CN116670131A - Phd抑制剂化合物、组合物和使用方法 - Google Patents

Phd抑制剂化合物、组合物和使用方法 Download PDF

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托马斯·P·布莱斯德尔
森卡拉·拉奥·阿卢
保罗·E·弗莱明
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Abstract

本发明部分地提供具有根据式(I)或其子式的结构的新型小分子PHD抑制剂：

Description

PHD抑制剂化合物、组合物和使用方法
相关申请交叉引用
本申请要求2020年8月14日提交的第63/065,642号美国临时申请的权益，其以全文引用的方式并入本文中。
背景技术
缺氧是其中氧气供应不足以正常生活功能的状况或状态，例如其中存在低动脉氧气供应。缺氧可能导致细胞的功能损伤和结构组织损伤。在缺氧期间细胞防御机制的活化由HIF(缺氧诱导因子)蛋白介导。响应于缺氧状况，由于HIFα脯氨酰基羟基化的减少，大多数细胞中的HIFα含量升高。HIFα的脯氨酰基羟基化是由蛋白质家族完成的，所述蛋白质不同地被称为含有脯氨酰基羟化酶结构域的蛋白质(PHD1、PHD2和PHD3)，也称为HIF脯氨酰基羟化酶(HPH-3、HPH-2和HPH-1)或EGLN-2、EGLN-1和EGLN-3。PHD蛋白是氧气传感器并且以氧气依赖性方式调节HIF的稳定性。三种PHD同种型在其HIF的调节中以不同方式起作用，并且可以具有其它非HIF相关的调节作用。
事实上，许多研究表明HIF的稳定化可以减弱组织炎症并促进组织修复。因此，可以抑制PHD蛋白的活性的化合物可以是特别有益的新疗法(Lee等人(2019)《实验与分子医学(Exp.Mol.Med.)》中51:68)。
本文描述新型小分子PHD抑制剂，其适用于治疗包括以下的疾病：心脏疾病(例如，缺血性心脏病、充血性心脏衰竭和瓣膜性心脏病)、肺部疾病(例如，肺部炎症、肺炎、急性肺损伤、肺高血压、肺纤维化和慢性阻塞性肺病)、呼吸道疾病(例如，呼吸道感染、急性呼吸窘迫综合征)、肝脏疾病(例如，急性肝衰竭和肝纤维化，以及肝硬化)以及肾脏疾病(例如，急性肾损伤和慢性肾病)、发炎性肠病(inflammatory bowel disease；IBD)、缺血性再灌注损伤(例如，中风)，以及早产儿视网膜病(retinopathy of prematurity；ROP)。
发明内容
此外，本发明提供PHD的新型小分子抑制剂，且其适用于治疗包括但不限于以下的疾病：心脏疾病(例如，缺血性心脏病、充血性心脏衰竭和瓣膜性心脏病)、肺部疾病(例如，肺部炎症、肺炎、急性肺损伤、肺高血压、肺纤维化以及慢性阻塞性肺病)、呼吸道疾病(例如，呼吸道感染、急性呼吸窘迫综合征)、肝脏疾病(例如，急性肝衰竭和肝纤维化，亦即肝硬化)以及肾脏疾病(例如，急性肾损伤和慢性肾病)、发炎性肠病(IBD)、缺血性再灌注损伤(例如，中风)以及早产儿视网膜病(ROP)。
在一方面，本文提供具有根据式(I)的结构的化合物
或其药学上可接受的盐，其中：
R1为任选地被取代的C1-3烷基、任选地被取代的C3-6环烷基或任选地被取代的3至6元杂环烷基；
R2为氢、任选地被取代的C1-3烷基、卤素、CN或任选地被取代的环烷基；
R3为氢、任选地被取代的芳基、任选地被取代的杂芳基、任选地被取代的环烷基、任选地被取代的杂环烷基、羰基、醚、硫醚、任选地被取代的芳基磺酰基、任选地被取代的杂芳基磺酰基、任选地被取代的芳基烷基、任选地被取代的炔基或任选地被取代的杂炔基；
R4和R5独立地为氢、任选地被取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；且
R6为OH或酯(例如，如本文所描述的OR18)。
在实施方案中，化合物具有根据式(I)的结构
或其药学上可接受的盐，其中：
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，且其中R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基，或R1为C3-6环烷基或3至6元杂环烷基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R3选自由以下组成的组：
氢；
其中X为共价键、O、S、SO2、C1-4亚烷基、C2-4亚炔基或C2-4亚杂炔基；每个A独立地为N或CR9，R8和R9独立地为氢、卤素、OR10或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，且R10为C1-3烷基或芳基；
其中B为N或CR11，D为N、NH或CR11，E为N、CR11或CHR12，且R11和R12独立地为氢或C1-3烷基，且其中虚线圆表示存在或不存在共轭体系；
其中每个G独立地为N、NH、NR13或CR14；R13为C3-6环烷基、3至6元杂环烷基、任选地被一个或多个卤素取代的芳基、任选地被一个或多个任选地被取代的C1-3烷基取代的芳基、杂芳基、任选地被叔丁氧基羰基取代的杂环烷基、任选地被芳基(其任选地被一个或多个卤素取代)取代的C1-4烷基，且R14为氢、卤素、C3-6环烷基、3至6元杂环烷基或C1-3烷基；
其中I为O、S或CH，J为N或CH，R15为氢、C3-6环烷基、3至6元杂环烷基或C1-3烷基，且R19为氢、C3-6环烷基、3至6元杂环烷基或芳基；
OR16，其中R16为芳基；
其中X1为N或CH，且R20为任选地被取代的芳基；且
COR17，其中R17为芳基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；且
R6为OH或OR18，其中R18为C1-6烷基。
在实施方案中，式(I)化合物具有根据式(II)的结构
或其药学上可接受的盐，其中：
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，且其中R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基，或R1为C3-6环烷基或3至6元杂环烷基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R3选自由以下组成的组：
氢；
其中X为共价键、O、S、SO2、C1-4亚烷基、C2-4亚炔基或C2-4亚杂炔基；每个A独立地为N或CR9，R8和R9独立地为氢、卤素、OR10或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，且R10为C1-3烷基或芳基；
其中B为N或CR11，D为N、NH或CR11，E为N、CR11或CHR12，且R11和R12独立地为氢或C1-3烷基，且其中虚线圆表示存在或不存在共轭体系；
其中每个G独立地为N、NR13、CR14，R13为C3-6环烷基、3至6元杂环烷基、任选地被一个或多个卤素取代的芳基、任选地被一个或多个任选地被取代的C1-3烷基取代的芳基、杂芳基、任选地被叔丁氧基羰基取代的杂环烷基、任选地被芳基(其任选地被一个或多个卤素取代)取代的C1-4烷基，且R14为氢、卤素、C3-6环烷基、3至6元杂环烷基或C1-3烷基；
其中I为O、S或CH，J为N或CH，R15为氢、C3-6环烷基、3至6元杂环烷基或C1-3烷基，且R19为氢、C3-6环烷基、3至6元杂环烷基或芳基；
OR16，其中R16为芳基；
其中X1为N或CH，且R20为任选地被取代的芳基；且
COR17，其中R17为芳基；
且
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基。
在实施方案中，R1为任选地被取代的C1-3烷基；和/或
R3为氢、任选地被取代的芳基、任选地被取代的杂芳基、任选地被取代的环烷基、任选地被取代的杂环烷基、羰基或醚。
在实施方案中，R1为任选地被OR7或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，且其中R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基；和/或
R3选自由氢、 组成的组。
在实施方案中，R3为
在实施方案中，R1为未被取代的C1-3烷基，R2为氢，R4和R5各自为氢，且R6为OH。
在实施方案中，每个R1和R2为未被取代的C1-3烷基，R4和R5各自为氢，且R6为OH。
在实施方案中，R2为未被取代的C1-3烷基，R3为氢，R4和R5各自为氢，且R6为OH。
在实施方案中，化合物具有根据式(III)的结构
或其药学上可接受的盐，其中
每个A独立地为N或CR9；
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基；
R8和R9独立地为氢、卤素、OR10或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；且
R10为C1-3烷基或芳基。
在实施方案中，化合物具有根据式(IV)的结构
或其药学上可接受的盐，其中
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基；
R8和R9独立地为氢、卤素、OR10或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；且
R10为C1-3烷基或芳基。
在实施方案中，化合物具有根据式(V)的结构
或其药学上可接受的盐，其中：
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基；
R8和每个R9独立地为氢、卤素、OR10或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；且
R10为C1-3烷基或芳基。
在实施方案中，化合物具有根据式(VI)的结构
或其药学上可接受的盐，其中
B为N或CR11；
D为N、NH或CR11；
E为N、CR11或CHR12；
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基；
R11和R12独立地为氢或C1-3烷基；且
其中虚线圆表示存在或不存在共轭体系。
在实施方案中，化合物具有根据式(VII)的结构
或其药学上可接受的盐。
在实施方案中，化合物具有根据式(VIII)的结构
或其药学上可接受的盐，其中：
B为N或CR11；
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基；且
R12为氢或C1-3烷基。
在实施方案中，化合物具有根据式(IX)的结构
或其药学上可接受的盐，其中：
每个G独立地为N、NH、NR13或CR14；
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，且其中R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R13为环丙基、任选地被一个或多个卤素取代的芳基、任选地被一个或多个任选地被取代的C1-3烷基取代的芳基、杂芳基、任选地被叔丁氧基羰基取代的杂环烷基、任选地被芳基(其任选地被一个或多个卤素取代)取代的C1-4烷基；且
R14为氢、卤素、环丙基或C1-3烷基。
在实施方案中，化合物具有根据式(X)的结构
或其药学上可接受的盐，其中：
每个G独立地为N、NR13或CR14；
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，且其中R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R13为环丙基、任选地被一个或多个卤素取代的芳基、任选地被一个或多个任选地被取代的C1-3烷基取代的芳基、杂芳基、任选地被叔丁氧基羰基取代的杂环烷基、任选地被芳基(其任选地被一个或多个卤素取代)取代的C1-4烷基；且
R14为氢、卤素、环丙基或C1-3烷基。
在实施方案中，化合物具有根据式(XI)的结构
或其药学上可接受的盐，其中
每个G独立地为N或NR13；
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，且其中R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R13为环丙基、杂芳基、任选地被一个或多个卤素取代的芳基、任选地被一个或多个任选地被取代的C1-3烷基取代的芳基、任选地被叔丁氧基羰基取代的杂环烷基、任选地被芳基(其任选地被一个或多个卤素取代)取代的C1-4烷基；且
R14为氢、卤素、环丙基或C1-3烷基。
在实施方案中，化合物具有根据式(XIIa)或式(XIIb)的结构
或其药学上可接受的盐，其中：
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基；
R13为环丙基、杂芳基、任选地被一个或多个卤素取代的芳基、任选地被一个或多个任选地被取代的C1-3烷基取代的芳基、任选地被叔丁氧基羰基取代的杂环烷基、任选地被芳基(其任选地被一个或多个卤素取代)取代的C1-4烷基；且
R14为氢、卤素、环丙基或C1-3烷基。
在实施方案中，化合物具有根据式(XIII)的结构
或其药学上可接受的盐，其中：
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；且
R13为芳基或杂芳基。
在实施方案中，化合物具有根据式(XIV)的结构
或其药学上可接受的盐，其中：
I为O、S或CH；
J为N或CH；
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，且其中R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R15为氢或C1-3烷基；且
R19为氢或芳基。
在实施方案中，化合物具有根据式(XV)的结构
或其药学上可接受的盐，其中：
I为O、S或CH；
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基；且
R15为氢或C1-3烷基。
R19为氢或芳基。
在实施方案中，化合物具有根据式(XVI)的结构
或其药学上可接受的盐，其中
X为O、S或SO2；
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基；
R8和R9独立地为氢、卤素、OR10或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；且
R10为C1-3烷基或芳基。
在实施方案中，化合物具有根据式(XVII)的结构
或其药学上可接受的盐，其中
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基；
R8和R9独立地为氢、卤素、OR10或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；且
R10为C1-3烷基或芳基。
在实施方案中，化合物具有根据式(XVIII)的结构
或其药学上可接受的盐，其中
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基；
R8和R9独立地为氢、卤素、OR10或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；且
R10为C1-3烷基或芳基。
在实施方案中，化合物具有根据式(XIX)的结构
或其药学上可接受的盐，其中：
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基；且
R13为环丙基、任选地被一个或多个卤素取代的芳基、任选地被一个或多个任选地被取代的C1-3烷基取代的芳基、杂芳基、任选地被叔丁氧基羰基取代的杂环烷基、任选地被芳基(其任选地被一个或多个卤素取代)取代的C1-4烷基。
在实施方案中，化合物具有根据式(XX)的结构
或其药学上可接受的盐，其中：
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基；且
R13为环丙基、任选地被一个或多个卤素取代的芳基、任选地被一个或多个任选地被取代的C1-3烷基取代的芳基、杂芳基、任选地被叔丁氧基羰基取代的杂环烷基、任选地被芳基(其任选地被一个或多个卤素取代)取代的C1-4烷基。
在实施方案中，化合物具有根据式(XXI)的结构
或其药学上可接受的盐，其中：
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；且
R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基。
在实施方案中，化合物具有根据式(XXII)的结构
或其药学上可接受的盐，其中：
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基；且
R20为任选地被取代的芳基。
在实施方案中，化合物具有根据式(XXIII)的结构
或其药学上可接受的盐，其中：
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基；且
R20为任选地被取代的芳基。
在实施方案中，R3不为氢。
在实施方案中，R3为未被取代的苯基、氟苯基、氯苯基、二氟苯基、二氯苯基或三氟甲基苯基。
在实施方案中，R3为OR16、SR16、SO2R16、CH2R16、CH2CH2R16、C≡CR16或C≡CCH2OR16，且其中R16为芳基。在实施方案中，R16为苯基。
在实施方案中，R3为吡咯基、四唑基、三唑基或吡唑基，任选地被芳基或环烷基取代。
在实施方案中，R3为哌啶基或哌嗪基，任选地被芳基取代。
在实施方案中，R3未被取代或被环丙基、未被取代的苯基、氟苯基、氯苯基、二氟苯基、二氯苯基或三氟甲基苯基取代。
在实施方案中，R3为COR17，且其中R17为芳基。在实施方案中，R17为苯基。
在实施方案中，R1为环丙基或被取代的C1-3烷基。
在实施方案中，R1为环丙基或二氟甲基。
在实施方案中，R1为C1-3烷基。在实施方案中，R1为CH2CH3。在实施方案中，R1为CH3。在实施方案中，R1为被芳基(其被卤素取代)取代的C1-3烷基。在实施方案中，R1为在实施方案中，R1为被OBn取代的C1-3烷基。在实施方案中，R1为CH2CH2 OBn。
在实施方案中，R2为氢。在实施方案中，R2为C1-3烷基。在实施方案中，R2为CH3。
在实施方案中，R4为氢且R5为氢。在实施方案中，R4为氢且R5为C1-3烷基。在实施方案中，R5为CH3。在实施方案中，R4为C1-3烷基且R5为C1-3烷基。在实施方案中，R4为CH3且R5为CH3。
在实施方案中，R4和R5与其连接的碳一起形成环烷基或杂环烷基。在实施方案中，环烷基为环丙基。在实施方案中，环烷基为环丁基。在实施方案中，杂环烷基为
在实施方案中，化合物为化合物1至50中的任一种：
或其药学上可接受的盐。
在实施方案中，化合物为化合物51至70中的任一种，
或其药学上可接受的盐。
在实施方案中，在式(I)至(XXIII)的化合物(例如化合物1至70中的任一种)中，至少一个氢原子被氘原子替代。
在另一方面，本发明的特征在于一种药物组合物，其包括本文所描述的任何化合物(例如，式(I)至(XXIII)的化合物，例如化合物1至70中的任一种)或其药学上可接受的盐，和药学上可接受的赋形剂。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗由PHD活性介导的疾病的方法，其包括向受试者施用本文所描述的任何化合物(例如，式(I)至(XXIII)的化合物，例如化合物1至70中的任一种)或其药学上可接受的盐。
在实施方案中，由PHD活性介导的疾病是缺血性再灌注损伤。(例如，中风、心肌梗塞或急性肾损伤)。
在实施方案中，由PHD活性介导的疾病是发炎性肠病(例如，溃疡性结肠炎或克罗恩氏病(Crohn's disease))。
在实施方案中，由PHD活性介导的疾病是癌症(例如，结肠直肠癌)。
在实施方案中，由PHD活性介导的疾病是肝病。
在实施方案中，由PHD活性介导的疾病是动脉粥样硬化。
在实施方案中，由PHD活性介导的疾病是心血管疾病。
在实施方案中，由PHD活性介导的疾病是眼睛的疾病或病状(例如，放射性视网膜病变、早产儿视网膜病变、糖尿病性视网膜病变、年龄相关性黄斑变性和眼部缺血)。
在实施方案中，由PHD活性介导的疾病是贫血(例如，与慢性肾病相关的贫血)。
在实施方案中，由PHD活性介导的疾病是慢性肾病。
在实施方案中，由PHD活性介导的疾病与高氧相关。
在实施方案中，由PHD活性介导的疾病是早产儿视网膜病。
在实施方案中，由PHD活性介导的疾病是支气管肺发育不良(bronchopulmonarydysplasia；BPD)。
在实施方案中，由PHD活性介导的疾病是缺血性心脏病、瓣膜性心脏病、充血性心力衰竭、急性肺损伤、肺纤维化、肺动脉高压、慢性阻塞性肺病(COPD)、急性肝衰竭、肝纤维化和肝硬化。
在实施方案中，由PHD活性介导的疾病是呼吸道疾病、肺病、呼吸道病毒感染或肺部病毒感染。
在实施方案中，呼吸道疾病选自呼吸道感染、急性呼吸窘迫综合征、肺部炎症、肺炎和急性肺损伤。
在实施方案中，肺部疾病是急性肺损伤(ALI)、支气管炎、肺炎、肺纤维化、哮喘或急性呼吸窘迫综合征(ARDS)。
在实施方案中，由PHD活性介导的疾病是一个或多个器官的损伤和/或衰竭(例如，急性器官损伤或器官衰竭)。
附图说明
图1是显示PHD酶(PHD1、PHD2和PHD3)的TR-FRET测定原理的示范性示意图。在存在2-氧代戊二酸盐和O2的情况下，PHD酶将生物素标记的HIF-1α肽的脯氨酸564羟基化，从而产生生物素标记的HIF-1α-羟基脯氨酸、琥珀酸和CO2。与His标记的VHL蛋白/EloB/EloC复合物(His-VBC)结合的供体荧光团复合物(单克隆抗体抗6His-铽(Tb)-穴合物金(anti-6His-Terbium(Tb)-cryptate Gold))和与HIF-1α-羟基脯氨酸结合的受体荧光团(SA-D2复合物)所产生的接近产生可以检测和量化的荧光共振能量转移信号。
具体实施方式
定义
为了使本发明更易于理解，下文首先定义某些术语。以下术语和其它术语的附加定义贯穿说明书中阐述。本文所引用的用于描述本发明的背景和提供关于其实践的额外细节的出版物和其它参考材料以引用的方式并入本文中。
动物：如本文所用，术语“动物”是指动物王国的任何成员。在一些实施方案中，“动物”是指在任何发育阶段的人。在一些实施方案中，“动物”是指在任何发育阶段的非人动物。在某些实施方案中，非人类动物是哺乳动物(例如，啮齿动物、小鼠、大鼠、兔、猴、犬、猫、绵羊、牛、灵长类动物和/或猪)。在一些实施方案中，动物包括但不限于哺乳动物、鸟类、爬行动物、两栖动物、鱼类、昆虫和/或蠕虫。在一些实施方案中，动物可以是转基因动物、遗传工程动物和/或克隆。
大约(approximately)或约(about)：如本文所用，应用于一个或多个感兴趣值的术语“大约”或“约”是指类似于所述参考值的值。在某些实施方案中，除非另外说明或另外从上下文中显而易见(除了这个值将超出可能值的100％的情况)，否则术语“大约”或“约”是指在任一方向(大于或小于)处于所述参考值的25％、20％、19％、18％、17％、16％、15％、14％、13％、12％、11％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％或更小值内的值范围。
如在说明书和所附权利要求中所使用，除非上下文另外明确规定，否则单数形式“一(a)”、“一(an)”和“所述(the)”可以包括复数个指示物。因而，例如，提及“一组合物”包括两种或更多种这类组合物的混合物。
贯穿本说明书的描述和权利要求，词语“包括(comprise)”以及所述词语的其它形式，如“包括(comprising和comprises)”意指“包括但不限于”，并且不旨在排除例如其它添加剂、组分、整数或步骤。
“任选的”或“任选地”意指随后描述的事件或情况可能会或可能不会发生，并且所述描述包括所述事件或情况发生的实例和所述事件或情况未发生的实例。
改善、增加或减少：如本文所使用的，术语“改善”、“增加”或“减少”或语法等效物表示相对于基线测量值的值，所述基线测量值例如在开始本文所述的治疗之前在同一个体中的测量值，或在不存在本文所述的治疗的情况下在对照受试者(或多个对照受试者)中的测量值。“对照受试者”是患有与所治受试者相同形式的疾病，其年龄与所治受试者约相同的受试者。
活体外：如本文所用，术语“活体外”是指在人工环境中，例如，在试管或反应器中、在细胞培养中等，而不是在多细胞生物体内发生的事件。
活体内：如本文所用，术语“活体内”是指在多细胞生物体，例如人类和非人类动物体内发生的事件。在基于细胞的系统的上下文中，所述术语可用于指在活细胞内发生的事件(与例如活体外系统相反)。
患者：如本文所用，术语“患者”或“受试者”是指可以向其施用所提供的组合物的任何生物体，例如，用于实验、诊断、预防、美容和/或治疗目的。典型患者包括动物(例如哺乳动物，例如小鼠、大鼠、兔、非人类灵长类动物和/或人类)。在一些实施方案中，患者是人类。人类包括出生前和出生后形式。
药学上可接受的：如本文所用，术语“药学上可接受的”是指在合理的医学判断的范围内适合与人类和动物的组织接触而没有过度毒性、刺激、过敏反应或其它问题或并发症的物质，与合理的益处/风险比相称。
药学上可接受的盐：药学上可接受的盐是本领域众所周知的。举例来说，S.M.Berge等人在药物科学杂志(J.Pharmaceutical Sciences)(1977)66:1-19中详细描述了药学上可接受的盐。本发明的化合物的药学上可接受的盐包括衍生自合适的无机和有机酸和碱的盐。药学上可接受的无毒的酸加成盐的实例是用无机酸，例如盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸和高氯酸或用有机酸，例如乙酸、草酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、琥珀酸或丙二酸形成或通过使用本领域中所使用的如离子交换的其它方法形成的具有氨基的盐。其它药学上可接受的盐包括己二酸盐、海藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、葡糖酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙磺酸盐、乳糖酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、十二烷基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸钠、十一烷酸盐、戊酸盐等。衍生自适当碱的盐包括碱金属盐、碱土金属盐、铵盐以及N+(C1-4烷基)4盐。代表性的碱金属盐或碱土金属盐包括钠盐、锂盐、钾盐、钙盐、镁盐等。在适当时，其它药学上可接受的盐包括无毒铵。季铵和使用抗衡离子形成的胺阳离子，所述抗衡离子例如卤离子、氢氧根、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、磺酸根和芳基磺酸根。其它药学上可接受的盐包括使用适当的亲电子剂(例如，烷基卤)使胺季铵化以形成季铵化烷基化氨基盐所形成的盐。
受试者：如本文所用，术语“受试者”是指人类或任何非人类动物(例如，小鼠、大鼠、兔、狗、猫、牛、猪、绵羊、马或灵长类动物)。人类包括出生前和出生后形式。在许多实施方案中，受试者是人类。受试者可以是患者，其是指为了诊断或治疗疾病而呈现给医疗提供者的人类。术语“受试者”在本文中与“个体”或“患者”可互换使用。受试者可以罹患疾病或病症或易患疾病或病症，但可以或可以不显示所述疾病或病症的症状。
基本上：如本文所用，术语“基本上”是指表现出所关注特性或性质的总或接近总范围或程度的定性条件。生物学领域的普通技术人员将理解，生物和化学现象很少会完成和/或开始完成或实现或避免绝对结果。因此，术语“基本上”在本文中用于捕获许多生物和化学现象中固有的潜在缺乏完整性。
治疗有效量：如本文所用，术语治疗剂的“治疗有效量”意指当施用于患有或易患疾病、病症和/或病状的受试者时足以治疗、诊断、预防和/或延迟疾病、病症和/或病状的症状的发作的量。本领域的普通技术人员应了解，治疗有效量通常经由包含至少一个单位剂量的给药方案施用。
治疗：如本文所用，术语“治疗(treat)”、“治疗(treatment)”或“治疗(treating)”是指用于部分或完全缓解、改善、减轻、抑制、预防、延迟发作、降低特定疾病、病症和/或病状的一种或多种症状或特征的严重性和/或降低其发生率的任何方法。治疗可以施用于没有表现出疾病体征和/或仅表现出疾病早期体征的受试者，以降低发展与疾病相关的病理的风险。
脂肪族：如本文所用，术语脂肪族是指C1-C40烃，并且包括饱和和不饱和烃。脂肪族可以是直链的、支链的或环状的。举例来说，C1-C20脂肪族可以包括C1-C20烷基(例如，直链或支链C1-C20饱和烷基)、C2-C20烯基(例如，直链或支链C4-C20二烯基、直链或支链C6-C20三烯基等)和C2-C20炔基(例如，直链或支链C2-C20炔基)。C1-C20脂肪族可以包括C3-C20环状脂肪族(例如，C3-C20环烷基、C4-C20环烯基或C8-C20环炔基)。在某些实施方案中，脂肪族可包括一个或多个环状脂肪族和/或一个或多个杂原子，例如氧、氮或硫，并且可以任选地被一个或多个取代基，例如烷基、卤基、烷氧基、羟基、氨基、芳基、醚、酯或酰胺取代。脂肪族基团是未被取代或被一个或多个如本文所述的取代基取代。举例来说，脂肪族可以被以下中的一个或多个(例如，1、2、3、4、5或6个独立选择的取代基)取代：卤素、-COR'、-CO2H、-CO2R'、-CN、-OH、-OR'、-OCOR'、-OCO2R'、-NH2、-NHR'、-N(R')2、-SR'或-SO2R'，其中R'的每个实例独立地是C1-C20脂肪族(例如，C1-C20烷基、C1-C15烷基、C1-C10烷基或C1-C3烷基)。在一些实施方案中，R'独立地是未被取代的烷基(例如，未被取代的C1-C20烷基、C1-C15烷基、C1-C10烷基或C1-C3烷基)。在一些实施方案中，R'独立地是未被取代的C1-C3烷基。在一些实施方案中，脂肪族未被取代。在一些实施方案中，脂肪族不包括任何杂原子。
烷基：如本文所用，术语“烷基”意指非环状直链及分支链烃基，例如，“C1-C20烷基”是指具有1-20个碳的烷基。烷基可以是直链或分支链的。烷基的实例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、叔戊基己基、异己基等。术语“低碳数烷基”意谓具有1至6个碳原子的烷基直链或分支链烷基。鉴于本公开的权益，其它烷基对于所属领域的技术人员来说将是显而易见的。烷基可以未被取代的或被一或多个如本文所述的取代基取代。举例来说，烷基可以被以下中的一个或多个(例如，1、2、3、4、5或6个独立选择的取代基)取代：卤素、-COR'、-CO2H、-CO2R'、-CN、-OH、-OR'、-OCOR'、-OCO2R'、-NH2、-NHR'、-N(R')2、-SR'或-SO2R'，其中R'的每个实例独立地是C1-C20脂肪族(例如，C1-C20烷基、C1-C15烷基、C1-C10烷基或C1-C3烷基)。在一些实施方案中，R'独立地是未被取代的烷基(例如，未被取代的C1-C20烷基、C1-C15烷基、C1-C10烷基或C1-C3烷基)。在一些实施方案中，R'独立地是未被取代的C1-C3烷基。在一些实施方案中，烷基被取代(例如，被1、2、3、4、5或6个如本文所描述的取代基取代)。在一些实施方案中，烷基被-OH基团取代并且在本文中也可以称为“羟烷基”，其中前缀表示-OH基团并且“烷基”如本文所描述。在一些实施方案中，烷基被-OR'基团取代并且在本文中也可以称为“烷氧基”。
将后缀“-ene”附加到基团表示所述基团是二价部分，例如，亚芳基是芳基的二价部分，并且亚杂芳基是杂芳基的二价部分。
亚烷基：如本文所用，术语“亚烷基”表示饱和的二价直链或支链烃基，并且以亚甲基、亚乙基、亚异丙基等为例。同样，如本文所用，术语“亚烯基”表示具有一个或多个不饱和碳-碳双键的不饱和二价直链或支链烃基，所述不饱和碳-碳双键可以存在于沿着链的任何稳定点，且术语“亚炔基”在本文中表示具有一个或多个不饱和碳-碳三键的不饱和二价直链或支链烃基，所述不饱和碳-碳三键可以存在于沿着链的任何稳定点。在某些实施方案中，亚烷基、亚烯基或亚炔基可以包括一个或多个环状脂肪族和/或一个或多个杂原子，例如氧、氮或硫，并且可以任选地被一个或多个取代基，例如烷基、卤基、烷氧基、羟基、氨基、芳基、醚、酯或酰胺取代。举例来说，亚烷基、亚烯基或亚炔基可以被以下中的一个或多个(例如，1、2、3、4、5或6个独立选择的取代基)取代：卤素、-COR'、-CO2H、-CO2R'、-CN、-OH、-OR'、-OCOR'、-OCO2R'、-NH2、-NHR'、-N(R')2、-SR'或-SO2R'，其中R'的每个实例独立地是C1-C20脂肪族(例如，C1-C20烷基、C1-C15烷基、C1-C10烷基或C1-C3烷基)。在一些实施方案中，R'独立地是未被取代的烷基(例如，未被取代的C1-C20烷基、C1-C15烷基、C1-C10烷基或C1-C3烷基)。在一些实施方案中，R'独立地是未被取代的C1-C3烷基。在某些实施方案中，亚烷基、亚烯基或亚炔基未被取代。在某些实施方案中，亚烷基、亚烯基或亚炔基不包括任何杂原子。
炔基：如本文所用，“烯基”意指具有一个或多个不饱和碳-碳双键的任何直链或支链烃链，所述不饱和碳-碳双键可存在于沿着链的任何稳定点，例如“C2-C20烯基”是指具有2-20个碳的烯基。举例来说，烯基包括丙-2-烯基、丁-2-烯基、丁-3-烯基、2-甲基丙-2-烯基、己-2-烯基、己-5-烯基、2,3-二甲基丁-2-烯基等。在一些实施方案中，烯基包括1、2或3个碳-碳双键。在一些实施方案中，烯基包括单个碳-碳双键。在一些实施方案中，多个双键(例如，2个或3个)是共轭的。烯基可未被取代或被一个或多个如本文所述的取代基取代。举例来说，烯基可以被以下中的一个或多个(例如，1、2、3、4、5或6个独立选择的取代基)取代：卤素、-COR'、-CO2H、-CO2R'、-CN、-OH、-OR'、-OCOR'、-OCO2R'、-NH2、-NHR'、-N(R')2、-SR'或-SO2R'，其中R'的每个实例独立地是C1-C20脂肪族(例如，C1-C20烷基、C1-C15烷基、C1-C10烷基或C1-C3烷基)。在一些实施方案中，R'独立地是未被取代的烷基(例如，未被取代的C1-C20烷基、C1-C15烷基、C1-C10烷基或C1-C3烷基)。在一些实施方案中，R'独立地是未被取代的C1-C3烷基。在一些实施方案中，烯基未被取代。在一些实施方案中，烯基被取代(例如，被1、2、3、4、5或6个如本文所述的取代基取代)。在一些实施方案中，烯基被-OH基团取代并且在本文中也可以称为“羟烯基”，其中前缀表示-OH基团并且“烯基”如本文所描述。
炔基：如本文所用，“炔基”意谓具有一个或多个碳-碳三键的直链或分支链构型的任何烃链，所述碳-碳三键存在于沿着链的任何稳定点，例如，“C2-C20炔基”是指具有2-20个碳炔基。炔基的例子包括丙-2-炔基、丁-2-炔基、丁-3-炔基、戊-2-炔基、3-甲基戊-4-炔基、己-2-炔基、己-5-炔基等。在一些实施方案中，炔基包括一个碳-碳三键。炔基可以未被取代或被一个或多个如本文所述的取代基取代。举例来说，炔基可被以下中的一个或多个(例如，1、2、3、4、5或6个独立选择的取代基)取代：卤素、-COR'、-CO2H、-CO2R'、-CN、-OH、-OR'、-OCOR'、-OCO2R'、-NH2、-NHR'、-N(R')2、-SR'或-SO2R'，其中R'的每个实例独立地为C1-C20脂肪族(例如，C1-C20烷基、C1-C15烷基、C1-C10烷基或C1-C3烷基)。在一些实施方案中，R'独立地是未被取代的烷基(例如，未被取代的C1-C20烷基、C1-C15烷基、C1-C10烷基或C1-C3烷基)。在一些实施方案中，R'独立地是未被取代的C1-C3烷基。在一些实施方案中，炔基未被取代。在一些实施方案中，炔基被取代(例如，被1、2、3、4、5或6个如本文所述的取代基取代)。
芳基：单独使用或作为较大部分如“芳烷基”的一部分使用的术语“芳基”是指具有总共六至十四个环成员的单环、双环或三环碳环环系统，其中所述环系统具有与分子的其余部分的单个附着点，系统中的至少一个环是芳族的，并且其中系统中的每个环含有4至7个环成员。在一些实施方案中，芳基具有6个环碳原子(“C6芳基”例如，苯基)。在一些实施方案中，芳基具有10个环碳原子(“C10芳基”例如，萘基，例如1-萘基和2-萘基)。在一些实施方案中，芳基具有14个环碳原子(“C14芳基”例如，蒽基)。“芳基”还包括环系统，其中如上文所定义，所述芳基环与一个或多个碳环基或杂环基融合，其中所述基团或附着点在所述芳基环上，并且在此类实例中，碳原子的数目继续标示所述芳基环系统中的碳原子的数目。示范性芳基包括苯基、萘基和蒽。
亚芳基：如本文所用，术语“亚芳基”是指二价的芳基(即，具有与分子的两个附着点)。示例性亚芳基包括亚苯基(例如，未被取代的亚苯基或取代的亚苯基)。
卤素或卤基：如本文所使用，术语“卤素”或“卤基”意指氟、氯、溴或碘。
酰胺：术语“酰胺”或“酰胺基”是指具有式-C(O)N(R')2、-C(O)N(R')-、-NR'C(O)R'、-NR'C(O)N(R')2-或-NR'C(O)-，其中每个R'独立地选自氢、烷基、烯基、炔基、杂烷基(通过链碳键结)、环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基(通过环碳键结)、杂芳基烷基或杂环烷基(通过环碳键结)，除非另外在说明书中陈述，否则每个部分本身可以任选地如本文所述被取代，或两个R'可与氮原子合并以形成3元、4元、5元、6元或7元环。
胺基：术语“氨基”或“胺”是指-N(R')2基团，其中每个R'独立地选自氢、烷基、烯基、炔基、杂烷基(通过链碳键结)、环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基(通过环碳键结)、杂芳基烷基、杂环烷基(通过环碳键结)、磺酰基、酰胺或羰基，除非另外在说明书中陈述，否则每个部分本身可以任选地如本文所述被取代，或两个R'可与氮原子合并以形成3元、4元、5元、6元或7元环。在一些实施方案中，氨基是-NHR'，其中R'是芳基(“芳基氨基”)、杂芳基(“杂芳基氨基”)、酰胺或烷基(“烷基氨基”)。
醚：术语“醚”是指R'-O-R'基团，其中每个R'独立地选自烷基、杂烷基(通过链碳键结)、芳基烷基、杂芳基烷基(通过环碳键结)、环烷基、芳基、杂芳基(通过环碳键结),除非另外在说明书中陈述，否则每个部分本身可以任选地如本文所述被取代。
酯：术语“酯”是指R'-C(＝O)O-R基团，其中每个R'独立地选自烷基、杂烷基(通过链碳键结)、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环烷基(通过环碳键结)、环烷基、芳基、杂芳基(通过环碳键结),除非另外在说明书中陈述，否则每个部分本身可以任选地如本文所述被取代。
磺酰基：术语“磺酰基”是指-S(＝O)2R'或-S(＝O)2-基团，其中R'选自氢、烷基、烯基、炔基、杂烷基(通过链碳键结)、氨基、环烷基、芳基、芳烷基、杂芳基(通过环碳键结)、杂芳基烷基、杂环烷基(通过环碳键结)，除非另外在说明书中陈述，否则每个部分本身可以任选地如本文所述被取代。举例来说，在一个实施方案中，磺酰基为-SO2R'，其中R'为被羰基取代的烷基。
亚磺酰基：术语“亚磺酰基”是指具有式-S(＝O)R'、-S(＝O)-或-S(＝O)(＝NR')-之化学部分，其中R'选自氢、烷基、烯基、炔基、杂烷基(通过链碳键结)、环烷基、芳基、芳烷基、杂芳基(通过环碳键结)、杂芳基烷基、杂环烷基(通过环碳键结)，除非另外在说明书中陈述，否则每个部分本身可以任选地如本文所述被取代。
羰基：术语“羰基”是指-C(＝O)R'或-C(＝O)-基团，其中R'选自氢、烷基、烯基、炔基、杂烷基(通过链碳键结)、环烷基、芳基、芳烷基、氨基、羟基、杂芳基(通过环碳键结)、杂芳基烷基、杂环烷基(通过环碳键结)，除非另外在说明书中陈述，否则每个部分本身可以任选地如本文所述被取代。
磷酰基：术语“磷酰基”是指-P(＝O)(R')2或-P(＝O)(R')-基团，其中R'选自氢、烷基、烯基、炔基、杂烷基(通过链碳或通过杂原子键结)、环烷基、芳基、芳烷基、杂芳基(通过环碳键结)、杂芳基烷基或杂环烷基(通过环碳键结)，除非另外在说明书中陈述，否则每个部分本身可以任选地如本文所述，或两个R'可以与氮原子合并以形成3元、4元、5元、6元或7元环。
杂烷基：术语“杂烷基”意指除了1、2、3或4个独立地选自由以下组成的组的杂原子之外：N、O、S和P，还具有从1至14个碳原子的支链或非支链烷基、烯基或炔基。杂烷基包含叔胺、仲胺、醚、硫醚、酰胺、硫代酰胺、氨基甲酸酯、硫代氨基甲酸酯、腙、亚胺、磷酸二酯、氨基磷酸酯、磺酰胺和二硫化物。杂烷基可以任选地包括单环、双环或三环，其中每个环理想地具有三至六个成员。杂烷基的实例包括聚醚，例如甲氧基甲基和乙氧基乙基。
亚杂烷基：如本文所用，术语“亚杂烷基”表示如本文所述的杂烷基的二价形式。
杂芳基：如本文所用，术语“杂芳基”是指具有总共六至十四个环成员的单环、双环或三环碳环系统，其中所述环系统具有与分子的其余部分的单个连接点，其中系统中的至少一个环是芳族，其中系统中的每个环含有4至7个环成员，且其中至少一个环原子为杂原子，例如但不限于氮和氧。
杂环烷基：如本文所用，术语“杂环烷基”是非芳香环，其中至少一个原子为杂原子，例如但不限于氮、氧、硫或磷，且剩余原子是碳。杂环烷基可以被取代或未被取代。
氘：术语“氘”(“D”或“2H”)也称为重氢。氘是氢的同位素，其中原子核由一个质子和一个中子组成，是普通氢原子核(一个质子)质量的两倍。
同位素：术语“同位素”是指特定化学元素的变体，其中子数不同，且因此核子数不同。给定元素的所有同位素在每个原子中具有相同数量的质子但不同数量的中子。
术语“被取代”意指特定基团或部分带有一个或多个取代基。术语“未被取代”意指指定基团不带有取代基。术语“任选地被取代”意指指定基团未被取代或被一个或多个取代基取代。在使用术语“被取代”来描述结构系统的情况下，取代意指在系统上的任何化合价允许的位置处发生，例如取代产生稳定的化合物(例如，不会自发经历转变的化合物，如通过重排、环化、消除或其它反应)。在指定部分或基团未明确注明为任选地被取代或被任何指定取代基取代的情况下，应理解此类部分或基团旨在未被取代。
当环系统(例如，环烷基、杂环基、芳基或杂芳基)被多个在明确定义范围内变化的取代基取代时，应理解取代基的总数不超过现有条件下的正常可用化合价。还应理解，假定存在氢原子以填充环系统的剩余化合价。被取代的基团仅涵盖那些产生稳定的或化学上可行的化合物的取代基和变量的组合。稳定的化合物或化学上可行的化合物是具有除其它因素外，足以允许其制备和检测的稳定性的一种化合物。
多种取代基是众所周知的，并且用于取代基的形成和引入到多种母体基团的方法也是众所周知的。代表性取代基包括但不限于烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、芳烷基、烷芳基、芳基、芳基烷氧基、芳氨基、杂芳基氨基、杂芳基、杂芳基烷氧基、杂环烷基、羟烷基、氨基烷基、卤烷基、硫代烷基、烷基硫烷基、羧基烷基、咪唑基烷基、吲哚基烷基、单卤烷基、二卤烷基和三卤烷基、单卤烷氧基、二卤烷氧基和三卤烷氧基、氨基、烷氨基、二烷基氨基、酰胺、氰基、烷氧基、羟基、磺酰胺、卤基(例如，-Cl及-Br)、硝基、羟亚胺基、-COOR50、-COR50、-SO0-2R50、-SO2NR50R51、NR52SO2R50、═C(R50R51)、═N-OR50、═N-CN、═C(卤基)2、═S、═O、-CON(R50R51)、-OCOR50、-OCON(R50R51)、-N(R52)CO(R50)、-N(R52)COOR50和-N(R52)CON(R50(R51)，其中R50、R51和R52可独立地选自以下：氢原子和分支链或直链C1-6烷基、C3-6环烷基、C4-6杂环烷基、杂芳基和芳基，具有或不具有取代基。在允许的情况下，R50和R51可以连接在一起形成碳环或杂环系统。
在优选的实施方案中，取代基选自卤素、-COR'、-CO2H、-CO2R'、-CN、-OH、-OR'、-OCOR'、-OCO2R'、-NH2、-NHR'、-N(R')2、-SR'和-SO2R'，其中R'的每个实例独立地是C1-C20脂肪族(例如，C1-C20烷基、C1-C15烷基、C1-C10烷基或C1-C3烷基)。在其某些实施方案中，R'独立地是未被取代的烷基(例如，未被取代的C1-C20烷基、C1-C15烷基、C1-C10烷基或C1-C3烷基)。优选地，R'独立地是未被取代的C1-C3烷基。
本文给出的任何式意欲表示具有结构式所描绘的结构以及某些变型或形式的化合物。具体地，本文给出的任何式的化合物可以具有非对称中心并且因此以不同的对映异构体形式存在。通式化合物的所有光学异构体和立体异构体以及其混合物都被认为在所述式的范围内。因此，本文给出的任何式意欲表示外消旋体、一种或多种对映异构体形式、一种或多种非对映异构体形式、一种或多种阻转异构体形式和其混合物。此外，某些结构可以作为几何异构体(即，顺式和反式异构体)、作为互变异构体或作为阻转异构体存在。另外，本文给出的任何式意欲包括此类化合物的水合物、溶剂化物和多晶型物以及其混合物。
本发明的化合物
本文公开作为PHD的强效抑制剂的化合物。在一些实施方案中，本发明的化合物针对PHD1、PHD2和PHD3中的任何一种具有小于100μM的酶促半最大抑制浓度(IC50)值。在一些实施方案中，本发明的化合物针对PHD1、PHD2和PHD3中的任何一种具有小于50μM的IC50值。在一些实施方案中，本发明的化合物针对PHD1、PHD2和PHD3中的任何一种具有小于25μM的IC50值。在一些实施方案中，本发明的化合物针对PHD1、PHD2和PHD3中的任何一种具有小于20μM的IC50值。在一些实施方案中，本发明的化合物针对PHD1、PHD2和PHD3中的任何一种具有小于15μM的IC50值。在一些实施方案中，本发明的化合物针对PHD1、PHD2和PHD3中的任何一种具有小于10μM的IC50值。在一些实施方案中，本发明的化合物针对PHD1、PHD2和PHD3中的任何一种具有小于5μM的IC50值。在一些实施方案中，本发明的化合物针对PHD1、PHD2和PHD3中的任何一种具有小于1μM的IC50值。在一些实施方案中，本发明的化合物针对PHD1、PHD2和PHD3中的任何一种具有约3nM至约5nM的IC50值。在一些实施方案中，本发明的化合物针对PHD1、PHD2和PHD3中的任何一种具有约5nM至约10nM的IC50值。在一些实施方案中，本发明的化合物针对PHD1、PHD2和PHD3中的任何一种具有约10nM至约20nM的IC50值。在一些实施方案中，本发明的化合物针对PHD1、PHD2和PHD3中的任何一种具有约20nM至约50nM的IC50值。在一些实施方案中，本发明的化合物针对PHD1、PHD2和PHD3中的任何一种具有约50nM至约100nM的IC50值。在一些实施方案中，本发明的化合物针对PHD1、PHD2和PHD3中的任何一种具有约100nM至约200nM的IC50值。在一些实施方案中，本发明的化合物针对PHD1、PHD2和PHD3中的任何一种具有约200nM至约500nM的IC50值。在一些实施方案中，本发明的化合物针对PHD1、PHD2和PHD3中的任何一种具有约500nM至约1000nM的IC50值。
来自所述类别的代表性实例显示了在体外针对PHD1、PHD2和PHD3的抑制活性。
本文描述了示范性化合物。
式(I)至(XXIII)的化合物
确切地说，本文所述的PHD抑制剂的特征在于3-羟基吡啶甲酰胺部分申请人出人意料地发现R1处的3-羟基吡啶甲酰胺部分(R1不为氢)的取代可以显著增加抑制剂的效力。此类取代的实例包括但不限于被取代或未被取代的烷基。
在一方面，本文提供具有根据式(I)的结构的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
R1为任选地被取代的C1-3烷基、任选地被取代的C3-6环烷基或任选地被取代的3至6元杂环烷基；
R2为氢、任选地被取代的C1-3烷基、卤素、CN或任选地被取代的环烷基；
R3为氢、任选地被取代的芳基、任选地被取代的杂芳基、任选地被取代的环烷基、任选地被取代的杂环烷基、羰基、醚、硫醚、任选地被取代的芳基磺酰基、任选地被取代的杂芳基磺酰基、任选地被取代的芳基烷基、任选地被取代的炔基或任选地被取代的杂炔基；
R4和R5独立地为氢、任选地被取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；且
R6为OH或酯(例如，如本文所描述的OR18)。
在实施方案中，R1是未被取代的C1-3烷基。在实施方案中，R1是被取代的C1-3烷基(例如，包括1、2或3个取代基的C1-3烷基)。
在实施方案中，R1是未被取代的C3-6环烷基(例如，未被取代的环丙基)。在实施方案中，R1是被取代的C3-6环烷基(例如，包括1、2或3个取代基的C3-6环烷基)。
在实施方案中，R1是未被取代的3至6元杂环烷基。在实施方案中，R1是被取代的3至6元杂环烷基(例如，包括1、2或3个取代基的3至6元杂环烷基)。
在实施方案中，R2为氢。在实施方案中，R2是任选地被取代的C1-3烷基。在实施方案中，R2是未被取代的C1-3烷基。在实施方案中，R2是被取代的C1-3烷基(例如，包括1、2或3个取代基的C1-3烷基)。在实施方案中，R2是卤素。在实施方案中，R2为CN。在实施方案中，R2是任选地被取代的环烷基(例如，C3-6环烷基)。在实施方案中，R2是未被取代的环烷基。在实施方案中，R2是被取代的环烷基(例如，包括1、2或3个取代基的环烷基)。
在实施方案中，R3为氢。在实施方案中，R3是未被取代的芳基(例如，苯基、萘)。在实施方案中，R3是被取代的芳基(例如，苯基、萘)。在实施方案中，R3是未被取代的杂芳基(例如，喹诺酮、异喹啉、吡啶、吡唑、吡咯、三唑、四唑、噁唑、噻唑)。在实施方案中，R3是被取代的杂芳基(例如，喹诺酮、异喹啉、吡啶、吡唑、吡咯、三唑、四唑、噁唑、噻唑)。在实施方案中，R3是未被取代的环烷基。在实施方案中，R3是被取代的环烷基。在实施方案中，R3是未被取代的杂环烷基(例如，含N杂环烷基)。在实施方案中，R3是被取代的杂环烷基(例如，含N杂环烷基)。在实施方案中，R3是羰基(例如，COR17，其中R17是根据本文所述的任何实施方案的)。在实施方案中，R3是醚(例如，OR16，其中R16是根据本文所述的任何实施方案的)。在实施方案中，R3为硫醚(例如，，SR16，其中R16是根据本文所述的任何实施方案的)。在实施方案中，R3是未被取代的芳基磺酰基(例如，苯磺酰基)。在实施方案中，R3是被取代的芳基磺酰基。在实施方案中，R3是未被取代的杂芳基磺酰基。在实施方案中，R3是被取代的杂芳基磺酰基。在实施方案中，R3是未被取代的芳烷基(例如，苯基烷基)。在实施方案中，R3是被取代的芳烷基(例如，苯基烷基)。在实施方案中，R3是未被取代的炔基。在实施方案中，R3是被取代的炔基(例如，被芳基取代的炔基)。在实施方案中，R3是未被取代的杂炔基。在实施方案中，R3是被取代的杂炔基(例如，被芳基取代的杂炔基)。在实施方案中，R3为OR16、SR16、SO2R16、CH2R16、CH2CH2R16、C≡CR16或C≡CCH2OR16，且其中R16为芳基。
在实施方案中，R4和R5独立地为氢或任选地被取代的C1-3烷基。在实施方案中，R4和R5独立地为氢或未被取代的C1-3烷基。在实施方案中，R4和R5各自为氢。在实施方案中，R4和R5中的一个是氢且另一个是未被取代的C1-3烷基。在实施方案中，R4和R5各自为未被取代的C1-3烷基。在实施方案中，R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基(例如，C3-6环烷基)。在实施方案中，R4和R5与其所连接的碳一起形成未被取代的环烷基(例如，未被取代的C3-6环烷基)。在实施方案中，R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的杂环烷基(例如，3至6元杂环烷基)。在实施方案中，R4和R5与其所连接的碳一起形成未被取代的杂环烷基(例如，未被取代的3至6元杂环烷基)。
在实施方案中，R6为氢。在实施方案中，R6为酯(例如，如本文所述的OR18)。在实施方案中，R6为OR18，其中R18为C1-6烷基。
在实施方案中，R1为任选地被取代的C1-3烷基；且/或R3为氢、任选地被取代的芳基、任选地被取代的杂芳基、任选地被取代的环烷基、任选地被取代的杂环烷基、羰基或醚。
在实施方案中，R1为未被取代的C1-3烷基(例如，CH3或CH2CH3)。在实施方案中，R1为CH3。在实施方案中，R2为氢。在实施方案中，R4和R5各自为氢。在实施方案中，R6为OH。
在实施方案中，每个R1和R2为未被取代的C1-3烷基。在实施方案中，每个R1和R2为CH3。在实施方案中，R4和R5各自为氢。在实施方案中，R6为OH。
在实施方案中，R2为未被取代的C1-3烷基(例如，CH3或CH2CH3)。在实施方案中，R2为CH3。在实施方案中，R3为氢。在实施方案中，R4和R5各自为氢。在实施方案中，R6为OH。
在实施方案中，化合物具有根据式(I)的结构，
或其药学上可接受的盐，其中
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，且其中R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基，或R1为任选地被取代的C3-6环烷基或任选地被取代的3至6元杂环烷基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R3选自由以下组成的组：
氢；
其中X为共价键、O、S、SO2、C1-4亚烷基、C2-4亚炔基或C2-4亚杂炔基；每个A独立地为N或CR9，R8和R9独立地为氢、卤素、OR10或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，且R10为C1-3烷基或芳基；
其中B为N或CR11，D为N、NH或CR11，E为N、CR11或CHR12，且R11和R12独立地为氢或C1-3烷基，且其中虚线圆表示存在或不存在共轭体系；
其中每个G独立地为N、NH、NR13或CR14；R13为C3-6环烷基、3至6元杂环烷基、任选地被一个或多个卤素取代的芳基、任选地被一个或多个任选地被取代的C1-3烷基取代的芳基、杂芳基、任选地被叔丁氧基羰基取代的杂环烷基、任选地被芳基(其任选地被一个或多个卤素取代)取代的C1-4烷基，且R14为氢、卤素、C3-6环烷基、3至6元杂环烷基或C1-3烷基；
其中I为O、S或CH，J为N或CH，R15为氢、C3-6环烷基、3至6元杂环烷基或C1-3烷基，且R19为氢、C3-6环烷基、3至6元杂环烷基或芳基；
OR16，其中R16为芳基；
其中X1为N或CH，且R20为任选地被取代的芳基；且
COR17，其中R17为芳基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；且
R6为OH或OR18，其中R18为C1-6烷基。
在实施方案中，R1是未被取代的C1-3烷基。在实施方案中，R1为CH3或CH2CH3。
在实施方案中，R1为被取代的C1-3烷基。在实施方案中，R1为被OR7取代的C1-3烷基。在实施方案中，R7为未被取代的C1-3烷基。在实施方案中，R7为被取代的C1-3烷基。在实施方案中，R7为被芳基取代的C1-3烷基。在实施方案中，芳基为苯基。在实施方案中，R7为被苯基取代的C1-3烷基。在实施方案中，R1为被OBn取代的C1-3烷基。在实施方案中，R1为CH2CH2OBn。
在实施方案中，R1是被一个或多个卤素(例如，F、Cl、Br或I)取代的C1-3烷基。在实施方案中，R1是二氟甲基。
在实施方案中，R1是被芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基。在实施方案中，任选地被取代的芳基是任选地被取代的苯基。在实施方案中，芳基或苯基是未被取代的芳基或未被取代的苯基。在实施方案中，芳基或苯基被一个或多个卤素取代。在实施方案中，R1为
在实施方案中，R1为任选地被取代的C3-6环烷基(例如，任选地被取代的环丙基)。在实施方案中，R1为C3-6环烷基(例如，未被取代的环丙基)。在实施方案中，R1为被取代的C3-6环烷基(例如，包括1、2或3个取代基的C3-6环烷基)。
在实施方案中，R1为任选地被取代的3至6元杂环烷基。在实施方案中，R1为未被取代的3至6元杂环烷基。在实施方案中，R1为被取代的3至6元杂环烷基(例如，包括1、2或3个取代基的3至6元杂环烷基)。
在实施方案中，R2为氢。
在实施方案中，R2为CN。
在实施方案中，R2是卤素。在实施方案中，卤素为F、Cl、Br或I。
在实施方案中，R2是未被取代的C1-3烷基。在实施方案中，R2为CH3。
在实施方案中，R2为被一个或多个卤素取代的C1-3烷基。
在实施方案中，R3为氢。在实施方案中，R3不是氢。
在实施方案中，R3为其中
X为共价键、O、S、SO2、C1-4亚烷基、C2-4亚炔基或C2-4亚杂炔基；
每个A独立地为N或CR9；
R8和R9独立地为氢、卤素、OR10或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；且
R10为C1-3烷基或芳基。
在实施方案中，R3为未被取代的苯基、氟苯基、氯苯基、二氟苯基、二氯苯基或三氟甲基苯基。
在实施方案中，R3为其中
B为N或CR11；
D为N、NH或CR11；
E为N、CR11或CHR12；且
R11和R12独立地为氢或C1-3烷基；且其中
虚线圆表示存在或不存在共轭体系。
在实施方案中，R3为其中
每个G独立地为N、NH、NR13或CR14；
R13为C3-6环烷基、3至6元杂环烷基、任选地被一个或多个卤素取代的芳基、任选地被一个或多个任选地被取代的C1-3烷基取代的芳基、杂芳基、任选地被叔丁氧基羰基取代的杂环烷基、任选地被芳基(其任选地被一个或多个卤素取代)取代的C1-4烷基；且
R14为氢、卤素、C3-6环烷基、3至6元杂环烷基或C1-3烷基。
在实施方案中，R3为吡咯基、四唑基、三唑基或吡唑基，任选地被芳基或环烷基取代。在实施方案中，R3(例如，吡咯基、四唑基、三唑基或吡唑基)被环丙基、未被取代的苯基、氟苯基、氯苯基、二氟苯基、二氯苯基或三氟甲基苯基取代。
在实施方案中，R3为其中
I为O、S或CH；
J为N或CH；
R15为氢、C3-6环烷基、3至6元杂环烷基或C1-3烷基；且
R19为氢、C3-6环烷基、3至6元杂环烷基或芳基。
在实施方案中，R3为OR16，其中R16为芳基。在实施方案中，芳基为苯基。在实施方案中，R3为OPh。
在实施方案中，R3为其中
X1为N或CH；且
R20为任选地被取代的芳基。
在实施方案中，R3为哌啶基或哌嗪基，任选地被环丙基或芳基取代。在实施方案中，R3(例如，哌啶基或哌嗪基)被环丙基、未被取代的苯基、氟苯基、氯苯基、二氟苯基、二氯苯基或三氟甲基苯基取代。
在实施方案中，R3是COR17，其中R17是芳基。在实施方案中，芳基为苯基。在实施方案中，R3是COPh。
在实施方案中，R3为
在实施方案中，R4和R5均为氢。
在实施方案中，R4和R5中的一个是氢，并且另一个是C1-3烷基。在实施方案中，C1-3烷基未被取代。在实施方案中，C1-3烷基被一个或多个卤素取代。在实施方案中，C1-3烷基是CH3。
在实施方案中，R4和R5均为C1-3烷基。在实施方案中，C1-3烷基未被取代。在实施方案中，C1-3烷基被一个或多个卤素取代。在实施方案中，C1-3烷基是CH3。
在实施方案中，R4和R5与其所连接的碳一起形成环烷基或杂环烷基。在实施方案中，环烷基或杂环烷基未被取代。在实施方案中，环烷基或杂环烷基未被取代(例如，包括1、2或3个取代基的环烷基或杂环烷基)。在实施方案中，环烷基或杂环烷基是3元环。在实施方案中，环烷基或杂环烷基是4元环。在实施方案中，杂环烷基是含氧杂环烷基。在实施方案中，环烷基或杂环烷基选自由环丙基、环丁基和组成的组。
在实施方案中，R6为OH。
在实施方案中，R6是OR18，其中R18是C1-6烷基。
在实施方案中，R1为未被取代的C1-3烷基(例如，CH3或CH2CH3)。在实施方案中，R1为CH3。在实施方案中，R2为氢。在实施方案中，R4和R5各自为氢。在实施方案中，R6为OH。
在实施方案中，每个R1和R2为未被取代的C1-3烷基。在实施方案中，每个R1和R2为CH3。在实施方案中，R4和R5各自为氢。在实施方案中，R6为OH。
在实施方案中，R2为未被取代的C1-3烷基(例如，CH3或CH2CH3)。在实施方案中，R2为CH3。在实施方案中，R3为氢。在实施方案中，R4和R5各自为氢。在实施方案中，R6为OH。
在实施方案中，R1为任选地被OR7或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，且其中R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基；且/或R3选自由以下组成的组：氢、
在实施方案中，式(I)化合物具有以下结构，
或其药学上可接受的盐，其中R1、R2、R3、R4和R5如本文任何地方所定义的。
在实施方案中，式(I)或式(II)的化合物具有以下结构，
或其药学上可接受的盐，其中R1、R2、R4和R5如本文任何地方所定义，且其中
每个A独立地为N或CR9；
R8和R9独立地为氢、卤素、OR10或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；且
R10为C1-3烷基或芳基。
在实施方案中，A为N。在实施方案中，A为CR9。在实施方案中，所有三个A基团都是CR9。在实施方案中，一个A是CR9，并且其它两个A基团是N。在实施方案中，一个A是N，其它两个A基团是CR9。在实施方案中，所有三个A基团都是N。
在实施方案中，R8和R9中的至少一个是氢。在实施方案中，R8和R9中的一个是氢。
在实施方案中，R8和R9均不为氢。
在实施方案中，R8为氢。
在实施方案中，R8为卤素。在实施方案中，卤素是F、Cl、Br或I。在实施方案中，R8是Cl。
在实施方案中，R8为OR10，其中R10为C1-3烷基。在实施方案中，R8为OMe。
在实施方案中，R8是OR10，其中R10是芳基。在实施方案中，芳基为苯基。在实施方案中，R8是OPh。
在实施方案中，R8为未被取代的C1-3烷基。在实施方案中，R8为被一个或多个卤素取代的C1-3烷基。
在实施方案中，R9为氢。
在实施方案中，R9为卤素。在实施方案中，卤素是F、Cl、Br或I。在实施方案中，R9是Cl。
在实施方案中，R9为OR10，其中R10为C1-3烷基。在实施方案中，R9为OMe。
在实施方案中，R9是OR10，其中R10是芳基。在实施方案中，芳基为苯基。在实施方案中，R9是OPh。
在实施方案中，R9为未被取代的C1-3烷基。在实施方案中，R9为被一个或多个卤素取代的C1-3烷基。在实施方案中，R9为CH3。在实施方案中，R9为CF3。
在实施方案中，式(I)、式(II)或式(III)的化合物具有以下结构，
或其药学上可接受的盐，其中R1、R2、R4、R5、R8和R9如本文任何地方所定义。
在实施方案中，式(I)、式(II)或式(III)的化合物具有以下结构，
或其药学上可接受的盐，其中R1、R2、R4、R5、R8和R9如本文任何地方所定义。
在实施方案中，是在实施方案中，R9为卤素、OR10或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基。在实施方案中，R9是卤素。
在实施方案中，是在实施方案中，R9为卤素、OR10或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基。在实施方案中，R9为卤素。
在实施方案中，是在实施方案中，R8为卤素、OR10或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基。在实施方案中，R8为卤素。
在实施方案中，式(I)或式(II)的化合物具有以下结构，
或其药学上可接受的盐，其中R1、R2、R4和R5如本文任何地方所定义，且其中
B为N或CR11；
D为N、NH或CR11；
E为N、CR11或CHR12；且
R11和R12独立地为氢或C1-3烷基；且
虚线圆表示存在或不存在共轭体系。
在实施方案中，虚线圆存在且R3为其中B为N或CR11；D为N,或CR11；且E为N或CR12。
在实施方案中，D为CR11，E为CR12，并且B为N。
在实施方案中，B为CR11，E为CR12，且D为N。
在实施方案中，B和D均为CR11，且E为N。
在实施方案中，B和D均为CR11，且E为CR12。
在实施方案中，虚线圆不存在，且R3为其中B为N或CR11；D是NH；且E为CHR12。
在实施方案中，B为CR11，并且E为CHR12。
在实施方案中，R11为氢。
在实施方案中，R11为C1-3烷基。在实施方案中，R11为CH3。
在实施方案中，R12为氢。
在实施方案中，R12为C1-3烷基。在实施方案中，R12为CH3。
在实施方案中，式(I)、式(II)或式(VI)的化合物具有以下结构，
或其药学上可接受的盐，其中B、D、E、R1、R2、R4和R5如本文任何地方所定义。
在实施方案中，是
在实施方案中，是
在实施方案中，是在实施方案中，R12为氢或C1-3烷基。在实施方案中，R12为氢。在实施方案中，R12为CH3。
在实施方案中，是
在实施方案中，式(I)、式(II)或式(VI)的化合物具有以下结构，
或其药学上可接受的盐，其中B、R1、R2、R4、R5和R12如本文任何地方所定义。
在实施方案中，是在实施方案中，R12为C1-3烷基。在实施方案中，R12为CH3。
在实施方案中，式(I)或式(II)的化合物具有以下结构，
或其药学上可接受的盐，其中R1、R2、R4和R5如本文任何地方所定义，并且其中
每个G独立地为N、NH、NR13或CR14；
R13为环丙基、任选地被一个或多个卤素取代的芳基、任选地被一个或多个任选地被取代的C1-3烷基取代的芳基、杂芳基、任选地被叔丁氧基羰基取代的杂环烷基、任选地被芳基(其任选地被一个或多个卤素取代)取代的C1-4烷基；且
R14为氢、卤素、环丙基或C1-3烷基。
在实施方案中，G是N。在实施方案中，G是NH。在实施方案中，G为NR13。在实施方案中，G为CR14。
在实施方案中，R13为环丙基。
在实施方案中，R13为未被取代的芳基。在实施方案中，R13为被一个或多个卤素取代的芳基。在实施方案中，R13为被一个或多个任选地被取代的C1-3烷基(例如，被一个或多个卤素取代的C1-3烷基)取代的芳基。在实施方案中，芳基为苯基。在实施方案中，R13是未被取代的苯基。在实施方案中，R13为被一个或多个卤素取代的苯基。在实施方案中，R13为被一个或多个任选地被取代的C1-3烷基(例如，被一个或多个卤素取代的C1-3烷基)取代的苯基。在实施方案中，R13选自由以下组成的组：对三氟甲基苯基、间氟苯基、对氟苯基、对氯苯基、2,4-二氯苯基和3,5-二氯苯基。
在实施方案中，R13为杂芳基。在实施方案中，杂芳基未被取代。在实施方案中，杂芳基被取代。在实施方案中，杂芳基是吡啶基。在实施方案中，R13为2-吡啶基、3-吡啶基或4-吡啶基。
在实施方案中，R13为未被取代的杂环烷基。在实施方案中，R13为被叔丁氧基羰基取代的杂环烷基。在实施方案中，杂环烷基是6元杂环烷基。在实施方案中，杂环烷基是含氮的杂环烷基。在实施方案中，杂环烷基是含氧杂环烷基。在实施方案中，R13为
在实施方案中，R13为未被取代的C1-4烷基。在实施方案中，R13为
在实施方案中，R13为被芳基取代的C1-4烷基。在实施方案中，芳基未被取代。在实施方案中，芳基被一个或多个卤素取代。在实施方案中，芳基为苯基。在实施方案中，苯基是未被取代的苯基。在实施方案中，苯基被一个或多个卤素取代。在实施方案中，R13为
在实施方案中，R14为氢。
在实施方案中，R14是卤素。在实施方案中，卤素是F、Cl、Br或I。在实施方案中，R14是F。
在实施方案中，R14为环丙基。
在实施方案中，R14为C1-3烷基。在实施方案中，R14为CH3。
在实施方案中，是
在实施方案中，是在实施方案中，R13为环丙基、任选地被一个或多个卤素取代的芳基、任选地被一个或多个任选地被取代的C1-3烷基取代的芳基、杂芳基、任选地被叔丁氧基羰基取代的杂环烷基、任选地被芳基(其任选地被一个或多个卤素取代)取代的C1-4烷基。在实施方案中，R13为未被取代的芳基。在实施方案中，R13为Ph。在实施方案中，R13为被一个或多个卤素取代的芳基。在实施方案中，R13为 在实施方案中，R13为环丙基。
在实施方案中，是在实施方案中，R13为环丙基、任选地被一个或多个卤素取代的芳基、任选地被一个或多个任选地被取代的C1-3烷基取代的芳基、杂芳基、任选地被叔丁氧基羰基取代的杂环烷基、任选地被芳基(其任选地被一个或多个卤素取代)取代的C1-4烷基。在实施方案中，R13为任选地被一个或多个卤素取代的芳基。在实施方案中，R13为被芳基(其被一个或多个卤素取代)取代的C1-4烷基。在实施方案中，R13为任选地被一个或多个卤素取代的芳基。在实施方案中，R13为Ph、
在实施方案中，是在实施方案中，是在实施方案中，R13为环丙基、任选地被一个或多个卤素取代的芳基、任选地被一个或多个任选地被取代的C1-3烷基取代的芳基、杂芳基、任选地被叔丁氧基羰基取代的杂环烷基、任选地被芳基(其任选地被一个或多个卤素取代)取代的C1-4烷基。在实施方案中，R13为芳基。在实施方案中，R13为Ph。在实施方案中，R13为Ph、 2-吡啶基、
在实施方案中，R14为氢、卤素、环丙基或C1-3烷基。在实施方案中，R14为C1-3烷基(例如，甲基)。
在实施方案中，是在实施方案中，R13为环丙基、任选地被一个或多个卤素取代的芳基、任选地被一个或多个任选地被取代的C1-3烷基取代的芳基、杂芳基、任选地被叔丁氧基羰基取代的杂环烷基、任选地被芳基(其任选地被一个或多个卤素取代)取代的C1-4烷基。在实施方案中，R13为芳基。在实施方案中，R13为Ph。
在实施方案中，式(I)、式(II)或式(IX)的化合物具有以下结构，
或其药学上可接受的盐，其中G、R1、R2、R4和R5如本文任何地方所定义。
在实施方案中，是在实施方案中，R13为环丙基、任选地被一个或多个卤素取代的芳基、任选地被一个或多个任选地被取代的C1-3烷基取代的芳基、杂芳基、任选地被叔丁氧基羰基取代的杂环烷基、任选地被芳基(其任选地被一个或多个卤素取代)取代的C1-4烷基。在实施方案中，R13为任选地被一个或多个卤素取代的芳基。在实施方案中，R13为被芳基(其被一个或多个卤素取代)取代的C1-4烷基。在实施方案中，R13为任选地被一个或多个卤素取代的芳基。在实施方案中，R13为Ph、
在实施方案中，式(I)、式(II)、式(IX)或式(X)的化合物具有以下结构，
或其药学上可接受的盐，其中R1、R2、R4、R5和R14如本文任何地方所定义。
在实施方案中，式(I)、式(II)、式(IX)、式(X)或式(XI)的化合物具有以下结构，
或其药学上可接受的盐，其中R1、R2、R4、R5、R13和R14如本文任何地方所定义。
在实施方案中，R14为卤素或C1-3烷基。在实施方案中，R14为甲基。在实施方案中，R14为F。
在实施方案中，R13为环丙基、任选地被一个或多个卤素取代的芳基、任选地被一个或多个任选地被取代的C1-3烷基取代的芳基、杂芳基、任选地被叔丁氧基羰基取代的杂环烷基、任选地被芳基(其任选地被一个或多个卤素取代)取代的C1-4烷基。在实施方案中，R13为任选地被一个或多个卤素取代的芳基。在实施方案中，R13为Ph、3-氟苯基或4-氟苯基。
在实施方案中，R14为氢且为在实施方案中，R14为氢且为在实施方案中，R13为环丙基、任选地被一个或多个卤素取代的芳基、任选地被一个或多个任选地被取代的C1-3烷基取代的芳基、杂芳基、任选地被叔丁氧基羰基取代的杂环烷基、任选地被芳基(其任选地被一个或多个卤素取代)取代的C1-4烷基。在实施方案中，R13为C1-4烷基。在实施方案中，R13为杂芳基。在实施方案中，R13为杂环烷基。在实施方案中，R13为被一个或多个卤素取代的芳基。在实施方案中，R13为被任选地被取代的C1-3烷基(例如，被一个或多个卤素取代的C1-3烷基)取代的芳基。在实施方案中，R13为Ph、 2-吡啶基、
在实施方案中，式(I)、式(II)、式(IX)、式(X)、式(XI)或式(XIIa)的化合物具有以下结构，
或其药学上可接受的盐，其中R2、R4、R5和R13如本文任何地方所定义。
在实施方案中，R13为环丙基、任选地被一个或多个卤素取代的芳基、任选地被一个或多个任选地被取代的C1-3烷基取代的芳基、杂芳基、任选地被叔丁氧基羰基取代的杂环烷基、任选地被芳基(其任选地被一个或多个卤素取代)取代的C1-4烷基。在实施方案中，R13为被叔丁氧基羰基取代的杂环烷基。在实施方案中，R13为芳基。在实施方案中，R13为被一个或多个卤素取代的芳基。在实施方案中，R13为被任选地被取代的C1-3烷基(例如，被一个或多个卤素取代的C1-3烷基)取代的芳基。在实施方案中，R13为Ph、2-吡啶基、
在实施方案中，式(I)、式(II)、式(IX)、式(X)或式(XI)的化合物具有以下结构，
或其药学上可接受的盐，其中R1、R2、R4、R5和R13如本文任何地方所定义。
在实施方案中，R13为环丙基、任选地被一个或多个卤素取代的芳基、任选地被一个或多个任选地被取代的C1-3烷基取代的芳基、杂芳基、任选地被叔丁氧基羰基取代的杂环烷基、任选地被芳基(其任选地被一个或多个卤素取代)取代的C1-4烷基。在实施方案中，R13为未被取代的芳基。在实施方案中，R13为Ph。
在实施方案中，式(I)、式(II)或式(IX)的化合物具有以下结构，
或其药学上可接受的盐，其中R1、R2、R4、R5和R13如本文任何地方所定义。
在实施方案中，R13为环丙基、任选地被一个或多个卤素取代的芳基、任选地被一个或多个任选地被取代的C1-3烷基取代的芳基、杂芳基、任选地被叔丁氧基羰基取代的杂环烷基、任选地被芳基(其任选地被一个或多个卤素取代)取代的C1-4烷基。在实施方案中，R13为未被取代的芳基。在实施方案中，R13为Ph。在实施方案中，R13为被一个或多个卤素取代的芳基。在实施方案中，R13为在实施方案中，R13为环丙基。
在实施方案中，式(I)、式(II)或式(IX)的化合物具有以下结构，
或其药学上可接受的盐，其中R1、R2、R4和R5如本文任何地方所定义。
在实施方案中，式(I)或式(II)的化合物具有以下结构，
或其药学上可接受的盐，其中R1、R2、R4和R5如本文任何地方所定义，并且其中
I为O、S或CH；
J为N或CH；
R15为氢或C1-3烷基；且
R19为氢或芳基。
在实施方案中，I为O。在实施方案中，I为S。在实施方案中，I为CH。
在实施方案中，J为N。在实施方案中，J为CH。
在实施方案中，R15为氢。
在实施方案中，R15为C1-3烷基。在实施方案中，R15为CH3。
在实施方案中，R19为氢。
在实施方案中，R19为芳基。在实施方案中，R19为苯基。
在实施方案中，式(I)、(II)或(XIV)的化合物具有以下结构，
或其药学上可接受的盐，其中I、R1、R2、R4、R5、R15和R19如本文任何地方所定义。
在实施方案中，是在实施方案中，R19为芳基。在实施方案中，R19为苯基。在实施方案中，R15为氢或C1-3烷基。在实施方案中，R15为氢或CH3。
在实施方案中，是在实施方案中，R19为芳基。在实施方案中，R19为苯基。
在实施方案中，式(I)或式(II)的化合物具有以下结构，
或其药学上可接受的盐，其中R1、R2、R4、R5、R8和R9如本文任何地方所定义，并且其中X为O、S或SO2。
在实施方案中，X是O。在实施方案中，X是S。在实施方案中，X是SO2。
在实施方案中，式(I)或式(II)的化合物具有以下结构，
或其药学上可接受的盐，其中R1、R2、R4、R5、R8和R9如本文任何地方所定义。
在实施方案中，式(I)或式(II)的化合物具有以下结构，
或其药学上可接受的盐，其中R1、R2、R4、R5、R8和R9如本文任何地方所定义。
在实施方案中，式(I)或式(II)的化合物具有以下结构，
或其药学上可接受的盐，其中R1、R2、R4和R5如本文任何地方所定义，并且其中R20为任选地被取代的芳基。
在实施方案中，R20为被取代的芳基(例如，包括1、2或3个取代基)。在实施方案中，R20为未被取代的芳基。在实施方案中，芳基为苯基。在实施方案中，R20为Ph。
在实施方案中，式(I)或式(II)的化合物具有以下结构，
或其药学上可接受的盐，其中R1、R2、R4和R5如本文任何地方所定义，并且其中R20为任选地被取代的芳基。
在实施方案中，R20为被取代的芳基(例如，包括1、2或3个取代基)。在实施方案中，R20为未被取代的芳基。在实施方案中，芳基为苯基。在实施方案中，R20为Ph。
示范性化合物
在一些实施方案中，PHD抑制剂化合物是化合物1至50或其药学上可接受的盐中的任一种。
在一些实施方案中，PHD抑制剂化合物是化合物51至70或其药学上可接受的盐中的任一种。
同位素体
应当理解，在本文所描述的化合物中(例如，式(I)至(XXIII)中的任何一个式的化合物，如化合物1至70中的任何一种化合物)，原子可以展现出它们的天然同位素丰度，或原子中的一个或多个原子可以人工富集具有相同原子序数但原子质量或质量数不同于主要见于自然界中的原子质量或质量数的特定同位素。本发明意图包括本文所描述的化合物的化合物的所有适合的同位素变化形式(例如，式(I)至(XXIII)中的任一个式的化合物，例如化合物1至70中的任一种化合物)。举例来说，氢(H)的不同同位素形式包括氕(1H)、氘(2H)和氚(3H)。氕是自然界中发现的主要氢同位素。
在一些实施方案中，本文所描述的化合物(例如，式(I)至(XXIII)中的任何一个式的化合物，例如化合物1至70中的任何一种化合物)的一个或多个氢被氘取代。富集氘可提供某些治疗优点，例如增加体内半衰期或降低剂量要求，或可提供可用作生物样品表征的标准的化合物。在一些实施方案中，本文所描述的化合物(例如，式(I)至(XXIII)中的任一个式的化合物，例如化合物1至70中的任一种化合物)的一个或多个氢被氚替代。氚是放射性的，并且因此可以提供放射性标记的化合物，可用作代谢或动力学研究中的示踪剂。
本文所公开的化合物(例如式(I)至(XXIII)中的任一个式的化合物，例如化合物1至70中的任一种化合物)的同位素富集可以在无过度实验的情况下通过本领域的技术人员众所周知的常规技术或通过与本文中的流程和实例中描述的那些类似的工艺使用适当的同位素富集试剂和/或中间物来实现。
术语“同位素体”是指具有与本文提供的特定化合物相同的化学结构和式的物种，除了一个或多个位置处的同位素取代位置和/或同位素富集水平，例如氢对氘。因此，如本文所使用，术语“化合物”涵盖具有相同化学结构但在分子的组成原子之间也具有同位素变化的分子的集合。因此，所属领域的技术人员将清楚，由含有所示氘原子的特定化学结构表示的化合物还将含有在所述结构中的一个或多个指定氘位处具有氢原子的较少量的同位素体。所提供的化合物中此类同位素体的相对量取决于许多因素，包括但不限于用于制备化合物的氘代试剂的同位素纯度和用于制备化合物的各种合成步骤中掺入氘的效率。
当位置被指定为“H”或“氢”时，所述位置应理解为在其天然丰度同位素组成上具有氢。当位置被指定为“D”或“氘”时，所述位置被理解为具有大于氘的天然丰度至少3340倍的丰度的氘，所述氘的天然丰度为0.015％(即，术语“D”或“氘”指示至少50.1％的氘掺入)。
在实施方案中，本文提供的化合物对于存在于指定为化合物上的潜在氘化位点的位点处的每个氘的同位素富集因子可以是至少3500(52.5％的氘掺入)、至少4000(60％的氘掺入)、至少4500(67.5％的氘掺入)、至少5000(75％的氘)、至少5500(82.5％的氘掺入)、至少6000(90％的氘掺入)、至少6333.3(95％的氘掺入)、至少6466.7(97％的氘掺入)、至少6600(99％的氘掺入)或至少6633.3(99.5％的氘掺入)。
本发明的化合物的合成
本文所描述的化合物(例如，式(I)至(XXIII)中的任一个式的化合物，例如化合物1至70中的任一种化合物)可以根据本领域中已知的方法制备，包括本文提供的实例的示范性合成。
本文使用的缩写和首字母缩写词包括以下内容：
组合物和方法
本发明提供式(I)至(XXIII)中的任一个式的化合物或其药学上可接受的盐的用途，其用于制造用于治疗如本文所描述的多种病状或病症的药剂。在一个实施方案中，提供一种药物组合物，其包括式(I)至(XXIII)中的任一个式的至少一种化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的赋形剂或载剂。在各种实施方案中，药物或药物组合物可以进一步包括至少一种另外的治疗剂或与至少一种另外的治疗剂组合使用。
本发明的化合物或包括所述化合物的药物或组合物可以用于抑制PHD的活性。PHD的抑制在治疗包括以下的疾病中具有特定益处：心脏疾病(例如，缺血性心脏病、充血性心脏衰竭和瓣膜性心脏病)、肺部疾病(例如，肺部炎症、肺炎、急性肺损伤、肺高血压、肺纤维化和慢性阻塞性肺病)、呼吸道疾病(例如，呼吸道感染、急性呼吸窘迫综合征)、肝脏疾病(例如，急性肝衰竭和肝纤维化，以及肝硬化)以及肾脏疾病(例如，急性肾损伤和慢性肾病)、发炎性肠病(IBD)、缺血性再灌注损伤(例如，中风)，以及早产儿视网膜病(ROP)。
在一个实施方案中，本发明方法包括向有需要的患者适用治疗有效量的式(I)至(XXIII)中的任一个式的化合物或其药学上可接受的盐，或包括式(I)至(XXIII)中的任一个式的一种或多种化合物的药物组合物。
本发明还涉及抑制PHD活性的方法。在一个实施方案中，所述方法包括使PHD与有效量的选自包括式(I)至(XXIII)中的任一个式的化合物或其药学上可接受的盐的群组的一或多种化合物接触。
在又其它实施方案中，本文所公开的化合物(例如，式(I)至(XXIII)中的任何一个式的化合物，如化合物1至70中的任何一种化合物)或其药学上可接受的盐适用于治疗或预防贫血，包括治疗与以下相关的贫血病状：慢性肾病、多囊肾病、再生障碍性贫血、自身免疫性溶血性贫血、骨髓移植性贫血、查格-施特劳斯综合症(Churg-Strauss syndrome)、戴-布二氏贫血(Diamond Blackfan anemia)、范科尼氏贫血(Fanconi's anemia)、费耳替综合症(Felty syndrome)、移植物抗宿主疾病、造血干细胞移植、溶血性尿毒综合症、骨髓增生异常综合症、夜间阵发性血红蛋白尿症、骨髓纤维瘤、全血细胞减少症、纯红细胞再生障碍、过敏性紫癜(purpura Schoenlein-Henoch)、难治性贫血伴母细胞过多、类风湿性关节炎、舒氏综合症(Shwachman syndrome)、镰状细胞病、重型地中海贫血、轻型地中海贫血、血小板减少性紫癜、经历外科手术的贫血或非贫血患者、与创伤相关或继发于创伤的贫血、铁粒幼红细胞性贫血、继发于其它治疗的贫血，包括：用于治疗HIV的逆转录酶抑制剂、皮质类固醇激素、环顺铂或不含顺铂的化疗药物、长春花生物碱、有丝分裂抑制剂、拓扑异构酶II抑制剂、蒽环类药物、烷化剂，特别是继发于炎性、衰老和/或慢性疾病的贫血。PHD抑制也可以用于治疗贫血症状，包括慢性疲劳、苍白和头晕。
在其它实施方案中，本文所公开的化合物(例如，式(I)至(XXIII)的化合物，如化合物1至70中的任一种)或其药学上可接受的盐适用于治疗或预防代谢障碍的疾病，包括但不限于糖尿病和肥胖症。
在又其它实施方案中，本文公开的化合物(例如，式(I)至(XXIII)的化合物，如化合物1至70中的任一种)或其药学上可接受的盐适用于治疗或预防血管障碍。这些包括但不限于缺氧或伤口愈合相关疾病，所述疾病需要用于血管生成、血管新生和动脉生成的促血管生成介质。
在其它实施方案中，本文所公开的化合物(例如，式(I)至(XXIII)的化合物，如化合物1至70中的任一种)或其药学上可接受的盐适用于治疗或预防局部缺血性再灌注损伤。这些包括但不限于中风、心肌梗塞和急性肾损伤。
在其它实施方案中，本文公开的化合物(例如，式(I)至(XXIII)的化合物，如化合物1至70中的任一种)或其药学上可接受的盐适用于治疗炎性肠病。这些包括但不限于溃疡性结肠炎和克罗恩氏病。
在其它实施方案中，本文公开的化合物(例如，式(I)至(XXIII)的化合物，如化合物1至70中的任一种)或其药学上可接受的盐适用于治疗癌症，例如结肠直肠癌。
在其它实施方案中，本文公开的化合物(例如，式(I)至(XXIII)的化合物，如化合物1至70中的任一种)或其药学上可接受的盐适用于治疗动脉粥样硬化。
在其它实施方案中，本文公开的化合物(例如，式(I)至(XXIII)的化合物，如化合物1至70中的任一种)或其药学上可接受的盐适用于治疗心血管疾病。
在其它实施方案中，本文公开的化合物(例如，式((I)至(XXIII)的化合物，如化合物1至70中的任一种)或其药学上可接受的盐适用于治疗眼部疾病或病症。这些包括但不限于放射性视网膜病变、早产儿视网膜病变(ROP)、糖尿病视网膜病变、年龄相关性黄斑变性和眼部缺血。
在其它实施方案中，本文公开的化合物(例如，式(I)至(XXIII)的化合物，如化合物1至70中的任何一种)或其药学上可接受的盐适用于治疗与高氧相关的疾病。
在其它实施方案中，本文公开的化合物(例如，式(I)至(XXIII)的化合物，如化合物1至70中的任一种)或其药学上可接受的盐适用于治疗支气管肺发育不良(BPD)。
在又其它实施方案中，本文公开的化合物(例如，式(I)至(XXIII)的化合物，如化合物1至70中的任一种)或其药学上可接受的盐适用于治疗心脏病。所述病状包括但不限于胰腺外科手术术后心肌缺血、经皮冠状动脉介入治疗(PCI)后心肌损伤、非心脏外科手术后心肌损伤、腹主动脉瘤择期手术围手术期心肌缺血、PCI术后心肌损伤、经历冠状动脉旁路移植术(CABG)外科手术的患者的心肌损伤、微创二尖瓣(MIMV)修复或置换，经历心脏直视外科手术的成年患者、慢性心力衰竭，NYHAII-IV级。
在其它实施方案中，本文所公开的化合物(例如，式(I)至(XXIII)的化合物，如化合物1至70中的任一种)或其药学上可接受的盐适用于治疗肺部疾病，如肺部发炎、肺炎、支气管炎、急性肺损伤(ALI)、肺高血压、肺纤维化、哮喘、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)或慢性阻塞性肺病。所述病状包括但不限于择期肺叶切除术期间的肺损伤、冠状动脉旁路移植术(CABG手术)期间的肺损伤和肺移植。
在其它实施方案中，本文所公开的化合物(例如，式(I)至(XXIII)的化合物，如化合物1至70中的任一种)或其药学上可接受的盐适用于治疗呼吸道疾病。所述病状包括但不限于呼吸道感染、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)、肺部炎症、肺炎和急性肺损伤。
在其它实施方案中，本文所公开的化合物(例如，式(I)至(XXIII)的化合物，如化合物1至70中的任一种)或其药学上可接受的盐适用于治疗肝病。所述病状包括但不限于非酒精性脂肪性肝炎(NASH)。
在其它实施方案中，本文公开的化合物(例如，式(I)至(XXIII)的化合物，如化合物1至70中的任一种)或其药学上可接受的盐适用于治疗肾病。所述病状包括但不限于造影剂诱导的急性肾损伤、经历计划的冠状动脉造影术的III至IV期慢性肾病、经历心脏瓣膜外科手术的患者的急性肾损伤、非透析依赖性慢性肾病、开始透析的慢性肾病患者、非透析依赖性慢性肾病。
在其它实施方案中，本文公开的化合物(例如，式(I)至(XXIII)的化合物，如化合物1至70中的任一种)或其药学上可接受的盐适用于治疗一个或多个器官的损伤和/或衰竭(例如，肺、心脏、肝或肾的损伤和/或衰竭)。所述病状包括但不限于急性器官损伤或器官衰竭和诱导性器官功能障碍。
在其它实施方案中，本文公开的化合物(例如，式(I)至(XXIII)的化合物，如化合物1至70中的任何一种)或其药学上可接受的盐适用于治疗呼吸道病毒(例如，冠状病毒)感染或肺病毒(例如，冠状病毒)感染。
另外，本文公开的化合物(例如，式(I)至(XXIII)的化合物，如化合物1至70中的任一种)或其药学上可接受的盐可与另外的活性成分组合用于治疗上述病状。另外的化合物可以与本文公开的化合物(例如，式(I)至(XXIII)的化合物，如化合物1至70中的任一种)或其药学上可接受的盐分开施用，或与另外的活性成分一起包括在根据本发明的药物组合物中。在一示范性实施方案中，另外的活性成分是已知或发现可有效治疗由PHD酶介导的病状、病症或疾病或针对与特定病状、病症或疾病相关的另一个靶标具有活性的那些活性成分，如替代性PHD调节剂。所述组合可用于增加功效(例如，通过在所述组合中包括增强根据本发明的化合物的效力或有效性的化合物)、降低一种或多种副作用或降低根据本发明的化合物的所需剂量。
本发明的化合物单独或与一种或多种其它他活性成分组合用于调配本发明的药物组合物。本发明的药物组合物包括：(a)有效量的本文所公开的化合物(例如，式(I)至(XXIII)的化合物，如化合物1至70中的任一种)或其药学上可接受的盐、药学上可接受的前药或药学上的活性代谢物；和(b)药学上可接受的赋形剂。
“药学上可接受的赋形剂”是指添加到药理学组合物中或在其它方面用作媒剂、载剂或稀释剂以促进药剂的施用并且与其相容的无毒的、生物学上可耐受的并且另外在生物学上适合于向受试者施用的物质，如惰性物质。赋形剂的实例包括碳酸钙、磷酸钙、各种糖和各种类型的淀粉、纤维素衍生物、明胶、植物油以及聚乙二醇。合适的赋形剂还可以包括抗氧化剂。此类抗氧化剂可以用于药物组合物或存储介质中以延长药品的保质期。
药物调配物和施用途径
如本领域众所周知的，本发明的化合物和组合物可以与合适的载体或赋形剂一起直接或在药物组合物或药剂中递送。本发明的治疗方法可以包括向有需要的受试者施用有效量的本发明化合物。在一优选的实施方案中，受试者是哺乳动物受试者，并且在一最优选的实施方案中，受试者是人类受试者。
此类化合物、组合物或药剂的有效量可以通过常规实验容易地确定，如可以是最有效且方便的施用途径以及最适当的调配物。各种调配物和药物递送系统在本领域中是可获得的。参见例如,Gennaro,A.R.,编(1995)《雷明顿氏药物科学(Remington'sPharmaceutical Sciences)》,同上。
合适的施用途径可以例如包括口服、直肠、局部、鼻、肺、眼、肠和肠胃外施用。胃肠外施用的主要途径包括静脉内、肌肉内和皮下施用。次要施用途径包括腹膜内、动脉内、关节内、心内、脑池内、皮内、病灶内、眼内、胸膜内、鞘内、子宫内和心室内施用。要治疗的适应症以及药物的物理、化学和生物学特性决定了要使用的调配物类型和施用途径，以及局部或全身递送是否是优选的。
本发明的化合物的药物剂型可以速释、控释、持续释放或靶向药物递送系统的形式提供。常用的剂型包括例如溶液和悬浮液、(微)乳液、软膏、凝胶和贴剂、脂质体、片剂、糖衣丸、软或硬壳胶囊、栓剂、卵状物、植入物、无定形或结晶粉末、气雾剂和冻干调配物。根据所使用的施用途径，可以需要特殊装置来施涂或施用药物，例如注射器和针头、吸入器、泵、注射笔、涂药器或特殊烧瓶。药物剂型通常由药物、赋形剂和容器/封闭系统组成。也称为非活性成分的一种或多种赋形剂可以添加到本发明的化合物中以改善或促进药物的制造、稳定性、施用和安全性，并且可以提供实现期望的药物释放曲线的方法。因此，要添加到药物中的赋形剂的类型可以取决于各种因素，例如药物的物理和化学特性、施用途径和制造程序。药学上可接受的赋形剂在本领域中是可获得的并且包括在各种药典中列出的那些。参见例如，美国药典(U.S.Pharmacopeia，USP)、日本药典(Japanese Pharmacopoeia，JP)、欧洲药典(European Pharmacopoeia，EP)和英国药典(British pharmacopeia，BP)；美国食品药品管理局
(www.fda.gov)药物评估和研究中心(CEDR)出版物，例如《非活性成分指南(Inactive Ingredient Guide)》(1996)；Ash和Ash编.(2002)《药物添加剂手册(Handbookof Pharmaceutical Additives)》,纽约恩迪科特Synapse信息资源公司(SynapseInformation Resources,Inc.,Endicott NY)；等)。[0149]本发明的化合物的药物剂型可以通过本领域熟知的任何方法制造，例如通过常规混合、筛分、溶解、熔融、制粒、糖衣丸制备、压片、悬浮、挤出、喷雾干燥、磨细、乳化、(纳米/微)包封、包埋或冻干方法。如上所述，本发明的组合物可以包括一种或多种生理学上可接受的非活性成分，其促进将活性分子加工成用于药物用途的制剂。
适当的调配物取决于所需的施用途径。举例来说，对于静脉内注射，组合物可以调配在水溶液中，如果需要的话，使用生理相容的缓冲剂，包括例如磷酸盐、组氨酸或柠檬酸盐以调节调配物的pH，以及张力剂，例如氯化钠或葡萄糖。对于经粘膜或经鼻施用，半固体、液体调配物或贴剂可以是优选的，可能含有增渗剂。此类渗透剂一般是所属领域中已知的。对于口服施用，化合物可以调配成液体或固体剂型，以及速释或控释/持续释放调配物。受试者口服摄入的合适剂型包括片剂、丸剂、糖衣丸、硬和软壳胶囊、液体、凝胶、糖浆、浆液、悬浮液和乳液。也可以将这些化合物调配成例如含有常规栓剂基质(如可可脂或其它甘油酯)的直肠组合物(如栓剂或保留灌肠剂)。
可以使用赋形剂获得固体口服剂型，其可以包括填充剂、崩解剂、粘结剂(干的和湿的)、溶解延迟剂、润滑剂、助流剂、抗粘附剂、阳离子交换树脂、润湿剂、抗氧化剂、防腐剂、着色剂和调味剂。这些赋形剂可以是合成或天然来源。此类赋形剂的实例包括纤维素衍生物、柠檬酸、磷酸二钙、明胶、碳酸镁、月桂基硫酸镁/钠、甘露醇、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、硅酸盐、二氧化硅、苯甲酸钠、山梨糖醇、淀粉、硬脂酸或其盐、糖(即，葡萄糖、蔗糖、乳糖等)、滑石粉、西黄蓍胶浆、植物油(氢化)和蜡。乙醇和水可以用作制粒助剂。在某些情况下，用例如掩味膜、抗胃酸膜或阻释膜对片剂进行包衣是期望的。天然和合成聚合物与着色剂、糖和有机溶剂或水组合通常用于对片剂进行包衣，从而产生糖衣丸。当胶囊优于片剂时，药物粉末、其悬浮液或溶液可以在相容的硬或软壳胶囊中递送。
在一个实施方案中，本发明的化合物可以局部施用，如通过皮肤贴剂、半固体或液体调配物，例如凝胶、(微)乳液、软膏、溶液、(纳米/微)悬浮液或泡沫。药物渗透到皮肤和底层组织可以例如使用增渗剂；亲脂性、亲水性和两亲性赋形剂的适当选择和组合，包括水、有机溶剂、蜡、油、合成和天然聚合物、表面活性剂、乳化剂；通过pH调节；以及使用复合剂来调节。如离子电渗疗法的其它技术可以用于调节本发明的化合物的皮肤渗透。举例来说，在期望以最小全身暴露进行局部递送的情况下，优选经皮或局部施用。
对于吸入施用或施用于鼻，根据本发明使用的化合物方便地以溶液、悬浮液、乳液或半固体气雾剂的形式从加压包装或雾化器中递送，通常使用推进剂，例如衍生自甲烷和乙烷的卤化碳、二氧化碳或任何其它合适的气体。对于局部气雾剂，如丁烷、异丁烯和戊烷的烃是适用的。在加压气雾剂的情况下，适当的剂量单位可以通过提供用于递送计量的量的阀门来确定。可以调配用于吸入器或吹入器的例如明胶的胶囊和药筒。这些通常含有化合物和如乳糖或淀粉的合适的粉末基质的粉末混合物。
通过注射调配用于肠胃外施用的化合物和组合物通常是无菌的并且可以单位剂型存在，例如在安瓿、注射器、注射笔或多剂量容器中，后者通常含有防腐剂。组合物可以采用油性或水性媒剂中的如悬浮液、溶液或乳液的此类形式，并且可以含有调配剂，如缓冲液、张力剂、粘度增强剂、表面活性剂、悬浮剂和分散剂、抗氧化剂、生物相容性聚合物、螯合剂和防腐剂。根据注射位点，媒剂可以含有水、合成油或植物油和/或有机助溶剂。在某些情况下，如使用冻干产物或浓缩物，肠胃外调配物将在施用之前重构或稀释。提供本发明的化合物的控释或持续释放的贮库调配物可以包括纳米/微米颗粒或纳米/微米或非微米化晶体的可注射悬浮液。除了本领域众所周知的其它外，如聚(乳酸)、聚(乙醇酸)或其共聚物的聚合物可以用作控释/持续释放基质。其它贮库递送系统可以需要切口的植入物和泵的形式呈现。
用于静脉内注射本发明化合物的合适载剂是本领域中众所周知的且包括含有碱的水基溶液，例如氢氧化钠，以形成离子化化合物；蔗糖或氯化钠作为张力剂；和缓冲液，例如含有磷酸盐或组氨酸的缓冲液。可以添加共溶剂，例如聚乙二醇。这些水基系统在溶解本发明化合物的方面是有效的并且在全身施用时产生低毒性。溶液系统的组分的比例可以在不破坏其溶解度和毒性特性的情况下显著变化。此外，组分的同一性可以变化。举例来说，可以使用如聚山梨醇酯或泊洛沙姆的低毒性表面活性剂，也可以使用聚乙二醇或其它共溶剂，可以添加如聚乙烯吡咯烷酮的生物相容性聚合物，并且其它糖和多元醇可以取代葡萄糖。
治疗有效剂量可以使用本领域熟知的各种技术进行最初估计。在动物研究中使用的初始剂量可以基于在细胞培养测定中建立的有效浓度。举例来说，可以使用从动物研究和细胞培养测定中获得的数据来确定适合于人类受试者的剂量范围。在某一些实施方案中，本公开的化合物被调配用于口服施用。用于口服施用的药物调配物中的本公开化合物的示范性剂量为约0.5至约10mg/kg受试者体重。在一些实施方案中，药物调配物包括约0.7至约5.0mg/kg受试者体重，或可替代地，约1.0至约2.5mg/kg受试者体重。用于口服施用的典型给药方案是每周三次、每周两次、每周一次或每天施用用于口服施用的药物调配物。
药剂，例如本发明化合物的有效量或治疗有效量或剂量是指导致受试者的症状改善或存活期延长的药剂或化合物的量。此类分子的毒性和治疗功效可以通过细胞培养物或实验动物中的标准制药程序确定，例如通过确定LD50(对50％群体致死的剂量)和ED50(对50％群体治疗有效的剂量)。毒性与治疗作用的剂量比为治疗指数，其可以表示为比率LD50/ED50。呈现高治疗指数的药剂是优选的。
有效量或治疗有效量是将研究人员、兽医、医生或其它临床医生正寻求的在组织、系统、动物或人类中引发生物反应或医学反应的化合物或药物组合物的量。剂量具体地落入包括ED50的具有很小毒性或无毒性的循环浓度范围内。剂量可以根据所采用的剂型和/或所利用的施用途径而在这个范围内变化。鉴于受试者的病状的具体情况，应根据本领域已知的方法选择精确的调配物、施用途径、剂量以及剂量间隔。
可以个别地调节给药量和间隔以提供活性部分的足以实现所要作用的血浆含量；即，最小有效浓度(MEC)。对于每种化合物，MEC将会有所不同，但是可以从例如体外数据和动物实验中估计。实现MEC所需的剂量将取决于个体特性和施用途径。在局部施用或选择性摄取的情况下，药物的有效局部浓度可能与血浆浓度无关。
所施用的化合物或组合物的量可以取决于多种因素，包括待治疗的受试者的性别、年龄和体重、痛苦的严重程度、施用方式以及处方医师的判断。
如果需要，本发明化合物和组合物可以呈现在包装或分配器装置中，所述包装或分配器装置可以含有一个或多个含有活性成分的单位剂型。此类包装或装置可以例如包括金属或塑料箔，如泡壳包装；或玻璃和橡胶塞子，如小瓶中。包装或分配器装置可以附有施用说明书。还可以制备包括在相容药物载体中调配的本发明的化合物的组合物，将其置于适当的容器中，并且标记用于治疗指定病状。
鉴于本文的公开内容，本领域的普通技术人员将容易想到本发明的这些和其它实施方案并且具体考虑。
范例
一般方法
大多数化学物质购自国药集团化学试剂有限公司(Sinopharm Chemical ReagentCo.；SCRC)、西格玛-奥德里奇公司(Sigma-Aldrich)、Alfa或其它供应商。
1H NMR或19F NMR光谱是在Bruker AVⅢ400或Bruker AVⅢ500上记录。
LCMS测量是在Agilent 1200HPLC/6100SQ系统上使用以下条件运行：
方法A：移动相：A：水(0.01％ TFA)B：乙腈(0.01％ TFA)；梯度相：在1.4min内5％B增加到95％ B，1.6min内95％ B(总运行时间：3min)；流速：2.3mL/min；柱：SunFire C18，4.6*50mm，3.5μm；柱温：50℃。检测器：ADC ELSD、DAD(214nm和254nm)、ES-API。
方法B：移动相：A：水(10mM NH4HCO3)B：乙腈；梯度相：在1.5min内自5％至95％ B，在1.5min内95％ B(总运行时间：3min)；流速：2.0mL/min；柱：XBridge C18，4.6*50mm，3.5um；柱温：40℃；检测器：ADC ELSD、DAD(214nm和254nm)、MSD(ES-API)。
用于合成式(I)化合物的一般方案
根据方案A使用可商购的材料制备式(I)化合物。卤化吡啶(化合物a)与氧化剂的反应产生化合物(b)的N-氧化物吡啶化合物。化合物(b)的氰化提供化合物(c)。化合物(c)与硼酸的交叉偶合产生化合物(e)。使用苯甲醇对化合物(e)进行卤素置换提供化合物(f)。化合物(f)的腈水解，接着与氨基酯形成酰胺，产生酰胺(化合物(i))。苯甲基的去保护提供式(I)化合物，其酯的后续皂化提供化合物(j)。
方案A：式(I)化合物的合成
示范性化合物的合成
实例1：化合物1的制备
3,5-二氯-4-甲基吡啶1-氧化物
在0℃向3,5-二氯-4-甲基-吡啶(5.0g，30.8mmol)于二氯甲烷(70.0mL)中的溶液中添加3-氯过氧苯甲酸(8.12g，40.11mmol，85％)。将混合物在室温下搅拌18.0h且添加碳酸钾(4.42g，32.0mmol)。将混合物再搅拌1h且过滤不可溶的固体。浓缩滤液以得到呈白色固体状的3,5-二氯-4-甲基吡啶1-氧化物(4.7g，26.4mmol，85.1％产率)。LC-MS：m/z＝178.1[M+H]+，滞留时间1.47min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
3,5-二氯-4-甲基皮考啉腈(3,5-Dichloro-4-methylpicolinonitrile)
将3,5-二氯-4-甲基-吡啶1-氧化物(5.0g，28.4mmol)、氰化三甲基硅烷(5.0g，40.3mmol)和三乙胺(4.28g，42.3mmol)于乙腈(90.0mL)中的混合物在85℃搅拌24.0h。混合物用水稀释并且用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水溶液洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝10/1)纯化，得到呈黄色油状的3,5-二氯-4-甲基皮考啉腈(4.96g，26.8mmol，94.5％产率)。LC-MS：m/z＝187.2[M+H]+，滞留时间1.74min(方法A)。
3-氯-5-(3-氟苯基)-4-甲基皮考啉腈
向3,5-二氯-4-甲基皮考啉腈(500mg，2.67mmol)、(3-氟苯基)硼酸(374mg，2.67mmol)和碳酸钾(443mg，3.21mmol)中的溶液中添加含[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯钯(II)(78mg，0.11mmol)的N,N-二甲基甲酰胺/水(5.0mL/0.5mL)。将混合物在45℃在氮气下搅拌16.0h，并且冷却到室温。将乙酸乙酯和水添加至溶液中，并且分离各层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩到干燥。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝2/1)纯化，得到呈黄色固体状的3-氯-5-(3-氟苯基)-4-甲基皮考啉腈(400mg，1.63mmol，61％产率)。LC-MS：m/z＝247.1[M+H]+，滞留时间＝1.83min(方法A)。
3-(苯甲氧基)-5-(3-氟苯基)-4-甲基皮考啉腈
在0℃在氮气下向3-氯-5-(3-氟苯基)-4-甲基皮考啉腈(400.0mg，1.62mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)中的溶液中添加氢化钠(78mg，1.94mmol，于矿物油中的60％w/w分散液)。将混合物在0℃搅拌10min，并且接着添加苯甲醇(210mg，1.94mmol)。将溶液在0℃搅拌1.0h且用乙酸乙酯和水稀释。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝3/1)纯化，得到呈黄色固体状的3-(苯甲氧基)-5-(3-氟苯基)-4-甲基皮考啉腈(378mg，1.18mmol，73％产率)。LC-MS：m/z＝319.1[M+H]+，滞留时间＝2.21min(方法A)。
3-(苯甲氧基)-5-(3-氟苯基)-4-甲基皮考啉酸
向3-(苯甲氧基)-5-(3-氟苯基)-4-甲基皮考啉腈(378mg，1.19mmol)于乙醇(10.0mL)中的溶液中添加30％氢氧化钠水溶液(5.0mL)。将混合物在100℃搅拌5.0h，冷却且浓缩以去除乙醇。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤且干燥，得到呈白色固体状的3-(苯甲氧基)-5-(3-氟苯基)-4-甲基皮考啉酸(340mg，1.01mmol，85％产率)。LC-MS：m/z＝338.1[M+H]+，滞留时间2.00min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
(3-(苯甲氧基)-5-(3-氟苯基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将3-(苯甲氧基)-5-(3-氟苯基)-4-甲基皮考啉酸(170mg，0.50mmol)、甘氨酸乙酯盐酸盐(70mg，0.50mmol)、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻(288mg，0.55mmol)和三乙胺(254mg，2.52mmol)于二氯甲烷(5.0mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。反应物用水淬灭，并且用二氯甲烷萃取。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到呈白色固体状的(3-(苯甲氧基)-5-(3-氟苯基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(200mg，0.47mmol，94％产率)。LC-MS：m/z＝423.1[M+H]+，滞留时间2.15min(方法A)。
(5-(3-氟苯基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将(3-(苯甲氧基)-5-(3-氟苯基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(200mg，0.47mmol)和10％钯/碳(20.0mg)于四氢呋喃(10.0mL)中的混合物在氢气气氛下搅拌18.0h。过滤不可溶的固体且浓缩滤液，得到呈黄色固体状的(3-羟基-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(150mg，0.45mmol，95％产率)。LC-MS：m/z＝333.1[M+H]+，滞留时间2.19min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
(5-(3-氟苯基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸
向(3-羟基-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(150mg，0.45mmol)于四氢呋喃/水(8.0mL/2.0mL)中的溶液中添加氢氧化锂单水合物(164mg，4.0mmol)。将混合物搅拌过夜且浓缩以去除四氢呋喃。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤，用水洗涤且干燥，得到呈白色固体状的(5-(3-氟苯基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸(24.0mg，0.06mmol，13％产率)。LC-MS：m/z＝305.1[M+H]+，滞留时间4.37min(方法A)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.81(s,1H),9.38(t,J＝5.9Hz,1H),8.06(s,1H),7.57(dd,J＝14.1,7.8Hz,1H),7.42–7.16(m,3H),4.01(d,J＝6.1Hz,2H),2.16(s,3H)。
实例2：化合物2的制备
3-氯-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基皮考啉腈
向3,5-二氯-4-甲基皮考啉腈(600mg，3.21mmol)、(3-甲氧基苯基)硼酸(487.7mg，3.21mmol)和碳酸钾(531.34mg，3.85mmol)的溶液中添加含[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯钯(II)(117.27mg，0.05mmol)的N,N-二甲基甲酰胺/水(2.0mL/0.2mL)。将混合物在45℃在氮气下搅拌12.0h并且冷却到室温。将乙酸乙酯和水添加至溶液中，并且分离各层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩到干燥。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝2/1)纯化，得到呈黄色固体状的3-氯-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基皮考啉腈(500mg，1.94mmol，61％产率)。LC-MS：m/z＝259[M+H]+，滞留时间2.13min(方法B)。
3-(苯甲氧基)-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基皮考啉腈
在0℃在氮气下向3-氯-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲腈皮考啉腈(500mg，1.94mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)中的溶液中添加氢化钠(100.8mg，2.52mmol，于矿物油中的60％w/w分散液)。将混合物在0℃搅拌10min，并且接着添加苯甲醇(172.1mg，2.52mmol)。将溶液在室温下搅拌2.0h且用乙酸乙酯和水稀释。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝3/1)纯化，得到呈黄色固体状的3-(苯甲氧基)-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基皮考啉腈(350mg，1.06mmol，54.6％产率)。LC-MS:m/z＝331.0[M+H]+，滞留时间1.91min(方法A)。
3-(苯甲氧基)-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基皮考啉酸
向3-(苯甲氧基)-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基皮考啉腈(350mg，1.06mmol)于乙醇(10.0mL)中的溶液中添加30％氢氧化钠水溶液(5.0mL)。将混合物在100℃搅拌3.0h，冷却且浓缩以去除乙醇。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤并加以干燥，得到呈白色固体状的3-(苯甲氧基)-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基皮考啉酸(350mg，1.0mmol，94.61％产率)。LC-MS：m/z＝350.0[M+H]+，滞留时间1.38min(方法B)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
(3-(苯甲氧基)-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将3-(苯甲氧基)-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基皮考啉酸(180mg，0.52mmol)、甘氨酸乙酯盐酸盐(86.0mg，0.62mmol)、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻(321.8mg，0.62mmol)和三乙胺(260.5mg，2.58mmol)于二氯甲烷(5.0mL)中的混合物在室温下搅拌12.0h。反应物用水淬灭且用二氯甲烷萃取。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到呈白色固体状的(3-(苯甲氧基)-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(180mg，0.41mmol，79.76％产率)。LC-MS：m/z＝435.0[M+H]+，滞留时间2.18min(方法B)。
(3-羟基-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将(3-(苯甲氧基)-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(180mg，0.42mmol)和10％钯/碳(20.0mg)于四氢呋喃(10.0mL)中的混合物在氢气气氛下搅拌过夜。过滤不可溶的固体且浓缩滤液，得到呈黄色固体状的(3-羟基-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(180mg，粗物质)。LC-MS：m/z＝345.0[M+H]+，滞留时间1.88min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
(3-羟基-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸
向(3-羟基-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(160mg，0.47mmol)于四氢呋喃/水(10.0mL/4.0mL)中的溶液中添加氢氧化钠(160mg，4.0mmol)。将混合物在40℃搅拌12.0h且浓缩以去除四氢呋喃。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤，用水洗涤且干燥，得到呈白色固体状的(3-羟基-5-(3-甲氧基苯基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸(62mg，0.20mmol，42％产率)。LC-MS：m/z＝317.0[M+H]+，滞留时间4.40min(方法A)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.78(s,1H),9.37(t,J＝6.0Hz,1H),8.05(s,1H),7.44(dd,J＝10.1,6.1Hz,1H),7.03(dt,J＝7.4,3.8Hz,1H),6.99(dd,J＝3.7,1.9Hz,2H),4.02(t,J＝7.9Hz,2H),3.82(s,3H),2.17(s,3H)。
实例3：化合物3的制备
6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)异喹啉
向6-溴异喹啉(1.04g，5.0mmol)、双(频哪醇)二硼(2.54g，10.0mmol)和乙酸钾(1.96g，20.0mmol)的溶液中添加含[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯钯(II)(365mg，0.5mmol)的1,4-二噁烷(15.0mL)。将混合物在90℃在氮气下搅拌2.0h并且冷却到室温。将乙酸乙酯和水添加至溶液中，并且分离各层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩到干燥。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝2/1)纯化，得到呈白色固体状的6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)异喹啉(0.79g，3.1mmol，62％产率)。LC-MS：m/z＝256.0[M+H]+，滞留时间1.41min(方法B)。
3-氯-5-(异喹啉-6-基)-4-甲基皮考啉腈
向3,5-二氯-4-甲基皮考啉腈(400mg，2.16mmol)、6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)异喹啉(550mg，2.16mmol)和碳酸钾(358mg，2.59mmol)的溶液中添加含[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯钯(II)(146mg，0.2mmol)的N,N-二甲基甲酰胺/水(5.0mL/0.5mL)。将混合物在45℃在氮气下搅拌过夜并且冷却到室温。将乙酸乙酯和水添加至溶液中，并且分离各层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩到干燥。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到呈黄色固体状的3-氯-5-(异喹啉-6-基)-4-甲基皮考啉腈(500mg，1.79mmol，83％产率)。LC-MS：m/z＝280.0[M+H]+，滞留时间1.58min(方法B)。
5-(异喹啉-6-基)-3-((4-甲氧基苯甲基)氧基)-4-甲基皮考啉腈
在0℃在氮气下向3-氯-5-(异喹啉-6-基)-4-甲基皮考啉腈(500.0mg，1.79mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)中的溶液中添加氢化钠(86mg，2.15mmol，于矿物油中的60％w/w分散液)。将混合物在0℃搅拌10min，并且接着添加(4-甲氧基苯基)甲醇(296mg，2.15mmol)。将溶液在0℃搅拌1.0h且用乙酸乙酯和水稀释。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到呈黄色固体状的5-(异喹啉-6-基)-3-((4-甲氧基苯甲基)氧基)-4-甲基皮考啉腈(250mg，0.66mmol，37％产率)。LC-MS：m/z＝382.1[M+H]+，滞留时间＝2.21min(方法A)。
3-羟基-5-(异喹啉-6-基)-4-甲基皮考啉酸
向5-(异喹啉-6-基)-3-((4-甲氧基苯甲基)氧基)-4-甲基皮考啉腈(250mg，0.66mmol)于乙醇(10.0mL)中的溶液中添加30％氢氧化钠水溶液(4.0mL)。将混合物在100℃搅拌5.0h，冷却且浓缩以去除乙醇。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤且干燥，得到呈白色固体状的3-羟基-5-(异喹啉-6-基)-4-甲基皮考啉酸(250mg，粗物质)。LC-MS：m/z＝401.1[M+H]+，滞留时间2.00min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
(3-羟基-5-(异喹啉-6-基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将3-羟基-5-(异喹啉-6-基)-4-甲基皮考啉酸(250mg，0.62mmol)、甘氨酸乙酯盐酸盐(87mg，0.62mmol)、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻(390mg，0.75mmol)和三乙胺(254mg，2.52mmol)于二氯甲烷(5.0mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。反应物用水淬灭，并且用二氯甲烷萃取。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到呈白色固体状的(3-羟基-5-(异喹啉-6-基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(140mg，0.38mmol，43％产率)。LC-MS：m/z＝366.1[M+H]+，滞留时间2.15min(方法A)。
(3-羟基-5-(异喹啉-6-基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸
向(3-羟基-5-(异喹啉-6-基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(140mg，0.38mmol)于四氢呋喃/水(8.0mL/2.0mL)中的溶液中添加氢氧化锂单水合物(164mg，4.0mmol)。将混合物搅拌过夜且浓缩以去除四氢呋喃。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤，用水洗涤且通过逆向制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的(3-羟基-5-(异喹啉-6-基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸(72.6mg，0.22mmol，56％产率)。LC-MS：m/z＝338.1[M+H]+，滞留时间2.28min(方法A)。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ12.88(s,1H),9.71(s,1H),9.45(t,J＝6.0Hz,1H),8.68(d,J＝6.1Hz,1H),8.47(d,J＝8.5Hz,1H),8.27(s,1H),8.24(d,J＝6.1Hz,1H),8.19(s,1H),7.95(dd,J＝8.5,1.4Hz,1H),4.04(d,J＝6.1Hz,2H),2.20(s,3H)。
实例4：化合物4的制备
3-氯-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉腈
向3,5-二氯-4-甲基-吡啶-2-甲腈(550mg，2.96mmol)、1-苯基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑(800mg，2.96mmol)和碳酸钾(490mg，3.55mmol)的溶液中添加含[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯钯(II)(86.5mg，0.12mmol)的N,N-二甲基甲酰胺/水(10.0mL/1.0mL)。将混合物在50℃在氮气下搅拌16.0h，并且冷却到室温。将乙酸乙酯和水添加至溶液中，并且分离各层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩到干燥。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝2/1)纯化，得到呈黄色固体状的3-氯-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉腈(400mg，1.36mmol，46％产率)。LC-MS：m/z＝295.3[M+H]+，滞留时间＝1.909min(方法A)。
3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉腈
在0℃在氮气下向3-氯-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉腈(600.0mg，2.04mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)中的溶液中添加氢化钠(90mg，2.24mmol，于矿物油中的60％w/w分散液)。将混合物在0℃搅拌10min，并且接着添加苯甲醇(220.2mg，2.04mmol)。将溶液在0℃搅拌1.0h且用乙酸乙酯和水稀释。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝3/1)纯化，得到呈黄色固体状的3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉腈(300mg，0.82mmol，40.2％产率)。LC-MS：m/z＝367.1[M+H]+，滞留时间＝2.20min(方法A)。
3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉酸
向3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉腈(300mg，0.82mmol)于乙醇(5.0mL)中的溶液中添加30％氢氧化钠水溶液(5.0mL)。将混合物在100℃搅拌5.0h，冷却且浓缩以去除乙醇。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤且干燥，得到呈白色固体状的3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉酸(290mg，0.75mmol，91.4％产率)。LC-MS：m/z＝386.4[M+H]+，滞留时间1.74min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉酸(290mg，0.75mmol)、甘氨酸乙酯盐酸盐(104mg，0.75mmol)、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻(430mg，0.83mmol)、三乙胺(380mg，3.75mmol)于二氯甲烷(8.0mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。反应物用水淬灭，并且用二氯甲烷萃取。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到呈黄色固体状的(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(200mg，0.42mmol，56.5％产率)。LC-MS：m/z＝471.1[M+H]+，滞留时间2.13min(方法A)。
(3-羟基-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(200mg，0.42mmol)和10％钯/碳(20.0mg)于四氢呋喃(10.0mL)中的混合物在氢气气氛下搅拌18h。过滤不可溶的固体且浓缩滤液，得到呈白色固体状的(3-羟基-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(150mg，0.39mmol，94％产率)。LC-MS：m/z＝381.0[M+H]+，滞留时间2.16min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
(3-羟基-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸
向(3-羟基-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(150mg，0.39mmol)于四氢呋喃/水(6.0mL/3.0mL)中的溶液中添加氢氧化锂单水合物(164mg，4.0mmol)。将混合物搅拌过夜且浓缩以去除四氢呋喃。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤，用水洗涤且干燥，得到呈白色固体状的(3-羟基-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸(121.6mg，0.35mmol，88.5％产率)。LC-MS：m/z＝353.1[M+H]+，滞留时间4.534min(方法A)。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ12.80(s,1H),9.32(t,J＝6.1Hz,1H),8.94(s,1H),8.33(s,1H),8.19(s,1H),7.94(d,J＝7.8Hz,2H),7.55(t,J＝7.9Hz,2H),7.37(t,J＝7.4Hz,1H),4.01(d,J＝6.1Hz,2H),2.38(s,3H)。
实例5：化合物5的制备
2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)喹啉
向6-溴-2-甲基喹啉(2.0g，9.01mmol)、双(频哪醇)二硼(2.6g，10.28mmol)和乙酸钾(2.65g，27mmol)的溶液中添加含[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯钯(II)(660mg，0.9mmol)的1,4-二噁烷(15.0mL)。将混合物在100℃在氮气下搅拌2.0h并且冷却到室温。将乙酸乙酯和水添加至溶液中，并且分离各层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩到干燥。得到粗物质2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)喹啉(2.1g，7.81mmol，87.5％产率)。LC-MS：m/z＝270.2[M+H]+，滞留时间2.08min(方法B)。将产物直接用于下一步骤。
3-氯-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)皮考啉腈
向3,5-二氯-4-甲基-吡啶-2-甲腈(1.2g，6.42mmol)、2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)喹啉(1.73g，6.42mmol)和碳酸钾(1.16g，7.70mmol)的溶液中添加含[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯钯(II)(234.5mg，0.32mmol)的N,N-二甲基甲酰胺/水(10.0mL/1.0mL)。将混合物在45℃在氮气下搅拌过夜并且冷却到室温。将乙酸乙酯和水添加至溶液中，并且分离各层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩到干燥。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到呈黄色固体状的3-氯-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)皮考啉腈(900mg，3.07mmol，47.9％产率)。LC-MS：m/z＝294.0[M+H]+，滞留时间1.61min(方法A)。
3-((4-甲氧基苯甲基)氧基)-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)皮考啉腈
在0℃在氮气下向3-氯-5-(异喹啉-6-基)-4-甲基皮考啉腈(500mg，1.71mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)中的溶液中添加氢化钠(95.6mg，2.39mmol，于矿物油中的60％w/w分散液)。将混合物在0℃搅拌10min，并且接着添加(4-甲氧基苯基)甲醇(329.7mg，2.39mmol)。将溶液在0℃搅拌2.0h且用乙酸乙酯和水稀释。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝2/1)纯化，得到呈黄色固体状的3-((4-甲氧基苯甲基)氧基)-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)皮考啉腈(400mg，1.01mmol，59.2％产率)。LC-MS:m/z＝396.0[M+H]+，滞留时间1.49min(方法A)。
3-羟基-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)皮考啉酸
向3-((4-甲氧基苯甲基)氧基)-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)皮考啉腈(400mg，0.47mmol)于乙醇(10.0mL)中的溶液中添加30％氢氧化钠水溶液(4.0mL)。将混合物在100℃搅拌5.0h，冷却且浓缩以去除乙醇。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤且干燥，得到呈白色固体状的3-羟基-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)皮考啉酸(400mg，粗物质)。LC-MS：m/z＝295.2[M+H]+，滞留时间1.15min(方法B)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
(3-羟基-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将3-羟基-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)皮考啉酸(200.0mg，0.68mmol)、甘氨酸乙酯盐酸盐(113.5mg，0.82mmol)、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻(424.5mg，0.82mmol)和三乙胺(343.5mg，3.40mmol)于二氯甲烷(10.0mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。反应物用水淬灭，并且用二氯甲烷萃取。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/2)纯化，得到呈白色固体状的(3-羟基-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(120mg，0.32mmol，47.1％产率)。LC-MS：m/z＝380.1[M+H]+，滞留时间1.60min(方法A)。
(3-羟基-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)皮考啉酰基)甘氨酸
向(3-羟基-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(120mg，0.33mmol)于四氢呋喃/水(8.0mL/2.0mL)中的溶液中添加氢氧化锂单水合物(140mg，3.3mmol)。将混合物搅拌过夜且浓缩以去除四氢呋喃。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤，用水洗涤且通过逆向制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的(3-羟基-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)皮考啉酰基)甘氨酸(5.9mg，0.017mmol，5.09％)。LC-MS：m/z＝352.1[M+H]+，滞留时间2.05min(方法B)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.04(s,1H),8.32(d,J＝8.4Hz,1H),8.15(s,1H),8.03(d,J＝8.8Hz,2H),7.78(d,J＝8.6Hz,1H),7.50(d,J＝8.4Hz,1H),3.72(d,J＝4.3Hz,2H),2.70(s,3H),2.20(s,3H)。
实例6：化合物6的制备
4-(4-(5-氯-6-氰基-4-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
向3,5-二氯-4-甲基-吡啶-2-甲腈(561mg，3.0mmol)、4-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.13 3.0mmol)和碳酸钾(497mg，3.6mmol)的溶液中添加含[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯钯(II)(110mg，0.15mmol)的N,N-二甲基甲酰胺/水(10.0mL/1.0mL)。将混合物在50℃在氮气下搅拌16.0h，并且冷却到室温。将乙酸乙酯和水添加至溶液中，并且分离各层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩到干燥。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝2/1)纯化，得到呈黄色固体状的4-(4-(5-氯-6-氰基-4-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(400mg，1.0mmol，33％产率)。LC-MS：m/z＝346.2[M-56]+，滞留时间＝2.078min(方法A)。
4-(4-(5-(苯甲氧基)-6-氰基-4-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在0℃在氮气下向4-(4-(5-氯-6-氰基-4-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(600mg，1.49mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)中的溶液中添加氢化钠(72mg，1.79mmol，于矿物油中的60％w/w分散液)。将混合物在0℃搅拌10min，并且接着添加苯甲醇(194mg，1.79mmol)。将溶液在0℃搅拌1.0h且用乙酸乙酯和水稀释。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝3/1)纯化，得到呈黄色固体状的4-(4-(5-(苯甲氧基)-6-氰基-4-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(330mg，0.70mmol，46％产率)。LC-MS：m/z＝474.0[M+H]+，滞留时间＝2.21min(方法A)。
3-(苯甲氧基)-5-(1-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉酸
向4-(4-(5-(苯甲氧基)-6-氰基-4-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(330mg，0.70mmol)于乙醇(15.0mL)中的溶液中添加30％氢氧化钠水溶液(5.0mL)。将混合物在100℃搅拌1.0h，冷却且浓缩以去除乙醇。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤并加以干燥，得到呈白色固体状的3-(苯甲氧基)-5-(1-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉酸(330mg，0.33mmol，96％产率)。LC-MS：m/z＝493.2[M+H]+，滞留时间1.97min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
4-(4-(5-(苯甲氧基)-6-((2-乙氧基-2-氧代乙基)氨基甲酰基)-4-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
将3-(苯甲氧基)-5-(1-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉酸(165mg，0.33mmol)、甘氨酸乙酯盐酸盐(47mg，0.33mmol)、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻(192mg，0.37mmol)和三乙胺(167mg，1.67mmol)于二氯甲烷(10.0mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。反应物用水淬灭，并且用二氯甲烷萃取。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到呈白色固体状的4-(4-(5-(苯甲氧基)-6-((2-乙氧基-2-氧代乙基)氨基甲酰基)-4-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(165mg，0.29mmol，85％产率)。LC-MS：m/z＝578.0[M+H]+，滞留时间2.14min(方法A)。
4-(4-(6-((2-乙氧基-2-氧代乙基)氨基甲酰基)-5-羟基-4-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
将4-(4-(5-(苯甲氧基)-6-((2-乙氧基-2-氧代乙基)氨基甲酰基)-4-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(165mg，0.29mmol)和10％钯/碳(20.0mg)于四氢呋喃(10.0mL)中的混合物在氢气气氛下搅拌18.0h。过滤不可溶的固体the浓缩滤液，得到呈黄色固体状的4-(4-(6-((2-乙氧基-2-氧代乙基)氨基甲酰基)-5-羟基-4-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(135mg，0.27mmol，97％产率LC-MS：m/z＝460.1[M+H]+，滞留时间2.19min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
(5-(1-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸
向4-(4-(6-((2-乙氧基-2-氧代乙基)氨基甲酰基)-5-羟基-4-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(135mg，0.27mmol)于四氢呋喃/水(8.0mL/2.0mL)中的溶液中添加氢氧化锂单水合物(164mg，4.0mmol)。将混合物搅拌过夜且浓缩以去除四氢呋喃。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤，用水洗涤并加以干燥，得到呈白色固体状的(5-(1-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰基
)甘氨酸(85.5mg，0.18mmol，67％产率)。LC-MS：m/z＝502.1[M+H]+，滞留时间5.33min(方法A)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.75(s,1H),9.62-9.10(m,1H),8.28(s,1H),8.23(s,1H),7.88(s,1H),4.56-4.30(m,1H),4.15-4.03(m,2H),4.00(d,J＝6.1Hz,2H),2.93(br s,2H),2.29(d,J＝8.5Hz,3H),2.14-2.00(m,2H),1.92-1.77(m,2H),1.43(s,9H)。
实例7：化合物7的制备
2-苯基-5-(三丁基锡烷基)噻唑
在-78℃在氮气下向2-苯基噻唑(10.0g，62.03mmol)于无水四氢呋喃(200.0mL)中的溶液中添加正丁基锂(30.98mL，77.54mmol，2.5M于己烷中)。将混合物在-78℃搅拌30分钟，并且接着添加三丁基氯化锡(20.8mL，71.34mmol)。使混合物升温到0℃并且再搅拌一小时。反应物用饱和氯化铵溶液淬灭，并且用乙酸乙酯萃取两次。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝5/1)纯化，得到呈黄色固体状的2-苯基-5-(三丁基锡烷基)噻唑(27.7g，61.6mmol，99％产率)。LC-MS:m/z＝451.2[M+H]+，滞留时间2.30min(方法A)。
3-氯-4-甲基-5-(2-苯基噻唑-5-基)皮考啉腈
向3,5-二溴-4,6-二甲基皮考啉腈(2.9g，15.55mmol)、2-苯基-5-(三丁基锡烷基)噻唑(5.0g，11.10mmol)、氟化铯(5.06g，33.31mmol)和碘化铜(423mg，2.22mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(20.0mL)中的溶液中添加四(三苯基膦)钯(1.28g，1.11mmol)。将混合物在40℃在氮气下搅拌16.0h，并且冷却到室温。将乙酸乙酯和水添加至溶液中，并且分离各层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩到干燥。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝2/1)纯化，得到呈绿色固体状的3-氯-4-甲基-5-(2-苯基噻唑-5-基)皮考啉腈(150mg，0.48mmol，10％产率)。LC-MS：m/z＝312.1[M+H]+，滞留时间＝1.909min(方法A)。
3-羟基-4-甲基-5-(2-苯基噻唑-5-基)皮考啉腈
向3-氯-4-甲基-5-(2-苯基噻唑-5-基)皮考啉腈(1.50g，4.81mmol)和碳酸钾(2.0g，14.43mmol)于N,N-二甲基乙酰胺(10.0mL)中的溶液中添加苯甲醇(780mg，7.22mmol)。将混合物在120℃搅拌2.0d且浓缩。将残余物在乙酸乙酯与水之间分配。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过逆向制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的3-羟基-4-甲基-5-(2-苯基噻唑-5-基)皮考啉腈(200mg，0.68mmol，14％产率)。LC-MS：m/z＝294.1[M+H]+，滞留时间＝1.40min(方法A)。
3-羟基-4-甲基-5-(2-苯基噻唑-5-基)皮考啉酸
向3-羟基-4-甲基-5-(2-苯基噻唑-5-基)皮考啉腈(200mg，0.68mmol)于乙醇(10.0mL)中的溶液中添加30％氢氧化钠水溶液(3.0mL)。将混合物在100℃搅拌3.0h，冷却且浓缩以去除乙醇。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤且干燥，得到呈白色固体状的3-羟基-4-甲基-5-(2-苯基噻唑-5-基)皮考啉酸(200mg，0.64mmol，94％产率)。LC-MS：m/z＝313.4[M+H]+，滞留时间1.74min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
(3-羟基-4-甲基-5-(2-苯基噻唑-5-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将3-羟基-4-甲基-5-(2-苯基噻唑-5-基)皮考啉酸(200mg，0.64mmol)、甘氨酸乙酯盐酸盐(150mg，1.08mmol)、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻(420mg，0.77mmol)和三乙胺(380mg，3.75mmol)于二氯甲烷(20.0mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。反应物用水淬灭，并且用二氯甲烷萃取。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/2)纯化，得到呈白色固体状的(3-羟基-4-甲基-5-(2-苯基噻唑-5-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(140mg，0.35mmol，55％产率)。LC-MS：m/z＝398.1[M+H]+，滞留时间2.13min(方法A)。
(3-羟基-4-甲基-5-(2-苯基噻唑-5-基)皮考啉酰基)甘氨酸
向(3-羟基-4-甲基-5-(2-苯基噻唑-5-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(140mg，0.35mmol)于四氢呋喃/水(8.0mL/4.0mL)中的溶液中添加氢氧化锂单水合物(164mg，4.0mmol)。将混合物在40℃搅拌过夜且浓缩以去除四氢呋喃。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤，用水洗涤且干燥，得到呈白色固体状的(3-羟基-4-甲基-5-(2-苯基噻唑-5-基)皮考啉酰基)甘氨酸(106.6mg，82％产率)。LC-MS：m/z＝370.0[M+H]+，滞留时间4.92min(方法A)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.91(s,1H),9.41(t,J＝6.1Hz,1H),8.31(s,1H),8.21(s,1H),8.12-7.87(m,2H),7.78-7.38(m,3H),4.02(d,J＝6.1Hz,2H),2.38(s,3H)。
实例8：化合物8的制备
4,4,5,5-四甲基-2-(3-苯氧基苯基)-1,3,2-二氧杂硼戊烷
向1-溴-3-苯氧基苯(1.5g，6.02mmol)、双(频哪醇)二硼(3.06g，12.04mmol)和乙酸钾(2.36g，24.1mmol)的溶液中添加含[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯钯(II)(438mg，0.6mmol)的1,4-二噁烷(15.0mL)。将混合物在90℃在氮气下搅拌2.0h并且冷却到室温。将乙酸乙酯和水添加至溶液中，并且分离各层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩到干燥。得到粗物质4,4,5,5-四甲基-2-(3-苯氧基苯基)-1,3,2-二氧杂硼戊烷(1.0g，3.37mmol，56.1％产率)。LC-MS：m/z＝297.0[M+H]+，滞留时间2.41min(方法B)。将产物直接用于下一步骤。
3-氯-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)皮考啉腈
向3,5-二氯-4-甲基-吡啶-2-甲腈(626mg，3.37mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(3-苯氧基苯基)-1,3,2-二氧杂硼戊烷(1.0g，3.37mmol)和碳酸钾(697mg，5.05mmol)的溶液中添加含[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯钯(II)(123mg，0.17mmol)的N,N-二甲基甲酰胺/水(10.0mL/1.0mL)。将混合物在50℃在氮气下搅拌过夜并且冷却到室温。将乙酸乙酯和水添加至溶液中，并且分离各层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩到干燥。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝3/1)纯化，得到呈黄色固体状的3-氯-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)皮考啉腈(450mg，1.41mmol，41.7％产率)。LC-MS：m/z＝321.0[M+H]+，滞留时间2.30min(方法A)。
3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)皮考啉腈
在0℃在氮气下向3-氯-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)皮考啉腈(450mg，1.41mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)中的溶液中添加氢化钠(113mg，2.82mmol，于矿物油中的60％w/w分散液)。将混合物在0℃搅拌10min，并且接着添加苯甲醇(152mg，1.41mmol)。将溶液在0℃搅拌1.0h且用乙酸乙酯和水稀释。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝2/1)纯化，得到呈黄色固体状的3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)皮考啉腈(350mg，0.89mmol，63.3％产率)。LC-MS:m/z＝352.0[M+H]+，滞留时间1.70min(方法A)。
3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)皮考啉酸
向3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)皮考啉腈(350mg，0.89mmol)于乙醇(10.0mL)中的溶液中添加30％氢氧化钠水溶液(4.0mL)。将混合物在100℃搅拌过夜，冷却且浓缩以去除乙醇。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤且干燥，得到呈白色固体状的3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)皮考啉酸(300mg，0.73mmol，82.0％产率)。LC-MS：m/z＝393.0(M+H)+，滞留时间2.35min(方法B)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)皮考啉酸(300mg，0.73mmol)、甘氨酸乙酯盐酸盐(152mg，1.09mmol)、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻(456mg，0.88mmol)和三乙胺(370mg，3.65mmol)于二氯甲烷(10.0mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。反应物用水淬灭，并且用二氯甲烷萃取。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/2)纯化，得到呈白色固体状的(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(210mg，0.42mmol，58.0％产率)。LC-MS:m/z＝497.0(M+H)+，滞留时间2.26min(方法A)。
(3-羟基-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(210mg，0.42mmol)和10％钯/碳(20.0mg)于四氢呋喃(10.0mL)中的混合物在40℃在氢气气氛下搅拌5.0h。过滤不可溶的固体且浓缩滤液，得到呈黄色固体状的(3-羟基-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(140mg，0.34mmol，81％产率)。LC-MS：m/z＝407.0(M+H)+，滞留时间2.32min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
(3-羟基-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)皮考啉酰基)甘氨酸
向(3-羟基-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(140mg，0.34mmol)于四氢呋喃/水(8.0mL/2.0mL)中的溶液中添加氢氧化锂单水合物(164mg，4.0mmol)。将混合物搅拌过夜且浓缩以去除四氢呋喃。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤，用水洗涤且通过逆向制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的(3-羟基-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)皮考啉酰基)甘氨酸(38.7mg，0.10mmol，30％产率)。LC-MS：m/z＝379.0[M+H]+，滞留时间5.76min(方法A)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.82(s,1H),9.46-9.14(m,1H),8.05(s,1H),7.53(t,J＝8.0Hz,1H),7.47-7.38(m,2H),7.25-7.14(m,2H),7.13-7.04(m,4H),3.96(d,J＝6.0Hz,2H),2.16(s,3H)。
实例9：化合物9的制备
5-氯-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-联吡啶]-6-甲腈
向3,5-二氯-4-甲基-吡啶-2-甲腈(500.00mg，2.67mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-2-(三氟甲基)吡啶(730.03mg，2.67mmol)和碳酸钾(443.41mg，3.21mmol)的溶液中添加含[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯钯(II)(78.25mg，0.11mmol)的N,N-二甲基甲酰胺/水(10.0mL/1.0mL)。将混合物在50℃在氮气下搅拌过夜并且冷却到室温。将乙酸乙酯和水添加至溶液中，并且分离各层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩到干燥。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝5/1)纯化，得到呈黄色固体状的5-氯-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-联吡啶]-6-甲腈(577mg，1.94mmol，72％产率)。LC-MS：m/z＝298[M+H]+，滞留时间2.052min(方法A)。
5-(苯甲氧基)-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-联吡啶]-6-甲腈
在0℃在氮气下向5-氯-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-联吡啶]-6-甲腈(500.00mg，1.68mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(20.0mL)中的溶液中添加氢化钠(80.8mg，2.02mmol，于矿物油中的60％w/w分散液)。将混合物在0℃搅拌10min，并且接着添加苯甲醇(217.97mg，2.02mmol，0.21mL)。将溶液在0℃搅拌50min且用乙酸乙酯和水稀释。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝5/1)纯化，得到5-(苯甲氧基)-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-联吡啶]-6-甲腈(306mg，49％产率)。LC-MS：m/z＝370[M+H]+，滞留时间2.190min(方法B)。
5-(苯甲氧基)-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-联吡啶]-6-甲酸
向5-(苯甲氧基)-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-联吡啶]-6-甲腈(306.00mg，0.83mmol)于乙醇(10.0mL)中的溶液中添加30％氢氧化钠水溶液(4.0mL)。将混合物在100℃搅拌3.0h，冷却且浓缩以去除乙醇。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤且干燥，得到呈白色固体状的5-(苯甲氧基)-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-联吡啶]-6-甲酸(353mg，粗物质)。LC-MS：m/z＝389[M+H]+，滞留时间1.977min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
(5-(苯甲氧基)-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-联吡啶]-6-羰基)甘氨酸乙酯
将5-(苯甲氧基)-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-联吡啶]-6-甲酸(300.00mg，0.77mmol)、甘氨酸乙酯盐酸盐(107.83mg，0.77mmol)、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻(442.21mg，0.85mmol)和三乙胺(390.85mg，3.86mmol，0.54mL))于二氯甲烷(20.0mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。反应物用水淬灭，并且用二氯甲烷萃取。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝2/1)纯化，得到(5-(苯甲氧基)-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-联吡啶]-6-羰基)甘氨酸乙酯(257mg，0.54mmol，70％产率)。LC-MS：m/z＝474[M+H]+，滞留时间1.810min(方法A)。
(5-羟基-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-联吡啶]-6-羰基)甘氨酸乙酯
将(5-(苯甲氧基)-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-联吡啶]-6-羰基)甘氨酸乙酯(230.00mg，0.49mmol)和10％钯/碳(20.0mg)于四氢呋喃(10.0mL)中的混合物在室温下在氢气气氛下搅拌过夜。过滤不可溶的固体且浓缩滤液，得到呈黄色固体状的(5-羟基-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-联吡啶]-6-羰基)甘氨酸乙酯(230mg，粗物质)。LC-MS：m/z＝384[M+H]+，滞留时间2.116min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
(5-羟基-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-联吡啶]-6-羰基)甘氨酸
向(5-羟基-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-联吡啶]-6-羰基)甘氨酸乙酯(200.00mg，0.52mmol)于甲醇/水(10.0mL/2.0mL)中的溶液中添加氢氧化锂单水合物(219mg，5.22mmol)。将混合物在40℃搅拌过夜且浓缩以去除甲醇。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤，用水洗涤且通过逆向制备型HPLC纯化，得到呈黄色固体状的(5-羟基-4-甲基-6'-(三氟甲基)-[3,3'-联吡啶]-6-羰基)甘氨酸(甲酸盐)(48.2mg，0.14mmol，26％产率)。LC-MS：m/z＝356[M+H]+，滞留时间4.420min(方法A)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ12.88(br,2H),9.43(t,J＝6.0Hz,1H),8.90(d,J＝1.5Hz,1H),8.24(dd,J＝8.5Hz,J＝2.0Hz,1H),8.16(s,1H),8.07(d,J＝7.5Hz,1H),4.01(d,J＝6.0Hz,2H),2.18(s,3H)。
实例10：化合物10的制备
5-氯-4-甲基-[3,3'-联吡啶]-6-甲腈
向3,5-二氯-4-甲基-吡啶-2-甲腈(500mg，2.67mmol)、吡啶-3-基硼酸(329mg，2.67mmol)和碳酸钾(443mg，3.21mmol)中的溶液中添加含[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯钯(II)(78mg，0.11mmol)的N,N-二甲基甲酰胺/水(5.0mL/0.5mL)。将混合物在45℃在氮气下搅拌过夜并且冷却到室温。将乙酸乙酯和水添加至溶液中，并且分离各层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩到干燥。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到呈黄色固体状的5-氯-4-甲基-[3,3'-联吡啶]-6-甲腈(300mg，1.31mmol，49％产率)。LC-MS：m/z＝230.1[M+H]+，滞留时间＝1.83min(方法A)。
5-(苯甲氧基)-4-甲基-[3,3'-联吡啶]-6-甲腈
在0℃在氮气下向5-氯-4-甲基-[3,3'-联吡啶]-6-甲腈(300.0mg，1.31mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)中的溶液中添加氢化钠(78mg，1.94mmol，于矿物油中的60％w/w分散液)。将混合物在0℃搅拌10min，并且接着添加苯甲醇(152mg，1.41mmol)。将溶液在0℃搅拌1.0h且用乙酸乙酯和水稀释。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝3/1)纯化，得到呈黄色固体状的5-(苯甲氧基)-4-甲基-[3,3'-联吡啶]-6-甲腈(300mg，0.99mmol，76％产率)。LC-MS：m/z＝302.1[M+H]+，滞留时间＝2.21min(方法A)。
5-(苯甲氧基)-4-甲基-[3,3'-联吡啶]-6-甲酸
向5-(苯甲氧基)-4-甲基-[3,3'-联吡啶]-6-甲腈(300mg，0.99mmol)于乙醇(10.0mL)中的溶液中添加30％氢氧化钠水溶液(4.0mL)。将混合物在100℃搅拌3.0h，冷却且浓缩以去除乙醇。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤且干燥，得到呈白色固体状的5-(苯甲氧基)-4-甲基-[3,3'-联吡啶]-6-甲酸(300mg，0.94mmol，94％产率)。LC-MS：m/z＝321.1[M+H]+，滞留时间2.00min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
(5-(苯甲氧基)-4-甲基-[3,3'-联吡啶]-6-羰基)甘氨酸乙酯
将5-(苯甲氧基)-4-甲基-[3,3'-联吡啶]-6-甲酸(300mg，0.94mmol)、甘氨酸乙酯盐酸盐(144mg，1.03mmol)、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻(536mg，1.03mmol)和三乙胺(473mg，4.68mmol)于二氯甲烷(10.0mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。反应物用水淬灭，并且用二氯甲烷萃取。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到呈白色固体状的(5-(苯甲氧基)-4-甲基-[3,3'-联吡啶]-6-羰基)甘氨酸乙酯(240mg，0.59mmol，63％产率)。LC-MS：m/z＝406.1[M+H]+，滞留时间2.15min(方法A)。
(5-羟基-4-甲基-[3,3'-联吡啶]-6-羰基)甘氨酸乙酯
将(5-(苯甲氧基)-4-甲基-[3,3'-联吡啶]-6-羰基)甘氨酸乙酯(240mg，0.59mmol)和10％钯/碳(20.0mg)于四氢呋喃(10.0mL)中的混合物在室温下在氢气气氛下搅拌18.0h。过滤不可溶的固体且浓缩滤液，得到呈黄色固体状的(5-羟基-4-甲基-[3,3'-联吡啶]-6-羰基)甘氨酸乙酯(185mg，0.59mmol，99％产率)。LC-MS：m/z＝316.1[M+H]+，滞留时间2.19min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
(5-羟基-4-甲基-[3,3'-联吡啶]-6-羰基)甘氨酸
向(5-羟基-4-甲基-[3,3'-联吡啶]-6-羰基)甘氨酸乙酯(185mg，0.59mmol)于四氢呋喃/水(8.0mL/2.0mL)中的溶液中添加氢氧化锂单水合物(164mg，4.0mmol)。将混合物搅拌过夜且浓缩以去除四氢呋喃。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤，用水洗涤并且通过逆向制备型HPLC来纯化，得到呈白色固体状的(5-羟基-4-甲基-[3,3'-联吡啶]-6-羰基)甘氨酸(甲酸盐)(34.0mg，0.118mmol，20％产率)。LC-MS：m/z＝288.1[M+H]+，滞留时间2.20min(方法A)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.83(s,2H),9.41(t,J＝6.1Hz,1H),8.84-8.50(m,2H),8.13(s,1H),8.10(s,1H),8.04-7.81(m,1H),7.73-7.41(m,1H),4.01(d,J＝6.1Hz,2H),2.17(s,3H)。
实例11：化合物11的制备
5-氯-4-甲基-[3,4'-联吡啶]-6-甲腈
向3,5-二氯-4-甲基-吡啶-2-甲腈(500.00mg，2.67mmol)、吡啶-4-基硼酸(328.63mg，2.67mmol)和碳酸钾(443.41mg，3.21mmol)的溶液中添加含[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯钯(II)(78.25mg，0.11mmol)的N,N-二甲基甲酰胺/水(10.0mL/1.0mL)。将混合物在50℃在氮气下搅拌16.0h，并且冷却到室温。将乙酸乙酯和水添加至溶液中，并且分离各层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩到干燥。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到5-氯-4-甲基-[3,4'-联吡啶]-6-甲腈(292mg，1.27mmol，48％产率)。LC-MS：m/z＝230[M+H]+，滞留时间1.599min(方法A)。
5-(苯甲氧基)-4-甲基-[3,4'-联吡啶]-6-甲腈
在0℃在氮气下向5-氯-4-甲基-[3,4'-联吡啶]-6-甲腈(250.00mg，1.09mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)中的溶液中添加氢化钠(52.3mg，1.31mmol，于矿物油中的60％w/w分散液)。将混合物在0℃搅拌10min，并且接着添加苯甲醇(141.25mg，1.31mmol，0.14mL)。将溶液在0℃搅拌50min且用乙酸乙酯和水稀释。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到5-(苯甲氧基)-4-甲基-[3,4'-联吡啶]-6-甲腈(86mg，0.29mmol，26％产率)。LC-MS：m/z＝302[M+H]+，滞留时间1.895min(方法B)。
5-羟基-4-甲基-[3,4'-联吡啶]-6-甲酸
向35-(苯甲氧基)-4-甲基-[3,4'-联吡啶]-6-甲腈(86.00mg，0.29mmol)于乙醇(5.0mL)中的溶液中添加30％氢氧化钠水溶液(4.0mL)。将混合物在100℃搅拌3.0h，冷却且浓缩以去除乙醇。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤并加以干燥，得到呈白色固体状的5-羟基-4-甲基-[3,4'-联吡啶]-6-甲酸(160mg，粗物质)。LC-MS：m/z＝231[M+H]+，滞留时间1.020min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
(5-羟基-4-甲基-[3,4'-联吡啶]-6-羰基)甘氨酸乙酯
将5-羟基-4-甲基-[3,4'-联吡啶]-6-甲酸(130.00mg，0.56mmol)、甘氨酸乙酯盐酸盐(78.82mg，0.56mmol)、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻(323.24mg，0.62mmol)和三乙胺(285.70mg，2.82mmol，0.4mL)于二氯甲烷(10.0mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。反应物用水淬灭且用二氯甲烷萃取。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝3/2)纯化，得到(5-羟基-4-甲基-[3,4'-联吡啶]-6-羰基)甘氨酸乙酯(36mg，0.114mmol，20％产率)。LC-MS：m/z＝316[M+H]+，滞留时间1.586min(方法A)。
(5-羟基-4-甲基-[3,4'-联吡啶]-6-羰基)甘氨酸
向(5-羟基-4-甲基-[3,4'-联吡啶]-6-羰基)甘氨酸乙酯(30.00mg，0.10mmol)于甲醇/水(4.0mL/1.0mL)中的溶液中添加氢氧化锂单水合物(22.79mg，0.95mmol)。将混合物在40℃搅拌16.0h且浓缩以去除甲醇。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤，用水洗涤并加以干燥，得到呈白色固体状的(5-羟基-4-甲基-[3,4'-联吡啶]-6-羰基)甘氨酸(13.2mg，46％产率)。LC-MS：m/z＝288[M+H]+，滞留时间2.159min(方法A)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ12.85(br,2H),9.42(s,1H),8.72(dd,J＝4.5Hz,J＝1.5Hz,2H),8.08(s,1H),7.51(dd,J＝4.0Hz,J＝1.5Hz,2H),4.01(d,J＝6.0Hz,2H),2.17(s,3H)。
实例12：化合物12的制备
5'-氯-4'-甲基-[2,3'-联吡啶]-6'-甲腈
向3,5-二溴-4,6-二甲基皮考啉腈(1.86g，10mmol)、2-(三丁基锡烷基)吡啶(4.42g，12mmol)、氟化铯(302mg，2.0mmol)和碘化铜(380mg，2.0mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(15.0mL)中的溶液中添加四(三苯基膦)钯(116mg，0.1mmol)。将混合物在50℃在氮气下搅拌16.0h，并且冷却到室温。将乙酸乙酯和水添加至溶液中，并且分离各层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩到干燥。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝10/1)纯化，得到呈黄色固体状的5'-氯-4'-甲基-[2,3'-联吡啶]-6'-甲腈(460mg，2.0mmol，20％产率)。LC-MS:m/z＝230.0[M+H]+，滞留时间＝1.704min(方法A)。
5'-(苯甲氧基)-4'-甲基-[2,3'-联吡啶]-6'-甲腈
在0℃在氮气下向5'-氯-4'-甲基-[2,3'-联吡啶]-6'-甲腈(160.0mg，0.70mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)中的溶液中添加氢化钠(33mg，0.84mmol，于矿物油中的60％w/w分散液)。将混合物在0℃搅拌10min，并且接着添加苯甲醇(90mg，0.84mmol)。将溶液在0℃搅拌1h且用乙酸乙酯和水稀释。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/2)纯化，得到呈黄色固体状的5'-(苯甲氧基)-4'-甲基-[2,3'-联吡啶]-6'-甲腈(120mg，0.40mmol，57％产率)。LC-MS：m/z＝302.1[M+H]+，滞留时间＝2.21min(方法A)。
5'-羟基-4'-甲基-[2,3'-联吡啶]-6'-甲酸
向5'-(苯甲氧基)-4'-甲基-[2,3'-联吡啶]-6'-甲腈(120mg，0.40mmol)于乙醇(10.0mL)中的溶液中添加30％氢氧化钠水溶液(4.0mL)。将混合物在100℃搅拌5.0h，冷却且浓缩以去除乙醇。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤并加以干燥，得到呈白色固体状的5'-羟基-4'-甲基-[2,3'-联吡啶]-6'-甲酸(140mg，粗物质)。LC-MS：m/z＝321.1[M+H]+，滞留时间2.00min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
(5'-羟基-4'-甲基-[2,3'-联吡啶]-6'-羰基)甘氨酸乙酯
将5'-羟基-4'-甲基-[2,3'-联吡啶]-6'-甲酸(140mg，0.44mmol)、甘氨酸乙酯盐酸盐(61mg，0.44mmol)、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻(250mg，0.48mmol)和三乙胺(254mg，2.52mmol)于二氯甲烷(5.0mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。反应物用水淬灭，并且用二氯甲烷萃取。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/2)纯化，得到呈白色固体状的(5'-羟基-4'-甲基-[2,3'-联吡啶]-6'-羰基)甘氨酸乙酯(50mg，0.16mmol，26％产率)。LC-MS：m/z＝406.1[M+H]+，滞留时间2.15min(方法A)。
(5'-羟基-4'-甲基-[2,3'-联吡啶]-6'-羰基)甘氨酸
向(5'-羟基-4'-甲基-[2,3'-联吡啶]-6'-羰基)甘氨酸乙酯(50mg，0.16mmol)于四氢呋喃/水(8.0mL/2.0mL)中的溶液中添加氢氧化锂单水合物(164mg，4.0mmol)。将混合物搅拌过夜且浓缩以去除四氢呋喃。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤，用水洗涤且通过逆向制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的(5'-羟基-4'-甲基-[2,3'-联吡啶]-6'-羰基)甘氨酸(9.6mg，21％产率)。LC-MS：m/z＝288.0[M+H]+，滞留时间2.54min(方法A)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.82(s,2H),9.42(t,J＝6.0Hz,1H),8.76(d,J＝4.3Hz,1H),8.21(s,1H),7.99(td,J＝7.8,1.7Hz,1H),7.68(d,J＝7.8Hz,1H),7.50(dd,J＝6.8,4.9Hz,1H),4.02(d,J＝6.2Hz,2H),2.24(s,3H)。
实例13：化合物13的制备
3-氯-5-(3-氯苯基)-4-甲基皮考啉腈
向3,5-二氯-4-甲基皮考啉腈(500mg，2.67mmol)、(3-氟苯基)硼酸(418mg，2.67mmol)和碳酸钾(443mg，3.21mmol)中的溶液中添加含[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯钯(II)(78mg，0.11mmol)的N,N-二甲基甲酰胺/水(5.0mL/0.5mL)。将混合物在45℃在氮气下搅拌16.0h，并且冷却到室温。将乙酸乙酯和水添加至溶液中，并且分离各层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩到干燥。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝2/1)纯化，得到呈黄色固体状的3-氯-5-(3-氯苯基)-4-甲腈皮考啉腈(640mg，2.43mmol，91％产率)。LC-MS：m/z＝264.1[M+H]+，滞留时间＝1.83min(方法A)。
3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基皮考啉腈
在0℃在氮气下向3-氯-5-(3-氯苯基)-4-甲腈皮考啉腈(3.2g，12.16mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(40.0mL)中的溶液中添加氢化钠(584mg，14.60mmol，于矿物油中的60％w/w分散液)。将混合物在0℃搅拌10min，并且接着添加苯甲醇(1.58g，14.60mmol)。将溶液在0℃搅拌1.0h且用乙酸乙酯和水稀释。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝3/1)纯化，得到呈黄色固体状的3-(苯甲氧基)-5-(3-氟苯基)-4-甲基皮考啉腈(3.2g，9.56mmol，80％产率)。LC-MS：m/z＝335.1[M+H]+，滞留时间＝2.21min(方法A)。
3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基皮考啉酸
向3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基皮考啉腈(3.2g，9.56mmol)于乙醇(60.0mL)中的溶液中添加30％氢氧化钠水溶液(20.0mL)。将混合物在100℃搅拌5.0h，冷却且浓缩以去除乙醇。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤且干燥，得到呈白色固体状的3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基皮考啉酸(2.1g，5.96mmol，64％产率)。LC-MS：m/z＝354.1[M+H]+，滞留时间2.00min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
2-(3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基吡啶甲酰胺基)-2-甲基丙酸甲酯
将3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基皮考啉酸(100mg，0.28mmol)、2-氨基-2-甲基丙酸甲酯盐酸盐(44mg，0.28mmol)、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻(162mg，0.31mmol)和三乙胺(143mg，1.41mmol)于二氯甲烷(5.0mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。反应物用水淬灭，并且用二氯甲烷萃取。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到呈白色固体状的2-(3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基皮考啉酰胺基)-2-甲基丙酸甲酯(110mg，0.24mmol，87％产率)。LC-MS：m/z＝453.1[M+H]+，滞留时间2.15min(方法A)。
2-(5-(3-氯苯基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰胺基)-2-甲基丙酸甲酯
将2-(3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基皮考啉酰胺基)-2-甲基丙酸甲酯(500mg，1.10mmol)和10％钯/碳(50.0mg)于四氢呋喃(10.0mL)中的混合物在氢气气氛下搅拌18.0h。过滤不可溶的固体且浓缩滤液，得到呈白色固体状的2-(5-(3-氯苯基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰胺基)-2-甲基丙酸甲酯(240mg，0.66mmol，60％产率)。LC-MS：m/z＝363.1[M+H]+，滞留时间2.19min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
2-(5-(3-氯苯基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰胺基)-2-甲基丙酸
向2-(5-(3-氯苯基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰胺基)-2-甲基丙酸甲酯(240mg，0.66mmol)于四氢呋喃/水(10.0mL/2.0mL)中的溶液中添加氢氧化锂单水合物(164mg，4.0mmol)。将混合物搅拌过夜且浓缩以去除四氢呋喃。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤，用水洗涤并加以干燥，得到呈白色固体状的2-(5-(3-氯苯基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰胺基)-2-甲基丙酸(176.3mg，0.51mmol，77％产率)。LC-MS：m/z＝349.0[M+H]+，滞留时间5.36min(方法A)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.93(br s,1H),12.70(s,1H),9.07(s,1H),8.04(s,1H),7.67-7.45(m,3H),7.47-7.18(m,1H),2.14(s,3H),1.59(s,6H)。
实例14：化合物14的制备
1-(3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基皮考啉酰胺基)环丙烷-1-甲酸乙酯
将3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基皮考啉酸(来自实例13的中间物)(100mg，0.28mmol)、1-氨基环丙烷-1-甲酸乙酯盐酸盐(43mg，0.28mmol)、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻(162mg，0.31mmol)和三乙胺(143mg，1.41mmol)于二氯甲烷(5.0mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。反应物用水淬灭，并且用二氯甲烷萃取。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到呈白色固体状的1-(3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基皮考啉酰胺基)环丙烷-1-甲酸乙酯(110mg，0.24mmol，85％产率)。LC-MS:m/z＝465.1[M+H]+，滞留时间2.15min(方法A)。
1-(5-(3-氯苯基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰胺基)环丙烷-1-甲酸乙酯
将1-(3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基皮考啉酰胺基)环丙烷-1-甲酸乙酯(500mg，1.08mmol)和10％钯/碳(50.0mg)于四氢呋喃(10.0mL)中的混合物在氢气气氛下搅拌18.0h。过滤不可溶的固体且浓缩滤液，得到呈白色固体状的1-(5-(3-氯苯基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰胺基)环丙烷-1-甲酸乙酯(250mg，0.67mmol，62％产率)。LC-MS：m/z＝375.1[M+H]+，滞留时间2.19min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
1-(5-(3-氯苯基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰胺基)环丙烷-1-甲酸
向1-(5-(3-氯苯基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰胺基)环丙烷-1-甲酸乙酯(250mg，0.67mmol)于四氢呋喃/水(10.0mL/2.0mL)中的溶液中添加氢氧化锂单水合物(164mg，4.0mmol)。将混合物搅拌过夜且浓缩以去除四氢呋喃。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤，用水洗涤并加以干燥，得到呈白色固体状的1-(5-(3-氯苯基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰胺基)环丙烷-1-甲酸(133.0mg，0.38mmol，58％产率)。LC-MS：m/z＝347.0[M+H]+，滞留时间4.93min(方法A)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.93(s,1H),12.57(s,1H),9.71(s,1H),8.02(s,1H),7.67-7.46(m,3H),7.45-7.36(m,1H),2.14(s,3H),1.44(dd,J＝7.8,4.6Hz,2H),1.25(dd,J＝7.9,4.6Hz,2H)。
实例15：化合物15的制备
1-(3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基皮考啉酰胺基)环丁烷-1-甲酸甲酯
将3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基皮考啉酸(来自实例13的中间物)(400mg，1.13mmol)、1-氨基环丁烷-1-甲酸甲酯盐酸盐(187mg，1.13mmol)、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻(647mg，1.24mmol)和三乙胺(571mg，5.65mmol)于二氯甲烷(15.0mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。反应物用水淬灭，并且用二氯甲烷萃取。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到呈白色固体状的1-(3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基皮考啉酰胺基)环丁烷-1-甲酸甲酯(500mg，1.08mmol，95％产率)。LC-MS:m/z＝465.1[M+H]+，滞留时间2.15min(方法A)。
1-(5-(3-氯苯基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰胺基)环丁烷-1-甲酸甲酯
将1-(3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基皮考啉酰胺基)环丁烷-1-甲酸甲酯(500mg，1.08mmol)和10％钯/碳(50.0mg)于四氢呋喃(10.0mL)中的混合物在氢气气氛下搅拌18.0h。过滤不可溶的固体且浓缩滤液，得到呈白色固体状的1-(5-(3-氯苯基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰胺基)环丁烷-1-甲酸甲酯(250mg，0.67mmol，62％产率)。LC-MS：m/z＝375.1[M+H]+，滞留时间2.19min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
1-(5-(3-氯苯基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰胺基)环丁烷-1-甲酸
向1-(5-(3-氯苯基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰胺基)环丁烷-1-甲酸甲酯(250mg，0.67mmol)于四氢呋喃/水(10.0mL/2.0mL)中的溶液中添加氢氧化锂单水合物(164mg，4.0mmol)。将混合物搅拌过夜且浓缩以去除四氢呋喃。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤，用水洗涤并加以干燥，得到呈白色固体状的1-(5-(3-氯苯基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰胺基)环丁烷-1-甲酸(93.0mg，0.26mmol，39％产率)。LC-MS：m/z＝361.0[M+H]+，滞留时间5.37min(方法A)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δδ12.80(s,1H),12.69(brs,1H),9.63(s,1H),8.05(s,1H),7.75-7.44(m,3H),7.49-7.26(m,1H),2.76-2.38(m,6H),2.14(s,3H),2.03-1.85(m,2H)。
实例16：化合物16的制备
3-(3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基皮考啉酰胺基)氧杂环丁烷-3-甲酸甲酯
将3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基皮考啉酸(来自实例13的中间物)(450mg，1.27mmol)、3-氨基氧杂环丁烷-3-甲酸甲酯盐酸盐(213mg，1.27mmol)、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻(728mg，1.40mmol)、三乙胺(571mg，5.65mmol)于二氯甲烷(15.0mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。反应物用水淬灭，并且用二氯甲烷萃取。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到呈白色固体状的3-(3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基皮考啉酰胺基)氧杂环丁烷-3-甲酸甲酯(500mg，1.07mmol，84％产率)。LC-MS:m/z＝467.1[M+H]+，滞留时间2.15min(方法A)。
3-(5-(3-氯苯基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰胺基)氧杂环丁烷-3-甲酸甲酯
将3-(3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基皮考啉酰胺基)氧杂环丁烷-3-甲酸甲酯(500mg，1.07mmol)和10％钯/碳(50.0mg)于四氢呋喃(10.0mL)中的混合物在氢气气氛下搅拌18h。过滤不可溶的固体且浓缩滤液，得到呈白色固体状的3-(5-(3-氯苯基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰胺基)氧杂环丁烷-3-甲酸甲酯(300mg，0.80mmol，74％产率)。LC-MS：m/z＝377.1[M+H]+，滞留时间2.19min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
3-(5-(3-氯苯基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰胺基)氧杂环丁烷-3-甲酸
向3-(5-(3-氯苯基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰胺基)氧杂环丁烷-3-甲酸甲酯(300mg，0.80mmol)于四氢呋喃/水(10.0mL/2.0mL)中的溶液中添加氢氧化锂单水合物(164mg，4.0mmol)。将混合物搅拌过夜且浓缩以去除四氢呋喃。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤，用水洗涤并加以干燥，得到呈白色固体状的3-(5-(3-氯苯基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰胺基)氧杂环丁烷-3-甲酸(71.4mg，0.20mmol，25％产率)。LC-MS：m/z＝363.0[M+H]+，滞留时间4.85min(方法A)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.53(s,1H),10.18(s,1H),8.08(s,1H),7.58-7.53(m,3H),7.45-7.37(m,1H),4.94-4.80(m,4H),2.14(s,3H)。
实例17：化合物17的制备
3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)皮考啉腈
在0℃在氮气下向3-氯-4-甲基-5-(3-苯氧基苯基)皮考啉腈(来自实例8的中间物)(700mg，2.39mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)中的溶液中添加氢化钠(114.80mg，2.87mmol，于矿物油中的60％w/w分散液)。将混合物在0℃搅拌10min，并且接着添加苯甲醇(309.6mg，2.87mmol)。将溶液在0℃搅拌1.0h且用乙酸乙酯和水稀释。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝4/1)纯化，得到3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)皮考啉腈(400mg，1.09mmol，45.87％产率)。LC-MS:m/z＝366.0[M+H]+，滞留时间1.72min(方法A)。
3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)皮考啉酸
向3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)皮考啉腈(400mg，1.09mmol)于乙醇(10.0mL)中的溶液中添加30％氢氧化钠水溶液(8.0mL)。将混合物在100℃搅拌3.0h，冷却且浓缩以去除乙醇。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤且干燥，得到呈白色固体状的3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)皮考啉酸(350mg，0.91mmol，75.32％产率)。LC-MS：m/z＝385.0[M+H]+，滞留时间1.51min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)皮考啉酸(350mg，0.91mmol)、甘氨酸乙酯盐酸盐(73.84mg，0.53mmol)、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻(276.25mg，0.53mmol)和三乙胺(223.57mg，2.21mmol)于二氯甲烷(5.0mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。反应物用水淬灭，并且用二氯甲烷萃取。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/2)纯化，得到呈白色固体状的(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(150mg，0.32mmol，72.69％产率)。LC-MS：m/z＝470.0[M+H]+，滞留时间2.04min(方法B)。
(3-羟基-4-甲基-5-(2-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-甲基喹啉-6-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(150mg，0.32mmol)和10％钯/碳(20.0mg)于四氢呋喃(10.0mL)中的混合物在室温下在氢气气氛下搅拌过夜。过滤不可溶的固体且浓缩滤液，得到呈黄色固体状的(3-羟基-4-甲基-5-(2-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(120mg，0.31mmol，97.91％产率)。LC-MS：m/z＝384.3[M+H]+，滞留时间2.27min(方法B)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
(3-羟基-4-甲基-5-(2-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)皮考啉酰基)甘氨酸
向(3-羟基-4-甲基-5-(2-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(100mg，0.26mmol)于四氢呋喃/水(8.0mL/2.0mL)中的溶液中添加氢氧化锂单水合物(164mg，4.0mmol)。将混合物搅拌过夜且浓缩以去除四氢呋喃。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤，用水洗涤且通过逆向制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的(3-羟基-4-甲基-5-(2-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)皮考啉酰基)甘氨酸(甲酸盐)(17.9mg，0.05mmol，19.39％)。LC-MS：m/z＝356.1[M+H]+，滞留时间3.91min(方法A)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.73(s,1H),9.17(s,1H),8.17(s,1H),7.97(s,1H),6.94(d,J＝6.3Hz,2H),6.56(d,J＝8.7Hz,1H),5.93(br s,1H),3.95(d,J＝5.5Hz,2H),2.82-2.60(m,3H),2.58-2.53(m,1H),2.18(s,3H),1.93-1.81(m,1H),1.56-1.37(m,1H),1.17(d,J＝6.1Hz,3H)。
实例18：化合物18的制备
2-(4-溴-1H-吡唑-1-基)吡啶
向2-(1H-吡唑-1-基)吡啶(1.0g，6.89mmol)于乙酸(20mL)中的溶液中逐滴添加溴(3302.54mg，20.67mmol，1.06mL)。将混合物在室温下搅拌30min。反应物用水稀释并且用乙酸乙酯萃取两次。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥且浓缩。获得呈黄色固体状的粗物质2-(4-溴-1H-吡唑-1-基)吡啶(1.35g，粗物质)。LC-MS：m/z＝224[M+H]+，滞留时间1.941min(方法B)。将产物直接用于下一步骤。
2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑-1-基)吡啶
向2-(4-溴-1H-吡唑-1-基)吡啶(1.2g，5.36mmol)、双(频哪醇)二硼(6.8g，26.78mmol)和乙酸钾(2.63g，26.78mmol)的溶液中添加含[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯钯(II)(391.88mg，0.54mmol)的1,4-二噁烷(15.0mL)。将混合物在90℃在氮气下搅拌16.0h，并且冷却到室温。将乙酸乙酯和水添加至溶液中，并且分离各层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩到干燥。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝10/1)纯化，得到2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑-1-基)吡啶(1.38g，5.09mmol，95％产率)。LC-MS：m/z＝272[M+H]+，滞留时间2.000min(方法B)。
3-氯-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉腈
向3,5-二氯-4-甲基皮考啉腈(862.2mg，4.61mmol)、2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑-1-基)吡啶(1.25g，4.61mmol)和碳酸钾(764.6mg，5.53mmol)的溶液中添加含[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯钯(II)(134.9mg，0.18mmol)的N,N-二甲基甲酰胺/水(10.0mL/1.0mL)。将混合物在45℃在氮气下搅拌16.0h且冷却至室温。将乙酸乙酯和水添加至溶液中，并且分离各层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥且浓缩至干燥。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝5/1)纯化，得到3-氯-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉腈(342mg，1.16mmol，25％产率)。LC-MS：m/z＝296[M+H]+，滞留时间2.090min(方法A)。
3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉腈
在0℃在氮气下向3-氯-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉腈(300.0mg，1.01mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)中的溶液中添加氢化钠(48.8mg，1.22mmol，于矿物油中的60％w/w分散液)。将混合物在0℃搅拌10min，并且接着添加苯甲醇(131.6mg，1.22mmol，0.127mL)。将溶液在0℃搅拌50min且用乙酸乙酯和水稀释。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝5/1)纯化，得到3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉腈(82mg，0.22mmol，22％产率)。LC-MS：m/z＝368[M+H]+，滞留时间2.138min(方法B)。
3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉酸
向3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉腈(70.0mg，0.19mmol)于乙醇(3.0mL)中的溶液中添加30％氢氧化钠水溶液(1.0mL)。将混合物在100℃搅拌5.0h，冷却且浓缩以去除乙醇。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤且干燥，得到呈白色固体状的3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉酸(72mg，粗物质)。LC-MS：m/z＝387[M+H]+，滞留时间1.290min(方法B)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉酸(60.0mg，0.16mmol)、甘氨酸乙酯盐酸盐(26.41mg，0.19mmol)、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻(88.89mg，0.17mmol)和三乙胺(78.56mg，0.78mmol)于二氯甲烷(5.0mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。反应物用水淬灭，并且用二氯甲烷萃取。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝3/2)纯化，得到(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(70mg，0.15mmol，93％产率)。LC-MS：m/z＝472[M+H]+，滞留时间2.028min(方法B)。
(3-羟基-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(60.0mg，0.13mmol)和10％钯/碳(20.0mg)于四氢呋喃(10.0mL)中的混合物在氢气气氛下搅拌5.0h。过滤不可溶的固体且浓缩滤液，得到呈白色固体状的(3-羟基-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(50mg，粗物质)。LC-MS：m/z＝382[M+H]+，滞留时间2.127min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
(3-羟基-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸
向(3-羟基-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(50.0mg，0.13mmol)于四氢呋喃/水(10.0mL/2.0mL)中的溶液中添加氢氧化锂单水合物(55.0mg，1.31mmol)。将混合物搅拌过夜且浓缩以去除四氢呋喃。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤，用水洗涤且通过逆向制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的(3-羟基-4-甲基-5-(1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸(甲酸盐)(28.5mg，0.08mmol，62％产率)。LC-MS：m/z＝354[M+H]+，滞留时间4.255min(方法A)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ12.84(br,1H),9.27(br,1H),9.01(s,1H),8.53(d,J＝4.0Hz,1H),8.35(s,1H),8.27(s,1H),8.08-8.00(m,2H),7.44-7.41(m,1H),3.97(d,J＝6.0Hz,2H),2.37(s,3H)。
实例19：化合物19的制备
4-溴-1-(4-氟苯基)-1H-吡唑
将4-溴-1H-吡唑(1.47g，10.0mmol)、1-氟-4-碘苯(2.44g，11.0mmol)、碳酸铯(6.50g，20.0mmol)、碘化铜(380mg，2.0mmol)和N,N'-二甲基-1,2-乙二胺(176mg，2.0mmol)于乙腈(20.0mL)中的混合物在80℃于密封试管中搅拌过夜。将溶液冷却到室温并且过滤。将乙酸乙酯和水添加至溶液中，并且分离各层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩到干燥。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝5/1)纯化，得到呈黄色固体状的4-溴-1-(4-氟苯基)-1H-吡唑(1.30g，5.39mmol，53.9％产率)。LC-MS：m/z＝243.0[M+H]+，滞留时间2.01min(方法A)。
1-(4-氟苯基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑
向4-溴-1-(4-氟苯基)-1H-吡唑(1.30g，5.39mmol)、双(频哪醇)二硼(1.21g，4.78mmol)和乙酸钾(2.11g，21.6mmol)的溶液中添加含[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯钯(II)(395mg，0.54mmol)的1,4-二噁烷(15.0mL)。将混合物在90℃在氮气下搅拌16.0h，并且冷却到室温。将乙酸乙酯和水添加至溶液中，并且分离各层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩到干燥。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝4/1)纯化，得到1-(4-氟苯基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑(1.21g，4.20mmol，77.9％产率)。LC-MS：m/z＝289.1[M+H]+，滞留时间2.14min(方法A)。
3-氯-5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉腈
向3,5-二氯-4-甲基皮考啉腈(785mg，4.20mmol)、1-(4-氟苯基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑(1.21g，4.20mmol)和碳酸钾(869.4mg，6.30mmol)的溶液中添加含[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯钯(II)(307mg，0.42mmol)的N,N-二甲基甲酰胺/水(10.0mL/1.0mL)。将混合物在50℃在氮气下搅拌16.0h且冷却至室温。将乙酸乙酯和水添加至溶液中，并且分离各层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥且浓缩至干燥。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝2/1)纯化，得到3-氯-5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉腈(180mg，0.58mmol，13.8％产率)。LC-MS：m/z＝313.0[M+H]+，滞留时间2.13min(方法A)。
3-(苯甲氧基)-5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉腈
在0℃在氮气下向3-氯-5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉腈(180mg，0.58mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)中的溶液中添加氢化钠(27.8mg，0.70mmol，于矿物油中的60％w/w分散液)。将混合物在0℃搅拌10min，并且接着添加苯甲醇(62.6mg，0.58mmol)。将溶液在0℃搅拌1.0h且用乙酸乙酯和水稀释。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝5/1)纯化，得到3-(苯甲氧基)-5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉腈(35mg，0.09mmol，15.7％产率)。LC-MS:m/z＝385.1[M+H]+，滞留时间2.194min(方法A)。
3-(苯甲氧基)-5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉酸
向3-(苯甲氧基)-5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉腈(35mg，0.09mmol)于乙醇(3.0mL)中的溶液中添加30％氢氧化钠水溶液(1.0mL)。将混合物在100℃搅拌5.0h，冷却且浓缩以去除乙醇。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤且干燥，得到呈白色固体状的3-(苯甲氧基)-5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉酸(32mg，粗物质)。LC-MS：m/z＝404.1[M+H]+，滞留时间2.014min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
(3-(苯甲氧基)-5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将3-(苯甲氧基)-5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉酸(32mg，粗物质)、甘氨酸乙酯盐酸盐(13.9mg，0.1mmol)、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻(62.4mg，0.12mmol)和三乙胺(50.5mg，0.5mmol)于二氯甲烷(5.0mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。反应物用水淬灭，并且用二氯甲烷萃取。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到(3-(苯甲氧基)-5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(40mg，0.08mmol，91％产率)。LC-MS：m/z＝489.1[M+H]+，滞留时间2.128min(方法A)。
(5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将(3-(苯甲氧基)-5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(40mg，0.08mmol)和10％钯/碳(10.0mg)于四氢呋喃(5.0mL)中的混合物在氢气气氛下搅拌过夜。过滤不可溶的固体且浓缩滤液，得到呈黄色固体状的(5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(30mg，0.08mmol，100％产率)。LC-MS：m/z＝399.0[M+H]+，滞留时间2.15min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
(5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸
向(5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(30mg，0.08mmol)于四氢呋喃/水(5.0mL/1.0mL)中的溶液中添加氢氧化锂单水合物(42mg，1.0mmol)。将混合物搅拌过夜且浓缩以去除四氢呋喃。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤，用水洗涤且干燥，得到呈白色固体状的(5-(1-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸(20.1mg，0.05mmol，67.9％产率)。LC-MS：m/z＝371.0[M+H]+，滞留时间4.641min(方法A)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ12.88(s,1H),9.21(s,1H),8.91(s,1H),8.32(s,1H),8.20(s,1H),8.07-7.84(m,2H),7.53-7.28(m,2H),3.92(d,J＝5.7Hz,2H),2.37(s,3H)。
实例20：化合物20的制备
4-溴-1-异丙基-1H-吡唑
在0℃在氮气下向4-溴-1H-吡唑(1.47g，10.0mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)中的溶液中添加氢化钠(480mg，12.0mmol，于矿物油中的60％w/w分散液)。将混合物在0℃搅拌20min，并且接着添加2-碘丙烷(1.7g，10.0mmol)。将溶液在室温下搅拌18.0h且用乙酸乙酯和水稀释。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝10/1)纯化，得到4-溴-1-异丙基-1H-吡唑(1.47g，7.8mmol，78％产率)。LC-MS：m/z＝189.0[M+H]+，滞留时间1.90min(方法B)。
1-异丙基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑
向4-溴-1-异丙基-1H-吡唑(1.47g，7.8mmol)、双(频哪醇)二硼(3.96g，15.6mmol)和乙酸钾(3.06，31.2mmol)的溶液中添加含[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯钯(II)(570mg，0.78mmol)的1,4-二噁烷(15.0mL)。将混合物在90℃在氮气下搅拌16.0h，并且冷却到室温。将乙酸乙酯和水添加至溶液中，并且分离各层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩到干燥。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝5/1)纯化，得到1-异丙基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑(1.18g，5.0mmol，64.1％产率)。LC-MS：m/z＝237.0[M+H]+，滞留时间1.96min(方法B)。
3-氯-5-(1-异丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉腈
向3,5-二氯-4-甲基皮考啉腈(1.5g，8.02mmol)、1-异丙基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑(1.9g，8.02mmol)和碳酸钾(1.3g，9.63mmol)的溶液中添加含[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯钯(II)(235mg，0.32mmol)的N,N-二甲基甲酰胺/水(15.0mL/1.5mL)。将混合物在50℃在氮气下搅拌过夜并且冷却到室温。将乙酸乙酯和水添加至溶液中，并且分离各层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩到干燥。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝2/1)纯化，得到呈黄色固体状的3-氯-5-(1-异丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉腈(580mg，2.22mmol，29％产率)。LC-MS：m/z＝261.1[M+H]+，滞留时间＝1.83min(方法A)。
3-(苯甲氧基)-5-(1-异丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉腈
在0℃在氮气下向3-氯-5-(1-异丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉腈(580.0mg，2.22mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)中的溶液中添加氢化钠(108mg，2.67mmol，于矿物油中的60％w/w分散液)。将混合物在0℃搅拌10min，并且接着添加苯甲醇(288mg，2.67mmol)。将溶液在0℃搅拌50min且用乙酸乙酯和水稀释。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝3/1)纯化，得到呈黄色固体状的3-(苯甲氧基)-5-(1-异丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉腈(180mg，0.54mmol，24％产率)。LC-MS：m/z＝333.1[M+H]+，滞留时间＝2.21min(方法A)。
3-(苯甲氧基)-5-(1-异丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉酸
向3-(苯甲氧基)-5-(1-异丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉腈(180mg，0.54mmol)于乙醇(5.0mL)中的溶液中添加30％氢氧化钠水溶液(1.0mL)。将混合物在100℃搅拌5.0h，冷却且浓缩以去除乙醇。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤且干燥，得到呈白色固体状的3-(苯甲氧基)-5-(1-异丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉酸(100mg，0.28mmol，53％产率)。LC-MS：m/z＝352.1[M+H]+，滞留时间2.00min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
(3-(苯甲氧基)-5-(1-异丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将3-(苯甲氧基)-5-(1-异丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉酸(100mg，0.28mmol)、甘氨酸乙酯盐酸盐(40mg，0.28mmol)、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻(178mg，0.34mmol)和三乙胺(254mg，2.52mmol)于二氯甲烷(5.0mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。反应物用水淬灭，并且用二氯甲烷萃取。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到呈白色固体状的(3-(苯甲氧基)-5-(1-异丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(100mg，0.18mmol，81％产率)。LC-MS：m/z＝437.1[M+H]+，滞留时间2.15min(方法A)。
(3-羟基-5-(1-异丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将(3-(苯甲氧基)-5-(1-异丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(100mg，0.18mmol)和10％钯/碳(20.0mg)于四氢呋喃(10.0mL)中的混合物在氢气气氛下搅拌18h。过滤不可溶的固体且浓缩滤液，得到呈黄色固体状的(3-羟基-5-(1-异丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(80mg，粗物质)。LC-MS：m/z＝347.1[M+H]+，滞留时间2.19min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
(3-羟基-5-(1-异丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸
向(3-羟基-5-(1-异丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(80mg，粗物质)于四氢呋喃/水(8.0mL/2.0mL)中的溶液中添加氢氧化锂单水合物(164mg，4.0mmol)。将混合物搅拌过夜且浓缩以去除四氢呋喃。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤，用水洗涤且干燥，得到呈白色固体状的(3-羟基-5-(1-异丙基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸(45.7mg，62％产率)。LC-MS：m/z＝319.1[M+H]+，滞留时间3.81min(方法A)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δδ12.75(s,1H),9.24(t,J＝6.0Hz,1H),8.23(s,2H),7.86(s,1H),4.58(dt,J＝13.3,6.6Hz,1H),3.99(d,J＝6.1Hz,2H),2.31(s,3H),1.48(d,J＝6.7Hz,6H)。
实例21：化合物21的制备
4-溴-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑
在0℃在氮气下向4-溴-1H-吡唑(1.47g，10.0mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)中的溶液中添加氢化钠(480mg，12.0mmol，于矿物油中的60％w/w分散液)。将混合物在0℃搅拌20min，并且接着添加甲磺酸四氢-2H-吡喃-4-基酯(1.8g，10.0mmol)。将溶液在10℃搅拌2.0h且用乙酸乙酯和水稀释。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝10/1)纯化，得到4-溴-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑(1.16g，5.0mmol，50％产率)。LC-MS：m/z＝231.0[M+H]+，滞留时间1.76min(方法B)。
1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑
向4-溴-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑(2.8g，12.10mmol)、双(频哪醇)二硼(3.7g，14.50mmol)和乙酸钾(3.6g，36.30mmol)的溶液中添加含[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯钯(II)(443mg，0.61mmol)的1,4-二噁烷(15.0mL)。将混合物在90℃在氮气下搅拌16.0h，并且冷却到室温。将乙酸乙酯和水添加至溶液中，并且分离各层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩到干燥。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝5/1)纯化，得到呈白色固体状的1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑(2.5g，8.99mmol，74％产率)。LC-MS：m/z＝279.1[M+H]+，滞留时间＝1.83min(方法A)。
3-氯-4-甲基-5-(1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉腈
向3,5-二氯-4-甲基皮考啉腈(1.51g，8.09mmol)、1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑(2.25g，8.09mmol)和碳酸钾(1.34g，9.71mmol)的溶液中添加含[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯钯(II)(237mg，0.32mmol)的N,N-二甲基甲酰胺/水(6.0mL/0.6mL)。将混合物在50℃在氮气下搅拌16.0h，并且冷却到室温。将乙酸乙酯和水添加至溶液中，并且分离各层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩到干燥。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝2/1)纯化，得到呈黄色固体状的3-氯-4-甲基-5-(1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉腈(1.0g，3.31mmol，37％产率)。LC-MS：m/z＝303.1[M+H]+，滞留时间＝1.83min(方法A)。
3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉腈
在0℃在氮气下向3-氯-4-甲基-5-(1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉腈(900.0mg，2.97mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)中的溶液中添加氢化钠(143mg，3.57mmol，于矿物油中的60％w/w分散液)。将混合物在0℃搅拌10min，并且接着添加苯甲醇(386mg，3.57mmol)。将溶液在0℃搅拌1.0h且用乙酸乙酯和水稀释。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝3/1)纯化，得到呈黄色固体状的3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉腈(100mg，0.27mmol，8％产率)。LC-MS：m/z＝375.1[M+H]+，滞留时间＝2.21min(方法A)。
3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉酸
向3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉腈(100mg，0.27mmol)于乙醇(5.0mL)中的溶液中添加30％氢氧化钠水溶液(1.5mL)。将混合物在100℃搅拌5.0h，冷却且浓缩以去除乙醇。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤且干燥，得到呈白色固体状的3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉酸(90mg，0.23mmol，86％产率)。LC-MS：m/z＝394.1[M+H]+，滞留时间2.00min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉酸(90mg，0.23mmol)、甘氨酸乙酯盐酸盐(32mg，0.23mmol)、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻(143mg，0.27mmol)和三乙胺(254mg，2.52mmol)于二氯甲烷(5.0mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。反应物用水淬灭，并且用二氯甲烷萃取。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到呈白色固体状的(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(90mg，0.19mmol，82％产率)。LC-MS：m/z＝479.1[M+H]+，滞留时间2.15min(方法A)。
(3-羟基-4-甲基-5-(1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(90mg，0.19mmol)和10％钯/碳(20.0mg)于四氢呋喃(10.0mL)中的混合物在氢气气氛下搅拌18h。过滤不可溶的固体且浓缩滤液，得到呈黄色固体状的(3-羟基-4-甲基-5-(1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(70mg，0.18mmol，96％产率)。LC-MS：m/z＝389.1[M+H]+，滞留时间2.19min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
(3-羟基-4-甲基-5-(1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸
向(3-羟基-4-甲基-5-(1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(70mg，0.18mmol)于四氢呋喃/水(8.0mL/2.0mL)中的溶液中添加氢氧化锂单水合物(164mg，4.0mmol)。将混合物搅拌过夜且浓缩以去除四氢呋喃。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤，用水洗涤且通过逆向制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的(3-羟基-4-甲基-5-(1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)(10.8mg，0.03mmol，17％产率)。LC-MS：m/z＝361.1[M+H]+，滞留时间3.45min(方法A)。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ12.76(s,2H),9.25(t,J＝6.0Hz,1H),8.28(s,1H),8.23(s,1H),7.89(s,1H),4.69-4.32(m,1H),3.98(d,J＝6.2Hz,4H),3.58-3.43(m,3H),2.31(s,3H),2.07-1.93(m,4H)。
实例22：化合物22的制备
4-溴-1-异丁基-1H-吡唑
向4-溴-1H-吡唑(1.0g，6.80mmol)和1-溴-2-甲基丙烷(1118.68mg，8.16mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)中的溶液中添加碳酸钾(2.82g，20.41mmol)。将混合物在90℃搅拌18.0h且用乙酸乙酯和水稀释。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝20/1)纯化，得到4-溴-1-异丁基-1H-吡唑(1.15g，5.69mmol，83％产率)。LC-MS：m/z＝203[M+H]+，滞留时间1.861min(方法B)。
1-异丁基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑
向4-溴-1-异丁基-1H-吡唑(1.1g，5.42mmol)、双(频哪醇)二硼(6.88g，27.08mmol)和乙酸钾(1.59g，16.25mmol)的溶液中添加含[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯钯(II)(396mg，0.54mmol)的1,4-二噁烷(15.0mL)。将混合物在90℃在氮气下搅拌16.0h，并且冷却到室温。将乙酸乙酯和水添加至溶液中，并且分离各层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩到干燥。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝10/1)纯化，得到1-异丁基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑(1.1g，4.39mmol，81％产率)。LC-MS：m/z＝251[M+H]+，滞留时间2.047min(方法A)。
3-氯-5-(1-异丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉腈
向3,5-二氯-4-甲基皮考啉腈(411.2mg，2.20mmol)、1-异丁基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑(550.0mg，2.20mmol)和碳酸钾(364.7mg，2.64mmol)的溶液中添加含[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯钯(II)(64.4mg，0.09mmol)的N,N-二甲基甲酰胺/水(10.0mL/1.0mL)。将混合物在50℃在氮气下搅拌过夜并且冷却到室温。将乙酸乙酯和水添加至溶液中，并且分离各层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩到干燥。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝3/1)纯化，得到3-氯-5-(1-异丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉腈(732mg，2.67mmol，87％产率)。LC-MS：m/z＝275[M+H]+，滞留时间2.065min(方法A)。
3-(苯甲氧基)-5-(1-异丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉腈
在0℃在氮气下向3-氯-5-(1-异丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉腈(650.00mg，2.37mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)中的溶液中添加氢化钠(113.6mg，2.84mmol，于矿物油中的60％w/w分散液)。将混合物在0℃搅拌10min，并且接着添加苯甲醇(307.0mg，2.84mmol，0.3mL)。将溶液在0℃搅拌50min且用乙酸乙酯和水稀释。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝3/1)纯化，得到3-(苯甲氧基)-5-(1-异丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉腈(105mg，0.30mmol，13％产率)。LC-MS：m/z＝347[M+H]+，滞留时间2.089min(方法B)。
3-(苯甲氧基)-5-(1-异丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉酸
向3-(苯甲氧基)-5-(1-异丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉腈(95.0mg，0.27mmol)于乙醇(3.0mL)中的溶液中添加30％氢氧化钠水溶液(1.0mL)。将混合物在100℃搅拌5.0h，冷却且浓缩以去除乙醇。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤且干燥，得到呈白色固体状的3-(苯甲氧基)-5-(1-异丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉酸(90mg，粗物质)。LC-MS：m/z＝366[M+H]+，滞留时间1.391min(方法B)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
(3-(苯甲氧基)-5-(1-异丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将3-(苯甲氧基)-5-(1-异丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉酸(90.00mg，0.25mmol)、甘氨酸乙酯盐酸盐(41.7mg，0.30mmol)、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻(140.98mg，0.27mmol)和三乙胺(124.6mg，1.23mmol)于二氯甲烷(10.0mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。反应物用水淬灭，并且用二氯甲烷萃取。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到(3-(苯甲氧基)-5-(1-异丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(30mg，0.067mmol，27％产率)。LC-MS:m/z＝451[M+H]+，滞留时间2.008min(方法B)。
(3-羟基-5-(1-异丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将(3-(苯甲氧基)-5-(1-异丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(25.0mg，0.06mmol)和10％钯/碳(20.0mg)于四氢呋喃(10.0mL)中的混合物在氢气气氛下搅拌18.0h。过滤不可溶的固体且浓缩滤液，得到呈黄色固体状的(3-羟基-5-(1-异丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(30.0mg，粗物质)。LC-MS：m/z＝361[M+H]+，滞留时间1.966min(方法B)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
(3-羟基-5-(1-异丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸
向(3-羟基-5-(1-异丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(25.00mg，0.07mmol)于四氢呋喃/水(8.0mL/2.0mL)中的溶液中添加氢氧化锂单水合物(164mg，4.0mmol)。将混合物搅拌过夜且浓缩以去除四氢呋喃。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。沉淀物通过逆向制备型HPLC纯化，得到呈黄色固体状的(3-羟基-5-(1-异丁基-1H-吡唑-4-基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸(甲酸盐)(6.4mg，0.02mmol，27％产率)。LC-MS：m/z＝333[M+H]+，滞留时间4.188min(方法A)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.75(s,1H),9.27-9.25(m,1H),8.22(s,1H),8.20(s,1H),7.87(s,1H),4.00(s,2H),3.98(d,J＝2.4Hz,2H),2.30(s,3H),2.19-2.15(m,1H),0.88(d,J＝6.8Hz,6H)。
实例23：化合物23的制备
3-氧代庚-6-烯酸甲酯
在0℃下向氢化钠(1.89g，47.30mmol，于矿物油中的60％w/w分散液)于无水四氢呋喃(120mL)中的悬浮液中添加3-氧代丁酸甲酯(3.23g，27.82mmol)。将溶液在0℃搅拌30min且添加正丁基锂(17.8mL，44.52mmol，2.5M于正己烷中)。在搅拌30min之后，添加3-溴基丙-1-烯(3.70g，30.61mmol)。使反应混合物升温至20℃并且再搅拌2.0h。反应物通过添加饱和氯化铵水溶液来淬灭，并且用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩到干燥。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝100/3)纯化，得到呈黄色油状的3-氧代庚-6-烯酸甲酯(2.74g，17.6mmol，63％产率)。LC-MS：m/z＝157[M+H]+，滞留时间1.446min(方法B)。
4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-氧代庚-6-烯酸甲酯
在0℃向3-氧代庚-6-烯酸甲酯(800.0mg，5.12mmol)于无水四氢呋喃(15.0mL)中的溶液中添加新的二异丙胺锂(11.2mmol，5.63mL，2.0M于正己烷中)。将混合物在0℃搅拌15min并且添加((2-溴甲氧基)甲基)苯(1.32g,6.15mmol)。使混合物升温到20℃并且保持搅拌3.0h。反应物用饱和氯化铵溶液淬灭，并且用乙酸乙酯萃取两次。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝10/1)纯化，得到呈黄色油状的4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-氧代庚-6-烯酸甲酯(729mg，2.51mmol，49％产率)。LC-MS:m/z＝313[M+H]+，滞留时间2.080min(方法A)。
2,2-二叠氮基-4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-氧代庚-6-烯酸甲酯
将4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-氧代庚-6-烯酸甲酯(700.0mg，2.41mmol)、叠氮化钠(626.9mg，9.64mmol)、碳酸氢钠(607.6mg，7.23mmol)和碘(1.25g，4.94mmol)于二甲亚砜/水(30.0mL/15.0mL)中的混合物在室温下搅拌16.0h。反应物用饱和氯化铵溶液淬灭，并且用乙酸乙酯萃取。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝10/1)纯化，得到2,2-二叠氮基-4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-氧代庚-6-烯酸甲酯(330mg，0.89mmol，37％产率)。LC-MS：m/z＝395[M+Na]+，滞留时间2.314min(方法A)。
4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-羟基-6-甲基皮考啉酸甲酯
将2,2-二叠氮基-4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-氧代庚-6-烯酸甲酯(300.0mg，0.81mmol)于甲苯(5.0mL)中的混合物在110℃下于密封试管中搅拌16.0h。将溶液冷却并且浓缩以得到干燥。所得残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝3/1)纯化，得到4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-羟基-6-甲基皮考啉酸甲酯(65mg，0.22mmol，27％产率)。LC-MS：m/z＝302[M+H]+，滞留时间1.991min(方法A)。
4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-羟基-6-甲基皮考啉酸
向4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-羟基-6-甲基皮考啉酸甲酯(60.0mg，0.20mmol)于甲醇/水(4.0mL/1.0mL)中的溶液中添加氢氧化锂单水合物(83.6mg，1.99mmol)。将混合物搅拌过夜且浓缩以去除甲醇。所得水溶液通过添加10％盐酸(5.0mL)酸化且用乙酸乙酯萃取两次。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。获得呈黄色固体状的粗物质4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-羟基-6-甲基皮考啉酸(55mg，0.19mmol，96％产率)。LC-MS：m/z＝288[M+H]+，滞留时间1.626min(方法A)。将粗产物用于下一步骤。
(4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-羟基-6-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-羟基-6-甲基皮考啉酸(50.00mg，0.17mmol)、甘氨酸乙酯盐酸盐(21.53mg，0.21mmol)、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻(99.62mg，0.19mmol)和三乙胺(88.05mg，0.87mmol)于二氯甲烷(10.0mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。反应物用水淬灭，并且用二氯甲烷萃取。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝4/1)纯化，得到呈白色固体状的(4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-羟基-6-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(48mg，0.13mmol，76％产率)。LC-MS：m/z＝373[M+H]+，滞留时间2.179min(方法A)。
(4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-羟基-6-甲基皮考啉酰基)甘氨酸
向(4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-羟基-6-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(48.0mg，0.13mmol)于甲醇/水(4.0mL/1.0mL)中的溶液中添加氢氧化锂单水合物(54.2mg，1.29mmol)。将混合物搅拌过夜且浓缩以去除甲醇。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。沉淀物通过逆向制备型HPLC纯化，得到呈红色固体状的(4-(2-(苯甲氧基)乙基)-3-羟基-6-甲基皮考啉酰基)甘氨酸(甲酸盐)(29.7mg，0.09mmol，66％产率)。LC-MS：m/z＝345[M+H]+，滞留时间4.596min(方法A)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ12.75(br,1H),12.40(s,1H),9.11(t,J＝6.0Hz,1H),7.34-7.31(m,3H),7.28-7.25(m,3H),4.48(s,2H),3.99(d,J＝6.0Hz,2H),3.69(t,J＝6.5Hz,2H),2.87(t,J＝6.5Hz,2H),2.42(s,3H)。
实例24：化合物24的制备
4-(4-氟苯甲基)-3-氧代庚-6-烯酸甲酯
在0℃下向3-氧代庚-6-烯酸甲酯(来自实例22的中间物)(500.0mg，3.20mmol)于无水四氢呋喃(20.0mL)中的溶液中添加新的二异丙胺锂(7.04mmol，3.52mL，2.0M于正己烷中)。将混合物在0℃下搅拌30min并且添加1-(溴甲基)-4-氟苯(726.2mg，3.84mmol)。使混合物升温到20℃并且保持搅拌3.0h。反应物用饱和氯化铵溶液淬灭，并且用乙酸乙酯萃取两次。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝10/1)纯化to give呈黄色油状的4-(4-氟苯甲基)-3-氧代庚-6-烯酸甲酯(650mg，2.46mmol，77％产率)。LC-MS：m/z＝265[M+H]+，滞留时间1.934min(方法B)。
2,2-二叠氮基-4-(4-氟苯甲基)-3-氧代庚-6-烯酸甲酯
将4-(4-氟苯甲基)-3-氧代庚-6-烯酸甲酯(500.0mg，1.89mmol)、叠氮化钠(369.2mg，5.68mmol)、碳酸氢钠(476.7mg，5.68mmol)和碘(984.3mg，3.88mmol)于二甲亚砜/水(20.0mL/10.0mL)中的混合物在室温下搅拌16.0h。反应物用饱和氯化铵溶液淬灭，并且用乙酸乙酯萃取。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝10/1)纯化，得到呈黄色固体状的2,2-二叠氮基-4-(4-氟苯甲基)-3-氧代庚-6-烯酸甲酯(310mg，0.89mmol，47％产率)。LC-MS:m/z＝369[M+Na]+，滞留时间2.279min(方法A)。
4-(4-氟苯甲基)-3-羟基-6-甲基皮考啉酸甲酯
将2,2-二叠氮基-4-(4-氟苯甲基)-3-氧代庚-6-烯酸甲酯(300.0mg，0.87mmol)于甲苯(5.0mL)中的混合物在110℃于密封试管中搅拌2.0h。将溶液冷却并且浓缩以得到干燥。所得残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝10/3)纯化，得到呈黄色油状的4-(4-氟苯甲基)-3-羟基-6-甲基皮考啉酸甲酯(64mg，0.23mmol，27％产率)。LC-MS：m/z＝276[M+H]+，滞留时间2.006min(方法A)。
4-(4-氟苯甲基)-3-羟基-6-甲基皮考啉酸
向4-(4-氟苯甲基)-3-羟基-6-甲基皮考啉酸甲酯(60.0mg，0.22mmol)于甲醇/水(4.0mL/1.0mL)中的溶液中添加氢氧化锂单水合物(91.5mg，2.18mmol)。将混合物搅拌过夜且浓缩以去除甲醇。所得水溶液通过添加10％盐酸(5.0mL)酸化且用乙酸乙酯萃取两次。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。呈黄色固体状的粗物质4-(4-氟苯甲基)-3-羟基-6-甲基皮考啉酸(34mg，0.13mmol，59％产率)。LC-MS：m/z＝262[M+H]+，滞留时间1.626min(方法A)。将粗产物用于下一步骤。
(4-(4-氟苯甲基)-3-羟基-6-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将4-(4-氟苯甲基)-3-羟基-6-甲基皮考啉酸(30.0mg，0.11mmol)、甘氨酸乙酯盐酸盐(14.21mg，0.14mmol)、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻(65.73mg，0.13mmol)和三乙胺(58.10mg，0.57mmol)于二氯甲烷(3.0mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。反应物用水淬灭，并且用二氯甲烷萃取。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝85/15)纯化，得到呈黄色固体状的(4-(4-氟苯甲基)-3-羟基-6-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(26mg，0.08mmol，68％产率)。LC-MS：m/z＝347[M+H]+，滞留时间2.180min(方法A)。
(4-(4-氟苯甲基)-3-羟基-6-甲基皮考啉酰基)甘氨酸
向(4-(4-氟苯甲基)-3-羟基-6-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(26.00mg，0.08mmol)于甲醇/水(4.0mL/1.0mL)中的溶液中添加氢氧化锂单水合物(31.53mg，0.75mmol)。将混合物搅拌过夜且浓缩以去除甲醇。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。沉淀物通过逆向制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的(4-(4-氟苯甲基)-3-羟基-6-甲基皮考啉酰基)甘氨酸(甲酸盐)(11.2mg，0.04mmol，47％产率).LC-MS：m/z＝319[M+H]+，滞留时间4.616min(方法A)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.85(br,1H),12.47(s,1H),9.15-9.11(m,1H),7.32-7.25(m,3H),7.11(t,J＝8.8Hz,2H),3.98(d,J＝6.4Hz,2H),3.93(s,2H),2.41(s,3H)。
实例25：化合物25的制备
3,5-二溴-2,4-二甲基吡啶1-氧化物
在0℃向3,5-二溴-2,4-二甲基吡啶(400mg，1.51mmol)于二氯甲烷(10.0mL)中的溶液中添加3-氯过氧苯甲酸(400mg，1.96mmol，85％)。将混合物在室温下搅拌18.0h且添加碳酸钾(400mg，3.20mmol)。将混合物再搅拌1h且过滤不可溶的固体。浓缩滤液，得到呈白色固体状的3,5-二溴-2,4-二甲基吡啶1-氧化物(400mg，1.43mmol，94％产率)。LC-MS：m/z＝281.1[M+H]+，滞留时间1.47min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
3,5-二溴-4,6-二甲基皮考啉腈
将3,5-二溴-2,4-二甲基吡啶1-氧化物(400mg，1.42mmol)、氰化三甲基硅烷(2.0mL)和三乙胺(2.0mL)于乙腈(10.0mL)中的混合物在85℃搅拌24.0h。混合物用水稀释并且用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水溶液洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝10/1)纯化，得到呈黄色油状的3,5-二溴-4,6-二甲基皮考啉腈(240mg，0.69mmol，46％产率)。LC-MS：m/z＝291.2[M+H]+，滞留时间1.74min(方法A)。
3-溴-4,6-二甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉腈
向3,5-二溴-4,6-二甲基皮考啉腈(600mg，2.07mmol)、1-苯基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑(559mg，2.07mmol)和碳酸钾(343mg，2.48mmol)的溶液中添加含[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯钯(II)(239mg，0.21mmol)的N,N-二甲基甲酰胺/水(3.0mL/0.3mL)。将混合物在45℃在氮气下搅拌16.0h，并且冷却到室温。将乙酸乙酯和水添加至溶液中，并且分离各层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩到干燥。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝2/1)纯化，得到呈黄色固体状的3-溴-4,6-二甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉腈(95mg，0.27mmol，32％产率)。LC-MS：m/z＝354.3[M+H]+，滞留时间＝1.909min(方法A)。
3-羟基-4,6-二甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉腈
将3-溴-4,6-二甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉腈(90.0mg，0.25mmol)、碳酸钾(106mg，0.76mmol)和苯甲醇(270mg，2.5mmol)于N,N-二甲基乙酰胺(3.0mL)中的混合物在120℃搅拌72.0h。将混合物冷却并且蒸发，得到干燥。所得残余物通过逆向制备型HPLC纯化，得到呈白色固体状的3-羟基-4,6-二甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉腈(20mg，0.07mmol，27％产率)。LC-MS：m/z＝291.1[M+H]+，滞留时间＝1.40min(方法A)。
3-羟基-4,6-二甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉酸
向3-羟基-4,6-二甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉腈(20mg，0.07mmol)于乙醇(5.0mL)中的溶液中添加30％氢氧化钠水溶液(1.0mL)。将混合物在100℃搅拌3.0h，冷却且浓缩以去除乙醇。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤且干燥，得到呈白色固体状的3-羟基-4,6-二甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉酸(25mg，粗物质)。LC-MS：m/z＝310.4[M+H]+，滞留时间1.74min(方法A)。产物足够纯并且直接用于下一步骤。
(3-羟基-4,6-二甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将3-羟基-4,6-二甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉酸(25mg，0.08mmol)、甘氨酸乙酯盐酸盐(17mg，0.12mmol)、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻(50mg，0.10mmol)和三乙胺(380mg，3.75mmol)于二氯甲烷(8.0mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。反应物用水淬灭，并且用二氯甲烷萃取。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/2)纯化，得到呈白色固体状的(3-羟基-4,6-二甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(20mg，0.05mmol，63％产率)。LC-MS：m/z＝395.1[M+H]+，滞留时间2.13min(方法A)。
(3-羟基-4,6-二甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸
向(3-羟基-4,6-二甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(20mg，0.05mmol)于甲醇/水(6.0mL/3.0mL)中的溶液中添加氢氧化锂单水合物(164mg，4.0mmol)。将混合物搅拌过夜且浓缩以去除甲醇。所得水溶液用10％盐酸溶液酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤，用水洗涤并且干燥，得到呈白色固体状的(3-羟基-4,6-二甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸(6.4mg，0.017mmol，36％产率)。LC-MS：m/z＝367.0[M+H]+，滞留时间4.81min(方法A)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.49(s,1H),9.18(t,J＝6.0Hz,1H),8.73(s,1H),8.01-7.81(m,3H),7.54(t,J＝7.9Hz,2H),7.35(t,J＝7.4Hz,1H),4.02(d,J＝6.1Hz,2H),2.39(s,3H),2.12(s,3H)。
实例26：化合物26的制备
3,5-二氯-4-甲基吡啶1-氧化物
在室温下历经2min向3,5-二氯-4-甲基吡啶(9.4g，57.7mmol)于DCM(150mL)中的溶液中逐滴添加m-CPBA(12.9g，74.7mmol)。将反应物在室温下搅拌过夜。在如由TLC分析所指示完成反应之后，向反应物中一次性添加K2CO3(12g，87mmol)且在室温下搅拌约2小时。在过滤所得悬浮液之后，将滤液浓缩至干燥。将残余物在混合溶剂(PE:EtOAc＝50:1，50mL)中浆化，得到7.4g标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z 178(M+H)+；
3,5-二氯-4-甲基皮考啉腈
在室温下向3,5-二氯-4-甲基吡啶1-氧化物(8g，44.94mmol)于MeCN(150mL)中的溶液中添加TMS-CN(9g，89.88mmol)和TEA(9.4mL)。使反应物回流过夜。在如由TLC分析所指示完成反应之后，反应物用盐水(150mL)淬灭且用EA(150mL×3)萃取。合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4(60g)干燥，过滤且在真空中浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法(PE:EtOAc＝10:1)纯化，得到6.8g标题化合物。1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ8.52(s,1H),2.57(s,3H))。
3-氯-4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)皮考啉腈
在氮气保护下，将3,5-二氯-4-甲基皮考啉腈(3.72g，20mmol)、B2Pin2(7.62g，30mmol)、Pd(dppf)Cl2(1.4g，2mmol)和KOAc(5.88g，60mmol)于二噁烷(100mL)中的混合物在100℃搅拌过夜。在如由TLC所指示完成反应之后，过滤所得悬浮液。用EtOAc(200mL)洗涤滤饼，将合并的滤液浓缩至干燥。将所得残余物溶解于NaOH水溶液(60mL，1N)中并且搅拌半小时。水溶液用EtOAc(100mL)洗涤。在分离之后，再次用NaOH水溶液(30mL，1N)处理有机相。在分离之后，合并的水相用稀释的HCl溶液(2N)酸化至pH＝4至5并且沉淀大量固体。过滤悬浮液，得到407mg标题化合物。1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ8.68(s,1H),2.61(s,3H),1.34(s,12H)。
3-氯-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)皮考啉腈
在氮气保护下，将3-氯-4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)皮考啉腈(270mg，0.97mmol)、5-溴-2-苯基噁唑(280mg，1.2mmol)、Pd(PPh3)4(138mg，0.12mmol)和K3PO4.H2O(958g，3.6mmol)于二噁烷(7mL)和H2O(0.4mL)中的混合物在100℃搅拌过夜。在如由TLC分析所指示完成反应之后，反应物用H2O(10mL)淬灭且用DCM(25mL×3)萃取。合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4(30g)干燥，过滤且在真空中浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法(DCM)纯化，得到250mg标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z 296(M+H)+；
3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)皮考啉腈
在室温下向3-氯-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)皮考啉腈(250mg，0.85mmol)于THF(12.5mL)中的溶液中添加BnOH(184mg，1.7mmol)和t-BuOK(184mg，1.7mmol)。将反应物在40℃搅拌3小时。在如由TLC分析所指示完成反应之后，反应物用H2O(20mL)淬灭且用DCM(10mL×3)萃取。合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4(5g)干燥，过滤且在真空中浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法(PE:EtOAc＝5/1)纯化，得到157mg标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z368(M+H)+；1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ8.84(s,1H),8.14-8.11(m,2H),7.54-7.50(m,6H),7.44-7.26(m,3H),2.25(s,2H),2.44(s,3H)。
3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)皮考啉酸
在室温下向3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)皮考啉腈(167mg，0.45mmol)于EtOH(15mL)中的溶液中添加NaOH水溶液(1.6mL，30wt％)。将反应物在回流温度下搅拌过夜。在如由LCMS分析所指示完成反应之后，将反应物冷却到RT并且用稀释的HCl溶液酸化至pH 4至5。沉淀出大量固体。过滤悬浮液，得到158mg标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z 387(M+H)+；
(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)皮考啉酰基)甘氨酸甲酯
在室温下向3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)皮考啉酸(158mg，0.41mmol)于DMF(5mL)中的溶液中添加甘氨酸甲酯盐酸盐(62mg，0.49mmol)、DIEA(212mg，1.64mmol)和HATU(234mg，0.45mmol)。将反应物在室温下搅拌过夜。在如由TLC分析所指示完成反应之后，反应物用H2O(20mL)淬灭且用DCM(10mL×3)萃取。合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4(5g)干燥，过滤且在真空中浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法(PE/DCM＝1/1)纯化，得到115mg标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z458(M+H)+；1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ8.77(s,1H),8.37(brs,1H),8.14-8.11(m,2H),7.55-7.49(m,6H),7.42-7.35(m,3H),5.13(s,2H),4.29(d,J＝6Hz,2H),3.81(s,3H),2.44(s,3H)。
(3-羟基-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)皮考啉酰基)甘氨酸甲酯
在室温下向(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)皮考啉酰基)甘氨酸甲酯(167mg，0.45mmol)于MeOH(6mL)和DCM(3mL)中的溶液中添加Pd/C(10wt％，34mg)。将反应物在大气压氢气气囊压力下搅拌45min。在如由TLC分析所指示完成反应之后，通过硅藻土包过滤反应物。将滤液在真空中浓缩以得到80mg标题化合物。1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ12.27(s,1H),8.47(s,2H),8.14-8.11(m,2H),7.51(d,J＝3.6Hz,4H),4.27(d,J＝6Hz,2H),3.83(s,3H),2.50(s,3H)。
(3-羟基-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)皮考啉酰基)甘氨酸
在室温下向(3-羟基-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)皮考啉酰基)甘氨酸甲酯(80mg，0.22mmol)于THF(5mL)和H2O(2mL)中的溶液中添加LiOH.H2O(92mg，2.2mmol).将反应物在50℃搅拌2小时。在如由TLC分析所指示完成反应之后，用稀释的HCl溶液(1N)将反应物酸化至pH 4至5。沉淀出大量固体。过滤悬浮液，得到45mg标题化合物。HPLC纯度为99.1％；LC-MS(ESI+):m/z 354(M+H)+；1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.95(s,1H),12.85(brs,1H),9.38(t,J＝6.0Hz,1H),8.61(s,1H),8.15-8.12(m,2H),7.95(s,1H),7.64-7.58(m,3H),4.03(d,J＝6.0Hz,2H),2.67(s,3H)。
实例27：化合物27的制备
5-氯-4,6'-二甲基-[3,3'-联吡啶]-6-甲腈
根据用于制备3-氯-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)皮考啉腈的程序使用5-溴-2-甲基吡啶合成所述化合物。LC-MS(ESI+):m/z 244(M+H)+。
5-(苯甲氧基)-4,6'-二甲基-[3,3'-联吡啶]-6-甲腈
根据用于制备3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)皮考啉腈的程序合成所述化合物。LC-MS(ESI+):m/z 316(M+H)+；1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ8.45(d,J＝1.8Hz,1H),8.30(s,1H),7.55-7.48(m,3H),7.55-7.42(m,3H),7.37-7.28(m,1H),5.28(s,2H),2.65(s,3H),2.17(s,3H)。
5-(苯甲氧基)-4,6'-二甲基-[3,3'-联吡啶]-6-甲酸
根据用于制备3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)皮考啉酸的程序合成所述化合物。LC-MS(ESI+):m/z 335(M+H)+；1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.45(brs,1H),8.53(d,J＝1.8Hz,1H),8.28(s,1H),7.81(dd,J＝7.8,2.1Hz,1H),5.03(s,2H),2.55(s,3H),2.15(s,3H)。
(5-(苯甲氧基)-4,6'-二甲基-[3,3'-联吡啶]-6-羰基)甘氨酸甲酯
根据用于制备(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)皮考啉酰基)甘氨酸甲酯的程序合成所述化合物。LC-MS(ESI+):m/z 406(M+H)+；
(5-羟基-4,6'-二甲基-[3,3'-联吡啶]-6-羰基)甘氨酸甲酯
根据用于制备(3-羟基-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)皮考啉酰基)甘氨酸甲酯的程序合成所述化合物。LC-MS(ESI+):m/z 316(M+H)+；1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ12.16(s,1H),8.49(d,J＝1.8Hz,2H),7.96(s,1H),7.56(dd,J＝8.1Hz,2.1Hz,1H),7.29(s,1H),4.26(d,J＝5.7Hz,2H),3.82(s,3H),2.64(s,3H),2.23(s,3H)。
(5-羟基-4,6'-二甲基-[3,3'-联吡啶]-6-羰基)甘氨酸
根据用于制备(3-羟基-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)皮考啉酰基)甘氨酸的程序合成所述化合物。LC-MS(ESI+):m/z 302(M+H)+；1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.80(s,1H),9.38(t,J＝6Hz,1H),8.53(d,J＝1.8Hz,1H),7.82-7.79(m,1H),7.42(d,J＝8.1Hz,1H),4.01(d,J＝6.6Hz,2H),2.55(s,3H),2.16(s,3H)。
实例28：化合物28的制备
根据用于制备(3-羟基-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)皮考啉酰基)甘氨酸的程序合成所述化合物。LC-MS(ESI+):m/z 338(M+H)+；1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.86(s,1H),12.80(brs,1H),9.45(t,J＝6.Hz,1H),9.00(d,J＝2.1Hz,1H),8.53(s,1H),8.23(s,1H),8.10(t,J＝8.1Hz,2H),7.88-7.73(m,1H),7.71-7.68(m,1H),4.03(d,J＝6Hz,2H),2.50(s,3H)。
实例29：化合物29的制备
根据用于制备(3-羟基-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)皮考啉酰基)甘氨酸的程序合成所述化合物。LC-MS(ESI+):m/z 302(M+H)+；1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.80(s,1H),9.39(t,J＝6.5Hz,1H),8.55(dd,J＝4.9,1.8Hz,1H),7.99(s,1H),7.62(dd,J＝7.6,1.8Hz,1H),7.36(dd,J＝7.7,4.9Hz,1H),4.00(d,J＝6.0Hz,2H),2.25(s,3H),1.96(s,3H)。
实例30：化合物30的制备
根据用于制备(3-羟基-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)皮考啉酰基)甘氨酸的程序合成所述化合物。LC-MS(ESI+):m/z 367(M+H)+；1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.88(brs,1H),12.78(s,1H),9.17(d,J＝7.7Hz,1H),8.92(s,1H),8.32(s,1H),8.18(s,1H),7.94(d,J＝8.0Hz,2H),7.55(t,J＝7.8Hz,2H),7.37(t,J＝7.4Hz,1H),4.51(t,J＝7.2Hz,1H),2.37(s,3H),1.47(d,J＝7.2Hz,3H)。
实例31：化合物31的制备
根据用于制备(3-羟基-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)皮考啉酰基)甘氨酸的程序合成所述化合物。LC-MS(ESI+):m/z 367(M+H)+；1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.90(brs,1H),12.77(s,1H),9.17(d,J＝7.6Hz,1H),8.93(s,1H),8.33(s,1H),8.18(s,1H),7.94(d,J＝8.0Hz,2H),7.55(t,J＝7.8Hz,2H),7.37(t,J＝7.4Hz,1H),4.51(t,J＝7.4Hz,1H),2.37(s,3H),1.47(d,J＝7.2Hz,3H).
实例32：化合物32的制备
3,5-二氯-4-甲基吡啶1-氧化物
将3,5-二氯-4-甲基-吡啶(5g，30.86mmol)溶解于DCM(70mL)中且冷却至0℃。在0℃分批添加m-CPBA(7.85g，40.11mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。LCMS指示完成转化成所需产物(MS/178)。添加K2CO3(4.427g，32.08mmol)。将浑浊的反应混合物搅拌1h。通过硅藻土垫过滤白色沉淀物，用DCM(50mL)冲洗滤饼。浓缩滤液，得到白色固体(5.0g)。LC-MS(ESI+):m/z 179.0(M+H)+。
3,5-二氯-4-甲基皮考啉腈
将3,5-二氯-4-甲基-吡啶1-氧化物(5g，28.087mmol)、TMS-氰化物(5g，50.38mmol)和三乙胺(5.8mL，42.29mmol)于乙腈(90mL)中的混合物加热至回流(85℃)，持续7h。将反应物冷却至室温并且搅拌过夜。反应物用NaHCO3水溶液(50mL)淬灭。混合物用乙酸乙酯(100mL)稀释。分离各层，有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥且浓缩。粗物质通过柱(12g柱，0-100％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到浅棕色液体(4.09g)。LC-MS(ESI+):m/z186.0(M+H)+。
3-氯-5-(3-氯苯基)-4-甲基皮考啉腈
在室温下将Pd(dppf)Cl2(0.178g，0.243mmol)添加至3,5-二氯-4-甲基-吡啶-2-甲腈(1.2g，6.416mmol)、(3-氯苯基)硼酸(1g，6.416mmol)和K2CO3(1.06g，7.699mmol)于DMF(10mL)和1mL水中的搅拌混合物中。将所得混合物在氮气下加热到45℃持续17h。TLC(30％EtOAc/己烷)指示起始材料发生90％消耗。反应混合物用水(20mL)和乙酸乙酯(30mL)稀释，充分搅拌。分离各层，有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥且浓缩。粗物质通过柱(24g柱，0-50％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到产物白色固体。1H-NMR指示3：8的区位异构体混合物。对混合物进行下一个反应。LC-MS(ESI+)：m/z 263.0(M+H)+。
3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基皮考啉腈
将4-氯-6-(3-氯苯基)-5-甲基-吡啶-3-甲腈(1.35g，5.130mmol)溶解于DMF(10mL)中，将反应混合物冷却至0℃。添加NaH(于矿物油中的60％悬浮液，246mg，6.156mmol)。在3分钟之后，在0℃逐滴添加苯甲醇(0.637mL，6.156mmol)。将红色反应物在0℃搅拌。在50min之后，TLC(10％乙酸乙酯/己烷)显示90％转化。反应物用水(20mL)淬灭。混合物用乙酸乙酯(30mL)萃取。有机层经Na2SO4干燥，且浓缩。粗物质通过柱(20g，0-40％乙酸乙酯/己烷)纯化，分离两种区位异构体(来自前述反应)。主要产物(1.16g，67％)。主要产物显示在8.40ppm与7.57-7.42ppm之间的强NOE，指示所需产物。LC-MS(ESI+):m/z 335.0(M+H)+。
3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基皮考啉酸
将4-苯甲氧基-6-(3-氯苯基)-5-甲基-吡啶-3-甲腈(1.1g，3.3mmol)于乙醇(11mL)和30％NaOH水溶液(14mL)中的混合物加热到100℃持续3h。LCMS指示完全转化成所需高极性。将反应物冷却至室温。在减压下蒸发乙醇。用浓HCl(pH约2)酸化残余物水溶液，分解出浅棕色固体。固体通过过滤分离，用水洗涤并且在空气中干燥，获得浅棕色固体(1.2g，100％)。将粗物质用于下一个反应。LC-MS(ESI+):m/z 354.0(M+H)+。
(3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
在室温下将PyBOP(323mg，0.621mmol)和三乙胺(0.39mL，2.862mmol)添加至4-苯甲氧基-6-(3-氯苯基)-5-甲基-吡啶-3-甲酸(200mg，0.565mmol)和2-氨基乙酸乙酯；盐酸盐(79mg，0.565mmol)于DCM(5mL)中的搅拌混合物中。将所得混合物在室温下搅拌2h。LCMS指示起始材料完全耗尽。直接浓缩反应物。粗物质通过柱(0-100％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到白色固体(201mg，81％)。LC-MS(ESI+):m/z 439.0(M+H)+。
(5-(3-氯苯基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将2-[[4-苯甲氧基-6-(3-氯苯基)-5-甲基-吡啶-3-羰基]氨基]乙酸乙酯(201mg，0.458mmol)和10％ Pd-碳(5mg)于甲醇(1mL)和乙酸乙酯(1mL)中的搅拌混合物用氢气脱气2min，并且接着在室温下在氢气气氛下搅拌12h。LCMS指示完全转化为所需产物。将反应物通过硅藻土垫过滤，用乙酸乙酯(15mL)冲洗。浓缩滤液。粗产物(151mg，0.429mmol)不经进一步纯化即进行下一个反应。LC-MS(ESI+):m/z 349.0(M+H)+。
(5-(3-氯苯基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸
在室温下将1N NaOH水溶液(0.5mL)添加至2-[[5-(3-氯苯基)-3-羟基-4-甲基-吡啶-2-羰基]氨基]乙酸乙酯(132mg，0.378mmol)于THF(1.5mL)和甲醇(1.5mL)中的搅拌溶液中。将反应物在40℃下搅拌1.5h。直接浓缩反应物以去除THF和甲醇。残余物通过1N HCl水溶液(0.6mL)酸化。将沉淀物过滤，用水洗涤，并且在空气中干燥。粗物质通过制备型HPLC纯化(30-80％ MeCN/水，历经25min)。LC-MS(ESI+):m/z 321.0(M+H)+；1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.79(s,2H),9.38(t,J＝6.1Hz,1H),8.04(d,J＝4.7Hz,1H),7.60-7.46(m,3H),7.46-7.35(m,1H),4.00(d,J＝6.2Hz,2H),2.14(s,3H)。
实例33：化合物33的制备
3-氯-4-甲基-5-(萘-2-基)皮考啉腈
在室温下将Pd(dppf)Cl2(0.032g，0.0248mmol)添加至3,5-二氯-4-甲基-吡啶-2-甲腈(0.4g，2.14mmol)、2-萘基硼酸(368mg，2.14mmol)和K2CO3(354mg，2.57mmol)于DMF(8mL)和水(0.8mL)中的搅拌混合物中。将所得混合物在氮气下加热到45℃持续17h。TLC(30％乙酸乙酯/己烷)指示起始材料完全耗尽。反应物用乙酸乙酯(20mL)和水(15mL)稀释。分离各层。有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥且浓缩。粗物质通过柱(24g柱，0-50％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到呈白色固体状的两种区位异构体的混合物(520mg，87％)。混合物进行下一个反应。LC-MS(ESI+)：m/z 279.0(M+H)+。
3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(萘-2-基)皮考啉腈
将3-氯-4-甲基-5-(2-萘基)吡啶-2-甲腈(520mg，1.87mmol)溶解于DMF(10mL)中且冷却至0℃。在0℃添加NaH(于矿物油中的60％悬浮液，90mg，2.24mmol)并且搅拌3min。在0℃添加苯甲醇(0.23mL，2.24mmol)。将反应混合物升温到室温并且搅拌30min。反应用NH4Cl水溶液(50mL)淬灭，并且用乙酸乙酯(20mL×3)萃取混合物。有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，且浓缩。粗物质通过柱(20g，0-50％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到呈白色固体状的产物(344mg，52％)。LC-MS(ESI+):m/z 351.0(M+H)+。
3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(萘-2-基)皮考啉酸
将3-苯甲氧基-4-甲基-5-(2-萘基)吡啶-2-甲腈(344mg，0.98mmol)和30％ NaOH水溶液(4.1mL，9mmol)于乙醇(3.4mL)中的混合物加热到100℃持续3h。通过LCMS监测反应进展。直接浓缩反应物以去除乙醇。混合物用浓HCl(4mL)酸化。通过过滤去除固体，用水洗涤并且在空气中干燥，得到黄色固体(360mg，100％)。粗物质不经进一步纯化即进行下一个反应。LC-MS(ESI+):m/z 370.0(M+H)+。
(3-(苯甲氧基)-4-甲基-5-(萘-2-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将三乙胺(0.7mL，5.01mmol)添加至3-苯甲氧基-4-甲基-5-(2-萘基)吡啶-2-甲酸(185mg，0.50mmol)、2-氨基乙酸乙酯盐酸盐(0.7512mmol)和PyBOP(390mg，0.7512mmol)于DCM(5mL)中的混合物中。将反应混合物在室温下搅拌。通过LCMS监测反应进展。直接浓缩反应物并且通过柱(4g柱，0-100％乙酸乙酯/己烷)纯化粗材料，得到呈茶色油状的产物(132mg，58％)。LC-MS(ESI+):m/z 455.0(M+H)+。
(3-羟基-4-甲基-5-(萘-2-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将2-[[3-苯甲氧基-4-甲基-5-(2-萘基)吡啶-2-羰基]氨基]乙酸乙酯(132mg，0.2904mmol)和10％钯/碳(5mg)于EtOAc(1mL)和甲醇(1mL)中的混合物用氢气脱气3min，并且接着在室温下在氢气下搅拌6h。反应物用乙酸乙酯(20mL))稀释并且过滤。浓缩滤液，得到呈棕色油状的粗产物(100mg，100％)。粗物质不经进一步纯化即用于下一个反应。LC-MS(ESI+):m/z 365.0(M+H)+。
(3-羟基-4-甲基-5-(萘-2-基)皮考啉酰基)甘氨酸
将粗物质2-[[3-羟基-4-甲基-5-(2-萘基)吡啶-2-羰基]氨基]乙酸乙酯(105mg，0.2882mmol)和1N NaOH水溶液(1mL)于THF(1mL)和甲醇(1mL)中的混合物加热到45℃持续1h。LCMS指示起始材料完全耗尽。直接浓缩反应物。残余物通过1N HCl酸化并且过滤沉淀物。将固体溶解于DMSO中，并且通过制备型HPLC(40-85％ MeCN/水，历经25min)来纯化，得到呈白色固体状的产物(52mg，52％)。LC-MS(ESI+):m/z 337.0(M+H)+；1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.81(s,2H),9.38(t,J＝5.9Hz,1H),8.15(s,1H),8.10-7.95(m,4H),7.64-7.54(m,3H),4.01(d,J＝6.0Hz,2H),2.21(s,3H)。
实例34：化合物34的制备
3-氯-4-甲基-5-(喹啉-6-基)皮考啉腈
在室温下将Pd(dppf)Cl2(0.032g，0.0248mmol)添加至3,5-二氯-4-甲基-吡啶-2-甲腈(0.4g，2.14mmol)、6-喹啉基硼酸(402mg，2.35mmol)和K2CO3(354mg，2.57mmol)于DMF(8mL)和0.8mL水中的搅拌混合物中。将所得混合物在氮气下加热到45℃持续15h。反应物用乙酸乙酯(20mL)稀释并且过滤。浓缩滤液并且通过柱(12g，0-100％乙酸乙酯/己烷)纯化所得粗残余物，得到产物混合物(360mg，60％，区位异构体混合物)。LC-MS(ESI+):m/z 280.0(M+H)+。
3-((4-甲氧基苯甲基)氧基)-4-甲基-5-(喹啉-6-基)皮考啉腈
在室温下将氢化钠(于矿物油中的60％悬浮液，107.68mg，2.69mmol)添加至3-氯-4-甲基-5-(6-喹啉基)吡啶-2-甲腈(502mg，1.79mmol)、(4-甲氧基苯基)甲醇(0.33mL2.69mmol)于DMF(8.97mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在室温下搅拌。2h之后，将反应物在0℃用水(20mL)淬灭。混合物用乙酸乙酯(20mL)萃取。有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥且浓缩。粗物质通过柱(0-100％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到呈棕色液体状的主要产物(610mg，89％)。LC-MS(ESI+):m/z 382.0(M+H)+。
3-羟基-4-甲基-5-(喹啉-6-基)皮考啉酸
将3-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]-4-甲基-5-(6-喹啉基)吡啶-2-甲腈(610mg，1.6mmol)和30％氢氧化钠水溶液(6.67mL，50.03mmol)于乙醇(6.1mL)中的混合物加热到100℃持续3h。直接浓缩反应物以去除乙醇。将混合物冷却至0℃且用浓HCl酸化。通过过滤分离黄色固体。将固体溶解于甲醇(20mL)中并且浓缩，得到黄色固体(160mg)。LCMS指示MS/281。粗物质不经进一步纯化即用于下一个反应。LC-MS(ESI+):m/z 281.0(M+H)+。
(3-羟基-4-甲基-5-(喹啉-6-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
在室温下将三乙胺(0.79mL，5.71mmol)添加至3-羟基-4-甲基-5-(6-喹啉基)吡啶-2-甲酸(160mg，0.57mmol)、PyBOP(356mg，0.69mmol)和2-氨基乙酸乙酯；盐酸盐(96mg，0.69mmol)于DCM(10mL)中的搅拌混合物中。将反应混合物在室温下搅拌过夜。直接浓缩反应物。粗残余物通过柱(4g，0-100％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到黄色发泡固体(58mg，28％)。LC-MS(ESI+):m/z 366.0(M+H)+。
(3-羟基-4-甲基-5-(喹啉-6-基)皮考啉酰基)甘氨酸
在室温下将1N NaOH水溶液(0.4mL，0.40mmol)添加至2-[[3-羟基-4-甲基-5-(6-喹啉基)吡啶-2-羰基]氨基]乙酸乙酯(58mg，0.160mmol)于THF(1mL)中的搅拌溶液中。将所得反应物在室温下搅拌2h。LCMS指示起始材料已完全耗尽。直接浓缩反应混合物以去除THF。残余物用1N HCl水溶液(0.5mL)酸化且过滤黄色沉淀物，用水洗涤。将固体悬浮于DMSO中，超声波处理10min。过滤DMSO溶液，得到白色固体，将其在乙酸乙酯中进一步湿磨。进一步过滤得到白色固体(22mg，40％)。LC-MS(ESI+):m/z 338.0(M+H)+；1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.84(s,1H),9.42(t,J＝6.1Hz,1H),8.97(dd,J＝4.2,1.7Hz,1H),8.45(d,J＝7.7Hz,1H),8.17(s,1H),8.13(d,J＝8.7Hz,1H),8.09(d,J＝1.9Hz,1H),7.84(dd,J＝8.7,2.0Hz,1H),7.61(dd,J＝8.3,4.2Hz,1H),4.01(d,J＝6.1Hz,2H),2.21(s,3H)。
实例35：化合物35的制备
3,5-双(苯甲氧基)-4-甲基皮考啉腈
在0℃将苯甲醇(2.55mL，24.59mmol)逐滴添加至NaH(于矿物油中的60％悬浮液，984mg，24.59mmol)于DMF(21.38mL)中的搅拌悬浮液中。将反应混合物在0℃搅拌15min。在0℃添加含3,5-二氯-4-甲基-吡啶-2-甲腈(2g，10.69mmol)的DMF(2mL)。将所得红色反应混合物在室温下搅拌1h。LCMS指示完成转化为所需产物质量(MS/331)。将反应物冷却至0℃且用水(50mL)淬灭。过滤沉淀物。通过column(0-100％乙酸乙酯/己烷)来纯化固体，得到白色固体(3.5g，99％)。LC-MS(ESI+):m/z 331.0(M+H)+。
3,5-双(苯甲氧基)-4-甲基皮考啉酸
将3,5-二苯甲氧基-4-甲基-吡啶-2-甲腈(3.5g，10.59mmol)和30％ NaOH水溶液(45mL，10.59mmol)于乙醇(35mL)中的混合物加热到100℃持续2h。直接浓缩反应物以去除乙醇。将残余物冷却至0℃，用浓HCl(pH约3)酸化。过滤棕色沉淀物，得到固体，将其用水(20mL)洗涤并且真空干燥，得到浅棕色固体(3.2g，86％)。粗物质不经进一步纯化即用于下一个反应。LC-MS(ESI+):m/z 350.0(M+H)+。
(3,5-双(苯甲氧基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
在室温下将PyBOP(5.72g，10.99mmol)添加至3,5-二苯甲氧基-4-甲基-吡啶-2-甲酸(3.2g，9.16mmol)于DCM(18.3mL)中的悬浮液中。将混合物冷却至0℃，添加三乙胺(6.36mL，45.8mmol)。在5min之后，在0℃添加2-氨基乙酸乙酯；盐酸盐(1.92g，13.74mmol)。将所得反应混合物在室温下搅拌过夜。直接浓缩反应物，并且通过柱(20g，0-100％乙酸乙酯/己烷)纯化粗残余物，得到棕色液体(3.6g，90％)。LC-MS(ESI+):m/z 435.0(M+H)+。
(3,5-二羟基-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将2-[(3,5-二苯甲氧基-4-甲基-吡啶-2-羰基)氨基]乙酸乙酯(3.6g，8.29mmol)和10％钯/碳(0.26mg，8.29mmol)于THF(20.7mL)和甲醇(20.7mL)中的混合物用氢气脱气5min并且在氢气压力下搅拌3h。LCMS指示完成转化为MS/255。将反应混合物过滤，用甲醇冲洗，且浓缩滤液，得到白色固体(2.1g，97％)。粗产物不经进一步纯化即进行下一个反应。LC-MS(ESI+):m/z 255.0(M+H)+。
(3-羟基-4-甲基-5-苯氧基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将2-[(3,5-二羟基-4-甲基-吡啶-2-羰基)氨基]乙酸乙酯(42mg，0.17mmol)、碘苯(33.7mg，0.17mmol)和K2CO3(68.3mg，0.50mmol)于DMF(2mL)中的混合物加热到90℃持续48h。将反应物冷却至室温，用DCM(10mL)稀释并过滤。浓缩滤液。粗物质通过柱(4g，0-100％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到棕色油状物(6mg，11％)。LC-MS(ESI+):m/z 331.0(M+H)+。
(3-羟基-4-甲基-5-苯氧基皮考啉酰基)甘氨酸
在室温下将1N NaOH水溶液(0.5mL，12.5mmol)添加至2-[[(3-羟基-4-甲基-5-苯氧基-吡啶-2-羰基)氨基]乙酸乙酯(6mg，0.02mmol)于THF(2mL)中的搅拌溶液中。将所得反应混合物在室温下搅拌2h。浓缩反应物且用5M HCl(0.1mL)酸化。浓缩混合物。将粗残余物溶解于DMSO(1mL)中，并通过制备型HPLC来纯化，得到白色固体(2.5mg，42％)。LCMS(ESI+):m/z 303.0(M+H)+；1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.92(s,2H),9.12(s,1H),7.76(s,1H),7.45-7.31(m,2H),7.16(t,J＝7.4Hz,1H),7.09-6.96(m,2H),3.89(d,J＝5.4Hz,2H),2.10(s,3H)。
实例36：化合物36的制备
(3-羟基-4-甲基-5-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
在室温下依序将三乙胺(1.34mL，9.68mmol)和1,1,1-三氟-N-苯基-N-(三氟甲基磺酰基)甲磺酰胺(3.17g，8.87mmol)添加至2-[(3,5-二羟基-4-甲基-吡啶-2-羰基)氨基]乙酸乙酯(2.05g，8.06mmol)于乙醇(26.9mL)中的搅拌悬浮液中。将所得反应混合物在32℃搅拌过夜。使反应混合物变成透明的棕色均相溶液。TLC(30％乙酸乙酯/己烷)指示完全转化。直接浓缩反应物，且通过柱(12g，0-10％ MeOH/DCM)纯化粗物质，得到棕色液体。由于持续存在杂质，再通过柱(12g，0-70％乙酸乙酯/己烷)纯化产物，得到浅黄色液体。LC-MS(ESI+):m/z 387.0(M+H)+。
(3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-5-((((三氟甲基)磺酰基)氧基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
在0℃将DIPEA(2.52mL，14.24mmol)和氯(甲氧基)甲烷(0.65mL，8.54mmol)依序添加至2-[[3-羟基-4-甲基-5-(三氟甲基磺酰氧基)吡啶-2-羰基]氨基]乙酸乙酯(2.2g，5.7mmol)于DCM(32.4mL)中的搅拌溶液中。将所得反应混合物在0℃搅拌15min，并且接着温热至室温持续1h。TLC(30％乙酸乙酯/己烷)指示起始材料完全耗尽。反应物用冷水(20mL)淬灭。将有机层分离，经Na2SO4干燥且浓缩。粗物质通过柱(12g，0-100％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到白色固体(1.5g，62％)。LC-MS(ESI+):m/z 431.0(M+H)+。
(5-(3,5-二氯苯基)-3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将(3,5-二氯苯基)硼酸(33.3mg，0.17mmol)、2-[[3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-5-(三氟甲基磺酰氧基)吡啶-2-羰基]氨基]乙酸乙酯(50mg，0.12mmol)和Pd(dppf)Cl2(8.5mg，0.01mmol)于1,4-二噁烷(2mL)和水(0.5mL)中的混合物加热到85℃持续20h。LCMS指示存在所需产物(MS/428)。反应物用甲醇(10mL)稀释并过滤。浓缩滤液。粗产物通过柱(0-100％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到预期产物以及去保护的产物。将两种产物合并且浓缩，得到23mg。使混合物进行下一个反应。LC-MS(ESI+):m/z 428.0(M+H)+。
(5-(3,5-二氯苯基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸
在室温下将TFA(0.1mL，0.05mmol)添加至2-[[5-(3,5-二氯苯基)-3-)(甲氧基甲氧基)-4-甲基-吡啶-2-羰基]氨基]乙酸乙酯(23mg，0.05mmol)于DCM(2mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在室温下搅拌过夜。LC-MS指示完全转化。直接浓缩反应物至干燥。将残余物溶解于THF(2mL)中且在室温下用1N NaOH水溶液(0.2mL，0.05mmol)处理3h。LCMS指示完全转化。直接浓缩反应物，用5N HCl(0.11mL)酸化，且浓缩至干燥。将残余物溶解于DMSO(1mL)中且过滤。通过HPLC来纯化滤液，得到白色固体(7.6mg，36％)。LC-MS(ESI+):m/z356.0(M+H)+；1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.83(s,1H),9.36(s,1H),8.06(s,1H),7.77(dd,J＝5.2,3.1Hz,2H),7.45(dd,J＝8.3,2.1Hz,1H),3.96(d,J＝5.7Hz,2H),2.14(s,3H)。
实例37：化合物37的制备
(3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-5-(4-甲基-2-苯基噻唑-5-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将4-甲基-2-苯基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)噻唑(162.8mg，0.54mmol)、2-[[3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-5-(三氟甲基磺酰氧基)吡啶-2-羰基]氨基]乙酸乙酯(155.1mg，0.36mmol)、Pd(dppf)Cl2(26.4mg，0.04mmol)和K3PO4(114.7mg，0.54mmol)于1,4-二噁烷(3mL)和水(1mL)中的混合物加热到85℃持续16h。将反应物冷却至室温，过滤且用乙酸乙酯冲洗。浓缩滤液且通过柱(4g，0-100％乙酸乙酯/己烷)纯化粗残余物，得到浅棕色油状物(64mg，39％)。LC-MS(ESI+):m/z 456.0(M+H)+。
(3-羟基-4-甲基-5-(4-甲基-2-苯基噻唑-5-基)皮考啉酰基)甘氨酸
在室温下将1N NaOH(0.6mL，15mmol)添加至2-[[3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-5-(4-甲基-2-苯基-噻唑-5-基)吡啶-2-羰基]氨基]乙酸乙酯(64mg，0.14mmol)于THF(3mL)和甲醇(1mL)中的搅拌溶液中且将所得反应混合物在室温下搅拌30min。LCMS指示发生完全酯水解(MS/428)。反应物用1N HCl(0.8mL)酸化并且搅拌30min。直接浓缩反应物以去除THF和甲醇。过滤沉淀物。通过制备型HPLC(30-85％ MeCN/水，历经25min)来纯化固体，得到白色固体(11mg，20％)。LC-MS(ESI+):m/z 384.0(M+H)+；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.08(s,1H),8.00-7.90(m,1H),7.55-7.46(m,2H),7.55-7.46(m,3H),4.16(s,2H),2.31(s,3H),2.22(s,3H)。
实例38：化合物38的制备
(5-(1-(4-氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将2-[[3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-5-(三氟甲基磺酰氧基)吡啶)-2-羰基]氨基]乙酸乙酯(200mg，0.46mmol)、1-(4-氟苯基)-3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)吡唑(281mg，0.93mmol)、Pd(dppf)Cl2(34mg，0.05mmol)和K3PO4(148mg，0.70mmol)于1,4-二噁烷(3mL)和水(1mL)中的混合物加热到80℃过夜。将反应物冷却至室温，用乙酸乙酯(20mL)稀释，通过硅藻土垫过滤。浓缩滤液，粗物质通过柱(0-100％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到棕色残余物(80mg，38％)。LC-MS(ESI+):m/z 384.0(M+H)+。
(5-(1-(4-氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸
将2-[[5-[1-(4-氟苯基)-3-甲基-吡唑-4-基]-3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-吡啶-2-羰基]氨基]乙酸乙酯(80mg，0.18mmol)悬浮于甲醇(1mL)中且添加5N HCl(0.1mL，0.50mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1h。直接浓缩反应物。将粗物质溶解于THF(3mL)中且添加1N NaOH(1.5mL，37.5mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。反应物通过5N HCl水溶液酸化且直接浓缩。将粗物质溶解于DMSO(1.5mL)中，过滤并通过制备型HPLC来纯化，得到灰白色固体(8mg，12％)。LC-MS(ESI+):m/z 385.0(M+H)+；1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.77(s,1H),9.34(t,J＝6.0Hz,1H),8.72(s,1H),8.09(s,1H),7.73(dd,J＝9.0,1.3Hz,2H),7.54(dd,J＝14.8,8.0Hz,1H),7.24-7.05(m,1H),3.98(d,J＝6.1Hz,2H),2.22(s,3H),2.18(s,3H)。
实例39：化合物39的制备
(5-(1-(3-氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将2-[[3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-5-(三氟甲基磺酰氧基)吡啶-2-羰基]氨基]乙酸乙酯(200mg，0.46mmol)、1-(3-氟苯基)-3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)吡唑(281mg，0.93mmol)、Pd(dppf)Cl2(34mg，0.05mmol)和K3PO4(296mg，1.40mmol)于1,4-二噁烷(3mL)和水(1mL)中的混合物加热到80℃过夜。将反应物冷却至室温，用乙酸乙酯(20mL)稀释，并且通过硅藻土垫过滤。浓缩滤液并且通过柱(0-100％乙酸乙酯/己烷)纯化粗残余物，得到棕色油状物(110mg，59％)；LC-MS(ESI+):m/z 457.0(M+H)+。
(5-(1-(3-氟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸
在室温下将5N HCl(0.1mL，0.24mmol)添加至2-[[5-[1-(3-氟苯基)-3-甲基-吡唑-4-基]-3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-吡啶-2-羰基]氨基]乙酸乙酯(110mg，0.24mmol)于甲醇(2mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在室温下搅拌1h。将反应物浓缩到干燥。将粗残余物溶解于THF(3mL)中并且在室温下添加1N NaOH水溶液(1.5mL，37.5mmol)。将所得反应混合物在室温下搅拌过夜。反应物通过5N HCl酸化且直接浓缩。将粗产物溶解于DMSO(1.5mL)中，过滤并通过制备型HPLC来纯化，得到白色固体(8mg，8.4％)。LC-MS(ESI+):m/z385.0(M+H)+；1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.75(s,1H),9.35(t,J＝6.1Hz,1H),8.64(s,1H),8.08(s,1H),7.89(ddd,J＝6.9,5.2,2.8Hz,2H),7.39-7.31(m,2H),4.00(d,J＝6.1Hz,2H),2.21(s,3H),2.18(s,3H)。
实例40：化合物40的制备
(3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-5-(1-苯基乙烯基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将1-苯基乙烯基硼酸(77.4mg，0.52mmol)、2-[[3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-5-(三氟甲基磺酰氧基)吡啶-2-羰基]氨基]乙酸乙酯(150mg，0.35mmol)、Pd(dppf)Cl2(25.5mg，0.03mmol)、K3PO4(222mg，1.05mmol)和水(0.03mL，1.74mmol)于1,4-二噁烷(3mL)中的混合物加热到80℃过夜。将反应物冷却至室温，用乙酸乙酯(20mL)稀释并过滤。浓缩滤液。所得粗残余物通过柱(0-100％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到棕色油状物(32mg，24％)；LC-MS(ESI+):m/z 385.0(M+H)+。
(5-苯甲酰基-3-羟基-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
在室温下向(3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-5-(1-苯基乙烯基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(32mg，0.09mmol)和NaIO4(201mg，0.94mmol)于THF(2mL)、丙酮(1mL)和aater(1mL)中的搅拌混合物中添加含2.5％ OsO4的tBuOH(0.12mL)。将所得反应混合物在室温下搅拌3天。反应物用乙酸乙酯(20mL)稀释，过滤且用乙酸乙酯(20mL)冲洗。滤液用盐水(15mL)洗涤，经Na2SO4干燥且浓缩。粗产物(32mg)不经进一步纯化即进行下一个反应。LC-MS(ESI+):m/z 343.0(M+H)+。
(5-苯甲酰基-3-羟基-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸
在室温下将1N NaOH水溶液(0.5mL，12.5mmol)添加至2-[(5-苯甲酰基-3-羟基-4-甲基-吡啶-2-羰基)氨基]乙酸乙酯(32mg，0.090mmol)于THF(2mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在室温下搅拌1h。反应物用5M HCl(0.11mL)酸化且直接浓缩。将粗物质溶解于DMSO(1mL)中，并通过制备型HPLC来纯化，得到白色固体(7mg，21％，历经2个步骤)。LC-MS(ESI+):m/z 315.0(M+H)+；1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.90(s,1H),12.81(bs,1H),9.49(t,J＝6.1Hz,1H),8.11(s,1H),7.83-7.77(m,2H),7.73(dd,J＝10.5,4.3Hz,1H),7.57(t,J＝7.8Hz,2H),4.01(d,J＝6.2Hz,2H),2.07(s,3H)。
实例41：化合物41的制备
(3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-5-((三甲基硅烷基)乙炔基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
在室温下将三乙胺(0.81mL，5.81mmol)和乙炔基(三甲基)硅烷(0.32mL，2.32mmol)添加至2-[[3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-5-(三氟甲基磺酰氧基)吡啶-2-羰基]氨基]乙酸乙酯(500mg，1.16mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(81.6mg，0.12mmol)和CuI(44.3mg，0.23mmol)于THF(11.6mL)中的搅拌混合物中。将所得反应混合物在室温下搅拌2h。反应混合物用乙酸乙酯(25mL)稀释且通过硅藻土垫过滤。浓缩滤液。将粗残余物溶解于乙酸乙酯(25mL)中，用水(10mL)、盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥且浓缩。粗产物通过柱(12g，0-70％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到棕色油状物(421mg，97％)；LC-MS(ESI+):m/z 378.0(M+H)+。
(5-乙炔基-3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
在0℃将K2CO3(15.4mg，0.11mmol)添加至2-[[3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-5-(2-三甲基硅烷基乙炔基)吡啶-2-羰基]氨基]乙酸乙酯(421mg，1.11mmol)于甲醇(5.56mL)中的搅拌溶液中。将所得反应混合物在0℃搅拌30min。反应物用乙酸乙酯(10mL)稀释并过滤。浓缩滤液并且通过柱(4g，0-100％乙酸乙酯/己烷)纯化粗残余物，得到无色油状物(265mg，77％)；LC-MS(ESI+):m/z 307.0(M+H)+。
(5-(1-(4-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
在室温下将抗坏血酸钠(5.3mg，0.03mmol)和CuSO4(2.1mg，0.01mmol)添加至2-[[5-乙炔基-3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-吡啶-2-羰基]氨基]乙酸甲酯(39.1mg，0.13mmol)、含(4-氟苯基)叠氮化物的叔丁基甲基醚(0.27mL，0.130mmol)于叔丁醇(1mL)、甲醇(1mL)和水(0.5mL)中的搅拌混合物中。将所得反应混合物在室温下搅拌过夜。LCMS指示完成转化为MS/386。反应物用乙酸乙酯(15mL)稀释并且过滤。浓缩滤液并且通过柱(4g，0-100％乙酸乙酯/己烷)纯化所得粗残余物，得到白色固体(50mg，69％)；LC-MS(ESI+):m/z400.0(M+H)+。
(5-(1-(4-氟苯基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸
在室温下将1N NaOH水溶液(0.41mL，0.41mmol)添加至2-[[5-[1-(4-氟苯基)三唑-4-基]-3-羟基-4-甲基-吡啶-2-羰基]氨基]乙酸甲酯(18.5mg，0.05mmol)于THF(3mL)和甲醇(1mL)中的搅拌混合物中。将所得白色浑浊混合物在室温下搅拌1h。LCMS指示起始材料完全耗尽。直接浓缩反应物，且用1N HCl(0.6mL)酸化残余物。过滤沉淀物并且用水洗涤。将固体在高真空下干燥，得到白色固体(16mg，85％)。LC-MS(ESI+):m/z 371.0(M+H)+；1H NMR(500MHz,DMSO)δ12.88(s,1H),12.80(s,1H),9.40(t,J＝6.1Hz,1H),9.27(s,1H),8.57(s,1H),8.08-8.00(m,2H),7.58-7.45(m,2H),4.01(d,J＝6.1Hz,2H),2.47(s,3H)。
实例42：化合物42的制备
(5-(1-(4-氯苯乙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将2-[[5-乙炔基-3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-吡啶-2-羰基]氨基]乙酸乙酯(50mg，0.16mmol)、2-(4-氯苯基)乙基亚氨基-亚氨基-铵(59.6mg，0.33mmol)、CuSO4(2.6mg，0.02mmol)和抗坏血酸钠(12.9mg，0.07mmol)于甲醇(1mL)、叔丁醇(1mL)和水(0.5mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。反应混合物用含50％ MeOH的DCM(20mL)稀释并且过滤。浓缩滤液。粗产物(145mg)不经进一步纯化即进行下一个反应。LC-MS(ESI+):m/z444.0(M+H)+。
(5-(1-(4-氯苯乙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸
在室温下将1N NaOH水溶液(0.24mL，6.03mmol)添加至2-[[5-[1-[2-(4-氯苯基)乙基]三唑-4-基]-3-羟基-4-甲基-吡啶-2-羰基]氨基]乙酸乙酯(70mg，0.16mmol)于THF(3mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在室温下搅拌1h。反应物用1N HCl(0.52mL)淬灭。直接浓缩混合物至干燥。将固体溶解于DMSO(1mL)中，并通过制备型HPLC来纯化，得到呈白色固体状的所需产物(8mg，12％)。LC-MS(ESI+):m/z 416.0(M+H)+；1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.23(s,1H),8.01(s,1H),7.19-7.12(m,2H),7.03(d,J＝8.5Hz,2H),4.63(t,J＝7.0Hz,2H),4.02(s,2H),3.19-3.13(m,J＝7.0Hz,2H),2.16(s,3H)。
实例43：化合物43的制备
(5-(1-(3-(4-氯苯基)丙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将2-[[5-乙炔基-3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-吡啶-2-羰基]氨基]乙酸乙酯(50mg，0.16mmol)、3-(4-氯苯基)丙基亚氨基-亚氨基-铵(64.2mg，0.33mmol)、CuSO4(2.6mg，0.02mmol)和抗坏血酸钠(12.9mg，0.07mmol)于叔丁醇(1mL)、甲醇(1mL)和水(0.50mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。反应物用DCM(20mL)稀释并过滤。浓缩滤液并且所得粗产物(150mg)不经纯化即进行下一个反应；LC-MS(ESI+):m/z 458.0(M+H)+。
(5-(1-(3-(4-氯苯基)丙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸
在室温下将1N NaOH水溶液(0.5mL，12.5mmol)添加至2-[[5-[1-[3-(4-氯苯基)丙基]三唑-4-基]-3-羟基-4-甲基-吡啶-2-羰基]氨基]乙酸乙酯(75mg，0.16mmol)于THF(3mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物搅拌1h。LCMS指示发生完成转化。反应物用1N HCl(0.52mL)淬灭。将混合物浓缩到干燥。将固体溶解于DMSO(1mL)中，并通过制备型HPLC来纯化，得到白色固体(36mg，49％)。LC-MS(ESI+):m/z 430.0(M+H)+；1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.84(s,1H),9.37(t,J＝6.1Hz,1H),8.66(s,1H),8.50(s,1H),7.38-7.30(m,2H),7.26(d,J＝8.4Hz,2H),4.46(t,J＝7.1Hz,2H),3.99(d,J＝6.1Hz,2H),2.67-2.58(m,2H),2.38(s,3H),2.26-2.15(m,2H)。
实例44：化合物44的制备
(3-羟基-4-甲基-5-(1-苯基-1H-1,2,3-三唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
在室温下将CuSO4(2.8mg，0.02mmol)和抗坏血酸钠(14.0mg，0.07mmol)添加至2-[[5-乙炔基-3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-吡啶-2-羰基]氨基]乙酸乙酯(54mg，0.18mmol)和含0.5M苯基叠氮化物的叔丁基甲基醚(0.71mL，0.350mmol)于叔丁醇(2mL)、甲醇(2mL)和水(1mL)中的搅拌混合物中。将所得反应混合物在室温下搅拌过夜。LCMS指示形成产物(MS/382)。反应物用DCM(20mL)稀释，过滤并且浓缩滤液。所得粗残余物通过柱(4g，0-100％乙酸乙酯/己烷)浓缩，得到白色固体(46mg，68％)。LCMS指示产物为甲酯与乙酯(MS/368与MS/382)的混合物。
(3-羟基-4-甲基-5-(1-苯基-1H-1,2,3-三唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸
在室温下将1N NaOH水溶液(1mL，25mmol)添加至2-[[3-羟基-4-甲基-5-(1-苯基三唑-4-基)吡啶-2-羰基]氨基]乙酸乙酯(46mg，0.12mmol)于THF(3mL)和甲醇(1mL)中的搅拌溶液中。将所得反应混合物在室温下搅拌2h。反应物用1N HCl水溶液(1.2mL)淬灭且在减压下浓缩。将粗物质悬浮于水(10mL)中并且通过过滤分离所形成的固体。将固体悬浮于乙酸乙酯(2mL)中，进行超声波处理，通过过滤分离固体，得到灰白色固体(35mg，78％)。LC-MS(ESI+):m/z 354.0(M+H)+；1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.89(s,1H),12.82(bs,1H),9.43(t,J＝6.1Hz,1H),9.30(s,1H),8.58(s,1H),8.00(d,J＝7.6Hz,2H),7.65(t,J＝7.9Hz,2H),7.54(t,J＝7.4Hz,1H),4.01(d,J＝6.1Hz,2H),2.47(s,3H)。
实例45：化合物45的制备
(3-羟基-4-甲基-5-乙烯基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将2-[[3-(2-甲氧基乙氧基甲氧基)-4-甲基-5-(三氟甲基磺酰氧基)吡啶-2-羰基]氨基]乙酸乙酯(300mg，0.63mmol)、三丁基(乙烯基)锡烷(0.22mL，0.76mmol)、LiCl(80.4mg，1.9mmol)和Pd(PPh3)2Cl2(22.5mg，0.03mmol)于DMF(5mL)中的混合物加热到69℃持续2h。将反应物冷却至室温并且在室温下保持搅拌三天。浓缩反应物并且通过柱(4g，0-100％乙酸乙酯/己烷)纯化所得粗残余物，得到呈棕色油状的产物(152mg，91％)；LC-MS(ESI+):m/z 265.0(M+H)+。
(5-甲酰基-3-羟基-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
在室温下将2.5M OsO4于叔丁醇(0.2mL)中的溶液添加至2-[(3-羟基-4-甲基-5-乙烯基-吡啶-2-羰基)氨基]乙酸乙酯(152mg，0.58mmol)、吡啶(0.1mL，0.58mmol)和NaIO4(615mg，2.88mmol)于丙酮(1mL)、THF(2mL)和水(1mL)中的搅拌混合物中。将所得反应混合物在室温下搅拌24h反应物用乙酸乙酯(20mL))稀释并且过滤。浓缩滤液并且通过柱(0-100％乙酸乙酯/己烷)纯化所得粗产物，得到白色固体(120mg，78％)；LC-MS(ESI+):m/z267.0(M+H)+。
(5-(2-(3,5-二氯苯基)-2H-四唑-5-基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将含2-[(5-甲酰基-3-羟基-4-甲基-吡啶-2-羰基)氨基]乙酸乙酯(120mg，0.45mmol)和4-甲基苯磺酰肼(100mg，0.54mmol)的DCM(10mL)在室温下搅拌30min(形成澄清溶液)。直接浓缩反应物并且将粗残余物溶解于吡啶(4mL)中且冷却至-5℃。在-5到0℃下逐滴添加含[(E)-(3,5-二氯苯基)偶氮基]-四氟-硼(235mg，0.90mmol)的乙醇(4mL)和水(2.5mL)。将所得反应混合物在室温下搅拌过夜。反应物用水(20mL)稀释并且用乙酸乙酯(20mL×2)萃取。浓缩有机层并且通过柱(4g，0-100％乙酸乙酯/DCM)纯化粗残余物，得到红色固体(94mg，46％)；LC-MS(ESI+):m/z 452.0(M+H)+。
(5-(2-(3,5-二氯苯基)-2H-四唑-5-基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸
将1N NaOH水溶液(0.5mL，12.5mmol)添加至2-[[5-[2-(3,5-二氯苯基)四唑-5-基]-3-羟基-4-甲基-吡啶-2-羰基]氨基]乙酸乙酯(94mg，0.21mmol)于THF(3mL)中的搅拌溶液中。将反应物在室温下搅拌30min。添加甲醇(1mL)并且将反应混合物在室温下再搅拌30min。LCMS指示完全转化。直接浓缩反应物。粗残余物用1N HCl酸化并且过滤所得沉淀物。将固体悬浮于乙醇(10mL)中，加热到90℃30min，冷却至室温并且通过过滤收集。将纯固体在真空下干燥，得到白色固体(9.5mg，10％)。LC-MS(ESI+):m/z424.0(M+H)+；1H NMR(400MHz,DMSO)δ13.02(s,1H),12.86(bs,1H),9.54(t,J＝5.7Hz,1H),8.77(s,1H),8.27(d,J＝1.8Hz,2H),7.98(t,J＝1.8Hz,1H),4.01(d,J＝6.0Hz,2H),2.59(s,3H)。
实例46：化合物46的制备
3,5-二氯-4-乙基吡啶1-氧化物
将3-氯过氧苯甲酸(1.41g，8.2mmol)溶解于DCM(20mL)中并且在室温下逐滴添加至3,5-二氯-4-乙基-吡啶(1.11g，6.31mmol)于DCM(15.8mL)中的搅拌溶液中。将所得混合物在室温下搅拌过夜。反应物用固体K2CO3(1.13g，8.2mmol)淬灭，并且搅拌1h。将沉淀物过滤并且用DCM(25mL)冲洗。浓缩滤液，得到白色固体(1.2g，99％)。粗物质不经进一步纯化即进行下一个反应；LC-MS(ESI+):m/z 193.0(M+H)+。
3,5-二氯-4-乙基皮考啉腈
将3,5-二氯-4-乙基-吡啶1-氧化物(1.2g，6.25mmol)、三乙胺(1.3mL，9.37mmol)和三甲基硅烷基甲腈(1.17mL，9.37mmol)于MeCN(20mL)中的混合物加热到80℃过夜。将反应物冷却至室温并且用NaHCO3水溶液(10mL)淬灭。混合物用乙酸乙酯(20mL)稀释。分离各层，并且将有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩。粗物质通过柱(12g柱，0-50％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到浅棕色液体(1.03g，82％)；LC-MS(ESI+):m/z 202.0(M+H)+。
3-氯-5-(3-氯苯基)-4-乙基皮考啉腈
将3,5-二氯-4-乙基-吡啶-2-甲腈(490mg，2.44mmol)、(3-氯苯基)硼酸(381mg，2.44mmol)、Pd(dppf)Cl2(89mg，0.12mmol)和K2CO3(504mg，3.66mmol)于DMF(5mL)和水(0.50mL)中的混合物用氮气脱气且加热到45℃过夜。反应物用乙酸乙酯(20mL)稀释，通过硅藻土垫过滤且用乙酸乙酯(20mL)冲洗。浓缩滤液。粗产物通过柱(12g，0-100％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到浅棕色油状物(670mg，99％)；LC-MS(ESI+):m/z 278.0(M+H)+。
5-(3-氯苯基)-4-乙基-3-((4-甲氧基苯甲基)氧基)皮考啉腈
在0℃将60％氢化钠于矿物油中的悬浮液(193.4mg，4.83mmol)添加至(4-甲氧基苯基)甲醇(0.6mL，4.83mmol)和3-氯-5-(3-氯苯基)-4-乙基-吡啶-2-甲腈(670mg，2.42mmol)于DMF(7mL)中的冰冷溶液。将所得反应混合物搅拌2h。反应物用冷水(20mL)淬灭。混合物用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。合并的有机层经Na2SO4干燥且浓缩。粗产物通过柱(12g，0-60％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到白色发泡固体(560mg，61％)；LC-MS(ESI+):m/z379.0(M+H)+。
5-(3-氯苯基)-4-乙基-3-((4-甲氧基苯甲基)氧基)皮考啉酸
将5-(3-氯苯基)-4-乙基-3-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]吡啶-2-甲腈(560mg，1.48mmol)和30％ NaOH水溶液(6.27mL，47.02mmol)于乙醇(5mL)中的混合物加热到100℃持续2h。将反应物冷却至室温并且直接浓缩以去除乙醇。反应混合物用6N HCl酸化并且过滤所得沉淀物。将固体溶解于甲醇中且浓缩，得到棕色残余物(610mg)。粗物质不经进一步纯化即进行下一个反应。LC-MS(ESI+):m/z 398.0(M+H)+。
(5-(3-氯苯基)-4-乙基-3-((4-甲氧基苯甲基)氧基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
在室温下将三乙胺(0.52mL，3.77mmol)添加至5-(3-氯苯基)-4-乙基-3-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]吡啶-2-甲酸(300mg，0.75mmol)、2-氨基乙酸乙酯盐酸盐(210mg，1.51mmol)和PyBOP(470mg，0.90mmol)于DCM(5mL)中的搅拌混合物中。将所得反应混合物在室温下搅拌3天。浓缩反应物，且通过柱(4g，0-100％乙酸乙酯/己烷)纯化粗残余物，得到浅棕色液体(240mg，65％)；LC-MS(ESI+):m/z 483.0(M+H)+。
(5-(3-氯苯基)-4-乙基-3-羟基皮考啉酰基)甘氨酸
在室温下将浓HCl(0.1mL，1.2mmol)添加至2-[[5-(3-氯苯基)-4-乙基-3-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]吡啶-2-羰基]氨基]乙酸乙酯(140mg，0.29mmol)于乙醇(1.5mL)中的搅拌溶液中将所得反应混合物在室温下搅拌2h。LCMS指示发生完全PMB去保护。在减压下直接浓缩反应物。将粗物质溶解于THF(1mL)和甲醇(1mL)中且在室温下用1N NaOH水溶液(1.5mL)处理2h。LCMS指示完全转化为所需产物。直接浓缩反应物以去除THF和甲醇。水溶液用1N HCl(1.52mL)酸化并且过滤所得沉淀物。将粗固体溶解于DMSO(2mL)中，并通过制备型HPLC(30-85％乙腈/水，历经25min)来纯化，得到白色固体(62mg，60％)。LC-MS(ESI+):m/z335.0(M+H)+；1H NMR(500MHz,DMSO)δ12.84(s,2H),9.39(s,1H),8.02(s,1H),7.60-7.53(m,2H),7.50(d,J＝1.0Hz,1H),7.41-7.35(m,1H),4.01(d,J＝6.0Hz,2H),2.59-2.53(q,J＝5.4Hz,2H),1.05(t,J＝7.5Hz,3H)。
实例47：化合物47的制备
(3-羟基-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)-L-丙氨酸
根据用于制备(3-羟基-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)皮考啉酰基)甘氨酸的程序合成所述化合物。LC-MS(ESI+):m/z 367(M+H)+；1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.90(brs,1H),12.77(s,1H),9.17(d,J＝7.6Hz,1H),8.93(s,1H),8.33(s,1H),8.18(s,1H),7.94(d,J＝8.0Hz,2H),7.55(t,J＝7.8Hz,2H),7.37(t,J＝7.4Hz,1H),4.51(t,J＝7.4Hz,1H),2.37(s,3H),1.47(d,J＝7.2Hz,3H)。
实例48：化合物48的制备
(3-羟基-4-甲基-5-(1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)-D-丙氨酸
根据用于制备(3-羟基-4-甲基-5-(2-苯基噁唑-5-基)皮考啉酰基)甘氨酸的程序合成所述化合物。LC-MS(ESI+):m/z 367(M+H)+；1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.88(brs,1H),12.78(s,1H),9.17(d,J＝7.7Hz,1H),8.92(s,1H),8.32(s,1H),8.18(s,1H),7.94(d,J＝8.0Hz,2H),7.55(t,J＝7.8Hz,2H),7.37(t,J＝7.4Hz,1H),4.51(t,J＝7.2Hz,1H),2.37(s,3H),1.47(d,J＝7.2Hz,3H)。
实例49：化合物49的制备
(5-(5-氟-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-3-((2-甲氧基乙氧基)甲氧基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将2-[[3-(2-甲氧基乙氧基甲氧基)-4-甲基-5-(三氟甲基磺酰氧基)吡啶-2-羰基]氨基]乙酸乙酯(200mg，0.4200mmol)、5-氟-1-苯基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)吡唑(240mg，0.830mmol)、Pd(dppf)Cl2.DCM(34.4mg，0.040mmol)和K3PO4(268mg，1.26mmol)于1,4-二噁烷(3mL)和水(0.2000mL)中的混合物用氮脱气且加热到95℃过夜。LCMS指示MS/487。将反应物冷却至室温。反应物用甲醇(10mL)稀释并且过滤，浓缩滤液，粗物质通过柱(4g，0-100％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到棕色油状物(60mg，39％)。LC-MS(ESI+):m/z 487.0(M+H)+。
(5-(5-氟-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸
在室温下将含4M HCl的二噁烷(0.2mL，0.1200mmol)添加至2-[[5-(5-氟-1-苯基-吡唑-4-基)-3-(2-甲氧基乙氧基甲氧基)-4-甲基-吡啶-2-羰基]氨基]乙酸乙酯(60mg，0.120mmol)于乙醇(2mL)中的搅拌溶液中。将所得反应混合物在室温下搅拌1h。LCMS指示发生完全MEM去保护。直接浓缩反应物，将粗物质溶解于THF(2mL)和甲醇(1mL)中且添加1NNaOH水溶液(0.5mL)。将反应物在室温下搅拌2h。LCMS指示发生完全酯水解。将反应物直接浓缩，用1N HCl水溶液酸化，过滤沉淀物。将固体溶解于DMSO中，并通过制备型HPLC来纯化，得到灰白色固体(11mg，23％)。LC-MS(ESI+):m/z 371.0(M+H)+；1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.80(s,2H),9.36(t,J＝6.2Hz,1H),8.21(s,1H),8.06(d,J＝3.1Hz,1H),7.73(d,J＝8.3Hz,2H),7.59(t,J＝7.9Hz,2H),7.47(t,J＝7.4Hz,1H),4.00(d,J＝6.1Hz,2H),2.29(d,J＝1.1Hz,3H)。
实例50：化合物50的制备
(3-羟基-4-甲基-5-(5-甲基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯
将2-[[3-(2-甲氧基乙氧基甲氧基)-4-甲基-5-(三氟甲基磺酰氧基)吡啶-2-羰基]氨基]乙酸乙酯(309mg，0.650mmol)、5-甲基-1-苯基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)吡唑(250mg，0.880mmol)、Pd(dppf)Cl2(47.68mg，0.070mmol)和K3PO4(276.6mg，1.3mmol)于1,4-二噁烷(5mL)和水(0.25mL)中的混合物加热到90℃过夜。将反应物冷却至室温，用乙酸乙酯(10mL)和1N HCl水溶液(5mL)稀释。分离有机层。干燥有机层经Na2SO4干燥，且浓缩。将粗物质溶解于乙醇(10mL)中，用含4N HCl的二噁烷(0.3mL)处理2h。LCMS指示发生MEM去保护。直接浓缩反应物。粗物质通过柱(4g，0-100％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到黄色固体(40mg，16％，历经2个步骤)。LC-MS(ESI+):m/z 395.0(M+H)+。
(3-羟基-4-甲基-5-(5-甲基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)皮考啉酰基)甘氨酸
在室温下将1N NaOH水溶液(0.5mL)添加至2-[[3-羟基-4--5-(5-甲基-4-苯基-吡唑-1-基)吡啶-2-羰基]氨基]乙酸乙酯(40mg，0.100mmol)于THF(5mL)和甲醇(2mL)中的搅拌溶液中。将所得反应混合物在室温下搅拌2天且加热到45℃持续2h。反应物用1N HCl水溶液酸化且直接浓缩。粗物质通过溶解于DMSO(2mL)中利用制备型HPLC来纯化，得到灰白色固体(20mg，52％)。LC-MS(ESI+):m/z 367.0(M+H)+；1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.73(s,2H),9.33(t,J＝6.1Hz,1H),8.07(s,1H),7.83(s,1H),7.65-7.53(m,4H),7.51-7.38(m,1H),4.00(d,J＝6.2Hz,2H),2.26(s,2H),2.20(s,2H)。
实例51：化合物51的制备
化合物51(AKE-7595)的制备。
步骤1：
将1-苯基哌啶(1g，6.2mmol)、Cu(OAc)2(2.25g，12.40mmol)、I2(1575mg，6.20mmol)和DMAP(758mg，6.20mmol)于ACN(20mL)中的溶液在80℃在氧大气压下搅拌5.5小时。在如由TLC所指示完成反应之后，将反应物冷却至室温，用饱和NH4Cl水溶液(250mL)淬灭且用EtOAc(100mL×3)萃取。将合并的有机相干燥、过滤且浓缩。残余物通过柱色谱法(EA:PE＝1:50)纯化，得到74mg标题化合物。1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ7.48-7.22(m,5H),7.15(d,J＝1.8Hz,1H),6.95(dd,J＝3.0,1.8Hz,1H),6.43(d,J＝3.0Hz,1H)。
步骤2：
在氮气保护下，将5-溴-3-甲氧基-4-甲基皮考啉腈(160mg，0.71mmol)、B2Pin2(269mg，1.06mmol)、KOAc(138mg，1.41mmol)和Pd(dppf)Cl2(26mg，0.035mmol)于二噁烷(10mL)中的溶液在100℃搅拌约6小时。在如由TLC分析所指示耗尽大部分5-溴-3-甲氧基-4-甲基皮考啉腈之后，直接浓缩反应物并且通过柱色谱法纯化残余物，得到185mg呈白色固体状的标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z 275(M+H)+。
步骤3：
在氮气保护下，将3-甲氧基-4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)皮考啉腈(185mg，0.68mmol)、3-碘-1-苯基-1H-吡咯(294mg，1.09mmol)、Pd(dppf)Cl2(25mg，0.034mmol)、K3PO4·3H2O(540mg，2.026mmol)于二噁烷(15mL)和H2O(3mL)中的溶液在75℃搅拌约3小时。在如由TLC分析所指示完成反应之后，将反应物直接浓缩至干燥并且通过柱色谱法纯化残余物，得到48mg呈黄色油状的标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z289(M+H)+。
步骤4：
根据制备AKB-7588(化合物57)的步骤5合成化合物。LC-MS(ESI+):m/z 309(M+H)+；
步骤5：
根据制备AKB-7588(化合物57)的步骤6合成化合物。LC-MS(ESI+):m/z 380(M+H)+；
步骤6：
根据制备AKB-7588(化合物57)的步骤7合成化合物。LC-MS(ESI+):m/z 366(M+H)+。
步骤7：
根据制备AKB-7588(化合物57)的步骤8合成化合物。LC-MS(ESI+):m/z 352(M+H)+；1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.82(brs,1H),12.78(s,1H),9.25(t,J＝6.0Hz,1H),8.29(s,1H),7.75(d,J＝3.0Hz,1H),7.70(m,2H),7.60-7.50(m,3H),7.40-7.32(m,1H),6.88(s,1H),4.00(d,J＝6.0Hz,2H),2.40(s,3H)。
实例52：化合物52的制备
化合物52(AKE-7562)的制备。
步骤1：
向(3-羟基-4-甲基-5-(2H-四唑-5-基)皮考啉酰基)甘氨酸甲酯(69mg，0.24mmol)和PivCl(34mg，0.28mmol)于THF中的溶液中一次性添加TEA(36mg，0.36mmol)。将所得混合物在室温下搅拌约6h。在如由TLC分析所指示完成反应之后，将反应物直接浓缩到干燥用于柱纯化。获得呈油状物的70mg标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z 377(M+H)+。
步骤2：
将特戊酸2-((2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基甲酰基)-4-甲基-5-(2H-四唑-5-基)吡啶-3-基酯(30mg，0.08mmol)、环丙基硼酸(14mg，0.16mmol)、Cu(OAc)2(8mg，0.04mmol)、2,2'-联吡啶(19mg，0.12mmol)和Na2CO3(21mg，0.20mmol)于DCE(0.75mL)中的悬浮液在回流下搅拌约36h。在如由LCMS分析所指示完成反应之后，将反应物直接浓缩到干燥。残余物通过柱色谱(DCM:PE＝1:1至1:0)纯化，得到10mg标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z 417(M+H)+。
步骤3：
根据制备AKB-7560(化合物65)的步骤12合成化合物。LC-MS(ESI+):m/z 319(M+H)+；1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.95(brs,1H),12.88(brs,1H),9.54(t,J＝6.3Hz,1H),8.63(s,1H),4.52(m,1H),4.02(d,J＝6.3Hz,2H),2.52(s,3H),1.50-1.40(m,2H),1.40-1.33(m,2H)。
实例53：化合物54的制备
化合物54(AKE-7590)的制备。
步骤4：
在室温下历经5min向(3-甲氧基-4-甲基-5-(苯硫基)皮考啉酰基)甘氨酸甲酯(180mg，0.52mmol)于DCM(5mL)中的溶液中逐份添加m-CPBA(269mg，1.56mmol)。将反应物在室温下搅拌约5h。在如由TLC分析所指示完成反应之后，所得混合物用水(10mL)淬灭且用DCM(10mL×2)萃取。合并的有机相用Na2SO4(10g)干燥，过滤且浓缩。残余物通过快速硅胶色谱法(EA:Hex＝1:2至1:1)纯化，得到190mg标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z 379(M+H)+；1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ9.03(s,1H),8.20(brs,1H),7.98-7.88(m,2H),7.70-7.50(m,3H),4.25(d,J＝6.3Hz,2H),3.89(s,3H),3.80(s,3H),2.46(s,3H)。
步骤5：
根据制备AKB-7589(化合物59)的步骤4合成化合物。LC-MS(ESI+):m/z 365(M+H)+。
步骤6：
LC-MS(ESI+):m/z 351(M+H)+；1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.08(s,1H),12.88(s,1H),9.67(s,1H),8.76(s,1H),8.05-7.90(m,2H),7.80-7.61(m,3H),4.01(d,J＝6.3Hz,2H),2.30(s,3H)。
实例54：化合物55的制备
根据AKB-7560(化合物65)的制备来制备化合物55(AKE-7597)。LC-MS(ESI+):m/z371(M+H)+。1H-NMR(300MHz,CD3OD)δ7.97(s,1H),7.35-7.25(m,2H),7.06-7.01(m,2H),6.88(t,J＝7.2Hz,1H),4.12(s,2H),3.35-3.30(m,4H),3.28-3.20(m,4H),2.21(s,3H)。
实例55：化合物56的制备
化合物56(AKE-7596)的制备。
步骤1：
在氮气保护下，向3,5-二氯-4-甲基皮考啉腈(2.18g，11.78mmol)于t-BuOH(20mL)中的溶液中添加4-苯基哌啶(950mg，5.89mmol)、RuPhos(412mg，0.88mmol)、Cs2CO3(5.76g，17.67mmol)和Pd(OAc)2(198mg，0.88mmol)。将反应物在110℃搅拌过夜。在如由TLC所指示完成反应之后，将所得混合物冷却至室温，用水(50mL)淬灭且用EtOAc(50mL×3)萃取。合并的有机相用Na2SO4(50g)干燥，过滤并且浓缩。残余物通过快速硅胶色谱法(EA:Hex＝1:50至1:2)纯化，得到310mg呈黄色固体状的标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z 312(M+H)+；1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.38(s,1H),7.40-7.31(m,4H),7.28-7.18(m,1H),3.48-3.36(m,2H),3.07-2.95(m,2H),2.80-2.68(m,1H),2.38(s,3H),1.95-1.78(m,4H)。
步骤2：
根据制备AKB-7588(化合物57)的步骤3合成化合物。LC-MS(ESI+):m/z 308(M+H)+；1H-NMR(300MHz,CDCl3)δLC-MS(ESI+):m/z 308(M+H)+；1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ8.15(s,1H),7.40-7.25(m,5H),4.04(s,3H),3.49-3.31(m,2H),3.05-2.85(m,4H),2.78-2.64(m,1H),2.27(s,3H),2.05-1.80(m,4H)。
步骤3：
根据制备AKB-7588(化合物57)的步骤5合成化合物。LC-MS(ESI+):m/z 327(M+H)+；1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.11(s,1H),7.40-7.15(m,5H),3.80(s,3H),3.35(m,2H),2.98-2.90(m,2H),2.79-2.62(m,1H),2.27(s,3H),1.99-1.78(m,4H)。
步骤4：
根据制备AKB-7588(化合物57)的步骤6合成化合物。LC-MS(ESI+):m/z 398(M+H)+；1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ8.28(t,J＝5.4Hz,1H),8.10(s,1H),7.41-7.20(m,5H),4.32-4.24(d,J＝5.4Hz,2H),3.92(s,3H),3.79(s,3H),3.43-3.31(m,2H),3.01-2.90(m,2H),2.77-2.65(m,1H),2.30(s,3H),2.05-1.86(m,4H)。
步骤5：
根据制备AKB-7588(化合物57)的步骤7合成化合物。LC-MS(ESI+):m/z 384(M+H)+。
步骤6：
根据制备AKB-7588(化合物57)的步骤8合成化合物。LC-MS(ESI+):m/z 370(M+H)+；1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.81(s,1H),12.55(s,1H),9.13(t,J＝5.4Hz,1H),7.93(s,1H),7.39-7.18(m,5H),3.96(d,J＝5.4Hz,2H),3.01-2.90(m,2H),2.80-2.68(m,1H),2.16(s,3H),1.98-1.75(m,4H)。
实例56：化合物57的制备
化合物57(AKE-7588)的制备。
步骤1：
在80℃向5-溴-4-甲基-3-硝基吡啶-2-胺(8.75g，0.038mol)于ACN(200mL)中的溶液中添加CuBr2(10.18g，0.046mol)。在将所得混合物在80℃搅拌20min之后，历经5min将t-BuONO(6.22g，0.060mol)逐滴添加至反应物中。将反应物继续在80℃搅拌1小时。在如由TLC分析所指示完成反应之后，将反应物冷却至室温，用水(200mL)淬灭且用EtOAc(200mL×2)萃取。将合并的有机相用无水Na2SO4(50g)干燥，过滤并且在真空中浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法(EA:Hex＝1:30至1:20)纯化，得到4.6g呈黄色固体状的所需产物。LC-MS(ESI+):m/z295(M+H)+；1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ8.58(s,1H),2.42(s,3H)。
步骤2：
将2,5-二溴-4-甲基-3-硝基吡啶(4.4g，0.015mol)和CuCN(2.68g，0.030mol)于DMF(100mL)中的悬浮液在120℃搅拌2h。在如由TLC分析所指示完成反应之后，将反应物冷却至室温，用水(200mL)淬灭且用EtOAc(200mL×2)萃取。将合并的有机相用水(100mL)和盐水(100mL)洗涤，用无水Na2SO4(100g)干燥，过滤且在真空中浓缩。残余物通过快速硅胶色谱法(EA:Hex＝1:30至1:10)纯化，得到1.29呈黄色固体状的标题化合物。1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ8.91(s,1H),2.54(s,3H)。
步骤3：
在室温下向5-溴-4-甲基-3-硝基皮考啉腈(1.33g，5.52mmol)于甲醇(30mL)中的溶液中添加MeONa于MeOH(993mg，5.52mmol，30wt％)中的溶液。将反应物在50℃搅拌7h。在如由TLC分析所指示完成反应之后，反应物用水(50mL)淬灭且用EtOAc(50mL×2)萃取。合并的有机相用无水Na2SO4(100g)干燥，过滤且在真空中浓缩。残余物通过快速硅胶色谱法(EA:Hex＝1:30至1:10)纯化，得到640mg呈黄色固体状的标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z 227,229(M+H)+；1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ8.50(s,1H),4.09(s,3H),2.41(s,3H)。
步骤4：
在氮气保护下，在室温下历经2min向酚(100mg，1.06mmol)于DMF(3mL)中的溶液中逐份添加NaH(71mg，1.77mmol)。将溶液在室温下搅拌30分钟之后，历经5min将反应混合物逐滴添加至5-溴-3-甲氧基-4-甲基皮考啉腈(200mg，0.86mmol)于DMF(2mL)中的溶液中。将反应物在100℃搅拌2h。在如由TLC分析所指示完成反应之后，将反应物冷却至室温，用盐水(5mL)淬灭且用EtOAc(5mL×3)萃取。合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法(PE:EtOAc＝20:1)纯化，得到110mg呈淡黄色油状的粗标题化合物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.91(s,1H),7.41(t,J＝7.9Hz,2H),6.93(t,J＝7.4Hz,1H),6.84(d,J＝7.6Hz,2H),4.11(s,3H),2.29(s,3H)。
步骤5：
在室温下向3-甲氧基-4-甲基-5-苯氧基皮考啉腈(100mg，0.42mmol)于EtOH(3mL)和H2O(2mL)中的溶液中一次性添加NaOH(167mg，4.17mmol)。将反应物在80℃搅拌7h。在如由LCMS分析所指示完成反应之后，用稀释的HCl溶液(2N)将反应物调节至pH 2至3。沉淀出大量固体。通过过滤收集固体并且在乙醇中浆化1小时。在过滤和干燥后，获得74mg呈黄色油状的标题化合物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.94(s,1H),7.42(t,J＝7.7Hz,2H),7.18(t,J＝7.7Hz,1H),7.04(d,J＝8.1Hz,2H),3.83(s,3H),2.18(s,3H)。
步骤6：
在室温下向3-甲氧基-4-甲基-5-苯氧基皮考啉酸(74mg，0.29mmol)于DCM(2mL)中的溶液中添加甘氨酸甲酯盐酸盐(54mg，0.43mmol)、EDCl(110mg，0.57mmol)、HOBt(77mg，0.57mmol)和DIEA(74mg，0.57mmol)。将反应物在室温下搅拌2h。在如由TLC分析所指示完成反应之后，反应物用盐水(2mL)淬灭且用CH2Cl2(2mL×3)萃取。合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。残余物通过硅胶柱色谱(PE:EtOAc＝3:1)纯化，得到31mg标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z 331(M+H)+。
步骤7：
将2-(3-甲氧基-4-甲基-5-苯氧基皮考啉酰胺)乙酸甲酯(29mg，0.09mmol)和LiCl(74mg，1.76mmol)于DMA(1mL)中的悬浮液在85℃搅拌6h。在如由TLC分析所指示完成反应之后，将反应物冷却至室温，用盐水(2mL)淬灭且用DCM(2mL×3)萃取。合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩，得到29mg呈黄色油状的标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z 317(M+H)+。
步骤8：
2-(3-羟基-4-甲基-5-苯氧基皮考啉酰基)乙酸
根据制备AKB-7560(化合物65)的步骤12合成化合物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.86(s,1H),12.79(brs,1H),9.23(t,J＝6.2Hz,1H),7.76(s,1H),7.45-7.36(m,2H),7.17(t,J＝7.4Hz,1H),7.05(d,J＝7.9Hz,2H),3.97(d,J＝6.2Hz,2H),2.11(s,3H)。
实例57：化合物58的制备
化合物58(AKE-7591)的制备。
步骤1：
在氮气保护下，将5-溴-3-甲氧基-4-甲基皮考啉腈(157 0.691)、苯甲基Bpin(226mg，1.04mmol)、Pd(dppf)Cl2(26mg，0.035mmol)和K3PO4·3H2O(553mg，2.074mmol)于二噁烷(10mL)和H2O(1mL)中的反应混合物在75℃搅拌约7h。在如由TLC所指示完成反应之后，将反应物浓缩至干燥并且通过柱色谱法纯化残余物，得到170mg呈油状的标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z 239(M+H)+。
步骤2：
根据制备AKB-7588(化合物57)的步骤5合成化合物。LC-MS(ESI+):m/z 258(M+H)+；
步骤3：
根据制备AKB-7588(化合物57)的步骤6合成化合物。LC-MS(ESI+):m/z 329(M+H)+
步骤4：
根据制备AKB-7588(化合物57)的步骤7合成化合物。LC-MS(ESI+):m/z 315(M+H)+；
步骤5：
根据制备AKB-7588(化合物57)的步骤8合成化合物。LC-MS(ESI+):m/z 301(M+H)+；1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.86(brs,1H),12.64(s,1H),9.13(t,J＝5.7Hz,1H),8.05(s,1H),7.39-7.18(m,5H),4.05(s,2H),3.99(d,J＝5.7Hz,2H),2.10(s,3H)。
实例58：化合物59的制备
化合物59(AKE-7589)的制备。
步骤1：
在室温下向苯硫酚(88mg，0.80mmol)于THF(3mL)中的溶液中一次性添加氢化钠(53mg，1.32mmol)将反应物在室温下搅拌约0.5小时。历经5min将5-溴-3-甲氧基-4-甲基皮考啉腈(150mg，0.66mmol)于THF(2mL)中的溶液逐滴添加至以上溶液中。将所得混合物继续在室温下搅拌1小时。在如由TLC分析所指示完成反应之后，反应物用水(5mL)淬灭且用EtOAc(3×5ml)萃取。将合并的有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并且在真空中浓缩。残余物通过快速硅胶色谱法(EA:Hex＝1:50至1:30)纯化，得到140mg呈白色油状的标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z 257(M+H)+；1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ7.82(s,1H),7.55-7.42(m,5H),4.09(s,3H),2.35(s,3H)。
步骤2：
根据制备AKB-7588(化合物57)的步骤5合成化合物。1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.35(s,1H),8.04(s,1H),7.50-7.35(m,5H),3.80(s,3H),2.31(s,3H)。
步骤3：
在室温下向3-甲氧基-4-甲基-5-(苯硫基)皮考啉酸(110mg，0.40mmol)于DCM(5mL)中的溶液中添加甘氨酸甲酯(75mg，0.60mmol)、EDCl(154mg，0.80mmol)、HOBt(108mg，0.80mmol)和DIEA(103mg，0.80mmol)。将反应物在45℃下搅拌过夜。在如由TLC所指示完成反应之后，所得混合物用水(10mL)稀释且用DCM(10mL×3)萃取。合并的有机相用Na2SO4(10g)干燥，过滤且浓缩。残余物通过快速硅胶色谱法(EA:Hex＝1:3至1:2)纯化，得到105mg呈黄色固体状的标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z 347(M+H)+；1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ8.15(s,1H),7.94(s,1H),7.39(s,5H),4.22(d,J＝6.3Hz,2H),3.92(s,3H),3.78(s,3H),2.38(s,3H)。
步骤4：
向(3-甲氧基-4-甲基-5-(苯硫基)皮考啉酰基)甘氨酸甲酯(100mg，0.29mmol)于AcOH(8ml)中的溶液中HBr/AcOH溶液(1mL，30％)。将反应物在60℃下搅拌过夜。在如由TLC分析所指示完成反应之后，将所得混合物浓缩至干燥，得到250mg粗标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z 333(M+H)
步骤5：
根据制备AKB-7560(化合物65)的步骤12合成化合物。LC-MS(ESI+):m/z 319(M+H)+；1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.00-12.61(m,2H),9.30(s,1H),7.81(s,1H),7.51-7.35(m,5H),4.01-3.90(m,2H),2.31(s,3H)。
实例59：化合物60的制备
化合物60(AKE-7566)的制备。
步骤1：
在室温下向4-溴吡唑(1.00g，6.80mmol)于DMF(20mL)中的溶液中添加2-氯-1-氟-4-硝基苯(1.44g，8.16mmol)和Cs2CO3(3.33g，10.20mmol)。将反应物在100℃搅拌3h。在如由TLC分析所指示完成反应之后，将反应物冷却至室温，用盐水(20mL)淬灭且用EtOAc(20mL×3)萃取。合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。将残余物在Et2O(20mL)中浆化1小时。在过滤后，获得1.61g呈白色固体状的标题化合物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.44(d,J＝2.5Hz,1H),8.26(dd,J＝8.9,2.5Hz,1H),8.16(s,1H),7.88(d,J＝8.9Hz,1H),7.77(s,1H)。
步骤2：
在60℃向饱和NH4Cl溶液(8mL)中添加铁粉(1.49g，26.67mmol)。将悬浮液在80℃搅拌30min。历经5min将4-溴-1-(2-氯-4-硝基苯基)-1H-吡唑(1.61g，5.33mmol)于乙醇(30mL)和THF(15mL)中的溶液逐滴添加至以上反应物中。将反应物继续在回流下搅拌2h。在如由TLC分析所指示完成反应之后，通过硅藻土垫过滤反应混合物。将滤液真空浓缩至干燥。残余物用水(30mL)稀释且用EtOAc(20mL×3)萃取。合并的有机相用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤且在真空浓缩，得到呈黄色固体状的1.67g粗标题化合物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.71(s,1H),7.65(s,1H),7.23(d,J＝8.5Hz,2H),6.76(d,J＝2.5Hz,1H),6.60(dd,J＝8.5,2.5Hz,1H),3.58(brs,2H)。
步骤3：
在氮气保护下，在50℃历经20min向CuCl2(1.43g，8.38mmol)和t-BuONO(921mg，8.94mmol)于无水DMF(20mL)中的悬浮液中逐滴添加4-(4-溴-1H-吡唑-1-基)-3-氯苯胺(1.52g，5.59mmol)于无水DMF(10mL)中的溶液。添加后，将反应物继续在50℃搅拌1.5h。在如由TLC分析所指示完成反应之后，反应物用盐水(30mL)淬灭且用EtOAc(30mL×3)萃取。合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法(PE:EtOAc＝150:1)纯化，得到970mg呈白色固体状的标题化合物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.89(s,1H),7.70(s,1H),7.57-7.48(m,2H),7.37(dd,J＝8.6,2.3Hz,1H)。
步骤4：
在氮气保护下，在室温下向4-溴-1-(2,4-二氯苯基)-1H-吡唑(430mg，1.47mmol)于二噁烷(15mL)中的溶液中添加双(频哪醇)二硼(748mg，2.95mmol)、Pd(dppf)Cl2(108mg，0.15mmol)和KOAc(433mg，4.42mmol)。将反应物在100℃下搅拌过夜。在如由TLC分析所指示完成反应之后，将反应物冷却至室温，用盐水(20mL)淬灭且用EtOAc(20mL×3)萃取。合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法(PE:EtOAc＝20:1至5:1)纯化，得到灰白色固体状的345mg粗标题化合物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.14(s,1H),7.99(s,1H),7.56-7.48(m,2H),7.35(dd,J＝8.6,2.3Hz,1H),1.34(s,12H)。
步骤5：
在氮气保护下，在室温下向2-(3-羟基-4-甲基-5-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)皮考啉酰胺基)乙酸甲酯(137mg，0.37mmol)于二噁烷(4mL)和水(0.2mL)中的溶液中添加1-(2,4-二氯苯基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑(400mg，1.18mmol)、Pd(dppf)Cl2(32mg，0.04mmol)和K3PO4(234mg，1.11mmol)。将反应物在90℃搅拌24h。在如由TLC分析所指示完成反应之后，将反应物冷却至室温，用盐水(5mL)淬灭且用EtOAc(5mL×3)萃取。合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法(PE:EtOAc＝5:1至3:1)纯化，得到64mg粗标题化合物。将粗标题化合物在MeOH(0.5mL)中浆化1小时。在过滤和干燥后，获得24mg呈白色固体状的标题化合物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ12.16(s,1H),8.45(s,1H),8.13(s,1H),8.06(s,1H),7.92(s,1H),7.67-7.56(m,2H),7.42(dd,J＝8.6,2.3Hz,1H),4.26(d,J＝5.7Hz,2H),3.82(s,3H),2.39(d,J＝1.2Hz,3H),1.56(s,3H)
步骤6：
根据制备AKB-7560(化合物65)的步骤12合成化合物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.81(s,2H),9.33(t,J＝6.2Hz,1H),8.64(s,1H),8.32(s,1H),8.23(s,1H),7.95(d,J＝2.2Hz,1H),7.75(d,J＝8.6Hz,1H),7.65(dd,J＝8.6,2.2Hz,1H),4.00(d,J＝6.1Hz,2H),2.36(s,3H)。
实例60：化合物61的制备
化合物61(AKE-7593)的制备。
步骤1：
将(3-羟基-4-甲基-5-(苯基乙炔基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(130mg，0.40mmol)和Pd/C(20mg，10wt％)于EtOAc(8mL)和MeOH(2mL)中的悬浮液在室温下在1Mpa氢气压力下搅拌过夜。在如由TLC所指示完成反应之后，通过硅藻土垫过滤悬浮液。将滤液浓缩至干燥，得到150mg呈棕色油状的标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z 329(M+H)+。
步骤2：
根据制备AKB-7588(化合物57)的步骤8合成化合物。LC-MS(ESI+):m/z 315(M+H)+；1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.86(brs,1H),12.70(s,1H),9.26(t,J＝6.0Hz,1H),7.90(s,1H),7.32-7.15(m,5H),3.97(d,J＝6.0Hz,2H),2.95(t,J＝6.3Hz,2H),2.85(t,J＝6.3Hz,2H),2.40(s,3H)。
实例61：化合物62的制备
化合物62(AKE-7592)的制备。
步骤1：
在氮气保护下，将(3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-5-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(248mg，0.6mmol)、乙炔基苯(122mg，1.20mmol)、Pd(pph3)2Cl2(21mg，0.030mmol)、CuI(6mg，0.030mmol)和TEA(302mg，2.98mmol)于DMF(8mL)中的反应混合物在85℃搅拌约16h。在如由TLC所指示完成反应之后，将反应物冷却至室温，用水(30mL)淬灭且用EtOAc(30mL×3)萃取。将合并的有机层用水(20mL)洗涤，干燥并且浓缩。残余物通过柱色谱法(EA:PE＝1:20)纯化，得到165mg呈黄色固体状的标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z 325(M+H)+。
步骤2：
根据制备AKB-7588(化合物57)的步骤8合成化合物。LC-MS(ESI+):m/z 339(M+H)+；1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.86(s,2H),9.43(t,J＝6.0Hz,1H),8.30(s,1H),7.72-7.64(m,2H),7.59-7.48(m,3H),3.99(d,J＝6.0Hz,2H),2.40(s,3H)。
实例62：化合物63的制备
根据AKB-7560(化合物65)的制备来制备化合物63(AKE-7563)。LC-MS(ESI+):m/z389(M+H)+。1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.10-12.82(m,2H),9.55(d,J＝6.6Hz,1H),8.76(s,1H),8.25(d,J＝8.7Hz,2H),7.80(d,J＝8.7Hz,2H),4.02(d,J＝6Hz,2H),2.80(s,3H)。
实例63：化合物64的制备
化合物64(AKE-7561)的制备。
步骤1：
将(5-甲酰基-3-羟基-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸甲酯(200mg，0.79mmol)、NH2OH.HCl(82mg，1.2mmol)和NaHCO3(166mg，2mmol)于甲醇(2mL)中的悬浮液在室温下搅拌约3h。在如由TLC分析所指示完成反应之后，反应物用水(5mL)淬灭，将pH调节至4且用DCM(10mL×2)萃取。将合并的有机相干燥，过滤且浓缩，得到180mg呈白色固体状的标题化合物。1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.70(s,1H),11.85(s,1H),9.52(brs,1H),8.41(s,1H),8.39(s 1H),4.08(d,J＝6.3Hz,2H),3.67(s,3H)。
步骤2：
将(E)-(3-羟基-5-((羟亚氨基)甲基)-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸甲酯(180mg，0.67mmol)和CDI(164mg，1.01mmol)于DCM(8mL)中的溶液在回流下搅拌约2h。在如由TLC所指示完成反应之后，反应物用水(5mL)稀释且用DCM(10mL×3)萃取。将合并的有机相干燥并且浓缩，得到207mg粗产物。将粗产物在EtOAc(2mL)中进一步浆化并且过滤，得到105mg所需产物。1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ8.55(brs,1H),8.25(s,1H),7.73(s,1H),4.48(d,J＝6Hz,2H),3.82(s,3H),2.55(s,3H)。
步骤3：
将(5-氰基-3-羟基-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸甲酯(85mg，0.34mmol)、NH4Cl(55mg，1.02mmol)和NaN3(67mg，1.02mmol)于DMF(1mL)中的悬浮液在100℃搅拌过夜。在如由TLC所指示完成反应之后，反应物用水(5mL)淬灭且用稀释的HCl溶液调节至pH 3。沉淀出大量的黄色固体。通过过滤收集固体，得到55mg标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z 293(M+H)+。
步骤4：
根据制备AKB-7560(化合物65)的步骤12合成化合物。LC-MS(ESI+):m/z 279(M+H)+；1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.95(s,1H),12.88(brs,1H),9.55(t,J＝6.3Hz,1H),8.51(s,1H),4.03(d,J＝6.3Hz,2H),2.45(s,3H)。
实例64：化合物65的制备
化合物65(AKE-7560)的制备。
步骤1：
3,5-二氯-4-甲基吡啶1-氧化物
在室温下历经2min向3,5-二氯-4-甲基吡啶(9.4g，57.7mmol)于DCM(150mL)中的溶液中逐滴添加m-CPBA(12.9g，74.7mmol)。将反应物在室温下搅拌过夜。在如由TLC分析所指示完成反应之后，向反应物中一次性添加K2CO3(12g，87mmol)且在室温下搅拌约2h。在过滤所得悬浮液之后，将滤液浓缩至干燥。将残余物在混合溶剂(PE:EtOAc＝50:1，50mL)中浆化并且过滤，得到7.4g标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z 178(M+H)+。
步骤2：
3,5-二氯-4-甲基皮考啉腈
在室温下向3,5-二氯-4-甲基吡啶1-氧化物(8g，44.94mmol)于MeCN(150mL)中的溶液中添加TMS-CN(9g，89.88mmol)和TEA(9.4mL)。使反应物回流过夜。在如由TLC分析所指示完成反应之后，将反应物冷却至室温，用盐水(150mL)淬灭且用EA(150mL×3)萃取。合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4(60g)干燥，过滤且在真空中浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法(PE:EtOAc＝10:1)纯化，得到6.8g标题化合物。1H-NMR(300MHz,CD3Cl)δ8.52(s,1H),2.57(s,3H))。
步骤3：
3,5-双(苯甲氧基)-4-甲基皮考啉腈
在氮气保护下，在0℃历经20min向NaH(60wt％，13.6g，0.34mol)于DMF(200mL)中的悬浮液中逐滴添加BnOH(36.8g，0.34mol)。在添加之后，将所得混合物继续在0℃搅拌15min。历经20min将3,5-二氯-4-甲基-吡啶-2-甲腈(21.2g，113.37mmol)于DMF(40mL)中的溶液逐滴添加至以上悬浮液中。将反应物在室温下搅拌过夜。在如由LCMS分析所指示完成反应之后，再将反应物冷却至0℃且用水(3L)缓慢淬灭。沉淀出大量固体。通过过滤收集固体，并通过柱色谱(PE:EtOAc＝1:0至5:1)来纯化，得到15g标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z331(M+H)+。
步骤4：
将3,5-二苯甲氧基-4-甲基-吡啶-2-甲腈(15g，45.4mmol)和NaOH(18.16g，454.0mmol)于乙醇(400mL)和H2O(150mL)中的溶液在70℃搅拌过夜。在通过LCMS分析完成反应之后，首先将反应物浓缩以去除过量的乙醇。残余物用浓HCl酸化至pH约3且沉淀出大量固体。通过过滤收集白色固体，用EtOAc(100mL)洗涤，在真空下干燥，得到15.3g标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z 350(M+H)+。
步骤5：
在室温下向3,5-二苯甲氧基-4-甲基-吡啶-2-甲酸(15.3g，43.76mmol)于DCM(500mL)中的悬浮液中一次性添加PyBOP(27.35g，52.55mmol)和TEA(22.16g，218.95mmol)。在搅拌悬浮液5min之后，观测到澄清溶液。接着历经2min向溶液中逐滴添加甲基-2-氨基乙酸盐HCl盐(8.25g，65.69mmol)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。在如由LCMS分析所指示完成反应之后，直接浓缩反应混合物并且通过柱色谱(PE:EtOAc＝1:0至1:1)纯化残余物，得到3.6g标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z 421(M+H)+。
步骤6：
将2-[(3.5-二苯甲氧基-4-甲基-吡啶-2-羰基)氨基]乙酸甲酯(16.9g，40.24mmol)和Pd/C(1.1g，10wt％)于THF(300ml)和甲醇(200mL)中的悬浮液用氢吹扫3次并且在大气氢气压力下搅拌过夜。在如由LCMS分析所指示完成反应之后，通过硅藻土垫过滤悬浮液。直接浓缩滤液，得到9.6g呈白色固体的标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z 241(M+H)+。
步骤7：
向2-(3,5-二羟基-4-甲基-吡啶-2-羰基)氨基]乙酸甲酯(9.6g，40.0mmol)于甲醇(500mL)中的悬浮液中一次性添加TEA(6.08g，60.0mmol)和1,1,1-三氟-N-苯基-N-(三氟甲基磺酰基)甲磺酰胺(17.15g，48.0mmol)。将反应物在室温下搅拌过夜后，观测到透明的棕色均质溶液。反应的完成取决于TLC分析。直接浓缩反应物，并通过柱色谱(PE:EtOAc＝1:0至1:1)来纯化，得到14.2g标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z 373(M+H)+。
步骤8：
在0℃向(3-羟基-4-甲基-5-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(14.2g，38.14mmol)于DCM(350mL)中的搅拌溶液中依序添加DIPEA(12.3g，95.36mmol)和MOMCl(4.61g，57.22mmol)。将反应物继续在0℃搅拌15min且在室温下搅拌约1小时。在如由TLC分析所指示完成反应之后，反应物用冷水(180mL)淬灭。分离之后，将有机相经Na2SO4干燥，且浓缩。残余物通过柱色谱(PE:EtOAc＝1:0至1:1)来纯化，得到6.61g标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z 417(M+H)+。
步骤9：
将(3-(甲氧基甲氧基)-4-甲基-5-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(5.15g，13.83mmol)、三丁基(乙烯基)锡烷(5.26g，16.60mmol)、LiCl(1.76g，41.50mmol)和Pd(PPh3)2Cl2(243mg，0.35mmol)于DMF(250mL)中的反应物在70℃搅拌6h。在如由TLC分析所指示完成反应之后，将反应物浓缩到干燥。残余物通过柱色谱法(PE:EtOAc＝1:0至1:1)纯化，得到1.84g呈白色固体状的标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z 251(M+H)+。
步骤10：
将(3-羟基-4-甲基-5-乙烯基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(1.74g，6.95mmol)、OsO4(50mg)、吡啶(550mg，6.95mmol)和NaIO4(7.44g，34.77mmol)于丙酮(20mL)、THF(40mL)和水(20ml)中的溶液在室温下搅拌16h。在通过TLC耗尽(3-羟基-4-甲基-5-乙烯基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯之后，反应物用EtOAc(100mL×2)萃取。将合并的有机相干燥且浓缩。残余物通过柱色谱(PE:EtOAc＝1:0至1:1)来纯化，得到1.5g呈白色固体状的标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z 285(M+Na)+；1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ12.27(s,1H),10.42(s,1H),8.55(brs,1H),8.42(s,1H),4.25(d,J＝6.3Hz,2H),3.82(s,3H),2.61(s,3H)。
步骤11：
将(5-甲酰基-3-羟基-4-甲基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(100mg，0.396mmol)和4-甲基苯磺酰肼(89mg，0.476mmol)于DCM(8mL)和THF(4mL)中的溶液在室温下搅拌过夜。接着将反应物浓缩到干燥。在-5℃向含残余物的吡啶(5mL)中添加(E)-1-苯基-2-(四氟-λ5-鹏烷基)二氮烯(153mg，0.793mmol)于乙醇(4mL)中的溶液并且历经5min逐滴添加水(3mL)。将所得反应混合物在室温下搅拌3h。在如由TLC分析所指示完成反应之后，反应物用水(40mL)稀释且用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。将有机相干燥且浓缩。残余物通过柱色谱法(0-100％乙酸乙酯/DCM)来纯化，得到158mg标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z 369(M+H)+。
步骤12：
向(3-羟基-4-甲基-5-(2-苯基-2H-四唑-5-基)皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(158mg，0.429mmol)于THF(6mL)和MeOH(6mL)中的溶液中添加NaOH(86mg)于4毫升水中的溶液。将反应物在室温下搅拌3.5h。在如由TLC分析所指示完成反应之后，用稀释的HCl溶液(1N)将反应物酸化至pH 3。沉淀出大量固体。通过过滤收集固体。干燥后，获得94mg标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z 355(M+H)+；1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.10-12.82(m,2H),9.55(t,J＝6.6Hz,1H),8.77(s,1H),8.25(d,J＝8.7Hz,2H),7.76-7.64(m,3H),4.01(d,J＝6.6Hz,2H),2.60(s,3H)。
实例65：化合物66的制备
根据化合物65(AKB-7560)的制备来制备化合物66(AKE-7567)。LC-MS(ESI+):m/z421(M+H)+。1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.82(s,2H),9.34(t,J＝6.0Hz,1H),9.07(s,1H),8.32(s,1H),8.28(s,1H),8.07(d,J＝1.9Hz,2H),7.62(s,1H),4.00(d,J＝6.0Hz,2H),2.37(s,3H)。
实例66：化合物67的制备
根据化合物65(AKB-7560)的制备来制备化合物67(AKE-7568)。LC-MS(ESI+):m/z421(M+H)+。1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.85(s,1H),9.38-9.30(m,1H),9.09(s,1H),8.34(s,1H),8.28(s,1H),8.18(d,J＝8.4Hz,2H),7.95(d,J＝8.4Hz,2H),4.01(d,J＝6.0Hz,2H),2.38(s,3H)。
实例67：化合物68的制备
化合物68(AKE-7565)的制备。
步骤1：
在室温下向4-溴吡唑(500mg，3.40mmol)于DCM(10mL)中的溶液中添加4-氯苯基硼酸(1.06g，6.80mmol)、Cu(OAc)2(1.24g，6.80mmol)和吡啶(806mg，10.20mmol)。将反应物在室温下搅拌过夜。在如由TLC分析所指示完成反应之后，通过硅藻土垫过滤悬浮液。滤液用盐水(10mL)淬灭且用DCM(10mL×3)萃取。合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法(PE:EtOAc＝100:1至50:1)纯化，得到800mg呈白色固体状的标题化合物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.91(s,1H),7.67(s,1H),7.59(d,J＝8.9Hz,2H),7.43(d,J＝8.9Hz,2H)。
步骤2：
在氮气保护下，在室温下向4-溴-1-(4-氯苯基)-1H-吡唑(1.00g，3.90mmol)于二噁烷(20mL)中的溶液中添加双(频哪醇)二硼(2.48g，9.76mmol)、Pd(dppf)Cl2(286mg，0.39mmol)和KOAc(1.15g，11.72mmol)。将反应物在100℃搅拌2h。在如由TLC分析所指示完成反应之后，将反应物冷却至室温，用盐水(20mL)淬灭且用EtOAc(20mL×3)萃取。合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法(PE:EtOAc＝20:1)纯化，得到1.4g呈黄色固体状的粗标题化合物。LC-MS(ESI+):m/z 305(M+H)+。
步骤3：
在氮气保护下，在室温下向2-(3-羟基-4-甲基-5-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)皮考啉酰胺基)乙酸甲酯(100mg，0.27mmol)于二噁烷(5mL)和水(0.25mL)中的溶液中添加粗物质1-(4-氯苯基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑(98mg，0.32mmol)、Pd(dppf)Cl2(20mg，0.03mmol)和K3PO4(114mg，0.54mmol)。将反应物在100℃搅拌24h。在如由TLC分析所指示完成反应之后，反应物用盐水(5mL)淬灭且用EtOAc(5mL×3)萃取。合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤且在真空中浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法(PE:EtOAc＝5:1)纯化，得到28mg呈白色固体状的标题化合物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ12.24(s,1H),8.53(t,J＝5.8Hz,1H),8.19(s,1H),8.13(s,1H),7.98(s,1H),7.78(d,J＝8.9Hz,2H),7.55(d,J＝8.9Hz,2H),4.34(d,J＝5.8Hz,2H),3.90(s,3H),2.47(s,3H)。
步骤4：
在室温下向2-(5-(1-(4-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)-3-羟基-4-甲基皮考啉酰胺基)乙酯(28mg，0.07mmol)于THF(0.25mL)和水(0.25mL)中的溶液中添加LiOH.H2O(6mg，0.14mmol)。将反应物在40℃搅拌1小时。在如由LCMS分析所指示完成反应之后，反应物用水(5mL)淬灭且用EtOAc(5mL×2)萃取。用稀释的HCl溶液(2N)将水相调节至pH 3约4。沉淀出大量固体。在过滤和干燥后，获得7.8mg呈浅棕色固体状的标题化合物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.81(s,2H),9.33(t,J＝6.2Hz,1H),8.97(s,1H),8.33(s,1H),8.22(s,1H),7.98(d,J＝8.9Hz,2H),7.63(d,J＝8.9Hz,2H),4.01(d,J＝6.1Hz,3H),2.38(s,3H)。
实例68：化合物69的制备
化合物69(CP-0285)的制备。
步骤1：4-环丙基吡啶-2-胺：
向4-溴吡啶-2-胺(10.0g，58.0mmol)、环丙基硼酸(7.5g，87.0mmol)和碳酸钾(16.0g，116mmol)的溶液中添加含[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯钯(II)(4.3g，5.8mmol)的1,4-二噁烷/水(50.0mL/10.0mL)。将混合物在90℃在氮气下搅拌12.0h，并且冷却到室温。将乙酸乙酯和水添加至溶液中，并且分离各层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩到干燥。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝3/1)纯化，得到呈黄色固体状的4-环丙基吡啶-2-胺(5.5g，70.5％产率)。LC-MS：m/z＝135.0[M+H]+，滞留时间1.47min(方法A)。
步骤2：3,5-二氯-4-环丙基吡啶-2-胺：
向4-环丙基吡啶-2-胺(5.0g，37.3mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(100.0mL)中的溶液中添加N-氯代琥珀酰亚胺(9.9g，74.0mmol)。将混合物在50℃下搅拌2.0h。反应物用水稀释且用乙酸乙酯萃取两次。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥且浓缩。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝5/1)纯化，得到呈黄色固体状的3,5-二氯-4-环丙基吡啶-2-胺(4.9g，66％产率)。LC-MS:m/z＝203.0(M+H)+，滞留时间1.94min(方法A)。
步骤3：3,5-二氯-4-环丙基皮考啉腈：
向3,5-二氯-4-环丙基吡啶-2-胺(2.0g，10.0mmol)和氰化铜(I)于二甲亚砜(30.0mL)中的溶液中添加亚硝酸叔丁酯(1.55g，15.0mmol)。将混合物在40℃下搅拌12.0h。反应物用水稀释，并且用乙酸乙酯萃取两次。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥且浓缩。获得呈黄色固体状的3,5-二氯-4-环丙基皮考啉腈(1.25g，57.1％产率)。LC-MS:m/z＝213.0(M+H)+，滞留时间2.05min(方法A)。
步骤4：3-氯-5-(3-氯苯基)-4-环丙基皮考啉腈：
向3,5-二氯-4-环丙基皮考啉腈(1.0g，4.7mmol)、(3-氯苯基)硼酸(0.68g，4.7mmol)和碳酸钾(1.2 8.7mmol)的溶液中添加[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯钯(II)(0.32g，0.44mmol)于N,N-二甲基甲酰胺/水(20.0mL/5.0mL)。将混合物在50℃在氮气下搅拌12.0h，并且冷却到室温。将乙酸乙酯和水添加至溶液中，并且分离各层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩到干燥。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝3/1)纯化，得到呈黄色固体状的3-氯-5-(3-氯苯基)-4-环丙基皮考啉腈(800mg，59.2％产率)。LC-MS:m/z＝289.0(M+H)+，滞留时间2.25min(方法A)。
步骤5：3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-环丙基皮考啉腈：
在0℃向3-氯-5-(3-氯苯基)-4-环丙基皮考啉腈(0.8g，2.8mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)中的溶液中添加(0.14g，3.4mmol，60％于油中)。将混合物在0℃搅拌20min且添加苯甲醇(0.3g，2.8mmol)。使混合物升温到室温并且保持再搅拌0.5h。反应物用冰水淬灭，并且用乙酸乙酯萃取两次。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝5/1)纯化，获得呈黄色油状的3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-环丙基皮考啉腈(600mg，60.5％产率)。LC-MS:m/z＝361.0(M+H)+，滞留时间2.29min(方法A)。
步骤6：3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-环丙基皮考啉酸：
向3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-环丙基皮考啉腈(400mg，1.1mmol)于四氢呋喃水(20.0mL/10.0mL)中的溶液中添加氢氧化钾(200mg，3.6mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜并且浓缩以去除四氢呋喃。所得水溶液用3N/L盐酸酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤，用水洗涤并加以干燥，得到呈白色固体状的3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-环丙基皮考啉酸(296mg，71.4％产率)。LC-MS：m/z＝380.0(M+H)+，滞留时间1.68min(方法A)。
步骤7：(3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-环丙基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯：
将3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-环丙基皮考啉酸(296mg，0.8mmol)、甘氨酸乙酯盐酸盐(140mg，0.96mmol)、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻(500mg，0.96mmol)和三乙胺(404mg，4.0mmol)于二氯甲烷(10.0mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。反应物用水淬灭，并且用二氯甲烷萃取。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝2/1)纯化，得到呈黄色固体状的(3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-环丙基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(306mg，81.7％产率)。LC-MS:m/z＝465.0(M+H)+，滞留时间2.26min(方法A)。
步骤8：(5-(3-氯苯基)-4-环丙基-3-羟基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯：
将(3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-环丙基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(300mg，0.64mmol)和10％钯-碳(20.0mg)于四氢呋喃(20.0mL)中的混合物在室温下在氢气气氛下搅拌5.0h。过滤混合物并且浓缩滤液。获得呈白色固体状的(5-(3-氯苯基)-4-环丙基-3-羟基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(210mg，82.6％产率)。LC-MS：m/z＝376.0(M+H)+，滞留时间2.55min(方法A)。
步骤9：(5-(3-氯苯基)-4-环丙基-3-羟基皮考啉酰基)甘氨酸：
向(5-(3-氯苯基)-4-环丙基-3-羟基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(200mg，0.52mmol)于四氢呋喃/水(10.0mL/5.0mL)中的溶液中添加氢氧化锂单水合物(210mg，5.0mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜并且浓缩以去除四氢呋喃。所得水溶液用3N/L盐酸酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤，用水洗涤并加以干燥，得到呈白色固体状的(5-(3-氯苯基)-4-环丙基-3-羟基皮考啉酰基)甘氨酸(106.5mg，57.5％产率)。LC-MS：m/z＝347.0(M+H)+，滞留时间5.03min(方法A)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.88(s,1H),9.37(t,J＝6.1Hz,1H),8.03(s,1H),7.58(s,1H),7.55-7.51(m,2H),7.50-7.44(m,1H),4.01(t,J＝10.3Hz,2H),1.84(tt,J＝8.7,5.7Hz,1H),0.81-0.67(m,2H),0.67-0.52(m,2H)。
实例69：化合物70的制备
化合物70(CP-0287)的制备。
步骤1：3,5-二氯-4-(二氟甲基)吡啶：
在-20℃向3,5-二氯异烟醛(1.75g，10.0mmol)于二氯甲烷(25.0mL)中的溶液中逐滴添加三氟化二乙基氨基硫(3.2g，20mmol)。将混合物在室温下搅拌12.0h。反应物用冰水稀释并且用二氯甲烷萃取两次。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥且浓缩。获得呈黄色固体状的所需产物(1.05g，70.4％)。LC-MS：m/z＝198.0(M+H)+，滞留时间1.95min(方法A)。
步骤2：3,5-二氯-4-(二氟甲基)吡啶1-氧化物：
向3,5-二氯-4-(二氟甲基)吡啶(1.0g，5.0mmol)于(25.0mL)中的溶液中添加3-氯苯并过氧酸(2.02g，10mmol，85％)。然后将反应混合物在室温下搅拌过夜。反应物用水稀释并且用二氯甲烷萃取两次。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥且浓缩。残余物通过纯化快速色谱法(二氯甲烷/甲醇＝100/3)，得到呈黄色固体状的3,5-二氯-4-(二氟甲基)吡啶1-氧化物(0.8g，74.1％产率)。LC-MS：m/z＝214.0(M+H)+，滞留时间1.57min(方法A)。
步骤3：3,5-二氯-4-(二氟甲基)皮考啉腈：
在0℃向3,5-二氯-4-(二氟甲基)吡啶1-氧化物(0.8g，3.7mmol)和三乙胺(0.75g，7.4mmol)于乙腈(30.0mL)中的溶液中逐滴添加三甲基硅烷甲腈(0.74g，7.4mmol)。将混合物在80℃下搅拌过夜。反应物用水稀释且用乙酸乙酯萃取两次。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥且浓缩。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝10/1)纯化，得到呈黄色固体状的3,5-二氯-4-(二氟甲基)皮考啉腈(0.35g，61％产率)。LC-MS:m/z＝223.0(M+H)+，滞留时间1.93min(方法A)
步骤4：3-氯-5-(3-氯苯基)-4-(二氟甲基)皮考啉腈：
向3,5-二氯-4-(二氟甲基)皮考啉腈(0.49g，2.2mmol)、(3-氯苯基)硼酸(0.37g，2.2mmol)和碳酸钾(0.6g，4.4mmol)的溶液中添加含[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯钯(II)(0.15g，0.22mmol)的N,N-二甲基甲酰胺/水(20.0mL/5.0mL)。将混合物在50℃在氮气下搅拌12.0h，并且冷却到室温。将乙酸乙酯和水添加至溶液中，并且分离各层。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且浓缩到干燥。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝3/1)纯化，得到呈黄色固体状的3-氯-5-(3-氯苯基)-4-(二氟甲基)皮考啉腈(0.48g，74.2％产率)。LC-MS:m/z＝299.0(M+H)+，滞留时间2.10min(方法A)。
步骤5：3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-(二氟甲基)皮考啉腈：
在0℃向3-氯-5-(3-氯苯基)-4-(二氟甲基)皮考啉腈(0.48g，1.6mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)中的溶液中添加氢化钠(76.8mg，1.92mmol，60％于油中)。将混合物在0℃搅拌20min且添加苯甲醇(0.18g，1.6mmol)。使混合物升温到室温并且保持再搅拌0.5h。反应物用冰水淬灭，并且用乙酸乙酯萃取两次。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。粗产物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝10/1)纯化，获得呈黄色油状的3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-(二氟甲基)皮考啉腈(400mg，64.5％产率)。LC-MS:m/z＝371.0(M+H)+，滞留时间2.20min(方法A)。
步骤6：5-(3-氯苯基)-4-(二氟甲基)-3-羟基皮考啉酸：
将3-(苯甲氧基)-5-(3-氯苯基)-4-(二氟甲基)皮考啉腈(370mg，1.0mmol)于50％硫酸(10.0mL)中的混合物在100℃搅拌3.0h。将溶液用冰水稀释。将所得固体过滤，用水洗涤并加以干燥，得到呈灰色固体状的5-(3-氯苯基)-4-(二氟甲基)-3-羟基皮考啉酸(200mg，61.7％产率)。LC-MS：m/z＝300.0(M+H)+，滞留时间2.09min(方法A)。
步骤7：(5-(3-氯苯基)-4-(二氟甲基)-3-羟基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯：
将5-(3-氯苯基)-4-(二氟甲基)-3-羟基皮考啉酸(200mg，0.66mmol)、甘氨酸乙酯盐酸盐(100mg，0.75mmol)、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻(390mg，0.75mmol)和三乙胺(0.34g，3.3mmol)于二氯甲烷(10.0mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。反应物用水淬灭，并且用二氯甲烷萃取。将有机层分离，用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并且在减压下浓缩。残余物通过快速色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到呈黄色固体状的(5-(3-氯苯基)-4-(二氟甲基)-3-羟基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(150mg，58.8％产率)。LC-MS:m/z＝385.0(M+H)+，滞留时间2.14min(方法A)。
步骤8：(5-(3-氯苯基)-4-(二氟甲基)-3-羟基皮考啉酰基)甘氨酸：
向(5-(3-氯苯基)-4-(二氟甲基)-3-羟基皮考啉酰基)甘氨酸乙酯(130mg，0.33mmol)于四氢呋喃/水(10.0mL/5.0mL)中的溶液中添加氢氧化锂单水合物(138mg，3.3mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜并且浓缩以去除四氢呋喃。所得水溶液用3N/L盐酸酸化至pH＝3至4。将沉淀物过滤，用水洗涤并加以干燥，得到呈白色固体状的(5-(3-氯苯基)-4-(二氟甲基)-3-羟基皮考啉酰基)甘氨酸(38.1mg，31.5％产率)。LC-MS：m/z＝357.0(M+H)+，滞留时间4.91min(方法A)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.35(s,1H),9.66-9.44(m,1H),8.20(s,1H),7.64-7.47(m,3H),7.40(d,J＝7.3Hz,1H),7.21-6.81(m,1H),4.03(d,J＝6.1Hz,2H)。
体外测定表明PHD抑制
对选定的本发明化合物测定酶促半数最大抑制浓度(IC50)值。
时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)测定用于确定PHD抑制剂对全长人类脯氨酰基-4-羟化酶结构域(PHD)酶PHD1、PHD2和PHD3的酶促半数最大抑制浓度(IC50)值。TR-FRET测定是基于羟基化HIF-1α肽与VHL、EloB和EloC形成的复合物(VBC)的特异性结合而开发的，从而产生荧光信号。TR-FRET的铽(Tb)-供体(单克隆抗体抗6His-Tb-穴合物金)和D2-受体(链霉亲和素[SA]-D2)分别与VBC复合物和HIF-1α肽连接。VBC复合物在羟基化时与HIF-1α肽特异性结合，从而使能量从TR-FRET供体转移到受体(图1)。
材料和方法
除非另有说明，否则所有化学品和材料都是标准实验室级并且购自西格玛-奥德里奇公司(Sigma-Aldrich)(美国密苏里州圣路易斯(St.Louis,MO,USA))。
试剂
TR-FRET试剂
单克隆抗体抗6His-Tb-穴合物金(目录号61HI2TLA)和链霉亲和素(SA)-D2(目录号610SADLA)购自CisBio国际公司(CisBio International)(美国马萨诸塞州贝德福德(Bedford,MA,USA))。
表示氨基酸547至581并且包括脯氨酸564PHD2羟基化位点的N端生物素化HIF-1αC35合成肽购自加利福尼亚肽研究公司(California Peptide Research)(美国犹他州盐湖城(Salt Lake City,UT,USA))。
重组蛋白
VBC复合物
His标记的重组VHL蛋白、EloB、EloC复合物(His-VBC)由Axxam公司(Axxam)(意大利米兰(Milan,Italy))提供。重组人类VHL(国家生物技术信息中心[NCBI]登录号NP_00542.1)在氨基酸55至213的C端处含有His标签，并且称为VHL-His。VHL-His在大肠杆菌中与全长人类EloB(NCBI登录号Q15370.1)和全长人类EloC(NCBI登录号Q15369.1)共表达，并且在镍-次氮基三乙酸(Ni-NTA)柱上通过亲和色谱法纯化为His-VBC复合物。通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)评估纯度(约80％)。
PHD1
重组人类PHD1蛋白(目录号81064，批号24717001)购自Active Motif(美国加利福尼亚州卡尔斯巴德(Carlsbad,CA,USA))。PHD1在杆状病毒表达系统中表达为具有N端FLAG标签(分子量44.9kDa)的全长蛋白(NCBI登录号NP_542770.2)。通过SDS-PAGE评估纯度(>90％)。
PHD2
用Beryllium(美国马萨诸塞州贝德福德)的杆状病毒感染的昆虫细胞(BIIC)表达系统产生全长人类PHD2酶。PHD2构建体含有PHD2的氨基酸1至426(UniProt知识库[UniProtKB]/Swiss-Prot登录号Q9GZT9.1)以及N端处的His标签和烟草蚀纹病毒(TEV)蛋白酶切割位点。所述构建体在Sf9昆虫细胞中表达，通过Ni-NTA柱进行纯化并且用TEV蛋白酶消化以去除His标签。通过SDS-PAGE评估最终切割的蛋白质的纯度，并且发现纯度>94％。
PHD3
重组人类PHD3蛋白(分子量31.1kDa)购自Active Motif(美国加利福尼亚州卡尔斯巴德)。所述重组人类PHD3蛋白在大肠杆菌中表达为具有N端6-His标签(目录号81033，批号24417001)的全长蛋白(NCBI登录号NP_071356.1)。通过SDS-PAGE评估纯度，并且发现纯度>75％。
PHD抑制剂。
合成小分子PHD抑制剂并且如本文所描述的确认它们的身份。
TR-FRET测定程序
在白色384孔Optiplate微孔板(目录号6007290，美国马萨诸塞州沃尔瑟姆的珀金埃尔默公司(Perkin Elmer,Waltham,MA,USA))中，将PHD抑制剂化合物与PHD酶在10μL反应体积中预温育。为此，将5μL PHD抑制剂化合物用稀释缓冲液(50mM HEPES4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸]pH 7.5，50mM氯化钠[NaCl]，0.01％ Tween-20，0.01％纯化的牛血清白蛋白[BSA])连续稀释，并且与在稀释缓冲液中制备为4×浓缩物的5μL PHD酶混合物混合，所述稀释缓冲液含有PHD酶(60nM PHD1、20nM PHD2、140nM PHD3)、40μM硫酸亚铁铵(FAS)、4mM抗坏血酸钠(Na)。将培养板在室温下温育30分钟而不旋转。
然后添加五微升VBC/抗6His-Tb-穴合物金混合物，其在含有20nM His-VBC、1.32nM单克隆抗体抗6His-Tb-穴合物金的稀释缓冲液中制备为4×浓缩物。此步骤后立即添加5μL HIF-1αC35底物混合物以达到20μL的最终反应体积，所述底物混合物在含有120nM生物素标记的HIF-1αC35、132nM SA-D2、4μM 2-氧代戊二酸盐(2-OG)的稀释缓冲液中制备为4×浓缩物。
最终测定反应含有50mM HEPES，pH 7.5；50mM NaCl；1μM 2-OG；10μM FAS；1mM抗坏血酸Na；0.01％ Tween-20；0.01％纯化的BSA；30nM生物素标记的HIF-1αC35；5nM His-VBC；0.33nM单克隆抗体抗6His-Tb-穴合物金；33nM SA-D2和PHD酶(15nM PHD1、5nM PHD2或35nMPHD3)以及稀释的化合物。
为了测量PHD抑制剂化合物的IC50，将反应物在室温下温育10分钟，然后在珀金埃尔默EnVision(美国马萨诸塞州沃尔瑟姆)上在340nm的激发波长处以及615nm和665nm的发射波长处读数。数据表示665nm和615nm处信号强度的商，由Envision Manager软件(美国马萨诸塞州沃尔瑟姆的珀金埃尔默公司)自动计算。IC50值(平均值、标准偏差、平均值的标准误差、几何平均值和95％置信区间)使用GraphPad Prism 7.0(美国加利福尼亚州拉荷亚(La Jolla,CA,USA)的GraphPad使用四参数曲线拟合确定并且表示针对665nm和615nm的计算比率绘制的化合物浓度。TR-FRET测定在每种化合物浓度下一式三份进行，并且独立地重复测定三次。
Ki是基于Cheng Prussoff等式由IC50计算出的：
Ki＝IC50/(1+[2-OG]/Km)
PHD1和PHD2测定中2-OG的最终浓度均为1uM。PHD1的2-OG的Km测定为12.7nM，而PHD2的2-OG的Km测定为22.6nM。
示范性化合物的IC50数据描述在表1中。
表1.示范性化合物的IC50数据
通过正在进行中的描述，本领域的技术人员可容易地确定本发明的必要特征，并且可以在不脱离本发明的精神和范围的情况下对本发明进行各种改变和修改，以使本发明适用于各种用途和条件。
本申请中引用的所有参考文献、专利或申请，无论是美国的还是或外国的，都通过引用并入本文，如同以其整体写入本文一样。在产生任何不一致的情况下，以本文真正公开的材料为主。

Claims (90)

1.一种式(I)化合物
或其药学上可接受的盐，其中：
R1为任选地被取代的C1-3烷基、任选地被取代的C3-6环烷基或任选地被取代的3至6元杂环烷基；
R2为氢、任选地被取代的C1-3烷基、卤素、CN或任选地被取代的环烷基；
R3为氢、任选地被取代的芳基、任选地被取代的杂芳基、任选地被取代的环烷基、任选地被取代的杂环烷基、羰基、醚、硫醚、任选地被取代的芳基磺酰基、任选地被取代的杂芳基磺酰基、任选地被取代的芳基烷基、任选地被取代的炔基或任选地被取代的杂炔基；
R4和R5独立地为氢、任选地被取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；且
R6为OH或酯。
2.根据权利要求1所述的化合物，其具有根据式(I)的结构
或其药学上可接受的盐，其中：
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，且其中R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基，或R1为C3-6环烷基或3至6元杂环烷基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R3选自由以下组成的组：
氢；
其中X为共价键、O、S、SO2、C1-4亚烷基、C2-4亚炔基或C2-4亚杂炔基；每个A独立地为N或CR9，R8和R9独立地为氢、卤素、OR10或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，且R10为C1-3烷基或芳基；
其中B为N或CR11，D为N、NH或CR11，E为N、CR11或CHR12，且R11和R12独立地为氢或C1-3烷基，且其中虚线圆表示存在或不存在共轭体系；
其中每个G独立地为N、NH、NR13或CR14；R13为C3-6环烷基、3至6元杂环烷基、任选地被一个或多个卤素取代的芳基、任选地被一个或多个任选地被取代的C1-3烷基取代的芳基、杂芳基、任选地被叔丁氧基羰基取代的杂环烷基、任选地被芳基(其任选地被一个或多个卤素取代)取代的C1-4烷基，且R14为氢、卤素、C3-6环烷基、3至6元杂环烷基或C1-3烷基；
其中I为O、S或CH，J为N或CH，R15为氢、C3-6环烷基、3至6元杂环烷基或C1-3烷基，且R19为氢、C3-6环烷基、3至6元杂环烷基或芳基；
OR16，其中R16为芳基；
其中X1为N或CH，且R20为任选地被取代的芳基；且
COR17，其中R17为芳基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；且
R6为OH或OR18，其中R18为C1-6烷基。
3.根据权利要求1或2所述的化合物，其具有根据式(II)的结构
或其药学上可接受的盐，其中：
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，且其中R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基，或R1为C3-6环烷基或3至6元杂环烷基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R3选自由以下组成的组：
氢；
其中X为共价键、O、S、SO2、C1-4亚烷基、C2-4亚炔基或C2-4亚杂炔基；每个A独立地为N或CR9，R8和R9独立地为氢、卤素、OR10或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，且R10为C1-3烷基或芳基；
其中B为N或CR11，D为N、NH或CR11，E为N、CR11或CHR12，且R11和R12独立地为氢或C1-3烷基，且其中虚线圆表示存在或不存在共轭体系；
其中每个G独立地为N、NR13、CR14，R13为C3-6环烷基或3至6元杂环烷基、任选地被一个或多个卤素取代的芳基、任选地被一个或多个任选地被取代的C1-3烷基取代的芳基、杂芳基、任选地被叔丁氧基羰基取代的杂环烷基、任选地被芳基(其任选地被一个或多个卤素取代)取代的C1-4烷基，且R14为氢、卤素、C3-6环烷基、3至6元杂环烷基或C1-3烷基；
其中I为O、S或CH，J为N或CH，R15为氢、
C3-6环烷基、3至6元杂环烷基或C1-3烷基，且R19为氢、C3-6环烷基、3至6元杂环烷基或芳基；
OR16，其中R16为芳基；
其中X1为N或CH，且R20为任选地被取代的芳基；且
COR17，其中R17为芳基；
且
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的化合物，其中
R1为任选地被取代的C1-3烷基；和/或
R3为氢、任选地被取代的芳基、任选地被取代的杂芳基、任选地被取代的环烷基、任选地被取代的杂环烷基、羰基或醚。
5.根据权利要求1至3中任一项所述的化合物，其中
R1为任选地被OR7或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，且其中R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基；和/或
R3选自由以下组成的组：氢、
6.根据权利要求1至3中任一项所述的化合物，其中R3为
7.根据权利要求1至6中任一项所述的化合物，其中R1为未被取代的C1-3烷基，R2为氢，R4和R5各自为氢，且R6为OH。
8.根据权利要求1至6中任一项所述的化合物，其中每个R1和R2为未被取代的C1-3烷基，R4和R5各自为氢，且R6为OH。
9.根据权利要求1至6中任一项所述的化合物，其中R2为未被取代的C1-3烷基，R3为氢，R4和R5各自为氢，且R6为OH。
10.根据权利要求1至3中任一项所述的化合物，其具有根据式(III)的结构
或其药学上可接受的盐，其中
每个A独立地为N或CR9；
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基；
R8和R9独立地为氢、卤素、OR10或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；且
R10为C1-3烷基或芳基。
11.根据权利要求1至3和10中任一项所述的化合物，其具有根据式(IV)的结构
或其药学上可接受的盐，其中
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基；
R8和R9独立地为氢、卤素、OR10或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；且
R10为C1-3烷基或芳基。
12.根据权利要求1至3和10中任一项所述的化合物，其具有根据式(V)的结构
或其药学上可接受的盐，其中：
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基；
R8和每个R9独立地为氢、卤素、OR10或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；且
R10为C1-3烷基或芳基。
13.根据权利要求1至3中任一项所述的化合物，其具有根据式(VI)的结构
或其药学上可接受的盐，其中：
B为N或CR11；
D为N、NH或CR11；
E为N、CR11或CHR12；
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基；
R11和R12独立地为氢或C1-3烷基；且
其中虚线圆表示存在或不存在共轭体系。
14.根据权利要求13所述的化合物，其具有根据式(VII)的结构
或其药学上可接受的盐。
15.根据权利要求13所述的化合物，其具有根据式(VIII)的结构
或其药学上可接受的盐，其中：
B为N或CR11；
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基；且
R12为氢或C1-3烷基。
16.根据权利要求1至3中任一项所述的化合物，其具有根据式(IX)的结构
或其药学上可接受的盐，其中：
每个G独立地为N、NH、NR13或CR14；
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，且其中R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R13为环丙基、任选地被一个或多个卤素取代的芳基、任选地被一个或多个任选地被取代的C1-3烷基取代的芳基、杂芳基、任选地被叔丁氧基羰基取代的杂环烷基、任选地被芳基(其任选地被一个或多个卤素取代)取代的C1-4烷基；且
R14为氢、卤素、环丙基或C1-3烷基。
17.根据权利要求16所述的化合物，其具有根据式(X)的结构
或其药学上可接受的盐，其中：
每个G独立地为N、NR13或CR14；
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，且其中R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R13为环丙基、任选地被一个或多个卤素取代的芳基、任选地被一个或多个任选地被取代的C1-3烷基取代的芳基、杂芳基、任选地被叔丁氧基羰基取代的杂环烷基、任选地被芳基(其任选地被一个或多个卤素取代)取代的C1-4烷基；且
R14为氢、卤素、环丙基或C1-3烷基。
18.根据权利要求16或17所述的化合物，其具有根据式(XI)的结构
或其药学上可接受的盐，其中
每个G独立地为N或NR13；
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，且其中R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R13为环丙基、杂芳基、任选地被一个或多个卤素取代的芳基、任选地被一个或多个任选地被取代的C1-3烷基取代的芳基、任选地被叔丁氧基羰基取代的杂环烷基、任选地被芳基(其任选地被一个或多个卤素取代)取代的C1-4烷基；且
R14为氢、卤素、环丙基或C1-3烷基。
19.根据权利要求16至18中任一项所述的化合物，其具有根据式(XIIa)或式(XIIb)的结构
或其药学上可接受的盐，其中：
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基；
R13为环丙基、杂芳基、任选地被一个或多个卤素取代的芳基、任选地被一个或多个任选地被取代的C1-3烷基取代的芳基、任选地被叔丁氧基羰基取代的杂环烷基、任选地被芳基(其任选地被一个或多个卤素取代)取代的C1-4烷基；且
R14为氢、卤素、环丙基或C1-3烷基。
20.根据权利要求16至19中任一项所述的化合物，其具有根据式(XIII)的结构
或其药学上可接受的盐，其中：
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；且
R13为芳基或杂芳基。
21.根据权利要求1至3中任一项所述的化合物，其具有根据式(XIV)的结构
或其药学上可接受的盐，其中：
I为O、S或CH；
J为N或CH；
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，且其中R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R15为氢或C1-3烷基；且
R19为氢或芳基。
22.根据权利要求21所述的化合物，其具有根据式(XV)的结构
或其药学上可接受的盐，其中：
I为O、S或CH；
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基；且
R15为氢或C1-3烷基。
R19为氢或芳基。
23.根据权利要求1至3和10中任一项所述的化合物，其具有根据式(XVI)的结构
或其药学上可接受的盐，其中
X为O、S或SO2；
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基；
R8和R9独立地为氢、卤素、OR10或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；且
R10为C1-3烷基或芳基。
24.根据权利要求1至3和10中任一项所述的化合物，其具有根据式(XVII)的结构
或其药学上可接受的盐，其中
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基；
R8和R9独立地为氢、卤素、OR10或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；且
R10为C1-3烷基或芳基。
25.根据权利要求1至3和10中任一项所述的化合物，其具有根据式(XVIII)的结构
或其药学上可接受的盐，其中
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基；
R8和R9独立地为氢、卤素、OR10或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；且
R10为C1-3烷基或芳基。
26.根据权利要求16所述的化合物，其具有根据式(XIX)的结构
或其药学上可接受的盐，其中：
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基；且
R13为环丙基、任选地被一个或多个卤素取代的芳基、任选地被一个或多个任选地被取代的C1-3烷基取代的芳基、杂芳基、任选地被叔丁氧基羰基取代的杂环烷基、任选地被芳基(其任选地被一个或多个卤素取代)取代的C1-4烷基。
27.根据权利要求16所述的化合物，其具有根据式(XX)的结构
或其药学上可接受的盐，其中：
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基；且
R13为环丙基、任选地被一个或多个卤素取代的芳基、任选地被一个或多个任选地被取代的C1-3烷基取代的芳基、杂芳基、任选地被叔丁氧基羰基取代的杂环烷基、任选地被芳基(其任选地被一个或多个卤素取代)取代的C1-4烷基。
28.根据权利要求16所述的化合物，其具有根据式(XXI)的结构
或其药学上可接受的盐，其中：
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；且
R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基。
29.根据权利要求1至3中任一项所述的化合物，其具有根据式(XXII)的结构
或其药学上可接受的盐，其中：
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基；且
R20为任选地被取代的芳基。
30.根据权利要求1至3中任一项所述的化合物，其具有根据式(XXIII)的结构
或其药学上可接受的盐，其中：
R1为任选地被OR7、卤素或芳基(其任选地被卤素取代)取代的C1-3烷基，或R1为环丙基；
R2为氢、卤素、CN或任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基；
R4和R5独立地为氢、任选地被一个或多个卤素取代的C1-3烷基，或R4和R5与其所连接的碳一起形成任选地被取代的环烷基或杂环烷基；
R7为任选地被芳基取代的C1-3烷基；且
R20为任选地被取代的芳基。
31.根据权利要求1至6中任一项所述的化合物，其中R3不为氢。
32.根据权利要求1至6中任一项所述的化合物，其中R3为未被取代的苯基、氟苯基、氯苯基、二氟苯基、二氯苯基或三氟甲基苯基。
33.根据权利要求1至6中任一项所述的化合物，其中R3为OR16、SR16、SO2R16、CH2R16、CH2CH2R16、C≡CR16或C≡CCH2OR16，且其中R16为芳基。
34.根据权利要求33所述的化合物，其中R16为苯基。
35.根据权利要求1至6中任一项所述的化合物，其中R3为吡咯基、四唑基、三唑基或吡唑基、任选地被取代的芳基或环烷基。
36.根据权利要求1至6中任一项所述的化合物，其中R3为哌啶基或哌嗪基，任选地被芳基取代。
37.根据权利要求35或36所述的化合物，其中R3未被取代或被环丙基、未被取代的苯基、氟苯基、氯苯基、二氟苯基、二氯苯基或三氟甲基苯基取代。
38.根据权利要求1至6中任一项所述的化合物，其中R3为COR17，且其中R17为芳基。
39.根据权利要求38所述的化合物，其中R17为苯基。
40.根据权利要求1至39中任一项所述的化合物，其中R1为环丙基或被取代的C1-3烷基。
41.根据权利要求40所述的化合物，其中R1为环丙基或二氟甲基。
42.根据权利要求1至39中任一项所述的化合物，其中R1为未被取代的C1-3烷基。
43.根据权利要求42所述的化合物，其中R1为CH2CH3。
44.根据权利要求42所述的化合物，其中R1为CH3。
45.根据权利要求1至6和9至39中任一项所述的化合物，其中R1为被芳基(其被卤素取代)取代的C1-3烷基。
46.根据权利要求45所述的化合物，其中R1为
47.根据权利要求1至6和9至39中任一项所述的化合物，其中R1为被OBn取代的C1-3烷基。
48.根据权利要求47所述的化合物，其中R1为CH2CH2OBn。
49.根据权利要求1至7和10至48中任一项所述的化合物，其中R2为氢。
50.根据权利要求1至6和8至48中任一项所述的化合物，其中R2为未被取代的C1-3烷基。
51.根据权利要求50所述的化合物，其中R2为CH3。
52.根据权利要求1至51中任一项所述的化合物，其中R4为氢且R5为氢。
53.根据权利要求1至6和10至51中任一项所述的化合物，其中R4为氢且R5为C1-3烷基。
54.根据权利要求53所述的化合物，其中R5为CH3。
55.根据权利要求1至3和10至51中任一项所述的化合物，其中R4为C1-3烷基且R5为C1-3烷基。
56.根据权利要求55所述的化合物，其中R4为CH3且R5为CH3。
57.根据权利要求1至6和10至51中任一项所述的化合物，其中R4和R5与其所连接的碳一起形成环烷基或杂环烷基。
58.根据权利要求57所述的化合物，其中所述环烷基为环丙基。
59.根据权利要求57所述的化合物，其中所述环烷基为环丁基。
60.根据权利要求57所述的化合物，其中所述杂环烷基为
61.根据权利要求1至6中任一项所述的化合物，其具有根据化合物1至50中任一项的结构：
或其药学上可接受的盐。
62.根据权利要求1至6中任一项所述的化合物，其具有根据化合物51至70中任一项的结构：
或其药学上可接受的盐。
63.根据权利要求1至62中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中至少一个氢原子被氘原子替代。
64.一种药物组合物，其包括根据权利要求1至62中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，和药学上可接受的赋形剂。
65.一种用于治疗由PHD活性介导的疾病的方法，其包括向受试者施用根据权利要求1至62中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐。
66.根据权利要求65所述的方法，其中所述由PHD活性介导的疾病是缺血性再灌注损伤。
67.根据权利要求66所述的方法，其中所述缺血性再灌注损伤选自中风、心肌梗塞和急性肾损伤。
68.根据权利要求65所述的方法，其中所述由PHD活性介导的疾病是发炎性肠病。
69.根据权利要求68所述的方法，其中所述发炎性肠病是溃疡性结肠炎。
70.根据权利要求68所述的方法，其中所述发炎性肠病是克罗恩氏病(Crohn'sdisease)。
71.根据权利要求65所述的方法，其中所述由PHD活性介导的疾病是癌症。
72.根据权利要求71所述的方法，其中所述癌症是结肠直肠癌。
73.根据权利要求65所述的方法，其中所述由PHD活性介导的疾病是肝病。
74.根据权利要求65所述的方法，其中所述由PHD活性介导的疾病是动脉粥样硬化。
75.根据权利要求65所述的方法，其中所述由PHD活性介导的疾病是心血管疾病。
76.根据权利要求65所述的方法，其中所述由PHD活性介导的疾病是眼睛的疾病或病状。
77.根据权利要求76所述的方法，其中所述眼睛的疾病或病状选自放射性视网膜病变、早产儿视网膜病变、糖尿病性视网膜病变、年龄相关性黄斑变性和眼部缺血。
78.根据权利要求65所述的方法，其中所述疾病是贫血。
79.根据权利要求78所述的方法，其中所述贫血是与慢性肾病相关的贫血。
80.根据权利要求65所述的方法，其中所述疾病是慢性肾病。
81.根据权利要求65所述的方法，其中所述疾病与高氧相关。
82.根据权利要求81所述的方法，其中所述疾病是早产儿视网膜病变。
83.根据权利要求81所述的方法，其中所述疾病是支气管肺发育不良(BPD)。
84.根据权利要求65所述的方法，其中所述疾病选自缺血性心脏病、瓣膜性心脏病、充血性心力衰竭、急性肺损伤、肺纤维化、肺动脉高压、慢性阻塞性肺病(COPD)、急性肝衰竭、肝纤维化和肝硬化。
85.根据权利要求65所述的方法，其中所述疾病是呼吸道疾病、肺部疾病、呼吸道病毒感染或肺部病毒感染。
86.根据权利要求85所述的方法，其中所述呼吸道疾病选自呼吸道感染、急性呼吸窘迫综合征、肺部炎症、肺炎和急性肺损伤。
87.根据权利要求85所述的方法，其中所述肺部疾病是急性肺损伤(ALI)、支气管炎、肺炎、肺纤维化、哮喘或急性呼吸窘迫综合征(ARDS)。
88.根据权利要求65所述的方法，其中所述疾病是一个或多个器官的损伤和/或衰竭。
89.根据权利要求88所述的方法，其中所述疾病是急性器官损伤。
90.根据权利要求88所述的方法，其中所述疾病是器官衰竭。
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