CN116650480A - 苦参碱在制备治疗子宫内膜异位症药物中的应用及药物组合物 - Google Patents
苦参碱在制备治疗子宫内膜异位症药物中的应用及药物组合物 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116650480A CN116650480A CN202310801992.7A CN202310801992A CN116650480A CN 116650480 A CN116650480 A CN 116650480A CN 202310801992 A CN202310801992 A CN 202310801992A CN 116650480 A CN116650480 A CN 116650480A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- matrine
- group
- pharmaceutical composition
- endometriosis
- cells
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 201000009273 Endometriosis Diseases 0.000 title claims abstract description 36
- ZSBXGIUJOOQZMP-JLNYLFASSA-N Matrine Chemical compound C1CC[C@H]2CN3C(=O)CCC[C@@H]3[C@@H]3[C@H]2N1CCC3 ZSBXGIUJOOQZMP-JLNYLFASSA-N 0.000 title claims abstract description 35
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 35
- ZSBXGIUJOOQZMP-UHFFFAOYSA-N Isomatrine Natural products C1CCC2CN3C(=O)CCCC3C3C2N1CCC3 ZSBXGIUJOOQZMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 34
- 229930014456 matrine Natural products 0.000 title claims abstract description 34
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 17
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 claims abstract description 16
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 claims abstract description 14
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 claims abstract description 13
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims abstract description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 7
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 210000002570 interstitial cell Anatomy 0.000 claims description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 4
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 claims description 4
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 2
- 239000006184 cosolvent Substances 0.000 claims description 2
- 239000006071 cream Substances 0.000 claims description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 2
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 claims description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 claims description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 claims description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 claims description 2
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims description 2
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 claims 1
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 claims 1
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 17
- 239000000178 monomer Substances 0.000 abstract description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 3
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 abstract description 2
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 abstract description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 59
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 11
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 9
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 8
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 8
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 7
- 210000002536 stromal cell Anatomy 0.000 description 7
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 6
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 6
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 6
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 6
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 description 5
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- 229940055695 pancreatin Drugs 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 4
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 4
- 102000011782 Keratins Human genes 0.000 description 4
- 108010076876 Keratins Proteins 0.000 description 4
- 102000013127 Vimentin Human genes 0.000 description 4
- 108010065472 Vimentin Proteins 0.000 description 4
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 4
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 4
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 4
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 4
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 4
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- 210000005048 vimentin Anatomy 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 3
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 description 3
- 210000004696 endometrium Anatomy 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 3
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M propidium iodide Chemical compound [I-].[I-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CCC[N+](C)(CC)CC)=C1C1=CC=CC=C1 XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 3
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 3
- 206010000077 Abdominal mass Diseases 0.000 description 2
- 101800005151 Cholecystokinin-8 Proteins 0.000 description 2
- 102400000888 Cholecystokinin-8 Human genes 0.000 description 2
- 206010013935 Dysmenorrhoea Diseases 0.000 description 2
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 2
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 2
- 230000012292 cell migration Effects 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 230000002357 endometrial effect Effects 0.000 description 2
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 description 2
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 2
- 231100000535 infertility Toxicity 0.000 description 2
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 2
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 2
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 230000002175 menstrual effect Effects 0.000 description 2
- 230000008969 mesenchymal cell apoptotic process Effects 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 2
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 2
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N sincalide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C1=CC=C(OS(O)(=O)=O)C=C1 IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 230000036962 time dependent Effects 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 102000000412 Annexin Human genes 0.000 description 1
- 108050008874 Annexin Proteins 0.000 description 1
- 108090000672 Annexin A5 Proteins 0.000 description 1
- 102000004121 Annexin A5 Human genes 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 1
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 1
- 208000005171 Dysmenorrhea Diseases 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 1
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 1
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010062717 Increased upper airway secretion Diseases 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 208000019255 Menstrual disease Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 206010034238 Pelvic adhesions Diseases 0.000 description 1
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 1
- 241000246044 Sophora flavescens Species 0.000 description 1
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 102000013530 TOR Serine-Threonine Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108010065917 TOR Serine-Threonine Kinases Proteins 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000004900 autophagic degradation Effects 0.000 description 1
- 239000012752 auxiliary agent Substances 0.000 description 1
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 230000000157 blood function Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 238000001516 cell proliferation assay Methods 0.000 description 1
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 1
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 230000003292 diminished effect Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 210000002782 epithelial mesenchymal cell Anatomy 0.000 description 1
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 210000001703 glandular epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 238000002357 laparoscopic surgery Methods 0.000 description 1
- 210000003041 ligament Anatomy 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000009681 mesenchymal cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000004089 microcirculation Effects 0.000 description 1
- 229960003248 mifepristone Drugs 0.000 description 1
- VKHAHZOOUSRJNA-GCNJZUOMSA-N mifepristone Chemical compound C1([C@@H]2C3=C4CCC(=O)C=C4CC[C@H]3[C@@H]3CC[C@@]([C@]3(C2)C)(O)C#CC)=CC=C(N(C)C)C=C1 VKHAHZOOUSRJNA-GCNJZUOMSA-N 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 210000003101 oviduct Anatomy 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007119 pathological manifestation Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 208000026435 phlegm Diseases 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 229930002341 quinoline alkaloid Natural products 0.000 description 1
- -1 quinoline alkaloid compound Chemical class 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
- A61K31/4375—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a six-membered ring having nitrogen as a ring heteroatom, e.g. quinolizines, naphthyridines, berberine, vincamine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/48—Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
- A61K36/489—Sophora, e.g. necklacepod or mamani
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Botany (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明属于中医药学技术领域，公开了苦参碱在制备治疗子宫内膜异位症药物中的应用及药物组合物。本发明所用中药单体苦参碱对子宫内膜异位症异位间质细胞起到抑制增殖、促进凋亡作用的同时，对于异位间质细胞的转移和复发也有显著的抑制作用，可以广泛应用于制备子宫内膜异位症药物中，具有重要的临床价值。
Description
技术领域
本发明属于中医药学技术领域，具体涉及苦参碱在制备治疗子宫内膜异位症药物中的应用及药物组合物。
背景技术
子宫内膜异位症是指子宫在位内膜的异位生长、浸润、周期性出血所致的多种临床病理表现，临床上常出现进行性加重的痛经、不孕、月经量增多、经前期阴道点滴出血等。子宫内膜异位症通常影响骨盆器官，如卵巢、输卵管和子宫韧带等，最常见于卵巢。子宫内膜异位症是一种多因素的长期疼痛性疾病，在女性群体中的发病率为6%-10%，严重影响患者的身体健康和生活质量。
目前临床上子宫内膜异位症的治疗目的在于缩减病灶、控制疼痛、促进生育、减少复发。治疗方法中以激素为主的药物治疗占据重要地位，如对于米非司酮治疗子宫内膜异位症疗效较肯定，但存在副作用较多、复发率高、价格昂贵、引起内分泌失调等问题，且要求生育妇女在服药期间避孕，疗效难以稳固；传统手术切除难以治愈，极易复发；随着腹腔镜手术的广泛使用与普及，作为切除病灶的首选方法，然而其复发率却很高，三年复发率为7%-30%，仍然需要激素类药物合并治疗，给患者的生理、心理以及经济上都带来了巨大压力与负担。
中医学根据其症状将其归属于“痛经”“癥瘕”“月经病”“不孕”等范畴，中医学认为胞宫受寒，痰湿内蕴，气机受阻，气滞血瘀，血流不畅，离经之血不能消散，瘀血蕴积，冲任失调，日久形成癥瘕。治法当活血化瘀，散结止痛；且化瘀不伤正，扶正不恋邪。现代药理研究表明，活血化瘀药能促进瘀血的分解和吸收，软化粘连，缩小包快，并具有扩张周围血管，改善微循环，溶解纤维蛋白，改善盆腔环境，调理脏腑气血功能，抑制异位内膜组织生长，调节内分泌及免疫等功能，从而达到消除病灶，减少盆腔粘连的目的。活血化瘀药在治疗子宫内膜异位症同时，还对肌体内分泌和免疫等多方面有良好调节作用。因此，在手术和激素类药物治疗均不理想的情况下，中医中药为治疗子宫内膜异位症提供了一个很好的选择。因此，从我国丰富的中草药资源宝库中挖掘出有效中药单体并明确其在治疗子宫内膜异位症中的作用及机制具有重大的意义。
苦参碱（matrine，C15H24N2O）是一种从豆科植物苦参的干燥根、植株、果实等提取的主要成分之一，是一种喹啉类生物碱化合物。研究表明苦参碱可抑制肺癌、胃癌等肿瘤细胞的增殖和转移，在诱导肿瘤细胞分化、促进肿瘤细胞凋亡亦表现出一定的作用；可抑制Hela细胞增殖和缩短细胞存活周期从而减少扩散；还可通过抑制AKT/mTOR通路提供保护性自噬发挥抗乳腺癌作用。
子宫内膜异位症虽是一种良性疾病，但其具有类肿瘤的浸润、远处迁移及异位种植的恶性行为。子宫内膜组织主要由腺上皮细胞和间质细胞组成，目前研究表明其中间质细胞的异常增殖，迁移及侵袭能力增强是子宫内膜异位症的发病的主要原因之一，因此，如何通过靶向抑制间质细胞增殖、迁移及侵袭，促进间质细胞凋亡成为了治疗子宫内膜异位症的关键问题。
发明内容
本发明的目的是解决现有技术的不足，提供苦参碱在制备治疗子宫内膜异位症药物中的应用及药物组合物，具体采用以下的技术方案：
根据本发明的第一方面，提供了苦参碱在制备治疗子宫内膜异位症药物中的应用，抑制异位间质细胞增殖率达到30%-90%，促进异位间质细胞凋亡率达到51%-90%。
本发明通过体外分离培养子宫内膜异位症异位内膜间质细胞，将上述中药单体苦参碱通过CCK8、划痕及流式细胞术实验方法测定该中药单体对间质细胞增殖、迁移及凋亡的影响，该中药单体对子宫内膜异位症异位间质细胞增殖具有抑制作用且呈浓度及时间依赖性增长；对迁移能力抑制作用呈浓度依赖性增长；对凋亡诱导作用呈浓度依赖性增长。本发明所用中药单体苦参碱对子宫内膜异位症异位间质细胞起到抑制增殖、促进凋亡作用的同时，对于异位间质细胞的转移和复发也有显著的抑制作用。
根据本发明的第二方面，还提供了一种用于治疗子宫内膜异位症的药物组合物，该药物组合物包括苦参碱。该药物组合物的剂型为注射剂、乳膏、凝胶剂、丸剂或胶囊剂。
优选地，苦参碱的浓度为1.0 mg/mL-1.4 mg/mL。当浓度为1.0 mg/mL-1.4 mg/mL时，间质细胞活力是减弱的，说明中高浓度是抑制细胞增殖的，且抑制作用呈浓度和时间依赖性；而当浓度低于1.0 mg/mL时，在24小时后间质细胞活力增强，从而促进了细胞的增殖。当浓度为1.0 mg/mL-1.4 mg/mL时，异位内膜间质细胞凋亡率显著升高，划痕愈合率显著降低，说明促进细胞凋亡和抑制间质细胞迁移能力增强。
优选地，该药物组合物还包括药学上可接受的载体，包括溶剂、分散介质、等渗调节剂和助剂中的至少一种。其中，溶剂为水、甘油或乙醇；分散介质为水、乙醇或糖；等渗调节剂为蒸馏水、葡萄糖、多元醇或氯化钠；助剂为乳化剂、防腐剂、助溶剂或稳定剂。等渗调节剂可以在用药后维持血浆的正常渗透压，使人体血管内外及细胞内外的水保持平衡，维持人体正常的生命活动，使用高于血浆渗透量的高渗液，会使细胞脱水、皱缩，影响细胞的正常功能。
本发明的有益效果为：本发明提供苦参碱在制备治疗子宫内膜异位症药物的新用途，所用苦参碱对子宫内膜异位症异位间质细胞起到抑制增殖、促进凋亡作用的同时，对于细胞的转移和复发也有显著的抑制作用，可以广泛应用于制备子宫内膜异位症药物中，具有重要的临床价值。
附图说明
图1所示为子宫内膜异位症异位间质细胞鉴定图（100×）；其中，（a）空白；（b）波形蛋白；（c）角蛋白；
图2所示为不同浓度苦参碱抑制子宫内膜异位症异位间质细胞增殖图；
图3所示为不同浓度苦参碱抑制子宫内膜异位症异位间质细胞迁移图；
图4所示为不同浓度苦参碱促进子宫内膜异位症异位间质细胞凋亡图。
具体实施方式
以下将结合实施例和附图对本发明的构思及产生的技术效果进行清楚、完整的描述，以充分地理解本发明的目的、方案和效果。需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。
实施例1
本实施例对子宫内膜异位症异位间质细胞进行分离培养和鉴定，包括以下步骤：
细胞分离培养：收集临床子宫内膜异位症患者手术后的的异位内膜组织，置于预冷的无菌PBS中，30分钟内进入超净台处理。PBS洗涤后将组织剪碎呈约1 mm3小块，置于终浓度为1 mg/mL的胶原蛋白酶IV溶液中，在37摄氏度的水浴中消化2小时，消化液依次经80目、300目无菌筛网过滤，将滤液移入离心管内，在3000 rpm/min条件下，离心5 min，弃上清液，用含10%胎牛血清、1%双抗的DMEM/F12细胞培养基重悬，置培养皿中，于CO2恒温培养箱培养2小时，换液，继续培养，并传代。
细胞鉴定：将胰酶消化细胞（异位间质细胞）制成细胞悬液，种于6孔板中，培养过夜。次日弃上清液，用PBS洗涤3次，4%多聚甲醛固定30分钟；吸弃残留液体，每孔滴一滴3%H2O2封闭内源性过氧化物酶，室温静置10分钟；再用PBS洗涤3次，滴加一抗(波形蛋白稀释度为1:70，角蛋白稀释度为1:100)，以覆盖细胞为宜，置于孵箱孵育1 h；PBS洗涤3次，滴加二抗，置于孵箱孵育30分钟；PBS洗涤3次，DAB显色，镜下观察充分显色后自来水终止染色。结果如图1所示，分离培养的细胞经波形蛋白（vimentin）孵育染色呈棕黄色，角蛋白（cytokeratin）孵育不染色，说明成功分离培养原代子宫内膜间质细胞，且纯度高达90%以上。
实施例2
本实施例为子宫内膜异位症异位间质细胞增殖实验，包括以下步骤：
将胰酶消化细胞（异位间质细胞）制成细胞悬液，并将3×104CFU的细胞种于96孔板，放于CO2恒温培养箱培养24小时；24小时后根据实验分组加入不同浓度药物，正常培养液为含10%胎牛血清、1%双抗的DMEM/F12细胞培养基，每组设5个复孔，分组如下：
①空白组（正常培养液，无细胞）；
②实验对照组（正常培养液+细胞，0组）；
③溶剂组（正常培养液+细胞+2% PBS，PBS组）；
④0.8 mg/mL实验组（正常培养液+细胞+0.8 mg/mL苦参碱（购自Sigma-Aldrich公司，CAS号：519-02-8），0.8mg/mL组）；
⑤1.0 mg/mL实验组（正常培养液+细胞+1.0 mg/mL苦参碱，1.0mg/mL组）；
⑥1.2 mg/mL实验组（正常培养液+细胞+1.2 mg/mL苦参碱，1.2mg/mL组）；
⑦1.4 mg/mL实验组（正常培养液+细胞+1.4 mg/mL苦参碱，1.4mg/mL组）。
分别在0小时、24小时、48小时、72小时、96小时进行加药处理，滤去培养基，加入CCK8溶液，置于CO2恒温培养箱内孵育2小时，再使用酶标仪在450 nm波长下测定吸光度（OD）；计算细胞存活率，细胞存活率=（实验组OD-空白组OD）/（对照组OD-空白组OD）×100%。如图2所示（从上至下依次为0.8mg/mL组、PBS组、1.0mg/mL组、1.2mg/mL组、1.4mg/mL组），与PBS组相比，低药物浓度组（0.8 mg/mL）在24小时后间质细胞活力是增强的，说明低浓度促进细胞增殖；而中高药物浓度组（1.0 mg/mL，1.2 mg/mL，1.4 mg/mL）间质细胞活力是减弱的，说明中高浓度是抑制细胞增殖的，且抑制作用呈浓度和时间依赖性。在96 h时，1.0 mg/mL组抑制间质细胞增殖率可达30%；1.2 mg/mL组抑制间质细胞增殖率可达61%；1.4 mg/mL组抑制间质细胞增殖率可达90%。
实施例3
本实施例为子宫内膜异位症异位间质细胞划痕实验，包括如下步骤：
将无菌得划痕小室贴于24孔板中，再将胰酶消化细胞（异位间质细胞）制成细胞悬液后，以3×105CFU的细胞密度种于小室内，24孔板放于CO2恒温培养箱内培养24小时，根据实验分组加入含不同浓度药物的培养基，移去划痕小室，分别于0小时和24小时拍照记录细胞愈合情况，image J软件分析计算划痕愈合率。正常培养液为含10%胎牛血清、1%双抗的DMEM/F12细胞培养基。分组如下：
①实验对照组（正常培养液+细胞，0组）；
②溶剂组（正常培养液+细胞+2% PBS，PBS组）；
③0.8 mg/mL实验组（正常培养液+细胞+0.8 mg/mL苦参碱，0.8 mg/mL组）；
④1.0 mg/mL实验组（正常培养液+细胞+1.0 mg/mL苦参碱，1.0 mg/mL组）；
⑤1.2 mg/mL实验组（正常培养液+细胞+1.2 mg/mL苦参碱，1.2 mg/mL组）；
⑥1.4 mg/mL实验组（正常培养液+细胞+1.4 mg/mL苦参碱，1.4 mg/mL组）。
如图3所示，与PBS组相比，药物浓度组（0.8 mg/mL组、1.0 mg/mL组、1.2 mg/mL组、1.4 mg/mL组）的划痕愈合率显著降低，其中1.2 mg/mL组抑制间质细胞迁移能力最显著（P<0.01）。
实施例4
本实施例为子宫内膜异位症异位间质细胞凋亡实验，包括如下步骤：
将胰酶消化细胞（异位间质细胞）制成细胞悬液，以3×104CFU的细胞密度种于6孔板，放于CO2恒温培养箱内培养24小时，去除培养基，根据实验分组加入含不同浓度药物的培养基，作用48小时后，用不含EDTA的胰酶消化，离心收集细胞，加入标记了异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate, FITC)的膜联蛋白V（Annexin V）和碘化丙啶(propidine iodide, PI)染色，避光孵育15分钟，离心，PBS洗涤后，加结合液重悬，上机检测。正常培养液为含10%胎牛血清、1%双抗的DMEM/F12细胞培养基。分组如下：
①实验对照组（正常培养液+细胞，0组）；
②溶剂组（正常培养液+细胞+2% PBS，PBS组）；
③0.8 mg/mL实验组（正常培养液+细胞+0.8 mg/mL苦参碱，0.8 mg/mL组）；
④1.0 mg/mL实验组（正常培养液+细胞+1.0 mg/mL苦参碱，1.0 mg/mL组）；
⑤1.2 mg/mL实验组（正常培养液+细胞+1.2 mg/mL苦参碱，1.2 mg/mL组）；
⑥1.4 mg/mL实验组（正常培养液+细胞+1.4 mg/mL苦参碱，1.4 mg/mL组）。
如图4所示（以膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素为横坐标，碘化丙啶为纵坐标；第一行从左至右依次为0组、PBS组、0.8 mg/mL组；第二行从左至右依次为1.0 mg/mL组、1.2 mg/mL组、1.4 mg/mL组），与PBS组相比，药物浓度组（1.0 mg/mL组、1.2 mg/mL组、1.4 mg/mL组）的细胞凋亡率显著升高，且促进凋亡的作用呈浓度依赖性。1.0 mg/mL组促进间质细胞凋亡率可达51%；1.2 mg/mL组促进间质细胞凋亡率可达81.8%；1.4 mg/mL组促进间质细胞凋亡率可达91.4%。
尽管本发明的描述已经相当详尽且特别对几个所述实施例进行了描述，但其并非旨在局限于任何这些细节或实施例或任何特殊实施例，而是应当将其视作是通过参考所附权利要求考虑到现有技术为这些权利要求提供广义的可能性解释，从而有效地涵盖本发明的预定范围。此外，上文以发明人可预见的实施例对本发明进行描述，其目的是为了提供有用的描述，而那些目前尚未预见的对本发明的非实质性改动仍可代表本发明的等效改动。
Claims (10)
1.苦参碱在制备治疗子宫内膜异位症药物中的应用，抑制异位间质细胞增殖率达到30%-90%，促进异位间质细胞凋亡率达到51%-90%。
2.一种用于治疗子宫内膜异位症的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括权利要求1所述的苦参碱。
3.根据权利要求2所述的药物组合物，其特征在于，所述苦参碱的浓度为1.0 mg/mL-1.4 mg/mL。
4.根据权利要求2所述的药物组合物，其特征在于，还包括药学上可接受的载体。
5.根据权利要求4所述的药物组合物，其特征在于，所述药学上可接受的载体包括溶剂、分散介质、等渗调节剂和助剂中的至少一种。
6.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，所述溶剂为水、甘油或乙醇。
7.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，所述分散介质为水、乙醇或糖。
8.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，所述等渗调节剂为蒸馏水、葡萄糖、多元醇或氯化钠。
9.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，所述助剂为乳化剂、防腐剂、助溶剂或稳定剂。
10.根据权利要求2-9任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物的剂型为注射剂、乳膏、凝胶剂、丸剂或胶囊剂。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310801992.7A CN116650480A (zh) | 2023-07-03 | 2023-07-03 | 苦参碱在制备治疗子宫内膜异位症药物中的应用及药物组合物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310801992.7A CN116650480A (zh) | 2023-07-03 | 2023-07-03 | 苦参碱在制备治疗子宫内膜异位症药物中的应用及药物组合物 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN116650480A true CN116650480A (zh) | 2023-08-29 |
Family
ID=87720745
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202310801992.7A Pending CN116650480A (zh) | 2023-07-03 | 2023-07-03 | 苦参碱在制备治疗子宫内膜异位症药物中的应用及药物组合物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN116650480A (zh) |
-
2023
- 2023-07-03 CN CN202310801992.7A patent/CN116650480A/zh active Pending
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US6569845B1 (en) | Neovascularization inhibitor containing dienogest as the active ingredient | |
| CN114470008B (zh) | 短乳杆菌或罗伊氏乳杆菌在制备治疗卵巢早衰的产品中的应用 | |
| WO2021244044A1 (zh) | 一种适用于角膜缘干细胞缺乏症的滴眼液及制备 | |
| CN114425033B (zh) | 一种含有间充质干细胞外泌体的眼用凝胶及其制备方法 | |
| Geng et al. | Carboxymethyl chitosan regulates macrophages polarization to inhibit early subconjunctival inflammation in conjunctival injury | |
| CN103269705A (zh) | 红色诺卡氏菌细胞壁骨架增强树突状细胞功能的方法 | |
| CN116650480A (zh) | 苦参碱在制备治疗子宫内膜异位症药物中的应用及药物组合物 | |
| CHODOS et al. | The treatment of ocular toxoplasmosis with spiramycin | |
| CN114984028B (zh) | 黄芪甲苷的用途 | |
| KR101617912B1 (ko) | 말초혈액 단핵세포를 유효성분으로 포함하는 예방 또는 치료용 약제학적 조성물 | |
| RU2390339C1 (ru) | Способ лечения хронических рецидивирующих урогенитальных бактериальных и вирусных заболеваний | |
| CN114225011A (zh) | 一种用于预防和治疗gsm的复合制剂及其应用 | |
| CN115154455A (zh) | 那布卡辛用于制备预防酒精相关的结肠癌肝转移的药物的用途 | |
| CN112263592A (zh) | 一种葛花解酲方含药血清在癌细胞中的应用 | |
| Gao et al. | Wnt-3a improves functional recovery after spinal cord injury by regulating the inflammatory and apoptotic response in rats via wnt/β-catenin signaling pathway | |
| CN111568937A (zh) | 片仔癀及其制剂在制备促进难愈性创面愈合的药物中的应用 | |
| Teryushkova et al. | Evaluation of stromal vascular fraction properties and histological changes of regenerating tissue during healing of radiation-induced lesions in the rectum | |
| CN116492351B (zh) | 氯替泼诺在制备治疗早发性卵巢功能不全及卵巢响应匮乏药物中的应用 | |
| CN118178539B (zh) | 鼻咽清毒剂在预防和治疗口腔表皮样癌中的应用 | |
| CN114306306B (zh) | 2-溴棕榈酸在制备治疗生精功能障碍相关疾病的药物中的应用 | |
| CN115025100B (zh) | 有效成分在制备治疗糖尿病肾病药品中的应用 | |
| CN118634236A (zh) | 落新妇苷在制备治疗妇科疾病的药物中的应用 | |
| CN102049009B (zh) | 含有莪术油和冰片的药物组合物的用途 | |
| CN117159560A (zh) | 环黄杨碱d在制备治疗乳腺癌药物中的应用 | |
| Toppozada et al. | Effect of subdermal levonorgestrel contraceptive implants on vaginal candidiasis |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |