CN116769869A - 检测磺胺甲恶唑环境浓度及环境风险的方法 - Google Patents
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Abstract
一种检测磺胺甲恶唑环境浓度及环境风险的方法，包括如下步骤：S1、按照给定的初始种群密度，在待测液体中接种取对数生长期的膨胀肾形虫，暴露预定时长；S2、在膨胀肾形虫暴露该预定时长后，测量膨胀肾形虫的种群密度；S3、根据磺胺甲恶唑浓度与膨胀肾形虫种群密度在暴露该预定时长的剂量‑效应模型，确定所述待测液体的磺胺甲恶唑浓度。本发明实现以较低的成本检测和评估磺胺甲恶唑环境浓度和环境风险，反应时间较短，操作相对简便，评估的准确性高且可快速评估，适于实际应用。
Description
技术领域
本发明涉及抗生素环境污染生物监测与风险评价，特别是涉及基于膨胀肾形虫种群剂量效应模型检测磺胺甲恶唑环境浓度及环境风险的方法。
背景技术
以往对磺胺甲恶唑毒性效应和环境风险开展的研究中，采用的受试生物主要包括多细胞动物和植物，单细胞藻类和原生动物。存在的主要问题是：
1、基于多细胞植物或者动物开展的研究方法成本较高，反应时间较长，操作复杂，影响因素多，在实际应用中受限。
2、基于单细胞藻类和原生动物的评价方法，侧重多种生物学指标的毒性效应，各种指标响应规律不一，没有建立环境浓度评估和风险等级预测结合的量化评估方案。
需要说明的是，在上述背景技术部分公开的信息仅用于对本申请的背景的理解，因此可以包括不构成对本领域普通技术人员已知的现有技术的信息。
发明内容
本发明的主要目的在于克服上述背景技术的缺陷，提供一种检测磺胺甲恶唑环境浓度及环境风险的方法。
为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
一种检测磺胺甲恶唑环境浓度及环境风险的方法，包括如下步骤：
S1、按照给定的初始种群密度，在待测液体中接种取对数生长期的膨胀肾形虫，暴露预定时长；
S2、在膨胀肾形虫暴露该预定时长后，测量膨胀肾形虫的种群密度；
S3、根据磺胺甲恶唑浓度与膨胀肾形虫种群密度在暴露该预定时长的剂量-效应模型，确定所述待测液体的磺胺甲恶唑浓度。
进一步地，步骤S1中，暴露24h，步骤S3中，所述剂量-效应模型的模型方程为回归方程：Y = 14.48X2 - 435.1X + 3226.64，相关系数R2=0.98151。
进一步地，步骤S1中，暴露48h，步骤S3中，所述剂量-效应模型的模型方程为回归方程：Y = 13.45X2 - 580.15X + 6295.78，相关系数R2=0.99261。
进一步地，步骤S1中，暴露72h，步骤S3中，所述剂量-效应模型的模型方程为回归方程：Y = 18.91X2 - 1087.05X + 14304.33，相关系数R2=0.97726。
进一步地，步骤S1中，暴露96h，步骤S3中，所述剂量-效应模型的模型方程为回归方程：Y = 12.74X2 - 1033.08X + 16691.36，相关系数R2=0.9342。
进一步地，所述方法还包括如下步骤：
根据磺胺甲恶唑浓度与相应浓度下膨胀肾形虫分裂抑制率在暴露该预定时长的剂量-分裂抑制效应关系，确定在暴露该预定时长时的细胞分裂无观察效应浓度NOEC和抑制细胞分裂的半数效应浓度EC50；
将步骤S3所得的磺胺甲恶唑环境浓度与EC50和NOEC值进行比较，对磺胺甲恶唑对膨胀肾形虫的环境风险进行评价；
其中，环境浓度＞EC50时为高风险，NOEC＜环境浓度＜EC50时为中风险，环境浓度＜NOEC时为低风险。
进一步地，暴露24h、48h、72h、96h时，对应的剂量-分裂抑制效应关系的回归方程、相关系数以及EC50和NOEC值分别为如下：
24 h： Y =69.43X + 17.34，R2=0.98，NOEC=0.56mg/L，EC50=2.95 mg/L
48 h： Y = 72.41X - 0.33，R2=0.98，NOEC=0.99 mg/L，EC50=4.85 mg/L
72 h： Y = 91.11X - 25.72，R2=0.93，NOEC=1.92 mg/L，EC50=6.78 mg/L
96 h： Y = 118.47X - 64.06，R2=0.98，NOEC=3.47 mg/L，EC50=9.18 mg/L。
进一步地，步骤S1之前还包括进行膨胀肾形虫的标准化培养，具体包括：挑取单只膨胀肾形虫置于24孔培养板中进行单克隆培养，每孔加入10 ml去离子水中和灭菌麦粒，在25℃恒温恒湿培养箱中培养72-96 h后转移至6孔板进行扩大培养，培养体系为10 ml蒸馏水和2颗灭菌麦粒。
进一步地，步骤S1中，膨胀肾形虫接种密度约为200 ind./ml。
进一步地，在25℃恒温恒湿培养箱中进行培养。
本发明具有如下有益效果：
本发明提供一种检测磺胺甲恶唑环境浓度及环境风险的方法，通过建立敏感指示生物膨胀肾形虫种群对磺胺甲恶唑的响应和剂量-效应关系模型，实现快速评估磺胺甲恶唑的环境浓度和环境风险。
本发明建立了一种利用单细胞生物膨胀肾形虫种群密度与磺胺甲恶唑剂量-效应关系模型用于磺胺甲恶唑环境浓度及风险评价的新方法，该方法可仅通过检测特定时间点的种群密度一种参数对磺胺甲恶唑的环境浓度和环境风险进行同时评价。
本发明实现了以较低的成本来检测和评估磺胺甲恶唑环境浓度和环境风险，反应时间较短，操作相对简便，评估的准确性高且可快速评估，适于实际应用。
本发明实施例中的其他有益效果将在下文中进一步述及。
附图说明
图1为本发明实施例不同浓度磺胺甲恶唑对膨胀肾形虫的种群密度的影响。
图2为本发明实施例不同浓度磺胺甲恶唑与膨胀肾形虫种群密度的剂量效应关系。
图3为本发明实施例磺胺甲恶唑暴露的四个时间点膨胀肾形虫分裂抑制率的回归方程拟合。
图4为本发明实施例磺胺甲恶唑暴露时间与EC50的变化关系。
具体实施方式
以下对本发明的实施方式做详细说明。应该强调的是，下述说明仅仅是示例性的，而不是为了限制本发明的范围及其应用。
本发明实施例提供一种检测磺胺甲恶唑环境浓度及环境风险的方法，包括如下步骤：
S1、按照给定的初始种群密度，在待测液体中接种取对数生长期的膨胀肾形虫，暴露预定时长；
S2、在膨胀肾形虫暴露该预定时长后，测量膨胀肾形虫的种群密度；
S3、根据磺胺甲恶唑浓度与膨胀肾形虫种群密度在暴露该预定时长的剂量-效应模型，确定所述待测液体的磺胺甲恶唑浓度。
在优选的实施例中，所述方法进一步包括如下步骤：
根据磺胺甲恶唑浓度与相应浓度下膨胀肾形虫分裂抑制率在暴露该预定时长的剂量-分裂抑制效应关系，确定在暴露该预定时长时的细胞分裂无观察效应浓度NOEC和抑制细胞分裂的半数效应浓度EC50；
将步骤S3所得的磺胺甲恶唑环境浓度与EC50和NOEC值进行比较，对磺胺甲恶唑对膨胀肾形虫的环境风险进行评价。
该方法可仅通过检测特定时间点的种群密度一种参数对磺胺甲恶唑的环境浓度和环境风险进行同时评价，实现了以较低的成本来检测和评估磺胺甲恶唑环境浓度和环境风险，反应时间较短，操作相对简便，评估的准确性高且可快速评估，适于实际应用。
以下进一步描述本发明具体实施例。
本发明提供一种检测磺胺甲恶唑环境浓度及环境风险的方法，通过建立单细胞生物膨胀肾形虫种群密度与磺胺甲恶唑剂量-效应关系模型进行磺胺甲恶唑环境浓度及风险检测和评价，该方法包括指示生物膨胀肾形虫的标准化培养、种群增长相关参数的计算以及剂量-效应关系模型的构建。
采用受试生物如下：
膨胀肾形虫(Colpoda inflata)，隶属于原生动物纤毛门，肾形纲，肾形目，肾形科，肾形属。广泛分布于全球淡水、土壤等自然生境中，对环境变化和有毒有害物质敏感度高，是环境风险早期预报的理想指示物种。
进行膨胀肾形虫的标准化培养如下：
挑取单只膨胀肾形虫置于24孔培养板中进行单克隆培养，每孔加入10 ml去离子水中和1颗灭菌麦粒，在25℃恒温恒湿培养箱中培养72-96 h后转移至6孔板进行扩大培养，培养体系为10 ml蒸馏水和2颗灭菌麦粒，取对数生长期的虫液用于磺胺甲恶唑浓度评价实验。
进行磺胺甲恶唑暴露实验如下：
以去离子水作为溶剂将纯度为98%的磺胺甲恶唑（CAS：723-46-6）配置为500mg/L的母液于棕色瓶中，由于磺胺甲恶唑难溶于水，因此每50mL的母液中需加入100μL氨水助溶，混合均匀后置于4℃储存备用。根据预实验在磺胺甲恶唑浓度为2.5~22.5 mg/L之间每2.5mg/L梯度设置一组实验，共设置9个实验组，以去离子水为对照组。在六孔板每孔加入5mL以上浓度的磺胺甲恶唑溶液和2粒灭菌麦粒，后接种取对数生长期的膨胀肾形虫，接种密度约为200 ind./ml（我们经过大量实验发现，初始接种量为200 ind./ml是膨胀肾形虫培养的最佳接种量，此接种量下培养效果最好且稳定），在25℃恒温恒湿培养箱中进行培养，每组实验设置5个平行组以减小误差。分别于96h以内每隔24h记录一次种群密度。
数据分析如下：
SMX暴露的96h内每24h记录的膨胀肾形虫种群密度，相关参数通过以公式计算：
公式中：N 0 为初始种群密度（ind./ml）；N 1 为t时刻对照组种群密度（ind./ml）；N t 为t时刻实验组的种群密度（ind./ml）；G为种群增长率；Inhibition rate为细胞分裂抑制率（%）。
以磺胺甲恶唑浓度的对数值（LgC）为横坐标X，细胞分裂抑制率为纵坐标Y进行回归拟合得到回归方程，根据回归方程：当膨胀肾形虫细胞分裂抑制率Y为50%时，计算X值后取对数所得到的浓度为EC50值（抑制细胞分裂的半数效应浓度），当膨胀肾形虫细胞分裂抑制率Y为0时，计算X值后取对数得到NOEC值（细胞分裂无观察效应浓度，即最大无影响浓度）。
使用SPSS对数据进行差异显著性分析（P <0.05），使用Origin对种群密度变化进行柱状图分析，使用MATLAB对膨胀肾形虫种群变化及磺胺甲恶唑浓度建立剂量-效应模型。
得到膨胀肾形虫种群密度与磺胺甲恶唑的剂量-效应关系，具体如下：
图1示出不同浓度磺胺甲恶唑对膨胀肾形虫的种群密度的影响。不同浓度磺胺甲恶唑暴露的96小时内，膨胀肾形虫种群密度显著变化。膨胀肾形虫的种群密度随着磺胺甲恶唑浓度增加而降低，24h膨胀肾形虫耐受磺胺甲恶唑的最大浓度为12.5mg/L（图1中A），膨胀肾形虫48h的最大耐受浓度为20mg/L（图1中B），在72h膨胀肾形虫能够耐受的磺胺甲恶唑极限浓度为17.5mg/L（图1中C），在96h膨胀肾形虫对磺胺甲恶唑的耐受浓度为20mg/L（图1中D）。综上，膨胀肾形虫的种群密度随着磺胺甲恶唑剂量的升高而降低，呈现出较好的剂量效应关系，并且持续的暴露会提高膨胀肾形虫对磺胺甲恶唑的耐受能力。
通过对连续96小时的磺胺甲恶唑浓度与膨胀肾形虫种群密度建立剂量-效应模型（表1）。四个时间点的剂量效应模型均符合高斯函数，不同时间下的剂量系数不同。在48h剂量效应模型的模型方程为Y = 13.45X2 - 580.15X + 6295.78（相关系数R2=0.99261），具有更好的拟合效果。图2示出不同浓度磺胺甲恶唑与膨胀肾形虫种群密度的剂量效应关系。此外，剂量效应模型曲线（图2中A-D）再次表明，四个时间点内膨胀肾形虫种群密度都随磺胺甲恶唑浓度升高而降低，表现出较好的剂量-效应关系，因此可将48小时的剂量效应模型曲线应用于评估环境磺胺甲恶唑的浓度。
表1 不同浓度磺胺甲恶唑暴露下膨胀肾形虫种群密度拟合曲线方程
根据上述剂量方程，可依据不同时间点肾形虫种群密度值推断磺胺甲恶唑环境浓度值。
进行磺胺甲恶唑对肾形虫种群抑制效应与环境风险评价如下：
膨胀肾形虫种群增长率对磺胺甲恶唑响应的结果如表2所示，随着磺胺甲恶唑浓度的升高，膨胀肾形虫的种群增长率呈现了一种逐渐下降的趋势。另一方面，随着暴露时间持续增长，在磺胺甲恶唑不同浓度的抑制作用下，膨胀肾形虫种群增长的抑制作用逐渐缓解，相应的风险也随之降低。在膨胀肾形虫暴露于10mg/L浓度的磺胺甲恶唑24小时后，其种群增长率开始呈现负增长趋势。相应的，当膨胀肾形虫暴露于17.5 mg/L浓度的磺胺甲恶唑48小时和96h同样开始出现负增长。特别的，在膨胀肾形虫暴露至磺胺甲恶唑96小时后，其种群增长率未出现负增长。
表2 磺胺甲恶唑暴露下膨胀肾形虫的种群增长率的变化情况
磺胺甲恶唑浓度与相应浓度下膨胀肾形虫分裂抑制率进行回归拟合分析（图3，A-D分别为磺胺甲恶唑暴露24、48、72、96小时）结果显示，每一个时间点的膨胀肾形虫的种群增长与磺胺甲恶唑的浓度呈现负相关，即浓度越高，膨胀肾形虫的种群增长越慢。同一浓度的磺胺甲恶唑处理下，药物对膨胀肾形虫的分裂抑制作用随着暴露时间的延长而减弱。仍然表现出了剂量-分裂抑制效应关系。磺胺甲恶唑对膨胀肾形虫不同时间的分裂抑制效应（表3）：NOEC和EC50大小随时间变化呈现递增的规律（NOEC和EC50的计算方法参见前文中的数据分析部分，具体计算可利用表3中对应的方程进行求解）。EC50与时间呈现正的线性关系（图4），随着暴露时间的延长 EC50值增大，磺胺甲恶唑对膨胀肾形虫的种群生长抑制性越弱。
综上所述，在实际应用时，可统计例如48小时膨胀肾形虫的种群密度，根据所得到的最优膨胀肾形虫种群密度与磺胺甲恶唑的剂量-效应模型Y = 13.45X2 - 580.15X +6295.78，计算评估磺胺甲恶唑的环境浓度，再将所得的磺胺甲恶唑环境浓度与该时间的EC50和NOEC值进行比较，进一步对磺胺甲恶唑对膨胀肾形虫的环境风险进行评价。这个方法的可高效便捷的仅通过种群密度一种参数，同时对磺胺甲恶唑的环境浓度和环境风险进行双重评价。
表3 磺胺甲恶唑对膨胀肾形虫分裂抑制效应
将基于肾形虫种群与磺胺甲恶唑的剂量-效应模型评估出的环境浓度，与表3中获得的NOEC和EC50值进行对照，可评估不同时间点环境风险等级。高风险：环境浓度＞EC50，中风险：NOEC＜环境浓度＜EC50，低风险：环境浓度＜NOEC。
与传统方法相比，本发明的创新贡献包括：
建立了一种利用单细胞生物膨胀肾形虫种群密度与磺胺甲恶唑剂量-效应关系模型进行磺胺甲恶唑环境浓度及风险检测与评价的新方法，该方法可仅通过检测特定时间点的种群密度一种参数对磺胺甲恶唑的环境浓度和环境风险进行同时评价；
指示生物膨胀肾形虫的标准化培养、种群增长相关参数的计算以及剂量-效应关系模型的构建；
本发明实现以较低的成本检测和评估磺胺甲恶唑环境浓度和环境风险，反应时间较短，操作相对简便，评估的准确性高且可快速评估，适于实际应用。
本发明的背景部分可以包含关于本发明的问题或环境的背景信息，而不一定是描述现有技术。因此，在背景技术部分中包含的内容并不是申请人对现有技术的承认。
以上内容是结合具体/优选的实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，其还可以对这些已描述的实施方式做出若干替代或变型，而这些替代或变型方式都应当视为属于本发明的保护范围。在本说明书的描述中，参考术语“一种实施例”、“一些实施例”、“优选实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。尽管已经详细描述了本发明的实施例及其优点，但应当理解，在不脱离专利申请的保护范围的情况下，可以在本文中进行各种改变、替换和变更。
Claims (10)
1.一种检测磺胺甲恶唑环境浓度及环境风险的方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、按照给定的初始种群密度，在待测液体中接种取对数生长期的膨胀肾形虫，暴露预定时长；
S2、在膨胀肾形虫暴露该预定时长后，测量膨胀肾形虫的种群密度；
S3、根据磺胺甲恶唑浓度与膨胀肾形虫种群密度在暴露该预定时长的剂量-效应模型，确定所述待测液体的磺胺甲恶唑浓度。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S1中，暴露24h，步骤S3中，所述剂量-效应模型的模型方程为回归方程：Y = 14.48X2 - 435.1X + 3226.64，相关系数R2=0.98151。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S1中，暴露48h，步骤S3中，所述剂量-效应模型的模型方程为回归方程：Y = 13.45X2 - 580.15X + 6295.78，相关系数R2=0.99261。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S1中，暴露72h，步骤S3中，所述剂量-效应模型的模型方程为回归方程：Y = 18.91X2 - 1087.05X + 14304.33，相关系数R2=0.97726。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S1中，暴露96h，步骤S3中，所述剂量-效应模型的模型方程为回归方程：Y = 12.74X2 - 1033.08X + 16691.36，相关系数R2=0.9342。
6.如权利要求1至5任一项所述的方法，其特征在于，还包括如下步骤：
根据磺胺甲恶唑浓度与相应浓度下膨胀肾形虫分裂抑制率在暴露该预定时长的剂量-分裂抑制效应关系，确定在暴露该预定时长时的细胞分裂无观察效应浓度NOEC和抑制细胞分裂的半数效应浓度EC50；
将步骤S3所得的磺胺甲恶唑环境浓度与EC50和NOEC值进行比较，对磺胺甲恶唑对膨胀肾形虫的环境风险进行评价；
其中，环境浓度＞EC50时为高风险，NOEC＜环境浓度＜EC50时为中风险，环境浓度＜NOEC时为低风险。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，暴露24h、48h、72h、96h时，对应的剂量-分裂抑制效应关系的回归方程、相关系数以及EC50和NOEC值分别为如下：
24 h： Y =69.43X + 17.34，R2=0.98，NOEC=0.56mg/L，EC50=2.95 mg/L
48 h： Y = 72.41X - 0.33，R2=0.98，NOEC=0.99 mg/L，EC50=4.85 mg/L
72 h： Y = 91.11X - 25.72，R2=0.93，NOEC=1.92 mg/L，EC50=6.78 mg/L
96 h： Y = 118.47X - 64.06，R2=0.98，NOEC=3.47 mg/L，EC50=9.18 mg/L。
8.如权利要求1至5任一项所述的方法，其特征在于，步骤S1之前还包括进行膨胀肾形虫的标准化培养，具体包括：挑取单只膨胀肾形虫置于24孔培养板中进行单克隆培养，每孔加入10 ml去离子水中和灭菌麦粒，在25℃恒温恒湿培养箱中培养72-96 h后转移至6孔板进行扩大培养，培养体系为10 ml蒸馏水和2颗灭菌麦粒。
9.如权利要求1至5任一项所述的方法，其特征在于，步骤S1中，膨胀肾形虫接种密度约为200 ind./ml。
10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，步骤S1中，在25℃恒温恒湿培养箱中进行培养。
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN117983657A (zh) * | 2024-04-02 | 2024-05-07 | 哈尔滨工业大学(深圳)(哈尔滨工业大学深圳科技创新研究院) | 一种用于镉污染修复与效应评估的方法和镉污染修复方法 |
| CN118028426A (zh) * | 2024-04-12 | 2024-05-14 | 哈尔滨工业大学(深圳)(哈尔滨工业大学深圳科技创新研究院) | 一种基于dhps蛋白的大肠杆菌体外表达载体的磺胺类污染物检测方法 |
Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE19843334A1 (de) * | 1998-09-22 | 2000-03-30 | Hassan Jomaa | Schwefelorganische Verbindungen und ihre Verwendung |
| CN102323122A (zh) * | 2011-07-19 | 2012-01-18 | 时文春 | 一种鲤鱼肌肉中磺胺甲恶唑残留冻干粉标准样品的制备方法 |
| CN102876600A (zh) * | 2012-09-13 | 2013-01-16 | 哈尔滨工业大学宜兴环保研究院 | 一株高效生物絮凝剂产生菌及其筛选方法以及在处理磺胺甲恶唑中的应用 |
| CN106868168A (zh) * | 2017-01-09 | 2017-06-20 | 广西壮族自治区水产科学研究院 | 用于水产动物源细菌磺胺类药物耐药基因三重荧光定量pcr检测的引物、探针及其使用方法 |
| SE1750143A1 (en) * | 2017-02-15 | 2018-08-16 | Pharem Biotech Ab | Enzyme identification |
| CN113428987A (zh) * | 2021-07-09 | 2021-09-24 | 山东大学 | 一种污水中多重抗生素和重金属的去除方法 |
| CN113777293A (zh) * | 2021-08-31 | 2021-12-10 | 哈尔滨工业大学（深圳） | 利用草履虫生物标志物及ibr检测评价磺胺甲恶唑环境风险的方法 |
| CN114716430A (zh) * | 2022-05-24 | 2022-07-08 | 合肥学院 | 一种磺胺甲恶唑荧光探针、制备方法及其应用 |
| CN115343242A (zh) * | 2021-05-12 | 2022-11-15 | 郑州大学 | 一种磺胺甲恶唑含量的测定方法 |
-
2023
- 2023-08-18 CN CN202311042303.5A patent/CN116769869B/zh active Active
Patent Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE19843334A1 (de) * | 1998-09-22 | 2000-03-30 | Hassan Jomaa | Schwefelorganische Verbindungen und ihre Verwendung |
| CN102323122A (zh) * | 2011-07-19 | 2012-01-18 | 时文春 | 一种鲤鱼肌肉中磺胺甲恶唑残留冻干粉标准样品的制备方法 |
| CN102876600A (zh) * | 2012-09-13 | 2013-01-16 | 哈尔滨工业大学宜兴环保研究院 | 一株高效生物絮凝剂产生菌及其筛选方法以及在处理磺胺甲恶唑中的应用 |
| CN106868168A (zh) * | 2017-01-09 | 2017-06-20 | 广西壮族自治区水产科学研究院 | 用于水产动物源细菌磺胺类药物耐药基因三重荧光定量pcr检测的引物、探针及其使用方法 |
| SE1750143A1 (en) * | 2017-02-15 | 2018-08-16 | Pharem Biotech Ab | Enzyme identification |
| CN115343242A (zh) * | 2021-05-12 | 2022-11-15 | 郑州大学 | 一种磺胺甲恶唑含量的测定方法 |
| CN113428987A (zh) * | 2021-07-09 | 2021-09-24 | 山东大学 | 一种污水中多重抗生素和重金属的去除方法 |
| CN113777293A (zh) * | 2021-08-31 | 2021-12-10 | 哈尔滨工业大学（深圳） | 利用草履虫生物标志物及ibr检测评价磺胺甲恶唑环境风险的方法 |
| CN114716430A (zh) * | 2022-05-24 | 2022-07-08 | 合肥学院 | 一种磺胺甲恶唑荧光探针、制备方法及其应用 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| LI WANG ET AL.: "Toxicity of two tetracycline antibiotics on Stentor coeruleus and Stylonychia lemnae: Potential use as toxicity indicator", CHEMOSPHERE, vol. 255, pages 1 - 9 * |
| 杜明磊: "三种抗生素对两种纤毛虫的毒性效应研究", 中国优秀硕士学位论文全文数据库 基础科学辑, no. 01, pages 8 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN117983657A (zh) * | 2024-04-02 | 2024-05-07 | 哈尔滨工业大学(深圳)(哈尔滨工业大学深圳科技创新研究院) | 一种用于镉污染修复与效应评估的方法和镉污染修复方法 |
| CN117983657B (zh) * | 2024-04-02 | 2024-05-28 | 哈尔滨工业大学(深圳)(哈尔滨工业大学深圳科技创新研究院) | 一种用于镉污染修复与效应评估的方法和镉污染修复方法 |
| CN118028426A (zh) * | 2024-04-12 | 2024-05-14 | 哈尔滨工业大学(深圳)(哈尔滨工业大学深圳科技创新研究院) | 一种基于dhps蛋白的大肠杆菌体外表达载体的磺胺类污染物检测方法 |
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