CN1169679A - 抑制与舒缓激肽有关疾病的方法 - Google Patents

Abstract

一种抑制与舒缓激肽过剩有关的生理状态的方法,包括给需要所述治疗的病人施用有效量的式Ⅰ的化合物或其药学上适用的盐或溶剂化物,其中R¹和R³独立地为氢原子、－CH₃、(a)或(b)。其中Ar是任意取代的苯基;R²选自吡咯烷子基、六亚甲基亚氨基和哌啶子基。

Description

抑制与舒缓激肽有关疾病的方法

发明背景

舒缓激肽是氨基酸序列如下的九肽：

Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg此后将该序列称为SEQ ID NO：1。该肽所属的激肽家族中还包括缓激肽-(或赖氨酰舒缓激肽)和蛋氨酰-赖氨酰-舒缓激肽。前者的氨基酸序列为

Lys-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg此后将该序列称为SEQ ID NO：2。后者的氨基酸序列为

Met-Lys-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg此后将该序列称为SEQ ID NO：3。这些激肽通过血浆和组织激肽释放酶的作用由血浆前体(激肽原)释放以调节基本的生理功能〔若要了解舒缓激肽受体拮抗剂的治疗前景综述，请参见J.N.Sharma，GeneralPharmacology 24：267-274(1993)〕。

舒缓激肽调节疼痛、血管渗透性、炎症、胃肠道功能及血管和其它组织中平滑肌的紧张性。舒缓激肽是机体对外伤及损伤反应的关键调节物之一。在对有害试剂、组织损伤或循环激酶缺乏的反应中，舒缓激肽释放水平的异常增高，能引起包括类风湿性关节炎直至哮喘这种大范围的严重病理症状。

舒缓激肽的受体存在于神经系统、上皮、平滑肌及成纤维细胞中。在每种组织类型中舒缓激肽激发特异的反应，包括神经递质释放、肌肉收缩、上皮液体分泌以及刺激细胞生长。这些生理反应的初始作用发生在细胞上的舒缓激肽受体位点。

舒缓激肽可激活神经元并导致神经递质释放。它可激活磷脂酶C和A₂，导致若干生物活性中间体的产生。

舒缓激肽受体是G蛋白偶合受体，它能激活磷脂酶C或磷脂酶A₂并增加肌醇三磷酸酯、二酰基甘油及花生四烯酸的合成。Olsen等，Journal of Bioloical Chemistry，263：18030-18035(1988)。G蛋白是一类膜蛋白，只有在结合鸟苷三磷酸酯后才被激活。活化的G蛋白依次激活膜内表面上的扩增引物酶；此酶再将前体分子转化为第二信使。

根据激动剂(激肽)及拮抗剂(激肽类似物)对不同药物制剂的相对强度，将舒缓激肽受体分为B₁和B₂。R.J.Vavrek and J.M.Stewart，Peptides，6：161-164(1985)。在离体组织培养和抗原引发的关节炎过程中B₁受体再在血管平滑肌中产生。J.Bouthiller等，BritishJournal of Pharmacology 92：257-264(1987)。

现在仍存在对非肽基舒缓激肽受体拮抗剂的需求。含有胍部分的药剂是已知的。参见，例如，美国专利5059624和5028613。这两项专利中描述了由某种海生海绵中分离、纯化的一系列吡咯并喹啉生物碱。于1994年2月22日发布的美国专利5288725描述了用作舒缓激肽受体拮抗剂的一系列吡咯并喹啉胍化合物。于1993年5月18日发布的美国专利5212182描述了一系列用作舒缓激肽受体拮抗剂具有止痛作用的喹啉基和萘基苯甲酰胺类化合物及苄胺类化合物。于1993年6月1日发布的美国专利5216165描述了一系列通过其作为舒缓激肽受体拮抗剂性质而用作止痛剂的N-取代的氨基喹啉类化合物。

仍存在对用作舒缓激肽受体拮抗剂的安全、有效的化合物的不断需求。本发明提供了一系列新的可通过多种途径(包括口服和非肠道)给药的这样的化合物。

本发明提供了抑制与舒缓激肽过剩有关的生理紊乱的方法，包括给需要所述治疗的病人使用治疗有效量的式I的化合物及其药学上适用的盐和溶剂化物：

其中R¹和R³独立地为氢、-CH₃、

或 其中Ar是任意取代的苯基；R²选自吡咯烷子基(pyrrolidino)、六亚甲基亚氨基和哌啶子基。

本发明发现，式I的一组经选择的2-苯基-芳酰基苯并噻吩类化合物(苯并噻吩类化合物)可用于抑制与舒缓激肽过剩有关的生理状态。

本发明提供的治疗及预防方法是通过给需要所述治疗的病人使用能有效抑制与舒缓激肽过剩有关的生理状态或其症状的一定量的式I的化合物及其药学上适用的盐或溶剂化物。

术语“抑制”包括其通常可接受的意义，包括阻止、防止、遏制和减缓、终止或逆转疾病的进程、严重程度或者所发生的症状。因此该方法包括治疗和预防给药，如果需要的话。

雷洛昔芬是本发明优选的化合物，它是R¹和R³为氢原子而R²为哌啶基的式I化合物的盐酸盐。

通常可以将本发明化合物与普通的赋形剂、稀释剂或载体一起配制，并压制成片剂、或者配制成方便口服给药的酏剂或溶液剂；或者通过肌内或静脉途径给药。该化合物可以经皮给药，并且可以配制成缓释剂型等。

本发明方法所使用的化合物可以按已有的和类似的方法(例如US4,133,814、4,418,068和4,380,635中所述的方法，这些专利引入本文作为参考)制备。一般，该方法用具有6-羟基和2-(4-羟苯基)基团的苯并[b]噻吩开始。将起始化合物保护、烷基化并脱保护，得到式I化合物。在上述美国专利中以及该申请的实施例中提供了这些化合物的制备实例。术语“任意取代的苯基”包括苯基和由C₁-C₆烷基、C₁-C₄烷氧基、羟基、硝基、氯、氟或三(氯或氟)甲基取代一次或二次的苯基。

用于本发明方法的化合物可以与多种有机和无机酸、碱生成药学上适用的酸和碱加成盐，药学上适用的酸和碱加成盐包括通常用于药物化学中的生理上适用的盐。所述盐也包括在本发明的范围内。用于生成上述盐的典型的无机酸包括盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硝酸、硫酸、磷酸、连二磷酸等。可以应用由有机酸生成的盐，有机酸包括脂肪族一或二羧酸、苯基取代的链烷酸、羟基链烷酸和羟基链烷二酸，芳香族酸、脂肪族和芳香族磺酸。因此所述药学适用的盐包括乙酸盐、苯基乙酸盐、三氟乙酸盐、丙烯酸盐、抗坏血酸盐、苯甲酸盐、氯代苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐、甲氧基苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、邻-乙酰氧基苯甲酸盐、萘-2-苯甲酸盐、溴化物、异丁酸盐、苯基丁酸盐、β-羟基丁酸盐、丁炔-1，4-二酸盐、己炔-1，4-二酸盐、癸酸盐、辛酸盐、氯化物、肉桂酸盐、柠檬酸盐、甲酸盐、富马酸盐、羟基乙酸盐、庚酸盐、马尿酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、羟基马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、烟酸盐、异烟酸盐、硝酸盐、草酸盐、邻苯二甲酸盐、对苯二甲酸盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、丙炔酸盐、丙酸盐、苯基丙酸盐、水杨酸盐、癸二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、焦硫酸盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、磺酸盐、苯磺酸盐、对溴苯磺酸盐、氯代苯磺酸盐、乙烷磺酸盐、2-羟基乙烷磺酸盐、甲磺酸盐、萘-1-磺酸盐、萘-2-磺酸盐、对甲苯磺酸盐、二甲苯磺酸盐、酒石酸盐等。优选的盐是盐酸盐。

药学上适用的酸加成盐一般可通过式I化合物与等摩尔或过量的酸反应制得。反应物通常于互溶剂如乙醚或苯中进行反应。盐一般在约1小时～10天内从溶液中析出，并且可以经过滤分离，或者按常规方法除去溶剂。

通常用于生成盐的碱包括氢氧化铵，碱金属和碱土金属氢氧化物，碳酸盐及脂肪族的伯、仲及叔胺，脂肪族二胺。用于制备加成盐的碱尤其包括氢氧化铵、碳酸钾、甲胺、乙二胺、二乙胺和环己胺。

与化合物(由该化合物衍生得到盐)相比较，药学上适用的盐通常有提高溶解度的性质，因此通常更适用于配制成液剂或乳剂。

药物制剂可按本技术领域已知的方法制备。例如，将化合物与常用的赋形剂、稀释剂或载体一起配制，并可配制成片剂、胶囊剂、混悬液剂、粉剂等。适用于上述制剂的赋形剂、稀释剂和载体包括：填充剂和增量剂如淀粉、糖、甘露糖醇以及硅衍生物；粘合剂如羧甲基纤维素和其他的纤维素衍生物，藻酸盐、明胶和聚乙烯吡咯烷酮；湿润剂如甘油；崩解剂如碳酸钙和碳酸氢钠；阻滞溶解剂如石蜡；吸收促进剂如季铵化合物；表面活性剂如鲸蜡醇、单硬脂酸甘油酯；吸附载体如高岭土和膨润剂；以及润滑剂如滑石、硬脂酸钙和硬脂酸镁以及固体聚乙二醇。

本发明的化合物也可以配制成方便口服给药的酏剂或溶液剂，或者配制成适于非经胃肠道(如经肌内、皮下或静脉途径)给药的溶液剂。另外，本发明化合物还非常适用于配制成缓释剂型等。缓释制剂可以这样构成，即使得它们仅仅或最好在肠道的特定部位，可能在一定时间内释放活性成分。包衣、包膜和保护基质可以由例如聚合物质或蜡制成。

经常希望或需要将药物组合物直接或间接引入脑中。直接引入技术通常包括将药物释放导管置于宿主的脑室系统中以绕开血-脑屏障。1991年4月30日发布的在美国专利5,011,472中，描述了一种用于将生物因子运送至特定解剖区域的这种可植入的给药系统。

根据本发明，为抑制与舒缓激肽过剩有关的生理状态或其症状而使用的式I化合物的具体剂量取决于由主治医师确定的病症严重程度、给药途径及相关因素。通常可接受的并有效的日剂量为约0.1至约1000毫克/天，更典型的是约50至200毫克/天。可每天一次或三次给需要所述治疗的患者施用此剂量，或者根据需要增加给药次数，以有效治疗或预防一种或多种疾病或症状。

如施用带有碱性基团(如哌啶子基环)的药物时惯用其酸加成盐一样，通常优选施用酸加成盐形式的式I化合物。为此目的，以下剂型是适用的。

                           制剂

在以下制剂中，“活性成分”是指式I化合物。

制剂1：明胶胶囊剂

硬明胶胶囊剂按下面方法制备

成分                                               量(mg/胶囊)

活性成分                                           0.1-1000

淀粉，NF                                           0-650

可流动的淀粉粉末                                   0-650

聚硅氧烷流体(350厘沲)                              0-15

将上述成分混合，通过美国45号筛并将其装入硬明胶胶囊。

已经制备的化合物雷洛昔芬的具体胶囊剂实施例包括下列制剂：

制剂2：雷洛昔芬胶囊剂

成分                               量(mg/胶囊)

雷洛昔芬                               1

淀粉，NF                               112

可流动的淀粉粉末                       225.3

聚硅氧烷流体(350厘沲)                  1.7

制剂3：雷洛昔芬胶囊剂

成分                               量(mg/胶囊)

雷洛昔芬                               5

淀粉，NF                               108

可流动的淀粉粉末                       225.3

聚硅氧烷流体(350厘沲)                  1.7

制剂4：雷洛昔芬胶囊剂

成分                               量(mg/胶囊)

雷洛昔芬                               10

淀粉，NF                               103

可流动的淀粉粉末                       225.3

聚硅氧烷流体(350厘沲)                  1.7

制剂5：雷洛昔芬胶囊剂

成分                           量(mg/胶囊)

雷洛昔芬                            50

淀粉，NF                            150

可流动的淀粉粉末                    397

聚硅氧烷流体(350厘沲)               3.0

按照合理的改变，还可以将上述具体的制剂进行变化。

用下述成分制备片剂：

制剂6：片剂

成分                           量(mg/片)

活性成分                       0.1-1000

微晶纤维素                     0-650

煅制的二氧化硅                 0-650

硬脂酸                         0-15

将上述成分混合并压制成片剂。

另外，每片含0.1～1000mg活性成分的片剂可以按下法制备：

制剂7：片剂

成分                              量(mg/片)

活性成分                          0.1-1000

淀粉                              45

微晶纤维素                        35

聚乙烯吡咯烷酮(为10％的水溶液)    4

羧甲基纤维素钠                    4.5

硬脂酸镁                          0.5

滑石                              1

将活性成分、淀粉和纤维素通过美国45号筛，并充分地混合。使聚乙烯吡咯烷酮溶液与得到的粉末混合，然后再通过美国14号筛。得到的颗粒于50～60℃干燥并通过美国18号筛。将预先通过美国60号筛的羧甲基纤维素钠、硬脂酸镁和滑石加到颗粒中，在混合以后将其在压片机上压制成片剂。

每5ml剂量含0.1-1000mg药物的混悬液剂可按下示制备：

制剂8：混悬液剂

成分                            量(mg/5ml)

活性成分                        0.1-1000mg

羧甲基纤维素钠                  50mg

糖浆                            1.25mg

苯甲酸溶液                      0.10ml

调味剂                          适量

着色剂                          适量

纯水             加至           5ml

将活性成分通过美国45号筛并与羧甲基纤维素钠和糖浆混合得到平滑的膏状物。将苯甲酸溶液、调味剂和着色剂用一定量的水稀释并边搅拌边加入其中，然后加入足够的水至所需的体积。

用初步筛选试验评价本发明化合物的生物活性，该试验能快速、准确地检测被试化合物与已知舒缓激肽受体位点的结合。用于评价舒缓激肽受体拮抗剂的试验是本领域熟知的。参见，例如，1992年11月10日发布的美国专利5162497、1993年5月8日发布的美国专利5212182、1993年6月1日发布的美国专利5216165及1994年2月22日发布的美国专利5288725，在此将所有这些文献引为参考。也可参见Ransom等，Biochemical Pharmacology，43：1823(1992)。豚鼠舒缓激肽结合试验

将豚鼠人工宰杀并取出肠。将这些肠用0.9％盐水彻底洗涤、拭干并称重。将组织在至少四倍体积的50mM Tris缓中液(pH7.7)中均化并在15000g下离心30分钟。

然后通过在相继地混悬于50mM Tris(pH7.7)中，然后离心，将这些丸状物洗涤三次。将最终的丸状物再悬浮于足够量的50mM Tris(pH7.7)中以得到浓度为每4毫升缓冲液中含湿重1克的组织。将这些样品冷冻保存于-80℃。

在结合试验中，将190-195μl试验缓冲液〔50mM Tris(pH7.7)、1mM 1，10-菲咯啉和10μM普鲁默抑制剂〕与200μl组织均浆及5-10μl被试样品混合，按所列顺序加入。然后将此试验混合物彻底混合。在1μM未标记的舒缓激肽存在下测定非特异结合。

向此试验混合物中加入100μl(1nM)³H-标记舒缓激肽。然后在室温孵育约90分钟进行结合反应，再通过GF/B玻璃纤维过滤器过滤，此过滤器在0.3％聚乙二胺中预浸湿至少1小时。用冷的50mM Tris(pH7.7)(3×3ml)洗涤过滤器，然后用闪烁计数器计数。

按上述制备的很多化合物具有显著的舒缓激肽受体拮抗剂活性。因为式I的化合物是有效的舒缓激肽受体拮抗剂，这些化合物可用于治疗以出现舒缓激肽过剩为特征的多种临床症状。因此，本发明提供了治疗或预防与舒缓激肽过剩有关的生理紊乱的方法。该方法包括给需要上述治疗的哺乳动物施用有效量的式I的化合物或其药学上适用的盐、溶剂化物或前体药物。术语“与舒缓激肽过剩有关的生理紊乱”包括与舒缓激肽受体被异常刺激有关的紊乱，不论病灶部位存在的舒缓激肽的实际数量。

这些生理紊乱可能包括鼻炎、哮喘、肠激惹综合症、溃疡性结肠炎、疼痛或感受伤害、炎症、牙周炎、类风湿性关节炎及骨髓炎。已知舒缓激肽在循环体内平衡中也扮演重要角色，因此，舒缓激肽受体拮抗剂可以用于血压调节及治疗或预防高血压或低血压。舒缓激肽受体拮抗剂也可用于治疗或预防由细菌细胞壁产生的内毒素与网状内皮系统互相作用引起的内毒素休克。

Claims (8)

1.抑制与舒缓肽过剩有关的病症的方法，包括给需要所述治疗的患者施用有效量的下式(I)化合物及或药学上适用的盐或溶剂化物：其中R¹和R³独立地为氢、-CH₃、

(C₁-C₆烷基)或

其中Ar是任意取代的苯基；

R²选自比咯烷子基、六亚甲基亚氨基和哌啶子基。

2.权利要求1所述的方法，其中所述化合物是其盐酸盐。

3.权利要求1所述的方法，其中所述施用是预防性的。

4.权利要求1所述的方法，其中所述化合物是下式化合物或其盐酸盐：

5.权利要求1所述的方法，其中与舒缓激肽过剩有关的病症是疼痛或感受伤害。

6.权利要求1所述的方法，其中与舒缓激肽过剩有关的病症是炎症。

7.权利要求1所述的方法，其中与舒缓激肽过剩有关的病症是鼻炎。

8.权利要求1所述的方法，其中与舒缓激肽过剩有关的病症是哮喘。