法B):RT＝0.91min,m/z＝554[M+H]+。
步骤4：N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-((R)-10-((6-氟-4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)乙酰胺：向搅拌的3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮(40mg,0.072mmol)和乙酸酐(34μL,0.361mmol)在DCM(1mL)中的溶液中加入DIPEA(0.13mL,0.723mmol)。将反应混合物在rt下搅拌18h。然后将反应混合物用饱和NaHCO3(aq)猝灭并使用相分离器用DCM(x3)萃取。真空浓缩合并的有机相，并通过快速色谱(在环己烷中的10-100％EtOAc；然后在EtOAc中的0-10％MeOH)纯化所得残留物，得到标题化合物(25.8mg，60％)。LCMS(方法B):RT＝1.26min,m/z＝596[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.37(s,1H),7.86–7.70(m,4H),7.15(td,J＝9.3,4.5Hz,1H),7.03(ddd,J＝8.8,7.4,3.5Hz,1H),6.95(ddd,J＝9.0,5.5,3.3Hz,1H),4.31–4.24(m,1H),4.16(dd,J＝13.4,2.9Hz,1H),3.89–3.75(m,2H),3.70(dtt,J＝11.6,8.1,3.9Hz,1H),3.40(d,J＝12.8Hz,1H),3.28(d,J＝3.5Hz,1H),2.85(s,1H),2.79–2.67(m,2H),1.89(td,J＝10.4,3.0Hz,3H),1.81(s,1H),1.76(s,3H),1.65(d,J＝18.1Hz,2H),1.60–1.45(m,3H),1.44–1.26(m,4H),1.22(dt,J＝13.9,7.1Hz,2H)。
实施例173的制备类似于实施例164，除了使用3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺环)[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮代替3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮[实施例86]。
实施例174：3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(二甲氨基)哌啶-1-羰 基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮
在rt下，向搅拌的3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮(40mg，0.072mmol)和37％甲醛(aq)溶液(108μL,1.45mmol)在1:1MeCN/MeOH(1.0mL)中的溶液中分批加入三乙酰氧基硼氢化钠(306mg，1.45mmol)。18h后，将反应混合物用饱和NaHCO3(aq)猝灭并使用相分离器用DCM(x3)萃取。真空浓缩合并的有机相，并使用Biotage Sfar Amino D柱通过快速色谱(在环己烷中的10-100％EtOAc；然后在EtOAc中的0-10％MeOH)纯化所得残留物，得到标题化合物(23.6mg，56％)。LCMS(方法B):RT＝0.91min,m/z＝582[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.37(s,1H),7.82(dd,J＝8.7,2.9Hz,1H),7.79–7.69(m,2H),7.13(td,J＝9.7,4.6Hz,1H),7.02(ddd,J＝7.9,6.1,3.1Hz,2H),4.27–4.21(m,1H),4.15(dd,J＝13.3,3.0Hz,1H),3.89–3.76(m,2H),3.39(d,J＝12.9Hz,1H),3.35–3.32(m,1H),2.86(s,1H),2.75(d,J＝12.9Hz,1H),2.66(d,J＝11.5Hz,1H),2.32(dd,J＝14.0,5.6Hz,1H),2.16(s,6H),1.92–1.73(m,4H),1.71–1.44(m,5H),1.43–1.15(m,6H)。
实施例175：(2S,4R)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂 螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-羧酸
/>
在rt下，向搅拌的(2S,4R)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-羧酸甲酯(90.3mg，0.159mmol)[实施例76]在无水THF(0.90mL)中的溶液中加入在水(0.30mL)中的氢氧化锂(7.6mg，0.318mmol)。16h后，将混合物用2M盐酸(2mL)分配。分离水相并使用DCM(2×1mL)萃取。将合并的有机相干燥(分相器)并真空浓缩，得到粗产物，其通过快速色谱(在环己烷中的0-100％EtOAc+1％(v/v)乙酸)纯化并冻干，得到标题化合物(94.5mg，定量)。LCMS(方法B):RT＝1.31min,m/z＝555[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.55(s,1H),8.09-8.02(m,2H),7.52-7.46(m,3H),7.25-7.17(m,4H),7.17-7.11(m,1H),6.97(s,1H),4.10(dd,1H),3.95(dd,1H),3.92-3.84(m,1H),3.70(t,1H),3.44(d,1H),2.91-2.77(m,1H),2.72-2.61(m,2H),2.43-2.36(m,1H),1.97-1.81(m,3H),1.81-1.72(m,1H),1.72-1.59(m,3H),1.59-1.42(m,3H),1.39-1.13(m,6H).未观察到OH信号。
实施例176的制备类似于实施例96，除了使用(2S,4R)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-羧酸和甲胺分别代替1-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮和环丙烷甲酸。实施例177的制备类似于实施例96，除了使用(2S,4R)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-羧酸和二甲胺分别代替1-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮和环丙烷甲酸。实施例178的制备类似于实施例168，除了使用中间体54代替中间体53，并且不需要非对映异构体的分离步骤。实施例179的制备类似于实施例123，除了使用中间体49代替中间体19。实施例180的制备类似于实施例91，除了使用中间体49代替中间体19。实施例181的制备类似于实施例153，除了使用中间体30代替中间体35。实施例182的制备类似于实施例163，除了使用中间体42代替中间体19。实施例183的制备类似于实施例152，除了使用中间体55代替中间体42。实施例184的制备类似于实施例174，除了使用3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(3,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺环)[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮[根据实施例172步骤1-3制备，除了使用中间体30代替((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯，并且对于步骤3，一般程序6代替一般程序1]代替3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮。实施例185的制备类似于实施例123，除了使用中间体42代替中间体19。实施例186的制备类似于实施例123，除了使用中间体55代替中间体19。
实施例187：3-(((S)-7-((R)-2-(2,5-二氟苯基)哌嗪-1-羰基)-10-甲氧基-7-氮 杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮
步骤1：(S)-10-甲氧基-10-((4-(2-甲氧基苯基)-6-氧代嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯：向冷却至0℃的搅拌的(S)-10-羟基-10-((4-(2-甲氧基苯基)-6-氧代嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(400mg，0.852mmol)在DMF(8mL)中的溶液中分批加入氢化钠(60％分散在油中，68.1mg，1.70mmol)。将所得悬浮液在0℃下搅拌30min，然后加入硫酸二甲酯(121μL，1.28mmol)。将反应物在0℃下搅拌2h，然后用饱和NaHCO3(aq)猝灭，并使用相分离器用DCM(x3)萃取所得混合物。真空浓缩合并的有机相并通过快速色谱(在环己烷中的0-100％EtOAc)纯化所得残留物，得到标题化合物(130mg，31％)。LCMS(方法B):RT＝1.66min,m/z＝484[M+H]+。
步骤2：(S)-3-((10-甲氧基-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用在DCM(1mL)中的(S)-10-甲氧基-10-((4-(2-甲氧基苯基)-6-氧代嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羧酸叔丁酯(130mg，0.269mmol)和TFA(0.5mL)，得到标题化合物(91mg，88％)。LCMS(方法B):RT＝0.81min,m/z＝384[M+H]+。
步骤3：(R)-3-(2,5-二氟苯基)-4-((S)-10-甲氧基-10-((4-(2-甲氧基苯基)-6-氧代嘧啶-1(6H))-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯：根据一般程序8进行制备，使用在DCM(4mL)中的三光气(15.5mg，0.052mmol)、吡啶(42μL,0.522mmol)和(R)-3-(2,5-二氟苯基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(18.7mg，0.063mmol)以产生氨基甲酰氯，其随后与在DCM(1mL)中的(S)-3-((10-甲氧基-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮(20mg，0.052mmol)和DIPEA(27μL，0.157mmol)一起用于一般程序7中，得到标题化合物(12mg，32％)。LCMS(方法B):RT＝1.72min,m/z＝708[M+H]+。
步骤4：3-(((S)-7-((R)-2-(2,5-二氟苯基)哌嗪-1-羰基)-10-甲氧基-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮：根据一般程序1进行制备，使用在DCM中(1mL)中的(R)-3-(2,5-二氟苯基)-4-((S)-10-甲氧基-10-((4-(2-甲氧基苯基)-6-氧代嘧啶)-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(12mg，0.017mmol)和TFA(0.5mL)，得到标题化合物(10mg，定量)。LCMS(方法B):RT＝1.01min,m/z＝608[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.31(s,1H),8.02(dd,J＝7.8,1.8Hz,1H),7.47(ddd,J＝8.8,7.3,1.8Hz,1H),7.17(ddt,J＝14.0,9.3,5.2Hz,3H),7.10–7.03(m,3H),4.47(d,J＝14.2Hz,1H),4.36(dd,J＝9.1,3.5Hz,1H),3.98(d,J＝14.2Hz,1H),3.89(s,3H),3.65(s,2H),3.35(d,J＝13.5Hz,1H),3.16(s,4H),2.97–2.71(m,5H),2.68–2.61(m,1H(被DMSO卫星遮蔽)),1.67(ddd,J＝35.3,11.8,6.2Hz,2H),1.56(dt,J＝16.3,6.2Hz,3H),1.43(dq,J＝19.1,9.1Hz,3H),1.19(d,J＝13.0Hz,1H),1.05–0.97(m,1H).未观察到NH信号。
实施例188的制备类似于实施例68，除了使用(R)-1-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮代替(R)-3-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮和中间体56代替中间体13。实施例189的制备类似于实施例101，除了使用中间体50代替中间体6。
实施例190：3-(((S)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(异丙氨基)哌啶-1-羰 基)-10-甲氧基-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮
/>
根据一般程序8进行制备，使用在DCM(4mL)中的三光气(27mg，0.091mmol)、吡啶(74μL，0.913mmol)和(S)-3-((10-甲氧基-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮(35mg，0.091mmol)，产生氨基甲酰氯，其随后与在MeCN(2mL)中的(2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-N-异丙基哌啶-4-胺盐酸盐(32mg，0.110mmol)和DIPEA(80μL，0.456mmol)一起用于一般程序7中，加热至50℃持续72h，得到标题化合物(25.1mg，40％)。LCMS(方法B):RT＝1.02min,m/z＝664[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.31(s,1H),8.03(dd,J＝7.8,1.8Hz,1H),7.47(ddd,J＝8.7,7.3,1.8Hz,1H),7.20–7.11(m,2H),7.11–6.98(m,4H),4.49(d,J＝14.1Hz,1H),4.24(d,J＝11.4Hz,1H),3.97(d,J＝14.2Hz,1H),3.90(s,3H),3.72–3.62(m,1H),3.40(d,J＝12.8Hz,1H),3.29–3.21(m,1H),3.15(s,3H),2.99–2.80(m,2H),2.73–2.62(m,2H,被DMSO卫星遮蔽),2.46–2.38(m,1H,被DMSO信号遮蔽),1.90(d,J＝12.4Hz,2H),1.75–1.67(m,1H),1.67–1.59(m,1H),1.59–1.30(m,7H),1.30–1.12(m,3H),0.98–0.88(m,7H)。
实施例191的制备类似于实施例101，除了使用中间体26代替中间体6。
实施例192：3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3,5-二氟苯基)-4-(异丙氨基)哌啶-1-羰 基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
向搅拌的3-[[(10R)-7-[(2S,4R)-4-氨基-2-(3,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基]-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基]甲基]-6-苯基-嘧啶-4-酮(41.2mg，0.073mmol)[实施例107]和丙酮(10.9μL，0.147mmol)在MeOH(1mL)中的溶液中加入NaBH(OAc)3(31.1mg，0.147mmol)并将混合物搅拌30min。进一步加入丙酮(10.9μL，0.147mmol)，随后加入NaBH(OAc)3(31.1mg，0.147mmol)。再过30min后，进一步加入丙酮(10.9μL，0.147mmol)，随后加入NaBH(OAc)3(31.1mg，0.147mmol)。进一步加入丙酮(10.9μL，0.147mmol)，随后加入NaBH(OAc)3(31.1mg，0.147mmol)并继续搅拌30min。需要进一步加入丙酮(10.9μL，0.147mmol)，随后加入NaBH(OAc)3(31.1mg，0.147mmol)，再重复8次，直至反应充分完成。用在DCM(50mL)中的20％(v/v)MeOH预处理SCX-2二氧化硅柱(5g)。将反应混合物用MeOH稀释直至其变成溶液(约0.5mL)，然后均匀地置于SCX-2柱上，使用MeOH(3×0.5mL)冲洗烧瓶。5min后，用在DCM(50mL)中的20％(v/v)MeOH冲洗柱，随后用在DCM(50mL)中的20％(v/v)(在MeOH中的7M氨)冲洗。真空浓缩氨溶液，并使用KP-NH柱通过快速色谱(在环己烷中的0-100％EtOAc)纯化剩余残留物并冻干，得到标题化合物(32mg，71％收率)。LCMS(方法K):RT＝0.93min,m/z＝604[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.55(s,1H),8.10-8.01(m,2H),7.54-7.45(m,3H),7.02-6.93(m,2H),6.92-6.84(m,2H),4.11(dd 1H),4.01(dd,1H),3.85(dt,1H),3.72(t,1H),3.41(d,1H),3.28-3.21(m,1H),2.92-2.78(m,2H),2.74(d,1H),2.69-2.60(m,2H),1.95-1.83(m,3H),1.83-1.74(m,1H),1.72-1.61(m,2H),1.61-1.44(m,2H),1.42-1.11(m,8H),0.98-0.88(m,6H)。
实施例193：3-(((R)-7-((2S,4R)-4-(((3-甲基吡啶-2-基)甲基)氨基)-2-苯基哌 啶-1-羰基)-7-氮杂螺环[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
在N2下，向搅拌的3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮(70mg，0.133mmol)[实施例25]在MeOH(1mL)中的溶液中加入3-甲基吡啶甲醛(20.2mg，0.167mmol)。将所得混合物在rt下搅拌18h，然后在rt下分批加入NaBH(OAc)3(282mg，1.33mmol)。1h后，用饱和NaHCO3(aq)猝灭反应并使用相分离器用DCM(x3)萃取。真空浓缩合并的有机相，并使用Biotage Sfar Amino D柱通过快速色谱(在环己烷中的10-100％EtOAc；然后在EtOAc中的0-10％MeOH)纯化粗品，得到标题化合物(43mg，50％)。LCMS(方法K):RT＝0.95min,m/z＝631[M+H]+.1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ8.55(s,1H),8.30(dd,J＝4.9,1.6Hz,1H),8.09–8.03(m,2H),7.50(dtt,J＝8.4,5.3,2.5Hz,4H),7.22(d,J＝6.1Hz,4H),7.18–7.10(m,2H),6.97(s,1H),4.10(dd,J＝13.0,3.1Hz,1H),3.97(dd,J＝11.7,3.0Hz,1H),3.88(d,J＝13.2Hz,1H),3.80(t,J＝4.8Hz,2H),3.70(t,J＝12.0Hz,1H),3.44(d,J＝12.9Hz,1H),3.29–3.22(m,1H),2.84(s,1H),2.73–2.61(m,3H),2.27(s,3H),2.20(s,1H),1.99(dd,J＝12.7,4.0Hz,2H),1.85(ddt,J＝10.5,7.0,3.4Hz,1H),1.77(s,1H),1.72–1.40(m,5H),1.39–1.24(m,4H),1.19(td,J＝15.9,14.2,8.6Hz,2H)。
实施例194的制备类似于实施例170，除了使用3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-1代替3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1)-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮和2-(氯甲基)-4,6-二甲基嘧啶代替4-(氯甲基)嘧啶。实施例195的制备类似于实施例78，除了使用中间体57代替中间体19。实施例196和实施例197[注：这是在实施例196的合成过程中的非期望副产物]的制备类似于实施例78，除了使用中间体58代替中间体19。实施例198的制备类似于实施例125，除了使用中间体59代替中间体27。实施例199的制备类似于实施例125，除了使用中间体60代替中间体27。实施例200的制备类似于实施例125，除了使用中间体61代替中间体1并且不需要脱保护步骤。实施例201的制备类似于实施例200，除了使用(R)-3-((7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮代替中间体27。
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USP19抑制剂化合物还公开于WO2018/020242、WO2020/115500、WO2019/150119和WO2020/115501中，其各自通过引用明确并入本文。根据式(I)的化合物是WO2018/020242、WO2020/115500、WO2019/150119和WO2020/115501中公开的化合物的类似物——即其中R0位置是H、F、NH2或OCH3的类似物——明确地并入本文并且可以由技术人员按照本文以及WO2018/020242、WO2020/115500、WO2019/150119和WO2020/115501中提供的合成方案获得。

Claims (68)

1.一种式(I)的化合物或其立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，
其中
R0是H、NH2、F或OCH3；
R1是任选取代的C1-C6烷基、乙基环丙基、乙基环丁基、任选取代的C5-C8芳基、任选取代的C3-C8杂芳基、任选取代的C3-C8杂环烷基、NRaRb、NRaCH2Rb、ORa或OCH2Ra
其中Ra和Rb独立地选自H、C1-C6烷基、CF3、任选取代的C3-C6环烷基、任选取代的C5-C8芳基、任选取代的C6-C9芳烷基和任选取代的C2-C8杂芳基，并且其中当R1是NRaCH2Rb时，亚甲基基团可以任选地被CF3取代，
或R1是NRaRb并且Ra和Rb与它们所附接的N一起形成任选取代的C2-C9杂环；
R2和R3独立地选自H和C1-C6烷基，或与它们所附接的碳一起形成C3-C6环烷基或C3-C6杂环烷基；
X不存在，是C、CR4a、CR4aR4b、N、NR4a或C＝O，
其中R4a和R4b独立地选自H、任选取代的C1-C6烷基和卤素；
或其中R4a和R4b一起形成包括它们所附接的碳的C3-C6环烷基或C3-C6杂环烷基；
Y是C、CR5、CR5R6、N、NR5或O，
其中R5和R6独立地选自H、卤素、任选取代的C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、任选取代的C3-C6环烷基、任选取代的C3-C6杂环烷基、任选取代的C5-C8芳基、任选取代的C6-C9芳基烷基、任选取代的C3-C8杂芳基、CH2OH、NR’R”、NS(O)R’R”、SO2R’、C(O)R’、COR’、C(O)OR’、C(O)NR’R”、OR’，其中R’和R”独立地选自H、C1-C6烷基、C5-C8芳基、C6-C9芳基烷基和C3-C8杂芳基，或其中R5是NR’R”并且R’和R”一起形成包括它们所附接的氮的任选取代的C3-6杂环烷基，
或其中R5和R6一起形成包括它们所附接的碳的C3-6环烷基或C3-C6杂环烷基；
Z是N、NR7、C、CR7、CR7R8或C＝O，
其中R7和R8独立地选自H、卤素、氰基、氧代、任选取代的C1-C6烷基、C2-C6烯烃、C2-C6炔烃、C3-C6环烷基、任选取代的C3-C6杂环烷基、C5-C8芳基、C6-C9芳基烷基、C3-C8杂芳基、CN、C(O)ORc、CONRcRd、NRcRd、NS(O)RcRd、S(O)(Rc)NRd、SORc、SO2Rc和SRc，其中Rc和Rd独立地是H、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C5-C6芳基、C6-C9芳基烷基、C3-C6杂芳基、CN、COOH或COCH3，或Rc和Rd与它们所附接的杂原子一起形成任选取代的C3-C7杂环；
或其中R7和R8一起形成包括它们所附接的碳的C3-6环烷基或C3-C6杂环烷基；
M不存在，是C、CR13或CR13R14，其中R13和R14独立地选自H和C1-C6烷基，或其中R13和R14与它们所附接的碳一起形成C3-C6环烷基或C3-C6杂环烷基；
和
A是CR9、CHR9、N、NR9、S或O；
D是CR9、CHR9、N或NR9，
G不存在，是CR9、CHR9或N，
其中R9独立地选自H、卤素、C1-C6烷基、CF3和OR*，其中R*选自任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C3-C6环烷基和任选取代的C3-C6杂环烷基，
E是CR10、CHR10、N、NR10、S或O，
其中R10选自H、卤素、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C5-C8芳基、C6-C9芳基烷基、C4-C8杂芳基、SRx、ORx、NRxRy和NS(O)RxRy、S(O)(Rx)NRy；
其中Rx和Ry独立地选自H、C1-C6烷基、CF3、C3-C6环烷基、C5-C8芳基、C6-C9芳烷基、C4-C8杂芳基、COOH、酰氨基、氰基、C2-C6烯烃、C2-C6炔烃，或其中Rx和Ry与它们所附接的氮一起形成任选取代的C4-C6杂环烷基；
或A、D、E和G均不存在，任选地其中X和M不存在，或任选地其中Y和Z一起形成任选取代的C5-C6芳基或C3-C6杂芳基稠合环，或Z和M一起形成任选取代的C5-C6芳基或C5-C6杂芳基稠合环；
或具有选自以下结构的化合物：
2.根据权利要求1所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中对于每个任选取代的基团，每个一个或多个任选的取代基独立地选自C1-C4烷基、C3-C4环烷基、卤素、CHF2、CF3、羟基、NH2、取代的氨基(例如NHCH3、NHCH2CH3)、NO2、CH2OH、CH2OCH3、甲氧基、OCHF2、OCF3、环丙氧基、苯基、氟取代的苯基(例如二氟取代的苯基)、苄基和氧代。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中R0是H。
4.根据权利要求1或权利要求2所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中R0是NH2。
5.根据权利要求1或权利要求2所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中R0是F或OCH3。
6.根据前述权利要求中任一项所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中R1是任选取代的C1-C6烷基，优选地其中任选的取代基选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和OH。
7.根据前述权利要求中任一项所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中R1是任选取代的三氟丙基，其中每个任选的取代基选自甲基、CH2OCH3和CH2OH。
8.根据权利要求1-5中任一项所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中R1是NRaRb或NRaCH2Rb，其中Ra和Rb独立地选自H、甲基、乙基、丙基、CF3、任选取代的环丙基、任选取代的环丁基、任选取代的环戊基、任选取代的环己基、任选取代的苯基、任选取代的苄基、任选取代的吡啶基、吡唑、咪唑、呋喃、苯并二氧杂环戊烯、任选取代的噁二唑、噻唑和噻吩，其中任选的取代基独立地选自卤素、甲基、环丙基和CN，
任选地其中R1是NRaCH2Rb并且亚甲基基团被CF3取代。
9.根据权利要求1-5中任一项所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中R1是NRaRb并且其中Ra和Rb与它们所附接的N一起形成任选取代的C3-C9杂环，
其中一个或多个任选的取代基中的每一个选自OH、氧代、任选地被OH和/或卤素取代的C1-C3烷基、任选取代的苯基、任选取代的苄基、C1-C3烷氧基、NRmRn、NHC(O)Rm和NHCH2Rn，
其中Rm和Rn独立地选自H；任选地被OH、甲氧基或卤素取代的C1-C3烷基；任选地被甲基和/或卤素取代的C3-C4环烷基；任选地被氧代、甲基或氟甲基取代的C3-C4杂环烷基；任选地被甲基取代的C3-C5杂芳基；和Boc；和/或其中Rn进一步选自CH2OCH3、COOH和COOCH3，
或其中Rm和Rn与它们所附接的N一起形成C3-C5杂环基基团，任选地其中Rm和Rn与它们所附接的N一起形成吗啉基基团。
10.根据权利要求1-5或权利要求9所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中R1是NRaRb并且其中Ra和Rb与它们所附接的N一起形成任选取代的C3-C9杂环，任选地被OH、CH2OH、CH2OCH3、氧代、NH2、C1-C3氨基烷基、氨基-硫杂环丁烷二氧化物、甲基、乙基、丙基、CF3、苯基、取代的苯基和苄基取代。
11.根据权利要求9或10所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中R1是NRaRb并且Ra和Rb与它们所附接的N一起形成任选取代的杂环，其中所述杂环选自吡咯烷基、哌啶基、吗啉代、哌嗪基和硫代吗啉代。
12.根据权利要求11所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中所述杂环任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：甲基、NH2、C1-C2氨基烷基、CH2CF3、氧代、噻吩，以及任选地被独立地选自F和CF3的一个或多个取代基取代的苯基，和OH，条件是相同的环碳也没有被甲基取代。
13.根据权利要求9-12中任一项所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中Ra和Rb与它们所附接的N一起形成杂环，其中所述杂环选自哌啶基或哌嗪基环，其中所述杂环任选地被独立地选自以下的一个或多个取代基取代：甲基、NH2、NHCH3、NHCH2CH3、CH2CF3、氧代、噻吩、任选地被F或CF3取代的苯基和OH，条件是相同的环碳也没有被甲基取代。
14.根据权利要求9-13所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中R1是NRaRb并且Ra和Rb与它们所附接的N一起形成被苯基、氟-苯基或二氟-苯基取代的哌嗪基基团，并且其中所述哌嗪基基团任选地进一步被甲基取代。
15.根据权利要求9-14所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中R1选自：
16.根据权利要求9-11所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中R1是NRaRb并且Ra和Rb与它们所附接的N一起形成任选地被苯基、氟-苯基或二氟-苯基取代的哌啶基基团，并且其中所述哌啶基基团任选地进一步被NRmRn、NHC(O)Rm或NHCH2Rn取代，
其中Rm和Rn独立地选自H；任选地被OH、甲氧基或卤素取代的C1-C3烷基；任选地被甲基和/或卤素取代的C3-C4环烷基；任选地被氧代、甲基或氟甲基取代的C3-C4杂环烷基；任选地被甲基取代的C3-C5杂芳基；和Boc；和/或其中Rn进一步选自CH2OCH3、COOH和COOCH3，
或其中Rm和Rn与它们所附接的N一起形成C3-C5杂环基基团，任选地其中Rm和Rn与它们所附接的N一起形成吗啉基基团。
17.根据权利要求9-11和16中任一项所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中R1是NRaRb并且Ra和Rb与它们所附接的N一起形成哌啶基基团，其中所述哌啶基基团在4位被NRmRn、NHC(O)Rm和NHCH2Rn取代，并且在2位进一步被苯基、氟-苯基或二氟-苯基取代。
18.根据权利要求9-11和16-17中任一项所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中Ra和Rb与它们所附接的N一起形成任选地被苯基、氟-苯基或二氟-苯基取代的哌啶基基团，并且其中所述哌啶基基团任选地进一步被NH2、NHCH3或NHCH2CH3取代。
19.根据权利要求9-11和16-18中任一项所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中R1选自：
20.根据权利要求8所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中R1是NRaCH2Rb，其中Ra是H或甲基并且Rb选自任选地被F取代的环丁基、环己基、任选地被F取代的苯基、呋喃和噻吩，
任选地其中亚甲基被CF3取代。
21.根据权利要求19所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中Rb是苯基或氟取代的苯基。
22.根据前述权利要求中任一项所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中R2和R3独立地选自H、甲基和乙基，或与它们所附接的碳一起形成任选取代的环丙基、任选取代的环丁基、任选取代的环戊基、任选取代的环己基、任选取代的吡咯烷、任选取代的四氢吡喃或任选取代的四氢呋喃。
23.根据前述权利要求中任一项所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中R2和R3独立地选自H和甲基，优选地其中R2和R3均是H。
24.根据权利要求22所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中R2和R3与它们所附接的碳一起形成环己基、环戊基或环丁基，优选环戊基。
25.根据前述权利要求中任一项所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中，当存在环XYADE(任选G)时，Y不是N。
26.根据前述权利要求中任一项所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中：
X是CR4a，其中R4a如权利要求1中所限定，任选地是H或C1-C6烷基；
Y是N；
Z是CR7，其中R7如权利要求1中所限定；
M是CH或C-CH3；
包括X、Y和Z的环是芳香族的，并且A、D、E和G均不存在。
27.根据权利要求26所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中Z是CR7并且R7选自H、苯基、吡啶、吡唑、吲唑、咪唑、Cl、Br、COOH、COOCH3、CONRcRd、NRcRd，
其中RcRd各自是甲基，或其中Rc和Rd与它们所附接的N一起形成任选取代的哌嗪、任选取代的吗啉或任选取代的吡咯烷。
28.根据权利要求26所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中R7是Cl、Br或C(O)OCH3，或其中R7是CONRcRd并且Rc和Rd各自是甲基，或其中Rc和Rd与它们所附接的N一起形成哌嗪基环。
29.根据权利要求1-25中任一项所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中：
X是CR4a，其中R4a如权利要求1中所限定，任选地是H或C1-C6烷基；
Y是CR5；
Z是N或CR7；
M是CH或C-CH3；
其中R5和R7如权利要求1中所限定，包括X、Y和Z的环是芳香族的，并且A、D、E和G均不存在。
30.根据权利要求29所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中Z是N或CR7，其中R7是H、C1-C6烷基、NR’R”、C(O)NR’R”、氰基、羧基、卤素、C1-C6烷基胺、C3-C6烷基酯、任选取代的C6-C10芳基或任选取代的C2-C6杂芳基，其中一个或多个杂原子选自N和O，并且所述芳基或杂芳基的一个或多个任选的取代基选自C1-C6烷基、C1-C6烷基胺、酰胺基和氰基，
其中R’和R”独立地选自H、任选地被OH取代的C1-C6烷基、C3-C7环烷基、C1-C7杂环烷基、C4-C7烷基环烷基、C3-C7烷基杂环烷基、苄基、苯基和甲氧基，或其中R’和R”彼此连接形成包括它们所附接的N的C2-C7杂环，其中所述杂环任选地是羟基取代的、氧代取代的、甲基取代的、CH2OH取代的或乙酰基取代的。
31.根据权利要求29或30所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中Y是CR5并且R5选自：任选地被独立地选自甲基、卤素(例如氟)和OCH3的一个或多个取代基取代的苯基；卤素；任选地被甲基取代的环丙基；任选地被两个或三个氟取代的甲基；和SCH3。
32.根据权利要求29-31所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中Z是N或CH。
33.根据权利要求29或30所述的化合物立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中：
X是CH，
Z是N或CH，
M是CH，
Y是CR5，其中R5选自卤素、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C3-C6环烷基、任选取代的C3-C6杂环烷基、任选取代的C5-C8芳基、任选取代的C3-C8杂芳基和NR’R”，其中R’和R”一起形成包括它们所附接的氮的任选取代的C3-C6杂环烷基。
34.根据权利要求29、32或33所述的化合物立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中R5选自卤素、任选取代的环丙基、任选取代的苯基、任选取代的噻吩基、任选取代的哌啶基、任选取代的吡唑基、任选取代的吡咯烷基、任选取代的二氢苯并呋喃基、任选取代的氮杂二环己基和任选取代的氮杂环丁烷基。
35.根据权利要求29或32-34所述的化合物立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中R5的一个或多个任选的取代基各自选自由以下组成的组：Cl、F、甲基、CHF2、CF3、甲氧基、OCHF2、OCF3和环丙氧基。
36.根据权利要求29或32-34所述的化合物立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中R5选自由以下组成的组：卤素；苯基，任选地被氟、甲氧基或甲基取代；任选地被单氟、二氟或三氟取代的甲基；任选地被甲基取代的环丙基。
37.根据权利要求29或30所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中R4a是H，R5是Cl或任选地被氟或甲氧基取代的苯基，并且Z是N或CR7。
38.根据权利要求29或30所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中R4a是H，R5是Cl或任选地被氟或甲氧基取代的苯基，并且Z是N或CR7，其中R7是H。
39.根据权利要求1-25中任一项所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中包括X、Y和Z的环是脂肪族的，其中A、D、E和G均不存在并且其中：
X不存在，是CR4aR4b、NR4a或C＝O
Y是O、CR5R6或NR5
Z是CR7R8，其中R7和R8独立地选自H、卤素、C1-C6烷基、C2-C6烯烃、C2-C6炔烃、C3-C6环烷基、任选取代的C3-C6杂环烷基、C5-C8芳基、C6-C9芳基烷基、C3-C8杂芳基、CN、COORc、CONRcRd、NRcRd，其中Rc和Rd独立地选自H、C1-C6烷基和C3-C6环烷基，或Rc和Rd与它们所附接的杂原子一起形成任选取代的C3-C7杂环，
或其中R7和R8一起形成包括它们所附接的碳的C3-6环烷基或C3-C6杂环烷基；
M不存在，是CH2，或Z和M一起形成任选取代的苯基或吡啶环的一部分；
或M不存在并且Y和Z一起形成稠合苯基或杂芳基环的一部分，
或M和X均不存在并且Z是CHR7，
其中R4a、R4b、R5和R6如权利要求1中所限定。
40.根据权利要求39所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中：
X是CR4aR4b，其中R4a选自H或C1-C6烷基，并且R4b是H；
Y是O或CR5R6，其中R5和R6独立地选自H、卤素、任选取代的C1-C6烷基、任选取代的苯基、苄基、吡啶基、CH2OH、C(O)R’、COR’、C(O)OR’、C(O)NR’R”和SO2R’，其中R’和R”独立地选自甲基、乙基、丙基、丁基、苯基和苄基，或其中R5和R6一起形成包括它们所附接的碳的环己基；
以及Z是CR7R8，其中R7选自H、C1-C6烷基、苯基和C(O)NRcRd，其中Rc和Rd独立地是H、甲基或Rc和Rd与它们所附接的氮一起形成任选取代的吡咯烷，并且其中R8是H。
41.根据权利要求39或40所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中：
R4a和R4b均是H；
Y是O或CR5R6，其中R5是苯基或C(O)NR’R”，其中R’和R”均是甲基，并且R6是H；和
Z是CR7R8，其中R7是苯基或C(O)NRcRd，其中Rc和Rd均是甲基。
42.根据权利要求38所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中Z是CH2并且Y是NR5，任选其中R5是苯基、吡啶基、羧酸丁酯或C(O)CH3，优选地其中R5是苯基。
43.根据权利要求38所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中X是CR4aR4b并且R4a和R4b均是H；Y是O；并且Z是CR7R8，其中R7和R8均是H。
44.根据权利要求38所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中X是CR4aR4b并且R4a和R4b均是H；Y是N以及Z是C并且Y和Z一起形成稠合杂芳基环，任选地一起形成稠合咪唑基环。
45.根据权利要求1-25中任一项所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中包括X、Y和Z的环是脂肪族的，并且其中：
A、D、E和G各自是C或N并且与包括X、Y和Z的脂肪族环形成稠合芳基或杂芳基环，
X是C，
Y是C，
Z是NR7、CR7R8或C＝O，
M不存在或是CR13R14，其中R13和R14独立地选自H和C1-C6烷基，或其中R13和R14与它们所附接的碳一起形成C3-C6环烷基；并且
其中R7和R8如权利要求1中所限定。
46.根据权利要求45所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中M不存在并且Z是CR7R8，其中R7和R8是H。
47.根据权利要求45或46所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中A、D和E是C，并且G是C或N。
48.根据权利要求1-25中任一项所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中：
X是C或N，
Y是C或N，
Z是N、NR7或CR7，其中R7如权利要求1中所限定，
M不存在，是CH或C-CH3，
A是CR9、CHR9、N、NR9、S或O，
D是CR9、CHR9、N或NR9，
G不存在，是CR9、CHR9或N，
其中R9独立地选自H、卤素、C1-C6烷基、CF3和OR*，其中R*选自任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C3-C6环烷基和任选取代的C3-C6杂环烷基，
E是CR10、CHR10、N、NR10、S或O，
其中R10选自H、卤素、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C5-C8芳基、C6-C9芳烷基、C4-C8杂芳基、SRx、ORx、NRxRy和NS(O)(Rx)Ry、S(O)(Rx)NRy，
其中Rx和Ry独立地选自H、C1-C6烷基、CF3、C3-C6环烷基、C5-C8芳基、C6-C9芳烷基、C4-C8杂芳基、COOH、酰氨基、氰基、C2-C6烯烃、C2-C6炔烃，或其中Rx和Ry与它们所附接的氮一起形成任选取代的C4-C6杂环烷基。
49.根据权利要求48所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中
Z是N或CR7，其中R7选自H、C1-C6烷基、CN或C(O)NRcRd，其中Rc和Rd独立地是H、甲基，或与它们所附接的氮一起形成任选取代的哌啶、哌嗪或吗啉环。
50.根据权利要求48或49所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中：
E是CR10、CHR10、N、NR10、S或O，
其中R10选自H、F、Cl、Br、甲基、乙基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、SRx、ORx、NRxRy和NS(O)(CH3)2，
其中Rx和Ry独立地选自H、甲基、乙基、CF3、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、COOH、酰胺基、氰基，或其中Rx和Ry与它们所附接的氮一起形成哌啶、哌嗪或吗啉，任选地被甲基取代。
51.根据权利要求48-50中任一项所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中：
A、M、X和Y是C，E是CR10，
D是N，
G是C或N，并且
Z是C或N，
使得包括A、D、E、G、X、Y、Z和M的环形成稠合芳环体系。
52.根据权利要求48所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中：
M不存在，
A、X和Y是C，D和G是N，E是CR10，并且Z是NR7，使得包括A、D、E、G、X和Y的环形成与包括X、Y和Z的环稠合的芳香环，
其中R7是H或C1-C6烷基，任选地其中R7是甲基。
53.根据权利要求48或50所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中
M、A、X、Y和Z是C，
D和G是N，
E是CR10，
并且包括A、D、E、G、X和Y的环形成与包括X、Y、M和Z的环稠合的芳香环。
54.根据权利要求48-53所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中E是CR10，其中R10是H或SRx，其中Rx是C1-C6烷基，优选地其中Rx是甲基。
55.根据权利要求42所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中：
X、Y、M、A和G是C，Z是N，D是CR9，并且E是CR10，使得包括A、D、E、G、X、Y、Z和M的环形成稠合芳环体系
其中R9是卤素，优选F或Cl，并且R10是H或卤素，任选F或Cl。
56.根据权利要求48所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中：
G不存在，A是C，D和Z是N，并且E是NR10，使得包括A、D、E、X、Y、Z和M的环形成稠合芳环体系，其中R10选自H、乙基、苯基和苄基。
57.根据权利要求1-25中任一项所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中：
X是CR4a，其中R4a如权利要求1中所限定；
Y是CR5，其中R5选自H、卤素、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、任选地被卤素取代的苯基、任选地被卤素取代的苄基、吡啶基、吡唑、咪唑、CH2OH、NR’R”、COR’、C(O)OR’、C(O)NR’R”、OR’，其中R’和R”独立地选自C1-C6烷基和苯基、苄基、吡啶基、吡唑、咪唑；
Z是CR7，其中R7如权利要求1中所限定；
M是CH；
包括X、Y和Z的环是芳香族的，并且A、D、E和G均不存在。
58.根据权利要求57所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中R5选自：任选地被F、OCH3或甲基取代的苯基；任选地被氟取代的甲基；CHF2和CF3。
59.根据权利要求57或58所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中Z是CH。
60.根据权利要求1-26、29、45、48、57和58中任一项所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中：
Z是CR7或CHR7并且R7选自NS(O)RcRd、S(O)(Rc)NRd、SO2Rc和SRc，其中Rc选自H、甲基；
并且其中Rd选自H、C1-C6烷基、C5-C6芳基、C6-C9芳基烷基、C3-C6杂芳基、CN、COOH或COCH3。
61.根据权利要求1-24中任一项所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，
X是CR4aR4b，其中R4a和R4b独立地选自H、任选取代的C1-C6烷基和卤素；或其中R4a和R4b一起形成包括它们所附接的碳的C3-C6环烷基或C3-C6杂环烷基；
Y是O，
Z是CR7R8，其中R7和R8独立地选自H、卤素、氰基、氧代、任选取代的C1-C6烷基、C2-C6烯烃、C2-C6炔烃、C3-C6环烷基、任选取代的C3-C6杂环烷基、C5-C8芳基、C6-C9芳基烷基、C3-C8杂芳基、CN、C(O)ORc、CONRcRd、NRcRd、NS(O)RcRd、S(O)(Rc)NRd、SORc、SO2Rc和SRc，其中Rc和Rd独立地是H、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C5-C6芳基、C6-C9芳基烷基、C3-C6杂芳基、CN、COOH或COCH3，或Rc和Rd与它们所附接的杂原子一起形成任选取代的C3-C7杂环；或其中R7和R8一起形成包括它们所附接的碳的C3-6环烷基或C3-C6杂环烷基；
M是CR13R14，其中R13和R14独立地选自H和C1-C6烷基，或其中R13和R14与它们所附接的碳一起形成C3-C6环烷基或C3-C6杂环烷基；
其中包括XYZM的环是脂肪族的。
62.根据权利要求1-24或61中任一项所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，其中X、Z和M是CH2并且Y是O。
63.根据权利要求1所述的化合物，其选自：
(R)-6-苯基-3-((1-(2-苯基哌嗪-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
(R)-6-苯基-3-((7-(2-苯基哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-9-烯-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
(R,Z)-6-苯基-3-((7-(2-苯基哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-亚基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
6-苯基-3-((7-((R)-4,4,4-三氟-2-甲基丁酰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
4-苯基-1-((7-((R)-4,4,4-三氟-2-甲基丁酰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮
(R)-4-苯基-1-((1-(2-苯基哌嗪-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮
6-苯基-3-((7-((S)-4,4,4-三氟-2-(甲氧基甲基)丁酰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
6-苯基-3-((7-((S)-2-苯基吡咯烷-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
3-((1-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
N-苄基-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-甲酰胺
3-((7-((R)-2-(3,5-二氟苯基)哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-((7-((3R,4R)-1-亚氨基-1-氧化-4-苯基四氢-1H-1λ6-噻吩-3-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-((7-((3S,4S)-1-亚氨基-1-氧化-4-苯基四氢-1H-1λ6-噻吩-3-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
6-苯基-3-(((S)-7-((R)-2-苯基哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
6-苯基-3-(((R)-7-((R)-2-苯基哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
4-苯基-1-(((S)-7-((R)-2-苯基哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮
4-苯基-1-(((R)-7-((R)-2-苯基哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮
1-((1-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
3-((3,3-二甲基-1-((R)-2-苯基哌嗪-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-((1-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
1-((3,3-二甲基-1-((R)-2-苯基哌嗪-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-((1-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
(R)-1-((1-(2-(2,5-二氟苯基)哌嗪-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-(((S)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((S)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮
3-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(二氟甲基)嘧啶-4(3H)-酮
3-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-环丙基嘧啶-4(3H)-酮
3-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
1-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)吡嗪-2(1H)-酮
3-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-甲基嘧啶-4(3H)-酮
2-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮
3-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4(3H)-酮
5-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-1-环丙基-1,5-二氢-4H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-酮
3-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(1-甲基环丙基)嘧啶-4(3H)-酮
3-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6,7-二氟喹唑啉-4(3H)-酮
1-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-(二氟甲基)吡啶-2(1H)-酮
1-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-甲基吡啶-2(1H)-酮
6-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-2-(甲硫基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-5(6H)-酮
4-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)吗啉-3-酮
7-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-7,8-二氢咪唑并[1,2-a]吡嗪-6(5H)-酮
1-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-(三氟甲基)吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-羟基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-(乙氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-(二甲氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-((1-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
3-((10-氨基-7-((R)-4,4,4-三氟-2-甲基丁酰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-((1,1-二氧化硫杂环己烷-3-基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4S)-4-((1,1-二氧化硫杂环己烷-3-基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-羟基-4-甲基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
4-(2-甲氧基苯基)-1-(((R)-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-(邻甲苯基)吡啶-2(1H)-酮
4-(2-氟苯基)-1-(((R)-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-((7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-10-氟-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
1-(((S)-10-甲氧基-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-(2-甲氧基苯基)吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-(邻甲苯基)吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-(2-氟苯基)吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-(乙氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3-氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3-氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(3-氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(3-氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-氯吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2R,4R)-4-氨基-2-乙基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-1-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-3,3-二甲基哌啶-4-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4S)-4-氨基-2-苯基吡咯烷-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-((2,2-二氟乙基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
1-(((R)-3,3-二甲基-1-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-(((S)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-10-甲氧基-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
3-((1-((2S,4R)-2-(3-氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-((1-((2S,4R)-4-(乙氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
(2S,4R)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-羧酸甲酯
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(邻-甲苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-(环丙氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(2,4-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(3-氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(邻甲苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(邻甲苯基)嘧啶-4(3H)-酮
4-氯-1-(((R)-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(邻甲苯基)嘧啶-4(3H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4S,5R)-4-氨基-5-氟-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4S,5S)-4-氨基-5-氟-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(3-氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-(2-甲氧基苯基)吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-(2-甲氧基苯基)吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4S)-4-(甲基氨基)-2-苯基吡咯烷-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮
N-((2S,4R)-1-((R)-10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)乙酰胺
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,4-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,4-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
N-((2S,4R)-1-((R)-10-((2-氧代-4-苯基吡啶-1(2H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)环丙甲酰胺
6-(2-甲氧基苯基)-3-(((R)-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
1-((1-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)哌啶-4-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮
6-氟-3-(((R)-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)喹唑啉-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3-氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2-氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(4-氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮
((2S,4R)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)甘氨酸甲酯
((2S,4R)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-基)甘氨酸钠
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(3,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(3,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
6-(2-氟苯基)-3-(((R)-7-((2S,4R)-4-(甲基氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
6-(2-甲氧基苯基)-3-(((R)-7-((2S,4R)-4-吗啉代-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-((3-甲基氧杂环丁烷-3-基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-4-((3-(氟甲基)氧杂环丁烷-3-基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-(2-甲氧基苯基)吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(邻甲苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((R)-2-(3-氟苯基)哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((R)-2-(2,5-二氟苯基)哌嗪-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,4-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2-氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-(2-甲氧基苯基)吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3-氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(邻甲苯基)嘧啶-4(3H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(4-氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-(2-甲氧基苯基)吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
4-氯-1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-10-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-(2-甲氧基苯基)吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,4-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-(2-甲氧基苯基)-5,6-二氢吡啶-2(1H)-酮
1-(((S)-7-((2S,4R)-2-(2,4-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-(2-甲氧基苯基)-5,6-二氢吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,4-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-2(1H)-酮
2-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,4-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)哒嗪-3(2H)-酮
6-(二氟甲基)-3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,4-二氟苯基)-4-(甲氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,3-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-(2-甲氧基苯基)吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,3-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3,4-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-((2,2-二氟乙基)氨基)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-((3,3-二氟环丁基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,3-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(邻甲苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,4-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(邻甲苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3,4-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3,4-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(邻甲苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,3-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-氟苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,4-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-氟苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3,4-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-氟苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-氟苯基)嘧啶-4(3H)-酮
6-苯基-3-(((R)-7-((2S,4R)-2-苯基-4-((吡啶-2-基甲基)氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-氟苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(邻甲苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-((1-甲基-1H-吡唑-3-基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-(((5-氟吡啶-2-基)甲基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,3-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮
6-苯基-3-(((R)-7-((2S,4R)-2-苯基-4-(苯氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-((1-甲基环丙基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-((2,2-二氟乙基)氨基)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(二氟甲基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮
((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)甘氨酸叔丁酯
N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)乙酰胺
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(乙氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-((2,2-二氟乙基)氨基)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮
((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)甘氨酸
4-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)吗啉-3-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(异丙氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-((2-羟乙基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(乙氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮
6-环丙基-3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)环丙烷甲酰胺
N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)吡啶酰胺
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,3-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮
6-氟-3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3-氟苯基)-4-(甲氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)喹唑啉-4(3H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基-5,6-二氢吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-((嘧啶-2-基甲基)氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-((嘧啶-4-基甲基)氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
6-氟-3-(((R)-7-((2S,4R)-4-吗啉代-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)喹唑啉-4(3H)-酮盐酸盐
N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-((R)-10-((6-氟-4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)乙酰胺
N-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-1-((R)-10-((6-氟-4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)环丙烷甲酰胺
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(二甲氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮
(2S,4R)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-羧酸
(2S,4R)-N-甲基-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-甲酰胺
(2S,4R)-N,N-二甲基-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)-2-苯基哌啶-4-甲酰胺
1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基-1,5-二氢-2H-吡咯-2-酮
4-氯-1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(乙氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-10-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮
1-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(乙氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-4-苯基吡啶-2(1H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-氨基-2-(3,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮盐酸盐
6-环丙基-3-(((R)-7-((2S,4R)-4-((2,2-二氟乙基)氨基)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-((3,3-二氟环丁基)氨基)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(二氟甲基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3,5-二氟苯基)-4-(二甲氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮盐酸盐
4-氯-1-(((R)-7-((2S,4R)-4-((2,2-二氟乙基)氨基)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮
4-氯-1-(((R)-7-((2S,4R)-4-((3,3-二氟环丁基)氨基)-2-(2,5-二氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮
3-(((S)-7-((R)-2-(2,5-二氟苯基)哌嗪-1-羰基)-10-甲氧基-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,5R)-5-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2R,5S)-5-氨基-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(异丙氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮
3-(((S)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(异丙氨基)哌啶-1-羰基)-10-甲氧基-7-氮杂螺[4.5]癸烷-10-基)甲基)-6-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,4-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3,5-二氟苯基)-4-(异丙氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-(((3-甲基吡啶-2-基)甲基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-(((4,6-二甲基嘧啶-2-基)甲基)氨基)-2-苯基哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(3-氟苯基)-4-((2-甲氧基乙基)氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-4-((2-氟乙基)氨基)-2-(3-氟苯基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
3-((2S,4R)-2-(3-氟苯基)-1-((R)-10-((6-氧代-4-苯基嘧啶-1(6H)-基)甲基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-7-羰基)哌啶-4-基)噁唑烷-2-酮
6-氯-3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸烷-10-基)甲基)喹唑啉-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,4R)-2-(2,5-二氟苯基)-4-(甲基氨基)哌啶-1-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)喹唑啉-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,5R)-5-(2,5-二氟苯基)-2-甲基吗啉-4-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-氟喹唑啉-4(3H)-酮
3-(((R)-7-((2S,5R)-5-(2,5-二氟苯基)-2-甲基吗啉-4-羰基)-7-氮杂螺[4.5]癸-10-基)甲基)-6-苯基嘧啶-4(3H)-酮
或其立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐。
64.一种药物组合物，其包含根据权利要求1-63中任一项所述的化合物或其立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体或稀释剂。
65.根据权利要求1-63中任一项所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐或根据权利要求64所述的药物组合物，其用于治疗。
66.根据权利要求1-63中任一项所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐或根据权利要求64所述的药物组合物，其用于治疗肌肉萎缩、肥胖、胰岛素抵抗或II型糖尿病。
67.一种治疗肥胖、胰岛素抵抗、II型糖尿病或肌肉萎缩的方法，其包括向有需要的受试者施用有效量的根据权利要求1-63中任一项所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐或根据权利要求64所述的药物组合物。
68.一种减少受试者的肌肉质量损失的方法，包括向有需要的受试者施用有效量的根据权利要求1-63中任一项所述的化合物、立体异构体、互变异构体、水合物、N-氧化物衍生物或药学上可接受的盐或根据权利要求64所述的药物组合物。
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