CN116746471A - 一种基于集约化育苗筛选烟草品种抗根结线虫的方法 - Google Patents
一种基于集约化育苗筛选烟草品种抗根结线虫的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116746471A CN116746471A CN202310911169.1A CN202310911169A CN116746471A CN 116746471 A CN116746471 A CN 116746471A CN 202310911169 A CN202310911169 A CN 202310911169A CN 116746471 A CN116746471 A CN 116746471A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- root
- tobacco
- disease
- floating
- knot nematode
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 title claims abstract description 91
- 241000208125 Nicotiana Species 0.000 title claims abstract description 76
- 241000243785 Meloidogyne javanica Species 0.000 title claims abstract description 54
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 44
- 238000012216 screening Methods 0.000 title claims abstract description 24
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 92
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 92
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 49
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 claims abstract description 39
- 238000009736 wetting Methods 0.000 claims abstract description 11
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 22
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 claims description 15
- 230000012447 hatching Effects 0.000 claims description 13
- 208000035240 Disease Resistance Diseases 0.000 claims description 12
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 11
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 10
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 claims description 8
- 238000009331 sowing Methods 0.000 claims description 4
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000003053 immunization Effects 0.000 claims description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 claims description 2
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 claims description 2
- 241000244206 Nematoda Species 0.000 abstract description 18
- 241001002356 Valeriana edulis Species 0.000 abstract description 18
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 abstract description 13
- 230000028327 secretion Effects 0.000 abstract description 11
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 abstract description 10
- 238000011835 investigation Methods 0.000 abstract description 9
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 abstract description 7
- 238000009395 breeding Methods 0.000 abstract description 4
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 abstract description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 10
- 230000003020 moisturizing effect Effects 0.000 description 6
- 241000243786 Meloidogyne incognita Species 0.000 description 5
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 5
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 3
- 210000000416 exudates and transudate Anatomy 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 241000227653 Lycopersicon Species 0.000 description 2
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 2
- 239000005708 Sodium hypochlorite Substances 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000004382 potting Methods 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N sodium hypochlorite Chemical compound [Na+].Cl[O-] SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 241001672739 Artemia salina Species 0.000 description 1
- 241001290235 Ceratobasidium cereale Species 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 241001143352 Meloidogyne Species 0.000 description 1
- 241000233647 Phytophthora nicotianae var. parasitica Species 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 208000022602 disease susceptibility Diseases 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 238000012809 post-inoculation Methods 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000013341 scale-up Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
- A01G31/00—Soilless cultivation, e.g. hydroponics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
- A01G7/00—Botany in general
- A01G7/06—Treatment of growing trees or plants, e.g. for preventing decay of wood, for tingeing flowers or wood, for prolonging the life of plants
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P60/00—Technologies relating to agriculture, livestock or agroalimentary industries
- Y02P60/20—Reduction of greenhouse gas [GHG] emissions in agriculture, e.g. CO2
- Y02P60/21—Dinitrogen oxide [N2O], e.g. using aquaponics, hydroponics or efficiency measures
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Ecology (AREA)
- Forests & Forestry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Botany (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
一种基于集约化育苗筛选烟草品种抗根结线虫的方法，涉及烟草抗病育种技术领域，其利用寄主根系分泌物诱导激发线虫卵孵化、孵化的二龄幼虫易侵染根系的根冠伸长区的生物学特性，采用根结线虫卵孵化的二龄幼虫持续接种，在恒温、透气、寄主烟草根系分泌物刺激下，根结线虫卵在幼根表面的水膜中持续孵化产生二龄幼虫。之后利用浅水湿润栽培创造适宜的温湿度及透气条件诱发病害，病害调查后，计算病情指数，根据病情指数评价待测品种抗性。该方法的操作更简便，选择效率高，具有较高的准确性、重现性。并且可以有效缩短整个鉴定周期，可不间断或部分重叠成批次地进行，提高了烟草根结线虫病抗性鉴定的时效性和规模化。
Description
技术领域
本发明涉及烟草抗病育种技术领域，具体而言，涉及一种基于集约化育苗筛选烟草品种抗根结线虫的方法。
背景技术
烟草根结线虫病(Meloidogyne sp.)是烟草(Nicotiana sp.)的重要病害之一。烟草受侵染后生长缓慢，基部、下部叶片叶尖、叶缘褪绿变黄，逐渐枯焦内卷，拔起病根，可发现根系形成粗细不匀的鸡爪状畸形根，严重时根系腐烂，整株枯死，对烟草生产造成极大损失，不仅直接危害烟草，而且会加重烟草黑胫病、青枯病等其他病害，每年所致烟草产值损失约4亿美元。选育和推广抗病品种是防治该病最经济有效的方法，而植株的抗病性鉴定是抗病育种研究的前提和基础。
目前，烟草抗根结线虫病鉴定主要采用以下两种方法：第一种是病土接种法，将待鉴定植株种植在已发病的田块或装有病土/线虫卵的盆中，60天后拔起植株调查病害，计算病情指数评价植株的抗性水平，该方法利用田间的自然发病条件，不用准备大量二龄幼虫，缺点是病土的二龄幼虫和卵块，或者卵孵化的二龄幼虫没有精确定量，而且鉴定过程中受到的影响因素多，评价植株抗性的准确性无法得到保障；第二种是二龄幼虫接种法，将二龄幼虫接种于已消毒土壤或基质中，移栽待测植株，60天后调查发病情况，该方法需要准备大量二龄幼虫，消毒大量的土壤或基质，费工费时。两种鉴定方法试验的工作量大，占用空间大，抗性鉴定时间过长，不利于扩大规模。因此，很有必要开发一种周期更短、结果稳定且易于规模化应用的烟草根结线虫病抗性鉴定方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种基于集约化育苗筛选烟草品种抗根结线虫的方法，其操作简单方便，鉴定周期短，并且具有较高的准确性和重现性。
本发明的实施例是这样实现的：
一种基于集约化育苗筛选烟草品种抗根结线虫的方法，其包括：
对待测烟草品种的种子进行漂浮育苗，直至须根穿出漂浮盘进入漂浮池，得到须根化烟苗；
取出漂浮盘，在须根的穿出面滴加根结线虫卵的悬浮液，并将须根的远端部分浸入水中，让根结线虫卵在须根表面的水膜中孵化产生二龄幼虫，以对须根进行侵染，得到染病烟株；
对染病烟株进行浅水湿润栽培，通过模拟根结线虫病最适宜的气候环境诱发病害，并对病害情况进行评价。
本发明实施例的有益效果是：
本发明实施例提供一种基于集约化育苗筛选烟草品种抗根结线虫的方法，其利用寄主根系分泌物诱导激发线虫卵孵化、孵化的二龄幼虫易侵染根系的根冠伸长区的生物学特性，采用根结线虫卵孵化的二龄幼虫持续接种，在恒温、透气、寄主烟草根系分泌物刺激下，根结线虫卵在幼根表面的水膜中持续孵化产生二龄幼虫。之后利用浅水湿润栽培创造适宜的温湿度及透气条件诱发病害，病害调查后，计算病情指数，根据病情指数评价待测品种抗性，避免了环境条件的变化对鉴定结果的影响，提高了烟草根结线虫病抗性鉴定的准确性、重现性。该方法的操作更简便，选择效率高，并且可以有效缩短整个鉴定周期，可不间断或部分重叠成批次地进行，提高了烟草根结线虫病抗性鉴定的时效性和规模化。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为本发明实施例1所提供的第一漂浮盘(325孔)育成的苗龄20～25天、3～4真叶烟苗的示意图；
图2为本发明实施例1所提供的第二漂浮盘(32孔)保湿培育须根化烟苗的示意图；
图3为本发明实施例1所提供的根系分泌物水膜线虫卵接种操作示意图；
图4为本发明实施例1所提供的浅水湿润栽培诱发病害的示意图；
图5为本发明实施例1所提供的接种40天后NC95的根系发病症状，其中，左边为带有少量基质的病根，右边为将基质清洗过后的病根；
图6为本发明实施例1所提供的接种40天后长脖黄的根系发病症状，其中，左边为带有少量基质的病根，右边为将基质清洗过后的病根；
图7为本发明实施例1所提供的接种40天后K326的根系发病症状，其中，左边为带有少量基质的病根，右边为将基质清洗过后的病根。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
下面对本发明实施例的一种基于集约化育苗筛选烟草品种抗根结线虫的方法进行具体说明。
一种基于集约化育苗筛选烟草品种抗根结线虫的方法，其包括：
S1.对待测烟草品种的种子进行漂浮育苗，直至须根穿出漂浮盘进入漂浮池，得到须根化烟苗；
S2.取出漂浮盘，在须根的穿出面滴加根结线虫卵的悬浮液，并将须根的远端部分浸入水中，让根结线虫卵在须根表面的水膜中孵化产生二龄幼虫，以对须根进行侵染，得到染病烟株；
S3.对染病烟株进行浅水湿润栽培，通过模拟根结线虫病最适宜的气候环境诱发病害，并对病害情况进行评价。
该方法利用寄主根系分泌物诱导激发线虫卵孵化、孵化的二龄幼虫易侵染根系的根冠伸长区的生物学特性，采用根结线虫卵孵化的二龄幼虫持续接种，在恒温、透气、寄主烟草根系分泌物刺激下，根结线虫卵在幼根表面的水膜中持续孵化产生二龄幼虫。之后利用浅水湿润栽培创造适宜的温湿度及透气条件诱发病害，病害调查后，计算病情指数，根据病情指数评价待测品种抗性，避免了环境条件的变化对鉴定结果的影响，提高了烟草根结线虫病抗性鉴定的准确性、重现性。
进一步地，根结线虫卵悬浮液的浓度为500～1000粒/mL，每株须根化烟苗的滴加量为1～2mL。上述浓度范围内，有利于根结线虫卵的快速孵化，达到更好的侵染效果。
可选地，让漂浮盘的底部与水面保持1～4cm的间距，使得须根的远端部分浸入水中。在该操作下，可以保持根部的透气，从而让根结线虫卵更好的孵化。具体地，可以在漂浮盘的底部加装3～5cm长的托柱，然后将漂浮盘放入5～8cm深的配套浅盘中，保持浅盘中水面高度1～2cm即可。
可选地，根结线虫卵的孵化时长为3～5天，孵化温度为20～30℃。在孵化过程中，可以采用保湿箱保湿或超声波加湿，让根结线虫卵在恒温、透气、寄主烟草根系分泌物刺激下快速孵化。
进一步地，在对待测烟草品种的种子进行漂浮育苗时，采用二段式漂浮育苗，包括：
将待测烟草品种的种子播于第一漂浮盘中，育苗20～25天至生长出3～4片真叶；
每品种挑选出整齐一致的幼苗连同基质移栽至无基质的第二漂浮育苗盘中，每穴1株，保湿漂浮育苗5～7天至须根刚穿出第二漂浮盘进入漂浮池，得到须根化烟苗。
其中，第一漂浮育苗盘基质为商品化烟草育苗基质，该基质培养的烟苗主侧根不明显、须根化，在大十字期烟苗拔出时80％以上能带出80％的基质。二段式漂浮育苗模式进行抗根结线虫鉴定，挖根、洗根调查的劳动强度明显降低，只需要将烟根拔出、洗除根系所带少量基质，具有操作简便、空间利用率高、选择效率高、烟草根结线虫病抗性表型鉴定准确等优点。
此外，在进行浅水湿润栽培时，每7～10天施用水溶性育苗肥，水溶性育苗肥中N、P2O5、K2O的质量比为15～20∶8～12∶10～15。上述水溶性育苗肥可以更好地促进染病烟株的生长，缩短鉴定周期。
以N含量计，该水溶性育苗肥的浓度为2.5‰～6.5‰。并且随着染病烟株的增大，浓度依次增加。在使用该水溶性育苗肥时，先兑水至所需浓度在加入到浅盘中，此时浅盘的水位最高3～4cm。
在进行浅水湿润栽培时，温度保持在20～30℃，采用干湿交替的方式模拟根结线虫病最适宜的气候环境诱发病害。
进一步地，在浅水润湿栽培40～50天后，对染病烟株的病害情况进行评价，并计算染病烟株的病情指数；
染病烟株的病情严重度分级如下：
0级：根部正常；
1级：1/4以下根上有少量根结；
3级：1/4～1/3根上有少量根结；
5级：1/3～1/2根上有根结；
7级：1/2以上根上有根结，少量次生根上产生根结；
9级：所有根上(包括次生根)长满根结。
病情指数采用如下公式计算：
其中，i为病情级数(0-9)；xi为i级植株的株数。
此外，根据病情指数，评价烟草品种的抗性等级，抗性等级按照以下标准划分：
免疫(I)：病情指数为0；
抗病(R)：病情指数为0.1～20.0；
中抗(MR)：病情指数为20.1～40.0；
中感(MS)：病情指数为40.1～60.0；
感病(S)：病情指数为60.1～80.0；
高感(HS)：病情指数为80.1～100.0。
进一步地，为了提高测试的准确性，每个烟草品种至少5株为1个重复，每品种重复至少3次，每品种重复随机分布于第二漂浮盘。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
本实施例提供了一种基于集约化育苗筛选烟草品种抗根结线虫的方法，本实施例所采用的烟草品种为NC95、长脖黄、K326。南方根结线虫采用感病番茄Rutgers活体繁殖，取根结，加次氯酸钠溶液搅拌，筛洗获得卵悬浮液。
其具体操作步骤如下：
S1.根化烟草幼苗的培育
将NC95、长脖黄、K326共3个待测烟草品种的种子播于第一漂浮盘(325孔)中，育苗20～25天至3～4真叶(图1)，每品种挑选出整齐一致的幼苗连同基质移栽至无基质的第二漂浮育苗盘(32孔)中，每穴1株，保湿漂浮育苗5～7天至须根刚穿出第二漂浮盘进入漂浮池，得到须根化烟苗(图2)，每品种12株为1个重复，每品种重复4次，每重复随机分布于第二漂浮盘(32孔)。
S2.根系分泌物水膜线虫卵孵化接种
将得到的须根化烟苗漂浮盘底部加3～5cm长托柱，托起放入深5～8cm配套的浅盘，在每株的四个根穿出面滴加1mL 500～600粒/mL的根结线虫卵悬浮液(图3)，浅盘中维持水位1～2cm保持根系透气，保湿箱保湿，让根结线虫卵在20℃～30℃恒温、透气、寄主烟草根系分泌物刺激下、3～5天在幼根表面的水膜中持续孵化产生二龄幼虫侵染栽培基质内外的幼根，完成接种，形成人工病圃。
S3.浅水湿润栽培诱发病害
接种后的烟株水培方式为浅水湿润栽培(图4)，每7～10天施用N∶P2O5∶K2O为15～20∶8～12∶10～15的水溶性育苗肥1次，浓度以N计，为2.5‰～6.5‰，随苗龄的增大浓度依次增加，兑水至所需浓度加入托盘，浅盘水位最高3～4cm，20℃～30℃恒温、干湿交替模拟烟草根结线虫病最适宜的气候环境诱发病害。
S4.抗病评价
接种后第40天进行病害调查，调查所有烟株，以病情严重度统计，计算病情指数，根据病情指数评价抗性，结果如表1所示。
表1.不同烟草品种对南方根结线虫的抗性鉴定结果
从表1可以看出，接种南方根结线虫卵浅水湿润栽培40天后调查各烟草品种的根结发生情况，发现各品种根结发生严重度存在明显差异(图5～图7)，试验结果表明供试的3个烟草品种对南方根结线虫的抗性差异明显，其中，NC95平均病情指数18.98、表现为抗病(R)，长脖黄平均病情指数64.98、表现为感病(S)，K326平均病情指数37.96、表现为中抗(MR)。这些品种的鉴定结果与文献报道的鉴定结果完全吻合，说明该方法稳定、可靠，能用于烟草品种对根结线虫病的抗性鉴定。
实施例2
本实施例提供了一种基于集约化育苗筛选烟草品种抗根结线虫的方法，本实施例所采用的烟草品种共计34个，详见表2。南方根结线虫采用感病番茄Rutgers活体繁殖，取根结，加次氯酸钠溶液搅拌，筛洗获得卵悬浮液。
具体操作步骤如下：
S1.须根化烟草幼苗的培育
将34个待测烟草品种的种子播于第一漂浮盘(325孔)中，育苗20～25天至3～4真叶，每品种挑选出整齐一致的幼苗连同基质移栽至无基质的第二漂浮育苗盘(32孔)中，每穴1株，保湿漂浮育苗5～7天至须根刚穿出第二漂浮盘进入漂浮池，得到须根烟苗，每品种12株为1个重复，每品种重复3次，每重复随机分布于第二漂浮盘(32孔)。
S2.根系分泌物水膜线虫卵孵化接种
将得到的须根烟苗漂浮盘底部加3～5cm长托柱，托起放入深5～8cm配套的浅盘，在每株的四个根穿出面滴加1mL 600～800粒/mL的根结线虫卵悬浮液，浅盘中维持水位1～2cm保持根系透气，保湿箱保湿，让根结线虫卵在20℃～30℃恒温、透气、寄主烟草根系分泌物刺激下、3～5天在幼根表面的水膜中持续孵化产生二龄幼虫侵染栽培基质内外的幼根，完成接种，形成人工病圃。
S3.浅水湿润栽培诱发病害
接种后的烟株水培方式为浅水湿润栽培，每7～10天施用N∶P2O5∶K2O为18∶10∶13的水溶性育苗肥1次，浓度以N计，为2.5‰～6.5‰，随苗龄的增大浓度依次增加，兑水至所需浓度加入托盘，浅盘水位最高3～4cm，20℃～30℃恒温、干湿交替模拟烟草根结线虫病最适宜的气候环境诱发病害。
S4.抗病评价
接种后第40天进行病害调查，调查所有烟株，以病情严重度统计，计算病情指数，根据病情指数评价抗性。
S5.对比试验
将34个待测烟草品种的种子播于第一漂浮盘(325孔)中，育苗20～25天至3～4真叶，每品种挑选出整齐一致的幼苗连同基质移栽至装好盆栽土的花盆(18CM×21CM)内，移栽前在盆中央挖1小坑，按3000～5000粒/株加南方根结线虫卵悬浮液拌匀塘后移栽烟苗，每盆1株，每品种6株为1个重复，每品种重复3次，按传统方法管理盆栽及进行病害调查和抗性鉴定，鉴定结果如表2所示。
表2.不同烟草品种对南方根结线虫的抗性比较
从表2各品种病情统计及抗性评价结果来看，本发明与盆栽抗性鉴定基本吻合，即使病情指数存在一定的差异，但抗感水平完全一致，34个烟草品种中，2个品种抗病(R)，12个品种中抗(MR)，14个品种中感(MS)，6个品种感病(S)。这些试验结果再次验证了本发明的鉴定方法能用于烟草品种对根结线虫病的抗性鉴定。与常规鉴定方法相比，本发明4份材料占用空间相当于1份盆栽材料，挖根、洗根的工作量减少1/2～2/3，鉴定周期缩短了10～20天，更适合于规模化鉴定。
综上所述，本发明实施例提供一种基于集约化育苗筛选烟草品种抗根结线虫的方法，其利用寄主根系分泌物诱导激发线虫卵孵化、孵化的二龄幼虫易侵染根系的根冠伸长区的生物学特性，采用根结线虫卵孵化的二龄幼虫持续接种，在恒温、透气、寄主烟草根系分泌物刺激下，根结线虫卵在幼根表面的水膜中持续孵化产生二龄幼虫。之后利用浅水湿润栽培创造适宜的温湿度及透气条件诱发病害，病害调查后，计算病情指数，根据病情指数评价待测品种抗性，避免了环境条件的变化对鉴定结果的影响，提高了烟草根结线虫病抗性鉴定的准确性、重现性。该方法的操作更简便，选择效率高，并且可以有效缩短整个鉴定周期，可不间断或部分重叠成批次地进行，提高了烟草根结线虫病抗性鉴定的时效性和规模化。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种基于集约化育苗筛选烟草品种抗根结线虫的方法，其特征在于，包括：
对待测烟草品种的种子进行漂浮育苗，直至须根穿出漂浮盘进入漂浮池，得到须根化烟苗；
取出所述漂浮盘，在所述须根的穿出面滴加根结线虫卵的悬浮液，并将所述须根的远端部分浸入水中，让所述根结线虫卵在所述须根表面的水膜中孵化产生二龄幼虫，以对所述须根进行侵染，得到染病烟株；
对所述染病烟株进行浅水湿润栽培，通过模拟根结线虫病最适宜的气候环境诱发病害，并对病害情况进行评价。
2.根据权利要求1所述的基于集约化育苗筛选烟草品种抗根结线虫的方法，其特征在于，所述根结线虫卵悬浮液的浓度为500～1000粒/mL，每株所述须根化烟苗的滴加量为1～2mL。
3.根据权利要求1所述的基于集约化育苗筛选烟草品种抗根结线虫的方法，其特征在于，让所述漂浮盘的底部与水面保持1～4cm的间距，使得所述须根的远端部分浸入水中。
4.根据权利要求2所述的基于集约化育苗筛选烟草品种抗根结线虫的方法，其特征在于，所述根结线虫卵的孵化时长为3～5天，孵化温度为20～30℃。
5.根据权利要求1所述的基于集约化育苗筛选烟草品种抗根结线虫的方法，其特征在于，在对所述待测烟草品种的种子进行漂浮育苗时，采用二段式漂浮育苗，包括：
将所述待测烟草品种的种子播于第一漂浮盘中，育苗20～25天至生长出3～4片真叶；
每品种挑选出整齐一致的幼苗连同基质移栽至无基质的第二漂浮育苗盘中，每穴1株，保湿漂浮育苗5～7天至所述须根刚穿出第二漂浮盘进入漂浮池，得到所述须根化烟苗。
6.根据权利要求1所述的基于集约化育苗筛选烟草品种抗根结线虫的方法，其特征在于，在进行所述浅水湿润栽培时，每7～10天施用水溶性育苗肥，所述水溶性育苗肥中N、P2O5、K2O的质量比为15～20∶8～12∶10～15。
7.根据权利要求6所述的基于集约化育苗筛选烟草品种抗根结线虫的方法，其特征在于，以N含量计，所述水溶性育苗肥的浓度为2.5‰～6.5‰。
8.根据权利要求7所述的基于集约化育苗筛选烟草品种抗根结线虫的方法，其特征在于，在进行所述浅水湿润栽培时，温度保持在20～30℃，采用干湿交替的方式模拟根结线虫病最适宜的气候环境诱发病害。
9.根据权利要求1所述的基于集约化育苗筛选烟草品种抗根结线虫的方法，其特征在于，在所述浅水润湿栽培40～50天后，对所述染病烟株的病害情况进行评价，并计算所述染病烟株的病情指数；
所述染病烟株的病情严重度分级如下：0级：根部正常；1级：1/4以下根上有少量根结；3级：1/4～1/3根上有少量根结；5级：1/3～1/2根上有根结；7级：1/2以上根上有根结，少量次生根上产生根结；9级：所有根上(包括次生根)长满根结；
所述病情指数采用如下公式计算：
其中，i为病情级数(0-9)；xi为i级植株的株数。
10.根据权利要求9所述的基于集约化育苗筛选烟草品种抗根结线虫的方法，其特征在于，根据所述病情指数，评价烟草品种的抗性等级，所述抗性等级按照以下标准划分：
免疫(I)：病情指数为0；抗病(R)：病情指数为0.1～20.0；中抗(MR)：病情指数为20.1～40.0；中感(MS)：病情指数为40.1～60.0；感病(S)：病情指数为60.1～80.0；高感(HS)：病情指数为80.1～100.0。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310911169.1A CN116746471A (zh) | 2023-07-24 | 2023-07-24 | 一种基于集约化育苗筛选烟草品种抗根结线虫的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310911169.1A CN116746471A (zh) | 2023-07-24 | 2023-07-24 | 一种基于集约化育苗筛选烟草品种抗根结线虫的方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN116746471A true CN116746471A (zh) | 2023-09-15 |
Family
ID=87959156
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202310911169.1A Pending CN116746471A (zh) | 2023-07-24 | 2023-07-24 | 一种基于集约化育苗筛选烟草品种抗根结线虫的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN116746471A (zh) |
-
2023
- 2023-07-24 CN CN202310911169.1A patent/CN116746471A/zh active Pending
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101496481A (zh) | 一种烟草青枯病抗性的苗期鉴定方法 | |
| CN105875399B (zh) | 基于一次成苗的桃树杂种胚试管培育方法及培育基体 | |
| US11357178B2 (en) | Method of screening tobacco germplasm for resistance to Alternaria alternata by ripening seedling leaves | |
| CN105191682B (zh) | 一种花生网斑病抗病性鉴定方法 | |
| CN108235904B (zh) | 一种早熟棉品种的种性保持和原种生产方法 | |
| CN110628870A (zh) | 一种辣椒苗期疫病抗性的浸根接种鉴定方法 | |
| Sato et al. | Associational effects against a leaf beetle mediate a minority advantage in defense and growth between hairy and glabrous plants | |
| Smith | Sedum pulchellum: a physiological and morphological comparison of diploid, tetraploid, and hexaploid races | |
| CN103194524B (zh) | 快速鉴定抗青枯病花生种质的方法 | |
| CN104152534B (zh) | 一种茄子黄萎病苗期快速抗性测定方法 | |
| CN107926868B (zh) | 一种基于雪莲果为寄主植物大量繁育丽蚜小蜂的方法 | |
| CN113693032B (zh) | 一种基于人工接种评价水稻品种抗水稻齿叶矮缩病的方法 | |
| CN116746471A (zh) | 一种基于集约化育苗筛选烟草品种抗根结线虫的方法 | |
| CN107771561B (zh) | 一种爪哇根结线虫的抗/耐病性鉴定方法 | |
| Nayak | Screening and evaluation of tomato varieties against root-knot nematode, Meloidogyne incognita | |
| Lambeth et al. | The sugar-acid ratio of selected tomato varieties | |
| CN108739127B (zh) | 一种快速比较番茄品种耐高温干旱特性的方法 | |
| CN114711129B (zh) | 一种烟草苗期青枯病抗性鉴定的方法 | |
| CN116746395A (zh) | 一种带病种苗盆栽评价烟草品种抗根结线虫的方法 | |
| CN103340107A (zh) | 一种鉴定棉花枯萎病抗性的适乐时包衣菌土营养钵法 | |
| CN115530037B (zh) | 改进的全生育期人工病圃烟草品种青枯病抗性鉴定方法 | |
| Nour et al. | Effect of Repeated Drought Periods on the Survival of Sorghum Seedlings 1 | |
| CN107815487A (zh) | 一种室内鉴定野生棉苗期黄萎病抗性的方法 | |
| Buchanan | A Bacterial Disease of Beans Transmitted by Hellothrips Femoralis Reut. | |
| RU2284689C1 (ru) | Способ создания скороспелого исходного материала для селекции подсолнечника |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |