CN117017921B - 一种人参皂苷脂质体及其制备方法 - Google Patents
一种人参皂苷脂质体及其制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及脂质体制备技术领域，尤其涉及一种人参皂苷脂质体及其制备方法。脂质体包括下列重量份的组分：人参皂苷1份、大豆卵磷脂5~20份、胆固醇5~20份；所述人参皂苷为芯材，所述大豆卵磷脂和所述胆固醇为壁材。制备方法包括：称取大豆卵磷脂、胆固醇，加入有机溶剂，混匀；将混合物旋转蒸发完全去除有机溶剂，在容器壁上形成均匀的膜；称取人参皂苷溶于磷酸盐缓冲溶液，加入至容器中，旋转蒸发并进行水合处理，直到膜被完全洗脱后，进行冰水浴超声处理；超声后将溶液离心以去除游离的人参皂苷，干燥，得到固态的人参皂苷脂质体。优点在于：脂质体的包封率高，粒径较小，分散性好，具有降血糖的作用。
Description
技术领域
本发明涉及脂质体制备技术领域，尤其涉及一种人参皂苷脂质体及其制备方法。
背景技术
人参为五加科多年生草本植物，是中国最古老的传统药材之一，已经有几千年的应用历史。东北资源尤为丰富。人参中的主要有效成分为人参皂苷。人参皂苷Rh2更可以调节葡萄糖吸收、干预葡萄糖运转和葡萄糖处理，改善胰岛素分泌和结合等方式来改善高血糖现象。因此，人参皂苷Rh2成了食品、医药等领域的研究热点。但是口服人参皂苷Rh2利用度低，药物释放率差等诸多问题亟待解决。
传统直接食用人参皂苷产品的方法，会造成大量的浪费，无法合理、高效应用，无法应准定位。将人参皂苷包埋在脂质体内部，能够保护人参皂苷，脂质体能防止物质降解、增加细胞内吸收、延长人参皂苷释放时间和精准靶向机制优化人参皂苷在应用部位的位置的作用。
脂质体作为一种良好的递送系统，与生物膜类似，具有显著的生物相容性、生物降解性和低毒性等特性。脂质体还具有靶向性、可控性、亲和性、缓释性、无毒性、长效性和稳定性等特点。它得应用前景非常广阔。而目前并没有公开将Rh2包埋于脂质体内部并应用于降血糖、抗氧化等领域的报道。
发明内容
本发明为解决上述问题，提供一种人参皂苷脂质体及其制备方法。
本发明第一目的在于提供一种人参皂苷脂质体，包括下列重量份的组分：人参皂苷1份、大豆卵磷脂5~20份、胆固醇5~20份；所述人参皂苷为芯材，所述大豆卵磷脂和所述胆固醇为壁材。
优选的，人参皂苷为(S)-Rh2和/或(R)-Rh2。
优选的，大豆卵磷脂10~20份、胆固醇10~20份；所述人参皂苷脂质体的包封率大于79%，粒径≤150nm。
优选的，大豆卵磷脂与胆固醇的质量比为1:1；所述人参皂苷脂质体的粒径≤120nm。
本发明第二目的在于提供一种人参皂苷脂质体的制备方法，具体包括如下步骤：
S1、称取大豆卵磷脂5~20份、胆固醇5~20份置于容器中，加入有机溶剂，混匀；将混合物在45~55℃、50~100rpm条件下旋转蒸发完全去除有机溶剂，在容器壁上形成均匀的膜；
S2、称取人参皂苷1份溶于磷酸盐缓冲溶液，加入至步骤S1的容器中，在45~55℃、50~100rpm条件下旋转蒸发并进行水合处理；
S3、水合处理直到容器壁上的膜被完全洗脱后，进行冰水浴超声处理，超声功率200w，超声时间8~15min；
S4、超声后将溶液在5000~8000rpm下离心8~15min以去除游离的人参皂苷，获得人参皂苷脂质体混悬液；
S5、将人参皂苷脂质体混悬液进行干燥，得到固态的人参皂苷脂质体。
优选的，水合处理的时间为25~35min；所述旋转蒸发的温度为50~55℃、60~80rpm。
优选的，步骤S5中的干燥为冷冻干燥或喷雾干燥。
优选的，步骤S1中的有机溶剂选自甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、氯仿中的一种或多种。
优选的，人参皂苷的制备方法包括如下步骤：
S201、取人参药材粉末适量，过40目筛，按人参药材粉末与乙醇溶液的体积质量比30mL：1g的比例加入浓度70%的乙醇溶液，加热回流提取2次，提取温度75~85℃，提取时间50~70min；
S202、过滤、浓缩、干燥，即得人参皂苷提取物；
S203、对人参皂苷提取物进行分离、纯化，得人参皂苷。
本发明第三目的在于提供一种人参皂苷脂质体在制备降血糖产品中的应用，所述降血糖产品为片剂、胶丸、口服液、注射剂、气雾剂或滴剂。
与现有技术相比，本发明能够取得如下有益效果：
（1）薄膜水合超声波结合法制备人参皂苷脂质体，与传统方法相比，制备的人参皂苷脂质体包封率高，人参皂苷被成功包埋于脂质体内部，良好的保护了人参皂苷，减少其被破坏和浪费，分散更加均匀，脂质体的多分散指数PDI＜0.2；
（2）人参皂苷脂质体具有降血糖的作用：高血糖模型大鼠在给予人参皂苷脂质体之后，生存状态良好，血糖值显著下降，表明人参皂苷具有降血糖的作用，可以用于制备降血糖的产品；
（3）抗氧化实验测试表明，人参皂苷脂质体具有清除DPPH·自由基的能力，具有一定的抗氧化活性；清除DPPH·自由基的速度快。
（4）该方法制备工艺简单、操作条件温和。
附图说明
图1是根据本发明实施例提供的人参皂苷脂质体的制备方法流程图。
图2是根据本发明实施例提供的DPPH标准曲线。
图3是根据本发明实施例提供的人参皂苷脂质体透射电镜分析结果；（A）实施例1制备的人参皂苷脂质体；（B）实施例2制备的人参皂苷脂质体；（C）实施例3制备的人参皂苷脂质体。
图4是根据本发明实施例提供的人参皂苷脂质体傅里叶红外光谱图。
具体实施方式
在下文中，将参考附图描述本发明的实施例。在下面的描述中，相同的模块使用相同的附图标记表示。在相同的附图标记的情况下，它们的名称和功能也相同。因此，将不重复其详细描述。
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及具体实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，而不构成对本发明的限制。
本发明涉及的材料与仪器：粒径检测仪Mastersizer2000(英国马尔文公司，230型精密pH计(美国奥立龙)，TU-8010紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)。
本发明所述的人参皂苷可以购买或采用现有技术中已知的任意方法制备。(S)-Rh2人参皂苷和(R)-Rh2人参皂苷的成品购买自上海源叶生物科技有限公司（分析标准品，HPLC≥98%）。自行制备人参皂苷的人参原材料购买来源：吉林省白山市人参批发市场。
在本发明具体的实施例中，使用的人参皂苷Rh2通过下述方法制备：取人参药材粉末适量，过40目筛，按液固比30:1(mL:g)加入浓度70%的乙醇溶液，加热回流提取2次，提取温度80℃，提取时间60min；过滤、浓缩、干燥，即得人参皂苷提取物；对人参皂苷提取物进行分离、纯化，得人参皂苷Rh2。
本发明提供一种人参皂苷脂质体，包括下列重量份的组分：人参皂苷1份、大豆卵磷脂5~20份、胆固醇5~20份；所述人参皂苷为芯材，所述大豆卵磷脂和所述胆固醇为壁材；所述人参皂苷脂质体的包封率大于79%；
在具体的实施例中，所述人参皂苷1份、大豆卵磷脂20份、胆固醇20份；或所述人参皂苷1份、大豆卵磷脂15份、胆固醇15份；或所述人参皂苷1份、大豆卵磷脂10份、胆固醇10份；所述人参皂苷1份、大豆卵磷脂15份、胆固醇15份；
在具体的实施例中，人参皂苷为(S)-Rh2和/或(R)-Rh2。
实施例1
一种人参皂苷脂质体，包括下列重量份的组分：人参皂苷1份、大豆卵磷脂20份、胆固醇20份；所述人参皂苷为芯材，所述大豆卵磷脂和所述胆固醇为壁材；所述人参皂苷为(S)-Rh2和(R)-Rh2；具体制备方法包括如下步骤：
S1、称取大豆卵磷脂2g、胆固醇2g，加入10mL甲醇溶剂，混匀；将混合物倒入圆底烧瓶中，在50℃、80rpm条件下旋转蒸发（约5min）完全去除甲醇溶剂，在圆底烧瓶的瓶壁上形成均匀的膜；
S2、称取人参皂苷0.1g和50ml磷酸盐缓冲溶液（pH=6.6），加入至步骤S1的圆底烧瓶中，在50℃下旋转蒸发并进行水合处理，时间30min，旋转蒸发的转速为80rpm；所述人参皂苷的制备方法包括如下步骤：
S201、取人参药材粉末适量，过40目筛，按液固比30:1(mL:g)加入浓度70%的乙醇溶液，加热回流提取2次，提取温度80℃，提取时间60min；
S202、过滤、浓缩、干燥，即得人参皂苷提取物；
S203、对人参皂苷提取物进行分离、纯化，得人参皂苷Rh2，其中包括(S)-Rh2和(R)-Rh2；
S3、水合处理直到圆底烧瓶的瓶壁上的膜被完全洗脱后，进行冰水浴超声处理(200w)，时间10min；
S4、超声后将溶液转移到超滤离心管中，并在6000rpm下离心10min以去除游离的人参皂苷Rh2，获得人参皂苷脂质体混悬液；
S5、将人参皂苷脂质体混悬液冷冻干燥，得到固态的人参皂苷脂质体。
稳定性测试：人参皂苷脂质体混悬液在5℃下放置10天，每2天取1ml脂质体悬浮液，进行离心后去除上清液，观察没有沉淀析出；测定沉淀中人参皂苷的含量，得出脂质体包封率。应用超滤离心法测定人参皂苷脂质体的包封率为90.12%，粒径为100-120nm之间，根据粒度分析仪测得脂质体的平均粒径为113.45nm；脂质体的多分散指数PDI＜0.2。
实施例2
一种人参皂苷脂质体，包括下列重量份的组分：人参皂苷1份、大豆卵磷脂15份、胆固醇15份；所述人参皂苷为芯材，所述大豆卵磷脂和所述胆固醇为壁材；所述人参皂苷为(S)-Rh2和(R)-Rh2；具体制备方法包括如下步骤：
S1、称取大豆卵磷脂1.5g、胆固醇1.5g，加入10mL乙醚溶剂，混匀；将混合物倒入圆底烧瓶中，在45℃、100rpm条件下旋转蒸发（约5min）完全去除乙醚溶剂，在圆底烧瓶的瓶壁上形成均匀的膜；
S2、称取人参皂苷0.1g和50ml磷酸盐缓冲溶液（pH=6.6），加入至步骤S1的圆底烧瓶中，在55℃下旋转蒸发并进行水合处理，时间25min，旋转蒸发的转速为60rpm；所述人参皂苷的制备方法包括如下步骤：
S201、取人参药材粉末适量，过40目筛，按液固比30:1(mL:g)加入浓度70%的乙醇溶液，加热回流提取2次，提取温度80℃，提取时间60min；
S202、过滤、浓缩、干燥，即得人参皂苷提取物；
S203、对人参皂苷提取物进行分离、纯化，得人参皂苷Rh2，其中包括(S)-Rh2和(R)-Rh2；
S3、水合处理直到圆底烧瓶的瓶壁上的膜被完全洗脱后，进行冰水浴超声处理(200w)，时间10min；
S4、超声后将溶液转移到超滤离心管中，并在8000rpm下离心6min以去除游离的人参皂苷Rh2，获得人参皂苷脂质体混悬液；
S5、将人参皂苷脂质体混悬液冷冻干燥，得到固态的人参皂苷脂质体。
稳定性测试：人参皂苷脂质体混悬液在5℃下放置10天，每2天取1ml脂质体悬浮液，进行离心后去除上清液，观察没有沉淀析出；测定沉淀中人参皂苷的含量，得出脂质体包封率。应用超滤离心法测定人参皂苷脂质体的包封率为91.05%，粒径为100-120nm之间，根据粒度分析仪测得脂质体的平均粒径为114.32nm；脂质体的多分散指数PDI＜0.2。
实施例3
一种人参皂苷脂质体，包括下列重量份的组分：人参皂苷1份、大豆卵磷脂10份、胆固醇10份；所述人参皂苷为芯材，所述大豆卵磷脂和所述胆固醇为壁材；所述人参皂苷为(S)-Rh2和(R)-Rh2；具体制备方法包括如下步骤：
S1、称取大豆卵磷脂1g、胆固醇1g，加入10mL甲醇溶剂，混匀；将混合物倒入圆底烧瓶中，在55℃、60rpm条件下旋转蒸发（约3min）完全去除甲醇溶剂，在圆底烧瓶的瓶壁上形成均匀的膜；
S2、称取人参皂苷0.1g和50ml磷酸盐缓冲溶液（pH=7），加入至步骤S1的圆底烧瓶中，在55℃下旋转蒸发并进行水合处理，时间25min，旋转蒸发的转速为80rpm；所述人参皂苷为购买所得；
S4、超声后将溶液转移到超滤离心管中，并在6000rpm下离心10min以去除游离的人参皂苷Rh2，获得人参皂苷脂质体混悬液；
S5、将人参皂苷脂质体混悬液喷雾干燥，得到固态的人参皂苷脂质体。
稳定性测试：人参皂苷脂质体混悬液在5℃下放置10天，每2天取1ml脂质体悬浮液，进行离心后去除上清液，观察没有沉淀析出；测定沉淀中人参皂苷的含量，得出脂质体包封率。应用超滤离心法测定人参皂苷脂质体的包封率为90.83%，粒径为100-120nm之间，根据粒度分析仪测得脂质体的平均粒径为113.47nm；脂质体的多分散指数PDI＜0.2。
对比例1
一种人参皂苷脂质体，包括下列重量份的组分：人参皂苷1份、大豆卵磷脂15份、胆固醇15份；所述人参皂苷为芯材，所述大豆卵磷脂和所述胆固醇为壁材；所述人参皂苷为(S)-Rh2和(R)-Rh2；具体制备方法（薄膜水合法）包括如下步骤：
S1、称取大豆卵磷脂1.5g、胆固醇1.5g，加入10mL乙醚溶剂，混匀；将混合物倒入圆底烧瓶中，在45℃、100rpm条件下旋转蒸发（约5min）完全去除乙醚溶剂，在圆底烧瓶的瓶壁上形成均匀的膜；
S2、称取人参皂苷0.1g，溶于5ml磷酸盐缓冲液（pH=6.6）中，制得溶液；所述人参皂苷为购买所得；
S3、将溶液加入至步骤S1的圆底烧瓶中，在30℃下放置30min；补加pH=6.6的磷酸盐缓冲溶液至体积为300ml，30℃下搅拌1.5h，得人参皂苷脂质体混悬液；每毫升混悬液约含有固体脂质体27.6mg；
S4、将人参皂苷脂质体混悬液冷冻干燥，得到固态的人参皂苷脂质体。
将人参皂苷脂质体混悬液5℃放置10天，没有沉淀析出。应用超滤离心法测定包封率为82.83%。粒径为110-140nm 之间，平均粒径为123.56nm；脂质体的多分散指数PDI＜0.3。
对比例2
一种人参皂苷脂质体，包括下列重量份的组分：人参皂苷1份、大豆卵磷脂15份、胆固醇15份；所述人参皂苷为芯材，所述大豆卵磷脂和所述胆固醇为壁材；所述人参皂苷为(S)-Rh2和(R)-Rh2；具体制备方法（逆向蒸发法）包括如下步骤：
S1、称取大豆卵磷脂1.5g、胆固醇1.5g，加入10mL乙醚溶剂，混匀，加入5ml溶解有0.1g人参皂苷的磷酸盐缓冲液（pH6.8）；
S2、对步骤S1所得溶液进行间歇的超声处理，时间为2min（每处理0.5min，间歇0.5min），旋转蒸发至凝胶状，再通过涡旋振荡使凝胶转相；
S3、继续旋转蒸发除去乙醚，通过超速离心（10000r.min-1、离心60min）除去游离的人参皂苷；
S4、取已经包封好的人参皂苷脂质体沉淀，加磷酸盐稀释（pH6.6）（稀释至300ml体积），得人参皂苷脂质体混悬液；冷冻干燥，得到固态的人参皂苷脂质体。
每毫升混悬液含有固体脂质体约12.6mg，将人参皂苷脂质体混悬液在5℃下放置10天，没有沉淀析出。应用超滤离心法测定包封率为79.52%。粒径为120-140nm之间，平均粒径为128.32nm；脂质体的多分散指数PDI＜0.3。
从对比例1和对比例2的结果可以看出，对比例1中单独采用薄膜水合法，没有结合超声，制备的人参皂苷脂质体包封率低，粒径较大；对比例2中采用逆向蒸发法制备的人参皂苷脂质体，与实施例1-3中采用薄膜水合超声波结合法制备的人参皂苷脂质体相比，同样是包封率低，粒径较大。对比例1和对比例2制备的人参皂苷脂质体技术效果没有本发明实施例1-3技术效果好。
实施例4
一种人参皂苷脂质体缓释片剂的制备，包括如下步骤：
S1、按实施例1的方法制备人参皂苷脂质体混悬液，加入1.8g乳糖、1.6g羟丙基甲基纤维素、0.04g预胶化淀粉，混匀；
S2、加入20ml乙醇（作为润湿剂）制成软材，用16目尼龙筛网制粒，在40℃下干燥0.5h；
S3、用16目尼龙筛网整粒，加0.02g硬脂酸镁混匀，压片，即得人参皂苷脂质体缓释片剂。
按中国药典2010年版溶出度测定法第一法测定，结果显示该缓释片剂2h释放度为30.5%，5h释放度为81%，8h释放度为89%，12h释放度为91%，18h和24h释放为度93%，具有缓释释放的特性。
实施例5
人参皂苷脂质体的降血糖效果实验，具体方法与结果如下：
一、实验材料
实验样品：按实施例1、实施例2和实施例3方法制备的人参皂苷脂质体。
实验动物：C57BL/6J小鼠购自沈阳长生生物有限公司，（批准号：SCXK（辽）2020—0001），涉及小鼠的程序严格按照国际动物护理标准进行，并经由吉林农业大学动物保护机构和使用委员会批准。实验动物使用3R原则给予人道关怀。实验操作根据《实验动物饲养管理与使用指南》的建议进行；20只，雌雄各半，随机分组，每组5只。
二、实验方法
在实验环境下C57BL/6J小鼠在正常喂养1周后禁食过夜。随机选择5只小鼠作为正常组继续饲喂基础饲料；其余小鼠喂高脂高糖饲料4周后，腹腔注射链脲佐菌素3d，期间正常组小鼠注射等体积生理盐水，每只小鼠在注射后禁食2h，以确保建模成功。注射链脲佐菌素3d后，从尾尖采血测空腹血糖，血糖值≥11.1表示造模成功。2型糖尿病大鼠模型（T2DM大鼠）造模成功后，实验组进行随机分组为三组，继续给予高脂高糖饲料，同时将实施例1、实施例2和实施例3方法制备的人参皂苷脂质体以喂食注入，连续喂食3天，并定期称量体重，于第3天喂食后1h取尾血，测定血糖值，每组取平均值，记录实验结果。
三、实验结果
表1的实验结果显示，2型糖尿病大鼠模型在给予人参皂苷脂质体之后，生存状态良好，血糖值显著下降，甚至接近高血糖模型建立之前的正常水平，表明人参皂苷具有降血糖的作用，并且本发明的人参皂苷脂质体的使用效果随给剂量增大而增强，可以用于制备降血糖的药物。
表1 人参皂苷脂质体对T2DM大鼠模型空腹血糖值的影响
注：给予剂量以混悬液中的固体脂质体的量计算。
实施例6
人参皂苷脂质体的体外抗氧化实验，具体方法与结果如下：
一、实验材料
待测样品：按实施例1、实施例2和实施例3方法制备的人参皂苷脂质体。
二、实验方法
DPPH法测定人参提取物皂苷的抗氧化、清除自由基的原理：二苯代苦味酰基自由基（DPPH·）是一种很稳定的以氮为中心的自由基，若受试物能清除它，则表示受试物具有降低羟自由基、烷自由基或过氧自由基等自由基的有效浓度，打断脂质过氧化链反应的作用。DPPH·有个单电子，光谱扫描显示在516nm处有强吸收，其乙醇水溶液呈深紫色，加入受试物后，通过在516nm测定其清除DPPH·自由基而引起吸光度减少的情况可以反映受试物的抗氧化活性，计算其清除自由基的能力。
1、标准曲线的绘制
利用紫外分光光度法测定：精密称取10mg DPPH·用无水乙醇溶解并定容于100ml容量瓶中，作为标准储备液，则该DPPH·标准储备液的质量浓度为100μg/ml。分别取1、2、4、6、8、10ml标准储备液在50mL棕色容量瓶中50ml刻度处定容，产生标准系列溶液，其质量浓度依次为：0.2、0.4、0.6、0.8、1.0g/L。在516nm处测定上述标准系列溶液的吸光度，绘制标准曲线（如图2所示）。得到其线性回归方程为：Y=1.1166X+0.1277，相关系数r2=0.9987，表明DPPH·浓度与其吸光度呈极显著正相关关系。
2、自由基残留率的测定
取适量精制的人参皂苷，以无水乙醇为溶剂，配制不同浓度的人参皂苷乙醇溶液（1μg/ml和8μg/ml），分别取0.5ml样液，加入4.5ml质量浓度为20μg/ml DPPH·标准液，摇匀。516nm 处动态测定混合物在不同时间的吸光度，根据标准曲线得到 DPPH·残留量。以不同浓度样液测得的结果得到人参皂苷清除自由基能力与皂苷浓度的关系。
分别取0.5ml按实施例1、实施例2和实施例3方法制备的人参皂苷脂质体混悬液样品，加入4.5ml质量浓度为20μg/ml DPPH·标准液，摇匀；在516nm处动态测定混合物在不同时间的吸光度，根据标准曲线（图2）得到DPPH·残留量。以不同人参皂苷脂质体样液测得的结果得到人参皂苷脂质体清除自由基能力与组分的关系。
3、人参皂苷浓度与清除自由基效果的关系
分别将不同浓度的人参皂苷（1μg/ml和8μg/ml）以及不同组分人参皂苷脂质体混悬液样品与DPPH·作用，在516nm处测定混合物在不同时间的吸光度，根据标准曲线换算出不同时间时DPPH·的残留质量浓度，继而由下列公式计算出DPPH·的残留率。
式中：为某一时刻DPPH·的质量浓度；/>为DPPH·的起始质量浓度。
各样品的抗氧化性如下表2所示：
表2 各样品在不同时间下的DPPH·残留率变化结果
试验结果表明，人参皂苷和人参皂苷脂质体混悬液都具有清除DPPH·自由基的能力，具有一定的抗氧化活性，而且，随抗氧化成分量的增加，清除自由基能力也增强。不同的是，清除DPPH·自由基的速度有差异。人参皂苷在含量相对比较高时清除速度也相对较快。
实施例1-3制备的人参皂苷Rh2脂质体(Rh2-Lip)经过透射电镜分析(图2)可知，人参皂苷Rh2脂质体在500nm的投射电子显微镜下可以观察到该芯材人参皂苷成功包埋于脂质体体分子内部，且大小均匀、分散性良好。
图3示出了人参皂苷脂质体（Rh2-Lip）的傅里叶红外光谱图，其中Rh2-Lip代表本发明制备的人参皂苷脂质体，Rh2代表人参皂苷Rh2。从图3可以看出芯材人参皂苷Rh2被成功包裹于脂质体内部，人参皂苷Rh2在1018cm-1处的特征峰在Rh2-Lip的图谱中消失。
综上，本发明所述人参皂苷脂质体的制备主要包括：(1)薄膜水合超声波结合法制备人参皂苷脂质体(Rh2-Lip)，与传统方法相比，此方法制备的人参皂苷Rh2脂质体包封率高，分散更加均匀；(2)Rh2-Lip具有缓释、降血糖和抗氧化的作用。本发明采用薄膜水合超声波结合的方法制备人参皂苷Rh2脂质体，人参皂苷Rh2被成功包埋于脂质体内部，良好的保护了人参皂苷Rh2，减少其被破坏和浪费，同时提高了脂质体的包封率，超声波的作用使人参皂苷脂质体的分散性良好，PDI＜0.2。将人参皂苷脂质体制备成缓释片剂，结果显示该缓释片剂2h释放度30.5%，5h释放度81%，8h释放度89%，12h释放度91%，18h和24h释放度93%，具有缓释释放的特性。降血糖实验测试结果表明，高血糖模型大鼠在给予人参皂苷脂质体之后，生存状态良好，血糖值显著下降，表明人参皂苷具有降血糖的作用，并且本发明的人参皂苷脂质体可以用于制备降血糖的药物。抗氧化实验测试表明，人参皂苷和人参皂苷脂质体混悬液（磷脂复合物）都具有清除DPPH·自由基的能力，具有一定的抗氧化活性；但是，清除DPPH·自由基的速度有差异；人参皂苷在含量相对比较高时清除速度也相对较快。本发明所制得的人参皂苷脂质体不仅可以用于对人参皂苷Rh2的脂质体制备，同时还可应用于作为其它中药材活性成分的递送系统。该方法制备工艺简单、操作条件温和。
应该理解，可以使用上面所示的各种形式的流程，重新排序、增加或删除步骤。例如，本发明公开中记载的各步骤可以并行地执行也可以顺序地执行也可以不同的次序执行，只要能够实现本发明公开的技术方案所期望的结果，本文在此不进行限制。
上述具体实施方式，并不构成对本发明保护范围的限制。本领域技术人员应该明白的是，根据设计要求和其他因素，可以进行各种修改、组合、子组合和替代。任何在本发明的精神和原则之内所作的修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明保护范围之内。
Claims (7)
1.一种人参皂苷脂质体，其特征在于，包括下列重量份的组分：人参皂苷1份、大豆卵磷脂5~20份、胆固醇5~20份；所述大豆卵磷脂与胆固醇的质量比为1:1；所述人参皂苷为(S)-Rh2和(R)-Rh2；所述人参皂苷为芯材，所述大豆卵磷脂和所述胆固醇为壁材；所述人参皂苷脂质体的包封率大于79%，粒径≤120nm；
制备方法具体包括如下步骤：
S1、称取大豆卵磷脂5~20份、胆固醇5~20份置于容器中，加入有机溶剂，混匀；将混合物在45~55℃、50~100rpm条件下旋转蒸发完全去除有机溶剂，在容器壁上形成均匀的膜；
S2、称取人参皂苷1份溶于磷酸盐缓冲溶液，加入至步骤S1的容器中，在45~55℃、50~100rpm条件下旋转蒸发并进行水合处理；
S3、水合处理直到容器壁上的膜被完全洗脱后，进行冰水浴超声处理，超声功率200w，超声时间8~15min；
S4、超声后将溶液在5000~8000rpm下离心8~15min以去除游离的人参皂苷，获得人参皂苷脂质体混悬液；
S5、将人参皂苷脂质体混悬液进行干燥，得到固态的人参皂苷脂质体。
2.根据权利要求1所述的一种人参皂苷脂质体，其特征在于：所述大豆卵磷脂10~20份、胆固醇10~20份。
3.根据权利要求2所述的一种人参皂苷脂质体，其特征在于：所述水合处理的时间为25~35min；所述旋转蒸发的温度为50~55℃、60~80rpm。
4.根据权利要求3所述的一种人参皂苷脂质体，其特征在于：所述步骤S5中的干燥为冷冻干燥或喷雾干燥。
5.根据权利要求4所述的一种人参皂苷脂质体，其特征在于：所述步骤S1中的有机溶剂选自甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、氯仿中的一种或多种。
6.根据权利要求5所述的一种人参皂苷脂质体，其特征在于，所述人参皂苷的制备方法包括如下步骤：
S201、取人参药材粉末适量，过40目筛，按乙醇溶液与人参药材粉末的体积质量比30mL：1g的比例加入浓度70%的乙醇溶液，加热回流提取2次，提取温度75~85℃，提取时间50~70min；
S202、过滤、浓缩、干燥，即得人参皂苷提取物；
S203、对人参皂苷提取物进行分离、纯化，得人参皂苷。
7.权利要求1所述的一种人参皂苷脂质体在制备降血糖产品中的应用，其特征在于：所述降血糖产品为片剂、胶丸、口服液、注射剂、气雾剂或滴剂。
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