CN117017551A - 一种兔食管胸膜瘘动物疾病模型及其构建方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于动物疾病模型技术领域，特别涉及一种兔食管胸膜瘘动物疾病模型，并进一步公开其构建方法。本发明所述兔食管胸膜瘘动物疾病模型的构建方法，取公母磁铁中的公磁体置于兔右侧胸腔，并将母磁体置入兔食管，控制所述公母磁铁对合于兔心脏下缘，利用所述公母磁铁对兔食管和胸膜的压榨作用成功构建食管胸膜瘘动物模型；在将公母磁体置入合适位置后，只需等待磁力压榨自行形成瘘口，期间实验动物管理方便，模型制备成功率高；不仅兔模型创伤小、应用性高，且具有操作简单的优势。

Description

一种兔食管胸膜瘘动物疾病模型及其构建方法

技术领域

本发明属于动物疾病模型技术领域，特别涉及一种兔食管胸膜瘘动物疾病模型，并进一步公开其构建方法。

背景技术

消化道瘘是普外科常见的并发症之一，可导致严重的并发症，易导致死亡，其患者病死率高、生存期短、生活质量差，危害较为严重。以食管胸膜瘘为例，其主要见于近端胃癌手术后，因手术损伤或食道吻合口处感染或局部组织缺血坏死等出现吻合口瘘累及胸腔。部分食管胸膜瘘还可因食道肿瘤侵犯胸膜穿孔或胸腔手术医源性损伤和放疗引发。因食管胸膜瘘形成后多伴有脓胸，其症状与胸腔感染形成的脓胸症状一致，患者可出现吞咽困难、胸痛、发热、呼吸困难、胸腔积液、营养不良等临床表现。

目前，临床上治疗食管胸膜瘘主要以脓肿引流、胸腔脓肿干净后的手术修复瘘管以及采用覆膜支架修补等处理为主，但其治疗效果尚欠佳，死亡率高达50％以上。而且因食管胸膜瘘罕见且死亡率高，一旦形成处理较为棘手，本领域期待开发更为有效的治疗方式。

但是，目前尚没有可供研究的食管胸膜瘘动物疾病模型，严重影响了对食管胸膜瘘的深入研究。这主要是因为，现有技术中消化道瘘动物模型手术建模过程，需要破坏气管食管间隙的正常解剖结构，二期修补手术时瘘口周围往往粘连严重、组织感染水肿明显、实验动物对二期修补手术耐受性差，与临床上获得性气管食管瘘病例之间差异较大。本领域期待开发合适的食管胸膜瘘动物疾病模型，为食管胸膜瘘疾病研究提供科研基础。

发明内容

为此，本发明所要解决的技术问题在于提供一种兔食管胸膜瘘动物疾病模型，所述模型为人类食管胸膜瘘疾病研究提供良好的研究型动物疾病模型；

本发明所要解决的第二个技术问题在于提供上述兔食管胸膜瘘动物疾病模型的构建方法，所述方法利用磁压榨技术成功构建食管胸膜瘘动物模型；

本发明所要解决的第三个技术问题在于提供上述兔食管胸膜瘘动物疾病模型的应用。

为解决上述技术问题，本发明所述的一种兔食管胸膜瘘动物疾病模型的构建方法，包括如下步骤：

(1)取待处理的兔子进行消毒及术前预处理，备用；

(2)将公母磁铁中的公磁体置于兔右侧胸腔，并将母磁体置入兔食管，控制所述公母磁铁对合于兔心脏下缘，利用所述公母磁铁对兔食管和胸膜进行压榨作用；

(3)术后形成瘘口及胸腔脓肿后，取出所述公母磁铁，经缝合、包扎、喂养，即得。

具体的，所述兔食管胸膜瘘动物疾病模型的构建方法，所述步骤(1)中，所述消毒步骤包括：将兔呈仰卧位固定四肢于手术台，剔除右侧胸壁毛发，使用络合碘及酒精消毒后，铺无菌孔巾。

具体的，所述兔食管胸膜瘘动物疾病模型的构建方法，所述步骤(1)中，所述术前预处理步骤包括：以兔腋前线及剑突水平线的交点为所述公母磁铁操作点，取标记点上方1±0.2cm处肋间为胸腔引流管穿刺点，于两标记点分别各取1±0.2cm大小切口，分离胸大肌及肋间肌肉直至胸膜层，于穿刺点两侧各穿上针线以备穿刺后打结封闭胸腔，给予一小弯钳夹住注射器塑料管头于胸腔引流管穿刺点将其送入胸腔内，送入2±0.2cm后打结固定塑料管道。

具体的，所述兔食管胸膜瘘动物疾病模型的构建方法，所述步骤(2)中，所述公母磁铁包括汝铁硼磁铁。

本发明所述模型构建方法中，所述公母磁铁的性状不限，但优选规则性状的磁铁，例如、块状、圆柱状等结构。

优选的，所述公母磁铁中，所述公磁体优选直径4-5mm，厚度2-3mm的扁圆柱状汝铁硼磁铁；

优选的，所述公母磁铁中，所述母磁体优选直径6-7mm，厚度2-3mm的扁圆柱状汝铁硼磁铁。

具体的，所述兔食管胸膜瘘动物疾病模型的构建方法，所述公磁体的置入步骤包括：以兔嘴至兔剑突距离为所述公磁体的置入深度，注射器注入15-20ml空气，使右侧肺叶塌陷位移至胸腔背侧，创造操作空间，将带有所述公磁体的携磁置入杆置入兔右侧胸腔。

具体的，所述兔食管胸膜瘘动物疾病模型的构建方法，所述母磁体的置入步骤包括：调整家兔头至合适位置，将带有所述母磁体的携磁置入杆从家兔口腔置入至目标深度，将所述携磁置入杆垂直于胸腔表面向胸腔内送入。

具体的，所述兔食管胸膜瘘动物疾病模型的构建方法，所述步骤(2)中，还包括调整所述公母磁体的位置使二者对合的步骤，以及，确保所述公母磁体对合后，通过胸腔引流管抽出兔右侧胸腔空气的步骤。

具体的，所述兔食管胸膜瘘动物疾病模型的构建方法，所述步骤(3)中还包括：

在所述公母磁体脱落于兔体内后，使用磁力探条置入家兔食管，通过磁体对磁力探条的牵引力探查磁体位置及对合情况的步骤；和/或，

在术后给予兔流质饮食进行喂养的步骤。

具体的，所述兔食管胸膜瘘动物疾病模型的构建方法，所述构建方法采用建模套件进行构建。

本发明还公开了由所述方法构建得到的兔食管胸膜瘘动物疾病模型。

本发明还公开了所述兔食管胸膜瘘动物疾病模型在食管胸膜瘘疾病非诊断研究中的应用。

本发明还公开了一种可用于进行上述兔食管胸膜瘘动物疾病模型构建的建模套件。

本发明提供一种食管胸膜瘘动物模型建模套件，包括：

携磁置入条，其上可拆卸连接有第一磁力件；

携磁置入杆，其上可拆卸连接有第二磁力件，第一磁力件适于与第二磁力件磁力连接；

第一磁力件与第二磁力件磁吸连接后，第一磁力件从携磁置入条上脱落，第二磁力件从携磁置入杆上脱落。

可选地，携磁置入条的头部设置有母磁体槽，第一磁力件安装在母磁体槽内。

可选地，母磁体槽设于携磁置入条头部的侧面。

可选地，携磁置入条内设置有导丝孔，导丝孔沿携磁置入条的长度方向延伸，导丝孔内安装有亲磁导丝，亲磁导丝适于与第一磁力件磁吸配合。

可选地，亲磁导丝尾部延伸至导丝孔外设置。

可选地，携磁置入条上安装有刻度条，刻度条沿携磁置入条的长度方向延伸。

可选地，携磁置入杆的头部设置有公磁体槽，第二磁力件安装在公磁体槽内

可选地，携磁置入杆侧壁上安装有亲磁粒，亲磁粒靠近携磁置入杆的头部设置，亲磁粒与第二磁力件之间磁吸配合。

可选地，还包括亲磁探条，用于在第一磁力件与第二磁力件磁吸连接后，确认第一磁力件和第二磁力件是否在试验动物体内对合。

可选地，亲磁探条包括探条本体和软胶头，探条本体至少一端包裹设置有软胶头。

本发明所述兔食管胸膜瘘动物疾病模型的构建方法，利用磁压榨技术成功构建食管胸膜瘘动物模型，在将公母磁体置入合适位置后，只需等待磁力压榨自行形成瘘口，完成动物疾病模型的构建。本发明所述兔食管胸膜瘘动物疾病模型的构建方法，不仅操作方便，且期间实验动物管理方便，模型制备成功率高；不仅兔模型创伤小、应用性高，且具有操作简单的优势，是目前报道的唯一能成功构建食管胸膜瘘动物疾病模型的方法，对于该类疾病的深入研究具体积极的意义。

本发明所述兔食管胸膜瘘动物疾病模型，是目前已报道的唯一成功构建的兔食管胸膜瘘动物疾病模型，实现了该类疾病动物模型从无到有的质变。本发明所述兔食管胸膜瘘动物疾病模型，可用于食管胸膜瘘疾病的研究，也可在此研究基础上评估不同封堵材料、手术方式以及各类治疗方法的效果，为人类食管胸膜瘘疾病研究提供良好的研究型动物疾病模型，具有较高的临床应用价值。

本发明所述兔食管胸膜瘘动物疾病模型的构建方法，利用提供的食管胸膜瘘动物模型建模套件进行模型构建，所述建模套件包括：携磁置入条，其上可拆卸连接有第一磁力件；携磁置入杆，其上可拆卸连接有第二磁力件，第一磁力件适于与第二磁力件磁力连接；第一磁力件与第二磁力件磁吸连接后，第一磁力件从携磁置入条上脱落，第二磁力件从携磁置入杆上脱落。

本发明所述兔食管胸膜瘘动物疾病模型的构建方法，进行食管胸膜瘘动物模型建模时，携磁置入条携带第一磁力件运动至试验动物体内食管内预设深度处，携磁置入杆携带第二磁力件置于试验动物体内食管外侧，并使第一磁力件与第二磁力件磁吸连接；第一磁力件与第二磁力件磁吸连接后，第一磁力件从携磁置入条上脱落，第二磁力件从携磁置入杆上脱落，第一磁力件与第二磁力件自动对合。术后5～7天形成食管胸膜瘘，术后2周～1月形成胸腔脓肿，第一磁力件与第二磁力件进入食道后随大便排出。通过设置第一磁力件和第二磁力件在动物模型体内自动形成食管胸膜瘘，极大的简化了建模的复杂性，手术过程对试验动物造成的创伤小，动物耐受好，成模稳定，成模率高，建模机制与食管胸膜瘘临床疾病发病机制相近，可较好的模拟临床实际情况。

本发明所述兔食管胸膜瘘动物疾病模型的构建方法，提供的食管胸膜瘘动物模型建模套件，携磁置入条内设置有导丝孔，导丝孔沿携磁置入条的长度方向延伸，导丝孔内安装有亲磁导丝，亲磁导丝适于与第一磁力件磁吸配合。在将携磁置入条置入到试验动物体内时，利用亲磁导丝与第一磁力件磁吸配合，使得第一磁力件稳定设置在携磁置入条上，防止第一磁力件在携磁置入条运动过程中脱落，在第一磁力件与第二磁力件配合连接后，将亲磁导丝从导丝孔中撤出，第一磁力件即可从携磁置入条上脱落，并与第二磁力件稳定配合连接。

本发明所述兔食管胸膜瘘动物疾病模型的构建方法，提供的食管胸膜瘘动物模型建模套件，携磁置入杆侧壁上安装有亲磁粒，亲磁粒靠近携磁置入杆的头部设置，亲磁粒与第二磁力件之间磁吸配合。通过设置亲磁粒与第二磁力件磁力配合吸引，使得携磁置入杆在试验动物体内运动时，第二磁力件能够稳定随携磁置入杆运动，防止第二磁力件从携磁置入杆上脱落，在第一磁力件与第二磁力件配合连接后，保证第二磁力件与亲磁粒之间的吸引力小于第一磁力件与第二磁力件之间的吸引力，即可使第二磁力件自动从携磁置入杆上脱落与第一磁力件配合连接。

本发明所述兔食管胸膜瘘动物疾病模型的构建方法，提供的食管胸膜瘘动物模型建模套件，还包括亲磁探条，用于在第一磁力件与第二磁力件磁吸连接后，确认第一磁力件和第二磁力件是否在试验动物体内对合，若第一磁力件和第二磁力件未准确对合，可能会造成第一磁力件和第二磁力件在试验动物体内分离，造成建模失败，需要对第一磁力件和第二磁力件重新安装，保证第一磁力件和第二磁力件在试验动物体内能够准确对合，稳定连接，使得第一磁力件和第二磁力件能够准确固定在试验动物的预设位置，进而控制食管胸膜瘘在动物体内的形成位置，准确模拟临床实际情况。

附图说明

为了使本发明的内容更容易被清楚的理解，下面根据本发明的具体实施例并结合附图，对本发明作进一步详细的说明，其中，

图1为本发明提供的携磁置入条的主视图；

图2为本发明提供的携磁置入杆的主视图；

图3为本发明提供的亲磁探条的主视图；

图4为本发明提供的携磁置入条的侧视图；

图5为本发明提供的携磁置入条的结构示意图；

图6为本发明提供的携磁置入条的俯视图；

图7为图6所示的携磁置入条的A-A方向的剖视图；

图8为本发明提供的携磁置入杆的立体图；

图9为本发明提供的携磁置入杆的俯视图；

图10为图9所示的携磁置入杆的B-B方向的剖视图；

图11为图9所示的携磁置入杆的C-C方向的剖视图；

图12为本发明实施例2中所述模型构建方法的操作步骤示意图；其中，A：黄色椭圆形区域为磁压榨主要操作区间；B：将连接注射器的塑料导管置入家兔胸腔；C：肺部塌陷后置入携磁置入条及携磁置入杆；D：公母磁体完成对合；E：撤离导丝及置入杆；F：术后5-7天磁体自动脱落排出；

图13为本发明实施例2中所述模型构建方法的操作步骤实操图；其中，A：建立胸腔闭式引流；B：将携磁导丝置入家兔食管，兔头需保持仰头位；C：术后伤口创面图，两切口均予6-0单股丝线连续缝合；

图14为实施例3中构建模型的X片结果；其中，A为胸腔正侧位X片；B为胸腔两侧位X片；

图15为实施例3中构建模型术后20天过量麻醉处死后尸体解剖CT结果，可见胸腔脓肿形成；其中，A可见脓肿形成于膈肌及心脏之间，符合磁压榨部位；B可见切开脓肿见脓肿壁较厚，内有脓性分泌物及食物残渣；C、D可见脓肿紧贴食管形成；

图16为实施例3中术后20天1号兔瘘口处病理切片标本HE X5染色结果，可见瘘口处鳞状上皮细胞向瘘口内生长；

附图标记说明：1-携磁置入条；11-置入条弧形头部；111-母磁体槽；112-弧形凸起；113-第一磁力件；12-置入条体部；13-置入条尾部；14-刻度条；15-导丝孔；16-亲磁导丝；2-携磁置入杆；21-置入杆头部；211-公磁体槽；212-第二磁力件；213-磁粒安装孔；214-亲磁粒；22-置入杆体部；3-亲磁探条；31-探条本体；32-软胶头。

具体实施方式

下面将结合附图对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

在本发明的描述中，需要说明的是，术语“中心”、“上”、“下”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。此外，术语“第一”、“第二”、“第三”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性。

在本发明的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。

此外，下面所描述的本发明不同实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互结合。

实施例1

本实施例提供一种可用于构建所需兔食管胸膜瘘动物模型的建模套件。

图1-图11所示为本实施例提供的一种食管胸膜瘘动物模型建模套件，包括携磁置入条1、携磁置入杆2和亲磁探条3。

携磁置入条1上可拆卸连接有第一磁力件113，携磁置入杆2上可拆卸连接有第二磁力件212，第一磁力件113适于与第二磁力件212磁力连接。第一磁力件113与第二磁力件212磁吸连接后，第一磁力件113从携磁置入条1上脱落，第二磁力件212从携磁置入杆2上脱落。亲磁探条3用于在第一磁力件113与第二磁力件212磁吸连接后，确认第一磁力件113和第二磁力件212是否在试验动物体内对合。其中第一磁力件113和第二磁力件212可以均为磁铁等永磁体，还可以第一磁力件113和第二磁力件212其中一个为永磁体，另一为铁、钴、镍等材质或合金制成的能够被磁铁吸引的磁力块。

携磁置入条1的头部设置有母磁体槽111，第一磁力件113安装在母磁体槽111内。母磁体槽111设于携磁置入条1头部的侧面。携磁置入条1内设置有导丝孔15，导丝孔15沿携磁置入条1的长度方向延伸，导丝孔15内安装有亲磁导丝16，亲磁导丝16适于与第一磁力件113磁吸配合。亲磁导丝16尾部延伸至导丝孔15外设置。在携磁置入条1上安装有刻度条14，刻度条14沿携磁置入条1的长度方向延伸。具体的，携磁置入条1分为置入条弧形头部11、置入条体部12和置入条尾部13，携磁置入条1内设有导丝孔15，导丝孔15内设有亲磁导丝16。置入条弧形头部11设有朝向一侧的弧形凸起112，弧形凸起112上设置有母磁体槽111，母磁体槽111内安装有第一磁力件113，母磁体受到亲磁导丝16吸引，固定位于母磁体槽111内，母磁体槽111深度与母磁体厚度相同，导丝孔15头端与母磁体槽111头端平齐。携磁置入条1上设有刻度条14用于辨别置入深度，刻度条14以母磁体槽111中央为零点向置入条尾部13以1cm为间距递增设置刻度线。携磁置入条1整体长度不小于24cm，宽度为4～8mm，厚度不超过4mm，亲磁导丝16尾部超出导丝孔15长度至少5cm。

携磁置入杆2的头部设置有公磁体槽211，第二磁力件212安装在公磁体槽211内。携磁置入杆2侧壁上设置有磁粒安装孔213，磁粒安装孔213内安装有亲磁粒214，亲磁粒214靠近携磁置入杆2的头部设置，亲磁粒214与第二磁力件212之间磁吸配合。具体的，携磁置入杆2分为置入杆头部21和置入杆体部22。第二磁力件212受到亲磁粒214吸引，固定位于公磁体槽211内，公磁体槽211深度与第二磁力件212厚度一致。亲磁粒214位于磁粒安装孔213内，亲磁粒214直径与磁粒安装孔213直径一致，磁粒安装孔213距离公磁体槽1mm。携磁置入杆2整体长度为20cm～25cm。

亲磁探条3包括探条本体31和软胶头32，探条本体31一端包裹设置有软胶头32。在其他实施例中，探条本体31的两端均包裹设置有软胶头32。亲磁探条3长度不小于24cm，直径为1mm～2mm。

第二磁力件212的形状与公磁体槽211相对应，第一磁力件113形状与母磁体槽111形状相对应，第一磁力件113和第二磁力件212的形状为扁圆柱形但不仅限于扁圆柱形，还可以为立方体型，棱柱型等能够在试验动物体内的预定位置稳定设置的形状。

在利用本实施例中提供的食管胸膜瘘动物模型建模套件对试验动物进行手术时，本实施例中的试验动物选用新西兰大白兔。待麻醉成功后，将新西兰大白兔呈仰卧位固定四肢于手术台，剔除右侧胸壁毛发，使用络合碘及酒精消毒，铺无菌孔巾，以腋前线及剑突水平线的交点为置入杆操作点，取标记点上方1cm处肋间为胸腔闭式引流穿刺点。于两标记点涂抹适量利多卡因软膏并分别各取1cm大小切口，分离胸大肌及肋间肌肉直至胸膜层，对于明显出血处予6-0单股线缝扎止血后于穿刺点两侧各穿上针线以备穿刺后打结封闭胸腔。予以一小弯钳夹住注射器带侧孔的塑料管头将其送入胸腔内，送入2cm后打结固定塑料管道。将携磁置入条1置于家兔正上方进行置入长度估计(经测量，3kg家兔食管磁体置入深度多在15～17cm)。将携磁置入杆2置入胸腔后，利用注射器向胸腔注入15～20ml空气，使右侧肺叶塌陷位移至胸腔背侧，创造操作空间。调整家兔头至合适位置后将携磁置入条1从家兔口腔置入至目标深度，将携磁置入杆2垂直于胸腔表面向胸腔内送入，第二磁力件212与第一磁力件113对合时，因第一磁力件113与第二磁力件212相互吸引，携磁置入杆2将受到短暂牵引，不断调整携磁置入杆2位置直至感受到短暂牵引，退出携磁置入杆2查看第二磁力件212是否仍然在携磁置入杆2前端。如第二磁力件212仍在携磁置入杆2上，可适当调整携磁置入条1位置后反复尝试。如携磁置入杆2上未见磁体，则退出携磁置入条1观察食管侧第一磁力件113是否从导丝端脱离。确保双侧磁体均已脱落后(即第二磁力件212与第一磁力件113在对应位置完成吸附)，撤出携磁置入杆2及携磁置入条1，结扎操作孔处预留的缝线以密封胸腔，将亲磁探条3置入家兔食管，探查磁体位置及对合情况，确保第一磁力件113在食管内位置较为固定后，撤出亲磁探条3。抽出家兔胸腔内游离气体后拔除塑料管，缝合加固胸大肌。缝合表皮。包扎伤口，停止麻醉，待家兔意识恢复后，放于饲养笼内流质饮食。术后2日对家兔牛奶内混入少量左氧氟沙星分散片剂并持续流质喂养。

本实施例提供的食管胸膜瘘动物模型建模套件可协助术者进行兔食管胸膜瘘动物疾病模型建模，可实现兔食管及胸膜侧1cm距离内磁体的自动对合，对目标位置进行磁压榨，过程中不需X线透视辅助操作，操作门槛低，对场地要求相对低。手术过程仅需对兔右侧胸腔进行穿刺，在目前兔食管胸膜瘘动物疾病模型中，创伤最小且兔术后耐受情况好，不易出现术后动物模型死亡。构建的食管胸膜瘘动物疾病模型成模后可有较长的生存时间(大于20天)，可供研究人员在此期间进行更多的试验性、治疗性操作，评估药物、器械、材料的相应效果。手术过程中还可通过亲磁探条3判断对合后食道内磁体位置，如对合不成功，可吸出食道内磁体后，再次操作。建模机制与食管胸膜瘘临床疾病发病机制相近，可较好的模拟临床实际情况。

实施例2模型构建

术前准备

选取新西兰大白兔5只，雌雄不限，体重在2.8-3.2kg，分别编号1-5，使用牛奶流质饮食3日后确保家兔耐受良好、无稀便、精神状态及活力无明显减弱方可开始实验。同时，量取每只家兔仰卧抬颈位门齿至剑突距离以得到携带磁体的探条置入深度。

磁体选择

本实施例中，所述公母磁铁选用汝铁硼磁铁，其中，食管侧选用N35圆形直径6mm、厚2mm钕铁硼磁铁，胸膜侧选用N45圆形直径4mm、厚2mm钕铁硼磁铁。

手术平台

手术平台主要包括异氟烷麻麻醉机1台，家兔专用麻醉面罩1个，携磁食管置入条1根，磁体置入杆1根，实验家兔固定台1个，实验家兔手术台1个，动物体重测量仪1台，无菌布单，无菌纱布，6-0单股带线圆针，20ml注射器，三通阀，2mm塑料管，普外手术器械套1套。

麻醉要求

该手术操作创伤较小，但由于操作需对家兔食管内置入携磁置入条，易刺激家兔吞咽反射产生头部及下颌活动，固麻醉不宜过浅。麻醉深度控制标准：家兔嘴唇及耳朵红润，以浅快呼吸为主，呼吸频率规律，无角膜反射，四肢肌力及肌张力弱，疼痛反射迟缓(切皮及有创操作时家兔无活动)。本实施例选取麻醉诱导时间为6.0±1.2min，(n＝5)。

手术过程

本实施例利用前述实施例1中建模套件进行所述模型的构建。

如图12-13所示的操作过程，待麻醉成功后，将新西兰大白兔呈仰卧位固定四肢于手术台，剔除右侧胸壁毛发，使用络合碘及酒精消毒，铺无菌孔巾，以腋前线及剑突水平线的交点为置入杆操作点，取标记点上方1cm处肋间为胸腔闭式引流穿刺点。

于两标记点涂抹适量利多卡因软膏并分别各取1cm大小切口，分离胸大肌及肋间肌肉直至胸膜层，对于明显出血处予6-0单股线缝扎止血后于穿刺点两侧各穿上针线以备穿刺后打结封闭胸腔。

予以一小弯钳夹住注射器带侧孔的塑料管头将其送入胸腔内，送入2cm后打结固定塑料管道。将带有公磁体的携磁置入条置于家兔正上方进行置入长度估计(经测量，3kg家兔食管磁体置入深度多在15-17cm)。将上述携磁置入杆置入胸腔后，注射器注入15-20ml空气，使右侧肺叶塌陷位移至胸腔背侧，创造操作空间，将携磁置入杆置入兔右侧胸腔。

调整家兔头至合适位置后将带有母磁体的携磁置入条从家兔口腔置入至目标深度，将携磁置入杆垂直于胸腔表面向胸腔内送入，不断调整置入杆位置直至感受到短暂牵引，退出磁体置入杆查看磁体是否仍然在置入杆前端。如磁体仍在置入杆上，可适当调整携磁置入条位置后反复尝试。如置入杆上未见磁体，则退出置入条观察食管侧磁体是否从导丝端脱离。术中一般不会出现置入杆磁体脱离后置入条端磁体未脱落的情况，但可出现置入条端磁体脱落，置入杆磁体未脱落情况。该情况的出现考虑主要与置入条放入时磁体意外脱落有关。

确保双侧磁体均已脱落后，撤出置入杆及置入条，结扎操作孔处预留的缝线以密封胸腔，将磁力探条置入家兔食管，探查磁体位置及对合情况，确保母磁体在食管内位置较为固定后，撤出磁力探条。予抽出家兔胸腔内游离气体后拔除塑料管，缝合加固胸大肌。

缝合表皮，包扎伤口，停止麻醉，待家兔意识恢复后，放于饲养笼内流质饮食。术后2日对家兔牛奶内混入少量左氧氟沙星分散片剂并持续流质喂养。

由附图13所示实操过程示意图可以看出，本发明所述模型构建方法具有微创性。

实施例3模型验证

取上述实施例2构建的模型进行验证，以食管镜观察食管侧瘘口，可见，本实施例方案成功构建所需模型结构。

分别对上述编号1-5的兔模型进行食管胸膜瘘动物模型数据测试，结果见下表1。

表1食管胸膜瘘动物模型数据

注：手术时长不包括麻醉时间。

对上述实施例2构建的1号兔模型进行X片检测，结果如附图14所示，其中，图14中A为胸腔正侧位X片可见磁体对合良好，未出现移位、脱落等情况；图14中B可见双侧胸膈角明显，未见明显胸腔积液样改变。

对上述实施例2构建的1号兔模型在术后20天取1号兔给予过量麻醉处死，并取尸体解剖进行CT检测，结果如附图15所示，其中，图15中A可见脓肿形成于膈肌及心脏之间，符合磁压榨部位；图15中B可见切开脓肿见脓肿壁较厚，内有脓性分泌物及食物残渣；图15中C和D可见脓肿紧贴食管形成。

对上述实施例2构建的兔模型在术后20天取1号兔在瘘口处的病理切片标本进行HE X5染色，结果见附图16所示，可见瘘口处鳞状上皮细胞向瘘口内生长。

综上，本发明实施例2中方案成功构建食管胸膜瘘动物模型。

本发明所述兔食管胸膜瘘动物模型，可用于验证治疗性药物(抗生素、生肌膏、其它辅助用药)对于食管胸膜瘘疗效；或者用于验证不同治疗手段(胸腔脓肿穿刺引流、胸腔灌洗、瘘口封堵材料、各类手术等)对于食管胸膜瘘的疗效等操作。

显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。

Claims (10)

1.一种兔食管胸膜瘘动物疾病模型的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)取待处理的兔子进行消毒及术前预处理，备用；

(2)将公母磁铁中的公磁体置于兔右侧胸腔，并将母磁体置入兔食管，控制所述公母磁铁对合于兔心脏下缘，利用所述公母磁铁对兔食管和胸膜进行压榨作用；

(3)术后形成瘘口及胸腔脓肿后，取出所述公母磁铁，经缝合、包扎、喂养，即得。

2.根据权利要求1所述兔食管胸膜瘘动物疾病模型的构建方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述术前预处理步骤包括：以兔腋前线及剑突水平线的交点为所述公母磁铁操作点，取标记点上方1±0.2cm处肋间为胸腔引流管穿刺点，于两标记点分别各取1±0.2cm大小切口，分离胸大肌及肋间肌肉直至胸膜层，于穿刺点两侧各穿上针线以备穿刺后打结封闭胸腔，给予一小弯钳夹住注射器管头于胸腔引流管穿刺点将其送入胸腔内，送入2±0.2cm后打结固定管道。

3.根据权利要求1或2所述兔食管胸膜瘘动物疾病模型的构建方法，其特征在于，所述步骤(2)中，所述公母磁体包括汝铁硼磁铁。

4.根据权利要求3所述兔食管胸膜瘘动物疾病模型的构建方法，其特征在于，所述公磁体的置入步骤包括：以兔嘴至兔剑突距离为所述公磁体的置入深度，注入15-20ml空气，使右侧肺叶塌陷位移至胸腔背侧，创造操作空间，将所述公磁体置入兔右侧胸腔。

5.根据权利要求3或4所述兔食管胸膜瘘动物疾病模型的构建方法，其特征在于，所述母磁体的置入步骤包括：调整家兔头至合适位置，将所述母磁体从家兔口腔置入至目标深度。

6.根据权利要求3-5任一项所述兔食管胸膜瘘动物疾病模型的构建方法，其特征在于，所述步骤(2)中，还包括调整所述公母磁体的位置使二者对合的步骤，以及，确保所述公母磁体对合后，通过胸腔引流管抽出兔右侧胸腔空气的步骤。

7.根据权利要求1-6任一项所述兔食管胸膜瘘动物疾病模型的构建方法，其特征在于，所述步骤(3)中还包括在所述公母磁体脱落于兔体内后，探查磁体位置及对合情况的步骤；和/或，在术后给予兔流质饮食进行喂养的步骤。

8.根据权利要求1-7任一项所述兔食管胸膜瘘动物疾病模型的构建方法，其特征在于，所述构建方法采用建模套件进行构建；

所述建模套件包括：

携磁置入条(1)，其上可拆卸连接有第一磁力件(113)；

携磁置入杆(2)，其上可拆卸连接有第二磁力件(212)，所述第一磁力件(113)适于与所述第二磁力件(212)磁力连接；

所述第一磁力件(113)与所述第二磁力件(212)磁吸连接后，所述第一磁力件(113)从所述携磁置入条(1)上脱落，所述第二磁力件(212)从所述携磁置入杆(2)上脱落。

9.由权利要求1-8任一项所述方法构建得到的兔食管胸膜瘘动物疾病模型。

10.权利要求9所述兔食管胸膜瘘动物疾病模型在食管胸膜瘘疾病非诊断研究中的应用。