CN116723848A - 用于加工胎儿支持组织的方法 - Google Patents

Abstract

在某些实施方案中，本文公开了制备胎儿支持组织产品的方法，所述方法包括：低温粉碎或均质化胎儿支持组织，在赋形剂中提取经低温粉碎的胎儿支持组织，以及对提取物进行灭菌。本文还公开了包含所述胎儿支持组织产品的药物组合物和使用所述胎儿支持组织产品治疗伤口、脊病况和关节炎的方法。

Description

用于加工胎儿支持组织的方法

交叉引用

本申请要求2020年10月26日提交的美国申请号63/105,770的权益，其通过引用整体并入本文。

发明内容

本文公开了制备胎儿支持组织产品的方法，其包括：(a)低温粉碎胎儿支持组织以生成经低温粉碎的胎儿支持组织；(b)在赋形剂中提取该经低温粉碎的胎儿支持组织以生成提取物；以及(c)使用具有约0.6μm或更小孔径的膜，然后使用具有约0.4μm或更小孔径的膜，通过过滤对该提取物进行灭菌；其中产生胎儿支持组织产品。在一些实施方案中，通过过滤进行灭菌是使用具有约0.45μm孔径的膜，然后使用具有约0.2μm或更小孔径的膜。在一些实施方案中，低温粉碎包括在液氮中粉碎胎儿支持组织。在一些实施方案中，低温粉碎包括将胎儿支持组织粉碎成细粉。在一些实施方案中，胎儿支持组织包括胎盘、脐带、胎盘羊膜、脐带羊膜、绒毛膜、或羊膜-绒毛膜或其任何组合。在一些实施方案中，胎儿支持组织包括脐带和胎盘羊膜。在一些实施方案中，赋形剂为盐水、注射用水(WFI)或其任何组合。在一些实施方案中，赋形剂为WFI。在一些实施方案中，赋形剂为盐水。在一些实施方案中，该方法进一步包括在步骤c)之后离心胎儿支持组织。在一些实施方案中，离心速度为约14,000相对离心力(rcf)或更高。在一些实施方案中，该方法进一步包括在离心后用赋形剂稀释胎儿支持组织。在一些实施方案中，赋形剂为WFI或盐水。在一些实施方案中，赋形剂为WFI。在一些实施方案中，赋形剂为盐水。在一些实施方案中，胎儿支持组织以至少约1.5、2.0或2.5倍的倍数进行稀释。在一些实施方案中，胎儿支持组织以约1.5至约3倍的倍数、约3倍至约5倍的倍数、或约5倍至10倍的倍数进行稀释。在一些实施方案中，胎儿支持组织以大于5倍的倍数进行稀释。在一些实施方案中，胎儿支持组织以大于10倍的倍数进行稀释。在一些实施方案中，胎儿支持组织以约2倍的倍数进行稀释。在一些实施方案中，经稀释的胎儿支持组织包含约1μg/ml至约150μg/ml的透明质酸(Hyaluronan，HA)。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品是抗炎、抗瘢痕形成、抗血管生成、抗粘连的或促进伤口愈合。在一些实施方案中，该方法包括将胎儿支持组织产品与至少一个附加胎儿支持组织产品汇集。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品和至少一个附加胎儿支持组织产品包括源自至少两名不同对象的胎儿支持组织。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品和至少一个附加胎儿支持组织产品包括源自至少五名不同对象的胎儿支持组织。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品和至少一个附加胎儿支持组织产品包括源自至少十五名不同对象的胎儿支持组织。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品和至少一个附加胎儿支持组织产品包括源自至少四十五名不同对象的胎儿支持组织。在一些实施方案中，该方法包括将胎儿支持组织产品填充到容器中。在一些实施方案中，该方法包括密封容器。在一些实施方案中，填充和密封是无菌地进行的。在一些实施方案中，填充和密封是无菌地并且在没有人为干预的单个连续过程中进行的。

在某些实施方案中，本文公开了一种制备胎儿支持组织产品的方法，其包括：(a)均质化胎儿支持组织以生成经均质化的胎儿支持组织；(b)在赋形剂中提取该经均质化的胎儿支持组织以生成提取物；以及(c)使用伽马照射或电子束灭菌对该提取物进行灭菌，其中产生胎儿支持组织产品。在一些实施方案中，均质化包括将胎儿支持组织粉碎成细粉。在一些实施方案中，胎儿支持组织包括胎盘、脐带、胎盘羊膜、脐带羊膜、绒毛膜、或羊膜-绒毛膜或其任何组合。在一些实施方案中，胎儿支持组织包括脐带和胎盘羊膜。在一些实施方案中，赋形剂为盐水、注射用水(WFI)或其任何组合。在一些实施方案中，赋形剂为WFI。在一些实施方案中，赋形剂为盐水。在一些实施方案中，该方法进一步包括在步骤c)之后离心胎儿支持组织。在一些实施方案中，离心速度为约14,000相对离心力(rcf)或更高。在一些实施方案中，该方法进一步包括在离心后用赋形剂稀释胎儿支持组织。在一些实施方案中，赋形剂为WFI或盐水。在一些实施方案中，赋形剂为WFI。在一些实施方案中，赋形剂为盐水。在一些实施方案中，胎儿支持组织以至少约1.5、2.0或2.5倍的倍数进行稀释。在一些实施方案中，胎儿支持组织以约1.5至约3倍的倍数、约3倍至约5倍的倍数、或约5倍至10倍的倍数进行稀释。在一些实施方案中，胎儿支持组织以大于5倍的倍数进行稀释。在一些实施方案中，胎儿支持组织以大于10倍的倍数进行稀释。在一些实施方案中，胎儿支持组织以约2倍的倍数进行稀释。在一些实施方案中，经稀释的胎儿支持组织包含约1μg/ml至约150μg/ml的透明质酸(HA)。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品是抗炎、抗瘢痕形成、抗血管生成、抗粘连的或促进伤口愈合。在一些实施方案中，该方法包括将胎儿支持组织产品与至少一个附加胎儿支持组织产品汇集。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品和至少一个附加胎儿支持组织产品包括源自至少两名不同对象的胎儿支持组织。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品和至少一个附加胎儿支持组织产品包括源自至少五名不同对象的胎儿支持组织。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品和至少一个附加胎儿支持组织产品包括源自至少十五名不同对象的胎儿支持组织。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品和至少一个附加胎儿支持组织产品包括源自至少四十五名不同对象的胎儿支持组织。在一些实施方案中，该方法包括将胎儿支持组织产品填充到容器中。在一些实施方案中，该方法包括密封容器。在一些实施方案中，填充和密封是无菌地进行的。在一些实施方案中，填充和密封是无菌地并且在没有人为干预的单个连续过程中进行的。

在某些实施方案中，本文公开了一种药物组合物，其包含(a)通过本文公开的任何方法制备的胎儿支持组织产品，以及(b)药学上可接受的载体。在一些实施方案中，药学上可接受的载体选自：卡波姆、纤维素、胶原蛋白、甘油、己二醇、透明质酸、羟丙基纤维素、磷酸、聚山梨醇酯80、丙二醇、丙二醇硬脂酸酯、盐水、氢氧化钠、磷酸钠、山梨醇(sorbital)、水、黄原胶或其任何组合。在一些实施方案中，胎儿支持组织粉末产品以乳膏、洗剂、软膏、滴眼液、喷雾剂、糊剂、凝胶、膜或涂剂的形式施用或提供。在一些实施方案中，药物组合物是抗炎、抗瘢痕形成、抗血管生成、抗粘连的或促进伤口愈合。

在某些实施方案中，本文公开了一种治疗有需要的个体的伤口的方法，其包括向伤口施用本文公开的任何药物组合物持续足以治疗该伤口的一段时间。在一些实施方案中，伤口为角膜上皮伤口。在一些实施方案中，角膜上皮伤口是由光消融治疗引起的。在一些实施方案中，伤口为选自真皮烧伤或瘢痕的皮肤病况。

在某些实施方案中，本文公开了一种治疗有需要的个体的脊病况的方法，其包括向个体施用本文公开的任何药物组合物持续足以治疗该脊病况的一段时间。在一些实施方案中，脊病况选自椎间盘突出、脊髓粘连、小关节骨关节炎、神经根病变或椎间盘炎。在一些实施方案中，脊病况为脊髓损伤。

在某些实施方案中，本文公开了一种治疗有需要的个体的关节炎病况的方法，其包括向个体施用本文公开的任何药物组合物持续足以治疗该关节炎病况的一段时间。在一些实施方案中，关节炎病况选自骨关节炎、类风湿性关节炎、脓毒性关节炎、强直性脊柱炎或椎关节强硬。

在某些实施方案中，本文公开了一种再生或修复有需要的个体的骨、组织或软骨的方法，其包括向个体施用或提供本文公开的任何药物组合物持续足以再生或修复骨、组织或软骨的一段时间。在一些实施方案中，药物组合物以贴剂的形式施用或提供。在一些实施方案中，药物组合物以伤口敷料的形式施用或提供。

附图说明

图1示出了说明本文公开的产生胎儿支持组织产品的方法的示例的流程图。

图2A-2D示出了提取1小时后经低温粉碎的胎儿支持组织的连续盐水和GnHCl提取物的蛋白质印迹分析。

图3A-3B示出了在盐水中提取并以不同离心速度离心的胎儿支持组织的蛋白质印迹分析。

图4示出了经低温粉碎的胎儿支持组织的连续盐水、注射用水(“WFI”)或无菌水(“SW”)和GnHCl提取物的琼脂糖凝胶分析。

图5A-5B示出了经低温粉碎的胎儿支持组织的连续盐水、WFI或SW和GnHCl提取物的蛋白质印迹分析。

图6示出了伽马照射处理后胎儿支持组织产品的琼脂糖凝胶分析。

图7A-7B示出了伽马照射处理后胎儿支持组织产品的考马斯蓝分析。

图8A-8D示出了伽马照射后胎儿支持组织提取物的蛋白质印迹分析。

图9示出了过滤灭菌和稀释后胎儿支持组织提取物的琼脂糖凝胶分析。

图10A-10D示出了过滤灭菌和稀释后胎儿支持组织提取物的蛋白质印迹分析。

图11A-11C示出了透明质酸(“HA”)浓度在三种效力测定—(1)TRAP测定；(2)M2测定；和(3)WST-1测定中的剂量依赖性线性分析。

图12示出了说明胎儿支持组织产品的储存、运输和最终灭菌的流程图。

图13A-13F示出了在伽马照射和未经伽马照射的情况下，在不同赋形剂中产生的胎儿支持组织产品的琼脂糖凝胶分析。

图14A-14B示出了在伽马照射和未经伽马照射的情况下，在不同赋形剂中产生的胎儿支持组织产品的考马斯蓝染色分析。

图15A-15J示出了在伽马照射和未经伽马照射的情况下，在不同赋形剂中产生的胎儿支持组织产品的蛋白质印迹分析。

图16A-16B示出了在伽马照射和未经伽马照射的情况下，在不同赋形剂中产生的胎儿支持组织产品的细胞形态图像。

图17A-17E示出了在伽马照射和未经伽马照射的情况下，在不同赋形剂中产生的胎儿支持组织产品的TRAP分析。

图18A-18B示出了胎儿支持组织产品的琼脂糖凝胶分析。

图19A-19D示出了胎儿支持组织产品的蛋白质印迹分析。

图20A-20B示出了胎儿支持组织产品的细胞形态分析和ODITRAP测定。

图21A-21B示出了胎儿支持组织产品的细胞形态分析和M2测定。

图22A-22B示出了胎儿支持组织产品的细胞形态分析和NO测定。

图23示出了说明本文公开的产生胎儿支持组织产品的方法的示例的流程图。

图24A-24C示出了说明本文公开的通过汇集多个供体以增加产率来产生胎儿支持组织产品的方法的示例的流程图。

具体实施方式

羊膜和脐带含有几种先天生物因子，该先天生物因子可用于多种目的，包括伤口愈合以及减少炎症和瘢痕形成。HC-HA/PTX3复合体—高分子量(HMW)透明质酸(HA)与来自间-α-胰蛋白酶抑制剂的重链(HC)1共价连接，并进一步与正五聚蛋白3(PTX3)复合—是脐带和羊膜的一种关键活性组分，负责其伤口愈合作用。因此，需要产生具有高产率的HC-HA/PTX3、HA和其他感兴趣蛋白质的胎儿支持组织产品(例如，用于伤口愈合的羊膜和脐带提取物)。还需要使用减少或防止HC-HA/PTX3复合体和其他感兴趣蛋白质降解的过程来产生胎儿支持组织产品。防止HA和其他感兴趣蛋白质的降解很重要，因为这样的蛋白质的降解会使胎儿支持组织产品不适合使用，例如，在角膜表面上通过降解产生的较小颗粒物可导致视力模糊。

在某些实施方案中，本文公开了制备胎儿支持组织产品的方法，其包括：(a)低温粉碎胎儿支持组织以生成经低温粉碎的胎儿支持组织；(b)在赋形剂中提取该经低温粉碎的胎儿支持组织以生成提取物；以及(c)使用具有约0.6μm或更小孔径的膜，然后使用具有约0.3μm或更小孔径的膜，通过过滤对该提取物进行灭菌。在一些实施方案中，胎儿支持组织是胎盘羊膜(PAM)或基本上分离的PAM、脐带羊膜(UCAM)或基本上分离的UCAM、绒毛膜或基本上分离的绒毛膜、羊膜-绒毛膜或基本上分离的羊膜-绒毛膜、胎盘或基本上分离的胎盘、脐带或基本上分离的脐带或其任何组合。在一些实施方案中，低温粉碎包括在液氮中粉碎胎儿支持组织。在一些实施方案中，低温粉碎包括将胎儿支持组织粉碎成细粉。在一些实施方案中，赋形剂为盐水、注射用水(WFI)或其任何组合。在一些实施方案中，该方法进一步包括离心胎儿支持组织。在一些实施方案中，离心速度为约14,000相对离心力(rcf)或更高。在一些实施方案中，该方法进一步包括在离心后用赋形剂稀释胎儿支持组织。在一些实施方案中，赋形剂为WFI或盐水。在一些实施方案中，胎儿支持组织以至少约1.5、2.0或2.5倍的倍数进行稀释。在一些实施方案中，胎儿支持组织以约1.5至约3倍的倍数、约3倍至约5倍的倍数、或约5倍至10倍的倍数进行稀释。在一些实施方案中，胎儿支持组织以大于5倍的倍数进行稀释。在一些实施方案中，胎儿支持组织以大于10倍的倍数进行稀释。在一些实施方案中，经稀释的胎儿支持组织包含约1μg/mL至约150μg/mL的透明质酸(HA)。在一些实施方案中，经稀释的胎儿支持组织包含约1μg/mL至约90μg/mL的HA。在一些实施方案中，经稀释的胎儿支持组织包含约90μg/ml至约150μg/ml的HA。在一些实施方案中，经稀释的胎儿支持组织包含约1-10μg/mL的HA、约10-20μg/mL的HA、约20-30μg/mL的HA、约30-40μg/mL的HA、约40-50μg/mL的HA、约50-60μg/mL的HA、约60-70μg/mL的HA、约70-80μg/mL的HA、约80-90μg/mL的HA、约90-100μg/mL的HA、约100-110μg/mL的HA、约110-120μg/mL的HA、约120-130μg/mL的HA、约130-140μg/mL的HA或约140-150μg/mL的HA。

在一些情况下，与使用其他均质化技术的生产方法相比，胎儿支持组织的低温粉碎产生具有更高产率的HC-HA/PTX3和其他蛋白质的胎儿支持组织产品。在一些情况下，与使用其他均质化技术的生产方法相比，胎儿支持组织的低温粉碎使得HC-HA/PTX3和其他感兴趣蛋白质的降解更少。在一些情况下，例如通过ODI-TRAP测定、M2测定、一氧化氮(NO)测定和/或WST-1测定所确定的，与使用其他均质化技术的生产方法相比，胎儿支持组织的低温粉碎产生更高效力的胎儿支持组织产品。在一些情况下，与通过伽马照射对胎儿支持组织产品进行灭菌的生产方法相比，通过过滤进行灭菌使得HC-HA/PTX3、HA和其他感兴趣蛋白质的降解更少。在一些情况下，通过过滤进行灭菌从胎儿支持组织产品中去除较小颗粒，这在某些制剂中可能是不期望的(例如，用在角膜表面上的包含胎儿支持组织的凝胶)。在一些情况下，与不包括稀释步骤的过程相比，稀释胎儿支持组织使得HC-HA/PTX3和其他感兴趣蛋白质的过滤更快且回收更好。在一些情况下，与使用不同赋形剂(诸如结构化水)的过程相比，使用注射用水作为赋形剂使得HC-HA/PTX3和其他感兴趣蛋白质的过滤更快且回收更好。

在某些实施方案中，本文公开了通过以下方法制备的胎儿支持组织产品，该方法包括：(a)低温粉碎胎儿支持组织以生成经低温粉碎的胎儿支持组织；(b)在赋形剂中提取该经低温粉碎的胎儿支持组织以生成提取物；以及(c)使用具有约0.6μm孔径的膜，然后使用具有约0.4μm或更小孔径的膜，通过过滤对该提取物进行灭菌。在一些实施方案中，胎儿支持组织是胎盘羊膜(PAM)或基本上分离的PAM、脐带羊膜(UCAM)或基本上分离的UCAM、绒毛膜或基本上分离的绒毛膜、羊膜-绒毛膜或基本上分离的羊膜-绒毛膜、胎盘或基本上分离的胎盘、脐带或基本上分离的脐带或其任何组合。

在某些实施方案中，本文公开了一种药物组合物，其包含本文公开的胎儿支持组织产品以及药学上可接受的载体。在一些实施方案中，药学上可接受的载体选自卡波姆、纤维素、胶原蛋白、甘油、己二醇、透明质酸、羟丙基纤维素、磷酸、聚山梨醇酯80、丙二醇、丙二醇硬脂酸酯、盐水、氢氧化钠、磷酸钠、山梨醇、水、黄原胶或其任何组合。在一些实施方案中，药物组合物以乳膏、洗剂、软膏、滴眼液、喷雾剂、糊剂、凝胶、膜或涂剂的形式施用或提供。在一些实施方案中，药物组合物是抗炎、抗瘢痕形成、抗血管生成、抗粘连的或促进伤口愈合。在一些实施方案中，药物组合物被配制为用于硬膜外施用、鞘内施用、吸入施用、静脉内施用或其组合。

在某些实施方案中，本文公开了治疗有需要的个体的伤口的方法，其包括向伤口施用本文公开的药物组合物持续足以治疗该伤口的一段时间。在一些实施方案中，伤口为选自真皮烧伤或瘢痕的皮肤病况。在一些实施方案中，药物组合物以贴剂的形式施用或提供。在一些实施方案中，药物组合物以伤口敷料的形式施用或提供。在一些实施方案中，药物组合物被配制用于注射。在一些实施方案中，药物组合物被配制用于胃肠外注射(例如，经由注射或输注，包括动脉内、心内、皮内、十二指肠内、髓内、肌内、骨内、腹膜内、鞘内、血管内、静脉内、玻璃体内、硬膜外和/或皮下)。在一些实施方案中，药物组合物被配制用于硬膜外施用、鞘内施用、吸入施用、静脉内施用或其组合。

在某些实施方案中，本文公开了治疗有需要的个体的脊病况的方法，其包括向个体施用本文公开的药物组合物持续足以治疗该脊病况的一段时间。在一些实施方案中，脊病况选自椎间盘突出、脊髓粘连、小关节骨关节炎、神经根病变或椎间盘炎。在一些实施方案中，脊病况为脊髓损伤。在一些实施方案中，药物组合物以贴剂的形式施用或提供。在一些实施方案中，药物组合物以伤口敷料的形式施用或提供。在一些实施方案中，药物组合物被配制用于注射。在一些实施方案中，药物组合物被配制用于胃肠外注射(例如，经由注射或输注，包括动脉内、心内、皮内、十二指肠内、髓内、肌内、骨内、腹膜内、鞘内、血管内、静脉内、玻璃体内、硬膜外和/或皮下)。在一些实施方案中，药物组合物被配制用于硬膜外施用、鞘内施用、吸入施用、静脉内施用或其组合。

在某些实施方案中，本文公开了治疗有需要的个体的关节炎病况的方法，其包括向个体施用本文公开的药物组合物持续足以治疗该关节炎病况的一段时间。在一些实施方案中，关节炎病况选自骨关节炎、类风湿性关节炎、脓毒性关节炎、强直性脊柱炎或椎关节强硬。在一些实施方案中，药物组合物以贴剂的形式施用或提供。在一些实施方案中，药物组合物以伤口敷料的形式施用或提供。在一些实施方案中，药物组合物被配制用于注射。在一些实施方案中，药物组合物被配制用于胃肠外注射(例如，经由注射或输注，包括动脉内、心内、皮内、十二指肠内、髓内、肌内、骨内、腹膜内、鞘内、血管内、静脉内、玻璃体内、硬膜外和/或皮下)。在一些实施方案中，药物组合物被配制用于硬膜外施用、鞘内施用、吸入施用、静脉内施用或其组合。

在某些实施方案中，本文公开了再生或修复有需要的个体的骨、组织或软骨的方法，其包括向个体施用或提供本文公开的药物组合物持续足以再生或修复骨、组织或软骨的一段时间。在一些实施方案中，药物组合物以贴剂的形式施用或提供。在一些实施方案中，药物组合物以伤口敷料的形式施用或提供。在一些实施方案中，药物组合物被配制用于注射。在一些实施方案中，药物组合物被配制用于胃肠外注射(例如，经由注射或输注，包括动脉内、心内、皮内、十二指肠内、髓内、肌内、骨内、腹膜内、鞘内、血管内、静脉内、玻璃体内、硬膜外和/或皮下)。在一些实施方案中，药物组合物被配制用于硬膜外施用、鞘内施用、吸入施用、静脉内施用或其组合。

胎儿支持组织产品的制备

初始加工

胎儿支持组织获自任何合适的来源(例如，医院或组织库)。在一些实施方案中，胎儿支持组织获自任何哺乳动物，诸如人类、非人灵长类动物、牛或猪。

在一些实施方案中，胎儿支持组织被冷冻(例如，在0℃或低于0℃下)直至确定供体和样本合格为止。在一些实施方案中，冷冻胎儿支持组织杀死在胎儿支持组织中发现的基本上所有细胞。在一些实施方案中，冷冻胎儿支持组织杀死在胎儿支持组织中发现的基本上所有细胞，同时保持或增加胎儿支持组织相对于新鲜(即，非冷冻)胎儿支持组织的生物活性。在一些实施方案中，冷冻胎儿支持组织使得在胎儿支持组织中发现的基本上所有细胞中丧失代谢活动。在一些实施方案中，冷冻胎儿支持组织使得在胎儿支持组织中发现的基本上所有细胞丧失代谢活动，同时保持或增加胎儿支持组织相对于新鲜(即，非冷冻)胎儿支持组织的生物活性(例如，其抗炎、抗瘢痕形成、抗血管形成和抗粘连特性)。

在一些实施方案中，胎儿支持组织未被冷冻。若胎儿支持组织未被冷冻，则立即按如下所述进行处理。

在一些实施方案中，遵循优良组织操作规范(Good Tissue Practice，GTP)进行加工以确保没有污染物被引入到胎儿支持组织粉末产品中。

在一些实施方案中，使用FDA许可的筛选测验对胎儿支持组织进行HIV-1、HIV-2、HTLV-1、乙型和丙型肝炎、西尼罗病毒、巨细胞病毒、人传染性海绵状脑病(例如，克雅氏病(Creutzfeldt-Jakob disease))和梅毒螺旋体的测试。在一些实施方案中，组织被HIV-1、HIV-2、HTLV-1、乙型和丙型肝炎、西尼罗病毒或巨细胞病毒污染的任何迹象都会导致立即检疫并随后销毁该组织样本。

在一些实施方案中，检查供体的医学档案以寻找乙型肝炎、丙型肝炎或HIV感染的风险因素和临床证据。在一些实施方案中，供体具有感染HIV-1、HIV-2、HTLV-1、乙型和丙型肝炎、西尼罗病毒、巨细胞病毒、人传染性海绵状脑病(例如，克雅氏病)和梅毒螺旋体的风险因素和/或临床证据的任何迹象都会导致立即检疫并随后销毁该组织样本。

在一些实施方案中，从胎儿支持组织中去除基本上所有的血液。在一些实施方案中，在冷冻胎儿支持组织之前，从胎儿支持组织中去除基本上所有的血液。

在一些实施方案中，未从胎儿支持组织中去除血液。在一些实施方案中，在冷冻胎儿支持组织之前，未从胎儿支持组织中去除血液。

在一些实施方案中，使胎儿支持组织与等渗缓冲液接触。在一些实施方案中，使胎儿支持组织与以下接触：盐水、PBS、PBS 1X、林格氏溶液(Ringer’s solution)、哈特曼氏溶液(Hartmann’s solution)、TRIS缓冲盐水、HEPES缓冲盐水、EBSS、HBSS、台氏盐溶液(Tyrode’ssalt Solution)、格氏平衡盐溶液(Gey’s Balanced Salt Solution)、DMEM、EMEM、GMEM、RPMI或其任何组合。

在一些实施方案中，用缓冲液边搅拌边洗涤胎儿支持组织以去除多余血液和组织。在一些实施方案中，边搅拌边洗涤减少洗涤时间。

在一些实施方案中，胎儿支持组织是胎盘羊膜(PAM)或基本上分离的PAM、脐带羊膜(UCAM)或基本上分离的UCAM、绒毛膜或基本上分离的绒毛膜、羊膜-绒毛膜或基本上分离的羊膜-绒毛膜、胎盘或基本上分离的胎盘、脐带或基本上分离的脐带或其任何组合。

在一些实施方案中，胎儿支持组织为脐带或脐带羊膜。在一些实施方案中，未从脐带或脐带羊膜中去除华通氏胶(Wharton’s Jelly)。在一些实施方案中，从脐带或脐带羊膜中去除部分或全部华通氏胶。

脐带包括两条动脉(脐动脉)和一条静脉(脐静脉)。在某些情况下，静脉和动脉被包围(或悬浮或掩埋)在华通氏胶内。在一些实施方案中，未从脐带中去除静脉和动脉。在一些实施方案中，从脐带中去除静脉和动脉。在一些实施方案中，在去除华通氏胶的同时去除静脉和动脉。

研磨/低温粉碎

在一些实施方案中，将胎儿支持组织通过任何合适的方法进行研磨。在一些实施方案中，研磨胎儿支持组织包括低温粉碎胎儿支持组织。在一些实施方案中，低温粉碎胎儿支持组织包括在胎儿支持组织处于冷冻(例如，暴露于低于0℃、-20℃、-40℃、-50℃、-60℃、-70℃、-75℃、-80℃、-90℃、-100℃的温度)或冷却状态时，粉碎、均质化或以其他方式片段化胎儿支持组织。在一些实施方案中，低温粉碎胎儿支持组织包括在低温控制的环境中粉碎或均质化胎儿支持组织。在一些实施方案中，低温粉碎胎儿支持组织包括在胎儿支持组织已经浸入或暴露于(例如，直接或间接)液氮之后粉碎或均质化胎儿支持组织。在一些实施方案中，低温粉碎胎儿支持组织包括在胎儿支持组织浸入或暴露于(例如，直接或间接)液氮时粉碎或均质化胎儿支持组织。在一些实施方案中，低温粉碎胎儿支持组织包括将胎儿支持组织置于研磨容器中，并在研磨之前将研磨容器浸入液氮中。在一些实施方案中，将研磨容器浸入液氮中持续研磨过程的至少1分钟。在一些实施方案中，低温粉碎胎儿支持组织包括将冷冻的胎儿支持组织暴露于锤子或旋转叶片。在一些实施方案中，低温粉碎胎儿支持组织包括将冷冻的胎儿支持组织暴露于冲击器。在一些实施方案中，冲击器通过电磁体驱动。在一些实施方案中，通过使用FreezerMill将胎儿支持组织低温粉碎。在一些实施方案中，通过使用研钵和研杵将胎儿支持组织低温粉碎。在一些实施方案中，通过使用混合器将胎儿支持组织低温粉碎。在一些实施方案中，通过使用BioPulverizer将胎儿支持组织低温粉碎。在一些实施方案中，与研磨未经冷冻的胎儿支持组织相比，在液氮中低温粉碎胎儿支持组织避免了激活胎儿支持组织蛋白酶和/或透明质酸酶，该胎儿支持组织蛋白酶和/或透明质酸酶可降解胎儿支持组织产品中的蛋白质和透明质酸。

在一些实施方案中，低温粉碎将胎儿支持组织减小为粉末。在一些实施方案中，包含粉末的颗粒具有均匀粒度分布。在一些实施方案中，包含粉末的颗粒不具有均匀粒度分布。在一些实施方案中，胎儿支持组织减小至小于约1000μm、500μm、400μm、300μm、200μm、100μm、50μm、40μm、30μm、20μm、10μm、5μm、1μm、0.5μm、0.4μm、0.3μm、0.2μm或0.1μm的粒度。在一些实施方案中，胎儿支持组织减小至小于500μm的粒度。在一些实施方案中，胎儿支持组织减小至小于约0.5μm的粒度。在一些实施方案中，胎儿支持组织减小至小于0.3μm的粒度。

提取和离心

在一些实施方案中，在胎儿支持组织上进行提取。在一些实施方案中，提取包括将感兴趣蛋白质与胎儿支持组织的其他组分分离。在一些实施方案中，在经低温粉碎的胎儿支持组织上进行提取。在一些实施方案中，提取包括将感兴趣蛋白质与经低温粉碎的胎儿支持组织的其他组分分离。在一些实施方案中，这样的感兴趣蛋白质包括蛋白质、聚糖、蛋白质-聚糖复合体(例如，透明质酸与IαI的重链和PTX3的复合体)和促进组织修复的酶。在一些实施方案中，这样的感兴趣蛋白质包括透明质酸与IαI的重链和PTX3的复合体(“HC-HA/PTX”)、透明质酸、高分子量透明质酸或其组合。在一些实施方案中，这样的感兴趣蛋白质包括透明质酸。

在一些实施方案中，提取物是通过在赋形剂中提取而制备的。在一些实施方案中，赋形剂为盐水、水、结构化水、注射用水(WFI)或其组合。在一些实施方案中，赋形剂为WFI。在一些实施方案中，与盐水或结构化水相比，使用WFI作为赋形剂产生更高的HA和总蛋白回收率。在一些实施方案中，在盐水或WFI中的提取提取了大部分感兴趣蛋白质(例如，HC-HA/PTX3)。

在一些实施方案中，提取进行约0至1小时、约1至2小时、约2至3小时、约3至4小时、约4至5小时、约5至6小时、约6至12小时、约12小时至24小时、约24小时至48小时或约48小时至72小时。在一些实施方案中，提取进行约1小时。在一些实施方案中，提取在WFI中进行约0至1小时、约1至2小时、约2至3小时、约3至4小时、约4至5小时、约5至6小时、约6至12小时、约12小时至24小时、约24小时至48小时或约48小时至72小时。在一些实施方案中，提取在WFI中进行约1小时。在一些实施方案中，提取在盐水中进行约0至1小时、约1至2小时、约2至3小时、约3至4小时、约4至5小时、约5至6小时、约6至12小时、约12小时至24小时、约24小时至48小时或约48小时至72小时。在一些实施方案中，提取在盐水中进行约1小时。

在一些实施方案中，提取在约4℃的温度下进行。在一些实施方案中，提取在约3℃、4℃、5℃或6℃的温度下进行。在一些实施方案中，提取在WFI中在约3℃、4℃、5℃或6℃的温度下进行。在一些实施方案中，提取在WFI中在约4℃的温度下进行。在一些实施方案中，提取在WFI中在约4℃的温度下进行约1小时。在一些实施方案中，提取在WFI中在约4℃的温度下进行约0至1小时、约1至2小时、约2至3小时、约3至4小时、约4至5小时、约5至6小时、约6至12小时、约12小时至24小时、约24小时至48小时或约48小时至72小时。在一些实施方案中，提取在盐水中在约3℃、4℃、5℃或6℃的温度下进行。在一些实施方案中，提取在盐水中在约4℃的温度下进行。在一些实施方案中，提取在盐水中在约4℃的温度下进行约0至1小时、约1至2小时、约2至3小时、约3至4小时、约4至5小时、约5至6小时、约6至12小时、约12小时至24小时、约24小时至48小时或约48小时至72小时。在一些实施方案中，提取在盐水中在约4℃的温度下进行约1小时。

在一些实施方案中，胎儿支持组织与提取赋形剂之比为约1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、1:0.75、1:0.5或1:0.25(重量:体积)。在一些实施方案中，胎儿支持组织与提取赋形剂之比为约6:1、5:1、4:1、3:1、2:1、1:1、0.75:1、0.5:1或0.25:1(重量:体积)。在一些实施方案中，胎儿支持组织与提取赋形剂之比为约1:4。在一些实施方案中，提取在WFI或盐水中进行。在一些实施方案中，提取在WFI中进行。在一些实施方案中，提取进行约0至1小时、约1至2小时、约2至3小时、约3至4小时、约4至5小时、约5至6小时、约6至12小时、约12小时至24小时、约24小时至48小时或约48小时至72小时。在一些实施方案中，提取进行约1小时。在一些实施方案中，提取在约3℃、4℃、5℃或6℃的温度下进行。在一些实施方案中，提取在约4℃的温度下进行。在一些实施方案中，提取在WFI中在约4℃的温度下以胎儿支持组织与赋形剂之比为约1:4进行约1小时。在一些实施方案中，提取在盐水中在约4℃的温度下以胎儿支持组织与赋形剂之比为约1:4进行约1小时。

在一些实施方案中，使用管转子进行提取。在一些实施方案中，管转子以约5-10rpm、10-20rpm、20-30rpm、30-40rpm或40-50rpm的速度范围旋转。在一些实施方案中，管转子以约20rpm的速度旋转。在一些实施方案中，管转子旋转约0至1小时、约1至2小时、约2至3小时、约3至4小时、约4至5小时、约5至6小时、约6至12小时、约12小时至24小时、约24小时至48小时或约48小时至72小时。在一些实施方案中，管转子旋转约1小时。在一些实施方案中，管转子在约3℃、4℃、5℃或6℃的温度下旋转。在一些实施方案中，管转子在约4℃的温度下旋转。在一些实施方案中，所使用的赋形剂为盐水或WFI。在一些实施方案中，所使用的赋形剂为WFI。在一些实施方案中，胎儿支持组织与提取赋形剂之比为约1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、1:0.75、1:0.5或1:0.25(重量:体积)。在一些实施方案中，胎儿支持组织与提取赋形剂之比为约1:4。在一些实施方案中，胎儿支持组织与提取赋形剂之比为约6:1、5:1、4:1、3:1、2:1、1:1、0.75:1、0.5:1或0.25:1(重量:体积)。在一些实施方案中，提取在WFI中在约4℃的温度下使用管转子以约20rpm的速度进行约1小时。在一些实施方案中，提取在盐水中在约4℃的温度下使用管转子以约20rpm的速度进行约1小时。

在一些实施方案中，对提取步骤产生的提取物进行离心。在一些实施方案中，将提取物离心约5至10分钟、约10至15分钟、约15至20分钟、约20至30分钟、约30分钟至1小时或约1至2小时。在一些实施方案中，将提取物离心约30分钟。在一些实施方案中，将提取物以约3,200rcf至10,000rcf、约10,000至14,000rcf、约14,000至32,000rcf或约32,000至约48,000rcf的速度离心。在一些实施方案中，将提取物以约14,000rcf或更高的速度离心。在一些实施方案中，将提取物以约14,000rcf的速度离心。在一些实施方案中，将提取物以约14,000rcf的速度离心约30分钟。在一些实施方案中，离心不影响或最低限度地影响提取物中感兴趣蛋白质的含量。

在一些实施方案中，提取产生包含感兴趣蛋白质的提取物(例如，透明质酸或透明质酸与IαI的重链和PTX3的复合体)。在一些实施方案中，大部分HC-HA/PTX3存在于提取物中。在一些实施方案中，大部分HA存在于提取物中。在一些实施方案中，与使用不同赋形剂(例如结构化水)的提取相比，在盐水或WFI中的提取使得对HC-HA/PTX3复合体的损伤更少。在一些实施方案中，与使用不同赋形剂(例如结构化水)的提取相比，在盐水或WFI中的提取使得HA或HC-HA/PTX3复合体的产率更高。在一些实施方案中，提取物含有大于约900μg/g的HA来进行提取(湿)。在一些实施方案中，提取物含有大于约1000μg/g的HA来进行提取(湿)。在一些实施方案中，提取物含有大于约1100μg/g的HA来进行提取(湿)。在一些实施方案中，提取物含有大于约1200μg/g的HA来进行提取(湿)。

稀释

在某些实施方案中，本文描述了用于加工胎儿支持组织产品的方法，其中该方法包括稀释步骤。在一些实施方案中，在胎儿支持组织已经进行提取和离心步骤之后执行稀释步骤。在一些实施方案中，在胎儿支持组织已经进行提取和离心步骤之后且在通过灭菌进行过滤之前执行稀释步骤。在一些实施方案中，稀释提取物(例如，降低提取物中感兴趣蛋白质的浓度)是通过将提取物与赋形剂混合来实现的。在一些实施方案中，赋形剂为盐水、水、结构化水、注射用水(WFI)或其组合。在一些实施方案中，赋形剂为WFI。在一些实施方案中，将提取物与赋形剂以约1至1.5、约1.5至2、约2至2.5、约2.5至3、约3-3.5、约3.5至4、约4至5、约5至6、约6至7、约7至8、约8至9或约9至10的稀释倍数混合。在一些实施方案中，稀释倍数大于5。在一些实施方案中，稀释倍数大于10。在一些实施方案中，稀释倍数为约2。在一些实施方案中，赋形剂为WFI，且稀释倍数为2。在一些实施方案中，赋形剂为盐水，且稀释倍数为2。在一些实施方案中，本文所述的方法进一步包括将提取物和赋形剂混合约10至30分钟、约30分钟至1小时或约1小时至2小时。在一些实施方案中，将提取物和赋形剂混合约30分钟。在一些实施方案中，将提取物和赋形剂以约5-10rpm、10-20rpm、20-30rpm、30-40rpm或40-50rpm的速度混合。在一些实施方案中，将提取物和赋形剂以约20rpm的速度混合。在一些实施方案中，将提取物和赋形剂以约20rpm的速度混合约1小时。在一些实施方案中，将提取物和赋形剂在约4℃的温度下混合。在一些实施方案中，将提取物和赋形剂在约4℃下以约20rpm的速度混合约1小时。在一些实施方案中，将提取物在过滤步骤之前进行稀释。在一些实施方案中，将提取物在过滤步骤之后进行稀释。

在一些实施方案中，与包含相同胎儿支持组织和赋形剂的未经稀释提取物相比，稀释增加过滤速度或一种或多种感兴趣蛋白质在过滤后的回收率、一种或多种感兴趣蛋白质的回收率、或提取物的效力(例如，如通过ODI-TRAP测定、M2测定、NO测定和/或WST-1测定所测量的)或其组合。在一些实施方案中，经稀释的胎儿支持组织包含约1μg/ml至约150μg/ml的透明质酸(HA)。在一些实施方案中，经稀释的胎儿支持组织包含约1μg/ml至约90μg/ml的透明质酸(HA)。在一些实施方案中，经稀释的胎儿支持组织包含约90μg/ml至约150μg/ml的透明质酸(HA)。

多个供体的汇集

在某些实施方案中，本文提供了制备经汇集的胎儿支持组织产品的方法。在一些情况下，生产经汇集的胎儿支持组织产品的方法包括生产本文所述的胎儿支持组织产品的任何方法和汇集步骤。在一些情况下，汇集步骤包括汇集源自多名对象的胎儿支持组织。在一些情况下，汇集步骤包括汇集源自多名对象的胎儿支持组织产品以产生经汇集的组合物(例如，经汇集的原料药)。在一些情况下，胎儿支持组织产品是通过本文所述的方法产生的，其可包括(a)低温粉碎胎儿支持组织以生成经低温粉碎的胎儿支持组织；(b)在赋形剂中提取该经低温粉碎的胎儿支持组织以生成提取物；以及(c)通过过滤对该提取物进行灭菌以产生该胎儿支持组织产品。在一些情况下，汇集步骤包括汇集源自多个供体组的胎儿支持组织产品以产生经汇集的组合物(例如，经汇集的原料药)。在一些情况下，供体组为来自单名对象的新胎盘。在一些情况下，汇集步骤包括汇集来自(例如，源自)至少15名对象的胎儿支持组织(例如，胎儿支持组织产品)以产生经汇集的组合物。在一些情况下，汇集步骤包括汇集来自至少30名对象的胎儿支持组织(例如，胎儿支持组织产品)以产生经汇集的组合物。在一些情况下，汇集步骤包括汇集来自至少45名对象的胎儿支持组织(例如，胎儿支持组织产品)以产生经汇集的组合物。在一些情况下，汇集步骤包括汇集来自至少10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100或超过100名对象的胎儿支持组织(例如，胎儿支持组织产品)以产生经汇集的组合物。在一些情况下，汇集步骤包括汇集来自至多5名对象的胎儿支持组织(例如，胎儿支持组织产品)。在一些情况下，汇集步骤包括汇集来自至多9、8、7、6、5、4、3或2名对象的胎儿支持组织(例如，胎儿支持组织产品)。在一些情况下，汇集步骤包括汇集多批次胎儿支持组织产品以产生经汇集的组合物。在一些情况下，汇集步骤包括汇集2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或15个批次。在一些情况下，将不超过三个批次进行汇集以产生经汇集的组合物。在一些情况下，一个批次为从源自多名对象的胎儿支持组织产品汇集的胎儿支持组织组合物。在一些情况下，一个批次包括源自15名对象的胎儿支持组织产品。在一些情况下，一个批次汇集自至少10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100或超过100名对象。在一些情况下，一个批次汇集自至多9、8、7、6、5、4、3或2名对象。在一些情况下，汇集包括汇集三个批次，并且每个批次包括来自15名对象的胎儿支持组织。

在一些情况下，汇集步骤包括摇动或混合来自多个供体的胎儿支持组织(例如，胎儿支持组织产品)。在一些情况下，混合发生在容器中。在一些情况下，使用摇床来混合容器。在一些情况下，容器以约1-40RPM、40-400RPM或400-800RPM的速度范围旋转。在一些情况下，摇床以约0-40RPM、约40-80RPM、约80-120RPM、约120-160RPM、约160-200RPM、约200-240RPM、约240-280RPM、约280RPM-320RPM、约320-360RPM、约360-400RPM、约400-440RPM、约440-480RPM、约480-520RPM、约520-560RPM、约560-600RPM、约600-640RPM、约640-680RPM、约680-720RPM、约720-760RPM或约760-800RPM的速度范围旋转。在一些情况下，容器以约40-400RPM的速度范围旋转。在一些情况下，混合发生约0-5分钟、5-10分钟、10-15分钟、15-20分钟、20-25分钟、25-30分钟、30-35分钟、35-40分钟、40-45分钟、45-50分钟、50-55分钟或55-60分钟。在一些情况下，混合发生约1分钟、2分钟、3分钟、4分钟、5分钟、6分钟、7分钟、8分钟、9分钟、10分钟、11分钟、12分钟、13分钟、14分钟、15分钟、16分钟、17分钟、18分钟、19分钟或20分钟。在一些实施方案中，混合发生约15分钟。在一些情况下，混合发生在约0℃、1℃、2℃、3℃、4℃、5℃、6℃、7℃、8℃、9℃、10℃、11℃、12℃、13℃、14℃或15℃的温度下。在一些情况下，混合发生在约4℃的温度下。在一些情况下，混合发生在0℃-5℃或5℃-10℃的温度下。在一些情况下，混合是在致冷器中进行的。在一些情况下，将多个供体、批次、组或其组合通过在具有摇床的容器中混合而汇集在一起，该摇床在约4℃的温度下以约40-400RPM的速度范围旋转约15分钟。

在一些情况下，汇集步骤包括筛分步骤。在一些情况下，筛分步骤控制经汇集的组合物(例如，散装原料药)的最大粒度。在一些情况下，筛子具有约0.1-0.2μm或更小、0.2-0.3μm或更小、0.3-0.4μm或更小、0.4-0.5μm或更小、0.5-0.6μm或更小、0.6-0.7μm或更小、0.7-0.8μm或更小、0.8-0.9μm或更小、0.9-1μm或更小、1-2μm或更小、2-3μm或更小、3-4μm或更小、4-5μm或更小、5-10μm或更小、10-20μm或更小、20-30μm或更小、30-40μm或更小、40-50μm或更小、50-100μm或更小、100-150μm或更小、150-200μm或更小、200-250μm或更小或250-300μm或更小的平均孔径。在一些情况下，汇集步骤包括对批次、组或胎儿支持组织产品进行病毒测试以汇集该批次、组或胎儿支持组织产品。在一些情况下，与通过相同方法，但没有进行汇集步骤而产生的组合物相比，汇集步骤产生具有高产率的HC-HA/PTX3、HA和其他感兴趣蛋白质、提高的稳定性、降低的变异性、提高的效力或其组合的组合物。

灭菌

在一些实施方案中，通过任何合适的方法对胎儿支持组织进行灭菌。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品通过照射、通过暴露于化学灭菌剂、通过加热、通过过滤、通过暴露于环氧乙烷气体、或通过使胎儿支持组织产品不受活微生物污染的任何过程进行灭菌。

在一些实施方案中，通过过滤对胎儿支持组织进行灭菌。在一些实施方案中，通过过滤对胎儿支持组织进行灭菌包括使胎儿支持组织通过过滤器。在一些实施方案中，选择过滤器孔径以防止细菌、酵母菌、霉菌或病毒通过过滤器。在一些实施方案中，过滤器包括具有约0.1-0.2μm或更小、0.2-0.3μm或更小、0.3-0.4μm或更小、0.4-0.5μm或更小、0.5-0.6μm或更小、0.6-0.7μm或更小、0.7-0.8μm或更小、0.8-0.9μm或更小、0.9-1μm或更小、1-2μm或更小、2-3μm或更小、3-4μm或更小、4-5μm或更小、5-10μm或更小、10-20μm或更小、20-30μm或更小、30-40μm或更小、40-50μm或更小、50-100μm或更小、100-150μm或更小、150-200μm或更小、200-250μm或更小或250-300μm或更小平均大小的孔。在一些实施方案中，过滤器具有约0.05-0.2μm的平均孔径。在一些实施方案中，过滤器包括具有约0.4μm或更小平均大小的孔。在一些实施方案中，过滤器包括具有约0.3μm或更小平均大小的孔。在一些实施方案中，过滤器包括具有约0.2μm或更小平均大小的孔。在一些实施方案中，过滤器包括具有约0.2μm平均大小的孔。在一些实施方案中，通过过滤进行灭菌包括使胎儿支持组织通过第一过滤器和第二过滤器。在一些实施方案中，第一过滤器的平均孔径大于第二过滤器的平均孔径。在一些实施方案中，第一或第二过滤器具有约0.1-0.2μm或更小、0.2-0.3μm或更小、0.3-0.4μm或更小、0.4-0.5μm或更小、0.5-0.6μm或更小、0.6-0.7μm或更小、0.7-0.8μm或更小、0.8-0.9μm或更小、0.9-1μm或更小、1-2μm或更小、2-3μm或更小、3-4μm或更小、4-5μm或更小5-10μm或更小的平均孔径。在一些实施方案中，第一或第二过滤器各自具有约0.05-0.2μm的平均孔径。在一些实施方案中，第一过滤器具有约0.6μm或更小的平均孔径并且第二过滤器具有约0.4μm或更小的平均孔径。在一些实施方案中，第一过滤器具有约0.5μm或更小的平均孔径并且第二过滤器具有约0.3μm或更小的平均孔径。在一些实施方案中，第一过滤器具有约0.45μm或更小的平均孔径并且第二过滤器具有约0.2μm或更小的平均孔径。在一些实施方案中，第一过滤器具有约0.45μm的平均孔径并且第二过滤器具有约0.2μm的平均孔径。

在一些实施方案中，本文所述的任何过滤器均容纳在灭菌单元中。在一些实施方案中，本文所述的任何过滤器为包含聚醚砜(PES)、聚偏二氟乙烯(PVDF)、聚四氟乙烯(PTFE)、聚丙烯、聚乙烯、聚酰胺、纤维素、硝酸纤维素、尼龙或其组合的膜。在一些实施方案中，本文所述的任何过滤器均已通过伽马照射进行灭菌。在一些实施方案中，过滤期间的过滤压力为约0-10psi、约10-20psi、约20-30psi、约30-40psi、约40-50psi、约50-60psi、约60-70psi、约70-80psi、约80-90psi或约90-100psi。在一些实施方案中，本文所述的任何过滤器的有效过滤面积为约0-20cm²、约20-40cm²、约40-60cm²、约60-80cm²、约80-100cm²、约100-120cm²、约120-140cm²、约140-160cm²、约160-180cm²或约180-200cm²。在一些实施方案中，过滤器的总直径为约0-10mm、约10-20mm、约20-30mm、约30-40mm、约40-50mm、约50-60mm、约60-70mm、约70-80mm、约80-90mm、约90-100mm、约100-200mm、约200-300mm、约300-400mm、约400-500mm、约500-600mm、约600-700mm、约700-800mm、约800-900mm或约900-1000mm。在一些实施方案中，过滤器的总直径为约67mm。在一些实施方案中，过滤器的总直径为约68mm。在一些实施方案中，过滤器的总高为约0-10mm、约10-20mm、约20-30mm、约30-40mm、约40-50mm、约50-60mm、约60-70mm、约70-80mm、约80-90mm、约90-100mm、约100-200mm、约200-300mm、约300-400mm、约400-500mm、约500-600mm、约600-700mm、约700-800mm、约800-900mm或约900-1000mm。在一些实施方案中，过滤器的总高为约82mm。在一些实施方案中，过滤器的总高为约83mm。在一些实施方案中，过滤器已成功地通过了制造前进流测试(manufacturing forward flow test)。在一些实施方案中，过滤器的前进流速率限制为约0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0或超过1.0mL/分钟。在一些实施方案中，当用水完全润湿时，过滤器的前进流速率限制在约2400、2450、2500、2550、2600、2650、2700、2750、2800、2850、2900或超过2900mbar的测试压力下为约0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0或超过1.0mL/分钟。在一些实施方案中，当用水完全润湿时，过滤器的前进流限制在约2760mbar的测试压力下为约0.58mL/分钟。在一些实施方案中，当用水完全润湿时，过滤器的前进流限制在约2700-2800mbar的测试压力下为约0.40-0.50mL/分钟、0.50-0.60mL/分钟或0.60-0.70mL/分钟。在一些实施方案中，前进流测试限制已经通过前进流限制与微生物激发试验(microbiological challenge test)的相关性对细菌去除进行了验证。在一些实施方案中，使用符合适用食品药品监督管理局(Food and DrugAdministration)指南的程序，对胎儿支持组织产品进行保留可接受的激发微生物的测试，以验证过滤器的细菌保留。

在一些实施方案中，通过任何合适的(例如，医学上可接受的)方法对本文公开的胎儿支持组织粉末产品进行最终灭菌。在一些实施方案中，将本文公开的胎儿支持组织粉末产品暴露于伽马照射持续足以对本文公开的胎儿支持组织粉末产品进行灭菌的一段时间。

在一些实施方案中，将本文公开的胎儿支持组织粉末产品暴露于约10至约75千戈瑞(kGy)的伽马照射持续足以对胎儿支持组织粉末产品进行灭菌的一段时间。在一些实施方案中，将本文公开的胎儿支持组织粉末产品暴露于约10至约30kGy的伽马照射持续足以对胎儿支持组织产品进行灭菌的一段时间。在一些实施方案中，将本文公开的胎儿支持组织粉末产品暴露于约15至约30kGy的伽马照射持续足以对胎儿支持组织产品进行灭菌的一段时间。在一些实施方案中，将本文公开的胎儿支持组织粉末产品暴露于约25kGy的伽马照射持续足以对胎儿支持组织产品进行灭菌的一段时间。在一些实施方案中，将本文公开的胎儿支持组织粉末产品暴露于约17.5kGy的伽马照射持续足以对胎儿支持组织粉末产品进行灭菌的一段时间。

在一些实施方案中，对本文公开的胎儿支持组织粉末产品进行电子束(E-Beam)灭菌。在一些实施方案中，将本文公开的胎儿支持组织产品暴露于约10至约75千戈瑞的电子束照射持续足以对胎儿支持组织产品进行灭菌的一段时间。在一些实施方案中，将本文公开的胎儿支持组织产品暴露于约10至约30kGy的电子束照射持续足以对胎儿支持组织产品进行灭菌的一段时间。在一些实施方案中，将本文公开的胎儿支持组织产品暴露于约15至约30kGy的电子束照射持续足以对胎儿支持组织产品进行灭菌的一段时间。在一些实施方案中，将本文公开的胎儿支持组织产品暴露于约25kGy的电子束照射持续足以对胎儿支持组织产品进行灭菌的一段时间。在一些实施方案中，将本文公开的胎儿支持组织产品暴露于约17.5kGy的电子束照射持续足以对胎儿支持组织产品进行灭菌的一段时间。

在一些实施方案中，将本文公开的胎儿支持组织粉末产品暴露于电子束持续足以对胎儿支持组织粉末产品进行灭菌的一段时间。在一些实施方案中，将本文公开的胎儿支持组织粉末产品暴露于X射线照射持续足以对胎儿支持组织粉末产品进行灭菌的一段时间。在一些实施方案中，将本文公开的胎儿支持组织粉末产品暴露于UV照射持续足以对胎儿支持组织粉末产品进行灭菌的一段时间。

在某些实施方案中，本文提供了用于制备胎儿支持组织产品的方法，其中该方法使得HA的回收百分比提高。在一些实施方案中，至少或约75％、80％、85％、90％、95％、99％或超过99％的HA被回收。在一些实施方案中，HA为HMW HA。在一些实施方案中，该方法使得HC-HA/PTX3的百分比提高。在一些实施方案中，至少或约75％、80％、85％、90％、95％、99％或超过99％的HC-HA/PTX3被回收。

在某些实施方案中，如本文所述的方法使得颗粒物或降解物得以去除。在一些实施方案中，本文所述的方法使得至少或约75％、80％、85％、90％、95％、99％或超过99％的颗粒物或降解物得以去除。在一些实施方案中，颗粒物或降解物包括氯化物。

填充和密封

在某些实施方案中，本文描述了用于加工胎儿支持组织产品的方法，其中该方法包括填充步骤、密封步骤或其组合。在一些情况下，填充步骤包括将胎儿支持组织填充到容器中(例如，小瓶、可密封袋、可密封包装袋、可密封囊等)。在一些情况下，填充步骤包括将胎儿支持组织产品或经汇集的散装原料药填充到容器(例如，小瓶、可密封袋、可密封包装袋、可密封囊等)中。在一些情况下，将胎儿支持组织产品或经汇集的散装原料药填充到容器中直到达到容器的目标填充重量。在一些情况下，胎儿支持组织产品或经汇集的散装原料药在填充之前是无菌的。在一些情况下，填充和密封是无菌进行的(例如，在将空气供应、材料、设备、人员或其组合进行调节以保持无菌的受控环境中)。在一些情况下，容器在无菌环境中形成、填充和密封而无需人为干预。在一些情况下，在没有任何外部人为干预的情况下并在无菌环境中的单个过程中，即时模制容器，用胎儿支持组织产品或经汇集的散装原料药填充容器，并将其密封。在一些情况下，使用吹填密封(BFS)设备将无菌产品填充并密封在容器中。在一些情况下，容器可灭菌(例如，可通过高压灭菌进行灭菌)。在一些情况下，本文的方法进一步包括对容器进行高压灭菌。在一些情况下，密封包括使用热封机进行密封。在一些情况下，容器被填充以容纳约0.01ml至0.50ml、0.51ml至3.0ml、3.1ml至6.0ml、6.1ml至15ml、15ml至20ml、20ml至25ml或25ml至30ml的胎儿支持组织产品或经汇集的散装原料药。在一些情况下，容器被填充以容纳约1ml、约1.5ml、约2ml、约2.5ml、约3ml、约3.5ml、约4ml、约4.5ml、约5ml、约5.5ml、约6ml、约6.5ml、约7ml、约7.5ml、约8ml、约8.5ml、约9ml、约9.5ml、约10ml、约10.5ml、约11ml、约11.5ml、约12ml、约12.5ml、约13ml、约13.5ml、约14ml、约14.5ml、约15ml、约15.5ml、约16ml、约16.5ml、约17ml、约17.5ml、约18ml、约18.5ml、约19ml、约19.5ml或约20ml的胎儿支持组织产品或经汇集的散装原料药。

胎儿支持组织产品制剂

在某些实施方案中，本文公开了通过以下方法制备的胎儿支持组织产品，该方法包括：(a)低温粉碎胎儿支持组织以生成经低温粉碎的胎儿支持组织；(b)在赋形剂中提取该经低温粉碎的胎儿支持组织以生成提取物；以及(c)使用具有约0.6μm孔径的膜，然后使用具有约0.4μm或更小孔径的膜，通过过滤对该提取物进行灭菌。在一些实施方案中，胎儿支持组织是胎盘羊膜(PAM)或基本上分离的PAM、脐带羊膜(UCAM)或基本上分离的UCAM、绒毛膜或基本上分离的绒毛膜、羊膜-绒毛膜或基本上分离的羊膜-绒毛膜、胎盘或基本上分离的胎盘、脐带或基本上分离的脐带或其任何组合。

在某些实施方案中，通过本文所述的方法产生的胎儿支持组织产品具有提高的稳定性。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品包含高百分比的HA。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品包含至少或约75％、80％、85％、90％、95％、99％或超过99％的HA。在一些实施方案中，HA为HMW HA。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品包含更高百分比的HC-HA/PTX3。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品包含至少或约75％、80％、85％、90％、95％、99％或超过99％的HC-HA/PTX3。

在某些实施方案中，通过本文所述的方法产生的胎儿支持组织产品基本上不包含颗粒物或降解物。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品包含至多约1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、15％或超过15％的颗粒物或降解物。在一些实施方案中，颗粒物或降解物包括氯化物。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被配制为溶液、悬浮液或乳液。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被配制用于经表面施用。

本文公开的药物制剂以任何合适的方式进行配制。任何合适的技术、载体和/或赋形剂均可考虑与本文公开的胎儿支持组织产品一起使用。

乳膏和洗剂

在某些实施方案中，本文公开了一种本文公开的胎儿支持组织产品的外用制剂，其中该外用制剂为乳膏形式。在某些情况下，乳膏为半固体(例如，软固体或粘稠液体)制剂，其包括分散在水包油乳液或油包水乳液中的本文公开的胎儿支持组织产品。

在某些实施方案中，本文公开了一种本文公开的胎儿支持组织产品的外用制剂，其中该外用制剂为洗剂形式。在某些情况下，洗剂为流体乳液(例如，水包油乳液或油包水乳液)。在一些实施方案中，洗剂和/或乳膏的疏水性组分源自动物(例如，羊毛脂、鱼肝油和龙涎香)、植物(例如，红花油、蓖麻油、椰子油、棉籽油、鲱鱼油、棕榈仁油、棕榈油、花生油、大豆油、菜籽油、亚麻籽油、米糠油、松油、芝麻油或葵花籽油)或石油(例如，矿物油或凡士林)。

软膏

在某些实施方案中，本文公开了一种本文公开的胎儿支持组织产品的外用制剂，其中该外用制剂为软膏形式。在某些情况下，软膏为在体温下软化或熔化的半固体制剂。

糊剂

在某些实施方案中，本文公开了一种本文公开的胎儿支持组织产品的外用制剂，其中该外用制剂为糊剂形式。在某些情况下，糊剂含有至少20％的固体。在某些情况下，糊剂为在体温下不流动的软膏。

凝胶和膜

在某些实施方案中，本文公开了一种本文公开的胎儿支持组织产品的外用制剂，其中该外用制剂为凝胶形式。在某些情况下，凝胶为由分散在液体中的大有机分子的分散体组成的半固体(或半刚性)系统。在某些情况下，凝胶是水溶性的，并且使用温水或盐水将其去除。

在某些情况下，在治疗真皮病变时，用敷料接触病变通常可扰乱受伤组织。去除伤口的许多敷料(诸如涉及皮肤显著区域的烧伤表面病变)可引起显著的疼痛，并且通常可重新打开至少部分部分愈合的伤口。在一些情况下，本文公开的胎儿支持组织产品的外用制剂以液体的形式应用于受影响区域，并将液体凝胶以膜的形式应用到受影响区域上。在一些情况下，膜为水溶性膜，并且可以用水或温和的水性洗涤剂去除，避免了与去除伤口敷料相关的疼痛和不适。在某些情况下，本文所述的外用制剂为真皮膜，其包括由聚烷基噁唑啉制成的柔性膜。在一些情况下，膜具有由聚烷基噁唑啉制成的结构层和将膜保持到位置的压敏黏合剂层。

棒状物

在某些实施方案中，本文公开了一种本文公开的胎儿支持组织产品的外用制剂，其中该外用制剂为棒状物。在某些情况下，棒状物为在体温下熔化的固体剂型。在一些实施方案中，棒状物包括蜡、聚合物、树脂、熔融成坚固物质的干固体和/或熔融晶体。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品的外用制剂为止血笔(即，通过以下方法制备的棒状物：(1)加热晶体，直到它们失去结晶水并熔化，以及(2)将熔化的晶体倒入到模具中并使其硬化)的形式。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品的外用制剂为棒状物形式，其中该棒状物包括蜡(例如，将蜡熔化并倒入到适当的模具中，在其中它们以棒状物形式固化)。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品的外用制剂为棒状物形式，其中棒状物包括熔化基底(即，在体温下软化的基底)。熔化基底的示例包括但不限于蜡、油、聚合物和凝胶。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品的外用制剂为棒状物形式，其中棒状物包括润湿基底(即，通过添加水分而活化的基底)。

贴剂

在某些实施方案中，本文公开了一种本文公开的胎儿支持组织产品的外用制剂，其中该外用制剂经由贴剂来施用。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品的外用制剂溶解和/或分散在聚合物或黏合剂中。在一些实施方案中，本文公开的膜、贴剂被构造用于连续、脉动式或按需递送的胎儿支持组织产品。

伤口敷料

在某些实施方案中，本文公开了一种本文公开的胎儿支持组织产品的外用制剂，其中该外用制剂与(或经由)伤口敷料一起施用。伤口敷料包括但不限于纱布、透明膜敷料、水凝胶、聚氨酯泡沫敷料、水胶体和褐藻胶。在某些情况下，伤口敷料促进伤口愈合。在一些情况下，伤口敷料减少或抑制异常伤口愈合。

植入体/假体

在某些实施方案中，本文公开了一种植入体或假体，其包含本文公开的胎儿支持组织产品。在一些实施方案中，假体为人造关节。在一些实施方案中，植入体为支架。

在一些实施方案中，假体为人造髋关节。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品被涂覆在人造髋关节的外侧上。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品自人造髋洗脱到周围组织中。

在一些实施方案中，假体为人造膝关节。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品被涂覆在人造膝关节的外侧上。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品自人造膝关节洗脱到周围组织中。

在一些实施方案中，假体为人造盂肱关节。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品被涂覆在人造盂肱关节的外侧上。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品自人造盂肱关节洗脱到周围组织中。

在一些实施方案中，假体为人造踝关节。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品被涂覆在人造踝关节的外侧上。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品自人造踝关节洗脱到周围组织中。

在一些实施方案中，植入体为冠状动脉支架。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品被涂覆在支架的外侧上。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品自支架洗脱到周围心脏组织中。在一些实施方案中，骨支架被置于骨折处。在一些实施方案中，骨支架是可扩展或可收缩的。

在一些实施方案中，植入体为输尿管支架。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品被涂覆在支架的外侧上。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品自支架洗脱到周围组织中。在一些实施方案中，骨支架被置于骨折处。在一些实施方案中，骨支架是可扩展或可收缩的。

在一些实施方案中，植入体为尿道或前列腺支架。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品被涂覆在支架的外侧上。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品自支架洗脱到周围组织中。在一些实施方案中，骨支架被置于骨折处。在一些实施方案中，骨支架是可扩展或可收缩的。

在一些实施方案中，植入体为食管支架。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品被涂覆在支架的外侧上。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品自支架洗脱到周围组织中。在一些实施方案中，骨支架被置于骨折处。在一些实施方案中，骨支架是可扩展或可收缩的。

在一些实施方案中，植入体为骨植入体。在一些实施方案中，骨植入体为骨整合式植入体。如本文所用，“骨整合式植入体”意指含有孔的三维植入体，成骨细胞和支持结缔组织可以迁移到该孔中。在一些实施方案中，骨植入体包含本文所述的组合物。在一些实施方案中，骨植入体为牙科植入体。在一些实施方案中，骨植入体被用于膝或关节置换术。在一些实施方案中，骨植入体为颅面假体(例如，人造耳、眼眶假体、鼻假体)。

在一些实施方案中，植入体为骨支架。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品被涂覆在支架的外侧上。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品自支架洗脱到周围骨中。在一些实施方案中，骨支架被插入到骨的髓内管中。在一些实施方案中，骨支架被置于跗骨窦处。在一些实施方案中，骨支架被置于膝或关节处。在一些实施方案中，骨支架被置于骨折处。在一些实施方案中，骨支架是可扩展或可收缩的。

在一些实施方案中，植入体为克氏针(K-wire)或Denham针。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品被涂覆在克氏针或Denham针的外侧上。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品自克氏针或Denham针洗脱到周围骨中。

各种制剂

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品作为真皮涂剂施用。如本文所用，涂剂(也称为成膜剂)为包含溶剂、单体或聚合物、活性剂和任选的一种或多种药学上可接受的赋形剂的溶液。应用于组织后，溶剂蒸发，留下包含单体或聚合物以及活性剂的薄涂层。涂层保护活性剂，并使它们在应用部位保持固定状态。这降低了可能缺失的活性剂的量，并相应地增加了递送至个体皮肤的受影响区域的量。作为非限制性示例，涂剂包括火棉胶(例如Flexible Collodion，USP)和包含糖类硅氧烷共聚物和交联剂的溶液。火棉胶为含有火棉(硝酸纤维素)的乙醚/乙醇溶液。应用后，乙醚/乙醇溶液蒸发，留下火棉的薄膜。在包含糖类硅氧烷共聚物的溶液中，该糖类硅氧烷共聚物在溶剂蒸发引发糖类硅氧烷共聚物的交联后形成涂层。

在某些实施方案中，本文所述的胎儿支持组织产品任选地掺入到控释颗粒、脂质复合体、脂质体、纳米颗粒、微球、微粒、纳米胶囊或增强或促进局部递送至皮肤的其他试剂中。用于药物制剂的常规微囊化过程的示例在美国专利号3,737,337中示出，其通过引用并入本文以用于这样的公开内容。

在一些情况下，本文所述的胎儿支持组织产品为脂质体制剂。通过将水性缓冲液引入磷脂和有机溶剂的混合物中来制备脂质体，并且随后通过减压蒸发除去有机溶剂。脂质体制剂的示例描述于Proc.Natl.Acad.Sci.1978,75,4194-98中，其通过引用并入本文以用于这样的公开内容。脂质体通过尺寸排阻色谱法(SEC)根据它们的粒度进行分级。脂质体通过光子相关光谱法(PCS)进一步确定它们的粒度进行亚分级。使用酶测定(例如，磷脂酰胆碱(PC)测定)来分析脂质体的脂质含量。

皮肤赋形剂

在某些实施方案中，本文公开了本文公开的胎儿支持组织产品的制剂，其中该制剂包含载体。合适的载体包括但不限于卡波姆、纤维素、胶原蛋白、乙醇、甘油、己二醇、透明质酸、羟丙基纤维素、磷酸、多元醇(丙二醇、聚乙二醇、丙三醇、氢化蓖麻油等)、聚山梨醇酯80、盐水、氢氧化钠、磷酸钠、山梨醇、水、黄原胶植物油(诸如橄榄油)、可注射有机酯(例如，油酸乙酯)、脂肪油(例如，芝麻油)以及合成脂肪酸酯(例如，油酸乙酯或甘油三酯)。

促渗剂

在某些实施方案中，本文公开了本文公开的胎儿支持组织产品的制剂，其中该制剂包含促渗剂。促渗剂包括但不限于月桂基硫酸钠、月桂酸钠、聚氧乙烯-20-十六烷基醚、月桂醇聚醚-9、十二烷基硫酸钠、二辛基硫化琥珀酸钠、聚氧乙烯-9-月桂基醚(PLE)、吐温80、壬基苯氧基聚乙烯(NP-POE)、聚山梨醇酯、甘氨胆酸钠、脱氧胆酸钠、牛磺胆酸钠、牛磺二氢夫西地酸钠、甘氨二氢夫西地酸钠、油酸、辛酸、甘油单酯和甘油二酯、月桂酸、酰基胆碱、辛酸、酰基肉碱、癸酸钠、EDTA、柠檬酸、水杨酸盐、DMSO、癸基甲基亚砜、乙醇、异丙醇、1,2-丙二醇(propylene glycol)、聚乙二醇、丙三醇、1,1-丙二醇(propanediol)和二乙二醇单乙醚。在某些实施方案中，本文所述的外用制剂是为最小的全身暴露而设计的并且包括例如低量的促渗剂。

胶凝剂

在某些实施方案中，本文公开了本文公开的胎儿支持组织产品的制剂，其中该制剂包含胶凝(或增稠)剂。在一些实施方案中，本文公开的制剂进一步包含约0.1％至约5％、约0.1％至约3％或约0.25％至约2％的胶凝剂。在某些实施方案中，本文公开的制剂的粘度在约100至约500,000cP、约100cP至约1,000cP、约500cP至约1500cP、约1000cP至约3000cP、约2000cP至约8,000cP、约4,000cP至约10,000cP、约10,000cP至约50,000cP的范围内。用于制备凝胶制剂的合适胶凝剂包括但不限于纤维素、纤维素衍生物、纤维素醚(例如，羧甲基纤维素、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羟甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素、甲基纤维素)、瓜尔胶、黄原胶、槐豆胶、褐藻胶(例如，褐藻酸)、硅酸盐、淀粉、西黄蓍胶、羧乙烯基聚合物、卡拉胶、石蜡、凡士林、阿拉伯胶(阿拉伯树胶)、琼脂、硅酸镁铝、褐藻酸钠、硬脂酸钠、墨角藻、膨润土、卡波姆、卡拉胶、carbopol、黄原胶、纤维素、微晶纤维素(MCC)、角豆胶、角叉菜胶、右旋糖、红藻胶、明胶、印度树胶、瓜尔胶、锂蒙脱石、乳糖、蔗糖、麦芽糖糊精、甘露醇、山梨糖醇、蜂蜜、玉米淀粉、小麦淀粉、水稻淀粉、马铃薯淀粉、明胶、刺梧桐胶、聚乙二醇(如PEG 200-4500)、西黄蓍胶、乙基纤维素、乙基羟乙基纤维素、乙基甲基纤维素、甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟乙基甲基纤维素、羟丙基纤维素、聚(甲基丙烯酸羟乙酯)、氧化聚明胶、果胶、聚明胶肽、聚维酮、碳酸丙烯酯、乙烯基甲醚/马来酸酐共聚物(PVM/MA)、聚(甲基丙烯酸甲氧基乙酯)、聚(甲基丙烯酸甲氧基乙氧基乙酯)、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、羧甲基纤维素钠(CMC)、二氧化硅、聚乙烯吡咯烷酮(PVP：聚维酮)或其组合。

凝胶包括单相或两相系统。单相凝胶由均匀分布在液体中的有机大分子组成，其中分散的大分子与液体之间不存在明显的边界。一些单相凝胶由合成大分子(例如，卡波姆)或天然树胶(例如，西黄蓍胶)制备。在一些实施方案中，单相凝胶通常是水性的，但也可以使用醇和油制成。两相凝胶由小的离散颗粒的网络组成。

凝胶也可分为疏水性或亲水性。在某些实施方案中，疏水性凝胶的基底由液体石蜡与聚乙烯或用胶体二氧化硅胶凝的脂肪油、或铝皂或锌皂组成。相反，亲水性凝胶的基底通常由用合适的胶凝剂(例如，西黄蓍胶、淀粉、纤维素衍生物、羧乙烯基聚合物以及硅酸镁铝)胶凝的水、丙三醇或丙二醇组成。

用于制剂的合适药剂在应用于皮肤成膜时以液体和凝胶的形式应用，其包括但不限于由聚氧丙烯和聚氧乙烯构成的聚合物，已知当掺入水溶液中时该聚合物会形成热可逆凝胶。这些聚合物具有在接近体温的温度下从液态变为凝胶态的能力，因此使得有用的制剂以凝胶和/或膜的形式应用于受影响区域。在体温下胶凝并用于本文所述的凝胶和/或膜中的聚合物的示例，包括但不限于泊洛沙姆(例如，PLURONICS和它们为环氧乙烷和环氧丙烷的嵌段共聚物)。液态到凝胶态的相变取决于聚合物浓度和溶液中的成分。

黏合剂

在一些情况下，本文所述的制剂包含压敏黏合剂(例如，聚烷基噁唑啉聚合物)并允许黏合剂膜应用于皮肤的受影响区域。

软化剂

在某些实施方案中，本文公开了本文公开的胎儿支持组织产品的制剂，其中该制剂包含软化剂。软化剂包括但不限于蓖麻油酯、可可脂酯、红花油酯、棉籽油酯、玉米油酯、橄榄油酯、鱼肝油酯、杏仁油酯、牛油果油酯、棕榈油酯、芝麻油酯、角鲨烯酯、库奎(kikui)油酯、大豆油酯、乙酰化单甘油酯、乙氧基化单硬脂酸甘油酯、月桂酸己酯、月桂酸异己酯、棕榈酸异己酯、棕榈酸异丙酯、棕榈酸甲酯、油酸癸酯、油酸异癸酯、硬脂酸十六烷基酯、硬脂酸癸酯、异硬脂酸异丙酯、异硬脂酸甲酯、己二酸二异丙酯、己二酸二异己酯、己二酸二己基癸酯、癸二酸二异丙酯、乳酸月桂酯、乳酸肉豆蔻酯和乳酸十六烷基酯、肉豆蔻酸油酯、硬脂酸油酯和油酸油酯、壬酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、异硬脂酸、羟基硬脂酸、油酸、亚油酸、蓖麻油酸、花生酸、山萮酸、芥子酸、月桂醇、肉豆蔻醇、鲸蜡醇、十六醇、硬脂醇、异硬脂醇、羟基硬脂醇、油醇、蓖麻油醇、山萮醇、芥子醇、2-辛基十二烷醇、羊毛脂和羊毛脂衍生物、蜂蜡、鲸蜡、肉豆蔻酸肉豆蔻酯、硬脂酸硬脂酸酯、巴西棕榈蜡、小烛树蜡、卵磷脂和胆固醇。

各种赋形剂

在某些实施方案中，包含本文公开的胎儿支持组织产品的制剂包含附加赋形剂，诸如，举例而言，磨料、吸收剂、抗结块剂、收敛剂、精油、香料、皮肤调理剂、皮肤愈合剂、皮肤保护剂(例如，防晒剂，或紫外线吸收剂或散射剂)、皮肤舒缓剂或其组合。

使用方法

在某些实施方案中，本文公开了使用通过本文所述的方法产生的胎儿支持组织产品的方法。在一些实施方案中，胎儿支持组织是胎盘羊膜(PAM)或基本上分离的PAM、脐带羊膜(UCAM)或基本上分离的UCAM、绒毛膜或基本上分离的绒毛膜、羊膜-绒毛膜或基本上分离的羊膜-绒毛膜、胎盘或基本上分离的胎盘、脐带或基本上分离的脐带或其任何组合。在一些实施方案中，通过本文公开的方法产生的胎儿支持组织产品包含胎儿支持组织和药学上可接受的载体。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被配制用于通过经表面施用或注射施用的方式来施用。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被配制为溶液、悬浮液或乳液。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品用于抑制以下中的至少一种：瘢痕形成、炎症、粘连和血管生成。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品用于促进伤口愈合。在一些实施方案中，用途为同源用途。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被最低限度地操作。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品不包含除水、类晶体、或灭菌剂、防腐剂或储存剂之外的其他物品。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品不具有全身效应，并且其主要功能并不依赖于活细胞的代谢活动。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品用作覆盖物(例如，伤口覆盖物)。在一些实施方案中，用途为同源用途。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品被最低限度地操作。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品不包含除水、类晶体、或灭菌剂、防腐剂或储存剂之外的其他物品。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品不具有全身效应，并且其主要功能并不依赖于活细胞的代谢活动。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品用于促进伤口修复。在一些实施方案中，用途为同源用途。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品被最低限度地操作。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品不包含除水、类晶体、或灭菌剂、防腐剂或储存剂之外的其他物品。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品不具有全身效应，并且其主要功能并不依赖于活细胞的代谢活动。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品用作粘连的阻隔物。在一些实施方案中，用途为同源用途。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品被最低限度地操作。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品不包含除水、类晶体、或灭菌剂、防腐剂或储存剂之外的其他物品。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品不具有全身效应，并且其主要功能并不依赖于活细胞的代谢活动。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品包括蛋白质、聚糖、蛋白质-聚糖复合体(例如，透明质酸与IαI的重链和PTX3的复合体)和促进组织修复的酶。例如，AM的间质含有生长因子、抗血管生成和抗炎蛋白，以及各种蛋白酶的天然抑制剂。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品中发现的蛋白质和酶从胎儿支持组织产品中扩散出来并进入周围组织中。

受伤组织的修复和补充

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品用作伤口覆盖物或用于促进伤口修复。在一些实施方案中，用途为同源用途(例如，功能性同源用途或结构同源用途)。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品被最低限度地操作。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品不包含除水、类晶体、或灭菌剂、防腐剂或储存剂之外的其他物品。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品不具有全身效应，并且其主要功能并不依赖于活细胞的代谢活动。

在一些实施方案中，组织因损伤(例如，烧伤；外科手术切口；由感染、创伤或毒素引起的坏死区域；撕裂伤)而受损、损害或缺失。在一些实施方案中，组织因烧伤而受损、损害或缺失。在一些实施方案中，组织因伤口(例如，切口、撕裂伤、擦伤)而受损、损害或缺失。在一些实施方案中，组织因坏死而受损、损害或缺失。在一些实施方案中，组织因溃疡而受损、损害或缺失。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品通过胃肠外注射(例如，经由注射或输注，包括动脉内、心内、皮内、十二指肠内、髓内、肌内、骨内、腹膜内、鞘内、血管内、静脉内、玻璃体内、硬膜外和/或皮下)进行施用。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品通过硬膜外、鞘内、通过吸入、静脉内或其组合进行施用。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品包括蛋白质、聚糖、蛋白质-聚糖复合体(例如，透明质酸与IαI的重链和PTX3的复合体)和促进组织修复的酶。例如，AM的间质含有生长因子、抗血管生成和抗炎蛋白，以及各种蛋白酶的天然抑制剂。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品中发现的蛋白质和酶从胎儿支持组织产品中扩散出来并进入周围组织中。

烧伤

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于烧伤。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于一度烧伤。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于二度烧伤。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于三度烧伤。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品在被置于烧伤之前应用于底物。

伤口

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于皮肤伤口(例如，切口、撕裂伤、擦伤、溃疡、穿刺、侵入)。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品在被置于伤口之前应用于底物。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品通过胃肠外注射(例如，经由注射或输注，包括动脉内、心内、皮内、十二指肠内、髓内、肌内、骨内、腹膜内、鞘内、血管内、静脉内、玻璃体内、硬膜外和/或皮下)进行施用。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品通过硬膜外、鞘内、通过吸入、静脉内或其组合进行施用。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于器官(例如，皮肤、脑、胃、肾、肝、肠、肺、膀胱、气管、食道、阴道、输尿管和血管壁)中的切口。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于外科手术切口。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于结肠切除术部位。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于胃切除术部位。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于乳房手术(例如，缩胸术、隆胸术和乳房切除术)部位。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品在被置于伤口之前应用于底物。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被用作皮肤切口(例如，表皮、真皮和/或皮下组织的切口)之上的覆盖物。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品用于痔疮手术后修复或补充皮肤。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品在被置于伤口之前应用于底物。

坏死

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被用作坏死组织区域(例如，来自感染)之上的保护性移植物。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被用作坏死皮肤区域之上的保护性移植物。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被置于坏死组织区域上。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品在被置于坏死组织之前应用于底物。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品通过胃肠外注射(例如，经由注射或输注，包括动脉内、心内、皮内、十二指肠内、髓内、肌内、骨内、腹膜内、鞘内、血管内、静脉内、玻璃体内、硬膜外和/或皮下)进行施用。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品通过硬膜外、鞘内、通过吸入、静脉内或其组合进行施用。

溃疡

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被用作溃疡之上的保护性覆盖物。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品在被置于溃疡之前应用于底物。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品通过胃肠外注射(例如，经由注射或输注，包括动脉内、心内、皮内、十二指肠内、髓内、肌内、骨内、腹膜内、鞘内、血管内、静脉内、玻璃体内、硬膜外和/或皮下)进行施用。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品通过硬膜外、鞘内、通过吸入、静脉内或其组合进行施用。

在一些实施方案中，溃疡为足部溃疡(例如，糖尿病足部溃疡或动脉供血不足性溃疡)。在一些实施方案中，治疗足部溃疡包括(a)准备伤口(例如，清创伤口)；以及(b)将本文公开的胎儿支持组织产品置于伤口上。在一些实施方案中，治疗足部溃疡包括(a)准备伤口(例如，清创伤口)；(b)将本文公开的胎儿支持组织产品置于伤口上；以及(c)用保护性阻隔物(例如，silvercell敷料、metipel、纱布或绷带)覆盖胎儿支持组织产品。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品在被置于溃疡之前应用于底物。

在一些实施方案中，溃疡为静脉淤滞(VS)溃疡。在一些实施方案中，治疗VS溃疡包括(a)准备伤口(例如，清创伤口)；以及(b)将本文公开的胎儿支持组织产品置于伤口上。在一些实施方案中，治疗VS溃疡包括(a)准备伤口(例如，清创伤口)；(b)将本文公开的胎儿支持组织产品置于伤口上；以及(c)用保护性阻隔物(例如，伤口贴、抗微生物敷料、纱布或绷带)覆盖胎儿支持组织产品。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品在被置于伤口之前应用于底物。

在一些实施方案中，溃疡为角膜溃疡(即，溃疡性角膜炎)。在一些实施方案中，治疗角膜溃疡包括(a)准备伤口(例如，清创伤口)；以及(b)将本文公开的胎儿支持组织产品置于伤口上。在一些实施方案中，治疗角膜溃疡包括(a)准备伤口(例如，清创伤口)；(b)将本文公开的胎儿支持组织产品置于伤口上；以及(c)用保护性阻隔物(例如，隐形眼镜或绷带)覆盖胎儿支持组织产品或胎儿支持组织产品。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品在被置于伤口之前应用于底物。

软组织用途

在某些实施方案中，本文公开了本文公开的胎儿支持组织产品用于修复、重建、替换或补充接受者受损、损害或缺失的软组织(例如，腱)的用途。

在一些实施方案中，用途为同源用途。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品被最低限度地操作。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品不包含除水、类晶体、或灭菌剂、防腐剂或储存剂之外的其他物品。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品不具有全身效应，并且其主要功能并不依赖于活细胞的代谢活动。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品包括蛋白质、聚糖、蛋白质-聚糖复合体(例如，透明质酸与IαI的重链和PTX3的复合体)和促进组织修复的酶。例如，AM的间质含有生长因子、抗血管生成和抗炎蛋白，以及各种蛋白酶的天然抑制剂。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品中发现的蛋白质和酶从胎儿支持组织产品中扩散出来并进入周围组织中。

在一些实施方案中，本文所述的本文公开的胎儿支持组织产品被用作软组织切口之上的覆盖物(例如，眼睑形成不同软组织层之间的组织平面)。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品被应用于底物，然后用作软组织切口之上的覆盖物(例如，眼睑形成不同软组织层之间的组织平面)。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品通过胃肠外注射(例如，经由注射或输注，包括动脉内、心内、皮内、十二指肠内、髓内、肌内、骨内、腹膜内、鞘内、血管内、静脉内、玻璃体内、硬膜外和/或皮下)进行施用。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品通过硬膜外、鞘内、通过吸入、静脉内或其组合进行施用。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被用作软组织的结构(构造)支持物。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品防止关节或肌腱修复粘连。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品用于修复肌腱或关节(诸如肩袖修复、手部肌腱修复)。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品用于强化肌腱或关节。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品用于防止愈合肌腱粘连至周围组织、肌腱或关节。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品用于防止肌腱上形成瘢痕组织。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品用于增强足部和踝部的较小肌腱和韧带，包括胫后肌腱、腓骨肌腱、屈伸肌腱、以及外踝复合体的韧带。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品用于强化膝关节周围的股四头肌和髌肌腱的一期修复。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作关节置换术中骨移植物的骨膜贴剂。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品用于在全关节翻修手术后增强有缺陷的髋和膝囊组织。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品用于修复撕裂的肩袖。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作肩袖肌肉或肌腱(例如，冈上肌腱)之上的贴剂。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品用于重建肩袖肌肉或肌腱(例如，冈上肌腱)。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且将该底物/胎儿支持组织产品用于增强肩袖肌肉或肌腱(例如，冈上肌腱)。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品用于强化肩袖肌肉和肌腱(例如，冈上肌腱)。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品用于防止软组织粘连至肩袖肌肉或肌腱(例如，冈上肌腱)。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品用于修复牙龈。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品用于修复牙龈退缩。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并用作牙龈之上的贴剂。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并用作暴露的牙根表面之上的贴剂。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品用于重建牙龈。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品用于增强牙龈。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品用于强化牙龈。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品用于防止软组织粘连至牙龈。

在一些实施方案中，本文所述的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作筋膜切口或撕裂之上的保护性移植物。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作筋膜的结构(构造)支持物。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作筋膜的替代品或补充物。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品用于修复疝气(例如，用于修复筋膜)。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品用于修复腹股沟疝。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品用于修复股疝。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品用于修复脐疝。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品用于修复切口疝。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品用于修复膈疝。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且底物/胎儿支持组织产品用于修复库柏氏疝(Cooper’shernia)、上腹疝、裂孔疝、利特雷氏疝(Littre’s hernia)、腰疝、梅德耳疝(maydl hernia)、闭孔疝、马裤疝(pantaloon hernia)、食管旁疝、脐旁疝、会阴疝、腹膜前疝、里希特氏疝(Richter’shernia)、滑疝、坐骨疝、半月线疝、运动疝、韦尔波疝(Velpeau hernia)或Amyand疝。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品用于修复椎间盘突出。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作椎间盘切口或撕裂之上的保护性移植物。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作纤维环切口或撕裂之上的保护性移植物。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作椎间盘的结构(构造)支持物。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作纤维环的结构(构造)支持物。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作椎间盘的替代品或补充物。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作椎间盘的结构(构造)支持物。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作纤维环的替代品或补充物。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品用于脑切口，或脑膜(即，硬脑膜、软脑膜和/或蛛网膜)中的一个(或全部)的切口之上。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作脑膜(即，硬脑膜、软脑膜和/或蛛网膜)中的一个(或全部)的结构(构造)支持物。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作脑膜(即，硬脑膜、软脑膜和/或蛛网膜)的一个(或全部)的替代品。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品用于肺或胸膜切口之上。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作胸膜的结构(构造)支持物。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作胸膜的替代品。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品用于鼓膜切口之上。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作鼓膜的结构(构造)支持物。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作鼓膜的替代品。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作心脏或心包切口之上的保护性移植物。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作心包的结构(构造)支持物。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作心包的替代品。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作腹膜切口之上的保护性移植物。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作腹膜的结构(构造)支持物。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作腹膜的替代品。

眼科用途

在某些实施方案中，本文公开了本文公开的胎儿支持组织产品用于修复、重建、替换或补充接受者受损、损害或缺失的眼组织的用途。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品通过胃肠外注射(例如，经由注射或输注，包括动脉内、心内、皮内、十二指肠内、髓内、肌内、骨内、腹膜内、鞘内、血管内、静脉内、玻璃体内、硬膜外和/或皮下)进行施用。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品通过硬膜外、鞘内、通过吸入、静脉内或其组合进行施用。

在一些实施方案中，用途为同源用途。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品被最低限度地操作。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品不包含除水、类晶体、或灭菌剂、防腐剂或储存剂之外的其他物品。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品不具有全身效应，并且其主要功能并不依赖于活细胞的代谢活动。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品包括蛋白质、聚糖、蛋白质-聚糖复合体(例如，透明质酸与IαI的重链和PTX3的复合体)和促进组织修复的酶。例如，AM的间质含有生长因子、抗血管生成和抗炎蛋白，以及各种蛋白酶的天然抑制剂。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品中发现的蛋白质和酶从胎儿支持组织产品中扩散出来并进入周围组织中。

青光眼的治疗

如本文所用，“青光眼”意指以视神经中视网膜神经节细胞丧失为特征的病症。在某些情况下，青光眼部分或完全由前房(AC)中的眼内压升高引起。眼内压根据眼睛的睫状突产生的液体房水和房水通过小梁网的引流而变化。

青光眼引流装置(GDD)为植入到眼内的医疗装置，其通过提供可替代的房水引流途径来缓解眼内压。如果不加盖，GDD管会腐蚀并使眼睛容易受到眼内感染。因此，需要覆盖GDD管。目前，用于覆盖GDD管的贴剂由心包、巩膜和角膜制成。这些贴剂的厚度为约400-550微米。这些贴剂很薄，导致它们在2年内熔化25％，潜在地使分流管再次暴露。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品用于覆盖GDD管。在一些实施方案中，底物/胎儿支持组织产品的厚度为300-600微米。在一些实施方案中，底物/胎儿支持组织产品在2年内熔化不到25％。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品通过胃肠外注射(例如，经由注射或输注，包括动脉内、心内、皮内、十二指肠内、髓内、肌内、骨内、腹膜内、鞘内、血管内、静脉内、玻璃体内、硬膜外和/或皮下)进行施用。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品通过硬膜外、鞘内、通过吸入、静脉内或其组合进行施用。

眼部溃疡的治疗

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品用于覆盖眼中的持续性上皮缺陷和/或溃疡。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品通过胃肠外注射(例如，经由注射或输注，包括动脉内、心内、皮内、十二指肠内、髓内、肌内、骨内、腹膜内、鞘内、血管内、静脉内、玻璃体内、硬膜外和/或皮下)进行施用。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品通过硬膜外、鞘内、通过吸入、静脉内或其组合进行施用。

在一些实施方案中，用外科手术海绵清创溃疡的基部并且去除与溃疡边缘相邻的黏附性差的上皮(例如，至上皮变得非常黏附的眼睛部分)。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被转移至接受者的眼睛。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，然后通过手术缝合线(例如，间断10-0尼龙手术缝合线或连续10-0尼龙手术缝合线)将底物/胎儿支持组织产品固定至眼睛，将缝线结掩埋。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且通过使用纤维蛋白将底物/胎儿支持组织产品胶固定至眼睛。在一些实施方案中，保护层被应用于胎儿支持组织产品/底物或整个眼睛(例如，隐形眼镜)之上。在一些实施方案中，底物/胎儿支持组织产品进一步包含抗生素(例如，新霉素、硫酸多黏菌素b和地塞米松)。

结膜、巩膜、眼睑和眼眶缘表面重建

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品用于结膜、巩膜、眼睑和眼眶缘表面重建。在一些实施方案中，结膜表面的损伤由睑球粘连溶胞；外科手术切除肿瘤、病变和/或瘢痕组织；准分子激光屈光性角膜切削术和治疗性角膜切削术；或其组合引起。

冠状动脉用途

在某些实施方案中，本文公开了本文公开的胎儿支持组织产品用于修复、重建、替换或补充接受者受损、损害或缺失的冠状组织的用途。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品通过胃肠外注射(例如，经由注射或输注，包括动脉内、心内、皮内、十二指肠内、髓内、肌内、骨内、腹膜内、鞘内、血管内、静脉内、玻璃体内、硬膜外和/或皮下)进行施用。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品通过硬膜外、鞘内、通过吸入、静脉内或其组合进行施用。

在一些实施方案中，用途为同源用途。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品被最低限度地操作。在一些实施方案中，AM不包含除水、类晶体、或灭菌剂、防腐剂或储存剂之外的其他物品。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品不具有全身效应，并且其主要功能并不依赖于活细胞的代谢活动。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品包括蛋白质、聚糖、蛋白质-聚糖复合体(例如，透明质酸与IαI的重链和PTX3的复合体)和促进组织修复的酶。例如，AM的间质含有生长因子、抗血管生成和抗炎蛋白，以及各种蛋白酶的天然抑制剂。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品中发现的蛋白质和酶从胎儿支持组织产品中扩散出来并扩散到周围组织中。

冠状动脉旁路术

本文公开了本文所述的胎儿支持组织产品在冠状动脉旁路术中的用途。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被移植到冠状动脉上，以绕过以动脉粥样硬化为特征的动脉部分。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品通过胃肠外注射(例如，经由注射或输注，包括动脉内、心内、皮内、十二指肠内、髓内、肌内、骨内、腹膜内、鞘内、血管内、静脉内、玻璃体内、硬膜外和/或皮下)进行施用。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品通过硬膜外、鞘内、通过吸入、静脉内或其组合进行施用。

心脏瓣膜

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被应用于心脏瓣膜之上。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作心脏瓣膜的结构(构造)支持物。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作心脏瓣膜的替代品。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品通过胃肠外注射(例如，经由注射或输注，包括动脉内、心内、皮内、十二指肠内、髓内、肌内、骨内、腹膜内、鞘内、血管内、静脉内、玻璃体内、硬膜外和/或皮下)进行施用。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品通过硬膜外、鞘内、通过吸入、静脉内或其组合进行施用。

静脉和动脉

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被应用于静脉或动脉。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作静脉或动脉的结构(构造)支持物。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品通过胃肠外注射(例如，经由注射或输注，包括动脉内、心内、皮内、十二指肠内、髓内、肌内、骨内、腹膜内、鞘内、血管内、静脉内、玻璃体内、硬膜外和/或皮下)进行施用。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品通过硬膜外、鞘内、通过吸入、静脉内或其组合进行施用。

神经用途

在某些实施方案中，本文公开了本文公开的胎儿支持组织产品用于修复、重建、替换或补充接受者受损、损害或缺失的神经组织的用途。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品通过胃肠外注射(例如，经由注射或输注，包括动脉内、心内、皮内、十二指肠内、髓内、肌内、骨内、腹膜内、鞘内、血管内、静脉内、玻璃体内、硬膜外和/或皮下)进行施用。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品通过硬膜外、鞘内、通过吸入、静脉内或其组合进行施用。

在一些实施方案中，用途为同源用途。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品被最低限度地操作。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品不包含除水、类晶体、或灭菌剂、防腐剂或储存剂之外的其他物品。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品不具有全身效应，并且其主要功能并不依赖于活细胞的代谢活动。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品包括蛋白质、聚糖、蛋白质-聚糖复合体(例如，透明质酸与IαI的重链和PTX3的复合体)和促进组织修复的酶。例如，AM的间质含有生长因子、抗血管生成和抗炎蛋白，以及各种蛋白酶的天然抑制剂。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品中发现的蛋白质和酶从胎儿支持组织产品中扩散出来并进入周围组织中。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作神经(例如，外周神经)之上的覆盖物。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作神经移植物、神经移位或经修复神经之上的覆盖物。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作神经(例如，外周神经)切口之上的覆盖物。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作神经(例如，外周神经)的结构(构造)支持物。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品防止神经修复粘连。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作受伤神经的非收缩性包裹物。在一些实施方案中，本文所述的胎儿支持组织产品防止或最小化瘢痕形成、包囊作用、慢性压迫、神经拴系和神经卡压。在一些实施方案中，本文所述的胎儿支持组织产品防止或最小化神经瘤形成。在一些实施方案中，本文所述的胎儿支持组织产品防止或最小化神经修复期间存在的内源性生长因子(即神经生长因子)的迁移。

脊用途

在某些实施方案中，本文公开了本文所述的胎儿支持组织产品在脊手术期间的用途。

在一些实施方案中，在椎板切除术期间使用本文所述的胎儿支持组织产品。在一些实施方案中，用途为同源用途。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品被最低限度地操作。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品不包含除水、类晶体、或灭菌剂、防腐剂或储存剂之外的其他物品。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品不具有全身效应，并且其主要功能并不依赖于活细胞的代谢活动。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品包括蛋白质、聚糖、蛋白质-聚糖复合体(例如，透明质酸与IαI的重链和PTX3的复合体)和促进组织修复的酶。例如，AM的间质含有生长因子、抗血管生成和抗炎蛋白，以及各种蛋白酶的天然抑制剂。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品中发现的蛋白质和酶从胎儿支持组织产品中扩散出来并进入周围组织中。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品通过胃肠外注射(例如，经由注射或输注，包括动脉内、心内、皮内、十二指肠内、髓内、肌内、骨内、腹膜内、鞘内、血管内、静脉内、玻璃体内、硬膜外和/或皮下)进行施用。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品通过硬膜外、鞘内、通过吸入、静脉内或其组合进行施用。

在一些实施方案中，本文所述的胎儿支持组织产品用于减少或防止脊手术(例如，椎板切除术)后的硬膜外纤维化和/或瘢痕粘连。在一些实施方案中，在脊手术(例如，椎板切除术)后在硬脑膜与外层组织之间植入本文所述的胎儿支持组织产品。在一些实施方案中，在脊手术(例如，椎板切除术)后在硬脑膜与外层组织之间植入本文所述的胎儿支持组织产品减少或防止成纤维细胞迁移至硬脑膜和硬脑膜上的胶原蛋白沉积。

在一些实施方案中，本文所述的胎儿支持组织产品用于减少或防止脊手术(例如，椎板切除术)后增生性瘢痕形成的发展。在一些实施方案中，本文所述的胎儿支持组织产品用于减少或防止术后(例如，椎板切除术后)硬膜外/硬膜周/神经周围瘢痕的发展。在一些实施方案中，本文所述的胎儿支持组织产品用于减少或防止脊手术(例如，椎板切除术)后增生性瘢痕形成的发展。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品用于减少或防止椎板切除术后膜(postlaminectomy membrane)的发展。

在一些实施方案中，本文所述的胎儿支持组织产品用于减少或防止脊手术(例如，椎板切除术)后硬膜外压迫或硬脑膜拴系的发展。在一些实施方案中，本文所述的胎儿支持组织产品用于减少或防止脊手术(例如，椎板切除术)后神经根拴系的发展。在一些实施方案中，本文所述的胎儿支持组织产品用于减少或防止脊手术(例如，椎板切除术)后蛛网膜炎的发展。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品进一步包含颗粒化骨组织。在一些实施方案中，在脊融合程序期间使用包含颗粒化骨组织的本文公开的胎儿支持组织产品。在一些实施方案中，在相邻椎骨之间植入包含颗粒化骨组织的本文公开的胎儿支持组织产品。在一些实施方案中，在两个相邻椎骨之间包含颗粒化骨组织的本文公开的胎儿支持组织产品的实施方式促进椎骨的融合。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被用作硬脑膜切口之上的保护性移植物。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作硬脑膜的结构(构造)支持物。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于底物，并且该底物/胎儿支持组织产品被用作硬脑膜的替代品。

胎儿支持组织产品的各种用途

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被应用于贴剂或伤口敷料。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品通过胃肠外注射(例如，经由注射或输注，包括动脉内、心内、皮内、十二指肠内、髓内、肌内、骨内、腹膜内、鞘内、血管内、静脉内、玻璃体内、硬膜外和/或皮下)进行施用。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品通过硬膜外、鞘内、通过吸入、静脉内或其组合进行施用。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被用作真皮填充物。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被注射到皮下面部组织中。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被注射到面部的皱纹和老化纹(例如，鼻唇沟、嘴角沟、“鱼尾纹”和前额皱纹)下。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品用于隆唇术。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被注射到唇中。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品用于治疗关节炎(例如，骨关节炎、类风湿性关节炎、脓毒性关节炎、强直性脊柱炎、椎关节强硬)。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被注射到关节炎关节(例如，膝关节)中。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品用于抑制有需要的个体的骨吸收。在一些实施方案中，个体患有关节炎、骨质疏松症、牙槽骨退化、佩吉特病(Paget’sdisease)或骨肿瘤。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品被注射到关节中。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品与骨接触(例如，通过使用伤口敷料或绷带)。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品包被骨支架、骨植入体或骨假体(例如，骨整合式植入体)。如本文所用，“骨整合式植入体”意指含有孔的三维植入体，成骨细胞和支持结缔组织可以迁移到该孔中。在一些实施方案中，骨支架被插入到骨的髓内管中。在一些实施方案中，骨支架被置于跗骨窦处。在一些实施方案中，骨支架被置于膝或关节处。在一些实施方案中，骨支架被置于骨折处。在一些实施方案中，骨支架是可扩展或可收缩的。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品用于在有需要的个体中促进或诱导有需要的个体中的骨形成。在一些实施方案中，个体患有关节炎、骨质疏松症、牙槽骨退化、佩吉特病或骨肿瘤。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品被注射到关节中。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品与骨接触(例如，通过使用伤口敷料或绷带)。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品包被骨支架、骨植入体或骨假体(例如，骨整合式植入体)。如本文所用，“骨整合式植入体”意指含有孔的三维植入体，成骨细胞和支持结缔组织可以迁移到该孔中。在一些实施方案中，骨支架被插入到骨的髓内管中。在一些实施方案中，骨支架被置于跗骨窦处。在一些实施方案中，骨支架被置于膝或关节处。在一些实施方案中，骨支架被置于骨折处。在一些实施方案中，骨支架是可扩展或可收缩的。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品用于抑制破骨细胞分化。在一些实施方案中，个体患有关节炎、骨质疏松症、牙槽骨退化、佩吉特病或骨肿瘤。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品被注射到关节中。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品与骨接触(例如，通过使用伤口敷料或绷带)。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品包被骨支架、骨植入体或骨假体(例如，骨整合式植入体)。如本文所用，“骨整合式植入体”意指含有孔的三维植入体，成骨细胞和支持结缔组织可以迁移到该孔中。在一些实施方案中，骨支架被插入到骨的髓内管中。在一些实施方案中，骨支架被置于跗骨窦处。在一些实施方案中，骨支架被置于膝或关节处。在一些实施方案中，骨支架被置于骨折处。在一些实施方案中，骨支架是可扩展或可收缩的。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品用于促进有需要的个体的成骨细胞的矿化。在一些实施方案中，个体患有关节炎、骨质疏松症、牙槽骨退化、佩吉特病或骨肿瘤。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品被注射到关节中。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品与骨接触(例如，通过使用伤口敷料或绷带)。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品包被骨支架、骨植入体或骨假体(例如，骨整合式植入体)。如本文所用，“骨整合式植入体”意指含有孔的三维植入体，成骨细胞和支持结缔组织可以迁移到该孔中。在一些实施方案中，骨支架被插入到骨的髓内管中。在一些实施方案中，骨支架被置于跗骨窦处。在一些实施方案中，骨支架被置于膝或关节处。在一些实施方案中，骨支架被置于骨折处。在一些实施方案中，骨支架是可扩展或可收缩的。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品用于平衡有需要的个体的骨吸收和骨形成。在一些实施方案中，个体患有关节炎、骨质疏松症、牙槽骨退化、佩吉特病或骨肿瘤。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品被注射到关节中。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品与骨接触(例如，通过使用伤口敷料或绷带)。在一些实施方案中，胎儿支持组织产品包被骨支架、骨植入体或骨假体(例如，骨整合式植入体)。如本文所用，“骨整合式植入体”意指含有孔的三维植入体，成骨细胞和支持结缔组织可以迁移到该孔中。在一些实施方案中，骨支架被插入到骨的髓内管中。在一些实施方案中，骨支架被置于跗骨窦处。在一些实施方案中，骨支架被置于膝或关节处。在一些实施方案中，骨支架被置于骨折处。在一些实施方案中，骨支架是可扩展或可收缩的。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品用于治疗正畸或牙周病况。在一些实施方案中，牙周病况选自牙龈炎、牙龈退缩或牙周炎。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被用作抗炎剂或用于促进骨整合或治愈。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品与牙科植入体组合使用以促进植入体骨整合、抗炎和愈合。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品用于治疗喉喑或嗓音病症。在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品用于注射喉成形术以修复声带。

在一些实施方案中，本文公开的胎儿支持组织产品被涂覆在医用植入体(例如，支架)上。在一些实施方案中，医用植入体/本文公开的胎儿支持组织产品被植入到有需要的个体中，其中该胎儿支持组织产品部分或完全释放到该个体中。在一些实施方案中，医用植入体为支架(例如，骨支架或冠状动脉支架)。在一些实施方案中，医用植入体为骨支架。在一些实施方案中，医用植入体为冠状动脉支架。

组合治疗

在一些实施方案中，本文所述的组合物和方法与其他熟知的治疗试剂结合使用，该治疗试剂因其对正在治疗的病况特别有用而被选择。通常，本文所述的组合物，以及在采用组合疗法的实施方案中，其他药剂不必以相同的组合物施用，并且由于不同的物理和化学特性，可能必须通过不同的途径施用。在可能的情况下，在相同组合物中，确定施用模式和施用可行性完全在熟练临床医师的知识范围内。可以根据本领域已知的既定方案进行初始施用，然后，基于观察到的效果，熟练临床医师可修改剂量、施用方式和施用时间。

所用化合物的具体选择将取决于主治医师的诊断和他们对患者病况的判断以及适当的治疗方案。在一些实施方案中，根据疾病、病症或病况的性质、患者的状况以及所用化合物的实际选择，同时(例如，同时、基本上同时或在相同治疗方案内)或依次施用化合物。在评估所治疗的疾病和患者病况后，确定治疗方案期间的施用顺序和每种治疗剂重复施用的次数均在熟练医师的知识范围内。

本领域技术人员已知，当药物用于治疗组合时，治疗有效剂量可变化。文献中描述了通过实验确定用于组合治疗方案的药物和其他药剂的治疗有效剂量的方法。例如，文献中对节律性给药(即，提供更频繁、更低的剂量以使毒性副作用最小化)的使用进行了广泛地描述。组合治疗进一步包括在各种时间开始和停止以协助患者的临床管理的周期性治疗。

对于本文所述的组合治疗，共同施用的化合物的剂量当然会根据所采用的共同用药的类型、所采用的具体药物、所治疗的疾病或病况等而变化。另外，在一些实施方案中，当与一种或多种生物活性剂共同施用时，本文提供的化合物与生物活性剂同时或依次施用。如果依次施用，主治医师将决定施用蛋白质与生物活性剂组合的适当顺序。

在一些实施方案中，以任何顺序或甚至同时施用多种治疗剂。在一些实施方案中，如果同时施用，以单一、统一的形式或以多种形式(仅作为示例，作为单个丸剂或作为两个分离的丸剂)提供多种治疗剂。在一些实施方案中，以多剂量给予治疗剂中的一种治疗剂，或以多剂量给予两种治疗剂。在一些实施方案中，如果不同时施用，多次剂量之间的时间从超过零周到少于四周不等。另外，组合方法、组合物和制剂不限于仅使用两种药剂；还设想了使用多种治疗组合。

应当理解的是，可根据多种因素修改用于治疗或改善欲缓解的病况的剂量方案。这些因素包括对象所罹患的病症，以及对象的年龄、体重、性别、饮食和医疗状况。因此，实际采用的剂量方案可广泛变化，因此可偏离本文所述的剂量方案。

试剂盒/制品

为了用于本文所述的治疗应用，本文还描述了试剂盒和制品。这样的试剂盒可包括载体、包装或容器，其被分隔以容纳一个或多个容器，诸如小瓶、管等，容器中的每一个容器包括用于本文所述的方法的独立元件中的一个独立元件。合适的容器包括例如瓶子、小瓶、注射器和试管。容器可以由多种材料(诸如玻璃或塑料)形成。

本文提供的制品含有包装材料。用于包装药物产品的包装材料为本领域技术人员所熟知的。参见，例如，美国专利号5,323,907、5,052,558和5,033,252。药物包装材料的示例包括但不限于泡罩包装、瓶子、管、吸入器、泵、袋子、小瓶、容器、瓶子和适用于所选制剂和预期施用和治疗模式的任何包装材料。设想了本文提供的化合物和组合物的多种制剂作为用于任何疾病、病症或病况的多种治疗。

例如，容器可包括本文所述的一种或多种UCAM组合物，任选地以组合物的形式或与本文公开的另一种药剂组合。容器任选地具有无菌进入口(例如，容器可为静脉内溶液袋或带有可通过皮下注射针头刺入的塞子的小瓶)。这样的试剂盒任选地包含化合物，该化合物具有与其在本文所述方法中的用途相关的识别描述或标签或说明。

试剂盒通常将包括一个或多个附加容器，每个容器均具有从商业和用户的角度来看使用本文所述的组合物所需的一种或多种不同的材料(诸如试剂，任选地以浓缩形式，和/或装置)。这样的材料的非限制性示例包括但不限于缓冲液、稀释剂、过滤器、针头、注射器；载体、包装、容器、小瓶和/或试管标签清单内容和/或使用说明，以及带有使用说明的包装插页。通常还将包括一组说明。

标签可在容器上或与容器相关。当形成标签的字母、数字或其他字符被附着、模制或蚀刻到容器本身时，标签可在容器上；当标签存在于也容纳容器的容置器或载体中时，标签可与容器相关，例如，作为包装插页。标签可用于指示内容物将用于特定的治疗应用。标签还可指示内容物的使用说明，例如在本文所述的方法中。

在某些实施方案中，组合物可存在于包装或分配器装置中，其可含有一种或多种含有本文提供的化合物的单位剂型。包装例如可包含金属或塑料箔，诸如泡罩包装。包装或分配器装置可附有施用说明。包装或分配器还可附有与容器相关的通知，该通知的形式由调控药品制造、用途或销售的政府机构规定，该通知反映了该机构对用于人类或兽医施用的药物形式的批准。例如，这样的通知可以是美国食品药品监督管理局批准的处方药标签，或批准的产品插页。还可制备含有在相容的载体中配制的本文提供的化合物的组合物，其被置于适当的容器中，并标记治疗所指示的病况。

部分术语

如本文所用，“胎儿支持组织”意指用于支持胎儿发育的组织。胎儿支持组织的示例包括但不限于胎盘羊膜(PAM)或基本上分离的PAM、脐带羊膜(UCAM)或基本上分离的UCAM、绒毛膜或基本上分离的绒毛膜、羊膜-绒毛膜或基本上分离的羊膜-绒毛膜、胎盘或基本上分离的胎盘、脐带或基本上分离的脐带或其任何组合。

如本文所用，“胎儿支持组织产品”意指由研磨胎儿支持组织产生的任何产品。胎儿支持组织的示例包括但不限于胎盘羊膜(PAM)或基本上分离的PAM、脐带羊膜(UCAM)或基本上分离的UCAM、绒毛膜或基本上分离的绒毛膜、羊膜-绒毛膜或基本上分离的羊膜-绒毛膜、胎盘或基本上分离的胎盘、脐带或基本上分离的脐带或其任何组合。

如本文所用，“粉末”意指细干颗粒形式的物质。在一些实施方案中，颗粒的尺寸不均匀。在一些实施方案中，颗粒的尺寸基本上均匀。

如本文所用，“研磨”意指将胎儿支持组织减小为小颗粒或粉末的任何方法。术语研磨包括粉碎、均质化、锉削、碾磨、磨碎、捣碎和压碎。

如本文所用，“胎盘”意指将发育中的胎儿连接到母体子宫壁使其通过母体供血来吸收养分、排除废物和交换气体的器官。胎盘由三层构成。胎儿周围最内层的胎盘层称为羊膜。尿囊为胎盘的中间层(源自胚胎后肠)；起源于脐部的血管穿过该膜。胎盘的最外层，即绒毛膜，与子宫内膜相接触。绒毛膜和尿囊融合形成绒毛尿囊膜。

如本文所用，“绒毛膜”意指由胚外中胚层和两层滋养层形成的膜。绒毛膜绒毛从绒毛膜中长出，侵入子宫内膜，并使养分从母体血液转移至胎儿血液。绒毛膜由两层组成：由滋养层形成的外层和由体壁中胚层形成的内层；羊膜与后者相接触。滋养层由立方体或棱柱体细胞的内层、细胞滋养层或朗格汉斯巨细胞(Langhans)层和没有细胞边界的富含核原生质外层、合体滋养层组成。无血管羊膜黏附在绒毛膜的内层。

如本文所用，“羊膜-绒毛膜”意指包含羊膜和绒毛膜的产品。在一些实施方案中，羊膜和绒毛膜没有分离(即，羊膜自然地黏附在绒毛膜的内层)。在一些实施方案中，羊膜最初与绒毛膜是分离的，然后在加工过程中与绒毛膜结合。

如本文所用，“脐带”意指将发育中的胎儿连接到胎盘的器官。脐带由华通氏胶构成，华通氏胶是主要由黏多糖制成的凝胶状物质。脐带包含一条静脉和两条动脉，静脉将含氧、养分丰富的血液输送给胎儿；动脉将缺氧、养分耗尽的血液带走。

如本文所用，“胎盘羊膜”(PAM)意指源自胎盘的羊膜。在一些实施方案中，PAM是基本上分离的。

如本文所用，“脐带羊膜”(UCAM)意指源自脐带的羊膜。UCAM为半透明膜。UCAM具有多层上皮层、基底膜；紧密层；成纤维细胞层；以及海绵状层。其缺乏血管或直接供血。在一些实施方案中，UCAM是基本上分离的。在一些实施方案中，UCAM包含华通氏胶。在一些实施方案中，UCAM包含血管和/或动脉。在一些实施方案中，UCAM包含华通氏胶以及血管和/或动脉。

“基本上分离的”或“分离的”意指胎儿支持组织产品已与源自原始来源生物的不期望的物质(例如，红细胞、血管和动脉)分离。纯度或“分离度”可通过标准方法测定，一般为至少约10％的纯度，更一般为至少约20％的纯度，通常为至少约30％的纯度，并且更通常为至少约40％的纯度；在进一步的实施方案中，为至少约50％的纯度，或更经常为至少约60％的纯度；在仍其他实施方案中，为至少约95％的纯度。

如本文所用，“生物活性”意指多肽和多糖的活性。在一些实施方案中，多肽和多糖的活性存在于脐带(和基本上分离的脐带)、UCAM(和基本上分离的UCAM)、胎盘(和基本上分离的胎盘)、PAM(和基本上分离的PAM)、绒毛膜(和基本上分离的绒毛膜)或羊膜-绒毛膜(和基本上分离的羊膜-绒毛膜)中。

如本文所用，基本保留生物活性或结构完整性意指与未加工组织的生物活性和结构完整性相比，胎儿支持组织产品的生物活性和结构完整性仅降低了约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约50％、约60％。

术语“新鲜”是指出生后小于10天的组织，其形式与出生后基本上相同。

术语“对象”和“个体”可互换使用。如本文所用，该两个术语均意指任何动物，优选哺乳动物，包括人类或非人类。术语患者、对象和个体可互换使用。这些术语均不得解释为需要医疗专业人员(例如，医生、护士、医师助理、护理员、临终关怀工作者)的监督。

如本文所用，术语“治疗”包括减缓、减轻或改善疾病或病况的症状，防止其他症状，改善或防止症状的潜在代谢原因，抑制疾病或病况，例如，阻止疾病或病况的发展、缓解疾病或病况、使得疾病或病况消退、缓解由疾病或病况引起的病况、或预防性和/或治疗性地停止疾病或病况的症状。

实施例

实施例1.加工方法

图1示出了说明加工本文公开的胎儿支持组织的方法的示例的流程图。胎儿支持组织—羊膜和脐带—获取自供体并被清洗。将清洗过的羊膜和脐带用FreezerMill低温粉碎以用于提取。将经低温粉碎的羊膜和脐带在注射用水中进行提取。将提取物离心以去除大的组织颗粒。然后将羊膜和脐带以2倍的稀释倍数用注射用水通过在4℃下以20rpm混合30min来进行稀释。然后将经稀释的盐水提取物用0.45μm过滤器过滤，然后用0.2μm过滤器过滤。

实施例2.提取时间对蛋白质回收的影响

依次将经低温粉碎的羊膜(“AM”)和脐带(“UC”)组织分别在盐水中提取1小时(h)、2h或3h，并将相应沉淀物用6MGnHCl/PBS提取24小时。

将来自供体的AM和UC加工并低温粉碎。将经低温粉碎的AM/UC使用管转子以20rpm在4℃下在盐水中以1:4(w/v，g/ml)的比例提取1、2或3h(n＝2)以产生MAU/盐水提取物。在4℃下以48,000g离心30min后，从上清液中收集MAU/盐水提取物。将剩余的沉淀物用盐水(10ml盐水/1g沉淀物)洗涤2次，并在4℃下用6M GnHCl/PBS和PI(10mM EDTA，2mM PMSF)以1:4(w/v，g/ml)的比例以20rpm提取24h。在4℃下以48,000g离心30min后，收集GnHCl提取物。MAU/盐水提取物和6M GnHCl提取物两者均用HA测定来测试HA含量，用BCA测定来测试总蛋白，以及用蛋白质印迹分析来测试HC-HA/PTX3含量。上述提取效率取决于MAU/盐水提取物中可获得的物质和/或6M GnHCl提取物中剩余的物质。

表1总结了HA和总蛋白的总体回收率。结果表明，1h后回收率达到总HA的82.8±0.7％，并且不会随着提取时间进一步增加至2h或3h而增加(相对于1h，所有p>0.05)。在盐水中提取1h也达到了总蛋白的9.5±0.1％的回收率，该回收率不会随着提取时间的进一步增加而增加(相对于1h，所有p>0.05)。因此，盐水中的提取时间优化为1小时。

表1.不同提取时间提取物中的总HA和蛋白质

结果表明，盐水提取物在透明质酸酶消化HA后，显示出从保留在加载孔中的HMWHC-HA/PTX3中释放出的强80kDa HCl和HMW PTX3涂物，而GnHCl提取物在透明质酸酶消化后，仅显示出弱HCl和PTX3涂物，而没有加载孔中的HMW HC-HA/PTX3(图2A-2B)。该结果强烈表明大部分HC-HA/PTX3在1h后通过盐水被提取。

实施例3.离心时间对蛋白质回收的影响

将经低温粉碎的AM/UC组织在盐水中提取1h，并以不同速度(即14,000rcf、10,000rcf、3200rcf和48,000rcf(作为对照))离心。

结果如表2所示。以3200rcf离心产生悬浮在溶液中的可见颗粒，并在30min后沉降。以10,000rcf离心也能观察到类似的可见颗粒，但数量较少，但以14,000rcf和48,000rcf离心时却观察不到。将沉淀物在盐水中洗涤2次，然后在4℃下用6M GnHCl/PBS以1:4(w/v，g/ml)提取24h；在4℃下以48,000g离心30min后收集上清液用于分析。对两种上清液进行蛋白质印迹分析测试。上述离心效率取决于盐水提取物中可获得的物质和/或6MGnHCl提取物中剩余的物质。

结果表明，以14,000rcf或更高的离心可用于制备上清液，以用于进一步制备脐带/羊膜胎儿支持组织产品(“MAU”)。表2中总结的HA和蛋白质的生化定量以及HC-HA/PTX3的蛋白质印迹分析(图3A-3B)进一步支持了该观点，这表明不同速度的离心并不影响提取物中HA、蛋白质和HC-HA/PTX3的含量。

表2.不同离心速度提取物中的总HA和蛋白质

实施例4.赋形剂对蛋白质回收的影响

在三种不同的赋形剂中制备和提取经低温粉碎的MAU。表3总结了在三种不同赋形剂(即，MAU/盐水、MAU/WFI和MAU/SW)中制备的MAU的HA和总蛋白的生化定量数据。WFI提取的HA与盐水(p>0.05)提取的HA相当，但检测不到蛋白质。留在沉淀物中的HA和蛋白质仍然可通过GnHCl进行提取。相比之下，与盐水和WFI(两者均p<0.05)相比，SW提取的HA较少，且检测不到蛋白质。这些结果表明，SW作为MAU制剂的赋形剂是不可接受的。

HA大小分布的琼脂糖凝胶分析证实，WFI提取的HA数量和大小与盐水相似，但与盐水和WFI相比，SW不仅提取的HA较少，而且提取的HA的MW也较低(图4)。蛋白质印迹用于半定量和测定HC-HA/PTX3完整性，用蛋白质印迹进一步分析，结果表明WFI成功地提取了大部分HC-HA/PTX3作为盐水；然而，SW仅提取了少部分HC-HA/PTX3，其中一些已降解(图5A-5B)。该结果表明，WFI提取的HC-HA/PTX3与盐水相当，但SW提取的HC-HA/PTX3较少且受损。总的来说，从上述数据可得出结论，盐水和WFI两者均为MAU可接受的赋形剂，但SW是不可接受的。

表3.按序的盐水、WFI或SW和GnHCl提取物中的总HA和蛋白质

实施例5.最终灭菌方法对蛋白质回收的影响

为了确定最终灭菌是否可通过γ照射进行，胎儿支持组织—羊膜和脐带—在盐水、WFI或SW中制备，并在干冰中经受最终灭菌以减少已知γ照射的潜在不良影响。将AM和UC在盐水、WFI或SW中在室温下以1:4(w/v)的比例混合，混合速度设置为高速15秒，然后低速15秒，共计六次高速/低速循环，在4℃下以3,200g离心30min，并用200μm的筛网过滤以分别收集作为MAU/盐水、MAU/WFI或MAU/SW。

使MAU/盐水、MAU/WFI和MAU/SW在有干冰或无干冰情况下以25±10％kGy的剂量经受γ照射。对未灭菌和灭菌样品进行HA测定、BCA测定、琼脂糖凝胶分析、考马斯蓝分析和蛋白质印迹分析测试。

表4总结了MAU/盐水、MAU/WFI和MAU/SW的HA和总蛋白的生化定量。结果表明，在有干冰γ照射或无干冰γ照射后，与未经γ照射的情况相比，MAU/盐水和MAU/WFI中的HA显著降低到检测不到或非常低的水平(p<0.05)。三个MAU中的总蛋白在γ照射后显著增加，尤其是在无干冰的情况下。增加的蛋白质水平可能源自通过γ照射的降解后的蛋白质片段(参见图7A-7B考马斯蓝分析)。该结果表示γ照射诱导MAU中HA和蛋白质的损伤。用于HA大小分布的琼脂糖凝胶分析(图6)和用于蛋白质分布的考马斯蓝分析(图7A-7B)证实了这一发现，这显示了HA或蛋白质在γ照射后分别完全(无干冰)或不完全(有干冰)降解。

表4.伽马照射后MAU中的HA和蛋白质的含量，A1、B1、C1，在4℃下保存。A2、B2和C2，在-80℃下保存。

为确定MAU中的HC-HA/PTX3是否被γ照射降解，使用MAU/盐水和MAU/WFI进行蛋白质印迹分析。结果表明，γ照射后MAU中不存在HC-HA/PTX3复合体(图8A-8D)，表明γ照射也在两个MAU中诱导了HC-HA/PTX3的损伤。总之，由于MAU/盐水、MAU/WFI和MAU/SW中的HA、蛋白质和HC-HA/PTX3会发生降解，因此不能将通过γ照射进行的最终灭菌应用于MAU。

实施例6.过滤灭菌和稀释对蛋白质回收的影响

胎儿支持组织产品经由0.45μm过滤器进行预过滤，然后经由0.2μm过滤器进行预过滤，进行了膜过滤灭菌。为了减少过滤器的堵塞并增加MAU的回收率，我们还对比了过滤前未经稀释和经连续稀释的MAU。未过滤的(作为对照)和所有经稀释或未经稀释的经过滤的MAU通过经受上述测定来对比。

将AM和UC低温粉碎，在盐水或WFI中在4℃下以1:4(w/v)的比例提取1h，在4℃下以48,000g离心30min，并分别收集上清液。将MAU/盐水和MAU/WFI分别用稀释倍数为1.5、2.0或2.5的盐水或WFI稀释，在4℃下以20rpm混合30min。将经稀释或未经稀释的MAU/盐水和MAU/WFI用0.45μm过滤器过滤，然后用0.2μm过滤器过滤。对经稀释或未经稀释的未过滤和经过滤的MAU/盐水和MAU/WFI进行HA测定、BCA测定、琼脂糖凝胶分析和蛋白质印迹分析测试。

表5总结了使用0.45μm和0.2μm过滤器依次过滤后MAU/盐水和MAU/WFI的HA和总蛋白的生化定量。结果表明，未经稀释的MAU/盐水和MAU/WFI过滤后，HA和总蛋白的回收率分别为91％和83％(MAU/盐水)或96％和72％(MAU/WFI)，并且与未经稀释的MAU/盐水或MAU/WFI相比，稀释1.5倍、2倍或2.5倍的MAU/盐水或MAU/WFI的HA和总蛋白的回收率没有任何差异(所有p>0.05)。该结果表明，经稀释或未经稀释的MAU/盐水和MAU/WFI的过滤对HA或总蛋白的回收率没有影响，并且HA和总蛋白的回收可用于MAU制剂。然而，正如预期的那样，经稀释的MAU优于未经稀释的MAU，因为随着稀释倍数的增加而增加了过滤速度。

表5.过滤后MAU/盐水和MAU/WFI中HA和蛋白质的回收

过滤后的经稀释或未经稀释的MAU的琼脂糖凝胶分析显示，与未过滤的MAU相比，所有过滤的MAU和稀释的MAU(1.5至3倍)中存在相似量的HMW HA(图9)，这表明HMW HA在过滤和稀释(1.5至3倍)后保留在MAU中。类似地，经稀释或未经稀释的MAU的蛋白质印迹分析显示所有过滤的MAU中存在HC-HA/PTX3并且其在稀释后得以增加(图10A-10D)，表明HC-HA/PTX3也在过滤后得以保留并且在稀释后得以增加。总的来说，过滤灭菌对于MAU最终灭菌是可行的。通过提高的HMW HA和HC-HA/PTX3的速度和回收可知，经2至2.5倍稀释的MAU的过滤优于未经稀释的MAU的过滤，同时不影响HA和总蛋白的回收率。

实施例7.过滤灭菌和稀释对蛋白质回收的影响

由于MAU需要冻干以获得更高浓度的HA，然后适用于ODI-TRAP，因此必须对水进行透析，作为MAU/盐水去除盐分的方法适用性的步骤，这会干扰TRAP测定。以前的数据表明，使用具有或不具有0.5mM PMSF的水对MAU/盐水透析48h可完全去除盐分。然而，如琼脂糖和蛋白质印迹分析所示，具有或不具有PMSF的较长时间的透析可能导致HA和HC-HA/PTX3降解。

将来自一个供体的AM和UC低温粉碎，在4℃下用盐水以1:4(w/v)的比例提取1h，在4℃下以48,000g离心30min，并收集上清液作为MAU/盐水。

将MAU/盐水用盐水稀释(2倍)。用0.45μm过滤器和0.2μm过滤器依次对未经稀释和经稀释的MAU/盐水两者进行过滤。

在不使用PMSF的情况下，在4℃下用3.5k MWCO Slide-A-Lyzer G2透析盒对经稀释或未经稀释的经过滤的MAU/盐水进行对水的透析1、3、6或24h，使用透析缓冲液(水)体积≥200倍的样品体积，每一小时换一次水，直至过夜24h。通过氯化物测定来测试经透析的MAU/盐水，以确定通过透析脱盐的效率。

表6总结了在不同透析时间下透析脱盐的程度。结果表明，透析3h从未经稀释和经稀释的MAU/盐水两者中去除了99％的氯化物，而透析6h达到了与透析24h相同的脱盐效果。因此，确定透析时间可减少至3h，并且透析3-6h对于MAU/盐水的有效脱盐是可接受的。

表6.透析前后MAU/盐水中的氯化物浓度

在三种效力测定，即，ODI-TRAP测定、M2测定、NO测定和/或WST-1测定中对比了使用或不使用2倍稀释的MAU/水或MAU/盐水的方法适用性。

将来自相同供体的AM和UC低温粉碎，在4℃下在盐水或WFI中以1:4(w/v)的比例提取1h，在4℃下以48,000g离心30min，并收集上清液作为MAU/盐水和MAU/WFI。MAU/盐水和MAU/WFI未经稀释或分别用赋形剂稀释(2倍)，并依次用0.45μm过滤器和0.2μm过滤器过滤。经过滤的MAU/盐水未透析或在4℃下对水透析3-6h以去除盐分。

对所有MAU/盐水和MAU/WFI样品进行了HA测定测试。MAU/盐水和MAU/WFI被冻干或未冻干，并在ODI-TRAP测定、M2测定、NO测定和/或WST-1测定中进行测试，所有三种测定的细胞培养基体积均设置为100μl。通过显微图像记录细胞形态。在每种测定中，以50、100、300和500μg/ml的HA剂量测试冻干样品。由于更高剂量的HA(例如，≥100μg/ml)会导致100μl的培养基体积不成比例地减少，从而使细胞测定无效，因此未冻干样品只能以一个50μg/ml的HA剂量进行测试。

表7总结了三种测定中表现出剂量依赖性线性的样品，而图12图示了三种测定的剂量依赖性线性。结果表明：

1.未冻干的情况下，可测试的最高HA浓度为50ug/ml，这仍会导致细胞受损，因此仍不适用于所有三种测定。

2.MAU/盐水的透析是必要的，因为在所有三种测定中，如果没有透析，细胞会因高盐而表现出形态学变化和细胞毒性。

3.最低检测剂量为：a.TRAP：≥300μg/ml HA，用于经稀释或未经稀释的透析MAU/盐水和MAU/WFI。b.WST-1：≥100μg/ml HA，用于经稀释或未经稀释的透析MAU/盐水和MAU/WFI。c.M2：≥300μg/ml HA，用于经稀释或未经稀释的MAU/WFI。M2不适用于经透析的MAU/盐水。

4.在所有三种测定中，经稀释或未经稀释的MAU/WFI比MAU/盐水更有效，即，在相同剂量的HA下对TRAP、WST-1和IL-12p40发挥更大程度的抑制或对IL-10发挥更大程度的促进作用，并表现出更好的线性。

5.经稀释的MAU/WFI在WST-1和M2中优于未经稀释的性能，具有更好的线性。经稀释的在TRAP中与未经稀释的性能相当，具有相似的线性。对于经透析的MAU/盐水，未经稀释的在TRAP中优于经稀释的性能，具有更好的线性，而未经稀释的在WST-1中与经稀释的性能相当，具有相似的线性。

6.对于经稀释或未经稀释的MAU/WFI，在最低检测剂量方面，WST-1的性能优于TRAP，TRAP的性能与M2相当。在线性方面，稀释WST-1的性能与M2相当，M2的性能优于TRAP。对于未经稀释的，WST-1的性能与TRAP和M2相当。对于经稀释或未经稀释的透析MAU/盐水，在最低检测剂量和线性方面，WST-1的性能优于TRAP。

表7.MAU样品在三种效力测定中表现出的剂量依赖性线性的对比

实施例8：加工参数对胎儿支持组织产品的影响

进行了一项研究，测试以下用于生产颗粒化羊膜和脐带胎儿支持组织的胎儿支持组织产品的过程参数：1)储存温度；2)储存时间；3)颗粒化赋形剂，即，盐水或WFI；和4)最终灭菌(有干冰伽马照射或无干冰伽马照射)。

方法

应用以下过程控制：(1)胎盘—羊膜(AM)和脐带(UC)—使用的供体为人类可移植级，USP<61>采集培养报告0集落形成单位(CFU)；(2)物料是一次性使用的并灭菌以确保无交叉污染；(3)所使用的赋形剂仅为新试剂，并确保在使用前盖上的密封件完好无损；(4)成品容器是无菌的并且不含RNA酶/DNA酶，以消除储存期间污染的可能性；以及(5)完成填充和贴标后，将成品样品送去进行USP<71>无菌测试，以确保基线产品中不含微生物。

根据两种赋形剂，即，盐水或WFI，将来自两个供体(分别为AM和UC)的组织按湿重平均分为两组(A和B，参见表8)。使用新的搅拌杯、锥形管、200μm过滤器、无菌容器和相关赋形剂对每组分别进行以下有序过程步骤：赋形剂颗粒化、离心、过滤、配制、包装以供分配和最终灭菌。在室温和3095rcf(4000rpm)下离心30min。所有样品均按照表8进行储存。

从每组(A和B)中取出样品，并在t＝0时将NLT(不少于)0.6ml填充到单独的无菌15mL螺帽管中进行无菌USP<71>测试。从每组(A和B)中取出等分样品以生成四(4)个亚组(A1-4和B1-4，参见表8)，每个亚组产生至少13个样品(每个亚组13个样×4个亚组×2个组＝共计104个样品)，并且每个样品的最小体积为4.6ml，填充到15mL螺帽管中。使用全部MAU制剂每管填充5ml(即，超过13管)。所使用的标签是防风雨的，包含样品ID和制造日期。此外，所有样品均按照表8进行储存。图12提供了详细说明所使用储存、运输和最终灭菌步骤的流程图。

表：8:样品储存方案

在基线(t＝0)处，将三(3)个无菌USP<71>样品运送到合约实验室VRL进行测试。将样品在填充有冰袋的VRL托运箱中运送。对于A3和B3组，将样品包装在Nanocool托运箱中，该托运箱经验证可在8℃下保持48至92小时。对于A4和B4组，将样品包装在Thermosafe托运箱中，内含NLT 30lbs干冰(外侧)和Corepack。以上样品由合约承运人(即联邦快递)递送。为了监测保持的温度，将数据记录仪放置在A3和B3组的运送容器中。照射期间将数据记录仪移除，并在照射后放回运送容器中。分析来自数据记录仪的数据以显示运送期间的温度。干冰在-78.5℃下升华，因此对于A4和B4组，样品的-80℃温度控制是通过目视检查是否存在干冰来判断的，并且在运送后对剩余干冰进行称重，仅供参考。Sterigenics按照以下计划以25±10％kGy的剂量进行伽马照射。

·星期一-运送样品

·星期二-接收运送和伽马照射过程

·星期三-完成伽马照射和处理返回用文书。

·星期四-返回样品

对样品进行分析测试，包括无菌USP<71>测试，其中在制造后储存前，即，t＝0时，立即对每组(A和B)一个样品进行测试。对样品进行BCA、HA、琼脂糖凝胶分析、蛋白质印迹和ODI-TRAP测试。来自A和B的每个亚组(n＝3)的三个样品在t＝0时经受了这些测试，并且来自A1/A2和B1/B2的每个亚组(n＝3)的三个样品在t＝1、3和6个月时经受这些测试。另外，来自每个亚组(n＝3)的三个样品在样品经过照射、运回并储存在相关温度下后t＝1、3和6个月时经受这些测试，如亚组A3/A4和B3/B4所指定。

结果

无菌USP<71>测试产生以下结果：

·A组<71>无最终生长。

·B组<71>无最终生长。

关于HA分析，对于A组(盐水)，在t＝3个月时，A1和A2(分别为4℃或-80℃，对照，未经伽马照射)显示HA浓度与基线相比没有差异，且彼此之间也没有差异，但A4(有干冰伽马照射后)检测不到HA浓度，如在t＝1个月时所见(表9)。对于B组(WFI)，B1和B2(分别为4℃或-80℃，对照，未经伽马照射)显示HA浓度与基线相比没有差异，且彼此之间也没有差异，而B4(有干冰伽马照射后)与基线相比，并且与对照(B2，表9)相比显示出显著减少，这与t＝1个月中所见的减少趋势一致。

关于总蛋白分析：对于A组(盐水)，在t＝3个月时，A1和A2(分别为4℃或-80℃，对照，未经伽马照射)中检测不到蛋白质浓度，而在t＝1个月和基线(表9)可检测到该浓度。与基线相比，A4(有干冰伽马照射后)没有统计学差异。对于B组(WFI)，B1和B2(分别为4℃或-80℃，对照，未经伽马照射)检测不到，如在t＝1个月和基线处所见。样品B4(有干冰伽马照射后)中检测不到蛋白质，如t＝1个月中所见(表9)。

表9：t＝3个月时MAU A组和B组的HA和蛋白质浓度(平均值±标准偏差)

关于琼脂糖凝胶分析(图13A-13F)，对于A1、A2、B1和B2样品的每个泳道，加载了相同量的10μg HA。对于A4和B4样品的每个泳道，由于A4和B4 HA浓度较低，分别加载了与A1或B1相同体积的10μg HA。泳道1具有50和601kDa标志，泳道17具有12kDa标志(将50和12kDa分离以进行更清楚地区分)(图13C)。在t＝3个月时的A组(盐水，未透析)和B组(WFI)两组对照样品(未经伽马照射)(A1、A2和B1、B2，图13F，分别为泳道3-6和泳道9-12)显示出与在它们的相关基线样品中所见的HA分布模式相同(图13E，分别为A组和B组的泳道3-5和泳道6-8)，并且有干冰伽马照射样品(A4和B4)显示出与在t＝1个月时与相关样品(图13B和13E，A组和B组，分别为泳道9-10和泳道17-18)所见相同的HA模式(图13F，A组和B组，分别为泳道7-8和泳道13-14)。总体而言，T＝3时的HA强度弱于T＝1时的强度。这是否是由于HA分布变化还是凝胶染色差异仍然未知。

对于考马斯蓝染色分析(图14A-14B)，对于A组(盐水，图14A)，根据是否存在可测量的HA，在每个加载孔中加载20μg或相同体积的HA。对于B组(WFI，图14B)，加载40μg或相同的体积的HA。当将A组(A1和A2)中的对照样品与B组(B1和B2)中的对照样品进行对比时，两者显示出相似的模式，在透明质酸酶消化后相同。在透明质酸酶和DTT处理后，两组的泳道底部均具有低于50kDa的涂物。注意到两组的储存温度(4℃与-80℃)没有差异。进行无干冰伽马照射后(A3和B3)在37和20kDa处显示出两条条带。在有干冰伽马照射后(A4和B4)和未经处理的两种情况下，凝胶顶部均显示出～30kDa的涂物。在透明质酸酶消化后，两组在20kDa和37kDa处均显示出两条条带(令人惊讶的是，在B组中更明显)，凝胶顶部有淡淡的涂物。在透明质酸酶和DTT处理后，两组均显示出20kDa条带。B组涂物始终比A组更淡。

关于蛋白质印迹分析(图15A-15J)，将A1、A2、B1和B2的样品在每个加载孔中加载10μg HA，并将A4和B4的样品分别加载与A1或B1相同体积的10μg HA。与基线(图15A和15B)处相关样品相比，使用或不使用透明质酸酶或透明质酸酶/DTT处理的未经伽马照射的A组和B组(A1、A2、B1和B2)的样品分别显示出相同的HCl(图15G和15H)和PTX3(图15I和15J)模式。与t＝1个月(图15C、15D、15E和15F)时的相关样品相比，使用或不使用透明质酸酶或透明质酸酶/DTT处理的经伽马照射的A组和B组(A4和B4)的样品分别显示出相同的HCl(图15G和15H)和PTX3(图15I和15J)模式。

图16A示出了MAU A组(盐水)和B组(WFI)在基线(t＝0)处的细胞形态。图16B示出了MAU A组和B组在t＝1个月时的细胞形态。与阴性对照相比，阳性对照显示出多核破骨细胞形成。以5μg/ml HA加载的参考标准(RS)抑制了多核破骨细胞的形成(图16A和16B)。MAUA组和B组在基线(图16A)处和t＝1个月时(图16B)在300和500μg/ml HA下显著抑制了多核破骨细胞形成。

图17A-17E示出了TRAP测定的结果。与阴性对照(p≤0.05)相比，阳性对照显示出高TRAP活性，并且以5μg/ml HA加载的参考材料(RM)显著抑制了TRAP活性(p≤0.05)，这验证了该测定(图17A-17E)。图17A，在使用或不使用PMSF的情况下进行透析的MAU(盐水)在所有浓度下均显著抑制了TRAP活性(p≤0.05)，而在使用或不使用PMSF的情况下进行透析的单独盐水不影响TRAP活性，证实了透析去除盐分。图17B，在不使用PMSF的情况下进行透析的MAU(盐水)显示出抑制TRAP活性(p≤0.05)，但在使用来自两个供体的PMSF透析时显示出促进TRAP活性(p≤0.05)。图17C，MAU A组(盐水)在100和/或300μg/ml HA(p≤0.05)时显示出促进TRAP活性，并没有抑制活性，而MAU B组(WFI)显示出显著抑制剂量依赖性的TRAP活性(p≤0.05)，并没有促进。图17D，在4℃(A1)或-80℃(A2)下储存的MAU A组(盐水)在300和/或500μg/ml HA(p≤0.05)时显示出促进TRAP活性，并没有抑制活性。无干冰伽马照射(A3)的MAU A组显示出抑制TRAP活性(p≤0.05)，但有干冰伽马照射(A4)显示出促进TRAP活性，并没有抑制活性。图17E，在4℃(B1)或-80℃(B2)下储存的或无干冰伽马照射(B3)或有干冰伽马照射(B4)的MAU B组(WFI)在300和/或500μg/ml HA(p≤0.05)时显示出抑制TRAP活性，在100μg/ml HA时在B1、B2和B4中促进TRAP活性(p≤0.05)。*p≤0.05相对于阳性对照，TRAP抑制。#p≤0.05相对于阳性对照，TRAP促进。

结果分析

关于在4℃与-80℃下的储存，对于A组(A1和A2)和B组(B1和B2)的对照样品，关于HA(数量和质量)和HC-HA/PTX3复合体存在具有以下例外的稳定性：HA浓度在A组和B组中是稳定的，在t＝1个月时没有在B组中看到HA浓度增加。HA在A组中伴随有硫酸软骨素，但B组中没有，如在基线和t＝1个月时所见。这些结果表明HA在样品储存3个月期间保持不变，并且在储存温度(4℃与-80℃)之间没有差异。琼脂糖凝胶结果表明，A组和B组两组的HA MW分布在4℃或-80℃下储存长达3个月没有变化，这与HA测定结果一致。在A组中在4℃和-80℃下检测不到蛋白质。对于A组，t＝3个月的结果与t＝1个月和基线不一致，但对于B组，蛋白质浓度与t＝1个月和基线结果一致均检测不到。根据基线中所见的相关处理，A组和B组保持了HA、HC-HA、HCl和PTX3模式，支持三个月的稳定性，表示存在HC-HA/PTX3复合体。

关于无干冰伽马照射(A3和B3)，蛋白质条带(在t＝1个月测试)如考马斯蓝所分析，明显减少。样品的琼脂糖凝胶未显示任何HA，表明HA通过伽马照射完全降解(与对照相比)。另外，蛋白质印迹未显示HCl或PTX3，表示HC-HA/PTX3复合体未被保留。在使用干冰的情况下，盐水(A4)显示检测不到HA，但蛋白质浓度保持在t＝1个月时所见的浓度。WFI(B4)HA浓度与基线相比降低了87.2％，并且蛋白质浓度如在t＝1个月和基线处所见，仍然检测不到。伽马照射结果后的琼脂糖凝胶结果与t＝1个月时的相关样品一致，表明其稳定性。将蛋白质印迹样品(A4和B4，t＝3个月)与t＝1个月时的样品进行对比，在两种情况下在相关处理下均没有检测到HC-HA，没有检测到HCl和HMW PTX3，表明样品中没有HC-HA/PTX3复合体，符合t＝1个月的结果。

关于TRAP测定，在t＝1个月时，未经伽马照射(A1和A2)的盐水样品显示出如基线处所见的TRAP促进活性。在有干冰伽马照射或无干冰伽马照射后(A3和A4)显示出在基线处未见的抑制活性。在t＝1个月时，未经伽马照射的WFI样品(B1和B2)显示出如在对照和基线中所见的TRAP抑制活性。对于B组，使用多项式4计算揭示了基线(之前未见)和t＝3个月时的蛋白质浓度，但未揭示t＝1个月中的蛋白质浓度。

因此，可得出结论，对照样品(A1、A2、B1和B2)在t＝3个月时保留了HC-HA/PTX复合体，如在t＝1个月和基线处所见。(有干冰)伽马灭菌后样品(A4和B4)在t＝3个月时未保留HC-HA/PTX复合体，如t＝1个月中所见。伽马后样品(A3、A4、B3和B4)在透明质酸酶和DTT还原后未显示未处理的HC-HA或HCl，但在A4中显示HMW PTX3，表示HC-HA/PTX复合体在t＝1个月时未被保留。

实施例9：MAU产品稳定性测试

MAU使用如下所述和图23中所示的过程制造。使用HA、ODI-TRAP、WST-1、NO和M2测定来测试成品的稳定性。

步骤1：规范起始物料

从接收开始将组织加工为规范起始物料。用于规范起始物料的组织制备过程包括清洗、切割和浸泡步骤。

步骤2：原料药

低温粉碎。如果AM和UC组织先前被储存过，则将其解冻。对组织进行称重并转移到冷冻研磨小瓶中。将封闭的小瓶转移至冷冻研磨机，在冷冻研磨机中将组织低温粉碎。一旦完成循环，将经粉碎的组织转移至无菌瓶(提取瓶)。对全部经粉碎的组织进行称重。

提取。将WFI(注射用水)以1:4w/v组织(克)：WFI(毫升)的比例添加至含有经粉碎的组织的瓶子中。将填充后的瓶子密封并转移至位于2-8℃致冷器内的瓶转子进行提取。提取将以12±6rpm运行60±5分钟。

离心。提取后立即将溶液装入离心管中进行离心。离心以14,000g运行30分钟。收集上清液并丢弃沉淀物。

稀释。用WFI将收集自离心的上清液稀释至500ml的最终体积。将装有500ml经稀释溶液的容器密封并转移至位于2-8℃致冷器内的管转子。将溶液以12±6rpm混合30±3分钟。

无菌过滤。使用蠕动泵和过滤组件执行无菌过滤。通过伽马照射对过滤组件进行灭菌。使用在上游侧配备有0.65微米去除等级不对称层并且在下游侧配备有0.2微米去除等级对称层的胶囊过滤器，在NMT 18psi下将经稀释的上清液从稀释瓶过滤到无菌滤液袋(封闭系统)中，该无菌滤液袋为过滤组件的一部分。

步骤3：药物产品

填充、密封、贴标、包装和储存。该过程包括将过滤后的原料药填充到成品管中，密封、贴标和储存成品。

此外，该组件将作为常规过程对照的一部分来进行系统完整性(压力衰减)、视觉外观和流体通道清洁度测试。

将密封单位剂量管。在密封UDT后，将它们移出洁净室，转移到受控的、未分类的房间，在那里将进行管贴标和二次包装和密封。

一旦填充和密封的管通过泄漏测试被视为合格，它们就会被贴上成品药(FDP)批号并进行包装。目视检查标签是否存在视觉缺陷，并核对标签和准确性。将对产品释放测试进行代表性抽样，其包括无菌性、内毒素、同一性、纯度和效力、总填充体积和液滴均匀性测试。

将成品分成三组。USP<71>无菌性测试结果如下：

·D1-TGEA19I010-结果没有增长。

·D2-GJ19C018RBI-结果没有增长。

·D3-TGED19I007-结果没有增长。

表10示出了为供体中的每一个所测量的HA浓度。使用t检验时，显示供体之间的HA浓度差异显著(p<0.05)，与D3相比，D1和D2的HA浓度较低。

表10：供体HA浓度

结果

琼脂糖凝胶分析(图18A-18B)显示所有样品中均存在HMW HA，D2和D3中的HMW>8000kDa，D1中的为6000kDa。紫色的LMW条带(<30.6kDa)主要存在于D2中多于D3，但在D1中非常弱，这在先前的MAU/WFI中并没有注意到(图18B，泳道9-14)。

由于在处理前和透明质酸酶处理后大量存在游离HCl，HCl的蛋白质印迹分析(图19A-19D)未显示HC-HA的解离。所有样品均显示具有HMW PTX3，其中可能由于大量存在，通过透明质酸酶处理的解离并不明显。

关于ODI-TRAP测定(图20A-20B)，IRM(HC-HA/PTX3)(25μg/ml)抑制了TRAP活性并诱导细胞死亡。另外，来自所有3个供体的样品(t＝0)在500μg/ml时抑制了TRAP活性并导致细胞死亡。

关于WST-1测定(图21A-21B)，IRM(25μg/ml)抑制了细胞代谢活动，并且D1和D3在500μg/ml时抑制了细胞代谢活动。D2抑制作用导致阴性OD，因此开始出现偏差。

关于M2测定(图22A-22B)，IRM(20μg/ml)下调了IL-12p40的产生，并且3个供体在500μg/ml时下调了IL-12p40的产生。

关于NO测定(图23A-23B)，IRM(20μg/ml)抑制了NO的产生，并且3个供体在500μg/ml时抑制了NO产生，且供体2和3诱导细胞死亡。

分析

与IRM(HC-HA/PTX3)相似，所有三个TTBT01供体在500μg/ml HA的加载剂量下均对ODI-TRAP测定、WST-1测定、M2极化IL-12测定和NO测定显示出抑制作用。

实施例10：MAU产品的后续稳定性测试

根据实施例9制造的MAU样品重复经受HA、ODI-TRAP、WST-1和M2测定，且t＝1、2和3时间点，如表11中所示。然后将跟踪数据以确定影响时间点的百分比变化。在稳定性研究期间，将以相同方式对所有批次进行分析。

表11：MAU制剂在三个时间点的测定策略

实施例12：扩大MAU的制造

MAU使用如下所述和图24中所示的过程制造。

步骤1：原材料到规范起始物料。该步骤涵盖从组织原材料(即，人类出生组织)的获取到规范起始物料(RSM)的产生，其包括来自个体供体的人类羊膜(AM)和脐带(UC)组织。该步骤包括供体筛选、采购、接收和检查、供体合格性确定、组织清洗、切割和浸泡，以生成RSM。

步骤2：原料药。单供体过程和多供体过程。该步骤包括个体供体的低温粉碎、提取、离心和目标填充体积。在获得足够数量的供体后，将多个供体在混合器中汇集在一起以生成汇集的原料药，其可进一步稀释成不同制剂以生成原料药(DS)。

步骤3：药物产品。在吹填密封(BFS)设备中通过填充和密封进行无菌过滤。该步骤从无菌过滤开始，将DS填充和密封到小瓶中。DS以每小瓶2.0mL的目标填充重量装入到小瓶中。所有密封的小瓶均经过目视检查是否存在缺陷，并在贴标前通过泄漏测试对容器密封完整性进行抽样。对代表性小瓶进行抽样并进行释放测试。

实施例13：治疗伤口的方法

将实施例1的胎儿支持组织产品应用于贴剂。将贴剂直接应用于伤口持续足以治疗伤口的一段时间。

实施例14：治疗椎间盘突出的方法

将实施例1的胎儿支持组织产品配制为注射剂。将该制剂在椎间盘突出部位处进行注射。持续治疗直至观察到治疗效果。

实施例15：治疗骨关节炎的方法

将实施例1的胎儿支持组织产品配制为注射剂。将该制剂注射到关节炎关节中。持续治疗直至观察到治疗效果。

Claims (44)

1.一种制备胎儿支持组织产品的方法，其包括：

(a)低温粉碎所述胎儿支持组织以生成经低温粉碎的胎儿支持组织；

(b)在赋形剂中提取所述经低温粉碎的胎儿支持组织以生成提取物；以及

(c)使用具有约0.6μm或更小孔径的膜，然后使用具有约0.4μm或更小孔径的膜，通过过滤对所述提取物进行灭菌；

从而产生所述胎儿支持组织产品。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述通过过滤进行灭菌是使用具有约0.45μm孔径的膜，然后使用具有约0.2μm或更小孔径的膜。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述低温粉碎包括在液氮中粉碎所述胎儿支持组织。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述低温粉碎包括将所述胎儿支持组织粉碎成细粉。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述胎儿支持组织包括胎盘、脐带、胎盘羊膜、脐带羊膜、绒毛膜、或羊膜-绒毛膜或其任何组合。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述胎儿支持组织包括脐带和胎盘羊膜。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述赋形剂为盐水、注射用水(WFI)或其任何组合。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述赋形剂为WFI。

9.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述赋形剂为盐水。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的方法，其进一步包括在步骤c)之后离心所述胎儿支持组织。

11.根据权利要求10所述的方法，其中所述离心速度为约14,000相对离心力(rcf)或更高。

12.根据权利要求10-11中任一项所述的方法，其进一步包括在离心后用赋形剂稀释所述胎儿支持组织。

13.根据权利要求12所述的方法，其中所述赋形剂为WFI或盐水。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述赋形剂为WFI。

15.根据权利要求13所述的方法，其中所述赋形剂为盐水。

16.根据权利要求12-14中任一项所述的方法，其中所述胎儿支持组织以至少约1.5、2.0或2.5倍的倍数进行稀释。

17.根据权利要求12-16中任一项所述的方法，其中所述胎儿支持组织以约1.5至约3倍的倍数进行稀释。

18.根据权利要求12-17中任一项所述的方法，其中所述胎儿支持组织以约2倍的倍数进行稀释。

19.根据权利要求12-18中任一项所述的方法，其中经稀释的胎儿支持组织包含约1μg/ml至约150μg/ml的透明质酸(HA)。

20.根据权利要求1-19中任一项所述的方法，其中所述胎儿支持组织产品是抗炎、抗瘢痕形成、抗血管生成、抗粘连的或促进伤口愈合。

21.一种药物组合物，其包含(a)通过根据权利要求1-20中任一项的任一权利要求所述的方法制成的胎儿支持组织产品，以及(b)药学上可接受的载体。

22.根据权利要求21所述的药物组合物，其中所述药学上可接受的载体选自：卡波姆、纤维素、胶原蛋白、甘油、己二醇、透明质酸、羟丙基纤维素、磷酸、聚山梨醇酯80、丙二醇、丙二醇硬脂酸酯、盐水、氢氧化钠、磷酸钠、山梨醇、水、黄原胶或其任何组合。

23.根据权利要求21或22所述的药物组合物，其中所述胎儿支持组织粉末产品以乳膏、洗剂、软膏、滴眼液、喷雾剂、糊剂、凝胶、膜或涂剂的形式施用或提供。

24.根据权利要求21-23中任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物是抗炎、抗瘢痕形成、抗血管生成、抗粘连的或促进伤口愈合。

25.一种治疗有需要的个体的伤口的方法，其包括向所述伤口施用根据权利要求21-24中任一项所述的药物组合物持续足以治疗所述伤口的一段时间。

26.根据权利要求25所述的方法，其中所述伤口为角膜上皮伤口。

27.根据权利要求26所述的方法，其中所述角膜上皮伤口是由光消融治疗引起的。

28.根据权利要求24-25中任一项所述的方法，其中所述伤口为选自真皮烧伤或瘢痕的皮肤病况。

29.一种治疗有需要的个体的脊病况的方法，其包括向所述个体施用根据权利要求21-24中任一项所述的药物组合物持续足以治疗所述脊病况的一段时间。

30.根据权利要求29所述的方法，其中所述脊病况选自椎间盘突出、脊髓粘连、小关节骨关节炎、神经根病变、脊髓损伤或椎间盘炎。

31.一种治疗有需要的个体的关节炎病况的方法，其包括向所述个体施用根据权利要求21-24中任一项所述的药物组合物持续足以治疗所述关节炎病况的一段时间。

32.根据权利要求31所述的方法，其中所述关节炎病况选自骨关节炎、类风湿性关节炎、脓毒性关节炎、强直性脊柱炎或椎关节强硬。

33.一种再生或修复有需要的个体的骨、组织或软骨的方法，其包括向所述个体施用或提供根据权利要求21-24中任一项所述的药物组合物持续足以再生或修复骨、组织或软骨的一段时间。

34.根据权利要求33所述的方法，其中所述药物组合物以贴剂的形式施用或提供。

35.根据权利要求33所述的方法，其中所述药物组合物以伤口敷料的形式施用或提供。

36.根据权利要求1-35中任一项所述的方法，其包括将所述胎儿支持组织产品与至少一个附加胎儿支持组织产品汇集。

37.根据权利要求36所述的方法，其中所述胎儿支持组织产品和所述至少一个附加胎儿支持组织产品包括源自至少两名不同对象的胎儿支持组织。

38.根据权利要求36所述的方法，其中所述胎儿支持组织产品和所述至少一个附加胎儿支持组织产品包括源自至少五名不同对象的胎儿支持组织。

39.根据权利要求36所述的方法，其中所述胎儿支持组织产品和所述至少一个附加胎儿支持组织产品包括源自至少十五名不同对象的胎儿支持组织。

40.根据权利要求36所述的方法，其中所述胎儿支持组织产品和所述至少一个附加胎儿支持组织产品包括源自至少四十五名不同对象的胎儿支持组织。

41.根据权利要求1-40中任一项所述的方法，其包括将所述胎儿支持组织产品填充到容器中。

42.根据权利要求41所述的方法，其包括密封所述容器。

43.根据权利要求41或42所述的方法，其中所述填充和密封是无菌地进行的。

44.根据权利要求41-43中任一项所述的方法，其中所述填充和密封是无菌地并且在没有人为干预的单个连续过程中进行的。