CN116916945A - 用于治疗哮喘的脂质运载蛋白突变蛋白干粉制剂 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及通过经口吸入向人类受试者施用包含治疗有效量的抗IL‑4受体α(IL‑4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的干粉制剂来治疗所述受试者的哮喘。本发明还涉及包含抗IL‑4受体α(IL‑4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的干粉制剂。

Description

用于治疗哮喘的脂质运载蛋白突变蛋白干粉制剂
技术领域
本发明涉及通过经口吸入向人类受试者施用包含治疗有效量的抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的干粉制剂来治疗所述受试者的哮喘。本发明还涉及包含抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的干粉制剂。
背景技术
哮喘是慢性、复杂且异质性的呼吸道疾病，其特征在于一系列致病特征，包括肺部炎症、粘液高分泌、可变气道阻塞和气道重塑。它是由包括随时间和严重程度而变化的喘息、呼吸短促和咳嗽的呼吸道症状史定义的。症状和气道阻塞都可由一系列因素引发，包括运动、暴露于吸入的刺激物或过敏原或呼吸道感染。患者有哮喘恶化(加剧)的风险。这些哮喘的加剧可危及生命，并且可显著影响患者的生活质量。大多数哮喘患者的治疗由控制疗法和支气管扩张疗法的治疗方案组成。吸入皮质类固醇(ICS)被认为是控制哮喘症状的“黄金标准”，并且长效β-激动剂(LABA)是目前可用的最有效的支气管扩张剂。口服皮质类固醇仍然是严重哮喘的护理标准，但与显著的副作用相关联，而奥马珠单抗(omalizumab)(抗IgE单克隆抗体)；贝那利珠单抗(benralizumab)、美泊珠单抗(mepolizumab)和瑞利珠单抗(reslizumab)(抗IL-5抗体)以及度匹鲁单抗(美国)(IL-4Rα和IL-13的单克隆抗体阻断剂)为重症患者提供了有限的选择。此外，患者在接受ICS/LABA治疗且甚至有限数量的替代疗法时仍经常无法得到控制，这凸显了一个重要的未满足需求(Ray，A.，等人，2016，Currentconcepts of severe asthma.J.Clin.Invest.126，2394–2403)。
白细胞介素-4、白细胞介素-13、白细胞介素-4-受体α和转录因子-6的信号转导因子和激活因子是哮喘中气道炎症、粘液产生和气道高反应性发展的关键组分。
脂质运载蛋白是蛋白质结合分子，其已经自然进化以结合配体。脂质运载蛋白存在于许多生物体中，包括脊椎动物、昆虫、植物和细菌。脂质运载蛋白家族的成员(Pervaiz，S.，和Brew，K.(1987)FASEB J.1，209-214)通常是小的分泌蛋白并且具有单个多肽链。它们的特征在于一系列不同的分子识别特性：它们结合各种大多疏水性的分子(诸如类视黄醇、脂肪酸、胆固醇、前列腺素、胆绿素、信息素、促味剂和气味剂)的能力，它们与特定细胞表面受体的结合以及它们大分子复合物的形成。尽管过去它们主要被归类为转运蛋白，但现在很清楚，脂质运载蛋白具有多种生理功能。这些包括在视黄醇转运、嗅觉、信息素信号传导和前列腺素合成中的作用。脂质运载蛋白还参与了免疫反应的调节和细胞稳态的介导(例如综述于Flower，D.R.(1996)Biochem.J.318，1-14和Flower，D.R.等人(2000)Biochim.Biophys.Acta 1482，9-24中)。
脂质运载蛋白共享异常低水平的整体序列保守性，其中序列同一性通常小于20％。强烈对比之下，它们的整体折叠模式高度保守。脂质运载蛋白结构的中心部分由单个八链反平行β-折叠组成，所述β-折叠自身闭合以形成连续的氢键β-桶。此β-桶形成中心空腔。桶的一端被穿过其底部的N端肽段以及连接β-链的三个肽环在空间上阻断。β-桶的另一端对溶剂开放，并包含由四个柔性肽环形成的靶结合位点。正是在其他方面刚性的脂质运载蛋白支架中环的这种多样性产生了各种不同的结合模式，每种模式都能够适应不同大小、形状和化学特征的靶标(综述于例如Flower，D.R.(1996)，同上；Flower，D.R.等人(2000)，同上，或Skerra，A.(2000)Biochim.Biophys.Acta 1482，337-350中)。
人泪脂质运载蛋白(TLPC或Tlc)(也称为脂质运载蛋白-1、泪前白蛋白或冯·埃布纳腺蛋白(von Ebner gland protein))最初被描述为人泪液的主要蛋白质(大约占总蛋白质含量的三分之一)，但也已在包括前列腺、肾上腺、胸腺、乳腺、睾丸、鼻粘膜和气管粘膜的几种其他分泌组织以及垂体的促肾上腺皮质激素细胞中鉴定出。已经在恒河猴、黑猩猩、大鼠、小鼠、猪、仓鼠、牛、狗和马中发现了同源蛋白质。泪脂质运载蛋白是不寻常的脂质运载蛋白成员，因为与其他脂质运载蛋白相比时，它表现出异常广泛的配体特异性，并且它具有对相对不溶性脂质的高度混杂性(参见ReRedl，B.(2000)Biochim.Biophys.Acta 1482；241-248)。泪脂质运载蛋白的这种特征归因于蛋白质在抑制角膜处细菌和真菌生长方面的功能。大量不同化学类别的亲脂性化合物(诸如脂肪酸、脂肪醇、磷脂、糖脂和胆固醇)是这种蛋白质的内源性配体。有趣的是，与其他脂质运载蛋白相比，配体(靶标)与泪脂质运载蛋白结合的强度与烷基酰胺和脂肪酸二者的烃尾长度相关。因此，泪脂质运载蛋白与可溶性最低的脂质结合最强烈(Glasgow，B.J.等人(1995)Curr.Eye Res.14，363-372；Gasymov，O.K.等人(1999)Biochim.Biophys.Acta 1433，307-320)。泪脂质运载蛋白的1.8-A晶体结构展示了其β-桶内部异常大的空腔(Breustedt，D.A.等人(2005)J.Biol.Chem.280，1，484-493)。
国际专利申请WO 2005/19256公开了具有针对不同或相同靶配体的至少一个结合位点的泪脂质运载蛋白的突变蛋白，并提供了一种用于产生此类人泪脂质运载蛋白的突变蛋白的方法。根据此PCT申请，对泪脂质运载蛋白一级序列内的某些氨基酸段(特别是包括成熟人泪脂质运载蛋白的氨基酸7-14、24-36、41-49、53-66、69-77、79-84、87-98和103-110的环区)进行诱变以便产生具有结合亲和力的突变蛋白。所得突变蛋白对所选配体的结合亲和力(KD)在纳摩尔范围内，在大多数情况下>100nM。国际专利申请WO 2008/015239公开了结合给定非天然配体(包括IL-4受体α)的泪脂质运载蛋白的突变蛋白。结合亲和力在纳摩尔范围内。国际专利申请WO 2011/154420描述了在纳摩尔范围内与人IL-4受体α结合的人泪脂质运载蛋白的高亲和力突变蛋白以及用于产生此类高亲和力突变蛋白的方法。国际专利申请WO 2013/087660描述了使用人泪脂质运载蛋白的突变蛋白来治疗其中IL-4/IL-13通路导致疾病发病机制的病症，包括哮喘。
国际专利申请WO 2020/200960描述了人泪脂质运载蛋白突变蛋白通过吸入(例如通过雾化)治疗哮喘的用途，其中脂质运载蛋白突变蛋白的递送剂量为约0.1mg至约160mg。
活性剂(诸如脂质运载蛋白突变蛋白)的肺部递送的优点包括患者自我施用的便利性、降低药物副作用的可能性、易于通过吸入递送、消除针头等。许多关于吸入性蛋白质、肽、DNA和小分子的临床研究表明，可在肺部和全身实现功效。然而，需要高有效载荷来递送的许多分子(尤其是生物分子)给可吸入制剂的开发带来了问题。制剂必须为生物有效载荷(例如脂质运载蛋白突变蛋白)提供稳定性，并且具有可放大的可制造性，同时还保持所需的物理特性，以便于递送至患者的肺中。
发明内容
本发明基于制剂前研究，即在人体中评估吸入的抗IL-4受体α(IL-4Rα)人泪脂质运载蛋白AZD1402在健康受试者中的药代动力学(PK效应)的I期交叉临床研究和评估AZD1402作为干粉施用于患有哮喘的人类患者的功效和安全性的两部分IIa期研究。AZD1402的氨基酸序列在表70中显示为SEQ ID NO:1。AZD1402拮抗IL-4受体α(IL-4Rα)，并且设计用于吸入。
基于这些研究，本发明提供了用于治疗人类受试者的哮喘的方法，其中所述方法包括通过吸入向所述受试者施用包含治疗有效量的抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白的干粉制剂或其变体或片段，所述抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列，其中通过经口吸入向所述受试者施用约0.1mg至约30mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
本发明还提供一种包含治疗有效量的抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的干粉制剂，其在治疗人类受试者的哮喘的方法中使用，其中所述方法包括通过吸入施用所述干粉制剂，其中通过经口吸入向所述受试者施用约0.1mg至约30mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，并且其中所述抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列，或其变体或片段。
此外，本发明提供了包含治疗有效量的抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的干粉制剂在生产用于人类受试者的哮喘的治疗性和/或预防性治疗的药物中的用途，其中所述治疗包含通过吸入施用所述干粉制剂，其中通过经口吸入向所述受试者施用约0.1mg至约30mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，并且其中所述抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列，或其变体或片段。
在本发明的任何上述方面，可通过经口吸入向所述受试者施用约0.5mg、约1mg、约3mg、约10mg或约30mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
在本发明的任何上述方面，可通过经口吸入向所述受试者施用约0.5mg、约1mg、约2mg、约3mg、约4mg、约5mg、约6mg、约10mg或约30mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
在一些实施方案中，可通过经口吸入向所述受试者施用约0.5mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，可通过经口吸入向所述受试者施用约1mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，可通过经口吸入向所述受试者施用约2mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，可通过经口吸入向所述受试者施用约3mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，可通过经口吸入向所述受试者施用约4mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，可通过经口吸入向所述受试者施用约5mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，可通过经口吸入向所述受试者施用约6mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，可通过经口吸入向所述受试者施用约10mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，可通过经口吸入向所述受试者施用约30mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
另一方面，本发明还提供了一种治疗人类受试者的哮喘的方法，其中所述方法包括通过吸入向所述受试者施用包含治疗有效量的抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的干粉制剂，所述抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列，其中通过经口吸入向所述受试者施用约0.2mg至约40mg的标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
本发明还提供一种包含治疗有效量的抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的干粉制剂，其在治疗人类受试者的哮喘的方法中使用，其中所述方法包括通过吸入施用所述干粉制剂，其中通过经口吸入向所述受试者施用约0.2mg至约40mg的标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，并且其中所述抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列，或其变体或片段。
此外，本发明提供了包含治疗有效量的抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的干粉制剂在生产用于人类受试者的哮喘的治疗性和/或预防性治疗的药物中的用途，其中所述治疗包含通过吸入施用所述干粉制剂，其中通过经口吸入向所述受试者施用约0.2mg至约40mg的标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，并且其中所述抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列，或其变体或片段。
在这些方面的任何一个方面中，可以向所述受试者施用约0.55mg、约0.6mg、约1.1mg、约3.3mg、约11.1mg、约12mg或约36mg的标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
在这些方面的任何一个方面中，可以向所述受试者施用约0.55mg、约0.6mg、约1.1mg、约2.2mg、约3.3mg、约4.4mg、约5.5mg、约6.6mg、约11.1mg、约12mg或约36mg的标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
在一些实施方案中，可向所述受试者施用约0.55mg的标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，可向所述受试者施用约0.6mg的标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，可向所述受试者施用约1.1mg的标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，可向所述受试者施用约2.2mg的标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，可向所述受试者施用约3.3mg的标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，可向所述受试者施用约4.4mg的标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，可向所述受试者施用约5.5mg的标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，可向所述受试者施用约6.6mg的标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，可向所述受试者施用约11.1mg的标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，可向所述受试者施用约12mg的标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，可向所述受试者施用约36mg的标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
在上述本发明的任何方面或实施方案中，可以每天至少一次向所述受试者施用脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，每天一次向所述受试者施用脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，每天两次向所述受试者施用脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
在一些实施方案中，每天一次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称递送剂量为约2.5mg、约5mg、约10mg、约15mg、约20mg或约25mg。
在一些实施方案中，每天一次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称递送剂量为约2.5mg。在一些实施方案中，每天一次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称递送剂量为约5mg。在一些实施方案中，每天一次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称递送剂量为约10mg。在一些实施方案中，每天一次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称递送剂量为约15mg。在一些实施方案中，每天一次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称递送剂量为约20mg。在一些实施方案中，每天一次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称递送剂量为约25mg。
在一些实施方案中，每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称递送剂量为约0.5mg、约1mg、约3mg、约10mg或约30mg。
在一些实施方案中，每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称递送剂量为约0.5mg、约1mg、约2mg、约3mg、约4mg、约5mg、约6mg、约10mg或约30mg。
在一些实施方案中，每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称递送剂量为约0.5mg。在一些实施方案中，每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称递送剂量为约1mg。在一些实施方案中，每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称递送剂量为约2mg。在一些实施方案中，每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称递送剂量为约3mg。在一些实施方案中，每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称递送剂量为约4mg。在一些实施方案中，每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称递送剂量为约5mg。在一些实施方案中，每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称递送剂量为约6mg。在一些实施方案中，每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称递送剂量为约10mg。在一些实施方案中，每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称递送剂量为约30mg。
在一些实施方案中，每天向所述受试者施用约1mg、约2mg、约6mg、约20mg或约60mg的总标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，例如每天向受试者施用一个、两个或更多个剂量，使得每天的总标称递送剂量为约1mg、约2mg、约6mg、约20mg或约60mg。
在一些实施方案中，每天向所述受试者施用约1mg、约2mg、约4mg、约6mg、约8mg、约10mg、约12mg、约20mg或约60mg的总标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，例如每天向受试者施用一个、两个或更多个剂量，使得每天的总标称递送剂量为约1mg、约2mg、约4mg、约6mg、约8mg、约10mg、约12mg、约20mg或约60mg。
在一些实施方案中，每天向所述受试者施用约2.5mg、约5mg、约10mg、约15mg、约20mg或约25mg的总标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，例如每天向受试者施用一个、两个或更多个剂量，使得每天的总标称递送剂量为约2.5mg、约5mg、约10mg、约15mg、约20mg或约25mg。
在一些实施方案中，每天向所述受试者施用约1mg的总标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，每天向所述受试者施用约2mg的总标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，每天向所述受试者施用约2.5mg的总标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，每天向所述受试者施用约4mg的总标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，每天向所述受试者施用约5mg的总标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，每天向所述受试者施用约6mg的总标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，每天向所述受试者施用约8mg的总标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，每天向所述受试者施用约10mg的总标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，每天向所述受试者施用约12mg的总标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，每天向所述受试者施用约15mg的总标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，每天向所述受试者施用约20mg的总标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，每天向所述受试者施用约25mg的总标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，每天向所述受试者施用约60mg的总标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
在一些实施方案中，每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称计量剂量为约0.55mg、约0.6mg、约1.1mg、约3.3mg、约11.1mg、约12mg或约36mg。
在一些实施方案中，每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称计量剂量为约0.55mg、约0.6mg、约1.1mg、约2.2mg、约3.3mg、约4.4mg、约5.5mg、约6.6mg、约11.1mg、约12mg或约36mg。
在一些实施方案中，每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称计量剂量为约0.55mg。在一些实施方案中，每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称计量剂量为约0.6mg。在一些实施方案中，每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称计量剂量为约1.1mg。在一些实施方案中，每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称计量剂量为约2.2mg。在一些实施方案中，每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称计量剂量为约3.3mg。在一些实施方案中，每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称计量剂量为约4.4mg。在一些实施方案中，每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称计量剂量为约5.5mg。在一些实施方案中，每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称计量剂量为约6.6mg。在一些实施方案中，每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称计量剂量为约11.1mg。在一些实施方案中，每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称计量剂量为约12mg。在一些实施方案中，每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称计量剂量为约36mg。
在一些实施方案中，每天向所述受试者施用约1.1mg、约1.2mg、约2.2mg、约6.6mg、约22.2mg、约24mg或约72mg的总标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，例如每天向所述受试者施用一个、两个或更多个剂量，使得每天的总标称计量剂量为约1.1mg、约1.2mg、约2.2mg、约6.6mg、约22.2mg、约24mg或约72mg。
在一些实施方案中，每天向所述受试者施用约1.1mg、约1.2mg、约2.2mg、约4.4mg、约6.6mg、约8.8mg、约11mg、约13.2mg、约22.2mg、约24mg或约72mg的总标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，例如每天向所述受试者施用一个、两个或更多个剂量，使得每天的总标称计量剂量为约1.1mg、约1.2mg、约2.2mg、约4.4mg、约6.6mg、约8.8mg、约11mg、约13.2mg、约22.2mg、约24mg或约72mg。
在一些实施方案中，每天向所述受试者施用约1.1mg所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的总标称计量剂量。在一些实施方案中，每天向所述受试者施用约1.2mg的总标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，每天向所述受试者施用约2.2mg的总标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，每天向所述受试者施用约4.4mg的总标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，每天向所述受试者施用约6.6mg的总标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，每天向所述受试者施用约8.8mg的总标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，每天向所述受试者施用约11mg的总标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，每天向所述受试者施用约13.2mg的总标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，每天向所述受试者施用约22.2mg的总标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，每天向所述受试者施用约24mg的总标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，每天向所述受试者施用约72mg的总标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
在本发明的任何所述方面和实施方案中，所述制剂可包含多个微粒，所述微粒包含所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
在本发明的任何所述方面的一些实施方案中，干粉制剂包含海藻糖、亮氨酸和/或三亮氨酸(trileucine)(单独或以其任意组合)。例如，在一些优选的实施方案中，干粉制剂可以包含(i)海藻糖，(ii)海藻糖和亮氨酸，(iii)海藻糖、亮氨酸和三亮氨酸，或(iv)海藻糖和三亮氨酸。
在本发明任何所述方面的一些实施方案中，干粉制剂还包含缓冲剂，诸如磷酸盐缓冲液，例如作为缓冲剂的磷酸二氢钾和/或无水磷酸二钠，以及张度剂，诸如氯化钠。
在另一方面，本发明提供了一种干粉制剂，其中所述制剂包含抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，所述抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列。
在一些实施方案中，干粉制剂包含海藻糖、亮氨酸和/或三亮氨酸(单独或其任意组合)。例如，在一些优选的实施方案中，干粉制剂可以包含(i)海藻糖，(ii)海藻糖和亮氨酸，(iii)海藻糖、亮氨酸和三亮氨酸，或(iv)海藻糖和三亮氨酸。在最优选的实施方案中，干粉制剂包含海藻糖、亮氨酸和三亮氨酸。
在一些实施方案中，干粉制剂还包含缓冲剂，诸如磷酸盐缓冲液，例如作为缓冲剂的磷酸二氢钾和/或无水磷酸二钠，以及张度剂，诸如氯化钠。
在一些实施方案中，干粉制剂还包含缓冲剂，诸如组氨酸缓冲剂，和张度剂，诸如氯化钠。
在一些实施方案中，当所述制剂通过经口吸入向所述受试者施用时，干粉制剂提供约0.1mg至约30mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
在一些实施方案中，当所述制剂通过经口吸入向所述受试者施用时，干粉制剂提供约0.5mg、约1mg、约3mg、约10mg或约30mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
在一些实施方案中，当所述制剂通过经口吸入向所述受试者施用时，干粉制剂提供约0.5mg、约1mg、约2mg、约3mg、约4mg、约5mg、约6mg、约10mg或约30mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
在一些实施方案中，当所述制剂通过经口吸入向所述受试者施用时，干粉制剂提供约2.5mg、约5mg、约10mg、约15mg、约20mg或约25mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
在一些实施方案中，标称递送剂量为约0.5mg。在一些实施方案中，标称递送剂量为约1mg。在一些实施方案中，标称递送剂量为约2mg。在一些实施方案中，标称递送剂量为约2.5mg。在一些实施方案中，标称递送剂量为约3mg。在一些实施方案中，标称递送剂量为约4mg。在一些实施方案中，标称递送剂量为约5mg。在一些实施方案中，标称递送剂量为约6mg。在一些实施方案中，标称递送剂量为约10mg。在一些实施方案中，标称递送剂量为约15mg。在一些实施方案中，标称递送剂量为约20mg。在一些实施方案中，标称递送剂量为约25mg。在一些实施方案中，标称递送剂量为约30mg。
在一些实施方案中，干粉制剂包含约0.2mg至约40mg的标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，以用于通过经口吸入向所述受试者施用。
在一些实施方案中，干粉制剂提供约0.55mg、约0.6mg、约1.1mg、约3.3mg、约11.1mg、约12mg或约36mg的标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，以用于通过经口吸入向所述受试者施用。
在一些实施方案中，干粉制剂提供约0.55mg、约0.6mg、约1.1mg、约2.2mg、约3.3mg、约4.4mg、约5.5mg、约6.6mg、约11.1mg、约12mg或约36mg的标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，以用于通过经口吸入向所述受试者施用。
在一些实施方案中，标称计量剂量为约0.55mg。在一些实施方案中，标称计量剂量为约0.6mg。在一些实施方案中，标称计量剂量为约1.1mg。在一些实施方案中，标称计量剂量为约2.2mg。在一些实施方案中，标称计量剂量为约3.3mg。在一些实施方案中，标称计量剂量为约4.4mg。在一些实施方案中，标称计量剂量为约5.5mg。在一些实施方案中，标称计量剂量为约6.6mg。在一些实施方案中，标称计量剂量为约11.1mg。在一些实施方案中，标称计量剂量为约12mg。在一些实施方案中，标称计量剂量为约36mg。
在本发明的任何方面或实施方案中，干粉制剂可包含多个微粒，所述微粒包含所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
本发明还提供了一种用于治疗人类受试者的哮喘的方法，其中所述方法包括通过经口吸入向所述受试者施用上述任一实施方案中所述的干粉制剂。
本发明还提供了在上述任一实施方案中描述的干粉制剂，其用于治疗人类受试者的哮喘的方法中，其中所述方法包括通过经口吸入向所述受试者施用干粉制剂。
此外，本发明提供了上述任一实施方案中描述的干粉制剂在生产用于人类受试者的哮喘的治疗性和/或预防性治疗的药物中的用途，其中所述治疗包括通过经口吸入向所述受试者施用干粉制剂。
附图说明
现在将参照附图讨论说明本发明原理的实施方案和实验，在附图中：
图1显示了实施例16中描述的I期临床试验的研究流程图。测试产品A：通过InnoSpire Go雾化器施用的18mg标称递送剂量的AZD1402雾化器溶液。测试产品B：通过Plastiape单剂量吸入器施用的10mg标称递送剂量的AZD1402吸入粉雾剂。测试产品C：通过Plastiape单剂量吸入器施用的30mg标称递送剂量的AZD1402吸入粉雾剂。
图2显示了在通过InnoSpire Go雾化器(18mg标称递送剂量)、Plastiape单剂量吸入器(10mg或30mg标称递送剂量)吸入后，AZD1402血清浓度(ng/mL)的几何平均数(*/SD)与时间的关系(药代动力学分析集-线性标度)。A：通过InnoSpire Go雾化器施用的雾化器溶液(18mg标称递送剂量)；B：通过Plastiape单剂量吸入器施用的吸入粉雾剂(10mg标称递送剂量)；C：通过Plastiape单剂量吸入器施用的吸入粉雾剂(30mg标称递送剂量)。SD：标准偏差。N：受试者数量。几何平均数/SD：exp(平均数[log{PK浓度}]–标准偏差[log{PK浓度}])。几何平均数*SD：exp(平均数[log{PK浓度}]+标准偏差[log{PK浓度)}])。垂直线代表几何平均数*/SD。
图3显示了在通过InnoSpire Go雾化器(18mg标称递送剂量)、Plastiape单剂量吸入器(10mg或30mg标称递送剂量)吸入后，AZD1402血清浓度(ng/mL)的几何平均数(*/SD)与时间的关系(药代动力学分析集-半对数标度)。A：通过InnoSpire Go雾化器施用的雾化器溶液(18mg标称递送剂量)；B：通过Plastiape单剂量吸入器施用的吸入粉雾剂(10mg标称递送剂量)；C：通过Plastiape单剂量吸入器施用的吸入粉雾剂(30mg标称递送剂量)。SD：标准偏差。N：受试者数量。几何平均数/SD：exp(平均数[log{PK浓度}]–标准偏差[log{PK浓度}])。几何平均数*SD：exp(平均数[log{PK浓度}]+标准偏差[log{PK浓度)}])。垂直线代表几何平均数*/SD。
图4显示了分别以5mg和1mg剂量每天一次和每天两次给药12天后的AZD1402稳态血清浓度。
具体实施方式
现在将参考附图论述本发明的方面和实施方案。其他方面和实施方案对于本领域技术人员来说将是显而易见的。此文本中提及的所有文件均以引用的方式并入本文。
本发明涉及一种治疗人类受试者的哮喘的方法。哮喘可以例如是中度或重度哮喘。在中度哮喘中，患者可以用短语说话，呼吸频率增加，不使用附属肌肉，脉率为100bpm-120bpm，氧饱和度(空气中)为90-95％，并且最大呼气流量(PEF)为>50％预测值或最佳值(参见哮喘管理和预防的袖珍本指南(Pocket Guide for Asthma Management andPrevention)，全球哮喘倡议(Global Initiative for Asthma)，2020年更新)。在重度哮喘中，患者用词说话，呼吸频率为>30次/分钟，使用附属肌肉，脉率为>120bpm，氧饱和度(空气中)为<90％。在一些实施方案中，哮喘是过敏性哮喘。
治疗哮喘的方法包括施用治疗有效量的抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，其包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列。
“治疗有效量”意指产生所施用效果的剂量。如本文所述，脂质运载蛋白突变蛋白的“治疗有效量”可根据诸如年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、施用时间、药物相互作用和病状严重程度的因素而变化，这可能是必要的，并且将通过本领域技术人员的常规实验可确定。当在本申请中使用时，治疗有效量也是其中脂质运载蛋白突变蛋白的任何毒性或有害作用被治疗有益作用所超过的量。
白细胞介素-4受体α链(IL-4Rα)是可结合白细胞介素4和白细胞介素13以调节B细胞中IgE抗体的产生的I型跨膜蛋白。在T细胞中，编码的蛋白质还可结合白细胞介素4以促进Th2细胞的分化。
脂质运载蛋白突变蛋白
对IL-4受体α(IL-4Rα)(特别是人IL-4Rα)具有特异性的脂质运载蛋白突变蛋白公开于国际专利公布WO 2008/015239、WO 2011/154420和WO 2013/087660中。人白细胞介素-4受体α链可具有SWISS PROT数据库登录号P24394的氨基酸序列(如SEQ ID NO:4所示)或其片段。人白细胞介素-4受体α链的片段的说明性实例包括IL-4受体α的氨基酸26至232。
具有如SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的IL-4Rα特异性脂质运载蛋白突变蛋白是人泪脂质运载蛋白的突变蛋白。
如本文所用，“突变蛋白”是指与天然存在的(野生型)核酸或蛋白质“参考”支架相比，一个或多个核苷酸或氨基酸的交换、缺失或插入，所述“参考”支架优选为如SEQ ID NO:3所示的成熟人泪脂质运载蛋白。如本文所述，所述“参考支架”还包括突变蛋白或其片段或变体。
人泪脂质运载蛋白的氨基酸序列由SWISS-PROT数据库登录号P31025提供，如SEQID NO:2所示。成熟人泪脂质运载蛋白不包括SWISS-PROT登录号P31025的序列中包括的N端信号肽，即它缺少包括在SWISS-PROT登录号P31025的序列中的N端信号肽(氨基酸1-18)。成熟人泪脂质运载蛋白的氨基酸序列在SEQ ID NO:3中示出。
本发明中使用的脂质运载蛋白突变蛋白包含SEQ ID NO:1或为其变体或片段。如SEQ ID NO:1所示的脂质运载蛋白突变蛋白是如SEQ ID NO:3所示的成熟人泪脂质运载蛋白的变体，其缺少前四个氨基酸，并且特别包括在与如SEQ ID NO:3所示的成熟人泪脂质运载蛋白的氨基酸序列的序列位置相对应的位置处的以下氨基酸取代：Arg 26→Ser、Glu 27→Arg、Phe 28→Cys、Glu 30→Arg、Met 31→Ala、Asn 32→Val、Leu 33→Tyr、Glu 34→Asn、Met 55→Ala、Leu56→Gln、Ile 57→Arg、Ser 58→Lys、Cys 61→Trp、Glu 63→Lys、Asp 80→Ser、Lys 83→Arg、Glu 104→Leu、Leu 105→Cys、His 106→Pro和Lys 108→Gln。
在一些实施方案中，本发明中使用的脂质运载蛋白突变蛋白包含SEQ ID NO:1或为其变体或片段。如SEQ ID NO:1所示的脂质运载蛋白突变蛋白是如SEQ ID NO:3所示的成熟人泪脂质运载蛋白的变体，其缺少前四个氨基酸，并且特别包括在与如SEQ ID NO:3所示的成熟人泪脂质运载蛋白的氨基酸序列的序列位置相对应的位置处的以下氨基酸取代：Arg 26→Ser、Glu 27→Arg、Phe 28→Cys、Glu 30→Arg、Met 31→Ala、Asn 32→Val、Leu33→Tyr、Glu 34→Asn、Val 53→Phe、Met 55→Ala、Leu 56→Gln、Ile 57→Arg、Ser 58→Lys、Cys 61→Trp、Glu 63→Lys、Val 64→Tyr、Ala 66→Leu、Asp 80→Ser、Lys83→Arg、Tyr 100→His、Cys 101→Ser、Glu 104→Leu、Leu 105→Cys、His 106→Pro、Lys 108→Gln、Arg 111→Pro、Lys 114→Trp和Cys 153→Ser。
变体
如本文所用，术语“变体”涉及包含例如通过氨基酸序列或核苷酸序列的取代、缺失、插入和/或化学修饰的突变的蛋白质或多肽的衍生物。在一些实施方案中，此类突变和/或化学修饰不降低蛋白质或肽的功能。此类取代可以是保守的，即氨基酸残基被化学上相似的氨基酸残基替代。保守取代的实例是以下组成员之间的替代：1)丙氨酸、丝氨酸和苏氨酸；2)天冬氨酸和谷氨酸；3)天冬酰胺和谷氨酰胺；4)精氨酸和赖氨酸；5)异亮氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸和缬氨酸；6)苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸。此类变体包括蛋白质或多肽，其中一个或多个氨基酸已被其各自的D-立体异构体或除天然存在的20个氨基酸以外的氨基酸(例如像鸟氨酸、羟脯氨酸、瓜氨酸、高丝氨酸、羟赖氨酸、正缬氨酸取代)。此类变体还包括例如其中在N端和/或C端添加或缺失一个或多个氨基酸残基(诸如从N端缺失四个氨基酸和/或从C端缺失两个氨基酸)的蛋白质或多肽。一般来说，变体具有与天然序列蛋白质或多肽至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约92％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％的氨基酸序列同一性。变体优选保留衍生其的蛋白质或多肽的生物学活性，例如结合相同的靶标。
因此，包含根据本发明的SEQ ID NO:1中列出的氨基酸的脂质运载蛋白突变蛋白的变体与如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列具有至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约92％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％的氨基酸序列同一性，并且保留与IL-4受体α(特别是人IL-4Rα)或其片段结合的能力。优选地，脂质运载蛋白突变蛋白的变体能够抑制IL-4与IL-4Rα的结合。
在一些实施方案中，包含根据本发明的SEQ ID NO:1中列出的氨基酸的脂质运载蛋白突变蛋白的变体与如SEQ ID NO:3所示的成熟人泪脂质运载蛋白的氨基酸序列具有至少约50％、至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约72％、至少约74％、至少约75％、至少约76％、至少约77％、至少约79％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约92％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％的氨基酸序列同一性，并且保留与IL-4受体α(特别是人IL-4Rα)或其片段的能力。优选地，脂质运载蛋白突变蛋白的变体能够抑制IL-4与IL-4Rα的结合。
如本文所用，术语“序列同一性”或“同一性”表示测量其相似性或关系的序列的特性。如本公开所用，术语“序列同一性”或“同一性”意指成对相同残基(在本公开的蛋白质或多肽的序列与所讨论的序列的(同源)比对之后)相对于这两个序列中较长的序列的残基数的百分比。通过将相同氨基酸残基数除以残基总数并将结果乘以100来测量序列同一性。
技术人员将识别可用的计算机程序，例如BLAST(Altschul等人，Nucleic AcidsRes，1997)、BLAST2(Altschul等人，J Mol Biol，1990)、FASTA(其使用Pearson和Lipman(1988)的方法)、Altschul等人(1990)同上的TBLASTN程序、GAP(Wisconsin GCG package，Accelerys Inc，San Diego USA)和Smith-Waterman(Smith和Waterman，J Mol Biol，1981)，以用于使用标准参数确定序列同一性。例如，可使用程序BLASTP，版本2.2.5，2002年11月16日(Altschul等人，Nucleic Acids Res，1997)在本文中确定序列同一性的百分比。在本实施方案中，同源性百分比基于包括多肽序列的整个蛋白质或多肽序列的比对(矩阵：BLOSUM 62；空位罚分：11.1；截断值设置为10-3)，优选地在成对比较中使用野生型蛋白质支架作为参考。所述同源性百分比被计算为BLASTP程序输出结果中指示的“阳性”(同源氨基酸)数除以所述程序出于比对选择的氨基酸总数的百分比。序列同一性通常参考算法GAP(Wisconsin GCG数据包，Accelerys Inc，San Diego USA)来定义。GAP使用Needleman和Wunsch算法来比对最大化匹配数并最小化空位数的两个完整序列，所述空位是比对中由于氨基酸的添加或缺失而产生的空间。通常使用默认参数，其中空位创造罚分等于12，并且空位扩展罚分等于4。
具体地，为了确定脂质运载蛋白(突变蛋白)的氨基酸序列的氨基酸残基是否不同于具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的脂质运载蛋白突变蛋白，技术人员可使用本领域众所周知的手段和方法，例如手动比对或通过使用计算机程序诸如BLAST 2.0(其代表Basic Local Alignment Search Tool)或ClustalW或适合生成序列比对的任何其他合适的程序的比对。因此，SEQ ID NO:1可用作“参考序列”，而与具有如本文所述的SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的脂质运载蛋白突变蛋白不同的脂质运载蛋白的氨基酸序列用作“查询序列”。
片段
如本文中结合本公开的脂质运载蛋白突变蛋白使用的术语“片段”涉及衍生自脂质运载蛋白突变蛋白的蛋白质或肽，其包含SEQ ID NO:1中列出的N端和/或C端截短(即缺少N端和/或C端氨基酸中的至少一个)的氨基酸序列。此种片段可缺少至多1个、至多2个、至多3个、至多4个、至多5个、至多10个、至多15个、至多20个、至多25个或至多30个(包括之间的所有数值)N端和/或C端氨基酸。作为说明性实例，此种片段可缺少一个、两个、三个或四个N端氨基酸和/或一个或两个C端氨基酸。应当理解，片段优选为全长脂质运载蛋白(突变蛋白)的功能片段，这意味着它优选包含衍生其的全长脂质运载蛋白(突变蛋白)的结合口袋。作为说明性实例，此种功能片段可至少包含与成熟人泪脂质运载蛋白的线性多肽序列相对应的位置5-158、1-156、5-156、5-153、26-153、5-150、9-148、12-140、20-135或26-133处的氨基酸。此类片段可包括如SEQ ID NO:1所示的序列的至少10个、至少20个、至少30个、至少40个、至少50个、至少60个、至少70个、至少80个、至少90个或至少100个连续氨基酸，并且通常在具有氨基酸序列SEQ ID NO:1的脂质运载蛋白突变蛋白的免疫测定中可检测到。片段可与如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列具有至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约92％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％或至少约99％的氨基酸序列同一性。优选地，片段保留与IL-4受体α(特别是人IL-4Rα或其片段)结合的能力。优选地，脂质运载蛋白突变蛋白的片段能够抑制IL-4与IL-4Rα的结合。
关于本公开的对应靶标IL-4Rα(其描述于UniProt P24394中且示出为SEQ ID NO:4，其不包括25个残基的信号肽)的“片段”是指N端和/或C端截短的IL-4Rα或IL-4Rα的蛋白质结构域。如本文所述的IL-4Rα的片段保留全长IL-4Rα被本公开的脂质运载蛋白突变蛋白识别和/或结合的能力。作为说明性实例，片段可以是IL-4Rα的细胞外结构域，诸如包含如SEQ ID NO:5所示的UniProt P24394的氨基酸残基26-232的细胞外结构域。
施用和递送剂量
在治疗哮喘的方法中，通过经口吸入干粉制剂向受试者施用约0.1mg至约30mg的标称递送剂量的脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，通过经口吸入干粉制剂向受试者施用约0.5mg、约1mg、约3mg、约10mg或约30mg的标称递送剂量的脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，通过经口吸入干粉制剂向受试者施用约0.5mg、约1mg、约2mg、约3mg、约4mg、约5mg、约6mg、约10mg或约30mg的标称递送剂量的脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，标称递送剂量为约0.5mg。在一些实施方案中，标称递送剂量为约1mg。在一些实施方案中，标称递送剂量为约2mg。在一些实施方案中，标称递送剂量为约3mg。在一些实施方案中，标称递送剂量为约4mg。在一些实施方案中，标称递送剂量为约5mg。在一些实施方案中，标称递送剂量为约6mg。在一些实施方案中，标称递送剂量为约10mg。在一些实施方案中，标称递送剂量为约30mg。标称递送剂量是受试者在吸入干粉制剂时接受的脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的目标量。例如，它可以是从用于施用干粉制剂的装置的接口递送的脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的量。标称递送剂量的计算基于干粉吸入装置效率。
标称计量剂量是用于添加到吸入装置的干粉制剂中存在的脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的目标量。例如，标称计量剂量可以是作为干粉制剂填充在胶囊中的脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的目标量，其中目标量是平均填充重量x平均活性药物成分(API)含量。在本文所述的治疗哮喘的方法中，通过经口吸入干粉制剂向受试者施用约0.2mg至约40mg的标称计量剂量的脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，通过经口吸入干粉制剂向受试者施用约0.65mg、约1.1mg、约3.3mg、约11.1mg、约12mg或约36mg的标称计量剂量的脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，通过经口吸入干粉制剂向受试者施用约0.55mg、约0.6mg、约1.1mg、约2.2mg、约3.3mg、约4.4mg、约5.5mg、约6.6mg、约11.1mg、约12mg或约36mg的标称计量剂量的脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
施用频率
可每天至少一次，并且优选每天两次，即每天两次向人类受试者施用脂质运载蛋白突变蛋白。当每天两次(即每天两次)向受试者施用约0.5mg、约1mg、约3mg、约10mg或约30mg的标称递送剂量的脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段时，每天两次(即每天两次)向受试者施用约0.5mg、约1mg、约3mg、约10mg或约30mg的每个剂量。因此，每天向受试者施用的脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的总标称递送剂量为约1mg、约2mg、约6mg、约20mg或约60mg。当每天两次(即每天两次)向受试者施用约0.5mg、约1mg、约2mg、约3mg、约4mg、约5mg、约6mg、约10mg或约30mg的标称递送剂量的脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段时，每天两次(即每天两次)向受试者施用约0.5mg、约1mg、约2mg、约3mg、约4mg、约5mg、约6mg、约10mg或约30mg的每个剂量。因此，每天向受试者施用的脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的总标称递送剂量为约1mg、约2mg、约4mg、约6mg、约8mg、约10mg、约12mg、约20mg或约60mg。类似地，当每天两次(即每天两次)向受试者施用约0.65mg、约1.1mg、约3.3mg、约11.1mg、约12mg或约36mg的标称计量剂量的脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段时，每天两次(即每天两次)向受试者施用约0.65mg、约1.1mg、约3.3mg、约11.1mg、约12mg或约36mg的每个剂量。因此，每天向受试者施用的脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的总标称计量剂量为约1.1mg、约2.2mg、约6.6mg、约22.2mg、约24mg或约72mg。当每天两次(即每天两次)向受试者施用约0.55mg、约0.6mg、约1.1mg、约2.2mg、约3.3mg、约4.4mg、约5.5mg、约6.6mg、约11.1mg、约12mg或约36mg的标称计量剂量的脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段时，每天两次(即每天两次)向受试者施用约0.55mg、约0.6mg、约1.1mg、约2.2mg、约3.3mg、约4.4mg、约5.5mg、约6.6mg、约11.1mg、约12mg或约36mg的每个剂量。因此，每天向受试者施用的脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的总标称计量剂量为约1.1mg、约1.2mg、约2.2mg、约4.4mg、约6.6mg、约8.8mg、约11mg、约13.2mg、约22.2mg、约24mg或约72mg。
在一些实施方案中，每天向受试者施用约1mg、约2mg、约6mg、约20mg或约60mg的总标称递送剂量的脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，每天向受试者施用约1mg、约2mg、约4mg、约6mg、约8mg、约10mg、约12mg、约20mg或约60mg的总标称递送剂量的脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，每天向受试者施用约1.1mg、约2.2mg、约6.6mg、约22.2mg、约24mg或约72mg的总标称计量剂量的脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。在一些实施方案中，每天向受试者施用约1.1mg、约1.2mg、约2.2mg、约4.4mg、约6.6mg、约8.8mg、约11mg、约13.2mg、约22.2mg、约24mg或约72mg的总标称计量剂量的脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。总标称递送剂量或总标称计量剂量可以通过每天任何数量的剂量，例如每天1、2、3、4或5个剂量来实现。
在一些实施方案中，约1mg、约2mg、约6mg、约20mg或约60mg的总标称递送剂量的脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段可通过每天一次向受试者施用约1mg、约2mg、约6mg、约20mg或约60mg的标称递送剂量的脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段来实现。类似地，约1.1mg、约1.2mg、约2.2mg、约6.6mg、约22.2mg、约24mg或约72mg的总标称计量剂量的脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段可通过每天一次向受试者施用约1.1mg、约1.2mg、约2.2mg、约6.6mg、约22.2mg、约24mg或约72mg的标称计量剂量的脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段来实现。
在一些实施方案中，约2.5mg、约5mg、约10mg、约15mg、约20mg或约25mg的总标称递送剂量的脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段可通过每天一次向受试者施用约2.5mg、约5mg、约10mg、约15mg、约20mg或约25mg的标称递送剂量的脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段来实现。
干粉吸入
根据本发明的脂质运载蛋白突变蛋白通过吸入干粉制剂向人类受试者施用。合适地，干粉制剂被配制用于肺部递送，包括通过干粉吸入器(DPI)吸入。干粉制剂的吸入通常通过经口吸入进行。干粉制剂可以例如存在于胶囊中。
脂质运载蛋白突变蛋白干粉制剂的吸入施用的方式和装置是技术人员已知的。此类方式和装置包括单剂量干粉吸入器，诸如基于胶囊的单剂量干粉吸入器。适用于将脂质运载蛋白突变蛋白的干粉制剂的吸入给药引导至肺部的其他方式和装置(诸如多剂量干粉吸入器)也是本领域已知的。
优选的基于胶囊的干粉吸入器是旋转胶囊吸入器，诸如Plastiape单剂量吸入器，例如RPC Plastiape S.p.A RS01单剂量模型7，其是根据医疗装置指令93/42/EEC的I类CE标记的医疗装置。这种吸入器以干粉形式将药物制剂递送至肺部，并且旨在由患者在家、在家外和在诸如医院和诊所的机构中自我施用。
干粉制剂
用于本发明的脂质运载蛋白突变蛋白通常以干粉制剂的形式施用，其可包含除脂质运载蛋白突变蛋白之外的至少一种组分。因此，除活性成分之外，根据本发明使用的药物组合物还可包含药学上可接受的赋形剂、载剂、缓冲剂、稳定剂或本领域技术人员众所周知的其他材料。此类材料应是无毒性的，并且不应干扰活性成分的功效。
例如，除了活性剂(即脂质运载蛋白突变蛋白)之外，干粉制剂可以包含稳定剂、气溶胶性能增强剂、缓冲剂和张度剂，如下文更详细描述的。
如本文所用，“干粉制剂”是指在粉末组合物中包括多个固体微粒的制剂，所述粉末组合物适当地含有小于约20％水分、更适当地小于10％水分、小于约5-6％水分、或小于约3％水分。如本文所述，干粉制剂可优选地用于经由吸入递送至患者。
微粒
如本文所用的“微粒”是指尺寸质量平均直径(MMD)小于20μm的固体颗粒。质量平均直径是微粒平均粒度的量度，其通过使用合适的方法(包括例如，离心沉降、电子显微镜、光散射、激光衍射)进行测量。
本文所述的干粉制剂适当地含有多个微粒。如本文所用，“多个”是指2个或更多个物品，并且适当地是指5个或更多个、10个或更多个、50个或更多个、100个或更多个、500个或更多个、1000个或更多个等。
稳定剂
在合适的实施方案中，本文所述的干粉制剂还包含稳定剂以帮助稳定制剂，特别是稳定活性剂。稳定剂是指稳定干粉制剂中的活性剂(适当地为多肽)并形成包含所述活性剂的无定形固体的赋形剂，所述稳定是适当地通过在干燥期间取代所述活性剂表面的水或以其他方式阻止降解过程来进行。稳定剂的实例包括无定形糖、聚合糖、缓冲剂、盐、或合成聚合物(例如聚-L-乙醇酸)、以及此类组分的混合物。在合适的实施方案中，稳定剂是无定形糖。最优选地，稳定剂是具有高玻璃化转变温度的无定形糖，诸如海藻糖。以下提供了海藻糖的化学结构:
合适地，海藻糖以干粉制剂的约0.5％至约99.5％(重量百分比，w/w％)存在。在一些实施方案中，海藻糖以干粉制剂的约5％至约98％(w/w％)存在。在优选的实施方案中，海藻糖以干粉制剂的约5％至约95％(w/w％)存在。
气溶胶性能增强剂
本发明的干粉制剂优选包括气溶胶性能增强剂，例如三亮氨酸和/或亮氨酸。
如本文所利用的“三亮氨酸”是指其中三个亮氨酸分子在肽中连接在一起的化学化合物，如亮氨酸-亮氨酸-亮氨酸(Leu-Leu-Leu)，C18H35N3O4。以下提供了三亮氨酸的化学结构：
如本文所用，无论是作为单一氨基酸存在还是作为肽的氨基酸组分存在，“亮氨酸”是指氨基酸亮氨酸(C6H13NO2)，其可以是外消旋混合物或呈其D形式或L形式、以及亮氨酸的修饰形式(即，其中亮氨酸的一个或多个原子已被另一个原子或官能团取代)。以下提供了亮氨酸的化学结构：
除非另有说明，否则将本文所提供的亮氨酸和三亮氨酸的量提供为制剂的重量百分比(wt％或w/w％)。由于干粉制剂几乎不含水(即使含有水，也非常少)，因此干粉制剂的重量组分为最终制剂的干重百分比。
在示例性实施方案中，干粉制剂包含约10重量％至约45重量％的亮氨酸(w/w％)或约20重量％至约45重量％的亮氨酸(w/w％)。在一些实施方案中，干粉制剂包含约40重量％的亮氨酸(w/w％)。
在示例性实施方案中，干粉制剂包含约2重量％至约20重量％的三亮氨酸(w/w％)。在一些实施方案中，干粉制剂包含约20重量％的三亮氨酸(w/w％)。
在包含亮氨酸、三亮氨酸和活性剂的制剂的实施方案中，亮氨酸和三亮氨酸保持在所需比率范围内，所述比率范围提供了本文所述的改善的压缩堆密度特征，以及提供了允许改善储存和递送的所需微粒特征。在一些实施方案中，微粒中亮氨酸和三亮氨酸的重量比(即亮氨酸:三亮氨酸)为约0.01:1至约20:1。在优选的实施方案中，微粒中亮氨酸:三亮氨酸的重量比小于约4:1。进一步增加制剂中存在的三亮氨酸的量可能对防潮性和保持颗粒形态具有有益的影响，同时扩大规模。
除非另有说明，本文所述的比率表达为按重量计的比率％(w/w-也称为“重量比”或w/w％)，即在本文所述的制剂中的亮氨酸重量:三亮氨酸重量。通过以下方式实现这些比率：在原料中提供所需的亮氨酸和三亮氨酸的mg/mL浓度，接着干燥以去除原料溶剂，从而形成雾化的微粒，其中将起始浓度比率(以mg/mL表示)保持为亮氨酸:三亮氨酸的最终重量比。
本文描述了可在干粉制剂中使用以实现这些比率的亮氨酸和三亮氨酸的示例性重量百分比。合适地，干粉制剂包含约5重量％至约15重量％的亮氨酸(w/w％)和约1重量％至约5重量％的三亮氨酸(w/w％)。在一些实施方案中，干粉制剂包含约8重量％至约11重量％的亮氨酸(w/w％)和约2重量％至约4重量％的三亮氨酸(w/w％)，并且在一些优选的实施方案中，干粉制剂包含约10重量％的亮氨酸和约2.6重量％的三亮氨酸(w/w％)。
在干粉制剂中使用亮氨酸和三亮氨酸的组合允许减少制备微粒所需的亮氨酸和/或三亮氨酸的总量(与仅含有这些组分中的一种的干粉制剂相比)，同时还提供了所需的稳定性。这有助于克服三亮氨酸和亮氨酸的溶解度限制，并且提供更高的通量。
根据本发明的实施方案，制备干粉制剂的示例性方法可如下进行。使用雾化器将含有干粉制剂的所需最终组分的液体原料雾化成细小薄雾。接着如本文所述将薄雾干燥。雾化的液滴含有最初呈液滴形式的溶解组分。随着液滴干燥，制剂的不同组分开始以不同的速率饱和并沉淀。如本文所述，在干粉制剂的微粒的外表面周围开始形成壳。此壳适当地在壳的外表面包括亮氨酸和三亮氨酸组分。应该注意的是亮氨酸和三亮氨酸优先位于微粒的外表面，同时少量的亮氨酸和三亮氨酸也可存在于整个微粒。在实施方案中，较高浓度的亮氨酸和三亮氨酸适当地存在于微粒表面或微粒表面附近，而不是靠近微粒中心。微粒表面处亮氨酸和三亮氨酸的存在可以通过飞行时间二次离子质谱(Time-of-FlightSecondary Ion Mass Spectometry；ToF-SIMS)来分析。在一些实施方案中，微粒的中心含有大量的活性剂，以及如本文所述的其他赋形剂组分，这些组分适当地呈无定形形式。如本文所用，“大量”的活性剂意指至少约60％的活性剂(即，占制剂中的总活性剂)位于微粒中心或微粒中心附近，适当地至少约70％、且更适当地至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、以及在实施方案中约95％-100％的活性剂位于微粒中心或微粒中心附近。
缓冲剂
可包含在干粉制剂中的示例性缓冲剂包括各种磷酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲剂(诸如柠檬酸钠)、组氨酸缓冲剂、甘氨酸缓冲剂、乙酸盐缓冲剂和酒石酸盐缓冲剂，以及这些缓冲剂的组合。优选地，缓冲剂是磷酸盐缓冲液。最优选地，干粉制剂包括磷酸二氢钾和无水磷酸二钠。在一些实施方案中，干粉制剂可以包含约0.01％至5％w/w缓冲盐。在一些实施方案中，干粉制剂可以包含约0.01％至3％w/w缓冲盐。
缓冲剂还提供了对干粉制剂的pH的控制，适当地将pH维持在约pH 5与约8之间，例如，约pH 5至约pH 6、约pH 5.5至约pH 6.5、约pH 6至约pH 7、约pH 6.5至约pH 7.5、或约pH7至约pH 8。
在“基本上由”所列举的成分组成的组合物和制剂中，此类组合物和制剂含有所列举的组分以及实质上不影响要求保护的制剂的基本和新颖特征的那些组分。实质上不影响要求保护的制剂的基本和新颖特征的组分是那些不限制亮氨酸和三亮氨酸稳定干粉制剂的能力的组分。适当地，基本上由所列举的成分组成的组合物和制剂特别排除其他氨基酸或三肽氨基酸，但是可包括另外的糖、缓冲剂等。
张度剂
在一些实施方案中，本文所述的干粉制剂包含张度剂，例如氯化钠。在一些实施方案中，干粉制剂包含0-15w/w％氯化钠。合适地，干粉制剂包含约0.4-15w/w％氯化钠。
微粒尺寸
组成本文所述的干粉制剂的微粒在以气溶胶形式提供时，适当地具有指定的质量中值空气动力学直径(MMAD)。
如本文所用，“质量中值空气动力学直径”或“MMAD”是分散微粒的空气动力学粒度的量度。空气动力学直径用于描述雾化粉末的沉降行为，并且是在空气中与微粒具有相同沉降速率的单位密度球体的直径。空气动力学直径涵盖微粒的颗粒形状、密度和物理尺寸。如本文所用，除非另外指明，否则MMAD是指由级联撞击(cascade impaction)确定的雾化粉末的空气动力学粒度分布的中点或中值。合适地，本文提供的干粉制剂的微粒的质量中值空气动力学直径(MMAD)为至少1μm或更大，更合适地约1μm至约10μm、约2μm至约8μm、约2μm至约7μm、约2μm至约6μm、约2μm至约5μm、约2μm至约4μm、约2μm至约3μm、约3μm至约4μm、约2μm或约3μm。
适当地，本文所述的干粉制剂的细颗粒级分(从吸入装置射出的空气动力学粒径小于5μm的颗粒的级分)≥50％、更适当地≥60％。这种细颗粒级分(FPF)可有助于递送至患者后在装置中余留小于20％、适当地小于15％、小于10％、或小于5％的干粉制剂的低装置保留。
示例性干粉制剂
下表显示了一些示例性制剂：
表1 AZD1402吸入粉雾剂、硬胶囊12mg/MD、10mg/DD的药品组成
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a MD＝计量剂量，从产品范围数据推断
b DD＝递送剂量，AZD1402的测量值和其他组分的理论值。
c来自原料药(AZD1402)溶液。由于原料药批次之间蛋白质浓度的差异，组分量将变化。
d在加工期间去除。
e海藻糖在生产过程中作为海藻糖二水合物加入，在加工期间去除水分。95mg海藻糖对应于105mg海藻糖二水合物。由于来自药物溶液的缓冲盐量的变化，海藻糖的量将变化。
f用于制备组合物的试剂，其不存在于最终组合物中或在组合物的加工期间被去除。
q.s.足量
NA不适用。
表2 AZD1402吸入粉雾剂、硬胶囊1.1mg/MD、1mg/DD的药品组成
a MD＝计量剂量，从产品范围数据推断
b DD＝递送剂量，AZD1402的测量值和其他组分的理论值。
c来自原料药(AZD1402)溶液。由于原料药批次之间蛋白质浓度的差异，组分量将变化。
d在加工期间去除。
e海藻糖在生产过程中作为海藻糖二水合物加入，在加工期间去除水分。745mg海藻糖对应于822mg海藻糖二水合物。由于来自药物溶液的缓冲盐量的变化，海藻糖的量将变化。
f用于制备组合物的试剂，其不存在于最终组合物中或在组合物的加工期间被去除。
q.s.足量
NA不适用。
表3 AZD1402吸入粉雾剂、硬胶囊3.3mg/MD、3mg/DD的药品组成
a MD＝计量剂量，从产品范围数据推断
b DD＝递送剂量，AZD1402的测量值和其他组分的理论值。
c来自原料药(AZD1402)溶液。由于原料药批次之间蛋白质浓度的差异，组分量将变化。
d在加工期间去除。
e海藻糖在生产过程中作为海藻糖二水合物加入，在加工期间去除水分。486mg海藻糖对应于536mg海藻糖二水合物。由于来自药物溶液的缓冲盐量的变化，海藻糖的量将变化。
f用于制备组合物的试剂，其不存在于最终组合物中或在组合物的加工期间被去除。
q.s.足量
NA不适用。
表4 AZD1402吸入粉雾剂、硬胶囊11.1mg/MD、10mg/DD的药品组成
a MD＝计量剂量，从产品范围数据推断
b DD＝递送剂量，AZD1402的测量值和其他组分的理论值。
c来自原料药溶液。由于原料药批次之间蛋白质浓度的差异，组分量将变化。
d在加工期间去除。
e海藻糖在生产过程中作为海藻糖二水合物加入，在加工期间去除水分。168mg海藻糖对应于185mg海藻糖二水合物。由于来自药物溶液的缓冲盐量的变化，海藻糖的量将变化。
q.s.足量
NA不适用。
因此，在一些优选的实施方案中，本发明的干粉制剂包含：包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列的抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段、海藻糖、亮氨酸和三亮氨酸。在一些实施方案中，干粉制剂还包含缓冲剂，诸如磷酸盐缓冲液，例如作为缓冲剂的磷酸二氢钾和/或无水磷酸二钠，和/或张度剂，诸如氯化钠。
因此，在一些实施方案中，本发明的干粉制剂包含：包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列的抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段、海藻糖、亮氨酸和三亮氨酸，其中所述制剂提供约0.5mg、约1mg、约3mg、约10mg或约30mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，当所述制剂通过经口吸入向所述受试者施用时，其中所述制剂可以进一步包含缓冲剂，诸如磷酸盐缓冲液，例如作为缓冲剂的磷酸二氢钾和/或无水磷酸二钠，和/或张度剂，诸如氯化钠。
因此，在一些实施方案中，本发明的干粉制剂包含：包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列的抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段、海藻糖、亮氨酸和三亮氨酸，其中所述制剂提供约0.5mg、约1mg、约2mg、约3mg、约4mg、约5mg、约6mg、约10mg或约30mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，当所述制剂通过经口吸入向所述受试者施用时，其中所述制剂可以进一步包含缓冲剂，诸如磷酸盐缓冲液，例如作为缓冲剂的磷酸二氢钾和/或无水磷酸二钠，和/或张度剂，诸如氯化钠。
因此，在一些实施方案中，本发明的干粉制剂包含：包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列的抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段、海藻糖、亮氨酸和三亮氨酸，其中所述制剂提供约2.5mg、约5mg、约10mg、约15mg、约20mg或约25mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，当所述制剂通过经口吸入向所述受试者施用时，其中所述制剂可以进一步包含缓冲剂，诸如磷酸盐缓冲液，例如作为缓冲剂的磷酸二氢钾和/或无水磷酸二钠，和/或张度剂，诸如氯化钠。
在其他优选的实施方案中，本发明的干粉制剂包含：包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列的抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段、海藻糖和亮氨酸。在一些实施方案中，干粉制剂还包含缓冲剂，诸如磷酸盐缓冲液，例如作为缓冲剂的磷酸二氢钾和/或无水磷酸二钠，和/或张度剂，诸如氯化钠。
因此，在一些实施方案中，本发明的干粉制剂包含：包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列的抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段、海藻糖和亮氨酸，其中所述制剂提供约0.5mg、约1mg、约3mg、约10mg或约30mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，当所述制剂通过经口吸入向所述受试者施用时，其中所述制剂可以进一步包含缓冲剂，诸如磷酸盐缓冲液，例如作为缓冲剂的磷酸二氢钾和/或无水磷酸二钠，和/或张度剂，诸如氯化钠。
因此，在一些实施方案中，本发明的干粉制剂包含：包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列的抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段、海藻糖和亮氨酸，其中所述制剂提供约0.5mg、约1mg、约2mg、约3mg、约4mg、约5mg、约6mg、约10mg或约30mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，当所述制剂通过经口吸入向所述受试者施用时，其中所述制剂可以进一步包含缓冲剂，诸如磷酸盐缓冲液，例如作为缓冲剂的磷酸二氢钾和/或无水磷酸二钠，和/或张度剂，诸如氯化钠。
因此，在一些实施方案中，本发明的干粉制剂包含：包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列的抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段、海藻糖和亮氨酸，其中所述制剂提供约2.5mg、约5mg、约10mg、约15mg、约20mg或约25mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，当所述制剂通过经口吸入向所述受试者施用时，其中所述制剂可以进一步包含缓冲剂，诸如磷酸盐缓冲液，例如作为缓冲剂的磷酸二氢钾和/或无水磷酸二钠，和/或张度剂，诸如氯化钠。
在其他优选的实施方案中，本发明的干粉制剂包含：包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列的抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段、海藻糖和三亮氨酸。在一些实施方案中，干粉制剂还包含缓冲剂，诸如磷酸盐缓冲液，例如作为缓冲剂的磷酸二氢钾和/或无水磷酸二钠，和/或张度剂，诸如氯化钠。
因此，在一些实施方案中，本发明的干粉制剂包含：包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列的抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段、海藻糖和三亮氨酸，其中所述制剂提供约0.5mg、约1mg、约2mg、约3mg、约4mg、约5mg、约6mg、约10mg或约30mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，当所述制剂通过经口吸入向所述受试者施用时，其中所述制剂可以进一步包含缓冲剂，诸如磷酸盐缓冲液，例如作为缓冲剂的磷酸二氢钾和/或无水磷酸二钠，和/或张度剂，诸如氯化钠。
因此，在一些实施方案中，本发明的干粉制剂包含：包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列的抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段、海藻糖和三亮氨酸，其中所述制剂提供约2.5mg、约5mg、约10mg、约15mg、约20mg或约25mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，当所述制剂通过经口吸入向所述受试者施用时，其中所述制剂可以进一步包含缓冲剂，诸如磷酸盐缓冲液，例如作为缓冲剂的磷酸二氢钾和/或无水磷酸二钠，和/或张度剂，诸如氯化钠。
每种单独的组分可以以本文所述的量和/或比率存在。
在一些实施方案中，本发明的干粉制剂可以如下表5-16中的一个所示，其中AZD1402是包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列的抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其片段或变体。
表5示例性制剂的组成
组分 量(w/w％)
AZD1402 60
PBS pH＝7.4 10.7
亮氨酸 20
海藻糖 9.3
表6示例性制剂的组成
组分 量(w/w％)
AZD1402 11
PBS pH＝7.4 1.9
亮氨酸 10
三亮氨酸 2.6
海藻糖 74.5
表7示例性制剂的组成
组分 量(w/w％)
AZD1402 33
PBS pH＝7.4 5.8
亮氨酸 10
三亮氨酸 2.6
海藻糖 48.6
表8示例性制剂的组成
表9：示例性制剂的组成
表10：示例性制剂的组成
表11：示例性制剂的组成
表12：示例性制剂的组成
/>
表13：示例性制剂的组成
组分 量(w/w％)
AZD1402 10.0
缓冲剂 0.11
张度剂 1.8
亮氨酸 40.0
海藻糖 48.1
表14：示例性制剂的组成
组分 量(w/w％)
AZD1402 10.0
缓冲剂 0.11
张度剂 1.8
三亮氨酸 20.0
海藻糖 68.1
表15：示例性制剂的组成
组分 量(w/w％)
AZD1402(SEQ ID NO:1) 50
组氨酸pH＝5.5 2.95
NaCl 8.63
亮氨酸 10
三亮氨酸 2.6
海藻糖 25.82
表16：示例性制剂的组成
组分 量(w/w％)
AZD1402(SEQ ID NO:1) 10
组氨酸pH＝5.5 0.59
NaCl 1.73
亮氨酸 10
三亮氨酸 2.6
海藻糖 75.08
因此，在一些优选的实施方案中，本发明的干粉制剂包含：包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列的抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段、海藻糖、亮氨酸和三亮氨酸。在一些实施方案中，干粉制剂进一步包含缓冲剂，例如磷酸盐缓冲液。
在其他优选的实施方案中，干粉制剂包含：包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列的抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段、海藻糖和亮氨酸。在一些实施方案中，干粉制剂进一步包含缓冲剂，例如磷酸盐缓冲液。
包含脂质运载蛋白突变蛋白的干粉制剂可单独施用或与其他治疗同时或顺序地组合施用。例如，脂质运载蛋白突变蛋白可与皮质类固醇(诸如吸入性皮质类固醇(ICS)、长效β2激动剂(LABA)和/或长效毒蕈碱拮抗剂(LAMA))联合施用。在一些实施方案中，脂质运载蛋白突变蛋白可与低或中剂量ICS、吸入性LABA和/或吸入性LAMA联合施用。ICS的低、中、高每日剂量描述于哮喘管理和预防的袖珍本指南，全球哮喘倡议，2020年更新中。
全身暴露
如本文所用，“全身暴露”意指吸入的脂质运载蛋白突变蛋白的实质部分进入循环系统，并且任选地，全身可受到脂质运载蛋白突变蛋白的影响。全身暴露可意味着进入循环系统的脂质运载蛋白突变蛋白的量是可量化的。全身暴露可相当于可量化的进入血流的脂质运载蛋白突变蛋白的浓度。此种暴露可由脂质运载蛋白突变蛋白的血液(血清、血浆或全血)浓度表示，所述浓度可随时间测量并通过一系列参数记录，包括曲线下面积(AUC)。全身暴露于脂质运载蛋白突变蛋白也可影响生物标志物，所述生物标志物的水平可与脂质运载蛋白突变蛋白的浓度直接相关，并因此与全身暴露相关。当与全身暴露结合使用时，术语“可量化的”或“可检测的”是指由脂质运载蛋白突变蛋白的血液(血清、血浆或全血)浓度或由通过本领域已知的一种或多种分析方法可测量的生物标志物的水平表示的暴露。此类分析方法包括但不限于ELISA、竞争性ELISA、荧光滴定、量热法、质谱(MS)和色谱法，诸如高效液相色谱法(HPLC)。还应理解，使用此类分析方法进行的测量与检测限(诸如仪器检测限、方法检测限和量化限)相关联。
药代动力学特性
本文呈现的结果证明，通过吸入干粉制剂向肺施用10mg的脂质运载蛋白突变蛋白的标称递送剂量引起与通过吸入雾化制剂施用18mg的脂质运载蛋白突变蛋白的标称递送剂量相当的脂质运载蛋白突变蛋白的全身暴露。在这种情况下，通过Cmax、AUC和AUClast测量全身暴露，如表69中所定义。因此，通过吸入干粉制剂施用脂质运载蛋白突变蛋白有利地实现了与通过吸入雾化制剂施用的剂量几乎两倍的相同水平的全身暴露。类似地，通过Cmax、AUC和AUClast测量的脂质运载蛋白突变蛋白的全身暴露在通过吸入雾化制剂施用18mg的脂质运载蛋白突变蛋白的标称递送剂量或通过吸入干粉制剂向肺施用10mg的脂质运载蛋白突变蛋白的标称递送剂量后比在通过吸入干粉制剂向肺施用30mg的脂质运载蛋白的标称递送剂量后低约73-78％。
在包括所附权利要求的整个说明书中，除非上下文另外要求，否则词语“包括(comprise、include)”及变型(诸如“包括(comprises、comprising和including)”)将理解为隐含包括规定的整数或步骤或者整数或步骤的组但不排除任何其他整数或步骤或者整数或步骤的组。
必须注意，除非上下文另有明确规定，如说明书和所附权利要求中所使用，单数形式“一个”、“一种”和“所述”包括复数指示物。因此，例如，对“脂质运载蛋白突变蛋白”的提及包括一种或多种脂质运载蛋白突变蛋白。
本文任何地方使用的术语“和/或”都包括“和”、“或”和“由所述术语连接的要素的所有或任何其他组合”的含义。
如本文所用，术语“约”或“大约”意指在给定值或范围的20％内，优选在10％内，并且更优选在5％内。然而，所述术语也包括具体数字，例如，“约20”包括20。
如本文所用，术语“至少约”包括具体数字，例如，“至少约6”包括6。
在前述描述中、或在以下权利要求中、或在附图中所公开的以其具体形式或根据用于执行所公开功能的手段，或用于获得所公开结果的方法或过程来表达的特征可单独地或以此类特征的任何组合用于以其多样化的形式实现本发明。
虽然已经结合上文描述的示例性实施方案描述了本发明，但当给出本公开时，本领域技术人员将了解许多等效的修改和变型。因此，上文阐述的本发明的示例性实施方案被视为说明性的而非限制性的。在不背离本发明的精神和范围的情况下，可以对所描述的实施方案作出各种改变。
为避免任何疑问，本文提供的任何理论解释都是为了提高读者的理解而提高。本发明人不希望受到这些理论解释中的任一种束缚。
本文所使用的任何小节标题仅出于组织性目的且不诠释为限制所描述的主题。
实施例
表17.标称计量和递送剂量
API：活性药物成分；T：海藻糖；TL：海藻糖和亮氨酸；TLT：海藻糖、亮氨酸和三亮氨酸；TT：海藻糖和三亮氨酸
实施例1-85W/W％AZD1402和缓冲盐制剂的气溶胶性能特征
以下实施例评估了包含AZD1402和缓冲盐的制剂在干粉吸入器装置中的气溶胶性能。对AZD1402:PBS的比率不小于(NLT)5.2:1的制剂进行表19中所列的气溶胶性能输出的测试。在所有实施例1-15中，使用单剂量RS01装置，用3号胶囊完成所有产品性能表征。在60L/min的空气流速下进行新一代撞击器(NGI)分析。
表18：制剂的组成
AZD 1402最初是液体制剂，NLT的浓度为50mg/ml。通过用水稀释AZD1402溶液来制备固体总浓度为50mg/mL的原料溶液。使用65℃的出口温度、1.85ml/min的原料进料速率、2150升/小时的雾化器空气和23千克/小时的干燥气体流量喷雾干燥进料溶液。选择参数以获得可接受的水含量和颗粒特性，并且保持旨在用于吸入的干粉制剂的生物活性。
表19列出了物理粉末特征属性的数据。
表19：分析的颗粒参数
按照美国药典第601章(USP<601>)进行级联撞击测试，以测量从干粉吸入器装置递送时喷雾干燥的制剂的气溶胶性能。所使用的级联撞击器设备是新一代撞击器(NGI；USP41，第<601>章)。对于本实施例中进行的气溶胶测量，按照USP方法，将一个含有20mg喷雾干燥粉末制剂的3号HPMC胶囊从干粉吸入器装置中分散出来，并且以60L/min的气流速率递送到NGI中。回收来自NGI的每个阶段的样品并分析AZD1402含量。
在所有实施例1-15中，使用酶联免疫吸附测定(ELISA)来证明AZD1402与其特定靶IL-4受体的结合活性。所述方法是一种抗体捕获、抗原过量测定法，并且依赖于AZD1402可以固定在包被有抗原重组人sIL-4α受体的96孔板上的事实。通过添加一抗AZD1402抗体来检测固定的AZD1402，随后添加用HRP酶标记的二抗抗体。HRP酶催化底物反应产生有色产物。有色产物的量与存在的二抗的量成正比，二抗的量又与抗原捕获的AZD1402的量成正比。将各种已知浓度的AZD1402标准品与过量抗原一起孵育，并且构建校准曲线。用4参数逻辑(4PL)曲线拟合绘制所得对数浓度对吸光度响应。
表20总结了包括单独储存在密封铝袋中的胶囊的12个月稳定性的结果。
表20：表征结果
a针对参考样品测量生物活性。
实施例2-海藻糖制剂中2W/W％AZD1402的气溶胶性能特征
以下实施例评估了干粉吸入器装置中包含海藻糖的制剂的气溶胶性能。对药物负载为2w/w％且AZD1402:PBS的比率为NLT 5.2:1的制剂进行表22中所列的气溶胶性能输出的测试。
表21：制剂的组成
AZD 1402最初是液体制剂，NLT的浓度为50mg/mL。通过首先将海藻糖溶解在水中，然后添加到AZD1402溶液中来制备固体总浓度为40-50mg/mL的原料溶液。使用65℃的出口温度、2.0ml/min的原料进料速率、2150升/小时的雾化器空气和23千克/小时的干燥气体流量喷雾干燥进料溶液。选择参数以获得可接受的水含量和颗粒特性，并且保持旨在用于吸入的干粉制剂的生物活性。
表22列出了物理粉末特征属性的数据。
表22：分析的颗粒参数
根据USP<601>进行级联撞击测试，以测量从干粉吸入器装置递送时喷雾干燥的制剂的气溶胶性能。所使用的级联撞击器设备是新一代撞击器(NGI；USP41，第<601>章)。对于本实施例中进行的气溶胶测量，按照USP方法，将一个含有20mg喷雾干燥粉末制剂的3号HPMC胶囊从干粉吸入器装置中分散出来，并且以60L/min的气流速率递送到NGI中。回收来自NGI的每个阶段的样品并分析AZD1402含量。
气溶胶分析的结果总结在表23中。由于初始结果指示不充分的特性，因此没有对此制剂的稳定性进行跟踪。
表23：表征结果
/>
a针对参考样品测量生物活性。
实施例3-海藻糖制剂中60W/W％AZD1402的气溶胶性能特征
以下实施例评估了干粉吸入器装置中包含海藻糖的制剂的气溶胶性能。对药物负载为60w/w％且AZD1402:PBS的比率为NLT 5.2:1的制剂进行表25中所列的气溶胶性能输出的测试。
表24：制剂的组成
AZD1402最初为液体制剂，NLT的浓度为50mg/mL。通过首先将海藻糖溶解在水中，然后添加到AZD1402溶液中来制备固体总浓度为40-50mg/mL的原料溶液。使用65℃的出口温度、2.0ml/min的原料进料速率、2150升/小时的雾化器空气和23千克/小时的干燥气体流量喷雾干燥进料溶液。选择参数以获得可接受的水含量和颗粒特性，并且保持旨在用于吸入的干粉制剂的生物活性。
表25列出了物理粉末特征属性的数据。
表25：分析的颗粒参数
根据USP<601>进行级联撞击测试，以测量从干粉吸入器装置递送时喷雾干燥的制剂的气溶胶性能。所使用的级联撞击器设备是新一代撞击器(NGI；USP41，第<601>章)。对于本实施例中进行的气溶胶测量，按照USP方法，将一个含有20mg喷雾干燥粉末制剂的3号HPMC胶囊从干粉吸入器装置中分散出来，并且以60L/min的气流速率递送到NGI中。回收来自NGI的每个阶段的样品并分析AZD1402含量。
表26总结了包括单独储存在密封铝袋中的胶囊的6个月稳定性的气溶胶分析的结果。
表26：表征结果
a针对参考样品测量生物活性。
实施例4-海藻糖-亮氨酸制剂中2W/W％AZD1402的气溶胶性能特征
以下实施例评估了干粉吸入器装置中包含海藻糖和亮氨酸的制剂的气溶胶性能。对药物负载为2w/w％且AZD1402:PBS的比率为NLT 5.2:1的制剂进行表28中所列的气溶胶性能输出的测试。
表27：制剂的组成
AZD 1402最初是液体制剂，NLT的浓度为50mg/mL。通过首先将亮氨酸和海藻糖溶解在水中，然后添加到AZD1402溶液中来制备固体总浓度为50mg/mL的原料溶液。使用65℃的出口温度、2.0ml/min的原料进料速率、2150升/小时的雾化器空气和23千克/小时的干燥气体流量喷雾干燥进料溶液。选择参数以获得可接受的水含量和颗粒特性，并且保持旨在用于吸入的干粉制剂的生物活性。
表28列出了物理粉末特征属性的数据。
表28：分析的颗粒参数
根据USP<601>进行级联撞击测试，以测量从干粉吸入器装置递送时喷雾干燥的制剂的气溶胶性能。所使用的级联撞击器设备是新一代撞击器(NGI；USP41，第<601>章)。对于本实施例中进行的气溶胶测量，按照USP方法，将一个含有10mg喷雾干燥粉末制剂的3号HPMC胶囊从干粉吸入器装置中分散出来，并且以60L/min的气流速率递送到NGI中。回收来自NGI的每个阶段的样品并分析AZD1402含量。
当从单剂量干粉吸入器装置递送时，喷雾干燥制剂的递送剂量测试按照USP<601>进行，同时使用不同的剂量收集单元。将粉末气溶胶收集在一个玻璃设备中，所述设备是一个撞击滤尘器，配有用于密封的可充气入口和烧结玻璃过滤器(孔径为40-100μm)，(也描述于Hugosson S等人，Pharm Forum 1993；19(第3期):5458-5466.中)。在此实施例中，按照USP方法，将一个含有10mg喷雾干燥粉末制剂的3号HPMC胶囊从干粉吸入器装置中分散出来，并且以60L/min的气流速率(对应于吸入器上4kPa的压降)递送到撞击滤尘器中。回收来自撞击滤尘器的样品，并且对其进行AZD1402含量分析。
表29总结了包括单独储存在密封铝袋中的胶囊的6个月稳定性的气溶胶分析的结果。
表29：气溶胶表征的结果
a针对参考样品测量生物活性，并且所述方法存在可变性。
实施例5-亮氨酸制剂中60W/W％AZD1402的气溶胶性能特征
以下实施例评估了干粉吸入器装置中包含海藻糖的制剂的气溶胶性能。对药物负载为60w/w％且AZD1402:PBS的比率为NLT 5.2:1的制剂进行表31中所列的气溶胶性能输出的测试。
表30：制剂的组成
AZD 1402最初是液体制剂，NLT的浓度为50mg/mL。通过首先将三亮氨酸和海藻糖溶解在水中，然后添加到AZD1402溶液中来制备固体总浓度为40-50mg/mL的原料溶液。使用65℃的出口温度、6.0ml/min的原料进料速率、6.5千克/小时的雾化器空气和40千克/小时的干燥气体流量喷雾干燥进料溶液。选择参数以获得可接受的水含量和颗粒特性，并且保持旨在用于吸入的干粉制剂的生物活性。此制剂具有足够的化学和物理稳定性，包括生物活性，以及在三亮氨酸来源成问题时的整个储存期间的气溶胶性能。
表31列出了物理粉末特征属性的数据。
表31：分析的颗粒参数
根据USP<601>进行级联撞击测试，以测量从干粉吸入器装置递送时喷雾干燥的制剂的气溶胶性能。所使用的级联撞击器设备是新一代撞击器(NGI；USP41，第<601>章)。对于本实施例中进行的气溶胶测量，按照USP方法，将一个含有20mg喷雾干燥粉末制剂的3号HPMC胶囊从干粉吸入器装置中分散出来，并且以60L/min的气流速率递送到NGI中。回收来自NGI的每个阶段的样品并分析AZD1402含量。
当从单剂量干粉吸入器装置递送时，喷雾干燥制剂的递送剂量测试按照USP<601>进行，同时使用不同的剂量收集单元。将粉末气溶胶收集在一个玻璃设备中，所述设备是一个撞击滤尘器，配有用于密封的可充气入口和烧结玻璃过滤器(孔径为40-100μm)，(也描述于Hugosson S等人，Pharm Forum 1993；19(第3期):5458-5466.中)。在此实施例中，按照USP方法，将一个含有20mg喷雾干燥粉末制剂的3号HPMC胶囊从干粉吸入器装置中分散出来，并且以60L/min的气流速率(对应于吸入器上4kPa的压降)递送到撞击滤尘器中。回收来自撞击滤尘器的样品，并且对其进行AZD1402含量分析。
表32总结了包括单独储存在密封铝袋中的胶囊的12个月稳定性的气溶胶分析的结果。
表32：气溶胶表征的结果
a针对参考样品测量生物活性，并且所述方法存在可变性。
实施例6-海藻糖-亮氨酸制剂中60W/W％AZD1402的气溶胶性能特征
以下实施例评估了干粉吸入器装置中包含海藻糖的制剂的气溶胶性能。对药物负载为60w/w％且AZD1402:PBS的比率为NLT 5.2:1的制剂进行表34中所列的气溶胶性能输出的测试。
表33：制剂的组成
AZD 1402最初是液体制剂，NLT的浓度为50mg/mL。通过首先将亮氨酸和海藻糖溶解在水中，然后添加到AZD1402溶液中来制备固体总浓度为40mg/mL的原料溶液。使用65℃的出口温度、2.0ml/min的原料进料速率、2150升/小时的雾化器空气和23千克/小时的干燥气体流量喷雾干燥进料溶液。选择参数以获得可接受的水含量和颗粒特性，并且保持旨在用于吸入的干粉制剂的生物活性。
表34列出了物理粉末特征属性的数据。
表34：分析的颗粒参数
根据USP<601>进行级联撞击测试，以测量从干粉吸入器装置递送时喷雾干燥的制剂的气溶胶性能。所使用的级联撞击器设备是新一代撞击器(NGI；USP41，第<601>章)。对于本实施例中进行的气溶胶测量，按照USP方法，将一个含有40mg喷雾干燥粉末制剂的3号HPMC胶囊从干粉吸入器装置中分散出来，并且以60L/min的气流速率递送到NGI中。回收来自NGI的每个阶段的样品并分析AZD1402含量。
当从单剂量干粉吸入器装置递送时，喷雾干燥制剂的递送剂量测试按照USP<601>进行，同时使用不同的剂量收集单元。将粉末气溶胶收集在一个玻璃设备中，所述设备是一个撞击滤尘器，配有用于密封的可充气入口和烧结玻璃过滤器(孔径为40-100μm)，(也描述于Hugosson S等人，Pharm Forum 1993；19(第3期):5458-5466.中)。在此实施例中，按照USP方法，将一个含有40mg喷雾干燥粉末制剂的3号HPMC胶囊从干粉吸入器装置中分散出来，并且以60L/min的气流速率(对应于吸入器上4kPa的压降)递送到撞击滤尘器中。回收来自撞击滤尘器的样品，并且对其进行AZD1402含量分析。
表35总结了包括单独储存在密封铝袋中的胶囊的6个月稳定性的气溶胶分析的结果。
表35：表征结果
a针对参考样品测量生物活性，并且所述方法存在可变性。
实施例7-海藻糖-亮氨酸-三亮氨酸制剂中2W/W％AZD1402的气溶胶性能特征
以下实施例评估了干粉吸入器装置中包含海藻糖的制剂的气溶胶性能。对药物负载为2w/w％且AZD1402:PBS的比率为NLT 5.2:1的制剂进行表37中所列的气溶胶性能输出的测试。
表36：制剂的组成
AZD 1402最初是液体制剂，NLT的浓度为50mg/mL。通过首先将亮氨酸和海藻糖溶解在水中，然后添加到AZD1402溶液中来制备固体总浓度为50mg/mL的原料溶液。使用65℃的出口温度、2.0ml/min的原料进料速率、2150升/小时的雾化器空气和23千克/小时的干燥气体流量喷雾干燥进料溶液。选择参数以获得可接受的水含量、颗粒特性和改善的物理稳健性，诸如防潮性，以及保持旨在用于吸入的干粉制剂的生物活性。
表37列出了物理粉末特征属性的数据。
表37：分析的颗粒参数
根据USP<601>进行级联撞击测试，以测量从干粉吸入器装置递送时喷雾干燥的制剂的气溶胶性能。所使用的级联撞击器设备是新一代撞击器(NGI；USP41，第<601>章)。对于本实施例中进行的气溶胶测量，按照USP方法，将一个含有10mg喷雾干燥粉末制剂的3号HPMC胶囊从干粉吸入器装置中分散出来，并且以60L/min的气流速率递送到NGI中。回收来自NGI的每个阶段的样品并分析AZD1402含量。
当从单剂量干粉吸入器装置递送时，喷雾干燥制剂的递送剂量测试按照USP<601>进行，同时使用不同的剂量收集单元。将粉末气溶胶收集在一个玻璃设备中，所述设备是一个撞击滤尘器，配有用于密封的可充气入口和烧结玻璃过滤器(孔径为40-100μm)，(也描述于Hugosson S等人，Pharm Forum 1993；19(第3期):5458-5466.中)。在此实施例中，按照USP方法，将一个含有10mg喷雾干燥粉末制剂的3号HPMC胶囊从干粉吸入器装置中分散出来，并且以60L/min的气流速率(对应于吸入器上4kPa的压降)递送到撞击滤尘器中。回收来自撞击滤尘器的样品，并且对其进行AZD1402含量分析。
表38总结了包括单独储存在密封铝袋中的胶囊的6个月稳定性的气溶胶分析的结果。
表38：表征结果
实施例8-海藻糖-亮氨酸-三亮氨酸制剂中60W/W％AZD1402的气溶胶性能特征
以下实施例评估了干粉吸入器装置中包含海藻糖的制剂的气溶胶性能。对药物负载为60w/w％且AZD1402:PBS的比率为NLT 5.2:1的制剂进行表40中所列的气溶胶性能输出的测试。
表39：制剂的组成
AZD 1402最初是液体制剂，NLT的浓度为50mg/mL。通过首先将亮氨酸和海藻糖溶解在水中，然后添加到AZD1402溶液中来制备固体总浓度为40mg/mL的原料溶液。使用65℃的出口温度、2.0ml/min的原料进料速率、2150升/小时的雾化器空气和23千克/小时的干燥气体流量喷雾干燥进料溶液。选择参数以获得可接受的水含量、颗粒特性和改善的物理稳健性，诸如防潮性，以及保持旨在用于吸入的干粉制剂的生物活性。
表40列出了物理粉末特征属性的数据。
表40：分析的颗粒参数
根据USP<601>进行级联撞击测试，以测量从干粉吸入器装置递送时喷雾干燥的制剂的气溶胶性能。所使用的级联撞击器设备是新一代撞击器(NGI；USP41，第<601>章)。对于本实施例中进行的气溶胶测量，按照USP方法，将一个含有40mg喷雾干燥粉末制剂的3号HPMC胶囊从干粉吸入器装置中分散出来，并且以60L/min的气流速率递送到NGI中。回收来自NGI的每个阶段的样品并分析AZD1402含量。
当从单剂量干粉吸入器装置递送时，喷雾干燥制剂的递送剂量测试按照USP<601>进行，同时使用不同的剂量收集单元。将粉末气溶胶收集在一个玻璃设备中，所述设备是一个撞击滤尘器，配有用于密封的可充气入口和烧结玻璃过滤器(孔径为40-100μm)，(也描述于Hugosson S等人，Pharm Forum 1993；19(第3期):5458-5466.中)。在此实施例中，按照USP方法，将一个含有40mg喷雾干燥粉末制剂的3号HPMC胶囊从干粉吸入器装置中分散出来，并且以60L/min的气流速率(对应于吸入器上4kPa的压降)递送到撞击滤尘器中。回收来自撞击滤尘器的样品，并且对其进行AZD1402含量分析。
表41总结了包括单独储存在密封铝袋中的胶囊的6个月稳定性的气溶胶分析的结果。
表41：气溶胶表征的结果
a针对参考样品测量生物活性，并且所述方法存在可变性。
实施例9-海藻糖-亮氨酸-三亮氨酸制剂中11W/W％AZD1402的气溶胶性能特征
以下实施例评估了干粉吸入器装置中包含海藻糖的制剂的气溶胶性能。对药物负载为11w/w％且AZD1402:PBS的比率为NLT 5.2:1的制剂进行表43中所列的气溶胶性能输出的测试。
表42：制剂的组成
AZD 1402最初是液体制剂，NLT的浓度为50mg/mL。通过首先将亮氨酸和海藻糖溶解在水中，然后添加到AZD1402溶液中来制备固体总浓度为50mg/mL的原料溶液。使用65℃的出口温度、6.0毫升/分钟的原料进料速率、9.5千克/小时的雾化器气体和40千克/小时的干燥气体流量喷雾干燥进料溶液。选择参数以获得可接受的颗粒特性和改善的物理稳健性，诸如防潮性，以及保持旨在用于吸入的干粉制剂的生物活性。此制剂表现出良好的气溶胶性能、改善的物理稳健性，诸如防潮性、生物活性，并且在整个储存期间是物理和化学稳定的。
表43列出了物理粉末特征属性的数据。
表43：分析的颗粒参数
根据USP<601>进行级联撞击测试，以测量从干粉吸入器装置递送时喷雾干燥的制剂的气溶胶性能。所使用的级联撞击器设备是新一代撞击器(NGI；USP41，第<601>章)。对于本实施例中进行的气溶胶测量，按照USP方法，将一个含有10mg喷雾干燥粉末制剂的3号HPMC胶囊从干粉吸入器装置中分散出来，并且以60L/min的气流速率递送到NGI中。回收来自NGI的每个阶段的样品并分析AZD1402含量。
当从单剂量干粉吸入器装置递送时，喷雾干燥制剂的递送剂量测试按照USP<601>进行，同时使用不同的剂量收集单元。将粉末气溶胶收集在一个玻璃设备中，所述设备是一个撞击滤尘器，配有用于密封的可充气入口和烧结玻璃过滤器(孔径为40-100μm)，(也描述于Hugosson S等人，Pharm Forum 1993；19(第3期):5458-5466.中)。在此实施例中，按照USP方法，将一个含有10mg喷雾干燥粉末制剂的3号HPMC胶囊从干粉吸入器装置中分散出来，并且以60L/min的气流速率(对应于吸入器上4kPa的压降)递送到撞击滤尘器中。回收来自撞击滤尘器的样品，并且对其进行AZD1402含量分析。
表44总结了包括单独储存在密封铝袋中的胶囊的6个月稳定性的气溶胶分析的结果。
表44：气溶胶表征的结果
a针对参考样品测量生物活性，并且所述方法存在可变性。
实施例10-海藻糖-亮氨酸-三亮氨酸制剂中33W/W％AZD1402的气溶胶性能特征
以下实施例评估了干粉吸入器装置中包含海藻糖的制剂的气溶胶性能。对药物负载为33w/w％且AZD1402:PBS的比率为NLT 5.2:1的制剂进行表46中所列的气溶胶性能输出的测试。
表45：制剂的组成
AZD 1402最初是液体制剂，NLT的浓度为50mg/mL。通过首先将亮氨酸和海藻糖溶解在水中，然后添加到AZD1402溶液中来制备固体总浓度为50mg/mL的原料溶液。使用65℃的出口温度、6.0毫升/分钟的原料进料速率、9.5千克/小时的雾化器气体和40千克/小时的干燥气体流量喷雾干燥进料溶液。选择参数以获得可接受的水含量和颗粒特性，并且保持旨在用于吸入的干粉制剂的生物活性。此制剂表现出良好的气溶胶性能、改善的物理稳健性，诸如防潮性、生物活性，并且在整个储存期间是物理和化学稳定的。
表46列出了物理粉末特征属性的数据。
表46：分析的颗粒参数
根据USP<601>进行级联撞击测试，以测量从干粉吸入器装置递送时喷雾干燥的制剂的气溶胶性能。所使用的级联撞击器设备是新一代撞击器(NGI；USP41，第<601>章)。对于本实施例中进行的气溶胶测量，按照USP方法，将一个含有10mg喷雾干燥粉末制剂的3号HPMC胶囊从干粉吸入器装置中分散出来，并且以60L/min的气流速率递送到NGI中。回收来自NGI的每个阶段的样品并分析AZD1402含量。
当从单剂量干粉吸入器装置递送时，喷雾干燥制剂的递送剂量测试按照USP<601>进行，同时使用不同的剂量收集单元。将粉末气溶胶收集在一个玻璃设备中，所述设备是一个撞击滤尘器，配有用于密封的可充气入口和烧结玻璃过滤器(孔径为40-100μm)，(也描述于Hugosson S等人，Pharm Forum 1993；19(第3期):5458-5466.中)。在此实施例中，按照USP方法，将一个含有10mg喷雾干燥粉末制剂的3号HPMC胶囊从干粉吸入器装置中分散出来，并且以60L/min的气流速率(对应于吸入器上4kPa的压降)递送到撞击滤尘器中。回收来自撞击滤尘器的样品，并且对其进行AZD1402含量分析。
表47总结了包括单独储存在密封铝袋中的胶囊的6个月稳定性的气溶胶分析的结果。
表47：气溶胶表征的结果
a针对参考样品测量生物活性，并且所述方法存在可变性。
实施例11-海藻糖-亮氨酸-三亮氨酸制剂中60W/W％AZD1402的气溶胶性能特征
以下实施例评估了干粉吸入器装置中包含海藻糖的制剂的气溶胶性能。对药物负载为60w/w％且AZD1402:PBS的比率为NLT 5.2:1的制剂进行表49中所列的气溶胶性能输出的测试。
表48：制剂的组成
AZD 1402最初是液体制剂，NLT的浓度为50mg/mL。通过首先将亮氨酸、三亮氨酸和海藻糖溶解在水中，然后添加到AZD1402溶液中来制备固体总浓度为50mg/mL的原料溶液。使用65℃的出口温度、6.0毫升/分钟的原料进料速率、9.5千克/小时的雾化器气体和40千克/小时的干燥气体流量喷雾干燥进料溶液。选择参数以获得可接受的水、颗粒特性和改善的物理稳健性，诸如防潮性，以及保持旨在用于吸入的干粉制剂的生物活性。此制剂显示出良好的气溶胶性能，改善的物理稳健性，诸如防潮性、生物活性，并且在整个储存期内是物理和化学稳定的。
表49列出了物理粉末特征属性的数据。
表49：分析的颗粒参数
/>
根据USP<601>进行级联撞击测试，以测量从干粉吸入器装置递送时喷雾干燥的制剂的气溶胶性能。所使用的级联撞击器设备是新一代撞击器(NGI；USP41，第<601>章)。对于本实施例中进行的气溶胶测量，按照USP方法，将一个含有18.5mg喷雾干燥粉末制剂的3号HPMC胶囊从干粉吸入器装置中分散出来，并且以60L/min的气流速率递送到NGI中。回收来自NGI的每个阶段的样品并分析AZD1402含量。
当从单剂量干粉吸入器装置递送时，喷雾干燥制剂的递送剂量测试按照USP<601>进行，同时使用不同的剂量收集单元。将粉末气溶胶收集在一个玻璃设备中，所述设备是一个撞击滤尘器，配有用于密封的可充气入口和烧结玻璃过滤器(孔径为40-100μm)，(也描述于Hugosson S等人，Pharm Forum 1993；19(第3期):5458-5466.中)。在此实施例中，按照USP方法，将一个含有18.5mg喷雾干燥粉末制剂的3号HPMC胶囊从干粉吸入器装置中分散出来，并且以60L/min的气流速率(对应于吸入器上4kPa的压降)递送到撞击滤尘器中。回收来自撞击滤尘器的样品，并且对其进行AZD1402含量分析。
表50总结了包括单独储存在密封铝袋中的胶囊的6个月稳定性的气溶胶分析的结果。
表50：气溶胶表征的结果
a针对参考样品测量生物活性，并且所述方法存在可变性。
实施例12-3W/W％三亮氨酸制剂中5W/W％AZD1402的气溶胶性能特征
以下实施例评估了干粉吸入器装置中包含海藻糖的制剂的气溶胶性能。对药物负载为5w/w％且AZD1402:PBS的比率为NLT 5.2:1的制剂进行表52中所列的气溶胶性能输出的测试。
表51：制剂的组成
AZD 1402最初是液体制剂，NLT的浓度为50mg/mL。通过首先将三亮氨酸和海藻糖溶解在水中，然后添加到AZD1402溶液中来制备固体总浓度为50mg/mL的原料溶液。使用65℃的出口温度、2.0ml/min的原料进料速率、2150升/小时的雾化器空气和23千克/小时的干燥气体流量喷雾干燥进料溶液。选择参数以获得可接受的水含量、颗粒特性和改善的物理稳健性，诸如防潮性，以及保持旨在用于吸入的干粉制剂的生物活性。
表52列出了物理粉末特征属性的数据。
表52：分析的颗粒参数
根据USP<601>进行级联撞击测试，以测量从干粉吸入器装置递送时喷雾干燥的制剂的气溶胶性能。所使用的级联撞击器设备是新一代撞击器(NGI；USP41，第<601>章)。对于本实施例中进行的气溶胶测量，按照USP方法，将一个含有10mg喷雾干燥粉末制剂的3号HPMC胶囊从干粉吸入器装置中分散出来，并且以60L/min的气流速率递送到NGI中。回收来自NGI的每个阶段的样品并分析AZD1402含量。
当从单剂量干粉吸入器装置递送时，喷雾干燥制剂的递送剂量测试按照USP<601>进行，同时使用不同的剂量收集单元。将粉末气溶胶收集在一个玻璃设备中，所述设备是一个撞击滤尘器，配有用于密封的可充气入口和烧结玻璃过滤器(孔径为40-100μm)，(也描述于Hugosson S等人，Pharm Forum 1993；19(第3期):5458-5466.中)。在此实施例中，按照USP方法，将一个含有10mg喷雾干燥粉末制剂的3号HPMC胶囊从干粉吸入器装置中分散出来，并且以60L/min的气流速率(对应于吸入器上4kPa的压降)递送到撞击滤尘器中。回收来自撞击滤尘器的样品，并且对其进行AZD1402含量分析。
表53总结了包括单独储存在密封铝袋中的胶囊的2个月稳定性的气溶胶分析的结果。
表53：气溶胶表征的结果
实施例13-5W/W％三亮氨酸制剂中5W/W％AZD1402的气溶胶性能特征
以下实施例评估了干粉吸入器装置中包含海藻糖的制剂的气溶胶性能。对药物负载为5w/w％且AZD1402:PBS的比率为NLT 5.2:1的制剂进行表55中所列的气溶胶性能输出的测试。
表54：制剂的组成
AZD 1402最初是液体制剂，NLT的浓度为50mg/mL。通过首先将三亮氨酸和海藻糖溶解在水中，然后添加到AZD1402溶液中来制备固体总浓度为50mg/mL的原料溶液。使用65℃的出口温度、2.0ml/min的原料进料速率、2150升/小时的雾化器空气和23千克/小时的干燥气体流量喷雾干燥进料溶液。选择参数以获得可接受的水含量、颗粒特性和改善的物理稳健性，诸如防潮性，以及保持旨在用于吸入的干粉制剂的生物活性。
表55列出了物理粉末特征属性的数据。
表55：分析的颗粒参数
根据USP<601>进行级联撞击测试，以测量从干粉吸入器装置递送时喷雾干燥的制剂的气溶胶性能。所使用的级联撞击器设备是新一代撞击器(NGI；USP41，第<601>章)。对于本实施例中进行的气溶胶测量，按照USP方法，将一个含有10mg喷雾干燥粉末制剂的3号HPMC胶囊从干粉吸入器装置中分散出来，并且以60L/min的气流速率递送到NGI中。回收来自NGI的每个阶段的样品并分析AZD1402含量。
当从单剂量干粉吸入器装置递送时，喷雾干燥制剂的递送剂量测试按照USP<601>进行，同时使用不同的剂量收集单元。将粉末气溶胶收集在一个玻璃设备中，所述设备是一个撞击滤尘器，配有用于密封的可充气入口和烧结玻璃过滤器(孔径为40-100μm)，(也描述于Hugosson S等人，Pharm Forum 1993；19(第3期):5458-5466.中)。在此实施例中，按照USP方法，将一个含有10mg喷雾干燥粉末制剂的3号HPMC胶囊从干粉吸入器装置中分散出来，并且以60L/min的气流速率(对应于吸入器上4kPa的压降)递送到撞击滤尘器中。回收来自撞击滤尘器的样品，并且对其进行AZD1402含量分析。
表56总结了包括单独储存在密封铝袋中的胶囊的2个月稳定性的气溶胶分析的结果。
表56：气溶胶表征的结果
a针对参考样品测量生物活性，并且所述方法存在可变性。
实施例14-海藻糖-亮氨酸-三亮氨酸制剂和组氨酸缓冲液中10W/W％AZD1402的气溶胶性能特征
以下实施例评估了干粉吸入器装置中包含海藻糖、亮氨酸和三亮氨酸的制剂的气溶胶性能。对药物负载为10w/w％且AZD1402:组氨酸的比率为NLT 4.1:1的制剂进行表58中所列的气溶胶性能输出的测试。
表57：制剂的组成
组分 量(w/w％)
AZD1402(SEQ ID NO:1) 10
组氨酸pH＝5.5 0.59
NaCl 1.73
亮氨酸 10
三亮氨酸 2.6
海藻糖 75.08
AZD 1402最初是液体制剂，NLT的浓度为50mg/mL。通过首先将亮氨酸和海藻糖溶解在水中，然后添加到AZD1402溶液中来制备固体总浓度为50mg/mL的原料溶液。使用65℃的出口温度、6.0毫升/分钟的原料进料速率、9.5千克/小时的雾化器气体和40千克/小时的干燥气体流量喷雾干燥进料溶液。选择参数以获得可接受的颗粒特性和改善的物理稳健性，诸如防潮性，以及保持旨在用于吸入的干粉制剂的生物活性。此制剂显示出良好的气溶胶性能，改善的物理稳健性，诸如防潮性、生物活性，并且在整个储存期内是物理和化学稳定的。
表58列出了物理粉末特征属性的数据。
表58：分析的颗粒参数
根据USP<601>进行级联撞击测试，以测量从干粉吸入器装置递送时喷雾干燥的制剂的气溶胶性能。所使用的级联撞击器设备是新一代撞击器(NGI；USP41，第<601>章)。对于本实施例中进行的气溶胶测量，按照USP方法，将一个含有10mg喷雾干燥粉末制剂的3号HPMC胶囊从干粉吸入器装置中分散出来，并且以60L/min的气流速率递送到NGI中。回收来自NGI的每个阶段的样品并分析AZD1402含量。
当从单剂量干粉吸入器装置递送时，喷雾干燥制剂的递送剂量测试按照USP<601>进行，同时使用不同的剂量收集单元。将粉末气溶胶收集在一个玻璃设备中，所述设备是一个撞击滤尘器，配有用于密封的可充气入口和烧结玻璃过滤器(孔径为40-100μm)，(也描述于Hugosson S等人，Pharm Forum 1993；19(第3期):5458-5466.中)。在此实施例中，按照USP方法，将一个含有10mg喷雾干燥粉末制剂的3号HPMC胶囊从干粉吸入器装置中分散出来，并且以60L/min的气流速率(对应于吸入器上4kPa的压降)递送到撞击滤尘器中。回收来自撞击滤尘器的样品，并且对其进行AZD1402含量分析。
表59总结了单独储存在密封铝袋中的胶囊的气溶胶分析的结果。
表59：气溶胶表征的结果
/>
a针对参考样品测量生物活性，并且所述方法存在可变性。
实施例15-海藻糖-亮氨酸-三亮氨酸制剂和组氨酸缓冲液中50W/W％AZD1402的气溶胶性能特征
以下实施例评估了干粉吸入器装置中包含海藻糖、亮氨酸和三亮氨酸的制剂的气溶胶性能。对药物负载为50w/w％且AZD1402:组氨酸的比率为NLT 4.1:1的制剂进行表61中所列的气溶胶性能输出的测试。
表60：制剂的组成
组分 量(w/w％)
AZD1402(SEQ ID NO:1) 50
组氨酸pH＝5.5 2.95
NaCl 8.63
亮氨酸 10
三亮氨酸 2.6
海藻糖 25.82
AZD 1402最初是液体制剂，NLT的浓度为50mg/mL。通过首先将亮氨酸和海藻糖溶解在水中，然后添加到AZD1402溶液中来制备固体总浓度为50mg/mL的原料溶液。使用65℃的出口温度、6.0毫升/分钟的原料进料速率、9.5千克/小时的雾化器气体和40千克/小时的干燥气体流量喷雾干燥进料溶液。选择参数以获得可接受的颗粒特性和改善的物理稳健性，诸如防潮性，以及保持旨在用于吸入的干粉制剂的生物活性。此制剂显示出良好的气溶胶性能，改善的物理稳健性，诸如防潮性、生物活性，并且在整个储存期内是物理和化学稳定的。
表61列出了物理粉末特征属性的数据。
表61：分析的颗粒参数
根据USP<601>进行级联撞击测试，以测量从干粉吸入器装置递送时喷雾干燥的制剂的气溶胶性能。所使用的级联撞击器设备是新一代撞击器(NGI；USP41，第<601>章)。对于本实施例中进行的气溶胶测量，按照USP方法，将一个含有18.5mg喷雾干燥粉末制剂的3号HPMC胶囊从干粉吸入器装置中分散出来，并且以60L/min的气流速率递送到NGI中。回收来自NGI的每个阶段的样品并分析AZD1402含量。
当从单剂量干粉吸入器装置递送时，喷雾干燥制剂的递送剂量测试按照USP<601>进行，同时使用不同的剂量收集单元。将粉末气溶胶收集在一个玻璃设备中，所述设备是一个撞击滤尘器，配有用于密封的可充气入口和烧结玻璃过滤器(孔径为40-100μm)，(也描述于Hugosson S等人，Pharm Forum 1993；19(第3期):5458-5466.中)。在此实施例中，按照USP方法，将一个含有18.5mg喷雾干燥粉末制剂的3号HPMC胶囊从干粉吸入器装置中分散出来，并且以60L/min的气流速率(对应于吸入器上4kPa的压降)递送到撞击滤尘器中。回收来自撞击滤尘器的样品，并且对其进行AZD1402含量分析。
表62总结了单独储存在密封铝袋中的胶囊的气溶胶分析的结果。
表62：气溶胶表征的结果
a针对参考样品测量生物活性，并且所述方法存在可变性。
实施例16.评估吸入装置和制剂对健康受试者单次吸入剂量AZD1402后的药代动力学的影响的随机开放标签、3期、3次治疗的交叉研究
2.1研究和剂量原理
本研究旨在评估吸入粉雾剂(通过Plastiape单剂量吸入器递送)对AZD1402的PK特征的影响，并且将其与迄今为止研究中施用的雾化溶液(通过InnoSpire Go递送)进行比较。研究结果提供了关于研究材料的PK曲线的信息以用于进一步的临床研究。由于PK评估是主要目的，因此选择了开放性设计。本研究在健康受试者中进行，以尽量减少伴随疾病状态或药物对研究测量的影响。受试者以随机顺序接受所有3种测试产品。
选择18mg的InnoSpire Go雾化器标称递送剂量(测试产品A)，因为它在迄今为止进行的研究中安全且耐受性良好，与未来的开发计划具有临床相关性，并且可提供长达18小时的可测量血清浓度。
选择10mg的Plastiape单剂量干粉吸入器(DPI)标称递送剂量(治疗B)以递送与9mg的治疗A相当的肺部剂量(基于计算的雾化器和DPI吸入装置效率)。选择30mg的Plastiape单剂量吸入器标称递送剂量(测试产品C)以评估吸入制剂和Plastiape单剂量吸入器装置的剂量比例。
所选剂量远低于高达160mg的InnoSpire Go雾化器的标称递送剂量，所述剂量已在单一递增剂量研究中施用于健康受试者且其安全且耐受性良好(NCT03384290)。
2.2总体研究设计和计划：描述
本研究是随机、开放标签、3期、3次治疗、单剂量、单中心的交叉研究。十八名健康的男性和女性受试者在本研究中被随机分组，以确保至少有12名受试者是可评估的。如果受试者完成了所有3个治疗期且无重大方案偏差，则所述受试者被视为可评估的。每个受试者接受全部3剂IMP；本研究中未使用安慰剂。
受试者被随机分配到6个治疗序列中的1个中，并且接受下文列出的3种单剂量
AZD1402测试产品。
●测试产品A：通过InnoSpire Go雾化器施用的18mg标称递送剂量的AZD1402雾化器溶液。
●测试产品B：通过Plastiape单剂量吸入器施用的10mg标称递送剂量的AZD1402吸入粉雾剂。
●测试产品C：通过Plastiape单剂量吸入器施用的30mg标称递送剂量的AZD1402吸入粉雾剂。
研究包括：
●首次施用AZD1402前长达28天的筛选期。
●三个治疗期，在此期间，受试者从给药AZD1402的前一天(第-1天)到给药后至少48小时住在临床单位，并且在第3天出院。
●在第3治疗期最后一次施用AZD1402后10至12天进行随访。
每个治疗期在各剂量之间相隔5天的最小清除期。所有受试者在参与任何特定的研究相关程序之前都签署了ICF。受试者在接受第一剂AZD1402前28天内参加了筛选访视。如果他们符合条件，当他们进行基线评估并以随机顺序接受3种测试产品中的1种时，他们返回治疗期1。对于每个治疗期，受试者在第1天早晨接受单剂量的IMP，并且在给药后48小时内进行进一步评估。
研究流程图如图1中所示。
表63研究药品的鉴定
上表1中列出了用于生产本研究的12mg胶囊(12mg/MD)的组分的实例。
2.3每位受试者的剂量选择和时机
在每个治疗期中，受试者接受单次吸入剂量的AZD1402。AZD1402对于测试产品A(治疗A)通过InnoSpire Go雾化器作为雾化溶液施用，并且对于测试产品B(治疗B)和测试产品C(治疗C)通过Plastiape单剂量吸入器作为吸入粉雾剂施用。
所述剂量在至少10小时的过夜禁食后施用。允许受试者喝水以防止脱水，直到IMP施用前1小时。从IMP施用后1小时开始允许随意饮水，并且在IMP施用后2小时提供少量早餐。所有受试者按照随机顺序接受测试产品。
2.4受试者的处置
按照计划，总共18名受试者被随机分配到6个治疗组中的1个中。所有随机受试者在3个治疗期期间接受了单剂量的全部3种研究药品(IMP)(即AZD1402的治疗A、B和C)。按照计划，每个治疗期在各剂量之间相隔5天的最小清除期。
18名随机受试者中的每一名都完成了所有3个治疗期。没有受试者退出研究或停止治疗。
2.5人口统计
研究中包括的所有受试者均为男性。大多数受试者是白人(77.8％)。
基线时，
在6个治疗序列中未观察到受试者人口统计学特征的相关差异。由于研究中且继而每个治疗序列中的受试者人数较少，因此各治疗序列的平均年龄差异被认为没有意义。
2.6药代动力学数据分析
2.6.1血清浓度
每位受试者和时间点通过InnoSpire Go雾化器(18mg递送剂量)或Plastiape单剂量吸入器(10mg或30mg递送剂量)单次吸入给药后AZD1402的血清浓度的汇总统计数据呈现于图2和图3中。
几何平均血清AZD1402浓度对时间曲线呈现于图2(线性标度)和图3(半对数标度)中。当样品的实际采集时间偏离标称时间>10％时，结果从汇总统计和几何平均图中排除。
2.6.2AZD1402的血清药代动力学参数
血清AZD1402 PK参数的汇总统计数据呈现于表64中。关键PK参数的统计分析呈现于表65和表66中。
来自第1期E0001133治疗C的一个曲线具有1.54ng/mL的阳性给药前浓度。此浓度<5％ Cmax，并且从PK分析中排除。
对于两个曲线，没有或有限的PK参数为可计算的：E0001133，治疗A在整个采样间隔内完全低于定量限(BLQ)，并且因此没有PK参数为可计算的和E0001143，治疗A只有一个可量化的浓度，因此只有Cmax和tmax为可计算的。
对于6个曲线，AUC、AUC/D、CL/F、Vz/F和MRT值从汇总统计中排除，因为外推>20％AUC：E0001110，治疗B；E0001114，治疗A和B；E0001116，治疗B和C；以及E0001118，治疗B。一个曲线(E0001135，治疗C)已调整R平方<0.8t1/2λz，并且t1/2λz相关参数从汇总统计中排除。
在通过喷雾器(治疗A，18mg递送剂量)或Plastiape单剂量吸入器(治疗B，10mg递送剂量，或治疗C，30mg递送剂量)吸入AZD1402后，观察到持续且相对延长的吸收，类似的中值tmax为3.00h至3.50h。单个tmax的范围为1.98h至8.27h，并且所有三个治疗的范围相似。
达到Cmax后，AZD1402的血清浓度以基本上单相的方式下降，所有三组的平均t1/2λz值相似：对于治疗A、B和C分别为6.919h、7.457h和6.912h。应用于数据的回归分析通常拟合良好(调整后的R平方>0.8)，并且被认为充分反映了浓度的下降。
治疗A和B后的大部分曲线和治疗C后的3个曲线的t1/2λz是在小于所得半衰期3倍的时间内计算的。由于曲线通常为单相，且所有3组的t1/2λz一致，因此没有数据因半衰期跨度而被排除。
使用Plastiape单剂量吸入器的治疗B和C的平均CL/F和Vz/F值相似，但通过InnoSpire Go雾化器施用(治疗A)后较高。结合治疗B和C后的较高剂量标准化暴露，这些数据与作为Innospire Go制剂给药时AZD1402的较低生物利用度一致。
AZD1402的受试者间差异对于AUC为中度至高度(治疗A、B和C分别为48.79％、35.84％和62.74％)，对于AUClast为较高(治疗A、B和C分别为51.86％、57.71％和68.69％)，并且对于Cmax为较高(治疗A、B和C分别为101.1％、47.76％和67.82％)。
根据Cmax和AUC判断，治疗A和B之间的AZD1402暴露量相似，并且治疗A的平均AUClast略高于治疗B。推断统计分析显示，在治疗A和B之间的比较中，Cmax和AUC的几何LS平均数比率分别为105.45％、102.39％，并且AUClast的几何LS平均数比率为122.21％。对于所有3个参数，几何LS平均数的90％ CI包括100％。
治疗A后的暴露量(Cmax、AUC和AUClast)为治疗C后的约27％：Cmax、AUC和AUClast的几何LS平均数比率(90％ CI)分别为27.47％(18.90，39.94)、27.09％(20.25，36.24)和26.50％(19.40，36.20)。
治疗B后的暴露量(Cmax、AUC和AUClast)为治疗C后的约22-26％：Cmax、AUC和AUClast的几何LS平均数比率(90％ CI)分别为26.05％(18.03，37.64)、26.46％(19.72，35.50)和21.68％(16.04，29.32)。
对两种干粉治疗B和C的剂量比例的评估给出了分别为1.196和1.259的Cmax和AUC的斜率估计值，并且相应的90％ CI含有1个单位，表明近似的剂量比例增加。然而，AUClast的斜率估计值略高于1，值为1.368(90％ CI：1.222，1.614)。
表64每次治疗的AZD1402的药代动力学参数汇总(药代动力学分析集)
AUC＝从时间零点外推至无穷大的血清浓度-时间曲线下的面积；AUC/D＝从时间零点外推至无穷大的血清浓度-时间曲线下的面积除以剂量；AUClast＝从时间零点到最后一次可定量浓度时间的血清浓度曲线下面积；AUClast/D＝从时间零点到最后一次可计量浓度时间的血清浓度曲线下面积除以剂量；Cmax＝最大观察血清浓度；Cmax/D＝最大观察血清浓度除以剂量；tmax＝达到最大观察浓度的时间；t1/2λz＝与半对数浓度时间曲线的终点斜率(λz)相关的半衰期终点；λz＝终末消除速率常数；MRT＝未变化药物在体循环中从零到无穷大的平均停留时间；CL/F＝血管外施用后药物从血清中的表观全身清除率；Vz/F＝血管外施用后终末期期间的表观分布体积。
表65 AZD1402的关键药代动力学参数的统计比较(药代动力学分析集)
A：通过InnoSpire Go雾化器施用的雾化器溶液(18mg估计递送剂量)
B：通过Plastiape单剂量吸入器施用的吸入粉雾剂(10mg估计递送剂量)
C：通过Plastiape单剂量吸入器施用的吸入粉雾剂(30mg估计递送剂量)
CI：置信区间；LS：最小二乘法，n：统计比较分析中包含的所有受试者；N：药代动力学分析集中的所有受试者。统计分析中只包括研究中的比较数据。
结果基于对数转换PK参数的方差分析(ANOVA)，其中治疗、序列、周期和序列内受试者作为固定效应。几何平均比例和相应的CI被反向转换并以百分比表示。几何LS平均值和相应的90％CI也被反向转换。
表66 AZD1402治疗B和C的干粉Plastiape单剂量吸入器施用的剂量比率统计分析(药代动力学分析集)
CI：置信区间。SE：标准误差，n：回归中使用的数据点数
模型：所使用的线性模型是log(Y)＝截距+斜率*log(剂量)，其中Y是参数估计值；使用了自然对数。此等式两侧的幂运算产生功率模型的通常形式：Y＝exp(截距)*(剂量)^斜率。斜率参数通过线性最小二乘法获得。
2.6.3药代动力学结论
●在单剂量的通过InnoSpire Go雾化器的AZD1402雾化器溶液或通过Plastiape单剂量吸入器的吸入粉雾剂后，观察到稳定的吸收；中位tmax范围为3.00小时至3.50小时，平均t1/2λz为约7小时，各治疗之间相似。
●根据Cmax、AUC和AUClast判断的AZD1402的全身暴露量在18mg标称递送剂量的InnoSpire Go雾化器和10mg标称递送剂量的Plastiape单剂量吸入器之间为相当的。
●根据Cmax、AUC和AUClast判断，在通过18mg标称递送剂量的InnoSpire Go雾化器或10mg标称递送剂量的Plastiape单剂量吸入器施用后，AZD1402的全身暴露量比通过30mg标称递送剂量的Plastiape单剂量吸入器施用后低约73％-78％。
●通过Plastiape单剂量吸入器单次吸入干粉后，AZD1402的Cmax和AUC以与10mg至30mg标称递送剂量大致成比例的方式增加。
2.7安全性结论
表67总结了3次单剂量治疗报告的AE：A(18mg，每日一次)、B(10mg，每日一次)和C(30mg，每日一次)以及总体。
共有13名受试者(18名治疗的受试者中的72.2％)在研究期间经历了至少1次TEAE。按首选术语分类，最常报告的TEAE(>2名受试者)为咳嗽(2名受试者在治疗A时报告发作，1名受试者在治疗B时报告发作，4名受试者在治疗C时报告发作)和头痛(2名受试者在治疗A和治疗B时报告发作，1名受试者在治疗C时报告发作)。
大多数受试者(72.2％)经历轻度TEAE。其余受试者经历中度TEAE：在治疗A时2名(11.1％)受试者，在治疗B时3名(16.7％)受试者，并且在治疗C时4名(22.2％)受试者。
一名受试者(过去有儿童哮喘病史且目前对尘螨、猫和树皮过敏的的健康志愿者)在吸入治疗C(AZD1402吸入粉雾剂，标称剂量递送为30mg)后的第3个治疗期期间具有疑似非预期的呼吸道炎症严重不良反应(SUSAR)。预测的受试者的FEV1下降，并且C-反应蛋白水平升高超出正常范围，当受试者在SUSAR发作21天内恢复时，两者均恢复至给药前水平。此SUSAR具有中等强度，并且研究者认为其与IMP有关。
总的来说，本研究的结果表明，通过吸入以DPI形式施用的AZD1402在健康志愿者中是安全的，并且值得在患有肺部疾病(例如哮喘)的患者中进行进一步测试。
表67 3次单剂量治疗报告的AE汇总
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2.8讨论
AZD1402是一种靶向白细胞介素4受体α(IL-4Rα)的重组、单特异性、(经修饰的脂质运载蛋白)蛋白，正在开发为吸入疗法以用于治疗标准护理治疗无法控制的患者的中度至重度持续性哮喘。这是评估吸入装置和制剂对健康受试者单次吸入剂量的AZD1402后的PK的影响的随机开放标签、3期、3次治疗的交叉研究。本研究旨在评估2种不同剂量的吸入粉雾剂(通过Plastiape单剂量吸入器递送)对AZD1402的PK特征的影响，并且将其与迄今为止临床研究中施用的雾化溶液(通过InnoSpire Go递送)进行比较。
根据Cmax和AUC判断，治疗A和B之间的AZD1402暴露量相似，并且治疗A的平均AUClast略高于治疗B。推断统计分析显示，在治疗A和B之间的比较中，Cmax和AUC的几何LS平均数比率分别为105.45％、102.39％，并且AUClast的几何LS平均数比率为122.21％。对于所有3个参数，几何LS平均数的90％ CI包括100％。
治疗A后的药物暴露量(Cmax、AUC和AUClast)为治疗C后的约27％：Cmax、AUC和AUClast的几何LS平均数比率(90％ CI)分别为27.47％(18.90，39.94)、27.09％(20.25，36.24)和26.50％(19.40，36.20)。
治疗B后的药物暴露量(Cmax、AUC和AUClast)为治疗C后的约22-26％：Cmax、AUC和AUClast的几何LS平均数比率(90％ CI)分别为26.05％(18.03，37.64)、26.46％(19.72，35.50)和21.68％(16.04，29.32)。
对两种干粉治疗B和C的剂量比例的评估给出了分别为1.196和1.259的Cmax和AUC的斜率估计值，并且相应的90％ Ci含有1个单位，从而表明近似的剂量比例增加。然而，AUClast的斜率估计值略高于1，值为1.368(90％ CI：1.222，1.614)。
所选剂量(InnoSpire Go雾化器标称递送剂量为18mg[治疗A]、Plastiape单剂量吸入器标称递送剂量为10mg[治疗B]和Plastiape单剂量吸入器标称递送剂量为30mg[治疗C])远低于在SAD研究(PRS-060-PCS_06_17)中向健康受试者施用的高达160mg的InnoSpireGo雾化器标称递送剂量，并且安全且耐受性良好。
2.10结论
●AZD1402在单剂量的通过InnoSpire Go雾化器的雾化器溶液或通过Plastiape单剂量吸入器的吸入粉雾剂后被稳定吸收；中位Tmax范围为3.00小时至3.50小时，并且平均t1/2λz约为7小时，各治疗之间相似。
●AZD1402的全身暴露量在18mg标称递送剂量的InnoSpire Go雾化器和10mg标称递送剂量的Plastiape单剂量吸入器之间为相当的。
●使用18mg标称递送剂量的InnoSpire Go雾化器或10mg标称递送剂量的Plastiape单剂量吸入器的AZD1402的全身暴露量低于使用30mg标称递送剂量的Plastiape单剂量吸入器的暴露量。通过Plastiape单剂量吸入器单次吸入干粉后，AZD1402的Cmax和AUC以与10mg至30mg标称递送剂量大致成比例的方式增加。
●总的来说，通过吸入以DPI形式施用的AZD1402的安全性值得在患有肺部疾病(例如哮喘)的患者中进行进一步测试。
实施例17评估服用中等剂量吸入性皮质类固醇的患有哮喘的成人每日两次以干粉形式施用三种吸入剂量水平的AZD1402持续四周的功效和安全性的两部分IIa期随机、双盲、安慰剂对照、剂量范围、多中心研究
这是评估吸入性AZD1402的功效和安全性的随机、安慰剂对照、双盲、多中心、2部分研究。第1部分将在每个剂量水平的引入队列中进行，以评估服用中等剂量吸入性皮质类固醇(ICS)-长效β受体激动剂(LABA)的患有受控哮喘的人群的安全性和药代动力学(PK)，然后在第2部分中对服用中等剂量ICS-LABA的患有不受控哮喘的成人进行给药。在对第1部分中相关剂量水平的安全性和PK进行评估后，将针对每个剂量水平启动第2部分。第1部分和第2部分中每位参与者的整个研究周期为约3.5个月；2周的筛选期、4周的磨合期、4周的治疗期和4周的随访期。
本研究的第1部分将是随机、双盲、安慰剂对照的，并且针对2个较低剂量水平(第1a部分)平行进行，随后进行非盲安全性审查，并且根据安全性审查的结果逐步增加到最高剂量(第1b部分)。
第1a部分将由30名参与者组成，他们将以1:1:1随机分组，以平行接受2种较低AZD1402干粉吸入剂(DPI)剂量中的1种(1mg或3mg标称递送剂量)或安慰剂。第1b部分将由15名参与者组成，他们将以2:1随机分组，以接受最高AZD1402 DPI剂量(10mg标称递送剂量)或安慰剂。
可用于生产用于本研究的1mg、3mg和10mg胶囊的组分的实例列于上文表2、表3和表4中。
第1a部分引入队列
·AZD1402经口吸入1mg标称递送剂量，每日两次(BID)，通过DPI
·AZD1402经口吸入3mg标称递送剂量，BID，通过DPI
·安慰剂经口吸入，BID，通过DPI
第1b部分引入队列
·AZD1402经口吸入10mg标称递送剂量，BID，通过DPI
·安慰剂经口吸入，BID，通过DPI
第2部分将是随机、双盲、安慰剂对照的，并且将包括360名参与者，以评估AZD1402相比于安慰剂的3种吸入剂量水平。
除了计划的门诊访视，本研究第2部分的4周给药将在家中进行。包括2个较低剂量水平(1mg和3mg标称递送剂量)的第2a部分将在第1a部分的非盲安全性审查后平行开始。根据安全性审查的结果，10mg标称递送剂量(第2b部分)的较高剂量将在第1b部分的非盲审查后纳入第2部分。一旦2b部分开始，所有3个剂量水平(和安慰剂)将平行运行。
第2部分将包括：
·AZD1402经口吸入1mg标称递送剂量，BID，通过DPI
·AZD1402经口吸入3mg标称递送剂量，BID，通过DPI
·AZD1402经口吸入10mg标称递送剂量，BID，通过DPI
·安慰剂经口吸入，BID，通过DPI
实施例18-每天一次服用AZD1402后的暴露情况
为了预测每天一次给药AZD1402后的暴露曲线，使用Nonmem(版本7.3.0)将单剂量研究NCT03384290(在WO 2020/200960的实施例2中描述)的静脉内(i.v.)暴露数据拟合到2室药代动力学模型。随后，基于来自研究NCT03384290(WO 2020/200960的实施例2中描述的单次递增剂量(SAD)研究)、NCT03574805(WO 2020/200960的实施例3和4中描述的多次递增剂量(MAD)研究)和NCT03921268的吸入暴露数据，对从肺部吸入的AZD1402的吸收率进行建模，所述研究在上面的实施例16中进行了描述。最终模型用于模拟在一定剂量范围内每天一次和两次后的PK血清暴露。图4显示，需要5倍高的每天一次的标称递送剂量(5mg)才能达到与1mg的每天两次的标称递送剂量相同的每日最低血清浓度。对于下表中总结的其他剂量，预计需要每天一次的剂量比每天两次的剂量高5倍(或为总每日剂量的2.5倍)。
表68
表69术语的缩写和定义列表
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参考文献
上面引用了许多出版物，以便更全面地描述和公开本发明以及本发明所属的现有技术水平。下面提供这些参考文献的完整引用。这些参考文献中的每个的全部内容并入本文。
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序列
表70
/>
描述本发明各方面的以下编号条款是说明书的一部分。
1.一种用于治疗人类受试者的哮喘的方法，其中所述方法包括通过吸入向所述受试者施用包含治疗有效量的抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的干粉制剂，所述抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列，其中通过经口吸入向所述受试者施用约0.1mg至约30mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
2.如条款1所述的方法，其中通过经口吸入向所述受试者施用约0.5mg、约1mg、约3mg、约10mg或约30mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
3.一种用于治疗人类受试者的哮喘的方法，其中所述方法包括通过吸入向所述受试者施用包含治疗有效量的抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的干粉制剂，所述抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列，其中通过经口吸入向所述受试者施用约0.2mg至约40mg的标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
4.如条款3所述的方法，其中向所述受试者施用约0.55mg、约0.6mg、约1.1mg、约3.3mg、约11.1mg、约12mg或约36mg的标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
5.如前述条款中任一项所述的方法，其中每天至少一次向所述受试者施用所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
6.如条款5所述的方法，其中每天两次向所述受试者施用所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
7.如条款6所述的方法，其中每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称递送剂量为约0.5mg、约1mg、约3mg、约10mg或约30mg。
8.如条款5或6所述的方法，其中每天向所述受试者施用约1mg、约2mg、约6mg、约20mg或约60mg的总标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
9.如条款6所述的方法，其中每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称计量剂量为约0.55mg、约0.6mg、约1.1mg、约3.3mg、约11.1mg、约12mg或约36mg。
10.如条款5或6所述的方法，其中每天向所述受试者施用约1.1mg、约1.2mg、约2.2mg、约6.6mg、约22.2mg、约24mg或约72mg的总标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
11.如前述条款中任一项所述的方法，其中所述制剂包含多个微粒，所述微粒包含所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
12.如前述条款中任一项所述的方法，其中所述干粉制剂包含海藻糖。
13.如前述条款中任一项所述的方法，其中所述干粉制剂包含亮氨酸。
14.如条款12或13所述的方法，其中所述干粉制剂包含三亮氨酸。
15.如条款14所述的方法，其中所述干粉制剂包含海藻糖、亮氨酸和三亮氨酸。
16.一种包含治疗有效量的抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的干粉制剂，其在治疗人类受试者的哮喘的方法中使用，其中所述方法包括通过吸入施用所述干粉制剂，其中通过经口吸入向所述受试者施用约0.1mg至约30mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，并且其中所述抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列，或其变体或片段。
17.如条款16所述使用的干粉制剂，其中通过经口吸入向所述受试者施用约0.5mg、约1mg、约3mg、约10mg或约30mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
18.一种包含治疗有效量的抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的干粉制剂，其在治疗人类受试者的哮喘的方法中使用，其中所述方法包括通过吸入施用所述干粉制剂，其中通过经口吸入向所述受试者施用约0.2mg至约40mg的标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，并且其中抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列，或其变体或片段。
19.如条款18所述使用的干粉制剂，其中向所述受试者施用约0.55mg、约0.6mg、约1.1mg、约3.3mg、约11.1mg、约12mg或约36mg的标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
20.如条款16至19中任一项所述使用的干粉制剂，其中每天至少一次向所述受试者施用所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
21.如条款20所述使用的干粉制剂，其中每天两次向所述受试者施用所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
22.如条款21所述使用的干粉制剂，其中每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称递送剂量为约0.5mg、约1mg、约3mg、约10mg或约30mg。
23.如条款20或21所述使用的干粉制剂，其中每天向所述受试者施用约1mg、约2mg、约6mg、约20mg或约60mg的总标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
24.如条款21所述使用的干粉制剂，其中每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称计量剂量为每天两次向所述受试者施用的约0.55mg、约0.6mg、约1.1mg、约3.3mg、约11.1mg、约12mg或约36mg的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
25.如条款20或21所述使用的干粉制剂，其中每天向所述受试者施用约1.1mg、约1.2mg、约2.2mg、约6.6mg、约22.2mg、约24mg或约72mg的总标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
26.如条款16至25中任一项所述使用的干粉制剂，其中所述制剂包含多个微粒，所述微粒包含所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
27.如条款16至26中任一项所述使用的干粉制剂，其中所述干粉制剂包含海藻糖。
28.如条款16至27中任一项所述使用的干粉制剂，其中所述干粉制剂包含亮氨酸。
29.如条款27或28所述使用的干粉制剂，其中所述干粉制剂包含三亮氨酸。
30.如条款29所述使用的干粉制剂，其中所述干粉制剂包含海藻糖、亮氨酸和三亮氨酸。
31.一种干粉制剂，其中所述制剂包含抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，所述抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列。
32.如条款31所述的干粉制剂，其中所述制剂包含海藻糖。
33.如条款31或32所述的干粉制剂，其中所述干粉制剂包含亮氨酸。
34.如条款32或33所述的干粉制剂，其中所述干粉制剂包含三亮氨酸。
35.如条款34所述的干粉制剂，其中所述干粉制剂包含海藻糖、亮氨酸和三亮氨酸。
36.如条款31至35中任一项所述的干粉制剂，其中当所述制剂通过经口吸入向所述受试者施用时，所述制剂提供约0.1mg至约30mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
37.如条款36所述的干粉制剂，其中当所述制剂通过经口吸入向所述受试者施用时，所述制剂提供约0.5mg、约1mg、约3mg、约10mg或约30mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
38.如条款31至37中任一项所述的干粉制剂，其中所述制剂包含约0.2mg至约40mg的标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，以用于通过经口吸入向所述受试者施用。
39.如条款38所述的干粉制剂，其中所述制剂包含约0.55mg、约0.6mg、约1.1mg、约3.3mg、约11.1mg、约12mg或约36mg的标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，以用于通过经口吸入向所述受试者施用。
40.如条款31至39中任一项所述的干粉制剂，其中所述制剂包含多个微粒，所述微粒包含所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
41.一种用于治疗人类受试者的哮喘的方法，其中所述方法包括通过经口吸入施用如条款31至40中任一项所述的干粉制剂。
42.如条款31至40中任一项所述的干粉制剂，其用于治疗人类受试者的哮喘的方法中，其中所述方法包括通过经口吸入向所述受试者施用所述干粉制剂。
43.条款31至40中任一项所述的干粉制剂在生产用于人类受试者的哮喘的治疗性和/或预防性治疗的药物中的用途，其中所述治疗包括通过经口吸入施用所述干粉制剂。
序列表
<110> 阿斯利康制药有限公司(AstraZeneca AB)
<120> 用于治疗哮喘的脂质运载蛋白突变蛋白干粉制剂
<130> 008136756
<150> US 63/127903
<151> 2020-12-18
<160> 5
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 154
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人泪脂质运载蛋白突变蛋白PRS-060/AZD1402的氨基酸序列
<400> 1
Ala Ser Asp Glu Glu Ile Gln Asp Val Ser Gly Thr Trp Tyr Leu Lys
1 5 10 15
Ala Met Thr Val Asp Ser Arg Cys Pro Arg Ala Val Tyr Asn Ser Val
20 25 30
Thr Pro Met Thr Leu Thr Thr Leu Glu Gly Gly Asn Leu Glu Ala Lys
35 40 45
Phe Thr Ala Gln Arg Lys Gly Arg Trp Gln Lys Tyr Lys Leu Val Leu
50 55 60
Glu Lys Thr Asp Glu Pro Gly Lys Tyr Thr Ala Ser Gly Gly Arg His
65 70 75 80
Val Ala Tyr Ile Ile Arg Ser His Val Lys Asp His Tyr Ile Phe His
85 90 95
Ser Glu Gly Leu Cys Pro Gly Gln Pro Val Pro Gly Val Trp Leu Val
100 105 110
Gly Arg Asp Pro Lys Asn Asn Leu Glu Ala Leu Glu Asp Phe Glu Lys
115 120 125
Ala Ala Gly Ala Arg Gly Leu Ser Thr Glu Ser Ile Leu Ile Pro Arg
130 135 140
Gln Ser Glu Thr Ser Ser Pro Gly Ser Asp
145 150
<210> 2
<211> 176
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)泪脂质运载蛋白
<400> 2
Met Lys Pro Leu Leu Leu Ala Val Ser Leu Gly Leu Ile Ala Ala Leu
1 5 10 15
Gln Ala His His Leu Leu Ala Ser Asp Glu Glu Ile Gln Asp Val Ser
20 25 30
Gly Thr Trp Tyr Leu Lys Ala Met Thr Val Asp Arg Glu Phe Pro Glu
35 40 45
Met Asn Leu Glu Ser Val Thr Pro Met Thr Leu Thr Thr Leu Glu Gly
50 55 60
Gly Asn Leu Glu Ala Lys Val Thr Met Leu Ile Ser Gly Arg Cys Gln
65 70 75 80
Glu Val Lys Ala Val Leu Glu Lys Thr Asp Glu Pro Gly Lys Tyr Thr
85 90 95
Ala Asp Gly Gly Lys His Val Ala Tyr Ile Ile Arg Ser His Val Lys
100 105 110
Asp His Tyr Ile Phe Tyr Cys Glu Gly Glu Leu His Gly Lys Pro Val
115 120 125
Arg Gly Val Lys Leu Val Gly Arg Asp Pro Lys Asn Asn Leu Glu Ala
130 135 140
Leu Glu Asp Phe Glu Lys Ala Ala Gly Ala Arg Gly Leu Ser Thr Glu
145 150 155 160
Ser Ile Leu Ile Pro Arg Gln Ser Glu Thr Cys Ser Pro Gly Ser Asp
165 170 175
<210> 3
<211> 158
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)泪脂质运载蛋白成熟形式
<400> 3
His His Leu Leu Ala Ser Asp Glu Glu Ile Gln Asp Val Ser Gly Thr
1 5 10 15
Trp Tyr Leu Lys Ala Met Thr Val Asp Arg Glu Phe Pro Glu Met Asn
20 25 30
Leu Glu Ser Val Thr Pro Met Thr Leu Thr Thr Leu Glu Gly Gly Asn
35 40 45
Leu Glu Ala Lys Val Thr Met Leu Ile Ser Gly Arg Cys Gln Glu Val
50 55 60
Lys Ala Val Leu Glu Lys Thr Asp Glu Pro Gly Lys Tyr Thr Ala Asp
65 70 75 80
Gly Gly Lys His Val Ala Tyr Ile Ile Arg Ser His Val Lys Asp His
85 90 95
Tyr Ile Phe Tyr Cys Glu Gly Glu Leu His Gly Lys Pro Val Arg Gly
100 105 110
Val Lys Leu Val Gly Arg Asp Pro Lys Asn Asn Leu Glu Ala Leu Glu
115 120 125
Asp Phe Glu Lys Ala Ala Gly Ala Arg Gly Leu Ser Thr Glu Ser Ile
130 135 140
Leu Ile Pro Arg Gln Ser Glu Thr Cys Ser Pro Gly Ser Asp
145 150 155
<210> 4
<211> 800
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)白细胞介素4受体α链
<400> 4
Met Lys Val Leu Gln Glu Pro Thr Cys Val Ser Asp Tyr Met Ser Ile
1 5 10 15
Ser Thr Cys Glu Trp Lys Met Asn Gly Pro Thr Asn Cys Ser Thr Glu
20 25 30
Leu Arg Leu Leu Tyr Gln Leu Val Phe Leu Leu Ser Glu Ala His Thr
35 40 45
Cys Ile Pro Glu Asn Asn Gly Gly Ala Gly Cys Val Cys His Leu Leu
50 55 60
Met Asp Asp Val Val Ser Ala Asp Asn Tyr Thr Leu Asp Leu Trp Ala
65 70 75 80
Gly Gln Gln Leu Leu Trp Lys Gly Ser Phe Lys Pro Ser Glu His Val
85 90 95
Lys Pro Arg Ala Pro Gly Asn Leu Thr Val His Thr Asn Val Ser Asp
100 105 110
Thr Leu Leu Leu Thr Trp Ser Asn Pro Tyr Pro Pro Asp Asn Tyr Leu
115 120 125
Tyr Asn His Leu Thr Tyr Ala Val Asn Ile Trp Ser Glu Asn Asp Pro
130 135 140
Ala Asp Phe Arg Ile Tyr Asn Val Thr Tyr Leu Glu Pro Ser Leu Arg
145 150 155 160
Ile Ala Ala Ser Thr Leu Lys Ser Gly Ile Ser Tyr Arg Ala Arg Val
165 170 175
Arg Ala Trp Ala Gln Cys Tyr Asn Thr Thr Trp Ser Glu Trp Ser Pro
180 185 190
Ser Thr Lys Trp His Asn Ser Tyr Arg Glu Pro Phe Glu Gln His Leu
195 200 205
Leu Leu Gly Val Ser Val Ser Cys Ile Val Ile Leu Ala Val Cys Leu
210 215 220
Leu Cys Tyr Val Ser Ile Thr Lys Ile Lys Lys Glu Trp Trp Asp Gln
225 230 235 240
Ile Pro Asn Pro Ala Arg Ser Arg Leu Val Ala Ile Ile Ile Gln Asp
245 250 255
Ala Gln Gly Ser Gln Trp Glu Lys Arg Ser Arg Gly Gln Glu Pro Ala
260 265 270
Lys Cys Pro His Trp Lys Asn Cys Leu Thr Lys Leu Leu Pro Cys Phe
275 280 285
Leu Glu His Asn Met Lys Arg Asp Glu Asp Pro His Lys Ala Ala Lys
290 295 300
Glu Met Pro Phe Gln Gly Ser Gly Lys Ser Ala Trp Cys Pro Val Glu
305 310 315 320
Ile Ser Lys Thr Val Leu Trp Pro Glu Ser Ile Ser Val Val Arg Cys
325 330 335
Val Glu Leu Phe Glu Ala Pro Val Glu Cys Glu Glu Glu Glu Glu Val
340 345 350
Glu Glu Glu Lys Gly Ser Phe Cys Ala Ser Pro Glu Ser Ser Arg Asp
355 360 365
Asp Phe Gln Glu Gly Arg Glu Gly Ile Val Ala Arg Leu Thr Glu Ser
370 375 380
Leu Phe Leu Asp Leu Leu Gly Glu Glu Asn Gly Gly Phe Cys Gln Gln
385 390 395 400
Asp Met Gly Glu Ser Cys Leu Leu Pro Pro Ser Gly Ser Thr Ser Ala
405 410 415
His Met Pro Trp Asp Glu Phe Pro Ser Ala Gly Pro Lys Glu Ala Pro
420 425 430
Pro Trp Gly Lys Glu Gln Pro Leu His Leu Glu Pro Ser Pro Pro Ala
435 440 445
Ser Pro Thr Gln Ser Pro Asp Asn Leu Thr Cys Thr Glu Thr Pro Leu
450 455 460
Val Ile Ala Gly Asn Pro Ala Tyr Arg Ser Phe Ser Asn Ser Leu Ser
465 470 475 480
Gln Ser Pro Cys Pro Arg Glu Leu Gly Pro Asp Pro Leu Leu Ala Arg
485 490 495
His Leu Glu Glu Val Glu Pro Glu Met Pro Cys Val Pro Gln Leu Ser
500 505 510
Glu Pro Thr Thr Val Pro Gln Pro Glu Pro Glu Thr Trp Glu Gln Ile
515 520 525
Leu Arg Arg Asn Val Leu Gln His Gly Ala Ala Ala Ala Pro Val Ser
530 535 540
Ala Pro Thr Ser Gly Tyr Gln Glu Phe Val His Ala Val Glu Gln Gly
545 550 555 560
Gly Thr Gln Ala Ser Ala Val Val Gly Leu Gly Pro Pro Gly Glu Ala
565 570 575
Gly Tyr Lys Ala Phe Ser Ser Leu Leu Ala Ser Ser Ala Val Ser Pro
580 585 590
Glu Lys Cys Gly Phe Gly Ala Ser Ser Gly Glu Glu Gly Tyr Lys Pro
595 600 605
Phe Gln Asp Leu Ile Pro Gly Cys Pro Gly Asp Pro Ala Pro Val Pro
610 615 620
Val Pro Leu Phe Thr Phe Gly Leu Asp Arg Glu Pro Pro Arg Ser Pro
625 630 635 640
Gln Ser Ser His Leu Pro Ser Ser Ser Pro Glu His Leu Gly Leu Glu
645 650 655
Pro Gly Glu Lys Val Glu Asp Met Pro Lys Pro Pro Leu Pro Gln Glu
660 665 670
Gln Ala Thr Asp Pro Leu Val Asp Ser Leu Gly Ser Gly Ile Val Tyr
675 680 685
Ser Ala Leu Thr Cys His Leu Cys Gly His Leu Lys Gln Cys His Gly
690 695 700
Gln Glu Asp Gly Gly Gln Thr Pro Val Met Ala Ser Pro Cys Cys Gly
705 710 715 720
Cys Cys Cys Gly Asp Arg Ser Ser Pro Pro Thr Thr Pro Leu Arg Ala
725 730 735
Pro Asp Pro Ser Pro Gly Gly Val Pro Leu Glu Ala Ser Leu Cys Pro
740 745 750
Ala Ser Leu Ala Pro Ser Gly Ile Ser Glu Lys Ser Lys Ser Ser Ser
755 760 765
Ser Phe His Pro Ala Pro Gly Asn Ala Gln Ser Ser Ser Gln Thr Pro
770 775 780
Lys Ile Val Asn Phe Val Ser Val Gly Pro Thr Tyr Met Arg Val Ser
785 790 795 800
<210> 5
<211> 207
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)白细胞介素4受体α链的细胞外结构域
<400> 5
Met Lys Val Leu Gln Glu Pro Thr Cys Val Ser Asp Tyr Met Ser Ile
1 5 10 15
Ser Thr Cys Glu Trp Lys Met Asn Gly Pro Thr Asn Cys Ser Thr Glu
20 25 30
Leu Arg Leu Leu Tyr Gln Leu Val Phe Leu Leu Ser Glu Ala His Thr
35 40 45
Cys Ile Pro Glu Asn Asn Gly Gly Ala Gly Cys Val Cys His Leu Leu
50 55 60
Met Asp Asp Val Val Ser Ala Asp Asn Tyr Thr Leu Asp Leu Trp Ala
65 70 75 80
Gly Gln Gln Leu Leu Trp Lys Gly Ser Phe Lys Pro Ser Glu His Val
85 90 95
Lys Pro Arg Ala Pro Gly Asn Leu Thr Val His Thr Asn Val Ser Asp
100 105 110
Thr Leu Leu Leu Thr Trp Ser Asn Pro Tyr Pro Pro Asp Asn Tyr Leu
115 120 125
Tyr Asn His Leu Thr Tyr Ala Val Asn Ile Trp Ser Glu Asn Asp Pro
130 135 140
Ala Asp Phe Arg Ile Tyr Asn Val Thr Tyr Leu Glu Pro Ser Leu Arg
145 150 155 160
Ile Ala Ala Ser Thr Leu Lys Ser Gly Ile Ser Tyr Arg Ala Arg Val
165 170 175
Arg Ala Trp Ala Gln Cys Tyr Asn Thr Thr Trp Ser Glu Trp Ser Pro
180 185 190
Ser Thr Lys Trp His Asn Ser Tyr Arg Glu Pro Phe Glu Gln His
195 200 205

Claims (46)

1.一种用于治疗人类受试者的哮喘的方法，其中所述方法包括通过吸入向所述受试者施用包含治疗有效量的抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的干粉制剂，所述抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列，其中通过经口吸入向所述受试者施用约0.1mg至约30mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
2.如权利要求1所述的方法，其中通过经口吸入向所述受试者施用约0.5mg、约1mg、约2mg、约3mg、约4mg、约5mg、约6mg、约10mg或约30mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
3.一种用于治疗人类受试者的哮喘的方法，其中所述方法包括通过吸入向所述受试者施用包含治疗有效量的抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的干粉制剂，所述抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列，其中通过经口吸入向所述受试者施用约0.2mg至约40mg的标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
4.如权利要求3所述的方法，其中向所述受试者施用约0.55mg、约0.6mg、约1.1mg、约2.2mg、约3.3mg、约4.4mg、约5.5mg、约6.6mg、约11.1mg、约12mg或约36mg的标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
5.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中每天至少一次向所述受试者施用所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
6.如权利要求5所述的方法，其中每天两次向所述受试者施用所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
7.如权利要求6所述的方法，其中每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称递送剂量为约0.5mg、约1mg、约2mg、约3mg、约4mg、约5mg、约6mg、约10mg或约30mg。
8.如权利要求5或6所述的方法，其中每天向所述受试者施用约1mg、约2mg、约4mg、约6mg、约8mg、约10mg、约12mg、约20mg或约60mg的总标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
9.如权利要求6所述的方法，其中每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称计量剂量为约0.55mg、约0.6mg、约1.1mg、约2.2mg、约3.3mg、约4.4mg、约5.5mg、约6.6mg、约11.1mg、约12mg或约36mg。
10.如权利要求5或6所述的方法，其中每天向所述受试者施用约1.1mg、约1.2mg、约2.2mg、约4.4mg、约6.6mg、约8.8mg、约11mg、约13.2mg、约22.2mg、约24mg或约72mg的总标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
11.如权利要求1所述的方法，其中每天一次向所述受试者施用约2.5mg、约5mg、约10mg、约15mg、约20mg或约25mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
12.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述制剂包含多个微粒，所述微粒包含所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
13.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述干粉制剂包含海藻糖。
14.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述干粉制剂包含亮氨酸。
15.如权利要求13或14所述的方法，其中所述干粉制剂包含三亮氨酸。
16.如权利要求15所述的方法，其中所述干粉制剂包含海藻糖、亮氨酸和三亮氨酸。
17.一种包含治疗有效量的抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的干粉制剂，其在治疗人类受试者的哮喘的方法中使用，其中所述方法包括通过吸入施用所述干粉制剂，其中通过经口吸入向所述受试者施用约0.1mg至约30mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，并且其中所述抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列，或其变体或片段。
18.如权利要求17所述使用的干粉制剂，其中通过经口吸入向所述受试者施用约0.5mg、约1mg、约2mg、约3mg、约4mg、约5mg、约6mg、约10mg或约30mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
19.一种包含治疗有效量的抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的干粉制剂，其在治疗人类受试者的哮喘的方法中使用，其中所述方法包括通过吸入施用所述干粉制剂，其中通过经口吸入向所述受试者施用约0.2mg至约40mg的标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，并且其中抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列，或其变体或片段。
20.如权利要求19所述使用的干粉制剂，其中向所述受试者施用约0.55mg、约0.6mg、约1.1mg、约2.2mg、约3.3mg、约4.4mg、约5.5mg、约6.6mg、约11.1mg、约12mg或约36mg的标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
21.如权利要求17到20中任一项所述使用的干粉制剂，其中每天至少一次向所述受试者施用所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
22.如权利要求21所述使用的干粉制剂，其中每天两次向所述受试者施用所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
23.如权利要求22所述使用的干粉制剂，其中每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称递送剂量为约0.5mg、约1mg、约2mg、约3mg、约4mg、约5mg、约6mg、约10mg或约30mg。
24.如权利要求21或22所述使用的干粉制剂，其中每天向所述受试者施用约1mg、约2mg、约4mg、约6mg、约10mg、约12mg、约20mg或约60mg的总标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
25.如权利要求22所述使用的干粉制剂，其中每天两次向所述受试者施用的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段的每个剂量的标称计量剂量为每天两次向所述受试者施用的约0.55mg、约0.6mg、约1.1mg、约2.2mg、约3.3mg、约4.4mg、约5.5mg、约6.6mg、约11.1mg、约12mg或约36mg的所述脂质运载蛋白突变蛋白或变体或片段。
26.如权利要求21或22所述使用的干粉制剂，其中每天向所述受试者施用约1.1mg、约1.2mg、约2.2mg、约4.4mg、约6.6mg、约8.8mg、约11mg、约13.2mg、约22.2mg、约24mg或约72mg的总标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
27.如权利要求17所述使用的干粉制剂，其中每天一次向所述受试者施用约2.5mg、约5mg、约10mg、约15mg、约20mg或约25mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
28.如权利要求17到27中任一项所述使用的干粉制剂，其中所述制剂包含多个微粒，所述微粒包含所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
29.如权利要求17至28中任一项所述使用的干粉制剂，其中所述干粉制剂包含海藻糖。
30.如权利要求17到29中任一项所述使用的干粉制剂，其中所述干粉制剂包含亮氨酸。
31.如权利要求29或30所述使用的干粉制剂，其中所述干粉制剂包含三亮氨酸。
32.如权利要求31所述使用的干粉制剂，其中所述干粉制剂包含海藻糖、亮氨酸和三亮氨酸。
33.一种干粉制剂，其中所述制剂包含抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，所述抗IL-4受体α(IL-4Rα)脂质运载蛋白突变蛋白包含SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列。
34.如权利要求33所述的干粉制剂，其中所述制剂包含海藻糖。
35.如权利要求33或34所述的干粉制剂，其中所述干粉制剂包含亮氨酸。
36.如权利要求34或35所述的干粉制剂，其中所述干粉制剂包含三亮氨酸。
37.如权利要求36所述的干粉制剂，其中所述干粉制剂包含海藻糖、亮氨酸和三亮氨酸。
38.如权利要求3337中任一项所述的干粉制剂，其中当所述制剂通过经口吸入向所述受试者施用时，所述制剂提供约0.1mg至约30mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
39.如权利要求38所述的干粉制剂，其中当所述制剂通过经口吸入向所述受试者施用时，所述制剂提供约0.5mg、约1mg、约2mg、约3mg、约4mg、约5mg、约6mg、约10mg或约30mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
40.如权利要求38所述的干粉制剂，其中当所述制剂通过经口吸入向所述受试者施用时，所述制剂提供约2.5mg、约5mg、约10mg、约15mg、约20mg或约25mg的标称递送剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
41.如权利要求33至40中任一项所述的干粉制剂，其中所述制剂包含约0.2mg至约40mg的标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，以用于通过经口吸入向所述受试者施用。
42.如权利要求41所述的干粉制剂，其中所述制剂包含约0.55mg、约0.6mg、约1.1mg、约2.2mg、约3.3mg、4.4mg、约5.5mg、约6.6mg、约11.1mg、约12mg或约36mg的标称计量剂量的所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段，以用于通过经口吸入向所述受试者施用。
43.如权利要求33至42中任一项所述的干粉制剂，其中所述制剂包含多个微粒，所述微粒包含所述脂质运载蛋白突变蛋白或其变体或片段。
44.一种用于治疗人类受试者的哮喘的方法，其中所述方法包括通过经口吸入来施用如权利要求33至43中任一项所述的干粉制剂。
45.如权利要求33至43中任一项所述的干粉制剂，其用于治疗人类受试者的哮喘的方法中，其中所述方法包括通过经口吸入向所述受试者施用所述干粉制剂。
46.权利要求33至43中任一项所述的干粉制剂在生产用于人类受试者的哮喘的治疗性和/或预防性治疗的药物中的用途，其中所述治疗包括通过经口吸入施用所述干粉制剂。
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